特許 5774091 疼痛治療のためのセロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターとオピオイド作動物質との組み合わせ

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5774091

(24)【登録日】2015年7月10日

(45)【発行日】2015年9月2日

(54)【発明の名称】疼痛治療のためのセロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターとオピオイド作動物質との組み合わせ

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/451 20060101AFI20150813BHJP

   A61K 31/485 20060101ALI20150813BHJP

   A61P 25/04 20060101ALI20150813BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20150813BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/451

   A61K31/485

   A61P25/04

   A61P43/00 121

   A61P43/00 114

   A61P43/00 111

【請求項の数】11

【全頁数】27

(21)【出願番号】特願2013-506308(P2013-506308)

(86)(22)【出願日】2011年4月21日

(65)【公表番号】特表2013-525372(P2013-525372A)

(43)【公表日】2013年6月20日

(86)【国際出願番号】US2011033461

(87)【国際公開番号】WO2011133790

(87)【国際公開日】20111027

【審査請求日】2014年3月4日

(31)【優先権主張番号】61/326,944

(32)【優先日】2010年4月22日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】514190040

【氏名又は名称】セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】マーティン， ウィリアム ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】シェン， フェイ

(72)【発明者】

【氏名】スミス， ジャックリーン エー．エム．

【審査官】 石井 裕美子

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００６−５２２０２７（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／４５１

Ａ６１Ｋ ３１／４８５

Ａ６１Ｐ ２５／０４

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ほ乳動物における疼痛状態を治療するためにオピオイド作動剤と組み合わせて使用するための組成物であって、前記組成物は、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩である、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤を含み、
前記オピオイド作動剤が、疼痛状態を治療するために単独使用時に使用される用量よりも低用量で使用され、前記オピオイド作動剤が、モルヒネまたはオキシコドンである、
組成物。

【請求項2】

前記阻害剤が４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩である、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記疼痛状態が慢性痛である、請求項１または２に記載の組成物。

【請求項4】

前記ほ乳動物がヒトである、請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項5】

前記阻害剤が、疼痛状態を治療するために単独使用時に投与される用量よりも低用量で投与される、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項6】

前記阻害剤と前記オピオイド作動剤が異なる投与経路で投与される、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項7】

ほ乳動物において鎮痛作用をもたらすためにオピオイド作動剤と組み合わせて使用するための組成物であって、前記組成物は、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩である、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤を含み、
前記オピオイド作動剤が、鎮痛作用をもたらすために単独使用時に使用される用量よりも低用量で使用され、前記オピオイド作動剤が、モルヒネまたはオキシコドンである、
組成物。

【請求項8】

前記阻害剤が４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩である、請求項７に記載の組成物。

【請求項9】

前記ほ乳動物がヒトである、請求項７または８に記載の組成物。

【請求項10】

前記阻害剤が、鎮痛作用をもたらすために単独使用時に投与される用量よりも低用量で投与される、請求項７から９のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項11】

前記阻害剤と前記オピオイド作動剤が異なる投与経路で投与される、請求項７から１０のいずれか一項に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（発明の背景）
（発明の分野）
本発明は、疼痛の治療又は管理のための特定の特性を有するセロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターの使用、並びに疼痛の治療又は管理のための、特定のセロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターの単独での使用もしくはオピオイド作動物質と組み合わせての使用を対象とする。

【背景技術】

【0002】

（最新技術）
疼痛は、実際の若しくは潜在的な組織損傷に付随した、又はかかる損傷に関して記述される、不快な知覚性及び情動性の経験である（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｐａｉｎ（ＩＡＳＰ），Ｐａｉｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ）。手術後のものなどの急性痛は、通常、疼痛の根本的原因を取り除くと、又は傷害が治癒すると、解消する。慢性痛は、急性痛以上に、又は傷害治癒予想時間を超えて、継続する（非特許文献１）。神経因性疼痛は、神経系における一次病巣又は機能不全によって惹起されるか又はそれに起因する疼痛である。末梢性神経因性疼痛は、病変又は機能不全が末梢神経系に影響を及ぼすと発生し、中心性神経因性疼痛は、病変又は機能不全が中枢神経系に影響を及ぼすと発生する（ＩＡＳＰ）。

【0003】

幾つかのタイプの治療剤が疼痛治療に現在使用されている。これらのうち主要なものは、モルヒネ、オキシコドン、メサドン、レボルファノール、トラマドールなどのオピオイド作動物質である。特にモルヒネ及び他のオピオイド作動物質の鎮痛薬としての臨床使用は、呼吸抑制、鎮静作用、悪心及びおう吐、並びに耐性、身体的及び精神的依存の発生の可能性を含めて、安全性及び耐容性の懸念から限られている。

【0004】

オピオイドの治療指数を増加させる試みとしては、代替処方、例えば、遅延又は持続放出、及び患者が、治療コースにおいて異なるオピオイド作動物質を順番に使用するオピオイド回転戦略の開発が挙げられる。患者により調節される鎮痛の導入によって、オピオイド作動物質を自己滴定して鎮痛効力と治療に付随する副作用とのトレードオフを最適化することができるようになった。しかし、今のところ、オピオイド消費が少ないほど鎮痛作用は低下する。

【0005】

オピオイド作動物質の治療指数を高める別の手法は、オピオイドを異なる作用機序によって疼痛を治療する薬剤と組み合わせて投与する併用療法である。セロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビター（ＳＮＲＩ：ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ ａｎｄ ｎｏｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ ｒｅｕｐｔａｋｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）などの内因性神経伝達物質レベルを増大させる医薬は、幾つかの疼痛状態の治療に臨床上の利点を有する。これらの薬剤は、セロトニントランスポーター及びノルエピネフリントランスポーター（それぞれ、ＳＥＲＴ及びＮＥＴ）に結合することによって、セロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン、５−ＨＴ）とノルエピネフリン（ＮＥ）の両方の再取り込みを阻害する。２０年以上前、ノルエピネフリン及びセロトニンの再取り込みを阻害する三環系抗うつ薬デシプラミンが、術後の歯痛においてモルヒネ鎮痛作用を増強することが示された（非特許文献２）。疼痛治療のための併用療法の可能性は、依然として活発な研究分野である。例えば、前臨床ラット疼痛モデルにおいて髄腔内注射によって投与されたモルヒネとＳＮＲＩマプロチリン及びアミトリプチリンとの相互作用が最近報告された（非特許文献３）。

【0006】

併用療法の有用性についての初期の指摘や何年もの研究にもかかわらず、ＳＮＲＩとオピオイド作動物質を併用する治療プロトコルは慣用ではない。したがって、依然として、疼痛治療のためのＳＮＲＩとオピオイド作動物質の併用の潜在的有用性を活用する必要がある。さらに、依然として、オピオイド作動物質と組み合わせて使用したときに最大の鎮痛作用を与えるＳＮＲＩの薬理学的諸性質を明らかにする必要がある。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0007】

【非特許文献1】Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐａｉｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ．、“Ｐａｉｎ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｒｉｍａｒｙ Ｃａｒｅ Ｓｅｔｔｉｎｇ．”、２００６年、１５巻

【非特許文献2】Ｌｅｖｉｎｅら、（１９８６年）Ｐａｉｎ、２７巻、ｐ．４５−４９

【非特許文献3】Ｐｅｔｔｅｒｓｅｎら、（２００９年）Ａｎｅｓｔｈｅｉａ＆Ａｎａｌｇｅｓｉａ、１０９巻、ｐ．１３１２−１３１７

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0008】

（発明の要旨）
本発明は、疼痛治療のための特定のセロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビター（ＳＮＲＩ）の使用、及び疼痛治療のための、ＳＮＲＩとオピオイド作動物質との使用に関する。さらに、本発明は、オピオイド作動物質が、単独使用時に所与の鎮痛作用レベルを得るのに必要な用量よりも少ない用量で使用される、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターとオピオイド作動物質の使用にも関する。

【0009】

二元的なセロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターである４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン（１）

【0010】

【化1】

及び薬学的に許容されるその塩は、米国特許出願公開第２０１０／０１２５０９２号Ａ１及び同２０１０／０１２５０９３号Ａ１として２０１０年５月２０日にそれぞれ公開された米国特許出願第１２／６１７，８２１号及び同１２／６１７，８３８号中に開示された。特に、化合物１の塩酸塩がその中で開示された。

【0011】

化合物１は、細胞を用いたｉｎ ｖｉｔｒｏ神経伝達物質取り込みアッセイにおいてＮＥＴ及びＳＥＲＴ活性の強力な阻害剤であることが示され、前臨床疼痛モデルにおいてｉｎ ｖｉｖｏで有効性が示された。したがって、化合物１は、疼痛治療に有益であることが期待される。化合物１と有効用量未満のモルヒネの同時投与によって、ラットホルマリン疼痛モデルにおいて疼痛挙動がかなり減少した。したがって、化合物１は、鎮痛作用についてモルヒネと相乗的相互作用を示した。特に、化合物１とオピオイド作動物質の同時投与は、より低いオピオイド用量で有効な鎮痛作用を与えることが期待され、すなわちオピオイドの節約が期待される。

【0012】

本発明の一態様は、ほ乳動物における疼痛状態を治療する方法であって、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩をほ乳動物に投与することを含む、方法に関する。本発明の別の一態様は、疼痛状態を治療する方法であって、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩とオピオイド作動剤を投与することを含む、方法に関する。特定の一態様においては、併用療法において、オピオイド作動物質は、単独使用時に鎮痛作用を与えるのに有効な用量未満で、すなわち単独使用時に所与の鎮痛作用レベルを得るのに必要な用量よりも低用量で、投与される。更に別の特定の一態様においては、併用療法において、有効用量未満の４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジンと有効用量未満のオピオイド作動物質を患者に投与する。特定の一態様においては、上記方法が対象とする疼痛状態は慢性痛である。

