特表 2023-511439 がんの治療のためのＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒアルファヘテロ二量体ＦＣ融合タンパク質

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-03-17

(54)【発明の名称】がんの治療のためのＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒアルファヘテロ二量体ＦＣ融合タンパク質

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/20 20060101AFI20230310BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20230310BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230310BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20230310BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20230310BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20230310BHJP

   C07K 19/00 20060101ALN20230310BHJP

   C07K 16/00 20060101ALN20230310BHJP

   C07K 14/54 20060101ALN20230310BHJP

   C07K 14/715 20060101ALN20230310BHJP

   C12N 5/0783 20100101ALN20230310BHJP

【ＦＩ】

A61K38/20

A61P35/04

A61P35/00

A61K47/68

A61K45/00

A61K39/395 U

A61K39/395 D

C07K19/00 ZNA

C07K16/00

C07K14/54

C07K14/715

C12N5/0783

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022544745

(86)(22)【出願日】2021-01-28

(85)【翻訳文提出日】2022-08-25

(86)【国際出願番号】 US2021015552

(87)【国際公開番号】W WO2021155042

(87)【国際公開日】2021-08-05

(31)【優先権主張番号】62/966,976

(32)【優先日】2020-01-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】509012625

【氏名又は名称】ジェネンテック， インコーポレイテッド

(71)【出願人】

【識別番号】510089100

【氏名又は名称】ゼンコア インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】ウンゲウィッケル， アレクサンダー ヨアヒム ポール

(72)【発明者】

【氏名】シブワ， ビッタル

(72)【発明者】

【氏名】ヤダブ， ライブハラン

【テーマコード（参考）】

4B065

4C076

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA94X

4B065BB19

4B065BB34

4B065CA24

4B065CA44

4C076AA95

4C076CC27

4C076EE59

4C084AA02

4C084AA03

4C084AA19

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA22

4C084BA23

4C084BA41

4C084DA12

4C084MA02

4C084NA05

4C084NA14

4C084ZB26

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB11

4C085EE03

4H045AA10

4H045AA11

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA02

4H045DA51

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

本開示は、ＩＬ１５タンパク質－Ｆｃドメイン融合を含む第１の単量体と、ＩＬ１５Ｒαタンク質－Ｆｃドメイン融合を含む第２の単量体とを含むヘテロ二量体タンパク質を投与することによりがんを治療する方法を提供する。
【選択図】図６

【特許請求の範囲】

【請求項1】

固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍を治療する方法であって、対象に対し、治療的有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。

【請求項2】

ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。

【請求項3】

ＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインが、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。

【請求項4】

ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及びＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。

【請求項5】

対象にＩＦＮγ生成を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインが、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。

【請求項6】

前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、Ｌ３２８Ｒ；Ｓ２３９Ｋ；及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ２のＦｃドメインに由来している、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；及びＥ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４のＦｃドメインに由来している。請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

ＩＬ－１５タンパク質が、Ｎ１Ｄ、Ｎ４Ｄ、Ｄ８Ｎ、Ｄ３０Ｎ、Ｄ６１Ｎ、Ｅ６４Ｑ、Ｎ６５Ｄ及びＱ１０８Ｅからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記ＩＬ－１５タンパク質及び前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が：６５ＤＰＣ；Ｅ８７Ｃ：６５ＤＣＡ；Ｖ４９Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｌ５２Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｅ８９Ｃ：Ｋ３４Ｃ；Ｑ４８Ｃ：Ｇ３８Ｃ；Ｅ５３Ｃ：Ｌ４２Ｃ；Ｃ４２Ｓ：Ａ３７Ｃ及びＬ４５Ｃ：Ａ３７Ｃからそれぞれ選択される一組のアミノ酸置換又は付加を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記ＩＬ－１５タンパク質が、配列番号１及び配列番号２からなる群から選択されるポリペプチド配列を含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、配列番号３及び配列番号４からなる群から選択されるポリペプチド配列を含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑをさらに含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項19】

ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合しており、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、可変長Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカーである、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（配列番号３９）、（Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４０）、（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４１）、及び（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４２）からなる群から選択されるリンカーを含み、ｎは１から５の間の整数である、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

前記ヘテロ二量体タンパク質が、ＸＥＮＰ２２８２２、ＸＥＮＰ２３５０４、ＸＥＮＰ２４０４５、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ２２８２１、ＸＥＮＰ２３３４３、ＸＥＮＰ２３５５７、ＸＥＮＰ２４１１３、ＸＥＮＰ２４０５１、ＸＥＮＰ２４３４１、ＸＥＮＰ２４０５２、ＸＥＮＰ２４３０１、及びＸＥＮＰ３２８０３タンパク質からなる群から選択される、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍を治療する方法であって、対象に対し、治療的有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、及びＥ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。

【請求項25】

ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。

【請求項26】

ＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。

【請求項27】

ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及びＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。

【請求項28】

対象にＩＦＮγを誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。

【請求項29】

前記第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓをさらに含み、前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、請求項２４～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

前記第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑをさらに含み、前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、請求項２４～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

前記第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、請求項２４～３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項32】

前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、請求項２４～３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、請求項２４～３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項34】

前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む、請求項２４～３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項35】

前記ＩＬ－１５タンパク質が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む、請求項２４～３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項36】

前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメインが、配列番号４に示されるアミノ酸配列を含む、請求項２４～３５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項37】

ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、請求項２４～３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項38】

ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、請求項２４～３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項39】

ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合しており、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、請求項２４～３８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、可変長Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカーである、請求項３７～３９のいずれか１つに記載の方法。

【請求項41】

第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（配列番号３９）、（Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４０）、（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４１）、及び（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４２）からなる群から選択されるリンカーを含み、ｎは１から５の間の整数である、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記第１の単量体が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体が、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１～５及び２４～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項43】

前記第１の単量体が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体が、配列番号１６に示されるアミノ酸配列を含む、請求項１～５及び２４～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

前記ヘテロ二量体タンパク質が、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ３２８０３、又はそれらの組み合わせである、請求項１～５及び２４～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、対象に投与される、請求項１～４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項46】

第１のヘテロ二量体タンパク質が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む第２の単量体とを含み；第２のヘテロ二量体タンパク質が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１６に示されるアミノ酸配列を含む第２の単量体とを含む、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とが同時に投与される、請求項４５又は４６に記載の方法。

【請求項48】

前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とが連続して投与される、請求項４５又は４６に記載の方法。

【請求項49】

前記固形腫瘍が、局所的に進行性、再発性又は転移性である、請求項１、６～２４及び２９～４８のいずれか１つに記載の方法。

【請求項50】

前記固形腫瘍が、扁平上皮がん、皮膚扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）がん、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん、膀胱がん、脂肪肉腫、軟部組織肉腫、尿路上皮癌、尿管及び腎盂、多発性骨髄腫、骨肉腫、肝細胞癌、黒色腫、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎細胞癌、肝がん、食道がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝臓癌、メルケル細胞癌、生殖細胞がん、高頻度マイクロサテライト不安定性がん及び頭頚部扁平上皮癌からなる群から選択される、請求項１、６～２４及び２９～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項51】

前記固形腫瘍が、黒色腫、腎細胞癌、非小細胞肺がん、頭頚部扁平上皮癌、及びトリプルネガティブ乳がんから選択される、請求項５０に記載の方法。

【請求項52】

前記固形腫瘍は、黒色腫、腎細胞癌、及び非小細胞肺がんから選択される、請求項５１に記載の方法。

【請求項53】

前記固形腫瘍が、黒色腫、非小細胞肺がん、頭頚部扁平上皮癌、及びトリプルネガティブ乳がんから選択される、請求項５１に記載の方法。

【請求項54】

対象が、固形腫瘍を治療するための薬剤を以前に投与されたことがない、請求項１、６～２４及び２９～５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項55】

対象が、現在チェックポイント阻害剤を投与されている、請求項１、６～２４及び２９～５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項56】

対象が、チェックポイント阻害剤を以前に投与されたことがある、請求項１、６～２４及び２９～５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項57】

チェックポイント阻害剤がＰＤ－１を標的とする、請求項５５又は５６に記載の方法。

【請求項58】

チェックポイント阻害剤がＰＤ－Ｌ１を標的とする、請求項５５又は５６に記載の方法。

【請求項59】

チェックポイント阻害剤がＣＴＬＡ－４を標的とする、請求項５５又は５６に記載の方法。

【請求項60】

前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、約０．００２５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０８ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．１２ｍｇ／ｋｇ、約０．１６ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ、約０．２４ｍｇ／ｋｇ及び約０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、請求項１～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、及び０．０６ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、請求項６２に記載の方法。

【請求項62】

前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、０．００２５ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１５ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０２５ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．１６ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ及び０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、請求項１～６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項63】

前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、及び０．０６ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、請求項６２に記載の方法。

【請求項64】

前記ヘテロ二量体タンパク質が、Ｑ１Ｗ、Ｑ２Ｗ、Ｑ３Ｗ、Ｑ４Ｗ、Ｑ５Ｗ及びＱ６Ｗからなる群から選択される頻度で投与される、請求項１－６３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項65】

前記ヘテロ二量体タンパク質が、Ｑ２Ｗの頻度で投与される、請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

対象に対し、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤を投与することをさらに含む、請求項１～６５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項67】

ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする前記薬剤が、抗ＰＤ－１抗体である、請求項６６に記載の方法。

【請求項68】

抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、セミプリマブ、スパルタリズマブ、カムレリズマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、トリパリマブ、ＭＤＸ－１１０６、ＡＭＰ－５１４及びＡＭＰ－２２４から選択される、請求項６７に記載の方法。

【請求項69】

ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする前記薬剤が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、請求項６８に記載の方法。

【請求項70】

抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、ＢＭＳ－３９８８６、ＫＮ０３５、ＣＫ－３０１及びＭＳＢ００１０７１８Ｃから選択される、請求項６９に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

［０００１］本開示は、ＩＬ１５－ＩＬ１５Ｒヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質を使用したがんの治療の分野に関する。

【0002】

関連出願の相互参照
［０００２］本出願は、２０２０年１月２８日出願の米国仮出願第６２／９６６，９７６号の優先的利益を主張し、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0003】

配列表
［０００３］本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。２０２１年１月２８日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーは、０００２１８－０００６－ＷＯ１＿ＳＬ．ｔｘｔという名称であり、サイズは１１０，４６９バイトである。

【背景技術】

【0004】

［０００４］がんは、世界で最も多い死因であり、２０１２年には世界中で推定１４００万人が新たに罹患し、８００万人が死亡した（Ｔｏｒｒｅ ｅｔ ａｌ． Ｃａｎｃｅｒ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｐｒｅｖ． ２０１６；２５（１）：１６－２７）。２０１８年までにこの傾向は高まり、新規症例が１８００万を超え、死亡例が９００万を超えるまで増加した（Ｎｅｗ ｇｌｏｂａｌ ｃａｎｃｅｒ ｄａｔａ：ＧＬＯＢＯＣＡＮ ２０１８． ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｕｉｃｃ．ｏｒｇ／ｎｅｗｓ／ｎｅｗ－ｇｌｏｂａｌ－ｃａｎｃｅｒ－ｄａｔａ－ｇｌｏｂｏｃａｎ－２０１８）。このような傾向は、危機の増大と、がん治療のための効果的な療法の必要性を示唆している。がん免疫療法（ＣＩＴ）は、近年腫瘍学において有望な手法として発展したものであり、チェックポイント阻害剤、養子細胞移入、標的とされる抗体（Ｔ／ＮＫ細胞エンゲージャ）、がんワクチン、及びサイトカインを広く含む。

【0005】

［０００５］サイトカインは、白血球の増殖、分化、及び生存を制御することにより、免疫細胞をブーストすることができる（Ｂｅｒｒａｏｎｄｏ ｅｔ ａｌ． Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ２０１９；１２０（１）：６－１５）。サイトカインの既知の生物学並びに免疫系及びがん生物学におけるその役割にも関わらず、ＩＦＮα（例えば、特に毛様細胞性白血病及び慢性骨髄性白血病）並びにＩＬ－２（例えば進行性黒色腫及び転移性ＲＣＣ）を含む限られた症候のがん治療に対してのみ、限定された数のサイトカインが承認されている。これは、これらサイトカインの低い忍容性、狭い治療指数、及び不良なＰＫ挙動に一部関連している（Ｂｅｒｒａｏｎｄｏ ｅｔ ａｌ． ２０１９、上掲）。

【0006】

［０００６］例えば、アルデスロイキン（Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標））としても知られる組み換えＩＬ－２が、２０年以上ＣＩＴ剤として臨床使用されている。抗腫瘍剤としてのその臨床的有用性が証明されているにも関わらず、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）は、毛細管漏出症候群（ＣＬＳ）などの主要な毒性を誘導する可能性があり、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎを投与される患者は、入院環境において広範なモニタリングを必要とする。ＩＬ－２は、分化－４陽性（ＣＤ４^＋）調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、内皮細胞、及び活性化Ｔ細胞のクラスターといった細胞に対して作用する分泌サイトカインであり、これら細胞は、ＣＤ１２２及びＣＤ１３２と一緒に、高親和性三量体受容体複合体にＩＬ－２Ｒα（ＣＤ２５）を発現する。ＩＬ－２は、活性化誘導細胞死（ＡＩＣＤ）を誘導することも知られている。Ｔｒｅｇ機能の増大及びＡＩＣＤの誘導は、経時的に抗腫瘍免疫を低減すると思われる２つの方法である。

【0007】

［０００７］インターロイキン（ＩＬ）－１５は、他の共通γ鎖（ＣＤ１３２）サイトカイン、例えばＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－７、ＩＬ－９、及びＩＬ－２１のように、免疫応答の調節に重要な役割を果たす。共通γ鎖に加えて、ＩＬ－１５及びＩＬ－２はまた、それらのヘテロ三量体受容体複合体においてβサブユニット（ＣＤ１２２）を共有し、重複する生物学的効果を有する。しかしながら、ＩＬ－１５及びＩＬ－２は、下流のシグナル伝達のための固有のα受容体サブユニットを有する。ＩＬ－１５及びＩＬ－２は、がん免疫において重要な役割を果たすことが知られており、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞と、分化－８陽性（ＣＤ８^＋）Ｔ細胞のクラスターとの増殖と活性化を誘導することにより、免疫系をブースとすることが示された。

【0008】

［０００８］ＩＬ－１５は、ＩＬ－１５Ｒα（ＣＤ２１５）との関連で、単球及び樹状細胞により、ＣＤ１２２及びＣＤ１３２を主に発現する他の細胞、例えばＮＫ細胞及びメモリーＣＤ８^＋Ｔ細胞（中等度の親和性のヘテロ二量体受容体複合体）に対してトランスで提示される。したがって、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒαは、ＮＫ及びＴ細胞上のＣＤ１２２及びＣＤ１３２に結合すると、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞の増殖及びメモリーＣＤ８^＋ Ｔ細胞の維持、並びにＮＫ細胞の増殖及び細胞傷害性の亢進を誘導することにより、持続性のＴ細胞応答を強化する。重要なことに、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒαの生物学的影響は、ＣＤ２５発現Ｔｒｅｇで最小であり、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒαは、ＩＬ－２に関連して引き起こされる血管漏出を低減すると考えられ、ＡＩＣＤを誘導することは知られていない。

【0009】

［０００９］したがって、ＩＬ－１５は、ＣＩＴ剤としてＩＬ－２を上回る潜在的利点を有する。過去十年間に、複数のＩＬ－２及びＩＬ－１５に基づく治療学、組み換えヒトＩＬ－１５（ｒｈＩＬ－１５）及び操作ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα－Ｆｃスーパーアゴニスト（ＡＬＴ－８０３）などが、臨床的有用性の向上と毒性の低下の達成を目指す様々な臨床試験において試験された。しかしながら、薬物動態（ＰＫ）的曝露、薬力学（ＰＤ）的応答、又は急性毒性については、これまでその臨床的影響に限界があった。例えば、ｒｈＩＬ－１５又はｒｈＩＬ－１５／ｒｈＩＬ－１５Ｒα複合体のＩＶボーラス投与は、高い標的媒介薬物動態（ＴＭＤＤ）及び急速な腎クリアランス（ＣＬ）（約６０ｋＤａの小さな分子サイズによる）に起因して低いＰＫ曝露をもたらし；頻繁な投与を必要とした。さらに、ＩＶボーラス投与は、ＣＬＳ及び低血圧を含む急性毒性により制限された。ＩＶボーラス投与に関連付けられるＰＫ及び安全性の制限により、忍容性及びＰＤ効果を向上させる皮下（ＳＣ）注射又は連続的なＩＶ点滴などの代替的な投与経路が模索された。これら手法のいくつかはＰＤ応答（即ち、ＮＫ及びＣＤ８^＋Ｔ細胞の拡大）及び忍容性を改善したが、ｒｈＩＬ－１５及びＡＬＴ－８０３のＳＣ投与には頻繁な注射部位反応が伴い、頻繁な投与（ＳＣ）又は複数日にわたる連続的注入が治療サイクル毎に必要とされる。ＩＬ－１５経路アゴニストの利用可能な臨床データは、ＰＫプロファイルが最適化され且つ治療指数が改善されたＩＬ－１５治療法を開発するための理論的根拠を提供した。

【0010】

［００１０］したがって、特にＩＬ－１５経路アゴニストのために、ＣＩＴ剤に対する需要が依然として存在している。

【発明の概要】

【0011】

［００１１］第１の態様において、本開示は、固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍を治療する方法を提供し、この方法は、対象に対し、治療的有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む。

【0012】

［００１２］第２の態様では、本開示は、対象におけるＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む。

【0013】

［００１３］第３の態様では、本開示は、対象におけるＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む。

【0014】

［００１４］第４の態様では、本開示は、対象におけるＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及びＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む。

【0015】

［００１５］第５の態様では、本開示は、対象におけるＩＦＮγ生成を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む。

【0016】

［００１６］いくつかの実施形態では、前記第１及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0017】

［００１７］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｌ３２８Ｒ；Ｓ２３９Ｋ；及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ２のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；及びＥ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４のＦｃドメインに由来している。

【0018】

［００１８］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ１Ｄ、Ｎ４Ｄ、Ｄ８Ｎ、Ｄ３０Ｎ、Ｄ６１Ｎ、Ｅ６４Ｑ、Ｎ６５Ｄ及びＱ１０８Ｅからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。

【0019】

［００１９］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質及びＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、Ｅ８７Ｃ：６５ＤＰＣ；Ｅ８７Ｃ：６５ＤＣＡ；Ｖ４９Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｌ５２Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｅ８９Ｃ：Ｋ３４Ｃ；Ｑ４８Ｃ：Ｇ３８Ｃ；Ｅ５３Ｃ：Ｌ４２Ｃ；Ｃ４２Ｓ：Ａ３７Ｃ及びＬ４５Ｃ：Ａ３７Ｃからそれぞれ選択される一組のアミノ酸置換又は付加を含む。

【0020】

［００２０］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、配列番号２（完全長ヒトＩＬ－１５）及び配列番号１（切断型ヒトＩＬ－１５）からなる群から選択されるポリペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、配列番号３（完全長ヒトＩＬ－１５Ｒα）及び配列番号４（ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン）からなる群から選択されるポリペプチド配列を含む。

【0021】

［００２１］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は配列番号４を含む。

【0022】

［００２２］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は配列番号４を含む。

【0023】

［００２３］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は配列番号４を含む。

【0024】

［００２４］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は配列番号４を含む。

【0025】

［００２５］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合しており、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。

【0026】

［００２６］いくつかの実施形態では、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、独立して、可変長Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカーである。いくつかの実施形態では、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、独立して、（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（配列番号３９）、（Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４０）、（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４１）、及び（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４２）からなる群から選択されるリンカーを含み、ｎは１から５の間の整数である。

【0027】

［００２７］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、ＸＥＮＰ２２８２２、ＸＥＮＰ２３５０４、ＸＥＮＰ２４０４５、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ２２８２１、ＸＥＮＰ２３３４３、ＸＥＮＰ２３５５７、ＸＥＮＰ２４１１３、ＸＥＮＰ２４０５１、ＸＥＮＰ２４３４１、ＸＥＮＰ２４０５２、ＸＥＮＰ２４３０１、及びＸＥＮＰ３２８０３タンパク質からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質はＸＥＮＰ２４３０６である。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質はＸＥＮＰ３２８０３である。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、ＸＥＮＰ２４３０６とＸＥＮＰ３２８０３の組み合わせである。

【0028】

［００２８］第６の態様では、本開示は、固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍を治療する方法を提供し、この方法は、対象に対し、治療的有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、及びＥ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む。

【0029】

［００２９］第７の態様では、本開示は、対象にＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、及びＥ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む。

【0030】

［００３０］第８の態様では、本開示は、対象にＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、及びＥ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む。

【0031】

［００３１］第９の態様では、本開示は、ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及びＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、及びＥ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む。

【0032】

［００３２］第１０の態様では、本開示は、対象にＩＦＮγの生成を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、及びＥ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む。

【0033】

［００３３］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓをさらに含み、前記第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0034】

［００３４］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑをさらに含み、前記第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0035】

［００３５］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0036】

［００３６］いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0037】

［００３７］いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0038】

［００３８］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む。

【0039】

［００３９］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む。

【0040】

［００４０］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメインは、配列番号４に示されるアミノ酸配列を含む。

【0041】

［００４１］いくつかの実施形態では、第１の単量体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む。

【0042】

［００４２］いくつかの実施形態では、第１の単量体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体は、配列番号１６に示されるアミノ酸配列を含む。

【0043】

［００４３］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。

【0044】

［００４４］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合しており、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。

【0045】

［００４５］いくつかの実施形態では、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、独立して、可変長Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカーである。いくつかの実施形態では、第１のリンカー及び／又は第２のリンカーは、独立して、（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（配列番号３９）、（Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４０）、（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４１）、及び（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４２）からなる群から選択されるリンカーを含み、ｎは１から５の間の整数である。

【0046】

［００４６］本明細書に開示される方法のいくつかの実施形態では、第１の単量体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、第１の単量体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体は、配列番号１６に示されるアミノ酸配列を含む。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質はＸＥＮＰ２４３０６である。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質はＸＥＮＰ３２８０３である。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６とＸＥＮＰ３２８０３の組み合わせが使用される。

【0047】

［００４７］本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約５０－約１００％、約７０－約９５％、約８０－約９０％、又は約８０－約８５％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１－約５０％、約５－約３０％、約１０－約２０％、又は約１５－約２０％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８５％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１５％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８４％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１６％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８３％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１７％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８２％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１８％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８１％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１９％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８０％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約２０％を占める。

【0048】

［００４８］本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、２つ以上のヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、対象に投与される。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質との組み合わせが、対象に投与される。

【0049】

［００４９］いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む第２の単量体とを含み；第２のヘテロ二量体タンパク質は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１６に示されるアミノ酸配列．第２の単量体とを含む。

【0050】

［００５０］いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、同時に投与される。いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、連続して投与される。いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、同じ組成物中において投与される。いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、別々の組成物中において投与される。

【0051】

［００５１］いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法のいずれかにより治療される固形腫瘍は、局所的に進行性、再発性又は転移性である。いくつかの実施形態では、前記固形腫瘍は、扁平上皮がん、皮膚扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）がん、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん、膀胱がん、脂肪肉腫、軟部組織肉腫、尿路上皮癌、尿管及び腎盂、多発性骨髄腫、骨肉腫、肝細胞癌、黒色腫、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎細胞癌、肝がん、食道がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝臓癌、メルケル細胞癌、生殖細胞がん、高頻度マイクロサテライト不安定性がん及び頭頚部扁平上皮癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、前記固形腫瘍は、黒色腫、腎細胞癌、非小細胞肺がん、頭頚部扁平上皮癌、及びトリプルネガティブ乳がんから選択される。いくつかの実施形態では、前記固形腫瘍は、黒色腫、腎細胞癌、及び非小細胞肺がんから選択される。いくつかの実施形態では、前記固形腫瘍は、黒色腫、非小細胞肺がん、頭頚部扁平上皮癌、及びトリプルネガティブ乳がんから選択される。

【0052】

［００５２］いくつかの実施形態では、対象は、以前にその状態の治療のための薬剤を投与されたことがない。いくつかの実施形態では、対象は、現在チェックポイント阻害剤を投与されている。いくつかの実施形態では、対象は、以前にチェックポイント阻害剤を投与されたことがある。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＰＤ－１を標的とする。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＰＤ－Ｌ１を標的とする。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＣＴＬＡ－４を標的とする。

【0053】

［００５３］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、体重で、約０．００２５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０８ｍｇ／ｋｇ、約０．１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１２ｍｇ／ｋｇ、約０．１６ｍｇ／ｋｇ、約０．２０ｍｇ／ｋｇ、約０．２４ｍｇ／ｋｇ及び約０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、体重で、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０９ｍｇ／ｋｇ、約０．１３５ｍｇ／ｋｇ、及び約０．２０２５ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、Ｑ１Ｗ、Ｑ２Ｗ、Ｑ３Ｗ、Ｑ４Ｗ、Ｑ５Ｗ及びＱＷ６からなる群から選択される頻度で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、体重で、０．００２５ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１５ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０２５ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．１６ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ及び０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、体重で、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．１３５ｍｇ／ｋｇ、及び０．２０２５ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、Ｑ１Ｗ、Ｑ２Ｗ、Ｑ３Ｗ、Ｑ４Ｗ、Ｑ５Ｗ及びＱ６Ｗからなる群から選択される頻度で投与される。

【0054】

［００５４］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせ（例えばＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３）は、体重で、約０．００２５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０８ｍｇ／ｋｇ、約０．１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１２ｍｇ／ｋｇ、約０．１６ｍｇ／ｋｇ、約０．２０ｍｇ／ｋｇ、約０．２４ｍｇ／ｋｇ及び約０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせ（例えばＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３）は、体重で、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０９ｍｇ／ｋｇ、約０．１３５ｍｇ／ｋｇ、及び約０．２０２５ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせは、Ｑ１Ｗ、Ｑ２Ｗ、Ｑ３Ｗ、Ｑ４Ｗ、Ｑ５Ｗ及びＱ６Ｗからなる群から選択される頻度で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせ（例えばＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３）は、体重で、０．００２５ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１５ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０２５ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．１６ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ及び０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせ（例えばＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３）は、体重で、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．１３５ｍｇ／ｋｇ、及び０．２０２５ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせは、Ｑ１Ｗ、Ｑ２Ｗ、Ｑ３Ｗ、Ｑ４Ｗ、Ｑ５Ｗ及びＱ６Ｗからなる群から選択される頻度で投与される。

【0055】

［００５５］いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、対象に対し、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする前記薬剤は、抗ＰＤ－１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、セミプリマブ、スパルタリズマブ、カムレリズマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、トリパリマブ、ＭＤＸ－１１０６、ＡＭＰ－５１４及びＡＭＰ－２２４から選択される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする前記薬剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、ＢＭＳ－３９８８６、ＫＮ０３５、ＣＫ－３０１及びＭＳＢ００１０７１８Ｃから選択される。

【0056】

［００５６］これら態様及びその他の態様は、本開示全体を踏まえると当業者には自明であろう。

【図面の簡単な説明】

【0057】

【図1】［００５７］ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせが、ヒトＰＢＭＣにおいて、ヒトＮＫ細胞（Ａ）とＣＤ８^＋Ｔ細胞（Ｂ）の用量依存性の増殖を促進することを示している。２２名の個別のヒトドナー由来のＰＢＭＣを、示される全濃度のＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせで４日間処置し、Ｋｉ６７^＋（細胞増殖のマーカー）の頻度を、ＣＤ３^－ ＣＤ５６^＋ＮＫ細胞（Ａ）又はＣＤ３^＋ＣＤ８^＋ＣＤ１６^－Ｔ細胞（Ｂ）についてフローサイトメトリーにより決定した。各点は、２２名のドナーの平均値を表し、エラーバーはＳＥＭを表す。曲線あてはめを、最小二乗法を使用して生成した。ＥＣ_５０値は、可変勾配（４パラメータ）式を使用するアゴニスト対応答を用いる非線形回帰解析により決定した。［ＣＤ＝分化のクラスター；ＮＫ＝ナチュラルキラー；ＰＢＭＣ＝末梢血単核細胞］。

【図2】［００５８］ヒトＰＢＭＣにおいて、ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ、組み換え野生型ＩＬ－１５（ｒＩＬ１５）及び野生型ＩＬ－１５／野生型ＩＬ－１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合（ＸＥＮＰ２２８５３）によって誘導された、ＣＤ８^＋ ターミナルエフェクターＴ細胞増殖の比較を示している。［ＥＣ_５０＝半数効果濃度］。

