特許 5711352 マクロライドの結晶形、およびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5711352

(24)【登録日】2015年3月13日

(45)【発行日】2015年4月30日

(54)【発明の名称】マクロライドの結晶形、およびその使用

(51)【国際特許分類】

   C07H 17/08 20060101AFI20150409BHJP

   A61K 31/7048 20060101ALI20150409BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20150409BHJP

   A61P 33/00 20060101ALI20150409BHJP

【ＦＩ】

   C07H17/08 BCSP

   A61K31/7048

   A61P31/04

   A61P33/00

【請求項の数】15

【全頁数】30

(21)【出願番号】特願2013-501396(P2013-501396)

(86)(22)【出願日】2011年3月22日

(65)【公表番号】特表2013-522367(P2013-522367A)

(43)【公表日】2013年6月13日

(86)【国際出願番号】US2011029424

(87)【国際公開番号】WO2011119604

(87)【国際公開日】20110929

【審査請求日】2013年4月4日

(31)【優先権主張番号】61/316,063

(32)【優先日】2010年3月22日

(33)【優先権主張国】US

【早期審査対象出願】

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】511100970

【氏名又は名称】センプラ ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100114775

【弁理士】

【氏名又は名称】高岡 亮一

(74)【代理人】

【識別番号】100191086

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 香元

(72)【発明者】

【氏名】ペレイラ，デービッド，イー．

【審査官】 井上 典之

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００９／０５５５５７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 米国特許出願公開第２００６／０１００１６４（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 有機化合物結晶作製ハンドブック−原理とノウハウ−，２００８年，pp.57-84

【文献】 PHARM TECH JAPAN，２００２年，Vol.18, No.10，pp.81-96

【文献】 Topics in Current Chemistry，１９９８年，No.198，pp.163-208

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｈ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Iの化合物の結晶形Ｉを含む組成物であって、前記結晶形Iが２θ＝６．２°，８．５°，８．８°，１０．５°，１１．０°，１２．４°，１３．２°，１７．０°，１８．６°及び２１．９°±０．２°２θにピークを含むＸ線粉末回折パターンを有することにより規定されることを特徴とする組成物。

【化1】

【請求項2】

式Iの化合物の結晶形ＩＩを含む組成物であって、前記結晶形IIが２θ＝５．６°，７．９°，９．３°，１１．７°，１２．９°，１５．１°，１６．７°，１８．６°，１９．７°及び２１．２°±０．２°２θにピークを含むＸ線粉末回折パターンを有することにより規定されることを特徴とする組成物。

【化2】

【請求項3】

請求項１に記載の組成物であって、前記結晶形Iが更に２θ＝１８．０°，１９．７°，２０．７°，２１．２°，２１．９°，２３．４°又は２４．９°±０．２°２θのうち１つ以上のピークを含むＸ線粉末回折パターンを有することにより規定されることを特徴とする組成物。

【請求項4】

請求項２の結晶形IIを含まない請求項１に記載の組成物。

【請求項5】

Ｘ線粉末回折パターンを有し、Ｘ線粉末回折パターンにおいて２θ＝５．６°、７．９°、９．８°又は１１．７°±０．２°２θのピークが１つ以上存在しないことを特徴とする、請求項１に記載の組成物。

【請求項6】

Ｘ線粉末回折パターンを有し、Ｘ線粉末回折パターンにおいて２θ＝５．６°又は７．９°±０．２°２θのピークが１つ以上存在しないことを特徴とする、請求項１に記載の組成物。

【請求項7】

請求項２に記載の組成物であって、前記結晶形ＩＩが更に２θ＝９．８°±０．２°２θのピークを含むＸ線粉末回折パターンを有することにより規定されることを特徴とする組成物。

【請求項8】

請求項１の結晶形Ｉを含まない、請求項２に記載の組成物。

【請求項9】

Ｘ線粉末回折パターンを有し、Ｘ線粉末回折パターンにおいて２θ＝８．５又は８．８°±０．２°２θのピークが１つ以上存在しないことを特徴とする、請求項２に記載の組成物。

【請求項10】

２θ＝６．２°、８．５°、８．８°、９．３°、１０．５°、１１．０°、１２．０°、１２．４°、１３．２°、１３．７°、１４．５°、１４．９°、１７．０°、１８．０°、１８．６°、１９．５°、１９．７°、２０．７°、２１．２°、２１．９°、２３．４°、２４．４°、２４．９°、２５．６°、２６．４°、２６．８°、２９．０°、および３０．０°±０．２°２θに位置するピークがあるＸ線粉末回折パターンを有することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。

【請求項11】

２θ＝５．６°、７．９°、９．３°、９．８°、１０．７°、１１．２°、１１．７°、１２．０°、１２．９°、１３．３°、１３．８°、１４．２°、１４．６°、１５．１°、１６．７°、１７．２°、１７．５°、１８．４°、１８．６°、１８．８°、１９．３°、１９．７°、２０．６°、２１．０°、２１．２°、２１．４°、２１．８°、２２．１°、２２．６°、２３．３°、２３．５°、２４．２°、２４．４°、２４．８°、２５．６°、２５．８°、２６．２°、２６．６°、２７．２°、２７．６°、２７．９°、２８．５°および２９．５°±０．２°２θに位置するピークがあるＸ線粉末回折パターンを有することを特徴とする、請求項２に記載の組成物。

【請求項12】

請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物であって、前記組成物は少なくとも１種の製薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤、またはそれらの組合せをさらに含む組成物。

【請求項13】

細菌感染、原虫感染、または、宿主動物からの細菌感染もしくは原虫感染によって引き起こされる障害を治療するための医薬組成物であって、前記医薬組成物は、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の治療上有効な量の前記組成物を含み、更に少なくとも１種の製薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤、またはそれらの組合せを含む医薬組成物。

