特許 5728611 ＡＴＰ結合カセット輸送体のモジュレーター

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5728611

(24)【登録日】2015年4月10日

(45)【発行日】2015年6月3日

(54)【発明の名称】ＡＴＰ結合カセット輸送体のモジュレーター

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/404 20060101AFI20150514BHJP

   A61K 31/47 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 3/00 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 5/14 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 5/16 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 5/18 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 7/04 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 7/12 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 19/04 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 19/08 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 25/14 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 25/16 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20150514BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20150514BHJP

   C07D 405/12 20060101ALI20150514BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/404

   A61K31/47

   A61P3/00

   A61P3/06

   A61P3/10

   A61P5/14

   A61P5/16

   A61P5/18

   A61P7/04

   A61P7/12

   A61P9/00

   A61P11/00

   A61P19/04

   A61P19/08

   A61P21/00

   A61P25/14

   A61P25/16

   A61P25/28

   A61P27/02

   A61P35/00

   A61P43/00 111

   C07D405/12

【請求項の数】4

【全頁数】68

(21)【出願番号】特願2014-165547(P2014-165547)

(22)【出願日】2014年8月15日

(62)【分割の表示】特願2011-535544(P2011-535544)の分割

【原出願日】2008年11月12日

(65)【公開番号】特開2014-208719(P2014-208719A)

(43)【公開日】2014年11月6日

【審査請求日】2014年8月20日

(31)【優先権主張番号】61/112,152

(32)【優先日】2008年11月6日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/112,145

(32)【優先日】2008年11月6日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】598032106

【氏名又は名称】バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＶＥＲＴＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ

(74)【代理人】

【識別番号】100101454

【弁理士】

【氏名又は名称】山田 卓二

(74)【代理人】

【識別番号】100062144

【弁理士】

【氏名又は名称】青山 葆

(74)【代理人】

【識別番号】100106518

【弁理士】

【氏名又は名称】松谷 道子

(74)【代理人】

【識別番号】100067035

【弁理士】

【氏名又は名称】岩崎 光隆

(74)【代理人】

【識別番号】100156144

【弁理士】

【氏名又は名称】落合 康

(72)【発明者】

【氏名】サラ・エス・ハディダ・ルアー

(72)【発明者】

【氏名】ペーテル・デー・イェー・フローテンハイス

(72)【発明者】

【氏名】フレドリック・バン・ゴール

(72)【発明者】

【氏名】マーク・ティ・ミラー

(72)【発明者】

【氏名】ジェイソン・マッカートニー

(72)【発明者】

【氏名】ジンラン・ジョウ

(72)【発明者】

【氏名】ブライアン・ベアー

(72)【発明者】

【氏名】メディ・ミシェル・ジャムル・ニュマ

【審査官】 上村 直子

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００７／１１７７１５（ＷＯ，Ａ２）

【文献】 特表２０１２−５０８２４６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１２−５０７５８０（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

ＣＡｐｌｕｓ（ＳＴＮ）

ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

（ｉ）式：

【化1】

で示される化合物またはその薬学的に許容される塩；
（ｉｉ）Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドまたはその薬学的に許容される塩；および
（ｉｉｉ）薬学的に許容される担体
を含む、医薬組成物。

【請求項2】

嚢胞性線維症、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、プロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、アイセル病／偽ハーラー病、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーII型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ(myleoperoxidase)欠損症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカン糖鎖異常(glycanosis)ＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ｄｉ）、中枢性ｄｉ、腎性ＤＩ、シャルコー−マリー−トゥース症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、ポリグルタミン神経障害、ハンチントン病、脊髄小脳性運動失調１型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病、ファブリー病、ストロイスラー−シャインカー症候群、ＣＯＰＤ、角膜乾燥症およびシェーグレン病から選択される、ＡＢＣ輸送体活性が関係する状態、疾患、または障害を処置するための、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

嚢胞性線維症膜貫通伝導制御因子アミノ酸配列の５０８位のフェニルアラニンの欠失をもたらす欠陥遺伝子を有する患者において、嚢胞性線維症を処置するための、請求項２に記載の組成物。

【請求項4】

患者が前記欠陥遺伝子を２コピー有する、請求項３に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本特許出願は、両方とも２００８年１１月６日付け出願の米国特許出願第６１／１１２，１５２号および同第６１／１１２，１４５号に対して優先権を主張する。これらの出願の内容全体は、その全体を引用により本明細書中に包含させる。

【0002】

発明の技術分野
本発明は、嚢胞性線維症膜貫通伝導制御因子（“ＣＦＴＲ”）を含む、ＡＴＰ結合カセット（“ＡＢＣ”）輸送体(transporter）またはその断片のモジュレーター、その組成物およびその使用方法に関する。本発明はまた、かかるモジュレーターを用いるＡＢＣ輸送体仲介疾患の処置方法に関する。

【背景技術】

【0003】

発明の背景
ＡＢＣ輸送体は、種々の薬剤、毒性である可能性のある薬物、および異物、ならびに陰イオンなどの輸送を制御する膜輸送タンパク質のファミリーである。ＡＢＣ輸送体は、細胞質アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）に結合し、それを、その特異的活性のために用いる相同性膜タンパク質である。これらの輸送体のいくつかは、化学療法剤に対して悪性癌細胞を保護する、多剤耐性タンパク質類（ＭＤＲ１−Ｐ 糖タンパク質、または多剤耐性タンパク質ＭＲＰ１など）として発見された。現在までに、４８個のＡＢＣ輸送体が同定されており、それらは配列同一性および機能に基づいて７個のファミリーにグループ分けされている。

【0004】

ＡＢＣ輸送体は、体内で様々な重要な生理的役割を制御し、有害な環境化合物に対する防御を提供する。このため、それらは、該輸送体の欠失と関係する疾患の処置、標的細胞からの薬物排出の阻止、およびＡＢＣ輸送体活性の調節が有益であり得る他の疾患への介入の重要な可能性のある薬物標的である。

【0005】

疾患と一般的に関係のあるＡＢＣ輸送体ファミリーの１つのメンバーは、ｃＡＭＰ／ＡＴＰにより仲介される陰イオンチャネルであるＣＦＴＲである。ＣＦＴＲは、吸収性および分泌性上皮細胞を含む種々の細胞タイプにおいて発現され、そこで、膜を通過する陰イオン流量を制御し、同時に他のイオンチャネルおよびタンパク質の活性を制御する。上皮細胞において、ＣＦＴＲの正常な機能は、呼吸器および消化器組織を含む身体全体の電解質輸送の維持に重要である。ＣＦＴＲは、６個の膜貫通ヘリックスおよび１個のヌクレオチド結合ドメインをそれぞれ含む、膜貫通ドメインの反復配列を構成するタンパク質をコード化する約１４８０アミノ酸から構成される。２個の膜貫通ドメインは、チャネル活性および細胞輸送を制御する、複数のリン酸化部位を有する、大きな極性調節性（Ｒ）−ドメインにより結合する。

【0006】

ＣＦＴＲをコードする遺伝子は、同定され、配列決定されている（Gregory, R. J. et al. (1990) Nature 347:382−386; Rich, D. P. et al. (1990) Nature 347:358−362；Riordan, J. R. et al. (1989) Science 245:1066−1073を参照のこと）。この遺伝子の欠失は、ＣＦＴＲの変異をもたらし、ヒトにおける最もよく見られる致死的遺伝疾患である嚢胞性線維症（“ＣＦ”）をもたらす。嚢胞性線維症は、合衆国においておよそ２，５００名につき１名の幼児に影響を与える。全アメリカ合衆国民中、１千万名程度までの人々が、疾患の影響を現すことなく、１コピーの欠損遺伝子を有する。対照的に、２コピーのＣＦ関連遺伝子を有する個体は、慢性肺疾患を含むＣＦの、消耗性で、かつ致死的影響を受ける。

【0007】

嚢胞性線維症を有する患者において、呼吸器上皮に内生的に発現するＣＦＴＲにおける変異は、イオンおよび液体輸送の不均衡をもたらす頂端側（apical）の陰イオン分泌の低下をもたらす。その陰イオン輸送の減少は、肺における粘液貯留の増大および付随する微生物感染に寄与し、最終的にＣＦ患者の死をもたらす。呼吸器疾患に加えて、ＣＦ患者は、典型的に、消化器異常および膵臓不全を有し、治療せずに放置すると死に至る。さらに、嚢胞性線維症を有する男性の多くは不妊症であり、嚢胞性線維症を有する女性は、生殖能力が低下している。２コピーのＣＦ関連遺伝子の深刻な影響とは対照的に、１コピーのＣＦ関連遺伝子を有する個体は、コレラおよび下痢による脱水症に対して増大した耐性を呈することから、該集団内でＣＦ遺伝子が比較的高頻度であることが説明されると考えられる。

【0008】

ＣＦ染色体のＣＦＴＲ遺伝子の配列解析により、病因となる種々の変異が明らかにされている（Cutting, G. R. et al. (1990) Nature 346:366−369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870; および Kerem, B−S. et al. (1989) Science 245:1073−1080; Kerem, B−S et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447−8451）。現在までに、ＣＦ遺伝子における１０００を越える病因となる変異が同定されている（http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/）。最も一般的な変異は、ＣＦＴＲアミノ酸配列の５０８位でのフェニルアラニンの欠失であり、一般的にはΔＦ５０８−ＣＦＴＲと称される。この変異は、嚢胞性線維症の症例の約７０％で起こり、重篤な疾患と関連している。

【0009】

ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失により、形成されつつあるタンパク質の正確な折りたたみが妨げられる。この結果、変異タンパク質がＥＲを出て、細胞膜へ輸送されることが不可能となる。結果として、該膜に存在するチャンネルの数は、野生型ＣＦＴＲを発現する細胞で観察されるものより遥かに少ない。該変異は、損なわれた輸送機構に加えて、チャンネル開閉にも欠陥をもたらす。まとめると、膜におけるチャンネル数の減少および欠陥のある開閉により、上皮を通過する陰イオン輸送は減少し、イオンおよび体液輸送の欠陥を招くことになる（Quinton, P. M. (1990), FASEB J. 4: 2709−2727）。しかしながら、本発明は、膜における減少した数のΔＦ５０８−ＣＦＴＲが、野生型ＣＦＴＲより少ないが、機能的であることを示している（Dalemans et al. (1991), Nature Lond. 354: 526−528; Denning et al., 前出; Pasyk and Foskett (1995), J. Cell. Biochem. 270: 12347−50）。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲに加えて、輸送機構、合成および／またはチャネル開閉に欠陥をもたらす、他の疾患の原因となるＣＦＴＲにおける変異を上方または下方制御することにより、陰イオン分泌が改変され、疾患の進行および／または重症度も緩和され得る。

【0010】

ＣＦＴＲは陰イオンに加えて種々の分子を輸送するが、この役割（陰イオンの輸送）が、上皮を通過してイオンおよび水を輸送する重要な機構における一要素であることは明らかである。他の要素には、上皮性Ｎａ^＋チャンネル、ＥＮａＣ、Ｎａ^＋／２Ｃｌ⁻／Ｋ^＋共輸送体、Ｎａ^＋−Ｋ^＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよび基底側膜Ｋ^＋チャネルが含まれ、これらは細胞へのクロライドの取込みに関与する。

【0011】

これらの要素が共に作用して、細胞内におけるそれらの選択的発現および局在性により上皮を通過する指向性の輸送を達成する。塩化物吸収は、頂端側膜に存在するＥＮａＣおよびＣＦＴＲの協調的活性および細胞の基底膜側表面で発現されるＮａ^＋−Ｋ^＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよびＣｌ⁻チャネルにより行われる。内腔側（luminal side）からの塩化物の二次的能動輸送により、細胞内塩化物の蓄積が促され、次いでＣｌ⁻チャネルにより受動的に細胞から排出されることにより、ベクトル輸送となり得る。Ｎａ^＋／２Ｃｌ⁻／Ｋ^＋共輸送体、Ｎａ^＋−Ｋ^＋−ＡＴＰａｓｅポンプおよび基底膜側表面での基底膜Ｋ^＋チャネルおよび内腔側でのＣＦＴＲの配置を調和させることにより、内腔側でのＣＦＴＲを介した塩化物の分泌を促す。水はそれ自体能動輸送されないと考えられるため、上皮を通過するその流動は、ナトリウムおよび塩化物の大きな流動により生じた小さな経上皮浸透圧勾配に依存する。

【0012】

嚢胞性線維症に加えて、ＣＦＴＲ活性の調節は、ＣＦＴＲでの変異によって直接誘発されない他の疾患、例えば分泌性疾患およびＣＦＴＲにより仲介される他のタンパク質フォールディング病にも有益であり得る。これらには、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、角膜乾燥症、およびシェーグレン症候群が含まれるが、これらに限定されない。

【0013】

ＣＯＰＤは、進行性であり、完全には可逆性ではない気流閉塞（airflow limitation）を特徴とする。気流閉塞は、粘液過剰分泌、気腫および細気管支炎に起因する。変異体または野生型ＣＦＴＲの活性化因子は、ＣＯＰＤに共通する粘液過剰分泌および損なわれた粘膜毛様体クリアランスの治療の可能性を提供する。具体的には、ＣＦＴＲを通過する陰イオン分泌の増加によって、気道表面液への体液輸送が促され、粘液を水和し、繊毛周囲（periciliary）液の粘度を最適化し得る。これにより、粘膜毛様体クリアランスは向上し、ＣＯＰＤに伴う症状は軽減される。角膜乾燥症は、涙液産生量低下および異常な涙液膜脂質、タンパク質およびムチンプロフィールを特徴とする。角膜乾燥症には多くの原因があり、そのいくつかの例としては、加齢、レーシック眼科手術、関節炎、薬物療法、化学的熱傷／熱傷、アレルギー、ならびに例えば嚢胞性線維症およびシェーグレン症候群などの疾患が含まれる。ＣＦＴＲを介する陰イオン分泌の増加により、角膜内皮細胞および眼の周囲の分泌腺からの液体輸送が増大し、角膜水和作用が高まり得る。これは、角膜乾燥症に伴う症状を軽減する一助となり得る。シェーグレン症候群は、免疫系が、眼、口腔、皮膚、呼吸器組織、肝臓、膣、および消化管を含む体内の水分産生腺（moisture−producing gland）を攻撃する自己免疫疾患である。症状としては、眼、口腔および膣の乾燥、ならびに肺疾患が含まれる。この疾患はまた、リウマチ性関節炎、全身紅斑性狼瘡（systemic lupus）、全身性硬化症および多発性筋炎（polymypositis）／皮膚筋炎とも関係する。欠陥のあるタンパク質輸送は、治療の選択肢が制限されるため、疾患を引き起こすと考えられている。ＣＦＴＲ活性のモジュレーターは、疾患に冒された様々な臓器を水和し、随伴症状の向上を促し得る。

【0014】

上記で検討した通り、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失により、形成されつつあるタンパク質の正確な折りたたみが阻止され、その結果、この変異タンパク質がＥＲを出て、細胞膜へ輸送されることが不可能になると考えられる。結果として、細胞膜に存在する成熟タンパク質の量は不十分となり、上皮組織内での塩化物輸送は著しく低下する。事実、ＥＲ機構によるＡＢＣ輸送体の欠陥ＥＲプロセッシングというこの細胞現象は、ＣＦ疾患だけでなく、広範囲の他の単発的および遺伝的疾患の基礎原因であることが示されている。ＥＲ機構が機能不全に陥り得る２つの過程は、分解に至るタンパク質のＥＲ輸送へのカップリングの喪失によるか、またはこれらの欠損／ミスフォールディングタンパク質のＥＲ蓄積によるものである［Aridor M, et al., Nature Med., 5(7), pp 745−751 (1999); Shastry, B.S., et al., Neurochem. International, 43, pp 1−7 (2003); Rutishauser, J., et al., Swiss Med Wkly, 132, pp 211−222 (2002); Morello, JP et al., TIPS, 21, pp. 466−469 (2000); Bross P., et al., Human Mut., 14, pp. 186−198 (1999)］。前者のクラスのＥＲ機能不全に伴う疾患は、嚢胞性線維症（上記のミスフォールディングΔＦ５０８−ＣＦＴＲに起因）、遺伝性気腫（ａ１−抗トリプシンに起因；非Ｐｉｚ変異型）、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、例えばプロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、例えば家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えばアイセル疾患／偽ハーラー病、ムコ多糖症（リソソームプロセッシング酵素に起因）、サンドホッフ／テイ−サックス病（β−ヘキソサミニダーゼに起因）、クリグラー−ナジャーII型（ＵＤＰ−グルクロニル−シアル−トランスフェラーゼに起因）、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病（インスリン受容体に起因）、ラロン型小人症（成長ホルモン受容体に起因）、ミエロペルオキシダーゼ(myleoperoxidase)欠損症、原発性副甲状腺機能低下症（プレプロ副甲状腺ホルモンに起因）、黒色腫（チロシナーゼに起因）である。後者のクラスのＥＲ機能不全に伴う疾患は、グリカン糖鎖異常(glycanosis)ＣＤＧ１型、遺伝性気腫（α１−抗トリプシンに起因（ＰｉＺ変異型））、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症（Ｉ、II、IV型プロコラーゲンに起因）、遺伝性低フィブリノーゲン血症（フィブリノーゲンに起因）、ＡＣＴ欠損症（α１−抗キモトリプシンに起因）、尿崩症（ＤＩ）、中枢性ＤＩ（バソプレッシンホルモン／Ｖ２−受容体に起因）、腎性ＤＩ（アクアポリンIIに起因）、シャルコー−マリー−トゥース症候群（末梢ミエリンタンパク質２２に起因）、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病（βＡＰＰおよびプレセニリンに起因）、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺(plasy)、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害、例えばハンチントン病、脊髄小脳性運動失調Ｉ型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、歯状核赤核(dentatorubral)・淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、例えば遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病（プリオンタンパク質プロセッシング欠損に起因）、ファブリー病（リソソーム性α−ガラクトシダーゼＡに起因）およびストロイスラー−シャインカー症候群（Ｐｒｐプロセッシング欠損に起因）である。

【0015】

ＣＦＴＲ活性の上方制御に加えて、ＣＦＴＲモジュレーターによる陰イオン分泌の低下は、分泌性下痢の処置に有益であり得て、上皮水分輸送は、分泌促進物質活性化塩化物輸送の結果として劇的に増大する。この機構は、ｃＡＭＰの上昇およびＣＦＴＲの刺激を伴う。

【0016】

下痢には多くの原因があるが、過度の塩化物輸送から生じる下痢性疾患の主たる結果は全てに共通しており、脱水症、アシドーシス、成長障害および死が含まれる。

【0017】

急性および慢性下痢は、世界の多くの地域における主たる医学的問題である。下痢は、栄養失調における重大な因子であると共に５歳未満の子供の最も多い死因である（死者５００万名／年）。

【0018】

分泌性下痢はまた、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）および慢性炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の患者においては危険な状態である。毎年１６００万名の先進国から開発途上国への旅行者が下痢を発症し、下痢の症例の重症度および数は、旅行した国および地域によって様々である。

【0019】

白痢（scours）としても公知の、家畜およびペット、例えばウシ、ブタおよびウマ、ヒツジ、ヤギ、ネコおよびイヌの下痢は、これらの動物の主たる死因である。下痢は、主たる移行期、例えば離乳期または身体的運動、ならびに種々の細菌またはウイルス感染に応答して起こり得て、一般的には動物において最初の数時間以内に起こる。

【0020】

下痢の最も一般的な病原菌は、Ｋ９９線毛抗原を有する腸毒素産生性大腸菌(E.coli)（ＥＴＥＣ）である。下痢の一般的ウイルス病因には、ロタウイルスおよびコロナウイルスが含まれる。他の感染源には、特にクリプトスポリジウム、ランブル鞭毛虫およびサルモネラ等が含まれる。

【0021】

ロタウイルス感染の症状には、水様便の排泄、脱水症および衰弱が含まれる。コロナウイルスは、生まれたての動物ではさらに深刻な疾患を引き起こし、ロタウイルス感染よりも死亡率は高い。しかしながら、多くの場合、若年動物は、一時に複数のウイルス、またはウイルスおよび細菌性微生物の組合せに感染し得る。このことにより、疾患の重症度は劇的に増大する。

