特許 6848046 ＰＤ−１抗体製剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6848046

(24)【登録日】2021年3月5日

(45)【発行日】2021年3月24日

(54)【発明の名称】ＰＤ−１抗体製剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20210315BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20210315BHJP

   A61K 47/02 20060101ALI20210315BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20210315BHJP

   A61K 47/18 20060101ALI20210315BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20210315BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20210315BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20210315BHJP

【ＦＩ】

   A61K39/395 YZNA

   A61K9/08

   A61K47/02

   A61K47/12

   A61K47/18

   A61K47/22

   A61K47/26

   A61P35/00

【請求項の数】13

【全頁数】17

(21)【出願番号】特願2019-507084(P2019-507084)

(86)(22)【出願日】2017年7月17日

(65)【公表番号】特表2019-527712(P2019-527712A)

(43)【公表日】2019年10月3日

(86)【国際出願番号】CN2017093141

(87)【国際公開番号】WO2018028383

(87)【国際公開日】20180215

【審査請求日】2019年4月8日

(31)【優先権主張番号】PCT/CN2016/094094

(32)【優先日】2016年8月9日

(33)【優先権主張国】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】518049935

【氏名又は名称】イノベント バイオロジックス （スウツォウ） カンパニー，リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 浩

(74)【代理人】

【識別番号】100120134

【弁理士】

【氏名又は名称】大森 規雄

(74)【代理人】

【識別番号】100135943

【弁理士】

【氏名又は名称】三橋 規樹

(74)【代理人】

【識別番号】100104282

【弁理士】

【氏名又は名称】鈴木 康仁

(72)【発明者】

【氏名】カオ，ウェイ

(72)【発明者】

【氏名】リ，ジュンフェン

(72)【発明者】

【氏名】リウ，シャオリン

【審査官】 小堀 麻子

(56)【参考文献】

【文献】 特開２０１６−１５５８２７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１４−５１５０１７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１３−５２１７６８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１６／０３２９２７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 Adv Drug Deliv Rev，２００６年，Vol.58, No.5-6，p.686-706

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３９／３９５

Ａ６１Ｋ ９／００

Ａ６１Ｋ ４７／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの濃度で、
クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、
ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、
マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、
塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、
エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、および
ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の濃度で
含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、
前記抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、両方のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、両方のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤。

【請求項2】

前記両方のＨＣのアミノ酸配列が配列番号３である、請求項１に記載の医薬製剤。

【請求項3】

前記両方のＨＣのアミノ酸配列が配列番号４である、請求項１に記載の医薬製剤。

【請求項4】

前記抗ＰＤ−１抗体の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項5】

前記ポリソルベート−８０の濃度が約０．０２％である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項6】

前記ポリソルベート−２０の濃度が約０．０２％である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項7】

前記クエン酸塩の濃度が２０ｍＭである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項8】

前記ヒスチジンの濃度が２５ｍＭである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項9】

前記マンニトールの濃度が１４０ｍＭである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項10】

前記塩化ナトリウムの濃度が５０ｍＭである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項11】

前記ｐＨが６．０である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【請求項12】

前記抗ＰＤ−１抗体の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬであり、
前記クエン酸塩の濃度が約２０ｍＭであり、
前記ヒスチジンの濃度が約２５ｍＭであり、
前記マンニトールの濃度が約１４０ｍＭであり、
前記塩化ナトリウムの濃度が約５０ｍＭであり、
前記エデト酸塩の濃度が約０．０２ｍＭであり、
前記ポリソルベート−８０の濃度が約０．０２％であり、
前記ｐＨが約６．０である、
請求項１に記載の医薬製剤。

【請求項13】

がんの治療において使用するための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は医薬の分野に関する。より詳細には本発明は、抗ヒトプログラム細胞死１（抗ＰＤ−１）抗体の医薬製剤に関する。この抗ＰＤ−１抗体医薬製剤は、単剤療法として抗ＰＤ−１抗体に応答するがんの治療に、ならびに化学療法剤と他のがん治療剤との併用において有用であると期待される。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0002】

