特開 2018-168098 骨髄止血剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2018-168098(P2018-168098A)

(43)【公開日】2018年11月1日

(54)【発明の名称】骨髄止血剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/765 20060101AFI20181005BHJP

   A61P 7/04 20060101ALI20181005BHJP

   A61P 19/00 20060101ALI20181005BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20181005BHJP

   A61K 38/08 20060101ALI20181005BHJP

   A61K 47/02 20060101ALI20181005BHJP

   A61K 9/06 20060101ALI20181005BHJP

   C07K 7/06 20060101ALN20181005BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/765ZNA

   A61P7/04

   A61P19/00

   A61K45/00

   A61K38/08

   A61K47/02

   A61K9/06

   C07K7/06

【審査請求】未請求

【請求項の数】6

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】17

(21)【出願番号】特願2017-66904(P2017-66904)

(22)【出願日】2017年3月30日

(71)【出願人】

【識別番号】504139662

【氏名又は名称】国立大学法人名古屋大学

(71)【出願人】

【識別番号】301023238

【氏名又は名称】国立研究開発法人物質・材料研究機構

(74)【代理人】

【識別番号】100064908

【弁理士】

【氏名又は名称】志賀 正武

(74)【代理人】

【識別番号】100108578

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 詔男

(74)【代理人】

【識別番号】100094400

【弁理士】

【氏名又は名称】鈴木 三義

(72)【発明者】

【氏名】蟹江 慧

(72)【発明者】

【氏名】緒方 藍歌

(72)【発明者】

【氏名】成田 裕司

(72)【発明者】

【氏名】加藤 竜司

(72)【発明者】

【氏名】荏原 充宏

(72)【発明者】

【氏名】宇都 甲一郎

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA06

4C076BB21

4C076CC14

4C076DD26

4C076EE41

4C076FF70

4C084AA19

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA17

4C084BA23

4C084MA55

4C084ZA531

4C084ZA532

4C084ZA962

4C086AA01

4C086AA02

4C086FA02

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA04

4C086MA27

4C086MA28

4C086MA55

4C086NA14

4C086ZA53

4C086ZA96

4H045AA30

4H045BA15

4H045EA20

4H045FA20

(57)【要約】

【課題】止血効果を有し、かつ止血箇所において骨が再生しやすく、取り扱い性に優れる骨髄止血剤の提供。
【解決手段】下記一般式（１）で表される構造を有する化合物を含む、骨髄止血剤。
［化１］

（式（１）中、Ｒ^１は炭化水素基であり、Ａは下記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは下記一般式（ｂ）で表される基であり、ｓは０以上の数であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。）
［化２］

（式（ａ）中、Ｒ^２は置換基を有していてもよい炭素数１〜５のアルキレン基である。式（ｂ）中、Ｒ^３は水素原子または炭化水素基であり、Ｒ^４は炭化水素基である。）
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記一般式（１）で表される構造を有する化合物を含む、骨髄止血剤。

【化1】

（式（１）中、Ｒ^１は炭化水素基であり、Ａは下記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは下記一般式（ｂ）で表される基であり、ｓは０以上の数であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。）

【化2】

（式（ａ）中、Ｒ^２は置換基を有していてもよい炭素数１〜５のアルキレン基である。）

【化3】

（式（ｂ）中、Ｒ^３は水素原子または炭化水素基であり、Ｒ^４は炭化水素基である。）

【請求項2】

前記一般式（１）中、ｍ：ｎ＝３０：７０〜７０：３０である、請求項１に記載の骨髄止血剤。

【請求項3】

前記化合物が、１つ以上のヒドロキシ基を有するアルコールの前記ヒドロキシ基の少なくとも一部が下記一般式（２）で表される置換基で置換された化合物である、請求項１または２に記載の骨髄止血剤。

【化4】

（式（２）中、Ａは前記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは前記一般式（ｂ）で表される基であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。）

【請求項4】

前記化合物が下記一般式（３）で表される化合物である、請求項３に記載の骨髄止血剤。

【化5】

（式（３）中、Ｒ^１は炭化水素基であり、Ｒ^５は水素原子または炭化水素基であり、Ａは前記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは前記一般式（ｂ）で表される基であり、ｓは０以上の数であり、ｔは１〜４であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。）

【請求項5】

有機粉体および無機粉体からなる群より選ばれる１種以上をさらに含む、請求項１〜４の何れか一項に記載の骨髄止血剤。

【請求項6】

骨化促進剤をさらに含む、請求項１〜５の何れか一項に記載の骨髄止血剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、骨髄止血剤に関する。

【背景技術】

【0002】

外科的処置等により骨を切断したり破砕したりすると、骨の断面から出血することがある。そこで、骨の断面に骨髄止血剤（骨蝋またはボーンワックスともいう。）を塗り込み、止血処置が行われている。

【0003】

従来、骨髄止血剤としては、蜜蝋を主成分とするものが知られている（非特許文献１参照）。
また、蜜蝋に代わる材料が開発されており、例えばポリエチレングリコール／マイクロファイバーコラーゲン複合体が骨髄止血剤としての機能を有することが報告されている（非特許文献２参照）。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0004】

