特許 5718929 組合せ物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5718929

(24)【登録日】2015年3月27日

(45)【発行日】2015年5月13日

(54)【発明の名称】組合せ物

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/519 20060101AFI20150423BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20150423BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20150423BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20150423BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20150423BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/519

   A61K31/506

   A61P35/00

   A61P35/02

   A61P43/00 121

【請求項の数】12

【全頁数】53

(21)【出願番号】特願2012-534386(P2012-534386)

(86)(22)【出願日】2010年10月15日

(65)【公表番号】特表2013-508294(P2013-508294A)

(43)【公表日】2013年3月7日

(86)【国際出願番号】US2010052808

(87)【国際公開番号】WO2011047238

(87)【国際公開日】20110421

【審査請求日】2013年4月22日

(31)【優先権主張番号】61/252,213

(32)【優先日】2009年10月16日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】509329523

【氏名又は名称】グラクソスミスクライン エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100091096

【弁理士】

【氏名又は名称】平木 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100118773

【弁理士】

【氏名又は名称】藤田 節

(74)【代理人】

【識別番号】100122389

【弁理士】

【氏名又は名称】新井 栄一

(74)【代理人】

【識別番号】100111741

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 夏夫

(74)【代理人】

【識別番号】100125508

【弁理士】

【氏名又は名称】藤井 愛

(72)【発明者】

【氏名】ダンブル，メリッサ

(72)【発明者】

【氏名】クマー，レイケッシュ

(72)【発明者】

【氏名】ラケール，シルビー

(72)【発明者】

【氏名】レボウィッツ，ピーター

【審査官】 深草 亜子

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００８−５０１６３１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００３−５１４８６０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００３−５１４９０６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００７−５３２５９０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特許第５４２６６６４（ＪＰ，Ｂ２）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／５１９

Ａ６１Ｋ ３１／５０６

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

（ｉ）式（Ｉ）の化合物

【化1】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物と、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物

【化2】

またはその薬学上許容可能な塩と、
を含む、癌の治療に使用するための組合せ物。

【請求項2】

式（Ｉ）の化合物がジメチルスルホキシド溶媒和物の形態にあり、式（ＩＩ）の化合物がメタンスルホン酸塩の形態にある、請求項１に記載の組合せ物。

【請求項3】

前記癌が、頭頸部癌、乳癌、肺癌、結腸癌、卵巣癌、前立腺癌、神経膠腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、多形神経膠芽腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット・デュクロ病、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、髄芽腫、腎癌、肝癌、黒色腫、膵臓癌、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺癌、リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリー細胞白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、ＡＭＬ、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、形質細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫 巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、腎癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、上咽頭癌、頬癌、口腔癌、ＧＩＳＴ（消化管間葉性腫瘍）、および精巣癌から選択される、請求項１または２に記載の組合せ物。

【請求項4】

前記癌が黒色腫である、請求項１または２に記載の組合せ物。

【請求項5】

請求項１〜４のいずれか１項に記載の組合せ物を含む癌治療用組合せ物キット。

【請求項6】

癌の治療のための薬剤の製造における、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組合せ物の使用。

【請求項7】

薬学上許容可能な希釈剤または担体と一緒に請求項１〜４のいずれか１項に記載の組合せ物を含む、癌治療用医薬組成物。

【請求項8】

（ｉ）式（Ｉ）の化合物

【化3】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物を含む、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物

【化4】

またはその薬学上許容可能な塩、あるいはそれを含む医薬組成物
と併用して癌を治療するための医薬組成物。

【請求項9】

（ｉ）式（ＩＩ）の化合物

【化5】

またはその薬学上許容可能な塩を含む、
（ｉｉ）式（Ｉ）の化合物

【化6】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物、あるいはそれを含む医薬組成物
と併用して癌を治療するための医薬組成物。

【請求項10】

式（Ｉ）の化合物がジメチルスルホキシド溶媒和物の形態にあり、式（ＩＩ）の化合物がメタンスルホン酸塩の形態にある、請求項８または９に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記癌が、頭頸部癌、乳癌、肺癌、結腸癌、卵巣癌、前立腺癌、神経膠腫、神経膠芽腫、星状細胞腫、多形神経膠芽腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット・デュクロ病、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、髄芽腫、腎癌、肝癌、黒色腫、膵臓癌、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺癌、リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリー細胞白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、ＡＭＬ、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、形質細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫 巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、腎癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、上咽頭癌、頬癌、口腔癌、ＧＩＳＴ（消化管間葉性腫瘍）、および精巣癌から選択される、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記癌が黒色腫である、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、哺乳動物において癌を治療する方法に、およびそのような治療に有用な組合せ物に関する。特に、本方法は、ＭＥＫ阻害剤Ｎ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル；−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド、またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物を、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤、特にＮ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミドまたはその薬学上許容可能な塩とともに含む新規な組合せ物、この新規な組合せ物を含む医薬組成物、ならびにＭＥＫおよび／またはＢ−Ｒａｆの阻害が有益である病態、例えば癌の治療においてそのような組合せ物および組成物を使用する方法に関する。

【背景技術】

【0002】

癌を含めた過剰増殖性障害の効果的な治療は、腫瘍学の分野における、引き続き存在する目標である。一般に、癌は、細胞分裂、分化およびアポトーシス細胞死を制御する正常なプロセスの脱調節から生じ、限りのない成長、局所拡大および全身性転移の潜在力を有する悪性細胞の増殖によって特徴づけられる。正常なプロセスの脱調節は、シグナル伝達経路における異常性および正常細胞において見出される因子とは異なる因子への応答を含む。

【0003】

酵素の重要な大ファミリーは、タンパク質キナーゼ酵素ファミリーである。現在、約５００の異なる公知のタンパク質キナーゼが存在する。タンパク質キナーゼは、ＡＴＰ−Ｍｇ^２＋複合体のγ−リン酸をアミノ酸側鎖へと移すことによって、種々のタンパク質の中のアミノ酸側鎖のリン酸化を触媒する働きをする。これらの酵素は、細胞内部のシグナル伝達プロセスの大部分を制御し、これによりタンパク質の中のセリン、トレオニンおよびチロシン残基のヒドロキシル基の可逆的リン酸化を通して、細胞機能、成長、分化および破壊（アポトーシス）を支配する。研究により、タンパク質キナーゼは、シグナル伝達、転写調節、細胞運動性、および細胞分裂を含めた多くの細胞機能の鍵となる調節因子であるということが示されている。また、いくつかの腫瘍遺伝子はタンパク質キナーゼをコードすることも示されており、これは、キナーゼが発癌においてある役割を果たすということを示唆する。これらのプロセスは、各キナーゼ自身が１以上のキナーゼによって調節されることになる複雑なかみ合った経路によって、高度に調節されることが多い。その結果、異常なまたは不適切なタンパク質キナーゼ活性は、良性および悪性の増殖性障害ならびに免疫系および神経系の不適切な活性化から生じる疾患を含めた、このような異常なキナーゼ活性に関連する疾患の病態の発生に寄与し得る。タンパク質キナーゼの生理学的関連性、多様性および偏在性のため、タンパク質キナーゼは、生化学的研究および医学的研究において、酵素の最も重要かつ広く研究されたファミリーの１つとなった。

【0004】

酵素のタンパク質キナーゼファミリーは、典型的には、それらがリン酸化するアミノ酸残基に基づいて２つの主要なサブファミリーに分類される：タンパク質チロシンキナーゼおよびタンパク質セリン／トレオニンキナーゼ。タンパク質セリン／トレオニンキナーゼ（ＰＳＴＫ）としては、環状ＡＭＰおよび環状ＧＭＰ依存性タンパク質キナーゼ、カルシウムおよびリン脂質依存性タンパク質キナーゼ、カルシウムおよびカルモジュリン依存性タンパク質キナーゼ、カゼインキナーゼ、細胞分裂周期タンパク質キナーゼなどが挙げられる。これらのキナーゼは、通常、細胞質内にあるかまたはおそらくはタンパク質をつなぎ止めることにより細胞の微粒子分画に結合している。異常なタンパク質セリン／トレオニンキナーゼ活性が、慢性関節リウマチ、乾癬、敗血症性ショック、骨量減少、多くの癌および他の増殖性疾患などのいくつかの病態に関わるとされてきたか、または疑われている。従って、セリン／トレオニンキナーゼおよびそれらが一部をなすシグナル伝達経路は、ドラッグデザインのための重要な標的である。チロシンキナーゼはチロシン残基をリン酸化する。チロシンキナーゼは、細胞制御において同じく重要な役割を果たす。これらのキナーゼは、成長因子およびホルモンなどの分子についてのいくつかの受容体を含み、表皮成長因子受容体、インスリン受容体、血小板由来成長因子受容体などが含まれる。研究により、多くのチロシンキナーゼは膜貫通型タンパク質であり、それらの受容体ドメインが細胞の外側に位置し、それらのキナーゼドメインが内側に位置するということが示されている。チロシンキナーゼの調節因子も同様に特定するために、多くの研究が同様に進行中である。

【0005】

受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）は、細胞成長、増殖および分化を支配する種々のタンパク質（受容体チロシンキナーゼ自身を含む）の中の特定のチロシルアミノ酸残基のリン酸化を触媒する。

【0006】

いくつかのＲＴＫの下流にいくつかのシグナル伝達経路が存在し、その中にＲａｓ−Ｒａｆ−ＭＥＫ−ＥＲＫキナーゼ経路がある。成長因子、ホルモン、サイトカインなどに応答したＲａｓ ＧＴＰａｓｅタンパク質の活性化がＲａｆキナーゼのリン酸化および活性化を刺激するということが、現在、理解されている。次いでこれらのキナーゼは、細胞内タンパク質キナーゼＭＥＫ１およびＭＥＫ２をリン酸化して活性化し、このことが、次に、他のタンパク質キナーゼ、ＥＲＫ１および２をリン酸化して活性化する。分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）経路または細胞質内のカスケードとしても知られるこのシグナル伝達経路は、成長シグナルに対する細胞応答を媒介する。これの最終的な機能は、細胞膜における受容体活性を、細胞増殖、分化、および生存を支配する細胞質内のまたは細胞核の標的の修飾と結びつけることである。

【0007】

この経路の構成的活性化は、細胞形質転換を誘導するのに十分である。異常な受容体チロシンキナーゼ活性化、Ｒａｓ変異またはＲａｆ変異に起因するＭＡＰキナーゼ経路の調節不全の活性化は、ヒトの癌においてしばしば見出されており、異常な成長制御を決定する主要な要因を代表する。ヒトの悪性腫瘍においては、Ｒａｓ変異は一般的であり、癌の約３０％において特定されてきた。ＧＴＰａｓｅタンパク質（グアノシン三リン酸をグアノシン二リン酸へと変換するタンパク質）のＲａｓファミリーは、活性化された成長因子受容体から、下流の細胞内パートナーへとシグナルを中継する。活性な膜結合Ｒａｓによって動員される標的の中で目立つものは、セリン／トレオニンタンパク質キナーゼのＲａｆファミリーである。このＲａｆファミリーは、Ｒａｓの下流エフェクターとして作用する３つの関連するキナーゼ（Ａ−、Ｂ−およびＣ−Ｒａｆ）から構成される。Ｒａｓによって媒介されるＲａｆ活性化は、次に、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２（ＭＡＰ／ＥＲＫキナーゼ１および２）の活性化を誘発し、これが、次に、チロシン−１８５およびトレオニン−１８３上でＥＲＫ１およびＥＲＫ２（細胞外シグナル調節キナーゼ１および２）をリン酸化する。活性化されたＥＲＫ１およびＥＲＫ２は転位置し、核の中に蓄積し、この核の中でＥＲＫ１およびＥＲＫ２は、細胞成長および生存を制御する転写因子を含めた様々な基質をリン酸化することができる。ヒトの癌の発生におけるＲａｓ／Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫ経路の重要性を考えると、このシグナル伝達カスケードのキナーゼ成分は、癌および他の増殖性疾患における疾患進行の調節のための潜在的に重要な標的として融合しつつある。

【0008】

ＭＥＫ１およびＭＥＫ２は、種々のＭＡＰキナーゼのトレオニンおよびチロシン残基をリン酸化する二重特異性キナーゼ（ＭＥＫ１−７）という、より大きいファミリーのメンバーである。ＭＥＫ１およびＭＥＫ２は別個の遺伝子によってコードされるが、それらは、Ｃ末端の触媒的キナーゼドメイン内およびほとんどのＮ末端調節領域の両方において高い相同性（８０％）を共有する。ＭＥＫ１およびＭＥＫ２の発癌性形態はヒトの癌では見出されたことはないが、ＭＥＫの構成的活性化が細胞形質転換を生じることは示されている。Ｒａｆに加えて、ＭＥＫも同様に他の腫瘍遺伝子によって活性化され得る。今までのところ、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２の唯一の公知の基質はＥＲＫ１およびＥＲＫ２である。チロシンおよびトレオニン残基の両方をリン酸化するというユニークな能力に加えてこの珍しい基質特異性は、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２をシグナル伝達カスケードの中の臨界点に置き、このシグナル伝達カスケードは、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２が多くの細胞外のシグナルをＭＡＰＫ経路へと統合することを可能にする。

【0009】

従って、ＭＡＰＫキナーゼ経路のタンパク質（例えばＭＥＫ）の阻害剤は、増殖性または浸潤性の疾患の封じ込めおよび／または治療に使用するための抗増殖性、アポトーシス促進性薬剤および抗浸潤性薬剤の両方として価値があるはずであるということが認識されてきた。

【0010】

さらに、ＭＥＫ阻害活性を有する化合物がＥＲＫ１／２活性の阻害および細胞増殖の抑制を効果的に誘導するということも知られており（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ． ２７６，Ｎｏ．４ ｐｐ．２６８６−２６９２，２００１）、そして当該化合物は、腫瘍形成および／または癌などの望ましくない細胞増殖によって引き起こされる疾患に対する効果を示すことが予想される。

【0011】

ＭＡＰＫ経路の持続的および構成的な活性化を導き、最終的には細胞分裂および生存の増大を生じ得る、種々のＲａｓ ＧＴＰａｓｅおよびＢ−Ｒａｆキナーゼにおける変異が、特定されている。この結果として、これらの変異は、広い範囲のヒトの癌の確立、発生、および進行と強く結びつけられてきた。シグナル伝達におけるＲａｆキナーゼの生物学的役割、特にＢ−Ｒａｆの生物学的役割は、Ｄａｖｉｅｓ，Ｈ．，ら、Ｎａｔｕｒｅ （２００２） ９：１−６；Ｇａｒｎｅｔｔ，Ｍ．Ｊ．およびＭａｒａｉｓ，Ｒ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ （２００４） ６：３１３−３１９；Ｚｅｂｉｓｃｈ，Ａ．およびＴｒｏｐｐｍａｉｒ，Ｊ．，Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ． （２００６） ６３：１３１４−１３３０；Ｍｉｄｇｌｅｙ，Ｒ．Ｓ．およびＫｅｒｒ，Ｄ．Ｊ．，Ｃｒｉｔ． Ｒｅｖ． Ｏｎｃ／Ｈｅｍａｔｏｌ． （２００２） ４４：１０９−１２０；Ｓｍｉｔｈ，Ｒ．Ａ．，ら、Ｃｕｒｒ． Ｔｏｐ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． （２００６） ６：１０７１−１０８９；およびＤｏｗｎｗａｒｄ，Ｊ．，Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｃａｎｃｅｒ （２００３） ３：１１−２２に記載されている。