抗ＰＤ−１抗体の医薬製剤は、がんを有する患者の治療に必要とされる。抗体を患者の静脈内に送達することができるような、特定濃度の抗ＰＤ−１抗体が医薬製剤に必要とされる。特定濃度の抗ＰＤ−１抗体を有するこの医薬製剤は、保存中長期間にわたり抗ＰＤ−１抗体の物理的および化学的安定性を維持するはずである。著しく変わり得る条件下での世界的な抗ＰＤ−１抗体の使用に関して、この製剤は室温で長期間抗ＰＤ−１抗体の安定性を維持するだけでなく、温度の変動が考えられる下、および露光の可能性がある下での安定性も維持するはずである。

【0003】

現在の医薬製剤において使用される抗ＰＤ−１抗体はＰＣＴ／ＣＮ２０１５／０８６４９４に開示されている。これらの抗体は、長期間の保存時および様々な環境条件下において、酸化を含めて化学的に不安定になる傾向があることが発見された。したがって、観察されたこれらの問題を回避し長期保存期間中に安定性も実証する、抗ＰＤ−１抗体の医薬製剤が必要とされる。

【課題を解決するための手段】

【0004】

したがって、本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤を提供する。

【0005】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約１０ｍｇ／ｍＬの濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0006】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約２０ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0007】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２５ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0008】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１４０ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0009】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約５０ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0010】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０２ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤を提供する。

【0011】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０２％の濃度で含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0012】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で、クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の範囲の濃度で含み、約６．０のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0013】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約１０ｍｇ／ｍＬの濃度で、クエン酸塩を約２０ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２５ｍＭの濃度で、マンニトールを約１４０ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約５０ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０２ｍＭの濃度で、ポリソルベート−８０を約０．０２％の濃度で含み、約６．０のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0014】

本発明は、抗ＰＤ−１抗体を約１０ｍｇ／ｍＬの濃度で、クエン酸塩を約２０ｍＭの濃度で、ヒスチジンを約２５ｍＭの濃度で、マンニトールを約１４０ｍＭの濃度で、塩化ナトリウムを約５０ｍＭの濃度で、エデト酸塩を約０．０２ｍＭの濃度で、ポリソルベート−２０を約０．０２％の濃度で含み、約６．０のｐＨを有する医薬製剤であって、抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、２本のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、２本のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤も提供する。

【0015】

一実施形態では、本発明は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ＰＤ−１抗体を含む医薬製剤も提供する。別の実施形態では、本発明は、約５ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ＰＤ−１抗体を含む医薬製剤を提供する。別の実施形態では、本発明は、約１０ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ＰＤ−１抗体を含む医薬製剤を提供する。別の実施形態では、本発明は、約１５ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ＰＤ−１抗体を含む医薬製剤を提供する。

【0016】

一実施形態では、本発明は、約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの範囲のクエン酸塩で緩衝化した医薬製剤も提供する。別の実施形態では、本発明は、１５ｍＭ〜２５ｍＭの範囲のクエン酸塩で緩衝化した医薬製剤を提供する。別の実施形態では、本発明は、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、または約２５ｍＭの濃度のクエン酸塩で緩衝化した医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、約２０ｍＭの濃度のクエン酸塩で緩衝化した医薬製剤を提供する。

【0017】

別の実施形態では、本発明は、２０ｍＭ〜３０ｍＭの範囲のヒスチジンで緩衝化した医薬製剤を提供する。別の実施形態では、本発明は、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、または約３０ｍＭの濃度のヒスチジンで緩衝化した医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、約２５ｍＭの濃度のヒスチジンで緩衝化した医薬製剤を提供する。

【0018】

一実施形態では、本発明は、約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度のマンニトールを含む医薬製剤も提供する。別の実施形態では、本発明は、約１３０ｍＭ、約１３５ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１４５ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１５５ｍＭ、約１６０ｍＭ、または約１６５ｍＭの濃度のマンニトールを含む医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、約１４０ｍＭの濃度のマンニトールを含む医薬製剤を提供する。

