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▶ メルク・シャープ・エンド・ドーム・ベー・フェーの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】5886873
(24)【登録日】2016年2月19日
(45)【発行日】2016年3月16日
(54)【発明の名称】Ｎ置換アゼチジン誘導体
(51)【国際特許分類】
C07D 409/12 20060101AFI20160303BHJP
C07D 413/12 20060101ALI20160303BHJP
C07D 405/12 20060101ALI20160303BHJP
C07D 409/14 20060101ALI20160303BHJP
C07D 417/14 20060101ALI20160303BHJP
C07D 413/14 20060101ALI20160303BHJP
C07D 417/12 20060101ALI20160303BHJP
C07D 205/04 20060101ALI20160303BHJP
A61K 31/397 20060101ALI20160303BHJP
A61K 31/42 20060101ALI20160303BHJP
A61K 31/41 20060101ALI20160303BHJP
A61K 31/4439 20060101ALI20160303BHJP
A61K 31/425 20060101ALI20160303BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20160303BHJP
A61P 15/00 20060101ALI20160303BHJP
A61P 13/08 20060101ALI20160303BHJP
A61P 19/00 20060101ALI20160303BHJP
A61K 31/568 20060101ALI20160303BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20160303BHJP
C07J 43/00 20060101ALI20160303BHJP
【ＦＩ】
C07D409/12
C07D413/12
C07D405/12
C07D409/14
C07D417/14
C07D413/14
C07D417/12
C07D205/04
A61K31/397
A61K31/42
A61K31/41
A61K31/4439
A61K31/425
A61P35/00
A61P15/00
A61P13/08
A61P19/00
A61K31/568
A61P43/00 111
C07J43/00
【請求項の数】7
【全頁数】69
(21)【出願番号】特願2013-545218(P2013-545218)
(86)(22)【出願日】2011年12月16日
(65)【公表番号】特表2014-503537(P2014-503537A)
(43)【公表日】2014年2月13日
(86)【国際出願番号】EP2011073041
(87)【国際公開番号】WO2012084711
(87)【国際公開日】20120628
【審査請求日】2014年7月2日
(31)【優先権主張番号】10196960.8
(32)【優先日】2010年12月24日
(33)【優先権主張国】EP
(73)【特許権者】
【識別番号】513156397
【氏名又は名称】メルク・シャープ・エンド・ドーム・ベー・フェー
(74)【代理人】
【識別番号】100146318
【弁理士】
【氏名又は名称】岩瀬 吉和
(74)【代理人】
【識別番号】100114188
【弁理士】
【氏名又は名称】小野 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100119253
【弁理士】
【氏名又は名称】金山 賢教
(74)【代理人】
【識別番号】100124855
【弁理士】
【氏名又は名称】坪倉 道明
(74)【代理人】
【識別番号】100129713
【弁理士】
【氏名又は名称】重森 一輝
(74)【代理人】
【識別番号】100137213
【弁理士】
【氏名又は名称】安藤 健司
(74)【代理人】
【識別番号】230105223
【弁護士】
【氏名又は名称】城山 康文
(72)【発明者】
【氏名】デイジクス，フレドリクス・アントニウス
(72)【発明者】
【氏名】ルシャー，スコツト・ジエイムズ
(72)【発明者】
【氏名】ストツク，ヘルマン・テイジス
(72)【発明者】
【氏名】ベーネマン，ゲルリツト・ヘルマン
【審査官】
前田 憲彦
(56)【参考文献】
【文献】
欧州特許出願公開第０１５７７２８８（ＥＰ，Ａ１）
【文献】
国際公開第２００９／０６７６００（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
特表２００５−５１７７３１（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特表２００５−５０６３３７（ＪＰ，Ａ）
【文献】
米国特許第３９８３２４５（ＵＳ，Ａ）
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ｃ０７Ｄ ４０９／００
Ａ６１Ｋ ３１／００
Ｃ０７Ｄ ２０５／００
Ｃ０７Ｄ ４０５／００
Ｃ０７Ｄ ４１３／００
Ｃ０７Ｄ ４１７／００
Ｃ０７Ｊ ４３／００
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式５のいずれか１つの化合物からなる群から選択されるＮ置換アゼチジン誘導体。
〔式中、
Ｒ１は、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ１−４）アルキルカルボニル、（Ｃ１−４）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のハロゲン、ニトリル、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルキルで置換されていてもよく；
（ｈ）Ａｒは、Ｒ１２およびＲ１３で置換されていてもよい芳香族環であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ４およびＲ７は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ１２は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ、ニトリルまたはヒドロキシルであり；
Ｒ１３は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ６は、Ｈ、ヒドロキシル、アミンまたは（Ｃ１−６）アルコキシである。〕
【化1】
〔式中、
Ｒ１は、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ１−４）アルキルカルボニル、（Ｃ１−４）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のハロゲン、ニトリル、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルキルで置換されていてもよく；
（ｈ）Ａｒは、Ｒ１２およびＲ１３で置換されていてもよい芳香族環であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ４およびＲ７は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ１２は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ、ニトリルまたはヒドロキシルであり；
Ｒ１３は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ６は、Ｈ、ヒドロキシル、アミンまたは（Ｃ１−６）アルコキシである。〕
【請求項2】
式６のいずれか１つの化合物からなる群から選択される、請求項１に記載のＮ置換アゼチジン誘導体。
【化2】
【請求項3】
式７のいずれか１つの化合物からなる群から選択される、請求項１に記載のＮ置換アゼチジン誘導体。
【化3】
【請求項4】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のＮ置換アゼチジン誘導体と、医薬的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項5】
治療に使用するための医薬の製造における、請求項１〜３のいずれか一項に記載のＮ置換アゼチジン誘導体の使用。
【請求項6】
排卵機能不全、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮内膜症、骨粗鬆症、前立腺癌、良性前立腺肥大症および乳癌、特に、ＥＲ陽性乳癌、さらに特定的には、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌の処置または予防に使用するための医薬の製造における、請求項１〜３のいずれか一項に記載のＮ置換アゼチジン誘導体の使用。
【請求項7】
前記医薬がＥＲ陽性タモキシフェン耐性乳癌の処置に使用される、請求項６に記載のＮ置換アゼチジン誘導体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新規Ｎ置換アゼチジン誘導体群、すなわち、Ｎ置換アゼチジン基で誘導体化された選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）フラグメント群、これらの化合物を含む医薬組成物、治療でのこれらの使用、特に、排卵機能不全、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮内膜症、骨粗鬆症、前立腺癌、良性前立腺肥大症および乳癌、特に、エストロゲン受容体（ＥＲ）陽性乳癌、さらに特定的には、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌の予防または処置のためのこれらの使用に関する。ある実施形態では、この新規化合物は、エストロゲン受容体アルファアンタゴニストであるＳＥＲＭに由来する化学骨格にエーテル結合を介して接続したＮ置換アゼチジン部分を含有する。
【背景技術】
【0002】
エストロゲン受容体（ＥＲ）は、核ホルモン受容体スーパーファミリーに属するリガンド誘導性転写因子である。エストロゲンは、男女を問わず、多くの生理学的プロセスの制御にとって重要な役割を担う。ヒトの場合、２種類の異なるＥＲサブタイプＥＲα、ＥＲβが知られており、それぞれ別個の組織分布をもち、生体内での役割が異なる。ＥＲαは、子宮内膜、乳癌細胞、卵巣間質細胞、視床下部に多く存在する。腎臓、脳、骨、心臓、肺、腸粘膜、前立腺、膀胱、卵巣、睾丸、内皮細胞でＥＲβタンパク質の発現が立証されてきた。総説としては、Ｊ．Ｗ．ＵｌｌｒｉｃｈおよびＣ．Ｐ．Ｍｉｌｌｅｒ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ、１６（２００６）５５９−５７２を参照。
【0003】
よく知られたＳＥＲＭの例は、タモキシフェンおよびラロキシフェンである。タモキシフェンは、例えば、骨および子宮内膜でエストロゲンに似た挙動を示し、一方、乳房組織では、抗エストロゲンに似た挙動を示す。ＳＥＲＭは、フェノール性ヒドロキシル基（またはその生物学的等価体）と、塩基性アミンを含む側鎖という２つの共通する構造的特徴によってさらに特徴づけられる。インビボで投与したときに、ＳＥＲＭのヒドロキシル基は、まだ存在していなくてもよく、プロドラッグを脱保護することによって（例えば、フェノール性メトキシ基の脱メチル化またはフェノール性エステル基の加水分解によって）、または代謝による導入（例えば、タモキシフェンを代謝によって、タモキシフェンの活性代謝物である４−ヒドロキシ−タモキシフェンに変換）によってインビボで形成されてもよい。塩基性アミンを含む側鎖の例は、２−（ジメチルアミノ）エトキシ（タモキシフェン中にあるような）、２−（１−ピペリジニル）エトキシ（ラロキシフェン中にあるような）、２−（１−ピロリジニル）エトキシ（ラソフォキシフェン中にあるような）である。ＳＥＲＭがエストロゲン受容体に結合すると、側鎖の塩基性アミンが、アミノ酸残基Ａｓｐ３５１（ＥＲα中）またはＡｓｐ３０３（ＥＲβ中）と相互作用を形成し、受容体の配座変化が起こる。ＳＥＲＭに関する総説としては、Ｃ．Ｐ．Ｍｉｌｌｅｒ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ ８（２００２）２０８９−２１１１；Ｖ．Ｃ Ｊｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６（２００３）８８３−９０８およびＪ．Ｈ．Ｐｉｃｋａｒら；Ｍａｔｕｒｉｔａｓ ６７（２０１０）１２９−１３８を参照。
【0004】
乳癌は、女性の主要な新生物性疾患である。ＥＲαは、乳癌進行の大きな要因である。既存の複数の処置手段は、エストロゲン濃度を下げるか、またはＥＲαへの結合を遮断することによって、ＥＲ陽性乳癌の腫瘍の進行をできるだけ遅くするか、または時には腫瘍退縮を誘導することを目的とする。タモキシフェンは、ＥＲ陽性乳癌について第一選択となる治療で使用される第一世代のＳＥＲＭである（Ｖ．Ｃ．Ｊｏｒｄａｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、２（２００３）２０５−２１３を参照）。乳癌処置の効能は、抗ホルモン治療（例えば、タモキシフェン阻害剤またはアロマターゼ阻害剤を用いた処置）に対する本質的な耐性または新しく開発された耐性によって大きく妨害される。このような耐性は、ＥＲのリン酸化、またはホルモン受容体および／または成長因子信号伝達経路における主要要素の制御の結果として、存在し得るか、または発生し得る（Ｖ．Ｃ．ＪｏｒｄａｎおよびＢ．Ｗ．Ｏ’Ｍａｌｌｅｙ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２５（２００７）５８１５−５８２４；Ｖ．Ｃ．Ｊｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，９８（２００６）６５７−６５９；Ｓ．Ｊ．Ｃｌｅａｔｏｒら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ ９（２００９）Ｓ６−Ｓ１７を参照）。
【0005】
タモキシフェン耐性は、タモキシフェンおよびその４−ＯＨ代謝物に残存するアゴニスト活性に由来する。第２世代のＳＥＲＭ（例えば、トレミフェン、ドロロキシフェン、イドキシフェン、アルゾキシフェン、ラロキシフェン）は、ＥＲ陽性乳癌の処置の際にタモキシフェンの効能を高めることができなかったか、および／または互いに交差耐性を示した（Ｖ．Ｄｅｓｈｍａｎｅら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２５（２００７）４９６７−４９７３）；Ｊ．Ｈ．Ｐｉｃｋａｒら、Ｍａｔｕｒｉｔａｓ ６７（２０１０）１２９−１３８）。
【0006】
フルベストラントは、ステロイド系Ｃ７置換１７β−エストラジオール誘導体であり、ＳＥＲＭには典型的なことだが、部分的なアゴニスト活性をもたない純粋なＥＲアンタゴニストであり、乳癌処置の第二選択として有効な唯一上市されているＳＥＲＤ（選択的エストロゲン受容体下方制御剤）である。ＥＲを拮抗すること以外に、フルベストラントは、細胞内のＥＲαタンパク質濃度も有効に下方制御する。このＳＥＲＤ活性は、ＥＲαによって誘導される増殖および腫瘍の成長を阻害する（ＥＲαを上方制御するタモキシフェンとは対照的）。筋肉内投与するとき、フルベストラントを１ヶ月に１回２５０ｍｇ投与することは、ＥＲ陽性の進行性乳癌の処置の際のタモキシフェンと同等に有効である（Ａ．Ｈｏｗｅｌｌら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２２（２００４）１６０５−１６１３）。ＥＲ陽性タモキシフェン耐性乳癌を処置する第二選択において、フルベストラントを筋肉内投与するとき、１ヶ月に１回２５０ｍｇ投与することは、アロマターゼ阻害剤と同等に有効であるが、バイオアベイラビリティおよび／または標的に対する暴露が比較的良くなく、臨床的な効能が制限されている（Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎら、Ｓａｎ Ａｎｔｏｎｉｏ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ，２００９；Ｌｉｎｄｅｎら、Ｓａｎ Ａｎｔｏｎｉｏ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ，２００７）。
【0007】
他の既知のＳＥＲＤは、ＩＣＩ １６４，３８４（すなわち、フルベストラントの構造類似体）、ＧＷ５６３８（すなわち、タモキシフェンの構造類似体）、ＧＷ７６０４（すなわち、４−ヒドロキシ−タモキシフェンの構造類似体）である。ＳＥＲＤに関する総説としては、Ｍ．Ｆａｎら、Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．１０３（２００７）３７−４４を参照。
【0008】
Ｍｅｒｃｋは、修飾された（すなわち、ビス−メチル化ピロリジニルエトキシ）塩基性アミン側鎖のすべてが、ＳＥＲＭではなく同時にＳＥＲＤとして挙動する２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］−オキサチイン誘導体群を報告している。しかし、この修飾された塩基性アミン側鎖は、他のＳＥＲＭに由来する化学骨格（例えば、ラロキシフェンのベンゾチオフェン、ラソフォキシフェンのテトラヒドロナフタレン、バゼドキシフェンのインドール）の上に存在しているときは、これらの修飾された化合物は、ＳＥＲＤとして挙動しなかった。Ｊ．Ｗ．ＵｌｌｒｉｃｈおよびＣ．Ｐ．Ｍｉｌｌｅｒ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，１６（２００６）５５９−５７２の５６１ページ、およびそこに引用されている参考文献１８および１０１−１０３を参照。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0009】
【非特許文献1】Ｊ．Ｗ．ＵｌｌｒｉｃｈおよびＣ．Ｐ．Ｍｉｌｌｅｒ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，１６（２００６）５５９−５７２
【非特許文献2】Ｃ．Ｐ．Ｍｉｌｌｅｒ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ ８（２００２）２０８９−２１１１
【非特許文献3】Ｖ．Ｃ Ｊｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６（２００３）８８３−９０８
【非特許文献4】Ｊ．Ｈ．Ｐｉｃｋａｒら；Ｍａｔｕｒｉｔａｓ ６７（２０１０）１２９−１３８