【0012】

ＭＡＰＫ経路シグナル伝達を活性化するＢ−Ｒａｆキナーゼの天然に存在する変異は、高い百分率のヒト黒色腫（Ｄａｖｉｅｓ （２００２） 前出）および甲状腺癌（Ｃｏｈｅｎら、Ｊ． Ｎａｔ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． （２００３） ９５（８） ６２５−６２７およびＫｉｍｕｒａら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． （２００３） ６３（７） １４５４−１４５７）において見出されており、さらには、より低い頻度ではあるが依然として有意な頻度で、以下のもので見出されている：
バレット腺癌（Ｇａｒｎｅｔｔら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ （２００４） ６ ３１３−３１９およびＳｏｍｍｅｒｅｒら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ （２００４） ２３（２） ５５４−５５８）、胆道癌（Ｚｅｂｉｓｃｈら、Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ． （２００６） ６３ １３１４−１３３０）、乳癌（Ｄａｖｉｅｓ （２００２） 前出）、子宮頸癌（Ｍｏｒｅｎｏ−Ｂｕｅｎｏら、Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． （２００６） １２（１２） ３８６５−３８６６）、胆管細胞癌（Ｔａｎｎａｐｆｅｌら、Ｇｕｔ （２００３） ５２（５） ７０６−７１２）、神経膠芽腫、星状細胞腫および上衣腫などの原発性中枢神経系腫瘍を含めた中枢神経系腫瘍（Ｋｎｏｂｂｅら、Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ． （Ｂｅｒｌ．） （２００４） １０８（６） ４６７−４７０、Ｄａｖｉｅｓ （２００２） 前出、およびＧａｒｎｅｔｔら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ （２００４） 前出）ならびに続発性中枢神経系腫瘍（すなわち、中枢神経系の外に由来する腫瘍の、中枢神経系への転移）、大腸結腸癌を含めた結直腸癌（Ｙｕｅｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． （２００２） ６２（２２） ６４５１−６４５５、Ｄａｖｉｅｓ （２００２） 前出およびＺｅｂｉｓｃｈら、Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ． （２００６）、胃癌（Ｌｅｅら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ （２００３） ２２（４４） ６９４２−６９４５）、頭頸部扁平上皮癌を含めた頭頸部の癌（Ｃｏｈｅｎら、Ｊ． Ｎａｔ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． （２００３） ９５（８） ６２５−６２７およびＷｅｂｅｒら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ （２００３） ２２（３０） ４７５７−４７５９）、白血病（Ｇａｒｎｅｔｔら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ （２００４） 前出、特に急性リンパ芽球性白血病（Ｇａｒｎｅｔｔら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ （２００４） 前出およびＧｕｓｔａｆｓｓｏｎら、Ｌｅｕｋｅｍｉａ （２００５） １９（２） ３１０−３１２）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）（Ｌｅｅら、Ｌｅｕｋｅｍｉａ （２００４） １８（１） １７０−１７２、およびＣｈｒｉｓｔｉａｎｓｅｎら、Ｌｅｕｋｅｍｉａ （２００５） １９（１２） ２２３２−２２４０）、骨髄異形成症候群（Ｃｈｒｉｓｔｉａｎｓｅｎら、Ｌｅｕｋｅｍｉａ （２００５） 前出）および慢性骨髄性白血病（Ｍｉｚｕｃｈｉら、Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍｕｎ． （２００５） ３２６（３） ６４５−６５１）；ホジキンリンパ腫（Ｆｉｇｌら、Ａｒｃｈ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． （２００７） １４３（４） ４９５−４９９）、非ホジキンリンパ腫（Ｌｅｅら、Ｂｒ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ （２００３） ８９（１０） １９５８−１９６０）、巨核芽球性白血病（Ｅｙｃｈｅｎｅら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ （１９９５） １０（６） １１５９−１１６５）および多発性骨髄腫（Ｎｇら、Ｂｒ． Ｊ． Ｈａｅｍａｔｏｌ． （２００３） １２３（４） ６３７−６４５）を含めた血液癌、肝細胞癌（Ｇａｒｎｅｔｔら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ （２００４）、
小細胞性肺癌（Ｐａｒｄｏら、ＥＭＢＯ Ｊ． （２００６） ２５（１３） ３０７８−３０８８）および非小細胞性肺癌（Ｄａｖｉｅｓ （２００２） 前出）を含めた肺癌（Ｂｒｏｓｅら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． （２００２） ６２（２３） ６９９７−７０００、Ｃｏｈｅｎら、Ｊ． Ｎａｔ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． （２００３） 前出およびＤａｖｉｅｓ （２００２） 前出）、卵巣癌（ＲｕｓｓｅｌｌおよびＭｃＣｌｕｇｇａｇｅ Ｊ． Ｐａｔｈｏｌ． （２００４） ２０３（２） ６１７−６１９およびＤａｖｉｅｓ （２００２） 前出）、子宮内膜癌（Ｇａｒｎｅｔｔら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ （２００４） 前出、およびＭｏｒｅｎｏ−Ｂｕｅｎｏら、Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． （２００６） 前出）、膵臓癌（Ｉｓｈｉｍｕｒａら、Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ． （２００３） １９９（２） １６９−１７３）、下垂体腺腫（Ｄｅ Ｍａｒｔｉｎｏら、Ｊ． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ． Ｉｎｖｅｓｔ． （２００７） ３０（１） ＲＣ１−３）、前立腺癌（Ｃｈｏら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ （２００６） １１９（８） １８５８−１８６２）、腎癌（Ｎａｇｙら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ （２００３） １０６（６） ９８０−９８１）、肉腫（Ｄａｖｉｅｓ （２００２） 前出）、および皮膚癌（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｖｉｃｉａｎａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ （２００６） ３１１（５７６５） １２８７−１２９０およびＤａｖｉｅｓ（２００２） 前出）。ｃ−Ｒａｆの過剰発現はＡＭＬ（Ｚｅｂｉｓｃｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． （２００６） ６６（７） ３４０１−３４０８、およびＺｅｂｉｓｃｈ（Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ． （２００６））および赤白血病（Ｚｅｂｉｓｃｈら、Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ． （２００６）に結びつけられてきた。

【0013】

これらの癌においてＲａｆファミリーキナーゼが果たす役割、およびＢ−Ｒａｆキナーゼ活性の阻害に選択的に標的化した薬剤を含めたある範囲の前臨床の治療薬を用いた予備的な研究（Ｋｉｎｇ Ａ．Ｊ．ら，（２００６） Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ６６：１１１００−１１１０５）に基づいて、１以上のＲａｆファミリーキナーゼの阻害剤は、このような癌またはＲａｆキナーゼに関連する他の病態の治療のために有用であろうということは一般に受け容れられている。

【0014】

Ｂ−Ｒａｆの変異も、心顔皮膚症候群（ｃａｒｄｉｏ−ｆａｃｉｏ−ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ−Ｖｉｃｉａｎａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ （２００６） ３１１（５７６５） １２８７−１２９０）および多発性嚢胞腎疾患（Ｎａｇａｏら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ． （２００３） ６３（２） ４２７−４３７）を含めた他の病態に関与するとされてきた。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0015】

ＭＥＫおよびＢ−Ｒａｆ阻害剤などの化合物を用いる癌の治療において多くの最近の進歩があったが、癌の作用に苦しむ個体のより有効かつ／または強化された治療に対するニーズがまだある。

【課題を解決するための手段】

【0016】

本発明者らは、単独療法よりも増加した活性をもたらす化学療法剤の組合せ物を特定した。特に、ＭＥＫ阻害剤であるＮ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド、またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物を、Ｂ−Ｒａｆ阻害剤であるＮ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミドまたはその薬学上許容可能な塩と組合せて含む薬物組合せ物が記載される。

【0017】

本発明のＭＥＫ阻害剤は、式（Ｉ）の構造：

【化1】

【0018】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物によって表され（本明細書中では、まとめて「化合物Ａ」と呼ばれる）、
本発明のＢ−Ｒａｆ阻害剤は、式（ＩＩ）の構造：

【化2】

【0019】

またはその薬学上許容可能な塩によって表される（本明細書中では、まとめて「化合物Ｂ」と呼ばれる）。

【0020】

本発明の第１の態様では、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物）：

【化3】

【0021】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物と、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物

【化4】

【0022】

またはその薬学上許容可能な塩と、
を含む組合せ物が提供される。

【0023】

本発明の別の態様では、Ｎ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド ジメチルスルホキシド（溶媒和物）と、Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド メタンスルホネートとを含む組合せ物が提供される。

【0024】

本発明の別の態様では、療法に使用するための、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物：

【化5】

【0025】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物と、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物：

【化6】

【0026】

またはその薬学上許容可能な塩と、
を含む組合せ物が提供される。

【0027】

本発明の別の態様では、癌の治療に使用するための、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物：

【化7】

【0028】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物と、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物：

【化8】

【0029】

またはその薬学上許容可能な塩と、
を含む組合せ物が提供される。

【0030】

本発明の別の態様では、
（ｉ）式（Ｉ）の化合物：

【化9】

【0031】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物と、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物：

【化10】

【0032】

またはその薬学上許容可能な塩と
を、薬学上許容可能な希釈剤または担体と一緒に含む医薬組成物が提供される。

【0033】

別の態様では、癌の治療のための薬剤の製造における、
ｉ）式（Ｉ）の化合物

【化11】

【0034】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物と、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物：

【化12】

【0035】

またはその薬学上許容可能な塩と、
を含む組合せ物の使用が提供される。

【0036】

別の態様では、哺乳動物に対して、
（ｉ）治療上有効量の式（Ｉ）の化合物

【化13】

【0037】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物と、
（ｉｉ）式（ＩＩ）の化合物：

【化14】

【0038】

またはその薬学上許容可能な塩を投与することを含む、哺乳動物における癌の治療方法が提供される。

【0039】

別の態様では、治療上有効量の、Ｎ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド、またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物、およびＮ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミドまたはその薬学上許容可能な塩の組合せ物の投与を含む、それを必要としているヒトにおいて癌を治療する方法が提供される。

【0040】

別の態様では、治療上有効量の、Ｎ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド ジメチルスルホキシド溶媒和物およびＮ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド メタンスルホネートの組合せ物の投与を含む、それを必要としているヒトにおいて癌を治療する方法が提供される。

【0041】

本発明のさらなる態様では、治療上有効量の、本発明の組合せ物を投与することを含み、この組合せ物は、ある特定期間内で、ある継続期間の間投与される、それを必要としている哺乳動物において癌を治療する方法が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0042】

【図1】化合物ＡのＭＥＫ阻害剤、化合物ＢのＢ−Ｒａｆ阻害剤、およびそれらの組合せ物の投与による、腫瘍増殖阻害を示すグラフである。

【図2】化合物ＡのＭＥＫ阻害剤、化合物ＢのＢ−Ｒａｆ阻害剤、およびそれらの組合せ物の投与による、腫瘍増殖阻害を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0043】

本発明で使用する、ＭＥＫ阻害剤であるＮ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド、またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物は、式（Ｉ）の化合物：

【化15】

【0044】

またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物によって表される。便宜のため、この群の想定される化合物および塩または溶媒和物は、まとめて化合物Ａと呼ばれ、これは、化合物Ａへの言及は、選択的に当該化合物またはその薬学上許容可能な塩もしくは溶媒和物のうちのいずれかを指すことになるということを意味する。

【0045】

命名法の取り決めに応じて、式（Ｉ）の化合物は、正しくＮ−｛３−［３−シクロプロピル−５−［（２−フルオロ−４−ヨードフェニル）アミノ］−６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１（２Ｈ）−イル］フェニル｝アセトアミドとも呼ばれ得る。

【0046】

本発明で使用する、ＢＲａｆ阻害剤であるＮ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミドまたはその薬学上許容可能な塩は、化合物式（ＩＩ）：

【化16】

【0047】

またはその薬学上許容可能な塩によって表される。便宜のため、この群の想定される化合物および塩は、まとめて化合物Ｂと呼ばれ、これは、化合物Ｂへの言及は、選択的に当該化合物またはその薬学上許容可能な塩のうちのいずれかを指すことになるということを意味する。

【0048】

本発明で使用する用語「本発明の組合せ物」は化合物Ａおよび化合物Ｂを含む組合せ物を指す。

【0049】

本発明で使用する用語「新生物」は、細胞または組織の異常成長を指し、良性、すなわち非癌性の成長、および悪性、すなわち癌性の成長を包含すると理解される。用語「新生物性の」は、新生物の、または新生物に関する、を意味する。

【0050】

本発明で使用する用語「薬剤、…薬、…剤」は、組織、系、動物、哺乳動物、ヒト、または他の被験体において所望の効果をもたらす物質を意味すると理解される。従って、用語「抗新生物薬」は、組織、系、動物、哺乳動物、ヒト、または他の被験体において抗新生物効果をもたらす物質を意味すると理解される。「薬剤、…薬、…剤」は、単独の化合物または２以上の化合物の組合せ物もしくは組成物であり得るということも理解されるべきである。

【0051】

本発明で使用する用語「治療すること」およびその派生語は、治療療法を意味する。特定の病態に関連しては、治療することは、（１）その病態、もしくはその病態の生物学的徴候のうちの１以上を寛解させること、（２）（ａ）その病態につながるかもしくはその病態に関与する生物学的カスケードの中の１以上の点、または（ｂ）その病態の生物学的徴候のうちの１以上を妨げること、（３）その病態に関連する症候、効果もしくは副作用のうちの１以上、またはその病態もしくはその病態の治療に関連する症候、効果もしくは副作用のうちの１以上を緩和すること、または（４）その病態もしくはその病態の生物学的徴候のうちの１以上の進行を遅くすることを意味する。

【0052】

本発明で使用する「予防」は、病態もしくはその生物学的徴候の見込みもしくは重症度を実質的に低減するため、またはそのような病態もしくはその生物学的徴候の発症を遅くするための薬物の予防的投与を指すと理解される。当業者は、「予防」は絶対的なものではないということはわかるであろう。予防的療法は、例えば、被験体が癌の強い家族歴をもつとき、または被験体が発癌性物質に曝露されたことがあるときなど、被験体が癌を発症するリスクが高いと考えられるときに、適切である。

【0053】

本発明で使用する用語「有効量」は、例えば研究者または臨床医によって求められている組織、系、動物またはヒトの生物学的応答または医学的応答を引き出すであろう、薬物または医薬品の量を意味する。さらに、用語「治療上有効量」は、そのような量を投与されたことがない対応する被験体と比較して、疾患、障害、もしくは副作用の改善された治療、治癒、予防、もしくは改善、または疾患または障害の前進の速度の減少を生じるいずれかの量を意味する。また、この用語は、その範囲の内に、正常な生理学的機能を亢進するために有効な量を包含する。

【0054】

化合物Ａおよび／またはＢは、１以上のキラル原子を含有し得、またはそうでなくとも鏡像異性体として存在することができ得る。従って、本発明の化合物は、鏡像異性体の混合物および精製された鏡像異性体または鏡像異性体が富化された混合物を包含する。また、すべての互変異性体および互変異性体の混合物が化合物Ａおよび化合物Ｂの範囲の内に包含されるということは理解される。

【0055】

また、化合物ＡおよびＢが、別々にまたは両方ともに、溶媒和物として与えられ得るということも理解される。本発明で使用する用語「溶媒和物」は、溶質（本発明においては、式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物またはその塩）および溶媒によって形成される様々な化学量論の複合体を指す。本発明の目的のためのこのような溶媒は、溶質の生物活性を妨げてはならない。好適な溶媒の例としては、水、メタノール、ジメチルスルホキシド、エタノールおよび酢酸が挙げられるが、これらに限定されない。１つの実施形態では、使用される溶媒は薬学上許容可能な溶媒である。好適な薬学上許容可能な溶媒の例としては、水、エタノールおよび酢酸が挙げられるが、これらに限定されない。別の実施形態では、使用される溶媒は水である。

【0056】

化合物ＡおよびＢは、複数の形態で結晶化する能力を有し得、これは、公知の多形性という特徴であり、このような多形形態（「多形」）は化合物ＡおよびＢの範囲の内にあると理解される。多形性は、一般に、温度もしくは圧力またはその両方の変化に対する応答として起こり得るが、結晶化プロセスでの変動からも生じ得る。多形は、ｘ線回折パターン、溶解性、および融点などの当該技術分野で公知の種々の物理的特徴によって区別し得る。

【0057】

化合物Ａは、その薬学上許容可能な塩と共に、およびそれらの溶媒和物としても、国際公開第２００５／１２１１４２号に、特に癌の治療における、ＭＥＫ活性の阻害剤として有用であると開示されクレームされている。化合物Ａは、実施例４−１の化合物である。化合物Ａは、国際公開第２００５／１２１１４２号に記載されているようにして調製され得る。

【0058】

好適には、化合物Ａはジメチルスルホキシド溶媒和物の形態にある。好適には、化合物Ａはナトリウム塩の形態にある。好適には、化合物Ａは、水和物、酢酸、エタノール、ニトロメタン、クロロベンゼン、１−ペンタノール、イソプロピルアルコール、エチレングリコールおよび３−メチル−１−ブタノールから選択される溶媒和物の形態にある。これらの溶媒和物および塩の形態は、国際公開第２００５／１２１１４２号の中の記載から、当業者によって調製され得る。

【0059】

化合物Ｂは、その薬学上許容可能な塩と共に、ＰＣＴ特許出願ＰＣＴ／ＵＳ０９／４２６８２号に、特に癌の治療における、ＢＲａｆ活性の阻害剤として有用であると開示されクレームされている。化合物Ｂは、当該出願の実施例５８ａ−５８ｅによって具体的に記載されている。このＰＣＴ出願は、２００９年１１月１２日に公開公報国際公開第２００９／１３７３９１号として公開されており、これを参照により本明細書に援用する。

【0060】

より具体的には、化合物Ｂは、下記の方法に従って調製され得る。

【0061】

方法１：化合物Ｂ（第１の結晶形態） − Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド

【化17】

【0062】

Ｎ−｛３−［５−（２−クロロ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（１９６ｍｇ、０．３６４ｍｍｏｌ）およびアンモニアの７Ｍ メタノール溶液（８ｍｌ、５６．０ｍｍｏｌ）の懸濁液を、密封チューブの中で９０℃に２４時間加熱した。この反応液をＤＣＭで希釈し、シリカゲルを加え、濃縮した。この粗生成物を、シリカゲルでクロマトグラフィーにかけ、１００％ ＤＣＭから１：１［ＤＣＭ：（９：１ ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）］を用いて溶出した。きれいな分画を濃縮し、粗生成物を得た。この粗生成物を、逆相ＨＰＬＣ（アセトニトリル：水のグラジエント。アセトニトリル、水ともに０．１％ＴＦＡを含む）によって再精製した。合わせたきれいな分画を濃縮し、次いでＤＣＭと飽和ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。ＤＣＭ層を分離し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。標記の化合物、Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミドを得た（９４ｍｇ、４７％収率）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６） δ ｐｐｍ １０．８３（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５５−７．７０（ｍ，１Ｈ），７．３５−７．４３（ｍ，１Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ），７．１４−７．２７（ｍ，３Ｈ），６．７０（ｓ，２Ｈ），５．７９（ｄ，Ｊ＝５．１３Ｈｚ，１Ｈ），１．３５（ｓ，９Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：５１９．９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0063】

