特開 2015-143217 注射剤およびデポ形成方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2015-143217(P2015-143217A)

(43)【公開日】2015年8月6日

(54)【発明の名称】注射剤およびデポ形成方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 9/08 20060101AFI20150710BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20150710BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20150710BHJP

   A61K 47/36 20060101ALI20150710BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20150710BHJP

   A61K 31/444 20060101ALI20150710BHJP

【ＦＩ】

   A61K9/08

   A61P27/02

   A61K47/26

   A61K47/36

   A61K45/00

   A61K31/444

【審査請求】未請求

【請求項の数】6

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】14

(21)【出願番号】特願2014-262257(P2014-262257)

(22)【出願日】2014年12月25日

(31)【優先権主張番号】特願2013-266567(P2013-266567)

(32)【優先日】2013年12月25日

(33)【優先権主張国】JP

(71)【出願人】

【識別番号】000177634

【氏名又は名称】参天製薬株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100106002

【弁理士】

【氏名又は名称】正林 真之

(74)【代理人】

【識別番号】100120891

【弁理士】

【氏名又は名称】林 一好

(74)【代理人】

【識別番号】100131705

【弁理士】

【氏名又は名称】新山 雄一

(72)【発明者】

【氏名】隠樹 健二

(72)【発明者】

【氏名】山田 和人

(72)【発明者】

【氏名】宮崎 達也

(72)【発明者】

【氏名】岡部 高明

(72)【発明者】

【氏名】巾下 紗代

(72)【発明者】

【氏名】榎本 裕志

(72)【発明者】

【氏名】吉井 健太

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C076AA11

4C076BB11

4C076BB24

4C076CC10

4C076DD67M

4C076EE30G

4C076EE58G

4C076FF17

4C076FF31

4C076FF68

4C084AA17

4C084MA05

4C084MA17

4C084MA58

4C084MA66

4C084NA10

4C084NA12

4C084ZA331

4C084ZA332

4C086AA10

4C086BC17

4C086GA08

4C086MA03

4C086MA05

4C086MA17

4C086MA58

4C086MA66

4C086NA12

4C086ZA33

(57)【要約】      （修正有）

【課題】薬物の徐放性に優れる新規な注射剤の提供。
【解決手段】例えば硝子体内に投与する為の、０．０００１〜５０．００％（ｗ／ｖ）の薬物と、０．１〜５０．０％（ｗ／ｖ）のトレハロース、及び０．０１〜３．００％のジェランガムとを含有し、リン酸緩衝液、体液（涙液、硝子体液など）、又は疑似体液に接触した際にデポを形成する注射剤。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

薬物と、トレハロースと、ジェランガムと、を含有する注射剤。

【請求項2】

前記注射剤の全体積に対し、前記薬物の含有量は０．０００１〜５０．００％（ｗ／ｖ）、トレハロースの含有量は０．１〜５０．０％（ｗ／ｖ）、ジェランガムの含有量は０．０１〜３．００％（ｗ／ｖ）である請求項１記載の注射剤。

【請求項3】

前記注射剤は、リン酸緩衝液、体液又は疑似体液に接触してデポを形成するものである請求項１又は２記載の注射剤。

【請求項4】

前記注射剤は、硝子体内投与用である請求項１から３いずれか記載の注射剤。

【請求項5】

前記注射剤は、網脈絡膜への前記薬物の供給に用いられる請求項１から４いずれか記載の注射剤。

【請求項6】

薬物と、トレハロースと、ジェランガムと、を含有する液状組成物を体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポ形成方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、注射剤およびデポ形成方法に関する。

【背景技術】

【0002】

網膜、脈絡膜、視神経、硝子体および強膜等の後眼部における疾患には難治性疾患が多く、その効果的な薬物治療法の開発が望まれている。眼疾患に対しては、薬物を点眼投与して治療するのが一般的であるが、網膜、脈絡膜、視神経、硝子体および強膜等の後眼部へは薬物が移行しにくい。

【0003】

そこで、後眼部疾患に対する薬物の投与手段として、硝子体注射、結膜下注射等の注射剤が着目されている。しかし、注射剤の投与は患者への負担が大きいため、頻回投与を回避するべく、患部での薬物濃度を長時間持続させることが望まれる。例えば特許文献１には、眼内投与用製剤を、薬物としてのスルホニルベンゾイミダゾール誘導体が徐放されるように製剤化することが開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特表２００９−５３６９１８号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

