特許 5666578 ＢＡＣＥ阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5666578

(24)【登録日】2014年12月19日

(45)【発行日】2015年2月12日

(54)【発明の名称】ＢＡＣＥ阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 513/04 20060101AFI20150122BHJP

   A61K 31/542 20060101ALI20150122BHJP

   A61K 31/5415 20060101ALI20150122BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20150122BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20150122BHJP

【ＦＩ】

   C07D513/04 371

   A61K31/542

   A61K31/5415

   A61P25/28

   A61P43/00 111

【請求項の数】7

【全頁数】86

(21)【出願番号】特願2012-519660(P2012-519660)

(86)(22)【出願日】2010年7月6日

(65)【公表番号】特表2012-532874(P2012-532874A)

(43)【公表日】2012年12月20日

(86)【国際出願番号】US2010041034

(87)【国際公開番号】WO2011005738

(87)【国際公開日】20110113

【審査請求日】2013年7月1日

(31)【優先権主張番号】61/224,241

(32)【優先日】2009年7月9日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】594197872

【氏名又は名称】イーライ リリー アンド カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100068526

【弁理士】

【氏名又は名称】田村 恭生

(74)【代理人】

【識別番号】100100158

【弁理士】

【氏名又は名称】鮫島 睦

(74)【代理人】

【識別番号】100138900

【弁理士】

【氏名又は名称】新田 昌宏

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(74)【代理人】

【識別番号】100176474

【弁理士】

【氏名又は名称】秋山 信彦

(72)【発明者】

【氏名】ジェイムズ・エドマンド・オーディア

(72)【発明者】

【氏名】ダスティン・ジェイムズ・マーゴット

(72)【発明者】

【氏名】チョンシェン・エリック・シー

(72)【発明者】

【氏名】グラント・マシューズ・ボート

(72)【発明者】

【氏名】ブライアン・モーガン・ワトソン

(72)【発明者】

【氏名】レオナード・ラリー・ウィンロスキ・ジュニア

【審査官】 前田 憲彦

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００９／０９１０１６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 米国特許出願公開第２０１０／００９３９９９（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２００９／０４０３３１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２００８／１３３２７３（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ ５１３／００

Ａ６１Ｋ ３１／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下式化合物：

【化1】

Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド、またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項2】

請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と併せて含む医薬製剤。

【請求項3】

１つ以上の他の治療剤をさらに含む、請求項２に記載の医薬製剤。

【請求項4】

治療に使用するための請求項２または３に記載の医薬製剤。

【請求項5】

アルツハイマー病を治療するための医薬を製造するための、請求項１に記載の化合物あるいはその薬学的に許容可能な塩の使用。

【請求項6】

下式化合物：

【化2】

Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド。

【請求項7】

請求項６に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を、薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と併せて含む医薬製剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、アルツハイマー病ならびにアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の神経毒かつ高い凝集ペプチドセグメントである、アミロイドβ（Ａβ）ペプチドに関連する他の疾患および障害を治療する分野である。β−セクレターゼまたはβ部位アミロイド前駆体タンパク質切断酵素（ＢＡＣＥ）の完全または部分的阻害は、マウスモデルにおいてプラーク関連およびプラーク依存性病変に対して顕著な効果を有することが示されており、Ａβレベルの低い減少でさえ、プラーク断面積およびシナプス欠損において長期間の顕著な減少を生じる場合があることが示唆されており、従って顕著な治療有効性を与える。

【背景技術】

【0002】

現在記載されているＢＡＣＥ阻害剤はペプチド模倣剤の遷移状態類似体であり、典型的にヒドロキシエチル部分を含む。これらの化合物の多くは、ＢＡＣＥの強力な阻害剤であるが、それらの高分子量および低い膜透過性により、それらは不十分な薬物候補となっている。非特許文献１を参照のこと。種々のヒドロキシエチルアミン骨格および複素環を含む骨格などのペプチド模倣剤の高分子から低分子への進行が存在する。例えば、非特許文献２を参照のこと。特定のアミノチアジン化合物は、特許文献１〜３においてＢＡＣＥ阻害剤として記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0003】

【特許文献1】国際公開第２００７／０４９５３２号パンフレット

【特許文献2】国際公開第２００８／１３３２７３号パンフレット

【特許文献3】国際公開第２００８／１３３２７４号パンフレット

【非特許文献】

【0004】

【非特許文献1】ＰａｒｋおよびＬｅｅ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ，２００３年，１２５（５２），ｐ．１６４１６−１６４２２

【非特許文献2】ＤｕｒｈａｍおよびＳｈｅｐｈｅｒｄ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＆ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００６年，９（６），ｐ．７７６−７９１

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

強力かつより有効なＢＡＣＥ阻害剤は、アルツハイマー病などのＡβペプチドにより媒介される疾患についての治療を与えるために必要である。本発明は新規の強力かつ有効なＢＡＣＥの阻害剤を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明は、式Ｉの化合物

【化1】

（式中、
Ｘは、−ＣＨ_２−または−Ｏ−であり、
ｎは、０または１であり、
ｍは、０、１、または２であり、
ｐは、０または１であり、ｐは、Ｘが−Ｏ−のとき０でなければならず、
Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４、ピリミジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、または−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシで必要に応じて一置換されたフェニルであり、
Ｒ^２は、ハロであり、
Ｒ^３は、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ、ヒドロキシ、または−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_３であり、
Ｒ^４は、フェニル、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、ピリジニル、またはチアゾリルである）
あるいはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。

【0007】

本発明はまた、患者におけるアルツハイマー病を治療する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の本発明の化合物を投与することを含む。

【0008】

本発明はさらに、患者におけるアルツハイマー病に対する軽度認識障害の進行を予防する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩を投与することを含む。

【0009】

本発明はさらに、アルツハイマー病を進行する危険性のある患者における進行を予防する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩を投与することを含む。

【0010】

本発明はまた、患者におけるＢＡＣＥを阻害する方法を提供し、そのような治療を必要とする哺乳動物に有効量の本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩を投与することを含む。

【0011】

本発明はまた、アミロイド前駆体タンパク質のＢＡＣＥにより媒介される切断を阻害する方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩を投与することを含む。

【0012】

本発明はさらに、Ａβペプチドの産生を阻害するための方法を提供し、そのような治療を必要とする患者に有効量の本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩を投与することを含む。

【0013】

本発明はまた、本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩を、薬理学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と併せて含む医薬製剤を提供する。特定の実施形態において、その製剤はさらに、１つ以上の他の治療剤を含む。

【0014】

さらに、本発明は、治療、特にアルツハイマー病の治療またはアルツハイマー病に対する軽度認識障害の進行の予防に使用するための本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。さらにまた、本発明は、アルツハイマー病を治療するための医薬の製造のための本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明はまた、アルツハイマー病に対する軽度認識障害の進行を予防するための医薬の製造のための本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明はまた、ＢＡＣＥを阻害するための医薬の製造のための本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明はさらに、Ａβペプチドの産生を阻害するための医薬の製造のための本発明の化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩の使用を提供する。

【0015】

さらに、本発明は、アルツハイマー病の治療に適した医薬製剤を提供する。さらに、本発明は、アルツハイマー病に対する軽度認識障害の進行の予防に適した医薬製剤を提供する。本発明はまた、ＢＡＣＥの阻害に適した医薬製剤を提供する。

【0016】

さらに、本発明は、アミロイド前駆体タンパク質のＢＡＣＥにより媒介される切断の阻害に適した医薬製剤を提供する。本発明はまた、過剰レベルのＡβペプチドから生じる状態の治療に適した医薬製剤を提供し、それは、本発明の化合物またはその薬理学的に許容可能な塩と、１つ以上の薬理学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤とを併せて含む。

【発明を実施するための形態】

【0017】

上記の式に使用される一般的化学用語は、それらの通常の意味を有する。例えば、用語「−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ」は、酸素原子に結合される−Ｃ_１−Ｃ_３アルキル基であり、メトキシ、エトキシ、プロポキシおよびイソ−プロポキシを指す。しかしながら、「ハロ」はフルオロおよびクロロを指す。

【0018】

用語「窒素保護基」は、計画された反応条件に安定であり、さらに、試薬および再生されたアミンと適合される反応条件により選択的に除去できる部分を意味するととられる。そのような基は当業者により周知であり、文献に記載される。例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第３版，第７章，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ Ｉｎｃ．，（１９９９）を参照のこと。

【0019】

用語「Ａβペプチドの産生の阻害」とは、哺乳動物におけるＡβペプチドのインビボでのレベルを減少させることを意味するととられる。

【0020】

用語「有効量の式Ｉの化合物」とは、哺乳動物におけるＡβペプチドのインビボでのレベルを減少させるのに十分なＢＡＣＥを阻害するのに必要とされる本発明の化合物の用量（複数も含む）を意味するととられる。

【0021】

軽度認知障害は、臨床所見および経時的なアルツハイマー型認知症に対する軽度認知障害を示す患者の進行に基づいたアルツハイマー疾患に関連する認知症の潜在的な前駆期と定義される。（Ｍｏｒｒｉｓら，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５８，３９７−４０５（２００１）；Ｐｅｔｅｒｓｅｎら，Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５６，３０３−３０８（１９９９））。用語「アルツハイマー病に対する軽度認知障害の進行の予防」とは、患者におけるアルツハイマー病に対する軽度認知障害の進行を遅延、停止、または反転させることを含む。

【0022】

当業者は、図（１）に描かれるように本発明の化合物が互変異性型で存在できることを理解するだろう。本出願において、本発明の化合物の特定の互変異性体の１つに対する任意の参照が与えられる場合、互変異性型およびそれらの全ての混合物の両方を含むことが理解される。

【化2】

【0023】

当業者は、本発明の化合物が少なくとも２つのキラル中心に含むコアから構成されることを理解するだろう。

【化3】

【0024】

本発明は、全ての個々の鏡像異性体、およびラセミ体を含む、前記化合物の鏡像異性体の混合物を意図するが、図（２）に例示される原子標識された１位および２位で絶対配置を有する化合物が好ましい本発明の化合物である。

【0025】

さらに、当業者は、さらなるキラル中心が、特定の可変物の選択により本発明の化合物において作製され得ることを理解するだろう。本発明は、全ての個々の鏡像異性体またはジアステレオマーおよびラセミ体を含む、前記化合物の鏡像異性体およびジアステレオマーの混合物を意図する。

【0026】

当業者はまた、全てのキラル中心についてのカーン・インゴルド・プレローグ（Ｒ）または（Ｓ）規則が、特定の化合物の置換パターンに依存して変化することを理解するだろう。単一の鏡像異性体またはジアステレオマーは、キラル試薬と開始することで、または立体選択的もしくは立体特異的合成技術によって調製され得る。あるいは、単一の鏡像異性体またはジアステレオマーは、本発明の化合物の合成における任意の都合の良い点での標準的なキラルクロマトグラフまたは結晶化技術により混合物から単離され得る。本発明の化合物の単一の鏡像異性体およびジアステレオマーは、本発明の好ましい実施形態である。

【0027】

本発明の化合物はアミンであり、従って、任意の数の無機酸および有機酸と反応して、薬理学的に許容可能な酸付加塩を形成する。薬理学的に許容可能な塩およびそれらを調製するための一般的な方法は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９７７年１月を参照のこと。好ましい薬理学的に許容可能な塩は、塩酸で形成されたものである。

【0028】

本発明の化合物の全ては有用なＢＡＣＥの阻害剤であるが、特定のクラスの化合物が好ましい。以下の項はそのような好ましいクラスを記載する。
ａ）ｎは、０であり、
ｂ）ｎは、１であり、
ｃ）ｍは、０であり、
ｄ）ｍは、１であり、
ｅ）ｍは、２であり、
ｆ）ｐは、０であり、
ｇ）ｐは、１であり、
ｈ）ｐは、Ｘが−Ｏ−のとき０でなければならず、
ｉ）Ｘは、−Ｏ−であり、
ｊ）Ｘは、−ＣＨ_２−であり、
ｋ）Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４であり、
ｌ）Ｒ^１は、ピリジニルであり、
ｍ）Ｒ^１は、−Ｃｌおよび−Ｆで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｎ）Ｒ^１は、ピリミジニルであり、
ｏ）Ｒ^１は、ピリミジニルまたはハロで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｐ）Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４、ピリミジニル、−Ｃｌおよび−Ｆで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｑ）Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシで必要に応じて置換されたフェニル、ピリミジニル、−Ｃｌおよび−Ｆで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｒ）Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシで必要に応じて置換されたフェニル、またはピリミジニルであり、
ｓ）Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４またはピリミジニルであり、
ｔ）Ｒ^２は、フルオロであり、
ｕ）Ｒ^３は、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシまたはヒドロキシであり、
ｖ）Ｒ^３は、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２（ＣＨ_３）_２、またはヒドロキシであり、
ｗ）Ｒ^４は、フェニルであり、
ｘ）Ｒ^４は、チアゾリルであり、
ｙ）Ｒ^４は、−Ｃｌまたは−Ｆで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、またはピリジニルであり、
ｚ）Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、またはチアゾリルであり、
ａａ）Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、ピリジニル、またはチアゾリルであり、
ｂｂ）Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、またはハロで必要に応じて置換されたピリミジニルであり、
ｃｃ）Ｒ^４は、ピリジニルであり、
ｄｄ）Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｅｅ）Ｒ^４は、フルオロで必要に応じて置換されたピリジニルであり、
ｆｆ）本発明の化合物は、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有し、
ｇｇ）本発明の化合物は、遊離塩基であり、
ｈｈ）本発明の化合物は、薬理学的に許容可能な塩であり、
ｉｉ）本発明の化合物は、塩酸塩であり、
ｊｊ）本発明の化合物は、二塩酸塩であり、
ｋｋ）本発明の化合物は、エタンスルホン酸塩であり、
ｌｌ）本発明の化合物は、ｐ−トルエンスルホン酸塩である。

【0029】

本発明の化合物の好ましい実施形態は、本発明の化合物（式中、Ｘは、−ＣＨ_２−または−Ｏ−であり、ｎは、０または１であり、ｍは、０、１、または２であり、ｐは、０または１であり、ｐは、Ｘが−Ｏ−のとき０でなければならず、Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４、ピリミジニル、またはハロで必要に応じて置換されたピリジニルであり、Ｒ^２は、フルオロであり、Ｒ^３は、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシまたはヒドロキシであり、Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、ピリジニル、またはチアゾリルである）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、ハロは、Ｒ^４がピリジニルの場合はクロロまたはフルオロであり、あるいはＲ^４がピリミジニルの場合はクロロである。さらに、前記実施形態において、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有する化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

【0030】

本発明の化合物の別の好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｘは、−ＣＨ_２−または−Ｏ−であり、ｎは、０または１であり、ｍは、０または１であり、ｐは、１であり、ｐは、Ｘが−Ｏ−のとき０でなければならず、Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシで必要に応じて置換されたフェニル、ピリミジニル、またはハロで必要に応じて置換されたピリジニルであり、Ｒ^２は、フルオロであり、Ｒ^３は、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシまたはヒドロキシであり、Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、またはチアゾリルである）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、ハロは、Ｒ^４がピリジニルまたはピリミジニルの場合はクロロまたはフルオロであるか、またはその薬理学的に許容可能な塩である。さらに、前記実施形態において、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有する化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

【0031】

本発明の化合物のより好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｘは、−ＣＨ_２−または−Ｏ−であり、ｎは、０または１であり、ｍは、０、１または２であり、ｐは、０または１であり、ｐは、Ｘが−Ｏ−のとき０でなければならず、Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４またはピリミジニルであり、Ｒ^２は、フルオロであり、Ｒ^３は、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシまたはヒドロキシであり、Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、ピリジニルまたはチアゾリルである）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、ハロは、Ｒ^４がピリジニルまたはピリミジニルの場合はクロロまたはフルオロであるか、あるいはその薬理学的に許容可能な塩である。さらに、前記実施形態において、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有する化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

【0032】

本発明の化合物のさらなる実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｘは、−ＣＨ_２−または−Ｏ−であり、ｎは、０または１であり、ｍは、０または１であり、ｐは、０または１であり、ｐは、Ｘが−Ｏ−のとき０でなければならず、Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシで必要に応じて置換されたフェニル、またはピリミジニルであり、Ｒ^２は、フルオロであり、Ｒ^３は、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシまたはヒドロキシであり、Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニル、ハロで必要に応じて置換されたピリミジニル、ピリジニル、またはチアゾリルである）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、ハロは、Ｒ^４がピリジニルまたはピリミジニルの場合はクロロまたはフルオロである。さらに、前記実施形態において、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有する化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

