特開 2018-52883 シノリン含水結晶並びにその組成物、製法及び用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2018-52883(P2018-52883A)

(43)【公開日】2018年4月5日

(54)【発明の名称】シノリン含水結晶並びにその組成物、製法及び用途

(51)【国際特許分類】

   C07C 251/20 20060101AFI20180309BHJP

   A61K 8/44 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 5/00 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 1/00 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 1/10 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 3/00 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 15/00 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 17/04 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 19/10 20060101ALI20180309BHJP

   A61Q 1/12 20060101ALI20180309BHJP

   A61K 31/198 20060101ALI20180309BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20180309BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20180309BHJP

   A61P 31/10 20060101ALI20180309BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20180309BHJP

   A61P 17/14 20060101ALI20180309BHJP

【ＦＩ】

   C07C251/20

   A61K8/44

   A61Q5/00

   A61Q1/00

   A61Q1/10

   A61Q3/00

   A61Q15/00

   A61Q17/04

   A61Q19/10

   A61Q1/12

   A61K31/198

   A61P17/00

   A61P35/00

   A61P31/10

   A61P27/02

   A61P17/14

【審査請求】未請求

【請求項の数】10

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】15

(21)【出願番号】特願2016-192019(P2016-192019)

(22)【出願日】2016年9月29日

(71)【出願人】

【識別番号】397077760

【氏名又は名称】株式会社林原

(71)【出願人】

【識別番号】000214272

【氏名又は名称】長瀬産業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100100158

【弁理士】

【氏名又は名称】鮫島 睦

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(72)【発明者】

【氏名】伊藤 理恵

(72)【発明者】

【氏名】小出 修也

(72)【発明者】

【氏名】日野 克彦

(72)【発明者】

【氏名】松山 恵介

(72)【発明者】

【氏名】松本 淳

【テーマコード（参考）】

4C083

4C206

4H006

【Ｆターム（参考）】

4C083AC581

4C083AC582

4C083CC03

4C083CC04

4C083CC05

4C083CC12

4C083CC14

4C083CC17

4C083CC19

4C083CC25

4C083CC28

4C083CC31

4C083CC32

4C083CC33

4C083CC36

4C083CC37

4C083CC38

4C083CC39

4C083DD08

4C083DD15

4C083DD17

4C083DD23

4C083DD31

4C083DD41

4C083EE17

4C083EE18

4C083EE21

4C083EE41

4C206AA01

4C206FA53

4C206KA16

4C206MA01

4C206MA04

4C206MA33

4C206MA36

4C206MA41

4C206MA42

4C206MA43

4C206MA48

4C206MA52

4C206MA55

4C206MA63

4C206MA78

4C206MA79

4C206MA83

4C206NA03

4C206ZA33

4C206ZA89

4C206ZA92

4C206ZB26

4C206ZB32

4C206ZC52

4H006AA01

4H006AA02

4H006AA03

4H006AB12

4H006AD15

4H006BB31

(57)【要約】

【課題】本発明が解決しようとする課題は、高湿下でも吸湿し難く、保存安定性の高いシノリンの結晶を提供することである。
【解決手段】シノリン含水結晶及びシノリン含水結晶含有組成物並びにそれらの製造方法及び用途を提供する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

Ｘ線源としてＣｕＫα線を用いて得られる粉末Ｘ線回折図において、回折角（２θ）６．８°±０．２°、７．９°±０．２°、１１．８°±０．２°及び１５．８°±０．２°に回折ピークを示し、結晶水を含有することを特徴とするシノリン含水結晶。

【請求項2】

さらに回折角（２θ）１３．７°±０．２°、１６．５°±０．２°、１７．７°±０．２°、２０．６°±０．２°、２２．８°±０．２°、２３．８°±０．２°、２６．４°±０．２°、２７．６°±０．２°、４０．３°±０．２°及び４８．７°±０．２°から選択される少なくとも１つの回折角に回折ピークを示す、請求項１記載のシノリン含水結晶。