【非特許文献5】Ｖ．Ｃ．Ｊｏｒｄａｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，２（２００３）２０５−２１３
【非特許文献6】Ｖ．Ｃ．ＪｏｒｄａｎおよびＢ．Ｗ．Ｏ’Ｍａｌｌｅｙ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２５（２００７）５８１５−５８２４
【非特許文献7】Ｖ．Ｃ．Ｊｏｒｄａｎ，Ｊ．Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，９８（２００６）６５７−６５９
【非特許文献8】Ｓ．Ｊ．Ｃｌｅａｔｏｒら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ ９（２００９）Ｓ６−Ｓ１７
【非特許文献9】Ｖ．Ｄｅｓｈｍａｎｅら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２５（２００７）４９６７−４９７３）
【非特許文献10】Ａ．Ｈｏｗｅｌｌら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２２（２００４）１６０５−１６１３
【非特許文献11】Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎら、Ｓａｎ Ａｎｔｏｎｉｏ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ，２００９
【非特許文献12】Ｌｉｎｄｅｎら、Ｓａｎ Ａｎｔｏｎｉｏ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ，２００７
【非特許文献13】Ｍ．Ｆａｎら、Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．１０３（２００７）３７−４４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0010】
したがって、新規かつ強力なＥＲαアンタゴニスト、好ましくは、ＥＲ下方制御活性を有し（乳癌細胞において）、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌細胞の増殖を刺激せず、経口投与可能であり、特に、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌の処置に有用であると考えられる新規かつ強力なＥＲαアンタゴニストが必要とされている。
【0011】
乳癌の処置以外にも、ＳＥＲＭは、多くの他の障害および／または疾患の処置にも使用されてきた。排卵を誘発するタモキシフェンおよびクエン酸クロミフェンによる排卵機能不全の処置は、Ａ．ＳｔｅｉｎｅｒらによってＨｕｍａｎ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ２０（２００５）１５１１−１５１５に、また、Ｊ．Ｈ．ＰｉｃｋａｒらによってＭａｔｕｒｉｔａｓ ６７（２０１０）１２９−１３８に記載されている。Ｊ．Ｈ．Ｐｉｃｋａｒらは、Ｍａｔｕｒｉｔａｓ ６７（２０１０）１２９−１３８において、ＳＥＲＭを用いた子宮癌、子宮内膜癌、骨粗鬆症、前立腺癌、良性前立腺肥大症の処置についても記載している。Ｓ．Ｊ．ＥｌｌｅｍおよびＧ．Ｐ．Ｒｉｓｂｒｉｄｇｅｒは、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ ７（２００７）６２１−６２７において、前立腺癌および良性前立腺過形成（または肥大）の処置についても記載している。卵巣癌の処置は、Ｇ．Ｍ．ＣｌｉｎｔｏｎおよびＷ．Ｈｕａによって、Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｏｎｃｏｌ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２５（１９９７）１−９に記載されている。Ｓ．Ｅ．Ｂｕｌｕｎは、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６０（２００９）２６８−２７９において、子宮内膜症におけるエストロゲンおよびエストロゲン受容体信号伝達の役割についてまとめている。
【課題を解決するための手段】
【0012】
本発明は、以下の式１を有するＮ置換アゼチジン誘導体群
【0013】
【化1】
ＳＥＲＭＦは、選択的エストロゲン受容体モジュレーターフラグメントであり；
Ｘは、原子なし、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、カルボニル、Ｎ−Ｒ５であり；
Ｒ１は、Ｈ、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ１−４）アルキルカルボニル、（Ｃ１−４）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のハロゲン、ニトリル、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルキルで置換されていてもよく；
Ｒ５は、Ｈ、１個以上のフッ素で置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルであり；
Ｒ１７、Ｒ１８およびＲ１９は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、ニトリルまたは１個以上のフッ素で置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルである〕
またはプロドラッグ、その同位体標識された誘導体または医薬的に許容される塩を提供する。
【発明を実施するための形態】
【0014】
本発明のＮ置換アゼチジン誘導体は、一般的に、ＳＥＲＭフラグメント（ＳＥＲＭＦと省略される）、例えば、ラロキシフェンの置換ベンゾチオフェン、ラソフォキシフェンの置換テトラヒドロナフタレン、バゼドキシフェンの置換インドール、タモキシフェンの置換ｔｒａｎｓ−１，２−ジフェニルブタ−１−エンなどが、塩基性アミン側鎖（すなわち、ラロキシフェンのピペリジニルエチルオキシ部分、ラソフォキシフェンのピロリジニルエチルオキシ部分、バゼドキシフェンのホモピペリジニルエチルオキシ部分またはタモキシフェンのジメチルアミノエチルオキシ部分など）に接続しているのではなく、Ｎ置換アゼチジン−Ｘ部分、特に、Ｎ置換アゼチジニル−３−オキシ部分に接続している対応するＳＥＲＭから誘導される。さまざまな適切なＳＥＲＭフラグメントの全体に関する総説については、Ｊ．Ｗ．ＵｌｌｒｉｃｈおよびＣ．Ｐ．ＭｉｌｌｅｒのＥｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，１６（２００６）５５９−５７２を参照。
【0015】
（Ｃ１−８）アルキルとの用語は、炭素原子を１〜８個含む直鎖または分枝鎖のアルキル鎖、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−オクチルを意味する。
【0016】
（Ｃ１−６）アルキルとの用語は、炭素原子を１〜６個含む直鎖または分枝鎖のアルキル鎖、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルを意味する。
【0017】
（Ｃ１−４）アルキルとの用語は、炭素原子を１〜４個含む直鎖または分枝鎖のアルキル鎖を意味し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルである。
【0018】
（Ｃ１−３）アルキルとの用語は、炭素原子を１〜３個含む直鎖または分枝鎖のアルキル鎖を意味し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピルである。
【0019】
（Ｃ１−２）アルキルとの用語は、炭素原子を１〜２個含むアルキル鎖を意味し、メチルおよびエチルである。
【0020】
（Ｃ３−８）シクロアルキルとの用語は、炭素原子を３〜８個含むシクロアルキル基、例えば、シクロプロピル、エチルシクロプロピル、シクロブチル、メチルシクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ビシクロ［２．２．１］ヘプチルを意味する。
【0021】
（Ｃ３−６）シクロアルキルとの用語は、炭素原子を３〜６個含むシクロアルキル基、例えば、シクロプロピル、エチルシクロプロピル、シクロブチル、メチルシクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ビシクロ［１．１．１］ペンチルを意味する。
【0022】
（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキルとの用語は、炭素原子を３〜６個とＮ、Ｏおよび／またはＳから選択されるヘテロ原子を１〜２個含み、炭素原子を介して結合するヘテロシクロアルキル基を意味する。例は、オキセタニル、メチルオキセタニル、テトラヒドロフラニル（ｔｅｔｒａｈｙｄｏｆｕｒａｎｙｌ）、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、テトラヒドロチオピラニル、オキサゼパニルである。
【0023】
（Ｃ２−６）アルケニルとの用語は、炭素原子を２〜６個含む分岐アルケニル基または分岐していないアルケニル基、例えば、エテニル、２−プロペン−１−イル、２−ブテニル、ｎ−ペンテニルを意味する。
【0024】
（Ｃ２−６）アルキニルとの用語は、炭素原子を２〜６個含む分岐アルキニル基または分岐していないアルキニル基、例えば、エチニル、２−プロピン−１−イル、２−ブチニル、ｎ−ペンチニルを意味する。
【0025】
（Ｃ１−４）アルキルカルボニルとの用語は、アルキル基が、上に定義したような炭素原子を１〜４個含む分岐アルキル基または分岐していないアルキル基であり、カルボニル基を介して結合するアルキルカルボニル基を意味する。
【0026】
（Ｃ１−６）アルコキシとの用語は、アルキル基が、上に定義したような炭素原子を１〜６個含む分岐アルキル基または分岐していないアルキル基であり、酸素原子を介して結合するアルキルオキシ基を意味する。例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ヘキシルオキシである。
【0027】
（Ｃ１−３）アルコキシとの用語は、アルキル基が、上に定義したような炭素原子を１〜３個含む分岐アルキル基または分岐していないアルキル基であり、酸素原子を介して結合するアルキルオキシ基を意味する。例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシである。
【0028】
（Ｃ１−３）アルキルチオとの用語は、アルキル基が、炭素原子を１〜３個含む分岐アルキル基または分岐していないアルキル基であり、硫黄原子を介して結合するアルキルチオ基を意味し、メチルスルファニル、エチルスルファニル、プロピルスルファニル、イソプロピルスルファニルである。
【0029】
（Ｃ１−４）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキルとの用語は、本明細書中で使用する場合、炭素原子を２〜４個含み、これに対してアルコキシ基が接続しており、炭素原子を１〜４個含むアルコキシ基に酸素原子を介して接続しているアルキル基を意味する。例は、２−メトキシ−エチル、３−メトキシプロピル、プロポキシメチル、２−エトキシエチルである。
【0030】
（Ｃ１−２）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキルとの用語は、本明細書中で使用する場合、炭素原子を２〜４個含み、これに対してアルコキシ基が接続しており、炭素原子を１〜２個含むアルコキシ基に酸素原子を介して接続しているアルキル基を意味する。例は、２−メトキシエチル、３−メトキシプロピル、２−エトキシエチルである。
【0031】
（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルとの用語は、本明細書中で使用する場合、炭素原子を１〜３個含み、これに対して炭素原子を３〜６個含むシクロアルキル置換基が接続しているアルキル基を意味する。例は、シクロプロピルメチル、シクロブチルエチル、メチルシクロブチルメチルである。
【0032】
（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルとの用語は、本明細書中で使用する場合、炭素原子を１〜３個含み、これに対して、すでに定義したのと同じ意味を有する（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル置換基が接続しているアルキル基を意味する。例は、オキセタニルメチル、テトラヒドロフラニルメチル（ｔｅｔｒａｈｙｄｏｆｕｒａｎｙｌｍｅｔｈｙｌ）、テトラヒドロピラニルエチル、Ｎ−メチルアゼチジニル−メチルである。
【0033】
ハロゲンとの用語は、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素、特に、フッ素および塩素、さらに特定的にはフッ素を意味する。
【0034】
式１または以下に記載する他の式中の構造の骨格または置換基の性質に依存して、本発明の化合物は、２種類のエナンチオマーを実質的に等量含むエナンチオマーのラセミ混合物として、任意の比率のエナンチオマー混合物として、または純粋なエナンチオマーとして存在してもよい。本発明は、その範囲に含まれる上述の混合物およびラセミ混合物、他のエナンチオマーを実質的に含まない個々の（＋）エナンチオマーおよび（−）エナンチオマー（すなわち、他のエナンチオマーを５％未満、好ましくは２％未満、特に１％未満しか伴わないエナンチオマー）を含む。
【0035】
式１または以下に記載する他の式中の構造の骨格または置換基の性質に依存して、本発明の化合物は、ジアステレオマー混合物として存在してもよい。本発明は、その範囲に含まれる上述のジアステレオマー混合物、および別のジアステレオマーを実質的に含まない個々のジアステレオマー（すなわち、ジアステレオマー過剰率が９５％を超えるか、好ましくは９８％を超え、特に９９％を超えるジアステレオマー）を含む。
【0036】
プロドラッグは、受容者の体内で、式１または以下に記載する他の式によって定義される化合物に変換される化合物であると定義される。特に、式１の骨格のＡ環にあるフェノール性ヒドロキシル基は、例えば、アルキル、アルケニル、アシル、アロイル、アルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルファメート、アリールスルファメート、ホスフェート基またはグリコシル基によって置換されていてもよく、それによって炭素鎖長は境界が明確ではないと考えられ、一方、アロイルおよびアリールは、一般的に、フェニル、ピリジニルまたはピリミジニルを含んでおり、これらの基は、当該技術分野で通常の置換基、例えば、アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、シアノ、（モノアルキルまたはジアルキル）アミノ基を含んでいてもよい。炭素鎖長は、プロドラッグの望ましい性質に依存して選択され、プロドラッグの鎖が長いほど（例えば、ラウリル鎖またはカプロイル鎖）、一般的に、持続性放出およびデポー製剤に適している。このような置換基は自然に加水分解するか、または酵素によって加水分解し、化合物骨格に遊離ヒドロキシル置換基を与えることが知られている。このようなプロドラッグは、受容者の体内で変換される化合物に匹敵する生体活性を有する。プロドラッグから変換される活性化合物は、親化合物と呼ばれる。作用の発生と作用の持続時間、およびプロドラッグの体内分布は、親化合物のこのような性質とは異なる場合がある。また、プロドラッグを投与した後に得られる親化合物の血漿濃度は、親化合物を直接投与した後に得られる血漿濃度とは異なる場合がある。他の種類のプロドラッグの場合、式１の化合物のヒドロキシル基は、受容者の代謝系によって所定の位置に配置可能であることを理解すべきである。ヒドロキシル基は、エストロゲン受容体に対する親和性に顕著に寄与する。したがって、式１によって定義されるが、ＳＥＲＭＦ部分にフェノール性ヒドロキシル基をもたない化合物も本発明の化合物として利用可能であるが、この化合物は、プロドラッグと呼ばれる。
【0037】
本発明の一実施形態では、式１または以下に記載する他の式中のＳＥＲＭＦフラグメントに接続したフェノール性ヒドロキシル基は、（Ｃ１−８）アルキル基または（Ｃ１−１８）アシル基、例えば、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−オクチル、アシル、オクタノイル、ドデカノイルおよびオクタデカノイルで置換されている。別の実施形態では、ヒドロキシル基は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル基または（Ｃ１−Ｃ８）アシル基、例えば、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、アシルおよびオクタノイルで置換されている。
【0038】
医薬の配合を容易にするため、および／または種々の経路で投与した後のバイオアベイラビリティ（例えば、経口投与後の腸での吸収）を上げる目的で、水溶解度を上げるために式１または以下に記載する他の式のＮ置換アゼチジン誘導体のプロドラッグを調製してもよい。このような可溶化プロドラッグは、当業者によく知られている。この手法の代表例は、Ｖ．Ｊ．ＳｔｅｌｌａおよびＷ．Ｎ．−Ａ．Ｋｗａｍｅ，Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ、５９（２００７）６７７−６９４の中に見いだすことができる。
【0039】
本発明は、式１または以下に記載する他の式のいずれかの化合物の同位体標識された誘導体も包含する。同位体標識された誘導体は、１個以上の原子が、天然に通常みられる原子数または質量数とは異なる原子数または質量数を有する原子と置き換わっているという事実を除いては本明細書に引用されている化合物と同じである。本発明の化合物に組み込むことが可能な同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、ヨウ素の同位体、例えば、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、１２３Ｉである。
【0040】