【非特許文献1】Ｃ． Ｓｃｈｏｎａｕｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｓｐｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ，（２００４），１３，ｐ．８９−９６

【非特許文献2】Ｄｅｎｎｉｓ Ｐ． Ｏｒｇｉｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，（１９９８），３９（３），ｐ．３５８−３６３

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

しかしながら、従来の骨髄止血剤は止血効果を有するものの、止血箇所において骨が再生しにくかった。
そのため、骨髄止血剤には、止血効果はもちろんのこと、止血箇所において骨が再生しやすいことが求められる。加えて、骨髄止血剤は使用前に指等で混練して適度な硬さに調製された後に、止血箇所に塗り込むため、取り扱い性が良好であることも求められる。

【0006】

本発明は上記事情に鑑みてなされたもので、止血効果を有し、かつ止血箇所において骨が再生しやすく、取り扱い性に優れる骨髄止血剤を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明は、以下の態様を有する。
［１］ 下記一般式（１）で表される構造を有する化合物を含む、骨髄止血剤。

【0008】

【化1】

【0009】

式（１）中、Ｒ^１は炭化水素基であり、Ａは下記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは下記一般式（ｂ）で表される基であり、ｓは０以上の数であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。

【0010】

【化2】

【0011】

式（ａ）中、Ｒ^２は置換基を有していてもよい炭素数１〜５のアルキレン基である。

【0012】

【化3】

【0013】

式（ｂ）中、Ｒ^３は水素原子または炭化水素基であり、Ｒ^４は炭化水素基である。

【0014】

［２］ 前記一般式（１）中、ｍ：ｎ＝３０：７０〜７０：３０である、［１］に記載の骨髄止血剤。
［３］ 前記化合物が、１つ以上のヒドロキシ基を有するアルコールの前記ヒドロキシ基の少なくとも一部が下記一般式（２）で表される置換基で置換された化合物である、［１］または［２］に記載の骨髄止血剤。

【0015】

【化4】

【0016】

式（２）中、Ａは前記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは前記一般式（ｂ）で表される基であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。

【0017】

［４］ 前記化合物が下記一般式（３）で表される化合物である、［３］に記載の骨髄止血剤。

【0018】

【化5】

【0019】

式（３）中、Ｒ^１は炭化水素基であり、Ｒ^５は水素原子または炭化水素基であり、Ａは前記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは前記一般式（ｂ）で表される基であり、ｓは０以上の数であり、ｔは１〜４であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。

【0020】

［５］ 有機粉体および無機粉体からなる群より選ばれる１種以上をさらに含む、［１］〜［４］の何れか１つに記載の骨髄止血剤。
［６］ 骨化促進剤をさらに含む、［１］〜［５］の何れか１つに記載の骨髄止血剤。

【発明の効果】

【0021】

本発明によれば、止血効果を有し、かつ止血箇所において骨が再生しやすく、取り扱い性に優れる骨髄止血剤を提供できる。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】化合物（３−１）〜（３−５）の生体内での分解の状態を示す写真である。

【図2】（ａ）は例２−１における貯蔵弾性率（Ｇ’）および損失弾性率（Ｇ’’）の結果を示すグラフであり、（ｂ）は例２−２における貯蔵弾性率（Ｇ’）および損失弾性率（Ｇ’’）の結果を示すグラフである。

【図3】試験３における骨髄液の漏れ量の結果を示すグラフである。

【図4】試験４における大腿骨の機械的強度の結果を示すグラフである。

【図5】試験４における仮骨の形成領域の結果を示すＣＴ写真である。

【図6】試験４における仮骨の形成領域の結果を示すグラフである。

【図7】試験５における胸骨の間隙領域の結果を示すＣＴ写真である。

【図8】試験５における胸骨の間隙領域の結果を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0023】

本発明の骨髄止血剤は、骨の断面からの出血を止めるために用いられる止血剤である。
本発明の骨髄止血剤は、以下に示す化合物（１）を含む。骨髄止血剤は、有機粉体および無機粉体からなる群より選ばれる１種以上（以下、単に「粉体」ともいう。）、骨化促進剤をさらに含むことが好ましい。

【0024】

＜化合物（１）＞
化合物（１）は、下記一般式（１）で表される構造を有する化合物である。

【0025】

【化6】

【0026】

式（１）中、Ｒ^１は炭化水素基であり、Ａは下記一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは下記一般式（ｂ）で表される基であり、ｓは０以上の数であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。

【0027】

式（１）中、Ｒ^１は炭化水素基である。Ｒ^１の炭素数は１〜１０が好ましく、１〜６がより好ましい。Ｒ^１の炭化水素基としては、直鎖もしくは分岐鎖のアルキレン基が挙げられる。