【請求項14】

前記宿主動物が哺乳動物、魚、鳥、または爬虫類である、請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項15】

前記宿主動物がヒトである、請求項１３に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本願は、２０１０年３月２２日に提出された米国特許仮出願第６１／３１６，０６３号（参照により本明細書に組み込まれる）に基づく利益を主張するものである。

【0002】

本明細書に説明されている本発明は、マクロライド化合物に関する。さらに詳細には、マクロライド化合物の新規結晶形、これらの結晶形を調整するプロセス、および、これらの結晶形を含む医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0003】

医薬品としてのさらなる進展が見込まれるとみなされている化合物は有益なことに、所望の生物学的特性に加えて、医薬品の製造での使用に合わせてその化合物を適合させる物理的特性も有することは明らかである。例えば、結晶性固体を含む安定な固体を形成する化合物をさらに容易に製造および調合できる。さらには、安定であるとともに、それに加えて、他の物理的形状を実質的に含まないように調製できる化合物の個々の物理的形状も、さらに容易に製造および調合できることも明らかである。本明細書においては、物理的形状によって、溶解度特性が異なる、バイオアベイラビリティおよび／または生物学的曝露が異なる、安定性が異なるなど、物理的特性が大きく異なる場合があると理解されたい。

【0004】

米国特許出願公開第２００６／０１００１６４号では、特定のマクロライド抗生物質化合物が開示されている。上記の公開特許、および本明細書で引用するさらなる公開特許のそれぞれは、参照により本明細書に組み込まれる。これらのマクロライドの１つは、Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ Ｒｅｇｉｓｔｒｙ Ｎｕｍｂｅｒが７６０９８１−８３−７のフルオロケトライドであり、ＣＥＭ−１０１およびソリスロマイシンとしても知られている。ＣＥＭ−１０１の非晶形の調製法は上記の公開特許に記載されている。ＣＥＭ−１０１の代替的な調製法は、国際公開第２００９／０５５５５７号に記載されている。ＣＥＭ−１０１は下記の化学構造を有する。

【化1】

【発明の概要】

【0005】

本発明の実例的な実施形態をもたらすさまざまな結晶形でＣＥＭ−１０１を単離できることを本発明で発見した。ＣＥＭ−１０１は、単離法に応じて、多種多様な物理的特性を有する材料としての結晶形で単離できる。その理由は、ＣＥＭ−１０１が複数の結晶形で存在できること、すなわち、ＣＥＭ−１０１が結晶多形を示すことにある。ＣＥＭ−１０１は、少なくとも２つの結晶形で単離でき、本明細書では、この２つの結晶形を結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩと称し、この各結晶形は純粋であるか、実質的に純粋であるか、および／または、他の形状を実質的に含まない。結晶形Ｉと結晶形ＩＩとのさまざまな混合物も単離することができる。加えて、１種以上の結晶性材料の混合物であるとともに、非晶性固体も含む固体を得ることができる。

【図面の簡単な説明】

【0006】

【図1】図１には、結晶形ＩのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）スペクトルの実例的な例、Ｘ軸に２θの角度、Ｙ軸に相対強度が取られている。

【図2】図２には、結晶形ＩＩのＸＲＰＤスペクトルの実例的な例が示されており、Ｘ軸に２θの角度、Ｙ軸に相対強度が取られている。

【0007】

結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩのそれぞれのピークのさらに詳細なリストは、実施例の表１〜４に後掲されており、これらの表では、ピークは、百分率の相対強度（Ｉ／Ｉ_０×１００）として示されている。Ｘ線粉末回折スペクトルでは、２θの角度（または対応する面間隔ｄ）について測定した厳密値は、分析する特定のサンプルと、使用する特定の分析手順によって変化する場合があると理解されたい。値の範囲は少なくとも２θが±０．１°、場合によっては少なくとも２θが±０．２°であるのが典型的であり得る。別々に調製したサンプルを異なる計器で測定すると、２θで±０．１°および／または２θで±０．２°を超える誤差が生じる場合がある。

【発明を実施するための形態】

【0008】

新規な物理的形状であるＣＥＭ−１０１結晶形Ｉは、Ｘ線粉末回折パターンによって説明できる結晶形である。２θ＝約８．８°、１０．５°、１３．２°、および１８．６°近辺のピークが、この結晶形を表している。結晶形ＩのＸ線粉末回折スペクトルの例は図１に示されている。これらのピークのさらに詳細な分析は、後掲の表１〜２に示されている。ＣＥＭ−１０１の結晶形Ｉは、熱重量分析（ＴＧＡ）によって、最小限の重量損失を示している。通常ロット中の、カール・フィッシャー滴定による水分定量値は、０．６〜１．１％である。動的水分吸着量によって、この材料は部分的に吸湿性であることが示されているが、結晶形Ｉは、脱着時に単離される。ＣＥＭ−１０１の結晶形Ｉは、ＤＳＣ分析によれば約２００℃で溶融する。

【0009】

１つの実施形態として、２θ＝約８．８°、１０．５°、１３．２°、および１８．６°近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを説明する。別の実施形態として、２θ＝約８．８°、１０．５°、１３．２°、および１８．６°近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを含むＣＥＭ−１０１固体形状を説明する。別の実施形態として、ＣＥＭ−１０１を含む組成物であって、そのＣＥＭ−１０１の大半が、２θ＝約８．８°、１０．５°、１３．２°、および１８．６°近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１結晶形Ｉである組成物を説明する。別の実施形態として、図１のＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを有する上記の各実施形態におけるＣＥＭ−１０１を説明する。