本発明は、以上の実情に鑑みてなされたものであり、薬物の徐放性に優れる新規な注射剤の提供を目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0006】

（１） 薬物と、トレハロースと、ジェランガムと、を含有する注射剤。

【0007】

（２） 前記注射剤の全体積に対し、前記薬物の含有量は０．０００１〜５０．００％（ｗ／ｖ）、トレハロースの含有量は０．１〜５０．０％（ｗ／ｖ）、ジェランガムの含有量は０．０１〜３．００％（ｗ／ｖ）である（１）記載の注射剤。

【0008】

（３） 前記注射剤は、リン酸緩衝液、体液又は疑似体液に接触してデポを形成するものである（１）又は（２）記載の注射剤。

【0009】

（４） 前記注射剤は、硝子体内投与用である（１）から（３）いずれか記載の注射剤。

【0010】

（５） 前記注射剤は、網脈絡膜への前記薬物の供給に用いられる（１）から（４）いずれか記載の注射剤。

【0011】

（６） 薬物と、トレハロースと、ジェランガムと、を含有する液状組成物を体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポ形成方法。

【発明の効果】

【0012】

本発明によれば、薬物に加えて、トレハロース及びジェランガムの組合せを含むことで、薬物の徐放性に優れる注射剤を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1】本発明の一実施例に係る注射剤を硝子体内投与した後のデポ形成を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0014】

以下、本発明の実施形態を説明するが、これが本発明を限定するものではない。

【0015】

本発明の注射剤は、薬物と、トレハロースと、ジェランガムと、を含有する。薬物に加えて、トレハロース及びジェランガムの組合せを含むことで、薬物の徐放性に優れる注射剤を提供することができる。本発明者により、トレハロースは、薬物（特に撥水性の薬物）の濡れ性を高めること、および、注射剤を等張化することに優れているだけでなく、薬物分散性を向上させることが分かった。一方、ジェランガムは、注射剤が投与された場所で良好にデポを形成し、このデポが薬物を徐放させる役割をもつことが分かった。また、トレハロースが共存することでデポ強度が増し、より優れた薬物の徐放性が実現されると推測される。

【0016】

本発明におけるトレハロースは、α，α−トレハロース、α，β−トレハロース、β，β−トレハロースの１種以上であってよく、α，α−トレハロースを含むことが好ましい。注射剤の全体積に対するトレハロースの含有量は、上記作用を十分に奏する観点で、０．１％（ｗ／ｖ）以上であることが好ましく、より好ましくは１．０％（ｗ／ｖ）以上、３．０％（ｗ／ｖ）以上、４．０％（ｗ／ｖ）以上、４．５％（ｗ／ｖ）以上、５．０％（ｗ／ｖ）以上である。上記トレハロースの含有量は、注射剤の浸透圧調整等の観点で、５０．０％（ｗ／ｖ）以下であることが好ましく、より好ましくは２０．０％（ｗ／ｖ）以下、１０．０％（ｗ／ｖ）以下である。

【0017】

また、上記作用に鑑み、トレハロースの含有量は、薬物の種類又はジェランガムの含有量に応じて最適化することも好ましい。

【0018】

なお、本発明の注射剤は、トレハロース以外の糖類を更に含有してもよい。このような糖類としては、単糖〜六糖、これらの糖アルコール、ヒアルロン酸、マルトデキストリン、及びポリビニルピロリドンからなる群より選ばれる糖類化合物が挙げられる。

【0019】

注射剤の全体積に対するジェランガムの含有量は、上記作用を十分に奏する観点で、０．０１％（ｗ／ｖ）以上、０．０３％（ｗ／ｖ）以上、又は０．０５％（ｗ／ｖ）以上であることが好ましく、より好ましくは０．１０％（ｗ／ｖ）以上、０．２０％（ｗ／ｖ）以上、０．３０％（ｗ／ｖ）以上、０．４０％（ｗ／ｖ）以上である。上記ジェランガムの含有量は、注射剤の粘度調整等の観点で、３．００％（ｗ／ｖ）以下であることが好ましく、より好ましくは２．０％（ｗ／ｖ）以下、１．０％（ｗ／ｖ）以下である。

