特開 2022-440 ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９を用いた組織特異的ゲノム操作

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】特開2022-440(P2022-440A)

(43)【公開日】2022年1月4日

(54)【発明の名称】ＣＲＩＳＰＲ−Ｃａｓ９を用いた組織特異的ゲノム操作

(51)【国際特許分類】

   C07H 3/10 20060101AFI20211203BHJP

   A61K 47/60 20170101ALI20211203BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20211203BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20211203BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20211203BHJP

   A61P 7/04 20060101ALI20211203BHJP

   A61P 7/10 20060101ALI20211203BHJP

   C12N 15/09 20060101ALN20211203BHJP

【ＦＩ】

   C07H3/10CSP

   A61K47/60ZNA

   A61P1/16

   A61P3/06

   A61P3/10

   A61P7/04

   A61P7/10

   C12N15/09 110

   C12N15/09 Z

【審査請求】有

【請求項の数】30

【出願形態】ＯＬ

【全頁数】301

(21)【出願番号】特願2021-149816(P2021-149816)

(22)【出願日】2021年9月15日

(62)【分割の表示】特願2018-524347(P2018-524347)の分割

【原出願日】2016年11月9日

(31)【優先権主張番号】62/254,652

(32)【優先日】2015年11月12日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】62/384,660

(32)【優先日】2016年9月7日

(33)【優先権主張国】US

(71)【出願人】

【識別番号】510069249

【氏名又は名称】ファイザー・インコーポレイテッド

(71)【出願人】

【識別番号】504438118

【氏名又は名称】ザ リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティー オブ カリフォルニア

【氏名又は名称原語表記】ＴＨＥ ＲＥＧＥＮＴＳ ＯＦ ＴＨＥ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＣＡＬＩＦＯＲＮＩＡ

(74)【代理人】

【識別番号】100127926

【弁理士】

【氏名又は名称】結田 純次

(74)【代理人】

【識別番号】100140132

【弁理士】

【氏名又は名称】竹林 則幸

(72)【発明者】

【氏名】スピロス・リラス

(72)【発明者】

【氏名】ヴィンセント・マスチッティ

(72)【発明者】

【氏名】アーロン・ベンジャミン・トゥマ

(72)【発明者】

【氏名】ジェニファー・エー・ドードゥナ

(72)【発明者】

【氏名】ロマン・ルーエ

【テーマコード（参考）】

4C057

4C076

【Ｆターム（参考）】

4C057AA18

4C057BB02

4C076AA95

4C076CC16

4C076CC21

4C076EE23

4C076EE59

(57)【要約】      （修正有）

【課題】化合物、組成物、及びその遺伝子標的化剤としての使用を提供する。
【解決手段】特定のエポキシ糖を有する化合物、組成物、それらの、疾患、状態、及び／または障害の治療のための使用、ならびにアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）標的化剤としてのそれらの使用を提供する。
【選択図】図１

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【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ａ−１）、（Ａ−２）、もしくは（Ａ−３）の化合物：

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

またはその医薬的に許容される塩であって、
式中、
Ｒ^xxは、−Ｈ、−アルキル、−シクロアルキル、−アルケニル、−アルキニル、−アリール、−ヘテロアリール、−ＯＲ⁵、−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＳＲ⁵であり、前記Ｒ^xxの−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記Ｒ^xxの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）か
ら選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、各々、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
Ｒ^yyは、−ＣＮ、−ＣＨ₂−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ₂−Ｎ₃、−ＣＨ₂−ＮＨ₂、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₂−ＯＨ、−ＣＨ₂−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−
Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、
−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ
（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−
Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ₂、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換され、
各Ｒ¹は、独立して、−ＣＮ、−ＣＨ₂−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ₂−Ｎ₃、−ＣＨ₂−Ｎ
Ｈ₂、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₂−
ＯＨ、−ＣＨ₂−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂
−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ
）−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｒ⁵、−
ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（
Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ₂、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（
Ｒ⁴）−Ｒ⁵、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換されるか、
または、Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｚ−
Ｘ^-Ｙ⁺、−Ｘ^-Ｙ⁺、もしくは−Ｙであり、
Ｘは、リンカーであり、
Ｘ⁺は、正に荷電したリンカーであり、
Ｘ^-は、負に荷電したリンカーであり、
Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドを含むリボ核タンパク質もしくはエンドヌクレアーゼであるか、Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドであるか、Ｙは、Ｃａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙは、Ｃａｓ９タンパク質であるか、Ｙは、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）であるか、Ｙは、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃ
ｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｙ⁺は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ⁺は、正に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ⁺は、正に荷電したＣａｓ９タンパク質であり、
Ｙ^-は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ^-は、負に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ^-は、負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙ^-は、負に荷電したｓｇＲＮＡであるか、Ｙ^-は、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮ
Ａ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｚは、存在しないか、または、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｓ−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ_2-Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、またはア
リールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換され、
Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｎ₃、−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ
（Ｏ）−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ³、
テトラゾール、またはトリアゾールであり、前記テトラゾール及びトリアゾールは、任意にＲ³で置換され、
各Ｒ³は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、
ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ₂−
基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基
と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基
は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つ
の炭素原子で離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は
、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ
原子と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−
ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ⁵は、独立して、−Ｈ、（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル
、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルであり、前記シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基または前記アルキルの１〜２０個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子と交換さ
れてもよく、前記ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択さ
れるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい、前記化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項2】

式（Ｂ）の化合物：

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

またはその医薬的に許容される塩であって、
式中、
Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｚ−Ｘ^-Ｙ⁺、
−Ｘ^-Ｙ⁺、または−Ｙであり、
Ｘは、リンカーであり、
Ｘ⁺は、正に荷電したリンカーであり、
Ｘ^-は、負に荷電したリンカーであり、
Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドを含むリボ核タンパク質もしくはエンドヌクレアーゼであるか、Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドであるか、Ｙは、Ｃａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙは、Ｃａｓ９タンパク質であるか、Ｙは、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）であるか、Ｙは、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｙ⁺は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ⁺は、正に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ⁺は、正に荷電したＣａｓ９タンパク質であり、
Ｙ^-は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ^-は、負に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ^-は、負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙ^-は、負に荷電したｓｇＲＮＡであるか、Ｙ^-は、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮ
Ａ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｚは、存在しないか、または、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｓ−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ_2-Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、またはア
リールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換され、
Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｎ₃、−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ
（Ｏ）−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ³、
テトラゾール、またはトリアゾールであり、前記テトラゾール及びトリアゾールは、任意にＲ³で置換され、
各Ｒ³は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、
ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ₂−
基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基
と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴
、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基
は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つ
の炭素原子で離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は
、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ
原子と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−
ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ⁵は、独立して、−Ｈ、（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル
、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルであり、前記シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基または前記アルキルの１〜２０個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子と交換さ
れてもよく、前記ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択さ
れるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい、前記化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項3】

Ｒ²が−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ₃である、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項4】

Ｒ¹が−Ｚ−Ｘ−Ｙである、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項5】

Ｒ¹が、Ｌ１〜Ｌ１０：

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

からなる群から選択される−Ｚ−Ｘ−Ｙである請求項４に記載の化合物であって、
ここで、各Ｔは、独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１つ以上の炭
素基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘ
テロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、ここで、アルキレン、アルケニレン、及びアルキニレンは、各々独立して、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは、独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、もしくは
Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、
及びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つの炭素原子で離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）２、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である、前記化合物。

【請求項6】

前記Ｘがジスルフィド結合を含む、請求項５に記載の化合物。

【請求項7】

式（Ｃ−１）、（Ｃ−２）、（Ｃ−３）、もしくは（Ｃ４）：

【化5】

[この文献は図面を表示できません]

の式を有する請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩であって、
式中、
ｎは１、２、または３であり、
Ｗは、存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_mであり、
各Ｔは、独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１つ以上の炭素基は、
各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子
基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、ここで、アルキレン、アルケニレン、及びアルキニレンは、各々独立して、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは、独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、もしくは
Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、
及びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つの炭素原子で離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）か
ら選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項8】

式（Ｅ）：

【化6】

[この文献は図面を表示できません]

の式を有する請求項２に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩であって、
式中、
ｎは１、２、または３であり、
Ｗは、存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_mであり、
各Ｔは、独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１つ以上の炭素基は、
各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子
基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、
各Ｑは、独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、もしくは
Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、
及びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つの炭素原子で離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）か
ら選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項9】

前記化合物が、式

【化7】

[この文献は図面を表示できません]

を有し、ｎ’が１または２である、請求項８に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項10】

Ｙが、Ｃａｓ９リボ核タンパク質であり、これが、（１）ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列、またはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）のいずれかを含む認識要素を含む第一の要素であって、前記ガイド配列は、発現時、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質の配列特異的結合を標的配列に向けるものであり、任意に１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む前記第一の要素、ならびに（２）Ｃａｓ９タンパク質ならびに任意に１つ以上の核局在配列（ＮＬＳ）及び任意に１つ以上の蛍光タンパク質、ならびに１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む第二の要素を含み、前記第一の要素が前記第二の要素に会合している、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項11】

Ｙが、１つまたは２つのＮＬＳを含み、前記ＮＬＳの各々が、アミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む、請求項１０に記載の化合物。

【請求項12】

前記Ｙが、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、またはＡ．ｅｂｒｅｕｓ由来のＣａｓ９タンパク質に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項13】

前記Ｙが、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９（野生型）（配列番号８４８）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ（配列番号８４９）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ及びＣ８０Ｓ（配列番号８５０）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｄ１０Ａ（配列番号８５１）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｈ８４０Ａ（配列番号８５２）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｅ９２３Ｐ及びＴ９２４Ｐ（配列番号８５３）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ ｅｂｒｅｕｓ Ｃａｓ９（配列番号８５４）、酸性鉱山排水細菌Ｇａ００５２１６１＿ＪＧＩ Ｃａｓ９（配列番号８５５）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ヌル変異体Ｄ１０Ａ及びＨ８４０Ａ（配列番号１０２７）、ならびにウラン鉱山細菌ＦＷ１０６＿ＪＧＩ Ｃａｓ９（配列番号８５６）から選択される配列に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少な
くとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項14】

前記化合物が、さらにエンドソーム脱出剤を含む、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項15】

前記エンドソーム脱出剤が、ペプチドｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０１２）である、請求項１４に記載の化合物。

【請求項16】

請求項１または２に記載の化合物及びエンドソーム脱出剤を含む組成物であって、前記化合物及び前記エンドソーム脱出剤が、前記組成物を形成するために共インキュベートされる、前記組成物。

【請求項17】

請求項１または２に記載の化合物、及び医薬的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤を含む、医薬組成物。

【請求項18】

対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態の治療方法であって、治療有効量の請求項１７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項19】

前記疾患もしくは状態が、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

対象の肝臓細胞における標的ＤＮＡの転写を選択的に調節する方法であって、請求項１７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項21】

対象における肝臓疾患または状態と関連するタンパク質をコードする核酸分子を編集する方法であって、請求項１６に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項22】

対象における肝臓疾患または状態と関連する少なくとも１つの遺伝子産物のレベルの発現を調節する方法であって、請求項１７に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項23】

リボ核タンパク質及びエンドソーム脱出剤を含む組成物。

【請求項24】

前記リボ核タンパク質が、Ｃａｓ９リボ核タンパク質またはＣｐｆ１リボ核タンパク質である、請求項２３に記載の組成物。

【請求項25】

請求項２３に記載の組成物及び医薬的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤を含む医薬組成物。

【請求項26】

対象における疾患または状態の治療方法であって、治療有効量の請求項２５に記載の医
薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項27】

対象の細胞における標的ＤＮＡの転写を選択的に調節する方法であって、請求項２５に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項28】

対象における疾患または状態と関連するタンパク質をコードする核酸分子を編集する方法であって、請求項２５に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【請求項29】

対象における疾患または状態と関連する少なくとも１つの遺伝子産物のレベルの発現を調節する方法であって、請求項２５に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
本出願は、２０１５年１１月１２日に出願された米国仮特許出願第６２／２５４，６５２号及び２０１６年９月７日に出願された米国仮特許出願第６２／３８４，６６０号の利益ならびに優先権を主張する。当該仮特許出願の各々は、参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットにて電子的に提出した、参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる配列表を含む。２０１６年１０月７日に作成された当該ＡＳＣＩＩコピーは、名称がＰＣＦＣ−９８９−ＷＯ１＿ＳＬ．ｔｘｔであり、サイズは８，０３６，１６１バイトである。

【0003】

発明の分野
本発明は、化合物、組成物、及びその遺伝子標的化剤としての使用に関する。

【背景技術】

【0004】

生物活性剤を特定の組織、細胞、及び／または細胞内部位に送達するための試薬ならびに方法の開発にはかなりの注意が向けられている。例えば、アンチセンスもしくはＲＮＡｉ分子またはタンパク質等の大きな分子の送達は、かかる化合物が一般に細胞膜を透過することができないために困難であり、通過できる場合、それらは多くの場合、目的の組織に対する選択性を欠いており、ひいては、オフターゲット薬理のリスクを増加させ、深刻な安全上の懸念をもたらす。さらに、標的化送達部位への選択的薬物送達は、細胞透過性の分子が多くの場合選択的でないために、しばしば困難である。細胞拡散及び標的化送達に対する１つの解決策は、標的化剤への薬物のコンジュゲーションである。

【0005】

遺伝子治療では、ほとんどの遺伝子編集剤は、多くの場合、アデノウィルスやアデノ随伴ウイルス等のウイルス由来ベクターに封入されたプラスミドＤＮＡを介して送達されている。残念なことに、このタイプの方法は、患者にとって深刻な問題、主に、ｉ）挿入変異のリスクの増大、ｉｉ）ウイルスベクターとクッパー細胞との相互作用による肝毒性のリスクの増大、及びｉｉｉ）標的細胞に対する免疫原性応答によって引き起こされる患者にとっての一時的のみの薬理学的効果という問題を抱えている。その結果、遺伝子編集剤を送達するためのより効果的かつより安全な方法を見出す必要性が残っている。これまでのところ、試みは捉えどころがなく、これに関連して、タンパク質の形態でありかつそのＤＮＡでもＲＮＡでもない形態での遺伝子編集剤の送達は、膨大な治療機会を意味する。

【0006】

標的化剤は、多くの場合、薬物動態及び薬力学を含む薬学的特性を向上させる。標的化剤は、当該標的化剤に結合された薬物ペイロードを、効率的に特定の細胞へ分配するようにし、かつ特定の細胞が取り込むようにする。ある特定の糖、例えばガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ならびにｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ、１３４、１９７８（２０１２）においてＭ．Ｇ． Ｆｉｎｎ及びＶ． Ｍａｓｃｉｔｔｉらによって記載されているものを含めた他のガラクトース誘導体は、肝細胞の表面に存在するアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）に結合するため、肝細胞に対する標的化剤として使用されている。

【0007】

薬物送達に関するさらなる問題として、受容体依存性エンドサイトーシスの機序において、エンドソームの取り込み経路は、標的細胞内部位への生物活性剤の送達に対する律速
バリアであることが知られている。生物活性分子は、多くの場合、エンドソーム小胞に捕捉され、リソソーム区画にて分解される。各種試薬、例えば、クロロキン、ポリエチレンイミン［ＰＥＩ］、ある特定の多価カチオン化合物、膜融合ペプチド、及び不活化アデノウィルスは、エンドソームを迅速に破壊し、送達される生物活性剤がエンドソーム様環境にて費やす時間を最小限にすることを目的として開発されている。しかしながら、これらの薬剤は、しばしば普遍性を欠き、当該カーゴのエンドソーム脱出を促進する能力が最適以下であり、毒性問題を含む様々な不利益と関連する。

【0008】

従って、汎用的で生体適合性の細胞送達システムが、遺伝子標的化及び治療薬の送達の臨床的成功にとって重要であろう。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明の一態様は、式（Ａ−１）、（Ａ−２）、もしくは（Ａ−３）の化合物：

【化1】

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またはその医薬的に許容される塩を提供し、
式中、
Ｒ^xxは、−Ｈ、−アルキル、−シクロアルキル、−アルケニル、−アルキニル、−アリール、−ヘテロアリール、−ＯＲ⁵、−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＳＲ⁵であり、該Ｒ^xxの−ＣＨ₂
−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基と
交換されてもよく、該Ｒ^xxの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から
選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、シクロアルキル、アルケニル、及びアルキニルは、各々独立して、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
Ｒ^yyは、−ＣＮ、−ＣＨ₂−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ₂−Ｎ₃、−ＣＨ₂−ＮＨ₂、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₂−ＯＨ、−ＣＨ₂−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−
Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、
−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ
（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−
Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ₂、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、該アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換され、
各Ｒ¹は、独立して、−ＣＮ、−ＣＨ₂−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ₂−Ｎ₃、−ＣＨ₂−Ｎ
Ｈ₂、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₂−
ＯＨ、−ＣＨ₂−ＳＨ、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂
−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ
）−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｒ⁵、−
ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（
Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ₂、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（
Ｒ⁴）−Ｒ⁵、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、該アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換されるか、
または、Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｚ−
Ｘ^-Ｙ⁺、−Ｘ^-Ｙ⁺、もしくは−Ｙであり、
Ｘは、リンカーであり、
Ｘ⁺は、正に荷電したリンカーであり、
Ｘ^-は、負に荷電したリンカーであり、
Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドを含むリボ核タンパク質もしくはエンドヌクレアーゼであるか、Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドであるか、Ｙは、Ｃａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙは、Ｃａｓ９タンパク質であるか、Ｙは、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）であるか、Ｙは、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｙ⁺は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ⁺は、正に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ⁺は、正に荷電したＣａｓ９タンパク質であり、
Ｙ^-は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ^-は、負に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ^-は、負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙ^-は、負に荷電したｓｇＲＮＡであるか、Ｙ^-は、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮ
Ａ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｚは、存在しないか、または、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｓ−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ_2-Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、またはア
リールもしくはヘテロアリールであり、該アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換され、
Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｎ₃、−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ
（Ｏ）−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ³、
テトラゾール、またはトリアゾールであり、該テトラゾール及びトリアゾールは、任意にＲ³で置換され、
各Ｒ³は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、
ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、またはハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニルであり、該アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ₂−基
は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基と
交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少
なくとも２つの炭素原子で離間されており、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つ
の炭素原子で離間された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、
各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原
子と交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は
、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ⁵は、独立して、−Ｈ、（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル
、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルであり、該シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基または該アルキルの１〜２０個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子と交換されて
もよく、該ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテ
ロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい。

【0010】

本発明の別の態様は、式（Ｂ）の化合物：

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

またはその医薬的に許容される塩を提供し、
式中、
Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｚ−Ｘ^-Ｙ⁺、
−Ｘ^-Ｙ⁺、または−Ｙであり、
Ｘは、リンカーであり、
Ｘ⁺は、正に荷電したリンカーであり、
Ｘ^-は、負に荷電したリンカーであり、
Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドを含むリボ核タンパク質もしくはエンドヌクレアーゼであるか、Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドであるか、Ｙは、Ｃａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙは、Ｃａｓ９タンパク質であるか、Ｙは、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）であるか、Ｙは、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｙ⁺は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ⁺は、正に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ⁺は、正に荷電したＣａｓ９タンパク質であり、
Ｙ^-は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したリボ核タンパク質もしくはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ^-は、負に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、
Ｙ^-は、負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙ^-は、負に荷電したｓｇＲＮＡであるか、Ｙ^-は、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮ
Ａ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｚは、存在しないか、または、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｓ−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ_2-Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、またはア
リールもしくはヘテロアリールであり、該アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換され、
Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｎ₃、−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ
（Ｏ）−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ³、
テトラゾール、またはトリアゾールであり、該テトラゾール及びトリアゾールは、任意に
Ｒ³で置換され、
各Ｒ³は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、
ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、該アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ₂−基
は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基と
交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少
なくとも２つの炭素原子で離間されており、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つ
の炭素原子で離間された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、
各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原
子と交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は
、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ⁵は、独立して、−Ｈ、（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル
、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルであり、該シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基または該アルキルの１〜２０個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子と交換されて
もよく、該ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテ
ロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい。

【0011】

本発明の別の態様は、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患が挙げられるがこれらに限定されない、対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態を治療するための、本明細書に記載の化合物または組成物の有効量を投与することを含む方法を含む。いくつかの実施形態では、該疾患または状態は、高脂血症、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。

【0012】

本発明の別の態様は、対象の肝臓細胞における標的ＤＮＡの転写を選択的に調節するための方法であって、該ＤＮＡは、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患が挙げられるがこれらに限定されない、対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態と関連しており、本明細書に記載の化合物または
組成物の有効量を投与することを含む方法を提供する。

【0013】

本発明の別の態様は、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患等であるがこれらに限定されない、対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態と関連するタンパク質をコードする核酸分子を編集するための、本明細書に記載の化合物または組成物の有効量を投与することを含む方法を含む。

【0014】

本発明の別の態様は、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患等であるがこれらに限定されない、肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態と関連する少なくとも１つの遺伝子産物のレベルの発現を調節するための、本明細書に記載の化合物または組成物の有効量を投与することを含む方法を含む。

【0015】

本発明の別の態様は、本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及びエンドソーム脱出剤を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）または該エンドソーム脱出剤は、抗体にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）は、グリコシル化部位を含むように修飾される。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）は、形質導入または転座ドメインを含むように修飾される。

【0016】

本発明の別の態様は、Ｃａｓ９リボ核タンパク質及びエンドソーム脱出剤を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質または該エンドソーム脱出剤は、抗体にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質は、グリコシル化部位を含むように修飾される。いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質は、形質導入または転座ドメインを含むように修飾される。

【0017】

本発明の別の態様は、（ｉ）本明細書に記載の通り、Ｃａｓ９リボ核タンパク質及びエンドソーム脱出剤を含む組成物、ならびに（ｉｉ）医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、または担体を含む医薬組成物を含む。

【0018】

本発明の別の態様は、Ｃｐｆ１リボ核タンパク質及びエンドソーム脱出剤を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、該Ｃｐｆ１リボ核タンパク質または該エンドソーム脱出剤は、抗体にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、該Ｃｐｆ１リボ核タンパク質は、グリコシル化部位を含むように修飾される。いくつかの実施形態では、該
Ｃｐｆ１リボ核タンパク質は、形質導入または転座ドメインを含むように修飾される。

【0019】

本発明の別の態様は、（ｉ）本明細書に記載の通り、Ｃｐｆ１リボ核タンパク質及びエンドソーム脱出剤を含む組成物、ならびに（ｉｉ）医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、または担体を含む医薬組成物を含む。

【0020】

本発明の別の態様は、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼疾患及び障害から選択されるがこれに限定されない疾患または状態を治療するための、本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物を投与することを含む方法を含む。

【0021】

本発明の別の態様は、対象の標的ＤＮＡの転写を選択的に調節するための方法であって、該ＤＮＡは、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼疾患及び障害から選択されるがこれに限定されない疾患または状態と関連しており、本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物を投与することを含む方法を含む。

【0022】

本発明の別の態様は、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼疾患及び障害から選択されるがこれに限定されない疾患または状態と関連するタンパク質をコードする核酸分子を編集するための、本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物を投与することを含む方法を含む。

【0023】

本発明の別の態様は、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼疾患及び障害から選択されるがこれに限定されない疾患または状態と関連する少なくとも１つの遺伝子産物の発現レベルを調節するための、本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物を投与することを含む方法を含む。

【0024】

本発明の別の態様は、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）の部位特異的エンドヌクレアーゼ的開裂のための方法であって、本明細書に記載の化合物、ＲＮＰ、または組成物を、プロトスペーサー隣接モチーフ（ＰＡＭ）提示オリゴヌクレオチド（ＰＡＭｍｅｒ）の存在下投与することを含む方法を提供する。

【0025】

本発明の別の態様は、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）の部位特異的エンドヌクレアーゼ的開裂のための方法であって、本明細書に記載の通り、ＣＲＩＳＰＲ／ＣａｓタイプＩＩＩ−Ｂ Ｃｍｒ複合体を含む化合物もしくはＲＮＰ、またはその組成物を投与することを含む方法を提供する。

【0026】

前述の一般的説明及び以下の詳細な説明の両方は、例示及び説明に過ぎず、請求項にか
かる本発明を限定するものではないことを理解されたい。

【図面の簡単な説明】

【0027】

【図1】ＳＨＥＬＸＴＬプロッティングパッケージを使用し、５０％の信頼水準で描かれる楕円体を用いてプロットした、化合物２３についての精密結晶構造を表す。

【図2】図２Ａ〜２Ｌは、ＲＮＰ構築物の顕微鏡的画像解析の結果を表す。図２Ａ〜２Ｃ：ＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１（Ａ）のＨｅｐＧ２細胞における取り込みは、いくつかの表面結合が依然として明らかな細胞内の点によって示されるように、６０分以内にはっきりとわかる。リソソームはデキストラン６４７（Ｂ）で標識し、核はＨｏｅｃｈｓｔ（Ｃ）で標識する。図２Ｄ〜２Ｆ：ＲＮＰ構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１（Ｄ）は、６０分で細胞表面の染色のみしか示さず、内在化の証拠はない。リソソームはデキストラン６４７（Ｅ）で標識し、核はＨｏｅｃｈｓｔ（Ｆ）で標識する。図２Ｇ〜２Ｉ：ＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１（Ｇ）は、細胞内の点によって示されるように、２０時間までにＨｅｐＧ２細胞に完全に内在化される。リソソームはデキストラン６４７（Ｈ）で標識し、核はＨｏｅｃｈｓｔ（Ｉ）で標識する。図２Ｊ〜２Ｌ：ＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１（Ｊ）は、６０分以内にＳＫ−Ｈｅｐ細胞表面に蓄積し、内在化の証拠を示さない。リソソームはデキストラン６４７（Ｋ）で標識し、核はＨｏｅｃｈｓｔ（Ｌ）で標識する。

【図3】図３Ａ及び３Ｂは、Ｃａｓ９構築物の質量分析を表す。図３Ａは、Ｃａｓ９構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍの質量分析を表す。図３Ｂは、Ｃａｓ９構築物Ｙ５３Ａａｓｇｐｒｌの質量分析を表す。

【図4】５０ｐｍｏｌのＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１またはＹ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１及び増加する濃度のｐｐＴＧ２１エンドソーム溶解ペプチド（６２．５、２５０、１０００、及び２０００ｎＭ）の存在下（共インキュベーション）で処理したＨｅｐＧ２及びＳｋＨｅｐ細胞におけるＥＭＸ１の編集の結果を表す。ＲＮＰ構築物のＲＮＰ単独処理及びリポフェクション処理は、対照として含めた。

【図5】５０ｐｍｏｌのＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ４及び増加する濃度のｐｐＴＧ２１エンドソーム溶解ペプチド（２５０及び１０００ｎＭ）の存在下（共インキュベーション）で処理したＨｅｐＧ２及びＳｋＨｅｐ細胞におけるＰＣＳＫ９のエクソン４及び５の編集の結果を表す。

【図6-1】例示的なＣａｓ９、Ｃａｓ９構築物、ＲＮＰ、ＲＮＰ構築物、及びＣｐｆ１の配列を示す。

【図6-2】図６−１の続き。

【図6-3】図６−２の続き。

【図6-4】図６−３の続き。

【図6-5】図６−４の続き。

【図6-6】図６−５の続き。

【図6-7】図６−６の続き。

【図6-8】図６−７の続き。

【図6-9】図６−８の続き。

【図6-10】図６−９の続き。

【図6-11】図６−１０の続き。

【図6-12】図６−１１の続き。

【図6-13】図６−１２の続き。

【図6-14】図６−１３の続き。

【発明を実施するための形態】

【0028】

詳細な説明
定義
本発明は、以下の本発明の例示的な実施形態の詳細な説明及びそこに含まれる実施例を参照することによりさらにいっそう容易に理解され得る。

【0029】

本明細書で別段の定義のない限り、本出願で使用される科学及び技術用語は、当業者によって一般に理解される意味を有するものとする。概して、本明細書に記載の化学、細胞及び組織培養、分子生物学、細胞及びがん生物学、神経生物学、神経化学、ウイルス学、免疫学、微生物学、薬理学、遺伝学、ならびにタンパク質及び核酸化学に関連して使用される用語体系、ならびにこれらの技術は、当技術分野で周知のものであり、当技術分野で一般に使用されているものである。

【0030】

本発明の方法及び技術は、別段の指示がない限り、概して、当技術分野で周知の従来の方法に従い、本明細書全般にわたって引用及び論じられている各種一般的ならびにより具体的な参考文献に記載の通りに行われる。例えば、”Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｎｅｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，”ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（２０００）、Ｍｏｔｕｌｓｋｙ，”Ｉｎｔｕｉｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ，”Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．（１９９５）、Ｌｏｄｉｓｈ ｅｔ ａｌ．，”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．，”Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（２０００）、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ ｅｔ ａｌ．，”Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ，７ｔｈ ｅｄ．，”Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．（１９９９）、及びＧｉｌｂｅｒｔ ｅｔ ａｌ．，”Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ
Ｂｉｏｌｏｇｙ，６ｔｈ ｅｄ．，”Ｓｉｎａｕｅｒ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｕｎｄｅｒｌａｎｄ，ＭＡ（２０００）を参照されたい。

【0031】

本明細書で使用される化学用語は、”Ｔｈｅ ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｒｍｓ，”Ｐａｒｋｅｒ Ｓ．，Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃ．Ａ．（１９８５）等の、当技術分野における従来の用法に従って使用される。

【0032】

本出願で言及されるすべての刊行物、特許、及び公開特許出願は、参照することにより本明細書に具体的に組み込まれる。矛盾する場合には、その具体的な定義を含めて、本明細書が優先される。

【0033】

本明細書全般にわたり、単語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ（含む）」またはその変形、例えば、「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ（含む）」もしくは「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含む）」は、述べられた完全体（もしくは成分）または完全体（もしくは成分）の群の包含を意味するが、いかなる他の完全体（もしくは成分）または完全体（もしくは成分）の群の排除も意味しないと理解される。

【0034】

単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他を指示しない限り複数形を含む。

【0035】

「含む」という用語は、「〜を含むがこれに限定されない」ということを意味するために使用される。「含む」及び「〜を含むがこれに限定されない」は、互換的に使用される。

【0036】

本明細書に記載の本発明の各実施形態は、単独で用いてもよいし、本発明の１つ以上の他の実施形態と組み合わせて用いてもよい。

【0037】

「ａｇｅｎｔ（剤）」という用語は、本明細書において、化合物（例えば、有機もしく
は無機化合物（例えば、本発明の化合物等）、化合物の混合物）、生体高分子（例えば、核酸、抗体、その一部、ヒト化、キメラ、及びヒト抗体ならびにモノクローナル抗体、タンパク質もしくはその一部、例えば、ペプチド、脂質、炭水化物）、または、細菌、植物、真菌、もしくは動物（特に哺乳類）細胞もしくは組織等の生物材料からなる抽出物を意味するために使用される。剤には、例えば、構造に関して既知の剤、及び構造に関して未知の剤が含まれる。

【0038】

「患者」、「対象」、または「個体」は、互換的に使用され、ヒトまたは非ヒト動物のいずれかを指す。これらの用語は、哺乳類、例えば、ヒト、霊長類、家畜動物（ウシ、ブタ等を含む）、コンパニオン・アニマル（例えば、イヌ、ネコ等）、ならびにげっ歯類（例えば、マウス及びラット）を含む。

【0039】

本化合物、組成物、及び方法を開示及び記載する前に、本発明が、当然ながら様々であり得る具体的な合成製造方法に限定されないことを理解されたい。また、本明細書で使用される術語は、特定の実施形態を説明するのみの目的のためであり、限定することを意図しないことも理解されたい。複数形及び単数形は、数の表示以外、互換的に扱われるべきである。

【0040】

本明細書で使用される、「アルキル」という用語は、一般式Ｃ_nＨ_2n+1の炭化水素ラジ
カルを指す。該アルカンラジカルは、直鎖でも分岐でもよい。例えば、「（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子を含む一価の直鎖、または分岐脂肪族基（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、１−メチルブチル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、ネオペンチル、３，３−ジメチルプロピル、ヘキシル、２−メチルペンチル等）を指す。同様に、アルコキシ、アシル（例えば、アルカノイル）、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルホニル、及びアルキルチオ基のアルキル部（すなわち、アルキル部分）も、上記と同じ定義を有する。「任意に置換される」ものとして示される場合、該アルカンラジカルまたはアルキル部分は、未置換でもよいし、「置換される」に対する定義において以下に記載する置換基の群から独立して選択される１つ以上の置換基（一般に、パークロロまたはパーフルオロアルキル等のハロゲン置換基の場合以外は１〜３個の置換基）で置換されてもよい。「ハロ置換アルキル」とは、１つ以上のハロゲン原子で置換されたアルキル基（例えば、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、パーフルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル等）を指す。

【0041】

同様に、「アルキレン」は、直鎖でも分枝でもよい一般式Ｃ_nＨ_2nの二価炭化水素ラジ
カルを指す。

【0042】

「アルケニル」という用語は、１つ以上の炭素間二重結合を有する一価不飽和炭化水素ラジカルを指す。該アルケニル部分は、直鎖でも分岐でもよい。例示的なアルケニル基としては、エチレニルが挙げられる。本明細書で使用される、「アルケニレン」は、１つ以上の炭素間二重結合を有する二価不飽和炭化水素ラジカルを指し、これは直鎖でも分岐でもよい。

【0043】

「アルキニル」という用語は、１つ以上の炭素間三重結合を有する一価不飽和炭化水素ラジカルを指す。該アルキニル部分は、直鎖でも分岐でもよい。

【0044】

本明細書で使用される、「アルキニレン」は、直鎖でも分岐でもよい、１つ以上の炭素間三重結合を有する二価不飽和炭化水素ラジカルを指す。

【0045】

「アリール」という用語は、１、２、または３つの環を含む炭素環式芳香族系を意味し
、かかる環は縮合していてもよい。該環が縮合している場合、該環の１つは完全に不飽和でなければならず、縮合された環（複数可）は、完全に飽和でも、部分的に不飽和でも、完全に不飽和でもよい。「縮合された」という用語は、第二の環が、第一の環と共通に２つの隣接する原子を有する（すなわち、共有する）ことで存在する（すなわち、結合または形成される）ことを意味する。「ｆｕｓｅｄ（縮合された）」という用語は、「ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ（縮合された）」という用語と同意義である。「アリール」という用語は、ベンジル、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−３（４Ｈ）−オニル、２，３−ジヒドロ−１Ｈインデニル、及び１，２，３，４−テトラヒドロナフタレニル等の芳香族ラジカルを包含する。

【0046】

「シクロアルキル」という用語は、完全に水素化され、単環、二環、またはスピロ環として存在し得る非芳香環を指す。特に定めのない限り、該炭素環は、一般に３〜２０員環である。例えば、シクロアルキルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、ノルボルニル（ビシクロ［２．２．１］ヘプチル）、ビシクロ［２．２．２］オクチル等の基が挙げられる。

【0047】

「ヘテロアリール」という用語は、酸素、窒素、及びイオウから独立して選択される１、２、３、または４個のヘテロ原子を含み、１、２、または３個の環を有し、かかる環が縮合されていてもよい芳香族炭素環系を意味する。縮合は上記で定義されている。「ヘテロアリール」という用語には、フリル、チエニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ピリジニル、ピリジアジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリジン−２（１Ｈ）−オニル、ピリダジン−２（１Ｈ）−オニル、ピリミジン−２（１Ｈ）−オニル、ピラジン−２（１Ｈ）−オニル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、５，６，７，８−テトラヒドロイソキノリニル、５，６，７，８−テトラヒドロキノリニル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジニル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｃ］ピリジニル、１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｃ］ピラゾリル、２，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｃ］ピラゾリル、５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾリル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−ピロロ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアゾリル、５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジニル、４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−インダゾリル、及び４，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−インダゾリルが含まれるがこれらに限定されない。

【0048】

「薬物送達システム」という用語は、治療有効量のリガンドを送達する手段を指し、これに含まれるのは、ＰＥＧ（ポリ（エチレングリコール）メチルエーテル）、ＰＥＧ−ＰＬＡ（ポリ（エチレングリコール）メチルエーテル−ポリ（Ｄ，Ｌラクチド））、ＰＥＧ−ＰＬＧＡ（ポリ（エチレングリコール）メチルエーテル−ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド））、及びＰＥＧ−ＰＣＬ（ポリ（エチレングリコール）−ポリ（ε−カプロラクトン）メチルエーテル）等のポリマー、量子ドット（Ｑドット）、リポソーム、免疫リポソーム、ミセル、ナノ粒子、ならびにナノゲルであるがこれらに限定されない。例示的な薬物送達システムは、すべての目的のため、参照することにより本明細書に組み込まれる、Ｔｉｗａｒｉ，Ｇ．，”Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ：ａｎ Ｕｐｄａｔｅｄ Ｒｅｖｉｅｗ”，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｉｎｖｅｓｔｉｇ ２（１）ｐ．２−１１（Ｊａｎ ２０１２）に記載されている。

【0049】

「小分子」という用語は、合成化合物及び天然産物が挙げられるがこれらに限定されない１００〜２，０００ダルトンの分子量を有する有機化合物を意味する。

【0050】

「抗体」は、当該免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介した、標的、例えば、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチド等に対する特異的結合が可能な免疫グロブリン分子である。本明細書で使用される該用語は、インタクトなポリクローナルまたはモノクローナル抗体だけでなく、そのフラグメント（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ）、一本鎖（ｓｃＦｖ）及びドメイン抗体）、ならびに抗体部分を含む融合タンパク質、ならびに抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の修飾配置を包含する。抗体には、任意のクラスの抗体、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、もしくはＩｇＭ（またはそのサブクラス）が含まれ、該抗体は、特定のクラスのものである必要はない。その重鎖の定常ドメインの抗体アミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスに割り当てることができる。５つの主要な免疫グロブリンのクラス、すなわち、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭがあり、これらのいくつかは、さらにサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２に分けられる場合がある。該異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、及びミューと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造及び三次元配置は周知である。

【0051】

本明細書で使用される、「モノクローナル抗体」は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、換言すれば、該集団を構成する個々の抗体は、少量存在する可能性がある、起こり得る自然発生突然変異以外は同一である。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、単一の抗原部位に向けられる。さらに、異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を通常含むポリクローナル抗体製剤とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に向けられる。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体集団から得られる抗体の特徴を示し、特定の方法によって抗体を産生する必要があるとは解釈されない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，１９７５，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５に最初に記載されたハイブリドーマ法によって作製されてもよいし、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているような組換えＤＮＡ法によって作製されてもよい。該モノクローナル抗体はまた、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２−５５４に記載の技術を用いて生成されるファージライブラリから単離してもよい。

【0052】

抗体の「可変領域」とは、抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を、単独または組合せのいずれかで指す。当技術分野で知られるように、重鎖及び軽鎖の可変領域は各々、超可変領域を含む３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）でつながれた４つのフレームワーク領域（ＦＲ）からなる。各鎖のＣＤＲは、ＦＲによって他方の鎖のＣＤＲとごく接近して保持され、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。ＣＤＲの決定に関しては、少なくとも２つの技術、すなわち、（１）異種間配列変化に基づく方法（すなわち、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，（５ｔｈ ｅｄ．，１９９１，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ ＭＤ））、及び（２）抗原抗体複合体の結晶学的研究に基づく方法（Ａｌ−ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．２７３：９２７−９４８）がある。本明細書で使用されるＣＤＲは、どちらかの方法によって、または両方の方法の組合せによって定義されるＣＤＲを指す可能性がある。

【0053】

当技術分野で知られるように、抗体の「定常領域」とは、抗体軽鎖の定常領域または抗体重鎖の定常領域を、単独または組合せのいずれかで指す。

【0054】

「治療有効量」という表現は、本明細書に記載の、（ｉ）特定の疾患、状態、もしくは
障害を治療する、（ｉｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害の１つ以上の症状を軽減、改善、もしくは除去する、または（ｉｉｉ）特定の疾患、状態、もしくは障害の１つ以上の症状の発現を予防もしくは遅延する本発明の化合物の量を意味する。

【0055】

「動物」という用語は、ヒト（男性または女性）、コンパニオン・アニマル（例えば、イヌ、ネコ、及びウマ）、食料源の動物、動物園の動物、海産動物、鳥類、ならびに他の同様の動物種を指す。「食用動物」とは、ウシ、ブタ、ヒツジ、及び家禽等の食料源の動物を指す。

【0056】

「医薬的に許容される」という表現は、当該物質または組成物が、化学的及び／または毒性学的に、製剤を構成する他の成分、及び／またはそれによって治療される哺乳類と適合しなければならないことを示す。

【0057】

「ｔｒｅａｔｉｎｇ（治療）」、「ｔｒｅａｔ（治療する）」、または「ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（治療）」という用語は、予防的、すなわち、予防のための治療及び姑息的治療の両方を包含する。

【0058】

本明細書で使用される、「医薬的に許容される担体」または「医薬的に許容される賦形剤」には、活性成分と組み合わされた場合に該成分が生物活性を維持できるようにし、かつ、当該対象の免疫系と反応しない任意の物質が含まれる。例としては、標準的な医薬担体のいずれか、たとえば、リン酸緩衝生理食塩水、水、油／水エマルション等のエマルション、及び種々のタイプの湿潤剤が挙げられるがこれらに限定されない。エアロゾルまたは非経口投与用の好ましい希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）または生理（０．９％）食塩水である。かかる担体を含む組成物は、周知の従来法で処方される（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ
ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１９９０、及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄ．，Ｍａｃｋ
Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，２０００参照）。

【0059】

「本発明の化合物」という用語は、（別段に明確に特定されない限り）、本明細書に記載の式のいずれかの化合物、ならびにそれらのすべてのエナンチオマー、互変異性体、及び同位体標識化合物を指す。本発明の化合物の水和物及び溶媒和物は、該化合物がそれぞれ水または溶媒と会合している本発明の組成物と見なされる。該化合物はまた、１つ以上の結晶状態、すなわち、共結晶、多形で存在する場合もあり、それらは無定形固体として存在する場合もある。すべてのかかる形態は、特許請求の範囲に包含される。

【0060】

「リンカー」という用語は、１つ以上の他の化学基を少なくとも１つの共有結合を介してつなぐ化学基である。該リンカーとしては、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル等が挙げられるがこれらに限定されない１つ以上のスペーサー基を挙げることができる。該リンカーは、電荷中性でも、電荷陽性でも、電荷陰性でもよい。さらに、該リンカーは、該リンカーを該リンカー内の別の化学基につなぐ、またはリガンドに結合している該リンカーの共有結合が、ある特定の条件下で破壊または開裂され得るように、開裂可能であってもよい（例えば、Ｈ．Ｂｒｕｙｅｒｅ，ｅｔ ａｌ．，”Ｔｕｎｉｎｇ ｔｈｅ ｐＨ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｅｓｔｅｒ ｂａｓｅｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｂｙ Ｓｉｍｐｌｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ”，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
Ｌｅｔｔｅｒｓ，２０，２２００（２０１０）及びＡ．Ａ．Ｋｉｓｌｕｋｈｉｎ ｅｔ
ａｌ．，”Ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｏｘａｎｏｒｂｏｒｎａｄｉｅｎｅ Ｒｅａｇｅｎｔｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ，１３４， ６４９１（２０１２）参照。これらの条件としては、ｐＨ、温度、塩濃度、触媒、または酵素が挙げられる（Ｇ．Ｍ．Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．，”Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ Ｂ−Ｌａｂｉｌｅ Ｄｉｐｅｐｔｉｄｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｆｏｒ Ｌｙｓｏｓｏｍａｌ Ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ ｆｒｏｍ Ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚｉｎｇ Ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：Ｍｏｄｅｌ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｒｅｌｅａｓｅ ａｎｄ Ａｎｔｉｇｅｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｃｔｉｖｉｔｙ”，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１３， ８５５（２００２），Ｇ．Ｌｅｒｉｃｈｅ ｅｔ ａｌ．，”Ｃｌｅａｖａｂｌｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ”，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０， ５７１（２０１２），Ｃ．Ｐ．Ｒ． Ｈａｃｋｅｎｂｅｒｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，”Ｃｈｅｍｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｌｉｇａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ
ｆｏｒ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ”，Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ Ｃｈｅｍｉｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｄｉｔｉｏｎ，４７， １００３０（２００８）、Ｄ．Ｍ．Ｐａｔｔｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，”Ｆｉｎｄｉｎｇ ｔｈｅ Ｒｉｇｈｔ（Ｂｉｏｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ） Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，ＡＣＳ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，９， ５９２（２０１４）、Ｃ．Ａ．Ｂｌｅｎｃｏｗｅ ｅｔ ａｌ．，”Ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｖｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｉｎ Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ”，Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２，
７７３（２０１１）。上記刊行物の開示は、すべての目的のため、参照することによりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。

【0061】

いくつかの実施形態では、該リンカーは、細胞内条件下で開裂可能であり、その結果、該リンカーの開裂で、式Ａ及びＢの化合物から当該リガンド単位が細胞内環境で放出される。いくつかの実施形態では、該リンカーは、細胞内環境（例えば、リソソームもしくはエンドソームまたはカベオラ（ｃａｖｅｏｌｕｓ）内）に存在する開裂剤によって開裂可能である。開裂可能なリンカーの一例は、酵素的に開裂されるリンカー、すなわちペプチジルリンカーであり、これは、リソソームプロテアーゼもしくはエンドソームプロテアーゼが挙げられるがこれに限定されない細胞内ペプチダーゼまたはプロテアーゼ酵素によって開裂される。いくつかの実施形態では、該ペプチジルリンカーは、少なくとも２アミノ酸長または少なくとも３アミノ酸長である。酵素的開裂剤としては、カテプシンＢ及びＤならびにプラスミンが挙げられ、これらはすべて、ジペプチド薬物誘導体を加水分解し、当該標的細胞内での活性薬物の放出をもたらすことが知られている（Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ，Ｇｅｎｅ Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｃａｔｈｅｐｓｉｎ Ｂ−Ｌａｂｉｌｅ Ｄｉｐｅｐｔｉｄｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｆｏｒ Ｌｙｓｏｓｏｍａｌ Ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２００２， １３， ８５５−８６９参照）。かかるリンカーには、すべての目的のため、参照することによりそれらの全体が本明細書に組み込まれる上記刊行物に記載のもの等のペプチド及びジペプチドが含まれる。

【0062】

他の開裂可能なリンカーは、求核／塩基性試薬、還元試薬、光照射、及び求電子／酸性試薬によって開裂され得る。例えば、Ｌｅｒｉｃｈｅ，Ｇｅｏｆｆｒａｙ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｅａｖａｂｌｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０（２０１２）５７１−５８２を参照されたい。

【0063】

さらに別の実施形態では、該リンカー単位は、開裂可能ではなく、薬物は、式Ａ及びＢ
の化合物から分解によって放出される。この過程は、しばしば自壊性脱離と呼ばれ、エントロピー及び熱力学によって行われる環化または電子カスケード反応によって作用する。開裂可能でないリンカーの一例は、ベンジル位で脱離基にコンジュゲートするアミノ基もしくはヒドロキシル基または他の電子供与基を備えた多置換の電子豊富な芳香族種である（Ｂｌｅｎｃｏｗｅ，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｖｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｉｎ Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１， ２， ７７３−７９０参照）。自壊性脱離リンカーとしては、アニリン系リンカー、Ｎ−ヒドロキシアニリン系リンカー、フェノール系リンカー、１，８−脱離系リンカー、環化系リンカー（すなわち、ヒドロキシル系リンカー、アミノ系リンカー、及びチオール系リンカー）、ポリマー−デンドロンコンジュゲート、ならびにポリマーコンジュゲート（すなわち、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）−メタクリルアミド（ＨＰＭＡ）ポリマーコンジュゲート、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ポリマーコンジュゲート）が挙げられるがこれに限定されない（Ｉ．Ｔｒａｎｏｙ−Ｏｐａｌｉｎｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｖｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｆｏｒ Ｔｕｒｎ ｏｕｒ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｐｒｏｄｒｕｇ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ Ａｇｅｎｔｓ ｉｎ
Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８， ８， ６１８−６３７、Ｂｌｅｎｃｏｗｅ，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｌｆ−ｉｍｍｏｌａｔｉｖｅ Ｌｉｎｋｅｒｓ ｉｎ Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１， ２， ７７３−７９０参照）。

【0064】

通常、該リンカーは、細胞外環境では実質的に開裂しない。本明細書で使用される、リンカーとの関連での「細胞外環境では実質的に開裂しない」とは、Ｘ−Ｙ基を含む式Ａ及びＢの化合物の試料における該リンカーの２０％以下、通常は約１５％以下、より通常は約１０％以下、さらにより通常は約５％以下、約３％以下、または約１％以下が、該化合物が細胞外環境（例えば、血漿）に存在する場合に開裂することを意味する。リンカーが細胞外環境で実質的に開裂しないかどうかは、例えば、最大２４時間までの所定時間（例えば、２、４、８、１６、または２４時間）血漿とともに該化合物をインキュベートし、その後、該血漿中に存在する遊離リガンドの量を定量化することによって判定することができる。

【0065】

該リンカーは、一価、二価、または三価の分岐リンカーでよい。１つの実施形態では、該リンカーは、ジスルフィド架橋である。別の実施形態では、該リンカーは、Ｙ及びＺへの連結を示す構造Ｌ１〜Ｌ１０のいずれかである（Ｙ及びＺは、概要において示した基を表す）：

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

ここで、各Ｔは、独立して、存在しないか、またはアルキレン、アルケニレン、もしくはアルキニレンであり、該アルキレン、アルケニレン、もしくはアルキニレンの１つ以上の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキレン、アルケニレン、及びアルキニレンは、各々独立して、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは、独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、もしくは
Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が該ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及
びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つの炭素原子で離間された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ
原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３
、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である。各（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）の各Ｔ及び各Ｑは、独立して選択される。

【0066】

１つの実施形態では、Ｑは、１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、ピリジニル、及び１，２，３，４−テトラゾリルから選択されるヘテロアリールである。

【0067】

該リンカーの長さをｎの値によって調節し、標的分子への接近可能性を最適化することができる。いくつかの場合では、該リンカーの最適な長さは、薬物−標的相互作用部位または式Ａ及びＢの化合物を適切に開裂するのに必要な空間を分析することによって設計することができる。

【0068】

「遺伝的に得られた材料」とは、タンパク質、エンドヌクレアーゼ、及びクラスＩ、ＩＩ、またはＩＩＩ由来のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ（例えば、Ｃａｓ９タンパク質）、プラスミド（例えば、Ｃａｓ９タンパク質またはＣａｓ９タンパク質及びガイド配列をコードするプラスミド）、ＲＮＡ配列、例えば、ｍＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ配列、ならびにＣａｓ９リボ核タンパク質を含むことを意図する。

【0069】

本明細書で使用される、「部位特異的修飾ポリペプチド」は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓエンドヌクレアーゼまたはその誘導体（クラスＩ、ＩＩ、またはＩＩＩ由来）を指す。いくつかの実施形態では、該部位特異的修飾ポリペプチドは、クラス２のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓエンドヌクレアーゼまたはその誘導体である。いくつかの実施形態では、該部位特異的修飾ポリペプチドは、タイプＩＩのＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓエンドヌクレアーゼ、例えば、Ｃａｓ９、またはその誘導体である。いくつかの実施形態では、該部位特異的修飾ポリペプチドは、タイプＶのＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓエンドヌクレアーゼ、例えば、Ｃｐｆ１、またはその誘導体である。いくつかの実施形態では、該部位特異的修飾ポリペプチドは、タイプＩＩＩのＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓエンドヌクレアーゼである。いくつかの実施形態では、該部位特異的修飾ポリペプチドは、タイプＩＩＩ−Ｂ Ｃｍｒ複合体、例えば、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ｓｏｌｆａｔａｒｉｃｕｓ、またはＴｈｅｒｍｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ由来のタイプＩＩＩ−Ｂ Ｃｍｒ複合体である。例えば、Ｈａｌｅ，Ｃ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０１４，２８：２４３２−２４４３，及びＭａｋａｒｏｖａ Ｋ．Ｓ． ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１５， １３，
１−１５を参照されたい。

【0070】

「誘導体」とは、天然に存在するポリペプチドと実質的に同一のアミノ酸配列を有し、１つ以上のアミノ酸が、該アミノ酸の側基で修飾されている任意のポリペプチドを指す。「誘導体」という用語はまた、１つ以上のアミノ酸が天然のポリペプチド配列から欠失している、これに付加されている、またはこれから置換されているが、該天然配列に対する実質的なアミノ酸配列相同性を保持している任意のポリペプチドも含むものとする。実質的な配列相同性は、５０パーセントを超える任意の相同性である。「誘導体」はまた、Ｃａｓ９／ｍｃｈｅｒｒｙ、Ｃａｓ９／過渡ドメイン、Ｃａｓ９／エンドソーム脱出剤、及びＣａｓ９／ＮＬＳ等の融合Ｃａｓ９−蛍光ポリペプチド融合タンパク質も含むものとする。「誘導体」はまた、Ｃｐｆ１／ｍｃｈｅｒｒｙ、Ｃｐｆ１／過渡ドメイン、Ｃｐｆ１／エンドソーム脱出剤、及びＣｐｆ１／ＮＬＳ等の融合Ｃｐｆ１−蛍光ポリペプチド融合タンパク質も含むものとする。さらに、「誘導体」はまた、ポリペプチド上のグリコシル化部位突然変異等の突然変異も含むものとする。

【0071】

「リボ核タンパク質」もしくは「ＲＮＰ」または「ＲＮＰ構築物」とは、リボ核酸（ＲＮＡ）とタンパク質を結びつける会合を指す。いくつかの実施形態では、リボ核タンパク
質は、本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質は、Ｃａｓ９タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質は、Ｃｐｆ１タンパク質を含む。

【0072】

「Ｃａｓ９リボ核タンパク質」もしくは「Ｃａｓ９ ＲＮＰ」または「Ｃａｓ９ ＲＮＰ構築物」は、２つの連結した、または会合した要素、すなわち、（１）ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列、またはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）のいずれかを含む認識要素を含む第一の要素であって、該ガイド配列は、発現時、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質の配列特異的結合を標的配列に向けるものであり、また、任意に１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む該第一の要素、ならびに（２）Ｃａｓ９タンパク質ならびに任意に１つ以上の核局在配列（ＮＬＳ）及び任意に１つ以上の蛍光タンパク質を含むＣａｓ９構築物、ならびに１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む第二の要素を含み、該第一の要素は、該第二の要素に会合している。ここで、式Ａ−１、Ａ−２、Ａ−３、またはＢの本化合物が含まれる場合、当該化合物は、該ＲＮＰ構築物の第一または第二の要素のいずれかにコンジュゲートされる。

【0073】

（１）ガイド配列を含む認識要素を含む第一の要素であって、該ガイド配列は、発現時、Ｃｐｆ１リボ核タンパク質の配列特異的結合を標的配列に向けるものであり、また、任意に１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む該第一の要素、ならびに（２）Ｃｐｆ１タンパク質及び任意に１つ以上の核局在配列（ＮＬＳ）ならびに任意に１つ以上の蛍光タンパク質を含むＣｐｆ１構築物、ならびに１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む第二の要素を含み、該第一の要素が該第二の要素に会合している、「Ｃｐｆ１リボ核タンパク質」。ここで、式Ａ−１、Ａ−２、Ａ−３、またはＢの本化合物が含まれる場合、当該化合物は、該ＲＮＰ構築物の第一または第二の要素のいずれかにコンジュゲートされる。

【0074】

リボ核タンパク質のいくつかの実施形態では、該ガイド配列は、該リボ核タンパク質の配列特異的結合を細胞における標的配列に向ける。該細胞は、真核性でも原核性でもよい。いくつかの実施形態では、該第二の要素は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のＮＬＳを、アミノ末端、カルボキシ末端、またはこれらの組合せにおいて、またはその近傍に含む（例えば、アミノ末端に１つ以上のＮＬＳ及びカルボキシ末端に１つ以上のＮＬＳ）。複数のＮＬＳが存在する場合、各々は他から独立して選択されてもよく、従って、単一のＮＬＳは、複数のコピーに、及び／または１つ以上のコピーに含まれる１つ以上の他のＮＬＳとの組合せで含まれてもよい。

【0075】

「ガイドＲＮＡ配列」は、標的ポリヌクレオチド配列との相補性が、該標的配列とハイブリダイズする、及び本明細書に記載のリボ核タンパク質の配列特異的結合を該標的配列に向けるのに十分な任意のポリヌクレオチド配列である。いくつかの実施形態では、「ガイドＲＮＡ配列」は、（ｉ）標的ポリヌクレオチド配列との相補性が、該標的配列とハイブリダイズするのに十分である部分、及び（ｉｉ）部位特異的修飾タンパク質（例えば、本明細書に記載のＣａｓ９、ｃｐｆ１等）に結合し、これを該標的配列に向ける部分を有する任意のポリヌクレオチド配列である。例えば、Ｊｉｎｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１２、Ｂｒｉｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ ２０１４を参照されたい。例示的なＣａｓ９タンパク質、Ｃａｓ９ガイドＲＮＡ配列、プラスミド、及びリボ核タンパク質は、２０１４年３月６日に公開されたＵＳ２０１４００６８７９７、０１／２９／２０１５に公開されたＵＳ２０１５０３１１３４、及び３／１９／２０１５に公開されたＵＳ２０１５０７９６８１に記載されている。これら公開はすべて、すべての目的のため、それらの全体が本明細書に組み込まれる。

【0076】

いくつかの実施形態では、該ガイド配列は、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも
１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０、少なくとも２１、少なくとも２２、少なくとも２３、少なくとも２４、少なくとも２５、少なくとも２６、少なくとも２７、少なくとも２８、少なくとも２９、または少なくとも３０のヌクレオチドを含み、該ガイド配列とその対応する標的配列の間の相補性度は、適切なアラインメントアルゴリズムを用いて最適に並べた場合、約５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上であるか、または、約５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくはそれ以上を超える。最適アラインメントは、配列を並べるために任意の適切なアルゴリズムを用いて決定され得る。その非限定的な例としては、Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズム、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ−Ｗｕｎｓｃｈアルゴリズム、Ｂｕｒｒｏｗｓ−Ｗｈｅｅｌｅｒ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍに基づくアルゴリズム（例えば、Ｂｕｒｒｏｗｓ Ｗｈｅｅｌｅｒ Ａｌｉｇｎｅｒ）、ＣｌｕｓｔａｌＷ、Ｃｌｕｓｔａｌ Ｘ、ＢＬＡＴ、Ｎｏｖｏａｌｉｇｎ（Ｎｏｖｏｃｒａｆｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ＥＬＡＮＤ（Ｉｌｌｕｍｉｎａ、カリフォルニア州サンディエゴ）、ＳＯＡＰ（ｓｏａｐ．ｇｅｎｏｍｉｃｓ．ｏｒｇ．ｃｎで入手可能）、及びＭａｑ（ｍａｑ．ｓｏｕｒｃｅｆｏｒｇｅ．ｎｅｔで入手可能）が挙げられる。

【0077】

Ｃａｓ９タンパク質は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、またはＡ．ｅｂｒｅｕｓ由来でよい。いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９タンパク質は、ＨＮＨホーミングエンドヌクレアーゼドメイン及びスプリットＲｕｖＣ／ＲＮａｓｅＨエンドヌクレアーゼドメインを有する保存構造を示し、各Ｃａｓ９タンパク質は、４つの主要なモチーフ、すなわち、ＲｕｖＣ様モチーフであるモチーフ１、２、及び４、ならびにＨＮＨモチーフであるモチーフ３を共有する。Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ（配列番号８）に関しては、モチーフ１は配列番号２６０であり、モチーフ２は配列番号２６１であり、モチーフ３は配列番号２６２であり、モチーフ４は配列番号２６３である。従って、「Ｃａｓ９タンパク質配列」または「Ｃａｓ９タンパク質」とは、当該配列内に少なくとも４つのモチーフを有するアミノ酸配列を含むポリペプチドを意味し、該モチーフは、配列番号２６０〜２６３のいずれかのＣａｓ９アミノ酸配列のモチーフ１、２、３、及び４、または、配列番号１〜８２９に示すアミノ酸配列のいずれかの対応する部分に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性を有する。別の実施形態では、該Ｃａｓ９アミノ酸配列は、配列番号８のアミノ酸位置７〜１６６、もしくは７３１〜１００３、または配列番号１〜７、９〜８２９に示すものの対応するアミノ酸に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性である。

【0078】

いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９タンパク質は、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９（野生型）（配列番号８４８）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ（配列番号８４９）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ及びＣ８０Ｓ（配列番号８５０）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｄ１０Ａ（配列番号８５１）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｈ８４０Ａ（配列番号８５２）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｅ９２３Ｐ及びＴ９２４Ｐ（配列番号８５
３）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ ｅｂｒｅｕｓ Ｃａｓ９（配列番号８５４）、酸性鉱山排水細菌Ｇａ００５２１６１＿ＪＧＩ Ｃａｓ９（配列番号８５５）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ヌル変異体Ｄ１０Ａ及びＨ８４０Ａ（配列番号１０２７）、ならびにウラン鉱山細菌ＦＷ１０６＿ＪＧＩ Ｃａｓ９（配列番号８５６）から選択される。

【0079】

Ｃｐｆ１タンパク質は、Ａ．ｓｐ．、Ｌ．ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｐ．ｍａｃａｃａｅ、及びＰ．ｄｉｓｉｅｎｓ由来でよい。いくつかの実施形態では、該Ｃｐｆ１タンパク質は、Ａ．ｓｐ Ｃｐｆ１（配列番号８５７）、Ｌ．ｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｃｐｆ１（配列番号８５８）、Ｐ．ｍａｃａｃａｅ Ｃｐｆ１（配列番号８５９）、Ｐ．ｄｉｓｉｅｎｓ Ｃｐｆ１（配列番号８６０）から選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、Ｃｐｆ１タンパク質は、配列番号８５７〜８６０のいずれか１つに対して、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。

【0080】

「核局在配列」（ＮＬＳ）とは、本発明のリボ核タンパク質、例えば、Ｃａｓ−９リボ核タンパク質が真核細胞の核に入るのを助けるアミノ酸配列を指す。従って、ＮＬＳは通常、当該タンパク質表面に露出した正に荷電したリジンまたはアルギニンの１つ以上の短配列を含む。例示的なＮＬＳとしては、アミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を有するＳＶ４０ウイルスラージＴ抗原のＮＬＳ、ヌクレオプラスミン由来のＮＬＳ（例えば、配列ＫＲＰＡＡＴＫＫＡＧＱＡＫＫＫＫ（配列番号８３１）のヌクレオプラスミン二分節ＮＬＳ、アミノ酸配列ＰＡＡＫＲＶＫＬＤ（配列番号８３２）またはＲＱＲＲＮＥＬＫＲＳＰ（配列番号８３３）を有するｃ−ｍｙｃ ＮＬＳ、配列ＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号８３４）を有するｈＲＮＰＡ１ Ｍ９ ＮＬＳ、インポーチンアルファ由来のＩＢＢドメインの配列ＲＭＲＩＸＦＫＮＫＧＫＤＴＡＥＬＲＲＲＲＶＥＶＳＶＥＬＲＫＡＫＫＤＥＱＩＬＫＲＲＮＶ（Ｘは任意のアミノ酸である）（配列番号８３５）、筋腫Ｔタンパク質の配列ＶＳＲＫＲＰＲＰ（配列番号８３６）及びＰＰＫＫＡＲＥＤ（配列番号８３７）、ヒトｐ５３の配列ＰＱＰＫＫＫＰＬ（配列番号８３８）、マウスｃ−ａｂｌ ＩＶの配列ＳＡＬＩＫＫＫＫＫＭＡＰ（配列番号８３９）、インフルエンザウイルスＮＳ１の配列ＤＲＬＲＲ（配列番号８４０）及びＰＫＱＫＫＲＫ（配列番号８４１）、デルタ型肝炎ウイルス抗原の配列ＲＫＬＫＫＫＩＫＫＬ（配列番号８４２）、マウスＭｘ１タンパク質の配列ＲＥＫＫＫＦＬＫＲＲ（配列番号８４３）、ヒトポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼの配列ＫＲＫＧＤＥＶＤＧＶＤＥＶＡＫＫＫＳＫＫ（配列番号８４４）、ステロイドホルモン受容体（ヒト）グルココルチコイドの配列ＲＫＣＬＱＡＧＭＮＬＥＡＲＫＴＫＫ（配列番号８４５）、配列ＭＡＰＫＫＫＲＫＶＧＩＨＲＧＶＰ（配列番号１０３５）、ならびに配列ＰＫＫＫＲＫＶＥＤＰＫＫＫＲＫＶＤ（配列番号１０３６）由来のＮＬＳ配列が挙げられるがこれらに限定されない。

【0081】

本明細書で使用される、「Ｃａｓ９構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ」または「Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ」は、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ及びＣ８０Ｓ（アミノ酸配列）−３ＮＬＳならびにｍＣｈｅｒｒｙ（配列番号１０１５）を指す。

【0082】

本明細書で使用される、「Ｃａｓ９構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−２Ｎ」または「Ｙ１Ｃ８０Ｓ−２Ｎ」は、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ及びＣ８０Ｓ（アミノ酸配列）−２ＮＬＳ（配列番号１０１３）を指す。

【0083】

本明細書で使用される、「Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ」または「Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ」は、システインのＳ原子とのジスルフィド結合の形成を介して、システイン位置１及び５７４（２×２１６５Ｄａの添加）で、フラグメント５３ａの２つのコピーで
標識した（化合物５３を反応物として使用、さらなる詳細は実験部分を参照のこと）Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ及びＣ８０Ｓ（アミノ酸配列）−３ＮＬＳならびにｍＣｈｅｒｒｙ（配列番号１０１５）を指す：

【化5】

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【0084】

本明細書で使用される、「ＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１」または「Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１」は、（１）Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ及び（２）ＥＭＸ１シングルガイドｓｇＲＮＡ配列（配列番号９０７）のモル比１：１．２での共インキュベーションによって調製されるＲＮＰ構築物を指す。

【0085】

本明細書で使用される、「ＲＮＰ構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１」または「Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１」は、（１）Ｃａｓ９構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ及び（２）ＥＭＸ１シングルガイドｓｇＲＮＡ配列（配列番号９０７）のモル比１：１．２での共インキュベーションによって調製されるＲＮＰ構築物を指す。

【0086】

本明細書で使用される、「ＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ４」または「Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ４」は、（１）Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ及び（２）ＰＣＳＫ９のエクソン４及び５の遺伝子座（配列番号９０６）を標的とするｓｇＲＮＡのモル比１：１．２での共インキュベーションによって調製されるＲＮＰ構築物を指す。

【0087】

本明細書で使用される、「ＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ１」または「Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ１」は、（１）Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ及び（２）ＰＣＳＫ９遺伝子（配列番号８９６）を標的とするｓｇＲＮＡのモル比１：１．２での共インキュベーションによって調製されるＲＮＰ構築物を指す。

【0088】

本明細書で使用される、「エンドソーム脱出剤」は、化合物、ＤＮＡ、ｓｉＲＮＡ、ポリペプチド、またはリボ核タンパク質等の剤が細胞のエンドソームを脱出するのを容易にする剤を指す。本発明での使用のためのエンドソーム脱出剤としては、リソソーム作用剤、細胞透過性ペプチド、膜融合ペプチド、エンドソーム溶解ペプチド、細孔形成剤、及びプロトンスポンジ剤が挙げられるがこれらに限定されない。リソソーム作用剤は、弱塩基であり、プロトン化形態としてリソソームを貫通し、細胞内のｐＨを上げることができる。細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）は、通常５〜３０個のアミノ酸を備える多様なペプチドのクラスであり、細胞膜を透過することができる。膜融合ペプチドは、リン脂質膜を不安定化する短ペプチドである。細孔形成剤は、膜を通過する細孔形成を誘導し、それによってエンドソームを破壊するペプチド等の剤である。プロトンスポンジ剤は、浸透圧溶解作用（ｏｓｍｏｌｙｔｉｃ ａｃｔｉｏｎ）によってエンドソームを破壊する複数のプロトン受容体部位を有する剤である。エンドソーム溶解ペプチドは、ｐＨ依存性の膜溶解活性を示し、エンドソームの溶解または漏損を促進するポリアニオンペプチドもしくはペプチド模倣体、または生理的ｐＨで中性もしくは中性に近い電荷を有するペプチドであり得る。ある特定の実施形態では、エンドソーム溶解ペプチドは、エンドソームのｐＨでその活性立体配座をとる。該「活性」立体配座は、エンドソーム溶解成分がエンドソームの溶解及び／または本発明のモジュール組成物、もしくはその成分の、エンドソームから当該細胞の細胞質への輸送を促進する立体配座である。

【0089】

いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、ＲＮＰ構築物と会合している。他の実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、該ＲＮＰ構築物の第一または第二の要素にコンジュゲートされる。さらなる実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、式Ａ−１、Ａ−２、Ａ−３、またはＢの化合物にコンジュゲートされる。

【0090】

化合物
本発明の一態様は、概要に記載の通り、式（Ａ−１）、（Ａ−２）、もしくは（Ａ−３）の化合物：

【化6】

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またはその医薬的に許容される塩を含む。

【0091】

式（Ａ−１）、（Ａ−２）、または（Ａ−３）の化合物のいくつかの実施形態では、該部位特異的修飾ポリペプチドは、Ｃａｓ９タンパク質またはＣｐｆ１タンパク質である。式（Ａ−１）、（Ａ−２）、または（Ａ−３）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、Ｃａｓ９リボ核タンパク質、Ｃａｓ９タンパク質、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）、またはＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、Ｙ⁺は、正に荷電したＣａｓ
９タンパク質であり、Ｙ^-は、負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質、負に荷電したｓ
ｇＲＮＡ、またはＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列である。

【0092】

本発明の別の態様は、概要に記載の通り、式（Ｂ）の化合物：

【化7】

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またはその医薬的に許容される塩を提供する。

【0093】

式（Ｂ）の化合物のいくつかの実施形態では、該部位特異的修飾ポリペプチドは、Ｃａｓ９タンパク質またはＣｐｆ１タンパク質である。式（Ｂ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、Ｃａｓ９リボ核タンパク質、Ｃａｓ９タンパク質、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）、またはＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、Ｙ⁺は、正に荷
電したＣａｓ９タンパク質であり、Ｙ^-は、負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質、負
に荷電したｓｇＲＮＡ、またはＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列である。

【0094】

式（Ａ−１）、（Ａ−２）、（Ａ−３）、または（Ｂ）の化合物のいくつかの実施形態
では、Ｒ²は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ₃である。

【0095】

式（Ａ−１）、（Ａ−２）、（Ａ−３）、または（Ｂ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-である。いくつかの実施形態では、Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ^-Ｙ⁺である。いくつかの実施形態では、Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙである。いくつかの実施形態では、
Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙであり、Ｌ１〜Ｌ１０からなる群から選択される：

【化8】

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【化9】

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ここで、各Ｔは、独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、該Ｔの１つ以上の炭素
基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテ
ロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキレン、アルケニレン、及びアルキニレンは、各々独立して、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは、独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、もしくは
Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が該ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及
びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つ
の炭素原子で離間された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、
−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、アルケ
ニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である。いくつかの実施形態では、Ｑは、独立して、１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、ピリジニル、及び１，２，３，４−テトラゾリルから選択されるヘテロアリールである。

【0096】

式（Ａ−１）、（Ａ−２）、（Ａ−３）、または（Ｂ）の化合物のいくつかの実施形態では、Ｘ、Ｘ⁺、またはＸ^-は、ジスルフィド結合を含む。

【0097】

本発明の別の態様は、式（Ｃ−１）、（Ｃ−２）、（Ｃ−３）、もしくは（Ｃ４）の化合物：

【化10】

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またはその医薬的に許容される塩を提供し、
式中、
ｎは１、２、または３であり、
Ｗは、存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_m−であり、
各Ｔは、独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、該Ｔの１つ以上の炭素基は、各
々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子基
と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキレン、アルケニレン、及びアルキニレンは、各々独立して、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは、独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、もしくは
Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が該ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及
びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つ
の炭素原子で離間された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、
−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）２、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよ
く、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０であり、
その他の部分は、式（Ａ−１）、（Ａ−２）、または（Ａ−３）で定義される通りである。

【0098】

本発明の別の態様は、式（Ｄ−１）もしくは（Ｄ−２）の化合物：

【化11】

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またはその医薬的に許容される塩を提供し、
式中、Ｙは、式（Ａ−１）、（Ａ−２）、または（Ａ−３）で定義される通りである。

【0099】

本発明の別の態様は、式（Ｅ）の化合物：

【化12】

[この文献は図面を表示できません]

またはその医薬的に許容される塩を提供し、
式中、
ｎは１、２、または３であり、
Ｗは、存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_mであり、
各Ｔは、独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、該Ｔの１つ以上の炭素基は、各
々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子基
と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキレン、アルケニレン、アルキニレンは、各々独立して、１つ以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは、独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、もしくは
Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が該ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂、及
びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は、独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つ
の炭素原子で離間された該アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、
−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、該アルキルの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、該ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、該アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０であり、
その他の部分は、式（Ｂ）で定義される通りである。

【0100】

本発明の別の態様は、式（Ｆ−１）もしくは（Ｆ−２）の化合物：

【化13】

[この文献は図面を表示できません]

またはその医薬的に許容される塩を提供し、
Ｙは、式（Ｂ）で定義される通りである。

【0101】

式（Ｃ−１）、（Ｃ−２）、（Ｃ−３）、（Ｃ４）、（Ｄ−１）、（Ｄ−２）、（Ｅ）、（Ｆ−１）、または（Ｆ−２）の化合物のいくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。

【0102】

式（Ｅ）の化合物のいくつかの実施形態では、該化合物は：

【化14】

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もしくは

【化15】

[この文献は図面を表示できません]

またはその医薬的に許容される塩である。

【0103】

本発明の化合物のいくつかの実施形態では、Ｗは存在しない。いくつかの実施形態では、Ｗは、エンドソーム溶解ペプチドまたは核局在ペプチドを含むペプチドである。いくつかの実施形態では、該エンドソーム溶解ペプチドは、ｐＨ依存性の膜溶解活性を示し、エンドソームの溶解または漏損をもたらすポリアニオンペプチド模倣体、または生理的ｐＨで中性もしくは中性に近い電荷を有するペプチドであり得る。ある特定の実施形態では、該エンドソーム溶解ペプチドは、エンドソームのｐＨでその活性立体配座をとる。該「活性」立体配座は、エンドソーム溶解成分がエンドソームの溶解及び／または本発明のモジュール組成物、もしくはその成分の、エンドソームから当該細胞の細胞質への輸送を促進する立体配座である。例えば、Ｍａｒｔｉｎ Ｍ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．Ｐｅｐｔｉｄｅ−ｇｕｉｄｅｄ ｇｅｎｅ ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ｔｈｅ ＡＡＰＳ Ｊｏｕｒｎａｌ，２００７， ９（１），ａｒｔｉｃｌｅ ３を参照されたい。

【0104】

いくつかの実施形態では、Ｗは、ＣＨＫ₆ＨＣ（配列番号８６１）、Ｈ５ＷＹＧ（配列
番号１０２９）、ＧＬＦＨＡＩＡＨＦＩＨＧＧＷＨＧＬＩＨＧＷＹＧ（配列番号８６２）、及びそれらの誘導体から選択されるがこれに限定されないエンドソーム溶解ヒスチジンリッチペプチドを含むペプチドである。