【0013】

疼痛治療用鎮痛薬として使用されるオピオイド作動物質としては、モルヒネ、オキシコドン、メサドン、レボルファノール及びトラマドールが挙げられるが、それだけに限定されない。特定の一態様においては、本発明は、オピオイド作動剤がモルヒネである、疼痛状態を治療する併用方法に関する。別の特定の一態様においては、本発明は、オピオイド作動剤がオキシコドンである、疼痛状態を治療する併用方法に関する。

【0014】

本発明の別の一態様は、ほ乳動物において鎮痛作用をもたらす方法であって、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩をほ乳動物に投与することを含む、方法、及びほ乳動物において鎮痛作用をもたらす方法であって、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩とオピオイド作動剤をほ乳動物に投与することを含む、方法に関する。更に別の一態様においては、本発明は、オピオイド作動物質が、単独使用時に所与の鎮痛作用レベルを得るのに必要な用量よりも低用量で投与される、方法に関する。

【0015】

更に別の一態様においては、本発明は、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩、オピオイド作動剤、及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物に関する。特定の態様においては、オピオイド作動剤はモルヒネであり、又はオピオイド作動剤はオキシコドンである。

【0016】

ｉｎ ｖｉｔｒｏ神経伝達物質取り込みアッセイのＳＥＲＴとＮＥＴのＩＣ_５０値比で判定して、セロトニン再取り込み（ＳＥＲＴ活性）の阻害に比べてノルエピネフリン再取り込み（ＮＥＴ活性）の阻害が約２倍から約４０倍選択的であるＳＮＲＩは、オピオイド作動物質との相乗作用を示すが、ＳＥＲＴ選択的ＳＮＲＩは相乗作用を示さないことが認められた。

【0017】

本発明の別の一態様は、したがって、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターが疼痛治療用オピオイド作動物質との相乗作用を示すかどうか予測する方法に関する。この方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ神経伝達物質取り込みアッセイにおいてＳＥＲＴ及びＮＥＴ ＩＣ_５０値を測定すること、並びにＳＥＲＴとＮＥＴのＩＣ_５０値比が、約２から約３０、約４から約３０、及び約４から約１０を含めて、約２から約４０であるかどうかを判定することを含む。

【0018】

本発明の更に別の一態様は、ほ乳動物における疼痛状態を治療する方法に関する。この方法は、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤とオピオイド作動剤をほ乳動物に投与することを含む。オピオイド作動物質は、疼痛状態を治療するために単独投与時に投与される用量よりも低用量で投与され、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込みインヒビターは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ神経伝達物質取り込みアッセイで決定されるＳＥＲＴとＮＥＴのＩＣ_５０値比が、約２から約３０、約４から約３０、及び約４から約１０を含めて、約２から約４０である。

【0019】

本発明の更に別の一態様は、ほ乳動物における疼痛状態の治療のためにオピオイド作動剤と組み合わせて使用するための、［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩である、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤に関する。更に別の一態様は、ほ乳動物において鎮痛作用をもたらすためにオピオイド作動剤と組み合わせて使用するための、［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩である、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤に関する。

【0020】

本発明の種々の態様を、添付図面を参照して説明する。
一実施形態において、例えば、以下の項目が提供される。
（項目１）
ほ乳動物における疼痛状態を治療するためにオピオイド作動剤と組み合わせて使用するための、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩である、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤。
（項目２）
前記オピオイド作動剤が、疼痛状態を治療するために単独使用時に使用される用量よりも低用量で使用される、項目１に記載の使用するための阻害剤。
（項目３）
前記阻害剤が４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩である、項目１又は項目２に記載の使用するための阻害剤。
（項目４）
前記疼痛状態が慢性痛である、項目１から３のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目５）
前記ほ乳動物がヒトである、項目１から４のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目６）
前記オピオイド作動剤がモルヒネである、項目１から５のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目７）
前記オピオイド作動剤がオキシコドンである、項目１から５のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目８）
前記阻害剤が、疼痛状態を治療するために単独使用時に投与される用量よりも低用量で投与される、項目１から７のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目９）
前記阻害剤と前記オピオイド作動剤が異なる投与経路で投与される、項目１から８のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目１０）
ほ乳動物において鎮痛作用をもたらすためにオピオイド作動剤と組み合わせて使用するための、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩である、セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤。
（項目１１）
前記オピオイド作動剤が、鎮痛作用をもたらすために単独使用時に使用される用量よりも低用量で使用される、項目１０に記載の使用するための阻害剤。
（項目１２）
前記阻害剤が４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩である、項目１０又は項目１１に記載の使用するための阻害剤。
（項目１３）
前記ほ乳動物がヒトである、項目１０から１２のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目１４）
前記オピオイド作動剤がモルヒネである、項目１０から１３のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目１５）
前記オピオイド作動剤がオキシコドンである、項目１０から１３のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目１６）
前記阻害剤が、鎮痛作用をもたらすために単独使用時に投与される用量よりも低用量で投与される、項目１０から１５のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目１７）
前記阻害剤と前記オピオイド作動剤が異なる投与経路で投与される、項目１０から１６のいずれか一項に記載の使用するための阻害剤。
（項目１８）
４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩と、オピオイド作動剤と、薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物。
（項目１９）
前記オピオイド作動剤がモルヒネ又はオキシコドンである、項目１８に記載の薬学的組成物。
（項目２０）
ほ乳動物における疼痛状態を治療するためにオピオイド作動剤と組み合わせて使用するためのセロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤であって、前記オピオイド作動剤が、疼痛状態を治療するために単独使用時に使用される用量よりも低用量で使用され、ｉｎ ｖｉｔｒｏ神経伝達物質取り込みアッセイで決定された前記阻害剤のＳＥＲＴとＮＥＴのＩＣ_５０値比が約２から４０である、阻害剤。
（項目２１）
前記オピオイド作動剤がモルヒネ又はオキシコドンである、項目２０に記載の阻害剤。
（項目２２）
セロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤が疼痛状態治療に対してオピオイド作動物質との相乗作用を示すかどうかを予測する方法であって、前記阻害剤のＳＥＲＴ及びＮＥＴのＩＣ_５０値をｉｎ ｖｉｔｒｏ神経伝達物質取り込みアッセイにおいて測定する工程、並びにＳＥＲＴとＮＥＴのＩＣ_５０値比が約２から約４０であるかどうかを判定する工程を含む、方法。
（項目２３）
ほ乳動物における疼痛状態を治療する方法であって、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩であるセロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤とオピオイド作動剤を前記ほ乳動物に投与する工程を含む、方法。
（項目２４）
ほ乳動物において鎮痛作用をもたらす方法であって、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン又は薬学的に許容されるその塩であるセロトニン・ノルエピネフリン再取り込み阻害剤とオピオイド作動剤を前記ほ乳動物に投与する工程を含む、方法。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】図１は、（ａ）４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝１２、１３）、（ｂ）アトモキセチン塩酸塩（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝１２、１６）、及び（ｃ）デュロキセチン塩酸塩（５ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝５、５）について、ＳＮＲＩ（白抜き棒グラフ、第１のｎ値）と１ｍｇ／ｋｇのモルヒネ

【0022】

【化2】

（ｎ＝４）の別々の効果を加算することによって予測されたラットホルマリンモデルにおけるビヒクル処理動物（ｖｅｈｉｃｌｅ−ｔｒｅａｔｅｄ ａｎｉｍａｌｓ）のたじろぎに対して正規化されたたじろぎ（ｆｌｉｎｃｈ）の減少率を、併用で観察された効果（しま模様の棒グラフ、第２のｎ値）と比較する。ここで、ｎは、反復数である。

【図2-1】図２は、ラットホルマリンモデルにおける４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩（１）の結果を示す。（ａ）モルヒネＳＣ単独（ｎ＝４〜５）及びモルヒネＳＣ＋ＩＰ化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝６〜１２）の用量反応曲線（ＤＲＣ）、並びに得られたＥＤ_５０値及び信頼区間（ＣＩ）、（ｂ）モルヒネＳＣ単独（ｎ＝４〜５）及びモルヒネＳＣ＋ＩＰ化合物１（３ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝６〜１２）の用量反応曲線、並びに得られたＥＤ_５０値及び信頼区間（ＣＩ）、（ｃ）化合物１ ＩＰ単独（ｎ＝１３〜１５）及び化合物１ ＩＰ＋モルヒネＳＣ（１ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝６〜１２）の用量反応曲線、並びに得られたＥＤ_５０値及び信頼区間（ＣＩ）、（ｄ）モルヒネＳＣ用量反応＋ＩＰ化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０、モルヒネＳＣ用量反応＋ＩＰ化合物１（３ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０、及び化合物１ ＩＰ用量反応＋モルヒネＳＣ（１ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０と、化合物１用量反応曲線のＥＤ_５０とモルヒネ用量反応曲線のＥＤ_５０の間に引かれた加成則の線を比較したアイソボログラム分析。（ｎ＝ｎ_１−ｎ_２）は、用量反応曲線上の反復数範囲を表す。

