特開 2015-110668 アネキシン１結合化合物に関する方法および組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2015-110668(P2015-110668A)

(43)【公開日】2015年6月18日

(54)【発明の名称】アネキシン１結合化合物に関する方法および組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/00 20060101AFI20150522BHJP

   C07K 9/00 20060101ALI20150522BHJP

   C12N 15/09 20060101ALI20150522BHJP

   C12Q 1/04 20060101ALI20150522BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20150522BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20150522BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20150522BHJP

【ＦＩ】

   A61K37/02

   C07K9/00ZNA

   C12N15/00 A

   C12Q1/04

   A61P35/00

   A61P43/00 105

   A61K48/00

【審査請求】有

【請求項の数】1

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

【全頁数】92

(21)【出願番号】特願2015-51656(P2015-51656)

(22)【出願日】2015年3月16日

(62)【分割の表示】特願2012-546245(P2012-546245)の分割

【原出願日】2010年12月23日

(31)【優先権主張番号】61/289,833

(32)【優先日】2009年12月23日

(33)【優先権主張国】US

(71)【出願人】

【識別番号】511090947

【氏名又は名称】サンフォード−バーナム メディカル リサーチ インスティテュート

(71)【出願人】

【識別番号】504300181

【氏名又は名称】国立大学法人浜松医科大学

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(72)【発明者】

【氏名】フクダ ミチコ

(72)【発明者】

【氏名】杉原 一廣

(72)【発明者】

【氏名】金山 尚裕

【テーマコード（参考）】

4B024

4B063

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B024AA01

4B024AA12

4B024AA15

4B024CA01

4B024DA02

4B024DA03

4B024EA04

4B024GA11

4B024HA17

4B063QA01

4B063QA18

4B063QA19

4B063QQ02

4B063QQ03

4B063QQ79

4B063QR48

4B063QR56

4B063QR58

4B063QR59

4B063QR63

4B063QR66

4B063QR67

4B063QR72

4B063QR77

4B063QS07

4B063QS36

4C084AA02

4C084AA13

4C084BA01

4C084BA02

4C084BA17

4C084NA05

4C084NA06

4C084NA07

4C084ZB212

4C084ZB262

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA14

4H045BA15

4H045BA16

4H045BA41

4H045BA55

4H045BA56

4H045BA72

4H045CA40

4H045DA50

4H045EA20

4H045EA51

4H045FA74

(57)【要約】

【課題】アネキシン１結合化合物に関する方法および組成物の提供。
【解決手段】治療剤または検出可能な剤に共有結合的に連結する、アネキシン１結合ペプチドＩＦＬＬＷＱＲを含む結合体が開示される。また、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む組成物が開示される。また、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドをコードする核酸配列を含む単離された核酸が開示される。また、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物を被験体に投与する工程を含む方法が開示される。また、被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、この方法は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを上記被験体に投与する工程を含む、方法が開示される。
【選択図】図１−１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

明細書に記載された発明。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願への相互参照
本願は、２００９年１２月２３日に出願された、米国仮出願第６１／２８９，８３３号の利益を主張する。２００９年１２月２３日に出願された、出願第６１／２８９，８３３号は、これによりその全体が本明細書中で参考として援用される。

【0002】

連邦により支援された調査に関する記述
本発明は、ＮＩＨ助成金Ｐ０１ＣＡ０７１９３２（ＭＦおよびＭＮＦ）、ＤｏＤ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＩＤＥＡ助成金ＤＡＭＤ １７−０２− １−０３１１（ＭＮＦ）、およびＳｕｓａｎ Ｋｏｍｅｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓｅａｒｃｈ助成金ＢＣＴＲ０５０４１７５（ＭＮＦ）の下で政府支援でなされた。本発明において、上記政府は特定の権利を有する。

【0003】

配列表への参照
２０１０年１２月２３日に作製され、９３５７バイトのサイズを有する「２４５２０＿４７＿９００１＿２０１０＿１２＿２３＿ＡＭＤ＿ＡＦＤ＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿Ｔｅｘｔ＿Ｆｉｌｅ．ｔｘｔ」と名付けられ、２０１０年１２月２３日にテキストファイルとして提出された配列表は、これにより米国特許法施行規則§１．５２（ｅ）（５）に準じて、参考として援用される。

【0004】

発明の分野
本発明は、一般に、分子医学、およびがん生物学の分野に関し、そしてより具体的には、選択的に腫瘍血管系に向かう（ｈｏｍｅ）アネキシン１結合化合物に関する。

【背景技術】

【0005】

発明の背景
がんを処置することにおける進歩に対する主要な障害は、がんを選択的に標的にし得るが正常組織に作用しない薬剤の相対的な欠乏である。例えば、一般に局所的な処置である放射線療法および手術は、処置の領域において、正常組織に対して実質的な損傷を引き起こし得、瘢痕化および正常細胞の欠損をもたらす。比較すると、一般に全身投与される化学療法は、すばやい細胞ターンオーバーおよび連続的な細胞分裂を受ける器官（例えば、骨髄、粘膜、皮膚および小腸）に実質的な損傷を引き起こし得る。結果として、所望されない副作用（例えば、嘔気、脱毛、および血液細胞数の低下）が、がん患者が化学療法薬物で静脈内処置されるときにしばしば起こる。このような所望されない副作用は、安全に投与され得る薬物の量を制限し得、それにより生存率に悪影響を与え、患者の生活の質に影響を与える。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0006】

細胞上の炭水化物受容体（ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）に結合し得るアミノ酸配列を含む単離されたペプチドが開示される。また、成分（ｍｏｉｅｔｙ）、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物が開示される。また、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドをコードする核酸配列を含む単離された核酸が開示される。

【0007】

また、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物を被験体に投与する工程を含む方法が開示される。また、被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、この方法は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを上記被験体に投与する工程を含む、方法が開示される。また、被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、この方法は、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物を上記被験体に投与する工程を含む、方法が開示される。また、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む組成物を上記被験体に投与する工程、および上記被験体において、上記組成物を検出する工程を含む方法が開示される。

【0008】

上記炭水化物受容体は、アネキシン１であり得る。上記アミノ酸配列は、選択的に上記炭水化物受容体を結合し得る。上記被験体は、細胞を含み得る。上記細胞は、腫瘍細胞であり得る。上記ペプチドは、アネキシン１結合化合物であり得る。上記アミノ酸配列は、アネキシン１結合化合物であり得る。

【0009】

上記アミノ酸配列は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アミノ酸配列と配列番号２との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２からなり得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２の少なくとも５個の連続したアミノ酸を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２の少なくとも６個の連続したアミノ酸を含み得る。

【0010】

上記ペプチドは、配列番号２を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも６個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも７個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも８個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも９個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、成分ペプチドをさらに含み得る。

【0011】

上記成分は、低分子、薬学的薬物、毒素、脂肪酸、検出可能なマーカー、結合タグ（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｎｇ ｔａｇ）、ナノシェル、または酵素であり得る。上記成分は、上記ペプチドに共有結合的に連結し得る。上記成分は、上記ペプチドのアミノ末端に連結し得る。上記成分は、上記ペプチドのカルボキシ末端に連結し得る。上記成分は、上記ペプチド内のアミノ酸に連結し得る。上記成分は、ＳＮ−３８であり得る。上記成分は、検出可能な剤（ｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ ａｇｅｎｔ）を含み得る。上記成分は、治療剤を含み得る。

【0012】

上記組成物は、上記成分と上記ペプチドとを繋ぐリンカーをさらに含み得る。上記組成物は、薬学的に受容可能なキャリアをさらに含み得る。上記組成物は、受容可能な薬剤をさらに含み得る。上記組成物は、治療剤をさらに含み得る。上記組成物は、抗がん剤をさらに含み得る。

【0013】

上記方法において上記組成物を検出する工程により、上記被験体における腫瘍を検出し得る。上記方法において上記組成物を検出する工程により、上記被験体におけるがんを診断し得る。上記方法において上記組成物を検出する工程は、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせを検出する工程を含み得、ここで、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせは、上記被験体におけるがんの予後を示す。上記方法は、投与および後の検出を繰り返す工程をさらに含み得、ここで、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせにおける変化は、上記被験体における子宮内膜症の経過を示す。上記方法は、投与および処置後の検出を繰り返す工程をさらに含み得、ここで、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせにおける変化は、上記被験体におけるがんの処置の経過を示す。

【0014】

上記ペプチドは、選択的に腫瘍血管系に結合する。上記アミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に結合する。上記ペプチドは、腫瘍血管系に結合し得る。上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系に結合し得る。

【0015】

上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。

【0016】

上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に結合し得る。

【0017】

上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、腫瘍血管系上の炭水化物受容体に結合し得る。上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得る。

【0018】

上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、腫瘍血管系上の炭水化物受容体に結合し得る。上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得る。

【0019】

上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、選択的に腫瘍血管系に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に結合する。上記組成物は、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に結合する。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドのうちの少なくとも１つは、選択的に腫瘍血管系に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記複数のペプチドは、それぞれ、選択的に腫瘍血管系に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、それぞれ、選択的に腫瘍血管系に結合するアミノ酸配列を含む。

【0020】

上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記組成物は、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合する。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドのうちの少なくとも１つは、細胞上の炭水化物受容体に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記複数のペプチドは、それぞれ、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、それぞれ、細胞上の炭水化物受容体に選択的に結合するアミノ酸配列を含む。

【0021】

上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。上記組成物は、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドのうちの少なくとも１つは、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記複数のペプチドは、それぞれ、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、それぞれ、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含む。

【0022】

上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、細胞上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に選択的に結合する。上記組成物は、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に選択的に結合する。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドのうちの少なくとも１つは、細胞上のアネキシン１に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記複数のペプチドは、それぞれ、細胞上のアネキシン１に選択的に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、それぞれ、細胞上のアネキシン１に選択的に結合するアミノ酸配列を含む。

【0023】

上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、細胞上のアネキシン１に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に結合し得る。上記組成物は、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、細胞上のアネキシン１に結合し得る。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドのうちの少なくとも１つは、細胞上のアネキシン１に結合し得るアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記複数のペプチドは、それぞれ、細胞上のアネキシン１に結合し得るアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、それぞれ、細胞上のアネキシン１に結合し得るアミノ酸配列を含む。

【0024】

上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合する。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合する。上記組成物は、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合する。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドのうちの少なくとも１つは、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記複数のペプチドは、それぞれ、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合するアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、それぞれ、腫瘍血管系上のアネキシン１に選択的に結合するアミノ酸配列を含む。

【0025】

上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得る。上記ペプチドは、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得る。上記組成物は、複数のアミノ酸配列を含み得、ここで上記アミノ酸配列は、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得る。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドのうちの少なくとも１つは、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得るアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記複数のペプチドは、それぞれ、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得るアミノ酸配列を含む。上記組成物は、複数のペプチドを含み得、ここで上記ペプチドは、それぞれ、腫瘍血管系上のアネキシン１に結合し得るアミノ酸配列を含む。

【0026】

上記アミノ酸配列、ペプチド、および組成物は、腫瘍血管内で結合し得る。上記組成物は、腫瘍の成長を低減し得る。上記組成物は、少なくとも１００のアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。上記組成物は、少なくとも１０００のアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。上記組成物は、少なくとも１０，０００のアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。

【0027】

上記組成物は、１つ以上の成分を含み得る。上記成分は、例えば、抗血管新生剤、血管新生促進剤（ｐｒｏ−ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ａｇｅｎｔ）、がん化学療法剤、細胞傷害性薬剤、抗炎症剤、抗関節炎剤、ポリペプチド、核酸分子、および低分子からなる群から独立して選択され得る。上記成分のうちの少なくとも１つは、治療剤であり得る。上記治療剤は、がんを処置するための化合物または組成物を含み得る。上記治療剤は、プログラム細胞死またはアポトーシスを誘導するための化合物または組成物を含み得る。上記治療剤は、Ａｂｒａｘａｎｅであり得る。上記治療剤は、パクリタキセルであり得る。上記治療剤は、ドセタキセルであり得る。上記成分のうちの少なくとも１つは、検出可能な剤であり得る。上記検出可能な剤は、ＦＡＭであり得る。

【0028】

上記アミノ酸配列、ペプチド、および組成物は、選択的に腫瘍血管系に向かうことができる。上記組成物は、治療効果を有し得る。上記治療効果は、全身腫瘍組織量の増加を遅くすること、または全身腫瘍組織量の低減であり得る。上記治療効果は、腫瘍サイズの増加を遅くすること、または腫瘍サイズの低減であり得る。上記治療効果は、腫瘍における血液循環の、低減または遮断であり得る。

【0029】

上記被験体は、標的にされるべき１つ以上の部位を有し得、ここで上記組成物は、標的にされるべき上記部位のうちの１つ以上に向かう。上記被験体は、腫瘍を有し得、ここで上記組成物は、該腫瘍に対する治療効果を有する。

【0030】

アネキシン１結合アミノ酸配列の数および組成物についての充足性は、例えば、被験体、または非ヒト動物における腫瘍において、上記組成物の蓄積を評価することによって決定することができる。

【0031】

開示される方法および組成物の追加の利点は、以下の記載において部分的に明記され、部分的にその記載から理解されるか、または開示される方法および組成物の実施によって学ぶことができる。開示される方法および組成物の利点は、添付の特許請求の範囲において特に指摘される要素および組み合わせによって実現および達成される。先行する一般記載および以下の詳細な記載の両方が、例示的および説明的のみであり、特許請求される如くの本発明を限定するものでないことが理解されるべきである。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
ペプチドおよび成分を含む組成物であって、ここで該ペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含む、組成物。
（項目２）
前記炭水化物受容体がアネキシン１である、項目１に記載の組成物。
（項目３）
前記アミノ酸配列が、前記炭水化物受容体に選択的に結合し得る、項目１または２に記載の組成物。
（項目４）
前記細胞が腫瘍細胞である、項目１〜３のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目５）
前記アミノ酸配列が、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）を含み、ここで各Ｘは、独立して、極性または荷電したアミノ酸であり、ここで該アミノ酸配列は、ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に保存的アミノ酸置換を有さないか、１つ有するかまたは１つ超有する、項目１〜４のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目６）
各Ｘが、アミノ酸Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、およびＭの全て、その全てのアミノ酸のうちの１０個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの９個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの８個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの７個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの６個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの５個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの４個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの３個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの２個の任意の組、またはその全てのアミノ酸のうちの任意の１個から独立して選択され得る、項目５に記載の組成物。
（項目７）
各Ｘが、３つのアミノ酸Ｃ、Ｒ、およびＫの組から独立して選択され得る、項目５に記載の組成物。
（項目８）
各Ｘが、２つのアミノ酸ＣおよびＲの組から独立して選択され得る、項目５に記載の組成物。
（項目９）
前記アミノ酸配列における前記Ｘのうちの１個がＣであるか、該アミノ酸配列における該Ｘのうちの２個がＣであるか、該アミノ酸配列における該Ｘのうちの２個がＲであるか、該アミノ酸配列における該Ｘのうちの３個がＲであるか、該アミノ酸配列における該Ｘのうちの４個がＲであるか、またはそれらの適合する組み合わせである、項目５〜８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０）
前記アミノ酸配列が、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）からなる、項目５〜９のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１）
前記配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する前記アミノ酸配列の構成部分が、該配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで前記アネキシン１結合化合物と配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる、項目５〜８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２）
前記配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する前記アミノ酸配列の構成部分が、該配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る、項目５〜８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３）
前記配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する前記アミノ酸配列の構成部分が、該配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る、項目５〜８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４）
前記アネキシン１結合化合物が、前記配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）の少なくとも５個の連続したアミノ酸を有する、項目５〜８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５）
前記アネキシン１結合化合物が、前記配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）の少なくとも６個の連続したアミノ酸を有する、項目５〜８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６）
前記アミノ酸配列が、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ（配列番号１７）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ（配列番号１９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ（配列番号１８）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ（配列番号２２）を含む、項目５に記載の組成物。
（項目１７）
前記アミノ酸配列が、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ（配列番号１７）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ（配列番号１９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ（配列番号１８）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ（配列番号２２）からなる、項目５に記載の組成物。
（項目１８）
前記アミノ酸配列が、保存的アミノ酸置換を有さないか、１つ有するか、または１つ超有する配列番号２を含む、項目１〜４のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目１９）
前記アミノ酸配列が、配列番号２に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し、ここで、該アミノ酸配列と配列番号２との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる、項目１〜４、または１８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２０）
前記アミノ酸配列が、配列番号２に対して少なくとも７０％の配列同一性を有する、項目１〜４、１８、または１９のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２１）
前記アミノ酸配列が、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、項目１〜４、または１８〜２０のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２２）
前記アミノ酸配列が、配列番号２を含む、項目１〜４、または１８〜２１のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２３）
前記ペプチドが、配列番号２を含む、項目１〜４、または１８〜２２のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２４）
前記アミノ酸配列が、配列番号２からなる、項目１〜４、または１８〜２３のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２５）
前記アミノ酸配列が、配列番号２のうちの少なくとも５個の連続したアミノ酸を含む、項目１〜４のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２６）
前記アミノ酸配列が、配列番号２のうちの少なくとも６個の連続したアミノ酸を含む、項目１〜４のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２７）
前記ペプチドが、少なくとも６個のアミノ酸を含む、項目１〜４のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２８）
前記ペプチドが、少なくとも７個のアミノ酸を含む、項目１〜４、または１８〜２７のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目２９）
前記ペプチドが、少なくとも８個のアミノ酸を含む、項目１〜１５、または１８〜２８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目３０）
前記ペプチドが、少なくとも９個のアミノ酸を含む、項目１〜２９のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目３１）
前記成分が、低分子、薬学的薬物、毒素、脂肪酸、検出可能なマーカー、結合タグ、ナノシェル、または酵素である、項目１〜３０のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目３２）
前記成分が、前記ペプチドに共有結合的に連結している、項目１〜３１のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目３３）
前記成分が、前記ペプチドのアミノ末端に連結している、項目３２に記載の組成物。
（項目３４）
前記成分が、前記ペプチドのカルボキシ末端に連結している、項目３２に記載の組成物。
（項目３５）
前記成分が、前記ペプチド内のアミノ酸に連結している、項目３２に記載の組成物。
（項目３６）
前記成分と前記ペプチドとを繋ぐリンカーをさらに含む、項目１〜３５のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目３７）
前記成分がＳＮ−３８であり、ここで前記アミノ酸配列は、配列番号２からなっていない、項目１〜３６のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目３８）
前記成分がＳＮ−３８であり、ここで前記ペプチドは、配列番号２からなっていない、項目１〜３６のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目３９）
前記成分が、がん化学療法剤である、項目１〜３６のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４０）
前記アミノ酸配列が、配列番号２からなる、項目１〜３９のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４１）
前記ペプチドが、配列番号２からなる、項目１〜３９のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４２）
薬学的に受容可能なキャリアをさらに含む、項目１〜４１のうちのいずれか一項に記載
の組成物。
（項目４３）
前記成分が、治療剤を含む、項目１〜４２のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４４）
前記組成物が、治療剤をさらに含む、項目１〜４３のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４５）
前記成分が、検出可能な剤を含む、項目１〜４４のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４６）
前記成分が、治療剤を含む、項目１〜４５のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４７）
前記組成物が、検出可能な剤をさらに含む、項目１〜４６のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４８）
前記組成物が、治療剤をさらに含む、項目１〜４７のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目４９）
前記組成物が、抗がん剤をさらに含む、項目１〜４８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
（項目５０）
項目１〜４９のうちのいずれか一項に記載のペプチドおよび成分をコードする核酸配列を含む、単離された核酸。
（項目５１）
項目１〜４９のうちのいずれか一項に記載の組成物を被験体に投与する工程を含む方法。
（項目５２）
前記被験体が細胞を含み、ここで該細胞は腫瘍細胞である、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
前記被験体が処置を必要とし、ここで前記投与が該被験体を処置する、項目５１または５２に記載の方法。
（項目５４）
前記被験体が、がんを有し、ここで前記投与が該被験体の該がんを処置する、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、該方法は、項目１〜４９のうちのいずれか一項に記載の組成物を該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目５６）
項目１〜４９のうちのいずれか一項に記載の組成物を前記被験体に投与する工程、および該被験体において該組成物を検出する工程を含む方法。
（項目５７）
前記組成物を検出する工程により、前記被験体において腫瘍を検出する、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
前記組成物を検出する工程により、前記被験体においてがんを診断する、項目５６に記載の方法。
（項目５９）
前記組成物を検出する工程が、前記被験体におけるがん組織に対する該組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせを検出する工程を含み、ここで該被験体におけるがん組織に対する該組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせは、該被験体における該がんの予後を示す、項目５６に記載の方法。
（項目６０）
前記投与および後の検出を繰り返す工程をさらに含み、ここで、前記被験体におけるがん組織に対する前記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせにおける変化は、該被験体における子宮内膜症の経過を示す、項目５６に記載の方法。
（項目６１）
前記投与および処置後の検出を繰り返す工程をさらに含み、ここで、前記被験体におけるがん組織に対する前記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせにおける変化は、該被験体における該がんの処置の経過を示す、項目５６に記載の方法。

【図面の簡単な説明】

【0032】

本明細書に組み込まれ、本明細書の一部を構成する、付随する図面は、開示される方法および組成物のいくつかの実施形態を例示し、そしてその記載とともに、開示される方法および組成物の原理を説明することに役立つ。

【図1-1】図１Ａ〜１Ｈは、腫瘍の成長、およびインビボでの腫瘍血管系標的化活性を有するペプチド配列の同定におけるアネキシン１（Ａｎｘａ１）の不可欠な役割を示す。（ＡおよびＢ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）変異マウスに皮下注射した、Ｂ１６腫瘍の成長。（Ｃ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）マウスにおいて生じさせたＢ１６腫瘍の組織学。各棒目盛は、２．００ｍｍを表す。（Ｄ）内皮細胞および血管系を示すＣＤ３１についてのＢ１６腫瘍の免疫組織化学。各棒目盛は、２００μｍを表す。（Ｅ）Ｂ１６腫瘍を有するマウスにおけるインビボでのファージ標的化。腫瘍または肺から回収された形質転換したコロニーの数が決定された。クローン１〜１０によって表面に表される（ｄｉｓｐｌａｙｅｄ）ペプチド配列は、ＩＥＬＬＱＡＲ（１；配列番号ｌ）、ＩＦＬＬＷＱＲ（２；配列番号２）、ＩＩＬＬＱＡＲ（３；配列番号３）、ＩＤＬＭＱＡＲ（４；配列番号４）、ＩＳＬＬＱＡＲ（５；配列番号５）、ＦＳＬＬＤＡＲ（６；配列番号６）、ＩＳＬＬＧＡＲ（７；配列番号７）、ＰＬＷＲＰＳＲ（８；配列番号８）、ＬＬＬＭＱＬＲ（９；配列番号９）、およびＬＹＬＱＲＬＲ（１０；配列番号１０）である。（Ｆ）ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２）を表面に表しているファージのインビボでの腫瘍および器官標的化活性。ファージは、抗Ａｎｘａ１抗体または対照のウサギＩｇＧで前もって注射された、Ｂ１６腫瘍を有するマウスに注射された。（Ｇ）細菌によって産生された、組換えＩＦ７−Ｈｉｓ_６タンパク質に対するＩＦ７−Ａ４８８（上部の線）および対照ＲＱ７−Ａ４８８Ｃ（下部の線）の結合についての、インビトロでのプレートアッセイ。（Ｈ）ＦＩＴＣ標識されたポリアクリルアミド−ＬｅＡオリゴ糖のＡｎｘａ１−Ｈｉｓ_６タンパク質に対する結合に及ぼす、ＩＦ７（上部の線）および対照ＲＱ７（下部の線）の作用。

【図1-2】図１Ａ〜１Ｈは、腫瘍の成長、およびインビボでの腫瘍血管系標的化活性を有するペプチド配列の同定におけるアネキシン１（Ａｎｘａ１）の不可欠な役割を示す。（ＡおよびＢ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）変異マウスに皮下注射した、Ｂ１６腫瘍の成長。（Ｃ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）マウスにおいて生じさせたＢ１６腫瘍の組織学。各棒目盛は、２．００ｍｍを表す。（Ｄ）内皮細胞および血管系を示すＣＤ３１についてのＢ１６腫瘍の免疫組織化学。各棒目盛は、２００μｍを表す。（Ｅ）Ｂ１６腫瘍を有するマウスにおけるインビボでのファージ標的化。腫瘍または肺から回収された形質転換したコロニーの数が決定された。クローン１〜１０によって表面に表される（ｄｉｓｐｌａｙｅｄ）ペプチド配列は、ＩＥＬＬＱＡＲ（１；配列番号ｌ）、ＩＦＬＬＷＱＲ（２；配列番号２）、ＩＩＬＬＱＡＲ（３；配列番号３）、ＩＤＬＭＱＡＲ（４；配列番号４）、ＩＳＬＬＱＡＲ（５；配列番号５）、ＦＳＬＬＤＡＲ（６；配列番号６）、ＩＳＬＬＧＡＲ（７；配列番号７）、ＰＬＷＲＰＳＲ（８；配列番号８）、ＬＬＬＭＱＬＲ（９；配列番号９）、およびＬＹＬＱＲＬＲ（１０；配列番号１０）である。（Ｆ）ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２）を表面に表しているファージのインビボでの腫瘍および器官標的化活性。ファージは、抗Ａｎｘａ１抗体または対照のウサギＩｇＧで前もって注射された、Ｂ１６腫瘍を有するマウスに注射された。（Ｇ）細菌によって産生された、組換えＩＦ７−Ｈｉｓ_６タンパク質に対するＩＦ７−Ａ４８８（上部の線）および対照ＲＱ７−Ａ４８８Ｃ（下部の線）の結合についての、インビトロでのプレートアッセイ。（Ｈ）ＦＩＴＣ標識されたポリアクリルアミド−ＬｅＡオリゴ糖のＡｎｘａ１−Ｈｉｓ_６タンパク質に対する結合に及ぼす、ＩＦ７（上部の線）および対照ＲＱ７（下部の線）の作用。

【図1-3】図１Ａ〜１Ｈは、腫瘍の成長、およびインビボでの腫瘍血管系標的化活性を有するペプチド配列の同定におけるアネキシン１（Ａｎｘａ１）の不可欠な役割を示す。（ＡおよびＢ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）変異マウスに皮下注射した、Ｂ１６腫瘍の成長。（Ｃ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）マウスにおいて生じさせたＢ１６腫瘍の組織学。各棒目盛は、２．００ｍｍを表す。（Ｄ）内皮細胞および血管系を示すＣＤ３１についてのＢ１６腫瘍の免疫組織化学。各棒目盛は、２００μｍを表す。（Ｅ）Ｂ１６腫瘍を有するマウスにおけるインビボでのファージ標的化。腫瘍または肺から回収された形質転換したコロニーの数が決定された。クローン１〜１０によって表面に表される（ｄｉｓｐｌａｙｅｄ）ペプチド配列は、ＩＥＬＬＱＡＲ（１；配列番号ｌ）、ＩＦＬＬＷＱＲ（２；配列番号２）、ＩＩＬＬＱＡＲ（３；配列番号３）、ＩＤＬＭＱＡＲ（４；配列番号４）、ＩＳＬＬＱＡＲ（５；配列番号５）、ＦＳＬＬＤＡＲ（６；配列番号６）、ＩＳＬＬＧＡＲ（７；配列番号７）、ＰＬＷＲＰＳＲ（８；配列番号８）、ＬＬＬＭＱＬＲ（９；配列番号９）、およびＬＹＬＱＲＬＲ（１０；配列番号１０）である。（Ｆ）ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２）を表面に表しているファージのインビボでの腫瘍および器官標的化活性。ファージは、抗Ａｎｘａ１抗体または対照のウサギＩｇＧで前もって注射された、Ｂ１６腫瘍を有するマウスに注射された。（Ｇ）細菌によって産生された、組換えＩＦ７−Ｈｉｓ_６タンパク質に対するＩＦ７−Ａ４８８（上部の線）および対照ＲＱ７−Ａ４８８Ｃ（下部の線）の結合についての、インビトロでのプレートアッセイ。（Ｈ）ＦＩＴＣ標識されたポリアクリルアミド−ＬｅＡオリゴ糖のＡｎｘａ１−Ｈｉｓ_６タンパク質に対する結合に及ぼす、ＩＦ７（上部の線）および対照ＲＱ７（下部の線）の作用。

【図1-4】図１Ａ〜１Ｈは、腫瘍の成長、およびインビボでの腫瘍血管系標的化活性を有するペプチド配列の同定におけるアネキシン１（Ａｎｘａ１）の不可欠な役割を示す。（ＡおよびＢ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）変異マウスに皮下注射した、Ｂ１６腫瘍の成長。（Ｃ）Ａｎｘａ１（＋／−）およびＡｎｘａ１（−／−）マウスにおいて生じさせたＢ１６腫瘍の組織学。各棒目盛は、２．００ｍｍを表す。（Ｄ）内皮細胞および血管系を示すＣＤ３１についてのＢ１６腫瘍の免疫組織化学。各棒目盛は、２００μｍを表す。（Ｅ）Ｂ１６腫瘍を有するマウスにおけるインビボでのファージ標的化。腫瘍または肺から回収された形質転換したコロニーの数が決定された。クローン１〜１０によって表面に表される（ｄｉｓｐｌａｙｅｄ）ペプチド配列は、ＩＥＬＬＱＡＲ（１；配列番号ｌ）、ＩＦＬＬＷＱＲ（２；配列番号２）、ＩＩＬＬＱＡＲ（３；配列番号３）、ＩＤＬＭＱＡＲ（４；配列番号４）、ＩＳＬＬＱＡＲ（５；配列番号５）、ＦＳＬＬＤＡＲ（６；配列番号６）、ＩＳＬＬＧＡＲ（７；配列番号７）、ＰＬＷＲＰＳＲ（８；配列番号８）、ＬＬＬＭＱＬＲ（９；配列番号９）、およびＬＹＬＱＲＬＲ（１０；配列番号１０）である。（Ｆ）ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２）を表面に表しているファージのインビボでの腫瘍および器官標的化活性。ファージは、抗Ａｎｘａ１抗体または対照のウサギＩｇＧで前もって注射された、Ｂ１６腫瘍を有するマウスに注射された。（Ｇ）細菌によって産生された、組換えＩＦ７−Ｈｉｓ_６タンパク質に対するＩＦ７−Ａ４８８（上部の線）および対照ＲＱ７−Ａ４８８Ｃ（下部の線）の結合についての、インビトロでのプレートアッセイ。（Ｈ）ＦＩＴＣ標識されたポリアクリルアミド−ＬｅＡオリゴ糖のＡｎｘａ１−Ｈｉｓ_６タンパク質に対する結合に及ぼす、ＩＦ７（上部の線）および対照ＲＱ７（下部の線）の作用。

