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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-07-06
(54)【発明の名称】ＦＲＳ２－ＦＧＦＲ相互作用の小分子阻害剤
(51)【国際特許分類】
A61K 31/47 20060101AFI20230629BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230629BHJP
A61P 35/04 20060101ALI20230629BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230629BHJP
【ＦＩ】
A61K31/47
A61P35/00
A61P35/04
A61P43/00 111
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022575184
(86)(22)【出願日】2021-06-08
(85)【翻訳文提出日】2023-01-31
(86)【国際出願番号】 EP2021065340
(87)【国際公開番号】W WO2021250029
(87)【国際公開日】2021-12-16
(31)【優先権主張番号】20178685.2
(32)【優先日】2020-06-08
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】515098691
【氏名又は名称】ウニヴェルズィテート チューリッヒ
(71)【出願人】
【識別番号】516091949
【氏名又は名称】イーティーエッチ チューリッヒ
(74)【代理人】
【識別番号】100149032
【弁理士】
【氏名又は名称】森本 敏明
(74)【代理人】
【識別番号】100181906
【弁理士】
【氏名又は名称】河村 一乃
(72)【発明者】
【氏名】シュナイザー，ジスベール
(72)【発明者】
【氏名】ブルンナー，シリル
(72)【発明者】
【氏名】バウムガートナー，マーティン
(72)【発明者】
【氏名】クマール，カルタゴ サンターナ
(72)【発明者】
【氏名】ゼルベ，オリバー
【テーマコード（参考）】
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC28
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZB26
4C086ZC51
(57)【要約】
本発明は、ＦＲＳ２－ＦＧＦＲ相互作用の小分子阻害剤に関するものである。本発明は、医薬としての使用のための、及びがんの治療又は予防における使用のための小分子阻害剤に関するものである。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
転移の治療又は予防における使用のための一般式（５００）の化合物であって、【化1】
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎであり、
－ Ｒ１は、（直鎖状又は分岐状）Ｃ１～Ｃ１６アルキル、（直鎖状又は分岐状）Ｃ２～Ｃ１６アルケン、ヘテロアリール、アリール、Ｃ４～Ｃ７シクロアルキル、及びＣ３～Ｃ６複素環から選択され、ここでＲ１は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及び非置換若しくは置換Ｃ１～Ｃ５アルキル又はＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、
特にＲ１は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡから選択される１つの部分で置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ ｎは、０、１、２、又は３であり、特にｎは、１であり；
－ ｍは、０、１、２、３、又は４であり、特にｍは、１又は２である、
前記化合物。
【請求項2】
Ｒ１は、－ＣＨ２－ＮＨ－ＣＨＲ４Ｒ５であり、式中、－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択されるか；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成する、
請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項3】
一般式（７００）の請求項１又は２に記載の使用のための化合物であって、【化2】
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、請求項２の記載と同じく定義され；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎである、
前記化合物。
【請求項4】
Ｒ４は、非置換のＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、かつＲ５は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換されたＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択される電気陰性部分であり、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；特に、Ｒ４は、エチル、ｉｓｏ－プロピル、及びｔｅｒｔ－ブチルから選択される、
請求項２又は３に記載の使用のための化合物。
【請求項5】
Ｒ５は、ＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のメチル、エチル、及びイソプロピルから選択される、請求項２～４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項6】
Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特にＦ又はＣｌから選択され、特にＲ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、及びＯＨから選択される、請求項１～５のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項7】
Ｒ３は、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特に、Ｒ３は、ハロゲンであり、より特にＲ３は、Ｆである、
請求項１～６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項8】
Ｘ１は、Ｎである、請求項１～７のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項9】
前記転移が、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん及び胃がんから選択されるがんから生じる、請求項１～８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項10】
血管新生アンタゴニストとしての使用のための請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物であって、特にがんの治療又は予防における血管新生アンタゴニストとしての使用のための前記化合物であり、より特に前記がんは、膀胱がん、肝細胞癌及び前立腺がんから選択される、前記化合物。
【請求項11】
ＦＧＦＲ駆動型疾患の予防又は治療における使用のための請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項12】
一般式（７００）の化合物であって、【化3】
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成し；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１はＮであり、
－ 但し、前記化合物は、一般式（００１）
【化4】
前記化合物。
【請求項13】
Ｒ４は、非置換のＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、かつＲ５は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換されたＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択される電気陰性部分であり、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；特にＲ４は、エチル、ｉｓｏ－プロピル、及びｔｅｒｔ－ブチルから選択され、かつＲ５は、ＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のメチル、エチル、及びイソプロピルから選択される、
請求項１２に記載の化合物。
【請求項14】
Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特にＦ又はＣｌから選択され、特にＲ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、及びＯＨから選択される、請求項１２又は１３に記載の化合物。
【請求項15】
Ｒ３は、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特に、Ｒ３は、ハロゲンであり、より特にＲ３は、Ｆである、
請求項１２～１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項16】
Ｘ１は、Ｎである、請求項１２～１５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項17】
医薬としての使用のための請求項１２～１６のいずれか一項に記載の化合物であって、但し、前記化合物は、一般式（００１）【化5】
前記化合物。
【請求項18】
がんの治療又は予防における使用のための請求項１２～１６のいずれか一項に記載の化合物であって、特に前記がんは、上衣腫、前立腺がん、食道がん、甲状腺がん、肝細胞癌、精巣がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、横紋筋肉腫、胃がん、肺多形癌、乳がん、非小細胞肺がん、脂肪肉腫、子宮頸がん、大腸がん、メラノーマ、多発性骨髄腫、子宮内膜がん、膀胱がん、グリア芽腫、肺扁平上皮癌、卵巣がん、頭頸部がん、膵臓がん、及び肉腫から選択され、より特に、前記がんは、膀胱がん、多発性骨髄腫、胃がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、グリア芽腫、上衣腫、大腸がん、及び肉腫から選択され、最も特に、前記がんは、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん、及び胃がんから選択され、但し、前記化合物は、一般式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ＦＲＳ２－ＦＧＦＲ相互作用の小分子阻害剤に関するものである。本発明は、医薬としての使用のための、及びがんの治療又は予防における使用のための小分子阻害剤に関するものである。
【背景技術】
【0002】
転移は、腫瘍性細胞が発生した臓器から離れた臓器で播種（ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ）及び増殖することであり、がん関連死亡の９０％程度の原因である。効果的ながん治療は、転移を特異的に防ぐ能力に大きく依存しており、より毒性の低い標的化した抗転移療法が緊急に必要とされている。全ての固形腫瘍の大部分における転移の重要かつ根本的な原因は、がん細胞の運動性挙動の調節不全である。微小環境は細胞の挙動を形成し、腫瘍の転移のアウトカム（ｏｕｔｃｏｍｅ）を決定する。Ｋｕｍａｒら（Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１８，ｖｏｌ．２３，ｉｓｓｕｅ １３，Ｐ３７９８－３８１２）は、小児脳腫瘍、髄芽腫（ＭＢ：ｍｅｄｕｌｌｏｂｌａｓｔｏｍａ）において微小環境の指示が腫瘍細胞の浸潤をどのように制御するかについて取り組んだ。彼らは、ｂＦＧＦがｉｎ ｖｉｔｒｏでＦＧＦ受容体（ＦＧＦＲ）を介してＭＢ腫瘍細胞の浸潤を促進すること、及びＦＧＦＲの遮断がｉｎ ｖｉｖｏで脳組織浸潤を抑制することを示す。ＴＧＦ－βは背景依存的様式に遊走促進性（ｐｒｏ－ｍｉｇｒａｔｏｒｙ）ｂＦＧＦ機能を制御する。低ｂＦＧＦでは、非標準的なＴＧＦ－β経路がＲＯＣＫの活性化及びＥＲＫ１／２の皮質移行を引き起こし、これはＦＧＦＲ基質２（ＦＲＳ２）を不活性化することでＦＧＦＲシグナル伝達に拮抗し、収縮性非運動性表現型を促進する。高ｂＦＧＦでは、ｂＦＧＦ誘導型ＥＲＫ１／２によるＦＲＳ２の負のフィードバック制御により、ＦＧＦＲ経路の抑制を引き起こす。これらの条件下では、ＴＧＦ－βはＦＲＳ２の不活性化に対抗し、遊走促進シグナル伝達を回復する。これらの知見は、腫瘍細胞浸潤を制御するメカニズムとしてＦＲＳ２によるｂＦＧＦ及びＴＧＦ－βシグナル伝達の同時検出を示している。したがって、ＦＲＳ２を標的にすることは、異常なＦＧＦＲシグナル伝達を無効にする新たな戦略を示している。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0003】
【非特許文献1】Ｋｕｍａｒら，Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１８，ｖｏｌ．２３，ｉｓｓｕｅ １３，Ｐ３７９８－３８１２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
上記の最新技術に基づいて、本発明の目的は、ＦＲＳ２－ＦＧＦＲ相互作用の小分子阻害剤を提供するための手段及び方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【0005】
この目的は、本明細書の独立請求項の主題によって達成される。
【図面の簡単な説明】
【0006】
【図3】図３は、Ｆ３．１４の結合親和力及び解離定数（Ｋｄ）を示す。ナノ回折走査型蛍光測定法（ｎａｎｏＤＳＦ）とマイクロスケール熱泳動法（ＭＳＴ）は、化合物と標的タンパク質との結合を評価するために用いられる生物物理学的アッセイである。１．５℃を超える温度変化は、有意な結合を示すとみなされる。
