特開 2015-151387 アッサムチャ花部から得られる脂肪分解阻害剤及び胃がん細胞増殖抑制剤、並びに新規サポニン化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2015-151387(P2015-151387A)

(43)【公開日】2015年8月24日

(54)【発明の名称】アッサムチャ花部から得られる脂肪分解阻害剤及び胃がん細胞増殖抑制剤、並びに新規サポニン化合物

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/18 20060101AFI20150728BHJP

   A61K 36/00 20060101ALI20150728BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20150728BHJP

   A61K 31/7034 20060101ALI20150728BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20150728BHJP

   C07J 63/00 20060101ALI20150728BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20150728BHJP

【ＦＩ】

   A61K35/78 C

   A61K35/78 X

   A61P35/00

   A61K31/7034

   A61P3/06

   C07J63/00CSP

   A61P1/00

【審査請求】未請求

【請求項の数】12

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】41

(21)【出願番号】特願2014-28679(P2014-28679)

(22)【出願日】2014年2月18日

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り 日本生薬学会 第６０回年会 講演要旨集 発行者 ：日本生薬学会 発行日 ：２０１３年８月２０日 （刊行物等） 日本生薬学会 第６０回年会 主催 ：日本生薬学会 開催日 ：２０１３年９月８日

(71)【出願人】

【識別番号】000125347

【氏名又は名称】学校法人近畿大学

(71)【出願人】

【識別番号】304026180

【氏名又は名称】株式会社ダイアベティム

(74)【代理人】

【識別番号】100094477

【弁理士】

【氏名又は名称】神野 直美

(74)【代理人】

【識別番号】100078813

【弁理士】

【氏名又は名称】上代 哲司

(72)【発明者】

【氏名】吉川 雅之

(72)【発明者】

【氏名】村岡 修

(72)【発明者】

【氏名】松田 久司

(72)【発明者】

【氏名】中村 誠宏

(72)【発明者】

【氏名】森川 敏生

(72)【発明者】

【氏名】二宮 清文

【テーマコード（参考）】

4C086

4C088

4C091

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086EA19

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA66

4C086ZB26

4C086ZC33

4C088AB45

4C088BA18

4C088BA24

4C088BA32

4C088CA06

4C088NA14

4C088ZB26

4C088ZC33

4C091AA06

4C091BB02

4C091CC03

4C091DD01

4C091EE03

4C091FF02

4C091FF06

4C091GG03

4C091GG05

4C091HH01

4C091JJ03

4C091KK01

4C091LL03

4C091LL06

4C091MM01

4C091NN02

4C091NN12

4C091PA20

4C091QQ05

4C091RR13

(57)【要約】

【課題】アッサムチャ花部由来の、脂肪分解阻害剤及び胃がん細胞増殖抑制剤、並びに、アッサムチャ花部の抽出液から分離、精製して得られる新規なサポニン化合物を提供する。
【解決手段】アッサムチャ花部、アッサムチャ花部の抽出液、アッサムチャ花部の抽出液から分離、精製して得られるサポニン化合物を、活性成分として含むことを特徴とする脂肪分解阻害剤及び胃がん細胞増殖抑制剤、並びに、アッサムチャ花部の抽出液から分離、精製して得られる新規なサポニン化合物。
【選択図】 なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

アッサムチャ花部、及び／又は、アッサムチャ花部の抽出液を活性成分として含むことを特徴とする脂肪分解阻害剤。

【請求項2】

アッサムチャ花部、及び／又は、アッサムチャ花部の抽出液を活性成分として含むことを特徴とする胃がん細胞増殖抑制剤。

【請求項3】

下記の式（１）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化1】

下記の式（２）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化2】

下記の式（３）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化3】

下記の式（４）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化4】

下記の式（５）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化5】

下記の式（６）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化6】

下記の式（７）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化7】

下記の式（８）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化8】

及び、下記の式（１１）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化9】

からなる群より選ばれる１種以上のサポニン化合物を、活性成分として含むことを特徴とする脂肪分解阻害剤。

【請求項4】

下記の式（３）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化10】

下記の式（４）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化11】

下記の式（６）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化12】

下記の式（７）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化13】

下記の式（８）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化14】

下記の式（９）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化15】

下記の式（１０）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化16】

及び、下記の式（１１）で表されるサポニン化合物またはその塩：

【化17】

からなる群より選ばれる１種以上のサポニン化合物を、活性成分として含むことを特徴とする胃がん細胞増殖抑制剤。

【請求項5】

下記の式（１）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化18】

【請求項6】

下記の式（２）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化19】

【請求項7】

下記式（３）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化20】

【請求項8】

下記の式（４）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化21】

【請求項9】

下記式（５）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化22】

【請求項10】

下記式（６）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化23】

【請求項11】

下記の式（７）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化24】

【請求項12】

下記の式（８）で表されるサポニン化合物またはその塩。

【化25】

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ツバキ科の植物であるアッサムチャ（学名：Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ ｖａｒ． ａｓｓａｍｉｃａ）の雌しべ、雄しべ、花弁、萼、包葉、花軸、花柄等を含むいわゆる花、花芽及び蕾等の花部（以後、アッサムチャ花部と表す）、アッサムチャ花部の抽出液、又はその抽出液から得られるサポニン化合物を活性成分として含有する脂肪分解阻害剤及び胃がん細胞増殖抑制剤に関する。又、本発明は、アッサムチャ花部の抽出液から分離、精製して得られる新規なサポニン化合物（トリテルペン配糖体）に関する。

【背景技術】

【0002】

ツバキ科ツバキ属に属するアッサムチャは、インドやスリランカなどで栽培される高木（喬木）で、日本や中国などで広く栽培される低木（灌木）のチャ（学名：Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、チャノキとも記される）の変種である。いずれもその幼葉を摘んで、紅茶や緑茶などの茶飲料として世界中で親しまれている（例えば、非特許文献１、２）。

【0003】

アッサムチャおよびチャに関しては、その葉部の成分として含まれるサポニン類が、抗炎症、抗菌作用などを有することが知られている（例えば、非特許文献１、２）。

【0004】

また本発明者らにより、チャ花部は、中性脂肪吸収抑制、糖吸収抑制および胃粘膜保護作用などを有するサポニン化合物を含むことが報告されている（例えば、非特許文献３、４）。