【0020】

また、上記作用に鑑み、ジェランガムの含有量は、薬物の種類又はトレハロースの含有量に応じて最適化することも好ましい。例えば、トレハロースの含有量が２０％（ｗ／ｖ）以上である場合には、ジェランガムの含有量は０．０１％（ｗ／ｖ）以上０．２０％（ｗ／ｖ）以下であってよい。この組合せは、薬物としてベタメタゾンを含む場合に特に好適であり得る。トレハロースの含有量が２０％（ｗ／ｖ）未満である場合には、ジェランガムの含有量は０．１０％（ｗ／ｖ）以上３．００％（ｗ／ｖ）以下であってよい。

【0021】

本発明におけるジェランガムは、イオン応答性の脱アシル型ジェランガム、熱応答性のネイティブ型ジェランガムの１種以上であってよい。注射剤の温度調節（投与前に高温に調整してゾル化させる）を行わなくてもよい点で、脱アシル型ジェランガムがより好ましい。

【0022】

薬物は、注射剤に求められる薬効に応じて適宜選択されてよく、具体的には、水に溶解する薬物であっても水に溶解しにくい薬物であってもよく、好ましい薬物としては、たとえばＴａｆｅｔｉｎｉｂ、ＳＩＭ−８１７３７８、ＡＣＴＢ−１００３、Ｃｈｉａｕｒａｎｉｂ 、ＣＴ−５３６０８ 、Ｃｉｎｎａｍｏｎ、ｃｈｉｍ４Ｇ８−ＳＤＩＥ、ＣＥＰ−５２１４、ＩＭＣ−１Ｃ１１、ＣＥＰ−７０５５、３−［５−［２−［Ｎ−（２−Ｍｅｔｈｏｘｙｅｔｈｙｌ）−Ｎ−ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏ］ｅｔｈｏｘｙ］−１Ｈ−ｉｎｄｏｌ−２−ｙｌ］ｑｕｉｎｏｌｉｎ−２（１Ｈ）−ｏｎｅ、ｈＦ４−３Ｃ５ 、ＺＫ−ＣＤＫ、ＩＭＣ−ＥＢ１０、ＬＳ−１０４ 、ＣＹＣ−１１６ 、ＯＳＩ−９３０ 、ＰＦ−３３７２１０、ＪＮＪ−２６４８３３２７、ＳＳＲ−１０６４６２、Ｒ−１５３０、ＰＲＳ−０５０、ＴＧ−０２、ＳＣ−７１７１０、ＳＢ−１５７８、ＡＭＧ−１９１、ＡＭＧ−８２０、Ｓｕｌｆａｔｉｎｉｂ、Ｌｕｃｉｔａｎｉｂ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、ＪＮＪ−２８３１２１４１、Ｉｌｏｒａｓｅｒｔｉｂ、ＰＬＸ−５６２２、ＡＲＲＹ−３８２、ＴＡＳ−１１５、Ｔａｎｉｂｉｒｕｍａｂ、Ｈｅｎａｔｉｎｉｂ ｍａｌｅａｔｅ、ＬＹ−２４５７５４６、ＰＬＸ−７４８６、ＦＰＡ−００８、ＮＶＰ−ＡＥＥ−７８８、ｃｇｉ−１８４２、ＲＡＦ−２６５、ＭＫ−２４６１、ＳＧ−００５２９、Ｒｅｂａｓｔｉｎｉｂ ｔｏｓｙｌａｔｅ、Ｇｏｌｖａｔｉｎｉｂ ｔａｒｔｒａｔｅ、Ｒｏｎｉｃｉｃｌｉｂ、ＢＶＴ−ＩＩ、Ｘ−８２、ＸＶ−６１５、ＫＤ−０２０、Ｌｅｓｔａｕｒｔｉｎｉｂ、Ｄｅｌｐｈｉｎｉｄｉｎ、Ｓｅｍａｘａｎｉｂ、Ｖａｔａｌａｎｉｂ ｓｕｃｃｉｎａｔｅ、ＯＳＩ−６３２、Ｔｅｌａｔｉｎｉｂ、Ａｌａｃｉｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ、ＡＴＮ−２２４、Ｔｉｖｏｚａｎｉｂ、ＸＬ−９９９、Ｉｃｒｕｃｕｍａｂ、Ｆｏｒｅｔｉｎｉｂ、Ｃｒｅｎｏｌａｎｉｂ ｂｅｓｙｌａｔｅ、Ｒ−４０６、Ｂｒｉｖａｎｉｂ、Ｐｅｇｄｉｎｅｔａｎｉｂ、ＴＧ−１００５７２、Ｏｌａｒａｔｕｍａｂ、Ｆｏｓｔａｍａｔｉｎｉｂ ｄｉｓｏｄｉｕｍ、ＢＭＳ−６９０５１４、ＡＴ−９２８３、ＭＧＣＤ−２６５、Ｑｕｉｚａｒｔｉｎｉｂ、ＥＮＭＤ−９８１６９３、Ｆａｍｉｔｉｎｉｂ ｍａｌａｔｅ、Ａｎｌｏｔｉｎｉｂ、Ｔｏｖｅｔｕｍａｂ、ＰＬＸ−３３９７、Ｆｒｕｑｕｉｎｔｉｎｉｂ、（−）−Ｅｐｉｇａｌｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ ｇａｌｌａｔｅ、Ｍｉｄｏｓｔａｕｒｉｎ、ＮＳＣ−７０６４５６、Ｏｒａｎｔｉｎｉｂ、Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ、Ｄｏｖｉｔｉｎｉｂ ｌａｃｔａｔｅ、ＸＬ−６４７、Ｍｏｔｅｓａｎｉｂ ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ、Ｌｉｎｉｆａｎｉｂ、Ｂｒｉｖａｎｉｂ ａｌａｎｉｎａｔｅ、Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ ｍａｌｅａｔｅ、Ａｐａｔｉｎｉｂ、Ｆｅｄｒａｔｉｎｉｂ、Ｐａｃｒｉｔｉｎｉｂ、Ｒａｍｕｃｉｒｕｍａｂ、Ｉｎｔｅｄａｎｉｂ、Ｍａｓｉｔｉｎｉｂ ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｅｌｅｍｅｎｅ、Ｄｉｈｙｄｒｏａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ、ＷＳ−１４４２、Ｉｔｒａｃｏｎａｚｏｌｅ、Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ、Ｄｉｈｙｄｒｏａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ、Ｉｍａｔｉｎｉｂ ｍｅｓｙｌａｔｅ、Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ ｍａｌａｔｅ、Ｄａｓａｔｉｎｉｂ、Ｐａｚｏｐａｎｉｂ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ、Ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ、Ａｘｉｔｉｎｉｂ、Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ、Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ Ｓ−ｍａｌａｔｅ、Ｐｏｎａｔｉｎｉｂ、２−［［［２−［（ヒドロキシアセチル）アミノ］−４−ピリジニル］メチル］チオ］−Ｎ−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−３−ピリジンカルボキサミドなどのチロシンキナーゼ阻害剤、ハイドロコルチゾン、トリアムシノロン、フルオシノロン、デキサメタゾン、ベタメタゾンなどのステロイド、イソプロピルウノプロストンなどのプロスタグランジン、シクロスポリン、シロリムス（ラパマイシン）などの免疫抑制剤、アゼラスチンなどの抗アレルギー剤、インドメタシン、ブロムフェナク、ジクロフェナクなどの非ステロイド性抗炎症剤、パゾパニブ、ＳＵ５４１６、バラチニブ、ラニビズマブ、ベバシズマブなどの血管新生阻害薬、ニカルジピン、ニトレンジピンなどの循環改善薬、ビタミンＥなどの抗酸化剤、アセタゾラミド、ブリンゾラミドなどの炭酸脱水酵素阻害剤、チモロール、プロスタグランジン誘導体などの眼圧下降薬、各種ビタミンＡ誘導体などのビジュアルサイクルモジュレーター、毛様体栄養因子（ＣＮＴＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）などの栄養因子や神経成長因子（ＮＧＦ）、幹細胞増殖因子（ＨＧＦ）のような各種成長因子、ペガプタニブのようなアプタマー、各種アンチセンス核酸、ｓｉＲＮＡのような核酸医薬、ルセンティス、ＩｇＧなどの抗体・ペプチド製剤、特開２００６−９６７３９、特開２０１１−３７８４４、特開２００５−２３２１４９、特開２００６−２７３８５１、特開２００６−３０６８６１、特開２００８−２６６２９４などに記載のＶＥＧＦ阻害剤、特開２００７−２３０９９３、特開２００８−０７４８２９、特開２００８−１４３８８９、特開２００８−１４３８９０、特開２００８−１４３８９１、特開２００９−００７３４４、特開２００９−０８４２７４などに記載のグルココルチコイド受容体結合活性を有する化合物、ＲＵ２４８５８などの選択的グルココルチコイド受容体アゴニスト、フルオロウラシルなどの抗癌剤、トファシチニブなどのヤヌスキナーゼ阻害剤、ルボキシスタウリンメシレートなどのプロテインキナーゼ阻害剤、などが挙げられる。

