特開 2017-193505 ２型糖尿病治療剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2017-193505(P2017-193505A)

(43)【公開日】2017年10月26日

(54)【発明の名称】２型糖尿病治療剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/4453 20060101AFI20170929BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20170929BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/4453

   A61P3/10

【審査請求】未請求

【請求項の数】5

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】8

(21)【出願番号】特願2016-84467(P2016-84467)

(22)【出願日】2016年4月20日

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り 平成２７年１０月２２日付、日経バイオテク−ＯＮＬＩＮＥ−において発表

(71)【出願人】

【識別番号】504159235

【氏名又は名称】国立大学法人 熊本大学

(74)【代理人】

【識別番号】100102015

【弁理士】

【氏名又は名称】大澤 健一

(72)【発明者】

【氏名】富澤 一仁

(72)【発明者】

【氏名】魏 范研

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC21

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA05

4C086ZC35

(57)【要約】

【課題】 本発明の課題は、Ｃｄｋａｌ１遺伝子が変異した膵臓β細胞における、ｔＲＮＡＬｙｓ（ＵＵＵ）の修飾異常によるインスリンの合成異常を原因の一つとする２型糖尿病患者に対する新規の治療薬を提供することにある。
【解決手段】 本発明により、（Ｓ（＋））-エペリゾンまたはその医薬的に許容される塩を有効成分として含有する２型糖尿病治療剤が提供される。
【選択図】図３

【特許請求の範囲】

【請求項1】

（Ｓ（＋））-エペリゾンまたはその医薬的に許容される塩を有効成分として含有する２型糖尿病治療剤。

【請求項2】

前記医薬的に許容される塩が、塩酸、硝酸、メタンスルホン酸、酢酸、レブリン酸、乳酸、フルビプロフェン、ケトプロフェン、シュウ酸、フマル酸、およびマレイン酸からなる群より選ばれるいずれか一つの酸との塩である請求項１に記載の２型糖尿病治療剤。

【請求項3】

実質的に（Ｒ（−））-エペリゾンまたはその塩を含有しない、請求項１または２に記載の２型糖尿病治療剤。

【請求項4】

前記２型糖尿病が、Ｃｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病である、請求項１〜３のいずれか一つに記載の２型糖尿病治療剤。

【請求項5】

プロインスリンからインスリンへの変換を活性化することを特徴とする請求項１〜４のいずれか一つに記載の２型糖尿病治療剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、Ｃｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病患者に対する治療剤に関する。

【背景技術】

【0002】

２型糖尿病は中年以降における最も一般的な生活習慣病の１つであり、我が国を含めた多くの国においてその罹患率が上昇している。２型糖尿病患者の多くは、遺伝的な要因に、環境因子（肥満、運動不足、脂肪の多い食生活など）が加わって発症すると考えられている。従って、糖尿病に関する遺伝因子を事前に診断し、発症前に糖尿病に罹患する可能性が高いと分かった人に対しては食事や運動面において注意することによって、糖尿病の発症を未然に防ぐことが可能となる。

【0003】

近年、ゲノム全体にわたる相関解析により、一塩基多型（ＳＮＰ）と呼ばれる、配列決定されたゲノムにおいて高頻度に検出される遺伝的変異の検出が可能となっている。２型糖尿病においても、いくつかのＳＮＰsが既に報告されている。Ｃｄｋａｌ１（Cdk5 regulator subunit associated protein 1-like1）遺伝子内に存在する特異的なＳＮＰ変異は、２型糖尿病発症リスクを高める遺伝子変異として、インスリンの分泌の低下ならびに２型糖尿病の発症と有意に相関することが知られている。

【0004】

インスリンは、膵臓β細胞内でまず、プレプロインスリンとして合成される。プレプロインスリンは、シグナルペプチド、Ｂ鎖、Ｃ−ペプチド、およびＡ鎖から成る。このプレプロインスリンが２カ所のジスルフィド結合により折りたたまれ、シグナルペプチドが切断されたものが、プロインスリンである。更に、プロインスリンからＣ−ペプチド部分が切断され、残った部分がインスリンとなる。このＣ−ペプチドとＡ鎖の切断部位にリジン残基が存在する。