【0033】

本発明の化合物の最も好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｘは、−ＣＨ_２−または−Ｏ−であり、ｎは、０または１であり、ｍは、０または１であり、ｐは、０または１であり、ｐは、Ｘが−Ｏ−のとき０でなければならず、Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４またはピリミジニルであり、Ｒ^２は、フルオロであり、Ｒ^３は、−Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシまたはヒドロキシであり、Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニルまたはハロで必要に応じて置換されたピリミジニルである）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、ハロは、Ｒ^４がピリジニルまたはピリミジニルの場合はクロロまたはフルオロであるか、またはその薬理学的に許容可能な塩である。さらに、前記実施形態において、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有する化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

【0034】

本発明の化合物の別の最も好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｘは、−ＣＨ_２−または−Ｏ−であり、ｎは、０または１であり、ｍは、０または１であり、ｐは、０であり、Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４であり、Ｒ^２は、フルオロであり、Ｒ^４は、ハロで必要に応じて置換されたピリジニルである）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、ハロは、Ｒ^４がピリジニルの場合はクロロまたはフルオロであるか、またはその薬理学的に許容可能な塩である。さらに、前記実施形態において、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有する化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

【0035】

本発明の化合物の特に好ましい実施形態は、式Ｉの化合物（式中、Ｘは、−Ｏ−であり、ｎは、０であり、ｍは、１であり、ｐは、０であり、Ｒ^１は、−ＮＨＣＯＲ_４であり、Ｒ^２は、ハロであり、Ｒ^４は、ハロで置換されたピリジニルである）あるいはその薬理学的に許容可能な塩に関する。前記実施形態において、Ｒ^２は、フルオロであることが好ましく、またはその薬理学的に許容可能な塩である。さらに、前記実施形態において、融合アミノチアジン環の接合部におけるキラル中心にてシス型立体配置を有する化合物あるいはその薬理学的に許容可能な塩が好ましい。

【0036】

式Ｉの化合物に関する本発明の化合物のさらに特に好ましい実施形態は

【化4】

またはその薬理学的に許容可能な塩である。

【0037】

式Ｉの化合物に関する本発明の化合物の別の特に好ましい実施形態は

【化5】

またはその薬理学的に許容可能な塩である。

【0038】

式Ｉの化合物はＢＡＣＥの阻害剤である。従って、本発明はまた、哺乳動物におけるＢＡＣＥを阻害する方法を提供し、そのような治療を必要とする哺乳動物に、ＢＡＣＥを阻害する量の式Ｉの化合物を投与することを含む。式Ｉの化合物の投与により治療される哺乳動物はヒトであることが好ましい。

【0039】

ＢＡＣＥの阻害剤として、本発明の化合物は、Ａβペプチドの産生を抑制するのに有用であり、従って、Ａβペプチドの過剰産生および／または低下したクリアランスに起因する過剰なＡβペプチドレベルから生じる障害の治療に有用である。本発明のさらなる実施形態は、ＢＡＣＥの阻害によって改善または予防できる疾患または状態を治療するための医薬を製造するための式Ｉの化合物の使用である。従って、式Ｉの化合物は、アルツハイマー病、軽度認識障害、ダウン症候群、Ｄｕｔｃｈ型アミロイド症を伴う遺伝性脳出血、脳アミロイド血管症、混合型の血管および進行性起源の認知症などの他の変性認知症、パーキンソン病に伴う認知症、進行性核上麻痺に伴う認知症、大脳皮質基底核変性症に伴う認知症、およびアルツハイマー病のびまん性Ｌｅｗｙ小体型の治療または予防するのに有用であると考えられる。

【0040】

本発明の化合物またはその塩は当該技術分野において公知の種々の手順によって調製され得、そのうちのいくつかは以下のスキーム、調製例および実施例に例示される。説明される各経路における特定の合成ステップは、式Ｉの化合物またはその塩を調製するために、異なる方法で組み合わされてもよいか、または、異なるスキームからのステップと組み合わされてもよい。以下のスキームにおける各々のステップの生成物は、抽出、蒸発、沈殿、クロマトグラフィー、濾過、粉砕、および結晶化を含む、従来の方法によって回収することができる。

【0041】

明確さの目的のために以下のスキームにおいて、特定の立体化学的中心は指定されないままであり、特定の置換基は除去されており、スキームの教示を限定することを決して意図するものではない。さらに、個々の異性体、鏡像異性体、またはジアステレオマーは、キラルクロマトグラフィーなどの方法によって式Ｉの化合物の合成における任意の都合の良い点で分離されてもよい。さらに、以下のスキームに記載される中間体は、多くの窒素保護基を含む。可変の保護基は、実施される特定の反応条件および特定の変換に依存する各々の発生において同じであってもよいか、または異なっていてもよい。保護および脱保護条件は当業者に周知であり、文献に記載されている。例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，前出を参照のこと。

【0042】

本願明細書において使用される略語は、Ａｌｄｒｉｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ，Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．１，１９８４に従って定義される。他の略語は以下のように定義される。「Ｐｒｅｐ」は、調製例を指し、「Ｅｘ」は、実施例を指し、「ｍｉｎ」は、分（複数を含む）を指し、「ＡＣＮ」は、アセトニトリルを指し、「ＤＩＰＥＡ」は、ジイソプロピルエチルアミンを指し、「ＤＩＣ」は、ジイソプロピルカルボジイミドを指し、「Ｅｔ_２Ｏ」は、ジエチルエーテルを指し、「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを指し、「ＨＡＴＵ」は、２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸メタンアミニウムを指し、「ＨＢＴＵ」は、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロ−リン酸を指し、「ＨＯＡｔ」は、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾールを指し、「ｉＰｒＯＨ」は、イソプロパノールを指し、「ＭｅＯＨ」は、メチルアルコールまたはメタノールを指し、「（ＯＥｔ）」は、エトキシドを指し、「ＰｙＢＯＰ」は、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロリン酸を指し、「ＰｙＢｒｏｐ」は、ブロモ−ｔｒｉｓ−ピロリジノホスホニウムヘキサフルオロリン酸を指し、「ＤＭＡＰ」は、４−ジメチルアミノピリジンを指し、「ＰＰｈ_３」は、トリフェニルホスフィンを指し、「ＴＦＡ」は、トリフルオロ酢酸を指し、「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを指し、「ＥｔＯＨ」は、エチルアルコールまたはエタノールを指し、「ＳＣＸ」は、強力な陽イオン交換を指し、「Ｔ_Ｒ」は、保持期間を指し、「ＩＣ_５０」は、その物質が可能な最大阻害反応の５０％を生じる物質の濃度を指し、「ＡＰＰ」は、アミロイド前駆体タンパク質を指し、「ＤＭＥＭ」は、ダルベッコ改変イーグル培地を指し、「Ｆ１２」は、ハムＦ１２培地を指し、「ＦＢＳ」は、ウシ胎仔血清を指し、「ＦＲＥＴ」は、蛍光共鳴エネルギー移動を指し、「ＨＥＫ」は、ヒト胎児腎臓細胞を指し、「ＰＤＡＰＰ」は、血小板由来アミロイド前駆体タンパク質を指し、「ＲＦＵ」は、相対蛍光単位を指す。

【0043】

以下のスキームにおいて、他に示されない限り、全ての置換基は以前に定義されている。試薬および出発物質は、当業者が一般的に容易に利用可能である。その他は、有機化学および複素環化学の標準的な技術によって作製され得、これらは、既知の構造的に類似する化合物の合成と類似しており、以下の調製例および実施例に記載の手順は新規の手順を含む。

【0044】

【化6】

【0045】

スキームＩは、式（２）のアリールカルボン酸を用いて式（１）の適切なアミン化合物をアシル化して、中間体（３）の脱保護の後に式（Ｉ）の化合物を得ることを示している。「ＰＧ」は、アミノ基（例えば、カルバメートおよびアミド）に対して開発された保護基である。このような保護基は、当該技術分野において周知である。

【0046】

式Ｉの化合物を、カップリング条件下で式（２）の化合物と反応させる。当業者は、カルボン酸とアミンの反応により生じるアミド生成のための多くの方法および試薬があることを理解するだろう。例えば、カップリング試薬およびアミン塩基（例えば、ＤＩＰＥＡまたはトリエチレンアミン）の存在下において式（２）の適切な酸と式（１）の適切な化合物との反応により、式（３）の化合物を得る。カップリング試薬としては、カルボジイミド（例えば、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣＩ）ならびに芳香族カップリング試薬（例えば、ＨＯＢｔおよびＨＯＡｔ）が挙げられる。さらに、非球核陰イオン（例えば、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、ＰｙＢＯＰ、およびＰｙＢｒＯＰ）のウロニウムまたはホスホニウム塩は、より慣用のカップリング試薬の代わりに使用することができる。添加剤（例えば、ＤＭＡＰ）を、反応を促進するために使用することができる。あるいは、式（１）の化合物を、塩基（例えば、トリエチルアミンまたはピリジン）の存在下において置換された塩化ベンゾイルを用いてアシル化することができる。

【0047】

中間体（３）における保護基を、酸性または塩基性条件下で除去して、式（１）の化合物を得ることができる。このような化合物の脱保護は、当該技術分野において周知であり、理解されている。

【0048】

任意のステップにおいて、式（Ｉ）の化合物の薬理学的に許容可能な塩を、式（Ｉ）の適切な遊離塩基と適切な薬理学的に許容可能な酸とを適切な溶媒内で標準的な条件で反応させることにより、形成することができる。さらに、このような塩の形成は、窒素保護基の脱保護において同時に起こり得る。このような塩の形成は、当該技術分野において周知であり、理解されている。

【0049】

【化7】

【0050】

スキームＩＩは、アリールボロン酸（５）を用いて式（４）の適切な化合物をアルキル化して、中間体（６）の脱保護の後に式（Ｉ）の化合物を得ることを示している。Ｙは、トリフルオロメタンスルホニルまたはハロゲン（例えば、ＢｒまたはＩ）である。Ｒ^１は、アリール基（例えば、フェニル）またはヘテロアリール基（例えば、ピリジニル）である。

【0051】

例えば、式（４）の適切な化合物を、Ｓｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａクロスカップリング条件下で適切なボロン酸（６）と反応させる。当業者は、このようなクロスカップリング反応を促進するのに有用な種々の条件を理解するだろう。したがって、適切なパラジウム試薬としては、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド、トリシクロヘキシルホスフィンと共にトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリド、パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン、または酢酸パラジウム（ＩＩ）が挙げられる。適切な塩基としては、炭酸セシウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、またはリン酸カリウム三塩基一水和物が挙げられる。

【0052】

保護基を、酸性または塩基性条件下で除去して、式Ｉのビ−アリール化合物を得ることができる。このような化合物の脱保護は当該技術分野において周知であり、理解されている。

【0053】

【化8】

【0054】

スキームＩＩＩは、適切なアリール臭化物（７）から出発して１級アミン（１）を調製するための２つのバリエーションを示している。

【0055】

１つのバリエーションにおいて、アジド−脱ハロゲン化をアジド源（例えば、アジドナトリウム）の存在下で適切なアリール臭化物（７）に対して行う。このようなアジド−脱ハロゲン化反応は、当該技術分野において周知であり、理解されている。得られたアジド（８）の１級アミン（１）への還元を、当該技術分野において周知の多くの還元剤（例えば、ＬｉＡｌＨ_４、ＮａＢＨ_４、ＰＰｈ_３）を用いることにより、あるいは、当該技術分野において周知であり、記載されている水素化条件により、達成することができる。

【0056】

あるいは、適切な１級アミン（１）を、触媒（例えば、ヨウ化銅）、塩基（例えば、炭酸カリウム）、および、リガンド（例えば、（＋／−）トランスＮ，Ｎ’−ジメチル１，２−シクロヘキサンジアミン）の存在下で、適切なアリール臭化物（７）をアンモニア代替物（例えば、トリフルオロアセトアミド）と反応させることにより直接調製することができる。このような反応は、当該技術分野において周知であり、理解されている。

【0057】

容易に理解されるように、式（７）の化合物を、当該技術分野において周知であり、確立されている手順による本願明細書に記載された方法と類似の方法によって、迅速に調製することができる。容易に理解されるように、式Ｉの化合物を調製するステップは、合成される特定の化合物、出発化合物、および、置換部分の相対的不安定性に依存する。

【0058】

調製例および実施例
以下の調製例および実施例は本発明をさらに例示する。

【0059】

本発明の化合物名は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａ，ｖｅｒｓｉｏｎ １０．０により提供される。

【0060】

他に記載されない限り、質量分析データは、１ｍＬ／分の流速で５０℃＋／−１０℃の温度にてＬＣ／ＭＳ：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｇｅｍｉｎｉ Ｃ_１８（２．０×５０μｍ、３．５μｍ）カラムにより得る。溶出系は、エレクトロスプレーイオン化（１００〜８００ａｍｕ走査範囲；０．２ａｍｕステップ；８０ｖ フラグメンター（Ｆｒａｇｍｅｎｔｏｒ）；１．０ゲイン；８０閾値）に結合され、７．０分間、５〜１００％のＡＣＮ ｗ／０．１％の水酸化アンモニウム、次いで１．０分間、１００％のＡＣＮで保持する。

【0061】

他に記載されない限り、ガスクロマトグラフィーデータは、７．３分で６０〜２８０℃、次いで２．０分間で２８０℃の温度プログラムおよび２０：１の分割比を用いてＧＣ／ＭＳ：ＡｇｉｌｅｎｔガスクロマトグラフィーＤＢ−５ｍｓ（０．２５ｍｍ×１５ｍ×０．２５μｍ）により得る。

【0062】

調製例１
ｔｅｒｔ−ブチル２−（アリルオキシ）アセテート

【化9】

テトラブチルアンモニウム硫酸水素塩（４７０ｇ，１．４０ｍｏｌ）を、水（１４Ｌ）およびトルエン（１４Ｌ）中の水酸化ナトリウム（６．６Ｋｇ，１６５ｍｏｌ）の溶液に２０℃で加える。アリルアルコール（８０１．５ｇ，１３．８ｍｏｌ）を加え、混合物を２０℃で１時間攪拌する。混合物を５℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモアセテート（４Ｋｇ，２０．５ｍｏｌ）をゆっくりと加え、内部温度を１５℃以下に維持する。反応混合物を室温で１６時間攪拌する。混合物を水（１２Ｌ）およびヘキサン（１２Ｌ）で希釈し、有機相を分離する。水相をＭＴＢＥ（５Ｌ）で抽出する。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、標題化合物を無色の油状物として得る（２．６Ｋｇ，１００％）。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：１７３（Ｍ＋１）。

【0063】

調製例２
２−（アリルオキシ）酢酸

【化10】

Ｔｅｒｔ−ブチル２−（アリルオキシ）アセテート（２．６Ｋｇ，１５．１ｍｏｌ）をジクロロメタン（１４Ｌ）に加える。ジオキサン（１４Ｌ）中の４ＭのＨＣｌを一度に加え、溶液を２５℃で１６時間攪拌する。溶媒を減圧下で取り除き、残渣を真空下で室温にて乾燥し、標題化合物（２．２Ｋｇ，１００％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：１１７（Ｍ＋１）。

【0064】

調製例３
２−（アリルオキシ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド

【化11】

塩化チオニル（１．５Ｌ）を、トルエン（３．０Ｌ）中の２−（アリルオキシ）酢酸（２．２Ｋｇ，１８．９ｍｏｌ）の溶液に一度に加え、混合物を窒素雰囲気下で１時間、６５℃にて加熱する。混合物を室温まで冷却し、５℃にて、ジクロロメタン（１９Ｌ）中のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２．１Ｋｇ，２１．５ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（６．５Ｌ，５９．２ｍｏｌ）の溶液に加える。反応混合物を２５℃で１６時間攪拌する。水を加え、反応混合物をジクロロメタンで抽出する。合わせた有機相を回収し、１ＭのＨＣｌ（６Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で濃縮する。残渣をヘキサン中の酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（１．４９Ｋｇ，５０％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：１６０（Ｍ＋１）。

