特許 5872466 放射性核種含有ナノ粒子を製造するための封入方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5872466

(24)【登録日】2016年1月22日

(45)【発行日】2016年3月1日

(54)【発明の名称】放射性核種含有ナノ粒子を製造するための封入方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 51/00 20060101AFI20160216BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 9/127 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 47/16 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 47/24 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 47/34 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 47/28 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 38/00 20060101ALI20160216BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20160216BHJP

   B01J 13/02 20060101ALI20160216BHJP

   B82Y 5/00 20110101ALI20160216BHJP

   B82Y 40/00 20110101ALI20160216BHJP

   G01T 1/161 20060101ALI20160216BHJP

   G01N 33/544 20060101ALI20160216BHJP

   G01N 33/548 20060101ALI20160216BHJP

【ＦＩ】

   A61K49/02 A

   A61K43/00

   A61P35/00

   A61K9/127

   A61K47/16

   A61K47/24

   A61K47/22

   A61K47/34

   A61K47/28

   A61K37/00

   A61K39/395 C

   B01J13/02

   B82Y5/00

   B82Y40/00

   G01T1/161 E

   G01N33/544 A

   G01N33/548 A

【請求項の数】32

【全頁数】90

(21)【出願番号】特願2012-519888(P2012-519888)

(86)(22)【出願日】2010年7月16日

(65)【公表番号】特表2012-533523(P2012-533523A)

(43)【公表日】2012年12月27日

(86)【国際出願番号】DK2010050192

(87)【国際公開番号】WO2011006510

(87)【国際公開日】20110120

【審査請求日】2013年6月19日

(31)【優先権主張番号】PA200900879

(32)【優先日】2009年7月17日

(33)【優先権主張国】DK

(31)【優先権主張番号】61/300,782

(32)【優先日】2010年2月2日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】10152394.2

(32)【優先日】2010年2月2日

(33)【優先権主張国】EP

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】512013477

【氏名又は名称】テクニカル ユニバーシティ オブ デンマーク

【氏名又は名称原語表記】ＴＥＣＨＮＩＣＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＤＥＮＭＡＲＫ

(73)【特許権者】

【識別番号】510201735

【氏名又は名称】リグスホスピタル

【氏名又は名称原語表記】ＲＩＧＳＨＯＳＰＩＴＡＬＥＴ

(74)【代理人】

【識別番号】110000774

【氏名又は名称】特許業務法人 もえぎ特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ペーテルゼン，アンカトリーネ ルイザ

(72)【発明者】

【氏名】ヒーゼングラン ラスムスン，パレ

(72)【発明者】

【氏名】ローセーヤ ヘンレクスン，ヨーナス

(72)【発明者】

【氏名】ケーア，アンドレーアス

(72)【発明者】

【氏名】アナスン，トマス ラース

【審査官】 吉田 佳代子

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２００９／００８１１２１（ＵＳ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ９／００−９／７２

Ａ６１Ｋ ３１／００−３３／４４

Ａ６１Ｋ ３８／００−３８／５８

Ａ６１Ｋ ４１／００−４９／２２

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

放射性核種が封入されたナノ粒子組成物の製造方法であって、
ａ．ベシクル形成成分と、前記ベシクル形成成分によって取り囲まれたキレート剤と、を含むナノ粒子組成物を用意することと、
ｂ．ベシクル膜を通して前記放射性核種を輸送する成分を用意することと、
ｃ．前記ナノ粒子組成物の内部に前記放射性核種を封入することと、
を含み、
前記キレート剤が、シクラム、シクレン、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及び１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）からなる群から選択されるキレート剤であり、
前記放射性核種を輸送する成分が、２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル）及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択されるイオノフォアである、方法。

【請求項2】

前記放射性核種が、銅（^６１Ｃｕ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ）、インジウム（^１１１Ｉｎ）、テクネチウム（^９９ｍＴｃ）、レニウム（^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ）、ガリウム（^６７Ｇａ、^６８Ｇａ）、ストロンチウム（^８９Ｓｒ）、サマリウム（^１５３Ｓｍ）、イッテルビウム（^１６９Ｙｂ）、タリウム（^２０１Ｔｌ）、アスタチン（^２１１Ａｔ）、ルテチウム（^１７７Ｌｕ）、アクチニウム（^２２５Ａｃ）、イットリウム（^９０Ｙ）、アンチモン（^１１９Ｓｂ）、スズ（^１１７Ｓｎ、^１１３Ｓｎ）、ジスプロシウム（^１５９Ｄｙ）、コバルト（^５６Ｃｏ）、鉄（^５９Ｆｅ）、ルテニウム（^９７Ｒｕ、^１０３Ｒｕ）、パラジウム（^１０３Ｐｄ）、カドミウム（^１１５Ｃｄ）、テルル（^１１８Ｔｅ、^１２３Ｔｅ）、バリウム（^１３１Ｂａ、^１４０Ｂａ）、ガドリニウム（^１４９Ｇｄ、^１５１Ｇｄ）、テルビウム（^１６０Ｔｂ）、金（^１９８Ａｕ、^１９９Ａｕ）、ランタン（^１４０Ｌａ）及びラジウム（^２２３Ｒａ、^２２４Ｒａ）からなる群から選択される１種以上の放射性核種を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記放射性核種が、^６１Ｃｕ、^６４Ｃｕ及び^６７Ｃｕからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の方法。

【請求項4】

前記放射性核種が、^６１Ｃｕ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^１７７Ｌｕ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^２２５Ａｃ、^９０Ｙ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ及び^１１９Ｓｂからなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項5】

前記放射性核種が、請求項２に記載の群から選択される２種以上の放射性核種である、請求項２に記載の方法。

【請求項6】

前記放射性核種が、^６４Ｃｕと^６７Ｃｕ、^６１Ｃｕと^６７Ｃｕ、^６４Ｃｕと^９０Ｙ、^６４Ｃｕと^１１９Ｓｂ、^６４Ｃｕと^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕと^１８８Ｒｅ、^６４Ｃｕと^１８６Ｒｅ、^６４Ｃｕと^２１１Ａｔ、^６４Ｃｕと^６７Ｇａ、^６１Ｃｕと^１７７Ｌｕ、^６１Ｃｕと^９０Ｙ、^６１Ｃｕと^１１９Ｓｂ、^６１Ｃｕと^２２５Ａｃ、^６１Ｃｕと^１８８Ｒｅ、^６１Ｃｕと^１８６Ｒｅ、^６１Ｃｕと^２１１Ａｔ、^６１Ｃｕと^６７Ｇａ、^６７Ｃｕと^１７７Ｌｕ、^６７Ｃｕと^９０Ｙ、^６７Ｃｕと^１１９Ｓｂ、^６７Ｃｕと^２２５Ａｃ、^６７Ｃｕと^１８８Ｒｅ、^６７Ｃｕと^１８６Ｒｅ、^６７Ｃｕと^２１１Ａｔ、^６８Ｇａと^１７７Ｌｕ、^６８Ｇａと^９０Ｙ、^６８Ｇａと^１１９Ｓｂ、^６８Ｇａと^２２５Ａｃ、^６８Ｇａと^１８８Ｒｅ、^６８Ｇａと^１８６Ｒｅ、^６８Ｇａと^２１１Ａｔ、^６８Ｇａと^６７Ｃｕからなる群から選択される２種類の放射性核種を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記放射性核種が、銅（^６１Ｃｕ、^６４Ｃｕ及び^６７Ｃｕ）からなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記ベシクル形成成分が、リン脂質、ＰＥＧ化リン脂質及びコレステロールからなる群から選択される１種以上の化合物を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記ベシクル形成成分が、ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＰＯＰＣ、ＣＨＯＬ、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００及びＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＴＡＴＥからなる群から選択される１種以上の両親媒性化合物を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項10】

前記ナノ粒子の内部ｐＨが３〜８の範囲内である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項11】

サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して測定した放射性核種の封入効率が、３５％よりも高い、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項12】

前記放射性標識ナノ粒子が、３７℃のヒト血清中で２４時間インキュベートした後に、漏出した放射性核種と放射性標識ナノ粒子とを分離するためのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析等の精製工程を行って見出される放射性核種の漏出率が２０％未満である安定性を有する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項13】

請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法によってナノ粒子組成物を製造するためのキットであって、
ａ．ｉ．ベシクル形成成分と、ｉｉ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれたキレート剤と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル）及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択されるイオノフォアを含む組成物とを含み、
前記キレート剤が、シクラム、シクレン、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及び１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）からなる群から選択されるキレート剤である、キット。

【請求項14】

請求項２に記載の放射性核種の１種以上をさらに含む、請求項１３に記載のキット。

【請求項15】

前記放射性核種が銅同位体（^６１Ｃｕ、^６４Ｃｕ及び^６７Ｃｕ）からなる群から選択される、請求項１３又は１４に記載のキット。

【請求項16】

放射性核種が封入されたナノ粒子組成物であって、
ｄ．ベシクル形成成分と、
ｅ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれたキレート剤と、
ｆ．前記ナノ粒子組成物の内部に封入された放射性核種と、
を含み、
前記キレート剤が、シクラム、シクレン、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及び１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）からなる群から選択されるキレート剤であり、
前記放射性標識ナノ粒子が、３７℃のヒト血清中で２４時間インキュベートした後に、漏出した放射性核種と放射性標識ナノ粒子とを分離するためのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析等の精製工程を行って見出される放射性核種の漏出率が２０％未満である安定性を有する、ナノ粒子組成物。

【請求項17】

ＰＥＧと共に誘導体化された両親媒性化合物をさらに含む、請求項１６に記載のナノ粒子組成物。

【請求項18】

前記ベシクル形成成分が１種以上の両親媒性化合物を含む、請求項１６又は１７に記載のナノ粒子組成物。

【請求項19】

前記ベシクル形成成分が、ＤＳＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＰＰＣ、ＣＨＯＬ、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００及びＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＴＡＴＥからなる群から選択される１種以上の両親媒性化合物を含む、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項20】

前記放射性核種が、銅（^６１Ｃｕ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ）、インジウム（^１１１Ｉｎ）、テクネチウム（^９９ｍＴｃ）、レニウム（^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ）、ガリウム（^６７Ｇａ、^６８Ｇａ）、ストロンチウム（^８９Ｓｒ）、サマリウム（^１５３Ｓｍ）、イッテルビウム（^１６９Ｙｂ）、タリウム（^２０１Ｔｌ）、アスタチン（^２１１Ａｔ）、ルテチウム（^１７７Ｌｕ）、アクチニウム（^２２５Ａｃ）、イットリウム（^９０Ｙ）、アンチモン（^１１９Ｓｂ）、スズ（^１１７Ｓｎ、^１１３Ｓｎ）、ジスプロシウム（^１５９Ｄｙ）、コバルト（^５６Ｃｏ）、鉄（^５９Ｆｅ）、ルテニウム（^９７Ｒｕ、^１０３Ｒｕ）、パラジウム（^１０３Ｐｄ）、カドミウム（^１１５Ｃｄ）、テルル（^１１８Ｔｅ、^１２３Ｔｅ）、バリウム（^１３１Ｂａ、^１４０Ｂａ）、ガドリニウム（^１４９Ｇｄ、^１５１Ｇｄ）、テルビウム（^１６０Ｔｂ）、金（^１９８Ａｕ、^１９９Ａｕ）、ランタン（^１４０Ｌａ）及びラジウム（^２２３Ｒａ、^２２４Ｒａ）からなる群から選択される１種以上の放射性核種を含む、請求項１６〜１９のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項21】

前記放射性核種が、銅（^６１Ｃｕ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ）及び／又は^１７７Ｌｕ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^２２５Ａｃ、^９０Ｙ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ及び^１１９Ｓｂからなる群から選択される、請求項１６〜２０のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項22】

前記放射性核種が、請求項２０又は２１に記載の群から選択される２種以上の放射性核種である、請求項２０又は２１に記載のナノ粒子組成物。

【請求項23】

前記放射性核種が、^６４Ｃｕと^６７Ｃｕ、^６１Ｃｕと^６７Ｃｕ、^６４Ｃｕと^９０Ｙ、^６４Ｃｕと^１１９Ｓｂ、^６４Ｃｕと^２２５Ａｃ、^６４Ｃｕと^１８８Ｒｅ、^６４Ｃｕと^１８６Ｒｅ、^６４Ｃｕと^２１１Ａｔ、^６４Ｃｕと^６７Ｇａ、^６１Ｃｕと^１７７Ｌｕ、^６１Ｃｕと^９０Ｙ、^６１Ｃｕと^１１９Ｓｂ、^６１Ｃｕと^２２５Ａｃ、^６１Ｃｕと^１８８Ｒｅ、^６１Ｃｕと^１８６Ｒｅ、^６１Ｃｕと^２１１Ａｔ、^６１Ｃｕと^６７Ｇａ、^６７Ｃｕと^１７７Ｌｕ、^６７Ｃｕと^９０Ｙ、^６７Ｃｕと^１１９Ｓｂ、^６７Ｃｕと^２２５Ａｃ、^６７Ｃｕと^１８８Ｒｅ、^６７Ｃｕと^１８６Ｒｅ、^６７Ｃｕと^２１１Ａｔ、^６８Ｇａと^１７７Ｌｕ、^６８Ｇａと^９０Ｙ、^６８Ｇａと^１１９Ｓｂ、^６８Ｇａと^２２５Ａｃ、^６８Ｇａと^１８８Ｒｅ、^６８Ｇａと^１８６Ｒｅ、^６８Ｇａと^２１１Ａｔ、^６８Ｇａと^６７Ｃｕからなる群から選択される２種類の放射性核種を含む、請求項１６〜２２のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項24】

抗体、アフィボディ及びペプチド成分からなる群から選択されるターゲティング化部分をさらに含む、請求項１６〜２３のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項25】

前記キレート剤に結合した細胞内ターゲティング特性を有する化合物を含む、請求項１６〜２４のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項26】

前記細胞内ターゲティング特性を有する化合物が核局在配列ペプチド（ＮＬＳペプチド）である、請求項２５に記載のナノ粒子組成物。

【請求項27】

前記ナノ粒子の内部ｐＨが３〜８の範囲内である、請求項１６〜２６のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項28】

前記ナノ粒子の直径が３０〜３００ｎｍの範囲内である、請求項１６〜２７のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項29】

撮影に使用するための、請求項１６〜２８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項30】

ポジトロン断層法（ＰＥＴ）スキャン又は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）スキャンに使用するための、請求項１６〜２８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項31】

医薬として使用するための、請求項１６〜２８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【請求項32】

癌治療に使用するための、請求項１６〜２８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本願は、２００９年７月１７日に出願されたデンマーク特許出願第ＰＡ ２００９ ００８７９号、２０１０年２月２日に出願された米国特許仮出願第６１／３００，７８２号及び２０１０年２月２日に出願された欧州特許出願第１０１５２３９４．２号に基づいて優先権を主張する。これらの出願の開示内容全体は参照により本願明細書に援用する。

【0002】

本願明細書において引用する全ての特許文献及び非特許文献の開示内容は参照によって本願明細書に援用する。

【0003】

本発明は、患者の癌及びその他の疾患を診断するために有用な撮影（画像化）用組成物に関連する技術分野に関する。特に、本発明は、銅同位体（例えば、⁶¹Ｃｕ及び⁶⁴Ｃｕ）等の放射性核種が封入された新規なリポソーム組成物を含む診断用化合物に関する。また、本発明は、リポソーム組成物等の送達システムに放射性核種を封入するための新規な方法、及び癌性組織等（一般的には血管の出血を伴う病理学的症状）の標的部位の診断におけるそれらの使用に関する。本発明は、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）の利用における新規な診断ツール（手段）を提供する。

【背景技術】

【0004】

リポソームは、その内部に封入され及び／又はその膜中に含有された様々な診断物質又は治療物質を送達するベシクルとして機能することができる。通常、リポソームは、１以上の二重層の膜によって外部環境から分離された内部コアからなるナノスケールのベシクルである。二重層膜は、疎水性領域と親水性領域を含む合成又は天然脂質等の両親媒性分子によって形成することができる（非特許文献１）。また、二重層膜は、粒子（例えば、ポリマーソーム又はポリマー粒子）を構成する両親媒性ポリマーによって形成することもできる。

【0005】

リポソームは、例えば、有用な特性を有するか又は有用な活性をもたらす化合物又は放射性核種等の担体として機能することができる。この場合、リポソームは内部に所望の物質を含むように形成される。リポソームに導入される物質は、リポソーム膜の外表面に結合していてもいいし、リポソームの内部コアに位置していてもよいし、又はリポソームの二重層中に位置していてもよい。リポソーム内に放射性核種を封入するための方法としては、例えば、リポソーム形成後の表面標識（非特許文献２）、予め形成したリポソームの脂質二重層への標識の導入（非特許文献３）、脂質キレート剤複合体の導入による予め形成したリポソームの表面標識（非特許文献４及び非特許文献５）、予め形成したリポソームへの水相封入（非特許文献６、非特許文献７、非特許文献８及び非特許文献９）が知られている。予め形成したリポソーム内への水相封入による物質の封入は、物質の「ｌｏａｄｉｎｇ」、「ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ」、「ｅｎｔｒａｐｐｉｎｇ」とも呼ばれる。

【0006】

水相封入によるリポソーム内への物質の封入は、生体内安定性が最も高いと見られるが、これは当該物質がリポソーム内の保護された場所に存在するようになるためである。リポソーム内に物質を封入する目的は、生体内の破壊的環境及び急速な排泄から物質を保護することである場合が多い。物質を封入することにより、当該物質の活性が有用ではなかったり望ましくなかったりし得る部位ではなくて、その活性が有益である部位又は環境において活性が主に発揮されるようにすることができる。ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）鎖が外表面に結合したリポソームは血流中において長い循環時間を示すことが知られている。これらのリポソーム組成物は、注入するやいなやリポソームを攻撃しその迅速な除去又は破裂及び内部に封入された物質の早過ぎる放出を引き起こす免疫系を、効果的に回避することができる。血流中における循環時間を長くすることにより、リポソーム内に封入された物質は標的組織に到達するまでリポソーム内にとどまることになる。この現象はパッシブターゲティング送達（ｐａｓｓｉｖｅ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ）と呼ばれ、長時間循環したナノ粒子が腫瘍領域又は炎症部位に蓄積するのは、これらの領域においては血管系が出血していること、及び有効なリンパ排出系が欠如していることによるものである。例えば、長時間循環リポソーム内に封入された放射性診断物質をパッシブターゲティングによって患者の患部に送達して診断を容易化することができる。アクティブ又はリガンドターゲッティング送達システムは、細胞表面の抗原又は受容体を標的とするリガンドを表面に結合させたリポソーム組成物である（非特許文献１０）。放射性核種が封入されたリポソーム組成物を含む製剤において長時間循環リポソームとターゲティング化リポソームの特性を一つに組み合わせることにより、標的部位（腫瘍等）における放射能送達の特異性と程度を著しく高めることができる。

【0007】

理想的には、リポソーム組成物は、（ｉ）高い封入効率（封入工程に使用される物質の全量に対する封入された物質の割合が高いこと）を達成し、（ｉｉ）安定した形態（保管時における、又は、リポソームが所期の活性を発揮することが期待される部位もしくは環境に到達する前における封入物質の放出（漏出）が最小であること）で、所望の物質（化合物又は放射性核種）を含むように形成することができる。

【0008】

予め形成したリポソーム内への水相封入による銅同位体等の放射性核種の封入は、脂質膜を通して金属イオンを輸送することができる化合物（イオノフォア）を使用して行うことができる。膜障壁を通過した放射性核種は、リポソーム組成物の内部に封入されたキレート剤に対するより強い親和性のために該キレート剤とより好ましく結合し、遊離（フリーの）イオノフォアは放出され、放射性核種はリポソーム組成物内に封入される。

【0009】

診断及び／又は治療用途において、銅同位体に注目が集まっている。診断用途においては、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）による診断撮影に使用することができる陽電子放射体の⁶¹Ｃｕ及び⁶⁴Ｃｕが注目を浴びている。⁶⁴Ｃｕは全ての崩壊様式を有する興味深い銅同位体であり、半減期が１２．７時間であって生物学的研究に適している。半減期が約６〜１２時間であれば、標的の迅速な識別を可能とする十分なバックグラウンドクリアランスを確保しながら、炎症性組織又は癌性標的においてリポソームを十分に蓄積させる上で理想的であると思われる（非特許文献１１）。また、⁶⁴Ｃｕは全ての銅同位体の化学特性を表すモデル核種として使用することができる。

【0010】

治療用途のための理想的な放射性同位体は、β、α及びオージェ電子放出体等の低透過性放射線を放射する同位体である。そのような放射性同位体の例としては、⁶⁷Ｃｕ、⁶⁷Ｇａ、²²⁵Ａｃ、⁹⁰Ｙ、¹⁷⁷Ｌｕ、¹¹⁹Ｓｂが挙げられる。放射性医薬品としての低エネルギー放射性同位体が標的部位に到達すると、エネルギーは標的部位のみに照射され、周辺の正常な組織には照射されない。異なる放射性同位体から放射された粒子のエネルギー及び組織におけるその到達範囲、並びにその半減期は様々であり、最も適切な放射性同位体は、用途、疾患及び疾患組織へのアクセス可能性に応じて異なる。

【0011】

診断用途において理想的な放射性同位体は、比較的短い半減期を有し、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）及び／又は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）等の撮影技術によって検出される高透過放射線を放射する同位体である。放射性核種の半減期は、非標的器官からの除去を可能としながらも、所望の化学反応を行って放射性医薬品を合成することが可能な程度に十分長く、また患者の標的組織において蓄積することができる程度に十分長くなければならない。放射性核種である⁶⁴Ｃｕは、ＰＥＴ及びＳＰＥＣＴ（非特許文献１２）並びに治療（非特許文献１３）の用途において汎用的な同位体であることが証明されている。⁶¹Ｃｕ（Ｔ_1/2＝３．３３時間）及び⁶⁴Ｃｕ（Ｔ_1/2＝１２．７時間）等の放射性核種からなる放射性医薬品及び放射性標識リポソーム組成物はポジトロン断層法（ＰＥＴ）による撮影に使用することができ、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）に対する主な利点としては、ａ）コリメータの代わりに、互いに対向する一対のシンチレーターによって同時（＜１０^-9秒）に検出された光子のみが表示（ｒｅｇｉｓｔｅｒｅｄ）される消滅放射線同時検出（ＡＣＤ）法を採用しており、検出視野が（非発散）円柱状であり、感度及び解像度が検出視野内において変化しないため、感度が著しく向上し（×３０〜４０）、空間分解能が約２倍（＜５ｍｍ）向上すること（非特許文献１４）、ｂ）ＰＥＴスキャナは、全ての画像を、光子減衰、散乱及び偶発性についての補正後の放射能濃度（例えば、Ｂｑ／ｍＬ）の単位に基づいて提供するため、ＳＰＥＣＴよりも定量的な方法であると考えられること（非特許文献１５）、が挙げられる。

【0012】

特許文献１は、腫瘍の中性子捕捉治療のためのリポソーム封入化合物にかかる組成物及び使用方法を開示している。特許文献１では、活性化しなければ放射性を示さない安定元素（ホウ素等）がリポソームに封入されている。特許文献１に開示された方法は、イオノフォアやキレート剤は使用していない。

【0013】

特許文献２は、癌治療に適しており、カルシウムイオノフォアＡ２３１８７を使用したイオノフォア封入によってα粒子を放射する重放射性核種（原子量：＞１５０）が封入された放射性標識リポソームを開示している。この方法は診断的見地からは有用ではなく、ＰＥＴを使用することもできない。

【0014】

特許文献３及び特許文献４は、子宮内膜インプラント又は該インプラント内の血管の出血を治療及び／又は検出するために有用な医薬組成物と共に放射性標識錯体が封入されたリポソームを開示している。放射性核種は、オキシン、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）のいずれかと錯体を形成している陽電子放射体又はガンマ放射体であり、陽電子放射体は¹¹Ｃ、¹⁸Ｆ、⁷⁶Ｂｒ、⁷⁷Ｂｒ及び⁸⁹Ｚｒから選択され、ガンマ放射体は⁶⁷Ｇａ及び¹¹¹Ｉｎから選択される。しかしながら、該リポソームは陽電子放射体の封入にオキシン以外のイオノフォアを使用しておらず、該医薬組成物は子宮内膜インプラント又は該インプラント内の血管の出血を治療及び／又は検出するためにのみ使用される。

【0015】

特許文献５は、イオノフォアとしてオキシンを使用して放射性核種¹¹¹Ｉｎ、¹⁷⁷Ｌｕ、⁹⁰Ｙ及び²²⁵Ａｃをリポソーム組成物に封入することを開示している。核種は、リポソーム組成物の内部に封入されたジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）又は他のキレート剤に対するより強い親和性のために、該キレート剤とより好ましく結合し、遊離オキシンは放出され、放射性核種がリポソーム組成物内に封入される。診断的見地からは、この方法はＰＥＴ撮影には使用することができず、放射性核種が限定されているためにＳＰＥＣＴにしか使用することができない。

【0016】

特許文献６は、各種撮影に使用される⁶⁰Ｃｕ、⁶²Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ等の放射性核種に結合するキレート剤に共有結合させることができ、インテグリン受容体に結合するペプチドミメチック部分（ｍｏｉｅｔｙ）を開示している。特許文献６は、キレート化Ｔｍ及びＧｄを含む、核磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）のためのリポソームの製造方法も開示している。特許文献６に開示された製造方法では、イオノフォアは使用していない。

【0017】

非特許文献１６は、理論的研究において放射性核種¹³¹Ｉ、⁶⁷Ｃｕ、¹⁸⁸Ｒｅ又は²¹¹Ａｔで標識されたリポソームの治療的有効性について分析しているが、標識リポソームを製造するための化学的方法については示唆していない。

