知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
特開2021-138694ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製を阻害し、コロナウイルス疾患２０１９を処置する方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】特開2021-138694(P2021-138694A)
(43)【公開日】2021年9月16日
(54)【発明の名称】ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製を阻害し、コロナウイルス疾患２０１９を処置する方法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/4015 20060101AFI20210820BHJP
A61K 31/404 20060101ALI20210820BHJP
A61K 31/428 20060101ALI20210820BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20210820BHJP
A61K 31/472 20060101ALI20210820BHJP
A61K 31/425 20060101ALI20210820BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20210820BHJP
A61K 31/7052 20060101ALI20210820BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/10 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/18 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/20 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/22 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/32 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/34 20170101ALI20210820BHJP
A61K 47/38 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/14 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/24 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/40 20060101ALI20210820BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20210820BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20210820BHJP
【ＦＩ】
A61K31/4015
A61K31/404
A61K31/428
A61K31/519
A61K31/472
A61K31/425
A61K45/00
A61K31/7052
A61K9/08
A61K47/10
A61K47/18
A61K47/20
A61K47/22
A61K47/32
A61K47/34
A61K47/38
A61K47/14
A61K47/24
A61K47/40
A61K47/12
A61P43/00 121
【審査請求】未請求
【請求項の数】43
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
【全頁数】116
(21)【出願番号】特願2021-33098(P2021-33098)
(22)【出願日】2021年3月3日
(31)【優先権主張番号】62/986538
(32)【優先日】2020年3月6日
(33)【優先権主張国】US
(31)【優先権主張番号】63/038502
(32)【優先日】2020年6月12日
(33)【優先権主張国】US
(31)【優先権主張番号】63/065644
(32)【優先日】2020年8月14日
(33)【優先権主張国】US
(31)【優先権主張番号】63/149434
(32)【優先日】2021年2月15日
(33)【優先権主張国】US
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＥＦＬＯＮ
２．ＴＷＥＥＮ
３．ＴＲＩＴＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】593141953
【氏名又は名称】ファイザー・インク
(74)【代理人】
【識別番号】100133927
【弁理士】
【氏名又は名称】四本 能尚
(74)【代理人】
【識別番号】100147186
【弁理士】
【氏名又は名称】佐藤 眞紀
(74)【代理人】
【識別番号】100174447
【弁理士】
【氏名又は名称】龍田 美幸
(74)【代理人】
【識別番号】100185960
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 理愛
(72)【発明者】
【氏名】パドマヴァニ ベザワダ
(72)【発明者】
【氏名】ベンジャミン ジョセフ バーク
(72)【発明者】
【氏名】エマ ルイーズ ホーキング
(72)【発明者】
【氏名】ロバート ルイス ホフマン
(72)【発明者】
【氏名】ロバート スティーブン カニア
(72)【発明者】
【氏名】ジョナサン リチャード リリス
(72)【発明者】
【氏名】マシュー ネイサン オブライエン ララミー
(72)【発明者】
【氏名】クレメンティーナ ディミトロヴァ ペンシェヴァ
(72)【発明者】
【氏名】ブラッドレー ポール サリバン
(72)【発明者】
【氏名】アンドリュー ジョン ティール
(72)【発明者】
【氏名】マーチン デヴィッド ティショースト
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076BB01
4C076BB11
4C076CC35
4C076DD01
4C076DD37
4C076DD41
4C076DD43
4C076DD52
4C076DD55
4C076DD60
4C076DD63
4C076EE16
4C076EE23
4C076EE32
4C076FF61
4C084AA19
4C084MA02
4C084MA17
4C084MA52
4C084MA65
4C084NA14
4C084ZB33
4C084ZC75
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC07
4C086BC13
4C086BC30
4C086BC78
4C086CB08
4C086EA12
4C086EA16
4C086GA02
4C086GA07
4C086GA16
4C086MA02
4C086MA03
4C086MA05
4C086MA17
4C086MA52
4C086MA65
4C086NA14
4C086ZB33
4C086ZC75
(57)【要約】
【課題】ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製を阻害し、コロナウイルス疾患２０１９を処置する方法を提供する。【解決手段】本発明は、治療有効量のある特定のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤化合物またはそれらを含有する医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することによって、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法に関する。本発明はまた、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連コロナウイルスプロテアーゼを、治療有効量のＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２プロテアーゼ阻害剤、例えばＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２の３ＣＬプロテアーゼ阻害剤およびそれを含む組成物と接触させることを含む、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスのウイルス複製活性の阻害に関する。
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための、
（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、
（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン、
（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド、
エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および
（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、
または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物。
（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、
（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン、
（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド、
エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および
（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、
または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物。
【請求項2】
経口または静脈内投与される、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項3】
静脈内投与される、請求項２に記載の使用のための化合物。
【請求項4】
２４時間の期間にわたって間欠的に、または２４時間の期間にわたって継続的に投与される、請求項３に記載の使用のための化合物。
【請求項5】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、請求項１から４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項6】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製の阻害または防止における使用のための、
（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、
（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン、
（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド、
エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および
（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、
または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物。
（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、
（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、
（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン、
（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド、
エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および
（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、
または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物。
【請求項7】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、請求項６に記載の使用のための化合物。
【請求項8】
ＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための、化合物Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド。
【請求項9】
０．２ｇ／日〜４ｇ／日のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが投与される、請求項８に記載の使用のための化合物。
【請求項10】
０．３ｇ／日〜３ｇ／日のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが投与される、請求項９に記載の使用のための化合物。
【請求項11】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、静脈内持続注入によって投与される、請求項８から１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項12】
約０．３ｇ／日〜３ｇ／日のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、静脈内持続注入によって投与される、請求項１０に記載の使用のための化合物。
【請求項13】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、およそ０．５μＭの有効濃度（Ｃｅｆｆ）を維持するのに十分な量で、静脈内持続注入によって投与される、請求項１２に記載の使用のための化合物。
【請求項14】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、１種または複数の追加の治療剤と組み合わせて投与される、請求項８から１３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項15】
追加の治療剤が、レムデシビルおよびアジスロマイシンである、請求項１４に記載の使用のための化合物。
【請求項16】
レムデシビルが、静脈内持続注入によって併用投与される、請求項１５に記載の使用のための化合物。
【請求項17】
８．６±０．２、１１．９±０．２、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２から選択される、２シータ度の３つまたはそれよりも多いＸ線回折ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物（形態３）である結晶性化合物。
【請求項18】
２シータ度の粉末Ｘ線回折ピークが、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２である、請求項１７に記載の結晶性化合物。
【請求項19】
２シータ度の粉末Ｘ線回折ピークが、８．６±０．２、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２である、請求項１７に記載の結晶性化合物。
【請求項20】
２シータ度の粉末Ｘ線回折ピークが、８．６±０．２、１１．９±０．２、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２である、請求項１７に記載の結晶性化合物。
【請求項21】
ＣＯＶＩＤ−１９の処置における非経口使用のための水性液体組成物であって、
ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約２．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、
ｂ）１種または複数の共溶媒、
ｃ）場合により１種または複数の界面活性剤、および
ｄ）緩衝液
を含み、約１．５〜約６のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、約３０％（ｖ／ｖ）までである、使用のための水性液体組成物。
ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約２．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、
ｂ）１種または複数の共溶媒、
ｃ）場合により１種または複数の界面活性剤、および
ｄ）緩衝液
を含み、約１．５〜約６のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、約３０％（ｖ／ｖ）までである、使用のための水性液体組成物。
【請求項22】
１日当たり約１０００ｍＬまたはそれ未満の体積で静脈内投与され、約３〜約５のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、約２０％（ｖ／ｖ）までである、請求項２１に記載の使用のための組成物。
【請求項23】
ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、
ｂ）１種または複数の共溶媒が、ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、１種または複数の共溶媒の全量が、約１０％（ｖ／ｖ）までであり、
ｃ）１種または複数の界面活性剤が、存在する場合には、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択され、
ｄ）緩衝液が、酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される、請求項２２に記載の使用のための組成物。
ｂ）１種または複数の共溶媒が、ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、１種または複数の共溶媒の全量が、約１０％（ｖ／ｖ）までであり、
ｃ）１種または複数の界面活性剤が、存在する場合には、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択され、
ｄ）緩衝液が、酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される、請求項２２に記載の使用のための組成物。
【請求項24】
ａ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００およびＰＥＧ４００からなる群から選択される１種または２種の共溶媒を含み、
ｂ）１種または２種の界面活性剤が、存在する場合には、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸から選択され、
ｃ）緩衝液が、５０ｍＭまでのクエン酸である、請求項２３に記載の使用のための組成物。
ｂ）１種または２種の界面活性剤が、存在する場合には、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸から選択され、
ｃ）緩衝液が、５０ｍＭまでのクエン酸である、請求項２３に記載の使用のための組成物。
【請求項25】
静脈内持続注入によって投与され、投与される組成物の体積が、１日当たり約２５０ｍＬ〜約５００ｍＬである、請求項２４に記載の使用のための組成物。
【請求項26】
ａ）治療有効量のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、
ｂ）α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される複合体化剤であって、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約２５：１である、複合体化剤、ならびに
ｃ）緩衝液
を含む、医薬組成物。
ｂ）α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される複合体化剤であって、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約２５：１である、複合体化剤、ならびに
ｃ）緩衝液
を含む、医薬組成物。
【請求項27】
すぐに使用できるまたはすぐに希釈できる非経口溶液であり、
ａ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒を含んでいてもよく、
ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤をさらに含んでいてもよく、
ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含み、
ｄ）非経口溶液のｐＨが、約３〜約５である、請求項２６に記載の医薬組成物。
ａ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒を含んでいてもよく、
ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤をさらに含んでいてもよく、
ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含み、
ｄ）非経口溶液のｐＨが、約３〜約５である、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項28】
ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの濃度のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、
ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約８：１であり、
ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１５％（ｖ／ｖ）までであり、
ｄ）ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、
ｅ）緩衝液が、クエン酸である、請求項２７に記載の医薬組成物。
ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約８：１であり、
ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１５％（ｖ／ｖ）までであり、
ｄ）ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、
ｅ）緩衝液が、クエン酸である、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項29】
ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約８ｍｇ／ｍＬの濃度のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、
ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）およびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、
ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１０％（ｖ／ｖ）までである、請求項２８に記載の医薬組成物。
ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）およびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、
ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１０％（ｖ／ｖ）までである、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項30】
請求項２８に記載の医薬組成物を調製するための方法であって、
ａ）Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択される１種または複数の共溶媒に溶解させて、第１の非水性溶液を提供するステップと、
ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）を、クエン酸緩衝液および場合により界面活性剤を含有する含水溶液に溶解させて、第２の水溶液を提供するステップと、
ｃ）ステップａ）からの第１の非水性溶液を、ステップｂ）からの第２の水溶液と合わせて、前記医薬組成物を提供するステップと
を含む、方法。
ａ）Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択される１種または複数の共溶媒に溶解させて、第１の非水性溶液を提供するステップと、
ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）を、クエン酸緩衝液および場合により界面活性剤を含有する含水溶液に溶解させて、第２の水溶液を提供するステップと、
ｃ）ステップａ）からの第１の非水性溶液を、ステップｂ）からの第２の水溶液と合わせて、前記医薬組成物を提供するステップと
を含む、方法。
【請求項31】
約１．１％のエタノール（ｖ／ｖ）、約３．４％のＰＥＧ４００（ｖ／ｖ）、約８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−シクロデキストリン、約６ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、約５０ｍＭまでのクエン酸を含み、ｐＨが約４〜約５である、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項32】
非経口投与に適した溶液にすぐに再構成できる凍結乾燥物または粉末である、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項33】
ａ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒を含んでいてもよく、
ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、
ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含む、請求項３２に記載の医薬組成物。
ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、
ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含む、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項34】
非経口溶液にすぐに再構成できる粉末であり、粉末が、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物（形態３）を含む、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項35】
ＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための、請求項２６から２９および３１から３４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項36】
ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）複合体化剤、ｃ）緩衝液、ｄ）場合により１種または複数の共溶媒、およびｅ）場合により１種または複数の界面活性剤を含み、最終組成物が、約１．５〜約６のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、存在する場合には、全溶液の約１５％（ｖ／ｖ）までである、水性液体組成物。
【請求項37】
ａ）１日当たり約１０００ｍＬまたはそれ未満の体積で静脈内投与され、ｂ）約３〜約５のｐＨを有し、ｃ）存在する場合には、全溶液の約１０％（ｖ／ｖ）までの全量の１種または複数の共溶媒を有する、請求項３６に記載の組成物。
【請求項38】
ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約８．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される複合体化剤であって、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約２５：１である、複合体化剤、ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液、ｄ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒であって、１種または複数の共溶媒の全量が、存在する場合には、全溶液の約６％（ｖ／ｖ）までである、共溶媒、ならびにｅ）場合によりポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される１種または複数の界面活性剤を含む、請求項３７に記載の組成物。
【請求項39】
ａ）複合体化剤が、β−シクロデキストリンであり、ｂ）β−シクロデキストリンとＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約８：１であり、ｃ）緩衝液が、約５０ｍＭまでのクエン酸である、請求項３８に記載の組成物。
【請求項40】
ａ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１〜２種の共溶媒を含み、ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）およびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）からなる群から選択され、ｃ）界面活性剤が、存在する場合には、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸から選択される、請求項３９に記載の組成物。
【請求項41】
ａ）２種の共溶媒が、エタノールおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の一方であり、他方の共溶媒が、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、エタノールもしくはＤＭＳＯとＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００もしくはＰＧの比が、約１：２〜約１：４であり、または
２種の共溶媒が、エタノールおよびＤＭＳＯであり、エタノールとＤＭＳＯの比が、約１：２〜約１：４であり、ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、ｃ）クエン酸緩衝液の濃度が、約５０ｍＭまでである、請求項４０に記載の組成物。
２種の共溶媒が、エタノールおよびＤＭＳＯであり、エタノールとＤＭＳＯの比が、約１：２〜約１：４であり、ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、ｃ）クエン酸緩衝液の濃度が、約５０ｍＭまでである、請求項４０に記載の組成物。
【請求項42】
静脈内持続注入に適しており、組成物の体積が、約２５０ｍＬ〜約５００ｍＬである、請求項４１に記載の組成物。
【請求項43】
ＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための、請求項３６から４２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ウイルス複製活性を阻害する方法であって、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連３Ｃ様（「３ＣＬ」）プロテアーゼを治療有効量のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連３Ｃ様プロテアーゼ阻害剤と接触させるステップを含む、方法に関する。本発明はまた、治療有効量のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連３Ｃ様プロテアーゼ阻害剤を、それを必要とする患者に投与することによって、患者におけるコロナウイルス疾患２０１９（「ＣＯＶＩＤ−１９」）を処置する方法に関する。本発明はさらに、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法であって、治療有効量のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連３Ｃ様プロテアーゼ阻害剤を含む医薬組成物を、それを必要とする患者に投与するステップを含む、方法に関する。
【背景技術】
【0002】
コロナウイルス疾患２０１９（「ＣＯＶＩＤ−１９」）の世界的大流行は、２０１９年１２月、中国、湖北省、武漢に起源する曝露と関連付けられている。２０２０年３月初めまでに、ＣＯＶＩＤ−１９の大流行は、米国を含めた世界中の数々の国に拡大し、９３，０００を超える人が感染したことが確認されており、その結果、３，０００を超える人が死亡している。ＣＯＶＩＤ−１９の原因物質は、新規なコロナウイルスとして同定され、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（「ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２」）と命名された。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２のゲノム配列は、中国、武漢の患者９人から得られた分離株から配列決定され、ベータコロナウイルス（Betacoronovirus）属のサルベコウイルス亜属に属することが見出されている。Ｌｕ，Ｒ．ら、Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ、２０２０年１月２９日；ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／Ｓ０１４０−６７３６（２０）。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の配列は、中国東部の舟山で２０１８年に収集されたコウモリ由来の２種のＳＡＲＳ様コロナウイルス、ｂａｔ−ＳＬ−ＣｏＶＺＣ４５およびｂａｔ−ＳＬ−ＣｏＶＺＸＣ２１と８８％の相同性を有することが見出された。またＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２は、２００２〜２００３年のＳＡＲＳ大流行の原因物質である重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（「ＳＡＲＳ−ＣｏＶ」）と約７９％の相同性を共有し、２０１２に中東に起源する呼吸器ウイルス大流行の原因物質である中東呼吸器症候群コロナウイルス（「ＭＥＲＳ−ＣｏＶ」）と約５０％の相同性を共有することが見出された。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の１０３個の配列決定されたゲノムの近年の解析に基づいて、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２は、２つの主要な型（ＬおよびＳ型）に分けることができ、Ｓ型は祖先型であり、Ｌ型はＳ型から進化したものであると提唱されている。Ｌｕ，Ｊ．、Ｃｕｉ，Ｊ．ら、Ｏｎ ｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ ｃｏｎｔｉｎｕｉｎｇ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２；ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ｎｓｒ／ｎｗａａ０３６。ＳおよびＬ型は、８，７８２位（ｏｒｆ１ａｂ：Ｔ８５１７Ｃ、同義）および２８，１４４位（ＯＲＦ８：Ｃ２５１Ｔ、Ｓ８４Ｌ）において固く連結したちょうど２つのＳＮＰによって、明確に定義付けることができる。解析した１０３個のゲノムにおいて、およそ７０％がＬ型であり、およそ３０％がＳ型であった。Ｓ型からのＬ型の進化が、ヒトにおいて生じたか、または動物由来感染症の中間物質を介して生じたかは不明であるが、Ｌ型は、Ｓ型よりも悪性度が高く、大流行を封じ込めるための試みにおけるヒトの干渉は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２大流行が始まった直後のＬおよびＳ型の相対的存在量に移行してきたと思われる。提唱されたＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２のＳ−およびＬ−サブタイプの発見により、個体が潜在的に、個々のサブタイプに逐次的に感染し得るか、または両方のサブタイプに同時に感染し得る可能性が高まっている。この進化しつつある脅威を考慮すると、ＣＯＶＩＤ−１９のための有効な処置およびＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスの複製を阻害する方法が、当技術分野において急速に必要とされている。
【0003】
近年の証拠は、ＣＯＶＩＤ−１９の原因物質である新規に発生したコロナウイルスＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２が、ウイルスの市中感染をもたらすヒトからヒトへの伝染能力を獲得したことを明らかに示している（疾病管理センター、ＣＤＣ）。アンギオテンシン２受容体、ＡＣＥ２と直接接触するその受容体結合モチーフ（ＲＢＭ）を含むＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２受容体結合ドメイン（「ＲＢＤ」）の配列は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶのＲＢＤおよびＲＢＭに類似しており、そのことは、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２が、その受容体としてＡＣＥ２を使用することを強力に示唆している。Ｙｕｓｈｕｎ Ｗａｎ，Ｙ．；Ｓｈａｎｇ，Ｊ．；Ｇｒａｈａｍ，Ｒ．；２、Ｂａｒｉｃ，Ｒ．Ｓ．；Ｌｉ，Ｆ．；Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｂｙ ｎｏｖｅｌ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｆｒｏｍ Ｗｕｈａｎ：Ａｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｄｅｃａｄｅ−ｌｏｎｇ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ＳＡＲＳ；Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．２０２０；ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００１２７−２０。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２のＲＢＭにおけるいくつかの非常に重要な残基（特に、Ｇｌｎ４９３）は、ヒトＡＣＥ２との好ましい相互作用を提供し、そのことはＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２のヒト細胞への感染能と合致している。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２のＲＢＭにおけるいくつかの他の非常に重要な残基（特に、Ａｓｎ５０１）は、ヒトＡＣＥ２と適合性があるが、ヒトＡＣＥ２に結合するには理想的ではなく、このことは、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２が、ヒトからヒトへの伝染に関する一部の能力においてＡＣＥ２結合を使用することを示唆している。
【0004】
コロナウイルスの複製および転写機能は、いわゆる「レプリカーゼ」遺伝子によってコードされ（Ｚｉｅｂｕｈｒ，Ｊ．、Ｓｎｉｊｄｅｒ，Ｅ．Ｊ．、およびＧｏｒｂａｌｅｙａ，Ａ．Ｅ．；Ｖｉｒｕｓ−ｅｎｃｏｄｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｉｎ Ｎｉｄｏｖｉｒａｌｅｓ．Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．２０００、８１、８５３〜８７９およびＦｅｈｒ，Ａ．Ｒ．；Ｐｅｒｌｍａｎ，Ｓ．；Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ：Ａｎ Ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ Ｔｈｅｉｒ Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２０１５；１２８２：１〜２３．ｄｏｉ：１０．１００７／９７８−１−４９３９−２４３８−７＿１）、その遺伝子は、ウイルスプロテアーゼによって広範にプロセシングされる２つの重複するポリタンパク質からなる。Ｃ近位領域は、１１個の保存されたドメイン間結合点において、コロナウイルスの主なまたは「３Ｃ様」プロテアーゼによってプロセシングされる（Ｚｉｅｂｕｈｒ、Ｓｎｉｊｄｅｒ、Ｇｏｒｂａｌｅｙａ、２０００およびＦｅｈｒ、Ｐｅｒｌｍａｎら、２０１５）。「３Ｃ様」プロテアーゼという名称は、コロナウイルス酵素と、周知のピコルナウイルス３Ｃプロテアーゼの間の、ある特定の類似性に由来する。これらの類似性には、基質選択、触媒作用における活性部位求核剤としてのシステインの使用、およびそれらの推定上の全体的なポリペプチドの折畳みの類似性が含まれる。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬプロテアーゼ配列（受託番号ＹＰ＿００９７２５３０１．１）は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶの３ＣＬプロテアーゼ（受託番号ＹＰ＿００９７２５３０１．１）と比較して、９６．０８％の相同性を共有することが見出された。Ｘｕ，Ｊ．；Ｚｈａｏ，Ｓ．；Ｔｅｎｇ，Ｔ．；Ａｂｄａｌｌａ，Ａ．Ｅ．；Ｚｈｕ，Ｗ．；Ｘｉｅ，Ｌ．；Ｗａｎｇ，Ｙ．；Ｇｕｏ，Ｘ．；Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｔｗｏ Ａｎｉｍａｌ−ｔｏ−Ｈｕｍａｎ Ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ Ｈｕｍａｎ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ：ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ ａｎｄ ＳＡＲＳ−ＣｏＶ；Ｖｉｒｕｓｅｓ ２０２０，１２，２４４；ｄｏｉ：１０．３３９０／ｖ１２０２０２４４。ごく最近になって、Ｈｉｌｇｅｎｆｅｌｄおよび同僚らは、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスの主なプロテアーゼ（３ＣＬ）の高分解能Ｘ線構造を公表した。Ｚｈａｎｇ，Ｌ．；Ｌｉｎ，Ｄ．；Ｓｕｎ，Ｘ．；Ｒｏｘ，Ｋ．；Ｈｉｌｇｅｎｆｅｌｄ，Ｒ．；Ｘ−ｒａｙ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｍａｉｎ Ｐｒｏｔｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｎｏｖｅｌ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ Ｅｎａｂｌｅｓ Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ａ−Ｋｅｔｏａｍｉｄｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ；ｂｉｏＲｘｉｖ ｐｒｅｐｒｉｎｔ ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／２０２０．０２．１７．９５２８７９。その構造は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２とＳＡＲＳ−ＣｏＶの３ＣＬプロテアーゼを比較した場合に差があることを示している。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ではなくＳＡＲＳ−ＣｏＶの３ＣＬプロテアーゼダイマーにおいては、各プロトマーの残基Ｔｈｒ２８５の側鎖ヒドロキシ基間に２．６０Åの水素結合を含み、Ｉｌｅ２８６とＴｈｒ２８５Ｃγ２の側鎖の間の疎水性接触によって支持された２つのドメインＩＩＩ間に、極性相互作用がある。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬにおいては、ＳＡＲＳ−ＣｏＶの３ＣＬにおける同じ残基と比較して、スレオニンはアラニンによって置き換えられ、イソロイシンはロイシンによって置き換えられている。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬプロテアーゼにおいて観察されたＴｈｒ２８５Ａｌａの置換えにより、２つのドメインＩＩＩは互いにいくらか近接することができる（分子ＡおよびＢにおける残基２８５のＣα原子間の距離は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶの３ＣＬプロテアーゼでは６．７７Åであり、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬプロテアーゼでは５．２１Åであり、２つのドメインＩＩＩの質量中心間の距離は、３３．４Åから３２．１Åに縮小する）。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬの活性部位において、Ｃｙｓ１４５およびＨｉｓ４１は、触媒作用的な二分染色体を形成し、これは、Ｈｉｓ４１に水素結合している埋没水分子と一緒になって、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬプロテアーゼの触媒作用的な二分染色体を構築するとみなすことができる。現在の世界的ＣＯＶＩＤ−１９大流行を引き起こした現在進行中のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の拡大を考慮すると、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製を阻害し、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する新しい方法を備えることが望ましい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0005】
【特許文献1】国際公開第２００５／１１３５８０号
【特許文献2】国際公開第０１／１４３２９Ａ１
【特許文献3】国際公開第９５０９８４３号
【特許文献4】米国特許第５４８４９２６号
【特許文献5】米国特許第６，９９５，１４２号
【特許文献6】米国特許第６，９５３，８５８号
【特許文献7】米国特許第７，１６９，９３２号
【特許文献8】国際公開第２００５／０５４２１４号
【特許文献9】国際公開第２００５／０５４１８７号
【非特許文献】
【0006】
【非特許文献1】Ｌｕ，Ｒ．ら、Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ、２０２０年１月２９日；ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０１６／Ｓ０１４０−６７３６（２０）
【非特許文献2】Ｌｕ，Ｊ．、Ｃｕｉ，Ｊ．ら、Ｏｎ ｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ ｃｏｎｔｉｎｕｉｎｇ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２；ｈｔｔｐ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１０９３／ｎｓｒ／ｎｗａａ０３６
【非特許文献3】Ｙｕｓｈｕｎ Ｗａｎ，Ｙ．；Ｓｈａｎｇ，Ｊ．；Ｇｒａｈａｍ，Ｒ．；２、Ｂａｒｉｃ，Ｒ．Ｓ．；Ｌｉ，Ｆ．；Ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｂｙ ｎｏｖｅｌ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｆｒｏｍ Ｗｕｈａｎ：Ａｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｄｅｃａｄｅ−ｌｏｎｇ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ＳＡＲＳ；Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．２０２０；ｄｏｉ：１０．１１２８／ＪＶＩ．００１２７−２０
【非特許文献4】Ｚｉｅｂｕｈｒ，Ｊ．、Ｓｎｉｊｄｅｒ，Ｅ．Ｊ．、およびＧｏｒｂａｌｅｙａ，Ａ．Ｅ．；Ｖｉｒｕｓ−ｅｎｃｏｄｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｉｎ Ｎｉｄｏｖｉｒａｌｅｓ．Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．２０００、８１、８５３〜８７９
【非特許文献5】Ｆｅｈｒ，Ａ．Ｒ．；Ｐｅｒｌｍａｎ，Ｓ．；Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ：Ａｎ Ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ Ｔｈｅｉｒ Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２０１５；１２８２：１〜２３．ｄｏｉ：１０．１００７／９７８−１−４９３９−２４３８−７＿１
【非特許文献6】Ｘｕ，Ｊ．；Ｚｈａｏ，Ｓ．；Ｔｅｎｇ，Ｔ．；Ａｂｄａｌｌａ，Ａ．Ｅ．；Ｚｈｕ，Ｗ．；Ｘｉｅ，Ｌ．；Ｗａｎｇ，Ｙ．；Ｇｕｏ，Ｘ．；Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｔｗｏ Ａｎｉｍａｌ−ｔｏ−Ｈｕｍａｎ Ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ Ｈｕｍａｎ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ：ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ ａｎｄ ＳＡＲＳ−ＣｏＶ；Ｖｉｒｕｓｅｓ ２０２０，１２，２４４；ｄｏｉ：１０．３３９０／ｖ１２０２０２４４
【非特許文献7】Ｚｈａｎｇ，Ｌ．；Ｌｉｎ，Ｄ．；Ｓｕｎ，Ｘ．；Ｒｏｘ，Ｋ．；Ｈｉｌｇｅｎｆｅｌｄ，Ｒ．；Ｘ−ｒａｙ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｍａｉｎ Ｐｒｏｔｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｎｏｖｅｌ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ Ｅｎａｂｌｅｓ Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ａ−Ｋｅｔｏａｍｉｄｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ；ｂｉｏＲｘｉｖ ｐｒｅｐｒｉｎｔ ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／２０２０．０２．１７．９５２８７９
【非特許文献8】Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ、１９９６、１９、１１５
【非特許文献9】Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９６、２９、１０
【非特許文献10】Ｎａｓｏｆｆら、ＰＮＡＳ ８８：５４６２〜５４６６、１９９１
【非特許文献11】Ｙｕら、Ｖｉｒａｌ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ５７４−５７７、Ｎｉｓｈｉｏｋａ、Ｓｕｚｕｋｉ ａｎｄ Ｍｉｓｈｉｒｏ（Ｅｄｓ．）；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｔｏｋｙｏ、１９９４
【非特許文献12】Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｎｅｕｍｏｎｉａ Ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ２０１９−ｎＣｏＶ（Ｔｒｉａｌ Ｖｅｒｓｉｏｎ ４）（利用可能なオンライン：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｈｃ．ｇｏｖ．ｃｎ／ｊｋｊ／ｓ３５７７／２０２００２／５７３３４０６１３ａｂ２４３ｂ３ａ７ｆ６１ｄｆ２６０５５１ｄｄ４／ｆｉｌｅｓ／ｃ７９１ｅ５ａ７ｅａ５１４９ｆ６８０ｆｄｃｂ３４ｄａｃ０ｆ５４ｅ．ｐｄｆ
【非特許文献13】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、８３、ｐｐ．５９５〜５９９（２００２）
【非特許文献14】Ｗａｔｅｒ−Ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ Ｄｒｕｇ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、Ｔｏｎｇ ａｎｄ Ｗｅｎ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｉｓｓｕｅ：「Ｏｎｅ ｍａｊｏｒ ｐｒｏｂｌｅｍ ｗｉｔｈ ｕｓｉｎｇ ｏｒｇａｎｉｃ ｃｏ−ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｉｓ ｔｈａｔ ｍｏｓｔ ｏｒｇａｎｉｃ ｃｏ−ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｗｉｌｌ ｃｏｍｐｅｔｅ ｆｏｒ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ＣＤ ｃａｖｉｔｙ，ａｎｄ ｔｈｕｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｃｏｍｐｌｅｘ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．」Ｔｏｎｇ，Ｗ．−Ｑ．；Ｗｅｎ，Ｈ；Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｆｏｒ Ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｉｎ Ｌｉｕ，Ｒ．（Ｅｄ．）Ｗａｔｅｒ Ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ Ｄｒｕｇ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、２０１８、ｐｐ１４９〜１７６
【非特許文献15】Ｐ．Ｌｉ、Ｌ．Ｚｈａｏ、Ｓ．Ｈ．Ｙａｌｋｏｗｓｋｙ、Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ ｏｎ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎｐｏｌａｒ ｄｒｕｇｓ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、８８（１９９９）１１０７〜１１１１
【非特許文献16】Ｈ．Ｖｉｅｒｎｓｔｅｉｎ、Ｐ．Ｗｅｉｓｓ−Ｇｒｅｉｌｅｒ、Ｐ．Ｗｏｌｓｃｈａｎｎ、Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｌｏｗ ｓｏｌｕｂｌｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ−ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、２５６（２００３）８５〜９４
【非特許文献17】Ｙ．Ｈｅ、Ｐ．Ｌｉ、Ｓ．Ｈ．Ｙａｌｋｏｗｓｋｙ、Ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｌｕａｓｔｅｒｏｎｅ ｉｎ ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ／ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、２６４（２００３）２５〜３４
【非特許文献18】Ｔ．Ｌｏｆｔｓｓｏｎ、Ｂ．Ｊ．Ｏｌａｆｓｄｏｔｔｉｒ、Ｈ．Ｆｒｉｄｒｉｋｓｄｏｔｔｉｒ、Ｓ．Ｊｏｎｓｄｏｔｔｉｒ、Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＳＡＩＤＳｓ：ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１（１９９３）９５〜１０１
【非特許文献19】Ｊ．Ｐｉｔｈａ、Ｔ．Ｈｏｓｈｉｎｏ、Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｏｎ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ ｗｉｔｈ ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ｏｒ ｗｉｔｈ ｍｅｔｈｙｌ ｏｒａｎｇｅ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、８０（１９９２）２４３〜２５１
【非特許文献20】Ｒ．Ａ．Ｓｉｎｇｅｒら、Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．２０１４、１８、２６
【非特許文献21】Ｚ．Ｐｅｎｇ，Ｊ．Ａ．Ｒａｇａｎら、Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．２０１４、１８、３６
【非特許文献22】Ｈ．Ｌｉら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９、５２、１２５５
【非特許文献23】Ｄｒａｇｏｖｉｃｈ，Ｐ．Ｓ．ら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ｂａｓｅｄ ｄｅｓｉｇｎ，ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ ｈｕｍａｎ ｒｈｉｎｏｖｉｒｕｓ ３Ｃ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．３．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｋｅｔｏｍｅｔｈｙｌｅｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ．Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，１９９９、４２：１２０３〜１２１２
【非特許文献24】Ｌｉｎ，Ｄ．ら、Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｒｕｐｉｎｔｒｉｖｉｒ；Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｈｉｎａ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｊｕｎｅ ２０１２ Ｖｏｌ．５５ Ｎｏ．６：１１０１〜１１０７ ｄｏｉ：１０．１００７／ｓ１１４２６−０１１−４４７８−５
【非特許文献25】http://www.rcsb.org/structure/3IWM
【非特許文献26】https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/YP_009725301.1
【非特許文献27】SchrodingerRelease 2019-1: Prime, Schrodinger, LLC, New York, NY, 2019.
【非特許文献28】DanielK. Gehlhaar, Gennady M. Verkhivker, Paul A. Rejto, Christopher J. Sherman,David R. Fogel, Lawrence J. Fogel, Stephan T. Freer, 「ＨＩＶ−１プロテアーゼによる阻害剤ＡＧ−１３４３の分子認識：進化的プログラミングによるコンホメーション的に柔軟なドッキング（Molecular recognition of the inhibitor AG-1343 by HIV-1 protease:conformationally flexible docking by evolutionary programming）」, Chemistry & Biology, Volume 2, Issue5, 1995, Pages 317-324.
【非特許文献29】DanielK. Gehlhaar, Djamal Bouzida,およびPaul A. Rejto, 「リガンド−タンパク質の構造予測における次元縮小：セリンプロテアーゼの共有結合阻害剤および部位特異的コンビナトリアルライブラリーの設計（Reduced Dimensionality in Ligand-Protein Structure Prediction:Covalent Inhibitors of Serine Proteases and Design of Site-DirectedCombinatorial Libraries）」RationalDrug Design. July 7, 1999, 292-311.
【非特許文献30】Tami J.Marrone, Brock A. Luty, Peter W. Rose, 「標的に結合した低分子の計算的に予測された構造および親和性からの高親和性リガンドの発見：仮想スクリーニング手法。（Discovering high-affinity ligands from the computationally predictedstructures and affinities of small molecules bound to a target: A virtualscreening approach.）」Perspectivesin Drug Discovery and Design 20, 209-230 (2000).