【図5】図５は、Ｆ３．１４の生化学的特異性を示し、該化合物の他のシグナル伝達経路に影響を与えずにＦＧＦシグナル伝達経路を阻害する能力を決定する。レーン１：対照－ ＤＡＯＹ ＬＡ－ＥＧＦＰ細胞を刺激せず、一晩血清飢餓状態にし、その後溶解したもの。レーン２：ｂＦＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）－ 一晩血清飢餓状態にしたＤＡＯＹ ＬＡ－ＥＧＦＰ細胞をｂＦＧＦで１０分間刺激し、その後溶解したもの。レーン３：Ｆ３．１４（１０μＭ）－ 一晩血清飢餓状態にしたＤＡＯＹ ＬＡ－ＥＧＦＰ細胞をＦ３．１４で４時間治療し、細胞をｂＦＧＦで１０分間刺激し、その後溶解したもの。
【図6】Ａ）結合部位１は、ＦＧＦＲの結合に関与せず、ＦＧＦＲのＮ末端とＦＲＳ２との相互作用部位の下に位置している。Ｂ）結合部位２は、ＦＧＦＲのＣ末端と相互作用する広い表面領域である。
【図16】図１６は、Ｆ３．１４のｉｎ ｖｉｔｒｏでの吸収、分布、代謝、排泄及び毒性（ＡＤＭＥＴ）特性を示す表である。流出比は、Ｆ３．１４の浸透性を表し、半熱力学的溶解度は水溶液中のＦ３．１４の溶解度を示す。固有クリアランス（ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｃｌｅａｒａｎｃｅ）及びｔ１／２は、Ｆ３．１４の代謝安定性を示し、ＭＴＴは、Ｆ３．１４の毒性を示し、効力は、Ｆ３．１４の有効性を示す。
【発明を実施するための形態】
【0007】
発明の概要
本発明の第１の態様は、転移の治療又は予防における使用のための一般式（５００）の化合物に関し、
式中、
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１はＮであり、
－ Ｒ１は、（直鎖状又は分岐状）Ｃ１～Ｃ１６アルキル、（直鎖状又は分岐状）Ｃ２～Ｃ１６アルケン、ヘテロアリール、アリール、Ｃ４～Ｃ７シクロアルキル、及びＣ３～Ｃ６複素環から選択され、ここでＲ１は非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは独立して、Ｈ、及び非置換若しくは置換Ｃ１～Ｃ５アルキル又はＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、
特にＲ１は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡから選択される１つの部分で置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ ｎは、０、１、２、又は３であり、特にｎは、１であり；
－ ｍは、０、１、２、３、又は４であり、特にｍは、１又は２である。
本発明の第１の態様は、転移の治療又は予防における使用のための一般式（５００）の化合物に関し、
【化1】
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１はＮであり、
－ Ｒ１は、（直鎖状又は分岐状）Ｃ１～Ｃ１６アルキル、（直鎖状又は分岐状）Ｃ２～Ｃ１６アルケン、ヘテロアリール、アリール、Ｃ４～Ｃ７シクロアルキル、及びＣ３～Ｃ６複素環から選択され、ここでＲ１は非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは独立して、Ｈ、及び非置換若しくは置換Ｃ１～Ｃ５アルキル又はＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、
特にＲ１は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡから選択される１つの部分で置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ ｎは、０、１、２、又は３であり、特にｎは、１であり；
－ ｍは、０、１、２、３、又は４であり、特にｍは、１又は２である。
【0008】
本発明の第２の態様は、血管新生アンタゴニストとしての使用のための第１の態様に記載の化合物に関するものである。特定の実施形態において、血管新生アンタゴニストは、がんの治療又は予防において提供される。特定の実施形態では、がんは、膀胱がん、肝細胞癌、及び前立腺がんから選択される。
【0009】
本発明の第３の態様は、一過性又は慢性の病的状態がＦＧＦＲシグナル伝達によって誘導される、ＦＧＦＲ駆動型疾患の予防又は治療における使用のための第１の態様に記載の化合物に関する。ＦＧＦＲは、細胞増殖、細胞分化、細胞移動、及び細胞生存に関与する受容体チロシンキナーゼである。ＦＧＦＲシグナル伝達経路における遺伝子増幅、活性化変異、及び染色体転座などの遺伝子変化は、様々な腫瘍の種類、発達疾患及び骨格疾患に関与している。
【0010】
本発明の第４の態様は、一般式（７００）の化合物に関し、
式中、
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成し；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎであり、
－ 但し、該化合物は、一般式（００１）
によって特徴付けられないことを条件とする。
【化2】
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成し；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎであり、
－ 但し、該化合物は、一般式（００１）
【化3】
【0011】
本発明の第５の態様は、医薬としての使用のための第４の態様に従う化合物に関し、但し、該化合物は、式（００１）
によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする。
【化4】
【0012】
本発明の第６の態様は、がんの治療又は予防における使用のための第４の態様に従う化合物に関し、但し、該化合物は、式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする。
【0013】
別の実施形態では、本発明は、本発明の化合物の少なくとも１つ、若しくはその薬学的に許容される塩、及び少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤若しくは賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【0014】
活性化した線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ：ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）チロシンキナーゼからのシグナル伝達は、腫瘍細胞の増殖、生存、並びに細胞の移動及び浸潤などの発がん機能を促進する。活性化したＦＧＦＲから下流のシグナル伝達カスケードへのシグナル伝達を、ＦＧＦＲに対して設計されたキナーゼ阻害剤で遮断することが、これらの発がん機能を軽減する確立した手法である。多くの悪性腫瘍におけるＦＧＦＲの異常な活性に加えて、ＦＧＦＲ活性は、キナーゼ阻害剤による標的療法を受けた患者のがんにおいて回避メカニズムとしても作用し、その結果、腫瘍の再増殖及び進行をもたらすことが観察されている。本出願に記載の小分子化合物は、活性化したＦＧＦＲから下流のエフェクター分子、特に腫瘍形成の重要な駆動物質である分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ：ｍｉｔｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ）へのシグナル伝達を防止するであろう。
【0015】
本化合物はＦＲＳ２に結合する。ＦＧＦＲ基質２（ＦＲＳ２）は、ＦＧＦシグナル伝達経路に主に特異的である重要なアダプタータンパク質である。これは、ＦＧＦＲの排他的な下流エフェクターである。ＦＲＳ２は、ｃ末端のリン酸化チロシン結合（ＰＴＢ：ｐｈｏｓｐｈｏ－ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｂｉｎｄｉｎｇ）ドメインを介してＦＧＦＲと相互作用し、正と負との両方のシグナル伝達タンパク質を組み立てることで分子ハブとして機能して、重要なＦＧＦ誘導細胞機能を媒介する。これは、ＦＧＦＲ（細胞外）からのシグナルを細胞内に伝達する。したがって、ＦＧＦシグナル伝達経路のかなり上流にあるＦＲＳ２を標的とすることで、下流のエフェクター、特にＦＧＦＲシグナル伝達のＭＡＰＫを効果的に遮断することができる。
【0016】
本化合物は、ＦＲＳ２タンパク質のリン酸化チロシン結合（ＰＴＢ）ドメインに特異的に結合する（図７）。化合物の結合によりＰＴＢドメインの構造変化が誘導され、ＦＲＳ２を介したＦＧＦＲ誘導性シグナル伝達が阻害される。２つの可能な結合部位が最初に選択される：結合部位１は、ＦＧＦＲ結合には関与せず、ＦＧＦＲのＮ末端とＦＲＳ２との相互作用部位の下に位置する。結合部位２は、ＦＧＦＲのＣ末端と相互作用する広い表面領域である。
【0017】
化合物－標的の相互作用、標的ドメインの構造変化、及び伝達遮断のメカニズムは、固有であり、かつ受容体チロシンキナーゼ阻害に依存しない。さらに、ＦＲＳ２はＦＧＦＲと異なり、他のアダプタータンパク質といずれの共通のタンパク質ドメインを持たない。したがって、既存のキナーゼ阻害剤と比較して、オフターゲット活性が非常に低くなることが期待される。また、既存のＦＧＦＲ標的化戦略とは対照的に、本化合物はまた、腫瘍形成及び腫瘍の進行に特に関連するこれらのＦＧＦＲの機能を特異的に干渉する。
【0018】
また、既存のＦＧＦＲ標的化戦略とは対照的に、本化合物はまた、増殖、移動及び浸潤、並びに血管新生など、腫瘍形成及び腫瘍の進行に特に関連するこれらのＦＧＦＲの機能を特異的に干渉する。例えば、以下の多くの種類のがんにおいてＦＲＳ２－ＦＧＦＲ相互作用が変更されるエビデンスがあり：前立腺がん（Ｙａｎｇ，Ｆ．ら Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ７３，３７１６－３７２４，２０１３，Ｌｉｕ Ｊら Ｏｎｃｏｇｅｎｅ．２０１６ Ａｐｒ ７；３５（１４）：１７５０－９）、食道がん（Ｎｅｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｏｈａｓｈｉ，Ｋ．，Ａｋａｓｈｉ，Ｔ．，Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｊ．Ｄ．及びＨｉｒｏｋａｗａ，Ｋ．Ｐａｔｈｏｂｉｏｌｏｇｙ ６５，１９５－２０３，１９９７）、甲状腺がん（Ｓｔ Ｂｅｒｎａｒｄ，Ｒ．ら Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４６，１１４５－１１５３，２００５）、肝細胞癌（Ｚｈｅｎｇ，Ｎ．，Ｗｅｉ，Ｗ．Ｙ．及びＷａｎｇ，Ｚ．Ｗ．Ｔｒａｎｓｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５，１－６，２０１６、Ｍａｔｓｕｋｉ Ｍら Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｄ．２０１８ Ｊｕｎ；７（６）：２６４１－２６５３）、精巣がん（Ｊｉａｎｇ，Ｘ．ら Ｊ Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｒｅｓ，２０１３）、髄芽腫（Ｓａｎｔｈａｎａ Ｋｕｍａｒ，Ｋ．ら Ｃｅｌｌ Ｒｅｐ ２３，３７９８－３８１２ ｅ３７９８，２０１８）、横紋筋肉腫（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ，Ｍ，Ｍｅｌｌｅｒ，Ｉ．及びＯｒｒ－Ｕｒｔｒｅｇｅｒ，Ａ．Ｇｅｎｅ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ Ｃａｎｃ ４６，１０２８－１０３８，２００７）、胃がん（Ｋｕｎｉｉ，Ｋ．ら Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６８，３５４９－３５４９，２００８）、肺多形性癌（Ｌｅｅ，Ｓ．ら Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｃｌｉｎ １３７，１２０３－１２１１，２０１１）、乳がん（Ｐｅｎａｕｌｔｌｌｏｒｃａ，Ｆ．ら Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ６１，１７０－１７６，１９９５）、非小細胞肺がん（Ｄｕｔｔ，Ａ．ら Ｐｌｏｓ Ｏｎｅ ６，２０１１）、脂肪肉腫（Ｚｈａｎｇ，Ｋ．Ｑ．ら Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ７３，１２９８－１３０７，２０１３）、子宮頸部がん（Ｊａｎｇ，Ｊ．Ｈ，Ｓｈｉｎ，Ｋ．Ｈ．及びＰａｒｋ，Ｊ．Ｇ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６１，３５４１－３５４３，２００１）、大腸がん（Ｓａｔｏ，Ｔ．ら Ｏｎｃｏｌ Ｒｅｐ ２１，２１１－２１６，２００９）、メラノーマ（Ｂｅｃｋｅｒ，Ｄ．，Ｌｅｅ，Ｐ．Ｌ，Ｒｏｄｅｃｋ，Ｕ．及びＨｅｒｌｙｎ，Ｍ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ７，２３０３－２３１３，１９９２）、多発性骨髄腫（Ｋａｌｆｆ，Ａ．及びＳｐｅｎｃｅｒ，Ａ．Ｂｌｏｏｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ，２，２０１２）、内膜がん（Ｋｏｎｅｃｎｙ，Ｇ．Ｅ．ら Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ １２，６３２－６４２，２０１３）、膀胱がん（Ｃａｐｐｅｌｌｅｎ，Ｄ．ら Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ ２３，１８－２０，１９９９，Ｗｕ Ｓ．ら Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ．２０１９ Ｆｅｂ １２；１０（１）：７２０）、グリア芽腫（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｒ．Ｓ．ら Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５４，２７９４－２７９９，１９９４）、肺扁平上皮癌（Ｗｅｉｓｓ，Ｊ．ら Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ４，２０１２）、卵巣がん（Ｃｏｌｅ，Ｃ．ら Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ Ｔｈｅｒ １０，２０１０）、頭頸部がん（Ｋｏｏｌｅ，Ｋ．ら Ｖｉｒｃｈｏｗｓ Ａｒｃｈ ４６９，Ｓ３１－Ｓ３１，２０１６）、及び膵臓がん（Ｉｓｈｉｗａｔａ，Ｔ．ら Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １８０，１９２８－１９４１，２０１２）などが挙げられる。
【0019】
発明の詳細な説明
用語と定義