【0010】

新規な物理的形状である結晶形Ｉは物理的に安定であり、後述のように、他の物理的形状を実質的に含まないように調製できる。１つの実施形態では、結晶形ＩＩを実質的に含まないＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを説明する。形状の相対量は、さまざまな分析技法によって、例えば、ＸＲＰＤスペクトルにおける代表的なピークの有無、および／または相対的ピーク高さ、および／または適切な識別可能なピークのピーク面積（これらに限らない）によって割り出してよい。他の物理的形状を実質的に含まないＣＥＭ−１０１結晶形Ｉは、２θ＝約８．８°、１０．５°、１３．２°、および１８．６°近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンによって特徴付けることができる。この結晶形では、２θ＝約６．２°、１９．７°、および／または２１．９°のピークも観察される。別の実施形態では、２θ＝約８．８°、１０．５°、１３．２°、および１８．６°近辺にピークがあるとともに、２θ＝約６．２°、１９．７°、および／または２１．９°に１つ以上のさらなるピークがあるＸ線粉末回折パターンによって特徴付けられる上記の各実施形態におけるＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを説明する。別の実施形態では、Ｘ線粉末回折パターンによって割り出した場合に、結晶形ＩＩを実質的に含まない上記の各実施形態におけるＣＥＭ−１０１結晶形Ｉであって、２θ＝５．６°、９．８°、および／または１１．７°のピークが１つ以上存在しないか、またはほぼ存在しないＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを説明する。

【0011】

別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、上記の各実施形態で説明されているようなＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを含むか、またはそのＣＥＭ−１０１結晶形Ｉから本質的になる医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、ＣＥＭ−１０１を含み、そのＣＥＭ−１０１が少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％結晶形Ｉである医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、ＣＥＭ−１０１を含み、そのＣＥＭ−１０１が結晶形ＩＩを実質的に含まない医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを含む医薬組成物であって、結晶形ＩＩの相対量が約４０％、２０％、１０％、５％、２％、または１％未満である医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、特定のピークの相対的ピーク高さによって結晶形Ｉと結晶形ＩＩの相対量が割り出される医薬組成物を説明する。２θ＝６．２°と２θ＝５．６°のピークの実例的な相対的ピーク高さ比は、約５：１以上、約１０：１以上、または約２０：１以上である。別の実施形態として、他の物理的形状を実質的に含まないＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを説明する。別の実施形態として、図１のＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物を説明する。

【0012】

新規な物理的形状であるＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩは、Ｘ線粉末回折パターンによって説明できる結晶形である。２θ＝約５．６°、７．９°、９．３°、１１．７°、１２．９°、および１６．７°近辺のピークが、この結晶形を表している。結晶形ＩＩのＸ線粉末回折スペクトルの例は図２に示されている。これらのピークのさらに詳細な分析は、後掲の表３〜４に示されている。単結晶Ｘ線回折の測定および動的水分吸着量分析に基づくと、結晶形ＩＩは、ＤＳＣ分析によれば、単一の吸熱イベントとして約２２５℃で溶融する非吸湿性の無水結晶形であると思われる。本発明においては、本明細書に記載されている結晶形ＩＩのような非吸湿性固体が、医薬組成物の調製の際に有益な場合があることは明らかである。その利点としては、製造時の扱いやすさおよび安定特性の向上、ロット間の品質管理の向上が挙げられる。

【0013】

１つの実施形態として、２θ＝約５．６°、７．９°、９．３°、１１．７°、１２．９°、および１６．７°の近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを説明する。別の実施形態として、２θ＝約５．６°、７．９°、９．３°、１１．７°、１２．９°、および１６．７°の近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを含むＣＥＭ−１０１固体形状を説明する。別の実施形態として、ＣＥＭ−１０１を含む組成物であって、そのＣＥＭ−１０１の大半が、２θ＝約５．６°、７．９°、９．３°、１１．７°、１２．９°、および１６．７°の近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩである組成物を説明する。別の実施形態として、図２のＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを有する上記の各実施形態におけるＣＥＭ−１０１を説明する。

【0014】

新規な物理的形状である結晶形ＩＩは物理的に安定であり、後述のように、他の物理的形状を実質的に含まないように調製できる。１つの実施形態では、結晶形Ｉを実質的に含まないＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを説明する。形状の相対量は、さまざまな分析技法によって、例えば、ＸＲＰＤスペクトルにおける代表的なピークの有無、および／または相対的ピーク高さ、および／または適切な識別可能なピークのピーク面積（これらに限らない）によって割り出してよい。他の物理的形状を実質的に含まないＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩは、２θ＝約５．６°、７．９°、９．３°、１１．７°、１２．９°、および１６．７°近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンによって特徴付けることができる。別の実施形態では、Ｘ線粉末回折パターンによって割り出した場合に、結晶形Ｉを実質的に含まない上記の各実施形態におけるＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩであって、２θ＝６．２°および／または８．８°のピークが１つ以上存在しないか、またはほぼ存在しないＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを説明する。

【0015】

別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、上記の各実施形態で説明されているようなＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを含むか、またはそのＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩから本質的になる医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、ＣＥＭ−１０１を含み、そのＣＥＭ−１０１が少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％結晶形ＩＩである医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを含む医薬組成物であって、結晶形Ｉの相対量が約４０％、２０％、１０％、５％、２％、または１％未満である医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、ＣＥＭ−１０１を含み、そのＣＥＭ−１０１が結晶形Ｉを実質的に含まない医薬組成物を説明する。別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物であって、結晶形ＩＩと結晶形Ｉの相対量が、特定のピークの相対的ピーク高さによって割り出される医薬組成物を説明する。２θ＝５．６°および２θ＝６．２°のピークの実例的な相対的ピーク高さ比は、約５：１以上、約１０：１以上、または約２０：１以上である。別の実施形態として、他の物理的形状を実質的に含まないＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを説明する。他の物理的形状を実質的に含まないＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩは、２θ＝約５．６°、７．９°、９．３°、１１．７°、１２．９°、おとび１６．７°の近辺にピークがあるＸ線粉末回折パターンによって特徴付けることができる。別の実施形態として、図２のＸ線粉末回折パターンと実質的に同じＸ線粉末回折パターンを有するＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物を説明する。