【0022】

従って、哺乳動物の細胞膜でのＡＢＣ輸送体の活性を調節するのに使用され得るＡＢＣ輸送体活性のモジュレーター、およびその組成物が必要とされている。

【0023】

ＡＢＣ輸送体活性のかかるモジュレーターを用いたＡＢＣ輸送体仲介疾患の処置方法が必要とされている。

【0024】

エスクビボでの哺乳動物の細胞膜におけるＡＢＣ輸送体活性の調節方法が必要とされている。

【0025】

哺乳動物の細胞膜におけるＣＦＴＲの活性を調節するのに使用され得るＣＦＴＲ活性のモジュレーターが必要とされている。

【0026】

ＣＦＴＲ活性のかかるモジュレーターを用いたＣＦＴＲ仲介疾患の処置方法が必要とされている。

【0027】

エスクビボでの哺乳動物の細胞膜におけるＣＦＴＲ活性の調節方法が必要とされている。

【発明の概要】

【0028】

発明の概要
今回、本発明の化合物、およびその薬学的に許容される組成物が、ＡＢＣ輸送体活性、特にＣＴＦＲ活性のモジュレーターとして有用であることが見出された。これらの化合物は、

【化1】

【化2】

【化3】

である。

【0029】

いくつかの態様において、該化合物は、

【化4】

である。他の態様において、該化合物は、

【化5】

である。

【0030】

さらに他の態様において、該化合物は、

【化6】

である。

【0031】

これらの化合物および薬学的に許容される組成物は、嚢胞性線維症、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、例えばプロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、例えば家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えばアイセル病／偽ハーラー病、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーII型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカン糖鎖異常ＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、中枢性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー−マリー−トゥース症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害、例えばハンチントン病、脊髄小脳性運動失調１型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、例えば遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病、ファブリー病、ストロイスラー−シャインカー症候群、ＣＯＰＤ、角膜乾燥症またはシェーグレン病を含むが、これらに限定されない種々の疾患、障害、または状態の処置または重症度の軽減に有用である。

【0032】

予期されていないことに、本発明の化合物は、治療的に有利な特性を有する。

【0033】

発明の詳細な説明
Ｉ．定義
本明細書で用いる通り、以下の定義を、他に特記しない限り適用するものとする。

【0034】

本明細書で用いる用語“ＡＢＣ輸送体”は、ＡＢＣ輸送体タンパク質または少なくとも１つの結合ドメインを含むその断片を意味し、該タンパク質またはその断片は、インビボまたはインビトロで存在する。本明細書で用いる用語“結合ドメイン”は、モジュレーターと結合し得るＡＢＣ輸送体のドメインを意味する。例えば、Hwang, T. C. et al., J. Gen. Physiol. (1998): 111(3), 477−90を参照のこと。

【0035】

本明細書で用いる用語“ＣＦＴＲ”は、嚢胞性線維症膜貫通伝導制御因子、またはΔＦ５０８ ＣＦＴＲおよびＧ５５１Ｄ ＣＦＴＲを含むが、これらに限定されない、調節活性能力を有するその変異体を意味する（ＣＦＴＲ変異については、例えば、http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/を参照のこと）。

【0036】

本明細書で用いる用語“調節”は、例えば活性の、測定可能な量での増大または低下を意味する。ＡＢＣ輸送体、例えば、ＣＦＴＲ陰イオンチャネルの活性を増大することにより、ＡＢＣ輸送体活性、例えば、ＣＦＴＲ活性を調節する化合物を、アゴニストと称する。ＡＢＣ輸送体、例えば、ＣＦＴＲ陰イオンチャネルの活性を低下することにより、ＡＢＣ輸送体活性、例えば、ＣＦＴＲ活性を調節する化合物を、アンタゴニストとする。アゴニストは、ＡＢＣ輸送体、例えばＣＦＴＲ陰イオンチャネルと相互作用し、内生リガンド結合に応答して細胞内シグナルを伝達する受容体の能力を増大する。アンタゴニストは、ＡＢＣ輸送体、例えば、ＣＦＴＲと相互作用し、そして内生リガンド（複数可）または基質（複数可）と受容体上の結合部位（複数可）に対して競合し、内生リガンド結合に応答して細胞内シグナルを伝達する受容体の能力を低下する。

【0037】

“ＡＢＣ輸送体仲介疾患を処置するかまたは重症度を低下させる”という記載は、ＡＢＣ輸送体および／またはＣＦＴＲ活性により直接的に引き起こされる疾患を処置すること、およびＡＢＣ輸送体および／またはＣＦＴＲ陰イオンチャネル活性により直接的にではなく引き起こされる疾患の症状を軽減することの両方を意味する。症状がＡＢＣ輸送体および／またはＣＦＴＲ活性により影響を受け得る疾患の例には、嚢胞性線維症、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、例えばプロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、例えば家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えばアイセル病／偽ハーラー病、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーII型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカン糖鎖異常ＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、中枢性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー−マリー−トゥース症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害、例えばハンチントン病、脊髄小脳性運動失調１型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、例えば遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病、ファブリー病、ストロイスラー−シャインカー症候群、ＣＯＰＤ、角膜乾燥症またはシェーグレン病が含まれるが、これらに限定されない。

【0038】

本発明の目的に関して、化学元素は元素周期表、CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Edに従って同定する。さらに、有機化学の一般的原理は、“Organic Chemistry”, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999および“March's Advanced Organic Chemistry”, 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley ＆ Sons, New York: 2001に記載されており、それらの全内容を引用により本明細書に包含させる。

【0039】

本明細書で記載の通り、本発明の化合物は、一般的に上記の説明または例示のように、本発明の特定のクラス、サブクラスおよび化学種により、所望により１個以上の置換基で置換されていてよい。

【0040】

本明細書で用いる用語“脂肪族”は、用語アルキル、アルケニル、アルキニルを含み、それらはそれぞれ、下記の通り所望により置換されていてよい。

【0041】

本明細書で用いる“アルキル”基は、１−１２個（例えば、１−８個、１−６個または１−４個）の炭素原子を含む飽和脂肪族炭化水素基を意味する。アルキル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘプチル、または２−エチルヘキシルが含まれるが、これらに限定されない。アルキル基は、ハロ、ホスホ、シクロ脂肪族［例えば、シクロアルキルまたはシクロアルケニル］、ヘテロシクロ脂肪族［例えば、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル］、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アシル［例えば、（脂肪族）カルボニル、（シクロ脂肪族）カルボニルまたは（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル］、ニトロ、シアノ、アミド［例えば、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、アルキルアミノカルボニル、シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロシクロアルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、またはヘテロアリールアミノカルボニル］、アミノ［例えば、脂肪族アミノ、シクロ脂肪族アミノ、またはヘテロシクロ脂肪族アミノ］、スルホニル［例えば、脂肪族−Ｓ（Ｏ）_２−］、スルフィニル、スルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、カルボキシ、カルバモイル、シクロ脂肪族オキシ、ヘテロシクロ脂肪族オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、または、ヒドロキシのような１個以上の置換基で置換されていてよい（すなわち、所望により置換されていてよい。）。置換アルキルのいくつかの例には、カルボキシアルキル（例えば、ＨＯＯＣ−アルキル、アルコキシカルボニルアルキル、およびアルキルカルボニルオキシアルキル）、シアノアルキル、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アシルアルキル、アラルキル、（アルコキシアリール）アルキル、（スルホニルアミノ）アルキル（例えば、（アルキル−Ｓ（Ｏ）_２−アミノ）アルキル）、アミノアルキル、アミドアルキル、（シクロ脂肪族）アルキル、または、ハロアルキルが含まれるが、これらに限定されない。

【0042】

本明細書で用いる“アルケニル”基は、２−１２個（例えば、２−８個、２−６個または２−４個）の炭素原子および少なくとも１個の二重結合を含む脂肪族炭素基を意味する。アルキル基同様、アルケニル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。アルケニル基の例には、アリル、イソプレニル、２−ブテニル、および２−ヘキセニルが含まれるが、これらに限定されない。アルケニル基は、所望によりハロ、ホスホ、シクロ脂肪族［例えば、シクロアルキルまたはシクロアルケニル］、ヘテロシクロ脂肪族［例えば、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル］、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アシル［例えば、（脂肪族）カルボニル、（シクロ脂肪族）カルボニル、または（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル］、ニトロ、シアノ、アミド［例えば、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、アルキルアミノカルボニル、シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロシクロアルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、またはヘテロアリールアミノカルボニル］、アミノ［例えば、脂肪族アミノ、シクロ脂肪族アミノ、ヘテロシクロ脂肪族アミノ、または脂肪族スルホニルアミノ］、スルホニル［例えば、アルキル−ＳＯ_２−、シクロ脂肪族−ＳＯ_２−、またはアリール−ＳＯ_２−］、スルフィニル、スルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、カルボキシ、カルバモイル、シクロ脂肪族オキシ、ヘテロシクロ脂肪族オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、またはヒドロキシのような１個以上の置換基で置換されていてよい。置換アルケニルのいくつかの例には、シアノアルケニル、アルコキシアルケニル、アシルアルケニル、ヒドロキシアルケニル、アラルケニル、（アルコキシアリール）アルケニル、（スルホニルアミノ）アルケニル（例えば、（アルキル−ＳＯ_２−アミノ）アルケニル）、アミノアルケニル、アミドアルケニル、（シクロ脂肪族）アルケニル、またはハロアルケニルが含まれるが、これらに限定されない。

【0043】

本明細書で用いる“アルキニル”基は、２−１２個（例えば、２―８個、２−６個または２−４個）の炭素原子および少なくとも１個の三重結合を含む脂肪族炭素基を意味する。アルキニル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。アルキニル基の例には、プロパルギルおよびブチニルが含まれるが、これに限定されない。アルキニル基は、所望によりアロイル、ヘテロアロイル、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ニトロ、カルボキシ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、スルホ、メルカプト、スルファニル［例えば、脂肪族スルファニルまたはシクロ脂肪族スルファニル］、スルフィニル［例えば、脂肪族スルフィニルまたはシクロ脂肪族スルフィニル］、スルホニル［例えば、脂肪族−ＳＯ_２−、脂肪族アミノ−ＳＯ_２−、またはシクロ脂肪族−ＳＯ_２−］、アミド［例えば、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルアミノカルボニル、ヘテロシクロアルキルアミノカルボニル、シクロアルキルカルボニルアミノ、アリールアミノカルボニル、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノまたはヘテロアリールアミノカルボニル］、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アシル［例えば、（シクロ脂肪族）カルボニルまたは（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル］、アミノ［例えば、脂肪族アミノ］、スルホキシ、オキソ、カルボキシ、カルバモイル、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ、または（ヘテロアリール）アルコキシのような１個以上の置換基で置換されていてよい。

【0044】

本明細書で用いる“アミド”は、“アミノカルボニル”および“カルボニルアミノ”の両方を包含する。単独でまたは他の基と関連して用いるとき、これらの用語は、末端に用いるとき−Ｎ（Ｒ^Ｘ）−Ｃ（Ｏ）−Ｒ^Ｙまたは−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ^Ｘ）_２、ならびに内部に用いるとき−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ^Ｘ）−または−Ｎ（Ｒ^Ｘ）−Ｃ（Ｏ）−｛ここで、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは、下記に定義の通りである。｝のようなアミド基を意味する。アミド基の例には、アルキルアミド（例えば、アルキルカルボニルアミノまたはアルキルアミノカルボニル）、（ヘテロシクロ脂肪族）アミド、（ヘテロアラルキル）アミド、（ヘテロアリール）アミド、（ヘテロシクロアルキル）アルキルアミド、アリールアミド、アラルキルアミド、（シクロアルキル）アルキルアミド、またはシクロアルキルアミドが含まれる。

【0045】

本明細書で用いる“アミノ”基は、−ＮＲ^ＸＲ^Ｙ(ここで、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは、それぞれ独立して水素、脂肪族、シクロ脂肪族、（シクロ脂肪族）脂肪族、アリール、芳香脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族、ヘテロアリール、カルボキシ、スルファニル、スルフィニル、スルホニル、（脂肪族）カルボニル、（シクロ脂肪族）カルボニル、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、アリールカルボニル、（芳香脂肪族）カルボニル、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、（ヘテロアリール）カルボニル、または（ヘテロ芳香脂肪族）カルボニルであり、各々が本明細書で定義の通りであり、そして所望により置換されていてよい。）を意味する。アミノ基の例は、アルキルアミノ、ジアルキルアミノまたはアリールアミノを含む。用語“アミノ”が末端基ではないとき（例えば、アルキルカルボニルアミノ）、それは−ＮＲ^Ｘ−（ここで、Ｒ^Ｘは、上記の定義と同じ意味を有する。）により表される。

【0046】

本明細書で用いる、単独で、または“アラルキル”、“アラルコキシ”もしくは“アリールオキシアルキル”のような大きな部分の一部として使用される“アリール”基は、単環式（例えば、フェニル）；二環式（例えば、インデニル、ナフタレニル、テトラヒドロナフチル、テトラヒドロインデニル）；および、三環式（例えば、フルオレニル、テトラヒドロフルオレニル、またはテトラヒドロアントラセニル、アントラセニル）環系｛ここで、単環式環系が芳香族性であるか、または二環式もしくは三環式環系の少なくとも１個の環が芳香族性である。｝を意味する。該二環式および三環式基には、ベンゾ縮合２−３員の炭素環式環が含まれる。例えば、ベンゾ縮合基は、２個以上のＣ_４−８炭素環式部分と縮合したフェニルを含む。アリールは、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニルまたはアルキニル］；シクロ脂肪族；（シクロ脂肪族）脂肪族；ヘテロシクロ脂肪族；（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族；アリール；ヘテロアリール；アルコキシ；（シクロ脂肪族）オキシ；（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ；アリールオキシ；ヘテロアリールオキシ；（芳香脂肪族）オキシ；（ヘテロ芳香脂肪族）オキシ；アロイル；ヘテロアロイル；アミノ；（ベンゾ縮合二環式または三環式アリールの非芳香族性炭素環式環上の）オキソ；ニトロ；カルボキシ；アミド；アシル［例えば、脂肪族カルボニル、（シクロ脂肪族）カルボニル、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、（芳香脂肪族）カルボニル、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、または（ヘテロ芳香脂肪族）カルボニル］；スルホニル［例えば、脂肪族−ＳＯ_２−またはアミノ−ＳＯ_２−］；スルフィニル［例えば、脂肪族−Ｓ（Ｏ）−またはシクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）−］；スルファニル［例えば、脂肪族−Ｓ−］；シアノ；ハロ；ヒドロキシ；メルカプト；スルホキシ；ウレア；チオウレア；スルファモイル；スルファミド；または、カルバモイルを含む１個以上の置換基で所望により置換されていてよい。あるいは、アリールは、非置換でもよい。

【0047】

置換アリールの例には、ハロアリール［例えば、モノ−、ジ（例えば、ｐ，ｍ−ジハロアリール）、および（トリハロ）アリール］；（カルボキシ）アリール［例えば、（アルコキシカルボニル）アリール、（（アラルキル）カルボニルオキシ）アリール、および（アルコキシカルボニル）アリール］；（アミド）アリール［例えば、（アミノカルボニル）アリール、（（（アルキルアミノ）アルキル）アミノカルボニル）アリール、（アルキルカルボニル）アミノアリール、（アリールアミノカルボニル）アリール、および（（（ヘテロアリール）アミノ）カルボニル）アリール］；アミノアリール［例えば、（（アルキルスルホニル）アミノ）アリールまたは（（ジアルキル）アミノ）アリール］；（シアノアルキル）アリール；（アルコキシ）アリール；（スルファモイル）アリール［例えば、（アミノスルホニル）アリール］；（アルキルスルホニル）アリール；（シアノ）アリール；（ヒドロキシアルキル）アリール；（（アルコキシ）アルキル）アリール；（ヒドロキシ）アリール、（（カルボキシ）アルキル）アリール；（（（ジアルキル）アミノ）アルキル）アリール；（ニトロアルキル）アリール；（（（アルキルスルホニル）アミノ）アルキル）アリール；（（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル）アリール；（（アルキルスルホニル）アルキル）アリール；（シアノアルキル）アリール；（ヒドロキシアルキル）アリール；（アルキルカルボニル）アリール；アルキルアリール；（トリハロアルキル）アリール；ｐ−アミノ−ｍ−アルコキシカルボニルアリール；ｐ−アミノ−ｍ−シアノアリール；ｐ−ハロ−ｍ−アミノアリール；または、（ｍ−（ヘテロシクロ脂肪族）−ｏ−（アルキル））アリールが含まれるが、これらに限定されない。

【0048】

本明細書で用いる“アラルキル”基のような“芳香脂肪族”基は、アリール基で置換されている脂肪族基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を意味する。“脂肪族”、“アルキル”および“アリール”は、本明細書中に定義されている。アラルキル基のような芳香脂肪族の例はベンジルである。

【0049】

本明細書で用いる“アラルキル”基は、アリール基で置換されているアルキル基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を意味する。“アルキル”および“アリール”は両方とも上記で定義されている。アラルキル基の例はベンジルである。アラルキルは、所望により、脂肪族［例えば、カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルまたはトリフルオロメチルのようなハロアルキルを含むアルキル、アルケニルまたはアルキニル］、シクロ脂肪族［例えば、シクロアルキルまたはシクロアルケニル］、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミド［例えば、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノまたはヘテロアラルキルカルボニルアミノ］、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、または、カルバモイルのような１個以上の置換基で置換されていてよい。

【0050】

本明細書で用いる“二環式環系”は、２環を形成する８−１２（例えば、９、１０または１１）員構造を含み、ここで、該２環は、少なくとも１個の原子を共通して有する（例えば、２個の原子が共通である）。二環式環構造は、ビシクロ脂肪族（例えば、ビシクロアルキルまたはビシクロアルケニル）、ビシクロヘテロ脂肪族、二環式アリール、および二環式ヘテロアリールを含む。

【0051】

本明細書で用いる“炭素環”または“シクロ脂肪族”基は、“シクロアルキル”基および“シクロアルケニル”基（それぞれ、下記の通りに所望により置換されていてよい。）を含む。

【0052】

本明細書で用いる“シクロアルキル”基は、３−１０個（例えば、５−１０個）の炭素原子の飽和炭素環式単環式または二環式（縮合または架橋）環を意味する。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチル、ノルボロニル、クビル、オクタヒドロ−インデニル、デカヒドロ−ナフチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．３．１］ノニル、ビシクロ［３．３．２．］デシル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、アダマンチル、または（（アミノカルボニル）シクロアルキル）シクロアルキルが含まれる。

【0053】

本明細書で用いる“シクロアルケニル”基は、１個以上の二重結合を有する３−１０個（例えば、４−８個）の炭素原子の、非芳香族性炭素環式環を意味する。シクロアルケニル基の例には、シクロペンテニル、１，４−シクロヘキサ−ジ−エニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル、ヘキサヒドロ−インデニル、オクタヒドロ−ナフチル、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、ビシクロ［２．２．２］オクテニルまたはビシクロ［３．３．１］ノネニルが含まれる。

【0054】

シクロアルキルまたはシクロアルケニル基は、所望により、ホスホ、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニル、またはアルキニル］、シクロ脂肪族、（シクロ脂肪族）脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、（芳香脂肪族）オキシ、（ヘテロ芳香脂肪族）オキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、アミド［例えば、（脂肪族）カルボニルアミノ、（シクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（アリール）カルボニルアミノ、（芳香脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロアリール）カルボニルアミノ、または（ヘテロ芳香脂肪族）カルボニルアミノ］、ニトロ、カルボキシ［例えば、ＨＯＯＣ−、アルコキシカルボニル、またはアルキルカルボニルオキシ］、アシル［例えば、（シクロ脂肪族）カルボニル、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、（芳香脂肪族）カルボニル、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、または（ヘテロ芳香脂肪族）カルボニル］、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、スルホニル［例えば、アルキル−ＳＯ_２−およびアリール−ＳＯ_２−］、スルフィニル［例えば、アルキル−Ｓ（Ｏ）−］、スルファニル［例えば、アルキル−Ｓ−］、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、またはカルバモイルのような１個以上の置換基で置換されていてよい。