方法２：化合物Ｂ（別の結晶形態） − Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド
１９．６ｍｇのＮ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（実施例５８ａに従って調製され得る）を、室温で、２ｍＬのバイアルの中で、５００Ｌの酢酸エチルと合わせた。このスラリーを、４８時間、０−４０℃の間で温度サイクルにかけた。得られたスラリーを室温まで冷却し、固体を減圧ろ過によって集めた。この固体をラマン、ＰＸＲＤ、ＤＳＣ／ＴＧＡ分析によって分析すると、上記の実施例５８ａから得られた結晶形態とは異なる結晶形態であることが示された。

【0064】

方法３：化合物Ｂ（別の結晶形態、大バッチ） − Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド

【化18】

【0065】

工程Ａ：３−｛［（２，６−ジフルオロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−フルオロ安息香酸メチル

【化19】

【0066】

３−アミノ−２−フルオロ安息香酸メチル（５０ｇ、１当量）を反応器の中に入れ、次いでジクロロメタン（２５０ｍＬ、５倍量）を入れた。この内容物を撹拌し、約１５℃に冷却し、ピリジン（２６．２ｍＬ、１．１当量）を加えた。このピリジンの添加後、反応器の内容物を約１５℃に調整し、滴下ロートを用いて２，６−ジフルオロベンゼンスルホニルクロリド（３９．７ｍＬ、１．０当量）の添加を開始した。添加の間、温度を２５℃未満に保った。添加終了後、反応器の内容物を２０−２５℃に加温し、一晩保持した。酢酸エチル（１５０ｍＬ）を添加し、ジクロロメタンを蒸留によって除去した。蒸留が完了すると、次いで反応混合物を酢酸エチル（５倍量）でもう一度希釈し、濃縮した。この反応混合物を酢酸エチル（１０倍量）および水（４倍量）で希釈し、すべての固体が溶解するまで、撹拌しながら内容物を５０−５５℃に加熱した。層を静置させ、分離した。有機層を水（４倍量）で希釈し、内容物を５０−５５℃に２０−３０分間加熱した。層を静置させ、次いで分離し、酢酸エチル層を減圧下で約３倍量まで濃縮した。酢酸エチル（５倍量）を添加し、減圧下で約３倍量まで再度濃縮した。次いでシクロヘキサン（９倍量）をこの反応器に加え、内容物を加熱して３０分間還流させ、次いで０℃に冷却した。固体をろ過し、シクロヘキサン（２×１００ｍＬ）で洗った。この固体を一晩風乾し、３−｛［（２，６−ジフルオロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−フルオロ安息香酸メチル（９４．１ｇ、９１％）を得た。

【0067】

工程Ｂ：Ｎ−｛３−［（２−クロロ−４−ピリミジニル）アセチル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド

【化20】

【0068】

ほぼ上記の工程Ａに従って調製した３−｛［（２，６−ジフルオロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−フルオロ安息香酸メチル（４９０ｇ、１当量）をＴＨＦ（２．４５Ｌ、５倍量）に溶解させ、撹拌し、０−３℃に冷却した。１Ｍ リチウムビス（トリメチルシリル）アミドのＴＨＦ溶液（５．２５Ｌ、３．７当量）をこの反応混合物に加え、次いでＴＨＦ（２．４５Ｌ、５倍量）中の２−クロロ−４−メチルピリミジン（２３８ｇ、１．３当量）を加えた。次いでこの反応液を１時間撹拌した。この反応液を、４．５Ｍ ＨＣｌ（３．９２Ｌ、８倍量）を用いてクエンチした。水層（下層）を除去し、捨てた。有機層を、減圧下で約２Ｌまで濃縮した。ＩＰＡＣ（酢酸イソプロピル）（２．４５Ｌ）をこの反応混合物に加え、次いでこれを約２Ｌまで濃縮した。ＩＰＡＣ（０．５Ｌ）およびＭＴＢＥ（２．４５Ｌ）を添加し、Ｎ_２下で一晩撹拌した。固体をろ過した。この固体および母ろ液を一緒に戻し、数時間撹拌した。固体をろ過し、ＭＴＢＥ（約５倍量）で洗浄した。この固体を、５０℃の真空オーブンの中に一晩置いた。この固体を３０℃の真空オーブンの中で週末のあいだ乾燥し、Ｎ−｛３−［（２−クロロ−４−ピリミジニル）アセチル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（４７９ｇ、７２％）を得た。

【0069】

工程Ｃ：Ｎ−｛３−［５−（２−クロロ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド

【化21】

【0070】

反応器に、Ｎ−｛３−［（２−クロロ−４−ピリミジニル）アセチル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（３０ｇ、１当量）を入れ、次いでジクロロメタン（３００ｍＬ）を入れた。この反応スラリーを約１０℃に冷却し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（「ＮＢＳ」）（１２．０９ｇ、１当量）を３つのおよそ等しい分量に分けて添加し、各添加の間に１０−１５分間撹拌した。ＮＢＳの最後の添加の後、反応混合物を約２０℃に加温し、４５分間撹拌した。次いで水（５倍量）をこの反応容器に加え、この混合物を撹拌し、次いで層を分離させた。水（５倍量）をジクロロメタン層に再度加え、この混合物を撹拌し、層を分離させた。ジクロロメタン層を約１２０ｍＬまで濃縮した。酢酸エチル（７倍量）をこの反応混合物に加え、約１２０ｍＬまで濃縮した。次いでジメチルアセトアミド（２７０ｍＬ）をこの反応混合物に加え、約１０℃に冷却した。２つの等しい分量に分けた２，２−ジメチルプロパンチオアミド（１．３ｇ、０．５当量）を、この反応器の内容物に加え、添加と添加との間で約５分間撹拌した。この反応液を２０−２５℃に加温した。４５分後、反応器の内容物を７５℃に加熱し、１．７５時間保持した。次いでこの反応混合物を５℃に冷却し、温度を３０℃より低く保って、水（２７０ｍｌ）をゆっくり添加した。次いで酢酸エチル（４倍量）を加え、この混合物を撹拌し、層を分離させた。酢酸エチル（７倍量）を水層に再度加え、内容物を撹拌し、分離した。酢酸エチル（７倍量）を水層に再度加え、内容物を撹拌し、分離した。有機層を合わせ、水（４倍量）で４回洗浄し、２０−２５℃で一晩撹拌した。次いで加熱および真空のもとで有機層を１２０ｍＬまで濃縮した。次いで反応器の内容物を５０℃に加熱し、ヘプタン（１２０ｍＬ）をゆっくり添加した。ヘプタンの添加後、反応器の内容物を加熱して還流させ、次いで０℃に冷却し、約２時間保持した。固体をろ過し、ヘプタン（２×２倍量）で洗った。次いでこの固体生成物を真空下、３０℃で乾燥し、Ｎ−｛３−［５−（２−クロロ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（２８．８ｇ、８０％）を得た。

【0071】

工程Ｄ：Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド
１ｇａｌの圧力反応器の中で、上記の工程Ｃに従って調製したＮ−｛３−［５−（２−クロロ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（１２０ｇ）、および水酸化アンモニウム（２８−３０％、２．４Ｌ、２０倍量）の混合物を、密閉した圧力反応器の中で９８−１０３℃に加熱し、この温度で２時間撹拌した。この反応液を室温（２０℃）までゆっくり冷却し、一晩撹拌した。固体をろ過し、最小量の母液で洗浄し、真空下で乾燥した。この固体をＥｔＯＡｃ（１５倍量）／水（２倍量）の混合物に添加し、完全に溶解するまで６０−７０℃で加熱し、水層を除去し、捨てた。このＥｔＯＡＣ層に水（１倍量）を入れ、ＨＣｌ水溶液を用いてｐＨ 約５．４−５．５まで中和し、水（１倍量）を添加した。６０−７０℃で水層を除去し、捨てた。６０−７０℃で有機層を水（１倍量）で洗浄し、水層を除去し、捨てた。有機層を６０℃でろ過し、３倍量まで濃縮した。ＥｔＯＡｃ（６倍量）をこの混合物に加え、加熱し、７２℃で１０分間撹拌し、次いで２０℃に冷却し、一晩撹拌した。真空蒸留によってＥｔＯＡｃを除去し、反応混合物を約３倍量まで濃縮した。この反応混合物を、約６５−７０℃で約３０分間維持した。上記の実施例５８ｂでヘプタンスラリーの中で調製した（そして、実施例５８ｂの手順によって調製できる）結晶と同じ結晶形態を有する生成物の結晶を加えた。６５−７０℃でヘプタン（９倍量）をゆっくり添加した。このスラリーを６５−７０℃で２−３時間撹拌し、次いで０−５℃にゆっくり冷却した。生成物をろ過し、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン（３／１ ｖ／ｖ、４倍量）で洗浄し、真空下、４５℃で乾燥し、Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（１０２．３ｇ、８８％）を得た。

【0072】

方法４：化合物Ｂ（メシル酸塩） − Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド メタンスルホネート

【化22】

【0073】

イソプロパノール（２ｍＬ）中のＮ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（２０４ｍｇ、０．３９３ｍｍｏｌ）の溶液に、メタンスルホン酸（０．１３１ｍＬ、０．３９３ｍｍｏｌ）を添加し、この溶液を室温で３時間撹拌した。白色沈殿物が生成し、スラリーをろ過し、ジエチルエーテルで洗い、標記の生成物を白色の結晶性固体として得た（２１０ｍｇ、８３％収率）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６） δ ｐｐｍ １０．８５（ｓ，１Ｈ）７．９２−８．０５（ｍ，１Ｈ）７．５６−７．７２（ｍ，１Ｈ）６．９１−７．５０（ｍ，７Ｈ）５．８３−５．９８（ｍ，１Ｈ）２．１８−２．３２（ｍ，３Ｈ）１．３６（ｓ，９Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）：５２０．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0074】

方法５：化合物Ｂ（別のメシル酸塩実施形態） − Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド メタンスルホネート
Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（実施例５８ａに従って調製し得る）（２．３７ｇ、４．５６ｍｍｏｌ）を、予めろ過したアセトニトリル（５．２５倍量、１２．４ｍＬ）と合わせた。Ｈ_２Ｏ（０．７５当量、１．７８ｍＬ）中のメシン酸（１．１当量、５．０２ｍｍｏｌ、０．４８ｇ）の予めろ過した溶液を２０℃で添加した。低い撹拌速度を維持しながら、得られた混合物の温度を５０−６０℃に上げた。混合物の温度が５０−６０℃に到達すると、Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド メタンスルホネートの種スラリー（０．２倍量の予めろ過したアセトニトリルの中でスラリーにした１．０％ ｗ／ｗ）を添加し、固体が沈降しないようにするのに十分速い速度で撹拌しながら、この混合物を５０−６０℃で２時間熟成させた。次いでこの混合物を０．２５℃／分で０−５℃まで冷却し、０−５℃で６時間保持した。この混合物をろ過し、湿ったケーキを、予めろ過したアセトニトリルを用いて２回洗浄した。最初の洗液は１４．２ｍｌ（６倍量）の予めろ過したアセトニトリルからなっており、第２の洗液は９．５ｍｌ（４倍量）の予めろ過したアセトニトリルからなっていた。この湿ったケーキを真空下、５０℃で乾燥し、２．３９ｇ（８５．１％収率）の生成物を得た。

【0075】

典型的には、本発明の塩は薬学上許容可能な塩である。用語「薬学上許容可能な塩」の中に包含される塩は、本発明の化合物の無毒な塩を指す。本発明の化合物の塩は、本発明の化合物の中の置換基の上にある窒素から誘導される酸付加塩を含み得る。代表的な塩としては以下の、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クラブラン酸塩、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニレート（ｇｌｙｃｏｌｌｙｌａｒｓａｎｉｌａｔｅ）、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチルブロミド、硝酸メチル、メチル硫酸塩、マレイン酸一カリウム塩、ムチン酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミン、シュウ酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、カリウム、サリチル酸塩、ナトリウム、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、トリエチオダイド、トリメチルアンモニウムおよび吉草酸塩などの塩が挙げられる。薬学上許容可能ではない他の塩は、本発明の化合物の調製において有用であり得、これらの塩は、本発明のさらなる態様を形成する。塩は、当業者によって容易に調製され得る。

【0076】

療法に使用するために、化合物ＡおよびＢが未加工の化学物質として投与され得ることが可能であるが、この活性成分を医薬組成物として提示することが可能である。従って、本発明は、化合物Ａおよび／または化合物Ｂと、１以上の薬学上許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤とを含む医薬組成物をさらに提供する。化合物ＡおよびＢは、上記のとおりである。担体（１種または複数種）、希釈剤（１種または複数種）または賦形剤（１種または複数種）は、製剤の他の成分と適合性であるという意味で許容可能なものでなければならず、医薬製剤化することができるものでなければならず、かつそのレシピエントに対して有害であってはならない。本発明の別の態様によれば、化合物Ａおよび／または化合物Ｂを、１以上の薬学上許容可能な担体、希釈剤または賦形剤と混合することを含む、医薬組成物の製造方法も提供される。利用される医薬組成物のこのような要素は、別々の薬学的組合せ物の中で提示されてもよいし、または１つの医薬組成物の中で一緒に製剤化されてもよい。従って、本発明は、１つが化合物Ａおよび１以上の薬学上許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤を含む複数の医薬組成物と、化合物Ｂおよび１以上の薬学上許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤を含有する医薬組成物の組合せ物をさらに提供する。

【0077】

化合物Ａおよび化合物Ｂは上記のとおりであり、上記の組成物のいずれにおいても利用され得る。

【0078】

医薬組成物は、単位用量あたり所定の量の活性成分を含有する単位用量形態で提示され得る。当業者に公知のように、用量あたりの活性成分の量は、治療しようとする病態、投与経路ならびに患者の年齢、体重および病態に依存するであろう。好ましい単位投薬量組成物は、１日用量もしくは分割日量、またはその適切な一部分、の活性成分を含有する組成物である。さらに、このような医薬組成物は、薬学分野で周知の方法のいずれかによって調製され得る。

【0079】

化合物ＡおよびＢは、いずれかの適切な経路によって投与され得る。好適な経路としては、経口、経直腸、鼻内、局所（口腔内および舌下を含む）、膣内、および非経口（皮下、筋肉内、静脈内、皮内、髄腔内、および硬膜外を含む）が挙げられる。好ましい経路は、例えば、組合せ物のレシピエントの病態および治療対象の癌に応じて変わり得るということはわかるであろう。投与される薬剤の各々が、同じまたは異なる経路によって投与され得ること、ならびに化合物ＡおよびＢが医薬組成物の中に一緒に配合され得るということも理解されよう。

【0080】

経口投与に適応させた医薬組成物は、カプセルもしくは錠剤、粉末もしくは顆粒、水性もしくは非水性液体中の液剤もしくは懸濁剤、食用フォームまたはホイップ、または水中油型乳濁液もしくは油中水型乳濁液などの個別単位として提示され得る。

【0081】

例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与のために、活性薬物成分は、エタノール、グリセロール、水などの、経口用の、無毒な薬学上許容可能な不活性な担体と合わされ得る。粉末は、当該化合物を好適な微細サイズへと細かく砕き、例えば、デンプンまたはマンニトールなどの食用炭水化物などの、同様に細かく砕いた医薬担体と混合することにより調製される。着香剤、防腐剤、分散剤および着色剤も存在し得る。

【0082】

カプセルは、粉末混合物を上記のように調製し、形成されたゼラチンシースに充填することにより作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールなどの滑剤および潤滑剤が、充填操作の前に、この粉末混合物に添加され得る。カプセル剤が服用されるときの薬剤の利用能を改善するために、寒天、炭酸カルシウムまたは炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または溶解補助剤も、加えられ得る。

【0083】

さらに、所望される場合または必要な場合、好適な結合剤、潤滑剤、崩壊剤および着色剤も粒状にされ得、粉末混合物は錠剤機に通され得、その結果物は不完全に形成された小塊であり、これが顆粒へと破壊される。この顆粒は潤滑化され上記混合物に組み込まれ得る。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、グルコースまたはβ−ラクトースなどの天然の糖、トウモロコシ甘味料、アラビアゴム、トラガントまたはアルギン酸ナトリウムなどの天然および合成のゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの剤形の中で使用される潤滑剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられるが、これらに限定されない。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、粉末にするかまたは小塊にし、潤滑剤および崩壊剤を添加し、そして錠剤へと押し固めることにより製剤化される。粉末混合物は、当該化合物、好適には細かく砕いた当該化合物を上記のとおりの希釈剤またはベースと、そして必要に応じてカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩もしくはアルギン酸エステル、ゼラチン、もしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級塩などの再吸収促進剤、および／またはベントナイト、カオリンもしくはリン酸二カルシウムなどの吸収剤と混合することにより調製される。この粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アラビアゴム粘液、またはセルロース誘導体もしくは高分子材料の溶液などの結合剤を用いて湿らせ、ふるいに押し通すことにより顆粒化され得る。別の選択肢として、錠剤形成押型への付着を防止するために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルクまたは鉱油が添加される。この潤滑された混合物は、次いで、錠剤へと圧縮される。また、本発明の化合物は、自由流動性の不活性な担体と合わされて、顆粒化または小塊化の工程を経ることなく直接錠剤へと圧縮され得る。セラックの封止被膜、糖または高分子材料のコーティング、およびワックスの艶出しコーティングからなる透明または不透明な保護コーティングが設けられ得る。異なる単位投薬量を区別するために、色素がこれらのコーティングに添加され得る。