【図3A-B】［００５９］反復用量のＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ及び異なる用量（０；０．０３ｍｇ／ｋｇ；０．２ｍｇ／ｋｇ及び０．６ｍｇ／ｋｇ）で処置したカニクイザルの全血におけるＣＤ８β^＋Ｔ細胞（Ａ（雄）及びＢ（雌））の絶対数を表すグラフである。

【図3C-D】反復用量のＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ及び異なる用量（０；０．０３ｍｇ／ｋｇ；０．２ｍｇ／ｋｇ及び０．６ｍｇ／ｋｇ）で処置したカニクイザルの全血におけるＮＫ細胞（Ｃ（雄）及びＤ（雌））の絶対数を表すグラフである。カニクイザル由来の全血を、抗体で染色し、ＣＤ８^＋Ｔ細胞をＣＤ４５^＋ ＣＤ３^＋ ＣＤ８β^＋ ＣＤ４^－ ＣＤ１６^－として、及びＮＫ細胞をＣＤ４５^＋ ＣＤ３^－ＣＤ１６^＋として同定した。各データ点は、１つのグループにつき３から５匹のカニクイザルの平均値を表し；エラーバーはＳＤを示す。

【図4】［００６０］合計３回の、ヘテロ二量体タンパク質のＱ２Ｗでの静脈内投与（０．０３ｍｇ／ｋｇ；０．２ｍｇ／ｋｇ及び０．６ｍｇ／ｋｇの用量）後の、カニクイザル（雄と雌との組み合わせ）における、平均（±ＳＤ）ヘテロ二量体タンパク質（ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせの血清濃度（ｎｇ／ｍＬ）対時間（日数）プロファイルを示すグラフである。

【図5】［００６１］ヒトＰＢＭＣを移植した非肥満糖尿病／重症複合免疫不全ガンマ（ＮＳＧ）マウスにおける体重減少を表すグラフである。ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせが、抗ＰＤ１二価抗体である、３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２の存在下又は非存在下において、様々な濃度で投与された。試料：（Ａ）ＰＢＳ；（Ｂ）３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２；（Ｃ）０．３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ；（Ｄ）０．１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ；（Ｅ）０．０３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ；（Ｆ）０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ；（Ｇ）０．３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ＋３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２；（Ｈ）０．１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ＋３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２；（Ｉ）０．０３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ＋３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２；及び（Ｊ）０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ＋３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２。

【図6】［００６２］ヒト腫瘍細胞（ｐｐ６５－ＭＣＦ７）及びヒト白血球源としてｈｕＰＢＭＣを移植した非肥満糖尿病／重症複合免疫不全ガンマ（ＮＳＧ）マウスにおける腫瘍体積の変化のグループ中央値を表すグラフである。ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせが、３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２の存在下又は非存在下において様々な濃度で投与された。試料：（Ａ）ＰＢＳ；（Ｂ）３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２；（Ｃ）１．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ；（Ｄ）０．３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ；（Ｅ）０．１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ；（Ｆ）１．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ＋３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２；（Ｇ）０．３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ＋３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２；及び（Ｈ）０．１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ＋３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ１６４３２。

【図7】［００６３］ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（例えば、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ３２８０３、又はＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ）に関する単剤療法の試験スキーマであり、用量漸増段階及び拡大段階という２つの段階に登録された患者と、これら２つの段階に関する詳細を示している。ＤＬ＝用量レベル；ＤＬＴ＝用量制限毒性；ＭＴＤ＝最大耐用量；ＰＤ＝薬力学；Ｑ２Ｗ＝２週毎；Ｑ３Ｗ＝３週毎；Ｑ４Ｗ＝４週毎；ＲＣＣ＝腎細胞癌；ＲＥＤ＝推奨拡大用量。^ａ ＰＤ効果は、末梢血ＮＫ細胞及びＣＤ８^＋Ｔ細胞の列挙とＫｉ６７染色によって評価される。^ｂｎ＝１／用量レベルから３＋３＋３設計に変更するための安全閾値は実施例６に定義される。≦１００％増量投与から≦５０％増量投与に変更するための安全閾値が実施例６に定義される。^ｄ累積毒性が許容されない忍容性（例えば、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の頻繁な用量遅延）をもたらす場合、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の投与頻度を低下させてもよい。

【図8】［００６４］ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（例えば、アテゾリズマブ（抗ＰＤ－Ｌ１抗体）と組み合わせた、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ３２８０３、又はＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ）に関する併用療法研究スキーマであり、用量漸増段階及び拡大段階という２つの段階に登録した患者と、これら２つの段階に関する詳細を示している。Ｂｘ＝生検；ＣＩＴ＝がん免疫療法；ｃＳＣＣ＝皮膚扁平上皮癌；ＤＬ＝用量レベル；ＤＬＴ＝用量制限毒性；ＧＣ＝胃がん；ＨＮＳＣＣ＝頭頚部扁平上皮癌；ＭＣＣ＝メルケル細胞癌；ＭＳＩ－Ｈ＝高頻度マイクロサテライト不安定性；ＭＴＤ＝最大耐用量；ＮＳＣＬＣ＝非小細胞肺がん；ＰＤ＝薬力学；Ｑ２Ｗ＝２週毎；Ｑ３Ｗ＝３週毎；Ｑ４Ｗ＝４週毎；ＲＣＣ＝腎細胞癌；ＲＥＤ＝ 推奨拡大用量；ＳＣＬＣ＝小細胞肺癌；ＴＢＤ＝未定；ＴＮＢＣ＝トリプルネガティブ乳がん；ＵＣＣ＝尿路上皮癌。^ａ≦００％増量投与から≦５０％へ切り替えるための安全閾値は、実施例６に定義される。^ｂ初期単剤療法のＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の０．０１ｍｇ／ｋｇの用量レベルがＰＤ活性を示す場合、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαのヘテロ二量体タンパク質の開始用量は、初期併用療法のアテゾリズマブ組み合わせコホートにおいて０．００５ｍｇ／ｋｇを超えないであろう。^ｃ累積毒性が許容されない忍容性（例えば、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の頻繁な用量遅延）をもたらす場合、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質／アテゾリズマブの投与頻度を低下してもよい。^ｄ初期ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の用量レベルを知らせるＰＤ効果は、実施例６に定義される。^ｅ 患者は、単剤として又は組み合わせで以前に抗ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１阻害剤を投与され、それまでの治療から臨床的有用性を得たことがなければならない。^ｆ症候には、黒色腫、ＮＳＣＬＣ、ＨＮＳＣＣ、ＴＮＢＣ、ＵＣＣ、ＲＣＣ、ＳＣＬＣ、ＧＣ、ＭＣＣ、ｃＳＣＣ、ＭＳＩ－Ｈがんが含まれる。^ｇ黒色腫、ＲＣＣ、ＵＣＣ、ＮＳＣＬＣ、ＨＮＳＣＣ、及びＴＮＢＣを有する患者が登録される。^ｈＰＤ－Ｌ１閾値は、症候によって異なる場合があり、この後決定される。

【図9】［００６５］ＸＥＮＰ２４３０６単量体１（配列番号９）、ＸＥＮＰ２４３０６単量体２（配列番号１０）、ＸＥＮＰ３２８０３単量体１（配列番号９）、及びＸＥＮＰ３２８０３単量体２（配列番号１６）のアミノ酸配列を提供する。単量体１の配列において、ＩＬ１５部分には下線が引かれており、リンカーはスラッシュでオフセットされて、太字且つ下線で示されている。Ｆｃ部分は２番目のスラッシュの後ろにあり、いずれのフォーマッティングも含まない。単量体２の配列において、ＩＬ１５Ｒα部分には下線が引かれており、リンカーはスラッシュでオフセットされて、太字且つ下線で示されている。Ｆｃ部分は２番目のスラッシュの後ろにあり、いずれのフォーマッティングも含まない。

【図10A】［００６６］ヒトＩＬ－１５前駆体タンパク質（完全長ヒトＩＬ－１５）（配列番号２）、成熟又は切断型ヒトＩＬ－１５タンパク質（配列番号１）、完全長ヒトＩＬ－１５Ｒαタンパク質（配列番号３）、ヒトＩＬ－１５Ｒαタンパク質の細胞外ドメイン（配列番号５４）のアミノ酸配列を提供している。

【図10B】ヒトＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン（配列番号４）、完全長ヒトＩＬ－１５Ｒβタンパク質（配列番号５５）及びヒトＩＬ－１５Ｒβタンパク質の細胞外ドメイン（配列番号５６）のアミノ酸配列を提供している。

【図11A】［００６７］ＸＥＮＰ２８５３野生型ＩＬ－１５－Ｆｃの第１の単量体（配列番号１１）のアミノ酸配列を提供している。

【図11B】ＸＥＮＰ２８２２タンパク質（配列番号１９及び配列番号２０）、及びＸＥＮＰ２３５０４タンパク質（配列番号２９及び配列番号３０）のアミノ酸配列を提供している。

【図11C】ＸＥＮＰ２４０４５タンパク質（配列番号２３及び配列番号２４）、及びＸＥＮＰ２２８２１タンパク質（配列番号１７及び配列番号１８）のアミノ酸配列を提供している。

【図11D】ＸＥＮＰ２３３４３タンパク質（配列番号３１及び配列番号３２）、及びＸＥＮＰ２３５５７タンパク質（配列番号２１及び配列番号２２）のアミノ酸配列を提供している。

【図11E】ＸＥＮＰ２４１１３タンパク質（配列番号３３及び配列番号３４）、及びＸＥＮＰ２４０５１タンパク質（配列番号２５及び配列番号２６）のアミノ酸配列を提供している。

【図11F】ＸＥＮＰ２４３４１タンパク質（配列番号３５及び配列番号３６）、及びＸＥＮＰ２４０５２タンパク質（配列番号２７及び配列番号２８）のアミノ酸配列を提供している。

【図11G】ＸＥＮＰ２４３０１タンパク質（配列番号３７及び配列番号３８）のアミノ酸配列を提供している。

【発明を実施するための形態】

【0058】

一般
［００６８］本明細書に開示される方法の実施、並びに組成物の調製及び使用には、別途指示がない限り、分子生物学、生化学、クロマチン構造と分析、計算化学、細胞培養、組み換えＤＮＡ及び関連分野における、当分野の技術の範囲内の一般的な技術が用いられる。これら技術は文献で十分に説明されている。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ． ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＣＬＯＮＩＮＧ：Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ，Ｓｅｃｏｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９８９ ａｎｄ Ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，２００１；Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，ＣＵＲＲＥＮＴ ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ ＩＮ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＢＩＯＬＯＧＹ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７ ａｎｄ ｐｅｒｉｏｄｉｃ ｕｐｄａｔｅｓ；ｔｈｅ ｓｅｒｉｅｓ ＭＥＴＨＯＤＳ ＩＮ ＥＮＺＹＭＯＬＯＧＹ、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ；Ｗｏｌｆｆｅ，ＣＨＲＯＭＡＴＩＮ ＳＴＲＵＣＴＵＲＥ ＡＮＤ ＦＵＮＣＴＩＯＮ、Ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，１９９８；ＭＥＴＨＯＤＳ ＩＮ ＥＮＺＹＭＯＬＯＧＹ，Ｖｏｌ． ３０４，“Ｃｈｒｏｍａｔｉｎ”（Ｐ．Ｍ． Ｗａｓｓａｒｍａｎ ａｎｄ Ａ． Ｐ． Ｗｏｌｆｆｅ，ｅｄｓ．），Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，１９９９；及びＭＥＴＨＯＤＳ ＩＮ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＢＩＯＬＯＧＹ，Ｖｏｌ． １１９，“Ｃｈｒｏｍａｔｉｎ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ”（Ｐ．Ｂ．Ｂｅｃｋｅｒ，ｅｄ．）Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，１９９９を参照されたい。

【0059】

［００６９］用語「本明細書」は、明細書全体を意味する。

【0060】

［００７０］本明細書に記載される実施形態のいずれもが、本開示の異なる態様及び明細書の異なる部分（実施例にのみ記載される実施形態を含む）に記載されるものを含め、明確に否定されるか又は不適切であると明記されない限り、本明細書に開示される１つ又は複数の他の実施形態と組み合わせることができると理解すべきである。実施形態の組み合わせは、複数の従属項により特許請求される特定の組み合わせに限定されない。

【0061】

［００７１］本明細書において言及されるいずれの出版物、特許、及び公開済み特許出願も、参照により本明細書に具体的に組み込まれる。矛盾する場合は、その特異的定義を含む本明細書が優先する。

【0062】

［００７２］本明細書を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語又はその文法的変形は、言及された整数（若しくは成分）又は整数（若しくは成分）の群を言外に含み、いずれの他の整数（若しくは成分）又は整数（若しくは成分）の群も除外しない。

【0063】

［００７３］本明細書を通して、組成物が特定の成分を有する、含む、又は備える（又はその変形）と記載される場合、組成物が言及された成分から本質的になっても、又はそのような成分からなってもよいと考慮される。同様に、方法又は過程が特定の工程段階を有する、含む、又は備えると記載される場合、その過程は、言及された工程段階から本質的になっても、又はそのような工程段階からなってもよい。さらに、本明細書に記載される組成物及び方法が作用可能である限り、工程の順序又は特定の動作を実施する順序は重要でないと理解すべきである。さらに、２つ以上の工程又は動作を同時に実行することができる。

【0064】

［００７４］用語「～を含む」は、「限定しないが～を含む」を意味するために使用される。「～を含む」及び「限定しないが～を含む」は、交換可能に使用される。

【0065】

［００７５］用語「例えば（”ｅ．ｇ．”又は”ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅ”）」に続く１つ又は複数の例は、排他的又は限定的であることを意味しない。

【0066】

［００７６］冠詞（”ａ”及び”ａｎ”）は、本明細書では、冠詞の文法的対象の１つ又は、２つ以上（即ち、少なくとも１つ）を指すために使用される。例として、「要素（”ｅｌｅｍｅｎｔ”）」は、１つの要素又は２つ以上の要素を意味する。

【0067】

［００７７］本明細書において使用されるとき、本開示の方法に用いられる組成物の成分、パラメータ、計算、又は測定値の数量を修飾する用語「約」は、例えば、実世界において単離されたポリペプチド又は薬学的組成物を作製するために使用される一般的な測定及び液体取り扱い手順により；これら手順の不注意による誤差により；組成物を作製するか又は方法を実行するために用いられる成分の製造、供給源、又は純度の差などにより；本開示の組成物又は方法の化学的又は物理的属性に実質的な影響を及ぼすことなく生じうる数量の変動を指す。このような変動は、所与の値又は範囲の、一般的には１０％以内、さらに一般的には５％以内の大きさの範囲内でありうる。用語「約」は、特定の初期混合物に起因する組成物の異なる平衡条件により異なる量も包含する。用語「約」によって修飾されているかどうかに関わらず、パラグラフは、その数量に相当するものを含む。本明細書における「約」に続く値又はパラメータへの言及は、その値又はパラメータ自体を対象とする実施形態を含む（且つ説明する）。例えば、「約Ｘ」に言及する記載には、「Ｘ」の記載が含まれる。数値範囲は、その範囲を規定する数値を包含する。

【0068】

［００７８］本明細書において使用される用語「又は」は、文脈上そうでないことが明白でない限り、「及び／又は」を意味すると理解されるべきである。

【0069】

［００７９］本開示の広い範囲を示す数値範囲及びパラメータは近似値であるにもかかわらず、特定の実施例に示される数値は可能な限り正確に報告される。しかしながら、任意の数値は、それぞれの試験測定値に見られる標準偏差から必然的に生じる特定の誤差を本質的に含む。さらに、本明細書に開示されるすべての範囲は、そこに含まれるすべての下位範囲を包含すると理解されたい。例えば、「１から１０」と記述される範囲は、最小値１と最大値１０の間のすべての下位範囲（１と１０を含む）；即ち、１以上の最小値で始まるすべての下位範囲、例えば、１から６．１、及び１０以下の最大値で終わるすべての下位範囲例えば、５．５から１０を含むと考えるべきである。範囲の開示は、その範囲の端点の開示としても考慮されるべきである。

【0070】

［００８０］例示的方法及び材料が以下に記載されるが、本明細書に開示されるものと類似又は同等の方法及び材料も、本出願の実施又は試験に使用できる。材料、方法、及び実施例は、例示にすぎず、限定を意図しない。

【0071】

定義
［００８１］以下の用語は、別途指示がない限り、以下の意味を有するものと理解すべきである：

【0072】

［００８２］本明細書において使用される用語「アブレーション」は、活性の低下又は除去を指す。したがって、例えば、「ＦｃγＲ結合をアブレートする」は、Ｆｃ領域アミノ酸バリアントが、特異的バリアントを含まないＦｃ領域と比較して、５０％未満の開始結合を有し、７０％未満、８０％未満、９０％未満、９５％未満又は９８％未満の活性喪失が好ましく、一般に、活性は、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）アッセイ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ及びＰｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）において検出可能な結合のレベルを下回ることを意味する。別途明記されない限り、本明細書に記載されるＦｃドメインは、ＦｃＲｎ受容体への結合を保持する。

【0073】

［００８３］対象に対して物質、化合物又は薬剤「を投与すること」又は対象への物質、化合物又は薬剤「の投与」は、その物質、化合物又は薬剤の、対象又は対象の細胞、組織、器官又は体液への接触を指す。このような投与は、当業者に既知の様々な方法のうちの１つを使用して実行することができる。例えば、化合物又は薬剤は、肺又は直腸への吸入により、舌下又は鼻腔内に投与することができる。投与は、例えば、１回、複数回、及び／又は１つ又は複数の延長期間にわたって実施することもできる。いくつかの実施形態では、投与には、自己投与を含む直接投与と、薬物の処方行為を含む間接投与との両方が含まれる。例えば、本明細書において使用される場合、患者に薬物を自己投与すること、又は別の人に薬物を投与してもらうことを指示する医師、及び／又は患者に薬物の処方を提供する医師は、薬物を患者に投与している。

【0074】

［００８４］本明細書において使用される用語、分子の「親和性」は、分子と結合パートナー、例えば受容体、リガンド又は抗原との間の相互作用の強度を指す。分子のその結合パートナーに対する親和性は、典型的には、特定の相互作用の結合親和性平衡解離定数（ＫＤ）として表され、ＫＤが低いほど親和性が高い。ＫＤ結合親和性定数は、例えばＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）システム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ ａｎｄ Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）を使用して、表面プラズモン共鳴により測定することができる。各々が参照により本明細書に組み込まれる、Ｊｏｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ． Ｂｉｏｌ． Ｃｌｉｎ． ５１：１９ ２６（１９９３）；Ｊｏｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １１：６２０ ６２７（１９９１）；Ｊｏｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ． Ｍｏｌ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔ． ８：１２５ １３１（１９９５）；Ｊｏｈｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８：２６８ ２７７（１９９１）；Ｈｅａｒｔｙ Ｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ． ９０７：４１１－４２（２０１２）も参照されたい。ＫＤは、ＫｉｎＥｘＡ（登録商標）システム（Ｓａｐｉｄｙｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｈａｎｏｖｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ ａｎｄ Ｂｏｉｓｅ，ＩＤ）を使用して測定してもよい。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５ バリアントは、野生型ＩＬ－１５と比較して、ＩＬ－２／ＩＬ－１５βγ受容体に対する結合親和性が低下した。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるヘテロ二量体タンパク質第１の及び／又は第２のＦｃバリアントは、ヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃγ受容体に対する親和性が低下した。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるヘテロ二量体タンパク質の第１及び／又は第２のＦｃバリアントは、ヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃγ受容体に結合しない。

【0075】

［００８５］本明細書において使用される用語「アミノ酸」及び「アミノ酸同一性」は、ＤＮＡ及びＲＮＡによってコードされる２０個の天然に存在する アミノ酸のうちの１つを指す。

【0076】

［００８６］本明細書において使用される用語「アミノ酸置換」又は「置換」は、親ポリペプチド配列の特定の位置におけるアミノ酸の異なるアミノ酸での置き換えを指す。特に、いくつかの実施形態では、置換は、特定の位置に天然には存在せず、生物内又は任意の生物内に天然には存在しないアミノ酸に対するものである。例えば、置換Ｅ２７２Ｙは、位置２７２のグルタミン酸がチロシンで置き換えられているバリアントポリペプチド、この場合はＦｃバリアントを指す。明確にするために、核酸コード配列を変更するが、開始アミノ酸を変更しない（例えば、宿主生物の発現レベルを増加させるためにＣＧＧ（アルギニンをコードする）をＣＧＡ（依然としてアルギニンをコードする）に交換する）ように操作されたタンパク質は、「アミノ酸置換」ではない。即ち、同じタンパク質をコードする新しい遺伝子が生成されたにもかかわらず、タンパク質が、開始位置である特定の位置に同じアミノ酸を有する場合、それはアミノ酸置換とは考慮されない。

【0077】

［００８７］本明細書において使用される用語「アミノ酸挿入」、「アミノ酸付加」又は「付加」又は「挿入」は、親ポリペプチド配列の特定の位置におけるアミノ酸配列の付加を指す。例えば、－２３３Ｅ又は２３３Ｅは、２３３位の後且つ２３４位の前のグルタミン酸の挿入を示す。さらに、－２３３ＡＤＥ又は２３３ＡＤＥは、２３３位の後且つ２３４位の前のＡｌａＡｓｐＧｌｕの挿入を示す。

【0078】

［００８８］本明細書において使用される用語「アミノ酸欠失」又は「欠失」は、親ポリペプチド配列の特定の位置におけるアミノ酸配列の除去を指す。例えば、Ｅ２３３－又はＥ２３３＃、Ｅ２３３（）又はＥ２３３ｄｅｌは、２３３位におけるグルタミン酸の欠失を指す。さらに、ＥＤＡ２３３－又はＥＤＡ２３３＃は、２３３位で始まる配列ＧｌｕＡｓｐＡｌａの欠失を示す。

【0079】

［００８９］本明細書において使用される用語「抗体」又は「Ａｂ」は、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する特異的な標的又は抗原、例えば炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどを認識して少なくとも１つの抗原認識部位を通して結合することのできる、免疫グロブリン分子（例えば、完全抗体、抗体断片又は修飾抗体）を指す。本明細書において使用される用語「抗体」は、あらゆる種類の抗体を含むことができ、これには、限定されないが、所与の抗原に特異的に結合するモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ヒト抗体、操作された抗体（ヒト化抗体、完全ヒト抗体、キメラ抗体、単鎖抗体、人工的に選択された抗体、ＣＤＲ－付与抗体などを含む）が含まれる。いくつかの実施形態では、「抗体」及び／又は「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、任意選択的にジスルフィド結合により相互接続した、少なくとも２つの重（Ｈ）鎖（約５０－７０ｋＤａ）と２つの軽（Ｌ）鎖（約２５ｋＤａ）とを含むポリペプチドを指す。軽鎖には、λとκの二種類がある。ヒトにおいて、λ及びκ軽鎖は類似しているが、各抗体には一種類のみが存在する。重鎖は、ミュー、デルタ、ガンマ、アルファ、又はイプシロンとして分類され、抗体のアイソタイプをそれぞれＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＥとして定義する。概説として、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｃｈ． ７（Ｐａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．，２ｎｄ ｅｄ． Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８９））（参照によりその全体が組み込まれる）を参照されたい。

【0080】

［００９０］本明細書において使用される用語「チェックポイント阻害剤」は、チェックポイントタンパク質を標的としてブロックする化合物を指す。チェックポイント阻害剤は、チェックポイントタンパク質とそのパートナータンパク質との間の相互作用を妨害する。チェックポイント阻害剤の例には、限定されないが、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１軸を標的とする薬剤と、ＣＴＬＡ－４を標的とする薬剤とが含まれる。

【0081】

［００９１］本明細書において使用される用語「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域と、Ｆｃ受容体又は別のエフェクター分子（例えば、Ｆｃ受容体様（ＦｃＲＬ）分子、補体成分Ｃ１ｑ、及び３分裂モチーフ含有タンパク質２１（ＴＲＩＭ２１））との相互作用に起因する生化学的事象を指す。エフェクター機能には、限定されないが、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介性食作用（ＡＤＣＰ）及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）が含まれる。本明細書で使用される用語「ＡＤＣＣ」又は「抗体依存性細胞媒介性細胞傷害」は、ＦｃγＲを発現する非特異的細胞傷害性細胞が標的細胞上の結合した抗体を認識し、続いて標的細胞の溶解を引き起こす細胞媒介反応を指す。ＡＤＣＣはＦｃγＲＩＩＩａへの結合と相関し、ＦｃγＲＩＩＩａへの結合の増加は、ＡＤＣＣ活性の増加をもたらす。本明細書で論じるように、本開示の多くの実施形態は、ＡＤＣＣ活性を完全にアブレートする。本明細書において使用される用語「ＡＤＣＰ」又は抗体依存性細胞媒介性食作用」は、ＦｃγＲを発現する非特異的細胞傷害性細胞が標的細胞上の結合した抗体を認識し、続いて標的細胞の食作用を引き起こす細胞媒介反応を意味する。本明細書において使用される用語「ＣＤＣ」又は「補体依存性細胞傷害」は、古典的補体経路の活性化をもたらすエフェクター機能を指し、これは、抗体の、標的細胞上の抗原への結合によって引き起こされ、血中に補体関連タンパク質群を含む一連のカスケードを活性化する。

【0082】

［００９２］本明細書において使用される用語「Ｆｃ」、「Ｆｃ領域」又は「Ｆｃドメイン」は、本明細書では交換可能に使用され、いくつかの事例では、第１の定常領域の免疫グロブリンドメイン（例えば、ＣＨ１）又はその一部分を除外する抗体の定常領域を含むポリペプチドを指し、いくつかの事例ではヒンジの一部を指す。したがって、Ｆｃは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＧの最後の２つの定常領域の免疫グロブリンドメイン（例えば、ＣＨ２及びＣＨ３）と、ＩｇＥ及びＩｇＭの最後の３つの定常領域の免疫グロブリンドメインと、これらドメインへのフレキシブルヒンジＮ末端とを指すことができる。ＩｇＡ及びＩｇＭの場合、ＦｃはＪ鎖を含みうる。ＩｇＧの場合、Ｆｃドメインは、免疫グロブリンドメインＣγ２及びＣγ３（Ｃγ２及びＣγ３）並びにＣγ１（Ｃγ１）とＣγ２（Ｃγ２）との間の下側ヒンジ領域を含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃは、免疫グロブリンの切断型ＣＨ１ドメインと、ＣＨ２及びＣＨ３を指す。Ｆｃ領域の境界は変化しうるが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、そのカルボキシル末端に残基Ｅ２１６又はＣ２２６又はＰ２３０を含むと定義され、番号付けはＥＵ番号付けに従う。いくつかの実施形態では、本明細書にさらに詳細に記載されるように、例えば１つ又は複数のＦｃγＲ受容体又はＦｃＲｎ受容体に対する結合を変更するために、アミノ酸修飾がＦｃ領域に対して行われる。いくつかの実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ１重鎖のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒトＩｇＧ２重鎖のＦｃドメインに由来している。「エーデルマンに規定されるＥＵフォーマット」又は「ＥＵ番号付け」又は「ＥＵインデックス」は、Ｅｄｅｌｍａｎ ＧＭ ｅｔ ａｌ．（Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． ＵＳＡ（１９６９），６３，７８－８５、参照により本明細書に全体が組み込まれる）に記載されるヒトＦｃドメインの残基の番号付けを指す。

【0083】

［００９３］本明細書において使用される用語「Ｆｃ融合タンパク質」及び「イムノアドヘシン」は、交換可能に使用され、一般に、（任意選択的に本明細書に記載されるリンカー部分を通して）本明細書に記載される異なるタンパク質に、例えばＩＬ－１５及び／又はＩＬ－１５Ｒに結合された、Ｆｃ領域を含むタンパク質を指す。いくつかの例では、２つのＦｃ融合タンパク質は、ホモ二量体Ｆｃ融合タンパク質又はヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質を形成することができ、後者が好ましい。