式１の化合物の特定の同位体標識された誘導体（例えば、３Ｈおよび１４Ｃで標識されたもの）または以下に記載する他の式の化合物の特定の同位体標識された誘導体は、化合物および／または基質の組織分布アッセイに有用である。トリチウム同位体（すなわち、３Ｈ）および炭素−１４（すなわち、１４Ｃ）同位体は、調製のしやすさおよび検出能のため、特に好ましい。式１または以下に記載する他の式の特定の同位体標識された化合物は、医学的な画像化用途にも有用であり得る。例えば、１１Ｃまたは１８Ｆのようなポジトロン放出同位体で標識されたものは、ポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）での用途に有用であると思われ、１２３Ｉのようなガンマ線放出同位体で標識されたものは、単光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）での用途に有用であり得る。さらに、重水素（すなわち、２Ｈ）のような重い同位体と置き換えると、代謝安定性が大きくなる（例えば、インビボ半減期の増加または投薬必要量の減少）から得られる特定の治療利益が得られるため、ある状況では好ましい場合がある。式１または以下に記載する他の式の同位体標識された化合物、特に、半減期が長い（Ｔ１／２＞１日）同位体を含む化合物は、一般的に、同位体標識されていない試薬を、適切な同位体標識された試薬で置き換えることによって、以下のスキームおよび／または実施例に開示される手順と類似する以下の手順によって調製することができる。
【0041】
医薬的に許容される塩は、当該技術分野でよく知られている。医薬的に許容される塩は、本発明の化合物の最終的な単離および精製の間に得てもよく、または有機酸（例えば、アスコルビン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、マレイン酸）または適切な鉱物酸（例えば、塩酸、リン酸または硫酸）、またはマロン酸、フマル酸、グリコール酸、コハク酸、プロピオン酸、酢酸、メタンスルホン酸などと遊離塩基官能基とを反応させることによって別個に得てもよい。または、本発明のいずれかの化合物の酸官能基を有機塩基または鉱物塩基（水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化リチウムのような）と反応させ、医薬的に許容される塩を得てもよい。
【0042】
本発明のＮ置換アゼチジン誘導体は、ＥＲαアンタゴニストである。特定の実施形態では、本発明の化合物は、ＥＲ陽性乳癌を処置するのに特に有用であり、すなわち、本発明の化合物は、ＥＲ陽性タモキシフェン耐性乳癌細胞の増殖の刺激に対しては非常に低い効能を示し、ＥＲ陽性乳癌細胞においてＥＲ下方制御を誘発することが可能であり、経口摂取可能であり、良好なバイオアベイラビリティを達成し、および／または標的に暴露し、最適な効能を得るのに十分な濃度になるまで投薬することができる。
【0043】
本発明の内容で、ＳＥＲＭ（選択的エストロゲン受容体モジュレーター）とは、ＥＲαに結合し、組織または細胞に特異的な様式でエストロゲン様活性または抗エストロゲン様活性を発揮する合成化合物を意味する。典型的には、ＳＥＲＭは、ヒトエストロゲン受容体α（ｈＥＲα）を用いて安定に同時形質導入された組み替えチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を用いたインビトロバイオアッセイにおいて、以下の実施例１１に記載するようなラットオキシトシンプロモーター（ＲＯ）およびルシフェラーゼレポーター遺伝子（ＬＵＣ）が、１７β−エストラジオールによって誘発されるトランス活性化を阻害し、ｐＩＣ５０＞６、同じバイオアッセイを用いて、抗エストロゲンＩＣＩ １６４，３８４と比較してアンタゴニスト効能が最小で０．８０、アゴニスト効能が最大で０．２０である化合物である。また、ＳＥＲＭは、以下の実施例１２に記載するようなＥＲ陽性タモキシフェン耐性ＭＣＦ−７Ｈ乳癌細胞の増殖を刺激することが可能で、ｐＥＣ５０＞７、効能＞０．１０である。
【0044】
本発明の内容で、ＳＥＲＤ（選択的エストロゲン受容体下方制御剤）とは、ＥＲαに結合し、ＥＲαを不安定化または下方制御することができ、組織または細胞で主に抗エストロゲン様活性を発揮する合成化合物を意味する。典型的には、ＳＥＲＤは、ｈＥＲαを用いて安定に同時形質導入された組み替えＣＨＯ細胞を用いたインビトロバイオアッセイにおいて、以下の実施例１１に記載するようなラットオキシトシンプロモーター（ＲＯ）およびルシフェラーゼレポーター遺伝子（ＬＵＣ）が、１７β−エストラジオールによって誘発されるトランス活性化を阻害し、同じバイオアッセイを用い、ｐＩＣ５０＞６、アンタゴニスト効能が最小で０．８０、アゴニスト効能が最大で０．２０を示す。また、ＳＥＲＤは、一般的に、以下の実施例１２に記載するようなＥＲ陽性タモキシフェン耐性ＭＣＦ−７Ｈ乳癌細胞の増殖を刺激せず、したがって、効能は、０．１０以下であろう。さらに、ＳＥＲＤは、以下の実施例１３に記載するようなＴ４７Ｄ細胞におけるバイオアッセイでは、ＥＲαを最小でも２０％下方制御する化合物である。
【0045】
一実施形態では、本発明は、ＸがＯ、ＳまたはＮＲ５である式１の化合物に関する。別の実施形態では、Ｘは、ＯまたはＳである。さらに別の実施形態では、ＸはＯである。
【0046】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１７、Ｒ１８およびＲ１９が、Ｈ、フッ素または（Ｃ１−３）アルキルである式１の化合物に関する。別の実施形態では、Ｒ１７、Ｒ１８およびＲ１９は、Ｈ、フッ素またはメチルである。さらに別の実施形態では、Ｒ１７、Ｒ１８およびＲ１９は、Ｈである。
【0047】
一実施形態では、本発明は、Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ１−２）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のフッ素で置換されていてもよい式１の化合物に関する。
【0048】
別の実施形態では、Ｒ１は、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ１−２）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のフッ素で置換されていてもよい。
【0049】
本発明の別の実施形態では、Ｒ１は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉｓｏ−ブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロプロピルメチル、シクロブチルメチル、（３−テトラヒドロフラニル）メチル、３−メトキシプロピル、３，３，３−トリフルオロプロピル、３−フルオロプロピルまたは２−プロペニルである。
【0050】
本発明の一実施形態では、Ｎ置換アゼチジン誘導体は、式３Ａ〜３ＢＦのいずれか１つの化合物
【0051】
【化2】
Ｒ１は、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ１−４）アルキルカルボニル、（Ｃ１−４）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のハロゲン、ニトリル、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルキルで置換されていてもよく；
Ｘは、原子なし、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、カルボニル、Ｎ−Ｒ５であり；
（ｈ）Ａｒは、Ｒ１２およびＲ１３で置換されていてもよい（ヘテロ）芳香族環であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ４およびＲ７は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ１２は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ、ニトリルまたはヒドロキシルであり；
Ｒ１３は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ６は、Ｈ、ヒドロキシル、アミンまたは（Ｃ１−６）アルコキシであり；
Ｒ６およびＲ２が連結し、フッ素、塩素または（Ｃ１−３）アルキルで置換されていてもよい（ヘテロ）芳香族環を形成していてもよく；
Ｒ５は、Ｈ、１個以上のフッ素で置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルであり；
Ｖは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、ＣＨＯＨ、ＣＨ（Ｃ１−３）アルコキシ、Ｃ＝ＣＨ２、カルボニル、Ｎ−Ｒ１６であり；
Ｒ１５は、Ｈ、ハロゲン、ニトロ、ニトリル、または１個以上のハロゲンで置換されていてもよい（Ｃ１−６）アルキルであり；
Ｒ１６は、Ｈ、１個以上のハロゲンで置換されていてもよい（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−４）アルケニルであり；
Ｒ２０は、１個以上のフッ素で置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルである。
【0052】
本発明の別の実施形態では、Ｎ置換アゼチジン誘導体は、以下に示す式４Ａ〜４Ｎおよび４Ｚのいずれか１つの化合物からなる群から選択され、式中、Ｒ１は、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ１−４）アルキルカルボニル、（Ｃ１−４）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のハロゲン、ニトリル、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルキルで置換されていてもよく；
Ｘは、原子なし、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、カルボニル、Ｎ−Ｒ５であり；
（ｈ）Ａｒは、Ｒ１２およびＲ１３で置換されていてもよい（ヘテロ）芳香族環であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ４およびＲ７は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ１２は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ、ニトリルまたはヒドロキシルであり；
Ｒ１３は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ６は、Ｈ、ヒドロキシル、アミンまたは（Ｃ１−６）アルコキシであり；
Ｒ６およびＲ２が連結し、フッ素、塩素または（Ｃ１−３）アルキルで置換されていてもよい（ヘテロ）芳香族環を形成していてもよく；
Ｒ５は、Ｈ、１個以上のフッ素で置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルであり；
Ｖは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２、ＣＨＯＨ、ＣＨ（Ｃ１−３）アルコキシ、Ｃ＝ＣＨ２、カルボニル、Ｎ−Ｒ１６であり；
【0053】
【化3】
Ｒ１６は、Ｈ、１個以上のハロゲンで置換されていてもよい（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ１−４）アルケニルであり；
Ｒ２０は、１個以上のフッ素で置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルである。
【0054】
（ｈ）Ａｒまたは（ヘテロ）芳香族環との用語は、芳香族骨格が５〜１０個の原子を含み、そのうち０〜４個の原子が炭素以外の酸素、窒素または硫黄から選択される原子である芳香族環系またはヘテロ芳香族環系を意味する。例は、フェニル、ナフチル、ピリジル、チエニル、フラニル、チアゾリル、オキサゾリル、ピローリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、ベンゾピローリル、ベンゾピラゾリルである。
【0055】
ＣＨ（Ｃ１−３）アルコキシとの用語は、炭素原子を１〜３個含むアルコキシ基で置換されたメチレン連結部を意味し、メトキシメチレン、エトキシメチレンおよびプロピルオキシメチレンである。
【0056】
一実施形態では、本発明は、Ｒ１が、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ１−２）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のフッ素で置換されていてもよい式３または４の化合物に関する。
【0057】
別の実施形態では、Ｒ１は、（Ｃ１−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ１−２）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のフッ素で置換されていてもよい。
【0058】
本発明の別の実施形態では、Ｒ１は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロプロピルメチル、シクロブチルメチル、（３−テトラヒドロフラニル）メチル、３−メトキシプロピル、３，３，３−トリフルオロプロピル、３−フルオロプロピルまたは２−プロペニルである。
【0059】
一実施形態では、本発明は、ＸがＯ、ＳまたはＮ−Ｒ５である式３または４の化合物に関する。別の実施形態では、Ｘは、ＯまたはＳである。さらに別の実施形態では、Ｘは、Ｏである。
【0060】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ２およびＲ３が、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ＣＦ３またはニトリルである式３または４の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素または（Ｃ１−２）アルキルである。
【0061】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ４およびＲ７が、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素または（Ｃ１−２）アルキルである式３または４の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ４およびＲ７は、それぞれ互いに独立して、Ｈまたはフッ素である。
【0062】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ５がＨまたはメチルである式３または４の化合物に関する。
【0063】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ６が、Ｈ、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルコキシであるか、またはＲ６が、Ｒ２とともに（ヘテロ）芳香族環の一部である式３または４の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ６は、Ｈ、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルコキシである。
【0064】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１２が、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ニトリルまたはヒドロキシルである式３または４の化合物に関する。
【0065】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１３が、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ、ＣＦ３またはニトリルである式３または４の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ１３は、Ｈ、フッ素、塩素または（Ｃ１−２）アルキルである。
【0066】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１５が、Ｈ、塩素、ニトリル、または１個以上のハロゲンで置換されていてもよい（Ｃ１−４）アルキルである式３または４の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ１５は、Ｈ、塩素、または１個以上のフッ素または塩素で置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルである。
【0067】
別の実施形態では、本発明は、Ｖが、Ｏ、ＣＨ２、ＣＨＯＨ、ＣＨ（Ｃ１−２）アルコキシ、Ｃ＝ＣＨ２またはカルボニルである式４の化合物に関する。
【0068】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１６が、Ｈ、１個以上のハロゲンで置換されていてもよい（Ｃ１−３）アルキルである式４の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ１６は、Ｈまたはメチルである。
【0069】
一実施形態では、本発明は、Ｒ２０がメチルまたはＣＦ３である式４の化合物に関する。
【0070】
本発明のさらに別の実施形態では、Ｎ置換アゼチジン誘導体は、以下に示される式５Ａ〜５Ｔのいずれか１つの化合物からなる群から選択され、式中、Ｒ１は、（Ｃ１−８）アルキル、（Ｃ３−８）シクロアルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル、（Ｃ２−６）アルケニル、（Ｃ２−６）アルキニル、（Ｃ１−４）アルキルカルボニル、（Ｃ１−４）アルコキシ（Ｃ２−４）アルキル、（Ｃ３−６）シクロアルキル（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ３−６）ヘテロシクロアルキル（Ｃ１−３）アルキルであり、それぞれ独立して、１個以上のハロゲン、ニトリル、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルキルで置換されていてもよく；
（ｈ）Ａｒは、Ｒ１２およびＲ１３で置換されていてもよい（ヘテロ）芳香族環であり；
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ４およびＲ７は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ１２は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ、ニトリルまたはヒドロキシルであり；
Ｒ１３は、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−３）アルキル、（Ｃ１−３）アルコキシ、（Ｃ１−３）アルキルチオ、ＣＦ３またはニトリルであり；
Ｒ６は、Ｈ、ヒドロキシル、アミンまたは（Ｃ１−６）アルコキシであり；
Ｒ６およびＲ２が連結し、フッ素、塩素または（Ｃ１−３）アルキルで置換されていてもよい（ヘテロ）芳香族環を形成していてもよい。
【0071】
【化4】
【0072】
【化5】