【0055】

本明細書で用いる用語“ヘテロ環”または“ヘテロシクロ脂肪族”は、ヘテロシクロアルキル基およびヘテロシクロアルケニル基（それぞれ、下記の通りに所望により置換されていてよい。）を含む。

【0056】

本明細書で用いる“ヘテロシクロアルキル”基は、１個以上の環原子がヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、Ｓまたはそれらの組合せ）である、３−１０員の単環式または二環式（縮合または架橋）（例えば、５員ないし１０員の単環式または二環式)飽和環構造を意味する。ヘテロシクロアルキル基の例には、ピペリジル、ピペラジル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフリル、１，４−ジオキソラニル、１，４−ジチアニル、１，３−ジオキソラニル、オキサゾリジル、イソキサゾリジル、モルホリニル、チオモルホリル、オクタヒドロベンゾフリル、オクタヒドロクロメニル、オクタヒドロチオクロメニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロピリンジニル（octahydropyrindinyl）、デカヒドロキノリニル、オクタヒドロベンゾ［ｂ］チオフェニル（thiopheneyl）、２−オキサ−ビシクロ［２．２．２］オクチル、１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクチル、３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチル、および２，６−ジオキサ−トリシクロ［３．３．１．０^３，７］ノニルが含まれる。単環式ヘテロシクロアルキル基は、フェニル部分と縮合してテトラヒドロイソキノリンのような構造を形成していてよく、それらはヘテロアリールとして分類され得る。

【0057】

本明細書で用いる“ヘテロシクロアルケニル”基は、１個以上の二重結合を有し、そして１個以上の環原子がヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、またはＳ）である、単環式または二環式（例えば、５員ないし１０員の単環式または二環式）非芳香環構造を意味する。単環式および二環式ヘテロシクロ脂肪族は、標準化学命名法に従い命名される。

【0058】

ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニル基は、ホスホ、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニル、またはアルキニル］、シクロ脂肪族、（シクロ脂肪族）脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、（芳香脂肪族）オキシ、（ヘテロ芳香脂肪族）オキシ、アロイル、ヘテロアロイル、アミノ、アミド［例えば、（脂肪族）カルボニルアミノ、（シクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（アリール）カルボニルアミノ、（芳香脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニルアミノ、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニルアミノ、（ヘテロアリール）カルボニルアミノ、または（ヘテロ芳香脂肪族）カルボニルアミノ］、ニトロ、カルボキシ［例えば、ＨＯＯＣ−、アルコキシカルボニル、またはアルキルカルボニルオキシ］、アシル［例えば、（シクロ脂肪族）カルボニル、（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、（芳香脂肪族）カルボニル、（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル、（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル、または（ヘテロ芳香脂肪族）カルボニル］、ニトロ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、スルホニル［例えば、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニル］、スルフィニル［例えば、アルキルスルフィニル］、スルファニル［例えば、アルキルスルファニル］、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、またはカルバモイルのような１個以上の置換基で置換されていてよい。

【0059】

本明細書で用いる“ヘテロアリール”基は、４ないし１５個の環原子を有する単環式、二環式、または三環式環系を意味し、環原子の１個以上がヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｏ、Ｓ、またはそれらの組合せ）であり、そして単環式環系が芳香族性であるか、または二環式もしくは三環式環系の少なくとも１個の環が芳香族性である。ヘテロアリール基は、２〜３環を有するベンゾ縮合環系を含む。例えば、ベンゾ縮合基は、１個または２個の４員ないし８員のヘテロシクロ脂肪族部分と縮合したベンゾ（例えば、インドリジル、インドリル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、インドリニル、ベンゾ［ｂ］フリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、キノリニル、またはイソキノリニル）を含む。ヘテロアリールのいくつかの例は、アゼチジニル、ピリジル、１Ｈ−インダゾリル、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、テトラゾリル、ベンゾフリル、イソキノリニル、ベンズチアゾリル、キサンテン、チオキサンテン、フェノチアジン、ジヒドロインドール、ベンゾ［１，３］ジオキソール、ベンゾ［ｂ］フリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリル、シンノリニル、キノリル、キナゾリニル、フタラジル、キノキサリニル、イソキノリニル、４Ｈ−キノリジル、ベンゾ−１，２，５−チアジアゾリル、または１，８−ナフチリジルである。

【0060】

単環式ヘテロアリールには、フリル、チオフェニル、２Ｈ−ピロリル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、２Ｈ−ピラニル、４−Ｈ−ピラニル、ピリジル、ピリダジル、ピリミジル、ピラゾリル、ピラジル、または１，３，５−トリアジルが含まれるが、これらに限定されない。単環式ヘテロアリールは、標準化学命名法に従い命名される。

【0061】

二環式ヘテロアリールには、インドリジル、インドリル、イソインドリル、３Ｈ−インドリル、インドリニル、ベンゾ[ｂ]フリル、ベンゾ[ｂ]チオフェニル、キノリニル、イソキノリニル、インドリジル、イソインドリル、インドリル、ベンゾ［ｂ］フリル、ベクソ［ｂ］チオフェニル、インダゾリル、ベンズイミダジル、ベンズチアゾリル、プリニル、４Ｈ−キノリジル、キノリル、イソキノリル、シンノリル、フタラジル、キナゾリル（quinazolyl）、キノキサリル、１，８−ナフチリジル、またはプテリジルが含まれるが、これらに限定されない。二環式ヘテロアリールは、標準化学命名法に従い命名される。

【0062】

ヘテロアリールは、脂肪族［例えば、アルキル、アルケニル、またはアルキニル］；シクロ脂肪族；（シクロ脂肪族）脂肪族；ヘテロシクロ脂肪族；（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族；アリール；ヘテロアリール；アルコキシ；（シクロ脂肪族）オキシ；（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ；アリールオキシ；ヘテロアリールオキシ；（芳香脂肪族）オキシ；（ヘテロ芳香脂肪族）オキシ；アロイル；ヘテロアロイル；アミノ；（二環式または三環式ヘテロアリールの非芳香族性炭素環式またはヘテロ環式環上の）オキソ；カルボキシ；アミド；アシル［例えば、脂肪族カルボニル；（シクロ脂肪族）カルボニル；（（シクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル；（芳香脂肪族）カルボニル；（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル；（（ヘテロシクロ脂肪族）脂肪族）カルボニル；または、（ヘテロ芳香脂肪族）カルボニル］；スルホニル［例えば、脂肪族スルホニルまたはアミノスルホニル］；スルフィニル［例えば、脂肪族スルフィニル］；スルファニル［例えば、脂肪族スルファニル］；ニトロ；シアノ；ハロ；ヒドロキシ；メルカプト；スルホキシ；ウレア；チオウレア；スルファモイル；スルファミド；またはカルバモイルのような１個以上の置換基で置換されていてよい。あるいは、ヘテロアリールは非置換でもよい。

【0063】

置換ヘテロアリールの例には、（ハロ）ヘテロアリール［例えば、モノ−およびジ−（ハロ）ヘテロアリール］；（カルボキシ）ヘテロアリール［例えば、（アルコキシカルボニル）ヘテロアリール］；シアノヘテロアリール；アミノヘテロアリール［例えば、（（アルキルスルホニル）アミノ）ヘテロアリールおよび（（ジアルキル）アミノ）ヘテロアリール］；（アミド）ヘテロアリール［例えば、アミノカルボニルヘテロアリール、（（アルキルカルボニル）アミノ）ヘテロアリール、（（（（アルキル）アミノ）アルキル）アミノカルボニル）ヘテロアリール、（（（ヘテロアリール）アミノ）カルボニル）ヘテロアリール、（（ヘテロシクロ脂肪族）カルボニル）ヘテロアリール、および（（アルキルカルボニル）アミノ）ヘテロアリール］；（シアノアルキル）ヘテロアリール；（アルコキシ）ヘテロアリール；（スルファモイル）ヘテロアリール［例えば、（アミノスルホニル）ヘテロアリール］；（スルホニル）ヘテロアリール［例えば、（アルキルスルホニル）ヘテロアリール］；（ヒドロキシアルキル）ヘテロアリール；（アルコキシアルキル）ヘテロアリール；（ヒドロキシ）ヘテロアリール；（（カルボキシ）アルキル）ヘテロアリール；（（（ジアルキル）アミノ）アルキル）ヘテロアリール；（ヘテロシクロ脂肪族）ヘテロアリール；（シクロ脂肪族）ヘテロアリール；（ニトロアルキル）ヘテロアリール；（（（アルキルスルホニル）アミノ）アルキル）ヘテロアリール；（（アルキルスルホニル）アルキル）ヘテロアリール；（シアノアルキル）ヘテロアリール；（アシル）ヘテロアリール［例えば、（アルキルカルボニル）ヘテロアリール］；（アルキル）ヘテロアリール、および（ハロアルキル）ヘテロアリール［例えば、トリハロアルキルヘテロアリール］が含まれるが、これらに限定されない。

【0064】

本明細書で用いる“ヘテロ芳香脂肪族”基（例えば、ヘテロアラルキル基）は、ヘテロアリール基で置換されている脂肪族基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を意味する。“脂肪族”、“アルキル”および“ヘテロアリール”は、上記で定義されている。

【0065】

本明細書で用いる“ヘテロアラルキル”基は、ヘテロアリール基で置換されているアルキル基（例えば、Ｃ_１−４アルキル基）を意味する。“アルキル”および“ヘテロアリール”は両方とも上記で定義されている。ヘテロアラルキルは、所望により、アルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキル、およびトリフルオロメチルのようなハロアルキルを含む）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、またはカルバモイルのような１個以上の置換基で置換されていてよい。

【0066】

本明細書で用いる“環式部分”および“環式基”は、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、アリールまたはヘテロアリール（それぞれ、上記で定義されている。）を含む、単環式、二環式、および三環式環系を意味する。

【0067】

本明細書で用いる“架橋二環式環系”は、二環式ヘテロ環式脂肪族環系または二環式シクロ脂肪族環系（該環は架橋されている。）を意味する。架橋二環式環系の例には、アダマンタニル、ノルボロニル（norbornanyl）、ビシクロ［３．２．１］オクチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．３．１］ノニル、ビシクロ［３．２．３］ノニル、２−オキサビシクロ［２．２．２］オクチル、１−アザ−ビシクロ［２．２．２］オクチル、３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクチル、および２，６−ジオキサ−トリシクロ［３．３．１．０^３，７］ノニルが含まれるが、これらに限定されない。架橋二環式環系は、所望によりアルキル（カルボキシアルキル、ヒドロキシアルキルおよびのトリフルオロメチルようなハロアルキル）、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、ヘテロシクロアルキル、（ヘテロシクロアルキル）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アラルキルオキシ、ヘテロアラルキルオキシ、アロイル、ヘテロアロイル、ニトロ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アルキルカルボニルオキシ、アミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、シクロアルキルカルボニルアミノ、（シクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アラルキルカルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキル）カルボニルアミノ、（ヘテロシクロアルキルアルキル）カルボニルアミノ、ヘテロアリールカルボニルアミノ、ヘテロアラルキルカルボニルアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシ、アシル、メルカプト、アルキルスルファニル、スルホキシ、ウレア、チオウレア、スルファモイル、スルファミド、オキソ、またはカルバモイルのような１個以上の置換基で置換されていてよい。

【0068】

本明細書で用いる“アシル”基は、ホルミル基またはＲ^Ｘ−Ｃ（Ｏ）−（例えば、−アルキル−Ｃ（Ｏ）−、“アルキルカルボニル”とも称する）を意味し、ここで、Ｒ^Ｘおよび“アルキル”は、上記に定義の通りである。アセチルおよびピバロイルは、アシル基の例である。

【0069】

本明細書で用いる“アロイル”または“ヘテロアロイル”は、アリール−Ｃ（Ｏ）−またはヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−を意味する。アロイルまたはヘテロアロイルのアリールおよびヘテロアリール部分は、上記の通り所望により置換されていてよい。

【0070】

本明細書で用いる“アルコキシ”基は、アルキル−Ｏ−基（“アルキル”は上記で定義の通りである。）を意味する。

【0071】

本明細書で用いる“カルバモイル”基は、構造−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ^ＸＲ^Ｙまたは−ＮＲ^Ｘ−ＣＯ−Ｏ−Ｒ^Ｚ（式中、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは上記で定義の通りであり、そしてＲ^Ｚは脂肪族、アリール、芳香脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ヘテロアリール、またはヘテロ芳香脂肪族であり得る。）を有する基を意味する。

【0072】

本明細書で用いる“カルボキシ”基は、末端基として用いるとき、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＲ^Ｘ、−ＯＣ（Ｏ）Ｈ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^Ｘを意味し；または、内部基として用いるとき、−ＯＣ（Ｏ）−または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−を意味する。

【0073】

本明細書で用いる“ハロ脂肪族“基は、１−３個のハロゲンで置換された脂肪族基を意味する。例えば、用語ハロアルキルは基−ＣＦ_３を含む。

【0074】

本明細書で用いる“メルカプト”基は、−ＳＨを意味する。

【0075】

本明細書で用いる“スルホ”基は、末端に用いるとき−ＳＯ_３Ｈまたは−ＳＯ_３Ｒ^Ｘを意味し、または内部に用いるとき−Ｓ（Ｏ）_３−を意味する。

【0076】

本明細書で用いる“スルファミド”基は、末端に用いるとき構造−ＮＲ^Ｘ−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^ＹＲ^Ｚを意味し、内部に用いるとき−ＮＲ^Ｘ−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^Ｙ−を意味する（式中、Ｒ^Ｘ、Ｒ^ＹおよびＲ^Ｚは、上記で定義の意味を有する。）。

【0077】

本明細書で用いる“スルホンアミド”基は、末端に用いるとき構造−Ｓ(Ｏ)_２−ＮＲ^ＸＲ^Ｙまたは−ＮＲ^Ｘ−Ｓ(Ｏ)_２−Ｒ^Ｚを意味し；または、内部に用いるとき−Ｓ（Ｏ）_２−ＮＲ^Ｘ−もしくは−ＮＲ^Ｘ−Ｓ（Ｏ）_２−を意味する（式中、Ｒ^Ｘ、Ｒ^Ｙ、およびＲ^Ｚは、上記で定義されている。）。

【0078】

本明細書で用いる“スルファニル”基は、末端に用いるとき−Ｓ−Ｒ^Ｘを意味し、内部に用いるとき−Ｓ−を意味する（式中、Ｒ^Ｘは上記で定義されている。）。スルファニルの例は、脂肪族−Ｓ−、シクロ脂肪族−Ｓ−、アリール−Ｓ−等を含む。

【0079】

本明細書で用いる“スルフィニル”基は、末端に用いるとき−Ｓ（Ｏ）−Ｒ^Ｘを意味し、内部に用いるとき−Ｓ（Ｏ）−を意味する（式中、Ｒ^Ｘは上記で定義されている。）。スルフィニル基の例は、脂肪族−Ｓ（Ｏ）−、アリール−Ｓ（Ｏ）−、（シクロ脂肪族（脂肪族））−Ｓ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｓ（Ｏ）−、ヘテロシクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）−、ヘテロアリール−Ｓ（Ｏ）−等を含む。

【0080】

本明細書で用いる“スルホニル”基は、末端に用いるとき−Ｓ（Ｏ）_２−Ｒ^Ｘを意味し、内部に用いるとき−Ｓ（Ｏ）_２−を意味する（式中、Ｒ^Ｘは上記で定義されている。）。スルホニル基の例は、脂肪族−Ｓ（Ｏ）_２−、アリール−Ｓ（Ｏ）_２−、（シクロ脂肪族（脂肪族））−Ｓ（Ｏ）_２−、シクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）_２−、ヘテロシクロ脂肪族−Ｓ（Ｏ）_２−、ヘテロアリール−Ｓ（Ｏ）_２−、（シクロ脂肪族（アミド（脂肪族）））−Ｓ（Ｏ）_２−等を含む。

【0081】

本明細書で用いる“スルホキシ”基は、末端で用いるとき−Ｏ−ＳＯ−Ｒ^Ｘまたは−ＳＯ−Ｏ−Ｒ^Ｘを意味し、内部に用いるとき−Ｏ−Ｓ（Ｏ）−または−Ｓ（Ｏ）−Ｏ−を意味する（式中、Ｒ^Ｘは上記で定義されている。）。

【0082】

本明細書で用いる“ハロゲン”または“ハロ”基は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。

【0083】

本明細書で用いる、単独でまたは他の基と関連して用いられる、用語カルボキシを包含する“アルコキシカルボニル”は、アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−のような基を意味する。

【0084】

本明細書で用いる“アルコキシアルキル”は、アルキル−Ｏ−アルキル−（ここで、アルキルは、上記で定義されている。）のようなアルキル基を意味する。

【0085】

本明細書で用いる“カルボニル”は−Ｃ（Ｏ）−を意味する。

【0086】

本明細書で用いる“オキソ”は＝Ｏを意味する。

【0087】

本明細書で用いる“ホスホ”は、ホスフィナートおよびホスホナートを意味する。ホスフィナートおよびホスホナートの例には、−Ｐ（Ｏ）（Ｒ^Ｐ）_２〔式中、Ｒ^Ｐは、脂肪族、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、（シクロ脂肪族）オキシ、（ヘテロシクロ脂肪族）オキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族またはアミノである。〕が含まれる。

【0088】

本明細書で用いる“アミノアルキル”は構造（Ｒ^Ｘ）_２Ｎ−アルキル−を意味する。

【0089】

本明細書で用いる“シアノアルキル”は構造（ＮＣ）−アルキル−を意味する。

【0090】

本明細書で用いる“ウレア”基は、構造−ＮＲ^Ｘ−ＣＯ−ＮＲ^ＹＲ^Ｚを意味し、“チオウレア”基は、末端に用いるとき構造−ＮＲ^Ｘ−Ｃ（Ｓ）−ＮＲ^ＹＲ^Ｚを意味し、内部に用いるとき構造−ＮＲ^Ｘ−ＣＯ−ＮＲ^Ｙ−または−ＮＲ^Ｘ−ＣＳ−ＮＲ^Ｙ−を意味し、ここでＲ^Ｘ、Ｒ^Ｙ、およびＲ^Ｚは、上記で定義されている。

【0091】

本明細書で用いる“グアニジン”基は、構造−Ｎ＝Ｃ（Ｎ（Ｒ^ＸＲ^Ｙ））Ｎ（Ｒ^ＸＲ^Ｙ）または−ＮＲ^Ｘ−Ｃ（＝ＮＲ^Ｘ）ＮＲ^ＸＲ^Ｙ｛式中、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは、上記で定義されている。｝を意味する。

【0092】

本明細書で用いる用語“アミジノ”基は、構造−Ｃ＝（ＮＲ^Ｘ）Ｎ（Ｒ^ＸＲ^Ｙ）｛式中、Ｒ^ＸおよびＲ^Ｙは、上記で定義されている。｝を意味する。

【0093】

一般に、用語“ビシナル”は、複数の置換基が隣接炭素原子に結合している、２個以上の炭素原子を含む基上の置換基の配置を意味する。

【0094】

一般に、用語“ジェミナル”は、複数の置換基が同じ炭素原子に結合している、２個以上の炭素原子を含む基上の置換基の配置を意味する。

【0095】

用語“末端に”および“内部に”は、置換基内の基の位置を意味する。基は、該基が、置換基の末端に存在し、他の残りの化学構造にさらに結合しないとき“末端”である。カルボキシアルキル、すなわちＲ^ＸＯ（Ｏ）Ｃ−アルキルは、末端で用いるカルボキシ基の例である。基は、該基が、化学構造の置換基の中間に存在するとき“内部”である。アルキルカルボキシ（例えば、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−またはアルキル−ＯＣ（Ｏ）−）およびアルキルカルボキシアリール（例えば、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アリール−またはアルキル−Ｏ（ＣＯ）−アリール−）は、内部で用いるカルボキシ基の例である。