【0065】

調製例４
２−（アリルオキシ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）エタノン

【化12】

テトラヒドロフラン（７２２ｍＬ）中の４−ブロモ−１−フルオロ−２−ヨードベンゼン（１３０．４ｇ，４３３．５ｍｍｏｌ）の攪拌した−７２°Ｃの溶液に、ヘキサン（１７３．４ｍＬ，４３３．５ｍｍｏｌ）中の２．５Ｍのブチルリチウムを窒素雰囲気下で、４０分にわたって加える。反応物を、３０分間、−７２℃で攪拌し、テトラヒドロフラン（１１５ｍＬ）中の２−（アリルオキシ）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（５７．５ｇ，３６１．２ｍｍｏｌ）を、３５分間、滴下して加える。−７２℃にて４５分後、冷却槽を取り除き、混合物を２５℃まで加温する。反応物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（５００ｍＬ）でクエンチし、水（３００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで３度抽出する。有機物を合わせ、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を、減圧下で取り除く。残渣を５％から１０％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配を用いてシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（６３ｇ，６４％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２７３／２７５（Ｍ＋１）。

【0066】

表１における以下の化合物を２−（アリルオキシ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）エタノンの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0067】

【表1】

１ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：８．０６（ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８６−７．８４（ｍ，１Ｈ），７．７１−７．６８（ｍ，１Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），５．９８−５．９１（ｍ，１Ｈ），５．３４−５．２３（ｍ，２Ｈ），４．６９（ｓ，２Ｈ），４．１４−４．１１（ｍ，２Ｈ）。
２ ジエチルエーテルが反応溶媒としてＴＨＦの代わりに利用される。
３ ３：１のトルエン：ヘキサンが反応溶媒としてＴＨＦ の代わりに利用される。化合物は混合物として回収される。

【0068】

調製例５
２−（アリルオキシ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）エタノンオキシム

【化13】

エタノール（１．７Ｌ）中の２−（アリルオキシ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）エタノン（１１８ｇ，４３２．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩（３４．５ｇ，４９６．９ｍｍｏｌ）およびエタン酸ナトリウム（４０．８ｇ，４９６．９ｍｍｏｌ）を２５℃で加える。反応物を７０℃で１時間、加熱する。反応物を冷却し、溶媒を減圧下で取り除く。残渣を水（１Ｌ）で洗浄し、ジクロロメタン（３×５００ｍＬ）で３度、抽出する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物を２つの可能なオキシム（１２０ｇ，９６％）の混合物として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２８８，２９０（Ｍ＋１）。

【0069】

表２における以下の化合物を２−（アリルオキシ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）エタノンオキシムの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0070】

【表2】

４ 化合物は混合物として回収する。

【0071】

調製例６
ラセミ化合物（３ａＳＲ，６ａＳＲ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）ヘキサヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール

【化14】

キシレン（２Ｌ）中の２−（アリルオキシ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）エタノンオキシム（１２０ｇ，４１７ｍｍｏｌ）の溶液を６時間、１４０℃で加熱する。反応物を冷却し、溶媒を減圧下で取り除き、固形物を得る。固形物を９：１のヘキサン／ＭＴＢＥを用い、粉砕により精製し、標題化合物（８５ｇ，７２％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２８８，２９０（Ｍ＋１）。

【0072】

表３における以下の化合物をラセミ化合物（３ａＳＲ，６ａＳＲ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）ヘキサヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0073】

【表3】

５ この反応は密閉管において１５０℃にて１８時間、トルエン中で実施する。
６ 化合物は混合物として回収する。

【0074】

調製例７
ラセミ化合物（（３ＲＳ，４ＳＲ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）テトラヒドロフラン−３−イル）メタノール

【化15】

亜鉛粉末（１９０ｇ，２．９１ｍｏｌ）を、３０℃以下の温度を維持する速度で酢酸（１．４Ｌ）中のラセミ化合物（３ａＳＲ，６ａＳＲ）−６ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）ヘキサヒドロフロ［３，４−ｃ］イソオキサゾール（８４ｇ，２９０ｍｍｏｌ）の混合物に加える。反応物を５時間、４０℃で加熱する。反応物を室温まで冷却し、珪藻土のパッドで濾過し、酢酸および水（２００ｍＬ）で洗浄する。溶媒を減圧下で取り除く。水（５００ｍＬ）を、残渣に加え、ｐＨを２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１０に調節する。塩基性の水性懸濁液をジクロロメタン（３×５００ｍＬ）中の１５％のイソプロピルアルコールで３度、抽出する。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物を白色の固形物（７３．０ｇ，８６％）として得る。Ｓ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２９０，２９２（Ｍ＋１）。

【0075】

表４における以下の化合物をラセミ化合物（（３ＲＳ，４ＳＲ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）テトラヒドロフラン−３−イル）メタノールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0076】

【表4】

７ ２０当量の亜鉛末を０．０６Ｍの酢酸中で使用する。化合物は混合物として回収する。

【0077】

調製例８
ラセミ化合物Ｎ−（（３ＳＲ，４ＲＳ）−３−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イルカルバモチオイル）ベンズアミド

【化16】

２５℃にて窒素雰囲気下で、テトラヒドロフラン（１．３Ｌ）中のラセミ化合物（（３ＲＳ，４ＳＲ）−４−アミノ−４−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）テトラヒドロフラン−３−イル）メタノール（７５ｇ，２５９ｍｍｏｌ）の溶液に、３０℃以下に内部温度を維持し、ビス（トリメチルシリル）トリフルオロアセトアミド（７６．３ｍＬ，２５９ｍｍｏｌ）を滴下して加える。反応物を、３０分間２５℃で攪拌する。ベンゾイルイソチオシアネート（３８．４ｍＬ，２８４ｍｍｏｌ）を、１０分間にわたり、内部温度を３５℃以下に維持して、加え、反応物を３０分間、２５℃にて攪拌する。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、１ＮのＨＣｌ（３×５００ｍＬ）で３度洗浄し、その後、水およびブラインで洗浄する。溶液を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除く。残渣を、２５％から５０％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配を用いて、シリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（１１０ｇ，９４％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４５３，４５５（Ｍ＋１）。

【0078】

表５における以下の化合物をラセミ化合物Ｎ−（（３ＳＲ，４ＲＳ）−３−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イルカルバモチオイル）ベンズアミドの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0079】

【表5】

８ 化合物は混合物として回収する。

【0080】

調製例９
ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化17】

テトラヒドロフラン（９７０ｍＬ）中のラセミ化合物Ｎ−（（３ＳＲ，４ＲＳ）−３−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−（ヒドロキシメチル）テトラヒドロフラン−３−イルカルバモチオイル）ベンズアミド（１１０ｇ，２４３ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（７６．４ｇ，２９１ｍｍｏｌ）の１５℃の混合物に、内部温度を２５℃以下に維持し、１０分間にわたり、３度に分けて、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレート（６７．１ｇ，２９１ｍｍｏｌ）を加える。加えた後、反応混合物を２５℃で１時間、攪拌する。溶媒を減圧下で取り除き、残渣を、１４％から３３％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配を用いて、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（８０ｇ，７６％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４３５，４３７（Ｍ＋１）。

【0081】

表６における以下の化合物をラセミ化合物Ｎ−（（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0082】

【表6】

９ １０％〜１５％のヘキサン中の酢酸エチルで溶出するラジアルクロマトグラフィーにより精製した。
１０ 化合物は混合物として回収する。

【0083】

調製例１０
Ｎ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化18】

ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−（７ａ（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（１０８ｇ，２４８ｍｍｏｌ）を、キラルＨＰＬＣ：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ ８×２５ｃｍのカラム；溶出液：０．２％のジメチルエチルアミンを有する９０：１０（メタノール：アセトニトリル）；流量：ＵＶ２５４ｎｍで３００ｍＬ／分により精製する。第２の溶出異性体を単離し、鏡像異性的に濃縮した標題化合物（４２．０ｇ，４０％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４３４．９／４３６．９（Ｍ＋１）。

【0084】

表７における以下の化合物をＮ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0085】

【表7】

【0086】

調製例１１
ラセミ化合物（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン

【化19】

５Ｎの塩酸水溶液（１５８ｍＬ）を、Ｎ−（７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（１６．３５ｇ，７．８９ｍｍｏｌ）に加え、混合物を９０°Ｃまで加熱する。１８時間後、混合物を周囲温度まで冷却し、ジクロロメタンで洗浄する。有機層を一度、５Ｎの塩酸水溶液で抽出する。水層のｐＨは５０％の水酸化ナトリウム水溶液で塩基性に調節し、１０％のイソプロピルアルコール：ジクロロメタンで２度、抽出する。有機層を減圧下で濃縮する。得られた残渣を２％から５％のメタノール中の７Ｎのアンモニア：ジクロロメタンで溶出するラジアルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（２．２３ｇ，４７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）３３１，３３３（Ｍ＋１）。

【0087】

表８における以下の化合物をラセミ化合物（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミンの方法により、実質的に調製する。

【0088】

【表8】

１１ 化合物は混合物として回収する。

【0089】

調製例１２
Ｎ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化20】

２Ｌの丸底フラスコに、Ｎ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（３５．０ｇ，８０．４ｍｍｏｌ）、トリフルオロアセトアミド（１６．２ｇ，１４３ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（２．６６ｇ，１３．７ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（２１．３ｇ，１４１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２１．５ｇ，１５３ｍｍｏｌ）を加える。フラスコを隔壁で覆い、真空とし、窒素で埋め戻しを行う。１，４−ジオキサン（７３１ｍＬ）（以前に真空−窒素でガス抜きがなされている）を、カニューレを介して加え、Ｎ，Ｎ’−ジメチル−，トランス（＋／−）１，２−シクロヘキサンジアミン（１０．１ｇ，７０．８ｍｍｏｌ）を加える。混合物を予熱した油槽内に１００℃で入れ、この温度にて１９時間、攪拌する。隔壁を還流冷却器と取り換え、メタノール（１５４ｍＬ）および水（１５４ｍＬ）の混合物をこの冷却器を介して加える。混合物を１００℃で３．５時間攪拌し、２２℃に冷却し、部分的に減圧下で濃縮する（０．６Ｌ容量まで）。水酸化アンモニウム水溶液（２５％，１５４ｍＬ）を加え、混合物を１０分間攪拌する。混合物を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で３度抽出し、溶媒を減圧下で取り除く。残渣を得て、５０％から７５％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配を用いるフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（１４．９ｇ，４７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３７２（Ｍ＋１）。

【0090】

調製例１３
Ｎ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（３−アジドフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化21】

０．６６ＭのＬ−アスコルビン酸の溶液を、水（６ｍＬ）中のＬ−アスコルビン酸ナトリウム塩（０．７９ｇ，２．０ｍｍｏｌ）に溶解させることによって調製する。Ｎ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（３−ブロモフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（１．４０ｇ，３．３５ｍｍｏｌ）および１，２−シクロヘキサンジアミン，Ｎ，Ｎ’−ジメチル−，トランス（＋／−）（１６２ｍｇ，１．１１ｍｍｏｌ）をエタノール（１３．４ｍＬ）中に溶解させる。アジ化ナトリウム（０．６６１ｇ，１０．１ｍｍｏｌ）を加える。０．６６Ｍの水性Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム塩（２．２４ｍＬ）および水（２．５８ｍＬ）を加える。反応フラスコに還流冷却器を取り付け、混合物をガス抜きし、窒素で排気する。硫酸銅（ＩＩ）五水和物（０．１８４ｇ，０．７３８ｍｍｏｌ）を加え、反応フラスコを８０℃まで加熱し、１．５時間、攪拌する。反応混合物を室温まで冷却し、氷水を加える。反応混合物を３度、酢酸エチルで抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、５０％のヘキサン中の酢酸エチルを用いてシリカゲル上で精製し、標題化合物（０．６２０ｇ，４９％）を得る。１００％の酢酸エチルを用いるフラッシュカラムのさらなる溶出によりさらに標題化合物（０．４８８ｇ，４１％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３８０（Ｍ＋１）。

【0091】

表９における以下の化合物をＮ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（３−アジドフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの方法により、実質的に調製する。

【0092】

【表9】

【0093】

調製例１４
Ｎ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（３−アミノフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化22】

Ｎ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（３−アジドフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．６２ｇ，１．６３ｍｍｏｌ）をエタノール（１０ｍＬ）および炭素上のＰｄ（１０％、湿潤、０．０６２ｇ）で希釈する。混合物をガス抜きし、一晩、水素（３０ｐｓｉ）下で、室温にて攪拌する。混合物を珪藻土で濾過し、リンスとしてエタノールを用いる。溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．１０６ｇ，１８％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３５４（Ｍ＋１）。

【0094】

表１０における以下の化合物をＮ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（３−アミノフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの方法により、実質的に調製する。

【0095】

【表10】

【0096】

調製例１５
Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド

【化23】

ジクロロメタン（３４５ｍＬ）およびＤＭＦ（６．５ｍＬ）の混合物中のＮ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（５−アミノ−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（２０．４ｇ，５１．８ｍｍｏｌ）、５−フルオロピコリン酸（８．７７ｇ，６２．２ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１０．３ｇ，６７．４ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１３．２ｇ，６７．４ｍｍｏｌ）の混合物を、８０分間、２２℃にて攪拌する。２Ｍの水酸化ナトリウム（１２９．５ｍＬ，２５９ｍｍｏｌ）の溶液を加え、攪拌を１０分間続ける。混合物を分離し、水相を２度、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で抽出する。有機層を減圧下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈する。有機層を冷水（２×５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、１００％の酢酸エチル用いるシリカのショートパッドで濾過し、標題化合物（２３．８ｇ，７９％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４９５（Ｍ＋１）。

【0097】

表１１における以下の化合物をＮ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミドの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0098】

【表11】

【0099】

調製例１６
Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド

【化24】

エタノール（７３５ｍＬ）中のＮ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（２３．７ｇ、４０．８ｍｍｏｌ）、ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（３４．４ｇ，４１２ｍｍｏｌ）およびピリジン（３３．３ｍＬ）の溶液を、４時間、５０℃まで加熱する。混合物を濃縮する。残渣を、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２×２５０ｍＬ）で２度洗浄し、重炭酸ナトリウム（４５３ｍＬ）の飽和水溶液に注ぐ。懸濁液を５分間振とうし、ジクロロメタン（１×１Ｌおよび２×０．５Ｌ）で抽出する。有機層を水（０．５Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、固形物を得る。固形物をさらに、濾過して水相から得る。固形物を合わせ、超音波槽中で３０分間、水（３００ｍＬ）で粉砕する。懸濁液を濾過し、水で洗浄し、真空下で乾燥させ、標題化合物（１７．３ｇ，１００％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３９１（Ｍ＋１）。

【0100】

調製例１７
１，５−ジブロモ−２，４−ジフルオロベンゼン

【化25】

鉄粉（１６．４９ｇ，２９１ｍｍｏｌ）を、３つ口フラスコ中の１，２−ジクロロエタン（９６８ｍＬ）中の１−ブロモ−２，４−ジフルオロベンゼン（１１０ｍＬ，９６８ｍｍｏｌ）に周囲温度にて窒素ストリーム下で加える。１，２−ジクロロエタン（９６８ｍＬ）中のブロミン（５９．７ｍＬ，１．１６ｍｏｌ）の溶液を滴下して１時間、加え、反応混合物を１８時間、周囲温度にて攪拌する。反応混合物を０°Ｃまで冷却し、重亜硫酸ナトリウム（１．１１Ｌ，５３３ｍｍｏｌ）の飽和水溶液を一部ずつ加え、混合物を分離する。水相をジクロロメタンで抽出する。有機層を重炭酸ナトリウムの飽和水溶液、水、およびブラインで洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、ジエチルエーテルを用いるシリカパッドで精製し、標題化合物（２２９ｇ，７６％）を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．７０（ｄｄ，Ｊ＝４．６，６．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９５−６．９２（ｍ，１Ｈ）。

【0101】

調製例１８
４−（３−ブロモフェニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール

【化26】

ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中の１，３−ジブロモベンゼン（１９．７１ｇ，８１．０５ｍｍｏｌ）の−７８°Ｃの攪拌した溶液に、ヘキサン（５０．６６ｍＬ，８１．０５ｍｍｏｌ）中の１．６Ｍのブチルリチウムを加え、反応物を１０分間、攪拌する。４Ｈ−ピラン−４−オン，テトラヒドロ−（５．４１ｇ，５４．０４ｍｍｏｌ）を滴下して加え、反応物を−７８°Ｃで２時間攪拌する。反応物を、塩化アンモニウム飽和水溶液（２５ｍＬ）を加えてクエンチし、次いで少量の水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、５％から１００％のヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（１１．１８ｇ，７６％）を得る。ＧＣ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２５６，２５８（Ｍ−１）。