【0084】

［００９４］本明細書において使用される用語「Ｆｃバリアント」又は「バリアントＦｃ」は、Ｆｃドメインにアミノ酸修飾を含むタンパク質を指す。本発明のＦｃバリアントは、それらを構成するアミノ酸修飾に従って定義される。したがって、例えば、Ｎ４３４Ｓ又は４３４Ｓは、親Ｆｃポリペプチドと比較して４３４位に置換セリンを有するＦｃバリアントであり、番号付けはＥＵインデックスに従う。同様に、Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓは、親Ｆｃポリペプチドと比較して置換Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓを有するＦｃバリアントを定義する。ＷＴアミノ酸の識別は未特定であってもよく、その場合、上記バリアントは４２８Ｌ／４３４Ｓと呼ばれる。置換が提供される順序は任意であり、即ち、例えば、４２８Ｌ／４３４Ｓは、Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓと同じＦｃバリアントであることなどに留意されたい。抗体に関連する本発明で論じられるすべての位置について、別途記載のない限り、アミノ酸位置の番号付けはＥＵインデックスに従う。修飾は、付加、欠失、又は置換でありうる。置換は、天然に存在するアミノ酸、及び場合によっては合成アミノ酸を含むことができる。例には、限定されないが、米国特許第６，５８６，２０７号；国際公開第９８／４８０３２号；国際公開第０３／０７３２３８号；米国特許出願公開第２００４－０２１４９８８号；国際公開第０５／３５７２７Ａ２号；国際公開第０５／７４５２４Ａ２号；Ｊ． Ｗ． Ｃｈｉｎ ｅｔ ａｌ．，（２００２），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ １２４：９０２６－９０２７；Ｊ． Ｗ． Ｃｈｉｎ，＆ Ｐ． Ｇ． Ｓｃｈｕｌｔｚ，（２００２），ＣｈｅｍＢｉｏＣｈｅｍ １１：１１３５－１１３７；Ｊ． Ｗ． Ｃｈｉｎ，ｅｔ ａｌ．，（２００２），ＰＩＣＡＳ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ ９９：１１０２０－１１０２４；及び、Ｌ． Ｗａｎｇ，＆ Ｐ． Ｇ． Ｓｃｈｕｌｔｚ，（２００２），Ｃｈｅｍ． １－１０が含まれ、これはすべて参照により全体が組み込まれる。

【0085】

［００９５］本明細書において使用される用語「Ｆｃガンマ受容体」、「ＦｃγＲ」及び「ＦｃガンマＲ」は、交換可能に使用され、ＩｇＧ抗体のＦｃ領域に結合するタンパク質のファミリーのいずれかのメンバーを指し、ＦｃγＲ遺伝子によってコードされる。ＦｃγＲは、任意の生物由来のものでよい。いくつかの実施形態では、ＦｃγＲはヒトＦｃγＲである。ヒトでは、このファミリーには、限定されないが、アイソフォームＦｃγＲＩａ、ＦｃγＲＩｂ及びＦｃγＲＩｃを含むＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）；アイソフォームＦｃγＲＩＩａ（アロタイプＨ１３１及びＲ１３１を含む）、ＦｃγＲＩＩｂ（ＦｃγＲＩＩｂ－１及びＦｃγＲＩＩｂ－２を含む）、及びＦｃγＲＩＩｃを含むＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）；アイソフォームＦｃγＲＩＩＩａ（アロタイプＶ１５８及びＦ１５８を含む）及びＦｃγＲＩＩＩｂ（アロタイプＦｃγＲＩＩｂ－ＮＡ１及びＦｃγＲＩＩｂ－ＮＡ２を含む）を含むＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）（Ｊｅｆｆｅｒｉｓ ｅｔ ａｌ．，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ ８２：５７－６５（参照により全体が組み込まれる））、並びに、任意の未発見のヒトＦｃγＲ又はＦｃγＲアイソフォーム若しくはアロタイプが含まれる。

【0086】

［００９６］本明細書において使用される用語「ＦｃＲｎ」又は「新生児Ｆｃ受容体」は、ＩｇＧ抗体Ｆｃ領域に結合し、ＦｃＲｎ遺伝子によって少なくとも部分的にコードされるタンパク質を指す。ＦｃＲｎは、任意の生物に由来するものでよい。いくつかの実施形態では、ＦｃＲｎは、ヒトＦｃＲｎである。当技術分野で知られているように、機能性ＦｃＲｎタンパク質は、多くの場合重鎖及び軽鎖と呼ばれる２つのポリペプチドを含む。軽鎖はベータ２ミクログロブリンであり、重鎖はＦｃＲｎ遺伝子によってコードされる。本明細書で別途明記されない限り、ＦｃＲｎ又はＦｃＲｎタンパク質は、ＦｃＲｎ重鎖とベータ２ミクログロブリンとの複合体を指す。様々なＦｃＲｎバリアントを使用して、ＦｃＲｎ受容体への結合を増加させ、場合によっては血清半減期を増加させることができる。一般に、別途明記されない限り、本明細書に開示されるＦｃモノマーは、ＦｃＲｎ受容体への結合を保持する（且つ、以下に述べるように、ＦｃＲｎ受容体への結合を増加させるアミノ酸バリアントを含むことができる）。

【0087】

［００９７］本明細書において使用される用語「修飾」は、ポリペプチド配列におけるアミノ酸置換、挿入、及び／若しくは欠失又はタンパク質に化学的に結合している部分への変更を指す。例えば、修飾は、タンパク質に結合した変化した炭水化物又はＰＥＧ構造でありうる。本明細書において「アミノ酸修飾」とは、ポリペプチド配列におけるアミノ酸の置換、挿入及び／又は欠失を意味する。明確にするために、別途明記されない限り、アミノ酸修飾は常に、ＤＮＡによってコードされるアミノ酸、例えば、ＤＮＡ及びＲＮＡにコドンを有する２０個のアミノ酸に言及している。

【0088】

［００９８］用語「核酸」、「ポリヌクレオチド」及び「オリゴヌクレオチド」は、交換可能に使用され、線形又は円形コンホメーション、且つ一本鎖又は二本鎖形態の、デオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドポリマーを指す。本開示の目的のために、これら用語は、ポリマーの長さに関する限定と解釈されない。これら用語は、天然ヌクレオチド、並びに塩基部分、糖部分及び／又はホスフェート部分において修飾されたヌクレオチドの既知のアナログ（例えば、ホスホロチオエート骨格）を包含することができる。一般に、特定のヌクレオチドのアナログは、同じ塩基－ペアリング特異性を有し；即ち、ＡのアナログはＴとの塩基対であろう。

【0089】

［００９９］本明細書において使用される用語「天然に存在しない修飾」は、アイソタイプでないアミノ酸修飾を指す。例えば、ＩｇＧのいずれも４３４位にセリンを含まないので、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４（又はそれらのハイブリッド）における置換４３４Ｓは、天然に存在しない修飾と考えられる。

【0090】

［００１００］用語「患者」、「対象」及び「個体」は、本明細書において交換可能に使用され、治療が必要なヒト又は非ヒト動物を指す。これら用語には、哺乳動物、例えばヒト、及び霊長類（例えば、サル）が含まれる。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。いくつかの実施形態では、対象はがんの治療を必要としている。本明細書において使用される用語「治療／処置すること」及び「治療／処置」は、症状の重症度及び／又は頻度の低下、症状及び／又はその原因の排除、症状の発生及び／又はその原因の予防、並びに損傷の改善又は修復を指す。

【0091】

［００１０１］本明細書において使用される、タンパク質配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」は、配列同一性最大パーセントが得られるように、配列を整列させ、必要に応じてギャップを導入した後に、いかなる保存的置換も配列同一性の部分として考慮せずに、特定の（親）配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列中のアミノ酸残基のパーセンテージとして定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のための整列は、当技術分野における技術の範囲内にある種々の方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、又はＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアといった公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して達成することができる。当業者であれば、比較されている配列の完全長にわたって最大の整列を達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、整列を測定するための適切なパラメータを決定することができる。１つの特定のプログラムは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１６０２４４５２５号の段落［０２７９］～［０２８０］に概説されているＡＬＩＧＮ－２プログラムである。

【0092】

［００１０２］本明細書において使用される用語「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」は、交換可能に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。この用語は、１つ又は複数のアミノ酸が対応する天然に存在するアミノ酸の化学アナログ又は修飾された誘導体であるアミノ酸ポリマーにも適用される。細胞における融合タンパク質の発現は、融合タンパク質の細胞への送達に起因するか、又は融合タンパク質をコードするポリヌクレオチドの細胞への送達により生じさせることができ、ポリヌクレオチドは転写され、転写物が翻訳されて、融合タンパク質が生成される。トランススプライシング、ポリペプチド切断及びポリペプチドライゲーションも、細胞におけるタンパク質の発現に関与している可能性がある。細胞へのポリヌクレオチド及びポリペプチド送達のための方法は従来技術に既知である。

【0093】

［００１０３］本明細書において使用される用語「位」は、タンパク質の配列中の位置を指す。位置は、連続的に、又は確立されたフォーマット、例えば抗体番号付けのためのＥＵインデックスに従って、番号付けされうる。位置は、参照配列に対して定義されうる。このような場合、参照配列は、比較目的で提供され、本開示のヘテロ二量体タンパク質（又はその一部分）は、参照配列に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含みうる。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質（又はその一部分）は、参照配列に対するいかなる追加的アミノ酸変更も含まない。

【0094】

［００１０４］本明細書において使用される用語「残基」は、タンパク質中の位置及びそれに関連付けられるアミノ酸同一性を指す。例えば、アスパラギン２９７（Ａｓｎ２９７又はＮ２９７とも呼ばれる）は、特定のタンパク質中の２９７位における残基である。

【0095】

［００１０５］本明細書において使用される用語「治療的有効量」は、治療される状態の症状のうちの１つ又は複数をある程度まで軽減するであろう、単剤として又は１つ若しくは複数の追加の薬剤との組み合わせで投与される治療剤の量を指す。いくつかの実施形態では、治療的有効量は、有効な又は所望の臨床結果をもたらすために十分な量である。がんの治療に関して、治療的有効量は、以下の効果のうちの少なくとも１つを有する量を指す：がん（及び／又はそれに関連付けられる症状）の進行を緩和する、改善する、安定化する、後退させる、予防する、遅らせる又は遅延させる。本開示において使用されうる有効量は、投与方式、対象の年齢、体重、及び健康全般に応じて変化する。適切な量及び投薬レジメンは、当技術分野で常套的なスキルを使用して決定することができる。

【0096】

［００１０６］本明細書において使用される用語「有効量」は、完全に又は部分的に有効な又は所望の結果を引き起こすために十分な量であろう、単剤として又は１つ若しくは複数の追加の薬剤との組み合わせで投与される薬剤の量を指す。本開示において使用されうる有効量は、投与方式、対象の年齢、体重、及び健康全般に応じて変化する。適切な量及び投薬レジメンは、当技術分野で常套的なスキルを使用して決定することができる。

【0097】

［００１０７］用語「野生型」又は「ＷＴ」は、本明細書において交換可能に使用され、対立遺伝子の変種を含め、天然に見られるアミノ酸配列又はヌクレオチド配列を指す。ＷＴタンパク質は、意図的に修飾されていないアミノ酸配列を有するか、又は意図的に修飾されていないヌクレオチド配列によってコードされている。

【0098】

一般
［００１０８］本開示は、固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍の治療方法に関し、この方法は、対象に対し、ＩＬ－１５及びＩＬ－１５受容体アルファ（ＩＬ－１５Ｒα）タンパク質ドメインを含む治療的有効量のヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質（又はヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質の組み合わせ）を投与することを含む。本開示は、ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及び／又はＮＫ細胞の増殖を対象に誘導するため、又はＩＦＮγ生成を対象に誘導するための方法に関し、この方法は、対象に対し、ＩＬ－１５及びＩＬ－１５受容体アルファ（ＩＬ－１５Ｒα）タンパク質ドメインを含む有効量のヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質（又はヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質の組み合わせ）を投与することを含む。Ｆｃドメインは、ＩｇＧ Ｆｃドメイン、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４のＦｃドメインから得ることができる。

【0099】

ＩＬ１５－ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質
［００１０９］開示内容全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１８／０１１８８０５号に開示されるＩＬ１５－ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質のいずれか、又はそれらの組み合わせが、本明細書に開示される方法に使用されうる。これらには、特に、立体バリアント（例えば、「ノブ・ホール」、「スキュー」、「静電ステアリング」、「静電対」バリアント）、ｐＩバリアント、アイソタイプバリアント、ＦｃγＲバリアント、及びアブレーションバリアント（例えば、「ＦｃγＲアブレーションバリアント」又は「Ｆｃノックアウト（ＦｃＫＯ又はＫＯ）」バリアント）といったＦｃバリアント、並びに本明細書に開示される様々なＩＬ－１５及びＩＬ１５Ｒαタンパク質が含まれる。

【0100】

［００１１０］したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法において有用なヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む。

【0101】

［００１１１］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＳ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＬ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＬ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＴ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＬ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＫ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＳ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＬ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＳ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＳ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＤ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインは、それぞれ、アミノ酸置換のＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓの組（ＥＵ番号付けによる）を含む。

【0102】

［００１１２］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ、又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ、又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ、又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ、又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0103】

［００１１３］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、遊離システインを２２０位に含まない。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、遊離システインを２２０位に含まない。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、遊離システインを２２０位に含まない。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインの両方がアミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。

【0104】

［００１１４］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｇ２３６Ｒ、Ｓ２３９Ｋ、Ｓ２６７Ｋ、Ａ３２７Ｇ、及びＬ３２８Ｒ又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換のうちのいずれか１つをさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｇ２３６Ｒ、Ｓ２３９Ｋ、Ｓ２６７Ｋ、Ａ３２７Ｇ、及びＬ３２８Ｒ、又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換のうちのいずれか１つをさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは各々が、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含む。

【0105】

［００１１５］様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）中の対応する位置を基準にしている。野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ１の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。当業者であれば、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４のＦｃドメインに由来するＦｃドメインにおける対応する置換を決定することができるであろう。例えば、当業者であれば、残基Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５及びＧ２３６が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来するＦｃドメイン中に存在することが分かるであろう。いくつかの実施形態では、様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）中の対応する位置を基準にしている。野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ３の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0106】

［００１１６］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及び Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第１の第２のＦｃドメインは、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第２のＦｃドメインは、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している。

【0107】

［００１１７］当業者であれば、ＩｇＧ２のＦｃドメインに由来するＦｃドメインにおける対応する残基がＰ２３３、Ｖ２３４、及びＡ２３５であり、ＩｇＧ２に由来するＦｃドメインが残基Ｇ２３６に対応する残基を欠くことも理解するであろう。したがって、当業者であれば、ＦｃドメインがＩｇＧ２のＦｃドメイン（即ち、野生型ＩｇＧ２中に存在するＰＶＡ－配列）である場合、本明細書におけるＥ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、及びＧ２３６ｄｅｌへの言及が、Ｐ２３３、Ｖ２３４、Ａ２３５及び－２３６への言及であることを理解するであろう。いくつかの実施形態では、様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）中の対応する位置を基準にしている。野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃ部分は、野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ２の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0108】

［００１１８］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｌ３２８Ｒ；Ｓ２３９Ｋ；Ｓ２６７Ｋ；Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＳ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ２のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメインは、Ｌ３２８Ｒ；Ｓ２３９Ｋ；Ｓ２６７Ｋ；Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＳ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ２のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第２のＦｃドメインは、Ｌ３２８Ｒ；Ｓ２３９Ｋ；Ｓ２６７Ｋ；Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＳ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ２のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｌ３２８Ｒ；Ｓ２３９Ｋ；Ｓ２６７Ｋ；Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＳ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ２のＦｃドメインに由来している。

【0109】

［００１１９］当業者であれば、ＩｇＧ４に由来するＦｃドメインでは、残基２３４がフェニルアラニンであることも理解するであろう。したがって、当業者であれば、ＦｃドメインがＩｇＧ４のＦｃドメインに由来している場合、本明細書におけるＬ２３４（例えば、Ｌ２３４Ｖ）への言及が、Ｆ２３４（例えば、Ｆ２３４Ｖ）への言及であることを理解するであろう。いくつかの実施形態では、様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）中の対応する位置を基準にしている。野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ４の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0110】

［００１２０］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ４又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第２のＦｃドメインは、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ４のＦｃドメインに由来している。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及びＥ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４のＦｃドメインに由来している。

【0111】

［００１２１］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ又はＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｎ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ又はＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｎ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0112】

［００１２２］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。Ｋ２４６Ｔ置換は、第２のＦｃドメインに出現すると、第２の単量体のアミノ酸番号付け（例えば、配列番号１０及び１６参照）に基づいてＫ１００Ｔ変異とも呼ばれる。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0113】

［００１２３］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓをさらに含む（ＥＵ番号付けによる）。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓをさらに含む（ＥＵ番号付けによる）。

【0114】

［００１２４］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｓ３６４Ｋ、及びＥ３５７Ｑを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓをさらに含む（ＥＵ番号付けによる）。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｋ２４６Ｔ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓをさらに含む（ＥＵ番号付けによる）。

【0115】

［００１２５］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の第１のＦｃドメインは、配列番号６に示される配列を含む。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の第２のＦｃドメインは、配列番号７に示される配列を含む。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の第２のＦｃドメインは、配列番号８に示される配列を含む。

【0116】

［００１２６］いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＦｃバリアントドメインのアミノ酸置換のうちのいずれか１つは、単量体の一方又は両方の単量体上にある（例えば、第１のＦｃドメイン上；第２のＦｃドメイン上又は両方のＦｃドメイン上）。

【0117】

［００１２７］いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ２に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ３に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ２に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ３に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ４に由来する。

【0118】

［００１２８］本明細書において使用される「ＩＬ－１５」、「ＩＬ１５」又は「インターロイキン１５」は、交換可能に使用することができ、サイトカインのファミリーに属する４－α－ヘリックスタンパク質を指しうる。ＩＬ－１５は、ＩＬ－２／ＩＬ－１５受容体β（ＩＬ－１５Ｒβ）（ＣＤ１２２）サブユニットで構成される受容体複合体を通してシグナル伝達する。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、配列番号２（完全長ヒトＩＬ－１５）に示されるポリペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、配列番号１（切断型又は成熟ヒトＩＬ－１５）に示されるポリペプチド配列を含む。

【0119】

［００１２９］いくつかの実施形態では、第１の単量体のＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５タンパク質（配列番号１）とは異なるアミノ酸配列を有するＩＬ－１５タンパク質バリアントである。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５バリアントは、急性毒性を低下させることにより忍容性を向上させて薬物動態を拡大させることを目標として、ＩＬ－２／ＩＬ－１５βγ受容体複合体に対して低下した結合親和性（野生型ＩＬ－１５と比較して）を有し、ＣＤ８^＋Ｔ細胞及びＮＫ細胞上でのＩＬ－１５媒介性シグナル伝達を介して最終的に抗腫瘍免疫を促進するように操作される。一部の実施形態では、第１の単量体のＩＬ－１５タンパク質バリアントの配列は、野生型ＩＬ－１５配列タンパク質（配列番号１）と比較して、少なくとも１つの（即ち、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０又はそれよりも多くの）アミノ酸置換を有する。いくつかの実施形態では、アミノ酸置換は、ＩＬ－１５Ｒ及び／又はＩＬ－２／ＩＬ－１５βγ受容体複合体と相互作用するＩＬ－１５のドメインに、アミノ酸置換又は欠失のうちの１つ又は複数を含みうる。いくつかの実施形態では、アミノ酸置換は、野生型ＩＬ－１５の親和性と比較して、ＩＬ－２／ＩＬ－１５βγ受容体複合体に対する結合親和性の低下を引き起こす、ＩＬ－１５タンパク質のドメインにおけるアミノ酸置換又は欠失のうちの１つ又は複数を含みうる。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ１Ｄ、Ｎ４Ｄ、Ｄ８Ｎ、Ｄ３０Ｎ、Ｄ６１Ｎ、Ｅ６４Ｑ、Ｎ６５Ｄ及びＱ１０８Ｅからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、前記ＩＬ１５タンパク質は、Ｅ８７Ｃ、Ｖ４９Ｃ、Ｌ５２Ｃ、Ｅ８９Ｃ、Ｑ４８Ｃ、Ｅ５３Ｃ、Ｃ４２Ｓ及びＬ４５Ｃからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。本明細書に開示されるＩＬ－１５タンパク質のアミノ酸置換は、野生型ＩＬ－１５（成熟形態；配列番号１）に対するものである。野生型ＩＬ－１５（成熟形態；配列番号１）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含みうる。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、異なる野生型ヒトＩＬ－１５の対立遺伝子に由来するものでよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５と比較していかなる追加のアミノ酸変更も含まない。いくつかの実施形態では、第１の単量体中に存在するＩＬ－１５タンパク質バリアントは、配列番号５（ＸＥＮＰ２４３０６／ＸＥＮＰ３２８０３）に示されるアミノ酸配列を含む。

【0120】

［００１３０］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む。いくつかの実施態様では、ＩＬ－１５タンパク質は、以下のアミノ酸置換：Ｎ４Ｄ及びＮ６５Ｄを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、以下のアミノ酸置換：Ｄ３０Ｎ及びＮ６５Ｄを含む。いくつかの実施形態では、第１の単量体中に存在するＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換及びＮ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１の単量体中に存在するＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換及びＮ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１の単量体中に存在するＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる。本明細書に開示されるＩＬ－１５タンパク質のアミノ酸置換は、野生型ＩＬ－１５（配列番号１）に対するものである。野生型ＩＬ－１５（配列番号１）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含みうる。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、異なる野生型ヒトＩＬ－１５の対立遺伝子に由来するものでよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５と比較していかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0121】

［００１３１］ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、小胞体（ＥＲ）から細胞質を通したＩＬ－１５の輸送と、細胞表面上でのＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα複合体の提示とを促進する、ＩＬ－１５に対する極めて高い親和性を有する膜貫通タンパク質である。本明細書において使用される用語「ＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン」は、ＩＬ－１５Ｒα又は組み換えヒトＩＬ－１５受容体αの切断型細胞外領域を指す。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、配列番号３（完全長ヒトＩＬ－１５Ｒα）のポリペプチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、配列番号４（ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン）のポリペプチド配列を含む。

【0122】

［００１３２］いくつかの実施形態では、前記ＩＬ１５Ｒαタンパク質は、残基６５（６５ＤＰＣ又はＤ９６／Ｐ９７／Ｃ９８、６５ＤＣＡ又はＤ９６／Ｃ９７／Ａ９８）、Ｓ４０Ｃ、Ｋ３４Ｃ、Ｇ３８Ｃ、Ｌ４２Ｃ及びＡ３７Ｃの後ろにＤＰＣ又はＤＣＡ挿入からなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸変更を含む。ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のこれらアミノ酸置換の番号付けは、ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）に対するものである。ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含みうる。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、異なる野生型ヒトＩＬ－１５Ｒαの対立遺伝子に由来するものでよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0123】

［００１３３］いくつかの実施形態では、ＩＬ１５タンパク質及びＩＬ１５Ｒαタンパク質は、Ｅ８７Ｃ：６５ＤＰＣ（残基６５又はＤ９６／Ｐ９７／Ｃ９８の後のＤＰＣ挿入）；Ｅ８７Ｃ：６５ＤＣＡ（残基６５又はＤ９６／Ｃ９７／Ａ９８の後ろのＤＣＡ挿入）；Ｖ４９Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｌ５２Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｅ８９Ｃ：Ｋ３４Ｃ；Ｑ４８Ｃ：Ｇ３８Ｃ；Ｅ５３Ｃ：Ｌ４２Ｃ；Ｃ４２Ｓ：Ａ３７Ｃ；及びＬ４５Ｃ：Ａ３７Ｃからなる群からそれぞれ選択される一組のアミノ酸置換又は付加を含む。ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のこれらアミノ酸置換の番号付けは、ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）に対するものである。ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含みうる。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαは、異なる野生型ヒトＩＬ－１５Ｒαの対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（配列番号４）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0124】

［００１３４］いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、配列番号３（完全長ヒトＩＬ－１５Ｒα）のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、配列番号４（ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン）のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、配列番号４（ヒトＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン）を含む。

【0125】

［００１３５］本開示のヘテロ二量体タンパク質は、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα－Ｆｃヘテロ二量体融合タンパク質である。ヘテロ二量体Ｆｃドメインの一方の側のＮ末端は、ＩＬ－１５タンパク質のＣ末端に共有結合し、他方の側は、ＩＬ－１５Ｒαのスシドメイン（切断型細胞外領域）に共有結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質及びＩＬ－１５Ｒα（スシドメイン）は、ＩＬ－１５及びＩＬ－１５ＲαのＣ末端と、Ｆｃ領域の各々のＮ末端との間に、可変長リンカーを有しうる。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５タンパク質は、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、第２のリンカーを使用して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している。本明細書において使用される用語「リンカー」は、２つ以上のドメインを結合するポリペプチド配列を指す。リンカーの特性及び特定の目的のためのそれらの安定性は、当技術分野において既知である。例えば、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ． Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ． Ｏｃｔｏｂｅｒ １５；６５（１０）：１３５７－１３６９（２０１３）（様々な種類のリンカー、それらの特性、並びに関連するリンカー設計ツール及びデータベースを開示する）を参照することができ、これは参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、リンカーは、柔軟性であるか、剛性であるか、又はｉｎ ｖｉｖｏで切断可能である。いくつかの実施形態では、リンカーは柔軟性である。柔軟性のリンカーは、典型的には、小さな非極性アミノ酸（例えばＧｌｙ）又は極性アミノ酸（例えば、Ｓｅｒ又はＴｈｒ）を含む。本開示に使用することのできる柔軟性リンカーの例は、主にＧｌｙ及びＳｅｒ残基のストレッチ（「ＧＳ」リンカー）からなる配列である。いくつかの実施形態では、柔軟性リンカーは、４つのＧｌｙ及びＳｅｒ残基の反復を含む。いくつかの実施形態では、柔軟性リンカーは、５つのＧｌｙ及びＳｅｒ残基の１－５の反復を含む。柔軟性リンカーの非限定的な例には、（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（配列番号３９）、（Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４０）、（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４１）、及び（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４２）（式中、ｎは１から５の間の任意の整数でありうる）を含む。いくつかの実施形態では、リンカーは、５から２５のアミノ酸残基長である。いくつかの実施形態では、柔軟性リンカーは、５、１０、１５、２０、又は２５の残基を含む。他の適切なリンカーは、ＡＳ（配列番号４３）、ＡＳＴ（配列番号４４）、ＴＶＡＡＰＳ（配列番号４５）、ＴＶＡ（配列番号４６）、ＡＳＴＳＧＰＳ（配列番号４７）、ＫＥＳＧＳＶＳＳＥＱＬＡＱＦＲＳＬＤ（配列番号４８）、ＥＧＫＳＳＧＳＧＳＥＳＫＳＴ（配列番号４９），（Ｇｌｙ）６（配列番号５０），（Ｇｌｙ）８（配列番号５１）、及びＧＳＡＧＳＡＡＧＳＧＥＦ（配列番号５２）からなる群から選択されうる。一般に、柔軟性リンカーは、良好な柔軟性及び溶解度を提供し、機能ドメイン間の距離を保つための受動的リンカーとして機能しうる。柔軟性リンカーの長さは、適正なフォールディングを可能にするか、又は融合タンパク質の最適な生物活性を達成するために調整することができる。いくつかの実施形態では、リンカーは、配列（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ；配列番号５３）を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２のリンカーは、異なる配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２のリンカーは、同じ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２のリンカーは、配列番号５３に示される配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２のリンカーは、配列番号５３に示される配列からなる。

【0126】

［００１３６］いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法において有用なヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインは、前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は独立して、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換及びＮ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む。様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）中の対応する位置を基準としている。野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）に対して追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ１の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメイン（配列番号１２）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。本明細書に開示されるＩＬ－１５タンパク質のアミノ酸置換は、野生型ＩＬ－１５（成熟形態；配列番号１）に対するものである。野生型ＩＬ－１５（成熟形態；配列番号１）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５に対する追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含みうる。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、異なる野生型ヒトＩＬ－１５の対立遺伝子に由来するものでよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５と比較していかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0127】

［００１３７］当業者であれば、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４のＦｃドメインに由来するＦｃドメイン中の対応する置換を決定することができるであろう。例えば、当業者であれば、残基Ｅ２３３、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｇ２３６及びＡ３２７が、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来するＦｃドメイン中に存在することが分かるであろう。いくつかの実施形態では、様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）中の対応する位置を基準にしている。野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）に対して追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ３の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ３のＦｃドメイン（配列番号１４）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。したがって、当業者は、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、ＦｃドメインがＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来しているとき、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を独立して含むことを理解するであろう。

