特許 5778164 放射標識ＰＤＥ１０リガンド

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5778164

(24)【登録日】2015年7月17日

(45)【発行日】2015年9月16日

(54)【発明の名称】放射標識ＰＤＥ１０リガンド

(51)【国際特許分類】

   C07D 401/14 20060101AFI20150827BHJP

   A61K 51/00 20060101ALI20150827BHJP

【ＦＩ】

   C07D401/14CSP

   A61K49/02 C

【請求項の数】8

【全頁数】59

(21)【出願番号】特願2012-535806(P2012-535806)

(86)(22)【出願日】2010年10月27日

(65)【公表番号】特表2013-509374(P2013-509374A)

(43)【公表日】2013年3月14日

(86)【国際出願番号】EP2010066237

(87)【国際公開番号】WO2011051324

(87)【国際公開日】20110505

【審査請求日】2013年8月1日

(31)【優先権主張番号】09174702.2

(32)【優先日】2009年10月30日

(33)【優先権主張国】EP

(73)【特許権者】

【識別番号】390033008

【氏名又は名称】ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ

【氏名又は名称原語表記】ＪＡＮＳＳＥＮ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡ ＮＡＡＭＬＯＺＥ ＶＥＮＮＯＯＴＳＣＨＡＰ

(74)【代理人】

【識別番号】110000741

【氏名又は名称】特許業務法人小田島特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】アンドレス−ジル，ホセ・イグナシオ

(72)【発明者】

【氏名】ド・アンジエリス，メリ

(72)【発明者】

【氏名】ボルマン，ギ・マウリツツ・アール

(72)【発明者】

【氏名】セレン・ソフイ，ジヤンヌ・レオポルデイーヌ

【審査官】 砂原 一公

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００９−５２６８２５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５２２３４６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００９／１５８４６７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／０９７３６７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 VERHOEST, Patrick R. et al，Discovery of a Novel Class of Phosphodiesterase 10A Inhibitors and Identification of Clinical Candidate 2-[4-(1-Methyl-4-pyridin-4-yl-1H-pyrazol-3-yl)-phenoxymethyl]-quinoline (PF-2545920) for the Treatment of Schizophrenia，Journal of Medicinal Chemistry，２００９年，Vol.52, No.16，p.5188-5196

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

ＭＡＲＰＡＴ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）

【化1】

［式中、
Ｒ¹は２−フルオロエチル又は３−フルオロプロピルであり、ここで少なくとも１個のＦは［¹⁸Ｆ］であり；
ｎは１、２又は３であり；
各Ｒ²は独立してＣ_1-3アルキル、シクロプロピル、Ｃ_1-3アルキルオキシ、ハロＣ_1-3アルキルオキシ、ハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ又はシアノである］
の化合物又はその立体異性体あるいはその溶媒和物又は塩形態。

【請求項2】

Ｒ¹が２−フルオロエチルである請求項１に従う化合物。

【請求項3】

Ｒ²が６−メチル、３，５−ジメチル又は５−メトキシである請求項１に従う化合物。

【請求項4】

化合物が２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−３，５−ジメチル−ピリジンスクシネートである請求項１に従う化合物。

【請求項5】

塩水中に溶解された請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を含んでなる無菌組成物。

【請求項6】

試験管内又は生体内で組織、細胞又は宿主を画像化するための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を含んでなる組成物。

【請求項7】

組織、細胞又は宿主と接触させるか、又はそれらに投与し、陽電子射出断層撮影画像化システムを用いて組織、細胞又は宿主を画像化することを含んでなる、組織、細胞又は宿主の画像化方法、に使用するための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を含んでなる組成物。

【請求項8】

式（ＶＩ）

【化2】

［式中、
ｍは１又は２であり；
ｎは１、２又は３であり；
各Ｒ²は独立してＣ_1-3アルキル、シクロプロピル、Ｃ_1-3アルキルオキシ、ハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ又はシアノである］
の化合物又はその立体異性体あるいはその溶媒和物もしくは塩形態。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

発明の分野
本発明は、陽電子射出断層撮影法（ＰＥＴ）を用いて組織中のＰＤＥ１０Ａ酵素を画像化及び定量するために有用である新規な選択的放射標識ＰＤＥ１０リガンドに関する。本発明は、そのような化合物を含んでなる組成物、そのような化合物及び組成物の調製方法ならびに試験管内又は生体内で組織、細胞又は宿主を画像化するためのそのような化合物及び組成物の使用も目的とする。

【背景技術】

【0002】

発明の背景
ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥｓ）は、２１個の遺伝子によりコードされる１群の酵素であり、構造的及び機能的性質に従って１１種の異なる群に細分される。これらの酵素は、広く存在する細胞内２次メッセンジャーである３’，５’−サイクリックアデノシンモノホスフェート（ｃＡＭＰ）及び３’，５’−サイクリックグアノシンモノホスフェート（ｃＧＭＰ）を代謝的に不活性化する。これらの２つのメッセンジャーは、炎症誘発性媒介物（ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍｅｄｉａｔｏｒ）生産及び作用、イオンチャンネル機能、筋肉収縮、学習、分化、アポプトシス、脂質生成、糖原分解及びグルコネオゲネシスを含む多様な生物学的プロセスを調節する。それらは、プロテインキナーゼＡ（ＰＫＡ）及びプロテインキナーゼＧ（ＰＫＧ）の活性化によりこれを行い、それらは今度は転写因子及び無数の生理学的反応を調節するイオンチャンネルを含む多様な基質をリン酸化する。ニューロンにおいて、これはｃＡＭＰ及びｃＧＭＰ−依存性キナーゼの活性化ならびにその後のシナプス伝達の短時間の（ａｃｕｔｅ）調節ならびにニューロン分化及び生存に含まれるタンパク質のリン酸化を含む。ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰの細胞内濃度は、サイクラーゼによる生合成の速度及びＰＤＥｓによる分解の速度により厳密に調節される。ＰＤＥｓは、不活性な５’−モノホスフェートを生成する３’−エステル結合の接触加水分解によりｃＡＭＰ及びｃＧＭＰを不活性化する加水分解酵素である（スキーム１）。

【0003】

【化1】

【0004】

基質特異性に基づき、ＰＤＥ群を３つのグループ：ｉ）ＰＤＥ４、−７及び−８を含むｃＡＭＰ−特異的ＰＤＥｓ；ｉｉ）ｃＧＭＰ−選択的酵素ＰＤＥ５及び−９；ならびにｉｉｉ）二重−基質ＰＤＥｓであるＰＤＥ１、−２及び−３ならびにＰＤＥ１０及び−１１に分けることができる。ホスホジエステラーゼ１０Ａ（ＰＤＥ１０Ａ）の発見は１９９９
年に報告された。１１種の既知のＰＤＥ群のすべての中で、ＰＤＥ１０Ａは最も限られた分布を有し、脳及びこう丸中でのみ高く発現される。脳において、ＰＤＥ１０Ａ ｍＲＮＡ及びタンパク質は線条において高度に発現される。脳におけるＰＤＥ１０Ａのこの独特の分布は、その薬理学的特性化の増進と一緒になって、精神分裂病のような神経学的及び精神医学的障害の処置のためのＰＤＥ１０Ａ阻害剤の使用の可能性を指摘している。

【0005】

陽電子射出断層撮影法（ＰＥＴ）は非−侵襲性画像化法であり、すべての核画像化法の最高の空間的及び時間的分解能を与え、組織中のトレーサー濃度の真の定量をそれが可能にできるという追加の利点を有する。それは検出のために、例えば^１５Ｏ、^１３Ｎ、^１１Ｃ及び^１８Ｆのような陽電子射出放射性核種を用いる。

【0006】

特許文献１（Ｐｆｉｚｅｒ）は、選択的ＰＤＥ１０阻害剤としてヘテロ芳香族キノリン化合物を開示している。特許文献２（Ｐｆｉｚｅｒ）は、ＰＤＥ１０阻害剤として二環式ヘテロアリール化合物を開示している。

【0007】

Ｚｈｕｄｅ Ｔｕ ｅｔ ａｌ．は、ＰＤＥ１０Ａの画像化のためのＰＥＴトレーサーとして［^１１Ｃ］−パパベリン（ｐａｐａｖｅｒｉｎｅ）を開示し（非特許文献１）、それは中枢神経系におけるＰＤＥ１０Ａの臨床的画像化のための理想的な放射性リガンドではないと結論付けている。ＰＤＥ３より高いＰＤＥ１０Ａに関する選択性及び向上した薬物動態学的性質を有する類似物が必要であると考えられている。

【0008】

特許文献３は、ＰＤＥ１０Ａリガンドとして有用な放射標識キノリン化合物、例えば−２−｛４−［１−（２−［^１８Ｆ］フルオロエチル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノキシメチル｝−キノリンを開示している。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】国際公開第２００６／０７２８２８号パンフレット

【特許文献2】国際公開第２００７／１２９１８３号パンフレット

【特許文献3】国際公開第２０１０／０９７３６７号パンフレット

【非特許文献】

【0010】

【非特許文献1】Ｚｈｕｄｅ Ｔｕ ｅｔ ａｌ．著，Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３７，２０１０年，５０９−５１６

【発明の概要】

【0011】

発明の概略
本発明は、式（Ｉ）

【0012】

【化2】

【0013】

［式中、
Ｒ^１は２−フルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチル又は３−フルオロプロピルであり；
ｎは１、２又は３であり；
各Ｒ^２は独立してＣ_１−３アルキル、シクロプロピル、Ｃ_１−３アルキルオキシ、Ｃ_１−３アルキルオキシ、ハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ又はシアノであり、
ここで少なくとも１個のＦは［^１８Ｆ］である］
を有する化合物又はその立体異性体あるいはその溶媒和物又は塩形態に関する。

【0014】

本発明は前に定義した式（Ｉ）の化合物の合成のための前駆体化合物にも関し、該化合物は式（ＶＩ）

【0015】

【化3】

【0016】

［式中、
ｍは１又は２であり；
ｎは１、２又は３であり；
各Ｒ^２は独立してＣ_１−３アルキル、シクロプロピル、Ｃ_１−３アルキルオキシ、Ｃ_１−３アルキルオキシ、ハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ又はシアノである］
を有するか、又はその立体異性体又はその溶媒和物もしくは塩形態である。

【0017】

本発明は、式（Ｉ）の［^１９Ｆ］−化合物に相当する参照化合物にも関する。

【0018】

本発明の例は、適した調製物中に溶解された本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物を含んでなる無菌の組成物である。

【0019】

本発明を例示するものは、試験管内又は生体内で組織、細胞又は宿主を画像化するための本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物の使用あるいはその方法である。

【0020】

さらに本発明を例示するものは、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物を組織、細胞又は宿主と接触させるか又はそれらに投与し、陽電子射出断層撮影画像化システムを用いて組織、細胞又は宿主を画像化することを含んでなる、組織、細胞又は宿主の画像化方法である。

【0021】

さらに本発明は、不活性溶媒中で塩基の存在下に、本明細書に記載される式（Ｖ）に従う化合物を^１１ＣＨ_３Ｉ又は^１１ＣＨ_３ＯＴｆと反応させる段階を含んでなる、本明細書に記載される式（Ｉ）に従う化合物の製造方法に言及する。

【0022】

発明の詳細な記述
本発明は、本明細書前記で定義された式（Ｉ）の化合物ならびにその製薬学的に許容され得る溶媒和物及び塩形態を目的とする。本発明はさらに、式（ＶＩ）の前駆体化合物を目的とする。

【0023】

１つの態様において、Ｒ^１は２−フルオロエチルである。

【0024】

別の態様において、Ｒ^２は６−メチル、３，５−ジメチル又は５−メトキシである。

【0025】

好ましい態様において、式（Ｉ）の化合物は２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−３，５−ジメチル−ピリジン．スクシネート（Ｂ−３）である。

【0026】

式（Ｉ）の化合物及び式（Ｉ）の化合物を含んでなる組成物を、試験管内又は生体内で組織、細胞又は宿主の画像化のために用いることができる。特に本発明は、試験管内又は生体内で組織、細胞又は宿主中のＰＤＥ１０Ａを画像化又は定量する方法に関する。

【0027】

細胞及び組織は、好ましくはＰＤＥ１０Ａが豊富である中枢神経系細胞及び組織である。すでに言及した通り、ＰＤＥ１０Ａは中枢神経系組織、さらに特定的に脳を形成する；さらに特定的に線条を形成する中枢神経系組織中に豊富である。

【0028】

方法が生体内で実行される場合、宿主は哺乳類である。そのような特定の場合、式（Ｉ）の化合物は静脈内に、例えばシリンジを用いるか、又は短カテーテルのような末梢静脈内ライン（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｌｉｎｅ）による注入によって投与される。

【0029】

宿主がヒトである場合、式（Ｉ）の化合物又は式（Ｉ）の化合物の無菌塩水溶液を含んでなる無菌組成物を、特に腕における静脈内投与により、特に手の背面中の同定され得る静脈中に、又は肘における肘正中皮静脈内に投与することができる。

【0030】

かくして特定の態様において、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ）の化合物又は式（Ｉ）の化合物を含んでなる組成物を哺乳類に静脈内投与し、陽電子射出断層撮影画像化システムを用いて組織又は細胞を画像化することを含んでなる、哺乳類における組織又は細胞の画像化方法に関する。

【0031】

かくしてさらなる特定の態様において、本発明は、本明細書で定義される式（Ｉ）の化合物又は式（Ｉ）の化合物を含んでなる無菌塩水組成物をヒトに静脈内投与し、陽電子射出断層撮影画像化システムを用いて組織又は細胞を画像化することを含んでなる、ヒトにおける組織又は細胞の画像化方法に関する。

【0032】

さらに別の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物又は式（Ｉ）の化合物を含んでなる組成物を哺乳類に静脈内投与し、陽電子射出断層撮影画像化システムを用いて画像化することを含んでなる、哺乳類におけるＰＤＥ１０Ａの画像化又は定量方法に関する。

【0033】

他の態様において、本発明は試験管内又は生体内で組織、細胞又は宿主を画像化するための式（Ｉ）の化合物の使用に関するか、あるいは本発明は、陽電子射出断層撮影法を用いる試験管内又は生体内での組織、細胞又は宿主の画像化における使用のための式（Ｉ）の化合物に関する。

【0034】

定義
独立した又は他の用語との組み合わせにおける「Ｃ_１−３アルキル」は、１、２又は３個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分枝鎖状飽和アルキル基、例えばメチル、エチル、１−プロピル及び２−プロピルを示す。

【0035】

本明細書で用いられる場合、「組成物」という用語は、特定の量における特定の成分ならびに特定の量における特定の成分の組み合わせから直接又は間接的に生ずる生成物を含んでなる産物を包含することが意図されている。

【0036】

本明細書前記又は下記で用いられる「立体異性体」という用語は、式（Ｉ）に従う化合物の付加塩及びそれらの付加塩が有することができるすべての可能な立体異性体を定義する。他にことわるか又は指示しなければ、化合物の化学的名称はすべての可能な立体化学的異性体の混合物を示す。

【0037】

式（Ｉ）の化合物の許容され得る塩は、対イオンが製薬学的に許容され得るものである。しかしながら、製薬学的に許容され得ない酸及び塩基の塩も、例えば製薬学的に許容され得る化合物の製造又は精製において用途を見出すことができる。製薬学的に許容され得ても、許容され得なくても、すべての塩が本発明の範囲内に含まれる。製薬学的に許容され得る塩は、式（Ｉ）に従う化合物が形成することができる治療的に活性な無毒性の酸付加塩の形態を含むと定義される。該塩は、式（Ｉ）に従う化合物の塩基形態を適した酸、例えば無機酸、例えばハロゲン化水素酸、特に塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸及びリン酸；有機酸、例えば酢酸、ヒドロキシ酢酸、プロパン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸及びパモ酸で処理することにより得られ得る。

【0038】

逆に、適した塩基を用いる処理により、該塩の形態を遊離の塩基の形態に転換することができる。

【0039】

「宿主」という用語は哺乳類、特にヒト、ラット、マウス、イヌ及びラットを指す。

【0040】

「細胞」という用語は、ＰＤＥ１０Ａ酵素を発現するか又はそれが導入された細胞を指す。

【0041】

本発明のピリジン化合物は、ヘテロ芳香族性二環式部分を必ず含む先行技術の化合物と構造的に異なる。それらが低下した親油性を有し、従ってそれらが脳のタンパク質及び脂肪への非−特異的結合をあまり示さず、ＰＥＴ放射性リガンドの可能性のあるものとしてそれらをより魅力的なものとしている点で、それらは機能的に異なる。２−｛４−［１−（２−［^１８Ｆ］フルオロエチル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノキシメチル｝−キノリンと比較すると、本発明の化合物はより速い速度論を有し、臨床的適用において頑強な（ｒｏｂｕｓｔ）分布容積値を得てより高い線条−対−小脳比に達するためのより短い取得時間を生じ、生体内画像におけるより高い質及びＰＤＥ１０Ａ結合ポテンシャル（ＰＤＥ１０Ａ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）のより正確な定量を生ずる。

【0042】

製造
一般に、それぞれの段階が熟練者に既知である一連続の段階により本発明に従う化合物を製造することができる。特に、以下の合成方法に従って化合物を製造することができる。

【0043】

Ａ．最終的な化合物の製造
非−放射標識形における式（Ｉ）の化合物は、当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により製造され得る。本発明の化合物を、例えば３つの異なる一般的方法により製造することができる：

