特許 5675096 肺の疾患の酵素的処置のための組成物及び方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5675096

(24)【登録日】2015年1月9日

(45)【発行日】2015年2月25日

(54)【発明の名称】肺の疾患の酵素的処置のための組成物及び方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/44 20060101AFI20150205BHJP

   A61K 31/095 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 31/375 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 31/573 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 31/7004 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 31/7008 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 33/18 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 33/20 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 33/26 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 38/16 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 38/46 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20150205BHJP

   A61K 47/34 20060101ALI20150205BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20150205BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20150205BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20150205BHJP

【ＦＩ】

   A61K37/50

   A61K31/095

   A61K31/375

   A61K31/573

   A61K31/7004

   A61K31/7008

   A61K33/18

   A61K33/20

   A61K33/26

   A61K37/14

   A61K37/54

   A61K47/10

   A61K47/12

   A61K47/34

   A61P11/00

   A61P31/04

   A61P43/00 111

【請求項の数】14

【全頁数】28

(21)【出願番号】特願2009-510175(P2009-510175)

(86)(22)【出願日】2007年5月10日

(65)【公表番号】特表2009-539764(P2009-539764A)

(43)【公表日】2009年11月19日

(86)【国際出願番号】US2007068688

(87)【国際公開番号】WO2007134180

(87)【国際公開日】20071122

【審査請求日】2010年2月16日

【審判番号】不服2013-4582(P2013-4582/J1)

【審判請求日】2013年3月11日

(31)【優先権主張番号】60/799,535

(32)【優先日】2006年5月10日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】510007012

【氏名又は名称】ラクレード，インコーポレーテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000855

【氏名又は名称】特許業務法人浅村特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ペリコ、マイケル

(72)【発明者】

【氏名】ボスコ、パメラ

【合議体】

【審判長】 内藤 伸一

【審判官】 齋藤 恵

【審判官】 新留 素子

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許第６７０２９９８（ＵＳ，Ｂ２）

【文献】 特開昭６４−０６１４２７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許第４５７６８１７（ＵＳ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００５／１２０５５６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開２００２−３２２０８８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００６−５０３８６５（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

A61K

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

（ａ）過酸化水素と、酸素受容体として作用し過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩との間の反応を触媒するペルオキシダーゼ酵素（ここで、該ペルオキシダーゼ酵素は該バイオサイドを治療有効濃度で生成するのに十分な量で存在する）、
（ｂ）過酸化水素と反応して、酸素受容体として作用し、治療有効濃度のバイオサイドを形成するのに十分な量のバイオサイドを形成することができる塩、
（ｃ）該ペルオキシダーゼ酵素及び酸素受容体として作用する該塩が安定である水性媒質、及び、
（ｄ）該形成されるバイオサイドの収率又は蓄積を増加させるのに有効な量のアミノヘキソース、
を含む治療組成物であって、
該組成物の成分が肺に到達し、肺内で該バイオサイドを生成するような方法でその中の感染又は状態を処置するために肺に投与するために製剤化される組成物であって、
該感染又は状態が肺炎であり、
塩（ｂ）がチオシアン酸塩、ヨウ素酸塩及び塩素酸塩からなる群から選択される陰イオンのアルカリ金属塩である、
組成物。

【請求項2】

請求項１に記載の組成物であって、
（ａ）第１成分であって、
（ｉ）（Ａ）基質の酸化を触媒することにより過酸化水素を生成する、該基質に対して特異的なオキシドレダクターゼ酵素（ここで、第１成分は、該オキシドレダクターゼ酵素が存在する媒質中に、ペルオキシダーゼと反応するのに十分な量の過酸化水素を生成するのに十分な量のオキシドレダクターゼ酵素を含む）、及び、
（Ｂ）ペルオキシダーゼと反応するのに十分な量の過酸化水素を生成するのに十分な量のオキシドレダクターゼ酵素により触媒される反応において酸化可能である基質、
のうちの一方、
（ｉｉ）過酸化水素と、酸素受容体として作用し過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩との間の反応を触媒するペルオキシダーゼ酵素（ここで、該ペルオキシダーゼ酵素は該バイオサイドを治療有効濃度で生成するのに十分な量で存在する）、並びに、
（ｉｉｉ）存在する場合、該酵素及び該酸化可能な基質が安定である水性又は非水性媒質を含む第１成分と、
（ｂ）第２成分であって、
（ｉ）（ａ）に存在しない、該オキシドレダクターゼ酵素及び該オキシドレダクターゼ酵素により触媒される反応において酸化可能である該基質のうちの他方、
（ｉｉ）過酸化水素と反応して、酸素受容体として作用し、治療有効濃度のバイオサイドを形成するのに十分な量のバイオサイドを形成することができる塩、並びに、
（ｉｉｉ）該オキシドレダクターゼ酵素及び該酸化可能な基質のうちの他方並びに酸素受容体として作用する該塩が安定である水性又は非水性媒質、
を含む第２成分と、
を含み、但し、第１成分及び第２成分の媒質のうちの一方は水性である、組成物であって、
オキシドレダクターゼ酵素（ｉ）（Ａ）がグルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、尿酸オキシダーゼ、コリンオキシダーゼ、Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ、Ｄ−グルタミン酸オキシダーゼ、グリシンオキシダーゼ、グリコールオキシダーゼ、Ｌ−ソルボースオキシダーゼ、アルコールオキシダーゼ及びアミンオキシダーゼからなる群から選択され、
基質（ｉ）（Ｂ）がチオシアン酸塩、ヨウ素酸塩及び塩素酸塩からなる群から選択される陰イオンのアルカリ金属塩である、
組成物。

【請求項3】

請求項１に記載の組成物であって、
（ａ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）５．０ｇのプロピレングリコール、及び、
（Ｃ）２５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、及び、
（Ｂ）０．１ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｂ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）１００．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（Ｃ）４９．５ｇのグリセロール、及び、
（Ｄ）０．５ｇのクエン酸、
を含む第１成分、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、及び、
（Ｂ）１．０ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｃ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）０．７５ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（Ｃ）７５．０ｇのソルビトール、及び、
（Ｄ）０．５ｇのラクトフェリン、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、及び、
（Ｂ）０．８ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｄ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）１０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（Ｃ）１．５ｇのリゾチーム、及び、
（Ｄ）６０．０ｇのポリエチレングリコール、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、及び、
（Ｂ）０．９ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｅ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）８０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（Ｃ）５０．０ＩＵのグルコースオキシダーゼ、及び、
（Ｄ）２０．０ｇのグリセリン、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）０．１５ミリモルのβ−Ｄ−グルコース、及び、
（Ｃ）０．１ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｆ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）５．０ｇのグリセロール、
（Ｃ）１．０ｇのソルビン酸カリウム、及び、
（Ｄ）０．７５ＩＵのミエロペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、及び、
（Ｂ）０．２５ミリモルの塩素酸ナトリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｇ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）１００．０ＩＵのミエロペルオキシダーゼ、
（Ｃ）５０００ＩＵのガラクトースオキシダーゼ、及び、
（Ｄ）５０．０ｇのグリセロール、
を含む第１成分、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）１．０ミリモルのチオシアン酸カリウム、及び、
（Ｃ）６０ミリモルのＤ−ガラクトース、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｈ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）５０．０ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ、及び、
（Ｃ）１０．０ｇのポリプロピレングリコール、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）０．００１ミリモルのヨウ素酸カリウム、及び、
（Ｃ）０．７５ｇのアスコルビン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｉ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）１．０ｇのグリセリン、
（Ｃ）５０．０ミリモルのコリン、及び、
（Ｄ）９５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）１０００ＩＵのコリンオキシダーゼ、及び、
（Ｃ）０．６ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｊ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量のグリセリン、及び、
（Ｂ）３０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、及び、
（Ｂ）０．６ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（ｋ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）２０．０ｇのソルビトール、及び、
（Ｃ）５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）２０．０ｇのグリセロール、及び、
（Ｃ）０．０００１ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、並びに、
（ｌ）（ｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）２５．０ｇのグリセロール、
（Ｃ）２０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（Ｄ）１０００ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ、
（Ｅ）０．０１ｇのアスコルビン酸ナトリウム、
（Ｆ）０．０５ｇの硫酸第一鉄、及び、
（Ｇ）０．２５ＩＵのグルコースオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｉｉ）１００グラムあたり
（Ａ）計１００グラムとなる適量の水、
（Ｂ）２５．０ｇのグリセロール、
（Ｃ）０．０５ミリモルのヨウ素酸カリウム、及び、
（Ｄ）４０．０ミリモルのβ−Ｄ−グルコース、
を含む第２成分、
を含む組成物、
の群から選択される、組成物。

【請求項4】

（ａ）の媒質及び（ｂ）の媒質の少なくとも１つが水性である請求項２に記載の組成物。

【請求項5】

該ペルオキシダーゼ酵素が、ラクトペルオキシダーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ミエロペルオキシダーゼ、好酸球ペルオキシダーゼ及びグルタチオンペルオキシダーゼからなる群から選択される請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項6】

ラクトペルオキシダーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ミエロペルオキシダーゼ、好酸球ペルオキシダーゼ及びグルタチオンペルオキシダーゼからなる群から選択される追加のペルオキシダーゼ酵素をさらに含む請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

