特開 2020-165765 蛍光画像分析装置及び蛍光画像分析方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2020-165765(P2020-165765A)

(43)【公開日】2020年10月8日

(54)【発明の名称】蛍光画像分析装置及び蛍光画像分析方法

(51)【国際特許分類】

   G01N 21/64 20060101AFI20200911BHJP

   G01N 33/48 20060101ALI20200911BHJP

   C12M 1/34 20060101ALI20200911BHJP

   C12Q 1/06 20060101ALI20200911BHJP

   C12Q 1/6813 20180101ALI20200911BHJP

【ＦＩ】

   G01N21/64 F

   G01N33/48 M

   G01N33/48 P

   C12M1/34 D

   C12Q1/06

   C12Q1/6813 Z

【審査請求】未請求

【請求項の数】22

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】30

(21)【出願番号】特願2019-65675(P2019-65675)

(22)【出願日】2019年3月29日

(71)【出願人】

【識別番号】390014960

【氏名又は名称】シスメックス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100079108

【弁理士】

【氏名又は名称】稲葉 良幸

(74)【代理人】

【識別番号】100140431

【弁理士】

【氏名又は名称】大石 幸雄

(72)【発明者】

【氏名】今久保 桃子

【テーマコード（参考）】

2G043

2G045

4B029

4B063

【Ｆターム（参考）】

2G043AA01

2G043AA04

2G043BA16

2G043DA05

2G043EA01

2G043HA01

2G043HA02

2G043HA09

2G043JA02

2G043LA03

2G043NA01

2G045AA24

2G045BA13

2G045BB24

2G045CB01

2G045FA19

2G045FB12

2G045JA01

2G045JA03

2G045JA04

4B029AA07

4B029BB11

4B029BB20

4B029FA04

4B029FA10

4B063QA01

4B063QA13

4B063QA17

4B063QA18

4B063QQ08

4B063QQ12

4B063QQ42

4B063QR32

4B063QR56

4B063QS34

4B063QS39

4B063QX02

(57)【要約】      （修正有）

【課題】試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度を向上させる蛍光画像分析技術を提供すること。
【解決手段】蛍光画像分析装置１は、標的部位を蛍光色素により標識した複数の細胞を含む試料１０を測定して分析を行う蛍光画像分析装置であって、試料１０に光を照射する光源１２０〜１２３と、光が照射されることにより蛍光を発する細胞の蛍光画像を撮像する撮像部１６０と、撮像された蛍光画像を処理する処理部１１と、を備え、処理部１１は、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

標的部位を蛍光色素により標識した複数の細胞を含む試料を測定して分析を行う蛍光画像分析装置であって、
前記試料に光を照射する光源と、
前記光が照射されることにより蛍光を発する前記細胞の蛍光画像を撮像する撮像部と、
撮像された前記蛍光画像を処理する処理部と、を備え、
前記処理部は、
前記蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、
測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、
取得した前記輝点パターンと選択した前記輝点パターンとに基づいて、取得した前記輝点パターンが、選択した前記輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する、
蛍光画像分析装置。

【請求項2】

測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた前記輝点パターンは、陰性パターンを更に含み、
前記処理部は、取得した前記輝点パターンと選択した前記輝点パターンとに基づいて、前記試料が、選択された前記輝点パターンに含まれる陰性パターンに該当するかを判定する、
請求項１に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項3】

表示部を更に備え、
前記処理部は、前記測定項目が特定された後に、特定された前記測定項目に応じた前記標識試薬を特定させることが可能な特定画面を前記表示部に表示する、
請求項１又は２に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項4】

前記処理部は、選択された前記少なくとも一つの輝点パターンを変更する、
請求項１〜３のいずれか一項に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項5】

表示部と、
前記標識試薬が格納された格納箱に付された識別情報、又は、前記標識試薬に関する文書に付された識別情報を読み取る読取装置と、
少なくとも前記輝点パターンを予め記憶する記憶部と、を更に備え、
前記処理部は、読み取られた前記識別情報に、前記記憶部に記憶された前記輝点パターンとは異なる輝点パターンが含まれる場合、前記異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面を前記表示部に表示する、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項6】

前記処理部は、前記異なる輝点パターンに関する情報の登録を前記ユーザーに促すために予め定められた表示形態で前記登録画面を前記表示部に表示する、
請求項５に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項7】

表示部を更に備え、
前記処理部は、取得した前記輝点パターンが、選択した前記輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定した結果を含む判定結果画面を前記表示部に表示する、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項8】

表示部を更に備え、
前記処理部は、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を前記表示部に表示する、
請求項１〜７のいずれか一項に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項9】

表示部を更に備え、
前記処理部は、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、判定された前記試料に含まれる細胞の蛍光画像とともに前記表示部に表示する、
請求項１〜８のいずれか一項に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項10】

表示部を更に備え、
前記処理部は、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報とともに、前記異常細胞の割合、又は、前記正常細胞の割合の少なくとも一方を示すグラフ画像を前記表示部に表示する、
請求項１〜９のいずれか一項に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項11】

表示部を更に備え、
前記処理部は、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果を、他の陽性パターンに関する判定結果とは異なる表示形態で前記表示部に表示する、
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の蛍光画像分析装置。

【請求項12】

標的部位を蛍光色素により標識した複数の細胞を含む試料を測定して分析する蛍光画像分析方法であって、
光源から前記試料に光が照射することにより蛍光を発する前記細胞の蛍光画像を撮像するステップと、
撮像された前記蛍光画像を処理するステップと、を含み、
前記処理するステップは、
前記蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、
測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、
取得した前記輝点パターンと選択した前記輝点パターンとに基づいて、取得した前記輝点パターンが、選択した前記輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する、
蛍光画像分析方法。

【請求項13】

測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた前記輝点パターンは、陰性パターンを更に含み、
前記処理するステップは、取得した前記輝点パターンと選択した前記輝点パターンとに基づいて、前記試料が、選択された前記輝点パターンに含まれる陰性パターンに該当するかを判定する、
請求項１２に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項14】

前記処理するステップは、前記測定項目が特定された後に、特定された前記測定項目に応じた前記標識試薬を特定させることが可能な特定画面を表示部に表示する、
請求項１２又は１３に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項15】

前記処理するステップは、選択された前記少なくとも一つの輝点パターンを変更する、
請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項16】

前記標識試薬が格納された格納箱に付された識別情報、又は、前記標識試薬に関する文書に付された識別情報を読み取るステップと、
少なくとも前記輝点パターンを予め記憶するステップと、を更に含み、
前記処理するステップは、読み取られた前記識別情報に、記憶された前記輝点パターンとは異なる輝点パターンが含まれる場合、前記異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面を表示部に表示する、
請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項17】

前記処理するステップは、前記異なる輝点パターンに関する情報の登録を前記ユーザーに促すために予め定められた表示形態で前記登録画面を表示する、
請求項１６に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項18】

前記処理するステップは、取得した前記輝点パターンが、選択した前記輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定した結果を含む判定結果画面を表示部に表示する、
請求項１２〜１７のいずれか一項に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項19】

前記処理するステップは、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を表示部に表示する、
請求項１２〜１８のいずれか一項に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項20】

前記処理するステップは、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、判定された前記試料に含まれる細胞の蛍光画像とともに表示部に表示する、
請求項１２〜１９のいずれか一項に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項21】

前記処理するステップは、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報とともに、前記異常細胞の割合、又は、前記正常細胞の割合の少なくとも一方を示すグラフ画像を表示部に表示する、
請求項１２〜２０のいずれか一項に記載の蛍光画像分析方法。

【請求項22】

前記処理するステップは、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果を、他の陽性パターンに関する判定結果とは異なる表示形態で表示部に表示する、
請求項１２〜２１のいずれか一項に記載の蛍光画像分析方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、蛍光画像分析装置及び蛍光画像分析方法に関する。

【背景技術】

【0002】

特許文献１には、蛍光インサイチュハイブリダイゼーション法（ＦＩＳＨ法）の検出にフローサイトメータ等を適用する際の細胞の処理方法が記載されている。ＦＩＳＨ法によれば、細胞中の検出対象のＤＮＡ配列領域に標識プローブをハイブリダイズさせる前処理により細胞を染色する。そして、標識プローブに起因して生じた蛍光を検出することにより、異常細胞の検出を行うことができる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0003】

【特許文献1】特表２００５−５１５４０８号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

上記のような異常細胞の分析手法を用いて、前処理された試料が特定の疾患について陽性又は陰性のいずれであるかを精度よく判定しようとすると、千個から一万個といった膨大な数の細胞を観察して異常細胞の検出を行う必要がある。また、陽性パターンの中には、典型的な陽性パターンと非典型的な陽性のパターンが存在する。オペレータはこれら全てについて陽性パターンと陰性パターンを把握しなければならず、異常細胞の分析は煩雑化している。

【0005】

このような場合、オペレータが異常細胞を分析する負担が増大するとともに、異常細胞の判定がオペレータの熟練度及び施設の運用内容に依存するため、上記分析手法において細胞の異常の有無の判定精度の維持が困難になるおそれがある。

【0006】

本発明はかかる点に鑑みてなされたものであり、施設の運用内容に依存することなく、試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度を向上させることができ、且つ、特別な技術者を必要としない蛍光画像分析技術を提供することを目的の一つとする。