【図2-2】図２は、ラットホルマリンモデルにおける４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩（１）の結果を示す。（ａ）モルヒネＳＣ単独（ｎ＝４〜５）及びモルヒネＳＣ＋ＩＰ化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝６〜１２）の用量反応曲線（ＤＲＣ）、並びに得られたＥＤ_５０値及び信頼区間（ＣＩ）、（ｂ）モルヒネＳＣ単独（ｎ＝４〜５）及びモルヒネＳＣ＋ＩＰ化合物１（３ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝６〜１２）の用量反応曲線、並びに得られたＥＤ_５０値及び信頼区間（ＣＩ）、（ｃ）化合物１ ＩＰ単独（ｎ＝１３〜１５）及び化合物１ ＩＰ＋モルヒネＳＣ（１ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝６〜１２）の用量反応曲線、並びに得られたＥＤ_５０値及び信頼区間（ＣＩ）、（ｄ）モルヒネＳＣ用量反応＋ＩＰ化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０、モルヒネＳＣ用量反応＋ＩＰ化合物１（３ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０、及び化合物１ ＩＰ用量反応＋モルヒネＳＣ（１ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０と、化合物１用量反応曲線のＥＤ_５０とモルヒネ用量反応曲線のＥＤ_５０の間に引かれた加成則の線を比較したアイソボログラム分析。（ｎ＝ｎ_１−ｎ_２）は、用量反応曲線上の反復数範囲を表す。

【図3】図３は、ラットホルマリンモデルにおける４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン塩酸塩（１）の結果を示す。（ａ）オキシコドンＳＣ単独（ｎ＝４〜１３）及びオキシコドンＳＣ＋ＩＰ化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）（ｎ＝５〜６）の用量反応曲線（ＤＲＣ）、並びに得られたＥＤ_５０値及び信頼区間（ＣＩ）、（ｂ）オキシコドンＳＣ用量反応＋ＩＰ化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０と、化合物１用量反応曲線のＥＤ_５０とオキシコドン用量反応曲線のＥＤ_５０の間に引かれた加成則の線とを比較したアイソボログラム分析。

【図4】図４は、ラットホルマリンモデルにおけるアトモキセチンの結果のアイソボログラム分析を示す。

【図5】図５は、ラットホルマリンモデルにおけるデュロキセチンの結果のアイソボログラム分析を示す。

【発明を実施するための形態】

【0023】

（発明の詳細な説明）
定義
本発明の化合物及び方法を記述するときに、以下の用語は、別段の記載がない限り、以下の意味を有する。さらに、本明細書では、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、使用される文脈が異なる事項を明確に指示していない限り、対応する複数形を含む。

【0024】

「治療有効量」という用語は、治療を必要とする患者に投与したときに治療を実施するのに十分な量、すなわち、所望の治療効果を得るのに必要な薬物量を意味する。例えば、疼痛治療の治療有効量は、例えば、疼痛の症候の軽減、抑制、除去若しくは防止に、又は疼痛の根本的原因の治療に必要な化合物量である。一方、「有効量」という用語は、所望の結果を得るのに十分な量を意味し、この結果が必ずしも治療結果である必要はない可能性がある。

【0025】

「有効量未満」又は同じく「有効用量未満」という用語は、治療有効量又は用量よりも少ない量又は用量を意味する。疼痛治療の文脈において、「有効用量未満」は、所与の鎮痛作用レベルを得るのに必要な用量よりも少ない用量である。

【0026】

本明細書では「治療すること」又は「治療」という用語は、ほ乳動物（特にヒト）などの患者において疾患又は（疼痛などの）病状を治療すること又はその治療を意味し、以下の１つ以上を含む：（ａ）疾患若しくは病状の発生防止、すなわち、患者の予防処置、（ｂ）疾患若しくは病状の改善、すなわち、患者における疾患若しくは病状の解消若しくは軽減、（ｃ）疾患若しくは病状の抑制、すなわち、患者における疾患若しくは病状の進行の遅延若しくは抑止、又は（ｄ）患者における疾患若しくは病状の症候の緩和。

【0027】

例えば、「疼痛治療」という用語は、疼痛管理、疼痛緩和、疼痛発生防止、疼痛制御、疼痛改善、疼痛抑制及び／又は疼痛症候の緩和を含む。「患者」という用語は、治療又は疾患防止を必要とする、特定の疾患又は病状の疾患防止又は治療を現在受けている、ヒトなどのほ乳動物、並びに本発明の化合物がアッセイで評価又は使用されている被験体、例えば、動物モデルを含むものとする。

【0028】

本明細書では「併用療法」という用語は、治療剤の複合作用から有益な効果が得られるように意図された治療プロトコルの一部として、２種類以上の治療剤の投与を意味する。

【0029】

「慢性痛」という用語は、当初の傷害又は状態から予想される回復期間を超えて持続する疼痛を意味する。慢性痛の一例は、帯状ほう疹後神経痛であり、急性帯状ほう疹感染に付随する疼痛が感染自体を超えて持続する。臨床的に、「慢性痛」は、所与の期間、典型的には約３か月を超えて持続する疼痛と定義することができる。

【0030】

２種類の薬剤の組合せの効果の記述において本明細書では「相乗作用」又は「相乗効果」という用語は、個々の効果の合計よりも大きい効果を意味する。以下に示すように、相乗作用は、最大値の半分の効果が観察される用量であるＥＤ_５０値の変化の統計的有意性、非重複９５％信頼区間、及びアイソボログラム分析によって示される。

【0031】

４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジンとして本明細書に定義された「化合物１」という用語は、場合によっては、その用語が使用される状況に応じて、４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジンの薬学的に許容される塩も含む。

【0032】

「モルヒネ」という用語は、特に硫酸モルヒネを含めて、モルヒネのすべての薬学的に許容される塩及び投与形態を含む。

【0033】

「オキシコドン」という用語は、特にオキシコドン塩酸塩を含めて、オキシコドンのすべての薬学的に許容される塩及び投与形態を含む。

【0034】

本明細書で使用するすべての他の用語は、当業者によって理解されるその通常の意味を有することが意図される。

【0035】

前臨床モデルにおけるオピオイド作動物質との相乗作用の証明
疼痛緩和における４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン（１）とオピオイド作動物質モルヒネ及びオキシコドンの組合せの有効性をラットホルマリン疼痛モデルにおいて評価した。ホルマリン注射によって誘発される足を引っ込める挙動を試験化合物が阻止する程度を観察した。

【0036】

化合物１は、ヒト組換え細胞アッセイにおいてｉｎ ｖｉｔｒｏで観察されたＳＥＲＴとＮＥＴのＩＣ_５０値比から判定して、ＮＥＴについて約４倍選択的であり、ラット脳シナプトソーム調製物を用いてｉｎ ｖｉｔｒｏで判定して約１０倍選択的である。以下の実施例において詳述するように、最大値の半分の効果が観察される用量であるＥＤ_５０値は、化合物１単独、モルヒネ単独、一定用量のモルヒネの存在下の化合物１、及び一定用量の化合物１の存在下のモルヒネについて用量反応曲線から決定された。用量１０ｍｇ／ｋｇの化合物１の追加によって、モルヒネ用量反応曲線は低モルヒネ用量側に大きく移行した。すなわち、化合物１とモルヒネの同時投与によって、より低用量のモルヒネで同等の効力を得ることができた。図２ａの非重複信頼区間に注意されたい。同様に、１ｍｇ／ｋｇのモルヒネの追加によって、化合物１用量反応曲線は低化合物１用量側に大きく移行した（図２ｃ）。

【0037】

１０ｍｇ／ｋｇの化合物１とモルヒネの相乗的相互作用は、２種類の薬物の同時投与によって、効果が単に相加的である場合に期待されるもの以上の効果が得られる、すなわち、モルヒネ＋化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）の用量反応曲線のＥＤ_５０が加成則の線の左に完全に位置することを示すアイソボログラム分析によって数学的に確認される（実施例１及び図２ｄ参照）。相加作用を超えることは、個々の効果の合計を同時投与の結果と比較することによっても説明することができる。１０ｍｇ／ｋｇでの化合物１の単回投与は、足を引っ込める挙動を２０±７％阻害し、１ｍｇ／ｋｇでのモルヒネの投与は、足を引っ込める挙動を１３±１１％阻害した。このどちらも統計的に有意とはみなされない。図１ａに示すように、有効用量未満の同時投与（１０ｍｇ／ｋｇでの化合物１と、１ｍｇ／ｋｇでのモルヒネ）の結果生じる７３±６％阻害は、効果が単に相加的である場合に期待されるものをかなり上回る。

【0038】

類似の結果は、化合物１とオキシコドンの同時投与のラットホルマリンモデルにおいても得られた。用量１０ｍｇ／ｋｇの化合物１の追加は、図３ａの非重複信頼区間によって示されるように、オキシコドン用量反応曲線を低オキシコドン用量側に大きく移行させた。１０ｍｇ／ｋｇの化合物１とオキシコドンの相乗的相互作用は、図３ｂに示すアイソボログラム分析によって数学的に確認される。

【0039】

セロトニントランスポーター及びノルエピネフリントランスポーターの占有率と観測された効力の関係についても調べた。モルヒネとオキシコドンの両方との相乗作用が認められた用量である１０ｍｇ／ｋｇの化合物１を投与した動物の腰髄における占有率は、８１±６％ＮＥＴ及び４６±２０％ＳＥＲＴであった。モルヒネ（３ｍｇ／ｋｇの化合物１を用いて試験された唯一のオピオイド）との相乗作用が認められなかった用量である３ｍｇ／ｋｇの化合物１を投与した動物における占有率は、７７±１５％ＮＥＴ及び２３±１４％ＳＥＲＴであった。これらの結果は、オピオイド作動物質との相乗作用が、ノルエピネフリントランスポーターとセロトニントランスポーターの両方の十分な占有率を必要とし、ＮＥＴが支配的であるという仮説と一致する。さらに、ＳＥＲＴよりもＮＥＴにおける占有率が高いという知見は、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにおけるＮＥＴ選択性の知見と一致する。