【請求項3】

結晶が三斜晶であることを特徴とする請求項１又は２記載のシノリン含水結晶。

【請求項4】

結晶の空間群がＰ_１であり、その格子定数がａ＝５．４±０．２Å、ｂ＝１１．７±０．２Å、ｃ＝１３．６±０．２Å、α＝１０５．７±０．２°、β＝９９．３±０．２°、γ＝９４．３±０．２°であることを特徴とする請求項１乃至３のいずれかに記載のシノリン含水結晶。

【請求項5】

融点が１１７±０．５℃以上１２５±０．５℃以下であることを特徴とする請求項１乃至４のいずれかに記載のシノリン含水結晶。

【請求項6】

結晶水を７質量％以上１０質量％以下含むことを特徴とする請求項１乃至５のいずれかに記載のシノリン含水結晶。

【請求項7】

請求項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶を含むことを特徴とするシノリン含水結晶含有組成物。

【請求項8】

シノリン純度が９０％以上のシノリンの水溶液を調製する工程、前記水溶液に有機溶媒を添加することなく、前記水溶液からシノリンを晶析する工程、及び、得られた結晶を回収する工程を含むことを特徴とする請求項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶の製造方法。

【請求項9】

請求項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶を種晶として用いることにより、シノリン溶液からシノリン含水結晶を晶出させ、これを採取することを特徴とする、シノリン含水結晶の製造方法。

【請求項10】

請求項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶又は請求項７記載のシノリン含水結晶含有組成物を含有する化粧品素材、医薬部外品素材、又は医薬品素材。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、シノリン含水結晶及びシノリン含水結晶含有組成物並びにそれらの製造方法及び用途に関する。

【背景技術】

【0002】

シノリンは、化学名がＮ−［３−（カルボキシメチルアミノ）−５−ヒドロキシ−５−ヒドロキシメチル−２−メトキシ−２−シクロヘキセン−１−イリデン］−Ｌ−セリンである式：

【化1】

で表わされるマイコスポリン様アミノ酸の１種である。シノリンは、海藻、海産動物、微細藻、カビ類などが生産する天然の紫外線吸収物質であり、波長３３４ｎｍ付近に強い吸収帯を有することが知られている。

【0003】

特許文献１には、ミクロコッカス ｓｐ． ＡＫ３３４株の菌体から８０％メタノールを用いて抽出した抽出物を精製することにより得た白色の紫外線吸収物質のシノリンが開示されている。ここでのシノリン精製の最終工程は０．０５％酢酸水溶液を溶媒として用いた逆相ＨＰＬＣであるが、粉末化の工程については記載がなく、生成物としては「白色の紫外線吸収物質」と記載されているのみである。

【0004】

これまで、シノリンの結晶としては、水性メタノール溶液から晶析して得られる無水結晶が知られており、広く用いられてきた。例えば非特許文献１〜４には、シノリン含有シラップ（シノリン高濃度溶液）をメタノール中で結晶化して得られた結晶が開示されており、当該結晶の融点（分解点）が１５２〜１５４℃ないし１５４〜１５６℃であることが開示されている。結晶の分解温度（融点）からこれらの結晶はシノリンの無水結晶であると同定できる。しかしながら、これらの無水結晶は、高湿下で容易に吸湿して固結するため、その保存安定性に問題があった。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特開平６−６２８７８号公報

【非特許文献】

【0006】

【非特許文献1】Botanica Marina, Vol.XXIII, pp.65-68 (1980)

【非特許文献2】北海道教育大学紀要, Vol.30, No.2, pp.271-278 (1980)

【非特許文献3】北海道教育大学紀要, Vol.38, No.1, pp.11-15 (1987)

【非特許文献4】Photomedicine Photobiology, Vol.24, pp.39-42 (2002)

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

本発明が解決しようとする課題は、高湿下でも吸湿し難く、保存安定性の高いシノリンの結晶を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明者らは、上記課題を解決すべくシノリンの結晶化条件を種々検討する中で、特定の晶析条件下、シノリンをその水溶液から晶析することにより、シノリンの２分子あたり約４分子の水分子を含有する結晶単位で、その結晶水の位置が結晶単位の中でゆらぎを有する特殊なシノリン含水結晶が得られることを見出し、意外にも当該含水結晶が高湿下においても吸湿し難く、保存安定性に優れることを確認し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、シノリン含水結晶及びシノリン含水結晶含有組成物並びにそれらの製造方法及び用途を提供する。