【課題を解決するための手段】

【0007】

図１、３、４、及び７に示すように、本発明の一態様に係る蛍光画像分析装置（１）は、標的部位を蛍光色素により標識した複数の細胞を含む試料（１０）を測定して分析を行う蛍光画像分析装置であって、試料（１０）に光を照射する光源（１２０〜１２３）と、光が照射されることにより蛍光を発する細胞の蛍光画像を撮像する撮像部（１６０）と、撮像された蛍光画像を処理する処理部（１１）と、を備え、処理部（１１）は、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する。

【0008】

上記態様によれば、蛍光画像分析装置（１）が、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する。よって、特別な技術者の熟練度に依存することなく輝点パターンを選択することができ、選択した輝点パターンを用いて試料（１０）の判定を行うことができる。したがって、施設の運用内容に依存することなく、試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度を向上させることができ、且つ、特別な技術者が不要となる。

【0009】

図１、３、４、及び７に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）は、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた輝点パターンは、陰性パターンを更に含み、処理部（１１）は、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、試料（１０）が、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンに該当するかを判定してもよい。

【0010】

上記態様によれば、処理部（１１）は、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、試料（１０）が、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンに該当するかを判定する。よって、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンをさらに参照することができる。したがって、試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度をより向上させることができる。

【0011】

図４に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、表示部（１３）を更に備え、処理部（１１）は、測定項目が特定された後に、特定された測定項目に応じた標識試薬を特定させることが可能な特定画面を表示部（１３）に表示してもよい。

【0012】

上記態様によれば、処理部（１１）は、測定項目が特定された後に、特定された測定項目に応じた標識試薬を特定させることが可能な特定画面を表示部に表示する。よって、測定項目に対応づけられた輝点パターンを絞り込んだ後に、さらに標識試薬に対応づけられた輝点パターンを特定することができる。したがって、効率的に輝点パターンを選択することができる。

【0013】

図４に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、処理部（１１）は、選択された少なくとも一つの輝点パターンを変更してもよい。

【0014】

上記態様によれば、処理部（１１）は、選択された少なくとも一つの輝点パターンを変更する。よって、選択された少なくとも一つの輝点パターンを自由に変更することができる。

【0015】

図５及び６に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）は、表示部（１３）と、標識試薬が格納された格納箱（Ｂ）に付された識別情報、又は、標識試薬に関する文書（Ｄ）に付された識別情報を読み取る読取装置（Ｒ）と、少なくとも輝点パターンを予め記憶する記憶部（１２）と、を更に備え、処理部（１１）は、読み取られた識別情報に、記憶部（１２）に記憶された輝点パターンとは異なる輝点パターンが含まれる場合、異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面を表示部（１３）に表示してもよい。

【0016】

上記態様によれば、読取装置（Ｒ）により、標識試薬が格納された格納箱（Ｂ）又は標識試薬に関する文書（Ｄ）に付された識別情報が読み取られる。読み取られた識別情報に、記憶部（１２）に記憶された輝点パターンとは異なる輝点パターンが含まれる場合、異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面が表示部（１３）に表示される。よって、異なる輝点パターンに関する情報を確実に、且つ、容易に取得することができ、且つ、異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面を表示することができる。

【0017】

図６に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、処理部（１１）は、異なる輝点パターンに関する情報の登録をユーザーに促すために予め定められた表示形態で登録画面を表示部（１３）に表示してもよい。

【0018】

上記態様によれば、処理部（１１）は、異なる輝点パターンに関する情報の登録をユーザーに促すために予め定められた表示形態で登録画面を表示部（１３）に表示する。よって、新たな輝点パターンに関する情報の登録を行う際のユーザーの負担が軽減される。

【0019】

図９及び１０に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、表示部（１３）を更に備え、処理部（１１）は、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定した結果を含む判定結果画面を表示部（１３）に表示してもよい。

【0020】

上記態様によれば、処理部（１１）は、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定した結果を含む判定結果画面を表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーが判定結果を容易に把握することができる。

【0021】

図９及び１０に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、表示部（１３）を更に備え、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を表示部（１３）に表示してもよい。

【0022】

上記態様によれば、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーが、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を容易に把握することができる。

【0023】

図９及び１０に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、表示部（１３）を更に備え、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、判定された試料（１０）に含まれる細胞の蛍光画像とともに表示部（１３）に表示してもよい。

【0024】

上記態様によれば、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、判定された試料（１０）に含まれる細胞の蛍光画像とともに表示部（１）に表示する。よって、ユーザーは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、試料（１０）に含まれる細胞の蛍光画像と併せて確認することができる。

【0025】

図９及び１０に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、表示部（１３）を更に備え、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報とともに、前記異常細胞の割合、又は、前記正常細胞の割合の少なくとも一方を示すグラフ画像を表示部（１３）に表示してもよい。

【0026】

上記態様によれば、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報とともに、前記異常細胞の割合、又は、前記正常細胞の割合の少なくとも一方を示すグラフ画像を表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報をグラフ画像と併せて確認することができる。

【0027】

図９及び１０に示すように、上記蛍光画像分析装置（１）において、表示部（１３）を更に備え、処理部（１１）は、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果を、他の陽性パターンに関する判定結果とは異なる表示形態で表示部（１３）に表示してもよい。

【0028】

上記態様によれば、処理部（１１）は、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果を、他の陽性パターンに関する判定結果とは異なる表示形態で表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーは、様々な判定結果を含む判定結果画面において、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果をより簡単に特定することができる。

【0029】

図１、３、４、７及び１１に示すように、本発明の一態様に係る蛍光画像分析方法は、標的部位を蛍光色素により標識した複数の細胞を含む試料（１０）を測定して分析する蛍光画像分析方法であって、光源（１２０〜１２３）から試料（１０）に光が照射することにより蛍光を発する細胞の蛍光画像を撮像するステップと、撮像された蛍光画像を処理するステップと、を含み、処理するステップは、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する。

【0030】

上記態様によれば、上記蛍光画像分析方法は、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する。よって、特別な技術者の熟練度に依存することなく輝点パターンを選択することができ、選択した輝点パターンを用いて試料の判定を行うことができる。したがって、施設の運用内容に依存することなく、試料（１０）に含まれる細胞の異常の有無の判定精度を向上させることができ、且つ、特別な技術者が不要となる。

【0031】

図１、３、４、７及び１１に示すように、上記蛍光画像分析方法は、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた輝点パターンは、陰性パターンを更に含み、処理するステップは、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、試料（１０）が、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンに該当するかを判定してもよい。

【0032】

上記態様によれば、処理するステップは、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、試料（１０）が、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンに該当するかを判定する。よって、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンをさらに参照することができる。したがって、試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度をより向上させることができる。

【0033】

図４及び１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、測定項目が特定された後に、特定された測定項目に応じた標識試薬を特定させることが可能な特定画面を表示部（１３）に表示してもよい。

【0034】

上記態様によれば、処理するステップは、測定項目が特定された後に、特定された測定項目に応じた標識試薬を特定させることが可能な特定画面を表示部に表示する。よって、測定項目に対応づけられた輝点パターンを絞り込んだ後に、さらに測定項目に応じた標識試薬に対応づけられた輝点パターンを特定することができる。したがって、効率的に輝点パターンを選択することができる。

【0035】

図４及び１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、選択された少なくとも一つの輝点パターンを変更してもよい。

【0036】

上記態様によれば、処理するステップは、選択された少なくとも一つの輝点パターンを変更する。よって、選択された少なくとも一つの輝点パターンを自由に変更することができる。

【0037】

図５、６及び１１に示すように、上記蛍光画像分析方法は、標識試薬が格納された格納箱（Ｂ）に付された識別情報、又は、標識試薬に関する文書（Ｄ）に付された識別情報を読み取るステップと、少なくとも輝点パターンを予め記憶するステップと、を更に含み、処理するステップは、読み取られた識別情報に、記憶された輝点パターンとは異なる輝点パターンが含まれる場合、異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面を表示部（１３）に表示してもよい。

【0038】

上記態様によれば、標識試薬が格納された格納箱（Ｂ）に付された識別情報、又は、標識試薬に関する文書（Ｄ）に付された識別情報が読み取られる。読み取られた識別情報に、記憶された輝点パターンとは異なる輝点パターンが含まれる場合、異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面が表示部（１３）に表示される。よって、異なる輝点パターンに関する情報を確実に、且つ、容易に取得することができ、且つ、異なる輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面を表示することができる。

【0039】

図６及び１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、異なる輝点パターンに関する情報の登録をユーザーに促すために予め定められた表示形態で登録画面を表示してもよい。

【0040】

上記態様によれば、処理するステップは、異なる輝点パターンに関する情報の登録をユーザーに促すために予め定められた表示形態で登録画面を表示する。よって、新たな輝点パターンに関する情報の登録を行う際のユーザーの負担が軽減される。

【0041】

図９〜１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定した結果を含む判定結果画面を表示部（１３）に表示してもよい。

【0042】

上記態様によれば、処理するステップは、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定した結果を含む判定結果画面を表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーが判定結果を容易に把握することができる。

【0043】

図９〜１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を表示部（１３）に表示してもよい。

【0044】

上記態様によれば、処理ステップは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーが、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を容易に把握することができる。

【0045】

図９〜１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、判定された試料（１０）に含まれる細胞の蛍光画像とともに表示部（１３）に表示してもよい。

【0046】

上記態様によれば、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、判定された試料（１０）に含まれる細胞の蛍光画像とともに表示部（１３１）に表示する。よって、ユーザーは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、試料（１０）に含まれる細胞の蛍光画像と併せて確認することができる。

