特表 2025-500228 肥満の治療における使用のためのＩＬ－４由来ペプチド

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2025-01-09

(54)【発明の名称】肥満の治療における使用のためのＩＬ－４由来ペプチド

(51)【国際特許分類】

   C07K 14/54 20060101AFI20241226BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 38/20 20060101ALI20241226BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20241226BHJP

【ＦＩ】

C07K14/54 ZNA

A61P3/04

A61K38/20

C07K19/00

【審査請求】有

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2024535790

(86)(22)【出願日】2023-01-04

(85)【翻訳文提出日】2024-07-17

(86)【国際出願番号】 EP2023050109

(87)【国際公開番号】W WO2023131619

(87)【国際公開日】2023-07-13

(31)【優先権主張番号】22150293.3

(32)【優先日】2022-01-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】524225143

【氏名又は名称】セロダス アンパーツセルスケープ

【氏名又は名称原語表記】ＳＥＲＯＤＵＳ ＡＰＳ

(74)【代理人】

【識別番号】100147485

【弁理士】

【氏名又は名称】杉村 憲司

(74)【代理人】

【識別番号】230118913

【弁護士】

【氏名又は名称】杉村 光嗣

(74)【代理人】

【識別番号】100173473

【弁理士】

【氏名又は名称】高井良 克己

(72)【発明者】

【氏名】エヴァ スタイネス

【テーマコード（参考）】

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA02

4C084AA07

4C084BA18

4C084BA50

4C084CA59

4C084DA16

4C084NA14

4C084ZA701

4C084ZA702

4H045AA10

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA02

4H045EA20

(57)【要約】

本開示は、肥満の治療のためのインターロイキン－４（ＩＬ－４）に由来するペプチドに関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

肥満の治療における使用のための、ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩であって、前記ペプチドが、２つの断片を含む二量体であり、各断片が、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_９４に由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基（すなわち、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣ）からなる断片、又は１、２、３、又は４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントであり、各断片が、リンカーを介して共有結合的に連結している、ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩。

【請求項2】

各断片が、１４～１８個の連続するアミノ酸残基、好ましくは１５～１７個の連続するアミノ酸残基、最も好ましくは１６個の連続するアミノ酸残基からなる、請求項１に記載の使用のためのペプチド。

【請求項3】

前記アミノ酸残基が、アミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する、前出請求項のいずれか一項に記載の使用のためのペプチド。

【請求項4】

前記ペプチドが、Ｉ型ＩＬ－４ＲについてのアゴニストかつＩＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアンタゴニストである、前出請求項のいずれかに記載のペプチド。

【請求項5】

前記ペプチドの少なくとも一部が、α－ヘリックスを形成する、前出請求項のいずれかに記載のペプチド。

【請求項6】

前記ペプチドが、２つの断片を含む二量体であり、各断片が、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_９４に由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基（すなわち、ＩＬ－４のα－Ｃヘリックス）からなる断片、又は１、２、３、又は４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントであり、各断片が、リンカーを介して共有結合的に連結され、前記ペプチドが、Ｉ型ＩＬ－４ＲについてのアゴニストかつＩＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアンタゴニストであり、さらに、前記ペプチドの少なくとも一部が、α－ヘリックスを形成する、請求項１に記載の使用のためのペプチド。

【請求項7】

前記ペプチドが、式（Ｉ）：

【化1】

の構造を有するか、又は、各ペプチド断片において１又は２個の置換を有するそのバリアントである、前出請求項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【請求項8】

前記ペプチドが、式（ＩＩ）：

【化2】

の構造を有するか、又は、各ペプチド断片において１又は２個の置換を有するそのバリアントである、前出請求項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、肥満の治療のためのＩＬ－４に由来するペプチドに関する。特に、本開示は、肥満の治療における使用のための、配列番号１のアミノ酸配列又はそのバリアントを含むペプチドに関する。

【背景技術】

【0002】

（背景）
過体重及び肥満は、健康に対するリスクを提示する異常な又は過剰な脂肪蓄積として定義される。ボディマスインデックス（ＢＭＩ）は、体重及び身長に基づいて計算される。２５を超えるＢＭＩは過体重とみなされ、３０を超えるＢＭＩは肥満とみなされる。肥満は流行の大きさを有し、過去５０年間にパンデミックレベルに達した。世界中の肥満は、１９７５年以来ほぼ３倍になっている。２０１６年には、１８歳以上の１９億人以上の成人が過体重であった。これらのうち６億５０００万人以上が肥満であった。５～１９歳の３億４０００万人を超える小児及び青年は、２０１６年に過体重又は肥満であった（Ｒｏｇｌｉｃ， Ｇ． ２０１６）。

【0003】

過体重及び肥満の両方は、２型糖尿病、心臓病、脳卒中、及びいくつかのタイプの癌を含む、米国における罹患及び死亡の主要原因と関連する全身性疾患である（Ｒｏｇｌｉｃ， Ｇ． ２０１６）。したがって、肥満は精神的健康状態の悪化、生活の質の低下にも関連し、平均余命の低下に寄与するので、重篤な状態である（Ａｂｄｅｌａａｌ ２０１７）。

【0004】

いくつかの薬剤が、肥満の治療のために承認されている。一例は、商品名Ｗｅｇｏｖｙで販売されているセマグルチドである。セマグルチドは、２型糖尿病の治療のために最初に開発され、承認されたグルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）アゴニストである。ＧＬＰ－１アゴニストの最も注目すべき効果は、膵臓β細胞上に発現されるＧＬＰ－１受容体に結合することによって、グルコース依存的にインスリン分泌を促進するそれらの能力である。ほとんど重要なことに、ＧＬＰ－１アゴニストは、空腹時レベルを超える血糖値でグルカゴン分泌を阻害することが示されている。重要なことに、これは、低血糖に対するグルカゴン応答に影響を及ぼさず、ＧＬＰ－１アゴニストを、インスリンと比較して非常に低い低血糖の発生率を有する安全な抗糖尿病薬にする。

