特表 2024-535610 黒髪再生エッセンス及びその製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-09-30

(54)【発明の名称】黒髪再生エッセンス及びその製造方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/9789 20170101AFI20240920BHJP

   A61K 8/44 20060101ALI20240920BHJP

   A61K 8/9767 20170101ALI20240920BHJP

   A61Q 5/00 20060101ALI20240920BHJP

【ＦＩ】

A61K8/9789

A61K8/44

A61K8/9767

A61Q5/00

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2024522470

(86)(22)【出願日】2022-11-30

(85)【翻訳文提出日】2024-04-12

(86)【国際出願番号】 CN2022135671

(87)【国際公開番号】W WO2024045385

(87)【国際公開日】2024-03-07

(31)【優先権主張番号】202211074879.5

(32)【優先日】2022-09-02

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】523038366

【氏名又は名称】曼秀雷敦（中国）薬業有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＭＥＮＴＨＯＬＡＴＵＭ （ＣＨＩＮＡ） ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＣＯ．， ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】Ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｅｓｔａｔｅｓ， Ｓａｎ Ｘｉａｎｇ Ｚｈｏｎｇｓｈａｎ ｃｉｔｙ， Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５２８４６３ Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】100145470

【弁理士】

【氏名又は名称】藤井 健一

(72)【発明者】

【氏名】林新文

(72)【発明者】

【氏名】高臣臣

(72)【発明者】

【氏名】王乃龍

【テーマコード（参考）】

4C083

【Ｆターム（参考）】

4C083AA111

4C083AA112

4C083AC111

4C083AC112

4C083AC121

4C083AC122

4C083AC301

4C083AC302

4C083AC431

4C083AC432

4C083AC441

4C083AC442

4C083AC521

4C083AC581

4C083AC582

4C083AD351

4C083AD352

4C083AD531

4C083AD532

4C083BB53

4C083CC31

4C083DD23

4C083DD27

4C083EE21

4C083EE26

4C083FF05

(57)【要約】

本発明は、黒髪再生エッセンス全量に対して、カンレンソウエキス０．０１０質量％～１０．００質量％、ゴマ種子エキス０．０１０質量％～５．００質量％、何首烏エキス０．０１０質量％～５．００質量％、加水分解アマ種子エキス０．００１０質量％～５．００質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００１０質量％～０．５００質量％、アセチルチロシン０．０１００質量％～１．００質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．００１０質量％～１．００質量％を含む黒髪再生組成物を含む黒髪再生エッセンスを提供する。本発明の黒髪再生エッセンスにおける黒髪再生組成物は、作用機序の異なる白髪から黒髪への有効成分を組み合わせて、毛乳頭におけるメラニン生成を増加させ、抗酸化防御を活性化してＲＯＳのメラノサイトへのダメージを抑え、毛髪のメラニンの沈着を刺激することにより、黒髪を再生させ、白髪をゆっくりと黒髪に戻すことができる。
【選択図】図１０

【特許請求の範囲】

【請求項1】

黒髪再生エッセンス全量に対して、カンレンソウエキス０．０１０質量％～１０．００質量％、ゴマ種子エキス０．０１０質量％～５．００質量％、何首烏エキス０．０１０質量％～５．００質量％、加水分解アマ種子エキス０．００１０質量％～５．００質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００１０質量％～０．５００質量％、アセチルチロシン０．０１００質量％～１．００質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．００１０質量％～１．００質量％を含む黒髪再生組成物を含む、ことを特徴とする黒髪再生エッセンス。

【請求項2】

前記黒髪再生組成物は、カンレンソウエキス０．０１０質量％～１．０質量％、ゴマ種子エキス０．０１０質量％～０．５質量％、何首烏エキス０．０１０質量％～１．０質量％、加水分解アマ種子エキス０．００１０質量％～０．２０質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００１０質量％～０．２０質量％、アセチルチロシン０．０１００質量％～０．４５質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．００１０質量％～０．１５質量％を含む、ことを特徴とする請求項１に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項3】

前記黒髪再生組成物は、カンレンソウエキス０．３質量％、ゴマ種子エキス０．０５質量％、何首烏エキス０．４１４質量％、加水分解アマ種子エキス０．００５５質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００５質量％、アセチルチロシン０．１７質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．０６質量％を含む、ことを特徴とする請求項２に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項4】