【0005】

さらに、本発明者により、チャ花部の抽出物および含有成分が、腸運動亢進作用と膵リパーゼ阻害作用（特許文献１）および脂肪代謝改善作用（特許文献２）を有することも見いだされている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【特許文献1】特開２００９−０５７３６５号公報

【特許文献2】特開２０１１−０５１９５０号公報

【非特許文献】

【0007】

【非特許文献1】村松敬一郎ら、「茶の機能」株式会社学会出版センター（東京）、３６４−３７７頁（２００２）

【非特許文献2】衛藤英男ら、「新版茶の機能」農山漁村文化協会（東京）、４３６−４４７頁（２０１３）

【非特許文献3】Ｙｏｓｈｉｋａｗａ Ｍ．eｔ aｌ．， Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｏｌ．５５，ｐｐ５９８−６０５（２００７）

【非特許文献4】Ｙｏｓｈｉｋａｗａ Ｍ．eｔ aｌ．，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．，ｖｏｌ．６８，ｐｐ１３６０−１３６５（２００５）

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明は、アッサムチャ花部に含有される成分の機能についての研究に基づいてなされたもので、アッサムチャ花部由来の、脂肪分解阻害剤及び胃がん細胞増殖抑制剤を提供することを課題とする。本発明は、又、アッサムチャ花部の抽出液から分離、精製して得られ、脂肪分解阻害剤、胃がん細胞増殖抑制剤等として用いられる新規なサポニン化合物を提供することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明者は、アッサムチャ花部及びアッサムチャ花部の抽出液並びに前記抽出液から分離、精製して得られるサポニン化合物について、次に示す１）及び２）の検討を行った。
１）脂肪分解阻害剤の活性評価の指標として、膵リパーゼ阻害作用。
２）胃がん細胞増殖抑制剤の活性評価の指標として、ヒト胃がん細胞株であるＭＫＮ４５細胞を用いた細胞増殖抑制作用。

【0010】

その結果、アッサムチャ花部、その抽出液、及び抽出液から分離、精製して得られるサポニン化合物が、膵リパーゼ阻害作用、及び胃がん細胞増殖抑制作用を示すことを見出すとともに、前記サポニン化合物中に新規の化合物が含まれていることを見出し、以下に示す態様の発明を完成した。

【0011】

本発明は、その第１の態様として、アッサムチャ花部、及び／又は、アッサムチャ花部の抽出液を活性成分として含むことを特徴とする脂肪分解阻害剤（請求項１）を提供する。この脂肪分解阻害剤は膵リパーゼ阻害作用を示し、これをヒト又は動物に投与することにより膵リパーゼによる脂肪の分解を阻害する。食事中の脂肪は、膵リパーゼによって分解され、モノグリセライドと脂肪酸となって吸収されるので、この脂肪の分解を阻害することにより肥満を抑制できると期待される。従って、第１の態様の脂肪分解阻害剤は、肥満抑制剤として用いることもできる。なお、アッサムチャ花部の抽出液とは、アッサムチャ花部を、水、低級脂肪族アルコールやグリコール及び低級脂肪族アルコールやグリコールの含水物等より選ばれる抽出溶媒により抽出した液、その抽出した液を濃縮して得られるエキス、その抽出した液を分配処理して得られる分配移行液（ｆｒａｃｔｉｏｎ）等も含む意味である。

【0012】

本発明は、その第２の態様として、アッサムチャ花部、及び／又は、アッサムチャ花部の抽出液を活性成分として含むことを特徴とする胃がん細胞増殖抑制剤（請求項２）を提供する。この胃がん細胞増殖抑制剤はヒト胃がん細胞株であるＭＫＮ４５細胞の増殖抑制作用を示し、これをヒト又は動物に投与することにより胃がん細胞の増殖を抑制できると期待される。従って、第２の態様の胃がん細胞増殖抑制剤は、抗がん剤として用いることもできる。

【0013】

本発明者は、さらに又、前記の抽出液を分離、精製し、含有成分の詳細な探索等を行い、さらにその含有成分の生物活性について検討を行ったところ、前記の抽出液中には、下記の構造式（１）、式（２）、式（３）、式（４）、式（５）、式（６）、式（７）、式（８）、式（９）、式（１０）又は式（１１）で表される化合物等、種々のサポニン化合物が含まれていることを見いだした。そして、構造式（１）、式（２）、式（３）、式（４）、式（５）、式（６）、式（７）、式（８）又は式（１１）で表されるサポニン化合物は、膵リパーゼ阻害作用を示し、脂肪分解阻害剤として用いられること、および、構造式（３）、式（４）、式（６）、式（７）、式（８）、式（９）、式（１０）又は式（１１）で表されるサポニン化合物は胃がん細胞増殖抑制作用を示し、胃がん細胞増殖抑制剤として用いられることを見いだした。

【0014】

【化1】

【0015】

（フローラアッサムサポニンI（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ I）と命名する）

【0016】

【化2】

【0017】

（フローラアッサムサポニンII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ II）と命名する）

【0018】

【化3】

【0019】

（フローラアッサムサポニンIII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ III）と命名する）

【0020】

【化4】

【0021】

（フローラアッサムサポニンIＶ（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ IＶ）と命名する）

【0022】

【化5】

【0023】

（フローラアッサムサポニンＶ（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ Ｖ）と命名する）

【0024】

【化6】

【0025】

（フローラアッサムサポニンＶI（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶI）と命名する）

【0026】

【化7】

【0027】

（フローラアッサムサポニンＶII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶII）と命名する）

【0028】

【化8】

【0029】

（フローラアッサムサポニンＶIII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶIII）と命名する）