酸素受容体として作用し、過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる該塩が、チオシアン酸アルカリ金属塩である請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項8】

カタラーゼに特異的な阻害剤を有効量でさらに含む請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項9】

カタラーゼに特異的な該阻害剤がアスコルビン酸の塩である請求項８に記載の組成物。

【請求項10】

鉄塩をさらに含む請求項９に記載の組成物。

【請求項11】

該媒質が水、グリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール及びそれらの混合物からなる群から各々独立して選択され、但し、該媒質のうちの少なくとも一方はかなり大きな割合の水を含む請求項２に記載の組成物。

【請求項12】

緩衝剤をさらに含む請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項13】

リゾチーム、ラクトフェリン及びステロイドからなる群から選択される成分をさらに含む請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項14】

該肺炎が肺炎球菌性肺炎、連鎖球菌性肺炎、ブドウ球菌性肺炎、ヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）の感染により引き起こされる肺炎及びマイコプラズマ肺炎からなる群から選択される請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（相互参照）
本出願は、２００６年５月１０日に出願されたＭｉｃｈａｅｌ Ｐｅｌｌｉｃｏ及びＰａｍｅｌａ Ｂｏｓｃｏによる仮特許出願番号６０／７９９，５３５号、表題「肺の疾患の酵素的処置のための組成物及び方法（Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｕｎｇ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）」の優先権を主張し、その全体が参照として明細書中に援用される。

【背景技術】

【0002】

本発明は、肺炎並びに他の肺及び副鼻腔（ｓｉｎｕｓ）の感染を罹患している患者のための酵素的処置に関する。

【0003】

現在、ベンチレータ誘導性の肺炎が、感染による病院内での死亡の主要な原因の１つである。そのような感染は院内感染としばしば称される。

【0004】

マイコプラズマニューモニエ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）は、ペニシリン、セファロスポリン及びバンコマイシンなどの多くの抗生物質に耐性である。マイコプラズマニューモニエは、しばしば「歩く肺炎」又は「原発性異型肺炎」と呼ばれる肺炎を引き起こす。

【0005】

他の肺炎の例は、連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ヘモフィルス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）属及びクラミジアを含む多くの種の細菌により引き起こされうるがこれらに限定されない。

【0006】

この疾患は、２つの型、気管支肺炎及び大葉性肺炎に分けられうる。

【0007】

１９７０年代初期にパプアニューギニア及び南アフリカで出現した肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）の多抗生物質耐性の型は、偶然の出来事と考えられるが、多抗生物質耐性は現在世界中に及び、１９９５年以来急激に増加している。ペニシリン耐性の増加に続いてセファロスポリンに対する耐性及び多剤耐性がある。ペニシリンに対する耐性の発生率は、１９８７年の＜０．０２％から１９９４年の３％まで、１９９８年にはアメリカ合衆国のいくつかのコミュニティーにおいては３０％、いくつかの他の国の地域においては８０％まで増加した。他の抗生物質に対する耐性が同時に出現し、トリメトプリム／スルファに対する耐性が２６％、セフォタキシムに対する耐性が９％、セフォタキシムに対する耐性が３０％、マクロライドに対する耐性が３０％、多剤に対する耐性が２５％であった。耐性のある生物体は、完全に悪性のままである。

【0008】

種々のペルオキシダーゼが、哺乳動物を感染から防御するのに重要な役割を果たしている。最も重要なペルオキシダーゼは、ラクトペルオキシダーゼ、ミエロペルオキシダーゼ及び好酸球ペルオキシダーゼである。これら種々のペルオキシダーゼは、唾液、乳汁、膣分泌物中、及び近年肺及び副鼻腔において見出されている。ペルオキシダーゼ酵素は、潜在的に毒性の過酸化水素を除去し、したがってフリーラジカルによる損傷に対する身体防御の重要な部分でもある。

【0009】

口内において、粘膜にコロニーを形成する細菌により過酸化水素が形成されるため、過酸化水素に対する防御の必要がある。唾液中で、ラクトペルオキシダーゼは、チオシアネートの存在下に、過酸化水素を次亜チオシアン酸塩（⁻ＯＳＣＮ）、酸素分子（Ｏ_２）及び水に変換することにより過酸化水素を解毒する。次いで、この次亜チオシアン酸イオンは、過酸化水素生成細菌を阻害する。したがって、ラクトペルオキシダーゼは唾液の抗菌防御の鍵となる部分を形成する。

【0010】

乳汁中の二番目に最も豊富なタンパク質は、ラクトペルオキシダーゼである。１９２４年にＨａｎｓｓｅｎは、サルモネラパラチフサ（Ｓ．ｐａｒａｔｙｐｈｏｓａ）を含むサルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）属などの細菌に対する乳汁の細菌特性は、そのペルオキシダーゼ活性の結果であると示唆した。その後、多くの研究によりその活性が確認された。１９７６年以降、Ｔｈｏｍａｓ及び共同研究者は細菌性スルフヒドリル及びタンパク質の酸化物質として⁻ＯＳＣＮ−ＨＯＳＣＮを確立した。

【0011】

「気道由来のペルオキシダーゼの単離及び特徴付け（Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ａｉｒｗａｙ）」の研究において、Ｓａｌａｔｈｅ及びＨｏｌｄｅｒｂｙは、ペルオキシダーゼが気道由来の過酸化水素を除去することを示した。過酸化水素は、気道炎症の重要なメディエーターである。これらは、このペルオキシダーゼがラクトペルオキシダーゼと似ているが、他のペルオキシダーゼ（ミエロペルオキシダーゼ、好酸球ペルオキシダーゼ及びグルタチオンペルオキシダーゼを含む）と異なることを示した。口腔及び膣内においてみられると同様に、ペルオキシダーゼはフリーラジカルを制御し、殺生物性化合物の機能を触媒する。これは特に感染中に重要である。例えば、細菌である肺炎連鎖球菌は、肺組織に炎症を起こさせる過酸化水素を大量に生成する。著者らは、気管分泌物中に見出されたペルオキシダーゼ活性を気道ペルオキシダーゼ（ＡＰＯ）と呼んだ。唾液中のラクトペルオキシダーゼと同様のこのペルオキシダーゼは、細菌、真菌及びウイルスに対して殺生物性であり、気道炎症中に過酸化水素のスカベンジャーとして作用するようである。２０００年にＧｅｒｓｅｎ、Ｓａｂａｔｅｒ及びＳｃｕｒｉにより発表された「気道のバクテリアクリアランスにおけるラクトペルオキシダーゼシステム機能（Ｔｈｅ Ｌａｃｔｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ Ｓｙｓｔｅｍ Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ Ａｉｒｗａｙｓ）」という表題の研究において、気道ペルオキシダーゼは乳汁ラクトペルオキシダーゼと同一であることが示された。これらのデータはまた、ラクトペルオキシダーゼシステムが気道の防御システムに主に寄与することを示した。前に述べたように、ラクトペルオキシダーゼシステムは、重要なフリーラジカルスカベンジャーである。研究は、肺炎連鎖球菌感染は肺胞上皮に対する重大な損傷を伴うことを示した。

【0012】

身体の他の部分においてみられるように、ラクトペルオキシダーゼシステムは通常、他のペルオキシダーゼ、リゾチーム及びラクトフェリンとともに身体から有害な生物を除くのに非常に有効に作用する。しかしながら、重度の感染時には、この防御システムが完全に破壊されることがある。感染に加えて、高濃度の過酸化水素を引き起こす別の可能性のある原因が、急性呼吸不全又はＡＲＤＳ（急性呼吸促迫症候群）を罹患している患者において見出される。急性呼吸不全又はＡＲＤＳの患者は、対照の患者より高濃度の過酸化水素を示す。

【0013】

いくつかの特許は、抗菌又は殺生物効果を生じる酵素システムの使用を記載する。

【0014】

Ｏｒｎｄｏｒｆｆ（１９８３）による米国特許第４，３７０，１９９号は、酸化剤（例えば、過酸化水素）の存在下で植物デヒドロゲナーゼ酵素（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ）を利用して、ハロゲン化物塩（例えば、ヨウ化カリウム又は塩化ナトリウム）を酸化し、微生物に毒性である酸化産物を生成する酵素的触媒バイオサイドシステムの添加により、工業用プロセス流中において微生物を殺し、その成長を阻害する方法を開示している。

【0015】

Ｈｏｏｇｅｎｄｏｏｒｎら（１９７９）による米国特許第４，１５０，１１３号及びＨｏｏｇｅｎｄｏｏｒｎら（１９７９）による米国特許第４，１７８，３６２号は、それぞれ酵素歯磨き粉及び酵素チュアブル歯磨き剤を開示し、これらは唾液及び歯垢中に存在するグルコースに作用し過酸化水素を生成するグルコースオキシダーゼを含む。この特許権保有者は、スルフヒドリル基を有する酵素システムを介して口腔細菌が糖を含む食品の解糖を生じさせることに注目し、唾液中に存在するラクトペルオキシダーゼが酸素を過酸化水素から口腔細菌に移し、スルフヒドリル基含有酵素の酸化によりスルフヒドリル基がジスルフィド基に酸化され不活性酵素となる手段を提供することを指摘している。さらに、チオシアン酸カリウムを用いて歯磨き剤が処方しうることを開示している。

