特許 5663699 ピラゾール誘導体及びその医薬用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5663699

(24)【登録日】2014年12月12日

(45)【発行日】2015年2月4日

(54)【発明の名称】ピラゾール誘導体及びその医薬用途

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/7056 20060101AFI20150115BHJP

   A61P 1/10 20060101ALI20150115BHJP

   C07H 17/02 20060101ALN20150115BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/7056

   A61P1/10

   !C07H17/02

【請求項の数】5

【全頁数】15

(21)【出願番号】特願2014-514708(P2014-514708)

(86)(22)【出願日】2013年5月2日

(86)【国際出願番号】JP2013062755

(87)【国際公開番号】WO2013168671

(87)【国際公開日】20131114

【審査請求日】2014年8月19日

(31)【優先権主張番号】特願2012-105847(P2012-105847)

(32)【優先日】2012年5月7日

(33)【優先権主張国】JP

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】000104560

【氏名又は名称】キッセイ薬品工業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100151231

【弁理士】

【氏名又は名称】柳 伸子

(72)【発明者】

【氏名】伊佐治 正幸

(72)【発明者】

【氏名】竹村 理明

(72)【発明者】

【氏名】伊澤 英俊

(72)【発明者】

【氏名】布袋 之彦

(72)【発明者】

【氏名】宮下 格

【審査官】 上條 のぶよ

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００９／０８４５３１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２００９／１２８４２１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 Diabetes Journal，２００３年，Vol.31, No.3，p.86-91

【文献】 モダンフィジシャン，１９９８年，Vol.18, No.6，p.717-719

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／００−３３／４４

Ｃ０７Ｈ １７／０２

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

３−（３−｛４−［３−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル］−３−メチルフェノキシ｝プロピルアミノ）−２，２−ジメチルプロピオンアミド又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する便秘の予防又は治療用医薬。

【請求項2】

ビス［３−（３−｛４−［３−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル］−３−メチルフェノキシ｝プロピルアミノ）−２，２−ジメチルプロピオンアミド］・モノセバシン酸塩を有効成分として含有する請求項１記載の医薬。

【請求項3】

便秘が機能性便秘である、請求項１又は２記載の医薬。

【請求項4】

機能性便秘が慢性特発性便秘症である、請求項３記載の医薬。

【請求項5】

機能性便秘が薬物性便秘である、請求項３記載の医薬。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、便秘の予防又は治療に有用な医薬に関する。

【0002】

さらに詳しくは、本発明は、式：

【化1】

で表される化合物（化学名：３−（３−｛４−［３−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル］−３−メチルフェノキシ｝プロピルアミノ）−２，２−ジメチルプロピオンアミド；以下、「化合物１」と略称する場合がある）又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する便秘の予防又は治療に有用な医薬に関する。

【背景技術】

【0003】

通常、排便は習慣的に行われ、生活に支障をきたすことはない。しかし、何らかの原因で十分量の快適な排便が困難となり、身体的苦痛を伴う状態となる。これが便秘とよばれる。便秘は、一般に、排便時のいきみ、硬便、排便回数の低下、残便感、腹部膨満感、消化管全体又は結腸通過時間の延長等の症状を伴う。