【非特許文献31】Ｂｏｒｅｎｆｒｅｕｎｄ，Ｅ．およびＰｕｅｒｎｅｒ，Ｊ．１９８５．Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｂｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｎｅｕｔｒａｌ ｒｅｄ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ．２４：１１９〜１２４
【非特許文献32】Ｐｒｏｍｅｇａ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｎｏ．２８８：ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）
【非特許文献33】Ｗｅｉｓｌｏｗ，Ｏ．Ｓ．、Ｋｉｓｅｒ，Ｒ．、Ｆｉｎｅ，Ｄ．Ｌ．、Ｂａｄｅｒ，Ｊ．、Ｓｈｏｅｍａｋｅｒ，Ｒ．Ｈ．およびＢｏｙｄ，Ｍ．Ｒ．１９８９．Ｎｅｗ Ｓｏｌｕｂｌｅ−Ｆｏｒｍａｚａｎ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ ＨＩＶ−１ Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ Ｅｆｆｅｃｔｓ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ Ｈｉｇｈ−Ｆｌｕｘ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｏｒ ＡＩＤＳ−Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ８１（０８）：５７７〜５８６
【非特許文献34】Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．２０１５ Ａｐｒ；５９（４）：２０８６〜２０９３．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＡＡＣ．０４７７９−１４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
【課題を解決するための手段】
【0008】
実施形態（Ｅｎ）は、本発明を説明するものであり、Ｅ１は、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法であって、それを必要とする患者に、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン；（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド；エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される治療有効量の化合物を投与するステップを含む、方法である。
【0009】
Ｅ２は、Ｅ１の方法であって、化合物が、経口または静脈内投与される、方法である。Ｅ３は、Ｅ２の方法であって、化合物が、静脈内投与される、方法である。Ｅ４は、Ｅ３の方法であって、化合物が、２４時間の期間にわたって間欠的に、または２４時間の期間にわたって継続的に投与される、方法である。Ｅ５は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエートまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ６は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレートまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ７は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ８は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ９は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１０は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１１は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１２は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１３は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１４は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オンまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１５は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１６は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエートまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。Ｅ１７は、Ｅ１〜Ｅ４のいずれか１つの方法であって、化合物が、（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、方法である。
【0010】
Ｅ１８は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製を阻害または防止する方法であって、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスプロテアーゼを、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン；（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド；エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される治療有効量の化合物と接触させるステップを含む、方法である。
【0011】
Ｅ１９は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製を阻害または防止する方法であって、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼを、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；およびＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される治療有効量の化合物と接触させるステップを含む、方法である。
【0012】
Ｅ２０は、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法であって、それを必要とする患者に、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン；（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド；エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される治療有効量の化合物、ならびに薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を投与するステップを含む、方法である。Ｅ２１は、Ｅ２０の方法であって、医薬組成物が、追加の治療剤をさらに含む、方法である。Ｅ２２は、Ｅ２１の方法であって、医薬組成物が、薬学的に許容されるインターフェロン、ｐ−糖タンパク質阻害剤およびＣＹＰ３Ａ４阻害剤の少なくとも１つをさらに含む、方法である。
【0013】
Ｅ２３は、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；およびＮ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物である。
【0014】
Ｅ２４は、Ｅ１の方法であって、それを必要とする患者に、レムデシビル、アジスロマイシン、クロロキンおよびヒドロキシクロロキンの１つまたは複数から選択される治療有効量の追加の治療剤をさらに投与するステップを含む、方法である。
【0015】
Ｅ２５は、Ｅ２４の方法であって、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩が投与される、方法である。
【0016】
Ｅ２６は、Ｅ２５の方法であって、レムデシビルおよびアジスロマイシンの一方または両方が投与される、方法である。
【0017】
Ｅ２７は、患者に、本明細書に記載される通りの薬学的に有効な量のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２プロテアーゼ阻害剤を投与することによって、前記患者におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３Ｃ様プロテアーゼ活性によって媒介される状態を処置する方法である。
【0018】
Ｅ２８は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連ウイルス感染症によって引き起こされた徴候を処置する手段として、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害を標的とする方法である。
【0019】
Ｅ２９は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２感染症によって引き起こされた徴候を、本明細書に記載される通りのＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２プロテアーゼ阻害剤を投与することによって処置するために使用することができるメンバーの機能を妨害する細胞またはウイルス経路を同定する方法である。
【0020】
Ｅ３０は、本明細書に記載される通りのＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２プロテアーゼ阻害剤を、他のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤の作用機序を理解するためのツールとして使用する方法である。
【0021】
Ｅ３１は、ＣＯＶＩＤ−１９などのＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２感染症によって引き起こされた徴候を処置するための阻害剤を同定する目的で、遺伝子の上方または下方調節をモニタリングするための遺伝子プロファイリング実験を行うために、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３Ｃ様プロテアーゼ阻害剤を使用する方法である。
【0022】
Ｅ３２は、ＣＯＶＩＤ−１９を処置するのに有効な量のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３Ｃ様プロテアーゼ阻害剤および薬学的に許容される担体を含有する、哺乳動物におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置するための医薬組成物である。
【0023】
Ｅ３３は、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを静脈内投与するステップを含む、方法である。
【0024】
Ｅ３４は、Ｅ３３の方法であって、０．２ｇ／日〜４ｇ／日のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、患者に投与される、方法である。
【0025】
Ｅ３５は、Ｅ３４の方法であって、０．３ｇ／日〜３ｇ／日のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、患者に投与される、方法である。
【0026】
Ｅ３６は、Ｅ３３〜Ｅ３５のいずれか１つの方法であって、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、静脈内持続注入によって患者に投与される、方法である。
【0027】
Ｅ３７は、Ｅ３６の方法であって、約０．３ｇ／日〜３ｇ／日のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、静脈内持続注入によって患者に投与される、方法である。
【0028】
Ｅ３８は、Ｅ３７の方法であって、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、およそ０．５μＭのＣｅｆｆを維持するのに十分な量で静脈内持続注入によって患者に投与される、方法である。
【0029】
Ｅ３９は、Ｅ３３〜Ｅ３８のいずれか１つの方法であって、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、１種または複数の追加の治療剤と組み合わせて投与される、方法である。
【0030】
Ｅ４０は、Ｅ３９の方法であって、追加の治療剤が、レムデシビルおよびアジスロマイシンである、方法である。
【0031】
Ｅ４１は、Ｅ４０の方法であって、レムデシビルが、静脈内持続注入によって併用投与される、方法である。
【0032】
Ｅ４２は、Ｅ４０の方法であって、アジスロマイシンが、静脈内持続注入によって併用投与される、方法である。
【0033】
Ｅ４３は、８．６±０．２、１１．９±０．２、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２から選択される、２シータ度の３つまたはそれよりも多いＸ線回折ピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを有する、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物（形態３）である結晶性化合物である。Ｅ４４は、２シータ度の粉末Ｘ線回折ピークが、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２である、請求項３７に記載の結晶性化合物である。Ｅ４５は、２シータ度の粉末Ｘ線回折ピークが、８．６±０．２、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２である、請求項３７に記載の結晶性化合物である。Ｅ４６は、２シータ度の粉末Ｘ線回折ピークが、８．６±０．２、１１．９±０．２、１４．６±０．２、１８．７±０．２および１９．７±０．２である、請求項３７に記載の結晶性化合物である。
【0034】
Ｅ４７は、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法であって、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約２．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）１種または複数の共溶媒、ｃ）場合により１種または複数の界面活性剤、およびｄ）緩衝液を含む水性液体組成物を非経口投与するステップを含み、最終組成物が、約１．５〜約６のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、約３０％（ｖ／ｖ）までである、方法である。
【0035】
Ｅ４８は、Ｅ４７の方法であって、組成物が、１日当たり約１０００ｍＬまたはそれ未満の体積で患者に静脈内投与され、約３〜約５のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、約２０％（ｖ／ｖ）までである、方法である。
【0036】
Ｅ４９は、Ｅ４８の方法であって、組成物が、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、ｂ）１種または複数の共溶媒が、ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、１種または複数の共溶媒の全量が、約１０％（ｖ／ｖ）までであり、ｃ）１種または複数の界面活性剤が、存在する場合には、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択され、ｄ）緩衝液が、酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸、および酒石酸からなる群から選択される、方法である。
【0037】
Ｅ５０は、Ｅ４９の方法であって、組成物が、ａ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００およびＰＥＧ４００からなる群から選択される１種または２種の共溶媒を含み、ｂ）１種または２種の界面活性剤が、存在する場合には、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択され、ｃ）緩衝液が、５０ｍＭまでのクエン酸である、方法である。
【0038】
Ｅ５１は、Ｅ５０の方法であって、組成物が、静脈内持続注入によって患者に投与され、患者に投与される組成物の体積が、１日当たり約２５０ｍＬ〜約５００ｍＬである、方法である。
【0039】
Ｅ５２は、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法であって、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）複合体化剤、ｃ）緩衝液、ｄ）場合により１種または複数の共溶媒、およびｅ）場合により１種または複数の界面活性剤を含む水性液体組成物を非経口投与するステップを含み、最終組成物が、約１．５〜約６のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、存在する場合には、全溶液の約１５％（ｖ／ｖ）までである、方法である。
【0040】
Ｅ５３は、Ｅ５２の方法であって、組成物が、ａ）１日当たり約１０００ｍＬまたはそれ未満の体積で患者に静脈内投与され、ｂ）約３〜約５のｐＨを有し、ｃ）存在する場合には、全溶液の約１０％（ｖ／ｖ）までの全量の１種または複数の共溶媒を有する、方法である。
【0041】
Ｅ５４は、Ｅ５３の方法であって、組成物が、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約８．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される複合体化剤であって、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約２５：１である、複合体化剤、ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液、ｄ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒であって、１種または複数の共溶媒の全量が、存在する場合には、全溶液の約６％（ｖ／ｖ）までである、共溶媒、ならびにｅ）場合によりポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から１種または複数選択される界面活性剤を含む、方法である。
【0042】
Ｅ５５は、Ｅ５４の方法であって、ａ）複合体化剤が、β−シクロデキストリンであり、ｂ）β−シクロデキストリンとＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約８：１であり、ｃ）緩衝液が、約５０ｍＭまでのクエン酸である、方法である。
【0043】
Ｅ５６は、Ｅ５５の方法であって、ａ）組成物が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１〜２種の共溶媒を含み、ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）およびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）からなる群から選択され、ｃ）界面活性剤が、存在する場合には、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸から選択される、方法である。
【0044】
Ｅ５７は、Ｅ５６の方法であって、ａ）２種の共溶媒が、エタノールおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の一方であり、他方の共溶媒が、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、エタノールもしくはＤＭＳＯとＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００もしくはＰＧの比が、約１：２〜約１：４であり、または２種の共溶媒が、エタノールおよびＤＭＳＯであり、エタノールとＤＭＳＯの比が、約１：２〜約１：４であり、ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、ｃ）クエン酸緩衝液の濃度が、約５０ｍＭまでである、方法である。
【0045】
Ｅ５８は、Ｅ５７の方法であって、組成物が、静脈内持続注入によって患者に投与され、患者に投与される組成物の体積が、１日当たり約２５０ｍＬ〜約５００ｍＬである、方法である。
【0046】
Ｅ５９は、ａ）治療有効量のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される複合体化剤であって、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約２５：１である、複合体化剤、ならびにｃ）緩衝液を含む、医薬組成物である。
【0047】
Ｅ６０は、Ｅ５９の医薬組成物であって、すぐに使用できるまたはすぐに希釈できる非経口溶液であり、ａ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒を含んでいてもよく、ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤をさらに含んでいてもよく、ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含み、ｄ）非経口溶液のｐＨが、約３〜約５である、医薬組成物である。
【0048】
Ｅ６１は、Ｅ６０の医薬組成物であって、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの濃度のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約８：１であり、ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１５％（ｖ／ｖ）までであり、ｄ）ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、ｅ）緩衝液が、クエン酸である、医薬組成物である。
【0049】
Ｅ６２は、Ｅ６１の医薬組成物であって、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約８ｍｇ／ｍＬの濃度のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１０％（ｖ／ｖ）までである、医薬組成物である。
【0050】
Ｅ６３は、Ｅ６２の医薬組成物であって、ａ）Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒に溶解させて、第１の非水性溶液を提供するステップと、ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）を、クエン酸緩衝液および場合により界面活性剤を含有する含水溶液に溶解させて、第２の水溶液を提供するステップと、ｃ）ステップａ）からの第１の非水性溶液を、ステップｂ）からの第２の水溶液と合わせて、前記医薬組成物を提供するステップとを含む方法によって調製された、医薬組成物である。
【0051】
Ｅ６４は、Ｅ６３の医薬組成物であって、約１．１％のエタノール（ｖ／ｖ）、約３．４％のＰＥＧ４００（ｖ／ｖ）、約８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−シクロデキストリン、約６ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、約５０ｍＭまでのクエン酸を含み、ｐＨが約４〜約５である、医薬組成物である。
【0052】
Ｅ６５は、Ｅ５９の医薬組成物であって、非経口投与に適した溶液にすぐに再構成できる凍結乾燥物（lyophile）または粉末である、医薬組成物である。
【0053】
Ｅ６６は、Ｅ６５の医薬組成物であって、ａ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒を含んでいてもよく、ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含む、医薬組成物である。
【0054】
Ｅ６７は、Ｅ６５の医薬組成物であって、非経口溶液にすぐに再構成できる粉末であり、粉末が、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物（形態３）を含む、医薬組成物である。
【0055】
Ｅ６８は、Ｅ１およびＥ４７〜Ｅ５８のいずれか１つの方法であって、１種または複数の追加の薬剤が、患者に投与され、１種または複数の追加の薬剤が、抗ウイルス薬、例えばレムデシビル、ガリデシビル、ファビピラビル／アビファビル、マルヌピラビル（mulnupiravir）（ＭＫ−４４８２／ＥＩＤＤ２８０１）、ＡＴ−５２７、ＡＴ−３０１、ＢＬＤ−２６６０、ファビピラビル、カモスタット、ＳＬＶ２１３エムトリシタビン（emtrictabine）／テノホビル（tenofivir）、クレブジン、ダルセトラピブ、ボセプレビルおよびＡＢＸ４６４、グルココルチコイド、例えばデキサメタゾンおよびヒドロコルチゾン、回復期血漿、組換えヒト血漿、例えばゲルゾリン（Ｒｈｕ−ｐ６５Ｎ）、モノクローナル抗体、例えばレグダンビマブ（regdanvimab）（Ｒｅｇｋｉｒｏｖａ）、ラブリズマブ（Ｕｌｔｏｍｉｒｉｓ）、ＶＩＲ−７８３１／ＶＩＲ−７８３２、ＢＲＩＩ−１９６／ＢＲＩＩ−１９８、ＣＯＶＩ−ＡＭＧ／ＣＯＶＩ ＤＲＯＰＳ（ＳＴＩ−２０２０）、バムラニビマブ（ＬＹ−ＣｏＶ５５５）、マブリリムマブ（mavrilimab）、レロンリマブ（ＰＲＯ１４０）、ＡＺＤ７４４２、レンジルマブ、インフリキシマブ、アダリムマブ、ＪＳ０１６、ＳＴＩ−１４９９（ＣＯＶＩＧＵＡＲＤ）、ラナデルマブ（Ｔａｋｈｚｙｒｏ）、カナキヌマブ（Ｉｌａｒｉｓ）、ジムシルマブおよびオチリマブ、抗体カクテル、例えばカシリビマブ／イムデビマブ（ＲＥＧＮ−Ｃｏｖ２）、組換え融合タンパク質、例えばＭＫ−７１１０（ＣＤ２４Ｆｃ／ＳＡＣＣＯＶＩＤ）、抗凝固剤、例えばヘパリンおよびアピキサバン、ＩＬ−６受容体アゴニスト、例えばトシリズマブ（Ａｃｔｅｍｒａ）およびサリルマブ（Ｋｅｖｚａｒａ）、ＰＩＫｆｙｖｅ阻害剤、例えばアプリモドジメシラート、ＲＩＰＫ１阻害剤、例えばＤＮＬ７５８、ＶＩＰ受容体アゴニスト、例えばＰＢ１０４６、ＳＧＬＴ２阻害剤、例えばダパグリフロジン（dapaglifozin）、ＴＹＫ阻害剤、例えばアビベルチニブ、キナーゼ阻害剤、例えばＡＴＲ−００２、ベムセンチニブ、アカラブルチニブおよびロスマピモド、Ｈ２遮断薬、例えばファモチジン、駆虫剤、例えばニクロサミド、フューリン阻害剤、例えばジミナゼンから選択される、方法である。
【0056】
本発明の処置実施形態の方法は、医療使用タイプの実施形態（例えば、以下のＥ１Ａ）またはその代わりに第２の医療使用タイプの実施形態（例えば、以下のＥ１Ｂ）としても解釈され得ると理解されるべきである。
【0057】
Ｅ１Ａは、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン；（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド；エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物である。
【0058】
Ｅ１Ｂは、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置のための医薬品の調製における使用のための、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン；（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド；エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物である。
【0059】
Ｅ２Ａは、経口または静脈内投与される、Ｅ１Ａによる使用のための化合物である。Ｅ３Ａは、静脈内投与される、Ｅ２Ａによる使用のための化合物である。Ｅ４Ａは、２４時間の期間にわたって間欠的に、または２４時間の期間にわたって継続的に投与される、Ｅ３Ａによる使用のための化合物である。Ｅ５Ａは、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエートまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ６Ａは、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレートまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ７Ａは、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ８Ａは、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ９Ａは、Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１０Ａは、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１１Ａは、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１２Ａは、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１３Ａは、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１４Ａは、（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オンまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１５Ａは、（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１６Ａは、エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエートまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。Ｅ１７Ａは、（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ１Ａ〜Ｅ４Ａのいずれか１つによる使用のための化合物である。
【0060】
Ｅ１８Ａは、患者におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製の阻害または防止における使用のための、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン；（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド；エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物である。
【0061】
Ｅ１９Ａは、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製の阻害または防止における使用のための、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；およびＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される化合物である。
【0062】
Ｅ２０Ａは、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための、（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−４−ヒドロキシ−３−オキソ−１−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）ブタン−２−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド；（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オン；（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミド；エチル（Ｅ，４Ｓ）−４−［［（２Ｒ，５Ｓ）−２−［（４−フルオロフェニル）メチル］−６−メチル−５−［（５−メチル−１，２−オキサゾール−３−カルボニル）アミノ］−４−オキソヘプタノイル］アミノ］−５−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ペンタ−２−エノエート、および（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミド、または薬学的に許容されるその塩からなる群から選択される治療有効量の化合物、ならびに薬学的に許容される担体を含む医薬組成物である。
【0063】
Ｅ２１Ａは、医薬組成物が、追加の治療剤をさらに含む、Ｅ２０Ａによる使用のための組成物である。Ｅ２２Ａは、医薬組成物が、薬学的に許容されるインターフェロン、ｐ−糖タンパク質阻害剤およびＣＹＰ３Ａ４阻害剤の少なくとも１つをさらに含む、Ｅ２０Ａによる使用のための組成物である。
【0064】
Ｅ２４Ａは、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための、レムデシビル、アジスロマイシン、クロロキンおよびヒドロキシクロロキンの１つまたは複数から選択される追加の治療剤をさらに含む、Ｅ１Ａによる使用のための組成物である。
【0065】
Ｅ２５Ａは、化合物が、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩である、Ｅ２４Ａによる使用のための組成物である。
【0066】
Ｅ２６Ａは、レムデシビルおよびアジスロマイシンの一方または両方が追加の治療剤である、Ｅ２５Ａによる使用のための組成物である。
【0067】
Ｅ４７Ａは、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約２．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）１種または複数の共溶媒、ｃ）場合により１種または複数の界面活性剤、およびｄ）緩衝液を含む水性液体組成物であって、最終組成物が、約１．５〜約６のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、約３０％（ｖ／ｖ）までである、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための水性液体組成物である。
【0068】
Ｅ４８Ａは、１日当たり約１０００ｍＬまたはそれ未満の体積で患者に静脈内投与され、約３〜約５のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、約２０％（ｖ／ｖ）までである、Ｅ４７Ａによる使用のための組成物である。
【0069】
Ｅ４９Ａは、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、ｂ）１種または複数の共溶媒が、ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、１種または複数の共溶媒の全量が、約１０％（ｖ／ｖ）までであり、ｃ）１種または複数の界面活性剤が、存在する場合には、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択され、ｄ）緩衝液が、酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸、および酒石酸からなる群から選択される、Ｅ４８Ａによる使用のための組成物である。
【0070】
Ｅ５０Ａは、ａ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００およびＰＥＧ４００からなる群から選択される１種または２種の共溶媒を含み、ｂ）１種または２種の界面活性剤が、存在する場合には、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択され、ｃ）緩衝液が、５０ｍＭまでのクエン酸である、Ｅ４９Ａによる使用のための組成物である。
【0071】
Ｅ５１Ａは、静脈内持続注入によって患者に投与され、患者に投与される組成物の体積が、１日当たり約２５０ｍＬ〜約５００ｍＬである、Ｅ５０Ａによる使用のための組成物である。
【0072】
Ｅ５２Ａは、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）複合体化剤、ｃ）緩衝液、ｄ）場合により１種または複数の共溶媒、およびｅ）場合により１種または複数の界面活性剤を含む水性液体組成物であって、最終組成物が、約１．５〜約６のｐＨを有し、１種または複数の共溶媒の全量が、存在する場合には、全溶液の約１５％（ｖ／ｖ）までである、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための水性液体組成物である。
【0073】
Ｅ５３Ａは、ａ）１日当たり約１０００ｍＬまたはそれ未満の体積で患者に静脈内投与され、ｂ）約３〜約５のｐＨを有し、ｃ）存在する場合には、全溶液の約１０％（ｖ／ｖ）までの全量の１種または複数の共溶媒を有する、Ｅ５２Ａによる使用のための組成物である。
【0074】
Ｅ５４Ａは、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約８．０ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される複合体化剤であって、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約２５：１である、複合体化剤、ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液、ｄ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒であって、１種または複数の共溶媒の全量が、存在する場合には、全溶液の約６％（ｖ／ｖ）までである、共溶媒、ならびにｅ）場合によりポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される１つまたは複数の界面活性剤を含む、Ｅ５３Ａによる使用のための組成物である。
【0075】
Ｅ５５Ａは、ａ）複合体化剤が、β−シクロデキストリンであり、ｂ）β−シクロデキストリンとＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約８：１であり、ｃ）緩衝液が、約５０ｍＭまでのクエン酸である、Ｅ５４Ａによる使用のための組成物である。
【0076】
Ｅ５６Ａは、ａ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１〜２種の共溶媒を含み、ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）およびスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）からなる群から選択され、ｃ）界面活性剤が、存在する場合には、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸から選択される、Ｅ５５Ａによる使用のための組成物である。
【0077】
Ｅ５７Ａは、ａ）２種の共溶媒が、エタノールおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の一方であり、他方の共溶媒が、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、エタノールもしくはＤＭＳＯとＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００もしくはＰＧの比が、約１：２〜約１：４であり、または２種の共溶媒が、エタノールおよびＤＭＳＯであり、エタノールとＤＭＳＯの比が、約１：２〜約１：４であり、ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、ｃ）クエン酸緩衝液の濃度が、約５０ｍＭまでである、Ｅ５６Ａによる使用のための組成物である。
【0078】
Ｅ５８Ａは、静脈内持続注入によって患者に投与され、患者に投与される組成物の体積が、１日当たり約２５０ｍＬ〜約５００ｍＬである、Ｅ５７Ａによる使用のための組成物である。
【0079】
Ｅ５９Ａは、ａ）治療有効量のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩、ｂ）α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される複合体化剤であって、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約２５：１である、複合体化剤、ならびにｃ）緩衝液を含む、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置における使用のための医薬組成物である。
【0080】
Ｅ６０Ａは、医薬組成物が、すぐに使用できるまたはすぐに希釈できる非経口溶液であり、ａ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒を含んでいてもよく、ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤をさらに含んでいてもよく、ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含み、ｄ）非経口溶液のｐＨが、約３〜約５である、Ｅ５９Ａによる使用のための組成物である。
【0081】
Ｅ６１Ａは、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約１６ｍｇ／ｍＬの濃度のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約１．５：１〜約８：１であり、ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１５％（ｖ／ｖ）までであり、ｄ）ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、ｅ）緩衝液が、クエン酸である、Ｅ６０Ａによる使用のための組成物である。
【0082】
Ｅ６２Ａは、ａ）約０．２ｍｇ／ｍＬ〜約８ｍｇ／ｍＬの濃度のＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を含み、ｂ）複合体化剤が、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）であり、複合体化剤とＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのモル比が、約２：１〜約６：１であり、ｃ）１種または２種の共溶媒が、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択され、共溶媒の全濃度が、全溶液の約１０％（ｖ／ｖ）までである、Ｅ６１Ａによる使用のための組成物である。
【0083】
Ｅ６３Ａは、医薬組成物が、ａ）Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドまたは薬学的に許容されるその塩を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒に溶解させて、第１の非水性溶液を提供するステップと、ｂ）ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）またはスルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−β−ＣＤ）を、緩衝液および場合により界面活性剤を含有する含水溶液に溶解させて、第２の水溶液を提供するステップと、ｃ）ステップａ）からの第１の非水性溶液を、ステップｂ）からの第２の水溶液と合わせて、前記医薬組成物を提供するステップとを含む方法によって調製される、Ｅ６２Ａによる使用のための組成物である。
【0084】
Ｅ６４Ａは、医薬組成物が、約１．１％のエタノール（ｖ／ｖ）、約３．４％のＰＥＧ４００（ｖ／ｖ）、約８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−シクロデキストリン、約６ｍｇ／ｍＬのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、約５０ｍＭまでのクエン酸を含み、ｐＨが約４〜約５である、Ｅ６３Ａによる使用のための組成物である。
【0085】
Ｅ６５Ａは、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の非経口投与による処置における使用に適した溶液にすぐに再構成できる凍結乾燥物または粉末である、Ｅ５９Ａによる使用のための組成物である。
【0086】
Ｅ６６Ａは、ａ）ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコール（ＰＧ）からなる群から選択される１種または複数の共溶媒を含んでいてもよく、ｂ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸からなる群から選択される界面活性剤を含んでいてもよく、ｃ）酢酸、クエン酸、乳酸、リン酸および酒石酸からなる群から選択される緩衝液を含む、Ｅ６５Ａによる使用のための組成物である。
【0087】
Ｅ６７Ａは、医薬組成物が、非経口溶液にすぐに再構成できる粉末であり、粉末が、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物（形態３）を含む、Ｅ６５Ａによる使用のための組成物である。
【0088】
Ｅ６８Ａは、レムデシビル、ガリデシビル、ファビピラビル／アビファビル、マルヌピラビル（ＭＫ−４４８２／ＥＩＤＤ２８０１）、ＡＴ−５２７、ＡＴ−３０１、ＢＬＤ−２６６０、ファビピラビル、カモスタット、ＳＬＶ２１３エムトリシタビン／テノホビル、クレブジン、ダルセトラピブ、ボセプレビル、ＡＢＸ４６４、デキサメタゾン、ヒドロコルチゾン、回復期血漿、ゲルゾリン（Ｒｈｕ−ｐ６５Ｎ）、レグダンビマブ（Ｒｅｇｋｉｒｏｖａ）、ラブリズマブ（Ｕｌｔｏｍｉｒｉｓ）、ＶＩＲ−７８３１／ＶＩＲ−７８３２、ＢＲＩＩ−１９６／ＢＲＩＩ−１９８、ＣＯＶＩ−ＡＭＧ／ＣＯＶＩ ＤＲＯＰ（ＳＴＩ−２０２０）、バムラニビマブ（ＬＹ−ＣｏＶ５５５）、マブリリムマブ、レロンリマブ（ＰＲＯ１４０）、ＡＺＤ７４４２、レンジルマブ、インフリキシマブ、アダリムマブ、ＪＳ０１６、ＳＴＩ−１４９９（ＣＯＶＩＧＵＡＲＤ）、ラナデルマブ（Ｔａｋｈｚｙｒｏ）、カナキヌマブ（Ｉｌａｒｉｓ）、ジムシルマブ、オチリマブ、カシリビマブ／イムデビマブ（ＲＥＧＮ−Ｃｏｖ２）、ＭＫ−７１１０（ＣＤ２４Ｆｃ／ＳＡＣＣＯＶＩＤ）、ヘパリン、アピキサバン、トシリズマブ（Ａｃｔｅｍｒａ）、サリルマブ（Ｋｅｖｚａｒａ）、アプリモドジメシラート、ＤＮＬ７５８、ＰＢ１０４６、ダパグリフロジン、アビベルチニブ、ＡＴＲ−００２、ベムセンチニブ、アカラブルチニブ、ロスマピモド、ファモチジン、ニクロサミドおよびジミナゼンからなる群から選択される１種または複数の追加の薬剤が、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９の処置のために使用される、Ｅ１Ａ〜Ｅ２６ＡおよびＥ４７Ａ〜Ｅ６７Ａのいずれか１つによる使用のための組成物。
【図面の簡単な説明】
【0089】
【図1】活性部位において示される、阻害剤化合物を伴うＳＡＲＳ−ＣｏＶとＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の間の残基の差の図。
【図2】コアにドッキングしたリガンド（化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド）を含む、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬの相同性モデルの結合部位。
【図3】ＳＡＲＳに対するＦＲＥＴベースのＩＣ５０値と比較したＣＯＶＩＤ−１９の予測されたΔＧ間のフィット。
【図4】Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドとＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏの代表的なサーマルシフト結合データ。
【図5】ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２に対する、レムデシビルと組み合わせたＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの抗ウイルス活性の３次元図。
【図5A】０ｎＭ、４８ｎＭ、９５ｎＭおよび１９０ｎＭのレムデシビルの存在下での、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの濃度関数としての活性（％）。
【図6】Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物、形態３のＰＸＲＤパターン。
【図7】Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、形態１のＰＸＲＤパターン。
【図8】Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、形態２のＰＸＲＤパターン。
【図9】Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、形態２の１３Ｃ固体状態のＮＭＲスペクトル。
【図10】目視による沈殿の観察を、エタノールに対して様々な体積分率のＰＥＧ４００を含有する溶液中、様々なＰＦ−００８３５２３１の濃度の製剤について記録した。
【図11】全共溶媒パーセント（％ｖ／ｖ）対シクロデキストリンとＰＦ−００８３５２３１比。
【図12】エタノール、ＰＥＧ４００およびＳＢＥ−β−シクロデキストリン、ならびに２、４、６および８ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１を含有するＰＦ−００８３５２３１製剤の７日間にわたるアッセイ値。
【図13】−２０℃（上）、４℃（中央）および２５℃（下）における、８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−シクロデキストリン、４．５％ｖ／ｖの全共溶媒（１．１％ｖ／ｖのエタノール、３．４％ｖ／ｖのＰＥＧ４００）、および６ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１溶液の安定性。
【図14】４０℃（上）および２２℃（下）におけるｐＨ４（黒色、白丸）およびｐＨ５（灰色、黒丸）のＣＤを含む（破線）およびＣＤを含まない（実線）溶液中の、ＰＦ−００８３５２３１の化学的安定性。
【発明を実施するための形態】
【0090】
本発明の詳細な説明本発明の目的では、本明細書に記載され、特許請求される通り、以下の用語が以下の通り定義される。
【0091】
本明細書で使用される場合、「含む（comprising）」および「含む（including）」という用語は、それらのオープンで非限定的な意味で使用される。「処置する」という用語は、本明細書で使用される場合、別段指定されない限り、このような用語が適用される状態の障害、またはこのような障害もしくは状態の１つもしくは複数の症状を逆転させ、軽減し、その進行を阻害し、または防止することを意味する。ＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法において、ＣＯＶＩＤ−１９は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルスによる感染によって患者において引き起こされた疾患であると理解されるべきである。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルスは、最初に発見されたウイルス株、ならびに出現する変異株、例えばそれに限定されるものではないが、Ｂ．１．１．７（ＵＫ変異株）、Ｂ．１．３５１（南アメリカ変異株）およびＰ．１（ブラジル変異株）などの株を包含すると理解されるべきである。「処置」という用語は、本明細書で使用される場合、別段指定されない限り、「処置する」が直前に定義されるような、処置する行為を指す。
【0092】
「薬学的に許容される塩」という句は、本明細書で使用される場合、別段指定されない限り、本明細書に記載される化合物中に存在し得る酸性または塩基性の基の塩を含む。本発明の方法において使用される塩基性の性質の化合物は、様々な無機および有機酸と多種多様な塩を形成することができる。このような塩基性化合物の薬学的に許容される酸付加塩を調製するために使用され得る酸は、非毒性の酸付加塩、すなわち薬理学的に許容できるアニオンを含有する塩、例えば酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、炭酸水素塩、重硫酸塩、酒石酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物塩、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物塩、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩（edislyate）、エストレート、エシレート、エチルコハク酸塩、フマル酸塩、グルセプチン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオジド（triethiodode）、および吉草酸塩を形成する酸である。本発明において使用される化合物は、薬学的に許容される塩として存在することに加えて、共結晶として存在し得ると理解されるべきである。
【0093】
本発明の方法において使用される化合物に関して、その化合物が互変異性体形態としても存在する場合、本発明は、このようなすべての互変異性体およびそれらの混合物の使用に関する。
【0094】