【0073】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ２およびＲ３が、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ＣＦ３またはニトリルである式５の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素または（Ｃ１−２）アルキルである。
【0074】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ４およびＲ７が、それぞれ互いに独立して、Ｈ、フッ素、塩素または（Ｃ１−２）アルキルである式５の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ４およびＲ７は、それぞれ互いに独立して、Ｈまたはフッ素である。
【0075】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ６が、Ｈ、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルコキシであるか、またはＲ６が、Ｒ２とともに（ヘテロ）芳香族環の一部である式５の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ６は、Ｈ、ヒドロキシルまたは（Ｃ１−２）アルコキシである。
【0076】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１２が、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、ニトリルまたはヒドロキシルである式５の化合物に関する。
【0077】
別の実施形態では、本発明は、Ｒ１３が、Ｈ、フッ素、塩素、（Ｃ１−２）アルキル、（Ｃ１−２）アルコキシ、ＣＦ３またはニトリルである式５の化合物に関する。さらに別の実施形態では、Ｒ１３は、Ｈ、フッ素、塩素または（Ｃ１−２）アルキルである。
【0078】
本発明の一実施形態では、Ｎ置換アゼチジン誘導体は、以下に示す式６ａ〜６ｘのいずれか１つの化合物からなる群から選択される。
【0079】
式６のＮ置換アゼチジン誘導体は、上に定義したようなｐＩＣ５０＞７のＥＲαアンタゴニストである（本明細書以下の表３も参照）。
【0080】
【化6】
【0081】
【化7】
【0082】
【化8】
【0083】
式８のＮ置換アゼチジン誘導体は、ｐＩＣ５０＞７のＥＲαアンタゴニストであり、Ｔ４７Ｄ細胞において最小でも２０％のＥＲα下方制御を示すＳＥＲＤであり、本明細書上に定義するように、ＥＲ陽性タモキシフェン耐性ＭＣＦ−７Ｈ乳癌細胞の増殖を刺激しない（効能が０．１０以下）（本明細書以下の表５も参照）。
【0084】
【化9】
【0085】
式９のＮ置換アゼチジン誘導体は、ｐＩＣ５０＞７のＥＲαアンタゴニストであり、Ｔ４７Ｄ細胞において最小でも２０％のＥＲα下方制御を示すＳＥＲＤであり、ＥＲ陽性タモキシフェン耐性ＭＣＦ−７Ｈ乳癌細胞の増殖を刺激せず（効能が０．１０以下）、ラットに経口摂取可能でもある（本明細書以下の表６も参照）。
【0086】
本発明の内容で「経口摂取可能」とは、化合物をラットに経口投薬すると、その化合物が、ラットにおいて化合物の血漿濃度を定量することによって決定されるような経口暴露を示すことを意味する。典型的には、本明細書以下の実施例１４に記載するように、化合物を２０μｍｏｌ／ｋｇ経口投薬する。経口暴露は、投薬から０〜６時間の時間範囲にわたって血漿濃度を測定することによって決定され、ＡＵＣ（０−６ｈ）であらわされる。化合物は、ＡＵＣ（０−６ｈ）＞０．３μＭ．ｈ、好ましくは、ＡＵＣ（０−６ｈ）＞１μΜ．ｈだと経口摂取可能であるとされる。
【0087】
【化10】
【0088】
ＳＥＲＭは、典型的には、フェノール性ヒドロキシル基を含む。以下に記載する合成順序の間、このフェノール性ヒドロキシル基は、中間体に存在するときは、一般的に保護する必要がある。スキーム１〜４において、保護されたフェノール性ヒドロキシル基の一例としてメトキシ基を使用する。これらの基は、ＳＥＲＭＦフラグメントに接続したＭｅＯ−およびＨＯ−として本明細書の以下に示す反応スキーム中に示される。
【0089】
スキーム１．Ｎ置換アゼチジン誘導体の調製
【0090】
【化11】
【0091】
Ｎ置換アゼチジン−Ｘ部分をＳＥＲＭＦフラグメントに導入する代替的な経路をスキーム２に概説する。ＳＥＲＭＦフラグメントが、電子吸引基Ｗがフッ素に対してオルト位またはパラ位にあるフルオロフェニルを含む場合（化合物２２のような）、芳香族置換反応によってフッ素を直接置換して化合物１１を得ることが可能である。必要な電子吸引性置換基は、置換基Ｒ４またはＲ７の片方または両方であってもよく、または、ＳＥＲＭＦフラグメントにフルオロフェニル基を接続する連結部Ｗであってもよい。このような電子吸引基Ｗの一例は、カルボニル基である。化合物２２をスキーム１にしたがって化合物１５に変換することができるが、スキーム２の下側部分に示されるようにＲ１がすでに接続しているアゼチジン部分と反応させることによって、化合物１５に直接変換することもできる。
【0092】
スキーム２．芳香族置換による化合物１１の合成
【0093】
【化12】
【0094】
スキーム３．スルホネートを介する置換アゼチジン誘導体の調製
【0095】
【化13】
【0096】
第１の工程では、溶媒としてアセトン中、塩基として炭酸カリウム存在下、ヨードメタンとの反応によって化合物２０のアミン基をアンモニウム塩に変換し、化合物２１を得る。同時に、化合物２０のＳＥＲＭＦフラグメントの保護されていないフェノール性ヒドロキシル基（すなわち、ＰＧ＝Ｈのとき）は、メトキシ基に変換される。２１のエチルアンモニウム側鎖は、塩基条件下（例えば、溶媒としてジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシドの使用によって）、Ｈｏｆｍａｎｎ脱離反応によって除去することができ、化合物１０を与える。次いで、化合物１０をスキーム１にしたがって化合物１５に変換することができる。
【0097】
スキーム４．ＳＥＲＭの塩基性アミン側鎖の除去
【0098】
【化14】
【0099】
スキーム５において、化合物１０のベンゾチオフェン類似体（すなわち、化合物２５）および化合物２２のベンゾチオフェン類似体（すなわち、化合物２６）を調製するための合成経路が与えられる。さらに、このような化合物をスキーム１〜３にしたがって最終化合物に変換することができる。化合物２４は、Ｎ置換アゼチジン部分をすでに含むボロネートとの反応によって最終化合物５４に直接変換することもできる。ベンゾチオフェン骨格の２位へのヘテロアリール基の導入は、スキーム５の経路Ｃにしたがって達成することができる。本明細書上に示すように、スキーム５のベンゾチオフェン化合物を、関連する式４および５のいずれかに定義されるようなＲ基で置換することができる。
【0100】
スキーム５．ベンゾチオフェン化合物の合成
【0101】
【化15】
【0102】
スキーム６．イソオキサゾール化合物の合成
【0103】
【化16】
【0104】
スキーム７．カルボニル連結部の修飾
【0105】
【化17】
【0106】
スキーム８．イソオキサゾールからイソチアゾールへの変換
【0107】
【化18】
【0108】
スキーム９．ＸがＣＨ２、カルボニルまたは直接結合である式１の化合物の合成
【0109】
【化19】
【0110】
Ｘ基がカルボニルである式１の化合物を、スキーム９の経路Ｃに概説するように化合物７２から出発して合成することができる。Ｗｅｉｎｒｅｂアミド７２をＧｒｉｇｎａｒｄ反応によって化合物７３に変換することができる。
【0111】
キラル化合物のエナンチオマーを、適切なキラルＨＰＬＣカラム、例えば、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ、ＯＤまたはＡＳカラムを用いてキラルＨＰＬＣまたはキラル超臨界液二酸化炭素（ＳＦＣ）ＨＰＬＣによって従来の様式で分離し、他のエナンチオマーを５％未満、好ましくは２％未満、特に１％未満しか伴わない１種類のエナンチオマーを得てもよい。
【0112】
例えば、ピリジン中、適切な酸無水物との反応によって遊離ヒドロキシル基をエステル化することによって、親化合物のエステルプロドラッグを製造することができる。
【0113】
さらなる局面では、本発明のＮ置換アゼチジン誘導体およびそのプロドラッグ、同位体標識された誘導体または医薬的に許容される塩（すなわち、本明細書上に記載したいずれか１つの式によるもの）が治療に有用である。このように、本発明のＮ置換アゼチジン誘導体は、排卵機能不全、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮内膜症、骨粗鬆症、前立腺癌、良性前立腺肥大症および乳癌、特に、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌の予防または処置に有用である。
【0114】
本発明はさらに、治療に有効な量の本発明のＮ置換アゼチジン誘導体またはそのプロドラッグ、その同位体標識された誘導体または医薬的に許容される塩を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、上述の疾患または障害のいずれかを患っているか、または患いやすい傾向のあるヒトおよび動物を含む哺乳動物を処置する方法も含む。有効な量または治療に有効な量とは、上述の疾患を抑制することによって所望な治療効果、軽減効果、抑制効果または予防効果を与えるのに有効な本発明の化合物または組成物の量を意味する。
【0115】
本発明はまた、治療に有効な量の本発明のＮ置換アゼチジン誘導体を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、排卵機能不全、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮内膜症、骨粗鬆症、前立腺癌、良性前立腺肥大症および乳癌、特に、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌を予防または治療する方法にも関する。
【0116】
別の局面では、本発明は、子宮内膜症を患う閉経前女性の血中エストロゲン濃度を下げる薬剤または治療と組み合わせた、本明細書で上に記載したいずれかの式のＮ置換アゼチジン誘導体の使用に関する。このような薬剤または治療の例は、黄体ホルモン物質、選択的プロゲステロン受容体モジュレーター（ＳＰＲＭ）、ゴナドトロピン放出ホルモン受容体（ＧｎＲＨ−Ｒ）のアゴニストまたはアンタゴニスト、またはエストロゲン−黄体ホルモン物質を組み合わせた製剤を用いた処置であるが、これらは避妊薬としても知られている。
【0117】
なおさらなる局面では、本発明は、医薬的に許容される賦形剤と混合した状態で本発明のＮ置換アゼチジン誘導体を含む医薬組成物に関する。医薬的に許容される賦形剤とは、１個以上の医薬的に許容される賦形剤を意味する。
【0118】
本発明はさらに、医薬的に許容される賦形剤と混合した状態で本発明のＮ置換アゼチジン誘導体を含む医薬組成物を、それを必要とする哺乳動物に治療に有効な量投与することを含む、排卵機能不全、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮内膜症、骨粗鬆症、前立腺癌、良性前立腺肥大症および乳癌、特に、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌を予防または処置する方法にも関する。
【0119】
好ましい実施形態では、本発明は、排卵機能不全、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、子宮内膜症、骨粗鬆症、前立腺癌、良性前立腺肥大症および乳癌、特に、ＥＲ陽性ホルモン療法耐性乳癌を予防または治療するための式６、７、８または９のいずれかのＮ置換アゼチジン誘導体の使用に関する。式６、７、８または９のいずれかの化合物の関連する生体活性データは、それぞれ本明細書以下に記載する表３、４、５および６中に見いだすことができる。
【0120】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＥＲ陽性タモキシフェン耐性乳癌を処置するための式６、７、８または９のいずれかのＮ置換アゼチジン誘導体の使用に関する。
【0121】
治療効果を達成するのに必要な本発明のＮ置換アゼチジン誘導体（本明細書では活性成分とも呼ばれる）の量は、もちろん、特定の化合物ごとに、投与経路、受容者の年齢および状態、処置すべき特定の障害または疾患によって異なる。
【0122】
活性成分またはその医薬組成物の実際の投薬量および投与計画は、特定の化合物ごとに、投与経路、その医薬を投与する個々の被検体の年齢および状態によって異なる。
【0123】
一般的に、非経口投与は、吸収のときにもっと依存性が高い他の投与方法よりも要求される投薬量は低い。しかし、ヒトに適した投薬量は、体重１キログラムあたり０．０００１〜１０ｍｇ、さらに特定的には、体重１キログラムあたり０．０１〜１０ｍｇであろう。望ましい投薬量は、１日の間に適切な間隔で投与される１回の投薬量または複数回の部分的な投薬量としてあらわされてもよく、または１日の間に適切な間隔で投与されるべき投薬量としてあらわされてもよい。また、１週間に１回または１ヶ月に１回投与してもよい。投薬量および投与計画は、女性の受容者と男性の受容者とでは異なっていてもよい。
【0124】
活性成分を単独で投与することも可能であるが、医薬組成物として存在することが好ましい。したがって、本発明は、１つ以上の医薬的に許容される賦形剤、例えば、Ｇｅｎｎａｒｏら、Ｒｅｍｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＷｉｌｋｉｎｓ、２０００（特に第５部：ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇを参照）に記載されるものと混合した状態で本発明のＮ置換アゼチジン誘導体を含む医薬組成物も提供する。適切な賦形剤は、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、第２版；編集者Ａ．ＷａｄｅおよびＰ．Ｊ．Ｗｅｌｌｅｒ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ，１９９４に記載されている。組成物には、経口、経鼻、肺、局所（口腔、舌下、経皮を含む）、非経口（皮下、静脈内および筋肉内）または直腸投与に適したものが含まれる。
【0125】
本発明のＮ置換アゼチジン誘導体および１個以上の医薬的に許容される賦形剤の混合物を圧縮して固体投薬単位（例えば、錠剤）にしてもよく、または、カプセルまたは坐剤になるように加工してもよい。薬学的に適した液体を用いることによって、化合物を溶液、懸濁物、エマルションまたはスプレー（例えば、経鼻スプレーまたは口腔スプレー）の形態で注入製剤として適用することもできる。投薬単位（例えば、錠剤）を製造するために、従来の添加剤（例えば、フィラー、着色剤、ポリマーバインダーなど）の使用が想定されている。一般的に、任意の医薬的に許容される添加剤を使用することができる。本発明の化合物は、即時放出および／または持続性放出のためのインプラント、貼り剤、ゲルまたは任意の他の製剤で使用するのにも適している。
【0126】
医薬組成物を調製し、投与することができる適切なフィラーとしては、適切な量で使用されるラクトース、デンプン、セルロースおよびその誘導体など、またはこれらの混合物が挙げられる。非経口投与の場合、医薬的に許容される分散剤および／または湿潤剤、例えば、プロピレングリコールまたはブチレングリコールを含む水系懸濁物、等張性食塩水溶液、滅菌注射用溶液を使用してもよい。
【0127】
本発明は、さらに、上に記載したような医薬組成物に適した包装材料と組み合わせた医薬組成物を含み、包装材料は、上に記載した組成物を使用するための指示書を含む。
【0128】
本発明を以下の実施例で説明する。
【実施例】
【0129】
以下の実施例において、化合物の番号は、上の記載のスキームに示されている化合物の番号と同じである。合成した式６、７、８、９の化合物の分析データは、本明細書以下の表３、４、５、６の中にそれぞれ見いだすことができる。
【0130】
一般的な手順Ａ（スキーム１にしたがった合成）工程１−１−Ｂｏｃ−３−ヨード−アゼチジンとのカップリング
化合物１０および炭酸セシウム（４当量）のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）懸濁物をＮ２雰囲気下、室温で５分間撹拌した。次いで、１−Ｂｏｃ−３−ヨード−アゼチジン（２当量）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、乾燥するまで蒸発させて未精製化合物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）によって精製し、所望のＢｏｃアゼチジン１１を得た。
【0131】
工程２−Ｂｏｃ基の酸性開裂Ｂｏｃアゼチジン１１のメタノール溶液に、１５当量の塩化水素（４Ｎジオキサン）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。ＬＣＭＳによれば、所望の生成物が生成していた。反応混合物をメタノールで希釈し、濃縮した。得られた残渣を精製することなく次の工程で使用するか、またはジエチルエーテルで磨砕した後、媒体をか焼したガラス漏斗で濾過し、ジエチルエーテルですすぎ、これを集めて化合物１２を白色固体として得た。
【0132】
工程３−アゼチジンの還元的アミノ化メタノール中の化合物１２、アルデヒドＲ１−ＣＨＯ（２当量）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２当量）およびモレキュラーシーブ（３Å）の混合物に酢酸（１当量）を加えた。この反応混合物をＮ２雰囲気下、室温で一晩撹拌した。反応混合物をメタノールで希釈し、濾過し、次いでメタノールを用いてＳＣＸ−２カラムに流して不純物を取り除いた。次いで、０．７Ｎアンモニア／メタノール溶液を用いて所望の生成物を溶出させ、化合物１４を得た。
【0133】
工程４−メトキシの脱メチル化（および存在する場合、Ｂｏｃの開裂）化合物１４のジクロロメタン（ＤＣＭ）溶液に、三フッ化ホウ素−硫化メチル錯体（２０当量）を加えた。この反応混合物をＮ２雰囲気下、室温で一晩撹拌した。反応混合物をメタノールでクエンチし、室温で３０分間撹拌した。混合物をメタノールでさらに希釈し、濾過し、ＳＣＸ−２カラムに入れた。ＳＣＸ−２カラムにメタノールを流して不純物を取り除き、次いで、０．７Ｎアンモニア溶液で溶出させて所望な生成物を得た。未精製生成物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）で精製した。生成物を含有する画分を凍結乾燥させ、化合物１５を白色固体として得た。
【0134】