【0128】

［００１３８］当業者であれば、ＩｇＧ２のＦｃドメインに由来するＦｃドメイン中の対応する残基がＰ２３３、Ｖ２３４、Ａ２３５及びＧ３２７であり、ＩｇＧ２に由来するＦｃドメインが残基Ｇ２３６に対応する残基を欠くことも理解するであろう。したがって、当業者は、ＦｃドメインがＩｇＧ２のＦｃドメイン（即ち、野生型ＩｇＧ２中に存在するＰＶＡ－配列）である場合、本明細書におけるＥ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ Ｇ２３６ｄｅｌ及びＡ３２７Ｇへの言及が、Ｐ２３３、Ｖ２３４、Ａ２３５、－２３６への言及であり、残基３２７における置換でないことを理解するであろう。いくつかの実施形態では、様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）中の対応する位置を基準にしている。野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）に対して追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ２の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ２のＦｃドメイン（配列番号１３）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。したがって、当業者は、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、ＦｃドメインがＩｇＧ２のＦｃドメインに由来しているとき、アミノ酸置換Ｓ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を独立して含むことを理解するであろう。

【0129】

［００１３９］当業者であれば、ＩｇＧ４に由来するＦｃドメインでは、残基２３４がフェニルアラニンであり、残基３２７がグリシンであることも理解するであろう。したがって、当業者であれば、ＦｃドメインがＩｇＧ４Ｆｃドメインに由来している場合、本明細書におけるＬ２３４（例えば、Ｌ２３４Ｖ）及びＡ３２７（例えば、Ａ３２７Ｇ）への言及が、それぞれＦ２３４（例えば、Ｆ２３４Ｖ）への言及であり、残基３２７における置換でないことを理解するであろう。いくつかの実施形態では、様々なＦｃドメイン置換の位置は、野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）中の対応する位置を基準にしている。野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）のアミノ酸配列は、比較目的で提供される例示的配列であり、ヘテロ二量体タンパク質のＩＬ－１５Ｒαタンパク質は、野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）に対して追加のアミノ酸変更（例えば、置換、挿入、及び欠失）を含んでもよい。例えば、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、異なる野生型ヒトＩｇＧ４の対立遺伝子に由来するものでもよい。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ４のＦｃドメイン（配列番号１５）に対するいかなる追加のアミノ酸変更も含まない。したがって、当業者であれば、ＦｃドメインがＩｇＧ４のＦｃドメインに由来しているとき、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を独立して含むことを理解するであろう。

【0130】

［００１４０］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインは、より低いｐＨ（６．０）で全身曝露をさらに延長し、ＦｃＲｎ結合の強化を通して半減期を延ばすように独立して操作される。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域に対する追加の操作により、本開示のヘテロ二量体タンパク質はエフェクターを持たなくなり（即ちＦｃγ受容体への結合を無効にする）、Ｔ細胞及びＮＫ細胞の抗体媒介性ＣＬが排除される。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインは、ホモ二量体化形成よりヘテロ二量体化形成を促すように独立して操作される。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインは、改善されたＰＫを有するように独立して操作される。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインは、２つの単量体間のｐＩ差を増大させることにより、ヘテロ二量体からのホモダイマーの精製を可能にするように、独立して操作される。一部の実施形態では、Ｆｃバリアントドメインは、（１）ジスルフィド結合の形成，（２）選択された宿主細胞との不適合性（３）選択された宿主細胞での発現時の末端不均一性Ｎ末端不均一性、（４）グリコシル化，（５）補体との相互作用，（６）新生児受容体以外のＦｃ受容体への結合，（７）抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、若しくは（８）抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）に影響するか、又はそれに関わる１つ又は複数のナイーブＦｃアミノ酸残基を欠く分子又は配列をさらに含みうる。Ｆｃバリアントは、以下でさらに詳細に記載される。

【0131】

［００１４１］いくつかの実施形態では、本開示の第１のＦｃドメイン又は第２のＦｃドメインは、「スキュー」バリアント（例えば、米国特許第１０，２５９，８８７号の図１Ａ－１Ｃに示される一組のアミノ酸置換；これらのすべては参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）を含みうる。スキューバリアントは、ホモ二量体化の形成よりもヘテロ二量体化の形成を促す。いくつかの実施形態では、スキューバリアントは、Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ（第１のＦｃドメインの）：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ（第２のＦｃドメインの）；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ，Ｅ３５７Ｌ，Ｋ３７０Ｓ Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ、Ｔ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ：Ｔ３６６Ｗ及びＴ３６６Ｓ／Ｌ３６８Ａ／Ｙ４０７Ｖ／Ｙ３４９Ｃ：Ｔ３６６Ｗ／Ｓ３５４Ｃ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓをさらに含み、前記第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑをさらに含み、前記第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0132】

［００１４２］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ、又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ、又はそれらの組み合わせ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換のうちのいずれか１つをさらに含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、前記第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0133】

［００１４３］いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、遊離システインを２２０位に含まない。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、遊離システインを２２０位に含まない。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、遊離システインを２２０位に含まない。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。

【0134】

［００１４４］いくつかの実施形態では、本開示の第１のＦｃドメイン又は第２のＦｃドメインは、改善されたＰＫのためのアミノ酸置換（Ｘｔｅｎｄ置換）を含みうる。いくつかの実施形態では、本開示の第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインは、独立して、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ及び／又はＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ又はＮ４３４Ｓを含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓを含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌを含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｎ４３４Ｓを含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ又はＮ４３４Ｓを含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓを含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｍ４２８Ｌを含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｎ４３４Ｓを含む。

【0135】

［００１４５］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。Ｋ２４６Ｔ置換は、第２のＦｃドメインに出現すると、第２の単量体のアミノ酸番号付け（例えば、配列番号１０及び１６参照）に基づいてＫ１００Ｔ変異とも呼ばれる。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む。

【0136】

［００１４６］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の第１のＦｃドメインは、配列番号６に示される配列を含む。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の第２のＦｃドメインは、配列番号７に示される配列を含む。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の第２のＦｃドメインは、配列番号８に示される配列を含む。

【0137】

［００１４７］いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＦｃバリアントドメインのアミノ酸置換のうちのいずれか１つは、単量体の一方又は両方の単量体上にある（例えば、第１のＦｃドメイン上；第２のＦｃドメイン上又は両方のＦｃドメイン上）。

【0138】

［００１４８］いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ２に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ３に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ２に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ３に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ４に由来する。

【0139】

［００１４９］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメインは、以下のアミノ酸置換：Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｌ３６８Ｄ、Ｋ３７０Ｓ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。［００１４９］いくつかの実施形態では、前記第２のＦｃドメインは、以下のアミノ酸置換：Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｓ３６４Ｋ、Ｅ３５７Ｑ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第２のＦｃドメインは、以下のアミノ酸置換：Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｌ３６８Ｄ、Ｋ３７０Ｓ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメインは、以下のアミノ酸置換：Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｓ３６４Ｋ、Ｅ３５７Ｑ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含む。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧのＦｃドメインと比較して、いかなる追加のアミノ酸変更も含まない。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメインと比較して、いかなる追加のアミノ酸変更も含まない。いくつかの実施形態では、第１のＦｃドメインは、配列番号１２と比較して、いかなる追加のアミノ酸変更も含まない。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧのＦｃドメインと比較して、いかなる追加のアミノ酸変更も含まない。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、野生型ＩｇＧ１のＦｃドメインと比較して、いかなる追加のアミノ酸変更も含まない。いくつかの実施形態では、第２のＦｃドメインは、配列番号１２と比較して、いかなる追加のアミノ酸変更も含まない。

【0140】

［００１５０］いくつかの実施形態では、前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、独立して、Ｇ２３６Ｒ、Ｓ２３９Ｋ、Ｌ３２８Ｒ、及びＡ３２７Ｇ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換の追加の組を含む。

【0141】

［００１５１］いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ２に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ３に由来する。いくつかの実施形態では、第１の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ１に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ２に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ３に由来する。いくつかの実施形態では、第２の単量体のＦｃドメインは、ＩｇＧ４に由来する。

【0142】

［００１５２］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の野生型スシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｑ２９５Ｅ、Ｌ３６８Ｄ、Ｋ３７０Ｓ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ、Ｎ４２１Ｄ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓを含み、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｅ３５７Ｑ、Ｓ３６４Ｋ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５タンパク質（配列番号１）と比較して、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む。

【0143】

［００１５３］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）野生型ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｑ２９５Ｅ、Ｅ３５７Ｑ、Ｓ３６４Ｋ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ、Ｎ４２１Ｄ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｌ３６８Ｄ、Ｋ３７０Ｓ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５タンパク質（配列番号１）と比較して、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む。

【0144】

［００１５４］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）野生型ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｑ２９５Ｅ、Ｌ３６８Ｄ、Ｋ３７０Ｓ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ、Ｎ４２１Ｄ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓを含み、第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｋ２４６Ｔ、Ｓ２６７Ｋ、Ｅ３５７Ｑ、Ｓ３６４Ｋ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５タンパク質（配列番号１）と比較して、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む。

【0145】

［００１５５］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）野生型ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；第１のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｑ２９５Ｅ、Ｅ３５７Ｑ、Ｓ３６４Ｋ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ、Ｎ４２１Ｄ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓを含み；第２のＦｃドメインは、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｋ２４６Ｔ、Ｓ２６７Ｋ、Ｌ３６８Ｄ、Ｋ３７０Ｓ、Ｍ４２８Ｌ、及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、野生型ＩＬ－１５タンパク質（配列番号１）と比較して、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む。

【0146】

［００１５６］いくつかの実施形態では、第１の単量体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体は、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の単量体は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体は、配列番号１６に示されるアミノ酸配列を含む。

【0147】

［００１５７］いくつかの実施形態では、第１の単量体は、（１）ＩＬ－１５と、（２）配列番号６に示される配列を含む第１のＦｃドメインとを含む。いくつかの実施形態では、第２の単量体は、（１）ＩＬ－１５Ｒαと、（２）配列番号７に示される配列を含む第２のＦｃドメインとを含む。

【0148】

［００１５８］いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質中に存在するアミノ酸置換は、米国特許出願公開第２０１８／０１１８８０５号に開示されており、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0149】

［００１５９］本明細書において参照される配列は、以下の表１に示される。

【0150】

［００１６０］いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、ＸＥＮＰ２０８１８、ＸＥＮＰ２０８１９、ＸＥＮＰ２１４７１、ＸＥＮＰ２１４７２、ＸＥＮＰ２１４７３、ＸＥＮＰ２１４７４、ＸＥＮＰ２１４７５、ＸＥＮＰ２１４７６、ＸＥＮＰ２１４７７、ＸＥＮＰ２１９８８、ＸＥＮＰ２１９８９、ＸＥＮＰ２１９９０、ＸＥＮＰ２１９９１、ＸＥＮＰ２１９９２、ＸＥＮＰ２２０１３、ＸＥＮＰ２２０１４、ＸＥＮＰ２２０１５、ＸＥＮＰ２２０１７、ＸＥＮＰ２２８１５、ＸＥＮＰ２２８１６、ＸＥＮＰ２２８１７、ＸＥＮＰ２２８１８、ＸＥＮＰ２２８１９、ＸＥＮＰ２２８２０、ＸＥＮＰ２２８２１、ＸＥＮＰ２２８２２、ＸＥＮＰ２２８２３、ＸＥＮＰ２２８２４、ＸＥＮＰ２２８２５、ＸＥＮＰ２２８２６、ＸＥＮＰ２２８２７、ＸＥＮＰ２２８２８、ＸＥＮＰ２２８２９、ＸＥＮＰ２２８３０、ＸＥＮＰ２２８３１、ＸＥＮＰ２２８３２、ＸＥＮＰ２２８３３、ＸＥＮＰ２２８３４、ＸＥＮＰ２３３４３、ＸＥＮＰ２３４７２、ＸＥＮＰ２３５０４、ＸＥＮＰ２３５５４、ＸＥＮＰ２３５５５、ＸＥＮＰ２３５５７、ＸＥＮＰ２３５５９、ＸＥＮＰ２３５６０、ＸＥＮＰ２３５６１、ＸＥＮＰ２４０１７、ＸＥＮＰ２４０１８、ＸＥＮＰ２４０１９、ＸＥＮＰ２４０２０、ＸＥＮＰ２４０４３、ＸＥＮＰ２４０４４、ＸＥＮＰ２４０４６、ＸＥＮＰ２４０５１、ＸＥＮＰ２４０５２、ＸＥＮＰ２４１１３、ＸＥＮＰ２４３０１、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ２４３４１、及びＸＥＮＰ３２８０３のヘテロ二量体タンパク質からなる群から選択される。その配列は米国特許第１０，５０１，５４３号の図１０４Ａ－１０４ＡＹに開示されており、参照により本明細書に組み込まれる。

【0151】

［００１６１］いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、ＸＥＮＰ２２８２２、ＸＥＮＰ２３５０４、ＸＥＮＰ２４０４５、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ２２８２１、ＸＥＮＰ２３３４３、ＸＥＮＰ２３５５７、ＸＥＮＰ２４１１３、ＸＥＮＰ２４０５１、ＸＥＮＰ２４３４１、ＸＥＮＰ２４０５２、ＸＥＮＰ２４３０１、及びＸＥＮＰ３２８０３のヘテロ二量体タンパク質からなる群から選択される。これらは以下の表２に記載される。ＸＥＮＰ２２８２２、ＸＥＮＰ２３５０４、ＸＥＮＰ２４０４５、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ２２８２１、ＸＥＮＰ２３３４３、ＸＥＮＰ２３５５７、ＸＥＮＰ２４１１３、ＸＥＮＰ２４０５１、ＸＥＮＰ２４３４１、ＸＥＮＰ２４０５２、及びＸＥＮＰ２４３０１の配列は、米国特許出願公開第２０１８／０１１８８０５号にも示されており、参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、ＸＥＮＰ２４３０６である。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、ＸＥＮＰ３２８０３である。いくつかの実施形態では、本開示の２つ以上（例えば、２、３、４、５など）のヘテロ二量体タンパク質の組み合わせは、本明細書に開示される方法に使用される。いくつかの実施形態では本開示の２つのヘテロ二量体タンパク質の組み合わせは、本明細書に開示される方法に使用される。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６とＸＥＮＰ３２８０３との組み合わせは、本明細書に開示される方法に使用される。

【0152】

［００１６２］いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約９９％、約９８％、約９７％、約９６％、約９５％、約９４％、約９３％、約９２％、約９１％、約９０％、約８９％、約８８％、約８７％、約８６％、約８５％、約８４％、約８３％、約８２％、約８１％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８４％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８３％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８２％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８１％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８０％を占める。

【0153】

［００１６３］いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約７５％、約７０％、約６５％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１９％、約１８％、約１７％、約１６％、約１５％、約１４％、約１３％、約１２％、約１１％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％又は約１％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１６％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１７％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１８％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１９％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約２０％を占める。

【0154】

［００１６４］いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約５０－１００％、約７０－９５％、約８０－９０％、又は約８０－８５％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１－５０％、約５－３０％、約１０－２０％、又は約１５－２０％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８５％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８４％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１６％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８３％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１７％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８２％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１８％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８１％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１９％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８０％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約２０％を占める。

【0155】

［００１６５］いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、９０％、８９％、８８％、８７％、８６％、８５％、８４％、８３％、８２％、８１％、８０％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、又は５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８４％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８３％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８２％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８１％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８０％を占める。

【0156】

［００１６６］いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、７５％、７０％、６５％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％又は１％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１６％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１７％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１８％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１９％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の２０％を占める。

【0157】

［００１６７］いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の５０－１００％、７０－９５％、８０－９０％、又は８０－８５％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１－５０％、５－３０％、１０－２０％、又は１５－２０％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８５％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１５％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８４％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１６％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８３％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１７％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８２％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１８％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８１％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１９％を占める。いくつかの実施形態では、ＸＥＮＰ２４３０６タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８０％を占め、ＸＥＮＰ３２８０３タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の２０％を占める。

【0158】

ＩＬ１５－ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質を用いた治療の方法
［００１６８］一態様において、本開示は、固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍の治療方法を提供し、この方法は、対象に対し、治療的有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを投与することを含む。

【0159】

［００１６９］別の態様では、本開示は、固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍の治療における使用のための、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを提供する。

【0160】

［００１７０］別の態様では、本開示は、固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍の治療のための医薬の製造における、治療的有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせの使用を提供する。

【0161】

［００１７１］いくつかの実施形態では、２つ以上（例えば、２、３、４、５、６など）のヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、本明細書に記載される方法に使用される。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質との組み合わせが、対象に投与される。

【0162】

［００１７２］いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む第２の単量体とを含み；第２のヘテロ二量体タンパク質は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１６に示されるアミノ酸配列．第２の単量体とを含む。

【0163】

［００１７３］いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約９９％、約９８％、約９７％、約９６％、約９５％、約９４％、約９３％、約９２％、約９１％、約９０％、約８９％、約８８％、約８７％、約８６％、約８５％、約８４％、約８３％、約８２％、約８１％、約８０％、約７５％、約７０％、約６５％、約６０％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１５％、約１０％、又は約５％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８５％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８４％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８３％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８２％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８１％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８０％を占める。

【0164】

［００１７４］いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせの約９５％、約９０％、約８５％、約８０％、約７５％、約７０％、約７５％、約７０％、約６５％、約５５％、約５０％、約４５％、約４０％、約３５％、約３０％、約２５％、約２０％、約１９％、約１８％、約１７％、約１６％、約１５％、約１４％、約１３％、約１２％、約１１％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％又は約１％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１５％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１６％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１７％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１８％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１９％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約２０％を占める。

【0165】

［００１７５］いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約５０－約１００％、約７０－約９５％、約８０－約９０％、又は約８０－約８５％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１－約５０％、約５－約３０％、約１０－約２０％、又は約１５－約２０％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８５％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１５％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８４％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１６％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８３％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１７％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８２％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１８％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８１％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約１９％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約８０％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の約２０％を占める。

【0166】

［００１７６］いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、９０％、８９％、８８％、８７％、８６％、８５％、８４％、８３％、８２％、８１％、８０％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、又は５％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８５％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８４％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８３％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８２％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８１％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８０％を占める。

【0167】

［００１７７］いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせの９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、７０％、７５％、７０％、６５％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％又は１％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１５％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１６％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１７％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１８％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１９％を占める。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の２０％を占める。

【0168】

［００１７８］いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の５０－１００％、７０－９５％、８０－９０％、又は８０－８５％を占める。本明細書に開示される方法のいずれかの、いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１－５０％、５－３０％、１０－２０％、又は１５－２０％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８５％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１５％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８４％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１６％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８３％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１７％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８２％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１８％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８１％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の１９％を占める。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の８０％を占め、第２のヘテロ二量体タンパク質は、組み合わせたヘテロ二量体タンパク質の２０％を占める。

【0169】

［００１７９］いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、同時に投与される。いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、連続して投与される。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、第２のヘテロ二量体タンパク質の前に投与される。いくつかの実施形態では、第２のヘテロ二量体タンパク質は、第１のヘテロ二量体タンパク質の前に投与される。いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、同じ組成物中において投与される。いくつかの実施形態では、前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とは、別々の組成物中において投与される。

【0170】

［００１８０］固形腫瘍は、通常嚢胞又は液体エリアを含まない組織の異常な腫瘤を指す。異なる種類の固形腫瘍が、それらを形成する細胞の種類に対して名付けられている。本明細書に開示される方法及び使用によって治療される固形腫瘍には、限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫及び肉腫が含まれる。このような腫瘍のさらに詳細な例には、扁平上皮がん、皮膚扁平上皮癌（ｃＳＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、胃腸がん、胃がん（ＧＣ）、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん、膀胱がん、脂肪肉腫、軟部組織肉腫、尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、尿管及び腎盂、多発性骨髄腫、骨肉腫、肝細胞癌、黒色腫、胃がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎細胞癌（ＲＣＣ）、肝がん、食道がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝臓癌、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、生殖細胞がん、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がん及び頭頚部がんが含まれる。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍である。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＮＳＣＬＣ、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、ＵＣＣ、ＲＣＣ、ＳＣＬＣ、ＧＣ、ＭＣＣ、ｃＳＣＣ及びＭＳＩ－Ｈがんからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＲＣＣ、ＮＳＣＬＣ、ＨＮＳＣＣ及びＴＮＢＣから選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は黒色腫である。いくつかの実施形態では、固形腫瘍はＲＣＣである。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＲＣＣ及びＮＳＣＬＣから選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＮＳＣＬＣ、ＨＮＳＣＣ及びＴＮＢＣから選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍はＮＳＣＬＣである。いくつかの実施形態では、固形腫瘍はＨＮＳＣＣである。いくつかの実施形態では、固形腫瘍はＴＮＢＣである。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、標準的治療が、存在しない、効果がない若しくは耐えられないと証明されているか、又は不適切と考えられる固形腫瘍であるか、或いは治験薬の臨床試験が標準治療として認められている固形腫瘍である。

【0171】

［００１８１］本明細書に記載される方法及び使用は、そのような効果を生成するために、対象に対し、治療的有効量の、本明細書に記載されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか、若しくはそれらの組み合わせ、又は本明細書に記載される組成物を投与することを含む。そのような治療を必要とする対象の同定は、対象又は医療専門家の判断において行われてよく、主観的（例えば意見）でも客観的（例えば試験又は診断方法によって測定可能な）でもよい。このような治療は、がんに罹患した、がんを有する、がんにかかりやすい、又はがんのリスクのある対象に対して適切に施されるであろう。

【0172】

［００１８２］別の態様では、本開示は、対象にＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを投与することを含む。

【0173】

［００１８３］別の態様では、本開示は、対象にＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを投与することを含む。

【0174】

［００１８４］別の態様では、本開示は、対象にＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを投与することを含み、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせの投与時に、ＮＫ細胞の増殖応答が、ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖応答より強い。

【0175】

［００１８５］別の態様では、本開示は、対象にＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及びＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを投与することを含む。いくつかの実施形態では、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせの投与時に、ＮＫ細胞の増殖応答がＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖応答より強い。

【0176】

［００１８６］別の態様では、本開示は、対象にＣＤ４^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを投与することを含む。

【0177】

［００１８７］別の態様では、本開示は、対象にＩＦＮγ生成を誘導するための方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量の、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のいずれか又はそれらの任意の組み合わせを投与することを含む。

【0178】

［００１８８］投与の経路には、限定されないが、非経口的、経口的、若しくは経鼻的なもの、膀胱への点滴注入、又は従来の非毒性の薬学的に許容される担体及びアジュバントを含む適切な送達デバイス若しくはインプラントを介したものが含まれる。いくつかの実施形態では、非経口投与は、注射、点滴又はインプラント術によるものである。いくつかの実施形態では、非経口投与は、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、皮内、髄腔内、骨内、心内、膀胱内、硝子体内、空洞内、硬膜外、脳内、脳室内、胸膜内、吸入性、又は経皮的投与などである。いくつかの実施形態では、非経口投与は皮下投与である。いくつかの実施形態では、非経口投与は静脈内投与である。いくつかの実施形態では、非経口投与は筋肉内投与である。いくつかの実施形態では、非経口投与は腹腔内投与である。

【0179】

［００１８９］いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、全身投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は局所投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、薬学的に許容されるバッファーを含む組成物として投与される。適切な担体及びその製剤は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｂｙ Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎに記載されている。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、非経口投与経路に適切な剤形で提供される。

【0180】

［００１９０］ヘテロ二量体タンパク質を含む組成物は、単位投与形態（例えば、単回用量のアンプル、シリンジ又はバッグ）で提供されうる。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質は、複数の用量を含むバイアルで提供される。適切な防腐剤が、組成物に添加されてもよい（以下参照）。組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液、点滴デバイス、又はインプラント術用の送達装置の形態であっても、又は使用前に水又は別の適切なビヒクルで再構成される乾燥粉末として提示されてもよい。本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質とは別に、組成物は、許容される適切な担体及び／又は添加物を含んでもよい。いくつかの実施形態では、組成物は、非経口投与に適している。１つ又は複数のヘテロ二量体タンパク質は、放出制御のための、ミクロスフェア、マイクロカプセル、ナノ粒子、又はリポソームなどに組み込むことができる。さらに、組成物は、懸濁剤、溶解補助剤、安定剤、ｐＨ調節剤、等張性調節剤、及び／又は分散剤を含みうる。

【0181】

［００１９１］ヘテロ二量体タンパク質を含む薬学的組成物は、滅菌注射に適した形態でもよい。このような組成物を調製するために、タンパク質は、非経口的に許容される液体ビヒクルに溶解又は懸濁される。用いることのできる許容されるビヒクル及び溶媒には、水、適当な量の塩酸の付加により適切なｐＨに調節された水、水酸化ナトリウム又は適切なバッファー、１，３－ブタンジオール、リンゲル液、並びに等張食塩水及びデキストローズ溶液がある。水性製剤は、１つ又は複数の防腐剤（例えば、メチル、エチル又はｎ－プロピルｐ－ヒドロキシベンゾエート）を含んでもよい。

【0182】

［００１９２］いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、経口投与される。生物学的に活性なタンパク質及びペプチドの経口投与のための方法は、当技術分野において既知である。経口投与されるタンパク質の劣化を防ぐための多数の戦略が示されている。ヘテロ二量体タンパク質の経口投与のための方法の例には、限定されないが、コアシェル粒子（米国特許第７，０９０，８６８号）及びナノチューブ（米国特許第７，１９５，７８０号）の使用；リポソームと水性乳濁液及び懸濁液（米国特許第７，３１６，８１８号；国際公開第０６／０６２５４４号；米国特許第６，０７１，５３５号；及び米国特許第５，８７４，１０５号）；ガス充填リポソーム（米国特許第６，５５１，５７６号；米国特許第６，８０８，７２０号；及び米国特許第７，０８３，５７２号）；水性媒体に分散させたナノ液滴（米国特許出願公開２００７／０１８４０７６号）；疎水性タンパク質の投与のために生物学的障壁を越えた浸透を提供するペプチド－エフェクターを含有するマトリックス担体（国際公開第０６／０９７７９３号、国際公開第０５／０９４７８５号、及び国際公開第０３／０６６８５９号）；非共有結合タンパク質－多糖類複合体の使用（ＥＰ０４９１１１４Ｂ１）；米国特許第８，９３６，７８６号に記載される薬学的組成物の使用；Ｐｅｐｔｅｌｌｉｇｅｎｃｅ（登録商標）システム（Ｅｎｔｅｒｉｓ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ）の使用（国際公開第２０１４／１３８２４１号、国際公開第２０１６／１１５０８２号及び国際公開第２００４／０６４７５８号）が含まれる。これら特許公報及び特許のすべては、参照により本明細書に具体的に含まれる。

【0183】

［００１９３］投与される本開示のヘテロ二量体タンパク質の量は、投与の形式、患者の年齢及び体重、並びに治療されるがんの臨床症状に応じて変動する。ヒトへの投与量は、マウス又は非ヒト霊長類に使用されるタンパク質の量から推定することにより決定することができる。一部の実施形態では、投与量は、体重で、約０．０００１ｍｇのタンパク質／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇの化合物；又は約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ体重、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．２ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．０２ｍｇ／ｋｇで変動しうる。いくつかの実施形態では、この用量は、体重１ｋｇあたり約０．０００１、約０．０００２５、約０．０００３、約０．０００５、約０．００１、約０．００３、約０．００５、約０．００８、約０．０１、約０．０１５、約０．０２、約０．０３、約０．０４、約０．０５、約０．０６、約０．０７、約０．０８、約０．０９、約０．１、約０．１２、約０．１３５、約０．１５、約０．１６、約０．２、約０．２０２５、約０．２４、約０．２５、約０．３、約０．３２、約０．３５、約０．４、約０．４５、約０．５、約０．５５、約０．６、約０．６５、約０．７、約０．７５、約０．８、約０．８５、約０．９、約０．９５、約１、約１．１、約１．１５、約１．２、約１．２５、約１．３、約１．３５、約１．４、約１．４５、約１．５、約１．６、約１．７、約１．８、約１．９、約２、約２．５、約３、約３．５、約４、約４．５、又は約５ｍｇでありうる。いくつかの実施形態では、用量は、体重で、約０．００２５ｍｇ、約０．００５ｍｇ、約０．０１ｍｇ、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０８ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．１２ｍｇ／ｋｇ、約０．１６ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ、約０．２４ｍｇ／ｋｇ及び約０．３２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．００２５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０１５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０８ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０９ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．１２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．１３５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．１６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．２０２５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．２４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．３２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、これら投与量に従ってＩＶ点滴により投与される。