本発明の主題はまた、１つまたは複数の原子が、自然に通常見出される原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられることを除き、本明細書に記載されるものと同一の同位体標識化合物を用いてＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法およびＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２を阻害する方法を含む。本発明の化合物に組み込まれ得る同位体の例として、水素、炭素、窒素、酸素、亜リン酸、フッ素および塩素の同位体、それぞれ、例えば２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、および３６Ｃｌが挙げられる。前述の同位体および／または他の原子の同位体を含有する、本発明の化合物、そのプロドラッグ、および前記化合物または前記プロドラッグの薬学的に許容される塩は、本発明の範囲内にある。本発明のある特定の同位体標識化合物、例えば３Ｈおよび１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれている化合物は、薬物および／または基質組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム標識、すなわち３Ｈ、および炭素−１４、すなわち１４Ｃ同位体は、調製および検出性が容易なので、特に好ましい。さらに、重水素、すなわち２Ｈなどのより重い同位体による置換は、より高い代謝安定性から生じるある特定の治療上の利点、例えばインビボ半減期の増大または必要投薬量の低減をもたらすことができ、したがって一部の環境において好ましい場合がある。本発明の方法において使用される同位体標識化合物およびそのプロドラッグは、一般に、非同位体標識試薬の代わりに容易に利用可能な同位体標識試薬を用いることによって、当技術分野において開示されている化合物を調製するための手段を行うことによって調製することができる。
【0095】
本発明はまた、本発明の化合物のプロドラッグを投与することによって、医薬組成物を使用する方法およびＣＯＶＩＤ−１９感染症を処置する方法を包含する。遊離アミドまたはヒドロキシ基を有する化合物は、プロドラッグに変換することができる。プロドラッグには、アミノ酸残基、または２つ以上（例えば、２つ、３つまたは４つ）のアミノ酸残基のポリペプチド鎖が、本発明の方法において使用される化合物のヒドロキシとのエステル結合によって共有結合的に結合している化合物が含まれる。アミノ酸残基には、それに限定されるものではないが、一般に３文字記号によって指定される２０種の自然に存在するアミノ酸が含まれ、４−ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリシン、デスモシン（demosine）、イソデスモシン（isodemosine）、３−メチルヒスチジン、ノルバリン、ベータ−アラニン、ガンマ−アミノ酪酸、シトルリンホモシステイン、ホモセリン、オルニチンおよびメチオニンスルホンも含まれる。さらなるタイプのプロドラッグも包含される。例えば、遊離ヒドロキシ基は、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ、１９９６、１９、１１５に概説されている通り、それに限定されるものではないが、ヘミスクシネート、リン酸エステル、ジメチルアミノアセテート、およびホスホリルオキシメチルオキシカルボニルを含めた基を使用して誘導体化され得る。ヒドロキシ基のカーボネートプロドラッグ、スルホン酸エステルおよび硫酸エステルと同様に、ヒドロキシおよびアミノ基のカルバメートプロドラッグも含まれる。（アシルオキシ）メチルおよび（アシルオキシ）エチルエーテル（アシル基は、それに限定されるものではないが、エーテル、アミンおよびカルボン酸官能基を含めた基で置換されていてもよいアルキルエステルであり得、またはアシル基は、前述の通りのアミノ酸のエステルである）としてのヒドロキシ基の誘導体化も包含される。このタイプのプロドラッグは、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９６、２９、１０に記載されている。遊離アミンは、アミド、スルホンアミドまたはホスホンアミドとしても誘導体化され得る。これらのプロドラッグ部分のすべては、それに限定されるものではないが、エーテル、アミンおよびカルボン酸官能基を含めた基を組み込むことができる。
【0096】
本発明の化合物は、他の薬物と組み合わせて使用することもできる。例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスに感染した患者（すなわち、ＣＯＶＩＤ−１９を有する患者）に、本発明のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤およびインターフェロン、例えばインターフェロンアルファ、またはペグ化インターフェロン、例えばＰＥＧ−イントロンもしくはＰｅｇａｓｕｓを投薬することにより、インターフェロン、ペグ化インターフェロンまたはＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス阻害剤いずれかの単独の投薬よりも高い臨床的利益を提供することができる。より高い臨床的利益の例として、ＣＯＶＩＤ−１９症状のより大きい低減、症状のより急速な軽減、肺病理の低減、患者におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスの量（ウイルス負荷）のより大きい低減、および死亡率の低下を挙げることができる。
【0097】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスは、ｐ−糖タンパク質を発現する細胞に感染する。本発明のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤の一部は、ｐ−糖タンパク質基質である。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスを阻害する、ｐ−糖タンパク質基質でもある化合物は、ｐ−糖タンパク質阻害剤と共に投薬することができる。ｐ−糖タンパク質阻害剤の例は、ベラパミル、ビンブラスチン、ケトコナゾール、ネルフィナビル、リトナビルまたはシクロスポリンである。ｐ−糖タンパク質阻害剤は、細胞からの本発明のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス阻害剤の排出を阻害することによって作用する。ｐ−糖タンパク質ベースの排出の阻害は、ｐ−糖タンパク質排出に起因するＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス阻害剤の細胞内濃度の低下を防止する。ｐ−糖タンパク質排出の阻害は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス阻害剤のより大きい細胞内濃度をもたらす。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスに感染した患者への、本発明のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤およびｐ−糖タンパク質阻害剤の投薬は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤の細胞内濃度を増大することによって、有効用量を達成するために必要なＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤の量を低減することができる。
【0098】
本発明の化合物への哺乳動物の曝露を増大するために使用することができる薬剤には、チトクロムＰ４５０（ＣＹＰ４５０）酵素の少なくとも１つのアイソフォームの阻害剤として使用することができる薬剤が含まれる。有益に阻害され得るＣＹＰ４５０のアイソフォームには、それに限定されるものではないが、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９およびＣＹＰ３Ａ４が含まれていた。本発明の方法において使用される化合物には、ＣＹＰ３Ａ４基質であってよく、ＣＹＰ３Ａ４によって代謝される化合物が含まれる。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスに感染した患者に、ＣＹＰ３Ａ４基質であるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス阻害剤、例えばＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤、およびＣＹＰ３Ａ４阻害剤、例えばリトナビル、ネルフィナビルまたはデラビルジンを投薬することにより、ＣＹＰ３Ａ４によるＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２コロナウイルス阻害剤の代謝が低減する。これにより、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス阻害剤のクリアランスが低下し、ＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２コロナウイルス阻害剤の血漿濃度が増大する。クリアランスの低下およびより高い血漿濃度は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス阻害剤の有効用量を低減することができる。
【0099】
本発明の方法においてＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤と組み合わせて使用することができる追加の治療剤には、以下が含まれる。
【0100】
ＰＬｐｒｏ阻害剤：リバビリン、バルガンシクロビル、β−チミジン、アスパルテーム、オクスプレノロール、ドキシサイクリン、アセトフェナジン、イオプロミド、リボフラビン、レプロテロール、２，２’−シクロシチジン、クロラムフェニコール、カルバミン酸クロルフェネシン、レボドロプロピジン、セファマンドール、フロクスウリジン、チゲサイクリン、ペメトレキセド、Ｌ（＋）−アスコルビン酸、グルタチオン、ヘスペレチン、アデメチオニン、マソプロコール、イソトレチノイン、ダントロレン、スルファサラジン抗菌薬、シリビン、ニカルジピン、シルデナフィル、プラチコジン、クリシン、ネオヘスペリジン、バイカリン、スゲトリオール−３，９−ジアセテート、（−）−没食子酸エピガロカテキン、ファイタントリンＤ、２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−［［２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３，４−ジヒドロ−５，７−ジヒドロキシ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］オキシ］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３，４，５，７−テトロール、２，２−ジ（３−インドリル）−３−インドロン、（Ｓ）−（１Ｓ，２Ｒ，４ａＳ，５Ｒ，８ａＳ）−１−ホルムアミド−１，４ａ−ジメチル−６−メチレン−５−（（Ｅ）−２−（２−オキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）エテニル）デカヒドロナフタレン−２−イル−２−アミノ−３−フェニルプロパノエート、ピセタノール、ロスマリン酸、およびマグノロール。
【0101】
３ＣＬｐｒｏ阻害剤：リメサイクリン、クロルヘキシジン、アルフゾシン、シラスタチン、ファモチジン、アルミトリン、プロガビド、ネパフェナク、カルベジロール、アンプレナビル、チゲサイクリン、モンテルカスト、カルミン酸、ミモシン、フラビン、ルテイン、セフピラミド、フェネチシリン、カンドキサトリル、ニカルジピン、吉草酸エストラジオール、ピオグリタゾン、コニバプタン、テルミサルタン、ドキシサイクリン、オキシテトラサイクリン、（１Ｓ，２Ｒ，４ａＳ，５Ｒ，８ａＳ）−１−ホルムアミド−１，４ａ−ジメチル−６−メチレン−５−（（Ｅ）−２−（２−オキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）エテニル）デカヒドロナフタレン−２−イル５−（（Ｒ）−１，２−ジチオラン−３−イル）ペンタノエート、ベツロナール（Betulonal）、クリシン−７−Ｏ−β−グルクロニド、アンドログラフィシド、（１Ｓ，２Ｒ，４ａＳ，５Ｒ，８ａＳ）−１−ホルムアミド−１，４ａ−ジメチル−６−メチレン−５−（（Ｅ）−２−（２−オキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）エテニル）デカヒドロナフタレン−２−イル２−ニトロベンゾエート、２β−ヒドロキシ−３，４−ｓｅｃｏ−フリーデロラクトン（friedelolactone）−２７−オイック酸（Ｓ）−（１Ｓ，２Ｒ，４ａＳ，５Ｒ，８ａＳ）−１−ホルムアミド−１，４ａ−ジメチル−６−メチレン−５−（（Ｅ）−２−（２−オキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）エテニル）デカヒドロナフタレン−２−イル−２−アミノ−３−フェニルプロパノエート、イソデコルチノール（Isodecortinol）、セレビステロール、ヘスペリジン、ネオヘスペリジン、アンドログラパニン、２−（（１Ｒ，５Ｒ，６Ｒ，８ａＳ）−６−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）−５，８ａ−ジメチル−２−メチレンデカヒドロナフタレン−１−イル）エチルベンゾエート、コスモシン、クレイストカルトン（Cleistocaltone）Ａ、２，２−ジ（３−インドリル）−３−インドロン、バイオロビン（Biorobin）、グニジシン（Gnidicin）、フィラエンブリノール（Phyllaemblinol）、テアフラビン３，３’−ジ−Ｏ−ガレート、ロスマリン酸、クーイチェンシド（Kouitchenside）Ｉ、オレアノール酸、スチグマスタ−５−エン−３−オール、デアセチルセンタピクリン（Deacetylcentapicrin）、およびベルケモール（Berchemol）。
【0102】
ＲｄＲｐ阻害剤：バルガンシクロビル、クロルヘキシジン、セフチブテン、フェノテロール、フルダラビン、イトラコナゾール、セフロキシム、アトバコン、ケノデオキシコール酸、クロモリン、パンクロニウム臭化物、コルチゾン、チボロン、ノボビオシン、シリビン、イダルビシン、ブロモクリプチン、ジフェノキシレート、ベンジルペニシロイルＧ、ダビガトランエテキシラート、ベツロナール、グニジシン、２β，３０β−ジヒドロキシ−３，４−ｓｅｃｏ−フリーデロラクトン−２７−ラクトン、１４−デオキシ−１１，１２−ジデヒドロアンドログラホリド、グニジトリン（Gniditrin）、テアフラビン３，３’−ジ−Ｏ−ガレート、（Ｒ）−（（１Ｒ，５ａＳ，６Ｒ，９ａＳ）−１，５ａ−ジメチル−７−メチレン−３−オキソ−６−（（Ｅ）−２−（２−オキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）エテニル）デカヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｃ］アゼピン−１−イル）メチル２−アミノ−３−フェニルプロパノエート、２β−ヒドロキシ−３，４−ｓｅｃｏ−フリーデロラクトン−２７−オイック酸、２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−［［２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３，４−ジヒドロ−５，７−ジヒドロキシ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３−イル］オキシ］−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン−３，４，５，７−テトロール、フィラエンブリシン（Phyllaemblicin）Ｂ、１４−ヒドロキシシペロツンドン（hydroxycyperotundone）、アンドログラフィシド、２−（（１Ｒ，５Ｒ，６Ｒ，８ａＳ）−６−ヒドロキシ−５−（ヒドロキシメチル）−５，８ａ−ジメチル−２−メチレンデカヒドロナフタレン−１−イル）エチルベンゾエート、アンドログラホリド、スゲトリオール−３，９−ジアセテート、バイカリン、（１Ｓ，２Ｒ，４ａＳ，５Ｒ，８ａＳ）−１−ホルムアミド−１，４ａ−ジメチル−６−メチレン−５−（（Ｅ）−２−（２−オキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）エテニル）デカヒドロナフタレン−２−イル５−（（Ｒ）−１，２−ジチオラン−３−イル）ペンタノエート、１，７−ジヒドロキシ−３−メトキシキサントン、１，２，６−トリメトキシ−８−［（６−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシル−β−Ｄ−グルコピラノシル）オキシ］−９Ｈ−キサンテン−９−オン、および１，８−ジヒドロキシ−６−メトキシ−２−［（６−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシル−β−Ｄ−グルコピラノシル）オキシ］−９Ｈ−キサンテン−９−オン、８−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−１，３，５−トリヒドロキシ−９Ｈ−キサンテン−９−オン。
【0103】
本発明の方法において使用することができる追加の治療剤には、ジオスミン、ヘスペリジン、ＭＫ−３２０７、ベネトクラックス、ジヒドロエルゴクリスチン、ボラジン（Bolazine）、Ｒ４２８、ジテルカリニウム、エトポシド、テニポシド、ＵＫ−４３２０９７、イリノテカン、ルマカフトール、ベルパタスビル、エルクサドリン、レジパスビル、ロピナビル／リトナビル＋リバビリン、アルフェロン（Alferon）、およびプレドニゾンが含まれる。
【0104】
本発明の方法において使用することができる他の追加の薬剤には、Ｚｈａｎｇ，Ｌ．；Ｌｉｎ，Ｄ．；Ｓｕｎ，Ｘ．；Ｒｏｘ，Ｋ．；Ｈｉｌｇｅｎｆｅｌｄ，Ｒ．；Ｘ−ｒａｙ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｍａｉｎ Ｐｒｏｔｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｎｏｖｅｌ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ Ｅｎａｂｌｅｓ Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ａ−Ｋｅｔｏａｍｉｄｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ；ｂｉｏＲｘｉｖ ｐｒｅｐｒｉｎｔ ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／２０２０．０２．１７．９５２８７９に記載されている通り、以下に示される１１ｒ、１３ａおよび１３ｂと指定されるα−ケトアミド化合物が含まれる。
【0105】
【化1】
【0106】
本発明の方法において使用することができる他の追加の薬剤には、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、アジスロマイシンおよびレムデシビルが含まれる。より高い臨床的利益の例として、ＣＯＶＩＤ−１９症状のより大きい低減、症状のより急速な軽減、肺病理の低減、患者におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスの量（ウイルス負荷）のより大きい低減、および死亡率の低下を挙げることができる。
【0107】
本発明の別の実施形態は、患者におけるＣＯＶＩＤ−１９を処置する方法であって、追加の薬剤が投与され、追加の薬剤が、抗ウイルス薬、例えばレムデシビル、ガリデシビル、ファビピラビル／アビファビル、マルヌピラビル（ＭＫ−４４８２／ＥＩＤＤ２８０１）、ＡＴ−５２７、ＡＴ−３０１、ＢＬＤ−２６６０、ファビピラビル、カモスタット、ＳＬＶ２１３エムトリシタビン／テノホビル、クレブジン、ダルセトラピブ、ボセプレビルおよびＡＢＸ４６４、グルココルチコイド、例えばデキサメタゾンおよびヒドロコルチゾン、回復期血漿、組換えヒト血漿、例えばゲルゾリン（Ｒｈｕ−ｐ６５Ｎ）、モノクローナル抗体、例えばレグダンビマブ（Ｒｅｇｋｉｒｏｖａ）、ラブリズマブ（Ｕｌｔｏｍｉｒｉｓ）、ＶＩＲ−７８３１／ＶＩＲ−７８３２、ＢＲＩＩ−１９６／ＢＲＩＩ−１９８、ＣＯＶＩ−ＡＭＧ／ＣＯＶＩ ＤＲＯＰＳ（ＳＴＩ−２０２０）、バムラニビマブ（ＬＹ−ＣｏＶ５５５）、マブリリムマブ、レロンリマブ（ＰＲＯ１４０）、ＡＺＤ７４４２、レンジルマブ、インフリキシマブ、アダリムマブ、ＪＳ０１６、ＳＴＩ−１４９９（ＣＯＶＩＧＵＡＲＤ）、ラナデルマブ（Ｔａｋｈｚｙｒｏ）、カナキヌマブ（Ｉｌａｒｉｓ）、ジムシルマブおよびオチリマブ、抗体カクテル、例えばカシリビマブ／イムデビマブ（ＲＥＧＮ−Ｃｏｖ２）、組換え融合タンパク質、例えばＭＫ−７１１０（ＣＤ２４Ｆｃ／ＳＡＣＣＯＶＩＤ）、抗凝固剤、例えばヘパリンおよびアピキサバン、ＩＬ−６受容体アゴニスト、例えばトシリズマブ（Ａｃｔｅｍｒａ）およびサリルマブ（Ｋｅｖｚａｒａ）、ＰＩＫｆｙｖｅ阻害剤、例えばアプリモドジメシラート、ＲＩＰＫ１阻害剤、例えばＤＮＬ７５８、ＶＩＰ受容体アゴニスト、例えばＰＢ１０４６、ＳＧＬＴ２阻害剤、例えばダパグリフロジン、ＴＹＫ阻害剤、例えばアビベルチニブ、キナーゼ阻害剤、例えばＡＴＲ−００２、ベムセンチニブ、アカラブルチニブおよびロスマピモド、Ｈ２遮断薬、例えばファモチジン、駆虫剤、例えばニクロサミド、フューリン阻害剤、例えばジミナゼンから選択される、方法である。
【0108】
「ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質」という用語は、本明細書に記載される任意のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤化合物、または薬学的に許容されるその塩、水和物、プロドラッグ、活性な代謝産物もしくは溶媒和物、またはＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の複製を任意の方式で阻害する化合物を意味する。
【0109】
細胞におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２関連コロナウイルス（「ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２」）のウイルス複製を「妨害するまたは防止する」という用語は、リボザイムまたはリボザイムをコードするベクターを過渡的にまたは安定に形質導入されていない細胞と比較して、細胞における子孫ウイルスに必要なＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製またはＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２構成成分の生成を低減することを意味する。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製が低減しているかどうかを決定するための簡単で好都合なアッセイには、対象の血中の抗ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２抗体の存在、非存在または存在の低下についてのＥＬＩＳＡアッセイ（Ｎａｓｏｆｆら、ＰＮＡＳ ８８：５４６２〜５４６６、１９９１）、ＲＴ−ＰＣＲ（Ｙｕら、Ｖｉｒａｌ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ ａｎｄ Ｌｉｖｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ５７４−５７７、Ｎｉｓｈｉｏｋａ、Ｓｕｚｕｋｉ ａｎｄ Ｍｉｓｈｉｒｏ（Ｅｄｓ．）；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｔｏｋｙｏ、１９９４）が含まれる。このような方法は、当業者に周知である。あるいは、形質導入され感染した「対照」細胞からの全ＲＮＡを単離し、ドットブロットまたはノーザンブロットによって解析し、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２特異的ＤＮＡでプローブして、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製が低減しているかどうかを決定することができる。あるいは、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２タンパク質の発現の低減を、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製の阻害の目安として使用することもできる。対照細胞と比較して、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製の５０パーセントよりも大きい低減は、典型的にＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製の防止を定量する。
【0110】
本発明の方法において使用されるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤化合物が塩基である場合、所望の塩は、遊離塩基を、無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等）で、または有機酸（例えば、酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル酸（例えば、グルクロン酸またはガラクツロン酸）、アルファ−ヒドロキシ酸（例えば、クエン酸または酒石酸）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸）、芳香族酸（例えば、安息香酸またはケイ皮酸）、スルホン酸（例えば、ｐ−トルエンスルホン酸またはエタンスルホン酸）などで処理することを含めた、当技術分野で公知の任意の適切な方法によって調製することができる。
【0111】
本発明の方法において使用されるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤化合物が酸である場合、所望の塩は、遊離酸を、無機もしくは有機塩基（例えば、アミン（第一級、第二級、または第三級））、アルカリ金属水酸化物、またはアルカリ土類金属水酸化物で処理することを含めた、当技術分野で公知の任意の適切な方法によって調製することができる。適切な塩の例として、アミノ酸（例えば、グリシンおよびアルギニン）、アンモニア、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミン、および環式アミン（例えば、ピペリジン、モルホリン、およびピペラジン）から誘導された有機塩、ならびにナトリウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、銅、亜鉛、アルミニウムおよびリチウムから誘導された無機塩が挙げられる。
【0112】
固体であるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤化合物、プロドラッグ、塩、または溶媒和物の場合、本発明の方法において使用されるヒドロキサメート化合物、プロドラッグ、塩、および溶媒和物は、異なる多形または結晶形態で存在することができ、それらすべてが本発明の範囲および特定の式に含まれることが企図されることが、当業者によって理解される。さらに、本発明の方法において使用されるヒドロキサメート化合物、塩、プロドラッグおよび溶媒和物は、互変異性体として存在することができ、それらすべてが本発明の広範な範囲に含まれることが企図される。
【0113】
ある場合には、本発明の方法において使用されるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤化合物、塩、プロドラッグおよび溶媒和物は、キラル中心を有することができる。キラル中心が存在する場合、ヒドロキサメート化合物、塩、プロドラッグおよび溶媒和物は、単一の立体異性体、ラセミ体、ならびに／またはエナンチオマーおよび／もしくはジアステレオマー（disastereomer）の混合物として存在することができる。このようなすべての単一の立体異性体、ラセミ体、およびそれらの混合物は、本発明の広範な範囲に含まれることが企図される。
【0114】
当業者に一般に理解される通り、光学的に純粋な化合物は、鏡像異性的に純粋な化合物である。本明細書で使用される場合、「光学的に純粋な」という用語は、少なくとも十分な活性を含む化合物を意味することが企図される。好ましくは、所望の薬理学的に純粋な本発明の化合物を有する化合物をもたらす単一エナンチオマーの光学的に純粋な量には、少なくとも９０％の単一異性体（８０％鏡像体過剰率）、より好ましくは少なくとも９５％（９０％ｅ．ｅ．）、さらにより好ましくは少なくとも９７．５％（９５％ｅ．ｅ．）、最も好ましくは少なくとも９９％（９８％ｅ．ｅ．）が含まれていた。
【0115】
「処置する」という用語は、本明細書で使用される場合、別段指定されない限り、このような用語が適用される障害もしくは状態、またはこのような障害もしくは状態の１つもしくは複数の症状を逆転させ、軽減し、その進行を阻害し、または防止することを意味する。「処置」という用語は、本明細書で使用される場合、別段指定されない限り、「処置する」が直前に定義されるような、処置する行為を指す。本発明の好ましい実施形態では、「処置する」または「処置」は、ＣＯＶＩＤ−１９の原因物質であるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の主なプロテアーゼであるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３Ｃ様プロテアーゼの活性を阻害することによって軽減される、ヒトにおける病状を少なくとも緩和することを意味する。ＣＯＶＩＤ−１９に罹患している患者では、発熱、疲労、および乾性咳が、その疾患の主な徴候であるが、一方、鼻閉、鼻汁、および上気道の他の症状はまれである。Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅｓ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎは、ＣＯＶＩＤ−１９の典型的な症例が、進行性の増悪プロセスを有することを示した。ＣＯＶＩＤ−１９は、中華人民共和国国務院の中華人民共和国国家衛生健康委員会（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｅａｌｔｈ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｃｈｉｎａ）、Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｎｅｕｍｏｎｉａ Ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ２０１９−ｎＣｏＶ（Ｔｒｉａｌ Ｖｅｒｓｉｏｎ ４）（利用可能なオンライン：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｈｃ．ｇｏｖ．ｃｎ／ｊｋｊ／ｓ３５７７／２０２００２／５７３３４０６１３ａｂ２４３ｂ３ａ７ｆ６１ｄｆ２６０５５１ｄｄ４／ｆｉｌｅｓ／ｃ７９１ｅ５ａ７ｅａ５１４９ｆ６８０ｆｄｃｂ３４ｄａｃ０ｆ５４ｅ．ｐｄｆ（２０２０年２月６日にアクセスした））による疾患重症度に基づいて、軽度、中程度（normal）、重度、および重篤タイプに分類することができる。（１）軽度症例−臨床症候は軽度であり、胸部コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）で肺炎が見出されなかった、（２）中程度症例−発熱、呼吸器症状、および肺炎の徴候を示す画像を有していることが見出された患者、（３）重度症例−以下の３つの状態の１つ：呼吸促迫、呼吸数≧３０回／分（安静状態で。酸素飽和度≦９３％を指す）、部分的動脈酸素圧（ＰａＯ２）／酸素吸収濃度（ＦｉＯ２）≦３００ｍｍＨｇ（１ｍｍＨｇ＝０．１３３ｋＰａ）、（４）重篤症例−以下の３つの状態の１つ：呼吸不全および人工呼吸器が必要、ショック、または集中治療室を必要とする他の臓器の関連不全。現在の臨床データは、死亡者の大部分が、より高齢の患者に生じたことを示している。しかし、重度症例は、特有の因子を有する若年成人、特に慢性疾患、例えば糖尿病またはＢ型肝炎を有する若年成人において記録されてきた。ホルモンまたは免疫抑制剤の長期使用、および免疫機能低下を有する人は、重度に感染する可能性が高い。
【0116】
ＣＯＶＩＤ−１９などの病状の緩和のための処置方法は、従来許容される任意の方式で、本発明の化合物の１つまたは複数を使用することを含む。本発明のある特定の好ましい実施形態によれば、本発明の方法において使用される１つまたは複数の化合物は、それを必要とする哺乳動物、例えばヒトに投与される。好ましくは、それを必要とする哺乳動物は、コロナウイルス、例えばＣＯＶＩＤ−１９の原因物質、すなわちＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２に感染している。
【0117】
本発明はまた、予防方法であって、有効量の本発明のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、薬学的に活性な代謝産物もしくは溶媒和物を、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２による感染リスクがある哺乳動物、例えばヒトに投与するステップを含む方法を含む。ある特定の好ましい実施形態によれば、有効量の１つもしくは複数の本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、薬学的に活性な代謝産物もしくは溶媒和物は、ＣＯＶＩＤ−１９の原因物質であるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２による感染リスクにあるヒトに投与される。本発明の予防方法は、従来許容される任意の方式で、本発明の化合物の１つまたは複数を使用することを含む。
【0118】
以下は、本発明の具体的な実施形態の例である。
【0119】
本発明の方法において使用される化合物のいくつかは、公知であり、当技術分野で公知の方法によって作成することができる。
【0120】
近年の証拠は、新型コロナウイルスＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２がＣＯＶＩＤ−１９の原因物質であることを示している。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスのヌクレオチド配列、ならびに最近決定されたＬ−およびＳ−サブタイプは、最近決定され、公的に利用可能になっている。
【0121】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス活性の阻害剤としての阻害剤化合物の活性は、インビボおよびインビトロアッセイを含めた当技術分野で利用可能な適切な方法のいずれかによって測定することができる。コロナウイルス３Ｃ様プロテアーゼ活性（例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスの３Ｃ様プロテアーゼ）の阻害剤としての本発明の化合物の活性は、インビボおよびインビトロアッセイを含めた当業者に公知の適切な方法のいずれかによって測定することができる。活性を測定するのに適したアッセイの例として、本明細書に記載される抗ウイルス細胞培養アッセイ、および本明細書に記載されるアンチプロテアーゼアッセイ、例えば実施例セクションに記載されるアッセイが挙げられる。
【0122】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害剤化合物、ならびに薬学的に許容されるそのプロドラッグ、塩、活性な代謝産物および溶媒和物の投与は、当業者に利用可能な許容された投与方法のいずれかに従って実施され得る。適切な投与方法の例として、経口、経鼻、肺内、非経口、局所、静脈内、注射、経皮、および直腸が挙げられる。経口、静脈内、および経鼻送達が好ましい。
【0123】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質は、医薬組成物として、任意の適切な医薬品形態で投与することができる。適切な医薬品形態には、固体、半固体、液体、または凍結乾燥製剤、例えば錠剤、散剤、カプセル剤、坐剤、懸濁液剤、リポソーム剤、およびエアロゾル剤が含まれる。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質は、様々な方法のいずれかを使用して溶液として調製することができる。例えば、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質を、酸（例えば、１ＭのＨＣｌ）に溶解させ、十分な体積の水中５％ブドウ糖（Ｄ５Ｗ）溶液で希釈して、所望の最終濃度のＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２阻害物質（例えば、約１５ｍＭ）をもたらすことができる。あるいは、約１５ｍＭのＨＣｌを含有するＤ５Ｗ溶液を使用して、適切な濃度のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質の溶液を提供することができる。さらに、ＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２阻害物質は、例えば、１％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）溶液を使用して懸濁液として調製することができる。
【0124】
医薬組成物の適切な医薬品形態を調製する許容される方法は、公知であり、または当業者によって日常的に決定され得る。例えば、医薬調製物は、錠剤形態に必要な場合の混合、造粒および圧縮、または静脈内、経口、非経口、局所、腟内、鼻腔内、気管支内、眼内、耳内および／もしくは直腸投与に所望の生成物を適宜得るための成分の混合、充填および溶解などのステップを含む、薬剤師の従来の技術に従って調製することができる。
【0125】
本発明の医薬組成物は、企図される使用に応じて、適切な賦形剤、希釈剤、ビヒクルおよび担体、ならびに他の薬学的に活性な薬剤を含むこともできる。固体または液体の薬学的に許容される担体、希釈剤、ビヒクル、または賦形剤を、医薬組成物において用いることができる。例示的な固体担体として、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸が挙げられる。例示的な液体担体として、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、生理食塩水溶液、および水が挙げられる。担体または希釈剤には、適切な持続放出材料、例えば単独のまたはワックスを伴う、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルが含まれ得る。液体担体が使用される場合、調製物は、シロップ、エリキシル、エマルション、軟ゼラチンカプセル、注射可能な滅菌液体（例えば、溶液）、または非水性もしくは水性懸濁液の形態であってよい。
【0126】
医薬組成物の用量は、少なくとも治療有効量のＳＡＲＳ−ＣｏＶ２阻害物質を含有することができ、好ましくは１つまたは複数の医薬品投薬量単位から構成される。選択された用量は、ＳＡＲＳ関連コロナウイルス活性の阻害によって媒介される処置を必要とする哺乳動物、例えばヒト患者に、局所を含めて、その用量を投与する任意の公知のまたは適切な方法によって、例えば軟膏またはクリームとして、経口的に、直腸内に、例えば坐剤として、注射によって非経口的に、静脈内に、または腟内、鼻腔内、気管支内、耳内もしくは眼内注入によって継続的に投与することができる。
【0127】
「治療有効量」および「有効量」という句は、処置を必要とする哺乳動物に投与される場合、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルス複製の阻害によって軽減される傷害または病状を処置するのに十分な、本発明の薬剤の量を意味することが企図される。本発明の方法において使用される、所与のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質の治療上有効な量は、特定のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質、病状およびその重症度、それを必要とする哺乳動物の同一性および特徴などの因子に応じて変わり、その量は、当業者によって日常的に決定され得る。
【0128】
本発明の医薬組成物において使用されるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２阻害物質の実際の投薬量は、使用される特定の薬剤、製剤化される特定の組成物、投与方法および特定の部位、ならびに処置される宿主および状態の特性に従って選択されることを理解されよう。状態の所与の組に最適な投薬量は、従来の投薬量決定試験を使用して当業者によって確認され得る。経口投与では、例えば、用いることができる用量は、体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは体重１ｋｇ当たり約０．１〜約５００ｍｇ／ｋｇ、さらにより好ましくは体重１ｋｇ当たり約１〜約５００ｍｇ／ｋｇであり、処置過程は適切な間隔で繰り返される。静脈内投薬では、１日当たり５グラムまでの用量を用いることができる。静脈内投与は、１日間という期間で間欠的に、または２４時間の期間にわたって継続的に行うことができる。
【0129】
「チトクロムＰ４５０阻害量」および「チトクロムＰ４５０酵素活性阻害量」という用語は、本明細書で使用される場合、このような化合物の存在下で、チトクロムＰ４５０酵素または特定のチトクロムＰ４５０酵素アイソフォームの活性を低減するのに必要な化合物の量を指す。特定の化合物が、チトクロムＰ４５０酵素活性を低減するかどうか、およびそれに必要なこのような化合物の量は、当業者に公知の方法および本明細書に記載される方法によって決定することができる。
【0130】
コロナウイルス複製および転写に必要なタンパク質機能は、いわゆる「レプリカーゼ」遺伝子によってコードされる。２つの重複するポリタンパク質は、この遺伝子から翻訳され、ウイルスプロテアーゼによって広範にプロセシングされる。Ｃ近位領域は、１１の保存されたドメイン間結合点において、コロナウイルスの主なまたは「３Ｃ様」プロテアーゼによってプロセシングされる。「３Ｃ様」プロテアーゼという名称は、コロナウイルス酵素と、周知のピコルナウイルス３Ｃプロテアーゼの間の、ある特定の類似性に由来する。これらの類似性には、基質選択、触媒作用における活性部位求核剤としてのシステインの使用、およびそれらの推定上の全体的なポリペプチドの折畳みの類似性が含まれる。ＳＡＲＳ−Ｃｏｖ−２関連コロナウイルス３Ｃ様プロテアーゼのアミノ酸配列と、ＳＡＲＳ−ＣｏＶなどの他の公知のコロナウイルスのアミノ酸配列を比較すると、それらのアミノ酸配列は、およそ９６％の共有相同性を有していることが示される。
【0131】
プロテアーゼ切断部位における基質のアミノ酸は、Ｎ末端からＣ末端まで以下の通り、−Ｐ３−Ｐ２−Ｐ１−Ｐ１’−Ｐ２’−Ｐ３’と付番され、Ｐ１残基とＰ１’残基の間で切断が生じる（Ｓｃｈｅｃｈｔｅｒ＆Ｂｅｒｇｅｒ、１９６７）。基質特異性は、Ｐ２、Ｐ１およびＰ１’位によって大きく決定付けられる。コロナウイルスの主なプロテアーゼの切断部位特異性は、Ｐ１にグルタミンがあり、Ｐ１’に小さいアミノ酸があるという必要条件を伴って高度に保存されている（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、８３、ｐｐ．５９５〜５９９（２００２））。
【実施例】
【0132】
化合物（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエートは、国際公開第２００５／１１３５８０号の実施例３９に記載され、以下に再生される通り調製することができる。化合物（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレートは、国際公開第２００５／１１３５８０号の実施例３７に記載され、以下に再生される通り調製することができる。化合物Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、国際公開第２００５／１１３５８０号の実施例１６に記載され、以下に再生される通り調製することができる。化合物Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、国際公開第２００５／１１３５８０号の実施例８に記載され、以下に再生される通り調製することができる。化合物Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、国際公開第２００５／１１３５８０号の実施例２に記載され、以下に再生される通り調製することができる。これらの化合物は、以下に再生されている場合、参照実施例と呼ばれる。
【0133】
下記の実施例では、別段指定されない限り、すべての温度は、摂氏で記載され、すべての部およびパーセンテージは、重量による。試薬は、商業的供給社、例えばＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、またはＬａｎｃａｓｔｅｒ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｌｔｄ．から購入することができ、別段指定されない限りさらなる精製なしに使用することができる。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）およびＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）は、ＡｌｄｒｉｃｈからＳｕｒｅ Ｓｅａｌボトルで購入し、受け取ったまま使用することができる。すべての溶媒を、別段指定されない限り、当業者に公知の標準法を使用して精製することができる。
【0134】
以下の実施例の化合物の構造は、以下の、プロトン磁気共鳴分光法、微量元素解析および融点の１つまたは複数によって確認される。プロトン磁気共鳴（１Ｈ ＮＭＲ）スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ分光計を使用し、３００〜４００メガヘルツ（ＭＨｚ）の場の強度で操作して決定される。化学シフトは、標準内部テトラメチルシランから百万分率（ｐｐｍ、δ）低磁場側で記録される。あるいは、１Ｈ ＮＭＲスペクトルを、以下の通り、ＣＨＣｌ３＝７．２６ｐｐｍ、ＤＭＳＯ＝２．４９ｐｐｍ、Ｃ６ＨＤ５＝７．１５ｐｐｍの残留プロトン性溶媒シグナルを参照した。ピーク多重度は、以下の通り、ｓは一重線、ｄは二重線、ｄｄは二重線の二重線、ｔは三重線、ｑは四重線、ｂｒはブロード共鳴、ｍは多重線と指定される。結合定数は、ヘルツで与えられる。微量元素解析は、Ａｔｌａｎｔｉｃ Ｍｉｃｒｏｌａｂ Ｉｎｃ．、Ｎｏｒｃｒｏｓｓ、ＧＡによって実施され、理論値の±０．４％で記載される元素についての結果をもたらした。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、Ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０（Ｍｅｒｃｋ Ａｒｔ ９３８５）または様々なＭＰＬＣ系を使用して実施される。解析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、Ｓｉｌｉｃａ ６０Ｆ２５４（Ｍｅｒｃｋ Ａｒｔ ５７１９）のプレコートシートを使用して実施した。すべての反応を、別段の注記がない限り、セプタム封止フラスコ中で、わずかなアルゴン陽圧または乾燥窒素下で実施する。
【0135】
本発明の方法において使用される他の好ましい化合物は、以下に具体的に記載されるものに類似の方式で調製することができる。
【0136】
以下に提供される実施例および調製物は、本発明の化合物およびこのような化合物を調製する方法をさらに例示し、例証する。本発明の範囲は、以下の実施例および調製物の範囲によって決して制限されないと理解されるべきである。以下の実施例では、別段の注記がない限り、単一のキラル中心を有する分子は、ラセミ混合物として存在する。２つまたはそれよりも多いキラル中心を有する分子は、別段の注記がない限り、ジアステレオマーのラセミ混合物として存在する。単一のエナンチオマー／ジアステレオマーは、当業者に公知の方法によって得ることができる。
【0137】
ＨＰＬＣクロマトグラフィーが、以下の調製物および実施例において言及される場合、使用される一般条件は、別段指定されない限り、以下の通りである。使用されるカラムは、距離１５０ｍｍおよび内径４．６ｍｍのＺＯＲＢＡＸμ ＲＸＣ１８カラム（Ｈｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄによって製造された）である。試料を、Ｈｅｗｌｅｔｔ Ｐａｃｋａｒｄ−１１００系で分析する。グラジエント溶媒法を使用し、１００パーセント酢酸アンモニウム／酢酸緩衝液（０．２Ｍ）から１００パーセントアセトニトリルに１０分にわたって分析する。次にその系は、１００パーセントアセトニトリルで１．５分間、次に１００パーセント緩衝溶液で３分間の洗浄サイクルに進行する。この期間にわたる流速は、一定の３ｍＬ／分である。
【0138】
実施例および明細書では、「Ｅｔ」は、エチルを意味し、「Ａｃ」は、アセチルを意味し、「Ｍｅ」は、メチルを意味し、「ＥＴＯＡＣ」または「ＥＴＯＡｃ」は、酢酸エチルを意味し、「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味し、「Ｂｕ」は、ブチルを意味し、Ｅｔ２Ｏは、ジエチルエーテルを指し、ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを指す。ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドを指す。ＭＴＢＥは、ｔｅｒｔ−ブチル（butly）メチルエーテルを指す。他の略語には、ＣＨ３ＯＨ（メタノール）、ＥｔＯＨ（エタノール）、ＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）、ＤＥＭ（エチレングリコールジメチルエーテル）が含まれる。ＤＣＭは、ジクロロメタンを指し、１，２ＤＣＥは、１，２ジクロロエタンを指す。Ｐｈ（フェニル）、Ｔｒ（トリフェニルメチル）、Ｃｂｚ（ベンジルオキシカルボニル）、Ｂｏｃ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）、ＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）、ＴＭＥＤＡ（Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン）、ＡｃＯＨ（酢酸）、Ａｃ２Ｏ（無水酢酸）、ＮＭＭ（４−メチルモルホリン）、ＨＯＢｔ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物）、ＨＡＴＵ ［Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート］、ＥＤＣ ［１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩］、ＴＥＡ トリエチルアミン、ＬＤＡ リチウムジイソプロピルアミド、ＤＣＣ（ジシクロヘキシル−カルボジイミド）、ＤＤＱ（２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン）、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）、Ｇｌｎ（グルタミン）、Ｌｅｕ（ロイシン）、Ｐｈｅ（フェニルアラニン）、Ｐｈｅ（４−Ｆ）（４−フルオロフェニルアラニン）、Ｖａｌ（バリン）、アミノ−Ａｌａ（２，３−ジアミノプロピオン酸）、および（Ｓ）−ピロール−Ａｌａ［（２Ｓ，３’Ｓ）−２−アミノ−３−（２’−オキソピロリジン−３’−イル）−プロピオン酸］。さらに、「Ｌ」は、自然に存在するアミノ酸の立体配置を表す。
【0139】
以下は、本発明の方法において使用される化合物であり、国際公開第２００５／１１３５８０号の実施例、２、８、１６、２３、３７および３９は、参照実施例と呼ばれる。
【0140】
参照実施例２：Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドＮ−（（１Ｓ）−１｛［（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド（４８８ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）およびベンゾイルギ酸（１９５ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）のＤＭＲ（６．５ｍＬ）溶液を、Ｎ２雰囲気下に置いた。この透明な薄黄色の溶液を、フッ化セシウム（３５０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）で処理し、その後、６５℃に加熱した。４時間後に、ここで黄色になった懸濁液をＲＴに冷却し、酢酸エチル（６０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ）で３回洗浄し、ブライン（３０ｍＬ）で１回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルオキソ（フェニル）アセテートを黄色の粗製泡状物として得た。Ｃ３２Ｈ３６Ｎ４Ｏ８についてのＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ６０５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。粗製（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルオキソ（フェニル）アセテートのメタノール（４０ｍＬ）溶液を、Ｎ２雰囲気下に置き、激しく撹拌しながら炭酸カリウム（７ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）で処理した。１時間後に、揮発物を真空中で除去して（<３０℃の浴）、黄色の粗製ガラス状物を得た。この材料を、Ｂｉｏｔａｇｅ ＭＰＬＣ（２５Ｍカラム、６％メタノール／クロロホルム）によって精製して、標題化合物３４６ｍｇ（７３％）を濁った白色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 11.56 (s, 1 H), 8.44 (d, J = 8 Hz, 1 H), 8.39
(d, J = 8 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.35 (s, 1 H), 7.08 (t, J = 8 Hz, 1 H), 6.99
(d, J = 8 Hz, 1 H), 6.49 (d, J = 8 Hz, 1 H), 5.04 (t, J = 8
Hz, 1 H), 4.46 (m, 2 H), 4.25 (dd, J = 8, 20 Hz, 1 H), 4.13 (dd, J
= 8, 20 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 3.10 (m, 2 H), 2.28 (m, 1 H), 2.08 (m, 1
H), 1.92 (m, 1 H), 1.70 - 1.53 (m, 5 H), 0.93 (d, J = 8 Hz, 3 H), .89 (d, J = 8
Hz, 3 H); C24H32N4O6のMS (ESI+) m/z 473.2 (M+H)+.
