【図1】グルコマンナンスキャフォールドおよびヒト間葉系幹細胞（ｈＭＳＣ）の走査型電子顕微鏡像（表面トポロジー）を示す図である。水の昇華後のグルコマンナンゲルの表面（Ａ）および内部構造（Ｂ）ならびにグルコマンナンスキャフォールドに播種されたｈＭＳＣ（Ｃ、Ｄ）を示している。

【図2】ポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）がｈＭＳＣの接着性に及ぼす影響を示す図である。ＰＬＬはゲル化前のグルコマンナン混合物に添加した。得られたスキャフォールドに対し、ｈＭＳＣは対照と比較して有意に高い接着性を示した（ｐ＜０．０５）。

【図3】図３ａおよび図３ｂは、グルコマンナンスキャフォールド内で培養したｈＭＳＣの生物発光を示す図である。ホタルルシフェラーゼを発現しているｈＭＳＣを対照またはＰＬＬで処理したグルコマンナンスキャフォールドに播種し、１週間ごとに撮影した。対照のスキャフォールド内で培養した細胞では生物発光の強度が時間とともに増大した。一方、グルコマンナンスキャフォールド内で培養したｈＭＳＣは播種した位置に拘束され、生物発光の増大を示さなかった。

【図4】グルコマンナンスキャフォールド内でのｈＭＳＣの組織構造を示す図である。グルコマンナンスキャフォールド内で培養したｈＭＳＣをヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。細胞播種前のグルコマンナンスキャフォールドは全体的に多孔構造［２００〜３００μｍ］を呈した（Ａ）。播種後、細胞は様々な形態を呈し、構造を形成した（Ｂ〜Ｄ）（倍率１０倍）。

【図5】ビメンチンおよびサイトケラチンの発現を示す図である。培養プレート上で培養したすべてのｈＭＳＣでビメンチンが強く発現していた（Ｂ）が、サイトケラチンは発現していなかった（Ａ）。グルコマンナンスキャフォールドに播種した細胞ではビメンチンが発現していた（Ｄ、Ｃはアイソタイプコントロール）。不定形の内腔の周囲に存在する細胞でサイトケラチンが強く発現しており、これらの内腔を覆う平坦な細胞ではビメンチンとサイトケラチンとの両方が発現していた（Ｅ、Ｆ）。

【図6】グルコマンナンスキャフォールドの酵素消化を示す図である。ｒｈＭＳＣを播種したグルコマンナンスキャフォールドを０．５、５．０および５０単位／ｍｌのセルラーゼまたはβ−マンナナーゼで消化し、スキャフォールドから遊離した細胞をトリプシン処理したうえでその数を計測した。セルラーゼとともにインキュベートしたスキャフォールドではすべての濃度で細胞の効率的な遊離が認められた。一方β−マンナナーゼは、高濃度で用いた場合は不十分な数の細胞しか得られなかったのに対し、０．５単位／ｍｌではセルロースと同程度の結果を示した（Ｃ）。遊離した細胞凝集塊を洗浄し、終夜培養した（Ａ）。細胞の増殖が認められた（Ｂ）。倍率は１０倍、インサートは２０倍。

【図7】グルコマンナンスキャフォールドに播種したｈＭＳＣの骨芽細胞への分化を示す図である。ｒｈＭＳＣをグルコマンナンスキャフォールドに播種し、骨芽細胞分化誘導培地の存在下または非存在下で培養したものを、抗ヒトオステオポンチン抗体および抗ヒト骨シアロタンパク質ＩＩ（ＢＳＰ ＩＩ）抗体で染色した。誘導培地を添加したｈＭＳＣではオステオポンチンとＢＳＰ ＩＩとの両方が発現していた。誘導培地を添加しなかった細胞ではＢＳＰ ＩＩが発現を開始していた。Ｖｏｎ Ｋｏｓｓａ染色では誘導培地を添加しなかったスキャフォールドと添加したスキャフォールドの両方に無機質の沈着が認められた。倍率は１０倍。

【図8】グルコマンナンスキャフォールド内でＣＤ３４＋造血細胞と共培養したｈＭＳＣの走査型電子顕微鏡像を示す図である。ｈＭＳＣをグルコマンナンスキャフォールドに播種し、ＣＤ３４＋造血細胞と共培養した。ＣＤ３４＋細胞によるｈＭＳＣへの接着がＳＥＭ像に認められた（Ａ〜Ｄ）。ｈＭＳＣは細孔を「架橋する」性質を示した（Ｂ）。

【図9】加工前および加工後のグルコマンナンスキャフォールドを示す図である。この画像は実施例１の一部であってもよい。ナイフ、生検パンチのうちいずれか一方を用い、ある種の椎骨の一形状（右上）や細胞および培養容器に適合する様々な形状へとグルコマンナンスキャフォールドを加工した。本発明のスキャフォールドが各種の器官系を模した様々な形状に加工しうるという構想を実証したひとつの例をこの図は与えている。

【図10】中和グルコマンナンスキャフォールドとヒト幹細胞とを用いて製造した三次元的な骨状構造体の肉眼写真を示す図である。