【0016】

Ｐｅｌｌｉｃｏら（１９８１）による米国特許第４，２６９，８２２号は、殺菌歯磨き剤を開示し、これは歯磨き剤の口腔適用において過酸化水素及びアンモニアを生成する基質に特異的な酸化アミノ酸基質及びオキシドレダクターゼ酵素を含み、使用前の安定性は歯磨き剤に存在する水の量を制限することにより維持される。

【0017】

Ｐｅｌｌｉｃｏら（１９８５）による米国特許第４，５３７，７６４号は、酵素歯磨き剤を開示し、これは歯磨き剤の口腔適用において過酸化水素を生成するためにβ−Ｄ−グルコース及びグルコースオキシダーゼを含み、使用前の安定性は歯磨き剤中の水を歯磨き剤の重量をベースに約１０重量％より少なく制限することにより維持される。

【0018】

Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙら（１９８６）による米国特許第４，５７６，８１７号は、身体の接触塗布のための酵素的包帯及びパッドを開示し、これは例えば血清においてβ−Ｄ−グルコース、水及び酸素間の反応を触媒し、過酸化水素を生成するグルコースオキシダーゼを含む。この包帯及びパッドはペルオキシダーゼ及び酸化可能な塩（例えば、ナトリウム又はカリウムのチオシアン塩、塩化物又はヨウ化物塩は、過酸化水素及びペルオキシダーゼの存在下それぞれ細菌阻害剤として作用する次亜シアン酸塩、次亜塩素酸塩及び次亜ヨウ素酸塩に酸化される）をさらに含みうる。

【0019】

Ｐｅｌｌｉｃｏら（１９８６）による米国特許第４，５６４，５１９号は、二酵素（ｄｉ−ｅｎｚｙｍａｔｉｃ）チュアブル歯磨き剤を開示し、これは例えば歯磨き剤を噛む際に過酸化水素を生成するためにグルコース及びグルコースオキシダーゼを含み、過酸化水素と反応して次亜チオシアン酸塩細菌阻害剤を生成するためのチオシアン酸塩及びラクトペルオキシダーゼをさらに含み、チュアブル歯磨き剤中の未結合の水を約１．０重量パーセントより少ない量に制限することにより、そして結合及び未結合の水の総量を約１０重量パーセントより少ない量に制限することにより、使用前の安定性が維持される。

【0020】

Ｐｅｌｌｉｃｏら（１９８６）による米国特許第４，５７８，３６５号は、二酵素歯磨き剤を開示し、これは例えば歯磨き剤の口腔適用において過酸化水素を生成するためのグルコース及びグルコースオキシダーゼを含み、過酸化水素と反応して次亜シアン酸塩を生成するためにチオシアン酸塩及びラクトペルオキシダーゼをさらに含み、歯磨き剤中の水を歯磨き剤の重量をベースに約１０重量％より少なく制限することにより使用前の安定性が維持される。

【0021】

Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ（１９８６）による米国特許第４，６１７，１９０号は、例えば、還元乳において陰イオン細菌阻害剤である次亜ヨウ素酸塩を生成するためのグルコース、グルコースオキシダーゼ、ペルオキシダーゼ及びヨウ化カリウムを含む酵素粉末ミルクを開示する。

【0022】

Ｐｅｌｌｉｃｏ（１９９４）による米国特許第５，３３６，４９４号は、口で噛む酵素でコートされたペット製品を開示し、これは例えば製品を口で噛む際に過酸化水素を生成するためにβ−Ｄ−グルコース及びグルコースオキシダーゼを含み、過酸化水素と反応して陰イオン細菌阻害剤である次亜ヨウ素酸塩を生成するためにペルオキシダーゼ及び酸素受容陰イオンのアルカリ金属塩（例えば、ヨウ化カリウム）をさらに含みうる。

【0023】

Ｐｅｌｌｉｃｏ（１９９５）による米国特許第５，４５３，２８４号は、１０重量パーセントを超える水分含量を有する水性酵素歯磨き剤を開示し、これは例えば歯磨き剤の口腔適用において過酸化水素を生成するためにβ−Ｄ−グルコース及びグルコースオキシダーゼを含み、過酸化水素と反応して陰イオン細菌阻害剤を生成するためにペルオキシダーゼ及び酸化可能なアルカリ金属塩（例えば、ナトリウム又はカリウムのチオシアン酸塩、塩化物塩又はヨウ化物塩）をさらに含みうる。使用前の安定性は、歯磨き剤が約８００から約７５，０００センチポイズの粘度を有するような量の水溶性増粘剤の添加により維持される。

【0024】

したがって、肺を含む呼吸器に送達され、過酸化水素のような過酸化物の分解を触媒することにより感染及び炎症に効果がありうる酵素活性を利用する組成物及び方法の必要性がある。明細書中の過酸化水素又は他の過酸化物の酵素分解を含む多くの公知の方法及び組成物があるが、これらの方法及び組成物は、酵素活性が感染及び炎症に効果を与える形態で呼吸器への酵素活性の送達方法を提供しない。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0025】

本発明の１つの実施様態は、
（１）第１成分であって、
（ａ）（ｉ）基質の酸化を触媒することにより過酸化水素を生成する、該基質に対して特異的なオキシドレダクターゼ酵素（ここで、第１成分は、該オキシドレダクターゼ酵素が存在する媒質中に、ペルオキシダーゼと反応するのに十分な量の過酸化水素を生成するのに十分な量のオキシドレダクターゼ酵素を含む）、及び、
（ｉｉ）ペルオキシダーゼと反応するのに十分な量の過酸化水素を生成するのに十分な量のオキシドレダクターゼ酵素により触媒される反応において酸化可能である基質、
のうちの一方、
（ｂ）過酸化水素と、酸素受容体として作用し過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩との間の反応を触媒するペルオキシダーゼ酵素（ここで、該ペルオキシダーゼ酵素はバイオサイドを治療有効濃度で生成するのに十分な量で存在する）、並びに、
（ｃ）存在する場合、該酵素及び該酸化可能な基質が安定である水性又は非水性媒質、
を含む第１成分と、
（２）第２成分であって、
（ａ）（１）に存在しない、該オキシドレダクターゼ酵素及び該オキシドレダクターゼ酵素により触媒される反応において酸化可能である該基質のうちの他方、
（ｂ）過酸化水素と反応して、酸素受容体として作用し、治療有効濃度のバイオサイドを形成するのに十分な量のバイオサイドを形成することができる塩、並びに、
（ｃ）オキシドレダクターゼ酵素及び酸化可能な基質のうちの他方並びに酸素受容体として作用する該塩が安定である水性又は非水性媒質、
を含む第２成分と、
を含み、但し、第１成分及び第２成分の媒質のうちの一方は水性である治療組成物である。

【0026】

１つの代替例において、（１）の媒質及び（２）の媒質は両方水性である。別の代替例において、（１）及び（２）の媒質のうちの一方は水性であり、（１）及び（２）の媒質のうちの他方は非水性である。

【0027】

典型的には、オキシドレダクターゼ酵素は、グルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、尿酸オキシダーゼ、コリンオキシダーゼ、Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ、Ｄ−グルタミン酸オキシダーゼ、グリシンオキシダーゼ、グリコールオキシダーゼ、Ｌ−ソルボースオキシダーゼ、アルコールオキシダーゼ及びアミンオキシダーゼからなる群から選択される。典型的にはペルオキシダーゼ酵素は、ラクトペルオキシダーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ミエロペルオキシダーゼ、好酸球ペルオキシダーゼ及びグルタチオンペルオキシダーゼからなる群から選択される。この組成物は、追加のペルオキシダーゼ酵素をさらに含みうる。

【0028】

典型的には、酸素受容体として作用し、過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩はチオシアン酸塩、ヨウ素酸塩及び塩素酸塩からなる群から選択される陰イオンのアルカリ金属塩である。典型的には、アルカリ金属塩はナトリウム塩及びカリウム塩からなる群から選択される。

【0029】

この組成物は、カタラーゼに特異的な阻害剤を有効量でさらに含みうる。典型的には、カタラーゼに特異的な阻害剤は、アスコルビン酸の塩である。典型的には、アスコルビン酸の塩は、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カリウム、アスコルビン酸カルシウム、パルミチン酸アスコルビル及びそれらの混合物からなる群から選択される。この組成物は、鉄塩をさらに含みうる。典型的には、鉄塩は、硫酸第一鉄、塩化第一鉄及びヨウ化第一鉄からなる群から選択される。

【0030】

この組成物は、形成されるバイオサイドの収率又は蓄積を増加させるのに有効な量のアミノヘキソースをさらに含みうる。典型的には、アミノヘキソースは、アミノグルコースである。典型的には、アミノグルコースは、グルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン及びそれらの混合物から選択される。

【0031】

本組成物において、媒質は、水、グリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール及びそれらの混合物からなる群から各々独立して選択されうるが、媒質のうちの少なくとも１つはかなり大きな割合の水を含む。

【0032】

この組成物は、緩衝剤をさらに含みうる。典型的には、緩衝剤は、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸カリウム及びステアリン酸カルシウムからなる群から選択される。

【0033】

この組成物は、リゾチーム、ラクトフェリン又はステロイドのうちのいずれか若しくはすべてをさらに含みうる。典型的には、ステロイドは、ヒドロコルチゾン、ベクロメタゾン、ブデノシド、シクレソニド、フルニソリド、フルチカゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン及びトリアムシノロン並びにそれらの塩、溶媒和物、類似体、同族体、生物学的等価体、加水分解産物、代謝産物、前駆体及びプロドラッグからなる群から選択される。好ましくは、ステロイドはヒドロコルチゾンである。