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は、（例えば、細胞培養、分子遺伝学、核酸化学、ハイブリダイゼーション技術及び生化学における）当業者により一般的に理解されるのと同じ意味を有する。分子、遺伝、生化学的手法（一般に、Ｓａｍｂｒｏｏｋら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，第２編（１９８９）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．及びＡｕｓｕｂｅｌら，Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９９）第４編，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．参照）及び科学的手法には標準的な技術が用いられる。
用語と定義
他に定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は、（例えば、細胞培養、分子遺伝学、核酸化学、ハイブリダイゼーション技術及び生化学における）当業者により一般的に理解されるのと同じ意味を有する。分子、遺伝、生化学的手法（一般に、Ｓａｍｂｒｏｏｋら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，第２編（１９８９）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．及びＡｕｓｕｂｅｌら，Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９９）第４編，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．参照）及び科学的手法には標準的な技術が用いられる。
【0020】
本明細書の文脈における「Ｃ１～Ｃ６アルキル」とは、１、２、３、４、５又は６個の炭素原子を有する飽和した直鎖状又は分岐状の炭化水素を指し、ここで１つの炭素－炭素結合は不飽和であってもよく、及び／又は１つのＣＨ２部分は酸素（エーテル橋）又は窒素（ＮＨ、又はＲがメチル、エチル、又はプロピルのＮＲ；アミノ橋）に置換されていてもよい。Ｃ１～Ｃ６アルキルの非限定的な例としては、上記のＣ１～Ｃ４アルキルについて示した例、及びさらに３－メチルブタ－２－エニル、２－メチルブタ－３－エニル、３－メチルブタ－３－エニル、ｎ－ペンチル、２－メチルブチル、３－メチルブチル、１，１－ジメチルプロピル、１，２－ジメチルプロピル、１，２－ジメチルプロピル、ペンタ－４－イニル、３－メチル－２－ペンチル、及び４－メチル－２－ペンチルが挙げられる。特定の実施形態において、Ｃ５アルキルは、ペンチル部分又はシクロペンチル部分であり、Ｃ６アルキルは、ヘキシル部分又はシクロヘキシル部分である。
【0021】
本明細書の文脈における「Ｃ３～Ｃ７シクロアルキル」という用語は、３、４、５、６又は７個の炭素原子を有する飽和炭化水素環に関し、特定の実施形態では、１つの炭素－炭素結合が不飽和であってもよい。Ｃ３～Ｃ７シクロアルキル部分の非限定的な例としては、シクロプロパニル部分（－Ｃ３Ｈ５）、シクロブタニル部分（－Ｃ４Ｈ７）、シクロペンテニル部分（Ｃ５Ｈ９）、及びシクロヘキセニル（Ｃ６Ｈ１１）部分が挙げられる。特定の実施形態において、シクロアルキルは、１つのＣ１からＣ４の非置換アルキル部分によって置換されている。特定の実施形態において、シクロアルキルは、２つ以上のＣ１からＣ４の非置換アルキル部分によって置換されている。
【0022】
本明細書の文脈における「炭素環」という用語は、炭素原子及び水素原子のみから構成される環状部分に関する。芳香族炭素環は、アリールとも呼ばれる。非芳香族炭素環は、シクロアルキルとも呼ばれる。
【0023】
本明細書の文脈における「複素環（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ）」という用語は、少なくとも１つの環原子、又は複数の環原子が、窒素、酸素及び／又は硫黄原子で置換されている環状部分に関する。芳香族複素環は、ヘテロアリールとも呼ばれる。非芳香族複素環は、少なくとも１つの環原子又は複数の環原子が窒素、酸素及び／又は硫黄原子で置換されているシクロアルキルである。
【0024】
本明細書の文脈における「複素二環（ｈｅｔｅｒｏｂｉｃｙｃｌｅ）」という用語は、少なくとも１つの環原子、又は複数の環原子が窒素、酸素及び／又は硫黄原子によって置換されている、２つの直接結合した環に関する。複素二環は、２つの複素環から、又は１つの複素環と１つの炭素環とから構成される。
【0025】
本明細書で最も狭い意味で使用される場合の「非置換Ｃｎアルキル」という用語は、分子の部分間の架橋として使用される際は、部分－ＣｎＨ２ｎ－に関し、又は末端部分の文脈で使用される際は－ＣｎＨ２ｎ＋１に関する。
【0026】
「非置換Ｃｎアルキル」及び「置換Ｃｎアルキル」という用語は、直鎖アルキル置換を有する、注釈又は記載の状況に応じて非置換又は置換されている環式構造、例えば、シクロプロパン部分、シクロブタン部分、シクロペンタン部分又はシクロヘキサン部分を含むか、又はそれに結合している直鎖アルキルを含む。直鎖又は環状構造内の炭素、及び必要に応じて、Ｎ、Ｏ、又はその他のヘテロ原子の総数はｎになる。
【0027】
化学式の文脈で使用される場合、以下の略語を使用することができる：Ｍｅは、メチル ＣＨ３であり、Ｅｔは、エチル －ＣＨ２ＣＨ３であり、Ｐｒｏｐは、プロピル －（ＣＨ２）２ＣＨ３（ｎ－プロピル、ｎ－ｐｒ）、又は－ＣＨ（ＣＨ３）２（ｉｓｏ－プロピル、ｉ－ｐｒ）であり、ｂｕｔは、ブチル －Ｃ４Ｈ９、－（ＣＨ２）３ＣＨ３、－ＣＨＣＨ３ＣＨ２ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、又は－Ｃ（ＣＨ３）である。
【0028】
広義の「置換アルキル」という用語は、炭素又は水素ではない原子、特にＮ、Ｏ、Ｆ、Ｂ、Ｓｉ、Ｐ、Ｓ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択される原子に共有結合している広義の上記定義のアルキルを指し、これらの原子自体は、場合により、この基の１つ又は複数の他の原子、又は水素、又は不飽和若しくは飽和の炭化水素（広義のアルキル又はアリール）に結合していてもよい。狭義には、「置換アルキル」は、アミン ＮＨ２、アルキルアミン ＮＨＲ、イミド ＮＨ、アルキルイミド ＮＲ、アミノ（カルボキシアルキル）ＮＨＣＯＲ若しくはＮＲＣＯＲ、ヒドロキシル ＯＨ、オキシアルキル ＯＲ、オキシ（カルボキシアルキル）ＯＣＯＲ、カルボニル Ｏ及びそのケタール又はアセタール（ＯＲ）２、ニトリル ＣＮ、イソニトリル ＮＣ、シアネート ＣＮＯ、イソシアネート ＮＣＯ、チオシアネート ＣＮＳ、イソチオシアネート ＮＣＳ、フッ化物 Ｆ、塩化物 Ｃｌ、臭化物 Ｂｒ、ヨウ化物 Ｉ、ホスホネート ＰＯ３Ｈ２、ＰＯ３Ｒ２、ホスフェート ＯＰＯ３Ｈ２及びＯＰＯ３Ｒ２、スルフヒドリル ＳＨ、スルフアルキル（ｓｕｆｌａｌｋｙｌ）ＳＲ、スルホキシド ＳＯＲ、スルホニル ＳＯ２Ｒ、スルファニルアミド ＳＯ２ＮＨＲ、サルフェート ＳＯ３Ｈ、及び硫酸エステル ＳＯ３Ｒから選択される基によって、１つ又は複数の炭素原子が置換されている広義の上記に定義されるようなアルキルに関し、現在の項で使用されているＲ置換基は、明細書の本文でＲに割り当てられている他の用途とは異なり、それ自体は、最も広い意味では、非置換又は置換のＣ１～Ｃ１２アルキルであり、より狭い意味では特に明記しない限りＲは、メチル、エチル又はプロピルである。
【0029】
「ヒドロキシル置換基」という用語は、１つ又は複数のヒドロキシル基 ＯＨによって修飾されている基を指す。
【0030】
「アミノ置換基」という用語は、１つ又は複数のアミノ基 ＮＨ２によって修飾されている基を指す。
【0031】
「カルボキシル置換基」という用語は、１つ又は複数のカルボキシル基 ＣＯＯＨによって修飾されている基を指す。
【0032】
アミノ置換アルキルの非限定的な例としては、末端部分については、－ＣＨ２ＮＨ２、－ＣＨ２ＮＨＭｅ、－ＣＨ２ＮＨＥｔ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＭｅ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＥｔ、－（ＣＨ２）３ＮＨ２、－（ＣＨ２）３ＮＨＭｅ、－（ＣＨ２）３ＮＨＥｔ、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＭｅ）ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＥｔ）ＣＨ３、－（ＣＨ２）３ＣＨ２ＮＨ２、－（ＣＨ２）３ＣＨ２ＮＨＭｅ、－（ＣＨ２）３ＣＨ２ＮＨＥｔ、－ＣＨ（ＣＨ２ＮＨ２）ＣＨ２ＣＨ３、－ＣＨ（ＣＨ２ＮＨＭｅ）ＣＨ２ＣＨ３、－ＣＨ（ＣＨ２ＮＨＥｔ）ＣＨ２ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＮＨ２）ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＮＨＭｅ）ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＮＨＥｔ）ＣＨ３、－ＣＨ（ＮＨ２）（ＣＨ２）２ＮＨ２、－ＣＨ（ＮＨＭｅ）（ＣＨ２）２ＮＨＭｅ、－ＣＨ（ＮＨＥｔ）（ＣＨ２）２ＮＨＥｔ、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨ２）ＣＨ２ＮＨ２、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＭｅ）ＣＨ２ＮＨＭｅ、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＥｔ）ＣＨ２ＮＨＥｔ、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨ２）（ＣＨ２）２ＮＨ２、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＭｅ）（ＣＨ２）２ＮＨＭｅ、－ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＥｔ）（ＣＨ２）２ＮＨＥｔ、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＮＨ２）２、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＮＨＭｅ）２、及び－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＮＨＥｔ）２が挙げられ、２つの他の部分を架橋するアミノ置換アルキル部分については、－ＣＨ２ＣＨＮＨ２－、－ＣＨ２ＣＨＮＨＭｅ－、－ＣＨ２ＣＨＮＨＥｔ－が挙げられる。
【0033】
ヒドロキシ置換アルキルの非限定的な例としては、末端部分については、－ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＨ２）２ＯＨ、－（ＣＨ２）３ＯＨ、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、－（ＣＨ２）４ＯＨ、－ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ３、－ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）２ＯＨ、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨ、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）２ＯＨ、及び－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２が挙げられ、２つの他の部分を架橋するヒドロキシル置換アルキル部分については、－ＣＨＯＨ－、－ＣＨ２ＣＨＯＨ－、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２－、－（ＣＨ２）２ＣＨＯＨＣＨ２－、－ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ２－、－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＨＯＨ－、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２ＯＨ、－ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）（ＣＨ２）２ＯＨ、及び－ＣＨ２ＣＨＣＨ２ＯＨＣＨＯＨ－が挙げられる。
【0034】
「スルホキシル置換基」という用語は、１つ又は複数のスルホキシル基－ＳＯ２Ｒによって修飾された基、又はその誘導体を指し、Ｒは前項で記載した意味を持ち、この明細書の本文でＲに付与した他の意味と異なる。
【0035】
「アミン置換基」という用語は、１つ又は複数のアミン基 －ＮＨＲ又は－ＮＲ２によって修飾された基、又はその誘導体を指し、Ｒは前項で記載した意味を持ち、この明細書の本文でＲに付与した他の意味とは異なる。
【0036】
「カルボニル置換基」という用語は、１つ又は複数のカルボニル基 －ＣＯＲで修飾された基、又はその誘導体を指し、Ｒは前項で記載した意味を持ち、本明細書の本文でＲに付与した他の意味とは異なる。
【0037】
「エステル」とは、１つ又は複数のエステル基 －ＣＯ２Ｒによって修飾された基を指し、Ｒは本明細書においてさらに定義される。
【0038】
「アミド」とは、１つ又は複数のアミド基 －ＣＯＮＨＲによって修飾された基を指し、Ｒは本明細書においてさらに定義される。
【0039】
「ハロゲン置換基」という用語は、（独立して）Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉから選択される１つ又は複数のハロゲン原子によって修飾された基を指す。
【0040】
「フルオロ置換アルキル」という用語は、１つ又は複数のフッ化物基 Ｆによって修飾されている、上記の定義によるアルキルを指す。フルオロ置換アルキルの非限定的な例としては、－ＣＨ２Ｆ、－ＣＨＦ２、－ＣＦ３、－（ＣＨ２）２Ｆ、－（ＣＨＦ）２Ｈ、－（ＣＨＦ）２Ｆ、－Ｃ２Ｆ５、－（ＣＨ２）３Ｆ、－（ＣＨＦ）３Ｈ、－（ＣＨＦ）３Ｆ、－Ｃ３Ｆ７、－（ＣＨ２）４Ｆ、－（ＣＨＦ）４Ｈ、－（ＣＨＦ）４Ｆ、及び－Ｃ４Ｆ９が挙げられる。
【0041】