【0141】
以下は、本発明の固体形態の実施例である。
【0142】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの固体形態の実施例Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの形態１および形態２
材料の調製：Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの試料の延長貯蔵により、ＰＸＲＤによって試験した後に形態２として示される結晶形態が生じた（図８に示される）。このロットおよそ９ｍｇを、一定分量１００μＬを添加し、それぞれ添加した後に試料をボルテックスすることによって、ＴＨＦ：トルエン（３：７ｖｏｌ／ｖｏｌ）１ｍＬに懸濁させた。材料の溶解は観察されず、バイアルを４０℃のローラーミキサー上に置いた。３０分間の平衡化の後に、固体を、遠心分離フィルターチューブを使用して濾過し、ＰＸＲＤによって解析し、形態１と示した（図７に示される）。
【0143】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物（形態３）の調製
【0144】
【化2】
【0145】
播種しない結晶化プロセスによる形態３の実施例は、上に図示される。２０℃のジャケット付き反応器に、ＰＦ−００８３５２３１（１．０当量、２．０ｇ）、アセトン（９．２ｍＬ、４．６ｍＬ／ｇ）および水（１．６ｍＬ、０．８１ｍＬ／ｇ）を充填した。混合物を２０℃で撹拌して、透明な溶液を得た。追加の水（４．１ｍＬ、２ｍＬ／ｇ）をゆっくり添加すると、まだ透明な溶液が生じていた。溶媒を真空下で除去して、ガム状の固体を提供した。アセトン（９ｍＬ、４．５ｍＬ／ｇ）を添加し、スラリーを加熱還流させた。水（２０ｍＬ、１０ｍＬ／ｇ）をゆっくり添加して、生成物を結晶化させ、その後、さらなる水（３０ｍＬ、１５ｍＬ／ｇ）を１時間にわたって添加する。生じたスラリーを、１時間にわたって１０℃に冷却し、最小で１時間粒状化させた後に、濾過し、洗浄した。固体を２０℃で１時間乾燥させて、ＰＦ−００８３５２３１水和物（形態３）を収率８５％で提供した。
【0146】
播種プロセスによる形態３の実施例：予め調製した水／アセトン（１５：８５、ｖ／ｖ）溶液２．８ｍＬを、８ドラムバイアル中、１．８５ｇのＰＦ−００８３５２３１に添加した。撹拌棒を加え、バイアルを撹拌装置プレート上に置いた（約５００ｒｐｍ）。形態３の種結晶およそ５ｍｇを添加し、固体が数分にわたって沈殿して、スラリーを生成することを観察した。水３．８ｍＬを、撹拌したスラリーに約５分にわたって滴下添加し、次にバイアルを封止し、周囲条件で約５時間撹拌した。スラリーを濾過し、固体残留物を、水およそ６ｍＬで洗浄した。固体残留物を、清潔な４ドラムバイアルに移し、５０℃の真空オーブン中に置いた。固体生成物を、ＰＸＲＤによって特徴付け（characterisation）、形態３と一致することを確認した。この特徴付けは、ピーク表を作成し、特徴的なピークを選択するために使用した。単結晶の研究では、結晶形態３は、１：１化学量論量の水：Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを有しているが、ある特定の貯蔵条件では、その化学量論量は、１．２：１の水：Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドとなり得ることが示されている。
【0147】
粉末Ｘ線回折Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの形態１、２および３についての粉末Ｘ線回折パターンを、Ｃｕ放射線源を備えたＢｒｕｋｅｒ ＡＸＳ Ｄ８ Ｅｎｄｅａｖｏｒ回折計を使用して作製した。管電圧およびアンペア数は、それぞれ４０ｋＶおよび４０ｍＡに設定した。電動発散スリットは、１１ｍｍの連続照明に設定した。回折放射線を、位置感知検出器（ＰＳＤ）開口部を４．００°に設定して、ＬＹＮＸＥＹＥ ＸＥ−Ｔエネルギー分散Ｘ線検出器を使用して検出した。データを、シータ−シータ角度計で、ＣｕＫアルファ波長２．０〜５５．０ ２シータ度（°２θ）においてステップサイズ０．０１９°２θおよびステップ当たりの時間０．１秒を使用して収集した。試料を、解析のために、ケイ素の低バックグラウンドフラットホルダーに入れることによって調製し、データ収集中、１５ｒｐｍで回転させた。データを、ＤＩＦＦＲＡＣ．ＥＶＡ ｖ４．２ソフトウェアで解析した。ピークリストを、それぞれの各回折パターンにおける最も強烈なバンドの≧５％の相対的強度を有する反射を使用して調製した。ピーク位置における±０．２°２θの典型的誤差（ＵＳＰ−９４１）を、このデータに適用する。この測定と関連する小さい誤差は、（ａ）試料の調製（例えば、試料の高さ）、（ｂ）機器の特徴、（ｃ）機器の較正、（ｄ）操作者による入力（例えば、ピーク位置の決定における）、および（ｅ）材料の性質（例えば、好ましい配向および透過性効果）を含めた様々な因子が原因で生じ得る。
【0148】
絶対的ピーク位置を得るために、粉末パターンは参照に対して整列されるべきである。参照は、室温で溶解した同じ形態の結晶構造または内部標準（例えば、シリカまたはコランダム）からシミュレートした粉末パターンのいずれかとなり得る。収集した形態３の粉末パターンを、シミュレートした粉末パターンに対して整列させた。
【0149】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、水和物（形態３）のＰＸＲＤプロファイルは、図６に提供され、対応するピークリストは、表ＰＸＲＤ１に提供される。形態３に特徴的なピークは、８．６、１１．９、１４．６、１８．７、１９．７°２θ位置におけるピークであり、各ピーク±０．２°２θである。形態１および形態２の参照ＰＸＲＤパターンは、それぞれ図７および８に提供される。
【0150】
【表1】
【0151】
固体状態のＮＭＲ固体状態のＮＭＲ（ｓｓＮＭＲ）解析を、Ｂｒｕｋｅｒ−ＢｉｏＳｐｉｎ Ａｖａｎｃｅ Ｎｅｏ ４００ＭＨｚ（１Ｈ周波数）ＮＭＲ分光計で実施した。１３Ｃ ｓｓＮＭＲスペクトルを、４ｍｍのＭＡＳプローブ上で、マジック角回転速度１５ｋＨｚにおいて収集し、温度を２５℃に調節した。１３Ｃ交差分極（ＣＰ）スペクトルを、ＣＰ接触時間２．５ｍｓおよび繰り返し遅延（recycle delay）３０秒で記録した。スペクトル獲得中、約１００ｋＨｚの位相変調プロトンデカップリング磁場を印加した。炭素スペクトルの参照は、純粋なテトラメチルシランに対するものであり、α−グリシンの外部試料からの高周波信号を１７６．５ｐｐｍに設定することによって行われる。
【0152】
自動ピークピッキングを、ＡＣＤ Ｌａｂｓ ２０１９ Ｓｐｅｃｔｒｕｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒソフトウェアを使用して、予備的なピーク選択のために３％相対的強度の閾値を使用して実施した。自動化ピークピッキングの出力を、妥当性を確保するために目視でチェックし、必要ならば手動で調整を行った。本明細書では特定の１３Ｃ ｓｓＮＭＲピーク値が記録されているが、装置、試料、および試料の調製の差異に起因して、これらのピーク値にはある範囲が実際に存在する。１３Ｃ化学シフトのｘ軸値の典型的なばらつきは、結晶固体についてプラスまたはマイナス０．２ｐｐｍほどである。本明細書で記録されたｓｓＮＭＲピーク高さは、相対的強度である。ｓｓＮＭＲ強度は、実験パラメーターの実際の設定および試料の熱履歴に応じて変わり得る。
【0153】
【表2】
【0154】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの製剤実施例Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド（以下、ＰＦ−００８３５２３１と呼ばれる）は、中程度の親油性であり、水溶性が限られる。ＰＦ−００８３５２３１は、生理的に関連するｐＨ範囲全体にわたって中性であり、したがって、ｐＨに依存しない溶解度挙動を有する。ＰＦ−００８３５２３１の物理化学的特性は、非経口投与のためにその溶解度を改善するのに適用できる手法を制限する。
【0155】
ＰＦ−００８３５２３１は、限られた水溶性、低透過性、および短い半減期に起因して、水溶液として静脈内（ＩＶ）注入によって非経口投与するのに最も適している。注入のための水溶液の代表例として、５％ｗ／ｖブドウ糖および乳酸リンゲル溶液中、注射のためのＵＳＰ水、０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウム、５％ｗ／ｖブドウ糖、０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウムを含む医薬組成物が挙げられる。持続ＩＶ注入によるＰＦ−００８３５２３１の予測有効１日用量は、およそ３００ｍｇ〜３３００ｍｇの範囲になると予測される。多くの病院で使用される最小限の注入速度に関する「静脈確保」（ＫＶＯ）の習慣に留まるためには、約２５０ｍＬ〜約５００ｍＬの１日持続注入体積が典型的に好ましい。約１０００ｍＬまでの１日持続ＩＶ注入体積を考慮することができるが、このような多量の流体は、追加の流体の併用投与を制限するおそれがある。予測された用量範囲および好ましいＩＶ注入体積に基づいて、標的ＩＶ注入濃度は、ＩＶ注入体積２５０ｍＬについては約１．２ｍｇ／ｍＬ〜約１３．２ｍｇ／ｍＬ、ＩＶ注入体積５００ｍＬについては約０．６ｍｇ／ｍＬ〜約６．６ｍｇ／ｍＬ、およびＩＶ注入体積１０００ｍＬについては約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約３．３ｍｇ／ｍＬであった。
【0156】
約０．３ｍｇ／ｍＬ〜約１３．２ｍｇ／ｍＬのＩＶ注入濃度を達成するために、複数の可溶化手法を考慮した。ＩＶ医薬組成物に典型的な可溶化手法には、水性系のｐＨ調整、塩形態の修飾、共溶媒の可溶化、界面活性剤の可溶化、および複合体化が含まれる。ＰＦ−００８３５２３１の場合、中性電荷は、ｐＨ調整または塩形態の修飾の機会を制限し、したがって可溶化賦形剤を評価した。可溶化賦形剤は、患者に起こり得る任意の有害効果を最小限に抑えるために、安全な、理想的には同じ投与経路によって先例となっているレベルで製剤化されるべきである。
【0157】
水溶性が低い化合物の溶解度を改善するために、しばしば溶媒の混合物が使用される。本明細書で使用される場合、共溶媒は、非経口投与による薬学的使用に適用できる非水性の水混和性溶媒として定義することができる。共溶媒の代表例として、それに限定されるものではないが、ベンジルアルコール（ＢＡ）、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、エタノール、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００）、およびプロピレングリコール（ＰＧ）が挙げられる。可溶化の共溶媒法は、溶解度を何桁も改善することができ、複数の投与経路にわたる商業製品への使用に成功して、より高い用量レベルが達成されてきた。しかし、可溶化の共溶媒法は、ＩＶ投与にはいくつかの制限がある。まず、使用される溶媒は、局所的刺激、全身毒性、または他の有害効果を引き起こさないレベルで投与されなければならない。これらの安全上の考慮は、特にすぐに使用できる（ＲＴＵ）ＩＶ製剤で投与することができる上限濃度をしばしば制限する。第２には、溶媒は、薬物生成物パッケージングおよび投与セットと適合性があるべきであり、任意の望ましくない化合物と反応する、それを分解する、または抽出するべきではない。第３には、共溶媒含量と薬物溶解度の間に、指数関数的関係が予測される。その結果として、薬物生成物が粉末またはすぐに希釈できる（ＲＴＤ）濃縮製剤として調製される場合には、ＩＶ投与のための希釈は、薬物を沈殿させる溶解度の指数関数的低下を引き起こすおそれがある。したがって、希釈製剤の物理的安定性には、細心の注意が払われなければならない。
【0158】
親油性化合物の溶解度を改善するための代替のまたは追加の手法は、界面活性剤またはポリマー賦形剤の使用を伴う。界面活性剤の代表例として、それに限定されるものではないが、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチン、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸が挙げられる。界面活性剤は、典型的に、臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）を上回ると自己組織化してミセルを形成する両親媒性分子であり、ここでＣＭＣおよび形成される構造は、製剤の組成に依存する。ミセルは、水溶液中では典型的に、分子の親水性領域を外の水溶液に向かわせ、分子の親油性領域をミセルの内腔内に向かわせて、水との相互作用を制限する。このようなミセルにおいて、両親媒性および親油性化合物は、それぞれミセルの壁または内腔において可溶化して、薬物溶解度を改善することができる。共溶媒または油の存在下では、共溶媒は、界面活性剤によって安定化される水中油エマルションを形成することができる。界面活性剤ベースの製剤は、共溶媒だけの製剤のように、同じ安全性および適合性の制約の多くを有する。界面活性剤ベースの製剤は、共溶媒だけの系とは対照的に、界面活性剤濃度と薬物溶解度の間に同じ指数関数的関係を有していない。その代わりに、薬物溶解度は、典型的に界面活性剤濃度がＣＭＣを上回るように維持される。その結果として、界面活性剤ベースの製剤は、典型的にＩＶ投与のための希釈時に沈殿の低減を示す。
【0159】
複合体化剤は、基質（すなわち薬物）が、１つまたは複数のリガンド（すなわち複合体化剤）と好ましい非共有結合性の相互作用を形成する、代替の可溶化手法である。複合体化剤の代表例として、それに限定されるものではないが、シクロデキストリン（ＣＤ）、ハイドロトロープ、アミノ酸、またはポリマーが挙げられる。最も一般的なクラスの複合体化剤は、シクロデキストリン（ＣＤ）である。ＣＤは、特に、可変数のＤ−グルコース単位（例えば、α−ＣＤについては６個、β−ＣＤについては７個、またはγ−ＣＤについては８個）、およびヒドロキシ基における可変置換（例えば、ヒドロキシプロピル、ＨＰ、またはスルホブチルエーテル、ＳＢＥ）を有する環式オリゴ糖である。ＣＤの形状は、親油性薬物を収容することができる親油性の円錐形内腔を提供し、ここでＤ−グルコース単位の数は、内腔サイズを改変し、置換は、複合体の溶解度および複合体化の好ましさを改変する。ＣＤは、共溶媒または界面活性剤ベースの可溶化手法を上回るいくつかの利点を有しており、それには典型的に、毒性の低減、容器栓の適合性の懸念の低下、および製造可能性の改善が含まれる。ＣＤを用いる複合体化は、しばしば、共溶媒ベースの可溶化よりも希釈に対してロバストであり、物理的安定性を改善する。しかし、ＣＤ複合体化は、ＣＤ内腔に収まり、好ましい複合体を形成することができる親油性分子に限られる。さらにＣＤ複合体化は、しばしば、著しい溶解度増強を可能にするために多量のＣＤを必要とする場合があり、それによって有害効果が生じ得る。さらに、初期ＣＤ複合体の形成は、薬物の溶解によって制限されることがあり、それによって、薬物を可溶化する能力が最終的に制限され得る。
【0160】
ＣＤを用いて薬物可溶化を増強するために、研究者らは、ポリマー賦形剤を添加して、三元複合体を形成することについて調査した。特に、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、および高分子量ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含めた水溶性ポリマーは、薬物の薬物溶解速度を増強し、ＣＤを用いる複合体化の改善を可能にすることが示されている。
【0161】
ポリマー賦形剤とは対照的に、共溶媒とＣＤの使用は、ＣＤ単独と比較して薬物溶解度をしばしば低減する。以下のテキスト、Ｗａｔｅｒ−Ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ Ｄｒｕｇ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、Ｔｏｎｇ ａｎｄ Ｗｅｎ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｉｓｓｕｅ：「Ｏｎｅ ｍａｊｏｒ ｐｒｏｂｌｅｍ ｗｉｔｈ ｕｓｉｎｇ ｏｒｇａｎｉｃ ｃｏ−ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｉｓ ｔｈａｔ ｍｏｓｔ ｏｒｇａｎｉｃ ｃｏ−ｓｏｌｖｅｎｔｓ ｗｉｌｌ ｃｏｍｐｅｔｅ ｆｏｒ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ＣＤ ｃａｖｉｔｙ，ａｎｄ ｔｈｕｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｃｏｍｐｌｅｘ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．」Ｔｏｎｇ，Ｗ．−Ｑ．；Ｗｅｎ，Ｈ；Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｆｏｒ Ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｉｎ Ｌｉｕ，Ｒ．（Ｅｄ．）Ｗａｔｅｒ Ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ Ｄｒｕｇ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、２０１８、ｐｐ１４９〜１７６。共溶媒の存在下でＣＤ可溶化が低減することについての代替の仮説は、共溶媒が水性媒体の極性を低減し、したがって親油性薬物が親油性ＣＤ内腔に入るための駆動力を低減するというものである。複数の研究文献が、この結論を裏付けている。例えば、Ｐ．Ｌｉ、Ｌ．Ｚｈａｏ、Ｓ．Ｈ．Ｙａｌｋｏｗｓｋｙ、Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ ｏｎ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎｐｏｌａｒ ｄｒｕｇｓ、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、８８（１９９９）１１０７〜１１１１；Ｈ．Ｖｉｅｒｎｓｔｅｉｎ、Ｐ．Ｗｅｉｓｓ−Ｇｒｅｉｌｅｒ、Ｐ．Ｗｏｌｓｃｈａｎｎ、Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｌｏｗ ｓｏｌｕｂｌｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ−ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、２５６（２００３）８５〜９４；Ｙ．Ｈｅ、Ｐ．Ｌｉ、Ｓ．Ｈ．Ｙａｌｋｏｗｓｋｙ、Ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｌｕａｓｔｅｒｏｎｅ ｉｎ ｃｏｓｏｌｖｅｎｔ／ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、２６４（２００３）２５〜３４；Ｔ．Ｌｏｆｔｓｓｏｎ、Ｂ．Ｊ．Ｏｌａｆｓｄｏｔｔｉｒ、Ｈ．Ｆｒｉｄｒｉｋｓｄｏｔｔｉｒ、Ｓ．Ｊｏｎｓｄｏｔｔｉｒ、Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘａｔｉｏｎ ｏｆ ＮＳＡＩＤＳｓ：ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１（１９９３）９５〜１０１；およびＪ．Ｐｉｔｈａ、Ｔ．Ｈｏｓｈｉｎｏ、Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｏｎ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｓ ｗｉｔｈ ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ｏｒ ｗｉｔｈ ｍｅｔｈｙｌ ｏｒａｎｇｅ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、８０（１９９２）２４３〜２５１を参照されたい。例えば、Ｖｉｅｒｎｓｔｅｉｎらは、低水溶性化合物である殺真菌剤トリフルミゾールを研究し、「一般に、共溶媒およびβ−シクロデキストリンの組合せは、共溶媒が包接複合体を不安定化するので、化合物の溶解度を増大しない」ことを見出した。Ｌｏｆｔｓｓｏｎらは、低水溶性の複数の非ステロイド系抗炎症薬物（ＮＳＡＩＤ）を研究し、「試験したすべてのＮＳＡＩＤが、ＣＤと包接複合体を形成したが、ＣＤ水溶液にエタノールまたはプロピレングリコールを添加すると、それらの複合体化度が低減した」ことを見出した。
【0162】
驚くべきことに、本発明者らは、複合体化剤を使用してＰＦ−００８３５２３１の水溶性を改善して、非経口的に適した組成物の標的溶解度範囲の下端を有効にし得ることを見出している。好ましい複合体化剤には、ＣＤ、アミノ酸およびハイドロトロープが含まれ、より好ましい複合体化剤には、β−ＣＤ、γ−ＣＤ、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムが含まれ、最も好ましい複合体化剤には、ＨＰ−β−ＣＤおよびＳＢＥ−β−ＣＤが含まれる。驚くべきことに、β−ＣＤは、薬物が中程度の親油性であるにもかかわらず、ＰＦ−００８３５２３１と複合体を形成することができる。ＰＦ−００８３５２３１の複合体化剤ベースの医薬組成物の好ましい実施形態は、溶液として製剤化し、次にそれを滅菌濾過し、適切な容器栓系に充填し、溶液として供給できることである。その溶液は、ＩＶ投与の前にさらなる希釈を必要としないＲＴＵ溶液として、またはＩＶ投与の前に希釈を必要とするＲＴＤ溶液として供給することができる。ＰＦ−００８３５２３１の複合体化剤ベースの医薬組成物のさらなる好ましい実施形態は、溶液として製剤化し、次にそれを滅菌濾過し、適切な容器栓系に充填し、フリーズドライして、凍結乾燥物を製造できることである。凍結乾燥生成物は、ＩＶ投与の前に再構成および／または希釈することができる。
【0163】
さらにより驚くべきことには、ＰＦ−００８３５２３１の溶解度は、１種または複数の複合体化剤および１種または複数の共溶媒を含有する製剤において増大し、それによって、標的用量範囲をより大きく網羅することが可能になる。この知見は、多くの共溶媒が、前述の通り複合体化に対して不安定化効果を有する場合があるという過去の報告によると、驚くべきことである。好ましい複合体化剤には、ＣＤおよびハイドロトロープが含まれ、より好ましい複合体化剤には、β−ＣＤ、γ−ＣＤ、ニコチンアミド、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムが含まれ、最も好ましい複合体化剤には、ＨＰ−β−ＣＤおよびＳＢＥ−β−ＣＤが含まれる。ＰＦ−００８３５２３１に対するＣＤのモル比に基づく、最終的な薬物生成物（およびＩＶ投与のための水性液体組成物）におけるＣＤの量は、好ましくは約１．５：１〜約２５：１の範囲、より好ましくは約１．５：１〜約８：１の範囲、最も好ましくは約２：１〜６：１の範囲である。好ましい共溶媒には、１種または複数の水混和性の極性プロトン性および非プロトン性溶媒が含まれていてもよく、より好ましい共溶媒には、ジメチルアクリルアミド（ＤＭＡ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、およびベンジルアルコール（ＢＡ）が含まれていてもよく、最も好ましい共溶媒には、エタノール、プロピレングリコール（ＰＧ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）およびポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６００）が含まれる。いくつかの製剤において、溶液の粘度を低減し、溶媒相互作用と関連する任意の物理的不安定性を制限するには、共溶媒の組合せが好ましい。最終的な薬物生成物（およびＩＶ投与のための水性液体組成物）において最も好ましい２種の共溶媒は、エタノールおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）の一方であり、他方の共溶媒は、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびプロピレングリコールからなる群から選択され、ここでエタノールまたはＤＭＳＯとＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００またはＰＧの比は、好ましくは約１：１〜約１：９の範囲、最も好ましくは約１：２〜約１：４の範囲である。最終製剤（およびＩＶ投与のための水性液体組成物）における全共溶媒の量は、体積分率に基づいて、好ましくは約１５％ｖ／ｖまで、最も好ましくは約６％ｖ／ｖまでである。複合体化剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の製剤の好ましい実施形態は、溶液として製剤化し、まず、ＰＦ−００８３５２３１を１種または複数の共溶媒に可溶化し、その後、好ましくは複合体化剤を含有する水性混合物と合わせることである。驚くべきことに、溶解度改善の規模は、この順序で賦形剤を添加することによって影響を受ける。複合体化剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の製剤の好ましい実施形態は、溶液として製剤化し、次にそれを滅菌濾過し、適切な容器栓系に充填し、溶液として供給できることである。その溶液は、ＩＶ投与の前にさらなる希釈を必要としないＲＴＵ溶液として、またはＩＶ投与の前に希釈を必要とするＲＴＤ溶液として供給することができる。複合体化剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の製剤の代替の好ましい実施形態は、溶液として製剤化し、次にそれを滅菌濾過し、適切な容器栓系に充填し、フリーズドライして、凍結乾燥物を製造できることである。凍結乾燥生成物は、ＩＶ投与の前に再構成および／または希釈することができる。複合体化剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の製剤の代替の実施形態は、それぞれ所望の共溶媒および所望の界面活性剤を含有する少なくとも２種の特殊希釈剤を含む適切な容器栓系に、ＰＦ−００８３５２３１を粉末として供給することである。ＰＦ−００８３５２３１粉末の例は、滅菌結晶化材料であるか、またはフリーズドライによって調製することができる。この実施形態では、粉末および希釈剤は、ＲＴＵまたはＲＴＤ生成物を生成するために適切な順序で混合することができ、その生成物は、他の実施形態と同様にさらに希釈することができる。複合体化剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の製剤の代替の実施形態は、濃縮共溶媒溶液として製剤し、それを滅菌濾過し、適切な容器栓系に充填し、所望の可溶化剤を含有する特殊希釈剤を含むＲＴＤ溶液として供給できることである。
【0164】
本発明者らはまた、ＰＦ−００８３５２３１の溶解度が、１種または複数の界面活性剤および１種または複数の共溶媒を含有する製剤において増大することもでき、それによって、複合体化剤単独よりも標的用量範囲をより大きく網羅することが可能になるが、複合体化剤および共溶媒よりは網羅範囲が小さいことを見出している。好ましい共溶媒には、水混和性極性プロトン性および非プロトン性溶媒が含まれていてもよく、より好ましい共溶媒には、ＰＧ、ＤＭＡが含まれていてもよく、最も好ましい共溶媒には、ＢＡ、ＤＭＳＯ、エタノール、ＮＭＰおよびポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００）が含まれる。ＩＶ投与のための水性液体組成物における共溶媒の好ましい量は、約３０％ｖ／ｖまでであり、共溶媒のより好ましい量は、約２０％ｖ／ｖまでであり、共溶媒の最も好ましい量は、約１０％ｖ／ｖまでである。好ましい界面活性剤には、非イオン性ポリマー、イオン性ポリマーおよび脂質が含まれ、より好ましい界面活性剤には、ＰＶＰ、ポロキサマー４０７、ポロキサマー１８８、ＨＰＭＣ、ポリエトキシ化ヒマシ油、レシチンが含まれ、最も好ましい界面活性剤には、ポリソルベート８０（ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（ＰＳ２０）、およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸が含まれる。ＩＶ投与のための水性液体組成物における界面活性剤の好ましい量は、約１００ｍｇ／ｍＬまでであり、界面活性剤の最も好ましい量は、約１２．５ｍｇ／ｍＬまでである。界面活性剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の医薬組成物の好ましい実施形態は、溶液として製剤化し、次にそれを滅菌濾過し、適切な容器栓系に充填し、溶液として供給できることである。その溶液は、ＩＶ注入の前にさらなる希釈を必要としないＲＴＵ溶液として、またはＩＶ注入の前に希釈を必要とするＲＴＤ溶液として供給することができる。界面活性剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の医薬組成物のさらなる好ましい実施形態は、溶液として製剤化し、次にそれを滅菌濾過し、適切な容器栓系に充填し、フリーズドライして、凍結乾燥物を製造できることである。凍結乾燥生成物は、ＩＶ注入の前に再構成および／または希釈することができる。界面活性剤および共溶媒ベースのＰＦ−００８３５２３１の医薬組成物のさらなる好ましい実施形態は、所望の共溶媒および所望の界面活性剤を含有する特殊希釈剤を含む適切な容器栓系に、ＰＦ−００８３５２３１を粉末として供給することである。この実施形態では、粉末および希釈剤は、ＲＴＵまたはＲＴＤ生成物を生成するために適切な順序で混合することができ、その生成物は、他の実施形態と同様にさらに希釈することができる。その粉末は、ＰＦ−００８３５２３１の形態３の水和物を含むことができる。
【0165】
薬物生成物が溶液として製剤化される前述の好ましい実施形態のそれぞれにおいて、ｐＨ依存性分解が観察される。薬物安定性を最大限にするために、最終的な医薬組成物は、好ましくは、約２〜約６、最も好ましくは約３〜約５の範囲の見かけのｐＨを有する。必要なｐＨを維持するために、医薬組成物は緩衝化され、好ましい緩衝液は、酢酸、乳酸、リン酸および酒石酸であり、最も好ましい緩衝液は、クエン酸である。驚くべきことに、ｐＨ調整およびＣＤの組合せは、最も好ましい化学的安定性をもたらす。
【0166】
薬物生成物が凍結乾燥される前述の好ましい実施形態のそれぞれにおいて、増量剤、浸透圧改変剤、または捕水用（water scavenging）賦形剤が含まれていてもよい。好ましい賦形剤には、糖、多価アルコール、ポリマー、およびアミノ酸が含まれ、より好ましい賦形剤には、ＰＶＰ、スクロース、マンニトール、ラクトース、およびグリシンが含まれ、最も好ましい賦形剤には、トレハロース、デキストラン、および低または高分子量ＰＥＧが含まれる。
【0167】
実施例の一般法超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）アッセイ法
Ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ Ｓｏｌｖｅｎｔ Ｍａｎａｇｅｒ、Ｓａｍｐｌｅ Ｍａｎａｇｅｒ、Ｃｏｌｕｍｎ Ｍａｎｇｅｒおよび解析用フローセル検出器（検出波長２９２ｎｍ）を伴うＴＵＶ検出器を備えたＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ系。Ｃｏｒｔｅｃｓ Ｔ３、１．６μｍ、２．１ｍｍ×１００ｍｍのカラムを、４０±２℃の温度に設定した。注入体積１μＬを設定して、流速０．３ｍＬ／分で分析した。移動相Ａ（１０ｍＭギ酸アンモニウム、ｐＨ３．０）および移動相Ｂ（メタノール）グラジエントを使用して、所望の分離を達成した。０〜１分については９５：５の移動相Ａ：移動相Ｂ比を設定し、次にその比を１５分の時点で５：９５に設定し、１６分まで同じ比を維持し、その後、１６．１０分において９５：５に設定し、同じ比で２０分間分析した。
【0168】
超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）純度方法Ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ Ｓｏｌｖｅｎｔ Ｍａｎａｇｅｒ、Ｓａｍｐｌｅ Ｍａｎａｇｅｒ、Ｃｏｌｕｍｎ ＭａｎｇｅｒおよびＰＤＡ検出器（検出波長２９２ｎｍ）を備えたＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ系。Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｆ５、１．７μｍ、２．１ｍｍ×１５０ｍｍのカラムを、６０±２℃の温度に設定した。注入体積５μＬを設定して、流速０．４ｍＬ／分で分析した。移動相Ａ（２０ｍＭギ酸アンモニウム、ｐＨ３．０）および移動相Ｂ（メタノール中２０ｍＭギ酸アンモニウム）グラジエントを使用して、所望の分離を達成した。０〜１分については６５：３５の移動相Ａ：移動相Ｂ比を設定し、次にその比を３１分の時点で４５：５５に設定し、その後、４６分において５：９５に設定し、４６．５分において６５：３５に設定し、５６分間分析した。
【0169】
粉末Ｘ線回折法１粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）を、ホルダーにＰＦ−００８３５２３１試料およそ２０ｍｇをロードすることによって実施した。測定は、Ｍｉｎｉｆｌｅｘ−６００で、１０ｍｍ×０．２ｍｍウェル試料ホルダーを備えたＲｉｇａｋｕ ９０６１６３を使用して実施した。その系では、Ｒｉｇａｋｕ ＰＤＸＬ２ソフトウェア（Ｖ２．８．４．０）およびＭｉｎｉｆｌｅｘ Ｇｕｉｄａｎｃｅ（Ｖ３．２．２０）を使用した。その系を、ステップモードに設定し、２°２θ度の出発角度および４０°２θ度の停止角度から、１秒間に０．０１９°２θのステップで、電圧４０Ｖおよび電流１５ｍＡを用いて分析した。
【0170】
粉末Ｘ線回折法２粉末Ｘ線回折パターンは、Ｃｕ放射線源を備えたＢｒｕｋｅｒ ＡＸＳ Ｄ８ Ｅｎｄｅａｖｏｒ回折計を使用して作製した。管電圧およびアンペア数を、それぞれ４０ｋＶおよび４０ｍＡに設定した。電動発散スリットを、１１ｍｍの一定照明に設定した。回折放射線を、ＬＹＮＸＥＹＥ ＸＥ−Ｔエネルギー分散Ｘ線検出器を使用し、位置感知検出器（ＰＳＤ）の開口部を４．００°に設定して検出した。データを、シータ−シータ角度計で、Ｃｕ波長２．０〜５５．０°２θにおいてステップサイズ０．０１９°２θおよびステップ当たりの時間０．１秒を使用して収集した。試料を、解析のためにそれらをケイ素の低バックグラウンドホルダーに入れることによって調製し、データ収集中、１５ｒｐｍで回転させた。データを、ＤＩＦＦＲＡＣ．ＥＶＡソフトウェアで解析した。
【0171】
クエン酸緩衝液の調製５０ｍＭクエン酸緩衝溶液１００ｍＬを、３．０、５．０、および７．０のｐＨ値を標的にするために、メスフラスコ中で精製水、無水クエン酸、およびクエン酸ナトリウム二水和物から調製した。緩衝溶液を、標的ｐＨに達するために１Ｎ水酸化ナトリウムまたは１Ｎ塩酸で調整した。
【0172】
例えば、ｐＨ５の５０ｍＭクエン酸緩衝液を、まず、精製水およそ２５ｍＬを１００ｍＬメスフラスコに添加することによって調製した。このフラスコに、無水クエン酸（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｐｈ．Ｅｕｒ／ＵＳＰ）およそ３３１ｍｇおよびクエン酸三ナトリウム二水和物（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｐｈ．Ｅｕｒ．／ＵＳＰ）およそ９６３ｍｇを添加した。精製水を、メスフラスコに標的体積まで添加し、均質になるまで反転して混合した。ｐＨを測定すると、さらなるｐＨ調整は必要なかった。
【0173】
製剤実施例Ｆ１：ＰＦ−００８３５３２１の水溶性飽和溶解度測定
クエン酸緩衝溶液を調製した後、必要なｐＨの緩衝溶液１０００μＬを、透明エッペンドルフ管に添加した。次に、ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ７ｍｇを、エッペンドルフ管中、クエン酸緩衝溶液に添加した。このプロセスを、各ｐＨ値において合計３回反復して繰り返した。溶液を観察して、ＰＦ−００８３５３２１が完全に溶解していなかった（すなわち、溶液は飽和していた）ことを保証した。次に、管をパラフィルムで封止し、ドラムバイアルの内側に入れ、およそ４℃の温度制御環境においてローラーミキサー上に置いた。
【0174】
４８時間後に、製剤をローラーミキサーから取り出し、ｐＨをチェックし、本来の値と一致していることが見出された。次に試料を、遠心分離フィルターを有する新しいエッペンドルフ管に移した。次に製剤を、１３，０００毎分回転数（ｒｐｍ）で、およそ４℃で３分間遠心分離した。フィルターに収集された固体残余分である試料を、ＰＸＲＤによって解析し、フィルターを通過した濾液試料を、ＵＰＬＣによって解析した（先を参照）。これらの飽和溶解度実験からの結果は、平均値として記録された以下の製剤の表Ｆ１に見出される。
【0175】
【表3】
【0176】
これらの飽和溶解度データにより、ＰＦ−００８３５２３１が、３．０〜７．０のｐＨとは独立に低い水溶性を有し、したがって、約１０００ｍＬまでの体積で適切な用量を達成するためには、溶解を可能にする製剤化手法の使用が必要になることが確認される。
【0177】
製剤実施例Ｆ２：共溶媒／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の溶解度飽和溶解度測定
共溶媒／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の飽和水溶解度を、水中２５％ｖ／ｖ共溶媒（co-co-solvent）含量まで研究した。
【0178】
製剤ごとに、共溶媒ストック溶液を、まず２．５％ｖ／ｖ、１０％ｖ／ｖ、または２５％ｖ／ｖの濃度で調製した。２５％ｖ／ｖの共溶媒ストック溶液を調製するために、共溶媒５ｍＬを２０ｍＬメスフラスコに添加し、その後、ｐＨ５の５０ｍＭクエン酸緩衝液１ｍＬを添加し、その後、水を添加して嵩を増した。１０％ｖ／ｖの共溶媒ストック溶液を調製するために、共溶媒１ｍＬを１０ｍＬメスフラスコに添加し、その後、ｐＨ５．０の５０ｍＭクエン酸緩衝液１ｍＬを添加し、その後、水を添加して嵩を増した。２．５％ｖ／ｖの共溶媒ストック溶液を調製するために、２５％ｖ／ｖの共溶媒ストック溶液１ｍＬを１０ｍＬメスフラスコに添加し、その後、ｐＨ５．０の５０ｍＭクエン酸緩衝液０．９ｍＬを添加し、その後、水を添加して嵩を増した。