【0028】

【化7】

【0029】

式（ａ）中、Ｒ^２は置換基を有していてもよい炭素数１〜５のアルキレン基である。アルキレン基は、置換基を有していてもよいし、有していなくてもよい。
置換基としては、炭素数１〜１０の直鎖または分岐鎖のアルキル基、炭素数２〜１０の直鎖または分岐鎖のアルケニル基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、ヒドロキシ基、アミノ基、炭素数１〜１０のアルキルアミノ基、カルボキシ基、アルキン基、歪環化アルキン基、メルカプト基、アルデヒド基、アジド基、アルコキシアミノ基、マレイミド基、フリル基などが挙げられる。

【0030】

【化8】

【0031】

式（ｂ）中、Ｒ^３は水素原子または炭化水素基であり、Ｒ^４は炭化水素基である。
Ｒ^３およびＲ^４の炭素数は、それぞれ１〜１０が好ましく、１〜６がより好ましい。Ｒ^３およびＲ^４の炭化水素基としては、それぞれ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基、または直鎖もしくは分岐鎖のアルケニル基が挙げられる。
Ｒ^３としては水素原子が好ましく、Ｒ^４としては炭素数１〜１０の直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基が好ましい。

【0032】

ｓは０以上の数であり、０〜２０が好ましく、１〜１０がより好ましく、１〜６がさらに好ましい。
ｍは０〜８００であり、１〜５００が好ましく、２〜３００がより好ましく、３〜１５０がさらに好ましく、５〜１００が特に好ましい。
ｎは１〜７００であり、１〜５００が好ましく、２〜３００がより好ましく、３〜１００がさらに好ましく、５〜１００が特に好ましい。
ｍ＋ｎ＝５〜１０００が好ましく、１０〜５００がより好ましく、３０〜３００がさらに好ましく、５０〜１５０が特に好ましい。
ｍ：ｎ＝０：１００〜９９：１が好ましく、１０：９０〜９０：１０がより好ましく、２０：８０〜８０：２０がさらに好ましく、３０：７０〜７０：３０が特に好ましく、４０：６０〜６０：４０が最も好ましい。特に、ｍ：ｎ＝３０：７０〜７０：３０の範囲内であれば、生体内での骨髄止血剤の分解性がより向上する。化合物（１）中のｍとｎの比率は、ＮＭＲにより測定できる。

【0033】

ＡとＢが混在する場合、これらは交互に混在していてもよいし、ランダム状に混在してもよいし、ブロック状に混在してもよい。また、グラフト状に混在していてもよい。すなわち、式（１）中の［（Ａ）_ｍ／（Ｂ）_ｎ］はＡとＢが交互、ランダム状、ブロック状およびグラフト状のいずれかに混在することを意味している。
例えば、ＡとＢがランダム状に混在していれば、化合物（１）の融点が低くなる傾向にあり、ワックスのような手触りの骨髄止血剤が得られる。ＡとＢがブロック状に混在していれば、化合物（１）の融点が高くなる傾向にあり、プラスチックのような手触りの骨髄止血剤が得られる。取り扱い性を考慮すると、ＡとＢはランダム状に混在していることが好ましい。
ＡとＢの混在状態は重合方法により容易に制御でき、ＡとＢの混在比率はｍ＋ｎの範囲を調製することで容易に制御できる。

【0034】

化合物（１）は、１つ以上のヒドロキシ基を有するアルコールの前記ヒドロキシ基の少なくとも一部が下記一般式（２）で表される置換基で置換された化合物（以下、「化合物（２）」ともいう。）であることが好ましい。

【0035】

【化9】

【0036】

式（２）中、Ａは一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは一般式（ｂ）で表される基であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。
式（２）中のＡ、Ｂ、ｍおよびｎは、それぞれ一般式（１）中のＡ、Ｂ、ｍおよびｎと同様であり、好ましい態様も同じである。

【0037】

１つ以上のヒドロキシ基を有するアルコールとしては、１価アルコール、２価アルコール、３価アルコール、４価アルコール、５価以上の多価アルコールが挙げられる。
１価のアルコールとしては、例えばメタノール、エタノール、１−ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、１−プロパノール、２−プロパノール等の炭素数１〜２０の脂肪族アルコール；フェノール、クレゾール、ベンジルアルコール、ナフタノール、アントロール等の炭素数６〜３０の芳香族アルコールなどが挙げられる。
２価のアルコールとしては、例えばエチレングリコール、ネオペンチルグリコール、１，２−プロパンジオール、１，３−プロパンジオール、１，３−ブタンジオール、１，４−ブタンジオール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、ポリエチレングリコール、アゾベンゼンジオール（４，４’−ジヒドロキシアゾベンゼン、２，２’−ジヒドロキシアゾベンゼン等）、メソゲンジオールなどが挙げられる。
３価アルコールとしては、例えばグリセリン、トリメチロールプロパン、１，２，４−ブタントリオール、１，２，５−ペンタントリオール、２−メチル−１，２，３−プロパントリオール、２−メチル−１，２，４−ブタントリオール、１，２，４−ベンゼントリオール、カルシトリオール（１，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール）、トリエタノールアミン、ブチルトリヒドロキシシランなどが挙げられる。
４価アルコールとしては、例えばペンタエリスリトール、１，４−ソルビタンなどが挙げられる。
５価以上の多価アルコールとしては、キシリトール、ソルビトール、マンニトール、ジペンタエリスリトール、トリペンタエリスリトール、キトサン、シクロデキストリン、キチン、セルロース、ヒアルロン酸、アミドエタノール表面基を有するデンドリマー（もしくはデンドロン）、ポリビニルアルコール等のヒドロキシル基含有ポリマーなどが挙げられる。