【0030】

【化9】

【0031】

この化合物は、フローラティーサポニンＤ（Ｆｌｏｒａｔｈｅａｓａｐｏｎｉｎ Ｄ）である。

【0032】

【化10】

【0033】

この化合物は、フローラティーサポニンＧ（Ｆｌｏｒａｔｈｅａｓａｐｏｎｉｎ Ｇ）である。

【0034】

【化11】

【0035】

この化合物は、ゴルドノシドＪ（Ｇｏｒｄｏｎｏｓｉｄｅ Ｊ）である。

【0036】

そこで、本発明は、その第３の態様として、
構造式（１）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（２）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（３）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（４）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（５）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（６）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（７）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（８）で表されるサポニン化合物またはその塩、および
構造式（１１）で表されるサポニン化合物またはその塩、からなる群より選ばれる１種以上のサポニン化合物を、活性成分として含むことを特徴とする脂肪分解阻害剤（請求項３）を提供する。この脂肪分解阻害剤は膵リパーゼ阻害作用を示し、例えば、これをヒト又は動物に投与することにより膵リパーゼによる脂肪の分解を阻害する。食事中の脂肪は、膵リパーゼによって分解され、モノグリセライドと脂肪酸となって吸収されるので、この脂肪の分解を阻害することにより、肥満を抑制できると期待される。従って、肥満抑制剤としての利用が期待される。

【0037】

又、本発明は、その第４の態様として、
構造式（３）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（４）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（６）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（７）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（８）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（９）で表されるサポニン化合物またはその塩、
構造式（１０）で表されるサポニン化合物またはその塩、および
構造式（１１）で表されるサポニン化合物またはその塩、からなる群より選ばれる１種以上のサポニン化合物を、活性成分として含むことを特徴とする胃がん細胞増殖抑制剤（請求項４）を提供する。この胃がん細胞増殖抑制剤はヒト胃がん細胞株であるＭＫＮ４５細胞の増殖抑制作用を示し、これをヒト又は動物に投与することにより胃がん細胞の増殖を抑制できると期待される。従って、抗がん剤としての利用が期待される。

【0038】

前記の第１の態様又は第３の態様の脂肪分解阻害剤、第２の態様又は第４の態様の胃がん細胞増殖抑制剤は、ヒト又は動物に投与することにより前記の作用を奏するので、ヒト又は動物用の医薬や医薬組成物（以後、医薬組成物を含めて医薬と言う）等として用いることができる。

【0039】

本発明者は、さらに、アッサムチャ花部の抽出液の分離、精製により得られた化合物について構造の解析を行ったところ、構造式（１）、構造式（２）、構造式（３）、構造式（４）、構造式（５）、構造式（６）、構造式（７）又は構造式（８）で表されるサポニン化合物は、新規なサポニン化合物であることを見出した。そして、前記のように、これらの新規なサポニン化合物は、脂肪分解阻害剤および／または胃がん細胞増殖抑制剤として用いられる。そこで、本発明は、第５の態様として、以下に示す新規なサポニン化合物を提供する。

【0040】

前記構造式（１）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンI）またはその塩（請求項５）。

【0041】

前記構造式（２）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンII）またはその塩（請求項６）。

【0042】

前記構造式（３）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンIII）またはその塩（請求項７）。

【0043】

前記構造式（４）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンIＶ）またはその塩（請求項８）。

【0044】

前記構造式（５）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンＶ）またはその塩（請求項９）。

【0045】

前記構造式（６）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンＶI）またはその塩（請求項１０）。

【0046】

前記構造式（７）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンＶII）またはその塩（請求項１１）。

【0047】

前記構造式（８）で表されるサポニン化合物（フローラアッサムサポニンＶIII）またはその塩（請求項１２）。

【0048】

請求項５、請求項６、請求項７、請求項８、請求項９、請求項１０、請求項１１または請求項１２のサポニン化合物、すなわち、構造式（１）、（２）、（３）、（４）、（５）、（６）、（７）または（８）で表されるサポニン化合物は、膵リパーゼ阻害作用を示し、脂肪分解阻害剤の活性成分として用いることができる。又、請求項７、請求項８、請求項１０、請求項１１または請求項１２のサポニン化合物、すなわち、構造式（３）、（４）、（６）、（７）または（８）で表されるサポニン化合物は、胃がん細胞増殖抑制作用を示し、胃がん細胞増殖抑制剤の活性成分として用いることができる。

【発明の効果】

【0049】

本発明の脂肪分解阻害剤（第１の態様及び第３の態様）は、膵リパーゼ阻害作用を示し、ヒト又は動物の肥満を抑制する効果がある。本発明の胃がん細胞増殖抑制剤（第２の態様及び第４の態様）は、ヒト胃がん細胞株であるＭＫＮ４５細胞の増殖抑制作用を示し、これをヒト又は動物に投与することにより胃がんの増殖を抑制できると期待される。

【0050】

本発明の新規サポニン化合物（第５の態様）は、膵リパーゼ阻害及び／又は胃がん細胞増殖抑制作用を示し、脂肪分解阻害剤及び／又は胃がん細胞増殖抑制剤として用いることができる。

【発明を実施するための形態】

【0051】

次に、本発明を実施するための形態について説明するが、本発明の範囲はこの実施の形態のみに限定されるものではない。

【0052】

本発明の、第１の態様の脂肪分解阻害剤、第２の態様の胃がん細胞増殖抑制剤としては、１）アッサムチャ花部を（抽出等の処理を行わずに）活性成分として用いるもの、２）アッサムチャ花部を、低級脂肪族アルコールやグリコール又は低級脂肪族アルコールやグリコールの含水物等により抽出した抽出液を濃縮して得られる抽出エキスを活性成分として用いるもの、を例示することができる。アッサムチャ花部を用いる場合は、アッサムチャ花部をそのまま用いることができるし、又は、粉砕、破砕、切断、すりつぶし等による形状変化を行ったもの、又は、乾燥等の調製をしたものを用いることもできる。

【0053】

抽出液は、アッサムチャ花部をそのまま又は粉砕、破砕、切断、すりつぶし等による形状変化を行ったものを、水、低級脂肪族アルコールやグリコール及び低級脂肪族アルコールやグリコールの含水物より選ばれる抽出溶媒により抽出して得ることができる。抽出効率の点からは、粉砕、破砕、切断、すりつぶし等による形状変化を行ったものを用いる方法が望ましい。

【0054】

抽出溶媒として用いられるアルコールとしては、炭素数１〜４の低級アルコール類が挙げられ、具体的には、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｔ−ブタノール又はこれらの混液等が挙げられる。グリコールとしては、エチレングリコール、プロピレングリコール等が挙げられる。抽出溶媒としては、好ましくはこれらのアルコールやグリコール、又はこれらのアルコールやグリコールに３０容量％までの水を含有する含水アルコールや含水グリコールが用いられる。前記のアルコールやグリコールの中でもメタノール及びエタノールが好ましい。これらの抽出溶媒は、抽出材料に対して、１〜５０質量倍程度、好ましくは１０〜３０質量倍程度用いられる。