【0005】

ｔＲＮＡはｍＲＮＡの情報を解読してタンパク翻訳において中心的な役割を有する小分子ＲＮＡである。一方、ｔＲＮＡは最も翻訳後化学修飾されるＲＮＡとしても知られている。特にアンチコドンに位置する３４番の塩基およびアンチコドンすぐ近傍の３７番の塩基における化学修飾は、翻訳の正確性を制御する重要な役割を有する。

【0006】

２型糖尿病の危険因子であるＣｄｋａｌ１分子はリジンに対応するｔＲＮＡの３７番アデノシンをチオメチル化する。遺伝的あるいは環境的な要因によりＣｄｋａｌ１の発現量や活性が低下すると、リジンｔＲＮＡのチオメチル化が低下する。その結果、膵β細胞においてインスリンなどタンパクの翻訳精度が低下し、プロセッシングできない異常インスリンが産生される。このことから、ｔＲＮＡＬｙｓ（ＵＵＵ）の修飾異常によるインスリンの合成異常が、２型糖尿病の発症に寄与していると考えられている。日本人を含めアジア圏において、４人に１人の割合でＣｄｋａｌ１遺伝子に変異が認められることから、多くの糖尿病患者においてタンパクの翻訳精度が低下し、インスリン分泌が低下していることが推測されている。

【0007】

現在、糖尿病治療薬としては、様々な治療薬が市販されており、具体的には、スルホニル尿素薬、グリニド薬、ビグアナイド薬、チアゾリジン薬、α−グルコシダーゼ阻害剤、ＤＰＰ−４阻害剤、ＧＬＰ−１受動態作動薬、ＳＧＬＴ−２阻害薬を挙げることができる。
これらの、現在市販されている抗糖尿病薬は、インスリン分泌の促進あるいはインスリンの感受性を改善すること、腸管での糖吸収を制御すること、または、血中グルコースの濃度を制御することで糖尿病の症状を改善する。しかし、上記の抗糖尿病薬はインスリンの翻訳に対して全く作用しないため、Ｃｄｋａｌ１遺伝子変異に起因する翻訳異常およびインスリン分泌低下に対して作用する新しい糖尿病治療薬の開発が必要とされている。

【0008】

本発明者らは以前、翻訳時において読み枠が誤翻訳でずれることによりルシフェラーゼが翻訳されるスクリーニング系を構築した。そして、同スクリーニング系を用い、翻訳の正確性を向上させる低分子化合物のスクリーニングを行った。その結果、翻訳の正確性を向上させる抗糖尿病効果を有する低分子化合物として、エペリゾン、フルオキセチン、およびエルビテグラビアを見いだし、特許を出願している（特許文献１）。エペリゾンは、従来、筋弛緩剤として知られていたが、抗糖尿病効果を有することが本発明者らにより初めて報告されたものである。エペリゾンには、不斉炭素原子が存在し、光学異性体が存在する。現在筋弛緩剤として市販されている塩酸エペリゾンは、光学異性体の混合物（ラセミ体）である。また、試薬として販売されているエペリゾンまたはその塩も混合物（ラセミ体）である。単一の光学異性体に単離されたエペリゾンについては、その薬理活性も含めて報告がない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】ＷＯ２０１４／１５６１９６

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

本発明の課題は、Ｃｄｋａｌ１遺伝子が変異した膵臓β細胞における、ｔＲＮＡＬｙｓ（ＵＵＵ）の修飾異常によるインスリンの合成異常を原因の一つとする２型糖尿病患者に対する新規の治療薬を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0011】