【0018】

放射性銅同位体を使用した放射性医薬品は現在までに数えるほどしか見出されていない。放射性銅同位体を使用した放射性医薬品の例としては、低酸素血症マーカーとしての⁶⁰Ｃｕ−ＡＴＳＭや、腫瘍治療剤としての可能性が示唆されている⁶⁴Ｃｕ−ＡＴＳＭ及び⁶⁴Ｃｕ−ＰＴＳＭが挙げられる。その他の物質として、銅標識ペプチドや、放射性銅が二官能性キレート剤を介して生体分子に結合した抗体も知られている。しかしながら、銅封入リポソーム組成物は得られていない。

【0019】

従って、診断用途に関連する技術分野において、放射性核種⁶¹Ｃｕ等のＰＥＴに有用な放射線診断用物質及び撮影用物質等の様々な化合物の送達に有用な各種リポソーム組成物を提供することが求められている。本発明は、化合物カルボスチリルを使用して、放射性銅同位体又は他の放射性核種を、予め形成したリポソーム組成物に封入するための新規な方法を提供する。全ての銅同位体の化学特性を表すモデル核種として陽電子放射体⁶⁴Ｃｕを使用する。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0020】

【特許文献1】欧州特許第３８６ １４６ Ｂ１号

【特許文献2】国際公開第ＷＯ２００１／０６０４１７号

【特許文献3】国際公開第ＷＯ２００４／０８２６２７号

【特許文献4】国際公開第ＷＯ２００４／０８２６２６号

【特許文献5】米国特許出願公開第２００９／００８１１２１号

【特許文献6】国際公開第ＷＯ２００６／０９５２３４号

【非特許文献】

【0021】

【非特許文献1】Ｌａｓｉｃ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１６：３０７−３２１，１９９８

【非特許文献2】Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ．，３７：１３−３２，１９９９

【非特許文献3】Ｍｏｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｍｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，１４：２１３−２１７，１９８１

【非特許文献4】Ｇｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ ｈａｒｍ Ｂｕｌｌ．（Ｔｏｋｙｏ），３７：１３５１−１３５４，１９８９

【非特許文献5】Ｓｅｏ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｃａｔｅ Ｃｈｅｍ．，１９：２５７７−２５８４，２００８

【非特許文献6】Ｈｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ．，７１６：１０１−１０９，１９８２

【非特許文献7】Ｐｈｉｌ−ｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄ Ａｐｐｌ Ｉｎｓｔｒｕｍ Ｂ，１９：５３９−５４７，１９９２

【非特許文献8】Ｇａｂｉｚｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｒｅｓ．，１：１２３−１２５，１９８８

【非特許文献9】Ｈｅｎｒｉｋｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ Ｂｉｏ．，３１：４４１−４４９，２００４

【非特許文献10】Ａｌｌｅｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０３：１８１８−１８２２，２００４

【非特許文献11】Ｇａｂｉｚｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５０：６３７１−６３７８

【非特許文献12】Ｄｅｈｄａｓｈｔｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ．３８：１０３Ｐ，１９９７

【非特許文献13】Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｎｕｃｌ Ｍｅｄ．，３６：２３１５−２３２５，１９９８

【非特許文献14】Ｋｏｓｔａｒｅｌｏｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｒｅｓ．，９：４２９−４６０，１９９９

【非特許文献15】Ｓｅｏ，Ｃｕｒｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，１：１７−２１，２００８

【非特許文献16】Ｋｏｓｔａｒｅｌｏｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｒｅｓ，９：４０７−４２４，１９９９

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0022】

本発明は、癌又はその他の疾患の撮影及び／又は治療のための多機能かつ多様式（ｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｔｙ）の放射性核種の送達に有用なリポソーム組成物に関する。

【0023】

本発明の一態様は、ベシクル形成成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、内部に封入され銅放射性核種を含む放射性標識物質と、を有するリポソーム組成物から構成される、リポソーム内に封入された放射性核種を提供する。本発明の一実施形態において、銅核種はＣｕ（ＩＩ）カチオンである。本発明の別の実施形態において、銅核種はＣｕ（Ｉ）カチオンである。本発明の一実施形態において、放射性核種は、銅とは異なる１種以上の同位体をさらに含み、該同位体は放射性であってもなくてもよい。一実施形態において、銅とは異なる１種以上の同位体は、キレート剤等のリンカー分子を介してナノ粒子組成物の内表面又は外表面に結合している。別の実施形態において、銅とは異なる１種以上の同位体は、ナノ粒子組成物の内部に封入されている。

【0024】

本発明の一実施形態において、ベシクルは、放射性であってもなくてもよい、銅とは異なる１種以上の同位体をさらに含む。

【0025】

本発明の別の態様は、リポソーム組成物内に封入された放射性核種の製造方法であって、リポソーム組成物は、ベシクル形成成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含み、物質封入成分は、キレート剤であるか、還元剤（アスコルビン酸、グルコース、フルクトース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノース、麦芽糖及びアセトール等）であるか、又は銅イオンと共に低溶解性塩を形成する物質（リン酸、シュウ酸、塩化物等）である方法に関する。リポソーム組成物内には放射性核種が封入され、放射性核種は銅放射性核種を含む。

【0026】

また、本発明は、患者の癌性疾患、及び、一般的に血管の出血を伴う病理学的症状を診断及び／又は治療するための方法であって、リポソーム組成物を患者に投与することを含み、リポソーム組成物は、ベシクル形成成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含み、放射性標識物質は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等からなる群から選択される銅同位体の形で放射性核種を含む方法を提供する。本発明の一実施形態において、放射性標識物質は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される銅同位体の形で放射性核種を含む。本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子組成物は静脈内投与する。本発明に係る方法の別の実施形態において、ナノ粒子組成物は経口投与する。

【0027】

本発明の特に重要な方法は、放射性核種が封入されたリポソーム組成物の製造方法である。放射性核種の封入は、形成されたリポソーム組成物（及び、一般的に脂質膜）を通して金属体を輸送することができる親油性化合物（イオノフォア）を使用して水相で行う。放射性核種は物質封入成分と相互作用し、リポソーム組成物の内部に封入される。これにより、遊離イオノフォアが放出され、放射性核種をリポソーム組成物の内部に封入することができる。

【0028】

また、本発明は、放射性標識リポソーム組成物の製造方法であって、該リポソーム組成物は、内部に封入された細胞内核ターゲティング特性を有する化合物をさらに含む方法を提供する。細胞内核ターゲティング特性を有する化合物は、キレート剤、アミノ酸配列及び放射性核種等からなる群から選択される成分を含む。一実施形態において、該化合物は、キレート剤、アミノ酸配列及び放射性核種からなる群から選択される。細胞内核ターゲティング特性を有する化合物は、物質封入成分に結合しナノ粒子組成物内に封入された核局在配列ペプチド（ＮＬＳペプチド）であってもよい。

【0029】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態は、リポソーム組成物及び／又は標識錯体を検出することによって患者の標的部位におけるリポソーム組成物の存在を監視する工程をさらに含む。放射性核種が陽電子放射体である場合には、監視はポジトロン断層法（ＰＥＴ）によって行うことができる。放射性核種がガンマ放射体である場合には、監視は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）によって行うことができる。

【0030】

本発明の別の実施形態は、患者の癌疾患又はその他の疾患を診断及び／又は治療するための方法であって、ナノ粒子が、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等からなる群から選択される銅同位体の形で放射性核種を含む方法を提供する。好適な実施形態において、銅同位体は⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される。

【0031】

また、本発明は、癌疾患を診断及び／又は治療するための方法であって、血管新生又は炎症部位の組織又は細胞を標的とする外部部分（リポソーム組成物の表面に結合される）と組み合わせて放射性核種を含む長時間循環リポソームを投与することを含み、放射性核種は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等からなる群から選択される銅同位体である方法を提供する。本発明の好適な実施形態において、放射性核種は⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される銅同位体である。

【0032】

また、本発明は、医薬送達組成物の製造方法であって、外部リン脂質層及び内部リン脂質層を有するリポソーム成分を用意する工程と、血管新生又は炎症部位又は血管の出血を標的とする部分を外部リン脂質層に結合させてターゲティング化リポソーム成分を形成する工程と、放射性標識錯体がリポソーム内に拡散しリポソーム内に封入されることに適した条件においてリポソーム成分を放射性標識錯体と組み合わせる工程と、を含む方法を提供する。

【0033】

式Ａで示されるイオノフォアは、ベシクル膜を通して様々な金属放射性核種を輸送することができることが見出された。従って、本発明の別の態様又は本発明に係る方法において、ベシクル膜を通して放射性核種を輸送するために使用するイオノフォアは式Ａ（図２）で示され（式Ａのあらゆる好適な実施形態を含む）、ベシクルに封入される放射性核種は銅とは異なる放射性核種であってもよい。

【0034】

本発明のさらなる態様及び利点は、以下の説明から明らかになるか、本発明を実施することにより明らかになるだろう。本発明の目的及び利点は、特に請求項に記載された要素及び組み合わせによって実現及び達成することができる。

【0035】

なお、上述した説明及び以下の説明は例示及び説明のみを目的とするものであり、請求項に記載された本発明の範囲を制限することを意図するものではないことを理解されたい。

【0036】

上述した発明の概要及び以下の発明の詳細な説明は、添付図面を参照することによってより良く理解されるだろう。本発明について説明するために、現時点において好適と思われる実施形態を図面に示している。ただし、本発明は図面に示す実施形態及び手段に限定されるものではないことを理解されたい。

【図面の簡単な説明】

【0037】

【図1】図１は、（Ａ）カルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、あるいは２ＨＱともいう）及び（Ｂ）キノリン（Ｃ₉Ｈ₇Ｎ）の構造を示す。Ｃ及びＤは、銅同位体又はその他の金属体をリポソームに封入するために使用することができる本発明に係るイオノフォアの例であるカルボスチリルの誘導体である。Ｒは、例えば、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、炭素鎖（Ｈ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖）、ＯＨ、Ｏ−Ｚ（式中、ＺはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖である）、Ｓ−Ｈ、Ｓ−Ｚ、Ｓｅ−Ｈ、Ｓｅ−Ｚ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｚ又はＮ−Ｚ−Ｚを表す。Ｘは、例えば、ＳＨ、ＳｅＨ、Ｏ−Ｙ（式中、ＹはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₈炭素鎖である）、Ｓ−Ｙ、ＳｅＹ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｙ、Ｎ−Ｙ−Ｙを表す。

【図2】図２は本発明に係る２−置換イオノフォアの一般化構造を示す。本発明の又は本発明に係る方法の好適な実施形態において、Ｘはヒドロキシ基であり、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は水素原子であり、この場合該化合物は２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル、あるいは２ＨＱ）と命名される（図１Ａを参照）。別の実施形態において、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、互いに独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表す。一実施形態において、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【図3】図３は、オキシン（８−ヒドロキシキノリン、８ＨＱともいう）の構造を示す（Ａ）。Ｂ及びＣは、銅同位体又はその他の金属体をリポソームに封入するために使用することができる本発明に係るイオノフォアの例である。Ｒは、例えば、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、炭素鎖（Ｈ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖）、ＯＨ、Ｏ−Ｚ（式中、ＺはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖である）、Ｓ−Ｈ、Ｓ−Ｚ、Ｓｅ−Ｈ、Ｓｅ−Ｚ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｚ又はＮ−Ｚ₂を表す。Ｘは、例えば、ＳＨ、ＳｅＨ、Ｏ−Ｙ（式中、ＹはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₈炭素鎖である）、Ｓ−Ｙ、ＳｅＹ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｙ、Ｎ−Ｙ₂を表す。

【図4】図４は本発明に係る８−置換イオノフォアの一般化構造を示す。本発明の又は本発明に係る方法の好適な実施形態において、Ｙはヒドロキシル基であり、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は水素原子であり、該化合物は８−ヒドロキシキノリン（オキシン、８ＨＱともいう）と命名される（図３Ａを参照）。別の実施形態において、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、互いに独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表す。一実施形態において、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【図5】図５Ａは、イオノフォア（カルボスチリル）を使用した⁶⁴Ｃｕ封入リポソーム組成物の封入モデルを示す。封入される銅同位体は、Ｃｕ（ＩＩ）カチオン又はＣｕ（Ｉ）カチオンであってもよい。図５Ｂは、イオノフォアを使用した放射性核種封入ナノ粒子組成物の封入モデルを示す。

【図6】図６は、等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）分析によるＤＯＴＡを使用した２−ヒドロキシキノリンからのＣｕ（ＩＩ）抽出の測定結果を示す。２−ヒドロキシキノリンとＤＯＴＡの交換を熱スパイクプロット（Ａ）及び積分熱プロット（Ｂ）として示している。実験条件：０．５ｍＭ Ｃｕ（２−ヒドロキシキノリン）₂に１０μＬの５ｍＭ ＤＯＴＡを注入して滴定した。全ての溶液はミリＱ水（ｐＨ７．４）を使用して調製した。

【図7】図７は、カルボスチリル（Ａ）又はオキシン（Ｂ）を使用した場合の、ＤＳＰＣ／コレステロール／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００から構成されるＤＯＴＡ封入リポソームへの⁶⁴Ｃｕの封入効率を示す（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用したサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）で解析）。いずれの場合も、リポソームの内部ｐＨは４．０だった。図７及び図１０に示すデータは、分析に使用したソフトウェアが異なる以外は同一である。高い封入効率（それぞれ９３％及び９４％）が得られた。

【図8】図８は、１００ｎｍのサイズを有する⁶⁴Ｃｕ−リポソームの、３７℃の溶液（ｐＨ７．４）中で２４時間インキュベートした後のインビトロ安定性を示す。⁶⁴Ｃｕ−リポソームには、カルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、２ＨＱ）（Ａ、Ｃ）又はオキシン（Ｂ、Ｄ）を使用して⁶⁴Ｃｕを封入した。リポソームの内部ｐＨは４．０（Ａ、Ｂ）及び７．４（Ｃ、Ｄ）であった。

【図9】図９は、等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）分析によるＤＯＴＡを使用した２−ヒドロキシキノリンからのＣｕ（ＩＩ）抽出の測定結果を示す。２−ヒドロキシキノリンとＤＯＴＡの交換を熱スパイクプロット（Ａ）及び積分熱プロット（Ｂ）として示している。実験条件：０．５ｍＭ Ｃｕ（２ＨＱ）₂に２μＬの５ｍＭ ＤＯＴＡを注入して滴定した。全ての溶液はＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．９）を使用して調製した。

【図10】図１０は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）による、⁶⁴Ｃｕ−リポソームと封入されなかった⁶⁴Ｃｕの分離を示す。カルボスチリル（Ａ）又はオキシン（Ｂ）を使用して⁶⁴ＣｕをＤＳＰＣ／コレステロール／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００から構成されるＤＯＴＡ封入リポソームに封入した。高い封入効率（それぞれ９３％及び９４％）が得られた。いずれの場合もリポソームの内部ｐＨは４．０だった。図７及び図１０に示すデータは、分析に使用したソフトウェアが異なる以外は同一である。

【図11】図１１は、マウスにおける⁶⁴Ｃｕ−リポソーム（ＤＳＰＣ／ＣＨＯＬ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００、モル比：５５：４０：５）及び⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡの血中濃度と時間のプロファイルを示す時間放射能曲線（ｔｉｍｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｃｕｒｖｅ：ＴＡＣ）である。放射能濃度は、ＰＥＴ／ＣＴ画像上で左心室の周囲に注目領域（ＲＯＩ）を描くことによって推定した。左心室は、マウスにおいて血中濃度を調べるための最も代表的な領域である。活性は、時間の関数としての％ＩＤ ｍＬ^-1（ｐｅｒｃｅｎｔ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｄｏｓｅ ｐｅｒ ｍｌ、すなわち１ｍｌあたりの、注入用量に対するパーセンテージ）で表した。全ての値は平均±ｓ．ｅ．ｍ（ｎ＝１０）である。

【図12】図１２は、肝臓、心臓、脾臓、筋肉組織及び腫瘍における⁶⁴Ｃｕ−リポソーム（ＤＳＰＣ／ＣＨＯＬ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００、モル比：５５：４０：５から構成される）のインビボ生体内分布（時間の関数としての％ＩＤ臓器^-1（ｐｅｒｃｅｎｔ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｄｏｓｅ ｐｅｒ ｏｒｇａｎ、すなわち臓器あたりの、注入用量に対するパーセンテージ）として表し、注目領域（ＲＯＩ）画像分析から算出した）の時間放射能曲線（ＴＡＣ）である。全ての値は平均±ｓ．ｅ．ｍ（ｎ＝１０）である。

【図13】図１３は、正常なマウス及び腫瘍を有するマウスにおける⁶⁴Ｃｕ−リポソーム（ＤＳＰＣ／ＣＨＯＬ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００、モル比：５５：４０：５から構成される）の分布を示す陽電子断層撮影（ＰＥＴ）／コンピュータ断層撮影（ＣＴ）画像を示す。Ａ：正常なマウスへの⁶⁴Ｃｕ−リポソームの静脈内注入から１、４、１２及び２４時間後の冠状（ｃｏｒｏｎａｌ）ＰＥＴ画像。Ｂ：正常なマウスへの⁶⁴Ｃｕ−リポソームの静脈内注入から４時間後の冠状ＰＥＴ／ＣＴ画像。Ｃ：結腸腺癌（ＨＴ２９（矢印を参照））を有するマウスの左及び右脇腹への⁶⁴Ｃｕ−リポソームの静脈内注入から２４時間後の冠状ＰＥＴ画像。Ｄ：結腸腺癌（ＨＴ２９（矢印を参照））を有するマウスの左及び右脇腹への⁶⁴Ｃｕ−リポソームの静脈内注入から２４時間後の軸位ＰＥＴ画像（上）及び軸位ＰＥＴ／ＣＴ画像（下）。

【図14】図１４は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）による、¹⁷⁷Ｌｕ−リポソームと封入されなかった¹⁷⁷Ｌｕの分離を示す。２−ヒドロキシキノリン（２ＨＱ）を使用して¹⁷⁷ＬｕをＤＳＰＣ／ＣＨＯＬ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００から構成されるＤＯＴＡ封入リポソームに封入した。９６％にも及ぶ高い封入効率が得られた（Ａ）。（Ｂ）は貯蔵安定性試験（３７℃で２４時間）の結果を示しており、２ＨＱを使用して¹⁷⁷Ｌｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む¹⁷⁷Ｌｕ−リポソーム（ｐＨ４．０）は全放射能の９５％を超える放射能を維持していた。

【図15】図１５は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）による、⁶⁴Ｃｕ／¹⁷⁷Ｌｕ−リポソームと封入されなかった⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕの分離を示す。２−ヒドロキシキノリン（２ＨＱ）を使用して⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷ＬｕをＤＳＰＣ／ＣＨＯＬ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００から構成されるＤＯＴＡ封入リポソームに封入した。高い封入効率（⁶⁴Ｃｕは９５％、¹⁷⁷Ｌｕは９８％）が得られた。この結果は、２ＨＱによってＤＯＴＡ封入リポソーム内に¹⁷⁷Ｌｕ及び⁶⁴Ｃｕを同時に効率的に封入することができることを示している。

【発明を実施するための形態】

【0038】

用語の定義
本願明細書において使用する「ベシクル」という用語は、内部空間が存在することによって特徴付けられる実体を意味する。好ましいベシクルは、本願明細書に開示する各種両親媒性成分等の脂質から構成される。

【0039】

本願明細書において使用する「ナノ粒子」という用語は、含水コアを取り囲む最も広義の膜を構成するリポソーム、ポリマーソーム又は脂質もしくはポリマーシェル構造体を意味する。

【0040】

本願明細書において使用する「キレート剤」（ｃｈｅｌａｔｏｒ又はｃｈｅｌａｔｉｎｇ−ａｇｅｎｔ）いう用語は、遷移金属又は他の物質と共に２以上の配位結合を含む錯体を形成することができる極性基の存在によって特徴付けられる化学的部分、物質、化合物又は分子を意味する。

【0041】

本願明細書において使用する「金属体（ｍｅｔａｌ ｅｎｔｉｔｙ）」という用語は、金属イオン又は放射性核種を意味し、「放射性核種」という用語は「放射性同位体」という用語と同じ意味で使用する。

【0042】

本願明細書において使用する「ホスファチド」という用語は、グリセリン構成要素を含むリン脂質を意味する。

【0043】

本願明細書において使用する「両親媒性」という用語は、極性領域及び非極性領域の両方を含む分子を意味する。

【0044】

本願明細書において同じ意味で使用する「結合親和性」及び「親和性」という用語は、分子間の引力の度合いを意味する。親和性は、解離定数又は会合定数として定量的に表すことができる。本発明においては、ａ）Ｃｕ（ＩＩ）もしくはＣｕ（Ｉ）等の遷移金属イオン又は他の金属体に対するカルボスチリル又はオキシン等のイオノフォアの親和性、及び、ｂ）Ｃｕ（ＩＩ）もしくはＣｕ（Ｉ）等の遷移金属イオン又は他の金属体に対するＤＯＴＡもしくはその誘導体等のキレート剤又は他の物質封入成分の親和性、という２種類の親和性が考えられる。

【0045】

本願明細書において使用する「イオノフォア」という用語は、リポソームの内部に又は他の二重層へと拡散することができるあらゆる化合物を意味する。また、「イオノフォア」という用語は、放射性核種又は金属体と錯体を形成し、前記錯体を二重層を通して輸送することができる化合物を意味する。

【0046】

本願明細書において使用する「封入物質」という用語は、本願明細書に開示するリポソーム組成物又はナノ粒子組成物内に封入された金属同位体（放射性核種又は非放射性同位体）を意味する。

【0047】

本願明細書において使用する「物質封入成分」という用語は、金属イオン又は放射性核種をリポソーム組成物内に封入することができるあらゆる化合物を意味する。好適な物質封入成分は、キレート剤、他の物質を還元することができる物質（還元剤）又は放射性核種もしくは金属体と低溶解性塩を形成する物質である。

【0048】

本願明細書において使用する「封入」という用語は、ナノ粒子組成物の内部への放射性核種又は金属体の取り込みを意味する。

【0049】

本願明細書において使用する「封入効率」という用語は、調製に使用される放射性核種又は金属体の全量に対するナノ粒子組成物の内部に取り込まれた放射性核種又は金属体の割合（％）を意味する。

【0050】

本願明細書において使用する「封入安定性」、「貯蔵安定性」又は「血清中安定性」という用語は、ナノ粒子組成物内部の封入物質のリーク及び／又は放出の度合いを測定するための、ナノ粒子組成物の安定性試験に基づくところを意味する。

【0051】

本願明細書において使用する「放射性標識錯体」という用語は、錯体を形成するキレート剤と放射性核種を意味する。

【0052】

本願明細書において使用する「ターゲティング化部分」という用語は、糖、オリゴ糖、ビタミン、ぺプチド、タンパク質、抗体、アフィボディ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ）及び他の受容体結合リガンドであって、ナノ粒子を標的部位又は標的細胞内により良好に送達するために脂質又はポリマー成分を介してナノ粒子表面に結合されたものを意味する。

【0053】

本願明細書において使用する「医薬」又は「薬剤」という用語は、ヒト又は動物の体内において局所的又は全身的（非局所的）に作用する生物学的、生理学的又は薬理学的に活性な物質を含む。

【0054】

本願明細書において使用する「治療」という用語は、治癒的治療、予防もしくは防止的治療又は改善的治療を意味する。「治療」という用語は、臨床的に確立され得る有益な又は所望の生理学的結果を得るための方法（手段）を含む。本発明においては、有益な又は所望の臨床結果は、検出可能であるか否かを問わず、症状の軽減、疾患の程度の低減、症状の安定化（悪化の不在）、症状の進行又は悪化の遅延又は減速、症状の改善又は緩和、（部分的又は完全な）寛解等を含む。本願明細書において使用する「緩和」という用語は、本発明の組成物を投与しない場合と比較した場合の、生理学的症状の程度及び／もしくは望ましくない発現の減少、並びに／又は時間的な進行の減速もしくは遅延を意味する。

【0055】

当業者には、上述した実施形態の広義の発明思想から逸脱することなく、上述した実施形態に変更を加えることができることは明らかであろう。従って、本発明は本願明細書に開示する特定の実施形態に限定されるものではなく、特許請求の範囲に記載された本発明の範囲から逸脱しない変形を含むものである。

【0056】

本発明は、リポソーム組成物内に封入された放射性核種の新規な製造方法に関する。リポソーム組成物は、好ましくはナノ粒子である。

【0057】

本発明は、放射性同位体を癌組織（および、一般的には、炎症部位等の血管の出血を伴う病理学的症状を示す組織）に送達するためのリポソーム組成物の製造方法を提供することによって診断応用技術分野におけるニーズを満たすものである。リポソーム組成物は、好ましくはナノ粒子である。

【0058】

本発明の実施形態によれば、リポソーム組成物は、ベシクル形成成分及び物質封入成分を含むマイクロメートル又はナノメートルサイズの粒子である。ベシクル形成成分は、粒子の閉鎖障壁を形成する。物質封入成分は、負の電荷を有する１以上の基を含むか又はイオンをトラップすることができる、少なくとも１種の化学的部分を有する。物質封入成分は、放射線診断薬又は放射線治療薬等の封入対象薬剤と静電相互作用して安定な錯体又は低溶解性塩を形成し、封入対象薬剤との関係においてイオノフォアと置き換わる。イオノフォアは、カルボスチリル等の化合物であり、あるいは、二重層を通して放射性核種を輸送しベシクル内で封入対象薬剤を安定化及び／又はトラップすることができるその他のイオノフォア又は化合物である。放射線診断薬又は放射線治療薬等の封入対象薬剤を安定化させることにより、血液循環におけるベシクルからの薬剤の放出を防止又は最小限化することができる。

【0059】

一実施形態において、本発明のナノ粒子組成物は１２０ｎｍ未満の直径を有する。

【0060】

別の実施形態において、本発明のナノ粒子組成物は８０ｎｍ超の直径を有する。

【0061】

好適な実施形態において、本発明のナノ粒子組成物は、３０〜３００ｎｍ、例えば３０〜６０ｎｍ、６０〜８０ｎｍ、８０〜１００ｎｍ、１００〜１２０ｎｍ、１２０〜１５０ｎｍ、１５０〜１８０ｎｍ、１８０〜２１０ｎｍ、２１０〜２４０ｎｍ、２４０〜２７０ｎｍ又は２７０〜３００ｎｍの直径を有する。