【0034】

本発明による治療組成物の別の実施形態は、
（１）過酸化水素と、酸素受容体として作用し過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩との間の反応を触媒するペルオキシダーゼ酵素、（ここで該ペルオキシダーゼ酵素は該バイオサイドを治療有効濃度で生成するのに十分な量で存在する）、
（２）過酸化水素と反応して、酸素受容体として作用し、治療有効濃度のバイオサイドを形成するのに十分な量のバイオサイドを形成することができる塩、及び、
（３）該ペルオキシダーゼ酵素及び酸素受容体として作用する該塩が安定である水性媒質、
を含む組成物である。

【0035】

本発明の特定の実施形態は、
（１）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約８０ｇの水、
（ｉｉ）約２０ｇのグリセロール、及び、
（ｉｉｉ）約５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．０１ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（２）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９５．０ｇの水、
（ｉｉ）約５．０ｇのプロピレングリコール、及び、
（ｉｉｉ）約２５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．１ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（３）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約５０．０ｇの水、
（ｉｉ）約１００．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約４９．５ｇのグリセロール、及び、
（ｉｖ）約０．５ｇのクエン酸、
を含む第１成分、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約１．０ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（４）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約２５．０ｇの水、
（ｉｉ）約０．７５ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約７５．０ｇのソルビトール、及び、
（ｉｖ）約０．５ｇのラクトフェリン、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．８ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（５）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約４０．０ｇの水、
（ｉｉ）約１０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約１．５ｇのリゾチーム、及び、
（ｉｖ）約６０．０ｇのポリエチレングリコール、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．９ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（６）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約８０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約５０．０ＩＵのグルコースオキシダーゼ、及び、
（ｉｖ）約２０．０ｇのグリセリン、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約０．１５ミリモルのβ−Ｄ−グルコース、及び、
（ｉｉｉ）約０．１ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（７）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９４．０ｇの水、
（ｉｉ）約５．０ｇのグリセロール、
（ｉｉｉ）約１．０ｇのソルビン酸カリウム、及び、
（ｉｖ）約０．７５ＩＵのミエロペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．２５ミリモルの塩素酸ナトリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（８）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約４５．０ｇの水、
（ｉｉ）約１００．０ＩＵのミエロペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約５０００ＩＵのガラクトースオキシダーゼ、及び、
（ｉｖ）約５０．０ｇのグリセロール、
を含む第１成分、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約１．０ミリモルのチオシアン酸カリウム、及び、
（ｉｉｉ）約６０ミリモルのＤ−ガラクトース、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（９）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９０．０ｇの水、
（ｉｉ）約５０．０ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ、及び、
（ｉｉｉ）約１０．０ｇのポリプロピレングリコール、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約９９．２５ｇの水、
（ｉｉ）約０．００１ミリモルのヨウ素酸カリウム、及び、
（ｉｉｉ）約０．７５ｇのアスコルビン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（１０）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９９．０ｇの水、
（ｉｉ）約１．０ｇのグリセリン、
（ｉｉｉ）約５０．０ミリモルのコリン、及び、
（ｉｖ）約９５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約１０００ＩＵのコリンオキシダーゼ、及び、
（ｉｖ）約０．６ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（１１）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇのグリセリン、及び、
（ｉｉ）約３０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．６ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（１２）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約８０．０ｇの水、
（ｉｉ）約２０．０ｇのソルビトール、及び、
（ｉｉｉ）約５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約８０．０ｇの水、
（ｉｉ）約２０．０ｇのグリセロール、及び、
（ｉｉｉ）約０．０００１ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、並びに、
（１３）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約７５．０ｇの水、
（ｉｉ）約２５．０ｇのグリセロール、
（ｉｉｉ）約２０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｖ）約１０００ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ、
（ｖ）約０．０１ｇのアスコルビン酸ナトリウム、
（ｖｉ）約０．０５ｇの硫酸第一鉄、及び、
（ｖｉｉ）約０．２５ＩＵのグルコースオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約７５．０ｇの水、
（ｉｉ）約２５．０ｇのグリセロール、
（ｉｉｉ）約０．０５ミリモルのヨウ素酸カリウム、及び、
（ｉｖ）約４０．０ミリモルのβ−Ｄ−グルコース、
を含む第２成分、
を含む組成物、
の群から選択される治療組成物を含むが、これらに限定されない。

【0036】

本発明の別の様態は、肺の疾患又は状態を処置するためにそれらを必要とする患者において本発明による組成物を使用する方法である。一般に本方法は、組成物の成分が肺に達し、肺内でバイオサイドを発生させて肺の疾患又は状態を処置する経路により肺の疾患又は状態を罹患している患者に本発明による組成物を投与するステップを含む。

【0037】

１つの代替例において、疾患又は状態は、肺炎球菌性肺炎、連鎖球菌性肺炎、ブドウ球菌性肺炎、ヘモフィルスの感染により引き起こされる肺炎及びマイコプラズマ肺炎のような肺炎である。或いは、疾患又は状態は、急性呼吸不全又は急性呼吸促迫症候群である。

【0038】

典型的には、組成物は、ベンチレータ、ベポライザー又はネブライザーを介して肺に取り込まれる。

【0039】

（発明の詳細な説明）
本発明の１つの実施様態は、
（１）第１成分であって、
（ａ）（ｉ）基質の酸化を触媒することにより過酸化水素を生成する、該基質に対して特異的なオキシドレダクターゼ酵素（ここで、第１成分は、該オキシドレダクターゼ酵素が存在する媒質中に、ペルオキシダーゼと反応するのに十分な量の過酸化水素を生成するのに十分な量のオキシドレダクターゼ酵素を含む）、及び、
（ｉｉ）ペルオキシダーゼと反応するのに十分な量の過酸化水素を生成するのに十分な量のオキシドレダクターゼ酵素により触媒される反応において酸化可能である基質、
のうちの一方、
（ｂ）過酸化水素と、酸素受容体として作用し過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩との間の反応を触媒するペルオキシダーゼ酵素（ここで、該ペルオキシダーゼ酵素は該バイオサイドを治療有効濃度で生成するのに十分な量で存在する）、並びに、
（ｃ）存在する場合、該酵素及び該酸化可能な基質が安定である水性又は非水性媒質、
を含む第１成分と、
（２）第２成分であって、
（ａ）（１）に存在しない、該オキシドレダクターゼ酵素及びオキシドレダクターゼ酵素により触媒される反応において酸化可能である該基質のうちの他方、
（ｂ）過酸化水素と反応して、酸素受容体として作用し、治療有効濃度のバイオサイドを形成するのに十分な量のバイオサイドを形成することができる塩、並びに、
（ｃ）該オキシドレダクターゼ酵素及び該酸化可能な基質のうちの他方並びに酸素受容体として作用する該塩が安定である水性又は非水性媒質、
を含む第２成分と、
を含み、但し、第１成分及び第２成分の媒質のうちの一方は水性である治療組成物である。この実施形態は特に、追加の内因性過酸化水素がないか又は疾患経過により生成される最小量の内因性過酸化水素のみがある真菌により引き起こされるような疾患及び状態の処置に適している。したがって、この実施形態において、酸化可能な基質及び基質に特異的なオキシドレダクターゼ酵素は、有効量のバイオサイドを生成するのに十分な量の過酸化水素を確かにするために添加される。

【0040】

典型的には、組成物は、約０．５から約５００国際単位のオキシドレダクターゼ酵素を含む。典型的には、組成物は、約０．０１５から約０．６ミリモルの酸化可能な基質を含む。典型的には、組成物は、約０．０５から約３０国際単位のペルオキシダーゼ酵素を含む。典型的には、組成物は、酸素受容体として作用する塩を約０．０００１から約０．０１ミリモル含む。

【0041】

１つの代替例において、第１及び第２成分の媒質は、両方水性媒質である。別の代替例において、第１成分の媒質は、グリセロールのような非水性媒質でありうる。本明細書で使用される場合、用語「水性」は、媒質中にかなりの割合の水が存在する限りグリセロール又はソルビトールのような非水性成分を排除しない。

【0042】

成分は、以下の実施例に示されるように第１と第２の成分の間で置き換え可能である。例えば、オキシドレダクターゼ酵素により触媒される反応において酸化可能な基質は第１成分に含まれ、オキシドレダクターゼ酵素は第２成分に含まれうる。

【0043】

１種を超えるペルオキシダーゼ酵素を含みうる。例えば、第１成分は、ラクトペルオキシダーゼ及び西洋ワサビペルオキシダーゼの両方を含みうる。他のペルオキシダーゼの組合せを使用しうる。

【0044】

第１成分及び第２成分を別々に調製し、使用する前に混合することができる。

【0045】

本明細書で使用される場合、用語国際単位（ＩＵ）は、酵素に関して定義された標準アッセイ条件下、１分間あたり１マイクロモルの基質の変換を触媒する酵素の量として定義される。