【0005】

２０２１年６月、セマグルチドは少なくとも１つの体重関連状態（例えば、高血圧、２型糖尿病、又は高コレステロール）を有する肥満又は過体重の成人における慢性体重管理について米国食品医薬品局によって承認された。抗肥満薬として、ＧＬＰ－１アゴニストは視床下部のＧＬＰ－１受容体に結合することによって作用し、それによって食欲を抑制する。さらに、ＧＬＰ－１アゴニストは胃のＧＬＰ－１受容体に結合し、胃内容排出、酸分泌、及び運動性を阻害し、これらは集合的に満腹感を促進する。結果として、ＧＬＰ－１受容体アゴニストで処理された糖尿病対象はまた、しばしば、それらの血糖レベルの制御に加えて、有益な重量減少を経験する。しかしながら、当技術分野では、肥満の新規かつより効果的な治療が依然として必要とされている。

【0006】

ヒトインターロイキン－４（ＩＬ－４）は、下記アミノ酸配列（シグナルペプチド、すなわちアミノ酸ＡＡ_１－２４を含む）を有する抗炎症性サイトカインである。
ＭＧＬＴＳＱＬＬＰＰ ＬＦＦＬＬＡＣＡＧＮ ＦＶＨＧＨＫＣＤＩＴ ＬＱＥＩＩＫＴＬＮＳ ＬＴＥＱＫＴＬＣＴＥ ＬＴＶＴＤＩＦＡＡＳ ＫＮＴＴＥＫＥＴＦＣ ＲＡＡＴＶＬＲＱＦＹ ＳＨＨＥＫＤＴＲＣＬ ＧＡＴＡＱＱＦＨＲＨ ＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬ ＤＲＮＬＷＧＬＡＧＬ ＮＳＣＰＶＫＥＡＮＱ ＳＴＬＥＮＦＬＥＲＬ ＫＴＩＭＲＥＫＹＳＫ ＣＳＳ （ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ － Ｐ０５１１２；配列番号３）

【0007】

成熟ＩＬ－４は、１２９個のアミノ酸残基を有し、下記アミノ酸配列を有する３つの分子内ジスルフィド結合（Ｃｙｓ３－Ｃｙｓ１２７； Ｃｙｓ４６－Ｃｙｓ９９； Ｃｙｓ２４－Ｃｙｓ６５）を含有する。
ＨＫＣＤＩＴＬＱＥＩ ＩＫＴＬＮＳＬＴＥＱ ＫＴＬＣＴＥＬＴＶＴ ＤＩＦＡＡＳＫＮＴＴ ＥＫＥＴＦＣＲＡＡＴ ＶＬＲＱＦＹＳＨＨＥ ＫＤＴＲＣＬＧＡＴＡ ＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩ ＲＦＬＫＲＬＤＲＮＬ ＷＧＬＡＧＬＮＳＣＰ ＶＫＥＡＮＱＳＴＬＥ ＮＦＬＥＲＬＫＴＩＭ ＲＥＫＹＳＫＣＳＳ （配列番号４）

【0008】

他のサイトカインと同様に、ＩＬ－４は、細胞表面上の受容体に結合することによってその生物学的活性を発揮する。ＩＬ－４の２つの受容体型が知られており、Ｉ型ＩＬ－４Ｒ及びＩＩ型ＩＬ－４Ｒと称される。Ｉ型ＩＬ－４ＲはＩＬ－４Ｒα鎖及びＩＬ－２Ｒγ（γ_ｃ）鎖の２つの成分から構成され、一方、ＩＩ型ＩＬ－４ＲはＩＬ－４Ｒα及びＩＬ－１３α１鎖から構成される。ＩＬ－４は、活性化されたＢ細胞及びＴ細胞増殖の刺激、ならびにＢ細胞の形質細胞への分化を含む、多くの生物学的役割を有する。血管外組織におけるＩＬ－４の存在はＭ２細胞へのマクロファージの代替活性化を促進し、Ｍ１細胞へのマクロファージの古典的活性化を阻害し、病理学的炎症の減少をもたらす。ＩＬ－４は主にＣＤ４＋ Ｔ細胞（Ｔｈ２細胞）によって分泌され、これは、ヒト免疫応答を調節するために、特定のサイトカインヒビター及び可溶性サイトカイン受容体の協調を制御し、炎症促進活性と抗炎症活性との間の適切なバランスを維持することによって、急性及び慢性炎症の病因において重要な役割を果たす。したがって、ＩＬ－４シグナル伝達の変調は、自己免疫疾患及び炎症性疾患において大いに研究されている。最近、ＩＬ－４は、ホルモン感受性リパーゼ（ＨＳＬ）活性の増強を介して脂肪分解を促進することが示された（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｐｏｒｔｓ， ２０１９ ９：１１９７４参照）。

【0009】

ＩＬ－４模倣体として作用するＩＬ－４に由来する小ペプチド断片は以前に、マクロファージからのＴＮＦ－α放出を阻害し、一次ニューロンからの神経突起形成応答を誘導することが示されている（国際公開第２０１０／０５４６６７号参照）。１つのそのような例は、アミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）を有するペプチドである。このペプチドはＩＬ－４受容体に結合し、マクロファージ活性化を阻害することができ、それによって炎症反応の発症を防止することができ、したがって、関節リウマチ、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、及びハンチントン病などの多くの炎症性疾患及び自己免疫疾患において有用であると提案されている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

（要旨）
本発明はＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１を含むペプチドを投与されたマウス（すなわち、処理群）が、プラセボ群と比較して体重増加に対する感受性が低いという驚くべき観察に関する。したがって、本発明はＩＬ－４に由来し、ＩＬ－４模倣物として作用するペプチドが、以前は抗炎症効果と関連していたにもかかわらず、肥満の治療に使用され得るという認識に関する。したがって、ＩＬ－４に由来し、ＩＬ－４模倣体として作用するペプチド断片は配列番号１のペプチド断片としての新規な作用様式を有する抗肥満薬の新世代として有望な可能性を有し得ることが、Ｉ型ＩＬ－４Ｒについての高親和性部分的アゴニストかつＩＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアンタゴニストであることが示されている（Ｋｌｅｍｅｎｔｉｖ ２０１３）。

【課題を解決するための手段】

【0011】

第１の態様では、本開示が肥満の治療における使用のためのペプチド又はその薬学的に許容可能な塩であって、１３～１９個のアミノ酸残基を含み、さらに、アミノ酸配列ＡＱＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）を有する断片、又は１、２、又は３個のアミノ酸置換及び／又は欠失を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含むペプチド又はその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0012】