【図2】図２は、ＩＦ７Ｃペプチド（配列番号１４）とＧＡとの結合体化、およびＩＦ７Ｃペプチド（配列番号１４）とＡｌｅｘａ ４８８との結合体化を示す。ゲルダナマイシン類似体、１７−ＧＭＢ−ＡＰＡ−ＧＡ（ＧＡ）をＩｎｖｉｖｏｇｅｎ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）から購入した。ＧＡをまた、Ｍａｎｄｌｅｒら（Ｊ Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ ９２，１５７３−８１，２０００）によって記載されるようにゲルダナマイシン（ＬＣ ｌａｂｓ，Ｗｏｂｕｒｎ，ＭＡ）から合成した。簡単に言うと、ＧＡを、クロロホルムに溶解させ、アルゴンガス下で室温にて２０時間、１，３−ジアミノプロパン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）と混合した。ジアミノプロパン架橋ＧＡをヘキサンで沈殿させた。沈殿物をクロロホルムに溶解させ、室温で２時間、Ｎ−［ｇ−マレイミドブチリルオキシ］スクシンイミドエステル（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）と反応させた。生成物すなわち１７−ＧＭＢ−ＡＰＡ−ＧＡを、ジクロロメタン：メタノール（９２：８、ｖ／ｖ）の溶媒系において分取ＴＬＣプレート（１．５ｍｍのシリカゲル、Ａｎａｌｔｅｃｈ，Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ）を用いた薄層クロマトグラフィーによって精製した。１７−ＧＭＢ−ＡＰＡ−ＧＡの構造を、ＭＡＳＳＬＹＮＸ ｖｅｒ３．５（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐ．，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）を用いて、ＥＳＩ質量分析法（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱ）により確かめた。ＩＦ７Ｃペプチド（配列番号１４）と１７−ＧＭＢ−ＡＰＡ−ＧＡとを結合させるために、それらを１：１のモル比でメタノールに溶解させた。等しい体積の純水をその混合物に対して加え、室温で２時間置いた。生成物、ＩＦ７Ｃ−ＧＡを、２．５ｍｌ／分の流速での、０．１％（ｖ／ｖ）のトリフルオロ酢酸を含む水中４０％〜５０％のアセトニトリルの勾配溶離によってＣ１８逆相ＨＰＬＣカラム（１０×１５０ｍｍ）によって精製した。ＩＦ７Ｃ−ＧＡの純度および構造をＥＳＩ質量分析法によって評価した。ＩＦ７Ｃをまた、Ａｌｅｘａ ｆｌｕｏｒ ４８８ Ｃ_５−マレイミド（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）と結合体化し、上に記載されるのと同様の様式でＨＰＬＣによって精製した。

【図3】図３は、Ａｎｘａ１コーティングされたチップおよび対照のコーティングされていないチップ上でのＩＦ−ペプチドの表面プラズモン共鳴分析を示す。ＩＡＳｙｓ（Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｓｅｎｓｏｒｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ）を使用した。Ａｎｘａ１−Ｈｉｓタンパク質を、ビス［スルホスクシンイミジル］基質（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いてアミノシラン表面に架橋することによってセンサーチップ上に固定化した。ＴＢＳＣに溶解させたＩＦ７Ｃの結合を２分間記録し、センサーチップにＴＢＳＣを加えることによってＩＦ７Ｃの解離を開始し、秒（ａｒｃ ｓｅｃｏｎｄ）を５分間記録した。

【図4】図４は、Ａｎｘａ１−Ｈｉｓタンパク質を用いたＩＦ７Ｋ３Ｃの等温熱量測定分析（ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｉｓ）を示す。Ｍｉｃｒｏｃａｌ（Ｎｏｒｔｈａｍｐｔｏｎ，ＭＡ）からのＶＰ−ＩＴＣ熱量計においてＩＴＣを行った。この分析において、ＩＦ７Ｋ３ＣペプチドすなわちＩＦＬＬＷＱＲＫＫＫＣ（配列番号１２）は、３つのリジン残基をＩＦ７とＣとの間に挿入させることによってＩＦ７を改変して水における可溶性を増加させた。１．０ｍＭまたは１．５ｍＭを含む溶液の８μｌアリコートを、１００μΜまたは１５０μΜのＡｎｘａ１−Ｈｉｓタンパク質を含む細胞に注射した。各実験において、３７の注射をした。上記実験を、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．９）、２５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ_２、および１０％のジメチルスルホキシドを含むバッファー中で２３℃にて行った。実験データを、ＩＴＣ製造者によって提供されるＭｉｃｒｏｃａｌ Ｏｒｉｇｉｎソフトウェア（Ｍｉｃｒｏｃａｌ，Ｎｏｒｔｈａｍｐｔｏｎ，ＭＡ）を用いて分析した。平均（Ｋ_ｄ＝１１±６μΜ、ｎ＝４）を、２つの異なるＡｎｘａ１−Ｈｉｓ調製物を用いて得た。

【図5-1】図５Ａ〜５Ｄは、背側皮脂層チャンバー（ｄｏｒｓａｌ ｓｋｉｎｆｏｌｄ ｃｈａｍｂｅｒ）における腫瘍に対するＩＦ７−Ａ４８８のインビボでの標的化を示す。（Ａ）Ｌｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）腫瘍を、ヌードマウスにおける背側皮脂層チャンバーウインドーにおいて３日間、血管新生させた。マウスに、１００μｌの、水中の５％グルコース中５０μΜ ＩＦ７−Ａ４８８（列ａ）またはＲＱ７−Ａ４８８（列ｂ）を注射した。ＩＦ７−Ａ４８８をまた、ウサギＩｇＧ（列ｃ）またはウサギ抗Ａｎｘａ１抗体（列ｄ）を前もって注射した腫瘍担持マウスに注射した。蛍光シグナルを、注射後４０分まで蛍光顕微鏡下でモニターした。左から：注射前の明視野、および注射後０分、５分、２０分の蛍光。最も右は、２０分での腫瘍と間質との境界（目盛棒＝５００ μｍ）である。（Ｂ）Ａにおいて示される分析の間の蛍光の定量分析。１０分における最も高いシグナルを有する線は、ＩＦ＆−Ａ４８８を表す。１０分における２番目に高いシグナルを有する線は、対照のＩｇＧを表す。１０分における３番目に高いシグナルを有する線は、Ａｎｘａ−１抗体を表す。１０分における最も低いシグナルを有する線は、ＲＱ７−Ａ４８８を表す。蛍光の強度をＩｍａｇｅ Ｊプログラムによって決定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝３）。アステリスクは、統計上の有意性すなわちｐ＜０．０００１、ｔ検定を示す。（Ｃ）ＩＦ７−Ａ４８８およびＲＱ７−Ａ４８８での注射後２０分の腫瘍切片の蛍光顕微鏡写真（ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ）。左から：ＩＦ７−Ａ４８８、ＤＡＰＩ、重ね合わせ、および明視野。ＩＦ７−Ａ４８８シグナル（上部の列）を、腫瘍血管系の内皮細胞上で検出した（目盛棒＝５０μｍ）が、ＲＱ７−Ａ４８８シグナルは検出しなかった（下部の列）。実験を３回繰り返し、代表的な結果を示す。矢印は、蛍光を示す。（Ｄ）蛍光は、皮下のＢ１６腫瘍を有する、または有さないマウスの循環中に残留した。ＩＦ７−Ａ４８８を、尾静脈を介して静脈内に注射し、循環中に残留する蛍光を測定した。上部の線は、「腫瘍なし」を表し、中間の線は、「３日間の腫瘍保持」を表し、底部の線は、「６日間の腫瘍保持」を表す。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝３）。

【図5-2】図５Ａ〜５Ｄは、背側皮脂層チャンバー（ｄｏｒｓａｌ ｓｋｉｎｆｏｌｄ ｃｈａｍｂｅｒ）における腫瘍に対するＩＦ７−Ａ４８８のインビボでの標的化を示す。（Ａ）Ｌｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）腫瘍を、ヌードマウスにおける背側皮脂層チャンバーウインドーにおいて３日間、血管新生させた。マウスに、１００μｌの、水中の５％グルコース中５０μΜ ＩＦ７−Ａ４８８（列ａ）またはＲＱ７−Ａ４８８（列ｂ）を注射した。ＩＦ７−Ａ４８８をまた、ウサギＩｇＧ（列ｃ）またはウサギ抗Ａｎｘａ１抗体（列ｄ）を前もって注射した腫瘍担持マウスに注射した。蛍光シグナルを、注射後４０分まで蛍光顕微鏡下でモニターした。左から：注射前の明視野、および注射後０分、５分、２０分の蛍光。最も右は、２０分での腫瘍と間質との境界（目盛棒＝５００ μｍ）である。（Ｂ）Ａにおいて示される分析の間の蛍光の定量分析。１０分における最も高いシグナルを有する線は、ＩＦ＆−Ａ４８８を表す。１０分における２番目に高いシグナルを有する線は、対照のＩｇＧを表す。１０分における３番目に高いシグナルを有する線は、Ａｎｘａ−１抗体を表す。１０分における最も低いシグナルを有する線は、ＲＱ７−Ａ４８８を表す。蛍光の強度をＩｍａｇｅ Ｊプログラムによって決定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝３）。アステリスクは、統計上の有意性すなわちｐ＜０．０００１、ｔ検定を示す。（Ｃ）ＩＦ７−Ａ４８８およびＲＱ７−Ａ４８８での注射後２０分の腫瘍切片の蛍光顕微鏡写真（ｍｉｃｒｏｇｒａｐｈ）。左から：ＩＦ７−Ａ４８８、ＤＡＰＩ、重ね合わせ、および明視野。ＩＦ７−Ａ４８８シグナル（上部の列）を、腫瘍血管系の内皮細胞上で検出した（目盛棒＝５０μｍ）が、ＲＱ７−Ａ４８８シグナルは検出しなかった（下部の列）。実験を３回繰り返し、代表的な結果を示す。矢印は、蛍光を示す。（Ｄ）蛍光は、皮下のＢ１６腫瘍を有する、または有さないマウスの循環中に残留した。ＩＦ７−Ａ４８８を、尾静脈を介して静脈内に注射し、循環中に残留する蛍光を測定した。上部の線は、「腫瘍なし」を表し、中間の線は、「３日間の腫瘍保持」を表し、底部の線は、「６日間の腫瘍保持」を表す。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝３）。

【図6-1】図６Ａおよび６Ｂは、黒色腫、肺癌腫、前立腺がん、および乳がんマウスモデルに対するＩＦ７−ＧＡの効果を示す。（Ａ）腫瘍サイズに対するＩＦ７−ＧＡの効果。（ａ）マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。１０日目に、各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７、ＧＡ、またはＩＦ７−ＧＡを含むものを静脈内注射した。注射を、合計３回の注射で、１４日目まで１日おきに投与した。マウスを１５日目に安楽死させて腫瘍重量を測定した。（ｂ）マウスＬｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計３回の注射で、１１日目まで１日おきに投与した。マウスを１３日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。（ｃ）ヒト前立腺がんＰＣ３腫瘍を、ＳＣＩＤマウスの前立腺において同所性に成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計４回の注射で、２２日目まで４日おきに投与した。マウスを２８日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。（ｄ）ヒト乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍を、ＳＣＩＤマウスの脂肪パッドにおいて同所性に成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計４回の注射で、２２日目まで４日おきに行った。マウスを２８日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。アステリスクは、統計上の有意性を示す（Ｍａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定）。（Ｂ）Ａにおいて記載される化合物を静脈内注射されたマウスからの腫瘍の組織化学。移植された腫瘍において、血管に沿ったアポトーシス性腫瘍細胞をＴＵＮＥＬアッセイによって検出する。各化合物で処置されたマウスからのＢ１６黒色腫（ａ）、ＬＬＣ肺癌腫（ｂ）、ＰＣ３前立腺腫瘍（ｃ）、およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳房腫瘍（ｄ）。脈管周囲のがん細胞は、対照のＩＦ７群およびＧＡ群において、めったにアポトーシスを示さないが、ＩＦ７−ＧＡ群における脈管周囲の腫瘍細胞は、より多数のアポトーシス性細胞（黒色で輪郭を描かれたいくつかの領域）を示す（目盛棒＝５０μｍ）ことに留意のこと。

【図6-2】図６Ａおよび６Ｂは、黒色腫、肺癌腫、前立腺がん、および乳がんマウスモデルに対するＩＦ７−ＧＡの効果を示す。（Ａ）腫瘍サイズに対するＩＦ７−ＧＡの効果。（ａ）マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。１０日目に、各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７、ＧＡ、またはＩＦ７−ＧＡを含むものを静脈内注射した。注射を、合計３回の注射で、１４日目まで１日おきに投与した。マウスを１５日目に安楽死させて腫瘍重量を測定した。（ｂ）マウスＬｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計３回の注射で、１１日目まで１日おきに投与した。マウスを１３日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。（ｃ）ヒト前立腺がんＰＣ３腫瘍を、ＳＣＩＤマウスの前立腺において同所性に成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計４回の注射で、２２日目まで４日おきに投与した。マウスを２８日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。（ｄ）ヒト乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍を、ＳＣＩＤマウスの脂肪パッドにおいて同所性に成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計４回の注射で、２２日目まで４日おきに行った。マウスを２８日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。アステリスクは、統計上の有意性を示す（Ｍａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定）。（Ｂ）Ａにおいて記載される化合物を静脈内注射されたマウスからの腫瘍の組織化学。移植された腫瘍において、血管に沿ったアポトーシス性腫瘍細胞をＴＵＮＥＬアッセイによって検出する。各化合物で処置されたマウスからのＢ１６黒色腫（ａ）、ＬＬＣ肺癌腫（ｂ）、ＰＣ３前立腺腫瘍（ｃ）、およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳房腫瘍（ｄ）。脈管周囲のがん細胞は、対照のＩＦ７群およびＧＡ群において、めったにアポトーシスを示さないが、ＩＦ７−ＧＡ群における脈管周囲の腫瘍細胞は、より多数のアポトーシス性細胞（黒色で輪郭を描かれたいくつかの領域）を示す（目盛棒＝５０μｍ）ことに留意のこと。

【図6-3】図６Ａおよび６Ｂは、黒色腫、肺癌腫、前立腺がん、および乳がんマウスモデルに対するＩＦ７−ＧＡの効果を示す。（Ａ）腫瘍サイズに対するＩＦ７−ＧＡの効果。（ａ）マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。１０日目に、各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７、ＧＡ、またはＩＦ７−ＧＡを含むものを静脈内注射した。注射を、合計３回の注射で、１４日目まで１日おきに投与した。マウスを１５日目に安楽死させて腫瘍重量を測定した。（ｂ）マウスＬｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計３回の注射で、１１日目まで１日おきに投与した。マウスを１３日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。（ｃ）ヒト前立腺がんＰＣ３腫瘍を、ＳＣＩＤマウスの前立腺において同所性に成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計４回の注射で、２２日目まで４日おきに投与した。マウスを２８日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。（ｄ）ヒト乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１腫瘍を、ＳＣＩＤマウスの脂肪パッドにおいて同所性に成長させた。７日目に、各マウスに、Ａ−ａにおけるような化合物を静脈内注射し、注射を、合計４回の注射で、２２日目まで４日おきに行った。マウスを２８日目に安楽死させ、腫瘍の重さを量った。アステリスクは、統計上の有意性を示す（Ｍａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定）。（Ｂ）Ａにおいて記載される化合物を静脈内注射されたマウスからの腫瘍の組織化学。移植された腫瘍において、血管に沿ったアポトーシス性腫瘍細胞をＴＵＮＥＬアッセイによって検出する。各化合物で処置されたマウスからのＢ１６黒色腫（ａ）、ＬＬＣ肺癌腫（ｂ）、ＰＣ３前立腺腫瘍（ｃ）、およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳房腫瘍（ｄ）。脈管周囲のがん細胞は、対照のＩＦ７群およびＧＡ群において、めったにアポトーシスを示さないが、ＩＦ７−ＧＡ群における脈管周囲の腫瘍細胞は、より多数のアポトーシス性細胞（黒色で輪郭を描かれたいくつかの領域）を示す（目盛棒＝５０μｍ）ことに留意のこと。

【図7】図７は、ＩＦ７−ＳＮ３８の合成を示す。ＳＮ−３８は、Ｙａｋｕｌｔ（Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ）によって合成された。結合体化を、以下を除いて、Ｍｅｙｅｒ−Ｌｏｓｉｃら、Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；１４：２１４５−５３によって記載される方法に従って行った。ｔｒａｎｓ−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸（トラネキサム酸、５００ｍｇ）を水（１２．５ｍｌ）に溶解させ、ｌＭのリン酸バッファー（ｐＨ６．５）（１ｍｌ）を加えた。ｔｒａｎｓ−およびｃｉｓ−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸の両方が利用可能であるが、トラネキサム酸は、より有効であった。ＳＭＣＣ（１ｇ）を、アセトニトリル（２２ｍｌ）と水（５．５ｍｌ）との混合物中に溶解させた。トラネキサム酸とＳＭＣＣとを混合し、これを４５℃で２時間インキュベートした。生成物４−｛４−［（Ｎ−マレイミドメチル（Ｎ−ｍａｌｅｉｍｙｄｏｍｅｔｈｙｌ））シクロヘキサンカルボキサミド］メチル｝シクロヘキサン−ｌ−カルボン酸（ＢＣＨ）を、ジクロロメタン（６０ｍｌ）および水中の０．１Ｍ ＮａＣｌ（２０ｍｌ）によって有機相へと抽出した。ＢＣＨとＳＮ−３８との結合体化を、室温で４時間行い、ＩＦ７ＣとＢＣＨ−ＳＮ３８との結合体化を、それらをジメチルホルムアミド中で、４５℃にて３時間インキュベートし、その後、水を加え、室温にて２０時間、インキュベートすることにより行った。生成物ＩＦ７−ＢＣＨ−ＳＮ３８（ＩＦ７−ＳＮ３８）を、ジクロロメタン（３０ｍｌ）と水中の５Ｍ ＮａＣｌ（２ｍｌ）との界面から回収した。乾燥させたＩＦ７−ＳＮ３８を水中５０％のアセトニトリルに溶解させ、０．１％のトリフルオロ酢酸を含む水中５０％〜７０％のアセトニトリルの勾配溶離によって、逆相ＨＰＬＣによって精製した。括弧内の数字は、質量分析法により確かめられた、各化合物の分子量である。

【図8-1】図８Ａ〜８Ｆは、Ｂ１６腫瘍を有するマウスにおけるＩＦ７−ＧＡおよびＩＦ７−ＳＮ３８の効果を示す。（Ａ）ＩＦ７−ＧＡまたはＩＦ７−ＳＮ３８で処置された、Ｂ１６腫瘍を有するマウスの生存。Ｂ１６細胞をマウスに皮下注射し、１４日目に各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７−ＧＡ、ＲＱ７−ＳＮ３８、またはＩＦ７−ＳＮ３８を含むものを静脈内注射した。矢印によって示されるように、注射を、合計７回の注射で、２６日目まで１日おきに投与した。ＩＦ７−ＳＮ３８のみが、２０日後に高い生存を示し、他の全ては、２０日より前に急落した。（Ｂ）腫瘍サイズにおけるＩＦ７−ＳＮ３８の効果。マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。１３日目に、各マウスに、１００μｌの５％グルコース（より濃い線）、または０．１３μｍｏｌのＩＦ７−ＳＮ３８を含むもの（より薄い線）を静脈内注射した。注射を、合計５回の注射で、２１日目まで１日おきに投与した。腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝６）。（Ｃ）腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝６）。組織学は、ＩＦ７−ＳＮ３８処置マウスからの腫瘍が、対照マウスから単離された腫瘍と比較して、わずかにより小さく、より多くの壊死を含むことを示した（図８Ｃ）。（Ｄ）ＩＦ７−ＧＡまたはＩＦ７−ＳＮ３８で処置されたＢ１６腫瘍を有するマウスの生存。Ｂ１６細胞をマウスの腹膜に（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ）注射し、１日目に各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７−ＧＡ、ＲＱ７−ＳＮ３８、またはＩＦ７−ＳＮ３８を含むものを静脈内注射した。矢印によって示されるように、注射を、合計６回の注射で、１２日目まで１日おきに投与した。マウスが衰弱の兆候を示すまで、マウスをそのままにした。ＩＦ７−ＳＮ３８は、２２日後に高い生存を示し、ＩＦ７−ＧＡは、２０日まで高い生存を示し、グルコースおよびＲＱ７−ＳＮ３８は、２０日より前に急落した。（Ｅ）５％のグルコース（ａ）、ＩＦ７−ＧＡ（ｂ）、またはＩＦ７−ＳＮ３８（ｃ）で静脈内注射されたマウスからの１０日目の腹膜のＢ１６腫瘍。目盛棒は、１ｃｍを表す。（Ｆ）Ｅにおいて示される腹膜のＢ１６腫瘍の組織学。目盛棒は、１００μｍを表す。

【図8-2】図８Ａ〜８Ｆは、Ｂ１６腫瘍を有するマウスにおけるＩＦ７−ＧＡおよびＩＦ７−ＳＮ３８の効果を示す。（Ａ）ＩＦ７−ＧＡまたはＩＦ７−ＳＮ３８で処置された、Ｂ１６腫瘍を有するマウスの生存。Ｂ１６細胞をマウスに皮下注射し、１４日目に各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７−ＧＡ、ＲＱ７−ＳＮ３８、またはＩＦ７−ＳＮ３８を含むものを静脈内注射した。矢印によって示されるように、注射を、合計７回の注射で、２６日目まで１日おきに投与した。ＩＦ７−ＳＮ３８のみが、２０日後に高い生存を示し、他の全ては、２０日より前に急落した。（Ｂ）腫瘍サイズにおけるＩＦ７−ＳＮ３８の効果。マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。１３日目に、各マウスに、１００μｌの５％グルコース（より濃い線）、または０．１３μｍｏｌのＩＦ７−ＳＮ３８を含むもの（より薄い線）を静脈内注射した。注射を、合計５回の注射で、２１日目まで１日おきに投与した。腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝６）。（Ｃ）腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝６）。組織学は、ＩＦ７−ＳＮ３８処置マウスからの腫瘍が、対照マウスから単離された腫瘍と比較して、わずかにより小さく、より多くの壊死を含むことを示した（図８Ｃ）。（Ｄ）ＩＦ７−ＧＡまたはＩＦ７−ＳＮ３８で処置されたＢ１６腫瘍を有するマウスの生存。Ｂ１６細胞をマウスの腹膜に（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ）注射し、１日目に各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７−ＧＡ、ＲＱ７−ＳＮ３８、またはＩＦ７−ＳＮ３８を含むものを静脈内注射した。矢印によって示されるように、注射を、合計６回の注射で、１２日目まで１日おきに投与した。マウスが衰弱の兆候を示すまで、マウスをそのままにした。ＩＦ７−ＳＮ３８は、２２日後に高い生存を示し、ＩＦ７−ＧＡは、２０日まで高い生存を示し、グルコースおよびＲＱ７−ＳＮ３８は、２０日より前に急落した。（Ｅ）５％のグルコース（ａ）、ＩＦ７−ＧＡ（ｂ）、またはＩＦ７−ＳＮ３８（ｃ）で静脈内注射されたマウスからの１０日目の腹膜のＢ１６腫瘍。目盛棒は、１ｃｍを表す。（Ｆ）Ｅにおいて示される腹膜のＢ１６腫瘍の組織学。目盛棒は、１００μｍを表す。

【図8-3】図８Ａ〜８Ｆは、Ｂ１６腫瘍を有するマウスにおけるＩＦ７−ＧＡおよびＩＦ７−ＳＮ３８の効果を示す。（Ａ）ＩＦ７−ＧＡまたはＩＦ７−ＳＮ３８で処置された、Ｂ１６腫瘍を有するマウスの生存。Ｂ１６細胞をマウスに皮下注射し、１４日目に各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７−ＧＡ、ＲＱ７−ＳＮ３８、またはＩＦ７−ＳＮ３８を含むものを静脈内注射した。矢印によって示されるように、注射を、合計７回の注射で、２６日目まで１日おきに投与した。ＩＦ７−ＳＮ３８のみが、２０日後に高い生存を示し、他の全ては、２０日より前に急落した。（Ｂ）腫瘍サイズにおけるＩＦ７−ＳＮ３８の効果。マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１腫瘍を、Ｃ５７ＢＬ６マウスにおいて皮下で成長させた。１３日目に、各マウスに、１００μｌの５％グルコース（より濃い線）、または０．１３μｍｏｌのＩＦ７−ＳＮ３８を含むもの（より薄い線）を静脈内注射した。注射を、合計５回の注射で、２１日目まで１日おきに投与した。腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝６）。（Ｃ）腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。エラーバーは、ＳＤを表す（ｎ＝６）。組織学は、ＩＦ７−ＳＮ３８処置マウスからの腫瘍が、対照マウスから単離された腫瘍と比較して、わずかにより小さく、より多くの壊死を含むことを示した（図８Ｃ）。（Ｄ）ＩＦ７−ＧＡまたはＩＦ７−ＳＮ３８で処置されたＢ１６腫瘍を有するマウスの生存。Ｂ１６細胞をマウスの腹膜に（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ）注射し、１日目に各マウスに、１００μｌの５％グルコース、または０．１３μｍｏｌの各ＩＦ７−ＧＡ、ＲＱ７−ＳＮ３８、またはＩＦ７−ＳＮ３８を含むものを静脈内注射した。矢印によって示されるように、注射を、合計６回の注射で、１２日目まで１日おきに投与した。マウスが衰弱の兆候を示すまで、マウスをそのままにした。ＩＦ７−ＳＮ３８は、２２日後に高い生存を示し、ＩＦ７−ＧＡは、２０日まで高い生存を示し、グルコースおよびＲＱ７−ＳＮ３８は、２０日より前に急落した。（Ｅ）５％のグルコース（ａ）、ＩＦ７−ＧＡ（ｂ）、またはＩＦ７−ＳＮ３８（ｃ）で静脈内注射されたマウスからの１０日目の腹膜のＢ１６腫瘍。目盛棒は、１ｃｍを表す。（Ｆ）Ｅにおいて示される腹膜のＢ１６腫瘍の組織学。目盛棒は、１００μｍを表す。

【図9】図９は、マウスにおけるＢ１６固形腫瘍についての時間（日数）に対する腫瘍体積（ｍｍ^３）のグラフである。ＩＦ７−Ｄｏｘ（ドキソルビシン）、ＩＦ７−ＳＮ３８、および対照（処置なし）での処置を比較する。両方の薬物が腫瘍の成長を抑制したが、ＩＦ７−ＳＮ３８による抗腫瘍活性は、ＩＦ７−Ｄｏｘに勝っていた。

【図10】図１０Ａおよび１０Ｂは、Ｘｅｎｏｇｅｎ ＩＶＩＳイメージャーによって可視化されたＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍の画像を示す。薬物ＩＦ７−ＳＮ３８ ６．５μｍｏｌ／ｋｇを、尾静脈を介して静脈内に投与した。

【図11】図１１Ａおよび１１Ｂは、ヌードマウスにおいて生じさせたＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍に対するＩＦ７−ＳＮ３８の効果を示す。ＩＦ７−ＳＮ３８ ６．５ｍｍｏｌ／ｋｇを、ＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍を有するマウスに毎日注射した。（Ａ）ルシフェラーゼベースの化学発光によってモニターされた腫瘍サイズ。１００％の光子数は、ｅ＋０７のオーダーである。（Ｂ）カリパス測定によってモニターされた腫瘍サイズ。

【図12】図１２Ａ、１２Ｂ、および１２Ｃは、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリリジンのＡｎｘａ１発現マウス内皮細胞に対する結合および浸透を実証する。（Ａ）インビトロで培養されたマウス内皮Ｆ−２細胞表面上の、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリリジンの結合。（Ｂ）頂端表面を介した、ＦＩＴＣ−結合体化ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンのＦ−２細胞単層の基底空間への輸送。トランスウェルインサートのフィルター上で培養されたＦ−２細胞にＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンを加えて、その試薬がＦ−２細胞の頂端細胞表面に結合されるようにした。単層を培地で洗浄後、インサートを、培地を含むウェル中に３７℃または４℃で置いた。インサートのより下のチャンバーへと移動した蛍光を測定した。（Ｃ）マウスのインビボＢ１６腫瘍における、静脈内に注射されたＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンの標的化および浸透。組織切片を、内皮細胞マーカーＣＤ３１について免疫染色した。ＦＩＴＣの蛍光シグナルは、内皮層の基底側の周囲、およびしばしば内皮層の基底側に局在し、このことは、内皮細胞を介したＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化プローブの浸透を示唆した。

【図13】図１３Ａ、および１３Ｂは、（Ａ）ヌードマウスにおいて生じさせた大きいＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍（０日目に光子数ｅ＋１１）に対するＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８の効果の代表的な結果、および（Ｂ）毎日の注射についてＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８の用量が、図１１において示されるＩＦ７−ＳＮ３８の用量と同じ６．５μｍｏｌ／ｋｇであったことを示す。

【図14】図１４は、ヌードマウスにおいて生じさせたＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍に対する低投与量のＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８の効果を示す。使用されたＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８は、６．５μｍｏｌ／ｋｇ／注射（図１１）で使用されたＩＦ７−ＳＮ３８と比較して８分の１の用量すなわち０．８１μｍｏｌ／ｋｇ／注射であった。対照ＲＱ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８を、ＳＮ−３８とリバースＩＦ７Ｃ（ＲＲ）、ＲＱＷＬＬＦＩ−Ｃ−ＲＲペプチド（配列番号１６）とを結合体化することによって調製した。

【図15-1】図１５Ａ、１５Ｂ、および１５Ｃは、１０日間毎日の注射で、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８およびＲＱ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８を用いて処置されたヌードマウスの体重（Ａ）、血液細胞数（Ｂ）、および血液化学（Ｃ）を示す。どのパラメーターも対照（薬物注射なし）群に対して有意差を示さなかった。

【図15-2】図１５Ａ、１５Ｂ、および１５Ｃは、１０日間毎日の注射で、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８およびＲＱ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８を用いて処置されたヌードマウスの体重（Ａ）、血液細胞数（Ｂ）、および血液化学（Ｃ）を示す。どのパラメーターも対照（薬物注射なし）群に対して有意差を示さなかった。

【発明を実施するための形態】

【0033】

開示される方法および組成物は、以下の、特定の実施形態の詳細な記載およびそこに含まれる実施例、ならびに図およびそれらの以前の記載および以下の記載への参照によって、より容易に理解され得る。

【0034】

本化合物、組成物、論文、デバイス、および／または方法が開示および記載される前に、それらが、そうでないと特定されない限り、具体的な合成方法または具体的な組換えバイオテクノロジー方法に限定されないこと、あるいは、そうでないと特定されない限り、特定の試薬に限定されないこと、それ自体もちろん変動し得ることが理解されるべきである。本明細書中で使用される用語が、特定の実施形態のみを記載する目的のためであり、限定することを意図しないことも理解されるべきである。

【0035】

がん患者に静脈内に投与される化学療法剤は希釈される、従って、高用量を必要とし、副作用を引き起こし、このことは、標的化薬物送達によって回避され得た（Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ Ｅ．ｅｔ ａｌ．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；１８：８１３−２７；Ｎｅｒｉ、Ｄ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ ２００５；５：４３６−４６；Ｂｅｌｌｏｎｅ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００８；２９：２３５−４１）。悪性度はがん細胞表面炭水化物に密接に関連しているので、炭水化物ベースの治療用物質が望ましいことがよくわかった。このような治療用物質は、以前に調査されていない。Ｉ−ペプチドと呼ばれる１つの炭水化物模擬ペプチド（ｍｉｍｉｃｒｙ ｐｅｐｔｉｄｅ）が、アネキシン１（Ａｎｘａ１）に結合することが見出された（Ｈａｔａｋｅｙａｍａ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００９；１０６：３０９５−１００）。Ａｎｘａ１は、特異的に腫瘍血管系を特徴づける（Ｏｈ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ２００４；４２９：６２９−３５）ので、Ｉ−ペプチドが、腫瘍標的化ビヒクルとして働き得ることが見出されている。Ｉ−ペプチド関連配列（Ｆｕｋｕｄａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０００；６０：４５０−６；Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００２；６２：４１９４−８；Ｆｕｋｕｄａ，Ｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ ２００６；４１６：５１−６０）を調査することは、高い効力を有する、腫瘍に特異的に向かうＩＦ７と呼ばれるペプチドの同定をもたらす。静脈内注射すると、効力のある抗がん薬物ＳＮ−３８と結合体化されたＩＦ７は、Ｂ１６腫瘍を宿している末期のマウスをレスキューした。ＩＦ７−ＳＮ３８はまた、腹膜のＢ１６腫瘍を有するマウスの生存を副作用なく延長した。これらの結果は、アネキシン１結合化合物が、標的化化学療法に使用され得ることを示す。