現在市販されている糖尿病治療薬と比べて、エペリゾンは、高抗糖尿病効果以外に、翻訳改善効果も有することから、翻訳異常を伴う２型糖尿病患者に対して高い治療効果が得られる。しかし、エペリゾンは光学異性体の混合物であるため、その薬効がまだ十分に発揮されていない可能性がある。そこで、本発明者らは、エペリゾンの光学異性体を分離し、ラセミ体の状態とは異なる状態にあるエペリゾンが高い翻訳改善効果および抗糖尿病効果を示すことを見いだし、本発明を完成させた。
本発明は以下の態様を含む。
［１］（Ｓ（＋））-エペリゾンまたはその医薬的に許容される塩を有効成分として含有する２型糖尿病治療剤。
［２］前記医薬的に許容される塩が、塩酸、硝酸、メタンスルホン酸、酢酸、レブリン酸、乳酸、フルビプロフェン、ケトプロフェン、シュウ酸、フマル酸、およびマレイン酸からなる群より選ばれるいずれか一つの酸との塩である上記［１］に記載の２型糖尿病治療剤。
［３］実質的に（Ｒ（−））-エペリゾンまたはその塩を含有しない、上記［１］または［２］に記載の２型糖尿病治療剤。
［４］前記２型糖尿病が、Ｃｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病である、上記［１］〜［３］のいずれか一つに記載の２型糖尿病治療剤。
［５］プロインスリンからインスリンへの変換を活性化することを特徴とする上記［１］〜［４］のいずれか一つに記載の２型糖尿病治療剤。

【発明の効果】

【0012】

本発明により、新規な２型糖尿病治療剤が提供される。本発明により提供される２型糖尿病治療剤は、（Ｓ（＋））−エペリゾンを有効成分として含むものであり、ラセミ体であるエペリゾンに比べ有意な翻訳改善効果、インスリン分泌促進効果、および血糖値抑制効果を示す。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1】エペリゾン光学異性体の分離を示す図である。分離開始から４．２分後に現れたピークはＲ（−）体を示し、５．６分後に現れたピークはＳ（＋）体を示す。

【図2】ルシフェラーゼ活性を指標にした系を用いて、ラセミ体エペリゾン（Ｅｐｅ）、およびエペリゾンの光学異性体であるＲ（−）体とＳ（＋）体のそれぞれの翻訳改善効果を示した図である。Ｎ＝４，＊＊Ｐ＜０．０１（ＡＮＯＶＡ）。

【図3】Ｃｄｋａｌ１欠損マウスの膵臓β細胞由来の細胞株を用いて、ラセミ体エペリゾン（Ｅｐｅ）、および、エペリゾンの光学異性体であるＲ（−）体とＳ（＋）体のそれぞれのインスリン翻訳の改善効果を示した図である。Ｃｏｎは対照（溶媒のみ）である。ｎ＝４。＊Ｐ＜０．０５（ＡＮＯＶＡ）。

【発明を実施するための形態】

【0014】

以下、本発明を、例示的な実施態様を例として、本発明の実施において使用することができる好ましい方法および材料とともに説明する。
なお、文中で特に断らない限り、本明細書で用いるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されるのと同じ意味をもつ。また、本明細書に記載されたものと同等または同様の任意の材料および方法は、本発明の実施において同様に使用することができる。
また、本明細書に記載された発明に関連して本明細書中で引用されるすべての刊行物および特許は、例えば、本発明で使用できる方法や材料その他を示すものとして、本明細書の一部を構成するものである。

【0015】

エペリゾン（Ｅｐｅｒｉｓｏｎｅ：1-(4-ethylphenyl)-2-methyl-3-(piperidin-1-yl)propan-1-one）は、中枢性骨格筋弛緩薬として古くから使用されてきた化合物である。
エペリゾンは、Ｒ（−）体とＳ（＋）体の混合物であるラセミ体からなり、市販品として入手可能である。医薬品として用いられているものも、塩酸エペリゾンのラセミ体である。エペリゾンの塩としては、塩酸塩、リン酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、酢酸塩、レブリン酸塩、乳酸塩、フルビプロフェン塩、ケトプロフェン塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、またはマレイン酸などが例示されるが、好ましくは、塩酸塩、リン酸塩、またはメタンスルホン酸塩であり、特に好ましくは、塩酸塩である。

【0016】

本発明に用いることができる、エペリゾンのＳ（＋）体は、常法に従い、エペリゾンのラセミ体から分離することができる。本発明に用いることができる（Ｓ（＋））−エペリゾンの調製方法は、ラセミ体混合物から分離することが好ましく用いられるが、それに限定されず、（Ｓ（＋））−エペリゾンのみを合成できる合成方法により取得した（Ｓ（＋））−エペリゾンも含む。また、エペリゾンの各種塩のＳ（＋）体も、本発明のおいて用いることができる。例えば、これに限定されないが、（Ｓ（＋））−塩酸エペリゾンを挙げることができる。