【0023】

注射剤の全体積に対する薬物の含有量は、０．０００１％（ｗ／ｖ）以上であることが好ましく、より好ましくは０．０５％（ｗ／ｖ）以上、０．１０％（ｗ／ｖ）以上、０．３０％（ｗ／ｖ）以上、０．５０％（ｗ／ｖ）以上、１．０％（ｗ／ｖ）以上である。また、本発明の注射剤は薬物の徐放性に優れるため、比較的少量の薬物でも優れた治療／予防効果を奏することができるため、上記薬物の含有量は、５０．００％（ｗ／ｖ）以下であることが好ましく、より好ましくは４０．００％（ｗ／ｖ）以下、３０．００％（ｗ／ｖ）以下、２５．００％（ｗ／ｖ）以下である。

【0024】

本発明に係る注射剤は、上記成分に加え、水等の分散媒、浸透圧調整剤、緩衝剤等を含んでもよい。

【0025】

本発明に係る注射剤は、特に限定されないが、デポを形成して徐放性を発揮することができる。本発明でデポが形成される条件は、リン酸緩衝液、体液（涙液、硝子体液など）への接触であってよく、各種条件に応じた処方及び投与方法を採用すればよい。例えば体液（涙液、硝子体液など）への接触でデポを形成する注射剤は、体内や硝子体内へ注射投与すればよい。また、疑似体液、リン酸緩衝液等の各種試験液に投与することもできる。これにより、各投与箇所においてデポが形成され、薬物が徐放されることになる。

【0026】

本発明に係る注射剤は、例えば硝子体内に投与すれば投与部位近傍でデポが形成されるので、眼内の患部（例えば網脈絡膜）へと薬物を効果的かつ持続的に供給することができる。

【0027】

この場合、本発明の注射剤は、後眼部疾患の治療／予防に好適に使用することができる。後眼部疾患としては、種々の原因による炎症、ウイルスや細菌の感染症、網膜脈絡膜の血管新生、血管透過性亢進に起因する疾患、網膜脈絡膜の腫瘍性疾患、網膜膜脈絡膜の遺伝性疾患、緑内障に起因する視神経障害が挙げられる。さらに具体的には、眼内炎、ぶどう膜炎、サイトメガロウイルス網膜炎、加齢性黄斑変性症、糖尿病性網膜症、増殖性硝子体網膜症、網膜静脈閉塞症、網膜動脈閉塞症、網膜剥離、中心性漿液性網脈絡膜症、網膜芽細胞腫、網膜色素変性症、黄斑ジストロフィー、コロイデレミア、色盲、先天網膜分離症、緑内障に伴う視野狭窄、視野欠損等が挙げられる。ただし、本発明の注射剤は、薬物や投与方法に応じ、種々の疾患の治療／予防に使用されてよい。

【0028】

本発明の注射剤は、適宜方法により製造することができる、例えば、まず、ジェランガムを溶媒に加えて基剤を調製する。溶媒は、生理的に許容される溶媒であればよく、好ましくは注射用蒸留水である。この基剤に薬物を加え、均一に分散、懸濁または溶解させて注射剤を調製する。薬物の基剤への懸濁は、固体の薬物を十分粉砕したうえで基剤に均一に分散させることで、また液状の薬物を乳化することで行えばよい。乳化方法としては、界面化学的乳化方法、機械的乳化方法、膜乳化方法等が挙げられる。