【0062】

一実施形態において、本発明は放射性標識リポソームの製造方法を提供する。放射性標識リポソームは、例えば、ベシクル形成成分と、膜を通してイオンを輸送するための成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含む。⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等の銅同位体等の１種以上の放射性核種を含む放射性標識物質がリポソーム組成物内に封入される。本発明において使用する銅同位体は、Ｃｕ（ＩＩ）カチオン又はＣｕ（Ｉ）カチオンであってもよい。

【0063】

別の実施形態において、本発明は、患者における固形腫瘍等の癌性疾患又は他の疾患を診断、治療及び／又は監視するための方法を提供する。前記方法は、ベシクル形成成分と、物質封入成分と、膜を通してイオンを輸送するための成分と、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等の銅同位体等の１種以上の放射性核種を含む放射性標識物質と、を含むリポソーム組成物を用意することを含む。銅同位体は、Ｃｕ（ＩＩ）カチオン又はＣｕ（Ｉ）カチオンであってもよい。次に、例えば静脈内投与によってリポソーム組成物を患者に投与し、所与の時間が経過した後に、リポソーム組成物内の放射性核種から放射される放射線の量を測定する。

【0064】

本願発明者らは、式Ａで示されるイオノフォアは、ベシクル膜を通して様々な金属放射性核種を輸送することができることを見出した。従って、本発明の別の態様又は本発明に係る方法において、ベシクル膜を通して前記放射性核種を輸送するために使用するイオノフォアは式Ａ（式Ａのあらゆる好適な実施形態を含む）で示され、封入物質は１種以上の金属放射性核種の１種以上の同位体である。

【0065】

金属放射性核種の封入同位体は、好ましくは、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択され、金属放射性核種の同位体は金属の任意の酸化状態にあってよい。このような酸化状態としては、一価カチオン、二価カチオン、三価カチオン、四価カチオン、五価カチオン、六価カチオン及び七価カチオンが挙げられる。本態様において、ベシクル形成成分、物質封入成分、ターゲティング化部分、サイズ、及びｐＨ特性を含むナノ粒子の諸特性並びにナノ粒子の使用は以下に記載するものと同様であり得る。

【0066】

別の好適な実施形態において、封入同位体は、レニウム（¹⁸⁶Ｒｅ）、ストロンチウム（⁸⁹Ｓｒ）、サマリウム（¹⁵³Ｓｍ）、イッテルビウム（¹⁶⁹Ｙｂ）、タリウム（²⁰¹Ｔｌ）又はアスタチン（²¹¹Ａｔ）であり、金属放射性核種の同位体は金属の任意の酸化状態にあってよい。このような酸化状態としては、一価カチオン、二価カチオン、三価カチオン、四価カチオン、五価カチオン、六価カチオン及び七価カチオンが挙げられる。本態様において、ベシクル形成成分、物質封入成分、ターゲティング化部分、サイズ、及びｐＨ特性を含むナノ粒子の諸特性並びにナノ粒子の使用は以下に記載するものと同様であり得る。

【0067】

本発明の本態様の別の好適な実施形態又は本発明に係る方法において、ベシクル膜を通して前記放射性核種を輸送するために使用するイオノフォアはカルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン）である。

【0068】

別の実施形態において、封入される金属放射性核種の同位体は、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）及びルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）からなる群から選択され、金属放射性核種の同位体は金属の任意の酸化状態にあってよい。このような酸化状態としては、一価カチオン、二価カチオン、三価カチオン、四価カチオン、五価カチオン、六価カチオン及び七価カチオンが挙げられる。

【0069】

放射性核種を組み合わせることは、癌等の様々な疾患の監視／撮影と治療の同時実施、及び／又は、複数の異なる撮影方法を使用した監視に有用である。放射性核種及び放射性核種の組合せは、アルファ粒子、ベータ＋粒子、ベータ−粒子、オージェ電子又はガンマ線等の１種以上の放射線を放射し得る。また、放射性核種を組み合わせることにより、１種以上の撮影及び／又は放射線治療を行うことができる。従って、別の実施形態において、本発明は、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ストロンチウム（⁸⁹Ｓｒ）、サマリウム（¹⁵³Ｓｍ）、イッテルビウム（¹⁶⁹Ｙｂ）、タリウム（²⁰¹Ｔｌ）、アスタチン（²¹¹Ａｔ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択される２種以上の放射性核種を含み、金属放射性核種の同位体は金属の任意の酸化状態にあってよい、ベシクル及びその製造方法を提供する。このような酸化状態としては、一価カチオン、二価カチオン、三価カチオン、四価カチオン、五価カチオン、六価カチオン及び七価カチオンが挙げられる。本態様において、ベシクル形成成分、物質封入成分、ターゲティング化部分、サイズ、及びｐＨ特性を含むナノ粒子の諸特性並びにナノ粒子の使用は以下に記載するものと同様であり得る。

【0070】

本発明に係るベシクルは、撮影のための１種以上の放射性核種及び治療のための１種以上の放射性核種の組合せを含むことができる。撮影のための放射性核種は、⁶⁴Ｃｕ、⁶¹Ｃｕ、^99mＴｃ、⁶⁸Ｇａ、⁸⁹Ｚｒ及び¹¹¹Ｉｎ等の放射性核種を含む。

【0071】

治療のための放射性核種は、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ、¹¹¹Ｉｎ、⁶⁷Ｇａ、¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ、⁸⁹Ｓｒ、¹⁵³Ｓｍ、¹⁶⁹Ｙｂ、²⁰¹Ｔｌ、²¹¹Ａｔ、¹⁷⁷Ｌｕ、²²⁵Ａｃ、⁹⁰Ｙ、¹¹⁹Ｓｂ、¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ、¹⁵⁹Ｄｙ、⁵⁶Ｃｏ、⁵⁹Ｆｅ、⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ、¹⁰³Ｐｄ、¹¹⁵Ｃｄ、¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ、¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ、¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ、¹⁶⁰Ｔｂ、¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ、¹⁴⁰Ｌａ、²²³Ｒａ及び²²⁴Ｒａ等の放射性核種を含む。

【0072】

本発明の好適な実施形態は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ、⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ、²²⁵Ａｃ、⁹⁰Ｙ、¹⁷⁷Ｌｕ、¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ及び¹¹⁹Ｓｂからなる群から選択される２種以上の放射性核種を含むベシクル及びその製造方法に関する。

【0073】

本発明のさらに好適な実施形態は、⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕ、又は⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ、又は⁶¹Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ、又は⁶⁴Ｃｕ及び⁹⁰Ｙ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹¹⁹Ｓｂ、又は⁶⁴Ｃｕ及び²²⁵Ａｃ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹⁸⁸Ｒｅ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹⁸⁶Ｒｅ、又は⁶⁴Ｃｕ及び²¹¹Ａｔ、又は⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｇａ、又は⁶¹Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕ、又は⁶¹Ｃｕ及び⁹⁰Ｙ、又は⁶¹Ｃｕ及び¹¹⁹Ｓｂ、又は⁶¹Ｃｕ及び²²⁵Ａｃ、又は⁶¹Ｃｕ及び¹⁸⁸Ｒｅ、又は⁶¹Ｃｕ及び¹⁸⁶Ｒｅ、又は⁶¹Ｃｕ及び²¹¹Ａｔ、又は⁶¹Ｃｕ及び⁶⁷Ｇａ、又は⁶⁷Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕ、又は⁶⁷Ｃｕ及び⁹⁰Ｙ、又は⁶⁷Ｃｕ及び¹¹⁹Ｓｂ、又は⁶⁷Ｃｕ及び²²⁵Ａｃ、又は⁶⁷Ｃｕ及び¹⁸⁸Ｒｅ、又は⁶⁷Ｃｕ及び¹⁸⁶Ｒｅ、又は⁶⁷Ｃｕ及び²¹¹Ａｔ、又は⁶⁸Ｇａ及び¹⁷⁷Ｌｕ、又は⁶⁸Ｇａ及び⁹⁰Ｙ、又は⁶⁸Ｇａ及び¹¹⁹Ｓｂ、又は⁶⁸Ｇａ及び²²⁵Ａｃ、又は⁶⁸Ｇａ及び¹⁸⁸Ｒｅ、又は⁶⁸Ｇａ及び¹⁸⁶Ｒｅ、又は⁶⁸Ｇａ及び²¹¹Ａｔ、又は⁶⁸Ｇａ及び⁶⁷Ｃｕを含むベシクル及びその製造方法に関する。

【0074】

１種以上の放射性核種を含む本発明に係るベシクルは、臨床撮影及び／又は放射線治療に使用することができる。臨床撮影は、診断、治療効果の監視又は放射線治療に使用されるベシクルの位置の監視のための撮影を含む。

【0075】

本発明に係るベシクルは、１種以上の撮影に使用することができる。撮影の例としては、Ｘ線撮影、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）及び核シンチグラフィ挙げられる。

【0076】

好適な実施形態において、本発明に係るベシクルは、⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕ、又は⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ、又は⁶¹Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ、又は⁶⁴Ｃｕ及び⁹⁰Ｙ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹¹⁹Ｓｂ、又は⁶⁴Ｃｕ及び²²⁵Ａｃ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹⁸⁸Ｒｅ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹⁸⁶Ｒｅ、又は⁶⁴Ｃｕ及び²¹¹Ａｔ等の、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）及び放射線治療の組合せの実施に有用な放射性核種の組合せを含む。

【0077】

さらに好適な実施形態において、本発明に係るベシクルは、⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷等の、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）と放射線治療の組合せの実施に有用な放射性核種の組合せを含む。

【0078】

本発明によれば、ナノ粒子は、キレート剤等のリンカー分子を介してナノ粒子組成物の内表面又は外表面に結合していてもよい銅とは異なる１種以上の同位体を含むことができる。そのような同位体は、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（⁹⁹ｍＴｃ）、レニウム（¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ストロンチウム（⁸⁹Ｓｒ）、サマリウム（¹⁵³Ｓｍ）、イッテルビウム（¹⁶⁹Ｙｂ）、タリウム（²⁰¹Ｔｌ）、アスタチン（²¹¹Ａｔ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）、ラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）、レニウム（¹⁸⁶Ｒｅ）、ストロンチウム（⁸⁹Ｓｒ）、サマリウム（¹⁵³Ｓｍ）、イッテルビウム（¹⁶⁹Ｙｂ）、タリウム（²⁰¹Ｔｌ）及びアスタチン（²¹¹Ａｔ）からなる群から選択されてもよく、金属放射性核種の前記同位体は金属の任意の酸化状態にあってよい。このような酸化状態としては、一価カチオン、二価カチオン、三価カチオン、四価カチオン、五価カチオン、六価カチオン及び七価カチオンが挙げられる。本態様において、ベシクル形成成分、物質封入成分、ターゲティング化部分、サイズ、及びｐＨ特性を含むナノ粒子の諸特性並びにナノ粒子の使用は以下に記載するものと同様であり得る。

【0079】

本発明の別の実施形態において、放射性核種は、患者の癌性疾患（及び、一般的には血管の出血を伴う病理学的症状）又は他の疾患を診断及び／又は治療するために有用なナノ粒子等のもう一つ別の担体に封入されていてもよい。

【0080】

本発明に係るリポソーム組成物を製造するための代表的なベシクル形成成分、物質封入成分及びイオノフォアについて以下に詳細に説明する。

【0081】

ベシクル形成成分：
ベシクル形成成分は、親水性部分及び疎水性部分を含む合成又は天然両親媒性化合物である。ベシクル形成成分の例としては、脂肪酸、中性脂肪、ホスファチド、糖脂質、脂肪族アルコール及びステロイドが挙げられる。

【0082】

本発明に係るベシクル形成成分又は本発明に係る方法におけるベシクル形成成分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）成分もしくはその誘導体等の親水性ポリマー又は多糖を含むことができる。この場合、ベシクル形成成分は親水性ポリマー（ＰＥＧ等）又は多糖と共に誘導体化すると言う。一実施形態において、ポリマーは、それと共に誘導体化されるベシクル形成成分にタンパク質又は他の受容体親和性分子を結合させることを可能にする。別の実施形態において、リポソーム組成物へのポリマー（ＰＥＧ等）の結合によって血流中における循環時間が長くなる。ＰＥＧ鎖を表面に含むベシクルは、出血している血管から侵出すること（ｅｘｔｒａｖａｓａｔｉｎｇ）ができる。

【0083】

本発明において又は本発明に係る方法において使用される適当なベシクル形成脂質の例としては、１，２−ジオレオイルホスファチジルコリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルコリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルコリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルコリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルコリン等のホスファチジルコリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、１−ステアロイル２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、及びＮ−スクシニルジオレオイルホスファチジルエタノールアミン等のホスファチジルエタノールアミン；１，２−ジオレオイルホスファチジルセリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルセリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルセリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルセリン、１−パルミトイル２−オレオイルホスファチジルセリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルセリン等のホスファチジルセリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジミリストイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジステアロイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルグリセロール、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール等のホスファチジルグリセロール；ＰＥＧ化脂質；ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−１０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−３０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−５０００］等のＰＥＧ化リン脂質；Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）１０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）２０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）３０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）５０００］｝等のＰＥＧ化セラミド；リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジルセリン、セラミド；スフィンゴ脂質；ガングリオシドＧＭｌ等の糖脂質；グルコリピド；スルファチド；ジパルミトイルグリセロホスファチジン酸等のホスファチジン酸；パルミチン脂肪酸；ステアリン脂肪酸；アラキドン脂肪酸；ラウリン脂肪酸；ミリスチン脂肪酸；ラウロレイン脂肪酸；フィセテリン脂肪酸；ミリストレイン脂肪酸；パルミトレイン脂肪酸；ペトロセリン脂肪酸；オレイン脂肪酸；イソラウリン脂肪酸；イソミリスチン脂肪酸；イソステアリン脂肪酸；コレステロール、コレステロールヘミスクシネート、コレステロール硫酸、コレステリル−（４−トリメチルアンモニオ）ブタノエート、エルゴステロール、ラノステロール等のステロール及びステロール誘導体；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル及びポリオキシエチレン脂肪酸アルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸アルコールエーテル；ポリオキシエチレン付加ソルビタン脂肪酸エステル、グリセロールポリエチレングリコールオキシステアレート；グリセロールポリエチレングリコールリシノレート；エトキシル化大豆ステロール；エトキシル化ヒマシ油；ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン脂肪酸ポリマー；ポリオキシエチレン脂肪酸ステアレート；ジオレオイル−ｓｎ−グリセロール；ジパルミトイル−スクシニルグリセロール；１、３−ジパルミトイル−２−スクシニルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルグリセロール；Ｎ−スクシニルジオクタデシルアミン；パルミトイルホモシステイン；臭化ラウリルトリメチルアンモニウム；臭化セチルトリメチルアンモニウム；ミリスチルトリメチルアンモニウムブロミド；Ｎ−［（１，２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎトリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニウム）プロパン（ＤＯＴＡＰ）；１，２−ジオレオイル−ｃ−（４’−トリメチルアンモニウム）−ブタノイル−ｓｎ−グリセロール（ＤＯＴＢ）が挙げられる。

【0084】

一実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）、ＰＯＰＣ（１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ₂₀₀₀−ＴＡＴＥ、（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］−ＴＡＴＥ）からなる群から選択される化合物を含む。

【0085】

ナノ粒子組成物の一実施形態において、ベシクル形成成分は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）からなる群から選択される両親媒性化合物から構成される（モル比：５５：４０：５）。

【0086】

ナノ粒子組成物の別の実施形態において、ベシクル形成成分は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）（Ａ）、コレステロール（Ｂ）、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）（Ｃ）からなる群から選択される両親媒性化合物から構成され、それらのモル比はＡ：Ｂ：Ｃであり、ここで、Ａの範囲は４５〜６５、Ｂの範囲は３５〜４５、Ｃの範囲は２〜８であり、Ａ＋Ｂ＋Ｃ＝１００である。

【0087】

本願明細書に開示する方法の一実施形態において、ベシクル形成成分は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）からなる群から選択される両親媒性化合物から構成される（モル比：５５：４０：５）。

【0088】

本願明細書に開示する方法の別の実施形態において、ベシクル形成成分は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）（Ａ）、コレステロール（Ｂ）、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）（Ｃ）からなる群から選択される両親媒性化合物から構成され、それらのモル比はＡ：Ｂ：Ｃであり、ここで、Ａの範囲は４５〜６５であり、Ｂの範囲は３５〜４５であり、Ｃの範囲は２〜８であり、Ａ＋Ｂ＋Ｃ＝１００である。

【0089】

好適な実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）を５０：４０：１０のモル比で含む。

【0090】

別の好適な実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）を５５：４０：５のモル比で含む。

【0091】

本願明細書に開示する方法の別の実施形態において、ベシクル形成成分は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）（Ａ）、コレステロール（Ｂ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）（Ｃ）、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］−ＴＡＴＥ（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＴＡＴＥ）（Ｄ）からなる群から選択される両親媒性化合物から構成され、それらのモル比はＡ：Ｂ：Ｃ：Ｄであり、ここで、Ａの範囲は４５〜６５であり、Ｂの範囲は３５〜４５であり、Ｃの範囲は５〜１３であり、Ｄの範囲は０〜３であり、Ａ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＝１００である。

【0092】

好適な実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］−ＴＡＴＥ（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＴＡＴＥ）を５０：４０：９：１のモル比で含む。

【0093】

ベシクル形成成分は、ナノ粒子が標的分子を有する細胞に特異的に結合することを可能とするターゲティング化部分として作用する抗体、アフィボディ又はペプチドの脂質複合体をさらに含むことができる。

【0094】

ベシクル形成成分はまた、ナノ粒子が疾患標的（ｄｉｓｅａｓｅｄ ｔａｒｇｅｔ）に特異的に結合することを可能とするターゲティング化部分として作用する抗体、アフィボディ又はペプチドの脂質複合体を含み得る。

【0095】

本発明において有用な抗体は、単一特異性抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体又はより高次の多重特異性抗体であってもよい。例えば、多重特異性抗体は、正常な組織と比較して標的部位により多く存在する可能性のあるサイトカイン、細胞又は酵素の複数のエピトープに対して特異的であり得る。

【0096】

本願明細書において使用する「抗体」という用語は、エピトープに特異的に結合するタンパク質と定義される。抗体は、ポリクローナル抗体又はモノクローナル抗体であってもよい。本発明において有用なモノクローナル抗体は、例えば、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リンフォサイド（ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ）、ビタキシン、Ｌｙｍ−１及びベバシズマブからなる群から選択される。好適な実施形態において、モノクローナル抗体は、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リンフォサイド、ビタキシン、Ｌｙｍ−１及びベバシズマブからなる群から選択される。

【0097】

本願明細書において使用する「アフィボディ」という用語は、多くの標的タンパク質に特異的に結合するように設計することができる安定な抗原結合小分子と定義される。アフィボディ分子は、多くの点でモノクローナル抗体を模倣すると共に、いくつかのユニークな特性も提供するので、多くの用途においてより優れた選択肢となる。用途の例としては、血管新生又は炎症部位における組織もしくは細胞を標的とするリポソーム組成物にアフィボディを脂質複合体として導入すること（該リポソーム組成物は、診断及び／又は治療用途のために⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等の銅同位体等の放射性核種を含む）が挙げられる。本発明において有用なアフィボディ分子は、例えば、抗ＥｒｂＢ２アフィボディ分子及び抗フィブリノゲンアフィボディ分子からなる群から選択される。

【0098】

本発明において有用なぺプチドは、ナノ粒子が疾患標的に特異的に結合することを可能とするターゲティング化部分として作用し、ＲＧＤ、ソマトスタチン及びその類似体、並びに細胞透過性ペプチドからなる群から選択される。一実施形態において、ぺプチドは、ＲＧＤ、ソマトスタチン及びその類似体、並びに細胞透過性ペプチドからなる群から選択される。一実施形態において、ソマトスタチン類似体はオクトレオテート（ＴＡＴＥ）である。

【0099】

ベシクル形成成分は、所定の流動性又は剛性を達成し、生体内におけるリポソーム組成物の安定性を制御し、リポソーム組成物内の封入物質の放出速度を制御するように選択される。ベシクル形成成分によって決定されるリポソーム組成物の剛性は、標的細胞へのリポソームの融合又はエンドサイトーシスにおいても何らかの役割を果たす場合がある。

【0100】

物質封入成分：
本発明に係る物質封入成分又は本発明に係る方法における物質封入成分は、放射性核種等の遷移金属又は放射性標識物質と共にキレート錯体を形成するキレート剤であり得る。キレート剤の例としては、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（シクレン）及びその誘導体；１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏシクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−二酢酸（ＤＯ２Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及びその誘導体；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその誘導体；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）及びその誘導体、並びにその他のアダマンザン及びその誘導体が挙げられる。

【0101】

本発明に係る物質封入成分又は本発明に係る方法における物質封入成分は、他の物質を還元することができる物質（還元剤）であってもよい。還元剤の例としては、アスコルビン酸、グルコース、フルクトース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノース、麦芽糖、アセトールが挙げられる。本発明の一実施形態において、Ｃｕ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）カチオンであってもよい封入銅同位体は、ベシクル膜中を拡散する際により低い酸化状態に還元され、銅同位体がベシクル内にトラップされる。別の実施形態において、銅とは異なる放射性核種が、ベシクル膜中を拡散する際により低い酸化状態に還元され、銅とは異なる該放射性核種がベシクル内にトラップされる。

【0102】

本発明の又は本発明に係る方法の範囲に含まれる物質封入成分は、銅同位体等の放射性核種又は金属体と共に低溶解性塩を形成する物質であってもよい。そのような塩の例としては、リン酸銅、シュウ酸銅、塩化銅が挙げられる。一実施形態において、銅（Ｃｕ（ＩＩ）かＣｕ（Ｉ））と共に形成される低溶解性塩は、リン酸銅、シュウ酸銅、塩化銅からなる群から選択される。

【0103】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、物質封入成分は、アダマンザンを含む大環状化合物；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（［１２］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（［１４］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン（［１５］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，５，９，１３−テトラアザシクロヘキサデカン（［１６］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；並びにエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその誘導体、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びその誘導体等の金属イオンと結合することができるその他のキレート剤からなる群から選択されるキレート剤である。

【0104】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において，物質封入成分は、１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏ−シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体；２−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸（ＤＯ１Ａ）及びその誘導体；２，２’−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジイル）二酢酸（ＤＯ２Ａ）及びその誘導体；２，２’，２’’−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリイル）三酢酸（ＤＯ３Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）及びその誘導体；１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）及びその誘導体；２−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１−イル）酢酸（ＴＥ１Ａ）及びその誘導体；２，２’−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，８−ジイル）二酢酸（ＴＥ２Ａ）及びその誘導体；並びにその他のアダマンザン及びその誘導体からなる群から選択されるキレート剤である。

【0105】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）及びその誘導体、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、シクラム並びにシクレンからなる群から選択される。

【0106】

本発明の又は本発明に係る方法の好適な実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、シクラム並びにシクレンからなる群から選択される。本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体からなる群から選択される。

【0107】

本発明の又は本発明に係る方法の特に重要な実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）である。

【0108】

本発明の又は本発明に係る方法の特に重要な実施形態において、リポソーム組成物の内部ｐＨを制御して物質封入成分及び／又はイオノフォアを所望のプロトン化状態とし、放射性核種の効率的な封入を行う。本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子の内部ｐＨは１〜１０の範囲内、例えば１〜２、２〜３、３〜４、４〜５、５〜６、６〜７、７〜８、８〜９又は９〜１０である。本発明の又は本発明に係る方法の好適な実施形態において、ナノ粒子の内部ｐＨは３〜８の範囲内、例えば３．０〜３．５、３．５〜４．０、４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５又は５．５〜６．０である。

【0109】

別の好適な実施形態において、ナノ粒子の内部ｐＨは３〜８の範囲内、例えば３．０〜３．５、３．５〜４．０、４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５、５．５〜６．０、６．０〜６．５、６．５〜７．０、７．０〜７．５又は７．５〜８である。

【0110】

イオノフォア：
本発明に係るイオノフォア又は本発明に係る方法におけるイオノフォアは、放射性核種又は金属体と共に錯体を形成し、その錯体を二重層を通して輸送することができる脂質可溶性分子である。本発明において、イオノフォアは放射性核種と共に錯体を形成し、放射性標識錯体をリポソーム脂質二重層を通して輸送する。本発明に係るイオノフォア又は本発明に係る方法におけるイオノフォアの例としては、２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル）（図１Ａ）及びキノリン（Ｃ₉Ｈ₇Ｎ）全般（図１Ｂ）、例えば２−ヒドロキシキノリン−４−カルボン酸；６−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；８−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；カルボスチリル１２４；カルボスチリル１６５；４，６−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン；４，８−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン；その他の２−キノリノール化合物；図１に示すその他の化合物、好ましくは図２に示す化合物が挙げられる。イオノフォアの例としては、Ｒ、又はＲ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆が、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい図１及び図２に示す化合物も挙げられる。

【0111】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0112】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘはヒドロキシ（ＯＨ）であり、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0113】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁は水素（Ｈ）であり、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0114】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁及びＲ₂は水素（Ｈ）であり、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0115】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂及びＲ₃は水素（Ｈ）であり、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0116】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃及びＲ₄は水素（Ｈ）であり、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0117】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅は水素（Ｈ）であり、Ｒ₆は、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表す。

【0118】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0119】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0120】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びカルボキシ（ＣＯＯＨ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0121】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）及びスルフヒドリル（ＳＨ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0122】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図２に示す化合物であり、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）及びエチル（Ｃ₂Ｈ₅）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0123】