前記黒髪再生エッセンスは、黒髪再生エッセンス全量に対して０．５質量％～１０質量％の助剤をさらに含む、ことを特徴とする請求項１に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項5】

前記助剤は、コンディショニング剤及び防腐剤のうちの１種以上を含む、ことを特徴とする請求項４に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項6】

前記コンディショニング剤は、グリセリン、ペンチレングリコール、ＰＥＧ?４０硬化ヒマシ油、メントール及びグリチルリチン酸ジカリウムのうちの１種以上である、ことを特徴とする請求項５に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項7】

前記助剤は、増粘剤、ｐＨ安定剤及びキレート安定剤をさらに含む、ことを特徴とする請求項６に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項8】

前記増粘剤がキサンタンガムであり、前記ｐＨ安定剤が無水クエン酸及びクエン酸ナトリウムであり、前記キレート安定剤がＥＤＴＡ二ナトリウムである、ことを特徴とする請求項７に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項9】

前記黒髪再生エッセンスは、カンレンソウエキス０．３質量％、ゴマ種子エキス０．０５質量％、何首烏エキス０．４１４質量％、加水分解アマ種子エキス０．００５５質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００５質量％、アセチルチロシン０．１７質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．０６質量％、ペンチレングリコール３質量％、グリセリン３質量％、ＥＤＴＡ二ナトリウム０．０５質量％、キサンタンガム０．２質量％、クエン酸ナトリウム０．２質量％、クエン酸０．１２質量％、グリチルリチン酸ジカリウム０．２質量％、メントール０．２質量％、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油１．０質量％を含む、ことを特徴とする請求項８に記載の黒髪再生エッセンス。

【請求項10】

請求項１～９のいずれか一項に記載の黒髪再生エッセンスの製造方法であって、
（１）ペンチレングリコール、グリセリン、ＥＤＴＡ二ナトリウム、キサンタンガム、グリチルリチン酸ジカリウムを所定の配合量で混合し、透明に溶解して調合液Ａとし、メントール、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油、トゥイーン－２０を混合して撹拌溶解し、調合液Ｂとする工程と、
（２）調合液Ａに、カンレンソウエキス、ゴマ種子エキス、何首烏エキス、加水分解アマ種子エキス、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス、アセチルチロシン、ヨーロッパカラマツエキスをこの順に加え、溶解後、クエン酸ナトリウム／クエン酸を加えて、ｐＨを４．５～５．０に調整し、調合液Ｂを加えて撹拌冷却し、黒髪再生エッセンスを得る工程と、を含むことを特徴とする黒髪再生エッセンスの製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は日用化粧品の技術分野に関し、特に黒髪再生エッセンス、及び当該黒髪再生エッセンスの製造方法に関する。

【背景技術】

【0002】

現在、市販されている一般的な黒髪製品のほとんどは、染毛成分を含有するクリーム状染毛剤であり、通常、その配合系により化学染毛料と天然染毛料に大別される。

【0003】

化学染毛料は、持続期間によって永久染毛料、半永久染毛料、一時染毛料に分けられる。永久染毛料には、染料中間体とカップリング剤又は修飾剤が含まれており、これらの中間体は毛髪の内部の髄質に浸透し、酸化、カップリング、縮合反応により安定した染料分子を形成し、毛髪の繊維内に封じ込められるため、洗い流されにくく、長期間染毛効果が持続し、通常１～３ヶ月維持することができる。半永久染毛料は、比較的分子量の小さい染料分子を毛髪の表皮又は皮質及び髄質の一部に浸透させることで、黒染め効果を得ることができ、持続時間が通常６～１２回のシャンプーに耐えることができる。一時染毛料は、主に一時的な毛髪の着色に使用され、一般的に水溶性の酸性染料、塩基性染料又は顔料で構成され、酸性染料、アンモニア又は金属塩の不溶性混合物で構成されることもでき、実質的に毛髪の表面に付着し、効果が一時的であり、使用時に不注意で衣服を汚してしまうおそれがある。これらの黒髪製品は、実質的に化学染毛成分を使用して毛髪を染色して黒髪効果を得るが、これらの製品には、染毛効果が長く続かず、頻繁に繰り返し染める必要があり、しかし、繰り返し染めると、頭皮アレルギーなどを引き起こしたり、髪質を傷めたりしやすくなるので、抜け毛やパサつきなどを起こしやすくなるなど、多くの欠点がある。