【発明の効果】

【0009】

本明細書におけるシノリン含水結晶は、高湿下でも吸湿し難く、保存安定性が高い。シノリン含水結晶はまた、その結晶単位中に水分子を含有した結晶構造を有することにより、吸湿性の高いシノリン無水結晶に比べて、吸湿しにくいという有利な効果を奏し得る。そのため、本明細書におけるシノリン含水結晶又はシノリン含水結晶含有組成物は、良好かつ安定な紫外線吸収効果を有する化粧品素材、医薬部外品素材、又は医薬品素材として利用することができる。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1】図１は、水溶液から晶析して得たシノリンの結晶写真を示す。

【図2】図２は、水溶液から晶析して得たシノリンの結晶の粉末Ｘ線回折パターン（Ａ）、及びシノリン無水結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す（Ｂ）。

【図3】図３は、水溶液から晶析して得たシノリンの結晶のＯＲＴＥＰ図を示す。

【発明を実施するための形態】

【0011】

本発明は、以下に例示する態様を含む。
項１．Ｘ線源としてＣｕＫα線を用いて得られる粉末Ｘ線回折図において、回折角（２θ）６．８°±０．２°、７．９°±０．２°、１１．８°±０．２°及び１５．８°±０．２°に回折ピークを示し、結晶水を含有することを特徴とするシノリン含水結晶。

【0012】

項２．さらに回折角（２θ）１３．７°±０．２°、１６．５°±０．２°、１７．７°±０．２°、２０．６°±０．２°、２２．８°±０．２°、２３．８°±０．２°、２６．４°±０．２°、２７．６°±０．２°、４０．３°±０．２°及び４８．７°±０．２°から選択される少なくとも１つの回折角に回折ピークを示す、項１記載のシノリン含水結晶。

【0013】

項３．結晶が三斜晶であることを特徴とする項１又は２記載のシノリン含水結晶。

【0014】

項４．結晶の空間群がＰ_１であり、その格子定数がａ＝５．４±０．２Å、ｂ＝１１．７±０．２Å、ｃ＝１３．６±０．２Å、α＝１０５．７±０．２°、β＝９９．３±０．２°、γ＝９４．３±０．２°であることを特徴とする項１乃至３のいずれかに記載のシノリン含水結晶。

【0015】

項５．融点が１１７±０．５℃以上１２５±０．５℃以下であることを特徴とする項１乃至４のいずれかに記載のシノリン含水結晶。

【0016】

項６．結晶水を７質量％以上１０質量％以下含むことを特徴とする項１乃至５のいずれかに記載のシノリン含水結晶。

【0017】

項７．項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶を含むことを特徴とするシノリン含水結晶含有組成物。

【0018】

項８．シノリン純度が９０％以上のシノリンの水溶液を調製する工程、前記水溶液に有機溶媒を添加することなく、前記水溶液からシノリンを晶析する工程、及び、得られた結晶を回収する工程を含むことを特徴とする項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶の製造方法。

【0019】

項９．項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶を種晶として用いることにより、シノリン溶液からシノリン含水結晶を晶出させ、これを採取することを特徴とする、シノリン含水結晶の製造方法。

【0020】

項１０．項１乃至６のいずれかに記載のシノリン含水結晶又は項７記載のシノリン含水結晶含有組成物を含有する化粧品素材、医薬部外品素材、又は医薬品素材。

【0021】

本明細書におけるシノリン含水結晶は、Ｘ線源としてＣｕＫα線を用いて得られる粉末Ｘ線回折図において、回折角（２θ）６．８°±０．２°、７．９°±０．２°、１１．８°±０．２°及び１５．８°±０．２°に回折ピークを示しうる。これらの回折ピークは、シノリン無水結晶の粉末Ｘ線回折図では認められないため、シノリン含水結晶はシノリン無水結晶と異なる。シノリン含水結晶は、さらに回折角（２θ）１３．７°±０．２°、１６．５°±０．２°、１７．７°±０．２°、２０．６°±０．２°、２２．８°±０．２°、２３．８°±０．２°、２６．４°±０．２°、２７．６°±０．２°、４０．３°±０．２°及び４８．７°±０．２°から選択される少なくとも１つの回折角に回折ピークを示し得る。