【0038】

これらアルコールは１種を単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、分岐鎖状のアルコールが好ましい。分岐鎖状のアルコールは、同じ分子量の直鎖状のアルコールに比べて化合物（２）の粘性が低くなる傾向にある。よって、骨髄止血剤を指等で混練して使用する際によりベタつきにくくなり、取り扱い性により優れる。
本発明において「分岐鎖状のアルコール」とは、主鎖から分岐した側鎖を１つ以上有するアルコールを意味し、該側鎖の１つ以上にもヒドロキシ基を有しているアルコールが好ましい。

【0039】

化合物（２）の具体例としては、例えば下記一般式（３）で表される化合物（以下、「化合物（３）」ともいう。）が挙げられる。

【0040】

【化10】

【0041】

式（３）中、Ｒ^１は炭化水素基であり、Ｒ^５は水素原子または炭化水素基であり、Ａは一般式（ａ）で表される基であり、Ｂは一般式（ｂ）で表される基であり、ｓは０以上の数であり、ｔは１〜４であり、ｍは０〜８００であり、ｎは１〜７００である。
式（３）中のＲ^１、Ａ、Ｂ、ｓ、ｍおよびｎは、それぞれ一般式（１）中のＲ^１、Ａ、Ｂ、ｓ、ｍおよびｎと同様であり、好ましい態様も同じである。

【0042】

式（３）中、Ｒ^５は炭化水素基である。Ｒ^５の炭素数は１〜１０が好ましく、１〜６がより好ましい。Ｒ^５の炭化水素基としては、直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基、または直鎖もしくは分岐鎖のアルケニル基が挙げられる。
Ｒ^５としては炭素数１〜１０の直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基が好ましい。
式（３）中、ｔは１〜４であり、２〜４が好ましく、３〜４がより好ましい。ｔは前記アルコールの価数に相当する。

【0043】

化合物（１）は、例えば以下のようにして製造される。
まず、アルコール開始剤および触媒の存在下、一般式（１）中のＢの由来となる化合物（以下、「化合物（Ｂ）」ともいう。）を重合する。一般式（１）中のｍが１以上の場合は、一般式（１）中のＡの由来となる化合物（以下、「化合物（Ａ）」ともいう。）と化合物（Ｂ）とを共重合する。
次いで、得られたポリマー（化合物（１））を含む反応溶液を良溶媒で希釈し、希釈液を貧溶媒に滴下してポリマーを再沈殿させて化合物（１）を回収する。

【0044】

アルコール開始剤としては、先に例示した１つ以上のヒドロキシ基を有するアルコールが挙げられる。
化合物（Ａ）としては、例えばε−カプロラクトン、α−アセトラクトン、β−プロピオラクトン、γ−ブチロラクトン、δ−バレロラクトンなどが挙げられる。
化合物（Ｂ）としては、例えばＤ−ラクチド、Ｌ−ラクチド、ＤＬ−ラクチドなどが挙げられる。
触媒としては、例えばオクチル酸スズ、スズアルコキシド等のスズ系触媒；アルミニウムイソプロポキシド、アルミニウムアルコキシド等のアルミニウム系触媒；マグネシウムアルコキシド等のマグネシウム系触媒；テトラブトキシチタン等のチタン系触媒などが挙げられる。
良溶媒としては、得られるポリマーに応じて決定すればよいが、例えばテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、酢酸エチルなどが挙げられる。
貧溶媒としては、得られるポリマーに応じて決定すればよいが、例えばヘキサン、ジエチルエーテル、メタノールなどが挙げられる。
これらアルコール開始剤、化合物（Ａ）、化合物（Ｂ）、触媒、良溶媒および貧溶媒は、それぞれ１種を単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。

【0045】

化合物（Ａ）と化合物（Ｂ）の割合（Ａ：Ｂ）は、Ａ：Ｂ＝０：１００〜９９：１が好ましく、１０：９０〜９０：１０がより好ましく、２０：８０〜８０：２０がさらに好ましく、３０：７０〜７０：３０が特に好ましく、４０：６０〜６０：４０が最も好ましい。
重合温度は、５０〜２００℃が好ましく、１００〜１５０℃がより好ましい。
重合時間は、１〜４８時間が好ましく、１０〜２４時間がより好ましい。
重合の際には、化合物（Ａ）が液体の場合、化合物（Ｂ）とアルコール開始剤が化合物（Ａ）に溶解していることが好ましい。化合物（Ａ）が液体でない場合や、化合物（Ｂ）およびアルコール開始剤が化合物（Ａ）に溶解しにくい場合は、化合物（Ａ）、化合物（Ｂ）およびアルコール開始剤が可溶な有機溶媒を併用してもよい。