本発明の又は本発明に係る方法の好適な実施形態において、イオノフォアは、２−ヒドロキシキノリン、２−ヒドロキシキノリン−４−カルボン酸；６−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；８−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；カルボスチリル１２４；カルボスチリル１６５；４，６−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン；４，８−ジメチル−２−ヒドロキシキノリンからなる群から選択される。

【0124】

図３（好ましくは図４）は本発明において又は本発明に係る方法において使用される他のイオノフォアを示しており、図３（好ましくは図４）に示す化合物の例としては、８−ヒドロキシキノリン（オキシン）；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルコピラノシド；８−ヒドロキシキノリングルクロニド；８−ヒドロキシキノリン−５−スルホン酸；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルクロニドナトリウム塩；８−キノリノールヘミ硫酸塩；８−キノリノールＮ−オキシド；２−アミノ−８−キノリノール；５，７−ジブロモ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジヨード−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジメチル−８−キノリノール；５−アミノ−８−ヒドロキシキノリン二塩酸塩；５−クロロ−８−キノリノール；５−ニトロ−８−ヒドロキシキノリン；７−ブロモ−５−クロロ−８−キノリノール；Ｎ−ブチル−２，２’−イミノ−ジ（８−キノリノール）；８−ヒドロキシキノリン安息香酸；２−ベンジル−８−ヒドロキシキノリン；５−クロロ−８−ヒドロキシキノリン塩酸；２−メチル−８−キノリノール；５−クロロ−７−ヨード−８−キノリノール；８−ヒドロキシ−５−ニトロキノリン；８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシ−２−メチルキノリン、その他のキノリン系化合物及びその誘導体、並びにその他のイオノフォアが挙げられる。

【0125】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択され、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0126】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙはヒドロキシ（ＯＨ）であり、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択され、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0127】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇は水素（Ｈ）を表し、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択され、Ｒ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0128】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇及びＲ₈は水素（Ｈ）を表し、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択され、Ｒ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0129】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉は水素（Ｈ）を表し、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択され、Ｒ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0130】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉及びＲ₁₀は水素（Ｈ）を表し、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択され、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0131】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀及びＲ₁₁は水素（Ｈ）を表し、Ｒ₁₂は、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される。

【0132】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択され、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0133】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0134】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びカルボキシ（ＣＯＯＨ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0135】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、ヒドロキシ（ＯＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）及びスルフヒドリル（ＳＨ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0136】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは図４に示す化合物であり、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びアミノ（ＮＨ₂）からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）及びヒドロキシ（ＯＨ）からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。

【0137】

本発明の又は本発明に係る方法の好適な実施形態において、イオノフォアは、８−ヒドロキシキノリン（オキシン）；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルコピラノシド；８−ヒドロキシキノリングルクロニド；８−ヒドロキシキノリン−５−スルホン酸；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルクロニドナトリウム塩；８−キノリノールヘミ硫酸塩；８−キノリノールＮ−オキシド；２−アミノ−８−キノリノール；５，７−ジブロモ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジヨード−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジメチル−８−キノリノール；５−アミノ−８−ヒドロキシキノリン二塩酸塩；５−クロロ−８−キノリノール；５−ニトロ−８−ヒドロキシキノリン；７−ブロモ−５−クロロ−８−キノリノール；Ｎ−ブチル−２，２’−イミノ−ジ（８−キノリノール）；８−ヒドロキシキノリン安息香酸；２−ベンジル−８−ヒドロキシキノリン；５−クロロ−８−ヒドロキシキノリン塩酸；２−メチル−８−キノリノール；５−クロロ−７−ヨード−８−キノリノール；８−ヒドロキシ−５−ニトロキノリン；８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシ−２−メチルキノリンからなる群から選択される。

【0138】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、イオノフォアは、Ａ２３１８７、ヘキサメチルプロピレンアミンオキシム（ＨＭＰＡＯ）及びその誘導体、ジイソプロピルイミノ二酢酸（ＤＩＳＩＤＡ）及びその誘導体、フタルジアルデヒド及びその誘導体、２，４−ジニトロフェノール及びその誘導体、ボーベリシン及びその誘導体、ジベンゾ−１８−クラウン−６及びその誘導体、ｏ−キシリレンビス（Ｎ，Ｎ−ジイソブチルジチオカーバメイト）及びその誘導体、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラシクロヘキシル−２，２’−チオジアセトアミド及びその誘導体、２−（１，４，８，１１−テトラチアシクロテトラデカ−６−イルオキシ）ヘキサン酸、２−（３，６，１０，１３−テトラチアシクロテトラデカ−１−オキシ）ヘキサン酸及びその誘導体、Ｎ，Ｎ−ビス（２−メルカプトエチル）−Ｎ’，Ｎ’−ジエチルエチレンジアミン及びその誘導体からなる群から選択される。

【0139】

本発明の好適な実施形態において、イオノフォアはカルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、２ＨＱ）である。

【0140】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子に銅同位体を封入し、銅同位体を封入したナノ粒子を精製した後に、該ナノ粒子組成物は測定可能な量のイオノフォアを含む。

【0141】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子に銅同位体を封入し、銅同位体を封入したナノ粒子を精製した後に、該ナノ粒子組成物はわずかな量のイオノフォアしか含まない。

【0142】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子に銅同位体を封入し、銅同位体を封入したナノ粒子を精製した後に、該ナノ粒子組成物は測定可能な量のイオノフォアを含まない。

【0143】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子に放射性核種を封入し、放射性核種を封入したナノ粒子を精製した後に、該ナノ粒子組成物は測定可能な量のイオノフォアを含む。

【0144】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子に放射性核種を封入し、放射性核種を封入したナノ粒子を精製した後に、該ナノ粒子組成物はわずかな量のイオノフォアしか含まない。

【0145】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子に放射性核種を封入し、放射性核種を封入したナノ粒子を精製した後に、該ナノ粒子組成物は測定可能な量のイオノフォアを含まない。

【0146】

本発明の又は本発明に係る銅同位体を封入したナノ粒子組成物の製造方法の一実施形態において、物質封入成分はキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、イオノフォアからキレート剤への銅の移動反応は、ΔＧ°＜０（ΔＧ°は交換の標準ギブズ自由エネルギーである）である場合は生得的に（ｉｎｈｅｒｅｎｔｌｙ）自発的なものとなるし、又はナノ粒子組成物内におけるキレート剤が高濃度の場合にも自発的に起こる。

【0147】

本発明の又は本発明に係る放射性核種を封入したナノ粒子組成物の製造方法の一実施形態において、物質封入成分はキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、イオノフォアからキレート剤への放射性核種の移動反応は、ΔＧ°＜０（ΔＧ°は交換の標準ギブズ自由エネルギーである）である場合は生得的に自発的なものとなるし、又はナノ粒子組成物内におけるキレート剤が高濃度の場合にも自発的に起こる。

【0148】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、本願明細書に開示する方法によって生成した放射性標識ナノ粒子は、３７℃の緩衝液又はヒト血清中で２４時間インキュベートした後に漏出した放射性核種と放射性標識ナノ粒子とを分離するための精製を行って見出される放射能の漏出率が、２０％未満、例えば１５％未満、１２％未満、１０％未満、８％未満、６％未満、４％未満、３％未満、２％未満又は１％未満であるという安定性を有する。前記精製は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を含む。

【0149】

本発明に係る銅同位体を封入したナノ粒子組成物の製造方法の一実施形態において、物質封入化合物はキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、イオノフォアのキレート剤に対するモル比は、１：１〜１：１０，０００，０００の範囲内、例えば、１：５、１：１０、１：５０、１：１００、１：２５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１０，０００、１：５０，０００、１：１００，０００、１：５００，０００、１：１，０００，０００、１：５，０００，０００又は１：１０，０００，０００である。

【0150】

式Ａで示されるイオノフォアを使用する本発明に係る放射性核種を封入したナノ粒子組成物の製造方法の一実施形態において、物質封入化合物はキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、イオノフォアのキレート剤に対するモル比は、１：１〜１：１０，０００，０００の範囲内、例えば、１：５、１：１０、１：５０、１：１００、１：２５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１０，０００、１：５０，０００、１：１００，０００、１：５００，０００、１：１，０００，０００、１：５，０００，０００又は１：１０，０００，０００である。

【0151】

本発明の一実施形態又は本発明に係る銅同位体を封入したナノ粒子組成物の製造方法の一実施形態では、ナノ粒子の合成時に、ナノ粒子の内部ｐＨが４〜５となるように内部ｐＨを制御する。本発明に係る銅同位体を封入したナノ粒子組成物の製造方法の別の実施形態では、ナノ粒子の合成時に、ナノ粒子の内部ｐＨが１〜１０の範囲内、例えば１〜２、２〜３、３〜４、４〜５、５〜６、６〜７、７〜８、８〜９又は９〜１０となるように内部ｐＨを制御する。

【0152】

式Ａで示されるイオノフォアを使用する本発明の又は本発明に係る放射性核種を封入したナノ粒子組成物の製造方法の一実施形態では、ナノ粒子の合成時に、ナノ粒子の内部ｐＨが４〜５となるように内部ｐＨを制御する。本発明に係る放射性核種を封入したナノ粒子組成物の製造方法の別の実施形態では、ナノ粒子の合成時に、ナノ粒子の内部ｐＨが１〜１０の範囲内、例えば１〜２、２〜３、３〜４、４〜５、５〜６、６〜７、７〜８、８〜９又は９〜１０となるように内部ｐＨを制御する。

【0153】

本発明の好適な実施形態において、ナノ粒子の内部ｐＨは３〜８の範囲内、例えば３．０〜３．５、３．５〜４．０、４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５、５．５〜６．０、６．０〜６．５、６．５〜７．０、７．０〜７．５又は７．５〜８である。

【0154】

一実施形態において、本願明細書に開示する銅を封入したナノ粒子の製造方法により、１２０ｎｍ未満の直径を有するナノ粒子が得られる。

【0155】

一実施形態において、本願明細書に開示する放射性核種を封入したナノ粒子の製造方法により、１２０ｎｍ未満の直径を有するナノ粒子が得られる。

【0156】

別の実施形態において、本願明細書に開示する銅を封入したナノ粒子の製造方法により、８０ｎｍを超える直径を有するナノ粒子が得られる。

【0157】

別の実施形態において、本願明細書に開示する放射性核種を封入したナノ粒子の製造方法により、８０ｎｍを超える直径を有するナノ粒子が得られる。

【0158】

好適な実施形態において、本願明細書に開示する銅を封入したナノ粒子の製造方法により、３０〜３００ｎｍの範囲内、例えば３０〜６０ｎｍ、６０〜８０ｎｍ、８０〜１００ｎｍ、１００〜１２０ｎｍ、１２０〜１５０ｎｍ、１５０〜１８０ｎｍ、１８０〜２１０ｎｍ、２１０〜２４０ｎｍ、２４０〜２７０ｎｍ又は２７０〜３００ｎｍの直径を有するナノ粒子が得られる。

【0159】

好適な実施形態において、本願明細書に開示する放射性核種を封入したナノ粒子の製造方法により、３０〜３００ｎｍの範囲内、例えば３０〜６０ｎｍ、６０〜８０ｎｍ、８０〜１００ｎｍ、１００〜１２０ｎｍ、１２０〜１５０ｎｍ、１５０〜１８０ｎｍ、１８０〜２１０ｎｍ、２１０〜２４０ｎｍ、２４０〜２７０ｎｍ又は２７０〜３００ｎｍの直径を有するナノ粒子が得られる。

【0160】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ（実施例を参照））、イオン交換クロマトグラフィー又は透析によって測定した封入効率は９０％を超える。本発明に係る方法の別の実施形態において、封入効率は、３５％を超え、例えば４０％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％を超える。

【0161】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、銅を封入したナノ粒子をＳＥＣ、イオン交換クロマトグラフィー又は透析によって精製する。

【0162】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態において、放射性核種を封入したナノ粒子をＳＥＣ、イオン交換クロマトグラフィー又は透析によって精製する。

【0163】

本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子への銅の封入によってナノ粒子組成物のサイズは実質的に変化しない。本発明に係る方法の別の実施形態において、ナノ粒子への銅同位体の封入によるナノ粒子組成物のサイズの変化は、２０％未満、例えば１７％未満、１４％未満、１１％未満、８％未満、５％未満、２％未満又は１％未満である。

【0164】

本発明に係る方法の一実施形態において、ナノ粒子への放射性核種の封入によってナノ粒子組成物のサイズは実質的に変化しない。本発明に係る方法の別の実施形態において、ナノ粒子への放射性核種の封入によるナノ粒子組成物のサイズの変化は、２０％未満、例えば１７％未満、１４％未満、１１％未満、８％未満、５％未満、２％未満又は１％未満である。

【0165】

本発明に係る方法の別の実施形態において、ナノ粒子への銅同位体の封入によるゼータ電位の変化は２０％未満である。本発明に係る方法の別の実施形態において、ナノ粒子への銅同位体の封入によるゼータ電位の変化は、１８％未満、例えば１６％未満、１４％未満、１２％未満又は１０％未満である。

【0166】

本発明に係る方法の別の実施形態において、ナノ粒子への放射性核種の封入によるゼータ電位の変化は２０％未満である。本発明に係る方法の別の実施形態において、ナノ粒子への放射性核種の封入によるゼータ電位の変化は、１８％未満、例えば１６％未満、１４％未満、１２％未満又は１０％未満である。

【0167】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態は、本願明細書に開示する方法によって生成したナノ粒子を診断又は治療に使用することをさらに含む。

【0168】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態は、本願明細書に開示する方法によって生成したナノ粒子を静脈内投与することをさらに含む。

【0169】

本発明の又は本発明に係る方法の一実施形態は、本願明細書に開示する方法によって生成したナノ粒子を経口投与することをさらに含む。

【0170】

キット（Ｋｉｔ ｏｆ ｐａｒｔｓ）
別の態様において、本発明は、
ａ．ｉ）ベシクル形成成分と、ｉｉ）ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．イオノフォアを含む組成物と、
ｃ．放射性核種であってもなくてもよい銅同位体を含む組成物と、を含み、
各成分は、「発明の概要」又は「発明を実施するための形態」の部分に記載された成分であるキットに関する。

【0171】

キットの一実施形態において、放射性核種であってもなくてもよい銅同位体はパーツｂに含まれ、すなわちこの場合キットは、
ａ．ｉ）ベシクル形成成分と、ｉｉ）ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．ｉｉｉ）イオノフォアと、ｉｖ）銅同位体と、を含む組成物と、を含み、
各成分は、「発明の概要」又は「発明を実施するための形態」の部分に記載された成分である。

【0172】

キットの別の実施形態において、放射性核種であってもなくてもよい銅同位体はパーツａに含まれ、すなわちこの場合キットは、
ａ．ｉ）ベシクル形成成分と、ｉｉ）ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、ｉｉｉ）銅同位体と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．イオノフォアを含む組成物と、を含み、
各成分は、「発明の概要」又は「発明を実施するための形態」の部分に記載された成分である。

【0173】

キットの別の実施形態において、パーツａはベシクル形成成分と物質封入成分に加えてイオノフォアを含み、すなわちこの場合キットは、
ａ．ｉ）ベシクル形成成分と、ｉｉ）ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、ｉｉｉ）イオノフォアと、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．銅同位体を含む組成物と、を含み、
各成分は、「発明の概要」又は「発明を実施するための形態」の部分に記載された成分である。

【0174】

キットの別の実施形態において、キットは同位体を含むナノ粒子を製造するためのものであり、前記同位体はキットとは別個に提供される。従って、この場合キットは、
ａ．ｉ）ベシクル形成成分と、ｉｉ）ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．イオノフォア組成物と、を含み、
各成分は、「発明の概要」又は「発明を実施するための形態」の部分に記載された成分である。

【0175】

一実施形態において、放射性核種を含む組成物は、放射性核種の特性に応じて、貯蔵される場合もあるし、そのつど製造者から供給される場合もある。放射性核種が例えば陽電子放射の⁶⁴Ｃｕである場合には、放射性核種は（凍結乾燥された）塩又は水溶液の形で、使用直前にサイクロトロン施設から治療又は診断場所に直接供給される。放射性核種を含むナノ粒子の投与前に、キットのパーツａ、ｂ及びｃを混合し、好ましくはキットと共に供給された簡単な試験手順を使用して封入効率の試験を行う。投与後に、患者に対してＰＥＴ又はＳＰＥＣＴスキャンを行うことができる。最適な可視化は、投与から４〜２４時間後に達成され得る。

【0176】

本発明のキットに含まれ得る銅同位体は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕを含む。

【0177】

本願明細書に開示するキットの一実施形態では、イオノフォアは式Ａで示され、該キットは、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ストロンチウム（⁸⁹Ｓｒ）、サマリウム（¹⁵³Ｓｍ）、イッテルビウム（¹⁶⁹Ｙｂ）、タリウム（²⁰¹Ｔｌ）、アスタチン（²¹¹Ａｔ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択される放射性核種の組合せを含む。

【0178】

本願明細書に開示するキットの別の実施形態では、イオノフォアは式Ａ（式Ａの好適な実施形態を含む）で示され、銅とは異なる放射性核種が使用され、該放射性核種は、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択される。放射性核種は、（凍結乾燥された）塩又は水溶液として供給を受けるか、又は、既存の生産設備及び出発材料を使用して合成することができる。放射性核種を含むナノ粒子の投与前に、キットのパーツａ、ｂ及びｃを混合し、好ましくはキットと共に供給された簡単な試験手順を使用して封入効率の試験を行う。封入試験後、該医薬を患者に投与する。

【0179】

本願明細書に開示するキットの別の実施形態では、イオノフォアは式Ａで示され、銅とは異なる放射性核種が使用され、該放射性核種は、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）及びルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）からなる群から選択される。放射性核種は、（凍結乾燥された）塩又は水溶液として供給を受けるか、又は、既存の生産設備及び出発材料を使用して合成することができる。放射性核種を含むナノ粒子の投与前に、キットのパーツａ、ｂ及びｃを混合し、好ましくはキットと共に供給された簡単な試験手順を使用して封入効率の試験を行う。封入試験後、該医薬を患者に投与する。

【0180】

本願明細書に開示するキットの好適な実施形態では、イオノフォアは式Ａで示され、該キットは、⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕ、又は⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ、又は⁶¹Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ、又は⁶⁴Ｃｕ及び⁹⁰Ｙ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹¹⁹Ｓｂ、又は⁶⁴Ｃｕ及び²²⁵Ａｃ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹⁸⁸Ｒｅ、又は⁶⁴Ｃｕ及び¹⁸⁶Ｒｅ、又は⁶⁴Ｃｕ及び²¹¹Ａｔ等の、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）及び放射線治療の組合せの実施に有用な放射性核種の組合せを含む。

【0181】

本願明細書に開示するキットのさらに好適な実施形態では、イオノフォアは式Ａで示され、該キットは、⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷等の、ポジトロン断層法（ＰＥＴ）及び放射線治療の組合せの実施に有用な放射性核種の組合せを含む。

【0182】

本願明細書に開示するキットの一実施形態では、イオノフォアはカルボスチリル（２ＨＱ）であり、該キットは、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ストロンチウム（⁸⁹Ｓｒ）、サマリウム（¹⁵³Ｓｍ）、イッテルビウム（¹⁶⁹Ｙｂ）、タリウム（²⁰¹Ｔｌ）、アスタチン（²¹¹Ａｔ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択される同位体を含むナノ粒子を製造するためのものであり、前記同位体は、キットの一部であってもなくてもよい。

【0183】

本願明細書に開示するキットの一実施形態では、イオノフォアは本発明に係るイオノフォアのいずれかであり、該キットは銅同位体（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）を含むナノ粒子を製造するためのものであり、前記同位体は、キットの一部であってもなくてもよい。

【0184】

好適な実施形態において、キットは、封入効率を評価するための試験手順をさらに含む。

【0185】

ナノ粒子組成物
一態様において、本発明は、ベシクル形成成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、ナノ粒子組成物内に封入された放射性標識物質と、を含む放射性標識ナノ粒子組成物に関し、ここで、放射性標識物質は銅同位体を含む。

【0186】

放射性標識ナノ粒子組成物は、標的分子を有する標的細胞に特異的に結合することを可能とするターゲティング化部分、又は疾患標的に特異的に結合する部分をさらに含むことができる。ターゲティング化部分は、脂質アンカー分子又はＰＥＧ複合脂質成分を介してナノ粒子組成物の表面に結合させ得る。

【0187】

本発明の実施形態において、放射性標識ナノ粒子組成物の表面に結合したターゲティング化部分は、例えば、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リンフォサイド、ビタキシン、Ｌｙｍ−１及びベバシズマブ等の抗体、抗ＥｒｂＢ２アフィボディ分子及び抗フィブリノゲンアフィボディ分子等のアフィボディ、ＲＧＤ、ソマトスタチン又はその類似体及び細胞透過性ペプチド等のペプチド、からなる群から選択される抗体、アフィボディ又はペプチド成分であってもよい。好適な実施形態において、ターゲティング化部分は、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リンフォサイド、ビタキシン、Ｌｙｍ−１、ベバシズマブ、抗ＥｒｂＢ２アフィボディ分子、抗フィブリノゲンアフィボディ分子、ＲＧＤ、ソマトスタチン又はその類似体及び細胞透過性ペプチドからなる群から選択される。本発明の一実施形態において、ソマトスタチンはオクトレオテート（ＴＡＴＥ）である。

【0188】

放射性標識ナノ粒子組成物のベシクル形成成分は、両親媒性成分もしくはその誘導体、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）もしくはその誘導体、又は多糖を含む。放射性標識ナノ粒子組成物はさらに、例えば、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（シクレン）及びその誘導体；１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏシクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−二酢酸（ＤＯ２Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及びその誘導体；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその誘導体；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）及びその誘導体、並びにその他のアダマンザン及びその誘導体、からなる群から選択されるキレート剤を含む物質封入成分を含む。別の実施形態において、放射性標識ナノ粒子組成物は、アスコルビン酸、グルコース、フルクトース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノース、麦芽糖、アセトール、又は銅イオンと共に低溶解性塩を形成する物質（リン酸、シュウ酸、塩化物）等の物質封入成分を含むことができる。

【0189】

放射性標識ナノ粒子組成物は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等からなる群から選択される銅同位体を含む放射性標識物質を含むことができる。

【0190】

好適な実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（シクレン）及びその誘導体；１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏシクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−二酢酸（ＤＯ２Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及びその誘導体；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその誘導体；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）及びその誘導体、並びにその他のアダマンザン及びその誘導体からなる群から選択される。

【0191】

放射性標識ナノ粒子組成物は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される銅同位体を含む放射性標識物質を含むことができる。

【0192】

本発明の好適な実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、シクラム及びシクレンからなる群から選択されるキレート剤である。

【0193】

本発明の放射性標識ナノ粒子組成物に含まれるベシクル形成成分は、親水性構成要素及び疎水性構成要素を含む合成又は天然の両親媒性化合物である。ベシクル形成成分の例としては、脂肪酸、中性脂肪、ホスファチド、糖脂質、脂肪族アルコール及びステロイドが挙げられる。本発明において又は本発明に係る方法において使用される適当なベシクル形成脂質の例としては、１，２−ジオレオイルホスファチジルコリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルコリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルコリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルコリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルコリン等のホスファチジルコリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、１−ステアロイル２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、及びＮ−スクシニルジオレオイルホスファチジルエタノールアミン等のホスファチジルエタノールアミン；１，２−ジオレオイルホスファチジルセリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルセリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルセリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルセリン、１−パルミトイル２−オレオイルホスファチジルセリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルセリン等のホスファチジルセリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジミリストイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジステアロイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルグリセロール、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール、１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール等のホスファチジルグリセロール；ＰＥＧ化脂質；ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−１０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−３０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−５０００］等のＰＥＧ化リン脂質；Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）１０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）２０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）３０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）５０００］｝等のＰＥＧ化セラミド；リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジルセリン、セラミド；スフィンゴ脂質；ガングリオシドＧＭｌ等の糖脂質；グルコリピド；スルファチド；ジパルミトイルグリセロホスファチジン酸等のホスファチジン酸；パルミチン脂肪酸；ステアリン脂肪酸；アラキドン脂肪酸；ラウリン脂肪酸；ミリスチン脂肪酸；ラウロレイン脂肪酸；フィセテリン脂肪酸；ミリストレイン脂肪酸；パルミトレイン脂肪酸；ペトロセリン脂肪酸；オレイン脂肪酸；イソラウリン脂肪酸；イソミリスチン脂肪酸；イソステアリン脂肪酸；コレステロール、コレステロールヘミスクシネート、コレステロール硫酸、コレステリル−（４−トリメチルアンモニオ）ブタノエート、エルゴステロール、ラノステロール等のステロール及びステロール誘導体；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸アルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸アルコールエーテル；ポリオキシエチレン付加ソルビタン脂肪酸エステル、グリセロールポリエチレングリコールオキシステアレート；グリセロールポリエチレングリコールリシノレート；エトキシル化大豆ステロール；エトキシル化ヒマシ油；ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン脂肪酸ポリマー；ポリオキシエチレン脂肪酸ステアレート；ジオレオイル−ｓｎ−グリセロール；ジパルミトイル−スクシニルグリセロール；１、３−ジパルミトイル−２−スクシニルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルグリセロール；Ｎ−スクシニルジオクタデシルアミン；パルミトイルホモシステイン；臭化ラウリルトリメチルアンモニウム；臭化セチルトリメチルアンモニウム；ミリスチルトリメチルアンモニウムブロミド；Ｎ−［（１，２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎトリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニウム）プロパン（ＤＯＴＡＰ）；１，２−ジオレオイル−ｃ−（４’−トリメチルアンモニウム）−ブタノイル−ｓｎ−グリセロール（ＤＯＴＢ）が挙げられる。

【0194】

一実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）、ＰＯＰＣ（１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ₂₀₀₀−ＴＡＴＥ、（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］−ＴＡＴＥ）からなる群から選択される化合物を含む。