【0084】

液剤、シロップおよびエリキシル剤などの経口用流体は、与えられた量が所定の量の当該化合物を含有するように、投薬単位形態の中に調製され得る。シロップは、当該化合物を好適には風味付きの水性溶液に溶解させることにより調製され得るのに対し、エリキシル剤は、無毒なアルコール性のビヒクルの使用によって調製される。懸濁剤は、当該化合物を無毒なビヒクルに分散させることにより製剤化され得る。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、防腐剤、ペパーミント油などの香料添加物、または天然甘味料もしくはサッカリンもしくは他の人工甘味料なども、添加され得る。

【0085】

適宜、経口投与のための組成物はマイクロカプセル化され得る。この組成物は、例えば、微粒子物質をポリマー、ワックスなどでコーティングするかまたは微粒子物質をポリマー、ワックスなどの中に埋め込むことにより、放出を長期化または持続させるためにも調製され得る。

【0086】

本発明に係る使用のための薬剤は、小型単層小胞体（ｓｍａｌｌ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ）、大型単層小胞体（ｌａｒｇｅ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ）および多層小胞体（ｍｕｌｔｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ）などのリポソーム送達システムの形態でも投与され得る。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンなどの様々なリン脂質から形成され得る。

【0087】

また、本発明に係る使用のための薬剤は、当該化合物分子が対にされる個々の担体としてのモノクローナル抗体の使用によって送達され得る。また、当該化合物は、標的を設定できる薬物担体としての可溶性ポリマーと対にされ得る。このようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリジンが挙げられ得る。さらに、当該化合物は、薬物の制御放出を成し遂げることにおいて有用な生分解性ポリマーの１つのクラス、例えば、ポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、およびヒドロゲルの架橋されたまたは両親媒性のブロック共重合体と対にされ得る。

【0088】

経皮投与に適応させた医薬組成物は、レシピエントの表皮と長期間密接に接触したままであることを意図された個別のパッチとして提示され得る。例えば、活性成分は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ３（６）， ３１８（１９８６）に一般的に記載されているようなイオントフォレーシスによって、そのパッチから送達され得る。

【0089】

局所投与に適応させた医薬組成物は、軟膏剤、クリーム、懸濁剤、ローション剤、粉末、液剤、ペースト、ゲル、スプレー、エアロゾルまたはオイルとして製剤化され得る。

【0090】

目または他の外部組織、例えば口および皮膚の治療のために、当該組成物は、好ましくは、局所用の軟膏剤またはクリームとして付与される。軟膏剤の中で製剤化されるとき、当該活性成分は、パラフィン系軟膏基剤または水混和性軟膏基剤のいずれかとともに用いられ得る。あるいは、その活性成分は、水中油型クリーム基剤または油中水型基剤とともにクリームの中で製剤化され得る。

【0091】

目への局所投与に適応させた医薬組成物としては、活性成分が好適な担体、とりわけ水性溶媒に溶解または懸濁されている点眼薬が挙げられる。

【0092】

口腔中での局所投与に適応させた医薬組成物としては、薬用キャンディー、トローチ剤および口腔洗浄薬が挙げられる。

【0093】

直腸投与に適応させた医薬組成物は、座薬または浣腸として提示され得る。

【0094】

担体が固体である鼻内投与に適応させた医薬組成物としては、例えば２０−５００ミクロンの範囲の粒径を有し、嗅ぎたばこが吸われるようにして、すなわち鼻のすぐ近くで保持された粉末の容器から、鼻内通過を通しての急速な吸入によって、投与される粗粉末が挙げられる。担体が液体である鼻噴霧薬としてまたは点鼻薬としての投与に好適な組成物としては、当該活性成分の水性または油性の液剤が挙げられる。

【0095】

吸入による投与に適応させた医薬組成物としては、種々の種類の定量加圧エアロゾル剤（ｍｅｔｅｒｅｄ ｄｏｓｅ ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ａｅｒｏｓｏｌ）、ネブライザーまたは注入器によって発生され得る微細粒子粉またはミストが挙げられる。

【0096】

膣内投与に適応させた医薬組成物は、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー組成物として提示され得る。

【0097】

非経口投与に適応させた医薬組成物としては、抗酸化剤、緩衝液、静菌薬、および製剤を意図されたレシピエントの血液と等張性であるようにする溶質を含有し得る水性および非水性の滅菌注射液、ならびに懸濁剤および増粘剤を含み得る水性および非水性の滅菌懸濁剤が挙げられる。この組成物は、単位用量容器または複数用量容器、例えば密封されたアンプルおよびバイアルの中で提示され得、使用直前に、注入のために、滅菌した液体担体、例えば水の添加だけを必要とするフリーズドライの（凍結乾燥された）状態で保存され得る。すぐに使用できる注射液および懸濁剤は、滅菌された粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。

【0098】

上で特に触れた成分に加えて、当該組成物は、取り上げる製剤のタイプを考慮して、当該技術分野で慣用的な他の薬剤を含み得、例えば経口投与に適した組成物は着香剤を含み得るということは理解されるべきである。

【0099】

特段の記載がない限り、本明細書に記載されるすべての投薬プロトコルにおいて、投与される化合物のレジメンは、治療の開始とともに開始して、治療の終わりとともにとともに終了する必要はなく、両方の化合物が投与される何日かの連続する日および当該要素化合物の一方のみが投与されてもよい何日かの連続する日、または示された投薬プロトコル（投与される化合物の量を含む）が、治療過程の間のある点で発生することが必要とされるだけである。

【0100】

化合物ＡおよびＢは、両方の化合物を含む単位医薬組成物の中で同時に投与することによって、本発明に従って組合せて用いられ得る。あるいは、その組合せ物は、各々が化合物ＡおよびＢのうちの１つを含む別々の医薬組成物の中で別々に、例えば、化合物Ａまたは化合物Ｂが最初に投与され他方が次に投与される連続的な態様で、投与され得る。このような逐次投与は、時間的に近くてもよいし（例えば同時に）または時間的に離れていてもよい。さらに、それらの化合物が同じ剤形の中で投与されるかどうかは重要ではなく、例えば一方の化合物は局所投与され得、他方の化合物は経口投与され得る。好適には、両方の化合物が経口投与される。

【0101】

従って、１つの実施形態では、１用量以上の化合物Ａは、１用量以上の化合物Ｂと同時にまたは１用量以上の化合物Ｂとは別々に投与される。

【0102】

特段の記載がない限り、本明細書に記載されるすべての投薬プロトコルにおいて、投与される化合物のレジメンは、治療の開始とともに開始して、治療の終わりとともにとともに終了する必要はなく、両方の化合物が投与される何日かの連続する日および当該要素化合物の一方のみが投与されてもよい何日かの連続する日、または示された投薬プロトコル（投与される化合物の量を含む）が、治療過程の間のある点で発生することが必要とされるだけである。

【0103】

１つの実施形態では、化合物Ａの複数回用量は、化合物Ｂの複数回用量と同時にまたは化合物Ｂの複数回用量とは別々に投与される。

【0104】

１つの実施形態では、化合物Ａの複数回用量は、化合物Ｂの１用量と同時にまたは化合物Ｂの１用量とは別々に投与される。

【0105】

１つの実施形態では、化合物Ａの１用量は、化合物Ｂの複数回用量と同時にまたは化合物Ｂの複数回用量とは別々に投与される。

【0106】

１つの実施形態では、化合物Ａの１用量は、化合物Ｂの１用量と同時にまたは化合物Ｂの１用量とは別々に投与される。

【0107】

上記の実施形態のすべてにおいて、化合物Ａが最初に投与されてもよいし、または化合物Ｂが最初に投与されてもよい。

【0108】

当該組合せ物は、組合せ物キットとして提供され得る。本発明で使用する用語「組合せ物キット」または「キット・オブ・パーツ（ｋｉｔ ｏｆ ｐａｒｔｓ）」は、本発明に従って化合物Ａおよび化合物Ｂを投与するために使用される医薬組成物（１つまたは複数）を意味する。両方の化合物が同時に投与されるとき、この組合せ物キットは、化合物Ａおよび化合物Ｂを錠剤などの１つの医薬組成物の中に、または別々の医薬組成物の中に含有し得る。化合物ＡおよびＢが同時に投与されないとき、この組合せ物キットは、化合物Ａおよび化合物Ｂを１つのパッケージの中の別々の医薬組成物の中に、または化合物Ａおよび化合物Ｂを別々のパッケージの中の別々の医薬組成物の中に含有することになろう。

【0109】

１つの態様では、
薬学上許容可能な賦形剤、希釈剤または担体を伴う化合物Ａと、
薬学上許容可能な賦形剤、希釈剤または担体を伴う化合物Ｂと、
という構成要素を含むキット・オブ・パーツが提供される。

【0110】

本発明の１つの実施形態では、キット・オブ・パーツは、以下の構成要素：
薬学上許容可能な賦形剤、希釈剤または担体を伴う化合物Ａと、
薬学上許容可能な賦形剤、希釈剤または担体を伴う化合物Ｂと、
を含み、これらの要素は、逐次投与、別々の投与および／または同時投与に適した形態で提供される。

【0111】

１つの実施形態では、キット・オブ・パーツは、
薬学上許容可能な賦形剤、希釈剤または担体を伴う化合物Ａを含む第１の容器と、
薬学上許容可能な賦形剤、希釈剤または担体を伴う化合物Ｂを含む第２の容器と、
この第１および第２の容器を収容するための容器手段と、
を含む。

【0112】

当該組合せ物キットは、説明書、例えば投薬量および投与の説明書も具え得る。このような投薬量および投与の説明書は、例えば製剤ラベルにより医師に対して提供される種類のものであり得るし、またはこの説明書は、患者への説明書などの、医師によって提供される種類のものであり得る。

【0113】

本発明で使用する用語「負荷投与量」は、例えば薬物の血中濃度レベルを急激に上昇させるために、被験体に投与される維持量よりも高い投薬量を有する、化合物Ａまたは化合物Ｂの単回投与または短期継続レジメンを意味すると理解されよう。好適には、本発明で使用するための短期継続レジメンは、１−１４日、好適には１−７日、好適には１−３日、好適には３日間、好適には２日間、好適には１日間となろう。いくつかの実施形態では、「負荷投与量」は、薬物の血中濃度を治療上有効なレベルまで上昇させることができる。いくつかの実施形態では、「負荷投与量」は、その薬物の維持量と併用して、薬物の血中濃度を治療上有効なレベルまで上昇させることができる。「負荷投与量」は、１日あたり１回、または１日あたり複数回（例えば、１日あたり４回まで）投与され得る。好適には、「負荷投与量」は１日１回投与されることになろう。好適には、この負荷投与量は、維持量の２−１００倍、好適には２−１０倍、好適には２−５倍、好適には２倍、好適には３倍、好適には４倍、好適には５倍の量であろう。好適には、負荷投与量は、１−７日間、好適には１−５日間、好適には１−３日間、好適には１日間、好適には２日間、好適には３日間投与されることになり、そのあと維持量投与プロトコルが続くことになろう。

【0114】

本発明で使用する用語「維持量」は、連続的に投与され（例えば、少なくとも２回）、かつ当該化合物の血中濃度レベルを治療上有効なレベルまでゆっくりと上げるか、またはこのような治療上有効なレベルを維持するかのいずれかが意図されている用量を意味すると理解されよう。この維持量は、一般に、１日あたり１回投与され、この維持量の１日用量は、負荷投与量の全１日用量よりも低い。

【0115】

好適には、本発明の組合せ物は、ある「特定期間」内で投与される。

【0116】

本発明で使用する用語「特定期間」およびその派生語は、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つの投与と、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの他方の投与との時間間隔を意味する。特段の記載がない限り、この特定期間は同時投与を含み得る。本発明の両方の化合物が１日１回投与されるとき、この特定期間は、ある１日の中の化合物Ａおよび化合物Ｂの投与を指す。本発明の化合物の一方または両方が１日に複数回投与されるとき、この特定期間は、特定の日の各化合物の最初の投与に基づいて算出される。特定の日の中のこの最初の投与のあとの、本発明の化合物のすべての投与は、この特定の期間を算出するときには考慮されない。

【0117】

好適には、当該化合物がある「特定期間」内で投与され、かつ同時に投与されない場合、それらの化合物は、互いの約２４時間以内に両方とも投与される − この場合、特定期間は約２４時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約１２時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約１２時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約１１時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約１１時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約１０時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約１０時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約９時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約９時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約８時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約８時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約７時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約７時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約６時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約６時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約５時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約５時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約４時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約４時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約３時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約３時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約２時間以内に投与されることになる − この場合、特定期間は約２時間となる；好適には、それらの化合物は、互いの約１時間以内に両方とも投与されることになる − この場合、特定期間は約１時間となる。本発明で使用する場合、約４５分間未満しか離れていない化合物Ａおよび化合物Ｂの投与は同時投与と考えられる。

【0118】

好適には、本発明の組合せ物が「特定期間」のあいだ投与されるとき、これらの化合物は、ある「継続期間」のあいだ同時投与されることになる。

【0119】

本発明で使用する用語「継続期間」およびその派生語は、本発明の両方の化合物が示された数の連続する日のあいだ投与されることを意味する。

【0120】

「特定期間」投与について：
好適には、両方の化合物は、ある特定期間内で少なくとも１日投与されることになり − この場合、継続期間は少なくとも１日ということになり；好適には、治療への過程の間に、両方の化合物は、ある特定期間内で少なくとも連続３日投与されることになり − この場合、継続期間は少なくとも３日ということになり；好適には、治療への過程の間に、両方の化合物は、ある特定期間内で少なくとも連続５日投与されることになり − この場合、継続期間は少なくとも５日ということになり；好適には、治療への過程の間に、両方の化合物は、ある特定期間内で少なくとも連続７日投与されることになり − この場合、継続期間は少なくとも７日ということになり；好適には、治療への過程の間に、両方の化合物は、ある特定期間内で少なくとも連続１４日投与されることになり − この場合、継続期間は少なくとも１４日ということになり；好適には、治療への過程の間に、両方の化合物は、ある特定期間内で少なくとも連続３０日投与されることになり − この場合、継続期間は少なくとも３０日ということになる。

【0121】

さらに「特定期間」投与に関して：
好適には、治療過程の間、化合物Ａおよび化合物Ｂは、７日間にわたる期間の間で１−４日の特定期間内に投与されることになり、この７日間のうちの他の日の間に化合物Ａが単独で投与される。好適には、この７日プロトコルは、２サイクルの間、すなわち１４日間；好適には４サイクルの間、すなわち２８日間；好適には継続的な投与のために繰り返される。

【0122】

好適には、治療過程の間、化合物Ａおよび化合物Ｂは、７日間にわたる期間の間で１−４日の特定期間内に投与されることになり、この７日間のうちの他の日の間に化合物Ｂが単独で投与される。好適には、この７日プロトコルは、２サイクルの間、すなわち１４日間；好適には４サイクルの間、すなわち２８日間；好適には継続的な投与のために繰り返される。好適には、化合物Ｂは、この７日の間に、連日投与される。好適には、化合物Ｂは、各７日の間、一日おきのパターンで投与される。

【0123】

好適には、治療過程の間、化合物Ａおよび化合物Ｂは、７日間にわたる期間の間で３日の特定期間内に投与されることになり、この７日間のうちの他の日の間に化合物Ｂが単独で投与される。好適には、この７日プロトコルは、２サイクルの間、すなわち１４日間；好適には４サイクルの間、すなわち２８日間；好適には継続的な投与のために繰り返される。好適には、化合物Ａは、この７日の間に連続３日投与されることになる。

【0124】

好適には、治療過程の間、化合物Ａおよび化合物Ｂは、７日間にわたる期間の間で２日の特定期間内に投与されることになり、この７日間のうちの他の日の間に化合物Ｂが単独で投与されることになる。好適には、この７日プロトコルは、２サイクルの間、すなわち１４日間；好適には４サイクルの間、すなわち２８日間；好適には継続的な投与のために繰り返される。好適には、化合物Ａは、この７日の間に連続２日投与されることになる。

【0125】

好適には、治療過程の間、化合物Ａおよび化合物Ｂは、７日間にわたる期間の間で１日の特定期間内に投与されることになり、この７日間のうちの他の日の間に化合物Ｂが単独で投与されることになる。好適には、この７日プロトコルは、２サイクルの間、すなわち１４日間；好適には４サイクルの間、すなわち２８日間；好適には継続的な投与のために繰り返される。