【0055】

抽出温度は、室温〜溶媒の沸点の間で任意に設定できるが、５０℃〜抽出溶媒の沸点の温度が好ましい。抽出は、振盪下もしくは非振盪下又は還流下に、前記の抽出材料、即ち、アッサムチャ花部そのもの、又はそれを粉砕、破砕、切断、すりつぶし等による形状変化を行ったもの等を、前記の抽出溶媒に浸漬することによって行うのが適当である。

【0056】

好ましい抽出時間は、抽出温度や抽出の際の振盪の有無等により変動し、特に限定されない。例えば、抽出材料を振盪下に浸漬する場合には、３０分間〜１０時間程度行うのが適当であり、非振盪下に浸漬する場合には、１時間〜２０日間程度行うのが適当である。又、抽出溶媒の還流下に抽出するときは、３０分間〜数時間加熱還流するのが好ましい。なお、５０℃より低い温度で浸漬して抽出することも可能であるが、その場合には、前記の時間よりも長時間浸漬するのが好ましい。抽出操作は、同一材料について１回だけ行ってもよいが、複数回、例えば２〜５回程度繰り返すのが好ましい。

【0057】

前記の抽出工程により得られた抽出液には、アッサムチャ花部の含有成分が溶出されている。本発明の、第１の態様の脂肪分解阻害剤、第２の態様の胃がん細胞増殖抑制剤としては、このようにして得られた抽出液を濃縮して用いてもよい。濃縮は、低温で減圧下に行うのが好ましい。濃縮する前に濾過して濾液を濃縮してもよい。なお、濃縮等の操作を行わず抽出液をそのまま用いても、脂肪分解阻害剤、胃がん細胞増殖抑制剤としての作用を奏する。

【0058】

また、濃縮は乾固するまで行ってもよく、粉末状又は凍結乾燥品等として用いてもよい。濃縮する方法、粉末状及び凍結乾燥品とする方法は当該分野での公知の方法を用いることができる。

【0059】

このようにして得られる抽出液（さらに濃縮したもの、分配により得られる分配移行液等を含む意味である）は、精製処理に付し、含有される各成分に分離することができる。前記の、構造式（１）〜（１１）のいずれかで表される化合物は、この精製、分離により得ることができる。そして、この精製、分離により得られた構造式（１）、構造式（２）、構造式（３）、構造式（４）、構造式（５）、構造式（６）、構造式（７）、構造式（８）又は構造式（１１）で表される化合物も、脂肪分解阻害剤として用いることができ（本発明の第３の態様）、又、この精製、分離により得られた構造式（３）、構造式（４）、構造式（６）、構造式（７）、構造式（８）、構造式（９）、構造式（１０）又は構造式（１１）で表される化合物も、胃がん細胞増殖抑制剤として用いることができる（本発明の第４の態様）。

【0060】

精製処理は、例えば、クロマトグラフ法、イオン交換樹脂を使用する溶離法、溶媒による分配抽出等を単独、又は組み合わせて採用することができる。クロマトグラフ法としては、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、遠心液体クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等を挙げることができ、これらのいずれか、又はそれらを組み合わせて行う方法が挙げられる。この際の担体、溶出溶媒等の精製条件は、各種クロマトグラフィーに対応して適宜選択することができる。

【0061】

前記のように、本発明の第１の態様の脂肪分解阻害剤、第２の態様の胃がん細胞増殖抑制剤を含有させることにより、ヒト又は動物用の医薬を製造することができる。本発明の脂肪分解阻害剤、胃がん細胞増殖抑制剤が、ヒト又は動物用の医薬として用いられる場合は、アッサムチャ花部そのもの、アッサムチャ花部の抽出液、もしくは前記式（１）〜（１１）で表される化合物を、そのままの状態で又は適当な媒体で希釈して、医薬品等の製造分野における公知の方法により、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤又は液剤等の種々の形態にして用いられる。

【0062】

これらの形態においては、適当な媒体を添加してもよい。適当な媒体としては、医薬的に許容される賦形剤、例えば結合剤（例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガント又はポリビニルピロリドン）、充填剤（例えば乳糖、砂糖、トウモロコシ澱粉、リン酸カルシウム、ソルビトール又はグリシン）、錠剤用滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール又はシリカ）、崩壊剤（例えば馬鈴薯澱粉）又は湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）が挙げられる。

【0063】

錠剤とする場合は、通常の製薬における周知の方法でコートしてもよい。液体製剤とする場合は、例えば水性又は油性の懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップ又はエリキシルの形態であってもよい。又、使用前に水や他の適切な賦形剤と混合する乾燥製品として提供してもよい。

【0064】

こうした液体製剤は、通常の添加剤、例えば、ソルビトール、シロップ、メチルセルロース、グルコースシロップ、ゼラチン水添加食用脂等の懸濁化剤、レシチン、ソルビタンモノオレエート、アラビアゴム等の乳化剤（食用脂を含んでもよい）、アーモンド油、分画ココヤシ油又はグリセリン、プロピレングリコールやエチレングリコールのような油性エステル等の非水性賦形剤、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル又はソルビン酸等の保存剤を含んでもよく、さらに所望により着色剤又は香料等を含んでもよい。

【0065】

本発明の医薬における、抽出液、前記式（１）〜（１１）で表される化合物の使用量は、濃縮、精製の程度、活性の強さ等、使用目的、対象疾患や自覚症状の程度、使用者の体重、年齢等によって適宜調整される。例えば、医薬として成人について使用する場合は、１回の投与毎に、抽出液の場合では、１ｍｇ〜２０ｇ程度の範囲で使用し、この範囲内で精製度や水分含量等に応じて調整することが適当な場合が多い。又、前記式（１）〜（１１）で表される化合物を使用する場合は、１ｍｇ〜１ｇ程度が適当な場合が多い。