【0096】

本明細書で用いる“脂肪族鎖”は、分枝鎖または直鎖脂肪族基（例えば、アルキル基、アルケニル基、またはアルキニル基)を意味する。直鎖脂肪族鎖は、構造−[ＣＨ_２]_ｖ−（ここで、ｖは１−１２である。）を有する。分枝鎖脂肪族鎖は、１個以上の脂肪族基で置換されている直鎖脂肪族鎖である。分枝鎖脂肪族鎖は、構造−[ＣＱＱ]_ｖ−（ここで、Ｑは、独立して、水素または脂肪族基である；しかしながら、Ｑは、少なくとも一例において、脂肪族基でなければならない。）を有する。用語脂肪族鎖は、アルキル鎖、アルケニル鎖、およびアルキニル鎖を含み、ここでアルキル、アルケニル、およびアルキニルは上記で定義されている。

【0097】

“所望により置換されていてよい”という記載は、“置換または非置換”という記載と互換的に用いられる。本明細書に記載の通り、本発明の化合物は、一般的に上記の説明または例示のように、本発明の特定のクラス、サブクラスおよび化学種により、所望により１個以上の置換基で置換されていてよい。本明細書に記載の通り、本明細書に記載の式に包含される可変基Ｒ_１、Ｒ_２、およびＲ_３ならびに他の可変基は、アルキルおよびアリールのような特定の基を含む。他に特記されない限り、そこに包含される可変基Ｒ_１、Ｒ_２、およびＲ_３、ならびに他の可変基についての特定の基はそれぞれ、所望により本明細書に記載の１個以上の置換基で置換されていてよい。特定の基の置換基はそれぞれ、所望により１ないし３個の、ハロ、シアノ、オキソ、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、アリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ヘテロアリール、ハロアルキル、およびアルキルでさらに置換されていてよい。例えば、アルキル基は、アルキルスルファニルで置換されていてよく、該アルキルスルファニルは、所望により１ないし３個の、ハロ、シアノ、オキソ、アルコキシ、ヒドロキシ、アミノ、ニトロ、アリール、ハロアルキル、およびアルキルで置換されていてよい。さらなる例として、（シクロアルキル）カルボニルアミノのシクロアルキル部分は、所望により１ないし３個のハロ、シアノ、アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、ハロアルキルおよびアルキルで置換されていてよい。２個のアルコキシ基が同じ原子または隣接原子に結合するとき、２個のアルコキシ基は、それらが結合する原子（複数可）と一体と成って環を形成し得る。

【0098】

一般に、用語“置換”は、用語“所望により”が前にあってもなくても、所定の構造上の水素ラジカルの、特定の置換基のラジカルでの置換を意味する。特定の置換基は、定義については上記の通りであり、各化合物およびその実施例については下記の通りである。他に特記しない限り、所望により置換されていてよい基は、該基の各置換可能な位置に置換基を有してよく、そして、所定の構造において２個以上の位置を、特定の基から選択された２個以上の置換基で置換されていてよく、該置換基は、全ての位置で同一であっても異なっていてもよい。ヘテロシクロアルキルのような環置換基は、シクロアルキルのような他の環と結合して、スピロ二環式環系を形成可能であり、例えば、両方の環が共通原子を共有する。当業者には理解され得る通り、本発明により想定される置換基の組合せは、安定なまたは化学的に実現可能な化合物の形成をもたらす組合せである。

【0099】

本明細書で用いる“安定なまたは化学的に実現可能な”という記載は、それらの製造、検出、および好ましくはそれらの回収、精製、および本明細書に開示の目的の１つ以上のための使用を可能にする条件に付されたときに、実質的に変わらない化合物を意味する。ある態様において、安定な化合物または化学的に実現可能な化合物は、４０℃以下の温度で、湿気または他の化学的反応条件の非存在下に維持したとき、少なくとも１週間実質的に変わらないものである。

【0100】

本明細書で用いる“有効量”は、処置する患者に対して治療的効果を与えるのに必要な量として定義され、典型的に患者の年齢、体表面積、体重、および状態に基づき決定される。動物およびヒトの投与量の相互関係（体表面積の平方メートルあたりのミリグラムに基づく）は、Freireich et al., Cancer Chemother. Rep., 50:219(1966) に記載されている。体表面積は、患者の身長および体重からおおよそ決定できる。例えば、Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardsley, New York, 537(1970)を参照のこと。本明細書で用いる“患者”は、ヒトを含む哺乳動物を意味する。

【0101】

他に特記しない限り、本明細書に記載の構造は、該構造の全ての異性体（例えば、エナンチオマー、ジアステレオマー、および幾何（または配座））形態；例えば、各不斉中心に対するＲおよびＳ配置、(Ｚ)および(Ｅ)二重結合異性体、ならびに(Ｚ)および(Ｅ)配座異性体を含むことも意図する。故に、本発明化合物の１個の立体化学的異性体ならびにエナンチオマー、ジアステレオマー、および幾何（または配座）混合物は、本発明の範囲内である。他に特記しない限り、本発明の化合物の全ての互変異性体形態は本発明の範囲内である。加えて、他に特記しない限り、本明細書に記載の構造はまた、１個以上の同位体富化原子の存在によってのみ異なる化合物を含むことも意図する。例えば、水素の重水素またはトリチウムによる置換、または炭素の^１３Ｃ−または^１４Ｃ−富化炭素による置換以外の本発明構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。かかる化合物は、例えば、生物学的アッセイにおける分析ツールまたはプローブとして、または治療剤として有用である。

【0102】

本発明の化合物は、ＡＢＣ輸送体のモジュレーターとして有用であり、ＡＢＣ輸送体仲介疾患の処置において有用である。

【0103】

ＩＩ．化合物
本発明の化合物は、以下の化合物である。

【化7】

【化8】

【0104】

別の局面において、本発明は、（ｉ）本発明の化合物；および、（ｉｉ）薬学的に許容される担体、を含む医薬組成物に関する。別の態様において、該組成物は、粘液溶解薬、気管支拡張薬、抗生物質、抗感染剤、抗炎症剤、ＣＦＴＲ修正剤（corrector）、または栄養剤から選択される追加薬剤を含む。別の態様において、該組成物はさらに、２００５年６月２４日出願の米国公開特許公報２００６／００７４０７５として刊行された米国特許出願第１１／１６５，８１８号であって、その内容全体が引用により本明細書に包含されるものに開示の化合物から選択される追加薬剤を含む。別の態様において、該組成物はさらに、Ｎ−（５−ヒドロキシ−２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニル）−４−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−カルボキサミドを含む。これらの組成物は、嚢胞性線維症を含む下記の疾患の処置に有用である。これらの組成物はまた、下記のキットに有用である。

【0105】

別の局面において、本発明は、細胞膜中の機能的ＡＢＣ輸送体の数を増大する方法であって、該細胞と以下の化合物

【化9】

【化10】

を接触させる工程を含む方法に関する。

【0106】

本方法の一態様において、該状態、疾患または障害は、嚢胞性線維症、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、例えばプロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、例えば家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えばアイセル病／偽ハーラー病、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーII型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ(myleoperoxidase)欠損症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカン糖鎖異常(glycanosis)ＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ｄｉ）、中枢性ｄｉ、腎性ＤＩ、シャルコー−マリー−トゥース症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害、例えばハンチントン病、脊髄小脳性運動失調１型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、例えば遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病、ファブリー病、ストロイスラー−シャインカー疾患、ＣＯＰＤ、角膜乾燥症、およびシェーグレン症候群から選択される。

【0107】

別の局面において、本発明は、インビトロまたはインビボで生物学的試料におけるＡＢＣ輸送体またはその断片の活性を測定するのに用いるためのキットであって、（ｉ）以下から選択される化合物を含む第一の組成物

【化11】

【化12】

；ならびに、（ｉｉ）ａ）該組成物を生物学的試料と接触させるための指示書；および
ｂ）該ＡＢＣ輸送体またはその断片の活性を測定するための指示書
を含む、キットに関する。

【0108】

一態様において、該キットは、ａ）追加組成物を生物学的試料と接触させるための指示書；ｂ）該ＡＢＣ輸送体またはその断片の活性を、該追加化合物の存在下で測定するための指示書；および、ｃ）追加化合物の存在下における該ＡＢＣ輸送体の活性を、第一の組成物の存在下におけるＡＢＣ輸送体の密度と比較するための指示書をさらに含む。

【0109】

一態様において、該キットをＣＦＴＲの密度を測定するために用いる。

【0110】

上記の全ての局面の任意の態様において、化合物は、

【化13】

である。

【0111】

上記の全ての局面の他の態様において、化合物は、

【化14】

である。

【0112】

上記の全ての局面のさらに他の態様において、化合物は、

【化15】

である。

【0113】

ＩＶ．一般的合成スキーム
本発明の化合物は、公知の方法により、市販されているかまたは公知の出発物質から容易に合成され得る。本発明の化合物を製造する合成方法の例を本明細書に記載する。

【0114】

Ｖ．製剤、投与、および使用
従って、本発明の別の局面において、薬学的に許容される組成物を提供し、これらの組成物は、本明細書に記載の何れかの化合物を含み、そして所望により薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含んでいてよい。任意の態様において、これらの組成物は、所望により１個以上の追加治療剤をさらに含んでいてよい。

【0115】

本発明の任意の化合物は、処置のために遊離形で存在し得るか、または適当なとき、その薬学的に許容される誘導体またはプロドラッグとして存在し得ることも理解され得る。本発明に従い、薬学的に許容される誘導体またはプロドラッグは、必要な患者への投与により、直接的または間接的に、他に本明細書に記載がない化合物、またはその代謝物もしくは残基を提供できる、薬学的に許容される塩、エステル、かかるエステルの塩、または何らかの他の付加物もしくは誘導体を含むが、これらに限定されない。

【0116】

本明細書で用いる用語“薬学的に許容される塩”は、医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答等を伴わずに、ヒトおよび下等動物の組織との接触に用いるのに適し、適当な利益／リスク比に相応する塩を意味する。“薬学的に許容される塩”は、レシピエントへの投与により、本発明の化合物またはその阻害活性代謝物もしくは残基を直接的または間接的に提供できる、本発明の全ての非毒性塩またはエステルの塩を意味する。

【0117】

薬学的に許容される塩は、当技術分野でよく知られている。例えば、薬学的に許容される塩は、S. M. Bergeらの、引用により本明細書中に包含するJ. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1−19に詳細に記載される。本発明の化合物の薬学的に許容される塩類は、適当な無機および有機の酸および塩基由来のものを含む。薬学的に許容される、非毒性の酸付加塩の例は、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸と、または有機酸、例えば酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸と形成されるアミノ基の塩、または当技術分野で用いられる他の方法、例えばイオン交換法を用いて形成される塩である。他の薬学的に許容される塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、二グルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸、パモ酸塩(palmoate)、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピコリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエン硫酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などを含む。適当な塩基由来の塩は、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびＮ^＋（Ｃ_１−４アルキル）_４塩を含む。本発明はまた、本発明の化合物の何れかの塩基性窒素含有基の四級化を想定している。水もしくは油可溶性または分散性生成物を、そのような四級化により得ることができる。典型的アルカリまたはアルカリ土類金属塩は、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等を含む。さらなる薬学的に許容される塩は、適当なとき、非毒性アンモニウム、四級アンモニウム、およびハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホン酸塩およびアリールスルホン酸塩のような、対イオンを用いて形成されるアミンカチオンを含む。

【0118】

上記の通り、本発明の薬学的に許容される組成物は、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルをさらに含み、本明細書で用いる通り、それらは、何れかおよび全ての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散体または懸濁液助剤、所望の特定の投与量形態に適する、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、防腐剤、固体結合剤、滑剤等を含む。Remington’s Pharmaceutical Sciences、第６版、E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)は、薬学的に許容される組成物の製剤に用いる種々の担体およびそれらの製造のための公知の技術を開示する。何れかの常套的担体媒体の場合以外は、本発明の化合物と不適合であり、例えば何らかの望ましくない生物学的効果を生じるか、または他に、薬学的に許容される組成物の何らかの他の成分（複数可）と有害な方法で相互作用し、その使用は、本発明の範囲内に意図される。薬学的に許容される担体として機能し得る物質のいくつかの例は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、緩衝物質、例えばホスフェート、グリシン、ソルビン酸、またはソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分的グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、蝋、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、羊毛脂、糖類、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース；デンプン類、例えばトウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン；セルロースおよびその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；粉末化トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えばカカオバターおよび坐薬ワックス；油類、例えばピーナッツ油、綿実油；サフラワー油；ゴマ油；オリーブ油；トウモロコシ油およびダイズ油；グリコール、例えばプロピレングリコールまたはポリエチレングリコール；エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；アルギン酸；発熱物質不含有水；等張食塩水；リンゲル溶液；エチルアルコール、およびリン酸緩衝溶液、ならびに他の非毒性適合性滑剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウム、ならびに製剤業者の判断に従い組成物中に存在してもよい着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤および香料、防腐剤および抗酸化剤を含むが、これらに限定されない。

【0119】

さらに別の局面において、本発明は、ＡＢＣ輸送体活性が関係する状態、疾患または障害の処置方法を提供する。任意の態様において、本発明は、ＡＢＣ輸送体活性の欠失が関係する状態、疾患、または障害の処置方法であって、３０８−３１２、３１３、３１５、３１６、３１８、３２０および３２２から選択される化合物を含む組成物を、それを必要とする対象、好ましくは哺乳動物に投与することを含む方法を提供する。

【0120】

任意の好ましい態様において、本発明は、嚢胞性線維症、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、例えばプロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、例えば家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えばアイセル病／偽ハーラー病、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーII型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカン糖鎖異常ＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、中枢性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー−マリー−トゥース症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害、例えばハンチントン病、脊髄小脳性運動失調１型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、例えば遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病（プリオンタンパク質プロセシング異常による）、ファブリー病、ストロイスラー−シャインカー疾患、分泌性下痢、多嚢胞性腎臓疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、角膜乾燥症、およびシェーグレン症候群の処置方法であって、３０８−３１２、３１３、３１５、３１６、３１８、３２０および３２２から選択される化合物、または上記のその好ましい態様を含む組成物の有効量を、該哺乳動物に投与する工程を含む方法を提供する。

【0121】

別の好ましい態様に従い、本発明は、３０８−３１２、３１３、３１５、３１６、３１８、３２０および３２２から選択される化合物、または上記のその好ましい態様を含む組成物の有効量を該哺乳動物に投与する工程を含む、嚢胞性線維症の処置方法を提供する。

【0122】

本発明に従い、化合物または薬学的に許容される組成物の“有効量”は、嚢胞性線維症、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、例えばプロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、例えば家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えばアイセル病／偽ハーラー病、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーII型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカン糖鎖異常ＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、中枢性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー−マリー−トゥース症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害、例えばハンチントン病、脊髄小脳性運動失調１型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、例えば遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病、ファブリー病、ストロイスラー−シャインカー疾患、分泌性下痢、多嚢胞性腎臓疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、角膜乾燥症、およびシェーグレン症候群の１種以上の処置、またはその重症度の軽減に有効な量である。

【0123】

本発明の方法に従い、化合物および組成物を、嚢胞性線維症、遺伝性気腫、遺伝性ヘモクロマトーシス、凝血−線維素溶解欠損症、例えばプロテインＣ欠乏症、１型遺伝性血管浮腫、脂質代謝異常症、例えば家族性高コレステロール血症、１型カイロミクロン血症、無βリポタンパク血症、リソソーム蓄積疾患、例えばアイセル病／偽ハーラー病、ムコ多糖症、サンドホッフ／テイ−サックス病、クリグラー−ナジャーII型、多発性内分泌腺症／高インスリン血症、真性糖尿病、ラロン型小人症、ミエロペルオキシダーゼ欠損症、原発性副甲状腺機能低下症、黒色腫、グリカン糖鎖異常ＣＤＧ１型、先天性甲状腺機能亢進症、骨形成不全症、遺伝性低フィブリノーゲン血症、ＡＣＴ欠損症、尿崩症（ＤＩ）、中枢性ＤＩ、腎性ＤＩ、シャルコー−マリー−トゥース症候群、ペリツェーウス−メルツバッヒャー病、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、進行性核上性麻痺、ピック病、いくつかのポリグルタミン神経障害、例えばハンチントン病、脊髄小脳性運動失調１型、脊髄性および延髄性筋萎縮症、淡蒼球ルイ体萎縮症、および筋緊張性ジストロフィー、ならびに海綿状脳障害、例えば遺伝性クロイツフェルト−ヤコブ病、ファブリー病、ストロイスラー−シャインカー疾患、分泌性下痢、多嚢胞性腎臓疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、角膜乾燥症、およびシェーグレン症候群の１種以上の処置、または重症度の軽減に有効な何れかの量および何れかの投与経路を用いて投与し得る。

【0124】

必要とされる正確な量は、対象の種、年齢、および全身状態、感染の重症度、特定の薬剤、その投与方法などによって、対象によって変わり得る。本発明の化合物は、好ましくは、投与を容易にするための単位投与量形態、および単一の投与量に製剤される。本明細書で用いる表現“単位投与量形態”は、処置すべき患者に適当な、物理的に別個の単位薬剤を意味する。しかしながら、本発明の化合物および組成物の一日の総利用量は、医学的判断の範囲内で担当医により決定され得ることが理解され得る。何れかの特定の患者または生物についての特定の有効投与量レベルは、処置される障害および障害の重症度；用いる特定の化合物の活性；用いる特定の組成物；患者の年齢、体重、全身的健康状態、性別および食生活；投与時間、投与経路、および用いる特定の化合物の排出速度；処置期間；用いる特定の化合物と組合せで、または同時に使用する薬剤類、ならびに薬学分野で公知のそのような因子を含む種々の因子によって変化し得る。本明細書で用いる用語“患者”は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。

【0125】

本発明の薬学的に許容される組成物は、ヒトおよび他の動物に、処置する感染の重症度に応じて、経口的、経直腸的、非経腸的、嚢内（intracisternally）、膣内、腹腔内、局所的（粉末、軟膏または液滴として）、頬内（bucally）に、口もしくは鼻スプレーなどとして投与され得る。任意の態様において、本発明の化合物を、所望の治療効果を得るために、１日当たり、対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇないし約５０ｍｇ、好ましくは約１ｍｇないし約２５ｍｇの投与量レベルで、１日１回以上、経口的または非経腸的に投与し得る。

【0126】

経口投与のための液体投与量形態は、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルを含むが、これらに限定されない。活性化合物に加えて、液体投与量形態は、当技術分野で常用される不活性希釈剤、例えば水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレングリコール、１,３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油類（特に、綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ひまし油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物を含み得る。不活性希釈剤以外に、経口組成物はまた、アジュバント、例えば湿潤剤、乳化および懸濁剤、甘味料、香味料および香料を含み得る。

【0127】

注射可能調製物、例えば滅菌注射可能水溶液または油性懸濁液は、適当な分散または湿潤剤および懸濁化剤を用いる公知技術にしたがって製剤され得る。滅菌注射可能製剤はまた、非毒性の非経腸的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射可能溶液、懸濁液またはエマルジョン、例えば１,３−ブタンジオール中の溶液でもあり得る。使用可能な許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液、Ｕ.Ｓ.Ｐ.および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、好都合には滅菌固定油が溶媒または懸濁媒体として使用される。この目的のために、合成モノ−またはジグリセリドを含む低刺激の固定油が使用され得る。さらに、脂肪酸、例えばオレイン酸が注射可能液の製造に使用される。

【0128】

注射可能製剤は、例えば、除菌フィルターでの濾過、または使用前に滅菌水または他の無菌注射可能媒体に溶解または分散され得る滅菌固体組成物形態で滅菌剤を組み込むことにより滅菌され得る。

【0129】

本発明の化合物の効果を長引かせるために、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅らせるのがしばしば望ましい。これは、水難溶性の結晶性またはアモルファス材料の液体懸濁液の使用により達成され得る。また、化合物の吸収速度は、その溶解速度に左右され、その溶解速度は結晶の大きさおよび結晶形態に左右され得る。あるいは、化合物を油性ビヒクルに溶解または懸濁することにより、経腸投与化合物形態の吸収を遅らせる。注射可能デポー形態は、生物分解性ポリマー、例えばポリラクチド−ポリグリコリドで化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成させることにより製造される。ポリマーに対する化合物の割合および用いる特定ポリマーの性質によって、化合物の放出速度は制御され得る。他の生物分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）がある。デポー形注射可能製剤はまた、身体組織と適合し得るリポソームまたはマイクロエマルジョンに化合物を封入することにより製造される。