【0195】

好適な実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）を５０：４０：１０のモル比で含む。

【0196】

別の好適な実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）を５５：４０：５のモル比で含む。

【0197】

本願明細書に開示する方法の別の実施形態において、ベシクル形成成分は、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）（Ａ）、コレステロール（Ｂ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）（Ｃ）、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］−ＴＡＴＥ（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＴＡＴＥ）（Ｄ）からなる群から選択される両親媒性化合物から構成され、それらのモル比はＡ：Ｂ：Ｃ：Ｄであり、ここで、Ａの範囲は４５〜６５であり、Ｂの範囲は３５〜４５であり、Ｃの範囲は５〜１３であり、Ｄの範囲は０〜３であり、Ａ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＝１００である。

【0198】

好適な実施形態において、ベシクル形成成分は、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＣＨＯＬ（コレステロール）、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］）、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］−ＴＡＴＥ（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００−ＴＡＴＥ）を５０：４０：９：１のモル比で含む。

【0199】

本発明に係るキットの別の実施形態において、イオノフォアは、放射性核種又は金属体と錯体を形成し、前記錯体を二重層を通して輸送することができる化合物として定義される任意のイオノフォアであり、１種以上の放射性核種は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる銅同位体群から選択され、同位体は、キットの一部であってもいいしキットとは別であってもよい。

【0200】

本発明の一実施形態において、キットは、８−ヒドロキシキノリン、２−ヒドロキシキノリン、２−ヒドロキシキノリン−４−カルボン酸；６−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；８−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；カルボスチリル１２４；カルボスチリル１６５；４，６−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン；４，８−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン、Ａ２３１８７、ヘキサメチルプロピレンアミンオキシム（ＨＭＰＡＯ）、ジイソプロピルイミノ二酢酸（ＤＩＳＩＤＡ）、フタルジアルデヒド及びその誘導体、２，４−ジニトロフェノール及びその誘導体、ボーベリシン及びその誘導体、ジベンゾ−１８−クラウン−６及びその誘導体、ｏ−キシリレンビス（Ｎ、Ｎ−ジイソブチルジチオカーバメイト）及びその誘導体、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラシクロヘキシル−２，２’−チオジアセトアミド及びその誘導体、２−（１，４，８，１１−テトラチアシクロテトラデカ−６−イルオキシ）ヘキサン酸、２−（３，６，１０，１３−テトラチアシクロテトラデカ−１−オキシ）ヘキサン酸及びその誘導体、Ｎ，Ｎ−ビス（２−メルカプトエチル）−Ｎ’，Ｎ’−ジエチルエチレンジアミン及びその誘導体からなる群から選択されるイオノフォアを含む。

【0201】

本発明の好適な実施形態において、キットはカルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、２ＨＱ）をイオノフォアとして含む。

【0202】

本願明細書に開示するキットの一実施形態において、イオノフォアはカルボスチリル（２ＨＱ）であり、該キットは、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ）からなる群から選択される放射性核種の組合せを含む。

【0203】

一実施形態において、本発明に係る放射性標識ナノ粒子組成物は３０〜３００ｎｍの平均粒径を有する。

【0204】

一実施形態において、物質封入成分のプロトン化又は脱プロトン化によって放射性標識ナノ粒子組成物の内部ｐＨを制御して放射性核種の効率的な封入を行うことができる。

【0205】

本発明の一実施形態では、放射性標識ナノ粒子組成物は、物質封入成分に結合しナノ粒子組成物内に封入された核局在配列ペプチド（ＮＬＳペプチド）等の、細胞内ターゲティング特性を有する化合物をさらに含む。

【0206】

製造方法
本発明の第２の態様は、放射性核種及び／又は金属体が封入されたナノ粒子組成物の製造方法を提供する。本発明に係る方法は、ベシクル形成成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、膜を通して放射性核種及び／又は金属体を輸送し、ナノ粒子組成物内に放射性標識物質を封入するための成分と、を含むナノ粒子組成物を製造する。

【0207】

本発明の第２の態様の一実施形態において、両親媒性成分もしくはその誘導体、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）もしくはその誘導体、又は多糖を含むナノ粒子組成物の製造方法を開示する。前記方法によって得られるナノ粒子組成物は、例えば、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（シクレン）及びその誘導体；１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏシクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−二酢酸（ＤＯ２Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及びその誘導体；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその誘導体；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）及びその誘導体並びにその他のアダマンザン及びその誘導体からなる群から選択されるキレート剤である物質封入成分を含むことができる。本発明の別の実施形態において、ナノ粒子組成物は、アスコルビン酸、グルコース、フルクトース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノース、麦芽糖、もしくはアセトール等の還元成分、又は銅イオンと共に低溶解性塩（リン酸塩、シュウ酸塩、塩化物等）を形成する物質を含むことができる。ナノ粒子組成物は、錯体を二重層を通して輸送することができるイオノフォア化合物と錯体を形成する放射性核種である放射性標識物質を含む。一実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（シクレン）及びその誘導体；１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）及びその誘導体；１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏシクラム）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−二酢酸（ＤＯ２Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）及びその誘導体；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）及びその誘導体；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びその誘導体；ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）及びその誘導体；１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）及びその誘導体、並びにその他のアダマンザン及びその誘導体からなる群から選択される。

【0208】

本発明の好適な実施形態において、物質封入成分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、シクラム及びシクレンからなる群から選択されるキレート剤である。

【0209】

ナノ粒子組成物の製造方法の別の実施形態において、ナノ粒子組成物には、二重層を通して金属イオンを輸送することができるできるイオノフォア化合物を含む放射性核種及び／又は金属イオンが封入される。イオノフォア化合物は、２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル）、２−ヒドロキシキノリン−４−カルボン酸；６−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；８−クロロ−２−ヒドロキシキノリン；カルボスチリル１２４；カルボスチリル１６５；４，６−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン；４，８−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン；１−シアノ−１，２−ジヒドロ−２−ヒドロキシキノリン及びその他の２−キノリノール化合物からなる群から選択されてもよい。下記化１のＡ及びＢは、放射性核種（特に銅同位体）をナノ粒子に封入するために使用することができる本発明に係るイオノフォアである。Ｒは、例えば、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、炭素鎖（Ｈ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖）、ＯＨ、Ｏ−Ｚ（式中、ＺはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖である）、Ｓ−Ｈ、Ｓ−Ｚ、Ｓｅ−Ｈ、Ｓｅ−Ｚ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｚ又はＮ−Ｚ₂を表す。Ｘは、例えば、ＳＨ、ＳｅＨ、Ｏ−Ｙ（式中、ＹはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₈炭素鎖である）、Ｓ−Ｙ、ＳｅＹ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｙ、Ｎ−Ｙ₂を表す。

【化1】

【0210】

本願明細書に開示するナノ粒子組成物の製造方法を使用することにより、例えば、８−ヒドロキシキノリン（オキシン）；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルコピラノシド；８−ヒドロキシキノリングルクロニド；８−ヒドロキシキノリン−５−スルホン酸；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルクロニドナトリウム塩；８−キノリノールヘミ硫酸塩；８−キノリノールＮ−オキシド；２−アミノ−８−キノリノール；５，７−ジブロモ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジヨード−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジメチル−８−キノリノール；５−アミノ−８−ヒドロキシキノリン二塩酸塩；５−クロロ−８−キノリノール；５−ニトロ−８−ヒドロキシキノリン；７−ブロモ−５−クロロ−８−キノリノール；Ｎ−ブチル−２，２’−イミノ−ジ（８−キノリノール）；８−ヒドロキシキノリン安息香酸；２−ベンジル−８−ヒドロキシキノリン；５−クロロ−８−ヒドロキシキノリン塩酸；２−メチル−８−キノリノール；５−クロロ−７−ヨード−８−キノリノール；８−ヒドロキシ−５−ニトロキノリン；８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシ−２−メチルキノリン、並びにその他のキノリン系化合物（１−アザナフタレン、１−ベンゾアジン）及びその誘導体からなる群から選択される、二重層を通して銅イオン等の金属体を輸送することができるイオノフォア化合物を利用して銅同位体がナノ粒子組成物に封入される。好適な実施形態において、イオノフォア化合物は、８−ヒドロキシキノリン（オキシン）；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルコピラノシド；８−ヒドロキシキノリングルクロニド；８−ヒドロキシキノリン−５−スルホン酸；８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルクロニドナトリウム塩；８−キノリノールヘミ硫酸塩；８−キノリノールＮ−オキシド；２−アミノ−８−キノリノール；５，７−ジブロモ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジヨード−８−ヒドロキシキノリン；５，７−ジメチル−８−キノリノール；５−アミノ−８−ヒドロキシキノリン二塩酸塩；５−クロロ−８−キノリノール；５−ニトロ−８−ヒドロキシキノリン；７−ブロモ−５−クロロ−８−キノリノール；Ｎ−ブチル−２，２’−イミノ−ジ（８−キノリノール）；８−ヒドロキシキノリン安息香酸；２−ベンジル−８−ヒドロキシキノリン；５−クロロ−８−ヒドロキシキノリン塩酸；２−メチル−８−キノリノール；５−クロロ−７−ヨード−８−キノリノール；８−ヒドロキシ−５−ニトロキノリン；８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸；５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシ−２−メチルキノリン、並びにその他のキノリン系化合物（１−アザナフタレン、１−ベンゾアジン）及びその誘導体からなる群から選択される。

【0211】

下記化２の構造Ａ及びＢは、銅放射性核種をナノ粒子に封入するために使用することができる本発明に係るイオノフォアである。Ｒは、例えば、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、炭素鎖（Ｈ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖）、ＯＨ、Ｏ−Ｚ（式中、ＺはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₂₄炭素鎖である）、Ｓ−Ｈ、Ｓ−Ｚ、Ｓｅ−Ｈ、Ｓｅ−Ｚ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｚ又はＮ−Ｚ₂を表す。Ｘは、例えば、ＳＨ、ＳｅＨ、Ｏ−Ｙ（式中、ＹはＨ以外の置換基を有していてもよい飽和又は不飽和Ｃ₁〜Ｃ₈炭素鎖である）、Ｓ−Ｙ、ＳｅＹ、ＮＨ₂、ＮＨ−Ｙ、Ｎ−Ｙ₂を表す。

【化2】

【0212】

本発明の好適な実施形態において、二重層を通して金属イオンを輸送することができるイオノフォア化合物はカルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、２ＨＱ）である。本発明の好適な実施形態において、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ストロンチウム（⁸⁹Ｓｒ）、サマリウム（¹⁵³Ｓｍ）、イッテルビウム（¹⁶⁹Ｙｂ）、タリウム（²⁰¹Ｔｌ）、アスタチン（²¹¹Ａｔ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択される放射性核種を輸送するためのイオノフォアとしてカルボスチリルを使用する。

【0213】

本発明の別の好適な実施形態において、二重層を通して金属イオンを輸送することができるイオノフォア化合物はオキシン（８−ヒドロキシキノリン、８ＨＱ）である。本発明の好適な実施形態において、銅同位体を輸送するためイオノフォアとしてオキシンを使用する。

【0214】

本願明細書に開示するナノ粒子組成物の製造方法を使用することにより、放射性標識物質がナノ粒子組成物内に封入され、放射性標識物質は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕ等からなる群から選択される放射性核種を含む。一実施形態において、封入される放射性核種は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される。

【0215】

本発明に係る方法の別の実施形態において、放射性核種は、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される銅同位体であり、イオノフォアは、放射性核種又は金属体と錯体を形成し前記錯体を二重層を通して輸送することができる化合物と定義される任意のイオノフォアである。

【0216】

本発明の一実施形態において、二重層を通して金属イオンを輸送することができるイオノフォア化合物は、Ａ２３１８７、ヘキサメチルプロピレンアミンオキシム（ＨＭＰＡＯ）もしくはその誘導体、ジイソプロピルイミノ二酢酸（ＤＩＳＩＤＡ）もしくはその誘導体、又はその他のイオノフォア化合物である。本発明の好適な実施形態において、Ａ２３１８７、ヘキサメチルプロピレンアミンオキシム（ＨＭＰＡＯ）、ジイソプロピルイミノ二酢酸（ＤＩＳＩＤＡ）等のいずれかのイオノフォア化合物を銅同位体を輸送するために使用する。

【0217】

本願明細書に開示する放射性核種及び／又は金属体が封入されたナノ粒子組成物の製造方法は、患者における癌又はその他の生体内異常（例えば、血管の出血を伴う病理学的症状）を診断及び／又は治療するために有用であり、ａ）ベシクル形成成分と、物質封入成分と、放射性標識物質と、を含み、物質封入成分と放射性標識物質はベシクル形成成分によって取り囲まれ、放射性標識物質は放射性核種を含むナノ粒子組成物を用意することと、ｂ）該ナノ粒子組成物を患者に投与することと、を含む。

【0218】

放射性核種を含むナノ粒子組成物の製造方法の一実施形態においては、静脈内投与することができるナノ粒子を製造する。

【0219】

ナノ粒子組成物の製造方法の別の実施形態は、物質封入成分又はイオノフォアのプロトン化又は脱プロトン化によってリポソームの内部ｐＨを制御して放射性核種の効率的な封入を行うことを含む。

【0220】

本願明細書に開示するナノ粒子組成物の製造方法において、ナノ粒子組成物は、癌性疾患（及び、一般的には、血管の出血を伴う病理学的症状）を標的とする、ナノ粒子の外層に結合した部位をさらに含むことができる。

【0221】

本願明細書に開示するナノ粒子組成物の製造方法において、ナノ粒子組成物は、物質封入成分に結合しナノ粒子組成物内に封入された、核局在配列ペプチド（ＮＬＳペプチド）等の細胞内ターゲティング特性を有する化合物をさらに含む。

【0222】

本願明細書に開示するナノ粒子組成物の製造方法は、ナノ粒子組成物内に封入された放射性核種から放射される放射線量を測定及び検出することをさらに含むことができる。

【0223】

以下、番号を付した項目に分けて本発明を記載する。
１．ａ）ベシクル形成成分と、ｂ）前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、ｃ）ナノ粒子組成物内に封入された銅同位体と、を含むナノ粒子組成物。
２．放射性標識されている、１に記載のナノ粒子組成物。
３．前記銅同位体が放射性核種である、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４．前記放射性核種が、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される、３に記載のナノ粒子組成物。
５．前記銅同位体がイオンである、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
６．前記イオンが、Ｃｕ（Ｉ）及びＣｕ（ＩＩ）からなる群から選択される、５に記載のナノ粒子組成物。
７．銅とは異なる１種以上の同位体をさらに含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
８．銅とは異なる１種以上の放射性核種をさらに含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
９．前記ベシクル形成成分が、両親媒性化合物からなる群から選択される１種以上の化合物を含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
１０．前記両親媒性化合物が、非誘導体化両親媒性化合物、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と共に誘導体化された両親媒性化合物、及び１種以上の多糖と共に誘導体化された両親媒性化合物からなる群から選択される、９に記載のナノ粒子組成物。
１１．前記ベシクル形成成分が、同一化合物の非ＰＥＧ化体とＰＥＧ化体の両方を含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
１２．前記両親媒性化合物が、親水性部分及び疎水性部分を含む合成又は天然両親媒性化合物からなる群から選択される、９又は１０に記載のナノ粒子組成物。
１３．前記合成又は天然両親媒性化合物が、脂肪酸、中性脂肪、ホスファチド、糖脂質、脂肪族アルコール及びステロイドからなる群から選択される、１２に記載のナノ粒子組成物。
１４．前記合成又は天然両親媒性化合物が、１，２−ジオレオイルホスファチジルコリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルコリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルコリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルコリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルコリン等のホスファチジルコリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、１−ステアロイル２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、及びＮ−スクシニルジオレオイルホスファチジルエタノールアミン等のホスファチジルエタノールアミン；１，２−ジオレオイルホスファチジルセリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルセリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルセリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルセリン、１−パルミトイル２−オレオイルホスファチジルセリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルセリン等のホスファチジルセリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジミリストイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジステアロイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルグリセロール、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール等のホスファチジルグリセロール；ＰＥＧ化脂質；ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−１０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−３０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−５０００］等のＰＥＧ化リン脂質；Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）１０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）２０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）３０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）５０００］｝等のＰＥＧ化セラミド；リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジルセリン、セラミド；スフィンゴ脂質；ガングリオシドＧＭｌ等の糖脂質；グルコリピド；スルファチド；ジパルミトイルグリセロホスファチジン酸等のホスファチジン酸；パルミチン脂肪酸；ステアリン脂肪酸；アラキドン脂肪酸；ラウリン脂肪酸；ミリスチン脂肪酸；ラウロレイン脂肪酸；フィセテリン脂肪酸；ミリストレイン脂肪酸；パルミトレイン脂肪酸；ペトロセリン脂肪酸；オレイン脂肪酸；イソラウリン脂肪酸；イソミリスチン脂肪酸；イソステアリン脂肪酸；コレステロール、コレステロールヘミスクシネート、コレステロール硫酸、コレステリル−（４−トリメチルアンモニオ）ブタノエート、エルゴステロール、ラノステロール等のステロール及びステロール誘導体；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸アルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸アルコールエーテル；ポリオキシエチレン付加ソルビタン脂肪酸エステル、グリセロールポリエチレングリコールオキシステアレート；グリセロールポリエチレングリコールリシノレート；エトキシル化大豆ステロール；エトキシル化ヒマシ油；ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン脂肪酸ポリマー；ポリオキシエチレン脂肪酸ステアレート；ジオレオイル−ｓｎ−グリセロール；ジパルミトイル−スクシニルグリセロール；１、３−ジパルミトイル−２−スクシニルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルグリセロール；Ｎ−スクシニルジオクタデシルアミン；パルミトイルホモシステイン；臭化ラウリルトリメチルアンモニウム；臭化セチルトリメチルアンモニウム；ミリスチルトリメチルアンモニウムブロミド；Ｎ−［（１，２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎトリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニウム）プロパン（ＤＯＴＡＰ）；及び１，２−ジオレオイル−ｃ−（４’−トリメチルアンモニウム）−ブタノイル−ｓｎ−グリセロール（ＤＯＴＢ）からなる群から選択される、１２に記載のナノ粒子組成物。
１５．前記合成又は天然両親媒性化合物が、リン脂質、ＰＥＧ化リン脂質及びコレステロールからなる群から選択される、１２に記載のナノ粒子組成物。
１６．前記合成又は天然両親媒性化合物が、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）からなる群から選択される、１２に記載のナノ粒子組成物。
１７．１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）のモル比が５５：４０：５である、１６に記載のナノ粒子組成物。
１８．前記物質封入成分が、キレート剤、還元剤、及び銅イオンと共に低溶解性塩を形成する物質からなる群から選択される化合物を含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
１９．前記物質封入成分が、キレート剤、還元剤、及び銅イオンと共に低溶解性塩を形成する物質からなる群から選択される２種類の異なる化合物を含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
２０．前記物質封入成分が、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（［１２］ａｎｅＮ₄）、１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）、１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（［１４］ａｎｅＮ₄）、１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン（［１５］ａｎｅＮ₄）、１，５，９，１３−テトラアザシクロヘキサデカン（［１６］ａｎｅＮ₄）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）からなる群から選択されるキレート剤である、１８又は１９に記載のナノ粒子組成物。
２１．前記物質封入成分が、１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）、１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏ−シクラム）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、２−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸（ＤＯ１Ａ）、２，２’−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジイル）二酢酸（ＤＯ２Ａ）、２，２’，２’’−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリイル）三酢酸（ＤＯ３Ａ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、２−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１−イル）酢酸（ＴＥ１Ａ）及び２，２’−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，８−ジイル）二酢酸（ＴＥ２Ａ）からなる群から選択されるキレート剤である、１８又は１９に記載のナノ粒子組成物。
２２．前記物質封入成分が、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、シクラム及びシクレンからなる群から選択される、２１に記載のナノ粒子組成物。
２３．前記物質封入成分が、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）である、２２に記載のナノ粒子組成物。
２４．前記物質封入成分が還元剤である、１８に記載のナノ粒子組成物。
２５．前記還元剤が、アスコルビン酸、グルコース、フルクトース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノース、麦芽糖及びアセトールからなる群から選択される、２４に記載のナノ粒子組成物。
２６．前記物質封入成分が、銅と共に低溶解性塩を形成する化合物である、１８に記載のナノ粒子組成物。
２７．前記銅と共に形成される低溶解性塩が、リン酸塩、シュウ酸塩及び塩化物からなる群から選択される、２６に記載のナノ粒子組成物。
２８．ターゲティング化部分をさらに含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
２９．前記ターゲティング化部分が、脂質固定分子又はＰＥＧ複合脂質成分を介して前記ナノ粒子組成物の表面に結合している、２８に記載のナノ粒子組成物。
３０．前記ナノ粒子組成物の表面に結合している前記ターゲティング化部分が、抗体、アフィボディ及びペプチド成分からなる群から選択される、２８又は２９に記載のナノ粒子組成物。
３１．前記ターゲティング化部分が、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リンフォサイド、ビタキシン、Ｌｙｍ−１及びベバシズマブからなる群から選択される抗体である、３０に記載のナノ粒子組成物。
３２．前記ターゲティング化部分が、抗ＥｒｂＢ２アフィボディ及び抗フィブリノゲンアフィボディ分子からなる群から選択されるアフィボディである、３０に記載のナノ粒子組成物。
３３．前記ターゲティング化部分が、ＲＧＤ、ソマトスタチン及びその類似体、並びに細胞透過性ペプチドからなる群から選択されるペプチド成分である、３０に記載のナノ粒子組成物。
３４．前記ソマトスタチン類似体がオクトレオテート（ＴＡＴＥ）である、３３に記載のナノ粒子組成物。
３５．前記物質の効率的な封入を生じさせる制御された内部ｐＨを有する、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
３６．前記ナノ粒子の内部ｐＨが、１〜１０の範囲内、例えば１〜２、２〜３、３〜４、４〜５、５〜６、６〜７、７〜８、８〜９又は９〜１０である、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
３７．前記ナノ粒子の内部ｐＨが、３〜６の範囲内、例えば３．０〜３．５、３．５〜４．０、４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５又は５．５〜６．０である、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
３８．前記ナノ粒子組成物内に封入された細胞内ターゲティング特性を有する化合物をさらに含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
３９．前記細胞内ターゲティング特性を有する化合物が、前記物質封入成分に結合した核局在配列ペプチド（ＮＬＳペプチド）である、３８に記載のナノ粒子組成物。
４０．前記ナノ粒子の直径が３０〜３００ｎｍの範囲内、例えば３０〜６０ｎｍ、６０〜８０ｎｍ、８０〜１００ｎｍ、１００〜１２０ｎｍ、１２０〜１５０ｎｍ、１５０〜１８０ｎｍ、１８０〜２１０ｎｍ、２１０〜２４０ｎｍ、２４０〜２７０ｎｍ又は２７０〜３００ｎｍである、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４１．前記ナノ粒子の直径が１２０ｎｍ未満である、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４２．前記ナノ粒子の直径が８０ｎｍよりも大きい、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４３．前記封入物質が、イオノフォアを使用して前記ナノ粒子組成物に封入されている、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４４．イオノフォアをさらに含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４５．微量のイオノフォアをさらに含む、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４６．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、前記イオノフォアから前記キレート剤への銅の移動反応が、生得的に又は前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、４３〜４５のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４７．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、前記イオノフォアから前記キレート剤への銅の移動反応が、前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、４３〜４６のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４８．前記放射性標識ナノ粒子が、３７℃のヒト血清中で２４時間インキュベートしてから漏出した放射性核種と放射性標識ナノ粒子とを分離するためのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析等の精製工程を行って見出される放射能の漏出率が、２０％未満、例えば１５％未満、１２％未満、１０％未満、８％未満、６％未満、４％未満、３％未満、２％未満又は１％未満である安定性を有する、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
４９．血管の出血を伴う病理学的症状の診断に使用するための、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
５０．癌の診断に使用するための、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
５１．ポジトロン断層法（ＰＥＴ）スキャン又は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）スキャンに使用するための、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
５２．医薬として使用するための、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
５３．癌の治療に使用するための、前項のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物。
５４．銅同位体が封入されたナノ粒子組成物の製造方法であって、ａ）ベシクル形成成分と、前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物を用意することと、ｂ）ベシクル膜を通して前記銅同位体を輸送する成分を用意することと、ｃ）前記ナノ粒子組成物の内部に前記銅同位体を封入することと、を含む方法。
５５．前記ナノ粒子組成物が放射性標識されている、５４に記載の方法。
５６．前記銅同位体が放射性核種である、５４又は５５に記載の方法。
５７．前記放射性核種が、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される、５６に記載の方法。
５８．前記銅同位体がイオンである、５４〜５７のいずれか１項に記載の方法。
５９．前記イオンが、Ｃｕ（Ｉ）及びＣｕ（ＩＩ）からなる群から選択される、５８に記載の方法。
６０．前記ベシクル膜を通して前記銅同位体を輸送する成分がイオノフォアである、５４〜５９のいずれか１項に記載の方法。
６１．前記イオノフォアが、下記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物、及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択される、６０に記載の方法。

【化3】

（式中、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、アミノ（ＮＨ₂）又はスルフヒドリル（ＳＨ）を表し、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。）
６２．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物、及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｘがヒドロキシ（ＯＨ）である、６１に記載の方法。
６３．Ｒ₁が水素（Ｈ）である、６１又は６２に記載の方法。
６４．Ｒ₁及びＲ₃が水素（Ｈ）である、６１又は６２に記載の方法。
６５．Ｒ₁、Ｒ₃及びＲ₅が水素（Ｈ）である、６１又は６２に記載の方法。
６６．Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅が水素（Ｈ）である、６１又は６２に記載の方法。
６７．Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が水素（Ｈ）である、６１又は６２に記載の方法。
６８．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物、及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、６１又は６２に記載の方法。
６９．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物、及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、６１又は６２に記載の方法。
７０．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物、及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びカルボキシ（ＣＯＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、６１又は６２に記載の方法。
７１．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物、及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）及びスルフヒドリル（ＳＨ）からなる群から選択される置換基を表す、６１又は６２に記載の方法。
７２．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物、及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）及びヒドロキシ（ＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、６１又は６２に記載の方法。
７３．前記イオノフォアが、２−ヒドロキシキノリン−４−カルボン酸、６−クロロ−２−ヒドロキシキノリン、８−クロロ−２−ヒドロキシキノリン、７−アミノ−４−メチル−２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル１２４）、７−ジメチルアミノ−４−メチル−２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル１６５）、４，６−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン、４，８−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン、その他の２−キノリノール化合物、並びにそれらの立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択される、６１又は６２に記載の方法。
７４．前記イオノフォアが２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル）である、６１又は６２に記載の方法。
７５．前記イオノフォアが、下記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択される、６０に記載の方法。