【0004】

天然染毛料は、天然色素から抽出した成分で製造された植物染毛料であり、一般的に毛髪を傷めたり、蓄積された色素を破壊したりすることはないが、黒髪効果が普通で、持続時間が短い。

【0005】

ヒトの毛髪の黒色は、毛根と皮膚の間に存在する色素幹細胞に由来し、色素幹細胞によって生成される色素細胞のおかげで、毛髪は黒く保たれていることが科学者によって発見された。この幹細胞が減少又は枯渇すると、毛髪が白くなってしまい、これは黒髪から白髪になる根本的な原因である。しかし、従来の黒髪製品は染毛によって白髪を黒くするものであり、白髪の問題を根本から解決するものではない。

【0006】

したがって、本発明は、染毛成分を含まず、メラニンの生成を増加させ、抗酸化防御を活性化してメラノサイトへのダメージを抑えることで、白髪の数を減少させ、白髪をゆっくりと黒髪に戻す黒髪再生エッセンスを提供する。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

本発明の第１の目的は、従来の黒髪製品は、染色成分を含有し、黒髪効果が長く続かず、白髪の発生を根本的に改善できないという技術的課題を解決する黒髪再生エッセンスを提供することにある。

【0008】

本発明の第２の目的は、黒髪再生エッセンスの製造方法を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明の目的は、以下の技術的手段によって達成される。
本発明の黒髪再生エッセンスは、黒髪再生エッセンス全量に対して、カンレンソウエキス０．０１０質量％～１０．００質量％、ゴマ種子エキス０．０１０質量％～５．００質量％、何首烏エキス０．０１０質量％～５．００質量％、加水分解アマ種子エキス０．００１０質量％～５．００質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００１０質量％～０．５００質量％、アセチルチロシン０．０１００質量％～１．００質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．００１０質量％～１．００質量％を含む黒髪再生組成物を含む。

【0010】

さらに、前記黒髪再生組成物は、カンレンソウエキス０．０１０質量％～１．０質量％、ゴマ種子エキス０．０１０質量％～０．５質量％、何首烏エキス０．０１０質量％～１．０質量％、加水分解アマ種子エキス０．００１０質量％～０．２０質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００１０質量％～０．２０質量％、アセチルチロシン０．０１００質量％～０．４５質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．００１０質量％～０．１５質量％を含む。

【0011】

さらに、前記黒髪再生組成物は、カンレンソウエキス０．３質量％、ゴマ種子エキス０．０５質量％、何首烏エキス０．４１４質量％、加水分解アマ種子エキス０．００５５質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００５質量％、アセチルチロシン０．１７質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．０６質量％を含む。

【0012】

本発明の黒髪再生組成物は、作用機序の異なる白髪から黒髪へのインビトロ試験効果を有する有効成分を組み合わせて、色素幹細胞の増殖を促進し、毛乳頭におけるメラニン生成を増加させ、抗酸化防御を活性化してＲＯＳのメラノサイトへのダメージを抑え、毛髪のメラニンの沈着を刺激することにより、黒髪を再生させ、白髪をゆっくりと黒髪に戻すことができる。本発明において、カンレンソウエキスは、抗酸化特性を改善し、抗酸化防御を活性化することでＲＯＳのメラノサイトへのダメージを抑える。黒ゴマは、中国の伝統的な栄養食品であり、顕著な健康効果を有し、チロシナーゼの活性化やメラニン生成の促進に強力な効果を発揮する。黒ゴマエキスは、細胞の増殖活性、メラニン含有量、チロシナーゼ活性に積極的な影響を与え、メラニン合成に関連する遺伝子（Ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ／ＭＩＴＦ／ＴＲＰ－１／ＴＲＰ－２）ｍＲＮＡとタンパク質の発現を促進し、メラニンの生成を促進して白髪を治療する。何首烏エキスは、肝臓や腎臓の不調の治療に使用され、陰を滋養する作用があり、健康な体のバランスを維持することができる。アセチルチロシンは、メラニン合成経路の必須条件であり、毛乳頭のメラノサイトにおけるメラニン合成を増加させる。