【0179】
次に、緩衝化共溶媒ストック溶液２０００μＬをＨＰＬＣバイアルに添加した。次に、ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ１０ｍｇを、ＨＰＬＣバイアル中の溶液に添加した。その溶液を、およそ１分間ボルテックスすることによって混合し、製剤を観察して、ＰＦ−００８３５２３１が完全に溶解していなかった（すなわち、溶液は飽和していた）ことを保証した。次に、管をパラフィルムで封止し、温度制御されたインキュベーターに入れ、回転させて混合した。温度制御されたインキュベーターを、４０℃に８時間、１５℃に５時間、および２５℃に１２時間制御した。実験の最後に、製剤をインキュベーターから取り出し、０．２μｍのＰＶＤＦ遠心分離フィルターを有する新しいエッペンドルフ管に移した。次に、溶液を１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。フィルターを通過した濾液試料を、ＨＰＬＣによって解析した。溶解度データは、表２に示される。
【0180】
【表4】
【0181】
これらの溶解度データは、共溶媒の濃度と飽和溶解度の間の指数関数的関係を実証している。試験した共溶媒の中でも、ＰＧ＜ＤＭＳＯ、エタノール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００＜ＮＭＰ＜ＢＡとして、順番にランク付けすることができる。これらの結果の最も驚くべき態様は、ＰＧが、溶解度を最も改善せず（１０％および２５％ｖ／ｖのＤＭＳＯ、エタノール、ＰＥＧ３００、およびＰＥＧ４００の約５０％）、ＮＭＰおよびＢＡが、溶解度を最も改善する（１０％ｖ／ｖのＤＭＳＯ、エタノール、ＰＥＧ３００、およびＰＥＧ４００と比較して、それぞれ約３倍および約１０倍）ということである。ＮＭＰは、優先順位が限られており、この投与経路を介する毒性が報告されていることに起因して、静脈内投与に適していない場合があるが、化合物が別の投与経路（すなわち、皮下）で投与されるならば適している場合がある。同等に挙動した４種の共溶媒について、２５％ｖ／ｖの共溶媒を添加すると、約１．５ｍｇ／ｍＬまでの中程度の溶解度の改善が観察された。ＰＦ−００８３５２３１についての０．３ｍｇ／ｍＬ〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲と比較すると、このデータは、２５％ｖ／ｖまでの単一共溶媒だけが、標的用量範囲の下端をカバーできることを示している。その結果として、異なる共溶媒の混合物が、溶解度をさらに改善すると同時に、必要とされる賦形剤レベルを低減できるかどうかを見るために研究した。
【0182】
製剤実施例Ｆ３：共溶媒／共溶媒／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の溶解度飽和溶解度測定
共溶媒／共溶媒／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の飽和水溶解度を、ｐＨ５に調整され、５ｍＭクエン酸緩衝液を有していた水中で、５０％ｖ／ｖの全共溶媒含量まで研究した。エタノール、ＰＥＧ４００、およびＰＧは、ＩＶ投与生成物におけるそれらの使用の先例があることに起因して、共溶媒として最終候補に残った。ストック溶液１０ｍＬを、１％ｖ／ｖ〜２５％ｖ／ｖの各共溶媒の濃度で調製し、１０％ｖ／ｖの５０ｍＭクエン酸緩衝液をｐＨ５．０に調整し、水で標的体積に希釈した。
【0183】
水和物形態（ＰＦ−００８３５２３１水和物、形態３）およそ１０ｍｇを、試料ごとに秤量してＨＰＬＣバイアルに入れ、体積１ｍＬの目的の共溶媒ビヒクルを添加した。そのプロセスは、２回の反復で完了した。試料をボルテックスし、２５℃のオーブン中のローラーミキサー上に４８時間置いた。４８時間後に、試料を目視で評価して、ＰＦ−００８３５３２１が完全に溶解していなかった（すなわち、溶液は飽和していた）ことを保証した。試料を、０．２μｍのＰＶＤＦ遠心分離フィルターを有する遠心分離プラスチック管に移した。溶液のｐＨを測定して、ＰＦ−００８３５２３１を添加した後にｐＨが変化していなかったことを確認した。試料を、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。上清を収集し、ＨＰＬＣによって解析した。溶解度データは、製剤の表Ｆ３に示される。
【0184】
【表5】
【0185】
これらの溶解度データは、全共溶媒含量と溶解度の間の相関を実証しており、ここでＰＥＧ４００およびエタノールは同等の可溶化を達成しており、これはＰＧよりも高い。２５％ｖ／ｖのＰＥＧ４００および２５％ｖ／ｖのエタノールを含有する製剤において、７．７ｍｇ／ｍＬまでの中程度の溶解度の改善が観察される。ＰＦ−００８３５２３１についての０．３〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲と比較すると、このデータは、それぞれ２５％ｖ／ｖまでの２種の共溶媒が、標的用量範囲のすべてではないが、より大きい部分をカバーできることを示している。その結果として、共溶媒および界面活性剤の混合物が、溶解度をさらに改善すると同時に、必要とされる賦形剤レベルを低減できるかどうかを見るために研究した。
【0186】
製剤実施例Ｆ４：共溶媒／共溶媒／界面活性剤の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の溶解度ＰＦ−００８３５２３１の溶解度を低減された共溶媒レベルで改善し、希釈時の沈殿リスクを低減するための、共溶媒と界面活性剤の混合物を研究した。
【0187】
飽和溶解度測定共溶媒／共溶媒／界面活性剤の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の飽和水溶解度を研究した。ＤＭＳＯ、エタノール、ＰＥＧ４００、およびＰＧを、共溶媒として使用した。ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、およびポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアリン酸を、界面活性剤として使用した。
【0188】
製剤ごとに、共溶媒／共溶媒／界面活性剤のストック溶液を、まず、以下のいずれかを用いてメスフラスコ中で調製した。・２５％ｖ／ｖの共溶媒１、２５％ｖ／ｖの共溶媒２、および１２．５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤
・１０％ｖ／ｖの共溶媒１、１０％ｖ／ｖの共溶媒２、および５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤
・５％ｖ／ｖの共溶媒１、５％ｖ／ｖの共溶媒２、および２．５ｍｇ／ｍＬの界面活性剤
【0189】
すべての製剤を、およそｐＨ５．０の５ｍＭクエン酸緩衝液の最終濃度で調製した。選択された濃度は、可能なＲＴＵおよびＲＴＤ製剤をひとまとめに扱い、可能な製剤設計空間をマッピングする一助になる。
【0190】
ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ２０ｍｇを、各ＨＰＬＣバイアルに添加した。次に、緩衝化共溶媒／共溶媒／界面活性剤のストック溶液１．５ｍＬを、ＨＰＬＣバイアルに添加した。溶液を、およそ１分間ボルテックスすることによって混合し、製剤を観察して、ＰＦ−００８３５２３１が完全に溶解していなかった（すなわち、溶液は飽和していた）ことを保証した。次に、管をパラフィルムで封止し、温度制御されたインキュベーターに入れ、回転させて混合した。温度制御されたインキュベーターを、回転数１２ｒｐｍで、４０℃に８時間、１５℃に５時間、および２５℃に１２時間制御した。実験の最後に、製剤をインキュベーターから取り出し、０．２μｍのＰＶＤＦ遠心分離フィルターを有する新しいエッペンドルフ管に移した。次に、溶液を１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。フィルターを通過した濾液試料を、ＨＰＬＣによって解析した。溶解度データは、製剤の表Ｆ４に示される。
【0191】
【表6】
【0192】
これらの溶解度データは、２種の共溶媒単独（製剤実施例Ｆ３）と比較して、２種の共溶媒および界面活性剤を含有する混合物について溶解度の改善を実証している。共溶媒の溶解度の傾向は、先の例と一致していた。使用した３種すべての界面活性剤（ＰＳ２０、ＰＳ８０、およびＫｏｌｌｉｐｈｏｒ ＨＳ−１５）は、同等の溶解度を達成した。これらの結果から、２５％ｖ／ｖのエタノール、２５％ｖ／ｖのＰＥＧ４００、および１２．５ｍｇ／ｍＬのＰＳ８０を添加すると、約１６．６ｍｇ／ｍＬの溶解度を達成することができ、これはＰＳ８０なしの同じ製剤よりも約９ｍｇ／ｍＬ高い。ＰＦ−００８３５２３１についての０．３ｍｇ／ｍＬ〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲と比較すると、このデータは、この組成物が、全標的用量範囲をカバーできることを示している。しかし、高い共溶媒レベルを有する製剤は、標的用量範囲の上端をカバーするためにこれらの製剤を臨床的に使用することを妨げるおそれがある、安全性リスクを示し得る。その結果として、低レベルの共溶媒を含む製剤は、標的用量範囲の下端をカバーすることを必要とされる場合があり、またはより高いレベルの共溶媒を含む製剤は、投与前に希釈されなければならない場合がある。
【0193】
純粋な共溶媒および界面活性剤の混合物における溶解度および安定性共溶媒および界面活性剤を含有する製剤について最も集中的な選択肢を研究するために、製剤を、純粋な共溶媒および界面活性剤を用いて調製した。目的のビヒクルは、必要量のエタノール（Ｍｅｒｃｋ）、ＰＥＧ４００（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）、およびポリソルベート８０ ｓｕｐｅｒ ｒｅｆｉｎｅｄ（Ｃｒｏｄａ）を、２５ｍＬメスフラスコに添加し、エタノールを補って嵩を増すことによって調製した。組成は、製剤の表に示される。ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ３０ｍｇをＨＰＬＣバイアルに添加し、その後、目的のビヒクルおよそ０．５ｍＬを添加した。次に試料を、２５℃のオーブン中のローラーミキサー上に置いた。４８時間後に、すべての溶液が透明になり、飽和溶解度が達成されていなかったことを示した。次に、溶液を１３，０００ｒｃｆで３分間、２回遠心分離した。上清を収集し、ＨＰＬＣによって解析した。飽和溶解度が達成されていなかったので、ＨＰＬＣデータは、製剤の表Ｆ５に示される通り、達成された最小溶解度であった。
【0194】
【表7】
【0195】
製剤の表Ｆ５のデータは、純粋な共溶媒および界面活性剤の混合物が、０．３ｍｇ／ｍＬ〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲を上回ってＰＦ−００８３５２３１を可溶化できることを示している。しかし、製剤の表Ｆ５に示される濃縮共溶媒混合物は、存在する共溶媒および界面活性剤の量に起因して、２５０ｍＬ〜５００ｍＬの標的注入体積ではＩＶ投与に適していない可能性が高い。その結果として、これらの製剤は、関連する希釈剤（すなわち、０．９％ｗ／ｖ生理食塩水）で希釈しなければならず、得られた混合物は、物理的安定性（すなわち、薬物が溶液のままであるか、または沈殿するか）についてモニタリングされなければならない。
【0196】
【表8】
【0197】
製剤の表Ｆ６に示される必要量の賦形剤を秤量して、５０ｍＬメスフラスコに入れた。最終ｐＨを制御するために、エタノール中０．１Ｍ無水クエン酸２４５μＬをビヒクル１に添加し、エタノール中０．１Ｍ無水クエン酸２８８μＬをビヒクル２に添加した。ビヒクル１には、精製水を補って嵩を増し、ビヒクル２には、エタノールを補って嵩を増し、混合するまで撹拌した。
【0198】
ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ８００ｍｇを、２０ｍＬメスフラスコに添加し、ビヒクル１またはビヒクル２のいずれかを補って嵩を増した。小型磁気撹拌子を添加し、メスフラスコを磁気撹拌機プレート上に移した。およそ４０ｍｇ／ｍＬの均質な溶液が達成されるまで、混合物を撹拌した。次に、希釈研究のために製剤を準備し、ビヒクル１とＰＦ−００８３５２３１を、製剤１と記載し、ビヒクル２とＰＦ−００８３５２３１を、製剤２と記載する。ＨＰＬＣ測定に基づくと、ＰＦ−００８３５２３１の濃度は、製剤１ではおよそ３６ｍｇ／ｍＬであり、製剤２ではおよそ３７ｍｇ／ｍＬであることが見出された。
【0199】
希釈は、外因性粒子を最小限に抑えるために層流エアフローフード内で、滅菌条件下で実施した。ガラス製品を予洗し、濾過水で１０回すすいで、目に見えるおよび目に見えない微粒子を低減した。ガラス製品を、実験前に層流エアフローキャビネット内で一晩乾燥させた。希釈を実施するために、製剤１および製剤２を、０．５０μｍのＰＶＤＦシリンジフィルターを介して濾過して、別個の保持容器に入れた。製剤１では、およそ５．５６ｍＬを、０．９％ｗ／ｖ生理食塩水を含有する１００ｍＬのフラスコに添加した（およそ２ｍｇ／ｍＬに１８倍希釈）。全体積５．５６ｍＬの製剤１を、一度に添加し、次にフラスコにキャップし、反転により混合した。このプロセスを、合計３つの試料について繰り返した。製剤２では、およそ４．１７ｍＬを、１００ｍＬのフラスコに添加し、生理食塩水で１００ｍＬに希釈した（およそ１．５ｍｇ／ｍＬに２４倍希釈）。全体積４．１７ｍＬの製剤２を、一度に添加し、次にフラスコにキャップし、反転により混合した。このプロセスを、合計３つの試料について繰り返した。
【0200】
フラスコを室温で静置した。目視による外観アセスメントを、およそ５分、１０分、３０分、１時間、２時間、３時間、１６時間、２０時間、および２４時間においてメスフラスコで完了し、プラセボ対照と比較した（プラセボ対照は、前述の通り、生理食塩水で希釈したＰＦ−００８３５２３１を含まない製剤１および２であった）。すべての場合において、ＰＦ−００８３５２３１を含有するメスフラスコ中で１６時間目の時点で粒子が観察され、３時間〜１６時間の間に沈殿が生じていたことが示された。プラセボ対照は、透明であることが観察された。
【0201】
これらのデータは、純粋な共溶媒および界面活性剤の混合物が、ＰＦ−００８３５２３１の溶解度を著しく改善して、標的用量範囲の下端を有効にし得ることを示している。しかし希釈時には、より高濃度の製剤の物理的安定性が制限されることに起因して、用量範囲を完全に網羅することは不可能である。その結果として、代替の製剤を評価した。
【0202】
製剤実施例Ｆ５：ＣＤ／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の溶解度共溶媒および界面活性剤ベースの可溶化手法による成功が限られていることに起因して、代替の手法を評価した。具体的には、ＳＢＥ−β−ＣＤおよびＨＰ−β−ＣＤを、複合体化剤として研究した。
【0203】
飽和溶解度実験ＰＦ−００８３５２３１の飽和溶解度を、５ｍＭクエン酸緩衝液でｐＨ５に調整した溶液中で、１５ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬで変わるＣＤ濃度により評価した。ＣＤ溶液を、ｐＨ５．０の５０ｍＭクエン酸緩衝液２．５ｍＬを２５ｍＬメスフラスコに添加することによって調製した。含水量について補正した、必要量のＳＢＥ−β−ＣＤ（Ｃａｒｂｏｎａｔｅ、医薬グレード）およびＨＰ−β−ＣＤ（Ｒｏｑｕｅｔｔｅ、非経口グレード、ＥＰ−ＵＳＰ／ＮＦ）を秤量して、メスフラスコに入れた。メスフラスコを、精製水を補って嵩を増し、次に完全に溶解し、混合するまで撹拌した。
【0204】
ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ５ｍｇを秤量し、２ｍＬのエッペンドルフ管に移した。ＣＤ溶液１ｍＬを添加し、試料をボルテックスした。懸濁液を得、試料を５分間超音波処理した。超音波処理した後、試料を適切にラベリングされたドラムバイアルに入れ、次に２５℃のオーブン中のローラーミキサー上で４８時間維持した。このプロセスを、２種の試料がＣＤ溶液ごとに作製されるように繰り返した。試料を４８時間後に観察した。試料を、遠心濾過デバイス（０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター）内で、１３，０００ｒｐｍで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ｐＨを測定して変化がないことを確認し、試料を効力についてＨＰＬＣによって解析した。
【0205】
【表9】
【0206】
製剤の表Ｆ７のデータに基づくと、ＣＤは、１００ｍｇ／ｍＬのＣＤ濃度においてＰＦ−００８３５２３１の溶解度を、ＳＢＥ−β−ＣＤについては１．５ｍｇ／ｍＬに、ＨＰ−β−ＣＤについては１．９ｍｇ／ｍＬに改善することができた。ＰＦ−００８３５２３１についての０．３ｍｇ／ｍＬ〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲と比較すると、このデータは、１００ｍｇ／ｍＬまでのＣＤが、標的用量範囲のより下端をカバーできることを示している。
【0207】
室温でのローラー混合実験のための方法５ｍＭクエン酸緩衝液中、ＨＰ−β−ＣＤの１００ｍｇ／ｍＬ溶液を調製した。ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ５ｍｇを秤量して、２ｍＬのエッペンドルフ管に入れた。５ｍＭクエン酸緩衝溶液中ＣＤ１ｍＬを、２ｍＬのエッペンドルフ管に添加した。試料をボルテックスし、次に適切にラベリングされたドラムバイアルに入れ、２５℃のオーブン中のローラーミキサー上で４８時間維持した。このプロセスを、２種の試料がＣＤ溶液ごとに作製されるように繰り返した。試料を４８時間後に観察すると、固体が残っていた。次に試料を、遠心濾過デバイス（０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター）内で、１３，０００ｒｐｍで３分間遠心分離した。上清を収集した。ｐＨを測定し、残留固体の固体形態を、ＰＸＲＤによって試験した。固体形態の変化は検出されなかった。試料を、効力についてＨＰＬＣによって解析し、その結果は製剤の表Ｆ８に示される（対照は、超音波処理なし、２５℃で４８時間のローラーミキサー）。
【0208】
延長超音波処理実験５ｍＭクエン酸緩衝液中、ＨＰ−β−ＣＤの１００ｍｇ／ｍＬ溶液を調製した。ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ５ｍｇを秤量して、２ｍＬのエッペンドルフ管に入れた。５ｍＭクエン酸緩衝溶液中ＣＤ１ｍＬを、２ｍＬのエッペンドルフ管に添加した。試料をボルテックスし、次に２０分間超音波処理した。次に、試料をドラムバイアルに入れ、２５℃のオーブン中のローラーミキサー上に４８時間置いた。このプロセスを、２種の試料がＣＤ溶液ごとに作製されるように繰り返した。試料を４８時間後に観察すると、固体が存在していた。次に試料を、遠心濾過デバイス（０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター）内で、１３，０００ｒｐｍで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ｐＨを測定して変化がないことを確認し、濾液を効力についてＨＰＬＣによって解析した。結果は、製剤の表Ｆ８に示される（２０分間の超音波処理、次に２５℃で４８時間のローラーミキサー）。
【0209】
【表10】
【0210】
加熱し、次にローラーミキサーを用いる実験のための方法ＳＢＥ−β−ＣＤおよびＨＰ−β−ＣＤの１００ｍｇ／ｍＬ溶液を、５ｍＭクエン酸緩衝液中で調製した。ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ５ｍｇを秤量して、２ｍＬのエッペンドルフ管に入れた。５ｍＭクエン酸緩衝溶液中ＣＤ１ｍＬを、２ｍＬのエッペンドルフ管に添加した。試料をボルテックスし、次にドラムバイアルに入れ、４０℃のオーブン中のローラーミキサー上で２４時間維持した。次に試料を、２５℃のオーブン中のローラーミキサー上に４８時間置いた。このプロセスを、２種の試料がＣＤ溶液ごとに作製されるように繰り返した。次に試料を、遠心濾過デバイス（０．２２μｍのＰＶＤＦフィルター）内で、１３，０００ｒｐｍで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ｐＨを測定して変化がないことを確認し、濾液を効力についてＨＰＬＣによって解析した。結果は、製剤の表Ｆ８に示される（４０℃で２４時間の加熱、次に２５℃で４８時間のローラーミキサー）。製剤の表Ｆ７に対して、製剤の表Ｆ８における溶解度データに基づくと、ＰＦ−００８３５２３１の溶解度は、加熱または超音波処理によって実質的な影響を受けなかった。
【0211】
ＰＦ−００８３５２３１についての０．３ｍｇ／ｍＬ〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲と比較すると、このデータは、１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度のＣＤを含有する製剤だけが、標的用量範囲のより低い部分をカバーできることを示している。その結果として、ＣＤと他の賦形剤の混合物が、溶解度をさらに改善すると同時に、必要とされる賦形剤レベルを低減できるかどうかを見るために研究した。
【0212】
製剤実施例Ｆ６：ポリマー賦形剤を含むＣＤ／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の溶解度飽和溶解度実験
ＰＦ−００８３５２３１の飽和溶解度を、５ｍＭクエン酸緩衝液でｐＨ５に調整した溶液中で、ＣＤ濃度を１５ｍｇ／ｍＬに固定して評価した。異なるポリマー賦形剤の効果を、一緒に研究した場合の溶解度の増強についての文献報告に基づいて研究した。
【0213】
表８に列挙した製剤ごとに、ストック溶液１０ｍＬを、５０ｍＭクエン酸緩衝液１ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤストック溶液１ｍＬ、および標的量のポリマー賦形剤を１０ｍＬメスフラスコ中で混合することによって調製した。ストック溶液を、精製水で標的体積に希釈した。以下のポリマー賦形剤を使用した。ＰＥＧ４００（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、ＮＦ）、ＰＥＧ３３５０（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、ＵＳＰ）、ＨＰＭＣ（Ｓｉｇｍａ、粘度２６００〜５６００ｃＰ）、およびＰＶＰ（Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ、分子量８０００Ｄａ）。
【0214】
次に、ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ２．５ｍｇを、製剤ごとにＨＰＬＣバイアルに添加し、ストック溶液およそ０．５ｍＬを添加して、およそ５ｍｇ／ｍのＰＦ−００８３５２３１の飽和溶液を作成した。製剤を５分間超音波処理し、次に周囲条件でおよそ２４時間、シェーカー上に置いた。次に、製剤を、０．１μｍのＰＶＤＦ遠心フィルターを有する遠心管に移し、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析して、ＰＦ−００８３５２３１についてのアッセイ値を提供した。
【0215】
【表11】
【0216】
製剤の表Ｆ９の溶解度データに基づくと、ＰＦ−００８３５２３１の溶解度は、研究した追加の賦形剤によって実質的に影響を受けなかった。その結果として、ＣＤベースの製剤の臨床適用は、研究した添加物質では改善されない。
【0217】
製剤実施例Ｆ７：異なる添加順で調製したＣＤ／共溶媒／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の溶解度溶解度実験
ＰＦ−００８３５２３１の溶解度を、エタノールおよびＨＰ−β−ＣＤを含有する水溶液中で研究した。およそ３００ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤストック溶液を、ＨＰ−β−ＣＤ（Ａｓｈｌａｎｄ、医薬グレード）粉末およそ６．００ｇを秤量して２０ｍＬメスフラスコに入れ、精製水で希釈して嵩を増すことによって調製した。フラスコにキャップし、透明になるまで反転して混合した。その後、およそ１５ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤストック溶液を、およそ３００ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤストック溶液０．５ｍＬおよびｐＨ５．０に調整したおよそ５０ｍＭクエン酸緩衝液１ｍＬを１０ｍＬメスフラスコに添加し、精製水で希釈して嵩を増すことによって調製した。
【0218】
ＰＦ−００８３５２３１製剤を、４ｍＬのバイアル中、まずＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ８ｍｇをバイアルに添加することによって調製した。一例として、エタノール（Ｐｈａｒｍｃｏ−ＡＡＰＥＲ、ＡＣＳ／ＵＳＰグレード）およそ１００μＬを、ＰＦ−００８３５２３１に添加し、溶液を溶解するまでボルテックスし、その後、およそ１５ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤストック溶液３．９ｍＬを添加した。得られた製剤は、およそ１５ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤおよび２ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１、ならびに２．５％ｖ／ｖの共溶媒の最終組成を有しており、ＰＦ−００８３５２３１に対するＣＤのモル比はおよそ２．５になる。別の例として、エタノール１００μＬをＰＦ−００８３５２３１に添加し、溶液を溶解するまでボルテックスし、ｐＨ５．０の５ｍＭクエン酸緩衝溶液３．９ｍＬを添加した。別の例では、１５ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤストック溶液３．９ｍＬをＰＦ−００８３５２３１に添加し、溶液を溶解するまでボルテックスし、エタノール１００μＬを添加した。
【0219】
製剤を、およそ３分間超音波処理し、次に周囲条件でおよそ２４時間、シェーカー上に置いた。次に、製剤を、０．１μｍのＰＶＤＦ遠心フィルターを有する遠心管に移し、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析して、ＰＦ−００８３５２３１についてのアッセイ値を提供した。
【0220】
【表12】
【0221】
製剤の表Ｆ１０の溶解度データに基づくと、ＰＦ−００８３５２３１の溶解度は、ＣＤに対するエタノールの添加順を逆にすると、０．４ｍｇ／ｍＬからおよそ５倍の１．９ｍｇ／ｍＬに改善された。具体的には、まずＰＦ−００８３５２３１をエタノールに溶解させ、その後、ＣＤ含有溶液で希釈すると、これによって溶解度が改善される。溶解度データの改善は、目視による観察によってさらに裏付けられ、その観察は、より低い溶解度を有する溶液が、２４時間後に目に見える微粒子を有しており、一方、より高い溶解度を有する溶液が、２４時間後に透明であることを示している。最初にＰＦ−００８３５２３１をエタノールに溶解し、その後、ＣＤなしで希釈する対照実験は、標的溶解度を達成し、物理的に安定な製剤を生成するのにＣＤが必要であることを示している。
【0222】
製剤の表Ｆ１０の溶解度データを、ＰＦ−００８３５２３１についての０．３ｍｇ／ｍＬ〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲と比較する場合、このデータは、およそ１５ｍｇ／ｍＬのＨＰ−β−ＣＤとおよそ２．５％ｖ／ｖのエタノールが、標的用量範囲のより下端をカバーすることができたが、全標的用量範囲をカバーするには不十分であることを示している。
【0223】
凍結解凍実験溶解度実験の後に、溶液を−２０℃の冷凍庫に約２４時間入れ、取り出し、室温に置き、解凍させた。次に、その製剤を目視検査によって解析した。いずれの試料にも微粒子は観察されず、これらの製剤が凍結に対して物理的に安定であることが実証された。
【0224】
製剤実施例Ｆ８：様々な組成物を用いて調製したＣＤ／共溶媒／水の混合物へのＰＦ−００８３５２３１の溶解度ＰＦ−００８３５２３１の代替の共溶媒の組合せが、同等の結果をもたらし得るかどうかを研究するために、追加の製剤を調製した。ＰＦ−００８３５２３１を、まず固定体積の１種または２種の共溶媒に可溶化させた。その後、共溶媒混合物を、およそ８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤ、５ｍＭクエン酸緩衝液、それぞれおよそ３．０％ｖ／ｖおよびおよそ４ｍｇ／ｍＬの濃度のＰＦ−００８３５２３１を有する水溶液と合わせて、医薬組成物を生成した。標的組成物は、およそ４．２：１のＣＤ：ＰＦ−００８３５２３１モル比を有している。これらの製剤は、２５０ｍＬ、５００ｍＬ、または１０００ｍＬの投与体積で、１ｇまで、２ｇまで、または４ｇまでの用量のＰＦ−００８３５２３１を送達可能にすると思われる。
【0225】
具体的には、製剤の表Ｆにおける各共溶媒の組合せのストック溶液１０ｍＬを、１０ｍＬメスフラスコ中、２．５ｍＬの共溶媒１を測定し、その後、共溶媒２で希釈して嵩を増して、体積でおよそ７５％の共溶媒１／２５％の共溶媒２のストック溶液を調製することによって調製した。フラスコを、数回反転して混合し、４０℃のオーブンにおよそ３０分間入れた後、実験した。およそ３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液を、ＳＢＥ−β−ＣＤ粉末およそ３．００ｇを秤量して１０ｍＬメスフラスコに入れ、精製水で希釈して嵩を増すことによって調製した。フラスコにキャップし、透明になるまで反転して混合した。
【0226】
ＰＦ−００８３５２３１ストック溶液を、２ｍＬのＨＰＬＣバイアル中、まずＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ２０ｍｇをバイアルに添加し、その後、加熱した共溶媒ストック混合物およそ１５０μＬを添加することによって調製した。次に、溶液をボルテックスして約１分間混合した。得られたＰＦ−００８３５２３１ストック溶液を、４０℃で温度制御されたインキュベーターに入れ、そこで試料を回転させて混合した。溶液を、完全に溶解した２０分後に取り出した。
【0227】
別個の２ｍＬのＨＰＬＣバイアル中、ｐＨ５．０に調整したおよそ５０ｍＭクエン酸塩溶液０．１５ｍＬおよび３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液０．４ｍＬを混合した。その後、精製水０．９０５ｍＬをバイアルに添加した。この添加の後、次にＰＦ−００８３５２３１溶液４５ｍＬを、ＣＤ含有溶液に移して、およそ４ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１溶液１．５ｍＬを作成した。次に、溶液にキャップし、ボルテックスして混合した。次に、溶液を周囲条件でシェーカー上に置いた。
【0228】
一定分量の各製剤を、ＨＰＬＣによるアッセイ決定のためにおよそ１日後および５日後に取り出した。具体的には、一定分量１５０μＬを、０．１μｍのＰＶＤＦフィルターを有する遠心フィルターに添加し、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析して、ＰＦ−００８３５２３１についてのアッセイ値を提供し、それを製剤の表Ｆ１１に記録する。
【0229】
【表13】
【0230】
製剤の表Ｆ１１は、１種または複数の共溶媒を使用して、ＰＦ−００８３５２３１を可溶化することができ、その後、共溶媒混合物をＣＤ含有水溶液と合わせて、物理的に安定な製剤を作成できることを実証している。すべての溶液が、２５℃で５日間混合した後、透明なままであった。さらに、１〜５日の間に、測定誤差内で一貫したＰＦ−００８３５２３１アッセイ値が観察された。製剤の表Ｆ１１のデータは、以下の共溶媒：ＤＭＳＯ単独、ＰＧ単独、エタノールとＤＭＳＯ、ＰＧ、ＰＥＧ３００もしくはＰＥＧ４００の組合せ、またはＤＭＳＯおよびＰＥＧ４００の組合せを用いて調製した製剤の同等の物理的安定性を示している。
【0231】
製剤実施例Ｆ９：沈殿を最小限に抑え、溶解度および安定性を最大限にするための組成物の最適化製剤実施例Ｆ８において、共溶媒へのＰＦ−００８３５２３１の溶解、その後のＣＤ含有溶液との混合により、溶解度および物理的安定性が改善されたことが見出された。この実験手法をさらに調査すると、ＰＦ−００８３５２３１は、エタノールの添加時に（ＣＤを添加する前）、一貫性なく溶液から沈殿した。この実験手法を用いてより一貫した結果を可能し、ＰＦ−００８３５２３１の沈殿の可能性を低減するために、追加の共溶媒（ＰＥＧ４００）をエタノールに添加した。およそ１０ｍｇ／ｍＬ〜２４０ｍｇ／ｍＬの範囲のＰＦ−００８３５２３１の濃度およびエタノールに対して０％〜１００％の範囲のＰＥＧ４００の体積分率について、５０種を超える異なる製剤からのデータを収集した。
【0232】
製剤の調製代表的な実験では、共溶媒混合物のストック溶液２０ｍＬを、２０ｍＬメスフラスコ中、０ｍＬ、２ｍＬ、４ｍＬ、５ｍＬ、１０ｍＬ、１５ｍＬ、または２０ｍＬのエタノール（Ｐｈａｒｍｃｏ−ＡＡＰＥＲ、ＡＣＳ／ＵＳＰグレード）を測定し、その後、ＰＥＧ４００（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｃａｒｂｏｗａｘ、ＮＦグレード）で希釈して嵩を増して、およそ１００％、９０％、８０％、７５％、５０％、２５％、または０％のＰＥＧ４００のストック溶液を調製することによって調製した。
【0233】
代表的な実験では、およそ３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤまたはＨＰ−β−ＣＤストック溶液を、２０ｍＬメスフラスコ中、ＳＢＥ−β−ＣＤまたはＨＰ−β−ＣＤ粉末およそ６．００ｇを秤量し、精製水で希釈して嵩を増すことによって調製した。フラスコにキャップし、透明になるまで反転して混合した。
【0234】
代表的な実験では、ＰＦ−００８３５２３１製剤を、２ｍＬのＨＰＬＣバイアル中、まず定義された量のＰＦ−００８３５２３１の水和物形態をバイアルに添加し、その後、少量の共溶媒ストック混合物、典型的に１００μＬ〜５００μＬを添加することによって調製した。次に溶液を、溶液が目視で透明になるまでボルテックスすることによって、および／または溶液を４０℃に加熱することによって溶解させた。沈殿が観察されたら、試料をそれ以上進展させなかった。
【0235】
別個の２ｍＬのＨＰＬＣバイアル中、ｐＨ５．０に調整した５０ｍＭクエン酸塩溶液１００μＬ、定義された量の３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤまたはＨＰ−β−ＣＤストック溶液、および定義された量の精製水を混合した。次に、共溶媒中ＰＦ−００８３５２３１溶液を、ＣＤ含有溶液と混合した。次に、合わせた溶液にキャップし、ボルテックスして混合した。次に、溶液を周囲条件でシェーカー上におよそ２４時間置いた。次に、製剤を、０．１μｍのＰＶＤＦ遠心フィルターを有する遠心管に移し、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析して、ＰＦ−００８３５２３１についてのアッセイ値を提供した。０のデータに基づくと、高体積分率のエタノール（５０％またはそれを超える）および高濃度のＰＦ−００８３５３２１（１００ｍｇ／ｍＬを上回る）を有する溶液は、沈殿しやすい傾向があると結論付けることができる。その結果として、沈殿の可能性を制限し、共溶媒混合物へのＰＦ−００８３５２３１の完全な可溶化を可能にするためには、少なくとも５０％の体積分率のＰＥＧ４００、好ましくは少なくとも７５％のＰＥＧ４００が利用されるべきである。これらの条件下では、少なくとも２００ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１の溶解度を達成することができる。さらに、１００％体積分率のＰＥＧ４００では、溶液は粘性が非常に高くなり、溶解はゆっくり進行し、潜在的な処理上の困難が生じることを示している。
【0236】
様々な共溶媒およびＣＤ含量を有する製剤の溶解度および安定性ＰＦ−００８３５２３１の溶解度および物理的安定性に対する共溶媒およびＣＤ含量の影響をさらに理解するために、様々な濃度の溶液を、前述の通り調製した。ＰＦ−００８３５２３１は、２５％のエタノールに対して７５％のＰＥＧ４００の固定体積分率で、固定体積の共溶媒に可溶化した。その後、溶液を、およそ５ｍＭクエン酸緩衝液および様々な濃度のＳＢＥ−β−ＣＤまたはＨＰ−β−ＣＤを有する水溶液と混合して、医薬組成物を生成した。次に、すべての溶液をおよそ４８時間混合して、室温ですべての平衡化を可能にし、その後、溶液を前述の通り濾過し、ＰＦ−００８３５２３１アッセイのためにＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析した。このデータは、製剤がアッセイ標的の９０％以内であったかどうかに基づいて、図１１に記録される。
【0237】
図１１に図示されるデータに基づくと、ＰＦ−００８３５３２１に対してより高いＣＤのモル比およびより低い全共溶媒含量を有する製剤について、より大きい物理的安定性が観察される。ＰＦ−００８３５２３１に対してＣＤをより多くすると、複合体化しやすくし、したがって可溶化しやすくする助けになる可能性が高いが、一方、共溶媒をより多くすると、複合体化が妨害され、可溶化が阻害される。
【0238】
製剤実施例Ｆ１０：８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤ、様々な共溶媒レベルのＰＥＧ４００およびエタノール、ならびに様々なＰＦ−００８３５２３１の濃度を有する製剤の溶解度および安定性より高濃度のＰＦ−００８３５２３１で安定な溶液を調製できるかどうかを研究するために、溶液を、製剤実施例Ｆ７よりも高いＣＤ濃度で調製した。ＰＦ−００８３５２３１を、およそ３：１のＰＥＧ４００：エタノールの固定体積分率で、固定体積の共溶媒に可溶化させた。その後、溶液を、およそ８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤおよび５ｍＭクエン酸緩衝液の最終濃度まで、水溶液と混合した。これらの希釈により、およそ１．５％、３．０％、４．５％、および６．０％ｖ／ｖの全共溶媒の濃度をもたらした。標的組成物は、２ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、および８ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１の濃度について、それぞれ、およそ８．４：１、４．２：１、２．８：１、および２．１：１のＣＤ：ＰＦ−００８３２３１モル比を有している。最高濃度の製剤は、２５０ｍＬ、５００ｍＬ、または１０００ｍＬの投与体積で、２ｇ、４ｇ、または８ｇまでの用量のＰＦ−００８３５２３１を送達可能にすると思われるが、より高い投与体積は、先例のある賦形剤レベルによって制限され得る。