【0184】

［００１９４］一部の実施形態では、投与量は、体重で、０．０００１ｍｇのタンパク質／ｋｇ～５ｍｇの化合物／ｋｇ；又は０．００１ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ、又は０．００５ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇ、又は０．００５ｍｇ／ｋｇ～０．３ｍｇ／ｋｇ、又は０．００５ｍｇ／ｋｇ～０．２ｍｇ／ｋｇ、又は０．００５ｍｇ／ｋｇ～０．０２ｍｇ／ｋｇで変動しうる。いくつかの実施形態では、この用量は、体重で、０．０００１、０．０００３、０．０００５、０．００１、０．００３、０．００５、０．００８、０．０１、０．０１５、０．０２、０．０３、０．０５、０．０８、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１、１．１、１．１５、１．２、１．２５、１．３、１．３５、１．４、１．４５、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．５、３、３．５、４、４．５、又は５ｍｇ／ｋｇでありうる。いくつかの実施形態では、用量は、体重で、０．００２５ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１５ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０２５ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．０９ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．１２ｍｇ／ｋｇ、０．１３５ｍｇ／ｋｇ、０．１６ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．２０２５ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ及び０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．００２５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０１５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０８ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０９ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．１２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．１３５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．１６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．２０２５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．２４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．３２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質は、これら投与量に従ってＩＶ点滴により投与される。

【0185】

［００１９５］一部の実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせの投与量は、体重で、約０．０００１ｍｇのタンパク質／ｋｇ～約５ｍｇの化合物／ｋｇ；又は約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約１ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．３ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．２ｍｇ／ｋｇ、又は約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約０．０２ｍｇ／ｋｇで変動しうる。いくつかの実施形態では、この用量は、体重で、約０．０００１、約０．０００３、約０．０００５、約０．００１、約０．００３、約０．００５、約０．００８、約０．０１、約０．０１５、約０．０２、約０．０３、約０．０５、約０．０８、約０．１、約０．１５、約０．２、約０．２５、約０．３、約０．３５、約０．４、約０．４５、約０．５、約０．５５、約０．６、約０．６５、約０．７、約０．７５、約０．８、約０．８５、約０．９、約０．９５、約１、約１．１、約１．１５、約１．２、約１．２５、約１．３、約１．３５、約１．４、約１．４５、約１．５、約１．６、約１．７、約１．８、約１．９、約２、約２．５、約３、約３．５、約４、約４．５、又は約５ｍｇ／ｋｇでありうる。いくつかの実施形態では、用量は、体重で、約０．００２５ｍｇ、約０．００５ｍｇ、約０．０１ｍｇ、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０８ｍｇ／ｋｇ、約０．１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１２ｍｇ／ｋｇ、約０．１６ｍｇ／ｋｇ、約０．２０ｍｇ／ｋｇ、約０．２４ｍｇ／ｋｇ及び約０．３２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．００２５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０１５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．０８ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．１２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．１６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．２４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で約０．３２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質の組み合わせは、これら投与量に従ってＩＶ点滴により投与される。

【0186】

［００１９６］一部の実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質の組み合わせの投与量は、体重で、０．０００１ｍｇのタンパク質／ｋｇ～５ｍｇの化合物／ｋｇ；又は０．００１ｍｇ／ｋｇ～４ｍｇ／ｋｇ、又は ０．００５ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇ、又は０．００５ｍｇ／ｋｇ～０．３ｍｇ／ｋｇ、又は０．００５ｍｇ／ｋｇ～０．２ｍｇ／ｋｇ、又は０．００５ｍｇ／ｋｇ～０．０２ｍｇ／ｋｇで変動しうる。いくつかの実施形態では、この用量は、体重で、０．０００１、０．０００３、０．０００５、０．００１、０．００３、０．００５、０．００８、０．０１、０．０１５、０．０２、０．０３、０．０５、０．０８、０．１、０．１５、０．２、０．２５、０．３、０．３５、０．４、０．４５、０．５、０．５５、０．６、０．６５、０．７、０．７５、０．８、０．８５、０．９、０．９５、１、１．１、１．１５、１．２、１．２５、１．３、１．３５、１．４、１．４５、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２、２．５、３、３．５、４、４．５、又は５ｍｇ／ｋｇでありうる。いくつかの実施形態では、用量は、体重で、０．００２５ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１５ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０２５ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．１２ｍｇ／ｋｇ、０．１６ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ及び０．３２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．００２５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０１５ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．０８ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．１２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．１６ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．２４ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、投与量は、体重で０．３２ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質の組み合わせは、これら投与量に従ってＩＶ点滴により投与される。

【0187】

［００１９７］いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質、又はそれらの組み合わせは、毎日、即ち、２４時間毎に投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、毎週、即ち、１週間に１回（Ｑ１Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、２週間に１回、即ち、１４日に１回（Ｑ２Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、３週間に１回、即ち、２１日に１回（Ｑ３Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、４週間に１回、即ち、２８日に１回（Ｑ４Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、５週間に１回（Ｑ５Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは６週間に１回（Ｑ６Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、７週間に１回（Ｑ７Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、８週間に１回（Ｑ８Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは９週間に１回（Ｑ９Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、１０週間に１回（Ｑ１０Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、１１週間に１回（Ｑ１１Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは１２週間に１回（Ｑ１２Ｗ）投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、１か月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、２カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、３カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、４カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、５か月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、６カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、７カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、８か月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、９カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、１０カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、１１か月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、１２カ月に１回投与される。いくつかの実施形態では、ヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、１年に１回投与される。いくつかの実施形態では、本開示のヘテロ二量体タンパク質又はそれらの組み合わせは、本明細書に開示される頻度に従ってＩＶ点滴により投与される。

【0188】

［００１９８］いくつかの実施形態では、対象は、以前にその状態の治療のための薬剤を投与されたことがない。いくつかの実施形態では、対象は、現在チェックポイント阻害剤を投与されている。いくつかの実施形態では、対象は、以前にチェックポイント阻害剤を投与されたことがある。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＰＤ－１を標的とする。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＰＤ－Ｌ１を標的とする。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＣＴＬＡ－４を標的とする。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１を標的とするチェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体である。ＰＤ－１に特異的に結合する抗体は、当技術分野において既知であり、例えば、Ｎａｉｄｏｏ ｅｔ ａｌ． Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１５；２６（１２）：２３７５－２３９１，Ｐｈｉｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ． Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１５；２７（１）：３９－４６，Ｔｕｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｅｄ．２０１９；８（１０）ａｎｄ Ｓｕｎｓｈｉｎｅ ｅｔ ａｌ． Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１５；３２－８；並びに米国特許第８００８４４９号、米国特許第８１６８７５７号、米国特許出願公開２０１１０００８３６９号、米国特許出願公開２０１３００１７１９９号、米国特許出願公開２０１３００２２５９５号、及び国際公開第２００６１２１１６８号、国際公開第２００９１１５４３３５号、国際公開第２０１２１４５４９３号、国際公開第２０１３０１４６６８号、国際公開第２００９１０１６１１号、ＥＰ２２６２８３７、及びＥＰ２５０４０２８に記載されている。抗ＰＤ－１抗体の例には、限定されないが、ニボルマブ（ＢＭＳ－９３６５５８）、ペンブロリズマブ（商品名Ｋｅｙｔｒｕｄａ、以前はランブロリズマブ；Ｍｅｒｃｋ３４７５及びＳＣＨ－９００４７５としても知られる）、ピディリズマブ（ＣＴ－０１１）、セミプリマブ、スパルタリズマブ（ＰＤＲ００１）、カムレリズマブ（ＳＨＲ１２１０）、シンチリマブ（ＩＢＩ３０８）、チスレリズマブ（ＢＧＢ－Ａ３１７）、トリパリマブ（ＪＳ ００１）、ＭＤＸ－１１０６、ＡＭＰ－５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）及びＡＭＰ－２２４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）が含まれる。ニボルマブは、国際公開第２００６／１２１１６８号に記載される抗ＰＤ－１抗体である。ペンブロリズマブは、国際公開第２００９／１１４３３５号及びＨａｍｉｄ ｅｔ ａｌ．（２０１３）．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３６９（２）：１３４－４４に記載される抗ＰＤ－１抗体である。ピディリズマブは、ＰＤ－１に結合するヒト化 ＩｇＧｋモノクローナル抗体である。ピディリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ１モノクローナル抗体は、国際公開第２００９／１０１６１１号に開示されている。ＡＭＰ－２２４は、ＰＤ－１とＢ７－Ｈ１との間の相互作用をブロックするＰＤ－Ｌ２ Ｆｃ融合可溶型受容体であり、国際公開第２０１０／０２７８２７号及び国際公開第２０１１／０６６３４２号に開示されている。他の抗ＰＤ－１抗体には、とりわけ、ＡＭＰ５１４、例えば、米国特許第８６０９０８９号、米国特許出願公開２０１００２８３３０号及び／又は米国特許出願公開２０１２０１１４６４９号に開示されている抗ＰＤ－１抗体が含まれる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体はニボルマブである。

【0189】

［００１９９］いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１を標的とするチェックポイント阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。ＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する抗体は、当技術分野において既知であり、例えば、Ｎａｉｄｏｏ ｅｔ ａｌ． Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１５ Ｄｅｃ；２６（１２）：２３７５－２３９１，Ｐｈｉｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ． Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１５ Ｊａｎ；２７（１）：３９－４６、Ｔｕｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｅｄ． ２０１９ Ｓｅｐ ２５；８（１０），Ｓｕｎｓｈｉｎｅ ｅｔ ａｌ． Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１５：３２－８、並びに米国特許第７９４３７４３号及び米国特許出願公開２０１２００３９９０６号に記載されている。抗ＰＤ－Ｌ１抗体の例には、限定されないが、ＢＭＳ－９３６５５９（ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ及びＭＤＸ－１１０５としても知られる）、ＢＭＳ－３９８８６、アテゾリズマブ（ＭＤＰＬ３２８０Ａ；Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ）、アベルマブ（Ｂａｖｅｎｃｉｏ）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６；Ｉｍｆｉｎｚｉ）、ＫＮ０３５、ＣＫ－３０１（Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃが含まれる。ＢＭＳ－９３６５５９は、国際公開第２００７／００５８７４号に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。アテゾリズマブは、ＰＤ－Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１を有するヒト化モノクローナル抗体である。ＢＭＳ－３９８８６は、Ｂｒａｈｍｅｒ ＪＲ ｅｔ ａｌ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１２；３６６：２４５５－２４６５に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。

【0190】

［００２００］いくつかの実施形態では、ＣＴＬＡ－４を標的とするチェックポイント阻害剤は、抗ＣＴＬＡ－４抗体である。ＣＴＬＡ－４に特異的に結合する抗体は、当技術分野において既知であり、例えば、Ｃａｌｌａｈａｎ ＭＫ ｅｔ ａｌ． Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ． ２０１０；３７（５）：４７３-４８４に記載されている。抗ＣＴＬＡ－４抗体の例には、限定されないが、イピリムマブ及びトレメリムマブが含まれる。イピリムマブ及びトレメリムマブはどちらも、ＣＴＬＡ－４に対する完全ヒト抗体である。イピリムマブ（ＭＤＸ－０１０又はＹｅｒｖｏｙとしても知られる；Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）は、１２-１４日の血漿半減期を有するＩｇＧ１である（Ｈｏｄｉ，Ｆ．Ｓ ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．２０１０；３６３（８）：７１１-７２３）。トレメリムマブ（ＣＰ－６７５，２０６又はチシリムマブとしても知られる；Ｐｆｉｚｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ）は、概ね２２日の血漿半減期を有するＩｇＧ２である（Ｒｅｕｂｅｎ，ＪＭ ｅｔ ａｌ． Ｃａｎｃｅｒ．２００６；１０６（１１）：２４３７-４４）。

【0191】

併用療法としてＩＬ１５－ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質とＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１阻害剤とを用いる治療の方法
［００２０１］本開示の別の態様は、固形腫瘍の治療を必要とする対象における本明細書に開示される固形腫瘍の治療方法を提供し、この方法は、対象に対し、有効量の（ａ）本明細書に開示される任意のヘテロ二量体タンパク質（即ち、ＩＬ１５－ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質）又はその組み合わせと、（ｂ）ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤とを投与することを含む。ヘテロ二量体タンパク質は、本明細書に開示される方法のいずれかに従って投与されうる。ヘテロ二量体タンパク質は、本明細書に開示される組成物のいずれかで投与されうる。

【0192】

［００２０２］いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のうちの２つ以上が対象に投与されうる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のうちの３つ以上が対象に投与されうる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のうちの４つ以上が対象に投与されうる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質のうちの５つ以上が対象に投与されうる。

【0193】

［００２０３］いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質との組み合わせが、対象に投与される。いくつかの実施形態では、第１のヘテロ二量体タンパク質は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む第２の単量体とを含み；第２のヘテロ二量体タンパク質は、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１６に示されるアミノ酸配列．第２の単量体とを含む。

【0194】

［００２０４］プログラム死－リガンド－１（ＰＤ－Ｌ１）は、多くのヒトのがんにおいて腫瘍細胞と腫瘍浸潤性免疫細胞によって広く発現される細胞表面タンパク質である。ＰＤ－Ｌ１の過剰発現は、複数のがんを有する患者の予後不良に関連付けられている。ＰＤ－Ｌ１は、活性化Ｔ細胞上での発現が慢性感染症又はがんといった長期間刺激の状態で維持される、ＰＤ－１とＢ７．１という２つの既知の受容体に結合する。ＰＤ－１又はＢ７．１によるＰＤ－Ｌ１のライゲーションは、Ｔ細胞増殖、サイトカイン生成、及び細胞溶解反応を阻害し、それによりＴ細胞の機能的不活性化又は阻害をもたらす。腫瘍細胞上でのＰＤ－Ｌ１の異常発現は、免疫回避をもたらす抗腫瘍免疫を妨げることが報告された。ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１／Ｂ７．１経路の妨害は、腫瘍特異的Ｔ細胞免疫を再活性化するための魅力的な戦略であり、実際に、ＰＤ－Ｌ１又はＰＤ－１の複数の阻害剤は、黒色腫、ＲＣＣ、ＮＳＣＬＣ、ＳＣＬＣ、尿路上皮性膀胱がん、ＨＮＳＣＣ、卵巣がん、及びＴＮＢＣを含む広範囲の腫瘍型に臨床有効性又は有望な抗腫瘍活性を示した。証明された利益は、これまでに選択された適応症における複数の抗ＰＤ－Ｌ１抗体（例えば、アテゾリズマブ、アベルマブ、及びデュルバルマブ）、並びに抗ＰＤ－１抗体（例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、及びセミプリマブ－ｒｗｌｃ）の承認に繋がった。

【0195】

［００２０５］いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、ＰＤ－１の阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤である。

【0196】

［００２０６］いくつかの実施形態では、ＰＤ－１の阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体である。ＰＤ－１に特異的に結合する抗体は、当技術分野において既知であり、例えば、Ｎａｉｄｏｏ ｅｔ ａｌ． Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１５；２６（１２）：２３７５－２３９１，Ｐｈｉｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ． Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１５；２７（１）：３９－４６，Ｔｕｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｅｄ．２０１９；８（１０）ａｎｄ Ｓｕｎｓｈｉｎｅ ｅｔ ａｌ． Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１５；３２－８；並びに米国特許第８００８４４９号、米国特許第８１６８７５７号、米国特許出願公開２０１１０００８３６９号、米国特許出願公開２０１３００１７１９９号、米国特許出願公開２０１３００２２５９５号、及び国際公開第２００６１２１１６８号、国際公開第２００９１１５４３３５号、国際公開第２０１２１４５４９３号、国際公開第２０１３０１４６６８号、国際公開第２００９１０１６１１号、ＥＰ２２６２８３７、及びＥＰ２５０４０２８に記載されている。抗ＰＤ－１抗体の例には、限定されないが、ニボルマブ（ＢＭＳ－９３６５５８）、ペンブロリズマブ（商品名Ｋｅｙｔｒｕｄａ、以前はランブロリズマブ；Ｍｅｒｃｋ３４７５及びＳＣＨ－９００４７５としても知られる）、ピディリズマブ（ＣＴ－０１１）、セミプリマブ、スパルタリズマブ（ＰＤＲ００１）、カムレリズマブ（ＳＨＲ１２１０）、シンチリマブ（ＩＢＩ３０８）、チスレリズマブ（ＢＧＢ－Ａ３１７）、トリパリマブ（ＪＳ ００１）、ＭＤＸ－１１０６、ＡＭＰ－５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）及びＡＭＰ－２２４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）が含まれる。ニボルマブは、国際公開第２００６／１２１１６８号に記載される抗ＰＤ－１抗体である。ペンブロリズマブは、国際公開第２００９／１１４３３５号及びＨａｍｉｄ ｅｔ ａｌ．（２０１３）．Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３６９（２）：１３４－４４に記載される抗ＰＤ－１抗体である。ピディリズマブは、ＰＤ－１に結合するヒト化ＩｇＧｋモノクローナル抗体である。ピディリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ１モノクローナル抗体は、国際公開第２００９／１０１６１１号に開示されている。ＡＭＰ－２２４は、ＰＤ－１とＢ７－Ｈ１との間の相互作用をブロックするＰＤ－Ｌ２Ｆｃ融合可溶型受容体であり、国際公開第２０１０／０２７８２７号及び国際公開第２０１１／０６６３４２号に開示されている。他の抗ＰＤ－１抗体には、とりわけ、ＡＭＰ５１４、例えば、米国特許第８６０９０８９号、米国特許出願公開２０１００２８３３０号及び／又は米国特許出願公開２０１２０１１４６４９号に開示されている抗ＰＤ－１抗体が含まれる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体はニボルマブである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ＸＥＮＰ２４３０６と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ニボルマブは、ＸＥＮＰ２４３０６と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ニボルマブは、ＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ニボルマブは、ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。

【0197】

［００２０７］いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１の阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。ＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する抗体は、当技術分野において既知であり、例えば、Ｎａｉｄｏｏ ｅｔ ａｌ． Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ．２０１５ Ｄｅｃ；２６（１２）：２３７５－２３９１，Ｐｈｉｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ． Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１５ Ｊａｎ；２７（１）：３９－４６、Ｔｕｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｅｄ． ２０１９ Ｓｅｐ ２５；８（１０），Ｓｕｎｓｈｉｎｅ ｅｔ ａｌ． Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１５：３２－８、並びに米国特許第７９４３７４３号及び米国特許出願公開２０１２００３９９０６号に記載されている。抗ＰＤ－Ｌ１抗体の例には、限定されないが、ＢＭＳ－９３６５５９（ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ及びＭＤＸ－１１０５としても知られる）、ＢＭＳ－３９８８６、アテゾリズマブ（ＭＤＰＬ３２８０Ａ；Ｔｅｃｅｎｔｒｉｑ）、アベルマブ（Ｂａｖｅｎｃｉｏ）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６；Ｉｍｆｉｎｚｉ）、ＫＮ０３５、ＣＫ－３０１（Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃが含まれる。ＢＭＳ－９３６５５９は、国際公開第２００７／００５８７４号に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。アテゾリズマブは、ＰＤ－Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１を有するヒト化モノクローナル抗体である。ＢＭＳ－３９８８６は、Ｂｒａｈｍｅｒ ＪＲ ｅｔ ａｌ． Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２０１２；３６６：２４５５－２４６５に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＸＥＮＰ２４３０６と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、ＸＥＮＰ２４３０６と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、ＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて投与される。

【0198】

［００２０８］本開示のヘテロ二量体タンパク質（又はその組み合わせ）と組み合わせて投与されるＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤の量は、投与の方式、患者の年齢及び体重、並びに治療されるがんの臨床症状に応じて変動する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、その承認された投与量で投与される。医師であれば、本開示のタンパク質と組み合わせて投与するための適正な投与量を決定することができるであろう。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、承認された投薬レジメンを使用して投与される。一部の実施形態では、投与量は、体重で、約０．５ｍｇのタンパク質／ｋｇ～約１００ｍｇの化合物／ｋｇ；又は約１ｍｇのタンパク質／ｋｇ～約１００ｍｇの化合物／ｋｇ；又は約２ｍｇのタンパク質／ｋｇ～約５０ｍｇの化合物／ｋｇ；又は約２．５ｍｇのタンパク質／ｋｇ～約１０ｍｇの化合物／ｋｇ、又は約３ｍｇのタンパク質／ｋｇ～約５ｍｇの化合物／ｋｇで変動しうる。いくつかの実施形態では、この用量は、体重で、約０．１、約０．３、約０．５、約１、約３、約５、約７．５、約１０、約１５、約２５、約５０、約７５、約１００ｍｇ／ｋｇでありうる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体の投与量は、３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、約３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、２週毎に約３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、約１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、約２４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、約４８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、２週毎に約２４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、４週毎に約４８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の投与量は、約３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の投与量は、約８４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、約８４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、約１２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、約１６８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、２週毎に約８４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、３週毎に約１２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、４週毎に約１６８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、３週毎に約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、２週毎に約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、毎週約２００ｍｇである。

【0199】

［００２０９］一部の実施形態では、投与量は、体重で、０．５ｍｇのタンパク質／ｋｇ～１００ｍｇの化合物／ｋｇ；又は１ｍｇのタンパク質／ｋｇ～１００ｍｇの化合物／ｋｇ；又は２ｍｇのタンパク質／ｋｇ～５０ｍｇの化合物／ｋｇ；又は２．５ｍｇのタンパク質／ｋｇ～１０ｍｇの化合物／ｋｇ、又は３ｍｇのタンパク質／ｋｇ～５ｍｇの化合物／ｋｇで変動しうる。いくつかの実施形態では、この用量は、体重で、０．１、０．３，０．５、１、３、５、７．５、１０、１５、２５、５０、７５、１００ｍｇ／ｋｇでありうる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体の投与量は、３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、２週毎に３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、１ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、２４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、４８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、２週毎に２４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ニボルマブの投与量は、４週毎に４８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の投与量は、３ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体の投与量は、８４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、８４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、１２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、１６８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、２週毎に８４０ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、３週毎に１２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブの投与量は、４週毎に１６８０ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、３週毎に２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、２週毎に２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブの投与量は、毎週２００ｍｇである。

【0200】

［００２１０］本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質、又はその組み合わせは、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤（例えば抗ＰＤ１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）と同時に又は連続して投与されうる。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、ヘテロ二量体タンパク質の投与の後で投与される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、ヘテロ二量体タンパク質の投与の前に投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質又はその組み合わせ及びＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤（例えば抗ＰＤ１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）が、同じ組成物で投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質、又はその組み合わせは、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤（例えば抗ＰＤ１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）とは異なる組成物で投与される。

【0201】

［００２１１］いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤を使用した治療は、がんのための確立された治療法であり、このレジメンへのヘテロ二量体タンパク質治療の付加は、患者に対する治療効果を向上させる。このような向上は、患者一人当たりの応答増加又は患者集団における応答増加として測定することができた。本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質又はその組み合わせとＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤とは、相乗作用しうる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヘテロ二量体タンパク質、又はその組み合わせは、単剤療法として投与されるときのその治療的有効用量より少ない投与量で投与されうる。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、単剤療法として投与されるときのその治療的有効用量より少ない投与量で投与されうる。

【0202】

［００２１２］いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、ＩＶ点滴により投与される。いくつかの実施形態では、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤は、本開示のヘテロ二量体タンパク質と組み合わせて各１４日間サイクルの１日目に、ＩＶ点滴により固定用量で投与されるいくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、本開示のヘテロ二量体タンパク質と組み合わせて、各１４日間サイクルの１日目に約８４０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、本開示のヘテロ二量体タンパク質と組み合わせて、各１４日間サイクルの１日目に８４０ｍｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、承認された投薬レジメンを使用して投与される。いくつかの実施形態では、ニボルマブは、承認された投薬レジメンを使用して投与される。いくつかの実施形態では、ペンブロリズマブは、承認された投薬レジメンを使用して投与される。

【0203】

［００２１３］いくつかの実施形態では、対象は、以前にその状態の治療のための薬剤を投与されたことがない。いくつかの実施形態では、対象は、現在チェックポイント阻害剤を投与されている。いくつかの実施形態では、対象は、以前にチェックポイント阻害剤を投与されたことがある。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＰＤ－１を標的とする。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＰＤ－Ｌ１を標的とする。いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤はＣＴＬＡ－４を標的とする。

【0204】

［００２１４］本開示のヘテロ二量体タンパク質とＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤（例えば抗ＰＤ１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）との組み合わせにより治療される固形腫瘍の例には、限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫及び肉腫が含まれる。このような固形腫瘍のさらに詳細な例には、扁平上皮がん、皮膚扁平上皮がん（ｃＳＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、胃腸がん、胃がん（ＧＣ）、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん、膀胱がん、脂肪肉腫、軟部組織肉腫、尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、尿管及び腎盂、多発性骨髄腫、骨肉腫、肝細胞癌、黒色腫、胃がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎細胞癌（ＲＣＣ）、肝がん、食道がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝臓癌、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、生殖細胞がん、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がん及び頭頚部がんが含まれる。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍である。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＮＳＣＬＣ、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）、ＵＣＣ、ＲＣＣ、ＳＣＬＣ、ＧＣ、ＭＣＣ、ｃＳＣＣ及びＭＳＩ－Ｈがんからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、腎細胞癌（ＲＣＣ）、ＮＳＣＬＣ、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、及びトリプルネガティブ乳がんから選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＲＣＣ、ＮＳＣＬＣ、ＨＮＳＣＣ及びＴＮＢＣから選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＲＣＣ、及びＮＳＣＬＣから選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、黒色腫、ＮＳＣＬＣ、ＨＮＳＣＣ及びＴＮＢＣから選択される。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は黒色腫である。いくつかの実施形態では、固形腫瘍はＲＣＣである。いくつかの実施形態では、がんはＮＳＣＬＣである。いくつかの実施形態では、固形腫瘍はＨＮＳＣＣである。いくつかの実施形態では、固形腫瘍はＴＮＢＣである。いくつかの実施形態では、固形腫瘍は、標準的治療が、存在しないか、無効若しくは耐えられないものであるか、又は不適切であると考えられるか、或いは治験薬の臨床試験が標準治療として認められている固形腫瘍である。

【0205】

［００２１５］併用療法はまた、より忍容性の高い治療レジメンに繋がるＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤（例えば抗ＰＤ１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）のより低い用量又はより頻度の低い投与で、改善された応答を提供しうる。例えば、１つ又は複数のヘテロ二量体タンパク質とＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤（例えば抗ＰＤ１又は抗ＰＤ－Ｌ１抗体）との併用療法は、増加したＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、及び／又はＮＫ細胞、Ｔ細胞、好中球又は単核球細胞のレベル又は免疫応答を含む様々な機序を通して強化された臨床活動を提供する。