【化4】

（式中、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、アミノ（ＮＨ₂）又はスルフヒドリル（ＳＨ）を表し、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。）
７６．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｙがヒドロキシ（ＯＨ）である、７５に記載の方法。
７７．Ｒ₈が水素（Ｈ）である、７５又は７６に記載の方法。
７８．Ｒ₈及びＲ₉が水素（Ｈ）である、７５又は７６に記載の方法。
７９．Ｒ₈、Ｒ₉及びＲ₁₁が水素（Ｈ）である、７５又は７６に記載の方法。
８０．Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉及びＲ₁₁が水素（Ｈ）である、７５又は７６に記載の方法。
８１．Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が水素（Ｈ）である、７５又は７６に記載の方法。
８２．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、７５又は７６に記載の方法。
８３．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、７５又は７６に記載の方法。
８４．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びカルボキシ（ＣＯＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、７５又は７６に記載の方法。
８５．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、ヒドロキシ（ＯＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）及びスルフヒドリル（ＳＨ）からなる群から選択される置換基を表す、７５又は７６に記載の方法。
８６．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）及びヒドロキシ（ＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、７５又は７６に記載の方法。
８７．前記イオノフォアが、８−ヒドロキシキノリン（オキシン）、８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド、８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルコピラノシド、８−ヒドロキシキノリングルクロニド、８−ヒドロキシキノリン−５−スルホン酸、２−アミノ−８−キノリノール、５，７−ジブロモ−８−ヒドロキシキノリン、５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシキノリン、５，７−ジヨード−８−ヒドロキシキノリン、５，７−ジメチル−８−キノリノール、５−クロロ−８−キノリノール、５−ニトロ−８−ヒドロキシキノリン、７−ブロモ−５−クロロ−８−キノリノール、８−ヒドロキシキノリンベンゾエート、２−ベンジル−８−ヒドロキシキノリン、２−メチル−８−キノリノール、５−クロロ−７−ヨード−８−キノリノール、８−ヒドロキシ−５−ニトロキノリン、８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸及び５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシ−２−メチルキノリンからなる群から選択される、７５又は７６に記載の方法。
８８．前記イオノフォアが８−ヒドロキシキノリン（オキシン）である、７５又は７６に記載の方法。
８９．前記ナノ粒子組成物が、１〜４８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物である、５４〜８８のいずれか１項に記載の方法。
９０．前記物質封入成分がキレート剤であり、前記イオノフォアの前記キレート剤に対するモル比が、１：１〜１：１０，０００，０００の範囲内、例えば、１：５、１：１０、１：５０、１：１００、１：２５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１０，０００、１：５０，０００、１：１００，０００、１：５００，０００、１：１，０００，０００、１：５，０００，０００又は１：１０，０００，０００である、５４〜８９のいずれか１項に記載の方法。
９１．前記ナノ粒子の内部ｐＨが、１〜１０の範囲内、例えば１〜２、２〜３、３〜４、４〜５、５〜６、６〜７、７〜８、８〜９又は９〜１０である、５４〜９０のいずれか１項に記載の方法。
９２．前記ナノ粒子の内部ｐＨが、３〜６の範囲内、例えば３．０〜３．５、３．５〜４．０、４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５又は５．５〜６．０である、５４〜９１のいずれか１項に記載の方法。
９３．生成した放射性標識ナノ粒子の純度を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して確認する、５４〜９０のいずれか１項に記載の方法。
９４．生成した放射性標識ナノ粒子を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して精製する、５４〜９３のいずれか１項に記載の方法。
９５．サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して測定した銅の封入効率が３０〜９５％である、５４〜９４のいずれか１項に記載の方法。
９６．サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して測定した銅の封入効率が、３５％よりも高く、例えば４０％、５０％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％又は９５％よりも高い、５４〜９４のいずれか１項に記載の方法。
９７．前記放射性標識ナノ粒子が、３７℃のヒト血清中で２４時間インキュベートしてから漏出した放射性核種と放射性標識ナノ粒子を分離するためのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析等の精製工程を行って見出される放射能の漏出率が、２０％未満、例えば１５％未満、１２％未満、１０％未満、８％未満、６％未満、４％未満、３％未満、２％未満又は１％未満である安定性を有する、５４〜９６のいずれか１項に記載の方法。
９８．前記ナノ粒子への銅の封入によって前記ナノ粒子のサイズが実質的に変化しない、５４〜９７のいずれか１項に記載の方法。
９９．前記ナノ粒子への銅同位体の封入による前記ナノ粒子組成物のサイズの変化が、２０％未満、例えば１７％未満、１４％未満、１１％未満、８％未満、５％未満又は２％未満である、５４〜９７のいずれか１項に記載の方法。
１００．前記ナノ粒子への銅の封入によるゼータ電位の変化が、２０％未満、例えば１８％未満、１６％未満、１４％未満、１２％未満又は１０％未満である、５４〜９８のいずれか１項に記載の方法。
１０１．前記ナノ粒子組成物内に封入された前記放射性核種から放射される放射線量を測定及び検出することをさらに含む、５４〜１００のいずれか１項に記載の方法。
１０２．前記ナノ粒子組成物を診断又は治療のために使用することをさらに含む、５４〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
１０３．前記ナノ粒子組成物を経口投与する、１０２に記載の方法。
１０４．前記ナノ粒子組成物を静脈内投与する、１０２に記載の方法。
１０５．血管の出血を伴う病理学的症状の診断に使用される、１０２〜１０４のいずれか１項に記載の方法。
１０６．癌の診断に使用される、１０２〜１０４のいずれか１項に記載の方法。
１０７．１〜４８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するためのキットであって、
ａ．ｉ．ベシクル形成成分と、ｉｉ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．イオノフォアを含む組成物と、
を含み、前記パーツａ又はｂは銅同位体をさらに含むキット。
１０８．１〜４８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するためのキットであって、
ａ．ｉ．ベシクル形成成分と、ｉｉ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．イオノフォアを含む組成物と、
ｃ．銅同位体を含む組成物と、
を含むキット。
１０９．１〜４８のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するためのキットであって、
ａ．ｉ．ベシクル形成成分と、ｉｉ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、ｉｉｉ．イオノフォアと、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．銅同位体を含む組成物と、
を含むキット。
１１０．前記銅同位体が放射性核種である、１０７〜１０９のいずれか１項に記載のキット。
１１１．前記イオノフォアが、下記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択される、１０７〜１１０のいずれか１項に記載のキット。

【化5】

（式中、Ｘは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）又はアミノ（ＮＨ₂）を表し、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₁及びＲ₂、又はＲ₂及びＲ₃、又はＲ₃及びＲ₄、又はＲ₄及びＲ₅、又はＲ₅及びＲ₆は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。）
１１２．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｘがヒドロキシ（ＯＨ）である、１１１に記載のキット。
１１３．Ｒ₁が水素（Ｈ）である、１１１又は１１２に記載のキット。
１１４．Ｒ₁及びＲ₃が水素（Ｈ）である、１１１又は１１２に記載のキット。
１１５．Ｒ₁、Ｒ₃及びＲ₅が水素（Ｈ）である、１１１又は１１２に記載のキット。
１１６．Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅が水素（Ｈ）である、１１１又は１１２に記載のキット。
１１７．Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が水素（Ｈ）である、１１１又は１１２に記載のキット。
１１８．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、１１１又は１１２に記載のキット。
１１９．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、スルフヒドリル（ＳＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、１１１又は１１２に記載のキット。
１２０．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びカルボキシ（ＣＯＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、１１１又は１１２に記載のキット。
１２１．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）及びスルフヒドリル（ＳＨ）からなる群から選択される置換基を表す、１１１又は１１２に記載のキット。
１２２．前記イオノフォアが、前記式Ａで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅及びＲ₆が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）及びヒドロキシ（ＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、１１１又は１１２に記載のキット。
１２３．前記イオノフォアが、２−ヒドロキシキノリン−４−カルボン酸、６−クロロ−２−ヒドロキシキノリン、８−クロロ−２−ヒドロキシキノリン、７−アミノ−４−メチル−２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル１２４）、７−ジメチルアミノ−４−メチル−２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル１６５）、４，６−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン、４，８−ジメチル−２−ヒドロキシキノリン、その他の２−キノリノール化合物、並びにそれらの立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択される、１１１又は１１２に記載のキット。
１２４．前記イオノフォアが２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル）である、１１１又は１１２に記載のキット。
１２５．前記イオノフォアが、下記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択される、１１１に記載のキット。

【化6】

（式中、Ｙは、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）又はアミノ（ＮＨ₂）を表し、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂は、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ニトロ（ＮＯ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、グルクロニド（Ｃ₆Ｈ₉Ｏ₇）、スルホニル（ＳＯ₃Ｈ）、ベンゾイル（Ｃ₆Ｈ₄ＣＯＯＨ）及びベンジル（Ｃ₆Ｈ₅（ＣＨ₂））からなる群から選択される置換基を表し、Ｒ₇及びＲ₈、又はＲ₈及びＲ₉、又はＲ₉及びＲ₁₀、又はＲ₁₀及びＲ₁₁、又はＲ₁₁及びＲ₁₂は、それらが結合している芳香族環と共にベンゾ縮合炭素環式芳香族環又は脂肪族環を形成していてもよい。）
１２６．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｙがヒドロキシ（ＯＨ）である、１２５に記載のキット。
１２７．Ｒ₈が水素（Ｈ）である、１２５又は１２６に記載のキット。
１２８．Ｒ₈及びＲ₉が水素（Ｈ）である、１２５又は１２６に記載のキット。
１２９．Ｒ₈、Ｒ₉及びＲ₁₁が水素（Ｈ）である、１２５又は１２６に記載のキット。
１３０．Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉及びＲ₁₁が水素（Ｈ）である、１２５又は１２６に記載のキット。
１３１．Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が水素（Ｈ）である、１２５又は１２６に記載のキット。
１３２．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、ブチル（Ｃ₄Ｈ₁₁）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｃ₆Ｏ₆Ｈ₁₁）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、１２５又は１２６に記載のキット。
１３３．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ジメチルアミノ（Ｎ（ＣＨ₃）₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、シアノ（ＣＮ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びスルホニル（ＳＯ₃Ｈ）からなる群から選択される置換基を表す、１２５又は１２６に記載のキット。
１３４．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、プロピル（Ｃ₃Ｈ₈）、アミノ（ＮＨ₂）、ヒドロキシ（ＯＨ）、スルフヒドリル（ＳＨ）及びカルボキシ（ＣＯＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、１２５又は１２６に記載のキット。
１３５．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、ハロ（Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、メチル（ＣＨ₃）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、ヒドロキシ（ＯＨ）、カルボキシ（ＣＯＯＨ）及びスルフヒドリル（ＳＨ）からなる群から選択される置換基を表す、１２５又は１２６に記載のキット。
１３６．前記イオノフォアが、前記式Ｂで示されるキノリン誘導体、並びにその立体異性体、立体異性体の混合物及び薬学的に許容され得る塩からなる群から選択され、Ｒ₇、Ｒ₈、Ｒ₉、Ｒ₁₀、Ｒ₁₁及びＲ₁₂が、それぞれ独立して、水素（Ｈ）、エチル（Ｃ₂Ｈ₅）、アミノ（ＮＨ₂）及びヒドロキシ（ＯＨ）からなる群から選択される置換基を表す、１２５又は１２６に記載のキット。
１３７．前記イオノフォアが、８−ヒドロキシキノリン（オキシン）、８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド、８−ヒドロキシキノリン−β−Ｄ−グルコピラノシド、８−ヒドロキシキノリングルクロニド、８−ヒドロキシキノリン−５−スルホン酸、２−アミノ−８−キノリノール、５，７−ジブロモ−８−ヒドロキシキノリン、５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシキノリン、５，７−ジヨード−８−ヒドロキシキノリン、５，７−ジメチル−８−キノリノール、５−クロロ−８−キノリノール、５−ニトロ−８−ヒドロキシキノリン、７−ブロモ−５−クロロ−８−キノリノール、８−ヒドロキシキノリンベンゾエート、２−ベンジル−８−ヒドロキシキノリン、２−メチル−８−キノリノール、５−クロロ−７−ヨード−８−キノリノール、８−ヒドロキシ−５−ニトロキノリン、８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸及び５，７−ジクロロ−８−ヒドロキシ−２−メチルキノリンからなる群から選択される、１２５又は１２６に記載のキット。
１３８．前記イオノフォアが８−ヒドロキシキノリン（オキシン）である、１２５又は１２６に記載のキット。
１３９．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、前記イオノフォアから前記キレート剤への銅の移動反応が、生得的に又は前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、１０７〜１３８のいずれか１項に記載のキット。
１４０．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、前記イオノフォアから前記キレート剤への銅の移動反応が、前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、１０７〜１３８のいずれか１項に記載のキット。
１４１．前記物質封入成分がキレート剤であり、前記イオノフォアの前記キレート剤に対するモル比が、１：１〜１：１０，０００，０００の範囲内、例えば、１：５、１：１０、１：５０、１：１００、１：２５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１０，０００、１：５０，０００、１：１００，０００、１：５００，０００、１：１，０００，０００、１：５，０００，０００又は１：１０，０００，０００である、１０７〜１４０のいずれか１項に記載のキット。
１４２．前記銅同位体が塩として送達される、１０７〜１４１のいずれか１項に記載のキット。
１４３．前記銅同位体が凍結乾燥塩として送達される、１０７〜１４２のいずれか１項に記載のキット。
１４４．前記銅同位体がイオン水溶液として送達される、１０７〜１４１のいずれか１項に記載のキット。
１４５．封入効率を判定するための試験手段をさらに含む、１０７〜１４４のいずれか１項に記載のキット。
１４６．前記パーツを、使用の０〜５時間前、例えば使用の０〜４時間前、使用の０〜３時間前、使用の０〜２時間前、使用の０〜１時間前又は使用の直前に混合することができる、１０７〜１４５のいずれか１項に記載のキット。
１４７．１〜５３のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するためのものである、１０７〜１４６のいずれか１項に記載のキット。
１４８．血管の出血を伴う病理学的症状の診断に使用するための、１０７〜１４７のいずれか１項に記載のキット。
１４９．医薬として使用するための、１０７〜１４７のいずれか１項に記載のキット。
１５０．癌を診断するために使用するための、１０７〜１４７のいずれか１項に記載のキット。
１５１．ポジトロン断層法（ＰＥＴ）スキャン又は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）スキャンに使用するための、１０７〜１４７のいずれか１項に記載のキット。
１５２．放射性核種が封入されたナノ粒子組成物の製造方法であって、ａ）ベシクル形成成分と、前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物を用意することと、ｂ）６１〜７４のいずれか１項に記載のイオノフォア（式Ａ）である、ベシクル膜を通して前記放射性核種を輸送する成分を用意することと、ｃ）前記ナノ粒子組成物の内部に前記放射性核種を封入することと、を含む方法。
１５３．前記放射性核種が、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択される、１５２に記載の方法。
１５４．前記放射性核種が、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）及びルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）からなる群から選択される、１５２に記載の方法。
１５５．前記放射性核種が、一価カチオン、二価カチオン、三価カチオン、四価カチオン、五価カチオン、六価カチオン又は七価カチオン等のイオンである、１５２〜１５４のいずれか１項に記載の方法。
１５６．前記ベシクル形成成分が、両親媒性化合物からなる群から選択される１種以上の化合物を含む、１５２〜１５５のいずれか１項に記載の方法。
１５７．前記両親媒性化合物が、非誘導体化両親媒性化合物、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と共に誘導体化された両親媒性化合物及び１種以上の多糖から誘導体化された両親媒性化合物からなる群から選択される、１５６に記載の方法。
１５８．前記ベシクル形成成分が、同一のベシクル形成化合物の非ＰＥＧ化体及びＰＥＧ化体の両方を含む、１５６又は１５７に記載の方法。
１５９．前記両親媒性化合物が、親水性部分及び疎水性部分を含む合成又は天然両親媒性化合物からなる群から選択される、１５６又は１５７に記載の方法。
１６０．前記合成又は天然両親媒性化合物が、脂肪酸、中性脂肪、ホスファチド、糖脂質、脂肪族アルコール及びステロイドからなる群から選択される、１５９に記載の方法。
１６１．前記合成又は天然両親媒性化合物が、１，２−ジオレオイルホスファチジルコリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルコリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルコリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルコリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルコリン等のホスファチジルコリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジミリストイルホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルエタノールアミン、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルエタノールアミン、及びＮ−スクシニルジオレオイルホスファチジルエタノールアミン等のホスファチジルエタノールアミン；１，２−ジオレオイルホスファチジルセリン、１，２−ジパルミトイルホスファチジルセリン、１，２−ジミリストイルホスファチジルセリン、１，２−ジステアロイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルセリン、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルセリン、１−パルミトイル２−オレオイルホスファチジルセリン、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルセリン等のホスファチジルセリン；１，２−ジオレオイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジミリストイルホスファチジルグリセロール、１，２−ジステアロイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール、１−オレオイル−２−ステアロイルホスファチジルグリセロール、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール、及び１−ステアロイル−２−オレオイルホスファチジルグリセロール等のホスファチジルグリセロール；ＰＥＧ化脂質；ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−１０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−３０００］、ホスファチジルエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−５０００］等のＰＥＧ化リン脂質；Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）１０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）２０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）３０００］｝、Ｎ−オクタノイルスフィンゴシン−１−｛スクシニル［メトキシ（ポリエチレングリコール）５０００］｝等のＰＥＧ化セラミド；リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジルセリン、セラミド；スフィンゴ脂質；ガングリオシドＧＭｌ等の糖脂質；グルコリピド；スルファチド；ジパルミトイルグリセロホスファチジン酸等のホスファチジン酸；パルミチン脂肪酸；ステアリン脂肪酸；アラキドン脂肪酸；ラウリン脂肪酸；ミリスチン脂肪酸；ラウロレイン脂肪酸；フィセテリン脂肪酸；ミリストレイン脂肪酸；パルミトレイン脂肪酸；ペトロセリン脂肪酸；オレイン脂肪酸；イソラウリン脂肪酸；イソミリスチン脂肪酸；イソステアリン脂肪酸；コレステロール、コレステロールヘミスクシネート、コレステロール硫酸、コレステリル−（４−トリメチルアンモニオ）ブタノエート、エルゴステロール、ラノステロール等のステロール及びステロール誘導体；ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸アルコール；ポリオキシエチレン脂肪酸アルコールエーテル；ポリオキシエチレン付加ソルビタン脂肪酸エステル、グリセロールポリエチレングリコールオキシステアレート；グリセロールポリエチレングリコールリシノレート；エトキシル化大豆ステロール；エトキシル化ヒマシ油；ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン脂肪酸ポリマー；ポリオキシエチレン脂肪酸ステアレート；ジオレオイル−ｓｎ−グリセロール；ジパルミトイル−スクシニルグリセロール；１、３−ジパルミトイル−２−スクシニルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−パルミトイルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アシルホスファチジルグリセロール；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルコリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルコリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルエタノールアミン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルエタノールアミン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルセリン等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルセリン；１−ヘキサデシル−２−ヘキサデシルホスファチジルグリセロール等の１−アルキル−２−アルキルホスファチジルグリセロール；Ｎ−スクシニルジオクタデシルアミン；パルミトイルホモシステイン；臭化ラウリルトリメチルアンモニウム；臭化セチルトリメチルアンモニウム；ミリスチルトリメチルアンモニウムブロミド；Ｎ−［（１，２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎトリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）；１，２−ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニウム）プロパン（ＤＯＴＡＰ）；及び１，２−ジオレオイル−ｃ−（４’−トリメチルアンモニウム）−ブタノイル−ｓｎ−グリセロール（ＤＯＴＢ）からなる群から選択される、１５９に記載の方法。
１６２．前記合成又は天然両親媒性化合物が、リン脂質、ＰＥＧ化リン脂質及びコレステロールからなる群から選択される、１５９に記載の方法。
１６３．前記合成又は天然両親媒性化合物が、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）からなる群から選択される、１６２に記載の方法。
１６４．１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール、及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）のモル比が５５：４０：５である、１６３に記載の方法。
１６５．前記物質封入成分が、キレート剤、還元剤、及び前記放射性核種と共に低溶解性塩を形成する物質からなる群から選択される、１５２〜１６４のいずれか１項に記載の方法。
１６６．前記物質封入成分が、キレート剤、還元剤、及び前記放射性核種と共に低溶解性塩を形成する物質からなる群から選択される２種類の異なる化合物を含む、１５２〜１６５のいずれか１項に記載の方法。
１６７．前記物質封入成分が、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン（［１２］ａｎｅＮ₄）、１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン（［１３］ａｎｅＮ₄）、１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（［１４］ａｎｅＮ₄）、１，４，８，１２−テトラアザシクロペンタデカン（［１５］ａｎｅＮ₄）、１，５，９，１３−テトラアザシクロヘキサデカン（［１６］ａｎｅＮ₄）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）からなる群から選択されるキレート剤である、１５２〜１６６のいずれか１項に記載の方法。
１６８．前記物質封入成分が、１，４−エタノ−１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｅｔ−シクラム）、１，４，７，１１−テトラアザシクロテトラデカン（ｉｓｏ−シクラム）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、２−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル）酢酸（ＤＯ１Ａ）、２，２’−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジイル）二酢酸（ＤＯ２Ａ）、２，２’，２’’−（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリイル）三酢酸（ＤＯ３Ａ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，７−ジ（メタンホスホン酸）（ＤＯ２Ｐ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリ（メタンホスホン酸）（ＤＯ３Ｐ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、２−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１−イル）酢酸（ＴＥ１Ａ）、２，２’−（１，４，８，１１−テトラアザシクロテトラデカン−１，８−ジイル）二酢酸（ＴＥ２Ａ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）からなる群から選択されるキレート剤である、１５２〜１６６のいずれか１項に記載の方法。
１６９．前記物質封入成分が、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、シクラム及びシクレンからなる群から選択される、１６８に記載の方法。
１７０．前記物質封入成分が、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）、１，４，８，１１−１５テトラアザシクロテトラデカン−１，４，８，１１−四酢酸（ＴＥＴＡ）、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ（メタンホスホン酸）（ＤＯＴＰ）、シクラム及びシクレンからなる群から選択される、１６９に記載の方法。
１７１．前記物質封入成分が、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）である、１７０に記載の方法。
１７２．前記物質封入成分が還元剤である、１５２〜１６６のいずれか１項に記載の方法。
１７３．前記還元剤が、アスコルビン酸、グルコース、フルクトース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノース、麦芽糖又はアセトールである、１７２に記載の方法。
１７４．前記物質封入成分が、前記放射性核種と共に低溶解性塩を形成する化合物である、１５２〜１６６のいずれか１項に記載の方法。
１７５．前記放射性核種と共に形成される低溶解性塩が、リン酸塩、シュウ酸塩及び塩化物からなる群から選択される、１７４に記載の方法。
１７６．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、カルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン）から前記キレート剤への放射性核種の移動反応が、生得的に又は前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、１５２〜１７５のいずれか１項に記載の方法。
１７７．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、前記イオノフォアから前記キレート剤への放射性核種の移動反応が、前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、１５２〜１７５のいずれか１項に記載の方法。
１７８．前記物質封入成分がキレート剤であり、前記イオノフォアの前記キレート剤に対するモル比が、１：１〜１：１０，０００，０００の範囲内、例えば、１：５、１：１０、１：５０、１：１００、１：２５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１０，０００、１：５０，０００、１：１００，０００、１：５００，０００、１：１，０００，０００、１：５，０００，０００又は１：１０，０００，０００である、１５２〜１７７のいずれか１項に記載の方法。
１７９．前記ナノ粒子組成物がターゲティング化部分をさらに含む、１５２〜１７８のいずれか１項に記載の方法。
１８０．前記ターゲティング化部分が、脂質固定分子又はＰＥＧ複合脂質成分を介して前記ナノ粒子組成物の表面に結合している、１７９に記載の方法。
１８１．前記ナノ粒子組成物の表面に結合している前記ターゲティング化部分が、抗体、アフィボディ及びペプチド成分からなる群から選択される、１７９又は１８０に記載の方法。
１８２．前記ターゲティング化部分が、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、リンフォサイド、ビタキシン、Ｌｙｍ−１及びベバシズマブからなる群から選択される抗体である、１８１に記載の方法。
１８３．前記ターゲティング化部分が、抗ＥｒｂＢ２アフィボディ及び抗フィブリノゲンアフィボディ分子からなる群から選択されるアフィボディである、１８１に記載の方法。
１８４．前記ターゲティング化部分が、ＲＧＤ、ソマトスタチン及びその類似体、並びに細胞透過性ペプチドからなる群から選択されるペプチド成分である、１８１に記載の方法。
１８５．前記ソマトスタチン類似体がオクトレオテート（ＴＡＴＥ）である、１８４に記載の方法。
１８６．内部ｐＨを制御して前記物質の効率的な封入を生じさせることをさらに含む、１５２〜１８５のいずれか１項に記載の方法。
１８７．前記ナノ粒子組成物の内部ｐＨが、１〜１０の範囲内、例えば１〜２、２〜３、３〜４、４〜５、５〜６、６〜７、７〜８、８〜９又は９〜１０である、１５２〜１８６のいずれか１項に記載の方法。
１８８．前記ナノ粒子の内部ｐＨが、３〜６の範囲内、例えば３．０〜３．５、３．５〜４．０、４．０〜４．５、４．５〜５．０、５．０〜５．５又は５．５〜６．０である、１５２〜１８７のいずれか１項に記載の方法。
１８９．前記ナノ粒子組成物が、前記ナノ粒子組成物内に封入された細胞内ターゲティング特性を有する化合物をさらに含む、１５２〜１８７のいずれか１項に記載の方法。
１９０．前記細胞内ターゲティング特性を有する化合物が、前記物質封入成分に結合した核局在配列ペプチド（ＮＬＳペプチド）である、１８９に記載の方法。
１９１．前記ナノ粒子組成物の直径が、３０〜３００ｎｍ、例えば３０〜６０ｎｍ、６０〜８０ｎｍ、８０〜１００ｎｍ、１００〜１２０ｎｍ、１２０〜１５０ｎｍ、１５０〜１８０ｎｍ、１８０〜２１０ｎｍ、２１０〜２４０ｎｍ、２４０〜２７０ｎｍ又は２７０〜３００ｎｍである、１５２〜１９０のいずれか１項に記載の方法。
１９２．前記ナノ粒子の直径が１２０ｎｍ未満である、１５２〜１９１のいずれか１項に記載の方法。
１９３．前記ナノ粒子の直径が８０ｎｍよりも大きい、１５２〜１９１のいずれか１項に記載の方法。
１９４．生成した放射性標識ナノ粒子の純度を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して確認する、１５２〜１９３のいずれか１項に記載の方法。
１９５．生成した放射性標識ナノ粒子を、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して精製する、５４〜１９４のいずれか１項に記載の方法。
１９６．サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して測定した放射性核種の封入効率が３０〜９５％である、１５２〜１９５のいずれか１項に記載の方法。
１９７．サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析を使用して測定した放射性核種の封入効率が、３５％より高く、例えば４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％又は９５％よりも高い、１５２〜１９６のいずれか１項に記載の方法。
１９８．前記放射性標識ナノ粒子が、３７℃のヒト血清中で２４時間インキュベートしてから漏出した放射性核種と放射性標識ナノ粒子とを分離するためのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、イオン交換クロマトグラフィー又は透析等の精製工程を行って見出される放射能の漏出率が、２０％未満、例えば１５％未満、１２％未満、１０％未満、８％未満、６％未満、４％未満、３％未満、２％未満又は１％未満である安定性を有する、１５２〜１９７のいずれか１項に記載の方法。
１９９．前記ナノ粒子への放射性核種の封入によって前記ナノ粒子のサイズが実質的に変化しない、１５２〜１９８のいずれか１項に記載の方法。
２００．前記ナノ粒子への放射性核種の封入による前記ナノ粒子組成物のサイズの変化が、２０％未満、例えば１７％未満、１４％未満、１１％未満、８％未満、５％未満又は２％未満である、１５２〜１９８のいずれか１項に記載の方法。
２０１．前記ナノ粒子への放射性核種の封入によるゼータ電位の変化が、２０％未満、例えば１８％未満、１６％未満、１４％未満、１２％未満又は１０％未満である、１５２〜２００のいずれか１項に記載の方法。
２０２．前記ナノ粒子組成物内に封入された前記放射性核種から放射される放射線量を測定及び検出することをさらに含む、１５２〜２０１のいずれか１項に記載の方法。
２０３．前記ナノ粒子組成物を診断又は治療のために使用することをさらに含む、１５２〜２０２のいずれか１項に記載の方法。
２０４．前記ナノ粒子組成物を経口投与する、２０３に記載の方法。
２０５．前記ナノ粒子組成物を静脈内投与する、２０３に記載の方法。
２０６．血管の出血を伴う病理学的症状の診断に使用される、２０３〜２０５のいずれか１項に記載の方法。
２０７．癌の診断に使用される、２０３〜２０５のいずれか１項に記載の方法。
２０８．１５２〜２０２のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するためのキットであって、
ａ．ｉ．ベシクル形成成分と、ｉｉ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．６１〜７４のいずれか１項に記載のイオノフォア（式Ａ）を含む組成物と、
を含み、前記パーツａ又はｂは放射性核種をさらに含むキット。
２０９．１５２〜２０２のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するためのキットであって、
ａ．ｉ．ベシクル形成成分と、ｉｉ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．６１〜７４のいずれか１項に記載のイオノフォア（式Ａ）を含む組成物と、
ｃ．放射性核種を含む組成物と、
を含むキット。
２１０．１５２〜２０２のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するためのキットであって、
ａ．ｉ．ベシクル形成成分と、ｉｉ．前記ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、ｉｉｉ．６１〜７４のいずれか１項に記載のイオノフォア（式Ａ）と、を含むナノ粒子組成物と、
ｂ．放射性核種を含む組成物と、
を含むキット。
２１１．前記放射性核種が、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、ルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）、スズ（¹¹⁷Ｓｎ、¹¹³Ｓｎ）、ジスプロシウム（¹⁵⁹Ｄｙ）、コバルト（⁵⁶Ｃｏ）、鉄（⁵⁹Ｆｅ）、ルテニウム（⁹⁷Ｒｕ、¹⁰³Ｒｕ）、パラジウム（¹⁰³Ｐｄ）、カドミウム（¹¹⁵Ｃｄ）、テルル（¹¹⁸Ｔｅ、¹²³Ｔｅ）、バリウム（¹³¹Ｂａ、¹⁴⁰Ｂａ）、ガドリニウム（¹⁴⁹Ｇｄ、¹⁵¹Ｇｄ）、テルビウム（¹⁶⁰Ｔｂ）、金（¹⁹⁸Ａｕ、¹⁹⁹Ａｕ）、ランタン（¹⁴⁰Ｌａ）及びラジウム（²²³Ｒａ、²²⁴Ｒａ）からなる群から選択される、２０８〜２１０のいずれか１項に記載のキット。
２１２．前記放射性核種が、銅（⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ、⁶⁷Ｃｕ）、インジウム（¹¹¹Ｉｎ）、テクネチウム（^99mＴｃ）、レニウム（¹⁸⁸Ｒｅ）、ガリウム（⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ）、アクチニウム（²²⁵Ａｃ）、イットリウム（⁹⁰Ｙ）、アンチモン（¹¹⁹Ｓｂ）及びルテチウム（¹⁷⁷Ｌｕ）からなる群から選択される、２０８〜２１０のいずれか１項に記載のキット。
２１３．前記放射性核種が、一価カチオン、二価カチオン、三価カチオン、四価カチオン、五価カチオン、六価カチオン又は七価カチオン等のイオンである、２０８〜２１１のいずれか１項に記載のキット。
２１４．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、前記イオノフォアから前記キレート剤への放射性核種の移動反応が、生得的に又は前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、２０８〜２１３のいずれか１項に記載のキット。
２１５．前記物質封入成分がキレート剤（ＤＯＴＡ等）であり、前記イオノフォアから前記キレート剤への放射性核種の移動反応が、前記ナノ粒子組成物内における高濃度のキレート剤のために自発的である、２０８〜２１３のいずれか１項に記載のキット。
２１６．前記物質封入成分がキレート剤であり、前記イオノフォアの前記キレート剤に対するモル比が、１：１〜１：１０，０００，０００の範囲内、例えば、１：５、１：１０、１：５０、１：１００、１：２５０、１：５００、１：１０００、１：５０００、１：１０，０００、１：５０，０００、１：１００，０００、１：５００，０００、１：１，０００，０００、１：５，０００，０００又は１：１０，０００，０００である、２０８〜２１５のいずれか１項に記載のキット。
２１７．前記放射性核種が塩として送達される、２０８〜２１６のいずれか１項に記載のキット。
２１８．前記放射性核種が凍結乾燥塩として送達される、２０８〜２１７のいずれか１項に記載のキット。
２１９．前記放射性核種がイオン水溶液として送達される、２０８〜２１６のいずれか１項に記載のキット。
２２０．封入効率を判定するための試験手段をさらに含む、２０８〜２１９のいずれか１項に記載のキット。
２２１．前記パーツを、使用の０〜５時間前、例えば使用の０〜４時間前、使用の０〜３時間前、使用の０〜２時間前、使用の０〜１時間前又は使用の直前に混合することができる、２０８〜２２０のいずれか１項に記載のキット。
２２２．１〜５３のいずれか１項に記載のナノ粒子組成物を製造するための、２０８〜２２１のいずれか１項に記載のキット。
２２３．血管の出血を伴う病理学的症状の診断に使用するための、２０８〜２２２のいずれか１項に記載のキット。
２２４．医薬として使用するための、２０８〜２２２のいずれか１項に記載のキット。
２２５．癌の診断に使用するための、２０８〜２２２のいずれか１項に記載のキット。
２２６．ポジトロン断層法（ＰＥＴ）スキャン又は単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ）スキャンに使用するための、２０８〜２２２のいずれか１項に記載のキット。