【0044】

方法Ａ：
スキーム２に示す反応順に従う。

【0045】

【化4】

【0046】

かくして例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中で、炭酸セシウム又は炭酸カリウムのような適した塩基の存在下に、式（ＩＩ）の化合物を、Ｚがハロ、例えばブロモ又はヨードのような適した離脱基である商業的に入手可能な式（ＩＩＩ）のアルキル化剤と反応させ、通常の加熱を用いるか又はマイクロ波照射下で適した温度において、典型的には１００〜１５０℃において、反応の完了に達するのに必要な時間、典型的にはマイクロ波オーブン中で１０〜２０分間、反応混合物を撹拌することができる。アルキル化反応は通常、ピラゾール環の両方の窒素原子上におけるアルキル化から誘導される２つの可能な位置異性体の混合物を与え、それらをカラムクロマトグラフィー又はＨＰＬＣによるクロマトグラフィー法により分離することができる。

【0047】

あるいはまた、Ｚはヒドロキシル基であることができ、その場合、化合物（ＩＩ）との反応は当該技術分野における熟練者により周知である通常のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ条件を用いて行われ得る。かくして例えばテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で、ジエチル−、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−又はジイソプロピルアゾジカルボキシレート及びトリフェニルホスフィンの存在下に、化合物（ＩＩ）を、Ｚがヒドロキシルである化合物（ＩＩＩ）と反応させ、適した温度で、典型的にはマイクロ波照射下で１２０℃において、反応の完了を可能にするのに適した時間、典型的には２０分間、反応混合物を撹拌することができる。Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応は通常、ピラゾール環の両方の窒素原子上におけるアルキル化から誘導される２つの可能な位置異性体の混合物を与え、それらをカラムクロマトグラフィー又はＨＰＬＣによるクロマトグラフィー法により分離することができる。

【0048】

方法Ｂ：
あるいはまた、スキーム３に示される反応順によって式（Ｉ）の化合物を製造することもできる。

【0049】

【化5】

【0050】

従って、当該技術分野における熟練者により周知の通常のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ条件を用い、式（ＩＶ）の化合物を式（Ｖ）の化合物と反応させることができる。かくして例えばテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で、ジエチル−、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−又はジイソプロピルアゾジカルボキシレート及びトリフェニルホスフィンの存在下に、化合物（ＩＶ）を化合物（Ｖ）と反応させ、適した温度で、典型的にはマイクロ波照射下で１２０℃において、反応の完了を可能にするのに適した時間、典型的には１５〜２０分間、反応混合物を撹拌することができる。式（Ｖ）の化合物は商業的に入手可能であるか、又は化学文献中に記載されており、熟練者により周知の簡単な標準的な合成法により製造され得る。

【0051】

方法Ｃ：
あるいはまた、スキーム４に示される反応順により、Ｒ１が２−フルオロエチル又は３−フルオロプロピルである式（Ｉ）の化合物を製造することもできる。

【0052】

【化6】

【0053】

従って、式（ＶＩ）の化合物において、当該技術分野における熟練者により周知の方法により、ヒドロキシル基を適した離脱基ＬＧ、例えばメタンスルホネート又はトシレートに変換し、式（ＶＩＩ）の中間体を与えることができる。次いで例えば不活性溶媒、例えばテトラヒドロフラン中でテトラブチルアンモニウムフルオリドと反応させ、適した温度で、典型的にはマイクロ波照射下で７０℃において、反応の完了を可能にするのに適した時間、典型的には１０分間、反応混合物を撹拌するような熟練者により周知の標準的な方法を用いて、離脱基をフッ素により置き換えることができる。あるいはまた、当該技術分野において既知の方法により、式（ＶＩ）の中間体のフッ素化剤、例えば（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）硫黄トリフルオリド（ＤＡＳＴ）との直接の反応により、式（Ｉ）の化合物を製造することもできる。

【0054】

Ｒ１が２−フルオロエチル又は３−フルオロプロピルである式（Ｉ）の化合物のＲ１側鎖中への放射性フッ素原子の導入は、当該技術分野において既知の方法を用いて、例えば式（ＶＩＩ）の適した前駆体を例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中で求核性放射性フッ素化剤、例えばＫ［^１８Ｆ］／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ^（Ｒ）２２２又は放射性フルオリドが導入されたテトラアルキルアンモニウム塩と反応させ、通常の加熱を用いるか又はマイクロ波照射下で適した温度において、反応の完了に達するのに必要な時間、反応混合物を撹拌することにより、行うことができる。あるいは又、例えば炭酸セシウムのような塩基の存在下に、例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中で、通常の加熱を用いるか又はマイクロ波照射下で適した温度において、反応の完了に達するのに必要な時間、典型的には通常の加熱を用いて９０℃において１５分間反応混合物を撹拌する、１−ブロモ−２−［^１８Ｆ］フルオロエタン又は１−ブロモ−３−［^１８Ｆ］フルオロプロパンを用いる式（ＩＩ）の中間体のアルキル化反応により、放射性フッ素の導入を行うこともできる。この場合、ＨＰＬＣにより所望の放射標識化合物（Ｉ）を他の放射標識位置異性体及び未反応前駆体から分離することができる。

【0055】

式（Ｉ）の化合物のＲ２置換基中への放射性炭素原子又は放射性フッ素原子の導入を、当該技術分野における熟練者により周知の放射化学的方法を用いて行うこともできる。例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中で、例えば炭酸セシウムのような塩基の存在下に、１個のＲ２がＯＨである適した式（Ｉ）の前駆体を［^１１Ｃ］ＣＨ_３Ｉ又は［^１１Ｃ］ＣＨ_３ＯＴｆと反応させ、通常の加熱を用いて適した温度において、反応の完了を可能にするのに適した時間、反応混合物を撹拌することにより、［^１１Ｃ］−メトキシ基を導入することができる。例えばジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド又はアセトニトリルのような不活性溶媒中で、１個のＲ２がピリジニル環の４もしくは６位におけるニトロ基、塩素又は臭素である適した式（Ｉ）の前駆体を求核性放射性フッ素化剤、例えばＫ［^１８Ｆ］／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ^（Ｒ）２２２と反応させ、通常の加熱を用いるか又はマイクロ波照射下における適した温度で、反応の完了を達成するのに必要な時間、反応混合物を撹拌することにより、Ｒ２における放射性フッ素原子の導入を行うことができる。

【0056】

最終的な化合物中に存在する種々の官能基の式（Ｉ）に従う他の官能基への変換は、当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により行われ得る。かくして例えばＲ２が臭素原子である式（Ｉ）の化合物を、例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中でヨウ化第１銅の存在下に、（フルオロスルホニル）ジフルオロ酢酸メチルエステルと反応させ、通常の加熱を用いるかもしくはマイクロ波照射下で適した温度において、典型的には１２０℃において、反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的には通常の加熱の２時間、反応混合物を撹拌し、Ｒ２がトリフルオロメチルである式（Ｉ）の化合物を与えることができる。他の例において、Ｒ２が臭素原子である式（Ｉ）の化合物を、例えばジオキサンのような不活性溶媒中で、例えば炭酸ナトリウム水溶液のような適した塩基及び例えばパラジウム（０）テトラキス（トリフェニルホスフィン）のようなパラジウム錯体触媒の存在下に、アルキル−又はシクロアルキルボロン酸と反応させ、通常の加熱を用いるかもしくはマイクロ波照射下における適した温度で、反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的にはマイクロ波オーブン中で１３０℃において１５分間、反応混合物を撹拌し、Ｒ２がＣ１−３アルキル又はシクロプロピルである式（Ｉ）の化合物を与えることができる。

【0057】

Ｂ．中間化合物の製造
当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により、例えばＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５２（１６），２００９年，５１８８−５１９６中に記載の方法に基づくスキーム５に示される反応順により、式（ＩＩ）の中間化合物を製造することができる。

【0058】

【化7】

【0059】

従って、式（ＶＩＩＩ）の化合物を過剰の商業的に入手可能なジメトキシメチル−ジメチルアミンと反応させ、還流温度において反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的には１時間、反応混合物を撹拌することができる。蒸発乾固の後、得られる残留物をメタノール中のヒドラジン水和物で処理し、還流温度で反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的には１時間、反応混合物を撹拌することができる。

【0060】

スキーム６に示される通り、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５２（１６），２００９年，５１８８−５１９６に記載されている方法と基本的に同じ合成方法に従って、３段階逐次反応により式（ＶＩＩＩ）の中間化合物を製造することができる。

【0061】

【化8】

【0062】

従って、式（ＩＸ）の化合物を、最初に対応するアシルクロリドを形成するために塩化チオニルと反応させ、次いでその場で例えばトリエチルアミンのような適した塩基の存在下に、例えばテトラヒドロフランのような不活性溶媒中でＯ，Ｎ−ジメチルヒドロキシルアミンと反応させ、室温で、反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的には６〜１８時間、反応混合物を撹拌することができる。かくして得られるＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−ベンズアミドを、続いて有機リチウム試薬、典型的にはリチウムジイソプロピルアミドの存在下に、例えばテトラヒドロフランのような不活性且つ乾燥溶媒中で４−ピコリンと反応させ、−７８℃で、確実に反応を完了させるのに必要な時間、反応混合物を撹拌することができる。

【0063】

式（ＩＸ）の中間化合物は、当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により
、例えばスキーム７に示される反応順により製造され得る。

【0064】

【化9】

【0065】

従って、式（Ｖ）の化合物を最初に商業的に入手可能な４−ヒドロキシ安息香酸メチルエステルと、当該技術分野における熟練者により周知の通常のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ条件を用いて反応させることができる。かくして例えばテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で、ジエチル−、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−又はジイソプロピルアゾジカルボキシレート及びトリフェニルホスフィンの存在下に、化合物（Ｖ）を４−ヒドロキシ安息香酸メチルエステルと反応させ、適した温度で、典型的にはマイクロ波照射下で１２０℃において、反応の完了を可能にするのに適した時間、典型的には２０分間、反応混合物を撹拌することができる。続いて、かくして得られる対応する化合物（ＩＸ）のメチルエステル誘導体を、例えばメタノール、テトラヒドロフラン又はメタノール／テトラヒドロフラン混合物のような不活性溶媒中で例えば水酸化ナトリウム水溶液又は水酸化カリウム水溶液のような希釈された塩基を用いる塩基性条件において、適した温度で、室温で反応の完了を可能にする適した時間、典型的には１８時間又はマイクロ波照射下における１５０℃で１０分間、反応混合物を撹拌して、加水分解することができる。式（Ｖ）の化合物は商業的に入手可能であるか又は化学文献に記載されており、熟練者により周知の簡単な標準的な合成方法により製造され得る。

【0066】

式（ＩＶ）の中間化合物は、当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により、例えばスキーム８に示される反応順により製造され得る。

【0067】

【化10】

【0068】

従って、Ｙがフェニル又は２−キノリニルである式（Ｘ）の化合物を、例えばエタノールのような適した不活性溶媒中で、例えば活性炭上の５％又は１０％パラジウムのような触媒の存在下に、典型的にはＨ−キューブ装置（Ｈ−ｃｕｂｅ ａｐｐａｒａｔｕｓ）中で５０〜８０℃且つ１気圧の水素において、確実に反応を完了させる時間、水素化分解反応に供することができる。

【0069】

式（Ｘ）の中間化合物は、当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により、例えば式（Ｉ）の化合物の合成のための方法Ａにおいて前に定義した様式と類似の様式において、スキーム９に示される反応順により製造され得る。

【0070】

【化11】

【0071】

かくしてＹがフェニル又は２−キノリニルである式（ＸＩ）の化合物を、炭酸セシウム又は炭酸カリウムのような適した塩基の存在下に、例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中で、Ｚがハロ、例えばブロモ又はヨードのような適した離脱基である式（ＩＩＩ）の商業的に入手可能なアルキル化剤と反応させ、通常の加熱を用いるか又はマイクロ波照射下で適した温度において、典型的には１００〜１５０℃において、反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的にはマイクロ波オーブン中で５〜２０分間、反応混合物を撹拌することができる。Ｒ１が−ＣＨ_２−ＣＯ−ＯＡｌｋである特別な場合、典型的な反応温度は室温であり、必要な時間は３時間である。アルキル化反応は通常、ピラゾール環の両方の窒素原子上におけるアルキル化から誘導される２つの可能な位置異性体の混合物を与え、それらはカラムクロマトグラフィー又はＨＰＬＣによるクロマトグラフィー法により分離され得る。

【0072】

あるいはまた、Ｚはヒドロキシル基であることができ、その場合、当該技術分野における熟練者により周知の通常のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ条件を用いて化合物（ＸＩ）との反応を行うことができる。かくして例えばテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で、ジエチル−、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−又はジイソプロピルアゾジカルボキシレート及びトリフェニルホスフィンの存在下に、化合物（ＸＩ）をＺがヒドロキシルである化合物（ＩＩＩ）と反応させ、適した温度で、典型的にはマイクロ波照射下で１２０℃において、反応の完了を可能にするのに適した時間、典型的には２０分間、反応混合物を撹拌することができる。Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ反応は通常、ピラゾール環の両方の窒素原子上におけるアルキル化から誘導される２つの可能な位置異性体の混合物を与え、それらはカラムクロマトグラフィー又はＨＰＬＣによるクロマトグラフィー法により分離され得る。

【0073】

Ｙがフェニルである式（ＸＩ）の化合物の合成は、特許出願国際公開第２００６／０７２８２８号パンフレットに記載されている。Ｙが２−キノリニルである式（ＸＩ）の化合物の合成は、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５２（１６），２００９年，５１８８−５１９６に記載されている。

【0074】

式（ＶＩ）の中間化合物は、当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により、例えばスキーム１０に示される反応順により製造され得る。

【0075】

【化12】

【0076】

従って、例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中で、炭酸セシウム又は炭酸カリウムのような適した塩基の存在下に、式（ＩＩ）の化合物を、Ｚがハロのような適した離脱基であり、ブロモが最も好ましい式（ＸＩＩ）の商業的に入手可能なアルキル化剤と反応させ、通常の加熱を用いるか又はマイクロ波照射下で適した温度において、典型的には１００℃において、反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的にはマイクロ波オーブン中で１０分間、反応混合物を混合することができる。アルキル化反応は通常、ピラゾール環の両方の窒素原子上におけるアルキル化から誘導される２つの可能な位置異性体の混合物を与え、それらはカラムクロマトグラフィー又はＨＰＬＣによるクロマトグラフィー法により分離され得る。

【0077】

あるいはまた、ｎが１である式（ＶＩ−ａ）の化合物をスキーム１１に示される反応の順により製造することもできる。

【0078】

【化13】

【0079】

かくして当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により、例えば適した不活性溶媒又は溶媒の混合物中で、例えばジクロロメタン及びメタノール中で、ナトリウムボロハイドライド又はナトリウムシアノボロハイドライドと反応させ、適した温度で、典型的には室温で、反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的には２時間、反応混合物を撹拌することにより、式（ＸＩＩＩ）の化合物のエステル基をアルコールに還元し、ｎが１である式（ＶＩ−ａ）の化合物を与えることができる。

【0080】

式（ＸＩＩＩ）の中間化合物は、当該技術分野における熟練者により周知の合成方法により、例えばスキーム１２に示される反応順により製造され得る。

【0081】

【化14】

【0082】

かくして炭酸セシウム又は炭酸カリウムのような適した塩基の存在下に、例えばジメチルホルムアミドのような不活性溶媒中で、式（ＩＩ）の化合物を商業的に入手可能なブロモ酢酸メチル又はエチルと反応させ、適した温度で、典型的には室温で、反応の完了を達成するのに必要な時間、典型的には３〜６時間、反応混合物を撹拌し、式（ＸＩＩＩ）の化合物を与えることができる。アルキル化反応は通常、ピラゾール環の両方の窒素原子上におけるアルキル化から誘導される２つの可能な位置異性体の混合物を与え、それらはカラムクロマトグラフィー又はＨＰＬＣによるクロマトグラフィー法により分離され得る。

【0083】

あるいはまた、式（ＸＩＩＩ）の中間化合物をスキーム１３に示される反応順により製造することもできる。

【0084】

【化15】

【0085】

従って、当該技術分野における熟練者により周知の通常のＭｉｔｓｕｎｏｂｕ条件を用いて式（ＩＶ−ａ）の化合物を式（Ｖ）の化合物と反応させることができる。かくして例えばテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で、ジエチル−、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−又はジイソプロピルアゾジカルボキシレート及びトリフェニルホスフィンの存在下に、化合物（ＩＶ−ａ）を化合物（Ｖ）と反応させ、適した温度で、典型的にはマイクロ波照射下で１２０℃において、反応の完了を可能にするのに適した時間、典型的には１５〜２０分間、反応混合物を撹拌することができる。式（ＩＶ−ａ）の化合物は、上記でスキーム９に示される反応順に従って合成され得るＲ１が−ＣＨ２−ＣＯ−ＯＡｌｋである式（Ｘ−ａ）の化合物から出発して、上記でスキーム８に示される水素化分解反応順に従って合成され得る。

【0086】

ラットＰＤＥ１０Ａ２−ｃＡＭＰ阻害の測定により式（Ｉ）の化合物の活性を決定し、ｐＩＣ５０は６．６０〜８．７９の範囲であった。他のＰＤＥｓを超える選択性も測定し、それはすべての場合に＞５０倍であり、ほとんどの化合物において＞１００倍であった。