第２の態様では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチド又はその薬学的に許容可能な塩に関し、前記ペプチドは第１の態様による２つ以上の共有結合したペプチド断片を含む。

【0013】

第３の態様では、本開示が肥満の治療における使用のための医薬組成物であって、第１及び／又は第２の態様によるペプチドを含む医薬組成物に関する。

【0014】

第４の態様では本開示が肥満の治療のための方法に関し、この方法は本明細書に開示される態様及び実施形態のいずれかに従って、有効量のペプチド又は医薬組成物を、それを必要とする個々に投与することを含む。

【0015】

（定義及び略称）
「個体」という用語は、脊椎動物、哺乳動物種の特定のメンバー、好ましくはヒトを含む霊長類を指す。本明細書で使用される場合、「対象」及び「個体」は、互換的に使用され得る。

【0016】

「それを必要とする個体」は、本開示から恩恵を発明個体を指す。一実施形態では、それを必要とする個体が肥満（ＢＭＩ＞３０超）であり、好ましくは少なくとも１つの体重関連状態（例えば、高血圧、２型糖尿病、又は高コレステロール）を有する個体である。別の実施形態では、それを必要とする個体が過体重（ＢＭＩ＞２５超）、好ましくは少なくとも１つの体重関連状態（例えば、高血圧、２型糖尿病、又は高コレステロール）を有する個体である。したがって、本文脈において、「肥満」は好ましくは少なくとも１つの体重関連状態（例えば、高血圧、２型糖尿病、又は高コレステロール）を伴う過体重（ＢＭＩ＞２５超）を含むと広い意味で理解されるべきである。

【0017】

ペプチドの「有効量」は、１回の投与で、又は例えば２４時間以内に有効量を合計する量の複数回の投与を介して投与することができる。それは、適切な量及び投与のタイミングを決定するための標準的な臨床手順を用いて決定することができる。「有効量」は、治療する医療専門家及び／又は個々の側における経験的及び／又は個別化（ケースバイケース）判定の結果であり得ることが理解される。

【0018】

本発明の文脈において、本発明がいくつかの連続するアミノ酸残基がアミノ酸領域、例えば、インターロイキン－４（配列番号４）のＡＡ_６８－ＡＡ_９７に由来するペプチド断片を指す場合、インターロイキン－４（配列番号４）のそれぞれの領域から選択されるアミノ酸の小ストレッチ（すなわち、連続する配列）として理解されるべきである。したがって、サイトカインＩＬ－４（配列番号４）は、本発明の一部を形成しない。例えば、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_８９ に由来する１６個の連続するアミノ酸残基を含むペプチド断片は、以下に太字で強調された連続する配列から得ることができる。

【0019】

ＨＫＣＤＩＴＬＱＥＩ ＩＫＴＬＮＳＬＴＥＱ ＫＴＬＣＴＥＬＴＶＴ ＤＩＦＡＡＳＫＮＴＴ ＥＫＥＴＦＣＲＡＡＴ ＶＬＲＱＦＹＳＨＨＥ ＫＤＴＲＣＬＧＡＴＡ ＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩ ＲＦＬＫＲＬＤＲＮＬ ＷＧＬＡＧＬＮＳＣＰ ＶＫＥＡＮＱＳＴＬＥ ＮＦＬＥＲＬＫＴＩＭ ＲＥＫＹＳＫＣＳＳ （配列番号４）。

【0020】

したがって、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_８９ に由来する１６個の連続するアミノ酸残基は、断片／配列ＡＴＡＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬ；ＴＡＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫ；ＡＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲ、ＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬ、ＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬＤ、ＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬＤＲ、ＨＲＨＫＱＬＩ ＲＦＬＫＲＬＤＲＮ、及びＲＨＫＱＬＩ ＲＦＬＫＲＬＤＲＮＬを含む。ペプチドは、インターロイキン－４（配列番号４）に由来する断片／配列のバリアントであってもよい。非限定的な例として、ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）は断片／配列ＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬのバリアントであり、ここで、末端アミノ酸Ｑ及びＬはＡで置換されている（すなわち、ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）は、２つのアミノ酸置換を有する）。したがって、本文脈において、本開示が例えば、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７に由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基の断片を含むペプチドを指す場合、連続するアミノ酸の数は１３個未満であってはならず、単一のアミノ酸ストレッチ（すなわち、存在する場合、いかなるリンカーも考慮しない断片）において１９個を超えてはならないが、ペプチドはリンカー（スペーサー）を介して連結された２つ以上のそのような断片を含み得ることが理解されるべきである。非限定的な例として、式（Ｉ）の以下のペプチドは、そのＣ末端でリンカーを介して連結された、各１６個の連続するアミノ酸の２つのペプチド断片を含む。

【化1】

【0021】

ペプチド断片はまた、ペプチドの薬物動態学的特性を変化させるために脂質化され得る。

【0022】

本明細書で使用される「配列同一性」は、比較される２つの異なる配列間で正確に一致するアミノ酸残基の数である。バリアントが１０個のアミノ酸残基を有する配列と９０％同一である場合、バリアントは、１つのアミノ酸置換によって配列と異なり得る。

【0023】

本明細書で使用される「治療する」、「治療」、及び「療法」という用語は、治癒的療法、予防的療法、予防的療法、又は改善的療法を同等に指す。この用語は有益な又は所望の生理学的結果を得るためのアプローチを含み、これは、例えば、体重減少又は脂肪割合の減少など、臨床的に確立され得る。