【0046】

このようにして得られる化合物（１）は、１つ以上のヒドロキシ基を有するアルコールの前記ヒドロキシ基の少なくとも一部が一般式（２）で表される置換基で置換されたポリマー、すなわち化合物（２）に相当する。例えば、１つ以上のヒドロキシ基を有するアルコールとして１〜４価のアルコールを用いれば、化合物（３）が得られる。

【0047】

＜粉体＞
骨髄止血剤が、化合物（１）に加えて粉体（但し、化合物（１）を除く）を含んでいれば、骨髄止血剤の粘性が低くなる傾向にある。よって、骨髄止血剤を指等で混練して使用する際によりベタつきにくくなり、取り扱い性により優れる。加えて、骨髄止血剤を用いて止血した箇所において骨がより再生しやすくなる。
粉体は、無機粉体でもよいし、有機粉体でもよい。

【0048】

粉体の体積平均粒子径は１０ｎｍ〜５００μｍが好ましく、１００ｎｍ〜４００μｍがより好ましく、１〜３００μｍがさらに好ましく、２０〜２００μｍが特に好ましく、４０〜１５０μｍが最も好ましい。粉体の体積平均粒子径が前記範囲内であれば、混合物（１）との混和性に優れる。
粉体の体積平均粒子径は、動的光散乱法より測定される。例えば粉体を分散媒に分散させ、粒子径分布測定装置を用いて体積基準の粒子径分布を測定し、得られた粒子径分布より体積平均粒子径を算出する。

【0049】

無機粉体としては、例えばハイドロキシアパタイト、β−リン酸三カルシウム、リン酸オクタカルシウムなどが挙げられる。
有機粉体としては、例えばポリ乳酸粒子、グリコール酸粒子、乳酸・グリコール酸共重合体の粒子などが挙げられる。
これら無機粉体および有機粉体は、それぞれ１種を単独で用いてもよいし、２種以上を併用してもよい。また、無機粉体と有機粉体を併用してもよい。
これら粉体の中でも、ワックス状の手触りがより得られやすく、しかも骨の再生（形成）にも優位である観点から、ハイドロキシアパタイトが好ましい。

【0050】

粉体の含有量は、化合物（１）１００質量部に対して、１０〜２５０質量部が好ましく、３０〜２００質量部がより好ましく、５０〜１５０質量部がさらに好ましい。粉体の含有量が前記下限値以上であれば、骨髄止血剤の取り扱い性がより向上する。しかし、粉体の含有量が前記上限値を超えると、取り扱い性の向上効果は頭打ちになる。

【0051】

＜骨化促進剤＞
骨髄止血剤が、化合物（１）に加えて骨化促進剤を含んでいれば、骨髄止血剤を用いて止血した箇所において骨がより再生しやすくなる。
骨化促進剤としてはペプチドが挙げられ、具体的には、８動物種、１９種のＢＭＰサブタイプの高相同性・高保存領域由来のアミノ酸配列を有するペプチドが挙げられる。このようなペプチドとしては、骨芽細胞および間葉系幹細胞に対して高増殖能力を有し、かつ、線維芽細胞に対して低増殖能力を有するペプチド（ＲＧＤ配列比較）；骨芽細胞および間葉系幹細胞に対して高骨分化（高ＡＬＰ活性）能力を有するペプチド（ＲＧＤ配列比較）などが挙げられる。これらの中でも、骨の再生促進に必要な細胞（骨芽細胞、間葉系幹細胞）に対しては選択的に増殖・骨分化能を与え、再生促進を妨げる細胞（線維芽細胞）に対しては増殖を阻害する、細胞選択的な骨化促進ペプチドが好ましく、配列番号１〜３のいずれかで表されるアミノ酸配列からなるペプチドが特に好ましい。

【0052】

骨化促進剤の含有量は、化合物（１）１００質量部に対して、０．０５〜１質量部が好ましく、０．１〜０．５質量部がより好ましく、０．１〜０．２質量部がさらに好ましい。骨化促進剤の含有量が上記範囲内であれば、骨の再生効果がより向上する。

【0053】

＜任意成分＞
骨髄止血剤は、本発明の効果を妨げない範囲内であれば、必要に応じて上述した化合物（１）、粉体および骨化促進剤以外の成分（任意成分）を含んでもよい。
任意成分としては、例えばアルギン酸等の人工骨助剤などが挙げられる。

【0054】

＜製造方法＞
化合物（１）は、そのまま骨髄止血剤として使用することもできるが、骨髄止血剤が化合物（１）に加えて、粉体、骨化促進剤および任意成分の少なくとも１つを含む場合は、これらを化合物（１）に添加し、混練することで骨髄止血剤を製造する。