【0087】

用途
本発明に従う化合物は、試験管内及び生体内の両方において、組織、細胞又は宿主の画像化のために種々の用途を見出す。かくして例えば種々の年令及び性別の患者におけるＰＤＥ１０の微分分布（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）のマッピングのためにそれらを用いることができる。さらに、それらは種々の疾患又は障害に苦しむ患者におけるＰＤＥ１０の微分分布に関する探査を可能にする。かくして異常な分布は、診断、症例発見（ｃａｓｅ ｆｉｎｄｉｎｇ）、患者集団の層別化において、ならびに個々の患者における疾患の進行の監視において助けとなり得る。放射性リガンドはさらに、他のリガンドによるＰＤＥ１０Ａサイトの占有の決定において用途を見出すことができる。放射性リガンドは微量で投与されるので、それから治療的効果は生じないであろう。

【発明を実施するための形態】

【0088】

実験部分
１．化学：
本明細書下記で、「ＬＣＭＳ」という用語は液体クロマトグラフィー／質量分析を意味し、「ＧＣＭＳ」という用語はガスクロマトグラフィー／質量分析を意味し、「ＨＰＬＣ」という用語は高−性能液体クロマトグラフィーを意味し、「ＤＣＭ」という用語はジクロロメタンを意味し、「ＤＭＦ」という用語はジメチルホルムアミドを意味し、「ＥｔＯＡｃ」という用語は酢酸エチルを意味し、「ＴＨＦ」という用語はテトラヒドロフランを意味し、「ｍｉｎ．」という用語は分を意味し、「ｈ．」という用語は時間を意味し、「Ｒ_ｔ」という用語は保持時間（分における）を意味し、「［Ｍ＋Ｈ］^＋」という用語は化合物の遊離の塩基のプロトン化質量を意味し、「［Ｍ−Ｈ］⁻」という用語は化合物の遊離の塩基の脱プロトン化質量を意味し、「ｍ．ｐ．」という用語は融点を意味する。

【0089】

マイクロ波補助反応は、シングル−モード反応器（ｓｉｎｇｌｅ−ｍｏｄｅ ｒｅａｃｔｏｒ）：Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ^ＴＭ Ｓｉｘｔｙマイクロ波反応器（Ｂｉｏｔａｇｅ）又はマルチモード反応器（ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ ｒｅａｃｔｏｒ）：ＭｉｃｒｏＳＹＮＴＨ Ｌａｂｓｔａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｅｓｔｏｎｅ，Ｉｎｃ．）において行われた。

【0090】

水素化反応は、ＴｈａｌｅｓＮａｎｏ Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｃからの連続流水素化器Ｈ−ＣＵＢＥ^（Ｒ）において行われた。

【0091】

薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、シリカゲル６０ Ｆ２５４プレート（Ｍｅｒｃｋ）上で試薬等級溶媒を用いて行われた。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル，メッシュ２３０−４００粒度及び６０Ａ孔径（Ｍｅｒｃｋ）上で標準的な方法の下に行われた。自動フラッシュカラムクロマトグラフィーは、Ａｒｍｅｎ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔからのＳＰＯＴ又はＦＬＡＳＨシステム上で、Ｍｅｒｃｋからの接続準備済み（ｒｅａｄｙ−ｔｏ−ｃｏｎｎｅｃｔ）カートリッジを用い、イレギュラーシリカゲル（ｉｒｒｅｇｕｌａｒ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ），粒度１５−４０μｍ（順相使い捨てフラッシュカラム）上で行われた。

【0092】

以下の実施例において、本発明の化合物の製造のためのいくつかの方法を例示し、それらは本発明の例示を意図しているがその範囲を制限することを意図していない。他にことわらなければ、すべての出発材料を商業的供給者から得、さらなる精製なしで用いた。

【0093】

Ａ．中間体及び前駆体の合成
中間体１
４−（６−メチル−ピリジン−２−イルメトキシ）−安息香酸メチルエステル（Ｉ−１）

【0094】

【化16】

【0095】

ＴＨＦ（４２ｍＬ）中の６−メチル−２−ピリジンメタノール（７．０ｇ，５６．８４ミリモル）、４−ヒドロキシ安息香酸メチル（８．６５ｇ，５６．８４ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１４．６５ｍＬ，７３．９ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（１９．３８ｇ，７３．９ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１２０℃において２０分間加熱した（反応を７つのバッチに分けた）。この時間の後、水を用いて混合物をクエンチングし、ＤＣＭで抽出し、真空中で溶媒を蒸発乾固し、粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ８０／２０から５０／５０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させ、所望の中間体Ｉ−１を純度が約５０％のオレンジ色の油として与え、主な不純物はトリフェニルホスフィンオキシドであった。混合物をさらなる精製なしで次の反応段階において用いた（２５ｇ，８５．５％）。Ｃ_１５Ｈ_１５ＮＯ_３。

【0096】

中間体２
４−（６−メチル−ピリジン−２−イルメトキシ）−安息香酸（Ｉ−２）

【0097】

【化17】

【0098】

１５０ｍＬのメタノール／ＴＨＦ（２：１）の混合物中の中間体Ｉ−１の溶液に、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（４９ｍＬ，９７．２ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、次いで６０℃で２時間撹拌した。有機溶媒の蒸発の後、水相をＥｔＯＡｃで洗浄し、次いで希ＨＣｌを用いてｐＨが５〜６になるまで酸性化した。沈殿する中間化合物Ｉ−２を濾過し、乾燥し、さらなる精製なしで次の反応段階のために用いた（９．０ｇ，７６．２％）。Ｃ_１４Ｈ_１３ＮＯ_３。

【0099】

中間体３
Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−４−（６−メチル−ピリジン−２−イルメトキシ）−ベンズアミド（Ｉ−３）

【0100】

【化18】

【0101】

中間体Ｉ−２（９．０ｇ，３７．０ミリモル）及び塩化チオニル（５０ｍＬ）の混合物を室温で３時間撹拌した。次いで混合物を濃縮乾固し、粗酸クロリドをＴＨＦ（１００ｍＬ）中に溶解した。次いでトリチルアミン（２０．５ｍＬ，１４８ミリモル）及びＯ，Ｎ−ジメチル−ヒドロキシルアミン塩酸塩（１０．８ｇ，１１１ミリモル）をゆっくり加え
た。反応混合物を室温で終夜撹拌した。水を用いてクエンチングした後、混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ヘプタン／ＥｔＯＡｃ ４０／６０から０／１００）により精製し、中間化合物Ｉ−３をオレンジ色の油として与え、それをさらなる精製なしで次の反応のために用いた（６．２ｇ，４６．８％）。Ｃ_１６Ｈ_１８Ｎ_２Ｏ_３。

【0102】

中間体４
２−ピリジン−４−イル−１−［４−（６−メチル−ピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−エタノン（Ｉ−４）

【0103】

【化19】

【0104】

ＴＨＦ（３５ｍＬ）中のリチウムジイソプロピルアミド（ＴＨＦ中の２Ｍ溶液，４３．３ｍＬ，８６．６ミリモル）の溶液に、窒素下に０℃において４−メチルピリジン（８．４３ｍＬ，８６．６ミリモル）を滴下した。３０分後、それを−７８℃に冷却し、この溶液の３５ｍＬを、やはり−７８℃に冷却されたＴＨＦ（６５ｍＬ）中の中間体Ｉ−３（６．２ｇ，１７．３２ミリモル）の別の溶液に滴下した。混合物をこの温度で２時間撹拌し、次いで最初に調製された溶液のさらに２０ｍＬを滴下した。得られる溶液を−７８℃でさらに１時間撹拌した。この時間の後、水を用いて反応混合物をクエンチングし、ＤＣＭで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させた。得られる粗残留物を洗浄し、ジエチルエーテルを用いて磨砕し、中間化合物Ｉ−４（４．７ｇ，８５．２％）を淡黄色の固体として与えた。Ｃ_２０Ｈ_１８Ｎ_２Ｏ_２。

【0105】

中間体５
２−メチル−６−［４−（４−ピリジン−４−イル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−ピリジン（Ｉ−５）

【0106】

【化20】

【0107】

ジメトキシメチル−ジメチルアミン（１５ｍＬ）中の中間体Ｉ−４（４．７ｇ，１４．７６ミリモル）の溶液を還流において１時間撹拌した。溶媒の蒸発後、粗残留物をメタノール（５０ｍＬ）中に溶解し、ヒドラジン水和物（１．０８ｍＬ，２２．１４ミリモル）を加えた。反応混合物を還流において１時間加熱し、その時間の後、溶媒を蒸発させて固体残留物を与え、それを洗浄し、ジエチルエーテル／ＥｔＯＡｃの混合物を用いて磨砕し、中間化合物Ｉ−５（３．４ｇ，６７．３％）を淡黄色の固体として与えた。Ｃ_２１Ｈ_１８Ｎ_４Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．４８，ｍ／ｚ ３４３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。

【0108】

中間体６
４−［３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジン（Ｉ−６）

【0109】

【化21】

【0110】

特許出願国際公開第２００６／０７２８２８号パンフレット中に記載されている方法に従って合成される４−［３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジン（６．７ｇ，２０．４７ミリモル）、１−ブロモ−２−フルオロエタン（３．１２ｇ，２４．５６ミリモル）及び炭酸セシウム（２０ｇ，６１．４ミリモル）のＤＭＦ（４２ｍＬ）中の混合物をマイクロ波オーブン中で１５０℃において５分間加熱した（反応を６つのバッチに分けた）。室温に冷ました後、濾過により固体を捨て、水を用いて溶液をクエンチングし、さらにＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させた。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；アセトニトリル／ジイソプロピルエーテル ３０／７０から８０／２０及び次いで再びＥｔＯＡｃ／ヘプタン ７０／３０）により精製した。所望の画分を集め、蒸発乾固し、所望の中間化合物Ｉ−６（４ｇ，５２．３％）を油として与えた。Ｃ_２３Ｈ_２０ＦＮ_３Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ４．２２，ｍ／ｚ ３７４［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法１）。

【0111】

クロマトグラフィー精製から、対応する位置異性体Ｉ−６’ ４−［５−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジンも単離された（２ｇ，２６．２％）。Ｃ_２３Ｈ_２０ＦＮ_３Ｏ。

【0112】

中間体７
４−［１−（２−フルオロエチル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノール（Ｉ−７）

【0113】

【化22】

【0114】

中間化合物Ｉ−６（４ｇ，１０．７１ミリモル）をエタノール（２００ｍＬ）中に溶解し、Ｈ−Ｃｕｂｅ^（Ｒ）システムにおいて、触媒としてＰｄ／Ｃ５％を用い（フル水素モード（ｆｕｌｌ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｍｏｄｅ），２．５ｍＬ／分）、８０℃及び大気圧において水素化に供した。溶媒を真空中で蒸発乾固し、中間化合物Ｉ−７（２．５ｇ，８２．４％）を与え、それをさらなる精製なしで次の反応のために用いた。Ｃ_１６Ｈ_１４ＦＮ_３Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ １．５７，ｍ／ｚ ２８４［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法８）。

【0115】

中間体８
４−［１−（３−フルオロプロピル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノール（Ｉ−８）

【0116】

【化23】

【0117】

４−［３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１−（２−フルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジンを４−［３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１−（２−フルオロプロピル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジンに置き換える以外は、中間化合物Ｉ−７の製造のための方法に従い、中間化合物Ｉ−８（９０％）を与えた。Ｃ_１７Ｈ_１６ＦＮ_３Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ １．８１，ｍ／ｚ ２９８［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。

【0118】

中間体９
４−［３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジン（Ｉ−９）

【0119】

【化24】

【0120】

特許出願国際公開第２００６／０７２８２８号パンフレット中に記載されている方法に従って合成される４−［３−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジン（２．０ｇ，６．１１ミリモル）、１，１，１−トリフルオロ−２−ヨードエタン（０．７３３ｍＬ，７．３３ミリモル）及び炭酸セシウム（５．９７ｇ，１８．３ミリモル）のＤＭＦ（１２ｍＬ）中の混合物をマイクロ波オーブン中で１２０℃において２０分間加熱した。室温に冷ました後、水を用いて混合物をクエンチングし、さらにＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させた。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；アセトニトリル／ジイソプロピルエーテル ５０／５０から８０／２０）により精製した。所望の画分を集め、蒸発乾固し、純度が約８０％の所望の中間化合物Ｉ−９（１．２ｇ，３８．４％）を油として与えた。Ｃ_２３Ｈ_１８Ｆ_３Ｎ_３Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ４．８６，ｍ／ｚ ４１０［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。

【0121】

クロマトグラフィー精製から、対応する位置異性体Ｉ−９’ ４−［５−（４−ベンジルオキシ−フェニル）−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−ピリジンも単離された（０．４ｇ，１４．６％）。Ｃ_２３Ｈ_１８Ｆ_３Ｎ_３Ｏ。

【0122】

中間体１０
４−［４−ピリジン−４−イル−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノール（Ｉ−１０）

【0123】

【化25】

【0124】

中間化合物Ｉ−９をエタノール（５０ｍＬ）中に溶解し、Ｈ−Ｃｕｂｅ^（Ｒ）システムにおいて、触媒としてＰｄ／Ｃ５％を用い（フル水素モード，１．５ｍＬ／分）、８０℃及び大気圧において水素化に供した。溶媒を真空中で蒸発乾固し、中間化合物Ｉ−１０（０．５５ｇ，７５．４％）を白色の固体として与え、それをさらなる精製なしで次の反応のために用いた。Ｃ_１６Ｈ_１２Ｆ_３Ｎ_３Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ １．８２，ｍ／ｚ ３２０［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。

【0125】

中間体１１
｛３−［４−（６−メチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１１）及び｛５−［４−（６−メチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１１’）

【0126】

【化26】

【0127】

ＤＭＦ（６ｍＬ）中の中間体Ｉ−５（０．３０ｇ，０．８７６ミリモル）の撹拌された溶液に、ブロモ酢酸メチル（０．１０ｍＬ，１．０５１ミリモル）及び炭酸セシウム（０．８６ｇ，２．６３ミリモル）を加えた。混合物を室温で６時間撹拌した。次いで水を用いてそれをクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機溶媒を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９０／１０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させ、２つの位置異性体Ｉ−１１及びＩ−１１’の混合物を与え、それをさらなる精製なしで次の反応のためにそのまま用いた（０．２１ｇ，４９．２％）。Ｃ_２４Ｈ_２２Ｎ_４Ｏ_３。

【0128】

中間体１２
２−｛３−［４−（６−メチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−エタノール（Ｉ−１２）

【0129】

【化27】

【0130】

ＤＣＭ（４ｍＬ）とメタノール（１ｍＬ）の混合物中の中間体Ｉ−１１及びＩ−１１’の混合物（０．２１ｇ，０．５０７ミリモル）の撹拌された溶液に、ナトリウムボロハイドライド（０．０９６ｇ，２．５３６ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。次いで水を用いて混合物をクエンチングし、さらなるＤＣＭで抽出し、有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９０／１０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させて中間化合物Ｉ−１２（０．１２ｇ，６１．２％）を与えた。Ｃ_２３Ｈ_２２Ｎ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．４８，ｍ／ｚ ３８７［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法３）。

【0131】

クロマトグラフィー分離から、対応する位置異性体Ｉ−１２’ ２−｛５−［４−（６−メチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−エタノールも単離された（０．０４５ｇ，２３％）。Ｃ_２３Ｈ_２２Ｎ_４Ｏ_２。

【0132】

中間体１３
｛４−ピリジン−４−イル−３−［４−（キノリン−２−イルメトキシ）−フェニル］−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１３）及び｛４−ピリジン−４−イル−５−［４−（キノリン−２−イルメトキシ）−フェニル］−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１３’）

【0133】

【化28】

【0134】

Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５２（１６），２００９年，５１８８−５１９６に記載されている方法に従って合成される２−［４−（４−ピリジン−４−イル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−フェノキシメチル］−キノリン（０．５ｇ，１．３３ミリモル）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中の撹拌された溶液に、ブロモ酢酸メチル（０．１５ｍＬ，１．６０ミリモル）及び炭酸セシウム（１．３０ｇ，３．９９ミリモル）を加えた。混合物を室温で３時間
撹拌した。次いで水を用いてそれをクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機溶媒を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９５／５）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させ、２つの位置異性体Ｉ−１３及びＩ−１３’の混合物を与え、それをさらなる精製なしで次の反応のために用いた（０．４７ｇ，４７％）。Ｃ_２７Ｈ_２２Ｎ_４Ｏ_３。

【0135】

中間体１４
［３−（４−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル］−酢酸メチルエステル（Ｉ−１４）及び［５−（４−ヒドロキシフェニル）−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル］−酢酸メチルエステル（Ｉ−１４’）

【0136】

【化29】

【0137】

中間化合物Ｉ−１３及びＩ−１３’の混合物（０．４７ｇ，１．０４３ミリモル）をエタノール（２０ｍＬ）中に溶解し、Ｈ−Ｃｕｂｅ^（Ｒ）システムにおいて、触媒としてＰｄ／Ｃ５％を用い（フル水素モード，１．５ｍＬ／分）、７０℃及び大気圧において水素化に供した。溶媒を真空中で蒸発乾固して黄色の油を与え、それを、ＤＣＭを用いる処理により固体とした。固体をさらなるＤＣＭで洗浄し、２つの位置異性体Ｉ−１４とＩ−１４’の混合物を与え、それをさらなる精製なしで次の反応のために用いた（０．２３５ｇ，７３％）。Ｃ_１７Ｈ_１５Ｎ_３Ｏ_３。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ０．９５（より多い方の（ｍａｊｏｒ）位置異性体），Ｒｔ １．００（より少ない方の（ｍｉｎｏｒ）位置異性体），ｍ／ｚ ３１０［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法８）。

【0138】

中間体１５
｛３−［４−（３，５−ジメチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１５）及び｛５−［４−（３，５−ジメチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１５’）