【0206】

番号付き実施形態
［００２１６］本開示の特定の実施形態は、以下の番号付き実施形態に示される。
１．固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍を治療する方法であって、対象に対し、治療的有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。
２．ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。
３．ＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインが、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。
４．ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及びＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインは、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。
５．対象にＩＦＮγ生成を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１及び前記第２のＦｃドメインが、Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ；Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ：Ｄ４０１Ｋ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ；Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ２６７Ｋ／Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｓ２６７Ｋ／Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ：Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；Ｓ３６４Ｋ：Ｌ３６８Ｅ／Ｋ３７０Ｓ；Ｄ４０１Ｋ：Ｔ４１１Ｅ／Ｋ３６０Ｅ／Ｑ３６２Ｅ；Ｓ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｌ：Ｌ３６８Ｄ／Ｋ３７０Ｓ；及びＳ３６４Ｋ／Ｅ３５７Ｑ：Ｋ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択される一組のアミノ酸置換を含む、方法。
６．前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。
７．前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ／Ａ３２７Ｇ；Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ／Ａ３２７Ｇ；及び Ｅ２３３Ｐ／Ｌ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ１又はＩｇＧ３のＦｃドメインに由来している、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
８．前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、Ｌ３２８Ｒ；Ｓ２３９Ｋ；及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、ＦｃドメインはＩｇＧ２のＦｃドメインに由来している、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
９．前記第１のＦｃドメイン及び／又は第２のＦｃドメインの各々が、独立して、Ｇ２３６Ｒ／Ｌ３２８Ｒ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２３９Ｋ；Ｅ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ／Ｓ２６７Ｋ；及びＥ２３３Ｐ／Ｆ２３４Ｖ／Ｌ２３５Ａ／Ｇ２３６ｄｅｌ（ＥＵ番号付けによる）からなる群から選択されるアミノ酸置換をさらに含み、Ｆｃドメインは、ＩｇＧ４のＦｃドメインに由来している、実施形態１～６のいずれか１つに記載の方法。
１０．前記ＩＬ－１５タンパク質が、Ｎ１Ｄ、Ｎ４Ｄ、Ｄ８Ｎ、Ｄ３０Ｎ、Ｄ６１Ｎ、Ｅ６４Ｑ、Ｎ６５Ｄ及びＱ１０８Ｅからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換を含む、実施形態１～９のいずれか１つに記載の方法。
１１．前記ＩＬ－１５タンパク質及び前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が：６５ＤＰＣ；Ｅ８７Ｃ：６５ＤＣＡ；Ｖ４９Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｌ５２Ｃ：Ｓ４０Ｃ；Ｅ８９Ｃ：Ｋ３４Ｃ；Ｑ４８Ｃ：Ｇ３８Ｃ；Ｅ５３Ｃ：Ｌ４２Ｃ；Ｃ４２Ｓ：Ａ３７Ｃ及びＬ４５Ｃ：Ａ３７Ｃからそれぞれ選択される一組のアミノ酸置換又は付加を含む、実施形態１～９のいずれか１つに記載の方法。
１２．前記ＩＬ－１５タンパク質が、配列番号１及び配列番号２からなる群から選択されるポリペプチド配列を含む、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の方法。
１３．前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、配列番号３及び配列番号４からなる群から選択されるポリペプチド配列を含む、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の方法。
１４．第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑをさらに含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。
１５．第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。
１６．第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。
１７．第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑを含み；第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ、Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々が、アミノ酸置換Ｃ２２０Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、Ｓ２６７Ｋ、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含み；前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含み；前記ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が配列番号４を含む、実施形態１～５のいずれか１つに記載の方法。
１８．ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、実施形態１～１７のいずれか１つに記載の方法。
１９．ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、実施形態１～１８のいずれか１つに記載の方法。
２０．ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合しており、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の方法。
２１．第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、可変長Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカーである、実施形態１８～２０のいずれか１つに記載の方法。
２２．第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（配列番号３９）、（Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４０）、（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４１）、及び（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４２）からなる群から選択されるリンカーを含み、ｎは１から５の間の整数である、実施形態２１に記載の方法。
２３．前記ヘテロ二量体タンパク質が、ＸＥＮＰ２２８２２、ＸＥＮＰ２３５０４、ＸＥＮＰ２４０４５、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ２２８２１、ＸＥＮＰ２３３４３、ＸＥＮＰ２３５５７、ＸＥＮＰ２４１１３、ＸＥＮＰ２４０５１、ＸＥＮＰ２４３４１、ＸＥＮＰ２４０５２、ＸＥＮＰ２４３０１、及びＸＥＮＰ３２８０３タンパク質からなる群から選択される、実施形態１～２２のいずれか１つに記載の方法。
２４．固形腫瘍の治療を必要とする対象における固形腫瘍を治療する方法であって、対象に対し、治療的有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、及びＥ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。
２５．ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。
２６．ＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。
２７．ＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞及びＮＫ細胞の増殖を誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。
２８．対象にＩＦＮγを誘導するための方法であって、対象に対し、有効量のヘテロ二量体タンパク質を投与することを含み、ヘテロ二量体タンパク質は、（ｉ）ＩＬ－１５タンパク質及び第１のＦｃドメインを含む第１の単量体であって、前記ＩＬ－１５タンパク質が前記第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第１の単量体と、（ｉｉ）ＩＬ－１５Ｒαタンパク質のスシドメイン及び第２のＦｃドメインを含む第２の単量体であって、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが前記第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、第２の単量体とを含み；前記第１のＦｃドメイン及び前記第２のＦｃドメインの各々は、アミノ酸置換Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３６ｄｅｌ、及びＳ２６７Ｋ（ＥＵ番号付けによる）を含み；前記ＩＬ－１５タンパク質は、Ｎ６５Ｄアミノ酸置換と、Ｎ４Ｄ、Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑからなる群から選択される１つ又は複数のアミノ酸置換とを含む、方法。
２９．前記第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓをさらに含み、前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、実施形態２４～２８のいずれか１つに記載の方法。
３０．前記第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｓ３６４Ｋ及びＥ３５７Ｑをさらに含み、前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｌ３６８Ｄ及びＫ３７０Ｓ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、実施形態２４～２８のいずれか１つに記載の方法。
３１．前記第１のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、実施形態２４～３０のいずれか１つに記載の方法。
３２．前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｑ２９５Ｅ、Ｎ３８４Ｄ、Ｑ４１８Ｅ及びＮ４２１Ｄ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、実施形態２４～３０のいずれか１つに記載の方法。
３３．前記第２のＦｃドメインが、アミノ酸置換Ｋ２４６Ｔ（ＥＵ番号付けによる）をさらに含む、実施形態２４～３２のいずれか１つに記載の方法。
３４．前記ＩＬ－１５タンパク質が、アミノ酸置換Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ及びＮ６５Ｄを含む、実施形態２４～３３のいずれか１つに記載の方法。
３５．前記ＩＬ－１５タンパク質が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態２４～３４のいずれか１つに記載の方法。
３６．ＩＬ－１５Ｒαタンパク質の前記スシドメインが、配列番号４に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態２４～３５のいずれか１つに記載の方法。
３７．ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、実施形態２４～３６のいずれか１つに記載の方法。
３８．ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、実施形態２４～３７のいずれか１つに記載の方法。
３９．ＩＬ－１５タンパク質が、第１のリンカーを介して第１のＦｃドメインのＮ末端に共有結合しており、ＩＬ－１５Ｒαタンパク質が、第２のリンカーを介して第２のＦｃドメインのＮ末端に共有結合している、実施形態２４～３８のいずれか１つに記載の方法。
４０．第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、可変長Ｇｌｙ－Ｓｅｒリンカーである、実施形態３７～３９のいずれか１つに記載の方法。
４１．第１のリンカー及び／又は第２のリンカーが、独立して、（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（配列番号３９）、（Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４０）、（Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４１）、及び（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）ｎ（配列番号４２）からなる群から選択されるリンカーを含み、ｎは１から５の間の整数である、実施形態４０に記載の方法。
４２．前記第１の単量体が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体が、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１～５及び２４～２８のいずれか１つに記載の方法。
４３．前記第１の単量体が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含み、第２の単量体が、配列番号１６に示されるアミノ酸配列を含む、実施形態１～５及び２４～２８のいずれか１つに記載の方法。
４４．前記ヘテロ二量体タンパク質が、ＸＥＮＰ２４３０６、ＸＥＮＰ３２８０３、又はそれらの組み合わせである、実施形態１～５及び２４～２８のいずれか１つに記載の方法。
４５．第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質との組み合わせが、対象に投与される、実施形態１～４４のいずれか１つに記載の方法。
４６．第１のヘテロ二量体タンパク質が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１０に示されるアミノ酸配列を含む第２の単量体とを含み；第２のヘテロ二量体タンパク質が、配列番号９に示されるアミノ酸配列を含む第１の単量体と、配列番号１６に示されるアミノ酸配列．第２の単量体とを含む、実施形態４５に記載の方法。
４７．前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とが同時に投与される、実施形態４５又は４６に記載の方法。
４８．前記第１のヘテロ二量体タンパク質と第２のヘテロ二量体タンパク質とが連続して投与される、実施形態４５又は４６に記載の方法。
４９．前記固形腫瘍が、局所的に進行性、再発性又は転移性である、実施形態１、６～２４及び２９～４８のいずれか１つに記載の方法。
５０．前記固形腫瘍が、扁平上皮がん、皮膚扁平上皮がん、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、胃腸がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）がん、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん、膀胱がん、脂肪肉腫、軟部組織肉腫、尿路上皮癌、尿管及び腎盂、多発性骨髄腫、骨肉腫、肝細胞癌、黒色腫、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜癌、唾液腺癌、腎細胞癌、肝がん、食道がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝臓癌、メルケル細胞癌、生殖細胞がん、高頻度マイクロサテライト不安定性がん及び頭頚部扁平上皮癌からなる群から選択される、実施形態１、６～２４及び２９～４８のいずれか１つに記載の方法。
５１．前記固形腫瘍が、黒色腫、腎細胞癌、非小細胞肺がん、頭頚部扁平上皮癌、及びトリプルネガティブ乳がんから選択される、実施形態５０に記載の方法。
５２．前記固形腫瘍が、黒色腫、腎細胞癌、及び非小細胞肺がんから選択される、実施形態５１に記載の方法。
５３．前記固形腫瘍が、黒色腫、非小細胞肺がん、頭頚部扁平上皮癌、及びトリプルネガティブ乳がんから選択される、実施形態５１に記載の方法。
５４．対象が、固形腫瘍を治療するための薬剤を以前に投与されたことがない、実施形態１、６～２４及び２９～５３のいずれか１つに記載の方法。
５５．対象が、現在チェックポイント阻害剤を投与されている、実施形態１、６～２４及び２９～５３のいずれか１つに記載の方法。
５６．対象が、チェックポイント阻害剤を以前に投与されたことがある、実施形態１、６～２４及び２９～５３のいずれか１つに記載の方法。
５７．チェックポイント阻害剤がＰＤ－１を標的とする、実施形態５５又は５６に記載の方法。
５８．チェックポイント阻害剤がＰＤ－Ｌ１を標的とする、実施形態５５又は５６に記載の方法。
５９．チェックポイント阻害剤がＣＴＬＡ－４を標的とする、実施形態５５又は５６に記載の方法。
６０．前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、約０．００２５ｍｇ／ｋｇ、約０．００５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０８ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．１２ｍｇ／ｋｇ、約０．１６ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ、約０．２４ｍｇ／ｋｇ及び約０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、実施形態１～５９のいずれか１つに記載の方法。
６１．前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、及び約０．０６ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、実施形態６０に記載の方法。
６２．前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、０．００２５ｍｇ／ｋｇ、０．００５ｍｇ／ｋｇ、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０１５ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０２５ｍｇ／ｋｇ、０．０３ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．０６ｍｇ／ｋｇ、０．０８ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．１６ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ及び０．３２ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、実施形態１～６０のいずれか１つに記載の方法。
６３．前記ヘテロ二量体タンパク質又はヘテロ二量体タンパク質の組み合わせが、体重で、０．０１ｍｇ／ｋｇ、０．０２ｍｇ／ｋｇ、０．０４ｍｇ／ｋｇ、及び０．０６ｍｇ／ｋｇからなる群から選択される用量で投与される、実施形態６２に記載の方法。
６４．前記ヘテロ二量体タンパク質が、Ｑ１Ｗ、Ｑ２Ｗ、Ｑ３Ｗ、Ｑ４Ｗ、Ｑ５Ｗ及びＱ６Ｗからなる群から選択される頻度で投与される、実施形態１～６３のいずれか１つに記載の方法。
６５．前記ヘテロ二量体タンパク質が、Ｑ２Ｗの頻度で投与される、実施形態６４に記載の方法。
６６．対象に対し、ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする薬剤を投与することをさらに含む、実施形態１～６５のいずれか１つに記載の方法。
６７．ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする前記薬剤が、抗ＰＤ－１抗体である、実施形態６６に記載の方法。
６８．抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、セミプリマブ、スパルタリズマブ、カムレリズマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、トリパリマブ、ＭＤＸ－１１０６、ＡＭＰ－５１４及びＡＭＰ－２２４から選択される、実施形態６７に記載の方法。
６９．ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１軸を標的とする前記薬剤が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、実施形態６８に記載の方法。
７０．抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アベルマブ、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、ＢＭＳ－９３６５５９、ＢＭＳ－３９８８６、ＫＮ０３５、ＣＫ－３０１及びＭＳＢ００１０７１８Ｃから選択される、実施形態６９に記載の方法。

【実施例】

【0207】

実施例１：ＸｍＡｂ２４３０６の非臨床薬理学
［００２１７］以下に詳述するように、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」））との組み合わせを、複数のｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏの試験において評価し、非臨床薬理学特性を特徴づけた。ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験は、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の組み合わせがヒト及びカニクイザルのＩＬ－２／ＩＬ－１５βγ受容体複合体（ＣＤ１２２／ＣＤ１３２）への結合を示し、ヒト及びカニクイザルのＣＤ８^＋Ｔ細胞及びＮＫ細胞に活性を有するが、げっ歯類の細胞（マウス及びラット）において不活性であることを実証した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）結合（ｐＨ６．０）の増加を示したが、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の媒介という点ではエフェクター機能を有していなかった。ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏの両試験は、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３が、好ましくはＣＤ８^＋Ｔ細胞及びＮＫ細胞を拡大し、ＣＤ４^＋ Ｔヘルパーリンパ球の拡大に中程度の影響を与えるが、Ｔｒｅｇ集団及びサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）関連サイトカインの拡大に対する影響は最小である。

【0208】

ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験
［００２１８］ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３のＩＬ－１５成分は、３つのアミノ酸置換（Ｄ３０Ｎ、Ｅ６４Ｑ、及びＮ６５Ｄ）を含む。これら置換は、ＩＬ－１５の効力低下をもたらす。ヒト及びカニクイザルのＩＬ－２／ＩＬ－１５βγ受容体複合体（ＣＤ１２２／ＣＤ１３２）に対する結合親和性ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３を、表面プラズモン共鳴により決定した。同様の結合キネティクス及び親和性を、２つの種の間で観察し、薬理学及び毒性試験用の前臨床動物種としてのカニクイザルの関連性を確立した。

【0209】

［００２１９］ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３は、エフェクターレスであり、ＦｃγＲ及びヒト補体成分１ｑ（Ｃ１ｑ）に対する結合の欠如によって示され、ＡＤＣＣ又はＣＤＣ機序を介した標的細胞の死滅を誘導することは期待されない。具体的には、Ｆｃ領域ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３は、ヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃγＲに対する結合を除去するように操作され；バイオレイヤーインターフェロメトリー（ＢＬＩ）法により結合相互作用は検出されなかった。また、補体系を開始するＣ１複合体の重要な成分であるヒトＣ１ｑに対するＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の結合がＢＬＩを使用して評価され、結合は観察されなかった。

【0210】

［００２２０］さらに、ＸｍＡｂ２４３０６の半減期を延長することを目標として、ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３のＦｃ領域が、より低いｐＨ（６．０）でＦｃＲｎに対する結合を強化するように操作された。ヒト、カニクイザル、及びマウスＦｃＲｎとの結合相互作用がＢＬＩ方法によって決定され、これら受容体に対するＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の親和性が、エンドソーム輸送に関して生理学的に関連性のあるｐＨであるｐＨ６．０で有意に強化された。

【0211】

［００２２１］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３種の選択性を、ホスホ－ＳＴＡＴ５アッセイを使用して評価した。ＣＤ１２２／ＣＤ１３２発現リンパ球に対するＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα受容体複合体の結合は、ヤヌスキナーゼ シグナルトランスデューサーの活性化及び転写シグナル伝達経路の活性化因子につながり、それはＳＴＡＴ５のリン酸化と、それに続く細胞増殖をもたらした。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、マウス又はラットのＣＤ８^＋ Ｔ細胞にＳＴＡＴ５のリン酸化を誘導せず、それにより、毒性試験のためのげっ歯類の使用又は抗腫瘍活性に関するＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の評価のための同系マウスモデルの使用が排除された。

【0212】

［００２２２］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の効力を、ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞増殖アッセイにおいて評価した。ヒトＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞は、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３処置に対して強い増殖応答を示した。これら２つの標的細胞集団のなかで、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞（半数効果濃度［ＥＣ_５０］：１２．７μｇ／ｍＬ）の増殖よりＮＫ細胞（半数効果濃度［ＥＣ_５０］：１．２μｇ／ｍＬ）に対して相対的に高い効力を示した（図１Ａ及び１Ｂ）。ＣＤ８^＋Ｔ細胞及びＮＫ細胞の増殖に加えて、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３はヒトＰＢＭＣにもＩＦＮγ生成を誘導した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３はまた、カニクイザルＰＢＭＣにおいてＮＫ細胞（ＥＣ_５０：０．５μｇ／ｍＬ）及びＣＤ８^＋ Ｔ細胞（ＥＣ_５０：３．８μｇ／ｍＬ）の増殖を促進し、これにより、薬理学及び毒性試験用の非臨床動物種としてカニクイザルが妥当であることが確認された。

【0213】

［００２２３］ＸＥＮＰ２４３０６及びＸＥＮＰ３２８０３は、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合タンパク質として設計された、効力の低下した組み換えヒトＩＬ－１５である。ＣＤ８^＋ ターミナルエフェクターＴ細胞上に示されるように、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３について、組み換え野生型ＩＬ－１５の概ね９００分の１の効力と、同様のフォーマット（野生型ＩＬ－１５／野生型ＩＬ－１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合；名称ＸＥＮＰ２２８５３；配列番号１１（野生型ＩＬ－１５－Ｆｃの第１の単量体）及び配列番号７（ＩＬ－１５Ｒα－Ｆｃの第２の単量体））の組み換え野生型ＩＬ－１５（ｒＩＬ１５）の概ね４００分の１の効力が観察された（図２）。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の効力を、異なるヒト免疫細胞サブセットで評価した。具体的には、ヒトＰＢＭＣを、漸増濃度のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３、組み換え野生型ＩＬ１５、又は野生型ＩＬ－１５／野生型ＩＬ－１５Ｒαヘテロ二量体Ｆｃ融合（ＸＥＮＰ２２８５３）で４日間処置し、細胞周期タンパク質Ｋｉ６７の細胞内染色により増殖についてフローサイトメトリーによりアッセイした。図２は、ＣＤ３^＋ ＣＤ８^＋ ＣＤ４５ＲＡ^＋ ＣＣＲ７^－ ＣＤ２８^－ ＣＤ９５^＋ 集団のゲーティングにより定義されたＣＤ８^＋ ターミナルエフェクターＴ細胞の結果を示している。曲線あてはめを、最小二乗法を使用して生成した。ＥＣ_５０値は、アゴニスト対応答及び可変勾配（４パラメータ）式を使用する非線形回帰解析により決定した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、細胞増殖マーカーＫｉ６７と細胞活性化マーカーＣＤ６９及びＣＤ２５とを発現するこれら細胞サブセットの頻度の上昇により示されるように、エフェクターメモリーＣＤ８^＋及びＣＤ４^＋ Ｔ細胞とＮＫ細胞の活性化を強化した。ＸｍＡｂ２４３０６は、ナイーブＣＤ８^＋又はＣＤ４^＋ Ｔ細胞に対して最小の影響しか与えなかった。

【0214】

［００２２４］２つの追加のｉｎ ｖｉｔｒｏ毒性試験：（１）ヒト原形質膜タンパク質細胞アレイを使用したＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の結合プロファイルの評価、及び（２）ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３により誘導されるサイトカイン放出の評価を実施し、可溶型及び固定化ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のサイトカイン生成を誘導する能力を比較した。最適化した濃度のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（２０μｇ／ｍＬ）を使用した複数の実験のデータは、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３について同定された説得力のあるオフターゲット結合相互作用がないことを示した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３によるサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の潜在的リスクを、非刺激ヒトＰＢＭＣを使用してｉｎ ｖｉｔｒｏで調査した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３がＣＲＳに関連付けられるサイトカインの生成を誘導する可能性を評価するために、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのヒトＰＢＭＣの刺激を、推奨されるＦＩＨ用量（０．０１ｍｇ／ｋｇ））濃度のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３で血中１０及び２０μｇ／ｍＬ（予想されるＣｍａｘ（０．２３μｇ／ｍＬ）の４３倍及び８７倍）で実施した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の両方の固定化された可溶型フォーマットが、ＩＦＮγの生成を誘導した。ＸｍＡｂ２４３０６（ビヒクルコントロールと比較して９～１４倍）によるＩＦＮγ誘導の大きさは、ポジティブコントロールとして使用された抗ＣＤ２８抗体（ビヒクルコントロールと比較して３９３倍）又は抗ＣＤ３抗体（ビヒクルコントロールと比較して１６０５倍）に観察されたものの数分の１であった。ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２ｐ７０、ＩＬ－１３、又はＴＮＦといった他のいずれのサイトカインの誘導も観察されなかった。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、ＩＬ－６及びＴＮＦとったＣＲＳに関与することが知られている炎症性サイトカインを誘導せず、このことは、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３がＣＲＳを誘導するリスクが低いことを示している。

【0215】

ｉｎ ｖｉｖｏ試験
［００２２５］免疫応答を、カニクイザルにおいてＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の単回又は反復投与の後で評価した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＩＶ投与の後で、ＩＬ－６、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦα）、及びＩＦＮγといった炎症性サイトカインの明らかな上昇は観察されなかった。ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１（単球化学誘引物質タンパク質－１）、ＭＩＰ－１α（マクロファージ炎症性タンパク質－１α）、ＭＩＰ－１β（マクロファージ炎症性タンパク質－１β）、ＴＡＲＣ（胸腺及び活性化調節ケモカイン）、及びエオタキシンといった他のサイトカイン及びケモカインの一過性の上昇が観察され、ＰＤ活性が示された。これらサイトカイン及びケモカインは、投与から１日以内にピーク血清濃度に到達し、１５日目までに処置前のレベルに戻った。可溶型ＣＤ２５の血清濃度は、処置後約４日目にピークに達し、１５日目までに処置前のレベルに戻った。

【0216】

［００２２６］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３処置は、末梢血中のＣＤ８^＋ Ｔ細胞とＮＫ細胞の数を拡大し、予想される免疫細胞集団の標的化が妥当であることを確認するものであった。おそらくは辺縁趨向に起因する血液リンパ球の最初の減少に続き、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞は、処置前のレベルを上回る用量依存性の拡大を呈した。血中のピーク応答は投与の１週間後に達成され、細胞数は、２週間後に処置前のレベル近くに戻るように見えた。セントラル及びエフェクターメモリー、ターミナルエフェクター、並びに幹細胞メモリー細胞を含むＣＤ８^＋ メモリーＴ細胞サブセットは拡大したが、ナイーブＣＤ８^＋ Ｔ細胞は拡大しなかった。ＣＤ４^＋ Ｔ細胞、Ｔｒｅｇｓ、Ｂ細胞、及び顆粒球は、最小の拡大を示すか、又はＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に応答しなかった。Ｋｉ６７発現（細胞増殖マーカー）の頻度の一過性及び用量依存性の上昇は、これら標的細胞集団のなかにも観察され、絶対細胞数の拡大と一貫していた。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（０．０３、０．２、及び０．６ｍｇ／ｋｇ、Ｑ２Ｗ）の反復投与は、各投与後のサイトカイン及びケモカイン応答の一過性の増大を示した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に対する応答は用量依存性であり、サイトカイン、ケモカイン、及びｓＣＤ２５のレベルで可逆的であった。反復用量の毒性試験は、末梢血中のＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の拡大（概ね中用量で６倍及び高用量で１４～１７倍）が各投与後に一過性であり、反復されるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３処置（図３）後にピーク数の減少が観察された。末梢ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の数は、４週間の回復期間後に処置前のレベルに戻った。

【0217】

［００２２７］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３が白血球の増殖及びエフェクター活性を強化する能力を、マウス移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）モデルでの反復用量試験において試験した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（０、７、１４、及び２１日目に投与される４つの用量レベル：０．０１、０．０３、０．１、又は０．３ｍｇ／ｋｇ）は、単剤としてヒトＰＢＭＣを移植した非肥満糖尿病／重症複合免疫不全ガンマ（ＮＳＧ）マウスにおいて評価された。この試験では、ＧＶＨＤの臨床徴候（即ち、体重減少及び死亡率）により測定可能なマウス宿主に対する免疫応答、及び免疫モニタリング評価、例えば末梢ヒトＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞数の増加と血清ＩＦＮγ濃度の上昇をモニタリングした。用量依存性のＧＶＨＤ－誘導活性が、０．３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３で処置したマウスに見られる有意な体重減少に観察され、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の数の有意な増加と血清ＩＦＮγ濃度の有意な上昇が、より低い用量で観察された。ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の数に時間（７、１４、２１日目）及び用量依存性の増加が観察された。ＣＤ４^＋ Ｔ細胞の拡大は、試験した２つの最高用量レベルで１４日目にのみ観察された。ＮＫ細胞の拡大増強により明らかになった最小の薬理学的活性用量は０．０１ｍｇ／ｋｇであり、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及び血清ＩＦＮγの有意な強化を示すためにはより高い用量が必要であった。したがって、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、ＧＶＨＤに貢献するＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の増殖とエフェクター強化を促進した。

【0218】

［００２２８］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（０、７、１４及び２１日目に投与される３つの用量レベル：０．１、０．３、又は１．０ｍｇ／ｋｇ）を、単剤として、マウスにおける抗腫瘍有効性について評価した。ＭＣＦ－７ヒト乳がん細胞及びヒトＰＢＭＣを移植したＮＳＧマウスを使用して、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３が抗腫瘍応答を促進するかを決定した。腫瘍増殖の低減により示される有意な抗腫瘍活性が、単剤として与えられたときのすべてのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３用量レベル（０．１、０．３、及び１．０ｍｇ／ｋｇ）で観察された。時間及び用量依存性の、末梢ＣＤ８^＋ Ｔ細胞、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞、及びＮＫ細胞の数の増加及び血清ＩＦＮγ濃度の上昇が測定され、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３が抗腫瘍応答を促進することが実証された。

【0219】

実施例２：動物における薬物動態と薬物代謝
［００２２９］ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」）は、ヒト及びカニクイザルのＩＬ－２／ＩＬ－１５βγヘテロ二量体受容体複合体に同等な親和性で結合し、ヒト及びカニクイザル両方のＣＤ８^＋ Ｔ細胞とＮＫ細胞において活性である。したがって、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の薬物動態（ＰＫ）を、優良実験室規範（ＧＬＰ）毒性試験のための用量選択をサポートするため、並びにファイーストインヒューマン（ＦＩＨ）試験における用量の選択及び用量レジメンをサポートするために、カニクイザルにおいて調査した。ＧＬＰ毒性試験をサポートするために、カニクイザルの血清試料中のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３を定量化するために、電気化学発光アッセイが開発され、検証された。ヤギ抗ヒトＩＬ－１５Ｒα抗体を捕獲として使用し、マウス抗ヒト／霊長類のＩＬ－１５ビオチン化抗体及びスルホタグ付きストレプトアビジンを、一次及び二次検出試薬として使用した。定量化下限値（ＬＬＯＱ）は３０．０ｎｇ／ｍＬであった。

【0220】

［００２３０］時間分解蛍光法は、カニクイザルの血清試料における非ＧＬＰ ＰＫ／ＰＤ試験のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３濃度を定量化するために開発された。このアッセイのＬＬＯＱは１．４ｎｇ／ｍＬであった。

【0221】

カニクイザルにおける単回用量薬物動態
［００２３１］ＧＬＰ試験設計の有効性を評価し、最大許容用量を規定するために設計された予備パイロット試験設計を実行した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の単回用量薬物動態は、カニクイザルにおける雄では３．０ｍｇ／ｋｇで、雌では０．６ｍｇ／ｋｇでの２つの独立したＰＫ／ＰＤ試験において特徴づけした。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、雄カニクイザルに対する単回の３．０ｍｇ／ｋｇのＩＶ投与の後で、平均クリアランス（ＣＬ）が６６．４ｍＬ／日／ｋｇであり、定常状態での平均分布容積（Ｖ_ｓｓ）が１０７ｍＬ／ｋｇであるという多相プロファイルを示した。平均Ｃ_ｍａｘ及び曝露（時点０から無限遠［ＡＵＣ_０－∞の濃度時間曲線下面積］）は、それぞれ６９．６μｇ／ｍＬ及び４５．４日μｇ／ｍＬであった。雌カニクイザルに対する０．６ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の単回ＩＶ投与の後で、平均Ｃ_ｍａｘは１１．９μｇ／ｍＬであり、曝露（ＡＵＣ_０－∞）は１１．７日μｇ／ｍＬであり、ＣＬは５２．６ｍＬ／日／ｋｇであり、Ｖ_ｓｓは８９．０ｍＬ／ｋｇであった。表３を参照されたい。

【0222】

カニクイザルにおける反復用量薬物動態
［００２３２］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の毒物動態学（ＴＫ）を、カニクイザルにおける５週間のＧＬＰ反復用量毒性試験において特徴づけた。３つの用量レベル（０．０３、０．２、及び０．６ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３）を、１４日間隔で合計３用量投与した。全身曝露がすべての動物において確認され、カニクイザルのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３曝露に性別による差は観察されなかった（図４）。Ｃ_ｍａｘは、初回用量の後、用量に比例していた。反復投与には、Ｃ_ｍａｘが減少するわずかな傾向があった；しかしながら、範囲（平均±ＳＤ）は、初回、２回目、及び３回目の用量の後にＣ_ｍａｘについて重複していた。ＡＵＣ_０-１４は、初回用量後、用量比例よりわずかに下回っていた。これに加えて、曝露（ＡＵＣ）は、反復ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３投与により、特に０．２ｍｇ／ｋｇの用量（７．７４～５．９６日μｇ ｇ／ｍＬ、２２％の減少）及び０．６ｍｇ／ｋｇの用量（２１．１～１４．９日μｇ／ｍＬ、３０％の減少；表４）で減少した。反復投与時の全身曝露（ＡＵＣ）のこのような減少は、標的細胞集団の増大の結果としてのＴＭＤＤの増大に起因していると思われた。初回用量の後のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＣＬは、１８～２８ｍＬ／日／ｋｇの範囲であり、Ｖ_ｓｓは、５２～８６ｍＬ／ｋｇの範囲であった。これら試験に観察されたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の通常より高いＩｇＧクリアランス（典型的なＩｇＧの場合＜１０ｍＬ／日／ｋｇ）は、ＴＭＤＤの結果であると思われた。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３については、初回用量後の用量増加に伴うＣＬの上昇と、反復投与後のＡＵＣ_０-１４における用量比例よりは小さいさらなる増加によって示されるように、複数の用量レベルにわたる時変の非線形ＰＫ挙動が観察された。同様のＰＫ挙動がヒトのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に予想される。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の投与に応答した標的細胞集団の増大が、ＴＭＤＤ効果を増大させ、この試験に観察されたような時変の薬物動態をもたらすと思われた。ＡＵＣ値の低下により示されるように、反復投与の後に蓄積は観察されず、初回用量と２回目の用量との間のＡＵＣ比は０．７０４～０．９９１倍であった（表４）。