【0016】

さらなる実施形態として、結晶形Ｉと結晶形ＩＩの比率がいずれかであるＣＥＭ−１０１を含む医薬組成物を説明する。さらなる実施形態として、結晶形Ｉの比率がいずれかであるＣＥＭ−１０１と、非晶性ＣＥＭ−１０１とを含む医薬組成物を説明する。さらなる実施形態として、結晶形ＩＩの比率がいずれかであるＣＥＭ−１０１と、非晶性ＣＥＭ−１０１とを含む医薬組成物を説明する。さらなる実施形態として、結晶形Ｉと結晶形ＩＩの比率がいずれかであるＣＥＭ−１０１と、非晶性ＣＥＭ−１０１とを含む医薬組成物を説明する。

【0017】

ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉは、他の物理的形状を実質的に含まない結晶形Ｉを含め、実施例で後述されているような再結晶化によって、例えば、表Ａの実験１８、２１〜２３、および２６に記載されているような再結晶化手順によって調製してよい。この表では、溶媒のＣＥＭ−１０１に対する比は、体積：重量比（ｍＬ／ｍｇ、またはＬ／ｇ）で示されており、「Ｔ」は体積の「倍数」を示している。一般に、結晶形Ｉは、例えばアセトン、メタノール、またはエタノールのような水混和性の極性有機溶媒にＣＥＭ−１０１を溶解させた溶液を水に加えて、ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉをもたらすことによって得てよい。

【0018】

１つの実施形態によれば、ＣＥＭ−１０１の結晶形Ｉの調製プロセスを本明細書で説明する。このプロセスは、水混和性の極性有機溶媒にＣＥＭ−１０１を溶解させた溶液を５０℃未満の温度などの水に加える工程を含む。加えて、このプロセスは、ＣＥＭ−１０１の溶液を加熱する追加の工程、ＣＥＭ−１０１の溶液をろ過する追加の工程、ＣＥＭ−１０１の溶液の体積を蒸発によって減少させる追加の工程、ＣＥＭ−１０１の溶液を加える間、水を攪拌する追加の工程のうちの１つ以上を含んでもよい。別の実施形態では、調製したＣＥＭ−１０１結晶形Ｉは、他の物理的形状を実質的に含まない。別の実施形態では、調製したＣＥＭ−１０１結晶形Ｉは、結晶形ＩＩを実質的に含まない。

【0019】

別の実施形態によれば、ＣＥＭ−１０１の結晶形Ｉの調製プロセスであって、ＣＥＭ−１０１源をアセトン、メタノール、もしくはエタノール、またはこれらの組み合わせに、任意で周囲温度を超える温度で溶解させる工程、この溶液を任意でろ過する工程、得られた溶液の体積を蒸発によって減少させる工程、この溶液を５０℃未満の温度の水に、任意で攪拌しながら加える工程、および得られた結晶性個体を回収する工程のうちの１つ以上を含むプロセスを本明細書で説明する。さらなる実施形態は、上記の溶媒がアセトンである実施形態である。さらなる実施形態は、上記の溶媒がエタノールである実施形態である。

【0020】

上記プロセスのいずれにおいても、さらなる実施形態は、上記の溶液を約１０℃〜約３０℃の温度の水に加える実施形態である。別の実施形態は、上記の溶液を水に滴下する実施形態である。別の実施形態では、調製したＣＥＭ−１０１結晶形Ｉは、他の物理的形状を実質的に含まない。別の実施形態では、調製したＣＥＭ−１０１結晶形Ｉは、結晶形ＩＩを実質的に含まない。

【0021】

ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを調製する上記プロセスいずれにおいても、溶媒のアセトン、メタノール、もしくはエタノール、またはこれらの組み合わせのいずれかを用いてよい。別の実施形態では、上記の有機溶液を約２０〜３０℃の水にゆっくり加える。別の実施形態では、上記の有機溶液の水に対する体積：体積比は約６〜約１５である。別の実施形態では、上記の有機溶液の水に対する体積：体積比は約１０〜約１３である。

【0022】

上記のプロセスは、ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉのシードを用いて行っても、用いずに行ってもよい。

【0023】

ＣＥＭ１０１結晶形ＩＩは、他の物理的形状を実質的に含まない結晶形ＩＩを含め、実施例で後述されているように、例えば、表Ａの実験１、５、６、８、９、１１、１２、１４、１６、１９、および２４に説明されているような再結晶化によって、または、表Ｂに例示されているようなスラリー手順によって調製してよい。一般に、水混和性の極性有機溶媒にＣＥＭ−１０１を溶解させた溶液に水を加えることによって、結晶形ＩＩを得ることができる。加えて、表Ａに示されているように、多くの有機溶媒から、貧溶媒を用いるか、貧溶媒を用いずに、かつ、シーディングを用いるか、またはシーディングを用いずに再結晶化することによって、ＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを得ることもできる。あるいは、結晶形Ｉと結晶形ＩＩとの混合物を、例えば２−プロパノール（イソプロピルアルコール、ＩＰＡ）中で６０℃にてスラリー化するか、この混合物を２−ブタノン（メチルエチルケトン、ＭＥＫ）中で、さまざまな条件下にてスラリー化することによって、この混合物をＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩに変換してよい。