【実施例】

【0066】

以下、実施例により、本発明をさらに具体的に説明するが、実施例は本発明の範囲を限定するものではない。なお、以下の実施例では、特に記載がない限り、以下に示す各種溶媒、濾紙、クロマトグラフィー用担体及びＨＰＬＣカラムを用いた。また、特に明記しない試薬については、和光純薬工業社製試薬（特級）を用いた。

【0067】

［溶媒］
メタノール：ナカライテスク社製、一級
ＨＰＬＣ用メタノール：ナカライテスク社製、特級

【0068】

［濾紙］
アドバンテック社製：Ｎｏ．２

【0069】

［クロマトグラフィー用担体］
順相シリカゲルカラムクロマトグラフ用担体：関東化学社製、Ｓｉｌｉｃａ Ｇｅｌ ６０Ｎ
逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフ用担体：富士シリシア社製、Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ ＯＤＳ１０２０Ｔ

【0070】

［ＨＰＬＣカラム］
ナカライテスク社製、Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ_１８−ＭＳ−II、２０ｍｍ（ｉ．ｄ．）×２５０ｍｍ

【0071】

実施例１
インド産アッサムチャ花部（６８７．４ｇ）を、メタノール（ＭｅＯＨ）で３時間熱時抽出し、抽出液を濾取した。残渣にメタノールを加え、同様の抽出操作を計３回行った。得られたメタノール抽出液を合わせ、減圧下溶媒を留去し、ＭｅＯＨ抽出エキス（収量２８０．４ｇ、収率４０．８％）（以下、括弧内で収量及び／又は収率を表す場合は、「収量」、「収率」を略して示す。なお、「収率」とは、アッサムチャ花部からの単離収率である。）を得た。

【0072】

このＭｅＯＨ抽出エキス（２７０．４ｇ）を、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）と水（１：１）で分配し、ＥｔＯＡｃ移行部（１７．３ｇ、２．６％）とＨ_２Ｏ移行部を得た。さらにこのＨ_２Ｏ移行部を、ｎ−ブタノール（ｎ−ＢｕＯＨ）と水（１：１）で分配し、ｎ−ＢｕＯＨ移行部（９２．１ｇ、１３．９％）とＨ_２Ｏ移行部（１４４．８ｇ、２１．９％）を得た。

【0073】

実施例２ 膵リパーゼ阻害作用試験
実施例１で得られたアッサムチャ花部のＭｅＯＨ抽出エキス、ＥｔＯＡｃ移行部、ｎ−ＢｕＯＨ移行部、Ｈ_２Ｏ移行部について、膵リパーゼ阻害作用の検討を行った。具体的には、次に示す方法により膵リパーゼ阻害作用を求めた。表１に示す結果より明らかなように、ＭｅＯＨ抽出エキス、ＥｔＯＡｃ移行部およびｎ−ＢｕＯＨ移行部に有意な阻害活性（膵リパーゼ阻害作用）が認められた。

【0074】

［膵リパーゼ阻害作用の測定］
基質としてトリオレイン溶液［トリオレイン８０ｍｇ、ホスファチジルコリン１０ｍｇ及びタウロコール酸５ｍｇに０．１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７．０：０．１ＭのＮａＣｌ含有）９ｍｌを加え、１０分間超音波処理を行った溶液］１００μｌに、被験サンプル溶液５μｌを加え、さらに０．１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７．０）９５μｌを加え、全量を２００μｌとした。３７℃で３分間予備加温したのち、ブタ膵臓由来のリパーゼ溶液５０μｌを加えて３０分間反応させ、その後２分間沸騰水浴（９０〜１００℃）に入れて反応を停止させた。別に、各サンプルにつきリパーゼ溶液に代えてトリス緩衝液を５０μｌ加え、同様の操作を行ったものを盲検として調製した。生成したオレイン酸の濃度をＮＥＦＡ Ｃ−テストワコー（和光純薬）により測定した。なお、リパーゼはトリス緩衝液に溶解し、本実験条件下で約０．７ｍｅｑ／Ｌのオレイン酸が生成する濃度に調製した。被験サンプルはＤＭＳＯを用いて溶解し希釈した。

【0075】

【数1】

【0076】

【表1】

【0077】

肥満は脂肪の合成または蓄積が分解を上回ることによって進展する。したがって肥満の予防には食事に含まれる脂肪の吸収を遅らせなければならない。食事中の脂肪は膵リパーゼによって分解され、モノグリセライドと脂肪酸となって吸収される。そこで、膵リパーゼによる脂肪の分解を阻害することで肥満を予防できると期待される。表１に示すように、ＭｅＯＨ抽出エキス、ＥｔＯＡｃ移行部およびｎ−ＢｕＯＨ移行部に有意な膵リパーゼ阻害活性が認められるので、これらは脂肪分解阻害剤として使用でき、肥満の予防に効果があると期待される。

【0078】

実施例３ ヒト胃がん細胞（ＭＫＮ４５）を用いた細胞増殖抑制作用試験
実施例１で得られたアッサムチャ花部のＭｅＯＨ抽出エキス、ＥｔＯＡｃ移行部、ｎ−ＢｕＯＨ移行部、Ｈ_２Ｏ移行部について、次に示す方法により胃がん細胞増殖抑制作用試験を行った。

【0079】

［胃がん細胞増殖抑制作用試験］
理化学研究所から購入したＭＫＮ４５を、１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１００ｕｎｉｔ／ｍｌペニシリンＧ及び１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含むＲＰＭI−１６４０培地（Ｓｉｇｍａ社製）で培養（５％ＣＯ_２、３７°Ｃ）した。次に細胞培養用９６ウェル平底マイクロプレート（住友ベークライト社製）に、７．５×１０^３ｃｅｌｌｓ（１００μｌ ｍｅｄｉｕｍ／ｗｅｌｌ）ずつ播種し、２４時間培養した。培地に被験物質を含む培地（１００μｌ、ＤＭＳＯ終濃度：０．１％）を添加して、さらに４８時間培養（５％ＣＯ_２、３７°Ｃ）した。

【0080】

培養後、５ｍｇ／ｍｌの３−（４，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２Ｈ−ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ（ＭＴＴ、ＰＢＳ（−）溶液）を２０μｌ／ｗｅｌｌ添加し、４時間培養した。培地を除去した後、生成したｆｏｒｍａｚａｎを０．０４Ｍ ＨＣｌ含有２−プロパノール（１００μｌ／ｗｅｌｌ）で溶解し、その後マイクロプレートリーダーにてＯ．Ｄ．値を測定し、以下の式により増殖抑制率を求めた（測定波長：５７０ｎｍ、参照波長：６５５ｎｍ）。