【0004】

便秘は、病歴の期間により急性便秘と慢性便秘に分類される。また、便秘は、その原因により器質性便秘と機能性便秘に分類される。器質性便秘は、大腸がん、大腸ポリープ、子宮筋腫などによって生じる消化管の狭窄、閉塞などの器質的障害が原因で排便が困難な状態である。機能性便秘は、更に症候性便秘、薬物性便秘及びその他の便秘に分類される。症候性便秘は、消化器疾患以外の疾患によって続発的に起こる便秘である。薬物性便秘は、薬物によって二次的に起こる便秘であり、オピオイド等の腸運動抑制作用を有する薬物や抗コリン作用を有する薬物等の投与により起こることが知られている。症候性便秘でも薬物性便秘でもない機能性便秘が最も多く、慢性特発性便秘症（chronic idiopathic constipation:ＣＩＣ）ともよばれ、食生活や生活環境の変化、精神的要因など様々な原因で発症する。慢性便秘症は、便秘の原因により大腸通過遅延型と排便機能障害型に分類されることもある。大腸通過遅延型では大腸平滑筋の収縮力の低下や蠕動性の減弱などにより、近位から遠位大腸への便の移送が障害されている状態、排便機能障害型では直腸まで便は移送されるにも関わらず、便の排出機能が障害され排便ができない状態である。便秘型過敏性腸症候群（ＩＢＳ−Ｃ）は、消化管に器質的な変化が無く、腹痛・腹部不快感と便通異常を主体とする消化器症状が持続する便秘であり、機能性便秘の患者の一部は、ＩＢＳ−Ｃに分類されることもある（非特許文献１〜３参照）。

【0005】

便秘の治療としては、生活療法、薬物療法、行動療法及び手術療法がある。治療の第一選択としては、不規則な食事習慣の是正、排便習慣の是正、十分な繊維食品及び水分摂取などの生活療法が基本となる。これらの生活療法を実施しても、便秘症状が改善しない場合、薬物療法が実施される。

【0006】

薬物療法には原則として、腸内容物の容積を増加させるような浸透性下剤、膨張性下剤など、作用が穏徐な薬剤から使用される。効果が不十分であれば、刺激性下剤、消化管運動機能改善薬などが使用される。浸透性下剤や膨張性下剤は習慣性が少なく長期投与も可能であるが、腎障害や血中電解質濃度異常、腎障害時の高マグネシウム血症等に注意が必要である。また、刺激性下剤は、連続投与で習慣性となったり、腸管粘膜に炎症変化をきたすことなどが知られている。

【0007】

便秘の新しい治療薬としてルビプロストンが知られている（非特許文献４参照）。ルビプロストンは国内において、慢性便秘症（器質的疾患による便秘を除く）の治療薬として販売され、また、米国において、慢性特発性便秘症及び便秘型過敏性腸症候群の治療薬として販売され、オピオイド誘発性便秘症（ＯＩＣ）の治療薬として承認されている。

【0008】

このように、現在でも、便秘の予防又は治療に用いられる薬剤が十分とはいえず、副作用が少ない、新しい作用機序を有する便秘の予防又は治療薬が強く求められている。

【0009】

化合物１又はその薬理学的に許容される塩は、糖尿病、耐糖能異常、空腹時血糖異常、糖尿病性合併症や肥満症等の高血糖症に起因する疾患の予防又は治療薬として有用なことが知られている（特許文献１〜３参照）。

【0010】

しかしながら、化合物１又はその薬理学的に許容される塩が便秘の予防又は治療薬として有用であることは知られていない。

【0011】

【特許文献1】国際公開第２００４／０１８４９１号

【特許文献2】国際公開第２００９／０８４５３１号

【特許文献3】国際公開第２００９／１２８４２１号

【0012】

【非特許文献1】北洞哲治、外４名、「別冊 日本臨床 新領域別症候群シリーズ」、２００９年、第１２号、ｐ．４２２−４２７

【非特許文献2】小森広嗣、外４名、「別冊 日本臨床 新領域別症候群シリーズ」、２００９年、第１２号、ｐ．４３３−４３５

【非特許文献3】George F. Longstrethら、「Gastroenterology」、２００６年、第１３０巻、ｐ．１４８０−１４９１

【非特許文献4】S．Fukudoら、「Neurogastroenterology and Motility」、２０１１年、第２３巻、ｐ．５４４−e２０５

【発明の開示】

【発明が解決しようとする課題】

【0013】

本発明は、便秘の予防又は治療に有用な医薬等を提供することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0014】

本発明は、化合物１又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する便秘の予防又は治療用医薬に関する。