【0105】

いくつかの実施形態では、Ｗは、インフルエンザＨＡ−２ペプチド、ｐｐＴＧ２１（配列番号１０１２）、Ａｕｒｅｉｎ １．２、ＧＬＦＤＩＩＫＫＩＡＥＳＦ（配列番号１０２３）、ＧＬＦＧＡＩＡＧＦＩＥＮＧＷＥＧＭＩＤＧＷＹＧ（配列番号８６３）、メリチン、ＧＩＧＡＶＬＫＶＬＴＴＧＬＰＡＬＩＳＷＩＫＲＫＲＱＱ（配列番号８６４）、ｔａｔ（４８−６０）、ＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＰＰＱ（配列番号８６５）、ペネトラチン、ＲＱＩＫＩＷＦＱＮＲＲＭＫＷＫＫ（配列番号８６６）、トランスポータン、ＧＷＴＬＮＳＡＧＹＬＬＧＫＩＮＬＫＡＬＡＡＬＡＫＫＩＬ（配列番号８６７）、ＧＡＬＡペプチド、ＷＥＡＡＬＡＥＡＬＡＥＡＬＡＥＨＬＡＥＡＬＡＥＡＬＥＡＬＡＡ（配列番号８６８）、ＫＡＬＡペプチド、ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＣＥＡ（
配列番号８６９）、ＪＳＴ−１、ＧＬＦＥＡＬＬＥＬＬＥＳＬＷＥＬＬＬＥＡ（配列番号８７０）、ｐｐＴＧ１、ＧＬＦＫＡＬＬＫＬＬＫＳＬＷＫＬＬＬＫＡ（配列番号８７１）、ｐｐＴＧ２０、ＧＬＦＲＡＬＬＲＬＬＲＳＬＷＲＬＬＬＲＡ（配列番号８７２）、及びそれらの誘導体から選択されるがこれに限定されない膜融合ペプチドを含むペプチドである。

【0106】

いくつかの実施形態では、Ｗは、Ｇｌｙ−Ａｌａリピートを備えたプロテアソームペプチド、例えば、ＣＷＫ₁₈（ＧＡ）₄（配列番号８７３）を含むペプチドである。

【0107】

いくつかの実施形態では、Ｗは、ＳＶ４０ Ｔ抗原、ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）、ＳＶ４０ Ｖｐ３、ＫＫＫＲＫ（配列番号８７４）、アデノウィルスＥ１ａ、ＫＲＰＲＰ（配列番号８７５）、ヒトｃ−ｍｙｃ、ＰＡＡＫＲＶＫＬＤ（配列番号８３２）、ＲＱＲＲＮＥＬＫＲＳＰ（配列番号８３３）、及びそれらの誘導体が挙げられるがこれらに限定されない単一分節ＮＬＳを含むペプチドである。いくつかの実施形態では、該ペプチドは、ヌクレオプラスミン、ＫＲＰＡＡＴＫＫＡＧＱＡＫＫＫＫ（配列番号８３１）、Ｘｅｎｏｐｕｓ Ｎｌ、ＶＲＫＫＲＫＴＥＥＥＳＰＬＫＤＫＤＡＫＫＳＫＱＥ（配列番号８７６）、マウスＦＧＦ３、ＲＬＲＲＤＡＧＧＲＧＧＶＹＥＨＬＧＧＡＰＲＲＲＫ（配列番号８７７）、ＰＡＲＰ、ＫＲＫＧＤＥＶＤＧＶＤＥＣＡＫＫＳＫＫ（配列番号８７８）、及びそれらの誘導体が挙げられるがこれらに限定されない二分節ＮＬＳを含む。いくつかの実施形態では、該ペプチドは、非古典的ＮＬＳ、例えば、Ｍ９ペプチド、ＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号８３４）を含む。

【0108】

いくつかの実施形態では、Ｗは、ＲＧＤペプチド、ＩＣＲＲＡＲＧＤＮＰＤＤＲＣＴ（配列番号１０３７）、インテグリン結合ペプチド、ＰＬＡＥＩＤＧＩＥＬＴＹ（配列番号１０３８）、セクレチン、ＨＳＤＧＴＦＴＳＥＬＳＲＬＲＤＳＡＲＬＱＲＬＬＱＧＬＶ（配列番号８７９）、ＧＥ７（ＥＧＦ由来）、ＮＰＶＶＧＹＩＧＥＲＰＱＹＲＤＬ（配列番号８８０）、ニューロテンシン、ＥＬＹＥＮＫＰＲＲＰＹＩＬ（配列番号８８１）、ＬＯＸ−１結合ペプチド、ＬＳＩＰＰＫＡ（配列番号８８２）、ＦＱＴＰＰＱＬ（配列番号８８３）、ＬＴＰＡＴＡＩ（配列番号８８４）、またはそれらの誘導体から選択されるがこれに限定されない細胞標的化ペプチドを含むペプチドである。

【0109】

本発明の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、Ｃａｓ９リボ核タンパク質である。いくつかの実施形態では、Ｙは、（１）ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列、またはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）のいずれかを含む認識要素を含む第一の要素であって、該ガイド配列は、発現時、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質の配列特異的結合を標的配列に向けるものである、該第一の要素、ならびに（２）Ｃａｓ９タンパク質及び任意に１つ以上の核局在配列（ＮＬＳ）を含む第二の要素を含み、該第一の要素は、該第二の要素に会合している、Ｃａｓ９リボ核タンパク質である。いくつかの実施形態では、該標的配列は、真核細胞の標的配列である。他の実施形態では、該標的配列は、原核細胞の標的配列である。

【0110】

いくつかの実施形態では、本明細書で使用される、該ｔｒａｃｒＲＮＡ、該ｃｒＲＮＡ、または該ｓｇＲＮＡは、各々任意に独立して、化学的に修飾されてもよい。適切な化学修飾としては、骨格に対する修飾、塩基に対する修飾、及び糖に対する修飾が挙げられる。例示的な化学修飾としては、ホスホロチオエート結合の使用（例えば、２つのリボヌクレオチド間の骨格リン酸上の１つの非架橋酸素原子をイオウ原子で置換することでホスホロチオエート（ＰＳ）結合ができる）、ボラノリン酸結合の使用（例えば、該非架橋酸素原子の代わりのホウ素原子の導入によるホウ素−リン結合の創出）、リボース環の２’と
４’炭素間にメチレン架橋を含むロックド核酸（ＬＮＡ）ヌクレオチドの使用、リボース糖の２’位での化学修飾（例えば、ＲＮＡ類似体の使用は、２’−Ｏ−メチルＲＮＡ、２’−Ｏ−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）ＲＮＡ、及び２’−フルオロＲＮＡを含む）、リボース環の４’炭素に結合した酸素の代わりにイオウ原子を導入することによる４’−チオ位の修飾、リボジフルオロトルイル（ｒＦ）ヌクレオチドの導入、及びＰＮＡまたはモルホリノモノマーの導入が挙げられるがこれらに限定されない。

【0111】

いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質の該第一の要素は、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列を含み、該化合物の残余は、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質に、１つ以上の各々が独立した該ｔｒａｃｒＲＮＡまたは該ｃｒＲＮＡに対する相互作用によって連結され、該ｔｒａｃｒＲＮＡまたは該ｃｒＲＮＡは、任意に化学的に修飾されてもよい。いくつかの実施形態では、該ｔｒａｃｒＲＮＡ及び該ｃｒＲＮＡを合わせてデュアルＲＮＡガイドが形成される。いくつかの実施形態では、該ｔｒａｃｒＲＮＡ−ｃｒＲＮＡデュアルＲＮＡガイドは、該デュアルＲＮＡガイド配列とその対応する標的配列の間の相補性度が、適切なアラインメントアルゴリズムを用いて最適に並べた場合、少なくとも５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。

【0112】

Ｃａｓ９リボ核タンパク質のいくつかの実施形態では、該ｔｒａｃｒＲＮＡは、配列：ＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＡＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵ（配列番号１０２８）に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性である配列を含み、該配列は、任意に、最初の３塩基の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含み、該ｔｒａｃｒＲＮＡは、任意にさらに修飾されてもよい。Ｃａｓ９リボ核タンパク質のいくつかの実施形態では、該ｔｒａｃｒＲＮＡは、配列：ＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＡＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵ（配列番号１０２８）に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性である配列を含み、該配列は、任意に、最初の３塩基に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含み、該ｔｒａｃｒＲＮＡは、任意にさらに修飾されてもよい。

【0113】

Ｃａｓ９リボ核タンパク質のいくつかの実施形態では、該ｃｒＲＮＡは、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１：
ＧＧＵＧＣＵＡＧＣＣＵＵＧＣＧＵＵＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８５）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列２：
ＣＧＵＧＣＵＣＧＧＧＵＧＣＵＵＣＧＧＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８６）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列３：
ＧＣＣＧＵＣＣＵＣＣＵＣＧＧＡＡＣＧＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列
番号８８７）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列４：
ＧＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＡＣＵＡＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８８）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列５：
ＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＡＧＧＧＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８９）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列６：
ＣＧＡＣＵＵＣＧＡＧＡＡＵＧＵＧＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９０）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列７：
ＧＡＧＵＧＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９１）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列８：
ＣＵＣＧＧＧＣＡＣＡＵＵＣＵＣＧＡＡＧＵＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９２）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列９：
ＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＡＧＡＡＧＧＣＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９３）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１０：
ＵＣＵＵＵＧＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９４）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、及び
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１１：
ＣＵＡＧＧＡＧＡＵＡＣＡＣＣＵＣＣＡＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９５）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）の任意の１つ以上に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含むものであって、該ｃｒＲＮＡは、任意にさらに化学的に修飾されてもよいものから選択される配列に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性である配列を含む。

【0114】

Ｃａｓ９リボ核タンパク質のいくつかの実施形態では、該ｃｒＲＮＡは、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１：
ＧＧＵＧＣＵＡＧＣＣＵＵＧＣＧＵＵＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８５）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列２：
ＣＧＵＧＣＵＣＧＧＧＵＧＣＵＵＣＧＧＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８６）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列３：
ＧＣＣＧＵＣＣＵＣＣＵＣＧＧＡＡＣＧＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８７）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列４：
ＧＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＡＣＵＡＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８８）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列５：
ＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＡＧＧＧＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８９）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列６：
ＣＧＡＣＵＵＣＧＡＧＡＡＵＧＵＧＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９０）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列７：
ＧＡＧＵＧＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９１）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列８：
ＣＵＣＧＧＧＣＡＣＡＵＵＣＵＣＧＡＡＧＵＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９２）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列９：
ＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＡＧＡＡＧＧＣＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９３）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１０：
ＵＣＵＵＵＧＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９４）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含む、及び
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１１：
ＣＵＡＧＧＡＧＡＵＡＣＡＣＣＵＣＣＡＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９５）、任意に、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆの修飾を含むものであって、該ｃｒＲＮＡは、任意にさらに化学的に修飾されてもよいものから選択される配列に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性である配列を含む。

【0115】

いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質の該第一の要素は、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）を含み、該化合物の残余は、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質に、該ｓｇＲＮＡに対する１つ以上の相互作用によって連結される。いくつかの実施形態では、該ｓｇＲＮＡは、２０以上のヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ｓｇＲＮＡは、少なくとも８個のヌクレオチドを含む。

【0116】

Ｃａｓ９リボ核タンパク質のいくつかの実施形態では、該ｓｇＲＮＡとその対応する標的配列の間の相補性度は、適切なアラインメントアルゴリズムを用いて最適に並べた場合、少なくとも５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８
％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。

【0117】

Ｃａｓ９リボ核タンパク質のいくつかの実施形態では、該ｓｇＲＮＡは、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列１：
ＧＧＵＧＣＵＡＧＣＣＵＵＧＣＧＵＵＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９６）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列２：
ＣＧＵＧＣＵＣＧＧＧＵＧＣＵＵＣＧＧＣＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９７）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列３：
ＧＣＣＧＵＣＣＵＣＣＵＣＧＧＡＡＣＧＣＡＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９８）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列４：
ＧＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＡＣＵＡＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９９）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列５：
ＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＡＧＧＧＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９００）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列６：
ＣＧＡＣＵＵＣＧＡＧＡＡＵＧＵＧＣＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０１）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列７：
ＧＡＧＵＧＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０２）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列８：
ＣＵＣＧＧＧＣＡＣＡＵＵＣＵＣＧＡＡＧＵＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０３）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列９：
ＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＡＧＡＡＧＧＣＣＡＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０４）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列１０：
ＵＣＵＵＵＧＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０５）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列１１：
ＣＵＡＧＧＡＧＡＵＡＣＡＣＣＵＣＣＡＣＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０６）、
ＥＭＸ１シングルガイドＲＮＡ配列：
ＧＵＣＡＣＣＵＣＣＡＡＵＧＡＣＵＡＧＧＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０７）、
ＲＯＳＡ２６シングルガイドＲＮＡ配列：
ＣＧＡＡＣＣＣＵＡＣＡＣＡＵＵＣＡＡＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０８）からなる群から選択される配列であって、任意に化学的に修飾される配列に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性を有する。

【0118】

本発明の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、Ｃｐｆ１リボ核タンパク質である。いくつかの実施形態では、Ｙは、（１）ガイド配列を含む認識要素を含む第一の要素であって、該ガイド配列は、発現時、Ｃｐｆ１リボ核タンパク質の配列特異的結合を標的配列に向けるものである該第一の要素、ならびに（２）Ｃｐｆ１タンパク質及び任意に１つ以上の核局在配列（ＮＬＳ）を含む第二の要素を含むＣｐｆ１リボ核タンパク質であり、該第一の要素は該第二の要素に会合している。いくつかの実施形態では、該標的配列は、真核細胞の標的配列である。いくつかの実施形態では、該標的配列は、原核細胞の標的配列である。

【0119】

いくつかの実施形態では、Ｃｐｆ１リボ核タンパク質は、ｃｒＲＮＡを含み、該ｃｒＲＮＡは、
ＥＭＸ１ ｃｒＲＮＡ配列（Ａｓｐ Ｃｐｆ１）：
ＵＡＡＵＵＵＣＵＡＣＵＣＵＵＧＵＡＧＡＵＵＣＡＵＣＵＧＵＧＣＣＣＣＵＣＣＣＵＣＣＣＵＧ（配列番号９０９）、
ＥＭＸ１ ｃｒＲＮＡ配列（Ｌｂａ Ｃｐｆ１）：
ＵＡＡＵＵＵＣＵＡＣＵＣＵＡＡＧＵＡＧＡＵＵＣＡＵＣＵＧＵＧＣＣＣＣＵＣＣＣＵＣＣＣＵＧ（配列番号９１０）、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１２（Ａｓｐ Ｃｐｆ１）：
ＵＡＡＵＵＵＣＵＡＣＵＣＵＵＧＵＡＧＡＵＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＵＧＧＡＡＣＣＵＧ（配列番号９１１）、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１２（Ｌｂａ Ｃｐｆ１）：
ＵＡＡＵＵＵＣＵＡＣＵＣＵＡＡＧＵＡＧＡＵＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＵＧＧＡＡＣＣＵＧ（配列番号９１２）、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１３（Ａｓｐ Ｃｐｆ１）：
ＵＡＡＵＵＵＣＵＡＣＵＣＵＵＧＵＡＧＡＵＣＣＧＧＵＧＧＵＣＡＣＵＣＵＧＵＡＵＧＣＵＧＧ（配列番号９１３）、及び
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１３（Ｌｂａ Ｃｐｆ１）：
ＵＡＡＵＵＵＣＵＡＣＵＣＵＡＡＧＵＡＧＡＵＣＣＧＧＵＧＧＵＣＡＣＵＣＵＧＵＡＵＧＣＵＧＧ（配列番号９１４）から選択される配列であって、任意に化学的に修飾される配列に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性である配列を含む。

【0120】

本明細書に記載の化合物いくつかの実施形態では、Ｙは、タイプＩＩＩ−Ｂ Ｃｍｒ複合体、例えば、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ｓｏｌｆａｔａｒｉｃｕｓ、及びＴｈｅｒｍｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ由来のタイプＩＩＩ−Ｂ Ｃｍｒ複合体である。いくつかの実施形態では、本明細書での使用に適したＣｍｒタンパク質としては、Ｈａｌｅ，Ｃ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０１４， ２８：２４３２−２４４３、及びＭａｋａｒｏｖａ Ｋ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１５， １３， １−１５に記載のものが挙げられるがこれらに限定されない。

【0121】

本明細書に記載の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、さらに蛍光プローブを含む。いくつかの実施形態では、該蛍光プローブは、ｍＣｈｅｒｒｙ配列（配列番号９１５）を含む。その他の適切な蛍光タンパク質としては、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）またはその変異体、ＧＦＰの青色蛍光変異体（ＢＦＰ）、ＧＦＰのシアン蛍光変異体（ＣＦＰ）、ＧＦＰの黄色蛍光変異体（ＹＦＰ）、高感度ＧＦＰ（ＥＧＦＰ）、高感度ＣＦＰ（ＥＣＦＰ）、高感度ＹＦＰ（ＥＹＦＰ）、ＧＦＰＳ６５Ｔ、エメラルド、トパーズ（ＴＹＦＰ）、Ｖｅｎｕｓ、Ｃｉｔｒｉｎｅ、ｍＣｉｔｒｉｎｅ、ＧＦＰｕｖ、不安定化ＥＧＦＰ（ｄＥＧＦＰ）、不安定化ＥＣＦＰ（ｄＥＣＦＰ）、不安定化ＥＹＦＰ（ｄＥＹＦＰ）、ｍＣＦＰｍ、Ｃｅｒｕｌｅａｎ、Ｔ−Ｓａｐｐｈｉｒｅ、ＣｙＰｅｔ、ＹＰｅｔ、ｍＫＯ、ＨｃＲｅｄ、ｔ−ＨｃＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ、ＤｓＲｅｄ２、ＤｓＲｅｄ−モノマー、Ｊ−Ｒｅｄ、ダイマー２、ｔ−ダイマー２（１２）、ｍＲＦＰｌ、ポシロポリン（ｐｏｃｉｌｌｏｐｏｒｉｎ）、Ｒｅｎｉｌｌａ ＧＦＰ、Ｍｏｎｓｔｅｒ ＧＦＰ、ｐａＧＦＰ、Ｋａｅｄｅタンパク質及びキンドリングタンパク質、Ｂ−フィコエリトリン、Ｒ−フィコエリトリン、及びアロフィコシアニン等のフィコビリタンパク質ならびにフィコビリタンパク質コンジュゲートが挙げられるがこれらに限定されない。蛍光タンパク質のその他の例としては、ｍＨｏｎｅｙｄｅｗ、ｍＢａｎａｎａ、ｍＯｒａｎｇｅ、ｄＴｏｍａｔｏ、ｔｄＴｏｍａｔｏ、ｍＴａｎｇｅｒｉｎｅ、ｍＳｔｒａｗｂｅｒｒｙ、ｍＣｈｅｒｒｙ、ｍＧｒａｐｅ１、ｍＲａｓｐｂｅｒｒｙ、ｍＧｒａｐｅ２、ｍＰｌｕｍ（Ｓｈａｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｎａｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２：９０５−９０９）等が挙げられる。例えば、Ｍａｔｚ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７：９６９−９７３に記載のように、花虫類種由来の各種蛍光及び有色タンパク質のいずれかが使用に適する。

【0122】

いくつかの実施形態では、Ｙは１つ以上のＮＬＳを含む。いくつかの実施形態では、Ｙは、１つ以上のＮＬＳを含み、各々は独立して、アミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を有するＳＶ４０ウイルスラージＴ抗原のＮＬＳ、ヌクレオプラスミン由来のＮＬＳ（例えば、配列ＫＲＰＡＡＴＫＫＡＧＱＡＫＫＫＫ（配列番号８３１）のヌクレオプラスミン二分節ＮＬＳ、アミノ酸配列ＰＡＡＫＲＶＫＬＤ（配列番号８３２）またはＲＱＲＲＮＥＬＫＲＳＰ（配列番号８３３）を有するｃ−ｍｙｃ ＮＬＳ、配列ＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号８３４）を有するｈＲＮＰＡ１ Ｍ９ ＮＬＳ、Ｘがインポーチンアルファ由来のＩＢＢドメインの任意のアミノ酸（配列番号８３５）である配列ＲＭＲＩＸＦＫＮＫＧＫＤＴＡＥＬＲ
ＲＲＲＶＥＶＳＶＥＬＲＫＡＫＫＤＥＱＩＬＫＲＲＮＶ、筋腫Ｔタンパク質の配列ＶＳＲＫＲＰＲＰ（配列番号８３６）及びＰＰＫＫＡＲＥＤ（配列番号８３７）、ヒトｐ５３の配列ＰＱＰＫＫＫＰＬ（配列番号８３８）、マウスｃ−ａｂｌ ＩＶの配列ＳＡＬＩＫＫＫＫＫＭＡＰ（配列番号８３９）、インフルエンザウイルスＮＳ１の配列ＤＲＬＲＲ（配列番号８４０）及びＰＫＱＫＫＲＫ（配列番号８４１）、デルタ型肝炎ウイルス抗原の配列ＲＫＬＫＫＫＩＫＫＬ（配列番号８４２）、マウスＭｘ１タンパク質の配列ＲＥＫＫＫＦＬＫＲＲ（配列番号８４３）、ヒトポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼの配列ＫＲＫＧＤＥＶＤＧＶＤＥＶＡＫＫＫＳＫＫ（配列番号８４４）、ステロイドホルモン受容体（ヒト）グルココルチコイドの配列ＲＫＣＬＱＡＧＭＮＬＥＡＲＫＴＫＫ（配列番号８４５）、配列ＭＡＰＫＫＫＲＫＶＧＩＨＲＧＶＰ（配列番号１０３５）、ならびに配列ＰＫＫＫＲＫＶＥＤＰＫＫＫＲＫＶＤ（配列番号１０３６）由来のＮＬＳ配列から選択されるがこれに限定されない。Ｙが２つ以上のＮＬＳを含む実施形態では、２つのＮＬＳの各々の間には任意に介在アミノ酸配列が存在してもよい。かかる介在配列は、１つ以上のアミノ酸残基を含んでよい。いくつかの実施形態では、Ｙは２つのＮＬＳを含み、各々がアミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む。Ｙは３つのＮＬＳを含み、各々がアミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む。

【0123】

本発明の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｓ．Ａｕｒｅｕｓ、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、またはＡ．ｅｂｒｅｕｓ由来のＣａｓ９タンパク質に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む。例えば、Ｈｏｕ ｅｔ ａｌ，ＰＮＡＳ ２０１３を参照されたい。いくつかの実施形態では、Ｙは、タイプＩＩのＣａｓ９タンパク質に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、Ｙは、配列番号８の位置７〜１６６、もしくは７３１〜１００３のアミノ酸、または配列番号１〜７、９〜８２９に示すものの対応するアミノ酸に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、Ｙは、配列番号８の位置７〜１６６、または７３１〜１００３のアミノ酸に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、Ｙは、当該配列内に少なくとも４つのモチーフを有するＣａｓ９タンパク質を含み、該モチーフは、配列番号２６０〜２６３のいずれかのＣａｓ９アミノ酸配列のモチーフ１、２、３、及び４に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性を有する。

【0124】

いくつかの実施形態では、Ｙは、タイプＩＩ−ＣのＣａｓ９タンパク質を含む。いくつ
かの実施形態では、Ｙは、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９（野生型）（配列番号８４８）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ（配列番号８４９）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ及びＣ８０Ｓ（配列番号８５０）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ
Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｄ１０Ａ（配列番号８５１）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｈ８４０Ａ（配列番号８５２）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｅ９２３Ｐ及びＴ９２４Ｐ（配列番号８５３）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ
ｅｂｒｅｕｓ Ｃａｓ９（配列番号８５４）、酸性鉱山排水細菌Ｇａ００５２１６１＿ＪＧＩ Ｃａｓ９（配列番号８５５）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ヌル変異体Ｄ１０Ａ及びＨ８４０Ａ（配列番号１０２７）、ならびにウラン鉱山細菌ＦＷ１０６＿ＪＧＩ
Ｃａｓ９（配列番号８５６）から選択される配列に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む。

【0125】

本明細書での使用に適したＣａｓ９タンパク質のいくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９タンパク質配列は、真核細胞での発現のため、または、その機能に影響を与えるように該配列に修飾を含めるため、例えばコドン最適化のように修飾され得る。いくつかの実施形態では、該Ｃａｓ９タンパク質配列は、１本または２本のＤＮＡ鎖の開裂を、例えば、ガイド配列（複数可）、例えば、該ＤＮＡ標的のセンス及びアンチセンス鎖をそれぞれ標的とし、それにより両方の鎖が切断されるようにし、非相同末端結合をもたらす２つのガイド配列と組み合わせて用いられるＣａｓ９ニッカーゼ（すなわち、Ｃａｓ９−Ｄ１０Ａ）を用いる等して、当該標的の当該位置に合わせる。Ｃａｓ９−Ｄ１０ＡとシングルガイドＲＮＡ配列は、インデルを作り出すことができる。しかしながら、他の実施形態では、該Ｃａｓ９タンパク質配列は、触媒能のないＣａｓ（ｄＣａｓ）ドメインの選択的使用等でＤＮＡ鎖の開裂活性を欠いている。他の実施形態では、該Ｃａｓ９タンパク質配列には、当該Ｃａｓ９タンパク質またはＣａｓ９リボ核タンパク質に共有結合を与えるため、リジン、グルタミン、及びシステイン残基修飾が挙げられる修飾がなされる。さらに他の実施形態では、該Ｃａｓ９リボ核タンパク質は、Ｏ’Ｃｏｎｎｅｌｌ，Ｍｉｔｃｈｅｌｌ Ｒ．，ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ ＲＮＡ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｅａｖａｇｅ ｂｙ ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９，Ｎａｔｕｒｅ，２０１４， ５１６，ｐ２６３−２６６に記載のように、ＲＮＡ鎖の開裂を指揮することが可能である。

【0126】

別の実施形態では、Ｃａｓ９タンパク質は、変異残基、例えば、ヒスチジン、システイン、またはグルタミンに変異させた溶媒曝露リジンまたはアルギニン残基（触媒活性、ＤＮＡの結合、もしくはＲＮＡの結合に関与しない）を有する。

【0127】

該Ｃａｓ９タンパク質配列の修飾としては、Ｄ１０Ａ（配列番号８のアミノ酸位置１０でのアスパラギン酸からアラニン）の変異（または配列１〜８２９として示すタンパク質のいずれかの対応する変異）を挙げることができ、これは、標的ＤＮＡの相補鎖を開裂することができるが、当該標的ＤＮＡの非相補鎖の開裂能が低下している（従って、二本鎖切断の代わりに一本鎖切断をもたらす）。別の修飾は、Ｈ８４０Ａ（配列番号８のアミノ酸位置８４０でのヒスチジンからアラニン）の変異（または配列１〜８２９として示すタンパク質のいずれかの対応する変異）であり、これは、標的ＤＮＡの非相補鎖を開裂することができるが、当該標的ＤＮＡの相補鎖の開裂能が低下している（従って、二本鎖切断の代わりに一本鎖切断をもたらす）。一本鎖切断とは対照的に、二本鎖切断がある場合、非相同末端結合が生じる可能性が大幅に高いため、Ｃａｓ９のＤ１０ＡもしくはＨ８４０Ａ変異体（または配列１〜８２９として示すタンパク質のいずれかにおける対応する変異）の使用で、期待される生物学的効果を変更することができる。

【0128】

他の残基を変異させ、モチーフ１、２、３、または４からの特定のヌクレアーゼを同様に不活性化することができる。非限定的な例として、残基Ｄ１０、Ｇ１２、Ｇ１７、Ｅ７６２、Ｈ８４０、Ｎ８５４、Ｎ８６３、Ｈ９８２、Ｈ９８３、Ａ９８４、Ｄ９８６、及び／またはＡ９８７（または配列番号１〜８２９として示すタンパク質のいずれかにおける対応する変異）を修飾することができる。変異としては、置換、付加、及び欠失、またはそれらの任意の組合せを挙げることができる。いくつかの例では、該変異は、当該変異アミノ酸を別のアミノ酸、例えば、アラニンに転換する。その他の修飾としては、塩基の修飾、骨格の修飾、及び／またはヌクレオシド間結合の修飾が挙げられる。

【0129】

本発明の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍまたはＹ１Ｃ８０Ｓ−２Ｎである。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１である。いくつかの実施形態では、該化合物は、Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬである。いくつかの実施形態では、該化合物は、Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１、Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ４、またはＹ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳｌである。

【0130】

本発明の化合物のいくつかの実施形態では、Ｙは、Ａ．ｓｐ．、Ｌ．ｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｐ．ｍａｃａｃａｅ、及びＰ．ｄｉｓｉｅｎｓ由来のＣｐｆ１タンパク質に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣｐｆ１タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、Ｙは、Ａ．ｓｐ Ｃｐｆ１（配列番号８５７）、Ｌ．ｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｃｐｆ１（配列番号８５８）、Ｐ．ｍａｃａｃａｅ Ｃｐｆ１（配列番号８５９）、Ｐ．ｄｉｓｉｅｎｓ Ｃｐｆ１（配列番号８６０）から選択されるがこれに限定されないＣｐｆ１タンパク質に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣｐｆ１タンパク質を含む。

【0131】

いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、さらにエンドソーム脱出剤を含む。本発明の化合物のいくつかの実施形態では、該化合物のＹ部分は、さらにエンドソーム脱出剤を含む。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、該化合物の残余に１つ以上の共有結合を介して連結される。いくつかのエンドソームの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、該化合物の残余と、例えば、静電相互作用を介して会合している。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、本発明の化合物と共インキュベートされる。

【0132】

本発明での使用に適したエンドソーム脱出剤としては、リソソーム作用剤、細胞透過性ペプチド、膜融合ペプチド、エンドソーム溶解ペプチド、細孔形成剤、及びプロトンスポンジ剤が挙げられるがこれらに限定されない。

【0133】

リソソーム作用剤は、弱塩基であり、プロトン化形態としてリソソームを透過し、細胞内のｐＨを上げることができる。本出願での使用に適したリソソーム作用剤としては、クロルプロマジン、アマンタジン、４−アミノキノリン、アミオダロン、アモジアキン、アジスロマイシン、クロロキン、クリンダマイシン、Ｎ−（３−［（２，４−ジニトロフェニル）−アミノ］−プロピル）−Ｎ−（３−アミノプロピル−メチルアミン）二塩酸塩（ＤＡＭＰ）、イミプラミン、メチルアミン、モネンシン、モノダンシルカダベリン、ＮＨ₄Ｃｌ、ペルヘキシレン、フェニルアラニンメチルエステル、プリマキン、キナクリン、
スラミン、チオリダジン、チロロン、トリブチルアミン、フマル酸ケトチフェン、グリセロール、及びスクロースが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、リソソーム作用剤は、クロロキン、グリセロール、またはスクロースである。

【0134】

細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）は、多様なペプチドのクラスであり、細胞膜を透過することができる通常５〜３０個のアミノ酸を備える。いくつかの実施形態では、本明細書での使用に適したＣＰＰとしては、カチオン性ＣＰＰ、両親媒性ＣＰＰ、及び疎水性ＣＰＰが挙げられる。本明細書での使用に適したＣＰＰとしては、表１に示すもの等のヘパリン結合、ＲＮＡ結合、及びＤＮＡ結合タンパク質由来のＣＰＰ、表２に示すもの等のシグナルペプチド由来のＣＰＰ、表３に示すもの等の抗微生物ペプチド由来のＣＰＰ、表４に示すもの等のウイルスタンパク質由来のＣＰＰ、表５に示すもの等の各種天然タンパク質由来のＣＰＰ、ならびに表６に示すもの等の設計されたＣＰＰ及びペプチドライブラリ由来のＣＰＰが挙げられるがこれらに限定されない。例えば、Ｍｉｌｌｅｔｔｉ，Ｆ． Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｔｏｄａｙ，Ｖｏｌｕｍｅ １７，Ｎｕｍｂｅｒｓ １５／１６， ２０１２， ８５０−８６０を参照されたい。

【表1】

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【表2】

[この文献は図面を表示できません]

【表3】

[この文献は図面を表示できません]

【表4】

[この文献は図面を表示できません]

【表5】

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【表6】

[この文献は図面を表示できません]

【表7】

[この文献は図面を表示できません]

【0135】

膜融合ペプチドは、リン脂質膜を不安定化する短ペプチドである。いくつかの実施形態では、膜融合ペプチドは、２０〜３０個のアミノ酸を含む。それらは、主に２つの主要な機序、すなわち、膜融合及び細孔形成によってエンドソーム脱出を誘発する。本明細書での使用に適した膜融合ペプチドは、インフルエンザＨＡ−２ペプチド、ＧＬＦＧＡＩＡＧＦＩＥＮＧＷＥＧＭＩＤＧＷＹＧ（配列番号８６３）、メリチン、ＧＩＧＡＶＬＫＶＬＴＴＧＬＰＡＬＩＳＷＩＫＲＫＲＱＱ（配列番号８６４）、ｔａｔ（４８−６０）、ＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＰＰＱ（配列番号８６５）、ペネトラチン、ＲＱＩＫＩＷＦＱＮＲＲＭＫＷＫＫ（配列番号８６６）、トランスポータン、ＧＷＴＬＮＳＡＧＹＬＬＧＫＩＮＬＫＡＬＡＡＬＡＫＫＩＬ（配列番号８６７）、ＧＡＬＡペプチド、ＷＥＡＡＬＡＥＡＬＡＥＡ
ＬＡＥＨＬＡＥＡＬＡＥＡＬＥＡＬＡＡ（配列番号８６８）、ＫＡＬＡペプチド、ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＣＥＡ（配列番号８６９）、ＪＳＴ−１、ＧＬＦＥＡＬＬＥＬＬＥＳＬＷＥＬＬＬＥＡ（配列番号８７０）、ｐｐＴＧ１、ＧＬＦＫＡＬＬＫＬＬＫＳＬＷＫＬＬＬＫＡ（配列番号８７１）、ｐｐＴＧ２０、ＧＬＦＲＡＬＬＲＬＬＲＳＬＷＲＬＬＬＲＡ（配列番号８７２）、及びそれらの誘導体が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、ＫＡＬＡペプチド、ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＣＥＡ（配列番号８６９）を含む。

【0136】

いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、ＣＨＫ₆ＨＣ（配列番号８６１）
、Ｈ５ＷＹＧ（配列番号１０２９）、ＧＬＦＨＡＩＡＨＦＩＨＧＧＷＨＧＬＩＨＧＷＹＧ（配列番号８６２）、及びそれらの誘導体から選択されるがこれに限定されないエンドソーム溶解ヒスチジンリッチペプチドを含む。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、Ｈ５ＷＹＧ（配列番号１０２９）、またはＧＬＦＨＡＩＡＨＦＩＨＧＧＷＨＧＬＩＨＧＷＹＧ（配列番号８６２）のペプチドを含む。

【0137】

いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、合成ペプチドである。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、構造：

【化16】

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を有するペプチドｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０１２）であり、図を明瞭にするために該ペプチド構造では水素原子を省略している。Ｒｉｔｔｎｅｒ，Ｋａｒｏｌａ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｗ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｍｂｒａｎｅ−Ｄｅｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｆｏｒ Ｐｌａｓｍｉｄ−Ｂａｓｅｄ Ｇｅｎｅ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ Ｖｉｖｏ，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＴＨＥＲＡＰＹ ５（２）１０４−１１４（２００２）を参照されたい。

【0138】

細孔形成剤は、膜を通る細孔形成を誘導し、それによってエンドソームを破壊するペプチド等の薬剤である。本明細書での使用に適した細孔形成剤としては、セクロピン（昆虫）、マガイニン、ＣＰＦ １、ＰＧＬａ、ボンビニンＢＬＰ−１（両生類由来の３種すべて）、メリチン（ハチ）、セミナルプラスミン（ウシ）、インドリシジン、バクテネシン（両方ともウシ好中球由来）、タキプレシン１（カニ）、プロテグリン（ブタ白血球）、及びデフェンシン（ヒト、ウサギ、ウシ、真菌、及び植物由来）、グラミシジンＡ及びグラミシジンＳ（ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）、ランチビオティクス、例えば、ナイシン（ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）、アンドロクトニン（サソリ）、心臓毒Ｉ（コブラ）、カエリン（カエルｌｉｔｏｒｉａ ｓｐｌｅｎｄｉｄａ）、デルマセプチン（カエル）が挙げられるがこれらに限定されない。ウイルスペプチドも同様に細孔形成活性を有することが示されており、例としては、ヘマグルチニンサブユニットＨＡ−２（インフルエンザウイルス）、Ｅ１（セムリキ森林熱ウイルス）、Ｆ１（センダイ及び麻疹ウイルス）、ｇｐ４１（ＨＩＶ）、ｇｐ３２（ＳＩＶ）、ならびにｖｐ１（ライノ、ポリオ、及びコクサッキーウイルス）が挙げられる。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、ライノウイルス由来のｖｐ１ペプチドである。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、ハチ毒由来のメリチンペプチド、またはそのマスクされた類似体である。

【0139】

プロトンスポンジ剤は、浸透圧溶解作用（ｏｓｍｏｌｙｔｉｃ ａｃｔｉｏｎ）によってエンドソームを破壊する複数のプロトン受容体部位を有する薬剤である。いくつかの実施形態では、本明細書での使用に適したプロトンスポンジ剤は、生理的ｐＨ及びリソソームのｐＨの間のｐＫａ値を有する複数のプロトン受容体部位を含む。いくつかの実施形態では、本明細書での使用に適したプロトンスポンジ剤は、４〜７の範囲内のｐＫａ値を有する複数のプロトン受容体部位を含み、このエンドソーム溶解成分はｐＨ４でポリカチオン性である。いくつかの実施形態では、該エンドソーム脱出剤は、１つ以上のヒスチジン、ヒスタミン、ビニルイミダゾール、もしくはそれらの組合せを含む化合物またはペプチド等のイミダゾール含有化合物から選択されるプロトンスポンジ剤である。いくつかの実施形態では、本明細書での使用に適したプロトンスポンジ剤としては、１つ以上の第二級または第三級アミンを有し、生理的ｐＨ及びリソソームのｐＨの間のｐＫａ値を示すポリマーが挙げられる。いくつかの実施形態では、本明細書での使用に適したプロトンスポンジ剤としては、ポリエチレンイミン、ポリアミドアミンデンドリマー、ＰＥＧ−オリゴ（グルタミン酸）−ＰＥＩ、ポリ（Ｌ−ヒスチジン）、クロロキン、メチルアミン、塩化アンモニウム等のポリマーが挙げられるがこれらに限定されない。

【0140】

別の実施形態では、記載の化合物は、肝細胞上に存在する受容体に結合することが可能である。別の実施形態では、肝細胞上に存在する該受容体は、アシアロ糖タンパク質受容体である。

【0141】

調製方法
本発明の化合物は、化学分野で周知のものと類似の過程を含む合成経路によって、とりわけ、本明細書に含まれる説明に照らして合成され得る。出発物質は、概して、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（ウィスコンシン州ミルウォーキー）等の商業的供給源から入手可能であるか、または、当業者に周知の方法を用いて容易に調製される（例えば、Ｌｏｕｉｓ Ｆ．Ｆｉｅｓｅｒ ａｎｄ Ｍａｒｙ Ｆｉｅｓｅｒ，Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｖ．１−１９，Ｗｉｌｅｙ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９６７−１９９９ ｅｄ．）、または付録を含めたＢｅｉｌｓｔｅｉｎｓ Ｈａｎｄｂｕｃｈ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ，４，Ａｕｆｌ．ｅｄ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ（バイルシュタインのオンラインデータベースでも入手可能）に一般的に記載の方法によって調製される）。

【0142】

例示の目的のため、以下に示す反応スキームは、本発明の化合物及び主要な合成中間体の可能性がある合成経路を提供する。個々の反応ステップのより詳細な説明については、以下の実施例の節を参照されたい。当業者には、他の合成経路を用いて本発明の化合物を合成してもよいことが理解されよう。特定の出発物質及び試薬が該スキームに示され、以下に論じられているが、様々な誘導体及び／または反応条件を与えるために他の出発物質及び試薬を容易に置き換えることができる。さらに、以下に記載の方法によって調製される化合物の多くは、当業者に周知の従来の化学を用いて、本開示に照らしてさらに変性することができる。

【0143】

本発明の化合物の調製において、中間体の遠隔官能基（例えば、一級または二級アミン）の保護が必要な場合がある。かかる保護の必要性は、当該遠隔官能基の性質及び当該調製方法の条件に応じて異なる。適切なアミノ保護基（ＮＨ−ＰｇまたはＮＰｇ）としては、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）、９−フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、及びフタルイミド（Ｐｈｔ）が挙げられる。「ヒドロキシ保護基」とは、ヒドロキシ官能基を封鎖または保護するヒドロキシ基の置換基を指す。適切なヒドロキシル保護基（Ｏ−Ｐｇ）としては、例えば、アリル、アセチル（Ａｃ）、シリル（トリメチルシリ（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｙ）（ＴＭＳ）またはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）等）
、ベンジル（Ｂｎ）、パラ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、トリチル（Ｔｒ）、パラ−ブロモベンゾイル、パラ−ニトロベンゾイル、及び同類のもの（１，２−または１，３−ジオールを保護するためのベンジリデン、環状ケタール、オルソエステル、オルソアミド）が挙げられる。かかる保護の必要性は、当業者によって容易に判断される。保護基及びそれらの使用の概要については、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９１を参照されたい。

【0144】

スキーム１は、本発明の化合物を与えるために使用することができる一般的な手順を概説する。スキーム１のステップ１では、Ｈ．Ｐａｕｌｓｅｎ ａｎｄ Ｍ．Ｐａａｌ ｉｎ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１３５， ５３（１９８４）に記載の手順により調製することができる合成中間体（Ｉ−ａ）を、古典的な条件下で［室温（約２３℃）にて塩化トリメチルシリル及びピリジンを用いて］パーシリル化し、続いて一級アルコールを保護しているトリメチルシリル基を選択的に開裂し（メタノール等のアルコール溶媒中、炭酸カリウム等の塩基性条件下、約−１０℃〜室温に及ぶ温度での反応により）、一級アルコール中間体（Ｉ−ｂ）を現す。スキーム１のステップ２では、中間体（Ｉ−ｃ）に見出される追加のヒドロキシメチレン基を、Ｊ．Ｒ．Ｐａｒｉｋｈ ａｎｄ
Ｗｉｌｌｉａｍ ｖ． Ｅ．Ｄｏｅｒｉｎｇ ｉｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ，８９， ５５０５−５５０７（１９６７）に記載のＰａｒｉｋｈ−Ｄｏｅｒｉｎｇ酸化と、それに続いて、水中またはアルコール溶媒中、ほぼ室温〜約６０℃に及ぶ温度で、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化ナトリウム、ナトリウムアルコキシド）の存在下、ホルムアルデヒド源（例えば、ホルムアルデヒド水溶液、固体パラホルムアルデヒド）との反応によって、このグリコシドに導入することができる。これは、アルドール・カニッツァーロ反応と呼ばれる。当業者に知られる本過程の改変形態を同様に使用してもよい。例えば、他の酸化剤、例えば、Ｏｚａｎｎｅ，Ａ．ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｌｅｔｔｅｒｓ，５， ２９０３（２００３）に記載の安定化された２−ヨードキシ安息香酸、Ｋａｎｊｉ Ｏｍｕｒａ ａｎｄ Ｄａｎｉｅｌ Ｓｗｅｒｎ ｉｎ Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，３４， １６５１（１９７８）に記載のスワーン酸化、ならびに当業者に知られる他の酸化剤も同様に使用することができる。アルドール・カニッツァーロシーケンスは、Ｒｏｂｅｒｔ Ｓｃｈａｆｆｅｒによりｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ，８１， ５４５２（１９５９）にて、及びＡｍｉｇｕｅｓ，Ｅ．Ｊ．によりＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，６３， １００４２（２００７）にて記載されている。スキーム１のステップ２の実験条件はまた、二級アルコールを保護するトリメチルシリル基の開裂も促進する。スキーム１のステップ３では、中間体（Ｉ−ｃ）を、水等の溶媒中、ほぼ室温から約１００℃に及ぶ温度で、有機もしくは無機酸（例えば、硫酸）または酸性樹脂と反応させ、化合物（１）を得る。スキーム１のステップ４では、化合物（１）を、アジド基を対応するアミンに還元することが既知の還元剤と反応させることができる（例えば、遷移金属媒介接触水素化、当業者に周知の古典的実験条件下、水中でトリフェニルホスフィン使用）。その後、アシル化剤の存在下での反応（例えば、無水酢酸または塩化アセチル、０〜８０℃に及ぶ温度で、ジクロロメタンもしくはテトラヒドロフラン等の溶媒中、ピリジンもしくはトリエチルアミンの存在下）で化合物（２）を得る。
スキーム１のステップ５では、約０〜室温に及ぶ温度で、アルコール溶媒もしくはテトラヒドロフラン等の溶媒または溶媒混合物中、アルコキシド（例えば、ナトリウムメトキシド）の存在下での化合物（２）の反応で化合物（３）を得る。さらに、このようにして得られた化合物は、その後、当業者に知られる周知の保護及び官能基の操作順序を用いて、本発明の他の請求項にかかる化合物に容易に官能化することができる。従って、スキーム１のステップ６及び７では、それぞれ化合物（１）及び（３）の二級ヒドロキシル基をさらに適切な保護基で保護し（例えば、ほぼ室温〜約９０℃に及ぶ温度で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の溶媒中、酸性条件下での２，２−ジメトキシプロパンとの反応による
環状ケタールとして）、（Ｉ−ｄ）及び（Ｉ−ｅ）等の中間体を得ることができる。次に、当業者に周知の合成変換ならびに官能基及び保護基の操作を用いて、（Ｉ−ｄ）及び（Ｉ−ｅ）をさらなる官能化及び一級ヒドロキシル基の誘導体化のために準備し、目的の所望のリンカーＸ及びリガンドＹを連結し、本発明の請求項にかかるＸＹ含有化合物を製造する。二級ヒドロキシル基を現すために当技術分野で周知の試薬及び条件を用いた保護基（例えば、Ｐｇ）の除去（例えば、２つのＰｇがアセトニド等の環状ケタールを形成する場合、酢酸、アルコール溶媒、水、テトラヒドロフラン等の溶媒または溶媒混合物中、酢酸等の酸を用いた酸性条件下、室温〜約８０℃に及ぶ温度で、それを除去することができる）で、本発明の請求項にかかるＸＹ含有化合物に至る。例えば、保護基の操作及び除去の後、（Ｉ−ｅ）の一級ヒドロキシル基のアルキル化で、本発明の請求項にかかる対応するエーテル結合のＸＹ含有化合物をもたらすことができる。本発明の請求項にかかるエステル結合、カーボネート結合、及びカルバメート結合のＸＹ含有化合物も同様に、（３）または中間体（Ｉ−ｅ）から、当業者に周知の適切な反応物及び試薬を用いて簡便に得ることができる。（Ｉ−ｅ）の一級ヒドロキシル基の対応するトリフレート（ＩＩＩ−ｅ−１）への転換、それに続く適切な求核剤での求核置換により、保護基の操作及び除去の後に、本発明の請求項にかかる対応するエーテル及びチオエーテル結合のＸＹ含有化合物をもたらすことができる。また、このチオエーテル中間体の酸化で、本発明の請求項にかかる対応するスルホキシド及びスルホン結合のＸＹ含有化合物をもたらすことができる。さらに、（ＩＩＩ−ｅ−１）の一級トリフレートのチオ酢酸カリウムによる置換と、それに続くチオエステルの加水分解で、対応するチオール（ＩＩＩ−ｅ−２）を与えることができ、これは、保護基の操作及び除去の後、化合物（ＩＶ−ｅ−１）を与え、チオール（ＩＩＩ−ｅ−２）のさらなるアルキル化ならびに保護基の操作及び除去で、本発明の請求項にかかるチオエーテル結合のＸＹ含有化合物を製造することができる。（ＩＩＩ−ｅ−２）はまた、対応するスルホニルクロリドに転換し、適切なアミンと反応させ、保護基の操作及び除去の後に本発明のスルホンアミド結合のＸＹ含有化合物を製造することができる。この一級トリフレート（ＩＩＩ−ｅ−１）はまた、アジ化ナトリウムで置換することで、対応するアジド含有化合物（ＩＩＩ−ｅ−３）を製造することができ、これは保護基の操作及び除去の後、化合物（ＩＶ−ｅ−２）を与える。化合物（ＩＩＩ−ｅ−３）の還元で、保護基の操作及び除去の後に、ＸＹ置換基を連結し、本発明の請求項にかかる化合物を製造するためのさらなる官能化（例えば、アミド結合形成、還元的アミノ化、スルホンアミド形成、尿素形成、カルバメート形成等）のための対応する一級アミン（ＩＩＩ−ｅ−４）を製造することができる。（ＩＩＩ−ｅ−４）はまた、保護基の操作及び除去の後、本発明の化合物（ＩＶ−ｅ−３）を製造することができる。上記アジド中間体（ＩＩＩ−ｅ−３）とアルキンまたはニトリル含有試薬もしくは合成中間体との反応と、それに続く、当業者に周知の条件下での保護基の操作及び除去で、それぞれ、本発明の請求項にかかるトリアゾールまたはテトラゾール結合のＸＹ含有化合物を製造することができる。
（Ｉ−ｅ）の一級ヒドロキシル基の、対応するアルデヒド（ＩＩＩ−ｅ−ｄ）への酸化と、それに続く当業者に既知の古典的条件下での適切なアミンでの還元的アミノ化、またはオレフィン化（例えば、ウィッティヒ、ホーナー・ワズワース・エモンズ、ピーターソン、ジュリア型及びそれらの改良されたもの）、それに続く形成されたオレフィンの還元（例えば、当業者に周知の金属媒介接触水素化またはジイミド介在還元を用いて）で、それぞれ、官能基の操作及び保護基の操作ならびに除去の後、本発明の請求項にかかる所望の窒素または炭素結合のＸＹ含有化合物をもたらすことができる。このアルデヒド（ＩＩＩ−ｅ−５）の対応するアルキン（ＩＩＩ−ｅ−６）への転換（コーリー・フックス型反応を用いて、またはセイファース・ギルバート型試薬を用いて）と、それに続く保護基の操作及び除去で、化合物（ＩＶ−ｅ−４）をもたらすことができる。次に、アルキン（ＩＩＩ−ｅ−６）または（ＩＶ−ｅ−４）とアジド含有試薬または合成中間体との反応と、それに続く当業者に周知の条件下での保護基の操作及び除去で、同様に、本発明の請求項にかかるトリアゾール結合のＸＹ含有化合物を製造することができる。アルキン（ＩＩＩ−ｅ−６）はまた、有用な合成中間体としても機能し、当業者に知られる金属媒介クロスカ
ップリング（例えば、薗頭型反応）下、適切な試薬との反応により、本発明の請求項にかかる他の化合物を得ることができる。当業者に周知の合成変換を用いた、（Ｉ−ｅ）の一級ヒドロキシル基の対応する酸（ＩＩＩ−ｅ−７）への酸化は、保護基の除去の後、本発明の請求項にかかるエステル及びアミド結合のＸＹ含有化合物の入手法を与える。（ＩＩＩ−ｅ−７）の保護基の操作及び除去はまた、容易に化合物（ＩＶ−ｅ−５）への入手法を与える。当業者に周知の条件下、（ＩＶ−ｅ−５）または（ＩＩＩ−ｅ−７）の対応する一級アミドへの転換は、直接化合物（ＩＶ−ｅ−６）を、または、保護基の操作及び除去の後に（ＩＶ−ｅ−６）を与える化合物（ＩＩＩ−ｅ−８）を与える。さらに、（ＩＩＩ−ｅ−８）のアミド官能基の脱水で、対応するニトリル（ＩＩＩ−ｅ−９）を与えることができ、これは、官能基の操作及び除去の後、化合物（ＩＶ−ｅ−７）を与える。一級トリフレート（ＩＩＩ−ｅ−１）のシアン化物アニオンでの置換で同様に、対応するニトリル含有化合物（ＩＩＩ−ｅ−１０）を製造することができ、これは保護基の操作及び除去の後、化合物（ＩＶ−ｅ−８）を与える。次に、（ＩＶ−ｅ−８）または（ＩＩＩ−ｅ−１０）のニトリルの加水分解で、直接酸（ＩＶ−ｅ−９）への、または、保護基の操作及び除去の後、（ＩＶ−ｅ−９）を与える（ＩＩＩ−ｅ−１１）の入手法を与えることができる。
（ＩＩＩ−ｅ−６）／（ＩＶ−ｅ−４）等のアルキン含有化合物、（ＩＩＩ−ｅ−８）／（ＩＶ−ｅ−６）等の一級アミド含有化合物、（ＩＩＩ−ｅ−９）／（ＩＶ−ｅ−７）／（ＩＩＩ−ｅ−１０）／（ＩＶ−ｅ−８）等のニトリル含有化合物、（ＩＩＩ−ｅ−７）／（ＩＶ−ｅ−５）／（ＩＩＩ−ｅ−１１）／（ＩＶ−ｅ−９）等の酸含有化合物、（ＩＩＩ−ｅ−５）等のアルデヒド含有化合物もまた、さらに官能化し、適切な試薬及び合成中間体と当業者に周知の（及び、Ｊ．Ａ．Ｊｏｕｌｅ ａｎｄ Ｋ．Ｍｉｌｌｓ，Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５^thｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ Ｅｄ．，（２０１０）、Ｊ．Ｊ．Ｌｉ，Ｎａｍｅ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｗｉｌｅｙ，（２００５）、Ｍ．Ｒ．Ｇｒｉｍｍｅｔｔ
Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７， ２４１，（１９８１）、Ｉ．Ｇ．Ｔｕｒｃｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ，７５， ３８９，（１９７５）、Ｋ．Ｔ．Ｐｏｔｔｓ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ，６１， ８７，（１９６１）、Ｒ．Ｈ．Ｗｉｌｅｙ，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，６， ３６７，（１９５１）、Ｌ．Ｂ．Ｃｌａｐｐ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０， ６５，（１９７６）、Ａ．Ｈｅｔｚｈｅｉｍ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７， １８３，（１９６７）、Ｊ．Ｓａｎｄｓｔｒｏｍ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，９， １６５，（１９６８）、Ｓ．Ｊ．Ｗｉｔｔｅｎｂｅｒｇｅｒ，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２６， ４９９，（１９９４）、Ｍ．Ｇ．Ｆｉｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ Ｃｈｅｍｉｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｄｉｔｉｏｎ，４８， ９８７９，（２００９）に要約された）条件下で反応させ、本発明の請求項にかかるさらなる５員環及び６員環（例えば、イソオキサゾール、イソチアゾール、ピラゾール、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、１，２，４−オキサジアゾール、１，２，４−チアジアゾール、１，２，４−トリアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１，３，４−チアジアゾール、テトラゾール、１，２，３−トリアゾール）結合のＸＹ含有化合物を製造することができる。本発明の請求項にかかるアリール環結合のＸＹ含有化合物も同様に、（ＩＩＩ−ｅ−６）及び（ＩＶ−ｅ−４）等のアルキンから、または、これらアルキンのヘテロ置換類似体（すなわち、（ＩＩＩ−ｅ−６）／（ＩＶ−ｅ−４）のアルキン水素をＯＲ⁴、Ｎ
（Ｒ⁴）₂、ＳＲ⁴で置換することによる。これらの化合物は、当業者に知られる条件及び
試薬を用いて得ることができる）から、当業者に知られるベンズアヌレーション反応（例えば、ダンハイザー型またはデッツ型ベンズアヌレーション）を介して得ることができる。

【0145】

化合物（３）及び（Ｉ−ｅ）について上述の同様の化学を、同様に化合物（１）及び中間体（Ｉ−ｄ）に適用し、本発明の請求項にかかるさらなる化合物を与えることができる。さらなる詳細については、実施例の節を参照されたい。

【0146】

【化17】

[この文献は図面を表示できません]

【化18】

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スキーム１のステップ４での無水トリフルオロ酢酸の使用でも同様に、Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド、すなわち、化合物（２４）の入手法を与えることができる。

【0147】

特にＲ¹が脂肪族、ＰＥＧ由来の鎖、ＰＥＧ由来のオリゴマーまたはポリマーを含む場
合、本発明の化合物を、当業者に知られる条件下、さらに官能化、反応、及び配合させ、本発明の請求項にかかるさらなる化合物を得ることができ、これらを、肝選択的薬物送達システム、例えば、生分解性ＰＬＧＡ−ｂ−ＰＥＧポリマーナノ粒子（Ｅｒｉｃａ Ｌｏｃａｔｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１４， １３１６，（２０１２）参照）及び脂質ベースのプラットフォーム、例えば、リポソーム、脂質ナノ粒子、安定な核酸脂質ナノ粒子（ＳａｒａＦａｌｓｉｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５７， １１３８（２０１４）参照）の処方に用い、組み込むことができる。

【0148】

ジアステレオマー混合物は、それらの個々のジアステレオ異性体に、それらの物理化学
的相違に基づいて、当業者に周知の方法により、例えば、クロマトグラフィー及び／または分別結晶、蒸留、昇華により分割することができる。エナンチオマーは、エナンチオマー混合物を、適切な光学活性化合物（例えば、キラルアルコールやモッシャー酸クロリド等の不斉補助剤）との反応でジアステレオマー混合物に転換し、これらのジアステレオマーを分割し、個々のジアステレオマーを対応する純粋なエナンチオマーに転換することによって分割することができる。また、本発明の化合物のいくつかは、アトロプ異性体（例えば、置換ビアリール）である場合があり、これらは本発明の一部と見なされる。エナンチオマーはまた、キラルＨＰＬＣ（高圧液体クロマトグラフィー）カラムの使用によっても分割することができる。

【0149】

本発明の中間体及び化合物は、異なる互変異性型で存在し得る可能性もあり、かかる型のすべてが本発明の範囲内に含まれる。「互変異性体」または「互変異性型」という用語は、低エネルギー障壁で相互変換可能である異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても知られる）には、プロトン転位を介した相互変換、例えば、ケト・エノール及びイミン・エナミン異性化が含まれる。プロトン互変異性体の具体例は、イミダゾール部分であり、ここでは、プロトンは２つの環窒素間を転位する場合がある。原子価互変異性体には、結合性電子の一部の再編成による相互変換が含まれる。いくつかの中間体（及び／または中間体の混合物）の閉じた型及び開いた型の間の平衡は、当業者に知られるアルドースが関与する変旋光の過程によく似ている。

【0150】

スキーム３は、本発明の化合物の調製における例示的なＣａｓ９の修飾を示し、ｎ、ｏ、ｐ、ｑ、またはｒは、出現ごとに独立して０〜５０から選択される整数である。

【化19】

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【0151】

スキーム４は、Ｃａｓ９タンパク質またはＣａｓ９リボ核タンパク質の１つ以上の他の部分へのジスルフィド結合を介した連結のための例示的な過程を示し、ｎは、出現ごとに独立して０〜５０から選択される整数である。当業者には、本明細書に示すジスルフィド結合が、他の適切な結合で置換され得ることが理解されよう。
「ＡＳＧＰＲＬ」または「ＡＳＧＰｒＬ」は、アシアロ糖タンパク質受容体のためのリガンドまたはそのデンドリマー、例えば、本発明に記載の化合物として指す。

【化20】

[この文献は図面を表示できません]

【0152】

スキーム５は、ＲＮＡがＣａｓ９タンパク質と静電相互作用を介して会合するＣａｓ９リボ核タンパク質の例示的な調製過程を示し、ｎは、出現ごとに独立して０〜５０から選択される整数である。

【化21】

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【0153】

スキーム６は、ＺがペプチドｐｐＴＧ２１であるタイプＬ１〜Ｌ１０のリンカーの例示的な合成を示し、図を明瞭にするためにこのペプチド構造では水素原子を省略している。当業者には、このペプチドｐｐＴＧ２１が、ＡＳＧＰｒＬもしくはエンドソーム溶解剤、または本明細書に記載のペプチド等の任意の小分子で置換され得ることが容易に理解されよう。

【化22】

[この文献は図面を表示できません]

【化23】

[この文献は図面を表示できません]

【化24】

[この文献は図面を表示できません]

【0154】

本発明はまた、１つ以上の原子が天然に通常見出される原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子で置換されているという事実以外は本明細書に記載のものと同一である、同位体標識された本発明の化合物も包含する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、イオウ、フッ素、ヨウ素、及び塩素の同位体、例えば、それぞれ²Ｈ、³Ｈ、¹¹Ｃ、¹³Ｃ、¹⁴Ｃ、¹³Ｎ、¹⁵Ｎ、¹⁵Ｏ、¹⁷Ｏ、¹⁸Ｏ，³¹Ｐ、³²Ｐ、³⁵Ｓ、¹⁸Ｆ、¹²³Ｉ、¹²⁵Ｉ、及び³⁶Ｃｌが挙げられる。

【0155】

本発明のある特定の同位体標識化合物（例えば、³Ｈ及び¹⁴Ｃで標識されたもの）は、
化合物及び／または基質の組織分布アッセイに有用である。トリチウム（すなわち、³Ｈ
）及び炭素１４（すなわち、¹⁴Ｃ）同位体は、それらの調製の容易さ及び検出能のために特に好ましい。さらに、重水素（すなわち、²Ｈ）等の重同位体での置換は、代謝安定性
がより高いことに起因するある特定の治療上の利点（例えば、インビボ半減期の延長または必要用量の減少）をもたらし、それ故、いくつかの状況で好ましい場合がある。陽電子放出同位体、例えば、¹⁵Ｏ、¹³Ｎ、¹¹Ｃ、及び¹⁸Ｆは、基質占有率を調べる陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）研究に有用である。本発明の同位体標識化合物は、通常、非同位体標識試薬を同位体標識試薬に置き換えることにより、本明細書で以下のスキーム及び／または実施例に開示するものと類似の以下の手順によって調製することができる。

【0156】

エンドソーム脱出剤含有組成物
本発明の別の態様は、本明細書に記載の化合物及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物を提供する。かかる組成物のいくつかの実施形態では、該化合物は、該エンドソーム脱出剤と共インキュベートされ、該組成物を形成する。

【0157】

本発明の別の態様は、本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物を提供する。かかる組成物のいくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）は、該エンドソーム脱出剤と共インキュベートされ、該組成物を形成する。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰもしくはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）または該エンドソーム脱出剤は、抗体またはそのフラグメントにコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）は、グリコシル化部位を含むように修飾される。いくつかの実施形態では、該リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）は、形質導入または転座ドメインを含むように修飾される。

【0158】

医薬組成物及び投与方法
本発明の化合物及び組成物は、疾患、状態、及び／または障害の治療に有用である。従って、本発明の別の実施形態は、本発明の治療有効量の化合物、もしくはエンドソーム脱出剤含有組成物、及び医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、または担体を含む医薬組成物である。本発明の化合物（本明細書で使用される組成物及び過程を含む）は、本明細書に記載の治療用途のための薬剤の製造にも使用される場合がある。

【0159】

本発明の医薬組成物は、液体溶液（例えば、注射用及び注入用溶液）状でよい。好ましい形態は、意図した投与方法及び治療用途に依存する。通常の医薬組成物は、注射用または注入用溶液の形態、例えば、ヒトの受動免疫法に使用されるものと同様の医薬組成物の形態である。１つの投与方法は、滅菌注射液または油性懸濁液の形態での非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、皮内、及び胸骨内）であるか、または注入技術によるものである。当業者には理解されるように、投与の経路及び／または方法は、所望の結果に応じて異なる。好ましい実施形態では、該化合物または組成物は、静脈内注入または注射によって投与される。別の好ましい実施形態では、該化合物または組成物は、筋肉内または皮下注射によって投与される。

【0160】

治療用の医薬組成物は、通常無菌であり、製造及び保存条件下で安定である。

【0161】

該医薬組成物は、溶液、マイクロエマルション、分散液、またはリポソームとして製剤化することができる。滅菌注射溶液は、本発明の化合物を必要量、適切な希釈剤中、必要に応じて上に列挙した成分の１つまたは組合せとともに組み込み、その後滅菌（例えば、濾過滅菌）することによって調製することができる。一般に、分散液は、基本的な分散媒及び上に列挙したものから必要な他の成分を含む滅菌媒体に、該活性化合物を組み込むことによって調製される。かかる懸濁液は、湿潤剤及び懸濁剤または他の許容される薬剤の適切な分散を用いて、既知の技術に従って製剤化され得る。滅菌注射製剤も同様に、非毒性の非経口的に許容される希釈剤もしくは溶剤の滅菌注射溶液または懸濁液、例えば、１，３−ブタンジオール溶液としてよい。採用され得る許容される媒体及び溶媒は、水、リンゲル液、及び等張塩化ナトリウム溶液である。さらに、滅菌不揮発油が従来溶媒または懸濁媒体として採用される。この目的のため、合成モノまたはジグリセリドを含めた任意の無刺激の不揮発油が採用され得る。さらに、ｎ−３多価不飽和脂肪酸が注射剤の調製に用途を見出す場合がある。

【0162】

滅菌注射溶液の調製用の滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、真空乾燥及び凍結乾燥であり、予め滅菌濾過されたその溶液から、活性成分に加えて任意のさらなる所望の成分の粉末が得られる。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティングの使用によって、分散体の場合は必要な粒径の維持によって、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。

【0163】

注射用医薬組成物の持続的吸収は、吸収を遅らせる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩及びゼラチンを該医薬組成物に含めることによって、または、該医薬組成物を持続的吸収形態、例えば、デポー、リポソーム、ポリマーミクロスフェア、ポリマーゲル、及びインプラントに製剤化することによってもたらすことができる。

【0164】

本明細書に記載の本発明の化合物の他の投与方法としては、対象の皮膚に直接当該薬剤を放出する皮膚パッチが挙げられる。かかるパッチは、本発明の化合物を任意に緩衝化した液体溶液中に含んでもよいし、接着剤に溶解及び／または分散された本発明の化合物を含んでも、ポリマーに分散された本発明の化合物を含んでもよい。

【0165】

該化合物は、１回投与されてもよいが、複数回投与されてもよい。例えば、該化合物は、１日１回から６か月またはそれ以上に１回投与されてもよい。該投与は、１日３回、１日２回、１日１回、２日に１回、３日に１回、毎週１回、２週間に１回、毎月１回、２か月に１回、３か月に１回、６か月に１回、１年に１回、２年に１回等のスケジュールでよい。

【0166】

該化合物は、ミニポンプで継続的に投与することもできる。該化合物は、身体の患部の部位に、または身体の患部の部位から離れた部位に投与することができる。該化合物は、１回、少なくとも２回、または少なくとも、疾患が治療され、緩和され、もしくは治癒するまでの期間、投与される場合がある。該化合物は、一般に、疾患が存在する限り、投与してよい。該化合物は、通常、上述の通り医薬組成物の一部として投与される。

【0167】

本発明の医薬組成物は、治療有効量または予防有効量の本発明の化合物を含み得る。該医薬組成物の調製において、該医薬組成物に含まれる該化合物の治療有効量は、例えば、所望の投与体積及び投与方法（複数可）、治療される状態の性質及び重症度、ならびに当該対象の年齢及びサイズを考慮に入れて決定することができる。

【0168】

本発明の医薬組成物を対象に投与するための例示的な非限定的用量範囲は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２００ｍｇ／ｋｇ（対象の体重１キログラム（ｋｇ）あたり、投与する式（Ａ）または（Ｂ）の化合物のミリグラム（ｍｇ）を単位として表す）、約０．１ｍｇ／
ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約５．０ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、または約１５ｍｇ／ｋｇである。本発明の目的では、平均的なヒト対象は、体重約７０ｋｇである。本明細書で言及する投与量のいずれかの中間にある範囲、例えば、約０．０２ｍｇ／ｋｇ〜１９９ｍｇ／ｋｇもまた、本発明の一部であることが意図される。例えば、上限及び／または下限として列挙された値のいずれかの組合せを用いた値の範囲が含まれることが意図される。

【0169】

投与計画を調整し、対象に対して経時的にいくつかに分割した用量を投与することによって所望の最適応答（例えば、治療または予防応答）を与えることもでき、または、治療状況の緊急性が示すように、該用量を比例的に減少もしくは増加させることもできる。非経口医薬組成物を投薬単位形態で製剤化することは、投与のしやすさ及び用量の均一性のために特に有利である。

【0170】

本明細書で使用される投薬単位形態とは、治療される哺乳類対象に対する単一の用量としてふさわしい物理的に別個の単位を指し、各単位は、所望の治療効果を必要な医薬担体と共同して生じるように計算された所定量の活性化合物を含む。本発明の投薬単位形態に関する仕様は、（ａ）該化合物または部分の固有の特性及び達成されるべき特定の治療または予防効果、ならびに（ｂ）個体における過敏症の治療用の当該抗体の配合の技術分野に固有の限界により決定づけられ、これらに直接依存する。

【0171】

本発明の液体医薬組成物は、単位剤形として調製することができる。例えば、バイアル当たりの単位用量は、異なる濃度の式（Ａ）または（Ｂ）の化合物を１〜１０００ミリリットル（ｍｌ）を含み得る。他の実施形態では、バイアル当たりの単位用量は、異なる濃度の式（Ａ）または（Ｂ）の化合物を約１ｍｌ、２ｍｌ、３ｍｌ、４ｍｌ、５ｍｌ、６ｍｌ、７ｍｌ、８ｍｌ、９ｍｌ、１０ｍｌ、１５ｍｌ、２０ｍｌ、３０ｍｌ、４０ｍｌ、５０ｍｌ、または１００ｍｌ含み得る。必要であれば、これらの製剤は、各バイアルに滅菌希釈剤を加えることで、所望の濃度に調整することができる。本発明の液体医薬組成物はまた、滅菌バッグまたは容器中に単位剤形として調製することもでき、これらは、静脈内投与ラインまたはカテーテルへの接続に適する。

【0172】

別の典型的な製剤は、本発明の化合物と担体、希釈剤、または賦形剤を混合することによって調製される。適切な担体、希釈剤、及び賦形剤は、当業者には周知であり、炭水化物、ワックス、水溶性及び／または膨潤性ポリマー、親水性もしくは疎水性物質、ゼラチン、油、溶媒、水等の材料を含む。使用される特定の単体、希釈剤、または賦形剤は、本発明の化合物を適用する手段及び目的によって決まる。溶媒は、一般に、哺乳類に投与するのに安全として当業者が認める（ＧＲＡＳ）溶媒を基に選択される。一般に、安全な溶媒は、水等の非毒性の水性溶媒、及び水溶性または水混和性である他の非毒性溶媒である。適切な水性溶媒としては、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ３００）等、及びそれらの混合物が挙げられる。該製剤はまた、薬物（すなわち、本発明の化合物またはその医薬組成物）の洗練された体裁を与えるため、または医薬製品（すなわち、薬剤）製造の助けを与えるため、１つ以上の緩衝剤、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、滑沢剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、酸化防止剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、及び他の既知の添加剤を含んでもよい。

【0173】

該製剤は、従来の溶解及び混合手順を用いて調製され得る。例えば、原薬物質（すなわち、本発明の化合物または該化合物の安定化形態（例えば、シクロデキストリン誘導体または他の既知の複合体形成剤との複合体））は、適切な溶媒に１つ以上の上記賦形剤の存在下で溶解される。本発明の化合物は、通常、薬の剤形に製剤化され、容易に制御できる用量の薬物を提供し、当該患者に洗練された取り扱いやすい製品を与える。

【0174】

該医薬組成物はまた、式（Ａ）または（Ｂ）の化合物の溶媒和物及び水和物を含む。「溶媒和物」という用語は、式（Ａ）または（Ｂ）で表される化合物（その医薬的に許容される塩を含む）と１つ以上の溶媒分子の分子複合体を指す。かかる溶媒分子は、レシピエントに無害であることが既知の、医薬分野で一般に使用されるもの、例えば、水、エタノール、エチレングリコール等である。「水和物」という用語は、溶媒分子が水である当該複合体を指す。該溶媒和物及び／または水和物は、好ましくは結晶形で存在する。メタノール、メチルｔ−ブチルエーテル、酢酸エチル、酢酸メチル、（Ｓ）−プロピレングリコール、（Ｒ）−プロピレングリコール、１，４−ブチン−ジオール等の他の溶媒は、より望ましい溶媒和物の調製において、中間体溶媒和物として使用され得る。該結晶形はまた、共結晶または共結晶材料の溶媒和物もしくは水和物として、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−ピログルタミン酸等の、他の無害な小分子との複合体として存在する場合もある。該溶媒和物、水和物、及び共結晶化合物は、参照することにより本明細書に組み込まれる、ＰＣＴ公開第ＷＯ０８／００２８２４号に記載の手順、または当業者に周知の他の手順を使用して調製され得る。

【0175】

適用のための該医薬組成物（または製剤）は、当該薬物の投与に用いられる方法に応じて様々な方法で包装され得る。一般に、流通用の物品は、該医薬製剤が適切な形態でその中に寄託されている容器を含む。適切な容器は、当業者に周知であり、ボトル（プラスチック及びガラス）、サッシェ、アンプル、プラスチックバッグ、金属シリンダ等の材料を含む。該容器はまた、タンパー防止構成を含み、当該包装の内容物への不用意な接触を防止してもよい。さらに、該容器は、当該容器の内容物を記載したラベルをつけている。該ラベルはまた、適切な警告を含み得る。

【0176】

方法
本出願の化合物及び組成物は、様々な疾患または状態の治療に有用である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物及び組成物は、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患が挙げられるがこれらに限定されない、対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態の治療に有用である。

【0177】

本出願の化合物及び組成物は、本明細書に記載の化合物または組成物の有効量を投与することを含む、対象の肝臓細胞における標的ＤＮＡの転写の選択的調節に有用であり、該ＤＮＡは、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患等であるがこれらに限定されない、対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態と関連している。いくつかの実施形態では、標的ＤＮＡは、ＰＣＳＫ９遺伝子である。

【0178】

本出願の化合物及び組成物は、本明細書に記載の化合物または組成物の有効量を投与す
ることを含む、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患等であるがこれらに限定されない、対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態と関連するタンパク質をコードする核酸分子の編集に有用である。

【0179】

本出願の化合物及び組成物は、本明細書に記載の化合物または組成物の有効量を投与することを含む、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア性肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性カイロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、ＩＩ型糖尿病のような高血糖、ならびにＩＩ型糖尿病に類似した異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患等であるがこれらに限定されない、対象における肝臓疾患もしくは状態、または肝臓変調疾患もしくは状態と関連する少なくとも１つの遺伝子産物のレベルの発現の調節に有用である。いくつかの実施形態では、該方法は、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）のレベルを調節する。いくつかの実施形態では、該方法は、当該対象の血中コレステロールレベルを調節する。いくつかの実施形態では、該方法は、当該対象の血中コレステロールレベルを低減する。

【0180】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法または使用に標的とされる疾患または状態は、高脂血症、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。いくつかの実施形態では、当該対象はヒトである。

【0181】

本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の本明細書に記載の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物は、対象における障害または疾患の治療に有用である。いくつかの実施形態では、当該対象はヒトである。いくつかの実施形態では、該障害または疾患は、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼疾患及び障害から選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、該血液障害または疾患は、貧血、裸リンパ球症候群、出血障害、Ｈ因子及びＨ因子様１、Ｖ、ＶＩＩＩ、ＶＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩＡ、もしくはＸＩＩＩＢ欠乏、ファンコーニ貧血、血球貪食性リンパ組織球症、血友病ＡもしくはＢ、出血性疾患、白血球欠乏症及び障害、鎌状赤血球貧血（ＨＢＢ）、ならびにサラセミアから選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、該細胞の調節不全及び腫瘍疾患または障害は、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫及び白血病から選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、該炎症及び免疫関連疾患は、ＡＩＤＳ、自己免疫性リンパ増殖性症候群、複合型免疫不全、ＨＩＶ感受性または感染症、重症複合型免疫不全から選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、該代謝性、肝臓、腎臓、またはタンパク質疾患は、アミロイド神経障害、アミロイドーシス、肝硬変、嚢胞性線維症、グリコーゲン蓄積症、肝腺腫、肝不全、肝性リパーゼ欠損症、肝芽腫、がん及び上皮性悪性腫瘍、髄質嚢胞腎疾患、フェニルケトン尿症、多発性嚢胞腎、ならびに肝疾患から選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、該筋肉または骨格疾患は、ベッカー型筋ジストロフィー、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、エメ
リ・ドレフュス型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー、筋ジストロフィー、大理石骨病、筋萎縮から選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、該神経学的及び神経疾患または障害は、ＡＬＳ、アルツハイマー病、自閉症、脆弱性Ｘ症候群、ハンチントン病及び病様障害、パーキンソン病、レット症候群、統合失調症、セクレターゼ関連疾患、ならびにトリヌクレオチド反復障害から選択されるがこれに限定されない。いくつかの実施形態では、該眼疾患または障害は、加齢黄斑変性、白内障、角膜薄濁及びジストロフィー、先天性扁平角膜、緑内障、レーバー先天黒内障、ならびに黄斑ジストロフィーから選択されるがこれに限定されない。