ヒドロキシル及びフルオロ置換アルキルの非限定的な例としては、－ＣＨＦＣＨ２ＯＨ、－ＣＦ２ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＨＦ）２ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＦ２）２ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＨＦ）３ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＦ２）３ＣＨ２ＯＨ、－（ＣＨ２）３ＯＨ、－ＣＦ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、－ＣＦ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＦ３、－ＣＦ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨＦＣＨ３、及び－ＣＦ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨＦＣＦ３が挙げられる。
【0042】
本明細書の文脈における「アリール」という用語は、環状芳香族Ｃ５～Ｃ１０炭化水素を意味する。アリールの例としては、次に限定されないが、フェニル及びナフチルが挙げられる。
【0043】
「ヘテロアリール」とは、１つ又は複数の窒素、酸素及び／又は硫黄原子を含むアリールである。ヘテロアリールの例としては、次に限定されないが、ピロール、チオフェン、フラン、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール、オキサゾール、ピリジン、ピリミジン、チアジン、キノリン、ベンゾフラン及びインドールなどが挙げられる。本明細書の文脈におけるアリール又はヘテロアリールは、さらに、１つ又は複数のアルキル基によって置換されていてもよい。
【0044】
本明細書で使用されるとおり、「医薬組成物」という用語は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を伴う、本発明の化合物、又は薬学的に許容されるその塩を指す。特定の実施形態では、本発明による医薬組成物は、局所投与、非経口投与、又は注射投与に適した形態で提供される。
【0045】
本明細書で使用されるとおり、「薬学的に許容される担体」という用語は、当業者に知られているように、任意の溶媒、分散媒質、コーティング、界面活性剤、抗酸化剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤、塩、保存剤、薬物、薬物安定剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、香料、色素等及びそれらの組み合わせが挙げられる（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，ＩＳＢＮ ０８５７１１０６２４を参照）。
【0046】
本明細書で使用されるとおり、任意の疾患又は障害（例えば、がん）を「治療する」又はその「治療」という用語は、一実施形態において、疾患又は障害を改善すること（例えば、疾患又はその臨床症状の少なくとも１つの発生を遅らせること、又は阻止すること、又は低減すること）を指す。別の実施形態では、「治療する」又は「治療」は、患者によって識別できない可能性があるものを含む少なくとも１つの身体的パラメータを緩和又は改善することを指す。さらに別の実施形態では、「治療する」又は「治療」は、物理的に（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理学的に（例えば、物理的パラメータの安定化）、又はその両方のいずれかで、疾患又は障害を調節することを指す。方法は、疾患の治療及び／又は予防を評価する方法である。
【0047】
本明細書の文脈における転移という用語は、腫瘍細胞が発生した同じ臓器又はそこから離れた臓器における、元の腫瘍床の外側での腫瘍細胞の播種及び増殖に関する。特定の実施形態において、開示される化合物による治療又は予防は、異常なＦＧＦＲシグナル伝達に関連する転移に対して採用される。本発明の化合物は、転移細胞の運動挙動を特異的に減少させ、播種を減少させる。特定の実施形態では、本発明の化合物は、癌細胞の運動性及び播種の予防又は治療に対して採用される。
【0048】
ＦＧＦＲ駆動型腫瘍形成
全てのヒト腫瘍の約７％は、ＦＧＦＲ変異（６６％の遺伝子増幅、２６％の変異、８％の遺伝子再編成）を保有する（Ｈｅｌｓｔｅｎ，Ｔ．ら，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２５９－２６８（２０１６）ｄｏｉ：１０．１１５８／１０７８－０４３２．ＣＣＲ－１４－３２１２）。ＦＧＦＲ１は、扁平上皮非小細胞肺がんの２０～２５％（Ｗｅｉｓｓ，Ｊ．ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（２０１０）ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．３００１４５１）及び１５％の乳がん（Ａｎｄｒｅ，Ｆ．ら，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１５，４４１－４５２（２００９））で増幅されることが多く、正中神経膠腫（ｍｉｄｌｉｎｅ ｇｌｉｏｍａ）の１８％で変異されることが多い（Ｄｉ Ｓｔｅｆａｎｏ，Ａ．Ｌ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ３６，２００５（２０１８））。ＦＧＦＲ２は、肝内胆管癌（ｉＣＣＡ、１５％）にて遺伝子融合によって主に活性化され、子宮内膜腫瘍の１０％における変異も報告されている（Ｋｏｎｅｃｎｙ，Ｇ．Ｅ．ら，Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ １６，６８６－６９４（２０１５）；Ｖｅｒｌｉｎｇｕｅ，Ｌ．ら，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ８７，１２２－１３０（２０１７））。ＦＧＦＲ３は、尿路上皮癌において変異により影響を受ける（転移性では最大２０％）；遺伝子融合（主にＦＧＦＲ３－ＴＡＣＣ３）は膠芽腫及び神経膠腫に存在し（３～６％（Ｄｉ Ｓｔｅｆａｎｏ，Ａ．Ｌ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ３６，２００５（２０１８）；Ｓｉｎｇｈ，Ｄ．ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７，１２３１－１２３５（２０１２）；Ｄｉ Ｓｔｅｆａｎｏ，Ａ．Ｌ．ら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２１，３３０７－３３１７（２０１５）））、並びに膀胱がんに存在する（２～３％（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，Ａ．Ｇ．ら，Ｃｅｌｌ １７１，５４０－５５６．ｅ２５（２０１７）））。ＦＧＦＲ１～４シグナルは、線維芽細胞増殖因子受容体基質２（ＦＲＳ２：Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ２）依存（ＲＡＳ／ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ）経路及びＦＲＳ２非依存（ＰＬＣ－γ、ＪＡＫ－ＳＴＡＴ）経路を介する（Ｔｕｒｎｅｒ，Ｎ．及びＧｒｏｓｅ，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ、１－１４（２０１０）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｃ２７８０）。ＦＲＳ２は、そのホスホチロシン結合ドメイン（ＰＴＢ）を介してＦＧＦＲと相互作用し（Ｇｏｔｏｈ，Ｎ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ ９９，１３１９－１３２５（２００８））、ＦＲＳ２の発現又は活性化の増加は、複数の腫瘍実体の腫瘍形成に関与する（Ｚｈａｎｇ，Ｋ．ら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ７３，１２９８－１３０７（２０１３）；Ｌｉ，Ｊ．－Ｌ．及びＬｕｏ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｒｅｖｉｅｗ ｆｏｒ ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｃｉｅｎｃｅｓ ２４，９７－１０８（２０２０）；Ｗｕ，Ｓ．ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ １－１２（２０１９）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１４６７－０１９－０８５７６－５；Ｌｉｕ，Ｊ．ら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，３５，１７５０－１７５９（２０１５）；Ｃｈｅｗ，Ｎ．Ｊ．ら，Ｃｅｌｌ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ １８，１－１７（２０２０））。ＦＲＳ２指向のＮ－ミリストイルトランスフェラーゼを抑制することを介するＦＲＳ２機能の標的化は、いくつかのがんの種類でＦＧＦＲのシグナル伝達、細胞増殖及び移動を抑制した（Ｌｉ，Ｑ．ら，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ２９３，６４３４－６４４８（２０１８））。ＦＧＦＲの薬理学的阻害は、髄芽腫の脳浸潤を減少させ、かつ肝細胞癌における転移（Ｈｕｙｎｈ，Ｈ．ら，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ６９，９４３－９５８（２０１９））及び肺がんにおける転移（Ｐｒｅｕｓｓｅｒ，Ｍ．ら，Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ ８３，８３－８９（２０１４））を低減する。ＦＧＦＲ駆動型の浸潤性はＦＲＳ２に依存する（Ｈｕｙｎｈ，Ｈ．ら，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ６９，９４３－９５８（２０１９））。ＦＧＦＲのＦＧＦリガンドは、以下で高発現し：骨格筋（Ｐｅｄｅｒｓｅｎ，Ｂ．Ｋ．及びＦｅｂｂｒａｉｏ，Ｍ．Ａ．，Ｎａｔ並びにＲｅｖｉｅｗｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．８ ４５７－４６５（２０１２））、骨（Ｓｕ，Ｎ．，Ｄｕ，Ｘ．Ｌ．及びＣｈｅｎ，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ｖｏｌ．１３ ２８４２－２８６５（２００８））及び脳脊髄液分泌性脈絡叢（ＣＳＦ－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｃｈｏｒｏｉｄ ｐｌｅｘｕｓ）（Ｇｒｅｅｎｗｏｏｄ，Ｓ．ら，Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ Ｆｌｕｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５，１３－２０（２００８））、局所浸潤及び遠位播種を引き起こすケモキネシス因子及びケモタクシス因子として機能できる。したがって、ＦＧＦＲ－ＦＲＳ２シグナル伝達の抑制は、腫瘍細胞の増殖能を抑制するだけでなく、原発腫瘍と標的臓器とでそれぞれ分泌されたＦＧＦのケモキネシス機能又はケモタクシス機能によって駆動される転移の広がりを止めることができる。
全てのヒト腫瘍の約７％は、ＦＧＦＲ変異（６６％の遺伝子増幅、２６％の変異、８％の遺伝子再編成）を保有する（Ｈｅｌｓｔｅｎ，Ｔ．ら，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２５９－２６８（２０１６）ｄｏｉ：１０．１１５８／１０７８－０４３２．ＣＣＲ－１４－３２１２）。ＦＧＦＲ１は、扁平上皮非小細胞肺がんの２０～２５％（Ｗｅｉｓｓ，Ｊ．ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（２０１０）ｄｏｉ：１０．１１２６／ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ．３００１４５１）及び１５％の乳がん（Ａｎｄｒｅ，Ｆ．ら，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，１５，４４１－４５２（２００９））で増幅されることが多く、正中神経膠腫（ｍｉｄｌｉｎｅ ｇｌｉｏｍａ）の１８％で変異されることが多い（Ｄｉ Ｓｔｅｆａｎｏ，Ａ．Ｌ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ３６，２００５（２０１８））。ＦＧＦＲ２は、肝内胆管癌（ｉＣＣＡ、１５％）にて遺伝子融合によって主に活性化され、子宮内膜腫瘍の１０％における変異も報告されている（Ｋｏｎｅｃｎｙ，Ｇ．Ｅ．ら，Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ １６，６８６－６９４（２０１５）；Ｖｅｒｌｉｎｇｕｅ，Ｌ．ら，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ８７，１２２－１３０（２０１７））。ＦＧＦＲ３は、尿路上皮癌において変異により影響を受ける（転移性では最大２０％）；遺伝子融合（主にＦＧＦＲ３－ＴＡＣＣ３）は膠芽腫及び神経膠腫に存在し（３～６％（Ｄｉ Ｓｔｅｆａｎｏ，Ａ．Ｌ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ３６，２００５（２０１８）；Ｓｉｎｇｈ，Ｄ．ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７，１２３１－１２３５（２０１２）；Ｄｉ Ｓｔｅｆａｎｏ，Ａ．Ｌ．ら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２１，３３０７－３３１７（２０１５）））、並びに膀胱がんに存在する（２～３％（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，Ａ．Ｇ．ら，Ｃｅｌｌ １７１，５４０－５５６．ｅ２５（２０１７）））。ＦＧＦＲ１～４シグナルは、線維芽細胞増殖因子受容体基質２（ＦＲＳ２：Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ２）依存（ＲＡＳ／ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ）経路及びＦＲＳ２非依存（ＰＬＣ－γ、ＪＡＫ－ＳＴＡＴ）経路を介する（Ｔｕｒｎｅｒ，Ｎ．