【0015】

すなわち、本発明は、
〔１〕３−（３−｛４−［３−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル］−３−メチルフェノキシ｝プロピルアミノ）−２，２−ジメチルプロピオンアミド又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する便秘の予防又は治療用医薬；
〔２〕ビス［３−（３−｛４−［３−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル］−３−メチルフェノキシ｝プロピルアミノ）−２，２−ジメチルプロピオンアミド］・モノセバシン酸塩を有効成分として含有する前記〔１〕記載の医薬；
〔３〕便秘が機能性便秘である、前記〔１〕又は〔２〕記載の医薬；
〔４〕機能性便秘が慢性特発性便秘症である、前記〔３〕記載の医薬；
〔５〕機能性便秘が薬物性便秘である、前記〔３〕記載の医薬；等に関する。

【発明の効果】

【0016】

本発明の医薬は、排便回数の増加作用等を有し、便秘の予防又は治療に有用である。

【図面の簡単な説明】

【0017】

【図1】実施例１の投与後２４時間の排便回数の結果を示す。図中、棒グラフは左から、正常群（Ｎｏｒｍａｌ）、対照群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）、化合物２の１ｍｇ／ｋｇ投与群、化合物２の３ｍｇ／ｋｇ投与群、化合物２の１０ｍｇ／ｋｇ投与群、ルビプロストンの０．１ｍｇ／ｋｇ投与群、ルビプロストンの０．７ｍｇ／ｋｇ投与群の値をそれぞれ示す。縦軸は、排便回数（１日３回の観察で排便が観察された回数）（各群１０例の平均値及び標準誤差）を示す。*は、対照群に比べて有意な差があることを示す。

【発明を実施するための形態】

【0018】

化合物１の薬理学的に許容される塩としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、リン酸などの鉱酸との酸付加塩、ギ酸、酢酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、プロピオン酸、クエン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、酪酸、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、炭酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、安息香酸、セバシン酸、パモ酸等の有機酸との酸付加塩等を挙げることができる。より好ましくは、化合物１のモノセバシン酸塩（化学名：ビス［３−（３−｛４−［３−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル］−３−メチルフェノキシ｝プロピルアミノ）−２，２−ジメチルプロピオンアミド］・モノセバシン酸塩；以下、「化合物２」と略称する場合がある）、化合物１の１／２フマル酸塩二水和物（化学名：３−（３−｛４−［３−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−４−イルメチル］−３−メチルフェノキシ｝プロピルアミノ）−２，２−ジメチルプロピオンアミド・１／２フマル酸塩二水和物；以下、「化合物３」と略称する場合がある）等が挙げられる。

【0019】

本発明の化合物１又はその薬理学的に許容される塩には、薬理学的に許容される溶媒（例えば、水、エタノール等）との溶媒和物も含まれる。

【0020】

本発明の化合物１又はその薬理学的に許容される塩は、特許文献１〜３に記載された方法又はそれに準じた方法で製造することもできる。

【0021】

本発明の化合物１は、適宜プロドラッグに変換して使用してもよい。例えば、化合物１のプロドラッグは、相当するハロゲン化物等のプロドラッグ化試薬を用いて、常法により、化合物１における水酸基、アミノ基及びピラゾール環上のアミノ基から選択される１以上の任意の基に、常法に従い適宜プロドラッグを構成する基を導入した後、所望に応じ、適宜常法に従い単離精製することにより製造することもできる。プロドラッグを構成する基としては、例えば、「医薬品の開発」（廣川書店、１９９０年）第７巻 ｐ．１６３−１９８に記載の基が挙げられる。

【0022】

本発明の医薬は、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、細粒剤、ドライシロップ剤等の経口剤、液剤、軟膏剤、坐剤等の非経口剤等の種々の形態で投与することもできる。

【0023】

本発明の医薬は、有効成分を適当な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤等の製剤担体と適宜混合又は希釈・溶解し、常法により種々の剤形のものを製造することもできる。