【0102】

表１２における以下の化合物を（４−（３−ブロモフェニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0103】

【表12】

１２ ２：１のトルエン：ヘキサンを反応溶媒として使用する。
１３ ジエチルエーテルを反応溶媒として使用する。
１４ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．６４（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４０−７．３１（ｍ，２Ｈ），７．１９（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），１．９９−１．８２（ｍ，８Ｈ）。

【0104】

調製例１９
４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン

【化27】

トルエン（１００ｍＬ）中の４−（３−ブロモフェニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−オール（１１．１７ｇ，４１．３ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．７９７ｇ，４．１３ｍｍｏｌ）の混合物を加熱し、ディーン・スターク・トラップを用いて３０分間還流させて水を取り除く。反応物を水および５ＮのＮａＯＨで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、５％から１００％のヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配を用いて溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（８．８５ｇ，９０％）を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２．４５−２．５０（ｍ，２Ｈ），３．９２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．７１Ｈｚ），４．３１（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝３．０７Ｈｚ，Ｊ＝５．７１Ｈｚ），６．１２−６．１４（ｍ，１Ｈ），７．１９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９１Ｈｚ），７．２８−７．３２（ｍ，１Ｈ），７．３６−７．３９（ｍ，１Ｈ），７．５１（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ）。

【0105】

表１３における以下の化合物を４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピランの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0106】

【表13】

１５ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５５（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．３１（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．１４（ｍ，２Ｈ），６．２１−６．１７（ｍ，１Ｈ），２．７３−２．６８（ｍ，２Ｈ），２．５６−２．５０（ｍ，２Ｈ），２．０１（五重項，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。

【0107】

調製例２０
（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メタノール

【化28】

ＣＨ_２Ｃｌ_２（１５ｍＬ）中の４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（０．５０ｇ，２．０９ｍｍｏｌ）の０℃の溶液を、パラホルムアルデヒド（０．２０８ｇ，２．２０ｍｍｏｌ）で処理し、５分間、０℃にて攪拌する。ヘキサン（３．０３ｍＬ，３．０３ｍｍｏｌ）中の塩化ジメチルアルミニウムの１Ｍの溶液を滴下してスラリーに加える。反応物を室温まで加温し、１時間攪拌する。反応物を０℃まで冷却し、さらに、ヘキサン（３．０３ｍＬ，３．０３ｍｍｏｌ）中のパラホルムアルデヒド（０．２０８ｇ，２．２０ｍｍｏｌ）および塩化ジメチルアルミニウムの１Ｍの溶液を加える。反応物を室温まで加温し、一晩攪拌する。反応物を、氷／１ＮのＨＣｌ混合物に注いでクエンチし、ＥｔＯＡｃで３度抽出する。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、５％から１００％のヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（０．３１５ｇ，５３％）を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５０（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝２．２，７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２９−７．２７（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．１１（ｔ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．３２−４．２９（ｍ，２Ｈ），４．２８−４．２５（ｍ，１Ｈ），３．７６（ｄｄ，Ｊ＝３．１，１１．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７０−３．６４（ｍ，２Ｈ），２．７０（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），１．８９（ｄｄ，Ｊ＝４．６，６．４Ｈｚ，１Ｈ）。

【0108】

表１４における以下の化合物を（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メタノールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0109】

【表14】

１６ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５２（ｄｄ，Ｊ＝２．２，６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２６−７．２２（ｍ，１Ｈ），７．０６（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．０４（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２８−４．２２（ｍ，３Ｈ），３．７３（ｄｄ，Ｊ＝３．１，１１．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６４−３．６２（ｍ，２Ｈ），２．６３（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），１．８８（ｓ，１Ｈ）。
１７ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４１（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１０．１Ｈｚ，１Ｈ），５．９６（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２７−４．２５（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．０６（ｍ，２Ｈ），３．８３（ｄｄ，Ｊ＝３．５，１１．４Ｈｚ，１Ｈ），３．６１（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），２．６９−２．６４（ｍ，１Ｈ），１．７５−１．９１（ｓ，１Ｈ）。
１８ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５３（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），７．１５（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．１９（ｓ，１Ｈ），３．６７（ｄｄ，Ｊ＝３．７，１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ｄｄ，Ｊ＝６．４，１０．８Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（ｄｄ，Ｊ＝１．３，２．６Ｈｚ，１Ｈ），２．５７−２．４７（ｍ，２Ｈ），２．２３−２．１３（ｍ，１Ｈ），２．０２−２．０２（ｍ，１Ｈ）。

【0110】

調製例２１
（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メタンスルホネート

【化29】

ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）中の（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メタノール（０．３０５ｇ，１．０８ｍｍｏｌ）の０°Ｃの溶液を、トリエチルアミン（０．２１８ｇ，２．１５ｍｍｏｌ）、次いで塩化メタンスルホニル（０．１４８ｇ，１．２９ｍｍｏｌ）で処理し、反応物を、０°Ｃで３０分間攪拌する。反応物を水で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．４３２ｇ，９７％）を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５１（ｔ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．４１（ｍ，１Ｈ），７．３１−７．２９（ｍ，１Ｈ），７．２５−７．２１（ｍ，１Ｈ），６．１８（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３３−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．２０（ｄｄ，Ｊ＝１．５，１１．６Ｈｚ，２Ｈ），４．１４−４．０８（ｍ，１Ｈ），３．７２−３．６８（ｍ，１Ｈ），３．０１−２．９８（ｍ，１Ｈ），２．９５（ｓ，３Ｈ）。

【0111】

表１５における以下の化合物を（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メチルメタンスルホネートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0112】

【表15】

１９ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３６（ｄｄｄ，Ｊ＝８．４，４．４，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄｄ，Ｊ＝２．６，６．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１０．１Ｈｚ，１Ｈ），６．０４（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２０−４．３１（ｍ，３Ｈ），４．０８−４．０３（ｍ，２Ｈ），３．８０−３．７６（ｍ，１Ｈ），３．１０（ｓ，１Ｈ），２．８９（ｓ，３Ｈ）。
２０ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５６（ｄｄ，Ｊ＝２．２，６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄｄｄ，Ｊ＝８．６，４．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．１３（ｔ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．３２−４．３０（ｍ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，１Ｈ），４．１９（ｄｄ，Ｊ＝１．３，１１．４Ｈｚ，１Ｈ），４．１０−４．０６（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．６，２．９，１．３Ｈｚ，１Ｈ），２．９５（ｓ，４Ｈ）。
２１ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３９（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．８９（ｄｄ，Ｊ＝８．１，１０．３Ｈｚ，１Ｈ），６．０２（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），４．２０−４．３１（ｍ，３Ｈ），４．０８−４．０２（ｍ，２Ｈ），３．８１−３．７５（ｍ，１Ｈ），２．９２（ｓ，４Ｈ）。
２２ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４２−７．４４（ｍ，１Ｈ），７．３６−３．３９（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．２２（ｍ，２Ｈ），６．０８−６．１１（ｍ，１Ｈ），４．００−４．０３（ｍ，２Ｈ），３．０８−３．１３（ｂｒｄ，１Ｈ），２．８５（ｓ，３Ｈ），２．１８−２．２２（ｍ，２Ｈ），１．９４−２．０１（ｍ，１Ｈ），１．７８−１．８８（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．７１（ｍ，２Ｈ）。
２３ ＤＭＡＰおよびトリエチルアミンをこの反応において利用する。
２４ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５３（ｓ，１Ｈ），７．３７−７．２９（ｍ，２Ｈ），７．１９（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．２２（ｓ，１Ｈ），４．２６（ｄｄ，Ｊ＝４．０，１０．１Ｈｚ，１Ｈ），４．０１（ｄｄ，Ｊ＝７．９，９．７Ｈｚ，１Ｈ），３．５４−３．５２（ｍ，１Ｈ），２．８６（ｓ，３Ｈ），２．５９−２．５１（ｍ，２Ｈ），２．２８−２．１９（ｍ，１Ｈ），２．０４（ｄｄｄ，Ｊ＝１７．０，７．８，３．８Ｈｚ，１Ｈ）。

【0113】

調製例２２
（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メチルカルバムイミドチオエートメタンスルホネート

【化30】

イソプロピルアルコール（１００ｍＬ）中の（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メチルメタンスルホネート（４．８２ｇ，１１．７ｍｍｏｌ）およびチオ尿素（１．７８ｇ，２３．３ｍｍｏｌ）の混合物を加熱して２４時間還流させる。反応物を冷却し、溶媒を減圧真空下で取り除き、残渣を得て、アセトニトリル（３０ｍＬ）およびヘキサン（１０ｍＬ）と混合する。固形物を結晶化し、スラリーを０℃まで冷却する。リンス（２５ｍＬ）として３：１のＡＣＮ：ヘキサンを用いてスラリーを濾過し、標題化合物をメシル酸塩（３．４５ｇ，７０％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）３２７，３２９（Ｍ＋１）。

【0114】

表１６における以下の化合物を（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メチルカルバムイミドチオエートメタンスルホネートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0115】

【表16】

【0116】

調製例２３
ラセミ化合物（４ａＳＲ，８ａＳＲ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン

【化31】

メタンスルホン酸（３５ｍＬ）中の（４−（３−ブロモフェニル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）メチルカルバムイミドチオエートメタンスルホネート（３．４１ｇ，８．０５ｍｍｏｌ）の混合物を、５０℃で５時間加熱する。反応物を冷却し、氷水に加える。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、ｐＨを５ＮのＮａＯＨで塩基性に調節する。塩基性の水層を酢酸エチルで３度抽出し、有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させる。溶媒を減圧下で取り除く。得られた残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２で粉砕し、標題ラセミ化合物を得る。さらなるラセミ生成物を、１％から１０％のＣＨ_２Ｃｌ_２（１．９９ｇ，７６％）中の７ＭのＮＨ_３／ＭｅＯＨの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによる濾液の精製によって得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）３２７，３２９（Ｍ＋１）。

【0117】

表１７における以下の化合物を（４ａＳＲ，８ａＳＲ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミンの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0118】

【表17】

２５ 反応物を９０℃で一晩加熱する。
２６ 反応物を５０℃で５時間加熱する。
２７ 反応物を室温で３時間撹拌する。
２８ 反応物を室温で１７時間撹拌する。生成物は塩として分離される。

【0119】

調製例２４
ラセミ化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳＲ，８ａＳＲ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化32】

１，４−ジオキサン（６０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（６０ｍＬ）中のラセミ化合物（４ａＳＲ，８ａＳＲ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン（２．０８ｇ，６．３６ｍｍｏｌ）およびジ−ｔ−ブチルジカルボネート（２．７７ｇ，１２．７ｍｍｏｌ）の混合物を８時間、室温で攪拌する。混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで３度抽出する。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、５％から１００％のヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製する物質を得て、標題化合物（２．８１ｇ，１００％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４２７，４２９（Ｍ＋１）。

【0120】

表１８における以下の化合物をラセミ化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳＲ，８ａＳＲ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0121】

【表18】

【0122】

調製例２５
ｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化33】

ラセミ化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳＲ，８ａＳＲ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（２．８０ｇ，６．５５ｍｍｏｌ）を、キラルＨＰＬＣ：カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ ８×３５ｃｍ；溶出液：７５：２５（メタノール：アセトニトリル）；流量：ＵＶ２６０ｎｍで４００ｍＬ／分により精製する。第２の溶出異性体を単離し、鏡像異性的に濃縮した標題化合物（１．３１ｇ，４７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４２７，４２９（Ｍ＋１）。

【0123】

表１９における以下の化合物をｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0124】

【表19】

【0125】

調製例２６
ｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−アジドフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化34】

硫酸銅の０．３３Ｍの溶液を、水（１２ｍＬ）中の硫酸銅（ＩＩ）五水和物（１．０ｇ，２．０ｍｍｏｌ）を溶解させることによって調製する。Ｌ−アスコルビン酸の０．６６Ｍの溶液を、水（１２ｍＬ）のＬ−アスコルビン酸ナトリウム塩（１．５８ｇ，４．０ｍｍｏｌ）を溶解させることによって調製する。エタノール（３．６ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．５００ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、アジ化ナトリウム（０．２２８ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）、１，２−シクロヘキサンジアミン，Ｎ，Ｎ’−ジメチル−，トランス（＋／−）（０．０５４９ｇ，０．３８６ｍｍｏｌ）、０．６６ＭのＬ−アスコルビン酸ナトリウム塩水溶液（０．７７２ｍＬ，０．５０９ｍｍｏｌ）、および水（０．７１ｍＬ）を加え、混合物を窒素でパージする。０．３３Ｍの硫酸銅（ＩＩ）五水和物（０．７７３ｍＬ，０．２５５ｍｍｏｌ）の水溶液を加え、反応物を８０℃で１２分加熱する。反応物を冷水に注ぎ、ＥｔＯＡｃで３度抽出して、青色の混合物を得る。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、粗物質を得て、５％から１００％のヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物（０．４００ｇ，８８％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３９０（Ｍ＋１）。

【0126】

表２０における以下の化合物をｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−アジドフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0127】

【表20】

【0128】

調製例２７
ｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−アミノフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化35】

エタノール（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−アジドフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．３９８ｇ，１．０２ｍｍｏｌ）および炭素上のパラジウム（１０重量％（０．２００ｇ））の混合物を、窒素でパージし、次いで水素でパージする。反応物を、水素（３０ｐｓｉ）下で２時間、室温にて攪拌する。Ｎａ_２ＳＯ_４を反応混合物に加え、メタノールを用いて、珪藻土で濾過し、濾過ケーキをリンスする。溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．３６１ｇ，９７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３６４（Ｍ＋１）。

【0129】

表２１における以下の化合物をｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−アミノフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0130】

【表21】

【0131】

調製例２８
ｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−（５−クロロピコリンアミド）フェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化36】

ＣＨ_２Ｃｌ_２（２．７５ｍＬ）およびＤＭＦ（０．３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−アミノフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．１５ｇ，０．４１３ｍｍｏｌ）、５−クロロピリジン−２−カルボン酸（０．０７８ｇ，０．４９５ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０７３ｇ，０．５３６ｍｍｏｌ）の混合物に、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（０．１０３ｇ，０．５３６ｍｍｏｌ）を加える。反応物を室温で一晩攪拌する。反応混合物を水および５ＮのＮａＯＨ（０．５ｍＬ）で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で３度抽出する。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、粗生成物を、５％から１００％のヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（０．１７６ｇ，８５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：（^３５Ｃｌ／^３７Ｃｌ）５０３，５０５（Ｍ＋１）。

【0132】

表２２における以下の化合物をｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−（５−クロロピコリンアミド）フェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0133】

【表22-1】

【表22-2】

【0134】

調製例２９
ｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（５−フルオロピコリンアミド）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化37】

ラセミ化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（５−フルオロピコリンアミド）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．２２６ｇ，０．４６０ｍｍｏｌ）を、キラルＨＰＬＣ：２．１×２５ｃｍ Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ−Ｈ、５ミクロンのカラム、３０％のメタノール／ＣＯ_２、流量：７０ｍＬ／分、ＵＶ：２３０ｎｍにより精製する。第２の溶出異性体を単離し、鏡像異性的に濃縮した標題化合物（０．０９２ｇ，４１％）を得る。ＥＳ／ＭＳ （ｍ／ｅ）：４９１（Ｍ＋１）。

【0135】

表２３における以下の化合物をｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（５−フルオロピコリンアミド）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートの方法によって実質的に調製する。

【0136】

【表23】

【0137】

調製例３０
ｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（２，４−ジフルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化38】

１，２−ジメトキシエタン（１０ｍＬ）、エタノール（４ｍＬ）および水（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル８ａ−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．３００ｇ，０．６４７ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素でパージし、９７°Ｃまで加熱する。ピリミジン−５−ボロン酸（０．６５５ｇ，５．１８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（１．９０ｇ，５．８３ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）塩化パラジウム（ＩＩ）（０．０９１ｇ，０．１２９ｍｍｏｌ）を一度に加えて、反応物を９７°Ｃで２０分間加熱する。反応物を冷却し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、粗生成物を、５％から１００％ヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物（０．２５８ｇ，８６％）を得る。ＥＳ／ＭＳ （ｍ／ｅ）：４６３（Ｍ＋１）。