【0182】

いくつかの実施形態では、該疾患または障害は、新形成、加齢黄斑変性、ＣＮＳ障害（例えば、統合失調症もしくは双極性、アルツハイマー病、パーキンソン病、及び自閉症）、トリヌクレオチド反復障害、脆弱性Ｘ症候群、セクレターゼ関連疾患、プリオン関連疾患、ＡＬＳ、及び薬物嗜癖から選択されるがこれに限定されない。

【0183】

本明細書に記載のリボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１ ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及び本明細書に記載のエンドソーム脱出剤を含む組成物は、対象における細胞機能の調節に有用である。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達、ＥＲＫ／ＭＡＰＫシグナル伝達、グルココルチコイド受容体シグナル伝達、軸索誘導シグナル伝達、エフリン受容体シグナル伝達、アクチン細胞骨格シグナル伝達、ハンチントン病シグナル伝達、アポトーシスシグナル伝達、Ｂ細胞受容体シグナル伝達、白血球溢出シグナル伝達、インテグリンシグナル伝達、急性期応答シグナル伝達、ＰＴＥＮシグナル伝達、ｐ５３のシグナル伝達、アリール炭化水素受容体シグナル伝達、異物代謝シグナル伝達、ＳＡＰＫ／ＪＮＫシグナル伝達、ＰＰＡｒ／ＲＸＲシグナル伝達、ＮＦ−ＫＢシグナル伝達、ニューレグリンシグナル伝達、Ｗｎｔ及びベータカテニンシグナル伝達、インスリン受容体シグナル伝達、ＩＬ−６シグナル伝達、肝胆汁うっ滞、ＩＧＦ−１シグナル伝達、ＮＲＦ２媒介酸化ストレス応答、肝線維症／肝星細胞細胞活性化、ＰＰＡＲシグナル伝達、ＦｃイプシロンＲＩシグナル伝達、Ｇタンパク質共役受容体シグナル伝達、イノシトールリン酸代謝、ＰＤＧＦシグナル伝達、ＶＥＧＦシグナル伝達、ナチュラルキラー細胞シグナル伝達、細胞周期：Ｇ１／Ｓチェックポイント調節、Ｔ細胞受容体シグナル伝達、細胞死受容体シグナル伝達、ＦＧＦシグナル伝達、ＧＭ−ＣＳＦシグナル伝達、筋萎縮性側索硬化症シグナル伝達、ＪＡＫ／Ｓｔａｔシグナル伝達、ニコチン酸及びニコチンアミド代謝、ケモカインシグナル伝達、ＩＬ−２シグナル伝達、シナプス長期抑制、エストロゲン受容体シグナル伝達、タンパク質ユビキチン化経路、ＩＬ−１０シグナル伝達、ＶＤＲ／ＲＸＲ活性化、ＴＧＦ−ベータシグナル伝達、Ｔｏｌｌ様受容体シグナル伝達、ｐ３８ＭＡＰＫシグナル伝達、ニューロトロフィン／ＴＲＫシグナル伝達、ＦＸＲ／ＲＸＲ活性化、シナプス長期増強、カルシウムシグナル伝達、ＥＧＦシグナル伝達、心臓血管系における低酸素シグナル伝達、ＲＸＲ機能のＬＰＳ／ＩＬ−１媒介阻害、ＬＸＲ／ＲＸＲ活性化、アミロイドプロセシング、ＩＬ−４シグナル伝達、細胞周期：Ｇ２／Ｍ ＤＮＡ損傷チェックポイント調節、心血管系における一酸化窒素シグナル伝達、プリン代謝、ｃＡＭＰ媒介シグナル伝達、ミトコンドリア機能障害、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達、小胞体ストレス経路、ピリミジン代謝、パーキンソンシグナル伝達、心臓及びベータアドレナリンシグナル伝達、解糖／糖新生、インターフェロンシグナル伝達、ソニックヘッジホッグシグナル伝達、グリセロリン脂質代謝、リン脂質分解、トリプトファン代謝、リジン分解、ヌクレオチド切出修復経路、デンプン及びスクロース代謝、アミノ糖代謝、アラキドン酸代謝、概日リズムシグナル伝達、凝固系、ドーパミン受容体シグナル伝達、グルタチオン代謝、グリセロ脂質代謝、リノール酸代謝、メチオニン代謝、ピルビン酸代謝、アルギニン及びプロリン代謝、エイコサノイドシグナル伝達、フルクトース及びマンノース代謝、ガラクトース代謝、スチルベン、クマリン及びリグニンの生合成、抗原提示経路、ステロイドの生合成、ブタン酸代謝、クエン酸回路、脂肪酸代謝、グリセロリン脂質代謝、ヒスチジン代謝、イノシトール
代謝、シトクロムＰ４５０による生体異物の代謝、メタン代謝、フェニルアラニン代謝、プロパン酸代謝、セレノアミノ酸代謝、スフィンゴ脂質代謝、アミノホスホン酸代謝、アンドロゲン及びエストロゲン代謝、アスコルビン酸及びアルダル酸代謝、胆汁酸生合成、システイン代謝、脂肪酸生合成、グルタミン酸受容体シグナル伝達、ＮＲＦ２媒介酸化ストレス応答、ペントースリン酸経路、ペントースとグルクロン酸の相互変換、レチノール代謝、リボフラビン代謝、チロシン代謝、ユビキノン生合成、バリン、ロイシン、及びイソロイシンの分解、グリシン、セリン、及びスレオニンの代謝、リジン分解、痛み／味覚、痛み、ミトコンドリア機能、ならびに発達神経学から選択されるがこれに限定されない。

【0184】

本明細書に記載の通り、リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１
ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及びエンドソーム脱出剤を含む組成物は、対象における標的ＤＮＡの転写の選択的調節に有用であり、該ＤＮＡは、本明細書に記載の通り、疾患または障害と関連している。いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、新形成と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＴＥＮ、ＡＴＭ、ＡＴＲ、ＥＧＦＲ、ＥＲＢＢ２、ＥＲＢＢ３、ＥＲＢＢ４、Ｎｏｔｃｈ１、Ｎｏｔｃｈ２、Ｎｏｔｃｈ３、Ｎｏｔｃｈ４、ＡＫＴ、ＡＫＴ２、ＡＫＴ３、ＨＩＦ、ＨＩＦｌａ、ＨＩＦ３ａ、Ｍｅｔ、ＨＲＧ、Ｂｃｌ２、ＰＰＡＲアルファ、ＰＰＡＲガンマ、ＷＴ１（ウイルムス腫瘍）、ＦＧＦ受容体ファミリーメンバー（５メンバー：１、２、３、４、５）、ＣＤＫＮ２ａ、ＡＰＣ、ＲＢ（網膜芽細胞腫）、ＭＥＮ１、ＶＨＬ、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２、ＡＲ（アンドロゲン受容体）、ＴＳＧ１０１、ＩＧＦ、ＩＧＦ受容体、Ｉｇｆ１（４変異体）、Ｉｇｆ２（３変異体）、Ｉｇｆ１受容体、Ｉｇｆ２受容体、Ｂａｘ、Ｂｃｌ２、カスパーゼファミリー（９メンバー：１、２、３、４、６、７、８、９、１２）、Ｋｒａｓ、Ａｐｃから選択される。

【0185】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、加齢黄斑変性と関連しており、該ＤＮＡは、Ａｂｃｒ、Ｃｃｌ２、Ｃｃ２、ｃｐ（セルロプラスミン）、Ｔｉｍｐ３、カテプシンＤ、Ｖｌｄｌｒ、Ｃｃｒ２から選択される。

【0186】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＣＮＳ障害と関連しており、該ＤＮＡは、ニューレグリン1（Ｎｒｇ１）、Ｅｒｂ４（ニューレグリンに対する受容体）、コンプレ
キシン１（Ｃｐｌｘ１）、Ｔｐｈ１トリプトファンヒドロキシラーゼ、Ｔｐｈ２トリプトファンヒドロキシラーゼ２、ニューレキシン１、ＧＳＫ３、ＧＳＫ３ａ、ＧＳＫ３ｂ、５−ＨＴＴ（Ｓｌｃ６ａ４）、ＣＯＭＴ、ＤＲＤ（Ｄｒｄ１ａ）、ＳＬＣ６Ａ３、ＤＡＯＡ、ＤＴＮＢＰ１、Ｄａｏ（Ｄａｏ１）、Ｍｅｃｐ２、ＢＺＲＡＰ１、ＭＤＧＡ２、Ｓｅｍａ５Ａ、ニューレキシン１、Ｆｒａｇｉｌｅ Ｘ（ＦＭＲ２（ＡＦＦ２）、ＦＸＲ１、ＦＸＲ２、Ｍｇｌｕｒ５）、Ｅ１、ＣＨＩＰ、ＵＣＨ、ＵＢＢ、Ｔａｕ、ＬＲＰ、ＰＩＣＡＬＭ、クラステリン、ＰＳ１、ＳＯＲＬ１、ＣＲ１、Ｖｌｄｌｒ、Ｕｂａ１、Ｕｂａ３、ＣＨＩＰ２８（Ａｑｐ１、アクアポリン１）、Ｕｃｈｌ１、Ｕｃｈｌ３、ＡＰＰ、ｘ−シヌクレイン、ＤＪ−１、ＬＲＲＫ２、Ｐａｒｋｉｎ、ＰＩＮＫ１から選択される。

【0187】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、トリヌクレオチド反復障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＴＴ（ハンチントンＤｘ）、ＳＢＭＡ／ＳＭＡＸ１／ＡＲ（ケネディＤｘ）、ＦＸＮ／Ｘ２５（フリードリヒ運動失調症）、ＡＴＸ３（マシャド・ジョセフＤｘ）、ＡＴＸＮ１及びＡＴＸＮ２（脊髄小脳失調症）、ＤＭＰＫ（筋緊張性ジストロフィー）、アトロフィン−１及びＡｔｎ１（ＤＲＰＬＡ Ｄｘ）、ＣＢＰ（Ｃｒｅｂ−ＢＰ−全体不安定性）、ＶＬＤＬＲ（アルツハイマー）、Ａｔｘｎ７、Ａｔｘｎ１０から選択される。

【0188】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、脆弱Ｘ症候群と関連しており、該ＤＮＡは
、ＦＭＲ２、ＦＸＲ１、ＦＸＲ２、ｍＧＬＵＲ５から選択される。

【0189】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、セクレターゼ関連疾患と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＰＨ−１（アルファ及びベータ）、プレセリニン（Ｐｓｅｎ１）、ニカストリン（Ｎｃｓｔｎ）、ＰＥＮ−２、Ｎｏｓ１、Ｐａｒｐ１、Ｎａｔ１、Ｎａｔ２から選択される。

【0190】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、プリオン関連疾患と関連しており、該ＤＮＡは、Ｐｒｐである。

【0191】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＡＬＳと関連しており、該ＤＮＡは、ＳＯＤ１、ＡＬＳ２、ＳＴＥＸ、ＦＵＳ、ＴＡＲＤＢＰ、ＶＥＧＦ（ＶＥＧＦ−ａ、ＶＥＧＦ−ｂ、ＶＥＧＦ−ｃ）から選択される。

【0192】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、嗜癖と関連しており、該ＤＮＡは、Ｐｒｋｃｅ（アルコール）、Ｄｒｄ２、Ｄｒｄ４、ＡＢＡＴ（アルコール）、ＧＲＩＡ２、Ｇｒｍ５、Ｇｒｉｎ１、Ｈｔｒ１ｂ、Ｇｒｉｎ２ａ、Ｄｒｄ３、Ｐｄｙｎ、Ｇｒｉａ１（アルコール）から選択される。

【0193】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、炎症と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＬ−１０、ＩＬ−１（ＩＬ−１ａ、ＩＬ−１ｂ）、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７（ＩＬ−１７ａ（ＣＴＬＡ８）、ＩＬ−１７ｂ、ＩＬ−１７ｃ、ＩＬ−１７ｄ、ＩＬ−１７ｆ）、ＩＩ−２３、Ｃｘ３ｃｒ１、ｐｔｐｎ２２、ＴＮＦａ、ＩＢＤに対するＮＯＤ２／ＣＡＲＤ１５、ＩＬ−６、ＩＬ−１２（ＩＬ−１２ａ、ＩＬ−１２ｂ）、ＣＴＬＡ４、Ｃｘ３ｃｌ１から選択される。

【0194】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、血液及び凝固疾患ならびに障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＣＤＡＮ１、ＣＤＡ１、ＲＰＳ１９、ＤＢＡ、ＰＫＬＲ、ＰＫ１、ＮＴ５Ｃ３、ＵＭＰＨ１、ＰＳＮ１、ＲＨＡＧ、ＲＨ５０Ａ、ＮＲＡＭＰ２、ＳＰＴＢ、ＡＬＡＳ２、ＡＮＨ１、ＡＳＢ、ＡＢＣＢ７、ＡＢＣ７、ＡＳＡＴ、ＴＡＰＢＰ、ＴＰＳＮ、ＴＡＰ２、ＡＢＣＢ３、ＰＳＦ２、ＲＩＮＧ１１、ＭＨＣ２ＴＡ、Ｃ２ＴＡ、ＲＦＸ５、ＲＦＸＡＰ、ＲＦＸ５、ＴＢＸＡ２Ｒ、Ｐ２ＲＸ１、Ｐ２Ｘ１、ＨＦ１、ＣＦＨ、ＨＵＳ、ＭＣＦＤ２、Ｆ７、Ｆ１０、Ｆ１１、Ｆ１２、ＨＡＦ，Ｆ１３Ａ１、Ｆ１３Ａ、Ｆ１３Ｂ、ＦＡＮＣＡ、ＦＡＣＡ、ＦＡ１、ＦＡ、ＦＡＡ、ＦＡＡＰ９５、ＦＡＡＰ９０、ＦＬＪ３４０６４、ＦＡＮＣＢ、ＦＡＮＣＣ、ＦＡＣＣ、ＢＲＣＡ２、ＦＡＮＣＤ１、ＦＡＮＣＤ２、ＦＡＮＣＤ、ＦＡＣＤ、ＦＡＤ、ＦＡＮＣＥ、ＦＡＣＥ、ＦＡＮＣＦ、ＸＲＣＣ９、ＦＡＮＣＧ、ＢＲＩＰ１、ＢＡＣＨ１、ＦＡＮＣＪ、ＰＨＦ９、ＦＡＮＣＬ、ＦＡＮＣＭ、ＫＩＡＡ１５９６、ＰＲＦ１、ＨＰＬＨ２、ＵＮＣ１３Ｄ、ＭＵＮＣ１３−４、ＨＰＬＨ３、ＨＬＨ３、ＦＨＬ３、Ｆ８、Ｆ８Ｃ、ＨＥＭＡ、Ｆ９、ＨＥＭＢ、ＰＩ、ＡＴＴ、Ｆ５、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＣＡＭＢ、ＬＡＤ、ＥＩＦ２Ｂ１、ＥＩＦ２ＢＡ、ＥＩＦ２Ｂ２、ＥＩＦ２Ｂ３、ＥＩＦ２Ｂ５、ＬＶＷＭ、ＣＡＣＨ、ＣＬＥ、ＥＩＦ２Ｂ４、ＨＢＢ、ＨＢＡ２、ＨＢＢ、ＨＢＤ、ＬＣＲＢ、ＨＢＡ１から選択される。

【0195】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、細胞の調節不全及び腫瘍疾患ならびに障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＢＣＬ７Ａ、ＢＣＬ７、ＴＡＬ１、ＴＣＬ５、ＳＣＬ、ＴＡＬ２、ＦＬＴ３、ＮＢＳ１、ＮＢＳ、ＺＮＦＮ１Ａ１、ＩＫ１、ＬＹＦ１、ＨＯＸＤ４、ＨＯＸ４Ｂ、ＢＣＲ、ＣＭＬ、ＰＨＬ、ＡＬＬ、ＡＲＮＴ、ＫＲＡＳ２、ＲＡＳＫ２、ＧＭＰＳ、ＡＦ１０、ＡＲＨＧＥＦ１２、ＬＡＲＧ、ＫＩＡＡ０３８２、ＣＡＬＭ、ＣＬＴＨ、ＣＥＢＰＡ、ＣＥＢＰ、ＣＨＩＣ２、ＢＴＬ、ＦＬＴ３、ＫＩＴ、ＰＢＴ、ＬＰＰ、ＮＰＭ１、ＮＵＰ２１４、Ｄ９Ｓ４６Ｅ、ＣＡＮ、ＣＡＩＮ、ＲＵＮＸ１、ＣＢＦＡ２
、ＡＭＬ１、ＷＨＳＣ１Ｌ１、ＮＳＤ３、ＦＬＴ３、ＡＦ１Ｑ、ＮＰＭ１、ＮＵＭＡ１、ＺＮＦ１４５、ＰＬＺＦ、ＰＭＬ、ＭＹＬ、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＡＦ１０、ＣＡＬＭ、ＣＬＴＨ、ＡＲＬ１１、ＡＲＬＴＳ１、Ｐ２ＲＸ７、Ｐ２Ｘ７、ＢＣＲ、ＣＭＬ、ＰＨＬ、ＡＬＬ、ＧＲＡＦ、ＮＦ１、ＶＲＮＦ、ＷＳＳ、ＮＦＮＳ、ＰＴＰＮ１１、ＰＴＰ２Ｃ、ＳＨＰ２、ＮＳ１、ＢＣＬ２、ＣＣＮＤ１、ＰＲＡＤ１、ＢＣＬ１、ＴＣＲＡ、ＧＡＴＡ１、ＧＦ１、ＥＲＹＦ１、ＮＦＥ１、ＡＢＬ１、ＮＱＯ１、ＤＩＡ４、ＮＭＯＲ１、ＮＵＰ２１４、Ｄ９Ｓ４６Ｅ、ＣＡＮ、ＣＡＩＮから選択される。

【0196】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、炎症及び免疫関連疾患ならびに障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＫＩＲ３ＤＬ１、ＮＫＡＴ３、ＮＫＢ１、ＡＭＢ１１、ＫＩＲ３ＤＳ１、ＩＦＮＧ、ＣＸＣＬ１２、ＳＤＦ１、ＴＮＦＲＳＦ６、ＡＰＴ１、ＦＡＳ、ＣＤ９５、ＡＬＰＳ１Ａ、ＩＬ２ＲＧ、ＳＣＩＤＸ１、ＳＣＩＤＸ、ＩＭＤ４、ＣＣＬ５、ＳＣＹＡ５、Ｄ１７Ｓ１３６Ｅ、ＴＣＰ２２８、ＩＬ１０、ＣＳＩＦ、ＣＭＫＢＲ２、ＣＣＲ２、ＣＭＫＢＲ５、ＣＣＣＫＲ５（ＣＣＲ５）、ＣＤ３Ｅ、ＣＤ３Ｇ、ＡＩＣＤＡ、ＡＩＤ、ＨＩＧＭ２、ＴＮＦＲＳＦ５、ＣＤ４０、ＵＮＧ、ＤＧＵ、ＨＩＧＭ４、ＴＮＦＳＦ５、ＣＤ４０ＬＧ、ＨＩＧＭ１、ＩＧＭ、ＦＯＸＰ３、ＩＰＥＸ、ＡＩＩＤ、ＸＰＩＤ、ＰＩＤＸ、ＴＮＦＲＳＦ１４Ｂ、ＴＡＣＩ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１（ＩＬ−１ａ、ＩＬ−１ｂ）、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７（ＩＬ−１７ａ（ＣＴＬＡ８）、ＩＬ−１７ｂ、ＩＬ−１７ｃ、ＩＬ−１７ｄ、ＩＬ−１７ｆ）、ＩＩ−２３、Ｃｘ３ｃｒ１、ｐｔｐｎ２２、ＴＮＦａ、ＩＢＤに対するＮＯＤ２／ＣＡＲＤ１５、ＩＬ−６、ＩＬ−１２（ＩＬ−１２ａ、ＩＬ−１２ｂ）、ＣＴＬＡ４、Ｃｘ３ｃｌ１、ＪＡＫ３、ＪＡＫＬ、ＤＣＬＲＥ１Ｃ、ＡＲＴＥＭＩＳ、ＳＣＩＤＡ、ＲＡＧ１、ＲＡＧ２、ＡＤＡ、ＰＴＰＲＣ、ＣＤ４５、ＬＣＡ、ＩＬ７Ｒ、ＣＤ３Ｄ、Ｔ３Ｄ、ＩＬ２ＲＧ、ＳＣＩＤＸ１、ＳＣＩＤＸ、ＩＭＤ４）から選択される。

【0197】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質疾患ならびに障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＴＴＲＰＡ１Ｂ、ＡＰＯＡ１、ＡＰＰ、ＡＡＡ、ＣＶＡＰ、ＡＤ１、ＧＳＮ、ＦＧＡ、ＬＹＺ、ＴＴＲ、ＰＡ１Ｂ、ＫＲＴ１８、ＫＲＴ８、ＣＩＲＨ１Ａ、ＮＡＩＣ、ＴＥＸ２９２、ＫＩＡＡ１９８８、ＣＦＴＲ、ＡＢＣＣ７、ＣＦ、ＭＲＰ７、ＳＬＣ２Ａ２、ＧＬＵＴ２、Ｇ６ＰＣ、Ｇ６ＰＴ、Ｇ６ＰＴ１、ＧＡＡ、ＬＡＭＰ２、ＬＡＭＰＢ、ＡＧＬ、ＧＤＥ、ＧＢＥ１、ＧＹＳ２、ＰＹＧＬ、ＰＦＫＭ、ＴＣＦ１、ＨＮＦ１Ａ、ＭＯＤＹ３、ＳＣＯＤ１、ＳＣＯ１、ＬＩＰＣ、ＣＴＮＮＢ１、ＰＤＧＦＲＬ、ＰＤＧＲＬ、ＰＲＬＴＳ、ＡＸＩＮ１、ＡＸＩＮ、ＣＴＮＮＢ１、ＴＰ５３、Ｐ５３、ＬＦＳ１、ＩＧＦ２Ｒ、ＭＰＲＩ、ＭＥＴ、ＣＡＳＰ８、ＭＣＨ５、ＵＭＯＤ、ＨＮＦＪ、ＦＪＨＮ、ＭＣＫＤ２、ＡＤＭＣＫＤ２、ＰＡＨ、ＰＫＵ１、ＱＤＰＲ、ＤＨＰＲ、ＰＴＳ、ＦＣＹＴ、ＰＫＨＤ１、ＡＲＰＫＤ、ＰＫＤ１、ＰＫＤ２、ＰＫＤ４、ＰＫＤＴＳ、ＰＲＫＣＳＨ、Ｇ１９Ｐ１、ＰＣＬＤ、ＳＥＣ６３から選択される。

【0198】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、筋肉／骨格疾患及び障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＤＭＤ、ＢＭＤ、ＭＹＦ６、ＤＭＤ、ＢＭＤ、ＬＭＮＡ、ＬＭＮ１、ＥＭＤ２、ＦＰＬＤ、ＣＭＤ１Ａ、ＨＧＰＳ、ＬＧＭＤ１Ｂ、ＬＭＮＡ、ＬＭＮ１、ＥＭＤ２、ＦＰＬＤ、ＣＭＤ１Ａ、ＦＳＨＭＤ１Ａ、ＦＳＨＤ１Ａ、ＦＫＲＰ、ＭＤＣ１Ｃ、ＬＧＭＤ２Ｉ、ＬＡＭＡ２、ＬＡＭＭ、ＬＡＲＧＥ、ＫＩＡＡ０６０９、ＭＤＣ１Ｄ、ＦＣＭＤ、ＴＴＩＤ、ＭＹＯＴ、ＣＡＰＮ３、ＣＡＮＰ３、ＤＹＳＦ、ＬＧＭＤ２Ｂ、ＳＧＣＧ、ＬＧＭＤ２Ｃ、ＤＭＤＡ１、ＳＣＧ３、ＳＧＣＡ、ＡＤＬ、ＤＡＧ２、ＬＧＭＤ２Ｄ、ＤＭＤＡ２、ＳＧＣＢ、ＬＧＭＤ２Ｅ、ＳＧＣＤ、ＳＧＤ、ＬＧＭＤ２Ｆ、ＣＭＤ１Ｌ、ＴＣＡＰ、ＬＧＭＤ２Ｇ、ＣＭＤ１Ｎ、ＴＲＩＭ３２、ＨＴ２Ａ、ＬＧＭＤ２Ｈ、ＦＫＲＰ、ＭＤＣ１Ｃ、ＬＧＭＤ２Ｉ、ＴＴＮ、ＣＭＤ１Ｇ、ＴＭＤ、ＬＧＭＤ２Ｊ、ＰＯＭＴ１、ＣＡＶ３、ＬＧＭＤ１Ｃ、ＳＥＰＮ１、ＳＥＬＮ、ＲＳＭＤ１、ＰＬＥＣ１、ＰＬＴＮ
、ＥＢＳ１、ＬＲＰ５、ＢＭＮＤ１、ＬＲＰ７、ＬＲ３、ＯＰＰＧ、ＶＢＣＨ２、ＣＬＣＮ７、ＣＬＣ７、ＯＰＴＡ２、ＯＳＴＭ１、ＧＬ、ＴＣＩＲＧ１、ＴＩＲＣ７、ＯＣ１１６、ＯＰＴＢ１、ＶＡＰＢ、ＶＡＰＣ、ＡＬＳ８、ＳＭＮ１、ＳＭＡ１、ＳＭＡ２、ＳＭＡ３、ＳＭＡ４、ＢＳＣＬ２、ＳＰＧ１７、ＧＡＲＳ、ＳＭＡＤ１、ＣＭＴ２Ｄ、ＨＥＸＢ、ＩＧＨＭＢＰ２、ＳＭＵＢＰ２、ＣＡＴＦ１、ＳＭＡＲＤ１から選択される。

【0199】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、神経学的及び神経疾患ならびに障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＳＯＤ１、ＡＬＳ２、ＳＴＥＸ、ＦＵＳ、ＴＡＲＤＢＰ、ＶＥＧＦ（ＶＥＧＦ−ａ、ＶＥＧＦ−ｂ、ＶＥＧＦ−ｃ、ＡＰＰ、ＡＡＡ、ＣＶＡＰ、ＡＤ１、ＡＰＯＥ、ＡＤ２、ＰＳＥＮ２、ＡＤ４、ＳＴＭ２、ＡＰＢＢ２、ＦＥ６５Ｌ１、ＮＯＳ３、ＰＬＡＵ、ＵＲＫ、ＡＣＥ、ＤＣＰ１、ＡＣＥ１、ＭＰＯ、ＰＡＣＩＰ１、ＰＡＸＩＰ１Ｌ、ＰＴＩＰ、Ａ２Ｍ、ＢＬＭＨ、ＢＭＨ、ＰＳＥＮ１、ＡＤ３、Ｍｅｃｐ２、ＢＺＲＡＰ１、ＭＤＧＡ２、Ｓｅｍａ５Ａ、ニューレキシン１、ＧＬＯ１、ＭＥＣＰ２、ＲＴＴ、ＰＰＭＸ、ＭＲＸ１６、ＭＲＸ７９、ＮＬＧＮ３、ＮＬＧＮ４、ＫＩＡＡ１２６０、ＡＵＴＳＸ２、ＦＭＲ２、ＦＸＲ１、ＦＸＲ２、ｍＧＬＵＲ５、ＨＤ、ＩＴ１５、ＰＲＮＰ、ＰＲＩＰ、ＪＰＨ３、ＪＰ３、ＨＤＬ２、ＴＢＰ、ＳＣＡ１７、ＮＲ４Ａ２、ＮＵＲＲ１、ＮＯＴ、ＴＩＮＵＲ、ＳＮＣＡＩＰ、ＴＢＰ、ＳＣＡ１７、ＳＮＣＡ、ＮＡＣＰ、ＰＡＲＫ１、ＰＡＲＫ４、ＤＪ１、ＰＡＲＫ７、ＬＲＲＫ２、ＰＡＲＫ８、ＰＩＮＫ１、ＰＡＲＫ６、ＵＣＨＬ１、ＰＡＲＫ５、ＳＮＣＡ、ＮＡＣＰ、ＰＡＲＫ１、ＰＡＲＫ４、ＰＲＫＮ、ＰＡＲＫ２、ＰＤＪ、ＤＢＨ、ＮＤＵＦＶ２、ＭＥＣＰ２、ＲＴＴ、ＰＰＭＸ、ＭＲＸ１６、ＭＲＸ７９、ＣＤＫＬ５、ＳＴＫ９、ＭＥＣＰ２、ＲＴＴ、ＰＰＭＸ、ＭＲＸ１６、ＭＲＸ７９、ｘ−シヌクレイン、ＤＪ−１、ニューレグリン１（Ｎｒｇ１）、Ｅｒｂ４（ニューレグリンに対する受容体）、コンプレキシン１（Ｃｐｌｘ１）、Ｔｐｈ１トリプトファンヒドロキシラーゼ、Ｔｐｈ２、トリプトファンヒドロキシラーゼ２、ニューレキシン１、ＧＳＫ３、ＧＳＫ３ａ、ＧＳＫ３ｂ、５−ＨＴＴ（Ｓｌｃ６ａ４）、ＣＯＭＴ、ＤＲＤ（Ｄｒｄ１ａ）、ＳＬＣ６Ａ３、ＤＡＯＡ、ＤＴＮＢＰ１、Ｄａｏ（Ｄａｏ１）、ＡＰＨ−１（アルファ及びベータ）、プレセニリン（Ｐｓｅｎｌ）、ニカストリン、（Ｎｃｓｔｎ）、ＰＥＮ−２、Ｎｏｓ１、Ｐａｒｐ１、Ｎａｔ１、Ｎａｔ２、ＨＴＴ（ハンチントンＤｘ）、ＳＢＭＡ／ＳＭＡＸ１／ＡＲ（ケネディＤｘ）、ＦＸＮ／Ｘ２５（フリードリヒ運動失調症）、ＡＴＸ３（マシャド・ジョセフＤｘ）、ＡＴＸＮ１及びＡＴＸＮ２（脊髄小脳失調症）、ＤＭＰＫ（筋緊張性ジストロフィー）、アトロフィン−１及びＡｔｎ１（ＤＲＰＬＡ Ｄｘ）、ＣＢＰ（Ｃｒｅｂ−ＢＰ−全体不安定性）、ＶＬＤＬＲ（アルツハイマー）、Ａｔｘｎ７、Ａｔｘｎ１０から選択される。

【0200】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、眼疾患及び障害と関連しており、該ＤＮＡは、Ａｂｃｒ、Ｃｃｌ２、Ｃｃ２、ｃｐ（セルロプラスミン）、Ｔｉｍｐ３、カテプシンＤ、Ｖｌｄｌｒ、Ｃｃｒ２、ＣＲＹＡＡ、ＣＲＹＡ１、ＣＲＹＢＢ２、ＣＲＹＢ２、ＰＩＴＸ３、ＢＦＳＰ２、ＣＰ４９、ＣＰ４７、ＣＲＹＡＡ、ＣＲＹＡ１、ＰＡＸ６、ＡＮ２、ＭＧＤＡ、ＣＲＹＢＡ１、ＣＲＹＢ１、ＣＲＹＧＣ、ＣＲＹＧ３、ＣＣＬ、ＬＩＭ２、ＭＰ１９、ＣＲＹＧＤ，ＣＲＹＧ４、ＢＦＳＰ２、ＣＰ４９、ＣＰ４７、ＨＳＦ４、ＣＴＭ、ＨＳＦ４、ＣＴＭ、ＭＩＰ、ＡＱＰ０、ＣＲＹＡＢ、ＣＲＹＡ２、ＣＴＰＰ２、ＣＲＹＢＢ１、ＣＲＹＧＤ、ＣＲＹＧ４、ＣＲＹＢＢ２、ＣＲＹＢ２、ＣＲＹＧＣ、ＣＲＹＧ３、ＣＣＬ、ＣＲＹＡＡ、ＣＲＹＡ１、ＧＪＡ８、ＣＸ５０、ＣＡＥ１、ＧＪＡ３、ＣＸ４６、ＣＺＰ３、ＣＡＥ３、ＣＣＭ１、ＣＡＭ、ＫＲＩＴ１、ＡＰＯＡ１、ＴＧＦＢＩ、ＣＳＤ２、ＣＤＧＧ１、ＣＳＤ、ＢＩＧＨ３、ＣＤＧ２、ＴＡＣＳＴＤ２、ＴＲＯＰ２、Ｍ１Ｓ１、ＶＳＸ１、ＲＩＮＸ、ＰＰＣＤ、ＰＰＤ、ＫＴＣＮ、ＣＯＬ８Ａ２、ＦＥＣＤ、ＰＰＣＤ２、ＰＩＰ５Ｋ３、ＣＦＤ、ＫＥＲＡ、ＣＮＡ２、ＭＹＯＣ、ＴＩＧＲ、ＧＬＣ１Ａ、ＪＯＡＧ、ＧＰＯＡ、ＯＰＴＮ、ＧＬＣ１Ｅ、ＦＩＰ２、ＨＹＰＬ、ＮＲＰ、ＣＹＰ１Ｂ１、ＧＬＣ３Ａ、ＯＰＡ１、ＮＴＧ、ＮＰＧ、ＣＹＰ１Ｂ１、ＧＬＣ３Ａ、ＣＲＢ１、ＲＰ１２、ＣＲＸ、ＣＯＲＤ２、ＣＲＤ、ＲＰＧＲＩＰ１、ＬＣＡ６、ＣＯＲＤ９
、ＲＰＥ６５、ＲＰ２０、ＡＩＰＬ１、ＬＣＡ４、ＧＵＣＹ２Ｄ、ＧＵＣ２Ｄ、ＬＣＡ１、ＣＯＲＤ６、ＲＤＨ１２、ＬＣＡ３、ＥＬＯＶＬ４、ＡＤＭＤ、ＳＴＧＤ２、ＳＴＧＤ３、ＲＤＳ、ＲＰ７、ＰＲＰＨ２、ＰＲＰＨ、ＡＶＭＤ、ＡＯＦＭＤ、ＶＭＤ２から選択される。

【0201】

本明細書に記載の通り、リボ核タンパク質（例えば、Ｃａｓ９ ＲＮＰまたはＣｐｆ１
ＲＮＰ等の部位特異的修飾ポリペプチドを含むＲＮＰ）及びエンドソーム脱出剤を含む組成物は、対象における標的ＤＮＡの転写の選択的調節に有用であり、該ＤＮＡは、本明細書に記載の通り、細胞機能と関連している。

【0202】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡ５、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＰＴＥＮ、ＥＩＦ４Ｅ、ＰＲＫＣＺ、ＧＲＫ６、ＭＡＰＫ１、ＴＳＣ１、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＩＫＢＫＢ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＤＫ８、ＣＤＫＮ１Ｂ、ＮＦＫＢ２、ＢＣＬ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＰＰ２Ｒ１Ａ、ＭＡＰＫ８、ＢＣＬ２Ｌ１、ＭＡＰＫ３、ＴＳＣ２、ＩＴＧＡ１、ＫＲＡＳ、ＥＩＦ４ＥＢＰ１、ＲＥＬＡ、ＰＲＫＣＤ、ＮＯＳ３、ＰＲＫＡＡ１、ＭＡＰＫ９、ＣＤＫ２、ＰＰＰ２ＣＡ、ＰＩＭ１、ＩＴＧＢ７、ＹＷＨＡＺ、ＩＬＫ、ＴＰ５３、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＤＹＲＫ１Ａ、ＣＤＫＮ１Ａ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＪＡＫ１、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＰＤＰＫ１、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＣＴＮＮＢ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＰＡＫ３、ＩＴＧＢ３、ＣＣＮＤ１、ＧＳＫ３Ａ、ＦＲＡＰ１、ＳＦＮ、ＩＴＧＡ２、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＢＲＡＦ、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３、ＦＯＸＯ１、ＳＧＫ、ＨＳＰ９０ＡＡ１、ＲＰＳ６ＫＢ１から選択される。

【0203】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＥＲＫ／ＭＡＰＫシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡ５、ＨＳＰＢ１、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１Ａ、ＴＬＮ１、ＥＩＦ４Ｅ、ＥＬＫ１、ＧＲＫ６、ＭＡＰＫ１、ＲＡＣ２、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＤＫ８、ＣＲＥＢ１、ＰＲＫＣＩ、ＰＴＫ２、ＦＯＳ、ＲＰＳ６ＫＡ４、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＰＰ２Ｒ１Ａ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＩＴＧＡ１、ＥＴＳ１、ＫＲＡＳ、ＭＹＣＮ、ＥＩＦ４ＥＢＰ１、ＰＰＡＲＧ、ＰＲＫＣＤ、ＰＲＫＡＡ１、ＭＡＰＫ９、ＳＲＣ、ＣＤＫ２、ＰＰＰ２ＣＡ、ＰＩＭ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＩＴＧＢ７、ＹＷＨＡＺ、ＰＰＰ１ＣＣ、ＫＳＲ１、ＰＸＮ、ＲＡＦ１、ＦＹＮ、ＤＹＲＫ１Ａ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＡＫ４、ＰＩＫ３Ｒ１、ＳＴＡＴ３、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＩＴＧＢ３、ＥＳＲ１、ＩＴＧＡ２、ＭＹＣ、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＣＲＫＬ、ＢＲＡＦ、ＡＴＦ４、ＰＲＫＣＡ、ＳＲＦ、ＳＴＡＴ１、ＳＧＫから選択される。

【0204】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、グルココルチコイド受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＲＡＣ１、ＴＡＦ４Ｂ、ＥＰ３００、ＳＭＡＤ２、ＴＲＡＦ６、ＰＣＡＦ、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＳＭＡＤ３、ＡＫＴ２、ＩＫＢＫＢ、ＮＣＯＲ２、ＵＢＥ２Ｉ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＲＥＢ１、ＦＯＳ、ＨＳＰＡ５、ＮＦＫＢ２、ＢＣＬ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＢＣＬ２Ｌ１、ＭＡＰＫ３、ＴＳＣ２２Ｄ３、ＭＡＰＫ１０、ＮＲＩＰ１、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ１３、ＲＥＬＡ、ＳＴＡＴ５Ａ、ＭＡＰＫ９、ＮＯＳ２Ａ、ＰＢＸ１、ＮＲ３Ｃ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＣＤＫＮ１Ｃ、ＴＲＡＦ２、ＳＥＲＰＩＮＥ１、ＮＣＯＡ３、ＭＡＰＫ１４、ＴＮＦ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＲＥＢＢＰ、ＣＤＫＮ１Ａ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＪＡＫ１、ＩＬ８、ＮＣＯＡ２、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＴＧＦＢＲ１、ＥＳＲ１、ＳＭＡＤ４、ＣＥＢＰＢ、ＪＵＮ、ＡＲ、ＡＫＴ３、ＣＣＬ２、ＭＭＰ１、ＳＴＡＴ１、ＩＬ６、ＨＳＰ９０ＡＡ１から選択される。

【0205】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、軸索誘導シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＴＧＡＭ、ＲＯＣＫ１、ＩＴＧＡ５、ＣＸＣＲ４、ＡＤＡＭ１２、ＩＧＦ１、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１Ａ、Ｅ１Ｆ４Ｅ、ＰＲＫＣＺ、ＮＲＰ１、ＮＴＲＫ２、ＡＲＨＧＥＦ７、ＳＭＯ、ＲＯＣＫ２、ＭＡＰＫ１、ＰＧＦ、ＲＡＣ２、ＰＴＰＮ１１、ＧＮＡＳ、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＥＲＢＢ２、ＰＲＫＣＩ、ＰＴＫ２、ＣＦＬ１、ＧＮＡＱ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＣＸＣＬ１２、ＰＩＫ３Ｃ３、ＷＮＴ１１、ＰＲＫＤ１、ＧＮＢ２Ｌ１、ＡＢＬ１、ＭＡＰＫ３、ＩＴＧＡ１、ＫＲＡＳ、ＲＨＯＡ、ＰＲＫＣＤ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＩＴＧＢ７、ＧＬＩ２、ＰＸＮ、ＶＡＳＰ、ＲＡＦ１、ＦＹＮ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＡＫ４、ＡＤＡＭ１７、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＧＬＩ１、ＷＮＴ５Ａ、ＡＤＡＭ１０、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＩＴＧＢ３、ＣＤＣ４２、ＶＥＧＦＡ、ＩＴＧＡ２、ＥＰＨＡ８、ＣＲＫＬ、ＲＮＤ１、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0206】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、エフリン受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＴＧＡＭ、ＲＯＣＫ１、ＩＴＧＡ５、ＣＸＣＲ４、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１Ａ、ＧＲＫ６、ＲＯＣＫ２、ＭＡＰＫ１、ＰＧＦ、ＲＡＣ２、ＰＴＰＮ１１、ＧＮＡＳ、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＤＯＫ１、ＣＤＫ８、ＣＲＥＢ１、ＰＴＫ２、ＣＦＬ１、ＧＮＡＱ、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＣＸＣＬ１２、ＭＡＰＫ８、ＧＮＢ２Ｌ１、ＡＢＬ１、ＭＡＰＫ３、ＩＴＧＡ１、ＫＲＡＳ、ＲＨＯＡ、ＰＲＫＣＤ、ＰＲＫＡＡ１、ＭＡＰＫ９、ＳＲＣ、ＣＤＫ２、ＰＩＭ１、ＩＴＧＢ７、ＰＸＮ、ＲＡＦ１、ＦＹＮ、ＤＹＲＫ１Ａ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＡＫ４、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＳＴＡＴ３、ＡＤＡＭ１０、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＩＴＧＢ３、ＣＤＣ４２、ＶＥＧＦＡ、ＩＴＧＡ２、ＥＰＨＡ８、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＣＲＫＬ、ＢＲＡＦ、ＰＴＰＮ１３、ＡＴＦ４、ＡＫＴ３、ＳＧＫから選択される。

【0207】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アクチン細胞骨格シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＣＴＮ４、ＰＲＫＣＥ、ＩＴＧＡＭ、ＲＯＣＫ１、ＩＴＧＡ５、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＲＡＣ１、ＩＮＳ、ＡＲＨＧＥＦ７、ＧＲＫ６、ＲＯＣＫ２、ＭＡＰＫ１、ＲＡＣ２、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＤＫ８、ＰＴＫ２、ＣＦＬ１、ＰＩＫ３ＣＢ、ＭＹＨ９、ＤＩＡＰＨ１、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、Ｆ２Ｒ、ＭＡＰＫ３、ＳＬＣ９Ａ１、ＩＴＧＡ１、ＫＲＡＳ、ＲＨＯＡ、ＰＲＫＣＤ、ＰＲＫＡＡ１、ＭＡＰＫ９、ＣＤＫ２、ＰＩＭ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＩＴＧＢ７、ＰＰＰ１ＣＣ、ＰＸＮ、ＶＩＬ２、ＲＡＦ１、ＧＳＮ、ＤＹＲＫ１Ａ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＡＫ４、ＰＩＰ５Ｋ１Ａ、ＰＩＫ３Ｒ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＩＴＧＢ３、ＣＤＣ４２、ＡＰＣ、ＩＴＧＡ２、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＣＲＫＬ、ＢＲＡＦ、ＶＡＶ３、ＳＧＫから選択される。

【0208】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ハンチントン病シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＧＦ１、ＥＰ３００、ＲＣＯＲ１、ＰＲＫＣＺ、ＨＤＡＣ４、ＴＧＭ２、ＭＡＰＫ１、ＣＡＰＮＳ１、ＡＫＴ２、ＥＧＦＲ、ＮＣＯＲ２、ＳＰ１、ＣＡＰＮ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＨＤＡＣ５、ＣＲＥＢ１、ＰＲＫＣ１、ＨＳＰＡ５、ＲＥＳＴ、ＧＮＡＱ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＩＧＦ１Ｒ、ＰＲＫＤ１、ＧＮＢ２Ｌ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＣＡＰＮ１、ＭＡＰＫ３、ＣＡＳＰ８、ＨＤＡＣ２、ＨＤＡＣ７Ａ、ＰＲＫＣＤ、ＨＤＡＣ１１、ＭＡＰＫ９、ＨＤＡＣ９、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＨＤＡＣ３、ＴＰ５３、ＣＡＳＰ９、ＣＲＥＢＢＰ、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＰＫ１、ＣＡＳＰ１、ＡＰＡＦ１、ＦＲＡＰ１、ＣＡＳＰ２、ＪＵＮ、ＢＡＸ、ＡＴＦ４、ＡＫＴ３、ＰＲＫＣＡ、ＣＬＴＣ、ＳＧＫ、ＨＤＡＣ６、ＣＡＳＰ３から選択される。

【0209】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アポトーシスシグナル伝達と関連しており
、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＲＯＣＫ１、ＢＩＤ、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＢＡＫ１、ＢＩＲＣ４、ＧＲＫ６、ＭＡＰＫ１、ＣＡＰＮＳ１、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＩＫＢＫＢ、ＣＡＰＮ２、ＣＤＫ８、ＦＡＳ、ＮＦＫＢ２、ＢＣＬ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＭＡＰＫ８、ＢＣＬ２Ｌ１、ＣＡＰＮ１、ＭＡＰＫ３、ＣＡＳＰ８、ＫＲＡＳ、ＲＥＬＡ、ＰＲＫＣＤ、ＰＲＫＡＡ１、ＭＡＰＫ９、ＣＤＫ２、ＰＩＭ１、ＴＰ５３、ＴＮＦ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＣＡＳＰ９、ＤＹＲＫ１Ａ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＣＨＵＫ、ＡＰＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＰＡＫ３、ＬＭＮＡ、ＣＡＳＰ２、ＢＩＲＣ２、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＢＲＡＦ、ＢＡＸ、ＰＲＫＣＡ、ＳＧＫ、ＣＡＳＰ３、ＢＩＲＣ３、ＰＡＲＰ１から選択される。

【0210】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、Ｂ細胞受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＲＡＣ１、ＰＴＥＮ、ＬＹＮ、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＲＡＣ２、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＩＫＢＫＢ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＲＥＢ１、ＳＹＫ、ＮＦＫＢ２、ＣＡＭＫ２Ａ、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＢＣＬ２Ｌ１、ＡＢＬ１、ＭＡＰＫ３、ＥＴＳ１、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ１３、ＲＥＬＡ、ＰＴＰＮ６、ＭＡＰＫ９、ＥＧＲ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＢＴＫ、ＭＡＰＫ１４、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＣＤＣ４２、ＧＳＫ３Ａ、ＦＲＡＰ１、ＢＣＬ６、ＢＣＬ１０、ＪＵＮ、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＴＦ４、ＡＫＴ３、ＶＡＶ３、ＲＰＳ６ＫＢ１から選択される。

【0211】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、白血球溢出シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＣＴＮ４、ＣＤ４４、ＰＲＫＣＥ、ＩＴＧＡＭ、ＲＯＣＫ１、ＣＸＣＲ４、ＣＹＢＡ、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１Ａ、ＰＲＫＣＺ、ＲＯＣＫ２、ＲＡＣ２、ＰＴＰＮ１１、ＭＭＰ１４、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＲＫＣＩ、ＰＴＫ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＣＸＣＬ１２、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＰＲＫＤ１、ＡＢＬ１、ＭＡＰＫ１０、ＣＹＢＢ、ＭＡＰＫ１３、ＲＨＯＡ、ＰＲＫＣＤ、ＭＡＰＫ９、ＳＲＣ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＢＴＫ、ＭＡＰＫ１４、ＮＯＸ１、ＰＸＮ、ＶＩＬ２、ＶＡＳＰ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＣＴＮＮＤ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＴＮＮＢ１、ＣＬＤＮ１、ＣＤＣ４２、Ｆ１１Ｒ、ＩＴＫ、ＣＲＫＬ、ＶＡＶ３、ＣＴＴＮ、ＰＲＫＣＡ、ＭＭＰ１、ＭＭＰ９から選択される。

【0212】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、インテグリンシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＣＴＮ４、ＩＴＧＡＭ、ＲＯＣＫ１、ＩＴＧＡ５、ＲＡＣ１、ＰＴＥＮ、ＲＡＰ１Ａ、ＴＬＮ１、ＡＲＨＧＥＦ７、ＭＡＰＫ１、ＲＡＣ２、ＣＡＰＮＳ１、ＡＫＴ２、ＣＡＰＮ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＴＫ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＣＡＶ１、ＣＡＰＮ１、ＡＢＬ１、ＭＡＰＫ３、ＩＴＧＡ１、ＫＲＡＳ、ＲＨＯＡ、ＳＲＣ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＩＴＧＢ７、ＰＰＰ１ＣＣ、ＩＬＫ、ＰＸＮ、ＶＡＳＰ、ＲＡＦ１、ＦＹＮ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＡＫ４、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＴＮＫ２、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＩＴＧＢ３、ＣＤＣ４２、ＲＮＤ３、ＩＴＧＡ２、ＣＲＫＬ、ＢＲＡＦ、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３から選択される。

【0213】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、急性期応答シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＲＡＫ１、ＳＯＤ２、ＭＹＤ８８、ＴＲＡＦ６、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＩＫＢＫＢ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＦＯＳ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＰＩＫ３ＣＢ、ＭＡＰＫ８、ＲＩＰＫ１、ＭＡＰＫ３、ＩＬ６ＳＴ、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ１３、ＩＬ６Ｒ、ＲＥＬＡ、ＳＯＣＳ１、ＭＡＰＫ９、ＦＴＬ、ＮＲ３Ｃ１、ＴＲＡＦ２、ＳＥＲＰＩＮＥ１、ＭＡＰＫ１４、ＴＮＦ、ＲＡＦ１、ＰＤＫ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＦＲＡＰ１、ＣＥＢＰＢ、ＪＵＮ、ＡＫＴ３、ＩＬ１Ｒ１、ＩＬ６から選択される。

【0214】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＰＴＥＮシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡ５、ＲＡＣ１、ＰＴＥＮ、ＰＲＫＣＺ、ＢＣＬ２Ｌ１１、ＭＡＰＫ１、ＲＡＣ２、ＡＫＴ２、ＥＧＦＲ、ＩＫＢＫＢ、ＣＢＬ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＤＫＮ１Ｂ、ＰＴＫ２、ＮＦＫＢ２、ＢＣＬ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＢＣＬ２Ｌ１、ＭＡＰＫ３、ＩＴＧＡ１、ＫＲＡＳ、ＩＴＧＢ７、ＩＬＫ、ＰＤＧＦＲＢ、ＩＮＳＲ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＣＡＳＰ９、ＣＤＫＮ１Ａ、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＰＤＧＦＲＡ、ＰＤＰＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＩＴＧＢ３、ＣＤＣ４２、ＣＣＮＤ１、ＧＳＫ３Ａ、ＩＴＧＡ２、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３、ＦＯＸＯ１、ＣＡＳＰ３、ＲＰＳ６ＫＢ１から選択される。

【0215】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ｐ５３のシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＴＥＮ、ＥＰ３００、ＢＢＣ３、ＰＣＡＦ、ＦＡＳＮ、ＢＲＣＡ１、ＧＡＤＤ４５Ａ、ＢＩＲＣ５、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＨＥＫ１、ＴＰ５３ＩＮＰ１、ＢＣＬ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＴＨＢＳ１、ＡＴＲ、ＢＣＬ２Ｌ１、Ｅ２Ｆ１、ＰＭＡＩＰ１、ＣＨＥＫ２、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＰ７３、ＲＢ１、ＨＤＡＣ９、ＣＤＫ２、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＭＡＰＫ１４、ＴＰ５３、ＬＲＤＤ、ＣＤＫＮ１Ａ、ＨｌＰＫ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＲＲＭ２Ｂ、ＡＰＡＦ１、ＣＴＮＮＢ１、ＳＩＲＴ１、ＣＣＮＤ１、ＰＲＫＤＣ、ＡＴＭ、ＳＦＮ、ＣＤＫＮ２Ａ、ＪＵＮ、ＳＮＡＩ２、ＧＳＫ３Ｂ、ＢＡＸ、ＡＫＴ３から選択される。

【0216】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アリール炭化水素受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＳＰＢ１、ＥＰ３００、ＦＡＳＮ、ＴＧＭ２、ＲＸＲＡ、ＭＡＰＫ１、ＮＱＯ１、ＮＣＯＲ２、ＳＰ１、ＡＲＮＴ、ＣＤＫＮ１Ｂ、ＦＯＳ、ＣＨＥＫ１、ＳＭＡＲＣＡ４、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰＫ８、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＡＴＲ、Ｅ２Ｆ１、ＭＡＰＫ３、ＮＲＩＰ１、ＣＨＥＫ２、ＲＥＬＡ、ＴＰ７３、ＧＳＴＰ１、ＲＢ１、ＳＲＣ、ＣＤＫ２、ＡＨＲ、ＮＦＥ２Ｌ２、ＮＣＯＡ３、ＴＰ５３、ＴＮＦ、ＣＤＫＮ１Ａ、ＮＣＯＡ２、ＡＰＡＦ１、ＮＦＫＢ１、ＣＣＮＤ１、ＡＴＭ、ＥＳＲ１、ＣＤＫＮ２Ａ、ＭＹＣ、ＪＵＮ、ＥＳＲ２、ＢＡＸ、ＩＬ６、ＣＹＰ１Ｂ１、ＨＳＰ９０ＡＡ１から選択される。

【0217】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、異物代謝シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＥＰ３００、ＰＲＫＣＺ、ＲＸＲＡ、ＭＡＰＫ１、ＮＱＯ１、ＮＣＯＲ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＡＲＮＴ、ＰＲＫＣＩ、ＮＦＫＢ２、ＣＡＭＫ２Ａ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＰＰ２Ｒ１Ａ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＰＲＫＤ１、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＭＡＰＫ３、ＮＲＩＰ１、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ１３、ＰＲＫＣＤ、ＧＳＴＰ１、ＭＡＰＫ９、ＮＯＳ２Ａ、ＡＢＣＢ１、ＡＨＲ、ＰＰＰ２ＣＡ、ＦＴＬ、ＮＦＥ２Ｌ２、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ、ＭＡＰＫ１４、ＴＮＦ、ＲＡＦ１、ＣＲＥＢＢＰ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＫＥＡＰ１、ＰＲＫＣＡ、ＥＩＦ２ＡＫ３、ＩＬ６、ＣＹＰ１Ｂ１、ＨＳＰ９０ＡＡ１から選択される。

【0218】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＳＡＰＫ／ＪＮＫシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＲＡＣ１、ＥＬＫ１、ＧＲＫ６、ＭＡＰＫ１、ＧＡＤＤ４５Ａ、ＲＡＣ２、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＦＡＤＤ、ＣＤＫ８、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＲＩＰＫ１、ＧＮＢ２Ｌ１、ＩＲＳ１、ＭＡＰＫ３、ＭＡＰＫ１０、ＤＡＸＸ、ＫＲＡＳ、ＰＲＫＣＤ、ＰＲＫＡＡ１、ＭＡＰＫ９、ＣＤＫ２、ＰＩＭ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＴＲＡＦ２、ＴＰ５３、ＬＣＫ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＤＹＲＫ１Ａ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＣＤＣ４２、ＪＵＮ、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＣＲＫＬ、ＢＲＡＦ、ＳＧＫから選択される。

【0219】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＰＰＡｒ／ＲＸＲシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＡＡ２、ＥＰ３００、ＩＮＳ、ＳＭＡＤ２、ＴＲＡＦ６、ＰＰＡＲＡ、ＦＡＳＮ、ＲＸＲＡ、ＭＡＰＫ１、ＳＭＡＤ３、ＧＮＡＳ、ＩＫＢＫＢ、ＮＣＯＲ２、ＡＢＣＡ１、ＧＮＡＱ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＭＡＰＫ８、ＩＲＳ１、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＲＥＬＡ、ＰＲＫＡＡ１、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ、ＮＣＯＡ３、ＭＡＰＫ１４、ＩＮＳＲ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＲＥＢＢＰ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＪＡＫ２、ＣＨＵＫ、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＴＧＦＢＲ１、ＳＭＡＤ４、ＪＵＮ、ＩＬ１Ｒ１、ＰＲＫＣＡ、ＩＬ６、ＨＳＰ９０ＡＡ１、ＡＤＩＰＯＱから選択される。

【0220】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＮＦ−ＫＢシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＲＡＫ１、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＥＰ３００、ＩＮＳ、ＭＹＤ８８、ＰＲＫＣＺ、ＴＲＡＦ６、ＴＢＫ１、ＡＫＴ２、ＥＧＦＲ、ＩＫＢＫＢ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＢＴＲＣ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＲＩＰＫ１、ＨＤＡＣ２、ＫＲＡＳ、ＲＥＬＡ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＴＲＡＦ２、ＴＬＲ４、ＰＤＧＦＲＢ、ＴＮＦ、ＩＮＳＲ、ＬＣＫ、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＲＥＢＢＰ、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＰＤＧＦＲＡ、ＮＦＫＢ１、ＴＬＲ２、ＢＣＬ１０、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３、ＴＮＦＡＩＰ３、ＩＬ１Ｒ１から選択される。

【0221】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ニューレグリンシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＲＢＢ４、ＰＲＫＣＥ、ＩＴＧＡＭ、ＩＴＧＡ５、ＰＴＥＮ、ＰＲＫＣＺ、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＥＧＦＲ、ＥＲＢＢ２、ＰＲＫＣＩ、ＣＤＫＮ１Ｂ、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＰＲＫＤ１、ＭＡＰＫ３、ＩＴＧＡ１、ＫＲＡＳ、ＰＲＫＣＤ、ＳＴＡＴ５Ａ、ＳＲＣ、ＩＴＧＢ７、ＲＡＦ１、ＩＴＧＢ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＤＡＭ１７、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＰＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＩＴＧＢ３、ＥＲＥＧ、ＦＲＡＰ１、ＰＳＥＮ１、ＩＴＧＡ２、ＭＹＣ、ＮＲＧ１、ＣＲＫＬ、ＡＫＴ３、ＰＲＫＣＡ、ＨＳＰ９０ＡＡ１、ＲＰＳ６ＫＢ１から選択される。

【0222】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、Ｗｎｔ及びベータカテニンシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＣＤ４４、ＥＰ３００、ＬＲＰ６、ＤＶＬ３、ＣＳＮＫ１Ｅ、ＧＪＡ１、ＳＭＯ、ＡＫＴ２、ＰＩＮ１、ＣＤＨ１、ＢＴＲＣ、ＧＮＡＱ、ＭＡＲＫ２、ＰＰＰ２Ｒ１Ａ、ＷＮＴ１１、ＳＲＣ、ＤＫＫ１、ＰＰＰ２ＣＡ、ＳＯＸ６、ＳＦＲＰ２、ＩＬＫ、ＬＥＦ１、ＳＯＸ９、ＴＰ５３、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＲＥＢＢＰ、ＴＣＦ７Ｌ２、ＡＫＴ１、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＷＮＴ５Ａ、ＬＲＰ５、ＣＴＮＮＢ１、ＴＧＦＢＲ１、ＣＣＮＤ１、ＧＳＫ３Ａ、ＤＶＬ１、ＡＰＣ、ＣＤＫＮ２Ａ、ＭＹＣ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３、ＳＯＸ２から選択される。

【0223】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、インスリン受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＴＥＮ、ＩＮＳ、ＥＩＦ４Ｅ、ＰＴＰＮ１、ＰＲＫＣＺ、ＭＡＰＫ１、ＴＳＣ１、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＣＢＬ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＲＫＣＩ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＩＲＳ１、ＭＡＰＫ３、ＴＳＣ２、ＫＲＡＳ、ＥＩＦ４ＥＢＰ１、ＳＬＣ２Ａ４、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＰＰＰ１ＣＣ、ＩＮＳＲ、ＲＡＦ１、ＦＹＮ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＪＡＫ１、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＰＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＧＳＫ３Ａ、ＦＲＡＰ１、ＣＲＫＬ、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３、ＦＯＸＯ１、ＳＧＫ、ＲＰＳ６ＫＢ１から選択される。

【0224】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＩＬ−６シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＳＰＢ１、ＴＲＡＦ６、ＭＡＰＫＡＰＫ２、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＩＫＢＫＢ、ＦＯＳ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＭＡＰＫ１０、ＩＬ６ＳＴ、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ１３、ＩＬ６Ｒ、ＲＥＬＡ、ＳＯＣＳ１
、ＭＡＰＫ９、ＡＢＣＢ１、ＴＲＡＦ２、ＭＡＰＫ１４、ＴＮＦ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＭＡＰ２Ｋ２、ＩＬ８、ＪＡＫ２、ＣＨＵＫ、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＣＥＢＰＢ、ＪＵＮ、ＩＬ１Ｒ１、ＳＲＦ、ＩＬ６から選択される。

【0225】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、肝胆汁うっ滞と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＲＡＫ１、ＩＮＳ、ＭＹＤ８８、ＰＲＫＣＺ、ＴＲＡＦ６、ＰＰＡＲＡ、ＲＸＲＡ、ＩＫＢＫＢ、ＰＲＫＣＩ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＭＡＰＫ８、ＰＲＫＤ１、ＭＡＰＫ１０、ＲＥＬＡ、ＰＲＫＣＤ、ＭＡＰＫ９、ＡＢＣＢ１、ＴＲＡＦ２、ＴＬＲ４、ＴＮＦ、ＩＮＳＲ、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＩＬ８、ＣＨＵＫ、ＮＲ１Ｈ２、ＴＪＰ２、ＮＦＫＢ１、ＥＳＲ１、ＳＲＥＢＦ１、ＦＧＦＲ４、ＪＵＮ、ＩＬ１Ｒ１、ＰＲＫＣＡ、ＩＬ６から選択される。

【0226】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＩＧＦ−１シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＧＦ１、ＰＲＫＣＺ、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＮＥＤＤ４、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＲＫＣＩ、ＰＴＫ２、ＦＯＳ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＩＧＦ１Ｒ、ＩＲＳ１、ＭＡＰＫ３、ＩＧＦＢＰ７、ＫＲＡＳ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＹＷＨＡＺ、ＰＸＮ、ＲＡＦ１、ＣＡＳＰ９、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＰＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＩＧＦＢＰ２、ＳＦＮ、ＪＵＮ、ＣＹＲ６１、ＡＫＴ３、ＦＯＸＯ１、ＳＲＦ、ＣＴＧＦ、ＲＰＳ６ＫＢ１から選択される。

【0227】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＮＲＦ２媒介酸化ストレス応答と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＥＰ３００、ＳＯＤ２、ＰＲＫＣＺ、ＭＡＰＫ１、ＳＱＳＴＭ１、ＮＱＯ１、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＲＫＣＩ、ＦＯＳ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＰＲＫＤ１、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＰＲＫＣＤ、ＧＳＴＰ１、ＭＡＰＫ９、ＦＴＬ、ＮＦＥ２Ｌ２、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＭＡＰＫ１４、ＲＡＦ１、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＲＥＢＢＰ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＰＩＢ、ＪＵＮ、ＫＥＡＰ１、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＴＦ４、ＰＲＫＣＡ、ＥＩＦ２ＡＫ３、ＨＳＰ９０ＡＡ１から選択される。

【0228】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、肝線維症／肝星細胞細胞活性化と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＤＮ１、ＩＧＦ１、ＫＤＲ、ＦＬＴ１、ＳＭＡＤ２、ＦＧＦＲ１、ＭＥＴ、ＰＧＦ、ＳＭＡＤ３、ＥＧＦＲ、ＦＡＳ、ＣＳＦ１、ＮＦＫＢ２、ＢＣＬ２、ＭＹＨ９、ＩＧＦ１Ｒ、ＩＬ６Ｒ、ＲＥＬＡ、ＴＬＲ４、ＰＤＧＦＲＢ、ＴＮＦ、ＲＥＬＢ、ＩＬ８、ＰＤＧＦＲＡ、ＮＦＫＢ１、ＴＧＦＢＲ１、ＳＭＡＤ４、ＶＥＧＦＡ、ＢＡＸ、ＩＬ１Ｒ１、ＣＣＬ２、ＨＧＦ、ＭＭＰ１、ＳＴＡＴ１、ＩＬ６、ＣＴＧＦ、ＭＭＰ９から選択される。

【0229】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＰＰＡＲシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＰ３００、ＩＮＳ、ＴＲＡＦ６、ＰＰＡＲＡ、ＲＸＲＡ、ＭＡＰＫ１、ＩＫＢＫＢ、ＮＣＯＲ２、ＦＯＳ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＭＡＰＫ３、ＮＲＩＰ１、ＫＲＡＳ、ＰＰＡＲＧ、ＲＥＬＡ、ＳＴＡＴ５Ａ、ＴＲＡＦ２、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ、ＰＤＧＦＲＢ、ＴＮＦ、ＩＮＳＲ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＲＥＢＢＰ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＣＨＵＫ、ＰＤＧＦＲＡ、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＪＵＮ、ＩＬ１Ｒ１、ＨＳＰ９０ＡＡ１から選択される。

【0230】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＦｃイプシロンＲＩシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＲＡＣ１、ＰＲＫＣＺ、ＬＹＮ、ＭＡＰＫ１、ＲＡＣ２、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＳＹＫ、ＰＲＫＣＩ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＰＲＫＤ１、ＭＡＰＫ３、ＭＡＰＫ１０、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ１
３、ＰＲＫＣＤ、ＭＡＰＫ９、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＢＴＫ、ＭＡＰＫ１４、ＴＮＦ、ＲＡＦ１、ＦＹＮ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＰＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＡＫＴ３、ＶＡＶ３、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0231】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、Ｇタンパク質共役受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＲＡＰ１Ａ、ＲＧＳ１６、ＭＡＰＫ１、ＧＮＡＳ、ＡＫＴ２、ＩＫＢＫＢ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＲＥＢ１、ＧＮＡＱ、ＮＦＫＢ２、ＣＡＭＫ２Ａ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＲＥＬＡ、ＳＲＣ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＦＹＮ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＰＤＰＫ１、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＢＲＡＦ、ＡＴＦ４、ＡＫＴ３、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0232】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、イノシトールリン酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＰＴＥＮ、ＧＲＫ６、ＭＡＰＫ１、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＤＫ８、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＰＲＫＣＤ、ＰＲＫＡＡ１、ＭＡＰＫ９、ＣＤＫ２、ＰＩＭ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＤＹＲＫ１Ａ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＩＰ５Ｋ１Ａ、ＰＩＫ３Ｒ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＡＴＭ、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＢＲＡＦ、ＳＧＫから選択される。

【0233】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＰＤＧＦシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＥＬＫ１、ＡＢＬ２、ＭＡＰＫ１、ＰＩＫ３ＣＡ、ＦＯＳ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＣＡＶ１、ＡＢＬ１、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＳＲＣ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＰＤＧＦＲＢ、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＧＦＲＡ、ＳＴＡＴ３、ＳＰＨＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＭＹＣ、ＪＵＮ、ＣＲＫＬ、ＰＲＫＣＡ、ＳＲＦ、ＳＴＡＴ１、ＳＰＨＫ２から選択される。

【0234】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＶＥＧＦシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＣＴＮ４、ＲＯＣＫ１、ＫＤＲ、ＦＬＴ１、ＲＯＣＫ２、ＭＡＰＫ１、ＰＧＦ、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＡＲＮＴ、ＰＴＫ２、ＢＣＬ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＢＣＬ２Ｌ１、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＨＩＦｌＡ、ＮＯＳ３、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＰＸＮ、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＥＬＡＶＬ１、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＳＦＮ、ＶＥＧＦＡ、ＡＫＴ３、ＦＯＸＯ１、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0235】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ナチュラルキラー細胞シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＲＡＣ１、ＰＲＫＣＺ、ＭＡＰＫ１、ＲＡＣ２、ＰＴＰＮ１１、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＳＹＫ、ＰＲＫＣＩ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＰＲＫＤ１、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＰＲＫＣＤ、ＰＴＰＮ６、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＬＣＫ、ＲＡＦ１、ＦＹＮ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＡＫ４、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＡＫＴ３、ＶＡＶ３、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0236】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、細胞周期：Ｇ１／Ｓチェックポイント調節と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＤＡＣ４、ＳＭＡＤ３、ＳＵＶ３９Ｈ１、ＨＤＡＣ５、ＣＤＫＮ１Ｂ、ＢＴＲＣ、ＡＴＲ、ＡＢＬ１、Ｅ２Ｆ１、ＨＤＡＣ２、ＨＤＡＣ７Ａ、ＲＢ１、ＨＤＡＣ１１、ＨＤＡＣ９、ＣＤＫ２、Ｅ２Ｆ２、ＨＤＡＣ３、ＴＰ５３、ＣＤＫＮ１Ａ、ＣＣＮＤ１、Ｅ２Ｆ４、ＡＴＭ、ＲＢＬ２、ＳＭＡＤ４、ＣＤＫＮ２Ａ、ＭＹＣ、ＮＲＧ１、ＧＳＫ３Ｂ、ＲＢＬ１、ＨＤＡＣ６から選択される。

【0237】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、Ｔ細胞受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＲＡＣ１、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＩＫＢＫＢ、ＣＢＬ、ＰＩＫ３ＣＡ、
ＦＯＳ、ＮＦＫＢ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＲＥＬＡ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＢＴＫ、ＬＣＫ、ＲＡＦ１、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＦＹＮ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＣＨＵＫ、ＭＡＰ２Ｋ１、ＮＦＫＢ１、ＩＴＫ、ＢＣＬ１０、ＪＵＮ、ＶＡＶ３から選択される。

【0238】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、細胞死受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＣＲＡＤＤ、ＨＳＰＢ１、ＢＩＤ、ＢＩＲＣ４、ＴＢＫ１、ＩＫＢＫＢ、ＦＡＤＤ、ＦＡＳ、ＮＦＫＢ２、ＢＣＬ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＭＡＰＫ８、ＲＩＰＫ１、ＣＡＳＰ８、ＤＡＸＸ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＲＥＬＡ、ＴＲＡＦ２、ＴＮＦ、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＣＡＳＰ９、ＣＨＵＫ、ＡＰＡＦ１、ＮＦＫＢ１、ＣＡＳＰ２、ＢＩＲＣ２、ＣＡＳＰ３、ＢＩＲＣ３から選択される。

【0239】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＦＧＦシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＲＡＣ１、ＦＧＦＲ１、ＭＥＴ、ＭＡＰＫＡＰＫ２、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＲＥＢ１、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＭＡＰＫ１３、ＰＴＰＮ６、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＭＡＰＫ１４、ＲＡＦ１、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＦＧＦＲ４、ＣＲＫＬ、ＡＴＦ４、ＡＫＴ３、ＰＲＫＣＡ、ＨＧＦから選択される。

【0240】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＧＭ−ＣＳＦシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＬＹＮ、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＡＭＫ２Ａ、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＧＮＢ２Ｌ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＭＡＰＫ３、ＥＴＳ１、ＫＲＡＳ、ＲＵＮＸ１、ＰＩＭ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＣＣＮＤ１、ＡＫＴ３、ＳＴＡＴ１から選択される。

【0241】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、筋萎縮性側索硬化症シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＢＩＤ、ＩＧＦ１、ＲＡＣ１、ＢＩＲＣ４、ＰＧＦ、ＣＡＰＮＳ１、ＣＡＰＮ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＢＣＬ２、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＢＣＬ２Ｌ１、ＣＡＰＮ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＴＰ５３、ＣＡＳＰ９、ＰＩＫ３Ｒ１、ＲＡＢ５Ａ、ＣＡＳＰ１、ＡＰＡＦ１、ＶＥＧＦＡ、ＢＩＲＣ２、ＢＡＸ、ＡＫＴ３、ＣＡＳＰ３、ＢＩＲＣ３から選択される。

【0242】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＪＡＫ／Ｓｔａｔシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＴＰＮ１、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＳＯＣＳ１、ＳＴＡＴ５Ａ、ＰＴＰＮ６、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＲＡＦ１、ＣＤＫＮ１Ａ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＪＡＫ１、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＦＲＡＰ１、ＡＫＴ３、ＳＴＡＴ１から選択される。

【0243】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ニコチン酸及びニコチンアミド代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＲＡＫ１、ＰＲＫＡＡ２、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＧＲＫ６、ＭＡＰＫ１、ＰＬＫ１、ＡＫＴ２、ＣＤＫ８、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＰＲＫＣＤ、ＰＲＫＡＡ１、ＰＢＥＦ１、ＭＡＰＫ９、ＣＤＫ２、ＰＩＭ１、ＤＹＲＫ１Ａ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＡＫ３、ＮＴ５Ｅ、ＴＴＫ、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＢＲＡＦ、ＳＧＫから選択される。

【0244】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ケモカインシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＣＸＣＲ４、ＲＯＣＫ２、ＭＡＰＫ１、ＰＴＫ２、ＦＯＳ、ＣＦＬ１、ＧＮＡＱ、ＣＡＭＫ２Ａ、ＣＸＣＬ１２、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ１３
、ＲＨＯＡ、ＣＣＲ３、ＳＲＣ、ＰＰＰ１ＣＣ、ＭＡＰＫ１４、ＮＯＸ１、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＭＡＰ２Ｋ１、ＪＵＮ、ＣＣＬ２、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0245】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＩＬ−２シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＳＹＫ、ＦＯＳ、ＳＴＡＴ５Ｂ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＳＯＣＳ１、ＳＴＡＴ５Ａ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＬＣＫ、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＪＡＫ１、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＪＵＮ、ＡＫＴ３から選択される。

【0246】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、シナプス長期抑制と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＩＧＦ１、ＰＲＫＣＺ、ＰＲＤＸ６、ＬＹＮ、ＭＡＰＫ１、ＧＮＡＳ、ＰＲＫＣＩ、ＧＮＡＱ、ＰＰＰ２Ｒ１Ａ、ＩＧＦ１Ｒ、ＰＲＫＤ１、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＧＲＮ、ＰＲＫＣＤ、ＮＯＳ３、ＮＯＳ２Ａ、ＰＰＰ２ＣＡ、ＹＷＨＡＺ、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＰＰＰ２Ｒ５Ｃ、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0247】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、エストロゲン受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＴＡＦ４Ｂ、ＥＰ３００、ＣＡＲＭ１、ＰＣＡＦ、ＭＡＰＫ１、ＮＣＯＲ２、ＳＭＡＲＣＡ４、ＭＡＰＫ３、ＮＲＩＰ１、ＫＲＡＳ、ＳＲＣ、ＮＲ３Ｃ１、ＨＤＡＣ３、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ、ＲＢＭ９、ＮＣＯＡ３、ＲＡＦ１、ＣＲＥＢＢＰ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＮＣＯＡ２、ＭＡＰ２Ｋ１、ＰＲＫＤＣ、ＥＳＲ１、ＥＳＲ２から選択される。