【0223】

実施例３：薬力学的影響
サイトカイン、ケモカイン及び可溶型ＣＤ２５に対する影響
［００２３３］サイトカインを、単回用量０．６又は３．０ｍｇ／ｋｇのＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（２つの独立したカニクイザルＰＫ／ＰＤ試験におけるＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％））との組み合わせ（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」））の後で評価した。０．６ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３用量の両方で、血清マーカー、並びにサイトカインとケモカインは、投与後８～１６時間以内にピークに達し、１５日目までに概ね処置前のレベルに戻った。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３治療後に上昇した血清マーカーは、エオタキシン、エオタキシン－３、ＩＬ－８、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＣＰ－４、ＭＤＣ、ＭＩＰ－１α、ＭＩＰ－１β、及びＴＡＲＣを含んでいた。これらサイトカイン及びケモカインの発現増加はさらに、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３によって誘導されるリンパ球拡大に寄与しうる。

【0224】

［００２３４］２つの独立したＰＫ／ＰＤ試験において、単回用量０．６又は３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の後でのｓＣＤ２５／ＩＬ－２Ｒαを評価した。０．６ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３用量グループの両方で、ｓＣＤ２５のパターンは、投与後３～４日間に漸増を示し、これはＴ細胞上でのＣＤ２５発現と一致していた。

【0225】

リンパ球に対する影響
［００２３５］単回用量０．６ｍｇ／ｋｇ又は３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の後で、リンパ球は、投与後３日まで、軽度～中程度減少した。この後、変動する用量依存性の中程度～顕著な増加が起こり、投与後７～９日でピークに達した。その後リンパ球は、試験終了までに、処置前のレベルに向かって回復又は部分的に回復した。単球は、リンパ球を忠実に反映する傾向があったが、その程度はずっと小さかった。０．６ｍｇ／ｋｇ用量の動物に対して実施された血液塗抹検査により、リンパ球の多くが不定型／反応性であることが認められた。
単核細胞浸潤
単回用量０．６ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の後では、肝臓の洞様毛細血管に最小～軽度の単核細胞浸潤が観察された。単回用量３．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３では、単核細胞浸潤は、肝臓、腎臓、肺、空腸、膀胱、及び皮膚に認められた。

【0226】

実施例４：反復用量の毒性
［００２３６］２つの反復用量ＧＬＰ試験を実施した：（１）本実施例に記載される４週間の回復期を伴う５週間の毒性試験、及び（２）実施例５に記載される専用の心血管安全性薬理学試験。

【0227】

［００２３７］５週間の反復用量ＧＬＰ毒性試験が、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％））との組み合わせ（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」）の毒性、薬理学、及びＴＫを評価するために、雄及び雌のカニクイザルにおいて実施された。動物は、１、１５、及び２９日目にＩＶボーラスを介して、ビヒクル（コントロールグループ）を投与されるか、又は０．０３、０．２、若しくは０．６ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３ を投与され、３４日目（主要な試験コホート）又は６４日目（回復コホート；コントロール及び０．６ｍｇ／ｋｇのＸｍＡｂ２４３０６）に剖検に供された。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に関連する影響の可逆性又は持続性を評価するために、３０日間の回復期が設計された。

【0228】

［００２３８］毒性の評価は、臨床観察、体重、定量的食品検査、眼科学、ＥＣＧ、臨床病理学パラメータ（血液学、凝固、臨床化学、尿検査、及び尿化学）、生物分析的及びＴＫパラメータ、ＡＤＡ、サイトカイン、フローサイトメトリー分析、重大な剖検所見、臓器重量、並びに病理組織検査に基づいていた。

【0229】

［００２３９］ＴＫ分析により、試験したすべての用量レベルでＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の全身曝露が確認された。曝露に性別による差はなかった。Ｃ_ｍａｘは、初回用量の後、用量に比例していた。初回用量の後のＡＵＣ_０-１４は用量と共に増加したが、用量比例よりはやや少なく、曝露（ＡＵＣ）は反復投与時に減少した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、カニクイザルにおいて、試験した用量レベルでのＴＭＤＤに起因して非線形動力学を有するように見えた（実施例２）。

【0230】

［００２４０］反復用量ＧＬＰ毒性試験におけるすべての所見は、予想されるＴ細胞及びＮＫ細胞の拡大の薬理的応答、及び関連する炎症誘発応答を伴う活性化と一貫していた。専用の反復用量ＧＬＰ毒性試験から規定されるＮＯＡＥＬは、０．０３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３と決定された。ＮＯＡＥＬに対する０．０１ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ Ｑ２Ｗの提案されるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＦＩＨ用量の対応する安全マージンは、実施例５に記載される。

【0231】

実施例５：安全性薬理学
［００２４１］単回の、専用ＧＬＰ安全性薬理学試験を、心血管系に対するＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）の組み合わせ（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」））の潜在的影響を評価するために、遠隔測定機器を取り付けた雄カニクイザル（１グループあたり４匹、ビヒクルコントロールグループを含む）において実施した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、１及び１５日目に、ＩＶボーラス注射により０．０３、０．２、及び０．６ｍｇ／ｋｇ（ＧＬＰ毒性試験と同じ用量）で投与され、動物は２３日目にコロニーに戻された。以下のパラメータ及びエンドポイントが評価された：臨床徴候、摂食量（定量評価）、体重、心血管評価（心収縮、拡張、及びＭＡＰ、心拍数、並びにＥＣＧ（定量評価と、ＲＲ間隔、ＰＲ間隔、ＱＲＳ間隔、及びＱＴ間隔の測定並びに誘導された心拍数補正ＱＴ［ＱＴｃａ］間隔とを含む）、体温、血清アルブミン濃度、及びＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３曝露並びにＡＤＡ発生率。

【0232】

［００２４２］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、すべての用量（０．０３、０．２、及び０．６ｍｇ／ｋｇ）で臨床的に良好な忍容性を示し、すべての動物は試験期間にわたって生存し、獣医の介入は不要であった。いずれの用量においても、臨床徴候、試験物に関連する摂食量の変化、体重変化、又はＥＣＧ異常は観察されなかった。ＥＣＧは、カニクイザルに考えられる定性的正常であり、処置に関連するＰＲ間隔、ＱＲＳ間隔、又はＱＴｃａ間隔の変化はなかった。

【0233】

［００２４３］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の全身曝露は、すべての用量レベルで示された。試験期間中、処置に関連する体重又は定性的摂食量の変化は生じなかった。

【0234】

［００２４４］カニクイザルにおけるＧＬＰ試験の所見の全体性に基づいて、無毒性量（ＮＯＡＥＬ）用量は、０．０３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３と考慮された。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の免疫アゴニスト特性により、ＦＩＨ用量の決定は、推定最小薬理作用量（ＭＡＢＥＬ）の手法に基づいていた。単剤としての用量０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３、ＩＶが、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＦＩＨ用量として提案される。このＦＩＨ用量は、ＥＣ_２０（０．２３μｇ／ｍＬ；２０名のドナーの幾何平均）に基づいており、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の最も感受性の高いｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイである、ヒトＰＢＭＣ中のｉｎ ｖｉｔｒｏ ＮＫ細胞（ＣＤ３^－ＣＤ５６^＋）増殖（Ｋｉ６７を発現する細胞のパーセント）を使用して得られた。図１を参照されたい。推奨されるＦＩＨ用量である０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、安全であると推定され、最小の生物学的影響を提供し、ヒトにおける治療媒介性反応のリスクが最小であると思われる。推奨されるＦＩＨ用量（即ち、０．０１ｍｇ／ｋｇ）でヒトにＩＶ投与されるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＣ_ｍａｘは、このＥＣ_２０レベルを超えないと思われる。ヒトにおけるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の開始用量０．０１ｍｇ／ｋｇは、カニクイザルの５週間のＧＬＰ毒性試験におけるＮＯＡＥＬ用量（０．０３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３、Ｑ２Ｗ）に対し、３倍の安全マージンを有する。０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３でヒトにＩＶ投与されるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＣ_ｍａｘは、カニクイザルにおいてＮＯＡＥＬ用量で観察されるＣ_ｍａｘ（０．７５±０．０４μｇ／ｍＬ；初回用量）を３．３倍下回ると予想される。表５を参照されたい。さらに、ヒトにおける０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３でのＡＵＣは、カニクイザルにＮＯＡＥＬ用量で観察されるＡＵＣを１．８倍下回ると予測される（表５）。即ち、関連する非臨床ＧＬＰ毒性モデル（カニクイザル）においてＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＮＯＡＥＬで観察されるＣ_ｍａｘ及びＡＵＣは、ＭＡＢＥＬに基づくＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３ ＩＶの開始用量０．０１ｍｇ／ｋｇをさらに支持し、試験に十分な安全マージンを提供する（表５）。

【0235】

［００２４５］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のヒトへの投与頻度はＱ２Ｗであり、Ｑ２Ｗで投与されたときに有意な急性毒性がなく、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３が概ね良好な耐容性を示した５週間のカニクイザルにおけるＧＬＰ毒性試験によって支持されている。ピーク末梢ＰＤ応答（ＮＫ及びＣＤ８^＋ Ｔ細胞といった標的細胞の拡大）は、投与の１週間後に達成され、これら末梢標的細胞数は、それらのベースラインに向かって ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３投与後２週間目の終わりまでに減少していった。さらに、ＰＤ活性を示すサイトカイン及びケモカインは、投与後８～１６時間の間にピークに達し、投与から１４日以内にベースラインに戻った（実施例３参照）。したがって、初期投与頻度Ｑ２Ｗは、試験処置の初回サイクルを含む用量制限毒性観察期間にＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３を用いる単剤療法の用量漸増試験において適切と考えられる。

【0236】

実施例６：ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の組み合わせの、単剤療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験
［００２４６］ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」））の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための、単剤療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験が実施されるであろう。

【0237】

［００２４７］試験は、最大２８日間のスクリーニング期間、処置期間、及び処置後９０日間の最小フォローアップ期間からなる。

【0238】

［００２４８］患者は、２段階：用量漸増段階及び拡大段階に登録される。

【0239】

［００２４９］局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍を有する概ね２１～５４名の患者が、用量漸増段階の試験に登録される。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の初回量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗである。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、ＩＶ点滴によって投与される。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の用量を、安全閾値（１名の患者の用量制限毒性（ＤＬＴ）又は所与のコホートのＤＬＴ評価期間中の少なくとも２名の患者における別の明確に同定可能な原因に起因しないグレード≧２の主要臓器有害事象と定義される）が観察されるまで、各連続コホートの先行する用量レベルの最大１００％まで増加させる。その後、単剤ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の最大耐用量（ＭＴＤ）又は最大投与量（ＭＡＤ）を決定するために、各々３～９名の患者のコホートを、３＋３＋３設計に従う漸増用量レベルで評価する。図７。

【0240】

［００２５０］この試験の患者はまず、スクリーニング期間（継続期間≦２８日）中に適格性について評価される。適格性の確認に続いて、患者は、各１４日間サイクル（Ｑ２Ｗ）の初日に、０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３をＩＶ点滴により投与される。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＰＫを評価する。患者は、用量漸増の間のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３処置の最初の８サイクルについて、拡大の間の最初の２サイクルについて、及びその後はそれよりも低い頻度で、定期的な血液学的評価及び代謝の実験室評価のために、身体検査及び採血により毎週評価される。腫瘍評価は、ベースライン及び試験開始後に行われる。

【0241】

［００２５１］単剤療法用量漸増コホートのクリアされたコホート（即ち、バックフィルコホート）に登録する患者は、以下のＰＤ－Ｌ１選択腫瘍型：黒色腫、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、ＧＣ、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、皮膚扁平上皮癌（ｃＳＣＣ）、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がんのうちの１つを有しなければならない。

【0242】

［００２５２］利用可能な標準的治療の後で進行した局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の悪性腫瘍を有するか、又は標準的治療の効果がない若しくは標準的治療が耐えられないことが証明されているか、又は治験薬の臨床試験が標準治療として認められている概ね１８５～２４０名の患者が、試験の拡大コホートに登録する。このような拡大段階は、単剤としてのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の安全性、薬物動態、ＰＤ活性、及び予備的な抗腫瘍活性をよりよく特徴づけるための、規定された患者のコホートからなる。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、拡大段階において、ＩＶ点滴によって投与される。暫定的なＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の推奨拡大用量（ＲＥＤ）は、用量漸増において確立されたＭＴＤ／ＭＡＤ以下で提案されるであろう。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＲＥＤが提案されたら、さらなる患者が拡大段階で登録され、ＲＥＤで処置される。

【0243】

［００２５３］すべての患者は、研究を通して、及び試験処置の最終用量後少なくとも９０日間又は別の全身性抗がん療法の開始までのいずれか先に生じるまでの間、有害事象について注意深くモニタリングされる。有害事象はＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０に従って類別される。

【0244】

［００２５４］単剤としてのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の薬物動態、免疫原性応答、及びＰＤ特性を特徴づけるために、投与の前後の様々な時点で血液試料を採取する。

【0245】

［００２５５］患者は、スクリーニング（ベースライン）において及び試験中定期的間隔で腫瘍評価に供され、固形癌効果判定基準（ＲＥＣＩＳＴ）ｖ１．１により測定されるる。免疫に基づく治療学（ｉＲＥＣＩＳＴ）の改訂ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１も、がん免疫療法（ＣＩＴ）に関連付けられる応答の異なるパターンをよりよく特徴づけるため、及びＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の予備的活性プロファイルのよりよい理解を可能にするために、この研究に使用することができる。ｉＲＥＣＩＳＴは、この試験において標準のＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を補充し、試験者が患者にとっての有用性とリスクを総合的に評価できるようにすることを意図している。

【0246】

［００２５６］この試験の活動目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の活性の予備評価を、以下のエンドポイントに基づいて行うことである：
・ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度；
・有害事象を有する参加者のパーセンテージ；
・完全寛解（ＣＲ）又は部分寛解（ＰＲ）を有する患者の割合として定義される客観的奏効率（ＯＲＲ）；
・文書化された客観的奏功が最初に発生してから、いずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間として定義される、応答持続時間（ＤＯＲ）；
・登録からいずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間と定義される、登録後無増悪生存期間（ＰＦＳ）；及び
・登録からいずれかの原因による死亡までの時間と定義される、登録後の全生存期間（ＯＳ）。

【0247】

［００２５７］この試験の安全性の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の安全性を、有害事象の発生と重症度、及び標的とされるバイタルサインのベースラインからの変化、又は臨床検査結果若しくはＥＣＧパラメータに基づいて評価することである。

【0248】

［００２５８］この試験の薬物動態（ＰＫ）の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＰＫプロファイルを、特定の時点のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度に基づいて特徴づけることである。

【0249】

［００２５９］この試験の免疫原性の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に対する免疫応答（Ｉａ）を、ベースラインでのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に対するＡＤＡ及び試験中におけるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に対するＡＤＡの発生に基づいて評価することである。

【0250】

実施例７：ＸＥＮＰ２４３０６の単剤療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験
［００２６０］ＸＥＮＰ２４３０６の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための単剤療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験が実施されるであろう。

【0251】

［００２６１］試験は、最大２８日間のスクリーニング期間、処置期間、及び処置後９０日間の最小フォローアップ期間からなる。

【0252】

［００２６２］患者は、２段階：用量漸増段階及び拡大段階に登録される。

【0253】

［００２６３］局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍を有する概ね２１～５４名の患者が、用量漸増段階の試験に登録される。ＸＥＮＰ２４３０６の初回量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗである。ＸＥＮＰ２４３０６は、ＩＶ点滴によって投与される。ＸＥＮＰ２４３０６の用量を、安全閾値（１名の患者の用量制限毒性（ＤＬＴ）又は所与のコホートのＤＬＴ評価期間中の少なくとも２名の患者における別の明確に同定可能な原因に起因しないグレード≧２の主要臓器有害事象と定義される）が観察されるまで、各連続コホートの先行する用量レベルの最大１００％まで増加させる。その後、単剤ＸＥＮＰ２４３０６の最大耐用量（ＭＴＤ）又は最大投与量（ＭＡＤ）を決定するために、各々３～９名の患者のコホートを、３＋３＋３設計に従う漸増用量レベルで評価する。図７。

【0254】

［００２６４］この試験の患者はまず、スクリーニング期間（継続期間≦２８日）中に適格性について評価される。適格性の確認に続いて、患者は、各１４日間サイクル（Ｑ２Ｗ）の初日に、０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６をＩＶ点滴により投与される。ＸＥＮＰ２４３０６のＰＫを評価する。患者は、用量漸増の間のＸＥＮＰ２４３０６治療の最初の８サイクルの、拡大の間の最初の２サイクルの、及びその後はそれよりも低い頻度での、定期的な血液学的及び代謝の実験室評価のために、身体検査及び血液濃度により毎週評価される。腫瘍評価は、ベースライン及び試験開始後に行われる。

【0255】

［００２６５］単剤療法用量漸増コホートのクリアされたコホート（即ち、バックフィルコホート）に登録する患者は、以下のＰＤ－Ｌ１選択腫瘍型：黒色腫、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、ＧＣ、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、皮膚扁平上皮癌（ｃＳＣＣ）、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がんのうちの１つを有しなければならない。

【0256】

［００２６６］利用可能な標準的治療の後で進行した局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の悪性腫瘍を有するか、又は標準的治療の効果がない若しくは標準的治療が耐えられないことが証明されているか、又は治験薬の臨床試験が標準治療として認められている概ね１８５～２４０名の患者が、試験の拡大コホートに登録する。このような拡大段階は、単剤としてのＸＥＮＰ２４３０６の安全性、薬物動態、ＰＤ活性、及び予備的な抗腫瘍活性をよりよく特徴づけるための、規定された患者のコホートからなる。ＸＥＮＰ２４３０６は、拡大段階において、ＩＶ点滴によって投与される。暫定的なＸＥＮＰ２４３０６の推奨拡大用量（ＲＥＤ）は、用量漸増において確立されたＭＴＤ／ＭＡＤ以下で提案されるであろう。ＸＥＮＰ２４３０６のＲＥＤが提案されたら、さらなる患者が拡大段階で登録され、ＲＥＤで処置される。

【0257】

［００２６７］すべての患者は、研究を通して、及び試験処置の最終用量後少なくとも９０日間又は別の全身性抗がん療法の開始までのいずれか先に生じるまでの間、有害事象について注意深くモニタリングされる。有害事象はＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０に従って類別される。

【0258】

［００２６８］単剤としてのＸＥＮＰ２４３０６の薬物動態、免疫原性応答、及びＰＤ特性を特徴づけるために、投与の前後の様々な時点で血液試料を採取する。

【0259】

［００２６９］患者は、スクリーニング（ベースライン）において及び試験中定期的間隔で腫瘍評価に供され、固形癌効果判定基準（ＲＥＣＩＳＴ）ｖ１．１により測定されるる。免疫に基づく治療学（ｉＲＥＣＩＳＴ）の改訂ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１も、がん免疫療法（ＣＩＴ）に関連付けられる応答の異なるパターンをよりよく特徴づけるため、及びＸＥＮＰ２４３０６の予備的活性プロファイルのよりよい理解を可能にするために、この試験に使用される。ｉＲＥＣＩＳＴは、この試験において標準のＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を補充し、試験者が患者にとっての有用性とリスクを総合的に評価できるようにすることを意図している。

【0260】

［００２７０］この試験の活動目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６の活性の予備評価を、以下のエンドポイントに基づいて行うことである：
・ＸＥＮＰ２４３０６の血清濃度；
・有害事象を有する参加者のパーセンテージ；
・完全寛解（ＣＲ）又は部分寛解（ＰＲ）を有する患者の割合として定義される客観的奏効率（ＯＲＲ）；
・文書化された客観的奏功が最初に発生してから、いずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間として定義される、応答持続時間（ＤＯＲ）；
・登録からいずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間と定義される、登録後無増悪生存期間（ＰＦＳ）；及び
・登録からいずれかの原因による死亡までの時間と定義される、登録後の全生存期間（ＯＳ）。

【0261】

［００２７１］この試験の安全性の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６の安全性を、有害事象の発生と重症度、及び標的とされるバイタルサインのベースラインからの変化、又は臨床検査結果若しくはＥＣＧパラメータに基づいて評価することである。

【0262】

［００２７２］この試験の薬物動態（ＰＫ）の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６のＰＫプロファイルを、特定の時点のＸＥＮＰ２４３０６の血清濃度に基づいて特徴づけることである。

【0263】

［００２７３］この試験の免疫原性の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６に対する免疫応答（Ｉａ）を、ベースラインでのＸＥＮＰ２４３０６に対するＡＤＡ及び試験中におけるＸＥＮＰ２４３０６に対するＡＤＡの発生に基づいて評価することである。

【0264】

実施例８：ＸＥＮＰ３２８０３の単剤療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験
［００２７４］ＸＥＮＰ３２８０３の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための単剤療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験が実施されるであろう。

【0265】

［００２７５］試験は、最大２８日間のスクリーニング期間、処置期間、及び処置後９０日間の最小フォローアップ期間からなる。

【0266】

［００２７６］患者は、２段階：用量漸増段階及び拡大段階に登録される。

【0267】

［００２７７］局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍を有する概ね２１～５４名の患者が、用量漸増段階の試験に登録される。ＸＥＮＰ３２８０３の初回量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ Ｑ２Ｗである。ＸＥＮＰ３２８０３は、ＩＶ点滴によって投与される。ＸＥＮＰ３２８０３の用量を、安全閾値（１名の患者の用量制限毒性（ＤＬＴ）又は所与のコホートのＤＬＴ評価期間中の少なくとも２名の患者における別の明確に同定可能な原因に起因しないグレード≧２の主要臓器有害事象と定義される）が観察されるまで、各連続コホートの先行する用量レベルの最大１００％まで増加させる。その後、単剤ＸＥＮＰ３２８０３の最大耐用量（ＭＴＤ）又は最大投与量（ＭＡＤ）を決定するために、各々３～９名の患者のコホートを、３＋３＋３設計に従う漸増用量レベルで評価する。図７。

【0268】

［００２７８］この試験の患者はまず、スクリーニング期間（継続期間≦２８日）中に適格性について評価される。適格性の確認に続いて、患者は、各１４日間サイクル（Ｑ２Ｗ）の初日に、０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ３２８０３をＩＶ点滴により投与される。ＸＥＮＰ３２８０３のＰＫを評価する。患者は、用量漸増の間のＸＥＮＰ３２８０３治療の最初の８サイクルの、拡大の間の最初の２サイクルの、及びその後はそれよりも低い頻度での、定期的な血液学的及び代謝の実験室評価のために、身体検査及び血液濃度により毎週評価される。腫瘍評価は、ベースライン及び試験開始後に行われる。

【0269】

［００２７９］単剤療法用量漸増コホートのクリアされたコホート（即ち、バックフィルコホート）に登録する患者は、以下のＰＤ－Ｌ１選択腫瘍型：黒色腫、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、ＧＣ、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、皮膚扁平上皮癌（ｃＳＣＣ）、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がんのうちの１つを有しなければならない。

【0270】

［００２８０］利用可能な標準的治療の後で進行した局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の悪性腫瘍を有するか、又は標準的治療の効果がない若しくは標準的治療が耐えられないことが証明されているか、又は治験薬の臨床試験が標準治療として認められている概ね１８５～２４０名の患者が、試験の拡大コホートに登録する。このような拡大段階は、単剤としてのＸＥＮＰ３２８０３の安全性、薬物動態、ＰＤ活性、及び予備的な抗腫瘍活性をよりよく特徴づけるための、規定された患者のコホートからなる。ＸＥＮＰ３２８０３は、拡大段階において、ＩＶ点滴によって投与される。暫定的なＸＥＮＰ３２８０３の推奨拡大用量（ＲＥＤ）は、用量漸増において確立されたＭＴＤ／ＭＡＤ以下で提案されるであろう。ＸＥＮＰ３２８０３のＲＥＤが提案されたら、さらなる患者が拡大段階で登録され、ＲＥＤで処置される。

【0271】

［００２８１］すべての患者は、研究を通して、及び試験処置の最終用量後少なくとも９０日間又は別の全身性抗がん療法の開始までのいずれか先に生じるまでの間、有害事象について注意深くモニタリングされる。有害事象はＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０に従って類別される。

【0272】

［００２８２］単剤としてのＸＥＮＰ３２８０３の薬物動態、免疫原性応答、及びＰＤ特性を特徴づけるために、投与の前後の様々な時点で血液試料を採取する。

【0273】

［００２８３］患者は、スクリーニング（ベースライン）において及び試験中定期的間隔で腫瘍評価に供され、固形癌効果判定基準（ＲＥＣＩＳＴ）ｖ１．１により測定されるる。免疫に基づく治療学（ｉＲＥＣＩＳＴ）の改訂ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１も、がん免疫療法（ＣＩＴ）に関連付けられる応答の異なるパターンをよりよく特徴づけるため、及びＸＥＮＰ３２８０３の予備的活性プロファイルのよりよい理解を可能にするために、この試験に使用される。ｉＲＥＣＩＳＴは、この試験において標準のＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を補充し、試験者が患者にとっての有用性とリスクを総合的に評価できるようにすることを意図している。

【0274】

［００２８４］この試験の活動目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３の活性の予備評価を、以下のエンドポイントに基づいて行うことである：
・ＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度；
・有害事象を有する参加者のパーセンテージ；
・完全寛解（ＣＲ）又は部分寛解（ＰＲ）を有する患者の割合として定義される客観的奏効率（ＯＲＲ）；
・文書化された客観的奏功が最初に発生してから、いずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間として定義される、応答持続時間（ＤＯＲ）；
・登録からいずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間と定義される、登録後無増悪生存期間（ＰＦＳ）；及び
・登録からいずれかの原因による死亡までの時間と定義される、登録後の全生存期間（ＯＳ）。

【0275】

［００２８５］この試験の安全性の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３の安全性を、有害事象の発生と重症度、及び標的とされるバイタルサインのベースラインからの変化、又は臨床検査結果若しくはＥＣＧパラメータに基づいて評価することである。

【0276】

［００２８６］この試験の薬物動態（ＰＫ）の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３のＰＫプロファイルを、特定の時点のＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度に基づいて特徴づけることである。

【0277】

［００２８７］この試験の免疫原性の目的は、単剤として投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３に対する免疫応答（Ｉａ）を、ベースラインでのＸＥＮＰ３２８０３に対するＡＤＡ及び試験中におけるＸＥＮＰ３２８０３に対するＡＤＡの発生に基づいて評価することである。