【0046】

オキシドレダクターゼ酵素は、典型的にはグルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、尿酸オキシダーゼ、コリンオキシダーゼ、Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ、Ｄ−グルタミン酸オキシダーゼ、グリシンオキシダーゼ、グリコールオキシダーゼ、Ｌ−ソルボースオキシダーゼ、アルコールオキシダーゼ及びアミンオキシダーゼからなる群から選択される。或いは参考として明細書中に援用されるＳｃｈｉｌｌｅｒらによる米国特許第４，３４０，４４８号に記載されるように、他の酵素が代替として使用されうる（例えば、ニトロエタンオキシダーゼ、Ｄ−アスパラギン酸オキシダーゼ、Ｌ−アミノ酸オキシダーゼ、ピリドキサミンリン酸オキシダーゼ、エタノールアミンオキシダーゼ、ピルビン酸オキシダーゼ、シュウ酸オキシダーゼ、ヘキソースオキシダーゼ、コレステロールオキシダーゼ、アリールアルコールオキシダーゼ、ピリドキシン４−オキシダーゼ、デヒドロオロチン酸オキシダーゼ、ラソステロールオキシダーゼ、サルコシンオキシダーゼ、Ｎ−メチルアミノ酸オキシダーゼ、Ｎ^６−メチルリシンオキシダーゼ、６−ヒドロキシ−Ｌ−ニコチンオキシダーゼ、６−ヒドロキシ−Ｄ−ニコチンオキシダーゼ、３−ヒドロキシアントラニル酸オキシダーゼ、アルデヒドオキシダーゼ及びキサンチンオキシダーゼ）。

【0047】

これらの酵素に関して、グルコースオキシダーゼはβ−Ｄ−グルコース、水及び酸素の反応を触媒し、過酸化水素及びグルコン酸を生成する。ガラクトースオキシダーゼは、Ｄ−ガラクトース及び酸素の反応を触媒し、過酸化水素及びＤ−ガラクト−ヘキソジアルドースを生成する。尿酸オキシダーゼは、尿酸、水及び酸素の反応を触媒し、過酸化水素、アラントイン及び二酸化炭素を生成する。コリンオキシダーゼは、コリン及び酸素の反応を触媒し、過酸化水素及びベタインアルデヒドを生成する。Ｄ−アミノ酸オキシダーゼは、Ｄ−プロリン、Ｄ−メチオニン、Ｄ−イソロイシン、Ｄ−アラニン、Ｄ−バリン又はＤ−フェニルアラニンのようなＤ−アミノ酸の水及び酸素との反応を触媒し、過酸化水素、アンモニア及び酸化されたＤ−アミノ酸に相当するα−ケト酸を生成する。Ｄ−グルタミン酸オキシダーゼは、Ｄ−グルタミン酸、水及び酸素の反応を触媒し、過酸化水素、アンモニア及び２−ケトグルタル酸を生成する。グリシンオキシダーゼは、グリシン、水及び酸素の反応を触媒し、過酸化水素、アンモニア及びグリオキシル酸を生成する。グリコール酸オキシダーゼ（２−ヒドロキシ酸オキシダーゼとしても公知）は、グリコール酸及び酸素の反応を触媒し、２−ケト酢酸及び過酸化水素を生成する。Ｌ−ソルボースオキシダーゼは、Ｌ−ソルボース及び酸素の反応を触媒し、５−デヒドロ−Ｄ−フルクトース及び過酸化水素を生成する。アルコールオキシダーゼは、低級一価アルコール又は不飽和アルコール及び酸素の反応を触媒し、相当するアルデヒド及び過酸化水素を生成する。アミンオキシダーゼは、典型的には第一級アミンであるが、場合によっては第二級又は第三級アミンでもあるアミン、水及び酸素の反応を触媒し、相当するアルデヒド、アンモニア及び過酸化水素を生成する。例示的な反応において、グルコースオキシダーゼは、外耳に適用する間にβ−Ｄ−グルコース、水及び酸素の反応を触媒し、過酸化水素及びグルコン酸を生成する。

【0048】

ペルオキシダーゼ酵素は、典型的にはラクトペルオキシダーゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ミエロペルオキシダーゼ、好酸球ペルオキシダーゼ及びグルタチオンペルオキシダーゼのうちの一方である。

【0049】

酸素受容体として作用し過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩は、典型的にはチオシアン酸塩、ヨウ素酸塩又は塩素酸塩のような陰イオンのアルカリ金属塩である。このアルカリ金属塩は、典型的にはナトリウム又はカリウムの塩であるが、リチウム又はセシウムのような他のアルカリ金属塩が代わりに使用されうる。

【0050】

本発明による組成物における使用に適した多くの好ましいオキシダーゼの特性が公知である。例えば、黒色アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）由来のグルコースオキシダーゼは、１５０，０００の分子量を有することが決定されている（Ｐａｚｕｒら（１９６５））。この酵素は、２分子の酸化還元補酵素フラビンアデニンジヌクレオチド（ＦＡＤ）を含む糖タンパク質である。アミノ酸組成は決定されている。酵素の等電点は４．２である。酵素の最適ｐＨは５．５であり、４〜７の広範なｐＨ範囲を有する。酵素の阻害剤は、一価の銀イオン並びに二価の水銀及び銅イオンを含む。

【0051】

ダクチリウムデンドロイデス（Ｄａｃｔｙｌｉｕｍ ｄｅｎｄｒｏｉｄｅｓ）由来のガラクトースオキシダーゼは、分子量４２，０００を有する。これは１モルあたり１グラム原子の銅を含む金属酵素である。アミノ酸組成は決定されている。酵素の最適ｐＨは７である。

【0052】

ブタ肝臓又は牛肉肝臓由来の尿酸オキシダーゼ（ウリカーゼ）は、分子量１００，０００を有する。これは１モルあたり１グラム原子の銅を含む金属酵素である。酵素の等電点は６．３である。酵素の最適ｐＨは９である。

【0053】

ブタ腎臓由来のＤ−アミノ酸オキシダーゼは、分子量９０，０００を有する。この酵素は、２分子のフラビンアデニンジヌクレオチドを含む糖タンパク質である。酵素の最適ｐＨは９．１である。特定の重金属は酵素の阻害剤である。

【0054】

酸化可能な基質は、典型的には治療組成物中に液体１ミリリットルあたり約０．０１５ミリモルから組成物１グラムあたり約０．６ミリモルの濃度で存在する。好ましくは、酸化可能な基質は、治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．０２５ミリモルから組成物１グラムあたり約０．１ミリモルの濃度で存在する。酸化受容体として作用する塩は、典型的には治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．０００１ミリモルから約０．０１ミリモルの濃度で存在する。酸素受容体として作用する塩は、好ましくは治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．００１ミリモルから約０．００６ミリモルの濃度で存在する。

【0055】

典型的には、オキシドレダクターゼ酵素は治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．５ＩＵから約５００ＩＵの濃度で存在する。好ましくは、オキシドレダクターゼ酵素は治療組成物中に組成物１グラムあたり約１０ＩＵから約４０ＩＵの濃度で存在する。オキシドレダクターゼ酵素は、必要に応じて１グラムあたり又は１ミリリットルベースの国際単位で濃度を明記したラベルを有する乾燥又は液体の形態で供給される。

【0056】

上記のように、本発明による治療組成物はまた、第２の酵素を有する。この第２の酵素は、ペルオキシダーゼである。適したペルオキシダーゼは、ラクトペルオキシダーゼである。ラクトペルオキシダーゼは糖タンパク質であり、１つの商業的実施形態において、牛乳由来の凍結乾燥粉末である。この商業的ペルオキシダーゼは、８０ＩＵ／ｍｇの活性及びヨウ素化Ｌ−チロシンとして推定分子量９３，０００を有する。ラクトペルオキシダーゼについて報告される物理化学的特性として、分子量７８，０００、アミノ酸組成を反映する部分比容０．７４、及びラクトペルオキシダーゼ１モルあたり１．０モルのヘムの存在が挙げられる。上記のように、西洋ワサビペルオキシダーゼ、ミエロペルオキシダーゼ、好酸球ペルオキシダーゼ及びグルタチオンペルオキシダーゼを含む他のペルオキシダーゼが代わりとして使用されうるが、これらに限定されない。

【0057】

ペルオキシダーゼは、典型的には治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．０５ＩＵから約３０ＩＵの濃度で存在し、好ましくは、ペルオキシダーゼは治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．１ＩＵから約１．０ＩＵの濃度で存在する。

【0058】

酵素システムの操作可能な整合性は、商業的グルコースオキシダーゼ及び粘膜組織に存在するカタラーゼの存在により影響されうる。本発明の酵素システムの外部にあるカタラーゼは、過酸化水素をめぐってペルオキシダーゼと競合する。カタラーゼの存在を介して過酸化水素の損失を減らすため、カタラーゼに特異的な酵素阻害剤は有効量で、有利に本発明による治療組成物に取り込まれうる。カタラーゼに特異的な、適した酵素阻害剤として、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カリウム、アスコルビン酸カルシウム、パルミチン酸アスコルビル又はこれらの混合物のようなアスコルビン酸の塩が挙げられるがこれらに限定されず、本発明による治療組成物中に含まれうる。本発明による組成物中のアスコルビン酸塩の有効濃度は、治療組成物１グラムあたり約１×１０^−６から約１×１０^−４ミリモルである。硫酸第一鉄、塩化第一鉄又はヨウ化第一鉄のような鉄塩はまた、カタラーゼ阻害剤の役割をするアスコルビン酸塩の増強剤として本発明による治療組成物に取り込まれうる。特に好ましい鉄塩は、硫酸第一鉄である。