【0138】

表２４における以下の化合物を、ｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（２，４−ジフルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0139】

【表24】

２９ 化合物は混合物として回収する。

【0140】

調製例３１
ラセミ化合物（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミンおよびラセミ化合物（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン

【化39】

ジオキサン（１９．２ｍＬ）中の４Ｍの塩化水素の溶液を、ラセミ化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメートおよびラセミ化合物ｔｅｒｔ−ブチル（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（１．８０ｇ，０．９６２ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応物を、室温で３時間攪拌する。混合物を１ＮのＨＣｌ水溶液で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。５Ｎの水酸化ナトリウム水溶液を水層に加え、塩基性にし、ジクロロメタン中の１０％のイソプロピルアルコールで２度抽出する。溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、３％から１０％のメタノール中の２Ｍのアンモニア：ジクロロメタンで溶出するラジアルクロマトグラフィーを用いるシリカゲル上で精製する。物質を、１０％のイソプロピルアミン：３０％の酢酸エチル：６０％のヘキサンで溶出するラジアルクロマトグラフィーを再び用いて精製し、標題化合物をラセミ化合物の２つの成分の混合物（０．２３１ｇ，７３％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３３１（Ｍ＋１）。

【0141】

調製例３２
（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミンおよび（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン

【化40】

ラセミ化合物（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミンおよびラセミ化合物（４ａＳＲ，７ａＳＲ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン（０．２３１ｇ，０．６９７ｍｍｏｌ）の混合物を、３０ｍＬ／分の流量、２２５ｎＭで、３／２のＥｔＯＨ：０．２％ジメチルエチルアミンを有するアセトニトリルで溶出するＣｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ ３×２５ｃｍ カラムを用いて分離し、（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン（Ｔ_Ｒ＝３．１２）（０．０３２ｇ，１４％）を得る：ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３３１（Ｍ＋１）および（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（２−フルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン（Ｔ_Ｒ＝４．４７９）（０．０５８ｇ，２５％）。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３３１（Ｍ＋１）。

【0142】

調製例３３
（７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン

【化41】

ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル７ａ−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（１．０４ｇ，２．７３ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（５ｍＬ）を加え、反応物を室温で１６時間攪拌する。溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、水および５ＮのＮａＯＨで希釈する。水層をＥｔＯＡｃで４度抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除く。粗生成物を、４：１のＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨおよび次いで２：１のＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ中の７ＮのＮＨ_３を用いる１０ｇのＳＣＸカラムで精製し、生成物を溶出し、標題化合物（０．７５６ｇ，９９％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：２８１（Ｍ＋１）。

【0143】

調製例３４
５−（（７ａＳ）−２−アミノ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−２−フルオロフェノール

【化42】

ＣＨ_２Ｃｌ_２（１５ｍＬ）中の（７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−メトキシフェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン（０．７１７ｇ，２．５６ｍｍｏｌ）の−７８°Ｃの溶液に、三臭化ホウ素（１１．２０ｇ，７．６７ｍｍｏｌ）を加える。反応物を、０℃まで加温し、２時間攪拌する。反応物を水で希釈し、ｐＨを７に調節する。水溶液を、ＥｔＯＡｃで３度抽出する（一部のＭｅＯＨを、抽出中に一部の固形物を溶解するのを促進するために加える）。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除く。粗生成物を、４：１のＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨおよび次いで２：１のＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ中の７ＮのＮＨ_３を用いる１０ｇのＳＣＸカラムで精製し、生成物を溶出し、標題化合物（０．５６ｇ，８２％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：２６７（Ｍ＋１）。

【0144】

調製例３５
ｔｅｒｔ−ブチル（７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−ヒドロキシフェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート

【化43】

１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（２０ｍＬ）中の５−（（４ａＲ，７ａＳ）−２−アミノ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−２−フルオロフェノール（０．５２４ｇ，１．９７ｍｍｏｌ）の混合物に、１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（０．４５１ｇ，２．０７ｍｍｏｌ）の溶液を加える。混合物を１６時間、室温で攪拌する。混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで３度抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、粗生成物を、５％から１００％のヘキサン中のＥｔＯＡｃの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物（０．４３６ｇ，６１％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３６７（Ｍ＋１）。

【0145】

調製例３６
５−（（７ａＳ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミド）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−２−フルオロフェニルトリフルオロメタンスルホネート

【化44】

ジクロロメタン（２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（４ａＲ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−ヒドロキシフェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．４２８ｇ，１．１７ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．１４８ｇ，１．８７ｍｍｏｌ）の０°Ｃの混合物に、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（０．３９５ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）を加える。反応物を０°Ｃで４５分間攪拌する。反応物を水および１ＮのＨＣｌ（４ｍＬ）で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で３度抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．６３３ｇ，１００％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４９９（Ｍ＋１）。

【0146】

調製例３７
５−ブロモ−２，４−ジフルオロベンズアルデヒド

【化45】

ヘキサン（１１４ｍＬ，１８２ｍｍｏｌ）中のブチルリチウムの１．６Ｍの溶液を、ジエチルエーテル（２９０ｍＬ）中の１，５−ジブロモ−２，４−ジフルオロベンゼン（４１．３ｇ，１５２ｍｍｏｌ）の−７８°Ｃの溶液に加える。ジメチルホルムアミド（１４．４ｇ，１９８ｍｍｏｌ）を加え、反応物を、−７８°Ｃで１５分間攪拌する。反応物を、１ＮのＨＣｌ（３００ｍＬ）でクエンチし、水で希釈し、酢酸エチルで３度抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、粗物質を得て、０％から５０％のヘキサン中のＣＨ_２Ｃｌ_２の線形勾配でシリカゲルクロマトグラフィーによって３０分間精製し、標題化合物（２０．５１ｇ，６１％）を得る。ＧＣ−ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２２０，２２２。

【0147】

調製例３８
１−（３−ブロモフェニル）ブト−３−エン−１−オール

【化46】

乾燥したジエチルエーテル（２００ｍＬ）中の３−ブロモベンズアルデヒド（１５．８ｇ，８５．６ｍｍｏｌ）の溶液に、０°Ｃにて窒素雰囲気下で攪拌しながら、エーテル（８５．６ｍＬ，８５．６ｍｍｏｌ）中のアリルマグネシウムブロミド溶液を滴下して加える。得られた混合物を、室温まで１時間にわたり加温し、１ＮのＨＣｌ水溶液を加えてクエンチする。反応物をジクロロメタンで抽出し、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗生成物を、０％から１００％のヘキサン中のジクロロメタンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって５０分間にわたって精製し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（１７．０１ｇ，８８％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２２７，２２９（Ｍ＋１）。

【0148】

表２５における以下の化合物を１−（３−ブロモフェニル）ブト−３−エン−１−オールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0149】

【表25】

【0150】

調製例３９
（１−（３−ブロモフェニル）ブト−３−エニルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシラン

【化47】

ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の１−（３−ブロモフェニル）ブト−３−エン−１−オール（１７．０ｇ，７４．９ｍｍｏｌ）、１Ｈ−イミダゾール（１１．８ｇ，１７２．２ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（１３．９ｇ，８９．８ｍｍｏｌ）の溶液を室温で、２時間攪拌する。混合物をジクロロメタンで希釈し、その後、水および飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得る。粗生成物を、５％のヘキサン中の酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（２３．９ｇ，９４％）として得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４４（ｓ，１Ｈ），７．３４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．２４−７．１４（ｍ，２Ｈ），５．７８−５．７０（ｍ，１Ｈ），５．０２−４．９７（ｍ，２Ｈ），４．６５−４．６２（ｍ，１Ｈ），２．４５−２．３１（ｍ，２Ｈ），０．８７（ｓ，９Ｈ），０．０２（ｓ，３Ｈ），０．１２（ｓ，３Ｈ）。

【0151】

表２６における以下の化合物を（１−（３−ブロモフェニル）ブト−３−エニルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシランの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0152】

【表26】

３０ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４８−７．４６（ｍ，１Ｈ），７．２４−７．１６（ｍ，１Ｈ），７．０３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），５．７６−５．６７（ｍ，１Ｈ），５．０２−４．９６（ｍ，２Ｈ），４．６４−４．６１（ｍ，１Ｈ），２．４３−２．３１（ｍ，２Ｈ），０．８７（ｓ，９Ｈ），０．０２（ｓ，３Ｈ），−０．１３（ｓ， ３Ｈ）。
３１ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．６３（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｄｄ，Ｊ＝８．４，９．６Ｈｚ，１Ｈ），５．７６−５．６８（ｍ，１Ｈ），５．０１−４．９５（ｍ，３Ｈ），２．３６（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），０．８６（ｓ，９Ｈ），０．０３（ｓ，３Ｈ），−０．１１（ｓ，３Ｈ）。

【0153】

調製例４０
３−（３−ブロモフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）プロパナール

【化48】

（１−（３−ブロモフェニル）ブト−３−エニルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジメチルシラン（２３．９ｇ，７０．１ｍｍｏｌ）ジクロロメタン（１２０ｍＬ）の溶液を、−７８°Ｃの窒素雰囲気下で冷却する。次いでオゾンを、青色になるまで溶液を通して泡立てる。混合物を窒素でフラッシュする。トリエチルアミン（１４．２ｇ，１４０．２ｍｍｏｌ）を溶液に加える。混合物を室温まで加温し、４時間攪拌する。混合物を減圧下で濃縮する。粗生成物を、０％から８％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２５分間にわたって精製し標題化合物をラセミ化合物の混合物（１７．９ｇ，７４％）として得る：^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ９．７５−９．７４（ｍ，１Ｈ），７．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ），７．３８−７．３６（ｍ，１Ｈ），７．２５−７．２３（ｍ，１Ｈ），７．１８（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），５．１５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．０，７．９Ｈｚ），２．８１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．９，８．０，２．５Ｈｚ），２．６３−２．５７（ｍ，１Ｈ），０．８４−０．８３（ｍ，９Ｈ），０．０２−０．０２（ｍ，３Ｈ），−０．１４（ｓ，３Ｈ）。

【0154】

表２７における以下の化合物を３−（３−ブロモフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）プロパナールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0155】

【表27】

３２ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ９．７４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１，６．６Ｈｚ），７．２５−７．２１（ｍ，１Ｈ），７．０６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），５．１５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．３，７．９Ｈｚ），２．８１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．１，７．９，２．４Ｈｚ），２．６０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１６．１，４．３，１．８Ｈｚ），０．８４（ｓ，９Ｈ），０．０３（ｓ，３Ｈ），−０．１４（ｓ，３Ｈ）。
３３ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ９．７４（ｄｄ，Ｊ＝１．９，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６８−７．６４（ｍ，１Ｈ），６．８３（ｄｄ，Ｊ＝８．２，９．７Ｈｚ，１Ｈ），５．４３（ｄｄｄ，Ｊ＝７．９，３．９，０．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７８（ｄｄｄ，Ｊ＝１６．１，７．９，２．７Ｈｚ，１Ｈ），２．６２（ｄｄｄ，Ｊ＝１６．１，３．９，１．７Ｈｚ，１Ｈ），０．８５（ｓ，９Ｈ），０．０５（ｓ，３Ｈ），−０．１１（ｓ，３Ｈ）。

【0156】

調製例４１
１−（３−ブロモフェニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサ−５−エン−３−オール

【化49】

乾燥したジエチルエーテル（１５０ｍＬ）中の３−（３−ブロモフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）プロパナール（１７．９ｇ，５２．１ｍｍｏｌ）の０°Ｃの溶液に、エーテル（５２．１ｍＬ，５２．１ｍｍｏｌ）中の１Ｍのアリルマグネシウムブロミド溶液を加える。得られた混合物を１時間、室温まで加温する。混合物をジクロロメタンで希釈し、塩化アンモニウムの飽和水溶液を加えてクエンチする。混合物をジクロロメタンで３度抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、標題化合物をラセミ化合物のジアステレオマー混合物（１８．８ｇ，８４％）として得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４５（ｓ，１Ｈ），７．３８−７．３４（ｍ，１Ｈ），７．２４−７．２１（ｍ，１Ｈ），７．１９−７．１５（ｍ，１Ｈ），５．８４−５．７６（ｍ，１Ｈ），５．０９−５．０４（ｍ，１Ｈ），５．００（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），４．８６−４．８０（ｍ，１Ｈ），３．８３−３．７５（ｍ，２Ｈ），２．２３−２．１５（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．６９（ｍ，２Ｈ），０．８９（ｄ，９Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．０６−０．０４（ｍ，３Ｈ），−０．１７（ｄ，Ｊ＝４０．４Ｈｚ，３Ｈ）。

【0157】

表２８における以下の化合物を１−（３−ブロモフェニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサ−５−エン−３−オールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0158】

【表28】

３４ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４９（ｄｔ，Ｊ＝６．６，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２３−７．２０（ｍ，１Ｈ），７．０５（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８２−５．７６（ｍ，１Ｈ），５．０９−５．０４（ｍ，１Ｈ），４．９８（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），４．８８−４．８２（ｍ，１Ｈ），３．８３−３．７４（ｍ，２Ｈ），３．０５−２．２２−２．１５（ｍ，２Ｈ），１．８５−１．７１（ｍ，２Ｈ），０．８８−０．８７（ｍ，９Ｈ），０．０５−０．０４（ｍ，３Ｈ），−０．１７（ｄ，Ｊ＝３４．４Ｈｚ，３Ｈ）。
３５ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．６８−７．６０（ｍ，１Ｈ），６．８３−６．７８（ｍ，１Ｈ），５．８２−５．７６（ｍ，１Ｈ），５．２８−５．２４（ｍ，０．５Ｈ），５．１３−５．０９（ｍ，０．５Ｈ），５．０９−５．０５（ｍ，２Ｈ），３．８２−３．７９（ｍ，１Ｈ），２．９６（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，０．５Ｈ），２．５９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，０．５Ｈ），２．２２−２．１９（ｍ，２Ｈ），１．８３−１．７３（ｍ，２Ｈ），０．８８（ｓ，４．５Ｈ），０．８７（ｓ，４．５Ｈ），０．０６（ｓ，１．５Ｈ），０．０６（ｓ，１．５Ｈ），−０．１１（ｓ，１．５Ｈ），−０．１９（ｓ，１．５Ｈ）。

【0159】

調製例４２
１−（３−ブロモフェニル）ヘキサ−５−エン−１，３−ジオール

【化50】

テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）中の１−（３−ブロモフェニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサ−５−エン−３−オール（１８．８ｇ，４４．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（６６．０ｍＬ，６６．０ｍｍｏｌ）中の１Ｍのテトラブチルアンモニウムフッ素溶液を加える。得られた混合物を室温で２時間、攪拌する。混合物をジクロロメタンで希釈し、その後、水および飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得る。粗生成物を、２０％から４０％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２６分間にわたって精製し、標題化合物をラセミ化合物のジアステレオマー混合物（１１．８ｇ，９９％）として得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５２（ｓ，１Ｈ），７．３８−７．３６（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．２４（ｍ，１Ｈ），７．２２−７．１７（ｍ，１Ｈ），５．８３−５．７５（ｍ，１Ｈ），５．１５−５．１１（ｍ，２Ｈ），５．０３−４．８９（ｍ，１Ｈ），４．００−３．９０（ｍ，１Ｈ），２．３２−２．２１（ｍ，２Ｈ），１．９６−１．８９（ｍ，２Ｈ）。

【0160】

表２９における以下の化合物を１−（３−ブロモフェニル）ヘキサ−５−エン−１，３−ジオールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0161】

【表29】

３６ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５６（ｄｔ，Ｊ＝６．６，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２６−７．２２（ｍ，１Ｈ），７．０９−７．０４（ｍ，１Ｈ），５．８２−５．７６（ｍ，１Ｈ），５．１６−５．１１（ｍ，２Ｈ），５．０５−４．８９（ｍ，１Ｈ），３．９９−３．９３（ｍ，１Ｈ），２．３２−２．２７（ｍ，２Ｈ），１．８９−１．７８（ｍ，２Ｈ）。
３７ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．７７−７．７３（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．７８（ｍ，１Ｈ），５．８２−５．７６（ｍ，１Ｈ），５．２７−５．１５（ｍ，３Ｈ），４．０７−４．０２（ｍ，１Ｈ），３．８５−３．８１（ｍ，０．５Ｈ），３．６２（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，０．５Ｈ），２．４６（ｄｄ，Ｊ＝１．２，２．９Ｈｚ，０．５Ｈ），２．３３−２．３１（ｍ，２．５Ｈ），１．９４−１．８８（ｍ，１Ｈ），１．８５−１．８１（ｍ，−１Ｈ），１．６９（ｄｔ，Ｊ＝１４．５，１０．２Ｈｚ，１Ｈ）。