【0248】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、タンパク質ユビキチン化経路と関連しており、該ＤＮＡは、ＴＲＡＦ６、ＳＭＵＲＦ１、ＢＩＲＣ４、ＢＲＣＡ１、ＵＣＨＬ１、ＮＥＤＤ４、ＣＢＬ、ＵＢＥ２Ｉ、ＢＴＲＣ、ＨＳＰＡ５、ＵＳＰ７、ＵＳＰ１０、ＦＢＸＷ７、ＵＳＰ９Ｘ、ＳＴＵＢ１、ＵＳＰ２２、Ｂ２Ｍ、ＢＩＲＣ２、ＰＡＲＫ２、ＵＳＰ８、ＵＳＰ１、ＶＨＬ、ＨＳＰ９０ＡＡ１、ＢＩＲＣ３から選択される。

【0249】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＩＬ−１０シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＴＲＡＦ６、ＣＣＲ１、ＥＬＫ１、ＩＫＢＫＢ、ＳＰ１、ＦＯＳ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ１３、ＲＥＬＡ、ＭＡＰＫ１４、ＴＮＦ、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＪＡＫ１、ＣＨＵＫ、ＳＴＡＴ３、ＮＦＫＢ１、ＪＵＮ、ＩＬ１Ｒ１、ＩＬ６から選択される。

【0250】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＶＤＲ／ＲＸＲ活性化と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＥＰ３００、ＰＲＫＣＺ、ＲＸＲＡ、ＧＡＤＤ４５Ａ、ＨＥＳ１、ＮＣＯＲ２、ＳＰ１、ＰＲＫＣ１、ＣＤＫＮ１Ｂ、ＰＲＫＤ１、ＰＲＫＣＤ、ＲＵＮＸ２、ＫＬＦ４、ＹＹ１、ＮＣＯＡ３、ＣＤＫＮ１Ａ、ＮＣＯＡ２、ＳＰＰ１、ＬＲＰ５、ＣＥＢＰＢ、ＦＯＸＯ１、ＰＲＫＣＡから選択される。

【0251】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＴＧＦ−ベータシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＰ３００、ＳＭＡＤ２、ＳＭＵＲＦ１、ＭＡＰＫ１、ＳＭＡＤ３、ＳＭＡＤ１、ＦＯＳ、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＭＡＰＫ９、ＲＵＮＸ２、ＳＥＲＰＩＮＥ１、ＲＡＦ１、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＲＥＢＢＰ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＭＡＰ２Ｋ１、ＴＧＦＢＲ１、ＳＭＡＤ４、ＪＵＮ、ＳＭＡＤ５から選択される。

【0252】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、Ｔｏｌｌ様受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＲＡＫ１、ＥＩＦ２ＡＫ２、ＭＹＤ８８、ＴＲＡＦ６、ＰＰＡＲＡ、ＥＬＫ１、ＩＫＢＫＢ、ＦＯＳ、ＮＦＫＢ２、ＭＡＰ３Ｋ１４、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ１３、ＲＥＬＡ、ＴＬＲ４、ＭＡＰＫ１４、ＩＫＢＫＧ、ＲＥＬＢ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＣＨ
ＵＫ、ＮＦＫＢ１、ＴＬＲ２、ＪＵＮから選択される。

【0253】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ｐ３８ＭＡＰＫシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＳＰＢ１、ＩＲＡＫ１、ＴＲＡＦ６、ＭＡＰＫＡＰＫ２、ＥＬＫ１、ＦＡＤＤ、ＦＡＳ、ＣＲＥＢ１、ＤＤＩＴ３、ＲＰＳ６ＫＡ４、ＤＡＸＸ、ＭＡＰＫ１３、ＴＲＡＦ２、ＭＡＰＫ１４、ＴＮＦ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＴＧＦＢＲ１、ＭＹＣ、ＡＴＦ４、ＩＬ１Ｒ１、ＳＲＦ、ＳＴＡＴ１から選択される。

【0254】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ニューロトロフィン／ＴＲＫシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＮＴＲＫ２、ＭＡＰＫ１、ＰＴＰＮ１１、ＰＩＫ３ＣＡ、ＣＲＥＢ１、ＦＯＳ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＰＫ１、ＭＡＰ２Ｋ１、ＣＤＣ４２、ＪＵＮ、及びＡＴＦ４から選択される。

【0255】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＦＸＲ／ＲＸＲ活性化と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＮＳ、ＰＰＡＲＡ、ＦＡＳＮ、ＲＸＲＡ、ＡＫＴ２、ＳＤＣ１、ＭＡＰＫ８、ＡＰＯＢ、ＭＡＰＫ１０、ＰＰＡＲＧ、ＭＴＴＰ、ＭＡＰＫ９、ＰＰＡＲＧＣ１Ａ、ＴＮＦ、ＣＲＥＢＢＰ、ＡＫＴ１、ＳＲＥＢＦ１、ＦＧＦＲ４、ＡＫＴ３、及びＦＯＸＯ１から選択される。

【0256】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、シナプス長期増強と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＲＡＰ１Ａ、ＥＰ３００、ＰＲＫＣＺ、ＭＡＰＫ１、ＣＲＥＢ１、ＰＲＫＣＩ、ＧＮＡＱ、ＣＡＭＫ２Ａ、ＰＲＫＤ１、ＭＡＰＫ３、ＫＲＡＳ、ＰＲＫＣＤ、ＰＰＰ１ＣＣ、ＲＡＦ１、ＣＲＥＢＢＰ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＭＡＰ２Ｋ１、ＡＴＦ４、及びＰＲＫＣＡから選択される。

【0257】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、カルシウムシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＲＡＰ１Ａ、ＥＰ３００、ＨＤＡＣ４、ＭＡＰＫ１、ＨＤＡＣ５、ＣＲＥＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＭＹＨ９、ＭＡＰＫ３、ＨＤＡＣ２、ＨＤＡＣ７Ａ、ＨＤＡＣ１１、ＨＤＡＣ９、ＨＤＡＣ３、ＣＲＥＢＢＰ、ＣＡＬＲ、ＣＡＭＫＫ２、ＡＴＦ４、及びＨＤＡＣ６から選択される。

【0258】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＥＧＦシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＬＫ１、ＭＡＰＫ１、ＥＧＦＲ、ＰＩＫ３ＣＡ、ＦＯＳ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ３、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＲＡＦ１、ＪＡＫ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＪＵＮ、ＰＲＫＣＡ、ＳＲＦ、及びＳＴＡＴ１から選択される。

【0259】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、心臓血管系における低酸素シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＤＮ１、ＰＴＥＮ、ＥＰ３００、ＮＱＯ１、ＵＢＥ２Ｉ、ＣＲＥＢ１、ＡＲＮＴ、ＨＩＦ１Ａ、ＳＬＣ２Ａ４、ＮＯＳ３、ＴＰ５３、ＬＤＨＡ、ＡＫＴ１、ＡＴＭ、ＶＥＧＦＡ、ＪＵＮ、ＡＴＦ４、ＶＨＬ、及びＨＳＰ９０ＡＡ１から選択される。

【0260】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＲＸＲ機能のＬＰＳ／ＩＬ−１媒介阻害と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＲＡＫ１、ＭＹＤ８８、ＴＲＡＦ６、ＰＰＡＲＡ、ＲＸＲＡ、ＡＢＣＡ１、ＭＡＰＫ８、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＧＳＴＰ１、ＭＡＰＫ９、ＡＢＣＢ１、ＴＲＡＦ２、ＴＬＲ４、ＴＮＦ、ＭＡＰ３Ｋ７、ＮＲ１Ｈ２、ＳＲＥＢＦ１、ＪＵＮ、及びＩＬ１Ｒ１から選択される。

【0261】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＬＸＲ／ＲＸＲ活性化と関連しており、該ＤＮＡは、ＦＡＳＮ、ＲＸＲＡ、ＮＣＯＲ２、ＡＢＣＡ１、ＮＦＫＢ２、ＩＲＦ３、ＲＥＬＡ、ＮＯＳ２Ａ、ＴＬＲ４、ＴＮＦ、ＲＥＬＢ、ＬＤＬＲ、ＮＲ１Ｈ２、ＮＦＫＢ１、ＳＲＥＢＦ１、ＩＬ１Ｒ１、ＣＣＬ２、ＩＬ６、及びＭＭＰ９から選択される。

【0262】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アミロイドプロセシングと関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＫＣＥ、ＣＳＮＫ１Ｅ、ＭＡＰＫ１、ＣＡＰＮＳ１、ＡＫＴ２、ＣＡＰＮ２、ＣＡＰＮ１、ＭＡＰＫ３、ＭＡＰＫ１３、ＭＡＰＴ、ＭＡＰＫ１４、ＡＫＴ１、ＰＳＥＮ１、ＣＳＮＫ１Ａ１、ＧＳＫ３Ｂ、ＡＫＴ３、及びＡＰＰから選択される。

【0263】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＩＬ−４シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＩＲＳ１、ＫＲＡＳ、ＳＯＣＳ１、ＰＴＰＮ６、ＮＲ３Ｃ１、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＪＡＫ１、ＡＫＴ１、ＪＡＫ２、ＰＩＫ３Ｒ１、ＦＲＡＰ１、ＡＫＴ３、及びＲＰＳ６ＫＢ１から選択される。

【0264】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、細胞周期：Ｇ２／Ｍ ＤＮＡ損傷チェックポイント調節と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＰ３００、ＰＣＡＦ、ＢＲＣＡ１、ＧＡＤＤ４５Ａ、ＰＬＫ１、ＢＴＲＣ、ＣＨＥＫ１、ＡＴＲ、ＣＨＥＫ２、ＹＷＨＡＺ、ＴＰ５３、ＣＤＫＮ１Ａ、ＰＲＫＤＣ、ＡＴＭ、ＳＦＮ、及びＣＤＫＮ２Ａから選択される。

【0265】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、心血管系における一酸化窒素シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＫＤＲ、ＦＬＴ１、ＰＧＦ、ＡＫＴ２、ＰＩＫ３ＣＡ、ＰＩＫ３ＣＢ、ＰＩＫ３Ｃ３、ＣＡＶ１、ＰＲＫＣＤ、ＮＯＳ３、ＰＩＫ３Ｃ２Ａ、ＡＫＴ１、ＰＩＫ３Ｒ１、ＶＥＧＦＡ、ＡＫＴ３、及びＨＳＰ９０ＡＡ１から選択される。

【0266】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、プリン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＮＭＥ２、ＳＭＡＲＣＡ４、ＭＹＨ９、ＲＲＭ２、ＡＤＡＲ、ＥＩＦ２ＡＫ４、ＰＫＭ２、ＥＮＴＰＤ１、ＲＡＤ５１、ＲＲＭ２Ｂ、ＴＪＰ２、ＲＡＤ５１Ｃ、ＮＴ５Ｅ、ＰＯＬＤ１、及びＮＭＥ１から選択される。

【0267】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ｃＡＭＰ媒介シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＲＡＰ１Ａ、ＭＡＰＫ１、ＧＮＡＳ、ＣＲＥＢ１、ＣＡＭＫ２Ａ、ＭＡＰＫ３、ＳＲＣ、ＲＡＦ１、ＭＡＰ２Ｋ２、ＳＴＡＴ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ＢＲＡＦ、及びＡＴＦ４から選択される。

【0268】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ミトコンドリア機能障害と関連しており、該ＤＮＡは、ＳＯＤ２、ＭＡＰＫ８、ＣＡＳＰ８、ＭＡＰＫ１０、ＭＡＰＫ９、ＣＡＳＰ９、ＰＡＲＫ７、ＰＳＥＮ１、ＰＡＲＫ２、ＡＰＰ、及びＣＡＳＰ３から選択される。

【0269】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、Ｎｏｔｃｈシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＥＳ１、ＪＡＧ１、ＮＵＭＢ、ＮＯＴＣＨ４、ＡＤＡＭ１７、ＮＯＴＣＨ２、ＰＳＥＮ１、ＮＯＴＣＨ３、ＮＯＴＣＨ１、及びＤＬＬ４から選択される。

【0270】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、小胞体ストレス経路と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＳＰＡ５、ＭＡＰＫ８、ＸＢＰ１、ＴＲＡＦ２、ＡＴＦ６、ＣＡＳＰ９、ＡＴＦ４、ＥＩＦ２ＡＫ３、及びＣＡＳＰ３から選択される。

【0271】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ピリミジン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＮＭＥ２、ＡＩＣＤＡ、ＲＲＭ２、ＥＩＦ２ＡＫ４、ＥＮＴＰＤ１、ＲＲＭ２Ｂ、ＮＴ５Ｅ、ＰＯＬＤ１、及びＮＭＥ１から選択される。

【0272】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、パーキンソンシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＵＣＨＬ１、ＭＡＰＫ８、ＭＡＰＫ１３、ＭＡＰＫ１４、ＣＡＳＰ９、ＰＡＲＫ７、ＰＡＲＫ２、及びＣＡＳＰ３から選択される。

【0273】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、心臓及びベータアドレナリンシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＧＮＡＳ、ＧＮＡＱ、ＰＰＰ２Ｒ１Ａ、ＧＮＢ２Ｌ１、ＰＰＰ２ＣＡ、ＰＰＰ１ＣＣ、及びＰＰＰ２Ｒ５Ｃから選択される。

【0274】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、解糖／糖新生と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＫ２、ＧＣＫ、ＧＰＩ、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＰＫＭ２、ＬＤＨＡ、及びＨＫ１から選択される。

【0275】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、インターフェロンシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＲＦ１、ＳＯＣＳ１、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＩＦＩＴＭ１、ＳＴＡＴ１、及びＩＦＩＴ３から選択される。

【0276】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ソニックヘッジホッグシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＲＲＢ２、ＳＭＯ、ＧＬＩ２、ＤＹＲＫ１Ａ、ＧＬＩ１、ＧＳＫ３Ｂ、及びＤＹＲＫＩＢから選択される。

【0277】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、グリセロリン脂質代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＬＤ１、ＧＲＮ、ＧＰＡＭ、ＹＷＨＡＺ、ＳＰＨＫ１、及びＳＰＨＫ２から選択される。

【0278】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、リン脂質分解と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、ＰＬＤ１、ＧＲＮ、ＹＷＨＡＺ、ＳＰＨＫ１、及びＳＰＨＫ２から選択される。

【0279】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、トリプトファン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＳＩＡＨ２、ＰＲＭＴ５、ＮＥＤＤ４、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＣＹＰ１Ｂ１、及びＳＩＡＨ１から選択される。

【0280】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、リジン分解と関連しており、該ＤＮＡは、ＳＵＶ３９Ｈ１、ＥＨＭＴ２、ＮＳＤ１、ＳＥＴＤ７、及びＰＰＰ２Ｒ５Ｃから選択される。

【0281】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ヌクレオチド切出修復経路と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＲＣＣ５、ＥＲＣＣ４、ＸＰＡ、ＸＰＣ、及びＥＲＣＣ１から選択される。

【0282】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、デンプン及びスクロース代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＵＣＨＬ１、ＨＫ２、ＧＣＫ、ＧＰＩ、及びＨＫ１から選択される。

【0283】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アミノ糖代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＮＱＯ１、ＨＫ２、ＧＣＫ、及びＨＫ１から選択される。

【0284】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アラキドン酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、ＧＲＮ、ＹＷＨＡＺ、及びＣＹＰ１Ｂ１から選択される。

【0285】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、概日リズムシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＣＳＮＫ１Ｅ、ＣＲＥＢ１、ＡＴＦ４、及びＮＲ１Ｄ１から選択される。

【0286】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、凝固系と関連しており、該ＤＮＡは、ＢＤＫＲＢ１、Ｆ２Ｒ、ＳＥＲＰＩＮＥ１、及びＦ３から選択される。

【0287】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ドーパミン受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＰＰ２Ｒ１Ａ、ＰＰＰ２ＣＡ、ＰＰＰ１ＣＣ、及びＰＰＰ２Ｒ５Ｃから選択される。

【0288】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、グルタチオン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＤＨ２、ＧＳＴＰ１、ＡＮＰＥＰ、及びＩＤＨ１から選択される。

【0289】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、グリセロ脂質代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＧＰＡＭ、ＳＰＨＫ１、及びＳＰＨＫ２から選択される。

【0290】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、リノール酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、ＧＲＮ、ＹＷＨＡＺ、及びＣＹＰ１Ｂ１から選択される。

【0291】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、メチオニン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＤＮＭＴ１、ＤＮＭＴ３Ｂ、ＡＨＣＹ、及びＤＮＭＴ３Ａから選択される。

【0292】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ピルビン酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＧＬＯ１、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＰＫＭ２、及びＬＤＨＡから選択される。

【0293】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アルギニン及びプロリン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１、ＮＯＳ３、及びＮＯＳ２Ａから選択される。

【0294】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、エイコサノイドシグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、ＧＲＮ、及びＹＷＨＡＺから選択される。

【0295】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、フルクトース及びマンノース代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＫ２、ＧＣＫ、及びＨＫ１から選択される。

【0296】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ガラクトース代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＨＫ２、ＧＣＫ、及びＨＫ１から選択される。

【0297】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、スチルベン、クマリン、及びリグニンの生合成と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、ＰＲＤＸ１、及びＴＹＲから選択される。

【0298】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、抗原提示経路と関連しており、該ＤＮＡは、ＣＡＬＲ、及びＢ２Ｍから選択される。

【0299】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ステロイドの生合成と関連しており、該ＤＮＡは、ＮＱＯ１、及びＤＨＣＲ７から選択される。

【0300】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ブタン酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１、及びＮＬＧＮ１から選択される。

【0301】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、クエン酸回路と関連しており、該ＤＮＡは、ＩＤＨ２、及びＩＤＨ１から選択される。

【0302】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、脂肪酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１、及びＣＹＰ１Ｂ１から選択される。

【0303】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、グリセロリン脂質代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、及びＣＨＫＡから選択される。

【0304】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ヒスチジン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＭＴ５、及びＡＬＤＨ１Ａ１から選択される。

【0305】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、イノシトール代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＥＲＯ１Ｌ、及びＡＰＥＸ１から選択される。

【0306】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、シトクロムＰ４５０による生体異物の代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＧＳＴＰ１、及びＣＹＰ１Ｂ１から選択される。

【0307】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、メタン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、及びＰＲＤＸ１から選択される。

【0308】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、フェニルアラニン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ６、及びＰＲＤＸ１から選択される。

【0309】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、プロパン酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１、及びＬＤＨＡから選択される。

【0310】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、セレノアミノ酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＭＴ５、及びＡＨＣＹから選択される。

【0311】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、スフィンゴ脂質代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＳＰＨＫ１、及びＳＰＨＫ２から選択される。

【0312】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アミノホスホン酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＭＴ５から選択される。

【0313】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アンドロゲン及びエストロゲン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＭＴ５である。

【0314】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、アスコルビン酸及びアルダル酸代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１である。

【0315】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、胆汁酸生合成と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１である。

【0316】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、システイン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＬＤＨＡである。

【0317】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、脂肪酸生合成と関連しており、該ＤＮＡは、ＦＡＳＮである。

【0318】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、グルタミン酸受容体シグナル伝達と関連しており、該ＤＮＡは、ＧＮＢ２Ｌ１である。

【0319】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ＮＲＦ２媒介酸化ストレス応答と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＤＸ１である。

【0320】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ペントースリン酸経路と関連しており、該ＤＮＡは、ＧＰＩである。

【0321】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ペントースとグルクロン酸の相互変換と関連しており、該ＤＮＡは、ＵＣＨＬ１である。

【0322】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、レチノール代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＦＤＨ１Ａ１である。

【0323】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、リボフラビン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＴＹＲである。

【0324】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、チロシン代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＭＴ５、及びＴＹＲから選択される。

【0325】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ユビキノン生合成と関連しており、該ＤＮＡは、ＰＲＭＴ５である。

【0326】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、バリン、ロイシン、及びイソロイシンの分解と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１である。

【0327】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、リジン分解と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＬＤＨ１Ａ１である。

【0328】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、グリシン、セリン、及びスレオニンの代謝と関連しており、該ＤＮＡは、ＣＨＫＡである。

【0329】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、痛みまたは味覚と関連しており、該ＤＮＡは、ＴＲＰＭ５、ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＣ５、ＴＲＰＣ６、ＴＲＰＣ１、Ｃｎｒｌ、ｃｎｒ２、Ｇｒｋ２、Ｔｒｐａ１、Ｐｏｍｃ、Ｃｇｒｐ、Ｃｒｆ、Ｐｋａ、Ｅｒａ、Ｎｒ２ｂ、ＴＲＰＭ５、Ｐｒｋａｃａ、Ｐｒｋａｃｂ、Ｐｒｋａｒ１ａ、及びＰｒｋａｒ２ａから選択される。

【0330】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、ミトコンドリア機能と関連しており、該ＤＮＡは、ＡＩＦ、ＣｙｔＣ、ＳＭＡＣ（Ｄｉａｂｌｏ）、Ａｉｆｍ−１、及びＡｉｆｍ−２から選択される。

【0331】

いくつかの実施形態では、該標的ＤＮＡは、発達神経学と関連しており、該ＤＮＡは、ＢＭＰ−４、Ｃｈｏｒｄｉｎ（Ｃｈｒｄ）、Ｎｏｇｇｉｎ（Ｎｏｇ）、ＷＮＴ（Ｗｎｔ２、Ｗｎｔ２ｂ、Ｗｎｔ３ａ、Ｗｎｔ４、Ｗｎｔ５ａ、Ｗｎｔ６、Ｗｎｔ７ｂ、Ｗｎｔ８ｂ、Ｗｎｔ９ａ、Ｗｎｔ９ｂ、Ｗｎｔ１０ａ、Ｗｎｔ１０ｂ、Ｗｎｔ１６）、ベータカテニン、Ｄｋｋ−１、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ関連タンパク質、Ｏｔｘ−２、Ｇｂｘ２、ＦＧＦ−８、リーリン、Ｄａｂｌ、ｕｎｃ−８６（Ｐｏｕ４ｆ１またはＢｒｎ３ａ）、Ｎｕｍｂ、Ｒ
ｅｌｎから選択される。

【0332】

本発明の別の態様は、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）の部位特異的エンドヌクレアーゼ的開裂のための方法であって、本明細書に記載の化合物、ＲＮＰ、または組成物を、プロトスペーサー隣接モチーフ（ＰＡＭ）提示オリゴヌクレオチド（ＰＡＭｍｅｒ）の存在下投与することを含む方法を提供する。本発明での使用に適した適切なＰＡＭｍｅｒとしては、Ｏ’Ｃｏｎｎｅｌｌ，Ｍ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，２０１４， ５１６（７５３０）：２６３−６に記載のものが挙げられるがこれらに限定されない。

【0333】

本発明の別の態様は、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）の部位特異的エンドヌクレアーゼ的開裂のための方法であって、本明細書に記載の通り、ＣＲＩＳＰＲ／ＣａｓタイプＩＩＩ−Ｂ Ｃｍｒ複合体を含む化合物もしくはＲＮＰ、またはその組成物を投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、該タイプＩＩＩ−Ｂ Ｃｍｒ複合体は、Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓ、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ｓｏｌｆａｔａｒｉｃｕｓ、またはＴｈｅｒｍｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ由来でよい。いくつかの実施形態では、本発明での使用に適した該Ｃｍｒタンパク質は、Ｈａｌｅ，Ｃ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２０１４， ２８：２４３２−２４４３，及びＭａｋａｒｏｖａ Ｋ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１５， １３， １−１５に記載のものが挙げられるがこれらに限定されない。

【0334】

本発明の実施形態を、以下の実施例により説明する。しかしながら、本発明の実施形態は、それらの他の変形が当業者に知られ、または本開示に照らして明らかにされるように、これら実施例の具体的詳細に限定されないことを理解されたい。

【実施例】

【0335】

別段の指定のない限り、出発物質は、概してＡｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｃｏ．（ウィスコンシン州ミルウォーキー）、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｉｎｃ．（ニューハンプシャー州ウィンダム）、Ａｃｒｏｓ Ｏｒｇａｎｉｃｓ（ニュージャージー州フェアローン）、Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｌｔｄ．（コーンウォール、イングランド）、Ｔｙｇｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（ニュージャージー州プリンストン）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（ロンドン、イングランド）、及びＡｃｃｅｌａ ＣｈｅｍＢｉｏ（カリフォルニア州サンディエゴ）等の商業的供給源から入手可能である。

【0336】

一般的実験手順
ＮＭＲスペクトルは、プロトンについて、Ｖａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ（商標）４００（Ｖａｒｉａｎ Ｉｎｃ．、カリフォルニア州パロアルトから入手可能）で室温にて４００ＭＨｚで記録した。化学シフトは、内部標準としての残留溶媒に対する百万分率（デルタ）で表される。ピーク形状は、次のように示す：ｓ、一重項；ｄ、二重項；ｄｄ、二重項の二重項；ｔ、三重項；ｑ、四重項；ｍ、多重項；ｂｓまたはｂｒ．ｓ．、ブロード一重項；２ｓ、２つの一重項；ｂｒ．ｄ．、ブロード二重項。いくつかの場合では、代表的な¹Ｈ ＮＭＲピークのみ示す。カラムクロマトグラフィーは、ガラスカラムもしくはＦｌ
ａｓｈ ４０ Ｂｉｏｔａｇｅ（商標）カラム（ＩＳＣ，Ｉｎｃ．、コネチカット州シェルトン）内で、Ｂａｋｅｒ（商標）シリカゲル（４０ミクロン、Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、ニュージャージー州フィリップスバーグ）またはシリカゲル５０（ＥＭ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（商標）、ニュージャージー州ギブスタウン）のいずれかで行った。ＭＰＬＣ（中圧液体クロマトグラフィー）は、Ｔｅｌｅｄｙｎｅ（商標）Ｉｓｃｏ（商標）からのＢｉｏｔａｇｅ（商標）ＳＰ精製システムまたはＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（登録商標）Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（登録商標）を用いて行った。低窒素圧下、Ｂｉｏｔａｇｅ（商標）ＳＮＡＰカート
リッジＫＰｓｉｌまたはＲｅｄｉｓｅｐ Ｒｆシリカ（Ｔｅｌｅｄｙｎｅ（商標）Ｉｓｃｏ（商標）から）を用いた。特に指定のある場合を除き、すべての反応は、無水溶媒を用い、窒素ガスの不活性雰囲気下で行った。同様に、特に指定のある場合を除き、すべての反応は室温（約２３℃）で行った。ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）を行う場合、Ｒ_f
は、化合物の移動距離を溶離液の移動距離で除した比として定義される。Ｒ_t（保持時間
）。Ｈ−Ｃｕｂｅ（登録商標）連続フロー式水素化反応器：連続フローの微量化学と内生的なオンデマンド水素生成及び使い捨て触媒カートリッジシステムとを組み合わせた卓上独立型水素化反応器。

【0337】

ＬＣ／ＭＳ ＴＯＦ（ＥＳＩ）：すべてのデータは、エレクトロスプレーイオン化源とともに動作するＭＳＤ ＴＯＦ（ＡｇｉｌｅｎｔモデルＧ１９６９Ａ）質量分析検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ １１００ＬＣに集めた。このＬＣ機器は、試料提出に外部施行（ｅｘｔｅｒｎａｌ ｔｒｙ）を用いるオートサンプラー（ＡｇｉｌｅｎｔモデルＧ１３１３Ａ）に取り付けた４００ｂａｒの圧力上限を有するバイナリポンプ（ＡｇｉｌｅｎｔモデルＧ１３１２Ａ）を含む。このカラム区画（ＡｇｉｌｅｎｔモデルＧ１３１６Ａ）はダイオードアレイ（ＡｇｉｌｅｎｔモデルＧ１３１５Ａ）に取り付ける。機器の取得及びデータの取扱いは、Ａｇｉｌｅｎｔ ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ ＴＯＦ／Ｑ−ＴＯＦ Ｂ．０２（Ｂ１１２８５）パッチ１．２．３を用いて行った。溶出条件：カラム：カラムは使用しなかった。フロー注入：注入量：１．０マイクロＬ、流速：０．５ｍＬ／分。実行時間：１．０分、溶媒：メタノール（０．１％ギ酸及び０．０５％ギ酸アンモニウム）。ＴＯＦ条件：イオン化源：ポジティブモードのエレクトロスプレーイオン化源、ガス温度：３２５℃、乾燥ガス：６Ｌ／分、ネブライザー：５０ｐｓｇ、ＶＣａｐ：３５００Ｖ、質量範囲１１０〜１００ｍ／ｚ、取得速度：０．９９スペクトル／秒：取得時間、１０１２．８ミリ秒／スペクトル。すべての溶媒は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）からのＨＰＬＣ Ｃｈｒｏｍａｓｏｌｖグレードのものであった。化学物質及び緩衝剤の大部分はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、すべて純度９７％以上であった。

【0338】

方法Ｃ １．５分間実行ＬＲＭＳ（低分解能質量分析）：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＨＳＳ Ｔ３、２．１ｍｍ×５０ｍｍ、Ｃ１８、１．７μｍ、移動相：Ａ：０．１％ギ酸水溶液（ｖ／ｖ）、移動相Ｂ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液（ｖ／ｖ）、流量−１．２５ｍｌ／分、初期条件：Ａ−９５％：Ｂ−５％、０．０〜０．１分は初期に保持する、０．１〜１．０分にかけてＡ−５％：Ｂ−９５％まで直線傾斜をかける、１．０〜１．１分はＡ−５％：Ｂ−９５％で保持する、１．１〜１．５分は初期条件に戻す。

【0339】

方法Ｃ ３．０分間実行ＬＲＭＳ（低分解能質量分析）：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｉｔｙ
ＨＳＳ Ｔ３、２．１ｍｍ×５０ｍｍ、Ｃ１８、１．７μｍ、移動相：Ａ：０．１％ギ酸水溶液（ｖ／ｖ）、移動相Ｂ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液（ｖ／ｖ）、流量−１．２５ｍｌ／分、初期条件：Ａ−９５％：Ｂ−５％、０．０〜０．１分は初期に保持する、０．１〜２．６分にかけてＡ−５％：Ｂ−９５％まで直線傾斜をかける、２．６〜２．９５分はＡ−５％：Ｂ−９５％で保持する、２．９５〜３．０分は初期条件に戻す。

【0340】

手順
（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−５−アジド−６−メトキシ−３，４−ビス（（トリメチルシリル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）メタノール（Ｉ−ｂ）

【化25】

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【0341】

（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−５−アジド−２−（ヒドロキシメチル）−６−メトキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジオール（Ｉ−ａ）（５ｇ、２３ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（１００ｍＬ）に溶解し、トリメチルシリルクロリド（１７．５ｍＬ、１３９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１２時間撹拌し、その後ピリジンを蒸発させた。残渣を酢酸エチル／水に溶解した。水相を酢酸エチルで１回抽出し、合わせた有機層を水、飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、９．９ｇ（収率９８％）の対応するパーシリル化化合物を黄色油として得た。この物質をさらに精製することなく次のステップに使用した。上記パーシリル化化合物（９．７１ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）の０℃に冷却した無水メタノール（４５ｍＬ）溶液に、炭酸カリウムのメタノール溶液（０．０３２Ｍ）９．０６ｍＬを添加した。この反応混合物を０℃で１時間撹拌し、その後１７マイクロＬの酢酸を添加して中和した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルに溶解した。水を添加し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（３０％酢酸エチル／ヘキサン）によりシリカゲルを通して精製し、６．７７ｇ（８４％）の（Ｉ−ｂ）を油として得た。［α］_D ７
（ｃ １， クロロホルム）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ）デル
タ ｐｐｍ ０．１４ （ｓ， ９Ｈ）， ０．２０ （ｓ， ９Ｈ）， １．８０ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ３．３６ − ３．４２ （ｍ， １Ｈ）， ３．４５ （ｄｄ， Ｊ＝ ７．３， ４．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５４ （ｄｄ， Ｊ＝１０．０， ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）
， ３．５９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．６５ （ｄｄ， Ｊ＝１１．３， ４．７ Ｈｚ， １Ｈ
）， ３．７７ （ｄ， Ｊ＝ ２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８７（ｄｄ， Ｊ＝１１．２，
７．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１４ （ｄ， Ｊ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ）デルタ ｐｐｍ ０．２７ （３Ｃ）， ０．６ （
３Ｃ）， ５７．３， ６２．６， ６４．０， ７１．１， ７３．７， ７５．２， １０
３．４； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₁₃Ｈ₂₉Ｎ₃Ｏ₅Ｓｉ₂ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｎａ］⁺に対
する計算値３８６．１５３８，実測値３８６．１５３９．

【0342】

（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−５−アジド−２，２−ビス（ヒドロキシメチル）−６−メトキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジオール（Ｉ−ｃ）

【化26】

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（Ｉ−ｂ）（７．７３ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（７０ｍＬ）に溶解した。ジメチルスルホキシド（１０．６ｍＬ、１５０ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（９ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を０℃に冷却した。三酸化イオウピリジン錯体（１０．２ｇ、６４ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を０℃で１時間撹拌し、その後３０分間かけて室温まで加温した。この反応物を飽和塩化ナトリウム溶液でクエンチし
、ジクロロメタンで希釈した。水相をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、対応するアルデヒドを得た。このアルデヒドを無水エタノール（１０６ｍＬ）に溶解し、パラホルムアルデヒド粉末（４０．３ｇ、４２５ｍｍｏｌ）、続いてナトリウムエトキシドの２１重量％エタノール溶液（１６ｍＬ、４２．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１２時間撹拌し、その後エタノールを蒸発させた。この粗混合物にメタノールを添加し、この固体を濾過し、メタノールで十分にすすいだ。所望の生成物を含むこの濾液にシリカゲルを添加し、メタノールを蒸発させた。得られた乾燥ロードを高真空下で乾燥し、カラムにロードした。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１０％メタノール／ジクロロメタン）によりシリカゲルを通して精製し、３．０３ｇの（Ｉ−ｃ）を無色油として得た（２ステップを通して５７％）。［α］_D −２０ （ｃ １．２５，メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ３．４６ （ｄｄ， Ｊ＝１０．２， ８．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５１ （ｓ， ３Ｈ）， ３．６４ − ３．８０ （ｍ， ５Ｈ）， ３．８０ − ３．８３ （ｍ， １Ｈ）， ４．５４ （ｄ， Ｊ＝ ８．０ Ｈｚ， １ Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ
ｐｐｍ ５７．２， ６１．２， ６３．６， ６５．９， ６９．９， ７１．２， ８０．９， １０１．２； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₈Ｈ₁₅Ｎ₃Ｏ₆ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｎａ］⁺に対する計算値２７２．０８５３，実測値２７２．０８５６．

【0343】

Ｎ−（（３ａＲ，４Ｓ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＲ）−４−（ヒドロキシメチル）−２，２−ジメチルヘキサヒドロ−４，７−エポキシ［１，３］ジオキソロ［４，５−ｄ］オキセピン−８−イル）アセトアミド（Ｉ−ｅ−１）

【化27】

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化合物（３）（２３０ｍｇ、０．９８６ｍｍｏｌ）の６．６ｍＬのジメチルホルムアミド溶液に、２，２−ジメトキシプロパン（０．８ｍＬ、６ｍｍｏｌ）、続いて（＋／−）−カンファー−１０−スルホン酸（１０１ｍｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を７０℃で２４時間撹拌し、室温まで冷却し、その後メタノールを添加した（１．２ｍＬ）。この反応混合物を室温で３０分間撹拌し，その後トリエチルアミン（５６マイクロＬ）で中和した。溶媒を蒸発させ、残渣をトルエンとともに３回共蒸発させた。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１５／１酢酸エチル／メタノール）により、シリカゲルを通して精製し、化合物（Ｉ−ｅ−１）を白色固体として得た（２４６ｍｇ、収率９１％）。ｍ．ｐ．： １６４．７−１６６．０ ℃； ［α］_D １４７ （ｃ １，
メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．
３４ （ｓ， ３Ｈ）， １．４８ （ｓ， ３Ｈ）， １．９８ （ｓ， ３Ｈ）， ３．７７ （ｄ， Ｊ＝７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３ （ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．
８６ （ｄ， ．Ｊ＝１１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０ （ｄ， ．Ｊ＝１１．３ Ｈｚ，
１Ｈ）， ３．９１ − ３．９４ （ｍ， １Ｈ）， ４．１４ − ４．１９ （ｍ， １Ｈ
）， ４．２９ （ｄ， Ｊ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２３ （ｄ， Ｊ＝ ２．０ Ｈ
ｚ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２
．７， ２６．９， ２８．５， ５６．８， ６１．９， ７０．２， ７６．１， ７６．
６， ８３．０， １０２．６， １１２．５， １７３．６； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₁₂
Ｈ₁₉ＮＯ₆ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値２７４．１２８５，実測値２７４．１２７４．

【0344】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジオール（１）

【化28】

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テトラオール（Ｉ−ｃ）（３ｇ、１２ｍｍｏｌ）を水（４０ｍＬ）に溶解し、濃硫酸（６．７ｍＬ）を添加した。この反応混合物を１００℃で４０時間撹拌し、室温に冷却し、その後濃水酸化アンモニウムの添加により中和した。水を蒸発させ、メタノールを得られた混合物に添加した。固体を濾過し、メタノールで十分にすすいだ。所望の生成物を含む濾液にシリカゲルを添加し、メタノールを蒸発させた。得られた乾燥ロードを高真空下で乾燥し、カラムにロードした。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１０％メタノール／ジクロロメタン）によりシリカゲルを通して精製し、２．２ｇ（８４％）の（１）を無色油として得た。［α］_D １６０ （ｃ １．１， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （
４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ３．３５ （ｄｄ， Ｊ＝９．２，
１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７０ （ｄ， Ｊ＝８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７６ （ｄ
， Ｊ＝８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８０ （ｄ， ．Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３
．８３ − ３．８９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．９０ （ｄ， Ｊ＝１１．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３２ （ｄ， Ｊ＝１．４ Ｈｚ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ６１．９， ６６．１， ６９．５， ６９．６， ７１．０，
８５．３， １０２．７； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₇Ｈ₁₁Ｎ₃Ｏ₅ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｎ
ａ］⁺に対する計算値２４０．０５９１，実測値２４０．０５９６．

【0345】

（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−１−（アセトキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジイルジアセテート（２）

【化29】

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丸底フラスコ内で、化合物（１）（１．９３ｇ、８．９ｍｍｏｌ）をエタノール（４５ｍＬ）に溶解し、この系を窒素でフラッシュした。リンドラー触媒（１．８９ｇ、０．９ｍｍｏｌ）を添加し、この系を窒素、その後水素でフラッシュした。この反応混合物を水素雰囲気下（バルーンを使用）室温で２４時間撹拌した。パラジウムをナイロン膜を用いて濾過し、メタノール、その後水で十分にすすいだ。溶媒を蒸発させ、残渣を水に溶解し、凍結乾燥した。その後、得られた粗物質をピリジン（４０ｍＬ）に溶解し、無水酢酸を添加した（９ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）。この反応混合物を室温で４８時間撹拌し、ピリジンを蒸発させた。残渣を酢酸エチルに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄した。水相を酢酸エチルで２回抽出し、その後合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（３％メタノール／ジクロロメタン）により、シリカゲルを通して精製し、（２）（３．１９ｇ、定量的）を得た。［α］_D ７５ （ｃ １， クロロホルム）； ¹Ｈ Ｎ
ＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．９５ （ｓ， ３Ｈ）， １．９５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．０４ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１５ （ｓ， ３Ｈ）， ３．
７５ （ｄ， Ｊ＝ ８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０６ （ｄ， Ｊ＝ ８．６ Ｈｚ， １Ｈ
）， ４．１３ （ｄ， Ｊ＝１１．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０ （ｄ， Ｊ＝１０．６
Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４６ （ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１３ （ｄｄ，
Ｊ＝１０．４， ４．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３５ （ｄ， Ｊ＝１．０ Ｈｚ， １Ｈ），
５．３８ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，メタノ
ール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２０．６， ２０．７ （２Ｃ）， ２２．６， ５３．３，
６３．０， ６８．９， ６９．１， ７０．３， ８２．６， １０３．０， １７１．８，
１７１．９， １７２．１， １７３．８； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₁₅Ｈ₂₁ＮＯ₉ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値３６０．１２８９，実測値３６０．１２９０．

【0346】

Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）アセトアミド（３）

【化30】

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化合物（２）（３．１９ｇ、８．８８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）に溶解し、０．５Ｍのナトリウムメトキシドのメタノール溶液（１００ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で１２時間撹拌し、その後Ｈ⁺ Ａｍｂｅｒｌｙｔ
ｅ（商標）ＩＲ−１２０樹脂の添加により中和した。この樹脂を濾過し、溶媒を蒸発させ、１．７１ｇの（３）を白色固体として得た（８３％）。ｍ．ｐ．： １７５．７−１７
６．１ ℃；［α］_D １６４ （ｃ １， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．９９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．６８ （ｄ， Ｊ＝８
．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７０− ３．７３ （ｍ， １Ｈ）， ３．７５ （ｄ， Ｊ＝７
．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８１ （ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８７ （ｄ，
Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２ （ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９
５ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．９， １．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２２ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， １ Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２．７， ５６．４， ６２．１， ６９．２， ６９．３， ７０．６， ８５．１， １０２．
８， １７４．１； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₉Ｈ₁₅ＮＯ₆ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対
する計算値２３４．０９７２，実測値２３４．０９７４．

【0347】

ベンジル（４−（（２−（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）エチル）アミノ）−４−オキソブチル）カルバメート（４）、ベンジル（４−（（１，３−ビス（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）プロパン−２−イル）アミノ）−４−オキソブチル）カルバメート（５）、ベンジル（４−（（１，３−ビス（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５
，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）−２−（（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）メチル）プロパン−２−イル）アミノ）−４−オキソブチル）カルバメート（６）

【化31】

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【0348】

マイクロ波バイアル内で、化合物（Ｉ−ｅ−１）（５０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を１ｍＬのジクロロメタンに溶解した。１２．５Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（０．５ｍＬ）、続いて１５−クラウン−５−エーテル（５マイクロＬ、０．０２ｍｍｏｌ）及び１−アジド−２−（２−（２−（２−ヨードエトキシ）エトキシ）エトキシ）エタン（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１３２， １５２３（２０１０）に記載）（３０１ｍｇ、０．９１５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を５５℃で２４時間激しく撹拌した。有機相を取り、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（５％メタノール／酢酸エチル）により、シリカゲルを通して精製し、化合物（Ｉ−ｅ−２）を油として得た（５２ｍｇ、収率６０％）。［α］_D ７４ （ｃ １， ク
ロロホルム）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．３４ （ｓ， ３Ｈ）， １．４９ （ｓ， ３Ｈ），１．９８ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３７
（ｔ， Ｊ＝４．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６２ − ３．７１ （ｍ， １４Ｈ）， ３．７
５ − ３．８０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８６ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １Ｈ） ３．９０− ３．９７ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１２−４．１９ （ｍ， １Ｈ）， ４．３１ （ｄ，
Ｊ＝５．８Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２３ （ｄ， Ｊ＝２．０Ｈｚ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２．７， ２６．９， ２８．５
， ５１．９， ５６．７， ７０．９， ７１．１， ７１．３， ７１．６， ７１．７， ７１．８， ７１．８１， ７１．８２， ７２．７， ７６．１， ７６．５， ８２．１，
１０２．４， １１２．４， １７３．６； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₂₀Ｈ₃₄Ｎ₄Ｏ₉ （ｍ
／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値４７５．２３９９，実測値４７５．２３８６．

【0349】

【化32】

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中間体（Ｉ−ｆ−１）は既知であり、ＷＯ０６１２０５４５に記載されている。
中間体（Ｉ−ｆ−２）は次のように合成することができる：Ｂｏｃ−セリノール（１０００ｍｇ、５．１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２１ｍＬ）溶液に、室温で、ヨウ化テトラブチルアンモニウム（２８７ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１５３ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）、及び臭化プロパルギル（１．８ｍＬ、１６ｍｍｏｌ、８０％トルエン溶液）を添加した。水酸化カリウム（５６９ｍｇ、１０．１ｍｍｏｌ）を３０分間かけて少量ずつ添加し、その後この混合物を室温で１６時間撹拌した。この反応混合物を酢酸エチル及び水で希釈した。水相を酢酸エチルで１回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（３０％酢酸エチル／ヘキサン）により、シリカゲルを通して精製し、化合物（Ｉ−ｆ−２）を油として得た（５３０ｍｇ、収率３９％）。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，
クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ １．４４ （ｓ， ９Ｈ）， ２．４４ （ｔ
， Ｊ＝２．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５３ − ３．６７ （ｍ， ４Ｈ）， ３．９２ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ４．１６ （ｄ， Ｊ＝ ２．５ Ｈｚ， ４Ｈ）， ４．９０ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／ ＴＭＳ） デ
ルタ ｐｐｍ ２８．４ （３Ｃ）， ４９．５， ５８．５ （２Ｃ）， ６８．６ （２Ｃ）， ７４．６ （２Ｃ）， ７７．２， ７９．５ （２Ｃ）， １５５．４； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₁₄Ｈ₂₁ＮＯ₄ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値２６８．１５４３，実
測値２６８．１５３６．

【0350】

中間体（Ｉ−ｆ−３）は、既知であり、Ｒ．Ｒｏｙ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．７３， ５６０２（２００８）に記載されている。

【化33】

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化合物（Ｉ−ｆ−１）、（Ｉ−ｆ−２）、または（Ｉ−ｆ−３）（１当量）をジクロロメタンに溶解し（０．２Ｍ）、４Ｍの塩化水素のジオキサン溶液（５〜１０当量）を添加した。この反応混合物を室温で２〜３時間撹拌し、その後溶媒を蒸発させた。この残渣を高真空下で１時間乾燥した。得られた中間体をさらに精製することなく次のステップに使用した。上記の得られた中間体（１当量）及び４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）ブタン酸（１当量）を、ジオキサンとジメチルホルムアミドの混合物（０．０９Ｍ、３：１）に溶解した。（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（１．２当量）、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５当量）を添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。ジクロロ
メタン及び水を添加し、水相をジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。この粗物質を最少量のトルエンに溶解し、カラムにロードし、フラッシュクロマトグラフィーによりシリカゲルを通しして精製した。

【0351】

中間体（Ｉ−ｇ−１）：精製条件：１００％酢酸エチル、定量的、油。¹Ｈ ＮＭＲ （
４００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ １．８０ − １．９１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２４ （ｔ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４６ （ｔ， Ｊ＝２
．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２２ − ３．３１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．４３ − ３．５１
（ｍ， ２Ｈ）， ３．５６ − ３．６４ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１６ （ｄ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．０７ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ５．１０ （ｓ， ２Ｈ）， ６．
０９ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ７．２８ − ７．４２ （ｍ， ５Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ
（１００ ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ ２５．９， ３３．７， ３９．１， ４０．５， ５８．３， ６６．７， ６８．７， ７４．８， ７９．４， １
２８．１， １２８．５ （４Ｃ）， １３６．６， １５６．７， １７２．５； ＨＲＭＳ
（ＥＳＩ） Ｃ₁₇Ｈ₂₂Ｎ₂Ｏ₄ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値３１９．１６５
２，実測値３１９．１６４６．

【0352】

中間体（Ｉ−ｇ−２）：精製条件：７０％酢酸エチル／ヘキサン、６５ｍｇ、油（収率７６％）、油。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐ
ｐｍ １．７９ − １．９１ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２４ （ｔ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４４ （ｔ， Ｊ＝２．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２０ − ３．２９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．５４ − ３．６９ （ｍ， ４Ｈ）， ４．１６ （ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， ４Ｈ）， ４．２２ − ４．３３ （ｍ， １Ｈ）， ５．１０ （ｂｒ． ｓ， ３Ｈ）， ６．０４ （ｄ， Ｊ＝７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２８ − ７．４２ （ｍ， ５Ｈ）； ¹³Ｃ
ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ ２５．８， ３
３．７， ４０．４， ４８．２， ５８．４ （２Ｃ）， ６６．６， ６８．３ （２Ｃ）
， ７４．７ （２Ｃ）， ７９．４ （２Ｃ）， １２８．１， １２８．５ （４Ｃ）， １３６．６， １５６．６， １７２．２； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₅ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値３８７．１９１４，実測値３８７．１９０４．

【0353】

中間体（Ｉ−ｇ−３）：精製条件：７０％酢酸エチル／ヘキサン、４２ｍｇ、油（収率６０％）。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ） デルタ ｐｐｍ １．７６− １．８８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２１ （ｔ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４４ （ｔ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．１８ − ３．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８４ （ｓ， ６Ｈ）， ４．１４ （ｄ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， ６Ｈ）， ５．１０ （ｓ， ２Ｈ
）， ５．１２ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ５．８９ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ７．２
８ − ７．４０ （ｍ， ５Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／
ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ ２５．７， ３４．３， ４０．３， ５８．６ （３Ｃ）， ５９．２， ６６．６， ６８．５ （３Ｃ）， ７４．６ （３Ｃ）， ７９．５ （３Ｃ）， １２８．１， １２８．５ （４Ｃ）， １３６．６， １５６．６， １７２．６； ＨＲＭＳ
（ＥＳＩ） Ｃ₂₅Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₆ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値４５５．２１７
７，実測値４５５．２１６７．

【0354】

【化34】

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中間体（Ｉ−ｈ−１）：
トリス（３−ヒドロキシプロピルトリアゾリルメチル）アミン（ＴＨＰＴＡ；Ｍ．Ｇ．Ｆｉｎｎ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ Ｃｈｅｍｉｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｄｉｔｉｏｎ ４８， ９８７９（２００９）参照）（２ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ）及び硫酸銅（１ｍｇ、０．００４ｍｍｏｌ）を水（５０マイクロＬ）に溶解し、その後（Ｉ−ｅ−２）（４２ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ）及びアルキン（Ｉ−ｇ−１）（４０ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）のメタノール（０．９ｍＬ）溶液に添加した。次に、水（３０マイクロＬ）に溶解したアスコルビン酸ナトリウム（１．８ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を室温で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（５％〜１０％メタノールのジクロロメタン溶液）によりシリカゲルを通して精製し、所望の化合物（Ｉ−ｈ−１）を油として得た（５４ｍｇ、収率７６％）。［α］_D ４８．２ （ｃ ０．５４， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ
（４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．３３ （ｓ， ３Ｈ）， １．
４８ （ｓ， ３Ｈ）， １．７０ − １．８３ （ｍ， ２Ｈ）， １．９８ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２１ （ｔ， Ｊ＝ ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１３ （ｔ， Ｊ＝ ６．９ Ｈｚ
， ２Ｈ）， ３．３７ （ｔ， Ｊ＝５．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５１ − ３．７０ （ｍ， １４Ｈ）， ３．７１ − ３．９５ （ｍ， ７Ｈ）， ４．１５ （ｔ， Ｊ＝ ６．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２９ （ｄ， Ｊ＝５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５６ （ｔ， Ｊ＝
５．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６０ （ｓ， ２Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ５．２
２ （ｄ， Ｊ＝１．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２５ − ７．３８ （ｍ， ５Ｈ）， ８．０１ （ｓ， １ Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ
２２．７， ２７．０， ２７．４， ２８．５， ３４．４， ４０．５， ４１．４， ５１．６， ５６．７， ６２．４， ６４．９， ６７．５， ７０．０， ７０．５， ７０
．８， ７１．１， ７１．５， ７１．６， ７１．６５， ７１．７， ７１．７３， ７
２．６， ７３．８， ７６．２， ７６．５， ８２．１， １０２．４， １１２．４，
１２６．１， １２９．０， １２９．１， １２９．６， １３８．６， １４６．１， １５９．０， １７３．６， １７５．７； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₃₇Ｈ₅₆Ｎ₆Ｏ₁₃ （ｍ／
ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値７９３．３９７８，実測値７９３．３９５９．

【0355】

中間体（Ｉ−ｈ−２）
ＴＨＰＴＡ（２２ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）及び硫酸銅（２．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を水（７０マイクロＬ）に溶解し、その後（Ｉ−ｅ−２）（４８ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及びアルキン（Ｉ−ｇ−２）（２０ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍＬ）溶液に添加した。次に、水（３０マイクロＬ）に溶解したアスコルビン酸ナトリウム（４ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を室温で７２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をジクロロメタン及び飽和塩化アンモニウム水溶液に溶解した。この水相をジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、
濾過し、濃縮した。この粗物質をさらに精製することなく次のステップに使用した。

【0356】

中間体（Ｉ−ｈ−３）
ＴＨＰＴＡ（３４ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）及び硫酸銅（４ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を水（２００マイクロＬ）に溶解し、その後（Ｉ−ｅ−２）（５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及びアルキン（Ｉ−ｇ−３）（２４ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍＬ）溶液に添加した。次に、水（３０マイクロＬ）に溶解したアスコルビン酸ナトリウム（６．５ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を室温で７２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をジクロロメタン及び飽和塩化アンモニウム水溶液に溶解した。水相をジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。この粗物質をさらに精製することなく次のステップに使用した。

【0357】

アセトニド除去の一般的手順
化合物（Ｉ−ｈ−１）、（Ｉ−ｈ−２）、または（Ｉ−ｈ−３）（０．０３０〜０．０６８ｍｍｏｌ）を、酢酸、メタノール、及び水の混合物（それぞれ１．６〜１．８ｍＬ、０．５ｍＬ、０．５ｍＬ）に溶解し、７０℃で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、この残渣をトルエンとともに２回共蒸発させた。この粗物質をフラッシュクロマトグラフィーによりシリカゲルを通して精製した。

【0358】

（４）：
精製条件：１０％メタノールのジクロロメタン溶液、４３．３ｍｇ、油（収率８５％）。［α］_D ４５ （ｃ １， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール
−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．７２ − １．８３ （ｍ， ２Ｈ）， １．９９ （ｓ， ３Ｈ
）， ２．２２ （ｔ， Ｊ＝７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１３ （ｔ， Ｊ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３７ （ｔ， Ｊ＝５．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５２ − ３．７９ （ｍ， ２０Ｈ）， ３．８５ − ４．００ （ｍ， ３Ｈ）， ４．５７ （ｔ， Ｊ＝５．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６１ （ｓ， ２Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２Ｈ）， ５．２１ （ｓ， １Ｈ）， ７．２４ − ７．４１ （ｍ， ５Ｈ）， ８．０２ （ｓ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２．８， ２７．４， ３４
．４， ４０．４， ４１．４， ５１．６， ５６．４， ６４．９， ６７．５， ６９．
０， ７０．０， ７０．１， ７０．４， ７０．５， ７１．４， ７１．５ （２Ｃ）， ７１．６， ７１．６５， ７１．７， ７２．５， ８４．３， １０２．６， １２６．０， １２９．０ （２Ｃ）， １２９．１， １２９．６ （２Ｃ）， １３８．６， １４５
．８， １５９．０， １７４．０， １７５．８； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₃₄Ｈ₅₂Ｎ₆Ｏ₁₃ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値７５３．３６６５，実測値７５３．３６７９．

【0359】

（５）：
精製条件：２０％メタノールのジクロロメタン溶液、２５ｍｇ、油（２つのステップを通して収率２０％）。［α］_D ５６ （ｃ １．２５， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４
００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．７２ − １．８１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９９ （ｓ， ６Ｈ）， ２．２３ （ｔ， Ｊ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１３
（ｔ， Ｊ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５０ − ３．８０ （ｍ， ３６Ｈ）， ３．
８５ − ３．９１ （ｍ， ６Ｈ）， ３．９２ − ４．００ （ｍ， ４Ｈ）， ４．１３
− ４．２５ （ｍ， １Ｈ）， ４．５２ − ４．６３ （ｍ， ８Ｈ）， ５．０７ （ｓ，
２Ｈ）， ５．２１ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２３ − ７．４０ （ｍ，
５Ｈ）， ８．０１ （ｓ， ２Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２．６ （２Ｃ）， ２７．２， ３４．２， ４１．２， ５０．２，
５１．４ （２Ｃ）， ５６．２ （２Ｃ）， ６５．０ （２Ｃ）， ６７．３， ６８．８
（２Ｃ）， ６９．９ （２Ｃ）， ７０．０ （２Ｃ）， ７０．２ （２Ｃ）， ７０．３
（２Ｃ）， ７１．２ （２Ｃ）， ７１．３ （４Ｃ）， ７１．４ （２Ｃ）， ７１．５
（２Ｃ）， ７１．５２ （２Ｃ）， ７２．３ （２Ｃ）， ８４．１ （２Ｃ）， １０２．４ （２Ｃ）， １２５．８ （２Ｃ）， １２８．８ （２Ｃ）， １２８．９， １２９
．４ （２Ｃ）， １３８．４， １４５．６ （２Ｃ）， １５８．８， １７３．８ （２
Ｃ）， １７５．３； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₅₅Ｈ₈₆Ｎ₁₀Ｏ₂₃ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値１２５５．５９４０，実測値１２５５．５９２５．

【0360】

（６）：
精製条件：２０％メタノールのジクロロメタン溶液、３１ｍｇ、油（２つのステップを通して収率１８％）。［α］_D ５３ （ｃ １， メタノール）；¹Ｈ ＮＭＲ （４００ Ｍ
Ｈｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．６５ − １．７８ （ｍ， ２Ｈ）， １．９８ （ｓ， ９Ｈ）， ２．１９ （ｔ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１１ （ｔ， Ｊ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５１ − ３．８０ （ｍ， ５４Ｈ）， ３．８６ −
３．９１ （ｍ， ９Ｈ）， ３．９１ − ３．９９ （ｍ， ６Ｈ）， ４．５１ − ４．６３ （ｍ， １２Ｈ）， ５．０６ （ｓ， ２Ｈ）， ５．２１ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．２４ − ７．４０ （ｍ， ５Ｈ）， ７．９８ （ｓ， ３Ｈ）； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₇₆Ｈ₁₂₀Ｎ₁₄Ｏ₃₃ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ ２Ｈ］⁺／２に対する計算値８７９
．４１４４，実測値８７９．４１４８．

【0361】

Ｎ−（２−（（１−（１−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）エチル）−４−アミノブタンアミド（７）、４−アミノ−Ｎ−｛１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］プロパン−２−イル｝ブタンアミド（８）、４−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ブタンアミド（９）

【化35】

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【0362】

丸底フラスコ内で、化合物（４）、（５）、または（６）（１当量）をメタノールに溶
解し（０．０１Ｍ）、このフラスコを窒素でフラッシュした。パラジウム炭素（１０％、０．７当量）を添加し、このフラスコを窒素、その後水素でフラッシュした。この反応混合物を室温で１２〜２４時間水素雰囲気下（水素充填バルーン使用）で攪拌した。パラジウムを０．４５マイクロｍのＰＴＦＥアクロディスクＣｒを用いて濾過し、メタノールで１回すすいだ。溶媒を蒸発させた。

【0363】

（７）：
２５．５ｍｇ、油、収率７６％；［α］_D ５７．６ （ｃ １．２５， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール− ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．７０ − １．８１ （ｍ， ２Ｈ）， １．９９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．２４ （ｔ， Ｊ＝７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６７ （ｔ， Ｊ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．３６ − ３．４１ （ｍ，
２Ｈ）， ３．５１ − ３．８０ （ｍ， １９Ｈ）， ３．８４ − ４．０１ （ｍ， ４Ｈ）， ４．５９ （ｔ， Ｊ＝ ５．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．６１ （ｓ， ２Ｈ）， ５．２１ （ｓ， １Ｈ）， ８．０３ （ｓ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２．８， ２９．６， ３４．５， ４０．４， ４２．０，
５１．６， ５６．４， ６４．９， ６９．０， ７０．０， ７０．１， ７０．５， ７０．６， ７１．４， ７１．５ （２Ｃ）， ７１．６， ７１．６６， ７１．７， ７２
．５， ８４．３， １０２．６， １２６．０， １４５．８， １７４．１， １７５．９； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₂₆Ｈ₄₆Ｎ₆Ｏ₁₁ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値６
１９．３２９７，実測値６１９．３２７８．

【0364】

（８）：
この粗物質を０．５ｍＬのメタノール／水（５０：５０）に溶解し、ＨＰＬＣカラムに注入した。分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８ ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５マイクロｍ、１９ｍｍＸ１００ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ、部品番号１８６００２９７８）を使用し、流速１７ｍＬ／分にて直線傾斜勾配で溶出して行った。溶媒勾配：４０分間でアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（２：９８：０．１）から（２２：５８：０．１）。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定された２５．７〜２７．３分の画分をプールし、蒸発させて、１０．７ｍｇの（８）を油として得た。収率４９％；［α］_D ５６ （ｃ １， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ
１．８６ − １．９５ （ｍ， ２Ｈ）， １．９９ （ｓ， ６Ｈ）， ２．３７ （ｔ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９６ （ｔ， Ｊ＝７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５０ − ３．８０ （ｍ， ３６Ｈ）， ３．８４ − ４．００ （ｍ， １０Ｈ）， ４．１７ − ４．２６ （ｍ， １Ｈ）， ４．５７ − ４．６２ （ｍ， ８Ｈ）， ５．２１ （ｓ， ２Ｈ）， ８．０３ （ｓ， ２ Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄）
デルタ ｐｐｍ ２２．８ （２Ｃ）， ２９．２， ３４．５， ４１．８， ５０．４， ５１．６ （２Ｃ）， ５６．４ （２Ｃ）， ６５．１ （２Ｃ）， ６９．０ （２Ｃ）， ７０．１ （２Ｃ）， ７０．３ （２Ｃ）， ７０．５ （２Ｃ）， ７０．６ （２Ｃ）， ７１．４ （２Ｃ）， ７１．５ （４Ｃ）， ７１．６ （２Ｃ）， ７．６７， （２Ｃ）， ７１．７ （２Ｃ）， ７２．５ （２Ｃ）， ８４．３ （２Ｃ）， １０２．６ （２Ｃ）
， １２６．１ （２Ｃ）， １４５．８ （２Ｃ）， １７４．１ （２Ｃ）， １７５．６
； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₄₇Ｈ₈₀Ｎ₁₀Ｏ₂₁ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値１１２１．５５７２，実測値１１２１．５５５８．

【0365】

（９）：
粗物質を０．５ｍＬのメタノール／水（５０：５０）に溶解し、ＨＰＬＣカラムに注入した。分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ
ＢＥＨ Ｃ１８ ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５マイクロｍ、１９ｍｍＸ１００ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ、部品番号１８６００２９７８）を使用し、流速１７ｍＬ／分にて直線傾
斜勾配で溶出して行った。溶媒勾配：４０分間でアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（２：９８：０．１）から（２２：５８：０．１）。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定された３０．３〜３２．０分の画分をプールし、蒸発させて、１５ｍｇの（９）を油として得た。収率６３％；［α］_D ５９．１ （ｃ １．１， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ
１．８４ − １．９２ （ｍ， ２Ｈ）， ２．００ （ｓ， ９Ｈ）， ２．３１ −２．３
８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．９７ （ｔ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．５４ − ３．８０ （ｍ， ５４Ｈ）， ３．８６ − ３．９３ （ｍ， ９Ｈ）， ３．９３ −４．００ （ｍ， ６Ｈ）， ４．５７ （ｓ， ６Ｈ）， ４．６０ （ｔ， Ｊ＝４．９ Ｈｚ， ６Ｈ）
， ５．２２ （ｓ， ３Ｈ）， ８．０２ （ｓ， ３Ｈ）； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₆₈Ｈ₁₁₄Ｎ₁₄Ｏ₃₁ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値１６２３．７８４７，実測値１６
２３．７８０３．

【0366】

（１０）、（１１）、及び（１２）、Ａｌｅｘａ ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７コンジュゲート

【化36】

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Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７カルボン酸スクシンイミジルエステルは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製であった（カタログ番号Ａ−２０１０６）。分子量は、約１２５０であるとＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎにより報告された。Ａｌｅｘａ６４７標識化合物の分子量は、ＬＣＭＳからのＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７カルボン酸スクシンイミジルエステルの９５５．０７の［Ｍ＋Ｈ］⁺実測値を基にして推定した。λ_max６５０に対する吸光係数は約２７００００±２００００であり、これはバッチごとに異なる。

【0367】

ＨＰＬＣ精製の一般的手順：
分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８ ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５マイクロｍ、１９ｍｍＸ１００ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ、部品番号１８６００２９７８）を使用し、流速１７ｍＬ／分にて直線傾斜勾配で溶出して行った。溶媒勾配：４０分間でアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（２：９８：０．１）から（２２：７８：０．１）。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定されたものをプールし、蒸発させた。

【0368】

（１０）：
化合物（７）（３．０ｍｇ、４．８マイクロｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（２００マイクロＬ）溶液に、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７カルボン酸スクシンイミジルエステル（５．０ｍｇ、４マイクロｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０マイクロＬ、１０当量）を添加した。この反応混合物を室温で１時間振とうし、その後分取ＨＰＬＣにより直接精製した。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定されたものをプールした（Ｒ_t＝２２．７〜２４分）。３．２
ｍｇの（１０）を得た（収率５５％）。この溶液を等分し、真空遠心分離器で蒸発させ、この生成物を４℃で保存した。ＭＳ （ＥＳＩ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値（ｍ／ｚ
）約１４５６，実測値１４５６．８２．

【0369】

（１１）：
化合物（８）（６．０ｍｇ、５マイクロｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（２００マイクロＬ）溶液に、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７カルボン酸スクシンイミジ
ルエステル（５．０ｍｇ、４マイクロｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０マイクロＬ、１０当量）を添加した。この反応混合物を室温で１時間振とうし、その後分取ＨＰＬＣにより直接精製した。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定されたものをプールした（Ｒ_t＝２５．３〜２６．７分）。４．８
ｍｇの（１１）を得た（収率６２％）。この溶液を等分し、真空遠心分離器で蒸発させ、この生成物を４℃で保存した。ＭＳ （ＥＳＩ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値（ｍ／ｚ
）約１９５８，実測値１９５８．７４．

【0370】

（１２）：
化合物（９）（９．８ｍｇ、６マイクロｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（２００マイクロＬ）溶液に、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７カルボン酸スクシンイミジルエステル（５．０ｍｇ、４．８マイクロｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０マイクロＬ、１０当量）を添加した。この反応混合物を室温で１時間振とうし、その後分取ＨＰＬＣにより直接精製した。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定されたものをプールした（Ｒ_t＝２７．７分）。５．２ｍｇの
（１２）を得た（収率５２％）。この溶液を等分し、真空遠心分離器で蒸発させ、この生成物を４℃で保存した。ＭＳ （ＥＳＩ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値（ｍ／ｚ）約２
４６０，実測値２４６１．１８．

【0371】

４−アミノ−Ｎ−［１，３１−ビス（１−｛［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−２，６，１０，１４，１８，２２，２６，３０−オクタオキサヘントリアコンタン−１６−イル］ブタンアミド（１３）及び４−アミノ−Ｎ−｛１，３１−ビス（１−｛［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−１６−［１５−（１−｛［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−２，６，１０，１４−テトラオキサペンタデカ−１−イル］−２，６，１０，１４，１８，２２，２６，３０−オクタオキサヘントリアコンタン−１６−イル｝ブタンアミド（１４）

【化37】

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【0372】

化合物（Ｉ−ｅ−１）（２４７ｍｇ、０．９０４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、ピリジンを添加した（１．４６ｍＬ、１８．１ｍｍｏｌ）。この反応混合物を−２０℃で冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（０．２３ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（０．６ｍＬ）溶液を滴下し、この混合物を５０分間かけて０℃に加温しながら撹拌した。この反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｍの塩化水素水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、及び飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。この粗物質をさらに精製することなく次のステップに使用した。アジ化ナトリウム（２７０ｍｇ、４．１ｍｍｏｌ）を、上記
トリフレートのジメチルホルムアミド（４．１ｍＬ）溶液に添加した。この反応混合物を６０℃で１６時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１５／１酢酸エチル／メタノール）によりシリカゲルを通して精製し、所望の化合物（Ｉ−ｅ−３）を黄色油として得た（２２７ｍｇ、収率９２％）。［α］_D １２７ （ｃ １， メタノール）； ¹Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ） デルタ ｐｐ
ｍ １．３４ （ｓ， ３Ｈ）， １．５３ （ｓ， ３Ｈ）， ２．００ （ｓ， ３Ｈ）， ３．６７ （ｄ， Ｊ＝１２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７２ （ｄ， Ｊ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７４ （ｄ， Ｊ＝ ７．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７５ （ｄ， Ｊ＝１２．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０２ − ４．１０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１１ （ｄ， Ｊ＝ ５．９
Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３５ （ｄ， Ｊ＝２．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９５ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ） デルタ
ｐｐｍ ２３．２， ２６．２， ２７．７， ５１．０， ５４．２， ６９．３， ７４．
８， ７６．１， ８０．６， １０１．２， １１１．６， １７０．１； ＨＲＭＳ （Ｅ
ＳＩ） Ｃ₁₂Ｈ₁₈Ｎ₄Ｏ₅ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値２９９．１３５０，実測値２９９．１３４４．

【0373】

【化38】

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化合物（Ｉ−ｊ−２）及び（Ｉ−ｊ−３）は、臭化プロパルギル、それぞれ（Ｉ−ｉ−２）（Ｄａｌｔｏｎ Ｐｈａｒｍａから市販されている；ＤＣ−００１７６０）及び（Ｉ−ｉ−３）（Ｂ．Ｅｒｎｓｔ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１６， ５２１６（２００８））から出発し、化合物（Ｉ−ｆ−２）の形成について記載した同じ手順に従って作製することができた。

【0374】

化合物（Ｉ−ｊ−２）：精製条件：２０％酢酸エチル／ヘキサン、８５ｍｇ、油（収率８％）；¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ １．７７ − １．９０ （ｍ， １４ Ｈ）， ２．２３ （ｔ， Ｊ＝７．１ Ｈｚ， ２Ｈ），
２．４３ （ｔ， Ｊ＝２．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．２０ − ３．２９ （ｍ， ２Ｈ），
３．３９ − ３．５５ （ｍ， ２４Ｈ）， ３．６０ （ｔ， Ｊ＝６．３ Ｈｚ， ４Ｈ）， ４．１３ （ｄ， Ｊ＝ ２．５ Ｈｚ， ４Ｈ）， ４．１５ − ４．２４ （ｍ， １Ｈ
）， ５．０９ （ｓ， ２Ｈ）， ５．１６ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ６．０５ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２８ − ７．４１ （ｍ， ５Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ ２５．８， ２９．８ （２
Ｃ）， ２９．９ （２Ｃ）， ３０．０ （２Ｃ）， ３３．７， ４０．４， ４８．５， ５８．１ （２Ｃ）， ６６．６， ６７．２ （２Ｃ）， ６７．６ （２Ｃ）， ６７．７ （２Ｃ）， ６７．８ （２Ｃ）， ６７．９ （２Ｃ）， ６８．３ （２Ｃ）， ６９．０ （２Ｃ）， ７４．２ （２Ｃ）， ７９．９ （２Ｃ）， １２８．１， １２８．５ （４
Ｃ）， １３６．６， １５６．６， １７２．１； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₃₉Ｈ₆₂Ｎ₂Ｏ₁₁ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値７３５．４４２６，実測値７３５．４４２４．

【0375】

化合物（Ｉ−ｊ−３）：精製条件：８５％酢酸エチル／ヘキサン、３２．６ｍｇ、油、（収率７１％）；¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ
ｐｐｍ １．７５ − １．９０ （ｍ， ２０Ｈ）， ２．１８ （ｔ， Ｊ＝ ６．９ Ｈｚ，
２Ｈ）， ２．４３ （ｔ， Ｊ＝２．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．２３ （ｑ， Ｊ＝６．３
Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４０ − ３．５３ （ｍ， ３０Ｈ）， ３．５９ （ｔ， Ｊ＝６．
３ Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．６７ （ｓ， ６Ｈ）， ４．１３ （ｄ， Ｊ＝ ２．３ Ｈｚ，
６Ｈ）， ５．０８ （ｓ， ２Ｈ）， ５．２７ （ｂｒ． ｓ．， １Ｈ）， ５．８５ （
ｓ， １Ｈ）， ７．２７ − ７．４０ （ｍ， ５Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ，
クロロホルム−ｄ／ＴＭＳ） デルタ ｐｐｍ ２５．７， ２９．７ （３Ｃ）， ２９．
９ （３Ｃ）， ３０．０ （３Ｃ）， ３４．４， ４０．４， ５８．１ （３Ｃ）， ５９．８， ６６．５， ６７．１ （３Ｃ）， ６７．６ （３Ｃ）， ６７．７ （３Ｃ）， ６７．８ （３Ｃ）， ６７．８２ （３Ｃ）， ６８．４ （３Ｃ）， ６９．１ （３Ｃ）， ７４．２ （３Ｃ）， ７９．９ （３Ｃ）， １２８．０， １２８．４ （４Ｃ）， １３
６．６， １５６．６， １７２．３； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₅₂Ｈ₈₄Ｎ₂Ｏ₁₅ （ｍ／ｚ
） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値９７７．５９４４，実測値９７７．５９４３．

【0376】

【化39】

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化合物（Ｉ−ｋ−２）：
ＴＨＰＴＡ（２２．６ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）及び硫酸銅（２．５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を水（２００マイクロＬ）に溶解し、その後（Ｉ−ｅ−３）（４５ｍｇ、０．１５２ｍｍｏｌ）及び（Ｉ−ｊ−２）（５１ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）のメタノール（１．１ｍＬ）溶液に添加した。次に、水（１００マイクロＬ）に溶解したアスコルビン酸ナトリウム（４．２ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を５０℃で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（５％メタノールのジクロロメタン溶液）によりシリカゲルを通して精製し、所望の化合物（Ｉ−ｋ−２）を油として得た（７２ｍｇ、収率７８％）。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メ
タノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．３４ （ｓ， ６Ｈ）， １．５２ （ｓ， ６Ｈ）， １．７３ − １．８６ （ｍ， １２Ｈ）， １．９７ （ｓ， ６Ｈ）， ２．２４ （ｔ， Ｊ＝７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１５ （ｔ， Ｊ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４３ − ３．５４ （ｍ， ２２Ｈ）， ３．５８ （ｔ， Ｊ＝６．３ Ｈｚ， ４Ｈ）， ３．８
６ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９７ （ｄｄ， Ｊ＝ ６．２， １．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１１ − ４．２３ （ｍ， ５Ｈ）， ４．５８ （ｓ， ４Ｈ）， ４．７８ （ｓ， ６Ｈ）， ４．９１ （ｄ， Ｊ＝１４．１ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．９８ （ｄ， Ｊ＝１４．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２Ｈ）， ５．２４ （ｄ， Ｊ＝１．８
Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２５ − ７．４０ （ｍ， ５Ｈ）， ７．９９ （ｓ， ２Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２．７ （２Ｃ），
２６．８ （２Ｃ）， ２７．５， ２８．４ （２Ｃ）， ３１．１ （４Ｃ）， ３１．２
（２Ｃ）， ３４．５， ４１．４， ５０．６， ５１．０ （２Ｃ）， ５６．３ （２Ｃ）， ６４．８ （２Ｃ）， ６７．５ （２Ｃ）， ６８．７ （２Ｃ）， ６８．８ （２Ｃ）， ６８．９ （３Ｃ）， ６９．０ （２Ｃ）， ６９．４ （２Ｃ）， ６９．７ （２Ｃ）， ７０．９ （２Ｃ）， ７６．３ （２Ｃ）， ７６．６ （２Ｃ）， ８１．５ （２Ｃ）， １０２．５ （２Ｃ）， １１２．８ （２Ｃ）， １２７．２ （２Ｃ）， １２９．
０ （２Ｃ）， １２９．１， １２９．６ （２Ｃ）， １３８．６， １４６．３ （２Ｃ
）， １５９．０， １７３．５ （２Ｃ）， １７５．５； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₆₃Ｈ₉₈Ｎ₁₀Ｏ₂₁ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値１３３１．６９８１，実測値１３３１．６９７１．