【0239】
具体的には、共溶媒のストック溶液１０ｍＬを、１０ｍＬメスフラスコ中、エタノール（Ｐｈａｒｍｃｏ−ＡＡＰＥＲ、ＡＣＳ／ＵＳＰグレード）２．５ｍＬを測定し、その後、ＰＥＧ４００（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｃａｒｂｏｗａｘ、ＮＦグレード）で希釈して嵩を増して、体積でおよそ７５％のＰＥＧ４００／２５％のエタノールのストック溶液を調製することによって調製した。フラスコを数回反転して混合し、５０℃のオーブンにおよそ３０分間入れた後、実験した。およそ３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液を、ＳＢＥ−β−ＣＤ（Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ、医薬グレード）粉末およそ３．００ｇを秤量して１０ｍＬメスフラスコに入れ、精製水で希釈して嵩を増すことによって調製した。フラスコにキャップし、透明になるまで反転して混合した。
【0240】
ＰＦ−００８３５２３１ストック溶液を、２ｍＬのＨＰＬＣバイアル中、まずＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ４０ｍｇをバイアルに添加し、その後、加熱した共溶媒ストック混合物およそ３００μＬを添加することによって調製した。次に溶液を、ボルテックスして約１分間混合した。得られたＰＦ−００８３５２３１ストック溶液を、５０℃のオーブンに入れ、５分ごとに取り出して完全に溶解するまでボルテックスした。
【0241】
別個の２ｍＬのＨＰＬＣバイアル中、ｐＨ５．０に調整したおよそ５０ｍＭクエン酸塩溶液１００μＬおよび３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液２６７μＬを混合した。その後、精製水６１８μＬ、６０３μＬ、５８８μＬ、または５７３μＬを、２ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、または８ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１に対応するバイアルに添加した。この添加の後、次にＰＦ−００８３５２３１溶液１５ｍＬ、３０ｍＬ、４５ｍＬ、または６０ｍＬを、ＣＤ含有溶液に移して、それぞれおよそ２ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、または８ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１溶液１ｍＬを作成した。次に、溶液にキャップし、ボルテックスして混合した。次に、溶液を周囲条件でシェーカー上に置いた。
【0242】
一定分量の各製剤を、ＨＰＬＣによるアッセイ決定のためにおよそ１日後、３日後、および７日後に取り出した。具体的には、一定分量１５０μＬを、０．１μｍのＰＶＤＦフィルターを有する遠心フィルターに添加し、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析して、ＰＦ−００８３５２３１についてのアッセイ値を提供し、それを図１２に記録する。図１２は、２ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬおよび８ｍｇ／ｍＬの４つの異なるＰＦ−００８３５２３１濃度における、エタノール、ＰＥＧ４００、およびＳＢＥ−β−ＣＤを含有する濾過したＰＦ−００８３５２３１製剤の７日間にわたるアッセイ値を図示している。アッセイ値は、７日間にわたって変化せず、これは製剤の物理的安定性を反映している。効力は、不純物および含水量については補正されず、それによって標的未満のアッセイ値につながった。
【0243】
図１２の溶解度データ（８ｍｇ／ｍＬまでのＰＦ−００８３５２３１）を、ＰＦ−００８３５２３１についての０．２〜１３．２ｍｇ／ｍＬの標的注入濃度範囲と比較すると、このデータは、およそ８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤとエタノールおよびＰＥＧ４００により、ほぼ全標的濃度範囲をカバーできたことを示している。賦形剤を含有すると思われるこれらの医薬組成物は、標的注入体積で調製される場合、ＩＶ投与された薬物生成物について先例のある１日用量レベル以内である。
【0244】
製剤実施例Ｆ１１：８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤ、１．１％ｖ／ｖのエタノール、３．４％ｖ／ｖのＰＥＧ４００、および６ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１を有する製剤のスケールアップ、化学的安定性、および物理的安定性製剤の調製
製剤実施例Ｆ１０において調製した製剤のロバスト性をさらに評価するために、単一製剤を、安定性研究において使用するのにスケールアップするために選択した。具体的には、８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤ、４．５％ｖ／ｖの全共溶媒（１．１％ｖ／ｖのエタノール、３．４％ｖ／ｖのＰＥＧ４００）、および６ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１を有する製剤を調製した。標的組成物は、ＰＦ−００８３５２３１に対するＣＤのモル比がおよそ２．８である。この製剤は、２５０ｍＬ、５００ｍＬ、または１０００ｍＬの投与体積で、１．５ｇ、３ｇ、または６ｇの用量のＰＦ−００８３５２３１を送達可能にすると思われるが、より高い投与体積は、先例のある賦形剤レベルによって制限され得る。
【0245】
この製剤を調製するために、共溶媒のストック溶液１０ｍＬを、１０ｍＬメスフラスコ中、エタノール（Ｐｈａｒｍｃｏ−ＡＡＰＥＲ、ＡＣＳ／ＵＳＰグレード）２．５ｍＬを測定し、その後、ＰＥＧ４００（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｃａｒｂｏｗａｘ、ＮＦグレード）で希釈して嵩を増して、体積でおよそ７５％のＰＥＧ４００／２５％のエタノールのストック溶液を調製することによって調製した。フラスコを数回反転して混合し、５０℃のオーブンにおよそ３０分間入れた後、実験した。およそ３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液を、ＳＢＥ−β−ＣＤ粉末およそ３．００ｇを秤量して１０ｍＬメスフラスコに入れ、精製水で希釈して嵩を増すことによって調製した。フラスコにキャップし、透明になるまで反転して混合した。３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤの追加の溶液２０ｍＬも同様に調製した。
【0246】
１００ｍＬメスフラスコ中、ｐＨ５に調整したおよそ５０ｍＭのクエン酸塩溶液１０．５ｍＬおよび３００ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液２８ｍＬを混合し、その後、精製水で標的体積に希釈した。フラスコにキャップし、反転して混合した。これにより、最終濃度５ｍＭのクエン酸緩衝液および８０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤを有する製剤を調製する水溶液が得られる。
【0247】
ＰＦ−００８３５２３１ストック溶液を、２ｍＬのＨＰＬＣバイアル中、まずＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ２００ｍｇをバイアルに添加し、その後、加熱した共溶媒ストック混合物およそ１．５ｍＬを添加することによって調製した。次に、溶液をボルテックスして約１分間混合した。得られたＰＦ−００８３５２３１ストック溶液を、５０℃のオーブンに入れ、５分ごとに取り出して完全に溶解するまでボルテックスした。
【0248】
次に、クエン酸緩衝液およびＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液１４．２９ｍＬを、２つの別個の２０ｍＬシンチレーションバイアルに添加した。この添加の後、次にＰＦ−００８３５２３１ストック溶液０．７１ｍＬをバイアルに移して、１５ｍＬのおよそ６ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１を作成した。次に、溶液にキャップし、ボルテックスして混合した。薬物生成物溶液を一晩混合し、０．２μｍのＰＶＤＦフィルターを介して濾過した。次に、一定分量０．５ｍＬの薬物生成物溶液を、４ｍＬのバイアルに充填し、ストッパー、クリンプを嵌め、−２０℃、４℃、および２５℃の温度制御チャンバに入れた。
【0249】
物理的安定性一定分量の各製剤を、ＨＰＬＣによるアッセイおよび純度決定のために１日後、３日後、７日後、１６日後、または３０日後のいずれかに取り出した。具体的には、一定分量０．２ｍＬを、０．１μｍのＰＶＤＦフィルターを有する遠心フィルターに添加し、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析して、ＰＦ−００８３５２３１についてのアッセイ値を提供した。
【0250】
調製した薬物生成物溶液が過飽和になるか、またはそうでなければ物理的に不安定になった場合には、ＨＰＬＣ試料調製中の濾過ステップにより、任意の沈殿したＰＦ−００８３５２３１が除去されるはずなので、アッセイ値の経時的な低下が予測されると思われる。さらに、溶液が室温で過飽和になった場合には、冷蔵または冷凍貯蔵温度への曝露により、沈殿が誘導され、アッセイの低下が引き起こされるはずである。図に示される通り、−２０℃におけるアッセイ値は、７日間にわたって一貫しているように見え、４℃および２５℃におけるアッセイ値は、試験した３０日間にわたって一貫しているように見える。その結果として、このデータは、研究した期間にわたって溶液が物理的に安定であることを示唆している。図１３は、−２０℃（上）、４℃（中央）、および２５℃（下）の３種の温度について、日数の時間関数としてプロットされた、ｍｇ／ｍＬによるＰＦ−００８３５２３１アッセイ値を図示している。条件ごとに、２つの別個の試料からのデータをプロットし、データへの線形フィットを用いて示す。データは、すべての試料について、研究した期間にわたって一貫したアッセイ値を示している。
【0251】
混合物の物理的安定性物理的安定性をさらに評価するために、薬物生成物溶液を、０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウムで、それぞれ２．４ｍｇ／ｍＬおよび０．６ｍｇ／ｍＬの濃度に２．５倍および１０倍希釈した。これらの希釈は、薬物生成物が、投与前に希釈されるすぐに希釈できる濃縮物として調製され得る、可能なＩＶ投与条件を模倣している。希釈実験によっても、製剤の物理的および化学的安定性をさらに評価する。
【0252】
２．５倍希釈物を調製するために、濾過した製剤１．６ｍＬを、４ｍＬのバイアル中、０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウム２．４ｍＬに添加した。１０倍希釈物を調製するために、濾過した製剤０．４ｍＬを、４ｍＬのバイアル中、０．９％ｗ／ｖ塩化ナトリウム３．６ｍＬに添加した。一定分量の各製剤を、ＨＰＬＣによるアッセイおよび純度決定のために２５℃で０日後および３日後に取り出した。具体的には、一定分量０．２ｍＬを、０．１μｍのＰＶＤＦフィルターを有する遠心フィルターに添加し、１３，０００ｒｃｆで３分間遠心分離した。濾液を収集し、ＰＦ−００８３５２３１標準に対してＨＰＬＣによって解析して、ＰＦ−００８３５２３１についてのアッセイ値を提供した。
【0253】
希釈なし、２．５倍希釈、および１０倍希釈の試料を比較すると、アッセイ値は、製剤の表Ｆ１２に示される通り、３日間にわたって一貫しており、これは物理的安定性を示している。さらに、ＰＦ−００８３５２３１の化学的安定性は、各希釈にわたって同等である。
【0254】
【表14】
【0255】
製剤実施例Ｆ１２：ＣＤを含むおよび含まないＰＦ−００８３５２３１製剤の化学的安定性ＰＦ−００８３５２３１の化学的安定性に対するＣＤの影響を研究するために、ＣＤを含むおよび含まない溶液を調製した。具体的には、溶液１０ｍＬを、およそ１ｍｇ／ｍＬのＰＦ−００８３５２３１、５％ｖ／ｖの全共溶媒（２．５％ｖ／ｖのＰＥＧ４００、２．５％ｖ／ｖのエタノール）、５ｍＭクエン酸緩衝液、および場合により１５ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤの最終組成を用いて調製した。ＣＤを含むおよび含まない溶液についてｐＨの影響を理解するために、２種の製剤をｐＨ４で調製し、２種の製剤をｐＨ５で調製した。ＣＤを含む製剤では、標的組成物は、ＰＦ−００８３５２３１に対するＣＤのモル比がおよそ３．２である。この製剤は、２５０ｍＬ、５００ｍＬ、または１０００ｍＬの投与体積で、０．２５ｇ、０．５ｇ、または１ｇの用量のＰＦ−００８３５２３１を送達可能にすると思われる。
【0256】
具体的には、およそ７５ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液を、ＳＢＥ−β−ＣＤ粉末およそ３．７５ｇを秤量して５０ｍＬメスフラスコに入れ、精製水で希釈して嵩を増すことによって調製した。フラスコにキャップし、溶液が透明になるまで数回反転して混合した。その後、およそ７５ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液２０ｍＬを、１００ｍＬメスフラスコ中、ｐＨ４または５のいずれかのおよそ５０ｍＭ緩衝液１０ｍＬと混合した。次に、得られた溶液を、精製水で標的体積に希釈し、透明になるまで反転して混合した。得られた溶液は、およそ１５ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤおよびｐＨ４または５のいずれかの５ｍＭクエン酸緩衝液の最終組成を有していた。ｐＨ４および５の５ｍＭクエン酸緩衝液も同様に、ＳＢＥ−β−ＣＤなしに調製した。
【0257】
２ｍＬのＨＰＬＣバイアルに、ＰＦ−００８３５２３１の水和物形態およそ１０ｍｇを添加し、その後、ＰＥＧ４００（Ｆｉｓｈｅｒ Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｃａｒｂｏｗａｘ、ＮＦグレード）２５０ｍＬおよびエタノール（Ｐｈａｒｍｃｏ−ＡＡＰＥＲ、ＡＣＳ／ＵＳＰグレード）２５０ｍＬを添加した。ＰＦ−００８３５２３１製剤を、溶解するまで超音波処理した。
【0258】
１０ｍＬのシンチレーションバイアルに、およそ１５ｍｇ／ｍＬのＳＢＥ−β−ＣＤストック溶液９．５ｍＬまたはクエン酸緩衝液９．５ｍＬを添加し、その後、共溶媒に溶解したＰＦ−００８３５２３１を添加した。次に、製剤を分割し、４℃、２２℃、または４０℃で安定状態にした。一定分量を、およそ０日後、１日後、３日後、および７日後に取り出し、純度プロファイルをＨＰＬＣによって調べた。
【0259】
この実験から、４℃では、すべての試料について分解は観察されなかった。ＣＤを含む試料は、複数回の凍結および解凍に対して物理的に安定であった（すなわち、微粒子は形成されなかった）が、一方、ＣＤを含まない試料は、解凍後に沈殿を示した。２２℃では、すべての試料についてクロマトグラフィー純度の０．５％未満の低下が観察され、ｐＨ４においてＳＢＥ−β−ＣＤの存在下で分解が最も少なかった。４０℃でも同じ傾向が観察される。その結果として、この実験は、驚くべきことに、ＣＤがＰＦ−００８３５２３１の化学的および物理的安定性の両方について保護効果を提供することを実証している。図１４は、４０℃（上）および２２℃（下）におけるｐＨ４（黒色、白丸）およびｐＨ５（灰色、黒丸）のＣＤを含む（破線）およびＣＤを含まない（実線）溶液中の、ＰＦ−００８３５２３１の化学的安定性を図示する。
【0260】
参照実施例８：Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの調製について記載される手順に従って、ただしＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝ペンチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを代用し、重要でない変更を加えることにより、黄色の粗製泡状物を提供した。この材料を、Ｂｉｏｔａｇｅ ＭＰＬＣ（２５Ｍカラム、５〜６％メタノール／クロロホルム）によって精製して、標題化合物８２ｍｇ（３５％）を濁った白色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 11.57 (s, 1 H), 8.42 (d, J = 8 Hz, 1 H),
8.38 (d, J = 4 Hz, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 7.35 (s, 1 H), 7.09 (t, J = 8 Hz, 1 H),
6.99 (d, J = 8 Hz, 1 H), 6.49 (d, J = 8 Hz, 1 H), 5.06 (t, J = 8
Hz, 1 H), 4.44 (m, 2 H), 4.25 (dd, J = 8, 20 Hz, 1 H), 4.14 (dd, J = 8, 20 Hz,
1 H), 3.87 (s, 3 H), 3.08 (m, 2 H), 2.28 (m, 1 H), 2.10 (m, 1 H), 1.91 (m, 1
H), 1.74 - 1.54 (m, 4 H), 1.32 (m, 4 H), 0.87 (t, J = 8 Hz, 3 H); C24H32N4O8のMS (ESI+) m/z 473.2 (M+H)+; 元素分析 C24H32N4O6・0.6 H2Oおよび・0.2酢酸エチルの計算値: C,
59.46; H, 7.01; N, 11.18. 実測値:
C, 53.37; H, 6.94; N, 11.23: HRMS (ESI+) C24H32N4O6+H1の計算値473.2395, 実測値473.2382.
【0261】
中間体の調製：メチルＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−５−メチル−Ｌ−ノルロイシネートＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−５−メチル−Ｌ−ノルロイシン（２．１４ｇ、５．８ｍｍｏｌ）のメタノール（１５ｍＬ）溶液に、トルエン（３０ｍＬ）を添加し、その後、ＴＭＳ−ジアゾメタン（２．９ｍＬ、ヘキサン中２Ｍ、５．８ｍｍｏｌ）を滴下添加した。ＴＬＣ解析により、不完全反応が示され、黄色が持続されるまで、ＴＭＳ−ジアゾメタンを滴下添加した。この時、ＡｃＯＨ（１ｍＬ）を添加することによって反応をクエンチし、その後、真空中で濃縮した。残留物を、Ｂｉｏｔａｇｅフラッシュクロマトグラフィーによって酢酸エチル／ヘキサンで溶離して精製して、標題化合物を白色の固体２．１８ｇ、９８％として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.76 (2 H, d, J = 7.6 Hz), 7.60 (2 H, dd,
J = 7.2, 3.9 Hz), 7.40 (2 H, t, J = 7.2 Hz), 7.31 (2 H, t, J = 7.5 Hz), 5.26 (1
H, d J = 8.6 Hz), 4.31 - 4.51 (3 H, m), 4.23 (1H, t, J = 7.1. Hz), 3.75 (3 H,
s), 1.78 - 1.93 (1 H, m), 1.6- - 1.76 (1 H, m), 1.45 - 1.60 (1 H, m), 1.05 -
1.34 (2 H, m), 0.88 (d, J = 4 Hz, 3 H), 0.86 (d, J = 4 Hz, 3 H), C23H27NO4のMS (APCI+) m/z 160.1 (M-Fmoc+H)+.
【0262】
中間体の調製：メチルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−メチル−Ｌ−ノルロイシネートＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−５−メチル−Ｌ−ノルロイシン（２．１８ｇ、５．７２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液に、ＫＦ（２．３３ｇ、４０．０４ｍｍｏｌ）を添加し、その後、トリエチルアミン（１．７０ｍＬ、１２．２４ｍｍｏｌ）および二炭酸（decarbonate）ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（７．３９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で撹拌した。４時間後に、ＴＬＣ解析により不完全反応が示され、反応混合物を、一部のＫＦ（２．７ｇ、４６．５５ｍｍｏｌ）およびＢＯＣ２Ｏ（８００ｍｇ、３．６７ｍｍｏｌ）で処理した。１６時間後に、混合物をジエチルエーテル（３００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×５０ｍＬ）、１Ｍ塩酸（２×５０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、粗製生成物を得、それをＢｉｏｔａｇｅフラッシュクロマトグラフィーによってジクロロメタン／ヘキサンで溶離して精製して、標題化合物を透明な油状物９８０ｍｇ、６６％として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.96 (1 H, d, J = 6.8 Hz), 4.21 - 4.32
(1H, m), 3.72 (3 H, s) 1.72 - 1.85 (1 H, m), 1.46 - 166 (2 H, m) 1.43 (9 H, s),
1.11 - 1.29 (2 H, m) 0.99 (d, J = 4 Hz, 3 H), 0.86, (d, J = 4 Hz, 3 H); C13H25NO4のMS (API-ES+) m/z 282.2 (M+Na)+.
【0263】
中間体の調製：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−メチル−Ｌ−ノルロイシネートＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−メチル−Ｌ−ノルロイシネート（９８０ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液に、０℃でＬｉＯＨ溶液（１Ｍ、１１．３ｍＬ、１１．３３ｍｍｏｌ）（５℃に予冷した）を添加し、生じた混合物を０℃で１時間撹拌し、次に周囲温度に加温した。反応物を、１Ｍ塩酸でｐＨ２の酸性にし、酢酸エチル（３×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物を、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を真空中で除去して、標題化合物を透明な油状物９９０ｍｇ、９９％として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.96 (1 H, d, J = 7.8 Hz), 4.23 - 4.34 (1
H, m), 1.75 - 1.93 (2 H, m), 1.60 - 1.72 (1 H, m), 1.50 - 1.59 (1 H, m), 1.44
(9 H, s), 1.19 - 1.30 (1 H, m), 0.88 (d, J = 4 Hz, 3 H), 0.86 (d, J = 4 Hz, 3
H); C12H23NO4のMS (API-ES+) m/z 268.1 (M+Na)+.
【0264】
中間体の調製：Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−５−メチル−Ｌ−ノルロイシンアミドＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−Ｌ−ロイシンアミドの調製について記載される手順に従って、ただしＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−メチル−Ｌ−ノルロイシンを代用し、重要でない変更を加えることにより、黄金色の粗製油状物を提供した。この材料を、Ｂｉｏｔａｇｅフラッシュクロマトグラフィーによってメタノール／ジクロロメタンで溶離して精製して、標題化合物を濁った白色の固体３６０ｍｇ、４１％として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.45 (1 H, d, J = 8.1 Hz), 7.62 (1 H, s),
7.02 (1 H, d, J = 7.1 Hz), 4.49 - 4.62 (2 H, m), 4.33 - 4.44 (1 H, m), 3.78 (1
H, m), 3.15 (1 H, t, J = 8.7 Hz), 3.00 - 3.10 (1 H, M), 2.18 - 2.30 (1 H, m),
2.04 - 2.14 (1 H, m), 1.92 - 2.02 (1 H, M), 1.40 - 1.68 (5 H, m), 1.36 (9 H,
s), 1.05 - 1.25 (2 H, m, J = 7.3 Hz), 0.83 (3 H, d, J = 1.52 Hz), 0.82 (3 H, d,
J = 1.52 Hz); C20H34N3O5ClのMS (API-ES+) m/z 454.2 (M+Na)+.
【0265】
参照実施例１６：Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの調製について記載される手順に従って、ただしＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを代用し、重要でない変更を加えることにより、黄色の粗製泡状物を提供した。この材料を、Ｂｉｏｔａｇｅ ＭＰＬＣ（４０Ｍカラム、４．５〜５．５％メタノール／クロロホルム）によって精製して、標題化合物７３０ｍｇ（７２％）を白色の固体として得た。1H NMR (DMSO-d6) δ 11.59 (s, 1 H), 8.49 (d, J = 8 Hz, 1 H),
8.43 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.41 (d, J = 8 Hz, 1 H),
7.23 (s, 1 H), 7.17 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7.02 (t, J = 8 Hz, 1 H), 5.05 (t, J = 8
Hz,, 1 H), 4.56 (m, 1 H), 4.43 (m, 1 H), 4.25 (dd, J = 8, 20 Hz, 1 H), 4.13
(dd, J = 8, 20 Hz, 1 H), 3.10 (m, 2 H), 2.25 (m, 1 H), 2.07 (m, 1 H), 1.93 (m,
1 H), 1.80 (m, 1 H), 1.64 (m, 3 H), 0.94 (s, 9 H); C24H32N4O5のMS (ESI+) m/z 457.1 (M+H)+; 元素分析 C24H32N4O5・0.2 CHCl3・0.2酢酸エチル・0.25 H2Oの計算値: C, 59.75; H,6.88; N, 11.15. 実測値C, 59.67; H, 6.72; N, 11.03; HRMS (ESI+) C24H32N4O5の計算値457.2446, 実測値457.2439.
【0266】
参照実施例２３：Ｎ−（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニンアミドＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの調製について記載される手順に従って、ただしＮ−（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニンアミドを代用し、重要でない変更を加えることにより、緑色がかった粗製ガム状物を提供した。その材料を、Ｂｉｏｔａｇｅフラッシュクロマトグラフィーによってメタノール／ジクロロメタンで溶離して精製して、標題化合物を濁った白色の固体１２３ｍｇ、４４％として得た。1H NMR (400 MHz DMSO-d6) δ 11.50 (1 H, d, J = 2.0 Hz), 8.58 (2 H, dd,
J = 8.2, 3.9 Hz), 7.63 (1 H, s), 7.35 - 7.43 (2 H, m), 7.31 (1 H, d, J = 1.8
Hz), 7.27 (2 H, t, J = 7.6 Hz), 7.17 (1 H, t, J = 7.3 Hz), 7.08 (1 H, t, J =
8.0 Hz), 6.98 (1 H, d, J = 8.1 Hz), 6.48 (1 H, d, J = 7.8 Hz), 5.06 (1 H, d, J
= 6.1 Hz), 4.72 (1 H, m), 4.48 (1 H, m), 4.16 (2 H, m), 3.89 (3 H, s), 2.97 -
3.18 (4 H, m), 2.24 - 2.36 (1 H, m), 2.04 - 2.18 (1 H, m), 1.88 - 2.01 (1 H,
m), 1.55 - 1.76 (2 H, m); C27H30N4O6のMS (APCI+) m/z 507.1 (M+H)+.
【0267】
中間体の調製：Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−Ｎ２−メチル−Ｌ−ロイシンアミドＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−Ｌ−ロイシンアミドの調製について記載される手順に従って、ただしＢｏｃ−Ｎ−メチル−Ｌｅｕ−ＯＨを代用し、重要でない変更を加えることにより、緑色の粗製ガム状物を提供した。この材料を、Ｂｉｏｔａｇｅフラッシュクロマトグラフィーによってメタノール／ジクロロメタンで溶離して精製して、標題化合物をオレンジ色の泡状物２．０８ｇ、４６％として得た。1H NMR (400 MHz DMSO-d6) δ 8.54 (1 H, d, J = 7.1 Hz), 7.69 (1 H, d, J
= 11.1 Hz), 4.58 (2 H, s), 4.48 (1 H, d, J = 11.9 Hz), 4.40 (1 H, s), 3.02 -
3.22 (2 H, m), 2.69 - 2.79 (3 H, m), 2.14 - 2.27 (1 H, m), 2.03 - 2.14 (1 H,
m), 1.87 - 2.00 (1 H, m), 1.48 - 1.76 (4 H, m), 1.38 (9 H, brd, J = 5.8 Hz),
0.79 - 0.97 (6 H, m).
【0268】
参照実施例３６：（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルアセテートオーブンで乾燥させたｓｐｉｎｂａｒを備えた４０ｍＬのシンチレーションバイアルに、酢酸（２７ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を充填し、その後、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド（１７２ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３．５ｍＬ）溶液を充填し、Ｎ２でパージした。次に、この薄黄色の溶液を、ＣｓＦ（１２２ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）で処理し、Ｔｅｆｌｏｎ加工のスクリューキャップで封止し、激しく撹拌しながら反応ブロック上で６５℃において加熱した。３時間後に、反応物をＲＴに冷却し、水（３０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（４×７ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を、水（２×２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、真空中で濃縮した。この材料を、Ｂｉｏｔａｇｅ ＭＰＬＣ（２５Ｍ、２．５〜４．５％メタノール／ジクロロメタン）によって精製して、標題化合物７８ｍｇ（４５％）を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s, 1 H), 8.57 (d, J = 7.8 Hz, 1 H),
8.43 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.36 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 7.08 (t, J
= 8.0 Hz, 1 H), 6.99 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 6.49 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 4.83 (d,
J = 3.0 Hz, 1 H), 4.76 - 4.95 (m, 1 H), 4.35 - 4.50 (m, 2 H), 3.87 (s, 3 H),
3.03 - 3.17 (m, 2 H), 2.22 - 2.35 (m, 1 H), 2.09 - 2.22 (m, 1 H), 2.07 (s, 3
H), 1.90 - 2.04 (m, 1 H), 1.65 - 1.77 (m, 2 H), 1.48 - 1.65 (m, 3 H), 0.94 (d,
J = 6.3 Hz, 3 H), 0.89 (d, J = 6.3 Hz, 3 H); C26H34N4O7のMS (ESI+) m/z 515.2 (M+H)+.
【0269】
参照実施例３７：（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレート（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルアセテートの調製について記載される手順に従って、ただしシクロプロパンカルボン酸を代用し、重要でない変更を加えることにより、粗製生成物を提供した。この材料を、Ｂｉｏｔａｇｅ ＭＰＬＣ（２５Ｍ、２．５〜４．５％メタノール／ジクロロメタン）によって精製して、標題化合物８２ｍｇ（４３％）を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.56 (d, J =
7.8 Hz, 1 H), 8.43 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.36 (d, J = 1.5 Hz, 1
H), 7.08 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.97 - 7.02 (m, 1 H), 6.49 (d, J = 7.6 Hz, 1 H),
4.85 (d, 1 H), 4.78 - 4.96 (m, 1 H), 4.33 - 4.51 (m, 2 H), 3.87 (s, 3 H), 3.02
- 3.16 (m, 2 H), 2.22 - 2.35 (m, 1 H), 2.01 - 2.11 (m, 1 H), 1.89 - 2.00 (m, 1
H), 1.65 - 1.77 (m, 3 H), 1.46 - 1.65 (m, 3 H), 0.81 - 0.98 (m, 10 H); C28H36N4O7のMS (ESI+) m/z 541.2 (M+H)+.
【0270】
参照実施例３９：（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエート（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルアセテートの調製について記載される手順に従って、ただしＮ１−（（１Ｓ）−３−クロロ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−４−メチル（methyt）−Ｎ２−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシンアミドおよび２，６−ジクロロ安息香酸を代用し、重要でない変更を加えることにより、薄琥珀色の残留物を提供した。その残留物を、分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｎａ １０μ Ｃ１８）によって０．１％ＡｃＯＨを含有する水中０．１％ＡｃＯＨを含有するＭｅＣＮのグラジエントで溶離して精製して、標題化合物０．１５５ｇ（５４％）をクリーム色の固体として得た。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7.79 (d, J = 8
Hz, 1 H), 7.71 (s, 1 H), 7.66 - 7.55 (m, 3H), 5.18 (s, 2H), 4.54 - 4.40 (m, 1
H), 4.37 - 4.35 (m, 1 H), 4.25 (m, 1 H), 3.98 - 3.91 (m, 1 H), 3.84 - 3.72 (m,
1 H), 3.23 - 3.07 (m, 2H), 2.33 - 2.23 (m, 1 H), 2.16 - 2.05 (m, 2 H), 1.86 -
1.74 (m, 3H),1.72 - 1.62 (m, 5 H), 0.89 (s, 9 H); C27H35Cl2N3O7のMS (ESI+) m/z 584 (M+H). 元素分析 C27H35Cl2N3O7・0.5 H2Oの計算値: C, 54.64; H, 6.11; N, 7.08. 実測値: C, 54.26; H, 6.00; N, 6.87. HRMS (ESI+) C27H35Cl2N3O7+H1の計算値584.1925, 実測値584.1921.