及びＧｒｏｓｅ，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ、１－１４（２０１０）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｒｃ２７８０）。ＦＲＳ２は、そのホスホチロシン結合ドメイン（ＰＴＢ）を介してＦＧＦＲと相互作用し（Ｇｏｔｏｈ，Ｎ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ ９９，１３１９－１３２５（２００８））、ＦＲＳ２の発現又は活性化の増加は、複数の腫瘍実体の腫瘍形成に関与する（Ｚｈａｎｇ，Ｋ．ら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ７３，１２９８－１３０７（２０１３）；Ｌｉ，Ｊ．－Ｌ．及びＬｕｏ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｒｅｖｉｅｗ ｆｏｒ ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｃｉｅｎｃｅｓ ２４，９７－１０８（２０２０）；Ｗｕ，Ｓ．ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ １－１２（２０１９）ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓ４１４６７－０１９－０８５７６－５；Ｌｉｕ，Ｊ．ら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，３５，１７５０－１７５９（２０１５）；Ｃｈｅｗ，Ｎ．Ｊ．ら，Ｃｅｌｌ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ １８，１－１７（２０２０））。ＦＲＳ２指向のＮ－ミリストイルトランスフェラーゼを抑制することを介するＦＲＳ２機能の標的化は、いくつかのがんの種類でＦＧＦＲのシグナル伝達、細胞増殖及び移動を抑制した（Ｌｉ，Ｑ．ら，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ２９３，６４３４－６４４８（２０１８））。ＦＧＦＲの薬理学的阻害は、髄芽腫の脳浸潤を減少させ、かつ肝細胞癌における転移（Ｈｕｙｎｈ，Ｈ．ら，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ６９，９４３－９５８（２０１９））及び肺がんにおける転移（Ｐｒｅｕｓｓｅｒ，Ｍ．ら，Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ ８３，８３－８９（２０１４））を低減する。ＦＧＦＲ駆動型の浸潤性はＦＲＳ２に依存する（Ｈｕｙｎｈ，Ｈ．ら，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ６９，９４３－９５８（２０１９））。ＦＧＦＲのＦＧＦリガンドは、以下で高発現し：骨格筋（Ｐｅｄｅｒｓｅｎ，Ｂ．Ｋ．及びＦｅｂｂｒａｉｏ，Ｍ．Ａ．，Ｎａｔ並びにＲｅｖｉｅｗｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．８ ４５７－４６５（２０１２））、骨（Ｓｕ，Ｎ．，Ｄｕ，Ｘ．Ｌ．及びＣｈｅｎ，Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ｖｏｌ．１３ ２８４２－２８６５（２００８））及び脳脊髄液分泌性脈絡叢（ＣＳＦ－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｃｈｏｒｏｉｄ ｐｌｅｘｕｓ）（Ｇｒｅｅｎｗｏｏｄ，Ｓ．ら，Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ Ｆｌｕｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５，１３－２０（２００８））、局所浸潤及び遠位播種を引き起こすケモキネシス因子及びケモタクシス因子として機能できる。したがって、ＦＧＦＲ－ＦＲＳ２シグナル伝達の抑制は、腫瘍細胞の増殖能を抑制するだけでなく、原発腫瘍と標的臓器とでそれぞれ分泌されたＦＧＦのケモキネシス機能又はケモタクシス機能によって駆動される転移の広がりを止めることができる。
【0049】
選択的ＦＧＦＲ阻害剤（例えばＡＺＤ４５４７、ＮＶＰ－ＢＧＪ３９８、及びＪＮＪ－４２７５６４９３）及び非選択的ＦＧＦＲ阻害剤（例えばドビチニブ又はポナチニブ）は、がん治療のために調査されてきた（Ｆａｃｃｈｉｎｅｔｔｉ，Ｆ．ら，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，（２０２０）ｄｏｉ：１０．１１５８／１０７８－０４３２．ＣＣＲ－１９－２０３５；Ｙａｍａｏｋａ，Ｔ．ら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．１９，１－３５（２０１８））。ＦＧＦＲ阻害剤に対する耐性は、下流シグナル伝達活性化のバイパスメカニズムを可能にする代替ＲＴＫの活性化又は触媒ドメインでのゲートキーパー変異の形成のいずれかによって、他のＲＴＫ阻害剤と同様に、発達可能である（Ｙａｍａｏｋａ，Ｔ．，ら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．１９，１－３５（２０１８））。このようなＦＧＦＲの変異は、ＡＴＰ結合クレフトで発生する可能性があり、薬物結合有効性を制限するように立体構造的な競合をもたらすことができる。例には、ＦＧＦＲ３＿Ｖ５５５Ｍ、ＦＧＦＲ１＿Ｖ５６１、及びＦＧＦＲ２＿Ｖ５６４が挙げられ、これらはｉｎ ｖｉｔｒｏでＦＧＦＲ阻害剤に対する耐性を誘導する（Ｃｈｅｌｌ，Ｖ．ら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ３２，３０５９－３０７０（２０１３）；Ｂｙｒｏｎ Ｓ．Ａ．ら，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ １５，９７５－９８８（２０１３））。
【0050】
非酵素的に活性なＦＧＦＲアダプタータンパク質ＦＲＳ２を標的とする本発明者らのアプローチは、ＲＴＫの下流のシグナル伝達をブロックすることによって、ＦＧＦＲゲートキーパー変異の発達を防止することができ、又はゲートキーパーＦＧＦＲ駆動型腫瘍の耐性を克服する一助となり得る。ＦＲＳ２を標的とすることは、ＦＲＳ２がリン酸化され、かつ発がん性ＭＡＰキナーゼ経路にシグナルを伝達するＦＧＦＲ３－ＴＡＣＣ３融合によって駆動される腫瘍に対しても有効である可能性が高い（Ｃｈｅｗ，Ｎ．Ｊ．ら，Ｃｅｌｌ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ １８，１－１７（２０２０））。さらに、ＦＧＦＲ阻害剤治療に関連する毒性が報告されており、高リン血症（ｈｙｐｅｒ－ｐｈｏｓｐｈｏｒｅｍｉａ）、疲労、口内炎を伴う皮膚及び口内の乾燥、手足症候群、及び胃腸機能不全などが挙げられる（Ｆａｃｃｈｉｎｅｔｔｉ，Ｆ．ら，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ，（２０２０）ｄｏｉ：１０．１１５８／１０７８－０４３２．ＣＣＲ－１９－２０３５）。オフターゲット化合物活性を制限するＦＲＳ２を特異的に標的とするアプローチは、ＦＧＦＲ阻害に一般に関連する毒性の重症度を軽減することができる。
【0051】
本発明の第１の態様は、転移の治療又は予防における使用のための一般式（５００）の化合物に関し、
式中、
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎであり、
－ Ｒ１は、（直鎖状又は分岐状）Ｃ１～Ｃ１６アルキル、（直鎖状又は分岐状）Ｃ２～Ｃ１６アルケン、ヘテロアリール、アリール、Ｃ４～Ｃ７シクロアルキル、及びＣ３～Ｃ６複素環から選択され、ここでＲ１は非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１，ＲＮ２，ＲＡ，ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及び非置換若しくは置換Ｃ１～Ｃ５アルキル、又はＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、
特にＲ１は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡから選択される１つの部分で置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ ｎは、０、１、２、又は３であり、特にｎは、１であり；
－ ｍは、０、１、２、３、又は４であり、特にｍは、１又は２である。
【化5】
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎであり、
－ Ｒ１は、（直鎖状又は分岐状）Ｃ１～Ｃ１６アルキル、（直鎖状又は分岐状）Ｃ２～Ｃ１６アルケン、ヘテロアリール、アリール、Ｃ４～Ｃ７シクロアルキル、及びＣ３～Ｃ６複素環から選択され、ここでＲ１は非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１，ＲＮ２，ＲＡ，ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及び非置換若しくは置換Ｃ１～Ｃ５アルキル、又はＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、
特にＲ１は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡから選択される１つの部分で置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ ｎは、０、１、２、又は３であり、特にｎは、１であり；
－ ｍは、０、１、２、３、又は４であり、特にｍは、１又は２である。
【0052】
特定の実施形態において、Ｒ１は、－ＣＨ２－ＮＨ－ＣＨＲ４Ｒ５であり、式中、
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成する。
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成する。
【0053】
特定の実施形態では、本化合物は、一般式（７００）の化合物であり、
式中、
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、請求項２の記載と同じく定義され；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎである。
【化6】
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、請求項２の記載と同じく定義され；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１は、Ｎである。
【0054】
特定の実施形態では、Ｒ４は、非置換のＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、Ｒ５は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換されたＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択される電気陰性部分であり、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立してＨ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択される。
【0055】
特定の実施形態において、Ｒ４は、エチル、ｉｓｏ－プロピル、及びｔｅｒｔ－ブチルから選択される。
【0056】
特定の実施形態では、Ｒ５は、ＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のメチル、エチル、及びイソプロピルから選択される。
【0057】
特定の実施形態において、Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特にＦ又はＣｌから選択される。
【0058】
特定の実施形態において、Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、及びＯＨから選択される。
【0059】
特定の実施形態において、Ｒ３は、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択される。特定の実施形態において、Ｒ３はハロゲンであり、より特にＲ３はＦである。
【0060】
特定の実施形態では、Ｘ１はＮである。
【0061】
特定の実施形態では、転移は、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん及び胃がんから選択されるがんから生じる。
【0062】
本発明の第２の態様は、血管新生アンタゴニストとしての使用のための第１の態様に記載の化合物に関するものである。特定の実施形態において、血管新生アンタゴニストは、がんの治療又は予防において提供される。特定の実施形態では、がんは、膀胱がん、肝細胞癌、及び前立腺がんから選択される。
【0063】
本発明の第３の態様は、ＦＧＦＲ駆動型疾患の予防又は治療における使用のための第１の態様に記載の化合物に関する。
【0064】
本発明の第４の態様は、一般式（７００）の化合物に関し、
式中、
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成し；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１はＮであり、
－ 但し、該化合物は、一般式（００１）
によって特徴付けられないことを条件とする。
【化7】
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成し；
－ Ｘ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、特にＸ１はＮであり、
－ 但し、該化合物は、一般式（００１）
【化8】
【0065】
この二環構造は、標的タンパク質上のグリシン及びアルギニンに富んだ領域と相互作用する。この二環構造は、Ｒ１５２、Ｒ１５３、Ｒ１３７、Ｇ１５７、Ｇ１５９及びＧ１５１と特異的に相互作用する。
【0066】
特に、Ｘ１はヘテロ原子である。ヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ）は、標的タンパク質との最初の相互作用を確立する。
【0067】