【0024】

本発明の医薬は、便秘の治療のために用いられる他の薬剤と組み合わせて投与することもできる。他の薬剤としては、例えば、カルメロースナトリウム等の膨張性下剤、酸化マグネシウム等の浸透性下剤、ピコスルファートナトリウム水和物等の刺激性下剤、グリセリン等の浣腸液、炭酸水素ナトリウム・無水リン酸二水素ナトリウム等の坐剤、トリメブチンマレイン酸塩等の消化管運動調律剤、ルビプロストン等のクロライドチャネル活性化剤、リナクロチド等のグアニル酸シクラーゼ受容体作動薬、メチルナルトレキソン等のμオピオイド受容体拮抗薬、Elobixibat等の胆汁酸トランスポーター阻害剤、プルカロプリド等のセロトニン４受容体作動薬等を挙げることができる。
本発明の医薬と上記の薬剤を組み合わせて使用する場合、本発明は、単一の製剤としての同時投与、及び別個の製剤としての同一又は異なる投与経路による同時投与、及び別個の製剤としての同一又は異なる投与経路による間隔をずらした投与のいずれの投与形態も含む。

【0025】

本発明の有効成分の投与量は、患者の体重、年齢、性別、疾患の程度等に応じて適宜定めればよい。成人に対する投与量は、経口投与の場合、例えば、０．１〜１６０ｍｇ／日、１〜６０ｍｇ／日、２〜６０ｍｇ／日、２〜４０ｍｇ／日、２〜２０ｍｇ／日又は２〜１０ｍｇ／日の範囲で定めることもでき、１日投与量を１回、２回又は３回に分けて投与してもよい。
また、例えば、１ｍｇを1日１回、１ｍｇを1日２回、１ｍｇを1日３回、２ｍｇを1日１回、２ｍｇを1日２回、２ｍｇを1日３回、２．５ｍｇを1日１回、２．５ｍｇを1日２回、２．５ｍｇを1日３回、５ｍｇを1日１回、５ｍｇを1日２回、５ｍｇを1日３回、１０ｍｇを1日１回、１０ｍｇを1日２回、１０ｍｇを1日３回、１５ｍｇを1日１回、１５ｍｇを1日２回、１５ｍｇを1日３回、２０ｍｇを１日１回、２０ｍｇを1日２回、２０ｍｇを1日３回、４０ｍｇを１日１回、４０ｍｇを1日２回、８０ｍｇを１日１回又は８０ｍｇを1日２回投与することができる。
また、初回投与量を、例えば、１ｍｇ、２ｍｇ、２．５ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ又は２０ｍｇから選択し、患者の感受性、疾患の程度等に応じて、その後漸増又は漸減することもできる。
非経口投与の場合、例えば、０．０５〜８０ｍｇ／日の範囲で定めることもできる。
本発明の医薬は、食前、食後又は食事とともに投与することもでき、食後投与が好ましい。

【0026】

本発明において、機能性便秘は、便秘のうち、器質性便秘以外の便秘をいう。慢性特発性便秘症（ＣＩＣ）は、機能性便秘のうち、症候性便秘及び薬物性便秘以外の便秘をいい、弛緩性便秘、痙攣性便秘及び直腸性便秘等が含まれる。
また、本発明において、慢性便秘症には、慢性の器質性便秘及び慢性の機能性便秘が含まれる。すなわち、慢性便秘症には、慢性特発性便秘症（ＣＩＣ）、症候性便秘、薬物性便秘、便秘型過敏性腸症候群（ＩＢＳ−Ｃ）及び慢性の器質性便秘が含まれる。

【0027】

症候性便秘は、機能性便秘のうち、消化器疾患以外の疾患によって続発的に起こる便秘をいい、甲状腺機能低下症、褐色細胞腫、下垂体機能低下症、副甲状腺機能亢進症等の内分泌疾患、アミロイドーシス、尿毒症等の代謝性疾患、鉛中毒、ヒ素中毒等の中毒性疾患、パーキンソン病、脳血管障害、脳腫瘍、多発性硬化症等の神経疾患、強皮症等の膠原病、肛門周囲膿瘍等の肛門疾患等により起こる便秘が含まれる。