【0022】

本明細書におけるシノリン含水結晶は、結晶水を含有する結晶である。シノリン含水結晶は、好ましくはシノリン二含水結晶であり得る。本明細書におけるシノリン含水結晶はまた、結晶水を７質量％以上１０質量％以下含み得る。
本明細書における結晶水とは、結晶中に一定の化合比（モル比）で含まれている水であって、結晶内で一定の位置をしめ、結晶格子の安定化に寄与している当該結晶の構成要素を指す。結晶水は、好ましくは結晶格子の空所を満たすために一定の割合で存在する格子水であってもよい。結晶水は、好ましくはシノリンの２分子あたり約４分子の水であり得、その結晶水の位置が結晶単位の中で一定の「ゆらぎ」を有していてもよい。

【0023】

本明細書におけるシノリン含水結晶の結晶は、好ましくは三斜晶系であり得る。シノリン含水結晶の空間群は、好ましくはＰ_１であり得、その格子定数は、例えばａ＝５．４±０．２Å、ｂ＝１１．７±０．２Å、ｃ＝１３．６±０．２Å、α＝１０５．７±０．２°、β＝９９．３±０．２°、γ＝９４．３±０．２°であり得る。

【0024】

本明細書におけるシノリン含水結晶の融点は、１１７±０．５℃以上１２５±０．５℃以下の範囲であり得る。

【0025】

本明細書におけるシノリン含水結晶は、例えば微生物等を用いた生物学的合成法又は有機合成等の化学的合成法によって得られたシノリンを特定条件下において晶析することにより製造することができる。シノリンの生物学的合成法としては、例えば国際公開第２０１５／１７４４２７号パンフレットに記載の方法等が挙げられる。シノリンの化学的合成法としては、例えば国際公開第２００２／０３９９７４号パンフレットに記載の方法等が挙げられる。これらの合成法に従って得られたシノリン溶液は、常法により精製を行い、シノリン純度を高めた後、晶析に供することができる。シノリン含水結晶の晶析は、例えばシノリンの飽和水溶液（例えばシノリン純度が９０％以上、好ましくは９５％以上のシノリン水溶液）を一定の温度（例えば室温）下で静置することにより行うことができる。斯くして得られた含水結晶は、メタノール溶液、エタノール溶液等の有機溶媒からの晶析で得られる従来のシノリン無水結晶とは結晶学的に異なる結晶である。

【0026】

本明細書におけるシノリン含水結晶の製造方法は、特に制限されるものではないが、例えば以下の工程を含んでもよい：
（１）シノリン純度が９０％以上、好ましくは９５％以上のシノリンの水溶液（シノリン含有シラップ）を調製する工程、
（２）前記水溶液に有機溶媒を添加することなく、前記水溶液からシノリンを晶析する工程、及び
（３）得られた結晶を回収する工程。
シノリン含水結晶の製造方法は、さらに（２−１）工程（１）で得られたシノリン含有シラップを該シラップ当たりのシノリン含量が２５質量％以上、好ましくは３０質量％以上まで濃縮する工程を含んでもよい。シノリン含水結晶の製造方法はまた、さらに（２−２）工程（２−１）で得られた濃縮物を、一定の温度下、例えば室温下で静置する工程を含んでもよい。シノリン含水結晶の製造方法はまた、さらに（４）工程（３）で回収した結晶を自然乾燥する工程を含んでもよい。

【0027】

本明細書におけるシノリン含水結晶は、後述する実施例の方法を少なくとも二回、好ましくは三回以上繰り返して得られたシノリン含水結晶を種晶として用いることにより、より効率良く製造し得る。シノリン溶液にシノリン含水結晶を種晶として添加することによりシノリン含水結晶を晶出させる場合には、当該シノリン溶液の溶媒は、シノリン含水結晶が得られる限り特に限定されるものではなく、例えば、水であってもよく、メタノール、エタノール、及びイソプロピルアルコール等の有機溶媒であってもよく、あるいはそれらを混合したものであってもよい。