【0036】

ゲノミクスおよびプロテオミクスにおける技術的進歩は、ＤＮＡおよびタンパク質の自動化化学合成とともに生物医学における進展に大きく貢献している。対照的に、炭水化物の使用および炭水化物の役割の理解は、技術の進歩の不足に起因して、立ち遅れている。例えば、組換え炭水化物または増幅可能な炭水化物または化学的に合成された複合糖質は、自動的に生産することができない。結果として、炭水化物ベースの薬剤の発見は、たとえ、がんの悪性度が、腫瘍細胞表面上に見出される炭水化物構造に密接に関連していても、大部分調査されていない（Ｈａｋｏｍｏｒｉ，Ｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ，２００２；９９：１０２３１−３；Ｎａｋａｍｏｒｉ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １９９３；５３：３６３２−７）。ペプチドを表面に表すファージ技術は、炭水化物模擬ペプチドを同定するために使用され得る（Ｆｕｋｕｄａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０００；６０：４５０−６；Ｆｕｋｕｄａ，Ｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ ２００６；４１６：５１−６０；Ｔａｋｉ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ２００８；１７８０：４９７−５０３；Ｓｃｏｔｔ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ １９９２；８９：５３９８−４０２）。例えば、Ｉ−ペプチド（ＩＥＬＬＱＡＲ；配列番号１３）は、セレクチンリガンド模擬体（ｍｉｍｉｃ）として同定され、マウスに静脈内注射されるとき、合成のＩ−ペプチドは、肺に対する炭水化物依存がん細胞のコロニー形成を阻害した（Ｆｕｋｕｄａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０００；６０：４５０−６；Ｚｈａｎｇ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００２；６２：４１９４−８）。

【0037】

内皮のＩ−ペプチド受容体を同定するように設計された実験は、Ｉ−ペプチドがアネキシン１（Ａｎｘａ１）のフラグメントに結合することを明らかにした（Ｈａｔａｋｅｙａｍａ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００９；１０６：３０９５−１００）。Ｉ−ペプチドアフィニティークロマトグラフィーによって、ラットの肺から単離されたＡｎｘａ１フラグメントにおいて同定されたペプチド配列は、配列番号１１である。１５ｋＤａにおけるタンパク質のバンドを、トリプシンで消化し、上記ペプチドフラグメントを質量分析法によって分析した。Ａｎｘａ１の同定をもたらした独特なペプチド配列は、下線を引くことによって示される。

【0038】

【化1】

Ａｎｘａ１は、特異的な腫瘍内皮細胞表面マーカーとして同定されている（Ｏｈ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ２００４；４２９：６２９−３５）。Ａｎｘａ１ヌル変異マウスにおいて、Ｂ１６黒色腫細胞が皮下に注射されるとき、腫瘍の成長は、Ａｎｘａ１異型接合マウスにおいて生じさせた腫瘍と比較して、有意に低減された（図１Ａおよび１Ｂを参照のこと）。Ａｎｘａ１ヌルにおいて生じさせた腫瘍は、大部分が壊死性であった（図１Ｃを参照のこと）。注目すべきことに、Ａｎｘａ１ヌルマウスにおいて生じさせた腫瘍において、血管系が見出されなかった（図１Ｄを参照のこと）。これらの発見は、内皮細胞表面上でのＡｎｘａ１の発現（Ｏｈ，Ｐ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ２００４；４２９：６２９−３５）が、上記マウスにおいて活動性腫瘍の成長に不可欠であることを示す。

【0039】

細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含む単離されたペプチドが開示される。また、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物が開示される。また、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドをコードする核酸配列を含む単離された核酸が開示される。

【0040】

また、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物を被験体に投与する工程を含む方法が開示される。また、被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、この方法は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを上記被験体に投与する工程を含む、方法が開示される。また、被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、この方法は、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物を上記被験体に投与する工程を含む、方法が開示される。また、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む組成物を上記被験体に投与する工程、および上記被験体において、上記組成物を検出する工程を含む方法が開示される。

【0041】

上記炭水化物受容体は、アネキシン１であり得る。上記アミノ酸配列は、選択的に上記炭水化物受容体を結合し得る。上記被験体は、細胞を含み得る。上記細胞は、腫瘍細胞であり得る。

【0042】

上記アミノ酸配列は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アミノ酸配列と配列番号２との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２からなり得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２の少なくとも５個の連続したアミノ酸を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２の少なくとも６個の連続したアミノ酸を含み得る。

【0043】

上記ペプチドは、配列番号２を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも６個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも７個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも８個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも９個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、成分ペプチドをさらに含み得る。

【0044】

上記成分は、低分子、薬学的薬物、毒素、脂肪酸、検出可能なマーカー、結合タグ、ナノシェル、または酵素であり得る。上記成分は、上記ペプチドに共有結合的に連結し得る。上記成分は、上記ペプチドのアミノ末端に連結し得る。上記成分は、上記ペプチドのカルボキシ末端に連結し得る。上記成分は、上記ペプチド内のアミノ酸に連結し得る。上記成分は、ＳＮ−３８であり得る。上記成分は、検出可能な剤を含み得る。上記成分は、治療剤を含み得る。

【0045】

上記組成物は、上記成分と上記ペプチドとを繋ぐリンカーをさらに含み得る。上記組成物は、薬学的に受容可能なキャリアをさらに含み得る。上記組成物は、検出可能な剤をさらに含み得る。上記組成物は、治療剤をさらに含み得る。上記組成物は、抗がん剤をさらに含み得る。

【0046】

上記方法において上記組成物を検出する工程により、上記被験体における腫瘍を検出し得る。上記方法において上記組成物を検出する工程により、上記被験体におけるがんを診断し得る。上記方法において上記組成物を検出する工程は、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせを検出する工程を含み得、ここで、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせは、上記被験体におけるがんの予後を示す。上記方法は、投与および後の検出を繰り返す工程をさらに含み得、ここで、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせにおける変化は、上記被験体における子宮内膜症の経過を示す。上記方法は、投与および処置後の検出を繰り返す工程をさらに含み得、ここで、上記被験体におけるがん組織に対する上記組成物の結合の、レベル、量、濃度、または組み合わせにおける変化は、上記被験体におけるがんの処置の進展を示す。

【0047】

被験体の細胞におけるアネキシン１のレベルを決定および／または評価する方法を開示する。上記方法は、上記被験体の細胞と、例えば、配列番号２を含む組成物に連結される検出可能な剤を含むアネキシン１結合組成物とを接触させる工程、およびアネキシン１と相互作用するアネキシン１結合組成物のレベルを検出し、それにより上記細胞においてアネキシン１のレベルを決定および／または評価する工程を含み得る。

【0048】

アネキシン１に関連する疾患を有する被験体を同定する方法が本明細書中で開示され、この方法は、上記被験体の細胞とアネキシン１結合組成物とを接触させる工程であって、ここで上記アネキシン１結合組成物は、例えば、配列番号２を含む組成物に連結される成分を含む、工程；および、アネキシン１とアネキシン１結合組成物との間の相互作用を検出し、それにより細胞上のアネキシン１の存在またはレベルを検出する工程であって、ここで細胞上のアネキシン１受容体の存在またはレベルは、上記被験体がアネキシン１に関連する疾患を有していると同定する、工程、を含む。

【0049】

アネキシン１に関連する疾患を有する被験体が本明細書中で開示される。これは、上記被験体がアネキシン１のレベルの増加を有すること、あるいはアネキシン１が、疾患もしくは障害を処置または疾患もしくは障害の症状を改善するために有効に標的化され得ることを意味する。「アネキシン１のレベルの増加」とは、上記被験体における選択された細胞または組織上のアネキシン１の分子の数が、当業者によって受け入れられる正常レベル、基礎レベル、または標準レベルを超えて増加することを意味する。それは、所定の細胞に存在するアネキシン１の分子の数が、基礎量、正常量、または標準量を超えて増加することも意味し得る。この目的のために使用され得る１つの標準レベルは、正常な肺の内皮細胞上のアネキシン１のレベルである。アネキシン１の標準レベルは、例えば、同じ被験体、異なる被験体、または個体の群もしくは集団の正常な肺の内皮細胞を用いて決定され得る。当業者は、被験体において、細胞および組織におけるアネキシン１のレベルを、本明細書中で開示される方法および当業者に公知である方法を用いて決定できることになる。アネキシン１に関連する疾患としては、例えば、いくつかのがんが挙げられる。

【0050】

定義
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈が別の方法で明確に指示しない限り、複数の指示対象を含む。従って、例えば、「薬学的キャリア」への言及は、２つまたはそれより多くのこのようなキャリアの混合物などを含む。

【0051】

範囲は、本明細書中で「約」１つの特定の値から、および／または「約」別の特定の値までと表現され得る。このような範囲が表現されるとき、別の実施形態は、上記１つの特定の値から、および／または他の特定の値までを含む。同様に、値が、先行する「約」の使用によって近似として表現されるとき、特定の値が別の実施形態を形成することが理解される。範囲のそれぞれの終点は、他の終点に関して、および他の終点と独立して、の両方において有効（ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ）であることがさらに理解される。本明細書中で開示される多くの値が存在すること、および各値がまた、それ自体の値の他に、「約」その特定の値として本明細書中で開示されることも理解される。例えば、値「１０」が開示される場合、そのとき「約１０」も開示される。値が開示されるとき、当業者によって適切に理解されるように、その値「以下」、その値「以上」であること、および値間の可能性のある範囲も開示されることがまた理解される。例えば、値「１０」が開示される場合、「１０以下」および「１０以上」も開示される。本願の隅から隅まで、多くの異なるフォーマットでデータが提供されること、およびこのデータが終点および出発点、ならびにデータ点の任意の組み合わせについての範囲を表すことも理解される。例えば、特定のデータ点「１０」および特定のデータ点１５が開示される場合、１０超、１０以上、１０未満、１０以下、および１０と等しい、ならびに１５超、１５以上、１５未満、１５以下、および１５と等しいこと、ならびに１０と１５との間であることが開示されると考えられるということが理解される。２つの特定の単位間の各単位も開示されることがまた、理解される。例えば、１０および１５が開示される場合、そのとき１１、１２、１３、および１４も開示される。

【0052】

本明細書において、およびその後の特許請求の範囲において、以下の意味を有すると定義される多くの用語に対する言及がなされる：
「必要に応じた」または「必要に応じて」は、引き続いて記載される事象または状況が、起こっても起こらなくてもよいこと、およびその記載が上記事象または状況が起こる例、起こらない例を含むことを意味する。

【0053】

本願の隅から隅まで、種々の刊行物が参照される。これらの刊行物の開示は、それらの全体において、これが属する技術の現状をより完全に記載するために、これにより本願に参考として援用される。開示される参考文献はまた、参考文献が依拠する文章において議論される、それらに含まれる資料について、個々に、および具体的に、本明細書中で参考として援用される。

【0054】

開示される方法および組成物が、具体的な合成方法、具体的な分析技術に限定されないこと、またはそうでないと特定されない限り、特定の試薬に限定されないこと、そしてそれ自体が変動し得ることが理解されるべきである。本明細書中で使用される用語が、特定の実施形態のみを記載する目的のためであり、限定することを意図しないことも理解されるべきである。

【0055】

「処置」および「処置する」は、疾患、病理学的状態、または障害を治療、回復、安定化、または予防することを意図した、被験体の医学的管理を意味する。この用語は、積極的な処置、すなわち、疾患、病理学的状態、または障害の改善に対して具体的に向けられた処置を含み、また、原因療法、すなわち、関連する疾患、病理学的状態、または障害の原因の除去に対して向けられた処置を含む。さらに、この用語は、緩和療法、すなわち、疾患、病理学的状態、または障害を治療するよりもむしろ症状の軽減のために設計された処置；予防療法、すなわち、関連する疾患、病理学的状態、または障害の発達を最小限にすること、あるいは関連する疾患、病理学的状態、または障害の発達を部分的もしくは完全に阻害することに対して向けられた処置；ならびに支持療法、すなわち、関連する疾患、病理学的状態、または障害の改善に対して向けられた別の具体的な療法を補足するために用いられる処置を含む。処置は、疾患、病理学的状態、または障害を治療、回復、安定化、または予防することが意図されるが、治療、回復、安定化、または予防を実際にもたらす必要がないことが理解される。処置の効果は、関与する疾患、病理学的状態、または障害に適するように、本明細書中に記載されるように、および当該分野において公知のように、測定または評価され得る。このような測定および評価は、定性的項目および／または定量的項目（ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｔｅｒｍ）においてなされ得る。従って、例えば、疾患、病理学的状態、または障害の特徴もしくは特色、および／あるいは疾患、病理学的状態、または障害の症状は、任意の結果または任意の量まで低減され得る。

【0056】

本明細書で用いられる場合、用語「処置を必要とする」は、世話をする人（例えば、ヒトの場合における、医師、ナース、ナースプラクティショナー、または個人；動物（非ヒト哺乳類が挙げられる）の場合における獣医師）によってなされる被験体が処置を必要とする、または処置から利益を得るという判断を指す。この判断は、世話をする人の専門知識の範囲における多様な要因に基づいてなされるが、本発明の化合物によって処置可能である状態の結果として、上記被験体が病気である、または病気になるという知識を含む。

【0057】

本明細書で用いられる場合、「被験体」としては、動物、植物、細菌、ウイルス、寄生生物、および任意の他の生物または実体が挙げられるが、これらに限定されない。上記被験体は、脊椎動物であり得、より具体的には、哺乳動物（例えば、ヒト、ウマ、ブタ、ウサギ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、非ヒト霊長類、ウシ、ネコ、モルモット、もしくはげっ歯類）、魚類、鳥類、または爬虫類、または両生類であり得る。上記被験体は、無脊椎動物であり得、より具体的には、節足動物（例えば、昆虫および甲殻類）であり得る。その用語は、特定の年齢または性別を示さない。従って、オスであろうとメスであろうと、成長した被験体および生まれたばかりの被験体、ならびに胎児（仔）が含まれることが意図される。患者は、疾患または障害で苦しむ被験体を指す。用語「患者」は、ヒトおよび獣医学の被験体を含む。

【0058】

アネキシンは、ほとんどの真核細胞タイプにおいて発現するカルシウム結合タンパク質および膜結合タンパク質に密接に関連するファミリーである。それらの多様な機能は、小胞輸送（ｖｅｓｉｃｌｅ ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ）、細胞分裂、アポトーシス、カルシウムシグナル伝達、および成長調節を含む。アネキシンは、最も深刻なヒト疾患（例えば、心血管系の疾患、およびがん）のいくつかに関連している。もともとリポコルチンと名付けられた３７ｋＤａのタンパク質であるアネキシン１は、炎症性応答を阻害し、いくつかの細胞機能（食作用、管外遊出、メディエーターの生成、および好中球のリクルートが挙げられる）に関与する。さらに、アネキシン１は、炎症プロセスに関係する細胞（例えば、内皮細胞、上皮細胞、肥満細胞、および滑膜細胞）に影響し得る。

【0059】

材料
開示される組成物を調製するために使用されるべき構成要素、ならびに本明細書中で開示される方法中で使用されるべき組成物自体が開示される。これらおよび他の材料が本明細書中で開示され、これらの材料の組み合わせ、部分集合、相互作用、群などが開示されるとき、これらの化合物の、それぞれの様々な個々のおよび集合的な、組み合わせおよび順列の具体的な参照は、明示的に開示され得ないが、それぞれは、本明細書中で具体的に企図および記載されるということが理解される。例えば、特定のペプチドが開示および議論され、多くの分子（上記ペプチドが挙げられる）に対してなされ得る多くの改変が議論される場合、上記ペプチドの、それぞれの組み合わせおよび順列、ならびにあらゆる組み合わせおよび順列、ならびにそうでないと具体的に示されない限り可能である改変が具体的に企図される。従って、分子Ａ、Ｂ、およびＣのクラス、ならびに分子Ｄ、Ｅ、およびＦのクラスが開示され、組み合わせ分子の例、Ａ−Ｄが開示される場合、そのとき、たとえそれぞれが個々に記載されないとしても、それぞれは、個々におよび集合的に企図されるが、それは、組み合わせ、Ａ−Ｅ、Ａ−Ｆ、Ｂ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、Ｃ−Ｄ、Ｃ−Ｅ、およびＣ−Ｆが開示されると考えられることを意味する。同様に、これらの任意の部分集合または組み合わせも開示される。従って、例えば、Ａ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、およびＣ−Ｅの部分群が開示されると考えられることになる。この概念は、本願の全ての局面に当てはまり、この局面としては、開示される組成物を作製および使用する方法におけるステップが挙げられるが、これに限定されない。従って、行われ得る多様な追加のステップが存在する場合、これらの追加のステップのそれぞれは、開示される方法の、任意の具体的な実施形態または実施形態の組み合わせで行われ得ることが理解される。

【0060】

開示されるアミノ酸配列は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得る。開示されるペプチドは、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含み得る。開示される組成物は、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを、含み得る。細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドをコードする核酸配列を含み得る単離された核酸が開示される。

【0061】

上記アミノ酸配列は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アミノ酸配列と配列番号２との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２からなり得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２の少なくとも５個の連続したアミノ酸を含み得る。上記アミノ酸配列は、配列番号２の少なくとも６個の連続したアミノ酸を含み得る。

【0062】

上記ペプチドは、配列番号２を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも６個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも７個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも８個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも９個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、成分ペプチドをさらに含み得る。

【0063】

上記組成物は、腫瘍血管内で結合し得る。上記組成物は、腫瘍の成長を低減し得る。上記組成物は、少なくとも１００のアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。上記組成物は、少なくとも１０００のアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。上記組成物は、少なくとも１０，０００のアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。

【0064】

上記組成物は、１つ以上の成分をさらに含み得る。上記成分は、抗血管新生剤、血管新生促進剤、がん化学療法剤、細胞傷害性薬剤、抗炎症剤、抗関節炎剤、ポリペプチド、核酸分子、および低分子からなる群から独立して選択され得る。上記成分のうちの少なくとも１つは、治療剤であり得る。上記治療剤は、がんを処置するための化合物または組成物を含み得る。上記治療剤は、プログラム細胞死またはアポトーシスを誘導するための化合物または組成物を含み得る。上記治療剤は、Ａｂｒａｘａｎｅであり得る。上記治療剤は、パクリタキセルであり得る。上記治療剤は、ドセタキセルであり得る。上記成分のうちの少なくとも１つは、検出可能な剤であり得る。上記検出可能な剤は、ＦＡＭであり得る。

【0065】

上記組成物は、選択的に腫瘍血管系に向かうことができる。上記組成物は、治療効果を有し得る。上記治療効果は、全身腫瘍組織量の増加を遅くすること、または全身腫瘍組織量の低減であり得る。上記治療効果は、腫瘍サイズの増加を遅くすること、または腫瘍サイズの低減であり得る。上記治療効果は、腫瘍における血液循環の、低減または遮断であり得る。

【0066】

Ａ．アネキシン１結合化合物
アネキシン１結合化合物は、アネキシン１と相互作用する能力を有する任意の化合物であり得る。上記アネキシン１結合化合物は、アネキシン１結合アミノ酸配列であり得る。開示されるアミノ酸配列は、アネキシン１結合アミノ酸配列であり得る。アネキシン１結合化合物は、例えば、アネキシン１に結合し得、選択的にアネキシン１に結合し得、アネキシン１含有細胞および組織に向かうことができ、アネキシン１含有細胞および組織を標的にし得、腫瘍血管系に結合し得、選択的に腫瘍血管系に結合し得、アネキシン１含有細胞および組織に蓄積し得、そして腫瘍血管系において蓄積し得る。開示されるアネキシン１結合化合物およびアミノ酸配列は、ホーミング（ｈｏｍｉｎｇ）分子またはホーミングペプチドであり得る。

【0067】

上記アネキシン１結合化合物は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アネキシン１結合化合物と配列番号２との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２の少なくとも５個の連続したアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２の少なくとも６個の連続したアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも６個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも７個のアミノ酸を含み得る。上記ペプチドは、少なくとも８個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも９個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１０個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１１個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１２個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１３個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１４個のアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１５個のアミノ酸を含み得る。

【0068】

上記アネキシン１結合化合物は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２を含むアミノ酸配列を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも５５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得、ここで、上記アミノ酸配列と配列番号２との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも７０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２を含むアミノ酸配列を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２からなるアミノ酸配列を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２の少なくとも５個の連続したアミノ酸を含むアミノ酸配列を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２の少なくとも６個の連続したアミノ酸を含むアミノ酸配列を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも６個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも７個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも８個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも９個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１０個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１１個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１２個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１３個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１４個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１５個のアミノ酸を含むペプチドを含み得る。

【0069】

上記アネキシン１結合化合物は、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有する配列番号２を含むアミノ酸配列からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも５５％の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり得、ここで、上記アミノ酸配列と配列番号２との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも７０％の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２を含むアミノ酸配列からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２からなるアミノ酸配列からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２の少なくとも５個の連続したアミノ酸を含むアミノ酸配列からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２の少なくとも６個の連続したアミノ酸を含むアミノ酸配列からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも６個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも７個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも８個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも９個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１０個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１１個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１２個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１３個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１４個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、少なくとも１５個のアミノ酸を含むペプチドからなり得る。

【0070】

上記アネキシン１−結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、極性または荷電したアミノ酸である。例えば、各Ｘは、独立して、アミノ酸Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、およびＭの全て、その全てのアミノ酸のうちの１０個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの９個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの８個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの７個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの６個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの５個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの４個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの３個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの２個の任意の組、またはその全てのアミノ酸のうちの任意の１個、から選択され得る。例えば、各Ｘは、独立して、３つのアミノ酸Ｃ、Ｒ、およびＫの組から選択され得る。別の例として、各Ｘは、独立して、２つのアミノ酸ＣおよびＲの組から選択され得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。例として、上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ（配列番号１７）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ（配列番号１９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ（配列番号１８）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ（配列番号２２）を含み得る。

【0071】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、またはＭである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0072】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、またはＫである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0073】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、ＣまたはＲである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0074】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、極性または荷電したアミノ酸である。例えば、各Ｘは、独立して、アミノ酸Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、およびＭの全て、その全てのアミノ酸のうちの１０個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの９個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの８個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの７個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの６個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの５個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの４個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの３個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの２個の任意の組、またはその全てのアミノ酸のうちの任意の１個、から選択され得る。例えば、各Ｘは、独立して、３つのアミノ酸Ｃ、Ｒ、およびＫの組から選択され得る。別の例として、各Ｘは、独立して、２つのアミノ酸ＣおよびＲの組から選択され得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。例として、上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ（配列番号１７）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ（配列番号１９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ（配列番号１８）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ（配列番号２２）からなり得る。

【0075】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、またはＭである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0076】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、またはＫである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0077】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜８）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸ（配列番号２０のアミノ酸１〜１１）、またはＩＦＬＬＷＱＲＸＸＸＸＸ（配列番号２０）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、ＣまたはＲである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0078】

いくつかの形態において、上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸１〜７において、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有し得る。いくつかの形態において、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アネキシン１結合化合物とＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。いくつかの形態において、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。いくつかの形態において、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。いくつかの形態において、上記アネキシン１結合化合物は、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）の少なくとも５個の連続したアミノ酸を有する。いくつかの形態において、上記アネキシン１結合化合物は、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）の少なくとも６個の連続したアミノ酸を有する。

【0079】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、極性または荷電したアミノ酸である。例えば、各Ｘは、独立して、アミノ酸Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、およびＭの全て、その全てのアミノ酸のうちの１０個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの９個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの８個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの７個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの６個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの５個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの４個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの３個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの２個の任意の組、またはその全てのアミノ酸のうちの任意の１個、から選択され得る。例えば、各Ｘは、独立して、３つのアミノ酸Ｃ、Ｒ、およびＫの組から選択され得る。別の例として、各Ｘは、独立して、２つのアミノ酸ＣおよびＲの組から選択され得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。例として、上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ（配列番号１７）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ（配列番号１９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ（配列番号１８）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ（配列番号２２）を含み得る。

【0080】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、またはＭである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0081】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、またはＫである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0082】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）を含み得、ここで各Ｘは、独立して、ＣまたはＲである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0083】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、極性または荷電したアミノ酸である。例えば、各Ｘは、独立して、アミノ酸Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、およびＭの全て、その全てのアミノ酸のうちの１０個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの９個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの８個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの７個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの６個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの５個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの４個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの３個の任意の組、その全てのアミノ酸のうちの２個の任意の組、またはその全てのアミノ酸のうちの任意の１個、から選択され得る。例えば、各Ｘは、独立して、３つのアミノ酸Ｃ、Ｒ、およびＫの組から選択され得る。別の例として、各Ｘは、独立して、２つのアミノ酸ＣおよびＲの組から選択され得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。例として、上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ（配列番号１７）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ（配列番号１９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ（配列番号１８）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ（配列番号２２）からなり得る。

【0084】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、Ｈ、Ｄ、Ｅ、Ｎ、Ｑ、またはＭである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0085】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、Ｃ、Ｒ、またはＫである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0086】

上記アネキシン１結合化合物は、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１０）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸ（配列番号２１のアミノ酸１〜１１）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＸＸＸＸ（配列番号２１）からなり得、ここで各Ｘは、独立して、ＣまたはＲである。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの１個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｃであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの２個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの３個は、Ｒであり得る。いくつかの形態において、上記Ｘのうちの４個は、Ｒであり得る。

【0087】

いくつかの形態において、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列番号２１のアミノ酸１〜８において、１つ以上の保存的アミノ酸置換を有し得る。いくつかの形態において、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アネキシン１結合化合物とＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。いくつかの形態において、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。いくつかの形態において、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。いくつかの形態において、上記アネキシン１結合化合物は、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）の少なくとも５個の連続したアミノ酸を有する。いくつかの形態において、上記アネキシン１結合化合物は、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ（配列番号１７）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ（配列番号１９）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ（配列番号１８）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ（配列番号２２）の少なくとも６個の連続したアミノ酸を有する。

【0088】

上記アネキシン１結合化合物は、アミノ酸１〜７に保存的アミノ酸置換を有さないか、１つ有するかまたは１つ超有する配列番号２０のアミノ酸１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列番号２０のアミノ酸１〜７に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アネキシン１結合化合物と配列番号２０のアミノ酸１〜７との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列番号２０のアミノ酸１〜７に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得、配列ＩＦＬＬＷＱＲ（配列番号２０のアミノ酸１〜７）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列番号２０のアミノ酸１〜７に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸８、またはアミノ酸８〜９、８〜１０、８〜１１、または８〜１２、および配列番号２０のアミノ酸１〜７のうちの少なくとも５個の連続したアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２０のアミノ酸１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得、配列番号２０のアミノ酸１〜７のうちの少なくとも６個の連続したアミノ酸を含み得る。

【0089】

上記アネキシン１結合化合物は、アミノ酸１〜８に保存的アミノ酸置換を有さないか、１つ有するかまたは１つ超有する配列番号２１のアミノ酸１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２１のアミノ酸１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列番号２１のアミノ酸１〜８に対して少なくとも５５％の配列同一性を有し得、ここで、上記アネキシン１結合化合物と配列番号２１のアミノ酸１〜８との間の違いは、保存的アミノ酸置換からなる。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２１のアミノ酸１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列番号２１のアミノ酸１〜７に対して少なくとも７０％の配列同一性を有し得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２１のアミノ酸１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得、配列ＩＦＬＬＷＱＲＣ（配列番号２１のアミノ酸１〜８）に相当する上記アネキシン１結合化合物の構成部分は、配列番号２１のアミノ酸１〜８に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２１のアミノ酸１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２１のアミノ酸１〜９、１〜１０、１〜１１、または１〜１２からなり得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２１のアミノ酸９、またはアミノ酸９〜１０、９〜１１、または９〜１２、および配列番号２１のアミノ酸１〜８のうちの少なくとも５個の連続したアミノ酸を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、配列番号２１のアミノ酸９、またはアミノ酸９〜１０、９〜１１、または９〜１２、および配列番号２１のアミノ酸１〜８のうちの少なくとも６個の連続したアミノ酸を含み得る。

【0090】

開示されるペプチドおよび組成物は、あらゆる数のアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。例として、上記組成物は、少なくとも１、５、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２２５、２５０、２７５、３００、３２５、３５０、３７５、４００、４２５、４５０、４７５、５００、５２５、５５０、５７５、６００、６２５、６５０、６７５、７００、６２５、７５０、７７５、８００、８２５、８５０、８７５、９００、９２５、９５０、９７５、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２２５０、２５００、２７５０、３０００、３５００、４０００、４５００、５０００、５５００、６０００、６５００、７０００、７５００、８０００、８５００、９０００、９５００、１０，０００、１５，０００、２０，０００、２５，０００、３０，０００、３５，０００、４０，０００、４５，０００、５０，０００、７５，０００、または１００，０００、またはそれより多くのアネキシン１結合アミノ酸配列を含み得る。上記ペプチドまたは組成物はまた、上に列挙された数の間のあらゆる数を含み得る。

【0091】

本明細書中で用いられる場合、用語「ホーミング分子」は、インビボで、他の組織または正常組織よりも好んで指定された標的部位または組織に選択的に向かう任意の分子を意味する。同様に、用語「ホーミングペプチド」または「ホーミングペプチドミメティック（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ）」は、インビボで、他の組織または正常組織よりも好んで指定された標的部位または組織に選択的に向かうペプチドを意味する。インビボで、例えば、腫瘍に選択的に向かうホーミング分子は、全ての腫瘍に向かうことができること、または腫瘍タイプのうちの１つまたは部分集合への優先的なホーミングを示し得ることが理解される。

【0092】

「選択的に向かう」とは、インビボで、上記ホーミング分子が、非標的と比較して、優先的に標的に結合することを意味する。例えば、上記ホーミング分子は、非腫瘍性組織または非脈管組織と比較して、優先的に腫瘍血管系に結合し得る。このようなホーミング分子は、例えば、腫瘍に選択的に向かうことができる。例えば、腫瘍への選択的なホーミングは、一般に、非腫瘍組織のうちの数個の組織タイプと比較して、腫瘍（または他の標的）内での少なくとも２倍多いの局在によって特徴づけられる。ホーミング分子は、非腫瘍性組織のうちの数個もしくは多くの組織タイプと比較、またはほとんどもしくは全ての非腫瘍性組織と比較して、腫瘍（または他の標的）への５倍、１０倍、２０倍、またはそれより多くの優先的な局在によって特徴づけられ得る。従って、いくつかの場合、ホーミング分子は、標的組織へのホーミングの他に、部分的に、１つ以上の正常器官に向かうことが理解される。選択的なホーミングはまた、標的化と称され得る。

【0093】

多くのホーミング分子およびホーミングペプチドは、標的組織の血管系に向かう。しかし、ホーミングは、便宜のために本明細書中のいくつかの箇所において、ホーミング分子またはホーミングペプチドが実際に向かってもよい血管系に結合する組織または細胞へのホーミングと称される。従って、例えば、腫瘍血管系に向かうホーミングペプチドは、本明細書中で腫瘍組織へのホーミングまたは腫瘍細胞へのホーミングと称され得る。ホーミング分子もしくはホーミングペプチドを、例えば、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、もしくは組成物に含ませるか、または結合させることによって、上記タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、もしくは組成物は、標的化することができるか、または上記ホーミング分子もしくはホーミングペプチドの標的に向かうことができる。この手法で、上記タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、または組成物は、上記ホーミング分子またはホーミングペプチドの標的に向かうと言われ得る。便宜のために、そしてそうでないと示されない限り、タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、組成物などのホーミングへの言及は、上記タンパク質、ペプチド、アミノ酸配列、組成物などが、適切なホーミング分子またはホーミングペプチドを含むこと、またはこれらに結合することを示すと意図される。

【0094】

上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、選択的に腫瘍に向かい得る。上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に向かい得る。上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、１つ以上の特定のタイプの腫瘍に選択的に向かい得る。上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的に向かい得る。上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、１つ以上の特定の病期の腫瘍またはがんに選択的に向かい得る。上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、１つ以上の特定の病期の腫瘍またはがんの血管系に選択的に向かい得る。上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、１つ以上の特定の病期の１つ以上のタイプの腫瘍に選択的に向かい得る。上記組成物、ペプチド、またはアミノ酸配列は、１つ以上の異なる病期の１つ以上の特定のタイプの腫瘍の血管系に選択的に向かい得る。