【0028】

薬物性便秘は、機能性便秘のうち、薬物によって二次的に起こる便秘をいい、オピオイド等の腸運動抑制作用を有する薬剤や抗コリン作用を有する薬物等の投与により起こる便秘（例えば、オピオイド誘発性便秘）が含まれる。

【0029】

便秘型過敏性腸症候群（ＩＢＳ−Ｃ）は、消化管に器質的な変化が無く、腹痛・腹部不快感と便通異常を主体とする消化器症状が持続する便秘をいい、上記機能性便秘に含まれる。

【0030】

機能性便秘の診断は、例えば、ＲｏｍｅIII診断基準に基づいて行うこともできる（非特許文献３、特にｐ．１４８６参照）。

【0031】

ＩＢＳ−Ｃの診断は、例えば、前記ＲｏｍｅIII診断基準に基づいて行うこともできる（非特許文献３、特にｐ．１４８１−１４８２参照）。

【0032】

本発明の医薬は、便秘の症状（排便回数、残便感、いきみ、便形状、腹部膨満、腹部不快感等）の一又は二以上を改善することができる。

【実施例】

【0033】

以下に、本発明を実施例にもとづいてさらに詳細に説明するが、本発明はその内容に限定されるものではない。

【実施例1】

【0034】

便秘モデルにおける改善効果１
１．投与液の調製方法
（１）被験物質の調製方法
化合物２を秤量し調製濃度が０．５, １．５及び５ ｍｇ／ｍＬとなるように蒸留水に溶解して調製した。
（２）対照物質の調製方法
ルビプロストン（ＴＬＣ Ｐｈａｒｍａ Ｃｈｅｍ）を秤量し調製濃度が０．０５及び０．３５ ｍｇ／ｍＬとなるように０．５％メチルセルロースに懸濁して調製した。
（３）モデル作製用試薬の調製方法
ロペラミド塩酸塩（和光純薬工業株式会社）を動物ごとに０．３，０．５，１．０，２．０，４．０又は８．０ｍｇ／ｋｇとなるように秤量し、ゼラチンカプセルへ充填した。
（４）混合炭水化物水溶液の調製方法
可溶性でんぷん:スクロース:ラクトース一水和物が６:３:１の割合になるように秤量し、調製量の８割程度の蒸留水を加えて加熱溶解した後、蒸留水を加えて０．４ ｇ／ｍＬ混合炭水化物水溶液を調製した。
２．試験方法
（１）ロペラミド誘発イヌ便秘モデル
ゼラチンカプセルに充填したロペラミド塩酸塩を、イヌ（ビーグル、雄、１３〜１４ヶ月齢、１０頭、北山ラベス株式会社）に経口投与した。投与量は０．３ ｍｇ／ｋｇから漸増し、個体ごとに排便状況を評価して２．０, ４．０又は８．０ ｍｇ／ｋｇ に設定した。ロペラミド塩酸塩処置時の２４時間糞便湿重量が無処置時（正常群）の２４時間糞便湿重量と比較し顕著に低い動物（処置時の糞便量＜（無処置時糞便量の平均値−２×標準偏差））を便秘モデル動物として試験に供した。
（２）実験操作
試験は完全クロスオーバー試験として実施した。各処置の間に５日間以上のウォッシュアウト期間を設け、糞便性状の回復を確認し、次の処置を実施した。
各処置の１日目及び２日目の午前９時前後にロペラミド塩酸塩を充填したゼラチンカプセルを経口投与した。
２日目の午後４時前後に注射筒及び経口カテーテルを用いて、化合物２（１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ）、ルビプロストン（０．１ｍｇ／ｋｇ又は０．７ｍｇ／ｋｇ）、又は蒸留水（２ ｍＬ／ｋｇ）を経口投与し、続けて０．４ ｇ／ｍＬ混合炭水化物水溶液を５０ ｍＬ／ｂｏｄｙ経口投与した。投与１７時間後、２１時間後及び２４時間後に糞便を観察し、投与後２４時間の糞便を採取秤量し、糞便湿重量とした。排便回数は、各観察点において糞便が観察された場合、糞便量の多寡に関わらず１回排便があったと計測した。糞便はBristol Stool Form Scaleに準じて便性状を７段階で採点した。採取した糞便は十分乾燥させた後秤量し、糞便乾燥重量とした。
（３）データ処理
統計解析はBartlett法により分散の一様性の検定を行い、分散が一様の場合は、蒸留水を投与した群（対照群）と各投与群との間でDunnett法により多重比較を、分散が一様でない場合にはSteel型多重比較を行った。いずれも有意水準５％未満をもって有意な差があるとした。
３．結果
試験で得られた各データを統計学的に評価した。各群１０例の投与後２４時間の糞便湿重量、糞便乾燥重量及び排便回数の平均値を、表１〜表３及び図１に示す。化合物２及びルビプロストンは、いずれも糞便湿重量（表１）、乾燥重量（表２）及び排便回数（表３及び図１）を用量依存的に増加させ、それらの作用は化合物２の３ ｍｇ／ｋｇ以上、及びルビプロストン０．１ ｍｇ／ｋｇ以上の投与群において対照群に比べて有意に高かった。このとき、軟便及び下痢の増加は観察されなかった。