【0047】

図９〜１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報とともに、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すグラフ画像を表示部（１３）に表示してもよい。

【0048】

上記態様によれば、処理部（１１）は、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報とともに、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すグラフ画像を表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーは、判定された試料（１０）に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報をグラフ画像と併せて確認することができる。

【0049】

図９〜１１に示すように、上記蛍光画像分析方法において、処理するステップは、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果を、他の陽性パターンに関する判定結果とは異なる表示形態で表示部（１３）に表示してもよい。

【0050】

上記態様によれば、処理部（１１）は、判定された前記試料に含まれる、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果を、他の陽性パターンに関する判定結果とは異なる表示形態で表示部（１３）に表示する。よって、ユーザーは、様々な判定結果を含む判定結果画面において、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果をより簡単に特定することができる。

【発明の効果】

【0051】

本発明によれば、施設の運用内容に依存することなく、試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度を向上させることができ、且つ、特別な技術者が不要となる。

【図面の簡単な説明】

【0052】

【図1】図１は、実施形態に係る蛍光画像分析装置及び前処理装置の構成の一例を示す斜視図である。

【図2】図２（ａ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置により取得される第１〜第３画像および明視野画像を例示する図である。図２（ｂ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置が行う核の領域の抽出を説明するための図である。図２（ｃ）、（ｄ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置が行う輝点の領域の抽出を説明するための図である。

【図3】図３は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の機能ブロック構成の一例を示す図である。

【図4】図４（ａ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の表示部における、測定項目及び標識試薬を特定するための特定画面の一例を示す説明図である。図４（ｂ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の表示部における陽性パターン選択画面の一例を示す説明図である。

【図5】図５（ａ）は、実施形態に係る読取装置を用いた、標識試薬が格納された格納箱に付着されたコードの読取処理の一例を示す説明図である。図５（ｂ）は、実施形態に係る読取装置を用いた、標識試薬に関する添付文書に記載されたコードの読取処理の一例を示す説明図である。

【図6】図６は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の表示部における、輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面の一例を示す説明図である。

【図7】図７（ａ）〜（ｄ）は、それぞれ、実施形態に係る陰性パターン、陽性パターン１、陽性パターン２、陽性パターン３の輝点の配置例を模式的に示す図である。

【図8】図８は、実施形態に係るＢＣＲ／ＡＢＬ融合遺伝子を標的とする各プローブがハイブリダイズする標的部位の例を示す図である。

【図9】図９は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の表示部における判定結果画面の一例を示す説明図である。

【図10】図１０は、図９に示す判定結果画面の一部を拡大した図である。

【図11】図１１は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の動作の一例を説明するフローチャートである。

【図12】図１２は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の輝点パターンの取得処理の一例を説明するフローチャートである。

【図13】図１３は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の輝点パターンの選択処理の一例を説明するフローチャートである。

【図14】図１４は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の判定処理の一例を説明するフローチャートである。

【図15】図１５は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の判定処理の他の一例を説明するフローチャートである。

【図16】図１６は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の表示制御処理の一例を説明するフローチャートである。

【発明を実施するための形態】

【0053】

以下、図面を参照して、本発明の好ましい実施の形態について説明する。なお、同一の要素には同一の符号を付し、重複する説明を省略す。また、上下左右等の位置関係は、特に断らない限り、図面に示す位置関係に基づくものとする。さらに、図面の寸法比率は、図示の比率に限定されるものではない。また、以下の実施の形態は、本発明を説明するための例示であり、本発明はこの実施の形態に限定されるものではない。

【0054】

以下の実施形態は、蛍光色素により標識した核酸プローブと核酸中の標的部位とをハイブリダイズさせる工程を含む前処理において調製された試料を測定して分析を行う装置に、本発明を適用したものである。具体的には、以下の実施形態では、核酸中の標的部位を２２番染色体にあるＢＣＲ遺伝子および９番染色体にあるＡＢＬ遺伝子とし、ＦＩＳＨ法に基づいて、慢性骨髄性白血病に見られる９番染色体と２２番染色体との間における転座が生じている細胞を異常細胞として検出する。つまり、以下の実施形態では、例えば、ＢＣＲ遺伝子又はＡＢＬ遺伝子が転座してＢＣＲ−ＡＢＬ融合遺伝子を生成している細胞を異常細胞として検出する。

【0055】

図１は、本実施形態の蛍光画像分析装置１の概略構成を示す。図１に示す蛍光画像分析装置１は、例示的に、測定装置１００と処理装置２００とを備えており、前処理装置３００による前処理により調製された試料１０を測定し、分析を行う。オペレータ（ユーザー）は、被検者から採取した血液検体に対して、例えばフィコール等の細胞分離用媒体を用いて遠心分離等を行って、測定対象細胞である有核細胞を回収する。有核細胞の回収にあたっては、遠心分離による有核細胞の回収に代えて溶血剤を用いて赤血球等を溶血させることにより有核細胞を残してもよい。

【0056】

前処理装置３００は、遠心分離等により得られた有核細胞浮遊液と試薬とを混合させるための混合容器、有核細胞浮遊液と試薬を混合容器に分注するための分注ユニット、混合容器を加温するための加温部等を含む。前処理装置３００は、例えば、被検者から採取した細胞内の標的部位を蛍光色素により標識する工程と、細胞の核を核染色用色素により染色する工程と、を含む前処理を行って試料１０を調製する。具体的には、標的部位を蛍光色素により標識する工程では、標的配列と、標的配列と相補的な配列を有する核酸配列を含み蛍光色素により標識されたプローブとをハイブリダイズされる。

【0057】

ＦＩＳＨ法は、１以上の蛍光色素を使用して染色体上の標的部位を検出する。好ましくは、ＦＩＳＨ法は、２以上の蛍光色素を使用して第１の染色体上の標的部位と第２の染色体上の標的部位を検出する（「染色体」を修飾する「第１」及び「第２」は染色体番号を意味しない、包括的な数の概念である）。例えば、ＢＣＲ遺伝子座とハイブリダイズするプローブは、ＢＣＲ遺伝子座の塩基配列に相補的な配列を有する核酸が、波長λ１１の光が照射されることにより波長λ２１の第１蛍光を生じる第１蛍光色素によって標識されたものである。このプローブを使うことで、ＢＣＲ遺伝子座が、第１蛍光色素によって標識される。ＡＢＬ遺伝子座とハイブリダイズするプローブは、ＡＢＬ遺伝子座の塩基配列に相補的な配列を有する核酸が、波長λ１２の光が照射されることにより波長λ２２の第２蛍光を生じる第２蛍光色素によって標識されたものである。このプローブを使うことで、ＡＢＬ遺伝子座が、第２蛍光色素によって標識される。核は、波長λ１３の光が照射されることにより波長λ２３の第３蛍光を生じる核染色用色素によって染色される。波長λ１１、波長λ１２及び波長λ１３はいわゆる励起光である。

【0058】

より具体的には、前処理装置３００は、例示的に、脱水により細胞が収縮しないよう細胞を固定する処理、プローブを細胞内に導入できる大きさの穴を細胞に開ける膜透過処理、細胞に熱を加える熱変性処理、標的部位とプローブとをハイブリダイゼーションさせる処理、細胞から不要なプローブを除去する洗浄処理、及び、核を染色する処理を含んでいる。

【0059】

測定装置１００は、例示的に、フローセル１１０と、光源１２０〜１２３と、集光レンズ１３０〜１３３と、ダイクロイックミラー１４０〜１４１と、集光レンズ１５０と、光学ユニット１５１と、集光レンズ１５２と、撮像部１６０と、を備えている。フローセル１１０の流路１１１には、試料１０が流される。

【0060】

光源１２０〜１２３は、フローセル１１０を流れる試料１０に光を照射する。光源１２０〜１２３は、例えば半導体レーザー光源により構成される。光源１２０〜１２３からは、それぞれ波長λ１１〜λ１４の光が出射される。

【0061】

集光レンズ１３０〜１３３は、光源１２０〜１２３から出射された波長λ１１〜λ１４の光をそれぞれ集光する。ダイクロイックミラー１４０は、波長λ１１の光を透過させ、波長λ１２の光を屈折させる。ダイクロイックミラー１４１は、波長λ１１及びλ１２の光を透過させ、波長λ１３の光を屈折させる。こうして、波長λ１１〜λ１４の光が、フローセル１１０の流路１１１を流れる試料１０に照射される。なお、測定装置１００が備える半導体レーザー光源の数は１以上であれば制限されない。半導体レーザー光源の数は、例えば、１、２、３、４、５又は６の中から選択することができる。

【0062】

フローセル１１０を流れる試料１０に波長λ１１〜λ１３の光が照射されると、細胞を染色している蛍光色素から蛍光が生じる。例えば、波長λ１１の光がＢＣＲ遺伝子座を標識する第１蛍光色素に照射されると、第１蛍光色素から波長λ２１の第１蛍光が生じる。波長λ１２の光がＡＢＬ遺伝子座を標識する第２蛍光色素に照射されると、第２蛍光色素から波長λ２２の第２蛍光が生じる。波長λ１３の光が核を染色する核染色用色素に照射されると、核染色用色素から波長λ２３の第３蛍光が生じる。フローセル１１０を流れる試料１０に波長λ１４の光が照射されると、この光は細胞を透過する。細胞を透過した波長λ１４の透過光は、明視野画像の生成に用いられる。例えば、実施形態では、第１蛍光は緑色の光の波長帯域であり、第２蛍光は赤色の光の波長帯域であり、第３蛍光は青色の光の波長帯域である。