【0013】

本発明では、前記黒髪再生エッセンスは、黒髪再生エッセンス全量に対して０．５質量％～１０質量％の助剤をさらに含む。

【0014】

本発明のいくつかの実施形態において、前記助剤は、コンディショニング剤及び防腐剤のうちの１種以上を含む。

【0015】

さらに、前記コンディショニング剤は、グリセリン、ペンチレングリコール、ＰＥＧ?４０硬化ヒマシ油、メントール及びグリチルリチン酸ジカリウムのうちの１種以上である。

【0016】

本発明のいくつかの実施形態において、前記助剤は、増粘剤、ｐＨ安定剤及びキレート安定剤をさらに含む。

【0017】

さらに、前記増粘剤がキサンタンガムであり、前記ｐＨ安定剤が無水クエン酸及びクエン酸ナトリウムであり、前記キレート安定剤がＥＤＴＡ二ナトリウムである。

【0018】

本発明のいくつかの実施形態において、前記黒髪再生エッセンスは、カンレンソウエキス０．３質量％、ゴマ種子エキス０．０５質量％、何首烏エキス０．４１４質量％、加水分解アマ種子エキス０．００５５質量％、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス０．０００５質量％、アセチルチロシン０．１７質量％、ヨーロッパカラマツエキス０．０６質量％、ペンチレングリコール３質量％、グリセリン３質量％、ＥＤＴＡ二ナトリウム０．０５質量％、キサンタンガム０．２質量％、クエン酸ナトリウム０．２質量％、クエン酸０．１２質量％、グリチルリチン酸ジカリウム０．２質量％、メントール０．２質量％、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油１．０質量％を含む。

【0019】

本発明の黒髪再生エッセンスの製造方法は、
（１）ペンチレングリコール、グリセリン、ＥＤＴＡ二ナトリウム、キサンタンガム、グリチルリチン酸ジカリウムを所定の配合量で混合し、透明に溶解して調合液Ａとし、メントール、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油、トゥイーン－２０を混合して撹拌溶解し、調合液Ｂとする工程と、
（２）調合液Ａに、カンレンソウエキス、ゴマ種子エキス、何首烏エキス、加水分解アマ種子エキス、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス、アセチルチロシン、ヨーロッパカラマツエキスをこの順に加え、溶解後、クエン酸ナトリウム／クエン酸を加えて、ｐＨを４．５～５．０に調整し、調合液Ｂを加えて撹拌冷却し、黒髪再生エッセンスを得る工程とを含む。

【発明の効果】

【0020】

従来技術と比べて、本発明は以下の有益な効果を有する。
（１）本発明の黒髪再生エッセンスにおける黒髪再生組成物は、作用機序の異なる白髪から黒髪への有効成分を組み合わせて、毛乳頭におけるメラニン生成を増加させ、抗酸化防御を活性化してＲＯＳのメラノサイトへのダメージを抑え、毛髪のメラニンの沈着を刺激することにより、黒髪を再生させ、白髪をゆっくりと黒髪に戻すことができる。
（２）本発明の黒髪再生エッセンスは、染毛成分を含まず、頭皮アレルギーなどを引き起こしたり、髪質を傷めたりすることなく、白髪を根本的に改善することができる。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】本発明に係る加水分解アマ種子エキスのチロシナーゼに対する影響を示す図である。

【図2】本発明に係る加水分解アマ種子エキスのＴＰＲ－１、ＭＩＴＦ、Ｐｍｅｌ１７及びｃ－Ｋｉｔの発現に対する影響を示す図である。

【図3】本発明に係る加水分解アマ種子エキスのケラチノサイトにおけるＰＡＲ－２の発現に対する影響を示す図である。

【図4】本発明に係るネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスのメラノサイトにおける主要な抗酸化遺伝子の発現に対する影響を示す図である。

【図5】本発明に係るネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスの毛乳頭細胞のＲＯＳに対する影響を示す図である。

【図6】本発明に係るネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスのチロシナーゼ活性に対する影響を示す図である。

【図7】本発明に係るネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスのメラニン生成量に対する影響を示す図である。