【0028】

本明細書におけるシノリン含水結晶はまた、適切な担体と適切な割合で混合してシノリン含水結晶含有組成物を構成し得る。
当該組成物に配合し得る担体としては、これらに限定されるものではないが、例えば二亜硫酸ナトリウム等の二亜硫酸塩等が挙げられる。
シノリン含水結晶含有組成物は、シノリン含水結晶と上記担体を重量比で１：２〜１：２０、好ましくは１：４〜１：６の割合で含み得る。

【0029】

本明細書におけるシノリン含水結晶又はシノリン含水結晶含有組成物は、化粧品、医薬部外品または医薬品の素材として有用であり得る。
「化粧品」および「医薬部外品」の例としては、皮膚用、頭髪用、眼用、および爪用のものが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、化粧水、乳液、ジェル、美容液、クリーム、日焼け止めクリーム、日焼け止めスプレー、紫外線吸収剤、パック、マスク、ファンデーション、おしろい、マニキュア（例えばベースコート、カラーポリッシュおよびトップコートなど）、浴用剤、制汗剤、ビタミン剤、ボディローション、シャンプー、リンス、ヘアトリートメント、ヘアコンディショナー、ヘアカラー、整髪料、ヘアトニック、および育毛剤が挙げられるが、これらに限定されない。
「医薬品」の例としては、皮膚用、頭髪用、眼用、および爪用のものが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、急性皮膚反応を予防または治療するための医薬品、皮膚老化を予防または改善するための医薬品、皮膚癌を予防または治療するための医薬品、育毛のための医薬品、眼病を予防または治療するための医薬品、および白癬を予防または治療するための医薬品が挙げられるが、これに限定されない。
「化粧品」、「医薬部外品」、または「医薬品」の形態としては、液体、クリーム、ローション、ペースト、軟膏、エマルジョン（例えば水中油型エマルジョン、油中水型エマルジョン、多重エマルジョン、ミクロエマルジョン、ＰＥＴ−エマルジョン、ピッカリング・エマルジョン等）、ゲル（例えばヒドロゲル、アルコールゲル等）、懸濁液、フォーム、スプレー、錠剤、粉末、点眼剤、点鼻剤、眼軟膏、外皮用薬、塗布剤または貼付剤などの形態が挙げられるが、これらに限定されない。
「化粧品」、「医薬部外品」、または「医薬品」は、シノリン含水結晶又はシノリン含水結晶含有組成物に加え、これらに通常用いられる、保湿剤、界面活性剤、色素、香料、防腐剤、殺菌剤、および酸化防止剤などの、補助剤および添加剤を含んでもよい。
また、本明細書におけるシノリン含水結晶又はシノリン含水結晶含有組成物は、塗料組成物やその他のコーティング剤などの紫外線吸収用組成物の活性成分としても有用である。塗料組成物やその他のコーティング剤は、スプレー法、ディッピング法、ローラーコート法、フローコーター法、流し塗り法などの当業者に公知の方法を用いて、基材（例えば金属、プラスチック、木材、セラミック、ガラス、繊維、紙等）に塗布またはコーティングされる。かかる紫外線吸収用組成物は、工業用途および医療機器等に適用することができる。例えば、かかる紫外線吸収用組成物を、コンタクトレンズおよび眼鏡レンズに適用してもよい。