【0126】

好適には、これらの化合物が「特定期間」の間に投与されない場合、それらの化合物は逐次的に投与される。本発明で使用する用語「逐次投与」およびその派生語は、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つが連続２日以上投与され、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの他方がそのあと連続２日以上投与されるということを意味する。また、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つの逐次投与と、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの他方との間に利用される休薬期間が、本発明において企図される。本発明で使用する「休薬期間」は、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つの逐次投与後でかつ化合物Ａおよび化合物Ｂの他方の投与前の日の期間であって、化合物Ａも化合物Ｂも投与されない期間である。好適には、この休薬期間は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日および１４日から選択される日の期間となろう。

【0127】

逐次投与について：
好適には、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つが連続１−３０日投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと連続１−３０日の化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの他方の投与が続く。好適には、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つが連続２−２１日投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと連続２−２１日の化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの他方の投与が続く。好適には、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つが連続２−１４日投与され、そのあと１−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続２−１４日の化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの他方の投与が続く。好適には、化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの１つが連続３−７日投与され、そのあと３−１０日の休薬期間が続き、そのあと連続３−７日の化合物Ａおよび化合物Ｂのうちの他方の投与が続く。

【0128】

好適には、化合物Ｂがこの一連の過程の中で最初に投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと化合物Ａの投与が続くことになる。好適には、化合物Ｂは連続１−２１日投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと連続１−２１日の化合物Ａの投与が続く。好適には、化合物Ｂは連続３−２１日投与され、そのあと１−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続３−２１日の化合物Ａの投与が続く。好適には、化合物Ｂは連続３−２１日投与され、そのあと３−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続３−２１日の化合物Ａの投与が続く。好適には、化合物Ｂが連続２１日投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと連続１４日の化合物Ａの投与が続く。好適には、化合物Ｂは連続１４日投与され、そのあと１−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続１４日の化合物Ａの投与が続く。好適には、化合物Ｂが連続７日投与され、そのあと３−１０日の休薬期間が続き、そのあと連続７日の化合物Ａの投与が続く。好適には、化合物Ｂが連続３日投与され、そのあと３−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続７日の化合物Ａの投与が続く。好適には、化合物Ｂが連続３日投与され、そのあと３−１０日の休薬期間が続き、そのあと連続３日の化合物Ｂの投与が続く。

【0129】

好適には、化合物Ａがこの一連の過程の中で最初に投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと化合物Ｂの投与が続くことになる。好適には、化合物Ａは連続１−２１日投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと連続１−２１日の化合物Ｂの投与が続く。好適には、化合物Ａは連続３−２１日投与され、そのあと１−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続３−２１日の化合物Ｂの投与が続く。好適には、化合物Ａは連続３−２１日投与され、そのあと３−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続３−２１日の化合物Ｂの投与が続く。好適には、化合物Ａが連続２１日投与され、そのあと休薬期間があってもよく、そのあと連続１４日の化合物Ｂの投与が続く。好適には、化合物Ａは連続１４日投与され、そのあと１−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続１４日の化合物Ｂの投与が続く。好適には、化合物Ａが連続７日投与され、そのあと３−１０日の休薬期間が続き、そのあと連続７日の化合物Ｂの投与が続く。好適には、化合物Ａが連続３日投与され、そのあと３−１４日の休薬期間が続き、そのあと連続７日の化合物Ｂの投与が続く。好適には、化合物Ａが連続３日投与され、そのあと３−１０日の休薬期間が続き、そのあと連続３日の化合物Ｂの投与が続く。

【0130】

「特定期間」投与および「逐次」投与のあとに反復投薬が続いてもよく、または交互投薬プロトコルが続いてもよく、そして休薬期間がこの反復投薬または交互投薬プロトコルの前に存在し得るということが理解される。

【0131】

好適には、本発明に係る組合せ物の一部として投与される化合物Ａの量（塩を形成していない／溶媒和されていない量の重量に基づく）は、約０．１２５ｍｇ−約１０ｍｇから選択される量となり；好適には、この量は約０．２５ｍｇ−約９ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約０．２５ｍｇ−約８ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約０．５ｍｇ−約８ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約０．５ｍｇ−約７ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約１ｍｇ−約７ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約５ｍｇとなろう。従って、本発明に係る組合せ物の一部として投与される化合物Ａの量は、約０．１２５ｍｇ−約１０ｍｇから選択される量となろう。例えば、本発明に係る組合せ物の一部として投与される化合物Ａの量は、０．１２５ｍｇ、０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ、０．７５ｍｇ、１ｍｇ、１．５ｍｇ、２ｍｇ、２．５ｍｇ、３ｍｇ、３．５ｍｇ、４ｍｇ、４．５ｍｇ、５ｍｇ、５．５ｍｇ、６ｍｇ、６．５ｍｇ、７ｍｇ、７．５ｍｇ、８ｍｇ、８．５ｍｇ、９ｍｇ、９．５ｍｇ、１０ｍｇであり得る。

【0132】

好適には、本発明に係る組合せ物の一部として投与される化合物Ｂの量（塩を形成していない／溶媒和されていない量の重量に基づく）は、約１０ｍｇ−約６００ｍｇから選択される量となろう。好適には、この量は約３０ｍｇ−約３００ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約３０ｍｇ−約２８０ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約４０ｍｇ−約２６０ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約６０ｍｇ−約２４０ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約８０ｍｇ−約２２０ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約９０ｍｇ−約２１０ｍｇから選択されることになり；好適には、この量は約１００ｍｇ−約２００ｍｇから選択されることになり、好適には、この量は約１１０ｍｇ−約１９０ｍｇから選択されることになり、好適には、この量は約１２０ｍｇ−約１８０ｍｇから選択されることになり、好適には、この量は約１３０ｍｇ−約１７０ｍｇから選択されることになり、好適には、この量は約１４０ｍｇ−約１６０ｍｇから選択されることになり、好適には、この量は１５０ｍｇとなろう。従って、本発明に係る組合せ物の一部として投与される化合物Ｂの量は約１０ｍｇ−約３００ｍｇから選択される量となろう。例えば、本発明に係る組合せ物の一部として投与される化合物Ｂの量は、好適には、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１０５ｍｇ、１１０ｍｇ、１１５ｍｇ、１２０ｍｇ、１２５ｍｇ、１３０ｍｇ、１３５ｍｇ、１４０ｍｇ、１４５ｍｇ、１５０ｍｇ、１５５ｍｇ、１６０ｍｇ、１６５ｍｇ、１７０ｍｇ、１７５ｍｇ、１８０ｍｇ、１８５ｍｇ、１９０ｍｇ、１９５ｍｇ、２００ｍｇ、２０５ｍｇ、２１０ｍｇ、２１５ｍｇ、２２０ｍｇ、２２５ｍｇ、２３０ｍｇ、２３５ｍｇ、２４０ｍｇ、２４５ｍｇ、２５０ｍｇ、２５５ｍｇ、２６０ｍｇ、２６５ｍｇ、２７０ｍｇ、２７５ｍｇ、２８０ｍｇ、２８５ｍｇ、２９０ｍｇ、２９５ｍｇおよび３００ｍｇから選択される。好適には、選択された量の化合物Ｂは１日１−４回投与される。好適には、選択された量の化合物Ｂは１日２回投与される。好適には、化合物Ｂは１５０ｍｇの量で１日２回投与される。好適には、選択された量の化合物Ｂは１日１回投与される。

【0133】

本発明で使用する、化合物Ａおよび化合物Ｂについて特定されるすべての量は、遊離のまたは塩を形成していない化合物の量として示されている。

【0134】

治療方法
本発明の組合せ物は、ＭＥＫおよび／またはＢ−Ｒａｆの阻害が有益である障害において有用性を有すると考えられる。

【0135】

従って、本発明は、療法において、特に、ＭＥＫおよび／またはＢ−Ｒａｆの活性の阻害が有益である障害、特に癌の治療において使用するための、本発明の組合せ物をも提供する。

【0136】

本発明のさらなる態様は、本発明の組合せ物を投与することを含む、ＭＥＫおよび／またはＢ−Ｒａｆの阻害が有益である障害の治療方法を提供する。

【0137】

本発明のさらなる態様は、ＭＥＫおよび／またはＢ−Ｒａｆの阻害が有益である障害の治療のための薬剤の製造における、本発明の組合せ物の使用を提供する。

【0138】

典型的には、この障害は、ＭＥＫおよび／またはＢ−Ｒａｆの阻害が有益な効果を有するような癌である。本発明の組合せ物を用いた治療に好適な癌の例としては、原発性ならびに転移性の形態の頭頸部癌、乳癌、肺癌、結腸癌、卵巣癌、および前立腺癌が挙げられるが、これらに限定されない。好適には、この癌は、脳癌（神経膠腫）、神経膠芽腫、星状細胞腫、多形神経膠芽腫、バナヤン−ゾナナ症候群（Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、カウデン病、レルミット・デュクロ病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、上衣腫、髄芽腫、結腸癌、頭頸部癌、腎癌、肺癌、肝癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨巨細胞腫、甲状腺癌、リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、ヘアリー細胞白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、ＡＭＬ、慢性好中球性白血病、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、形質細胞腫、免疫芽球性大細胞型白血病、マントル細胞白血病、多発性骨髄腫 巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫、急性巨核球性白血病、前骨髄球性白血病、赤白血病、悪性リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、リンパ芽球性Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、神経芽細胞腫、膀胱癌、尿路上皮癌、肺癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、腎癌、中皮腫、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、上咽頭癌、頬癌、口腔癌、ＧＩＳＴ（消化管間葉性腫瘍）および精巣癌から選択される。

【0139】

さらに、治療対象の癌の例としては、バレット腺癌、胆道癌、乳癌、子宮頸癌、胆管細胞癌、原発性中枢神経系腫瘍（神経膠芽腫、星状細胞腫（例えば、多形神経膠芽腫）および上衣腫など）、および続発性中枢神経系腫瘍（すなわち、中枢神経系の外に由来する腫瘍の、中枢神経系への転移）を含めた中枢神経系腫瘍、大腸結腸癌を含めた結直腸癌、胃癌、頭頸部扁平上皮癌を含めた頭頸部の癌、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群、慢性骨髄性白血病、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、巨核芽球性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病などの白血病およびリンパ腫を含めた血液癌、肝細胞癌、小細胞性肺癌および非小細胞性肺癌を含めた肺癌、卵巣癌、子宮内膜癌、膵臓癌、下垂体腺腫、前立腺癌、腎癌、肉腫、黒色腫を含む皮膚癌、ならびに甲状腺癌が挙げられる。

【0140】

好適には、本発明は、脳癌（神経膠腫）、神経膠芽腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット・デュクロ病、乳癌、結腸癌、頭頸部癌、腎癌、肺癌、肝癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される癌を治療するかまたは癌の重症度を低減するための方法に関する。

【0141】

好適には、本発明は、卵巣癌、乳癌、膵臓癌および前立腺癌から選択される癌を治療するかまたは癌の重症度を低減するための方法に関する。

【0142】

本発明の組合せ物は、単独または１以上の他の治療薬と組合せて使用され得る。従ってさらなる態様では、本発明は、さらなる治療薬（１つまたは複数）とともに本発明の組合せ物を含むさらなる組合せ物、この組合せ物を含む組成物および薬剤、ならびに療法における、特にＭＥＫおよび／またはキナーゼＢの阻害の影響を受けやすい疾患の治療におけるこのさらなる組合せ物、組成物および薬剤の使用を提供する。

【0143】

当該実施形態では、本発明の組合せ物は、癌治療の他の治療方法とともに用いられ得る。特に、抗新生物療法において、他の化学療法剤、ホルモン剤、抗体薬、ならびに上記の薬剤以外の外科治療および／または放射線治療を伴う併用療法が想定される。従って、本発明に係る併用療法としては、化合物Ａおよび化合物Ｂの投与、ならびに必要に応じた他の抗新生物薬を含めた他の治療薬の使用が挙げられる。薬剤のこのような組合せは、一緒にまたは別々に投与され得、別々に投与されるとき、これは、同時に、または時間的に近くてもよく時間的に離れていてもよい任意の順序で逐次的に行われ得る。１つの実施形態では、当該薬学的組合せ物は、化合物Ａおよび化合物Ｂを含み、ならびに少なくとも１つのさらなる抗新生物薬を含んでもよい。

【0144】

示されたように、化合物Ａおよび化合物Ｂの治療上有効量は、上で論じられている。本発明のさらなる治療薬の治療上有効量は、例えば、当該哺乳動物の年齢および体重、治療を必要とする正確な病態、病態の重症度、製剤の性質、および投与経路を含めたいくつかの要因に依存することになろう。最終的には、この治療上有効量は、主治医または主治獣医の判断によることになろう。投与の相対的タイミングは、所望の複合的な治療効果を成し遂げるために選択されることになろう。

【0145】

１つの実施形態では、さらなる抗癌療法は外科的療法および／または放射線療法である。

【0146】

１つの実施形態では、さらなる抗癌療法は、少なくとも１つのさらなる抗新生物薬である。

【0147】

治療しようとする感受性のある腫瘍に対して活性を有するいずれの抗新生物薬も、当該組合せ物の中で利用され得る。典型的な有用な抗新生物薬としては、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドなどの抗微小管薬、白金配位錯体、ナイトロジェンマスタード、オキサアザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソウレア、およびトリアゼンなどのアルキル化剤、アントラサイクリン、アクチノマイシンおよびブレオマイシンなどの抗生物剤、エピポドフィロトキシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物などの代謝拮抗剤、カンプトテシンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似体、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシン血管新生阻害剤、免疫療法薬、アポトーシス促進剤、ならびに細胞周期シグナル伝達阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。

【0148】

抗微小管薬または有糸分裂阻害薬：抗微小管薬または有糸分裂阻害薬は、細胞周期のＭ期または有糸分裂期の間、腫瘍細胞の微小管に対して活性な期特異的な（ｐｈａｓｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ）薬剤である。抗微小管薬の例としては、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドが挙げられるが、これらに限定されない。

【0149】

ジテルペノイドは天然の供給源に由来し、このジテルペノイドは、細胞周期のＧ_２／Ｍ期で作動する期特異的抗癌剤である。このジテルペノイドは、微小管のβ−チューブリンサブユニットと結合することによりこのタンパク質を安定化すると考えられる。そのあとこのタンパク質の分解は阻害され、有糸分裂が停止されて細胞死が続くようである。ジテルペノイドの例としては、パクリタキセルおよびその類似体ドセタキセルが挙げられるが、これらに限定されない。

【0150】

パクリタキセル、５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン ４，１０−ジアセテート ２−ベンゾエート １３−位で（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとのエステル、は、タイヘイヨウイチイの木Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａから単離される天然のジテルペン産物であり、注射液ＴＡＸＯＬ（登録商標）として市販されている。それは、テルペンのタキサンファミリーのメンバーである。パクリタキセルは、米国において難治性の卵巣癌の治療（Ｍａｒｋｍａｎら，Ｙａｌｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，６４：５８３，１９９１；ＭｃＧｕｉｒｅら、Ａｎｎ． ｌｎｔｅｍ， Ｍｅｄ．，１１１：２７３，１９８９）および乳癌の治療（Ｈｏｌｍｅｓら，Ｊ． Ｎａｔ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，８３：１７９７，１９９１）における臨床使用について承認されている。パクリタキセルは、皮膚（Ｅｉｎｚｉｇら，Ｐｒｏｃ． Ａｍ． Ｓｏｃ． Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌ．，２０：４６）および頭頸部癌（Ｆｏｒａｓｔｉｒｅら，Ｓｅｍ． Ｏｎｃｏｌ．， ２０：５６，１９９０）の新生物の治療のための潜在的な候補である。またこの化合物は、多発性嚢胞腎疾患（Ｗｏｏら，Ｎａｔｕｒｅ，３６８：７５０． １９９４）、肺癌およびマラリアの治療についても可能性を示す。パクリタキセルを用いた患者の治療は、閾値濃度（５０ｎＭ）を超える投薬の継続期間に関連する骨髄抑制（多数の細胞系統、Ｉｇｎｏｆｆ，Ｒ．Ｊ．ら，Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｐｏｃｋｅｔ Ｇｕｉｄｅ，１９９８）を生じる（Ｋｅａｒｎｓ，Ｃ．Ｍ．ら，Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，３（６） ｐ．１６−２３，１９９５）。

【0151】

ドセタキセル、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、１３−位で５β−２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン ４−アセテート ２−ベンゾエートとのエステル、三水和物、は、ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）として、注射液として市販されている。ドセタキセルは乳癌の治療に適応がある。ドセタキセルは、セイヨウイチイの木の針状葉から抽出される天然の前駆体、１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを使用して調製されるパクリタキセル（上記を参照）の半合成の誘導体である。

【0152】

ビンカアルカロイドは、ツルニチニチソウ植物に由来する期特異的抗新生物薬である。ビンカアルカロイドは、チューブリンに特異的に結合することにより、細胞周期のＭ期（有糸分裂）で作用する。その結果、結合したチューブリン分子は微小管へと重合できない。有糸分裂は、細胞分裂中期で停止され、そのあと細胞死が続くと考えられる。ビンカアルカロイドの例としては、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0153】

ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチン、は、ＶＥＬＢＡＮ（登録商標）として、注射液として市販されている。ビンブラスチンは、種々の固形腫瘍の第二選択療法として適応の可能性を有するが、ビンブラスチンは、主に、精巣癌およびホジキン病を含めた種々のリンパ腫、ならびにリンパ球性リンパ腫および組織球性リンパ腫の治療に適応がある。骨髄抑制は、ビンブラスチンの用量制限副作用である。

【0154】

ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチン、２２−オキソ−、硫酸塩、は、ＯＮＣＯＶＩＮ（登録商標）として、注射液として市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に適応があり、ホジキン悪性リンパ腫および非ホジキン悪性リンパ腫のための治療レジメンで使用されてきた。脱毛症および神経学的効果は、ビンクリスチンの最も一般的な副作用であり、より少ない程度ではあるが骨髄抑制および胃腸の粘膜炎効果が起こる。

【0155】

ビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ^＊，Ｒ^＊）−２，３−ジヒドロキシブタンジオエート（１：２）（塩）］は、酒石酸ビノレルビンの注射液（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））として市販されており、これは、半合成のビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単独の薬剤としてまたはシスプラチンなどの他の化学療法剤と組合せて、種々の固形腫瘍、特に非小細胞性肺癌、進行乳癌、およびホルモン不応性前立腺癌の治療に適応がある。骨髄抑制は、ビノレルビンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0156】

白金配位錯体：白金配位錯体は、ＤＮＡと相互作用できる、期特異的でない抗癌剤である。この白金錯体は、腫瘍細胞に進入し、アクア化を受けて、ＤＮＡと鎖内および鎖間の架橋を形成し、腫瘍に対して有害な生物学的効果を引き起こす。白金配位錯体の例としては、オキサリプラチン、シスプラチンおよびカルボプラチンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0157】

シスプラチン、シス−ジアミンジクロロ白金、は、ＰＬＡＴＩＮＯＬ（登録商標）として、注射液として市販されている。シスプラチンは、主に、転移性の精巣癌および卵巣癌ならびに進行膀胱癌の治療に適応がある。

【0158】

カルボプラチン、白金、ジアミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシレート（２−）−Ｏ，Ｏ’］、は、ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ（登録商標）として、注射液として市販されている。カルボプラチンは、主に、進行卵巣癌の第一選択および第二選択の治療に適応がある。

【0159】

アルキル化剤：アルキル化剤は、期特異的でない抗癌剤かつ強い求電子剤である。典型的には、アルキル化剤は、リン酸、アミノ、スルフヒドリル、ヒドロキシル、カルボキシル、およびイミダゾール基などの、ＤＮＡ分子の求核的部分を介して、アルキル化によって、ＤＮＡへと共有結合を形成する。このようなアルキル化は核酸機能を破壊し、細胞死へと導く。アルキル化剤の例としては、シクロホスファミド、メルファラン、およびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード、ブスルファンなどのアルキルスルホネート、カルムスチンなどのニトロソウレア、ならびにダカルバジンなどのトリアゼンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0160】

シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサアザホスホリン ２−オキシド一水和物、は、ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）として、注射液または錠剤として市販されている。シクロホスファミドは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、および白血病の治療に適応がある。

【0161】

メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン、は、ＡＬＫＥＲＡＮ（登録商標）として、注射液または錠剤として市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および切除不可能な卵巣上皮癌の対症療法に適応がある。骨髄抑制は、メルファランの最も一般的な用量制限副作用である。

【0162】

クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸、は、ＬＥＵＫＥＲＡＮ（登録商標）錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ性白血病、ならびにリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫、およびホジキン病などの悪性リンパ腫の対症療法に適応がある。

【0163】

ブスルファン、１，４−ブタンジオール ジメタンスルホネート、は、ＭＹＬＥＲＡＮ（登録商標）錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の対症療法に適応がある。

【0164】

カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレア、は、ＢｉＣＮＵ（登録商標）として、凍結乾燥された物質の単一バイアルとして市販されている。カルムスチンは、単独の薬剤としてまたは他の薬剤と組合せて、脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫のための対症療法に適応がある。

【0165】

ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキシアミド、は、ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）として、物質の単一バイアルとして市販されている。ダカルバジンは、転移性の悪性黒色腫の治療について、および他の薬剤と組合せてホジキン病の第二選択治療に適応がある。

【0166】

抗生物質抗新生物薬：抗生物質抗新生物薬は、ＤＮＡに結合するかまたはインターカレートする、期特異的でない薬剤である。典型的には、このような作用は安定なＤＮＡ複合体または鎖切断を生じ、これは核酸の通常の機能を破壊し細胞死を導く。抗生物質抗新生物薬の例としては、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン、ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントラサイクリン、ならびにブレオマイシンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0167】

アクチノマイシンＤとしても知られるダクチノマイシンは、ＣＯＳＭＥＧＥＮ（登録商標）として、注射剤型で市販されている。ダクチノマイシンは、ウィルムス腫瘍および横紋筋肉腫の治療に適応がある。

【0168】

ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ ナフタセンジオン塩酸塩、は、ＤＡＵＮＯＸＯＭＥ（登録商標）としてリポソーム注射剤型として、またはＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥ（登録商標）として注射剤として市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行したＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療における寛解導入療法に適応がある。

【0169】

ドキソルビシン、（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ ナフタセンジオン塩酸塩、は、ＲＵＢＥＸ（登録商標）またはＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ ＲＤＦ（登録商標）として、注射剤型として市販されている。ドキソルビシンは、主に、急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽球性白血病の治療に適応があるが、いくつかの固形腫瘍およびリンパ腫の治療においても有用な成分である。

【0170】

Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓ（ストレプトマイセス・ベルチシルス）の株から単離される細胞毒性糖ペプチド抗生物質の混合物であるブレオマイシンは、ＢＬＥＮＯＸＡＮＥ（登録商標）として市販されている。ブレオマイシンは、単独の薬剤としてまたは他の薬剤と組合せて、扁平上皮癌、リンパ腫、および精巣癌の対症療法として適応がある。

【0171】

トポイソメラーゼＩＩ阻害剤：トポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、エピポドフィロトキシンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0172】

エピポドフィロトキシンは、マンドレイク植物に由来する期特異的抗新生物薬である。エピポドフィロトキシンは、典型的には、トポイソメラーゼＩＩおよびＤＮＡと三元複合体を形成してＤＮＡ鎖の切断を引き起こすことにより、細胞周期のＳおよびＧ_２期において細胞に影響を及ぼす。この鎖の切断は蓄積し、その後に細胞死が続く。エピポドフィロトキシンの例としては、エトポシドおよびテニポシドが挙げられるが、これらに限定されない。

【0173】

エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン ９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］、は、ＶｅＰＥＳＩＤ（登録商標）として、注射液またはカプセルとして市販されており、ＶＰ−１６として一般に知られる。エトポシドは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、精巣癌および非小細胞性肺癌の治療に適応がある。

【0174】

テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン ９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］、は、ＶＵＭＯＮ（登録商標）として、注射液として市販されており、ＶＭ−２６として一般に知られる。テニポシドは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、小児の急性白血病の治療に適応がある。

【0175】

代謝拮抗剤新生物薬：代謝拮抗剤新生物薬は、ＤＮＡ合成を阻害しまたはプリンもしくはピリミジン塩基の合成を阻害しこれによりＤＮＡ合成を制限することにより、細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）で作用する、期特異的抗新生物薬である。その結果、Ｓ期は進行せず、その後に細胞死が続く。代謝拮抗剤抗新生物薬の例としては、フルオロウラシル、メトトレキセート、シタラビン、メルカプトプリン、チオグアニン、およびゲムシタビンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0176】

５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ） ピリミジンジオン、は、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルの投与は、チミジル酸合成の阻害を導き、また、ＲＮＡおよびＤＮＡの両方の中へと取り込まれる。その結果は、典型的には細胞死である。５−フルオロウラシルは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、乳房、結腸、直腸、胃および膵臓の癌の治療に適応がある。他のフルオロピリミジン類似体としては、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸が挙げられる。

【0177】

シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２ （１Ｈ）−ピリミジノン、は、ＣＹＴＯＳＡＲ−Ｕ（登録商標）として市販されており、Ａｒａ−Ｃとして一般に知られる。シタラビンは、シタラビンの、成長するＤＮＡ鎖への末端組み込みによってＤＮＡ鎖の延長を阻害することにより、Ｓ期において細胞期特異性を示すと考えられる。シタラビンは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、急性白血病の治療に適応がある。他のシチジン類似体としては、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）が挙げられる。

【0178】

メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物、は、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬ（登録商標）として市販されている。メルカプトプリンは、いまだ特定されていない機構によってＤＮＡ合成を阻害することによりＳ期において細胞期特異性を示す。メルカプトプリンは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、急性白血病の治療に適応がある。有用なメルカプトプリン類似体はアザチオプリンである。

【0179】

チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン、は、ＴＡＢＬＯＩＤ（登録商標）として市販されている。チオグアニンは、いまだ特定されていない機構によってＤＮＡ合成を阻害することによりＳ期において細胞期特異性を示す。チオグアニンは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、急性白血病の治療に適応がある。他のプリン類似体としてはペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、リン酸フルダラビン、およびクラドリビンが挙げられる。

【0180】

ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β−異性体）、は、ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）として市販されている。ゲムシタビンは、Ｇ１／Ｓ境界で細胞の進行を遮断することによりＳ期において細胞期特異性を示す。ゲムシタビンは、シスプラチンと組合せて局所進行非小細胞性肺癌の治療に、および単独で局所進行膵臓癌の治療に適応がある。

【0181】

メトトレキセート、Ｎ−［４［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸、は、メトトレキセートナトリウムとして市販されている。メトトレキセートは、プリンヌクレオチドおよびチミジル酸の合成のために必要とされるジヒドロ葉酸レダクターゼの阻害を通してＤＮＡ合成、修復および／または複製を阻害することにより、特異的にＳ期において細胞期効果を示す。メトトレキセートは、単独の薬剤としてまたは他の化学療法剤と組合せて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、ならびに乳房、頭部、頸部、卵巣および膀胱の癌の治療に適応がある。

【0182】

トポイソメラーゼＩ阻害剤：カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を含めたカンプトテシンは、トポイソメラーゼＩ阻害剤として利用できるかまたは開発中である。カンプトテシン細胞傷害活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性と関連すると考えられる。カンプトテシンの例としては、イリノテカン、トポテカン、および下記の７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学異性体が挙げられるが、これらに限定されない。

【0183】

イリノテカンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩、は、注射液ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）として市販されている。イリノテカンは、自身の代謝産物ＳＮ−３８と共に、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体である。細胞毒性は、トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリノテカンまたはＳＮ−３８の三元複合体と複製酵素との相互作用によって引き起こされる回復不能な二重鎖の切断の結果として起こると考えられる。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療に適応がある。

【0184】

トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩、は、注射液ＨＹＣＡＭＴＩＮ（登録商標）として市販されている。トポテカンはトポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体であり、ＤＮＡ分子のねじれ歪みに応答してトポイソメラーゼＩによって引き起こされる一重鎖の切断の再連結を防止する。トポテカンは、卵巣癌および小細胞性肺癌の転移性癌の第二選択治療に適応がある。

【0185】

ホルモンおよびホルモン類似体：ホルモンおよびホルモン類似体は、ホルモン（１つまたは複数）と癌の成長および／または成長の欠如との間に関係がある癌を治療するために有用な化合物である。癌治療において有用なホルモンおよびホルモン類似体の例としては、小児の悪性リンパ腫および急性白血病の治療において有用なプレドニゾンおよびプレドニゾロンなどの副腎皮質ステロイド、副腎皮質癌およびエストロゲン受容体を含有するホルモン依存性乳癌の治療において有用な、アミノグルテチミドならびにアナストロゾール、レトラゾール、ボロゾール、およびエクセメスタンなどの他のアロマターゼ阻害剤、ホルモン依存性乳癌および子宮内膜癌の治療において有用な酢酸メゲストロールなどのプロゲストリン、前立腺癌および良性前立腺肥大の治療において有用な、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロンなどのエストロゲン、アンドロゲン、および抗アンドロゲンならびにフィナステリドおよびデュタステリドなどの５α−レダクターゼ、ホルモン依存性乳癌および他の感受性の癌の治療において有用な、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェンなどの抗エストロゲン剤、ならびに米国特許第５，６８１，８３５号、米国特許第５，８７７，２１９号、および米国特許第６，２０７，７１６号に記載されるものなどの選択的エストロゲン受容体調節因子（ＳＥＲＭＳ）、ならびに前立腺癌の治療のために黄体形成ホルモン（ＬＨ）および／または濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激する性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）およびその類似体、例えば、酢酸ゴセレリンおよびリュープロリドなどのＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニストが挙げられるが、これらに限定されない。

【0186】

シグナル伝達経路阻害剤：シグナル伝達経路阻害剤は、細胞内変化を惹起する化学プロセスを遮断または阻害する阻害剤である。本発明で使用するこの変化は細胞増殖または分化である。本発明で有用なシグナル伝達阻害剤としては、受容体チロシンキナーゼ、非受容体チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカー、セリン／トレオニンキナーゼ、ホスファチジルイノシトール−３ キナーゼ、ミオイノシトールシグナル伝達、およびＲａｓ腫瘍遺伝子の阻害剤が挙げられる。

【0187】

いくつかのタンパク質チロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与する種々のタンパク質の中の特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する。このようなタンパク質チロシンキナーゼは、受容体または非受容体キナーゼとして広く分類され得る。

【0188】

受容体チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、およびチロシンキナーゼドメインを有する膜貫通型タンパク質である。受容体チロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与し、一般に成長因子受容体と呼ばれる。例えば過剰発現または変異による、これらのキナーゼのうちの多くの不適切または制御されない活性化、すなわち異常なキナーゼ増殖因子受容体活性は、制御されない細胞成長を生じるということが示されている。従って、このようなキナーゼの異常な活性は、悪性の組織成長に結びつけられてきた。結果として、このようなキナーゼの阻害剤は、癌治療方法を提供し得る。成長因子受容体としては、例えば、表皮成長因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、ｒｅｔ、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、免疫グロブリン様および表皮成長因子相同ドメインを有するチロシンキナーゼ（ＴＩＥ−２）、インスリン成長因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、およびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体、およびＲＥＴ癌原遺伝子が挙げられる。成長受容体のいくつかの阻害剤が開発中であり、それらには、リガンドアンタゴニスト、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびアンチセンスオリゴヌクレオチドが含まれる。成長因子受容体および成長因子受容体の機能を阻害する薬剤は、例えばＫａｔｈ，Ｊｏｈｎ Ｃ．，Ｅｘｐ． Ｏｐｉｎ． Ｔｈｅｒ． Ｐａｔｅｎｔｓ （２０００） １０（６）：８０３−８１８；Ｓｈａｗｖｅｒら ＤＤＴ Ｖｏｌ ２， Ｎｏ． ２ １９９７年２月；およびＬｏｆｔｓ，Ｆ．Ｊ．ら，「Ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｓ ｔａｒｇｅｔｓ」，Ｎｅｗ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ， Ｗｏｒｋｍａｎ，ＰａｕｌおよびＫｅｒｒ，Ｄａｖｉｄ編， ＣＲＣ ｐｒｅｓｓ １９９４， Ｌｏｎｄｏｎに記載されている。

【0189】

成長因子受容体キナーゼではないチロシンキナーゼは、非受容体チロシンキナーゼと呼ばれる。抗癌剤の標的または潜在的な標的である本発明で有用な非受容体チロシンキナーゼとしては、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（接着斑キナーゼ）、ブルトン型チロシンキナーゼ、およびＢｃｒ−Ａｂｌが挙げられる。このような非受容体キナーゼおよび非受容体チロシンキナーゼの機能を阻害する薬剤は、Ｓｉｎｈ，Ｓ．およびＣｏｒｅｙ，Ｓ．Ｊ．， （１９９９） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ８（５）：４６５−８０；およびＢｏｌｅｎ，Ｊ．Ｂ．，Ｂｒｕｇｇｅ，Ｊ．Ｓ．， （１９９７） Ａｎｎｕａｌ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ． １５：３７１−４０４に記載されている。

【0190】

ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカーは、ＰＩ３−Ｋ ｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）およびＲａｓ−ＧＡＰなどの様々な酵素またはアダプタータンパク質においてＳＨ２またはＳＨ３ドメイン結合を破壊する薬剤である。抗癌剤についての標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Ｓｍｉｔｈｇａｌｌ，Ｔ．Ｅ． （１９９５）， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ． ３４（３） １２５−３２で論じられている。