【0139】

【化30】

【0140】

ＴＨＦ（６ｍＬ）中の２つの位置異性体Ｉ−１４及びＩ−１４’の混合物（０．２３５ｇ，０．７６０ミリモル）、３，５−ジメチル−２−ヒドロキシメチルピリジン（０．１５６ｇ，１．１４ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．２６２ｇ，１．１４ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．２９９ｇ，１．１４ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１２０℃において２０分間加熱した。この時間の後、炭酸ナトリウムの飽和水溶液を用いて混合物をクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で溶媒を蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９５／５）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を真空中で蒸発させ、２つの中間化合物Ｉ−１５及びＩ−１５’の混合物を与え、それをさらなる精製なしで次の反応のために用いた（０．１８ｇ，５５％）。Ｃ_２５Ｈ_２４Ｎ_４Ｏ_３。

【0141】

中間体１６
２−｛３−［４−（３，５−ジメチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−エタノール（Ｉ−１６）

【0142】

【化31】

【0143】

ＤＣＭ（４ｍＬ）とメタノール（１ｍＬ）の混合物中の中間体Ｉ−１５及びＩ−１５’の混合物（０．１８ｇ，０．４２０ミリモル）の撹拌された溶液に、ナトリウムボロハイドライド（０．０７９ｇ，２．１０ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いで水を用いて混合物をクエンチングし、さらなるＤＣＭで抽出し、有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９０／１０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させて中間化合物Ｉ−１６（０．１２ｇ，６１．２％）を与えた。クロマトグラフィー分離から他の位置異性体は単離されなかった。Ｃ_２４Ｈ_２４Ｎ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．５３，ｍ／ｚ ４０１［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法６）。

【0144】

中間体１７
｛３−［４−（５−メトキシピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１７）及び｛５−［４−（５−メトキシピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−酢酸メチルエステル（Ｉ−１７’）

【0145】

【化32】

【0146】

ＴＨＦ（４ｍＬ）中の２つの位置異性体Ｉ−１４及びＩ−１４’の混合物（０．１７ｇ，０．５５０ミリモル）、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１３，２００５年，６７６３−６７７０に記載されている（５−メトキシ−ピリジン−２−イル）メタノール（０．１１５ｇ，０．８２５ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１９０ｇ，０．８２５ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．２１６ｇ，０．８２５ミリモル）を、マイクロ波オーブン中で１２０℃において２０分間加熱した。この時間の後、真空中で溶媒を蒸発乾固し、粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９５／５）により精製した。所望の画分を集め、溶媒を真空中で蒸発させ、２つの中間化合物Ｉ−１７及びＩ−１７’の混合物を与え、それをさらなる精製なしで次の反応のために用いた（０．１８ｇ，７６％）。Ｃ_２４Ｈ_２２Ｎ_４Ｏ_４。

【0147】

中間体１８
２−｛３−［４−（５−メトキシピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−エタノール（Ｉ−１８）

【0148】

【化33】

【0149】

ＤＣＭ（４ｍＬ）とメタノール（１ｍＬ）の混合物中の中間体Ｉ−１７及びＩ−１７’の混合物（０．１８ｇ，０．４１８ミリモル）の撹拌された溶液に、ナトリウムボロハイドライド（０．０７９ｇ，２．０９ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。次いで水を用いて混合物をクエンチングし、さらなるＤＣＭで抽出し、有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９０／１０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させて中間化合物Ｉ−１８（０．０９ｇ，５３．５％）を与えた。クロマトグラフィー分離から他の位置異性体は単離されなかった。Ｃ_２３Ｈ
_２２Ｎ_４Ｏ_３。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．８７，ｍ／ｚ ４０３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。

【0150】

中間体１９
メタンスルホン酸 ２−｛３−［４−（３，５−ジメチルピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−エチルエステル（Ｉ−１９）

【0151】

【化34】

【0152】

ＤＣＭ（１ｍＬ）中の中間体Ｉ−１６（５ｍｇ，０．０１２ミリモル）の溶液にピリジン（１１μＬ）を加え、この溶液を０℃で撹拌した。次いでメタンスルホン酸無水物（１６．５ｍｇ，０．０９５ミリモル）を加え、０℃で４時間撹拌を続け、その後窒素を用いるフラッシングにより溶媒を蒸発させた。粗混合物をメタノール（０．５ｍＬ）中に溶解し、水（４．５ｍＬ）で希釈し、メタノール（３ｍＬ）及びｍｉｌｌｉＱ^（Ｒ）水（６ｍＬ）で予備状態調節されたＣ_１８ＳｅｐＰａｋ^（Ｒ）カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ，ＵＳＡ）に通過させた。次いで追加量の水（２ｍＬ）を用いてカートリッジを３回濯ぎ、未反応メタンスルホン酸無水物を可能な限り多く除去した。アセトニトリル（３ｍＬ）を用いて生成物をカートリッジから溶出させ、減圧下で溶媒を蒸発させた。溶媒の蒸発の前に、ＨＰＬＣ分析を行ってヒドロキシル−前駆体Ｉ−１６のそのＯ−メシル誘導体Ｉ−１９への転換率を調べた。このＨＰＬＣ分析は、分析的ＸＴｅｒｒａ^ＴＭ ＲＰ Ｃ_１８カラム（Ｗａｔｅｒｓ）上で行われ、それは１ｍＬ／分の流量で水及びアセトニトリルの勾配混合物（０分：９５：５ ｖ／ｖ，２５分：１０：９０ ｖ／ｖ，３０分：１０：９０ ｖ／ｖ，直線的勾配）を用いて溶出させた。分析は、平均転換率が９８％（ｎ＝９）であることを示した。アセトニトリルを用いる共沸蒸留により残留水を除去し、混合物を真空炉中で終夜乾燥した。通常は翌日である放射標識実験の日に、この反応生成物を無水ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解し、直接求核的放射性フッ素化に用いた（０．３ｍＬ）。Ｃ_２５Ｈ_２６Ｎ_４Ｏ_４Ｓ。

【0153】

中間体Ｉ−２０
メタンスルホン酸 ２−｛３−［４−（５−メトキシピリジン−２−イルメトキシ）−フェニル］−４−ピリジン−４−イル−ピラゾール−１−イル｝−エチルエステル（Ｉ−２０）

【0154】

【化35】

【0155】

ＤＣＭ（１ｍＬ）中の中間体Ｉ−１８（５ｍｇ，０．０１２ミリモル）の溶液にピリジン（１１μＬ）を加え、この溶液を０℃で撹拌した。次いでメタンスルホン酸無水物（１６．５ｍｇ，０．０９５ミリモル）を加え、０℃で４時間撹拌を続け、その後窒素を用いるフラッシングにより溶媒を蒸発させた。粗混合物をメタノール（０．５ｍＬ）中に溶解し、水（４．５ｍＬ）で希釈し、メタノール（３ｍＬ）及びｍｉｌｌｉＱ^（Ｒ）水（６ｍＬ）で予備状態調節されたＣ_１８ＳｅｐＰａｋ^（Ｒ）カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ，ＵＳＡ）に通過させた。次いで追加量の水（２ｍＬ）を用いてカートリッジを３回濯ぎ、未反応メタンスルホン酸無水物を可能な限り多く除去した。アセトニトリル（３ｍＬ）を用いて生成物をカートリッジから溶出させ、減圧下で溶媒を蒸発させた。溶媒の蒸発の前に、ＨＰＬＣ分析を行ってヒドロキシル−前駆体Ｉ−１８のそのＯ−メシル誘導体Ｉ−２０への転換率を調べた。このＨＰＬＣ分析は、分析的ＸＴｅｒｒａ^ＴＭ ＲＰ Ｃ_１８カラム（Ｗａｔｅｒｓ）上で行われ、それは１ｍＬ／分の流量で水及びアセトニトリルの勾配混合物（０分：９５：５ ｖ／ｖ，２５分：１０：９０ ｖ／ｖ，３０分：１０：９０ ｖ／ｖ，直線的勾配）を用いて溶出させた。分析は、平均転換率が９８％（ｎ＝９）であることを示した。アセトニトリルを用いる共沸蒸留により残留水を除去し、混合物を真空炉中で終夜乾燥した。通常は翌日である放射標識実験の日に、この反応生成物を無水ＤＭＦ（１．５ｍＬ）中に溶解し、直接求核的放射性フッ素化に用いた（０．３ｍＬ）。Ｃ_２４Ｈ_２４Ｎ_４Ｏ_５Ｓ。

【0156】

Ｂ．最終的化合物の製造
実施例Ｂ１
２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−６−メチル−ピリジン．二塩酸塩（Ｂ−１）
ＤＭＦ（５ｍＬ）中の中間化合物Ｉ−５（０．３０ｇ，０．８７６ミリモル）、１−ブロモ−２−フルオロエタン（０．０８３ｍＬ，１．０５１ミリモル）及び炭酸セシウム（０．８６ｇ，２．６３ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１５０℃において１０分間加熱した。この時間の後、水を用いて反応混合物をクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で溶媒を蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９０／１０）により精製し、２つの異性体の混合物を与えた。この混合物をさらに別のカラムクロマトグラフィー精製（シリカゲル；アセトニトリル／メタノール １００／０から９５／５）に供した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させ、所望の化合物Ｂ−１を油として与えた（０．１５ｇ，４４．１％）。この油性の化合物をイソプロピルアルコール中の塩化水素の溶液で処理し、続いてジエチルエーテル／ＤＣＭから結晶化すると、化合物Ｂ−１の塩酸塩を黄色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_２１ＦＮ_４Ｏ．２ＨＣｌ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．８２，ｍ／ｚ ３８９［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法３）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．６６（ｓ，３Ｈ），４．５６（ｄｔ，Ｊ＝２８．０，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８８（ｄｔ，Ｊ＝４７．２，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．３７（ｓ，２Ｈ），７．１５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．６７（
ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），８．１３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），８．７１（ｓ，１Ｈ），８．７４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）．

【0157】

クロマトグラフィー分離から、対応する位置異性体２−｛４−［２−（２−フルオロエチル）−４−ピリジン−４−イル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノキシメチル｝−６−メチル−ピリジン（Ｂ−１’）も、７０％の純度で油として単離された（０．１５ｇ，３０．８％）。Ｃ_２３Ｈ_２１ＦＮ_４Ｏ。

【0158】

直接標識法（Ｒａｄｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）：［^１８Ｆ］フルオロエチルブロミド及び［^１８Ｆ］Ｂ−１の製造
Ｃｙｃｌｏｎｅ １８／９サイクロトロン（Ｉｏｎ Ｂｅａｍ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｌｏｕｖａｉｎ−ｌａ−Ｎｅｕｖｅ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）からの１８ＭｅＶプロトンを用い、ニオブターゲット中の１．９５ｍＬの９７％濃縮［^１８Ｏ］Ｈ_２Ｏ（Ｒｏｔｅｍ
ＨＹＯＸ１８，Ｒｏｔｅｍ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｂｅｅｒ Ｓｈｅｖａ，Ｉｓｒａｅｌ）を照射することによる［^１８Ｏ（ｐ，ｎ）^１８Ｆ］反応により、［^１８Ｆ］フルオリド（［^１８Ｆ］Ｆ⁻）を製造した。約６０分間の照射の後、ＳｅｐＰａｋ^ＴＭ Ｌｉｇｈｔ Ａｃｃｅｌｌならびに０．５Ｍ Ｋ_２ＣＯ_３溶液（１０ｍＬ）及び水（２ｘ１０ｍＬ）を用いる連続的処理により予備状態調節されたＱＭＡアニオン交換カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）を用い、得られる［^１８Ｆ］Ｆ⁻を［^１８Ｏ］Ｈ_２Ｏから分離した。次いでＨ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ（０．７５ｍＬ；５：９５ ｖ／ｖ）中に溶解された炭酸カリウム（２．４７ｍｇ）及びＫｒｙｐｔｏｆｉｘ^（Ｒ）２２２（２７．９２ｍｇ）を含有する溶液を用い、［^１８Ｆ］Ｆ⁻をカートリッジからコニカル反応バイアル（１ｍＬ）中に溶出させた。通常の加熱を２分間適用することにより、１１０℃で溶媒を蒸発させた。溶媒の蒸発の後、１１０℃の温度でアセトニトリル（１ｍＬ）を用い、完全に乾固するまで微量の水を共沸蒸留することにより、［^１８Ｆ］Ｆ⁻をさらに乾燥した。

【0159】

［^１８Ｆ］Ｆ⁻を含有するバイアルにｏ−ジクロロベンゼン（０．７ｍＬ）中の２−ブロモエチルトリフレート（５μＬ，ＩｓｏＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）の溶液を加えた。得られる［^１８Ｆ］ＦＥｔＢｒを、次いでヘリウム流（３〜４ｍＬ／分）を用いて１２０℃で蒸留し、無水ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中に前駆体Ｉ−５（０．２ｍｇ）及び少量（１〜３ｍｇ）のＣｓ_２ＣＯ_３を含有する第２の反応バイアル中に吹き込んだ（ｂｕｂｂｌｅｄ）。前駆体溶液中に十分な量の放射能を蒸留した後、反応バイアルを閉め、９０℃で１５分間加熱した。反応の後、粗混合物を１．６ｍＬの水で希釈し、半−調製的ＸＢｒｉｄｇｅ^ＴＭカラム（Ｃ_１８，５μｍ，４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ）より成るＨＰＬＣシステム上に注入し、それを１ｍＬ／分の流量で０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５及びＥｔＯＨの混合物（７０：３０ ｖ／ｖ）を用いて溶出させた。２５４ｎｍにおいてＨＰＬＣ溶出物のＵＶ検出を行った。約３７分後に放射標識生成物［^１８Ｆ］Ｂ−１を集めた。（約４５分後に望まれていない異性体が溶出する）。１．５〜２ｍＬの体積（移動相）中で平均５０ｍＣｉ（ｎ＝２）の精製された［^１８Ｆ］Ｂ−１を集めた。［^１８Ｆ］Ｂ−１に相当する集められたピークを、次いで通常生理食塩水（Ｍｉｎｉ Ｐｌａｓｃｏ^（Ｒ），Ｂｒａｕｎ，Ｍｅｌｓｕｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で希釈してエタノール濃度を＜５％に下げ、０．２２μｍ膜フィルター（Ｍｉｌｌｅｘ^（Ｒ）−ＧＶ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｉｒｅｌａｎｄ）を介して無菌濾過した。ＸＢｒｉｄｇｅ^ＴＭカラム（Ｃ_１８，３．５μｍ，３ｍｍｘ１００ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ）より成り、０．８ｍＬ／分の流量で０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５及びアセトニトリルの混合物（７０：３０ ｖ／ｖ）を用いて溶出させる分析的ＨＰＬＣシステムを用い、放射性トレーサーの純度を分析した（Ｒｔ＝７．５分）。［^１８Ｆ］Ｂ−１は５７％の放射化学的収率（［^１８Ｆ］ＦＥｔＢｒ出発放射能に対して，ｎ＝２）で合成された。上記の分析的ＨＰＬＣシステムを用いて調べられた放射化学的純度は＞９９％であっ
た。

【0160】

実施例Ｂ２
２−［［４−［１−（３−フルオロプロピル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−６−メチル−ピリジン．塩酸塩（Ｂ−２）
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の中間化合物Ｉ−５（０．３０ｇ，０．８７６ミリモル）、３−フルオロプロパン−１−オール（０．１０３ｇ，１．３１４ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．２６１ｍＬ，１．３１４ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．３４５ｇ，１．３１４ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１２０℃において２０分間加熱した。この時間の後、真空中で溶媒を蒸発乾固し、粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；アセトニトリル／メタノール １００／０から９５／５）により精製した。所望の画分を集め、真空中で蒸発させ、所望の化合物Ｂ−２を無色の油として与え、それを白色の固体としての対応する塩酸塩に転換した。（０．０７５ｇ，１９．５％）（正確な化学量論はわからない）。Ｃ_２４Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ．ＨＣｌ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ４．０９，ｍ／ｚ ４０３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法３）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．２０−２．３４（ｍ，２Ｈ），２．６２（ｓ，３Ｈ），４．３３（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），４．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝４７．３，５．６，５．５Ｈｚ，２Ｈ），５．３２（ｓ，２Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），８．０５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），８．６９（ｓ，１Ｈ），８．７３（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）．

【0161】

クロマトグラフィー分離から、対応する位置異性体２−｛４−［２−（３−フルオロプロピル）−４−ピリジン−４−イル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノキシメチル｝−６−メチル−ピリジン（Ｂ−２’）も単離され、白色の粉末としてのその対応する塩酸塩に転換された（０．０７ｇ，１８．２％）。Ｃ_２４Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ。

【0162】

実施例Ｂ３
２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−３，５−ジメチル−ピリジン．スクシネート（Ｂ−３）
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の中間化合物Ｉ−７（０．２０ｇ，０．７０６ミリモル）、３，５−ジメチル−２−ヒドロキシメチルピリジン（０．１２６ｇ，０．９１８ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．２１１ｇ，０．９１８ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．２４１ｇ，０．９１８ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１２０℃において１５分間加熱した。この時間の後、炭酸ナトリウムの飽和水溶液を用いて混合物をクエンチングし、ＤＣＭで抽出した。有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９５／５）により精製した。所望の画分を集め、真空中で溶媒を蒸発させ、化合物Ｂ−３を無色の油として与えた。残留物をメタノール（２ｍＬ）中に溶解し、メタノール（２ｍＬ）中のコハク酸（０．０７３ｇ，０．６１９ミリモル）の溶液をゆっくり加えた。溶媒を蒸発乾固し、固体残留物をジエチルエーテルで数回洗浄し、最終的な化合物Ｂ−３のコハク酸塩を白色の固体として与えた（０．２９５ｇ，８０．３％）。Ｃ_２４Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．０８，ｍ／ｚ ４０３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．２８（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，４Ｈ），４．４９（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．７Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．２，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．１６（ｓ，２Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），７．
３２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｓ，２Ｈ），８．４６（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），１２．１５（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0163】