【実施例】

【0030】

以下に実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。

【0031】

＜実施例１：シノリンの調製と精製＞
シノリンの調製は、国際公開第２０１５／１７４４２７号パンフレットの実施例１記載の方法に従って行った。すなわち、ストレプトマイセス・エバメチルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ａｖｅｒｍｉｔｉｌｉｓ） ＭＡ−４６８０株（ＮＩＴＥ寄託番号：ＮＢＲＣ １４８９３）に、４種のマイコスポリン様アミノ酸生合成酵素遺伝子を従来公知の方法により相同組換えにより導入し、シノリンを生産する微生物を調製した。得られた微生物を２０ｍＬのＡＶＭ培地にて、２８℃で４８時間振盪培養し、前培養液とした。次いで、前培養液を３基のジャーファーメンター（容量１０Ｌ）に入れた各６ＬのＴＳＢｔ培地にそれぞれ６ｍＬ添加し、２８℃で２週間通気撹拌培養した。培養終了後、得られた培養液をろ過することにより除菌し、１４．４Ｌの培養上清を得た。得られた培養上清のシノリン濃度は２．０ｇ／Ｌであった。培養上清にアセトン３３Ｌを加えて生じた沈殿をろ別した後、ろ液を約１．４Ｌになるまで減圧濃縮した。陽イオン交換樹脂ＰＫ２１８（三菱化学社）１０Ｌを充填し、予めナトリウムイオンを水素イオンに置換しておいたカラムに、前記濃縮ろ液をチャージし、脱イオン水３００Ｌで溶出してシノリン画分を回収した。さらに回収したシノリン含有溶液を、活性炭「白鷺Ａ−５」（大阪ガスケミカル社）を充填したカラム４．５Ｌにチャージしてシノリンを吸着させ、脱イオン水９０Ｌでカラムを洗浄した後、５０％エタノール３０Ｌでシノリンを溶出させた。シノリン画分を回収し０．７８Ｌまで減圧濃縮した。得られたシノリン水溶液のシノリン濃度は３１ｇ／Ｌ、シノリン純度は９９．８％であった。
なお、シノリン濃度は、下記条件によるＨＰＬＣ分析において保持時間約８．２５分のシノリンのピーク面積を算出し検量線と比較する事により求めた。また、シノリン純度は、下記条件によるＨＰＬＣ分析において全ピーク面積に対するシノリンのピーク面積の割合として求めた。
＜ＨＰＬＣ分析条件＞
カラム： ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＯＤＳ−ＡＱ Ｓ−５μＭ、１２ｎｍ
２５０×４．６ｍｍＩ．Ｄ．
流 速： ０．５ｍＬ／分
温 度： ３０℃
溶離液： ０．１％ギ酸水溶液
検 出： 紫外可視吸光度検出器（波長３３４ｎｍ）

【0032】

＜実施例２：シノリンの結晶の調製＞
従来のシノリン無水結晶とは異なるシノリンの結晶を見出すことを目的として、晶析温度、シノリン濃度などシノリンの結晶化条件の探索を行った。
その結果、実施例１で得たシノリン水溶液０．７６Ｌを、エバポレーターを用いて、該シノリン水溶液当たりのシノリン含有濃度が３５質量％まで濃縮し、室温で一晩静置することにより、水溶液からシノリンを晶析することに成功した。得られたシノリンの結晶を回収し、自然乾燥することにより、シノリンの結晶８．７ｇを得た。得られたシノリンの結晶の写真を図１に示す。
なお、前記方法で得られたシノリンの結晶と従来公知のシノリン無水結晶とを比較するため、実施例１で得たシノリン水溶液１６ｍＬを浴温４０℃でエバポレーターを用いて１．３ｇになるまで濃縮し、エタノール０．８ｍＬを添加して５℃に冷却することにより、シノリン無水結晶を析出させた後、得られた結晶を回収し、減圧乾燥することにより、０．２２ｇのシノリン無水結晶を得た。

【0033】

＜実施例３：水溶液から晶析したシノリンの結晶の融点＞
水溶液から晶析したシノリンの結晶とシノリン無水結晶との異同を確認することを目的として、融点の測定を行った。
実施例２で水溶液から晶析したシノリンの結晶を自動融点測定装置（商品名「ＭＰ７０」、メトラー・トレド社販売）に供し、結晶の融点を測定した。また、対照として、別途調製したシノリン無水結晶についても同様に測定を行った。
その結果、水溶液から晶析したシノリンの結晶は、その融点が１１７〜１２５℃であり、シノリン無水結晶の融点である１５１〜１５４℃とは大きく異なっていたことから、従来のシノリン無水結晶とは異なる結晶であることが示唆された。