【0019】

一実施形態では、本発明は、約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度のＮａＣｌを含む医薬製剤も提供する。別の実施形態では、本発明は、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、または約５５ｍＭの濃度のＮａＣｌを含む医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、約５０ｍＭの濃度のＮａＣｌを含む医薬製剤を提供する。

【0020】

一実施形態では、本発明は、約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度のエデト酸塩を含む医薬製剤も提供する。別の実施形態では、本発明は、約０．０１ｍＭ、約０．０１５ｍＭ、約０．０２ｍＭ、約０．０２５ｍＭ、または約０．０３ｍＭの濃度のエデト酸二ナトリウムを含む医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、約０．０２ｍＭの濃度のエデト酸二ナトリウムを含む医薬製剤を提供する。

【0021】

一実施形態では、本発明は、約０．０１％〜約０．０３％の濃度のポリソルベート−８０またはポリソルベート−２０を含む医薬製剤も提供する。別の実施形態では、本発明は、約０．０１％、約０．０１５％、約０．０２％、約０．０２５％、または約０．０３％の濃度のポリソルベート−８０を含む医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、約０．０２％の濃度のポリソルベート−８０を含む医薬製剤を提供する。

【0022】

一実施形態では、本発明は、約５．５〜約６．５のｐＨ範囲内の医薬製剤も提供する。別の実施形態では、本発明は、約５．５、約６．０、または約６．５のｐＨを有する医薬製剤を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、約６．０のｐＨを有する医薬製剤を提供する。

【0023】

特定の医薬製剤が好ましい。以下に列挙する選択肢は、そのような好ましいクラスを記載する：
１）抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含む抗体を含み、それぞれのＬＣが配列番号２のアミノ酸配列であり、それぞれのＨＣが配列番号３のアミノ酸配列または配列番号４のアミノ酸配列である；
２）抗ＰＤ−１抗体が約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの濃度である；
３）抗ＰＤ−１抗体が約１０ｍｇ／ｍＬの濃度である；
４）ポリソルベート−８０が約０．０１％〜約０．０３％の濃度である
５）ポリソルベート−８０が約０．０２％の濃度である
６）ポリソルベート−２０が約０．０１％〜約０．０３％の濃度である
７）ポリソルベート−２０が約０．０２％の濃度である
８）クエン酸塩が約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度である；
９）クエン酸塩が約２０ｍＭの濃度である；
１０）ヒスチジンが約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度である；
１１）ヒスチジンが約２５ｍＭの濃度である；
１２）マンニトールが約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度である；
１３）マンニトールが約１４０ｍＭの濃度である；
１４）塩化ナトリウムが約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度である；
１５）塩化ナトリウムが約５０ｍＭの濃度である；
１６）エデト酸塩が約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの範囲の濃度である。
１７）エデト酸塩が約０．０２ｍＭの濃度である；
１８）ヒスチジンが約２５ｍＭの濃度であり、クエン酸塩が約２０ｍＭの濃度である。
１９）ｐＨが５．５〜６．５である。
２０）ｐＨが約６．０である。

【0024】

さらに本発明は、有効量の本明細書に記載の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む、抗ＰＤ−１抗体に応答し得るがんを治療する方法を提供する。さらに、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含むがんを治療する方法、この場合がんはメラノーマ、肺がん、頭頸部がん、結腸直腸がん、膵臓がん、胃がん、腎臓がん、膀胱がん、前立腺がん、乳がん、卵巣がん、または肝細胞癌の群から選択される。より詳細には本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含むメラノーマを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む肺がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む頭頸部を治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む結腸直腸がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む膵臓がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む胃がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む腎臓がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む膀胱がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む前立腺がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む乳がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む卵巣がんを治療する方法を提供する。さらに本発明は、有効量の本発明の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む肝細胞癌を治療する方法を提供する。さらに本発明は、がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、メラノーマ、肺がん、頭頸部がん、結腸直腸がん、膵臓がん、胃がん、腎臓がん、膀胱がん、前立腺がん、乳がん、卵巣がん、または肝細胞癌の治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。より詳細には本発明は、メラノーマの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、肺がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、頭頸部がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、結腸直腸がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、胃がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、結腸直腸がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、腎臓がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、膀胱がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、前立腺がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、乳がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、卵巣がんの治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。さらに本発明は、肝細胞癌の治療において使用するための本発明の医薬製剤を提供する。