【0059】

本発明による治療組成物はまた、酸化陰イオン殺生剤の収率又は蓄積を増加させるために有利にアミノヘキソースとともに処方され、アミノヘキソースの量は酸化陰イオン殺生剤の収率又は蓄積を増加させるために効果的である。典型的には、アミノヘキソースはアミノグルコースであるが、アミノガラクトースのような他のアミノヘキソースが代わりとして使用されうる。典型的には、アミノグルコースはグルコサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン及びそれらの混合物からなる群から選択される。アミノグルコースは、典型的には治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．０００１ミリモルから約０．００２ミリモルの濃度で存在する。好ましくは、アミノグルコースは治療組成物中に組成物１グラムあたり約０．０００３ミリモルから約０．００１ミリモルの濃度で存在する。

【0060】

上記の媒質は、典型的には水、グリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール及びそれらの混合物からなる群から各々独立して選択されるが、媒質のうちの少なくとも１つはかなり大きな割合の水を含む。本明細書で使用される場合、用語「かなり大きな割合の水」は、イオンが効果的に溶媒和され、イオン種の関与を必要とする酵素反応が効果的に進められうるように２つの成分が混合される場合に十分な量の水として定義される。さらに、非水性媒質は、酵素に対して不変性であり、酵素により触媒される反応の触媒作用に適した媒質として供される実質的に等価な特性を有する溶媒を含みうる。この媒質は、典型的には組成物中に総濃度約８０重量パーセントから約９６重量パーセントで存在する。好ましくは、この媒質は、組成物中に総濃度約９０重量パーセントから約９６重量パーセントで存在する。媒質及びその濃度は、適切な圧力応答応用特性を有する組成物を提供するように選択される。

【0061】

いくつかの代替例において、治療組成物の活性化された酵素システムの生成物は、グルコン酸のような弱い有機酸を含む。この場合、これは有機酸を中和するための緩衝剤を有する組成物を製剤化するのに有利である。適した緩衝剤として、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸カリウム又はステアリン酸カルシウムのようなステアリン酸の塩が挙げられるが、これらに限定されない。特に好ましいステアリン酸の塩は、ステアリン酸ナトリウムである。これらの塩は、組成物中に約６．０重量パーセントまでの濃度で存在しうる。典型的には、この塩は組成物中に約２．０重量パーセントから約６．０重量パーセントの量で存在する。クエン酸はまた、緩衝剤として使用されうる。

【0062】

この組成物は、ソルビン酸ナトリウム又はソルビン酸カリウムのようなソルビン酸の塩をさらに含みうる。好ましいソルビン酸の塩は、ソルビン酸カリウムである。

【0063】

酵素のリゾチーム、タンパク質のラクトフェリン及び抗炎症薬剤（例えば、これらに限定されないがヒドロコルチゾン、ベクロメタゾン、ブデノシド、シクレソニド、フルニソリド、フルチカゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン及びトリアムシノロンを含むステロイド）並びにこれらの塩、溶媒和物、類似体、同族体、生物学的等価体、加水分解産物、代謝産物、前駆体及びプロドラッグのような補助的な治療物質は、本発明の酵素製剤に添加されうる。特に好ましいステロイドは、ヒドロコルチゾンである。

【0064】

着色剤、キレート剤、防腐剤及び安定剤を含む薬学分野において一般に公知の他の成分は、本発明による治療組成物に取り込まれうるが、但し、これらの追加の成分は、本発明による組成物の活性が依存する酸化還元反応を阻害しない。

【0065】

流動性を有する液体の形態における二酵素治療組成物は、任意の適した方法（例えば乾燥成分を液体成分にかき混ぜながら均一の混合物が得られるまで混合することにより）で調製されうるが、但し、酵素を含むせん断性成分は、これら成分に対するせん断衝撃を最小にするために最後に添加される。酵素が添加される場合、酵素を含むタンパク質を変性する傾向を有する極端な温度、ｐＨ及びイオン強度は避けられるべきである。以下の組成物製剤の流動性を有する液体は、以下に記載されるように使用されうる。例えば、液体は、適用のために適したディスペンサーに充填されうる。

【0066】

本発明の別の実施形態において、オキシドレダクターゼ酵素及び酸化可能な基質は除外される。本実施形態において、組成物はペルオキシダーゼ酵素及び酸素受容体として作用する塩を含み、組成物は肺で起こるように内因性の過酸化水素を分解することにより作用する。

【0067】

一般的に組成物の本実施形態は、
（１）過酸化水素と、酸素受容体として作用し過酸化水素と反応してバイオサイドを形成することができる塩との間の反応を触媒するペルオキシダーゼ酵素（ここで該ペルオキシダーゼ酵素は該バイオサイドを治療有効濃度で生成するのに十分な量で存在する）、
（２）過酸化水素と反応して、酸素受容体として作用し、治療有効濃度のバイオサイドを形成するのに十分な量のバイオサイドを形成することができる塩、及び、
（３）該ペルオキシダーゼ酵素及び酸素受容体として作用する該塩が安定である水性媒質、
を含む。

【0068】

ペルオキシダーゼ酵素及び酸素受容体として作用する塩は上記のとおりである。

【0069】

典型的には、この代替例において、組成物は約０．０５から約３０国際単位のペルオキシダーゼ酵素を含む。典型的には、組成物は約０．０００１から約０．０１ミリモルの酸素受容体として作用する塩を含む。

【0070】

組成物は、実施例に示されるように２つのパートに製剤化されうる。この代替例において、１つのパートはペルオキシダーゼ酵素を含み、他方のパートは酸素受容体として作用する塩を含む。この代替例において、１つのパートは非水性媒質を含みうるが、但し、２つのパートが合わせられる場合、合わせた媒質は水性である。しかしながらこの媒質は、これらに限定されないがグリセロール、ソルビトール、プロピレングリコール又はこれらの混合物のような上記の非水性溶媒をさらに含む。

【0071】

上記のように、この組成物の実施形態は、カタラーゼに効果的な阻害剤を有効量でさらに含みうる。この組成物の実施形態は、上記のように鉄塩をさらに含みうる。この組成物の実施形態はまた、上記のように形成されるバイオサイドの収率又は蓄積を増加させるのに有効な量のアミノヘキソースをさらに含みうる。この組成物の実施形態はまた、上記のように緩衝剤をさらに含みうる。さらにこの組成物の実施形態は、上記のようにリゾチーム、ラクトフェリン又はステロイドのいずれか又はすべてをさらに含みうる。

【0072】

本発明の特定の実施形態は、
（１）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約８０ｇの水、
（ｉｉ）約２０ｇのグリセロール、及び、
（ｉｉｉ）約５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．０１ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（２）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９５．０ｇの水、
（ｉｉ）約５．０ｇのプロピレングリコール、及び、
（ｉｉｉ）約２５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．１ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（３）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約５０．０ｇの水、
（ｉｉ）約１００．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約４９．５ｇのグリセロール、及び、
（ｉｖ）約０．５ｇのクエン酸、
を含む第１成分、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約１．０ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（４）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約２５．０ｇの水、
（ｉｉ）約０．７５ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約７５．０ｇのソルビトール、及び、
（ｉｖ）約０．５ｇのラクトフェリン、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．８ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（５）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約４０．０ｇの水、
（ｉｉ）約１０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約１．５ｇのリゾチーム、及び、
（ｉｖ）約６０．０ｇのポリエチレングリコール、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．９ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（６）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約８０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約５０．０ＩＵのグルコースオキシダーゼ、及び、
（ｉｖ）約２０．０ｇのグリセリン、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約０．１５ミリモルのβ−Ｄ−グルコース、及び、
（ｉｉｉ）約０．１ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（７）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９４．０ｇの水、
（ｉｉ）約５．０ｇのグリセロール、
（ｉｉｉ）約１．０ｇのソルビン酸カリウム、及び、
（ｉｖ）約０．７５ＩＵのミエロペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．２５ミリモルの塩素酸ナトリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（８）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約４５．０ｇの水、
（ｉｉ）約１００．０ＩＵのミエロペルオキシダーゼ、
（ｉｉｉ）約５０００ＩＵのガラクトースオキシダーゼ、及び、
（ｉｖ）約５０．０ｇのグリセロール、
を含む第１成分、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約１．０ミリモルのチオシアン酸カリウム、及び、
（ｉｉｉ）約６０ミリモルのＤ−ガラクトース、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（９）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９０．０ｇの水、
（ｉｉ）約５０．０ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ、及び、
（ｉｉｉ）約１０．０ｇのポリプロピレングリコール、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約９９．２５ｇの水、
（ｉｉ）約０．００１ミリモルのヨウ素酸カリウム、及び、
（ｉｉｉ）約０．７５ｇのアスコルビン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（１０）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約９９．０ｇの水、
（ｉｉ）約１．０ｇのグリセリン、
（ｉｉｉ）約５０．０ミリモルのコリン、及び、
（ｉｖ）約９５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、
（ｉｉ）約１０００ＩＵのコリンオキシダーゼ、及び、
（ｉｖ）約０．６ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（１１）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇのグリセリン、及び、
（ｉｉ）約３０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約１００ｇの水、及び、
（ｉｉ）約０．６ミリモルのヨウ素酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、
（１２）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約８０．０ｇの水、
（ｉｉ）約２０．０ｇのソルビトール、及び、
（ｉｉｉ）約５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約８０．０ｇの水、
（ｉｉ）約２０．０ｇのグリセロール、及び、
（ｉｉｉ）約０．０００１ミリモルのチオシアン酸カリウム、
を含む第２成分、
を含む組成物、並びに、
（１３）（ａ）１００グラムあたり
（ｉ）約７５．０ｇの水、
（ｉｉ）約２５．０ｇのグリセロール、
（ｉｉｉ）約２０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、
（ｉｖ）約１０００ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ、
（ｖ）約０．０１ｇのアスコルビン酸ナトリウム、
（ｖｉ）約０．０５ｇの硫酸第一鉄、及び、
（ｖｉｉ）約０．２５ＩＵのグルコースオキシダーゼ、
を含む第１成分、並びに、
（ｂ）１００グラムあたり
（ｉ）約７５．０ｇの水、
（ｉｉ）約２５．０ｇのグリセロール、
（ｉｉｉ）約０．０５ミリモルのヨウ素酸カリウム、及び、
（ｉｖ）約４０．０ミリモルのβ−Ｄ−グルコース、
を含む第２成分、
を含む組成物、
の群から選択される治療組成物を含むが、これらに限定されない。