【0024】

１つの実施形態によれば、ＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを調製するプロセスを本明細書で説明する。このプロセスは、水混和性の極性有機溶媒にＣＥＭ−１０１を溶解させた溶液に水を加える工程を含む。加えて、このプロセスは、ＣＥＭ−１０１の溶液をろ過する追加の工程、ＣＥＭ−１０１の溶液の体積を蒸発によって減少させる追加の工程、水を加える間、ＣＥＭ−１０１を攪拌する追加の工程、および得られた結晶性個体を回収する追加の工程のうちの１つ以上を含んでよい。別の実施形態では、上記の水混和性の極性有機溶媒はプロトン性である。別の実施形態では、上記の水混和性の極性有機溶媒は非プロトン性である。さらなる実施形態は、上記の水混和性の極性有機溶媒がアセトン、アセトニトリル、１，４−ジオキサン、メタノール、もしくはエタノール、またはこれらの組み合わせである実施形態である。さらなる実施形態は、ＣＥＭ−１０１の溶液が周囲温度を超える、例えば、約６５〜約８０℃、または約６５℃である実施形態である。さらなる実施形態は、周囲温度前後の水を溶液に加える実施形態である。別の実施形態は、水を上記の溶液に滴下する実施形態である。ＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩを調製する上記のプロセスのいずれのうちの１つ実施形態では、有機溶媒の水に対する体積：体積比は約１〜約１０である。別の実施形態では、調製したＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩは、他の物理的形状を実質的に含まない。

【0025】

上記のプロセスは、ＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩのシードを用いて行っても、用いずに行ってもよい。

【0026】

上記の手順では、ＣＥＭ−１０１源が固体であるときには、結晶形Ｉもしくは結晶形ＩＩとして、さらなる結晶形状として、ガラスとして、またはこれらの形状のうちのいずれかの組み合わせとしての非晶性形状のＣＥＭ−１０１であってよい。ＣＥＭ−１０１の溶液がＣＥＭ−１０１源をもたらすこともできることを理解されたい。別の実施形態として、ＣＥＭ−１０１を精製するプロセスであって、他の物理的形状を実質的に含まない結晶形Ｉまたは結晶形ＩＩに、１つ以上のＣＥＭ−１０１形状、またはＣＥＭ１０１−形状の混合物を変換する工程を含むプロセスを説明する。このような精製の後、さらなる活用に備えて、ＣＥＭ−１０１を異なる物理的形状に変換するのが望ましい場合がある。

【0027】

別の実施形態では、水混和性の極性有機溶媒にＣＭＥ−１０１を溶解させた溶液を５０℃未満の温度などの水に加える工程を含むプロセスによって調製される、ＣＥＭ−１０１の固体形状を本明細書で説明する。加えて、このプロセスは、任意で加熱しながら、任意で上記の溶液をろ過する追加の工程、任意で攪拌しながら、得られた溶液の体積を蒸発によって任意で減少させる追加の工程、および得られた結晶性個体を回収する追加の工程のうちの１つ以上を含んでよい。別の実施形態では、上記の水は、約１０℃〜約３０℃の温度である。別の実施形態では、上記の溶媒はアセトン、メタノール、もしくはエタノール、またはこれらの組み合わせである。別の実施形態では、上記の有機溶液を約２０〜３０℃の水にゆっくり加える。別の実施形態では、上記の有機溶液の水に対する体積：体積比は、約６〜約１５である。別の実施形態では、上記の有機溶液の水に対する体積：体積比は、約１０〜約１３である。上記の実施形態の変形形態では、上記プロセスは、ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉのシードを用いることを含んでよい。

【0028】

別の実施形態では、水混和性の極性有機溶媒にＣＥＭ−１０１を溶解させた溶液に水を加える工程を含むプロセスによって調製される、ＣＥＭ−１０１の固体形状を本明細書で説明する。加えて、上記のプロセスは、上記の溶液を任意でろ過する追加の工程、任意で攪拌しながら、得られた溶液の体積を蒸発によって任意で減少させる追加の工程、および得られた結晶性固体を回収する追加の工程のうちの１つ以上を含んでもよい。別の実施形態では、水混和性の極性有機溶媒はプロトン性である。別の実施形態では、水混和性の極性有機溶媒は非プロトン性である。さらなる実施形態は、水混和性の極性有機溶媒がアセトン、アセトニトリル、１，４−ジオキサン、メタノール、もしくはエタノール、またはこれらの組み合わせである実施形態である。さらなる実施形態は、水混和性の極性有機溶媒の溶液が周囲温度を超える温度、例えば約６５〜約８０℃、または約６５℃である実施形態である。さらなる実施形態は、周囲温度前後の水を上記の溶液に加える実施形態である。別の実施形態は、水を上記の溶液に滴下する実施形態である。別の実施形態では、上記の有機溶媒の水に対する体積：体積比は約１〜約１０である。上記の実施形態の変形形態では、上記のプロセスは、ＣＥＭ−１０１の結晶形ＩＩのシードを用いることを含んでよい。

【0029】

別の実施形態として、本明細書のいずれかの説明部分に記載されているような結晶形状のＣＥＭ−１０１を含むとともに、少なくとも１種の製薬学的に許容可能な担体または賦形剤をさらに含む医薬組成物を説明する。

【0030】

実例的には、組成物は、１種以上の担体、希釈剤、および／または賦形剤を含んでよい。本明細書に記載されている化合物、またはそれらを含む組成物は、治療上有効な量で、本明細書に記載の方法に適したいずれかの従来の剤形で調合してよく、１種以上の担体、希釈剤、および／または賦形剤を含んでよい。このような調合組成物は、本明細書に記載されている方法のための多種多様な従来の経路によって、多種多様な剤形で、既知の手順を用いて投与してよい。カプセル剤および錠剤が、抗生物質の経口投与で広く用いられている実施形態である。一般にはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（２１ｓｔ．ｅｄ．，２００５）を、加えて実施例の実例的な調合組成物を参照されたい。