【0191】

Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外調節キナーゼ（Ｍｉｔｏｇｅｎ ｏｒ Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ Ｋｉｎａｓｅ、ＭＥＫ）、および細胞外調節キナーゼ（Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ Ｋｉｎａｓｅ、ＥＲＫ）の遮断薬を含む、ＭＡＰキナーゼカスケード遮断薬などのセリン／トレオニンキナーゼの阻害剤；ならびにＰＫＣ（アルファ、ベータ、ガンマ、イプシロン、ミュー、デルタ、イオタ、ゼータ）の遮断薬などのタンパク質キナーゼＣファミリーメンバー遮断薬。ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ａｋｔキナーゼファミリーのメンバー、およびＴＧＦβ受容体キナーゼ。このようなセリン／トレオニンキナーゼおよびその阻害剤は、Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｔａｙａ，Ｓ．，Ｋａｉｂｕｃｈｉ，Ｋ．， （１９９９）， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ． １２６（５） ７９９−８０３；Ｂｒｏｄｔ，Ｐ，Ｓａｍａｎｉ，Ａ．、およびＮａｖａｂ，Ｒ． （２０００）， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，６０． １１０１−１１０７；Ｍａｓｓａｇｕｅ，Ｊ．，Ｗｅｉｓ−Ｇａｒｃｉａ，Ｆ． （１９９６） Ｃａｎｃｅｒ Ｓｕｒｖｅｙｓ． ２７：４１−６４；Ｐｈｉｌｉｐ，Ｐ．Ａ．、およびＨａｒｒｉｓ，Ａ．Ｌ． （１９９５）， Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ． ７８： ３−２７，Ｌａｃｋｅｙ，Ｋ．ら Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ， （１０）， ２０００，２２３−２２６；米国特許第６，２６８，３９１号；ならびにＭａｒｔｉｎｅｚ−Ｉａｃａｃｉ，Ｌ．ら，Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃａｎｃｅｒ （２０００）， ８８（１），４４−５２に記載されている。

【0192】

ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫ、およびＫｕの遮断薬を含めたホスファチジルイノシトール−３ キナーゼファミリーのメンバーの阻害剤も本発明で有用である。このようなキナーゼは、Ａｂｒａｈａｍ，Ｒ．Ｔ． （１９９６）， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ． ８（３） ４１２−８；Ｃａｎｍａｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｌｉｍ，Ｄ．Ｓ． （１９９８）， Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １７（２５） ３３０１−３３０８；Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｓ．Ｐ． （１９９７）， Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ． ２９（７）：９３５−８；およびＺｈｏｎｇ，Ｈ．ら，Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓ， （２０００） ６０（６），１５４１−１５４５で論じられている。

【0193】

ホスホリパーゼＣ遮断薬およびミオイノシトール類似体などのミオイノシトールシグナル伝達阻害剤も本発明で有用である。このようなシグナル阻害剤は、Ｐｏｗｉｓ，Ｇ．、およびＫｏｚｉｋｏｗｓｋｉ Ａ．， （１９９４） Ｎｅｗ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｐａｕｌ ＷｏｒｋｍａｎおよびＤａｖｉｄ Ｋｅｒｒ編， ＣＲＣ ｐｒｅｓｓ １９９４， Ｌｏｎｄｏｎに記載されている。

【0194】

別の群のシグナル伝達経路阻害剤は、Ｒａｓ腫瘍遺伝子の阻害剤である。このような阻害剤としては、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニル−ゲラニルトランスフェラーゼ、およびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害剤、ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイムおよび免疫療法が挙げられる。このような阻害剤は、野生型変異体ｒａｓを含有する細胞においてｒａｓ活性化を遮断し、これにより抗増殖薬として作用することが示されている。Ｒａｓ腫瘍遺伝子阻害は、Ｓｃｈａｒｏｖｓｋｙ，Ｏ．Ｇ．，Ｒｏｚａｄｏｓ，Ｖ．Ｒ．，Ｇｅｒｖａｓｏｎｉ，Ｓ．Ｉ． Ｍａｔａｒ，Ｐ． （２０００）， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ． ７（４） ２９２−８；Ａｓｈｂｙ，Ｍ．Ｎ． （１９９８）， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ． ９（２） ９９−１０２；およびＢｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ， （１９８９９） １４２３（３）：１９−３０で論じられている。

【0195】

上で触れたように、受容体キナーゼリガンド結合に対する抗体アンタゴニストは、シグナル伝達阻害剤としての役割も果たし得る。この群のシグナル伝達経路阻害剤としては、受容体チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗体の使用が挙げられる。例えばＩｍｃｌｏｎｅ Ｃ２２５ ＥＧＦＲ特異的抗体（Ｇｒｅｅｎ，Ｍ．Ｃ．ら，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ， Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ． Ｒｅｖ．， （２０００），２６（４），２６９−２８６を参照のこと）；Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体（Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：ｅｒｂＢ Ｆａｍｉｌｙ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅｓ， Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２０００，２（３），１７６−１８３を参照のこと）；および２ＣＢ ＶＥＧＦＲ２特異的抗体（Ｂｒｅｋｋｅｎ，Ｒ．Ａ．ら，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＶＥＧＦＲ２ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ａ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉ−ＶＥＧＦ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｌｏｃｋｓ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． （２０００） ６０，５１１７−５１２４を参照のこと）である。

【0196】

抗血管新生薬：非受容体ＭＥＫ血管新生阻害剤を含めた抗血管新生薬も有用であり得る。血管内皮成長因子の効果を阻害するものなどの抗血管新生薬（例えば抗血管内皮細胞成長因子抗体ベバシズマブ［Ａｖａｓｔｉｎ（商標）］、および他の機構によって働く化合物（例えばリノミド、インテグリンαｖβ３機能の阻害剤、エンドスタチンおよびアンジオスタチン）、
免疫療法薬：免疫療法レジメンで使用される薬剤も、式（Ｉ）の化合物と組合せて有用であり得る。例えば患者の腫瘍細胞の免疫原性を上昇させるためのｅｘ−ｖｉｖｏおよびｉｎ−ｖｉｖｏアプローチを含めた免疫療法アプローチ、例えばインターロイキン２、インターロイキン４または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子などのサイトカインを用いた形質移入、Ｔ細胞の免疫反応不顕性を低下させるためのアプローチ、サイトカインで形質移入した樹状細胞などの形質移入した免疫細胞を使用するアプローチ、サイトカインで形質移入した腫瘍細胞株を使用するアプローチ、および抗イディオタイプ抗体を使用するアプローチ。

【0197】

アポトーシス促進剤：アポトーシス促進レジメンで使用される薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）も本発明の組合せ物で使用され得る。

【0198】

細胞周期シグナル伝達阻害剤：細胞周期シグナル伝達阻害剤は、細胞周期の制御に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれるタンパク質キナーゼのファミリーおよびそれらと、サイクリンと呼ばれるタンパク質のファミリーとの相互作用は、真核細胞周期の進行を制御する。異なるサイクリン／ＣＤＫ複合体の協調的な活性化および不活化は、細胞周期の正常な進行のために必要である。細胞周期シグナル伝達のいくつかの阻害剤が開発中である。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、およびＣＤＫ６を含めたサイクリン依存性キナーゼ、およびそれらについての阻害剤の例は、例えば、Ｒｏｓａｎｉａら，Ｅｘｐ． Ｏｐｉｎ． Ｔｈｅｒ． Ｐａｔｅｎｔｓ （２０００） １０（２）：２１５−２３０に記載されている。

【0199】

１つの実施形態では、本発明の組合せ物は、式Ｉの化合物またはその塩もしくは溶媒和物と、抗微小管薬、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似体、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシンＭＥＫ血管新生阻害剤、免疫療法薬、アポトーシス促進剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤から選択される少なくとも１つの抗新生物薬とを含む。

【0200】

１つの実施形態では、本発明の組合せ物は、式Ｉの化合物またはその塩もしくは溶媒和物と、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドから選択される抗微小管薬である少なくとも１つの抗新生物薬とを含む。

【0201】

さらなる実施形態では、この少なくとも１つの抗新生物薬はジテルペノイドである。

【0202】

さらなる実施形態では、この少なくとも１つの抗新生物薬はビンカアルカロイドである。

【0203】

１つの実施形態では、本発明の組合せ物は、式Ｉの化合物またはその塩もしくは溶媒和物と、白金配位錯体である少なくとも１つの抗新生物薬とを含む。

【0204】

さらなる実施形態では、この少なくとも１つの抗新生物薬はパクリタキセル、カルボプラチン、またはビノレルビンである。

【0205】

さらなる実施形態では、この少なくとも１つの抗新生物薬はカルボプラチンである。

【0206】

さらなる実施形態では、この少なくとも１つの抗新生物薬はビノレルビンである。

【0207】

さらなる実施形態では、少なくとも１つの抗新生物薬はパクリタキセルである。

【0208】

１つの実施形態では、本発明の組合せ物は、式Ｉの化合物およびその塩または溶媒和物と、シグナル伝達経路阻害剤である少なくとも１つの抗新生物薬とを含む。

【0209】

さらなる実施形態では、シグナル伝達経路阻害剤は、成長因子受容体キナーゼＶＥＧＦＲ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦＲ、ＢＴＫ、ｅｒｂＢ２、ＥＧＦｒ、ＩＧＦＲ−１、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣ、またはｃ−ｆｍｓの阻害剤である。

【0210】

さらなる実施形態では、このシグナル伝達経路阻害剤は、セリン／トレオニンキナーゼｒａｆｋ、ａｋｔ、またはＰＫＣ−ζの阻害剤である。

【0211】

さらなる実施形態では、このシグナル伝達経路阻害剤は、キナーゼのｓｒｃファミリーから選択される非受容体チロシンキナーゼの阻害剤である。

【0212】

さらなる実施形態では、このシグナル伝達経路阻害剤は、ｃ−ｓｒｃの阻害剤である。

【0213】

さらなる実施形態では、このシグナル伝達経路阻害剤は、ファルネシルトランスフェラーゼおよびゲラニルゲラニルトランスフェラーゼの阻害剤から選択されるＲａｓ腫瘍遺伝子の阻害剤である。

【0214】

さらなる実施形態では、このシグナル伝達経路阻害剤は、ＰＩ３Ｋからなる群から選択されるセリン／トレオニンキナーゼの阻害剤である。

【0215】

さらなる実施形態では、このシグナル伝達経路阻害剤は、二重ＥＧＦｒ／ｅｒｂＢ２阻害剤、例えばＮ−｛３−クロロ−４−［（３−フルオロベンジル）オキシ］フェニル｝−６−［５−（｛［２−（メタンスルホニル）エチル］アミノ｝メチル）−２−フリル］−４−キナゾリンアミン（下記の構造）である。

【化23】

【0216】

１つの実施形態では、本発明の組合せ物は、式Ｉの化合物またはその塩もしくは溶媒和物と、細胞周期シグナル伝達阻害剤である少なくとも１つの抗新生物薬とを含む。

【0217】

さらなる実施形態では、細胞周期シグナル伝達阻害剤は、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４またはＣＤＫ６の阻害剤である。

【0218】

１つの実施形態では、本発明の方法および使用における哺乳動物はヒトである。

【0219】

好適には、本発明は、Ｒａｆ、Ｒａｓ、ＭＥＫ、およびＰＩ３Ｋ／Ｐｔｅｎの各々について野生型または変異体のいずれかである癌を治療するかまたはそのような癌の重症度を低減する方法に関する。これは、ＲＡＦについて変異体、ＲＡＳについて野生型、ＭＥＫについて野生型、およびＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮについて野生型である癌、ＲＡＦについて変異体、ＲＡＳについて変異体、ＭＥＫについて野生型、およびＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮについて野生型である癌、ＲＡＦについて変異体、ＲＡＳについて変異体、ＭＥＫについて変異体、およびＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮについて野生型である癌、ならびにＲＡＦについて変異体、ＲＡＳについて野生型、ＭＥＫについて変異体、およびＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮについて野生型である癌を有する患者を含むが、これらに限定されない。

【0220】

当該技術分野で理解される用語「野生型」は、遺伝子改変のない未変性の集団で現れるポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列を指す。また当該技術分野で理解されるように、「変異体」は、それぞれ野生型ポリペプチドまたはポリヌクレオチドで見出される対応するアミノ酸または核酸と比較して、アミノ酸または核酸に対して少なくとも１つの改変を有するポリペプチド配列またはポリヌクレオチド配列を含む。最も一般的に見出される（野生型）核酸鎖と比較して１つの塩基対の相違が核酸鎖の配列に存在する、一塩基多型（ＳＮＰ）は、用語「変異体」に含まれる。

【0221】

Ｒａｆ、Ｒａｓ、ＭＥＫについて野生型もしくは変異体のいずれかであるか、またはＰＩ３Ｋ／Ｐｔｅｎについて変異体である癌は、公知の方法によって特定される。例えば、野生型または変異体の腫瘍細胞は、ＤＮＡ増幅および配列決定技術、ＤＮＡおよびＲＮＡの検出技術（特に限定されないが、それぞれノーザンブロットおよびサザンブロット、ならびに／または種々のバイオチップおよびアレイ技術が挙げられる）によって特定され得る。野生型および変異体のポリペプチドは、特に限定されないが、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロットまたは免疫細胞化学などの免疫診断技術が挙げられる様々な技術によって検出され得る。好適には、加ピロリン酸分解活性化重合（ＰＡＰ）および／またはＰＣＲ方法が使用され得る。Ｌｉｕ，Ｑら、Ｈｕｍａｎ Ｍｕｔａｔｉｏｎ ２３：４２６−４３６（２００４）。

【0222】

以下の実施例は、説明のためだけに意図されており、本発明の範囲を限定することは決して意図されていない。

【実施例】

【0223】

実施例１ − カプセル剤組成物
本発明の組合せ物を投与するための経口用剤形は、標準的な２片の硬ゼラチンカプセル剤を、下記の表Ａに示す割合で成分を充填することにより製造する。

【表1】

【0224】

本発明の好ましい実施形態は上に説明されているが、本発明は本明細書に開示されるまさにそのインストラクションに限定されず、以下の特許請求の範囲の中に包含されるすべての改変に対する権利が留保されるということを理解されるべきである。

【0225】

アッセイ
異なる変異をコードする複数の起源に由来する癌細胞株についてのＢＲＡＦおよびＭＥＫ阻害剤のｉｎ ｖｉｔｒｏ組合せ物研究
Ａ． 濃度範囲Ａ
薬物組合せ物実験を３８４穴プレートの中で実施した。細胞を、１０％ ＦＢＳおよび１％ ペニシリン／ストレプトマイシンを補った各細胞のタイプに適切な培地の中で５００細胞／ウェルで３８４穴プレートにプレーティングし、３７℃、５％ ＣＯ_２で一晩インキュベーションした。各薬物の１６の濃度の２倍希釈を、細胞増殖阻害についてマトリクスで試験した。化合物Ａ（遊離形態）について試験した濃度は１μＭ−０．０３ｎＭであり、化合物Ｂ（ＤＭＳＯ溶媒和物）については１０μＭ−０．３ｎＭであった。細胞を化合物組合せ物で処置し、３７℃で７２時間インキュベーションした。製造業者のプロトコルに従ってＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬を使用して細胞成長を測定し、０．５秒読み取りでルミネッセンスモードに設定したＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ＥｎＶｉｓｉｏｎ（商標）読み取り機でシグナルを読み取った。結果は、ＤＭＳＯ処置した細胞と比較した百分率阻害として表され、バックグラウンド補正を、細胞を含有しないウェルからの値を差し引くことにより行った。

【0226】

「ａ」濃度における化合物「Ａ」の応答（未処置の試料と比較しかつ培地のみに対して正規化した百分率阻害）（Ｒａ）および「ｂ」濃度における化合物「Ｂ」の応答（Ｒｂ）を、それぞれ「ａ」および「ｂ」濃度における化合物「Ａ」および「Ｂ」の混合物の応答（Ｒａｂ）と比較する。これらの値を使用して、エクセス・オーバー・ハイエスト・シングル・エージェント（Ｅｘｃｅｓｓ Ｏｖｅｒ Ｈｉｇｈｅｓｔ Ｓｉｎｇｌｅ Ａｇｅｎｔ、ＥＯＨＳＡ）を、試験した細胞株の各々の各濃度について算出した：
Ｒａｂ＞ＲａおよびＲｂのうちで高いほうの値の１０％ ＝ 加成性を超える
Ｒａｂ＜ＲａおよびＲｂのうちで高いほうの値の−１０％ ＝ 拮抗作用
この式を使用して、ＲａｂがＲａとＲｂとの間の最も高い値よりも１０％以上大きい場合、その薬物組合せ物は加成性を超えると考えられる。ＲａｂがＲａとＲｂとの間の最も高い値よりも１０％以上小さい場合、その薬物組合せ物は拮抗的である。

【0227】

試験した細胞株の各々について、１６×１６のマトリクスの中での、加成性を超える応答を有する組合せ物（Ｒａｂが、ＲａおよびＲｂのうちで高いほうの値よりも１０％以上高い組合せ物）の数を数えた。（試験した２６４個のうちで）加成性を超える組合せ物の数を表１に要約する。この表で、試験した組合せ物の２０％（試験した２５６個のうちの５１の組合せ物）超が＞１０％ ＥＯＨＳＡを示したならば、与えられた細胞株についての濃度の組合せが特に有益である（灰色の枠）ことが見出されるであろう。

【表2】

【0228】

これらのデータは、化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物は、ＭＡＰＫまたはＡＫＴ／ＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮ経路の中の鍵となる腫瘍遺伝子の変異状態によらず、複数の起源由来の複数の癌細胞株について好ましいということを実証する。