【0024】

「共有結合した」という用語は、リンカー又はスペーサーを介して互いに共有結合した、本開示による少なくとも２つのペプチド／断片として理解されるべきである。共有結合したペプチドは、同じ配列又は異なる配列を有し得る。様々なタイプのリンカー（スペーサー）を使用して、ペプチドを一緒に連結することができ、例えば、ペプチドデンドリマー、融合ペプチド／タンパク質、又はハイブリッドペプチドについて当技術分野で一般に知られているものを連結することができる。例えば、リンカー（スペーサー）はペプチドリンカー、例えば、本明細書に例示されるようなリジン－ベータアラニン、単一アミノ酸、例えばリジン、又はアミノ酸の小ストレッチであり得る（例えば、Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ． ２０１３ Ｏｃｔ １５； ６５（１０）： １３５７-１３６９を参照）。リンカーはまた、非ペプチドリンカー、例えばＰＥＧ鎖、又はエチレンジアミンなどのジアミンであってもよい。当業者は、使用されるリンカー（スペーサー）が本発明の概念から逸脱することなく、他のリンカー（スペーサー）に変更され得ることを理解するのであろう。最も好ましくは、ペプチド／断片が本明細書に例示されるように、それらのＮ端末装置又はＣ端末装置、最も好ましくはそれらのＣ端末装置を介して共有結合される。最も好ましくは、２つのペプチド／断片が本明細書に例示されるように、リジンによって連結される。リジンリンカー部分のベータアラニンは合成中の立体障害を低減するために、ＳＰＰＳにおいて使用されるリンクリンクリンカー間のスペーサーとして作用するにすぎない。したがって、ベータアラニン部分は、ＳＰＰＳの技術分野で使用される他の一般的なスペーサと置き換えられてもよい。リジンに基づく様々な分岐デンドリマーは例えば、（Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ， Ｖｏｌ ８５， ｐｐ． ５４０９－５４１３， Ａｕｇｕｓｔ １９８８）に記載されているように得ることができる。本明細書に開示される二量体は、単量体よりも良好に機能することが見出された。

【0025】

「バリアント」という用語は、ペプチド配列が例えば、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって修飾され得ることを意味する。Ｌ－アミノ酸及びＤ－アミノ酸の両方が使用されてもよく、非天然アミノ酸、好ましくはＬ－アミノ酸が使用される。本文脈において、１つ、２つ、又は３つのアミノ酸置換及び／又は欠失を有するバリアントに言及する場合、置換及び／又は欠失の合計は最大３つことを理解されたい。一例として、バリアントは例えば、２つの置換及び１つの欠失（合計＝３）を有し得る。同様に、バリアントは３つの置換及びゼロ削除（合計＝３）を有してもよく、又はバリアントは３つの削除及びゼロ置換（合計＝３）を有する可能性がある。一例として、本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドが例えば１３アミノ酸残基を有し、さらに前記ペプチドがＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡのバリアント（配列番号１、すなわち１６アミノ酸）を含む場合、それは３つの欠失（１６－３＝１３アミノ酸）を有するバリアントでなければならないことになる。好ましくは、バリアントにおける置換が保存的アミノ酸に対する保存的置換である。保存的アミノ酸の群は以下のとおりである。
Ａ、Ｇ（中性、弱疎水性）、
Ｑ、Ｎ、Ｓ、Ｔ（親水性、非荷電）
Ｅ、Ｄ（親水性、酸性）
Ｈ、Ｋ、Ｒ（親水性、塩基性）
Ａ、Ｌ、Ｐ、Ｉ、Ｖ、Ｍ、Ｆ、Ｙ、Ｗ（疎水性、芳香族）
Ｃ（架橋形成）

【0026】

保存的置換は本開示による使用のために、ペプチドの任意の位置に導入され得る。しかしながら、本開示による使用のために、ペプチドの任意の位置に非保存的置換を導入することも望ましい場合がある。

【0027】

本開示のペプチド配列は、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）などの任意の従来の合成方法によって調製することができる。

【0028】

本発明によるペプチドは、薬学的に許容される塩の形成であってもよい。したがって、薬学的に許容される塩は、ペプチドの配合において一般的に使用される任意の塩を含むことが意図される。このような塩としては、酸付加塩及び塩基性塩の両方が挙げられ、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， １７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎに見出され得る。

【図面の簡単な説明】

【0029】

図面の簡単な説明

【図1A】図１Ａは、αへリックスＣ（ＡＡ_７１－ＡＡ_９４）の一部を構成する領域ＡＡ_７１－ＡＡ_８６に示されるアミノ酸残基を有するＩＬ－４（ＰＤＢ識別子：１ＣＹＬ）の結晶構造を示す。

【図1B】図１Ｂは、αへリックスＣ（ＡＡ_７１－ＡＡ_９４）の一部を構成する領域ＡＡ_７１－ＡＡ_８６に示されるアミノ酸残基を有するＩＬ－４（ＰＤＢ識別子：１ＣＹＬ）の結晶構造を示す。

【発明を実施するための形態】

【0030】

（詳細な説明）
本発明はＩＬ－４に由来する小さなペプチド断片、より具体的には、抗炎症効果に関連するのみであったＩＬ－４のα－ヘリックスＣ（すなわち、ＩＬ－４Ｒ Ｉ型アゴニスト）が投与時に動物の体重を有意に減少させることが見出されたという驚くべき発見に関する。

【0031】

したがって、本開示は、肥満の治療における使用のためのペプチドであって、ＩＬ－４受容体Ｉ型アゴニスト、好ましくはＩＬ－４受容体ＩＩ型アンタゴニストであるペプチドに関する。

【0032】

成熟ＩＬ－４は、１２９アミノ酸残基を有し、３つの分子内ジスルフィド結合（Ｃｙｓ３－Ｃｙｓ１２７； Ｃｙｓ４６－Ｃｙｓ９９； Ｃｙｓ２４－Ｃｙｓ６５）を含有する。本明細書の実験の節で使用されるペプチドはリンカー（スペーサ）（すなわち、リジン－ベータアラニン）を介してＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）（すなわち、第２の断片）のアミノ酸配列を有する別のペプチドに共有結合したＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）（すなわち、第１の断片）のアミノ酸配列を有する。配列番号１のペプチドは、配列番号４のアミノ酸ＡＡ_７１－ＡＡ_８６（シグナル配列を含まないＩＬ－４）に由来するペプチドのバリアントである（以下に太字で強調する）。

【0033】

ＨＫＣＤＩＴＬＱＥＩ ＩＫＴＬＮＳＬＴＥＱ ＫＴＬＣＴＥＬＴＶＴ ＤＩＦＡＡＳＫＮＴＴ ＥＫＥＴＦＣＲＡＡＴ ＶＬＲＱＦＹＳＨＨＥ ＫＤＴＲＣＬＧＡＴＡ ＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩ ＲＦＬＫＲＬＤＲＮＬ ＷＧＬＡＧＬＮＳＣＰ ＶＫＥＡＮＱＳＴＬＥ ＮＦＬＥＲＬＫＴＩＭ ＲＥＫＹＳＫＣＳＳ （配列番号４）