【0031】

別の実施形態として、細菌感染、原虫感染、または、細菌感染もしくは原虫感染に関連する障害を治療する方法であって、その治療を必要とする被検者に、本明細書に記載されているような結晶形状のＣＥＭ−１０１、または、少なくとも１種の製薬学的に許容可能な担体もしくは賦形剤を更に含むその医薬組成物を治療上有効な量投与する工程を含む方法を説明する。実例的な投与スケジュールとしては、約１，２００ｍｇ、約１，０００ｍｇ、約８００ｍｇ、約４００ｍｇ、約２００ｍｇ、または約１００ｍｇを含む単一または分割形体による組成物の連日投与が挙げられる。

【0032】

別の実施形態として、細菌感染、原虫感染、または、細菌感染もしくは原虫感染に関連する障害の治療のために、本明細書に記載されているような結晶形状のＣＥＭ−１０１を使用することを説明する。

【0033】

別の実施形態として、細菌感染、原虫感染、または、細菌感染もしくは原虫感染に関連する障害の治療用の医薬の製造のために、本明細書に記載されているような結晶形状のＣＥＭ−１０１を使用することを説明する。

【0034】

さらなる実施形態として、上記の方法または使用は、被検者が哺乳動物、魚、鳥、または爬虫類である方法または使用である。別の実施形態として、被検者が哺乳動物である方法または使用を説明する。別の実施形態として、被検者がヒトである方法または使用を説明する。

【0035】

「治療上有効な量」という用語は、本明細書で使用する場合、組織系、動物、またはヒトにおいて、研究者、獣医、医師、またはその他の臨床医が求めている生物学的反応または医薬反応を引き出す、活性化合物または製剤の量を指し、この反応としては、治療する疾患又は障害の症状の緩和が挙げられる。１つの態様では、治療上有効な量は、いずれかの内科治療に適用できる合理的なベネフィット／リスク比で疾患または疾患の症状を治療または緩和できる量である。しかしながら、適切な医学的判断の範囲内で内科医の診察を受けることによって、本明細書に記載されている化合物および組成物の１日当たりの総使用量を決定してよいことを理解されたい。いずれかの特定の患者に対する具体的な治療上有効な投与レベルは、治療する障害と、その障害の重症度、用いる具体的な化合物の活性、用いる具体的な組成物、患者の年齢、体重、総体的な健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、用いる具体的な化合物の排出速度、治療期間、用いる具体的な化合物と併用または同時投与する薬物、および、研究者、獣医、医師、または通常の技術を有するその他の臨床医に周知の類似の要因を含むさまざまな要因によって決まることになる。

【0036】

後掲の表Ｂの実施例に概要が示されているスラリー相互変換実験で示されているように、結晶形ＩおよびＩＩのスラリーは、周囲温度、準周囲温度、および高温の２−プロパノール（ＩＰＡ）および４−ブタノン（ＭＥＫ）中で調製する。２−プロパノールでは、結晶形Ｉの結晶形ＩＩへの変換は、周囲温度および準周囲温度で溶解性によって引き起こされると思われ、３日にわたるＸＲＰＤ分析によれば、結晶形ＩとＩＩの比率の明らかな変化はあまり観察されなかった。相互変換期間を室温で８日まで延長したところ、微量の結晶形Ｉしか残らなかった。２−プロパノールでは、高温で結晶形ＩＩのみが得られる。２−ブタノンベースの実験では、明確な溶解性限度はなかったとともに、準周囲温度、周囲温度、および高温において唯一観察された形状として、結晶形ＩＩが得られた。これらの実験、およびＤＳＣの結果に基づくと（ただし理論に縛られることなく）、結晶形ＩＩは、上記の温度範囲にわたり、結晶形Ｉよりも高い安定性を有し得ると思われる。加えて（ただし理論には縛られることなく）、ＤＳＣの結果により、結晶形ＩおよびＩＩは単変的関係を有することが示唆されている。

【0037】

後掲の実施例の表Ｃ−１に示されているように、結晶形Ｉは、９．２〜１．２のｐＨ範囲にわたり、結晶形ＩＩよりも水溶解性が高かった。

【0038】

当該化合物が十分に可溶化されているビヒクルで、ＣＥＭ−１０１の上記結晶形を投与すると、結晶形Ｉと結晶形ＩＩの間では、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、およびＡＵＣを含む薬物動態パラメーター測定値の差異は観察されない。当該化合物が固体として存在するビヒクルで、ＣＥＭ１０１の上記結晶形を投与すると、結晶形Ｉと結晶形ＩＩの間では、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、およびＡＵＣを含む薬物動態パラメーター測定値の統計的差異は見られない。

【0039】

別の実施形態では、ＣＥＭ−１０１の非晶性形状よりも高い溶解性を示すＣＥＭ−１０１結晶形、およびこれらの混合物を本明細書で説明する。

【実施例】

【0040】

Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）のピーク位置
曲線位置敏感型検出器を備え、２θの範囲が１２０°であるＩｎｅｌ ＸＲＧ−３０００という回折計を用いて、ＸＲＰＤパターンを取った。ＣｕＫα線（４０ｋＶ、３０ｍＡ）の入射ビームを用いて、リアルタイムで、２θ＝０．０３°の分解能にてデータを集めた。分析前に、基準物質のシリコン（ＮＩＳＴ ＳＲＭ６４０ｃ）を分析して、Ｓｉ １１１のピーク位置を確認した。薄肉のガラスキャピラリーにサンプルを入れることによって、分析用にサンプルを準備した。各キャピラリーをゴニオメーターヘッドの上に取り付け、データの取得中、回転させた。モノクロメータースリットは、５ｍｍ×１６０μｍに設定した。