【0063】

集光レンズ１５０は、フローセル１１０の流路１１１を流れる試料１０から生じた第１蛍光〜第３蛍光と、フローセル１１０の流路１１１を流れる試料１０を透過した透過光とを集光する。光学ユニット１５１は、４枚のダイクロイックミラーが組み合わせられた構成を有する。光学ユニット１５１の４枚のダイクロイックミラーは、第１蛍光〜第３蛍光と透過光とを、互いに僅かに異なる角度で反射し、撮像部１６０の受光面上において分離させる。集光レンズ１５２は、第１蛍光〜第３蛍光と透過光とを集光する。

【0064】

撮像部１６０は、ＴＤＩ（Time Delay Integration）カメラにより構成される。撮像部１６０は、第１蛍光〜第３蛍光と透過光とを撮像して第１蛍光〜第３蛍光にそれぞれ対応した蛍光画像と、透過光に対応した明視野画像とを、撮像信号として処理装置２００に出力する。第１蛍光〜第３蛍光に対応する蛍光画像を、以下、それぞれ「第１画像」、「第２画像」、「第３画像」と称する。「第１画像」、「第２画像」及び「第３画像」は、輝点の重なりを分析するため同じ大きさであることが好ましい。「第１画像」、「第２画像」及び「第３画像」は、カラー画像であってもよいし、グレースケール画像であってもよい。

【0065】

本実施形態における輝点とは、蛍光画像に生じる小さな蛍光の点を意味する。より具体的には、輝点とは、核中の標的部位となる遺伝子に結合した核酸プローブの蛍光色素から得られる蛍光の点を意味する。

【0066】

図２（ａ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置により取得される第１〜第３画像および明視野画像を例示する図である。図２（ａ）の第１画像において黒く点状に見える部分は、第１蛍光の輝点、つまり第１蛍光色素で標識された標的部位を示す。第２画像において第１画像ほどではないが核を示す淡い灰色の中に濃い灰色の点が認められる。これは、第２蛍光の輝点、つまり第２蛍光色素で標識された標的部位を示す。第３画像では、略円形の核の領域が黒く表されている。明視野画像では、実際の細胞の状態を観察できる。なお、図２（ａ）の各画像は、前処理後の白血球をスライドガラス上に配置して顕微鏡で観察したものを例として示す画像であり、蛍光画像は生データ（ローデータ）では、蛍光強度が高いほど白く、蛍光強度が低いほど黒く撮像される。図２（ａ）の第１〜第３画像は、撮像された生データの階調を反転させグレースケールで表したものである。上記のようにフローセル１１０を流れる試料１０を撮像部１６０により撮像した場合は、細胞が互いに分離した状態で流路１１１を流れるため、蛍光画像および明視野画像は、細胞ごとに取得されることになる。

【0067】

図１に戻り、処理装置２００は、ハードウェア構成として、例示的に、処理部１１と、記憶部１２と、表示部１３と、入力部１４と、を備える。処理部１１は、プロセッサ（ＣＰＵ）により構成される。記憶部１２は、処理部１１の各種処理の作業領域に使用する読み出し及び書き込み可能メモリ（ＲＡＭ）、コンピュータプログラム及びデータを記憶する読み出し専用メモリ（ＲＯＭ）及びハードディスク等により構成される。処理部１１及び記憶部１２は、汎用コンピュータで構成することができる。ハードディスクは、コンピュータ内に含まれていてもよいし、コンピュータの外部装置として置かれてもよい。表示部１３は、例えば、ディスプレイにより構成される。入力部１４は、例えば、マウス、キーボード、タッチパネル装置等により構成される。処理部１１は、バス１５を介して記憶部１２との間でデータを伝送し、インターフェース１６を介して表示部１３、入力部１４、測定装置１００との間でデータの入出力を行う。

【0068】

処理部１１は、例えば、ＲＯＭやハードディスクに記憶されている各種コンピュータプログラムをＲＡＭに読み出して実行することにより、測定装置１００による試料１０の測定により取得された細胞の蛍光画像の処理を行い、表示部１３、入力部１４などの動作を制御する。

【0069】

図３は、実施形態に係る蛍光画像分析装置１の処理部１１のブロック構成の一例を示す図である。図３に示すように、処理部１１は、機能的に、取得部２１と、選択部２３と、判定部２５と、表示制御部２７と、を備える。

【0070】

取得部２１は、例えば、撮像部１６０により撮像された生データを階調反転、グレースケール表示された第１〜第３画像を取得する。取得部２１は、取得した第１〜第３画像を記憶部１２に記憶させる。

【0071】

取得部２１は、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得する。例えば、第１蛍光に基づく第１画像における第１蛍光の輝点パターンを取得するとともに、第２蛍光に基づく第２画像における第２蛍光の輝点パターンを取得する。

【0072】

図２に戻り、図２（ｂ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置が行う核の領域の抽出を説明するための図である。図２（ｃ）、（ｄ）は、実施形態に係る蛍光画像分析装置が行う輝点の領域の抽出を説明するための図である。図２（ｂ）の左端に示す第３画像と、図２（ｃ）の左端に示す第１画像と、図２（ｄ）の左端に示す第２画像は、図１に示すフローセル１１０を流れる試料２０ａの同じ領域から取得されたものである。

【0073】

図２（ｂ）の左端に示すように第３画像が取得された場合、取得部２１は、第３画像上の各画素における輝度に基づいて、図２（ｂ）の中央に示すように輝度と度数のグラフを作成する。縦軸の度数は、画素の個数を示している。取得部２１は、このグラフにおいて輝度の閾値を設定する。そして、取得部２１は、閾値よりも大きい輝度を有する画素が分布する範囲を、図２（ｂ）の右端において破線で示すように、核の領域として抽出する。なお、第３画像において、２つの核が重なり合っている場合、重なった細胞に関する第１〜第３画像は、前処理の適否判定および異常細胞の判定には用いられず除外される。

【0074】

図２（ｃ）の左端に示すように第１画像が取得された場合、取得部２１は、第１画像上の各画素における輝度に基づいて、図２（ｃ）の中央に示すように輝度と度数のグラフを作成する。取得部２１は、このグラフにおいて、たとえば大津法に基づいて輝点とバックグランドとの境界として輝度の閾値を設定する。そして、取得部２１は、閾値よりも大きい輝度を有する画素が分布する範囲を、図２（ｃ）の右端において破線で示すように、輝点の領域として抽出する。なお、第１画像から輝点の領域を抽出する場合に、極端に小さい領域を有する輝点、極端に大きい領域を有する輝点、および、図２（ｂ）の右端に示した核の領域に含まれない輝点は除外される。

【0075】

図２（ｄ）の左端に示すように第２画像が取得された場合、第１画像の場合と同様、取得部２１は、第２画像上の各画素における輝度に基づいて、図２（ｄ）の中央に示すように輝度と度数のグラフを作成する。取得部２１は、このグラフにおいて、輝度の閾値を設定し、閾値よりも大きい輝度を有する画素が分布する範囲を、図２（ｄ）の右端において破線で示すように、輝点の領域として抽出する。なお、第２画像から輝点の領域を抽出する場合に、極端に小さい領域を有する輝点、極端に大きい領域を有する輝点、および、図２（ｂ）の右端に示した核の領域に含まれない輝点は除外される。

【0076】

なお、取得部２１は、図２（ｂ）〜（ｄ）の中央に示すようにグラフを作成することなく、上記のような手順に沿って、演算により、第３画像から核の領域を抽出し、第１画像および第２画像輝点から輝点の領域を抽出してもよい。また、輝点の抽出は、正常とされる輝点の分布波形と判定対象の領域との整合の度合いを判定し、整合の度合いが高い場合に、判定対象の領域を輝点として抽出してもよい。取得部２１は、第３画像から核の領域を抽出することにより細胞を検出したが、明視野画像に基づいて細胞を検出してもよい。明視野画像に基づいて細胞が検出される場合、第３画像の取得を省略することもできる。

【0077】

図３に戻り、処理部１１の選択部２３は、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択する。以下では、輝点パターンの選択処理の一例について説明する。例えば、処理部１１は、記憶部１２に記憶された複数の測定項目又は複数の標識試薬の少なくとも一方に対応した複数の輝点パターンから、試料の測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に対応した、少なくとも一つの輝点パターンを選択する処理を実行する。

【0078】

図４（ａ）は、実施形態に係る表示部１３における、測定項目及び標識試薬を特定するための特定画面ＳＣ１の一例を示す説明図である。図４（ａ）に示すように、特定画面ＳＣ１において、例えば項目「測定項目」又は項目「プローブ名」（標識試薬）をプロダウン方式で特定することができる。「測定項目」に関して、例えば、ＢＣＲ／ＡＢＬ融合遺伝子、ＡＬＫ遺伝子、又は、第５染色体長腕欠失等を細胞ごとに選択可能である。「プローブ名」に関して、例えば、「測定項目」がＢＣＲ／ＡＢＬ融合遺伝子であれば、ＤＦプローブあるいはＥＳプローブまで選択することが可能である。なお、ＢＣＲ／ＡＢＬ融合遺伝子等、ＤＦプローブ及びＥＳプローブの詳細については、後述する。