【0040】

比較化合物の検討
オピオイド作動物質との相乗作用を示すＳＮＲＩに特有であるＮＥＴとＳＥＲＴの活性比を更に理解するために、プロファイルの異なる化合物もラットホルマリンモデルにおいて検討した。

【0041】

アトモキセチンは、ｉｎ ｖｉｔｒｏでは、ヒト組換え細胞アッセイにおいてＮＥＴについて約２０倍選択的であり、ラット脳シナプトソーム調製物を用いると約３０倍選択的であることが示された。１０ｍｇ／ｋｇ用量のアトモキセチンは、モルヒネ用量反応曲線を低モルヒネ用量側に移行させた。さらに、１ｍｇ／ｋｇでのモルヒネの追加も、アトモキセチン用量反応曲線を低アトモキセチン用量側に移行させた。アトモキセチンとモルヒネの相乗的相互作用は、アイソボログラム分析によって確認され（図４）、さらに図１ｂで示される。すなわち、有効用量未満の同時投与（１０ｍｇ／ｋｇでのアトモキセチンと、１ｍｇ／ｋｇでのモルヒネ）の結果生じる阻害は、個々の効果の合計よりもかなり大きいことが示された。

【0042】

それに対して、デュロキセチンは、ヒト組換え細胞アッセイにおいてＳＥＲＴについて約１０倍選択的であり、ラット脳シナプトソーム調製物においてＳＥＲＴについて約５倍選択的であり、モルヒネ節約効果を示さなかった。デュロキセチン１０ｍｇ／ｋｇの単回投与は、足を引っ込める挙動をかなり阻害し、１０ｍｇ／ｋｇ用量のデュロキセチンはモルヒネ用量反応曲線をより低モルヒネ用量側に移行させたが、１ｍｇ／ｋｇ用量のモルヒネはデュロキセチン用量反応曲線を移行させなかった。デュロキセチン３、５又は１０ｍｇ／ｋｇにおけるモルヒネ節約効果の欠如は、アイソボログラム分析（図５）によって確認され、有効用量未満の組合せ（５ｍｇ／ｋｇでのデュロキセチンと、１ｍｇ／ｋｇでのモルヒネ）について図１ｃにグラフで示したが、予想される相加作用を大きくは超えなかった。

【0043】

デュロキセチン５ｍｇ／ｋｇを投与した動物におけるトランスポーター占有率は約６３％ＮＥＴ及び約９１％ＳＥＲＴであった。（下記アッセイ２における表５参照）。モルヒネとの相乗作用は、ＳＥＲＴ選択的ＳＮＲＩではどの用量でも認められなかった。しかし、５−ＨＴ_３受容体拮抗物質オンダンセトロンを有効用量未満のデュロキセチン（５ｍｇ／ｋｇ）と同時投与すると、モルヒネ節約効果が認められた。この知見は、デュロキセチンによる５−ＨＴレベルのＳＥＲＴ媒介性の増大が、ＳＥＲＴ選択的二元的ＳＮＲＩとモルヒネの相乗的相互作用を阻害することを示唆している。

【0044】

ヒトにおける鎮痛活性が証明された化合物は、ラットホルマリンモデルにおいて効力を示す（Ｌｅ Ｂａｒｓ（２００１）Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．５３：５９７−６５２；Ｖｉｓｓｅｒｓら（２００６）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｅｈａｖｉｏｒ ８４：４７９−４８６）。例えば、本明細書に記載の実験において１０ｍｇ／ｋｇで抗侵害受容性を示したデュロキセチンは、糖尿病性末梢神経因性疼痛、線維筋痛、慢性腰痛、骨関節炎疼痛などの幾つかの慢性痛状態の治療に対して米国ＦＤＡによって認可された。（Ｓｋｌｊａｒｅｖｓｋｉら（２００９）Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ １６：１０４１−１０４８；Ｃｈａｐｐｅｌｌら（２００９）Ｐａｉｎ １４６：２５３−２６０も参照されたい。）これらの結果は、ＳＮＲＩが疼痛治療用オピオイド作動物質との相乗的相互作用をもたらすと期待されるかどうかを予測する方法を与える。この方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ神経伝達物質取り込みアッセイにおいてＳＥＲＴ及びＮＥＴ ＩＣ_５０値を測定すること、並びにＳＥＲＴとＮＥＴのＩＣ_５０値比が、約２から約３０、約４から約３０、及び約４から約１０を含めて、約２から約４０であるかどうかを判定することを含む。

【0045】

治療方法
したがって、ＳＮＲＩである４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン（１）及び化合物１とオピオイド作動剤、特にモルヒネ又はオキシコドンとの組合せは、特に、オピオイド薬剤が最適な鎮痛効果のために単独使用時に必要な用量よりも低用量で使用される場合、疼痛状態の治療に有用であることが期待される。併用療法は、より低用量のオピオイドを用いて同じ鎮痛作用を得ることができ、したがってオピオイドの使用に付随する有害作用を減少させることができると期待される。さらに、化合物１とオピオイド作動剤、特にモルヒネ又はオキシコドンとの組合せは、各薬剤が有効用量未満で存在する場合、疼痛状態の治療に有用であることが期待される。

【0046】

併用療法が有用であり得る疼痛障害としては、炎症性疼痛及び神経因性疼痛を含めた、急性疼痛障害及び慢性疼痛障害が挙げられる。より具体的には、これらとしては、以下に付随又は起因する疼痛が挙げられる：関節炎；慢性腰痛を含めた背痛；腫瘍関連疼痛（例えば、骨痛、頭痛、顔面痛又は内臓痛）及び癌治療に付随する疼痛（例えば、放射線照射後症候群）を含めた、慢性術後疼痛、癌；線維筋痛；慢性緊張性頭痛を含めた頭痛；関節リウマチ、変形性関節症、および多発性筋痛に付随する炎症；片頭痛；複合性局所疼痛症候群を含めた神経因性疼痛；術後痛；肩痛；卒中後痛を含めた中枢痛症候群、並びに脊髄傷害及び多発性硬化症に付随する疼痛；幻肢痛；パーキンソン病に付随する疼痛；内臓痛（例えば、過敏性腸症候群）、糖尿病性末梢神経障害（ＤＰＮ）、ＨＩＶ関連神経障害、帯状ほう疹後神経痛（ＰＨＮ）、及び化学療法による末梢神経障害。

【0047】

併用療法に使用する際には、化合物１はオピオイド作動剤と物理的に混合されて、両方の薬剤を含む組成物を形成するか、又は各薬剤は、別々の異なる組成物中に存在し、患者に同時に又は任意の順序で逐次的に投与される。併用療法は、別々に製剤化された場合、２種類の薬剤の実質的に同時の投与、及び異なる時間での各薬剤の投与を含む。

【0048】

例えば、化合物１は、従来の手順及び装置を使用して、第２の治療剤と組み合わせて、化合物１と第２の治療剤とを含む組成物を形成することができる。さらに、治療剤は、薬学的に許容される担体と組み合わせて、化合物１、第２の治療剤及び薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物を形成することができる。この実施形態においては、組成物の成分は、典型的には、混合又はブレンドされて、物理的混合物を生成する。次いで、物理的混合物は、後述する経路のいずれかを使用して治療有効量で投与される。

【0049】

あるいは、治療剤は、患者に投与するまで分離したままとすることができる。この実施形態においては、薬剤は、投与前に物理的に混合されず、同時に、又は別々の時間に、別々の組成物として投与される。かかる組成物は、別々にパッケージすることができ、又はキットとして一緒にパッケージすることができる。キットは、ある剤形の化合物１とある剤形のオピオイド作動剤を含む。キット中の２種類の治療剤は、同じ投与経路によって、又は異なる投与経路によって、投与することができる。例えば、化合物１は、経口投与することができ、オピオイド作動剤は、髄腔内注射、静脈内注射、皮下注射、又は経口錠剤、カプセル剤若しくは液剤などの、かかる薬剤の従来の投与経路のいずれかによって投与することができる。

【0050】

併用療法の一部として１回に投与される化合物１の量若しくは１日に投与される総量は、前もって決定することができ、又は患者の状態の性質及び重症度、治療される状態、患者の年齢、体重及び全般的健康状態、活性薬剤に対する患者の耐性、投与経路、活性薬剤の活性、効力、薬物動態学及び毒物学プロファイル、特にオピオイド作動剤の性質及び投与量などの薬理学的考慮を含めて、多数の因子を考慮して患者ごとに決定することができる。（疼痛状態などの）疾患又は病状を患っている患者の治療は、所定の投与量、又は治療する医師によって決定された投与量で開始することができ、疾患又は病状の症候を防止、改善、抑制又は軽減するのに必要な期間継続される。かかる治療を受ける患者は、典型的には、所定の手順に基づいてモニターされて療法の有効性を決定する。例えば、神経因性疼痛の治療においては、治療の有効性の尺度は、患者の生活の質の評価、例えば、患者の就眠パターンの改善、出勤状況、運動及び通院の能力などを含み得る。ポイントに基づいて管理される疼痛の度合いを使用して、患者の疼痛レベルの評価に役立てることもできる。本明細書に記載の他の疾患及び状態の指標は、当業者によく知られており、治療する医師が容易に利用することができる。医師による連続モニターは、最適量の活性薬剤が任意の所与の時間に投与されることを確実にし、治療期間の決定を容易にする。

【0051】

疼痛状態を治療するための化合物１の適切な用量は、単独使用時には、平均７０ｋｇのヒトに対して、約５から約３０ｍｇ／日、約７から約２０ｍｇ／日を含めて、約２から約５０ｍｇ／日の範囲と予想される。