【0017】

本発明における「Ｃｄｋａｌ１遺伝子が変異する」とは、Ｃｄｋａｌ１遺伝子のＤＮＡあるいはＲＮＡの１つもしくは複数のヌクレオチドが別の塩基に置換する、Ｃｄｋａｌ１遺伝子のＤＮＡあるいはＲＮＡに１つもしくは複数のヌクレオチドが挿入する、又はＣｄｋａｌ１遺伝子のＤＮＡあるいはＲＮＡの１つもしくは複数のヌクレオチドが欠失することを意味する。これらヌクレオチドの置換、挿入、あるいは欠失は、Ｃｄｋａｌ１遺伝子のＤＮＡあるいはＲＮＡの複数の箇所で起こってもよく、異なる変異が同時に起こってもよい。

【0018】

本発明の２型糖尿病の治療剤、特にＣｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病の治療剤や、治療キット、あるいは、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化剤や、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化キットに、さらに、各種スルホニル尿素薬、各種グリニド系薬、各種ビグアナイド系薬、各種α−グルコシダーゼ阻害薬、各種チアゾリン誘導体、各種ＧＬＰ−１受容体作動薬、各種ＤＰＰ−４阻害剤、各種ＳＧＬＴ−２阻害剤等の糖尿病治療薬の１種又は２種以上を組み合わせて併用することができる。本発明の２型糖尿病の治療剤や、治療キット、あるいは、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化剤や、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化キットは、これら既存の糖尿病治療薬とは作用メカニズムが異なるため、２型糖尿病の治療剤との組合せを用いると、相加的な、場合によっては相乗的な効果が期待できる。

【0019】

本発明の２型糖尿病の治療剤、特にＣｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病の治療剤や、治療キットの各成分や、治療学的薬剤の組合せの各成分、あるいは、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化剤や、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化キットの各成分の投与経路としては、舌下投与も含む経口投与、あるいは、点鼻投与、吸入投与、点滴を含む静脈内投与、パップ剤等による経皮投与、座薬、又は経鼻胃管、経鼻腸管、胃漏チューブ若しくは腸漏チューブを用いる強制的経腸栄養法による投与等の非経口投与などを挙げることができる。なお、治療学的薬剤の組合せにおける２型糖尿病の治療剤の投与経路は、各薬剤において既に認められている投与経路を採用することが好ましい。

【0020】

本発明の２型糖尿病の治療剤、特にＣｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病の治療剤や、治療キットの各成分の剤形、あるいは、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化剤や、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化キットの各成分の剤形としては、上記投与経路に応じて適宜決定することができるが、注射剤、点鼻剤、点滴剤、錠剤、カプセル剤、細粒剤、散在、液剤、シロップ等に溶解した水剤、パップ剤、座剤等を挙げることができる。本発明の２型糖尿病の治療剤治療剤や、治療キットの各成分、あるいは、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化剤や、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化キットの各成分は医薬用途の他、錠剤やカプセル剤のサプリメントの形態とすることもできる。また特に、嚥下することが困難な高齢者等には、口中において速やかな崩壊性を示す崩壊錠の形態や、経鼻胃管投与に適した液剤の形態が好ましい。

【0021】

本発明の２型糖尿病の治療剤、特にＣｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病の治療剤や、治療キット、あるいは、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化剤や、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化キットを調製するために、必要に応じて、薬理学的に許容し得る担体、賦形剤、希釈剤、添加剤、崩壊剤、結合剤、被覆剤、潤滑剤、滑走剤、滑沢剤、風味剤、甘味剤、可溶化剤、溶剤、ゲル化剤、栄養剤等を添加することができ、具体的には、水、生理食塩水、動物性脂肪および油、植物油、乳糖、デンプン、ゼラチン、結晶性セルロース、ガム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリアルキレングリコール、ポリビニルアルコール、グリセリンを例示することができる。