【0377】

化合物（Ｉ−ｋ−３）：
ＴＨＰＴＡ（１６ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）及び硫酸銅（１．７ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）を水（１００マイクロＬ）に溶解し、その後（Ｉ−ｅ−３）（３２．５ｍｇ、０．１０９ｍｍｏｌ）及び（Ｉ−ｊ−３）（３２ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）のメタノール（１．１ｍＬ）溶液に添加した。次に、水（１００マイクロＬ）に溶解したアスコルビン酸ナトリウム（３ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を５０℃で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、この粗物質をフラッシュクロマトグラフィー（１０％メタノールのジクロロメタン溶液）によりシリカゲルを通して精製し、所望の化合物（Ｉ−ｋ−３）を油として得た（４３．５ｍｇ、収率７０％）。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ，
メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．３３ （ｓ， ９Ｈ）， １．５２ （ｓ， ９Ｈ）， １．７１ − １．８７ （ｍ， １８Ｈ）， １．９７ （ｓ， ９Ｈ）， ２．２０ （ｔ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１５ （ｔ， Ｊ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４３ − ３．５２ （ｍ， ２８Ｈ）， ３．５８ （ｔ， Ｊ＝６．３ Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．６７ （ｓ， ６Ｈ）， ３．８６ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９７ （ｄｄ
， Ｊ＝ ６．０， １．８ Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１４ − ４．２２ （ｍ， ５Ｈ）， ４
．５８ （ｓ， ６Ｈ）， ４．７８ （ｓ， ８Ｈ）， ４．９１ （ｄ， Ｊ＝１４．６ Ｈ
ｚ， ３Ｈ）， ４．９７ （ｄ， Ｊ＝１４．６ Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．０７ （ｓ， ２Ｈ
）， ５．２４ （ｄ， Ｊ＝ ２．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， ７．２６ − ７．３８ （ｍ， ５
Ｈ）， ７．９８ （ｓ， ３Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （１００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ２２．７ （３Ｃ）， ２６．９ （３Ｃ）， ２７．７， ２８．４ （３Ｃ）， ３１．１ （３Ｃ）， ３１．２ （３Ｃ）， ３１．３ （３Ｃ）， ３５．２， ４１．３， ５１．０ （３Ｃ）， ５６．３ （３Ｃ）， ６１．８， ６４．９ （３Ｃ）， ６７．５ （３Ｃ）， ６８．７ （３Ｃ）， ６８．８ （３Ｃ）， ６８．９ （３Ｃ）， ６９．０ （４Ｃ）， ６９．６ （３Ｃ）， ６９．７ （３Ｃ）， ７０．０ （３Ｃ）， ７６．３ （３Ｃ）， ７６．６ （３Ｃ）， ８１．５ （３Ｃ）， １０２．５ （３Ｃ）， １１２．８ （３Ｃ）， １２７．２ （３Ｃ）， １２９．０ （２Ｃ）， １２９．１，
１２９．７ （２Ｃ）， １３８．６， １４６．４ （３Ｃ）， １５９．０， １７３．５
（３Ｃ）， １７５．６； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₈₈Ｈ₁₃₈Ｎ₁₄Ｏ₃₀ （ｍ／ｚ） ［Ｍ
＋ Ｈ］⁺に対する計算値１８７１．９７７６，実測値１８７１．９７１３．

【0378】

【化40】

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化合物（Ｉ−ｋ−２）または（Ｉ−ｋ−３）（０．０６８ｍｍｏｌ）を、酢酸、メタノール、及び水の混合物（それぞれ２．５〜３ｍＬ、０．６〜０．９ｍＬ、０．６〜０．９ｍＬ）に溶解し、７０℃で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、この残渣をトルエンとともに２回共蒸発させた。得られた粗物質をさらに精製することなく次のステップに使用した。

【0379】

【化41】

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丸底フラスコ内で、化合物（Ｉ−ｌ−２）または（Ｉ−ｌ−３）（１当量）をメタノー
ルに溶解し（０．０１Ｍ）、このフラスコを窒素でフラッシュした。パラジウム炭素（１０％、０．７当量）を添加し、このフラスコを窒素、その後水素でフラッシュした。この反応混合物を水素雰囲気下（水素を充填したバルーンを使用）室温で２４時間撹拌した。パラジウムを、０．４５マイクロｍのＰＴＦＥ Ａｃｒｏｄｉｓｃ Ｃｒを使用して濾過し、メタノールで１回すすいだ。溶媒を蒸発させた。

【0380】

（１３）：
この粗物質を０．５ｍＬのメタノール／水（５０：５０）に溶解し、ＨＰＬＣカラムに注入した。分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８ ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５マイクロｍ、１９ｍｍＸ１００ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ、部品番号１８６００２９７８）を使用し、流速１７ｍＬ／分にて直線傾斜勾配で溶出して行った。溶媒勾配：４０分間でアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（２：９８：０．１）から（２２：５８：０．１）。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定された３４．７〜３５．６分の画分をプールし、蒸発させて、１２．８ｍｇの（１３）を油として得た（２ステップを通して収率１７％）。¹Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．７３ − １．
８７ （ｍ， １２Ｈ）， １．８８ − １．９６ （ｍ， ２Ｈ）， １．９８ （ｓ， ６Ｈ）， ２．３９ （ｔ， Ｊ＝７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９８ （ｔ， Ｊ＝７．４ Ｈｚ
， ２Ｈ）， ３．４２ （ｄ， Ｊ＝ ８．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４５ − ３．５５ （
ｍ， ２４Ｈ）， ３．５９ （ｔ， Ｊ＝６．３ Ｈｚ， ４Ｈ）， ３．７１ − ３．７５ （ｍ， ４Ｈ）， ３．７７ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９６ − ４．０２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１３ − ４．２０ （ｍ， １Ｈ）， ４．５８ （ｓ， ４Ｈ）， ４．９１ − ４．９５ （ｍ， ４Ｈ）， ５．２０ （ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．９８ （ｓ， ２Ｈ）； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₄₉Ｈ₈₄Ｎ₁₀Ｏ₁₉ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋
Ｈ］⁺に対する計算値１１１７．５９８７，実測値１１１７．５９７７．

【0381】

（１４）：
粗物質を０．５ｍＬのメタノール／水（５０：５０）に溶解し、ＨＰＬＣカラムに注入した。分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ
ＢＥＨ Ｃ１８ ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５マイクロｍ、１９ｍｍＸ１００ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ、部品番号１８６００２９７８）を使用し、流速１７ｍＬ／分にて直線傾斜勾配で溶出して行った。溶媒勾配：４０分間でアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（２：９８：０．１）から（４２：５８：０．１）。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定された２４．７〜２５．６分の画分をプールし、蒸発させて、５．５ｍｇの（１４）を油として得た（２ステップを通して収率１０％）；¹Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ １．７５ − １．８６ （ｍ， １８Ｈ）， １．８７ − １．９４ （ｍ， ２Ｈ）， １．９８ （ｓ， ９Ｈ）， ２．３７ （ｔ， Ｊ＝ ６．８ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９８ （ｔ， Ｊ＝７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．４３ （ｄ， Ｊ＝ ８．５ Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．４６ − ３．５３ （ｍ， ３
１Ｈ）， ３．５９ （ｔ， Ｊ＝６．３ Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．６８ （ｓ， ６Ｈ）， ３
．７２ − ３．７６ （ｍ， ５Ｈ）， ３．７７ （ｄ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９７ − ４．０２ （ｍ， ３Ｈ）， ４．５９ （ｓ， ６Ｈ）， ４．９０ − ４．９６
（ｍ， ６Ｈ）， ５．２０ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， ３Ｈ） ７．９８ （ｓ， ３Ｈ）； ＨＲＭＳ （ＥＳＩ） Ｃ₇₁Ｈ₁₂₀Ｎ₁₄Ｏ₂₈ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値
１６１７．８４６９，実測値１６１７．８４１５．

【0382】

（１５）及び（１６）、Ａｌｅｘａ ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７（ＡＦ６４７）コンジュゲート

【化42】

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Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７カルボン酸スクシンイミジルエステルは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ製であった（カタログ番号Ａ−２０１０６）。分子量は約１２５０であるとＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎにより報告された。Ａｌｅｘａ６４７標識化合物の分子量は、ＬＣＭＳからのＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７カルボン酸スクシンイミジルエステルの９５５．０７の［Ｍ＋Ｈ］⁺実測値を基に推定した。λ_max６５０に対する吸光係数は約２７００００±２００００であり、これはバッチごとに異なる。

【0383】

ＨＰＬＣ精製の一般的手順：
分取高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ＢＥＨ Ｃ１８ ＯＢＤ分取カラム、１３０Å、５マイクロｍ、１９ｍｍＸ１００ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ、部品番号１８６００２９７８）を使用し、流速１７ｍＬ／分にて直線傾斜勾配で溶出して行った。溶媒勾配：４０分間でアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（２：９８：０．１）から（２２：７８：０．１）。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定されたものをプールし、蒸発させた。

【0384】

（１５）：
化合物（１３）（４．５ｍｇ、４マイクロｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（２００マイクロＬ）溶液に、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７カルボン酸スクシンイミジルエステル（５．０ｍｇ、４マイクロｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０マイクロＬ、１０当量）を添加した。この反応混合物を室温で１時間振とうし、その後分取ＨＰＬＣにより直接精製した。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定されたものをプールした（Ｒ_t＝３７．３〜３９分）。４．０ｍ
ｇの（１５）を得た（収率５０％）。この溶液を等分し、真空遠心分離器で蒸発させ、この生成物を４℃で保存した。ＭＳ （ＥＳＩ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値（ｍ／ｚ）
約１９５５，実測値１９５５．３２．

【0385】

（１６）：
化合物（１４）（５．２ｍｇ、３．２マイクロｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（２００マイクロＬ）溶液に、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）６４７カルボン酸スクシンイミジルエステル（５．０ｍｇ、４マイクロｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０マイクロＬ、１０当量）を添加した。この反応混合物を室温で１時間振とうし、その後分取ＨＰＬＣにより直接精製した。収集した画分を分析ＬＣＭＳにより分析し、十分な純度を有すると判定されたものをプールした（Ｒ_t＝２４．３〜２５．３分）。
４．０ｍｇの（１６）を得た（収率５１％）。この溶液を等分し、真空遠心分離器で蒸発させ、この生成物を４℃で保存した。ＭＳ （ＥＳＩ） ［Ｍ ＋ Ｈ］⁺に対する計算値（
ｍ／ｚ）約２４５５，実測値２４５６．９０．

【0386】

（１７）〜（２１）を得るための基本的アルキル化／脱保護条件：
（Ｉ−ｅ−１）のジクロロメタン溶液に、所望のヨードアルキル、硫酸水素テトラブチルアンモニウム、及び１２．５Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を添加した。この反応混合物を室温で一夜撹拌し、水及びジクロロメタンで希釈し、水相をジクロロメタンでさらに２回抽出した。合わせた有機層を１Ｍの塩酸水溶液、水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた物質は、粗製のまま次の反応を引き続き行って
もよいし、フラッシュクロマトグラフィーを用いてシリカゲルを通して精製してもよい。得られた物質を酢酸／メタノール／水の混合物（３：１：１ｖ／ｖ）に溶解し、この溶液を６０〜７０℃に一夜加熱した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、トルエンとともに２回共蒸発させ、この粗物質をフラッシュクロマトグラフィーによりシリカゲルを通して、または逆相クロマトグラフィーにより精製した。

【0387】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（エトキシメチル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（１７）

【化43】

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（１７）は、ヨードエタン（２０当量）を使用し、上記一般的手順に記載の通りに合成した。この粗生成物をメタノールに溶解し、これに活性炭を添加した。この混合物を１５分間撹拌し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより、シリカゲルを通して、酢酸エチル／メタノール（１５：１）で溶出して精製した。所望の生成物を含む画分を収集し、減圧下で濃縮した。この粗物質に酢酸エチル／メタノール（１５：１）を添加して沈殿物を得、これを濾過して、９．１ｍｇ（収率３２％）の所望の生成物を固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄）
デルタ ｐｐｍ ５．２３ （ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９７ （ｄｄ， Ｊ＝９．７， １．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９４ （ｄ， Ｊ＝ ９．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．８８ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７９ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １
Ｈ）， ３．７３ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．８， ４．３ Ｈｚ， １ Ｈ），３．６６ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．６０ （ｄ， Ｊ＝ ９．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５９ （ｄｑ， Ｊ＝ ９．６， ７．１ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５５ （ｄｑ， Ｊ＝ ９．６，
７．１ Ｈｚ， １ Ｈ）， ２．００ （ｓ， ３ Ｈ）， １．１９ （ｔ， Ｊ＝ ６．９ Ｈｚ， ３ Ｈ）． ＬＣＭＳ （ＡＰＣＩ） ｍ／ｚ： ２６２．１ ［Ｍ＋Ｈ］ （１００ ％
）．

【0388】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（プロポキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（１８）

【化44】

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（１８）は、ヨードプロパン（２０当量）を使用し、上記一般的手順に記載の通りに合成した。この粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーを用い、シリカゲルを通して、酢酸エチル／メタノール（１５：２）で溶出して精製し、１３．９ｍｇ（収率８０％）の所望の生成物を油として得た。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デル
タ ｐｐｍ ５．２３ （ｄ， Ｊ＝ １．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９７ （ｄｄ， Ｊ＝ ９
．７， １．４ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９５ （ｄ， Ｊ＝ ９．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．８９ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７９ （ｄ， Ｊ＝ ７．８ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７３ （ｄｄ， Ｊ＝９．８， ４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．６６ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５９ （ｄ， Ｊ＝ ９．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．４９ （ｄｔ， Ｊ＝ ９．３， ６．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．４６ （ｄｔ， Ｊ＝ ９．３， ６
．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ２．０１ （ｓ， ３ Ｈ）， １．６０ （ｑｔ， Ｊ＝ ７．４， ６．５ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ０．９４ （ｔ， Ｊ＝７．４ Ｈｚ， ３ Ｈ）． ＬＣＭＳ （
ＡＰＣＩ） ｍ／ｚ： ２７６．２ ［Ｍ＋Ｈ］ （１００ ％）．

【0389】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（ブトキシメチル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（１９）

【化45】

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（１９）は、ヨードブタン（２０当量）を使用し、上記一般的手順に記載の通りに合成した。所望の粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーを用い、シリカゲルを通して、酢酸エチル／メタノール（１５：１）で溶出して精製し、１８ｍｇ（収率１００％）の所望の生成物を油として得た。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ５．２３ （ｄ， Ｊ＝ １．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９７ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．
６， １．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９４ （ｄ， Ｊ＝ ９．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．８８ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７９ （ｄ， Ｊ＝ ７．８ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７３ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．８， ４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．６６ （ｄ， Ｊ＝ ７．８ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５９ （ｄ， Ｊ＝ ９．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５４ （ｄｔ， Ｊ＝ ９．３， ６．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５０ （ｄｔ， Ｊ＝ ９．３， ６
．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ２．００ （ｓ， ３ Ｈ）， １．５２ − １．６１ （ｍ， ２
Ｈ）， １．３４ − １．４５ （ｍ， ２ Ｈ）， ０．９５ （ｔ， Ｊ＝７．３ Ｈｚ，
３ Ｈ）． ＬＣＭＳ （ＡＰＣＩ） ｍ／ｚ： ２９０．２ ［Ｍ＋Ｈ］ （１００ ％）．

【0390】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−［（ペンチルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝アセトアミド（２０）

【化46】

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（２０）は、ヨードペンタン（２０当量）を使用し、上記一般的手順に記載の通りに合成した。所望の粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーを用い、シリカゲルを通して、酢酸エチル／メタノール（１５：１）で溶出して精製し、１７ｍｇ（収率６８％）の所望の生成物を油として得た。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ５．２３ （ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９７ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．８， １．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９４ （ｄ， Ｊ＝ ９．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．８８
（ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７９ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １ Ｈ），
３．７３ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．８， ４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．６６ （ｄ， Ｊ＝ ８
．１ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５９ （ｄ， Ｊ＝ ９．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５３ （ｄｔ， Ｊ＝９．３， ６．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．４９ （ｄｔ， Ｊ＝９．３， ６．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ２．０１ （ｓ， ３ Ｈ）， １．５３ − １．６３ （ｍ， ２ Ｈ），
１．２９ − １．４１ （ｍ， ４ Ｈ）， ０．８９ − ０．９７ （ｍ， ３ Ｈ）． Ｌ
ＣＭＳ （ＡＰＣＩ） ｍ／ｚ： ３０４．１ ［Ｍ＋Ｈ］ （１００ ％）．

【0391】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−［（ヘキシルオキシ）メチル］−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝アセトアミド（２１）

【化47】

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（２１）は、ヨードヘキサン（２０当量）を使用し、上記一般的手順に記載の通りに合成した。所望の粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーを用い、シリカゲルを通して、酢酸エチル／メタノール（１５：１）で溶出して精製し、５６ｍｇの生成物を油として得た。この物質を、逆相クロマトグラフィーを用いて再精製し、７．１ｍｇ（収率１５％）の所望の生成物を固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄）
デルタ ｐｐｍ ５．２３ （ｄ， Ｊ＝１．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９６ （ｄｄ， Ｊ
＝１０．１， １．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９４ （ｄ， Ｊ＝ ９．６ Ｈｚ， １ Ｈ）
， ３．８８ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７９ （ｄ， Ｊ＝ ７．８ Ｈｚ
， １ Ｈ）， ３．７３ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．８， ４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．６６ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５９ （ｄ， Ｊ＝ ９．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．５３ （ｄｔ， Ｊ＝ ９．３， ６．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．４９ （ｄｔ， Ｊ＝ ９
．３， ６．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ２．００ （ｓ， ３ Ｈ）， １．５３ − １．６２ （ｍ， ２ Ｈ）， １．２７ − １．５０ （ｍ， ６ Ｈ）， ０．８９ − ０．９７ （ｍ，
３ Ｈ）． ＬＣＭＳ （ＡＰＣＩ） ｍ／ｚ： ３１８．１ ［Ｍ＋Ｈ］ （１００ ％）．

【0392】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（２２）

【化48】

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（Ｉ−ｅ−１）のジクロロメタン（３ｍＬ）溶液に、ピリジン（０．３ｍＬ、４ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を−２０℃に冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（０．０４７ｍＬ、０．２８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（０．６ｍＬ）溶液を添加した。この反応混合物を１時間かけて−１０℃に加温し、ジクロロメタンで希釈し、１Ｍの塩酸水溶液、飽和重炭酸ナトリウム水溶液、ブラインで連続的に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、所望の粗物質を得、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。０℃に冷却した２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−
１３−オール（２０７ｍｇ、０．９９４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液に、水素化ナトリウム（３９．９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を１０分間撹拌した。上記の粗製（（３ａＲ，４Ｒ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＲ）−８−アセトアミド−２，２−ジメチルテトラヒドロ−４，７−エポキシ［１，３］ジオキソロ［４，５−ｄ］オキセピン−４（５Ｈ）−イル）メチルトリフルオロメタンスルホネートのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液を滴下し、この反応混合物を０℃で２５分間撹拌した。この反応物をメタノールでクエンチし、この反応混合物を５分間撹拌した。次に、得られた混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をジクロロメタンに溶解し、水で洗浄した。水層をジクロロメタンでさらに２回抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮した。この粗物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより、シリカゲルを通して、酢酸エチル／メタノール（１５：２）で溶出して精製し、８５ｍｇ（１００％）の所望の生成物を得た。Ｎ−（（３ａＲ，４Ｓ，７Ｓ，８Ｒ，８ａＲ）−２，２−ジメチル−４−（２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデシル）ヘキサヒドロ−４，７−エポキシ［１，３］ジオキソロ［４，５−ｄ］オキセピン−８−イル）アセトアミド（８５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の酢酸／メタノール／水の混合物（３．９：１．３：１．３ｖ／ｖ）溶液を、７０℃に一夜加熱した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた粗物質をトルエンとともに２回蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィーにより、シリカゲルを通して、１０％メタノール／ジクロロメタンで溶出して精製し、１５ｍｇの所望の生成物（２２）を油として得た。¹Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄） デルタ ｐｐｍ ５．２２ （ｄ， Ｊ＝１．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９６ （ｄ， Ｊ＝ ９．６
Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．９５ （ｄｄ， Ｊ＝ ９．９， １．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．８
９ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ３．７８ （ｄ， Ｊ＝８．１ Ｈｚ， １ Ｈ）
， ３．５９ − ３．７４ （ｍ， １７ Ｈ）， ３．５３ − ３．５６ （ｍ， ２ Ｈ），
３．３６ （ｓ， ３ Ｈ）， １．９９ （ｓ， ３ Ｈ）． ＬＣＭＳ （ＡＰＣＩ） ｍ／
ｚ： ４２４．２ ［Ｍ＋Ｈ］ （１３ ％）， ４４１．３ ［Ｍ＋ＮＨ₄］ （１００ ％）
．

【0393】

（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アセトアミド−１−（（（４−ブロモベンゾイル）オキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジイルビス（４−ブロモベンゾエート）（２３）

【化49】

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室温で冷却した（３）（９ｍｇ）の無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５００マイクロＬ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３４マイクロＬ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（４．３ｍｇ）、続いてｐ−ブロモベンゾイルクロリド（４４ｍｇ）を添加し、得られた混合物を室温で４．５時間撹拌した。水を添加し、得られた混合物を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機相を０．５Ｍの塩酸水溶液及びブラインで連続的に洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮し、この粗物質を、フラッシュクロマトグラフィーにより、シリカゲルを通して、０〜１００％の酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶出して精製し、２３ｍｇの生成物（２３）を得た（収率８０％）。
１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３）： デルタ （ｐｐｍ） ７．８９ − ７．
９５ （ｍ， ２ Ｈ）， ７．７８ − ７．８４ （ｍ， ２ Ｈ）， ７．５４ − ７．６６
（ｍ， ６ Ｈ）， ７．４１ − ７．４６ （ｍ， ２ Ｈ）， ５．８７ （ｄ， Ｊ＝８．８ Ｈｚ， １ Ｈ）， ５．８０ （ｄ， Ｊ＝４．３ Ｈｚ， １ Ｈ）， ５．６０ （ｄ， Ｊ＝ｌ．ｌ Ｈｚ， １ Ｈ）， ５．４４ （ｄｄ， Ｊ＝１０．２， ４．５ Ｈｚ， １ Ｈ）， ４．５４ − ４．６４ （ｍ， ３ Ｈ）， ４．１５ （ｄ， Ｊ＝ ８．６ Ｈｚ， １
Ｈ）， ３．９３ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １ Ｈ）， １．９５ （ｓ， ３ Ｈ）． ¹³Ｃ ＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） デルタ ｐｐｍ １７０．６， １６５．６， １６５．０， １６４．９， １３２．１， １３１．９， １３１．８， １３１．４， １３１．２， １３１．２， １２９．３， １２９．０， １２８．９， １２７．７， １２７．５， １２７．４， １０１．８， ８１．６， ６９．５， ６８．８， ６８．４，
６２．５， ５２．７， ２３．２。メタノール及びヘプタンを溶媒として用いた蒸気拡散技術により、単結晶を得た。単結晶Ｘ線解析：データ収集は室温にてＢｒｕｋｅｒ ＡＰＥＸ回折計で行った。データ収集は、それぞれ０．５ステップで低角度での３回及び高角度での３回のオメガスキャンからなるものであった。加えて、２回のファイスキャンを収集して、吸収補正の質を改善した。構造は非欠面性双晶であり、第二のドメインを無視することにより精密化した。空間群Ｐ２（１）においてＳＨＥＬＸソフトウェアスイート（ＳＨＥＬＸＴＬ，Ｖｅｒｓｉｏｎ ５．１、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＸＳ，１９９７参照）を使用する直接法により、構造を解明した。その後、構造を完全行列最小二乗法により精密化した。異方性変位パラメーターを使用して、すべての非水素原子を見出し、精密化した。窒素上にある水素原子はこの位置に置き、合理的な位置に拘束した。残りの水素原子は算出された位置に置き、それらの担体原子に乗せた。最終精密化は、すべての水素原子についての等方性変位パラメーターを含んでいた。尤度法（Ｒ．Ｗ．Ｗ．Ｈｏｏｆｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｃｒｙｓｔ．，４１，９６−１０３（２００８））を用いる絶対構造の解析を、ＰＬＡＴＯＮ（Ａ．Ｌ．Ｓｐｅｋ，Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｃｒｙｓｔ．，３６，７−１３（２００３））を用いて行った。結果は、絶対構造が正確に割り当てられたことを示す。この方法は、構造が正確である確率が１００．０であると算出する。Ｈｏｏｆｔパラメーターは、０．０３６でｅｓｄ０．０１３として報告される。加えて、Ｆｌａｃｋパラメーターは、０．０３でｅｓｄ０．０４である。最終Ｒ指数は５．６％であった。最終差フーリエは、欠落したまたは間違って配置された電子密度がないことを明らかにした。関連する結晶、データ収集及び精密化を、表１及び図１に要約する。
表１．（２３）に関する結晶データ及び構造精密化。
実験式 Ｃ１５Ｈ１２Ｂｒ１．５０Ｎ０．５０Ｏ４．５０
式量 ３９１．１２
温度 ２９６（２）Ｋ
波長 １．５４１７８Å
結晶系 単斜晶系
空間群 Ｐ２（１）
単位格子の寸法 ａ＝１２．５７４８（９）Å α＝９０°
ｂ＝５．６４６５（４）Å β＝９７．４５３（４）°
ｃ＝２１．２８０６（１６）Å γ＝９０°
体積 １４９８．２３（１９）Å３
Ｚ ４
密度（計算値） １７３４Ｍｇ／ｍ³
吸収計数 ５．４７６ｍｍ^-1
Ｆ（０００） ７７６
結晶サイズ ０．３７×０．２２×０．１５ｍｍ³
データ収集様のシータ範囲 ２．０９〜６８．３０°
指数範囲 −１３≦ｈ≦５、−５≦ｋ≦６、−２４≦１≦２４
収集した反射 ８０５０
独立した反射 ４４０８［Ｒ（ｉｎｔ）＝０．０２４７］
シータ＝６８．３０°に対する完全性 ９３．９％
吸収補正 経験的
精密化方法 Ｆ２の完全行列最小二乗法
データ／抑制／パラメーター ４４０８／３２／３８９
Ｆ２の適合度 １．０３１
最終Ｒ指数［Ｉ＞２シグマ（Ｉ）］ Ｒ１＝０．０５６３、ｗＲ２＝０．１６５８
Ｒ指数（全データ） Ｒ１＝０．０５８９、ｗＲ２＝０．１７０１
絶対構造パラメーター ０．０４（３）
最大差ピーク及びホール ０．９４９及び−０．６８５ｅ．Å^-3

【0394】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン（ｌ−ｍ−１）

【化50】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジオール（１）（４４５ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（６０％鉱油分散液、４１０ｍｇ、１０．２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。この反応物は非常に濃厚になり、十分に撹拌できなかった。追加の５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを添加し、この反応物を室温で３０分間撹拌した後、臭化ベンジル（１．２３ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）を滴下した。この反応物を室温で一夜撹拌した。翌朝、この反応物を水でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ ４０ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から３０％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶出して精製し、表題化合物を得た（８９０．０ｍｇ、８９．１％）。方法Ｃ：３分間実行ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ ＝ ５１０］。¹Ｈ ＮＭＲ （メタノー
ル−ｄ₄） δ： ７．０７−７．５２ （ｍ， １５Ｈ）， ５．３１ （ｓ， １Ｈ）， ４
．８１ （ｄ， Ｊ＝５．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７８ （ｄ， Ｊ＝５．５ Ｈｚ， １Ｈ
）， ４．６８−４．７４ （ｍ， １Ｈ）， ４．４７−４．５１ （ｍ， １Ｈ）， ４．
４６ （ｄ， Ｊ＝６．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３５−４．４２ （ｍ， １Ｈ）， ４．１２ （ｄ， Ｊ＝３．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８７−３．９１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．８６
（ｄ， Ｊ＝８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６２ （ｄ， Ｊ＝８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５８ （ｄ， Ｊ＝９．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４６ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ
）

【0395】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−１）

【化51】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン（ｌ−ｍ−１）（３１０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（３３４ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、水（９２ｍｇ、５．１ｍｍｏｌ）、及びテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）の混合物を、６５℃で１６時間撹拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、この残渣をシリカゲルカラムにロードした。２０％から８０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶出するクロマトグラフィーで、表題生成物を無色ゴム質として得た（２１０ｍｇ、７２％）。¹Ｈ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ： ７．２０−７．３７ （ｍ，
１５Ｈ）， ５．２９ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９０ （ｄ， １１．５
Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７９ （ｄ， Ｊ＝１１．５Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５７ （ｄ， Ｊ＝１１．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５６ （ｄ， Ｊ＝１２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３
（ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３９ （ｄ， Ｊ＝１１．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９７ （ｄ， Ｊ＝３．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １
Ｈ）， ３．６９ （ｄ， Ｊ＝８．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５９ （ｄ， Ｊ＝８．２ Ｈ
ｚ， １Ｈ）， ３．４２ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３７ （ｄｄ， Ｊ＝
９．４， ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．０７ （ｄｄ， Ｊ＝９．４， １．２ Ｈｚ， １
Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ： １３１．８， １３１．６， １３１．
５， １２８．２， １２８．２， １２８．１， １２８．１， １２８．０， １２７．７， １２７．６， １２７．６， １２７．４， １０３．５， ８２．６， ８０．３， ７
４．５， ７３．３， ７３．１， ７２．２， ６９．９， ６９．３， ５５．１； ＬＣ
ＭＳ （ＥＳ＋）： １．１８分， ４８４．２ （Ｍ＋Ｎａ）⁺．

【0396】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝アセトアミド（ｌ−ｎ−２）

【化52】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−１）（２５ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）、ピリジン（４３ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）、及び２−メチル−テトラヒドロフラン（１ｍＬ）の撹拌混合物に、無水酢酸（４６ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を室温で一度に添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチルと水との間で分配した。この有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。この残渣を、シリカゲルカラムにて、２０
％から６０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶出して精製し、表題生成物を白色固体として得た（２０ｍｇ、７３％）。¹Ｈ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ： ７．２４
−７．４３ （ｍ， １５Ｈ）， ５．３５ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０６
（ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９６ （ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７４ （ｄ， Ｊ＝１２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ （ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ，
１Ｈ）， ４．４２ （ｄ， Ｊ＝１２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３０−４．３６ （ｍ， １Ｈ）， ４．０４ （ｄ， Ｊ＝３．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９６ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６７−３．７０ （ｍ， １Ｈ）， ３．５８−３．６１ （ｍ， １Ｈ）， ３．４１−３．４７ （ｍ， ２Ｈ）， １．８７ （ｓ
， ３Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ： １７０．０， １３８．２， １３７．８， １３７．４， １２８．７， １２８．５， １２８．４， １２８．３， １２８．２， １２８．１， １２８．０， １２７．８， １０１．６， ８２．８， ７５．７，
７５．０， ７３．８， ７３．２， ７１．５， ７０．１， ６９．５， ５３．５， ２３．３； ＬＣＭＳ （ＥＳ＋）： １．８７分， ５２６．３ （Ｍ＋Ｎａ）⁺．

【0397】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝−２，２，２−トリフルオロアセトアミド（１−ｎ−３）

【化53】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−１）（７５ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、ピリジン（１２９ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、及び２−メチル−テトラヒドロフラン（１ｍＬ）の撹拌混合物に、無水トリフルオロ酢酸（１０２ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を室温で一度に添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチルと水との間で分配した。有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。この残渣を、シリカゲルカラムにて、１０％から４０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶出して精製し、表題生成物を白色固体として得た（６０ｍｇ、６６％）。¹Ｈ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ：
７．２５−７．４２ （ｍ， １５Ｈ）， ５．９１ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ），
５．３５ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９５ （ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ，
１Ｈ）， ４．７２ （ｄ， Ｊ＝１２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ （ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．４０ （ｄ， Ｊ＝１２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３６ （ｔ， Ｊ＝９．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０８ （ｄ， Ｊ＝３．９
Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９６ （ｄ， Ｊ＝９．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６８−３．７２ （ｍ， １Ｈ）， ３．６０−３．６３ （ｍ， １Ｈ）， ３．５０ （ｄｄ， Ｊ＝１０．０
， ３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４５ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ
（クロロホルム−ｄ） δ： １３７．９， １３７．１， １３６．１， １２８．９，
１２８．５， １２８．５， １２８．４， １２８．４， １２８．１， １２８．１， １２８．１， １２７．９， １００．６， ８３．０， ７５．０， ７４．９， ７３．８，
７２．７， ７１．４， ７０．３， ６９．２， ５４．１； ¹⁹Ｆ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ： −７５．７ （ｓ）； ＬＣＭＳ （ＥＳ−）： ２．１１分， ５５６．２ （Ｍ−Ｈ）^-．

【0398】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝メタンスルホンアミド（１−ｎ−４）

【化54】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−１）（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．１００ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）、及び２−メチル−テトラヒドロフラン（１ｍＬ）の撹拌混合物に、メタンスルホニルクロリド（０．０２５ｍＬ、０．３３ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチルと飽和重炭酸ナトリウム水溶液との間で分配した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。この残渣を、シリカゲルカラムにて、１０％から５０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶出して精製し、表題生成物を白色固体として得た（５８ｍｇ、６５％）。¹Ｈ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ：７．２２−７．４１ （ｍ， １５Ｈ），
５．４３ （ｄ， Ｊ＝１．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９３ （ｄ， Ｊ＝１１．３ Ｈｚ，
１Ｈ）， ４．７９ （ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６２ （ｂｒ．ｓ．， １
Ｈ）， ４．５６ （ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５４ （ｄ， Ｊ＝１１．３
Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４１ （ｄ， Ｊ＝１２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３７ （ｄ， Ｊ
＝１２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０５ （ｄ， Ｊ＝３．９ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２
（ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７４ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３
．６８−３．７２ （ｍ， １Ｈ）， ３．６２ （ｄ， Ｊ＝８．６ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５４ （ｄｄ， Ｊ＝１０．０， ３．７ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４４ （ｄ， Ｊ＝９．０
Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９０ （ｓ， ３Ｈ）； ¹³Ｃ ＮＭＲ （クロロホルム−ｄ） δ：
１３８．０， １３７．３， １３７．２， １２８．７（２）， １２８．５（２）， １
２８．４（２）， １２８．３， １２８．１（２）， １２８．１， １２７．９（２），
１２７．８（２）， １０２．７， ８２．９， ７７．２， ７７．１， ７５．０， ７
３．７， ７３．５， ７２．８， ７０．２， ６９．３， ５７．７， ４１．２；； Ｌ
ＣＭＳ （ＥＳ−）： １．９７分， ５３８．３ （Ｍ−Ｈ）^-．

【0399】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝プロパンアミド（１−ｎ−５）

【化55】

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プロピオン酸（２３ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の撹拌混合物に、１ｍＬの１，１’−カルボニルジイミダゾール（３３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を室温で一度に加え、透明溶液を室温で３時間攪拌した。トリエチルアミン（０．０２８ｍＬ、０．２０ｍｍｏｌ）及び（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−１）（４７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を、室温で一度に添加した。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチル（３ｍＬ）、ブライン（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）の間で分配させた。有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。この残渣を、１０％から５０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶離させるシリカゲルカラムで精製して、表題の生成物を白色固体として得た（４３ｍｇ， ８２％）． ¹Ｈ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）
δ：７．０３−７．５８（ｍ， １５Ｈ）， ５．３５（ｓ， １Ｈ）， ５．０９（ｄ，
Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９５（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２（
ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５７（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３（ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３９（ｓ， ２Ｈ）， ４．３１−４．３
８（ｍ， １Ｈ）， ４．０４（ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５（ｄ， Ｊ＝９．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５９（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４４−３．４９（ｍ， １Ｈ）， ３．４４（ｄ， Ｊ＝８．
６Ｈｚ， １Ｈ）， ２．０８（ｑ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．１１（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ３Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：１７３．５， １３８．１
， １３７．８， １３７．４， １２８．６， １２８．５， １２８．３， １２８．３，
１２８．２， １２８．１， １２８．０， １２８．０， １２７．７， １０１．６，
８２．７， ７５．７， ７４．９， ７３．７， ７３．２， ７１．５， ７０．１， ６
９．４， ５３．３， ２９．６， ９．５． ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：１．９４分， ５１６
．４（Ｍ−Ｈ）^-． ＬＣＭＳ（ＡＰ＋）：１．９４分， ５１８．５（Ｍ＋Ｈ）⁺．

【0400】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝−３，３，３−トリフルオロプロパンアミド（１−ｎ−６）

【化56】

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テトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の３，３，３−トリフルオロプロピオン酸（３９ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、室温において１，１’カルボニルジイミダゾール（３３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を一度に加え、この透明な溶液を室温で３時間攪拌した。トリエチルアミン（０．０２８ｍＬ、０．２０ｍｍｏｌ）及び（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−１）（４７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチル（３ｍＬ）、ブライン（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）の間で分配させた。有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。この残渣を、１０％から５０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶離させるシリカゲルカラムに供して、表題の生成物を白色固体として得た（４０ｍｇ、６９％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（
クロロホルム−ｄ）δ：７．２４−７．４２（ｍ， １５Ｈ）， ５．３７（ｄ， Ｊ＝８
．６Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３５（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９５（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）４．７１（ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５６（ｄ，
Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４５（ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４０
（ｓ， ２Ｈ）， ４．３５−４．４０（ｍ， １Ｈ）， ４．０５（ｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ
， １Ｈ）， ３．９５（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６１（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５０（ｄｄ， Ｊ＝１０．０， ３．７Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４５（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９２（ｑ， Ｊ＝１０．５Ｈｚ， ２Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：１６２．３， １３８．０， １３７．６， １３７．３， １２８．７， １２８．５， １２８．４，
１２８．３， １２８．３， １２８．２， １２８．０， １２８．０， １２７．８，
１０１．１， ８２．８， ７５．８， ７５．０， ７３．７， ７３．２， ７１．９，
７０．２， ６９．３，５４．０，４１．７． ¹⁹Ｆ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：
−６２．８（ｓ）． ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：２．０５分， ５７０．３（ＭＨ）^-．

【0401】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝−２，２−ジフルオロアセトアミド（１−ｎ−７）

【化57】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中のジフルオロ酢酸（２９ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、１ｍＬの１，１’−カルボニルジイミダゾール（３３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を室温で一度に加え、この溶液を室温で３時間攪拌した。トリエチルアミン（０．０２８ｍＬ、０．２０ｍｍｏｌ）及び（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−１）（４７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチル（３ｍＬ）、ブライン（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）の間に分配させた。有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。この残渣を、１０％から５０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶離するシリカゲルカラムクロマトグラフィーに供して、標記生成物を白色固体として得た（３２ｍｇ、５８％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（クロロホル
ム−ｄ）δ：７．１４−７．４７（ｍ， １５Ｈ）， ６．０２（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）， ５．８３（ｔ， Ｊ＝５４．２Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３５（ｓ， １Ｈ）， ４．９６（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７３（ｄ， Ｊ＝１２．５Ｈｚ， １Ｈ）
， ４．５８（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４５（ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４１ ２Ｈ）， ４．３４−４．４０（ｍ， １Ｈ）， ４．０８（ｄ， Ｊ
＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９６（ｄ， Ｊ＝９．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６７−３．
７５（ｍ， １Ｈ）， ３．５９−３．６５（ｍ， １Ｈ）， ３．５３（ｄｄ， Ｊ＝９．
８，３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４６（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ
（クロロホルム−ｄ）δ：１６２．６， １３８．０， １３７．３， １２８．８， １２８．５， １２８．４， １２８．３， １２８．１， １２８．０， １２７．８， １０８．３（ｔ， Ｊ＝２５３．１Ｈｚ）， ７２．９， ７１．６， ７０．２， ６９．３， ５３．５． ¹⁹Ｆ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：−１２６．１（ｄ， Ｊ＝５３．１Ｈｚ）． ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：２．０５分， ５３８．２（Ｍ−Ｈ）^-．

【0402】

ｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝カルバメート（１−ｎ−８）

【化58】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−アミン（１−ｎ−ｌ）（１２０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（６．４ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）の攪拌混合物に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１１３ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた． この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、減圧下で濃縮した。
この残渣を、中における１０％から４０％への酢酸エチルヘプタン溶液の勾配で溶離させるシリカゲルカラムで精製して、表題の生成物を白色固体として得た（１０４ｍｇ、７１％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：７．１７−７．４５（ｍ， １５Ｈ）， ５
．３５（ｓ， １Ｈ）， ４．９７（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７４（ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５７（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４７
（ｄ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３９（ｓ， ２Ｈ）， ４．０９（ｂｒ．ｓ， １Ｈ）， ４．０１（ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９３（ｄ， Ｊ＝９．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６３−３．７１（ｍ， １Ｈ），３．５４−３．６２（ｍ， １Ｈ），３．
３８−３．４８（ｍ， ２Ｈ），１．４７（ｓ， ９Ｈ）。¹³Ｃ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：１５５．２， １３８．２， １３７．８， １３７．４， １２８．５， １２８
．４， １２８．３， １２８．３， １２８．０， １２７．９， １２７．８， １２７．８， １２７．７， １０２．２， ８２．８， ７９．４， ７４．８， ７３．７， ７３
．４， ７２．０， ７０．０， ６９．４， ５４．６， ３１．９， ２８．４． ＬＣＭ
Ｓ（ＡＰ＋）：２．２５分， ４６２．２（Ｍ−Ｂｏｃ＋Ｈ）⁺．

【0403】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］プロパンアミド（２５）

【化59】

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Ｎ−（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル］プロパンアミド（１−ｎ−５）（４２ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．０９３ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）、活性炭上の１０％Ｐｄ（２０ｍｇ）及び２−プロパノール（２．５ｍＬ）の混合物を、８０℃で３時間攪拌した。水（０．２ｍＬ）を加え、この混合物全体をシリカゲルにロードし、ロータリーエバ
ポレーターで乾燥させた。この物質を、４％から１５％へのメタノールのジクロロメタン溶液勾配で溶離させるシリカゲルカラムで精製して、表題化合物を無色ゴム状物として得た（１２ｍｇ、６０％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２１（ｄ， Ｊ＝１
．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５（ｄｄ， Ｊ＝１０．１，１．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９
２（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８７（ｄ， Ｊ＝１Ｈ）， ３．８１（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７５（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１−
３．７６（ｍ， ２Ｈ）， ３．６８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３５（ｓ， １Ｈ）， ２．２６（ｑ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．１３（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ
， ３Ｈ）。¹³Ｃ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：１７７．７， １０２．６， ８４．９， ７０．４， ６９．１， ６９．０， ６１．９， ５６．０， ３０．０， １０．３。
ＬＣＭＳ（ＡＰ＋）：０．２５分， ２４８．２（Ｍ＋Ｈ）⁺．

【0404】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−２，２，２−トリフルオロアセトアミド（２４）

【化60】

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Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド（１−ｎ−３）（２０ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．０９３ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）、活性炭上の１０％Ｐｄ（２０ｍｇ）及び２−プロパノール（２．５ｍＬ）の混合物を、８０℃で３時間攪拌した。水（０．２ｍＬ）を加え、この混合物全体をシリカゲル上にロードし、ロータリーエバポレーターで乾燥させた。この物質を、４％から１５％へのメタノールのジクロロメタン溶液勾配で溶離させるシリカゲルカラムで精製し、表題化合物を無色ゴム状物（７．２ｍｇ、６９％）として得た。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２５（ｄ， Ｊ＝１．２Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０２（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ，
１Ｈ）， ３．９０（ｄ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８８−３．９５（ｍ， ２Ｈ
）， ３．８２（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３５（ｓ， １Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：１５９．８，１０２．３，８５．５，７０．８，６９．
７，６８．４，６２．２，５７．４． ¹⁹Ｆ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：−７７．
０（ｓ）． ＬＣＭＳ（ＡＰ＋）：０．４２分， ２８８．２（Ｍ＋Ｈ）⁺．

【0405】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］メタンスルホンアミド（２６）

【化61】

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Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（
（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）メタンスルホンアミド（１−ｎ−４）（１９ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．０９３ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）、活性炭上の１０％Ｐｄ（２０ｍｇ）及び２−プロパノール（２．５ｍＬ）の混合物を、８０℃で３時間攪拌した。水（０．２ｍｌ）を加え、この混合物全体をシリカゲルにロードし、ロータリーエバポレーターで乾燥させた。この物質を、４％から１５％へのメタノールのジクロロメタン溶液勾配で溶離するシリカゲルカラムで精製して、表題化合物を無色ゴム状物（６．４ｍｇ、６８％）として得た。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２６（ｄ，
Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９１（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８７（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８０（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６８（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６６−３．７１（ｍ， １Ｈ）， ３．３７（ｄｄ， Ｊ＝９．８，１．６Ｈｚ， １Ｈ），
３．３５（ｓ， １Ｈ）， ３．０４（ｓ， ３Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：１０４．６， ８５．１， ７０．９， ６９．８， ６９．３， ６２．０， ６０．２， ４１．７． ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：０．１５分， ２６８．０（Ｍ−Ｈ）^-．

【0406】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−２，２−ジフルオロアセトアミド（２７）

【化62】

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５ｍＬのマイクロ波バイアル中において、２−プロパノール（１．０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）中の、Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝−２，２−ジフルオロアセトアミド（１−ｎ−７）（３２．０ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）の溶液に、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．２ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を添加し、続いて炭素上の１０％パラジウム（５０％湿ｗｔ／ｗｔ、２０．０ｍｇ、０ｍｍｏｌ）を添加した。バイアルを密閉し、８０℃に４時間加熱した。４時間後、ＴＬＣ（１０％メタノール／ジクロロメタン）により、反応は完了していないが所望の生成物が形成されていることが示された。追加の１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．２ｍＬｍｇ、２ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を再密閉し、８０℃に一晩（１８時間）加熱した。合計で２２時間後、この反応物をメタノールで希釈し、ライフサイエンスアクロディスク社（Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ａｃｒｏｄｉｓｃ）の２５ｍｍシリンジフィルターで濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタンの勾配で溶離して精製し、表題化合物を固体として得た（５．０ｍｇ、固体、３１％）。方法Ｃ：3分間運転のＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎ
ａ＝２９２］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：６．０６（ｔ， Ｊ＝５４．２Ｈｚ
， １Ｈ）， ５．２５（ｓ， １Ｈ）， ４．０２（ｄ， Ｊ＝９．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３
．９２（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８４−３．９０（ｍ， ２Ｈ）， ３．
８１（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７０（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）．

【0407】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−３，３，３−
トリフルオロプロパンアミド（２８）

【化63】

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５ｍＬのマイクロ波バイアル中において、２−プロパノール（１．０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）中の、Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］ピリジン−４−イル｝−３，３，３−トリフルオロプロパンアミド（１−ｎ−６）の溶液に、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．２ｍＬ、１．７５ｍｍｏｌ）を添加した後、炭素上の１０％パラジウム（５０％湿ｗｔ／ｗｔ、２０．０ｍｇ、０ｍｍｏｌ）を添加した。バイアルを密閉し、８０℃に４時間加熱した。４時間後、この反応物をメタノールで希釈し、ライフサイエンスアクロディスク社（Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ａｃｒｏｄｉｓｃ）の２５ｍｍシリンジフィルターで濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタンの勾配で溶離して精製して表題化合物を固体として得た（１５．３ｍｇ、７３％）。ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝３０２］． ¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２３（ｓ， １Ｈ）， ３．９
９（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２（ｄ， Ｊ＝１１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８７（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８１（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７６（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１−３．７４（ｍ， １Ｈ）， ３．６
９（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．２２（ｑｄ， Ｊ＝１０．７，２．５Ｈｚ，
２Ｈ）

【0408】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ））−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝−Ｎ−メチルアセトアミド（１−ｏ−１）

【化64】

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Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）アセトアミド（１−ｎ−２）（１９ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）の攪拌混合物に、水素化ナトリウム（鉱油中の６０％懸濁液）を室温で一度に加え、この混合物を３０分間撹拌した。ヨードメタン（１６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチル（３ｍＬ）、ブライン（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）の間に分配させた。有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。この残渣を、１０％から５０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶離するシリカゲルカラムで精製して、表題生成物を無色ゴム状物として得た（１９ｍｇ、９７％）。回転異性体の混
合物（３：１）． 回転異性体ｌ：¹Ｈ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）ｄ：７．２１−７．４３（ｍ， １５Ｈ）， ５．３７（ｓ， １Ｈ）， ４．９３（ｄ， Ｊ＝１０．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６５（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５４（ｄ， Ｊ＝１１．３
Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５０（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３７−４．４５（
ｍ， ２Ｈ）， ４．１５（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０９（ｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９３（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８５（ｄｄ， Ｊ＝１０．１，３．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６４
（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４５（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８０（ｓ， ３Ｈ）， ２．１９（ｓ， ３Ｈ）． 回転異性体２：¹Ｈ−ＮＭＲ（クロロホル
ム−ｄ）ｄ：７．２１−７．４３（ｍ， １５Ｈ）， ５．２７（ｓ， １Ｈ）， ５．１２（ｄ， Ｊ＝１０．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９４−４．９８（ｍ， １Ｈ）， ４．７４（
ｄ， Ｊ＝１２．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５６（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４６（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３７−４．４６（ｍ， ２Ｈ）， ４．１
４−４．１７（ｍ， １Ｈ）， ３．９７（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２−
３．８９（ｍ， ２Ｈ）， ３．７９（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６０−３．
６３（ｍ， １Ｈ）， ２．７１（ｓ， ３Ｈ）， ２．０８（ｓ， ３Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）ｄ：１７２．２， １３８．０， １３７．３， １３７．２， １２８．６， １２８．５， １２８．５， １２８．４， １２８．１， １２８．０， １２７．９， １２７．９， １２７．９， １２７．８， １０３．２， ８３．２， ７５．２，
７４．１， ７３．８， ７３．７， ７３．０， ７２．４， ７０．１， ６９．２， ６１．２， ２８．０， ２２．２． ＬＣＭＳ（ＡＰ＋）：１．９９分， ５１８．０（Ｍ＋Ｈ）⁺．

【0409】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝−Ｎ−メチルメタンスルホンアミド（１−ｏ−２）

【化65】

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Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）メタンスルホンアミド（１−ｎ−４）（１９ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）の攪拌混合物に、水素化ナトリウム（鉱油中の６０％懸濁液）を室温で一度に加え、この混合物を３０分間撹拌した。ヨードメタン（１６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を室温で一度に加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌し、酢酸エチル（３ｍＬ）、ブライン（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）の間に分配させた。有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。この残渣を、１０％から５０％への酢酸エチルのヘプタン溶液勾配で溶離するシリカゲルカラムで精製して、表題生成物を無色ゴム状物として得た（１１ｍｇ、５６％）。¹Ｈ−
ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：７．２５−７．３９（ｍ， １５Ｈ）， ５．３９（ｄ，
Ｊ＝０．８Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９３（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８０（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８（ｄ， Ｊ＝１１．３Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４５（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）
， ４．４１（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２１（ｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１８（ｄ， Ｊ＝１０．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９８（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ
， １Ｈ）， ３．８７（ｄｄ， Ｊ＝１０．５， ３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２（ｄ，
Ｊ＝８．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６２（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４５（ｄ， Ｊ＝９．０Ｈｚ， １Ｈ）， ２．８３（ｓ， ３Ｈ）， ２．６８（ｓ， ３Ｈ）． ¹³
Ｃ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：１３８．１， １３７．３， １３６．８， １２８
．７， １２８．５， １２８．４， １２８．４， １２８．１， １２８．１， １２８．０， １２７．８， １２８．１， １０４．６， ８２．９， ７４．９， ７３．８， ７
３．５， ７３．３， ７１．６， ７０．３， ６９．４， ５９．７， ３７．５， ２９
．５． ＬＣＭＳ（ＡＰ＋）：２．０８分， ５７５．８（Ｍ＋Ｎａ）⁺．

【0410】

ｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝メチルカルバメート（１−ｏ−３）

【化66】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンゾオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝カルバメート（１−ｎ−８）（１００ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、水素化ナトリウム（鉱油中の６０％分散液、８．５５ｍｇ、０．２１４ｍｍｏｌ）を室温で加えた。この反応物を１時間撹拌した後、ヨードメタン（０．０５５ｍＬ、０．８９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を室温で一晩撹拌した。２４時間後、反応を水でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇシリカゲルカラム）を使用し、０％から１００％への酢酸エチル／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物（７８ｍｇ、７６％）を得た。方法Ｃ：３分間運転のＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５９８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（化合物は２つの回転異性体の約１：１混合物で
ある）。
回転異性体１：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．０８−７．４８（ｍ， １５
Ｈ）， ５．２６（ｓ， １Ｈ）， ４．８３−４．９０（ｍ， １Ｈ）， ４．７３（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４７−４．５８（ｍ， ３Ｈ）， ４．３６−４．４７（ｍ， ２Ｈ）， ４．２１（ｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９８（ｄｄ， Ｊ＝１０．７， ３．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２（ｄｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．６１（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４７（ｄｄ， Ｊ＝８．６， ３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７５（ｓ， ３Ｈ）， １．４２（ｓ， ９Ｈ）
回転異性体２：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．０８−７．４８（ｍ， １５
Ｈ）， ５．２１（ｓ， １Ｈ）， ４．８３−４．９０（ｍ， １Ｈ）， ４．７３（ｄ， Ｊ＝１１．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４７−４．５８（ｍ， ３Ｈ）， ４．３６−４．４７
（ｍ， ２Ｈ）， ４．２１（ｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９８（ｄｄ， Ｊ＝１０．７， ３．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６１（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４７（ｄｄ， Ｊ＝８．６， ３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ２．７０（ｓ， ３Ｈ）， １．４４−１．５２（ｍ， ９Ｈ）

【0411】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−Ｎ−メチルアセトアミド（２９）

【化67】

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Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ））−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（ベンジルオキシ）メチル−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル）−Ｎ−メチルアセトアミド（１−ｏ−１）（１９ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．０９３ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）、活性炭上の１０％Ｐｄ（２０ｍｇ）及び２−プロパノール（２．５ｍＬ）の混合物を８０℃で３時間攪拌した。水（０．２ｍｌ）を加え、この混合物全体をシリカゲルにロードし、ロータリーエバポレーターで乾燥させた。この物質を、４％から１５％へのメタノールのジクロロメタン溶液勾配で溶離させるシリカゲルカラムで精製して、表題化合物を無色ゴム状物質（４．３ｍｇ、４７％）として得た。¹Ｈ−ＮＭＲ（回転異性体の約１：１混合物）。
回転異性体１：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２０（ｓ， １Ｈ）， ４．６５（ｄ， Ｊ＝１０．５Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０２−４．０９（ｍ， １Ｈ）， ３．８９
−３．９８（ｍ， ２Ｈ）， ３．８４（ｓ， １Ｈ）， ３．７８−３．８２（ｍ， １Ｈ
）， ３．６８（ｓ， １Ｈ）， ３．１１（ｓ， ３Ｈ）， ２．１５（ｓ， ３Ｈ）
回転異性体２：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．３７（ｓ， １Ｈ）， ４．０２−４．０９（ｍ， １Ｈ）， ３．８９−３．９８（ｍ， ３Ｈ）， ３．８４−３．８７（ｍ， １Ｈ）， ３．７９−３．８３（ｍ， １Ｈ）， ３．７１（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ
， １Ｈ）， ２．９８（ｓ， ３Ｈ）， ２．１５（ｓ， ３Ｈ）
¹³Ｃ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：１７５．４，１０４．８５．８， ７１．３，
６９．７， ６６．２， ６２．３， ５９．１， ２８．８， ２２．７． ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：０．４１分， ２４６．２（Ｍ−Ｈ）―

【0412】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミド（３０）

【化68】

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Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−（（ベンジルオキシ）メチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−４−イル）−Ｎ−メチルメタンスルホンアミド（１−ｏ−２）（１１ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．０９３ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）、活性炭上の１０％Ｐｄ（２０ｍｇ）及び２−プロパノール（２．５ｍＬ）の混合物を、
８０℃で３時間撹拌した。水（０．２ｍｌ）を加え、この混合物全体をシリカゲルにロードし、ロータリーエバポレーターで乾燥させた。４％から１５％へのメタノールのジクロロメタン溶液勾配で溶離させるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、表題化合物を無色ゴム状物として得た（２．９ｍｇ、５１％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２６（ｄ， Ｊ＝１．２Ｈｚ， １Ｈ）， ４．００−４．０５（ｍ， １Ｈ）， ３
．９２−３．９６（ｍ， １Ｈ）， ３．８９−３．９１（ｍ， １Ｈ）， ３．８４（ｄ，
Ｊ＝１．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７７−３．８３（ｍ， ２Ｈ）， ３．６８（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３５（ｓ， ３Ｈ）， ２．９３（ｓ， ３Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：１０６．１， ８５．５， ７１．５， ６９．７， ６５．９
， ６２．６， ６２．２， ３７．８， ３０．４． ＬＣＭＳ（ＥＳ−）：０．４２分， ２８２．０（Ｍ−Ｈ）^-

【0413】

ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］メチルカルバメート（３１）

【化69】

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５ｍＬのマイクロ波バイアル中において、２−プロパノール（１．０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ビス（ベンジルオキシ）−１−［（ベンジルオキシ）メチル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝メチルカルバメート（１−ｏ−３）（７５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．１８ｍＬ、１．５６ｍｍｏｌ）を添加し、続いて炭素上の１０％パラジウム（５０％湿ｗｔ／ｗｔ、２０．０ｍｇ）を添加した。バイアルを密閉し、８０℃に４時間加熱した。４時間後のＴＬＣ（１０％メタノール／ジクロロメタン）により、反応は完結しなかったが、所望の生成物が形成されたことが示された。追加の１−メチル−１，４−シクロヘキサジエン（０．１８ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を再封止し、８０℃に一晩（１８時間）加熱した。合計２２時間後、この反応物をメタノールで希釈し、Ｌｉｆｅ・Ｓｃｉｅｎｃｅｓ・Ａｃｒｏｄｉｓｃの２５ｍｍシリンジフィルターで濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物を固体として得た（２９．０ｍｇ、７３％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝３２８］。化合物は、２つの回転異性体の約１：１混合物である：
回転異性体１：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：：５．２２（ｂｒ．ｓ．， １Ｈ
）， ４．１９（ｄ， Ｊ＝１０．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．００（ｄ， Ｊ＝１０．６Ｈｚ
， １Ｈ）， ３．９０−３．９５（ｍ， ２Ｈ）， ３．７７−３．８２（ｍ， ２Ｈ）， ３．６７（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９４（ｓ， ３Ｈ）， １．４７（ｓ， ９Ｈ）
回転異性体２：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２１（ｂｒ．ｓ．， １Ｈ）
， ４．０５−４．１０（ｍ， １Ｈ）， ４．００（ｄ， Ｊ＝１０．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０−３．９５（ｍ， ２Ｈ）， ３．７７〜３．８２（ｍ， ２Ｈ）， ３．６７（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９４（ｓ， ３Ｈ）， １．４７（ｓ， ９Ｈ）

【0414】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−４−（メチルアミノ
）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジオール塩酸塩（３２）

【化70】

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ジクロロメタン（５．０ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］メチルカルバメート（３１）（２５．３ｍｇ、０．０８２９ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン（０．５１８ｍＬ、２．０７ｍｍｏｌ）中の４．０Ｍ塩化水素を加え、この反応物を室温で４８時間撹拌した。４８時間後に、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を酢酸エチル（５ｍＬ）で洗浄し、これにより固体が生成され、ヘプタン（１０ｍＬ）で希釈し、減圧下で濃縮して、表題化合物を固体として得た（３０．０ｍｇ、１３０％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝２０６］。¹
Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．６３（ｓ， １Ｈ）， ３．９０−３．９７（ｍ
， ３Ｈ）， ３．８４（ｓ， ２Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３
．１０−３．２０（ｍ， １Ｈ）， ２．８４（ｓ， ３Ｈ）

【0415】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−３）

【化71】

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ジクロロメタン（３０．０ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（Ｉ−ｅ−１）（１２００ｍｇ、４．３９ｍｍｏｌ）及び１３−ヨード−１−フェニル−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン

【化72】

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（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｍｅｔａｌｓ，１６２（２３）、２１６３−２１７０、２０１２参照、７０００ｍｇ、１７．７６ｍｍｏｌ）の溶液に、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（２２９０ｍｇ、６．６０ｍｍｏｌ）を加え、続いて１２．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（３０．０ｍＬ、３８０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で６４時間撹拌した。６４時間後、この反応物を水及びジクロロメタンで希釈した。層を分離し、水層をジクロロメタンで更に２回抽出した。合わせた有機層を１Ｎ塩酸で洗浄し、硫酸マグネシウムで
乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗製物質に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、３０分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＩＳＣＯ・ＲｅｄｉＳｅｐ・Ｇｏｌｄ・８０ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離した後に、直ちに０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して表題化合物を得た（１２６７ｍｇ、５３．５％）。方法Ｃ：１．５分間の運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５６２］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．１３−７．４５（ｍ， ５Ｈ）， ５．２２（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５５（ｓ， ２Ｈ）， ４．３０（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８９−３．９
７（ｍ， ２Ｈ）， ３．８５（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３−３．７９（
ｍ， ２Ｈ）， ３．５８−３．７１（ｍ， １６Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ）， １．４８（ｓ， ３Ｈ）， １．３３（ｓ， ３Ｈ）

【0416】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（１５−フェニル｝−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３３）

【化73】

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酢酸（４．０ｍＬ）、メタノール（１．０ｍＬ）及び水（１．０ｍＬ）の中のＮ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−３）（６０．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に一晩加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物をゴム状物として得た（４２．５ｍｇ、７７％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝５００］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．１４−７．４５（ｍ，
５Ｈ）， ５．２１（ｓ， １Ｈ）， ４．５５（ｓ， ２Ｈ）， ３．９２−４．０１（ｍ， ２Ｈ）， ３．８８（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７７（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７０（ｄｄ， Ｊ＝９．８，３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５８−３．
６８（ｍ， １８Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ）

【0417】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−２）

【化74】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍｌ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２．６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（１−ｅ−１）（１０．０ｇ、３６．５９ｍｍｏｌ、１．０当量）溶液に、水酸化カリウム（８．２１ｇ、１４６．３７ｍｍｏｌ、４当量）を５℃（氷／水）で加えた。添加後、この反応混合物を５℃で３０分間攪拌した。次いで、１−アジド−２−｛２−［２−（２−ヨードエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エタン（３６．１３ｇ、１０９．７８ｍｍｏｌ、３．０当量）を、５℃（氷／水）で反応混合物に添加した。この反応混合物を５℃（氷／水）で３０分間攪拌し、この反応混合物を２７℃に加熱して、２７℃で１８時間撹拌した。１８時間後、この反応混合物を氷／水に注ぎ、ジクロロメタン（４００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を水（４００ｍｌ）、ブライン（５００ｍｌ）で３回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して粗生成物を得た。この粗生成物を、ジクロロメタン：メタノール＝１００：１から４０：１で溶離させるシリカゲルクロマトグラフィーにより、無色油状物としての表題化合物（１０．０ｇ、５７．６％）へと精製した。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋４５（ギ酸）＝５１９］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２３（ｄ， Ｊ＝２．０Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３１（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ
）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９３−３．９７（ｍ， １Ｈ）， ３．９０−３．９３（ｍ， Ｊ＝２．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８６（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７５（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６１−３．７１（ｍ， １４Ｈ）， ３．３７（ｔ， Ｊ＝４．９Ｈｚ
， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ）， １．４９（ｓ， ３Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ
）

【0418】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３４）

【化75】

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酢酸（６．０ｍＬ）、メタノール（１．４５ｍＬ）及び水（１．４５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−２）（８２．０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃で一晩加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題
化合物を油状物として得た（４３．３ｍｇ、５８％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ−１＝４３３］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２１（ｄ， Ｊ＝０．８， １Ｈ）， ３．９８（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９４（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８９（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ
， １Ｈ）， ３．７２（ｄｄ， Ｊ＝１０．１，４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６１−３．
６９（ｍ， １６Ｈ）， ３．３８（ｔ， Ｊ＝４．９Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ３Ｈ）

【0419】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（２，５，８，１１−テトラオキサテトラデカ−１３−エンー１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−４）

【化76】

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ジクロロメタン（１．５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（ヒドロキシメチル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ］［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（Ｉ−ｅ−１）（５０．０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及び３−｛２−［２−（２−ヨードエトキシ）エトキシ］エトキシ｝プロパ−１−エン

【化77】

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（Ｏｒｇａｎｉｃ Ｌｅｔｔｅｒｓ、５（１１）、１８８７−１８９０、２００３参照、１３９．０ｍｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）の溶液に、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（９５．３ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）を加え、続いて１２．５Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（０．７５ｍＬ、９．４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。１８時間後、この反応物を水及びジクロロメタンで希釈した。層を分離し、水層をジクロロメタンで更に２回抽出した。合わせた有機層を１Ｎ塩酸、水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗製物質を酢酸エチル（５ｍＬ）で希釈し、得られた沈殿物を室温で３０分間撹拌した。この沈殿物を濾過し、濾過ケーキを酢酸エチル（２×５ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＩＳＣＯ・ＲｅｄｉＳｅｐ・ｇｏｌｄ・４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離して精製した。次いで、カラムを０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して、表題化合物（１３．６ｍｇ、１７％）を得た。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝４６８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．９２（ｄｄｔ， Ｊ＝１６．８， １０．９，
５．７Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２８（ｄｄ， Ｊ＝１７．４， １．４Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２３（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１６（ｄｄ， Ｊ＝１０．３， １．０Ｈｚ
， １Ｈ）， ４．３１（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０２（ｄ， Ｊ＝５．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８９−３．９７（ｍ， ２Ｈ）， ３．８６（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３−３．８０（ｍ， ２Ｈ
）， ３．５６−３．７２（ｍ， １２Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ）， １．４９（ｓ，
３Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ）．

【0420】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１３−エン−１−イル）６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３５）

【化78】

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酢酸（１．０ｍＬ）、メタノール（０．２５ｍＬ）及び水（０．２５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（２，５，８，１１−テトラオキサテトラデカ−１３−エン−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−４）（１３．０ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に一晩加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して粗製物質を精製し、表題化合物（６．５ｍｇ、５５％）を得た。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４０６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．８０−６．０９（ｍ， １Ｈ
）， ５．２８（ｄｄ， Ｊ＝１７．２，１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２１（ｄ， Ｊ＝０
．８Ｈｚ， １Ｈ）， ５．１６（ｄｄ， Ｊ＝１０．５， １．２Ｈｚ， １Ｈ）， ４．０２（ｄ， Ｊ＝５．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９８（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８９（ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝１０．０，４．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５７−３．６８（ｍ， １４Ｈ）， １．９９（ｓ， ３Ｈ）．

【0421】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（２，５，８，１１−テトラオキサテトラデカ−１３−イン−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌｅ−５）

【化79】

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ジクロロメタン（３ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（Ｉ―ｅ−１）（１００．０ｍｇ、０．３６６ｍｍｏｌ）及び３−｛２−［２−（２−ヨードエトキシ）エトキシ］エトキシ｝プロパ−１−イン

【化80】

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（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、（１０）、１６３９−１６４４、２０１０参照、４２５．０ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）の溶液に、硫酸水素テトラブチルアンモニウム（１９１ｍｇ、０．５５０ｍｍｏｌ）を添加し、続いて１２．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５ｍＬ、１９ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を室温で一晩撹拌した。１８時間後、この反応物を水及びジクロロメタンで希釈した。層を分離し、水層をジクロロメタンで更に２回抽出した。合わせた有機層を１Ｎ塩酸、水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた粗製物質を酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、得られた沈殿物を室温で３０分間撹拌した。この沈殿物を濾過し、フィルターケーキを酢酸エチル（２×１５ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＩＳＣＯ・ＲｅｄｉＳｅｐ・ｇｏｌｄ・１２ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離して精製した。次いで、カラムを０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して、表題化合物（７０．０ｍｇ、４３％）を得た。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ ［Ｍ ＋ Ｎａ＝４６６］。¹Ｈ
−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２３（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３１（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１９（ｄ， Ｊ＝２．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０−３．９７（ｍ， ２Ｈ）， ３．８６（
ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ２Ｈ）， ３．６０−３．
７２（ｍ， １２Ｈ）， ２．８５（ｔ， Ｊ＝２．３Ｈｚ， １Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ）， １．４９（ｓ， ３Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ）

【0422】

Ｎ［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（２，５，８，１１−テトラオキサテトラデカ−１３−イン−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３６）

【化81】

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酢酸（４．０ｍＬ）、メタノール（１．０ｍＬ）及び水（１．０ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（２，５，８，１１−テトラオキサテトラデク−１３−イン−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−５）（７０．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に一晩加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物をゴム状物として得た（５７．６ｍｇ、９０％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４０４］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２２（ｓ， １Ｈ）， ４．１９（ｄ， Ｊ＝１．８Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９８（ｄ， Ｊ＝１０．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９４（ｄ， Ｊ＝１０．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８９（ｄ， Ｊ＝４．１Ｈｚ， １Ｈ）
， ３．７８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝１０．０， ４．１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６０−３．６９（ｍ， １４Ｈ）， ２．８６（ｓ， １Ｈ）， １
．９９（ｓ， ３Ｈ）

【0423】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−アミノ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３７）

【化82】

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エタノール（２ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３４）（４０．０ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｈキューブに通した（条件：触媒（炭素上の１０％パラジウム（３０×４ｍｍ）、流速：１ｍＬ／分、温度：室温、圧力＝全Ｈ₂
）。Ｈキューブに通した後にこの溶液を収集し、減圧下に濃縮し、ゴム状物として表題化合物を得た（１７．２ｍｇ、４６％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４０９］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２１（ｓ， １Ｈ）， ３．９２−４．００（ｍ， ２Ｈ）， ３．８９（ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６９−３．７４８ｍ， １Ｈ）， ３．６１−３．６９（ｍ， １４
Ｈ）， ３．５６（ｔ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８５（ｔ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ３Ｈ）

【0424】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（１３−ヒドロキシ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３８）

【化83】

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Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド（３３）（４３ｍｇ、０.０
８６ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍＬ）に溶解し、Ｈキューブに通した（条件：触媒（炭素上の２０％水酸化パラジウム（３０×４ｍｍ）、流速：１ｍＬ／分、温度：６０℃、圧力＝全Ｈ₂）。Ｈ−キューブに通過させた後、溶液を収集し、減圧下で濃縮して、表題化
合物を得た（３２．２ｍｇ、９１％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２１（ｓ， １Ｈ）， ３．９８（ｄ， Ｊ＝９．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８９（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝９．８，４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６１
−３．６９（ｍ， １６Ｈ）， ３．５４−３．５９（ｍ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ３
Ｈ）． ¹³Ｃ−ＮＭＲ（メタノールｄ₄）δ：１７４．１， １０２．６， ８４．３， ７
３．８， ７２．５， ７１．７， ７１．７（２）， ７１．６， ７１．５， ７１．４，
７０．５， ７０．２， ６９．０， ６２．４， ５６．４， ２２．７

【0425】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−ヒドロキシ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−６）

【化84】

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Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−３）（２．８９７ｇ、５．３７ｍｍｏｌ）をメタノール（１５０ｍＬ）に溶解し、Ｈキューブに通した（条件：触媒（炭素上の１０％パラジウム（３０×４ｍｍ）、流速：１ｍＬ／分、温度：６０℃、圧力＝全Ｈ₂）。Ｈ−キューブに通過させた後、溶液
を収集し、減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（２．５ｇ、１００％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４５０］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２３（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３１（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ，
１Ｈ）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８９−３．９７（ｍ， ２Ｈ
）， ３．８６（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７４−３．８０（ｍ， ２Ｈ）， ３．６０−３．７１（ｍ， １４Ｈ）， ３．５３−３．５９（ｍ， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ）， １．４９（ｓ， ３Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ）

【0426】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（１３−オキソ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−６ａ）

【化85】

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ジクロロメタン（５．０ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−ヒドロキシ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−６）（１７５ｍｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬（３５４ｍｇ、０．５８４ｍｍｏｌ）を添加して混合物を得た。約３０分後にこの反応物は概ね均質になった。３時間後、この反応混合物をジクロロメタンで希釈し、セライトのプラグを通して濾過し、ジクロロメタンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・２４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製した。所望の生成物を含有する管を減圧下で濃縮した。得られた物質をジクロロメタン（４ｍＬ）で希釈し、エチルエーテル（１０ｍＬ）で希釈して、白色沈殿物を得た。溶液をデカントし、固体をジクロロメタン（２ｍＬ）及びエ
チルエーテル（８ｍＬ）で希釈し、２回目にデカントした。デカントした溶液を、０．４５μｍのナイロン膜を備えたＬｉｆｅ・Ｓｃｉｅｎｃｅ・Ａｃｒｏｄｉｓｃ・２５ｍｍシリンジフィルターに通した。収集した溶液を減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物（６５．０ｍｇ、３７％）として得た。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４４８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（クロロホルム−ｄ）δ：９．７４（ｓ， １Ｈ）， ５．６３（ｄ， Ｊ＝９．０Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３４（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１７（ｓ， ２Ｈ）， ４．０９−４．１５（ｍ， １Ｈ）， ４．０１（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９７（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ， １Ｈ
）， ３．７７−３．８５（ｍ， ３Ｈ）， ３．６８−３．７６（ｍ， ５Ｈ）， ３．６
１−３．６８（ｍ， ７Ｈ）， ２．０３（ｓ， ３Ｈ）， １．５６（ｓ， ３Ｈ）， １．３６（ｓ， ３Ｈ）．

【0427】

１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−オイック酸（３８Ａ）

【化86】

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テトラヒドロフラン／ｔ−ブタノール（１．５ｍＬ／１．５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−４，４−ジメチル−１−（１３−オキソ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（ｌ−ｅ−６ａ）（６０．０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）の溶液を、ガラスピペットを介して、２−メチル−２−ブテン（１．０ｍＬ）で処理し、続いて水（１．５ｍＬ）中の亜塩素酸ナトリウム（１６９．４ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）及びリン酸ナトリウム（２５０．０ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）（一塩基性及び一水和物、２５０ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。この反応物を室温で２４時間攪拌させた。２４時間後に、この反応混合物を水中に投入し、酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を廃棄した。水層を減圧下で濃縮し、得られた粗生成物をメタノール（１０ｍＬ）及びジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、得られた混合物を濾過した。濾液を減圧下で濃縮した。得られた物質をメタノール（５ｍＬ）及びジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、得られた混合物を濾過した。濾液をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から１００％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物をナトリウム塩としてゴム状物として得た（４０ｍｇ、なし、６７％）。ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４２４］。¹Ｈ−Ｎ
ＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２４（ｓ， １Ｈ）４．１４（２Ｈ）３．９７（ｄ，
Ｊ＝１０．１Ｈｚ， ２Ｈ）３．９０（ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）３．８１（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６３−３．７７（ｍ， １５Ｈ）， ２．０１（ｓ， ３Ｈ
）

【0428】

１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イルメタンスルホネート（ｌ−ｅ−７）

【化87】

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ジクロロメタン（１２．４ｍＬ）中の、１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イルメタンスルホネート（１−ｅ−６）（１１１７ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（１．０５ｍＬ、７．４５ｍｍｏｌ）を加え、氷浴を用いて０℃に冷却した後、塩化メタンスルホニル（０．２３２ｍＬ、２．９８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物をゆっくりと室温まで温め、室温で１．５時間攪拌した。１．５時間後に反応を水でクエンチし、抽出した。層を分離し、水層をジクロロメタンで更に抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物を得、これは粗製の状態で次に進めた（１３００．０ｍｇ、９９．２％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５５０］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノ
ール−ｄ₄）δ：５．２３（ｄ， Ｊ＝２．０Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３４−４．４０（ｍ，
２Ｈ）， ４．３１（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．４，
１Ｈ）， ３．８９−３．９７（ｍ， ２Ｈ）， ３．８６（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ
）， ３．７２−３．８１（ｍ， ４Ｈ）， ３．５９−３．７１（ｍ， １２Ｈ）， ３．
１１（ｓ， ３Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ）， １．４８（ｓ， ３Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ）

【0429】

Ｓ−｛１［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝エタンチオエート（１−ｅ−８）

【化88】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の、１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イルメタンスルホネート（１−ｅ−７）（１２５．０ｍｇ、０．２３７ｍｍｏｌ）の溶液に、チオ酢酸カリウム（１３５ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物を室温で６４時間撹拌した。６４時間後、この反応物を水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物をゴム状物として得た（９５．２ｍｇ、７９．２％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５３０］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール
−ｄ₄）δ：５．２３（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３１（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈ
ｚ， １Ｈ）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０〜３．９７（ｍ， ２Ｈ）， ３．８６（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ２Ｈ
）， ３．５５−３．７２（ｍ， １４Ｈ）， ３．０８（ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）
， ２．３２（ｓ， ３Ｈ）， １．９８（ｓ， ３Ｈ），１．４９（ｓ， ３Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ）