【0052】

オピオイド作動剤との併用療法の一部として使用するときには、上述した有効用量の化合物１、又は単独使用時に鎮痛に必要な用量未満である有効用量未満の化合物１を投与することができる。

【0053】

本発明による併用療法に使用することができるオピオイド作動活性を有する薬剤としては、コデイン、ジヒドロコデイン、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、モルヒネ、オキシコドン、オキシモルホン、トラマドール、タペンタドール、レボルファノール、メペリジン、ペチジン、メサドン、ブプレノルフィン、フェンタニル、アルフェンタニル、ブトルファノール（ｂｕｔｒｏｐｈａｎｏｌ）、ナルブフィン及びスフェンタニルが挙げられるが、それだけに限定されない。本発明の特定の態様においては、オピオイド作動剤はモルヒネである。本発明の別の特定の態様においては、オピオイド作動剤はオキシコドンである。

【0054】

オピオイド作動物質の適切な用量は、典型的には、治療すべき状態の重症度、選択される投与経路、投与される特定の薬剤及びその相対活性、患者の年齢、体重及び反応、並びに特にオピオイドに対する患者の耐性を含めて、関連状況を考慮して医師によって決定される。オピオイド作動物質の有効用量は、７０ｋｇのヒトに対して、ほんの１０ｍｇ／日から６０、１２０又は３６０ｍｇ／日の量までの範囲であることが知られている。併用療法の一部として使用するときには、オピオイド作動剤は、治療有効量、すなわち、化合物１と同時投与したときに治療上有益な効果をもたらす任意の量で投与される。この場合、かかる量は、最適な単独療法に必要な量よりも少ないことが期待される。

【0055】

薬学的組成物及び製剤
本ＳＮＲＩ化合物とオピオイド作動剤は、典型的には、薬学的組成物又は製剤の形態で患者に投与される。かかる薬学的組成物は、経口、直腸、膣、経鼻、吸入、（経皮を含めた）局所及び非経口投与方法を含むが、それだけに限定されない任意の許容される投与経路によって患者に投与することができる。

【0056】

薬学的組成物は、典型的には、治療有効量の活性薬剤を含む。しかし、当業者は、薬学的組成物が、治療有効量を超える量を含んでもよく（すなわち、バルク組成物）、治療有効量未満の量（すなわち、治療有効量を得るために複数回投与用に設計された個々の単位用量）を含んでもよいことを認識するであろう。

【0057】

典型的には、かかる薬学的組成物は、約０．１から約９５重量％の活性薬剤、好ましくは約５から約７０重量％、より好ましくは約１０から約６０重量％の活性薬剤を含む。

【0058】

任意の従来の担体又は賦形剤を本発明の薬学的組成物に使用することができる。特定の担体若しくは賦形剤又は担体若しくは賦形剤の組合せの選択は、特定の患者の治療に使用される投与方法、又は医学的状態若しくは疾患状態のタイプに依存するであろう。なお、特定の投与方法に適切な薬学的組成物の調製は、薬学分野の当業者の十分な範囲内である。さらに、本発明の薬学的組成物に使用される担体又は賦形剤は、商業的に入手可能である。更なる説明として、従来の製剤技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０^ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（２０００）、及びＨ．Ｃ．Ａｎｓｅｌら，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，７^ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（１９９９）に記載されている。

【0059】

薬学的に許容される担体として役立ち得る材料の代表例としては、以下が挙げられるが、それだけに限定されない：ラクトース、グルコース、スクロースなどの糖；コーンスターチ、ジャガイモデンプンなどのデンプン；微結晶性セルロースなどのセルロース、及びカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロースなどのセルロース誘導体；トラガカント粉末；麦芽；ゼラチン；タルク；カカオバター、坐剤ワックスなどの賦形剤；落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、ダイズ油などの油；プロピレングリコールなどのグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチル、ラウリン酸エチルなどのエステル；寒天；水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコール；リン酸緩衝液；並びに薬学的組成物に使用される他の無毒適合性物質。

【0060】

薬学的組成物は、典型的には、活性薬剤を薬学的に許容される担体及び１種類以上の任意に選択される成分と徹底的かつ十分に混合又はブレンドすることによって調製される。次いで、生成した均一ブレンド混合物は、従来の手順及び装置を使用して、錠剤、カプセル剤、丸剤などに成形又は充填することができる。

【0061】

薬学的組成物は、好ましくは、単位剤形としてパッケージされる。「単位剤形」という用語は、患者への投薬に適切な物理的に分離した単位を指す。すなわち、各単位は、所望の治療効果を単独で、又は１個以上の追加の単位と組み合わせて、もたらすように計算された所定量の活性薬剤を含む。例えば、かかる単位剤形は、カプセル剤、錠剤、丸剤など、又は非経口投与に適切な単位パッケージとすることができる。

【0062】

一実施形態においては、本発明の薬学的組成物は、経口投与に適切である。経口投与に適切な薬学的組成物は、所定量の治療化合物を活性成分として各々が含む、カプセル剤、錠剤、丸剤、ロゼンジ剤、カシェ剤、糖衣錠剤、散剤、顆粒剤の形態で、又は水性若しくは非水性液体の溶液若しくは懸濁液として、又は水中油型若しくは油中水型乳濁液として、又はエリキシル剤若しくはシロップ剤として、およびその他類するもので存在し得る。

【0063】

固体剤形（すなわち、カプセル剤、錠剤、丸剤などとして）の経口投与が意図されるときには、薬学的組成物は、典型的には、活性薬剤と、クエン酸ナトリウム、第二リン酸カルシウムなどの１種類以上の薬学的に許容される担体とを含む。場合によっては又はあるいは、かかる固体剤形は、デンプン、微結晶性セルロース、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及び／又はケイ酸などの充填剤又は増量剤；カルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース及び／又はアラビアゴムなどの結合剤；グリセロールなどの加湿剤；寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプン又はタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリカート、及び／又は炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；パラフィンなどの溶解遅延剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進物質；セチルアルコール及び／又はモノステアリン酸グリセロールなどの湿潤剤；カオリン及び／又はベントナイトクレイなどの吸収剤；タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及び／又はその混合物などの潤滑剤；着色剤；並びに緩衝剤も含むことができる。

【0064】

離型剤、湿潤剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、芳香剤、保存剤及び抗酸化剤も本発明の薬学的組成物中に存在することができる。薬学的に許容される抗酸化剤の例としては、アスコルビン酸、システイン塩酸塩、硫酸水素ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；及びクエン酸、エチレンジアミン四酢酸、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート化剤などが挙げられる。錠剤、カプセル剤、丸剤などのコーティング剤としては、酢酸フタル酸セルロース、ポリビニルアセタートフタラート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、メタクリル酸−メタクリル酸エステルコポリマー、酢酸トリメリット酸セルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセタートスクシナートなどの腸溶コーティングに使用されるものなどが挙げられる。コーティング剤は、タルク、ポリエチレングリコール、ヒプロメロース（ｈｙｐｏｍｅｌｌｏｓｅ）及び二酸化チタンも含む。

【0065】

薬学的組成物は、例として、異なる割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、又は別のポリマーマトリックス、リポソーム及び／又はミクロスフェアを使用して、活性薬剤を徐放又は制御放出するように製剤化することもできる。さらに、薬学的組成物は、場合によっては乳白剤を含んでもよく、そして、薬学的組成物は、胃腸管の特定の部分のみでまたはその特定の部分において優先的に、活性成分を、場合によっては遅延方式で、放出するように製剤化することもできる。使用可能な埋め込み組成物の例としては、重合体物質及びワックスが挙げられる。活性薬剤は、適宜、上記賦形剤の１種類以上を用いてマイクロカプセル形態とすることもできる。

【0066】

適切な経口投与用液体剤形としては、実例として、薬学的に許容される乳濁液剤、マイクロエマルジョン剤、溶液剤、懸濁液剤、シロップ剤及びエリキシル剤が挙げられる。液体剤形は、典型的には、活性薬剤、及び例えば水などの不活性希釈剤、又はエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（特に、綿実油、落花生油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ひまし油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪酸エステルなどの他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、並びにその混合物を含む。懸濁液剤は、活性成分に加えて、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、トラガカントなどの懸濁化剤、及びその混合物を含むことができる。

【0067】

本活性薬剤は、（例えば、静脈内、髄腔内、皮下、筋肉内又は腹腔内注射によって）非経口的に投与することもできる。非経口投与の場合、活性薬剤は、典型的には、例として、無菌水溶液、食塩水、プロピレングリコールなどの低分子量アルコール、ポリエチレングリコール、植物油、ゼラチン、オレイン酸エチルなどの脂肪酸エステルなどを含めて、適切な非経口投与用ビヒクルと混合される。非経口製剤は、１種類以上の抗酸化剤、可溶化剤、安定剤、保存剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤又は分散剤を含むこともできる。これらの製剤は、無菌注射用媒体、殺菌剤、ろ過、照射又は熱の使用によって無菌にすることができる。

【0068】

あるいは、薬剤は、吸入投与用に製剤化される。適切な吸入投与用薬学的組成物は、典型的には、エアロゾル又は粉末の形態である。かかる組成物は、一般に、定量吸入器、乾燥粉末吸入器、ネブライザー、類似の送達装置などの周知の送達装置を使用して投与される。