【0095】

開示されるアネキシン１結合化合物は、アネキシン１結合化合物の改変された形態を含み得る。上記アネキシン１結合化合物は、任意の有用な改変を有し得る。例えば、いくつかの改変は、上記アネキシン１結合化合物を安定化し得る。例えば、開示されるアネキシン１結合アミノ酸配列は、メチル化されたアネキシン１結合アミノ酸配列を含む。

【0096】

本明細書中で用いられる場合、タンパク質、ペプチド、アミノ酸セグメント、アミノ酸配列などの「メチル化された誘導体」は、メチル化された上記タンパク質、ペプチド、アミノ酸セグメント、アミノ酸配列などの形態を指す。文脈がそうでないと示さない限り、タンパク質、ペプチド、アミノ酸セグメント、アミノ酸配列などのメチル化された誘導体への言及は、メチル化以外に、基礎のタンパク質、ペプチド、アミノ酸セグメント、アミノ酸配列などについてのどの改変も含まない。メチル化された誘導体はまた、他の改変を有し得るが、このような改変は、一般に言及される。例えば、アミノ酸配列の保存的バリアントは、基礎とされるアミノ酸配列の保存的アミノ酸置換を含む。従って、例えば、具体的なアミノ酸配列の「メチル化された誘導体」、「およびその保存的バリアント」への言及は、上記具体的なアミノ酸配列のメチル化された形態、および上記具体的なアミノ酸配列の保存的バリアントのメチル化された形態を含むが、誘導物（ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ）の任意の他の改変は含まない。別の例として、アミノ酸置換を含むアミノ酸セグメントのメチル化された誘導体への言及は、上記アミノ酸配列のメチル化された形態、およびアミノ酸置換を含むアミノ酸配列のメチル化された形態を含む。

【0097】

ペプチドは、多様な改変を有し得る。改変は、上記ペプチドの特性を変える、または改善するために使用され得る。例えば、開示されるペプチドは、１つ以上のアミノ酸における、Ｎ−メチル化、Ｏ−メチル化、Ｓ−メチル化、Ｃ−メチル化、または組み合わせであり得る。

【0098】

開示されるペプチドのアミノ末端および／またはカルボキシ末端は、改変され得る。アミノ末端の改変としては、メチル化（例えば、−ＮＨＣＨ_３、または−Ｎ（ＣＨ３）_２）、アセチル化（例えば、酢酸、またはそのハロゲン化誘導体（例えば、α−クロロ酢酸、α−ブロモ酢酸、またはα−ヨード酢酸）を用いて）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）基を加えること、またはＲＣＯＯ−によって定義されるカルボキシレート官能性もしくはＲ−ＳＯ_２−によって定義されるスルホニル官能性（ここでＲは、アルキル、アリール、ヘテロアリール、およびアルキルアリールなどからなる群から選択される）を含む任意のブロック基、ならびに同様の基でアミノ末端をブロックすることが挙げられる。当業者はまた、デスアミノ酸をＮ末端に組み込んで（その結果、Ｎ末端アミノ基がなくなる）、プロテアーゼに対する感受性を減少させるか、またはペプチド化合物のコンフォメーションを制限し得る。好ましい実施形態において、上記Ｎ末端は、酢酸または無水酢酸でアセチル化される。

【0099】

カルボキシ末端の改変は、遊離酸をカルボキサミド基と置き換える工程、または環状ラクタムをカルボキシ末端において形成して、構造上の拘束を導入する工程を含む。当業者はまた、開示されるペプチドを環化するか、または末端のアミノ基またはカルボキシル基が存在しないように、ペプチドの末端においてデスアミノもしくはデスカルボキシ残基を組み込んで、プロテアーゼに対する感受性を減少させるか、またはペプチドのコンフォメーションを制限し得る。開示されるペプチドのＣ末端の官能基としては、アミド、低級アルキルアミド（ａｍｉｄｅ ｌｏｗｅｒ ａｌｋｙｌ）、ジ（低級アルキル）アミド（ａｍｉｄｅ ｄｉ（ｌｏｗｅｒ ａｌｋｙｌ））、低級アルコキシ、ヒドロキシ、およびカルボキシ、ならびにそれらの低級エステル誘導体、ならびにそれらの薬学的に受容可能な塩が挙げられる。

【0100】

当業者は、遺伝的にコードされたアミノ酸（または立体異性体のＤアミノ酸）の天然に存在する側鎖を、他の側鎖、例えば、基（例えば、アルキル、低級（Ｃ_１〜６）アルキル、環状４員、５員、６員、７員アルキル、アミド、低級アルキルアミド ジ（低級アルキル）アミド、低級アルコキシ、ヒドロキシ、およびカルボキシ、ならびにそれらの低級エステル誘導体）で、および４員、５員、６員、７員複素環式基で置き換えることができる。特に、プロリン残基の環のサイズが５員から４員、６員、または７員に変えられるプロリン類似体が用いられ得る。環式基（ｃｙｃｌｉｃ ｇｒｏｕｐ）は、飽和であっても不飽和であってもよく、不飽和の場合、芳香族であっても非芳香族であってもよい。複素環式基は、好ましくは、１つ以上の窒素、酸素、および／または硫黄ヘテロ原子を含む。このような基の例としては、フラザニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、モルホリニル（例えば、モルホリノ）、オキサゾリル、ピペラジニル（例えば、１−ピペラジニル）、ピペリジル（例えば、１−ピペリジル、ピペリジノ）、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル（例えば、１−ピロリジニル）、ピロリニル（ｐｙｒｒｏｌｉｎｙｌ）、ピロリル、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、チオモルホリニル（例えば、チオモルホリノ）、およびトリアゾリルが挙げられる。これらの複素環式基は、置換されていても非置換であってもよい。基が置換される場合、その置換基は、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、酸素、または置換または非置換のフェニルであり得る。

【0101】

当業者はまた、リン酸化、および他の方法［例えば、Ｈｒｕｂｙ，ｅｔ ａｌ．（１９９０） Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．２６８：２４９−２６２に記載されるような］によってペプチドを容易に改変し得る。

【0102】

開示されるペプチドはまたは、同様の生物学的活性を有する非ペプチド性化合物についての構造モデルとして役立つ。当業者は、多様な技術が、リードペプチド化合物と同じまたは同様の所望される生物学的活性を有する化合物、また溶解性、安定性、および加水分解およびタンパク質分解に対する感受性に関して、リードペプチド化合物よりも好都合な活性を有する化合物を構築するのに利用可能であることを認識する［Ｍｏｒｇａｎ ａｎｄ Ｇａｉｎｏｒ（１９８９）Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２４：２４３−２５２を参照のこと］。これらの技術としては、ペプチド骨格を、ホスホネート、アミデート、カルバメート、スルホンアミド、第二級アミン、およびＮ−メチルアミノ酸から構成される骨格と置き換える工程が挙げられるが、これに限定されない。

【0103】

開示されるアネキシン１結合化合物、ペプチド、アミノ酸配列、成分、治療剤などの全ては、本明細書中に記載されるように使用され得る。本明細書中に記載されるあらゆる一般のまたは特定のアネキシン１結合化合物、ペプチド、アミノ酸配列、成分、治療剤などは、個々にまたは群においてのいずれかで、アネキシン１結合化合物、ペプチド、アミノ酸配列、成分、治療剤などの任意の組に具体的に含まれ得るか、またはその任意の組から具体的に除外され得、そして／あるいは任意の使用に具体的に含まれ得るか、または任意の使用から具体的に除外され得る。例えば、Ｉ−ペプチドおよび／またはＩ−ペプチドの配列バリアントは、例えば、アネキシン１結合化合物、ペプチド、アミノ酸配列などの任意の組から具体的に除外され得、そして／または任意の使用から具体的に除外され得る。別の例として、ゲルダナマイシンは、例えば、成分、治療剤などの任意の組から具体的に除外され得、そして／または任意の使用から具体的に除外され得る。別の例として、ＩＦ７（配列番号２）および／またはＩＦ７の配列バリアントは、例えば、アネキシン１結合化合物、ペプチド、アミノ酸配列などの任意の組から具体的に除外され得、そして／または任意の使用から具体的に除外され得る。本明細書中に記載されるあらゆる一般のまたは特定のアネキシン１結合化合物、ペプチド、アミノ酸配列、成分、治療剤などは、個々にまたは群においてのいずれかで、本明細書中に記載されるようなアネキシン１結合化合物、ペプチド、アミノ酸配列、成分、治療剤など任意の組に具体的に含まれ得るか、またはその任意の組から具体的に除外され得、そして／あるいは本明細書中に記載されるような任意の使用に具体的に含まれ得るか、またはそのような任意の使用から具体的に除外され得る。

【0104】

Ｂ．ペプチドおよびアミノ酸配列
いくつかの形態において、開示されるペプチドおよびアミノ酸配列は、ペプチド、ペプチドミメティック、および／またはアミノ酸セグメントであり得るか、これらを含み得る。文脈がそうでないと示さない限り、本明細書中での「ペプチド」への言及は、また、ペプチドの一部を形成し得るアミノ酸配列、またはペプチド全体を構成するアミノ酸配列を指すことが意図される。開示されるペプチドは、単離された形態であり得る。開示されるペプチドに関して本明細書中で用いられる場合、用語「単離された」は、材料（例えば、混入しているポリペプチド、脂質、核酸、および細胞において通常上記ペプチドに結合するか、またはライブラリーもしくは粗製調製物において上記ペプチドに結合する他の細胞材料）を相対的に含まない形態であるペプチドを意味する。

【0105】

開示されるペプチドおよびアミノ酸配列は、任意の適切な長さを有し得る。開示されるペプチドは、例えば、６残基未満、７残基未満、８残基未満、９残基未満、１０残基未満、１２残基未満、１５残基未満、２０残基未満、２５残基未満、３０残基未満、３５残基未満、または４０残基未満の比較的短い長さを有し得る。開示されるペプチドはまた、顕著により長い配列の関連において有用であり得る。従って、上記ペプチドは、例えば、５０残基まで、１００残基まで、１５０残基まで、２００残基まで、２５０残基まで、３００残基まで、４００残基まで、５００残基まで、１０００残基まで、または２０００残基までの長さを有し得る。特定の実施形態において、ペプチドは、少なくとも１０残基、少なくとも２０残基、少なくとも３０残基、少なくとも４０残基、少なくとも５０残基、少なくとも６０残基、少なくとも７０残基、少なくとも８０残基、少なくとも９０残基、少なくとも１００残基、または少なくとも２００残基の長さを有し得る。さらなる実施形態において、ペプチドは、５〜２００残基、５〜１００残基、５〜９０残基、５〜８０残基、５〜７０残基、５〜６０残基、５〜５０残基、５〜４０残基、５〜３０残基、５〜２０残基、５〜１５残基、５〜１０残基、１０〜２００残基、１０〜１００残基、１０〜９０残基、１０〜８０残基、１０〜７０残基、１０〜６０残基、１０〜５０残基、１０〜４０残基、１０〜３０残基、１０〜２０残基、２０〜２００残基、２０〜１００残基、２０〜９０残基、２０〜８０残基、２０〜７０残基、２０〜６０残基、２０〜５０残基、２０〜４０残基、または２０〜３０残基の長さを有し得る。本明細書中で用いられる場合、用語「残基」は、アミノ酸、またはアミノ酸類似体を指す。

【0106】

開示されるアミノ酸配列は、例えば、６残基未満、７残基未満、８残基未満、９残基未満、１０残基未満、１２残基未満、１５残基未満、２０残基未満、２５残基未満、３０残基未満、３５残基未満、または４０残基未満の比較的短い長さを有し得る。開示されるアミノ酸配列はまた、顕著により長い配列の関連において有用であり得る。従って、上記アミノ酸配列は、例えば、５０残基まで、１００残基まで、１５０残基まで、２００残基まで、２５０残基まで、３００残基まで、４００残基まで、５００残基まで、１０００残基まで、または２０００残基までの長さを有し得る。特定の実施形態において、アミノ酸配列は、少なくとも１０残基、少なくとも２０残基、少なくとも３０残基、少なくとも４０残基、少なくとも５０残基、少なくとも６０残基、少なくとも７０残基、少なくとも８０残基、少なくとも９０残基、少なくとも１００残基、または少なくとも２００残基の長さを有し得る。さらなる実施形態において、アミノ酸配列は、５〜２００残基、５〜１００残基、５〜９０残基、５〜８０残基、５〜７０残基、５〜６０残基、５〜５０残基、５〜４０残基、５〜３０残基、５〜２０残基、５〜１５残基、５〜１０残基、１０〜２００残基、１０〜１００残基、１０〜９０残基、１０〜８０残基、１０〜７０残基、１０〜６０残基、１０〜５０残基、１０〜４０残基、１０〜３０残基、１０〜２０残基、２０〜２００残基、２０〜１００残基、２０〜９０残基、２０〜８０残基、２０〜７０残基、２０〜６０残基、２０〜５０残基、２０〜４０残基、または２０〜３０残基の長さを有し得る。本明細書中で用いられる場合、用語「残基」は、アミノ酸、またはアミノ酸類似体を指す。

【0107】

本明細書が、種々のタンパク質、タンパク質配列、ペプチド、ペプチド配列、およびアミノ酸配列を議論しているとおりに、これらの配列をコードし得る核酸も開示されることが理解される。このことは、具体的なタンパク質配列に関連する全ての縮重配列、すなわち、１つの特定のタンパク質配列をコードする配列を有する全ての核酸、ならびに上記タンパク質配列の開示されるバリアントおよび誘導体をコードする全ての核酸（縮重核酸が挙げられる）を含む。従って、それぞれの特定の核酸配列が、本明細書中で書き出されていないことがあるが、各配列およびあらゆる配列が、開示されるタンパク質配列を介して、本明細書中で実際に開示および記載されることが理解される。

【0108】

ペプチドに似ているが、天然のペプチド連結を介してつながれていない分子が、生成され得る。例えば、アミノ酸またはアミノ酸類似体についての連結としては、−ＣＨ_２ＮＨ−、−ＣＨ_２Ｓ−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ）、−ＣＯＣＨ_２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２−、および−ＣＨ_２ＳＯ−が挙げられ得る。これらおよび他のものは、Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，ｅｄｓ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐ．２６７（１９８３）；Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．，Ｖｅｇａ Ｄａｔａ（Ｍａｒｃｈ １９８３），Ｖｏｌ．１，Ｉｓｓｕｅ ３，Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｂａｃｋｂｏｎｅ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ（一般概説）；Ｍｏｒｌｅｙ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ（１９８０）ｐｐ．４６３−４６８；Ｈｕｄｓｏｎ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｅｐｔ Ｐｒｏｔ Ｒｅｓ １４：１７７−１８５（１９７９）（−ＣＨ_２ＮＨ−、−ＣＨ_２ＣＨ_２−）；Ｓｐａｔｏｌａ ｅｔ ａｌ．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ ３８：１２４３−１２４９（１９８６）（−ＣＨ_２Ｓ−）；Ｈａｎｎ Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．Ｉ ３０７−３１４（１９８２）（−ＣＨ＝ＣＨ−、ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ）；Ａｌｍｑｕｉｓｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２３：１３９２−１３９８（１９８０）（−ＣＯＣＨ_２−）；Ｊｅｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２３：２５３３（１９８２）（−ＣＯＣＨ_２−）；Ｓｚｅｌｋｅ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ａｐｐｌｎ，ＥＰ ４５６６５ ＣＡ（１９８２）：９７：３９４０５（１９８２）（−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２−）；Ｈｏｌｌａｄａｙ ｅｔ ａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ．Ｌｅｔｔ ２４：４４０１−４４０４（１９８３）（−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２−）；およびＨｒｕｂｙ Ｌｉｆｅ
Ｓｃｉ ３１：１８９−１９９（１９８２）（−ＣＨ_２−Ｓ−）において見出され得、これらのそれぞれは、本明細書中で参考として援用される。特に好ましい非ペプチド連結は、−ＣＨ_２ＮＨ−である。ペプチド類似体は、結合原子（例えば、β−アラニン、およびγ−アミノ酪酸など）間に１つ超の原子を有し得ることが理解される。

【0109】

例えば、別個の機能を有する第二のペプチドに縮合されるアネキシン１結合ペプチドを含む二官能性ペプチドがまた、開示される。このような二官能性ペプチドは、全長の分子の異なる構成部分（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｏｒｔｉｏｎｓ）によって与えられる少なくとも２つの機能を有し、例えば、腫瘍ホーミングの他に抗血管新生活性、またはアポトーシス促進活性（ｐｒｏ−ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ）を表し得る。

【0110】

それぞれが独立してペプチドまたはアミノ酸配列（例えば、アミノ酸配列（配列番号２）、または保存的バリアントもしくはそのペプチドミメティック）を含む少なくとも２つの部分配列（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｃｅ）を含む単離された多価のペプチドがまた、開示される。上記多価のペプチドは、例えば、それぞれが独立してペプチドを含むこのような部分配列のうちの少なくとも３個、少なくとも５個、または少なくとも１０個を有し得る。特定の実施形態において、上記多価のペプチドは、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１５個、または２０個の、同一部分配列または非同一部分配列を有し得る。これは、開示される組成物に含まれ得る複数のアネキシン１結合アミノ酸配列に加えてのことである。さらなる実施形態において、上記多価のペプチドは、同一部分配列（例えば、配列番号２の繰り返し）を含み得る。さらなる実施形態において、上記多価のペプチドは、任意の介在アミノ酸によって分離されない隣接する同一部分配列または非同一部分配列を含む。

【0111】

本明細書で用いられる場合、用語「ペプチド」は、ペプチド、タンパク質、およびタンパク質のフラグメントなどを意味するために広く使用される。本明細書で用いられる場合、用語「ペプチドミメティック」は、それが構造的な基礎となるペプチドの活性を有するペプチド様分子を意味する。このようなペプチドミメティックとしては、化学的に改変されたペプチド、天然に存在しないアミノ酸を含むペプチド様分子、およびペプトイドが挙げられ、ペプチドミメティックが由来するペプチドの標的との選択的相互作用などの活性を有する（例えば、Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｒｏ，Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，ｉｎ「Ｂｕｒｇｅｒ’ｓ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ」Ｖｏｌ．１（ｅｄ．Ｍ．Ｅ．Ｗｏｌｆｆ；Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ １９９５），ｐａｇｅｓ ８０３−８６１を参照のこと）。

【0112】

多様なペプチドミメティックは、当該分野において公知であり、例えば、拘束されたアミノ酸、ペプチド二次構造を模倣する非ペプチド構成要素を含むペプチド様分子、またはアミド結合等価体（ｉｓｏｓｔｅｒｅ）が挙げられる。拘束された天然に存在しないアミノ酸を含むペプチドミメティックは、例えば、α−メチル化アミノ酸；α，α．−ジアルキルグリシンまたはα−アミノシクロアルカンカルボン酸；Ｎ^α−Ｃ^α環化アミノ酸；Ｎ^α−メチル化アミノ酸；β−またはγ−アミノシクロアルカンカルボン酸；α，β−不飽和アミノ酸；β，β−ジメチルまたはβ−メチルアミノ酸；β−置換−２，３−メタノアミノ酸；Ｎ−Ｃ^εまたはＣ^α−Ｃ^Δ環化アミノ酸；置換プロリン、または別のアミノ酸ミメティックを含み得る。ペプチド二次構造を模倣するペプチドミメティックは、例えば、非ペプチド性β−ターン模擬体；γ−ターン模擬体；β−シート構造の模擬体；または螺旋構造の模擬体を含み得、これらのそれぞれは、当該分野において周知である。ペプチドミメティックはまた、例えば、アミド結合等価体（例えば、レトロ−インバース（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｅ）改変；還元アミド結合；メチレンチオエーテル、またはメチレン−スルホキシド結合；メチレンエーテル結合；エチレン結合；チオアミド結合；ｔｒａｎｓ−オレフィンまたはフルオロオレフィン結合；１，５−二置換テトラゾール環；ケトメチレンまたはフルオロケトメチレン結合）、または別のアミド結合等価体を含むペプチド様分子であり得る。当業者は、これらおよび他のペプチドミメティックが、本明細書中で用いられる場合、用語「ペプチドミメティック」の意味内に包含されることを理解する。

【0113】

ペプチドミメティックを同定するための方法は、当該分野において周知であり、例えば、潜在的なペプチドミメティックのライブラリーを含むデータベースのスクリーニングが挙げられる。例として、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ｄａｔａｂａｓｅは、公知の結晶構造を有する３００，０００よりも多い化合物のコレクションを含む（Ａｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｑｒ．Ｓｅｃｔｉｏｎ Ｂ，３５：２３３１（１９７９））。この構造デポジトリー（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ）は、新しい結晶構造が決定されるにつれ、絶えず更新され、適切な形（例えば、開示されるペプチドと同じ形）、ならびに標的分子に対して潜在的な幾何学的および化学的相補性を有する化合物についてスクリーニングされ得る。ペプチドまたはそのペプチドを結合する標的分子の結晶構造が利用可能でない場合、構造は、例えば、プログラムＣＯＮＣＯＲＤ（Ｒｕｓｉｎｋｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｆ．Ｃｏｍｐｕｔ．Ｓｃｉ．２９：２５１（１９８９））を用いて生成され得る。別のデータベースＡｖａｉｌａｂｌｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｄｉｒｅｃｔｏｒｙ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｓｉｇｎ Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｓａｎ Ｌｅａｎｄｒｏ Ｃａｌｉｆ）は、市販される約１００，０００の化合物を含み、また、例えば、がん性細胞と選択的に相互作用する活性を有するペプチドの潜在的なペプチドミメティックを同定するために検索され得る。

【0114】

Ｃ．成分
本明細書中で開示される組成物は、１つ以上の成分を含み得る。例えば、成分は、分子、結合体、結合したもの（ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）、組成物、および混合物であり得る。成分の例としては、抗血管新生剤、血管新生促進剤、がん化学療法剤、細胞傷害性薬剤、抗炎症剤、抗関節炎剤、ポリペプチド、核酸分子、低分子、ナノ粒子、および、ミクロ粒子が挙げられるが、これらに限定されない。上記成分のうちの少なくとも１つは、治療剤であり得る。治療剤の例は、パクリタキセルおよびドセタキセルである。上記成分のうちの少なくとも１つは、検出可能な剤であり得る。ペプチドまたはアミノ酸配列である成分は、それぞれ、成分ペプチドまたは成分アミノ酸配列と称され得る。

【0115】

本明細書中で用いられる場合、用語「成分」は、一般に、連結または結合体化された分子に生物学的に有用な機能を付与する物理的材料、化学的材料、または生物学的材料を意味するために広く使用される。本明細書中で開示される場合、成分の特性はまた、ペプチドもしくはアミノ酸配列において、またはそのペプチドもしくはアミノ酸配列の両方において見出され得、上記成分は、本明細書中で開示される形質のうちの１つを共有し得る。例えば、上記ペプチドまたはアミノ酸配列は、検出可能な剤を含み得、他方、上記成分は、治療剤を含み得る。このことは、本明細書中で開示されるような成分の特性のうちの１つ以上を含み得るアネキシン１結合化合物についても適用される。以下の治療剤および検出可能な剤の記載は、成分、ペプチド、アミノ酸配列、またはアネキシン１結合化合物のうちのいずれかに適用することが意図される。従って、例えば、成分は、開示されるペプチド、アミノ酸配列、アネキシン１結合化合物、組成物、もしくはペプチド、アミノ酸配列、およびアネキシン１結合化合物の結合体に結合体化され得、これらに結合され（ｃｏｕｐｌｅｄ）得、またはこれらの一部であり得る。

【0116】

成分は、任意の天然または天然ではない材料であり得、限定することなく、生物学的材料（例えば、細胞、ファージ、または他のウイルス）；有機化学物質（例えば、低分子）；ナノ粒子、放射性核種；核酸分子もしくはオリゴヌクレオチド；ポリペプチド；またはペプチドが挙げられる。例えば、成分（例えば、治療効果を有する成分）は、標的に影響し得るか、または上記標的（例えば、蛍光分子または放射性核種）の検出、視覚化、または画像化を容易にし得る。有用な成分としては、治療剤（例えば、がん化学療法剤、細胞傷害性薬剤、アポトーシス促進剤、および抗血管新生剤；検出可能な標識および画像化剤；ならびにタグまたは他の不溶性支持体が挙げられるが、これらに限定されない。有用な成分としては、限定することなく、ファージおよび他のウイルス、細胞、リポソーム、重合体マトリックス、非重合体マトリックスまたは粒子（例えば、金粒子）、マイクロデバイス、およびナノデバイス、ならびにナノスケール半導体材料がさらに挙げられる。これらおよび当該分野において公知である他の成分は、組成物の構成要素であり得る。

【0117】

開示される組成物の構成要素は、任意の適切な様式で組み合わせられ得、連結され得、および／または結合され得る。例えば、成分および他の分子は、共有結合的または非共有結合的に、直接的または間接的に、リンカー成分を有してかまたは有さずに、結合され得る。

【0118】

１．治療剤
上記成分は、治療剤であり得る。本明細書中で用いられる場合、用語「治療剤」は、正常組織または病的組織において、１つ以上の生物学的活性を有する分子を意味する。多様な治療剤は、成分として使用され得る。上記治療剤は、がんを処置するための化合物または組成物を含み得る。上記治療剤は、プログラム細胞死またはアポトーシスを誘導するための化合物または組成物を含み得る。例えば、上記治療剤は、（ＫＬＡＫＬＡＫ）_２または_Ｄ（ＫＬＡＫＬＡＫ）_２（配列番号２４）であり得る。

【0119】

いくつかの実施形態において、上記治療剤は、がん化学療法剤であり得る。本明細書中で用いられる場合、「がん化学療法剤」は、がん細胞の増殖、成長、寿命、または転移活性を阻害する化学薬剤である。このようながん化学療法剤は、限定することなく、タキサン（例えば、ドセタキセル）；アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン）；アルキル化剤；ビンカアルカロイド；代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート）；白金薬剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、またはオキサリプラチン）；ステロイド；抗生物質（例えば、アドリアマイシン）；イホスファミド；または選択的エストロゲン受容体モデュレータ；抗体（例えば、トラスツズマブ）；パクリタキセル（例えば、Ａｂｒａｘａｎｅ）であり得る。

【0120】

タキサンは、本明細書中に開示される組成物とともに有用な化学療法剤である。有用なタキサンとしては、限定することなく、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ；ｓａｎｏｆｉ−ａｖｅｎｔｉｓ；Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，Ｎ．Ｊ．）およびパクリタキセル（Ｔａｘｏｌ；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ；Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）が挙げられる。例えば、Ｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１７：２３４１−２３５４（１９９９）、およびＰａｒｉｄａｅｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１８：７２４（２０００）を参照のこと。

【0121】

本明細書中に開示される組成物とともに有用ながん化学療法剤はまた、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン、イダルビシン、またはダウノルビシン）であり得る。ドキソルビシンは、一般的に使用されるがん化学療法剤であり、例えば、乳がんを処置するのに有用であり得る（Ｓｔｅｗａｒｔ ａｎｄ Ｒａｔａｉｎ，Ｉｎ：「Ｃａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ ｏｎｃｏｌｏｇｙ」５ｔｈ ｅｄ．，ｃｈａｐ．１９（ｅｄｓ．ＤｅＶｉｔａ，Ｊｒ．，ｅｔ ａｌ．；Ｊ．Ｐ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ １９９７）；Ｈａｒｒｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ 「Ｃａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ ｏｎｃｏｌｏｇｙ，」上記、１９９７）。さらに、ドキソルビシンは、抗血管新生活性を有し、（Ｆｏｌｋｍａｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １５：５１０（１９９７）；Ｓｔｅｉｎｅｒ，Ｉｎ 「Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ：Ｋｅｙ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ−Ｓｃｉｅｎｃｅ，ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，」ｐｐ．４４９−４５４（ｅｄｓ．Ｓｔｅｉｎｅｒ ｅｔ ａｌ．；Ｂｉｒｋｈａｕｓｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，１９９２））、このことは、がんを処置することにおけるその有効性に寄与し得る。

【0122】

アルカリ化剤（例えば、メルファラン、イホスファミド、またはクロラムブシル）はまた、有用ながん化学療法剤であり得る。同様に、ビンカアルカロイド（例えば、ビンデシン、ビンブラスチン、またはビノレルビン）；または代謝拮抗物質（例えば、５−フルオロウラシル、５−フルオロウリジン、メトトレキサート、またはそれらの誘導体）は、有用ながん化学療法剤であり得る。

【0123】

白金薬剤はまた、有用ながん化学療法剤であり得る。このような白金薬剤は、例えば、Ｃｒｏｗｎ，Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２８：２８−３７（２００１）に記載されるような、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、またはオキサリプラチンであり得る。他の有用ながん化学療法剤としては、限定することなく、マイトマイシン−Ｃ、アドリアマイシン（ドキソルビシン）、およびアンサマイシンが挙げられる。

【0124】

乳がんおよび他のホルモンに依存する（ｈｏｒｍｏｎａｌｌｙ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ）がんの処置に有用であるがん化学療法剤はまた、エストロゲンの作用に拮抗する薬剤（例えば、選択的エストロゲン受容体モデュレータ、または抗エストロゲン）であり得る。上記選択的エストロゲン受容体モデュレータ、タモキシフェンは、乳がんの処置のための組成物において使用され得るがん化学療法剤である（Ｆｉｓｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔ．９０：１３７１−１３８８（１９９８））。

【0125】

上記治療剤は、抗体（例えば、ヒト化モノクローナル抗体）であり得る。例として、抗上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）抗体、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆ．）は、ＨＥＲ２／ｎｅｕ過剰発現乳がんを処置するのに有用な治療剤であり得る（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．５２：１２５−１４１（２００１））。

【0126】

有用な治療剤はまた、細胞傷害性薬剤であり得、本明細書中で用いられる場合、直接的または間接的に細胞死を促進する任意の分子であり得る。有用な細胞傷害性薬剤としては、限定することなく、低分子、ポリペプチド、ペプチド、ペプチドミメティック、核酸分子、細胞、およびウイルスが挙げられる。非限定的な例として、有用な細胞傷害性薬剤としては、細胞傷害性低分子（例えば、ドキソルビシン、ドセタキセル、またはトラスツズマブ）；抗菌性ペプチド（例えば、下にさらに記載されるもの）；アポトーシス促進性ポリペプチド（例えば、カスパーゼおよび毒素、例えば、カスパーゼ−８；ジフテリア毒素Ａ鎖、シュードモナス外毒素Ａ、コレラ毒素、リガンド融合毒素（例えば、ＤＡＢ３８９ＥＧＦ）、ヒマ毒素（リシン））；および細胞傷害性細胞（例えば、細胞傷害性Ｔ細胞）が挙げられる。例えば、Ｍａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６０：３２１８−３２２４（２０００）；Ｋｒｅｉｔｍａｎ ａｎｄ Ｐａｓｔａｎ，Ｂｌｏｏｄ ９０：２５２−２５９（１９９７）；Ａｌｌａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：２６１５−２６１８（１９９７）；およびＯｓｂｏｒｎｅ ａｎｄ Ｃｏｒｏｎａｄｏ−Ｈｅｉｎｓｏｈｎ，Ｃａｎｃｅｒ Ｊ．Ｓｃｉ．Ａｍ．２：１７５（１９９６）を参照のこと。当業者は、これら、および本明細書中に記載または当該分野において公知の追加の細胞傷害性薬剤が、開示される組成物および方法において有用であり得ることを理解する。