一般的な手順Ｂ（スキーム２にしたがった合成）１−Ｂｏｃ−３−（ヒドロキシ）アゼチジン（０．５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．５ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（４ｍｌ）懸濁物に化合物２２（０．２５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を窒素雰囲気下、室温で１６時間撹拌した。次いで、水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（２回）。有機層を合わせ、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）で精製し、化合物１１を良好な純度で得た。
【0135】
窒素雰囲気下、室温で水素化ナトリウム（７０ｍｍｏｌ；ヘプタンで洗浄）をジメチルホルムアミド（１２０ｍｌ）に懸濁させた。次いで、１−プロピルアゼチジン−３−オール塩酸塩（１９．９ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた混合物を室温で１５分間撹拌した。次いで、化合物２２（ＰＧ＝ＨまたはＭｅ）（１１．７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（４回）。有機層を合わせ、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）で精製した。生成物を含有する画分をアセトニトリル／２Ｎ ＨＣｌから凍結乾燥させ、目的化合物をＨＣｌ塩として、白色固体として良好な純度で得た。
【0136】
化合物１４（ＰＧ＝Ｍｅ）を一般的な手順Ａの工程４にしたがって化合物１５（ＰＧ＝Ｈ）に変換することができる。
【0137】
一般的な手順Ｃ（スキーム３にしたがった合成）工程１
２−フェニル−１，３−ジオキサン−５−オール（６０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１４５ｍｌ）溶液を撹拌し、窒素雰囲気下、室温でこれに水素化ナトリウム（１５９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２０分間撹拌した。この混合物に、化合物１０（２６ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１０５ｍｌ）溶液を加えた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を用いて反応をクエンチし、混合物を酢酸エチルで抽出した（４回）。有機層を合わせ、水で洗浄し（１回）、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して化合物１６を得て、これをそのまま次の工程で使用した。
【0138】
工程２窒素雰囲気下、化合物１６（２９ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（７００ｍｌ）に溶解した。混合物を０℃まで冷却し、三臭化ホウ素（１４７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃で９０分間撹拌し、次いで、氷／水に注いだ。得られた混合物を酢酸エチルで抽出した（２回）。有機層を合わせ、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物１７を良好な純度で得た。
【0139】
工程３窒素雰囲気下、０℃で、化合物１７（１８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１５１ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（２５０ｍｌ）に溶解し、塩化メタンスルホニル（１４９ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１６時間撹拌した。次いで、酢酸エチルを加え、混合物を水で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して化合物１８を得て、これをそのまま次の工程で使用した。
【0140】
工程４密閉管中、化合物１８（ＳＯ２Ｒ＝メシル）（０．２１ｍｍｏｌ）およびアミンＲ１−ＮＨ２（５当量）のアセトニトリル（６ｍｌ）溶液を１００℃で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）で精製した。生成物を含有する画分に４Ｎ ＨＣｌを加え、混合物を凍結乾燥させ、化合物１５を白色固体として良好な純度で得た。
【0141】
工程５密閉管中、化合物１８（ＳＯ２Ｒ＝トシル）（０．２０ｍｍｏｌ）およびアミンＲ１−ＮＨ２（５当量）のアセトニトリル（６ｍｌ）溶液を１００℃で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）で精製した。生成物を含有する画分に４Ｎ ＨＣｌを加え、混合物を凍結乾燥させ、化合物１９を白色固体として良好な純度で得た。
【0142】
工程６化合物１９（０．０４ｍｍｏｌ）のメタノール（３ｍｌ）溶液に水酸化カリウム（２００ｍｇ）を加えた。密閉管中、混合物を８０℃で２時間撹拌し、次いで室温まで冷却し、ＳＣＸ−２カラム（１０ｇカラム物質）に入れた。カラムをメタノールで洗浄し、次いで、生成物を０．７Ｍ アンモニアメタノール溶液で溶出させた。未精製生成物を分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）でさらに精製した。生成物を含有する画分を４Ｎ ＨＣｌと混合し、混合物を凍結乾燥させ、化合物１５を白色固体として良好な純度で得た。
【0143】
一般的な手順Ｄ（スキーム４にしたがった合成）工程１−アミン基からアンモニウム塩への変換
化合物２０、ヨードメタン（８当量）、炭酸カリウム（８当量）のアセトンの黄色懸濁物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物をメタノールで希釈し、濃縮した。得られた未精製生成物を精製せずに次の工程で直接使用するか、またはジエチルエーテルで磨砕し、媒体をか焼したガラス漏斗で濾過し、ジエチルエーテルですすぎ、集めた後、所望のアンモニウム塩２１を黄色固体として定量的な収率で得た。
【0144】
工程２−エチルアンモニウム側鎖の開裂化合物２１およびカリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド（５当量）のＤＭＳＯ溶液を室温で３時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ｐＨ＝１になるまでＨＣｌを加えた。混合物をさらに１５分間撹拌し、次いで、酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、水、塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、乾燥するまで蒸発させて未精製化合物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン）で精製し、所望なフェノール１０を優れた収率で得た。
【0145】
化合物１０を一般的な手順Ａにしたがって化合物１５へと変換することができる。
【0146】
一般的な手順Ｅ（スキーム５にしたがった合成）化合物２４を文献に記載されるように調製することができる（Ａ．Ｄ．Ｐａｌｋｏｗｉｔｚら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４０（１９９７）１４０７−１４１６）。
【0147】
化合物２４（１．０ｍｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェノール（２．０ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４．７Ｈ２Ｏ（３．０ｍｍｏｌ）およびＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（０．０５ｍｍｏｌ）のジオキサン（１０ｍｌ）溶液をＮ２雰囲気下、９０℃で１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温まで冷却した。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、化合物２５を良好な純度で得た。
【0148】
ピナコールボロネート６４の合成工程１
窒素雰囲気下、水素化ナトリウム（３０ｍｍｏｌ）を無水ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）に加え、次いで、化合物６２（１５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、４−ブロモ−フルオロベンゼン（１８ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（５ｍｌ）溶液を滴下した。混合物を６０℃で１６時間撹拌した。次いで、酢酸エチルを加え、混合物を水に注いだ。有機相を分離し、水で洗浄し（３回）、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール）で精製し、化合物６３を良好な純度で得た。
【0149】
工程２窒素雰囲気下、化合物６３（１０ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジホウ素（１５ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（１０ｍｍｏｌ）をジオキサン（３０ｍｌ）に溶解した。次いで、１，１’ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）クロリド（０．５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した（２回）。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール）によって精製し、化合物６４を良好な純度で得た。
【0150】
化合物２４（１．０ｍｍｏｌ）、化合物６４（２．０ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４．７Ｈ２Ｏ（３．０ｍｍｏｌ）およびＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（０．０５ｍｍｏｌ）のジオキサン（１０ｍｌ）溶液をＮ２雰囲気下、９０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５４を良好な純度で得た。
【0151】
化合物２５および５４を一般的な手順Ａにしたがって化合物１５へと変換することができる。
【0152】
Ｃ．Ｙａｎｇら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．１５（２００５）１５０５−１５０７に記載される方法によって化合物２６を調製することができる。化合物２６を一般的な手順Ａにしたがって化合物１５へと変換することができる。
【0153】
スキーム５の経路Ｃの合成は、Ｄ．Ａ．ＢｒａｄｌｅｙらによってＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４０（１９９９）５１５５−５１５９に記載された方法に類似の方法で行われた。
【0154】
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａにしたがった合成）工程１
（Ｅ／Ｚ）−２−クロロベンズアルデヒドオキシム
２−クロロベンズアルデヒド（４０．１ｍｌ、３５６ｍｍｏｌ）のエタノール（１００ｍｌ）溶液を冷却し（５℃）、これにヒドロキシルアミン（２７．２ｇ；３９１ｍｍｏｌ）の水（１００ｍｌ）溶液を加え、次いで、５Ｎ水酸化ナトリウム（７３．６ｍｌ）を加えた。混合物を５℃で９０分間撹拌した。次いで、混合物を６Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ６になるまで酸性化し、ｔｅｒｔ．ブチルメチルエーテルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して目的化合物を白色固体として得た（５５ｇ；収率９９％；ＨＰＬＣ純度９７％）。生成物をそのまま次の工程で使用した。
【0155】
工程２（Ｅ／Ｚ）−２−クロロ−Ｎ−ヒドロキシベンズイミドイルクロリド（化合物３２の一例）
（Ｅ／Ｚ）−２−クロロベンズアルデヒドオキシム（４．０ｇ、２５．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１２ｍｌ）溶液を冷却し（１０℃）、これにＮ−クロロスクシンイミド（３．４３ｇ、２５．７ｍｍｏｌ）を何回かにわけて加えた。加え終わったら、水（５０ｍｌ）を加え、反応混合物をＴＨＦで３回抽出した。有機層を合わせ、水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮し、目的化合物を黄色油状物として得た（４．９８ｇ、ＨＰＬＣ純度７４％、定量的）。未精製生成物をそのまま次の工程に使用した。
【0156】
工程３３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール（化合物３４の一例）
（Ｅ／Ｚ）−２−クロロ−Ｎ−ヒドロキシベンズイミドイルクロリド（０．５０ｇ、１．７１ｍｍｏｌ）、１−エタ−１−イニル−４−メトキシベンゼン（０．２７１ｇ、２．０５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍｌ）溶液を冷却し（０℃）、これにトリエチルアミン（０．２３８ｍｌ、１．７１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで濾過した。濾液を濃縮し、エタノールから再結晶化し、目的化合物を白色固体として得た（０．３３ｇ、ＨＰＬＣ純度：９９％；収率６８％）。
【0157】
工程４４−ブロモ−３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール（化合物３５の一例）
３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール（２８５ｍｇ、０．９９７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍｌ）溶液に、室温でＮ−ブロモスクシンイミド（２３１ｍｇ、１．２９７ｍｍｏｌ）を何回かにわけて加え、次いでｐ−トルエンスルホン酸（９．５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１７時間撹拌した。次いで、混合物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液で洗浄し（２回）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し（１回）、水で洗浄した（２回）。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物を分取ＨＰＬＣで精製し、目的化合物を白色固体として得た（２６４ｍｇ、ＨＰＬＣ純度９９％；収率：７３％）。
【0158】
工程５４−（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）フェノール（化合物３６の一例）
４−ブロモ−３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール（１．２６ｇ、３．４６ｍｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェノール（１．５２ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４．７Ｈ２Ｏ（３．５１ｇ、１０．３８ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２のジオキサン（２０ｍｌ）溶液をＮ２雰囲気下、９０℃で１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温まで冷却した。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をカラムクロマトグラフィーで精製し、目的化合物を白色固体として得た（９１０ｍｇ、収率：７０％）。
【0159】
工程６（一般的な手順Ａの工程１である）ｔｅｒｔ−ブチル ３−（４−（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）−フェノキシ）−アゼチジン−１−カルボキシレート
４−（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）フェノール（７４０ｍｇ、１．９５９ｍｍｏｌ）、１−Ｂｏｃ−３−ヨード−アゼチジン（８３２ｍｇ、２．９４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍｌ）溶液に炭酸セシウム（２．５５ｇ、７．８３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、酢酸エチルを加え、混合物を水で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をカラムクロマトグラフィーで精製し、目的化合物を白色固体として得た（７００ｍｇ；収率：６７％。
【0160】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ ４．８３（ｍ，１Ｈ，アゼチジン３−Ｈ）。
【0161】
工程７（一般的な手順Ａの工程４である）４−（４−（４−（アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−３−（２−クロロフェニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール（化合物６ｆ）
ｔｅｒｔ−ブチル ３−（４−（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−メトキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）フェノキシ）−アゼチジン−１−カルボキシレート（５３３ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２０ｍｌ）溶液に、Ｎ２雰囲気下、三フッ化ホウ素−硫化メチル錯体（２．１０ｍｌ、２０．０ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物を１６時間撹拌した。次いで、水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をメタノールに溶解し、ＳＣＸカラムで精製し（不純物をメタノールで洗浄し、生成物を０．７Ｎ ＮＨ３メタノールを用いて溶出させ、目的化合物を得た（３８７ｍｇ；収率：９２％）。
【0162】