【0069】

加圧容器を使用した吸入によって投与するときには、本発明の薬学的組成物は、典型的には、活性成分、及びジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、他の適切なガスなどの適切な噴霧剤を含む。さらに、薬学的組成物は、本発明の化合物と粉末吸入器における使用に適した粉末とを含む、（例えば、ゼラチンでできた）カプセル又はカートリッジの形態とすることができる。適切な粉末基剤としては、例として、ラクトース又はデンプンが挙げられる。

【0070】

最後に、活性薬剤は、公知の経皮送達システム及び賦形剤を使用して経皮投与することもできる。例えば、活性薬剤は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウラート、アザシクロアルカン−２−オンなどの透過促進剤と混合することができ、貼付剤又は類似の送達系に混ぜ込むことができる。ゲル化剤、乳化剤及び緩衝剤を含めた追加の賦形剤を必要に応じてかかる経皮組成物に使用することができる。

【0071】

疼痛治療に有用である代表的薬学的組成物としては、以下の例が挙げられるが、それだけに限定されない。化合物１は、典型的には塩酸塩として供給されるが、特定の投与方法に適した任意の形態の化合物（すなわち、遊離塩基又は薬学的塩）を以下の薬学的組成物に使用できることが理解される。

【0072】

製剤例Ａ：経口投与用硬ゼラチンカプセル剤
化合物１（２０ｍｇ）、デンプン（８９ｍｇ）、微結晶性セルロース（８９ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（２ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いでＮｏ．４５メッシュＵ．Ｓ．篩に通す。生成した組成物を硬ゼラチンカプセルに充填する（組成物２００ｍｇ／カプセル）。

【0073】

製剤例Ｂ：経口投与用硬質非ゼラチン（ＨＰＭＣ）カプセル剤
化合物１（１０ｍｇ）、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアート（５０ｍｇ）及びデンプン粉末（２５０ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いで硬質非ゼラチン（ＨＰＭＣ）カプセルに充填する（組成物３１０ｍｇ／カプセル）。

【0074】

製剤例Ｃ：経口投与用錠剤
化合物１（５ｍｇ）、微結晶性セルロース（４００ｍｇ）、ヒュームド二酸化ケイ素（１０ｍｇ）及びステアリン酸（５ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いで圧縮して錠剤（組成物４２０ｍｇ／錠剤）を形成する。

【0075】

製剤例Ｄ：経口投与用錠剤
化合物１（１０ｍｇ）、微結晶性セルロース（１６０ｍｇ）、ラクトース一水和物（２０ｍｇ）、ヒュームド二酸化ケイ素（５ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（５ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いで圧縮して錠剤（組成物２００ｍｇ／錠剤）を形成する。

【0076】

製剤例Ｅ：単一割線入り経口投与用錠剤
化合物１（１５ｍｇ）、コーンスターチ（５０ｍｇ）、クロスカルメロースナトリウム（２５ｍｇ）、ラクトース（１２０ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（５ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いで圧縮して単一割線入り錠剤（組成物２１５ｍｇ／錠剤）を形成する。

【0077】

製剤例Ｆ：経口投与用懸濁液剤
以下の成分
化合物１（２００ｍｇ）、安息香酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、精製水（１００ｍＬになるまでの適量）
を徹底的に混合して、懸濁液１０ｍＬあたり活性成分２０ｍｇを含む経口投与用懸濁液剤を形成する。

【0078】

製剤例Ｇ：注射用製剤
化合物１（２０ｍｇ）を０．１Ｍクエン酸ナトリウム緩衝液（１５ｍＬ）とブレンドする。生成した溶液のｐＨを１Ｎ塩酸水溶液又は１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ６に調節する。次いで、クエン酸塩緩衝剤中の無菌等張食塩水を添加して、総体積２０ｍＬにする。

【0079】

製剤例Ｈ：単一割線入り経口投与錠剤
化合物１（５ｍｇ）、硫酸モルヒネ（５ｍｇ）、コーンスターチ（５０ｍｇ）、微結晶性セルロース（１５ｍｇ）、ヒドロキシプロピルセルロース（１０ｍｇ）、ラクトース（１２０ｍｇ）及びステアリン酸マグネシウム（５ｍｇ）を徹底的にブレンドし、次いで圧縮して、単一割線入り錠剤（組成物２１０ｍｇ／錠剤）を形成する。

【0080】

製剤例Ｉ：経口投与用懸濁液剤
以下の成分
化合物１（５０ｍｇ）、オキシコドン塩酸塩（５０ｍｇ）、安息香酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、精製水（１００ｍＬになるまでの適量）
を徹底的に混合して、懸濁液１０ｍＬあたり各薬剤５ｍｇを含む経口投与用懸濁液剤を形成する。

【実施例】

【0081】

本発明のＳＮＲＩである４−［２−（２，４，６−トリフルオロ−フェノキシメチル）−フェニル］−ピペリジン（１）とミューオピオイド作動物質であるモルヒネ及びオキシコドンとの相互作用、並びに比較ＳＮＲＩアトモキセチン及びデュロキセチンとモルヒネの相互作用を疼痛のラットホルマリンモデルで評価した。

【0082】

ラットホルマリンモデル方法
雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット（動物体重範囲：１５０〜２４０ｇ、Ｈａｒｌａｎ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）をペアで１２時間明／暗サイクルに置き、食物及び水を自由に摂らせた。すべての実験は、Ｔｈｅｒａｖａｎｃｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって認可され、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｐａｉｎによって確立された指針に準拠した。既報（Ｙａｋｓｈら，（２００１）Ｊ Ａｐｐｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ．９０：２３８６−４０２）のように、ホルマリン（５％）５０μＬの注射によって惹起される行動反応を阻害する化合物の能力を評価した。金属バンドをラットの左後足に取り付けた。各ラットをプラスチック円筒（直径１５ｃｍ）内でバンドに６０分間慣らした。自動侵害分析計（ＵＣＳＤ Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を使用して、たじろぎ数を連続して６０分間数えた。抗侵害受容期間は、ホルマリン注射後１５〜４０分間（フェーズ２Ａ）から決定され、これは、持続痛状態、すなわち、最初の刺激に対する反応が鎮静した後に経験する疼痛状態に対応する。試験化合物を１０％Ｔｗｅｅｎ２０の蒸留水（ビヒクル）溶液中で調製し、腹腔内（ＩＰ）又は皮下（ＳＣ）経路によって２ｍＬ／ｋｇの体積で投与した。

【0083】

潜在的オピオイド節約効果を評価するために、モルヒネの用量反応を化合物１（３及び１０ｍｇ／ｋｇ ＩＰ）、アトモキセチン（３及び１０ｍｇ／ｋｇ ＩＰ）及びデュロキセチン（３、５及び１０ｍｇ／ｋｇ ＩＰ）の非存在下及び存在下で決定した。モルヒネ（１ｍｇ／ｋｇ ＳＣ）の存在下で化合物１及び比較化合物の用量反応曲線も決定した。さらに、オキシコドン（ＳＣ）の用量反応を化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ ＩＰ）の非存在下及び存在下で決定した。さらに、デュロキセチン（５ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ）をモルヒネ（１ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ）の非存在下及び存在下でオンダンセトロン（３ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ）と同時投与した。すべての試験化合物をホルマリン注射の３０分前に投与した。

【0084】

データ解析
阻害率は、同時に試験したビヒクル処理ラットにおけるフェーズ２Ａ中のたじろぎの総数を比較することによって以下の式に従って決定した：（ビヒクル−処理）／（ビヒクル×１００）。各用量における各ラットの阻害率値を使用して、ＥＤ_５０値を得た。ＥＤ_５０値は、最小及び最大をそれぞれ０及び１００にして、Ｓ字形の用量反応（傾き可変）曲線に一致させることによって決定した（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ）。データは平均±ＳＥＭ（平均値の標準誤差）を意味する。

【0085】

潜在的オピオイド節約効果を評価するために、ＥＤ_５０値は、モルヒネ、化合物１、デュロキセチン及びアトモキセチン単独の用量反応曲線、並びにモルヒネ（１ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ）の存在下のＳＮＲＩの用量反応曲線又はその逆を作成することによって決定した。化合物１とオピオイド作動物質オキシコドンの同時投与の効果についても調べた。試験化合物の組合せ間の潜在的相乗作用を以下の方法の１つ以上において評価した。

【0086】

（１）オピオイド作動物質＋ＳＮＲＩ（又はその逆）の用量反応曲線を比較した。ＥＤ_５０値の変化は、非重複９５％信頼区間で統計的に有意な効果であるとみなされた。

【0087】

（２）２種類の薬物の同時投与がラットホルマリンモデルにおいて相加的、相加未満（拮抗的）又は相加を超える（相乗的）抗侵害受容効果を示したかどうかをアイソボログラム分析を使用して数学的に評価した。（Ｔａｌｌａｒｉｄａ ＲＪ，（２０００）Ｄｒｕｇ Ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ ａｎｄ Ｄｏｓｅ−ｅｆｆｅｃｔ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｃｈａｐｍａｎ＆Ｈａｌｌ／ＣＲＣ，ｐｐ５−１０）。手短に述べると、各薬物（薬物Ａ及び薬物Ｂ）単独のＥＤ_５０をそれぞれｘ及びｙ軸上にプロットし、２つのＥＤ_５０間の連結線を引いた（加成則の線）。一定用量の薬物Ａを全範囲の用量の薬物Ｂと同時投与して、このペアの合算されたＥＤ_５０値を得た。この合算されたＥＤ_５０（と信頼区間範囲）が加成則の線の左に位置する場合、２種類の薬物の相互作用は相乗的であるとみなされる。

【0088】

（３）単なる説明のために、モルヒネ（１．０ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ）処理に起因するたじろぎの減少％を種々の用量のＳＮＲＩを用いて得られたたじろぎの減少％に加算することによって予測される抗侵害受容の大きさ（たじろぎの減少％）を、併用療法で実測された抗侵害受容の程度と比較した。