【0025】

本発明の医薬製剤はクエン酸塩を含む。クエン酸、クエン酸三ナトリウム二水和物、およびクエン酸一水和物の１つまたは複数；またはクエン酸一水和物、二塩基性リン酸ナトリウム、およびクエン酸を使用してクエン酸塩を生成することができる。さらに、一塩基性クエン酸ナトリウム、クエン酸三ナトリウム塩、または三塩基性クエン酸ナトリウム水和物を含むクエン酸塩を生成することができる。クエン酸ナトリウム二水和物およびクエン酸とクエン酸塩が生成することが好ましい。ナトリウム以外の他の対イオンを使用することができる。

【0026】

本発明の医薬製剤はエデト酸塩を含む。エデト酸塩はエデト酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ．２Ｎａ）であることが好ましい。

【0027】

抗体１は、それぞれのＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、それぞれのＨＣのアミノ酸配列が配列番号３である、２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含む抗ＰＤ−１抗体である。

【0028】

抗体２は、それぞれのＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、それぞれのＨＣのアミノ酸配列が配列番号４である、２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含む抗ＰＤ−１抗体である。

【0029】

本発明の製剤において使用するための抗ＰＤ−１抗体は、当技術分野で周知の技法、例えば組換え技術、ファージディスプレイ技術、合成技術、またはこのような技術もしくは当技術分野において容易にわかる他の技術の組合せを使用して生成することができる。抗体と抗原結合性断片を生成および精製するための方法は当技術分野で周知であり、例えばHarlow and Lane(1988)Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, chapters 5-8 and 15, ISBN0-87969-314-2中に見ることができる。

【0030】

抗体１および２は、抗体分野での通常技術を使用した産業規模の細胞培養に一般に使用される、哺乳動物発現系において調製することができる。ＣＨＯまたはＮＳ０などの、このような一般的な哺乳動物発現系において発現すると、発現した抗体は、予想されるジスルフィド結合を鎖内および鎖間に有するであろう。さらに、抗体はＣＨ２内でグリコシル化されるであろう。

【0031】

安定であると考えられるためには、溶液中の抗体は充分な化学的安定性と物理的安定性を有していなければならない。酸化、脱アミド化、および加水分解は、製剤において抗体が有し得る化学的安定性の問題の数例である。凝集およびゲル形成は、製剤において抗体が有し得る物理的安定性の問題の数例である。製剤中の抗体の分解、修飾、凝集、生物活性の消失などの程度が許容可能に制御され、時間と共に許容不能に増大しない場合、抗体の医薬製剤は安定状態であると考えられる。試料の光散乱、見た目の光の減衰（吸光度、または光学濃度）、（例えば、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）による）凝集体もしくは他のポリマー型抗体のサイズ、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）により測定するｉｎ ｖｉｔｒｏもしくはｉｎ ｖｉｖｏ生物活性および／または性質の測定を含めた、当技術分野で周知の方法によって安定性を評価することができる。安定性を評価するための他の方法は当技術分野で周知であり、本発明に従い使用することもできる。

【0032】

前述のように、本発明は、有効量の本明細書に記載の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む、抗ＰＤ−１抗体に応答し得るがんを治療する方法を提供する。本発明の抗ＰＤ−１抗体製剤の有効量は、治療を必要とする患者に投与したとき、高いＰＤ−１レベルを有する対象に投与したとき、許容不能な副作用を引き起こさずに所望の治療効果をもたらす量である。