【0130】

直腸または膣投与用組成物は、好ましくは、環境温度では固体であるが体温では液体であるため、直腸または膣腔で溶解し、活性化合物を放出する、適当な非刺激性賦形剤または担体、例えばカカオバター、ポリエチレングリコールまたは坐剤ワックスと本発明化合物を混合することにより製造され得る坐薬である。

【0131】

経口投与用固体投与量形態は、カプセル剤、錠剤、丸薬、粉末剤および顆粒を含む。かかる固体投与量形態では、活性化合物を少なくとも１種の薬学的に許容される不活性賦形剤または担体、例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムおよび／またはａ）充填剤または増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸、ｂ）結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアラビアゴム、ｃ）保湿剤、例えばグリセロール、ｄ）崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリケート、および炭酸ナトリウム、ｅ）溶解遅延剤、例えばパラフィン、ｆ）吸収促進剤、例えば四級アンモニウム化合物、ｇ）湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびグリセリンモノステアレート、ｈ）吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイト粘土、およびｉ）滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびそれらの混合物と混合する。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合、投与量形態は緩衝剤も含み得る。

【0132】

類似タイプの固体組成物はまた、ラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を用いる軟および硬ゼラチンカプセルにおける充填剤としても使用され得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸薬および顆粒の固体投与量形態は、コーティングおよびシェル、例えば腸溶コーティングおよび製薬業界で公知の他のコーティングにより製造され得る。それらは、所望により乳白剤を含んでいてもよく、それらが活性成分（複数可）のみを、または優先的に腸管の任意の部分で、所望により遅延方法で放出する組成であり得る。使用可能な埋め込み組成物の例には、ポリマー物質および蜜蝋が含まれる。類似タイプの固体組成物はまた、賦形剤、例えばラクトースまたは乳糖および高分子量ポリエチレングリコールなどを用いる軟および硬ゼラチンカプセルにおける充填剤としても使用され得る。

【0133】

活性化合物はまた、上記の１種以上の賦形剤を含むマイクロカプセル形態でもあり得る。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸薬および顆粒の固体投与量形態は、コーティングおよびシェル、例えば腸溶コーティング、放出制御型コーティングおよび製薬業界で公知の他のコーティングにより製造され得る。上記固体投与量形態では、活性化合物を、少なくとも１種の不活性希釈剤、例えばスクロース、ラクトースまたはデンプンと混合し得る。かかる投与量形態はまた、通常実施している通り、不活性希釈剤以外の付加物質、例えば錠剤滑剤および他の錠剤化助剤、例えばステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースを含み得る。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合、該投与量形態は緩衝剤も含み得る。それらは、所望により乳白剤を含んでいてよく、それらが活性成分（複数可）のみを、または小腸管の任意の部分で優先的に、所望により遅延方法で放出する組成であり得る。使用可能な埋め込み組成物の例には、ポリマー物質および蜜蝋が含まれる。

【0134】

本発明化合物の局所または経皮投与用投与量形態には、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入薬またはパッチが含まれる。滅菌条件下で、活性成分を薬学的に許容される担体および必要な防腐剤と、または必要に応じて緩衝剤と混合する。眼用製剤、点耳薬および点眼薬もまた、本発明の範囲内に含まれるものとする。さらに、本発明は、身体への化合物の制御送達という追加利点を有する経皮パッチの使用も包含する。かかる投与量形態は、化合物を適切な媒体に溶解または分散することにより製造される。吸収促進剤を用いることによっても、皮膚への化合物の浸透を高め得る。速度制御膜を設けるか、または化合物をポリマーマトリックスもしくはゲルに分散させることにより速度を制御し得る。

【0135】

概して本明細書に上記の通り、本発明の化合物は、ＡＢＣ輸送体のモジュレーターとして有用である。故に、何らかの特定の理論にとらわれることなく、化合物および組成物は、特に、ＡＢＣ輸送体の過剰活性または不活性が、疾患、状態または障害に関係するとき、該疾患、状態または障害の処置または重症度の軽減に有用である。ＡＢＣ輸送体の過剰活性または不活性が、特定の疾患、状態または障害と関係するとき、該疾患、状態または障害は、“ＡＢＣ輸送体仲介疾患、状態または障害”とも称され得る。従って、別の局面において、本発明は、ＡＢＣ輸送体の過剰活性または不活性が疾患状態に関係するとき、該疾患、状態または障害の処置方法または重症度の軽減方法を提供する。

【0136】

本発明においてＡＢＣ輸送体のモジュレーターとして用いる化合物の活性を、当技術分野で、および本明細書の実施例に一般的に記載の方法によりアッセイし得る。

【0137】

本発明の化合物および薬学的に許容される組成物を、併用療法に用いることができ、すなわち該化合物および薬学的に許容される組成物を、１種以上の他の所望の治療剤または医学的処置と同時に、先行して、または後続して投与し得ることも当然理解され得る。併用レジメンで用いる治療（治療剤または処置法）の特定の組合せでは、所望の治療剤および／または処置法の適合性および達成すべき所望の治療効果を考慮すべきである。また、用いる治療剤は、同じ障害に対して所望の効果を達成し得る（例えば、本発明化合物は、同じ障害の処置に使用される別の薬剤と同時に投与され得る）か、またはそれらは異なる効果（例えば、副作用の制御）を達成し得る。本明細書で用いる、特定の疾患または状態を処置または予防するために通常投与される追加治療剤は、「処置すべき疾患または状態に適当である」ものとして知られている。

【0138】

本発明の組成物中に存在する追加治療薬の量は、唯一の活性成分としてその治療剤を含む組成物において通常投与される量を超えることはない。好ましくは、本発明で開示している組成物における追加治療薬の量は、唯一の治療的活性成分としてその薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲であり得る。

【0139】

本発明の化合物またはその薬学的に許容される組成物はまた、移植可能な医療装置、例えばプロテーゼ（人工器官）、人工弁、血管移植片、ステントおよびカテーテルをコーティングする組成物に組み込まれ得る。従って、本発明は、別の局面において、一般的に上記の本発明の化合物、ならびに本明細書のクラスおよびサブクラスにおける化合物、ならびに上記の移植可能な装置のコーティングに適切な担体を含む移植可能な装置をコーティングする組成物を包含する。さらに別の局面において、本発明は、上記に一般的に記載の本発明の化合物、ならびに本明細書のクラスおよびサブクラスにおける化合物、ならびに上記の移植可能な装置のコーティングに適切な担体を含む組成物でコーティングされた移植可能な装置を包含する。適切なコーティングおよびコーティングされた移植可能な装置の一般的製法は、米国特許第６，０９９，５６２号；同第５，８８６，０２６号；および同第５，３０４，１２１号に記載されている。コーティングは、典型的には生物適合性ポリマー材料、例えばヒドロゲルポリマー、ポリメチルジシロキサン、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール、ポリ乳酸、エチレンビニルアセテート、およびそれらの混合物である。コーティングは、所望により、組成物において放出制御特性を付与するためのフルオロシリコーン、多糖類、ポリエチレングリコール、リン脂質またはそれらの組合せの適切な保護膜によりさらに被覆され得る。

【0140】

本発明の別の局面は、生物学的試料または患者において（例えば、インビトロまたはインビボで）ＡＢＣ輸送体活性を調節する方法であって、患者に投与すること、または該生物学的試料と式Ｉの化合物または該化合物を含む組成物を接触させることを含む方法に関する。本明細書で用いる用語“生物学的試料”には、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物から得られる生検材料またはその抽出物；および、血液、唾液、尿、排泄物、精液、涙、または他の体液もしくはそれらの抽出物が含まれるが、これらに限定されない。

【0141】

生物学的試料におけるＡＢＣ輸送体活性の調節は、当業者に公知の種々の目的に有用である。かかる目的の例には、生物学的および病理学的現象におけるＡＢＣ輸送体の研究；ならびに、ＡＢＣ輸送体の新規モジュレーターの比較評価が含まれるが、これに限定されない。

【0142】

さらに別の態様において、陰イオンチャネルと３０８−３１２、３１３、３１５、３１６、３１８、３２０および３２２から選択される化合物を接触させる工程を含む、インビトロまたはインビボでの該チャネルの活性の調節方法を提供する。好ましい態様において、陰イオンチャネルは、クロライドチャネルまたは重炭酸イオンチャネルである。他の好ましい態様において、該陰イオンチャネルはクロライドチャネルである。

【0143】

別の態様に従い、本発明は、細胞膜中の機能的ＡＢＣ輸送体の数を増大する方法であって、該細胞と３０８−３１２、３１３、３１５、３１６、３１８、３２０および３２２から選択される化合物を接触させる工程を含む方法を提供する。本明細書で用いる用語“機能的ＡＢＣ輸送体”は、輸送活性能力を有するＡＢＣ輸送体を意味する。好ましい態様において、該機能的ＡＢＣ輸送体はＣＦＴＲである。

【0144】

別の好ましい態様に従い、ＡＢＣ輸送体の活性を、貫膜電位差を測定することにより測定する。生物学的試料における膜を越える電位差を測定する手段は、当技術分野で公知の方法、例えば光学的膜電位アッセイまたは他の電気生理的方法の何れかを用いることができる。

【0145】

光学的膜電位アッセイは、蛍光変化の測定装置、例えば電位差／イオンプローブリーダー（ＶＩＰＲ）（Gonzalez, J. E., K. Oades, et al. (1999) “Cell−based assays and instrumentation for screening ion−channel targets” Drug Discov Today 4(9): 431−439を参照のこと）と組み合わせて、GonzalezおよびTsienにより記載される膜電位感受性ＦＲＥＴセンサーを利用する（Gonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1995) “Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells” Biophys J 69(4): 1272−80、およびGonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1997) “Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer” Chem Biol 4(4): 269−77を参照のこと）。

【0146】

これらの電位感受性アッセイは、膜−可溶性の電位−感受性色素であるＤｉＳＢＡＣ_２（３）と、蛍光リン脂質であるＣＣ２−ＤＭＰＥ（それは、原形質膜の外側に結合して、ＦＲＥＴ供与体として作用する。）の間の、蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）における変化に基づく。膜電位（Ｖ_ｍ）の変化は、負電荷のＤｉＳＢＡＣ_２（３）が原形質膜を通過して再分布するのを誘発し、それによってＣＣ２−ＤＭＰＥからのエネルギー伝達量が変化する。蛍光放射の変化を、ＶＩＰＲ（登録商標）ＩＩを用いて測定することができ、それは、９６−または３８４−ウェルマイクロタイタープレートにおいて細胞ベースのスクリーニングを行うよう設計された、統合した液体処理システム（handler）および蛍光検出器である。

【0147】

別の局面において、本発明は、インビトロまたはインビボで生物学的試料におけるＡＢＣ輸送体またはその断片の活性を測定するのに用いるための、（ｉ）３０８−３１２、３１３、３１５、３１６、３１８、３２０および３２２から選択される化合物または上記態様の何れかを含む組成物；ならびに、（ｉｉ）ａ．）該組成物と生物学的試料を接触させるための指示書、および、ｂ．）該ＡＢＣ輸送体またはその断片の活性を測定するための指示書、を含むキットを提供する。一態様において、該キットは、ａ．）追加組成物と生物学的試料を接触させる指示書；ｂ．）該ＡＢＣ輸送体またはその断片の活性を該追加化合物の存在下で測定するための指示書、そしてｃ．）該追加化合物の存在下での該ＡＢＣ輸送体の活性と、３０８−３１２、３１３、３１５、３１６、３１８、３２０および３２２から選択される化合物の存在下での該ＡＢＣ輸送体の密度を比較するための指示書、をさらに含む。好ましい態様において、該キットは、ＣＦＴＲの密度を測定するために用いられる。

【0148】

本明細書に記載の本発明をより一層理解し得るように、以下の実施例を記載する。これらの実施例は説明のみを目的としており、いかなる方法によっても本発明を制限するものではないことが理解されるべきである。

【実施例】

【0149】

ＶＩ．製造法および実施例
一般的方法Ｉ：カルボン酸ブロック

【化16】

【0150】

ベンジルトリエチル塩化アンモニウム（０．０２５当量）および適当なジハロ化合物（２．５当量）を、置換フェニルアセトニトリルに添加した。混合物を７０℃に加熱し、次いで５０％水酸化ナトリウム（１０当量）を該混合物にゆっくり添加した。反応液を７０℃で１２−２４時間撹拌し、シクロアルキル部分の完全な形成を確認し、１３０℃で２４−４８時間加熱して、ニトリルからカルボン酸への完全な変換を確認した。暗褐色／黒色の反応混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで３回抽出して、副生成物を除去した。塩基性水溶液を、濃塩酸でｐＨ１未満まで酸性化し、ｐＨ４で形成し始めた沈殿を濾過して、１Ｍ塩酸で２回洗浄した。該固体物質をジクロロメタン中に溶解し、１Ｍ塩酸で２回抽出し、塩化ナトリウムの飽和水溶液で１回抽出した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させて、蒸発乾固して、シクロアルキルカルボン酸を得た。収率および純度は、典型的に９０％以上であった。

【0151】

実施例１：１−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル−シクロプロパンカルボン酸

【化17】

２−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）アセトニトリル（５．１０ｇ、３１．７ｍｍｏｌ）、１−ブロモ−２−クロロ−エタン（９．００ｍＬ、１０９ｍｍｏｌ）、およびベンジルトリエチル塩化アンモニウム（０．１８１ｇ、０．７９５ｍｍｏｌ）の混合物を、７０℃で加熱し、次いで５０％（ｗｔ．／ｗｔ．）水酸化ナトリウム水溶液（２６ｍＬ）を該混合物にゆっくり添加した。反応液を７０℃で２４時間撹拌し、次いで１３０℃で４８時間加熱した。暗褐色の反応混合物を水（４００ｍＬ）で希釈し、等量の酢酸エチルで１回抽出し、等量のジクロロメタンで１回抽出した。塩基性水溶液を、濃塩酸でｐＨ１未満まで酸性化し、沈殿を濾過し、１Ｍ塩酸で洗浄した。固体物質をジクロロメタン（４００ｍＬ）中に溶解し、等量の１Ｍ塩酸で２回抽出し、塩化ナトリウムの飽和水溶液で１回抽出した。有機溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固して、白色から僅かにオフホワイト色−白色固体（５．２３ｇ、８０％）を得た。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値２０６．１、実測値２０７．１（Ｍ＋１）^＋。保持時間２．３７分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d₆) δ 1.07−1.11 (m, 2H), 1.38−1.42 (m, 2H), 5.98 (s, 2H), 6.79 (m, 2H), 6.88 (m, 1H), 12.26 (s, 1H)。

【0152】

実施例２：１−（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボン酸

【化18】

【0153】

２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボン酸メチルエステル

【化19】

アセトニトリル（３０ｍＬ）およびトリエチルアミン（１０ｍＬ）を含むメタノール（２０ｍＬ）中、５−ブロモ−２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール（１１．８ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）［Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、５．７８ｇ、５．００ｍｍｏｌ］の溶液を、一酸化炭素雰囲気（５５ＰＳＩ）下で、７５℃（油浴温度）にて１５時間撹拌した。冷却した反応混合物を濾過し、濾液を蒸発乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、粗２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボン酸メチルエステル（１１．５ｇ）を得て、それを直接次工程に用いた。

【0154】

（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−メタノール

【化20】

２０ｍＬの無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中に溶解した粗２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−カルボン酸メチルエステル（１１．５ｇ）を、０℃にて、無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、水素化アルミニウムリチウム（４．１０ｇ、１０６ｍｍｏｌ）の懸濁液にゆっくり添加した。次いで、混合物を室温まで温めた。室温で１時間撹拌後、反応混合物を０℃まで冷却し、水（４．１ｇ）で処理し、次いで水酸化ナトリウム（１０％水溶液、４．１ｍＬ）で処理した。得られるスラリーを濾過し、ＴＨＦで洗浄した。合わせた濾液を蒸発乾固し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−メタノール（７．２ｇ、３８ｍｍｏｌ、２段階で７６％）を無色油状物として得た。

【0155】

５−クロロメチル−２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール

【化21】

塩化チオニル（４５ｇ、３８ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（２００ｍＬ）中、（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−メタノール（７．２ｇ、３８ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃にて、ゆっくり添加した。得られる混合物を一晩室温で撹拌し、次いで蒸発乾固した。残渣を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）とジクロロメタン（１００ｍＬ）の間に分配させた。分離した水層をジクロロメタン（１５０ｍＬ）で抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固して、粗５−クロロメチル−２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール（４．４ｇ）を得て、それを直接次工程に用いた。

【0156】

（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−アセトニトリル

【化22】

ジメチルスルホキシド（５０ｍＬ）中、粗５−クロロメチル−２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール（４．４ｇ）およびシアン化ナトリウム（１．３６ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で一晩撹拌した。反応混合物を、氷中に注ぎ、酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固して、粗（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−アセトニトリル（３．３ｇ）を得て、それを直接次工程に用いた。

【0157】

１−（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボニトリル

【化23】

水酸化ナトリウム（５０％水溶液、１０ｍＬ）を、７０℃にて、粗（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−アセトニトリル、ベンジルトリエチル塩化アンモニウム（３．００ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）、および１−ブロモ−２−クロロエタン（４．９ｇ、３８ｍｍｏｌ）の混合物にゆっくり添加した。

【0158】

混合物を７０℃にて一晩撹拌し、その後、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固して、粗１−（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボニトリルを得て、それを直接次工程に用いた。

【0159】

１−（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボン酸

【化24】

１−（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボニトリル（最後の工程からの粗物質）を、１０％水酸化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）中、２．５時間還流した。冷却した反応混合物をエーテル（１００ｍＬ）で洗浄し、水相を２Ｍ塩酸を用いてｐＨ２まで酸性化した。沈殿した固体を濾過して、１−（２，２−ジフルオロ−ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）−シクロプロパンカルボン酸を白色固体として得た（０．１５ｇ、４段階で１．６％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値２４２．０４、実測値２４１．５８（Ｍ＋１）^＋；¹H NMR (CDCl₃) δ 7.14−7.04 (m, 2H), 6.98−6.96 (m, 1H), 1.74−1.64 (m, 2H), 1.26−1.08 (m, 2H)。

【0160】

下記の表２は、市販されているか、または上記の３方法のうち１方法で製造される、カルボン酸ブロックのリストを含む：

【表1】

【0161】

実施例３：５−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−インドール−６−イルアミン

【化25】

【0162】

２−ブロモ−４−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニルアミン

【化26】

ＤＭＦ（５００ｍＬ）中、４−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニルアミン（４４７ｇ、３．００ｍｏｌ）の溶液に、ＤＭＦ（５００ｍＬ）中、ＮＢＳ（５３１ｇ、３．００ｍｏｌ）を室温で滴下した。添加の完了後、反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をさらなる精製なしに次工程に用いた。

【0163】

２−ブロモ−４−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−フェニルアミン

【化27】

２−ブロモ−４−ｔｅｒｔ−ブチル−フェニルアミン（１６０ｇ、０．７１ｍｏｌ）を、Ｈ_２ＳＯ_４（４１０ｍＬ）に室温で滴下し、透明な溶液を得た。次いで、この透明溶液を−５ないし−１０℃まで冷却した。Ｈ_２ＳＯ_４（４１０ｍＬ）中、ＫＮＯ_３（８３ｇ、０．８２ｍｏｌ）の溶液を滴下し、その間、温度を−５ないし−１０℃に維持した。添加の完了後、反応混合物を氷／水中に注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を５％Ｎａ_２ＣＯ_３および塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／石油エーテル１：１０）により精製して、２−ブロモ−４−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−フェニルアミンを黄色固体として得た（１５０ｇ、７８％）。