【0034】

配列番号１と配列番号４のアミノ酸ＡＡ_７１ －ＡＡ_８６とのアラインメントから分かるように、配列番号１は、２つのアミノ酸置換を有するこの部位に由来するペプチド断片のバリアントである（太字で強調表示）。

【0035】

ＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬ ＩＬ－４のＡＡ_７１－ＡＡ_８６（配列番号４）
ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ （配列番号１）。

【0036】

配列番号４の領域ＡＡ_７１－ＡＡ_８６は図１Ａ／Ｂの結晶構造に示されるように、ＩＬ－４のαヘリックスＣ（ＡＡ_７１－ＡＡ_９４）の一部を形成する（ＰＤＢ識別子：１ＣＹＬ）。このα－ヘリックスＣはＩＬ－４ Ｒα１の外部ドメイン部分と相互作用し、したがって、α－ヘリックスＣ（ＡＡ_７１ －ＡＡ_９４）に由来するペプチド断片は、配列番号１と同様の結合特徴及び薬理学を有する可能性が高い。言い換えると、ＡＡ_７１－ＡＡ_９４、好ましくは配列番号４のＡＡ_７１－ＡＡ_８６の領域又はその近傍に由来するペプチドは、肥満の治療における使用に適している。α－ヘリックスＣ（ＡＡ_７１－ＡＡ_９４）に由来するペプチド断片は、少なくともアミノ酸配列の一部について、α－ヘリックスを形成し得る。短いペプチドがα－ヘリックスを形成する傾向はＰＲＯＴＥＵＳ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｅｒ等のソフトウェアを使用して予測することができ、又は例えばＸ線結晶学を使用して実験的に決定することができる。分かるように、ＰＲＯＴＥＵＳ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ Ｓｅｒｖｅｒは、太字のＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）で強調されたアミノ酸がα－ヘリックスを形成する高い傾向を有することを予測する（０～９の範囲のスケールにおける信頼スコア９、９が最高信頼度である）。したがって、最も好ましくは、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣ（ＡＡ_７１－ＡＡ_９４）に由来する断片の少なくとも一部がα－ヘリックスを形成する。

【0037】

特に、本発明は、アミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）を有する断片を含むペプチドが本明細書の実験の項に示すように、投与時に動物の体重増加を有意に減少させるという知見に関する。

【0038】

したがって、第１の態様において、本開示は肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは１３～１９個のアミノ酸残基を含み、さらに、前記ペプチドは、アミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）を有する断片、又は１、２、もしくは３個のアミノ酸置換及び／もしくは欠失を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含む。

【0039】

好ましい実施形態では、本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドであって、１４～１８個のアミノ酸残基を含み、さらに、アミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）を有する断片、又は１、２、又は３個のアミノ酸置換及び／又は欠失を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含むペプチドに関する。

【0040】

より好ましい実施形態では、本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドであって、１５～１７個のアミノ酸残基を含み、さらに、アミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）を有する断片、又は１、２、又は３個のアミノ酸置換及び／又は欠失を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含むペプチドに関する。

【0041】

さらにより好ましい実施形態では、本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドであって、１６個のアミノ酸残基を含み、さらに、１、２又は３個のアミノ酸置換を有する配列番号１（ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）又は配列番号１（ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）のバリアントを含むペプチドに関する。

【0042】

別の実施形態では本発明が肥満の治療における使用のためのペプチド又はその薬学的に許容可能な塩に関し、ここで、ペプチドはアミノ酸部位ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４、より好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはインターロイキン－４（配列番号４）のＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基を含むか、又は１、２、３、もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントである。より好ましい実施形態では、ペプチドがアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４、好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６、インターロイキン－４（配列番号４）に由来する１４～１８個の連続するアミノ酸残基を有するか、又は１、２、３、もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントである。より好ましい実施形態では、ペプチドがアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４、好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはインターロイキン－４のＡＡ_７１－ＡＡ_８６（配列番号４）に由来する１５～１７個の連続するアミノ酸残基を有するか、又は１、２、３、もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントである。さらにより好ましい実施形態では、ペプチドがアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４、より好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはインターロイキン－４（配列番号４）のＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する１６個の連続するアミノ酸残基を有するか、又は１、２、３、もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントである。上述の実施形態では、ペプチドがアミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）、又は１つ又は２つの置換を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含むことが非常に好ましい。

【0043】

上述の実施形態のいずれかにおいて、バリアントは、好ましくは２つのアミノ酸置換及び／又は欠失、さらにより好ましくは１つのアミノ酸置換又は欠失を有する。

【0044】

本発明による使用のためのペプチドは、Ｃ末端（－ＣＯＮＨ_２）でアミド化されていてもよく、遊離カルボン酸（－ＣＯＯＨ）、又はメチルエステル（－ＣＯＯＭｅ）などの別の翻訳後修飾を有していてもよい。本発明によるペプチドは、遊離アミン（－ＮＨ_２）、Ｎ－アシル化（－ＮＨＣＯＲ）、Ｎ－メチル化（－ＮＨＣＨ_３又は－Ｎ（ＣＨ_３）_２）、又はＮ末端で脱アミノ化されていてもよい。ペプチドはまた、ペプチドのＰＫ特性を変化させるために、例えば、Ｎ端末装置及び／又は１つもしくは複数のリジン残基で脂質化され得る。

【0045】

したがって、本開示の一実施形態では、Ｃ末端アミノ酸が遊離カルボン酸（「－ＣＯＯＨ」）として存在する。別の実施形態において、Ｃ末端アミノ酸は、アミド化誘導体（「－ＣＯＮＨ_２」）である。別の実施形態では、Ｎ末端アミノ酸が遊離アミノ基（「ＮＨ_２」）を含む。別の実施形態において、Ｎ末端アミノ酸は、アセチル化誘導体（ＣＯＣＨ_３）である。最も好ましくは、Ｃ末端がＣ末端を介してリンカーを介して別のペプチド／断片に連結されていない限り、アミド化されている（「－ＣＯＮＨ_２」）。最も好ましくは、Ｎ端末装置は遊離アミノ基（「ＮＨ_２」）を含む。