【0127】

いくつかの形態において、治療剤は、治療ポリペプチドであり得る。本明細書中で用いられる場合、治療ポリペプチドは、生物学的に有用な機能を有する任意のポリペプチドであり得る。有用な治療ポリペプチドは、限定することなく、サイトカイン、抗体、細胞傷害性ポリペプチド；アポトーシス促進性ポリペプチド；および抗血管新生ポリペプチドを包含する。非制限的な例として、有用な治療ポリペプチドは、サイトカイン（例えば、腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α））、腫瘍壊死因子−β（ＴＮＦ−β）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、インターフェロン−α（ＩＦＮ−α）；インターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−３（ＩＬ−３）、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−７（ＩＬ−７）、インターロイキン−１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、リンホタクチン（ＬＴＮ）、もしくは樹状細胞ケモカイン１（ＤＣ−ＣＫ１））；抗ＨＥＲ２抗体もしくはそのフラグメント；細胞傷害性ポリペプチド（毒素もしくはカスパーゼ、例えば、ジフテリア毒素Ａ鎖、シュードモナス外毒素Ａ、コレラ毒素、リガンド融合毒素（例えば、ＤＡＢ３８９ＥＧＦ）、もしくはリシンが挙げられる）；または抗血管新生ポリペプチド（例えば、アンギオスタチン、エンドスタチン、トロンボスポンジン、血小板第４因子；アナステリン）；または本明細書中にさらに記載されるもの、もしくは当該分野において公知であるものうちのあるもの、であり得る。これらおよび生物学的活性を有する他のポリペプチドは、「治療ポリペプチド」であり得ることが理解される。アポトーシス促進性治療剤の例は、（ＫＬＡＫＬＡＫ）_２または_Ｄ（ＫＬＡＫＬＡＫ）_２（配列番号２４）（ｄｅｌ Ｒｉｏ，２００１；Ｅｌｌｅｒｂｙ、１９９９）である。_Ｄ（ＫＬＡＫＬＡＫ）_２（配列番号２４）は、Ｄアミノ酸を用いて作製された配列ＫＬＡＫＬＡＫＫＬＡＫＬＡＫ（配列番号２４）を指す。これらのペプチドは、開示される組成物のいずれかにおいて使用され得、開示されるペプチドまたはアネキシン１結合化合物のいずれかと組み合わせられ得る。このような組成物の例としては、ＩＦＬＬＷＱＲ−ＫＬＡＫＬＡＫＫＬＡＫＬＡＫ（配列番号２および２４）、ＩＦＬＬＷＱＲＣ−ＫＬＡＫＬＡＫＫＬＡＫＬＡＫ（配列番号１４および２４）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲ−ＫＬＡＫＬＡＫＫＬＡＫＬＡＫ（配列番号１７および２４）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲ−ＫＬＡＫＬＡＫＫＬＡＫＬＡＫ（配列番号１９および２４）、ＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲ−ＫＬＡＫＬＡＫＫＬＡＫＬＡＫ（配列番号１８および２４）、またはＩＦＬＬＷＱＲＣＲＲＲＲ−ＫＬＡＫＬＡＫＫＬＡＫＬＡＫ（配列番号２２および２４）が挙げられる。

【0128】

治療剤はまた、抗血管新生剤であり得る。本明細書中で用いられる場合、用語「抗血管新生剤」は、血管の成長および発生である血管新生を低減または防止する分子を意味する。多様な抗血管新生剤は、日常の方法によって調製され得る。このような抗血管新生剤としては、限定することなく、低分子；タンパク質（例えば、血管新生因子、転写因子、および抗体のドミナントネガティブ形態）；ペプチド；ならびに核酸分子（リボザイム、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ならびに核酸分子（例えば、血管新生因子および受容体、転写因子、ならびに、抗体およびその抗原結合フラグメントのドミナントネガティブ形態をコードする）が挙げられる）が挙げられる。例えば、Ｈａｇｅｄｏｒｎ ａｎｄ Ｂｉｋｆａｌｖｉ，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．３４：８９−１１０（２０００），およびＫｉｒｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｏｎｃｏｌ．５０：１４９−１６３（２０００）を参照のこと。

【0129】

血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、多くのタイプのがんにおける血管新生について重要であることが示されており、それには、インビボでの乳がんにおける血管新生が挙げられる（Ｂｏｒｇｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１９：４２１３−４２１４（１９９９））。ＶＥＧＦの生物学的効果としては、内皮細胞の増殖、生存、移動、および管形成の刺激、ならびに血管透過性の調節が挙げられる。抗血管新生剤は、例えば、ＶＥＧＦまたは別の血管新生因子の、発現またはシグナル伝達を低減するインヒビターまたは中和抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ中和モノクローナル抗体）（Ｂｏｒｇｓｔｒｏｍ ｅｔ ａｌ．，上記、１９９９）であり得る。抗血管新生剤はまた、別の血管新生因子（例えば、線維芽細胞成長因子ファミリーのメンバー（例えば、ＦＧＦ−１（酸性）、ＦＧＦ−２（塩基性）、ＦＧＦ−４、またはＦＧＦ−５））（Ｓｌａｖｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１９：４３１−４４４（１９９５）；Ｆｏｌｋｍａｎ ａｎｄ Ｓｈｉｎｇ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７：１０９３１−１０９３４（１９９２））、または血管新生因子（例えば、内皮細胞特異的Ｔｉｅ２受容体チロシンキナーゼを介してシグナル伝達する因子であるアンジオポエチン−１（Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ８７：１１６１−１１６９（１９９６）；およびＳｕｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ８７：１１７１−１１８０（１９９６））、またはこれらの血管新生因子のうちの１つの受容体を阻害し得る。多様なメカニズムは、血管新生因子の活性を阻害するために働き得ることが理解され、これには、限定することなく、受容体結合の直接的な阻害、血管新生因子の細胞外の空間への分泌を低減することによる間接的な阻害、または血管新生因子の発現、機能、もしくはシグナル伝達の阻害が挙げられる。

【0130】

多様な他の分子はまた、抗血管新生剤として機能し得、これには、限定することなく、アンギオスタチン；アンギオスタチンのクリングルペプチド；エンドスタチン；アナステリン、フィブロネクチンのヘパリン結合フラグメント；アンチトロンビンの改変された形態；コラゲナーゼインヒビター；基底膜ターンオーバーインヒビター；血管新生抑制のステロイド（ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｃ ｓｔｅｒｏｉｄ）；血小板第４因子ならびにそのフラグメントおよびペプチド；トロンボスポンジンならびにそのフラグメントおよびペプチド；ならびにドキソルビシンが挙げられる（Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ７９：３１５−３２８（１９９４））；Ｏ’Ｒｅｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ８８：２７７−２８５（１９９７）；Ｈｏｍａｎｄｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈ．１２０：３２７−３３２（１９８５）；Ｈｏｍａｎｄｂｅｒｇ ｅｔ−ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ ８７４：６１−７１（１９８６）；およびＯ’Ｒｅｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８５：１９２６−１９２８（１９９９））。市販の抗血管新生剤としては、例えば、アンギオスタチン、エンドスタチン、メタスタチンおよび２ＭＥ２（ＥｎｔｒｅＭｅｄ；Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍｄ．）；抗ＶＥＧＦ抗体（例えば、Ａｖａｓｔｉｎ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆ．））；およびＶＥＧＦＲ−２インヒビター（例えば、ＳＵ５４１６（ＶＥＧＦＲ−２の低分子インヒビター）（ＳＵＧＥＮ；Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ
Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆ．）、およびＳＵ６６６８（ＳＵＧＥＮ）（ＶＥＧＦＲ−２、血小板由来成長因子受容体および線維芽細胞成長因子Ｉ受容体の低分子インヒビター））が挙げられる。これらおよび他の抗血管新生剤は、日常の方法によって調製され得ること、本明細書中で用いられる場合、用語「抗血管新生剤」によって包含されることが理解される。

【0131】

有用な治療剤のいくつかの他の例としては、ナイトロジェンマスタード類、ニトロソ尿素類、エチレンイミン、アルカンスルホネート類、テトラジン、白金化合物、ピリミジン類似体、プリン類似体、代謝拮抗物質、フォレート類似体（ｆｏｌａｔｅ ａｎａｌｏｇｓ）、アントラサイクリン類、タキサン類、ビンカアルカロイド類、トポイソメラーゼインヒビター、およびホルモン剤が挙げられる。例示的な化学療法薬物は、アクチノマイシン−Ｄ、アルケラン、Ａｒａ−Ｃ、アナストロゾール、アスパラギナーゼ、ＢｉＣＮＵ、ビカルタミド、ブレオマイシン、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カルボプラチナム（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎｕｍ）、カルムスチン、ＣＣＮＵ、クロラムブシル、クロマファジン（Ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）、シスプラチン、クラドリビン、ＣＰＴ−１１、シクロホスファミド、シタラビン、シトシンアラビノシド、サイトキサン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デクスラゾキサン、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標），Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）、ドキシル、ドキソルビシン、ＤＴＩＣ、エピルビシン、エストラムスチン、エチレンイミン、エトポシド、フロクスウリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フルタミド、フォテムスチン、ゲムシタビン、ハーセプチン、ヘキサメチルアミン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イリノテカン、ロムスチン、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩（Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ ｏｘｉｄｅ
ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキサート、マイトマイシン、ミトーテン、ミトザントロン、ノベムビエヒン、オキサリプラチン、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標），Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、パミドロネート、ペントスタチン、フェネステリン、プリカマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン、リツキシマブ、ステロイド類、ＳＴＩ−５７１、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、テトラジン、チオグアニン、チオテパ、トムデックス、トポテカン、トレオスルファン、トリメトレキサート、トロホスファミド、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ＶＰ−１６、およびゼローダである。アルキル化剤（例えば、チオテパ、および；アルキルスルホネート類（例えば、ブスルファン、インプロスルファン、およびピポスルファン）；アジリジン類（例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、およびウレドーパ）；エチレンイミン類、およびメチラメラミン類（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）（アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスファオラミド（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈａｏｒａｍｉｄｅ））およびトリメチロロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）が挙げられる）；ニトロソ尿素類（例えば、カヌスチン（Ｃａｎｎｕｓｔｉｎｅ）、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、およびラニムスチン）；抗生物質（例えば、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（Ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリケアマイシン、カラビシン（Ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマイシン（Ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモイニシン類（Ｃｈｒｏｍｏｉｎｙｃｉｎｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、エソルビシン、イダムビシン（Ｉｄａｍｂｉｃｉｎ）、マルセロマイシン、マイトマイシン類、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（Ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、プロマイシン、ケラマイシン（Ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（Ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、およびゾルビシン）；代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート、および５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体（ｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ ａｎａｌｏｇｕｅｓ）（例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、およびトリメトレキサート）；プリン類似体（例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、およびチオグアニン）；ピリミジン類似体（例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、および５−ＦＵ）；アンドロゲン類（例えば、カルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、ルネピチオスタン（Ｒｎｅｐｉｔｉｏｓｔａｎｅ）、およびテストラクトン）；抗副腎剤（ａｎｔｉ−ａｄｒｅｎａｌｓ）（例えば、アミノグルテチミド、ミトーテン、およびトリロスタン）；葉酸補充物（ｒｅｐｌｅｎｉｓｈｅｒ）（例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ））；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）；アミノレブリン酸；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート（Ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デフォファミン（Ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルシン；ジアジコン；エルフォルニチン（Ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダミン；ミトグアゾン；ミトザントロン；モピダモール；ニトラクリン；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ；ラゾキサン；シゾフラン（Ｓｉｚｏｆｒｒａｎ）；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（Ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド類（例えば、パクリタキセル、およびドセタキセル）；ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、およびオキサリプラチン）；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；マイトマイシンＣ；ミトザントロン；ビンブラスチン；ビンクリスチン；ビノレルビン；ナベルビン；ノバントロン；テニポシド；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼインヒビターＲＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸；エスペラマイシン類（Ｅｓｐｅｒａｍｉｃｉｎｓ）；カペシタビン；および薬学的に受容可能な、上記のいずれかの塩、酸、または誘導体。また、腫瘍におけるホルモン作用を調節または阻害するように働く抗ホルモン剤（例えば、抗エストロゲン剤（例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼを阻害する４（５）−イミダゾール類、４ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、オナプリストン、およびトレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ）が挙げられる）；および抗アンドロゲン剤（例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリン））；および薬学的に受容可能な、上記のいずれかの塩、酸、または誘導体が挙げられる。有用な治療剤としては、例えば、ドキソルビシン、ハーセプチン、およびリポソームドキソルビシンが挙げられる。

【0132】

上記治療剤はまた、ホウ素含有化合物を含み得る。ホウ素含有化合物は、有機合成における技術がこの原子を含むように拡大しているので、過去数年間にわたって、治療剤として、ますます増加する注目を受けている（Ｂｏｒｏｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｏｎ ｔｈｅ ｈｏｒｉｚｏｎ，Ｇｒｏｚｉａｋ，Ｍ．Ｐ．；Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（２００１）８，３２１−３２８）。最も注目すべきホウ素含有治療用物質は、多発性骨髄腫の処置のために最近世の中に送り出されたボロン酸ボルテゾミブである。この大発見により、薬学的薬剤としてホウ素含有化合物を用いることの実行可能性が実証される。ホウ素含有化合物は、種々の生物学的活性を有することが示されている（除草剤（Ｏｒｇａｎｉｃ ｂｏｒｏｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ａｓ ｈｅｒｂｉｃｉｄｅｓ．Ｂａｒｎｓｌｅｙ，Ｇ．Ｅ．；Ｅａｔｏｎ，Ｊ．Ｋ．；Ａｉｒｓ，Ｒ．Ｓ．；（１９５７），ＤＥ １０１６９７８ １９５７１００３）、ホウ素中性子捕捉療法（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｂ−１０ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｆｏｒ Ｎｅｕｔｒｏｎ Ｃａｐｔｕｒｅ Ｔｈｅｒａｐｙ．Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｙ．；Ｐｕｒｅ Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，（１９９１）６３，４２３−４２６）、セリンプロテアーゼ阻害（Ｂｏｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｓ ｐｒｏｂｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｔ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｓｉｔｅｓ ｏｆ ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ ａｎｄ α−ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ．Ｓｉｍｐｅｌｋａｍｐ，Ｊ．；Ｊｏｎｅｓ，Ｊ．Ｂ．；Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ，（１９９２），２（１１），１３９１−４；Ｄｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｂｏｒｏｎ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｔｈｒｏｍｂｉｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｗｅｉｎａｎｄ，Ａ．；Ｅｈｒｈａｒｄｔ，Ｃ．；Ｍｅｔｔｅｒｎｉｃｈ，Ｒ．；Ｔａｐｐａｒｅｌｌｉ，Ｃ．；Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（１９９９），７，１２９５−１３０７）、アセチルコリンエステラーゼ阻害（Ｎｅｗ，ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ ｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｌｋｙｌｂｏｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ．Ｋｏｅｈｌｅｒ，Ｋ．Ａ．；Ｈｅｓｓ，Ｇ．Ｐ．；Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９７４），１３，５３４５−５０）、および抗菌剤として（Ｂｏｒｏｎ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ：Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ Ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｂａｃｔｅｒｉａ Ｕｎｄｅｒ Ｖａｒｉｏｕｓ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｂａｉｌｅｙ，Ｐ．Ｊ．；Ｃｏｕｓｉｎｓ，Ｇ．；Ｓｎｏｗ，Ｇ．Ａ．；およびＷｈｉｔｅ，Ａ．Ｊ．；Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，（１９８０），１７，５４９−５５３）が挙げられる）。抗菌活性を有する上記ホウ素含有化合物は、２つの主要なクラス、１９６０年代から公知であるジアザボリニン類とジチエニルボリン酸（ｄｉｔｈｉｅｎｙｌｂｏｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ）複合体とに細分され得る。この後者のクラスは、効力のある抗菌活性を有する、多くの異なるジアリールボリン酸複合体を含むように拡大している（Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉａｒｙｌｂｏｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ ｅｓｔｅｒｓ ａｓ ＤＮＡ ｍｅｔｈｙｌ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｂｅｎｋｏｖｉｃ，Ｓ．Ｊ．；Ｓｈａｐｉｒｏ，Ｌ．；Ｂａｋｅｒ，Ｓ．Ｊ．；Ｗａｈｎｏｎ，Ｄ．Ｃ．；Ｗａｌｌ，Ｍ．；Ｓｈｉｅｒ，Ｖ．Ｋ．；Ｓｃｏｔｔ，Ｃ．Ｐ．；Ｂａｂｏｖａｌ，Ｊ．；ＰＣＴ国際出願（２００２），ＷＯ ２００２０４４１８４）。

【0133】

これらおよび他の薬剤が、開示される組成物および方法において、別個にまたは一緒に使用され得る有用な治療剤であることが、医薬腫瘍学（ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｏｎｃｏｌｏｇｙ）における当業者によって理解される。従って、本明細書中に開示される組成物がこのような治療剤のうちの１つ以上を含み得ること、および所望される場合、追加の構成要素がその組成物の一部として含まれ得ることが理解される。非限定的な例として、いくつかの場合において、開示されるペプチド、アミノ酸配列、およびアネキシン１結合化合物と上記治療剤との間で、オリゴペプチドスペーサーを利用することが所望され得る（Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ ａｎｄ Ｇａｒｎｅｔｔ，Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ．１０：１−９（１９９５））。

【0134】

２．検出可能な剤
開示される組成物における成分はまた、検出可能な剤であり得る。多様な検出可能な剤は、開示される方法において有用である。本明細書中で用いられる場合、用語「検出可能な剤」は、検出され得る任意の分子を指す。有用な検出可能な剤としては、インビボで投与され、その後検出され得る化合物および分子が挙げられる。開示される組成物および方法において有用である検出可能な剤としては、放射性同位元素標識（ｒａｄｉｏｌａｂｅｌ）および蛍光分子がさらに挙げられるが、これらに限定されない。上記検出可能な剤は、例えば、直接的または間接的のいずれかで、好ましくは非侵襲性および／またはインビボでの可視化技術によって、検出を容易にする任意の成分または分子であり得る。例えば、検出可能な剤は、任意の公知の画像化技術（例えば、放射線技術、磁気共鳴技術、または超音波技術が挙げられる）によって検出可能であり得る。検出可能な剤としては、例えば、造影剤が挙げられ得る。上記造影剤は、例えば、Ｆｅｒｉｄｅｘであり得る。造影する薬剤（ｃｏｎｔｒａｓｔｉｎｇ ａｇｅｎｔ）は、例えば、イオン性または非イオン性であり得る。いくつかの実施形態において、例えば、上記検出可能な剤は、タンタル化合物および／またはバリウム化合物（例えば、硫酸バリウム）を含む。いくつかの実施形態において、上記検出可能な剤は、ヨウ素（例えば、放射性ヨウ素）を含む。いくつかの実施形態において、例えば、上記検出可能な剤は、有機ヨウ素酸（ｉｏｄｏ ａｃｉｄ）（例えば、ヨードカルボン酸（ｉｏｄｏ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、トリヨードフェノール、ヨードホルム、および／またはテトラヨードエチレン）を含む。いくつかの実施形態において、上記検出可能な剤は、非放射性の検出可能な剤（例えば、非放射性同位体）を含む。例えば、酸化鉄およびＧｄは、特定の実施形態において、非放射性の検出可能な剤として使用され得る。検出可能な剤としてはまた、放射性同位体、酵素、発蛍光団、および量子ドット（Ｑｄｏｔ（登録商標））が挙げられ得る。例えば、検出成分は、酵素、ビオチン、金属、またはエピトープタグであり得る。他の公知または新たに見出された検出可能なマーカーは、提供される組成物との使用が企図される。いくつかの実施形態において、例えば、上記検出可能な剤は、バリウム化合物（例えば、硫酸バリウム）を含む。

【0135】

上記検出可能な剤は、１つ以上の画像化剤であり得る。画像化剤の例としては、放射性造影剤（例えば、ジアトリゾ酸ナトリウム塩二水和物（ｄｉａｔｒｉｚｏｉｃ ａｃｉｄ ｓｏｄｉｕｍ ｓａｌｔ ｄｉｈｙｄｒａｔｅ）、ヨウ素、および硫酸バリウム）、蛍光を発する（ｆｌｕｏｒｅｓｃｉｎｇ）画像化剤（例えば、リサミンローダミンＰＥ）、例えば、可視色を与え得るかまたは可視波長もしくは他の波長（例えば、赤外もしくは紫外）での電磁放射の特徴的なスペクトルを反映する、蛍光または非蛍光の、染料または色素（例えば、ローダミン）、放射性同位体、陽電子放出同位体（例えば、^１８Ｆまたは^１２４Ｉ）（陽電子放出同位体の短い半減期は、いくつかの制限を課すことがあるけれども）、金属、強磁性化合物、常磁性化合物（例えば、ガドリニウム）、超常磁性化合物（例えば、酸化鉄）、および反磁性化合物（例えば、硫酸バリウム）が挙げられる。画像化剤は、選ばれた画像化技術によって生み出される画像の有用性を最適化するように選択され得る。例えば、上記画像化剤は、目的の特徴（例えば、胃腸ポリープ）と正常な胃腸組織との間のコントラストを高めるために選択され得る。画像化は、任意の適切な画像化技術（例えば、Ｘ線、コンピューター断層撮影（ＣＴ）、ＭＲＩ、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）、またはＳＰＥＣＴ）を用いて達成され得る。いくつかの形態において、開示される構成要素、化合物、および組成物は、核医学画像化剤（例えば、インジウム−ＩＩＩ、またはテクネチウム−９９）に、ＰＥＴ画像化剤に、またはＭＲＩ画像化剤（例えば、ナノ粒子）に結合され得る。

【0136】

画像化技術の例としては、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、コンピューター断層撮影（ＣＴ）、単一光子放出型コンピューター断層撮影（ＳＰＥＣＴ）、および陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）が挙げられる。画像化剤は、一般に、その適用において、診断的または治療的のいずれかとして分類され得る。組織に及ぼす放射線の損傷作用に起因して、放射性薬品のできるだけ正確な生体内分布を目標にすることは有用である。ＰＥＴは、例えば、陽電子放出体（例えば、^１８Ｆ、^１１Ｃ、^１３Ｎおよび^１５Ｏ、^７５Ｂｒ、^７６Ｂｒおよび^１２４Ｉ）で標識された画像化剤を使用し得る。ＳＰＥＣＴは、例えば、単光子放出体（例えば、^２０１Ｔｌ、^９９Ｔｃ、^１２３Ｉ、および^１３１Ｉ）で標識された画像化剤を使用し得る。

【0137】

グルコースベースの化合物およびアミノ酸ベースの化合物は、画像化剤として使用され得る。アミノ酸ベースの化合物は、腫瘍細胞を分析することにおいて、より有用である。なぜなら、それらは腫瘍細胞によってより速く取り込まれ、タンパク質合成へ組込まれるからである。アミノ酸ベースの化合物のうち、^１１Ｃ含有化合物および^１８Ｆ含有化合物は、首尾よく使用されている。画像化に適している^１１Ｃ含有の放射性同位元素標識されたアミノ酸としては、例えば、Ｌ−［ｌ−^１１Ｃ］ロイシン（Ｋｅｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｃｅｒｅｂ．Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ Ｍｅｔａｂ．１９８９（９）：４２９−４５）、Ｌ−［ｌ−^１１Ｃ］チロシン（Ｗｉｅｓｅｌ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．１９９１（３２）：２０４１−４９）、Ｌ−［メチル−^１１Ｃ］メチオニン（Ｃｏｍａｒ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．１９７６（１）：１１−１４）、およびＬ−［ｌ−^１１Ｃ］メチオニン（Ｂｏｌｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ．Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔ．１９８６（３７）：１０６９−７０）が挙げられる。

【0138】

ＰＥＴは、同時係数法を用いる、短寿命陽電子放出放射性同位体からの消滅光子の形態でのγ線の検出に関与し、その同位体には、約１１０分間の半減期を有する^１８Ｆ、約２０分間の半減期を有する^１１Ｃ、約１０分間の半減期を有する^１３Ｎ、および約２分間の半減期を有する^１５Ｏが挙げられるが、これらに限定されない。ＰＥＴ画像化研究について、化合物（例えば、［^１１Ｃ］メタ−ヒドロキシエフェドリン（ＨＥＤ）および２−［^１８Ｆ］フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（ＦＤＧ））が使用され得る。ＳＰＥＣＴは、より長寿命な同位体を使用することができ、これには、約６時間の半減期を有する^９９ｍＴｃ、および約７４時間の半減期を有する^２０１Ｔ１が挙げられるが、これらに限定されない。放射性ヨウ素標識された（ｒａｄｉｏ−ｉｏｄｉｎａｔｅｄ）メタヨードベンジルグアニジン（ＭＩＢＧ）は、核医学画像化研究において使用され得る放射性追跡剤（ｒａｄｉｏｔｒａｃｉｎｇ ａｇｅｎｔ）である。

【0139】

検出可能な剤の他の例としては、検出可能な放射線を放出する分子か、またはそれを放出することを引き起こし得る分子（例えば、蛍光励起、放射性崩壊、スピン共鳴励起など）、局所電磁界に影響する分子（例えば、磁性、強磁性、強磁性、常磁性、および／または超常磁性の種）、放射線エネルギーを吸収または散乱させる分子（例えば、発色団および／または発蛍光団）、量子ドット、重元素および／またはそれらの化合物が挙げられる。例えば、米国公開第２００４／０００９１２２号に記載される検出可能な剤を参照のこと。検出可能な剤の他の例としては、プロトン放出分子、放射線不透過性分子、および／または放射性分子（例えば、Ｔｃ−９９ｍおよび／またはＸｅ−１３のような放射性核種）が挙げられる。このような分子は、放射性薬品として使用され得る。さらに他の実施形態において、開示される組成物は、１つ以上の異なるタイプの検出可能な剤（本明細書中に開示される検出可能な剤の任意の組み合わせが挙げられる）を含み得る。

【0140】

有用な蛍光成分としては、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、５，６−カルボキシメチルフルオレセイン、テキサスレッド（Ｔｅｘａｓ ｒｅｄ）、ニトロベンズ−２−オキサ−ｌ，３−ジアゾール−４−イル（ＮＢＤ）、クマリン、塩化ダンシル、ローダミン、アミノメチルクマリン（ＡＭＣＡ）、エオシン、エリトロシン、ボディピー（登録商標）、カスケードブルー（登録商標）、オレゴングリーン（登録商標）、ピレン、リサミン、キサンテン類、アクリジン類、オキサジン類、フィコエリトリン、ランタニドイオンの大環状キレート類（例えば、量子色素^ＴＭ）、蛍光エネルギー移動色素（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｅｎｅｒｇｙ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｄｙｅ）（例えば、チアゾールオレンジ−エチジウム異質二量体、およびシアニン色素Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、およびＣｙ７が挙げられる。他の具体的な蛍光標識の例としては、３−ヒドロキシピレン５，８，１０−トリスルホン酸、５−ヒドロキシトリプタミン（５−ＨＴ）、酸性フクシン、アリザリンコンプレクソン（Ａｌｉｚａｒｉｎ Ｃｏｍｐｌｅｘｏｎ）、アリザリンレッド、アロフィコシアニン、アミノクマリン、アントロイルステアレート、アストラゾンブリリアントレッド４Ｇ、アストラゾンオレンジＲ、アストラゾンレッド６Ｂ、アストラゾンイエロー（Ａｓｔｒａｚｏｎ Ｙｅｌｌｏｗ）７ ＧＬＬ、アタブリン、オーラミン、オーロホスフィン（Ａｕｒｏｐｈｏｓｐｈｉｎｅ）、オーロホスフィンＧ、ＢＡＯ ９（ビスアミノフェニルオキサジアゾール（Ｂｉｓａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌｏｘａｄｉａｚｏｌｅ））、ＢＣＥＣＦ、ベルベリンスルフェート、ビスベンズアミド（Ｂｉｓｂｅｎｚａｍｉｄｅ）、ブランコフォル（Ｂｌａｎｃｏｐｈｏｒ）ＦＦＧ溶液、ブランコフォルＳＶ、ボディピーＦｌ、ブリリアントスルホフラビンＦＦ、カルシエンブルー（Ｃａｌｃｉｅｎ Ｂｌｕｅ）、カルシウムグリーン、カルコフロールＲＷ溶液、カルコフロールホワイト、カルコフロールホワイトＡＢＴ溶液、カルコフロールホワイト標準溶液、カルボスチリル、カスケードイエロー（Ｃａｓｃａｄｅ Ｙｅｌｌｏｗ）、カテコールアミン、チナクリン（Ｃｈｉｎａｃｒｉｎｅ）、コリホスフィンＯ、クマリン−ファロイジン、ＣＹ３．１ ８、ＣＹ５．１ ８、ＣＹ７、Ｄａｎｓ（１−ジメチルアミノナファリン（Ｄｉｍｅｔｈｙｌ Ａｍｉｎｏ Ｎａｐｈａｌｉｎｅ）５スルホン酸）、Ｄａｎｓａ（ジアミノナフチルスルホン酸）、ダンシルＮＨ−ＣＨ３、ジアミノフェニルオキシジアゾール（ＤＡＯ：Ｄｉａｍｉｎｏ Ｐｈｅｎｙｌ Ｏｘｙｄｉａｚｏｌｅ）、ジメチルアミノ−５−スルホン酸、ジピロメテンボロンジフルオリド、ジフェニルブリリアントフラビン７ＧＦＦ、ドーパミン、エリスロシンＩＴＣ、ユークリシン（Ｅｕｃｈｒｙｓｉｎ）、ＦＩＦ（ホルムアルデヒド誘導蛍光）、フラゾオレンジ（Ｆｌａｚｏ Ｏｒａｎｇｅ）、フルオ３、フルオレスカミン、フラ−２、ゲナクリルブリリアントレッド（Ｇｅｎａｃｒｙｌ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｒｅｄ）Ｂ、ゲナクリルブリリアントイエロー（Ｇｅｎａｃｒｙｌ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｙｅｌｌｏｗ）１０ＧＦ、ゲナクリルピンク（Ｇｅｎａｃｒｙｌ Ｐｉｎｋ）３Ｇ、ゲナクリルイエロー（Ｇｅｎａｃｒｙｌ Ｙｅｌｌｏｗ）５ＧＦ、グロキサン酸（Ｇｌｏｘａｌｉｃ Ａｃｉｄ）、グラニュラーブルー（Ｇｒａｎｕｌａｒ Ｂｌｕｅ）、ヘマトポルフィリン、Ｉｎｄｏ−１、イントラホワイト Ｃｆ 液体（Ｉｎｔｒａｗｈｉｔｅ Ｃｆ Ｌｉｑｕｉｄ）、ロイコフォア（Ｌｅｕｃｏｐｈｏｒ）ＰＡＦ、ロイコフォアＳＦ、ロイコフォアＷＳ、リサミンローダミンＢ２００（ＲＤ２００）、ルシファーイエローＣＨ、ルシファーイエローＶＳ、マグダラレッド（Ｍａｇｄａｌａ Ｒｅｄ）、マリーナブルー（Ｍａｒｉｎａ Ｂｌｕｅ）、マキシロンブリリアントフラビン（Ｍａｘｉｌｏｎ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｆｌａｖｉｎ）１０ ＧＦＦ、マキシロンブリリアントフラビン ８ ＧＦＦ、ＭＰＳ（メチルグリーンピロニンスチルベン（Ｍｅｔｈｙｌ Ｇｒｅｅｎ Ｐｙｒｏｎｉｎｅ Ｓｔｉｌｂｅｎｅ））、ミトラマイシン、ＮＢＤアミン、ニトロベンゾオキサジドール（Ｎｉｔｒｏｂｅｎｚｏｘａｄｉｄｏｌｅ）、ノルアドレナリン、ヌクレアファストレッド、ヌクレアイエロー（Ｎｕｃｌｅａｒ Ｙｅｌｌｏｗ）、ニロサンブリリアントフラビン（Ｎｙｌｏｓａｎ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｆｌａｖｉｎ）Ｅ８Ｇ、オキサジアゾール、パシフィックブルー（Ｐａｃｉｆｉｃ Ｂｌｕｅ）、パラローズアニリン（Ｐａｒａｒｏｓａｎｉｌｉｎｅ）（フォイルゲン）、ホルワイト（Ｐｈｏｒｗｉｔｅ）ＡＲ溶液、ホルワイトＢＫＬ、ホルワイトＲｅｖ、ホルワイトＲＰＡ、ホスフィン３Ｒ、フタロシアニン、フィコエリトリンＲ、ポリアザインダセンポントクロームブルーブラック（Ｐｏｌｙａｚａｉｎｄａｃｅｎｅ Ｐｏｎｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｂｌｕｅ Ｂｌａｃｋ）、ポルフィリン、プリムリン、プロシオンイエロー、ピロニン、ピロニンＢ、ピロザルブリリアントフラビン（Ｐｙｒｏｚａｌ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｆｌａｖｉｎ）７ＧＦ、キナクリンマスタード、ローダミン１２３、ローダミン５ ＧＬＤ、ローダミン６Ｇ、ローダミンＢ、ローダミンＢ ２００、ローダミンＢエクストラ、ローダミンＢＢ、ローダミンＢＧ、ローダミンＷＴ、セロトニン、セブロンブリリアントレッド（Ｓｅｖｒｏｎ Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ Ｒｅｄ）２Ｂ、セブロンブリリアントレッド４Ｇ、セブロンブリリアントレッドＢ、セブロンオレンジ（Ｓｅｖｒｏｎ Ｏｒａｎｇｅ）、セブロンイエローＬ（Ｓｅｖｒｏｎ Ｙｅｌｌｏｗ Ｌ）、ＳＩＴＳ（プリムリン）、ＳＩＴＳ（スチルベンイソチオスルホン酸）、スチルベン、スナーフ（Ｓｎａｒｆ）１、スルホローダミン（Ｓｕｌｐｈｏ Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ）Ｂ Ｃａｎ Ｃ、スルホローダミンＧエクストラ（Ｓｕｌｐｈｏ Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ Ｇ Ｅｘｔｒａ）、テトラサイクリン、チアジンレッドＲ、チオフラビンＳ、チオフラビンＴＣＮ、チオフラビン５、チオライト（Ｔｈｉｏｌｙｔｅ）、チアゾールオレンジ、チノポール（Ｔｉｎｏｐｏｌ）ＣＢＳ、トゥルーブルー（Ｔｒｕｅ Ｂｌｕｅ）、ウルトラライト（Ｕｌｔｒａｌｉｔｅ）、ウラニンＢ、ユビテックスＳＦＣ、キシレンオレンジ、およびＸＲＩＴＣが挙げられる。