【実施例】

【0224】

実施例Ｉ
以下の実施例では、血液循環によって放射線診断剤及び／又は放射線治療剤を癌性組織又は血管の出血を伴う病理学的症状を示す組織等の標的部位に送達するために有用であり、標的部位における放射能シグナルの特異性及び強度を高める放射性核種封入リポソーム組成物の製造方法について記載する。なお、以下の実施例は本発明の範囲を制限するものではない。全ての銅同位体の化学特性を表すモデル核種として放射性核種⁶⁴Ｃｕを使用した。

【0225】

等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）は、主として錯体形成のエンタルピー及びストイキオメトリーが得られるように設計した。反応熱は観察されたピークの積分によって決定した。注入の希釈熱の寄与分を差し引いた後、熱を測定成分のモル比に対してプロットした。結合定数（Ｋ_a、配位子交換定数Ｋともいう）、結合エンタルピー（ΔＨ⁰）及び錯体形成のストイキオメトリー（ｎ）は、独立した結合モデルを使用して結合方程式に対して結合等温線を当てはめることによって決定した。

【0226】

ＩＴＣ試料の調製及び実験：
ＩＴＣ実験のためのＣｕＣｌ₂、２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル、２ＨＱ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製（デンマーク））及びＤＯＴＡの溶液をミリＱ水を使用して調製した（ｐＨ７．４）。等温滴定熱量計（Ｎａｎｏ ＩＴＣ、ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）を使用して、金属イオン、イオノフォア及びキレート剤の結合親和性のＩＴＣ測定を２５℃で行った。等温滴定熱量計は、製造者の推奨に従って電気パルスによって電気的に較正した。滴定剤の注入には注射器（２５０μＬ）を使用し、平衡化時及び実験時に注射器を４００ｒｐｍで撹拌することによって混合を行った。一回の滴定において、典型的には、滴定剤を１０μＬずつ２０回注入し、注入操作間には６００秒の間隔を空けた。水を満たした熱量計の参照セルを試料セルに対する熱参照（ｔｈｅｒｍａｌ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）として使用した。ＣｕＣｌ₂、ＤＯＴＡ及びカルボスチリルの希釈熱について補正するために、緩衝液のみを使用して同様な条件で対照実験を行った。全ての溶液は、ノイズを減少させるために滴定前に脱気した。

【0227】

ＤＯＴＡを使用した２−ヒドロキシキノリンからのＣｕ（ＩＩ）抽出のＩＴＣ測定結果を図６に示す。２−ヒドロキシキノリンとＤＯＴＡの交換を熱スパイクプロット（Ａ）及び積分熱プロット（Ｂ）として示している。実験条件：０．５ｍＭ Ｃｕ（２−ヒドロキシキノリン）₂に１０μＬの５ｍＭ ＤＯＴＡを注入して滴定した。全ての溶液（ｐＨ７．４）はミリＱ水を使用して調製した。

【0228】

ＩＴＣデータ（図６）に基づき、ＤＯＴＡのＣｕ（ＩＩ）に対する結合親和性は２−ヒドロキシキノリンと比較して非常に高いことが分かった。従って、２−ヒドロキシキノリンを使用したＤＯＴＡを含むリポソームへのＣｕ（ＩＩ）の封入は熱力学的に好ましい方法である。

【0229】

⁶⁴Ｃｕ−カルボスチリルの放射性標識：
本発明に係るリポソーム組成物の製造方法に含まれる⁶⁴Ｃｕ−カルボスチリルの製造例を以下に記載する。５〜１００μＬの水性緩衝液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）中の０．３１４〜３１．４ｍＭ ２−ヒドロキシキノリン（カルボスチリル、２ＨＱ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製（デンマーク））を、乾燥した放射性⁶⁴ＣｕＣｌ₂に添加した。

【0230】

⁶⁴Ｃｕ−オキシンの放射性標識：
本発明に係るリポソーム組成物の製造方法に含まれる⁶⁴Ｃｕ−オキシンの製造例を以下に記載する。５〜１００μＬの水性緩衝液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）中の０．３１４〜３１．４ｍＭ ８−ヒドロキシキノリン（オキシン、８ＨＱ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製（デンマーク））を、乾燥した放射性⁶⁴ＣｕＣｌ₂に添加した。

【0231】

リポソームの調製：
標準的な薄膜水和及び反復押出を使用して小さな単層膜ベシクル（ＳＵＶ）（１００ｎｍ）を調製した。１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００ｇｌ］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）（モル比：５５：４０：５）をクロロホルムに溶解・混合し、緩やかなアルゴン流下において脂質薄膜を得た。有機溶媒残渣を減圧下で一晩にわたって除去した。脂質膜を適当な水溶液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）に分散させ、６５℃で６０分間水和した。次に、ミニ押出機を使用してポリカーボネートメンブランフィルターに懸濁液を通過させてＳＵＶを得た。

【0232】

キレート剤含有リポソームの調製：
標準的な薄膜水和及び反復押出を使用し、キレート剤（ＤＯＴＡ等）をＤＳＰＣ、コレステロール及びＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（モル比：５５：４０：５）から構成されるリポソーム内に導入した。簡単に説明すると、脂質をクロロホルム内で混合し、緩やかな窒素流下において乾燥させて脂質膜を得た。有機溶媒残渣を減圧下で一晩にわたって除去した。キレート剤（ＤＯＴＡ）を１〜５０ｍＭの濃度で含む水溶液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４））に脂質膜を分散させた。次に、溶液を６５℃で６０分間にわたって水和した。ミニ押出機を使用して１００ｎｍポリカーボネートメンブランフィルターに多層膜ベシクル（ＭＬＶ）を複数回通過させて小さな単層膜ベシクル（ＳＵＶ）を得た。封入されなかったキレート剤をサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０充填 １×２５ｃｍカラムを使用、水溶液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で溶出）で除去した。

【0233】

放射性標識⁶⁴Ｃｕ−カルボスチリルのリポソームへの封入：
５〜１００μＬの放射性標識⁶⁴Ｃｕ−カルボスチリル（０．１〜１ＧＢｑ）を０．５〜２ｍＬのキレート剤含有リポソームと共に３７〜５０℃で６０分間インキュベートして放射性標識⁶⁴Ｃｕ−カルボスチリルをリポソーム内に封入した。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって、未封入放射性核種⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離して⁶⁴Ｃｕ封入リポソームについて分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。⁶⁴Ｃｕ封入効率は９０％を超えていた。図７Ａは、カルボスチリルを使用してＤＯＴＡ封入リポソーム内に⁶⁴Ｃｕを封入することができたことを示している。図７Ａは、イオノフォアとしてカルボスチリルを使用した場合の⁶⁴Ｃｕの封入効率も示している。

【0234】

放射性標識⁶⁴Ｃｕ−オキシンのリポソームへの封入：
５〜１００μＬの放射性標識⁶⁴Ｃｕ−オキシン（０．１〜１ＧＢｑ）を０．５〜２ｍＬのキレート剤含有リポソームと共に３７〜５０℃で６０分間インキュベートして放射性標識⁶⁴Ｃｕ−オキシンをリポソーム内に封入した。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって、未封入放射性核種⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離して⁶⁴Ｃｕ封入リポソームについて分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。⁶⁴Ｃｕ封入効率は９０％を超えていた。図７Ｂは、オキシンを使用してＤＯＴＡ封入リポソーム内に⁶⁴Ｃｕを封入することができたことを示している。図７Ｂは、イオノフォアとしてオキシンを使用した場合の⁶⁴Ｃｕの封入効率も示している。

【0235】

カルボスチリルを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームの貯蔵安定性（３７℃、２４時間）：
精製した５００μＬの⁶⁴Ｃｕ−リポソーム溶液を３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって遊離⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって⁶⁴Ｃｕ−リポソームの安定性について分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。図８Ａは貯蔵安定性試験の結果を示しており、カルボスチリルを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む⁶⁴Ｃｕ−リポソームは全放射能の９９％を超える放射能を維持していた。放射性核種は、リポソームの内部に封入されたＤＯＴＡに対してより強い親和性を有するため、ＤＯＴＡの方とより好ましく結合し、遊離カルボスチリルは放出され、放射性核種はリポソーム内に封入される。

【0236】

オキシンを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームの貯蔵安定性（３７℃、２４時間）：
精製した５００μＬの⁶⁴Ｃｕ−リポソーム溶液を３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって遊離⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって⁶⁴Ｃｕ−リポソームの安定性について分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。図８Ｂは貯蔵安定性試験の結果を示しており、オキシンを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む⁶⁴Ｃｕ−リポソームは全放射能の７９％だけを維持していた（封入された⁶⁴Ｃｕの２１％が漏出）。

【0237】

カルボスチリルを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームの血清中安定性：
精製した５００μＬの⁶⁴Ｃｕ−リポソーム溶液を２５０μＬのヒト血清中で３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって遊離⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって⁶⁴Ｃｕ−リポソームの安定性について分析した。その結果、カルボスチリルを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む⁶⁴Ｃｕ−リポソームは全放射能の９９％を超える放射能を維持していた。

【0238】

また、イオノフォアとしてカルボスチリルを使用した⁶⁴Ｃｕの封入前後における⁶⁴Ｃｕ−リポソームのサイズ及びゼータ電位を測定した。以下の表１に示すように、⁶⁴Ｃｕ封入の前（９７．９ｎｍ）及び後（９６．０７ｎｍ）におけるサイズの有意差並びに⁶⁴Ｃｕ封入の前（−４．０９ｍＶ）及び後（−３．７８ｍＶ）におけるゼータ電位の有意差は観察されず、本発明によって調製した⁶⁴Ｃｕ−リポソーム組成物は高いインビトロ安定性を有することを示している。

【0239】

【表1】

【0240】

高い保存安定性及び高い血清中安定性を有するため、イオノフォアとしてカルボスチリルを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームのみを生体内実験に使用した。

【0241】

上記結果は、本発明により、ベシクル形成成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、リポソーム組成物内に封入され銅同位体を含む放射性標識物質と、を有するリポソーム組成物からなるリポソーム内に封入された放射性核種を提供することができることを示している。

【0242】

また、上記結果は、本発明により、新規イオノフォアとしてカルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、２ＨＱ）又はその誘導体（図１、好ましくは図２を参照のこと）を使用して銅同位体又は他の放射性核種をリポソーム組成物に封入する新規な方法が提供されることを示している。

【0243】

また、上記結果は、本発明の実施形態に係るリポソーム組成物を生体内研究に使用することができることを示している。さらに、上記結果は、リポソーム組成物は、所望の物質、例えば、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕから選択される銅同位体を、高い封入効率（＞９０％）で含み、３７℃で２４時間にわたる保存やヒト血清内インキュベーションを経ても封入物質の放出（漏出）が最小限である安定な形態を有することを示している。従って、本発明によって調製したリポソーム組成物は、ＰＥＴ撮影を含む放射性撮影、生体内癌診断並びに患者の血管の出血を伴うその他の病理学的症状の診断に使用することができる。本発明に係る新規な放射性標識リポソーム組成物は、患者の癌性疾患又はその他の疾患を治療するための放射線治療にも有用である。

【0244】

実施例ＩＩ
以下の実施例も本発明の実施形態を示すものである。なお、以下の実施例は本発明の範囲を制限するものではない。全ての銅同位体の化学特性を表すモデル核種として放射性核種⁶⁴Ｃｕを使用した。

【0245】

等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）を使用してイオノフォアと物質封入化合物（本実施例ではキレート剤）との間の配位子交換の平衡定数（Ｋ、交換定数ともいう）を得た。Ｃｕ（ＩＩ）と錯体を形成する場合のカルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、２ＨＱ）とＤＯＴＡとの配位子交換について、Ｃｕ（２ＨＱ）₂の緩衝溶液をＤＯＴＡで滴定することによって調べた。配位子交換は、ピーク積分によって決定されるＩＴＣ実験（図９Ａ）における注入による反応熱によって監視した。配位子交換定数（Ｋ）は、図９Ｂに示す反応熱を使用して決定した。結合等温式は以下の平衡によって定義される：

【数1】

【0246】

配位子交換定数（Ｋ）は以下のように定義される：

【数2】

【0247】

式中、ＣｕＤＯＴＡ、Ｃｕ（２ＨＱ）₂、２ＨＱ及びＤＯＴＡは、それぞれＣｕ−ＤＯＴＡ錯体の濃度、Ｃｕ（２ＨＱ）₂錯体の濃度、２ＨＱの遊離濃度及びＤＯＴＡの遊離濃度であり、ｃ_wは純水のモル濃度（５５．５Ｍ）である。

【0248】

ＩＴＣ試料の調製及び実験：
ＩＴＣ実験のためのＣｕＣｌ₂、２ＨＱ及びＤＯＴＡの溶液をＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．９）及び酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を使用して調製した。ＩＴＣ測定は、等温滴定熱量計（ｉＴＣ２００、ＭｉｃｒｏＣａｌ、ＧＥ社製）を使用して２５℃で行った。等温滴定熱量計は、製造者の推奨に従って電気パルスによって電気的に較正した。滴定には注射器（４０μＬ）を使用し、平衡化時及び実験時に注射器を１０００ｒｐｍで撹拌することによって混合した。一回の滴定において、典型的には、滴定剤を２μＬずつ２０回注入し、注入操作間には１５０秒の間隔を空けた。水を満たした熱量計の参照セルを試料セルに対する熱参照として使用した。ＣｕＣｌ₂、２ＨＱ及びＤＯＴＡの希釈熱について補正するために、緩衝液のみを使用して同様な条件で対照実験を行った。全ての溶液は、ノイズを減少させるために滴定前に脱気した。

【0249】

ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．９）内におけるＤＯＴＡを使用した２ＨＱからのＣｕ（ＩＩ）抽出のＩＴＣ測定結果を図９に示す。ｐＨ５．９における２ＨＱとＤＯＴＡの交換を熱スパイクプロット（Ａ）及び積分熱プロット（Ｂ）として示している。実験条件：０．０５ｍＭ Ｃｕ（２ＨＱ）₂に２μＬの０．５ｍＭ ＤＯＴＡを注入して滴定した。全ての溶液はＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．９）を使用して調製した。

【0250】

ＩＴＣデータ（図９）に基づき、ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．９）内における交換定数（Ｋ）は（５．２±１．６）・１０^-4、酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）内における交換定数（Ｋ）は（１．０±０．３）・１０^-2と推定され、Ｃｕ（ＩＩ）の２ＨＱからＤＯＴＡへの交換はｐＨ５．９よりもｐＨ４．０が有利であることが分かった。⁶⁴Ｃｕを封入するためのリポソームは、リポソーム内のＤＯＴＡ濃度が高くなるように調製した（ＣｕＤＯＴＡとＣｕ（２ＨＱ）₂の比が約１０⁵）。高い封入効率と高い封入安定性を達成するためには、リポソーム内におけるＣｕＤＯＴＡ濃度のＣｕ（２ＨＱ）₂濃度に対する比が大きいことが有利である。脂質二重膜を通して起こる２ＨＱによる⁶⁴Ｃｕの輸送は、２ＨＱからＤＯＴＡへのＣｕ（ＩＩ）の急速な交換が関わり、２ＨＱはＤＯＴＡを含むリポソームへの⁶⁴Ｃｕの封入を促進することができる。

【0251】

⁶⁴Ｃｕ−２ＨＱの放射性標識：
本発明に係るリポソーム組成物の製造方法に含まれる⁶⁴Ｃｕ−２ＨＱの製造例を以下に記載する。１０μＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ：７．４）中の０．３１４ｍＭ ２ＨＱを乾燥した放射性⁶⁴ＣｕＣｌ₂に添加した。⁶⁴Ｃｕ−２ＨＱの放射性標識は、２ＨＱ濃度をより高くした場合や、ＭＥＳ緩衝液、酢酸緩衝液等の他の緩衝液を使用した場合でも成功した。

【0252】

⁶⁴Ｃｕ−オキシンの放射性標識：
本発明に係るリポソーム組成物の製造方法に含まれる⁶⁴Ｃｕ−オキシンの製造例を以下に記載する。１０μＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ：７．４）中の０．３１４ｍＭ オキシンを乾燥した放射性⁶⁴ＣｕＣｌ₂に添加した。⁶⁴Ｃｕ−オキシンの放射性標識は、より高いオキシン濃度や、ＭＥＳ緩衝液、酢酸緩衝液等の他の緩衝液を使用した場合でも成功した。

【0253】

リポソームの調製：
標準的な薄膜水和及び反復押出を使用して小さな単層膜ベシクル（ＳＵＶ）（１００ｎｍ）を調製した。１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、コレステロール及び１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００）（モル比：５５：４０：５）をクロロホルムに溶解・混合し、緩やかなアルゴン流下において脂質薄膜を得た。有機溶媒残渣を減圧下で一晩にわたって除去した。脂質膜を適当な水溶液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ：７．４））に分散させ、６５℃で６０分間水和した。次に、ミニ押出機を使用してポリカーボネートメンブランフィルターに懸濁液を通過させてＳＵＶを得た。