【0041】

上記の代わりに、ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｘ’Ｐｅｒｔ Ｐｒｏという回折計を用いてＸＥＰＲパターンを取った。Ｏｐｔｉｘの長高精度焦点線源を用いてＣｕＫα線の入射ビームを生成した。楕円傾斜多層ミラーを用いて、線源のＣｕＫαＸ線を試料に通したとともに、検出器に当てた。Ｘ’Ｐｅｒｔ Ｐｒｏ Ｄａｔａ Ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ（ｖ．２．２ｂ）というソフトウェアを用いてデータの収集および分析を行った。分析の前に、シリコン試料（ＮＩＳＴ ＳＲＭ６４０ｃ）を分析して、Ｓｉ １１１のピーク位置を確認した。試料を厚さ３μｍの薄膜の間に挟み、透過配置で分析し、回転させて配向統計を最適化した。ビームストップとヘリウム雰囲気を用いて、空気散乱によって生じるバックグラウンドを最小限にした。入射および回折ビーム用にソーラースリットを用いて、軸発散を最小限にした。試料から２４０ｍｍに位置する走査位置敏感型検出器（Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ）を用いて回折パターンを取った。

【0042】

本明細書に示されているデータは、Ｘ線回折パターンと、ピークリストが示されている表を含む。収集されるデータの範囲は、計器に左右される場合があることを理解されたい。典型的な環境下では、２θ＝最大約３０°の範囲内のピークを選択する。ピークは、回折パターン上にラベリングするとともに、表に列挙することができるが、異なる丸めアルゴリズムを用いて、データを収集するのに用いる計器、および／または固有のピーク分解能に応じて、各ピークを２θ＝０．１または０．０２°の位に丸めてよいことを理解されたい。差異がある場合には、表に列挙されているピーク位置を用いる必要がある。図および表の両方におけるｘ軸（２θの角度）沿いのピークの場所は、適切なソフトウェア（典型的には、用いる計器に常駐している）を用いて自動的に割り出してよく、上記の基準に基づき、小数点以下、１桁または２桁の有意な数字に丸めてよい。ＵＳＰ ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ ｏｆ ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ ｉｎ ｘ−ｒａｙ ｐｏｗｄｅｒ ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ（Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｉａ，ＵＳＰ３２，ＮＦ２７，Ｖｏｌ．１，ｐｇ．３９２，２００９）に概説されている勧告に基づき、ピーク位置のばらつきは本発明では、２θ＝±０．１°以内にしてある。本明細書に報告されているいずれかの特定の測定値に関する正確度と精度は、割り出されていない。別個に調製したサンプルに関するさまざまな計器による測定値によって、ばらつきが２θ＝±０．１°を超えることがある。面間隔ｄの列挙については、面間隔ｄを算出するのに用いる波長は、Ｃｕ−Ｋα_１の波長とＣｕ−Ｋα_２波長の加重平均である１．５４１８７４Åであった（Ｐｈｙｓ．Ｒｅｖ．Ａ５６（６）４５５４−４５６８（１９９７））。面間隔ｄの推定値に関するばらつきは、それぞれの面間隔ｄで、ＵＳＰの勧告に基づいて算出し、それぞれのデータ表に示した。

【0043】

複数の回折パターンが得られるときには、粒子統計（ＰＳ）および／または好ましい配向（ＰＯ）の評価が可能である。単一の回折計で分析した複数のサンプルから得られるＸＲＰＤパターン間の再現性によって、その粒子統計が適正であることが示される。複数の回折計から得られるＸＲＰＤパターン間の相対強度の一貫性によって、良好な配向統計が示される。あるいは、単結晶構造が入手可能な場合、その単結晶構造に基づき、観察されるＸＲＰＤパターンを、算出したＸＲＰＤパターンと比較してよい。エリア検出器を用いた２次元散乱パターンを用いて、ＰＳ／ＰＯを評価することもできる。ＰＳおよびＰＯ双方の影響が無視できるものであることが分かった場合には、そのＸＲＰＤパターンは、そのサンプルの粉末平均強度を表すものであり、突出したピークは、「代表的なピーク」として見なしてよい。一般に、代表的なピークを割り出すために収集されるデータが多いほど、それらのピークの分類が、統計的により有意であることは明らかである。

【0044】

ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉ
この材料について、１つのＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌパターンと１つのＩｎｅｌパターンを分析したので、複数のパターンとの比較を通じて、少なくとも部分的に最適化された配向と粒子統計の影響を評価することができた。ピーク位置と強度はパターン間で一貫しており、粒子および配向統計が適正であることが示されている。観察されたピークは図１および表１に示されており、代表的なピークは表２に列挙されている。

【表1】

【表2】

【0045】

ＣＥＭ−１０１結晶形ＩＩ
この材料について、１つのＩｎｅｌパターンを分析し、単結晶データからシミュレートしたパターン（図示なし）との比較を通じて、好ましい配向および粒子統計の影響を評価できた。ピーク位置と強度はパターン間で一貫しており、粒子および配向統計が適正であることが示された。観察されたピークは図２および表３に示されており、代表的なピークは表４に列挙されている。

【表3】

【表4】

【0046】

再結晶化実験
結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩをもたらす再結晶化条件と、非晶性材料、または結晶形Ｉと結晶形ＩＩとの混合物をもたらす条件と、これらの条件による生成量（回収量）が下記の表Ａ「再結晶化実験結果」に示されている。各単離生成物のＸ線粉末回折パターンの分析によって、結晶多形を割り出した。表では、「Ｔ」は、溶媒の固体質量に対する比率をｍＬ／ｍｇ（またはＬ／ｇ）で表したものであり、ＤＣＭはジクロロメタンを意味し、ＤＭＦはジメチルホルムアミドを意味し、ＩＰＥはイソプロピルエーテルを意味する。