特定の実施形態では、Ｒ４は、非置換Ｃ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、かつＲ５は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換されたＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択される電気陰性部分であり、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択される。
【0068】
電気陰性部分Ｒ５は、標的タンパク質のリジンに富んだ領域と相互作用を確立する。Ｒ５は特にＬ１２１及びＬ１４１と相互作用する。
【0069】
特定の実施形態において、Ｒ４はエチル、ｉｓｏ－プロピル、及びｔｅｒｔ－ブチルから選択され、Ｒ５はＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のメチル、エチル、及びイソプロピルから選択される。
【0070】
特定の実施形態において、Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特にＦ又はＣｌから選択される。特定の実施形態において、Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、及びＯＨから選択される。
【0071】
特定の実施形態において、Ｒ３は、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択される。特定の実施形態において、Ｒ３はハロゲンであり、より特にＲ３はＦである。
【0072】
特定の実施形態では、Ｘ１はＮである。
【0073】
本発明の第５の態様は、医薬としての使用のための第４の態様による化合物に関し、但し、該化合物は、式（００１）
によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする。
【化9】
【0074】
本発明の第６の態様は、がんの治療又は予防における使用のための第４の態様に従う化合物に関し、但し、該化合物は、式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする。特定の実施形態において、がんは、上衣腫、前立腺がん、食道がん、甲状腺がん、肝細胞癌、精巣がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、横紋筋肉腫、胃がん、肺多形性癌、乳がん、非小細胞肺がん、脂肪肉腫、子宮頸がん、大腸がん、メラノーマ、多発性骨髄腫、子宮内膜がん、膀胱がん、グリア芽腫、肺扁平上皮癌、卵巣がん、頭頸部がん、及び膵臓がん、肉腫から選択される。特定の実施形態では、がんは、膀胱がん、多発性骨髄腫、胃がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、グリア芽腫、上衣腫、大腸がん、及び肉腫から選択される。特定の実施形態では、がんは、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん、及び胃がんから選択される。
【0075】
医療、剤形、及び塩
同様に、本発明の範囲内には、上記記載による化合物を患者に投与することを含む、それを必要とする患者のがん又は転移を治療すること、又はその方法が含まれる。
同様に、本発明の範囲内には、上記記載による化合物を患者に投与することを含む、それを必要とする患者のがん又は転移を治療すること、又はその方法が含まれる。
【0076】
同様に、本発明の上記の態様又は実施形態のいずれかによる非アゴニストリガンド又はアンチセンス分子を含む、がんの予防又は治療のための剤形が提供される。
【0077】
当業者は、任意に特に言及された薬物が当該薬物の薬学的に許容される塩として存在し得ることを理解している。薬学的に許容される塩には、イオン化された薬物及び逆帯電した対イオンを含む。薬学的に許容される陰イオン塩形態の非限定的な例には、酢酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、酒石酸水素塩（ｂｉｔａｔｒａｔｅ）、臭化物、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エンボン酸塩、エストール酸塩、フマル酸塩、グルセプ酸塩、グルコン酸塩、臭化水素、塩酸塩、ヨウ化物、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、臭化メチル塩、硫酸メチル塩、ムチン酸塩（ｍｕｃａｔｅ）、ナプシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、サリチル酸塩、ジサリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド塩及び吉草酸塩が挙げられる。薬学的に許容されるカチオン塩形態の非限定的な例には、アルミニウム、ベンザチン、カルシウム、エチレンジアミン、リジン、マグネシウム、メグルミン、カリウム、プロカイン、ナトリウム、トロメタミン及び亜鉛が挙げられる。
【0078】
投与形態は、鼻腔、口腔、直腸、経皮、若しくは経口の投与などの腸内投与、又は吸入剤若しくは坐剤とすることができる。あるいは、皮下、静脈内、肝内、若しくは筋肉内注射の形態などの非経口投与が用いられてもよい。任意に、薬学的に許容される担体及び／又は賦形剤が存在してもよい。
【0079】
局所投与もまた、本発明の有利な使用の範囲内である。当業者は、以下の内容によって例示されるとおり、局所製剤を提供するための広い範囲の可能な処方について理解している：Ｂｅｎｓｏｎ及びＷａｔｋｉｎｓｏｎ（編），Ｔｏｐｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（第１編，Ｗｉｌｅｙ ２０１１，ＩＳＢＮ－１３：９７８－０４７０４５０２９１）；及びＧｕｙ及びＨａｎｄｃｒａｆｔ：Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ：Ｒｅｖｉｓｅｄ ａｎｄ Ｅｘｐａｎｄｅｄ（第２編，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ ２００２，ＩＳＢＮ－１３：９７８－０８２４７０８６１０）；Ｏｓｂｏｒｎｅ及びＡｍａｎｎ（編）：Ｔｏｐｉｃａｌ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ（第１編 ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ １９８９；ＩＳＢＮ－１３：９７８－０８２４７８１８３５）。
【0080】
医薬組成物及び投与
本発明の別の態様は、本発明の化合物、又はその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に関する。さらなる実施形態では、該組成物は、本明細書に記載されるものなどの少なくとも２つの薬学的に許容される担体を含む。
本発明の別の態様は、本発明の化合物、又はその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に関する。さらなる実施形態では、該組成物は、本明細書に記載されるものなどの少なくとも２つの薬学的に許容される担体を含む。
【0081】
本発明の特定の実施形態において、本発明の化合物は、典型的に、容易に制御可能な薬物の投与量を提供し、かつ患者に明解でかつ容易に扱いやすい製品を付与するような医薬剤形に製剤化される。
【0082】
本発明の化合物の局所的使用に関する本発明の実施形態では、医薬組成物は、水溶液、懸濁液、軟膏、クリーム、ゲル又は噴霧可能な製剤、例えばエアゾール等による送達用のものなど、局所投与に適した方法で製剤化され、活性成分を当業者に知られている１つ又は複数の可溶化剤、安定剤、等張化増強剤、バッファー及び防腐剤と共に含んでいる。
【0083】
医薬組成物は、経口投与、非経口投与、又は直腸投与用に製剤化することができる。さらに、本発明の医薬組成物は、固体形態（限定されないが、カプセル、錠剤、丸薬、顆粒、粉末又は坐剤を含む）、又は液体形態（限定されないが、溶液、懸濁液又は乳液を含む）において構成することができる。
【0084】
本発明の化合物の投与レジメンは、特定の薬剤の薬力学的特性及びその投与の様式及び経路などの既知の要因：例えば、レシピエントの種、年齢、性別、健康状態、病状、及び体重；症状の性質と程度；同時治療の種類；治療の頻度；投与経路、患者の腎機能及び肝機能、並びに所望の効果などに応じて変化するであろう。特定の実施形態において、本発明の化合物は、１日１回の用量で投与されてもよいし、又は１日の総用量が、１日２回、３回、又は４回に分割した用量で投与されてもよい。
【0085】
特定の実施形態では、本発明の医薬組成物又は組み合わせは、約５０～７０ｋｇの対象に対して約１～１０００ｍｇの活性成分（複数可）の単位用量であり得る。化合物、医薬組成物、又はそれらの組み合わせの治療上有効な投与量は、対象の種、体重、年齢及び個人の状態、治療される障害又は疾患又はその重篤度に依存する。通常の技術を有する医師、臨床医又は獣医師であれば、障害又は疾患の予防、治療又は進行抑制に必要な各有効成分の有効量を容易に決定することができる。
【0086】
本発明の医薬組成物は、滅菌などの従来の医薬操作にかけることができ、及び／又は従来の不活性希釈剤、潤滑剤、又は緩衝剤、並びに保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤及び緩衝剤などのアジュバントを含有することができる。これらは、標準的なプロセス、例えば、従来の混合、造粒、溶解又は凍結乾燥プロセスによって製造することができる。医薬組成物を調製するための多くのそのような手順及び方法は、当技術分野で知られており、例えば、Ｌ．Ｌａｃｈｍａｎら、Ｔｈｅ Ｔｈｅｏｒｙ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ，第４編，２０１３（ＩＳＢＮ ８１２３９２２８９２）を参照されたい。
【0087】
本発明による製造方法及び治療方法
本発明は、さらなる態様として、がん又は転移の治療又は予防のための医薬の製造方法における使用のための、上記で詳細に規定したとおりの、本明細書で特定される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用をさらに包含する。
本発明は、さらなる態様として、がん又は転移の治療又は予防のための医薬の製造方法における使用のための、上記で詳細に規定したとおりの、本明細書で特定される化合物又はその薬学的に許容される塩の使用をさらに包含する。
【0088】
同様に、本発明は、がん又は転移に関連する疾患と診断された患者の治療方法を包含する。この方法は、本明細書において詳細に規定されるとおり、本明細書において特定される化合物又はその薬学的に許容される塩の有効量を患者に投与することを伴う。
【0089】
本明細書において、例えばリガンドの種類又は医療適用などの単一の分離可能な特徴の代替が「実施形態」として示されている場合、そのような代替は自由に組み合わせて、本明細書に開示された本発明の個別の実施形態を形成することができると理解されるべきである。したがって、リガンドの種類についてのいずれの代替の実施形態は、本明細書に記載されたいずれの医療適用と組み合わせることができる。
【0090】
本発明は、さらに以下の項目を包含する。
【0091】
項目
項目１． 一般式（１００）の化合物であって、
Ｒ１－Ｌ－ＢＣ （１００）
式中、
－ Ｌは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ５アミン、又はＣ１～Ｃ４アミドからなるリンカーであり、ここでＬは、非置換であるか、又はＣ１～Ｃ４アルキルで置換されており、特にＬは、Ｃ１～Ｃ５アミンであり；
－ Ｒ１は、（直鎖状又は分岐状）Ｃ１～Ｃ１６アルキル、（直鎖状又は分岐状）Ｃ２～Ｃ１６アルケン、ヘテロアリール、アリール、Ｃ４～Ｃ７シクロアルキル、及びＣ３～Ｃ６複素環から選択され、ここでＲ１は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され、
特にＲ１は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡから選択される１つの部分で置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、ＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ ＢＣは、芳香族又は非芳香族の複素二環又は炭素二環であり、これは、非置換であるか、又はＣ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから独立して選択される１～７個の部分で置換され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 但し、前記化合物は、一般式（００１）
によって特徴付けられないことを条件とする、
前記化合物。
項目２． 一般式（２０１）、（２０２）、又は（２０３）の項目１に記載の化合物であって、
式中、
－ Ｌ及びＲ１は、項目１で定義されたものと同じ意味を有し；
－ ｎは、０、１、２、又は３であり、特にｎは、１であり、
－ ｍは、０、１、２、３、又は４であり、特にｍは、１又は２であり；
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 各Ｘ１～Ｘ７は、独立して、ＣＨ、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、ここでＸ１～Ｘ７の２～７原子は、ＣＨであり、
特にＸ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、かつ他の全てのＸは、ＣＨであり、
より特に、Ｘ１はＮであり、かつ他の全てのＸは、ＣＨである、
前記化合物。
項目３． 一般式（３００）の項目１又は２に記載の化合物であって、
式中、
－ Ｘ１、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎ、及びｍは、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目４． 一般式（４００）の項目１～３のいずれか一項に記載の化合物であって、
式中、
－ Ｘ１、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目５． 一般式（５００）の項目１～３のいずれか一項に記載の化合物であって、
式中、
－ Ｘ１、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎ、及びｍは、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目６． 一般式（６００）の項目１～３のいずれか一項に記載の化合物であって、
式中、