【0079】

処理部１１は、試料１０の測定項目及び標識試薬を特定するための特定画面ＳＣ１であって、オペレータに対して、標識試薬の内容よりも測定項目の内容を優先して特定させることが可能な特定画面ＳＣ１を表示部１３に表示する。処理部１１は、例えば、図４（ａ）に示すように、特定画面ＳＣ１において項目「測定項目」が項目「プローブ名」の上位にくるように表示制御してもよい。また、処理部１１は、特定画面ＳＣ１において項目「測定項目」のみ強調表示してもよい。さらに、処理部１１は、特定画面ＳＣ１において項目「測定項目」が特定された後に、特定された項目「測定項目」の内容に応じた項目「プローブ名」を特定させることができるように制御してもよい。さらにまた、処理部１１は、オペレータに対して、標識試薬の内容よりも測定項目の内容を優先して特定させるために、まず、項目「測定項目」を含む特定画面を表示し、「測定項目」が特定された後に、項目「測定項目」を含む特定画面とは異なる、項目「プローブ名」を含む特定画面を表示してもよい。この場合、処理部１１は、項目「プローブ名」を含む特定画面を表示する際に、「測定項目」を含む特定画面は非表示となるように制御してもよい。

【0080】

上記構成によれば、オペレータに対して、標識試薬の内容よりも測定項目の内容を優先して特定させることが可能である。よって、測定項目に対応づけられた輝点パターンを絞り込んだ後に、さらに標識試薬に対応づけられた輝点パターンを特定することができる。したがって、効率的に輝点パターンを選択することができる。

【0081】

図４（ｂ）は、実施形態に係る表示部１３における陽性パターン選択画面ＳＣ３の一例を示す説明図である。オペレータが、図４（ａ）に示す特定画面ＳＣ１において、測定項目「ＢＤＲ−ＡＢＬ」とプローブ名「ＥＳ」とを特定すると、図１に示す表示部１３には、図４（ｂ）に示す陽性パターン選択画面ＳＣ３が表示される。つまり、図１に示す記憶部１２に記憶された複数の陽性パターンのうち、測定項目「ＢＤＲ−ＡＢＬ」及びプローブ名「ＥＳ」に対応づけられた陽性パターンは、図４（ｂ）に示す「典型パターン G1R2F1」、「マイナーパターン G1R1F2」、「９ｑ欠失パターン G2R1F1」、及び「９ｑ・２２ｑ欠失パターン G1R1F1」であることがわかる。

【0082】

また、処理部１１は、各陽性パターンを、判定結果の表示対象に含めるか、判定結果の表示対象から除外するかをチェックボックス方式で変更可能なように陽性パターン選択画面ＳＣ３を表示部１３に表示してもよい。例えば、処理部１１は、各陽性パターン「典型パターン G1R2F1」、「マイナーパターン G1R1F2」、「９ｑ欠失パターン G2R1F1」、及び「９ｑ・２２ｑ欠失パターン G1R1F1」のそれぞれに対応づけられた４つのチェックボックス内のチェックの有無に応じて、判定結果の表示対象に含めるか、判定結果の表示対象から除外するかを判定してもよい。

【0083】

なお、図４（ｂ）に示す陽性パターン選択画面ＳＣ３は、陽性パターンのみ表示されているが、測定項目「ＢＤＲ−ＡＢＬ」及びプローブ名「ＥＳ」に対応づけられた陰性パターンを含んでもよい。つまり、処理部１１は、特定された測定項目及びプローブ名に対応づけられた陽性パターン及び陰性パターンを含む輝点パターンを含む画面を表示してもよい。

【0084】

処理部１１は、選択された少なくとも一つの輝点パターンを変更してもよい。例えば、処理部１１は、図４（ｂ）に示すように、オペレータに対して、各陽性パターンをプルダウン方式で変更可能なように陽性パターン選択画面ＳＣ３を表示部１３に表示する。そして、オペレータが陽性パターン選択画面ＳＣ３を操作することによって、「典型パターン G1R2F1」、「マイナーパターン G1R1F2」、「９ｑ欠失パターン G2R1F1」、及び「９ｑ・２２ｑ欠失パターン G1R1F1」の少なくとも一つの内容を他のパターンに変更することが可能である。

【0085】

上記構成によれば、選択された少なくとも一つの輝点パターンを変更する。よって、選択された少なくとも一つの輝点パターンを自由に変更することができる。

【0086】

処理部１１は、少なくとも一つの陽性パターンを選択可能な陽性パターン選択画面ＳＣ３を操作する権限をオペレータごとに管理する。例えば、処理部１１は、選択画面ＳＣ３の識別情報とオペレータの識別情報とを関連づけて記憶部１２に記憶させる。処理部１１は、記憶部１２に記憶した情報を参照することによって、権限を付与された特定オペレータに対応づけられた陽性パターン選択画面ＳＣ３を表示部１３に表示してもよい。

【0087】

上記構成によれば、権限を付与された特定オペレータは、特定オペレータに対応づけられた陽性パターン選択画面ＳＣ３を操作することが可能になる。よって、他のオペレータによって陽性パターン選択画面ＳＣ３を操作され、特定オペレータが所望する陽性パターンを勝手に変更されることを防止できる。

【0088】

図５（ａ）は、実施形態に係る読取装置を用いた、標識試薬が格納された格納箱に付着されたコード（識別情報）の読取処理の一例を示す説明図である。図５（ｂ）は、実施形態に係る読取装置を用いた、標識試薬に関する添付文書に記載されたコードの読取処理の一例を示す説明図である。図５（ａ）及び（ｂ）に示すように、図１に示す蛍光画像分析装置１は、標識試薬が格納された格納箱Ｂに付されたコードＣ又は標識試薬に関する添付文書Ｄに付されたコードＣを読み取る読取装置Ｒを更に備えてもよい。そして、図３に示す処理部１１の取得部２１は、読取装置Ｒによって読み取られたコードＣに含まれる情報を取得する。コードＣに含まれる情報は、例えば、プローブ名（標識試薬）に関する情報と、当該プローブ名に対応づけられた陽性パターン又は陰性パターンの少なくとも一方と、を含む。

【0089】

なお、コードＣは、一次元コードであるバーコードのみならず、二次元コードであるQRコード（登録商標）を含んでもよいし、他のコードを含んでもよい。

【0090】

図６は、実施形態に係る表示部１３における、輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面ＲＣ１の一例を示す説明図である。図６に示すように、処理部１１は、コードＣに新たな輝点パターンに関する情報が含まれる場合、新たな輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面ＲＣ１を表示部１３に表示する。例えば、図５（ａ）及び（ｂ）に示すように、読取装置Ｒは、標識試薬が格納された格納箱Ｂ又は標識試薬に関する文書Ｄに付着されたコードＣを読み取る。そして、処理部１１は、記憶部１２に予め記憶されている情報、例えば、プローブ名（標識試薬）に関する情報、及び、当該プローブ名に対応づけられた陽性パターン又は陰性パターンの少なくとも一方に関する情報を参照する。処理部１１は、記憶部１２に予め記憶されている情報以外の情報がコードＣに含まれている場合、新たな輝点パターンに関する情報をオペレータに登録させるために、登録画面ＲＣ１を表示部１３に表示する。

【0091】

図６の例では、登録内容に関する情報（例えば、「測定項目」、「プローブ名」、「陰性パターン名」、「陰性パターン名」の「輝点情報」、「陽性パターン名」、及び「陽性パターン名」の「輝点情報」）がすでに入力されている。しかしながら、通常、登録画面ＲＣ１が表示される際には、未入力の状態であり、オペレータは、図５（ｂ）に示す添付文書Ｄに記載の登録内容を参照しながら各項目に対して登録（例えば手入力）する。登録内容について、他社製あるいは市販の標識試薬の添付文書Ｄには、例えば、標識位置とその標識試薬を採用した場合の陽性パターン及び陰性パターンが記載されている。他方、自社（シスメックス株式会社）製の標識試薬に添付されたコードには、登録内容に関する情報が含まれている。読取装置Ｒで、この情報を読み取ることで、自動的に、登録内容に関する情報が登録画面ＲＣ１に登録されてもよい。なお、登録画面ＲＣ１の登録内容はオペレータが自由に編集できてもよいし、図４（ｂ）に示す陽性パターン選択画面ＳＣ３のように権限が付与されたオペレータのみが編集可能に管理されてもよい。

【0092】

上記構成によれば、読取装置（Ｒ）により、標識試薬が格納された格納箱（Ｂ）又は標識試薬に関する文書（Ｄ）に付着されたコード（Ｃ）が読み取られる。読み取られたコード（Ｃ）に新たな輝点パターンに関する情報が含まれる場合、新たな輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面が表示部（１３）に表示される。よって、新たな輝点パターンに関する情報を確実に、且つ、容易に取得することができ、且つ、新たな輝点パターンに関する情報を登録するための登録画面を表示することができる。

【0093】

処理部１１は、新たな輝点パターンに関する情報の登録をオペレータに促すために予め定められた表示形態で登録画面ＲＣ１を表示部１３に表示してもよい。処理部１１は、例えば、標識試薬が他社製あるいは市販の場合、上記したとおり、登録内容に関する情報はオペレータによって手入力される。そこで、例えば、登録画面ＲＣ１における「輝点情報」において共通して登録することが予想される、第１輝点を示す「Ｇ」、第２輝点を示す「Ｒ」、及び第３輝点を示す「Ｆ」を予め表示してもよい。具体的には、登録画面ＲＣ１を表示部１３に表示する際に、「陽性パターン名」の「輝点情報」において「Ｇ Ｒ Ｆ 」と予め表示することによって、オペレータには、「 （スペース）」の部分にのみ、０、１、２又は３を登録させるように促すことができる。