【0055】

＜作用効果＞
以上説明した本発明の骨髄止血剤は、上述した特定の構造を有する化合物（１）を含む。該化合物（１）は、骨蝋（ボーンワックス）と同様に止血効果を有するので、止血処置の際に好適に使用できる。具体的には、外科的処置等により骨を切断したり破砕したりするなどして出血した箇所に、本発明の骨髄止血剤を塗り込むことで、止血することができる。
加えて、化合物（１）は適度な粘性を有するので、本発明の骨髄止血剤を指等で混練して使用する際にベタつきにくくなり、取り扱い性に優れる。しかも、化合物（１）は生体内での分解性に優れる。よって、本発明の骨髄止血剤を用いて止血した箇所において骨が再生しやすい。

【0056】

特に、本発明の骨髄止血剤がハイドロキシアパタイト等の粉体をさらに含んでいれば、取り扱い性がより良好となると共に、本発明の骨髄止血剤を用いて止血した箇所において骨がより再生しやすくなる。また、本発明の骨髄止血剤がペプチド等の骨化促進剤をさらに含んでいれば、本発明の骨髄止血剤を用いて止血した箇所において骨がより再生しやすくなる。

【実施例】

【0057】

以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

【0058】

「試験１」
＜例１−１：化合物（３−１）の製造＞
一般式（３）中、Ｒ^１＝メチレン基、Ｒ^２＝ペンチレン基、Ｒ^３＝水素原子、Ｒ^４＝メチル基、ｓ＝１、ｍ＝８０、ｎ＝２０、ｔ＝４である化合物（３−１）を以下のようにして製造した。
ε−カプロラクトンにペンタエリスリトールおよびＤＬ−ラクチドを溶解させた後、オクチル酸スズを触媒量添加し、１４０℃で２４時間反応させ（開環重合）、ポリマーを得た。得られたポリマーを含む反応溶液をＴＨＦで希釈し、得られた希釈液をヘキサンおよびジエチルエーテルの混合溶液（ヘキサン：ジエチルエーテル＝５０：５０（質量比））に滴下してポリマーを再沈殿させて、化合物（３−１）を得た。
なお、ε−カプロラクトンとＤＬ−ラクチドの比率（ｍ：ｎ）が８０：２０（ｍ＋ｎ＝１００）となるように、ε−カプロラクトンおよびＤＬ−ラクチドの使用量を調整した。また、ペンタエリスリトール１モルに対して、ε−カプロラクトンおよびＤＬ−ラクチドを合計で４００モル使用した。

【0059】

得られた化合物（３−１）を用い、以下のようにして生体内での分解試験を行った。
化合物（３−１）を指で混練して直径約１ｃｍ、厚さ約１ｍｍの円形板状に成形し、丸型サンプルとした。該丸型サンプルをラットの皮下に埋入して、所定期間経過後に取り出し、その形状の比較を行った。
分解試験前の化合物（３−１）と、分解試験開始から１、３、６ヶ月経過後の化合物（３−１）の状態を図１に示す。

【0060】

＜例１−２：化合物（３−２）の製造＞
ε−カプロラクトンとＤＬ−ラクチドの比率（ｍ：ｎ）が７０：３０（ｍ＋ｎ＝１００）となるように、ε−カプロラクトンおよびＤＬ−ラクチドの使用量を変更した以外は化合物（３−１）と同様にして、一般式（３）中、Ｒ^１＝メチレン基、Ｒ^２＝ペンチレン基、Ｒ^３＝水素原子、Ｒ^４＝メチル基、ｓ＝１、ｍ＝７０、ｎ＝３０、ｔ＝４である化合物（３−２）を製造し、生体内での分解試験を行った。結果を図１に示す。

【0061】

＜例１−３：化合物（３−３）の製造＞
ε−カプロラクトンとＤＬ−ラクチドの比率（ｍ：ｎ）が６０：４０（ｍ＋ｎ＝１００）となるように、ε−カプロラクトンおよびＤＬ−ラクチドの使用量を変更した以外は化合物（３−１）と同様にして、一般式（３）中、Ｒ^１＝メチレン基、Ｒ^２＝ペンチレン基、Ｒ^３＝水素原子、Ｒ^４＝メチル基、ｓ＝１、ｍ＝６０、ｎ＝４０、ｔ＝４である化合物（３−３）を製造し、生体内での分解試験を行った。結果を図１に示す。

【0062】

＜例１−４：化合物（３−４）の製造＞
ε−カプロラクトンを用いず、１４０℃で溶融させたＤＬ−ラクチドに、ペンタエリスリトールを添加した以外は化合物（３−１）と同様にして、一般式（３）中、Ｒ^１＝メチレン基、Ｒ^３＝水素原子、Ｒ^４＝メチル基、ｓ＝１、ｍ＝０、ｎ＝１００、ｔ＝４である化合物（３−４）を製造し、生体内での分解試験を行った。結果を図１に示す。