【0033】

[実施例１]
固形バッファー成分を重量測定し、標的体積の８０％のｄｄＨ_２Ｏを加えたビーカーに移し、混合物は磁気撹拌器で撹拌して成分を溶かす。全ての成分が溶解した後、２Ｍクエン酸を使用して溶液のｐＨを６．０に調節し、ｄｄＨ_２Ｏを加えて標的体積を得る。次いでポリソルベート８０を、初期バッファーを使用して２０ｍｇ／ｍＬで調製し、１００倍濃度のポリソルベート８０を得る。抗体試料は、３８００ｇでＡｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ−３０Ｋ遠心分離フィルターを使用して約１５ｍｇ／ｍＬに濃縮する。濃縮した抗体試料には、初期バッファーにおいて６〜７ラウンドのバッファー交換を施す。バッファー交換した抗体試料は、初期バッファーおよび１００倍ポリソルベート８０で希釈して、１０ｍｇ／ｍＬの最終濃度の抗体および０．２ｍｇ／ｍＬの最終濃度のポリソルベート８０を得る。試料は０．２２μｍフィルターで滅菌濾過して最終医薬品を得る。

【0034】

【表1】

【0035】

【表2】

【0036】

ｐＨの影響
医薬製剤の安定性を得るため、物理的供給源と化学的供給源の両方の不安定性を製剤において処理する必要がある。化学的不安定性は抗体の分解をもたらす可能性がある。

【0037】

５ｍｇ／ｍＬでの抗体１の化学的安定性に対するｐＨの影響を評価するため、様々なｐＨでクエン酸バッファー中の抗体１の試料を分析する。クエン酸バッファーは二回蒸留水（ｄｄＨ_２Ｏ）中に１０ｍＭで調製し、バッファーのｐＨは４、５、６、７または８のｐＨに調節する。抗体１は様々なｐＨに調節したクエン酸バッファー中に５ｍｇ／ｍＬで希釈し、１０日間３７℃でインキュベートした。これらの試料を、People's Republic of China, (Edition2010, Section3, Appendix IIIB)の薬局方に従いＳＥＣ−ＨＰＬＣ（サイズ排除クロマトグラフィー−高速液体クロマトグラフィー）によって０日と１０日に試験し、親水性シリカゲルサイズ排除カラムによって検出し、試料の純度は面積正規化によって測定する。０日の主ピーク面積％は９８．６５％であった。

【0038】

表３中に実証した結果は、抗体１は６のｐＨで最も安定しており、５のｐＨではごくわずかに不安定であることを示す。より酸性のｐＨ状態またはよりアルカリ性のｐＨ状態において、抗体１は最も安定性が低い。これらの結果は、抗体１に関する医薬製剤溶液のｐＨはｐＨ５とｐＨ６の間でなければならないことを示す。

【0039】

【表3】

【0040】

抗体１の安定性に対するバッファー、多価アルコール、界面活性剤および他の賦形剤の影響
抗体の安定性に対する一般的に使用されるバッファーの影響を調べて、抗体１に最適なバッファー系が何であるかを理解する。この試験は多変量法を使用して、抗体１溶液製剤の物理的安定性と化学的安定性を調べる。抗体１溶液製剤は表４に従い調製する。リン酸バッファーとクエン酸バッファーはｄｄＨ_２Ｏ中に２０ｍＭで調製する。表４中に示した様々な試験賦形剤を試験して、抗体１に最適な製剤を決定する。賦形剤を様々なバッファーに加えて、各試料に関してｐＨを６．０に調節する。試験試料は最大３ヶ月間２５℃でインキュベートする。People's Republic of China, (Edition2010, Section three, Appendix IIIB)の薬局方に従いＣＥＸ−ＨＰＬＣ（イオン交換クロマトグラフィー−高速液体クロマトグラフィー）により０日、および１ヶ月と３ヶ月に安定性に関して試料を試験し、陽イオンカラムで検出し、試料の純度は面積正規化によって測定する。これらの結果は表５中に例証する。

【0041】

【表4】

【0042】

試験したそれぞれの製剤は１０ｍｇ／ｍＬの抗体１、５０ｍＭの塩化ナトリウム、および０．０２％のポリソルベートを含んでおり、それぞれ６．０に調節されたそのｐＨを有していた。