【0034】

＜実施例４：水溶液から晶析したシノリンの結晶の粉末Ｘ線回折パターンの測定＞
水溶液から晶析したシノリンの結晶とシノリン無水結晶との異同を確認することを目的として、粉末Ｘ線回折パターンの測定を行った。
実施例２で水溶液から晶析したシノリンの結晶を乳鉢ですり潰し、粉末化した後、得られた結晶粉末約５０ｍｇをシリコン製無反射板に乗せ、市販の反射光方式による粉末Ｘ線回折装置（商品名「Ｘ’ Ｐｅｒｔ Ｐｒｏ ＭＰＤ」、スペクトリス株式会社製）を用い、Ｃｕ対陰極から放射される特性Ｘ線であるＣｕＫα線（波長：１．５４０５オングストローム）を照射し、粉末Ｘ線回折パターンを測定した。また、対照として、別途調製したシノリン無水結晶についても同様に測定を行った。水溶液から晶析したシノリンの結晶およびシノリン無水結晶の粉末Ｘ線回折パターンをそれぞれ図２の（Ａ）および（Ｂ）に示す。
図２から明らかなように、水溶液から晶析したシノリンの結晶は、少なくとも回折角（２θ）６．８°、７．９°、１１．８°、及び１５．８°付近にシノリン無水結晶には認められない特徴的なピークを示し、シノリン無水結晶と全く異なる粉末Ｘ線回折パターンを示したことから、従来のシノリン無水結晶とは異なる結晶であることが示唆された。

【0035】

＜実施例５：水溶液から晶析したシノリンの結晶の元素分析＞
水溶液から晶析したシノリンの結晶の元素組成を確認することを目的として、元素分析を行った。
実施例２で水溶液から晶析したシノリンの結晶を２ｍｇ秤取し、元素分析装置（商品名「２４００ ＣＨＮＳ／Ｏ Ｓｅｒｉｅｓ ＩＩ Ｓｙｓｔｅｍ」、パーキン・エルマー社製）を用いて、反応温度９８０℃、還元温度６５０℃の条件下で炭素原子（Ｃ）、水素原子（Ｈ）、および窒素原子（Ｎ）について定量を行った。
その結果、水溶液から晶析したシノリンの結晶の元素組成は、Ｃ：４２．６５質量％、Ｈ：６．３０質量％、およびＮ：７．５９質量％であることが判明した。この結果は、当該結晶がシノリン二含水結晶（Ｃ_１３Ｈ_２０Ｎ_２Ｏ_８・２Ｈ_２Ｏ）であると仮定した場合の元素組成の理論値であるＣ：４２．３９質量％、Ｈ：６．５７質量％、およびＮ：７．６１質量％とそれぞれよく一致することから、当該結晶はシノリン二含水結晶であることが示唆された。

【0036】

＜実施例６：水溶液から晶析したシノリンの結晶のＸ線結晶構造解析＞
水溶液から晶析したシノリンの結晶の構造を決定することを目的として、Ｘ線結晶構造解析を行った。
実施例２で水溶液から晶析したシノリンの単結晶を単結晶Ｘ線回折装置（商品名「ＶａｒｉＭａｘ ｗｉｔｈ Ｓａｔｕｒｎ」、株式会社リガク販売）に供し、液体窒素気流下において、Ｍｏ対陰極から放射される特性Ｘ線であるＭｏＫα線（波長：０．７０９２６オングストローム）を照射し、Ｘ線回折データの測定を行った。その後、得られたデータの構造解析を構造解析ソフトウェア（商品名「ＣｒｙｓｔａｌＣｌｅａｒ」、株式会社リガク販売）を用いて行った。得られたＸ線回折データの解析値を表１に、結晶構造の原子座標を表２に、ＯＲＴＥＰ図を図３に示す。