【0162】

調製例４３
１−（３−ブロモフェニル）−３−ヒドロキシヘキサ−５−エン−１−オン

【化51】

ジクロロメタン（８０ｍＬ）中の１−（３−ブロモフェニル）ヘキサ−５−エン−１，３−ジオール（２．６０ｇ，９．５９ｍｍｏｌ）および酸化マンガン（ＩＶ）（９．８１ｇ，９５．９ｍｍｏｌ）の混合物を加熱し、還流下で４時間、攪拌する。反応混合物を珪藻土のパッドで濾過し、残渣をジクロロメタンで２度洗浄する。濾液を減圧下で濃縮し、標題化合物（２．１２ｇ，８２％）を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ），７．８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．６９−７．５２（ｍ，１Ｈ），７．３５−７．３１（ｍ，１Ｈ），５．９１−５．８２（ｍ，１Ｈ），５．１８−５．１２（ｍ，２Ｈ），４．３２−４．２６（ｍ，１Ｈ），３．０９−３．００（ｍ，２Ｈ），２．３９−２．３０（ｍ，２Ｈ）。

【0163】

表３０における以下の化合物を１−（３−ブロモフェニル）−３−ヒドロキシヘキサ−５−エン−１−オンの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0164】

【表30】

３８ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．１６（ｄｄ，Ｊ＝２．２，６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．６，４．７，２．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１９（ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），５．９１−５．８３（ｍ，１Ｈ），５．１９−５．１５（ｍ，２Ｈ），４．３１−４．３０（ｍ，１Ｈ），３．１２−２．９８（ｍ，２Ｈ），２．３９−２．３６（ｍ，２Ｈ）。
３９ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．１１（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１０．４Ｈｚ，１Ｈ），５．８８−５．７９（ｍ，１Ｈ），５．１５−５．１２（ｍ，２Ｈ），４．２９−４．２６（ｍ，１Ｈ），３．１４−３．０３（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．３５−２．３０（ｍ， ２Ｈ）。

【0165】

調製例４４
１−（３−ブロモフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサ−５−エン−１−オン

【化52】

ＤＭＦ（４０ｍＬ）の１−（３−ブロモフェニル）−３−ヒドロキシヘキサ−５−エン−１−オン（９．０８ｇ，３３．７ｍｍｏｌ）、１Ｈ−イミダゾール（５．３４ｇ，７７．６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（６．２９ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）の混合物を、２時間、室温にて攪拌する。混合物をジクロロメタンで希釈し、その後、水および飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗生成物を、０％から５％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２０分間にわたって精製し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（１１．３ｇ，８８％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）３８３，３８５（Ｍ＋１）。

【0166】

表３１における以下の化合物を１−（３−ブロモフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサ−５−エン−１−オンの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0167】

【表31】

４０ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．１６（ｄｄ，Ｊ＝２．１，６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．６，４．７，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．１９−７．１５（ｍ，１Ｈ），５．９０−５．８２（ｍ，１Ｈ），５．１２−５．０７（ｍ，２Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝７．７，１５．３Ｈｚ，１Ｈ），２．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．６，１５．３Ｈｚ，１Ｈ），２．３８−２．３３（ｍ，２Ｈ），０．８８−０．７８（ｍ，９Ｈ），０．０４−０．０１（ｍ，６Ｈ）。
４１ ^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ８．０５−８．０１（ｍ，１Ｈ），６．９２（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．３，８．０，０．３Ｈｚ，１Ｈ），５．８５−５．７８（ｍ，１Ｈ），５．０６（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０３−５．０１（ｍ，１Ｈ），４．４０−４．３５（ｍ，１Ｈ），３．１２−２．９９（ｍ，２Ｈ），２．３０−２．２７（ｍ，２Ｈ），０．７８（ｓ，９Ｈ），０．０３（ｓ，３Ｈ），−０．０７（ｓ，３Ｈ）。

【0168】

調製例４５
１−ベンジル−６ａ−（３−ブロモフェニル）−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール

【化53】

ＴＨＦ（６０ｍＬ）中の１−（３−ブロモフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサ−５−エン−１−オン（６．８４ｇ，１７．８ｍｍｏｌ）およびＮ−ベンジルヒドロキシルアミン（２．８６ｇ，２３．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｔｉ（ＯＥｔ）_４（８．１４ｇ，３５．７ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を密閉した管中で７０℃まで加熱する。２時間後、温度を８０°Ｃまで上昇させ、３日間、攪拌を続ける。反応混合物を室温まで冷却する。水および酢酸エチルを加え、混合物を１５分間、勢いよく攪拌する。固形物を沈殿させ、有機層および水層を珪藻土のパッドでデカントする。層を分離し、水層を酢酸エチルで３度抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗生成物を、０％から２０％のヘキサン中の酢酸エチルの勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで２０分間、精製し、標題化合物をジアステレオマー混合物（７．４２ｇ，８５％）として得る。ＥＳ／ＭＳｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４８８，４９０（Ｍ＋１）。

【0169】

表３２における以下の化合物を１−ベンジル−６ａ−（３−ブロモフェニル）−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0170】

【表32】

４２ Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）ヒドロキシルアミンをＮ−ベンジルヒドロキシルアミンの代わりに利用した。
４３ Ｎ−（４−メトキシベンジル）ヒドロキシルアミンをＮ−ベンジルヒドロキシルアミンの代わりに利用した。

【0171】

調製例４６
１−べンジル−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−６ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール

【化54】

１，２−ジメトキシエタン（３０ｍＬ）中の１−ベンジル−６ａ−（３−ブロモフェニル）−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール（７．４２ｇ，１５．２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、炭酸ナトリウム（２２．８ｍＬ，４５．６ｍｍｏｌ）、３−メトキシフェニルボロン酸（２．７７ｇ，１８．２ｍｍｏｌ）および（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）塩化パラジウム（ＩＩ）（０．７５９ｇ，０．９１１ｍｍｏｌ）の２Ｍの水溶液を加える。反応混合物を７時間、１１０℃で加熱する。反応物を冷却し、酢酸エチルで希釈し、濾過する。得られた濾液を分離し、水層を、酢酸エチルで３度抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。粗生成物を、１０％から２０％のヘキサン中の酢酸エチルの勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２０分間にわたって精製し、標題化合物（７．５９ｇ，９２％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：５１６（Ｍ＋１）。

【0172】

調製例４７
（２−アミノ−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）シクロペンチル）メタノール

【化55】

酢酸（１０ｍＬ）中の１−ベンジル−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−６ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール（２．０４ｇ，３．７６ｍｍｏｌ）および炭素上のパラジウム（０．４００ｇ）の混合物を、水素雰囲気下（５０ｐｓｉ）で１９時間、室温にて攪拌する。反応物を珪藻土のパッドで濾過し、濾過ケーキをメタノールで３度洗浄し、濾液を減圧下で濃縮する。残渣をジクロロメタン中で溶解させ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を加えてｐＨをｐＨ１２に調節し、ジクロロメタンで３度抽出する。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮させ、標題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４２８（Ｍ＋１）。

【0173】

調製例４８
Ｎ−（４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）−１−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）シクロペンチルカルバモチオイル）ベンズアミド

【化56】

ＴＨＦ（８８ｍＬ）中の（２−アミノ−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）シクロペンチル）メタノール（９．４４ｇ，２２．１ｍｍｏｌ）およびベンゾイルイソチオシアネート（３．４９ｇ，２１．０ｍｍｏｌ）の溶液を、１．５時間、室温で攪拌し、減圧下で濃縮させる。粗生成物を、０％から５％のジクロロメタン中のメタノールの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２７分間にわたり精製し、標題化合物（９．６１ｇ，７０％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：５８９（Ｍ−１）。

【0174】

調製例４９
ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化57】

ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＮ−（４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）−１−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）シクロペンチルカルバモチオイル）ベンズアミド（６．３７ｇ，８．４１ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４．４１ｇ，１６．８ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレート（３．８７ｇ，１６．８ｍｍｏｌ）の別々の溶液に、室温にて加える。反応物を３０分間、攪拌し、減圧下で濃縮する。粗生成物を、１０％から４０％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２６分間にわたり精製し、粗ジアステレオマー混合物（７．３９ｇ，１００％）を得る。混合物を再び、シリカゲルクロマトグラフィー上で精製し、１５％のへキサン中の酢酸エチルで溶出するジアステレオマーを分離し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（１．４７ｇ，２４％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：５７３（Ｍ＋１）。

【0175】

表３３における以下の化合物を、ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの調製例に実質的に記載されるように調製する。

【0176】

【表33】

【0177】

調製例５０
ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−６−ヒドロキシ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化58】

アセトニトリル（６ｍＬ）中のラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（１．４７ｇ，２．３１ｍｍｏｌ）の溶液に、２０〜２５％のフルオロケイ酸水溶液（２．８２ｇ，４．６２ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を、３時間、室温にて攪拌する。反応物を、酢酸エチルで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液でクエンチする。混合物を水およびブラインで洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮させる。粗生成物を、１０％から６０％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって４０分間、精製し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（０．７０９ｇ，６４％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４５９（Ｍ＋１）。

【0178】

調製例５１
Ｎ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−６−ヒドロキシ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化59】

ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−６−ヒドロキシ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．６８９ｇ，１．５０ｍｍｏｌ）を、キラルＨＰＬＣ：２．１×２５ｃｍ Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、５ミクロン、３５％のＩＰＡ／ＣＯ_２、流量：７０ｍＬ／分、ＵＶ：２２５ｎｍにより精製する。第１の溶出異性体を単離し、鏡像異性的に濃縮した標題化合物（０．２４２ｇ，３５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４５９（Ｍ＋１）。

【0179】

調製例５２
Ｎ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−６−メトキシ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化60】

ジクロロメタン（０．６ｍＬ）中のＮ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−６−ヒドロキシ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．０８６ｇ，０．１６９ｍｍｏｌ）および４８％のフルオロホウ酸水溶液（０．０３１ｇ，０．１６９ｍｍｏｌ）の０℃の混合物に、ヘキサン（０．１０１ｍＬ，０．２０２ｍｍｏｌ）中の２Ｍのトリメチルシリルジアゾメタンを加える。混合物を３０分間、０℃にて攪拌し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液に注ぐ。混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。その後、有機層を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶媒を減圧下で取り除き、粗生成物を、１０％から６０％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２０分間にわたり精製し、標題化合物（０．０３８ｇ，４８％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４７３（Ｍ＋１）。

【0180】

調製例５３
Ｎ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−６−（メトキシメトキシ）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化61】

無水ジクロロメタン（０．６ｍＬ）中のＮ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−６−ヒドロキシ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．０８７ｇ，０．１９０ｍｍｏｌ）の攪拌した０°Ｃの溶液に、クロロメトキシメタン（０．０３１ｇ，０．３７９ｍｍｏｌ）を加え、その後、ジイソプロピルエチルアミン（０．０４９ｇ，０．３７９ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を、０℃にて１時間、攪拌し、次いで２４時間にわたって室温まで加温する。混合物をジクロロメタンで希釈し、重炭酸ナトリウム飽和水溶液を加えてクエンチし、ジクロロメタンで３度抽出する。合わせた有機層を水およびブラインで洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮させる。粗生成物を、０％から６０％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２６分間にわたり精製し、標題化合物（０．０８９，９３％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：５０３（Ｍ＋１）。

【0181】

調製例５４
６−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン

【化62】

エタノール中（４ｍＬ）のＮ−（６−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．２００ｇ，０．３４９ｍｍｏｌ）およびヒドラジン（０．５５９ｇ，１．７５ｍｍｏｌ）の混合物を、一晩、１２０℃で攪拌する。混合物を冷却し、酢酸エチルで希釈し、水で洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．１６４ｇ，１００％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４６９（Ｍ＋１）。

【0182】

調製例５５
ラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オール

【化63】

ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール（３．００ｇ，４．７７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ（７．１５ｍＬ，７．１５ｍｍｏｌ）中の１Ｎのテトラブチルアンモニウムフッ素溶液を加える。室温で２時間攪拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得て、ジクロロメタンで希釈し、水およびブラインで洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得て、０％から１０％のジクロロメタン中のメタノールの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって２０分間、精製し、標題化合物をジアステレオマー混合物（２．２６ｇ，１００％）として得る。この混合物を再び、シリカゲルクロマトグラフィー上で精製し、０％から１５％のヘキサン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するジアステレオマーを１５分間にわたり分離し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（０．８５２ｇ，３７％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４５２，４５４（Ｍ＋１）。

【0183】

表３４における以下の化合物をラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0184】

【表34】

４４ ジアステレオマーのラセミ化合物の混合物として単離した。

【0185】

調製例５６
ラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモフェニル）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−メトキシヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール

【化64】

水素化ナトリウム（０．０７６ｇ，１．８９ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（７ｍＬ）中のラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモフェニル）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オール（０．６８４ｇ，１．５７ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に加える。反応物を室温まで１０分間、加温し、次いで０℃まで冷却する。ヨウ化メチル（０．２４６ｇ，１．７３ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で６時間、攪拌する。さらなる水素化ナトリウム（０．０３２ｇ，０．７９０ｍｍｏｌ）およびヨウ化メチル（０．１１２ｇ，０．７９０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１８時間、攪拌する。反応物を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で取り除く。得られた残渣を、１０％のＣＨ_２Ｃｌ_２中の酢酸エチルを用いて、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物（０．４４３ｇ，６３％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４４８，４５０（Ｍ＋１）。

【0186】

表３５における以下の化合物をラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモフェニル）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−メトキシヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾールの方法によって実質的に調製する。

【0187】

【表35】

４５ ジアステレオマーの混合物として単離した。

【0188】

調製例５７
ラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−５−イソプロポキシ−１−（４−メトキシベンジル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール

【化65】

ジクロロメタン（２．５ｍＬ）中のラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−１−（４−メトキシベンジル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オール（１．７２ｇ，４．０７ｍｍｏｌ）の混合物に、トリフルオロメタンスルホン酸銀（２．６２ｇ，１０．２ｍｍｏｌ）および粉末乾燥した４Ａのふるい（１．５０ｇ）を加える。ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中の２−ヨードプロパン（１．７３ｇ，１０．２ｍｍｏｌ）の溶液を、１５分間にわたって混合物に加える。厚い混合物を一晩、室温で攪拌する。混合物をジクロロメタンで希釈し、珪藻土で濾過する。溶媒を減圧下で取り除き、残渣を、０％から１０％のジクロロメタン中の酢酸エチルの線形勾配で、シリカゲルクロマトグラフィーによって１５分間、精製し、標題化合物（０．４６６ｇ，２５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４６４，４６６（Ｍ＋１）。

【0189】

調製例５８
ラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オール

【化66】

ＴＦＡ（４ｍＬ）中のラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オール（０．８５２ｇ，１．７９ｍｍｏｌ）およびトリエチルシラン（０．６２４ｇ，５．３７ｍｍｏｌ）混合物を、３時間、８０℃まで加熱する。反応物を、室温まで冷却し、減圧下で濃縮し、残渣を得て、ＳＣＸカラム上で精製し、その後、ジクロロメタン、メタノール、およびＭｅＯＨ中の７ＮのＮＨ_３で洗浄し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（０．５７ｇ，１００％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）３０２，３０４（Ｍ＋１）。

【0190】

表３６における以下の化合物をラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オールの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0191】

【表36】

４６ ジアステレオマーの混合物として単離した。

【0192】

調製例５９
ラセミ化合物（１ＲＳ，３ＳＲ，４ＲＳ）−３−アミノ−３−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンタノ−ル

【化67】

酢酸（１２．６ｍＬ）中のラセミ化合物（３ａＲＳ，５ＲＳ，６ａＳＲ）−６ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）ヘキサヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｃ］イソオキサゾール−５−オール（０．５７ｇ，１．８９ｍｍｏｌ）および亜鉛（０．６１７ｇ，９．４３ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素雰囲気下で３時間、４２℃まで加熱する。反応物を室温まで冷却し、濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得て、ＳＣＸカラム上で精製し、その後、ジクロロメタン、メタノール、およびＭｅＯＨ中の７ＮのＮＨ_３で洗浄し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（０．５３ｇ，９２％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）３０４，３０６（Ｍ＋１）。