【0073】

本発明の別の様態は、肺の疾患又は状態を処置するためにそれらを必要とする患者において本発明による組成物を使用する方法である。一般に本方法は、組成物の成分が肺に達し、肺内でバイオサイドを発生させて肺の疾患又は状態を処置する経路により肺の疾患又は状態を罹患している患者に本発明による組成物を投与するステップを含む。

【0074】

本組成物は、ベンチレータ、ベポライザー又はネブライザーを介して肺に導入されうる。酵素、過酸化水素及び基質間の反応は非常に速いので、典型的には本組成物は２つのパートで投与され、第１成分及び第２成分は別々に投与される。そうでなければこの反応は、上部肺気道（ｕｐｐｅｒ ｌｕｎｇ ｔｒａｃｔ）においてより強力に起こりうるが、肺の下部においては十分強力ではない。

【0075】

非常に低用量の吸入療法は最小限の副作用で最適な治療を提供するので、エアロゾル治療はほぼ理想的なリスク対効果比を達成できるようになる。しかしながら、エアロゾル化により投与される薬物の治療効果は、薬物自体の薬理学的特性だけでなく、送達デバイスの特徴にも依存する。送達デバイスの特徴は、肺に沈着する薬物の量及び気道における薬物分布のパターンに影響を与える。

【0076】

エアロゾルは微粒子の浮遊懸濁物である。この粒子は固体又は液体でありうる。エアロゾル粒子は多分散であり（すなわち粒子は様々なサイズである）、エアロゾル粒子のサイズ分布は対数正規分布で最もよく記載される。粒子は積もり（堆積）、お互いに付着し（凝集する）、管組織及び粘膜などの組織に付着する（沈着）する傾向がある。エアロゾルにより送達される粒子は、これらの空気力学的挙動に基づいて都合よく特徴づけられうる。１つのパラメーターは空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）である。定義により１μＭのＭＭＡＤを有する粒子分布は、単位密度及び１μＭの直径の液滴と同じ平均沈降速度を有する。

【0077】

呼吸器システムに影響を及ぼす変数でもあるエアロゾル粒子のサイズは、気道における吸入エアロゾルの沈着に影響を与える。一方で、直径が１０μＭより大きい粒子は肺に沈着する可能性はない。しかしながら、０．５μＭより小さい粒子は肺胞に到達する可能性があるか又は吐き出されうる。したがって、１μＭと５μＭの間の直径を有する粒子は、下気道に最も効果的に沈着される。これらのサイズの粒子は、肺の疾患又は状態の処置のための治療物質の送達に最も効果的である。

【0078】

呼吸に適した液滴内に含まれるエアロゾル質量のパーセンテージ（すなわち、５μＭより小さい直径を有する液滴）は、使用される吸入デバイスに依存する。ゆっくりで安定した吸入は、肺の末梢部分に浸透する粒子の数を増加させる。吸入容量が増加すると、エアロゾルは気管支樹へとより末梢に浸透しうる。吸入の完了による呼吸停止期間は、肺の末梢に浸透した粒子を重力により気道へと定着させることができる。典型的に急性喘息を有する患者において観察される増加した吸気流速は、吸入した薬物の損失の増加を生じる。これはエアロゾル粒子が上気道及び最初のいくらかの気管支部分の分岐で衝突するために起こる。肺気道疾患と関連する他の因子はまた、エアロゾル沈着を変えうる。

【0079】

エアロゾルの投与において、鼻は肺に粒子が沈着する前に効率的に粒子を捕捉してしまう。そのためエアロゾル化粒子の口呼吸が好ましい。エアロゾル化粒子は多くの部位から失われる。一般的に小気道に到達するネブライザー投与の量は、≦１５％である。多くの場合、約９０％の吸入用量が飲み込まれ、次いで消化管から吸収される。気道に到達する用量のごくわずかはまた血流に吸収される。そのため飲み込まれた用量の一部は吸収され、経口製剤と同様の方法で代謝されるが、気道に到達する用量の一部は、血流に吸収され、静脈内投与と同様の方法で代謝される。

【0080】

（肺へのエアロゾル送達を介して）薬物が局所的に投与される場合、望ましい治療効果は局所組織濃度に依存する。さらに経肺吸収に影響を与える因子を考慮するべきである。

【0081】

治療エアロゾルは一般に、ジェットネブライザー内での液体の噴霧により又は静止して貯蔵している液体の振動（超音波噴霧）により生成される。製剤化前のエアロゾルもまた投与されうる。後者の例として、ＭＤＩ及びドライパウダーデバイスが挙げられる。

【0082】

すべてのジェットネブライザーは同様な操作原理を介して作動し、普通の香水アトマイザーに代表される。液体は密封容器の下部に配置され、エアロゾルは、デバイスを通るコンプレッサー又は圧縮されたガスボンベのいずれかからの空気の噴出により発生される。超音波ネブライザーは、約１ｍＨｚの振動数でトランスデューサー上にある液体を振動させることによりエアロゾルを生成する。これはデバイスから患者に気流により運ばれる粒子の集団を生成する。粒子の量、サイズ及び分布の異なるエアロゾルがネブライザーにより生成され、これはネブライザーの設計及び操作方法に依存する。すべてのネブライザーが最適な効果を提供するのに必要とされる仕様（ＭＭＡＤ、流れ、出力）を有するわけではないことを注意すべきである。近年の研究は、健常ボランティアにおいて肺沈着を４つのネブライザーで比較し、ネブライザーに最初に充填された用量のパーセンテージで表される平均肺エアロゾル沈着が２〜１９％の範囲であったことを示した。

【0083】

利便性及び有効性のため、定量噴霧吸入器（ＭＤＩ）は、外来患者への吸入薬物送達のために使用されるおそらく最も広く使用される治療エアロゾルである。現在使用のほとんどのＤＭＩは、プロペラントに薬物の懸濁液を含む。２つの主要なＭＤＩコンポーネントがある：（ｉ）プロペラント、活性薬剤及び定量チャンバーを含む密閉のプラスチック又は金属シリンダーであるキャニスター；及び（ｉｉ）キャニスターを保持し患者の気道に向かって放出されるエアロゾルを導く成形されたプラスチック容器であるアクチュエーター。

【0084】

プロペラント混合物は最適な薬物送達に望ましい蒸気圧及びスプレー特性を達成するように選択される。クロロフルオロカーボンは以前使用されていたが、環境問題のため非塩素化プロペラントが現在使用されている。通常１μＭより小さい微粉化された薬物粒子を、加圧（液化）プロペラントに懸濁させる。薬物が凝集するのを防ぐために、オレイン酸ソルビタン、レシチン又はオレイン酸のような界面活性剤が典型的に添加される。他の界面活性剤は当該分野において公知である。定量チャンバーには通常２５から１００μＬが入る。定量チャンバーの内容物は、キャニスターがアクチュエーターに押し下げられたときに放出される。ほとんど即座にプロペラントが蒸発し始め、放出された液体の大きな推進力で前に推進される粒子への分解を生じる。最適な肺の薬物沈着のために、薬剤は約５秒続くゆっくりな吸気の始まりで放出され、１０秒の呼吸停止が続く。いくつかの吸入補助剤がＭＤＩの有効性を改善するために考案されている。これらは手と呼吸の調整動作がうまくいかない患者に最も有用である。短いチューブ（例えば、円錐状又は球状）は、エアロゾルをまっすぐ口に方向づけることができ、又は折りたたみバッグは、患者が薬物を吸入しうる時間である３〜５秒間、懸濁液中に粒子を維持するエアロゾルリザーバーとして作用することができる。しかしながら、これらデバイスのいずれかを使用する場合、中咽頭に入る際のエアロゾル速度は減少し、肺に対する薬物アベイラビリティー及び中咽頭への沈着は減少する。