【0037】

【表1】

【0038】

【表2】

【0039】

表１に示されるとおり、水溶液から晶析したシノリンの結晶は三斜晶であり、その空間群はＰ_１であり、その格子定数はａ＝５．４Å、ｂ＝１１．７Å、ｃ＝１３．６Å、α＝１０５．７°、β＝９９．３°、γ＝９４．３°であることが判明した。得られた結晶構造は、構造の信頼性を示す指標であるＲ−ｆａｃｔｏｒ及びｗｅｉｇｈｔｅｄ Ｒ−ｆａｃｔｏｒがそれぞれ３．５３％及び８．０９％と十分に低かったことから、信頼性の高いものであると判断した。表２および図３に示されるとおり、結晶の非対称単位には、２分子のシノリンと１分子の水に加え、さらに合計で３分子相当の水分子が結晶のａ軸方向の空隙に沿って非化学量論的に存在することが確認され、水分子はシノリン２分子に対して合計で約４分子相当の量が存在することが判明した。すなわち、ここでａ軸方向の空隙に沿って非化学量論的に存在する３つの水分子は、表２の占有率が１に満たない酸素を含む水分子で、図３ではＯ４１〜Ｏ４３、Ｏ５１、Ｏ５２、Ｏ６１〜Ｏ６５がそれにあたる。これらの結果により、ここでのシノリン含水結晶が一つの固定した結晶単位からなるのでなく、水分子の結晶単位における位置に僅かな「ゆらぎ」のある特殊な結晶構造を有することが示された。
以上のことから、水溶液から晶析したシノリンの結晶は含水結晶と同定した。

【0040】

＜実施例７：シノリン含水結晶の吸湿性の評価＞
シノリン含水結晶について、種々の相対湿度雰囲気下における結晶の質量を測定し、吸湿性の評価を行った。
実施例２で得たシノリン含水結晶２００ｍｇを温度２５℃、相対湿度２０％の雰囲気下に２４時間静置した後、２４時間毎に相対湿度を４０％、６０％、８０％と段階的に上昇させた。各相対湿度で２４時間静置した後の結晶について、高精度分析天びんを用いて質量をそれぞれ測定し、相対湿度２０％時からの質量の増加率を求めた。また、対照として、別途調製したシノリン無水結晶についても同様に測定を行った。結果を表３に示す。

【0041】

【表3】

【0042】

表３に示されるとおり、シノリン無水結晶は、相対湿度が２０〜６０％の範囲においては、質量の増加率が０．２４％以下であったが、相対湿度が８０％の雰囲気下では吸湿し、質量の増加率が１１．３８％にまで上昇した。一方、シノリン含水結晶は、相対湿度が２０〜８０％の範囲において、質量の増加率が０．４６％以下であったことから、高湿下においても実質的に吸湿することなく、保存安定性に優れていることが判明した。

【0043】

＜実施例８：シノリン含水結晶含有組成物の製造＞
実施例２で得られたシノリン含水結晶と二亜硫酸ナトリウムを１：５の重量比で混合する事により、シノリン含水結晶含有組成物を得る。この組成物は化粧品素材として有用である。

【産業上の利用可能性】

【0044】

本明細書におけるシノリン含水結晶は、シノリン無水結晶と比較して、高湿下においても吸湿し難く、保存安定性に優れることから、より取り扱いが容易な素材として、化粧品、医薬部外品、または医薬品に使用することができる。

【符号の説明】

【0045】

図２中の各符号は以下の回折ピークを示す：
ａ：回折角（２θ）６．８°の回折ピーク
ｂ：回折角（２θ）７．９°の回折ピーク
ｃ：回折角（２θ）１１．８°の回折ピーク
ｄ：回折角（２θ）１３．７°の回折ピーク
ｅ：回折角（２θ）１５．８°の回折ピーク
ｆ：回折角（２θ）１６．５°の回折ピーク
ｇ：回折角（２θ）１７．７°の回折ピーク
ｈ：回折角（２θ）２０．６°の回折ピーク
ｉ：回折角（２θ）２２．８°の回折ピーク
ｊ：回折角（２θ）２３．８°の回折ピーク
ｋ：回折角（２θ）２６．４°の回折ピーク
ｌ：回折角（２θ）２７．６°の回折ピーク
ｍ：回折角（２θ）４０．３°の回折ピーク
ｎ：回折角（２θ）４８．７°の回折ピーク

【図1】

【図2】

【図3】