【0081】

【数2】

【0082】

【表2】

【0083】

表２に示すように、ＭｅＯＨ抽出エキス、ＥｔＯＡｃ移行部およびｎ−ＢｕＯＨ移行部に有意な胃がん細胞増殖抑制作用が認められるので、これらは胃がん増殖抑制剤剤として使用でき、胃がんの予防及び増悪の抑制に効果があると期待される。

【0084】

実施例４ アッサムチャ花部の含有成分の単離
実施例１で得られたｎ−ＢｕＯＨ移行部溶出部を、順相Ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌカラムクロマトグラフィー［２．４ｋｇ、クロロホルム（ＣＨＣｌ_３）→ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ＝７：３：１（下層）→６５：３５：１０→ＭｅＯＨ］にて分画し、画分１（１０．３ｇ）、画分２（２．９ｇ）、画分３（３１．６ｇ）、画分４（２２．９ｇ）、画分５（５．１ｇ）を得た。

【0085】

画分３（３０．３ｇ）を逆相ＯＤＳカラムクロマトグラフィー［６００ｇ、ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ＝（２０：８０）→（３０：７０）→（３５：６５）→（４０：６０）→（５０：５０）→（６０：４０）→（７０：３０）→（８０：２０）→（９０：１０）→ＭｅＯＨ→Ａｃｅｔｏｎｅ］にて分画し、画分３−１（２０．７ｍｇ）、画分３−２（１８．６ｇ）、画分３−３（１．３ｇ）、画分３−４（４１９．７ｍｇ）、画分３−５（１．３ｇ）、画分３−６（２３８．２ｇ）、画分３−７（５６８．２ｍｇ）、画分３−８（１．０ｇ）、画分３−９（５．７ｇ）、画分３−１０（２８２．９ｍｇ）、画分３−１１（１７２．３ｍｇ）、画分３−１２（３９２．２ｍｇ）、画分３−１３（８９９．４ｍｇ）、画分３−１４（４７１．２ｍｇ）、画分３−１５（１４８．３ｍｇ）、画分３−１６（８０．５ｍｇ）、画分３−１７（３０．７ｍｇ）を得た。

【0086】

さらに画分３−８（１．０ｇ）についてＨＰＬＣ［ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ：酢酸（ＡｃＯＨ）＝７０：３０：１］を用いて分離精製した結果、化合物１（３５．４ｍｇ、０．０００７％）、化合物２（７７．８ｍｇ、０．０１４％）、化合物３（１８．０ｍｇ、０．００３％）、化合物４（２９．６ｍｇ、０．００５％）、化合物５（１９．９ｍｇ、０．００４％）、化合物６（２３．２ｍｇ、０．００４％）、化合物９（５８．６ｍｇ、０．０１１％）、化合物１０（６２．５ｍｇ、０．０１１％）、化合物１１（２２．４ｍｇ、０．００４％）を単離した。

【0087】

また、画分３−９についてＨＰＬＣ［ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ：酢酸（ＡｃＯＨ）＝７０：３０：１］を用いて分離精製した結果、化合物１２（１７．１ｍｇ、０．０１９％）、化合物７（１８．１ｍｇ、０．０１８％）、化合物８（３４．７ｍｇ、０．０３５％）、化合物１３（４９．３ｍｇ、０．０４９％）、化合物１４（１７．１ｍｇ、０．０１８％）を単離した。

【0088】

上記のようにして得られた化合物１〜８及び１２について、^１Ｈ−ＮＭＲ、^１３Ｃ−ＮＭＲ、質量分析（ＭＳスペクトル）、旋光度、ＩＲスペクトル等の測定を行い、その測定結果に基づき構造決定を行ったところ、
化合物１は、前記構造式（１）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンI（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ I）と命名する）、
化合物２は、前記構造式（２）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ II）と命名する）、
化合物３は、前記構造式（３）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンIII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ III）と命名する）、
化合物４は、前記構造式（４）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンIＶ（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ IＶ）と命名する）、
化合物５は、前記構造式（５）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンＶ（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ Ｖ）と命名する）、
化合物６及び化合物１２は、前記構造式（６）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンＶI（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶI）と命名する）、
化合物７は、前記構造式（７）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンＶII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶII）と命名する）、
化合物８は、前記構造式（８）で表されるサポニン化合物（新規トリテルペン配糖体：フローラアッサムサポニンＶIII（Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶIII）と命名する）であることが確認された。

【0089】

又、化合物９及び化合物１３は、前記構造式（９）で表されるサポニン化合物（既知トリテルペン配糖体：フローラティーサポニンＤ（Ｆｌｏｒａｔｈｅａｓａｐｏｎｉｎ Ｄ））、
化合物１０及び化合物１４は、前記構造式（１０）で表されるサポニン化合物（既知トリテルペン配糖体：フローラティーサポニンＧ（Ｆｌｏｒａｔｈｅａｓａｐｏｎｉｎ Ｇ））であることが確認された。いずれもＹｏｓｈｉｋａｗａ Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｏｌ．５５，ｐｐ５９８−６０５（２００７）に記載の化合物である。

【0090】

又、化合物１１は、前記構造式（１１）で表され、Ｆｕ Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．，ｖｏｌ．７４，ｐｐ１０６６−１０７２（２０１１）に記載のサポニン化合物（既知トリテルペン配糖体：ゴルドノシドＪ（Ｇｏｒｄｏｎｏｓｉｄｅ Ｊ））であることが確認された。

【0091】

なお、旋光度［α］_Ｄ、質量分析、ＵＶスペクトル、ＩＲスペクトル及び^１Ｈ−ＮＭＲ及び^１３Ｃ−ＮＭＲ等は、以下に示す測定装置、条件により行った。

【0092】

［旋光度］
［α］_Ｄ 堀場高感度ＳＥＰＡ−３００デジタルポラリメーター（ｌ＝０．５）（堀場製作所社製）を用いて測定した。

【0093】

［質量分析］
高分解能質量分析（高分解能ＦＡＢ−ＭＳ）及び質量分析（ＦＡＢ−ＭＳ）は、日本電子社製ＪＭＳ−ＳＸ １０２型質量分析装置を用いて測定した。

【0094】

［ＩＲスペクトル］
Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＦＴ−ＩＲ ＤＲ−８０００ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（島津製作所社製）を用いて測定した。