【0046】

非常に好ましい実施形態では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは１６個のアミノ酸残基を含み、さらに、前記ペプチドは配列番号１の断片（ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）を含む。配列番号１が１６個のアミノ酸を有するという事実を考慮すると、ペプチドは例えば、脂質付加され得、及び／又は当技術分野で一般に使用される翻訳後修飾を含み得ることが、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という文言から理解されるべきである。

【0047】

別の非常に好ましい実施形態では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは１、２又は３個のアミノ酸置換を有する配列番号１（ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）又は配列番号１のバリアント（ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）からなる。

【0048】

さらに非常に好ましい実施形態では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドはＡｃ－ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号２）からなるペプチドである。

【0049】

最も好ましい実施形態では、本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドであって、ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）からなるペプチドであるペプチドに関する。

【0050】

本発明によるペプチドはＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアゴニストであり、好ましくはＩＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアンタゴニストである。アゴニストは、スーパーアゴニスト、完全アゴニスト又は部分的アゴニストのいずれかであり得る。

【0051】

本発明のペプチドは、二量体、三量体、又は四量体などの多量体の一部を形成し得る。本開示のペプチドを組み込んだ多量体、例えばペプチドデンドリマーも使用することができる。最も好ましくは、ペプチドが単量体又は二量体、最も好ましくは二量体の形成である。本開示によるペプチドは融合ペプチド又はタンパク質のために当技術分野で一般に使用されるものなどの各種リンカー（スペーサー）を介してペプチドを共有結合させることによって、共有結合して多量体（例えば、二量体）を形成することができる。

【0052】

本開示の第２の態様は肥満の治療における使用のためのペプチド又はその薬学的に許容可能な塩に関し、前記ペプチドは、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣに由来する２つ以上の共有結合したペプチド断片を含む。

【0053】

したがって、第２の態様では、本発明が肥満の治療における使用のためのペプチド又はその薬学的に許容される塩に関し、前記ペプチドは２つ以上の共有結合した断片を含み、それぞれの断片はアミノ酸部位ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはＡＡ_６８－ＡＡ_８９、より好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４（すなわち、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣ）、さらにより好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６のインターロイキン－４（配列番号４）、又は１、２、３もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントに由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基からなる。第２の態様の好ましい実施形態において、各断片は、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはＡＡ_６８－ＡＡ_８９、より好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４、さらにより好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する１４～１８個の連続するアミノ酸残基からなるか、又は１、２、３もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントである。第２の態様のより好ましい実施形態において、各断片は、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはＡＡ_６８－ＡＡ_８９、より好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４、さらにより好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する１５～１７個の連続するアミノ酸残基からなるか、又は１、２、３もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントである。第２の態様のさらにより好ましい実施形態では、各断片がインターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_８９、より好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_９４、さらにより好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する１６個の連続するアミノ酸残基からなるか、又は１、２、３もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントである。第２の態様の上述の実施形態では、各断片が１つ又は２つの置換を有するアミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）、又はＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡのバリアント（配列番号１）を含むことが非常に好ましい。最も好ましくは、共有結合した断片は同一である。最も好ましくは、ペプチドは二量体（すなわち、２つの共有結合した断片）である。

【0054】

第２の態様の好ましい実施形態では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドであって、前記ペプチドは２つ以上の共有結合した断片を含み、各断片は１３～１９個のアミノ酸残基からなり、さらに、前記ペプチドはアミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）、又は１つ、２つ、又は３つのアミノ酸置換及び／又は欠失を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含む、ペプチドに関する。

【0055】

第２の態様のより好ましい実施形態では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは２つ以上の共有結合した断片を含み、各断片は１４～１８個のアミノ酸残基からなり、さらに、各断片はアミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）、又は１つ、２つ、もしくは３つのアミノ酸置換及び／もしくは欠失を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含む。

【0056】

第２の態様のさらにより好ましい実施形態では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは２つ以上の共有結合した断片を含み、各断片は１５～１７個のアミノ酸残基からなり、さらに、各断片はアミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）、又は１つ、２つ、又は３つのアミノ酸置換及び／又は欠失を有するＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）のバリアントを含む。

【0057】

第２の態様のさらにより好ましい実施形態では本開示が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは２つ以上の共有結合した断片を含み、各断片は１６個のアミノ酸残基からなり、さらに、前記ペプチドは１、２、又は３個のアミノ酸置換を有する配列番号１（ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）又は配列番号１のバリアント（ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）を含む。

【0058】

第２の態様の上述の実施形態のいずれかにおいて、バリアントは、好ましくは２つのアミノ酸置換及び／又は欠失、さらにより好ましくは１つのアミノ酸置換又は欠失を有する。第２の態様の上述の実施形態のいずれかにおいて、ペプチドは最も好ましくは２つの共有結合した断片（すなわち、二量体）を含み、各断片は、同じ配列からなる。

【0059】

第２の態様の最も好ましい実施形態では、本発明は、肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは、式（Ｉ）：

【化2】

の構造を有するか、又は、各ペプチド断片において１又は２個の置換を有するそのバリアントである。

【0060】

式（Ｉ）の二量体ペプチド中の配列番号１の各断片（すなわち、ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ）は、それらのＣ末端でリンカーを介して共有結合的に連結している。

【0061】

第２の態様の別の最も好ましい実施形態では本発明が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは以下の構造（化合物Ａ）に示されるリンカー（リジン－ベータアラニン）を介して連結された配列番号１の二量体である：

【化3】

【0062】

第２の態様の別の実施形態では本発明が肥満の治療における使用のためのペプチドに関し、前記ペプチドは配列番号１及び／もしくは配列番号２の４つのコピーを含む四量体デンドリマー、又は１、２、もしくは３つのアミノ酸置換を含むそのバリアントの一部を形成する。別の好ましい実施形態では、ペプチドが配列番号１の２つのコピーを含む二量体デンドリマー、又は配列番号２の１つ、２つ、もしくは３つのアミノ酸置換を含むそのバリアント、又は配列番号２の２つのコピー、又は１つ、２つ、もしくは３つのアミノ酸置換を含むそのバリアントである。別の実施形態では、ペプチドが４コピーの配列番号１を含む四量体デンドリマー、又は１、２、もしくは３個のアミノ酸置換を含むそのバリアント、又は４コピーの配列番号２、又は１、２、もしくは３個のアミノ酸置換を含むそのバリアントである。