【0141】

特に有用な蛍光標識としては、フルオレセイン（５−カルボキシフルオレセイン−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、ローダミン（５，６−テトラメチルローダミン）、ならびにシアニン色素Ｃｙ３、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、およびＣｙ７が挙げられる。これらの蛍光体についての吸収および発光の最大は、それぞれ：ＦＩＴＣ（４９０ｎｍ；５２０ｎｍ）、Ｃｙ３（５５４ｎｍ；５６８ｎｍ）、Ｃｙ３．５（５８１ｎｍ；５８８ｎｍ）、Ｃｙ５（６５２ｎｍ：６７２ｎｍ）、Ｃｙ５．５（６８２ｎｍ；７０３ｎｍ）、およびＣｙ７（７５５ｎｍ；７７８ｎｍ）であり、従って、それらの同時検出を可能にする。フルオレセイン色素の他の例としては、６−カルボキシフルオレセイン（６−ＦＡＭ）、２’，４’，１，４，−テトラクロロフルオレセイン（ＴＥＴ）、２’，４’，５’，７’，１，４−ヘキサクロロフルオレセイン（ＨＥＸ）、２’，７’−ジメトキシ−４’、５’−ジクロロ−６−カルボキシローダミン（ＪＯＥ）、２’−クロロ−５’−フルオロ−７’，８’−縮合フェニル−ｌ，４−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＮＥＤ）、および２’−クロロ−７’−フェニル−ｌ，４−ジクロロ−６−カルボキシフルオレセイン（ＶＩＣ）が挙げられる。蛍光標識は、多様な商業的供給源から得られ得、その供給源としては、Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ；およびＲｅｓｅａｒｃｈ Ｏｒｇａｎｉｃｓ，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，Ｏｈｉｏが挙げられる。蛍光プローブおよびその使用はまた、Ｒｉｃｈａｒｄ Ｐ． ＨａｕｇｌａｎｄによるＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｐｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｄｕｃｔｓに記載される。

【0142】

放射性の検出可能な剤の更なる例としては、γ放出体（例えば、γ放出体Ｉｎ−１１１、Ｉ−１２５およびＩ−１３１、レニウム−１８６および１８８、ならびにＢｒ−７７（例えば、Ｔｈａｋｕｒ，Ｍ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｒｏｍ Ｒｅｓ．Ｖｏｌ．９ ｐｇ．３４５（１９７６）；Ｐｏｗｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．３２ ｐｇ．９３８（１９８２）；および米国特許第５，０１１，６８６号を参照のこと））；陽電子放出体（例えば、Ｃｕ−６４、Ｃ−ｌ１、およびＯ−１５、ならびにＣｏ−５７、Ｃｕ−６７、Ｇａ−６７、Ｇａ−６８、Ｒｕ−９７、Ｔｃ−９９ｍ、Ｉｎ−１１３ｍ、Ｈｇ−１９７、Ａｕ−１９８、およびＰｂ−２０３）が挙げられる。他の放射性の検出可能な剤としては、例えば、トリチウム、Ｃ−ｌ４および／またはタリウム、ならびにＲｈ−１０５、Ｉ−１２３、Ｎｄ−１４７、Ｐｍ−１５１、Ｓｍ−１５３、Ｇｄ−１５９、Ｔｂ−１６１、Ｅｒ−１７１および／またはＴｌ−２０１が挙げられ得る。

【0143】

テクネチウム（Ｔｅｃｈｎｉｔｉｕｍ）−９９ｍ（Ｔｃ−９９ｍ）の使用が好ましく、それは、他の出願において記載されている（例えば、米国特許第４，４１８，０５２号、および米国特許第５，０２４，８２９号を参照のこと）。Ｔｃ−９９ｍは、１４０ｋｅＶの単一光子エネルギーおよび約６時間の半減期を有するγ放出体であり、Ｍｏ−９９／Ｔｃ−９９発生器から容易に得られ得る。

【0144】

いくつかの実施形態において、放射性の検出可能な剤を含む組成物は、検出に適切な放射性同位体を、開示される構成要素および組成物に結合させることによって調製され得る。結合工程は、例えば、キレート剤（例えば、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ−，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＤＯＴＡ）、および／またはメタロチオネインを介し得、これらのうちのいずれかは、開示される構成要素、化合物、および組成物に、共有結合的に結合され（ａｔｔａｃｈｅｄ）得る。いくつかの実施形態において、テクネチウム−９９ｍ、還元剤、および水溶性リガンドの水性混合物が調製されて、次に開示される構成要素、化合物、または組成物と反応させられ得る。このような方法は、当該分野において公知であり、例えば、国際公開ＷＯ ９９／６４４４６を参照のこと。いくつかの実施形態において、放射性ヨウ素を含む組成物は、交換反応を用いて調製され得る。例えば、非放射性ヨウ素（ｃｏｌｄ ｉｏｄｉｎｅ）に対する放射性ヨウ素（ｈｏｔ ｉｏｄｉｎｅ）の交換は、当該分野において周知である。あるいは、放射性ヨウ素で標識された化合物は、対応するブロモ化合物から、トリブチルスタニル中間体を介して調製され得る。

【0145】

磁性の検出可能な剤としては、例えば、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を用いて使用される常磁性造影剤（例えば、ガドリニウムジエチレントリアミン五酢酸）（例えば、Ｄｅ Ｒｏｏｓ，Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｒｄ．Ｉｍａｇｉｎｇ Ｖｏｌ．７ ｐｇ．１３３（１９９１）を参照のこと）が挙げられる。いくつかの好ましい実施形態は、上記検出可能な剤として、原子番号２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、４２、４４、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、または７０を有する元素の、二価または三価のイオンである常磁性原子を使用する。適切なイオンとしては、クロム（ＩＩＩ）、マンガン（ＩＩ）、鉄（ＩＩ）、鉄（ＩＩＩ）、コバルト（ＩＩ）、ニッケル（ＩＩ）、銅（ＩＩ）、プラセオジム（ＩＩＩ）、ネオジム（ＩＩＩ）、サマリウム（ＩＩＩ）、およびイッテルビウム（ＩＩＩ）、ならびにガドリニウム（ＩＩＩ）、テルビウム（ｔｅｒｂｉｕｒｎ）（ＩＩＩ）、ジスプロシウム（ｄｙｓｏｐｒｏｓｉｕｍ）（ＩＩＩ）、ホルミウム（ＩＩＩ）、およびエルビウム（ＩＩＩ）が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの好ましい実施形態は、強い磁気モーメントを有する原子を使用する（例えば、ガドリニウム（ＩＩＩ））。

【0146】

いくつかの実施形態において、磁性の検出可能な剤を有する組成物は、開示される構成要素、化合物、および組成物を、常磁性原子と結合させることによって調製され得る。例えば、適切な常磁性原子の金属酸化物または金属塩（例えば、硝酸塩、塩化物、または硫酸塩の塩）は、水／アルコール媒体（例えば、メチル、エチル、および／またはイソプロピルアルコール）中に溶解または懸濁され得る。その混合物は、同様の水／アルコール媒体中の等モル量の開示される構成要素、化合物、および組成物の溶液に加えられて、撹拌（ｓｔｉｒ）され得る。その混合物は、反応が完了またはほとんど完了するまで穏やかに加熱され得る。形成される不溶性組成物は、濾過によって得られ得るが、可溶性組成物は、溶媒を蒸発させることによって得られ得る。キレートする成分上の酸基（ａｃｉｄ ｇｒｏｕｐ）が、開示される組成物中に残る場合、無機塩基（例えば、ナトリウム、カリウム、および／またはリチウムの、水酸化物、炭酸塩、および／または重炭酸塩）、有機塩基、および／または塩基性アミノ酸は、酸性基を中和するために、例えば、組成物の単離または精製を容易にするために使用され得る。

【0147】

好ましい実施形態において、上記検出可能な剤は、開示される組成物、ペプチド、アミノ酸配列、およびアネキシン１結合化合物の、アネキシン１と相互作用するための能力を妨げないような手法で、上記組成物に結合され得る。いくつかの実施形態において、上記検出可能な剤は、上記組成物、ペプチド、アミノ酸配列、またはアネキシン１結合化合物に、化学的に結合され得る。いくつかの実施形態において、上記検出可能な剤は、ある成分と化学的に結合し得、ここでその成分は、それ自体が上記組成物、ペプチド、アミノ酸配列、またはアネキシン１結合化合物に化学的に結合しており、その画像化剤（ｉｍａｇｉｎｇ）と開示される構成要素、化合物、および組成物とを間接的に繋ぐ。

【0148】

上記成分としてはまた、ポリ−Ｌ−リジン、および関連する分子が挙げられ得る。例えば、成分としては、本明細書中に開示される成分のいずれかが挙げられ得、それは、その成分に結合体化または結合されるポリ−Ｌ−リジンの付加を有する。例えば、上記成分は、ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジン、またはＡｌｅｘａ４８８−ポリ−Ｌ−リジンであり得る。このような成分を有する組成物の例としては、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジン、およびＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化Ａｌｅｘａ４８８−ポリ−Ｌ−リジンが挙げられる。

【0149】

Ｄ．結合（ｌｉｎｋａｇｅ）、リンカー、および切断可能な結合
開示されるアネキシン１結合化合物（（例えば、開示されるペプチドおよびアミノ酸配列）、および成分（または開示される組成物の他の構成要素）は、任意の有用な手法で連結され得る。例えば、アネキシン１結合化合物および成分は、共有結合的に結合（直接的にまたは間接的に）、または非共有結合的に結合（直接的にまたは間接的に）、またはその両方で結合され得る。共有結合的な結合は、有用である。直接的な結合は、上記アネキシン１結合化合物と上記成分との間の共有結合を介し得る。このような場合の共有結合は、上記アネキシン１結合化合物と上記成分との間の結合（ｌｉｎｋａｇｅ）と考えられ得る。間接的な結合は、１つ以上の介在する分子または構成要素を介し得る。有用な間接的な結合は、リンカーを介し得る。上記リンカー、上記アネキシン１結合化合物と上記成分とを結合するリンカーにおける任意の結合、上記アネキシン（ａｎｎｅｘｉ）１結合化合物と上記リンカーとの間の結合、および／または上記成分と上記リンカーとの間の結合が、結合（ｌｉｎｋａｇｅ）と考えられ得る。任意の適切なリンカーが使用され得る。例えば、上記リンカーは、オリゴマー（例えば、ペプチド、またはペプチドミメティック）であり得る。

【0150】

上記リンカーは、切断可能な結合を含み得るか、または結合（ｌｉｎｋａｇｅ）は、切断可能な結合であり得る。切断可能な結合は、例えば、標的化する部位において上記成分を自由にするのに有用であり得る。上記切断可能な結合は、任意の適切な手法で切断され得る。例えば、上記切断可能な結合は、酵素により、または酵素によらず、切断され得る。酵素による切断について、切断する酵素は、上記組成物が、送達される、向かう、移動する（ｔｒａｖｅｌ）、または蓄積する部位で供給され得るか、またはその部位に存在し得る。例えば、上記酵素は、上記組成物が、送達される、向かう、移動する、または蓄積する細胞の近くに存在し得る。酵素によらない切断について、上記組成物は、切断剤（ｃｌｅａｖｉｎｇ ａｇｅｎｔ）と接触され得るか、切断条件に置かれ得るか、またはその両方であり得る。切断剤は、上記切断可能な結合の切断を媒介または刺激し得る任意の物質である。酵素によらない切断剤は、酵素を除く任意の切断剤である。切断条件は、上記切断可能な結合の切断を媒介または刺激し得る任意の溶液または環境条件であり得る。例えば、いくつかの不安定な結合は、酸性条件、アルカリ性条件、反応基（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｇｒｏｕｐ）の存在下などで切断され得る。酵素によらない切断条件は、酵素の存在を除く、任意の切断条件である。剤によらない（ｎｏｎ−ａｇｅｎｔ）切断条件は、切断剤の存在を除く、任意の切断条件である。

【0151】

「プロテアーゼでの切断可能な結合」は、プロテアーゼによって切断され得る切断可能な結合を指す。有用なプロテアーゼとしては、開示される組成物が送達される、標的にする、向かうなどの場所に存在し得るプロテアーゼが挙げられる。有用なプロテアーゼの例としては、例えば、セリンプロテアーゼ（例えば、プラスミンおよびプラスミノゲン（ｐａｓｍｉｎｏｇｅｎ）アクチベータが挙げられる）、プロタンパク質転換酵素（例えば、Ｄｕｃｋｅｒｔ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ ｃｌｅａｖａｇｅ ｓｉｔｅｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ １７（１）：１０７−１１２（２００４）を参照のこと）、フーリン類（ｆｕｒｉｎｓ）、およびカルボキシペプチダーゼ類が挙げられる。セリンプロテアーゼは、がん細胞および腫瘍を標的にする組成物に特に有用である。塩基性残基のＣ末端側において切断する酵素の例としては、Ａｒｇ−Ｃプロテアーゼ（これは、アルギニン残基のＣ末端側において切断する；Ｋｅｉｌ，Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ−Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９２））、クロストリパイン（これは、アルギニン残基のＣ末端側において切断する；Ｋｅｉｌ，１９９２）、エンテロキナーゼ（これは、配列−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−後に切断する；配列番号２３）、Ｘａ因子（これは、配列−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−後に切断する；Ｆｕｊｉｋａｗａ ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｖｉｎｅ ｆａｃｔｏｒ Ｘ（Ｓｔｕａｒｔ ｆａｃｔｏｒ）：ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ ｆａｃｔｏｒ Ｘａ ａｌｐｈａ ｔｏ ｆａｃｔｏｒ Ｘａ ｂｅｔａ， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７２：３３５９−３３６３（１９７５））、Ｌｙｓ−Ｃ（これは、リジン残基のＣ末端側において切断する；Ｋｅｉｌ，１９９２）、トロンビン（これは、アルギニン残基のＣ末端側において切断する；Ｋｅｉｌ，１９９２）、トリプシン（これは、アルギニンおよびリジン残基のＣ末端側において切断する；Ｋｅｉｌ，１９９２）、セリンプロテアーゼ、プロタンパク質転換酵素（（例えば、ＰＣ１、ＰＣ２、ＰＣ３、ＰＣ４、ＰＣ５、ＰＣ６、ＰＣ７、ＰＣ８、フーリン、Ｐａｃｅ、ＰＡＣＥ４、Ｓｉｔｅ１プロテアーゼ、Ｓ１Ｐ、ＳＫＩ、ＮＡＲＣ−１、ＰＣＳＫ１、ＰＣＳＫ２、ＰＣＳＫ３、ＰＣＳＫ４、ＰＣＳＫ５、ＰＣＳＫ６、ＰＣＳＫ７、ＰＣＳＫ８、およびＰＣＳＫ９）、プラスミン、およびプラスミノゲンアクチベータが挙げられる。それらの切断部位のＣ末端側の配列を認識する酵素の例としては、Ａｓｐ−Ｎエンドペプチダーゼ（これは、アスパラギン酸のＮ末端側において切断する；Ｋｅｉｌ，１９９２）、およびカルボキシペプチダーゼ（例えば、カルボキシペプチダーゼＡ（これは、プロリン、リジン、およびアルギニンを除くＣ末端残基を切断する）。

【0152】

プロテアーゼの例はまた、Ｈｏｏｋ，Ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｉｎ ｐｒｏｈｏｒｍｏｎｅ ａｎｄ ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，ＲＧ Ｌａｎｄｅｓ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ａｕｓｔｉｎ，Ｔｅｘａｓ，ＵＳＡ（１９９８）；Ｈｏｏｐｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３２１：２６５−２７９（１９９７）；Ｗｅｒｂ，Ｃｅｌｌ ９１：４３９−４４２（１９９７）；Ｗｏｌｆｓｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１３１：２７５−２７８（１９９５）；Ｍｕｒａｋａｍｉ ａｎｄ Ｅｔｌｉｎｇｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１４６：１２４９−１２５９（１９８７）；Ｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３０７：３１３−３２６（１９９５）；Ｓｍｙｔｈ ａｎｄ Ｔｒａｐａｎｉ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ １６：２０２−２０６（１９９５）；Ｔａｌａｎｉａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：９６７７−９６８２（１９９７）；およびＴｈｏｒｎｂｅｒｒｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１７９０７−１７９１１（１９９７）に記載される。

【0153】

「エステラーゼでの切断可能な結合」は、プロテアーゼによって切断され得る切断可能な結合を指す。有用なエステラーゼとしては、開示される組成物が送達される、標的にする、向かうなどの場所に存在し得るエステラーゼが挙げられる。

【0154】

Ｅ．薬学的組成物およびキャリア
開示される組成物は、単独、または薬学的に受容可能なキャリア中のいずれかで、インビボで投与され得る。「薬学的に受容可能」とは、生物学的に、または他の、所望されないものではない材料を意味し、すなわち、その材料は、あらゆる所望されない生物学的作用を引き起こすことなく、またはそれが含まれる上記薬学的組成物の他の構成要素のいずれかと有害な様式で相互作用することなく、本明細書中に開示される組成物と一緒に被験体に投与され得る。上記キャリアは、活性成分（ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）のあらゆる分解を最小限にするため、および上記被験体におけるいかなる不都合な副作用を最小限にするために、当業者に周知である通りに、当然のこととして選択される。上記材料は、溶液、懸濁物中に存在し得る（例えば、ミクロ粒子、リポソーム、または細胞に組み込まれる）。

【0155】

１．薬学的に受容可能なキャリア
本明細書中に開示される組成物は、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて治療に使用され得る。

【0156】

適切なキャリアおよびそれらの処方物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（１９ｔｈ ｅｄ．）ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ １９９５に記載される。代表的に、適切な量の薬学的に受容可能な塩は、上記処方物を等張にするためにその処方物中で使用される。上記薬学的に受容可能なキャリアの例としては、食塩水、リンゲル液、およびデキストロース溶液が挙げられるが、これらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは、約５〜約８、およびより好ましくは、約７〜約７．５である。さらなるキャリアとしては、徐放性調製物（例えば、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックス、ここでマトリックスは、成形された物品（例えば、フィルム、リポソーム、またはミクロ粒子）の形態である）が挙げられる。特定のキャリアが、例えば、投与の経路および投与される組成物の濃度に依存して、より好ましい場合があることは、当業者に明らかである。

【0157】

薬学的キャリアは、当業者に公知である。これらは、最も代表的に、ヒトへの薬物の投与のための標準キャリアであり、溶液（例えば、滅菌水、食塩水、および生理的ｐＨの緩衝化溶液）が挙げられる。上記組成物は、筋肉内に、または皮下に投与され得る。他の化合物は、当業者によって使用される標準手順に従って投与される。

【0158】

薬学的組成物としては、一般に好まれる上記分子の他に、キャリア、増粘剤（ｔｈｉｃｋｅｎｅｒ）、希釈剤、バッファー、保存剤、および表面活性剤などを含み得る。薬学的組成物はまた、１つ以上の活性成分（ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）（例えば、抗菌剤、抗炎症剤、および麻酔薬など）を含み得る。

【0159】

上記薬学的組成物は、局所処置が所望されるか、または全身処置が所望されるかに依存して、および処置されるべき領域に依存して、多くの手法で投与され得る。投与は、局所的（眼に、膣に、直腸に、鼻内に、が挙げられる）、経口、吸入によって、または非経口（例えば、静脈内点滴、皮下注射、腹腔内注射、または筋肉内注射によって）であり得る。開示される抗体は、静脈内に、腹腔内に、筋肉内に、皮下に、腔内に（ｉｎｔｒａｃａｖｉｔｙ）、または経皮に投与され得る。

【0160】

非経口投与の調製物としては、滅菌の、水性または非水性の、溶液、懸濁物、およびエマルジョンが挙げられる。非水性の溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オリーブ油）、および注射可能な有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）である。水性のキャリアとしては、水、アルコール性／水性の溶液、エマルジョンまたは懸濁物が挙げられる（食塩水、および緩衝化媒体が挙げられる）。非経口ビヒクルとしては、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸リンゲル、または固定油が挙げられる。静脈内ビヒクルとしては、流体および栄養補充物、電解質補充物（例えば、リンゲルデキストロースに基づくもの）、などが挙げられる。例えば、抗菌物質、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガスなどのような、保存剤および他の添加剤も存在し得る。

【0161】

局所投与のための処方物としては、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、点滴剤、坐剤、スプレー剤、液剤（ｌｉｑｕｉｄｓ）、および散剤が挙げられ得る。従来の薬学的キャリア、水性の、粉末状のまたは油性の基剤、および増粘剤などは、必要であるか、または所望され得る。

【0162】

経口投与のための組成物としては、粉末または顆粒、水中または非水性の媒体中の懸濁物または溶液、カプセル、サシェ（ｓａｃｈｅｔ）、または錠が挙げられる。増粘剤、着香料、希釈剤、乳化剤、分散補助剤（ｄｉｓｐｅｒｓｉｎｇ ａｉｄ）、または結合剤が好ましい場合がある。

【0163】

上記組成物のいくつかは、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸、およびリン酸）、および有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、およびフマル酸）との反応によって、または無機塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウム）、および有機塩基（例えば、モノアルキルアミン、ジアルキルアミン、トリアルキルアミン、アリールアミン、および置換エタノールアミン）との反応によって形成される薬学的に受容可能な酸付加塩または塩基付加塩として投与され得る。

【0164】

２．ナノ粒子、ミクロ粒子、およびマイクロバブル
用語「ナノ粒子」は、ナノメートルで測定されるサイズを有するナノスケールの粒子を指す（例えば、約１００ｎｍ未満の少なくとも１つの寸法を有するナノスコピック粒子（ｎａｎｏｓｃｏｐｉｃ ｐａｒｔｉｃｌｅ））。ナノ粒子の例としては、常磁性ナノ粒子、超常磁性ナノ粒子、金属ナノ粒子、ナノワーム、フラーレン様材料、無機ナノチューブ、デンドリマー（例えば、共有結合的に結合した（ａｔｔａｃｈｅｄ）金属キレートを有する）、ナノファイバー、ナノホム（ｎａｎｏｈｏｍ）、ナノオニオン、ナノロッド、ナノロープ（ｎａｎｏｒｏｐｅ）、および量子ドットが挙げられる。

【0165】

ミクロスフェア（またはマイクロバブル）はまた、本明細書中に開示される方法とともに使用され得る。発色団を含むミクロスフェアは、広く多様な適用において利用されている。ミクロスフェアの単分散性は、重要であり得る。

【0166】

ナノ粒子（例えば、金属ナノ粒子、金属酸化物ナノ粒子、または半導体ナノクリスタルなど）は、ミクロスフェアに組み込まれ得る。上記ナノ粒子は、例えば、熱生成ナノシェル（ｈｅａｔ ｇｅｎｅｒａｔｉｎｇ ｎａｎｏｓｈｅｌｌ）であり得る。本明細書中で用いられる場合、「ナノシェル」は、１つ以上の伝導性シェル層によって囲まれる離散的誘電性（ｄｉｓｃｒｅｔｅ ｄｉｅｌｅｃｔｒｉｃ）または半導性コアセクションを有するナノ粒子である。米国特許第６，５３０，９４４号は、これにより、金属ナノシェルを作製および使用する方法の教示についてのその全体が本明細書中で参考として援用される。ナノシェルは、材料（例えば、放射線（例えば、近赤外線（約８００ｎｍ〜約１３００ｎｍ）を用いて励起され得る、高度に伝導性の金属）でコーティングされる、誘電性または不活性材料（例えば、ケイ素）のコアで形成され得る。励起の際に、上記ナノシェルは、熱を放つ。結果として得られる高熱は、周囲の細胞（複数化）または組織を死滅させ得る。上記ナノシェルのシェルとコアとを組み合わせた直径は、数十ナノメートル〜数百ナノメートルの範囲に及ぶ。近赤外線は、組織を貫通するその能力のために有利である。放射線の他のタイプはまた、ナノ粒子コーティングおよび標的化細胞の選択に依存して使用され得る。例としては、ｘ線、磁界、電界、および超音波が挙げられる。

【0167】

上記ナノ粒子は、金属ナノ粒子、金属酸化物ナノ粒子、または半導体ナノクリスタルであり得る。上記金属ナノ粒子または上記金属酸化物ナノ粒子の金属としては、チタン、ジルコニウム、ハフニウム、バナジウム、ニオブ、タンタル、クロム、モリブデン、タングステン、マンガン、テクネチウム、レニウム、鉄、ルテニウム、オスミウム、コバルト、ロジウム、イリジウム、ニッケル、パラジウム、白金、銅、銀、金、亜鉛、カドミウム、スカンジウム、イットリウム、ランタン、ランタニド系列、またはアクチニド系列元素（例えば、セリウム、プラセオジム、ネオジム、プロメチウム、サマリウム、ユーロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウム、ルテチウム、トリウム、プロトアクチニウム、およびウラニウム）、ホウ素、アルミニウム、ガリウム、インジウム、タリウム、ケイ素、ゲルマニウム、スズ、鉛、アンチモン、ビスマス、ポロニウム、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、およびバリウムが挙げられ得る。特定の実施形態において、上記金属は、鉄、ルテニウム、コバルト、ロジウム、ニッケル、パラジウム、白金、銀、金、セリウム、またはサマリウムであり得る。上記金属酸化物は、これらの材料または材料の組み合わせのうちのいずれかの酸化物であり得る。例えば、上記金属は、金であり得、または上記金属酸化物は、酸化鉄、酸化コバルト、酸化亜鉛、酸化セリウム、または酸化チタンであり得る。金属および金属酸化物ナノ粒子の調製は、例えば、米国特許第５，８９７，９４５号、および同第６，７５９，１９９号に記載され、そのそれぞれは、その全体が参考として援用される。

【0168】

３．リポソーム
「リポソーム」は、この用語が本明細書中で使用されるとき、内部の水性の空間を取り囲む外側の脂質二重層または脂質多重層の膜を含む構造を指す。リポソームは、細胞に送達するための任意の生物学的活性薬剤を包みこむために使用され得る。

【0169】

リポソームを形成するための材料および手順は、当業者に周知である。適切な媒体中での分散の際に、広範なリン脂質は膨張し、水和し、水性媒体の層が脂質二重層を分離する多重層同心性二重層小胞（ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｃ ｂｉｌａｙｅｒ ｖｅｓｉｃｌｅ）を形成する。これらの系は、多重層リポソームまたは多重層脂質小胞（「ＭＬＶ」）と称され、１０ｎｍ〜１００μｍの範囲内の直径を有する。これらのＭＬＶは、Ｂａｎｇｈａｍら、Ｊ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１３：２３８−２５２（１９６５）によって最初に記載された。一般に、脂質、または親油性物質は、有機溶媒に溶解される。上記溶媒が、除去されるとき（例えば、ロータリーエバポレーションによる減圧下で）、上記脂質残留物は、容器の壁にフィルムを形成する。代表的に電解質または親水性の生物学的に活性のある材料を含む水性の溶液は、次に上記フィルムに加えられる。大ＭＬＶは、撹拌（ａｇｉｔａｔｉｏｎ）の際に生産される。より小さいＭＬＶが所望されるとき、より大きい小胞は、音波処理に供し、続いて、孔のサイズを漸減させたフィルターを通した濾過を行うか、または機械的剪断の他の形態によって低減される。また、ＭＬＶが、サイズおよびラメラ（ｌａｍｅｌｌａ）の数の両方において低減され得る技術が存在する（例えば、加圧押出（ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｅｘｔｒｕｓｉｏｎ）による）（Ｂａｒｅｎｈｏｌｚ，ｅｔ ａｌ．，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．９９：２１０−２１４（１９７９））。

【0170】

リポソームはまた、ＭＬＶのより広範囲な音波処理によって調製される単一層（ｕｎｉｌａｍｎｅｌｌａｒ）小胞の形態を取り得、水性溶液を取り囲む単一の球状の脂質二重層からなる。単一層小胞（「ＵＬＶ」）は、小さいことがあり、２０ｎｍ〜２００ｎｍの範囲内の直径を有するが、より大きいＵＬＶは、２００ｎｍ〜２μｍの範囲内の直径を有し得る。単一層小胞を作製するためのいくつかの周知の技術が存在する。Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １３５：６２４−２３８ （１９６８）において、リン脂質の水性分散物（ａｑｕｅｏｕｓ ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ）を音波処理することにより、水性溶液を取り囲む脂質二重層を有する小ＵＬＶを生産する。Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ、米国特許第４，０８９，８０１号は、超音波処理と、その後の両親媒性化合物を含む水性媒体の添加および遠心分離して生体分子脂質層系を形成することによる、リポソーム前駆体の形成を記載する。

【0171】

小ＵＬＶはまた、Ｂａｔｚｒｉら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ２９８：１０１５−１０１９（１９７３）によって記載されるエタノール注入技術、およびＤｅａｍｅｒら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ４４３：６２９−６３４（１９７６）のエーテル注入技術によって調製され得る。これらの方法は、脂質の有機溶液をバッファー溶液にすばやく注入することに関与し、このことは、単一層リポソームのすばやい形成をもたらす。ＵＬＶを作製するための別の技術は、「Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」，ｅｄ．Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，Ｖｏｌ．Ｉ，Ｃｈａｐｔｅｒ ７，ｐｇ．７９−１０７（１９８４）においてＷｅｄｅｒらによって教示される。この洗剤除去方法は、脂質および添加物を、洗剤を用いて、撹拌（ａｇｉｔａｔｉｏｎ）または音波処理することによって可溶化して、所望される小胞を生産することに関与する。

【0172】

Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓら、米国特許第４，２３５，８７１号は、有機溶媒中での脂質の油中水型エマルジョンの形成に関与する逆相エバポレーション技術による、大ＵＬＶの調製、および水性バッファー溶液中に被包されるべき薬物を記載する。上記有機溶媒は、圧力下で除去されて、混合物を生じ（ｙｉｅｌｄ）、このものは、水性媒体中で撹拌（ａｇｉｔａｔｉｏｎ）または分散すると、大ＵＬＶに転換される。Ｓｕｚｕｋｉら、米国特許第４，０１６，１００号は、剤および脂質の水性リン脂質分散物（ａｑｕｅｏｕｓ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ａｇｅｎｔ ａｎｄ ｌｉｐｉｄｓ）を凍結／解凍することによって、単一層小胞中に剤を被包する別の方法を記載する。