【0164】

４−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−２−トリメチルシラニルエチニル−フェニルアミン

【化28】

トルエン（２００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）中、２−ブロモ−４−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−フェニルアミン（２７．３ｇ、１００ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｅｔ_３Ｎ（２７．９ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（２．１１ｇ、３．００ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（９５０ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）およびトリメチルシリルアセチレン（２１．２ｍＬ、１５０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で添加した。密閉した圧力フラスコ中で反応混合物を７０℃で２．５時間加熱し、室温まで冷却し、そしてセライトの短いプラグを通して濾過した。濾過ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた濾液を５％ＮＨ_４ＯＨ溶液および水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗生成をカラムクロマトグラフィー（０−１０％酢酸エチル／石油エーテル）により精製して、４−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−２−トリメチルシラニルエチニル−フェニルアミンを褐色粘性液体として得た（２５ｇ、８１％）。

【0165】

５−ｔｅｒｔ−ブチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール

【化29】

ＤＭＦ（１００ｍＬ）中、４−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−２−トリメチルシラニルエチニル−フェニルアミン（２５ｇ、８６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣｕＩ（８．２ｇ、４３ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で添加した。混合物を、密閉した圧力フラスコ中で１３５℃にて一晩加熱し、室温まで冷却し、セライトの短いプラグを通して濾過した。濾過ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた濾液を水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（１０−２０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−ｔｅｒｔ−ブチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドールを黄色固体として得た（１３ｇ、６９％）。

【0166】

５−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−インドール−６−イルアミン

【化30】

ラネーニッケル（３ｇ）を、メタノール（１００ｍＬ）中、５−ｔｅｒｔ−ブチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール（１５ｇ、６７ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を水素（１ａｔｍ）下で３０℃にて３時間撹拌した。触媒を濾過により除いた。濾液をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗暗褐色粘性油状物を、カラムクロマトグラフィー（１０−２０％酢酸エチル／石油エーテル）により精製して、５−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−インドール−６−イルアミンを灰色固体として得た（１１ｇ、８７％）。¹H NMR (300 MHz, DMSO−d6) δ 10.3 (br s, 1H), 7.2 (s, 1H), 6.9 (m, 1H), 6.6 (s, 1H), 6.1 (m, 1H), 4.4 (br s, 2H), 1.3 (s, 9H)。

【0167】

実施例４：５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル

【化31】

【0168】

ａ）ＫＣＮ、ＤＭＳＯ；ｂ）Ｐｄ／Ｃ、ＥｔＯＡｃ
工程ａ：２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル
２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール（４．０ｇ、１７ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ溶液（３０ｍＬ）に、ＫＣＮ（３．４ｇ、５１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で３時間撹拌し、水（８０ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル中、７％ＥｔＯＡｃ）により精製して、２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル（２．２ｇ、５３％）を得た。¹H NMR (DMSO, 300 MHz) δ 12.23 (br s, 1 H), 8.09 (d, J＝9.0 Hz, 1 H), 7.75 (d, J＝9.0 Hz, 1 H), 6.50 (s, 1 H), 1.38 (s, 9 H). MS (ESI) m／z: 244.2 [M＋H^＋]。

【0169】

工程ｂ：５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル
２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル（５５０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ溶液（１０ｍＬ）に、窒素雰囲気下でラネーＮｉ（０．１ｇ）を添加した。混合物を、室温にて１時間、水素雰囲気（１ａｔｍ）下で撹拌した。触媒をセライトで濾取し、濾液を真空下で蒸発させて、５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル（２５０ｍｇ、５１％）を得た。¹H NMR (DMSO, 300 MHz) δ 10.93 (br s, 1 H), 7.25 (d, J＝8.7 Hz, 1 H), 6.49 (d, J＝8.7 Hz, 1 H), 5.94 (d, J＝2.1 Hz, 1 H), 5.40 (br s, 2 H), 1.30 (s, 9 H). MS (ESI) m/z: 214.0 [M＋H^＋]．

【0170】

実施例６：Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−シアノ−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化32】

【0171】

工程ａ：Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−シアノ−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボニルクロライド（２６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）中、５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル（２１ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４１．７μＬ、０．３ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで濾過し、逆相ＨＰＬＣで精製することにより生成物Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−シアノ−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを得た。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４３７．２、実測値 ４３８．７ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．１０分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 11.48 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 7.52 (d, J＝8.5 Hz, 2H), 7.41 (d, J＝8.3 Hz, 1H), 7.32 (dd, J＝1.5, 8.3 Hz, 1H), 7.03 (d, J＝8.6 Hz, 1H), 6.21 (d, J＝1.8 Hz, 1H), 1.51−1.49 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.18−1.16 (m, 2H)。

【0172】

実施例７：Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−シアノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化33】

【0173】

工程ａ：２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−ヒドロキシエチル）−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル
２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル（２００ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、２−ヨードエタノール（７７μＬ、０．９８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（５３４ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１．３ｍＬ）の混合物を、一晩９０℃に加熱した。次いで、さらに２−ヨードエタノール（７７μＬ、０．９８ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を９０℃で３日間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルと水の間に分配させた。水層を酢酸エチルで洗浄し、次いで合わせた酢酸エチル層を水（ｘ３）および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させて濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（５０−１００％ＣＨ_２Ｃｌ_２−ヘキサン）により精製して、生成物を黄色固体として得た（１８０ｍｇ、ＮＭＲにより〜２５％純度、インドール出発物質との共溶出生成物）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ２８７．１、実測値 ２８８．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．５９分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 12.23 (s, 1H), 8.14 (d, J＝9.1 Hz, 1H), 8.02 (d, J＝9.1 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.10 (t, J＝5.5 Hz, 1H), 4.55 (t, J＝6.3 Hz, 2H), 3.78−3.73 (m, 2H) および 1.49 (s, 9H) ppm。

【0174】

工程ｂ：５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル
２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−ヒドロキシエチル）−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル（１８０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（６ｍＬ）に、Ｎ_２雰囲気下で、Ｐｄ−Ｃ（５％重量、１８ｍｇ）を添加した。反応物を、Ｎ_２（ｇ）でフラッシュし、次いでＨ_２（ｇ）でフラッシュし、Ｈ_２（ａｔｍ）下で室温にて１．５時間撹拌した。反応物をセライトを通して濾過し、濃縮して、生成物を得た（１５０ｍｇ、９３％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ２５７．２、実測値 ２５８．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．２６分。

【0175】

工程ｃ：Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−シアノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボニルクロライド（１９６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を、５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−４−カルボニトリル（１５０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２４２μＬ、１．７４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（２ｍＬ）に添加した。反応物を室温で一晩撹拌した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、１Ｎ ＨＣｌ溶液（ｘ２）、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（ｘ２）、塩水で抽出し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させて、濾過し、濃縮した。残渣をＤＭＳＯ中に溶解し、逆相ＨＰＬＣにより精製して、生成物Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−シアノ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを得た。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４８１．２、実測値 ４８２．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．９９分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.93 (s, 1H), 7.71 (d, J＝8.8 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 (d, J＝8.3 Hz, 1H), 7.33 (d, J＝1.6 Hz, 1H), 7.08 (d, J＝8.8 Hz, 1H), 6.28 (s, 1H), 5.05 (t, J＝5.6 Hz, 1H), 4.42 (t, J＝6.8 Hz, 2H), 3.70−3.65 (m, 2H), 1.51−1.48 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.19−1.16 (m, 2H)。

【0176】

実施例８：２−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエタンアミニウムクロライド

【化34】

【0177】

工程ａ：ｔｅｒｔ−ブチル ２−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）エチルカルバメート
塩化チオニル（８１．２８μＬ、１．１１７ｍｍｏｌ）中、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボン酸（９０．１４ｍｇ、０．３７２２ｍｍｏｌ）に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８．２０４μＬ、０．１０６４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、その後、過剰な塩化チオニルおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを真空下で除去して、酸塩化物を得た。次いで、該酸塩化物をジクロロメタン（１．５ｍＬ）に溶解し、ｔｅｒｔ−ブチル ２−（５−アミノ−２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）エチルカルバメート（１５６．１ｍｇ、０．４４６７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１５５．６μＬ、１．１１７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１．５ｍＬ）にゆっくり添加した。得られる反応混合物を室温で２１時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタン（５ｍＬ）で希釈し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液（５ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中、０−３０％酢酸エチル）により精製して、ｔｅｒｔ−ブチル ２−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）エチルカルバメートを白色固体として得た（１４０ｍｇ、６６％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５７３．２、実測値 ５７４．７ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．４１分。1H NMR (400.0 MHz, DMSO) d 8.35 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.44−7.41 (m, 2H), 7.34−7.29 (m, 2H), 7.13−7.10 (m, 1H), 6.17 (s, 1H), 4.24−4.20 (m, 2H), 3.20−3.17 (m, 2H), 1.48−1.45 (m, 2H), 1.41 (s, 18H) および 1.15−1.12 (m, 2H) ppm。

【0178】

工程ｂ：Ｎ−（１−（２−アミノエチル）−２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
ｔｅｒｔ−ブチル ２−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）エチルカルバメート（１３７．５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１．８ｍＬ）に、トリフルオロ酢酸（４４４μＬ、５．８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応物をジクロロメタンで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（３ｍＬ）および塩水（３ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させた。粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中、０−１０％メタノール）により精製して、Ｎ−（１−（２−アミノエチル）−２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを白色固体として得た（９３．７ｍｇ、８２％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４７３．１９、実測値 ４７４．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．６１分。

【0179】

工程ｃ：２−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエタンアミニウムクロライド
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中、Ｎ−（１−（２−アミノエチル）−２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド（５０ｍｇ、０．１０５６ｍｍｏｌ）の透明溶液に、ヨウ化メチル（３３６．８ｍｇ、１４７．７μＬ、２．３７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１０６．９ｍｇ、１４７．２μＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で２時間加熱した。粗生成物を逆相分取ＨＰＬＣにより精製した。この生成物２２ｍｇを、メタノール中、１．２５Ｍ ＨＣｌ（１１２μＬ、０．１４ｍｍｏｌ）に溶解し、６０℃で１時間加熱した。反応物を室温まで冷却した。生成物をまず乾燥させ、次いでジクロロメタン中に溶解し、再び乾燥させた。この方法を４回繰り返して、２−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエタンアミニウムクロライドを得た。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５１６．２５、実測値 ５１６．７ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．６９分。1H NMR (400.0 MHz, DMSO) δ 8.43 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.45−7.41 (m, 2H), 7.36−7.31 (m, 2H), 6.27 (s, 1H), 4.74−4.70 (m, 2H), 3.57−3.53 (m, 2H), 3.29 (s, 9H), 1.48−1.42 (m, 11H), および 1.15 (dd, J＝3.9, 6.8 Hz, 2H) ppm。

【0180】

実施例９：２−（４−（Ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール

【化35】

【0181】

工程ａ：３−フルオロ−４−ニトロアニリン
ＣＨ_２Ｃｌ_２（４００ｍＬ）中、Ｎ−（３−フルオロ−４−ニトロ−フェニル）−２，２−ジメチル−プロピオンアミド（８７．０ｇ、０．３６ｍｏｌ）および６Ｎ塩酸（８００ｍＬ）の混合物を、２時間、加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物を１０００ｍＬの酢酸エチルで希釈し、炭酸カリウム（５００．０ｇ）を少しずつ添加した。水溶液を分離し、有機層を塩水で洗浄して、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させて除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル ３０：１）により精製して、３−フルオロ−４−ニトロアニリン（５６．０ｇ、９９％）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.07 (t, J＝8.7 Hz, 1 H), 7.86 (dd, J_＝2.1, 13.2 Hz 1 H), 7.59 (brs, 2 H), 7.22 (s, 1 H)。

【0182】

工程ｂ：２−ブロモ−５−フルオロ−４−ニトロアニリン
３−フルオロ−４−ニトロアニリン（５６ｇ、０．３６ｍｏｌ）の酢酸溶液（５００ｍＬ）に、１時間かけて、臭素（１７．７ｍＬ、０．３６ｍｏｌ）を少しずつ添加した。反応混合物を、氷浴中、０−５℃で１時間撹拌した。反応混合物を飽和Ｎａ_２ＣＯ_３で塩基性にし、酢酸エチルで抽出した（２００ｍＬｘ３）。合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、濾過し、減圧下で濃縮して、残渣を得て、それをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル １０：１）により精製して、２−ブロモ−５−フルオロ−４−ニトロアニリン（４５．６ｇ、８４％）を黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.29 (d, J＝7.6 Hz, 1 H), 653 (d, J＝12.4 Hz, 1 H), 4.94 (br s, 2 H)。

【0183】

工程ｃ：エチル５−（２−アミノ−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−３，３−ジメチルペント−４−イノアート
２−ブロモ−５−フルオロ−４−ニトロアニリン（４５．７ｇ、０．１９ｍｏｌ）およびエチル３，３−ジメチルペント−４−イノアート（８８．３ｇ、０．５７ｍｏｌ）のＥｔ_３Ｎ溶液（７００ｍＬ）に、Ｎ_２下、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（１３．８ｇ、０．０２ｍｏｌ）およびＣｕＩ（３．６ｇ、０．０２ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を、７０℃で８時間撹拌した。反応混合物を、５００ｍＬの酢酸エチルおよび１５００ｍＬの水で希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチルで抽出し（５００ｍＬ×３）、合わせた有機層を塩水で洗浄して、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させて、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル １０：１）により精製して、エチル−５−（２−アミノ−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−３，３−ジメチルペント−４−イノアート（３４．５ｇ、５７％）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.05 (d, J＝8.1Hz, 1 H), 6.36 (d, J＝13.2 Hz, 1 H), 5.60 (brs, 2 H), 4.16 (q, J＝7.2 Hz, 2 H), 2.51 (s, 2 H), 1.40 (s, 6 H), 1.28 (t, J＝7.2 Hz, 3 H)。

【0184】

工程ｄ：エチル３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタノエート
ＣＨ_３ＣＮ（３５０ｍＬ）中、エチル５−（２−アミノ−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−３，３−ジメチルペント−４−イノアート（３４．５ｇ、０．１１ｍｏｌ）およびＰｄＣｌ_２（１０．４ｇ、５８．６ｎｍｏｌ）の混合物を、１．５時間、加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却した。酢酸エチル（３００ｍＬ）を添加し、沈殿を濾取し、メタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル ４０：１）により精製して、エチル３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタノエート（３４．０ｇ、９８％）を濃黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 10.11 (brs, 1 H), 8.30 (d, J＝7.2 Hz, 1 H), 7.14 (d, J＝11.7 Hz, 1 H), 6.35 (d, J＝1.5 Hz, 1 H), 4.17 (q, J＝7.2 Hz, 2 H), 2.69 (s, 2 H), 1.51 (s, 6 H), 1.25 (t, J＝7.2 Hz, 3 H)。

【0185】

工程ｅ：３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール
エチル３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタノエート（３４ｇ、０．１１ｍｏｌ）の乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２溶液（４００ｍＬ）に、−７８℃で、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（２８３．４ｍＬ、０．２７ｍｏｌ）を２時間かけて少しずつ添加した。反応混合物を−７８℃で１０時間撹拌し、次いで水（２００ｍＬ）を添加して急冷した。沈殿を濾取し、メタノールで洗浄した。濾液をＣＨ_２Ｃｌ_２（２００ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル ５０：１）により精製して、３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールを得た（６．６ｇ、２２％）。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.35 (brs, 1 H), 8.30 (d, J＝7.6 Hz, 1 H), 7.11 (d, J＝12.0 Hz, 1 H), 6.35 (d, J＝1.2 Hz, 1 H), 3.74 (t, J＝6.4 Hz, 2 H), 1.9 (t, J＝6.4 Hz, 2 H), 1.4 (s, 6 H)。

【0186】

工程ｆ：２−（４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール
３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール（６．６ｇ、２５ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２溶液（８０ｍＬ）に、０℃で、ＴＢＳＣｌ（３．７ｇ、２５ｎｍｏｌ）およびイミダゾール（４．２ｇ、６２ｎｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１２時間撹拌した。沈殿を濾取し、メタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル １０：１）により精製して、所望の生成物を褐色固体として得た（５．０ｇ、５３％）。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 9.80 (brs, 1 H), 8.30 (d, J＝7.2 Hz,1 H), 7.05 (d, J＝11.7 Hz, 1 H), 6.33 (t, J＝1.2 Hz, 1 H), 3.7 (t, J＝6.0 Hz, 2 H), 1.91 (t, J＝6.0 Hz, 2 H), 1.42 (s , 6 H), 0.94 (s , 9 H), 0.12 (s , 6 H)。ＭＳ （ＥＳＩ） ｍ／ｚ （Ｍ＋Ｈ^＋）： ３８１．１。

【0187】

実施例１０：ベンジル２，２−ジメチルブタ−３−イノアート

【化36】

【0188】

工程ａ：メチル２，２−ジメチル−３−オキソブタノエート
ＴＨＦ（２７０ｍＬ）中、ＮａＨ（２８．５ｇ、０．７１８ｍｏｌ、６０％）の懸濁液に、０℃で、３−オキソ−酪酸メチルエステル（７８．６ｇ、０．６７７ｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（７０ｍＬ）を滴下した。混合物を０℃で０．５時間撹拌した。ＭｅＩ（９９．０ｇ、０．６９８ｍｏｌ）を０℃で滴下した。得られた混合物を室温まで温め、１時間撹拌した。ＮａＨ（２８．５ｇ、０．７１８ｍｏｌ、６０％）を０℃で少しずつ添加し、得られる混合物を０℃で０．５時間撹拌し続けた。次いで、ＭｅＩ（９９．０ｇ、０．６９８ｍｏｌ）を０℃で滴下した。反応混合物を室温まで温め、一晩撹拌した。混合物を氷水に注いだ。有機層を分離した。水相をＥｔＯＡｃで抽出した（３００ｍＬ×３）。合わせた有機層を乾燥させ、減圧下で蒸発させて、メチル ２，２−ジメチル−３−オキソブタノエート（５２ｇ、５３％）を得て、それを直接次工程に用いた。

【0189】

工程ｂ：メチル ３−クロロ−２，２−ジメチルブタ−３−エノアート
ジクロロメタン（６００ｍＬ）中、ＰＣｌ_５（１６１ｇ、０．７７２ｍｏｌ）の懸濁液に、０℃で、メチル２，２−ジメチル−３−オキソブタノエート（５２ｇ、０．３６１ｍｏｌ、最後の工程からの粗物質）を少しずつ添加し、次いで、乾燥ＤＭＦを約２０滴添加した。混合物を一晩、加熱還流した。冷却後、反応混合物を氷水にゆっくり注いだ。有機層を分離し、水層をジクロロメタンで抽出した（３００ｍＬ×３）。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。溶媒を蒸発させて、生成物メチル３−クロロ−２，２−ジメチルブタ−３−エノアートを得て、それをさらに精製することなく用いた（４７ｇ、８２％）。

【0190】

工程ｃ：３−クロロ−２，２−ジメチルブタ−３−エン酸
水（３００ｍＬ）中、メチル３−クロロ−２，２−ジメチルブタ−３−エノアート（４２．０ｇ、０．２６ｍｏｌ）およびＮａＯＨ（１２．４ｇ、０．３１ｍｏｌ）の混合物を、一晩、加熱還流した。冷却後、反応混合物をエーテルで抽出した。有機層は、２０ｇのメチル３−クロロ−２，２−ジメチルブタ−３−エノアートを含んでいた（４８％回収）。水層を冷２０％ ＨＣｌ溶液で酸性化し、エーテルで抽出した（２５０ｍＬ×３）。合わせた有機層を乾燥させ、減圧下で蒸発させて、３−クロロ−２，２−ジメチルブタ−３−エン酸（１７ｇ、４４％）を得て、それを直接次工程に用いた。