【0430】

Ｓ｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６、８−ジオキサビシクロ（３．２．１）オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝エタンチオエート（３９）

【化89】

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酢酸（６．０ｍＬ）、メタノール（１．４５ｍＬ）及び水（１．４５ｍＬ）の中の、Ｓ−｛１［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝エタンチオエート（１−ｅ−８）（８１．０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に一晩加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を使用し、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物をゴム状物として得た（５３．７ｍｇ、７２％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４６８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタ
ノール−ｄ₄）δ：５．２３（ｓ， １Ｈ）， ４．００（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， １Ｈ）
， ３．９７（ｄ， Ｊ＝９．８ヘルツ， １Ｈ）， ３．９１（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８０（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３（ｄｄ， Ｊ＝１０．１，
４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６３−３．７０（ｍ， １４Ｈ）， ３．６０（ｔ， Ｊ＝６
．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１０（ｔ， Ｊ＝２Ｈ）， ２．３４（ｓ， ３Ｈ）， ２．０１（ｓ， ３Ｈ）

【0431】

Ｎ−｛（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２，３−ジヒドロキシ−１−［１３−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル］−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル｝アセトアミド（４０）

【化90】

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メタノール（３ｍＬ）中の、Ｓ−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６、８−ジオキサビシクロ（３．２．１）オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝エタンチオエート（３９）（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、続いてメタノール中の０．５Ｍナトリウムメトキシドの（１．２８ｍＬ、０．６４２ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で４５分間撹拌した。４５分後に、酢酸（４２ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ、０．０４
０ｍＬ）を加え、１０分間撹拌した。このメタノール溶液を、メタノール（２ｍＬ）及び酢酸（１ｍＬ）の混合物中の２，２’−ジスルファンジイルジピリジン（３５．３ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴下して加えた。この反応物を室温で２時間攪拌した。２時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・ｇｏｌｄ・４ｇシリカゲルカラム）を用い、この粗製物質を０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物を得た（３１．４ｍｇ、５５％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５５７］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール
−ｄ₄）δ：８．３９（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９４（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈ
ｚ， １Ｈ）， ７．８３（ｔｄ， Ｊ＝７．８，１．６Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２２（ｄ， Ｊ＝６．８，５．３Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２１（ｓ， １Ｈ）， ３．９２−４．００（ｍ， ２Ｈ）， ３．８８（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７７（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７１（ｔ， Ｊ＝６．０Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５９−３．６７（ｍ， １２Ｈ）， ３．５２−３．５８（ｍ， ２Ｈ）， ３．０２（ｔ， Ｊ＝６．０Ｈｚ， ２
Ｈ）， １．９９（ｓ， ３Ｈ）

【0432】

ｔｅｒｔ−ブチル｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−イル｝カルバメート（１−ｆ−３）

【化91】

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（１−ｆ−３）の合成については、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ７３（１４），５６０２−５６０５、２００８を参照されたい。

【0433】

１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−アミン塩酸（１−ｐ−ｌ）

【化92】

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ジクロロメタン（４５ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−イル｝カルバメート（１−ｆ−３）（３０００ｍｇ、８．９４５ｍｍｏｌ）の溶液に、ジオキサン中の４．０Ｍ塩化水素（２０ｍＬ、８９．４ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で１８時間撹拌した。１８時間後に、この反応物を減圧下で濃縮して油状物を得た。この粗製混合物に酢酸エチル（２０ｍＬ）を加え、得られた混合物を撹拌した。ヘプタン（２０ｍＬ）を加え、この混合物を室温で２時間撹拌した。この物質を濾過し、フィルターケーキを酢酸エチルで洗浄し、２時間真空引きして乾燥し、表題化合物を得た（２１４０ｍｇ、８８％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：４．２５（ｓ， ６Ｈ）， ３．７２（ｓ， ６Ｈ）， ２．９７（ｓ， ３Ｈ）．

【0434】

ベンジル［６−（｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−イル｝アミノ）−６−オキソ
ヘキシル］カルバメート（１−ｑ―１）

【化93】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２０．０ｍＬ）中の６−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝ヘキサン酸

【化94】

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（２９１０ｍｇ、１１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１−ｐ−１）（２１５０ｍｇ、１１．０ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１４８０ｍｇ、１１．０ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で１時間撹拌し、その間に反応物は均一になった。１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−アミン塩酸（２１３０ｍｇ、７．８４ｍｍｏｌ）を無希釈で前記攪拌溶液に一度に加え、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．４６ｍＬ、３１．４ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物を６０℃に２４時間加熱した。この反応物を室温に冷却し、２４時間撹拌した。反応を水（１５０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。水層を酢酸エチルで更に洗浄した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・８０ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離してこの粗製物質を精製することにより、表題化合物が油状物として得られ、これは放置すると固化した（３２５０ｍｇ、８６％）。方法Ｃ：ＭａｓｓＬｙｎｘ＼Ａｃｉｄ＿３．０Ｍｉｎ．ｏｌｐ−ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４８３］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．１０−７．４６（ｍ， ５Ｈ）， ５．０６（ｓ， ２Ｈ）， ４．１４（ｄ， Ｊ＝
２．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．７９（ｓ， ６Ｈ）， ３．０３−３．２０（ｍ， ２Ｈ）， ２．８３（ｔ， Ｊ＝２．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．１８（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）
， １．５９（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４４−１．５４（ｍ， ２Ｈ
）， １．２８−１．４０（ｍ， ２Ｈ）

【0435】

６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサン酸（１−ｒ−１）

【化95】

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エタノール（１２．０ｍＬ）及び酢酸（０．２９１ｍＬ）の混合物中の２，２’−ジスルファンジイルジピリジン

【化96】

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（１４９０ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下で撹拌し、続いて酢酸エチル（６．０ｍＬ）中の６−スルファニルヘキサン酸

【化97】

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（１０００．０ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ）を滴下により加えた。この反応物を室温で２時間攪拌した。２時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・ｇｏｌｄ・４０ｇシリカゲルカラム）を使用し、０％から１００％への酢酸エチル（２％酢酸改質剤）／ヘプタン勾配で溶離してこの粗製物質を精製し、粗製の表題化合物（１１７０ｍｇ）を得た。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ ｇｏｌｄ ４０ｇシリカゲルカラム）を使用し、０％から１００％への酢酸エチル（２％酢酸改質剤）／ヘプタン勾配で溶離して再び精製して、表題化合物を油状物として得た（５４４ｍｇ、３１％）。

【0436】

１−｛［６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ｓ−１）

【化98】

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【0437】

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中の６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサン酸（１−ｒ−１）（７０５ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３０６ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（５２０ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。翌朝、反応を水でクエンチし、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇ・ｇｏｌｄカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離して精製し、標題化合物を得た（３６４ｍｇ、４７％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝３５５］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．３９（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８５−７．９０（ｍ， １Ｈ），
７．７７−７．８４（ｍ， １Ｈ）， ７．２１（ｄｄ， Ｊ＝６．６，５．５Ｈｚ， １
Ｈ）， ２．７７−２．９０（ｍ， ６Ｈ）， ２．６１（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）
， １．６３−１．８３（ｍ， ４Ｈ）， １．４６−１．５９（ｍ， ２Ｈ）

【0438】

Ｎ−｛（１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−イル｝−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ｔ−１）

【化99】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０ｍＬ）中の１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−アミン塩酸（１−ｐ−１）（１００．０ｍｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３３９ｍＬ、１．９５ｍｍｏｌ）を加え、１０分間攪拌した後、１−｛［６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ｓ−１）（１３８ｍｇ、０．３８９ｍｍｏｌ）を一度に加え、次いでこの反応物を６０℃に１６時間加熱した。１６時間後、この反応物を水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇシリカゲルカラム）を使用し、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離してこの粗製物質を精製することにより、表題化合物をゴム状物として得た（６６．７ｍｇ、４３％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝４９７］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．３９（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， １Ｈ）， ７．
８５−７．９０（ｍ， １Ｈ）， ７．７８−７．８４（ｍ， １Ｈ）， ７．１９−７．２５（ｍ， １Ｈ）， ４．０６−４．２３（ｍ， ６Ｈ）， ３．７２−３．８４（ｍ， ６
Ｈ）， ２．７８−２．８７（ｍ， ５Ｈ）， ２．１２−２．２０（ｍ， ２Ｈ）， １．
７１（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５７（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ，
２Ｈ）， １．３６−１．５０（ｍ， ２Ｈ）

【0439】

１−｛［４−（ベンジルオキシ）ブタノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ｕ−１）

【化100】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７．５４ｍＬ）中の４−（ベンジルオキシ）ブタン酸（１０００ｍｇ、３．７７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（５２１ｍｇ、４．５２ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（８８５ｍｇ、４．５２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。翌朝、反応を水でクエンチし、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇ・ｇｏｌｄカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離して、表題化合物を得た（１０９８ｍｇ、１００％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝３１４］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．１１−７．５０（ｍ， ５Ｈ）， ４．５１（ｓ， ２Ｈ）， ３．５６（ｔ， Ｊ＝６．０Ｈｚ， ２Ｈ），
２．８１（ｓ， ４Ｈ）， ２．７３（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｑｕｉｎ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）

【0440】

４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−イル］ブタンアミド（１−ｖ−１）

【化101】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−アミントリフルオロ酢酸（１−ｐ−１）（７５０．０ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．６９ｍＬ、９．７１ｍｍｏｌ）を添加し、１０分間撹拌した後に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中の１−｛［４−（ベンジルオキシ）ブタノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ｕ−１）（５６６ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）の溶液を加え、この反応物を６０℃に７２時間加熱した。７２時間後に、この反応物を水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・２４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（４９５ｍｇ、なし、７４％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝４１２］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．２１−７．４１（ｍ， ５Ｈ）， ４．５１（ｓ， ２Ｈ）， ４．１２（ｄ， Ｊ＝２．３Ｈｚ， ６Ｈ），
３．７８（ｓ， ６Ｈ）， ３．５１（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２８（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７９−１．９４（ｍ， ２Ｈ）

【0441】

ｔｅｒｔ−ブチル（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）カルバメート（１−ｗ−１）

【化102】

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撹拌棒を備えた５０ｍＬの丸底フラスコに、ｔｅｒｔ−ブチル｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル）プロパン−２−イル｝カルバメート（１−ｆ−３）（３０５．０ｍｇ、０．９０９ｍｍｏｌ）を充填し、ｔ−ブタノール（１２ｍＬ）中のＮ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（１−ｅ−２）（１４３３．０ｍｇ、３．０２０ｍｍｏｌ）の溶液を加えた後、水（５ｍＬ）を添加し、続いてアスコルビン酸ナトリウム（１８４０ｍｇ、９．０９ｍｍｏｌ）を無希釈で加え、この反応物を窒素で１０分間パージした。硫酸銅（ＩＩ）（１４７ｍｇ、０．９０９ｍｍｏｌ）を１ｍＬの水（脱イオン）に加え、室温で２４時間攪拌した。２４時間後、この反応混合物を飽和塩化アンモニウム（３０ｍＬ）及び濃水酸化アンモニウム（３ｍＬ）に添加して反応を停止させ、ジクロロメタン（２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・８０ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を使用し、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して粗製物質を精製することにより、標題化合物を白色泡状物として得た（７８９．０ｍｇ、なし、４９．３％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋４５−１＝１８０４］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．００（ｓ， ３Ｈ）， ５．２３（ｄ，
Ｊ＝１．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５１−４．６３（ｍ， １２Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８７−３．
９６（ｍ， １２Ｈ）， ３．８４（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７３−３．８
０（ｍ， ６Ｈ）， ３．６４−３．７２（ｍ， １２Ｈ）， ３．５４−３．６３（ｍ，
３０Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．４８（ｓ， ９Ｈ）， １．４０（ｓ， ９Ｈ）， １．３３（ｓ， ９Ｈ）

【0442】

Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２
．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ｘ−１）

【化103】

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ｔ−ブタノール（２ｍＬ）中の、Ｎ−｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル］プロパン−２−イル｝−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ｔ−１）（６６．０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）及びＮ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８、１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（１−ｅ−２）（２１９ｍｇ、０．４５９ｍｍｏｌ）の溶液に、水（０．５ｍＬ、脱イオン水）を加えた。アスコルビン酸ナトリウム（８４．３ｍｇ、０．４１７ｍｍｏｌ）を固体として加え、この反応混合物を窒素で５分間パージした後、水（０．５ｍＬ、脱イオン水）中の硫酸銅（ＩＩ）（６．７３ｍｇ、０．０４１７ｍｍｏｌ）を添加し、室温で２４時間撹拌した。この反応混合物を飽和塩化アンモニウム（２０ｍＬ）及び濃水酸化アンモニウム（２ｍＬ）に添加することにより反応を停止し、ジクロロメタン（１５ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製することにより、純粋でない表題化合物（１０５．０ｍｇ、なし、４０％）を得た。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して再びこの粗製物（１０５．０ｍｇ）を精製し、表題化合物をゴム状物として得た（９４．５ｍｇ、３６％）。方法Ｃ：ＭａｓｓＬｙｎｘ＼Ａｃｉｄ＿３．０Ｍｉｎ．ｏｌｐ−ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝１９２１］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ
：８．３８（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９７（ｓ， ３Ｈ）， ７．８２−７
．８８（ｍ， １Ｈ）， ７．７８−７．８１（ｍ， １Ｈ）， ７．２０（ｔ， Ｊ＝５．
９Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２３（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６２（ｍ， １２Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８６−３．９６（ｍ， １２Ｈ）， ３．８１−３．８５（ｍ， ３Ｈ）， ３．７２−３．８０（ｍ， １２Ｈ）， ３．５４−３．７１（ｍ， ３６Ｈ）， ２．７９（ｔ， Ｊ
＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．６４−１．７３（ｍ， ２Ｈ）， １．５０−１．５７（ｍ， ２Ｈ）， １
．４８（ｓ， ９Ｈ）， １．４２（ｄ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３２（ｓ， ９Ｈ）

【0443】

ベンジル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（１−ｙ−１）

【化104】

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撹拌棒を備えた２５０ｍＬ丸底フラスコに、ベンジル［６−（｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２−［（プロパ−２−イン−１−イル）メチル］プロパン−２−イル｝アミノ）−６−オキソヘキシル］カルバメート（１−ｑ−１）（８８０．０ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を充填し、ｔ−ブタノール（２６ｍＬ）中のＮ−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］アセトアミド（１-ｅ−２）（３０７５
．０ｍｇ、６．８ｍｍｏｌ）を加え、続いて水（１２ｍＬ）を添加し、続いてアスコルビン酸ナトリウム（３６９０ｍｇ、１８．２ｍｍｏｌ）を無希釈で加え、この反応物を窒素で１０分間パージした。硫酸銅（ＩＩ）（２９４ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を水１ｍＬに
て加え、室温で２４時間撹拌した。２４時間後、この反応混合物を飽和塩化アンモニウム（５０ｍＬ）及び水酸化アンモニウム（５ｍＬ）に加えて反応を停止させ、ジクロロメタン（４５ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・８０ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を使用し、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物を固体の純粋でない表題化合物として得た（１８９０．０ｍｇ、５４．４％）。この粗製物（１２７０．０ｍｇ、３６．５％）を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・８０ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して表題化合物（６０７．０ｍｇ、１７．５％）を得た。表題化合物の全収量２．４９７ｇ（７２％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１９０７］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール
−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ７．２１−７．４７（ｍ， ５Ｈ）， ５．２５（
ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．０７（ｓ， ２Ｈ）， ４．５３−４．６２（ｍ， １２Ｈ）， ４．３１（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１８（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈ
ｚ， ３Ｈ）， ３．８８−３．９８（ｍ， １２Ｈ）， ３．８５（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ
， ３Ｈ）， ３．７４−３．８１（ｍ， １２Ｈ）， ３．５３−３．７１（ｍ， ３６Ｈ
）， ３．１０（ｑ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１８（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．００（ｓ， ９Ｈ）， １．５３−１．６５（ｍ， ２Ｈ）， １．５０（ｓ， １１Ｈ）， １．３４（ｓ， １１Ｈ）

【0444】

Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル）プロパン−２−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（４１）

【化105】

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酢酸（４ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）及び水１．０ｍＬ）中の、Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（Ｉ−ｘ−ｌ）（９４．５ｍｇ、０．０４９８ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に６４時間加熱した。６４時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮して、純粋でない表題化合物をゴム状物（８５．３ｍｇ）として得た。この粗製物質を、以下の条件を用いて逆相クロマトグラフィーで精製し、表題化合物をゴム状物として得た（４７．６ｍｇ、５３．８％）。

【0445】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ １９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：８．５分で８０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で６５％Ｈ₂Ｏ／３５％アセトニトリルへ、９．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、９．０から１０．０
分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。４７．６ｍｇ
の表題化合物をゴム状物として得た（保持時間２．８７、観測された質量＝８９０．４３７６）。

【0446】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８ ４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ
：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。３．７５分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５０％アセトニトリルから直線で５０％Ｈ₂Ｏ／５０％アセトニトリルへ、４．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．
０から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持
時間２．８７、観測された質量＝８９０．４３７６。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝８８９］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．４１（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ
， １Ｈ）， ７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ７．８４−７．９１（ｍ， ２Ｈ）， ７．２６（ｔ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５８（ｔ， Ｊ＝５．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ４．５６（ｓ， ６Ｈ）， ３．９５（ｔ， Ｊ＝８．８Ｈｚ， ６Ｈ），
３．８９（ｔ， Ｊ＝５．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８６−３．８８（ｍ， ３Ｈ）， ３．７４−３．７８（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝９．４，４．１Ｈｚ， ３Ｈ），
３．５４−３．６７（ｍ， ４２Ｈ）， ２．８０（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．６８（ｑｕｉ
ｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５０−１．５７（ｍ， ２Ｈ）， １．３５−１．
４４（ｍ， ２Ｈ）

【0447】

Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル｝メトキシ）メチル｝−２−アミノプロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド−塩酸塩（４２）。

【化106】

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酢酸（８．０ｍＬ）、メタノール（２．０ｍＬ）及び水（２．０ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ
−ブチル（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）カルバメート（１−ｗ−１）（２１０ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）の溶液を、一晩７０℃に加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエン及びメタノールで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をジクロロメタン（１０ｍＬ）及びメタノール（４ｍＬ）で希釈し、これにジオキサン（２．０ｍＬ、８ｍｍｏｌ）中の４．０Ｍ塩化水素を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。１８時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を酢酸エチル（１ｍＬ）で希釈し、これにヘプタン（１０ｍＬ）を加え、減圧下で濃縮した。次いで、この物質を高真空下に１８時間置き、表題化合物を固体として得た（１９８．８ｍｇ、１０６％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝１５６１］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．１３−８．２１（ｍ， ３Ｈ
）， ５．２２（ｓ， ３Ｈ）， ４．７１（ｓ， ９Ｈ）， ４．６５（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．９２−４．００（ｍ， １２Ｈ）， ３．９０（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ
， ３Ｈ）， ３．５８−３．８０（ｍ， ５１Ｈ）， ２．０２（ｓ， ９Ｈ）

【0448】

６−アジド−Ｎ−（１，３−ビス［１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（４３）

【化107】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル｝メトキシ）メチル｝−２−アミノプロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド−塩酸塩（４２）（２５ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１１１ｍＬ、０．０６３５ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌した後、無希釈の１−［（６−アジドヘキサノイル）オキシ］ピロリジン−２，５−ジオン

【化108】

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（ＰＣＴ国際出願２０１１０３４９５１，２０１１年３月２４日参照、６．０５ｍｇ、０．０２３８ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を１８時間、室温で攪拌した。次いで、この反応物を６０℃に３２時間加熱した。３２時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）で希釈してシリンジフィルターに通し、この粗製物質を以下に示す条件を用いて逆相クロマトグラフィーで精製し、表題化合物をゴム状物として得た（６．２ｍｇ、２３％）。

【0449】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ １９×１００，５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で９０．０％Ｈ₂Ｏ／１０．０％アセトニトリルから直線で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルへ、０．５分で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルから直線で０
％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．０から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0450】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８ ４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。ＭｏｂＣｅ相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５
％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間１．７７、観測された質量＝８３９．７０９７。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１６７８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．００（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５８（ｔ， Ｊ＝４．７
Ｈｚ， ６Ｈ）， ４．５７（ｓ， ６Ｈ）， ３．９５（ｍ， ９Ｈ）， ３．８５〜３．９２（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４〜３．８０（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝１０．
０，４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５５〜３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．２５（ｔ， Ｊ
＝６．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１９（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５２−１．６２（ｍ， ４Ｈ）， １．３３−１．４１（ｍ， ２Ｈ）

【0451】

Ｎ−（１，３−ビス［１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘプタ−６−エナミド（４４）

【化109】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル｝メトキシ）メチル｝−２−アミノプロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド−塩酸塩（４２）（２５ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１１１ｍＬ、０．０６３５ｍｍｏｌ）を添加し、１０分攪拌させた後に、無希釈の１−（ヘプタ−６−エノイルオキシ）ピロリジン−２，５−ジオン

【化110】

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（Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ Ｃｈｅｍｉｅ、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｅｄｉｔｉｏｎ、５１（２５）、６１４４−６１４８、Ｓ６１４４／１−Ｓ６１４４／５３、２０１２、５．３６ｍｇ、０．０２３８ｍｍｏｌ）に添加し、この反応物を室温で１８時間撹拌させた。次いで、この反応物を６０℃に３２時間加熱した。３２時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）で希釈し、シリンジフィルターに通し、この粗製物質を逆相クロマトグラフィーで下記の条件を用いて精製し、表題化合物をゴム状物として得た（４．９ｍｇ、１９％）。

【0452】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣで精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：０．０５％ＴＦＡ／水（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。１０．５分で５５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルから直線で５５％Ｈ₂Ｏ／４５％アセトニトリルへ、０．５分で５５％Ｈ₂Ｏ／４５％アセトニトリルから直線で０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．０分から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持
。流量：２５ｍＬ／分。

【0453】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリ
ルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．８１。観測された質量＝８２５．２３８１。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ−１＝１６４７］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．６９−５．８８（ｍ， １Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３
Ｈ）， ４．９５（ｍ， ２Ｈ）， ４．５１−４．６３（ｍ， １２Ｈ）， ３．９５（ｔ
， Ｊ＝９．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８５−３．９１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４−３．８
１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝９．４，４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５４−
３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０１−２
．０９（ｍ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５２−１．６１（ｍ， ２Ｈ）， １．３９（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．５Ｈｚ， ２Ｈ）

【0454】

Ｎ−（１，３−ビス［１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘプタ−６−イナミド（４５）

【化111】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル｝メトキシ）メチル｝−２−アミノプロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド−塩酸塩（４２）（２５ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１１１ｍＬ、０．０６３５ｍｍｏｌ）を添加し、１０分間攪拌した後、無希釈の１−（ヘプト−６−イノイルオキシ）ピロリジン−２，５−ジオン

【化112】

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（ＰＣＴ国際出願２００７０５６３８９、２００７年５月１８日：５．３１ｍｇ、０．０２３８ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で１８時間撹拌した。次いで、この反応物を６０℃に３２時間加熱した。３２時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）で希釈し、シリンジフィルターに通し、この粗製物質を以下の条件で逆相クロマトグラフィーを用いて精製して、表題化合物をゴム状物として得た（５ｍｇ、１９％）。

【0455】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ）で精製した。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。１０．５分で９５％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５５％Ｈ₂Ｏ／４５％アセトニトリルへ、０．５分で５５％Ｈ₂Ｏ／４５％アセトニトリルから直線で０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．０分から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリル
を維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0456】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維
持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．６８。観測された質量＝８２４．２２３７。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝８２３］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５９（ｔ， Ｊ＝５．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ４．５６（ｓ， ６Ｈ）， ３．９５（ｔ， Ｊ＝１０．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８５−３．９２（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ，
Ｊ＝１０．０， ４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５４−３．６７（ｍ， ４１Ｈ）， ２．１
３−２．２４（ｍ， ６Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．６６（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７
．５Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５０（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）

【0457】

７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−７−オキソヘプタン酸エチル（１−ｚ−１）

【化113】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６．０ｍＬ）中の７−エトキシ−７−オキソヘプタン酸

【化114】

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（４４８ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３２９ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（５５９ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で７２時間撹拌した。７２時間後、反応を水でクエンチし、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇ・ｇｏｌｄカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタンの勾配で溶離して精製して、表題化合物をゴム状物として得た（４２６ｍｇ、６３％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝３０８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール
−ｄ₄）δ：４．１２（ｑ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８３（ｓ， ４Ｈ）， ２．６４（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３３（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７４（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５８−１．６８（ｍ， ２Ｈ），
１．４０−１．５３（ｍ， ２Ｈ）， １．２４（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ３Ｈ）．

【0458】

７−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸（ナトリウム塩）（４６）

【化115】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル｝メトキシ）メチル｝−２−アミノプロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−４−イル］アセトアミド−塩酸塩（４２）（３０．０ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１３３ｍＬ、００７６２ｍｍｏｌ）を加え、１０分間撹拌した後に、無希釈の７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−７−オキソヘプタン酸エチル（Ｉ−ｚ−１）（７．４ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）に加え、この反応物を室温で１８時間撹拌した。次いで、この反応物を６０℃に３２時間加熱した。３２時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をエタノール（１ｍＬ）及び水（０．０３ｍＬ）で希釈し、続いて１２．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．０１
５ｍＬ、０．１９０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を室温で３時間攪拌した。３時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）で希釈し、シリンジフィルターで濾過した。この溶液を、以下の条件を用いて逆相クロマトグラフィーで精製し、表題化合物をゴム状物として得た（３．７ｍｇ、１１％）。

【0459】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣ（カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ）で精製した。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ））。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。１０．５分で９０．０％Ｈ₂Ｏ／１０．０％アセトニトリルから直線で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルへ、０．５分で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルから直線で０％
Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．０分から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0460】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリ
ルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．５８分。観察された質量＝８３９．７０９７）。方法Ｃ：ＭａｓｓＬｙｎｘ＼Ａｃｉｄ＿３．０Ｍｉｎ．ｏｌｐ−ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１６８１］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５８（ｔ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ４．５６（ｓ， ６Ｈ），
３．９５（ｔ， Ｊ＝９．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８９（ｄｔ， Ｊ＝９．８，４．８Ｈ
ｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝１０．０，
４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５３−３．６７（ｍ， ４２Ｈ）， ２．２５（ｔ， Ｊ＝７
．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５８（ｄｑｕｉｎ， Ｊ＝１４．３，７．３Ｈｚ， ４Ｈ）， １．３１〜１．３９（ｍ， １Ｈ），

【0461】

ベンジル｛６−［１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（４７）

【化116】

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酢酸（６ｍＬ）、メタノール（１．５ｍＬ）及び水（１．５ｍＬ）中の、ベンジル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（１−ｙ−１）（３０８ｍｇ、０．１６２ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に６４時間加熱した。６４時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮して、表題化合物を得た（２８６ｍｇ、なし、９９％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１７８７］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタ
ノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ、３Ｈ）、７．１９−７．４３（ｍ、５Ｈ）、５．２１
（ｓ、３Ｈ）、５．０６（ｓ、２Ｈ）、４．５０−４．６６（ｍ， １２Ｈ）， ３．９５（ｄｄ， Ｊ＝９．６，５．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８６−３．９１（ｍ， ９Ｈ）， ３
．７４−３．７８（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝１０．０， ４．１Ｈｚ， ３
Ｈ）， ３．５４−３．６７（ｍ， ４２Ｈ）， ３．０３−３．１２（ｍ， ２Ｈ）， ２
．１１−２．２４（ｍ， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５１−１．６３（ｍ，
２Ｈ）， １．４３−１．５１（ｍ， ２Ｈ）， １．３３（ｄ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）．

【0462】

６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド酢酸塩（４８）

【化117】

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ベンジル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（４７）（６４０ｍｇ、０．３５８ｍｍｏｌ）を、メタノール（２０．０ｍＬ）及び酢酸（０．０４１ｍＬ、０．７１７ｍｍｏｌ）中に溶解させた。次いで、この溶液を以下のパラメーター（温度＝５０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂（１ｂａｒ））を使用し、炭素
上の１０％パラジウム（小カートリッジ）を用いたＨキューブに通した。この溶液を集め、減圧下で濃縮して、表題化合物を白色泡状物として得た（５７２ｍｇ、９３％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１６５２］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．００（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５９（ｔ， Ｊ＝４．９Ｈｚ， ６Ｈ）， ４．５６（ｓ， ６Ｈ）， ３．９５（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８５−３．９２（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９Ｈ）， ３．６９−３．７４（ｍ， ３Ｈ）， ３．５５−３．６９（ｍ， ４２Ｈ）， ２．９１（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ
， ２Ｈ）， ２．２０（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １
．９０（ｓ， ３Ｈ）， １．５２−１．６８（ｍ， ４Ｈ）， １．３４−１．４３（ｍ，
２Ｈ）

【0463】

Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］―２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−６−（２，５−ジオキ
ソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（４９）

【化118】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（４８）（６０ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２５３ｍＬ、０．１４５ｍｍｏｌ）及び１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン

【化119】

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（１２．３ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）を室温において１６時間添加した。１６時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を逆相クロマトグラフィーで以下の条件を用いて精製し、表題化合物をゴム状物として得た（１５．４ｍｇ、２３％）。

【0464】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で８０％Ｈ₂０／２０．０％アセトニトリルから直線で７５％Ｈ₂Ｏ／２５％アセトニトリルへ、１１．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．０分
から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0465】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：４．０分で９５％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニト
リルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．６９分。観察された質量観察＝９２３．４９０７。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ−１＝１８４３］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノー
ル−ｄ₄）δ：８．００（ｓ， ３Ｈ）， ６．８０（ｓ， ２Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５９（ｔ， Ｊ＝５．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ４．５６（ｓ， ６Ｈ）， ３．９５（ｔ， Ｊ＝９．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．９０（ｔ， Ｊ＝５．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８８（ｄ， Ｊ＝４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄ
ｄ， Ｊ＝１０．０， ４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５５−３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．４８（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１２（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１１−２．２３（ｍ， ４Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５３−１．６６（ｍ， ６Ｈ）， １．４８（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２４−１．３６（
ｍ， ４Ｈ）

【0466】

Ｎ−｛６−［１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−６−［（ブロモアセチル）アミノ］ヘキサンアミド（５０）

【化120】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ
−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（４８）（６０ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２５３ｍＬ、０．１４５ｍｍｏｌ）及び６−［（ブロモアセチル）アミノ］ヘキサン酸ペンタフルオロフェニル

【化121】

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（Ｃｈｅｍｉｓｔｒ −Ａ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ、１４（１６）、４９３９−４９４７、２００８参照、１６．７ｍｇ、０．０４００ｍｍｏｌ）を、室温で１６時間加えた。１６時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、以下の条件で逆相クロマトグラフィーを用いて精製し、表題化合物をゴム状物として得た（４．４ｍｇ、６．４％）。観察された質量：９４４．１５４３。

【0467】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で８０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で７５％Ｈ₂Ｏ／２５％アセトニトリルへ、１１．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．０分か
ら１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0468】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：４．０分で９５％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニト
リルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．６４分。観測された質量＝９４４．１５４３。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１８８６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−
ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５７−４．６２（ｍ
， ６Ｈ）， ４．５６（ｓ， ６Ｈ）， ３．９２−３．９８（ｍ， ６Ｈ）， ３．８３−３．９１（ｍ， １０Ｈ）， ３．８０（ｓ， ２Ｈ）， ３．６９−３．７９（ｍ， １２
Ｈ）， ３．５４−３．６８（ｍ， ４３Ｈ）， ３．１３（ｔ， Ｊ＝６．７Ｈｚ， ２Ｈ
）， ２．１８（ｄ， Ｊ＝６．５Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５９−１．６７（ｍ， ２Ｈ）， １．５１−１．５９（ｍ， ４Ｈ）， １．４８（ｂｒ．ｓ．，
２Ｈ）， １．２７−１．４１（ｍ， ４Ｈ）

【0469】

９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル｛（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝カルバメート（１−ａａ−１）

【化122】

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Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（２４７ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を、５〜１０℃において、脱水テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）中の
（２Ｓ）−シクロペンチル｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝エタン酸

【化123】

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（３８０ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１３７．６ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の溶液に少しずつ加えた。添加後、この混合物を室温で一晩攪拌した。この混合物を−２０℃に冷却し、次いで濾過して副生成物を除去した。濾過ケーキを冷テトラヒドロフランで洗浄し、濾液を濃縮乾固し、フラッシュカラム（石油エーテル：酢酸エチル１００：１０から１００：５０で溶出）で精製して、表題化合物（３８０ｍｇ、７９％）を得た。

【0470】

Ｎ〜５〜−カルバモイル−Ｎ〜２〜−［（２Ｓ）−２−シクロペンチル−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝アセチル］−Ｌ−オルニチン（１−ａｂ−１）

【化124】

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水（１５ｍＬ）中の（２Ｓ）−２−アミノ−５−（カルバモイルアミノ）ペンタン酸（１５１ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）及び重炭酸ナトリウム（７２．５ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）を０℃で加えた。得られた混合物に、１，２−ジメトキシ−エタン（１５ｍＬ）中の９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル｛（１Ｓ）−１−シクロペンチル−２−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２−オキソエチル｝カルバメート（１−ａａ−１）（３８０ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下で滴下した。添加後、この混合物を室温で一晩撹拌した。この反応混合物をメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５０ｍＬ）で４回洗浄した。有機相を捨て、水層を塩酸水溶液（１Ｍ）によりｐＨ＝３〜４に酸性化した。この溶液をクロロホルム／イソプ
ロピルアルコール（４：１）（５０ｍＬ）を用いて６回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、乾固するまで濃縮して、表題化合物を白色固体として得た（４０３ｍｇ、９３．７％）。

【0471】

９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル［（１Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−５−（カルバモイルアミノ）−１−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］アミノ｝−１−オキソペンタン−２−イル］アミノ｝−１−シクロペンチル−２−オキソエチル］カルバメート（１−ａｃ−１）

【化125】

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ジクロロメタン／メタノール（３０ｍＬ／１５ｍＬ）中の、Ｎ〜５〜−カルバモイル−Ｎ〜２〜−［（２Ｓ）−２−シクロペンチル−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝アセチル］−Ｌ−オルニチン（１−ａｂ−１）（５００ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）及び４−アミノベンジルアルコール（４７０ｍｇ、３．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１，２−ジヒドロキノリン（７０８ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、この反応混合物を暗所において室温で一晩攪拌した。翌朝、この反応物を減圧下で濃縮し、残渣をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１００ｍＬ×３）で洗浄した。次いで、濾過ケーキを分取ＨＰＬＣ（以下の条件を参照）により精製して、表題化合物を黄色固体として得た（３１ｍｇ、５．１％）。¹
Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ）δ：９．９５（ｓ， １Ｈ）， ８．０９（ｄ， １Ｈ）， ７．９０−７．８８（ｄ， ２Ｈ）， ７．７３−７．７１（ｔ， ２Ｈ）， ７
．５５−７．５３（ｔ， ２Ｈ）， ７．４１（ｔ， ２Ｈ）， ７．３４−７．３０（ｔ，
２Ｈ）， ７．２４−７．２２（ｄ， ２Ｈ）， ５．９６（ｔ， １Ｈ）， ５．３９（ｓ， ２Ｈ）， ５．１１−５．０８（ｔ， １Ｈ）， ４．４４−４．４２（ｄ， ３Ｈ）， ４．３２−４．２３（ｍ， ３Ｈ）， ３．９６−３．９２（ｔ， １Ｈ）， ３．０１−３．００（ｍ， ３Ｈ）， ２．１５−２．１３（ｍ， １Ｈ）， １．６６−１．２４（ｍ，
１２Ｈ）、Ｃ₃₅Ｈ₄₁Ｎ₅Ｏ₆についてのｍ／ｚ：６２８．４（Ｍ＋Ｈ）⁺、保持時間：４．２１３分

【0472】

精製条件
カラム：ＤＩＫＭＡ・Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ（２）Ｃ１８、２００＊２０ｍｍ＊５ｕｍ。移動相：水中の３０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）から水中の５０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）。波長＝２２０ｎｍ。ワークアップ：濃縮し、凍結乾燥する。

【0473】

ＱＣ条件：
カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ・ＸＢ−Ｃ１８、３＊５０ｍｍ、３ｕｍ。保持時間：４．３３分。移動相：Ａ、水（４Ｌの水中の２．７ｍＬのＴＦＡ）。Ｂ：アセトニトリル（４Ｌのアセトニトリル中の２．５ｍＬのＴＦＡ）、溶離勾配１％から１００％。波長：２２０ｎｍ。ｅｅ値：１００％。カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ・ＯＤ−３、５０＊４．６ｍｍ、Ｉ．Ｄ．３ｕｍ。保持時間：１．９２３分。移動相：５％から４０％のＣＯ₂中エタノー
ル（０．０５％ＤＥＡ）。流速：２．５ｍＬ／分。波長：２５４ｎｍ。ｅｅ値＝１００％
。カラム：ＡＤ−３、５０＊４．６ｍｍ、Ｉ．Ｄ．３μｍ。保持時間：１．９８１分。移動相：５％から４０％のＣＯ₂中エタノール（０．０５％ＤＥＡ）。流速：２．５ｍＬ／
分。波長：２２０ｎｍ

【0474】

Ｎ〜２〜−［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチルアセチル］−Ｎ〜５〜カルバモイル−Ｎ−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１−ａｄ−１）

【化126】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の、９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル［（１Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−５−（カルバモイルアミノ）−１−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］アミノ｝−１−オキソペンタン−２−イル］アミノ｝−１−シクロペンチル−２−オキソエチル］カルバメート（１−ａｃ−１）（５００ｍｇ、０．７９７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、窒素下に５℃でピペリジン（４ｍＬ）を滴下により加えた。この混合物を室温で１．５時間攪拌した。この反応物を濃縮乾固させた。この粗生成物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で洗浄し、濾過し、濾過ケーキを真空中で乾燥させ、固体として表題化合物（３００ｍｇ、９３．１％）を得、これを精製することなく次のステップに使用した。

【0475】

Ｎ−［（１Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−５−（カルバモイルアミノ）−１−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］アミノ｝−１−オキソペンタン−２−イル］アミノ｝−１−シクロペンチル−２−オキソエチル］−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（１−ａｅ−１）

【化127】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ｍＬ）中のＮ〜２〜−［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロペンチルアセチル］−Ｎ〜５〜カルバモイル−Ｎ−［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１−ａｄ−１）（３００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１−｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（２７２ｍｇ、０．８８９ｍｍｏｌ）を３℃において窒素下で加えた。この混合物を室温で２時間撹拌した。この反応物をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２５０ｍＬ）に滴下して加え、室温で２０分間撹拌し
、濾過し、濾過ケーキを濃縮乾固して、表題化合物（３００ｍｇ、６７．８％）を固体として得、これを精製することなく次のステップに使用した。

【0476】

Ｎ−５〜−カルバモイル−Ｎ〜２〜−［（２Ｓ）−２−シクロペンチル−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［４−（｛［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１−ａｆ−１）

【化128】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ｍＬ）中の、Ｎ−［（１Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−５−（カルバモイルアミノ）−１−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］アミノ｝−１−オキソペンタン−２−イル］アミノ｝−１−シクロペンチル−２−オキソエチル］−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド（１−ａｅ−１）（３００ｍｇ、０．７４０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ビス（４−ニトロフェニル）カーボネート（９００ｍｇ、２．９６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３９０ｍｇ、２．９６ｍｍｏｌ）を窒素下に３℃で添加した。この反応物を室温で一晩撹拌した。この反応物をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（６０ｍＬ）に滴下により添加し、室温で２０分間撹拌し、濾過し、濾過ケーキをメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。この粗生成物を真空中で乾燥し乾固させた。この粗生成物を、１００：１から９４：６へのジクロロメタン：メタノールで溶離するフラッシュカラムにより精製して、表題化合物を固体として得た（５０ｍｇ、１７．７％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ）δ：１０．０９（ｂｒ， １Ｈ）， ８．３３（ｄ， ２Ｈ）， ８．１３（ｄ， １Ｈ）， ７．９３（ｄ， １Ｈ）， ７．６７−７．４１（ｍ， ６Ｈ）， ７．０１（ｓ， ２Ｈ）， ５．９８（ｂｒ， １Ｈ）， ５．４３（ｓ，
２Ｈ）， ５．２５（ｓ， ２Ｈ）， ４．３９（ｍ， １Ｈ）， ４．２３−４．１９（ｍ， １Ｈ）， ３．３７（ｍ， １Ｈ）， ３．０３−２．９６（ｍ， ２Ｈ）， ２．１４−２．１１（ｍ， ３Ｈ）， １．７０−１．１９（ｍ， １９Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ：Ｃ₃₇Ｈ₄₅
Ｎ₇Ｏ₁₁についてのｍ／ｚ：７６４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。保持時間：０．８２３分。

【0477】

４−｛［（２Ｒ）−５−（カルバモイルアミノ）−２−｛［（２Ｒ）−２−シクロペンチル−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝アセチル］アミノ｝ペンタノイル］アミノ｝ベンジル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（５１）

【化129】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．３ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（４８）（４５ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で１８時間、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１９ｍＬ、０．１０９ｍｍｏｌ）及びＮ〜５〜−カルバモイル−Ｎ〜２〜−［（２Ｓ）−２−シクロペンチル−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝アセチル］−Ｎ−［４−（｛［（４−ニトロフェノキシ）カルボニル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−オルニチンアミド（１−ａｆ−１）（２０．８ｍｇ、０．０２７２ｍｍｏｌ）を加えた。１８時間後に試料を除去し、ＵＰＬＣは所望の生成物の形成を示した。この粗製反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた粗製物質を、以下の条件を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物をゴム状物として得た（２１．７ｍｇ、３５％）。

【0478】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で７５．０％Ｈ₂Ｏ／２５．０％アセトニトリルから直線で６５％Ｈ₂Ｏ／３５％アセトニトリルへ、１１．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．
０分から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／
分。

【0479】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリ
ルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．９９分。観測された質量＝１１３９．１２５４。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝１１３８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノ
ール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ７．５７（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３０（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．７９（ｓ， ２Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ５．０１（ｓ， ２Ｈ）， ４．５５−４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ４．５１（
ｄｄ， Ｊ＝９．０，５．１Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４３（ｑ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， １Ｈ）
， ４．１６（ｄ， Ｊ＝９．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８５−３．９１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９Ｈ）， ３．７
１（ｄｄ， Ｊ＝９．８，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５４−３．６７（ｍ， ４１Ｈ），
３．４７（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１６−３．２６（ｍ， １Ｈ）， ３．１０−３．１６（ｍ， １Ｈ）， ３．０７（ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２４
（ｑ， Ｊ＝７．７Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．１６（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．８５−１．９５（ｍ， １Ｈ）， １．４２−１．８４（ｍ， １
６Ｈ）， １．３７（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２３−１．３４（ｍ， ５Ｈ
）

【0480】

Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−３，１９−ジオキソ−１−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４，２０−ジアザヘキサコサン−２６−アミド（５２）

【化130】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．６ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．６ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド酢酸塩（４８）（７０．０ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）及びＮ−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝−３−（ピリジン−２−イル）プロパンアミド

【化131】

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（２７．５ｍｇ、０．０４９１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２８５ｍＬ、０．１６４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で１８時間撹拌した。１８時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を以下の条件を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（４７．７ｍｇ、５６％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／３Ｍ＋１＝６９９］。¹Ｈ−ＮＭＲ
（メタノール−ｄ₄）δ：８．４７（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０１（ｓ，
３Ｈ）， ７．９３（ｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３０−７．３８（ｓ， １Ｈ
）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５７−４．６２（ｍ， ６Ｈ）， ４．５７（ｓ， ６Ｈ）， ３．９２−３．９９（ｍ， ６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ， Ｊ＝１０．７，４．９Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．８０（ｍ， ９Ｈ）， ３，７２（ｄ， Ｊ＝９．８，４．
７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．５１−３．６８（ｍ， ５５Ｈ）， ３．３５−３．４１（ｍ，
２Ｈ）， ３．１４（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１０（ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ
， ２Ｈ）， ２．６４（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４３（ｔ， Ｊ＝６．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ），
１．５２−１．６１（ｍ， ２Ｈ）， １．４３−１．５１（ｍ， ２Ｈ）， １．２７−１．３８（ｍ， ２Ｈ）

【0481】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：８．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルへ、９．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、９．０から
１０．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0482】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５
％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．７８分。観察された質量＝６９９．６４０４

【0483】

Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−３，３１−ジオキソ−１−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−４，３２−ジアザオクタトリアコンタン−３８−アミド（５３）

【化132】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．６ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．６ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド酢酸塩（４８）（７０．０ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）及びＮ−｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−１−イル｝−３−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパンアミド

【化133】

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（３０．１ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２８５ｍＬ、０．１６４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で１８時間撹拌した。１８時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、以下の条件を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物をゴム状物として得た（５９．２ｍｇ、６４％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／３Ｍ＝７５７］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタ
ノール−ｄ₄）δ：８．４７（ｄ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０１（ｓ， ３Ｈ）
， ７．９２（ｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．３０−７．３９（ｍ， ６Ｈ）， ５．２１（ｓ, ３Ｈ），４．５７（ｓ， ６Ｈ）， ３．９２−３．９９（ｍ， ６Ｈ）， ３．８６−３．９２（ｍ， Ｈ）， ３．７４（ｍ， ６Ｈ）， ３．７７（ｍ， ９Ｈ）， ３．６９−３．７４（ｍ， ６Ｈ）， ３．５０−３．６８（ｍ， ７３Ｈ）， ３．１４（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１０（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．６４（ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４３（ｔ， Ｊ＝６．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５３−１．６３（ｍ
， ２Ｈ）， １．４２−１．５２（ｍ， ２Ｈ）， １．３２（ｄｔ， Ｊ＝１５．１， ７．５Ｈｚ， ２Ｈ）

【0484】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０
．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：８．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルへ、９．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、９．０から
１０．０分までは０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0485】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：４．０分で９５％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニト
リルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．８５分。観測された質量＝７５８．４０５

【0486】

６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ、２Ｒ、６Ｒ、７Ｒ、８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）

【化134】

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ベンジル−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミ
ノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（１−ｙ−１）（１２００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を、メタノール（３０ｍＬ）に溶解した。次いで、この溶液を、以下のパラメーター（温度＝５０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂（１ｂａｒ））
を使用して、炭素上の１０％パラジウム（小カートリッジ）を使用したＨ−キューブに通した。この溶液を収集した。試料を取り出したところ、ＵＰＬＣは出発物質が残っていることを示した。上記のパラメーターを用いて、この反応物を２回目にＨ−キューブに通した。収集した溶液を減圧下で濃縮して、表題化合物を白色泡状物として得た（１０３９ｍｇ、９３％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝８８６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（
メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．２３（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， ３
Ｈ）， ４．４５−４．６２（ｍ， １２Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ
）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８７−３．９８（ｍ， １２Ｈ）
， ３．７３−３．８５（ｍ， １５Ｈ）， ３．５４−３．７０（ｍ， ３６Ｈ）， ２．
８７（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２０（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５３−１．６９（ｍ， ４Ｈ）， １．４８（ｓ， ９Ｈ）， １．３４−１．４１（ｍ， ２Ｈ）， １．３３（ｓ， ９Ｈ）

【0487】

Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−２）

【化135】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサト
リシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ、２Ｒ、６Ｒ、７Ｒ、８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（１０５．０ｍｇ、０．０５９３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０３１ｍＬ、０．１７８ｍｍｏｌ）を添加し、１０分間攪拌した後、１−｛［６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ｓ−１）（２５．２ｍｇ、０．０７１１ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を１６時間室温に加熱した。１６時間後、この反応物を水（１５ｍＬ）及びブライン（５ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・シリカゲルカラム）を用い、０から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物を得た（５６．６ｍｇ、５０％）。方法Ｃ：ＭａｓｓＬｙｎｘ＼Ａｃｉｄ＿３．０Ｍｉｎ．ｏｌｐ−ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝１００６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．３９（ｄ， Ｊ＝
４．７Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ７．８３−７．８７（ｍ， １Ｈ）， ７．７７−７．８３（ｍ， １Ｈ）， ７．２１（ｔ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ５．
２３（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５０−４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ４．２
９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ ， ３Ｈ）， ３．８７−３．９６（ｍ， １２Ｈ）， ３．８４（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．
７１−３．７９（ｍ， １５Ｈ）， ３．５４−３．７０（ｍ， ３１Ｈ）， ３．１８−３．２８（ｍ， ２Ｈ）， ３．１３（ｑ， Ｊ＝６．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８２（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１２−２．２３（ｍ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）
， １．７１（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５１−１．６４（ｍ， ６Ｈ
）， １．４４−１．５１（ｍ， １１Ｈ）， １．２８−１．３４（ｍ， １１Ｈ）

【0488】

Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（５４）

【化136】

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酢酸（４ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）及び水（１ｍＬ）中の、Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−２）（５９ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃で２４時間加熱した。２４時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質についてトルエンで２回目の希釈を行い、減圧下で濃縮して、粗製表題化合物（５０．５ｍｇ、９１％）を得た。この粗製物質を、以下の条件を用いた逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物をゴム状物として得た（２５．２ｍｇ、４５％）。

【0489】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルへ、１１．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．
０分から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／
分。

【0490】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリ
ルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．９６分。観測された質量＝９４６．５１３７。
方法Ｃ：ＭａｓｓＬｙｎｘ＼Ａｃｉｄ＿３．０Ｍｉｎ．ｏｌｐ−ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋
１＝９４６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．４５（ｄ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， １Ｈ）， ８．０１（ｓ， ３Ｈ）， ７．９４（ｄ， Ｊ＝３．１Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２９−７．３６（ｍ， １Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５７−４．６２（ｍ， ６
Ｈ）， ４．５７（ｓ， ６Ｈ）， ３．９２−４．００（ｍ， ６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ
， Ｊ＝１０．７，４．９Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．８０（ｍ， ９Ｈ）， ３．７
１（ｄｄ， Ｊ＝１０．１，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５３−３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．１３（ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８５（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．７１（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５２−１．６４（ｍ， ４Ｈ）， １．４５（
ｔｄ， Ｊ＝１５．０， ７．８Ｈｚ， ４Ｈ）， １．２６−１．３７（ｍ， ２Ｈ）

【0491】

２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（１−ａｇ−３）

【化137】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．３ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ、２Ｒ、６Ｒ、７Ｒ、８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（６１．４ｍｇ、０．０３４７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２４１ｍＬ、０．１３９ｍｍｏｌ）及び４−ニトロフェニル２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチルカーボネ
ート

【化138】

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（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、８２，３５５−３６２、２０１４参照、１８．０ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）を、室温で１６時間加えた。１６時間後、この反応混合物を減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物をゴム状物として得た（５７．４ｍｇ、なし、８３％）。方法Ｃ：ＭａｓｓＬｙｎｘ＼Ａｃｉｄ＿３．０Ｍｉｎ．ｏｌｐ−ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝９９３］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メ
タノール−ｄ₄）δ：８．４０（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ７．９８（ｓ， ３Ｈ
）， ７．８３−７．８９（ｍ， １Ｈ）， ７．７５−７．８３（ｍ， １Ｈ）， ７．１
５−７．２５（ｍ， １Ｈ）， ５．２２（ｄ， Ｊ＝１．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５１−
４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．２３（ｔ
， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ３Ｈ）３．８６−３
．９７（ｍ， １２Ｈ）， ３．８３（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７２−３．
７９（ｍ， １２Ｈ）， ３．５３−３．６９（ｍ， ３６Ｈ）， ３．０５（ｔ， Ｊ＝５
．７Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５１−１．６１（ｍ， ２Ｈ）， １．４８（ｓ， １１Ｈ）， １．３３（ｓ， １１Ｈ）

【0492】

２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１―［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（５５）

【化139】

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酢酸（４．０ｍＬ），メタノール（１．０ｍＬ）及び水（１．０ｍＬ）中の、２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（１−ａｇ−３）（５７．４ｍｇ、０．０２８９ｍｍｏｌ）の溶液を、２４時間７０℃に加熱した。２４時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、以下の条件を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物をゴム状物として得た（２９．８ｍｇ、５５％）。

【0493】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で７０％Ｈ₂Ｏ／３０％アセトニトリルへ、１１．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、１１．
０分から１２．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／
分。

【0494】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリ
ルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．９１分。観測された質量＝９３３．４３１３。方法Ｃ：ＭａｓｓＬｙｎｘ＼Ａｃｉｄ＿３．０Ｍｉｎ．ｏｌｐ−ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝９３３］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．４６（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ
， １Ｈ）， ８．０１（ｓ， ３Ｈ）， ７．８６−７．９７（ｍ， ２Ｈ）， ７．３２（
ｔ， Ｊ＝５．３Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５５−４．６２（ｍ， １２Ｈ）， ４．２４（ｔ， Ｊ＝６．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９２−３．９９（ｍ， ６
Ｈ）， ３．８５−３．９２（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｓ， ３Ｈ）， ３．
７１（ｄｄ， Ｊ＝９．８，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５２−３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ２．９９−３．１５（ｍ， ４Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５６（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４２−
１．５０（ｍ， ２Ｈ）， １．２４−１．３８（ｍ， ２Ｈ）

【0495】

１−｛［６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５（１−ａｈ−１）

【化140】

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ジクロロメタン（５．０ｍＬ）中のクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（Ｉ）、ウィルキンソン触媒（３９．７ｍｇ、０．０４２９ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素で１０分間パージした後に、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（２９９ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ、０．３４０ｍＬ）を滴下して加えた。この反応物を室温で１０分間攪拌した。２，５−ジオキソピロリジン−１−イルヘキサ−５−エノエート

【化141】

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（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ、１３２（３５）、１２１９７−１２１９９参照、２０１０，４１２ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１．０ｍＬ）に溶解し、滴下して加えた。この反応物を室温で１８時間攪拌した。翌朝、この反応物をジクロロメタンで希釈し、水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・２４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を使用し、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離して精製し、粗製表題化合物（３６６ｍｇ）を得た。この粗製表題化合物を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・２４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を使用し、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離して精製し、表題化合物を油状物として得た（２７１．０ｍｇ、なし、４１．０％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：２．８３（ｓ， ４Ｈ）， ２．６１（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７１（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．１Ｈｚ， ２
Ｈ）， １．３８−１．５０（ｍ， ４Ｈ）， １．２４（ｓ， １２Ｈ）， ０．７５（ｔ
， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ２Ｈ）．

【0496】

Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−
４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−４）

【化142】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．６ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．６ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（２００ｍｇ、０．１１３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８６ｍＬ、０．４５１ｍｍｏｌ）を加え、続いて１−｛［６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ａｈ−１）（５７．４ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で２４時間攪拌した。２４時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製することにより、表題化合物をゴム状物として得た（２０９．０ｍｇ、なし、９３％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝９９８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ５．２３（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６２（ｍ， １２Ｈ）， ４．２９
（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８７−３．９７（ｍ， １２Ｈ）， ３．８４（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７２
−３．７９（ｍ， １２Ｈ）， ３．５４−３．６９（ｍ， ３６Ｈ）， ３．１３（ｑ，
Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６（ｑ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ
， ９Ｈ）， １．５２−１．６６（ｍ， ４Ｈ）， １．４４−１．５１（ｍ， １１Ｈ）
， １．３５−１．４３（ｍ， ２Ｈ）， １．２７−１．３５（ｍ， １３Ｈ）， １．１
８−１．２５（ｍ， １２Ｈ）， ０．７３（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ２Ｈ）

【0497】

Ｎ−｛６［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ヘキサンアミド（５６）

【化143】

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酢酸（４ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）及び水（１ｍＬ）中の、Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−４）（１０４．０ｍｇ、０．０５２１ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃で２４時間加熱した。２４時間後、この反応物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目の希釈をし、減圧下で濃縮して、粗製標題化合物を得た（１１２．０ｍｇ、１１５％）。この粗製表題化合物の一部（５２．７ｍｇ）を逆相クロマトグラフィーにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（１８．２ｍｇ、１９％）。

【0498】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ １９×１００・５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：８．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で６５％Ｈ₂Ｏ／３５％アセトニトリルへ、９、０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮ、９．０分から
１０．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0499】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５
％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝２分。観察された質量＝９３８．９６２８。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．０１（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３
Ｈ）， ４．５１−４．６６（ｍ， １２Ｈ）， ３．９５（ｄｄ， Ｊ＝９．４，５．９Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ， Ｊ＝１１．７， ４．７Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．８１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝９．８，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５
２−３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．１３（ｔ， Ｊ＝２Ｈ）， ２．１７（ｑ， Ｊ＝７
．０Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５３−１．６６（ｍ， ４Ｈ）， １．４５−１．５２（ｍ， ２Ｈ）， １．３６−１．４４（ｍ， ２Ｈ）， １．２７−１．３５（ｍ， ４Ｈ）， １．２３（ｓ， １２Ｈ）， ０．７３（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ２Ｈ）

【0500】

７−［（１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸エチル（１−ａｉ−１）

【化144】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）中の７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−７−オキソヘプタン酸エチル（１−ｚ−１）（２２８．０ｍｇ、０．７９９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．５５７ｍＬ、３．２０ｍｍｏｌ）を添加し、１０分間撹拌した後、２−アミノプロパン−１，３−ジオール（７２．８ｍｇ、０．７９９ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で７２時間攪拌した。７２時間後、この反応物を水で希釈し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製表題化合物（８９．０ｍｇ、なし、４３％）を得た。水層を減圧下で濃縮した。この粗製の濃縮水層をメタノール（５ｍＬ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）で希釈した。この混合物をデカントし、最初の抽出からの粗製表題化合物と合わせた。この溶液を減圧下で濃縮した。この合わせた粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製することにより、表題化合物を得た（１８３．０ｍｇ、８８％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝２６２］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：４．１１（ｑ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８３−３．９９（ｍ， １Ｈ）， ３．６０
（ｄ， Ｊ＝５．５Ｈｚ， ４Ｈ）， ２．３１（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２３（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６３（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．５Ｈｚ， ４Ｈ）
， １．３０−１．４５（ｍ， ２Ｈ）， １．２４（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ３Ｈ）

【0501】

７−［（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸エチル（１−ａｊ−１）

【化145】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中の７−［（１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸エチル（１−ａｉ−１）（１８０．０ｍｇ、０．６８９ｍｍｏｌ）の溶液に、２，２−ジメトキシプロパン（０．５３ｍＬ、４．１３ｍｍｏｌ）を加え、続いて（１Ｓ）−（＋）−１０−カンファースルホン酸（６４．０ｍｇ、０．２７６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を７０℃に７２時間加熱した。７２時間後、この反応物を室温に冷却し、水（２０ｍＬ）及び酢酸エチル（１０ｍＬ）の間に分配させた。層を抽出し、層を分離した。水層を酢酸エチル（１０ｍＬ）で更に２回洗浄した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製の表題化合物を得た（９４．０ｍｇ、なし、４５％）。

【0502】

７−［（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸（１−ａｋ−１）

【化146】

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エタノール（５ｍＬ）中の７−［（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸エチル（１−ａｊ−１）（９４．０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の溶液に、１．０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で一晩撹拌した。翌朝、この反応物を減圧下で濃縮した。得られた粗製物質を１Ｎ塩酸（３．０ｍＬ）及び酢酸エチルで希釈した。層を分離し、有機層を酢酸エチルで更に２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製表題化合物を得た（２９．４ｍｇ、なし、３４％）。

【0503】

Ｎ−｛６［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−Ｎ’−（１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル）ヘプタンジアミド（５７）

【化147】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．３ｍＬ）中の、７−［（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）アミノ］−７−オキソヘプタン酸（１−ａｋ−１）（１８．８ｍｇ、０．０６８８ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１０．３ｍｇ、０．０７６２ｍｍｏｌ）及びＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１４．９ｍｇ、０．０７６２ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で１時間撹拌した。この反応混合物を、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（７５．０ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２９５ｍＬ、０．１６９ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で１６時間撹拌した。１６時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を酢酸（４．０ｍＬ）、メタノール（１ｍＬ）及び水（１．０ｍＬ）に溶解し、７０℃に２４時間加熱した。２４時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮して、粗製表題化合物（１７５．０ｍｇ、２２０％）を得た。この表題化合物を、下記の条件を使用して逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物をゴム状物として得た（１０．９ｍｇ、１４％）。

【0504】

精製条件：
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：８．５分で８５．０％Ｈ₂Ｏ／１５．０％アセトニトリルから直線で７５％Ｈ₂Ｏ／２５％アセトニトリルへ、９．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、９．０分か
ら１０．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0505】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ
（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、４．０分から５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリ
ルを維持。流量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．５３分。観測された質量＝９３４．５４８。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝１８８９］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．００（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６２（ｍ，
１２Ｈ）， ３．９５（ｔ， Ｊ＝９．４Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８５−３．９１（ｍ， ９
Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝１０．０，４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５５−３．６７（ｍ， ４７Ｈ）， ３．１２（ｔ， Ｊ＝６．７Ｈｚ
， ２Ｈ）， ２．２２（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５８−１．６９（ｍ， ４Ｈ）， １．５１−１．５７（ｍ， ２Ｈ）， １．４８（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２
６−１．４０（ｍ， ４Ｈ）

【0506】

６−アジド−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−６−オキソヘキシル｝ヘキサンアミド（１−ａｇ−５）

【化148】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．６ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．６ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１
３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（３００ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１１８ｍＬ、０．６７７ｍｍｏｌ）及び１−［（６−アジドヘキサノイル）オキシ］ピロリジン−２，５−ジオン（５６．０ｍｇ、０．２２０ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で２４時間攪拌した。２４時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製反応混合物を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・２４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離して精製し、表題化合物をゴム状物として得た（２６９ｍｇ、８３％）。方法Ｃ：3分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝９５６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ５．２２（ｓ， ３Ｈ）， ４．
５０−４．６５（ｍ， １２Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１
６（ｔ， Ｊ＝６．５Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８３−３．９５（ｍ， １２Ｈ）， ３．８３
（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７３−３．７９（ｍ， １２Ｈ）， ３．５５−
３．７１（ｍ， ３６Ｈ）， ３．２６−３．３０（ｍ， ２Ｈ）， ３．１４（ｑ， Ｊ＝
６．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１８（ｑ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５３−１．６８（ｍ， ６Ｈ）， １．４５−１．５１（ｍ， １１Ｈ）， １
．３６−１．４３（ｍ， ２Ｈ）， １．２９−１．３６（ｍ， １１Ｈ）

【0507】

６−アジド−Ｎ−｛６−（１，３−ビス［１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝ヘキサンアミド（５８）

【化149】

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酢酸（３ｍＬ）、メタノール（０．７５ｍＬ）及び水（０．７５ｍＬ）中の、６−アジド−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−
２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−６−オキソヘキシル｝ヘキサンアミド（１−ａｇ−５）（２５．０ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に２４時間加熱した。２４時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（２２．７ｍｇ、９７％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１７９１］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５１−４．６６（ｍ， １２Ｈ）， ３．９２−４．０１（ｍ，
６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．８１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝１０．０，４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５２−３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．２５−３．３０（ｍ， ２Ｈ）， ３．０８−３．１９（ｍ， ２Ｈ
）， ２．１３−２．２３（ｍ， ４Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５４−１．６
９（ｍ， ６Ｈ）， １．４９（ｄｔ， Ｊ＝１４．４，７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３６
−１．４４（ｍ， ２Ｈ）， １．３２（ｄｄ， Ｊ＝１４．８，６．２Ｈｚ， ２Ｈ）

【0508】

１−｛［６−（ベンジルオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ａｌ−１）

【化150】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中の６−（ベンジルオキシ）ヘキサン酸

【化151】

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（Ｓｙｎｌｅｔｔ、（４）、６９３−６９７、２００４参照、１４００．０ｍｇ、６．２９８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（８７０ｍｇ、７．５６ｍｍｏｌ）を加え、続いてＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１４８０ｍｇ、７．５６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。翌朝、反応を水でクエンチし、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇ・ｇｏｌｄカラム）を使用し、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離して粗製物質を精製することにより、表題化合物をゴム状物として得た（７１５ｍｇ、３６％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝３４２］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．２２−７．４２（ｍ， ５Ｈ）， ４．５１（ｓ， ２Ｈ）， ３．５３（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．８５（ｓ， ４Ｈ）， ２．６５（ｔ， ７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７６（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．５Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６１−１．７１（ｍ， ２Ｈ）， １．４７
−１．５９（ｍ， ２Ｈ）

【0509】

６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス｛１−｛１−［［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５
，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝ヘキサンアミド（１−ａｇ−６）

【化152】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．６ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．６ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（２００ｍｇ、０．１１３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８６ｍＬ、０．４５１ｍｍｏｌ）及び１−｛［６−（ベンジルオキシ）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ａｌ−１）（４６．９ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で２４時間撹拌した。２４時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することによりこの粗製物質を精製して、表題化合物をゴム状物として得た（２０３ｍｇ、９１％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−
ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ７．１９−７．３８（ｍ， ５Ｈ）， ５．２３（ｄ
， Ｊ＝１．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ４．４８（ｓ， ２Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ
， ３Ｈ）， ３．８６〜３．９６（ｍ， １２Ｈ）， ３．８３（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７２〜３．８０（ｍ， １２Ｈ）， ３．５４−３．７０（ｍ， ３６Ｈ），
３．４９（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０８−３．１５（ｍ， ２Ｈ）， ２．１２−２．２６（ｍ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５１−１．６８（ｍ，
６Ｈ）， １．４８（ｓ， １１Ｈ）， １．３７−１．４４（ｍ， ２Ｈ）， １．３３（
ｓ， １１Ｈ）

【0510】

６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル］ヘキサンアミド（５９）

【化153】

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酢酸（６．０ｍｌ）メタノール）（１．５ｍＬ）及び水（１．５ｍＬ）中の、６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス｛１−｛１−［［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝１Ｈ−２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝ヘキサンアミド（１−ａｇ−６）（１８０．０ｍｇ、０．０９１１ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に２４時間加熱した。２４時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（１６４．０ｍｇ、９７．０％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝９２８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ７．２５−７．３９（ｍ， ５Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６６（ｍ， １２Ｈ）， ４．４８（ｓ， ２Ｈ）， ３．９２−３．９９（ｍ， ６Ｈ）， ３．８４−３．９１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４−３．８１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ
＝９．８，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５４−３．６７（ｍ， ４２Ｈ）， ３．４９（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０８−３．１７（ｍ， ２Ｈ）， ２．１３−２．２
２（ｍ， ４Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５１−１．６８（ｍ， ６Ｈ）， １．４８（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３９（ｄｔ， Ｊ＝１５．３， ７．８Ｈｚ
， ２Ｈ）， １．２６−１．３５（ｍ， ２Ｈ）

【0511】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２−（アセチルオキシ）−１−｛１３−［４−（４，４−ビス｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−６，１３−ジオキソ−２０−フェニル−２，１９−ジオキサ−５，１２−ジアザイコス−１−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イルアセテート（ｌ−ａｍ−１）

【化154】

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６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル］ヘキサンアミド（５９）（１３０ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）を、（３ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）に溶解し、これに室温で無水酢酸（０．１９８ｍＬ、２．１０ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、この反応物を５０℃に一晩加熱した。翌朝、この反応物を減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することによりこの粗製物質を精製して、表題化合物をゴム状物として得た（１３０．０ｍｇ、８８％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝１０５４］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ７．１６−７．３９（ｍ， ５Ｈ）， ５．４４（ｄ， Ｊ＝４
．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．３２（ｓ， ３Ｈ）， ５．１０（ｄｄ， Ｊ＝１０．５， ４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６０（ｍ， １２Ｈ）， ４．４８（ｓ， ２Ｈ）４．
１８（ｄ， Ｊ＝１０．５Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９９（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８９（ｔ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．７０−３．８１（ｍ， １２Ｈ）， ３
．５２−３．６７（ｍ， ３９Ｈ）， ３．４９（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．
１３（ｑ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１３−２．２１（ｍ， １３Ｈ）， １．９
４（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １８Ｈ）， １．５１−１．６８（ｍ， ６Ｈ）， １．４５
−１．５０（ｍ， ２Ｈ）， １．３７−１．４３（ｍ， ２Ｈ）， １．２８−１．３５（ｍ， ２Ｈ）

【0512】

Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−６−ヒドロキシヘキサンアミド（１−ａｎ−１）

【化155】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２−（アセチルオキシ）−１−｛１３−［４−（４，４−ビス｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−６，１３−ジオキソ−２０−フェニル−２，１９−ジオキサ−５，１２−ジアザイコス−１−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イルアセテート（ｌ−ａｍ−１）（１１０ｍｇ、０．０５２２ｍｍｏｌ）をメタノール（１０．０ｍＬ）に溶解し、次いで、この溶液を次のパラメーター（温度＝６０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂（１ｂａｒ））を用い、炭素上の１０％パラジウム（小カー
トリッジ）を用いたＨキューブに通した。この溶液を収集し、減圧下に濃縮し、ゴム状物として表題化合物を得た（９１．６ｍｇ、８７％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＝１００９］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ５．４４（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．３２（ｓ， ３Ｈ）， ５．１０（ｄｄ， Ｊ＝１０．５，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５０−４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ４．１８（
ｄ， Ｊ＝１０．５Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９９（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９０（ｔ， Ｊ＝４．９Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．７１−３．８２（ｍ， ９Ｈ）， ３．４４−
３．６６（ｍ， ４４Ｈ）， ３．０８−３．１９（ｍ， ２Ｈ）， ２．１６−２．２２（ｍ， ４Ｈ）， ２．１５（ｓ， ９Ｈ）， １．９４（ｄ， Ｊ＝１．２Ｈｚ， １８Ｈ），
１．４４−１．６８（ｍ， ８Ｈ）， １．２７−１．４２（ｍ， ４Ｈ）

【0513】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−｛１３−［４−（｛３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）-４-(アセチルアミノ)−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクト−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１H−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ］メチル
｝−２−（｛６［（６−ヒドロキシヘキサノイル）アミノ］ヘキサノイル｝アミノ）プロポキシ｝メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート（６０）

【化156】

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６−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝ヘキサンアミド（１−ａｎ−１）（３１．０ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、次いで、この溶液を次のパラメーター（温度＝６０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂（１ｂａｒ））を使用して、炭素上の１０％パラジウム（小カ
ートリッジ）を用いたＨキューブに通した。この溶液を収集し、減圧下に濃縮し、ゴム状物として表題化合物を得た（７．９ｍｇ、２７％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋
１＝１７６６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．４９−４．６３（ｍ， １２Ｈ）， ３．９２−４．００（ｍ，
６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ， Ｊ＝３．５Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９
Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝９．８，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５３−３．６７（ｍ， ４４Ｈ）， ３．０２−３．１６（ｍ， ２Ｈ）， ２．１８（ｔｄ， Ｊ＝７．３， ３．３Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．４４−１．７２（ｍ， ８Ｈ）， １．２５−１．４２（ｍ， ４Ｈ）

【0514】

Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］２−｛［（１−｛１−［１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル｝メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−６−オキソヘキシル］カルバメート（１−ａｇ−７）

【化157】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１．０ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（２２２ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０８７３ｍＬ、０．５０１ｍｍｏｌ）及びベンジル｛６−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート

【化158】

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（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２３（３）、９０１−３、１９８６参照、６８．１ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で２４時間攪拌した。２４時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製反応混合物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（２５０ｍｇ、９９％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝１０１０］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ７．２２−７．４０（ｍ， ５Ｈ）， ５．２２（ｄ， Ｊ＝１．
２Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．０６（ｓ， ２Ｈ）， ４．５１−４．６１（ｍ， １２Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１６（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８６〜３．９６（ｍ， １２Ｈ）， ３．８３（ｄ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ３
．７３−３．７９（ｍ， １２Ｈ）， ３．５３−３．７０（ｍ， ３６Ｈ）， ３．０４−３．１９（ｍ， ４Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５８（ｔｄ， Ｊ＝１４．５， ７．６Ｈｚ， ４Ｈ）， １．４８（ｓ， １３Ｈ）， １．３３（ｓ， １３Ｈ）

【0515】

ベンジル［６−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−６−オキソヘキシル］カルバメート（６１）

【化159】

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酢酸（８ｍＬ）、メタノール（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）中の、ベンジル［６−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチ
ルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］２−｛［（１−｛１−［１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル｝メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−６−オキソヘキシル］カルバメート（１−ａｇ−７）（２５０．０ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）の溶液を３６時間７０℃に加熱した。３６時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで希釈し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をトルエンで２回目に希釈し、減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（２２５ｍｇ、９６％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝９５０］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ７．２２−７．４１（ｍ， ５Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ５．０５（ｓ， ２Ｈ）， ４．５７（ｔ， Ｊ＝５．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ４．５５（ｓ， ６Ｈ）， ３．９２−４．
００（ｍ， ６Ｈ）， ３．８３−３．９１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７３−３．７８（ｍ，
９Ｈ）， ３．６８−３．７２（ｍ， Ｊ＝１０．０，４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５２−３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．０５−３．１７（ｍ， ４Ｈ）， ２．１６（ｔ， Ｊ＝
７．３Ｈｚ， ４Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５７−１．６５（ｍ， ２Ｈ）， １．５３−１．５７（ｍ， ２Ｈ）， １．４３−１．５２（ｍ， ４Ｈ）， １．２４−１．３９（ｍ， ４Ｈ）

【0516】

６−アミノ−Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−ｙｌ］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ−６−オキソヘキシル｝ヘキサンアミドアセテート（６２）

【化160】

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ベンジル［６−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ
，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−６−オキソヘキシル］カルバメート（６１）（２００ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）をメタノール（２０ｍＬ）及び酢酸（０．０２４ｍＬ、０．４２１ｍｍｏｌ）中に溶解し、次いでこの溶液を、次のパラメーター（温度＝５０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂
（１ｂａｒ））を使用し、炭素上の１０％パラジウム（小カートリッジ）を使用するＨキューブに通した。この溶液を集め、減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（１４８ｍｇ、７７％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋４５（ギ酸）＝１８０９］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．０２（ｓ， ３Ｈ）， ５．２３（ｓ， ３Ｈ
）， ４．５９−４．６３（ｍ， ６Ｈ）， ４．５８（ｓ， ６Ｈ）， ３．９７（ｄｄ， Ｊ＝９．６，５．３Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．９１（ｄ， Ｊ＝１１．３，４．７Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７６−３．８２（ｍ， ９Ｈ）， ３．７３（ｄｄ， Ｊ＝１０．１，４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５６−３．７０（ｍ， ４２Ｈ）， ３．１６（ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９３（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６−２．２９（ｍ， ４Ｈ
）， ２．０１（ｓ， ９Ｈ）， １．９２（ｓ， ３Ｈ）， １．６２−１．７４（ｍ， ４Ｈ）， １．５４−１．６１（ｍ， ２Ｈ）， １．４６−１．５３（ｍ， ２Ｈ）， １．
３９−１．４５（ｍ， ２Ｈ）， １．２９−１．３８（ｍ， ２Ｈ）

【0517】

［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−アジド−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］メタノール（１−ｄ−１）

【化161】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２１ｍＬ）中の（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アジド−１−（ヒドロキシメチル）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタン−２，３−ジオール（１）（２．５２ｇ，１１．６１ｍｍｏｌ）の溶液に、２ ２−ジメトキシプロパン（９．０ｍＬ、６９．６ｍｍｏｌ）を加え、次いで（１Ｓ）−（＋）−１０−カンファースルホン酸（１．０８ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を２４時間に亘って７０℃に加熱した。２４時間後、この反応物を室温に冷却した後にメタノール（５ｍＬ）を加え、続いてトリエチルアミン（０．２２ｍＬ、１．５５ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を１０分間撹拌した後、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・８０ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、純粋でない表題化合物を得た。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離することにより精製して、純粋でない表題化合物を得た（２４１９ｍｇ、８１％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．４２（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ
， １Ｈ）， ４．３４−４．４３（ｍ， ２Ｈ）， ３．８８−３．９８（ｍ， ３Ｈ）， ３．８１−３．８７（ｍ， １Ｈ）， ３．３７（ｄｄ， Ｊ＝６．２，１．６Ｈｚ， １Ｈ
）， １．５４（ｓ， ３Ｈ）， １．４２（ｓ， ３Ｈ）