直接標識法：［^１８Ｆ］フルオリド及び［^１８Ｆ］Ｂ−３の製造
０．４５ｍＬのＫｒｙｐｔｏｆｉｘ^（Ｒ）２２２／Ｋ_２ＣＯ_３溶液及び０．３ｍＬのアセトニトリルの溶液を用いて［^１８Ｆ］Ｆ⁻をカートリッジから溶出させる修正を以て、［^１８Ｆ］ＦＥｔＢｒの直接標識法に関して上記に記載したと類似の方法で［^１８Ｆ］フルオリド（［^１８Ｆ］Ｆ⁻）を製造した。

【0164】

放射標識される前駆体Ｉ−１９（０．３ｍＬのＤＭＦ中の約０．６ｍｇ）を、乾燥された［^１８Ｆ］Ｆ⁻／Ｋ_２ＣＯ_３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ^（Ｒ）２２２錯体に加え、９０℃における１５分間の通常の加熱により求核的置換反応を行った。反応の後、粗混合物を１．４ｍＬの水で希釈し、半−調製的ＸＢｒｉｄｇｅ^ＴＭカラム（Ｃ_１８，５μｍ，４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ）より成るＨＰＬＣシステム上に注入し、それを１ｍＬ／分の流量で０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５及びＥｔＯＨの混合物（６５：３５ ｖ／ｖ）を用いて溶出させた。２５４ｎｍにおいてＨＰＬＣ溶出物のＵＶ検出を行った。約２６分後に放射標識生成物［^１８Ｆ］Ｂ−３を集めた。１．５〜２ｍＬの体積（移動相）中で平均１００ｍＣｉ（ｎ＝７，最低６０ｍＣｉ，最高１８０ｍＣｉ）の精製された［^１８Ｆ］Ｂ−３を集めた。［^１８Ｆ］Ｂ−３に相当する集められたピークを、次いで通常生理食塩水（Ｍｉｎｉ Ｐｌａｓｃｏ^（Ｒ），Ｂｒａｕｎ，Ｍｅｌｓｕｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で希釈してエタノール濃度を＜５％に下げ、０．２２μｍ膜フィルター（Ｍｉｌｌｅｘ^（Ｒ）−ＧＶ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｉｒｅｌａｎｄ）を介して無菌濾過した。ＸＢｒｉｄｇｅ^ＴＭカラム（Ｃ_１８，３．５μｍ，３ｍｍｘ１００ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ）より成り、０．８ｍＬ／分の流量で０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５及びアセトニトリルの混合物（６５：３５ ｖ／ｖ）を用いて溶出させる分析的ＨＰＬＣシステムを用い、放射性トレーサーの純度を分析した（Ｒｔ＝５．６分）。２５４ｎｍにおいてＨＰＬＣ溶出物のＵＶ検出を行った。［^１８Ｆ］Ｂ−３は１６％の放射化学的収率（出発放射能［^１８Ｆ］Ｆ⁻に対して，ｎ＝７）で合成された。上記の分析的ＨＰＬＣシステムを用いて調べられた放射化学的純度は＞９８％であった。上記の分析的ＨＰＬＣシステムを用いて調べられたトレーサーの平均比放射能は、合成の最後（ＥＯＳ）に１７６ＧＢｑ／μモル（４７６４Ｃｉ／ミリモル，ｎ＝７）であることがわかった。

【0165】

実施例Ｂ４
２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−５−メトキシ−ピリジン（Ｂ−４）
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の中間化合物Ｉ−７（０．１３ｇ，０．３４４ミリモル）、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１３，２００５年，６７６３−６７７０に記載されている通りに製造される（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノール（０．０７２ｇ，０．５１６ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１０ｍＬ，０．５１６ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．１３５ｇ，０．５１６ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１２０℃において２０分間加熱した。この時間の後、炭酸ナトリウムの飽和水溶液を用いて混合物をクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９５／５）により精製した。所望の画分を集め、真空中で溶媒を蒸発させ、化合物Ｂ−４を白色の固体として与えた（０．１２ｇ，８６．２％）。Ｃ_２３Ｈ_２１ＦＮ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．７，ｍ／ｚ ４０５［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ３．８７（ｓ，３Ｈ），４．４７（ｄｔ，Ｊ＝２７．０，４．７Ｈｚ，２Ｈ），４．８４（ｄｔ，Ｊ＝４６．９，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１８（
ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄｄ，Ｊ＝８．６，３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．３０（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）．

【0166】

直接標識法：［^１８Ｆ］フルオリド及び［^１８Ｆ］Ｂ−４の製造
化合物［^１８Ｆ］Ｂ−３の直接標識法に関して上記に記載したと全く同じ方法で、［^１８Ｆ］フルオリド（［^１８Ｆ］Ｆ⁻）を製造した。

【0167】

放射標識される前駆体Ｉ−２０（０．３ｍＬのＤＭＦ中の約０．６ｍｇ）を、乾燥された［^１８Ｆ］Ｆ⁻／Ｋ_２ＣＯ_３／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ^（Ｒ）２２２錯体に加え、９０℃における１０分間の通常の加熱により求核的置換反応を行った。反応の後、粗混合物を１．４ｍＬの水で希釈し、半−調製的ＸＢｒｉｄｇｅ^ＴＭカラム（Ｃ_１８，５μｍ，４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ）より成るＨＰＬＣシステム上に注入し、それを１ｍＬ／分の流量で０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５及びＥｔＯＨの混合物（７０：３０ ｖ／ｖ）を用いて溶出させた。２５４ｎｍにおいてＨＰＬＣ溶出物のＵＶ検出を行った。約３５分後に放射標識生成物［^１８Ｆ］Ｂ−４を集めた。典型的に、１．５〜２ｍＬの体積（移動相）中で約９０ｍＣｉの精製された［^１８Ｆ］Ｂ−４を集めた。［^１８Ｆ］Ｂ−４に相当する集められたピークを、次いで通常生理食塩水（Ｍｉｎｉ Ｐｌａｓｃｏ^（Ｒ），Ｂｒａｕｎ，Ｍｅｌｓｕｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で希釈してエタノール濃度を＜５％に下げ、０．２２μｍ膜フィルター（Ｍｉｌｌｅｘ^（Ｒ）−ＧＶ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｉｒｅｌａｎｄ）を介して無菌濾過した。ＸＢｒｉｄｇｅ^ＴＭカラム（Ｃ_１８，３．５μｍ，３ｍｍｘ１００ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ）より成り、０．８ｍＬ／分の流量で０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５及びアセトニトリルの混合物（７０：３０ ｖ／ｖ）を用いて溶出させる分析的ＨＰＬＣシステムを用い、放射性トレーサーの純度を分析した（Ｒｔ＝７．２分）。２５４ｎｍにおいてＨＰＬＣ溶出物のＵＶ検出を行った。［^１８Ｆ］Ｂ−４は１５％の放射化学的収率（出発放射能［^１８Ｆ］Ｆ⁻に対して，ｎ＝２）で合成された。上記の分析的ＨＰＬＣシステムを用いて調べられた放射化学的純度は＞９９％であった。上記の分析的ＨＰＬＣシステムを用いて調べられたトレーサーの平均比放射能は、ＥＯＳに１４１ＧＢｑ／μモル（３８００Ｃｉ／ミリモル，ｎ＝２）であることがわかった。

【0168】

実施例Ｂ５
５−メトキシ−２−［［４−［４−（４−ピリジニル）−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン（Ｂ−５）
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の中間化合物Ｉ−１０（０．１５ｇ，０．４７ミリモル）、（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノール（０．０９８ｇ，０．７０ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１４ｍＬ，０．７０ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．１８５ｇ，０．７０ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１２０℃において２０分間加熱した。この時間の後、炭酸ナトリウムの飽和水溶液を用いて混合物をクエンチングし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／メタノール １００／０から９５／５）により精製した。所望の画分を集め、真空中で溶媒を蒸発させ、化合物Ｂ−５を無色の油として与え（０．１１ｇ，５３．２％）、それは放置すると固化し、白色の固体を与えた。Ｃ_２３Ｈ_１９Ｆ_３Ｎ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ４．２７，ｍ／ｚ ４４１［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ３．８７（ｓ，３Ｈ），４．７７（ｑ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１９（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｄｄ，Ｊ＝８．６，３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ
，１Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．３０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）．

【0169】

実施例Ｂ６
２−ブロモ−６−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン．０．７５スクシネート（Ｂ−６）
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の中間化合物Ｉ−７（０．３０ｇ，１．０６ミリモル）、（６−ブロモ−ピリジン−２−イル）メタノール（０．３０ｇ，１．５９ミリモル）、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．３１５ｍＬ，１．５９ミリモル）及びトリフェニルホスフィン（０．４１７ｇ，１．５９ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１００℃において３０分間加熱した。この時間の後、炭酸ナトリウムの飽和水溶液を用いて混合物をクエンチングし、ＤＣＭで抽出した。有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；最初にＥｔＯＡｃ／ヘプタン ７０／３０及び次いでジエチルエーテル／ＤＣＭ ７０／３０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で溶媒を蒸発させ、化合物Ｂ−６を無色の油として与えた（０．３０ｇ，５３．１％）。最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で、ある量の化合物Ｂ−６（０．０８ｇ）を対応するコハク酸塩に転換し、最終的化合物Ｂ−６を白色の固体として与えた。Ｃ_２２Ｈ_１８ＢｒＦＮ_４Ｏ．０．７５Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．２２，ｍ／ｚ ４５３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．４２（ｓ，３Ｈ），４．５０（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．２，４．７Ｈｚ，２Ｈ），５．２０（ｓ，２Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），１２．１６（ｂｒ．ｓ．，１．５Ｈ）．

【0170】

実施例Ｂ７
２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−６−（トリフルオロメチル）−ピリジン（Ｂ−７）
化合物Ｂ−６（０．４５ｇ，０．７２５ミリモル）をＤＭＦ（３ｍＬ）中に溶解し、次いで（フルオロスルホニル）ジフルオロ酢酸メチルエステル（０．４６４ｍＬ，３．６２ミリモル）及びヨウ化第１銅（０．６９ｇ，３．６２ミリモル）を溶液に加えた。反応混合物を、密閉された管中で１２０℃において２時間加熱した。１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を用いて反応混合物をクエンチングし、ＤＣＭで抽出した。有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン ７０／３０から１００／０）により精製した。所望の画分を集め、真空中で溶媒を蒸発させ、所望の化合物を黄色の油として与え、それは主に不純物としてトリフェニルホスフィンオキシドを含有した。粗化合物をさらに調製的ＨＰＬＣ（Ｃ１８ ＸＢｒｉｄｇｅ ３０ｘ１００；炭酸アンモニウム水溶液ｐＨ９／アセトニトリル勾配 ８０／２０から０／１００）により精製し、Ｂ−７を無色の油として与えた。ジエチルエーテル／ヘプタンの添加により化合物を固体とし、最終的にジイソプロピルエーテルから再結晶し、最終的化合物Ｂ−７（０．０２３ｇ，７．２％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_１８Ｆ_４Ｎ_４Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．７３，ｍ／ｚ ４４３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法４）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ４．５０（ｄｔ，Ｊ＝２７．８，４．７Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．２，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．３１（ｓ，２Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ
，２Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ）．

【0171】

実施例Ｂ８
２−シクロプロピル−６−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン．スクトネート（Ｂ−８）
炭酸ナトリウム水溶液／ジオキサン １：１の混合物（５ｍＬ）中の化合物Ｂ−６（０．１４ｇ，０．２６３ミリモル）、シクロプロピル−ボロン酸（０．０２９ｇ，０．３４１ミリモル）及びパラジウム（０）テトラキス（トリフェニルホスフィン）（０．０１５ｇ，０．０１３ミリモル）の混合物を、マイクロ波オーブン中で１３０℃において１５分間加熱した。室温に冷ました後、粗混合物を水で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機溶媒を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。残留物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；ＥｔＯＡｃ）により精製し、所望の画分を集め、溶媒を真空中で蒸発させ、所望の化合物を無色の油として与え、それは主な不純物としてトリフェニルホスフィンオキシドを含有した。化合物をさらに調製的ＨＰＬＣ（Ｃ１８ ＸＢｒｉｄｇｅ １９ｘ１００；炭酸アンモニウム水溶液ｐＨ９／アセトニトリル勾配 ８０／２０から０／１００）により精製し、Ｂ−８を無色の油として与えた。残留物をメタノール（２ｍＬ）中に溶解し、メタノール（１ｍＬ）中のコハク酸（０．０１７ｇ，０．１４４ミリモル）の溶液をゆっくり加えた。溶媒を蒸発乾固し、残留物をＤＣＭ／ジイソプロピルエーテルで処理し、最終的な化合物Ｂ−８のコハク酸塩（０．０７６ｇ，５４．４％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２５Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ４．１９，ｍ／ｚ
４１５［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ０．８７−０．９９（ｍ，４Ｈ），２．０５−２．１６（ｍ，１Ｈ），２．４２（ｓ，４Ｈ），４．４９（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．２，４．７Ｈｚ，２Ｈ），５．１０（ｓ，２Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２０−７．２４（ｍ，３Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．６８（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），１２．１７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．

【0172】

上記の合成方法の１つに従って、以下の化合物を製造した。

【0173】

３−メトキシ−２−［［４−［４−（４−ピリジニル）−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン（Ｂ−９）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを（３−メトキシピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−５の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−９（５８％）を白色の固体として与え、それをジイソプロピルエーテルからさらに結晶化させた。Ｃ_２３Ｈ_１９Ｆ_３Ｎ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．０１，ｍ／ｚ ４４１［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ３．８９（ｓ，３Ｈ），４．７７（ｑ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），７．０２−７．０７（ｍ，２Ｈ），７．１７−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．３，４．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．２５（ｄｄ，Ｊ＝４．４，１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４９−８．５３（ｍ，２Ｈ）．

【0174】

３−（２−フルオロエトキシ）−２−［［４−［４−（４−ピリジニル）−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピ
リジン．スクシネート（Ｂ−１０）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを［３−（２−フルオロエトキシ）−ピリジン−２−イル］−メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−５の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−１０を与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−１０のコハク酸塩（３３．８％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２４Ｈ_２０Ｆ_４Ｎ_４Ｏ_２．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．９６，ｍ／ｚ ４７３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．４０（ｓ，４Ｈ），４．３１−４．４２（ｍ，２Ｈ），４．６７−４．８２（ｍ，２Ｈ），５．２１（ｑ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），７．０５（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．２２−７．２６（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．４，４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄｄ，Ｊ＝４．５，１．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），８．４５−８．５２（ｍ，２Ｈ），１２．１９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0175】

５−（２−フルオロエトキシ）−２−［［４−［４−（４−ピリジニル）−１−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン．スクシネート（Ｂ−１１）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを［５−（２−フルオロエトキシ）−ピリジン−２−イル］−メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−５の製造のための方法に従い、ジイソプロピルエーテル／ヘプタンからの結晶化の後、最終的化合物Ｂ−１１（２０．３％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２４Ｈ_２０Ｆ_４Ｎ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．９，ｍ／ｚ ４７３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法５）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ４．２２−４．３４（ｍ，２Ｈ），４．７０−４．８７（ｍ，２Ｈ），４．７７（ｑ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），６．９４−７．００（ｍ，２Ｈ），７．１７−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．３３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．４９−８．５４（ｍ，２Ｈ）．

【0176】

２−［［４−［１−（３−フルオロプロピル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−３−メトキシ−ピリジン（Ｂ−１２）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを（３−メトキシピリジン−２−イル）メタノールに置き換え、Ｉ−１０を中間化合物Ｉ−８に置き換える以外は化合物Ｂ−５の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−１２（４０％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２４Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．７８，ｍ／ｚ ４１９［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ２．３４（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝２６．９，６．０，６．０，６．０，６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），４．３３（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），４．５１（ｄｔ，Ｊ＝４７．１，５．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２５（ｓ，２Ｈ），７．０１−７．０６（ｍ，２Ｈ），７．１６−７．２０（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．４，４．７Ｈｚ，１Ｈ），７．３４−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．６３（ｓ，１Ｈ），８．２５（ｄｄ，Ｊ＝４．５，１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．４５−８．５０（ｍ，２Ｈ）．

【0177】

３−（２−フルオロエトキシ）−２−［［４−［１−（３−フルオロプロピル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン．スクシネート（Ｂ−１３）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを［３−（２−フルオロエトキシ）−
ピリジン−２−イル］メタノールに置き換え、Ｉ−１０を中間化合物Ｉ−８に置き換える以外は化合物Ｂ−５の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−１３を与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテル／ジイソプロピルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−１３のコハク酸塩（３９．２％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２５Ｈ_２４Ｆ_２Ｎ_４Ｏ_２．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．７５，ｍ／ｚ ４５１［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．２５（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝２６．３，６．４，６．４，６．４，６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．４２（ｓ，４Ｈ），４．２７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），４．３７（ｄｔ，Ｊ＝２９．８，３．８Ｈｚ，２Ｈ），４．５３（ｄｔ，Ｊ＝４７．４，５．７Ｈｚ，２Ｈ），４．７５（ｄｔ，Ｊ＝４７．７，３．５Ｈｚ，２Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），７．０４（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．１９−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．４，４．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），１２．１７（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0178】