【0035】

実施例１の結果から、便秘モデルにおいて、化合物２は糞便量及び排便回数の増加作用を有し、便秘の予防又は治療薬として有用であることが示唆された。

【0036】

【表1】

【0037】

【表2】

【0038】

【表3】

【実施例2】

【0039】

便秘モデルにおける改善効果２
１．投与液の調製方法
（１）被験物質の調製方法
化合物２を秤量し調製濃度がフリー体として３, １０及び３０ ｍｇ／ｍＬとなるように蒸留水に溶解して調製した。
（２）対照物質の調製方法
ルビプロストン調製媒体として０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）を用いた。ルビプロストンを秤量し調製濃度が１, ３及び１０ ｍｇ／ｍＬとなるように０．５%ＭＣに懸濁して調製した。
（３）陽性対照物質の調製方法
硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ_４）（和光純薬株式会社）を秤量し調製濃度が２００ ｍｇ／ｍＬとなるように蒸留水に溶解して調製した。
（４）混合炭水化物水溶液の調製方法
可溶性でんぷん:スクロース:ラクトース一水和物が６:３:１の割合になるように秤量し、調製量の８割程度の蒸留水を加えて加熱溶解した後、蒸留水を加えて０．４ ｇ／ｍＬ混合炭水化物水溶液を調製した。
２．低繊維飼料
文献（Kakino et al. BMC Complementary and Alternative Medicine 2010, 10：68）に基づいて低繊維飼料を作製した。
３．試験方法
（１）低繊維飼料給餌ラット便秘モデル作製
ラットに低繊維飼料を１−２週間給餌し、便秘状態にした。２４時間糞便重量について、通常餌給餌群（正常群）の２４時間糞便重量と比較し顕著に低い動物（低繊維飼料給餌時糞便量＜（通常餌給餌群糞便量の平均値−２×標準偏差））を便秘状態と判断し、さらに１週間低繊維飼料給餌を続けた動物を慢性便秘モデルとして試験に供した。
（３）実験操作
午前９時前後に１ｍＬ注射筒及び胃ゾンデを用いて、化合物２（フリー体として３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ又は３０ｍｇ／ｋｇ）、ルビプロストン（１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇ）、ＭｇＳＯ_４（２０００ｍｇ／ｋｇ）又は媒体（蒸留水：対照群１、０．５％ＭＣ：対照群２）を経口投与した。対照群１及び化合物２投与群では、続けて０．４ ｇ／ｍＬ混合炭水化物水溶液を２ ｍＬ／ｂｏｄｙ経口投与した。通常餌給餌群には、蒸留水を投与した。試験群と例数を表４に示す。
投与４, ８, １２及び２４時間後に糞便を観察し、糞便を採取秤量し糞便重量とした。各採取時間における糞便重量を合計したものを投与後２４時間の糞便重量とした。