【0095】

［核磁気共鳴スペクトル］
^１Ｈ−ＮＭＲ及び^１３Ｃ−ＮＭＲは、日本電子社製のＪＮＭ−ＥＸ ２７０（２７０ＭＨｚ）、ＪＮＭ−ＬＡ ５００（５００ＭＨｚ）及びＪＮＭ−ＥＣＡ ６００（６００ＭＨｚ）を用い、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を内部標準として用いて、測定した。

【0096】

［高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）］
ポンプはＳｈｉｍａｄｚｕ ＬＣ−６ＡＤを、示差屈折計検出器は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＲＩＤ−１０Ａを、紫外可視分光光度計検出器は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＳＰＤ−１０Ａを用いた。（いずれも島津製作所社製）

【0097】

以下、実施例４で得られた新規サポニン化合物１〜８についての、外観、旋光度［α］_Ｄ、質量分析、ＵＶスペクトル、ＩＲスペクトル、^１Ｈ−ＮＭＲの測定結果を示す。

【0098】

［化合物１：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ I］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２１−１８．３°（ｃ＝０．８０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９２６、１７３４、１７１７、１６９８、１０７８ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １４１５．６４５８［Ｃ_６６Ｈ_１０４Ｏ_３１Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １４１５．６４５９］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８３、１．０２、１．０８、１．１９、１．２７、１．２８、１．８２（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２９、２４、３０、２３、２７−Ｈ_３）、１．６２、２．０５（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、１５−Ｈ_２）、１．６３（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−４−Ｈ_３）、１．９２（３Ｈ、ｓ、２２−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、１．９３（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−５−Ｈ_３）、３．２６（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．９８（２Ｈ、ｍ、２８−Ｈ_２）、４．７４（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．７６（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１’’’’’−Ｈ）、４．９７（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ、１’−Ｈ）、５．７１（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ、１’’−Ｈ）、５．８９（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、６．０５（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．１０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２２−Ｈ）、６．１４（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．５８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２１−Ｈ）、７．０９（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−３−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表３に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １４１５ （Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0099】

［化合物２：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ II］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２１−１２．２°（ｃ＝０．８０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９２５、１７３４、１７１６、１６９７、１０７８ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １４１５．６４６２［Ｃ_６６Ｈ_１０４Ｏ_３１Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １４１５．６４５９］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８０、０．９８、１．０４、１．１２、１．２１、１．２９、１．８０（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２９、２４、３０、２３、２７−Ｈ_３）、１．６０、２．０５（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、１５−Ｈ_２）、１．９１（３Ｈ、ｓ、２２−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、１．９６（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−５−Ｈ_３）、２．０５（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−４−Ｈ_３）、３．２２（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．４４（２Ｈ、ｍ、２８−Ｈ_２）、４．７５（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．７７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１’’’’’−Ｈ）、４．９３（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ、１’−Ｈ）、５．３３（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、５．６８（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ、１’’−Ｈ）、５．９２（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−３−Ｈ）、６．０２（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．０３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、２２−Ｈ）、６．１３（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．５７（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、２１−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表４に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １４１５ （Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0100】

［化合物３：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ III］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２２−１１．６°（ｃ＝０．５０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９３２、１７３４、１７１６、１７００、１０７８ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２６９．５８８５［Ｃ_６０Ｈ_９４Ｏ_２７Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １２６９．５８８０］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８３、１．０１、１．０８、１．１２、１．１６、１．３４、１．８６（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２４、２９、２３、３０、２７−Ｈ_３）、１．６６（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−４−Ｈ_３）、１．７７（３Ｈ、ｓ、２２−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、１．９７（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−５−Ｈ_３）、３．２５（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．４７、３．７３（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、２８−Ｈ_２）、４．１６（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．４０（１Ｈ、ｍ、１５−Ｈ）、４．９２（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、１’−Ｈ）、５．５１（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、５．８７（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ、１’’−Ｈ）、６．０６（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．１５（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．２８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２２−Ｈ）、６．６１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２１−Ｈ）、７．１３（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−３−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表５に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２６９ （Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0101】

［化合物４：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ IＶ］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２１−２１．３°（ｃ＝０．８０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９３２、１７３４、１７１６、１６９８、１０７８ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２６９．５８７６［Ｃ_６０Ｈ_９４Ｏ_２７Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １２６９．５８８０］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８３、１．０１、１．１２、１．１９、１．２６、１．３３、１．８４（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２９、２４、２３、３０、２７−Ｈ_３）、１．６６（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−４−Ｈ_３）、１．７８（３Ｈ、ｓ、２２−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、１．９７（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−５−Ｈ_３）、３．２８（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．４７、３．７３（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、２８−Ｈ_２）、４．１９（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．４０（１Ｈ、ｍ、１５−Ｈ）、４．９６（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、１’−Ｈ）、５．５１（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、５．７１（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ、１’’−Ｈ）、６．０６（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．１５（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．２３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２２−Ｈ）、６．６０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２１−Ｈ）、７．１３（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−３−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表６に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２６９ （Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0102】

［化合物５：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ Ｖ］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２２−１５．８°（ｃ＝１．１０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９３２、１７３４、１７１７、１７００、１０７８ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２６９．５８９０［Ｃ_６０Ｈ_９４Ｏ_２７Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １２６９．５８８０］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８２、１．００、１．１１、１．１９、１．２６、１．３１、１．８５（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２９、２４、２３、３０、２７−Ｈ_３）、１．７８（３Ｈ、ｓ、２２−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、２．０３（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−５−Ｈ_３）、２．１３（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−４−Ｈ_３）、３．２３（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．４６、３．７２（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、２８−Ｈ_２）、４．１９（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．４０（１Ｈ、ｍ、１５−Ｈ）、４．９６（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、１’−Ｈ）、５．５０（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、５．７１（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ、１’’−Ｈ）、６．００（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−３−Ｈ）、６．０６（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．１４（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．２３（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２２−Ｈ）、６．６２（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２１−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表７に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２６９（Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0103】