２−［［４−［１−（３−フルオロプロピル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−５−メトキシ−ピリジン．０．５スクシネート（Ｂ−１４）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールに置き換え、Ｉ−１０を中間化合物Ｉ−８に置き換える以外は化合物Ｂ−５の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−１４を無色の油として与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−１４のコハク酸塩（２５．６％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２４Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ_２．０．５Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．９７，ｍ／ｚ ４１９［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．２４（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝２６．４，６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．４１（ｓ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），４．２７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），４．５２（ｄｔ，Ｊ＝４７．２，５．７Ｈｚ，２Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），７．０３（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１７−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄｄ，Ｊ＝８．３，３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．２９（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．４０−８．４８（ｍ，２Ｈ），１２．１８（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）．

【0179】

５−（２−フルオロエトキシ）−２−［［４−［１−（３−フルオロプロピル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン（Ｂ−１５）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを［５−（２−フルオロエトキシ）−ピリジン−２−イル］−メタノールに置き換え、Ｉ−１０を中間化合物Ｉ−８に置き換える以外は化合物Ｂ−５の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−１５を無色の油として与え、それは放置すると固化した。最後に化合物をジイソプロピルエーテルで洗浄し、最終的化合物Ｂ−１５（３５．８％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２５Ｈ_２４Ｆ_２Ｎ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．６９，ｍ／ｚ ４５１［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法５）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ２．３４（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝２６．９，６．２，６．２，６．２，６．２Ｈｚ，２Ｈ），４．２３−４．３３（ｍ，２Ｈ），４．３３（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），４．５１（ｄｔ，Ｊ＝４７．４，５．７Ｈｚ，２Ｈ），４．７１−４．８６（ｍ，２Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），６．９４−６．９９（ｍ，２Ｈ），７．１８（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），７．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３５−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．
７Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｓ，１Ｈ），８．３３（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）．

【0180】

２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−３−メトキシ−ピリジン．スクシネート（Ｂ−１６）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを（３−メトキシピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−４の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−１６を与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−１６のコハク酸塩（３２．５％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_２１ＦＮ_４Ｏ_２．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．５２，ｍ／ｚ ４０５［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．４１（ｓ，４Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），４．４９（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．２，４．８Ｈｚ，２Ｈ），５．１３（ｓ，２Ｈ），７．０３（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１８−７．２６（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄｄ，Ｊ＝８．３，４．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１６（ｄｄ，Ｊ＝４．６，１．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．４３−８．４８（ｍ，２Ｈ），１２．１６（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）．

【0181】

３−（２−フルオロエトキシ）−２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン．スクシネート（Ｂ−１７）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを［３−（２−フルオロエトキシ）−ピリジン−２−イル］−メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−４の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−１７を与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−１７のコハク酸塩（７８．３％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２４Ｈ_２２Ｆ_２Ｎ_４Ｏ_２．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．５２，ｍ／ｚ ４３７［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．４２（ｓ，４Ｈ），４．３２−４．４１（ｍ，２Ｈ），４．４９（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．６８−４．８１（ｍ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．１，４．９Ｈｚ，２Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），７．０４（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．２１−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．３２（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．４，４．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．４４−８．４８（ｍ，２Ｈ），１２．１６（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0182】

３−フルオロ−２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン．１．２スクシネート（Ｂ−１８）
（６−ブロモピリジン−２−イル）メタノールを（３−フルオロピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−６の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−１８を与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−１８のコハク酸塩（２３．９％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２２Ｈ_１８Ｆ_２Ｎ_４Ｏ．１．２Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．６３，ｍ／ｚ ３９３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．４１（ｓ，４．８Ｈ），４
．５０（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４６．９，４．９Ｈｚ，２Ｈ），５．２５（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），７．０４−７．１０（ｍ，２Ｈ），７．１９−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．５４（ｄｔ，Ｊ＝８．５，４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７８−７．８４（ｍ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．４２−８．５１（ｍ，３Ｈ），１２．２６（ｂｒ．ｓ．，２．４Ｈ）．

【0183】

５−（２−フルオロエトキシ）−２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン（Ｂ−１９）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを［５−（２−フルオロエトキシ）−ピリジン−２−イル］−メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−４の製造のための方法に従い、ジイソプロピルエーテルを用いる処理の後に化合物Ｂ−１９（５６．３％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２４Ｈ_２２Ｆ_２Ｎ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．４８，ｍ／ｚ
４３７［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法５）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ４．２２−４．３４（ｍ，２Ｈ），４．４７（ｄｔ，Ｊ＝２７．１，４．９Ｈｚ，２Ｈ），４．７０−４．８７（ｍ，２Ｈ），４．８４（ｄｔ，Ｊ＝４６．９，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），６．９７（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．１６−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．４２（ｍ，２Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．３３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），８．４５−８．５２（ｍ，２Ｈ）．

【0184】

５−ブロモ−２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン（Ｂ−２０）
（６−ブロモピリジン−２−イル）メタノールを（５−ブロモピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−６の製造のための方法に従い、ジエチルエーテルを用いる処理の後に化合物Ｂ−２０（１５．６％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２２Ｈ_１８ＢｒＦＮ_４Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．２９，ｍ／ｚ ４５３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ４．４７（ｄｔ，Ｊ＝２７．０，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８４（ｄｔ，Ｊ＝４６．９，４．９Ｈｚ，２Ｈ），５．１８（ｓ，２Ｈ），６．９３−６．９８（ｍ，２Ｈ），７．１７−７．２０（ｍ，２Ｈ），７．３８−７．４２（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．７Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝０．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．４７−８．５１（ｍ，２Ｈ），８．６６（ｄｄ，Ｊ＝２．３，０．５Ｈｚ，１Ｈ）．

【0185】

６−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−３−ピリジンカルボニトリル（Ｂ−２１）
（６−ブロモピリジン−２−イル）メタノールを６−（ヒドロキシメチル）ニコチノニトリルに置き換える以外は化合物Ｂ−６の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−２１（３９．４％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_１８ＦＮ_５Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．１１，ｍ／ｚ ４００［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法４）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ４．４８（ｄｔ，Ｊ＝２７．２，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４６．８，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．２８（ｓ，２Ｈ），６．９６（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１６−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３９−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝８．１，２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４９（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），８．８７（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ）．

【0186】

２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−５−（トリフルオロメチル）−ピリジン（Ｂ−２２）
（６−ブロモピリジン−２−イル）メタノールを（５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−６の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−２２（２９．４％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_１８Ｆ_４Ｎ_４Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．３７，ｍ／ｚ ４４３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ４．４８（ｄｔ，Ｊ＝２７．０，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８４（ｄｔ，Ｊ＝４６．９，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．２９（ｓ，２Ｈ），６．９５−７．００（ｍ，２Ｈ），７．１６−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３９−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．７０（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４６−８．５３（ｍ，２Ｈ），８．８６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）．

【0187】

５−シクロプロピル−２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン（Ｂ−２３）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを（５−シクロプロピル−ピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−４の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−２３を無色の油として与え、それは放置すると固化した。最後に化合物をジイソプロピルエーテルで洗浄し、最終的化合物Ｂ−２３（４５．６％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２５Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．２４，ｍ／ｚ ４１５［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ０．６７−０．７８（ｍ，２Ｈ），０．９６−１．１０（ｍ，２Ｈ），１．８７−１．９５（ｍ，１Ｈ），４．４７（ｄｔ，Ｊ＝２６．９，４．８Ｈｚ，２Ｈ），４．８４（ｄｔ，Ｊ＝４７．１，４．７Ｈｚ，２Ｈ），５．１９（ｓ，２Ｈ），６．９４−６．９９（ｍ，２Ｈ），７．１６−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３２（ｄｄ，Ｊ＝８．１，２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３６−７．４１（ｍ，３Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）．

【0188】

２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−６−メトキシ−ピリジン．スクシネート（Ｂ−２４）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを（６−メトキシピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−４の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−２４を与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−２４のコハク酸塩（２５．８％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_２１ＦＮ_４Ｏ_２．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ４．１６，ｍ／ｚ ４０５［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．４２（ｓ，４Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），４．４９（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．９Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．４，４．９Ｈｚ，２Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０３−７．０９（ｍ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２０−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．３１−７．３６（ｍ，２Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝８．２，７．４Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．４２−８．４９（ｍ，２Ｈ），１２．１７（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0189】

２−エトキシ−６−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−ピリジン．スクシネート（Ｂ−２５）
（５−メトキシピリジン−２−イル）メタノールを（６−エトキシピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−４の製造のための方法に従い、化合物Ｂ−２５を与え、それを最終的化合物Ｂ−３に関して上記に記載されたと類似の方法で対応するコハク酸塩に転換し、それをジエチルエーテルから結晶化させ、最終的化合物Ｂ−２５のコハク酸塩（３９．６％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２４Ｈ_２３ＦＮ_４Ｏ_２．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．５６，ｍ／ｚ ４１９［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ１．３１（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），２．４１（ｓ，４Ｈ），４．３０（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），４．４９（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．４，４．９Ｈｚ，２Ｈ），５．１０（ｓ，２Ｈ），６．７４（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０３−７．０８（ｍ，２Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２０−７．２５（ｍ，２Ｈ），７．２９−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝８．２，７．３Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．４３−８．４８（ｍ，２Ｈ），１２．１９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0190】

６−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−２−ピリジンカルボニトリル（Ｂ−２６）
（６−ブロモピリジン−２−イル）メタノールを６−ヒドロキシメチル−２−シアノピリジンに置き換える以外は化合物Ｂ−６の製造のための方法に従い、ジエチルエーテルを用いる処理の後に化合物Ｂ−２６（４０．８％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_１８ＦＮ_５Ｏ。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ２．６８，ｍ／ｚ ４００［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法７）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ４．５０（ｄｔ，Ｊ＝２７．５，４．４Ｈｚ，２Ｈ），４．８５（ｄｔ，Ｊ＝４７．４，４．９Ｈｚ，２Ｈ），５．２８（ｓ，２Ｈ），７．０５−７．１０（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３３−７．３８（ｍ，２Ｈ），７．８９（ｄｄ，Ｊ＝７．９，０．９Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄｄ，Ｊ＝７．６，０．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｓ，１Ｈ），８．４７（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0191】

３−ブロモ−２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−６−メトキシ−ピリジン（Ｂ−２７）
（６−ブロモピリジン−２−イル）メタノールを３−ブロモ−２−（ヒドロキシメチル）−６−メトキシピリジンに置き換える以外は化合物Ｂ−６の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−２７（５４．１％）を白色の固体として与えた。Ｃ_２３Ｈ_２０ＢｒＦＮ_４Ｏ_２。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ４．５８，ｍ／ｚ ４８３［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法２）。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣ１_３）δｐｐｍ３．８５（ｓ，３Ｈ），４．４７（ｄｔ，Ｊ＝２６．８，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．８４（ｄｔ，Ｊ＝４６．９，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．２２（ｓ，２Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９８−７．０３（ｍ，２Ｈ），７．１７−７．２１（ｍ，２Ｈ），７．３６−７．４１（ｍ，２Ｈ），７．６８−７．７２（ｍ，２Ｈ），８．４６−８．５１（ｍ，２Ｈ）．

【0192】

２−［［４−［１−（２−フルオロエチル）−４−（４−ピリジニル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］フェノキシ］メチル］−３，４，５−トリメチル−ピリジン．スクシネート（Ｂ−２８）
３，５−ジメチル−２−ヒドロキシメチルピリジンを（３，４，５−トリメチルピリジン−２−イル）メタノールに置き換える以外は化合物Ｂ−３の製造のための方法に従い、最終的化合物Ｂ−２８（５６．８％）をそのコハク酸塩の形態で白色の固体として与えた。Ｃ_２５Ｈ_２５ＦＮ_４Ｏ．Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_４。ＬＣＭＳ：Ｒｔ ３．５３，ｍ／ｚ ４１７［Ｍ＋Ｈ］^＋（方法６）。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ２．２６（ｓ，３Ｈ），２．３
０（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．４８（ｓ，４Ｈ），４．５５（ｄｔ，Ｊ＝２７．７，４．６Ｈｚ，２Ｈ），４．９１（ｄｔ，Ｊ＝４７．１，４．６Ｈｚ，２Ｈ），５．２３（ｓ，２Ｈ），７．０９−７．１４（ｍ，２Ｈ），７．２７−７．３１（ｍ，２Ｈ），７．３５−７．４１（ｍ，２Ｈ），８．２１（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），８．５０−８．５４（ｍ，２Ｈ），１２．２２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）．

【0193】

試験管内アッセイ
組み換えｒＰＤＥ１０Ａバクロウイルス構築物を用い、ラット組み換えＰＤＥ１０Ａ（ｒＰＤＥ１０Ａ）をＳｆ９細胞中で発現させた。感染から４８時間後に細胞を収穫し、ｒＰＤＥ１０Ａタンパク質をＮｉ−セファロース ６ＦＦ上の金属キレートクロマトグラフィーにより精製した。調べられる化合物を１００％ＤＭＳＯ中で溶解し、アッセイにおける最終的な濃度の１００倍の濃度に希釈した。化合物の希釈液（０．４μｌ）を３８４ウェルプレート中で２０μｌのインキュベーション緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．８，８．３ｍＭ ＭｇＣｌ２，１．７ｍＭ ＥＧＴＡ）に加えた。インキュベーション緩衝液中のｒＰＤＥ１０Ａ酵素の１０μｌを加え、６０ｎＭ ｃＡＭＰ及び０．００８μＣｉ ３Ｈ−ｃＡＭＰの最終的な濃度まで１０μｌの基質を加えることにより、反応を開始させた。反応物を室温で６０分間インキュベーションした。インキュベーションの後、２０μｌの１７．８ｍｇ／ｍｌ ＰＤＥ ＳＰＡビーズを用いて反応を停止させた。３０分間ビーズを沈降させた後、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｔｏｐｃｏｕｎｔシンチレーションカウンターにおいて放射能を測定し、結果をｃｐｍとして表わした。ブランク値のために、反応から酵素を省略し、インキュベーション緩衝液により置き換えた。化合物の代わりに１％の最終的な濃度のＤＭＳＯを加えることにより、標準値を得た。化合物濃度に対するブランク値が引き去られた標準値の％のプロットに、最小平方和法（ｍｉｎｉｍｕｍ
ｓｕｍ ｏｆ ｓｑｕａｒｅｓ ｍｅｔｈｏｄ）により最良適合曲線を合わせ、この曲線からｐＩＣ５０値を誘導した。

【0194】

【表1】

【0195】

Ｃ．分析部分
融点：
値はピーク値であり、この分析法に通常伴う実験的不確定性を以て得られる。

【0196】

上記の表中で「ＤＳＣ」と記される複数の化合物に関し、ＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）を用いて融点（ｍ．ｐ．）を決定した。３０℃／分の温度勾配を用いて融点を測定した。最高温度は４００℃であった。

【0197】

複数の化合物に関し、開放毛管中でＭｅｔｔｌｅｒ ＦＰ６２装置上において融点を決定した。１０℃／分の温度勾配を用いて融点を測定した。最高温度は３００℃であった。デジタルディスプレーから融点を読み取った。

【0198】

核磁気共鳴（ＮＭＲ）
標準的なパルス配列（ｐｕｌｓｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ）を有し、それぞれ４００ＭＨｚ及び５００ＭＨｚで運転されるＢｒｕｋｅｒ ＤＰＸ−４００又はＢｒｕｋｅｒ ＡＶ−５００分光計上で^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを記録した。内部標準として用いられるテトラメチルシラン（ＴＭＳ）から下方磁場への百万当たりの部（ｐｐｍ）において化学シフト（δ）を報告する。

【0199】

ＬＣＭＳ−方法：
本発明の化合物のＬＣＭＳ−特性化のために、以下の方法を用いた。

【0200】

ＨＰ １１００−ＭＳ測定器のための一般的方法（ＴＯＦ又はＳＱＤ）
ＨＰＬＣ測定は、脱ガス器を有するポンプ（クウォーターナリー又はバイナリー）、オートサンプラー、カラムオーブン、ダイオード−アレー検出器（ＤＡＤ）及びそれぞれの方法において特定されるカラムを含んでなるＨＰ １１００（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）システムを用いて行われた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源又はＥＳＣＩ二重イオン化源（大気圧化学イオン化と組み合わされたエレクトロスプレー）を用いて形成された。ネブライザーガスとして窒素を用いた。源温度は１４０℃又は１００℃に保たれた。ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘソフトウェア又はＣｈｅｍｓａｔｉｏｎ−Ａｇｉｌｅｎｔ Ｄａｔａ Ｂｒｏｗｓｅｒソフトウェアを用いてデータ取得を行なった。

【0201】

Ａｃｑｕｉｔｙ−ＳＱＤ測定器のための一般的方法
ＵＰＬＣ（超高性能液体クロマトグラフィー）測定は、サンプルオルガナイザー、脱ガス器を有するバイナリーポンプ、４つのカラムのオーブン、ダイオードアレー検出器（ＤＡＤ）及びそれぞれの方法において特定されるカラムを含んでなるＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行なわれた。ＭＳ検出器は、ＥＳＣＩ二重イオン化源（大気圧化学イオン化と組み合わされたエレクトロスプレー）を用いて形成された。ネブライザーガスとして窒素を用いた。源温度は１４０℃に保たれた。ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアを用いてデータ取得を行なった。