【0043】

【表5】

【0044】

これらの結果は、製剤試験試料Ｆ２とＦ６には酸性種のわずかな増大があり、これは他の試験製剤と比較したとき、Ｆ２とＦ６の製剤は抗体１により安定的な環境をもたらすことを示すだけでなく、クエン酸バッファー中にポリソルベート８０、マンニトールおよびヒスチジンの独自の組合せは抗体１に関して高い安定性をもたらすことを、驚くことに示したことを実証する。

【0045】

抗体１の安定性に対する露光の影響
試験試料Ｆ２とＦ６の製剤と条件を再現して、抗体１の光感受性試験に関して試験する。１０ｍｇ／ｍＬで抗体１を含有する試験試料Ｆ２とＦ６を、１０日間２５℃で高強度蛍光（５０００Ｌｕｘ）に曝す。ＣＥＸ−ＨＰＬＣおよびＳＥＣ−ＨＰＬＣ技術を使用して０日、５日および１０日に試料を安定性に関して試験する。

【0046】

【表6】

【0047】

表６中に示した結果は、試験試料Ｆ６の製剤は、試験試料Ｆ２の製剤と比較すると抗体１に関してより高い抗酸化性を与え、抗体１に関して向上した安定性と抗酸化性を結果としてもたらすことを、驚くことに実証する。

【0048】

抗体１の加速安定性試験
製剤Ｆ６を使用し加速安定性試験法によって、抗体１を安定性に関して試験する。前述の製剤中の抗体１を無菌状態でガラスバイアルに分配し、ラバーストッパーとプラスチックカバーで密封し、１ヶ月間２５℃±２℃でインキュベートする。ＣＥＸ−ＨＰＬＣおよびＳＥＣ−ＨＰＬＣ技術を使用して０日および１ヶ月に試料を安定性に関して試験する。

【0049】

加速安定性試験の結果を表７および表８中に例証する。これらの結果は、前述の製剤中の抗体１の純度と全体的安定性が、加速条件下での１ヶ月のインキュベーション期間後に、著しく影響を受けることはなかったことを実証する。外観、濃度、濁度に関するさらなる分析も同様の結果を示した。したがって、この製剤は、抗体１の安定性を２５℃で少なくとも１ヶ月間維持できることが示された。

【0050】

【表7】

【0051】

抗体１の長期安定性試験
生物学的医薬品を５℃±３℃で保存して、製品の保存期間にわたり化学的および物理的分解を最小にする。１０ｍｇ／ｍＬで、製剤Ｆ６における長期安定性に関して抗体１を試験する。

【0052】

抗体１を無菌状態でバイアルに分配し、ラバーストッパーとプラスチックカバーで密封し、１１ヶ月間２℃〜約８℃でインキュベートする。ＣＥＸ−ＨＰＬＣおよびＳＥＣ−ＨＰＬＣ技術を使用して０日、ならびに３、６および１１ヶ月の時点で試料を安定性に関して試験する。

【0053】

長期安定性試験の結果を表９および表１０中に例証する。これらの結果は、前述の製剤中の抗体１の純度と全体的安定性が、長期条件下での１１ヶ月のインキュベーション期間後に、著しく影響を受けることはなかったことを実証する。外観、濃度、濁度に関するさらなる分析も同様の結果を示した。この独自の製剤は、前に例示した安定性の利点以外に、抗体１の安定性を２℃〜約８℃で少なくとも１１ヶ月間維持できることがさらに示された。

【0054】

【表8】

【0055】

抗体１の凍結−解凍安定性試験
１０ｍｇ／ｍＬで、製剤Ｆ６における凍結−解凍安定性に関して抗体１を試験する。実施例５における前述の製剤中の抗体１を無菌状態でガラスバイアルに分配し、ラバーストッパーとプラスチックカバーで密封し、−８０℃でインキュベートし、次に室温での解凍サイクルを施す。凍結−解凍サイクルは同じ試料に関して最大６回繰り返す。ＣＥＸ−ＨＰＬＣおよびＳＥＣ−ＨＰＬＣ技術を使用して、凍結前、第３および第６の解凍サイクル時に試料を安定性に関して試験する。