【0191】

工程ｄ：２，２−ジメチルブタ−３−イン酸
三つ口フラスコ（５００ｍＬ）に、ＮａＮＨ_２（１７．８ｇ、０．４５８ｍｍｏｌ、ペレット）およびＤＭＳＯ（５０ｍＬ）を添加した。混合物を、もはやＮＨ_３（ｇ）が放出されなくなるまで、室温で撹拌した。３−クロロ−２，２−ジメチルブタ−３−エン酸（１７．０ｇ、１１４ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ溶液（５０ｍＬ）を０℃で滴下した。混合物を温め、５０℃で５時間撹拌し、次いで室温で一晩撹拌した。混合物を冷２０％ＨＣｌ溶液に注ぎ、次いでエーテルで３回抽出した。エーテル抽出物を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して、６：１比で出発物質とアルキン産物を得た。残渣をエーテルおよびＮａ_２ＳＯ_４を用いて再び乾燥させて、上記の反応条件に再び反応させた。反応混合物を同様の方法で後処理し、２，２−ジメチルブタ−３−イン酸を得た（１２．０ｇ、９４％）。

【0192】

ベンジル２，２−ジメチルブタ−３−イノアート
ジクロロメタン（８００ｍＬ）中、２，２−ジメチルブタ−３−イン酸（８７．７ｇ、０．７８２ｍｍｏｌ）およびベンジルアルコール（１１４．６ｇ、０．９３８ｍｏｌ）の撹拌溶液に、−２０℃で、ＤＣＣ（１９３．５ｇ、０．９３８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いで、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤として、石油エーテル中、２％酢酸エチル）により精製して、ベンジル２，２−ジメチルブタ−３−イノアートを得た（１００ｇ、５９％収率）。¹H NMR (CDCl_3, 400 MHz) δ 7.37−7.36 (m, 5 H), 5.19 (s, 2 H), 2.28 (s, 1 H), 1.52 (s, 6 H)。

【0193】

実施例１１：２−（１−（Ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−メチルプロパン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール

【化37】

【0194】

工程ａ：ベンジル４−（２−アミノ−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−２，２−ジメチルブタ−３−イノアート
２−ブロモ−５−フルオロ−４−ニトロアニリン（２３．０ｇ、０．１ｍｏｌ）のＥｔ_３Ｎ溶液（２５０ｍＬ）に、ベンジル２，２−ジメチルブタ−３−イノアート（５９．０ｇ、０．２９ｍｏｌ）、ＣｕＩ（１．８５ｇ）およびＰｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（２．３ｇ）を室温で添加した。混合物を８０℃で一晩撹拌した。室温まで冷却後、反応物を水で急冷し、水層を酢酸エチルで抽出した（１００ｍＬ×３）。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル中、１０％酢酸エチル）により精製して、ベンジル４−（２−アミノ−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−２，２−ジメチルブタ−３−イノアートを得た（２０．０ｇ、５６％）。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) 8.05 (d, J＝8.4 Hz, 1 H), 7.39−7.38 (m, 5 H), 6.33 (d, J＝13.2 Hz, 1 H), 5.20 (s, 2 H), 4.89 (br s, 2 H), 1.61 (s, 6 H)。

【0195】

工程ｂ：ベンジル２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート
ベンジル４−（２−アミノ−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−２，２−ジメチルブタ−３−イノアート（２０．０ｇ、５６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（１００ｍＬ）に、室温で、ＰｄＣｌ_２（５．０ｇ、２８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で一晩撹拌した。混合物を濾取し、溶媒を真空下で蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル中、１０％ＥｔＯＡｃ）により精製して、ベンジル２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエートを得た（１８．０ｇ、９０％）。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) 8.96 (br s, 1 H), 8.33 (d, J＝7.2 Hz, 1 H) 7.35−7.28 (m, 5 H) 7.08 (d, J＝11.7 Hz, 1 H), 6.47 (s, 1 H), 5.18 (s, 2 H) 1.69 (s, 6 H)。

【0196】

工程ｃ：２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール
ベンジル２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート（１８．０ｇ、０．０５ｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２溶液（１００ｍＬ）に、−７８℃で、ＤＩＢＡＬ−Ｈ（１２ｍＬ）を添加した。混合物をその温度で１時間撹拌し、室温まで温めた。反応物を水で急冷し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬ×３）。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル中、１０％ＥｔＯＡｃ）により精製して、２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オールを得た（１０．０ｇ、７７％）。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) 9.37 (s, 1 H), 8.32 (d, J＝7.2 Hz, 1 H), 7.11 (d, J＝11.7 Hz, 1 H), 6.36 (s, 1 H), 3.73 (d, J＝5.1 Hz 2 H), 1.97 (t, J＝5.1 Hz, 1 H), 1.39 (s, 6 H)。

【0197】

工程ｄ：２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−メチルプロパン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール
ＣＨ_２Ｃｌ_２中、２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール（１０．０ｇ）の撹拌溶液に、室温で、ＴＢＳＣｌ（８．９ｇ）、イミダゾール（８．１ｇ、０．１２ｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル中、１０％ＥｔＯＡｃ）により精製して、２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−メチルプロパン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドールを得た（５．３ｇ、３８％）。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) 9.51 (s, 1 H), 8.31 (d, J＝7.5 Hz, 1 H), 7.02 (d, J＝11.7 Hz, 1 H), 6.32 (s, 1 H), 3.63 (s, 2 H), 1.35 (s, 6 H), 0.99 (s, 9 H), 0.11 (s, 6 H)．

【0198】

実施例１２：６−フルオロ−１，１−ジメチル−７−ニトロ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］インドール、（Ｒ）−３−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール、２−（４−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール、３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールおよび（Ｒ）−２−（４−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール

【化38】

【0199】

工程ａ：６−フルオロ−１，１−ジメチル−７−ニトロ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］インドール、（Ｒ）−３−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール、２−（４−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール、３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールおよび（Ｒ）−２−（４−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、２−（４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール（１．９ｇ、５．０ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸（Ｓ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル（２．８６ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３（４．８８ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を９０℃で２４時間加熱した。反応物を酢酸エチルと水の間に分配させた。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。溶媒の除去後、残渣をカラムクロマトグラフィー（１０−５０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、６−フルオロ−１，１−ジメチル−７−ニトロ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［１，２−ａ］インドールを得た（６００ｍｇ、４８％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ２４８．１、実測値 ２４９．２ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．００分；２−（４−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール（２７０ｍｇ、（Ｒ）−２−（４−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドールを幾らか含む）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４９４．２および３８０．２、実測値 ４９５．４および３８１．４ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．１２および１．９２分；（Ｒ）−３−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール（１．０ｇ、３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールを含む）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ３８０．２および２６６．１、実測値 ３８１．２および２６７．２ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．７４および１．４８分。

【0200】

実施例１３：（Ｒ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オールおよび３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール

【化39】

【0201】

（Ｒ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オールおよび３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールの混合物を、２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−メチルプロパン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドールから出発して上記の方法に従って得た。（Ｒ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ３６６．２、実測値 ３６７．２ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．７１分；３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ２５２．１、実測値 ２５３．４ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．４２分。

【0202】

実施例１４：（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化40】

【0203】

工程ａ：（Ｒ）−３−（５−アミノ−１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール
エタノール（１０ｍＬ）中、３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール（５００ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を幾らか含む（Ｒ）−３−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールの溶液に、ギ酸アンモニウム（５００ｍｇ、７．９ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、１３９ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間還流した。Ｐｄ触媒をセライト濾過により除去し、エタノールで洗浄した。濾液を蒸発乾固し、カラムクロマトグラフィー（３０−５０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、（Ｒ）−３−（５−アミノ−１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールを得た（２２０ｍｇ、４８％、３−（５−アミノ−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールを幾らか含む）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ３５０．２ 実測値 ３５１．４ （Ｍ＋１）^＋。保持時間０．９４分。

【0204】

工程ｂ：（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
ＤＭＦ（３．０ｍＬ）中、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボン酸（１８３ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）、３−（５−アミノ−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール（２２０ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）を幾らか含む（Ｒ）−３−（５−アミノ−１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オール、ならびにＨＡＴＵ（２８７ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）の混合物に、トリエチルアミンを添加した（０．２１ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）。反応物を室温で一晩撹拌し、次いで酢酸エチルと水の間に分配させた。水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。溶媒の除去後、残渣をカラムクロマトグラフィー（２０−４０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを得た（３１５ｍｇ、８７％、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを幾らか含む）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５７４．２、実測値 ５７５．７ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．０８分。

【0205】

工程ｃ：（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
メタノール（３ｍＬ）および水（０．３ｍＬ）中、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド（３１５ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を幾らか含む（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドに、ｐ−ＴｓＯＨ．Ｈ_２Ｏ（２１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で３０分間加熱した。反応物を酢酸エチルと水の間に分配させて、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。溶媒の除去後、残渣をカラムクロマトグラフィー（２０−８０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルブタン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを得た（９２ｍｇ、３１％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５３４．２、実測値 ５３５．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．７２分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.32 (s, 1H), 7.53 (d, J＝1.0 Hz, 1H), 7.43−7.31 (m, 4H), 6.17 (s, 1H), 4.97−4.92 (m, 2H), 4.41 (dd, J＝2.4, 15.0 Hz, 1H), 4.23 (t, J＝5.0 Hz, 1H), 4.08 (dd, J＝8.6, 15.1 Hz, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.48−3.44 (m, 1H), 3.41−3.33 (m, 1H), 3.20 (dd, J＝7.4, 12.7 Hz, 2H), 1.94−1.90 (m, 2H), 1.48−1.45 (m, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.41 (s, 3H) および 1.15−1.12 (m, 2H) ppm．

【0206】

実施例１５：１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（（Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドおよび（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化41】

【0207】

１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（（Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドおよび（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（（Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドおよび（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを、（Ｒ）−２−（４−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール）を幾らか含む２−（４−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メトキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドールから出発して、上記の方法と同様にして製造した。１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（（Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−１−（（Ｒ）−２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ６０８．２、実測値 ６０９．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．６７分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.32 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.43−7.31 (m, 4H), 6.19 (s, 1H), 4.95−4.93 (m, 2H), 4.51 (d, J＝5.0 Hz, 1H), 4.42−4.39 (m, 2H), 4.10−4.04 (m, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.49−3.43 (m, 2H), 3.41−3.33 (m, 1H), 3.30−3.10 (m, 6H), 2.02−1.97 (m, 2H), 1.48−1.42 (m, 8H) および 1.13 (dd, J＝4.0, 6.7 Hz, 2H) ppm；（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−（４−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）−２−メチルブタン−２−イル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５３４．２、実測値 ５３５．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．８１分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 10.91 (d, J＝1.5 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42−7.33 (m, 3H), 7.03 (d, J＝10.9 Hz, 1H), 6.07 (d, J＝1.6 Hz, 1H), 4.56 (d, J＝5.0 Hz, 1H), 4.43 (t, J＝5.7 Hz, 1H), 3.51−3.46 (m, 1H), 3.31−3.13 (m, 6H), 1.88 (t, J＝7.3 Hz, 2H), 1.48−1.45 (m, 2H), 1.31 (s, 6H) および 1.15−1.12 (m, 2H) ppm。

【0208】

実施例１６：１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化42】

【0209】

１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを、（Ｒ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オールおよび３−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−メチルブタン−１−オールを含む混合物から出発して、上記の方法に従い製造した。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４４６．２、実測値 ４４７．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．８８分。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.68 (s, 1H), 8.20 (d, J＝7.7 Hz, 1H), 7.30−7.21 (m, 3H), 7.12 (d, J＝8.2 Hz, 1H), 6.94 (d, J＝11.2 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 3.64 (s, 2H), 1.75 (dd, J＝3.8, 6.8 Hz, 2H), 1.34 (s, 6H) および 1.14 (dd, J＝3.9, 6.9 Hz, 2H) ppm。

【0210】

実施例１７：（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化43】

【0211】

工程ａ：（Ｒ）−ベンジル ２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエートおよび（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル ２−（１−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート
炭酸セシウム（８．２３ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１７ｍＬ）中、ベンジル ２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート（３．０ｇ、８．４ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル ４−メチルベンゼンスルホネート（７．２３ｇ、２５．３ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。反応物を、窒素雰囲気下で、８０℃にて４６時間撹拌した。次いで、混合物を酢酸エチルと水の間に分配させた。水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過して濃縮した。上記の生成物の両方を含む粘性の褐色油状物である粗生成物を、さらに精製することなく直接用いた。（Ｒ）−ベンジル ２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４７０．２、実測値 ４７１．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．２０分。（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル ２−（１−（（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４９４．５、実測値 ４９５．７ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．０１分。

【0212】

工程ｂ：（Ｒ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール
工程（ａ）で得られた粗反応混合物をＴＨＦ（４２ｍＬ）中に溶解し、氷浴中で冷却した。ＬｉＡｌＨ_４（１６．８ｍＬの１Ｍ溶液、１６．８ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。添加の完了後、反応物をさらに５分間撹拌した。反応物を、水（１ｍＬ）、１５％ＮａＯＨ溶液（１ｍＬ）、その後、水（３ｍＬ）の添加により急冷した。混合物をセライト濾過し、固体をＴＨＦおよび酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（３０−６０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、生成物を褐色油状物として得た（２．６８ｇ、２工程で８７％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ３６６．４、実測値 ３６７．３ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．６８分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.34 (d, J＝7.6 Hz, 1H), 7.65 (d, J＝13.4 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.94 (t, J＝5.4 Hz, 1H), 4.64−4.60 (m, 1H), 4.52−4.42(m, 2H), 4.16−4.14 (m, 1H), 3.76−3.74 (m, 1H), 3.63−3.53 (m, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.38−1.36 (m, 6H) および 1.19 (s, 3H) ppm。

【0213】

工程ｃ：（Ｒ）−２−（５−アミノ−１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール
（Ｒ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール（２．５ｇ、６．８２ｍｍｏｌ）を、エタノール（７０ｍＬ）に溶解し、反応物をＮ_２でフラッシュした。次いで、Ｐｄ−Ｃ（２５０ｍｇ、５％重量）を添加した。反応物を再び窒素でフラッシュし、次いでＨ_２（ａｔｍ）下で撹拌した。２．５時間後、生成物への部分的な変換がＬＣＭＳにより観察された。反応物をセライトを通して濾過した。残渣を、上記の条件に再び付した。２時間後、ＬＣＭＳにより、生成物への完全な変換が示された。反応混合物をセライトを通して濾過した。濾液を濃縮して、生成物を黒色固体として得た（１．８２ｇ、７９％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ３３６．２、実測値 ３３７．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間０．８６分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 7.17 (d, J＝12.6 Hz, 1H), 6.76 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.79−4.76 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.37−4.31 (m, 3H),4.06 (dd, J＝6.1, 8.3 Hz, 1H), 3.70−3.67 (m, 1H), 3.55−3.52 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.32 (s, 6H) および 1.21 (s, 3H) ppm。

【0214】

工程ｄ：（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
ＤＭＦ（３滴）を、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボン酸（１．８７ｇ、７．７ｍｍｏｌ）および塩化チオニル（１．３０ｍＬ、１７．９ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に添加した。１時間後、透明溶液が形成された。該溶液を真空下で濃縮し、次いでトルエン（３ｍＬ）を添加し、混合物を再び濃縮した。トルエン工程をもう一度繰り返し、残渣を高真空下に１０分間置いた。次いで、酸塩化物をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、ジクロロメタン（４５ｍＬ）中、（Ｒ）−２−（５−アミノ−１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール（１．８ｇ、５．４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２．２４ｍＬ、１６．１ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。反応物を室温で１時間撹拌した。反応物を１Ｎ ＨＣｌ溶液、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して、生成物を黒色泡状固体として得た（３ｇ、１００％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５６０．６、実測値 ５６１．７ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．０５分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42−7.40 (m, 2H), 7.34−7.30 (m, 3H), 6.24 (s, 1H), 4.51−4.48 (m, 1H), 4.39−4.34 (m,2H), 4.08 (dd, J＝6.0, 8.3 Hz, 1H), 3.69 (t, J＝7.6 Hz, 1H), 3.58−3.51 (m, 2H), 1.48−1.45 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 1.34−1.33 (m, 6H), 1.18 (s, 3H) および 1.14−1.12 (m, 2H) ppm。

【0215】

工程ｅ：（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
（Ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド（３．０ｇ、５．４ｍｍｏｌ）を、メタノール（５２ｍＬ）中に溶解した。水（５．２ｍＬ）を添加し、次いでｐ−ＴｓＯＨ．Ｈ_２Ｏ（２０４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を８０℃で４５分間加熱した。溶液を濃縮し、次いで酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ_３溶液の間に分配させた。酢酸エチル層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（５０−１００％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、生成物をクリーム色の泡状固体として得た（１．３ｇ、４７％、ＳＦＣによりｅｅ＞９８％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５２０．５、実測値 ５２１．７ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．６９分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42−7.38 (m, 2H), 7.33−7.30 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 5.01 (d, J＝5.2 Hz, 1H), 4.90 (t, J＝5.5 Hz, 1H), 4.75 (t, J＝5.8 Hz, 1H), 4.40 (dd, J＝2.6, 15.1 Hz, 1H), 4.10 (dd, J＝8.7, 15.1 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.65−3.54 (m, 2H), 3.48−3.33 (m, 2H), 1.48−1.45 (m, 2H), 1.35 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) および 1.14−1.11 (m, 2H) ppm。

【0216】

実施例１８：（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化44】

【0217】

工程ａ：（Ｓ）−ベンジル ２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエートおよび（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル ２−（１−（（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート
炭酸セシウム（２．７４ｇ、８．４ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５．６ｍＬ）中、ベンジル ２−（６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート（１．０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）および（Ｓ）−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル ４−メチルベンゼンスルホネート（３．２１ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。反応物を、窒素雰囲気下で、８０℃にて６４時間撹拌した。次いで、混合物を酢酸エチルと水の間に分配させた。水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させて、濾過し、濃縮した。上記の生成物の両方を含む粘性の褐色油状物である粗生成物を、さらに精製することなく直接用いた。（Ｓ）−ベンジル ２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４７０．２、実測値 ４７１．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．２２分。（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル ２−（１−（（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエート、ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ４９４．５、実測値 ４９５．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．０３分。

【0218】

工程ｂ：（Ｓ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール
（Ｓ）−ベンジル ２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエートおよび（（Ｒ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル ２−（１−（（（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパノエートの粗反応混合物の混合物を、ＴＨＦ（１５ｍＬ）中に溶解し、氷水浴中で冷却した。ＬｉＡｌＨ_４（２．８ｍＬの１Ｍ溶液、２．８ｍｍｏｌ）を滴下した。添加の完了後、反応物を５分間撹拌した。反応物を水（０．５ｍＬ）、１５％ＮａＯＨ溶液（０．５ｍＬ）、次いで水（１．５ｍＬ）の添加により急冷した。混合物をセライトで濾過し、固体をＴＨＦおよび酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（３０−６０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、生成物を褐色油状物として得た（５０５ｍｇ、２工程で４９％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ３６６．４、実測値 ３６７．３ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．６８分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.34 (d, J＝7.6 Hz, 1H), 7.65(d, J＝13.5 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.94 (t, J＝5.4 Hz, 1H), 4.64−4.60 (m, 1H), 4.52−4.42 (m, 2H), 4.14 (dd, J＝6.2, 8.4 Hz, 1H), 3.74 (dd, J＝7.0, 8.3 Hz, 1H), 3.63−3.53 (m,2H), 1.42 (s, 3H), 1.37 (m, 6H) および 1.19 (s, 3H) ppm。

【0219】

工程ｃ：（Ｓ）−２−（５−アミノ−１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール
（Ｓ）−２−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール（５００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を、エタノール（１５ｍＬ）中に溶解し、反応物をＮ_２でフラッシュした。次いで、Ｐｄ−Ｃ（５０ｍｇ、５％重量）を添加した。反応物を再び窒素でフラッシュし、次いでＨ_２（ａｔｍ）下で撹拌した。１時間後、生成物への部分的な変換がＬＣＭＳにより観察された。反応物をセライトを通して濾過し濃縮した。残渣を、上記の条件に再び付した。１時間後、ＬＣＭＳにより、生成物への完全な変換が示された。反応混合物をセライトを通して濾過した。濾液を濃縮して、生成物を黒色固体として得た（４２０ｍｇ、９１％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ３３６．２、実測値 ３３７．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間０．９０分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 7.17 (d, J＝12.6 Hz, 1H), 6.76 (d, J＝9.0 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.78 (br s, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.41−4.27 (m, 3H), 4.06(dd, J＝6.1, 8.3 Hz, 1H), 3.70−3.67 (m, 1H), 3.53 (dd, J＝10.7, 17.2 Hz, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.32 (s, 6H) および 1.21 (s, 3H) ppm。