【0040】

【表4】

【0041】

（４）データ処理
統計解析はBartlett法により分散の一様性の検定を行い、分散が一様の場合は対照群１と化合物２、又は対照群２とルビプロストン投与群との間でそれぞれDunnett法により多重比較を、分散が一様でない場合にはSteel型多重比較を行った。いずれも有意水準５％未満をもって有意な差があるとした。
４．結果
通常餌給餌群（i）、化合物２及び硫酸マグネシウム投与試験（ii）及びルビプロストン投与試験（iii）で得られたデータを複合し集計した結果を表５に示す。
化合物２及びルビプロストンは、いずれも投与後２４時間糞便重量を用量依存的に増加させ、それらの作用は化合物２の１０ ｍｇ／ｋｇ以上及びルビプロストン１０ ｍｇ／ｋｇ投与群において各対照群と比較して有意であった。陽性対照であるＭｇＳＯ_４投与群でも糞便重量の増加が確認された。また、化合物２の１０ ｍｇ／ｋｇ以上、ルビプロストン３ ｍｇ／ｋｇ以上及びＭｇＳＯ_４投与群で水様便が認められた。

【0042】

実施例２の結果から、便秘モデルにおいて、化合物２は糞便量の増加作用を有し、便秘の予防又は治療薬として有用であることが示唆された。

【0043】

【表5】

【実施例3】

【0044】

健康成人男性を対象とした単回投与試験
１．試験方法
健康成人男性を対象として、化合物２の２，５，１０，２０，４０，８０，１６０ｍｇ（フリー体換算値）又はプラセボを朝食直前に単回経口投与した。化合物２の投与には、フリー体換算で１，５又は１０ｍｇ含有する錠剤を用いた。検査期間は、投与から投与４８時間後退院までとした。医師の診察の際、排便回数を調査し、便形状と所見から異常所見（下痢又は軟便）と判断した場合を有害事象（胃腸障害）とした。
２．結果
化合物２投与群で排便回数が増加し（表６）、８０ｍｇ群及び１６０ｍｇ群の多くの被験者で便形状がBristol Stool Form ScaleのType６又はType７と判定された。すなわち、化合物２は、ヒトにおいても便を軟化させ、排便回数を増加させることが示された。表７に胃腸障害として記録された腹部膨満、腹痛及び下痢の発現例数を示すが、程度は、いずれも軽度であった。

【0045】

【表6】

【0046】

【表7】

【実施例4】

【0047】

健康成人男性を対象とした反復投与試験
１．試験方法
健康成人男性を対象に、化合物２の２，５，１０，２０ｍｇ（フリー体換算値）、プラセボ又はミグリトール５０ｍｇを、投与１日目および投与１３日目は１日１回朝食直前、投与３日目〜投与１２日目は１日３回毎食直前に反復経口投与した。化合物２の投与には、フリー体換算で１，５又は１０ｍｇ含有する錠剤を用いた。投与１日目から投与１５日目を検査期間とした。医師の診察の際、排便回数を調査し、便形状と所見から異常所見（下痢又は軟便）と判断した場合を有害事象（胃腸障害）とした。なお、表８の排便回数は、１５日間の１日あたりの平均値（回／日）を表す。
２．結果
投与量の増加に伴って、Bristol Stool Form ScaleのType6又はType７の排便を有する被験者数及び回数の増加傾向がみられた。表９に胃腸障害として記録された下痢及び腹痛の発現例数を示すが、いずれも軽度であり、処置なく消失又は回復した。