［化合物６：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶI］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２２−１３．２°（ｃ＝０．８０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９２６、１７３４、１７１９、１７００、１０７６ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２５３．５９４１［Ｃ_６０Ｈ_９４Ｏ_２６Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １２５３．５９３１］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８０、０．８５、１．１０、１．１１、１．１８、１．３４、１．８３（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２４、２９、２３、３０、２７−Ｈ_３）、１．６３、１．９０（１Ｈｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、１５−Ｈ_２）、１．６７（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−４−Ｈ_３）、１．９２（３Ｈ、ｓ、２２−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、１．９７（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−５−Ｈ_３）、３．２５（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．４１、３．６５（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、２８−Ｈ_２）、４．４７（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．９１（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、１’−Ｈ）、５．４２（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、５．８６（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ、１’’−Ｈ）、６．０８（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．１５（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．２８（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２２−Ｈ）、６．６１（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２１−Ｈ）、７．１１（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−３−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表８に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２５３ （Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0104】

［化合物７：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶII］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２２−２２．７°（ｃ＝０．８０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９２６、１７３２、１７１７、１７００、１０７８ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２５３．５９１７［Ｃ_６０Ｈ_９４Ｏ_２６Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １２５３．５９３１］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８０、０．８５、１．０９、１．１０、１．１８、１．３２、１．８５（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２４、２９、２３、３０、２７−Ｈ_３）、１．６６、１．８８（１Ｈｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、１５−Ｈ_２）、１．９４（３Ｈ、ｓ、２２−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、２．０３（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−５−Ｈ_３）、２．１３（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−４−Ｈ_３）、３．２７（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．４０、３．６５（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、２８−Ｈ_２）、４．４８（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．９１（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’−Ｈ）、５．４１（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、５．８６（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、１’’−Ｈ）、６．００（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ａｎｇ−３−Ｈ）、６．０９（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．１７（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．２４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２２−Ｈ）、６．６４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１０．３Ｈｚ、２１−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表９に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２５３ （Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0105】

［化合物８：Ｆｌｏｒａａｓｓａｍｓａｐｏｎｉｎ ＶIII］
・性状：無色無晶形粉末
・旋光度：［α］_Ｄ^２２−３５．９°（ｃ＝０．２０、ＭｅＯＨ）
・ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：ν_ｍａｘ ３４００、２９２５、１７３４、１７１６、１６９８、１０７８ｃｍ^−１
・高分解能ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２５３．５９３５［Ｃ_６０Ｈ_９４Ｏ_２６Ｎａの計算値： （Ｍ＋Ｎａ）^＋：ｍ／ｚ １２５３．５９３１］
・^１Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ：０．８３、０．９０、１．０８、１．１２、１．１７、１．２８、１．９０（３Ｈ ｅａｃｈ、ａｌｌ ｓ、２５、２６、２４、２９、２３、３０、２７−Ｈ_３）、１．６８、１．９０（１Ｈｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、１５−Ｈ_２）、１．９３（３Ｈ、ｓ、２８−Ｏ−Ａｃ−Ｈ_３）、１．９６（３Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−５−Ｈ_３）、１．７０（３Ｈ、ｂｒ ｄ−ｌｉｋｅ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−４−Ｈ_３）、３．２３（１Ｈ、ｄｄ−ｌｉｋｅ、３−Ｈ）、３．２５、４．２１（１Ｈ ｅａｃｈ、ｂｏｔｈ ｍ、２８−Ｈ_２）、４．４２（１Ｈ、ｍ、１６−Ｈ）、４．８６（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’−Ｈ）、５．４０（１Ｈ、ｂｒ ｓ、１２−Ｈ）、５．４４（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．４Ｈｚ、２２−Ｈ）、５．９０（１Ｈ、ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、１’’−Ｈ）、６．０８（１Ｈ、ｓ、１’’’’−Ｈ）、６．１８（１Ｈ、ｄ−ｌｉｋｅ、１’’’−Ｈ）、６．４０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝９．４Ｈｚ、２１−Ｈ）７．０１（１Ｈ、ｍ、２１−Ｏ−Ｔｉｇ−３−Ｈ）
・^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）δ_Ｃ：表１０に記載
・ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｉｏｎ ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ １２５３ （Ｍ＋Ｎａ）^＋

【0106】

化合物１〜化合物８についての、^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ピリジン−ｄ_５）の測定結果を、それぞれ以下の表３〜表１０に示す。なお、表３〜表１０中、Ａｃはアセチルを、Ｔｉｇはチグロイルを、Ａｎｇはアンゲロイルを、ＧｌｃＡはβ−Ｄ−グルクロノピラノシルを、Ｇｌｃはβ−Ｄ−グルコピラノシル、Ｇａｌはβ−Ｄ−ガラクトピラノシル、Ａｒａ（ｐ）はα−Ｌ−アラビノピラノシル、Ｒｈａはα−Ｌ−ラムノピラノシルを表す。

【0107】

【表3】

【0108】

【表4】

【0109】

【表5】

【0110】

【表6】

【0111】

【表7】

【0112】

【表8】

【0113】

【表9】

【0114】

【表10】

【0115】

実施例５ サポニン成分の膵リパーゼ阻害作用
実施例４で得られた化合物１〜８及び化合物１１について、膵リパーゼ阻害作用の検討を実施例２と同様な方法で行った。その結果を表１１に示す。その結果より明らかなように、化合物１、化合物２、化合物３、化合物４、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８及び化合物１１に阻害活性が認められた。特に、化合物５、化合物６、化合物７、化合物８及び化合物１１には、強い阻害活性が認められた。

【0116】

【表11】

【0117】

表１１中のＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎ（％）は、２値平均値を表している。

【0118】

実施例６ サポニン成分のヒト胃がん増殖抑制作用
実施例４で得られた化合物１〜化合物４及び化合物６〜化合物１１について、胃がん細胞増殖抑制作用の検討を実施例３と同様な方法で行った。その結果を表１２、１３に示すが、表１２、１３より明らかなように、化合物３、化合物４、化合物６、化合物７、化合物８、化合物９、化合物１０及び化合物１１に有意な胃がん細胞増殖抑制作用が認められた。

【0119】

【表12】

【0120】

【表13】