【0085】

本発明による方法が使用されうる疾患及び状態は、（１）肺炎球菌性肺炎、連鎖球菌性肺炎、ブドウ球菌性肺炎、ヘモフィルスの感染により引き起こされる肺炎及びマイコプラズマ肺炎を含む肺炎；（２）急性呼吸不全；及び（３）急性呼吸促迫症候群である。本発明による方法はまた、これらに限定されないが、嚢胞性線維症、喘息及び肺癌を含む炎症反応が肺組織に存在する他の疾患及び状態を処置するために使用されうる。

【0086】

投与頻度及び投与される治療組成物の量を含む的確な製剤、投与ルート及び投薬量は、患者の状態を考慮して個々の医師により選択されうる（例えば、Ｆｉｎｇｌら、Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、１９７５、Ｃｈ．１、ｐ．１を参照）。担当医はどのように、そしていつ毒性又は臓器機能不全により投与をいつ終了、中断又は調整するかを知っていることを留意すべきである。反対に、担当医はまた、臨床反応が十分でない（毒性を除く）場合、処置をより高いレベルに調整することを知っている。関与する疾患の管理における投与量の大きさは、処置される状態の重篤度及び投与経路、並びに肝臓及び腎臓機能のような考慮すべき薬物動態によって変化する。状態の重症度は、例えば部分的には標準的な予測評価方法により評価されうる。さらに、投薬及びおそらく投薬回数はまた、年齢、体重及び個々の患者の反応により変化する。上の議論と類似のプログラムが動物用医薬品において使用されうる。

【0087】

本発明は以下の実施例により例示される。これらの実施例は例示目的のためのみであり、本発明の制限を意味するものではない。

【実施例】

【0088】

（例１）
すべての例は１部あたり合計１００グラムであり、パートＡ及びパートＢを含む。

【0089】

パートＡは、８０ｇの水、２０ｇのグリセロール及び５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼである。パートＢは、１００ｇの水及び０．０１ミリモルのチオシアン酸カリウムである。本例において、ラクトペルオキシダーゼは肺において内因性の過酸化水素を利用し、抗菌性の次亜チオシアン酸イオンを生成する。

【0090】

（例２）
パートＡは、９５．０ｇの水、５ｇのプロピレングリコール及び２５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼである。パートＢは、１００．０ｇの水及び０．１ミリモルのヨウ素酸カリウムである。本例において、ラクトペルオキシダーゼは肺において内因性の過酸化水素を利用し、抗菌性の次亜ヨウ素酸イオンを生成する。

【0091】

（例３）
パートＡは、５０．０ｇの水、１００．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、４９．５ｇのグリセロール及び０．５ｇのクエン酸である。パートＢは、１００．０ｇの水及び１．０ミリモルのチオシアン酸カリウムである。本処方において、クエン酸は穏やかな緩衝剤として添加される。

【0092】

（例４）
パートＡは、２５．０ｇの水、０．７５ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、７５．０ｇのソルビトール及び０．５ｇのラクトフェリンである。パートＢは、１００．０ｇの水及び０．８ミリモルのヨウ素酸カリウムである。本例において、ラクトフェリンは追加の抗菌性タンパク質として添加される。

【0093】

（例５）
パートＡは、４０．０ｇの水、１０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、１．５ｇのリゾチーム及び６０．０ｇのポリエチレングリコールである。パートＢは、１００．０ｇの水及び０．９ミリモルのチオシアン酸カリウムである。本例において、抗菌性酵素リゾチームが添加される。

【0094】

（例６）
パートＡは、１００．０ｇの水、８０．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、５０．０ＩＵのグルコースオキシダーゼ及び２０．０ｇのグリセロールである。パートＢは、１００．０ｇの水、０．１５ミリモルのβ−Ｄ−グルコース及び０．１ミリモルのヨウ素酸カリウムである。本例において、グルコースオキシダーゼ及びその基質β−Ｄ−グルコースは過酸化水素の追加の供給源として添加された。

【0095】

（例７）
パートＡは、９４．０ｇの水、５．０ｇのグリセロール、１．０ｇのソルビン酸カリウム及び０．７５ＩＵのミエロペルオキシダーゼである。パートＢは、１００．０ｇの水及び０．２５ミリモルの塩素酸ナトリウムである。本例において、酵素ミエロペルオキシダーゼは、過酸化物との反応を触媒する酵素として使用され、殺生物性陰イオンを生成する。

【0096】

（例８）
パートＡは、４５．０ｇの水、１００．０ＩＵのミエロペルオキシダーゼ、５０００ＩＵのガラクトースオキシダーゼ及び５０．０ｇのグリセロールである。パートＢは、１００．０ｇの水、１．０ミリモルのチオシアン酸カリウム及び６０ミリモルのＤ−ガラクトースである。本例において、ガラクトースオキシダーゼ及びＤ−ガラクトースは、過酸化水素の追加の供給源として添加される。

【0097】

（例９）
パートＡは、９０．０ｇの水、５０．０ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ及び１０．０ｇのポリプロピレングリコールである。パートＢは、９９．２５ｇの水、０．００１ミリモルのチオシアン酸カリウム及び０．７５ｇのアスコルビン酸カリウムである。本例において、西洋ワサビペルオキシダーゼは過酸化物との反応を触媒する酵素として使用され、殺生物性陰イオンを生成する。

【0098】

（例１０）
パートＡは、９９．０ｇの水、１．０ｇのグリセロール、５０．０ミリモルのコリン及び９５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼである。パートＢは、１００．０ｇの水、１０００ＩＵのコリンオキシダーゼ及び０．６ミリモルのチオシアン酸カリウムである。本例において、コリンはパートＡに添加され、コリンオキシダーゼはパートＢに添加された。これは、オキシドレダクターゼ酵素及びその基質がパートＡ又はパートＢのいずれかに添加されうることを示す。

【0099】

（例１１）
パートＡは、１００．０ｇのグリセロール及び３０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼである。パートＢは、１００．０ｇの水及び０．６ミリモルのヨウ素酸カリウムである。本例において、グリセロールは、パートＡにおいてラクトペルオキシダーゼ酵素のキャリアである。

【0100】

（例１２）
パートＡは、８０．０ｇの水、２０．０ｇのソルビトール及び５．０ＩＵのラクトペルオキシダーゼである。パートＢは、８０．０ｇの水、２０．０ｇのグリセロール及び０．０００１ミリモルのチオシアン酸カリウムである。本例において、ラクトペルオキシダーゼはより高い濃度である。

【0101】

（例１３）
パートＡは、７５．０ｇの水、２５．０ｇのグリセロール、２０００ＩＵのラクトペルオキシダーゼ、１０００ＩＵの西洋ワサビペルオキシダーゼ、０．０１ｇのアスコルビン酸ナトリウム、０．０５ｇの硫酸第一鉄及び０．２５ＩＵのグルコースオキシダーゼである。パートＢは、７５．０ｇの水、２５．０ｇのグリセロール、０．０５ミリモルのヨウ素酸カリウム及び４０．０ミリモルのβ−Ｄ−グルコースである。本例において、パートＡに２つのペルオキシダーゼ酵素がある。

【0102】

（発明の利点）
本発明による組成物及び方法は、炎症又は微生物感染により特徴づけられる肺炎、急性呼吸不全及び急性呼吸促迫症候群を含む多くの肺の疾患及び状態を処置するための新規且つ効果的な方法を提供する。これらの組成物及び方法は、薬物のような抗菌効果を割り当て、増強する抗菌剤と一緒に使用されうる。これらは、肺炎の原因が細菌又はマイコプラズマであろうと、そしてたとえ抗生物質耐性が存在する場合でも効果的である。これらはまた、これらの状態を伴う炎症を処置する。これらは十分忍容性が認められ、副作用又は禁忌なしにかなりの長期間にわたり使用されうる。

【0103】

明細書に例示的に記載される本発明は、特に明細書に開示されないが任意の要素、限定の非存在下で適切に実施されうる。したがって、例えば用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」などは広く限定なしに読み取られる。さらに、明細書に使用される用語及び表現は、説明の用語として限定なしに使用され、今後示され、記載される任意の同等物又はそれらの任意の部分を除外するような用語及び表現の使用を意図するものではなく、種々の改変が特許請求の範囲内で可能であると認識される。したがって、本発明は、具体的には好ましい実施形態及び任意の特徴により開示されたが、明細書に記載される本発明の改変及び変更は当業者により実施され、そのような改変及び変更は明細書に開示される発明の範囲内にあると見なされることが理解されるはずである。本発明は、明細書に広く、一般的に記載された。一般的開示の範囲内に収まる狭い種及び亜属の分類の各々はまた、これら発明の一部を形成する。これは削除した材料が具体的に明細書にあるかないかに関わらず、条件付きで又は属由来の任意の対象を除く消極的な限定で各発明の一般的説明を含む。

【0104】

さらに、ここで発明の特徴又は様態がマーカッシュグループの観点から記載される場合、当業者は、本発明がまた、マーカッシュグループの任意の個々のメンバー又はメンバーのサブグループに関して明細書により記載されることを理解するであろう。また上の記載は例示的であり限定的でないことを意図すると理解されるべきである。多くの実施形態は、上の説明を検討することにより当業者に明らかである。そのため本発明の範囲は上の説明を参照せずに決定されるはずであるが、権利を与えられるかかる請求項と等価物の全範囲に沿って、添付の請求項により代わりに決定されるはずである。特許公報を含むすべての論文及び参考文献の開示は、参考として明細書に援用される。