【0202】

ＬＣ方法１及び２のためのＭＳ方法：正のイオン化モードのみ、又は正／負モードの場合に、１００から７５０ｕｍａｓまで走査することにより、高−分解能質量スペクトル（タイムオブフライト（Ｔｉｍｅ ｏｆ Ｆｌｉｇｈｔ）、ＴＯＦ検出器）を取得した。毛管針電圧（ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｎｅｅｄｌｅ ｖｏｌｔａｇｅ）は、正のモードの場合に２．５ｋＶであり、負のイオン化モードの場合に２．９Ｋｖであった。コーン電圧は、正及び負の両方のイオン化モードの場合に２０Ｖであった。ロイシン−エンケファリンは、ロックマスキャリブレーション（ｌｏｃｋ ｍａｓｓ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ）のために用いられる標準物質であった。

【0203】

ＬＣ方法３、４、５、６、７及び８のためのＭＳ方法：正のイオン化モードのみ、又は正／負モードの場合に、１００から１０００ｕｍａｓまで走査することにより、低−分解能質量スペクトル（シングルクアドラポール（ｓｉｎｇｌｅ ｑｕａｄｒａｐｏｌｅ）、Ｓ
ＱＤ検出器）を取得した。毛管針電圧は３ｋＶであった。正のイオン化モードの場合、コーン電圧は２０Ｖ、２５Ｖ又は２０Ｖ／５０Ｖであった。負のイオン化モードの場合、コーン電圧は３０Ｖであった。

【0204】

方法１
一般的方法に加え：ＡｇｉｌｅｎｔからのＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ，２．１ｘ３０ｍｍ）上で、６０℃において１ｍｌ／分の流量を用いて、逆相ＨＰＬＣを行った。用いられる勾配条件は：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液），５％Ｂ（アセトニトリル），５％Ｃ（メタノール）から５０％Ｂ及び５０％Ｃとし、次いで１００％Ｂとし、９．０分の実行（ｒｕｎ）まで初期条件に平衡化である。注入容積は２μｌである。

【0205】

方法２
一般的方法に加え：ＷａｔｅｒｓからのＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ，２．１ｘ３０ｍｍ）上で、６０℃において１．０ｍｌ／分の流量で逆相ＨＰＬＣを行った。用いられる勾配条件は：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル），５％Ｂ（アセトニトリル又はアセトニトリル／メタノール １／１）から１００％Ｂとし、９又は７分の実行まで初期条件に平衡化である。注入容積は２μｌである。

【0206】

方法３
一般的方法に加え：ＡｇｉｌｅｎｔからのＸＤＢ−Ｃ１８カートリッジ（１．８μｍ，２．１ｘ３０ｍｍ）上で、６０℃において０．８ｍｌ／分の流量を用いて、逆相ＨＰＬＣを行った。用いられる勾配条件は：９０％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液），１０％Ｂ（アセトニトリル／メタノール，１／１の混合物）から１００％Ｂとし、９．０分の実行まで初期条件に平衡化である。注入容積は２μｌである。

【0207】

方法４
一般的方法に加え：ＷａｔｅｒｓからのＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ，２．１ｘ３０ｍｍ）上で、６０℃において１．０ｍｌ／分の流量で逆相ＨＰＬＣを行った。用いられる勾配条件は：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル），５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール，１／１の混合物）から１００％Ｂとし、７分の実行まで初期条件に平衡化である。注入容積は２μｌである。

【0208】

方法５
一般的方法に加え：ＷａｔｅｒｓからのＸＢｒｉｄｇｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ，２．１ｘ３０ｍｍ）上で、６０℃において１．０ｍｌ／分の流量で逆相ＨＰＬＣを行った。用いられる勾配条件は：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル），５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール，１／１の混合物）から１００％Ｂとし、９．０分の実行まで初期条件に平衡化である。注入容積は２μｌである。

【0209】

方法６
一般的方法に加え：ＡｇｉｌｅｎｔからのＥｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ−Ｃ１８カラム（３．５μｍ，２．１ｘ３０ｍｍ）上で、６０℃において１．０ｍｌ／分の流量で逆相ＨＰＬＣを行った。用いられる勾配条件は：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル），５％Ｂ（アセトニトリル又はアセトニトリル／メタノール，１／１）から１００％Ｂとし、７分の実行まで初期条件に平衡化である。注入容積は２μｌである。

【0210】

方法７
一般的方法に加え：ＷａｔｅｒｓからのＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ，２．１ｘ５０ｍｍ）上で、６０℃において０．８ｍｌ／分の流量を用い、逆相ＵＰＬＣを行なった。用いられる勾配条件は：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル），５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール，１／１の混合物）から２０％Ａ，８０％Ｂとし、次いで１００％Ｂとし、７又は５分の実行まで初期条件に平衡化である。注入容積は０．５μｌである。

【0211】

方法８
一般的方法に加え：ＷａｔｅｒｓからのＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ，２．１ｘ５０ｍｍ）上で、５０℃において１．０ｍｌ／分の流量を用い、逆相ＵＰＬＣを行なった。用いられる勾配条件は：９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル），５％Ｂ（アセトニトリル）から４０％Ａ，６０％Ｂとし、次いで５％Ａ，９５％Ｂとし、５分の実行まで初期条件に平衡化である。注入容積は０．５μｌである。

【0212】

ＩＩ．体内分布研究
一般的方法
健康な雄のＷｉｓｔｅｒラット（体重２００〜５００ｇ）において、注入から２分、３０分及び６０分後に（ｐ．ｉ．）体内分布研究を行った（ｎ＝３／時点）。［^１８Ｆ］Ｂ−４の場合、２分及び３０分の時点のみを調べた。麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下で尾静脈を介し、約３０μＣｉのトレーサーをラットに注入し、上記で特定した時点に断頭により犠牲にした。風袋を量った管中に血液及び主要な器官を集め、秤量した。血液、器官及び他の体の部分における放射能を、自動ガンマカウンターを用いて測定した。トレーサーの注入後の種々の時点での体の種々の部分における放射能の分布を計算し、注入された用量に対するパーセンテージ（％ＩＤ）として、ならびに選ばれた器官に関して組織のグラム当たりに注入された用量に対するパーセンテージ（％ＩＤ／ｇ）として表わした。％ＩＤは、器官におけるｃｐｍ／回収された全ｃｐｍとして計算される。血液における全放射能の計算のために、血液の質量を体の質量の７％であると仮定した。

【0213】

Ａ．化合物［^１８Ｆ］Ｂ−１に関する体内分布の結果
雄のＷｉｓｔｅｒラットにおける［^１８Ｆ］Ｂ−１の生体内分布研究の結果を表１及び２に示す。表１は、放射性トレーサーの注入から２分、３０分及び６０分後における％ＩＤ値を示す。注入から２分後に、注入用量の約４．０％が血液中に存在し、これはトレーサーの注入から６０分後までに２．２％にクリアランスされた。脳による初期のトレーサーの吸収の合計は０．５９％であり、ＩＤの０．４９％が大脳で吸収され、０．０９％が小脳で吸収された。放射性トレーサーの注入から６０分後に、５４％ＩＤが肝臓及び腸に存在した。トレーサーの親油性の故に、トレーサーの尿中排泄は最少であり、注入から６０分後にわずか約２．６％ＩＤしか泌尿系に存在しなかった。胃における堆積の増加が観察された（それぞれ注入から２、３０及び６０分後に３％ＩＤ、１０％ＩＤ、１７％ＩＤ）。胴体（ｃａｒｃａｓｓ）の大きな質量の観点から、注入された用量の有意な量（約２８％ＩＤ）が、調べられたすべての時点に胴体中に存在した。典型的には、胴体は動物の全体重の＞９０％を構成する。表２は、注入から２分、３０分及び６０分後における種々の器官に関する％ＩＤ／ｇ値を示す。

【0214】

【表2】

【0215】

【表3】

【0216】

腎臓及び肝臓は排出器官なので、それらは最も高い％ＩＤ／ｇ値を有し、注入から２分後に腎臓の場合に約１．８％ＩＤ／ｇであり、肝臓の場合に３．４％ＩＤ／ｇである。脳の種々の器官、すなわち線条、海馬、皮質及び小脳に関する％ＩＤ／ｇ値を表２に示す。種々の動物の間の体重の差に関して修正するために、組織のｇ当たりの％ＩＤ値を体重に関して標準化した。標準化された値を表３に示す。調べられたすべての脳領域の場合に、２分から３０分までの放射能濃度における有意な低下があり（注入から３０分後に、体重に関して修正された＜０．０７％ＩＤ／ｇ）、調べられたすべての脳領域からの有意なトレーサーの洗い出しを示している。

【0217】

【表4】

【0218】

表４は、脳の種々の領域に関する％ＩＤ／ｇ値（動物の体重に関して標準化された）の２分／３０分及び２分／６０分の比を示す。すべての脳領域の場合に２分／３０分の比は＞２．４９であり、トレーサーがこの時間の間にすでに洗い出され（ｗａｓｈｏｕｔ）始めたことを示している。最も遅い洗い出しは、ＰＤＥ１０の最も高い発現を有する領域である線条の場合に観察される。

【0219】

【表5】

【0220】

表５は、［^１８Ｆ］Ｂ−１の注入から後の種々の時点における線条と脳の他の領域ならびに血液の間の比を示す。線条はＰＤＥ１０Ａが豊富な領域と考えられ、小脳は参照領域
と考えられる。従って、生体内で優れた質の画像を得るために、高い線条−対−小脳の比が望ましい。最大の線条−対−小脳の比は約２であり、それは優れたＰＤＥ１０画像化トレーサーとしては幾分低い。

【0221】

これらの体内分布研究の結果は、ＰＤＥ１０Ａが豊富な領域である線条に［^１８Ｆ］Ｂ−１が有意に保持されないことを示している。

【0222】

【表6】

【0223】

Ｂ．化合物［^１８Ｆ］Ｂ−３に関する体内分布の結果
雄のＷｉｓｔｅｒラットにおける［^１８Ｆ］Ｂ−３の生体内分布研究の結果を表６及び７に示す。表６は、放射性トレーサーの注入から２分、３０分及び６０分後における％ＩＤ値を示す。脳による初期のトレーサーの全吸収は幾分低かった：注入から２分後にＩＤの０．３９％であり、大脳において０．３１％ＩＤであり、小脳において０．０７％ＩＤであった。注入から３０分後に、ＰＤＥ１０Ａの最も高い発現を有し、放射性トレーサーが結合を示すことが予測される場所である線条にＩＤの０．０３５％が存在した。血液循環からのクリアランスは幾分遅かった。注入から２分後、注入された用量の約４．０％が血液中に存在し、これは注入から６０分後までに３．３％にクリアランスされた。放射性トレーサーの注入から６０分後に合計でＩＤの５０％が肝臓及び腸に存在するので、トレーサーは主に肝胆道系によりクリアランスされた。トレーサーの親油性の故に、トレーサーの尿中排泄は最少であり、注入から６０分後にわずか約３．２％ＩＤしか泌尿系に存在しなかった。胃において予測されなかった高い堆積もある（それぞれ注入から２、３０及び６０分後に２．６％ＩＤ、６．７％ＩＤ、２０％ＩＤ）。胴体の大きな質量の観点から、注入された用量の有意な量（約２７％ＩＤ）が、調べられたすべての時点に胴体中に存在した。典型的には、胴体は動物の全体重の＞９０％を構成する。

【0224】

表７は、注入から２分、３０分及び６０分後における種々の器官に関する％ＩＤ／ｇ値を示す。

【0225】

【表7】

【0226】

【表8】

【0227】

腎臓及び肝臓は排出器官なので、それらは最も高い％ＩＤ／ｇ値を有し、注入から２分後に腎臓の場合に約１．９％ＩＤ／ｇであり、肝臓の場合に５．５％ＩＤ／ｇである。脳の種々の器官、すなわち線条、海馬、皮質及び小脳に関する％ＩＤ／ｇ値を表７に示す。種々の動物の間の体重の差に関して修正するために、組織のｇ当たりの％ＩＤ値を体重に関して標準化した。標準化された値を表８に示す。注入から２分後に、脳で最も高い放射能濃度が線条領域において観察され（体重に関して修正された０．０９８％ＩＤ／ｇ）、これはやがては（ｉｎ ｔｉｍｅ）増加する（注入から３０分後に、修正された０．１２１％ＩＤ／ｇ及び６０分後に、修正された０．１７８％ＩＤ／ｇ）。この線条における放射能の堆積は、この領域におけるＰＤＥ１０酵素のより高い発現と一致する。ＰＤＥ１０Ａの最少の発現を有する領域である海馬、皮質及び小脳の場合、３０分の時点における濃度は２分の時点と比較して減少し、これらの脳領域からのトレーサーの洗い出しを示している。これらの脳領域に関する６０分におけるわずかな増加は、脳に入る放射性代謝物の形成の故であり得る。

【0228】

【表9】

【0229】

表９は、脳の種々の領域に関する％ＩＤ／ｇ値（動物の体重に関して標準化された）の２分／３０分及び２分／６０分の比を示す。２分／３０分の比に関し、小脳は２．７１の最も高い比を有し、トレーサーのクリアランスがこの領域から最も速いことを示し、ＰＤＥ１０の最少の発現を有する領域である皮質（２．５４）及び海馬（２．１４）が続く。他方、線条の場合、２分／６０分の比（０．５５）は２分／３０分の比（０．８１）より低く、ＰＤＥ１０Ａの豊富な線条における［^１８Ｆ］Ｂ−３の堆積を示している。

【0230】

【表10】

【0231】

表１０は、［^１８Ｆ］Ｂ−３の注入から後の種々の時点における線条と脳の他の領域ならびに血液の間の比を示す。線条はＰＤＥ１０Ａが豊富な領域と考えられ、小脳は参照領
域と考えられる。従って、生体内で優れた質の画像を得るために、高い線条−対−小脳の比が望ましい。注入から２分後に、線条−対−小脳の比は約１．６であり、この比はトレーサーの注入から６０分後までに６．６に増加した。線条−対−皮質及び線条−対−海馬の比も＞６．５（注入から６０分後）であり、線条における［^１８Ｆ］Ｂ−３の特異的な保持を確証した。

【0232】

【表11】

【0233】

これらの体内分布研究からの結果は、脳による初期の吸収は幾分遅いが、線条において［^１８Ｆ］Ｂ−３の継続的堆積があり、一方、参照領域である小脳からは時間を経ての洗い出しがあることを示している。これは、ＰＤＥ１０Ａが豊富な領域である線条における［^１８Ｆ］Ｂ−３の特異的な保持を示唆している。

【0234】

Ｃ．化合物［^１８Ｆ］Ｂ−４に関する体内分布の結果
雄のＷｉｓｔｅｒラットにおける［^１８Ｆ］Ｂ−４の生体内分布研究の結果を表１１及び１２に示す。脳による初期の吸収が幾分低く、線条における堆積が少なかったので、６０分における体内分布分析を行わなかった。表１１は、放射性トレーサーの注入から２分及び３０分後における％ＩＤ値を示す。脳による初期のトレーサーの全吸収は幾分低かった：注入から２分後にＩＤの０．４０％であり、大脳において０．３２％ＩＤであり、小脳において０．０７％ＩＤであった。注入から３０分後に、線条にＩＤの０．０１９％が存在し、それは幾分低く、それは、線条がＰＤＥ１０Ａの最も高い発現を有し、脳のこの領域で放射性トレーサーが結合を示すことが予測されるからである。トレーサーは主に肝臓を介して（注入から３０分後に４７％ＩＤ）腸中に（注入から３０分後に１２％ＩＤ）クリアランスされた。トレーサーの親油性の故に、トレーサーの尿中排泄は最少であり、注入から３０分後にわずか約２．５％ＩＤしか泌尿系に存在しなかった。胃において予測されなかった高い堆積もある（それぞれ注入から２及び３０分後に２．８％ＩＤ及び８％ＩＤ）。表１２は、注入から２分及び３０分後における種々の器官に関する％ＩＤ／ｇ値を示す。

【0235】

【表12】

【0236】

【表13】

【0237】

腎臓及び肝臓は排出器官なので、それらは最も高い％ＩＤ／ｇ値を有し、注入から２分後に腎臓の場合に約１．３％ＩＤ／ｇであり、肝臓の場合に２．３％ＩＤ／ｇである。脳の種々の器官、すなわち線条、海馬、皮質及び小脳に関する％ＩＤ／ｇ値を表１２に示す。種々の動物の間の体重の差に関して修正するために、組織のｇ当たりの％ＩＤ値を体重に関して標準化した。標準化された値を表１３に示す。注入から２分後に、脳で最も高い放射能濃度が線条において観察される（体重に関して修正された０．２２６％ＩＤ／ｇ）。海馬、皮質及び小脳の場合、この値はそれぞれ修正された０．０９１％ＩＤ／ｇ、修正された０．１６８％ＩＤ／ｇ、修正された０．１０９％ＩＤ／ｇであった。注入から３０分後に、線条における濃度は体重に関して修正された０．１２５％ＩＤ／ｇに減少した。他の脳領域の場合、洗い出しはもっと高かった（注入から３０分後に体重に関して修正された＜０．０４０％ＩＤ／ｇ）。

【0238】

【表14】

【0239】

表１４は、脳の種々の領域に関する％ＩＤ／ｇ値（体重に関して標準化された）の２分／３０分及び２分／６０分の比を示す。２分／３０分の比に関し、皮質は４．２４の最も高い比を有し、トレーサーのクリアランスがこの領域から最も速いことを示し、ＰＤＥ１０を発現しない小脳（３．８２）及び海馬（３．０８）が続く。線条の場合、２分／３０分の比は最も低く（１．８０）、ＰＤＥ１０の豊富な領域である線条からの［^１８Ｆ］Ｂ−４のより遅い洗い出しを示した。