【0220】

工程ｄ：（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
ＤＭＦ（３滴）を、１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボン酸（１８７ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）および塩化チオニル（０．１３ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に添加した。３０分後、透明溶液が形成された。少量をピペリジンと混合して、酸塩化物が形成されたことを試験した。溶液をｒｏｔｏｖａｐ中で濃縮し、次いでトルエン（１ｍＬ）を添加し、混合物を再び濃縮した。トルエン工程をもう一度繰り返し、残渣を高真空下に１０分間置いた。次いで、酸塩化物をジクロロメタン（２ｍＬ）中に溶解し、ジクロロメタン（４ｍＬ）中、（Ｓ）−２−（５−アミノ−１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）−２−メチルプロパン−１−オール（２００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。反応物を室温で４５分間撹拌した。反応物を１Ｎ ＨＣｌ溶液、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して、生成物を黒色泡状固体として得た（３２０ｍｇ、９６％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５６０．６、実測値 ５６１．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間２．０５分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42−7.40 (m, 2H), 7.34−7.30 (m, 3H), 6.24 (s, 1H), 4.84 (t, J＝5.5 Hz, 1H), 4.51−4.46 (m, 1H), 4.41−4.32 (m, 2H), 4.08 (dd, J＝6.0, 8.3 Hz, 1H), 3.71−3.67 (m, 1H), 3.58−3.50 (m, 2H), 1.48−1.45 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.34−1.33 (m, 6H), 1.18 (s, 3H) および 1.14−1.12 (m, 2H) ppm。

【0221】

工程ｅ：（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド
（Ｓ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（１−（（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）メチル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド（２９０ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を、メタノール（５ｍＬ）中に溶解した。水（０．５ｍＬ）を添加し、次いでｐ−ＴｓＯＨ．Ｈ_２Ｏ（２０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を８０℃で４５分間加熱した。次いで、溶液を酢酸エチルと飽和ＮａＨＣＯ_３溶液の間に分配させた。酢酸エチル層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（５０−１００％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して、生成物をクリーム色の泡状固体として得た（１４６ｍｇ、５４％、ＳＦＣによりｅｅ＞９７％）。ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ 計算値 ５２０．５、実測値 ５２１．５ （Ｍ＋１）^＋。保持時間１．６７分。¹H NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (d, J＝1.1 Hz, 1H), 7.42−7.37 (m, 2H), 7.33−7.30 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 5.01 (d, J＝5.0 Hz, 1H), 4.91 (t, J＝5.5 Hz, 1H), 4.75 (t, J＝5.8 Hz, 1H), 4.42−4.38 (m, 1H), 4.10 (dd, J＝8.8, 15.1 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.64−3.54 (m, 2H), 3.48−3.33 (m, 2H), 1.48−1.45 (m, 2H), 1.35 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) および 1.14−1.11 (m, 2H) ppm。

【0222】

実施例１９：（Ｒ）−１−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化45】

【0223】

（Ｒ）−１−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを、１−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボン酸および２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドールから、実施例７２と同様の実験方法を用いて製造した。

【0224】

実施例２０：（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミド

【化46】

【0225】

（Ｓ）−１−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチル−１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−１Ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを、１−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）シクロプロパンカルボン酸および２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−フルオロ−５−ニトロ−１Ｈ−インドールから、実施例７２と同様の実験方法を用いて製造した。

【0226】

化学分野の当業者は、下記の表３の化合物を含む本発明の化合物を合成するための公知の合成方法と合わせて、実施例およびスキームを用いることができる。

【0227】

【表2】

【表3】

【0228】

実施例２１：化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ矯正（correction）特性を検出および測定するためのアッセイ
化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節特性をアッセイするための光学的膜電位方法
該アッセイは、ＮＩＨ３Ｔ３細胞における機能的ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増大を読み出すために、蛍光プレートレーダー（例えば、FLIPR III, Molecular Devices, Inc.）を用いて膜電位の変化を測定するために蛍光電圧検出色素を利用する。応答の駆動力は、細胞を予め化合物で処理し、その後、電圧検出色素を充填した後の、単回液体添加工程によるチャネル活性化と関連する塩化物イオン勾配の構築である。

【0229】

矯正化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲと関係する輸送障害を矯正する小分子を同定するため、単一付加（single−addition）ＨＴＳアッセイフォーマットを開発した。細胞を含むアッセイプレートを、３７℃、５％ＣＯ_２、９０％湿度で組織培養インキュベーター中、〜２−４時間インキュベートする。次いで、細胞を、アッセイプレートの底に接着後に、化合物暴露様に準備する。

【0230】

細胞を、血清不含有媒体中、試験化合物の存在または不存在下（陰性対照）で、３７℃、５％ＣＯ_２、９０％湿度の組織培養インキュベーター中、１６−２４時間インキュベートした。その後、細胞をクレブスリンゲル溶液で３回濯ぎ、電位感受性再分布色素を充填した。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを活性化するため、１０μＭフォルスコリンおよびＣＦＴＲ増強剤、ゲニステイン（２０μＭ）を、各ウェルにＣｌ⁻不含有媒体と共に添加した。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ活性化に応答してＣｌ⁻排出を促進するＣｌ⁻不含有媒体の添加およびその結果の膜脱分極を、電位感受性色素を用いて光学的に測定した。

【0231】

増強化合物の同定
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの増強剤を同定するため、二重付加（double−addition）ＨＴＳアッセイフォーマットを開発した。このＨＴＳアッセイは、温度矯正ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ ＮＩＨ ３Ｔ３細胞において、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの開閉（伝導性）の増強を測定するために、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩ上で膜電位の変化を測定するための蛍光電位感受性色素を利用する。応答の駆動力は、細胞を予め増強化合物（または、ＤＭＳＯビヒクル対照）で処理し、その後、再分配色素を充填した後の、ＦＬＩＰＲ ＩＩＩのような蛍光プレートレーダーを用いる単回液体添加工程における、フォルスコリンでのチャネル活性化と関連する塩素イオン勾配である。

【0232】

溶液 浴溶液＃１：ＮａＣｌ １６０ｍＭ、ＫＣｌ ４．５ｍＭ、ＣａＣｌ_２ ２ｍＭ、ＭｇＣｌ_２ １ｍＭ、ＨＥＰＥＳ １０ｍＭ、ＮａＯＨでｐＨ７．４。
塩化物不含有浴溶液：浴溶液＃１中塩化物塩を、グルコン酸塩に置き換える。

【0233】

細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、膜電位の光学的測定に用いた。細胞を、１７５ｃｍ^２培養フラスコ中、２ｍＭグルタミン、１０％ウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、および２５ｍＭ ＨＥＰＥＳを添加したダルベッコの修飾イーグルス媒体中で、３７℃にて５％ＣＯ_２下で、９０％湿度にて維持した。全ての光学アッセイに関して、細胞を、３８４ウェルマトリゲル−コートしたプレート中〜２０，０００／ウェルで播種し、３７℃で２時間培養し、その後、増強剤アッセイのために２７℃で２４時間培養した。矯正アッセイに関して、細胞を１６−２４時間、化合物を含有または不含有下、２７℃または３７℃で培養した。

【0234】

化合物のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ調節特性をアッセイするための電気生理的アッセイ
１．ユッシングチャンバーアッセイ
ユッシングチャンバー実験を、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを発現する極性化上皮細胞で行い、光学的アッセイで同定したΔＦ５０８−ＣＦＴＲモジュレーターをさらに特徴付けた。非ＣＦおよびＣＦ気道上皮細胞を、既報の培養された気管支組織から単離し（Galietta, L.J.V., Lantero, S., Gazzolo, A., Sacco, O., Romano, L., Rossi, G.A., & Zegarra−Moran, O. (1998) In vitro Cell. Dev. Biol. 34, 478−481）、ＮＩＨ３Ｔ３−馴化培地で予めコーティングしたCostar（商標）Snapwell^{（登録商標）}フィルター上にプレーティングした。４日後、頂端部媒体（apical media）を除去し、細胞を、使用前に＞１４日間、気液界面で増殖させた。この結果、繊毛化した完全分化したカラム化細胞の単層が得られ、それは気道上皮の特徴を示す。非ＣＦ ＨＢＥを、何らかの公知の肺疾患を有さない非喫煙者から単離した。ＣＦ−ＨＢＥを、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲのホモ接合体患者から単離した。

【0235】

Costar（商標）Snapwell^{（登録商標）}細胞培養インサート上で増殖したＨＢＥを、ユッシングチャンバー（Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA）中にマウントし、基底外側から頂端部のＣｌ⁻勾配（Ｉ_ＳＣ）の存在下、経上皮抵抗性および短絡回路電流を、電圧固定システム（Department of Bioengineering, University of Iowa, IA）を用いて測定した。簡単には、ＨＢＥを、電圧固定記録条件（Ｖ_ｈｏｌｄ＝０ｍＶ）下、３７℃で調べた。基底外側溶液は、１４５ｍＭ ＮａＣｌ、０．８３ｍＭ Ｋ_２ＨＰＯ_４、３．３ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４、１．２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１．２ｍＭ ＣａＣｌ_２、１０ｍＭ グルコース、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ＮａＯＨでｐＨ７．３５に合わせた）を含み、頂端部溶液は、１４５ｍＭ グルコン酸Ｎａ、１．２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１．２ｍＭ ＣａＣｌ_２、１０ｍＭ グルコース、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ＮａＯＨでｐＨ７．３５に合わせた）を含んでいた。

【0236】

矯正化合物の同定
典型的なプロトコールは、基底側から頂端膜のＣｌ⁻濃度勾配を利用した。この勾配を設定するため、通常のリンゲル溶液を基底側膜に用い、一方、頂端ＮａＣｌを、等モルのグルコン酸ナトリウムに置き換え（ＮａＯＨを用いてｐＨ７．４に滴定）、上皮を横切る大きなＣｌ⁻濃度勾配を得た。全ての実験を、無傷の単層で行った。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを完全に活性化するため、頂端側に、フォルスコリン（１０μＭ）、ＰＤＥ阻害物質、ＩＢＭＸ（１００μＭ）およびＣＦＴＲ増強剤、ゲニステイン（５０μＭ）を添加した。

【0237】

他の細胞タイプにおける観察として、△Ｆ５０８−ＣＦＴＲを発現する、ＦＲＴ細胞およびＣＦ罹患患者から単離したヒト気管支上皮細胞（ＣＦ−ＨＢＥ）の低温でのインキュベートは、細胞膜でのＣＦＴＲの機能的密度を増大する。矯正化合物の活性を決定するため、細胞を試験化合物と共に２４−４８時間３７℃にてインキュベートし、その後、３回洗浄して、記録した。化合物処理した細胞におけるｃＡＭＰ−およびゲニステイン−仲介Ｉ_ＳＣを、３７℃対照に標準化し、ｗｔ−ＨＢＥにおけるＣＦＴＲ活性の活性％として現した。細胞と矯正化合物のプレインキュベーションは、３７℃対照と比較して、ｃＡＭＰ−およびゲニステイン−仲介Ｉ_ＳＣを顕著に増大した。

【0238】

増強化合物の同定
典型的なプロトコールは、基底側から頂端膜のＣｌ⁻濃度勾配を利用した。この勾配を設定するため、通常のリンゲル溶液を基底側膜に用い、一方、頂端ＮａＣｌを、等モルのグルコン酸ナトリウムに置き換え（ＮａＯＨを用いてｐＨ７．４に滴定）、上皮を横切る大きなＣｌ⁻濃度勾配を得た。フォルスコリン（１０μＭ）および全ての試験化合物を、頂端側の細胞培養インサートに添加した。推定上のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強剤の効果を、公知の増強剤であるゲニステインのそれと比較した。

【0239】

２．パッチクランプ記録
ΔＦ５０８−ＮＩＨ３Ｔ３細胞中、全Ｃｌ⁻電流を、既報の有孔パッチ記録構成（Rae, J., Cooper, K., Gates, P., ＆ Watsky, M. (1991) J. Neurosci. Methods 37, 15−26）を用いて測定した。電圧−クランプ記録を、Axopatch 200B パッチクランプ増幅器（Axon Instruments Inc., Foster City, CA）を用いて２２℃で行った。ピペット溶液は、１５０ｍＭ Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＮＭＤＧ）−Ｃｌ、２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２ｍＭ ＣａＣｌ_２、１０ｍＭ ＥＧＴＡ、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳおよび２４０μｇ／ｍｌアンホテリシン−Ｂ（ＨＣｌでｐＨ７．３５に合わせた）を含んでいた。細胞外培地は、１５０ｍＭ ＮＭＤＧ−Ｃｌ、２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２ｍＭ ＣａＣｌ_２、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ＨＣｌでｐＨ７．３５に合わせた）を含んでいた。パルス発生、データ収集および分析を、Clampex 8に接続されたDigidata 1320 Ａ／Ｄインターフェースを備えたＰＣ（Axon Instruments Inc.）を用いて実施した。活性化するために、ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ、１０μＭ フォルスコリンおよび２０μＭ ゲニステインを浴に添加し、電流電圧関係を３０秒毎にモニターした。

【0240】

矯正化合物の同定
細胞膜における機能的△Ｆ５０８−ＣＦＴＲの密度を増大するための矯正化合物の活性を決定するため、本発明者らは、上記の有孔パッチ−記録技術を矯正化合物で２４時間処理後の電流密度を測定するために用いた。△Ｆ５０８−ＣＦＴＲを完全に活性化するため、１０μＭフォルスコリンおよび２０μＭゲニステインを細胞に添加した。本発明の記録条件下で、２７℃で２４時間インキュベート後の電流密度は、３７℃で２４時間インキュベート後に観察される密度よりも高かった。これらの結果は、細胞膜における△Ｆ５０８−ＣＦＴＲの密度に対する低温インキュベートの公知の効果と一致する。ＣＦＴＲ電流密度に対する矯正化合物の効果を決定するため、細胞を、３７℃で２４時間、１０μＭの試験化合物と共にインキュベートし、電流密度を２７℃および３７℃対照と比較した（％活性）。記録の前に、細胞を細胞外記録培地で３回洗浄して、残っている試験化合物を除去した。１０μＭの矯正化合物とのプレインキュベーションは、３７℃対照と比較して、ｃＡＭＰ−およびゲニステイン−依存性電流を顕著に増大した。

【0241】

増強化合物の同定
△Ｆ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞における巨視的ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ Ｃｌ⁻電流（Ｉ_{ΔＦ５０８}）を増大するΔＦ５０８−ＣＦＴＲ増強剤の能力もまた、有孔パッチ−記録技術を用いて調査した。光学アッセイで同定された増強剤は、光学アッセイにおいて同様の効力および観察された効果を有するＩ_{ΔＦ５０８}において用量依存的増大を引き起こした。試験した全ての細胞において、増強剤適用前および適用中の逆転電位は、約−３０ｍＶであって、それは、計算されたＥ_Ｃｌである（−２８ｍＶ）。

【0242】

細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、全細胞記録に用いた。該細胞を、１７５ｃｍ^２培養フラスコ中、２ｍＭグルタミン、１０％ウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、および２５ｍＭ ＨＥＰＥＳを添加したダルベッコの修飾イーグルス培地中、５％ＣＯ_２および９０％湿度にて、３７℃で維持した。全細胞記録のために、２，５００−５，０００細胞を、ポリ−Ｌ−リシン−コートしたガラスのカバースリップ上に播種し、２７℃にて２４−４８時間培養し、その後、増強剤の活性を試験するために用いた；そして、矯正体の活性を測定するために、３７℃にて矯正化合物の有無においてインキュベートした。

【0243】

３．単一チャネル記録
ＮＩＨ３Ｔ３細胞において安定に発現される温度修正ΔＦ５０８−ＣＦＴＲの単一チャネル活性および増強化合物の活性を、Axopatch 200B patch−clamp amplifier （Axon Instruments Inc.）を用いて、既報（Dalemans, W., Barbry, P., Champigny, G., Jallat, S., Dott, K., Dreyer, D., Crystal, R.G., Pavirani, A., Lecocq, J-P., Lazdunski, M. (1991) Nature 354, 526−528）の通り切り離した内側−外側細胞膜パッチを用いて観察した。ピペットは、１５０ｍＭ ＮＭＤＧ、１５０ｍＭ アスパラギン酸、５ｍＭ ＣａＣｌ_２、２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、および１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（トリス塩基でｐＨ７．３５に合わせた）を含んでいた。浴は、１５０ｍＭ ＮＭＤＧ−Ｃｌ、２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、５ｍＭ ＥＧＴＡ、１０ｍＭ ＴＥＳおよび１４ｍＭ トリス塩基（ＨＣｌでｐＨ７．３５に合わせた）を含んでいた。切除後、野生型およびΔＦ５０８−ＣＦＴＲの両方ともが、１ｍＭ Ｍｇ−ＡＴＰ、７５ｎＭ ｃＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼの触媒サブユニット（ＰＫＡ； Promega Corp. Madison, WI）、およびタンパク質ホスファターゼの阻害のための１０ｍＭ ＮａＦの添加により活性化され、それは電流低下を阻止した。ピペット電位は、８０ｍＶで維持した。チャネル活性を、≦２活性チャネルを含む膜パッチから分析した。同時に開く最大数が、実験コース中、活性チャネルの数を決定した。単一チャネル電位振幅を決定するため、１２０秒のΔＦ５０８−ＣＦＴＲ活性から記録されたデータを、１００Ｈｚで“オフライン”フィルター処理し、次いで、Bio−Patch Analysisソフトウェア（Bio−Logic Comp. France）を用いてマルチガウス関数に合わせた、全ての振幅点ヒストグラムを構築するために用いた。顕微鏡的総電位および開確率（Ｐ_ｏ）が、１２０秒のチャネル活性から決定された。Ｐ_ｏを、Ｂｉｏ−Ｐａｔｃｈソフトウェアを用いて決定するか、またはＰ_ｏ＝Ｉ／ｉ（Ｎ）（式中、Ｉ＝平均電流、ｉ＝単一チャネル電位振幅であり、Ｎ＝パッチにおける活性チャネルの数である。）の関係から決定した。

【0244】

細胞培養
ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定に発現するＮＩＨ３Ｔ３マウス線維芽細胞を、切除した膜のパッチクランプ記録に用いた。該細胞を、１７５ｃｍ^２培養フラスコ中、２ｍＭグルタミン、１０％ウシ胎仔血清、１×ＮＥＡＡ、β−ＭＥ、１×ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ、および２５ｍＭ ＨＥＰＥＳを添加したダルベッコの修飾イーグルス培地中、５％ＣＯ_２および９０％湿度で、３７℃にて維持した。単一チャネル記録のため、２，５００−５，０００細胞を、ポリ−Ｌ−リシン−コートしたガラスのカバースリップ上に播種し、２７℃で２４−４８時間インキュベートし、その後使用した。

【0245】

本発明の化合物は、上記のアッセイで測定された通り、矯正活性を示すことが見いだされた。

【0246】

本発明の化合物は、ＡＴＰ結合カセット輸送体のモジュレーターとして有用である。上記の方法を用いて、本発明の化合物の活性、すなわちＥＣ５０は、約３．８ｎＭないし約１３．５μＭであると測定された。さらに、上記の方法を用いて、本発明の化合物の効力は、約３５％ないし約１１０％であると測定された。

【0247】

表４において、以下の意味が適用される：
ＥＣ５０：“＋＋＋”は、＜２ｕＭを意味する；“＋＋”は、２ｕＭないし５ｕＭを意味する；“＋”は、５ｕＭないし２５ｕＭを意味する。
％効果：“＋”は、＜２５％を意味する；“＋＋”は、２５％ないし１００％を意味する；“＋＋＋”は、＞１００％を意味する。

【表4】

【0248】

他の態様
本発明をその詳細な記載と関連して記載しているが、前記は説明を意図するものであり、本発明の範囲を制限するものではなく、それは添付の特許請求の範囲により定義されるものであることは理解されるべきである。他の局面、利点および修飾は、特許請求の範囲の範囲内である。