【0193】

表３７における以下の化合物をラセミ化合物（１ＲＳ，３ＳＲ，４ＲＳ）−３−アミノ−３−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンタノ−ルの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0194】

【表37】

４７ ジアステレオマーの混合物として単離した。

【0195】

調製例６０
ラセミ化合物Ｎ−（（１ＳＲ，２ＲＳ，４ＲＳ）−１−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）シクロペンチルカルバモチオイル）ベンズアミド

【化68】

ＴＨＦ（６．３１ｍＬ）中のラセミ化合物（１ＲＳ，３ＳＲ，４ＲＳ）−３−アミノ−３−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンタノ−ル（０．４８ｇ，１．５８ｍｍｏｌ）の溶液に、ベンゾイルイソチオシアネート（０．２６３ｇ，１．５８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１．５時間、攪拌する。溶媒を減圧下で取り除き、粗生成物を、０％から１０％のジクロロメタン中のメタノールの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより２０分間、精製し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（０．６０２ｇ，７６％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４６７，４６９（Ｍ＋１）。

【0196】

表３８における以下の化合物をラセミ化合物Ｎ−（（１ＳＲ，２ＲＳ，４ＲＳ）−１−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）シクロペンチルカルバモチオイル）ベンズアミドの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0197】

【表38】

４８ ジアステレオマーの混合物として単離した。

【0198】

調製例６１
ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−７ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化69】

無水ＴＨＦ（１８ｍＬ）中のラセミ化合物Ｎ−（（１ＳＲ，２ＲＳ，４ＲＳ）−１−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）シクロペンチルカルバモチオイル）ベンズアミド（１．２１ｇ，２．０２ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（０．６９０ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＨＦ（３６ｍＬ）中のジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレート（０．６０６ｇ，２．６３ｍｍｏｌ）の別々の溶液に、室温で加える。反応混合物を室温で１時間、攪拌し、減圧下で濃縮し、残渣を得て、０％から４０％のジクロロメタン中の酢酸エチルの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで１５分間、精製し、標題化合物をラセミ化合物の混合物（０．５５７ｇ，６１％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４４９，４５１（Ｍ＋１）。

【0199】

表３９における以下の化合物をラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−７ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0200】

【表39】

【0201】

調製例６２
Ｎ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−７ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化70】

ラセミ化合物Ｎ−（（４ａＲＳ，６ＲＳ，７ａＳＲ）−７ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．４９２ｇ，１．０９ｍｍｏｌ）を、キラルＨＰＬＣ：カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ ３×２５ｃｍ；溶出液：７５：２５（メタノール：アセトニトリル）；流量：ＵＶ２２５ｎｍで４０ｍＬ／分により精製する。第２の溶出異性体を単離し、鏡像異性的に濃縮した標題化合物（０．１７１ｇ，３５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４４９，４５１（Ｍ＋１）。

【0202】

表４０における以下の化合物をＮ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−７ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0203】

【表40】

【0204】

調製例６３
Ｎ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド

【化71】

１，２−ジメトキシエタン（８ｍＬ）、エタノール（４ｍＬ）、および水（４ｍＬ）の混合物中のＮ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−７ａ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．５８８ｇ，１．３１ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素でパージし、９７℃まで加熱する。ピリミジン−５−ボロン酸（０．８１０ｇ，６．５４ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（２．５６ｇ，７．８４ｍｍｏｌ）、およびビス（トリフェニルホスフィン）塩化パラジウム（ＩＩ）（０．１８４ｇ，０．２６１ｍｍｏｌ）を一度に加え、反応物を３０分間、９７℃で加熱する。反応物を冷却し、水で希釈し、酢酸エチルで２度抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、粗生成物を、０％から４０％のジクロロメタン中の酢酸エチルの線形勾配でシリカゲルクロマトグラフィーにより２０分間、精製し、標題化合物（０．４６４ｇ，７９％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：４４９（Ｍ＋１）。

【0205】

表４１における以下の化合物をＮ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−６−ヒドロキシ−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミドの調製例に記載されるように実質的に調製した。

【0206】

【表41】

４９ ２Ｎの炭酸ナトリウム溶液を炭酸セシウムの代わりに利用する。

【実施例】

【0207】

実施例１
Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド塩酸塩

【化72】

ジオキサン（８３４．８μＬ；３．３ｍｍｏｌ）中の４Ｍの塩化水素の溶液をｔｅｒｔ−ブチル７ａ−（５−（５−フルオロピコリンアミド）−２−フルオロフェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（９１ｍｇ；１６７．０μｍｏｌ）に加え、周囲温度にて攪拌する。２日後、反応混合物を真空内で濃縮する。残渣を少量のジクロロメタンおよびメタノール中で溶解させる。エーテルおよびヘキサンを加える。生成物を塩として沈殿させ、遠心分離により母液から分離し、真空下に置き、残りの溶媒を取り除き標題化合物（５８ｍｇ；１２５μｍｏｌ）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ３９１（Ｍ＋１）；Ｔ_Ｒ＝１．６７５。

【0208】

実施例１ａ
エタノール（６３１．４５ｍＬ）およびジクロロメタン（４２０．９６ｍＬ）の混合物中のＮ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（１７．３ｇ，４２．１０ｍｍｏｌ）の懸濁液に、１，４−ジオキサン（４６．３１ｍＬ，１８５．２２ｍｍｏｌ）中の４Ｍの塩化水素の溶液を加える。混合物を２２℃で１時間、攪拌し、濃縮し、残渣をＥｔＯＨ（２００ｍＬ）で粉砕する。固形物を濾過し、ＥｔＯＨで洗浄する。固形物を水で粉砕し、懸濁液を減圧下で濃縮する。残渣を真空オーブン内で乾燥させ（１８時間、４０℃）、標題化合物を白色の固形物（１７．１ｇ，９４％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３９１（Ｍ＋１）。

【0209】

実施例１ｂ
Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド
水（２８０ｍＬ）中のＮ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド塩酸塩（２０ｇ，４７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、室温で、２Ｎの水酸化ナトリウム水溶液（１．２ｅｑ，２７ｍＬ）を加える。混合物を３０分間、攪拌する。懸濁液を濾過し、固形物を水（３×１００ｍＬ）で洗浄する。固形物を、真空下、４５℃で乾燥させ、標題化合物を白色の固形物として得る。得られた固形物を、以下の２つの方法を介して精製する：
方法Ａ：固形物（１６ｇ）を２４０ｍＬの水中に懸濁し、２Ｎの水酸化ナトリウム水溶液（１．５ｅｑ，３１ｍＬ）を加える。混合物を、２２℃で１５分間、超音波槽に入れ、２２℃で３時間、攪拌する。白色の固形物を濾過し、水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、真空オーブン内で、一晩、４５℃で乾燥させ、標題化合物（１４ｇ）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ３９１（Ｍ＋１）。
方法Ｂ：固形物（３ｇ）をメタノール（４０ｍＬ）中で懸濁し、６２℃から６４℃の間で１５時間、加熱し、Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−４−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミドの遊離塩基の種晶を播種する。混合物を室温まで冷却し、スラリーを濾過する。固形物をメタノールで洗浄し、真空オーブン内で、５０℃で４時間、乾燥させ、標題化合物（２．３ｇ）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ３９１（Ｍ＋１）。

【0210】

実施例２
Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−５−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド二塩酸塩

【化73】

ピリジン（０．４４ｍＬ，５．４６ｍｍｏｌ）を、エタノール（１５ｍＬ）中のＮ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−ベンズアミド−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−５−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（０．２７ｇ，０．５４６ｍｍｏｌ）およびＯ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（０．４５６ｇ，５．４６ｍｍｏｌ）の混合物に加える。得られた混合物を、５０℃で６時間、攪拌する。混合物を室温まで冷却し、３日間、攪拌を続ける。混合物をジクロロメタンおよび０．１ＭのＮａＯＨ水溶液で希釈し、ジクロロメタンで５度、抽出する。合わせた有機相をＭｅＯＨで希釈し、均質な溶液とし、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、５％のジクロロメタン中のメタノールを用いて、シリカゲル上で精製し、標題化合物を遊離塩基（０．１０９ｇ，５１％）として得る。塩化水素を、メタノール中で、約５分間、Ｎ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−５−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド（０．１０９ｇ，０．２７９ｍｍｏｌ）の溶液に通して泡立てる。次いで、溶液を減圧下で濃縮し、高真空上で乾燥させ、標題化合物（０．１２８ｇ，５１％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３９１（Ｍ＋１）。

【0211】

表４２における以下の化合物をＮ−（３−（（４ａＳ，７ａＳ）−２−アミノ−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−５−フルオロフェニル）−５−フルオロピコリンアミド二塩酸塩の調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0212】

【表42】

【0213】

実施例５
Ｎ−（３−（（８ａＳ）−２−アミノ−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−８ａ−イル）フェニル）−５−クロロピコリンアミド二塩酸塩

【化74】

ＣＨ_２Ｃｌ_２（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（８ａＳ）−８ａ−（３−（５−クロロピコリンアミド）フェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．１７２ｇ，０．３４２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を加え、反応物を、室温で一時間、攪拌する。溶媒を減圧下で取り除く。残渣を、４：１のＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ、その後、２：１のＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ中の７ＮのＮＨ_３を用いて、１０ｇのＳＣＸカラム上で精製し、標題化合物を遊離塩基（０．１２７ｇ，９２％）として得る。遊離塩基（０．１２４ｇ，０．３０８ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２で溶解させ、Ｅｔ_２Ｏ（０．６５ｍＬ，０．６０５ｍｍｏｌ）中の１ＭのＨＣｌで処理し、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．１２７ｇ，７８％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ（^３５Ｃｌ／^３７Ｃｌ）４０３，４０５（Ｍ＋１）。

【0214】

表４３における以下の化合物をＮ−（３−（（８ａＳ）−２−アミノ−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−８ａ−イル）フェニル）−５−クロロピコリンアミド二塩酸塩の調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0215】

【表43-1】

【表43-2】

【表43-3】

５０ １，４−ジオキサン中の４ＮのＨＣｌをＴＦＡの代わりに脱保護のために利用して、ＨＣｌ塩を直接得る。
５１ ジクロロメタン／ジエチルエーテル中のＨＣｌガスをＴＦＡの代わりに脱保護のために利用して、ＨＣｌ塩を直接得る。

【0216】

実施例２３
（８ａＳ）−８ａ−（２，４−ジフルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩

【化75】

ＣＨ_２Ｃｌ_２（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル８ａ−（２，４−ジフルオロ−５−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，７，８，８ａ−ヘキサヒドロピラノ［４，３−ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．２５８ｇ，０．５５８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（４ｍＬ）を加え、反応物を、室温で一時間、攪拌する。溶媒を減圧下で取り除き、残渣を得て、水および１ＮのＮａＯＨで希釈し、ｐＨを１２に調節する。水層を、ＥｔＯＡｃで３度抽出する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、粗生成物を、１％から１０％のＣＨ_２Ｃｌ_２中の７ＮのＮＨ_３／ＭｅＯＨの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物を遊離塩基（０．１６５ｇ，６８％）として得る。遊離塩基（０．１６２ｇ，０．４４８ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２中に溶解させ、Ｅｔ_２Ｏ（０．９４ｍＬ，０．９４０ｍｍｏｌ）中の１ＭのＨＣｌで処理し、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．２０８ｇ，８６％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３６３（Ｍ＋１）。

【0217】

実施例２４
（４ａＲ，７ａＳ）−７ａ−（３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩

【化76】

１，２−ジメトキシエタン（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（４ａＲ，７ａＳ）−７ａ−（３−ブロモフェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イルカルバメート（０．８６０ｇ，２．０９ｍｍｏｌ）、ピリミジン−５−ボロン酸（０．４２３ｇ，３．３４ｍｍｏｌ）、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）塩化パラジウム（ＩＩ）（０．１７１ｇ，０．２０９ｍｍｏｌ）の混合物を、窒素雰囲気下で、１００℃まで加熱する。２Ｍの炭酸ナトリウム水溶液（３．１４ｍＬ，６．２７ｍｍｏｌ）を、シリンジで反応混合物に加える。得られた混合物を１１０℃で２０分間、攪拌する。反応物を冷却し、ジクロロメタンで３度、抽出し、合わせた抽出物を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。残渣を、０から２０％のジクロロメタン中のメタノールの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって３０分間、精製し、標題化合物を遊離塩基（０．４８２ｇ，７４％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ： ３１１（Ｍ＋１）。

【0218】

メタノール（２ｍＬ）中の（４ａＲ，７ａＳ）−７ａ−（３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン（０．４８２ｇ，１．５５ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中の４ＮのＨＣｌを室温で加える。得られた混合物を、室温で１時間、攪拌し、減圧下で濃縮し、標題化合物（０．５９５ｇ，１００％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ： ３１１（Ｍ＋１）。

【0219】

表４４における以下の化合物を（４ａＲ，７ａＳ）−７ａ−（３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩の調製例に実質的に記載されるように実質的に調製する。

【0220】

【表44】

【0221】

実施例２６
（７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩

【化77】

１，４−ジオキサン（６ｍＬ）中の５−（（４ａＲ，７ａＳ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−７ａ−イル）−２−フルオロフェニルトリフルオロメタンスルホネート（０．６３０ｇ，１．２６ｍｍｏｌ）、ピリミジン−５−イルボロン酸（０．１８９ｇ，１．５３ｍｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．０３５ｇ，０．１２５ｍｍｏｌ）およびトリス（ベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．０５７ｇ，０．０６２２ｍｍｏｌ）の混合物に、１．２７Ｍのリン酸カリウム水溶液、三塩基、Ｎ−水和物（１．７６ｍＬ，２．２４ｍｍｏｌ）を加える。混合物を７３℃まで加熱し、一晩攪拌する。反応物を冷却し、水およびＥｔＯＡｃで希釈する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、乾燥するまで蒸発させて、粗生成物を、１％から１０％のＣＨ_２Ｃｌ_２中の７ＮのＮＨ_３／ＭｅＯＨの線形勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、標題化合物を遊離塩基（０．１９１ｇ，４６％）として得る。遊離塩基（０．１９１ｇ，０．５８２ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２中で溶解させ、Ｅｔ_２Ｏ（１．１６ｍＬ，１．１６ｍｍｏｌ）中の１ＭのＨＣｌで処理し、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．２４ｇ，４７．５％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３２９（Ｍ＋１）。

【0222】

実施例２７
（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−２−アミノ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−６−オール塩酸塩

【化78】

エタノール（５ｍＬ）中のＮ−（（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−６−ヒドロキシ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．０６１ｇ，０．１３３ｍｍｏｌ）、ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（０．１１１ｇ，１．３ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．１０５ｇ，１．３０ｍｍｏｌ）の混合物を、１５時間、５０℃まで加熱する。混合物を減圧下で濃縮する。粗生成物を、０．５％から１０％のジクロロメタン中のＮＨ_３（メタノール中の７Ｎの溶液）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって、３０分間、精製し、標題化合物を遊離塩基（０．０４１ｇ，８７％）として得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３５５（Ｍ＋１）。Ｅｔ_２Ｏ（０．１３９ｍＬ，０．１３９ｍｍｏｌ）中のＨＣｌの１Ｎの溶液を、少量のジクロロメタンおよびメタノール中の（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−２−アミノ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−６−オール（０．０４１ｇ，０．１１６ｍｍｏｌ）の溶液に加える。溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．０４５ｇ，８６％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３５５（Ｍ＋１）。

【0223】

表４５における以下の化合物を（４ａＲ，６Ｒ，７ａＳ）−２−アミノ−７ａ−（３’−メトキシビフェニル−３−イル）−４，４ａ，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロシクロペンタ［ｄ］［１，３］チアジン−６−オール塩酸塩の調製例に記載されるように実質的に調製する。

【0224】

【表45-1】

【表45-2】

【表45-3】

【0225】

実施例４２
（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（２，４−ジフルオロ−５−（５−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩

【化79】

５Ｎの塩酸水溶液（８．７０ｍＬ）を、メタノール（４ｍＬ）中のＮ−（（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（２，４−ジフルオロ−５−（５−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−イル）ベンズアミド（０．２５２ｇ，０．４３５ｍｍｏｌ）に加え、混合物を９０℃まで加熱する。１８時間後、熱を取り除き、反応混合物のｐＨを５Ｎの水酸化ナトリウム水溶液を用いて塩基性に調節する。混合物を、１０％のジクロロメタン中のイソプロピルアルコールを用いて３度、抽出する。有機層を減圧下で濃縮し、得られた残渣を、メタノール中の３％の２Ｍのアンモニア：ジクロロメタンので溶出するラジアルクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物を遊離塩基として得る。遊離塩基を少量のジクロロメタン中で溶解させ、およびエーテル中の１Ｍの塩化水素を過剰に加える。ヘキサン（１ｍＬ）を加え、溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（０．１２９ｇ，６７％）を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３６６（Ｍ＋１）。

【0226】

表４６における以下の化合物を（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（２，４−ジフルオロ−５−（５−フルオロピリジン−３−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩の方法によって実質的に調製する。

【0227】

【表46】

【0228】

実施例４５
（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩

【化80】

ジエチルエーテル中の１Ｍの塩化水素の溶液を、少量のジクロロメタン中の（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン（２２ｍｇ，６６．５９μｍｏｌ）に過剰に加える。溶媒を減圧下で取り除き、標題化合物（２７ｍｇ，１００％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｅ：３３１（Ｍ＋１）。

【0229】

表４７における以下の化合物を（４ａＳ，７ａＳ）−７ａ−（４−フルオロ−３−（ピリミジン−５−イル）フェニル）−４ａ，５，７，７ａ−テトラヒドロ−４Ｈ−フロ［３，４−ｄ］［１，３］チアジン−２−アミン二塩酸塩の方法によって実質的に調製する。

【0230】

【表47】

【0231】

インビトロでのアッセイ手順
インビトロでの酵素および細胞アッセイのために、試験化合物をＤＭＳＯ中で調製して、１０ｍＭのストック溶液を作製する。そのストック溶液をＤＭＳＯ中で連続希釈して、９６ウェル−丸底ウェルプレート中で、１０ｍＭから１ｎＭの範囲の最終化合物濃度で１０点希釈曲線を得て、その後、インビトロでの酵素および全細胞アッセイを実施する。

【0232】

インビトロでのプロテアーゼ阻害アッセイ
ＢＡＣＥ１ ＦＲＥＴアッセイ
試験化合物の連続希釈を上記のように調製する。化合物をさらにＫＨ_２ＰＯ_４緩衝液中で２０倍に希釈する。各希釈液の１０μＬを、反応混合物（２５μＬの５０ｍＭのＫＨ_２ＰＯ_４、ｐＨ４．６、１ｍＭのＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００、１ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン、および１５μＭのＦＲＥＴ基質）（Ｙａｎｇら，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，９１（６）１２４９−５９（２００４）を参照）を含む対応する低タンパク質結合ブラックプレートの列Ａ〜Ｈで各ウェルに加える。内容物を１０分間プレートシェーカーで十分に混合する。１５μＬのＫＨ_２ＰＯ_４緩衝液中の２００ｐＭのヒトＢＡＣＥ１（１〜４６０）：Ｆｃ（Ｖａｓｓｅｒら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８６，７３５−７４１（１９９９）参照）を、基質および試験化合物を含むプレートに加えて、反応を開始する。プレートシェーカーで簡単に混合した後、０時の混合物のＲＦＵを３５５ｎｍの励起波長、４６０ｎｍの発光波長で記録する。反応プレートをアルミニウム箔で覆い、暗所の加湿オーブン内に、１６〜２４時間、室温で置く。ＲＦＵをインキュベーションの終わりの時点で、０時で用いられたものと同じ励起波長および発光波長の設定を用いて記録する。０時と、インキュベーションの終わりの時点とのＲＦＵの相違は、化合物処理下でのＢＡＣＥ１の活性を表す。ＲＦＵの相違を、阻害濃度に対してプロットし、曲線を４パラメーターロジスティック式にフィットさせて、ＥＣ_５０およびＩＣ_５０の値を得る（Ｓｉｎｈａら，Ｎａｔｕｒｅ，４０２，５３７−５４０（２０００）を参照）。

【0233】

本明細書に例示された化合物を、上記のように実質的に試験し、１μＭ未満のＢＡＣＥ１についてＩＣ_５０の値を示す。以下の例示した化合物を上記のように実質的に試験し、ＢＡＣＥ１について以下の活性を示した。

【0234】

【表48】

【0235】

これらのデータは、表４８の化合物が、インビトロにて、精製された組み換えＢＡＣＥ１酵素活性を阻害することを示す。

【0236】

ヒトＢＡＣＥ１の発現
ヒトＢＡＣＥ１（受託番号：ＡＦ１９０７２５）を、室温−ＰＣＲによって全脳ｃＤＮＡからクローニングする。アミノ酸配列＃１〜４６０に対応するヌクレオチド配列を、ヒトＩｇＧ_１（Ｆｃ）ポリペプチドをコードするｃＤＮＡに挿入する（Ｖａｓｓａｒら，１９９９）。このｈｕＢＡＣＥ１：Ｆｃと名付けたＢＡＣＥ１（１〜４６０）およびヒトＦｃの融合タンパク質をｐＪＢ０２ベクター中に構築する。ヒトＢＡＣＥ１（１〜４６０）：Ｆｃ（ｈｕＢＡＣＥ１：Ｆｃ）を、ＨＥＫ２９３細胞において一過性に発現する。各構築物の２５０μｇのｃＤＮＡをＦｕｇｅｎｅ６と混合し、１リットルのＨＥＫ２９３細胞に加える。トランスフェクションの４日後、馴化培地を精製のために収集する。

【0237】

ｈｕＢＡＣＥ１：Ｆｃの精製
ｈｕＢＡＣＥ１：ＦｃをプロテインＡクロマトグラフィーにより精製する。酵素を少ないアリコートで−８０℃にて保存する。

【0238】

β−セクレターゼ活性の阻害を測定するための全細胞アッセイ
ＨＥＫ２９３Ｓｗｅ全細胞アッセイ
β−セクレターゼ活性の阻害を測定するための慣用の全細胞アッセイは、一般にＳｗｅｄｉｓｈ変異（ＨＥＫ２９３／ＡＰＰ７５１ｓｗと記される）と呼ばれ、Ａｂｅｔａを過剰産生することが示されている（Ｃｉｔｒｏｎら，Ｎａｔｕｒｅ，３６０，６７２−６７４（１９９２））、天然の二重変異Ｌｙｓ６５１Ｍｅｔ６５２からＡｓｎ６５１Ｌｅｕ６５２を含むヒトＡＰＰ７５１ｃＤＮＡを安定して発現するヒト胎児腎臓細胞株ＨＥＫ２９３ｐ（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１５７３）を利用する。インビトロでのＡｂｅｔａ減少アッセイは文献（Ｄｏｖｅｙら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７６，１７３−１８１（２００１）；Ｓｅｕｂｅｒｔら，Ｎａｔｕｒｅ，３６１，２６０（１９９３）；およびＪｏｈｎｓｏｎ−Ｗｏｏｄら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９４，１５５０−１５５５（１９９７）を参照）に記載されている。

【0239】

細胞（２００μＬの培地（１０％のＦＢＳを含むＤＭＥＭ）を含む、３．５×１０^４細胞／ウェルでのＨＥＫ２９３／ＡＰＰ７５１ｓｗ、）を、所望の濃度で阻害剤（ＤＭＳＯで希釈した）の存在／非存在下において３７℃で４〜２４時間インキュベートする。インキュベーションの終わりの時点で、馴化培地を、例えばＡｂｅａｔペプチドの分析によって、β−セクレターゼ活性を証明するために分析する。全Ａｂｅｔａペプチド（Ａｂｅｔａ１〜ｘ）を、捕捉抗体としてモノクローナル２６６、および報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を用いてサンドイッチＥＬＩＳＡによって測定する。あるいは、Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２ペプチドを、Ａｂｅｔａ１〜４０についての捕捉抗体としてモノクローナル２Ｇ３、およびＡｂｅｔａ１〜４２についての捕捉抗体としてモノクローナル２１Ｆ１２を用いてサンドイッチＥＬＩＳＡにより測定する。Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２ＥＬＩＳＡの両方は、報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を使用する。化合物の処理後の馴化培地に放出されるＡｂｅｔａの濃度は、このような条件下でＢＡＣＥ１の活性に対応する。１０点の阻害曲線をプロットし、４パラメーターロジスティック式にフィットさせて、Ａｂｅｔａにより低下した効果についてＥＣ_５０およびＩＣ_５０値を得る。以下の例示した化合物を上記のように実質的に試験し、Ａｂｅｔａにより低下した効果について以下の活性を示した。

【0240】

【表49】

【0241】

これらのデータは、表４９の化合物がインビトロでの細胞内において生来の内因性ヒトＢＡＣＥ１を阻害することを証明する。

【0242】

ＰＤＡＰＰ初代ニューロンアッセイ
確認全細胞アッセイもまた、ＰＤＡＰＰトランスジェニック胎仔マウスから生成した初代ニューロン培養中で実施する。初代皮質ニューロンを、１６日の胎仔のＰＤＡＰＰ胚から調製し、９６ウェルプレート（ＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）および１０％のＦＢＳ中に１５×１０^４細胞／ウェル）で培養する。インビトロで４〜６日後、培地を、Ｂ２７補足物を含む無血清ＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）と取り換え、ニューロンを、所望の濃度で阻害剤（ＤＭＳＯ中で希釈された）の存在／非存在下において３７℃で２４時間、インキュベートする。インキュベーションの終わりの時点で、馴化培地を、例えばＡｂｅｔａペプチドの分析によって、β−セクレターゼ活性の証明のために分析する。全Ａｂｅｔａペプチド（Ａｂｅｔａ１〜ｘ）を、捕捉抗体としてモノクローナル２６６および報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を用いて、サンドイッチＥＬＩＳＡによって測定する。あるいは、Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２ペプチドを、Ａｂｅｔａ１〜４０についての捕捉抗体としてモノクローナル２Ｇ３、およびＡｂｅｔａ１〜４２についての捕捉抗体としてモノクローナル２１Ｆ１２を用いて、サンドイッチＥＬＩＳＡによって測定する。Ａｂｅｔａ１〜４０およびＡｂｅｔａ１〜４２のＥＬＩＳＡの両方は、報告している抗体としてビオチン化３Ｄ６を使用する。化合物処理後の馴化培地に放出されるＡｂｅｔａの濃度は、このような条件下でＢＡＣＥ１の活性に対応する。１０点の阻害曲線をプロットし、４パラメーターロジスティック式にフィットさせて、Ａｂｅｔａにより低下した効果についてＥＣ_５０およびＩＣ_５０値を得る。以下の例示した化合物を上記のように実質的に試験し、Ａｂｅｔａにより低下した効果について以下の活性を示した。

【0243】

【表50】

【0244】

これらのデータは、表５０の化合物がインビトロでの細胞内において生来の内因性ヒトＢＡＣＥ１を阻害することを証明する。

【0245】

インビボでのβ−セクレターゼの阻害
マウス、モルモット、イヌおよびサルを含む、いくつかの動物モデルを、化合物処理後のインビボでのβ−セクレターゼ活性の阻害をスクリーニングするために使用できる。本発明に使用する動物は、野生型、トランスジェニック、または遺伝子ノックアウト動物であってもよい。例えば、Ｇａｍｅｓら，Ｎａｔｕｒｅ３７３，５２３−５２７（１９９５）に記載されるように調製されるＰＤＡＰＰマウスモデルおよび他の非トランスジェニックまたは遺伝子ノックアウト動物は、阻害化合物の存在下においてＡｂｅｔａのインビボでの阻害およびｓＡＰＰｂｅｔａ産生を分析するのに有用である。一般に、２〜１２ヶ月齢のＰＤＡＰＰマウス、遺伝子ノックアウトマウス、または非トランスジェニック動物に、例えばコーン油、シクロデキストラン、リン酸緩衝液、ＰＨＡＲＭＡＳＯＬＶＥ（登録商標）等のビヒクル、または他の適切なビヒクルで調製される化合物を投与する。化合物の投与の１〜２４時間後、動物を屠殺し、脳ならびに脳脊髄液および血漿を、Ａｂｅｔａｓ、Ｃ９９、およびｓＡＰＰフラグメントの分析のために除去する（Ｄｏｖｅｙら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７６，１７３−１８１（２００１）；およびＪｏｈｎｓｏｎ−Ｗｏｏｄら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９４，１５５０−１５５５（１９９７）を参照）。

【0246】

標準的なインビボでの薬理学的研究のために、様々な濃度の化合物を動物に投与し、同時に投与したビヒクル処理したコントロール群と比較する。いくらかの経時変化研究のために、脳組織、血漿、または脳脊髄液を選択した動物から得て、０時で開始してベースラインを確立する。化合物を他の群に投与し、投与後、様々な時間において屠殺する。脳組織、血漿または脳脊髄液を選択した動物から得て、例えば特異的サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイによって、Ａｂｅｔａペプチド、ｓＡＰＰｂｅｔａおよび他のＡＰＰフラグメントを含む、ＡＰＰ切断産物の存在について分析する。試験期間の終わりに、動物を屠殺し、必要に応じて、脳組織、血漿または脳脊髄液を、Ａｂｅｔａペプチド、Ｃ９９およびｓＡＰＰｂｅｔａの存在について分析する。ＡＰＰトランスジェニック動物の脳組織もまた、化合物の処理後のβ−アミロイドプラークの量について分析する。

【0247】

阻害化合物を投与した動物（ＰＤＡＰＰまたは他のＡＰＰトランスジェニックまたは非トランスジェニックマウス）は、ビヒクル処理したコントロールまたは０時でのコントロールと比較した場合、脳組織、血漿、または脳脊髄液におけるＡｂｅｔａまたはｓＡＰＰｂｅｔａの減少、ならびに脳組織におけるβ−アミロイドプラークの低下を示し得る。例えば、若い雌のＰＤＡＰＰマウスに対する実施例１の１０ｍｇ／ｋｇの化合物の皮下投与の３時間後、Ａｂｅｔａ１〜ｘペプチド、Ｃ９９およびｓＡＰＰｂレベルは、ビヒクル処置したマウスと比較して、それぞれ、大脳皮質において、約６４％、６０％、および４４％低下する。同様に、若い雌のＰＤＡＰＰマウスに対する実施例１の１０ｍｇ／ｋｇの化合物の皮下投与の３時間後、Ａｂｅｔａ１〜ｘペプチド、Ｃ９９、およびｓＡＰＰｂレベルは、ビヒクル処置したマウスと比較して、それぞれ、大脳皮質において、約５４％、３４％、および４２％低下する。実施例１の１０ｍｇ／ｋｇの化合物の経口投与の３時間後、脳Ａｂｅｔａ、Ｃ９９およびｓＡＰＰｂの変化と一致して、ＣＳＦ Ａｂｅｔａ１〜ｘおよび１〜４２レベルは、それぞれ、約６２％および６２％低下する。インビボでのＢＡＣＥ阻害のメカニズムと一致して、実施例１の１０ｍｇ／ｋｇの化合物の経口投与の３時間後、ＣＳＦ ｓＡＰＰβレベルは２２％低下し、一方でＣＳＦ ｓＡＰＰαレベルは変化しない。

【0248】

本発明の化合物は好ましくは、種々の経路によって投与される医薬組成物として処方される。最も好ましくは、このような化合物は経口投与用である。このような医薬組成物およびそれを調製するためのプロセスは、当該技術分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏら．，ｅｄｓ，１９^ｔｈｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，１９９５）を参照のこと。

【0249】

式Ｉの化合物は、通常、広範な用量範囲にわたって効果的である。例えば、１日あたりの用量は、通常、体重１ｋｇあたり約０．０１〜約３０ｍｇ／ｋｇの範囲内である。一部の例において、前述の範囲の下限より低い用量レベルがより適切であってもよく、一方、他の場合において、さらに多い用量が、いかなる有害な副作用も引き起こさずに利用されてもよく、従って、上記の用量範囲は、本発明の範囲を限定することを決して意図するものではない。実際に投与される化合物の量は、治療される状態、選択される投与経路、投与される実際の化合物（複数も含む）、年齢、体重、および個々の患者の反応、ならびに患者の症状の重症度を含む、関連する状況を考慮して医師によって決定されることは理解されるだろう。