工程８（一般的な手順Ａの工程３である）４−（４−（４−（Ｎ−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−３−（２−クロロフェニル）イソオキサゾール−５−イル）−フェノール（化合物６ｇ＝７ｖ＝８ｄ＝９ａ）
４−（４−（４−（アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−３−（２−クロロフェニル）イソオキサゾール−５−イル）−フェノール（６３０ｍｇ、１．５０４ｍｍｏｌ）、プロピオンアルデヒド（２１９μｌ、３．０１ｍｍｏｌ）のメタノール（５０ｍｌ）溶液に酢酸（８６μｌ、１．５０ｍｍｏｌ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（１８９ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで濾過し、ＳＣＸカラムに入れた。メタノールによって不純物をカラムから洗い流し、生成物を０．７Ｎ ＮＨ３メタノールで溶出させた。得られた未精製生成物をさらに分取ＨＰＬＣ（１０から６０％アセトニトリル／水／３％ＴＦＡ）によって精製した。生成物を含有する画分に２Ｎ ＨＣｌを加え、混合物を凍結乾燥させ、目的化合物をＨＣｌ塩として、白色固体として得た（１７４ｍｇ、収率：２３％）。
【0163】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ ０．８８（ｔ，３Ｈ），１．５１（ｍ，２Ｈ），３．１４（ｔ，ｂｒ，２Ｈ），４．１０（ｍ，ｂｒ，１Ｈ），４．１８（ｍ，ｂｒ，１Ｈ），４．３９（ｍ，ｂｒ，１Ｈ），４．６２（ｍ，ｂｒ，１Ｈ），４．９７および５．０９（２ｘｍ，ｂｒ，１Ｈ，アゼチジンＨ−３），６．８１および７．１０（２ｘｄ，ＡＢ系，４Ｈ），７．３７−７．５３（ｍ，８Ｈ），１０．１４（ｓ，ｂｒ，１Ｈ，ＯＨ），１０．５４および１０．６８（２ｘｓ，ｂｒ，１Ｈ；ＨＣｌ）。
【0164】
化合物３５（１．０ｍｍｏｌ）、化合物６４（２．０ｍｍｏｌ）、Ｋ３ＰＯ４．７Ｈ２Ｏ（３．０ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（０．０５ｍｍｏｌ）のジオキサン（１０ｍｌ）溶液をＮ２雰囲気下、９０℃で１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温まで冷却した。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、塩水で洗浄し（１回）、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物５５を良好な純度で得た。
【0165】
化合物５５を一般的な手順Ａにしたがって化合物１５へと変換することができる。
【0166】
一般的な手順Ｇ（スキーム６の経路Ｂにしたがった合成）工程１
窒素雰囲気下、１−エチニル−４−メトキシベンゼン（１２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）に溶解した。この溶液を−７８℃まで冷却し、ｎ−ブチル−リチウム（１．６Ｍヘキサン；１３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を−４０℃で撹拌し、化合物３８（１１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、水（５０ｍｌ）を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（２回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製化合物をジイソプロピルエチルエーテル（１０ｍｌ）で磨砕し、化合物３９を良好な純度で得た。
【0167】
工程２水酸化ナトリウム（５４ｍｍｏｌ）のエタノール（５０ｍｌ）溶液に塩酸メトキシルアミン（４５ｍｍｏｌ）を室温で加えた。得られた懸濁物を室温で１時間撹拌した。次いで、Ｎａ２ＳＯ４を加え、混合物を濾過した。硫酸（４ｍｌ）および化合物３９（９ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍｌ）溶液を冷却し（０℃）、これに上の濾液を滴下し、非常に発熱性の反応を得た。混合物を８０℃で３０分間撹拌した。次いで、水（１００ｍｌ）を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（２回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物は、Ｅ異性体とＺ異性体の両方を含んでいた。分取ＨＰＬＣ（アセトニトリル／水）によって精製し、化合物４０の所望のＺ−異性体を良好な純度で得た。
【0168】
工程３化合物４０（１．４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍｌ）溶液を冷却し（０℃）、これに一塩化ヨウ素（２．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで、ＮａＳ２Ｏ３および水を加え、混合物を塩化メチレンで抽出した（２回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をジイソプロピルエチルエーテルで磨砕し、化合物４１を良好な純度で得た。
【0169】
化合物４１を、化合物３５を化合物１５に変換するのと似たいくつかの工程で化合物１５へと変換することができる（一般的な手順Ｆの工程５およびその後）。
【0170】
一般的な手順Ｈ（スキーム６の経路Ｃにしたがった合成）工程１
窒素雰囲気下、４−フルオロベンゾイルクロリド（１１９ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン（６６０ｍｌ）溶液に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．７９ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（Ｉ）（９５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、１−エチニル−４−メトキシベンゼン（７９ｍｍｏｌ）を加え、発熱反応を得た。混合物を室温で１６時間撹拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィー（ヘプタン／酢酸エチル ９：１）によって精製し、化合物４３を良好な純度で得た。
【0171】
工程２窒素雰囲気下、化合物４３（３０ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍｌ）溶液に室温で、（Ｅ）−２−クロロ−Ｎ−ヒドロキシベンズイミドイルクロリド（３８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６０℃で１６時間撹拌した。次いで、水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した（３回）。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィーで精製し、化合物４４を良好な純度で得た。
【0172】
化合物４４を一般的な手順Ｂにしたがっていくつかの工程で化合物１５へと変換することができる。
【0173】
一般的な手順Ｉ（スキーム６の経路Ｄにしたがった合成）工程１
化合物４６を一般的な手順Ｈの工程１にしたがって調製した。
【0174】
工程２化合物４７を一般的な手順Ｈの工程２にしたがって調製した。
【0175】
化合物４７を一般的な手順Ｂにしたがっていくつかの工程で化合物１５へと変換することができる。
【0176】
２−（４−ヒドロキシフェニル）−３−（４−（１−メチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−オール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ａ）一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
２−（４−ヒドロキシフェニル）−３−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−オール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｂ＝７ａ＝８ａ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
２−（４−ヒドロキシフェニル）−３−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェノキシ）ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−オール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｃ＝７ｃ＝８ｂ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
凍結乾燥させた後、表題化合物を白色固体として得た（１０６ｍｇ；収率６２％）。
【0177】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）０．８７（ｔ，３Ｈ），１．４８（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｍ，２Ｈ），４．１０（ｂｒｍ，２Ｈ），４．５０（ｂｒｍ，２Ｈ），４．９５（ｂｒｍ，１Ｈ），６．８０（ｍ，５Ｈ），６．９０（ｄ，２Ｈ），７．１０（ｄ，１Ｈ），７．２８（ｄ，１Ｈ），７．５０（ｄ，２Ｈ），９．７９（ｓ，１Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ）。
【0178】
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｄ＝７ｈ＝８ｃ）一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−イソプロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物６ｅ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
４−（４−（４−（１−ブチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−３−（２−クロロフェニル）イソオキサゾール−５−イル）−フェノール塩酸塩（化合物６ｈ）
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａ）にしたがった合成
４−（４−（４−（１−ｓｅｃ−ブチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−３−（２−クロロフェニル）イソオキサゾール−５−イル）−フェノール塩酸塩（化合物６ｉ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
４−（４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−３−ｏ−トリルイソオキサゾール−５−イル）フェノール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｊ）
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａ）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）−３−メチルフェノール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｋ）
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａ）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）−２−メチルフェノール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｌ）
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａ）にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物６ｍ＝７ａｇ＝８ｅ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（５−（２−クロロフェニル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン（化合物６ｎ＝７ａｙ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
３−（４−（（３Ｓ，４Ｓ）−７−メトキシ−２，２−ジメチル−３−フェニルクロマン−４−イル）フェノキシ）−１−プロピルアゼチジン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｏ＝７ｂｄ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
凍結乾燥させた後、生成物を白色固体として得た（６７．２ｍｇ；収率５３％）。
【0179】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）０．８５（ｔ，３Ｈ），１．１８（ｓ，３Ｈ），１．２８（ｓ，３Ｈ），１．４８（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｔ，２Ｈ），３．３０（ｄ，１Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），４．１０（ｂｒｍ，２Ｈ），４．４９（ｄ，１Ｈ），４．６０（ｂｒｍ，２Ｈ），４．９１（ｂｒｍ，１Ｈ），６．３２（ｄｄ，１Ｈ），６．３９（ｍ，２Ｈ），６．６１（ｂｒｄ，１Ｈ），７．０５（ｄ，２Ｈ），７．１２（ｍ，１Ｈ），７．２０（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｂｒｍ，２Ｈ）。
【0180】
（３Ｓ，４Ｓ）−２，２−ジメチル−３−フェニル−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）クロマン−７−オール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｐ＝７ｂｅ）一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
凍結乾燥させた後、生成物を白色固体として得た（３２．５ｍｇ；収率４９％）。
【0181】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）０．８５（ｔ，３Ｈ），１．１５（ｓ，３Ｈ），１．２５（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｔ ２Ｈ），３．２８（ｄ，１Ｈ），４．１０（ｂｒｍ，２Ｈ），４．４９（ｄ，１Ｈ），４．６０（ｂｒｍ，２Ｈ），４．９２（ｂｒｍ，１Ｈ），６．１７（ｄｄ，１Ｈ），６．１９（ｄ，１Ｈ），６．２９（ｄ，１Ｈ），６．６１（ｄ，２Ｈ），７．０２（ｄ，２Ｈ），７．１２（ｍ，１Ｈ），７．１９（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｂｒｍ，２Ｈ），９．２１（ｓ，１Ｈ）。
【0182】
（５Ｒ，６Ｓ）−６−フェニル−５−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール塩酸塩（化合物６ｑ＝７ｂｃ＝８ｊ）一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
７−ヒドロキシ−３−フェニル−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）ベンジル）−２Ｈ−クロメン−２−オン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｒ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
凍結乾燥させた後、表題化合物を白色固体として得た（５５ｍｇ；収率６０％）。
【0183】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）１．００（ｔ，３Ｈ），１．６９（ｍ，２Ｈ），３．１１（ｔ，２Ｈ），３．７５（ｂｒｍ，２Ｈ），３．９９（ｓ，２Ｈ），４．８０（ｂｒｍ，２Ｈ），５．１２（ｂｒｍ，１Ｈ），６．６２（ｄ，２Ｈ），６．７５（ｄ，１Ｈ），６．８２（ｄ，１Ｈ），６．９８（ｄ，２Ｈ），７．２３（ｄ，２Ｈ），７．３１（ｄ １Ｈ），７．３８（ｍ，３Ｈ）。
【0184】
（８Ｓ，１１Ｓ，１３Ｓ、１４Ｓ，１７Ｓ）−１３−メチル−１１−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−７，−８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（化合物６ｓ）一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
（８Ｓ，１１Ｓ，１３Ｓ，１４Ｓ，１７Ｓ）−１１−（４−（１−（シクロプロピルメチル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−１３−メチル−７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−６Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３，１７−ジオール（化合物６ｔ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
３−（４−（１，２−ジフェニルブタ−１−エニル）フェノキシ）−１−プロピルアゼチジン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｕ＝７ｂｇ＝８ｋ＝９ｇ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
表題化合物を無色油状物として得た（１２６ｍｇ；収率４６％）。
【0185】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）０．８０−０．９４（ｍ，１２Ｈ），１．５０（ｍ，４Ｈ），２．４０（ｍ ４Ｈ），３．１２，３，１９２ｘ（ｂｒｔ，２Ｈ），４．００−４．３０（ｂｒｍ，４Ｈ），４．３０−４．７５（ｂｒｍ，４Ｈ），４．８２−５．１７ ２ｘ（ｂｒｍ，２Ｈ），６．５５（ｂｒｍ，２Ｈ），６．７５−６．９３（ｍ，６Ｈ），６．９５−７．０７（ｍ，３Ｈ），７．０７−７．２５（ｍ，１４Ｈ），７．３０（ｍ，１Ｈ），７．４０（ｍ，２Ｈ）。