【0056】

凍結−解凍安定性試験の結果を表９中に例証する。これらの結果は、前述の製剤中の抗体１の純度と全体的安定性が、６サイクル後に著しく影響を受けることはなかったことを実証する。外観、濃度、濁度に関するさらなる分析も同様の結果を示した。したがってこの製剤は、６凍結−解凍サイクルに関して抗体１の安定性を維持できることが示された。

【0057】

【表9】

【0058】

前述の実施例において実証したように、様々な条件下で組換えヒト抗プログラム細胞死−１（ＰＤ−１）モノクローナル抗体の安定性を維持できる製剤を開発するために、広範な試験を実施した。抗酸化性、長期保存期間をもたらし、おそらく抗体の臨床安全性を向上させることによって、抗ＰＤ−１抗体の物理的および化学的安定性を改善し得る性質を与える予想外の成分の組合せを含む、新しい独自の製剤。困難な条件下、ならびに２〜８℃、２５℃、３７℃および−８０℃の範囲の様々な温度において、抗ＰＤ−１抗体が化学的および物理的安定性を維持するのを可能にする独自の製剤。

【0059】

配列
配列番号１（ヒトＰＤ−１）

【0060】

【化1】

【0061】

配列番号２（軽鎖）

【0062】

【化2】

【0063】

配列番号３（重鎖）

【0064】

【化3】

【0065】

配列番号４（重鎖）

【0066】

【化4】

また、本発明は以下を提供する。
［１］
抗ＰＤ−１抗体を約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの濃度で、
クエン酸塩を約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの濃度で、
ヒスチジンを約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で、
マンニトールを約１３０ｍＭ〜約１６５ｍＭの濃度で、
塩化ナトリウムを約４５ｍＭ〜約５５ｍＭの濃度で、
エデト酸塩を約０．０１ｍＭ〜約０．０３ｍＭの濃度で、および
ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を約０．０１％〜約０．０３％の濃度で
含み、約５．５〜約６．５のｐＨを有する医薬製剤であって、
前記抗ＰＤ−１抗体が２本の軽鎖（ＬＣ）と２本の重鎖（ＨＣ）を含み、両方のＬＣのアミノ酸配列が配列番号２であり、両方のＨＣのアミノ酸配列が同じであり、配列番号３または配列番号４のいずれかである、医薬製剤。
［２］
前記両方のＨＣのアミノ酸配列が配列番号３である、［１］に記載の医薬製剤。
［３］
前記両方のＨＣのアミノ酸配列が配列番号４である、［１］に記載の医薬製剤。
［４］
前記抗ＰＤ−１抗体の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬである、［１］〜［３］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［５］
前記ポリソルベート−８０の濃度が約０．０２％である、［１］〜［４］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［６］
前記ポリソルベート−２０の濃度が約０．０２％である、［１］〜［４］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［７］
前記クエン酸塩の濃度が２０ｍＭである、［１］〜［６］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［８］
前記ヒスチジンの濃度が２５ｍＭである、［１］〜［７］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［９］
前記マンニトールの濃度が１４０ｍＭである、［１］〜［８］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［１０］
前記塩化ナトリウムの濃度が５０ｍＭである、［１］〜［９］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［１１］
前記ｐＨが６．０である、［１］〜［１０］のいずれか一項に記載の医薬製剤。
［１２］
前記抗ＰＤ−１抗体の濃度が約１０ｍｇ／ｍＬであり、
前記クエン酸塩の濃度が約２０ｍＭであり、
前記ヒスチジンの濃度が約２５ｍＭであり、
前記マンニトールの濃度が約１４０ｍＭであり、
前記塩化ナトリウムの濃度が約５０ｍＭであり、
前記エデト酸塩の濃度が約０．０２ｍＭであり、
前記ポリソルベート−８０の濃度が約０．０２％であり、
前記ｐＨが６．０である、
［１］に記載の医薬製剤。
［１３］
有効量の［１］〜［１２］のいずれか一項に記載の医薬製剤を、それを必要とする患者に投与することを含む、がんを治療する方法。
［１４］
がんにおいて使用するための、［１］〜［１３］のいずれか一項に記載の医薬製剤。

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]