【0029】

本発明は、薬物と、トレハロースと、ジェランガムと、を含有する液状組成物を体液、疑似体液又はリン酸緩衝液に接触させることを含む、デポ形成方法も包含する。

【実施例】

【0030】

〔１〕製剤例１〜３および比較例１〜２の調製
製剤例１
メスフラスコに２−［［［２−［（ヒドロキシアセチル）アミノ］−４−ピリジニル］メチル］チオ］−Ｎ−［４−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−３−ピリジンカルボキサミド（以下「化合物Ａ」とする。）０．０２５ｇを入れ、０．４％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ２０）水溶液０．５ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。つぎに滅菌済み５０％トレハロース水溶液０．８ｍＬを加え、スターラーで撹拌後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液２ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0031】

製剤例２
メスフラスコに化合物Ａ０．１２５ｇを入れ、０．４％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ２０）水溶液０．５ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。つぎに５０％トレハロース水溶液０．８ｍＬを加え、スターラーで撹拌後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液２ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0032】

製剤例３
メスフラスコに化合物０．２５０ｇを入れ、０．４％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ２０）水溶液０．５ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。つぎに滅菌済み５０％トレハロース水溶液０．８ｍＬを加え、スターラーで撹拌後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液２ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0033】

比較例１
メスフラスコに化合物Ａ０．１２５ｇを入れ、０．４％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ２０）水溶液０．５ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。つぎに５０％トレハロース水溶液０．８ｍＬを加え、スターラーで撹拌後、注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0034】

比較例２
メスフラスコに化合物Ａ０．１２５ｇを入れ、０．４％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ２０）水溶液０．５ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。つぎに１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．８ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。しかしながら、得られた注射剤は凝集物を含む不均一な懸濁液となったため、その後の溶出試験には使用できなかった。

【0035】

〔２〕製剤例１〜３および比較例１〜２で得られた各注射剤の溶出試験
１％モノステアリン酸ポリエチレングリコール（ＭＹＳ４０）含有１０ｍＭ中性リン酸緩衝液（ダルベッコＰＢＳ）５０ｍＬを入れたガラス試験管に、製剤例１〜３、比較例１で得られた各注射剤を０．０２ｍＬずつ加え、３７℃にて緩やかに振とうした。溶出試験開始１日後および３日後に１ｍＬの溶出液を回収し、マイクロプレートリーダーを用いて２７０ｎｍ吸光度から溶出液中の化合物Ａの濃度を算出した。なお、検量線には０．０００３１３、０．０００６２５、０．００１２５、０．００２５、０．００５および０．０１ｍｇ/ｍＬの化合物Ａを１％ＭＹＳ４０含有１０ｍＭ中性リン酸緩衝液（ダルベッコＰＢＳ）に溶解させた溶液を用いた。これらの試験結果を表１に示す。

【0036】

【表1】

【0037】

表１より、製剤例１〜３はいずれも、薬剤（化合物Ａ）について良好な徐放化効果（薬物放出率）を示すのに対し、ジェランガムを含まない比較例１は薬物徐放性が良好ではなく、また、トレハロースを含まない比較例２は凝集物を含み、注射剤としては適用できない。

【0038】

〔３〕製剤例４〜８の調製
製剤例４
メスフラスコに化合物Ａ５０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液０．２ｍＬに加えてスターラーおよび超音波処理にて撹拌分散した後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．８ｍＬを加え、再度撹拌分散して注射剤を調製した。

【0039】

製剤例５
メスフラスコに化合物Ａ５０ｍｇを入れ、２５％トレハロース水溶液０．２ｍＬに加えてスターラーおよび超音波処理にて撹拌分散した後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．８ｍＬを加え、再度撹拌分散して注射剤を調製した。

【0040】

製剤例６
メスフラスコに化合物Ａ５０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液０．１ｍＬに加えてスターラーおよび超音波処理にて撹拌分散した後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．９ｍＬを加え、再度撹拌分散して注射剤を調製した。

【0041】

製剤例７
メスフラスコに化合物Ａ５０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液０．１ｍＬに加えてスターラーおよび超音波処理にて撹拌分散した後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．６ｍＬおよび注射用水０．３ｍＬを加え、再度撹拌分散して注射剤を調製した。

【0042】

製剤例８
メスフラスコに化合物Ａ５０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液を０．１ｍＬに加えてスターラーおよび超音波処理にて撹拌分散した後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．４ｍＬおよび注射用水０．５ｍＬを加え、再度撹拌分散して注射剤を調製した。