【0186】
（Ｅ／Ｚ）−４−（２−フェニル−１−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）ブタ−１−エニル）フェノール ２，−２，２−トリフルオロアセテート（化合物６ｖ＝７ｂｈ）一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
凍結乾燥させた後、表題化合物を白色固体として得た（１１７ｍｇ；収率５８％）。
【0187】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）０．８７ ４ｘ（ｔ，３Ｈ），１．４８ ２ｘ（ｍ，２Ｈ），２．４０ ２ｘ（ｍ ２Ｈ），３．１３ ２ｘ（ｔ，２Ｈ），４．１０ ２ｘ（ｂｒｍ，２Ｈ），４．５０ ２ｘ（ｂｒｍ，２Ｈ），４．９０，５．０９ ２ｘ（ｂｒｍ，１Ｈ），６．４０（ｄ，２Ｈ），６．５３（ｄ，２Ｈ），６．６０（ｄ，２Ｈ），６．７７（ｄ，４Ｈ），６．８８（ｄ，２Ｈ），６．９８（ｄ，２Ｈ），７．０７−７．２１（ｍ，１２Ｈ），９．２１（ｓ，１Ｈ），９．４６（ｓ，１Ｈ）。
【0188】
（Ｅ／Ｚ）−３−（２−フェニル−１−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）ブタ−１−エニル）フェノール（化合物６ｗ＝７ｂｉ＝９ｈ）一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
凍結乾燥させた後、表題化合物を白色固体として得た（１０７ｍｇ；収率６４％）。
【0189】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）０．８５ ４ｘ（ｔ，３Ｈ），１．４５ ２ｘ（ｍ，２Ｈ），２．３８ ２ｘ（ｍ ２Ｈ），３．１５ ２ｘ（ｔ，２Ｈ），４．１５ ２ｘ（ｂｒｍ，２Ｈ），４．６０ ２ｘ（ｂｒｍ，２Ｈ），５．０１ ２ｘ（ｂｒｍ，１Ｈ），６．２５（ｍ，２Ｈ），６．３９（ｄ，１Ｈ），６．５５（ｍ，３Ｈ），６．６２（ｄ，１Ｈ），６．６９（ｄ，１Ｈ），６．８０（ｍ，３Ｈ），６．８９（ｂｒｄ，２Ｈ），７．０８−７．２２（ｍ，１３Ｈ），９．０９（ｓ，１Ｈ），９．４２（ｓ，１Ｈ）。
【0190】
（Ｅ／Ｚ）−３−（４−（２−クロロ−１，２−ジフェニルビニル）フェノキシ）−１−プロピルアゼチジン ２，２，２−トリ−フルオロアセテート（化合物６ｘ＝７ｂｊ）一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
凍結乾燥させた後、表題化合物を白色固体として得た（６０ｍｇ；収率４６％）。
【0191】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）０．８８ ２ｘ（ｔ，３Ｈ），１．４５ ２ｘ（ｍ，２Ｈ），３．１５ ２ｘ（ｔ，２Ｈ），４．１５ ２ｘ（ｂｒｍ，２Ｈ），４．６０ ２ｘ（ｂｒｍ，２Ｈ），５．０１ ２ｘ（ｂｒｍ，１Ｈ），６．６５（ｄ，２Ｈ），６．９０（ｄ，４Ｈ），６．９６（ｍ，２Ｈ），７．１５（ｍ，４Ｈ），７．２０−７．３８（ｍ，１４Ｈ），７．４２（ｍ，２Ｈ）。
【0192】
３−（４−（１−アリルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−６−オール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ｂ）一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−メチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｄ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−フェニルベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｅ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（チオフェン−２−イル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｆ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
（４−（１−エチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］−チオフェン−３−イル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ｇ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
（４−（１−シクロプロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ｉ）
一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
（４−（１−（３−フルオロプロピル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−フェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ｊ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−（３−メトキシ−プロピル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ｋ）
一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
（４−（１−シクロブチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）メタノン塩酸塩（化合物７ｌ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−イソブチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｍ）
一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
（４−（１−（シクロブチルメチル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−フェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）メタノン塩酸塩（化合物７ｎ）
一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−（（テトラヒドロフラン−３−イル）メチル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｏ）
一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−（３，３，３−トリフルオロプロピル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｐ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−２−メチルフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｑ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシ−３−メチルフェニル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｒ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
（２−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）−６−ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｓ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
（２−（３，５−ジフルオロフェニル）−６−ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｔ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
（３−フルオロ−４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）（６−ヒドロキシ−２−（４−ヒドロキシフェニル）−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）メタノン塩酸塩（化合物７ｕ）
一般的な手順Ｅ（スキーム５の経路Ｃ）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−イソブチルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）−フェノール塩酸塩（化合物７ｗ＝９ｂ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−（（テトラヒドロフラン−３−イル）メチル）アゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール塩酸塩（化合物７ｘ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−（シクロプロピルメチル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−イソオキサゾール−５−イル）フェノール塩酸塩（化合物７ｙ＝９ｃ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−（シクロブチルメチル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−イソオキサゾール−５−イル）フェノール塩酸塩（化合物７ｚ＝９ｄ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−（３−フルオロプロピル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール塩酸塩（化合物７ａａ＝９ｅ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ａｂ）
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａ）にしたがった合成
４−（３−（２，３−ジメチルフェニル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ａｃ）
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａ）にしたがった合成
４−（３−（２−エチルフェニル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）−フェノール ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ａｄ）
一般的な手順Ｆ（スキーム６の経路Ａ）にしたがった合成
４−（３−（４−メチル−１，２，３−チアジアゾール−５−イル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール塩酸塩（化合物７ａｅ）
一般的な手順Ｇ（スキーム６の経路Ｂ）にしたがった合成
４−（３’，５’−ジメチル−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）−３，４，−ビイソオキサゾール−５−イル）−フェノール塩酸塩（化合物７ａｆ）
一般的な手順Ｇ（スキーム６の経路Ｂ）にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−（−（３−フルオロプロピル）アゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ａｈ＝８ｆ）
一般的な手順Ｃ（スキーム３）にしたがった合成
（５−（４−ヒドロキシフェニル）−３−フェニルイソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｉ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（５−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ｏ−トリルイソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｊ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（３−（２，６−ジフルオロフェニル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｋ＝８ｇ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（５−（４−ヒドロキシへニル）−３−（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｌ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（５−（４−ヒドロキシヘニル）−３−（３−メチルピリジン−２−イル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｍ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（５−（４−ヒドロキシヘニル）−３−（３−メチルチオフェン−２−イル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｎ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−フェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｏ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（３−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｐ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（１Ｈ−ピロール−３−イル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ａｑ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（５−（４−アミノフェニル）−３−（２−クロロフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イル−オキシ）フェニル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ａｒ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン ２，２，２−トリフルオロアセテート（化合物７ａｓ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（３−フルオロ−４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｔ）
一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）−フェノール塩酸塩（化合物７ａｕ）
スキーム７にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（ヒドロキシ（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）メチル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール（７９ｍｇ、０．１６１ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍｌ）溶液にトリエチルシラン（３９μｌ、０．２４１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を０℃まで冷却し、トリフルオロ酢酸（１．１９５ｍｌ、１６．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、水および飽和ＮａＨＣＯ３溶液を加えた。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物を分取ＨＰＬＣ（１０−６０％アセトニトリル／水＋３％ＴＦＡ）で精製した。生成物を含有する画分に４Ｎ ＨＣｌ（０．５ｍｌ）を加え、混合物を凍結乾燥させ、目的化合物を白色固体として得た（６０ｍｇ、収率７０％）。
【0193】
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（ヒドロキシ（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メチル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール（化合物７ａｖ＝９ｆ）スキーム７にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン（１００ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ）のエタノール溶液に水素化ホウ素ナトリウム（１４４ｍｇ、３．８１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を環流状態で４８時間撹拌した。次いで、水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィーによって精製し（塩化メチレン／メタノール／トリエチルアミン ９５：５：０．１で溶出させ）、所望の生成物を遊離塩基として得た（６０ｍｇ、収率４３％）。
【0194】
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（メトキシ（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メチル）−イソオキサゾール−５−イル）フェノール（化合物７ａｗ）スキーム７にしたがった合成
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール（３５ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３ｍｌ）溶液に塩化水素（０．７１ｍｍｏｌ）およびメタノール（２ｍｌ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィーで精製した（塩化メチレン／メタノール／アンモニア ９５：５：０．１で溶出させた）。生成物を含有する画分を濃縮し、アセトニトリル／水に再び溶解し、凍結乾燥させ、所望な化合物を白色固体として得た（２０ｍｇ、収率４８％）。