【0254】

キレート剤含有リポソームの調製：
標準的な薄膜水和及び反復押出を使用し、キレート剤（ＤＯＴＡ等）をＤＳＰＣ、コレステロール及びＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（モル比：５５：４０：５）から構成されるリポソーム内に導入した。簡単に説明すると、脂質をクロロホルム内で混合し、緩やかな窒素流下において乾燥して脂質膜を得た。有機溶媒残渣を減圧下で一晩にわたって除去した。キレート剤（ＤＯＴＡ）を１０ｍＭの濃度で含む水溶液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４））に脂質膜を分散させた（ｐＨ４．０）。次に、溶液を６５℃で６０分間にわたって水和した。ミニ押出機を使用して１００ｎｍポリカーボネートメンブランフィルターに多層膜ベシクル（ＭＬＶ）を複数回通過させて、より小さい単層膜ベシクル（ＳＵＶ）を得た。封入されなかったキレート剤をサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０充填 １×２５ｃｍカラムを使用、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で溶出）で除去した。

【0255】

放射性標識⁶⁴Ｃｕ−２ＨＱのリポソームへの封入：
１０μＬの放射性標識⁶⁴Ｃｕ−２ＨＱ（１００ＭＢｑ）を０．５ｍＬのキレート剤含有リポソームと共に５０℃で６０分間インキュベートして上記リポソームの封入を行った。より高い放射能（１００〜４００ＭＢｑ）及び異なるリポソーム濃度（１〜５０ｍＭ）及び異なるリポソーム量（０．５〜２ｍＬ）でも封入を行うことができた。温度を２０℃まで下げ、インキュベーション時間を３０分まで短くしても、封入を行うことができた。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって、未封入放射性核種⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離して⁶⁴Ｃｕ封入リポソームについて分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。⁶⁴Ｃｕ封入効率は９０％を超えていた。図１０Ａは、２ＨＱによってＤＯＴＡ封入リポソーム内に⁶⁴Ｃｕを効率的に封入することができたことを示している。図１０Ａは、イオノフォアとしてカルボスチリルを使用した場合の高い封入効率も示している。

【0256】

放射性標識⁶⁴Ｃｕ−オキシンのリポソームへの封入：
１０μＬの放射性標識⁶⁴Ｃｕ−オキシン（１００ＭＢｑ）を０．５ｍＬのキレート剤含有リポソームと共に５０℃で６０分間インキュベートして放射性標識⁶⁴Ｃｕ−オキシンを上記リポソーム内に封入した。より高い放射能（１００〜４００ＭＢｑ）及び異なるリポソーム濃度（１〜５０ｍＭ）及び異なるリポソーム量（０．５〜２ｍＬ）でも封入を行うことができた。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって未封入放射性核種を⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって、封入された⁶⁴Ｃｕ−リポソームについて分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。⁶⁴Ｃｕ封入効率は９０％を超えていた。図１０Ｂは、オキシンによってＤＯＴＡ封入リポソーム内に⁶⁴Ｃｕを効率的に封入することができたことを示している。図１０Ｂは、イオノフォアとしてオキシンを使用した場合の封入効率も示している。

【0257】

２ＨＱを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームの貯蔵安定性（３７℃、２４時間）：
精製した５００μＬの⁶⁴Ｃｕ−リポソーム溶液（２ＨＱを使用して封入）を３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって未封入⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって、⁶⁴Ｃｕ−リポソームの安定性について分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。図８Ａは貯蔵安定性試験の結果を示しており、カルボスチリルを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む⁶⁴Ｃｕ−リポソーム（ｐＨ４．０）は全放射能の９９％を超える放射能を維持していた。放射性核種は、リポソームの内部に封入されたＤＯＴＡの方とより好ましく結合し、そのため遊離カルボスチリルは放出され、放射性核種はリポソーム内に封入される。図８Ｃは２４時間の安定性試験の結果を示し、⁶⁴Ｃｕ−リポソームは１０ｍＭ ＤＯＴＡを含ませて２ＨＱを使用して封入を行った（ｐＨ７．４）。２４時間後、封入された⁶⁴Ｃｕの５１％の漏出が観察された。

【0258】

オキシンを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームの貯蔵安定性（３７℃、２４時間）：
精製した５００μＬの⁶⁴Ｃｕ−リポソーム溶液（オキシンを使用して封入）を３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって未封入⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって⁶⁴Ｃｕ−リポソームの安定性について分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。図８Ｂは貯蔵安定性試験の結果を示しており、オキシンを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む⁶⁴Ｃｕ−リポソーム（ｐＨ４．０）は全放射能の７９％だけを維持していた（封入された⁶⁴Ｃｕの２１％が漏出）。図８Ｄは２４時間の安定度試験の結果を示し、⁶⁴Ｃｕ−リポソームは１０ｍＭ ＤＯＴＡを含ませてオキシンを使用して封入を行った（ｐＨ７．４）。２４時間後、封入された⁶⁴Ｃｕの５１％の漏出が観察された。

【0259】

２ＨＱを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームの血清中安定性：
精製した５００μＬの⁶⁴Ｃｕ−リポソーム溶液を２５０μＬのヒト血清中で３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって遊離⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって⁶⁴Ｃｕ−リポソームの安定性について分析した。その結果、２ＨＱを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む⁶⁴Ｃｕ−リポソーム（ｐＨ４．０）は２４時間後に全⁶⁴Ｃｕの９９％を超える⁶⁴Ｃｕを保持していた。

【0260】

上記結果は、本発明により、ベシクル形成成分と、ベシクル形成成分によって取り囲まれた物質封入成分と、リポソーム組成物内に封入され銅同位体を含む放射性標識物質と、を有するリポソーム組成物（好ましくはナノ粒子の形態である）からなるリポソーム内に封入された放射性核種を提供することができることを示している。

【0261】

また、上記結果は、本発明により、新規イオノフォアとしてカルボスチリルもしくはその誘導体又はオキシンもしくはその誘導体（図１又は図３（好ましくは図２又は図４）を参照のこと）を使用して銅同位体又は他の放射性核種をリポソーム組成物に封入するための新規な方法が提供されることを示している。

【0262】

また、上記結果は、本発明の実施形態に係るリポソーム組成物を生体内研究に使用することができることを示している。さらに、上記結果は、リポソーム組成物は、所望の物質、例えば、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕから選択される銅同位体を高い封入効率（＞９０％）で含み、３７℃で２４時間にわたる保存やヒト血清中インキュベーションを経ても封入物質の放出（漏出）が最小限である安定な形態を有することを示している。好適な実施形態において、銅同位体は⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される。一実施形態において、イオノフォアがカルボスチリル又はその誘導体である場合には、放射性核種は銅とは異なる放射性核種を含むことができる。従って、本発明によって調製したリポソーム組成物は、ＰＥＴ撮影を含む放射性撮影、生体内癌診断並びに患者の血管の出血を伴うその他の病理学的症状の診断に使用することができる。本発明に係る新規な放射性標識リポソーム組成物は、患者の癌性疾患又はその他の疾患を治療するための放射線治療にも有用である。

【0263】

実施例ＩＩＩ
以下の実施例も本発明の実施形態を示すものである。以下の実施例は本発明の範囲を制限するものではない。⁶¹Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕを含む全ての銅同位体の化学特性を表す診断及び治療用途のためのモデル核種として放射性核種⁶⁴Ｃｕを使用した。

【0264】

等温滴定熱量測定（ＩＴＣ）を使用してイオノフォアと物質封入化合物（本実施例ではキレート剤）との間の配位子交換の平衡定数（Ｋ、交換定数ともいう）を得た。Ｃｕ（ＩＩ）と錯体を形成する場合のカルボスチリル（２−ヒドロキシキノリン、２ＨＱ）とキレート剤（ｃｈｅｌａｔｅ）との配位子交換について、Ｃｕ（２ＨＱ）₂の緩衝溶液をＤＯＴＡ、ＴＥＴＡ、シクラム、シクレン及びＤＯＴＰから選択されるキレート剤で滴定することによって調べた。配位子交換は、ピーク積分によって決定されるＩＴＣ実験における注入による反応熱によって監視した。配位子交換定数（Ｋ）は反応熱を使用して決定した。結合等温式は以下の平衡によって定義される：

【数3】

【0265】

配位子交換定数（Ｋ）は以下のように定義される。

【数4】

【0266】

式中、Ｃｕ（ｃｈｅｌａｔｅ）、Ｃｕ（２ＨＱ）₂、２ＨＱ及びｃｈｅｌａｔｅは、それぞれＣｕ（キレート剤）錯体の濃度、Ｃｕ（２ＨＱ）₂錯体の濃度、２ＨＱの濃度及びキレート剤の濃度であり、ｃ_wは純水のモル濃度（５５．５Ｍ）である。

【0267】

ＩＴＣ試料の調製及び実験：
ＩＴＣ実験のためのＣｕＣｌ₂、２ＨＱ及びキレート剤（ＤＯＴＡ、ＴＥＴＡ、シクラム、シクレン又はＤＯＴＰ）の溶液をＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．９）及び酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を使用して調製した。ＩＴＣ測定は、等温滴定熱量計（ｉＴＣ２００、ＭｉｃｒｏＣａｌ、ＧＥ社製）を使用して２５℃及び５０℃で行った。等温滴定熱量計は、製造者の推奨に従って電気パルスによって電気的に較正した。滴定には注射器（２５０μＬ）を使用し、平衡化時及び実験時に注射器を１０００ｒｐｍで撹拌することによって混合した。典型的には、一回の滴定において滴定剤を２μＬずつ２０回注入し、注入操作間には１５０秒の間隔を空けた。水を満たした熱量計の参照セルを試料セルに対する熱参照として使用した。ＣｕＣｌ₂、２ＨＱ及びキレート剤の希釈熱について補正するために、緩衝液のみを使用して同様な条件で対照実験を行った。全ての溶液は、ノイズを減少させるために滴定前に脱気した。

【0268】

【表2】

【0269】

ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．９）及び酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）内におけるＤＯＴＡ、ＴＥＴＡ、シクラム、シクレン又はＤＯＴＰを使用した２−ヒドロキシキノリン（２ＨＱ）からのＣｕ（ＩＩ）抽出のＩＴＣ測定（２５℃及び５０℃）結果を表２に示す。配位子交換定数（Ｋ）及び配位子交換エンタルピー（ΔＨ）は、反応スキーム（１）に基づく結合等温線を利用したパラメータを適用して決定した。実験条件：０．５ｍＭ Ｃｕ（２ＨＱ）₂に２μＬの５ｍＭ ＤＯＴＡ、ＴＥＴＡ、シクラム、シクレン又はＤＯＴＰを注入して滴定した。

【0270】

ＩＴＣデータ（表２）に基づき、Ｃｕ（ＩＩ）と錯体を形成する物質封入成分として各キレート剤を使用することができることが分かった。また、測定された交換定数（Ｋ）に基づき、表２に示す異なるｐＨ及び温度条件下において、各キレート剤（ＤＯＴＡ、ＴＥＴＡ、シクラム、シクレン又はＤＯＴＰ）によって２−ヒドロキシキノリンからＣｕ（ＩＩ）を抽出することができることが分かった。

【0271】

表２に示すように、Ｃｕ（ＩＩ）の２ＨＱからＤＯＴＡへの交換にはｐＨ５．９よりもｐＨ４．０が有利であり、２５℃よりも５０℃が有利であることが分かった。また、Ｃｕ（ＩＩ）の２ＨＱからＴＥＴＡへの交換にはｐＨ４．０よりもｐＨ５．９が有利であり、２５℃よりも５０℃が有利であることが分かった。

【0272】

キレート剤含有リポソームの調製：
標準的な薄膜水和及び反復押出を使用し、キレート剤（ＤＯＴＡ）をＤＳＰＣ、コレステロール及びＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（モル比：５５：４０：５）から構成されるリポソーム内に導入した。簡単に説明すると、脂質をクロロホルム内で混合し、緩やかなアルゴン流下において乾燥して脂質膜を得た。有機溶媒残渣を減圧下で一晩にわたって除去した。キレート剤（ＤＯＴＡ）を１０ｍＭの濃度で含む水溶液（例えば、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４））に脂質膜を分散させた（ｐＨ４．０）。次に、溶液を６５℃で６０分間にわたって水和した。ミニ押出機を使用して１００ｎｍポリカーボネートメンブランフィルターに多層膜ベシクル（ＭＬＶ）を複数回通過させて単層膜ベシクル（ＳＵＶ）を得た。導入されなかったキレート剤をサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０充填１×２５ｃｍカラムを使用、ＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で溶出）で除去した。

【0273】

また、異なるベシクル形成成分を使用して上記のようにリポソームを調製した。表３に、２−ヒドロキシキノリンを使用した場合の、異なるリポソーム組成物への⁶⁴Ｃｕの封入効率を示す。

【0274】

【表3】

【0275】

また、イオノフォアとしてカルボスチリルを使用した⁶⁴Ｃｕの封入の前後における⁶⁴Ｃｕ−リポソームのサイズ及びゼータ電位を測定した。以下の表４に示すように、⁶⁴Ｃｕ封入の前（９７．９ｎｍ）及び後（９６．０７ｎｍ）におけるサイズの有意差並びに⁶⁴Ｃｕ封入の前（−４．０９ｍＶ）及び後（−３．７８ｍＶ）におけるゼータ電位の有意差は観察されず、本発明によって調製した⁶⁴Ｃｕ−リポソーム組成物は高いインビトロ安定性を有することを示している。

【0276】

【表4】

【0277】

生体内研究における動物腫瘍モデル：
ヒト結腸腺癌（ＨＴ２９）腫瘍細胞（２×１０⁶細胞）を雌ＮＭＲＩ（Ｎａｖａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）ヌードマウスの左及び右脇腹に接種し、４週間にわたって悪性固形腫瘍に成長させた。

【0278】

生体内研究のための⁶⁴Ｃｕ−リポソームを上述したように調製した。⁶⁴Ｃｕ−リポソームは、ＤＳＰＣ／ＣＨＯＬ／ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−２０００（モル比：５５：４０：５）から構成され、リポソーム内にキレート剤（ＤＯＴＡ）を１０ｍＭの濃度で含んでいた（ｐＨ４．０）。

【0279】

２ＨＱを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した⁶⁴Ｃｕ−リポソームの血清中安定性：
精製した５００μＬの⁶⁴Ｃｕ−リポソーム溶液を２５０μＬのヒト血清内で３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって遊離⁶⁴Ｃｕを⁶⁴Ｃｕ−リポソームから分離することによって⁶⁴Ｃｕ−リポソームの安定性について分析した。その結果、２ＨＱを使用して⁶⁴Ｃｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む⁶⁴Ｃｕ−リポソームは全放射能の９９％を超える放射能を維持していた。

【0280】

生体内分布イメージング及び定量化のための⁶⁴Ｃｕ−リポソーム及び⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡの投与：
⁶⁴Ｃｕ−リポソームの懸濁液及び⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡの懸濁液を、腫瘍を有しないＮＭＲＩヌードマウス（⁶⁴Ｃｕ−リポソーム、ｎ＝７；⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡ、ｎ＝５）及び腫瘍を有するマウス（⁶⁴Ｃｕ−リポソーム、ｎ＝５；⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡ、ｎ＝３）に静脈内（ｉ．ｖ．）投与した。⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡは、リポソームの内部を表す対照トレーサーの役割を果たす。マウス１匹当たりの注入量は１００μＬとした。各マウスに対してセボフルラン麻酔を行い、尾静脈に適切に注入するためにカテーテルを挿入した。ヌードマウスはＴａｃｏｎｉｃ社（Ｂｏｒｕｐ、デンマーク）から購入した。動物実験は、デンマーク法務省のガイドラインに従って行った。

【0281】

陽電子断層撮影（ＰＥＴ）／コンピュータ断層撮影（ＣＴ）及び定量化：
⁶⁴Ｃｕ−リポソーム又は⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡを静脈内投与した後、１、４、１２及び２４時間が経過した時点で各マウスに対してマイクロＰＥＴ／ＣＴを行った。ＰＥＴにおいては、画像中の対象領域（ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｅｒｅｓｔ（ＲＯＩ））に特異的に存在する放射能の量を算出することができ、シグナル強度の差に基づく直接的な定量を行うことができる。ＰＥＴ及びＣＴ画像を再構築した後、画像をソフトウェア（Ｓｉｅｍｅｎｓ社製Ｉｎｖｅｏｎ）で融合し、選択した臓器上にＲＯＩを設定することによってＰＥＴデータを分析した。ＰＥＴ値は平均ベクレルｍｌ^-1（Ｂｑ ｍｌ^-1）で表され、ＲＯＩは対象臓器上に手動で描いた。注入後の８０分間にわたって動的ＰＥＴデータを収集した後（２２フレーム収集し、２０分間の最後のフレームが１時間のスキャンを表す）、２０分間（４時間及び１２時間）及び４０分間（２４時間）の静的スキャンを行った。

【0282】

図１１は、⁶⁴Ｃｕ−リポソーム及び⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡの血中濃度と時間のプロファイルを示す時間放射能曲線（ＴＡＣ）である。⁶⁴Ｃｕ−リポソーム及び⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡの血中濃度は、ＲＯＩを描くことによって各マウスの左心室内の放射能濃度から測定した。推定左心室ＲＯＩ（％ＩＤ ｍＬ^-1）を、血液量（全体重の７％と推定）に対して正規化することによって％ＩＤ ｏｒｇａｎ^-1に変換した。血中濃度のＴＡＣは、各左心室ＲＯＩ（％ＩＤ ｏｒｇａｎ^-1）を時間の関数としてプロットすることによって得た。全注入活性用量は、注入から４分後に動物全体を囲むＲＯＩを描くことによって測定した。左心室ＲＯＩから導かれる血液ＴＡＣの定量化を評価するために、注入から２４時間後に動脈血試料を採取した。血液試料は、左心室ＲＯＩから得られた結果と同程度の⁶⁴Ｃｕ−リポソームレべルを示した。従って、左心室は、心臓において血中リポソーム濃度を正確に定量化するための領域として用いられる。予想通り、遊離⁶⁴Ｃｕ−ＤＯＴＡは投与後に腎臓濾過によって急速に除去された。

【0283】

図１２は、マウスの組織における⁶⁴Ｃｕ−リポソームの生体内分布の時間放射能曲線（ＴＡＣ）である。肝臓、心臓、脾臓、筋肉及び腫瘍における⁶⁴Ｃｕ−リポソームの生体内分布を、時間の関数としての％ＩＤ ｏｒｇａｎ^-1（臓器（ｏｒｇａｎ）あたりのパーセント注入用量）として示した。⁶⁴Ｃｕ−リポソームレベルは肝臓及び脾臓において４時間後に最高レベルに達した後、一定のレべルで推移した。これは、肝臓クッパー細胞及び脾臓マクロファージによってリポソームが循環血液から初期段階で迅速に除去されたことを反映している。また、腫瘍内皮は血管透過性が高まっていることは確立された知見であり、長時間循環ＰＥＧ化⁶⁴Ｃｕ−リポソームはこの透過性の上昇によって腫瘍組織に蓄積する。腫瘍部位における活性の上昇が観察され、リポソームが血流内を循環している限り腫瘍内におけるリポソームの蓄積は連続的に増加した。

【0284】

⁶⁴Ｃｕ−リポソームの静脈注射後の異なる時点で陽電子断層撮影（ＰＥＴ）／コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャンを行ったところ、生体内分布画像及び血中濃度時間プロファイルから定量的な測定を行うことができた。図１３は、異なる時点における正常なマウス及び腫瘍を有するマウスにおける⁶⁴Ｃｕ−リポソームの分布を示すＰＥＴ及びＰＥＴ／ＣＴ画像である。

【0285】

上記結果は、本発明の実施形態に係るリポソーム組成物を生体内研究に使用することができることを示している。また、上記結果は、リポソーム組成物は、所望の物質、例えば、⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕから選択される銅同位体を高い封入効率（＞９０％）で含み、３７℃で２４時間にわたる保存やヒト血清内インキュベーションを経ても封入物質の放出（漏出）が最小限である安定な形態を有することを示している。好適な実施形態において、銅同位体は⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される。一実施形態において、イオノフォアがカルボスチリル又はその誘導体である場合には、放射性核種は銅とは異なる放射性核種を含むことができる。従って、本発明によって調製したリポソーム組成物は、ＰＥＴ撮影を含む放射性撮影、生体内癌診断並びに患者の血管の出血を伴うその他の病理学的症状の診断に使用することができる。本発明に係る新規な放射性標識リポソーム組成物は、患者の癌性疾患又はその他の疾患を治療するための放射線治療にも有用である。

【0286】

¹⁷⁷Ｌｕ−２ＨＱの放射性標識：
１０μＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）中の０．３１４ｍＭ ２ＨＱを１０μＬの放射性¹⁷⁷ＬｕＣｌ₃（蒸留水中）に添加した。

【0287】

放射性標識¹⁷⁷Ｌｕ−２ＨＱのリポソームへの封入：
「キレート剤含有リポソームの調製」に記載したように調製した０．５ｍＬのキレート剤含有リポソームを、２０μＬの放射性標識¹⁷⁷Ｌｕ−２ＨＱ（１５０ＭＢｑ）と共に５０℃で６０分間インキュベートして封入を行った。放射性核種は、リポソームの内部に封入されたＤＯＴＡとより好ましく結合し、そのため遊離イオノフォア（２ＨＱ）は放出され、放射性核種¹⁷⁷Ｌｕがリポソーム内に封入される。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって未封入放射性核種¹⁷⁷Ｌｕを¹⁷⁷Ｌｕ−リポソームから分離することによって¹⁷⁷Ｌｕ封入リポソームについて分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。¹⁷⁷Ｌｕ封入効率は９６％だった。図１４Ａは、２ＨＱによってＤＯＴＡ封入リポソーム内に¹⁷⁷Ｌｕを効率的に封入することができたことを示している。

【0288】

２ＨＱを使用して¹⁷⁷Ｌｕを封入した¹⁷⁷Ｌｕ−リポソームの貯蔵安定性（３７℃、２４時間）：
精製した５００μＬの¹⁷⁷Ｌｕ−リポソーム溶液（オキシンを使用して封入）を３７℃で２４時間インキュベートし、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって未封入¹⁷⁷Ｌｕを¹⁷⁷Ｌｕ−リポソームから分離することによって¹⁷⁷Ｌｕ−リポソームの安定性について分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。図１４Ｂは貯蔵安定性試験（３７℃で２４時間）の結果を示しており、カルボスチリルを使用して¹⁷⁷Ｌｕを封入した場合には、１０ｍＭ ＤＯＴＡを含む¹⁷⁷Ｌｕ−リポソーム（ｐＨ４．０）は全放射能の９５％を超える放射能を維持していた。

【0289】

本発明に係るリポソーム組成物の製造方法に含まれる２ＨＱの二重放射性標識（¹⁷⁷Ｌｕ及び⁶⁴Ｃｕ）並びに放射線治療及び放射線診断のための放射性標識¹⁷⁷Ｌｕ−２ＨＱ及び⁶⁴Ｃｕ−２ＨＱを使用したリポソーム内への¹⁷⁷Ｌｕ及び⁶⁴Ｃｕの封入の例を以下に記載する。⁶⁴Ｃｕは、全ての銅同位体の化学特性を代表する。

【0290】

¹⁷⁷Ｌｕ／⁶⁴Ｃｕ−２ＨＱの放射性標識：
１０μＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ：７．４）中の０．３１４ｍＭ ２ＨＱを乾燥した放射性⁶⁴ＣｕＣｌ₂及び１０μＬの放射性¹⁷⁷ＬｕＣｌ₃（蒸留水中）に添加した。

【0291】

放射性標識⁶⁴Ｃｕ／¹⁷⁷Ｌｕ−２ＨＱを使用した⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕのリポソームへの封入：
「キレート剤含有リポソームの調製」に記載したように調製した０．５ｍＬのキレート剤含有リポソームを、¹⁷⁷Ｌｕ（１００ＭＢｑ）、⁶⁴Ｃｕ（１００ＭＢｑ）及び１０μＬの０．３１４ｍＭ ２ＨＱと共に５０℃で６０分間インキュベートすることによって封入を行った。サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ−５０カラムを使用）によって未封入放射性核種⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕを⁶⁴Ｃｕ／¹⁷⁷Ｌｕ−リポソームから分離することによって⁶⁴Ｃｕ／¹⁷⁷Ｌｕ封入リポソームについて分析した。溶出プロファイルは、インライン放射能検出器を使用して監視した。図１５は、２ＨＱによってＤＯＴＡ封入リポソーム内に⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕを効率的に封入することができたことを示している。¹⁷⁷Ｌｕの封入効率は９８％であり、⁶⁴Ｃｕの封入効率は９５％だった。ゲルマニウム検知器を使用して２種類のガンマ線源（⁶⁴Ｃｕ及び¹⁷⁷Ｌｕ）を識別し、リポソーム内への各放射性核種の封入を定量的に測定した。

【0292】

上記結果は、本発明の実施形態に係るリポソーム組成物を生体内研究に使用することができることを示している。また、上記結果は、リポソーム組成物は、所望の物質、例えば、¹⁷⁷Ｌｕ及び／又は銅同位体（例えば⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕから選択される）を高い封入効率（＞９０％）で含み、３７℃で２４時間にわたる保存やヒト血清内でのインキュベーションを経ても封入物質の放出（漏出）が最小限である安定な形態を有することを示している。好適な実施形態において、銅同位体は⁶¹Ｃｕ、⁶⁴Ｃｕ及び⁶⁷Ｃｕからなる群から選択される。一実施形態において、イオノフォアがカルボスチリル又はその誘導体である場合には、放射性核種は銅とは異なる放射性核種（例えば¹⁷⁷Ｌｕ）を含むことができる。従って、本発明によって調製したリポソーム組成物は、ＰＥＴ撮影を含む放射性撮影、生体内癌診断及び患者の血管の出血を伴うその他の病理学的症状の診断に使用することができる。本発明に係る新規な放射性標識リポソーム組成物は、患者の癌性疾患又はその他の疾患を治療するための放射線治療にも有用である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図7A】

【図7B】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【図8D】

【図9A】

【図9B】

【図10A】

【図10B】

【図11】

【図12】

【図13A】

【図13B】

【図13C】

【図13D】

【図14A】

【図14B】

【図15】