特許 5937112 選択的ＦＡＫ阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】5937112

(24)【登録日】2016年5月20日

(45)【発行日】2016年6月22日

(54)【発明の名称】選択的ＦＡＫ阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 239/42 20060101AFI20160609BHJP

   C07D 401/12 20060101ALI20160609BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20160609BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20160609BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20160609BHJP

【ＦＩ】

   C07D239/42 ZCSP

   C07D401/12

   A61K31/506

   A61P35/00

   A61P43/00 111

【請求項の数】26

【全頁数】89

(21)【出願番号】特願2013-553996(P2013-553996)

(86)(22)【出願日】2012年2月17日

(65)【公表番号】特表2014-505719(P2014-505719A)

(43)【公表日】2014年3月6日

(86)【国際出願番号】GB2012000176

(87)【国際公開番号】WO2012110774

(87)【国際公開日】20120823

【審査請求日】2015年2月16日

(31)【優先権主張番号】61/443,773

(32)【優先日】2011年2月17日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/523,489

(32)【優先日】2011年8月15日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/579,729

(32)【優先日】2011年12月23日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】513209361

【氏名又は名称】カンサー・セラピューティクス・シーアールシー・プロプライエタリー・リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＣＡＮＣＥＲ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ ＣＲＣ ＰＴＹ ＬＩＭＩＴＥＤ

(74)【代理人】

【識別番号】110000523

【氏名又は名称】アクシス国際特許業務法人

(72)【発明者】

【氏名】イアン・ピーター・ホルムズ

(72)【発明者】

【氏名】イルヴァ・バーグマン

(72)【発明者】

【氏名】ジリアン・エリザベス・ルニス

(72)【発明者】

【氏名】マリカ・ニカク

(72)【発明者】

【氏名】ニール・チョイ

(72)【発明者】

【氏名】キャサリン・フェイ・ヘムリー

(72)【発明者】

【氏名】スコット・レイモンド・ウォーカー

(72)【発明者】

【氏名】リチャード・チャールズ・フォイトジック

(72)【発明者】

【氏名】ダニー・ガネイム

(72)【発明者】

【氏名】ロミナ・レッセン

【審査官】 松本 淳

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１３−５３４２２７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１０／０５８０３０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／０５５１１７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００６−５１５２９８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００５−５０９６２４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００６−５２０３５４（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＡＲＰＡＴ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）：

【化1】

の化合物であって、式中、
Ｒ¹は、Ｈ及び

【化2】

から選択され、
Ｒ^N1は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N2は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N3は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N4は、Ｈ及びＣＨ₃から選択され、
Ｒ²は、Ｈ及び

【化3】

から選択され、
Ｒ^N5は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N6は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ¹及びＲ²の一方だけがＨであり、
Ｒ³は、Ｏ−Ｃ_1-2アルキル、Ｃ_1-2アルキル、ハロゲン、シアノから選択され、Ｃ_1-2アルキル基は１個以上のフルオロ基で置換され得て、
Ｒ⁴は、ＣＦ₃、ハロゲン、ＣＦ₂Ｈ及びＣＮから選択され、
Ｒ⁵は、以下の式：

【化4】

の基から選択され、
Ｒ⁶は、Ｈ、（ＣＨＲ^C1）_n1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^N6）Ｚ¹及び（ＣＨ₂）_n2Ｃ（Ｏ）ＯＺ²から選択され、
ｎ１は１であり、
Ｒ^C1はＨ又はＭｅであり、
Ｒ^N6はＨ又はＣＨ₃であり、
Ｚ¹はＨ、ＣＨ₃又はＯＣＨ₃であり、
ｎ２は１であり、
Ｚ²はＣＨ₃であり、
Ｒ^N6及びＺ¹の一方だけがＣＨ₃になり得て、
Ｒ⁷は、Ｈ及び（ＣＨ₂）_m1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^M1）Ｙ¹から選択され、
ｍ１は０又は１であり、
Ｒ^M1はＨであり、
Ｙ¹はＨ、Ｍｅ又はＯＣＨ₃であり、
Ｒ⁶及びＲ⁷の一方だけがＨであり、
Ｒ⁸はＨであり、あるいはＲ⁷がＣ（＝Ｏ）ＮＨ₂の場合、Ｒ⁸はＨ及びＣ_1-2アルキルから選択される
ことを特徴とする化合物。