【0278】

実施例９：抗ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１阻害剤と組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の非臨床薬理学ｉｎ ｖｉｖｏ試験。
［００２８８］ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」））が白血球の増殖及びエフェクター活性を強化する能力を、マウス移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）モデルでの反復用量試験において試験した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（０、７、１４、及び２１日目に投与される４つの用量レベル：０．０１、０．０３、０．１、又は０．３ｍｇ／ｋｇ）が、３．０ｍｇ／ｋｇの固定用量で投与される抗ＰＤ－１阻害剤であるＸＥＮＰ１６４３２との組み合わせで、ヒトＰＢＭＣを移植した非肥満糖尿病／重症複合免疫不全ガンマ（ＮＳＧ）マウスにおいて評価された。この試験では、ＧＶＨＤの臨床徴候（即ち、体重減少及び死亡率）により測定可能なマウス宿主に対する免疫応答、及び免疫モニタリング評価、例えば末梢ヒトＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞数の増加と血清ＩＦＮγ濃度の上昇をモニタリングした。用量依存性のＧＶＨＤ－誘導活性が、０．３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３で処置したマウスに見られる有意な体重減少に観察され、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の数の有意な増加と血清ＩＦＮγ濃度の有意な上昇が、より低い用量で検出された（図５）。ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の数に時間（７、１４、２１日目）及び用量依存性の増加が観察された。ＣＤ４^＋ Ｔ細胞の拡大は、試験した２つの最高用量レベルで１４日目にのみ観察された。ＮＫ細胞の拡大増強により明らかになった最小の薬理学的活性用量は０．０１ｍｇ／ｋｇであり、ＣＤ８^＋Ｔ細胞及び血清ＩＦＮγの有意な強化を示すためにはより高い用量が必要であった。したがって、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は、ＧＶＨＤに貢献するＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の増殖とエフェクター強化を促進した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（０．１及び０．３ｍｇ／ｋｇの用量の）と抗ＰＤ－１抗体との組み合わせグループは、抗ＰＤ－１抗体のみと比較して、有意に優れたＧＶＨＤ誘導活性を示した。

【0279】

［００２８９］この試験は、ヒト免疫細胞上での、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒα－Ｆｃ融合タンパク質であるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の免疫賦活活性を説明する。重要なことに、この試験は、抗ＰＤ１処置のみを上回る免疫応答を強化するための、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３と、ＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１、抗ＰＤ１の二価抗体とを使用する併用治療の有用性を実証するものであり、承認された抗ＰＤ－Ｌ１剤とＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３とを組み合わせることにより臨床的有用性を向上させる可能性を示唆する。

【0280】

［００２９０］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のみが投与されるとき、未処置のコントロールと比べて増加したＮＫ細胞の拡大により明らかになった最小薬理学的作用量（ＭＰＡＤ）は０．０１ｍｇ／ｋｇであった。Ｔ細胞及び血清ＩＦＮγ、並びにＧＶＨＤの増悪の有意な増強を実証するために、より高い用量が必要であった。

【0281】

［００２９１］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３とＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１との併用処置はまた、抗ＰＤ１の単剤処置と比較して、白血球数及びＩＦＮγ生成の有意な増強を促進した。特に、白血球数がＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の増幅の影響に応答して増加すると、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の測定されたトラフ血清濃度は、おそらくは漸進的に拡大する白血球集団に対する標的媒介薬物動態により、減少した。

【0282】

［００２９２］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（０、７、１４及び２１日目に投与される３つの用量レベル：０．１、０．３、又は１．０ｍｇ／ｋｇ）を、３．０ｍｇ／ｋｇの固定用量で投与される抗ＰＤ－１阻害剤であるＸＥＮＰ１６４３２との組み合わせで、マウスにおける抗腫瘍有効性について評価した。ＭＣＦ－７ヒト乳がん細胞及びヒトＰＢＭＣを移植したＮＳＧマウスを使用して、抗ＰＤ－１と組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３が抗腫瘍応答を促進するかを決定した。時間及び用量依存性の、末梢ＣＤ８^＋ Ｔ細胞、ＣＤ４^＋ Ｔ細胞、及びＮＫ細胞の数の増加及び血清ＩＦＮγ濃度の上昇が測定され、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３が抗腫瘍応答を促進することが実証された。図６。

【0283】

［００２９３］ＰＢＳで処置した動物（グループＡ）は、試験の最後まで安定した腫瘍増殖を示した。試験の過程で安楽死させた／死亡していた動物はグループＡにはいなかった。ＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１で処置した動物（グループＢ）は最初、１３日目までＰＢＳ処置した動物（グループＡ）と同様の腫瘍増殖動態を示した。しかしながら、１５日目に開始。

【0284】

［００２９４］ＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１で処置した動物は、ＰＢＳで処置したマウスと比較して、統計的に有意な腫瘍増殖の阻害を示した。ＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１で処置した動物に見られた腫瘍体積の減少は、一般的な同種異系抗腫瘍応答と一貫している。試験の過程で安楽死させた／死亡していたＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１で処置したマウスはいなかった。０．１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（グループＥ）での処置は、既に８日目に、ＰＢＳで処置した動物と比較して有意な腫瘍サイズの縮小を誘導した。１３日目までに、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の３つすべての用量レベル（１．０、０．３及び０．１ｍｇ／ｋｇ；グループＣ、Ｄ及びＥ）は、ＰＢＳで処置したマウスと比較して、有意且つ用量依存性の腫瘍増殖の低減を示した。腫瘍体積は、試験の最後まで縮小したままであった。単剤のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３での処置はまた、０．１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３で処置した動物（グループＥ）について、単剤のＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１（グループＢ）での処置と比較して、既に８日目に、有意な腫瘍増殖の阻害をもたらした。１３日目までに、１．０ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（グループＣ）は、腫瘍体積の減少に関して、ＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１を上回る有意性を獲得しており、０．３ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（グループＤ）の場合、ＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１を上回る有意性が１９日目に生じた。

【0285】

［００２９５］加えて、抗ＰＤ－１（単剤）処置グループと比較して、抗ＰＤ－１阻害剤と組み合わせたより高い用量のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（０．３及び１．０ｍｇ／ｋｇ）は、有意により大幅な腫瘍増殖の低減、より顕著な末梢ＣＤ８^＋ Ｔ細胞及びＮＫ細胞の拡大、並びにＩＦＮγの上昇を示した。特に、ＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１と組み合わせて投与されると、０．３及び０．１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３（グループＧ及びＨ）は、ＰＢＳコントロール及び単剤のＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１グループの両方と比較して、既に８日目に、用量依存性で統計的に有意な腫瘍体積の減少をもたらした。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３とＸＥＮ１６４３２の３つすべての組み合わせ用量グループは、１１日目に、ＰＢＳ及び単剤のＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１の両方と比較して、用量依存性で統計的に有意な腫瘍サイズの減少を示した。

【0286】

［００２９６］この試験は、ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒα－Ｆｃ融合タンパク質であるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の抗腫瘍活性を説明する。重要なことに、この試験はまた、抗ＰＤ１処置のみを上回る抗腫瘍免疫応答を強化するために一緒に投与される、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３と、抗ＰＤ１二価抗体であるＸＥＮＰ１６４３２とを使用した併用処置のさらなる有用性を実証するものであり、承認された抗ＰＤ－Ｌ１剤とＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３とを組み合わせることにより臨床的有用性を向上させる可能性を示唆する。用量依存性のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の抗腫瘍活性は、末梢血白血球数の用量依存性の増加及びＩＦＮγ生成の上昇と相関していた。

【0287】

［００２９７］最低レベルの０．１ｍｇ／ｋｇを含む、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のすべての用量レベルは、この抗腫瘍モデルにおいて活性であり、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のすべての用量レベルは、白血球拡大及びＩＦＮγ生成の増加を促進し、最高１ｍｇ／ｋｇの用量のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３は最大の効果を媒介した。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３とＸＥＮＰ１６４３２／抗ＰＤ１の併用治療はまた、抗ＰＤ１単剤療法と比較して、白血球数及びＩＦＮγ生成の増強を増加させた。

【0288】

実施例１０：アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の併用療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験
［００２９８］アテゾリズマブなどの抗ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１抗体と組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６（例えば、～８２％）＋ＸＥＮＰ３２８０３（例えば、～１８％）の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための併用療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験が実施されるであろう。

【0289】

［００２９９］試験は、最大２８日間のスクリーニング期間、処置期間、及び処置後９０日間の最小フォローアップ期間からなる。ＰＤ－Ｌ１で選択された腫瘍を有する併用療法の拡大コホートへの登録を考える患者は、２８日間のスクリーニング期間の前に実施されるＰＤ－Ｌ１ステータスに関する組織プレスクリーニングを受けることができる。

【0290】

［００３００］患者は、２段階：用量漸増段階及び拡大段階に登録される。

【0291】

［００３０１］局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍を有する概ね２１～５４名の患者が、試験の併用療法部分の用量漸増段階に登録される。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３及びアテゾリズマブは、ＩＶ点滴によって投与される。適格性の確認に続いて、患者は、各１４日間サイクルの初日に、アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３をＩＶ点滴により投与される。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の併用療法の開始用量は、２週毎に０．０１ｍｇ／ｋｇ ＩＶである。アテゾリズマブは、各１４日間サイクルの１日目に、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて、８４０ｍｇの固定用量でＩＶ点滴により投与される。アテゾリズマブは、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３及びその後の観察期間の後で投与される。

【0292】

［００３０２］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の用量を、安全閾値（１名の患者の用量制限ＤＬＴ）又は所与のコホートのＤＬＴ評価期間中の少なくとも２名の患者における別の明確に同定可能な原因に起因しないグレード≧２の主要臓器有害事象と定義される）が観察されるまで、各連続コホートの先行する用量レベルの最大１００％まで増加させる。その後、アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＭＴＤ（又はＭＡＤ）を決定するために、各々３～９名の患者のコホートを、３＋３＋３設計に従う漸増用量レベルで評価する。図８。

【0293】

［００３０３］併用療法用量漸増コホートのクリアされたコホート（即ち、バックフィルコホート）に登録する患者は、以下のＰＤ－Ｌ１選択腫瘍型：黒色腫、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、胃がん（ＧＣ）、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、皮膚扁平上皮癌（ｃＳＣＣ）、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がんのうちの１つを有しなければならない。

【0294】

［００３０４］全体で、概ね２５～３５箇所の世界中の治験地において、最大で概ね２２５～３５０名の患者がこの試験に登録されうる。この試験の患者はまず、スクリーニング期間（継続期間≦２８日）中に適格性について評価される。アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の開始用量は、試験の単剤療法部分でＰＤ活性を示すＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の用量を下回る１つの用量レベルより高くなることはない（実施例６）。単剤療法のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の初回用量レベル０．０１ｍｇ／ｋｇがＰＤ活性を示す場合、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の開始用量が最初のアテゾリズマブ組み合わせコホートにおいて０．００５ｍｇ／ｋｇより高くなることはない。ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３及びアテゾリズマブは、拡大段階において、ＩＶ点滴によって投与される。暫定的なＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の推奨拡大用量（ＲＥＤ）は、用量漸増において確立されたＭＴＤ／ＭＡＤ以下で提案されるであろう。

【0295】

［００３０５］アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＲＥＤが提案されたら、さらなる患者が拡大段階に登録され、ＲＥＤで処置される。

【0296】

［００３０６］ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＰＫを評価する。患者は、用量漸増の間のアテゾリズマブ処置と組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の最初の８サイクルについて、拡大の間の最初の２サイクルについて、及びその後はそれよりも低い頻度で、定期的な血液学的評価及び代謝の実験室評価のために、身体検査及び採血により毎週評価される。腫瘍評価は、ベースライン及び試験開始後に行われる。

【0297】

［００３０７］すべての患者は、研究を通して、及び試験処置の最終用量後少なくとも９０日間又は別の全身性抗がん療法の開始までのいずれか先に生じるまでの間、有害事象について注意深くモニタリングされる。有害事象はＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０に従って類別される。

【0298】

［００３０８］アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の薬物動態、免疫原性応答、及びＰＤ特性を特徴づけるために、投与の前後の様々な時点で血液試料を採取する。

【0299】

［００３０９］患者は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１により測定される、スクリーニング（ベースライン）で及び試験中定期的に腫瘍評価に供される。ｉＲＥＣＩＳＴも、がん免疫療法（ＣＩＴ）に関連付けられる応答の異なるパターンをよりよく特徴づけるため、及びアテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の予備的活性プロファイルのよりよい理解を可能にするために、この研究に使用することができる。ｉＲＥＣＩＳＴは、この試験において標準のＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を補充し、試験者が患者にとっての有用性とリスクを総合的に評価できるようにすることを意図している。

【0300】

［００３１０］この試験の活動目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の活性の予備評価を、以下のエンドポイントに基づいて行うことである：
・ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度；
・有害事象を有する参加者のパーセンテージ；
・≧４週間の間隔を空けた２回の連続した機会に完全寛解（ＣＲ）又は部分寛解（ＰＲ）を有する患者の割合として定義される、客観的奏効率（ＯＲＲ）；
・文書化された客観的奏功が最初に発生してから、いずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間として定義される、応答持続時間（ＤＯＲ）；
・登録からいずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間と定義される、登録後無増悪生存期間（ＰＦＳ）；及び
・登録からいずれかの原因による死亡までの時間と定義される、登録後の全生存期間（ＯＳ）。

【0301】

［００３１１］この試験の安全性の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の安全性を、有害事象の発生と重症度、及び標的とされるバイタルサインのベースラインからの変化、又は臨床検査結果若しくはＥＣＧパラメータに基づいて評価することである。

【0302】

［００３１２］この試験の薬物動態（ＰＫ）の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３のＰＫプロファイルを、特定の時点のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度に基づいて特徴づけることである。

【0303】

［００３１３］この試験の免疫原性の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に対する免疫応答を、試験中におけるＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に対するＡＤＡと、ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３及びアテゾリズマブに対するＡＤＡに基づいて評価することである。

【0304】

実施例１１：アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６の併用療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験
［００３１４］アテゾリズマブなどの抗ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１抗体と組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための併用療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験が実施されるであろう。

【0305】

［００３１５］試験は、最大２８日間のスクリーニング期間、処置期間、及び処置後９０日間の最小フォローアップ期間からなる。ＰＤ－Ｌ１で選択された腫瘍を有する併用療法の拡大コホートへの登録を考える患者は、２８日間のスクリーニング期間の前に実施されるＰＤ－Ｌ１ステータスに関する組織プレスクリーニングを受けることができる。

【0306】

［００３１６］患者は、２段階：用量漸増段階及び拡大段階に登録される。

【0307】

［００３１７］局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍を有する概ね２１～５４名の患者が、試験の併用療法部分の用量漸増段階に登録される。ＸＥＮＰ２４３０６及びアテゾリズマブは、ＩＶ点滴によって投与される。適格性の確認に続いて、患者は、各１４日間サイクルの初日に、アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６をＩＶ点滴により投与される。ＸＥＮＰ２４３０６の併用療法の開始用量は、２週毎に０．０１ｍｇ／ｋｇ ＩＶである。アテゾリズマブは、各１４日間サイクルの１日目に、ＸＥＮＰ２４３０６と組み合わせて、８４０ｍｇの固定用量でＩＶ点滴により投与される。アテゾリズマブは、ＸＥＮＰ２４３０６及びその後の観察期間の後で投与される。

【0308】

［００３１８］ＸＥＮＰ２４３０６の用量を、安全閾値（１名の患者の用量制限ＤＬＴ又は所与のコホートのＤＬＴ評価期間中の少なくとも２名の患者における別の明確に同定可能な原因に起因しないグレード≧２の主要臓器有害事象と定義される）が観察されるまで、各連続コホートの先行する用量レベルの最大１００％まで増加させる。その後、アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６のＭＴＤ（又はＭＡＤ）を決定するために、各々３～９名の患者のコホートを、３＋３＋３設計に従う漸増用量レベルで評価する。図８。

【0309】

［００３１９］併用療法用量漸増コホートのクリアされたコホート（即ち、バックフィルコホート）に登録する患者は、以下のＰＤ－Ｌ１選択腫瘍型：黒色腫、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、胃がん（ＧＣ）、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、皮膚扁平上皮癌（ｃＳＣＣ）、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がんのうちの１つを有しなければならない。

【0310】

［００３２０］全体で、概ね２５～３５箇所の世界中の治験地において、最大で概ね２２５～３５０名の患者がこの試験に登録されうる。この試験の患者はまず、スクリーニング期間（継続期間≦２８日）中に適格性について評価される。アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６の開始用量は、試験の単剤療法部分でＰＤ活性を示すＸＥＮＰ２４３０６の用量を下回る１つの用量レベルより高くなることはない（実施例６）。単剤療法のＸＥＮＰ２４３０６の初回用量レベル０．０１ｍｇ／ｋｇがＰＤ活性を示す場合、ＸＥＮＰ２４３０６の開始用量が最初のアテゾリズマブ組み合わせコホートにおいて０．００５ｍｇ／ｋｇより高くなることはない。ＸＥＮＰ２４３０６及びアテゾリズマブは、拡大段階において、ＩＶ点滴によって投与される。暫定的なＸＥＮＰ２４３０６の推奨拡大用量（ＲＥＤ）は、用量漸増において確立されたＭＴＤ／ＭＡＤ以下で提案されるであろう。

【0311】

［００３２１］アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６のＲＥＤが提案されたら、さらなる患者が拡大段階に登録され、ＲＥＤで処置される。

【0312】

［００３２２］ＸＥＮＰ２４３０６のＰＫを評価する。患者は、用量漸増の間のアテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６処置の最初の８サイクルについて、拡大の間の最初の２サイクルについて、及びその後はそれよりも低い頻度で、定期的な血液学的評価及び代謝の実験室評価のために、身体検査及び採血により毎週評価される。腫瘍評価は、ベースライン及び試験開始後に行われる。

【0313】

［００３２３］すべての患者は、研究を通して、及び試験処置の最終用量後少なくとも９０日間又は別の全身性抗がん療法の開始までのいずれか先に生じるまでの間、有害事象について注意深くモニタリングされる。有害事象はＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０に従って類別される。

【0314】

［００３２４］アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６の薬物動態、免疫原性応答、及びＰＤ特性を特徴づけるために、投与の前後の様々な時点で血液試料を採取する。

【0315】

［００３２５］患者は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１により測定される、スクリーニング（ベースライン）で及び試験中定期的に、腫瘍評価に供される。ｉＲＥＣＩＳＴも、がん免疫療法（ＣＩＴ）に関連付けられる応答の異なるパターンをよりよく特徴づけるため、及びアテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６の予備的活性プロファイルのよりよい理解を可能にするために、この研究に使用される。ｉＲＥＣＩＳＴは、この試験において標準のＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を補充し、試験者が患者にとっての有用性とリスクを総合的に評価できるようにすることを意図している。

【0316】

［００３２６］この試験の活動目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６の活性の予備評価を、以下のエンドポイントに基づいて行うことである：
・ＸＥＮＰ２４３０６の血清濃度；
・有害事象を有する参加者のパーセンテージ；
・≧４週間の間隔を空けた２回の連続した機会に完全寛解（ＣＲ）又は部分寛解（ＰＲ）を有する患者の割合として定義される、客観的奏効率（ＯＲＲ）；
・文書化された客観的奏功が最初に発生してから、いずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間として定義される、応答持続時間（ＤＯＲ）；
・登録からいずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間と定義される、登録後無増悪生存期間（ＰＦＳ）；及び
・登録からいずれかの原因による死亡までの時間と定義される、登録後の全生存期間（ＯＳ）。

【0317】

［００３２７］この試験の安全性の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６の安全性を、有害事象の発生と重症度、及び標的とされるバイタルサインのベースラインからの変化、又は臨床検査結果若しくはＥＣＧパラメータに基づいて評価することである。

【0318】

［００３２８］この試験の薬物動態（ＰＫ）の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６のＰＫプロファイルを、特定の時点のＸＥＮＰ２４３０６の血清濃度に基づいて特徴づけることである。

【0319】

［００３２９］この試験の免疫原性の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ２４３０６に対する免疫応答を、試験中におけるＸＥＮＰ２４３０６に対するＡＤＡと、ＸＥＮＰ２４３０６及びアテゾリズマブに対するＡＤＡとに基づいて評価することである。

【0320】

実施例１２：アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３の併用療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験
［００３３０］アテゾリズマブなどの抗ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１抗体と組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための併用療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験が実施されるであろう。

【0321】

［００３３１］試験は、最大２８日間のスクリーニング期間、処置期間、及び処置後９０日間の最小フォローアップ期間からなる。ＰＤ－Ｌ１で選択された腫瘍を有する併用療法の拡大コホートへの登録を考える患者は、２８日間のスクリーニング期間の前に実施されるＰＤ－Ｌ１ステータスに関する組織プレスクリーニングを受けることができる。

【0322】

［００３３２］患者は、２段階：用量漸増段階及び拡大段階に登録される。

【0323】

［００３３３］局所的に進行性、再発性、又は転移性の不治の固形腫瘍を有する概ね２１～５４名の患者が、試験の併用療法部分の用量漸増段階に登録される。ＸＥＮＰ３２８０３及びアテゾリズマブは、ＩＶ点滴によって投与される。適格性の確認に続いて、患者は、各１４日間サイクルの初日に、アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３をＩＶ点滴により投与される。ＸＥＮＰ３２８０３の併用療法の開始用量は、２週毎に０．０１ｍｇ／ｋｇ ＩＶである。アテゾリズマブは、各１４日間サイクルの１日目に、ＸＥＮＰ３２８０３と組み合わせて、８４０ｍｇの固定用量でＩＶ点滴により投与される。アテゾリズマブは、ＸＥＮＰ３２８０３及びその後の観察期間の後で投与される。

【0324】

［００３３４］ＸＥＮＰ３２８０３の用量を、安全閾値（１名の患者の用量制限ＤＬＴ又は所与のコホートのＤＬＴ評価期間中の少なくとも２名の患者における別の明確に同定可能な原因に起因しないグレード≧２の主要臓器有害事象と定義される）が観察されるまで、各連続コホートの先行する用量レベルの最大１００％まで増加させる。その後、アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３のＭＴＤ（又はＭＡＤ）を決定するために、各々３～９名の患者のコホートを、３＋３＋３設計に従う漸増用量レベルで評価する。図８。

【0325】

［００３３５］併用療法用量漸増コホートのクリアされたコホート（即ち、バックフィルコホート）に登録する患者は、以下のＰＤ－Ｌ１選択腫瘍型：黒色腫、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、頭頚部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）尿路上皮癌、（ＵＣＣ）、腎細胞癌（ＲＣＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、胃がん（ＧＣ）、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）、皮膚扁平上皮癌（ｃＳＣＣ）、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）がんのうちの１つを有しなければならない。

【0326】

［００３３６］全体で、概ね２５～３５箇所の世界中の治験地において、最大で概ね２２５～３５０名の患者がこの試験に登録されうる。この試験の患者はまず、スクリーニング期間（継続期間≦２８日）中に適格性について評価される。アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３の開始用量は、試験の単剤療法部分でＰＤ活性を示すＸＥＮＰ３２８０３の用量を下回る１つの用量レベルより高くなることはない（実施例６）。単剤療法のＸＥＮＰ３２８０３の初回用量レベル０．０１ｍｇ／ｋｇがＰＤ活性を示す場合、ＸＥＮＰ３２８０３の開始用量が最初のアテゾリズマブ組み合わせコホートにおいて０．００５ｍｇ／ｋｇより高くなることはない。ＸＥＮＰ３２８０３及びアテゾリズマブは、拡大段階において、ＩＶ点滴によって投与される。暫定的なＸＥＮＰ３２８０３の推奨拡大用量（ＲＥＤ）は、用量漸増において確立されたＭＴＤ／ＭＡＤ以下で提案されるであろう。

【0327】

［００３３７］アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３のＲＥＤが提案されたら、さらなる患者が拡大段階に登録され、ＲＥＤで処置される。

【0328】

［００３３８］ＸＥＮＰ３２８０３のＰＫを評価する。患者は、用量漸増の間のアテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３処置の最初の８サイクルについて、拡大の間の最初の２サイクルについて、及びその後はそれよりも低い頻度で、定期的な血液学的評価及び代謝の実験室評価のために、身体検査及び採血により毎週評価される。腫瘍評価は、ベースライン及び試験開始後に行われる。

【0329】

［００３３９］すべての患者は、研究を通して、及び試験処置の最終用量後少なくとも９０日間又は別の全身性抗がん療法の開始までのいずれか先に生じるまでの間、有害事象について注意深くモニタリングされる。有害事象はＮＣＩ ＣＴＣＡＥ ｖ５．０に従って類別される。

【0330】

［００３４０］アテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３の薬物動態、免疫原性応答、及びＰＤ特性を特徴づけるために、投与の前後の様々な時点で血液試料を採取する。

【0331】

［００３４１］患者は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１により測定される、スクリーニング（ベースライン）で及び試験中定期的に、腫瘍評価に供される。ｉＲＥＣＩＳＴも、がん免疫療法（ＣＩＴ）に関連付けられる応答の異なるパターンをよりよく特徴づけるため、及びアテゾリズマブと組み合わせたＸＥＮＰ３２８０３の予備的活性プロファイルのよりよい理解を可能にするために、この研究に使用される。ｉＲＥＣＩＳＴは、この試験において標準のＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１を補充し、試験者が患者にとっての有用性とリスクを総合的に評価できるようにすることを意図している。

【0332】

［００３４２］この試験の活動目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３の活性の予備評価を、以下のエンドポイントに基づいて行うことである：
・ＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度；
・有害事象を有する参加者のパーセンテージ；
・≧４週間の間隔を空けた２回の連続した機会に完全寛解（ＣＲ）又は部分寛解（ＰＲ）を有する患者の割合として定義される、客観的奏効率（ＯＲＲ）；
・文書化された客観的奏功が最初に発生してから、いずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間として定義される、応答持続時間（ＤＯＲ）；
・登録からいずれかの原因による疾患進行又は死亡（いずれか先に発生した方）までの時間と定義される、登録後無増悪生存期間（ＰＦＳ）；及び
・登録からいずれかの原因による死亡までの時間と定義される、登録後の全生存期間（ＯＳ）。

【0333】

［００３４３］この試験の安全性の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３の安全性を、有害事象の発生と重症度、及び標的とされるバイタルサインのベースラインからの変化、又は臨床検査結果若しくはＥＣＧパラメータに基づいて評価することである。

【0334】

［００３４４］この試験の薬物動態（ＰＫ）の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３のＰＫプロファイルを、特定の時点のＸＥＮＰ３２８０３の血清濃度に基づいて特徴づけることである。

【0335】

［００３４５］この試験の免疫原性の目的は、アテゾリズマブと組み合わせて投与されたときのＸＥＮＰ３２８０３に対する免疫応答を、試験中におけるＸＥＮＰ３２８０３に対するＡＤＡと、ＸＥＮＰ３２８０３及びアテゾリズマブに対するＡＤＡとに基づいて評価することである。

【0336】

［００３４６］本開示は、明確な理解を目的として、説明及び例示によりある程度詳細に提供されたが、当業者には、本開示の主旨又は範囲から逸脱せずに、様々な変形例及び修正例が実施可能であることが自明であろう。したがって、上記の記載及び実施例は、限定的なものとして解釈されるべきでない。

【0337】

実施例１３：ＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質の組み合わせのみ又はアテゾリズマブとの組み合わせの非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験
［００３４７］実施例６によるＩＬ１５／ＩＬ１５Ｒαヘテロ二量体タンパク質（ＸＥＮＰ２４３０６（～８２％）とＸＥＮＰ３２８０３（～１８％）との組み合わせ（「ＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３」））の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための単剤療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験と、実施例１０によるアテゾリズマブなどの抗ＰＤ－Ｌ１／ＰＤ－１抗体と組み合わせたＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の安全性、忍容性薬物動態及び活性を評価するための併用療法非盲検多施設共同グローバル用量漸増試験が実施された。

【0338】

［００３４８］固形腫瘍を有する１２名の患者が、この試験に採用された。試験の用量漸増試験群（第１ａ相）において、各１４日間サイクル（Ｑ２Ｗ）の初日に、ＩＶ点滴により、１名の患者に０．０１ｍｇ／ｍｌのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３を投与し；３名の患者に０．０２ｍｇ／ｍｌのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３を投与し；３名の患者に０．０４ｍｇ／ｍｌのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３を投与し；２名の患者に０．０６ｍｇ／ｍｌのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３を投与した。実施例６及び図７参照。これら患者の薬力学的（ＰＤ）活性を、ＣＤ８＋ Ｔ細胞及び／又はＮＫ細胞の拡大によりモニタリングした。

【0339】

［００３４９］ＣＤ３－ＣＤ１６＋／ＣＤ５６＋ ＮＫ細胞の用量依存性の拡大が、第１ａ相用量漸増試験においてＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に観察された。試験の併用療法群（第１ｂ相）のＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３の開始用量は、０．０１ｍｇ／ｋｇのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３に設定され、３名の患者に、８４０ｍｇのアテゾリズマブと組み合わせた０．０１ｍｇ／ｍｌのＸＥＮＰ２４３０６＋ＸＥＮＰ３２８０３をＩＶによりＱ２Ｗで投与した。実施例１０及び図８参照。

【図1】

【図2】

【図3A-B】

【図3C-D】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10A】

【図10B】

【図11A】

【図11B】

【図11C】

【図11D】

【図11E】

【図11F】

【図11G】

【配列表】

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【国際調査報告】