【0094】

上記構成によれば、新たな輝点パターンに関する情報の登録を行う際のオペレータの負担が軽減される。

【0095】

図３に戻り、処理部１１の判定部２５は、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する。

【0096】

以下では、判定処理の一例について説明する。一例として、細胞が染色体異常を有する異常細胞であるか否かの判定方法について説明する。

【0097】

図７（ａ）は、染色体異常を有していない正常細胞の輝点の配置例つまり輝点パターン（陰性パターン）を例示し、図７（ｂ）〜（ｄ）は異常細胞の輝点パターン（陽性パターン）を例示している。なお、図７（ａ）〜（ｄ）のいずれにおいても、各画像には第３画像を重ね合わせた状態で表示している。

【0098】

図７（ａ）に示すように、ＢＣＲ遺伝子座とＡＢＬ遺伝子座の転座等の染色体に異常が生じていない場合、それぞれの遺伝子は１つの核内に１対ずつ、各対立遺伝子が独立して存在する。したがって、第１画像において、第１輝点は１つの核領域内に２つ存在する。また、第２画像において、第２輝点は１つの核領域内に２つ存在する。この場合、同じ大きさで撮像された第１画像と第２画像とを重ね合わせて合成すると、合成画像においては、２つの第１輝点と２つの第２輝点とが、１つの核領域内に重ならずに存在することになる。そのため、図７（ａ）に示すように核領域内に第１輝点及び第２輝点が２つずつ存在する細胞は、染色体異常が認められない、つまり染色体異常が陰性の正常細胞であると判定する。

【0099】

陽性パターンの一例をＢＣＲ／ＡＢＬ融合遺伝子を標的とするプローブ［Cytocell BCR/ABL Translocation, Extra Signal (ES) Probe (シスメックス株式会社)］（以下、単に「ＥＳプローブ」ということがある）を使用した場合を例にして説明する。なお、ＢＣＲ／ＡＢＬ融合遺伝子を標的とするプローブは複数種存在する。

【0100】

図８は、各プローブがハイブリダイズする標的部位の一例を示す図である。ＢＣＲ遺伝子は染色体２２ｑ１１．２２−ｑ１１．２３に位置し、ＢＣＲ遺伝子座にハイブリダイズするプローブは第１蛍光（例えば、緑）で標識されている。ＡＢＬ遺伝子は染色体９ｑ３４．１１−ｑ３４．１２に位置し、ＡＢＬ遺伝子座にハイブリダイズするプローブは第２蛍光（例えば、赤）で標識されている。図８Ａは、上述のＥＳプローブの結合部位を示し、図８Ｂは、Cytocell BCR/ABL Translocation, Dual Fusion (DF) Probe (シスメックス株式会社、Cat No. LPH007)（以下、単に「ＤＦプローブ」ということがある）の結合部位を示す。

【0101】

図７（ｂ）に示すように、転座によりＡＢＬ遺伝子座の一部が９番染色体に移動している場合、第１画像において、第１輝点は核内に２点存在し、第２画像において、第２輝点は核内に３点存在する。この場合に、第１画像と第２画像とを合成すると、合成画像においては、１つの第１輝点と、２つの第２輝点と、第１輝点及び第２輝点が互いに重なった１つの第４蛍光（例えば黄色）の輝点（融合輝点）とが、１つの核内に存在することになる。そのため、図７（ｂ）に示すように各輝点が存在する細胞は、ＢＣＲ遺伝子とＡＢＬ遺伝子について転座が生じている、つまり染色体異常が陽性の異常細胞であると判定する。

【0102】

図７（ｃ）に示すように、転座によりＢＣＲ遺伝子座の一部が２２番染色体に移動し、ＡＢＬ遺伝子の一部が９番染色体に移動している場合、第１画像において、第１輝点は核内に３点存在し、第２画像において、第２輝点は核内に３点存在する。この場合に、第１画像と第２画像とを合成すると、合成画像においては、１つの第１輝点と、１つの第２輝点と、第１輝点及び第２輝点が互いに重なった２つの融合輝点とが、１つの核内に存在することになる。そのため、図７（ｃ）に示すように各輝点が存在する細胞は、ＢＣＲ遺伝子座とＡＢＬ遺伝子座について転座が生じている、つまり染色体異常が陽性の異常細胞であると判定する。

【0103】

図７（ｄ）に示すように、転座によりＡＢＬ遺伝子座が９番染色体に移動している場合、第１画像において、第１輝点は核内に２点存在し、第２画像において、第２輝点は核内に２点存在する。この場合に、第１画像と第２画像を合成すると、合成画像において、１つの第１輝点と、１つの第２輝点と、第１輝点及び第２輝点が互いに重なった１つの融合輝点とが、１つの核内に存在することになる。そのため、図７（ｄ）に示すように各輝点が存在する細胞は、ＢＣＲ遺伝子座とＡＢＬ遺伝子座について転座が生じている、つまり染色体異常が陽性の異常細胞であると判定する。

【0104】

上述したように、第１画像及び第２画像を合成した合成画像における各輝点の位置、数に基づき、細胞ごとに染色体異常を有する異常細胞であるかどうかを判定することができる。そのため、処理部１１は、細胞ごとに、蛍光画像の蛍光の輝点パターンとして、第１画像及び第２画像の合成画像の各輝点の位置ごとの数、つまり、第２輝点と重ならない位置の第１輝点の数と、第１輝点と重ならない位置の第２輝点の数と、第１輝点及び第２輝点が互いに重なる位置の融合輝点の数とをカウントする。例えば、図７（ｄ）では、輝点パターンを、単体の第１輝点の数を「１」、単体の第２輝点の数を「１」、第１輝点及び第２輝点からなる融合輝点の数を「１」として作成することができる。

【0105】

なお、第１輝点、第２輝点及び融合輝点は、色として示してもよい。例えば単体の第１輝点を緑（Ｇ）、単体の第２輝点を赤（Ｒ）、融合輝点を黄（Ｆ）として表すことができ、Ｇ、Ｒ、Ｆの直後に、それぞれ、Ｇ、Ｒ、Ｆの輝点の数を示すことで、輝点パターンとすることができる。例えば、図７（ｄ）では、輝点パターンが「Ｇ１Ｒ１Ｆ１」で表示することができる。

【0106】

また、蛍光画像の蛍光の輝点パターンとしては、上述した第１輝点の数を、第１画像における第１輝点の総数とし、上述した第２輝点の数を、第２画像における第２輝点の総数として作成することができる。例えば、図７（ｄ）では、輝点パターンを、第１画像における第１輝点の数を「２」、第２画像における第２輝点の数を「２」、合成画像における第１輝点及び第２輝点が互いに重なる融合輝点の数を「１」として作成し、「Ｇ２Ｒ２Ｆ１」と表示することができるが、意味は同じである。

【0107】

合成画像において、第１画像の第１輝点と第２画像の第２輝点とが重なっているか否かは、第１輝点及び第２輝点の互いに重なる領域の割合、例えば、第１輝点に含まれる複数の画素のうち、第２輝点に含まれる各画素と同じ位置（座標情報（ｘ、ｙ））にある画素の割合が閾値よりも大きいか否かで判定することができる。また、第１輝点の中心点（最も蛍光強度が高い画素の位置）と、第２輝点の中心点（最も蛍光強度が高い画素の位置）との距離が閾値よりも小さいか否かで判定することができる。

【0108】

なお、細胞ごとに取得する蛍光画像における蛍光の輝点パターンとしては、合成画像における輝点の色ごとの数であってもよい。つまり、各画像をグレースケールで表示することに代えて、第１画像の各画素の色をその画素値に基づく緑色の色階調（ＲＧＢ値）で表示し、第２画像の各画素の色を赤色の色階調（ＲＧＢ値）で表示する。そして、各画像を重ねて合成した際には、合成画像の各画素のＲＧＢ値の組み合わせに基づき、細胞が異常細胞であると、核領域に、緑色の第１輝点と、赤色の第２輝点と、第１輝点及び第２輝点が重なることで黄色の融合輝点とが存在する。よって、輝点パターンとして、輝点の色ごとの数をカウントすることでも、細胞が異常細胞であるか否かを判定できる。

【0109】

上記のとおり、処理部１１は、細胞ごとに取得した輝点パターンに基づいて、細胞が異常細胞であるか正常細胞であるかを判定する。本実施形態では、記憶部１２は、細胞が異常細胞であるか正常細胞であるかを判定するための参照パターン（測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターン）を記憶する。処理部１１は、細胞ごとに取得した輝点パターンと、記憶部１２に記憶された複数の参照パターンから選択部２３により選択された参照パターン（少なくとも一つの輝点パターン）とを比較することで、細胞ごとに異常細胞であるか否かを判定する。

【0110】

なお、参照パターンとは、例えば図７で示したような、染色体異常を有する異常細胞の蛍光画像における蛍光の輝点パターン（陽性パターン）、及び、染色体異常を有していない正常細胞の蛍光画像における蛍光の輝点パターン（陰性パターン）の少なくとも一方を含むものである。本実施形態では、参照パターンに、異常細胞の輝点パターン（陽性パターン）及び正常細胞の輝点パターン（陰性パターン）の両方を含んでいる。