【0063】

第３の態様では本開示が肥満の治療における使用のための医薬組成物に関し、前記医薬組成物は本明細書に開示される態様及び実施形態による１つ又は複数のペプチドを含む。薬学的組成物は、許容される薬学的担体、及び場合により１つ以上の賦形剤を含み得る。医薬組成物（すなわち、製剤）は投与前に溶解することを意図した錠剤、丸剤、カプセル剤、乳剤、懸濁剤、徐放性製剤、溶液、又は凍結乾燥粉末を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、製剤は、徐放性を提供するデポー製剤であってもよい。ポリペプチドの製剤ならびに化学的及び／又は代謝的安定性の選択に応じて、異なる投与経路を使用してもよいことを理解されたい。そのような投与経路には経口投与、非経口投与（静脈内（ＩＶ）、皮下（ＳＣ）、皮内（ＩＤ）及び筋肉内（ＩＭ））、又は吸入が含まれ得るが、これらに限定されない。本発明の好ましい実施形態では、投与経路は非経口投与である。さらにより好ましい実施形態では、投与経路は皮下である。

【0064】

第４の態様では、本開示が肥満の治療のための方法であって、本明細書に開示される態様及び実施形態のいずれかに従って、有効量のペプチドを、それを必要とする個々に投与することを含む方法に関する。

【実施例】

【0065】

実施例
（実施例１：体重に対するＩＬ－４由来ペプチドの効果）
（材料及び方法）
（動物）
３０匹の雌マウス（ＢＫＳ．Ｃｇ－Ｄｏｃｋ７ｍ ＋／＋ Ｌｅｐｔｉｎ ｄｂ／ｄｂ ＢＬＫＳ、５週齢）をデンマークのＧｕｂｒａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ動物ユニットに移した。馴化期間及び試験期間を通して、動物は、食物及び水を自由に摂取できる、光、温度、及び湿度を制御した部屋に収容した。すべての動物実験は、実験動物のケア及び使用に関する国際的に認められた原理に完全に準拠したＧｕｂｒａ生命倫理ガイドラインに従って実施した。試験開始時（基準）、１３日目、２７日目、３４日目、４３日目、６０日目及び７７日目（試験終了）に動物の体重を記録した。

【0066】

（化合物）
化合物Ａは、標準的な固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて調製した。化合物Ａは、Ｐｈｌｏｇｏ ＡｐＳ、コペンハーゲン、デンマーク（１０ｍｇ／ｍｌ ｍｉｌｉＱ水で用量処方に希釈した）によって提供された。ベヒクルは、ｍｉｌｉＱ：ＰＢＳ １：５であった。

【0067】

（インビボ手順）
マウスをベヒクル群（ｎ＝１５）及び１０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ（ｎ＝１５）に無作為化した。化合物及びベヒクルを１日１回皮下投与した。２７日目に、用量を５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ（ｎ＝１５）に低下させ、４３日目に、用量を２．５ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ（ｎ＝１５）に低下させた。

【0068】

（結果）
ベヒクルと比較して、試験した化合物Ａは、化合物Ａを受けた処理群において重量を有意に減少させた。重量結果（平均値）を以下の表１に示す。

【0069】

【表1】

【0070】

（考察）
興味深いことに、体重増加は、プラセボ群と比較して処理群において有意に小さい。プラセボ群の動物の平均体重は、試験期間中に５．７６ｇ（１２．８％）増加した。対照的に、処理群は、それらの重量を３．５１ｇ（７．８％）増加させただけであった。したがって、化合物Ａ（配列番号１）は、体重増加を減少させた。

【0071】

（配列の概要）
配列番号１
ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ

【0072】

配列番号２
Ａｃ－ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ

【0073】

配列番号３（シグナルペプチド、１５３アミノ酸を含むＩＬ－４ペプチド）
ＭＧＬＴＳＱＬＬＰＰ ＬＦＦＬＬＡＣＡＧＮ ＦＶＨＧＨＫＣＤＩＴ ＬＱＥＩＩＫＴＬＮＳ ＬＴＥＱＫＴＬＣＴＥ ＬＴＶＴＤＩＦＡＡＳ ＫＮＴＴＥＫＥＴＦＣ ＲＡＡＴＶＬＲＱＦＹ ＳＨＨＥＫＤＴＲＣＬ ＧＡＴＡＱＱＦＨＲＨ ＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬ ＤＲＮＬＷＧＬＡＧＬ ＮＳＣＰＶＫＥＡＮＱ ＳＴＬＥＮＦＬＥＲＬ ＫＴＩＭＲＥＫＹＳＫ ＣＳＳ

【0074】

配列番号４（シグナルペプチドを含まないＩＬ－４ペプチド、１２９アミノ酸）
ＨＫＣＤＩＴ ＬＱＥＩＩＫＴＬＮＳ ＬＴＥＱＫＴＬＣＴＥ ＬＴＶＴＤＩＦＡＡＳ ＫＮＴＴＥＫＥＴＦＣ ＲＡＡＴＶＬＲＱＦＹ ＳＨＨＥＫＤＴＲＣＬ ＧＡＴＡＱＱＦＨＲＨ ＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬ ＤＲＮＬＷＧＬＡＧＬ ＮＳＣＰＶＫＥＡＮＱ ＳＴＬＥＮＦＬＥＲＬ ＫＴＩＭＲＥＫＹＳＫ ＣＳＳ

【0075】

（参考文献）
Ｒｏｇｌｉｃ， Ｇ． Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ． （２０１６）． Ｇｌｏｂａｌ ｒｅｐｏｒｔ ｏｎ ｄｉａｂｅｔｅｓ． ＩＳＢＮ ９７８９２４１５６５２５７．
Ａｂｄｅｌａａｌ Ｍ． ｅｔ ａｌ． Ｍｏｒｂｉｄｉｔｙ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｏｂｅｓｉｔｙ． Ａｎｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ． ２０１７ Ａｐｒ；５（７）：１６１， ｐ．１－１２．
Ｋｌｅｍｅｎｔｉｅｖ Ｂ． ｅｔ ａｌ． Ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ａ ｐｅｐｔｉｄｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－４． Ｃｙｔｏｋｉｎｅ， Ｖｏｌ． ６４， Ｎｏ． １， １０．２０１３， ｐ． １１２－２１．