【0089】

材料
化合物１の塩酸塩を米国特許出願第１２／６１７，８２１号に記載の手順に従って調製した。その開示を参照により本明細書に援用する。アトモキセチン塩酸塩をＡＫ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．（Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ）から購入し、デュロキセチン塩酸塩をＷａｔｅｒｓｔｏｎｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＬＬＣ（Ｃａｒｍｅｌ、ＩＮ）から購入した。モルヒネ及びオキシコドンをＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）から購入した。オンダンセトロンをＴｏｃｒｉｓ（Ｅｌｌｉｓｖｉｌｌｅ、ＭＯ）から購入した。すべての被験物質を１０％Ｔｗｅｅｎ２０の蒸留水溶液に溶解させた。

【0090】

（実施例１）
ラットホルマリンモデルにおける化合物１とモルヒネの組合せ
化合物１単独、モルヒネ単独、３ｍｇ／ｋｇ又は１０ｍｇ／ｋｇの化合物１の存在下のモルヒネ、及びモルヒネ１ｍｇ／ｋｇの存在下の化合物１の用量反応曲線を決定した。図２ａに示すように、モルヒネ投与のＥＤ_５０値は２．１ｍｇ／ｋｇであり、信頼区間（ＣＩ）は１．５〜２．９ｍｇ／ｋｇであった。化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）とモルヒネの同時投与は、モルヒネ用量反応曲線を低モルヒネ用量側に大きく移行させ、ＥＤ_５０値が０．２ｍｇ／ｋｇであり、非重複ＣＩが０．１〜０．４ｍｇ／ｋｇであった。しかし、化合物１（３ｍｇ／ｋｇ）とモルヒネの同時投与は、図２ｂに示すように、モルヒネ用量反応曲線をさほど移行させなかった。モルヒネ１ｍｇ／ｋｇと組み合わせた化合物１の用量反応を図２ｃに示す。単独投与時に統計的に有意な効果を示さなかったＥＤ_５０値未満の用量の一定用量のモルヒネの追加は、化合物１の用量反応曲線を低い値の側に大きく移行させ、化合物１単独の２０．０（１４．０〜２８．４）ｍｇ／ｋｇに比べて組合せのＥＤ_５０値（ＣＩ）は４．４（３．３〜５．９）ｍｇ／ｋｇであった。化合物１とモルヒネの相乗的相互作用は、図２ｄのアイソボログラムによって確認され、モルヒネ＋化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０（０．２ｍｇ／ｋｇ）及び化合物１＋モルヒネ（１ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０（４．４ｍｇ／ｋｇ）が加成則の線の左に完全に位置する。

【0091】

観察がホルマリン注射から１５〜４０分後に成された上記実験は、ヒト慢性痛状態に近いと考えられる持続痛の前臨床モデルを与える。疼痛挙動の減少は、注射後最初の１０分間でも認められ（フェーズ１）、反応期間は、急性痛の処理を反映すると考えられる。したがって、前臨床データによれば、化合物１及び化合物１とモルヒネの組合せは、術後痛などの急性痛状態も軽減する。

【0092】

（実施例２）
ラットホルマリンモデルにおける化合物１とオキシコドンの組合せ
オキシコドン単独及び化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）の存在下のオキシコドンの用量反応曲線を決定した。図３ａに示すように、オキシコドンを投与すると、ＥＤ_５０値は１．１ｍｇ／ｋｇであり、信頼区間（ＣＩ）は１．０〜１．２ｍｇ／ｋｇであった。化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）とオキシコドンの同時投与は、オキシコドン用量反応曲線を低オキシコドン用量側に大きく移行させ、ＥＤ_５０値は０．２ｍｇ／ｋｇであり、非重複ＣＩは０．１〜０．４ｍｇ／ｋｇであった。化合物１とオキシコドンの相乗的相互作用は、図３ｄのアイソボログラムによって確認され、オキシコドン＋化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０（０．２ｍｇ／ｋｇ）は、エラーバーを含めて、加成則の線の左に位置する。

【0093】

（実施例３）
ラットホルマリンモデルにおける比較ＳＮＲＩの研究
モルヒネと一緒の、３及び１０ｍｇ／ｋｇのアトモキセチン並びに３、５及び１０ｍｇ／ｋｇのデュロキセチンの効果を下表に要約する。モルヒネに１０ｍｇ／ｋｇのアトモキセチンを追加すると、ＥＤ_５０値と非重複信頼区間が減少した（表１）。モルヒネ１ｍｇ／ｋｇの同時投与もアトモキセチンＥＤ_５０値を大きく減少させた（表２）。アトモキセチンとモルヒネの相乗的相互作用は、図４のアイソボログラムによって確認され、モルヒネ＋アトモキセチン（１０ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０（０．６ｍｇ／ｋｇ）及びアトモキセチン＋モルヒネ（１ｍｇ／ｋｇ）のＥＤ_５０（３．０ｍｇ／ｋｇ）が、どちらもエラーバーを含めて、加成則の線の左に位置する。

【0094】

１０ｍｇ／ｋｇのデュロキセチンをモルヒネに追加すると、ＥＤ_５０値と非重複信頼区間が減少するが（表１）、モルヒネ１ｍｇ／ｋｇをデュロキセチンに追加しても、デュロキセチン用量反応曲線は低デュロキセチン用量側に移行せず、すなわち、デュロキセチン単独及びデュロキセチン＋モルヒネ１ｍｇ／ｋｇの表２のＥＤ_５０値は、重複信頼区間を有する。図５のアイソボログラムによれば、併用用量のデュロキセチンとモルヒネは加成則の線の左にはない。デュロキセチンは、モルヒネと相乗作用を示さなかった。

【0095】

【表1】

【0096】

【表2】

^＊（ｎ＝ｎ_１−ｎ_２）は、用量反応曲線上の反復数範囲である。

【0097】

アッセイ１
Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ ＳＥＲＴ及びＮＥＴ神経伝達物質取り込みアッセイ
ヒト及びラットモノアミントランスポーターにおける試験化合物のｐＩＣ_５０値をそれぞれ決定するために、神経伝達物質取り込みアッセイを使用して、各ヒト組換えトランスポーター（ｈＳＥＲＴ又はｈＮＥＴ）を発現する細胞中への、および、ラット脳シナプトソーム調製物中への、^３Ｈ−セロトニン（^３Ｈ−５−ＨＴ）及び^３Ｈ−ノルエピネフリン（^３Ｈ−ＮＥ）取り込みの阻害を測定した。

【0098】

細胞培養
ｈＳＥＲＴ又はｈＮＥＴがそれぞれ安定に移入されたＨＥＫ−２９３由来の細胞系を、５％ＣＯ_２加湿恒温器中の１０％透析ＦＢＳ（ｈＳＥＲＴの場合）又はＦＢＳ（ｈＮＥＴの場合）、１００μｇ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン、２ｍＭ Ｌ−グルタミン及び２５０μｇ／ｍｌアミノグリコシド系抗生物質Ｇ４１８を補充したダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で３７℃で増殖させた。培養が５０〜８０％コンフルエントに達したときに、細胞を（Ｃａ^２＋及びＭｇ^２＋を含まない）ＰＢＳで徹底的に洗浄し、５ｍＭのＥＤＴＡのＰＢＳ溶液で剥離させた。細胞を１１００ｒｐｍで５分間の遠心分離によって収集し、上清を廃棄し、ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、ＣａＣｌ_２（２．２ｍＭ）、アスコルビン酸（２００μＭ）及びパージリン（２００μＭ）を含むｐＨ７．４の室温クレブス−リンゲル炭酸水素塩緩衝剤中で静かにすりつぶして、細胞ペレットを再懸濁させた。細胞懸濁液中の細胞の最終濃度は、ｈＳＥＲＴが７．５×１０^４細胞／ｍｌ及びｈＮＥＴが１２．５×１０^４細胞／ｍｌであった。

【0099】

シナプトソーム調製物
ラットを断頭によって安楽死させた。ラットの新たに解剖された皮質組織断片を氷冷スクロース緩衝剤中に組織湿重量１００ｍｇ／緩衝剤１ｍＬの比で懸濁させた。前もって冷却したガラス製Ｄｏｕｎｃｅホモジナイザーを使用して組織を２０ストロークホモジナイズした。ホモジネートを１，０００×ｇ（４℃で１０分間）で遠心分離した。ペレットを廃棄し、生成した上清を１０，０００×ｇ（４℃で２０分間）で遠心分離して、粗製シナプトソームのペレットを得た。シナプトソームをスクロース緩衝剤に再懸濁させ、タンパク質濃度をＢｒａｄｆｏｒｄの方法（Ｂｒａｄｆｏｒｄ（１９７６）Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ７２：２４８５４）によって測定し、調製後すぐに使用した。