【0048】

【表8】

【0049】

【表9】

【実施例5】

【0050】

慢性便秘症患者を対象とした臨床試験
１．試験方法
慢性便秘症患者７９例を対象に、２週間の経過観察後、化合物２又はプラセボを食後に４週間経口投与した。ＲｏｍｅIIIにおける機能性便秘の診断基準を参考に、長期に亘り一定症状を有する便秘患者を対象として選択した。
各投与群は、以下のとおりである。
２ｍｇ ＴＩＤ群：化合物２を２ｍｇ １日３回投与
（朝食後、昼食後、夕食後）
２０ｍｇ ＱＤ群：化合物２を２０ｍｇ １日１回投与
（朝食後）
２０ｍｇ ＢＩＤ群：化合物２を２０ｍｇ １日２回投与
（朝食後、夕食後）
２０ｍｇ ＴＩＤ群：化合物２を２０ｍｇ １日３回投与
（朝食後、昼食後、夕食後）
プラセボ群 ：プラセボ、１日３回投与
（朝食後、昼食後、夕食後）
化合物２の投与には、化合物２をフリー体換算で、１ｍｇ又は１０ｍｇ含有する錠剤を用いた。
日常生活に支障がある自発排便回数の増加又は便形状の軟化により、１回２錠での投与継続が困難であると被験者より訴えがあった場合は、医師の判断により、１又は２週来院時に１回１錠に減量し、投与を継続した。
２．評価項目
自発排便回数、快便回数（残便感の無い自発排便回数）、初回投与２４時間以内に排便した患者の割合、初回投与４８時間以内に排便した患者の割合、初回自発排便回数までの時間、便形状（Bristol Stool Form Scale）等を評価した。
３．結果
（１）被験者１
化合物２を２ｍｇ １日３回投与（２ｍｇ ＴＩＤ群）した被験者１において、観察期、投与1週、２週、３週及び４週の、週あたりの自発排便回数は、それぞれ、１．１、７．０、７．０、１１．０及び１０．５（回／週）を示した。
また、被験者１において、観察期、投与1週、２週、３週及び４週の、Bristol Stool Form Scaleは、それぞれ、１．５、３．７、３．７、４．１及び３．８（平均／週）を示した。
なお、初回排便までの時間は、５時間２０分であった。
（２）被験者２
化合物２を２０ｍｇ １日１回投与（２０ｍｇ ＱＤ群）した被験者２において、観察期、投与1週、２週及び３週の、週あたりの自発排便回数は、それぞれ、１．８、１２．０、１３．０及び８．０（回／週）を示した。
また、被験者２において、観察期、投与1週、２週及び３週の、Bristol Stool Form Scaleは、それぞれ、３．０、４．６、４．０及び３．４（平均／週）を示した。
なお、初回排便までの時間は、２４時間２０分であった。
（３）被験者３
化合物２を２０ｍｇ １日２回投与（２０ｍｇ ＢＩＤ群）から、投与１週経過時に、化合物２を１０ｍｇ １日２回投与に減量した被験者３において、観察期、投与1週、２週、３週及び４週の、週あたりの自発排便回数は、それぞれ、２．２、２１．０、６．０、６．０及び５．０（回／週）を示した。
また、被験者３において、観察期、投与1週、２週、３週及び４週の、Bristol Stool Form Scaleは、それぞれ２．０、５．９、４．０、４．３及び４．２（平均／週）を示した。
なお、初回排便までの時間は、１時間２０分であった。

【0051】

実施例５の結果から、慢性便秘症患者において、化合物２は自発排便を促進し、便形状を改善する効果を有し、慢性便秘症の治療薬として有用であることが示された。なお、化合物２の投与群において、低血糖を発現した例は、認められなかった。

【産業上の利用可能性】

【0052】

本発明の医薬は、便秘の予防又は治療薬として極めて有用である。

【図1】