【0076】

（項目）
１． ＡＡ_６８－ＡＡ_９７、好ましくはインターロイキン－４（配列番号４）のＡＡ_６８－ＡＡ_８９に由来する１３～１９隣接のするアミノ酸残基からなる断片、又は１、２、３もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントを含む、肥満の治療における使用のためのペプチド又はその薬学的に許容される塩。

【0077】

２． 前記ペプチドが、好ましくはインターロイキン－４のＡＡ_６８－ＡＡ_８９（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７に由来する１４～１８個の連続するアミノ酸残基からなる断片、又は１、２、３もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントを含む、前記項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【0078】

３． 前記ペプチドが、好ましくはインターロイキン－４のＡＡ_６８－ＡＡ_８９（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７に由来する１５～１７個の連続するアミノ酸残基からなる断片、又は１、２、３、もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントを含む、前記項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【0079】

４． 前記ペプチドが、好ましくはインターロイキン－４のＡＡ_６８－ＡＡ_８９ （配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_６８－ＡＡ_９７に由来する１６個の連続するアミノ酸残基からなる断片、又は１、２、３、もしくは４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントを含む、前記項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【0080】

５． 前記アミノ酸残基がアミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_９４（すなわち、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣ）、好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する、前記項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【0081】

６． 前記ペプチドが、アミノ酸配列ＡＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＡ（配列番号１）からなる断片、又は１つもしくは２つの置換を有するそのバリアントを含む、前記項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【0082】

７． 前記ペプチドが、リンカーを介して共有結合された２つ以上の同一の断片を含む、前記項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【0083】

８． 肥満の治療における使用のためのペプチド又はその薬学的に許容可能な塩であって、前記ペプチドが２つの断片を含む二量体であり、各断片がインターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_９４に由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基からなる、ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩（すなわち、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣ）、又は１、２、３、又は４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントであり、各断片がリンカーを介して共有結合的に連結している、ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩。

【0084】

９． アミノ酸残基がアミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_８９に由来し、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６である、項目８に記載の使用のためのペプチド。

【0085】

１０． 各断片が、１４～１８個の連続するアミノ酸残基、好ましくは１５～１７個の連続するアミノ酸残基、最も好ましくは１６個のアミノ酸残基からなる、項目８～９のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【0086】

１１． ２つの同一の断片を含む、項目８～１０のいずれか一項に記載の使用のためのペプチド。

【0087】

１２． 式（Ｉ）の構造を有する、前項のいずれかに記載の使用のためのペプチド：

【化4】

の構造を有するか、又は、各ペプチド断片において１又は２個の置換を有するそのバリアントである。

【0088】

１３． 前記ペプチドが、Ｉ型ＩＬ－４ＲについてのアゴニストかつＩＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアンタゴニストで前記項のいずれかに記載のペプチド。

【図1A】

【図1B】

【配列表】

2025500228000001.xml

【手続補正書】

【提出日】2023-12-14

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

肥満の治療における使用のための、ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩であって、前記ペプチドが、２つの断片を含む二量体であり、各断片が、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_９４に由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基（すなわち、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣ）からなる断片、又は１、２、３、又は４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントであり、前記２つの断片が、リンカーを介して共有結合的に連結され、前記ペプチドが、Ｉ型ＩＬ－４ＲについてのアゴニストかつＩＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアンタゴニストであり、さらに、前記ペプチドの少なくとも一部が、α－ヘリックスを形成する、ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩。

【請求項2】

各断片が、１４～１８個の連続するアミノ酸残基、好ましくは１５～１７個の連続するアミノ酸残基、最も好ましくは１６個の連続するアミノ酸残基からなる、請求項１に記載の使用のためのペプチド。

【請求項3】

前記アミノ酸残基が、アミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_８９、最も好ましくはＡＡ_７１－ＡＡ_８６に由来する、前出請求項のいずれか一項に記載の使用のためのペプチド。

【請求項4】

前記ペプチドが、式（Ｉ）：

【化1】

の構造を有するか、又は、各ペプチド断片において１又は２個の置換を有するそのバリアントである、前出請求項のいずれかに記載の使用のためのペプチド。

【手続補正書】

【提出日】2024-09-10

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩を含む、肥満の治療における使用のための医薬組成物であって、前記ペプチドが、２つの断片を含む二量体であり、各断片が、インターロイキン－４（配列番号４）のアミノ酸領域ＡＡ_７１－ＡＡ_９４に由来する１３～１９個の連続するアミノ酸残基（すなわち、ＩＬ－４のα－ヘリックスＣ）からなる断片、又は１、２、３、又は４個のアミノ酸置換を有するそのバリアントであり、前記２つの断片が、リンカーを介して共有結合的に連結され、前記ペプチドが、Ｉ型ＩＬ－４ＲについてのアゴニストかつＩＩ型ＩＬ－４Ｒについてのアンタゴニストであり、さらに、前記ペプチドの少なくとも一部が、α－ヘリックスを形成する、医薬組成物。

【請求項2】

各断片が、１４～１８個の連続するアミノ酸残基からなる、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

各断片が、１５～１７個の連続するアミノ酸残基からなる、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項4】

各断片が、１６個の連続するアミノ酸残基からなる、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記アミノ酸残基が、アミノ酸領域ＡＡ _７１ －ＡＡ _８９ に由来する、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項6】

前記アミノ酸残基が、アミノ酸領域ＡＡ _７１ －ＡＡ _８６ に由来する、請求項１～４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項7】

ペプチド又はその薬学的に許容可能な塩を含む、肥満の治療における使用のための医薬組成物であって、前記ペプチドが、２つの断片を含む二量体であり、前記ペプチドが、式（Ｉ）：

【化1】

の構造を有するか、又は、各ペプチド断片において１個の置換を有するそのバリアントである、医薬組成物。

【国際調査報告】