【図8】本発明に係るヨーロッパカラマツエキスの毛包におけるメラニン生成量に対する影響を示す図である。

【図9】本発明の実施例に係る黒髪再生エッセンスの脱落した白髪の毛包におけるメラニン生成量に対する影響を示す図である。

【図10】本発明の実施例に係る黒髪再生エッセンスで処理された脱落した白髪の毛包の画像である。

【図11】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の白髪の割合の変化を示す図である。

【図12】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の効果を示す図である。

【図13】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の効果を示す図である。

【図14】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の効果を示す図である。

【図15】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の効果を示す図である。

【図16】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の効果を示す図である。

【図17】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の白髪密度の定量分析を示す図である。

【図18】ヒト試験ボランティアが実施例１の黒髪再生エッセンスを使用した後の白髪密度の効果を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0022】

以下、当業者が本発明の技術的手段をよりよく理解して実施できるように、具体的な実施例を参照して本発明を詳しく説明する。
（実施例１）

【0023】

黒髪再生エッセンスは、以下の成分を含む。

【0024】

【表1】

【0025】

前記黒髪再生エッセンスの製造方法は、
（１）ペンチレングリコールと濃グリセリンを混合し、均一に撹拌して調合液Ａとし、メントール、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油、トゥイーン－２０を混合し、４０～５０℃に加熱し、撹拌して透明に溶解し、冷却して調合液Ｂとし、
（２）適当な容器に水、ＥＤＴＡ二ナトリウム、グリチルリチン酸ジカリウム、キサンタンガムを加えて撹拌溶解し、６０～７５℃に加熱し、調合液Ａを加えて完全に溶解するまで撹拌し、
（３）カンレンソウエキス、ゴマ種子エキス、何首烏エキス、加水分解アマ種子エキス、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス、アセチルチロシン、ヨーロッパカラマツエキスをこの順に加え、完全に溶解して透明になるまで撹拌し、
（４）クエン酸及びクエン酸ナトリウムを加え、撹拌溶解し、ｐＨを４．０～５．０に調整し、
（５）調合液Ｂ及び防腐剤を加え、撹拌溶解し、３０℃以下に冷却して終了とする。
（実施例２）

【0026】

黒髪再生エッセンスは、以下の成分を含む。

【0027】

【表2】

【0028】

前記黒髪再生エッセンスの製造方法は、
（１）ペンチレングリコールと濃グリセリンを混合し、均一に撹拌して調合液Ａとし、メントール、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油、トゥイーン－２０を混合し、４０～５０℃に加熱し、撹拌して透明に溶解し、冷却して調合液Ｂとし、
（２）適当な容器に水、ＥＤＴＡ二ナトリウム、グリチルリチン酸ジカリウム、キサンタンガムを加えて撹拌溶解し、６０～７５℃に加熱し、調合液Ａを加えて完全に溶解するまで撹拌し、
（３）カンレンソウエキス、ゴマ種子エキス、何首烏エキス、加水分解アマ種子エキス、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス、アセチルチロシン、ヨーロッパカラマツエキスをこの順に加え、完全に溶解して透明になるまで撹拌し、
（４）クエン酸及びクエン酸ナトリウムを加え、撹拌溶解し、ｐＨを４．０～５．０に調整し、
（５）調合液Ｂ及び防腐剤を加え、撹拌溶解し、３０℃以下に冷却して終了とする。
（実施例３）

【0029】

黒髪再生エッセンスは、以下の成分を含む。

【0030】

【表3】

【0031】

前記黒髪再生エッセンスの製造方法は、
（１）ペンチレングリコールと濃グリセリンを混合し、均一に撹拌して調合液Ａとし、メントール、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油、トゥイーン－２０を混合し、４０～５０℃に加熱し、撹拌して透明に溶解し、冷却して調合液Ｂとし、
（２）適当な容器に水、ＥＤＴＡ二ナトリウム、グリチルリチン酸ジカリウム、キサンタンガムを加えて撹拌溶解し、６０～７５℃に加熱し、調合液Ａを加えて完全に溶解するまで撹拌し、
（３）カンレンソウエキス、ゴマ種子エキス、何首烏エキス、加水分解アマ種子エキス、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス、アセチルチロシン、ヨーロッパカラマツエキスをこの順に加え、完全に溶解して透明になるまで撹拌し、
（４）クエン酸及びクエン酸ナトリウムを加え、撹拌溶解し、ｐＨを４．０～５．０に調整し、
（５）調合液Ｂ及び防腐剤を加え、撹拌溶解し、３０℃以下に冷却して終了とする。
（実施例４）