【0063】

＜例１−５：化合物（３−５）の製造＞
ＤＬ−ラクチドを用いなかった以外は化合物（３−１）と同様にして、一般式（３）中、Ｒ^１＝メチレン基、Ｒ^２＝ペンチレン基、ｓ＝１、ｍ＝１００、ｎ＝０、ｔ＝４である化合物（３−５）を製造し、生体内での分解試験を行った。結果を図１に示す。

【0064】

図１中、上から１段目は例１−５であり、２段目は例１−１であり、３段目は例１−２であり、４段目は例１−３であり、５段目は例１−４である。
図１の結果から明らかなように、化合物（３−１）〜（３−４）は、時間の経過とともに生体内で分解した。
対して、一般式（３）中、ｎ＝０である化合物（３−５）は、６ヶ月経過しても殆ど分解しなかった。

【0065】

「試験２」
＜例２−１＞
市販の骨蝋（ＬＵＫＥＮＳ社製、商品名「ＢＯＮＥ ＷＡＸ」）について、レオメーター（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ社製、製品名「ＭＣＲ３０１」）を用い、以下の測定条件にて貯蔵弾性率（Ｇ’）および損失弾性率（Ｇ’’）を求めた。結果を図２（ａ）に示す。
・試料寸法：幅３０ｍｍ×長さ３０ｍｍ×厚さ１ｍｍ。
・測定プレート：直径１０ｍｍのパラレルプレート。
・測定ギャップ（プレート間の距離）：試料の厚み。
・周波数：０．０１〜１００Ｈｚ。
・負荷歪み：０．１％。
・測定温度：３７℃

【0066】

＜例２−２＞
例１−３と同様にして化合物（３−３）を製造し、得られた化合物（３−３）とハイドロキシアパタイトとを質量比５０：５０で混合し、混合物（Ｘ）を得た。
得られた混合物（Ｘ）について、例２−１と同様にして貯蔵弾性率（Ｇ’）および損失弾性率（Ｇ’’）を求めた。結果を図２（ｂ）に示す。

【0067】

図２の結果から明らかなように、化合物（３−３）は、市販の骨蝋と同様の貯蔵弾性率（Ｇ’）および損失弾性率（Ｇ’’）の挙動を示した。よって、化合物（３−３）は、市販の骨蝋と同程度の取り扱い性を有することが示された。

【0068】

「試験３」
＜例３−１＞
ウサギの大腿骨に直径２ｍｍ、深さ８ｍｍの穴をあけた。穴から漏れた骨髄液の量（漏れ量）を測定した。結果を図３に示す。

【0069】

＜例３−２＞
例３−１と同様にしてウサギの大腿骨に穴をあけた。この穴に市販の骨蝋（ＬＵＫＥＮＳ社製、商品名「ＢＯＮＥ ＷＡＸ」）を塗り込んだ後、穴から漏れた骨髄液の量を測定した。結果を図３に示す。

【0070】

＜例３−３＞
例２−２と同様にして混合物（Ｘ）を得た。
例３−１と同様にしてウサギの大腿骨に穴をあけた。この穴に混合物（Ｘ）を塗り込んだ後、穴から漏れた骨髄液の量を測定した。結果を図３に示す。

【0071】

＜例３−４＞
例２−２と同様にして混合物（Ｘ）を得た。得られた混合物（Ｘ）１００質量部に対して、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなるペプチド０．２質量部添加し、混合物（Ｙ）を得た。
例３−１と同様にしてウサギの大腿骨に穴をあけた。この穴に混合物（Ｙ）を塗り込んだ後、穴から漏れた骨髄液の量を測定した。結果を図３に示す。

【0072】

図３の結果から明らかなように、例３−１では止血しなかったので、骨髄液の漏れ量は約０．６ｇであった。
対して、例３−２〜３−４では、骨髄液が殆ど漏れず、充分に止血できた。よって化合物（３−３）は、市販の骨蝋と同程度の止血の効果を有することが示された。

【0073】

「試験４」
＜例４−１＞
ウサギの大腿骨に直径２ｍｍ、深さ８ｍｍの穴をあけた。止血することなく、２週間放置した。その後、卓上形精密万能試験機（株式会社島津製作所製、製品名「オートグラフ ＡＧＳ−Ｊ ５００Ｎ」）を用い、支点間距離８ｍｍ、折り曲げ速度１０ｍｍ／分の条件で３点折り試験を行い、大腿骨の破断が起きるときの応力（最大破断荷重）を測定し、これを大腿骨の機械的強度とした。結果を図４に示す。なお、穴をあけた部分を基点として破断するように大腿骨を試験機に設置した。機械的強度が高いほど、骨が再生したことを意味する。
また、２週間放置した後の大腿骨をコンピューター断層撮影（ＣＴ）した。結果を図５に示す。また、得られた画像から仮骨の形成領域（Ｃａｌｌｕｓ ａｒｅａ）を求めた。結果を図６に示す。仮骨の形成領域が大きいほど、治癒を促進させて骨が再生したことを意味する。