【0043】

〔４〕製剤例４〜８で得られた各注射剤の溶出試験
１％モノステアリン酸ポリエチレングリコール（ＭＹＳ４０）含有１０ｍＭ中性リン酸緩衝液（ダルベッコＰＢＳ）５０ｍＬを入れたガラス試験管に、製剤例４〜８で得られた各注射剤を０．０２ｍＬずつ加え、３７℃にて緩やかに振とうした。溶出試験開始１日後、３日後および７日後に０．１８ｍＬの溶出液を回収し、マイクロプレートリーダーを用いて２７０ｎｍ吸光度から溶出液中の化合物Ａの濃度を算出した。なお、検量線には０．０００８、０．００４および０．０２ｍｇ／ｍＬの化合物Ａを１％ＭＹＳ４０含有１０ｍＭ中性リン酸緩衝液（ダルベッコＰＢＳ）に溶解させた溶液を用いた。これらの試験結果を表２に示す。

【0044】

【表2】

【0045】

表２より、製剤例４〜８はいずれも、薬剤（化合物Ａ）について良好な徐放化効果（薬物放出率）を示した。

【0046】

〔５〕製剤例９および１０の調製
製剤例９
メスフラスコにシロリムス３０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液０．１ｍＬに加えてスターラーおよび超音波処理にて分散させた後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．９ｍＬを加え、再度撹拌分散して注射剤を得た。

【0047】

製剤例１０
メスフラスコにシロリムス３０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液０．６ｍＬに加えてスターラーおよび超音波処理にて分散させた後、１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．４ｍＬを加え、再度撹拌分散して注射剤を得た。

【0048】

〔６〕製剤例９および１０で得られた各注射剤の溶出試験
０．１％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）含有中性リン酸緩衝液１２ｍＬを入れたガラス試験管に、製剤例９、１０で得られた各注射剤を０．０１５ｍＬずつ加え、３７℃にて緩やかに振とうした。溶出試験開始１日後に溶出液を１０ｍＬ回収し、ＵＰＬＣを用いて溶出液中のシロリムス濃度を算出した。これらの試験結果を表３に示す。

【0049】

【表3】

【0050】

表３より、製剤例９および１０は、薬剤（シロリムス）について良好な徐放化効果（薬物放出率）を示した。

【0051】

〔７〕製剤例１１〜１３の調製
製剤例１１
滅菌済みメスフラスコに化合物Ａ０．３ｇを入れ、滅菌済み２０％トレハロース水溶液３．７５ｍＬを加え、スターラーおよび超音波処理にて撹拌後、滅菌済み１％脱アシル型ジェランガム水溶液９ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で１５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0052】

製剤例１２
滅菌済みメスフラスコに化合物Ａ０．２５ｇを入れ、滅菌済み０．４％ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ２０）水溶液０．５ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。さらに滅菌済み５０％トレハロース水溶液０．８ｍＬを加え、スターラーで撹拌後、滅菌済み１％脱アシル型ジェランガム水溶液２ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0053】

製剤例１３
滅菌済みメスフラスコにシロリムス１ｇを入れ、滅菌済み２０％トレハロース水溶液２ｍＬを加え、スターラーおよび超音波処理にて撹拌後、滅菌済み１％脱アシル型ジェランガム水溶液３ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0054】

〔８〕ｉｎ ｖｉｖｏにおける薬物放出特性試験
製剤例１１〜１３で得られた各注射剤を５０μＬずつ２６ゲージの針を用いて日本白色ウサギの硝子体に投与した（Ｎ＝４）。投与後経時的に（４週間後、１２週間後、２４週間後）ウサギから硝子体及び網脈絡膜を採取し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いて薬物濃度を測定した。これらの薬物放出特性試験の結果を表４〜６に示す。

【0055】

【表4】

【0056】

【表5】

【0057】

【表6】

【0058】

本注射剤（製剤例１１〜１３）は、硝子体注射後、４週間に渡って一定以上の網脈絡膜中薬剤濃度を維持し、投与４週後では硝子体中に７７％以上の薬剤が残存し、投与１２週後でも硝子体中に６８％以上の薬剤が残存していることから、薬物徐放効果を長期間持続することが予想される。また、製剤例１１、１２と製剤例１３では含有する薬物が異なることから、本注射剤は種々の薬物を用いても共通する徐放効果を奏することが示唆された。