【0022】

本発明の２型糖尿病の治療剤、特にＣｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下した２型糖尿病の治療剤や、治療キット、あるいは、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化剤や、プロインスリンからインスリンへの変換の活性化キットは、ヒトの他、家畜・家禽類やペットなど獣医分野でも使用することができる。かかる治療剤等の投与の量・頻度・期間としては、対象がヒトの場合、２型糖尿病患者の年齢、体重、症状等により異なるが、（Ｓ（＋））−エペリゾンまたはその医薬的に許容される塩の投与量としては、エペリゾン換算で、成人一人当たり、０．０１ｍｍｏｌ〜２５ｍｍｏｌ／日、好ましくは０．０２５ｍｍｏｌ〜７．５ｍｍｏｌ／日、より好ましくは０．０７５ｍｍｏｌ〜５．５ｍｍｏｌ／日、さらに好ましくは０．２ｍｍｏｌ〜２ｍｍｏｌ／日、特に好ましくは０．４５ｍｍｏｌ〜１．３ｍｍｏｌ／日を挙げることができ、投与頻度としては、一日一回〜複数回（例えば、３回）の投与又は点滴等による連続的投与を例示することができる。投与期間は、当該技術分野の薬理学者や臨床医が既知の方法により決定することもできるが、その際に血糖値や血中インスリン量を指標にすることもできる。

【実施例】

【0023】

以下、実施例により、本発明を具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。

【0024】

（実施例１）エペリゾン光学異性体の分離
エペリゾンを１ ｍｇ／ｍＬ（和光より購入）になるようにＨＰＬＣ用溶媒（アセトニトリル（和光）およびジエチルアミン（和光）の混合液）に溶かし、その１０μＬをＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＺ−Ｈカラム（ダイセル）に添加した。同溶媒を１ ｍＬ／ｍｉｎの流速でカラムに流し、４．２分後の第一ピーク（Ｒ（−）体）および５．６分後の第２ピーク（Ｓ（＋））体を、それぞれ分取した。溶出パターンを図１に示す。

【0025】

（実施例２）エペリゾン光学異性体の翻訳改善効果
ホタルルシフェラーゼ遺伝子（Ｆｉｒｅｆｌｙ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）の開始コドンの３’側にフェニルアラニンに対応するコドンＡＡＡを挿入し、その直後にストップコドンであるＴＡＡを挿入した。フレームシフトが生じれば、ストップコドンであるＴＡＡのＴが読み飛ばされ、ＡＡＣが新たなコドンとなるため、ホタルルシフェラーゼ遺伝子が翻訳される。一方、フレームシフトが起こらなければ、ホタルルシフェラーゼの翻訳がＴＡＡで停止する。ホタルルシフェラーゼはｐＡＣＹＣＤｕｅｔ−１プラスミドベクターのＭｕｌｔｉ−Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｉｔｅ １ （ＭＣＳ１）領域に挿入した。一方、ウミシイタケルシフェラーゼ（Ｒｅｎｉｌｌａ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）遺伝子は対照としてＭｕｌｔｉ−Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｉｔｅ ２（ＭＣＳ２）領域に挿入した。

【0026】

大腸菌においてチオメチル化を行う酵素はＣＤＫＡＬ１と相同性を持つＭｉａＢである。本実施例ではＭｉａＢを欠損させた翻訳異常を検出する上記のコンストラクトを導入し大腸菌に形質転換した。形質転換済みの大腸菌コロニーを１ ｍｌ のＬＢ培地でＯＤ＞０．８以上まで震盪培養した後、最終濃度が１０ μＭとなるようにして、ＤＭＳＯのみのコントロール、エペリゾンのラセミ体、Ｒ（−）体、およびＳ（＋）体を培地に加えた。さらに１時間振盪培養した後、大腸菌を遠心分離により集菌し、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．４， ５ ｍＭ ＭｇＣｌ_２， １０Ｕ Ｌｙｓｏｚｙｍｅを５００ μＬ 加え、氷上で３０分静置した。次に、ドライアイスと温浴で急冷および急解凍を行い、細胞を破砕した。１０，０００ｇ，４ ℃で５ 分遠心し、上清をＤｕａｌ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）でホタルルシフェラーゼとウミシイタケルシフェラーゼの活性測定を行った。翻訳の精度は、ホタルルシフェラーゼの値をウミシイタケルシフェラーゼの値で補正した値を用いた。なお、対照値として溶媒のみを加えた時の値を用いた。
結果を図２に示す。エペリゾン（ラセミ体）と比較し、Ｓ（＋）体は翻訳精度を有意に向上させることが判った。また、エペリゾンのＲ（＋）体もラセミ体と同様の活性を示した。