【0173】

ＭＬＶおよびＵＬＶの他に、リポソームはまた、多小胞であり得る。Ｋｉｍら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ７２８：３３９−３４８（１９８３）に記載されるように、これらの多小胞リポソームは球状であり、内部粒状構造を含む。その外膜は、脂質二重層であり、内部領域は、二重層隔壁によって分離される小さい区画を含む。リポソームのさらに別のタイプは、オリゴラメラ（ｏｌｉｇｏｌａｍｅｌｌａｒ）小胞（「ＯＬＶ」）であり、これは、いくつかの周辺脂質層（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｌｉｐｉｄ ｌａｙｅｒ）によって取り囲まれる大きい中心区画を有する。２μｍ〜１５μｍの直径を有するこれらの小胞は、Ｃａｌｌｏら、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ２２（３）：２５１−２６７（１９８５）において記載される。

【0174】

Ｍｅｚｅｉら、米国特許第４，４８５，０５４号、および同第４，７６１，２８８号もまた脂質小胞を調製する方法を記載する。より最近、Ｈｓｕ、米国特許第５，６５３，９９６号は、エアゾール適用を利用して、リポソームを調製する方法を記載し、Ｙｉｏｕｒｎａｓら、米国特許第５，０１３，４９７号は、高速剪断混合室（ｈｉｇｈ ｖｅｌｏｃｉｔｙ−ｓｈｅａｒ ｍｉｘｉｎｇ ｃｈａｍｂｅｒ）を利用して、リポソームを調製するための方法を記載する。ＵＬＶ（Ｗａｌｌａｃｈら、米国特許第４，８５３，２２８号）またはＯＬＶ（Ｗａｌｌａｃｈ、米国特許第５，４７４，８４８号、および同第５，６２８，９３６号）を生産するための具体的な出発材料を使用する方法も記載される。

【0175】

全ての前述の脂質小胞、およびそれらの調製のための方法の包括的な概説は、「Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」，ｅｄ．Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，Ｖｏｌ．Ｉ，ＩＩ ＆ ＩＩＩ（１９８４）に記載される。これと本発明における使用に適した種々の脂質小胞を記載する前述の参考文献は、本明細書中で参考として援用される。

【0176】

Ｆ．コンピューター支援の薬物設計
開示される組成物は、開示される組成物の構造を同定するか、または所望される手法で、開示される組成物と相互作用する、潜在的分子もしくは実際の分子（例えば、低分子）を同定するかのいずれかのための任意の分子モデリング技術の標的（ｔａｒｇｅｔ）として使用され得る。

【0177】

開示される組成物をモデリング技術において用いるとき、分子（例えば、高分子の分子）が、特定の所望される特性（例えば、標的分子の機能の阻害、または刺激）を有すると同定されることが理解される。開示される組成物、ペプチドなどを用いるとき、同定および単離される分子も開示される。従って、開示される組成物に関与する分子モデリングアプローチを用いて生産される生成物はまた、本明細書中に開示されると考えられる。

【0178】

従って、一般に好まれる分子を結合する分子を単離するための１つの手法は、合理的な設計を介する。これは、構造の情報およびコンピューターモデリングを介して達成され得る。コンピューターモデリング技術は、選択される分子の三次元原子構造の可視化、および上記分子と相互作用する新たな化合物の合理的設計を可能にする。三次元の構築物は、代表的に、上記選択される分子のＸ線結晶学的解析またはＮＭＲ画像法からのデータに依存する。分子動力学は、力場データを必要とする。コンピューターグラフィックスシステムは、新たな化合物が、標的分子にどのように連結するかの予測を可能にし、結合特異性を改良するための、上記化合物および標的分子の構造の実験的操作を可能にする。分子−化合物の相互作用が、一方または両方において小さな変化がなされるときにどのようなものであるかの予測は、分子力学ソフトウェアおよびコンピューター計算の集中的なコンピューター（ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌｌｙ ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ ｃｏｍｐｕｔｅｒ）を必要とし、通常、分子設計プログラムと使用者との間の、使いやすいメニュー駆動型のインターフェイスと合わせられている。

【0179】

分子モデリングシステムの例は、ＣＨＡＲＭｍおよびＱＵＡＮＴＡプログラム（Ｐｏｌｙｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）である。ＣＨＡＲＭｍは、エネルギー最小化および分子動力学機能を行う。ＱＵＡＮＴＡは、分子構造の構築、グラフィックモデリング、および分析を行う。ＱＵＡＮＴＡは、分子のお互いの挙動についての、相互作用の構築、改変、可視化、および分析を可能にする。

【0180】

多くの論文は、具体的なタンパク質と相互作用する薬物のコンピューターモデリングを概説する（例えば、Ｒｏｔｉｖｉｎｅｎ，ｅｔ ａｌ．，１９８８ Ａｃｔａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ Ｆｅｎｎｉｃａ ９７，１５９−１６６；Ｒｉｐｋａ，Ｎｅｗ Ｓｃｉｅｎｔｉｓｔ ５４−５７ （Ｊｕｎｅ １６，１９８８）；ＭｃＫｉｎａｌｙ ａｎｄ Ｒｏｓｓｍａｎｎ，１９８９ Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｉｏｌ．２９，１１１−１２２；Ｐｅｒｒｙ ａｎｄ Ｄａｖｉｅｓ，ＱＳＡＲ：Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ｐｐ．１８９−１９３（Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８９）；Ｌｅｗｉｓ ａｎｄ Ｄｅａｎ，１９８９ Ｐｒｏｃ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｌｏｎｄ．２３６，１２５−１４０ ａｎｄ １４１−１６２；および核酸構成要素についてのモデル酵素に関して、Ａｓｋｅｗ，ｅｔ ａｌ．，１９８９．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１１，１０８２−１０９０）。化学物質を調べ（ｓｃｒｅｅｎ）、グラフによって示す他のコンピュータープログラムは、企業（例えば、ＢｉｏＤｅｓｉｇｎ，Ｉｎｃ．，Ｐａｓａｄｅｎａ，ＣＡ．，Ａｌｌｅｌｉｘ，Ｉｎｃ，Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇａ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ，およびＨｙｐｅｒｃｕｂｅ，Ｉｎｃ．，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｏｎｔａｒｉｏ）から利用可能である。これらは、初めは特定のタンパク質に特異的な薬物に適用するために設計されるが、一旦ＤＮＡまたはＲＮＡの特異的な領域が同定されると、そのＤＮＡまたはＲＮＡの特異的な領域と特異的に相互作用する分子を設計するのに応用され得る。

【0181】

結合を変更し得る化合物の設計および生成に関して上に記載したが、当業者はまた、公知の化合物（天然の生成物、または合成化学物質が挙げられる）、および生物学的に活性のある材料（タンパク質が挙げられる）のライブラリーを、基質結合または酵素活性を変更する化合物について調べ得る。

【0182】

Ｇ．同様の機能を有する組成物
本明細書中に開示される組成物が特定の機能（例えば、アネキシン１に結合すること、または腫瘍血管系に向かうこと）を有することが理解される。開示される機能を行うための特定の構造の必要条件が本明細書中に開示され、開示される構造に関連する同じ機能を行い得る多様な構造が存在すること、およびこれらの構造が、最終的には同じ結果（例えば、刺激または阻害）を達成することが理解される。

【0183】

Ｈ．キット
本明細書中に開示される方法を実施することにおいて、使用され得る試薬を対象とするキットが、本明細書中に開示される。上記キットは、本明細書中で議論される任意の試薬もしくは試薬の組み合わせ、または開示される方法の実施において、必要とされるか、もしくは有益であることが理解される任意の試薬もしくは試薬の組み合わせを含み得る。例えば、上記キットは、本明細書中に開示される組成物を含み得る。

【0184】

Ｉ．混合物
上記方法が、組成物、または構成要素、または試薬を混合または接触させることに関与するときはいつでも、上記方法を行うことにより、多くの異なる混合物が作り出される。例えば、上記方法が３つの混合ステップを含む場合に、それらのステップが別個に行われる場合、これらのステップのそれぞれ１つの後に、特有の混合物が形成される。さらに、全てのステップの完了時点で、それらのステップがどのように行われたかに関係なく、混合物が形成される。本開示は、開示される方法が行われることによって得られる、これらの混合物、ならびに任意の開示される試薬、組成物、または構成要素（例えば、本明細書中に開示されるもの）を含む混合物を企図する。

【0185】

Ｊ．システム
開示される方法を行うこと、または開示される方法を行うことにおいて補助することに有用であるシステムが開示される。システムは、一般に、製造される物品（例えば、構造物、機械、およびデバイスなど）、ならびに組成物、化合物、および材料などの組み合わせを含む。開示される、または開示から明らかであるこのような組み合わせが企図される。

【0186】

Ｋ．コンピューター読み取り可能媒体
開示される核酸およびタンパク質が、ヌクレオチドまたは（ｏｆ）アミノ酸からなる配列として表され得ることが理解される。これらの配列を表示するための多様な手法が存在する（例えば、ヌクレオチドのグアノシンは、Ｇまたはｇで表され得る）。同様に、アミノ酸のバリンは、ＶａｌまたはＶで表され得る。当業者は、任意の核酸またはタンパク質配列を、存在する多様な手法のいずれかで、どのように表示および表現するかを理解し、そのそれぞれが、本明細書中に開示されるとみなされる。コンピューター読み取り可能媒体（例えば、市販のフロッピー（登録商標）ディスク、テープ、チップ、ハードドライブ、コンパクトディスク、およびビデオディスク）、または他のコンピューター読み取り可能媒体におけるこれらの配列の表示が、本明細書中に具体的に企図される。また、開示される配列のバイナリーコード表示が開示される。当業者は、コンピューター読み取り可能媒体が何かを理解する。従って、上記核酸またはタンパク質配列が記録、記憶、または保存される、コンピューター読み取り可能媒体。

【0187】

Ｌ．ペプチド合成
本明細書中に開示される組成物、および開示される方法を行うのに必要である組成物は、そうでないと具体的に言及されない限り、その特定の試薬または化合物について、当業者に公知である任意の方法を用いて作製され得る。

【0188】

開示されるタンパク質（例えば、配列番号２）を生産する１つの方法は、タンパク質化学の技術によって２つ以上のペプチドまたはポリペプチドを一緒に連結することである。例えば、ペプチドまたはポリペプチドは、Ｆｍｏｃ（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）またはＢｏｃ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボノイル（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｏｙｌ））化学（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ，ＣＡ）のいずれかを用いて、現在、利用可能な研究室機器を用いて化学的に合成され得る。当業者は、開示されるタンパク質に対応するペプチドまたはポリペプチドが、例えば、標準的な化学反応によって合成され得ることを容易に認識し得る。例えば、ペプチドまたはポリペプチドは、合成され、その合成レジンから切断され得ないが、一方のペプチドまたはタンパク質の他のフラグメントは、合成され、その後、上記レジンから切断され得、それにより、上記他のフラグメント上で機能的にブロックされる末端基を曝す。ペプチド縮合反応によって、これら２つのフラグメントは、それらのカルボキシル末端およびアミノ末端それぞれでのペプチド結合を介して共有結合的に結合されて、抗体またはそのフラグメントを形成し得る（Ｇｒａｎｔ ＧＡ（１９９２）Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａ Ｕｓｅｒ Ｇｕｉｄｅ．Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．（１９９２）；Ｂｏｄａｎｓｋｙ Ｍ ａｎｄ Ｔｒｏｓｔ Ｂ．，Ｅｄ．（１９９３）Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ Ｉｎｃ．，ＮＹ（これは、少なくとも、ペプチド合成に関連する材料について、本明細書中で参考として援用される）。あるいは、上記ペプチドまたはポリペプチドは、本明細書中に記載されるように、インビボで独立して合成される。一旦、単離されると、これらの独立したペプチドまたはポリペプチドは、同様のペプチド縮合反応を介して、連結されてペプチドまたはそのフラグメントを形成し得る。

【0189】

例えば、クローン化または合成ペプチドセグメントの酵素によるライゲーションは、比較的短いペプチドフラグメントが結合されて（ｊｏｉｎｅｄ）より大きなペプチドフラグメント、ポリペプチド、またはタンパク質ドメイン全体を生産することを可能にする（Ａｂｒａｈｍｓｅｎ Ｌ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０：４１５１（１９９１））。あるいは、合成ペプチドのネイティブ化学ライゲーションは、大きいペプチドまたはポリペプチドを、より短いペプチドフラグメントから合成によって構築するために利用され得る。この方法は、２つのステップの化学反応からなる（Ｄａｗｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｂｙ Ｎａｔｉｖｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｉｇａｔｉｏｎ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２６６：７７６−７７９（１９９４））。第一のステップは、開始の共有結合性生成物（ｃｏｖａｌｅｎｔ ｐｒｏｄｕｃｔ）としてチオエステル連結中間体を与えるための、無保護の合成ペプチド−チオエステルと、アミノ末端Ｃｙｓ残基を含む別の無保護のペプチドセグメントとの化学選択的反応である。反応条件における変化なしで、この中間体は、自発的なすばやい分子内反応を経て、そのライゲーション部位において、ネイティブペプチド結合（ｎａｔｉｖｅ ｐｅｐｔｉｄｅ ｂｏｎｄ）を形成する（Ｂａｇｇｉｏｌｉｎｉ Ｍ ｅｔ ａｌ．（１９９２） ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．３０７：９７−１０１；Ｃｌａｒｋ−Ｌｅｗｉｓ Ｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６９：１６０７５（１９９４）；Ｃｌａｒｋ−Ｌｅｗｉｓ Ｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０：３１２８（１９９１）；Ｒａｊａｒａｔｈｎａｍ Ｋ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３３：６６２３−３０（１９９４））。

【0190】

あるいは、無保護のペプチドセグメントは、化学ライゲーションの結果としてペプチドセグメント間で形成される結合が、非天然の（ｕｎｎａｔｕｒａｌ）（非ペプチド）結合であるところで化学的に連結される（Ｓｃｈｎｏｌｚｅｒ，Ｍ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５６：２２１（１９９２））。この技術は、タンパク質ドメインの類似体、ならびに完全な生物学的活性を有する大量の比較的純粋なタンパク質を合成するために使用されている（ｄｅＬｉｓｌｅ Ｍｉｌｔｏｎ ＲＣ ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＩＶ．Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２５７−２６７（１９９２））。

【0191】

方法
開示される組成物、アネキシン１結合化合物、アネキシン１結合アミノ酸配列、ペプチド、またはアミノ酸配列を被験体に投与する工程を含む方法が、本明細書中に開示される。上記組成物、アネキシン１結合化合物、アネキシン１結合アミノ酸配列、ペプチド、およびアミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に向かうことができる。上記組成物は、腫瘍血管系において蓄積し得る。上記方法のいくつかの形態は、本明細書中に開示される組成物、アネキシン１結合化合物、アネキシン１結合アミノ酸配列、ペプチド、またはアミノ酸配列を被験体に投与する工程を含み、ここで上記組成物、アネキシン１結合化合物、アネキシン１結合アミノ酸配列、ペプチド、またはアミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に向かい、ここで上記組成物、アネキシン１結合化合物、アネキシン１結合アミノ酸配列、ペプチド、またはアミノ酸配列は、腫瘍血管系において蓄積する。上記組成物、アネキシン１結合化合物、アネキシン１結合アミノ酸配列、ペプチド、またはアミノ酸配列は、選択的に腫瘍血管系に向かうことができる。

【0192】

成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物を被験体に投与する工程を含む方法が開示される。また、被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、この方法は、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを上記被験体に投与する工程を含む、方法が開示される。また、被験体において腫瘍細胞を標的にする方法であって、この方法は、成分、および細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む、組成物を上記被験体に投与する工程を含む、方法が開示される。また、細胞上の炭水化物受容体に結合し得るアミノ酸配列を含むペプチドを含む組成物を上記被験体に投与する工程、および上記被験体において、上記組成物を検出する工程を含む方法が開示される。

【0193】

１つの例において、上記組成物は、治療効果を有し得る。この効果は、腫瘍の部位への治療剤の送達によって高められ得る。

【0194】

治療効果は、全身腫瘍組織量の増加を遅くすること、または全身腫瘍組織量の低減であり得る。この、上記全身腫瘍組織量の増加を遅くすること、または全身腫瘍組織量の低減は、非処置腫瘍または異なる方法によって処置された腫瘍と比較して、上記全身腫瘍組織量の増加において、または全身腫瘍組織量の低減において、１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％、６００％、７００％、８００％、９００％、もしくは１０００％、もしくはそれより多くの改善であり得る。

【0195】

治療効果はまた、腫瘍における血液循環の、低減または遮断であり得る。腫瘍における血液循環のこの低減または遮断は、非処置腫瘍または異なる方法によって処置された腫瘍と比較して、腫瘍における血液循環の効果的な遮断において、１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％、６００％、７００％、８００％、９００％、または１０００％、またはそれより多くの改善であり得る。

【0196】

開示される組成物は、アネキシン１が、正常な量よりも多い量で存在する任意の疾患を処置するために使用され得る（例えば、がん）。処置され得る、異なるタイプのがんの非限定的なリストとしては、リンパ腫（ホジキンおよび非ホジキン）、癌腫、固形組織（ｓｏｌｉｄ ｔｉｓｓｕｅ）の癌腫、扁平上皮細胞癌腫、腺癌、肉腫、神経膠腫、高度神経膠腫（ｈｉｇｈ ｇｒａｄｅ ｇｌｉｏｍａ）、芽細胞腫、神経芽細胞腫、プラスマ細胞腫、組織球腫、黒色腫、腺腫、低酸素性腫瘍、骨髄腫、ＡＩＤＳ関連のリンパ腫または肉腫、転移性のがん、またはがん全般が挙げられる。

【0197】

開示される組成物が処置するために使用され得る、代表的だが非限定的な、がんのリストは、以下：リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、ホジキン病、骨髄性白血病、膀胱がん、脳がん、神経系がん、頭頸部がん、頭頸部の扁平上皮細胞癌腫、腎臓がん、肺がん（例えば、小細胞肺がん、および非小細胞肺がん）、神経芽細胞腫／神経膠芽細胞腫、卵巣がん、膵がん、前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ）、皮膚がん、肝がん、黒色腫、口、咽喉、喉頭、および肺の扁平上皮細胞癌腫、結腸がん、子宮頸がん、子宮頸癌腫、乳がん、および上皮がん、腎がん、泌尿生殖器がん、肺のがん（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｃａｎｃｅｒ）、食道癌種、胃がん、頭頸部癌腫、大腸がん、造血がん（ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ）；精巣がん；結腸および直腸がん、前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、または膵がん、である。

【0198】

開示される組成物はまた、細網内皮系（ＲＥＳ）組織による上記組成物の取り込みを低減するためにおとり粒子（ｄｅｃｏｙ ｐａｒｔｉｃｌｅ）の前処置後に投与され得る。このようなおとり粒子の前処置は、上記粒子の血中半減期（ｂｌｏｏｄ ｈａｌｆ−ｌｉｆｅ）を長くし得、腫瘍標的化を増大させる。

【0199】

上記方法は、投与する工程の後に、開示されるペプチドおよび組成物を検出する工程をさらに含み得る。開示されるペプチドおよび組成物は、蛍光、ＣＴスキャン、ＰＥＴ、またはＭＲＩによって検出され得る。開示されるペプチドおよび組成物は、蛍光によって検出され得る。開示されるペプチドおよび組成物は、被験体における腫瘍血管系または腫瘍と結合体化し得る。

【実施例】

【0200】

実施例
本明細書中で請求される化合物、組成物、物品、デバイスおよび／または方法がどのように作製および評価されるのかの完全な開示および記載を、当業者に提供するために以下の実施例を示し、これらは、純粋に例示的であることを意図し、本開示を限定することを意図しない。数字（例えば、量、温度など）に関して正確性を確実にするための努力がなされているが、いくつかの誤差および偏差は、考慮されるべきである。そうでないと示されない限り、部分は、重量による部分であり、温度は、℃にあるかまたは周囲温度であり、圧力は、大気圧または大気圧近くである。

【0201】

Ａ．実施例１：炭水化物模擬ペプチドＩＦ７による、悪性腫瘍に対して標的化した高度に効率的な薬物送達
１．導入
ゲノミクスおよびプロテオミクスにおける技術的進歩は、ＤＮＡおよびタンパク質の自動化化学合成とともに生物医学における進展に大きく貢献している。対照的に、炭水化物の役割の理解は、技術の進歩の不足に起因して、立ち遅れている。現在、組換え炭水化物または増幅可能な炭水化物は、生産することができず、複合糖質は、自動的に化学合成され得ない。結果として、炭水化物ベースの薬物の発見は、がんの悪性度が、腫瘍細胞表面上に見出される炭水化物構造に密接に関連しているという事実にも関わらず、大部分調査されていない（Ｓ． Ｈａｋｏｍｏｒｉ．Ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ ｄｅｆｉｎｉｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ：ｎｅｗ ｗｉｎｅ ｉｎ ａｎ ｏｌｄ ｂｏｔｔｌｅ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ ９９：１０２３１−１０２３３（２００２）；Ｓ．Ｎａｋａｍｏｒｉ、ｅｔ ａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｉａｌｙｌ Ｌｅｗｉｓｘ ａｎｔｉｇｅｎ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｐｏｏｒ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔｕｄｙ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５３：３６３２−３６３７（１９９３））。このジレンマを超えて進むために、ペプチドを表面に表すファージ技術および同定された炭水化物模擬ペプチドが用いられている（Ｍ．Ｎ．Ｆｕｋｕｄａ，ｅｔ ａｌ．Ａ ｐｅｐｔｉｄｅ ｍｉｍｉｃ ｏｆ Ｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ ｌｉｇａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｓｉａｌｙｌ Ｌｅｗｉｓ Ｘ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｌｕｎｇ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６０：４５０−４５６（２０００）；Ｍ．Ｎ．Ｆｕｋｕｄａ．Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｅ−ｄｉｓｐｌａｙｉｎｇ ｐｈａｇｅ ｌｉｂｒａｒｉｅｓ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｓｈｏｒｔ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｍｉｍｉｃｋｉｎｇ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ ４１６：５１−６０ （２００６）；Ｔ．Ｔａｋｉ，ｅｔ ａｌ．Ａ ｎｅｗ ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ ｄｒｕｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｆｒｏｍ ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｐｈａｇｅ−ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ ｌｉｂｒａｒｙ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １７８０：４９７−５０３（２００８）；Ｊ．Ｋ．Ｓｃｏｔｔ，Ｄ．Ｌｏｇａｎａｔｈａｎ，Ｒ．Ｂ Ｅａｓｌｅｙ，Ｘ．Ｇｏｎｇ，Ｉ．Ｊ Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ．Ａ ｆａｍｉｌｙ ｏｆ ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ Ａ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ａ ｈｅｘａｐｅｐｔｉｄｅ ｅｐｉｔｏｐｅ ｌｉｂｒａｒｙ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ ８９：５３９８−５４０２（１９９２））。例えば、Ｉ−ペプチド、すなわちＩＥＬＬＱＡＲは、セレクチンリガンド模擬体として同定され、マウスに静脈内注射されるとき、合成のＩ−ペプチドは、肺に対する炭水化物依存がん細胞のコロニー形成を阻害した（Ｍ．Ｎ．Ｆｕｋｕｄａ，ｅｔ ａｌ．Ａ ｐｅｐｔｉｄｅ ｍｉｍｉｃ ｏｆ Ｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ ｌｉｇａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｓｉａｌｙｌ Ｌｅｗｉｓ Ｘ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｌｕｎｇ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６０：４５０−４５６（２０００）；Ｊ．Ｚｈａｎｇ，ｅｔ ａｌ．Ｓｉａｌｙｌ Ｌｅｗｉｓ Ｘ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｌｕｎｇ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂ１６ ｍｅｌａｎｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ａ ｓｅｌｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｆｒｏｍ Ｅ− ｏｒ Ｐ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６２：４１９４−４１９８（２００２））。

【0202】

Ｉ−ペプチドがアポトーシス誘導リポソーム（Ｒ．Ｄｅ Ｍａｒｉａ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ＧＤ３ ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ ｉｎ ＣＤ９５− ａｎｄ ｃｅｒａｍｉｄｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７７：１６５２−１６５５ （１９９７））に充填され、腫瘍のないマウスに静脈内注射されるとき、Ｉ−ペプチドは、それらのリポソームを、がん細胞のコロニー形成を可能にする潜在的な炭水化物依存部位を表す肺の内皮細胞に向かわせた（ｔａｒｇｅｔｅｄ）（Ｓ．Ｈａｔａｋｅｙａｍａ ｅｔ ａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍＲＮＡ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｆａｃｔｏｒｓ ａｓ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｌｕｎｇ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０６：３０９５−３１００（２００９））。Ｉ−ペプチド充填リポソームで処置されたマウスは、肺の炭水化物依存がんのコロニー形成を示さなかった。意味深いことに、Ｉ−ペプチド充填リポソームを、皮下に生じさせたＢ１６腫瘍を有するマウスに注射したとき、一次性の（ｐｒｉｍａｒｙ）腫瘍のサイズが低減した。Ｉ−ペプチドによって促進される抗腫瘍活性は、Ｉ−ペプチドがアネキシン１（Ａｎｘａ１）フラグメントに結合したときに、アネキシン１（Ａｎｘａ１）によって媒介され得る（Ｓ．Ｈａｔａｋｅｙａｍａ ｅｔ ａｌ．Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍＲＮＡ ｓｐｌｉｃｉｎｇ ｆａｃｔｏｒｓ ａｓ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｌｕｎｇ ｃｏｌｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １０６：３０９５−３１００（２００９））。広範囲なサブトラクティブプロテオミクス（ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ）は、Ａｎｘａ１を特異的な腫瘍内皮細胞表面マーカーとして同定した（Ｏｈ ｅｔ ａｌ．Ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｉｎ ｌｕｎｇ ａｎｄ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｕｒｓ ｆｏｒ ｔｉｓｓｕｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎａｔｕｒｅ ４２９：６２９−６３５（２００４））。これらの予備的な観測は、アネキシンファミリータンパク質による炭水化物結合活性（Ｒ．Ｈａｎｎｏｎ ｅｔ ａｌ．Ａｂｅｒｒａｎｔ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ ｉｎ ａｎｎｅｘｉｎ １−／− ｍｏｕｓｅ．Ｆａｓｅｂ Ｊ １７：２５３−２５５（２００３）；Ｈ．Ａ． Ｌｅｈｒ ｅｔ ａｌ．Ｄｏｒｓａｌ ｓｋｉｎｆｏｌｄ ｃｈａｍｂｅｒ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｆｏｒ ｉｎｔｒａｖｉｔａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １４３：１０５５−１０６２（１９９３））とともに、炭水化物模擬ペプチドを利用する腫瘍血管系特異的標的化ビヒクルの開発を促進した。本明細書中で、ＩＦ７と指定されるＡｎｘａ１結合炭水化物模擬ペプチドは、抗がん薬物についての高度に効率的な腫瘍標的化ビヒクルとして同定されている。

【0203】

２．結果
ｉ．腫瘍血管系マーカーとしてのＡｎｘａ１の妥当性
Ｃ５７ＢＬ／６に対して完全に戻し交配された、Ａｎｘａ１ヌル変異マウス（Ｒ．Ｈａｎｎｏｎ ｅｔ ａｌ．Ａｂｅｒｒａｎｔ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｓ ｉｎ ａｎｎｅｘｉｎ １−／− ｍｏｕｓｅ．Ｆａｓｅｂ Ｊ １７：２５３−２５５，２００３）において、Ｂ１６黒色腫細胞を皮下に注射したとき、腫瘍の成長が、Ａｎｘａ１異型接合マウスにおいて生じさせた腫瘍と比較して、有意に低減した（図１Ａ、Ｂ）。Ａｎｘａ１ヌルにおいて生じさせた腫瘍は、大部分が壊死性であった（図１Ｃ）。注目すべきことに、Ａｎｘａ１ヌルマウスにおいて生じさせた腫瘍において、血管系を見出さなかった（図１Ｄ）。これらの発見は、内皮細胞表面上でのＡｎｘａ１の発現（Ｐ．Ｏｈ ｅｔ ａｌ．Ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｉｎ ｌｕｎｇ ａｎｄ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｕｒｓ ｆｏｒ ｔｉｓｓｕｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎａｔｕｒｅ ４２９：６２９−６３５，２００４）が、上記マウスにおいて活動性腫瘍の成長に不可欠であることを示唆する。

【0204】

ｉｉ．ＩＦ７の同定：腫瘍標的化およびＡｎｘａ１結合ペプチド
Ｉ−ペプチド（ＩＥＬＬＱＡＲ；配列番号１３）を、セレクチンリガンド模擬物（ｍｉｍｉｃｒｙ）として同定し、マウスに静脈内注射したとき、合成のＩ−ペプチドは、肺に対する炭水化物依存がん細胞のコロニー形成を阻害した（Ｆｕｋｕｄａ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０００；６０：４５０−６；Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００２；６２：４１９４−８）。Ａｎｘａ１に対するＩ−ペプチド結合活性は、腫瘍標的化ビヒクルとして使用され得る。しかし、以前に示されるように、上記Ｉ−ペプチドはまた、ｐｒｅ−ｍＲＮＡスプライシング因子を介して正常な肺を標的にする（Ｈａｔａｋｅｙａｍａ，Ｓ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００９；１０６：３０９５−１００）。従って、正常な肺の血管系ではなく腫瘍を特異的に標的にするペプチド配列が望ましい。腫瘍を有するマウスに静脈内注射されたファージクローンの器官標的化は、ＩＦ７と指定されるＩＦＬＬＷＱＲが、肺の組織ではなく、腫瘍を標的にすること示した（図１Ｅ、クローン＃２）。さらに、ＩＦ７ファージによる腫瘍標的化は、抗Ａｎｘａ１抗体によって完全に阻害され（図１Ｆ）、ＩＦ７が、内皮細胞表面上に発現するＡｎｘａ１を介して腫瘍血管系に結合することを示した（Ｏｈ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ２００４；４２９：６２９−３５）。低レベルのＡｎｘａ１を、ビオチン化によって、肺において検出した（Ｈａｔａｋｅｙａｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００９；１０６：３０９５−１００）が、腫瘍を有するマウスにおいて、肺に対するＩＦ７の標的化は検出できなかった（図１Ｆ）。このことは、肺の内皮細胞表面上に発現するＡｎｘａ１のレベルが、腫瘍血管系において発現するものよりも顕著に低いことを示した。

【0205】

蛍光Ａｌｅｘａ ４８８と結合体化された、化学的に合成されたＩＦ７は、ＩＦ７−Ａ４８８と指定される結合体であり（図２）、このものは、プレートアッセイにおいて、組換えＡｎｘａ１−Ｈｉｓ_６タンパク質に結合するが、ＲＱ７−Ａ４８８（ＲＱＷＬＬＦＩ（配列番号１５）またはリバースＩＦ７と結合体化されたＡｌｅｘａ ４８８）は、Ａｎｘａ１に結合しなかった（図１Ｇ）。Ａｎｘａ１に結合するＩＦ７を、表面プラズモン共鳴アッセイおよび等温滴定アッセイ（ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ｔｉｔｒａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ）によって確かめた（図３および４）。フコシル化された炭水化物は、Ａｎｘａ１に結合し（図４）、その結合は、ＩＦ７によって阻害されたがＲＱ７によっては阻害されなかった（図１Ｈ）。