【0271】
化合物Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミド、Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロペンチル−１−オキソプロパン−２−イル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド、およびＮ−（（Ｓ）−２−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−１−シクロペンチル−２−オキソエチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを、前述のものおよび国際公開第２００５／１１３５８０号に記載される下記の通りの他の化合物に類似の方式で調製した。
【0272】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニンの調製０℃に冷却したメチルＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン（oxopyrrolisin）−３−イル］−Ｌ−アラニネート（国際公開０１／１４３２９Ａ１、化合物３、そのスキーム９に従って調製した）（２０ｇ、７０ｍｍｏｌ）のメタノール（１００ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（１４ｇ、３５０ｍｍｏｌ）の水（１２０ｍＬ）溶液をゆっくり添加した。混合物を、０℃で１時間撹拌し、生成物のナトリウム塩が沈殿するまで、温度を２５℃未満に維持して真空中で濃縮した。混合物を、氷浴冷却を用いて濃ＨＣｌ水溶液でｐＨ５に中和し、さらに１ＮのＨＣｌ水溶液でｐＨ１の酸性にした。混合物を、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、高真空下でさらに一晩乾燥させて、所望の酸（１９ｇ、収率１００％）を得た。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 4.12 (m, 1H), 3.33 (m, 2H), 2.48 (m, 1H),
2.35 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.81 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).
【0273】
ｔｅｒｔ−ブチル（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）カルバメートの調製Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニン（１９ｇ、７０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５０ｍＬ）溶液に、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（６．９７ｇ、７０ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（２６．９ｍＬ、２４．７８ｇ、２４５ｍｍｏｌ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（９．４６ｇ、７０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１６．１ｇ、８４ｍｍｏｌ）を固体として添加した。混合物を０℃で４時間撹拌し、これに１ＮのＨＣｌ水溶液１５０ｍＬを添加した。有機相を、水相から分離した。水層を、ジクロロメタン（１×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮した。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して（ジクロロメタン中６〜１０％メタノールで溶離する）、所望の生成物を白色の固体として得た（１７ｇ、収率７７％）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.00 (bs, 1H), 5.41 (d, J=8.6 Hz, 1H),
4.68 (d, J=8.9 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.35 (m, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.50 (m, 2H),
2.11 (t, J=10.8 Hz), 1.84 (m, 1H), 1.68 (m, 1H), 1.43 (s, 9H). LCMS ESI
(M+Na+): 338.1.
【0274】
Ｎ−｛（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−［（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドールカルボキサミドの調製ｔｅｒｔ−ブチル（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）カルバメート（４７３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の無水１，４−ジオキサン溶液に、１，４−ジオキサン（約１０当量）中４．０ＭのＨＣｌを添加する。混合物を室温で一晩撹拌し、真空中で濃縮して、脱保護されたアミンのＨＣｌ塩を白色の泡状物として得る。アミンを、ジクロロメタンおよびＮ−メチルモルホリン（約４当量）に溶解させ、この溶液に、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−シクロペンチルグリシン（約１当量）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（約１当量）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（約１．２当量）を添加する。混合物を周囲温度で１時間撹拌し、１ＮのＨＣｌ水溶液に注ぐ。有機相を１ＮのＨＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を、フラッシュクロマトグラフィーによって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−（（（２Ｓ）−１−（メトキシ（メチル）アミノ）−１−オキソ−３−（２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバメートを提供する。次に、ｔｅｒｔ−ブチル（（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−（（（２Ｓ）−１−（メトキシ（メチル）アミノ）−１−オキソ−３−（２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバメートのＢｏｃ保護基を、酸触媒脱保護（ジオキサン中ＨＣｌなどを用いる）によって除去し、それを後処理した後に、アミンである（２Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチルアセトアミド）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（２−オキソピロリジン−３−イル）プロパンアミドを提供する。次に、（２Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチルアセトアミド）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（２−オキソピロリジン−３−イル）プロパンアミドを、Ｎ−メチルモルホリンおよびジクロロメタン中１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（約１．２当量）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で、４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸と結合させる。所望の化合物であるＮ−｛（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−［（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドールカルボキサミドを、白色の固体として得た（６９９ｍｇ、収率９０％）。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.79 (s, 1H), 8.53 (bs, 1H), 7.15 (t,
J=7.9 Hz, 1H), 7.09 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.04 (d, J=8.3 Hz, 1H), 6.94 (d, J=9 Hz,
1H), 6.48 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.39 (bs, 1H), 5.18-5.05 (m, 2H), 3.95 (s, 3H),
3.83 (s, 3H), 3.30 (s, 3H), 3.13 (m, 2H), 2.50-2.25 (m, 3H), 2.15 (m, 1H),
1.75-1.40 (m, 10H). LCMS ESI (M+H+) 514.2, (M+Na+)
536.2.
【0275】
Ｎ−｛（１Ｓ）−２−［（（１Ｓ）−２−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−１−シクロペンチル−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの調製ベンゾチアゾール（０．５９７ｍＬ、５．５０ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液に、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、２．２０ｍＬ、５．５０ｍｍｏｌ）をゆっくり添加し、混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、これに、Ｎ−｛（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−［（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドールカルボキサミド（２５７ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン溶液を添加する。生じた混合物を−７８℃で２時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチする。混合物を室温に加温し、次に酢酸エチルおよび水に注ぐ。有機層を分離し、水で洗浄し、次にブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。残留物を、フラッシュカラムクロマトグラフィーによってジクロロメタン中１〜５％メタノールのグラジエントで溶離して精製して、所望の化合物を薄黄色の固体として得る（２１９ｍｇ、収率７４％）。1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s, 1H), 8.75-9.02 (m, 1H),
7.53-7.80 (m, 3H), 7.35 (s, 1H), 6.83-7.20 (m, 2H), 6.38-6.59 (m, 1H),
5.39-5.66 (m, 1H), 4.14-4.64 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.91-3.26 (m, 2H),
1.96-2.37 (m, 3H), 1.65-1.99 (m, 3H), 1.13-1.66 (m, 8H). 元素分析 C31H33N5O5S・0.3 CH2Cl2の計算値: C, 61.31; H, 5.52; N, 11.42; 実測値: C, 61.18; H, 5.59; N, 11.29. LCMS
ESI (M+H+): 588.20.
【0276】
３−シクロペンチル−Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−アラニル−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニンアミドの調製材料を、Ｎ−｛（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−［（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドールカルボキサミドと同様に（前述の通り）、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−シクロペンチルグリシンの代わりにＢｏｃ−β−シクロペンチル−Ｌ−アラニン（２００ｍｇ、０．７７７ｍｍｏｌ）を使用したことを除いて、ｔｅｒｔ−ブチル（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）カルバメート（２６８ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）から出発して調製して、所望の化合物を白色の固体として得た（２８７ｍｇ、収率７０％）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.01 (bs, 1H), 8.05 (bs, 1H), 7.17 (t,
J=8.1 Hz, 1H), 7.08 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.03 (t, J=8.3 Hz, 1H), 6.84 (d, J=8 Hz,
1H), 6.49 (d, J=7.6 Hz, 1H), 5.95 (bs, 1H), 5.03 (m, 1H), 4.93 (m, 1H), 3.95
(s, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 3.22 (m, 2H) 2.43 (m, 2H), 2.17 (m, 1H),
1.95-1.70 (m, 8H), 1.60-1.40 (m, 3H), 1.14 (m, 2H). LCMS ESI (M+H+)
528.2, (M+Na+) 550.2.
【0277】
Ｎ−｛（１Ｓ）−２−［（（１Ｓ）−２−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−１−（シクロペンチルメチル）−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの調製標題化合物を、Ｎ−｛（１Ｓ）−２−［（（１Ｓ）−２−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−１−シクロペンチル−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドについて前述の通り同様に、ベンゾチアゾール（９２８ｍｇ、６．８６ｍｍｏｌ）、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、２．７４ｍＬ、６．８６ｍｍｏｌ）および３−シクロペンチル−Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−アラニル−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニンアミド（１８１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）から調製して、所望の標題化合物を濁った白色の固体として得た（１０５ｍｇ、収率５１％）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.45 (s, 1H), 8.52 (d, J=7 Hz, 1H), 8.08
(m, 1H), 7.97 (m, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.18 (m, 1H), 7.09 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.00
(d, J=8.4 Hz, 1H), 6.89 (d, J=8 Hz, 1H), 6.49 (d, J=7.8 Hz, 1H), 6.00 (s,
1H), 5.73 (m, 1H), 4.84 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.33 (m, 2H), 2.66 (m, 1H), 2.51
(m, 1H), 2.22 (m, 2H), 2.05-1.80 (m, 7H), 1.60-1.45 (m, 3H), 1.17 (m,
2H). LCMS ESI (M+H+) 602.1, (M+Na+) 624.1.
【0278】
３−シクロプロピル−Ｎ−（ピリジン−２−イルカルボニル）−Ｌ−アラニル−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニンアミドの調製ｔｅｒｔ−ブチル（（１Ｓ）−２−［メトキシ（メチル）アミノ］−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）カルバメートを、前述の通りジオキサン中ＨＣｌを使用して脱保護し、生じたアミンを、前述の方法と同様に、ジクロロメタン中ヒドロキシベンゾトリアゾール（約１当量）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（約１．２当量）およびＮ−メチルモルホリンを使用してＢｏｃ−β−シクロプロピル−Ｌ−アラニンと結合させて、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｌ−アラニル−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニンアミドを提供する。Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｌ−アラニル−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニンアミド（４２６．５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）のＢｏｃ基を除去し（ジオキサン中ＨＣｌ）、生じたアミンを、ジクロロメタン（５ｍＬ）中、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２０１ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．５５ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）の存在下でピリジン−２−カルボン酸（１２９ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）と結合させて、所望の化合物を白色の固体として得た（２７２ｍｇ、収率６３％）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=8 Hz, 1H), 8.58 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.17 (d, J=7.8 Hz,
1H), 7.84 (td, J=7.7, 1.7 Hz, 1H), 7.45-7.41 (m, 2H), 5.70 (s, 1H), 4.97 (m,
1H), 4.74 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.30 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.46 (m, 2H), 2.18
(m, 1H), 1.88-1.73 (m, 4H), 0.85 (m, 1H), 0.50 (m, 2H), 0.17 (m, 2H).
LCMS ESI (M+H+) 432.1, (M+Na+) 454.1.
【0279】
Ｎ−［（１Ｓ）−２−［（（１Ｓ）−２−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−１−（シクロプロピルメチル）−２−オキソエチル］ピリジン−２−カルボキサミドの調製標題化合物を、Ｎ−｛（１Ｓ）−２−［（（１Ｓ）−２−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝エチル）アミノ］−１−シクロペンチル−２−オキソエチル｝−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド（前述）と同様に、ベンゾチアゾール（６６９ｍｇ、４．９５ｍｍｏｌ）、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ、１．９８ｍＬ、４．９５ｍｍｏｌ）および３−シクロプロピル−Ｎ−（ピリジン−２−イルカルボニル）−Ｌ−アラニル−Ｎ１−メトキシ−Ｎ１−メチル−３−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］−Ｌ−アラニンアミド（１７８ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）から出発して調製して、所望の化合物を白色の固体として得た（１２３ｍｇ、収率５９％）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.58 (d, J=4 Hz, 1H), 8.29 (d, J=6.8 Hz,
1H), 8.15 (d, J=7.8 Hz, 1H), 8.11-8.09 (m, 1H), 7.99-7.97 (m, 1H), 7.82 (td,
J=7.7,1.8 Hz, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 5.77 (m, 1H), 5.71 (bs, 1H),
4.81 (m, 1H), 3.38 (m, 2H), 2.61 (m, 2H), 2.29-2.14 (m,2H), 2.04 (m,1H),
1.90-1.80 (m, 2H), 0.87 (m, 1H), 0.51 (m, 2H), 0.19 (m, 2H). LCMS ESI
(M+H+) 506.1, (M+Na+) 528.1.
【0280】
ＨＣＶポリメラーゼ阻害剤である化合物フィリブビル、（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−［２−（２，６−ジエチルピリジン−４−イル）エチル］−５−［（５，７−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−２−イル）メチル］−４−ヒドロキシ−３Ｈ−ピラン−６−オンの合成は、３つの連続する論文に記載されている。パートＩについては、Ｒ．Ａ．Ｓｉｎｇｅｒら、Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．２０１４、１８、２６を参照されたい。パートＩＩについては、Ｚ．Ｐｅｎｇ，Ｊ．Ａ．Ｒａｇａｎら、Ｏｒｇ．Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．２０１４、１８、３６を参照されたい。フィリブビルの合成の発見については、Ｈ．Ｌｉら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９、５２、１２５５を参照されたい。
【0281】
抗レトロウイルスのプロテアーゼ阻害剤であるネルフィナビル（Nelfinivir）、（３Ｓ，４ａＳ，８ａＳ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（２Ｒ，３Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−［（３−ヒドロキシ−２−メチルベンゾイル）アミノ］−４−フェニルスルファニルブチル］−３，４，４ａ，５，６，７，８，８ａ−オクタヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−３−カルボキサミドは、Ｂ．Ａ．Ｄｒｅｓｓｍａｎら、国際公開第９５０９８４３号および米国特許第５４８４９２６号（１９９５、１９９６、共にＡｇｏｕｒｏｎ）に記載されている方法に従って調製することができる。
【0282】
ルピントリビル（Ruprintrivir）は、米国特許第６，９９５，１４２号の実施例１７、ならびにＤｒａｇｏｖｉｃｈ，Ｐ．Ｓ．ら、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ｂａｓｅｄ ｄｅｓｉｇｎ，ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ ｈｕｍａｎ ｒｈｉｎｏｖｉｒｕｓ ３Ｃ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．３．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｋｅｔｏｍｅｔｈｙｌｅｎｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ．Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，１９９９、４２：１２０３〜１２１２、およびＬｉｎ，Ｄ．ら、Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｒｕｐｉｎｔｒｉｖｉｒ；Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｈｉｎａ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｊｕｎｅ ２０１２ Ｖｏｌ．５５ Ｎｏ．６：１１０１〜１１０７ ｄｏｉ：１０．１００７／ｓ１１４２６−０１１−４４７８−５に記載されている通り調製することができる。
【0283】
（Ｒ）−３−（（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−｛［１−（３−ヒドロキシ−２−メチル−フェニル）−メタノイル］−アミノ｝−４−フェニル−ブタノイル）−５，５−ジメチル−チアゾリジン−４−カルボン酸アリルアミドは、米国特許第６，９５３，８５８号および米国特許第７，１６９，９３２号、ならびに国際公開第２００５／０５４２１４号および国際公開第２００５／０５４１８７号に記載されている方法に従って調製することができる。
【0284】
ドッキング実験方法
相同性モデリング。ＳＡＲＳおよびＣＯＶＩＤ−１９における３Ｃ様プロテイナーゼの配列は、ＲＣＳＢからの参考文献１（例えば、３ＩＷＭ）およびＮＣＢＩからの参考文献２（例えば、参照配列：ＹＰ＿００９７２５３０１．１ＮＣＢＩ）に見ることができる。
【0285】
ＳＡＲＳの３Ｃプロテアーゼ配列（ＰＤＢ ３ＩＷＭ）：ＳＧＦＲＫＭＡＦＰＳＧＫＶＥＧＣＭＶＱＶＴＣＧＴＴＴＬＮＧＬＷＬＤＤＴＶＹＣＰＲＨＶＩＣＴＡＥＤＭＬＮＰＮＹＥＤＬＬＩＲＫＳＮＨＳＦＬＶＱＡＧＮＶＱＬＲＶＩ
ＧＨＳＭＱＮＣＬＬＲＬＫＶＤＴＳＮＰＫＴＰＫＹＫＦＶＲＩＱＰＧＱＴＦＳＶＬＡＣＹＮＧＳＰＳＧＶＹＱＣＡＭＲＰＮＨＴＩＫＧＳＦＬＮＧＳＣＧＳＶＧＦＮＩＤＹＤＣＶ
ＳＦＣＹＭＨＨＭＥＬＰＴＧＶＨＡＧＴＤＬＥＧＫＦＹＧＰＦＶＤＲＱＴＡＱＡＡＧＴＤＴＴＩＴＬＮＶＬＡＷＬＹＡＡＶＩＮＧＤＲＷＦＬＮＲＦＴＴＴＬＮＤＦＮＬＶＡ
ＭＫＹＮＹＥＰＬＴＱＤＨＶＤＩＬＧＰＬＳＡＱＴＧＩＡＶＬＤＭＣＡＡＬＫＥＬＬＱＮＧＭＮＧＲＴＩＬＧＳＴＩＬＥＤＥＦＴＰＦＤＶＶＲＱＣＳＧＶＴＦＱ
【0286】
新しい武漢コロナウイルスＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２配列（同じセクション）：ＳＧＦＲＫＭＡＦＰＳＧＫＶＥＧＣＭＶＱＶＴＣＧＴＴＴＬＮＧＬＷＬＤＤＶＶＹＣＰＲＨＶＩＣＴＳＥＤＭＬＮＰＮＹＥＤＬＬＩＲＫＳＮＨＮＦＬＶＱＡＧＮＶＱＬＲＶＩ
ＧＨＳＭＱＮＣＶＬＫＬＫＶＤＴＡＮＰＫＴＰＫＹＫＦＶＲＩＱＰＧＱＴＦＳＶＬＡＣＹＮＧＳＰＳＧＶＹＱＣＡＭＲＰＮＦＴＩＫＧＳＦＬＮＧＳＣＧＳＶＧＦＮＩＤＹＤＣＶ
ＳＦＣＹＭＨＨＭＥＬＰＴＧＶＨＡＧＴＤＬＥＧＮＦＹＧＰＦＶＤＲＱＴＡＱＡＡＧＴＤＴＴＩＴＶＮＶＬＡＷＬＹＡＡＶＩＮＧＤＲＷＦＬＮＲＦＴＴＴＬＮＤＦＮＬＶＡ
ＭＫＹＮＹＥＰＬＴＱＤＨＶＤＩＬＧＰＬＳＡＱＴＧＩＡＶＬＤＭＣＡＳＬＫＥＬＬＱＮＧＭＮＧＲＴＩＬＧＳＡＬＬＥＤＥＦＴＰＦＤＶＶＲＱＣＳＧＶＴＦＱ
【0287】
相同性モデルを、ファイザーのデータベースのＳＡＲＳの３Ｃ様プロテアーゼの結晶構造から、ＳｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒのＰＲＩＭＥを使用して構築した３。ベンゾチアゾールケトンまたはベンジル側鎖を含有するリガンドによるクラッシュを除去するために、これらのリガンド部分を有する他のＳＡＲＳの３Ｃ様結晶構造のタンパク質コンホメーションを調べた後に、リガンドとの複合体における相同性モデルの最小化を使用した。１８５〜１９０ループにおける残基、Ｈｉｓ４１およびＭｅｔ４９の弛緩は、異なって最小化された３つの相同性モデルバージョンをもたらした。触媒作用的なＣｙｓは、Ｇｌｙ（Ｃ１４５Ｇ）に変異して、触媒作用的なＣｙｓによるクラッシュなしに、ＡＧＤＯＣＫ５コアドッキングおよびその後スコアリングを促進した。
【0288】
ドッキング：９つの化合物を、ＡＧＤＯＣＫ５とのコアドッキング４を使用して相同性モデルにドッキングした。ドッキングは、タンパク質−リガンド共有結合を形成することなく実施された。その代わりに、ラクタム側鎖および反応性ケトンを含む共通のコアを、そのリガンドにおいて同定し、共有結合性ドッキングの模倣物として、結晶構造の方位に固定して保持した（図２を参照されたい）。ＡＧＤＯＣＫコアドッキングについての親和性尺度は、ＨＴスコアであった６。
【0289】
方法の参考文献１．http://www.rcsb.org/structure/3IWM
２．https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/YP_009725301.1
３．Schrodinger
Release 2019-1: Prime, Schrodinger, LLC, New York, NY, 2019.
４．Daniel K.
Gehlhaar, Gennady M. Verkhivker, Paul A. Rejto, Christopher J. Sherman, David
R. Fogel, Lawrence J. Fogel, Stephan T. Freer, 「ＨＩＶ−１プロテアーゼによる阻害剤ＡＧ−１３４３の分子認識：進化的プログラミングによるコンホメーション的に柔軟なドッキング（Molecular recognition of the inhibitor AG-1343 by HIV-1 protease:
conformationally flexible docking by evolutionary programming）」, Chemistry & Biology, Volume 2, Issue
5, 1995, Pages 317-324.
５．Daniel K.
Gehlhaar, Djamal Bouzida,およびPaul
A. Rejto, 「リガンド−タンパク質の構造予測における次元縮小：セリンプロテアーゼの共有結合阻害剤および部位特異的コンビナトリアルライブラリーの設計（Reduced Dimensionality in Ligand-Protein Structure Prediction:
Covalent Inhibitors of Serine Proteases and Design of Site-Directed
Combinatorial Libraries）」
Rational Drug Design. July 7, 1999, 292-311.
６．Tami J. Marrone,
Brock A. Luty, Peter W. Rose, 「標的に結合した低分子の計算的に予測された構造および親和性からの高親和性リガンドの発見：仮想スクリーニング手法。（Discovering high-affinity ligands from the computationally predicted
structures and affinities of small molecules bound to a target: A virtual
screening approach.）」Perspectives
in Drug Discovery and Design 20, 209-230 (2000).
【0290】
結果相同性モデル：ＳＡＲＳ−ＣｏＶとＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の間の配列相同性は、９６．１％である。３０６の残基のうち、異なっているのは１２であり（図１で強調されているＴ３５Ｖ、Ａ４６Ｓ、Ｓ６５Ｎ、Ｌ８６Ｖ、Ｒ８８Ｋ、Ｓ９４Ａ、Ｈ１３４Ｆ、Ｋ１８０Ｎ、Ｌ２０２Ｖ、Ａ２６７Ｓ、Ｔ２８５ＡおよびＩ２８６Ｌ）、それが９６．１％の同一性と解釈される。
【0291】
その相同性モデルを構築するために使用した結晶構造と関連するリガンドは、化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドである。ＳＡＲＳの３Ｃ様プロテアーゼとＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３Ｃ様プロテアーゼのモデルの間で異なっていた、化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドに最も近いアミノ酸残基は、Ａ４６Ｓであり、Ｃａｌｐｈａからそのリガンドまでの最短距離は、８．３Åである。他の残基は、化合物Ｂにおける最も近い原子から、１１Å〜３８Åの間である。
【0292】
【表15】
【0293】
図１．図１は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶとＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の間の残基の差を図示している。残基の変化の位置は、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２相同性モデルのこのリボンの図において灰色の球体で示されている。化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの位置（左側の上）は、スティック型で示される。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２アミノ酸残基のＣ−アルファと化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドにおける最も近い原子の間のおよその距離は、先の表１に示される。
【0294】
ドッキングの結果ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬとＳＡＲＳ−ＣｏＶの３ＣＬのおよそ９６％の相同性、およびリガンド間の類似性によって、ＳＡＲＳ−ＣｏＶにおけるｘｔａｌリガンドのペプチド骨格とＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬモデルにおけるドッキングしたリガンドの間のＲＭＳＤを比較することができる（図２を参照）。コアにドッキングしたリガンドからペプチド骨格までのＲＭＳＤは、０．３２Åを超えて異なっていなかった（平均０．２８Å）。一例については図２を参照されたい。化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの場合、全分子のＲＭＳＤは、０．３７Åであった。
【0295】
図２．存在するコアにドッキングしたリガンド（化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド）を有するＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬの相同性モデルの結合部位。化合物Ｂ、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの結晶構造の一部（ペプチド骨格、ラクタム側鎖および攻撃されたケトン）を使用して、その骨格に対する様々なリガンドのＲＭＳＤを測定した（灰色の炭素、太いスティック）。コアドッキングのために使用されたコアは、ボール表示（明るい炭素）で、挿入化学構造において１１個の重原子として示される。距離はオングストロームで示される。
【0296】
以下の表２のドッキングの結果は、化合物のいくつかが、標的認識および結合と一般に釣り合う、予測親和性（ΔＧｂｉｎｄ、ｋｃａｌ／ｍｏｌ）を有することを示している。ΔＧを推定するために使用した方法は、ＨＴＳスコアリング関数であった６。有効効力は、細胞取込み、排出、補因子競合または基質競合などのいくつかの因子に応じてΔＧ結合の観点とは異なる場合がある。
【0297】
【表16-1】
【0298】
【表16-2】
【0299】
図３．ＳＡＲＳに対するＦＲＥＴベースのＩＣ５０値と比較したＣＯＶＩＤ−１９（ＨＴ）の予測されたΔＧ間のフィット。０．３５のＲ−ｓｑが存在し、そのフィットは、９種の化合物についての９０％信頼水準で有意である（９５％信頼水準では有意でない）。
【0300】
前述の化合物を、ＦＲＥＴ生化学アッセイおよびインビトロウイルス学的アッセイによって、細胞培養技術を使用して解析する。
【0301】
ＳＡＲＳ感染からの保護：ニュートラルレッドエンドポイントＳＡＲＳコロナウイルスによる感染に対して細胞を保護する化合物の能力は、Ｂｏｒｅｎｆｒｅｕｎｄ，Ｅ．およびＰｕｅｒｎｅｒ，Ｊ．１９８５．Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｂｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｎｅｕｔｒａｌ ｒｅｄ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ．２４：１１９〜１２４に記載されているアッセイに類似の細胞生存率アッセイによって、ニュートラルレッド染色をエンドポイントとして利用して測定される。簡潔には、適切な濃度の化合物を含有する培地または培地だけを、ベロ細胞に添加する。細胞を、ＳＡＲＳ随伴ウイルスに感染させるか、または培地だけで疑似感染させる。１〜７日後に、培地を除去し、ニュートラルレッドを含有する培地を、試験プレートに添加する。３７℃で２時間インキュベーションした後、細胞を、ＰＢＳおよび５０％ＥｔＯＨで２回洗浄し、１％酢酸溶液を添加する。細胞を、１〜２分間振とうし、３７℃で５〜１０分間インキュベートする。ニュートラルレッドの量を、５４０ｎｍで分光光度的に数量化する。データは、化合物を含まない非感染細胞のウェルにおけるニュートラルレッドと比較した、化合物で処置した細胞のウェルにおけるニュートラルレッドのパーセントとして表される。５０パーセント有効濃度（ＥＣ５０）は、化合物で処置した感染細胞におけるニュートラルレッドの生成パーセントを、化合物を含まない非感染細胞によって生成されたニュートラルレッドの５０％に増大する化合物の濃度として計算される。５０％細胞傷害性濃度（ＣＣ５０）は、化合物で処置した非感染細胞において生成されたニュートラルレッドのパーセンテージを、化合物を含まない非感染細胞において生成されたニュートラルレッドの５０％に低減する化合物の濃度として計算される。治療指標は、細胞傷害性（ＣＣ５０）を抗ウイルス活性（ＥＣ５０）で割ることによって計算される。
【0302】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２感染からの保護：ＧｌｏエンドポイントＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルスによる感染に対して細胞を保護する化合物の能力も、細胞生存率アッセイによって、細胞内ＡＴＰを測定するためのルシフェラーゼをエンドポイントとして利用して測定することができる。簡潔には、適切な濃度の化合物を含有する培地または培地だけを、ベロ細胞に添加する。細胞を、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ウイルスに感染させるか、または培地だけで疑似感染させる。１〜７日後に、培地を除去し、細胞内ＡＴＰの量を、Ｐｒｏｍｅｇａ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ Ｎｏ．２８８：ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）に従って測定する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬を、試験プレートに添加し、３７℃で１．２５時間インキュベーションした後、シグナル量を、ルミノメーターを４９０ｎｍで使用して数量化する。データは、化合物を含まない非感染細胞のウェルからの発光シグナルと比較した、化合物で処置した細胞のウェルからの発光シグナルのパーセントとして表される。５０パーセント有効濃度（ＥＣ５０）は、化合物で処置した感染細胞からの発光シグナルのパーセントを、化合物を含まない非感染細胞からの発光シグナルの５０％に増大する化合物の濃度として計算される。５０％細胞傷害性濃度（ＣＣ５０）は、化合物で処置した非感染細胞からの発光シグナルのパーセントを、化合物を含まない非感染細胞からの発光シグナルの５０％に低減する化合物の濃度として計算される。治療指標は、細胞傷害性（ＣＣ５０）を抗ウイルス活性（ＥＣ５０）で割ることによって計算される。
【0303】
細胞傷害性細胞において細胞傷害性を引き起こす化合物の能力は、Ｗｅｉｓｌｏｗ，Ｏ．Ｓ．、Ｋｉｓｅｒ，Ｒ．、Ｆｉｎｅ，Ｄ．Ｌ．、Ｂａｄｅｒ，Ｊ．、Ｓｈｏｅｍａｋｅｒ，Ｒ．Ｈ．およびＢｏｙｄ，Ｍ．Ｒ．１９８９．Ｎｅｗ Ｓｏｌｕｂｌｅ−Ｆｏｒｍａｚａｎ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ ＨＩＶ−１ Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ Ｅｆｆｅｃｔｓ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ Ｈｉｇｈ−Ｆｌｕｘ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｏｒ ＡＩＤＳ−Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ８１（０８）：５７７〜５８６に記載されているアッセイに類似の細胞生存率アッセイによって、ホルマザンをエンドポイントとして利用して測定される。簡潔には、ベロ細胞を、適切な濃度の化合物を含有する培地または培地だけに再懸濁させる。１〜７日後に、ＸＴＴおよびＰＭＳを試験プレートに添加し、３７℃で２時間インキュベーションした後、生成されたホルマザンの量を、分光光度的に５４０ｎｍで数量化する。データは、化合物を含まない細胞のウェルにおいて生成されたホルマザンと比較した、化合物で処置した細胞において生成されたホルマザンのパーセントとして表される。５０％細胞傷害性濃度（ＣＣ５０）は、化合物で処置した非感染細胞において生成されたホルマザンのパーセンテージを、化合物を含まない非感染細胞において生成されたホルマザンの５０％に低減する化合物の濃度として計算される。
【0304】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス感染からの保護ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２による感染に対して細胞を保護する化合物の能力は、Ｗｅｉｓｌｏｗ，Ｏ．Ｓ．、Ｋｉｓｅｒ，Ｒ．、Ｆｉｎｅ，Ｄ．Ｌ．、Ｂａｄｅｒ，Ｊ．、Ｓｈｏｅｍａｋｅｒ，Ｒ．Ｈ．およびＢｏｙｄ，Ｍ．Ｒ．１９８９．Ｎｅｗ Ｓｏｌｕｂｌｅ−Ｆｏｒｍａｚａｎ Ａｓｓａｙ ｆｏｒ ＨＩＶ−１ Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ Ｅｆｆｅｃｔｓ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｔｏ Ｈｉｇｈ−Ｆｌｕｘ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｏｒ ＡＩＤＳ−Ａｎｔｉｖｉｒａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ８１（０８）：５７７〜５８６に記載されているアッセイに類似の細胞生存率アッセイによって、ホルマザンをエンドポイントとして利用して測定される。簡潔には、適切な濃度の化合物を含有する培地または培地だけを、ＭＲＣ−５細胞に添加する。細胞を、ヒトコロナウイルスＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２に感染させるか、または培地だけで疑似感染させる。１〜７日後に、ＸＴIおよびＰＭＳを試験プレートに添加し、３７℃で２時間インキュベーションした後、生成されたホルマザンの量を、分光光度的に５４０ｎｍで数量化する。データは、化合物を含まない非感染細胞のウェルにおけるホルマザンと比較した、化合物で処置した細胞におけるホルマザンのパーセントとして表される。５０パーセント有効濃度（ＥＣ５０）は、化合物で処置した感染細胞におけるホルマザンの生成パーセントを、化合物を含まない非感染細胞によって生成されたホルマザンの５０％に増大する化合物の濃度として計算される。５０％細胞傷害性濃度（ＣＣ５０）は、化合物で処置した非感染細胞において生成されたホルマザンのパーセンテージを、化合物を含まない非感染細胞において生成されたホルマザンの５０％に低減する化合物の濃度として計算される。治療指標は、細胞傷害性（ＣＣ５０）を抗ウイルス活性（ＥＣ５０）で割ることによって計算される。