【0032】

黒髪再生エッセンスは、以下の成分を含む。

【0033】

【表4】

【0034】

前記黒髪再生エッセンスの製造方法は、
（１）ペンチレングリコールと濃グリセリンを混合し、均一に撹拌して調合液Ａとし、メントール、ＰＥＧ－４０硬化ヒマシ油、トゥイーン－２０を混合し、４０～５０℃に加熱し、撹拌して透明に溶解し、冷却して調合液Ｂとし、
（２）適当な容器に水、ＥＤＴＡ二ナトリウム、グリチルリチン酸ジカリウム、キサンタンガムを加えて撹拌溶解し、６０～７５℃に加熱し、調合液Ａを加えて完全に溶解するまで撹拌し、
（３）カンレンソウエキス、ゴマ種子エキス、何首烏エキス、加水分解アマ種子エキス、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス、アセチルチロシン、ヨーロッパカラマツエキスをこの順に加え、完全に溶解して透明になるまで撹拌し、
（４）クエン酸及びクエン酸ナトリウムを加え、撹拌溶解し、ｐＨを４．０～５．０に調整し、
（５）調合液Ｂ及び防腐剤を加え、撹拌溶解し、３０℃以下に冷却して終了とする。
（性能試験）

【0035】

本発明の加水分解アマ種子エキスは、毛髪の本来の色を維持、回復するのに役立ち、以下の役割を果たす。１）図１に示すように、メラノサイトにおけるメラニンの生成を開始する律速鍵酵素であるチロシナーゼのレベルを大幅に増加させた。２）図２に示すように、ＴＰＲ－１、ＭＩＴＦ、Ｐｍｅｌ１７、ｃ－Ｋｉｔなどのすべてのタンパク質マーカーの発現を増加させ、ＴＰＲ－１はヒトメラノサイトにおけるメラニン合成に関与する重要なタンパク質であり、ＭＩＴＦはヒトメラノサイトにおけるメラニン合成に寄与し、Ｐｍｅｌ１７はヒトメラノサイトにおけるメラニンの貯蔵に有利であり、ｃ－Ｋｉｔはヒトメラノサイトにおけるメラニンプロセスを制御する。３）図３に示すように、ケラチノサイトにおけるＰＡＲ－２の発現を大幅に増加させ、メラノサイトからケラチノサイトへのメラニンの移送を促進した。

【0036】

本発明のネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスは、ピクロシドＩＩと呼ばれるイリドイド配糖体とポリフェノールを含有し、抗アポトーシス作用、抗炎症作用、抗酸化作用を有し、白髪を黒髪に戻す効果が高い。１）図４に示すように、メラノサイトの主要な抗酸化遺伝子の発現を増加させ、酸化ストレスを防止し、抗酸化特性を改善し、毛髪の白髪化を抑制した。２）毛包の毛乳頭細胞は、活発なメラノサイトの再生を制御する上で重要な役割を果たすが、細胞におけるＲＯＳがそれらの活性に影響を与えることがあり、図５に示すように、ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスは、毛乳頭細胞におけるＲＯＳの産生を減少させ、環境の酸化ストレスを抑制し、毛髪の着色を向上させることができた。３）図６に示すように、チロシナーゼの活性を促進し、色素沈着を増加させた。４）図７に示すように、メラニンの生成を促進し、毛髪の色素の減少を逆転させた。

【0037】

ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスのメラノサイトの抗酸化遺伝子の発現に対する影響の試験方法は、メラノサイトを１．０％のネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスで４８時間培養し、２４時間後に酸化ストレスを検出し、つまり、２つの部分に分けて、１つの部分を２５０μｍＨ_２Ｏ_２で２時間処理し、もう１つの部分を処理せず、混合培養三倍体上でＲＴ－ｑＰＣＲを使用してＮＲＦ２、ＨＭＯＸ１、ＳＬＣ７Ａ１１遺伝子のｍＲＮＡ発現を検出する。