【0100】

神経伝達物質取り込みアッセイ
神経伝達物質取り込みアッセイを、９６ウェルのアッセイプレートにおいて、アッセイ緩衝剤（ＨＥＰＥＳ（１０ｍＭ）、ＣａＣｌ_２（２．２ｍＭ）、アスコルビン酸（２００μＭ）及びパージリン（２００μＭ）を含むｐＨ７．４のクレブス−リンゲル炭酸水素塩緩衝剤）中に、ＳＥＲＴ及びＮＥＴについてはそれぞれ１．５×１０^４及び２．５×１０^４細胞、又は皮質シナプトソームタンパク質１０μｇを含む総体積４００μＬで実施した。試験化合物のｐＩＣ_５０値を測定する阻害アッセイを１０ｐＭから１００μＭの範囲の１１の異なる濃度で実施した。試験化合物の原液（ＤＭＳＯ中１０ｍＭ）を調製し、段階希釈物を５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、ｐＨ７．４、０．１％ＢＳＡ、４００μＭアスコルビン酸を使用して調製した。放射性標識された神経伝達物質^３Ｈ−５−ＨＴ（最終濃度２０ｎＭ）又は^３Ｈ−ＮＥ（最終濃度４０ｎＭ）の添加前に、試験化合物をそれぞれの細胞又はシナプトソームと一緒に３７℃で３０分間インキュベートした。非特異的神経伝達物質取り込みをＳＥＲＴ又はＮＥＴアッセイそれぞれについて（各々希釈緩衝剤中の）２．５μＭデュロキセチン又は２．５μＭデシプラミンの存在下で測定した。

【0101】

放射性リガンドと一緒に３７℃で１０分間の細胞のインキュベーション（ラットシナプトソームの場合は６分間のインキュベーション）後、９６ウェルのＵｎｉＦｉｌｔｅｒ ＧＦ／Ｂプレート上の急速ろ過によって反応を終了させ、１％ＢＳＡで前処理し、洗浄緩衝剤（氷冷ＰＢＳ）６５０μｌで６回洗浄した。プレートを乾燥させ、ＭｉｃｒｏＳｃｉｎｔ（商標）−２０（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）３５〜４５μｌを添加し、取り込まれた放射能を液体シンチレーション測定によって定量した。阻害曲線をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を使用して解析した。Ｐｒｉｓｍ ＧｒａｐｈＰａｄのＳｉｇｍｏｉｄａｌ Ｄｏｓｅ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（傾き可変）アルゴリズムを使用して濃度反応曲線から得られたＩＣ_５０値を、ＩＣ_５０値の負の十進法対数ｐＩＣ_５０として下記表３に報告する。

【0102】

【表3】

（ａ）ＮＥＴ選択性を１０^＊＊（ＮＥＴ ｐＩＣ_５０−ＳＥＲＴ ｐＩＣ_５０）として計算した。

【0103】

アッセイ２
Ｅｘ Ｖｉｖｏ ＳＥＲＴ及びＮＥＴトランスポーター占有率の研究
ＳＥＲＴ及びＮＥＴトランスポーター占有率を、化合物１又はデュロキセチンが腹腔内（ＩＰ）経路で投与されたラットから調製された皮質又は腰髄ホモジネートにおいて測定した。ＳＥＲＴ及びＮＥＴトランスポーター占有率をモニターするために、ｅｘ ｖｉｖｏ占有率アッセイを使用した。組織ホモジネートに対するＳＥＲＴ又はＮＥＴ選択的放射性リガンドのそれぞれの会合の初速度をモニターした。放射性リガンドの会合の初速度は、遊離（非占有）トランスポーターレベルに正比例する。

【0104】

組織収集
ラットを化合物投与から１．２５時間後に断頭によって安楽死させた。断頭後、脳を除去し、氷上の清浄な金属ブロック上に置いた。脳全体を正中線の約４ｍｍ側方で矢状面に平行に切断した。外側の皮質部分を廃棄した。脳全長にわたって正中矢状面で切断した。次いで、正中矢状面が最上部になるように、各半球に対応する脳の塊をそれぞれの側方の割面上に置いた。脳梁に平行に脳梁の約１ｍｍ背側を１回切断して皮質部分を除去した。皮質部分をドライアイスで凍結後、−８０℃で貯蔵した。脊髄をＰＢＳの水圧で押し出して収集した。１８ゲージ針を腸骨稜近くの脊柱に挿入し、緩衝剤を脊柱に注射し、脊髄を無傷で押し出した。腰髄（長さ約１〜１．５ｃｍ）を迅速に解剖し、ドライアイスで凍結後、−８０℃で貯蔵した。

【0105】

凍結組織断片を秤量し、ホモジナイズするまでドライアイス上に維持した。脊髄組織をアッセイ緩衝剤（凍結組織１００ｍｇ当たり０．１５４ｍＬ）中にＰｏｌｙｔｒｏｎホモジナイザー（モデル：ＰＴ２１００、設定１９ １０秒間）を用いてホモジナイズした。粗製ホモジネートをｅｘ ｖｉｖｏ結合アッセイの開始直前に調製した。

【0106】

放射性リガンド結合アッセイ
放射性リガンド結合アッセイを９６ウェルのポリプロピレンアッセイプレートにおいて膜タンパク質約２５μｇを含む全アッセイ体積２００μＬで実施した。いずれの場合においても、最終アッセイ緩衝剤は、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、０．０２５％ＢＳＡ、１００μＭアスコルビン酸、ｐＨ７．４であった。

【0107】

全体及び非特異的結合を放射性リガンド単一濃度（括弧内）で測定した：ＳＥＲＴ及びＮＥＴでは、それぞれ［^３Ｈ］−シタロプラム（３ｎＭ）及び［^３Ｈ］−ニソキセチン（５ｎＭ）。［^３Ｈ］−シタロプラム及び［^３Ｈ］−ニソキセチンの非特異的結合を、それぞれ１μＭデュロキセチン又は１μＭデシプラミンの存在下で測定した。６つの時点で皮質又は脊髄ホモジネートを添加してｅｘ ｖｉｖｏ結合アッセイを開始して、ＳＥＲＴの場合は０．４、１．０、１．５、２．０、２．５及び３分間のインキュベーション時間、又はＮＥＴの場合は０．２５、０．５、１．２５、１．７５及び２．２５分間のインキュベーション時間の時間コースを作成した。０．３％ポリエチレンイミンに予浸した９６ウェルＧＦ／Ｂガラス繊維ろ板（Ｐａｃｋａｒｄ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ、ＣＴ）での急速ろ過によって反応を終了させた。ろ板を洗浄緩衝剤（氷冷５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、０．９％ＮａＣｌ、４℃）で６回洗浄して結合していない放射能を除去した。プレートを乾燥させ、Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０液体シンチレーション流体（Ｐａｃｋａｒｄ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）３５〜４５μＬを各ウェルに添加し、プレートをＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）で数えた。

【0108】

データ解析
特異的結合を、（試験化合物の非存在下で）全体及び（上述したように決定された）非特異的結合を使用して同じプレートから以下のように計算した：特異的結合＝値−非特異的結合。次いで、データをＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して線形回帰分析によって解析した。直線の傾きに等しい［^３Ｈ］−シタロプラム又は［^３Ｈ］−ニソキセチンの会合の初速度を、データポイントの特異的結合（ｃｐｍ）対時間（分）をフィッティングすることによって決定した。ビヒクルを投与した動物から［^３Ｈ］−シタロプラム会合又は［^３Ｈ］−ニソキセチン会合の初速度の平均を計算した。試験化合物を投与した動物のＮＥＴ又はＳＥＲＴトランスポーター占有率（％）を以下の式によって計算する：トランスポーター占有率（％）＝１００×（１−［（化合物が投与された動物の会合の初速度）／（ビヒクルが投与された動物の会合の平均初速度）］）。化合物１のＩＰ投与後の脊髄における占有率を下記表４に報告する。

【0109】

【表4】

^＊±標準誤差
デュロキセチンのＩＰ投与後の皮質における占有率を下記表５に報告する。用量５ｍｇ／ｋｇの占有率は、３ｍｇ／ｋｇと１０ｍｇ／ｋｇの各値のほぼ平均であると予想される。別の研究では、脊髄と皮質の占有率で類似の値が観察された。

【0110】

【表5】

^＊±標準誤差
アトモキセチンのＩＰ投与後の皮質における占有率を下記表６に報告する。

【0111】

【表6】

^＊±標準誤差
アッセイ３
薬物動態試験
ＳＮＲＩを単独で又はオピオイド作動物質と組み合わせて投与したラットの血しょう中濃度を測定して、薬物−薬物相互作用の可能性を評価した。

【0112】

化合物１（３ｍｇ／ｋｇ）、デュロキセチン（１０ｍｇ／ｋｇ）又はアトモキセチン（１０ｍｇ／ｋｇ）をモルヒネ（３ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ）又はビヒクル（ＳＣ）と組み合わせてＩＰ投与した。ＳＮＲＩの血しょう中濃度は、化合物１、アトモキセチン若しくはデュロキセチンを単独で又はモルヒネと組み合わせて投与したラットにおいて同等であった。化合物１（１０ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ）はオキシコドン（３ｍｇ／ｋｇ、ＳＣ）と組み合わせても投与された。両方の薬剤の血しょう中濃度は、化合物１若しくはオキシコドンを単独又はそれらの組合せを投与したラットにおいて同等であった。これらのデータによれば、ホルマリンアッセイにおける高い鎮痛効力の証拠が、同時投与時のオピオイド作動物質又はＳＮＲＩの血しょう中曝露の増加の作用であるとは考えられない。すなわち、実測された薬理効果を薬物−薬物相互作用に帰することはできない。

【0113】

本発明をその具体的実施形態に関連して記述したが、当業者は、本発明の真の精神及び範囲から逸脱することなく、種々の変更を加えることができ、等価物で置換できることを理解すべきである。さらに、多数の改変を加えて、特定の状況、材料、組成物、プロセス、プロセスステップ（単数又は複数）を本発明の目的、精神及び範囲に適合させることができる。すべてのかかる改変は、添付した特許請求の範囲内にあるものとする。さらに、すべての上記刊行物、特許及び特許文献は、参照によって個々に援用されたかのごとく、参照により全体が本明細書に援用される。

【図1】

【図2-1】

【図2-2】

【図3】

【図4】

【図5】