【0111】

処理部１１は、輝点パターンの比較処理に関して、分析対象の細胞の輝点パターンが陰性パターンに合致する場合には、当該細胞が正常細胞であると判定する。一方、分析対象の細胞の輝点パターンが陰性パターンに合致しない場合には、典型陽性パターンと比較する。典型陽性パターンに合致する場合には、当該細胞が典型異常細胞であると判定する。一方で、典型陽性パターンに合致しない場合には、当該細胞が非典型異常細胞であると判定する。処理部１１は、同様の比較処理を分析対象の細胞の全てに対し繰り返し行って、細胞ごとに異常細胞又は正常細胞の判定を行う。処理部１１は、判定結果を細胞ごとに記憶部１２に記憶させる。

【0112】

上記のとおり、蛍光画像分析装置１は、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた輝点パターンは、陰性パターンを更に含み、処理部１１は、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、試料１０が、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンに該当するかを判定してもよい。

【0113】

上記構成によれば、陽性パターンのみならず、選択された輝点パターンに含まれる陰性パターンをさらに参照することができる。したがって、試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度をより向上させることができる。

【0114】

図３に戻り、処理部１１の表示制御部２７は、各種画面を表示部１３に表示するように制御する。各種画面は、例えば、上記した図４（ａ）に示す特定画面ＳＣ１と、図４（ｂ）に示す陽性パターン選択画面ＳＣ３と、図６に示す登録画面ＲＣ１と、後述する図９に示す判定結果画面ＲＣ３と、を含む。

【0115】

図９は、実施形態に係る表示部１３における判定結果画面ＲＣ３の一例を示す説明図である。図９に示すように、表示制御部２７は、分析対象の細胞ごとの判定結果に関する情報を表示部１３に表示させる。判定結果に関する情報として、処理部１１は、例えば、異常細胞と判定した細胞の蛍光画像（第１画像、第２画像及び第３画像の合成画像）、正常細胞と判定した細胞の蛍光画像（第１画像、第２画像及び第３画像の合成画像）等を、表示部１３に表示させる。

【0116】

図９の判定結果画面ＲＣ３では、分析対象の細胞のうち、所定の分析方法に基づき検出した細胞ごとに蛍光画像が縦横に並べて表示される。判定結果画面ＲＣ３には、細胞の分析に用いた測定項目３３が表示されるとともに、分析方法を選択可能な分析方法選択欄３４が設けられている。分析方法選択欄３４では、正常細胞の分析方法としてＤＦパターンを検出するか否かを選択できる。また、分析方法選択欄３４では、異常細胞の分析方法として、典型異常細胞（ＥＳメジャーパターン）を検出するか、非典型異常細胞（ＥＳマイナーパターン、ＥＳディリーションパターン）を検出するか等を選択できる。また、判定結果画面ＲＣ３には、分析方法選択欄３４で選択された分析方法に基づき検出された細胞について、異常細胞（ポジティブ）と判定された細胞の蛍光画像を表示させる選択肢、正常細胞（ネガティブ）と判定された細胞の蛍光画像を表示させる選択肢、分析した全ての細胞の蛍光画像を表示させる選択肢、を例えばプルダウン方式で選択可能な表示画像選択欄３８が設けられている。

【0117】

処理部１１は、分析方法選択欄３４で選択された分析方法に基づいて検出した細胞について、表示画像選択欄３８で選択された細胞の蛍光画像を判定結果画面ＲＣ３の画像表示欄３５に表示させる。画像表示欄３５に表示される細胞の蛍光画像には、細胞の蛍光画像ごとに、Ｃｅｌｌ ＩＤの他、異常細胞（ポジティブ）であるか正常細胞（ネガティブ）であるかの判定結果が表示される。なお、表示画像選択欄３８の選択に応じて、正常細胞と判定された細胞の蛍光画像、あるいは、分析した全ての細胞の蛍光画像を表示させることができる。

【0118】

これにより、オペレータ等は、異常細胞と判定された細胞の蛍光画像を表示部１３で観察することができる。なお、オペレータ等の観察により、異常細胞であると判定された細胞が正常細胞であると判断された場合には、処理部１１は、表示部１３に表示された異常細胞の蛍光画像の中から、オペレータ等に入力部１４により正常細胞であるとして選択され、改訂ボタン（「Ｒｅｖｉｓｅ Ｊｕｄｇｅｍｅｎｔ」）３６で改訂された異常細胞については正常細胞に判定結果を修正する。そして、処理部１１は、改訂後の判定結果を記憶部１２に記憶する。同様に、オペレータ等の観察者の観察により、正常細胞であると判定された細胞が異常細胞であると判断された場合には、処理部１１は、表示部１３に表示された正常細胞の蛍光画像の中から、オペレータ等に入力部１４で異常細胞であるとして選択され、改訂ボタン３６で改訂された正常細胞については異常細胞に判定結果を修正する。そして、処理部１１は、改訂後の判定結果を記憶部１２に記憶する。これにより、異常細胞及び正常細胞の検出精度を高めることができる。また、処理部１１は、改訂後の異常細胞あるいは正常細胞と判定した細胞の蛍光画像を表示部１３に再表示させることもできる。

【0119】

このように、処理部１１は、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定した結果を含む判定結果画面ＲＣ３を表示部１３に表示する。

【0120】

上記構成によれば、オペレータが判定結果を容易に把握することができる。

【0121】

処理部１１は、細胞ごとの異常細胞であるか否かの判定結果に基づいて、試料１０の判定結果に関する情報を生成する。例えば、処理部１１は、分析方法選択欄３４で選択された分析方法による分析結果に基づき、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を生成する処理を行う。異常細胞の数の割合及び正常細胞の数の割合は、例えば、検出した全ての細胞の数（異常細胞と判定した細胞の数及び正常細胞と判定した細胞の数の合算値）に対する割合であってもよいし、分析した細胞の総数に対する割合であってもよい。

【0122】

処理部１１は、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を記憶部１２に記憶させるとともに表示部１３に表示させる。図９の判定結果画面ＲＣ３の一例では、判定結果欄３７が設けられており、この判定結果欄３７に、異常細胞と判定した細胞の数及び割合、正常細胞と判定した細胞の数及び割合が表示されている。ここでは、判定結果欄３７に、判定結果が「Ｇ２Ｒ３Ｆ１」の典型異常細胞（ポジティブメジャー）の数及び割合、判定結果が「Ｇ３Ｒ３Ｆ３」の典型異常細胞（ポジティブマイナー）の数及び割合、判定結果が「Ｇ２Ｒ２Ｆ１」の非典型異常細胞（ポジティブエイティピカル）の数及び割合、及び、判定結果が「Ｇ２Ｒ２Ｆ０」の正常細胞（ネガティブ）の数及び割合が表示されている。なお、その他にも、例えば、分析方法選択欄３４で非典型異常細胞（ＥＳマイナーパターン、ＥＳディリーションパターン）を検出する分析方法が選択されると、判定結果が非典型異常細胞（ポジティブ）の数及び割合、判定結果が正常細胞（ネガティブ）の数及び割合等が分析結果欄３７に表示されてもよい。

【0123】

図９の判定結果欄３７に示すように、処理部１１は、判定された試料１０に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を表示部１３に表示する。

【0124】

上記構成によれば、オペレータは、判定された試料１０に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を容易に把握することができる。

【0125】

図９の画像表示欄３５及び判定結果欄３７に示すように、処理部１１は、判定された試料１０に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、判定された試料１０に含まれる細胞の蛍光画像とともに表示部１３に表示する。

【0126】

上記構成によれば、オペレータは、判定された試料１０に含まれる、異常細胞の数、異常細胞の割合、正常細胞の数、又は、正常細胞の割合の少なくとも一つの情報を、試料１０に含まれる細胞の蛍光画像と併せて確認することができる。

【0127】

図９の判定結果欄３７に示すように、処理部１１は、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターン（例えば、典型異常細胞（ポジティブメジャー））に関する判定結果を、他の陽性パターンに関する判定結果とは異なる表示形態で表示部１３に表示してもよい。例えば、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する情報を赤色で表示し、他の輝点パターンの情報は黒色で表示してもよい。また、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する情報をハイライト表示してもよい。さらに、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する情報を太字で表示してもよい。

【0128】

上記構成によれば、オペレータは、様々な判定結果を含む判定結果画面ＲＣ３において、異常細胞の数、又は、異常細胞の割合が最も多い陽性パターンに関する判定結果をより簡単に特定することができる。

【0129】

なお、試料１０の判定結果に関する情報としては、「陽性の可能性がある」、「陰性の可能性がある」等のテキスト情報等、他の様々な情報を、処理部１１は生成して表示部１３に表示させることができる。

【0130】

図１０は、図９に示す判定結果画面ＲＣ３の一部を拡大した図である。図９及び図１０に示すように、処理部１１は、判定結果に関する情報をグラフで表示したグラフ表示欄３２を含む判定結果画面ＲＣを表示部１３に表示してもよい。図１０に示すように、「Ｔｙｐｅ」に関する円グラフは、典型異常細胞、非典型異常細胞、及び正常細胞の割合を示し、「Ｎｅｇａ／Ｐｏｓｉ」に関する円グラフは、異常細胞と正常細胞との割合を示し、「Ｐｏｓｉｔｉｖｅ」に関する円グラフは、典型異常細胞及び非典型異常細胞の割合を示す。

【0131】

図９及び１０に示すように、処理部１１は、判定された試料１０に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報とともに、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すグラフ画像を表示部１３に表示してもよい。なお、円グラフに限られず、棒グラフ等の他のグラフで表示してもよい。