【0518】

（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−アジド−４，４−ジメチル−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−３，５、９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカン（１−ｄ−２）

【化162】

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テトラヒドロフラン（５ｍＬ）中の、［（１Ｓ、２Ｒ、６Ｒ、７Ｒ、８Ｓ）−７−アジド−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］メタノール（１−ｄ−１）（４９０ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ）の溶液に、鉱油中の６０％水酸化ナトリウム分散液（１２７ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。この反応物を窒素下で３０分間撹拌した後、テトラヒドロフラン（２ｍＬ）中の１３−ヨード−１−フェニル−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン（１１３０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を室温で一晩撹拌した。翌朝（１８時間）、反応を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。水層を酢酸エチルで更に２回洗浄した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を，ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＩＳＣＯ・ＲｅｄｉＳｅｐ・ｇｏｌｄ・４０ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から１００％への酢酸エチル／ヘプタン勾配で溶離することにより粗物質を精製して、表題化合物をゴム状物として得た（３３６．０ｍｇ、３４％）。
方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５４６］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−
ｄ₄）δ：７．１７−７．４７（ｍ， ５Ｈ）， ５．３５（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １Ｈ
）， ４．５５（ｓ， ２Ｈ）， ４．３２−４．３７（ｍ， １Ｈ）， ４．２５−４．３
２（ｍ， １Ｈ）， ３．９２（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８８（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７３−３．８０（ｍ， ２Ｈ）， ３．５５−３．７１（ｍ，
１７Ｈ）， １．４９（ｓ， ３Ｈ）， １．３６（ｓ， ３Ｈ）

【0519】

ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−ヒドロキシ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］カルバメート（１−ａｏ−１）

【化163】

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５０ｍＬの反応器中で、出発物質（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−アジド−４，４−ジメチル−１−（１５−フェニル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキサペンタデカ−１−イル）−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］］ウンデカン（１−ｄ−２）（３１０．０ｍｇ、０．５９２ｍｍｏｌ）をメタノー
ル（６ｍＬ）に溶解し、続いてジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカルボネート（１６２ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）及び炭素上１０％パラジウム（５０％湿重量／重量、１００．０ｍｇ、０．９４０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応器を密封し、この反応物を窒素（５０ｐｓｉ）で３回パージし、次いで水素（５０ｐｓｉ）で２回パージし、水素を５０ｐｓｉまで充填し、一晩攪拌した。翌朝（２４時間）、この反応物をセライトプラグで濾過し、メタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（３０４ｍｇ、１００％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５３０］。¹Ｈ−Ｎ
ＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２２（ｓ， １Ｈ）， ４．２８（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１１（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９３（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８０−３．８５（ｍ， １Ｈ）， ３．７６（ｄ， Ｊ＝６．２Ｈｚ
， １Ｈ）， ３．７４（ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３．６０−３．７１（ｍ， １５Ｈ）， ３．５３−３．５９（ｍ，２Ｈ）， １．５０（ｓ， ３Ｈ）， １．４５（ｓ，
９Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ）

【0520】

１−｛（１Ｓ．２Ｒ．６Ｒ．７Ｒ．８Ｓ）−７−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イルメタンスルホネート（１−ａｐ−１）

【化164】

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ジジクロロメタン（２ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−ヒドロキシ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］カルバメート（１−ａｏ−１）（３００．０ｍｇ、０．５９１ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（０．３３２ｍｌ、２．３６ｍｍｏｌ）を加え、氷浴を用いて０℃に冷却し、続いて塩化メタンスルホニル（０．０５５ｍＬ、０．７１ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を徐々に室温に温め、室温で２０時間撹拌した。２０時間後、反応を水でクエンチし、抽出した。層を分離し、水層をジクロロメタンで更に抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物を油状物として得た（３３９ｍｇ、９８％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝５３０］¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２２（ｓ， １Ｈ）， ４．３３−４．４３（ｍ， ２Ｈ）， ４．２８（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１１（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９３（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ
， １Ｈ）， ３．８０−３．８６（ｍ， １Ｈ）， ３．７２−３．７９（ｍ， ４Ｈ）， ３．６１−３．７０（ｍ， １２Ｈ）， ３．５８（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ３
．１１（ｓ， ３Ｈ）， １．５０（ｓ， ３Ｈ）， １．４５（ｓ， ９Ｈ）， １．３４（ｓ， ３Ｈ）

【0521】

ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］カルバメート（１−ａｑ−１）

【化165】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中の、１−｛（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イルメタンスルホネート（１−ａｐ−１）（３３９ｍｇ０．５７９ｍｍｏｌ）の溶液に、ナトリウムアジド（６７．７ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を密封した５ｍＬマイクロ波バイアル中で１００℃に一晩加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、この反応物を水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（２４６ｍｇ、８０％）。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：５．２４（ｓ， １Ｈ）， ４．３０（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１３（ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９５（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８２−３．８８（
ｍ， １Ｈ）， ３．７５−３．８０（ｍ， ２Ｈ）， ３．５３−３．７４（ｍ， １５Ｈ
）， ３．３９（ｔ， Ｊ＝４．９Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５２（ｓ， ３Ｈ）， １．４７（ｓ， ９Ｈ）， １．３６（ｓ， ３Ｈ）

【0522】

ｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−［１３−（４−｛［２−｛［４−（ベンジルオキシ）ブタノイル］アミノ｝−３−｛［１−（１−｛（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキシトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキシトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（１−｛（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝メチル）プロポキシ］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル｝カルバメート（１−ａｒ−１）

【化166】

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攪拌棒を備えた２０ｍＬのバイアルに、４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−｛１，３−ビス（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）−２―［（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）メチル）プロパン−２−イル｝ブタンアミド（１−ｖ−１）（４５．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を充填し、これにｔ−ブタノール（３ｍＬ）及び水（１．５ｍＬ、脱イオン水）中の、ｔｅｒｔ−ブチル［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−（１３−アジド−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル］カルバメート（１−ａｑ−１）（１９２ｍｇ、０．３６１ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物に窒素を５分間パージした後、アスコルビン酸ナトリウム（６６．３ｍｇ、０．３２８ｍｍｏｌ）を添加し、水（５００ｕＬ、脱イオン水）中の硫酸銅（ＩＩ）の溶液（５．２４ｍｇ、０．０３２８ｍｍｏｌ）を滴下により加えた。この反応物を室温で２０時間撹拌した。２０時間後、この反応液を室温に冷却し、この反応混合物を飽和塩化アンモニウム（３０ｍＬ）及び濃水酸化アンモニウム（２ｍＬ）に加えて反応を停止させ、ジクロロメタン（１５ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（１６５ｍｇ、なし、７５％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝１００５。¹Ｈ−
ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９７（ｓ， ３Ｈ）， ７．１７−７．４３（ｍ， ５Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６０（ｍ， １２Ｈ）， ４．４５（ｓ
， ２Ｈ）， ４．２５（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１０（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８５−３．９３（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１−３．８２（ｍ， １５Ｈ
）， ３．６３−３．６９（ｍ， ６Ｈ）， ３．５３−３．６２（ｍ， ３３Ｈ）， ３．
４８（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２７（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７４−１．９６（ｍ， ２Ｈ）， １．４９（ｓ， ９Ｈ）， １．４５（ｓ， ２７Ｈ）
， １．３２（ｓ， ９Ｈ）

【0523】

４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，
４Ｒ，５Ｓ）−４−アミノ−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アミノ−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ブタンアミド（６３）

【化167】

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酢酸（５ｍＬ）、メタノール（１．５ｍＬ）及び水（１．５ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル｛（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−１−［１３−（４−｛［２−｛［４−（ベンジルオキシ）ブタノイル］アミノ｝−３−｛［１−（１−｛（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキシトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキシトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（１−｛（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝メチル）プロポキシ］メチル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル］−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−７−イル｝カルバメート（１−ａｒ−１）（１５０．０ｍｇ、０．０７４７ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃に１８時間加熱した。１８時間後、この反応物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をジクロロメタン（１０ｍＬ）及びメタノール（４ｍＬ）で希釈し、これにジオキサン（２．０ｍＬ、８ｍｍｏｌ）中の４．０Ｍ塩化水素を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。１８時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を酢酸エチル（１ｍＬ）で希釈し、これにヘプタン（１０ｍＬ）を加え、減圧下で濃縮した。次いで、この物質を１８時間高真空下に置いて、表題化合物（１３９．０ｍｇ、１０３％）を得た。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝７９５］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．０９（ｓ， ３Ｈ）， ７．２７−７．
３９（ｍ， ５Ｈ）， ５．４８（ｓ， ３Ｈ）， ４．５７−４．６６（ｍ， １２Ｈ）， ４．４７（ｓ， ２Ｈ）， ３．９８（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９０−３．
９５（ｍ， ９Ｈ）， ３．８２−３．８９（ｍ， ６Ｈ）， ３．７９（ｓ， ６Ｈ）， ３．７６（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７１（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５７−３．６９（ｍ， ３６Ｈ）， ３．５０（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ３
．２１（ｄ， Ｊ＝９．４Ｈｚ， ３Ｈ）， ２．２９（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８５（ｑｕｉｎ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ２Ｈ）

【0524】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−｛［４−（ベンジルオキシ）ブタノイル］アミノ｝プロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート（１−ａｓ−１）

【化168】

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４−（ベンジルオキシ）−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アミノ−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−アミノ−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ブタンアミド（６３）（８０ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を、ピリ
ジン（無水）（１．５ｍＬ、１９ｍｍｏｌ）に溶解し、これに無水酢酸（０．１２５ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）を室温で加えた。次いで、この反応物を５０℃で一晩加熱した。翌朝、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、粗製表題化合物を得た。この粗製表題化合物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、ゴム状物として表題化合物を得た（５４．０ｍｇ、６２％）。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝９８４］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−
ｄ₄）δ：７．９７（ｓ， ３Ｈ）， ７．１９−７．４２（ｍ， ５Ｈ）， ５．４４（ｄ
， Ｊ＝４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．３１（ｓ， ３Ｈ）， ５．１０（ｄｄ， Ｊ＝１０．３，４．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５１−４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ４．４５（ｓ， ２
Ｈ）， ４．１８（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９９（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ
， ３Ｈ）， ３．８８（ｔ， Ｊ＝４．９Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．６８−３．８２（ｍ， １２Ｈ）， ３．５２−３．６４（ｍ， ３９Ｈ）， ３．４８（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２
Ｈ）， ２．２６（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１５（ｓ， ９Ｈ）， １．９４（ｄ， Ｊ＝１．２Ｈｚ， １８Ｈ）， １．８４（ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ２Ｈ）．

【0525】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−｛１３−［４−（｛３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−［（４−ヒドロキシブタノイル）アミノ］プロポキシ｝メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート（１−ａｔ−１）

【化169】

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（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−（１３−｛４−［（３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−｛［４−（ベンジルオキシ）ブタノイル］アミノ｝プロポキシ）メチル］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル｝−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル）−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート（１−ａｓ−１）（５４．０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）をメタノール（１０．０ｍＬ）に溶解し、次いでこの溶液を、次のパラメーター（温度＝６０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂（１ａｔｍ））を使用して、炭素上の１０％パ
ラジウム（小カートリッジ）を使用するＨキューブに通した。この溶液を収集し、減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（５１．０ｍｇ、９９％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋Ｎａ＝１８９９］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ５．４４（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．３２（ｓ， ３Ｈ），
５．１０（ｄｄ， Ｊ＝１０．５， ３．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．４１−４．６６（ｍ， １２Ｈ）， ４．１８（ｄ， Ｊ＝１０．５Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９９（ｄ， Ｊ＝８．６
Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９０（ｔ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．６８−３．８３（ｍ
， １２Ｈ）， ３．５１−３．６７（ｍ， ４１Ｈ）， ２．２４（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ
， ２Ｈ）， ２．１５（ｓ， ９Ｈ）， １．９４（ｓ， １８Ｈ）， １．６９−１．８３（ｍ， ２Ｈ）

【0526】

Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ
−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−４−ヒドロキシブタンアミド（６４）

【化170】

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メタノール（０．１５４ｍＬ ｍｇ、０．０７７０ｍｍｏｌ）中の、（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−｛１３−［４−（｛３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−［（４−ヒドロキシブタノイル）アミノ］プロポキシ｝メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート（１−ａｔ−１）（８．５ｍｇ、０．００４５ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール（１ｍＬ）中の０．５Ｍナトリウムメトキシド（０．１５４ｍＬ、０．０７７０ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で３時間撹拌した。３時間後、メタノールで３回すすいだＡｍｂｅｒｌｙｓｔ１５イオン交換樹脂（ＣＡＳ＃＝３９３８９−２０−３、ＲＳ−１０６００８）を、ｐＨ＝５になるまで加えることにより反応を中和した。この反応混合物を濾過し、この樹脂をメタノールで２回すすいだ。濾液を減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（１．５ｍｇ、２０％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋４５（ギ酸）＝１６６８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．００（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ，
３Ｈ）， ４．５３−４．６５（ｍ， １２Ｈ）， ３．９２−４．００（ｍ， ６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ， Ｊ＝１１．１， ４．９Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ，
９Ｈ）， ３．７１（ｄｄ， Ｊ＝９．８， ４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５２−３．６９
（ｍ， ４４Ｈ）， ２．２４（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．７６（ｑｕｉｎ， Ｊ＝６．９Ｈｚ， ２Ｈ）．

【0527】

スキーム４ｂの化合物（６６）によって例示され、スキーム３ｂに総括的に記載されるオルトエステルリンカーは、（Ｉ−ａｘ−１）を生成するために、（Ｉ−ａｗ−１）（Ｈ．Ｂｒｕｙｅｒｅ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，２０，２２００−２２０３，（２０１０）参照）、（Ｉ−ａｎ−１）のような適切なアルコール、及びトルエンのような適切な溶媒中において、ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウムのような適切な酸を還流条件下で利用することにより当業者が合成できるであろう。（Ｉ−ａｘ−１）の脱保護は、当業者に知られた塩基性条件下（メタノール中の触媒性炭酸カリウムなど）で達成することができ、これは化合物（６５）を生じるであろう。（６５）の更なる官能化は、本発明で請求される追加の化合物を生成するために達成することができる。従って、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような適切な塩基を用いて、適切な酸及びカップリング剤（当業者に知られている）または（Ｉ−ｓ−１）のような活性化されたエステル（例えばヒドロキシスクシンイミド）で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の溶媒中、（６５）を処理することにより、化合物（６６）を製造することができる。

【化171】

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【化172】

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【0528】

同様の方法で、スキーム５ｂに示すように、当業者は、スキーム４ｂについて先に記載した記載した反応条件を用いることにより、（Ｉ−ａｎ−１）のような適切なアルコール及び（Ｉ−ａｖ−１）を利用して化合物（６６）を合成できるであろう。

【化173】

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【0529】

Ｎ−（１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ａｕ−１）

【化174】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７ｍＬ）中の１−｛［６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサノイル］オキシ｝ピロリジン−２，５−ジオン（１−ｓ−１）（５１８ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エ
チルカルボジイミド塩酸塩（４６３ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３２６ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間撹拌した。１時間後、２−アミノプロパン−１，３−ジオール（１８３ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）を加え、次いでＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０５ｍＬ、６．０４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を室温で一晩撹拌した。１８時間後、この反応物を水で希釈し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・２４ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより、表題化合物（３６８ｍｇ、５５％）を得た。方法Ｃ：１．５分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋４５（ギ酸）＝３７５］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．３８（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８４−７．８９（ｍ， １Ｈ），
７．７７−７．８３（ｍ， １Ｈ）， ７．２１（ｔ， Ｊ＝５．７Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２（ｑｕｉｎ， Ｊ＝５．５Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５１−３．７０（ｍ， ４Ｈ）， ２
．８２（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２１（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７１（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６０（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．５Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３７−１．５１（ｍ， ２Ｈ）

【0530】

Ｎ−（２−メトキシ−１，３−ジオキサン−５−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ａｖ−１）

【化175】

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ジクロロメタン（０．６０５ｍＬ）及びオルトギ酸トリメチル（０．５ｍＬ、５ｍｍｏｌ）中の、Ｎ−（１，３−ジヒドロキシプロパン−２−イル）−６−（ピリジン−２−イルジスルファニル）ヘキサンアミド（１−ａｕ−１）（２８０ｍｇ、０．８４７ｍｍｏｌ）の混合物に、７−トルエンスルホン酸一水和物（１．７８ｍｇ、０．００８４７ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で３時間攪拌した。３時間後、ＴＬＣは出発物質のほぼ完全な消費を示した。この反応物をジクロロメタンで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（３×１ｍＬ）、ブライン（１ｍＬ）で洗浄し、無水炭酸カリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製の標題化合物を得た（２６３．０ｍｇ、８３．３％）。方法Ｃ：３分間運転（基本モード：カラム：ベース：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ、２．１ｍｍ×５０ｍｍ、Ｃ１８、１．８μｍ。移動相Ａ：水中の０．１％アンモニア（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：０．１％アンモニア／アセトニトリル（ｖ／ｖ））。ＬＲＭＳ［Ｍ＋４５＝４１７］。シス／トランス異性体の１：１混合物。
異性体１：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．４１（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８６−７．９２（ｍ， １Ｈ）， ７．８０−７．８６（ｍ， １Ｈ）， ７．
２０−７．２７（ｍ， １Ｈ）， ５．３１（ｓ， １Ｈ）， ４．２９（ｄ， Ｊ＝２．７
Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２−３．９６（ｍ， １Ｈ）， ３．８３（ｂｒ．ｓ， １Ｈ）， ３．６３（ｄ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， １Ｈ）， ３．５９（ｄｄ， Ｊ＝１１．５， ３．７
Ｈｚ， １Ｈ）， ３．４２（ｓ， ３Ｈ）， ２．８５（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ），
２．２１−２．３０（ｍ， ２Ｈ）， １．６８−１．８０（ｍ， ２Ｈ）， １．５６−
１．６７（ｍ， ２Ｈ）， １．３９−１．５３（ｍ， ２Ｈ）
異性体２：¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．４１（ｄ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， １Ｈ）， ７．８６−７．９２（ｍ， １Ｈ）， ７．８０−７．８６（ｍ， １Ｈ）， ７．
２０−７．２７（ｍ， １Ｈ）， ５．２７（ｓ， １Ｈ）， ４．２６（ｄ， Ｊ＝２．７
Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９２−３．９６（ｍ， ２Ｈ）， ３．８６−３．９１（ｍ， １Ｈ
）， ３．５９（ｄｄ， Ｊ＝１１．５，３．７Ｈｚ， １Ｈ）， ３．３８（ｓ， ３Ｈ）
， ２．８５（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２１−２．３０（ｍ， ２Ｈ）， １．６８−１．８０（ｍ， ２Ｈ）， １．５６−１．６７（ｍ， ２Ｈ）， １．３９−１．５３（ｍ， ２Ｈ）．

【0531】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２−（アセチルオキシ）−１−｛１３−［４−（１２，１２−ｂｉｓ｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ｂｉｓ（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−３，１０−ジオキソ−１−フェニル−２，１４−ジオキサ−４，１１−ジアザペンタデカン−１５−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イルアセテート（Ｉ−ａｚ−１）

【化176】

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ベンジル｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバメート（４７）（１６９０．０ｍｇ、０．９４６３ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（２０ｍＬ、２５０ｍｍｏｌ）に溶解し、これに無水酢酸（２．６８ｍＬ、２８．４ｍｍｏｌ）を室温で加えた。次いで、この反応物を５０℃に一晩加熱した。翌朝、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離させることにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（
１１７２ｍｇ、６２．８％）。
方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝１０２０］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール
−ｄ₄）δ：７．９７（ｓ， ３Ｈ）， ７．２２−７．４０（ｍ， ５Ｈ）， ５．４４（
ｄ， Ｊ＝３．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．３２（ｓ， ３Ｈ）， ５．１０（ｄｄ， Ｊ＝１０．５， ４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．０５（ｓ， ２Ｈ）， ４．５６−４．６０（ｍ， ６Ｈ）， ４．５５（ｓ， ６Ｈ）， ４．１８（ｄ， Ｊ＝１０．５Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９９（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８９（ｔ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．７１−３．８０（ｍ， １２Ｈ）， ３．５１−３．６５（ｍ， ３９Ｈ）， ３．０９（ｑ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６−２．１９（ｍ， ２Ｈ）， ２．１５（ｓ， ９Ｈ）， １．９４（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １８Ｈ）， １．５２−１．６１（ｍ， ２Ｈ
）， １．４２−１．５２（ｍ， ２Ｈ）， １．３３（ｄ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）

【0532】

（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−｛１３−［４−（｛３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−［（６−アミノヘキサノイル）アミノ］プロポキシ｝メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート（Ｉ−ｂａ−１）

【化177】

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メタノール（４０ｍＬ）中の、（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２−（アセチルオキシ）−１−｛１３−［４−（１２，１２−ビス｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（ア
セチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−３，１０−ジオキソ−１−フェニル−２，１４−ジオキサ−４，１１−ジアザペンタデカン−１５−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−３−イルアセテート（Ｉ−ａｚ−１）（９３０．０ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ）の溶液を、以下のパラメーター（温度＝５０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂（１ｂａｒ））を用いて、炭素上の１０％パラジウム（小型カー
トリッジ）を使用するＨ−キューブに通した。この溶液を収集し、減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（８３７ｍｇ、９６％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋４５（ギ酸）−１＝１９４８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９（ｓ， ３Ｈ）， ５．４４（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．３２（ｓ， ３Ｈ）， ５
．１０（ｄｄ， Ｊ＝１０．５， ４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５９（ｔ， Ｊ＝５．１Ｈ
ｚ， ６Ｈ）， ４．５６（ｓ， ６Ｈ）， ４．１８（ｄ， Ｊ＝１０．１Ｈｚ， ３Ｈ），
３．９９（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９０（ｔ， Ｊ＝５．１Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．７１−３．８２（ｍ， １２Ｈ）， ３．５３−３．６６（ｍ， ３９Ｈ）， ２．
７６（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６−２．２３（ｍ， ２Ｈ）， ２．１５
（ｓ， ９Ｈ）， １．９４（ｓ， １８Ｈ）， １．４８−１．６４（ｍ， ４Ｈ）， １．２９−１．４３（ｍ， ２Ｈ）

【0533】

エチル・７−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］ｏｃｔ−１−ｙｌ］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］ｏｃｔ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝｝アミノ）−７−オキソヘプタノエート（Ｉ−ｂｂ−１）

【化178】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中の、（
１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−１−｛１３−［４−（｛３−［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−２−［（６−アミノヘキサノイル）アミノ］プロポキシ｝メチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカ−１−イル｝−３−（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−２−イルアセテート（１−ｂａ−１）（２００．０ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）の溶液に、７−［（２，５−ジフルオロフェニル）ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−７−オキソヘプタン酸エチル

【化179】

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（４０．３ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３２ｍＬで、０．４２０ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で２４時間撹拌した。２４時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・１２ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（１４０．０ｍｇ、６４．３％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝１０３８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９８（ｓ， ３Ｈ）， ５．４４（ｄ， Ｊ＝４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．３２（ｓ， ３Ｈ）， ５．１０（ｄｄ， Ｊ＝１０．５， ４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５７−４．６１（ｍ， ６Ｈ）， ４．５６
（ｓ， ６Ｈ）， ４．１８（ｄ， Ｊ＝９．８Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１１（ｑ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９９（ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．９０（ｔ， Ｊ＝４．９Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．７１−３．８３（ｍ， １２Ｈ）， ３．５３−３．６５（ｍ，
３９Ｈ）， ３．０８−３．１７（ｍ， ２Ｈ）， ２．３１（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６−２．２２（ｍ， ４Ｈ）， ２．１５（ｓ， ９Ｈ）， １．９４（ｄ， Ｊ＝１．６Ｈｚ， １８Ｈ）， １．５３−１．６６（ｍ， ６Ｈ）， １．４３−１．５２（ｍ， ２Ｈ）， １．２８−１．４０（ｍ， ４Ｈ）， １．２４（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ
， ３Ｈ）

【0534】

７−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ―１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−ｙｌ）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ―１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−７−オキソヘプタン酸（６７）

【化180】

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エタノール（２ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中の、７−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−ｙｌ］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］ｏｃｔ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝｝アミノ）−７−オキソヘプタノエートエチル（Ｉ−ｂｂ−１）（１４０．０ｍｇ、０．０６７５ｍｍｏｌ）の溶液に、５Ｍ水酸化ナトリウム（０．１３５ｍＬ、０．６７５ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を一晩室温で撹拌した。翌朝、酸性樹脂を用いて反応物を中和し、濾過した。この樹脂をエタノールで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。この物質をエタノール（８ｍＬ）で希釈し、シリンジフィルターに通した。次いで、濾液を減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（１１０ｍｇ、９０．８％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝８９８］。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９９ （ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｄ， Ｊ＝１．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５７−４．６２（ｍ， ６Ｈ）， ４．５
６（ｓ， ６Ｈ）， ３．９２−３．９９（ｍ， ６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ， Ｊ＝１０．
７， ４．９Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．６９−３．８０（ｍ， １２Ｈ）， ３．５４−３．６
８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．１２（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１６（ｑ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ６Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５３−１．６７（ｍ， ６Ｈ）， １．４９（ｄｔ， Ｊ＝１４．７， ７．７Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２７−１．４１（ｍ，
４Ｈ）

【0535】

Ｓ−［１−（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−４，４−ビス｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝−６，１３−
ジオキソ−２，１６，１９，２２，２５−ペンタオキサ−５，１２−ジアザヘプタコンサン−２７−イル］エタンチオエート（６８）

【化181】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（４８）（２００．５ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）、Ｓ−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデシ−１−イル｝エタンチオエート（６０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で２０時間撹拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮した。この粗製表題化合物を以下の条件を用いた逆相クロマトグラフィーにより精製して、表題化合物を無色ゴム状物（９９ｍｇ、４３％）として得た。ＭＳ［１／３Ｍ＋１］＝６５３．７。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：８．０１（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ３．９５（ｔ， Ｊ＝９．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８５−３．９１（ｍ， ９Ｈ）， ３．７４−３．８０（ｍ， ９Ｈ）， ３
．６８−３．７３（ｍ， ６Ｈ）， ３．５４−３．６７（ｍ， ５５Ｈ）， ３．１４（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０６（ｔ， Ｊ＝６．５Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．４３（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．３１（ｓ， ３Ｈ）， ２．１７（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５６（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．５Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４９（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２８−１．４０（ｍ，
２Ｈ）

【0536】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：０．０５％ＴＦＡ中のアセトニトリル（ｖ／ｖ）。１０．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で６０．０％Ｈ₂Ｏ／４０．０％アセトニトリルへ、０．５分で６０．０％Ｈ₂Ｏ／４０．０％アセトニトリ
ルから直線で０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルへ、１１．０分から１２．０分まで０
％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0537】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルに維持。流
量：２ｍＬ／分。

【0538】

Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−６−｛［３−（４−メチル−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）プロパノイル］アミノ｝ヘキサンアミド（６９）

【化182】

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塩化３−（４−メチル−２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロフラン−３−イル）プロパノイル（Ｉ−ｂｃ−１）

【化183】

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（１５ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ：Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９４、５０、８９６９参照）のジクロロメタン（０．１ｍＬ）中の溶液に、ジクロロメタン（０．９ｍＬ）、Ｎ
，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．１ｍＬ）及び無水ピリジン（０．０２４ｍＬ、０．３０ｍｍｏｌ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド酢酸塩（４８）（１２６．０ｍｇ、０．０７３６ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。１８時間後に、更に４当量のピリジン（０．０２４ｍＬ、０．３０ｍｍｏｌ）を添加し、続いて１．０当量の酸塩化物（Ｉ−ｂｃ−１）（１５ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で一晩撹拌した。翌朝、更に２当量の酸塩化物（Ｉ−ｂｃ−１）を加え（３０ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）、この反応物を室温で４日間撹拌した。４日後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製表題化合物を、以下の条件を使用して逆相クロマトグラフィーにより精製することにより、表題化合物をゴム状物として得た（１６．１ｍｇ、１２％）。方法Ｃ：３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝９１０］。¹Ｈ−ＮＭＲ（
メタノール−ｄ₄）δ：８．００（ｓ， ３Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−
４．６２（ｍ， １２Ｈ）， ３．９２−３．９９（ｍ， ６Ｈ）， ３．８９（ｄｄ， Ｊ
＝１１．３， ４．７Ｈｚ， ９Ｈ）， ３．７４−３．７９（ｍ， ９Ｈ）， ３．７１（
ｄｄ， Ｊ＝１０．１， ４．３Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．５４−３．６８（ｍ， ４２Ｈ）， ３．１１（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７５（ｔ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）
， ２．４６−２．５３（ｍ， ２Ｈ）， ２．１６（ｔ， Ｊ＝７．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０５（ｓ， ３Ｈ）， １．９９（ｓ， ９Ｈ）， １．５５（ｄｔ， Ｊ＝１４．９， ７．６Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４６（ｑｕｉｎ， Ｊ＝７．２Ｈｚ， ２Ｈ）， １．２４−１
．３４（ｍ， ２Ｈ）

【0539】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。１０．５分で７５．０％Ｈ₂Ｏ／２５．０％アセトニトリルから直線で６５．０％Ｈ₂Ｏ／３５．０％アセトニトリルへ、０．５分で６５．０％Ｈ₂Ｏ／３５．０％アセトニトリ
ルから直線で０％Ｈ₂０／１００％アセトニトリルへ、１１．０分から１２．０分まで０
％Ｈ₂０／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0540】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂０／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％Ｈ₂０／９５％アセトニトリルを維持。流
量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．８２分。観察された質量＝９０９．８６４９。質量ターゲット＝９０９．２。

【0541】

ｔｅｒｔ−ブチル［（５Ｓ）−５−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］
−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバモイル）−７，３５−ジオキソ−３７−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１−オクタオキサ−６，３４−ジアザヘプタトリアコンタ−１−イル］カルバメート（Ｉ−ｂｄ−１）

【化184】

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テトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）及び無水Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０ｍＬ）中のＮ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−２−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−リジン

【化185】

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（７０．９ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２４．５ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）及びＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（３５．５ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で１時間攪拌した。出発アミン、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（４８）（２５０ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）を、上記溶液に、固体として加え、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１０５ｍＬ、０．６０５ｍｍｏｌ）を加えて
、この反応物を室温で１８時間撹拌した。１８時間後、ピペリジン（９００ｍｇ、１０ｍｍｏｌ、０．６ｍＬ）をこの反応物に加え、室温で３時間撹拌した。３時間後、この反応物を減圧下で濃縮して、粗製のゴム状物（４５０．０ｍｇ、１５８％）を得た。

【0542】

ｔｅｒｔ−ブチル［（５Ｓ）−５−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバモイル）−７，３５−ジオキソ−３７−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１−オクタオキサ−６，３４−ジアザヘプタトリアコンタ−１−イル］カルバメート（７０）

【化186】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル［（５Ｓ）−５−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバモイル）−７，３５−ジオキソ−３７−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１−オクタオキサ−６，３４−ジアザヘプタトリアコンタ−１−イル］カルバメート（Ｉ−ｂｄ−１）（２２５ｍｇ、０．１２０ｍｍｏｌ）、及びＮ−｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−１−イル］−３−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパンアミド（１１１ｍｇ、０．１５１ｍｍｏｌ）

【化187】

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の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ、０．５７４ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を室温で３日間撹拌した。３日後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製標題化合物の試料を、以下の条件を用いた逆相クロマトグラフィーにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（１３．８ｍｇ、４．６％）。

【0543】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ・Ｃ１８ １９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０３％ＮＨ₄ＯＨ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０３％ＮＨ₄ＯＨ（ｖ／ｖ）。８．５分で７５．０％Ｈ₂Ｏ／２５．０％アセトニトリルから直線で４５％Ｈ₂Ｏ／５５％アセトニトリルへ、０．５分で４５％Ｈ₂Ｏ／５５％アセトニトリルから直線で
０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、９．０分から１０．０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流速：２５ｍＬ／分。

【0544】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流
量：２ｍＬ／分。保持時間＝２．０６分。観測された質量＝８４３．５６６９、質量ターゲット＝８３３．４

【0545】

（３３Ｓ）−３３−（４−アミノブチル）−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−３，３１，３４−トリオキソ−１−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−４，３２，３５−トリアザヘプタトリアコンタ−４１−アミド（７１）

【化188】

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残りの粗製ｔｅｒｔ−ブチル［（５Ｓ）−５−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝カルバモイル）−７，３５−ジオキソ−３７−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１−オクタオキサ−６，３４−ジアザヘプタトリアコンタ−１−イル］カルバメート（７０）をメタノール（３ｍＬ）中に希釈し、ジオキサン（０．８９８ｍＬ、３．５９ｍｍｏｌ）中の４．０Ｍ塩化水素を加え、この反応物を室温で１８時間撹拌した。１８時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製表題化合物を下記の条件を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物をゴム状物として得た（７８．９ｍｇ、２７％）。

【0546】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。８．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で４５％Ｈ₂Ｏ／５５％アセトニトリルへ、０．５分で４５％Ｈ₂Ｏ／５５％アセトニトリルから直線で０％Ｈ₂Ｏ／１００％ＭｅＣＮへ、０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを９．０から１０．０分
まで維持。流速：２５ｍＬ／分。

【0547】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流
量：２ｍＬ／分。保持時間＝１．７５４４分。観測された質量＝６０１．１５９（１／４Ｍ＋１）。質量ターゲット＝６００．３）

【0548】

ＬＣＭＳ方法Ｅ：ＭａｘＥｎｔデコンボリューションソフトウェアを用いたＥＳＩ（ｍ／ｚ）。
カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ・ＢＥＨ３００・Ｃ４１．７ｕｍ
移動相：水中のＡ＝０．１％ギ酸。Ｂ＝ＡＣＮ中の０．１％ギ酸
勾配：２分で９７％Ａから５％Ａへ。５％Ａで０．７５分間維持する。その後、開始条件に戻る。
温度：７０℃
ＭＳ検出＝ＥＳＩ ０〜２０００ダルトン、より高いＭＷ種を解析するためにＭａｘＥｎｔを使用する。

【0549】

９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル［（２Ｓ）−１−（｛６−［１，３−ビス（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−１−オキソペンタ−４−イン−２−イル］カルバメート（Ｉ−ｂｅ−１）

【化189】

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バイアルに、（２Ｓ）−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝ペンタ−４−イン酸（５１．７ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（５８．０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及び無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍｌ）を加えた後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍｌ、０．５９３ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を５分間撹拌した。この混合物を、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．７５ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ、２Ｒ、６Ｒ、７Ｒ、８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，
３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）ヘキサンアミド（１−ａｇ−１）（２１０ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）の溶液に滴下により加えた。ＬＣＭＳにより反応が完了するまで、室温でこの反応物を撹拌する。Ｇｅｎｅ ｖａｃを用いて粗製油状物に濃縮し、０％から２０％へのＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配を用いてシリカゲルカラム上で精製した。単離された画分を濃縮して、２０５ｍｇ（収率８２％）の表題化合物を白色形態として得た。方法Ｃ：ＬＲＭＳ（１／２Ｍ＋１＝１０４５．７）。ＮＭＲスペクトルは、部分的水素として報告される回転異性体（１：４比）を示した。
¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノール−ｄ₄）δ：７．９６（ｓ， ３Ｈ）， ７．８５（ｄ， Ｊ＝８
．２Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．７９（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．７３（
ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．６６（ｄ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．５１（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．４３−７．４７（ｍ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．３９（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．２８−７．
３２（ｍ， １．６Ｈ）， ５．２２（ｓ， ３Ｈ）， ４．５０−４．６２（ｍ， １２Ｈ
）， ４．３８−４．４５（ｍ， １Ｈ）， ４．３０−４．３６（ｍ， １Ｈ）， ４．２
８（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．１９−４．２５（ｍ， ２Ｈ）， ４．１５（
ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８８−３．９４（ｍ， ６Ｈ）， ３．８７（ｔ， Ｊ＝４．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８２（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７２−３
．７８（ｍ， １２Ｈ）， ３．４８−３．７０（ｍ， ３６Ｈ）， ３．１２−３．２０（ｍ， ２Ｈ）， ２．６５（ｂｒ．ｓ．， １Ｈ）， ２．５４−２．６１（ｍ， １Ｈ）， ２．４０（ｂｒ．ｓ．， １Ｈ）， ２．１５（ｔ， Ｊ＝６．７Ｈｚ， ２Ｈ）， １．９
７（ｓ， ９Ｈ）， １．４７（ｓ， ９Ｈ）， １．４３−１．５９（ｍ， ４Ｈ）， １．３１（ｓ， ９Ｈ）， １．３６（ｓ， ２Ｈ）

【0550】

ｔｅｒｔ−ブチル（４Ｓ）−５−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−ｙｌ］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−ｙｌ｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−ｙｌ）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−ｙｌ］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−ｙｌ｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−ｙｌ）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−４−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルバモイル］アミノ｝−５−オキソペンタノエート（Ｉ−ｂｆ−１）

【化190】

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上記の表題化合物は、（Ｉ−ｂｅ−１）と同様の方法で合成され、（２Ｓ）−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸（６３．１ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）を用いて、２０４ｍｇ（収率８２％）の表題化合物を白色形態で得た。方法Ｃ：ＬＲＭＳ（１／２Ｍ＋１＝１０９０．７）。ＮＭＲスペクトルは回転異性体（１：４比）を示したが、これは部分的水素として報告される。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ₄）δ：７．９６（ｓ， ３Ｈ）
， ７．８６（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．８０（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．７３（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．６６（ｔ， Ｊ＝６
．５Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．５１（ｔ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ０．４Ｈ），７．４３−７．４７（ｍ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．３９（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， １．
６Ｈ）， ７．２８−７．３３（ｍ， １．６Ｈ）， ５．２３（ｓ， ３Ｈ）， ４．５０
−４．６１（ｍ， １２Ｈ）， ４．３８−４．４６（ｍ， １Ｈ）， ４．３１−４．３８（ｍ， １Ｈ）， ４．２８（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．２２（ｔ， Ｊ＝６．７Ｈｚ， １Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．２Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．０４−４．１１（
ｍ， １Ｈ）， ３．８５−３．９６（ｍ， １２Ｈ）， ３．８２（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ
， ３Ｈ）， ３．７１−３．７８（ｍ， １２Ｈ）， ３．５１−３．７０（ｍ， ３６Ｈ
）， ３．１０−３．１９（ｍ， ２Ｈ）， ２．２９（ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１５（ｔ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０１−２．１０（ｍ， １Ｈ）， １．
９８（ｓ， ９Ｈ）， １．７８−１．９０（ｍ， １Ｈ）， １．５１−１．５９（ｍ，
２Ｈ）， １．４７（ｓ， １１Ｈ）， １．４４（ｓ， ９Ｈ）， １．３２（ｓ， １１Ｈ）

【0551】

９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル［（２Ｓ）−３−アジド−１−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル］カルバメート（Ｉ−ｂｇ−１）

【化191】

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上記の表題化合物は（Ｉ−ｂｅ−１）と同様にして合成され、３−アジド−Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−アラニン（５１．６ｍｇ、０．１４８ｍｍｏｌ）を用いることにより、１９１ｍｇ（収率６８％）の標題化合物を白色の形態で得た。方法Ｃ：ＬＲＭＳ（１／２Ｍ＋１＝１０５４．１）。ＮＭＲスペクトルは、部分的水素として報告される回転異性体（１：４比）を示した。¹Ｈ−ＮＭＲ（メタノー
ル−ｄ₄）δ：７．９７（ｓ， ３Ｈ）， ７．８５（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ０．４Ｈ）
， ７．８０（ｄ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．７３（ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．６７（ｄ， Ｊ＝７．０Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．５０（ｄ， Ｊ＝７
．６Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．４５（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ０．４Ｈ）， ７．３９（
ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， １．６Ｈ）， ７．２９−７．３３（ｍ， １．６Ｈ）， ５．２
２（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６２（ｍ， １２Ｈ）， ４．４１−４．４７（ｍ，
１Ｈ）， ４．３４−４．４０（ｍ， １Ｈ）， ４．２８（ｄ， Ｊ＝５．９Ｈｚ， ３Ｈ
）， ４．２１−４．２６（ｍ， １Ｈ）， ４．１５（ｔ， Ｊ＝６．５Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．８９−３．９５（ｍ， ６Ｈ）， ３．８７（ｔ， Ｊ＝５．０Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．
８２（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ３Ｈ）， ３．７２−３．７９（ｍ， １２Ｈ）， ３．４
９−３．６９（ｍ， ３９Ｈ）， ３．０６−３．２３（ｍ， ２Ｈ）， ２．１３−２．２３（ｍ， ２Ｈ）， １．９８（ｓ， ９Ｈ）， １．５０−１．６３（ｍ， ４Ｈ）， １．４７（ｓ， ９Ｈ）， １．３２（ｓ， ９Ｈ）， １．２８−１．４０（ｍ， ２Ｈ）

【0552】

９Ｈ−フルオレン−９−イルメチル［（２Ｓ）−１−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ―1−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１
，２，３−ｔｒｉａｚｏｌ−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，８Ｓ）−７−（アセチルアミノ）−４，４−ジメチル−３，５，９，１１−テトラオキサトリシクロ［６．２．１．０〜２，６〜］ウンデカ―1−イル］−２，
５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝アミノ）−３−（１−｛１５−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝−１Ｈ−１，
２，３−トリアゾール−４−イル）−１−オキソプロパン−２−イル］カルバメート（Ｉ−ｂｈ−１）

【化192】

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実施例のアルキン（Ｉ−ｂｅ−１）（３６．５ｍｇ、０．０１７５ｍｍｏｌ）、１−［（１−アジド−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカン−１５−イル）オキシ］ピロリジン−２，５−ジオン（１１ｍｇ、０．０２８３ｍｍｏｌ）及びアスコルビン酸ナトリウム（４．０ｍｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブタノール（１ｍｌ）中に投入して透明な溶液を得た。新しく調製した硫酸銅（０．９３ｍｇ、０．００５８ｍｍｏｌ）の水（０．４ｍｌ）中の溶液を反応フラスコに加える。室温で１時間撹拌した後、この反応物はクリーム状になり、次に薄緑色／青色に変わった。１時間後、この反応物をジクロロメタン（２ｍｌ）で３回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して粗製の固体を得た。方法Ｅ：Ｍ／Ｚ＝２４７８．０

【0553】

Ｓ−｛１５−［（２Ｓ，４Ｒ）−２−｛［ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝エタンチオエート（Ｉ−ｂｉ−１）

【化193】

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（３Ｒ、５Ｓ）−５−｛［ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝ピロリジン−３−オールを、公開された手順（Ｐｒａｋａｓｈ，Ｔ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．，８７９６−８８０７，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２０１４，４２，８７９６に従って調製した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の、（３Ｒ，５Ｓ）−５−｛［ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝ピロリジン−３−オール（０．１８ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）、Ｓ−｛［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−１５−オキソ−３，６，９，１２−テトラオキサペンタデカ−１−イル｝エタンチオエート（０．２０ｇ、０．４８
ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２８ｇ、２．２ミリモル）の溶液を室温で５日間撹拌した。この反応混合物を水（１０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。この粗製残渣をカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中の０％から７％へのメタノール）により精製して、表題化合物を無色油状物として得た（０．１９ｇ、６２％）。

【0554】

方法Ｆ：３．０分間運転ＬＲＭＳ（低分解能質量分析）：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ・ＵＰＬＣ・ＢＥＨ、２．１ｍｍ×５０ｍｍ、Ｃ１８ １．８μｍ。カラム温度６０℃。移動相Ａ：水中の０．１％アンモニア（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．１％アンモニア（ｖ／ｖ）。流量＝１．２５ｍＬ／分。初期条件：Ａ−９５％：Ｂ−５％。０．０〜０．１分は初期条件を維持。０．１〜２．６分はＡ−５％：Ｂ−９５％へと上昇。２．６〜２．９５分はＡ−５％：Ｂ−９５％を維持。２．９５〜３．０分は初期条件に戻る。

【0555】

方法Ｄ：３分法ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝７２６．６］。ＮＭＲスペクトルは、２：１混合物中の回転異性体の存在によって混乱したが、見られた通りに報告されている。¹Ｈ−ＮＭ
Ｒ（６００ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄）δ：７．３４−７．４２（ｍ， ２Ｈ）， ７．２３−７．３２（ｍ， ６Ｈ）， ７．１６−７．２３（ｍ， １Ｈ）， ６．８１−６．９０（ｍ， ４Ｈ）， ４．５２−４．６２（ｍ， ０．６６Ｈ）， ４．４８（ｄｔ， Ｊ＝９
．７， ５．１Ｈｚ， ０．３３Ｈ）， ４．２２−４．３４（ｍ， １Ｈ）， ３．６７−
３．８４（ｍ， ８Ｈ）， ３．４０−３．６４（ｍ， １６Ｈ）， ３．２２（ｍ， Ｊ＝
５．６， ５．６Ｈｚ， ０．６６Ｈ）， ３．１３（ｄｄ， Ｊ＝９．４， ２．３Ｈｚ， ０．６６Ｈ）， ３．０１−３．１０（ｍ， １．６６Ｈ）， ２．５４−２．６８（ｍ， １．６６Ｈ）， ２．２６−２．３７（ｍ， ３．３３Ｈ）， ２．１７−２．２５（ｍ， １Ｈ）， ２．０２−２．１１（ｍ， ０．３３Ｈ）， １．９１−２．００（ｍ， ０．６６Ｈ）．

【0556】

Ｎ−｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ―１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−ｙｌ）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ―１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝−７−［（２Ｓ，４Ｒ）−２−｛［ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル］−７−オキソヘプタンアミド（７２）

【化194】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．１ｍＬ）中の（３Ｒ、５Ｓ）−５−｛［ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝ピロリジン−３−オール（１４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中の、７−（｛６−［（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］ｏｃｔ−１−ｙｌ］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ビス（アセチルオキシ）−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］ｏｃｔ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）アミノ］−６−オキソヘキシル｝｝アミノ）−７−オキソヘプタノエート（Ｉ−ｂｂ−１）（６１ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（１６ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液に加え、この反応物を室温で５日間撹拌した。次いで、（３Ｒ、５Ｓ）−５−｛［ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ］メチル｝ピロリジン−３−オール（１４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（１６ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を添加し、この反応物を更に２日間撹拌した。この反応混合物を減圧下に濃縮し、以下の条件で精製した。

【0557】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ・Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０３％ＮＨ₄ＯＨ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０３％ＮＨ₄ＯＨ（ｖ／ｖ）。
１０．５分で６０．０％Ｈ₂Ｏ／４０．０％アセトニトリルから直線で４０％Ｈ₂０／６０％アセトニトリルへ、１２．０分まで０％Ｈ₂０／１００％アセトニトリルを維持。流
量：２５ｍＬ／分。
表題化合物を無色の残渣として得た（１ｍｇ、１％）。方法Ｆ：３分法ＬＲＭＳ［１／２Ｍ−１］＝１０９７．２。¹Ｈ−ＮＭＲ（６００ＭＨｚ， メタノール−ｄ₄）δ：７．
９９（ｓ， ３Ｈ）， ７．４０（ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２４−７．３２
（ｍ， ６Ｈ）， ７．１６−７．２２（ｍ， １Ｈ）， ６．８５（ｄ， Ｊ＝８．８Ｈｚ
， ４Ｈ）， ５．２１（ｓ， ３Ｈ）， ４．５２−４．６４（ｍ， １２Ｈ）， ４．３９−４．４７（ｍ， １Ｈ）， ４．２１（ｂｒ．ｓ．， １Ｈ）， ３．９５（ｔ， Ｊ＝９
．７Ｈｚ， ６Ｈ）， ３．８５−３．９２（ｍ， ９Ｈ）， ３．４４−３．８３（ｍ，
６５Ｈ）， ３．０９−３．１７（ｍ， ２Ｈ）， ２．２４−２．４９（ｍ， ２Ｈ），
２．１２−２．２３（ｍ， ４Ｈ）， １．９３−２．１１（ｍ， １０Ｈ）， １．５３−１．７０（ｍ， ６Ｈ）， １．４４−１．５２（ｍ， ２Ｈ）， １．２２−１．４２（ｍ， ４Ｈ）

【0558】

【化195】

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【化196】

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【化197】

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スキーム９は、本発明の化合物を提供するために使用できる一般的な手順を概説している。スキーム９のステップ１及びステップ４において、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、１３５，５３（１９８４）でＨ．Ｐａｕｌｓｅｎ及びＭ．Ｐａａｌによって記載された手順により調製できる合成中間体（Ｉ−ｂｊ）は、（例えばＴａｋａｏ Ａｏｋｉ ｅｔ．ａｌ．のＷＯ／２００６０２８１２９Ａｌ、２００６年３月１６日に記載のように、適切なルイス酸（例えば、ジエチルエーテル三フッ化ホウ素錯体）、ジクロロメタンのような適切な有機溶媒、及び適切なアルコールを使用するなど、当業者に周知のプロトコルを使用して）、グリコシル化することにより（Ｉ−ｂｋ）及び（Ｉ−ｂｎ）のような中間体を製造することができる。スキーム９のステップ２及びステップ５においては、約０℃〜室温の温度での溶媒または溶媒混合物（例えば、ナトリウムメトキシド）中のアルコキシドの存在下での中間体（Ｉ−ｂｋ）及び（Ｉ−ｂｎ）の処理は、（Ｉ−ｂｌ）及び（Ｉ−ｂｏ）のような中間体を与える。スキーム９のステップ３において、（Ｉ−ｂ１）のような化合物中の第２級ヒドロキシル基は、適切な保護基（例えば、約室温〜約９０℃の範囲の温度で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中での酸性条件下の
２，２’−ジメトキシプロパンでの処理時には環状ケタールとして）で更に保護されて、（Ｉ−ｂｍ）のような中間体となる。加えて、スキーム９のステップ６において、化合物（Ｉ−ｂｏ）は、アジド基を対応するアミンに還元することが知られた還元剤（例えば、遷移金属媒介接触水素化、当業者に周知の古典的な実験条件下での水中におけるトリフェニルホスフィンの使用）で処理することができる。続いて、アシル化剤（例えば、無水酢酸またはピリジンまたはトリエチルアミンの存在下の、ジクロロメタンまたはテトラヒドロフランのような溶媒中における０〜８０℃の温度での塩化アセチル）の存在下での処理。溶媒、またはアルコール溶媒もしくはテトラヒドロフランのような溶媒の混合物中において、約０℃〜室温の範囲の温度でアルコキシド（例えば、ナトリウムメトキシド）を後で添加すると、（Ｉ−ｂｐ）のような化合物が得られる。スキーム９のステップ７において、化合物（Ｉ−ｂｐ）中の第２級ヒドロキシル基は、適切な保護基（例えば、約室温〜約９０℃の範囲の温度で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中の酸性条件下での２，２−ジメトキシプロパンでの処理により環状ケタールとして）により更に保護して、（Ｉ−ｂｑ）のような中間体とすることができる。次いで、（Ｉｄ）及び（Ｉｅ）について同様に記載された当業者に周知の合成変換ならびに官能基及び保護基の操作を用いることは、（Ｉ−ｂｍ）及び（Ｉ−ｂｑ）のために用いることができ、これは本発明で特許請求されるＸＹ含有化合物を形成するように、目的の所望のリンカーＸ及びリガンドＹを結合させて第１級ヒドロキシル基を更に官能化及び誘導体化するために用意される。当業者に周知の試薬及び条件を使用して、保護基（例えば、Ｐｇ）を除去することは（例えば、２つのＰｇがアセトニドなどの環状ケタールを形成する場合、それは酢酸、アルコール溶媒、水、テトラヒドロフランのような溶媒の混合物中で酢酸等酸を用いた酸性条件下に、室温〜約８０℃の温度で除去できる）、二級ヒドロキシル基を露出させて、本発明で請求されるＸＹ含有化合物を導く。例えば、（Ｉ−ｂｑ）中の第一級ヒドロキシル基のアルキル化は、保護基の操作及び除去後に、本発明で権利請求される対応のエーテル結合型ＸＹ含有化合物をもたらすことができる。本発明で請求されるエステル結合型、カーボネート結合型及びカルバメート結合型のＸ−Ｙ含有化合物もまた、当業者に周知の適切な反応体及び試薬を使用して、（Ｉ−ｂｍ）または（Ｉ−ｂｑ）のような中間体から便宜に得ることができる。（Ｉ−ｅ）について先に述べたのと同様の（Ｉ−ｂｑ）に対する更なる操作は、中間体（ＩＩＩ−ｅ−１）〜（ＩＩＩ−ｅ−１１）及び（ＩＶ−ｅ−１）〜（ＩＶ−ｅ−９）についての当業者に類似の方法で、（ＩＩＩ−ｂｏ−１）〜（ＩＩＩ−ｂｏ−２２）及び（ＩＶ−ｂｏ−１）〜（ＩＶ−ｂｏ−１）のような中間体を得ることを可能にする（Ｉｅ）。

【0559】

２−｛２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｉ−ｂｒ−１）

【化198】

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２−｛２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＷＯ２００６／０２８１２９Ａ１、２００６年３月１６日：１６００ｍｇ、３．７８ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（３．０ｍＬ、３８ｍｍｏｌ）に溶解し、これに無水酢酸（５．３６ｍＬ、５６．８ｍｍｏｌ）を
室温で添加した。次いで、この反応物を５０℃で一晩加熱した。翌朝、この反応物を減圧下で濃縮した。ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇシリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することによりこの粗製物質を精製して、表題化合物をゴム状物として得た（１８００ｍｇ、８７％）。３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝５４９．３］

【0560】

ベンジル（６−｛［１，３−ビス｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝メチル）プロパン−２−イル］アミノ｝−６−オキソヘキシル）カルバメート（Ｉ−ｂｓ−１）

【化199】

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攪拌棒を備えた５０ｍＬ丸底フラスコに（Ｉ−ｑ−１）（２５０ｍｇ、０．５１８ｍｍｏｌ）を充填し、ｔ−ブタノール（７ｍＬ）中の２−｛２−［２−（２−アジドエトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｉ−ｂｒ−１）（７５０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を加え、続いて水（３ｍＬ）を加えた後、アスコルビン酸ナトリウム（１０５０ｍｇ、５．１８ｍｍｏｌ）を無希釈で加え、この反応物を窒素で３０分間パージした。硫酸銅（８３．５ｍｇ、０．５１８ｍｍｏｌ）を０．５ｍＬの水（脱イオン水）に加え、室温で２４時間攪拌した。２４時間後、この反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（２０ｍＬ）及び濃水酸化アンモニウム（２ｍＬ）に添加して反応をクエンチし、ジクロロメタン（１０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。この粗製物質を、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ・Ｒｆ（ＲｅｄｉＳｅｐ・４０ｇ・ゴールド・シリカゲルカラム）を用い、０％から２０％へのメタノール／ジクロロメタン勾配で溶離することにより精製して、表題化合物をゴム状物として得た（５７４．０ｍｇ、５２．１％）。３分間運転ＬＲＭＳ［１／２Ｍ＋１＝１０６５．２］

【0561】

６−アミノ−Ｎ−［１，３−ビス｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ
］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−９イル］メトキシ｝メチル）プロパン−２−イル］ヘキサンアミド（Ｉ−ｂｔ−１）

【化200】

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メタノール（１０ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（４ｍＬ）中の、ベンジル（６−｛［１，３−ビス｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝メチル）プロパン−２−イル］アミノ｝−６−オキソヘキシル）カルバメート（Ｉ−ｂｓ−１）（２７４．０ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール中の２５重量％ナトリウムメトキシド（０．４１２ｍＬ、１．８０ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で２０時間攪拌した。２０時間後、アンバーライトＩＲ−１２０（Ｈ）、イオン交換樹脂（ＣＡＳ＃７８９２２−０４−０、メタノールで３回すすいだ）をｐＨ＝約６になるまで加えた。この混合物を濾過し、この樹脂をメタノール（２×１５ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（２４３．０ｍｇ、１０８％）。３分間運転ＬＲＭＳ［Ｍ＋１＝１７５１．４］

【0562】

６−アミノ−Ｎ−［１，３−ビス｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝メチル）プロパン−２−イル］ヘキサンアミドアセテート（Ｉ−ｂｕ−１）

【化201】

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メタノール（１３．９ｍＬ）及び酢酸（０．０１ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）中の、６−アミノ−Ｎ−［１，３−ビス｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−９イル］メトキシ｝メチル）プロパン−２−イル］ヘキサンアミド（Ｉ−ｂｔ−１）（２４３ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）を、炭素上の１０％パラジウム（小カートリッジ）を用いるＨキューブに、以下のパラメーターを用いて通過させた（温度＝５０℃、流速＝１．０ｍＬ／分、圧力＝全Ｈ₂（１ｂａｒ））。この溶液を集め、減圧
下で濃縮して、表題化合物をゴム状物として得た（１８７ｍｇ、８０％）。

【0563】

Ｎ−［１，３−ビス｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝メチル）プロパン−２−イル］−３，３１−ジオキソ−１−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−４，３２−ジアザオクタトリアコンタン３８−アミド（７３）

【化202】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中の、６−アミノ−Ｎ−［１，３−ビス｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝−２−（｛［１−（２−｛２−［２−（２−｛［２−（アセチルアミノ）−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル］オキシ｝エトキシ）エトキシ］エトキシ｝エチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル］メトキシ｝メチル）プロパン−２−イル］ヘキサンアミドアセテート（Ｉ−ｂｕ−１）（７８．８ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）及びＮ−｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ］−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−１−イル−３−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパンアミド

【化203】

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（ＭＦＣＤ１３１８５００３：４１．５ｍｇ、０．０５６４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０４ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を室温で１８時間撹拌した。１８時間後、この反応物を減圧下で濃縮した。この粗製標題化合物を以下の条件を用いて逆相クロマトグラフィーにより精製し、表題化合物をゴム状物として得た（４２．７ｍｇ、４１％）。

【0564】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８。１９×１００、５μ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で８０．０％Ｈ₂Ｏ／２０．０％アセトニトリルから直線で６５．０
％Ｈ₂Ｏ／３５．０％アセトニトリルへ、０．５分で６５．０％Ｈ₂Ｏ／３５．０％アセトニトリルから直線で０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルへ、１１．０分から１２.０分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルを維持。流量：２５ｍＬ／分。

【0565】

ＱＣ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５μ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：４．０分で９５．０％Ｈ₂Ｏ／５．０％アセトニトリルから直線で５
％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流速：２ｍＬ／分、保持時間＝１．６６６７分、観測された質量＝７４６．５０４２
、質量ターゲット＝７４５．３）。

【0566】

ペプチド実験手順
ペプチドの純度チェック：特に明記しない限り、純粋なペプチドは、溶剤勾配Ａ：Ｂで溶離する４．６×１５０ｍｍのＰｈｅｎｏｍｅｎｏｘ・Ｃ１８（２）、５μｍ１００Ａカラムを有するＨＰ１０９０システムを用いて分析した。ここで、溶媒Ａ＝水中の０．１％トリフルオロ酢酸水中の酸、及びＢ＝０．０９％トリフルオロ酢酸。アセトニトリル：水（４：１）の混合物を流速１．０ｍＬ／分で２０分間かけて添加した。比保持時間、ＵＶ純度（２２０ｎｍ）、及び溶媒勾配が、最終ペプチドについて記載されている。水素原子は、見やすくするために以下のペプチド構造から省かれている。
質量スペクトル分析：Ａｇｉｌｅｎｔ６２００シリーズＴＯＦ／６５００シリーズＱ−ＴＯＦまたはＴｈｅｒｍｏ−ＬＣＱ・Ａｄｖａｎｔａｇｅシステムを使用して、ＥＳＩに基づく質量データを収集した。
ｐｐＴＧ２１及びｐｐＴＧ２１誘導体
ｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号：１０１２）（７４）、

【化204】

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Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−Ｗａｎｇ樹脂（５ｍｍｏｌ、１０ｇ）をペプチド反応器に入れ、この樹脂をＤＭＦ中で２時間膨潤させた。次いで、ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中のピペリジンの２０％（容量）溶液の添加、続いて１分間の攪拌によってＦｍｏｃ基を除去した。この処理を５回繰り返した。完全な脱保護を示すためにカイザーニンヒドリン試験を行った。ＤＭＦ（約４０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（１５．０ｍｍｏｌ、９．２９ｇ）及びＨＢＴＵ（１４．３ｍｍｏｌ、５．４２ｇ）の溶液を０℃でＮ−メチルモルホリン（３０ｍｍｏｌ、３．３ｍＬ）で処理し、この混合物を０℃で１５分間維持した。この溶液をＨ−Ａｌａ−Ｗａｎｇ樹脂に添加し、この混合物を２５℃で１時間撹拌したところ、カイザーニンヒドリン試験により反応は完了したことが示された。この混合物を濾過し、固体をＤＭＦ（５×１５０ｍＬ）で洗浄した。得られたＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｗａｎｇ樹脂生成物を、更に処理することなくその後のステップにおいて使用した。
ペプチジル樹脂のＦｍｏｃ脱保護の後、Ｆｍｏｃ−アミノ酸を、上記の標準的なアミドカップリング／ＦＭＯＣ切断方法を用いて樹脂結合ペプチドに連続的にカップリングさせ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌａｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｗａｎｇ樹脂（配列番号：１０５２）を供給した。このペプチジル樹脂をＭｅＯＨ（２×１５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×１５０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。この樹脂を真空下で一晩乾燥させた。ＴＦＡ：チオアニソール：フェノール：ＥＤＴ：Ｈ₂Ｏの溶液０（８７．５：５：２．５：２．５：２．５，６５０ｍ
Ｌ）をこのペプチジル樹脂に添加し、得られた懸濁液を２．５時間振とうし、濾過した。濾液にエーテル（５Ｌ）を加え、固体を得た。この混合物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。得られた固体をエーテル（３×）で洗浄し、真空中で一晩乾燥させた。次いで、得られた粗製物を、逆相ＨＰＬＣによって精製し、類似の画分を合わせた後、凍結乾燥して５．１８ｇの所望のペプチド（ＴＦＡ塩）を白色固体として得た。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．４％（保持時間＝９．２２分、溶媒勾配Ａ：Ｂ、２４：７６から１４：
８６）。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２３４１．３４３０（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0567】

Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ｐｐＴＧ２１：Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０４９）（７５）

【化205】

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上記で述べたのと略同一のペプチド負荷及びアミノ酸方法を用いて、Ａｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｗａｎｇ樹脂（配列番号１０５３）を提供した。このペプチジル樹脂をメタノール（２×１５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×１５０ｍＬ）及びメタノール（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。この樹脂を真空下で一晩乾燥させた。ＴＦＡ：チオアニソール：フェノール：ＥＤＴ：Ｈ₂Ｏの溶液＝８７．５：５：２．５：２．５：２．５，６５０ｍＬ）をペプチジ
ル樹脂に添加し、この懸濁液を２．５時間振とうし、次いで濾過した。濾液にエーテル（５Ｌ）を加え、固体を得た 。この混合物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。得
られた固体をエーテル（３×）で洗浄し、真空中で一晩乾燥させた。次いで、得られた粗製ペプチドを、逆相ＨＰＬＣを介して精製し、同様の画分を合わせ、凍結乾燥して、８００ｍｇ（ＵＶにより９０％）のＡｃ−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＯＨ（配列番号１０５４）を得た。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中のペプチドの溶液を、２，２’−ジチオジ（５−ニトロピリジン）（２００ｍｇ、２当量）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２３ｍＬ、４当量）で処理した 。この混合物を１時間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミドを減圧下に除去して、黄色油状物（１．０５ｇ）を得た。得られた粗製ペプチドを、逆相ＨＰＬＣを介して精製し、同様の画分を合わせ、凍結乾燥して、５２０ｍｇ（６６％）の所望のペプチド（ＴＦＡ塩）を白色固体として得た。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．６％。保持時間＝１０．８０分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝１０：９０から０：１００。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２６４０．３３４５（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0568】

Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＰＥＧ４−ｐｐＴＧ２１：Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＰＥＧ３−ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０５０）（７６）

【化206】

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ペプチド反応器にＦｍｏｃ−Ａｌａ−ｗａｎｇ樹脂（１．０ｍｍｏｌ、２ｇ）を入れ、この樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中で２時間膨潤させた。次いで、ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の２０容量％（体積）のピペリジン溶液の添加し、続いて１分間攪拌することによりＦｍｏｃ基を開裂させた。この処理を５回繰り返した。完全な脱保護を示すためにカイザーニンヒドリン試験を行った。

【0569】

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（約１０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ
（３ｍｍｏｌ、１．８９ｇ）、ＨＢＴＵ（２．８５ｍｍｏｌ、１．０８ｇ）の溶液を、Ｎ−メチルモルホリン（６ｍｍｏｌ、０．６６ｍＬ）で、０℃で処理し、この混合物を０℃で１５分間維持した。次いで、この溶液をＨ−Ａｌａ−ｗａｎｇ樹脂に添加し、この混合物を２５℃で１時間撹拌し、その時点でカイザーニンヒドリン試験は反応が完了したことを示した 。この混合物を濾過し、固体をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５×３０ｍＬ
）で洗浄した。得られたＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−ＣＴＣ樹脂生成物を、更に処理することなく次のステップで使用した。このペプチジル樹脂のＦｍｏｃ脱保護の後、Ｆｍｏｃアミノ酸を、上記の標準的なアミドカップリング／ＦＭＯＣ切断方法を用いて、樹脂結合ペプチドに連続的にカップリングさせた。Ａｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＰＥＧ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｗａｎｇ樹脂（配列番号１０５５）を構築した後、このペプチジル樹脂をメタノール（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）及びメタノール（２×５０ｍＬ）で洗浄した。この樹脂を真空下で一晩乾燥させた。ＴＦＡ：チオアニソール：フェノール：ＥＤＴ：Ｈ₂Ｏ
＝８７．５：５：２．５：２．５：２．５，１５０ｍＬ）の溶液を加え、この懸濁液を２．５時間振とうし、濾過した。濾液にエーテル（１．２Ｌ）を加え、固体を得た 。この
混合物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。得られた固体をエーテル（３×）で洗浄し、真空中で一晩乾燥させた。得られた粗製ペプチドを逆相ＨＰＬＣで精製し、同様の画分を合わせ、凍結乾燥して、Ａｃ−Ｃｙｓ−ＰＥＧ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−ＯＨ（配列番号１０５６）を得た。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１１０ｍＬ）中の粗製ペプチド（１．１０ｇ、純度：ＨＰＬＣで８５％）を、２，２’−ジチオジ（５−ニトロピリジン）（２７５ｍｇ、２当量）及びＤＩＰＥＡ（０．３２ｍＬ、４当量）で処理した 。この混合物を１時間撹拌し
、次いでＤＭＦを減圧下で除去して、黄色油状物を得た。得られた粗製ペプチドを、逆相ＨＰＬＣを用いて精製し、同様の画分を合わせ、凍結乾燥して、２７０ｍｇ（２７％）の所望のペプチド（ＴＦＡ塩）を白色固体として得た。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．４％。保持時間＝９．１８分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝１４：８６から４：９６。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２８８７．４９７２（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0570】

ｐｐＴＧ２１−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＯＨ：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＯＨ（配列番号１０５１）（７７）

【化207】

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Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＣＴＣ樹脂（１．０ｍｍｏｌ、３．３ｇ）をペプチド反応器に入れた。この樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中で２時間膨潤させた。次いで、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中のピペリジンの２０％（容量）溶液を用いてＦｍｏｃ基を切断し、続いて１分間撹拌した。この処理を５回繰り返した。完全な脱保護を示すためにカイザーニンヒドリン試験を行った。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（３ｍｍｏｌ、０．９３ｇ）、ＨＢＴＵ（２．８５ｍｍｏｌ、１．０８ｇ）の溶液を、０℃でＮ−メチルモルホリン（６ｍｍｏｌ、０．６６ｍＬ）混合物を０℃で１５分間維持した。次いでこの溶液をＨ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＣＴＣ樹脂に添加し、この混合物を２５℃で１時間撹拌したところ、この時点でカイザーニンヒドリン試験は反応が完了したことを示した 。この混合物を濾過し、固体をＮ，Ｎ−
ジメチルホルムアミド（５×３０ｍＬ）で洗浄した。このＦｍｏｃ−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＣＴＣ樹脂を、更に処理することなく次のステップで使用した。

【0571】

以下のアミノ酸を、上記の標準的なアミドカップリング／ＦＭＯＣ切断方法を用いて、樹脂結合ペプチドに連続的にカップリングさせた。Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ａｌａ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＣＴＣ樹脂（配列番号：１０５７）を構築した。このペプチジル樹脂をメタノール（２×１００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）及びメタノール（２×１００ｍＬ）で洗浄した。この樹脂を真空下で一晩乾燥させた。ＴＦＡ：チオアニソール：フェノール：ＥＤＴ：Ｈ₂０＝８７．
５：５：２．５：２．５：２．５，１５０ｍＬの溶液を添加し、この懸濁液を２．５時間振とうし、次いで濾過した。エーテル（１．２Ｌ）を濾液に添加して固体を得た 。この
混合物を遠心分離し、エーテル層をデカントした。この粗製ペプチドをエーテル（３×）で洗浄し、真空中で一晩乾燥させた。得られた残渣を逆相ＨＰＬＣにより精製し、同様の画分を合わせ、凍結乾燥して、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−ＯＨ（配列番号１０５８）を得た。このペプチド１．４ｇ（ＨＰＬＣ純度７５％）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１４０ｍＬ）に溶解し、２，２’−ジチオジ（５−ニトロピリジン）（２１７ｍｇ、２当量）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２５ｍＬ、４当量）を加えた 。この混合物を１時
間撹拌し、次いでＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを減圧下で除去して黄色油状物を得た。得られた粗製ペプチドを、逆相ＨＰＬＣにより精製し、同様の画分を合わせ、凍結乾燥して、２８０ｍｇ（２５％）の所望のペプチド（ＴＦＡ塩）を白色固体として得た。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．３％。保持時間＝９．８８分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝１１：８９から１：９９。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）１２９９．９（Ｍ／２＋Ｈ）⁺、８６６．７（Ｍ／３＋Ｈ
）⁺。

【0572】

Ａｃ−Ｃｙｓ−ｐｐＴＧ２１：Ａｃ−ＣＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０５９）（７８），

【化208】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．６％。保持時間＝１０．２５分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝１４：８６から４：９６。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２４８６．３３３３（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0573】

Ａｃ−Ｃｙｓ−ｄＰＥＧ４−ｐｐＴＧ２１：Ａｃ−Ｃｙｓ−ｄＰＥＧ４−ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０６０）（７９），

【化209】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．３％。保持時間＝８．６１分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝１８：８２から８：９２。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２７３３．５１５７（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0574】

ｐｐＴＧ２１−Ｃｙｓ：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡＣ（配列番号１０６１）（８０），

【化210】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．３％。保持時間＝１０．２６分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝２１：７９から１１：８９。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２４４４．３６７３（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0575】

Ａｃ−Ｇｌｙ（プロパルギル）−ｐｐＴＧ２１：Ａｃ−Ｇｌｙ（プロパルギル）−ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０６２）（８１

【化211】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．４％。保持時間＝１０．５６分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝１４：８６から４：９６。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）２４７８．４１５４（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0576】

ＳＰＤＰ−ｄＰＥＧ８−ｐｐＴＧ２１：ＳＰＤＰ−ｄＰＥＧ８−ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０６３）（８２）

【化212】

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無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）中のｐｐＴＧ２１（７４）ペプチド・ヘキサトリフルオロ酢酸塩（７．７ｍｇ、０．００２５ｍｍｏｌ）の溶液に、｛２７−［（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル））オキシ］−２７−オキソ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４−オクタオキサヘプタコス−１−イル｝−３−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパンアミド

【化213】

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（ＦＣＤ１３１８５００３、１．９７ｍｇ、０．００２７ｍｍｏｌ）の溶液を加え、続い
てＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７．０μＭ）を室温で添加した。この反応物を室温で１８時間撹拌し、Ｇｅｎｅｖａｃを用いて減圧下で濃縮した。この粗製物質を、以下の条件を用いる逆相クロマトグラフィーを使用して精製し、標題化合物をガラス状固体として得た（３．３ｍｇ、４０％）。

【0577】

精製条件
残渣をジメチルスルホキシド（１ｍＬ）に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８、１９×１００、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：１０．５分で６０．０％Ｈ₂Ｏ／４０．０％アセトニトリルから直線で３０．０
％Ｈ₂Ｏ／７０．０％アセトニトリルへ、１０．５分で３０．０％Ｈ₂Ｏ／７０．０％アセトニトリルから直線で０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルへ、１１．０分から１２．０
分まで０％Ｈ₂Ｏ／１００％アセトニトリルへ。流量：２５ｍＬ／分。

【0578】

ＱＣ条件
カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ａｔｌａｎｔｉｓ ｄＣ１８、４．６×５０、５ｕ。移動相Ａ：水中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．０５％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）。勾配：４．０分で７５．０％Ｈ₂Ｏ／２５．０％から直線で５％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルへ、５．０分まで４．０％Ｈ₂Ｏ／９５％アセトニトリルを維持。流量
：２ｍＬ／分。保持時間＝３．３３分。観察された質量Ｍ／Ｚ＝７４１．６５。方法Ｅ：ＥＳＩＭ／Ｚ＝２９６３．０

【0579】

ＫＡＬＡ及びＫＡＬＡ誘導体
ＫＡＬＡ：ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＣＥＡ（配列番号８６９）（８３）

【化214】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成された。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．６％。保持時間＝１０．０３分。溶媒勾配Ａ：Ｂ＝５４：４６から４４：５６。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３１３０．８２７２（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0580】

Ｃｙｓ−ＫＡＬＡ：ＣＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＣＥＡ（配列番号１０６４）（８４）

【化215】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９７．２％。保持時間＝８．０５分。水（０．１％ＴＨＦ：アセトニトリル／水（４：１、０．１％ＴＦＡ）の溶媒勾配を使用、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ・Ｋｉｎｅｔｅｘ（１００×４．６ｍｍ）。流量＝１ｍＬ／分、１０分間。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）１６１８．６（Ｍ＋２Ｈ）²⁺、１０７９．３（Ｍ＋３Ｈ）³⁺、８０９．８（Ｍ＋４Ｈ）⁴⁺。

【0581】

システイン（ＫＡＬＡ）−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＯＨのためのセリン、
ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＳＥＡ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＯＨ（配列番号１０６５）（８５）

【化216】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いてを合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．８％。保持時間＝９．４８分、溶媒勾配Ａ：Ｂ（５０：５０から４０：６０）。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３３７２．８８（Ｍ＋Ｈ）⁺

【0582】

Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−Ｓｅｒｉｎｅ（ＫＡＬＡ）−ＯＨ、Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＳＥＡ（配列番号１０６６）（８６）

【化217】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．７％。保持時間＝９．７８分、溶媒勾配Ａ：Ｂ＝４６：５４から３６：６４。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３４１４．９０７９（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0583】

Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＰＥＧ−（ＫＡＬＡ）セリン置換：Ａｃ−Ｃｙｓ（ＮＰｙｓ）−ＰＥＧ−ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＳＥＡ（配列番号１０６７）（８７）

【化218】

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このペプチドは、先の実施例に記載したのと同様の固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）手順を用いて合成した。ＵＶ純度（２２０ｎｍ）＝９５．１％。保持時間＝９．２３分、溶媒勾配Ａ：Ｂ＝５３：４７から３７：６３。ＥＳＩ（ｍ／ｚ）３６６２．０７１５（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0584】