【0074】

＜例４−２＞
例４−１と同様にしてウサギの大腿骨に穴をあけた。この穴に市販の骨蝋（ＬＵＫＥＮＳ社製、商品名「ＢＯＮＥ ＷＡＸ」）を塗り込んだ以外は、例４−１と同様にして２週間放置し、大腿骨の機械的強度を測定した。結果を図４に示す。また、２週間放置した後の大腿骨をコンピューター断層撮影し、画像から仮骨の形成領域を求めた。結果を図５、６に示す。さらに、１６週間放置した後の大腿骨をコンピューター断層撮影した。結果を図５に示す。

【0075】

＜例４−３＞
例２−２と同様にして混合物（Ｘ）を得た。
例４−１と同様にしてウサギの大腿骨に穴をあけた。この穴に混合物（Ｘ）を塗り込んだ以外は、例４−１と同様にして２週間放置し、大腿骨の機械的強度を測定した。結果を図４に示す。また、２週間放置した後の大腿骨をコンピューター断層撮影し、画像から仮骨の形成領域を求めた。結果を図５、６に示す。

【0076】

＜例４−４＞
例３−４と同様にして混合物（Ｙ）を得た。
例４−１と同様にしてウサギの大腿骨に穴をあけた。この穴に混合物（Ｙ）を塗り込んだ以外は、例４−１と同様にして２週間放置し、大腿骨の機械的強度を測定した。結果を図４に示す。また、２週間放置した後の大腿骨をコンピューター断層撮影し、画像から仮骨の形成領域を求めた。結果を図５、６に示す。さらに、１６週間放置した後の大腿骨をコンピューター断層撮影した。結果を図５に示す。

【0077】

図４〜６の結果から明らかなように、例４−３、４−４の場合、２週間経過後の大腿骨の機械的強度は、骨蝋などの止血剤を用いなかった例４−１と同程度であり、仮骨が形成した領域も例４−１と同程度であった。よって化合物（３−３）は、骨蝋などの止血剤を用いない場合と同程度に骨が再生しやすいことが示された。特に、ペプチドを配合した例４−４では、骨がより再生しやすく、１６週間経過すると正常な形状と構造を有した骨の再生が認められた。
対して、市販の骨蝋を用いた例４−２の場合、例４−１、４−３、４−４に比べて２週間経過後の大腿骨の機械的強度が低く、仮骨が形成した領域も狭かった。また、１６週間経過しても正常な形状と構造を有した骨の再生は認められなかった。例４−２の場合、止血箇所において骨が再生しにくかった。

【0078】

「試験５」
＜例５−１＞
ウサギの胸骨を縦に切断し、開胸した。次いで、切断した胸骨をシルク縫合糸で閉鎖し、筋組織、皮下組織および真皮を吸収糸で縫合し、閉胸した。閉胸後、２週間経過した後の胸骨をコンピューター断層撮影（ＣＴ）した。結果を図７に示す。また、得られた画像から間隙領域（Ｃｒｅｖｉｃｅ ａｒｅａ）求めた。結果を図８に示す。間隙領域が小さいほど、骨が再生したことを意味する。

【0079】

＜例５−２＞
例５−１と同様にしてウサギの胸骨を縦に切断し、開胸した。胸骨の切断表面に市販の骨蝋（ＬＵＫＥＮＳ社製、商品名「ＢＯＮＥ ＷＡＸ」）を塗り込んだ以外は、例５−１と同様にして閉胸し、２週間放置した後の胸骨をコンピューター断層撮影し、画像から間隙領域を求めた。結果を図７、８に示す。

【0080】

＜例５−３＞
例２−２と同様にして混合物（Ｘ）を得た。
例５−１と同様にしてウサギの胸骨を縦に切断し、開胸した。胸骨の切断表面に混合物（Ｘ）を塗り込んだ以外は、例５−１と同様にして閉胸し、２週間放置した後の胸骨をコンピューター断層撮影し、画像から間隙領域を求めた。結果を図７、８に示す。

【0081】

＜例５−４＞
例３−４と同様にして混合物（Ｙ）を得た。
例５−１と同様にしてウサギの胸骨を縦に切断し、開胸した。胸骨の切断表面に混合物（Ｙ）を塗り込んだ以外は、例５−１と同様にして閉胸し、２週間放置した後の胸骨をコンピューター断層撮影し、画像から間隙領域を求めた。結果を図７、８に示す。

【0082】

図７、８の結果から明らかなように、例５−３、５−４の場合、２週間経過後の胸骨の間隙領域は、骨蝋などの止血剤を用いなかった例５−１と同程度であった。よって化合物（３−３）は、骨蝋などの止血剤を用いない場合と同程度に骨が再生しやすいことが示された。
対して、市販の骨蝋を用いた例５−２の場合、例５−１、５−３、５−４に比べて胸骨の間隙領域が大きかった。例５−２の場合、止血箇所において骨が再生しにくかった。

【産業上の利用可能性】

【0083】

本発明の骨髄止血剤は、止血効果を有し、かつ止血箇所において骨が再生しやすく、取り扱い性に優れる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]