－ Ｘ１、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎ、及びｍは、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有し；
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成する、
前記化合物。
項目７． 一般式（７００）の項目１～６のいずれか一項に記載の化合物であって、
式中、
－ Ｘ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、項目１、２又は６で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目８． Ｌは、１～６原子長を有し、より特にＬは、２～４原子長を有し、最も特にＬは、２原子長を有する、項目１～４又は６のいずれか一項に記載の化合物。
項目９． 項目６又は７のいずれか一項に記載の化合物であって、Ｒ４は、非置換のＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、かつＲ５は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換されたＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択される電気陰性部分であり、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され、
特にＲ４は、エチル、ｉｓｏ－プロピル、及びｔｅｒｔ－ブチルから選択され、かつＲ５は、ＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のメチル、エチル、及びイソプロピルから選択される、前記化合物。
項目１０． Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特にＦ又はＣｌであり、
特にＲ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、及びＯＨから選択される、項目１～９のいずれか一項に記載の化合物。
項目１１． Ｒ３は、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、
特にＲ３は、ハロゲンである、項目１～１０のいずれか一項に記載の化合物。
項目１２． Ｘ１は、Ｎである、項目１～１１のいずれか一項に記載の化合物。
項目１３． 医薬としての使用のための、項目１～１２のいずれか一項に記載の化合物であって、但し、一般式（００１）
によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
項目１４． がんの治療又は予防における使用のための、項目１～１３のいずれか一項に記載の化合物であって、特に前記がんは、上衣腫、前立腺がん、食道がん、甲状腺がん、肝細胞癌、精巣がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、横紋筋肉腫、胃がん、肺多形癌、乳がん、非小細胞肺がん、脂肪肉腫、子宮頸がん、大腸がん、メラノーマ、多発性骨髄腫、子宮内膜がん、膀胱がん、グリア芽腫、肺扁平上皮癌、卵巣がん、頭頸部がん、及び膵臓がん、肉腫から選択され、より特に、前記がんは、膀胱がん、多発性骨髄腫、胃がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、グリア芽腫、上衣腫、大腸がん、及び肉腫から選択され、最も特に、前記がんは、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん、及び胃がんから選択され、但し、前記化合物は、一般式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
項目１５． 転移の治療又は予防における使用のための、項目１～１２のいずれか一項に記載の化合物であって、特に前記転移は、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん、及び胃がんから選択されるがんから発生し、但し、一般式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
項目１６． 血管新生アンタゴニストとしての使用のための、項目１～１２のいずれか一項に記載の化合物であって、特にがんの治療又は予防における血管新生アンタゴニストとしての使用のための前記化合物であって、より特に、前記がんは、膀胱がん、肝細胞癌、及び前立腺がんから選択され、但し、一般式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
項目１． 一般式（１００）の化合物であって、
Ｒ１－Ｌ－ＢＣ （１００）
式中、
－ Ｌは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ５アミン、又はＣ１～Ｃ４アミドからなるリンカーであり、ここでＬは、非置換であるか、又はＣ１～Ｃ４アルキルで置換されており、特にＬは、Ｃ１～Ｃ５アミンであり；
－ Ｒ１は、（直鎖状又は分岐状）Ｃ１～Ｃ１６アルキル、（直鎖状又は分岐状）Ｃ２～Ｃ１６アルケン、ヘテロアリール、アリール、Ｃ４～Ｃ７シクロアルキル、及びＣ３～Ｃ６複素環から選択され、ここでＲ１は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され、
特にＲ１は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡから選択される１つの部分で置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、ＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ ＢＣは、芳香族又は非芳香族の複素二環又は炭素二環であり、これは、非置換であるか、又はＣ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ、及びハロゲンから独立して選択される１～７個の部分で置換され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 但し、前記化合物は、一般式（００１）
【化10】
前記化合物。
項目２． 一般式（２０１）、（２０２）、又は（２０３）の項目１に記載の化合物であって、
【化11】
－ Ｌ及びＲ１は、項目１で定義されたものと同じ意味を有し；
－ ｎは、０、１、２、又は３であり、特にｎは、１であり、
－ ｍは、０、１、２、３、又は４であり、特にｍは、１又は２であり；
－ 各Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＲＯＨ、ＮＨ２、ＣＮ、ＣＯＯＲＣＯＯ及びハロゲンから選択され、ここでＲＣＯＯ及びＲＯＨは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
－ 各Ｘ１～Ｘ７は、独立して、ＣＨ、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、ここでＸ１～Ｘ７の２～７原子は、ＣＨであり、
特にＸ１は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択され、かつ他の全てのＸは、ＣＨであり、
より特に、Ｘ１はＮであり、かつ他の全てのＸは、ＣＨである、
前記化合物。
項目３． 一般式（３００）の項目１又は２に記載の化合物であって、
【化12】
－ Ｘ１、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎ、及びｍは、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目４． 一般式（４００）の項目１～３のいずれか一項に記載の化合物であって、
【化13】
－ Ｘ１、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、及びＲ３は、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目５． 一般式（５００）の項目１～３のいずれか一項に記載の化合物であって、
【化14】
－ Ｘ１、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎ、及びｍは、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目６． 一般式（６００）の項目１～３のいずれか一項に記載の化合物であって、
【化15】
－ Ｘ１、Ｌ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｎ、及びｍは、項目１又は２で定義されたものと同じ意味を有し；
－ Ｒ４及びＲ５は、独立して、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ２～Ｃ５アルケンから選択され、ここでＲ４及びＲ５は、非置換であるか、又はＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換され、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され；
又は
－ Ｒ４とＲ５とは共に、非置換又はＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のシクロペンタン又はシクロヘキサンを形成する、
前記化合物。
項目７． 一般式（７００）の項目１～６のいずれか一項に記載の化合物であって、
【化16】
－ Ｘ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、項目１、２又は６で定義されたものと同じ意味を有する、
前記化合物。
項目８． Ｌは、１～６原子長を有し、より特にＬは、２～４原子長を有し、最も特にＬは、２原子長を有する、項目１～４又は６のいずれか一項に記載の化合物。
項目９． 項目６又は７のいずれか一項に記載の化合物であって、Ｒ４は、非置換のＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択され、かつＲ５は、ＯＲＯ、ＣＮ、ハロゲン、ＮＲＮ１ＲＮ２、ＳＯ２ＲＳ、ＣＯＯＲＡで置換されたＣ１～Ｃ５アルキル及びＣ２～Ｃ５アルケンから選択される電気陰性部分であり、ここでＲＮ１、ＲＮ２、ＲＡ、ＲＯ、及びＲＳは、独立して、Ｈ、及びＣ１～Ｃ３アルキルから選択され、
特にＲ４は、エチル、ｉｓｏ－プロピル、及びｔｅｒｔ－ブチルから選択され、かつＲ５は、ＯＨ－、ハロゲン－、及び／又はＣＮ－置換のメチル、エチル、及びイソプロピルから選択される、前記化合物。
項目１０． Ｒ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、特にＦ又はＣｌであり、
特にＲ２は、Ｃ１～Ｃ３アルキル、及びＯＨから選択される、項目１～９のいずれか一項に記載の化合物。
項目１１． Ｒ３は、ＯＨ、ＮＨ２、及びハロゲンから選択され、
特にＲ３は、ハロゲンである、項目１～１０のいずれか一項に記載の化合物。
項目１２． Ｘ１は、Ｎである、項目１～１１のいずれか一項に記載の化合物。
項目１３． 医薬としての使用のための、項目１～１２のいずれか一項に記載の化合物であって、但し、一般式（００１）
【化17】
項目１４． がんの治療又は予防における使用のための、項目１～１３のいずれか一項に記載の化合物であって、特に前記がんは、上衣腫、前立腺がん、食道がん、甲状腺がん、肝細胞癌、精巣がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、横紋筋肉腫、胃がん、肺多形癌、乳がん、非小細胞肺がん、脂肪肉腫、子宮頸がん、大腸がん、メラノーマ、多発性骨髄腫、子宮内膜がん、膀胱がん、グリア芽腫、肺扁平上皮癌、卵巣がん、頭頸部がん、及び膵臓がん、肉腫から選択され、より特に、前記がんは、膀胱がん、多発性骨髄腫、胃がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、グリア芽腫、上衣腫、大腸がん、及び肉腫から選択され、最も特に、前記がんは、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん、及び胃がんから選択され、但し、前記化合物は、一般式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
項目１５． 転移の治療又は予防における使用のための、項目１～１２のいずれか一項に記載の化合物であって、特に前記転移は、膀胱がん、小児脳腫瘍、髄芽腫、多発性骨髄腫、大腸がん、及び胃がんから選択されるがんから発生し、但し、一般式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
項目１６． 血管新生アンタゴニストとしての使用のための、項目１～１２のいずれか一項に記載の化合物であって、特にがんの治療又は予防における血管新生アンタゴニストとしての使用のための前記化合物であって、より特に、前記がんは、膀胱がん、肝細胞癌、及び前立腺がんから選択され、但し、一般式（００１）によって特徴付けられる化合物を含むことを条件とする、前記化合物。
【0092】
本発明は、以下の実施例及び図によってさらに説明され、そこからさらなる実施形態及び利点を引き出すことができる。これらの実施例は、本発明を説明するためのものであり、その範囲を限定するものではない。
【実施例】
【0093】
本発明者らは、小分子断片の大きなライブラリーをスクリーニングすることにより、ＦＲＳ２－ＦＧＦＲ相互作用の阻害剤を設計した。本発明者らは、Ｆ３．１４をＦＲＳ２－ＦＧＦＲ相互作用の推定小分子阻害剤として同定した。発明者らは、Ｆ３．１４のＦＲＳ２への結合を、生物物理学的アッセイであるｎａｎｏＤＳＦ、ＭＳＴ、及びＮＭＲ分析を使用して確認した。本発明者らは、ＦＧＦＲ駆動型がん細胞モデルを使用して、がん細胞の浸潤及び増殖の阻害におけるＦ３．１４の有効性を評価した。スフェロイド浸潤アッセイ及び細胞力価ｇｌｏアッセイの結果は、Ｆ３．１４が、試験した全てのＦＧＦＲ駆動型がん細胞株でがん細胞の浸潤及び増殖を効果的に阻害することを示している。ＦＧＦシグナル伝達経路に対するＦ３．１４の効果を試験するために、本発明者らはイムノブロッティングを使用した。Ｆ３．１４は、ＦＧＦシグナル伝達経路の下流エフェクターのリン酸化を阻害することによりＦＧＦシグナル伝達を阻害する。本発明者らは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＡＤＭＥＴ試験及びｉｎ ｖｉｖｏ ＰＫ試験を用いて、Ｆ３．１４の「薬物様」特性を決定した。これらのアッセイの結果から、Ｆ３．１４は良好な浸透性、非常に良好な溶解性、中程度の固有クリアランス、非常に低い毒性、及び高い効力を持っていることが実証された。ｉｎ ｖｉｖｏ ＰＫ試験では、Ｆ３．１４はマウスでの忍容性が高く、ＦＧＦＲ駆動型疾患の治療のために生体への静脈内経路による投与が安全に行えることが示された。