【0027】

（実施例３）エペリゾン光学異性体によるインスリン翻訳改善効果
Ｃｄｋａｌ１欠損マウスの膵β細胞由来の株細胞（１万個）を２４ウェル培養プレートに撒き、溶媒（ＤＭＳＯ）のみのコントロール、エペリゾンのラセミ体、Ｒ（−）体およびＳ（＋）体をそれぞれ１０ μＭになるように培地（ＤＭＥＭ／１０％ＦＢＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に添加し、一晩培養した。低ブドウ糖リンガー液（２．８ ｍＭ Ｇｌｕｃｏｓｅ，１１５ ｍＭ ＮａＣｌ，５ ｍＭ ＫＣｌ，１０ ｍＭ ＮａＨＣＯ_３，２．５ ｍＭ ＭｇＣｌ_２，２．５ ｍＭ ＣａＣｌ_２，および２０ ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ ７．４，０．１％ ＢＳＡ）で３０分培養した後、高ブドウ糖リンガー液（１６．７ ｍＭ Ｇｌｕｃｏｓｅを含む）を加え、３０分刺激した。その後リンガー液を回収した。液中に分泌されたインスリンおよびプロインスリンの量をＥＬＩＳＡ法（Ｓｈｉｂａｙａｇｉ製キット：レビスインスリン−マウスＴ、レビスプロインスリン−マウス）により測定した。測定方法は、同キットの方法に従った。
結果を図３に示す。エペリゾン（ラセミ体）と比べ、Ｓ（＋）体投与は有意にインスリン翻訳改善効果を示した一方、Ｒ（−）体投与は、統計的な有意差が認められなかったが、エペリゾン（ラセミ体）と比べて改善傾向を示した（Ｐ＝０．０５９）。即ち、エペリゾンのラセミ体に比べ、エペリゾンのＳ（−）体およびＲ（＋）体のいずれもより強い活性をもつこと、およびエペリゾンのＳ（−）体は、Ｒ（＋）体が存在しない状態に維持された場合に、より顕著なインスリン翻訳改善効果を示すことが判った。

【0028】

（実施例４）動物個体における光学異性体の抗糖尿病効果
エペリゾン（ラセミ体）、およびエペリゾンの光学異性体（Ｒ（−）体とＳ（＋）体）をそれぞれ生理食塩水に溶かし、膵臓β細胞特異的Ｃｄｋａｌ１欠損マウス（雄、３０週齢）に投与した。エペリゾンは、１ ｍｇ／Ｋｇ体重になるように投与した。光学異性体は０．５ ｍｇ／Ｋｇ体重になるように投与した。毎日午後４時に経腹投与を行い、６日間連続投与を行った。糖負荷試験を行うために、化合物の最終投与日の午後８時から餌を除去し、１２時間絶食を行った。ブドウ糖を生理食塩水に溶かし、１ ｇ／ｋｇ体重となるように腹腔内に投与した。血糖値は、経時的に尾静脈から出血させ、簡易型血糖測定機ＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ（Ｒｏｃｈｅ）を用いて血中グルコース濃度を測定した。
これにより、エペリゾン（ラセミ体）投与群と比べ、Ｓ（＋）体およびＲ（−）体投与群のマウスの耐糖能が改善されたことが確認できた。

【0029】

上記の詳細な記載は、本発明の目的および対象を単に説明するものであり、添付の特許請求の範囲を限定するものではない。添付の特許請求の範囲から離れることなしに、記載された実施態様に対しての、種々の変更および置換は、本明細書に記載された教示より当業者にとって明らかである。

【産業上の利用可能性】

【0030】

本発明により、膵臓β細胞のＣｄｋａｌ１遺伝子が変異することによりインスリン分泌能が低下している２型糖尿病患者に対し、新規治療薬を提供することが可能となる。

【図1】

【図2】

【図3】