【0206】

ｉｉｉ．ＩＦ７によるインビボでの腫瘍標的化活性
ＩＦ７によるインビボでの腫瘍血管系標的化活性を試験するために、腫瘍を、ヌードマウスに取り付けられた（ｉｎｓｔａｌｌｅｄ）背側皮脂層チャンバーにおいて、生じさせた（Ｌｅｈｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １９９３； １４３： １０５５−６２）。ＩＦ７−Ａ４８８を尾静脈を介して注射し、腫瘍の蛍光を顕微鏡によりモニターし、蛍光シグナルが１分間以内に腫瘍において現れ、９分間でプラトーに達し、４０分間または実験が終わるまで高いままであった（図５Ａ−ａ、図５Ｂ）。対照的に、対照のペプチドＲＱ７−Ａ４８８のシグナルは、検出可能ではなかったか、またはバックグラウンドレベルのままであった（図５Ａ−ｂ、図５Ｂ）。抗Ａｎｘａ１抗体をＩＦ７−Ａ４８８注射の前に注射したとき、腫瘍における蛍光シグナルは、有意に低減した（図５Ａ−ｄ、５Ｂ）。他方、無関係のウサギＩｇＧ抗体は、ＩＦ７−Ａ４８８腫瘍標的化を阻害しなかった（図５Ａ−ｃ、５Ｂ）。注射の２０分後に腫瘍から調製される組織切片は、ＩＦ７−Ａ４８８による脈管の染色を示したが（図５Ｃ−ａ）、ＲＱ７−Ａ４８８によるものは示さなかった（図５Ｃ−ｂ）。これらの結果は、ＩＦ７が、内皮細胞表面上に発現するＡｎｘａ１を介して腫瘍を標的にすることを示す。

【0207】

腫瘍を有するマウスの循環中に残留するＩＦ７−Ａ４８８のレベルは、ＩＦ７による腫瘍標的化の効力を示し得る（図５Ｄ）。ＩＦ７−Ａ４８８を、腫瘍を有さない対照のマウスに静脈内注射したとき、ＩＦ７−Ａ４８８は、初期のサージ（ｉｎｉｔｉａｌ ｓｕｒｇｅ）後、循環中に残留した。しかし、ＩＦ７−Ａ４８８をＢ１６腫瘍を有するマウスに注射したとき、蛍光シグナルの初期のサージは、顕著に低減し、循環からのそれらの完全な消滅が続いた。このことは、ＩＦ７の極めて高い腫瘍標的化の効力を示す。

【0208】

ｉｖ．ＩＦ７−結合体化薬物による腫瘍特異的送達
ＩＦ７への抗がん薬物結合体化は、インビボで、腫瘍に薬物を送達し、腫瘍の成長を抑制し得る。ＩＦ７を、アポトーシスを誘導する薬物であるゲルダナマイシン類似体１７−ＡＡＧと結合体化させた（Ｖａｓｉｌｅｖｓｋａｙａ，Ｉ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００３；６３：３２４１−６；Ｍａｎｄｌｅｒ、Ｒ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ ２０００；９２：１５７３−８１）（図２）。ＩＦ７−ＧＡ結合体をＢ１６腫瘍を有するマウスに静脈内注射したとき、腫瘍の成長は、抑制された：ＩＦ７−ＧＡ−処置マウスからの腫瘍は、対照のマウスからの腫瘍よりも有意に小さかった（図６Ａ−ａ）。ＩＦ７−ＧＡとして使用される１７−ＡＡＧの用量は、５ｍｇ／ｋｇであったが、マウス腫瘍モデルの以前の研究においては、５０〜７５ｍｇ／ｋｇの１７−ＡＡＧが使用されていることに留意すべきである（Ｅｉｓｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ２００５； ５５：２１−３２；Ｓｏｌｉｔ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００２；８：９８６−９３；Ｍｉｔｓｉａｄｅｓ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ ２００６；１０７：１０９２−１００）。対照のマウスからのＢ１６腫瘍は、血管周囲に活動性の成長を示したが（図６Ｂ−ａ）、ＩＦ７−ＧＡ−処置マウスからの腫瘍におけるＢ１６細胞は、管に沿ったアポトーシスのはっきりした兆候および血管の形態学的に明らかな壊死を示し、これは、腫瘍および腫瘍内皮細胞に対するＧＡの効果を示していた（Ｖａｓｉｌｅｖｓｋａｙａ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００３；６３：３２４１−６；Ｓｏｌｉｔ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００３；６３：２１３９−４４）。使用された全てのマウスからの主要な器官の組織学的分析は、明らかな異常を示さなかった。全てのマウスからの血液検査は、肝臓機能、腎臓機能、および血液細胞数において異常を示さなかった。しかし、ＩＦ７−ＧＡによって処置された腫瘍を有するマウスは、対照のマウスよりも長く生存しなかった。

【0209】

同様の結果を、ＢＬ６マウスにＬｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）細胞を皮下注射することによって生じさせた肺癌腫の腫瘍モデルを用いて（図６Ａ−ｂ、図６Ｂ−ｂ）、および免疫不全マウスに、ヒト前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ）ＰＣ３細胞および乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、それぞれ同所注射することによって生じさせたヒト前立腺がんマウスモデルおよび乳がんマウスモデルにおいて（図６Ａ−ｃ、６Ａ−ｄ、６Ｂ−ｃ、および６Ｂ−ｄ）得た。

【0210】

本明細書中で使用されたＩＦ７−ＧＡの投与量は、漸増する用量が腫瘍を有するマウスの生存を改善または腫瘍サイズを低減しなかったので、最適であると考えられ得る。ＩＦ７−ＧＡ−処置マウスをレスキューし損なったことは、Ｈｓｐ−９０を阻害することによりアポトーシスを誘導するＧＡの控えめな活性に起因する（Ｃｌａｒｋｅ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２０００；１９：４１２５−３３；Ｐａｎａｒｅｔｏｕ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ ２００２；１０：１３０７−１８）。従って、ＩＦ７を、高度に効力のある抗がん薬物ＳＮ−３８（Ｍｅｙｅｒ−Ｌｏｓｉｃ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；１４：２１４５−５３）（図７）に、エステラーゼでの切断可能なクロスリンカー（ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｅｒ）を用いて、結合体化させた。注目すべきことに、ＩＦ７−ＳＮ３８を、大きなＢ１６固形腫瘍を有するマウスに静脈内注射したとき、それらのマウスはレスキューされ（図８Ａ）：腫瘍を有するマウスは、ＩＦ７−ＳＮ３８の注射が続く限り生存した（図８Ａ）。従って、ＩＦ７−ＳＮ３８は、末期に近いマウスをレスキューすることにおいて有効であるが、ＩＦ７−ＧＡは、有効でなかった。ＩＦ７−ＳＮ３８は、投与後すぐに腫瘍細胞の増殖を遅くさせたが、腫瘍サイズは、徐々に増加した（図８Ｂ）。大きな腫瘍サイズに関わらず、マウスは、ＩＦ７−ＳＮ３８によってもたらされた、延長された日数の生存の間、衰弱の兆候を示さなかった。ＩＦ７−ＳＮ３８−注射マウスからの腫瘍は、時折、浮腫を示したが、対照のマウスからの腫瘍は示さなかった。これらの観測は、流体の蓄積が、ＩＦ７−ＳＮ３８注射マウスにおいて見られる増加した腫瘍サイズの一因となることを示している。腫瘍の早期におけるＩＦ７−ＳＮ３８の効果を決定するために、ＩＦ７−ＳＮ３８を８日目に注射し、２日後に腫瘍を単離した。ＩＦ７−ＳＮ３８−注射マウスからの腫瘍は、対照のマウスからの腫瘍と比較して、より小さく、より多くの壊死を含んでいる（図８Ｃ）。この研究において使用されたＩＦ７−ＳＮ３８の投与量は、７．５ｍｇ／ｋｇであったが、腫瘍血管系標的化活性のないペプチドと結合体化されたＳＮ−３８は、以前の研究において、９５ｍｇ／ｋｇで使用された（Ｍｅｙｅｒ−Ｌｏｓｉｃ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；１４：２１４５−５３）。

【0211】

ＩＦ７−ＳＮ３８の効果をさらに分析するために、腹膜に注射したＢ１６腫瘍を有するマウスを試験した。腹膜のＢ１６腫瘍において、がん細胞はすばやく成長し、マウスの生存は、制限された。これらの実験において、ＩＦ７−ＳＮ３８は、Ｂ１６腫瘍を有するマウスの生存時間を延ばした（図８Ｄ）。ＩＦ７−ＧＡはまた、Ｂ１６腫瘍を有するマウスの生存を延ばすことにおいて、有効であった。ＩＦ７−ＧＡ処置マウスおよびＩＦ７−ＳＮ３８処置マウスから単離された腫瘍は、対照のマウスからの腫瘍よりも小さかった（図８Ｅ）。対照の腫瘍を有するマウスにおいて、微小転移巣からもたらされる多くの小さい病巣が腹膜壁に見られたが、ＩＦ７−ＧＡ−処置マウスおよびＩＦ７−ＳＮ３８−処置マウスにおいては、微小転移巣を検出しなかった。組織学は、ＩＦ７−ＧＡ処置マウスおよびＩＦ７−ＳＮ３８処置マウスからの腫瘍が、対照のマウスからの腫瘍よりも多くの脂肪細胞を示すことを示し（図８Ｆ）、このことは、ＩＦ７−ＧＡおよびＩＦ７−ＳＮ３８の両方が、がん細胞の増殖を抑制したことを示した。図８Ｅおよび８Ｆにおいて示されたＩＦ７−ＳＮ３８の効果は、ＩＦ７−ＧＡの効果よりも優れていることに留意のこと。血液検査は、肝臓機能、腎臓機能、および血液細胞数において異常を示さなかった。

【0212】

上に記載した実験において、腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。しかし、この方法は、特に、壊死が腫瘍における浮腫またはリンパ流体（ｌｙｍｐｈａｔｉｃ ｆｌｕｉｄ）の蓄積を引き起こす場合、最も正確なものというわけではない。マウスにおいてインビボでＩＦ７−ＳＮ３８の効果をモニターするために、ルシフェラーゼを発現する安定した細胞系、ＨＣＴ１１６−ｌｕｃを生産し、生きているＨＣＴ１１６−ｌｕｃ細胞によって生じる光子数を測定した。ＩＦ７−ＳＮ３８（０．６８μモル）をＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍を有するマウスに注射したとき、生きているＨＣＴ１１６−ｌｕｃ細胞の数は次の日に低減したが、ＩＦ７−ＳＮ３８の注射なしでは、これらの細胞は、２日後に増加した（図１０）。これは、ＩＦ７−ＳＮ３８を、腫瘍の成長を抑制するために毎日投与するべきであることを示した。ＩＦ７−ＳＮ３８を、ＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍を有するマウスに毎日、静脈内注射したとき、腫瘍の成長が完全に抑制され、このことを、光子数およびカリパス測定の両方によって実証した（図１１）。

【0213】

ｖ．腫瘍血管系に対するＩＦ７Ｃ（ＲＲ）ペプチドの標的化および浸透
ＩＦ７−ＳＮ３８は、高度に疎水性であるので、静脈内注射後にＩＦ７−ＳＮ３８が不溶性になるという可能性に関する懸念があった。このようなことは、インビボでの、ＩＦ７−ＳＮ３８の活性を低減し得る。水性の環境において、ＩＦ７−ＳＮ３８の可溶性を増加させるために、２個のアルギニン残基を、システイン残基の後に、ＩＦ７に付加した。従って、ＩＦＬＬＷＱＲ−Ｃ−ＲＲ（配列番号１７）すなわちＩＦ７Ｃ（ＲＲ）を合成した。ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）をＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンに結合体化させたとき、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンは、Ａｎｘａ１発現マウス内皮Ｆ−２細胞の表面に結合した（図１２Ａ）。その細胞質および核のＦＩＴＣシグナルは、上記細胞質および核におけるＡｎｘａ１の局在と合致する（Ｇｅｒｋｅ、２００５ ＃５２９９）。ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）のないＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンは、Ｆ−２細胞に結合しなかった（データ示さず）。ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンを、トランスウェルチャンバーのインサートのフィルター（ｆｉｌｔｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｓｅｒｔ ｆｏｒ ｔｒａｎｓ ｗｅｌｌ ｃｈａｍｂｅｒ）上に成長させたＦ−２細胞に加え、洗浄し、次に、培地中で３７℃または４℃にてインキュベートしたとき、蛍光は、３７℃でインキュベートされた細胞から、より下のチャンバーへと移動したが、４℃でインキュベートされた細胞からは、移動しなかった（図１２Ｂ）。これは、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）の結合および輸送が、細胞を介した能動輸送メカニズムによって媒介されることを示す。ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）の結合および輸送が、腫瘍血管系においてインビボで起こるかどうかを決定するために、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−結合体化ＦＩＴＣ−ポリ−Ｌ−リジンを、Ｂ１６腫瘍を有するマウスに静脈内注射した。腫瘍組織切片は、血管系の反管腔側（ａｂｌｕｍｉｎａｌ）領域の周りに緑色蛍光シグナルを示した（図１２Ｃ）。このことは、腫瘍血管系に対するＩＦ７Ｃ（ＲＲ）の結合、および内皮細胞を介した管腔側（ｌｕｍｉｎａｌ）から反管腔側表面へのこのペプチドの輸送を示している。低分子（例えば、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）と結合体化されたＳＮ−３８）は、大きい分子（例えば、ポリ−Ｌ−リジン）よりも深く、そしてより速く腫瘍に浸透し得る。

【0214】

ｖｉ．ＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍に対するＩＦ７Ｃ（ＲＲ）結合体化ＳＮ−３８の効果
ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８の活性を、上に記載されるＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍を用いて試験した。大きいＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍を有するヌードマウスに、毎日の注射によって、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８を注射し、腫瘍サイズをルシフェラーゼベースの化学発光によってモニターした（図１３）。ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８は、図１１に示されるＩＦ７−ＳＮ３８よりも強い抗腫瘍活性を有したようである。ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８は、その成長を抑制しただけではなく、そのサイズを顕著に低減したが、ＩＦ７−ＳＮ３８は、上記腫瘍サイズを、実質的に、薬物注射前のレベルより低くに、低減することはなかった。

【0215】

ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８のさらなる抗腫瘍活性を決定するために、この薬物の効果を低用量で試験した。投与量を低減した実験は、ＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８が、ＨＣＴ１１６−ｌｕｃ腫瘍の成長を、わずか０．８１μｍｏｌ／ｋｇという低投与量で、有効に抑制することを示した（図１４）。本発明者らは、これらの投与量で注射されたＩＦ７Ｃ（ＲＲ）−ＳＮ３８は、副作用を有さないことを予想した。これを、一連の血液検査によって確認した（図１５）。

【0216】

３．考察
Ａｎｘａ１は、内皮カベオラ（ｃａｖｅｏｌａ）における腫瘍内皮細胞表面に局在し、エンドサイトーシスを介して内部移行する（Ｓｃｈｎｉｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９９５；２７０：１４３９９−４０４）。最近の研究は、頂端細胞表面で内皮カベオリ（ｃａｖｅｏｌｉ）タンパク質に結合するリガンドが、基底表面へと効率的に輸送され、下方の間質に放出されることを示す。（Ｓｃｈｎｉｔｚｅｒ Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ ２００１；４９：２６５−８０）。従って、管腔側表面で内皮細胞によって捕捉されるＩＦ７−結合体化薬物は、がん細胞が、高濃度で薬物に曝され得る間質に放出され得る。これらのプロセスの間、抗がん薬物結合体のペプチド成分は、プロテアーゼによっておそらく消化され、薬物が腫瘍細胞に浸透するのを可能にする。この仮説は、血管系の周りに位置するがん細胞が、ＩＦ７−結合体化アポトーシス誘導薬物ＩＦ７−ＧＡを注射された、腫瘍を有するマウスにおいて、アポトーシスを経験することを示している組織学的観測に合致する（図６Ｂ）。遊離の（ｆｒｅｅ）ＳＮ−３８は、血清または組織エステラーゼの作用を介して生産され得る。このことは、ＳＮ−３８が細胞に入り、その効果を有することを可能にする。

【0217】

ＩＦ７−結合体化抗がん薬物は、Ａｎｘａ１に対するＩＦ７の結合を介して（図１Ｆ〜Ｈ）、および腫瘍血管系上のＡｎｘａ１の発現によって（図１Ｆ、５Ａ−Ｃ）、化学療法の効力を改善する（Ｐ．Ｏｈ ｅｔ ａｌ．Ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｉｎ ｌｕｎｇ ａｎｄ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｕｒｓ ｆｏｒ ｔｉｓｓｕｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎａｔｕｒｅ ４２９：６２９−６３５（２００４））。これらの特徴は、ＩＦ７−結合体化化合物を腫瘍に送達することにおいて極めて高い特異性および効力をもたらす（図５）。抗体がその抗原に結合するのに少なくとも１５〜３０分間かかり得ることを考慮すると、腫瘍血管系に結合するＩＦ７の効力は、今までのところ公知である、あらゆる腫瘍標的化試薬のレベルを超える。それは、７マーペプチドであるので、ＩＦ７の生産および品質管理は、臨床試験のためのヒト化モノクローナル抗体を生産するために使用されるものよりも、大いに簡単である（Ｓ．Ｉｚｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．Ｐｈａｓｅ ＩＩ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌ ｏｆ Ｗｉｌｍｓ ｔｕｍｏｒ １ ｐｅｐｔｉｄｅ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ １０８：９６３−９７１（２００８））。さらに、ペプチドは容易に分解可能であり、従って、ヒトおよび環境上の毒性に関する懸念は、最小限であるはずである。短い７マーペプチド（例えば、ＩＦ７）は、抗原としておそらく機能せず、従って、ＩＦ７によって注射される患者における免疫反応に関する懸念は、最小限であるはずである。

【0218】

一般に、ペプチドベースの薬物は、それらが、インビボでプロテアーゼに対して感受性であるので、不安定であると考えられている（Ｌ．Ｏｔｖｏｓ，Ｊｒ．Ｐｅｐｔｉｄｅ−ｂａｓｅｄ ｄｒｕｇ ｄｅｓｉｇｎ：ｈｅｒｅ ａｎｄ ｎｏｗ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ４９４：１−８（２００８），Ｌ．Ａ．Ｌａｎｄｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｉｓ ｐｈａｇｅ ｄｉｓｐｌａｙ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｎ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅ−ｂａｓｅｄ ｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇｓ？ Ｃｕｒｒ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｅｃｈｎｏｌ １：１１３−１３２（２００４））。しかし、ＩＦ７によって達成される極めて高い腫瘍血管系標的化は、タンパク質分解によって引き起こされる潜在的な問題を克服し得：ＩＦ７は、抗がん薬物のためのビヒクルとして機能し、そしてほとんどのＩＦ７−結合体化薬物は、ＩＦ７がタンパク質分解を受ける前に送達され得る。短いペプチドは、腫瘍血管系標的化について、マウスにおいてインビボで、首尾よく試験されている（Ｗ．Ａｒａｐ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｂｙ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７９：３７７−３８０ （１９９８）；Ｅ．Ａ． Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｔｕｍｏｒ ｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ １０５：９３４３−９３４８（２００８）；Ｎ．Ｏｋｕ ｅｔ ａｌ．Ａｎｔｉ−ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒ ｔｈｅｒａｐｙ ｕｓｉｎｇ ｎｏｖｅｌ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｈｏｍｉｎｇ ｔｏ ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ｖｅｓｓｅｌｓ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２１：２６６２−２６６９（２００２）；Ｆ．Ｄｏｎａｔｅ ｅｔ ａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ＡＴＮ−１６１（Ａｃ−ＰＨＳＣＮ−ＮＨ２）：ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｕ−ｓｈａｐｅｄ ｄｏｓｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｕｒｖｅ ｉｎ ｓｅｖｅｒａｌ ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １４：２１３７−２１４４（２００８））。しかし、臨床試験は、将来有望な成果を、まだもたらしていない。ＩＦ７は、正常血管系と腫瘍血管系との厳密な比較後に同定されたＡｎｘａ１を標的にするので、以前に公知の腫瘍血管系標的化ペプチドを凌駕する利点を有し得る（Ｐ．Ｏｈ ｅｔ ａｌ．Ｓｕｂｔｒａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｓｕｒｆａｃｅ ｉｎ ｌｕｎｇ ａｎｄ ｓｏｌｉｄ ｔｕｍｏｕｒｓ ｆｏｒ ｔｉｓｓｕｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｎａｔｕｒｅ ４２９：６２９−６３５（２００４））。

【0219】

腫瘍血管系への薬物送達の成功した標的化は、ヒトにおいて達成されていない（Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ Ｅ．ｅｔ ａｌ．Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；１８：８１３−２７；Ｎｅｒｉ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ ２００５；５：４３６−４６；Ｂｅｌｌｏｎｅ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００８；２９：２３５−４１）。炭水化物模擬ペプチドＩＦ７は、ＩＦ７が、腫瘍血管系上に特異的に発現するＡｎｘａ１を標的にするので、このような送達のためのビヒクルとして役立ち得る（Ｏｈ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ２００４；４２９：６２９−３５）。ペプチドベースの治療物質は、大量の短く、高度に精製されたペプチドが、臨床試験のために低コストで合成され得るので、有利である（Ｉｚｕｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ ２００８；１０８：９６３−７１）。さらに、ペプチドは、容易に分解可能であり、ヒトおよび環境上の毒性に関する懸念は、最小限であるはずである。ペプチドベースの抗がん薬物は、確立されていない（Ａｒａｐ ｅｔ ａｌ．，．Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８；２７９：３７７−８０；Ｍｕｒｐｈｙ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ２００８；１０５：９３４３−８；Ｏｋｕ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ２００２；２１：２６６２−９；Ｄｏｎａｔｅ，Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；１４：２１３７−４４）が、ＩＦ７−ＧＡおよびＩＦ７−ＳＮ３８による、はっきりした抗がん活性は、ＩＦ７−結合体化薬物のすばやい送達が、ＩＦ７のタンパク質分解性分解の潜在的な問題を克服することを示している。

【0220】

有効な化学療法は、早期だけではなく進行した病期における悪性腫瘍を有する患者を救い、がん幹細胞を根絶することによって悪性度の回帰（ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ）をさらに抑制するはずである。ＩＦ７による高度に効率的な標的化薬物送達は、それぞれ明瞭な活性を有する異なる抗がん薬物によって、複数の化学療法を可能にする。それにもかかわらず、ＩＦ７−結合体化抗がん薬物の効力は、がん患者において、まだ臨床的に評価されないでいる。

【0221】

４．材料および方法
ｉ．材料
ペプチドをＧｅｎＳｃｒｉｐｔ（Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）によって合成した。ウサギ抗アネキシン１抗体（Ｈ−６５）は、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ，ＣＡ）由来である。それぞれＩ−ペプチドおよびＩＦ７を表面に表しているファージクローンは、記載されている（Ｆｕｋｕｄａ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０００；６０：４５０−６）。

【0222】

ｉｉ．脊椎動物の使用
マウスのプロトコルは、Ｂｕｒｎｈａｍ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ ＲｅｓｅａｒｃｈにおけるＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅｓによって承認された。

【0223】

ｉｉｉ．インビボでのファージ標的化
マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１細胞（２×ｌ０^５細胞／１００μｌのＰＢＳ）を、Ｃ５７ＢＬ／６雌性マウス（８〜１０週齢）の背側側腹（ｄｏｒｓａｌ ｆｌａｎｋ）に皮下注射した。１０日後、１００μｌのＰＢＳ中にＩ−ペプチドを表面に表しているファージクローン、またはＩ−ペプチド関連配列を表面に表している各クローン（１×ｌ０^５ｐｆｕ）を静脈内注射した。実験の別個の組において、ウサギ抗Ａｎｘａ１抗体（Ｈ−６５，Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）、またはウサギＩｇＧ（２０μｇのＩｇＧ）を、ファージ注射の１５分前に注射した。そのマウスを、１ｍＭのＣａＣｌ_２を含むＴＢＳ（ＴＢＳＣ）で灌流し、腫瘍および肺の組織を単離した。組織ホモジェネート（１００ｍｇのタンパク質）を、コンピテント（ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ）Ｋ９１細菌とともにインキュベートし、テトラサイクリン（１０μｇ／ｍｌ）およびカナマイシン（１００μｇ／ｍｌ）を含むＬＢ寒天に蒔いた。３７℃で２０時間培養した後に、寒天プレート上に現れるコロニーを数えた。

【0224】

ｉｖ．ＩＦ７−Ｈｉｓ_６タンパク質に対するＩＦ７−Ａ４８８の結合
Ａｎｘａ１をコードする全長のｃＤＮＡを、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）から得て、ｐＥＴ２９ａベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ）にサブクローニングして、ＩＦ７−Ｈｉｓ_６融合タンパク質を生産した。組換えタンパク質を、Ｎｉ^＋アフィニティークロマトグラフィーによって精製した。黒色の３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ ｂｉｏ−ｏｎｅ）のウェルを、組換えＩＦ７−Ｈｉｓ_６タンパク質（１０μｇ／ウェル）でコーティングした。１ｍＭのＣａＣｌ_２および０．０５％のＴｗｅｅｎ ２０を含む１０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌバッファー（ｐＨ７．４）に溶解させたＩＦ７−Ａ４８８（４μｇ／ｍｌ）を加えた。そのプレートを洗浄後、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ａｎａｌｙｓｔ ＨＴプレートリーダーによって蛍光を測定した。ＩＦ７および対照ＲＱ７ペプチドによる、Ａｎｘａ１−Ｈｉｓ_６に対するＬｅｗｉｓ Ａオリゴ糖の結合の阻害の分析を、上に記載されるようにＦＩＴＣ−結合体化ポリアクリルアミド−ＬｅＡ（Ｇｌｙｃｏｔｅｃｈ）を用いて実施した。

【0225】

ｖ．背側皮脂層チャンバーウインドーにおけるＩＦ７−Ａ４８８のインビボでの画像化
記載されるように、Ｌｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）腫瘍を、皮下注射によってドナーのヌードマウスにおいて生じさせ、腫瘍の小さい断片（１ｍｍ^３未満）を、レシピエントのヌードマウス（８〜１０週齢の雌性Ｂａｌｂ／ｃヌード）における背側皮脂層チャンバーに移植した（Ｌｅｈｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １９９３；１４３：１０５５−６２；Ｏｈ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ２００７；２５：３２７−３７）。３日後、そのマウスに、１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール（２５μｌ／ｇ）の腹膜注射によって麻酔をかけた。ＩＦ７−Ａ４８８またはＲＱ７−Ａ４８８（１００μｌ；５％のグルコース溶液中５０ｍＭ）を、尾静脈を介して注射した。腫瘍における生体内（ｉｎｔｒａｖｉｔａｌ）Ａｌｅｘａ ４８８シグナルを、Ｚｅｉｓｓ Ａｘｉｏｐｌａｎ蛍光顕微鏡およびデジタルカメラシステム（ＤＰ７０およびＤＰコントローラー，Ｏｌｙｍｐｕｓ）によって検出および記録した。阻害アッセイについて、ウサギ抗Ａｎｘａ１抗体（Ｈ−６５，Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）、またはウサギＩｇＧ（２０μｇのＩｇＧ）を、ＩＦ７−Ａ４８８注射の１５分前に注射した。腫瘍における０分〜４０分のシグナル強度をＩｍａｇｅ Ｊ（ＮＩＨ，Ｍａｒｙｌａｎｄ）によって測定した。１０分後、ＵＶランプによる標本の照射を、写真を撮る回数（ｔｉｍｅｓ）にのみ限定して、蛍光退色（ｂｌｅａｃｈｉｎｇ）を避けた。その腫瘍を背側皮脂層チャンバーから単離して、４％のパラホルムアルデヒドで室温にて１５分間固定し、Ｏ．Ｃ．Ｔ化合物中に埋め、凍結切片（ｃｒｙｏｓｅｃｔｉｏｎ）を作製した。凍結切片（ｆｒｏｚｅｎ ｓｅｃｔｉｏｎ）をＤＡＰＩ含有Ｖｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ（Ｖｅｃｔｏｒ ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）で覆い、Ｚｅｉｓｓ Ａｘｉｏｐｌａｎ蛍光顕微鏡下で調査した。

【0226】

ｖｉ．腫瘍モデル、およびＩＦ７−ＧＡまたはＩＦ７−ＳＮ３８処置
マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１細胞（２×１０^５細胞／１００μｌの血清を含まないＤＭＥＭ）を、Ｃ５７ＢＬ／６雌性マウス（８〜１０週齢）の背側側腹に皮下注射した。１０日後、マウスを無作為に４つの群に分け、それらは、１０日目、１２日目、および１４日目に、（１）１００μｌの５％グルコース、またはそれぞれ１．３ｍＭの（２）ＩＦ７、（３）ＧＡ、もしくは（４）ＩＦ７−ＧＡを含む同じ量の５％グルコースを受けた。１５日目に、マウスを犠牲にし、腫瘍重量を決定した。マウスＬｅｗｉｓ肺癌腫（ＬＬＣ）細胞（４×ｌ０^５細胞／１００μｌの血清を含まないＤＭＥＭ）を、Ｃ５７ＢＬ／６雌性マウス（８〜１０週齢）の背側側腹に皮下注射した。７日後、マウスを無作為に４つの群に分け、それらは、７日目、９日目、および１１日目に、（１）１００μｌの５％グルコース、または１．３ｍＭの（２）ＩＦ７、（３）ＧＡ、もしくは（４）ＩＦ７−ＧＡを含む５％グルコースを受けた。１３日目に、マウスを犠牲にし、腫瘍重量を決定した。前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ）モデルについて、ＳＣＩＤ／Ｃ．Ｂ−１７雄性マウス（６〜８週齢）に、１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノールの腹膜注射によって麻酔をかけた。ヒト前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ）ＰＣ３細胞（ｌ×ｌ０^６細胞／２０μｌの血清を含まないＤＭＥＭ）を、マウスの前立腺に同所注射した。７日目に、マウスを４つの群に分け、上記のように７日目、１２日目、１７日目、および２２日目に処置した。２８日目に、マウスを犠牲にし、前立腺腫瘍重量を決定した。乳がんモデルについて、ＳＣＩＤ／Ｃ．Ｂ−１７雌性マウス（８〜１０週齢）に、ヒト乳がんＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（ハンクス平衡塩溶液５０μｌ中１×１０^６細胞）を５０μｌのマトリゲル（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｓａｎ Ｊｏｓｅ，ＣＡ）とともに、乳房の脂肪へと注射した。ＩＦ７−ＧＡおよび対照の試薬の静脈内注射は、前立腺がん（ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ）モデルについて記載されたスケジュールに従った。

【0227】

図９に示される結果について、マウス黒色腫Ｂ１６Ｆ１細胞（２×１０^５細胞／１００μｌの血清を含まないＤＭＥＭ）を、Ｃ５７ＢＬ／６雌性マウス（８〜１０週齢）の背側側腹に皮下注射した。１０日後、マウスを無作為に３つの群に分け、それらは、１０日目、１２日目、１４日目、および１６日目に、それぞれ０．０８２μモルのＩＦ７−ＤｏｘまたはＩＦ７−ＳＮ３８を含む１００μｌの５％グルコースを受けた。腫瘍のサイズを、カリパスを用いて測定した。

【0228】

ｖｉｉ．統計解析
統計解析を、ＳＰＳＳ（Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ）、およびＭｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ（Ｒｅｄｍｏｎｄ，ＷＡ）プログラムを用いて行った。図およびテキストにおける全ての値は、ｎ実測値（ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ）の平均値±標準偏差（ＳＤ）として表現され、ここで、ｎは、分析された動物の数である。データセットを、スチューデントの対応のないｔ検定（両側）、またはＭａｎｎ−ＷｈｉｔｎｅｙのＵ検定を用いて比較した。ｐ値≦０．０５を有意であると考えた。

【0229】

【表1】

【0230】

【表2】

【0231】

【表3】

【0232】

【表4】

【0233】

【化2】

【0234】

【化3】

【図1-1】

【図1-3】

【図1-4】

【図3】

【図4】

【図6-1】

【図6-2】

【図8-1】

【図9】

【図11】

【図13】

【図14】

【図15-1】

【図15-2】

【図1-2】

【図2】

【図5-1】

【図5-2】

【図6-3】

【図7】

【図8-2】

【図8-3】

【図10】

【図12】

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]

【外国語明細書】

2015110668000001.pdf