【0094】
方法及び機器
スフェロイド浸潤試験（ＳＩＡ：ｓｐｈｅｒｏｉｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ ａｓｓａｙ）及び自動細胞播種カウンター（ａＣＤｃ：ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ ｃｏｕｎｔｅｒ）
低接着細胞性（ｃｅｌｌ－ｒｅｐｅｌｌｅｎｔ）９６ウェルマイクロプレート（６５０７９０，Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－ｏｎｅ）に、１０００細胞／１００μｌ／ウェルで播種した。この細胞を３７℃で一晩培養し、スフェロイドを形成した。７０μｌの培地を各ウェルから除去し、残りのスフェロイドを有する培地に２．５％のウシコラーゲン１を重ねて添加した。コラーゲンの重合の後に、新しい培地を細胞に添加し、増殖因子及び／又は阻害剤で治療した。細胞をコラーゲンマトリックスに２４時間浸潤させた後、４％ＰＦＡで固定し、ヘキスト染色を行った。画像は、５倍の対物レンズを使用して、Ａｘｉｏ Ｏｂｓｅｒｖｅｒ ２ ｍｏｔ ｐｌｕｓ蛍光顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ、ミュンヘン、ドイツ）で取得した。細胞浸潤は、自動細胞播種カウンター（ａＣＤｃ）と発明者らの細胞播種カウンターソフトウェアａＳＤＩｃｓとを用いて決定されるとおりスフェロイドの中心からの細胞による浸潤距離の平均として決定した（Ｋｕｍａｒら，Ｓｃｉ Ｒｅｐ ５，１５３３８（２０１５））。
スフェロイド浸潤試験（ＳＩＡ：ｓｐｈｅｒｏｉｄ ｉｎｖａｓｉｏｎ ａｓｓａｙ）及び自動細胞播種カウンター（ａＣＤｃ：ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ ｃｏｕｎｔｅｒ）
低接着細胞性（ｃｅｌｌ－ｒｅｐｅｌｌｅｎｔ）９６ウェルマイクロプレート（６５０７９０，Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－ｏｎｅ）に、１０００細胞／１００μｌ／ウェルで播種した。この細胞を３７℃で一晩培養し、スフェロイドを形成した。７０μｌの培地を各ウェルから除去し、残りのスフェロイドを有する培地に２．５％のウシコラーゲン１を重ねて添加した。コラーゲンの重合の後に、新しい培地を細胞に添加し、増殖因子及び／又は阻害剤で治療した。細胞をコラーゲンマトリックスに２４時間浸潤させた後、４％ＰＦＡで固定し、ヘキスト染色を行った。画像は、５倍の対物レンズを使用して、Ａｘｉｏ Ｏｂｓｅｒｖｅｒ ２ ｍｏｔ ｐｌｕｓ蛍光顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ、ミュンヘン、ドイツ）で取得した。細胞浸潤は、自動細胞播種カウンター（ａＣＤｃ）と発明者らの細胞播種カウンターソフトウェアａＳＤＩｃｓとを用いて決定されるとおりスフェロイドの中心からの細胞による浸潤距離の平均として決定した（Ｋｕｍａｒら，Ｓｃｉ Ｒｅｐ ５，１５３３８（２０１５））。
【0095】
ナノ示差走査蛍光測定法（ｎａｎｏＤＳＦ）
グアニンヌクレオチド結合タンパク質サブユニット ベータ（ＧＢ１）及び６×ヒスチジン残基でタグ付けされた精製ＦＲＳ２タンパク質を、タンパク質バッファー（１００ｍＭ リン酸ナトリウム、５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０ｍＭ アルギニン、１ｍＭ ＴＣＥＰ、ｐＨ ７．０）中で終濃度３０μＭに希釈した。本化合物を、終濃度１００％ＤＭＳＯを用いて、５０又は１００ｍＭで１００％中に溶解し、１ｍＭにさらに希釈した。化合物とタンパク質とを１：１の比率で混合し、本化合物について５００μＭ及び１５μＭの終濃度を得た。測定前に混合物を室温で１５分間インキュベートした。測定は、高感度キャピラリーにおいてＰｒｏｍｅｔｈｅｕｓシステムで実行した。サンプルは、１℃／分間隔で２０～９５℃の温度勾配に供した。
グアニンヌクレオチド結合タンパク質サブユニット ベータ（ＧＢ１）及び６×ヒスチジン残基でタグ付けされた精製ＦＲＳ２タンパク質を、タンパク質バッファー（１００ｍＭ リン酸ナトリウム、５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０ｍＭ アルギニン、１ｍＭ ＴＣＥＰ、ｐＨ ７．０）中で終濃度３０μＭに希釈した。本化合物を、終濃度１００％ＤＭＳＯを用いて、５０又は１００ｍＭで１００％中に溶解し、１ｍＭにさらに希釈した。化合物とタンパク質とを１：１の比率で混合し、本化合物について５００μＭ及び１５μＭの終濃度を得た。測定前に混合物を室温で１５分間インキュベートした。測定は、高感度キャピラリーにおいてＰｒｏｍｅｔｈｅｕｓシステムで実行した。サンプルは、１℃／分間隔で２０～９５℃の温度勾配に供した。
【0096】
マイクロスケール熱泳動法（ＭＳＴ）
グアニンヌクレオチド結合タンパク質サブユニット ベータ（ＧＢ１）及び６×ヒスチジン残基でタグ付けした精製ＦＲＳ２タンパク質を、第２世代ＢＬＵＥ－ＮＨＳ色素で標識した。このタンパク質を６０μＭの色素を用いて終濃度２０μＭで標識した。この標識は、アルギニンを添加しないタンパク質バッファーで実施した。標識の後のタンパク質のバッファーに対してアルギニンを再緩衝化した。本化合物を、終濃度１００％ＤＭＳＯを用いて、５０又は１００ｍＭで１００％に溶解し、１ｍＭにさらに希釈した。その後化合物を、１０％ＤＭＳＯを添加したタンパク質バッファーで１ｍＭ～６１．０４ｎＭまでの１：１連続希釈において希釈した。１０μｌの５０ｎＭ標識したタンパク質を各化合物希釈液１０μｌに加え、最終標識したタンパク質濃度を２５ｎＭ、かつＤＭＳＯ濃度を５％にした。該サンプルを室温で１５分間インキュベートした。実験はプレミアムコーティングされたキャピラリーで実施した。励起パワーを２０％、ＭＳＴパワーを４０％（４ケルビン温度勾配）に設定し、レーザーオン時間を２０秒、レーザーオフ時間を３秒とした。温度は２５℃に設定した。各測定は２回繰り返した。相互作用は、独立して２重に測定した。
グアニンヌクレオチド結合タンパク質サブユニット ベータ（ＧＢ１）及び６×ヒスチジン残基でタグ付けした精製ＦＲＳ２タンパク質を、第２世代ＢＬＵＥ－ＮＨＳ色素で標識した。このタンパク質を６０μＭの色素を用いて終濃度２０μＭで標識した。この標識は、アルギニンを添加しないタンパク質バッファーで実施した。標識の後のタンパク質のバッファーに対してアルギニンを再緩衝化した。本化合物を、終濃度１００％ＤＭＳＯを用いて、５０又は１００ｍＭで１００％に溶解し、１ｍＭにさらに希釈した。その後化合物を、１０％ＤＭＳＯを添加したタンパク質バッファーで１ｍＭ～６１．０４ｎＭまでの１：１連続希釈において希釈した。１０μｌの５０ｎＭ標識したタンパク質を各化合物希釈液１０μｌに加え、最終標識したタンパク質濃度を２５ｎＭ、かつＤＭＳＯ濃度を５％にした。該サンプルを室温で１５分間インキュベートした。実験はプレミアムコーティングされたキャピラリーで実施した。励起パワーを２０％、ＭＳＴパワーを４０％（４ケルビン温度勾配）に設定し、レーザーオン時間を２０秒、レーザーオフ時間を３秒とした。温度は２５℃に設定した。各測定は２回繰り返した。相互作用は、独立して２重に測定した。
【0097】
イムノブロッティング（ＩＢ：ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ）
がん細胞をｂＦＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）及び／又は化合物で治療し、放射免疫沈降アッセイ（ＲＩＰＡ：Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ）バッファーを使用して溶解した。ＲＩＰＡバッファー溶解物をＳＤＳ－ＰＡＧＥで分離し、製造元の説明書（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）に従って転写装置を使用してニトロセルロース膜に転写した。膜を、ホスホ－ＦＲＳ２、ＦＲＳ２、ＥＲＫ１／２、ホスホ－ＥＲＫ１／２、ＡＫＴ、ホスホ－ＡＫＴ、ホスホ－ＰＫＣ、及びチューブリンに対する一次抗体でプローブした。ＨＲＰ結合二次抗体（１：５０００）を使用して一次抗体を検出した。化学発光検出は、ＣｈｅｍｉＤｏｃ Ｔｏｕｃｈゲル及びウエスタンブロットイメージングシステム（ＢｉｏＲａｄ）を使用して実行した。
がん細胞をｂＦＧＦ（１００ｎｇ／ｍｌ）及び／又は化合物で治療し、放射免疫沈降アッセイ（ＲＩＰＡ：Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ）バッファーを使用して溶解した。ＲＩＰＡバッファー溶解物をＳＤＳ－ＰＡＧＥで分離し、製造元の説明書（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）に従って転写装置を使用してニトロセルロース膜に転写した。膜を、ホスホ－ＦＲＳ２、ＦＲＳ２、ＥＲＫ１／２、ホスホ－ＥＲＫ１／２、ＡＫＴ、ホスホ－ＡＫＴ、ホスホ－ＰＫＣ、及びチューブリンに対する一次抗体でプローブした。ＨＲＰ結合二次抗体（１：５０００）を使用して一次抗体を検出した。化学発光検出は、ＣｈｅｍｉＤｏｃ Ｔｏｕｃｈゲル及びウエスタンブロットイメージングシステム（ＢｉｏＲａｄ）を使用して実行した。
【0098】
細胞力価ｇｌｏアッセイ
細胞の代謝活性及び増殖を、製造元の指示に従って、ＰｒｏｍｅｇａのＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ ｇｌｏアッセイを使用して決定した。簡潔には、２５０細胞／１００μｌ／ウェル（最大７２時間のインキュベーション）をＧｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ μ－ｃｌｅａｒ ３８４ウェルプレート（６５５０９０、Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ）に播種し、３７℃で一晩インキュベートした。次いで、古い培地を新しい無血清培地と交換し、所望の時点まで細胞をＢＧＪ３９８又はＦ３．１４で治療した。各時点での適切なインキュベーションの後、１０μｌの細胞力価ｇｌｏ試薬を各ウェルに添加し（ウェルあたりの終濃度細胞力価ｇｌｏ試薬 １：１０）、３７°Ｃで３０分間インキュベートした。その後、１ウェルあたり０．５～１秒の信号積分時間で発光を測定した。
細胞の代謝活性及び増殖を、製造元の指示に従って、ＰｒｏｍｅｇａのＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ ｇｌｏアッセイを使用して決定した。簡潔には、２５０細胞／１００μｌ／ウェル（最大７２時間のインキュベーション）をＧｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ μ－ｃｌｅａｒ ３８４ウェルプレート（６５５０９０、Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ）に播種し、３７℃で一晩インキュベートした。次いで、古い培地を新しい無血清培地と交換し、所望の時点まで細胞をＢＧＪ３９８又はＦ３．１４で治療した。各時点での適切なインキュベーションの後、１０μｌの細胞力価ｇｌｏ試薬を各ウェルに添加し（ウェルあたりの終濃度細胞力価ｇｌｏ試薬 １：１０）、３７°Ｃで３０分間インキュベートした。その後、１ウェルあたり０．５～１秒の信号積分時間で発光を測定した。
【0099】
Ｉｎ ｖｉｖｏ薬物動態
３匹の健康な非ＳＣＩＤマウスをＦ３．１４で静脈内治療した。治療後２、４、６、８及び２４時間にて血液サンプルを採取した。採取した血液サンプルから血清を単離し、血清中のＦ３．１４の濃度を測定して、Ｆ３．１４の固有クリアランスを決定した。
３匹の健康な非ＳＣＩＤマウスをＦ３．１４で静脈内治療した。治療後２、４、６、８及び２４時間にて血液サンプルを採取した。採取した血液サンプルから血清を単離し、血清中のＦ３．１４の濃度を測定して、Ｆ３．１４の固有クリアランスを決定した。
【0100】
経路分析
ＲＩＰＡバッファーのＦＧＦＲ駆動型細胞溶解物をＳＤＳ－ＰＡＧＥで分離し、製造元の指示（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）に従って転写装置を使用してニトロセルロース膜に転写した。膜を、ホスホ－ＦＲＳ２、ＦＲＳ２、ＥＲＫ１／２、ホスホ－ＥＲＫ１／２、ＡＫＴ、ホスホ－ＡＫＴ、ホスホ－ＰＫＣ、及びチューブリンに対する一次抗体でプローブした。ＨＲＰ結合二次抗体（１：５０００）を使用して一次抗体を検出した。化学発光検出は、ＣｈｅｍｉＤｏｃ Ｔｏｕｃｈゲル及びウエスタンブロットイメージングシステム（ＢｉｏＲａｄ）を使用して実行した。Ａｄｏｂｅ Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ ＣＳ５を使用して、免疫反応性バンドの積算密度を定量した。
ＲＩＰＡバッファーのＦＧＦＲ駆動型細胞溶解物をＳＤＳ－ＰＡＧＥで分離し、製造元の指示（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）に従って転写装置を使用してニトロセルロース膜に転写した。膜を、ホスホ－ＦＲＳ２、ＦＲＳ２、ＥＲＫ１／２、ホスホ－ＥＲＫ１／２、ＡＫＴ、ホスホ－ＡＫＴ、ホスホ－ＰＫＣ、及びチューブリンに対する一次抗体でプローブした。ＨＲＰ結合二次抗体（１：５０００）を使用して一次抗体を検出した。化学発光検出は、ＣｈｅｍｉＤｏｃ Ｔｏｕｃｈゲル及びウエスタンブロットイメージングシステム（ＢｉｏＲａｄ）を使用して実行した。Ａｄｏｂｅ Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ ＣＳ５を使用して、免疫反応性バンドの積算密度を定量した。
【0101】
化合物の入手方法
化合物は、ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ社にて以下のベンダーＩＤで購入した：
Ｆ３．１４ ２４６６２３１０（ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ）。
化合物は、ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ社にて以下のベンダーＩＤで購入した：
Ｆ３．１４ ２４６６２３１０（ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ）。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【国際調査報告】