【表5】

【0047】

高温顕微鏡検査およびＤＳＣ
ＣＥＭ−１０１の結晶形Ｉは、高温顕微鏡検査によれば、約１８０℃で溶融を開始し、約２００℃で最終溶融し、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によれば、１７０℃、および１９７〜１９８℃に吸熱イベントを示す。ＣＥＭ−１０１の結晶形ＩＩは、高温顕微鏡検査によれば、約２１５℃で溶融を開始し、約２２５℃で、単一の吸熱イベントとしてＤＳＣピークを示す。各種量の結晶形Ｉと結晶形ＩＩとの混合物は、それらの結晶形の比率に応じて、ＤＳＣによれば、１９４〜１９９℃、および２１９〜２２５℃に吸熱イベントを示した。高温顕微鏡検査および／またはＤＳＣを用いて、本明細書に記載されている化合物および組成物中の特定の結晶形の有無を調べられることを理解されたい。

【0048】

相互変換実験
結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩをスラリー化することによる相互変換実験が下記の表Ｂに示されており、この実験では、開始固体は結晶形Ｉと結晶形ＩＩとの混合物であり、ＩＰＡはイソプロピルアルコール（イソプロパノール）であり、ＭＥＫはメチルエチルケトン（２−ブタノン）である。

【表6】

【0049】

水溶解度
ＣＥＭ−１０１の濃度をＬＣ／ＭＳ−ＭＳピーク面積に対してプロットすることによって得た直線検量線を用いて、ＣＥＭ−１０１の結晶形の水溶解度を下記のようにして得た。沈殿するまで試験化合物（乾燥粉末）を０．９％塩類溶液（初期ｐＨ６．０３）に加え、その混合物を振とうしながら６時間インキュベートする。このインキュベート期間後、サンプルを２回遠心分離し、その化合物の直線検量線を用いて溶解度を推定する。結晶形Ｉの溶解度は１４１１μｇ／ｍＬを示した。

【0050】

ＣＥＭ−１０１の濃度をＬＣ／ＭＳ−ＭＳピーク面積に対してプロットすることによって得た直線検量線を用いて、ＣＥＭ−１０１の結晶形の水溶解度を下記のようにして得た。沈殿するまで、試験化合物（乾燥粉末）を下記のｐＨの水に加え、その混合物を振とうしながら６時間インキュベートした。このインキュベート期間後、サンプルを２回遠心分離し、その化合物の直線検量線を用いて溶解度を推定した。（媒質：ｐＨ９．２、７．４、４、および１．２の水（０．１ＮのＮａＯＨおよび０．１ＮのＨＣｌを用いて調整）、インキュベーション：振とうしながら２６℃で６時間、試験濃度：飽和するまで乾燥粉末を加える、検出：ＬＣ／ＭＳ−ＭＳ。）結果は表Ｃ−１に示されている。

【表7】

【0051】

固有溶解比較
上記の２つの結晶形の代表的なバッチの平均固有溶解速度が、結晶形Ｉの３つのバッチ（１つのバッチについてＳＤおよび％ＣＶが示されている）と、結晶形ＩＩに関して、表ｃＣ−２に示されている。

【表8】

【0052】

ＣＥＭ−１０１のバルブ／ｃマウスにおける薬物動態評価
強制経口投与によって体重（ｂ．ｗ．）１ｋｇ当たり２０または１００ｍｇを単回投与したバルブ／ｃマウス内で、ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩとして特徴付けられるＣＥＭ−１０１のロットの薬物動態を評価した。投与剤は、０．５％（ｗ／ｖ）カルボキシメチルセルロース水溶液のビヒクル中に２．０ｍｇ／ｍＬまたは１０ｍｇ／ｍＬとして、投与体積１０ｍＬ／ｋｇ ｂ．ｗ．で調製した。投与後６時間にわたり、さまざまな時点に血液サンプルを採取した。結果を以下に示す。

【表9】

【表10】

【表11】

【表12】

【表13】

【表14】

【0053】

薬物動態（ＰＫ）比較
５、１０、および２０ｍｇ／ｋｇを単回投与した５匹の雌バルブ／ｃマウスのグループにおける結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩのさらなる経口投与時薬物動態実験の結果を表Ｊに示す。

【表15】

【0054】

ＣＥＭ−１０１結晶形Ｉを用いた医薬組成物の例
下記の調合を用いて、１カプセル当たり２００ｍｇのＣＥＭ−１０１を含む０号サイズの硬ゼラチンカプセル剤をもたらす。

【表16】

【0055】

下記の調合を用いて、１錠当たり２００ｍｇ含み、薬物充填率が５４％で、標的重量が３７０ｍｇ／１錠である錠剤をもたらす。この製剤は湿式造粒法によって製造し、これらの錠剤は、６ｋＰで圧縮されたものである。

【表17】

【0056】

例 下記の表に示されているように、さまざまな条件下でＣＥＭ−１０１の結晶形Ｉおよび結晶形ＩＩの安定性を評価した。いずれのケースにおいても、実験全体を通じて、試験材料の色の変化は観察されなかった。いずれのケースにおいても、まず試験材料を一次包装材（ＨＭＨＤＰＥ／ＬＤＰＥ／ＬＤＰＥブレンドバッグ内のＬＬＤＰＥバッグに入れてからヒートシールした）。この一次包装材を二次包装材（ＨＤＰＥドラム）に入れた。他のすべての不純物はいずれの時点においても１％未満であった。

【表18】

【表19】

【表20】

【表21】

【表22】

【表23】

【表24】

【表25】

【表26】

【図1】

【図2】