【0240】

【表15】

【0241】

表１５は、［^１８Ｆ］Ｂ−４の注入から後の種々の時点における線条と脳の他の領域ならびに血液の間の比を示す。線条はＰＤＥ１０Ａが豊富な領域と考えられ、小脳は参照領域と考えられる。従って、生体内で優れた質の画像を得るために、高い線条−対−小脳の
比が望ましい。注入から２分後に、線条−対−小脳の比は約２．０７であり、この比はトレーサーの注入から３０分後までに４．３８に増加した。線条−対−皮質及び線条−対−海馬の比も＞３．１６であり、線条における［^１８Ｆ］Ｂ−４の保持を確証した。

【0242】

【表16】

【0243】

ＩＩＩ．化合物［^１８Ｆ］Ｂ−３の放射性代謝物分析
Ａ．注入から２／３０／６０分後における血漿放射性代謝物分析
トレーサーの注入から２、３０分及び６０分後に血漿中の親トレーサー及び放射性代謝物の相対的な量を決定することにより、正常なラット（ｎ＝２）において化合物［^１８Ｆ］Ｂ−３の代謝安定性を調べた。麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下で尾静脈を介し、約１．７ｍＣｉの［^１８Ｆ］Ｂ−３を静脈内（ｉ．ｖ．）投与した後、上記で言及した時点に尾静脈を介し、リチウムヘパリン含有管（４．５ｍＬ ＬＨ ＰＳＴ管；ＢＤ ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ，ＢＤ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ，ＵＳＡ）中に血液を集め（同じ動物から）、氷上に保存して代謝を止めた。次に、血液を３０００ｒｐｍで１０分間遠心し、血漿を分離した。約０．１ｍＬの体積の血漿試料を単離し、同定のために約１０μＬの基準の非−放射性Ｂ−３（１ｍｇ／ｍＬ溶液）及び１０μＬの中間体Ｉ−７（１ｍｇ／ｍＬ溶液，試験管内研究に従って主代謝物）で割った（ｓｐｉｋｅｄ）。次いで血漿をＣｈｒｏｍｏｌｉｔｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅカラム（Ｃ_１８，３ｍｍｘ１００ｍｍ，Ｍｅｒｃｋ）から成るＨＰＬＣシステム上に注入し、それを０．０５Ｍ ＮａＯＡｃ ｐＨ５．５（溶媒Ａ）及びアセトニトリル（溶媒Ｂ）の混合物を用いて溶出させた。分析のために以下の方法を用いた：０．５ｍＬ／分の流量で１００％Ａを用いる４分間のアイソクラチック溶出、次いで１ｍＬ／分の流量で１４分まで９０％Ｂへの直線状勾配ならびに１７分まで１ｍＬ／分の流量で１０％Ａ及び９０％Ｂの混合物を用いるアイソクラチック溶出。イン−ライン（ｉｎ−ｌｉｎｅ）ＵＶ検出器（２５４ｎｍ）に通過させた後、自動画分収集器を用いてＨＰＬＣ溶出物を１−ｍＬ画分（毎分に画分収集）として集めた。無損傷のトレーサーと極性の放射性代謝物である［^１８Ｆ］Ｉ−７の間の優れた分離のために、ＨＰＬＣ注入から８分後から初めてＨＰＬＣ注入から１２分後まで、３０秒毎に画分を集めた。自動ガンマカウンターを用いてすべての画分中の放射能を測定した。無損傷の［^１８Ｆ］Ｂ−３に対応するピークは約１８分に溶出したが、予測される放射性代謝物［^１８Ｆ］Ｉ−７は約１３分〜１５分に溶出した。脳において、３〜５分に溶出する同定されない極性の放射性代謝物も検出された。血漿放射性代謝物分析からの結果の概要を表１６に示す。

【0244】

【表17】

【0245】

分析は、放射性トレーサーの注入から２分後に、血漿中で回収された放射能の約９６％が無損傷の形態にあったことを示している。注入から３０分後に、４７％の極性の放射性代謝物が血漿中で検出され、この量は注入から６０分後に６２％に増加した。ほとんどの極性の放射性代謝物は、おそらく［^１８Ｆ］フルオロ−エチル鎖の切断及び酸化から生じ、それは、この極性の放射性代謝物が脳においても検出されるからである（下記を参照されたい）。無損傷のトレーサーに近接して溶出する第２の極性放射性代謝物は、［^１８Ｆ］Ｉ−７と同定することができた。無損傷のトレーサーの後に溶出する（より親油性の）画分に対応する放射能は無視され得、これは、もし存在するなら血液−脳関門を貫通することができる親油性放射性代謝物が形成されないことを示す。

【0246】

Ｂ．注入後３０／６０分における灌流された脳の放射性代謝物分析
調べられたそれぞれの時点に関して２匹のラットに、約０．６ｍＣｉの［^１８Ｆ］Ｂ−３を注入した。トレーサーの注入から３０分又は６０分後に、過剰用量のネンブタール（ｎｅｍｂｕｔａｌ）の投与によりラットを犠牲にした。呼吸が止まったら、肝臓が青ざめるまで、ラットに塩水（Ｍｉｎｉ Ｐｌａｓｃｏ^（Ｒ），Ｂｒａｕｎ，Ｍｅｌｓｕｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を灌流した。脳を単離し、大脳及び小脳を分離し、それぞれ３ｍＬ及び２ｍＬのアセトニトリル中で約２分間均質化した。１ｍＬの体積のこのホモジネートを等しい体積の水で希釈し、このホモジネートの一部を、０．２２μｍのフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｅｄｆｏｒｄ，ＵＳＡ）を介して濾過した。約０．４ｍＬの濾液を０．１ｍＬの水で希釈し、同定のために１０μＬの基準の非−放射性Ｂ−３（１ｍｇ／ｍＬ溶液）及び１０μＬのＩ−７（１ｍｇ／ｍＬ溶液，試験管内研究に従って主代謝物）で割った。次いで大脳／小脳ホモジネートを分析的ＸＢｒｉｄｇｅ^ＴＭカラム（Ｃ_１８，５μＭ，３ｍｍｘ１００ｍｍ，Ｗａｔｅｒｓ）から成るＨＰＬＣシステム上に注入し、０．８ｍＬ／分の流量で０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．５及びアセトニトリルの混合物（７０：３０ ｖ／ｖ）を用いて溶出させた。ＨＰＬＣ溶出物を、ＵＶ検出器に通過させた後に１−ｍＬ画分として集め（毎分に画分収集）、自動ガンマカウンターを用いて画分中の放射能を測定した。

【0247】

無損傷の［^１８Ｆ］Ｂ−３に対応するピークは約１５分に溶出したが、血漿中に存在する主な放射性代謝物［^１８Ｆ］Ｉ−７は脳において検出されなかった。約２分に溶出する極性代謝物も血漿において検出され（上記を参照されたい）、試験管内インキュベーション研究（下記を参照されたい）から推論され得る通り、血液−脳−関門を通過する。灌流されたラットの脳の放射性代謝物分析からの結果の概要を表１７に示す。脳において検出される極性放射性代謝物の割合（ｆｒａｃｔｉｏｎ）は無視し得る。小脳において検出される極性代謝物のパーセンテージは、大脳と比較してより高い。注入から３０分後に、回収された放射能の約８６％は大脳において無損傷のトレーサーとして存在し、小脳においてこれは約６９％であった。６０分後、大脳中の無損傷のトレーサーの量は約７２％に減少し、小脳においてこれは約４７％であった。

【0248】

【表18】

【0249】

Ｃ．［^１８Ｆ］Ｂ−３と一緒に３７℃において６０分間試験管内インキュベーションした後のラット血液、血漿及び脳ホモジネートの放射性代謝物分析
ラットの血液、血漿及び均質化された脳を約０．１７ｍＣｉの［^１８Ｆ］Ｂ−３と一緒に３７℃でインキュベーションした。６０分のインキュベーションの後、試料を氷上に置いて代謝を止めた。血液及び脳ホモジネート試料を調製し、上記の通りＲＰ−ＨＰＬＣ上で分析した。１時間のインキュベーション後にラット血液、血漿及び脳中で検出される放射性代謝物の量は無視され得た。これは、［^１８Ｆ］Ｂ−３の注入から３０及び６０分後に灌流されたラットの大脳及び小脳中で観察される極性放射性代謝物（［^１８Ｆ］フルオロエチル−誘導体であると仮定された）が末梢で（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｌｙ）（肝臓中で）生成し、血液−脳−関門を横切ることを示している。

【0250】

ＩＶ．マイクロＰＥＴ（ＭｉｃｒｏＰＥＴ）画像化研究
３００〜６００ｇの様々な体重を有する雄のＷｉｓｔｅｒラットを用い、Ｆｏｃｕｓ^ＴＭ ２２０ マイクロＰＥＴスキャナー（Ｃｏｎｃｏｒｄｅ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ，ＴＮ，ＵＳＡ）上で画像化実験を行った。すべての走査セッション（ｓｅｓｓｉｏｎｓ）の間、動物はガス麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下に保たれた。１２０分の動的走査（ｄｙｎａｍｉｃ ｓｃａｎｓ）をリストモード（ｌｉｓｔ ｍｏｄｅ）で取得した。画像の再構築の後、それらをラット脳の［^１１Ｃ］ラクロプリドテンプレート（ｒａｃｌｏｐｒｉｄｅ ｔｅｍｐｌａｔｅ）を用いて半−自動的に同時記録し（ｃｏ−ｒｅｇｉｓｔｅｒｅｄ）、所見のある部分の体積（ＶＯＩｓ）を種々の解剖学的脳構造（線条、大脳皮質及び小脳）に関して作成し、それからＰＭＯＤソフトウェア（ＰＭＯＤ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｌｔｄ．）を用いてそれぞれの個々の画像に関して時間−放射能（ａｃｔｉｖｉｔｙ）曲線（ＴＡＣ）を構築した。動物の体重及び注入された用量に関する標準化を行った。種々の脳領域中の放射能濃度を、放射性トレーサーの注入から後の秒における時間の関数としてのＳＵＶ（標準化された吸収値）として表わした。同じソフトウェアを用い、非−特異的結合に関する入力ＴＡＣとして大脳のＴＡＣを用いる単純化された参照組織モデルを用いることにより、すべての取得された画像に関してパラメトリック結合ポテンシャル（ＢＰ）値を計算した。

【0251】

Ａ．化合物［^１８Ｆ］Ｂ−３を用いるマイクロＰＥＴ研究
麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下に、尾静脈を介し、約２．２ｍＣｉの［^１８Ｆ］Ｂ−３の高比放射能調製物を３匹のラットに注入し、ベースラインを２時間走査した。

【0252】

線条において高い強度のシグナルが観察され、皮質領域ならびに小脳中ではバックグラウンド放射能のみであった。ＴＡＣｓは、［^１８Ｆ］Ｂ−３の注入後、線条、皮質領域及び小脳において放射性トレーサーの高い初期の吸収があることを示す。血液プール活性（
ｂｌｏｏｄ ｐｏｏｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ）の故のこの初期の高い吸収の後、非−特異的放射能は皮質領域及び小脳からクリアランスされた。線条において、放射能濃度は注入から約１６分後にその最大に達し（１．０４の平均ＳＵＶ）、これは注入から約５３分後まで類似のレベルに留まった。注入から２３分後に５．６対１（ｎ＝３）のピーク線条−対−小脳の比が得られ、これらの比は注入から約５３分後まで約５．６に留まった。この後、線条からの放射能のクリアランスの故に、比は実験の最後までゆっくり減少した。線条のＴＡＣがＰＤＥ１０の豊富なＴＡＣと考えられ、小脳のＴＡＣがＰＤＥ１０の少ないＴＡＣとして用いられる単純化された参照組織モデルを用いることにより、ＢＰ値を計算した。ベースラインにおける平均ＢＰは４．１であった（ｎ＝３）。

【0253】

１匹のラット（ベースライン走査において用いられた３匹の動物中の１匹）において、非−放射性類似体Ｂ−３を体重のｋｇ当たり２．５ｍｇの用量で皮下経路を介して投与する予備処理研究を行った。予備処理から６０分後、麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下に、尾静脈を介し、約２．２４ｍＣｉの［^１８Ｆ］Ｂ−３の高比放射能調製物をラットに注入し、動的走査を２時間行った。

【0254】

動物を「冷（ｃｏｌｄ）」化合物で予備−処理すると、線条−対−小脳の比は１．０に減少した。ベースライン走査と比較して予備処理の場合、ＢＰ値における約８０％の減少もあった（遮蔽後のＢＰ＝０．８（ｎ＝１））。

【0255】

体内分布研究ならびにマイクロＰＥＴ画像化研究は、ＰＤＥ１０が豊富な領域である線条におけるこのトレーサーの特異的な保持又はそこからのより遅い洗い出しを示した。従って、［^１８Ｆ］Ｂ−３はＰＥＴを用いるＰＤＥ１０Ａの画像化及び定量に適した薬剤である。

【0256】

Ｂ．化合物［^１８Ｆ］Ｂ−４を用いるマイクロＰＥＴベースライン研究
麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下に、尾静脈を介し、約４ｍＣｉの［^１８Ｆ］Ｂ−４の高比放射能調製物を１匹のラットに注入し、ベースラインを２時間走査した。

【0257】

線条において高い強度のシグナルが観察され、皮質領域ならびに小脳中ではバックグラウンド放射能のみであった。ＴＡＣｓは、［^１８Ｆ］Ｂ−４の注入後、線条、皮質領域及び小脳において放射性トレーサーの高い初期の吸収があることを示す。血液プール活性の故のこの初期の高い吸収の後、非−特異的放射能は皮質領域及び小脳からクリアランスされた。線条からのクリアランスはそれより遅く、この領域におけるトレーサーの保持を示した。注入から約６分後に４．４対１のピーク線条−対−小脳の比が得られ、これらの比は注入から約１３分後まで約４．４に留まった。この後、線条からの放射能のクリアランスの故に、比は幾分速く減少した。小脳を参照組織として用いる単純化された参照組織モデルを用いることにより、これらの画像からＢＰ値を計算した。ベースラインにおけるＢＰは２．５であった（ｎ＝１）。

【0258】

体内分布研究ならびにマイクロＰＥＴ画像化研究は、ＰＤＥ１０が豊富な領域である線条における［^１８Ｆ］Ｂ−４の特異的な保持又はそこからのより遅い洗い出しを示した。化合物［^１８Ｆ］Ｂ−３もＰＥＴを用いる脳におけるＰＤＥ１０Ａ発現の画像化に適した薬剤であり得る。

【0259】

［^１８Ｆ］Ｂ−３及び［^１８Ｆ］参照化合物の速度論の比較
２つの有望なＰＤＥ１０Ａ ＰＥＴリガンドである［^１８Ｆ］Ｂ−３及び［^１８Ｆ］参照化合物（２−｛４−［１−（２−［^１８Ｆ］フルオロエチル）−４−ピリジン−４−イル−１Ｈ−ピラゾール−３−イル］−フェノキシメチル｝−キノリン 国際公開第２０１
０／０９７３６７号パンフレット）の速度論を比較した。

【0260】

正常な雄のＷｉｓｔａｒラットに、麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下に、尾静脈を介し、高比放射能トレーサー［^１８Ｆ］Ｂ−３又は［^１８Ｆ］参照化合物を静脈内注入し、μＰＥＴを用いて１２０分間動的に走査した。走査セッションの間、動物はガス麻酔（１Ｌ／分の流量でＯ_２中の２．５％イソフルラン）下に保たれた。種々の脳領域中の放射能濃度を、動物の体重及び注入される用量に関する標準化により、放射性トレーサーの注入から後の時間の関数としてのＳＵＶ値として表わした。

【0261】

ベースライン時間−放射能曲線
両トレーサーに関し、ＰＤＥ１０Ａの発現が最少である脳領域である小脳及び皮質からの放射能の明白な洗い出しがある。線条において両トレーサーは保持されるが、この脳領域における速度論は両ＰＥＴリガンドに関して異なる。［^１８Ｆ］参照化合物は、注入から約５７分後にその最大放射能濃度に達し［０．７３の平均ＳＵＶ］、これは実験の最後まで同じレベルに留まる。［^１８Ｆ］Ｂ−３は、注入から約１６分後にその最大放射能濃度に達する［１．０４の平均ＳＵＶ］。線条からの［^１８Ｆ］Ｂ−３の洗い出しは、注入から約５３分後に始まる。［^１８Ｆ］参照化合物と比較してより速い［^１８Ｆ］Ｂ−３の速度論は、線条−対−小脳の比にも反映されている。［^１８Ｆ］Ｂ−３の場合、約５．６のピーク線条−対−小脳比は注入から２３分後に得られ、これらの比は注入から約５３分後まで約５．６に留まった。この後、実験の最後まで、線条からの放射能のクリアランスの故に、比はゆっくり減少した。［^１８Ｆ］参照化合物の場合、注入から約３２分後に４．２の最大線条−対−小脳比に達し、それは走査の最後まで一定に留まった。

【0262】

【表19】

【0263】

より遅い速度論は、臨床的適用において頑強な分布容積値を得るためにより長い取得時間を要する。従って、［^１８Ｆ］Ｂ−３は、ヒト脳の画像化のためのＰＤＥ１０Ａリガンドとしてより有望である。さらに、［^１８Ｆ］Ｂ−３は［^１８Ｆ］参照化合物と比較してより高い線条における放射能濃度及びより高い線条−対−小脳比に達し（表１８）、生体内画像におけるより高い質及びＰＤＥ１０Ａ結合ポテンシャルのより正確な定量を生ずる。