【0229】

Ｂ． 濃度範囲Ｂ
セクションＡで生成された、しかし臨床的に関連すると見なす（１００ｎＭ−３ｎＭ）薬物濃度についてのみのデータを使用して、化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物の上記のセクションＡに類似の評価を実施した。これらの濃度を、前臨床マウス異種移植モデルで有効であるが無毒である傾向がある濃度として選んだ。これらの濃度を使用して、合計２５の薬物組合せ物を各細胞株について評価し、結果を表２に要約する。

【0230】

２５の試験した臨床的に関連する組合せ物のうちの、ＲａおよびＲｂのうちで高いほうの値の１０％を超えるＲａｂを有する組合せ物の数を算出し、百分率として表２に表す。

【0231】

表２：臨床的に関連する薬物濃度を使用するＭＥＫおよびＢＲＡＦ阻害剤のｉｎ ｖｉｔｒｏ組合せ物

【表3】

【0232】

これらのデータは、化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物は、関連する臨床薬物濃度では、ＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮ経路の変異状態によらず、試験したほとんどの細胞株において好ましく、そして試験したすべてのＢＲＡＦ^{Ｖ６００Ｅ}およびＫＲＡＳ変異体細胞株について非常に好ましいということを実証する。

【0233】

腫瘍細胞株におけるｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞増殖阻害
方法：
細胞株および成長状態 − ヒト結腸腫瘍株、Ｃｏｌｏ−２０５、ＤＬＤ−１、ＨＣＴ−８、ＨＴ−２９、ＬＳ−１０３４、ＮＣＩ−Ｈ５０８、ＲＫＯ、ＳＷ１４１７、ＳＷ１４６３、ＳＷ４８０およびＳＷ８３７、およびヒト黒色腫株Ａ３７５をＡＴＣＣから得た。Ａ３７５ＰＦ１１はＡ３７５由来であった。１２Ｒ５−１、１２Ｒ５−３、１２Ｒ８−１、１２Ｒ８−３、１６Ｒ５−２、１６Ｒ６−３および１６Ｒ６−４は、１２００および１６００ｎＭの濃度までの化合物Ａの中で成長し、これにより化合物Ｂに対する獲得された耐性を示すように選択された、Ａ３７５ＰＦ１１細胞の混合集団に由来する単一の細胞クローンである。すべての株を、１０％ ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含有するＲＰＭＩ １６４０培地の中で培養した。

【0234】

細胞増殖阻害アッセイおよび組合せデータ解析 − すべての細胞を、細胞のプレーティングの前に、最低７２時間培養した。１ウェルあたり１，０００細胞で、すべての細胞について、１０％ ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ培地の９６穴の組織培養プレート（ＮＵＮＣ １３６１０２）の中で細胞をアッセイした。プレーティングからおよそ２４時間後に、１０％ ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ培地の中で、細胞を、１０の、３倍の段階希釈の化合物、または１：１０ 化合物Ａ（ＤＭＳＯ溶媒和物） 対 化合物Ｂ（遊離形態）の一定モル 対 モル比の当該２つの薬剤の組合せ物に曝露した。化合物Ａについての試験した濃度は、１μＭ−０．０５ｎＭであり、化合物Ｂについては１０μＭ−０．５ｎＭであった。細胞を、化合物の存在下で３日間インキュベーションした。ＡＴＰレベルを、製造業者のプロトコルに従ってＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標） （Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加することにより測定した。簡潔に言えば、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ（登録商標）を各プレートに添加し、３０分間インキュベーションし、次いで発光シグナルを、０．５秒の積算時間を用いて、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｌ プレートリーダーで読み取った。

【0235】

細胞成長の阻害を、化合物または化合物の組合せ物を用いた３日間の処置の後に評価し、シグナルをビヒクル（ＤＭＳＯ）を用いて処置した細胞と比較した。細胞成長を、ビヒクル（ＤＭＳＯ）処置した対照のウェルに対して算出した。対照の細胞成長の５０％を阻害する化合物の濃度（ＩＣ_５０）を、方程式、ｙ＝（Ａ＋（Ｂ−Ａ）／（１＋（Ｃ／ｘ）＾Ｄ）））（式中、Ａは最小応答（ｙ_ｍｉｎ）であり、Ｂは最大応答（ｙ_ｍａｘ）であり、Ｃは曲線の変曲点（ＥＣ_５０）であり、ＤはＨｉｌｌ係数である）を用いた非線形回帰を使用して、ｙ＝ビヒクル対照の５０％であるときに補間した。

【0236】

逆補間した（ｂａｃｋ−ｉｎｔｅｒｐｏｌａｔｅｄ）ＩＣ_５０値と、ＣｈｏｕおよびＴａｌａｌａｙ（１）によって誘導された相互に非排他的な式（ｍｕｔｕａｌｌｙ ｎｏｎ−ｅｘｃｌｕｓｉｖｅ ｅｑｕａｔｉｏｎ）：
ＣＩ ＝ Ｄａ／ＩＣ_５０（ａ） ＋ Ｄｂ／ＩＣ_５０（ｂ） ＋ （Ｄａ×Ｄｂ）／（ＩＣ_５０（ａ）×ＩＣ_５０（ｂ））
（式中、ＩＣ_５０（ａ）は化合物ＡについてのＩＣ_５０であり、ＩＣ_５０（ｂ）は化合物ＢについてのＩＣ_５０であり、Ｄａは、細胞成長の５０％を阻害した化合物Ｂと組合せた化合物Ａの濃度であり、Ｄｂは、細胞成長の５０％を阻害した化合物Ａと組合せた化合物Ｂの濃度である）とを用いて算出した組合せ指数（Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ Ｉｎｄｅｘ、ＣＩ）を使用して、効力に対する組合せ効果を評価した。一般に、０．９未満、０．９−１．１の間、または＞１．１超のＣＩ値は、それぞれ、相乗作用、加成性および拮抗作用を示す。一般に、ＣＩ数が小さいほど、相乗作用の強さが大きい。

【0237】

応答スケールに対する組合せ効果を、ＰｅｔｅｒｓｏｎおよびＮｏｖｉｃｋ（２００７）ならびにＰｅｔｅｒｓｏｎ（２０１０）［（２；３）［ＰｅｔｅｒｓｏｎおよびＮｏｖｉｃｋ，２００７；Ｐｅｔｅｒｓｏｎ，２０１０］によって詳細に記載されている非線形混合の概念に基づいて、エクセス・オーバー・ハイエスト・シングル・エージェント（ＥＯＨＳＡ）によって定量化した。ＥＯＨＳＡ値は、組合せ物についてのその成分の用量レベルでの最良の単独の薬剤に対する、組合せ物によってもたらされる改善（本発明では「百分率ポイント」（ｐｐｔｓ）の差）の増加として定義される。単独の薬剤および併用治療について、細胞を一定用量比で化合物に曝露し、用量反応曲線を実験データにフィッティングし、回帰モデルを使用して分析した。用量反応曲線に沿ったＣ_５０の特定された全用量レベルで、（ＩＣ_５０に対応する）用量の組合せを、ＥＯＨＳＡの統計的推定を行うために、決定した。より具体的には、組合せ薬物について、用量ｄ１の薬物１および用量ｄ２の薬物２（すなわち、全用量はｄ１＋ｄ２に等しい）が関与する実験は、組合せ物での平均応答が、用量ｄ１の薬物１または用量ｄ２の薬物２に対する平均応答よりも良好である場合、正のＥＯＨＳＡを有すると言われる。

【0238】

結果：
ＭＥＫ阻害剤化合物Ａ、ＢＲＡＦ阻害剤化合物Ｂおよびこれらの組合せ物による細胞増殖阻害の効果を、ヒト腫瘍細胞株のパネルにおいて判定した。（少なくとも２つの独立の実験からの平均ＩＣ_５０）およびＩＣ_５０での組合せ効果を、ＢＲＡＦおよびＫＲＡＳ変異状態とともに表３に要約する。

【0239】

表３を参照すると、ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を有する４つの結腸細胞株は、０．００１μＭ−０．０２５μＭのＩＣ_５０値で化合物Ａに、および０．０１８μＭ−５．６５４μＭのＩＣ_５０値で化合物Ｂに対する感受性を提示した。化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物は、これらのＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を有する４つの株において、０．２５−０．７３のＣＩ値で相乗的であり、かつ／または７−２６ｐｐｔｓのＥＯＨＳＡ値で細胞増殖阻害を亢進した。ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を有しない（ＢＲＡＦ Ｇ５９６ＲまたはＫＲＡＳ変異のいずれかを有する）７つの結腸株は、化合物Ｂに感受性がなかった（ＩＣ_５０＞１０μＭ）が、しかしながら化合物Ａによる細胞増殖阻害には非常に敏感であり、ＩＣ_５０は、この７つの株のうちの６つで０．００１−０．０９３μＭの範囲であった。化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物は、ＤＬＤ１結腸腫瘍株において亢進された細胞増殖阻害を示し、他の６つの結腸細胞株においては化合物Ａの単独化合物治療と比べて最小の利益〜付加された利益なしであった。

【0240】

表３に列挙する黒色腫株については、ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅ変異を有するＡ３７５ＰＦ１１細胞は、化合物Ａ（ＩＣ_５０＝０．００１μＭ）または化合物Ｂ（ＩＣ_５０＝０．０１２μＭ）のいずれかの単独の薬剤に対して非常に感受性が高かった。Ａ３７５ＰＦ１１細胞においては化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物は相乗的で、ＣＩ値は０．３であった。黒色腫株１２Ｒ８−３、１２Ｒ８−１、１２Ｒ５−３、および１６Ｒ６−３は、化合物Ｂに対して耐性があり（ＩＣ_５０＞１０μＭ）、化合物Ａに対しては０．０５８μＭ−０．１０９の範囲のＩＣ_５０で中程度に感受性があり、化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物に対して、化合物Ａについての０．０１８−０．０２３μＭおよび化合物Ｂについての０．１７８−０．２３４μＭの範囲のＩＣ_５０で応答した。黒色腫株１６Ｒ５−２、１６Ｒ６−４および１２Ｒ５−１は、化合物Ａまたは化合物Ｂのいずれか単独に対して耐性があるかまたは感受性がなかったが、しかしながら、化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物に対しては、化合物Ａについて０．０１８−０．０３９μＭおよび化合物Ｂについて０．１７７−０．３８６μＭの範囲のＩＣ_５０で感受性を示すようになった。また、化合物Ａおよび化合物Ｂの組合せ物は、すべてのこれらの黒色腫株において細胞増殖阻害の亢進を示した。なお、単独の薬剤の値が試験した範囲の外にある場合は、ＣＩ値は算出することができず、それゆえ適用なしであった。

【0241】

興味深いことに、ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅ変異体の結腸細胞株および黒色腫細胞株における化合物Ａおよび化合物Ｂの併用投与は、０．９未満のＣＩ値によって実証される相乗効果を示したか、またはこれらの単独の薬剤のうちの少なくとも１つが試験した範囲内で５０％阻害を生じなかった場合でも、単独で投与された化合物Ａまたは化合物ＢのＩＣ５０値と比べて低下したＩＣ５０値を生じた。

【0242】

表３．ヒト腫瘍細胞株における化合物Ａ、化合物Ｂおよびこれらの組合せ物による細胞増殖阻害。

【表4】

【0243】

参考文献の一覧
（１）Ｃｈｏｕ ＴＣ，Ｔａｌａｌａｙ Ｐ． Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｄｏｓｅ−ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ： ｔｈｅ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｄｒｕｇｓ ｏｒ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ． Ａｄｖ Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｇｕｌ １９８４；２２：２７−５５。

【0244】

（２）Ｐｅｔｅｒｓｏｎ ＪＪ，Ｎｏｖｉｃｋ ＳＪ． Ｎｏｎｌｉｎｅａｒ ｂｌｅｎｄｉｎｇ： ａ ｕｓｅｆｕｌ ｇｅｎｅｒａｌ ｃｏｎｃｅｐｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｄｒｕｇ ｓｙｎｅｒｇｙ． Ｊ Ｒｅｃｅｐｔ Ｓｉｇｎａｌ Ｔｒａｎｓｄｕｃｔ Ｒｅｓ ２００７；２７（２−３）：１２５−４６。

【0245】

（３）Ｐｅｔｅｒｓｏｎ Ｊ． Ａ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｃｏｎｃｅｐｔｓ ｏｆ Ｎｏｎｌｉｎｅａｒ Ｂｌｅｎｄｉｎｇ ａｎｄ Ｄｏｓｅ−Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｆｉｌｅｓ． Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｏｆ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｓ２， ４８３−５０３． ２０１０。

【0246】

マウス異種移植モデルＡ
Ａ３７５Ｐ Ｆ１１（ＢＲａｆ^{Ｖ６００Ｅ}変異をコードするヒト黒色腫細胞株）細胞を使用する異種移植モデルを、組織培養液の中で成長させた細胞から確立し、トリプシン消化を使用して無菌的に回収した。この腫瘍細胞を、５０％マトリゲルの中の５×１０^６−１０^７細胞で雌の無胸腺マウス（系統 ｎｕ／ｎｕ）に皮下注射した。腫瘍を確立させた。約２００ｍｍ^３の平均腫瘍体積に対応する移植から２４日目に投薬を始めた。

【0247】

このヒト異種移植腫瘍モデルは、一群あたり８匹のマウスで４群のマウスを利用した。これらの動物を皮下（ｓｃ）マイクロチップまたはタトゥーによって特定した。

【0248】

未処置またはプラセボ処置した腫瘍保有の対照動物の第１の群が対照としての役割を果たした。第２の群には、Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（結晶性の遊離塩基形態）（化合物Ｂ）を１日１回経口投与した。第３の群には、Ｎ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド ジメチルスルホキシド溶媒和物（化合物Ａ）を１日１回経口投与した。第４の群には、Ｎ−｛３−［５−（２−アミノ−４−ピリミジニル）−２−（１，１−ジメチルエチル）−１，３−チアゾール−４−イル］−２−フルオロフェニル｝−２，６−ジフルオロベンゼンスルホンアミド（結晶性の遊離塩基形態）およびＮ−｛３−［３−シクロプロピル−５−（２−フルオロ−４−ヨード−フェニルアミノ）６，８−ジメチル−２，４，７−トリオキソ−３，４，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピリド［４，３−ｄ］ピリミジン−１−イル］フェニル｝アセトアミド ジメチルスルホキシド溶媒和物の組合せ物を１日１回経口投与した。各薬物を、０．５％ ＨＰＭＣ／０．２％ ＴＷＥＥＮ ８０の懸濁液の中で与えた。

【0249】

Ｖｅｒｎｉｅｒカリパスを使用して腫瘍サイズを一週間に２回測定した。扁長楕円体の体積を近似する式：
立方ｍｍ単位での腫瘍体積＝（長さ×幅^２）×０．５
を使用して二次元測定値から腫瘍体積を算出した。

【0250】

３６日の治療後の測定値を図１に報告する。これらのデータは、ＭＥＫおよびＢ−Ｒａｆ阻害剤の組合せ物が、個々に投与される各薬剤と比較して有利であるということを示す。

【0251】

マウス異種移植モデルＢ
Ａ３７５Ｐ細胞を、３７℃で５分間、０．２５％ トリプシン／ＥＤＴＡに曝露することにより培養フラスコから回収した。剥離した細胞を集め、遠心分離し（１５００ｒｐｍ、５分、４℃）、洗ってトリプシン溶液を除去した。マグネシウムもカルシウムも含まないＰＢＳに細胞を再懸濁させ、数えた。細胞をこれまでのように回転させてＰＢＳを除去し、１００μＬの皮下注射がマウス１匹あたりに必要とされる細胞数を送達するであろうように、単一の細胞懸濁液を５０％マトリゲル：５０％ ＰＢＳ（ｖ：ｖ）または１００％ ＰＢＳのいずれかの中で作製した。このＡ３７５Ｐ黒色腫株を、マウス１匹あたり１７５万細胞で、８−１０週齢の、雌のＣＤ−１ ｎｕ／ｎｕマウスに、マトリゲルを用いて皮下注射した。注射後２−４週間以内にすべての細胞株について腫瘍を確立させた（約１５０−３００ｍｍ^３）。

【0252】

化合物Ａ（ＤＭＳＯ溶媒和物）および化合物Ｂ（遊離形態）を、蒸留水、ｐＨ ７．０−８．０中の０．５％ ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース、Ｓｉｇｍａ カタログ番号Ｈ７５０９）および０．２％ Ｔｗｅｅｎ ８０（Ｓｉｇｍａ カタログ番号Ｐ１７５４）の中で０．２ｍｌ／２０グラム体重で、示した用量でマウスに経口投与した。

【0253】

同様のサイズの腫瘍（１５０−２００ｍｍ^３）を有するマウスを特定した。腫瘍の長さおよび幅を手持ち式のカリパスによって測定し、卓上体重計を使用してマウスの体重を測定した。適宜にマウスを８匹または７匹の群に分け、ビヒクル、個々の化合物または化合物組合せ物のいずれかを経口投薬した。この研究の継続期間のあいだ、一週間に２回、マウスの体重を測定し、腫瘍を測定した。図２に提示するデータは、３３日間（移植後２４−５６日）毎日の化合物Ａ（０．１ｍｇ／ｋｇ）および化合物Ｂ（３０ｍｇ／ｋｇ）の組合せ物が各薬剤単独よりも有効であるということを実証する。

【図1】

【図2】