【0059】

〔８〕製剤例１１で得られた注射剤のデポ形成能
製剤例１１の注射剤をウサギの硝子体内へ注射投与し、その４週間後に眼球を摘出し、ドライアイスで眼球を凍結し、剃刀を用いて毛様体扁平部から前眼部を除去した。さらに攝子などを用いて凍結状態で網脈絡膜と硝子体とを分離し、硝子体融解後に硝子体中のデポを撮影した。この結果を図１に示す。なお、図１中のアスタリスクは、硝子体ゲルの破砕のために用いたビーズ（直径３ｍｍ）を示す。

【0060】

図１に示されるように、硝子体中にはデポが形成されており（中央やや左側に見える白色状物）、本発明の注射剤が硝子体液に接触してデポを形成することが確認された。

【0061】

〔８〕製剤例１４〜１９の調製
製剤例１４
メスフラスコにベタメタゾン５０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液１ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。１％脱アシル型ジェランガム水溶液３ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、さらに注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0062】

製剤例１５〜１９
製剤例１４のベタメタゾン５０ｍｇに代えてジクロフェナク５０ｍｇ、インドメタシン５０ｍｇ、ブリンゾラミド５０ｍｇ、アゼラスチン５０ｍｇ、ＩｇＧ（ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ）５０ｍｇを用い、製剤例１４と同様の操作を行って、製剤例１５〜１９の各注射剤を調製した。

【0063】

製剤例１４〜１９の各注射剤の配合組成を表７に示す。

【0064】

【表7】

【0065】

〔９〕デポ形成確認試験
１％モノステアリン酸ポリエチレングリコール（ＭＹＳ４０）含有１０ｍＭ中性リン酸緩衝液（ダルベッコＰＢＳ）１５ｍＬを入れたガラス試験管に、製剤例１４〜１９の各注射剤を０．０２０ｍＬずつ３７℃にて添加した。製剤例１４〜１９の注射剤を入れた各試験管にはどれも、白色のデポが形成されていることを目視で確認した。

【0066】

〔１０〕製剤例２０〜２３の調製
製剤例２０
サンプル瓶にベタメタゾン５０ｍｇを入れ、５０％トレハロース水溶液０．０５ｍＬを加え、スターラーと超音波で分散させた。１％脱アシル型ジェランガム水溶液４ｍＬを加えて再度スターラーで撹拌し、均一になった後にメスフラスコに移し、注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。なお、調製途中で固化した場合は、適宜５０℃への加温を行った。

【0067】

製剤例２１
ベタメタゾン１．５ｇを５０％トレハロース水溶液２ｍＬに、メノウ乳鉢を用いて分散させた。１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．１５ｍＬを加えてボルテックスあるいはペンシルミキサーで撹拌し、均一になった後にメスフラスコに移し、さらに５０％トレハロース水溶液２ｍＬを共洗いしながら加え、注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0068】

製剤例２２
ベタメタゾン３ｇを５０％トレハロース水溶液５ｍＬに、メノウ乳鉢を用いて分散させた。１％脱アシル型ジェランガム水溶液１ｍＬを加えてボルテックスあるいはペンシルミキサーで撹拌し、均一になった後にメスフラスコに移し、注射用水で１０ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0069】

製剤例２３
ベタメタゾン２ｇを５０％トレハロース水溶液２ｍＬに、メノウ乳鉢を用いて分散し、さらに１％脱アシル型ジェランガム水溶液０．５ｍＬを加えて混合した。メスフラスコに移し、ペンシルミキサーで撹拌しながらさらに５０％トレハロース水溶液２ｍＬを共洗いしながら加え、注射用水で５ｍＬにメスアップして注射剤を調製した。

【0070】

製剤例２０〜２３の各注射剤の配合組成を表８に示す。

【0071】

【表8】

【0072】

〔１１〕デポ形成確認試験
ダルベッコＰＢＳ１５ｍＬを入れたガラス試験管に、製剤例２０〜２３の各注射剤を０．０２０ｍＬずつ３７℃にて添加した。製剤例２０〜２３の注射剤を入れた各試験管にはどれも、白色のデポが形成されていることを目視で確認した。

【図1】