【0038】

ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスのメラノサイトのＲＯＳ含有量に対する影響の試験方法は、以下のようである。毛包の毛乳頭細胞は、活発なメラノサイトの再生を制御する上で重要な役割を果たすが、細胞におけるＲＯＳの蓄積がそれらの活性に影響を与えるため、ＲＯＳ産生の低減により毛髪の着色を向上させることができる。ヒト毛乳頭細胞（ＨＦＤＰＣ）を黒髪再生組成物で２４時間培養した後、３０分以内に酸化ストレス（２５０ｕｍＨ_２Ｏ_２）を加え、最後に蛍光プローブ（２，７－ＨＦＤＰＣ－ＤＡ）を使用して細胞内のＲＯＳを測定し、その結果、濃度の異なるネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスで処理することにより、ＲＯＳの産生を効果的に低減できることが示された。

【0039】

ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスのチロシナーゼ活性に対する影響の試験方法は、メラノサイトをネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスで７２時間（ｎ＝３）培養し、７２時間後に酸化ストレスを検出し、つまり、５ＭＨ_２Ｏ_２で３０分間処理し、Ｌ－ＤＯＰＡ基質とインキュベートした後、酵素活性を５４０ｎｍでの光学密度（ＯＤ）によって評価する。

【0040】

ネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキスのメラニン生成に対する影響の試験方法は、メラノサイト及びケラチノサイトをネオピクロリザスクロフラリフロラ根エキス又はＬ－チロシンと１０日間共培養し、０日目、３日目、７日目に酸化ストレスを測定し、つまり、２５０ｕｍＨ_２Ｏ_２で２時間処理し、４０５ｎｍ（ｎ＝３）での光学密度（ＯＤ）によって細胞のメラニン含有量を評価する。

【0041】

本発明において、ヨーロッパカラマツエキスは、白髪におけるメラニンの生成を刺激し、図８に示すように、インビトロ試験の結果は、３日間以内に毛包におけるメラニン生成が６６％と大幅に増加したことを示した。

【0042】

ヨーロッパカラマツエキスのインビトロ試験方法は、発毛初期の毛包を濃度の異なるヨーロッパカラマツエキスで７２時間処理し、Ｆｏｎｔａｎａ Ｍａｓｓｏｎ染色法と画像解析法を用いてメラニン生成を評価する。

【0043】

一、白髪におけるメラニン生成を測定する生体外実験
図９及び１０に示すように、２名のドナーからの発毛初期の白髪の毛包を、実施例１の黒髪再生組成物を１％含む黒髪再生エッセンスで７２時間処理するか又は処理せず、Ｆｏｎｔａｎａ Ｍａｓｓｏｎ染色法（図２の黒色）及び画像分析法を用いて評価し、毛包に入ったメラニン含有量を定量化した。
結果：１％の黒髪再生組成物により、毛包におけるメラニン生成が３日間以内に１５％と大幅に増加した。

【0044】

二、白髪の割合を減らす実験
第１群のボランティアはプラセボを、第２群のボランティアは実施例１の黒髪再生組成物を１％含む黒髪再生エッセンスを１日１回、４か月間使用して白髪の割合を評価した。
結果：図１１に示すように、４か月後、黒髪再生組成物により白髪の割合が１７％と大幅に減少され、プラセボ群の２．１倍であった。図１２～図１６はヒト試験ボランティアの効果を示す図であり、図１２は２４歳の女性、図１３は４６歳の男性、図１４は３５歳の男性、図１５は４４歳の女性である。

【0045】

三、白髪密度の定量分析実験
第１群のボランティアはプラセボを、第２群のボランティアは黒髪再生組成物を１％含むヘアコンディショナーを１日１回、４か月間使用して白髪の割合を評価した。
結果：図１７及び図１８に示すように、４か月後、黒髪再生組成物により１平方センチメートルあたりの白髪の数が大幅に減少され、平均で６．８本減少され、プラセボ群の３．４倍であった。

【0046】

上記の実施例は、本発明のさまざまな実施過程について詳しく説明したが、本発明の実施形態はこれらに限定されるものではなく、当業者であれば、本発明で開示された内容に基づいて本発明の目的を達成することができる。本発明の思想に基づいてなされた改良や変形はすべて本発明の保護範囲に属し、具体的な保護範囲は特許請求の範囲に記載されるものとする。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【国際調査報告】