【0195】
４−（３−（２−クロロフェニル）−４−（１−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）ビニル）イソオキサゾール−５−イル）フェノール（化合物７ａｘ）スキーム７にしたがった合成
（３−（２−クロロフェニル）−５−（４−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン（７６ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２ｍｌ）溶液を冷却し（０℃）、窒素雰囲気下、これにメチルリチウム（０．９７１ｍｌ、１．５５４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィーで精製した（塩化メチレン／メタノール／アンモニア ９５：５：０．１で溶出した）。得られた中間体（５０ｍｇ）をアセトニトリル（２ｍｌ）に溶解し、数滴の濃ＨＣｌを加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。未精製生成物をシリカカラムクロマトグラフィーで精製した（塩化メチレン／メタノール／アンモニア ９５：５：０．１で溶出した）。精製した生成物をアセトニトリル／水に溶解し、凍結乾燥し、所望な生成物を白色固体として得た（３９ｍｇ、収率３８％）。
【0196】
（３−（４−ヒドロキシフェニル）−５−ｏ−トリルイソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ａｚ＝８ｈ）一般的な手順Ｂ（スキーム２）にしたがった合成
（５−（２−フルオロフェニル）−３−（３−ヒドロキシフェニル）イソオキサゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｂａ）
スキーム６の経路Ｄにしたがった合成
（５−（４−ヒドロキシフェニル）−３−ｏ−トリルイソチアゾール−４−イル）（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）−フェニル）メタノン塩酸塩（化合物７ｂｂ）
スキーム８にしたがった合成
７−メトキシ−３−フェニル−４−（４−（１−プロピルアゼチジン−３−イルオキシ）ベンジル）−２Ｈ−クロメン−２−オン（化合物７ｂｆ）
一般的な手順Ａ（スキーム１）にしたがった合成
表題化合物を白色固体として得た（７５ｍｇ；収率８５％）。
【0197】
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）０．９０（ｔ，３Ｈ），１．３９（ｍ，２Ｈ），２．４６（ｔ，２Ｈ），３．０３（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｍ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．９９（ｓ ２Ｈ），４．７２（ｍ，１Ｈ），６．６２（ｄ，２Ｈ），６．７５（ｄ，１Ｈ），６．８２（ｄ，１Ｈ），６．９８（ｄ，２Ｈ），７．２３（ｄ，２Ｈ），７．３１（ｄ １Ｈ），７．３８（ｍ，３Ｈ）。
【0198】
実施例１１エストロゲン受容体に対する化合物のアンタゴニスト活性を、ヒトエストロゲン受容体α（ｈＥＲα）、ラットオキシトシンプロモーター（ＲＯ）およびルシフェラーゼレポーター遺伝子（ＬＵＣ）を用いて安定に同時形質導入された組み替えチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を用いたインビトロバイオアッセイで決定した。試験化合物が１７β−エストラジオールによってルシフェラーゼ酵素のトランス活性化を拮抗し、エストロゲン受容体ｈＥＲαが介在する能力を、標準的な抗エストロゲンＩＣＩ １６４．３８４のＩＣ５０に対し、ＩＣ５０（単位ｍｏｌ／ｌ）および／またはｐＩＣ５０（−ｌｏｇ（ＩＣ５０））および／またはパーセント（％）としてあらわす（有効性試験 化合物＝（ＩＣ５０ ＩＣＩ １６４，３８４／ＩＣ５０ 試験化合物）×１００％）。アンタゴニスト効能（すなわち、ある化合物によって活性化された１７β−エストラジオール受容体の最大阻害量）は、標準的な抗エストロゲンＩＣＩ １６４，３８４によって誘発されるような最大阻害と比較した割合としてあらわす（効能試験 化合物＝（最大阻害試験 化合物／最大阻害 ＩＣＩ １６４，３８４））。この方法論のさらに詳細な記載は、Ｄｅ Ｇｏｏｙｅｒら、Ｓｔｅｒｏｉｄｓ、６８（２００３）２１−３０中に見いだすことができる。
【0199】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、ＥＲαに対しアンタゴニスト性であり、ｐＩＣ５０＞７である。
【0200】
実施例１２どの程度まで化合物がＥＲ陽性タモキシフェン耐性乳癌細胞の増殖を刺激することができるかをＭＣＦ−７Ｈ細胞を用いたインビトロ増殖アッセイで７日間試験する。さらに特定的には、このインビトロバイオアッセイを用い、この化合物のデータと参照化合物である１７β−エストラジオール（Ｅ２）のデータを同じ試験で比較することによって、化合物の効能（最大応答の割合）、ｐＥＣ５０、化合物が増殖を誘発する相対有効性を決定する。
【0201】
使用する方法のさらに詳細な記載は以下のとおりである。
【0202】
細胞培養物：ヒト上皮乳癌細胞株ＭＣＦ−７Ｈ（由来：Ｈｕｂｒｅｃｈｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、ユトレヒト、オランダ）を、Ｈａｍ’ｓ Ｆ１２培地およびＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カールズバッド、ＵＳＡ）の１：１混合物であり、フェノールレッドを含まず、以下のものを含有するように調節された５％胎児ウシ血清（ＦＣＳ；Ｈｙｃｌｏｎｅ、ユタ、ＵＳＡ）、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、１００単位／ｍｌのペニシリンを豊富に含む完全培地中で常に維持しておいた。
【0203】
リン酸二水素ナトリウム２Ｈ２０ ＥＰ ０．０７０６６１８ｇ／Ｌ無水リン酸水素二ナトリウム ＥＰ ０．０７１０２ｇ／Ｌ
無水硫酸銅 ０．０００８ｇ／Ｌ
Ｌ−グルタミン １．０８５ｇ／Ｌ
Ｄ−ビオチン ＥＰ＋ ０．０００００３７ｇ／Ｌ
ピルビン酸ナトリウム ０．１６５ｇ／Ｌ
亜セレン酸ナトリウム５Ｈ２０ ０．０００４４７ｇ／Ｌ
メルカプトエタノール ０．００２３ｇ／Ｌ
エタノールアミンＨＣＬ ０．００１９８ｇ／Ｌ
ウシインスリン ０．０００５ｇ／Ｌ
８０ｃｍ２培養フラスコ（Ｎｕｎｃ、ロスキレ、デンマーク）中で細胞を成長させ、５％ＣＯ２−９５％空気雰囲気下、３７℃で維持した。約８０〜９０％のコンフルエントに達したら、細胞を継代培養し、１週間で１回継代した。継代培養は、トリプシン／ＥＤＴＡを用いて細胞を剥離させ、細胞懸濁物を１０倍に希釈することを含む。
【0204】
メチル−３Ｈ−チミジン取り込みアッセイ：播種の１日前に、ＦＣＳの代わりに５％の活性炭処理した（ＣＴ）仔ウシ血清（ＢＣＳ；Ｈｙｃｌｏｎｅ）を含み、ウシインスリンの最終濃度が１．０μｇ／ｍｌであるアッセイ培地中、ＭＣＦ−７Ｈ細胞を一晩かけて飢餓状態にした。白色２４ウェルプレート（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、シェルトン、ＵＳＡ）中、密度が７．５×１０３細胞／ウェルになるように５％ ＣＴ ＢＣＳを含むアッセイ培地に細胞を播種し、それぞれのウェルには、６３０μＬのアッセイ培地が含まれていた。参照化合物および／または試験化合物を用いて刺激する２４時間前に細胞を付着させ、広げた。７日間の刺激期間の後、ウェルあたり０．２５μＣｉ／ウェルのメチル−３Ｈ−チミジン（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ、バッキンガムシャー、ＵＫ）を加えた。培養物を５％ＣＯ２−９５％空気雰囲気下、３７℃で維持した。一晩インキュベートした後、過剰量のメチル−３Ｈ−チミジンを吸引し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で細胞を洗浄した。１ｍｌのシンチレーション液Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）とともに１時間インキュベートした後、Ｐａｃｋａｒｄ ＴＯＰ−カウントＮＸＴマイクロプレートシンチレーションカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で放射線を測定した。１７β−エストラジオール（Ｅ２）およびエチニルエストラジオール（ＥＥ）は、ピコモル濃度範囲で、最大限の効能でＭＣＦ−７Ｈ乳癌細胞の増殖を誘発する（Ｅ２の効能は、定義によれば１．０、選択した化合物のデータを表１に与える）。
【0205】
表１：ＭＣＦ−７Ｈ乳癌細胞増殖アッセイにおける選択した参照化合物のインビトロデータ化合物 Ｅ２％ 効能（Ｅ２に対する割合）
Ｅ２ １００ａ １．００ａ
ＥＥ １３７ ０．９９
タモキシフェン ０．００８ ０．５８
４ＯＨＴｂ ２．３ ０．４９
ラロキシフェン ２１．１ ０．３３
アルゾキシフェン ９９．１ ０．３４
ドロロキシフェン ５．９ ０．３８
フルベストラント １８．９ ０．０２
ａ 定義；試験化合物のデータを、Ｅ２のデータに対して正規化している。
【0206】
ｂ ４−ＯＨ−タモキシフェンは、タモキシフェンの薬理学的に強力な活性代謝物である。
【0207】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、ＭＣＦ−７Ｈ乳癌細胞増殖アッセイにおいて０．１０以上の効能を示す。
【0208】
実施例１３どの程度まで化合物がＥＲ陽性乳癌細胞のエストロゲン受容体アルファを安定化する、または下方制御する（不安定化する）ことができるかを、Ｔ４７Ｄ細胞を用いたインビトロアッセイで試験する。さらに特定的には、このインビトロバイオアッセイを用い、この化合物のデータと参照化合物であるＩＣＩ １８２，７８０（フルベストラント）のデータを同じ試験で比較することによって、化合物の効能（最大応答の割合）を決定する（フルベストラントの下方制御は、定義によれば１００％）。４−ＯＨ−タモキシフェンは、この細胞内でＥＲαタンパク質の濃度を安定化する化合物の一例として入れられている（選択した化合物のデータを表２に与えている）。
【0209】
使用する方法のさらに詳細な記載は以下のとおりである。
【0210】
細胞培養物。ヒト上皮乳癌細胞株Ｔ４７Ｄ（由来：ＡＴＣＣ）を、５％の胎児ウシ血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．５、１００μｇ／ｍｌのペニシリン−ストレプトマイシン溶液を豊富に含むＨａｍ’ｓ Ｆ１２培地およびＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ（Ｇｉｂｃｏ）の１：１混合物中で常に維持しておいた。８０ｃｍ２培養フラスコ（Ｎｕｎｃ、ロスキレ、デンマーク）中で細胞を成長させ、５％ＣＯ２−９５％空気雰囲気下、３７℃で維持した。約８０〜９０％のコンフルエントに達したら、細胞を継代培養し、１週間で１回継代した。継代培養は、Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｂｕｆｆｅｒ［Ｓｉｇｍａ］を用いて細胞を剥離させた後、新しいＲｏｕｘフラスコ（１７５ｃｃ）に１：５または１：１０で接種し、および／またはＮｕｎｃｌｏｎ（商標）Ｓｕｒｆａｃｅ ９６ウェルマイクロプレートに播種することを含む。培地は、適用可能な場合、インキュベート３日目または４日目に新しいものに換える必要がある。
【0211】
ＥＲαタンパク質濃度の決定：マイクロプレート中のＴ４７Ｄ細胞を１Ｅ−５Ｍの試験化合物とともに２４時間インキュベートする。すべてのウェルの上澄みを注意深く吸引する。マイクロプレート上で細胞を溶解させ、細胞溶解物について、ＥＲα ＥＬＩＳＡアッセイキット（Ａｃｔｉｖｅ Ｍｏｔｉｆ）を用い、ＥＲα含有量について調べる。
【0212】
表２：Ｔ４７Ｄ乳癌細胞のＥＲα下方制御アッセイにおける選択した参照化合物のインビトロデータ化合物 下方制御（フルベストラントに対する％）
フルベストラント １００ａ
４ＯＨＴｂ −３３０ｃ
ラロキシフェン −３９ｃ
溶媒対照（１％ ＤＭＳＯ） ０ｄ
ａ 定義；試験化合物のデータを、フルベストラントのデータに対して正規化している。
【0213】
ｂ ４−ＯＨ−タモキシフェンは、タモキシフェンの薬理学的に強力な活性代謝物である。
【0214】
ｃ 負の数は、受容体の上方制御または安定化を示す。
【0215】
ｄ 化合物によって誘発される効果を溶媒対照に対して正規化している。
【0216】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、Ｔ４７Ｄ乳癌細胞アッセイにおいてＥＲαの少なくとも２０％下方制御を示す。
【0217】
実施例１４迅速なラットＰＫ
この試験を用い、雄（無傷または去勢済）または雌（無傷または卵巣切除済）のラット（Ｒａｔｔｕｓ Ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）に化合物を経口投与した後の薬物動態パラメータ（ＡＵＣ（０−６ｈ）、ＣｍａｘおよびＴｍａｘ）を決定する。化合物を２０μｍｏｌ／ｋｇで経口投与した後、尾静脈から血液を種々の時間点（化合物を投与してから０．５、１、２、３、４、６時間後）で集めた。時間点ごとに血漿サンプルを保存しておき、後でＬＣ−ＭＳを用いて血漿中の濃度を決定した。薬物動態パラメータ（ＡＵＣ（０−６ｈ）、ＣｍａｘおよびＴｍａｘ）は、Ａｎｉｍａｌｓ！またはＷｉｎＮｏｎｌｉｎのノンコンパートメント解析モジュールを用い、得られた濃度対時間の曲線から誘導した。
【0218】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、ラットにおいて、経口摂取可能であり、ＡＵＣ（０−６ｈ）＞１μＭ．ｈである。
【0219】
【表1】
Ａ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（０から６０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｂ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（４０から８０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｃ：ＬＣＭＳ Ｘｂｒｉｄｇｅ、Ｃ１８、３．５ｕｍ、３．５×２０ｍｍ（０から１００％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｄ：Ｌｕｎａ Ｃ１８、３ｕｍ、１００×２ｍｍ（２５％アセトニトリル／７５％水）
Ｅ：Ｌｕｎａ Ｃ１８、３ｕｍ、１００×２ｍｍ（０−８０％アセトニトリル／５％ＴＦＡ）
【0220】
【表2】
（ｂ）実施例１３を参照
（ｃ）Ｎ−プロピルアゼチジニル−３−オキシ側鎖がピペリジニルエチルオキシ側鎖と置き換わっている化合物７ｃの対応する類似体（すなわち、米国特許第５，４８８，０５８号の実施例１８に記載される化合物ＬＹ−３３５５６２）は、−１９９％の下方制御（すなわち、１９９％の上方制御）を示す。
【0221】
（ｄ）−５％の下方制御は、５％の上方制御を意味する。Ｎ−プロピルアゼチジニル−３−オキシ側鎖がジメチルアミノエチルオキシ側鎖と置き換わっている化合物７ｂｈの対応する類似体（すなわち、４−ヒドロキシ−タモキシフェン）は、−３４３％の下方制御（すなわち、３４３％の上方制御）を示す。
【0222】
Ａ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（０から６０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）Ｂ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（４０から８０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｃ：ＬＣＭＳ Ｘｂｒｉｄｇｅ、Ｃ１８、３．５ｕｍ、３．５×２０ｍｍ（０から１００％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｄ：Ｌｕｎａ Ｃ１８、３ｕｍ、１００×２ｍｍ（２５％アセトニトリル／７５％水）
Ｅ：Ｌｕｎａ Ｃ１８、３ｕｍ、１００×２ｍｍ（０−８０％アセトニトリル／５％ＴＦＡ）
Ｆ：ＨＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８ ５ｕｍ Ｌｕｎａカラム（１０から６０％アセトニトリル／水５％ＴＦＡ）
Ｇ：ＨＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８ ５ｕｍ Ｌｕｎａカラム（１０から７０％アセトニトリル／水５％ＴＦＡ）
【0223】
【表3】
（ｂ）実施例１２を参照
（ｃ）実施例１３を参照
（ｄ）表４の化合物７ｃに対するコメント（ｃ）を参照
Ａ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（０から６０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｂ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（４０から８０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｃ：ＬＣＭＳ Ｘｂｒｉｄｇｅ、Ｃ１８、３．５ｕｍ、３．５×２０ｍｍ（０から１００％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｄ：Ｌｕｎａ Ｃ１８、３ｕｍ、１００×２ｍｍ（２５％アセトニトリル／７５％水）
Ｅ：Ｌｕｎａ Ｃ１８、３ｕｍ、１００×２ｍｍ（０−８０％アセトニトリル／５％ＴＦＡ）
【0224】
【表4】
（ｂ）実施例１２を参照
（ｃ）実施例１３を参照
（ｄ）実施例１４を参照
Ａ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（０から６０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｂ：ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８、１．７ｕｍ、２．１×１００ｍｍ（４０から８０％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）
Ｃ：ＬＣＭＳ Ｘｂｒｉｄｇｅ、Ｃ１８、３．５ｕｍ、３．５×２０ｍｍ（０から１００％アセトニトリル／水／５％ＴＦＡ）