【0132】

上記構成によれば、オペレータは、判定された試料１０に含まれる、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合の少なくとも一方を示すテキスト情報をグラフ画像と併せて確認することができる。オペレータは、グラフ画像を確認できるので、異常細胞の割合、又は、正常細胞の割合を容易に把握することができる。

【0133】

以下、細胞の蛍光画像を分析するための処理手順を規定したコンピュータプログラムに基づき、処理部１１により実行される蛍光画像の分析方法の一例について、図１１を参照して説明する。図１１は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の動作の一例を説明するフローチャートである。なお、当該コンピュータプログラムは、予め図１に示す記憶部１２に格納されているが、例えばＣＤ−ＲＯＭ等のコンピュータ読み取り可能な可搬型記録媒体からインストールしてもよいし、例えば外部のサーバからネットワークを介してダウンロードしてインストールしてもよい。

【0134】

図１１に示すように、処理部１１は、例えば、撮像部１６０により撮像された生データを階調反転、グレースケール表示された第１〜第３画像を取得する（ステップＳ１）。処理部１１は、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得する（ステップＳ３）。処理部１１は、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、試料の測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に対応する１又は複数の輝点パターンを選択する（ステップＳ５）。処理部１１は、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する（ステップＳ７）。処理部１１は、判定結果を表示部１３に表示する（ステップＳ９）。以下、ステップＳ３の詳細は、図１２を参照して説明し、ステップＳ５の詳細は、図１３を参照して説明し、ステップＳ７の詳細は、図１４を参照して説明し、ステップＳ９の詳細は、図１５を参照して説明する。

【0135】

図１２は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の輝点パターンの取得処理の一例を説明するフローチャートである。図１２に示すように、図３に示す取得部２１は、図２（ｂ）の左端に示すように第３画像が取得された場合、第３画像上の各画素における輝度に基づいて、図２（ｂ）の中央に示すように輝度と度数のグラフを作成する（ステップＳ３１）。図２（ｃ）の左端に示すように第１画像が取得された場合、取得部２１は、第１画像上の各画素における輝度に基づいて、図２（ｃ）の中央に示すように輝度と度数のグラフを作成する（ステップＳ３３）。図２（ｄ）の左端に示すように第２画像が取得された場合、第１画像の場合と同様、取得部２１は、第２画像上の各画素における輝度に基づいて、図２（ｄ）の中央に示すように輝度と度数のグラフを作成する（ステップＳ３５）。取得部２１は、第３画像から核の領域を抽出し、第１画像および第２画像輝点から輝点の領域を抽出する（ステップＳ３７）。取得部２１は、抽出した核の領域、及び、輝点の領域に基づいて、輝点パターンを作成する（ステップＳ３９）。

【0136】

図１３は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の輝点パターンの選択処理の一例を説明するフローチャートである。図１３に示すように、図３に示す表示制御部２７は、測定項目及び標識試薬を特定するための特定画面ＳＣ１（図４（ａ）参照）を表示部１３に表示する（ステップＳ５１）。オペレータは、表示部１３に表示された特定画面ＳＣ１において測定項目を特定する（ステップＳ５３）。表示制御部２７は、測定項目が特定された後に、特定された測定項目の内容に応じたプローブ名を特定可能に、特定画面ＳＣ１を表示部１３に表示する（ステップＳ５５）。オペレータは、表示部１３に表示された特定画面ＳＣ１においてプローブ名を特定する（ステップＳ５７）。選択部２３は、特定された測定項目及びプローブ名に関連づけられた陽性パターンを選択する（ステップＳ５９）。

【0137】

図１４は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の判定処理の一例を説明するフローチャートである。図１４に示すように、図３に示す選択部２３は、記憶部１２に記憶された複数の参照パターンから参照パターン（少なくとも一つの輝点パターン）を選択する（ステップＳ７１）。判定部２５は、輝点パターンの比較処理に関して、分析対象の細胞の輝点パターンが陰性パターンに合致する場合には、ステップＳ７２でＹｅｓとなり、ステップＳ７３に進み、当該細胞が正常細胞であると判定する。一方、判定部２５は、分析対象の細胞の輝点パターンが陰性パターンに合致しない場合には、ステップＳ７２でＮｏとなり、ステップＳ７４に進み、典型陽性パターンと比較する。判定部２５は、典型陽性パターンに合致する場合には、ステップＳ７４でＹｅｓとなり、ステップＳ７５に進み、当該細胞が典型異常細胞であると判定する。一方で、判定部２５は、典型陽性パターンに合致しない場合には、ステップＳ７４でＮｏとなり、ステップＳ７６に進み、当該細胞が非典型異常細胞であると判定する。判定部２５は、同様の比較処理を分析対象の細胞の全てに対し繰り返し行って、細胞ごとに異常細胞又は正常細胞の判定を行う。判定部２５は、判定結果を細胞ごとに記憶部１２に記憶させる。

【0138】

図１５は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の判定処理の一例を説明するフローチャートである。図１５に示す判定処理は、最初に分析対象の細胞の輝点パターンが陽性パターンに合致するか否かを判定する点で、最初に分析対象の細胞の輝点パターンが陰性パターンに合致するか否かを判定する図１４に示す判定処理と相違する。図１５に示すように、図３に示す選択部２３は、記憶部１２に記憶された複数の参照パターンから参照パターン（少なくとも一つの輝点パターン）を選択する（ステップＳ８１）。判定部２５は、輝点パターンの比較処理に関して、分析対象の細胞の輝点パターンが典型陽性パターンに合致する場合には、ステップＳ８２でＹｅｓとなり、ステップＳ８３に進み、当該細胞が典型異常細胞であると判定する。一方、判定部２５は、分析対象の細胞の輝点パターンが典型陽性パターンに合致しない場合には、ステップＳ８２でＮｏとなり、ステップＳ８４に進み、非典型陽性パターンと比較する。判定部２５は、非典型陽性パターンに合致する場合には、ステップＳ８４でＹｅｓとなり、ステップＳ８６に進み、当該細胞が非典型異常細胞であると判定する。一方で、判定部２５は、非典型陽性パターンに合致しない場合には、ステップＳ８４でＮｏとなり、ステップＳ８５に進み、当該細胞が正常細胞であると判定する。判定部２５は、同様の比較処理を分析対象の細胞の全てに対し繰り返し行って、細胞ごとに異常細胞又は正常細胞の判定を行う。判定部２５は、判定結果を細胞ごとに記憶部１２に記憶させる。

【0139】

なお、図１４及び図１５に記載の判定処理において、陰性パターンは複数存在してもよい。つまり、分析対象の細胞の輝点パターンが陰性パターンに合致するか否かの判定において、分析対象の細胞の輝点パターンが複数の異なる陰性パターンと比較されてもよい。また、図１４及び図１５において、分析対象の細胞の輝点パターンが参照対象の陽性パターンのいずれにも該当しない場合、又は、分析対象の細胞の輝点パターンが参照対象の陰性パターンのいずれにも該当しない場合、エラーが発生したことを示す情報を表示部１３に表示してもよい。さらに、図１４及び図１５において、分析対象の細胞の輝点パターンが参照対象の陽性パターンのいずれにも該当しない場合、又は、分析対象の細胞の輝点パターンが参照対象の陰性パターンのいずれにも該当しない場合、当初参照対象ではなかった、他の陽性パターン又は他の陰性パターンを記憶部１２から読みだして分析対象の細胞の輝点パターンとの比較処理を実行してもよい。

【0140】

図１６は、実施形態に係る蛍光画像分析装置の処理部の表示制御処理の一例を説明するフローチャートである。図１６に示すように、図３に示す表示制御部２７は、判定部２５又は記憶部１２から判定結果を取得する（ステップＳ９１）。表示制御部２７は、判定結果を表示部１３に表示するための表示情報を生成し、生成した表示情報を表示部１３に出力する（ステップＳ９３）。表示部１３は、受信した表示情報に基づいて、図９に示す判定結果画面ＲＣ３を表示する（ステップＳ９５）。

【0141】

以上のとおり上記実施形態によれば、蛍光画像分析装置１が、蛍光画像における蛍光の輝点パターンを取得し、測定項目又は標識試薬の少なくとも一方に予め対応づけられた、１又は複数の陽性パターンを含む複数の輝点パターンから、少なくとも一つの輝点パターンを選択し、取得した輝点パターンと選択した輝点パターンとに基づいて、取得した輝点パターンが、選択した輝点パターンに含まれる１又は複数の陽性パターンのいずれに該当するかを判定する。よって、特別な技術者の熟練度に依存することなく輝点パターンを選択することができ、選択した輝点パターンを用いて試料１０の判定を行うことができる。したがって、施設の運用内容に依存することなく、試料に含まれる細胞の異常の有無の判定精度を向上させることができ、且つ、特別な技術者が不要となる。

【0142】

＜他の実施形態＞
上記実施形態は、本発明の理解を容易にするためのものであり、本発明を限定して解釈するものではない。本発明はその趣旨を逸脱することなく、変更／改良（たとえば、各実施形態を組み合わせること、各実施形態の一部の構成を省略すること）され得るとともに、本発明にはその等価物も含まれる。

【符号の説明】

【0143】

１：蛍光画像分析装置、１０：試料、１１：処理部、１２：記憶部、１３：表示部、１２０〜１２３：光源、１６０：撮像部、Ｂ：格納箱、Ｃ：コード、Ｄ：添付文書、Ｒ：読取装置

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】