Ｃａｓ９構築物及びガイドＲＮＡの調製
Ｃａｓ９構築物及びガイドＲＮＡの発現及び精製を、文献（Ｊｉｎｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ａ ｐｒｏｇｒａｍｍａｂｌｅ ｄｕａｌ−ＲＮＡ−ｇｕｉｄｅｄ ＤＮＡ ｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ ｉｎ ａｄａｐｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，３３７（６０９６）：ｐ．８１６−２１（２０１２））に記載されたようにして実施した。簡単に説明すると、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ Ｍ１Ｃ／Ｃ８０Ｓタンパク質（配列番号８５０）をコードする大腸菌コドン最適化遺伝子を、ヘキサ−ヒスチジン（配列番号１０６８）と、Ｎ末端におけるマルトース結合タンパク質タグと、Ｃ末端における２つの核酸局在化シグナル（ＮＬＳ）（各ＮＬＳはＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０））または３つのＮＬＳ（各ＮＬＳはＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）及びｍＣｈｅｒｒｙ（配列番号９１５）との融合タンパク質として、細菌タンパク質発現プラスミドに挿入した。配列番号１０１３に記載のＣａｓ９構築物のアミノ酸配列は、Ｙ１Ｃ８０Ｓ−２Ｎと呼ばれる。配列番号１０１５に記載のＣａｓ９構築物のアミノ酸配列は、Ｃａｓ９構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍと呼ばれる。

【0585】

プラスミドを大腸菌Ｒｏｓｅｔｔａ（ＤＥ３）に形質転換した。細菌を、リソゲンブロス（Ｌｙｓｏｇｅｎｙ ｂｒｏｔｈ）培地中に、６００ｎｍの光学濃度（ＯＤ₆₀₀ｎｍ）
０．０５で接種し、３７℃、１７０ｒｐｍで増殖させた。０．８μｍのＯＤ値で、０．２ｍＭイソプロピル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）の添加により発現を誘導し、１６℃で１６時間増殖させた。細菌を、６００の光学密度（ＯＤ_600nm）０．０５
において、リソゲンブロス（ＬＢ）培地に接種し、３７℃、１７０ｒｐｍで増殖させた。細菌をペレット化し、上清を捨て、次いで２０ｍＭの４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、５００ｍＭの塩化カリウム（ＫＣｌ）、５ｍＭのトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）、１０ｍＭのイミダゾール、ｐＨ７．５中における超音波処理により溶解させた。清澄化された溶解物をＮｉ−ＮＴＡアガロース（Ｑｉａｇｅｎ）上に捕捉し、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５００ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのＴＣＥＰ、１０ｍＭのイミダゾール、ｐＨ７．５で徹底的に洗浄し、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２５０ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのＴＣＥＰ、３００ｍＭのイミダゾール、１０％グリセロール、ｐＨ７．５。４℃で溶離させた。タバコエッチウイルス（ＴＥＶ）プロテアーゼにより一晩、６×Ｈｉｓ−ＭＢＰタグ（配列番号１０６８として開示された「６×Ｈｉｓ」を）を除去する一方、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、３００ｍＭのＫＣｌ、５ｍＭのＴＣＥＰ、１０％グリセロール、ｐＨ７．５中で透析した。Ｃａｓ９構築物を、ヘパリンＳＰカラム（ＧＥヘルスケア）での捕捉及び３００ｍＭから１ＭのＫＣｌで、直線で溶離することによってタグから分離した。最後に、Ｃａｓ９構築物を、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ７．５中のＳｕｐｅｒｄｅｘ・Ｓ２００・ＨｉＬｏａｄカラム（ＧＥヘルスケア）で更に精製した。この時点で、Ｃａｓ９構築物は、ＵＶ吸光度により決定した濃度の約１５〜２０ｍｇ／ｍＬに濃縮され、純度はＳＤＳ−ＰＡＧＥにより評価され、アリコートは液体窒素中で急速凍結された。アリコートを−８０℃で保存した。

【0586】

図３Ａは、インタクトなＣａｓ９構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍの質量スペクトルを表す。

【0587】

Ｔ７プロモーターをコードするＤＮＡ及びガイドＲＮＡ鋳型を、３７℃で一晩、８ｍＭ及びｐＨ７．５のＴ７ポリメラーゼ及びリボヌクレオチド溶液混合物を用いて、ｉｎ ｖｉｔｒｏで転写した。ＤＮＡ鋳型を３７℃で１時間ＤＮＡｓｅにより分解し、変性ＰＡＧＥゲル上でＲＮＡを精製した。ＲＮＡバンドをＰＡＧＥゲルから切り出し、３００ｍＭ酢酸ナトリウム（ＮａＯＡｃ）ｐＨ５．０で溶離し、エタノールで沈殿させた。ＲＮＡペレットを２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ７．５に再懸濁させた。ガイドＲＮＡを、７０℃で５分間インキュベートすることにより再折畳みし、室温に冷却し、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ₂）を最終濃度１ｍＭになるように加え
、５０℃で５分間インキュベートし、最後に室温まで冷却した。濃度をＵＶ吸光度により決定し、−８０℃で保存した。

【0588】

Ｃａｓ９−ＡＳＧＰＲリガンドコンジュゲートの調製
実施例Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ：ＡＳＧＰＲリガンド（化合物５３、Ｎ−（１，３−ビス［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６,８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５
，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］−２−｛［（１−｛１−［（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−４−（アセチルアミノ）−２，３−ジヒドロキシ−６，８−ジオキサビシクロ［３．２．１］オクタ−１−イル］−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン−１３−イル｝−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ］メチル｝プロパン−２−イル）−３，３１−ジオキソ−１−（ピリジン−２−イルジスルファニル）−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−４，３２−ジアザオクタトリアコンタン３８−アミド）を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中で８ｍＭに再構成して、リガンド断片５３ａを得た（下記に示す）。その後、リガンド断片５３ａを、２０：１のＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ７．５中で１０倍に希釈し、リガンド対タンパク質のモル比１５：１で、Ｃａｓ９構築物（Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ）に直接添加し、室温で１〜２時間インキュベートした。標識されたＣａｓ９構築物、Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬをＺｅｂａ・Ｓｐｉｎカラム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を用いて脱塩した。

【0589】

逆相Ｃ４カラム（１５０ｍｍ×１．０ｍｍ、Ｒｅｓｔｅｋ）を備えたＡｇｉｌｅｎｔ・１２００液体クロマトグラフ（ＬＣ）を使用して、インタクトなＣａｓ９構築物、Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬに対する質量スペクトル分析により標識効率を決定し、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）源を備えたＴｈｅｒｍｏ・ＬＴＱ−Ｏｒｂｉｔｒａｐ−ＸＬ質量分析計を用いて測定した。Ｘｃａｌｉｂｕｒソフトウェア（バージョン２．０．７、Ｔｈｅｒｍｏ）を用いて生の質量スペクトルを観察し、ＰｒｏＭａｓｓソフトウェア（バージョン２．５ＳＲ−１、Ｎｏｖａｔｉａ）を用いて質量スペクトル逆重畳積分を行った。

【0590】

図３Ｂは、Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬの質量分析を表しており、この構築物は、断片５３ａの２コピーで標識されたＣａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ２であり、１つは１位及び５７４位のシステインの各々において、システインのＳ原子とのジスルフィド結合の形成を介して標識される（２×２１６５Ｄａの付加）。

【化219】

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Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ（１）及びＹ５３ａＡＳＧＰＲＬ（２）は、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ７．５を使用して、分析的サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ Ｓ２００ １０／３０ＧＬ）、５０μＭにおいて５０μＬでランされた。（１）についての溶離容量：１１．５６ｍＬ；及び（２）についての溶離用量：１１．４４ｍＬ。

【0591】

ＲＮＰアセンブリ及び遺伝子編集アッセイ
実施例Ｙ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１：（５３）ＲＮＰ（ＥＭＸ１ｓｇＲＮＡガイド配列（配列番号９０７）に連結された、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９−突然変異Ｃ８０Ｓ（アミノ酸配列）３ＮＬＳ−ｍｃｈｅｒｒｙ（配列番号１０２６
）
１ｍＭのＭｇＣｌ₂、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロー
ル（ｐＨ７．５）中のＥＭＸｌ・ｓｇＲＮＡガイド配列（配列番号９０７）の溶液（１５．６μＬ、２２２μΜ、３４６３ｐｍｏｌ）に、２９．５μＬの１ｍＭのＭｇＣｌ₂、２
０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）バッファを加えて、ＥＭＸｌ・ｓｇＲＮＡガイド配列（配列番号９０７）を、４５μｌ、７６．８μＭで得た。

【0592】

２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）緩衝液中の、化合物（５３）（１２μＬ、８０μＭ、９６０ｐｍｏｌ）で標識されたＳ・ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９−突然変異Ｃ８０Ｓ（アミノ酸配列）−３ＮＬＳ及びｍＣｈｅｒｒｙ（配列番号１０２６）［本明細書ではＹ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬと称し、Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬについて記載したのと同様の方法によい化合物（５３）で標識される］に、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ中の５ｍＭのＭｇＣｌ₂の３μＬを、１５０ｍ
ＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）緩衝液を加えて、１ｍＭのＭｇＣｌ₂、
２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）緩衝液中のＣａｓ９構築物Ｙ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬ１５μｌを得た。

【0593】

１５μＬの上記ＥＭＸ１・ｓｇＲＮＡガイド配列（配列番号９０７）溶液（１５μＬ、７６．８μＭ、１１５２ｐｍｏｌ）を、別の２ｍＬエッペンドルフ管に移し、これにＹ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬ（１５μＬ、６４μM、９６０ｐｍｏｌ）を加え、５回ピ
ペッティングして混合し、Ｙ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬ・ＲＮＰ構築物（３０μＭ、３２μＭ）を得た。このＲＮＰ構築物を、ここでは、Ｙ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１と称する。この反応混合物を３７℃（水浴）で１０分間インキュベートし、次いで生物学的実験または蛍光顕微鏡実験において直接使用した。

【0594】

実施例Ｙ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１：化膿性Ｃａｓ−突然変異Ｍ１Ｃ・＆・Ｃ８０Ｓ（アミノ酸配列）−化合物（５３ＲＮＰ）（ＰＣＳＫ９単一ガイドｓｇＲＮＡ配列１（配列番号８９６））で標識された３ＮＬＳ及びｍＣｈｅｒｒｙ（配列番号１０１５）
１ｍＭのＭｇＣｌ₂、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロー
ル（ｐＨ７．５）バッファ中のＰＣＳＫ９単一ガイドｓｇＲＮＡ配列（配列番号８９６）の溶液に、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ中の０．９６μＬの１ｍＭのＭｇＣｌ₂、２０ｍＭのＨ
ＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）緩衝液を加えて、６４μＭで５μＬのＰＣＳＫ９単一ガイドｓｇＲＮＡ配列１（配列番号８９６）を得た。

【0595】

２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）バッファ中のＣａｓ９構築物Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ（４μＬ、８０μＭ、３２０ｐｍｏｌ）に、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）緩衝液中の１μＬの５ｍＭのＭｇＣｌ₂を加えて、１ｍＭのＭｇＣｌ₂、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール（ｐＨ７．５）緩衝液中のＣａｓ９構築物Ｙ５３ａ−Ｃ５７４−ＡＳＧＰＲＬ（６４μＭで５μＬ）を得た。

【0596】

上記のＹ５３ａＡＳＧＰＲＬの溶液（５μＬ、６４μＭ、３２０ｐｍｏｌ）を、ＰＣＳＫ９単一ガイドｓｇＲＮＡ配列１（配列番号８９６）（５μＬ、７６．８μＭ、３８４ｐｍｏｌ）の溶液に加え、５回ピペッティングして混合し、Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ・ＲＮＰ構築物（３２μＭで１０μＬ）（これは、ここではＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ１と称する）を得た。この反応混合物を３７℃（水浴）で１０分間インキュベートし、次いで生物学的または蛍光顕微鏡実験で直接使用した。
同様の手順を用いて、以下のＲＮＰを調製した：
実施例Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１：Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ及びＥＭＸ１ガイドＲＮＡ配列（配列番号９０７）を用いた。
実施例Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＰＣＳ４：Ｃａｓ９構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ及びＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列（配列番号９０６）を用いた。

【0597】

一般的プロトコル：
ヒト肝細胞における遺伝子編集は、Ｔ７エンドヌクレアーゼ１（Ｔ７Ｅ１）エンドヌクレアーゼアッセイによって行った。簡単に説明すると、８００００のＨｅｐＧ２（ＡＳＧＰＲ陽性−ＡＴＣＣｎｂ．ＨＢ−８０６５）またはＳｋＨｅｐ（ＡＳＧＲＰ陰性−ＡＴＣＣｎｂ．ＨＴＢ−５２）細胞を、２４ウエルプレートに播種した。以下のＣａｓ９構築物：Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ及びＹ５３ａＡＳＧＰＲＬを、１：１．２のモル比のガイドＲＮＡと共に、３７℃で１０分間インキュベートすることにより、Ｃａｓ９ガイドＲＮＡリボヌクレオタンパク質（Ｃａｓ９・ＲＮＰ）を組立てた。

【0598】

Ｃａｓ９・ＲＮＰ＋／−ｐｐＴＧ２１を培養培地に直接分注し、加湿大気中において３７℃、５％ＣＯ₂でインキュベートすることにより、細胞を、ｐｐＴＧ２１エンドゾーム
分解剤の存在下または非存在下において、５０ｐｍｏｌのＣａｓ９・ＲＮＰで処理した。インキュベーションの４８時間後、培養培地を除去し、細胞をＱｕｉｃｋＥｘｔｒａｃｔ緩衝液（Ｅｐｉｂｉｏ）を用いて５分間室温で溶解した。チューブに上清を移し、この試料を６５℃で２０分間加熱し、続いて９５℃で２０分間加熱した。ＵＶ吸光度によりゲノムＤＮＡ濃度を測定した。特異的プライマー（以下の配列）を用いて対象の遺伝子座を増幅し、またポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）産物をアガロースゲル上で視覚化し、標準と比較することにより定量化した。２００ｎｇのＰＣＲ産物を融解及び再ハイブリダイズし、それを３７℃で３０分間、Ｔ７Ｅ１エンドヌクレアーゼを用いて消化した。切断されたＰＣＲ産物の定量により、編集効率を決定した。

【0599】

ＥＭＸ１遺伝子座プライマー：
順方向：５’−ＧＣＣＡＴＣＣＣＣＴＴＣＴＧＴＧＡＡＴＧＴＴＡＧＡＣ−３’（配列番号１０１７）
逆方向：５’−ＧＧＡＧＡＴＴＧＧＡＧＡＣＡＣＧＧＡＧＡＧＣＡＧ−３’（配列番号：１０１８）

【0600】

ＰＣＳＫ９エキソン１遺伝子座プライマー：
順方向：５’−ＣＣＡＧＣＴＣＣＣＡＧＣＣＡＧＧＡＴＴＣ−３’（配列番号１０１９）
逆方向：５’−ＡＴＣＧＴＧＣＣＡＡＧＣＧＡＡＧＡＧＣ−３’（配列番号１０２０）

【0601】

ＰＣＳＫ９エキソン４＆５遺伝子座プライマー：
順方向：５’−ＴＧＡＴＧＧＣＣＴＴＧＧＡＣＡＧＴＴＡＣＣ−３’（配列番号１０２１）
逆方向：５’−ＧＧＴＣＣＡＧＡＴＧＧＡＧＡＧＡＧＡＣＣＡ−３’（配列番号１０２２）

【0602】

ＨｅｐＧ２及びＳｋＨｅｐ細胞を、５０ｐｍｏｌのＲＮＰ構築物Ｙ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１を用いて、また濃度を増大させながらｐｐＴＧ２１エンドソーム溶解性ペプチド（６２．５，２５０，１０００及び２０００ｎＭ）の存在下（共インキュベーション）で処理した。ＲＮＰ構築物のみの処理（エンドゾーム溶解性ペプチドなし）及びＲＮＰ構築物のリポフェクション処理を、それぞれ陰性対照及び陽性対照として用いた。Ｔ７Ｅ１エンドヌクレアーゼアッセイにより編集を評価する前に、細胞を４８時間処理した。編集効率を図４に注記する。

【0603】

ＨｅｐＧ２及びＳｋＨｅｐ細胞を、５０μLのＣａｓ９ＲＮＰＹ５３ａＡＳＧＰＲＬ−
ＲＮＰ−ＰＣＳ４で、濃度を増加させたｐｐＴＧ２１エンドソーム溶解性ペプチド（２５０及び１０００ｎＭ）の存在下で処理した。Ｔ７Ｅ１エンドヌクレアーゼアッセイにより編集を評価する前に、細胞を４８時間処理した。編集効率を図５に注記する。

【0604】

ＡＳＧＰＲ−Ｃａｓ９顕微鏡イメージング試験
材料／試薬：
ＳＫＨｅｐ細胞（ＡＴＣＣ ＨＴＢ−５２）
ＨｅｐＧ２細胞（ＡＴＣＣ ＨＢ−８０６５）
増殖培地：ＤＭＥＭ高グルコース（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ １１９６５−０９２）
１０％ウシ胎仔血清、熱不活性化型（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ １６０００−０４４）
１ｍＭの非必須アミノ酸（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ １１１４０−０５０）
２ｍＭのＬ−グルタミン（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ ２５０３０−０８１）
１００単位／ｍＬのペニシリン／ストレプトマイシン（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ １０３７８−０１６）
ＭａｔＴｅｋガラス底ウエル（ＭａｔＴｅｋ・Ｃｏｒｐ・Ｐ３５Ｇ−１．５−１４−Ｃ）
デキストラン６４７−（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｄ３４６８２）
Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２８−（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ６２２４９）−１μｇ／ｍＬで使用
コラーゲン−（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ａ１０４８３−０１）−５ｕｇ／ｃｍ²で使用
上記のＹ５３ａＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１及びＹ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１・ＲＮＰ構築物を使用した。図２に画像を示す。
プロトコル：
−コラーゲンでコーティングしたＭａｔＴｅｋウエルに、増殖培地中４０，０００／ウエルで細胞をプレーティングする
−２４時間後に新しい培地に変える
−Ｄｅｘｔｒａｎ６４７（５００ｎｇ／ｍＬ）で４時間処理する。
−４時間後、培地にＨｏｅｃｈｓｔを５分間添加する。
−新鮮な培地に変える。
−培地を除去し、Ｙ１・Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１・ＲＮＰ構築物６４μＭで、またはＹ５３・ＡＳＧＰＲＬ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１・ＲＮＰ構築物を６４μＭで添加する。
−生細胞条件で１時間、Ｚｅｉｓｓ回転ディスク顕微鏡で画像化し、５分ごとに画像を収集する。
・画像はＺｅｎソフトウェア（Ｃａｒｌ Ｚｅｉｓｓ、Ｉｎｃ）で処理した。

【0605】

薬理学データ
本発明の化合物を用いてアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）を標的とすることにより調節される疾患を治療するための本発明の実施は、以下に記載する１以上の機能アッセイにおける活性によって証明することができる。供給源は括弧内に記載する。

【0606】

ＡＳＧＰｒリガンドのＳＰＲ結合測定：
化合物を用いた全てのＳＰＲ測定は、Ｂｉａｃｏｒｅ ３０００（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて２５℃で行った。ビオチン化ＡＳＧＰＲは、ＳＡセンサーチップ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）またはＣＭ５センサーチップ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）への標準のアミンカップリングにより固定されたＮｅｕｔｒａｖｉｄｉｎ（Ｐｉｅｒｃ
ｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ）を備えたカスタムセンサーチップを使用して、典型的には２０００〜３０００共鳴単位（Ｒｕ）で固定化された。ランニング緩衝液はＨＢＳ（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ）、２０ｍＭのＣａＣｌ₂、０．０１％のｐ２
０、３％のＤＭＳＯ、または５０ｍＭのトリス、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのＣａＣｌ₂、０．０１％のｐ２０、３％のＤＭＳＯ、ｐＨ７．５であった。化合物を、９００
μＭの濃度でランニング緩衝液の中に希釈し、３倍で、３．３μＭまで段階的に希釈した。化合物溶液を５０ｕL／分で１分間注入し、続いて各濃度について２回ずつ1分間解離させた。多量体コンジュゲート（二量体、三量体）については、コンジュゲートをランニング緩衝液中で１００ｎＭまたは１０ｎＭの濃度にまで段階的に希釈した。コンジュゲートを２分間注入し、オフ速度を３００または６００秒間検出した。オフ・フェーズ・データの完了後、９００μＭのＧａｌＮＡｃの注入を用いて化合物を置換し、受容体表面を遊離状態に戻した。スクラバー２（Ｂｉｏｌｏｇｉｃ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｉｎｃ．）を使用して全てのデータを処理し、ゼロ調整し、排除体積効果について整列させ、参照し、修正した。Ｋ_DＳは、スクラバー２中での化合物及び単一接合分子の定常状態結合応答をフィ
ッティングすることによって決定した。動態応答を示す多量体コンジュゲートのＫ_Dをス
クラバー２で処理し、ＢｉａＥｖａｌ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に適合させて、Ｋ_Dを計算するためにオン及びオフ速度パラメータを抽出した。その値は、複数の実験の標
準偏差を反映している。
ＳＰＲ結合アッセイについては以下の結果が得られ、ここで各アッセイは別々に報告され、またはラン回数（ｎ）及び標準偏差が記録される。

【表8】

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【表9】

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【表10】

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【0607】

ＲＮＰ構築物のＳＰＲ結合測定：
ＳＰＲ：全ての実験は、市販のストレプトアビジンセンサー（Ｓｅｎｏｒ Ｃｈｉｐ ＳＡ、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を２５℃で用い、Ｂｉａｃｏｒｅ３０００（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で行った。
ＡＳＧＰｒ・ＨＩ・ＣＲＤタンパク質の固定化レベルは実験に依存し、個々の実験プロトコルに記載されている。全ての実験は、５０ｕL／分の流量で行った。全ての実験にお
いて、ストレプトアビジンセンサー表面を参照として使用した。得られた全てのデータは、Ｓｃｒｕｂｂｅｒ２ソフトウェア（ＢｉｏＬｏｇｉｃ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して処理し、ゼロ調整し、ｘ−整列させ、参照及びベースラインについて修正した。曲線は、スクラバーにおける１：１動態結合モデルを使用して適合させた。

【0608】

試薬：
ＡＳＧＰｒ ＨＩ ＣＲＤ：ストレプトアビジン表面上への捕捉のために、先に述べたようにして、ＡＳＧＰｒ ＨＩ ＣＲＤは、孤立した遊離システインと反応されたマレイミド−ＰＥＧ２−ビオチン（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いて誘導体化された。タンパク質コンジュゲートについては、立体的な衝突を生じさせる表面上の混雑を減少させるために、表面密度を低く維持した。

【0609】

試薬：上記で述べたＡＳＧＰｒ−ビオチン
ＲＮＰ構築物は、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ・ｐＨ７．５、１５０ｍＭのＫＣｌ、２０ｍＭのＣａＣｌ₂、５ｍＭのＭｇＣｌ₂、０．０１％のｐ２０の中の３２μＭのストックとして供給され、これはＲＮＰと共にＳＰＲのランニング緩衝液として役立った。Ｃａｓ９−リボ核タンパク質については、このストックをランニング緩衝液で１０倍に希釈し、次いで最大濃度として１０ｎＭに再度希釈した。ＡＳＧＰｒを、５０及び２００Ｒｕでストレプトアビジンセンサー上に固定化した。１０ｎＭ濃度の単回注入は、低分子複合体で観察されたのと同様に、過剰の（９００μＭ）Ｎ−アセチル−ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）の注入によって主に競合され得る明確な結合を示した。ＡＳＧＰｒリガンド（Ｙ１Ｃ８０Ｓ−３Ｎ−ｍ−ＲＮＰ−ＥＭＸ１）を含まない対照ＲＮＰ構築物も最高濃度（１０ｎＭ）で注入されたが、固定化された受容体への如何なる結合も示さなかった。タンパク質をランニング緩衝液中で１０ｎＭから２倍に連続希釈して、両方の密度で親和性を得た。各濃度の間で９００μＭのＧａｌＮＡｃを注入して、受容体からＲＮＰを除去した。一連の濃度からの応答を前述のスクラバー２を用いて処理し、１：１結合モデルに適合させた。

【表11】

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【0610】

本出願の全体を通して、様々な刊行物が参照される。これら刊行物の開示内容の全体を、全ての目的のために本明細書の一部として援用する。

【0611】

当業者には、本発明の範囲または精神から逸脱することなく、本発明において様々な変更及び変形が可能であることが明らかであろう。本発明の他の実施形態は、本明細書の考慮及び本明細書に開示された発明の実施から当業者に明らかであろう。実施例を含めて、本明細書は単なる例示と看做されるべきものであり、本発明の真の範囲及び精神は添付の特許請求の範囲によって示されるものである。

【0612】

以下は例示的な実施形態である：
１．式（Ａ−１）、（Ａ−２）、または（Ａ−３）の化合物、またはその医薬的に許容される塩：

【化220】

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式中、
Ｒ^xxは、−Ｈ、−アルキル、−シクロアルキル、−アルケニル、アルキニル、−アリール、−ヘテロアリール、−ＯＲ⁵、−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＳＲ⁵であり、前記Ｒ^xxの−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記Ｒ^xxの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）
から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子によって離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、各々１以上のハロ原子で置換されてもよく、
Ｒ^yyは、−ＣＮ、−ＣＨ₂−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ₂−Ｎ₃、−ＣＨ₂−ＮＨ₂、−Ｃ
Ｈ２−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₂−ＯＨ、−
ＣＨ₂−ＳＨ、−ＣＨ−ＣＨ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ
−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ₂、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは任意にＲ⁵で置換され、
各Ｒ¹は、独立して、−ＣＮ、−ＣＨ₂−ＣＮ、−Ｃ≡ＣＨ、−ＣＨ₂−Ｎ₃、−ＣＨ₂−
ＮＨ₂、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₂
−ＯＨ、−ＣＨ₂−ＳＨ、−ＣＨ−ＣＨ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｒ⁵、−
ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ⁵、−ＣＨ₂−Ｓ（
Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ₂、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ⁵、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（
Ｒ⁴）−Ｒ⁵、またはアリールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換されるか、
または、Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｚ
−Ｘ^-Ｙ⁺、−Ｘ^-Ｙ⁺、または−Ｙであり、
Ｘは、リンカーであり、
Ｘ⁺は、正に荷電したリンカーであり、
Ｘ^-は、負に荷電したリンカーであり、
Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドを含むリボ核タンパク質またはエンドヌクレアーゼであるか、Ｙは部位特異的修飾ポリペプチドであるか、ＹはＣａｓ９リボ核タンパク質で
あるか、ＹはＣａｓ９タンパク質であるか、ＹはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）であるか、ＹはＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｙ⁺は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したリボ核タンパク質またはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ⁺は正に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、Ｙ⁺は正に荷電したＣａｓ９タンパク質であり、
Ｙ^-は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したリボ核タンパク質もしくはエ
ンドヌクレアーゼであるか、またはＹ^-は負に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであ
るか、Ｙ^-は負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質であるか、またはＹ^-は負に荷電したｓｇＲＮＡであるか、またはＹ^-はＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活
性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｚは、存在しないか、または−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｓ−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴
）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、または
アリールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは任意にＲ⁵で置換され、
Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｎ₃、−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）−
Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ³
、テトラゾール、またはトリアゾールであり、前記テトラゾール及びトリアゾールは任意にＲ³で置換され、
各Ｒ³は独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、
ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ₂−
基は各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基と
交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は各々が独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基で置換されてもよく、前記ヘテロ原子基は
少なくとも２つの炭素原子で離間されており、
各Ｒ⁴は独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記少なくとも
２つの炭素原子で離間されたアルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は
各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原
子と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基
は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルはハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ⁵は独立して、−Ｈ、（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル
、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルであり、前記シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基、または前記アルキルの１〜２０個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子と交換
されてもよく、前記ヘテロ原子は少なくとも２つの炭素原子で離間されており、また前記アルキルの−ＣＨ₃は各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択
されるヘテロ原子で置換されてもよく、前記ヘテロ原子基は少なくとも２つの炭素原子で離間されており；また前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよい。
２．式（Ｂ）の化合物、またはその医薬的に許容される塩：

【化221】

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式中、
Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｚ−Ｘ^-Ｙ⁺
、−Ｘ^-Ｙ⁺、または−Ｙであり、
Ｘはリンカーであり、
Ｘ⁺は、正に荷電したリンカーであり、
Ｘ^-は、負に荷電したリンカーであり、
Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドを含むリボ核タンパク質またはエンドヌクレアーゼであるか、Ｙは部位特異的修飾ポリペプチドであるか、ＹはＣａｓ９リボ核タンパク質であるか、ＹはＣａｓ９タンパク質であるか、ＹはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）であるか、ＹはＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｙ⁺は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したリボ核タンパク質またはエン
ドヌクレアーゼであるか、またはＹ⁺は正に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドである
か、またはＹ⁺は正に荷電したＣａｓ９タンパク質であり、
Ｙ^-は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したリボ核タンパク質またはエン
ドヌクレアーゼであるか、Ｙ^-は負に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドであるか、Ｙ^-は負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質であるか、Ｙ^-は負に荷電したｓｇＲＮＡであ
るか、またはＹ^-はＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性化ｃｒＲＮＡ
（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列であり、
Ｚは、存在しないか、または−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｓ−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｓ（Ｏ）₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｓ（Ｏ）₂−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴
）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＣＨ₂−Ｎ（Ｒ⁴）−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、または
アリールもしくはヘテロアリールであり、前記アリールもしくはヘテロアリールは任意にＲ⁵で置換され、
Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｎ₃、−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）−
Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ³、−Ｎ（Ｒ³）−Ｓ（Ｏ）₂−Ｒ³
、テトラゾール、またはトリアゾールであり、前記テトラゾール及びトリアゾールは任意にＲ³で置換され、
各Ｒ³は独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、
ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、ハロ置換−（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記アルキルまたはシクロアルキルの−ＣＨ₂−
基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から選択されるヘテロ原子基
と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は各々が独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴
、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基
は少なくとも２つの炭素原子で離間されており、
各Ｒ⁴は独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、−
（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記少なくとも
２つの炭素原子で離間されたアルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は
、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ
原子で置換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−
ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルはハロ原子で置換されてもよく、
各Ｒ⁵は独立して、−Ｈ、（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル
、−（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルであり、前記シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基、または前記アルキルの１〜２０個の−ＣＨ₂−基は、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子と交換
されてもよく、前記ヘテロ原子は、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記アルキルの−ＣＨ₃は各々独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択さ
れるヘテロ原子と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は少なくとも２つの炭素原子で離間されており；また前記アルキル、アルケニル、アルキニル、及びシクロアルキルはハロ原子で置換されてもよい。
３．実施形態１または２に記載の化合物であって、Ｒ²が、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ₃である前記化合物。
４．実施形態１〜３の何れかに記載の化合物であって、Ｒ¹が、−Ｚ−Ｘ＋Ｙ−である
前記化合物。
５．実施形態１〜３の何れかに記載の化合物であって、Ｒ¹が、−Ｚ−Ｘ−Ｙ＋である
前記化合物。
６．実施形態１〜３の何れかに記載の化合物であって、Ｒ¹が、−Ｚ−Ｘ−Ｙである前
記化合物。
７．実施形態６に記載の化合物であって、Ｒ¹が、Ｌ１〜Ｌ１０からなる群から選択さ
れる−Ｚ−Ｘ−Ｙである前記化合物：

【化222】

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【化223】

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【化224】

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式中、
各Ｔは独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、または（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１以上の炭素基は、各々
独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子基と
交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子によって離間されており、また前記アルキレン、アルケニレン、及びアルキニレンは各々独立して１以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、またはＯ
、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、ここでは少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂及びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つの炭素原子で離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基が、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−で置換されてもよく、また前記アルキルの−ＣＨ₃は各々独立して−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）か
ら選択されるヘテロ原子基が交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子によって離間されており、また前記アルキル及びシクロアルキルは、ハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは独立して０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である。
８．実施形態７に記載の化合物であって、前記Ｑの各出現が独立して、１Ｈ−１，２，
３−トリアゾリル、ピリジニル及び１，２，３，４−テトラゾリルから選択されるヘテロアリールである前記化合物。
９．実施形態7または８に記載の化合物であって、前記Ｘはジスルフィド結合を含んで
いる前記化合物。
１０．実施形態１に記載の化合物であって、式（Ｃ−１）、（Ｃ−２）、（Ｃ−３）または（Ｃ４）の式を有する前記化合物、またはその医薬的に許容される塩：

【化225】

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式中、
ｎは、１、２、または３であり、
Ｗは、存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_m−であり、
各Ｔは独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１以上の炭素基は、各
々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子基
と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は少なくとも２つの炭素原子によって離間されており、アルキレン、アルケニレン、及びアルキニレンは各々独立して１以上のハロ原子で置換されてもよく、
各Ｑは独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、またはＯ
、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂及びＮ
Ｒ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つの炭素原子によって離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基が、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、前記アルキルの−ＣＨ₃は、各々独立して−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴
）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は、少なくとも２つの炭素原子によって離間されており、前記アルキル及びシクロアルキルはハロ原子で置換されてもよく、
各ｍは独立して０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である。
１１．実施形態１に記載の化合物であって、式（Ｄ−１）または（Ｄ−２）の式を有する前記化合物、またはその医薬的に許容される塩：

【化226】

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式中、
ｎは１、２または３である。
１２．実施形態２に記載の化合物であって、式（Ｅ）を有する前記化合物、またはその医薬的に許容される塩：

【化227】

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式中、
ｎは１、２または３であり、
Ｗは存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_m−であり、
式中、
各Ｔは独立して、存在しないか、または（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１以上の炭素基は、各
々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−から独立して選択されるヘテロ原子基
で置換されてもよく、前記ヘテロ原子基は少なくとも２つの炭素原子によって離間されており、
各Ｑは独立して、存在しないか、またはＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ⁴、ＮＲ⁴−Ｃ（Ｏ）−Ｏ、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、またはＯ
、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂及びＮＲ⁴から選択されるヘテロ原子基であり、ここでは少なくとも２つの炭素原子が前記ヘテロ原子基Ｏ、Ｓ、Ｓ−Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）₂及びＮＲ⁴を任意の他のヘテロ原子基から離間し、
各Ｒ⁴は独立して、−Ｈ、−（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、少なくとも２つの炭素原子によって離間された前記アルキルまたはシクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基が、各々独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｒ⁴）−と交換されてもよく、また前記アルキルの−ＣＨ₃は、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）から選択されるヘテロ原子基と交換されてもよく、前記ヘテロ原子基は少なくと
も２つの炭素原子によって離間されており、また前記アルキル及びシクロアルキルはハロ原子で置換されてもよく、また
各ｍは独立して０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である。
１３．実施形態２に記載の化合物であって、式（Ｆ−１）または（Ｆ−２）の式を有する前記化合物、またはその医薬的に許容される塩：

【化228】

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式中、
ｎは１、２及び３から選択される。
１４．実施形態１０〜１３の何れか１項に記載の化合物であって、ｎが３である前記化合物。
１５．実施形態１２に記載の化合物であって、式

【化229】

[この文献は図面を表示できません]

を有する前記化合物、またはその医薬的に許容される塩。
１６．実施形態１０または１２に記載の化合物であって、Ｗがエンドソーム溶解性ペプチドまたは核局在化ペプチドであるペプチドである前記化合物。
１７．先行する実施形態の何れか1項に記載の化合物であって、Ｙは、
（１）ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列、またはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）の何れかを備えた認識要素を含む第一の要素であって、前記配列は、発現されたときにＣａｓ９リボ核タンパク質の標的配列への配列特異的結合を指示し、前記第一の要素は１以上のエンドソーム脱出剤を任意に含む前記第一の要素と、
（２）Ｃａｓ９タンパク質及び場合により１つ以上の核局在配列（ＮＬＳ）及び場合により１つ以上の蛍光タンパク質及び１以上のエンドソーム脱出剤を含む第二の要素を含んだＣａｓ９リボ核タンパク質であり、
前記第一の要素は前記第二の要素と会合している前記化合物。
１８．実施形態１７に記載の化合物であって、前記標的配列が真核細胞標的配列である前記化合物。
１９．実施形態１７に記載の化合物であって、前記第一の要素が、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列を含み、前記化合物の残りは、それぞれ独立してｔｒａｃｒＲＮＡ配列またはｃｒＲＮＡへの1以上の相互作用を介して前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質に連結され
る前記化合物。
２０．実施形態１９に記載の化合物であって、前記ｔｒａｃｒＲＮＡが任意に化学的に修飾される前記化合物。
２１．実施形態１９または２０に記載の化合物であって、前記ｔｒａｃｒＲＮＡは、ＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＡＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵ（配列番号１０２８）の配列に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の核酸配列同一性を有する配列を含み、前記配列は任意で、最初の３個の塩基において２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む前記化合物。
２２．実施形態１９〜２１の何れか1項に記載の化合物であって、前記ｃｒＲＮＡが任
意に化学的に修飾されている前記化合物。
２３．実施形態１９〜２１の何れか1項に記載の化合物であって、前記ｃｒＲＮＡは、
下記から選択される配列に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％のヌクレオチド配列同一性を有する配列を含む前記化合物：
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１：
ＧＧＵＧＣＵＡＧＣＣＵＵＧＣＧＵＵＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８５）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列２：
ＣＧＵＧＣＵＣＧＧＧＵＧＣＵＵＣＧＧＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８６）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列３：
ＧＣＣＧＵＣＣＵＣＣＵＣＧＧＡＡＣＧＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８７）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列４：
ＧＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＡＣＵＡＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８８）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列５：
ＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＡＧＧＧＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８９）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列６：
ＣＧＡＣＵＵＣＧＡＧＡＡＵＧＵＧＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９０）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列７：
ＧＡＧＵＧＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９１）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列８：
ＣＵＣＧＧＧＣＡＣＡＵＵＣＵＣＧＡＡＧＵＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９２）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列９：
ＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＡＧＡＡＧＧＣＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９３）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１０：
ＵＣＵＵＵＧＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９４）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む、
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１１：
ＣＵＡＧＧＡＧＡＵＡＣＡＣＣＵＣＣＡＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９５）、最後の４塩基の最初の３つ（ＧＣＵ）に任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む。
２４．実施形態１７に記載の化合物であって、前記第一の要素がシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）を含み、前記化合物の残りがｓｇＲＮＡに対する１以上の相互作用を介して前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質に連結される前記化合物。
２５．実施形態２４に記載の化合物であって、前記ｓｇＲＮＡが少なくとも２０ヌクレオチドを含む前記化合物。
２６．実施形態２４に記載の化合物であって、前記ｓｇＲＮＡが少なくとも８個のヌク
レオチドを含む前記化合物。
２７．実施形態２４に記載の化合物であって、前記ｓｇＲＮＡとその対応する標的配列との間の相補性の程度が、適切なアライメントアルゴリズムを使用して最適に整列されたときに、少なくとも５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％である前記化合物。
２８．実施形態２４の何れか1項に記載の化合物であって、前記ｓｇＲＮＡは、下記か
らなる群から選択される配列に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセントまたは１００パーセントのヌクレオチド配列同一性を有する前記化合物：
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列１
ＧＧＵＧＣＵＡＧＣＣＵＵＧＣＧＵＵＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９６）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列２
ＣＧＵＧＣＵＣＧＧＧＵＧＣＵＵＣＧＧＣＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９７）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列３
ＧＣＣＧＵＣＣＵＣＣＵＣＧＧＡＡＣＧＣＡＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９８）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列４
ＧＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＡＣＵＡＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９９）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列５
ＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＡＧＧＧＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９００）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列６
ＣＧＡＣＵＵＣＧＡＧＡＡＵＧＵＧＣＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０１）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列７
ＧＡＧＵＧＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０２）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列８
ＣＵＣＧＧＧＣＡＣＡＵＵＣＵＣＧＡＡＧＵＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号
９０３）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列９
ＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＡＧＡＡＧＧＣＣＡＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０４）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列１０
ＵＣＵＵＵＧＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０５）、
ＰＣＳＫ９シングルガイドＲＮＡ配列１１
ＣＵＡＧＧＡＧＡＵＡＣＡＣＣＵＣＣＡＣＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０６）、
ＥＭＸ１シングルガイドＲＮＡ配列
ＧＵＣＡＣＣＵＣＣＡＡＵＧＡＣＵＡＧＧＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０７）、
ＲＯＳＡ２６シングルガイドＲＮＡ配列
ＣＧＡＡＣＣＣＵＡＣＡＣＡＵＵＣＡＡＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０８）、
ここで、前記配列は任意に化学的に修飾される。
２９．実施形態２４〜２８の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが任意に化学的に修飾されたｓｇＲＮＡを含む前記化合物。
３０．実施形態１〜２９の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが更に蛍光プローブを含む前記化合物。
３１．実施形態３０に記載の化合物であって、前記蛍光プローブがｍＣｈｅｒｒｙ配列（配列番号９１５）である前記化合物。
３２．先行する実施形態の何れか1項に記載の化合物であって、前記Ｙが１以上のＮＬ
Ｓを含む前記化合物。
３３．実施形態３２に記載の化合物であって、前記ＮＬＳの各々が、下記からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む前記化合物：
ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）、
ＫＲＰＡＡＴＫＫＡＧＱＡＫＫＫＫ（配列番号８３１）、
ＰＡＡＫＲＶＫＬＤ（配列番号８３２）、
ＲＱＲＲＮＥＬＫＲＳＰ（配列番号８３３）、
ＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号８３４）、
ＲＭＲＩＸＦＫＮＫＧＫＤＴＡＥＬＲＲＲＲＶＥＶＳＶＥＬＲＫＡＫＫＤＥＱＩＬＫＲＲＮＶ（配列番号８３５）、
ＶＳＲＫＲＰＲＰ（配列番号８３６）、
ＰＰＫＫＡＲＥＤ（配列番号８３７）、
ＰＱＰＫＫＫＰＬ（配列番号８３８）、
ＳＡＬＩＫＫＫＫＫＭＡＰ（配列番号８３９）、
ＤＲＬＲＲ（配列番号８４０）、
ＰＫＱＫＫＲＫ（配列番号８４１）、
ＲＫＬＫＫＫＩＫＫＬ（配列番号８４２）、
ＲＥＫＫＫＦＬＫＲＲ（配列番号８４３）、
ＫＲＫＧＤＥＶＤＧＶＤＥＶＡＫＫＫＳＫＫ（配列番号８４４）、
ＲＫＣＬＱＡＧＭＮＬＥＡＲＫＴＫＫ（配列番号８４５）、
ＭＡＰＫＫＫＲＫＶＧＩＨＲＧＶＰ（配列番号１０３５）、及び
ＰＫＫＫＲＫＶＥＤＰＫＫＫＲＫＶＤ（配列番号１０３６）。
３４．実施形態３３に記載の化合物であって、前記ＮＬＳの各々がアミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む前記化合物。
３５．実施形態３４に記載の化合物であって、各々がアミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む２つのＮＬＳを含む前記化合物。
３６．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙは、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓまたはＡ．ｅｂｒｅｕｓ由来のＣａｓ９タンパク質に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む前記化合物。
３７．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが、ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む前記化合物。
３８．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが、配列番号８の７〜１６６位または７３１〜１００３位のアミノ酸または配列番号１〜７、９〜８２９に記載のものの対応するアミノ酸に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む前記化合物。
３９．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが、配列番号８の７〜１６６位、または７３１〜１００３位におけるアミノ酸に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む前記化合物。
４０．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが、配列番号２６０〜２６３の何れかのＣａｓ９アミノ酸配列のモチーフ１，２，３及び４に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性を有する配列内の少なくとも４モチーフを有するＣａｓ９タンパク質を含む前記化合物。
４１．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９（野生型）（配列番号８４８）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９−突然変異Ｍ１Ｃ（配列番号８４９）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９−突然変異Ｍ１Ｃ＆Ｃ８０Ｓ（配列番号８５０）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ニッカーゼ変異体Ｄ１０Ａ（配列番号８５１）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ニッカーゼ変異体Ｈ８４０Ａ（配列番号８５２）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ニッカーゼ変異体Ｅ９２３Ｐ＆Ｔ９２４Ｐ（配列番号８５３）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ ｅｂｒｅｕｓ（Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ ｅｂｒｅｕｓ）Ｃａｓ９（配列番号８５４）、酸性鉱山排水菌Ｇａ００５２１６１＿ＪＧＩ・
Ｃａｓ９（配列番号８５５）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ヌル変異体Ｄ１０Ａ＆Ｈ８４０Ａ（配列番号１０２７）、及びウラン鉱山菌ＦＷ１０６＿ＪＧＩＣａｓ９（配列８５６）から選択される配列に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性を有するＣａｓ９タンパク質を含む前記化合物。
４２．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、肝細胞上に存在する受容体に結合できる前記化合物。
４３．実施形態４２に記載の化合物であって、前記肝細胞に存在する受容体がアシアロ糖タンパク質受容体である前記化合物。
４４．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、エンドソーム脱出剤を更に含む前記化合物。
４５．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物であって、前記Ｙが更にエンドソーム脱出剤を含む前記化合物。
４６．実施形態４４または４５に記載の化合物であって、前記エンドソーム脱出剤は、リソソーム作用剤、細胞浸透性ペプチド、融合性ペプチド、孔形成剤、及びプロトンスポンジ剤からなる群から選択される前記化合物。
４７．実施形態４６に記載の化合物であって、前記エンドソーム脱出剤がペプチドｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０１２）である前記化合物。
４８．実施形態１〜４７の何れか１項に記載の化合物及びエンドソーム脱出剤を含有する組成物であって、前記組成物を形成するために前記化合物及び前記エンドソーム脱出剤が同時インキュベートされる前記組成物。
４９．実施形態４８に記載の組成物であって、前記エンドソーム脱出剤が、リソソーム作用剤、細胞浸透性ペプチド、融合性ペプチド、細孔形成剤、及びプロトンスポンジ剤からなる群より選択される前記組成物。
５０．実施形態４９に記載の組成物であって、前記エンドソーム脱出剤がペプチドｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０１２）である前記組成物。
５１．先行する実施形態の何れか１項に記載の化合物と、医薬的に許容される担体、賦形剤または希釈剤とを含有する医薬組成物。
５２．対象における肝疾患もしくは状態、または肝臓調節疾患もしくは状態を治療する方法であって、前記対象に対して、実施形態５１に記載の医薬組成物の治療的有効量を投与することを含む前記方法。
５３．実施形態５２に記載の方法であって、前記疾患または状態が、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１−アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性キロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、高血糖、及びＩＩ型糖尿病と同様に異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患からなる群から選択される前記方法。
５４．実施形態５３に記載の方法であって、前記疾患または状態が、高脂血症、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＦＬＤ）である方法。
５５．対象の肝臓細胞における標的ＤＮＡの転写を選択的に調節する方法であって、前記対象に対して、実施形態５１による医薬組成物を投与することを含む方法。
５６．実施形態５５に記載の方法であって、前記標的ＤＮＡが、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１−アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンド
リア肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性キロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、高血糖、及びＩＩ型糖尿病と同様の異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患からなる群から選択される疾患または状態に関連する前記方法。
５７．実施形態５５に記載の方法であって、前記標的ＤＮＡがＰＣＳＫ９遺伝子である前記方法。
５８．対象において肝疾患または状態に関連するタンパク質をコードする核酸分子を編集する方法であって、実施態様４８に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む前記方法。
５９．実施形態５７の方法であって、前記タンパク質は、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１−アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性キロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、高血糖、及びＩＩ型糖尿病と同様の異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患からなる群から選択される肝疾患または状態に関連する前記方法。
６０．対象における肝疾患または状態に関連した少なくとも１つの遺伝子産物の発現レベルを調節する方法であって、前記対象に対して、実施形態５１に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
６１．実施形態６０に記載の方法であって、前記遺伝子産物が、遺伝性血管浮腫、家族性チロシン血症Ｉ型、アラジール症候群、アルファ−１−アンチトリプシン欠損症、胆汁酸合成及び代謝異常、胆道閉鎖症、嚢胞性線維症肝疾患、特発性新生児肝炎、ミトコンドリア肝障害、進行性家族性肝内胆汁うっ滞、原発性硬化性胆管炎、トランスサイレチンアミロイドーシス、血友病、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、家族性キロミクロン血症、高脂血症、脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、高血糖、及びＩＩ型糖尿病と同様の異常に高い肝臓グルコース産生を伴う疾患からなる群から選択される肝臓疾患または状態に関連する前記方法。
６２．実施形態６１に記載の方法であって、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）のレベルを調節する前記方法。
６３．実施形態６１に記載の方法であって、前記対象の血液中コレステロールのレベルを調節する前記方法。
６４．実施形態６３に記載の方法であって、前記対象の血中コレステロールのレベルを低下させる前記方法。
６５．リボ核タンパク質及びエンドソーム脱出剤を含有する組成物。
６６．実施形態６５に記載の組成物であって、前記リボ核タンパク質がＣａｓ９リボ核タンパク質またはＣｐｆｌリボ核タンパク質であるである前記組成物。
６７．実施形態６６に記載の組成物であって、前記リボ核タンパク質がＣａｓ９リボ核タンパク質である前記組成物。
６８．実施形態６７に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質及び前記エンドソーム脱出剤が共インキュベートされる前記組成物。
６９．実施形態６７または６８に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が、
（１）ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列、またはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）の何れかを備えた認識要素を含む第一の要素であって、前記ガイド配列は、発現されたときにＣａｓ９リボ核タンパク質の標的配列への配列特異的結合を指示し、前記第一の要素は任意に１以上のエンドソーム脱出剤を含む第一の要素と、
（２）Ｃａｓ９タンパク質及び任意に１以上の核局在配列（ＮＬＳ）及び任意に１以上
の蛍光タンパク質、ならびに１以上のエンドソーム脱出剤を含む第二の要素を含み、
前記第一の要素は前記第二の要素と会合している前記組成物。
７０．請求項６９に記載の組成物であって、前記標的配列が真核細胞標的配列である前記組成物。
７１．実施形態６９に記載の組成物であって、前記第一の要素が、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性化ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を備えたデュアルガイドＲＮＡ配列を含む前記組成物。
７２．実施形態７１に記載の組成物であって、前記ｔｒａｃｒＲＮＡが任意に化学的に修飾される組成物。
７３．実施形態７１または７２に記載の組成物であって、前記ｔｒａｃｒＲＮＡが、ＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＡＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵ（配列番号１０２８）の配列に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または少なくとも約９５％、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性である配列を含み、前記配列は任意に、最初の３塩基において２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む前記組成物。
７４．実施形態７１〜７３の何れか1項に記載の組成物であって、前記ｃｒＲＮＡが任
意に化学的に修飾される前記組成物。
７５．実施形態７１〜７３の何れか1項に記載の組成物であって、前記ｃｒＲＮＡが、
下記から選択される配列に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性を有する配列を含む前記組成物：
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１：
ＧＧＵＧＣＵＡＧＣＣＵＵＧＣＧＵＵＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８５）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列２：
ＣＧＵＧＣＵＣＧＧＧＵＧＣＵＵＣＧＧＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８６）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列３：
ＧＣＣＧＵＣＣＵＣＣＵＣＧＧＡＡＣＧＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８７）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列４：
ＧＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＡＣＵＡＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８８）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列５：
ＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＡＧＧＧＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８８９）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列６：
ＣＧＡＣＵＵＣＧＡＧＡＡＵＧＵＧＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９０）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列７：
ＧＡＧＵＧＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９１）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列８：
ＣＵＣＧＧＧＣＡＣＡＵＵＣＵＣＧＡＡＧＵＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９２）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列９：
ＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＡＧＡＡＧＧＣＣＡＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９３）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１０：
ＵＣＵＵＵＧＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９４）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
ＰＣＳＫ９ ｃｒＲＮＡ配列１１：
ＣＵＡＧＧＡＧＡＵＡＣＡＣＣＵＣＣＡＣＣＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧ（配列番号８９５）、最後の４塩基の最初の３塩基（ＧＣＵ）において任意に２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｆ修飾を含む
７６．実施形態６９に記載の組成物であって、前記第一の要素がシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）を含む前記組成物。
７７．実施形態７６に記載の組成物であって、前記ｓｇＲＮＡが少なくとも２０ヌクレオチドを含む前記組成物。
７８．実施形態７６に記載の組成物であって、前記ｓｇＲＮＡが少なくとも８ヌクレオチドを含む前記組成物。
７９．実施形態７６に記載の組成物であって、前記ｓｇＲＮＡとその対応する標的配列との間の相補性の程度は、適切なアライメントアルゴリズムを使用して最適に整列されたときには、少なくとも５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である前記組成物。
８０．実施形態７６に記載の組成物であって、前記ｓｇＲＮＡは、下記からからなる群から選択される配列に対して、少なくとも約７５パーセント、少なくとも約８０パーセント、少なくとも約８５パーセント、少なくとも約９０パーセント、少なくとも約９５パーセント、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのヌクレオチド配列同一性を有する前記組成物：
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列１
ＧＧＵＧＣＵＡＧＣＣＵＵＧＣＧＵＵＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９６）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列２
ＣＧＵＧＣＵＣＧＧＧＵＧＣＵＵＣＧＧＣＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９７）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列３
ＧＣＣＧＵＣＣＵＣＣＵＣＧＧＡＡＣＧＣＡＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号
８９８）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列４
ＧＧＡＣＧＡＧＧＡＣＧＧＣＧＡＣＵＡＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号８９９）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列５
ＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＡＧＧＧＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９００）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列６
ＣＧＡＣＵＵＣＧＡＧＡＡＵＧＵＧＣＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０１）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列７
ＧＡＧＵＧＡＣＣＡＣＣＧＧＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０２）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列８
ＣＵＣＧＧＧＣＡＣＡＵＵＣＵＣＧＡＡＧＵＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０３）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列９
ＧＧＡＡＧＣＣＡＧＧＡＡＧＡＡＧＧＣＣＡＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０４）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列１０
ＵＣＵＵＵＧＣＣＣＡＧＡＧＣＡＵＣＣＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０５）、
ＰＣＳＫ９ガイドＲＮＡ配列１１
ＣＵＡＧＧＡＧＡＵＡＣＡＣＣＵＣＣＡＣＣＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０６）、
ＥＭＸ１ガイドＲＮＡ配列
ＧＵＣＡＣＣＵＣＣＡＡＵＧＡＣＵＡＧＧＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号９０７）、
ＲＯＳＡ２６ガイドＲＮＡ配列
ＣＧＡＡＣＣＣＵＡＣＡＣＡＵＵＣＡＡＣＧＧＵＵＵＡＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＧＡＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＵＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵＵＵＵ（配列番号
９０８）、
ここで、前記配列は任意に化学的に修飾される。
８１．実施形態７６〜８０の何れか１項に記載の組成物であって、前記ｓｇＲＮＡが任意に化学的に修飾される前記組成物。
８２．実施形態６７〜８１の何れか１項に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が更に蛍光プローブを含む前記組成物。
８３．実施形態８２に記載の組成物であって、前記蛍光プローブがｍＣｈｅｒｒｙ配列（配列番号９１５）である前記組成物。
８４．実施形態６７〜８３の何れか１項に記載の組成物であって、１以上のＮＬＳを含む前記組成物。
８５．実施形態６７〜８３の何れか１項に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が１以上のＮＬＳを含む前記組成物。
８６．実施形態８４または８５に記載の組成物であって、前記ＮＬＳの各々が、下記からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む前記組成物：
ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）、
ＫＲＰＡＡＴＫＫＡＧＱＡＫＫＫＫ（配列番号８３１）、
ＰＡＡＫＲＶＫＬＤ（配列番号８３２）、
ＲＱＲＲＮＥＬＫＲＳＰ（配列番号８３３）、
ＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号８３４）、
ＲＭＲＩＸＦＫＮＫＧＫＤＴＡＥＬＲＲＲＲＶＥＶＳＶＥＬＲＫＡＫＫＤＥＱＩＬＫＲＲＮＶ（配列番号８３５）、
ＶＳＲＫＲＰＲＰ（配列番号８３６）、
ＰＰＫＫＡＲＥＤ（配列番号８３７）、
ＰＱＰＫＫＫＰＬ（配列番号８３８）、
ＳＡＬＩＫＫＫＫＫＭＡＰ（配列番号８３９）、
ＤＲＬＲＲ（配列番号８４０）、
ＰＫＱＫＫＲＫ（配列番号８４１）、
ＲＫＬＫＫＫＩＫＫＬ（配列番号８４２）、
ＲＥＫＫＫＦＬＫＲＲ（配列番号８４３）、
ＫＲＫＧＤＥＶＤＧＶＤＥＶＡＫＫＫＳＫＫ（配列番号８４４）、
ＲＫＣＬＱＡＧＭＮＬＥＡＲＫＴＫＫ（配列番号８４５）、
ＭＡＰＫＫＫＲＫＶＧＩＨＲＧＶＰ（配列番号１０３５）、及び
ＰＫＫＫＲＫＶＥＤＰＫＫＫＲＫＶＤ（配列番号１０３６）。
８７．実施形態８６に記載の組成物であって、前記ＮＬＳの各々がアミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む前記組成物。
８８．実施形態８７に記載の組成物であって、２つのＮＬＳを含有し、その各々がアミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む前記組成物。
８９．実施形態６７〜８８の何れか１項に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質は、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、またはＮ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ由来のＣａｓ９タンパク質に対して少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む前記組成物。
９０．実施形態６７〜８９の何れか１項に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が、ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タン
パク質を含む前記組成物。
９１．実施形態６７〜９０の何れか１項に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が、配列番号８の７〜１６６位または７３１〜１００３位のアミノ酸または配列番号１〜７、９〜８２９に記載のものの対応するアミノ酸に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６パーセント、少なくとも約９７パーセント、少なくとも約９８パーセント、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９リボ核タンパク質を含む前記組成物。
９２．実施形態９１に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が、配列番号８の７〜１６６位、または７３１〜１００３位におけるアミノ酸に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む前記組成物。
９３．実施形態９２に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が、配列番号２６０〜２６３何れかのＣａｓ９アミノ酸配列のモチーフ１，２，３及び４に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性を有する配列内の少なくとも４モチーフを有するＣａｓ９タンパク質を含む前記組成物。
９４．実施形態６７〜９３の何れか１項に記載の組成物であって、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質が、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９（野生型）（配列番号８４８）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９変異体Ｍ１Ｃ（配列番号８４９）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９−突然変異Ｍ１Ｃ＆Ｃ８０Ｓ（配列番号８５０）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ニッカーゼ変異体Ｄ１０Ａ（配列番号８５１）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ニッカーゼ変異体Ｈ８４０Ａ（配列番号８５２）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ニッカーゼ変異体Ｅ９２３Ｐ＆Ｔ９２４Ｐ（配列番号８５３）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ ｅｂｒｅｕｓ（Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ ｅｂｒｅｕｓ）Ｃａｓ９（配列番号８５４）、酸性鉱山排水菌Ｇａ００５２１６１＿ＪＧＩ・Ｃａｓ９（配列番号８５５）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓＣａｓ９ヌル変異体Ｄ１０Ａ＆Ｈ８４０Ａ（配列番号１０２７）、及びウラン鉱山菌ＦＷ１０６＿ＪＧＩ・Ｃａｓ９（配列８５６）から選択される配列に対して、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９パーセント、または１００パーセントのアミノ酸配列同一性を有するＣａｓ９タンパク質を含む前記組成物。
９５．実施形態６７〜９４の何れか１項に記載の組成物であって、前記エンドソーム脱出剤が、リソソーム作用剤、細胞浸透性ペプチド、融合性ペプチド、細孔形成剤、及びプロトンスポンジ剤からなる群から選択される前記組成物。
９６．実施形態９５に記載の組成物であって、前記エンドソーム脱出剤がペプチドｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０１２）である前記組成物。
９７．実施形態６５〜９６の何れか１項に記載の組成物、及び薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤を含有する医薬組成物。
９８．対象における疾患または状態を治療する方法であって、前記対象に対して、治療的有効量の実施形態９７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
９９．実施形態９８に記載の方法であって、前記疾患または状態が、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質の疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼疾患及び障害からなる群から選択される前記方法。
１００．対象の細胞内標的ＤＮＡの転写を選択的に調節する方法であって、前記対象に
対して、実施態様９７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
１０１．実施形態１００に記載の方法であって、前記標的ＤＮＡが、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質の疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼の疾患及び障害からなる群から選択される障害または状態と関連する前記方法。
１０２．対象における疾患または状態に関連するタンパク質をコードする核酸分子を編集する方法であって、前記対象に対して、請求項９７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
１０３．実施形態１０２に記載の方法であって、前記タンパク質が、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質の疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経疾患ならびに障害、ならびに眼の疾患及び障害からなる群から選択される疾患または状態と関連する前記方法。
１０４．対象の疾患または状態に関連する少なくとも１つの遺伝子産物の発現レベルを調節する方法であって、前記対象に対して、実施態様９７に記載の医薬組成物を投与することを含む前記方法。
１０５．実施形態１０４に記載の方法であって、前記遺伝子産物が、血液障害、細胞の調節不全もしくは腫瘍疾患及び障害、炎症及び免疫関連疾患、代謝性、肝臓、腎臓、及びタンパク質の疾患ならびに障害、筋肉もしくは骨格疾患、神経学的及び神経の疾患障害、ならびに眼の疾患及び障害からなる群から選択される疾患または状態と関連する前記方法。

【図1】

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【図2】

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【図3】

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【図4】

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【図5】

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【図6-1】

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【図6-2】

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【図6-3】

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【図6-4】

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【図6-5】

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【図6-6】

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【図6-7】

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【図6-8】

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【図6-9】

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【図6-10】

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【図6-11】

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【図6-12】

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【図6-13】

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【図6-14】

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【配列表】

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【手続補正書】

【提出日】2021年9月15日

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｂ）の化合物：

【化1】

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またはその医薬的に許容される塩であって、
式中、
Ｒ¹は、−Ｚ−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｙ、−Ｘ−Ｙ、−Ｚ−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｘ⁺Ｙ^-、−Ｚ−Ｘ^-Ｙ⁺、−Ｘ^-Ｙ⁺、または−Ｙであり；
Ｘは、リンカーであり；
Ｘ⁺は、正に荷電したリンカーであり；
Ｘ^-は、負に荷電したリンカーであり；
Ｙは、部位特異的修飾ポリペプチドを含むリボ核タンパク質、部位特異的修飾ポリペプチドを含むエンドヌクレアーゼ、部位特異的修飾ポリペプチド、シングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）、並びにＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列から成る群から選択され、前記Ｙは、任意にＣａｓ９リボ核タンパク質またはＣａｓ９タンパク質であり；
Ｙ⁺は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したリボ核タンパク質、部位特異的修飾ポリペプチドを含む正に荷電したエンドヌクレアーゼ、及び正に荷電した部位特異的修飾ポリペプチドから成る群から選択され、前記Ｙ⁺は、任意に正に荷電したＣａｓ９タ
ンパク質であり；
Ｙ^-は、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したリボ核タンパク質、部位特異的修飾ポリペプチドを含む負に荷電したエンドヌクレアーゼ、負に荷電した部位特異的修飾ポリペプチド、負に荷電したｓｇＲＮＡ、並びにＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む負に荷電したデュアルガイドＲＮＡ配列から成る群から選択され、前記Ｙ^-は、任意に負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質であり；
Ｚは、共有結合、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂Ｓ−、−ＣＨ₂Ｓ（Ｏ）−、−ＣＨ₂ＳＯ₂−、−ＣＨ₂ＳＯ₂Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＯ₂−、−ＣＨ₂Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂Ｎ（Ｒ⁴）Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ₂Ｎ（Ｒ⁴）ＳＯ₂−、−ＣＨ₂Ｎ（Ｒ⁴）ＣＯ₂−、−ＣＨ₂Ｎ（Ｒ⁴）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ₂ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＨ₂ＯＣＯ₂−、アリール、またはヘテロアリールであり、前記アリールまたはヘテロアリールは、任意にＲ⁵で置換されており；
Ｒ²は、−ＯＨ、−Ｎ₃、−Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）Ｃ（Ｏ）Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ³）₂、−Ｎ（Ｒ³）ＣＯ₂Ｒ³、−Ｎ（Ｒ³）ＳＯ₂Ｒ³、テトラゾール、またはトリアゾールであり、前記テトラゾールまたトリアゾールは、任意にＲ³で置換されており；
各Ｒ³は、独立して、Ｈ、（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルケニル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル、ハロ置換（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキル、及び（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルの−ＣＨ₂−基のいずれか１つ以上は、各々任意に独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択される第１のヘテロ原子基と交換され、前記（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキル及びハロ置換（Ｃ₁−Ｃ₅）アルキルの−ＣＨ₃基のいずれか１つ以上は、各々任意に独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−ＳＲ⁴からなる群から選択される第２のヘテロ原子基と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており；
各Ｒ⁴は、独立して、Ｈ、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル及び（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルの−ＣＨ₂−基の１〜６個は、各々任意に独立して、−Ｏ−、または−Ｓ−であるヘテロ原子と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルケニル、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキニル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルは、任意に、１つ以上のハロゲン原子で置換されており；
各Ｒ⁵は、独立して、Ｈ、（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル、（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルであり、前記（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基または前記（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルの１〜２０個の−ＣＨ₂−基は、各々任意に独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択される第１のヘテロ原子と交換され、前記第１のヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルの−ＣＨ₃基のいずれか１つ以上は、各々任意に独立して、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−ＯＲ⁴、及び−Ｓ（Ｒ⁴）からなる群から選択される第２のヘテロ原子基と交換され、前記第２のヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₃−Ｃ₂₀）シクロアルキル、（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルケニル、（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキニル、または（Ｃ₁−Ｃ₆₀）アルキルは、任意に１つ以上のハロゲン原子で置換されている、
前記化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項2】

Ｒ²が−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ₃である、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

Ｒ¹が−Ｚ−Ｘ−Ｙである、請求項１に記載の化合物。

【請求項4】

Ｒ¹が、Ｌ１〜Ｌ１０：

【化2】

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【化3】

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からなる群から選択される−Ｚ−Ｘ−Ｙである請求項３に記載の化合物であって、
ここで、各Ｔは、独立して、共有結合、（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、または（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔのいずれか１つ以上の−ＣＨ₂−基は、各々任意に独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択されるヘテロ原子基と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、または（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンは、任意に、１つ以上のハロゲン原子で置換されており；
各Ｑは、独立して、共有結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｎ（Ｒ⁴）Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＯ₂−、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、または−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）₂−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択されるヘテロ原子基であり、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており；
各Ｒ⁴は、独立して、Ｈ、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルで
あり、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル及び（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、各々任意に独立して、−Ｏ−、または−Ｓ−であるヘテロ原子基と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキルまたは（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルは、任意に、１つ以上のハロゲン原子で置換されており；および
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である、前記化合物。

【請求項5】

前記Ｘがジスルフィド結合を含む、請求項４に記載の化合物。

【請求項6】

式（Ｃ−１）、（Ｃ−２）、（Ｃ−３）、もしくは（Ｃ４）：

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

の化合物またはその医薬的に許容される塩であって、
式中、
ｎは１、２、または３であり、
Ｗは、存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_m−であり、
各Ｔは、独立して、共有結合、（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、または（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１つ以上の−ＣＨ₂−基は、各々任意に独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択されるヘテロ原子基と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、または（Ｃ₂−
Ｃ₁₀）アルキニレンは、任意に、１つ以上のハロゲン原子で置換されており；
各Ｑは、独立して、共有結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｎ（Ｒ⁴）Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｎ（Ｒ⁴）−、−ＣＯ₂−、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、または−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）₂−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択されるヘテロ原子基であり、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており；
各Ｒ⁴は、独立して、Ｈ、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル及び（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、各々任意に独立して、−Ｏ−、または−Ｓ−であるヘテロ原子基と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキルまたは（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルは、任意に、１つ以上のハロゲン原子で置換されており；および
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項7】

式（Ｅ）：

【化5】

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の式を有する請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩であって、
式中、
ｎは１、２、または３であり、
Ｗは、存在しないか、またはペプチドであり、
Ｌは、−（Ｔ−Ｑ−Ｔ−Ｑ）_m−であり、
各Ｔは、独立して、共有結合、（Ｃ₁−Ｃ₁₀）アルキレン、（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルケニレン、もしくは（Ｃ₂−Ｃ₁₀）アルキニレンであり、前記Ｔの１つ以上の−ＣＨ₂−基は、各々任意に独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択されるヘテロ原子基と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており；
各Ｑは、独立して、共有結合、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｎ（Ｒ⁴）Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁴）−、−Ｎ（Ｒ⁴）ＣＯ₂−、−ＣＨ₂−、ヘテロアリール、または−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）₂−、及び−Ｎ（Ｒ⁴）−からなる群から選択されるヘテロ原子基であり、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており；
各Ｒ⁴は、独立して、Ｈ、（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル、または（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルであり、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル及び（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルの１〜６個の−ＣＨ₂−基は、各々任意に独立して、−Ｏ−、または−Ｓ−であるヘテロ原子基と交換され、前記ヘテロ原子基のいずれか２つは、少なくとも２つの炭素原子で離間されており、前記（Ｃ₁−Ｃ₂₀）アルキル及び（Ｃ₃−Ｃ₆）シクロアルキルは、任意に、１つ以上のハロゲン原子で置換されており；および
各ｍは、独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、
２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０である、前記化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項8】

前記化合物が、式

【化6】

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を有し、ｎ’が１または２である、請求項７に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。

【請求項9】

Ｙが、Ｃａｓ９リボ核タンパク質であり、これが、（１）ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）及びトランス活性型ｃｒＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含むデュアルガイドＲＮＡ配列、またはシングルガイドＲＮＡ配列（ｓｇＲＮＡ）のいずれかを含む認識要素を含む第一の要素であって、前記ガイド配列は、発現時、前記Ｃａｓ９リボ核タンパク質の配列特異的結合を標的配列に向けるものであり、任意に１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む前記第一の要素、ならびに（２）Ｃａｓ９タンパク質ならびに任意に１つ以上の核局在配列（ＮＬＳ）及び任意に１つ以上の蛍光タンパク質、ならびに１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む第二の要素を含み、前記第一の要素が前記第二の要素に会合している、請求項１に記載の化合物。

【請求項10】

Ｙが、１つまたは２つのＮＬＳを含み、前記ＮＬＳの各々が、アミノ酸配列ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）を含む、請求項９に記載の化合物。

【請求項11】

前記Ｙが、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、またはＡ．ｅｂｒｅｕｓ由来のＣａｓ９タンパク質に対して、少なくとも７５パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む、請求項１に記載の化合物。

【請求項12】

前記Ｙが、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９（野生型）（配列番号８４８）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ（配列番号８４９）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９変異体Ｍ１Ｃ及びＣ８０Ｓ（配列番号８５０）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｄ１０Ａ（配列番号８５１）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｈ８４０Ａ（配列番号８５２）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ニッカーゼ変異体Ｅ９２３Ｐ及びＴ９２４Ｐ（配列番号８５３）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ ｅｂｒｅｕｓ Ｃａｓ９（配列番号８５４）、酸性鉱山排水細菌Ｇａ００５２１６１＿ＪＧＩ Ｃａｓ９（配列番号８５５）、Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ Ｃａｓ９ヌル変異体Ｄ１０Ａ及びＨ８４０Ａ（配列番号１０２７）、ならびにウラン鉱山細菌ＦＷ１０６＿ＪＧＩ Ｃａｓ９（配列番号８５６）から選択される配列に対して、少なくとも７５パーセントのアミノ酸配列同一性であるＣａｓ９タンパク質を含む、請求項１に記載の化合物。

【請求項13】

前記化合物が、さらにエンドソーム脱出剤を含む、請求項１に記載の化合物。

【請求項14】

前記エンドソーム脱出剤が、ペプチドｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０１２）である、請求項１３に記載の化合物。

【請求項15】

前記エンドソーム脱出剤が、ペプチドＫＡＬＡ：ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＣＥＡ（配列番号８６９）である、請求項１３に記載の化合物。

【請求項16】

請求項１に記載の化合物及びエンドソーム脱出剤を含む医薬組成物であって、前記化合物及び前記エンドソーム脱出剤が、前記医薬組成物を形成するために共インキュベートされる、前記医薬組成物。

【請求項17】

請求項１に記載の化合物、及び医薬的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤を含む、医薬組成物。

【請求項18】

ＹがＣａｓ９リボ核タンパク質またはＣａｓ９タンパク質である、請求項１に記載の化合物。

【請求項19】

Ｙ⁺が正に荷電したＣａｓ９タンパク質である、請求項１に記載の化合物。

【請求項20】

Ｙ^-が負に荷電したＣａｓ９リボ核タンパク質である、請求項１に記載の化合物。

【請求項21】

Ｚが共有結合である、請求項１に記載の化合物。

【請求項22】

Ｑが１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、ピリジニル及び１，２，３，４−テトラゾリルからなる群から選択されるヘテロアリールである、請求項４に記載の化合物。

【請求項23】

Ｗがエンドソーム溶解ペプチドおよび核局在ペプチドからなる群から選択される、請求項７に記載の化合物。

【請求項24】

ｎが３である、請求項７に記載の化合物。

【請求項25】

第一の要素が、ｃｒＲＮＡおよびｔｒａｃｒＲＮＡを含むデュアルガイドＲＮＡ配列を含む認識要素を含み、ｔｒａｃｒＲＮＡが配列ＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＡＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣ ＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣＵＵＵＵ（配列番号１０２８）を含む、請求項９に記載の化合物

【請求項26】

ｔｒａｃｒＲＮＡ配列の最初の３個のヌクレオチド塩基が２’−Ｏ−メチルまたは２’−フルオロ修飾された糖である、請求項２５に記載の化合物。

【請求項27】

Ｙが１つまたは２つのＮＬＳを含み、ＮＬＳの各々が、ＰＫＫＫＲＫＶ（配列番号８３０）、ＫＲＰＡＡＴＫＫＡＧＱＡＫＫＫＫ（配列番号８３１）、ＰＡＡＫＲＶＫＬＤ（配列番号８３２）、ＲＱＲＲＮＥＬＫＲＳＰ（配列番号８３３）、ＮＱＳＳＮＦＧＰＭＫＧＧＮＦＧＧＲＳＳＧＰＹＧＧＧＧＱＹＦＡＫＰＲＮＱＧＧＹ（配列番号８３４）、ＲＭＲＩＸＦＫＮＫＧＫＤＴＡＥＬＲＲＲＲＶＥＶＳＶＥＬＲＫＡＫＫＤＥＱＩＬＫＲＲＮＶ（配列番号８３５）、ＶＳＲＫＲＰＲＰ（配列番号８３６）、ＰＰＫＫＡＲＥＤ（配列番号８３７）、ＰＱＰＫＫＫＰＬ（配列番号８３８）、ＳＡＬＩＫＫＫＫＫＭＡＰ（配列番号８３９）、ＤＲＬＲＲ（配列番号８４０）、ＰＫＱＫＫＲＫ（配列番号８４１）、ＲＫＬＫＫＫＩＫＫＬ（配列番号８４２）、ＲＥＫＫＫＦＬＫＲＲ（配列番号８４３）、ＫＲＫＧＤＥＶＤＧＶＤＥＶＡＫＫＫＳＫＫ（配列番号８４４）、ＲＫＣＬＱＡＧＭＮＬＥＡＲ
ＫＴＫＫ（配列番号８４５）、ＭＡＰＫＫＫＲＫＶＧＩＨＲＧＶＰ（配列番号１０３５）、及びＰＫＫＫＲＫＶＥＤＰＫＫＫＲＫＶＤ（配列番号１０３６）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項９に記載の化合物。

【請求項28】

Ｙが、ペプチドｐｐＴＧ２１：ＧＬＦＨＡＬＬＨＬＬＨＳＬＷＨＬＬＬＨＡ（配列番号１０１２）およびペプチドＫＡＬＡ：ＷＥＡＫＬＡＫＡＬＡＫＡＬＡＫＨＬＡＫＡＬＡＫＡＬＫＡＣＥＡ（配列番号８６９）から成る群から選択される１つ以上のエンドソーム脱出剤を含む、請求項９に記載の化合物。

【請求項29】

式（Ｆ−１）または（Ｆ−２）：

【化7】

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の式を有し、ｎが１、２または３である、請求項１に記載の化合物。

【請求項30】

ｎが３である、請求項２９に記載の化合物。