【0305】
ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣプロテアーゼのＦＲＥＴアッセイおよび解析ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼのタンパク分解活性を、連続的蛍光共鳴エネルギー移動アッセイを使用して測定する。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏのＦＲＥＴアッセイにより、ＴＡＭＲＡ−ＳＩＴＳＡＶＬＱＳＧＦＲＫＭＫ−（ＤＡＢＣＹＬ）−ＯＨからＴＡＭＲＡ−ＳＩＴＳＡＶＬＱおよびＳＧＦＲＫＭＫ（ＤＡＢＣＹＬ）−ＯＨへの、プロテアーゼによって触媒された切断を測定する。切断されたＴＡＭＲＡ（励起波長５５８ｎｍ／発光波長５８１ｎｍ）ペプチドの蛍光を、ＴＥＣＡＮ ＳＡＦＩＲＥ蛍光プレートリーダーを使用して１０分間にわたって測定した。典型的な反応溶液は、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）、１ｍＭのＥＤＴＡ、４．０μＭのＦＲＥＴ基質、４％ＤＭＳＯおよび０．００５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有していた。アッセイは、２５ｎＭのＳＡＲＳの３ＣＬｐｒｏ（ＳＡＲＳコロナウイルス完全ゲノム配列のＵｒｂａｎｉ株（ＮＣＢＩ受入番号ＡＹ２７８７４１）のヌクレオチド配列９９８５〜１０９０２）を添加して惹起した。阻害パーセントを、０．００１ｍＭレベルの阻害剤を用いて二つ組で決定した。データを、非線形回帰解析プログラムＫａｌｉｄａｇｒａｐｈを用いて、以下の等式を使用して解析した。
ＦＵ＝ｏｆｆｓｅｔ＋（ｌｉｍｉｔ）（１−ｅ−（ｋｏｂｓ）ｔ）
式中、ｏｆｆｓｅｔは、非切断ペプチド基質の蛍光シグナルに等しく、ｌｉｍｉｔは、完全に切断されたペプチド基質の蛍光に等しい。ｋｏｂｓは、この反応の一次速度定数であり、任意の阻害剤がない状態での基質の利用を表す。不可逆的阻害剤を含有し、計算されたｌｉｍｉｔが理論的最大限界の２０％未満である酵素出発反応では、計算されたｋｏｂｓは、コロナウイルス３Ｃプロテアーゼの不活化速度を表す。ｋｏｂｓ対［Ｉ］のプロットの勾配（ｋｏｂｓ／Ｉ）は、酵素に関する阻害剤の結合活性の尺度である。非常に急速な不可逆的阻害剤については、ｋｏｂｓ／Ｉは、勾配というよりむしろ１つだけまたは２つの［Ｉ］における観察から計算される。
【0306】
あるいは、化合物は、以下のＳＡＲＳ ＣｏＶ−２ ＦＲＥＴアッセイを使用して評価され得る。
【0307】
ＳＡＲＳ ＣｏＶ−２プロテアーゼのＦＲＥＴアッセイおよび解析ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の主なプロテアーゼである３ＣＬｐｒｏのタンパク分解活性を、連続蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）アッセイを使用してモニタリングした。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏアッセイにより、コンセンサスペプチド上でモデル化された以下の配列Ｄａｂｃｙｌ−ＫＴＳＡＶＬＱ−ＳＧＦＲＫＭＥ−Ｅｄａｎｓを有する合成蛍光発生基質ペプチドを切断する、全長ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬプロテアーゼの活性を測定する。切断されたＥｄａｎｓペプチドの蛍光（励起３４０ｎｍ／発光４９０ｎｍ）を、蛍光強度プロトコールを使用してＦｌｅｘｓｔａｔｉｏｎリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）で測定する。蛍光シグナルは、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏの強力な阻害剤であるＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの存在下で低減する。アッセイ反応緩衝液は、２０ｍＭのＴｉｒｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．３）、１００ｎＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、５ｍＭのＴＣＥＰおよび２５μＭペプチド基質を含有していた。酵素反応を、１５ｎＭのＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬプロテアーゼを添加することにより惹起し、２３℃で６０分間進行させた。阻害または活性パーセントを、化合物を含有していない（０％阻害／１００％活性）および対照化合物を含有する（１００％阻害／０％活性）対照ウェルに基づいて計算した。ＩＣ５０値を、ＡＢＡＳＥソフトウェア（ＩＤＢＳ）を使用し、４パラメーターフィットモデルを使用して作製した。Ｋｉ値を、Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｂａｓｅソフトウェア（ＩＤＢＳ）を使用して、酵素濃度パラメーターを１５ｎＭに固定し、Ｋｍパラメーターを１４μＭに固定し、基質濃度パラメーターを２５μＭに固定してＭｏｒｒｉｓｏｎ等式にフィットさせた。
【0308】
化合物（３Ｓ）−３−（｛４−メチル−Ｎ−［（２Ｒ）−テトラヒドロフラン−２−イルカルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチル２，６−ジクロロベンゾエートは、先のアッセイで評価すると、１７ｎＭのＩＣ５０（ｎ＝３２で１６ｎＭ〜１８ｎＭの９５％信頼区間）および２．７１ｎＭのＫｉ（ｎ＝３２で２．２９ｎＭ〜３．１３ｎＭの９５％信頼区間）を有していた。化合物Ｎ−（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）−Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニンアミドは、先のアッセイで評価すると、３７５ｎＭのＩＣ５０（ｎ＝４で２６０ｎＭ〜４８９ｎＭの９５％信頼区間）および１３９ｎＭのＫｉ（ｎ＝２で６５．８ｎＭ〜２１２ｎＭの９５％信頼区間）を有していた。化合物（３Ｓ）−３−（｛Ｎ−［（４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）カルボニル］−Ｌ−ロイシル｝アミノ）−２−オキソ−４−［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］ブチルシクロプロパンカルボキシレートは、先のアッセイで評価すると、１２８ｎＭのＩＣ５０（ｎ＝５で１０７ｎＭ〜１４９ｎＭの９５％信頼区間）および４２．７ｎＭのＫｉ（ｎ＝２で３７．９ｎＭ〜４７．５ｎＭの９５％信頼区間）を有していた。化合物Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３，３−ジメチルブチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、先のアッセイで評価すると、２４ｎＭのＩＣ５０（ｎ＝６で１６ｎＭ〜３２ｎＭの９５％信頼区間）および２．８１ｎＭのＫｉ（ｎ＝４で１．３９ｎＭ〜４．２２ｎＭの９５％信頼区間）を有していた。化合物Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、先のアッセイで評価すると、７ｎＭのＩＣ５０（ｎ＝７で６ｎＭ〜８ｎＭの９５％信頼区間）および０．２７ｎＭのＫｉ（ｎ＝６で０．１７ｎＭ〜０．３７ｎＭの９５％信頼区間）を有していた。化合物Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１−オキソ−３−（（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル）プロパン−２−イル）アミノ）−３−シクロプロピル−１−オキソプロパン−２−イル）ピコリンアミドは、先のアッセイで評価すると、８４０２ｎＭのＩＣ５０（ｎ＝３で４３９６ｎＭ〜１２４０７ｎＭの９５％信頼区間）および３０４８ｎＭのＫｉ（ｎ＝１）を有していた。化合物ＡＧ−００１１８５９、フィリブビル、ネルフィナビルおよびルピントリビル（ruprintrivir）はすべて、先のアッセイで評価すると、＞３０μＭのＩＣ５０を有していた。
【0309】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを、生化学的蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）プロテアーゼ活性アッセイを使用して、コロナウイルス科のアルファ、ベータおよびガンマ群を代表する様々な他のコロナウイルス由来の３ＣＬｐｒｏに対して評価した。そのアッセイは、先のＦＲＥＴアッセイに類似しており、示されるウイルスからの全長のプロテアーゼ配列を用いることができる。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、アルファ−コロナウイルス（ＮＬ６３−ＣｏＶ、ＰＥＤＶ−ＣｏＶ−２、ＦＩＰＶ−ＣｏＶ−２）、ベータ−コロナウイルス（ＨＫＵ４−ＣｏＶ、ＨＫＵ５−ＣｏＶ、ＨＫＵ９−ＣｏＶ、ＭＨＶ−ＣｏＶ、ＯＣ４３−ＣｏＶ、ＨＫＵ１−ＣｏＶ）、およびガンマ−コロナウイルス（ＩＢＶ−ＣｏＶ−２）のメンバーを含めた試験したすべてのコロナウイルス３ＣＬｐｒｏに対して、表３に含まれるＫｉ値および試験した酵素濃度で、強力な阻害活性を実証した。この阻害活性は、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドがヒトプロテアーゼおよびＨＩＶプロテアーゼのパネルに対して不活性であったので、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼに制限される。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、ヒトカテプシンＢに対して検出可能な活性を示したが、３ＣＬｐｒｏと比較して１０００倍のマージンがあった（表４）。これらのデータは、ｐａｎコロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害剤としてのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを、まとめて裏付けている。
【0310】
【表17】
【0311】
【表18】
【0312】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドとＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏのサーマルシフトシフト結合データは、インビトロでＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬとの密な特異的結合を示す。０．２７ｎＭのＫｉ値でＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏを強力に阻害するＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの能力を考慮して、さらなる研究を行った。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドおよびＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏのＸ線共結晶構造の研究は、活性部位の触媒作用的なシステイン残基における共有結合性の可逆的相互作用で３ＣＬ酵素に結合し、したがって３ＣＬｐｒｏの活性を阻害する化合物と一致する。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドと、その標的タンパク質であるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏの間の直接結合を評価するために、サーマルシフトアッセイも使用した。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏの融解温度は、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの結合時に、５５．９＋／−０．１１℃（ｎ＝１６）から７０．５＋／−０．１２℃（ｎ＝８）に、１４．６℃シフトした。融解温度（Ｔｍ）は、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｈｅｒｍａｌ Ｓｈｉｆｔ Ｓｏｆｔｗａｒｅ ｖ１．３においてボルツマンモデルを使用して、天然タンパク質から変性タンパク質への転移相の中間相として計算した。これらのデータは、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏへのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの密な特異的結合を裏付けており（図４を参照）、それによって、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２の３ＣＬｐｒｏの阻害剤としてのこの化合物の分子機序についてのさらなる証拠を提供する。
【0313】
細胞のＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２抗ウイルス活性は、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドによってインビトロで阻害される。
【0314】
細胞培養におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２に対するＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの抗ウイルス活性を、細胞変性作用（ＣＰＥ）アッセイを用いて、ＡＣＥ２が濃縮されたベロＥ６細胞（ベロＥ６−ｅｎＡＣＥ２）受容体またはＥＧＦＰを構成的に発現するベロＥ６細胞（ベロＥ６−ＥＧＦＰ）のいずれかを使用して評価した。これらの細胞系に、それぞれ同一の３ＣＬｐｒｏアミノ酸配列を有するＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ株１またはベータＣｏｖ ＧＨＢ−０３０２１／２０２０株を感染させた。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、それぞれ３９．７μＭおよび８８．９μＭ（ＥＣ５０、表５）で、細胞をウイルスＣＰＥから保護した。しかしベロ細胞は、そのＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが公知の基質である、高レベルの排出輸送体Ｐ−ｇｐ（ＭＤＲ１またはＡＢＣＢ１としても公知）を発現する。したがって、そのアッセイを、Ｐ−ｇｐ排出阻害剤、ＣＰ−１００３５６、４−（３，４−ジヒドロ−６，７−ジメトキシ−２（１Ｈ）−イソキノリニル）−Ｎ−２［２−（３，４−ジメトキシフェニル）エチル］−６，７−ジメトキシ−２−キナゾリンアミンの存在下で繰り返した。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、２μＭのＰ−ｇｐ阻害剤の存在下で、ベロＥ６−ｅｎＡＣＥ２細胞において０．２３μＭおよびベロＥ６−ＥＧＦＰ細胞において０．７６μＭのＥＣ５０値で、活性の１１７〜１７３倍の増大を示した（表５）。Ｐ−ｇｐ阻害剤単独は、これらの濃度では抗ウイルスまたは細胞傷害活性を有しておらず、プロテアーゼ阻害剤の存在下では細胞傷害性を引き起こさなかった。両方の細胞型において、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの用量の増大に対して急激な応答があり、ＥＣ５０とＥＣ９０の間（すなわち、５０％有効濃度と９０％有効濃度の間）には約２〜３倍の差があった（Ｐ−ｇｐ阻害剤の存在下で、ベロＥ６−ｅｎＡＣＥ２細胞においてＥＣ９０＝０．４８μＭおよびベロＥ６−ＥＧＦＰ細胞においてＥＣ９０＝１．６μＭ）。肺細胞系を、Ｐ−ｇｐ阻害剤（Ａ５４９−ＡＣＥ２およびＭＲＣ５）の存在下および非存在下で抗ウイルス効力について試験した場合、抗ウイルス効力の有意差は観察されなかった（表５）。さらに、２μＭのＰ−ｇｐを伴う両方のベロＥ６細胞系におけるＥＣ５０およびＥＣ９０値は、Ａ５４９−ＡＣＥ２細胞におけるウイルスタンパク質を検出すること、および極性ヒト気道上皮細胞においてプラークアッセイ（Ｐｇ−ｐ発現がより低い）を使用することを含めた、異なる細胞型を用いる異なるアッセイ法を使用して得られた値に類似している。
【0315】
【表19】
【0316】
ベロＥ６細胞におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２に対する抗ウイルス活性のためにアジスロマイシンまたはレムデシビルのいずれかと組み合わされたＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの効力。手短には、ｈＡＣＥ２発現が濃縮されているベロＥ６細胞に、ＢＳＬ−３のラボにおいて感染多重度０．００２でＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２（ＵＳＡ＿ＷＡ１／２０２０）をバッチで接種させた（innoculated）。次に、ウイルスを接種させた細胞を、アッセイの準備ができた化合物プレートに、４，０００細胞／ウェルの密度で添加する。３日間のインキュベーションの後、ウイルス誘導性細胞変性作用が、未処置の感染対照条件において９５％になった時点で、細胞生存率を、ＡＴＰレベルを定量するＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、製造者のプロトコールに従って評価した。化合物の細胞傷害性を、並列の非感染細胞において評価した。
【0317】
組合せ処置が、相乗または相加効果を有するかどうかを調べるために、各化合物を、用量マトリックスの濃度で試験する。Ｃｈａｌｉｃｅ解析器を使用して、Ｌｏｅｗｅ相加性および過剰モデルを計算した。Ｌｏｅｗｅ過剰は、一般に過剰阻害パーセントを示すために使用され、過剰阻害パーセントは、経験的な阻害パーセント値から、様々なモデルにおいて非シナジー対を想定する様々な組合せの予測阻害パーセント値を引くことによって計算される。これらのデータにより、対ごとのアイソボログラム、シナジースコア、および最良の組合せ指標（ＣＩ）の計算が可能になった。一般に、＞１のシナジースコアおよび＜１のＣＩは、組合せ処置が相乗効果を有することを示し、シナジースコア１およびＣＩ１は、組合せ処置が相加効果だけを有することを示す。Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．２０１５ Ａｐｒ；５９（４）：２０８６〜２０９３．ｄｏｉ：１０．１１２８／ＡＡＣ．０４７７９−１４。
【0318】
シナジーが、高阻害レベルで達成され得るかどうかを評価するために、アイソボログラムレベルを０．９に設定して、９０％ウイルス低減（１−ｌｏｇ１０低減に等価）を伴う有意義なシナジーを捉えた。
【0319】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドにアジスロマイシンを加えた組合せは、シナジースコア３．７６およびＣＩ０．４でシナジーを生じた。試験したすべての組合せについて著しい細胞傷害性がなかったので、観察されたシナジーは、細胞傷害性に起因するものではなかった。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドおよびレムデシビルの組合せは、シナジースコア５．１およびＣＩ０．２１で相加性を実証した。観察されたシナジーは、用量を低減し、したがって阻害剤の安全マージンを増大してインビボでの治療濃度域を達成するために潜在的に使用することができる。さらに、組合せ治療は、薬物耐性を最小限に抑えるために利用することができる。
【0320】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドをレムデシビルと組み合わせた、組合せによる抗ウイルスの利益の潜在可能性をさらに評価するために、追加の研究を行った。
【0321】
抗ウイルス剤、特にウイルス複製サイクルにおいて異なるステップを標的にする抗ウイルス剤の組合せは、ウイルス性疾患の処置において頻繁に用いられる治療戦略である。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドおよびヌクレオシドＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ阻害剤であるレムデシビルは、ウイルス複製サイクルにおいて異なるステップを標的にするので、２種の化合物の抗ウイルス活性を、単独でまたは組み合わせて、ＨｅＬａ−ＡＣＥ２細胞を使用して評価した。このアッセイでは、２人の異なるＣＯＶＩＤ−１９患者からの回復期ヒトポリクローナル血清を使用して、ウイルスタンパク質を検出した。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド（表６中の指定化合物１）単独では、０．１４μＭの平均ＥＣ５０および０．４０μＭのＥＣ９０でＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２複製を阻害し、他方で、レムデシビルは、０．０７４μＭの平均ＥＣ５０および０．１７μＭのＥＣ９０を有していた（表６）。
【0322】
【表20】
【0323】
組合せ研究を、薬物試験マトリックスを使用して実施し、薬物の組合せのデータを、参照モデル（Ｌｏｅｗｅ、Ｂｌｉｓｓ、ＨＳＡ）を使用して解析して、薬物の組合せの効果を、相加的、相乗的または拮抗的として分類した（アイソボログラム、シナジースコア、および組合せ指標）。一般に、＞１のシナジースコアおよび＜１の組合せ指標は、組合せ処置が相乗効果を有していることを示している（Ｙｅｏら、２０１５）。シナジーが、高阻害レベルで達成され得るかどうかを評価するために、アイソボログラムレベルを０．９に設定して、９０％ウイルス低減（１ｌｏｇ１０低減に等価）を伴う有意義なシナジーを捉えた。
【0324】
表７にまとめられる通り、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドおよびレムデシビルの組合せは、２つの独立な実験で患者番号１の血清からはシナジーを示し、患者番号２の血清を用いる単一実験では相加性を示した（表７）。異なる分類は、検出試薬として使用した異なる回復期血清に起因する可能性が最も高い。これらの同じ抗ウイルスデータを、Ｓｙｎｅｒｇｙｆｉｎｄｅｒプログラムも使用して解析し、それによって、２種の薬物が相加的から相乗的であったことも示され、代表的なグラフは図５に示される。拮抗作用は、これらの研究においてＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドおよびレムデシビルの組合せについては実証されなかった。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミド（図５中の指定ＰＦ−００８３５２３１）およびレムデシビル（濃度は、図５中の軸に沿って示される）の系列希釈を、マトリックス形式で組み合わせた。試験したすべての濃度にわたって、ＧｅｎｅＤａｔａプログラムを使用して解析した、シナジースコア（３回の反復のメジアンスコア）をプロットする３次元薬物相互作用のランドスケープを、図５に示す。３次元グラフの平面の上のスコア領域は、シナジーを示し、一方、平面の下は拮抗作用を示す。試験したすべての組合せについて、ウイルス感染した宿主細胞において注目すべき細胞傷害性がなかったので、観察された相加性／シナジーは、細胞傷害性には起因していなかった。
【0325】
【表21】
【0326】
図５Ａは、ＨＥＬＡ−ＡＣＥ２細胞アッセイにおいてレムデシビルと組み合わされたＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの活性のグラフ表示を提供する。このアッセイで見出されたＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのＥＣ９０（ｎＭ）は、レムデシビル濃度の増大と共に低下した（すなわち、ＥＣ９０は、レムデシビル濃度を０ｎＭから４８ｎＭ、９５ｎＭ、１９０ｎＭに増大した場合、それぞれ４３３ｎＭから１２３ｎＭ、５４．５ｎＭ、次に＜０．７８ｎＭに低下した）。
【0327】
Ａ５４９＋ＡＣＥ２細胞におけるインビトロ薬物有効性および細胞傷害性。Ａ５４９＋ＡＣＥ２細胞を、ブラックウォール９６ウェルプレートに７０％集密度で播種した。翌日、感染の２時間前に培地を除去し、化合物／担体を含有する完全培地で置き換えた。次に細胞を、ベロＥ６力価に基づいて、０．４２５の感染多重度（ＭＯＩ）で３７℃において感染させた。ウイルス添加の１時間後に、ウイルスを除去し、化合物／担体を含有する培地を添加した。感染の２４および４８時間後に、細胞を、１０％ホルマリン溶液に３０〜４５分間浸すことによって固定した。固定した後、細胞をＨ２Ｏで１回洗浄して、過剰のホルマリンを除去した。プレートを乾燥させ、１ウェルごとにＰＢＳを添加した後、ＢＳＬ−３の施設から出した。固定細胞をＴｒｉｔｏｎ−Ｘで透過処理し、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２と交差反応するマウスモノクローナルＳＡＲＳ−ＣｏＶ抗Ｎ抗体１Ｃ７、ヤギ抗−マウスＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４７、およびＤＡＰＩを用いて染色した。プレートを、ＣｅｌｌＩｎｓｉｇｈｔ ＣＸ７ ＬＺＲ高含量スクリーニングプラットフォームで走査した。合計９つの画像を、ウェル全体にわたって４倍の拡大率で収集した。画像を、ＨＣＳナビゲーターを使用して解析して、細胞の総数／ウェル（ＤＡＰＩ染色細胞）およびＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２感染細胞（ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４７陽性細胞）のパーセンテージを得た。正確な数量化を可能にするために、チャネルごとの曝露時間を、飽和の２５％に調整し、解析では各画像の端部の細胞を除外した。ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２−感染細胞を、疑似感染した細胞および担体で処理した細胞の平均蛍光強度の３標準偏差を超える平均蛍光強度を有する細胞を含むようにゲーティングした。ウイルス焦点の代表的な画像を、ＢＺ−Ｘ８１０を使用して、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２感染の４８ｈｐｉで固定したプレートの４０倍拡大率で獲得した。細胞傷害性の決定のために、Ａ５４９＋ＡＣＥ２細胞を、不透明ホワイトウォール９６〜７２４ウェルプレートに播種した。翌日、培地を除去し、化合物／担体またはスタウロスポリンを含有する培地で置き換え、それぞれ２４時間または４８時間インキュベートした。これらの時点で、ＡＴＰレベルを、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ ２．０（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ９２４２）によって、ＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙ ＨＴＸマルチモードリーダーを使用して決定した。
【0328】
ＰＦ−００８３５２３１は、Ａ５４９＋ＡＣＥ２細胞においてＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ ＵＳＡ−ＷＡ１／２０２０に対して評価すると、感染の２４時間後に、０．２２１μＭのＥＣ５０（０．１３７〜０．３５６の９５％ＣＩ）、０．７３４μＭのＥＣ９０（０．３９１〜１．３８の９５％ＣＩ）および＞１０μＭのＣＣ５０を有しており、感染の４８時間後に、０．１５８μＭのＥＣ５０（０．０７９５〜０．３１４の９５％ＣＩ）、０．４３９μＭのＥＣ９０（０．３８０〜０．５０８の９５％ＣＩ）および＞１０μＭのＣＣ５０を有しており、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ ＵＳＡ−ＮＹＵ−ＶＣ−００３／２０２０に対して評価すると、感染の２４時間後に、０．１８４μＭのＥＣ５０（０．０１６〜０．３７７の９５％ＣＩ）、０．５９１μＭのＥＣ９０（０．５３４〜０．６５４の９５％ＣＩ）および＞１０μＭのＣＣ５０を有していた。
【0329】
ヒト気道上皮培養物（ＨＡＥＣ）。ＨＡＥＣを作製するために、Ｂｃｉ−ＮＳ１．１を、ラット尾コラーゲン１型でコーティングされた透過性トランズウェル膜支持体（６．５ｍｍ、Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３４７０）上に蒔き（７．５Ｅ＋０４細胞／ウェル）、Ｐｎｅｕｍａｃｕｌｔ Ｅｘ Ｐｌｕｓ培地（ＳｔｅｍＣｅｌｌ、カタログ番号０５０４０）の頂端側および基底外側に浸漬させた。集密度に達したら、培地を頂端側から除去し（「エアリフト」）、基底外側チャンバの培地をＰｎｅｕｍａｃｕｌｔ ＡＬＩ維持培地（ＳｔｅｍＣｅｌｌ、カタログ番号０５００１）に変更した。基底外側チャンバの培地を、１２〜１５日間で２〜３日ごとにフレッシュなＰｎｅｕｍａｃｕｌｔ ＡＬＩ維持培地で交換して、インビボの多列線毛粘液線毛上皮に類似した分化した極性培養物を形成した。分化の４〜６週間以内に培養物を使用した。ＨＡＥＣを、細胞傷害性アッセイおよびＳＡＲＳ−６８８ ＣｏＶ−２感染症のために使用した。
【0330】
化合物の獲得、希釈、および調製。ＰＦ−００８３５２３１、レムデシビル、およびＣＰ−１００３５６は、１００％ＤＭＳＯに可溶化され、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．によって提供されたものであった。ＤＭＳＯで３０ｍＭに希釈した化合物ストックを、−２０℃で貯蔵した。化合物を、完全培地またはＰｎｅｕｍａｃｕｌｔ ＡＬＩ維持培地中１０μＭの使用濃度に希釈した。その後のすべての化合物の希釈を、１０μＭ化合物に等価なＤＭＳＯを含有する培地中で実施した。
【0331】
ヒト気道上皮培養物（ＨＡＥＣ）におけるインビトロ有効性および細胞傷害性。感染の４８時間前に、２〜６週熟成させたＨＡＥＣを、頂端側で、カルシウムおよびマグネシウムを含有する予め加温したＰＢＳで２回、それぞれ３０分間洗浄して、頂端表面上の粘液を除去した。感染の２時間前に、ＨＡＥＣを、基底チャンバのＡＬＩ維持培地を、化合物または担体を含有するフレッシュな培地で交換することによって、予め処理した。レムデシビルおよびＰＦ−００８３５２３１を、１０、０．５および０．０２５μＭで使用し、ＣＰ−１００３５６を１μＭで使用した。感染の１時間前に、培養物を、頂端側で、カルシウムおよびマグネシウムを含有する予め加温したＰＢＳで２回、それぞれ３０分間洗浄した。各培養物を、培養物当たり１．３５Ｅ＋０５ＰＦＵ（ベロＥ６）で、３７℃で２時間感染させた。接種菌液の試料を、ベロＥ６細胞でプラークアッセイによって逆滴定するために、−８０℃で維持し、貯蔵した。化合物の毒性アセスメントのために、追加の培養物を洗浄し、感染した培養物として予め処理した。これらの培養物は、感染させる代わりに、疑似処理としてカルシウムおよびマグネシウムだけを含有するＰＢＳと共にインキュベートした。ＨＡＥＣを、ウイルス希釈物と共にまたは疑似処理により３７℃で２時間インキュベートした。接種菌液を除去し、培養物を、カルシウムおよびマグネシウムを含有する予め加温したＰＢＳで３回洗浄した。洗浄ステップごとに、緩衝液を頂端表面に添加し、培養物を３７℃で３０分間インキュベートした後、緩衝液を除去した。３回目の洗浄物を収集し、ベロＥ６細胞でプラークアッセイによって滴定するために、−８０℃で貯蔵した。感染した培養物を、３７℃で合計７２時間インキュベートした。感染性子孫ウイルスを、カルシウムおよびマグネシウムを含有する予め加温したＰＢＳ６０μＬを添加し、３７℃で３０分間インキュベートし、頂端側洗浄物を収集することによって１２時間ごとに収集して、滴定まで−８０℃で貯蔵した。さらに、経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）を、未感染であるが処理したＨＡＥＣにおいて測定して、化合物または担体を用いる処理に対する応答における組織完全性を数量化した。エンドポイントで、培養物を１０％ホルマリン溶液に２４時間浸すことによって固定し、カルシウムおよびマグネシウムを含有するＰＢＳで３回洗浄した後に、組織学的検査のためにさらに処理した。あるいは、エンドポイントで、トランズウェル膜を切り取り、ＲＬＴ緩衝液に浸して、ＲＮＡｅａｓｙキット（Ｑｉａｇｅｎ、カタログ番号７４１０４）を使用してＲＮＡを抽出した。ｃＤＮＡ合成を、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ（商標）ＩＩＩ系（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒカタログ番号１８０８００５１）、その後ＲＴ−ｑＰＣＲを使用し、ＴａｑＭａｎ ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＰＣＲマスターミックス（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒカタログ番号４３０５７１９）およびＴａｑＭａｎ遺伝子発現アッセイプローブ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ ＧＡＰＤＨカタログ番号４３３３７６４Ｆ、ＢＡＸカタログ番号Ｈｓ００１８０２６９＿ｍ１、ＢＣＬ２カタログ番号Ｈｓ００６０８０２３＿ｍ１）を用いて、ＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ ３リアルタイムＰＣＲ系を使用して実施した。
【0332】
未分化ＨＡＥＣ前駆細胞における細胞傷害性をさらに決定するために、Ｂｃｉ−ＮＳ１．１細胞を、不透明ホワイトウォール９６ウェルプレートに播種した。翌日、培地を除去し、化合物／担体またはスタウロスポリンを含有する培地で置き換え、それぞれ２４時間または４８時間インキュベートした。これらの時点で、ＡＴＰレベルを、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ ２．０（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ９２４２）によってＢｉｏＴｅｋ Ｓｙｎｅｒｇｙ ＨＴＸマルチモードリーダーを使用して決定した。
【0333】
ＨＡＥＣにおけるＰＦ−００８３５２３１抗ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２活性を、ＨＡＥＣの基底外側チャンバに対して０．０２５μＭ、０．５μＭまたは１０μＭのいずれかのＰＦ−００８３５２３１もしくはレムデシビル、またはＤＭＳＯ担体対照で評価する。ＨＡＥＣを、頂端側で、ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２ ＵＳＡ−ＷＡ１／２０２０でチャレンジし、ウイルス感染力価を、１２時間ごとに収集した頂端側洗浄物から決定する。ＤＭＳＯで処理した培養物からの頂端側洗浄物における子孫ウイルス粒子は、感染の１２時間後に存在しており、このことは、ＨＡＥＣ細胞におけるＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２のライフサイクルが、その時間までには完了することを示している。ＰＦ−００８３５２３１およびレムデシビルは、共に用量依存方式でＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２力価を強力に阻害し、１０μＭ用量では、ウイルス力価はほとんどの時点で３６６検出限界未満となる。
【0334】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの好ましい前臨床ＡＤＭＥおよび薬物動態プロファイルＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの代謝安定性を、プールしたヒト肝ミクロソーム（ＨＬＭ）および肝細胞を使用してインビトロで評価した。薬物は、チトクロムＰ４５０酵素によって代謝され、非結合Ｃｌｉｎｔ１４μｌ／分／ｍｇを示すことが示された。化学的阻害剤および異種的に発現した組換え酵素を用いて、ＣＹＰ３Ａ４を、この化合物の代謝に関与する主なＣＹＰとして同定した。多形的に発現されたＣＹＰ３Ａ５は、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを代謝することもでき、ＣＹＰ３Ａ５エクスプレッサーにおいてクリアランスがわずかにより高くなり得ることも認められた。ヒトチトクロムＰ４５０酵素（ＣＹＰ１Ａ２、２Ｂ６、２Ｃ８、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、および３Ａ）を可逆的に阻害する化合物の潜在可能性を、プールしたＨＬＭにおいてプローブ基質（補足的）を使用して評価すると、＞２００μＭのＩＣ５０値およびＣＹＰ３Ａ４／５の時間依存的阻害について弱いシグナルが提供され、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドが、他の薬物との併用投与の際に薬物と薬物の相互反応（ＤＤＩ）を引き起こすリスクが低いことが示された。ある範囲の輸送体（ＢＣＲＰ、Ｐｇｐ、ＯＡＴＰ１Ｂ１／１Ｂ３、ＯＣＴ１／２、ＯＡＴ１／３およびＭＡＴＥ１／２Ｋ）を阻害するＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの潜在可能性を、インビトロ系を使用して評価した。＞２０μＭのＩＣ５０値は、計画された臨床的曝露で、輸送体阻害に起因するＤＤＩを引き起こすリスクが低いことを示している。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの血漿タンパク質結合を、種にわたって平衡透析を使用して測定すると、種にわたって０．２６〜０．４６の血漿遊離分画で血漿タンパク質に対する中程度の結合が示された。
【0335】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドを、ラット、イヌおよびサル（１ｍｇ／ｋｇまたは２ｍｇ／ｋｇ）に静脈内投与すると、その中性の生理化学および親油性（ＳＦＬｏｇＤ７．４＝１．７）に従って、種にわたって中程度の血漿クリアランス（３５〜６０％肝血流量）、低分布体積（＜１Ｌ／Ｋｇ）および短い半減期（＜１．５時間）が示された。ラット（２ｍｇ／ｋｇ）およびサル（５ｍｇ／ｋｇ）への経口投与後に、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、低バイオアベイラビリティ（＜２％）を示したが、これは、その低い透過性による低い吸収（１．３×１０−６ｃｍ／ｓｅｃの見かけのＭＤＣＫ−ＬＥ透過性２８，３４）、低溶解度、Ｐ−ｇｐおよびＢＣＲＰによる腸内の能動排出の潜在可能性、ならびに胃腸管における消化酵素によるアミド加水分解の潜在可能性の組合せに起因している可能性が高い。ラット、イヌおよびサルにおいては、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのおよそ１０％がそのまま尿中に排出され、ヒトにおけるＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドのクリアランスにおいて、腎排出も小さい役割を果たし得ることが示された。
【0336】
ＩＶ投与に適したヒト薬物動態の予測。ヒトインビトロ代謝データ、ならびにラット、イヌおよびサルにおけるインビボ薬物動態（ＰＫ）データを考慮すると、Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、ヒトにおいて約６ｍＬ／分／ｋｇの血漿クリアランス（ＣＬｐ）（主にＣＹＰ、腎経路で少量）、１Ｌ／ｋｇの定常状態の分布体積（Ｖｄｓｓ）、およびおよそ２時間の半減期を示すと予測される。経口バイオアベイラビリティが限られること、排出半減期が短いこと、および遊離全身濃度を経時的に維持する必要性がある可能性が高いことに起因して、静脈内持続（ＩＶ）注入が、最適な投薬経路およびレジメンとして提案された。
【0337】
標的Ｃｅｆｆを達成するための有効標的濃度および実現可能なヒト用量の見積もり阻害指数（ＩＱ）は、いくつかのウイルス性疾患にわたって、前臨床抗ウイルス効力を診療所につなげるのに有用な計量になってきた。ＩＱは、抗ウイルスアッセイにおいて、ヒトＣｍｉｎ，ｕ非結合濃度をインビトロ非結合（血清を調整）ＥＣ５０，ｕ値で割ったものとして定義される（等式１）。
【0338】
【数1】
【0339】
一部の抗ウイルス治療は、１に近いＩＱで著しい利益を示したが、ウイルス複製を急速に制御するには、インビトロＥＣ５０よりも少なくとも１０倍高い曝露を維持することが頻繁に必要になる。臨床的に承認されているプロテアーゼ阻害剤は、タンパク質結合および作用部位曝露を考慮する場合、１〜１００のＩＱ値で投薬されるとウイルス負荷を有効に低減した。重要なことに、一般に抗ウイルス薬、具体的にはプロテアーゼ阻害剤は、１未満のＩＱで投薬されると、変異およびさらなる薬物耐性を潜在的に増大するおそれがある。
【0340】
どれほど高いＩＱ値が必要であるかは、用量応答曲線の勾配に応じて決まる。Ｈｉｌｌ係数（ｍ）およびＥＣ５０は、等式２によって、ある範囲の濃度（Ｃ）でインビトロ抗ウイルス活性に関連付けられる。
【0341】
【数2】
【0342】
Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、ＨＩＶおよびＨＣＶを標的にする臨床的プロテアーゼ阻害剤の勾配と同様に、ある範囲のインビトロ抗ウイルスアッセイにわたって高勾配（ｍ＝３）を示す。抗ウイルスＥＣ５０およびＥＣ９０濃度の間には、Ｈｉｌｌ係数１を有する抗ウイルス剤に典型的な９倍の差ではなく、２〜３倍の差しかない。したがって、ＥＣ５０値に対して相対的に小さい比（３〜１０）の曝露は、ほぼ完全なウイルス抑制に関連付けられる。
【0343】
計画された最小有効濃度（Ｃｅｆｆ）は、承認されているプロテアーゼ阻害剤の前臨床から臨床的への変換と一致するインビトロＥＣ９０に合致するように選択した。Ｎ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドは、持続注入によって投与されることが提案されたので、計画された定常状態曝露は、投薬間隔にわたって維持されたＣｍｉｎに等しい。生理的に関連する細胞型であるヒト肺癌で実施した用量応答アッセイは、０．４４μＭの平均ＥＣ９０値をもたらした。このことは、Ｐ−ｇｐ阻害剤が、肺内の実質的なＰ−ｇｐ輸送体の欠如をより良好に反映するために添加された場合の、Ｈｅｌａ−ＡＣＥ２細胞（ＥＣ９０＝０．４μＭ）およびベロ細胞系（ＥＣ９０＝０．４８〜１．６μＭ）における追加の抗ウイルスデータと一致している。さらに、抗ウイルス阻害は、一次ヒト気道上皮モデルで実施した抗ウイルス時間経過実験によって裏付けられ（予備データは、＜０．５μＭの非結合ＥＣ９０を示す）、異なる細胞型にわたってＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの一貫した内因性抗ＳＡＲＳ−ＣｏＶ−２活性を示している。したがって、提案される標的Ｃｅｆｆは、約０．５μＭである。
【0344】
肺を介する急速な血液灌流および定常状態の静脈内持続注入レジメンに起因して、遊離血漿および肺の遊離濃度は、平衡状態であると想定され、したがって、遊離血漿濃度は、疾患の主な作用部位における濃度の妥当な代替を提供する。ヒトＰＫ予測に基づくと、この曝露を達成するのに必要なＮ−（（１Ｓ）−１−｛［（（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−オキソ−１−｛［（３Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イル］メチル｝プロピル）アミノ］カルボニル｝−３−メチルブチル）−４−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボキサミドの最小有効用量は、静脈内持続注入として投与される３２０ｍｇ／日である。有効性のために必要な投薬期間は、不確定のままであり、ヒトにおいて評価する必要がある。レムデシビルからの臨床結果に基づくと、患者の転帰を改善するためには、１０日までの投薬期間が必要となり得る。
【0345】
本明細書で先に記載されるすべての特許文書および論文は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本発明を、様々な好ましい実施形態および具体例に関して記載してきたが、本発明は、先の詳細な説明によって制限されず、添付の特許請求の範囲およびそれらの等価物によって定義されると理解されるべきである。
【外国語明細書】