【請求項2】

Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化5】

であり、Ｒ^N1はＣ（＝Ｏ）Ｍｅである、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化6】

であり、Ｒ^N1はＨ、メチル又はエチルである、請求項１に記載の化合物。

【請求項4】

Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化7】

であり、Ｒ^N2はＨ、メチル及びエチルから選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項5】

Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化8】

であり、Ｒ^N3はＨ及びメチルから選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項6】

Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化9】

であり、Ｒ^N4はＨ及びメチルから選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項7】

Ｒ¹はＨであり、Ｒ²は

【化10】

であり、Ｒ^N5はＨ及びメチルから選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項8】

Ｒ¹はＨであり、Ｒ²は

【化11】

であり、Ｒ^N6はＨ及びメチルから選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項9】

Ｒ³は、Ｆ、Ｍｅ、Ｅｔ、ＯＭｅ及びＯＣＦ₃から選択される、請求項１−８のいずれかに記載の化合物。

【請求項10】

Ｒ³はＯＭｅである、請求項１−９のいずれかに記載の化合物。

【請求項11】

Ｒ⁴はＣＦ₃、Ｃｌ及びＣＦ₂Ｈから選択される、請求項１−１０のいずれかに記載の化合物。

【請求項12】

Ｒ⁴はＣＦ₃である、請求項１１に記載の化合物。

【請求項13】

Ｒ⁵は、以下の式：

【化12】

の基である、請求項１−１１のいずれかに記載の化合物。

【請求項14】

Ｒ⁷はＨであり、Ｒ⁶は、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃、ＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃から選択される、請求項１３に記載の化合物。

【請求項15】

Ｒ⁷はＨであり、Ｒ⁶は、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、ＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃から選択される、請求項１４に記載の化合物。

【請求項16】

Ｒ⁷はＨであり、Ｒ⁶は、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂から選択される、請求項１５に記載の化合物。

【請求項17】

Ｒ⁶はＨであり、Ｒ⁷はＣ（Ｏ）ＮＨ₂、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃から選択される、請求項１３に記載の化合物。

【請求項18】

Ｒ⁶はＨであり、Ｒ⁷はＣ（Ｏ）ＮＨ₂である、請求項１７に記載の化合物。

【請求項19】

Ｒ⁸はメチルである、請求項１８に記載の化合物。

【請求項20】

Ｒ⁵は、以下の式：

【化13】

の基である、請求項１−１１のいずれかに記載の化合物。

【請求項21】

組成物であって、
請求項１−２０のいずれかに記載の化合物と薬学的に許容可能な担体又は希釈剤とを含むことを特徴とする組成物。

【請求項22】

治療法で使用するための、請求項１−２０のいずれかに記載の化合物。

【請求項23】

ＦＡＫの阻害により改善される疾患を治療するための薬物の調製における、請求項１−２０のいずれかに記載の化合物の使用。

【請求項24】

ＦＡＫの阻害により改善される疾患の治療法で使用するための、請求項１−２０のいずれかに記載の化合物。

【請求項25】

ヒト又は動物の身体の治療法で使用するための、請求項１−２０のいずれかに記載の化合物。

【請求項26】

インビトロ又はインビボ（ただしヒトの体内を除く）でＦＡＫを阻害する方法であって、
細胞を、有効量の請求項１−２０のいずれかに記載の化合物と接触させることを含む
ことを特徴とする方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、タンパク質チロシンキナーゼ２（ＰＴＫ２）としても知られる接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）を阻害する２，４，５−置換ピリミジン並びにこのような化合物を含有する医薬組成物に関する。本発明は、このような化合物をがん等の増殖性疾患の予防及び／又は治療に使用する方法にも関する。

【背景技術】

【0002】

方向性を持った細胞遊走は、胚発生、創傷治癒、血管新生、腫瘍浸潤、転移を含めた多くの生理的及び病的過程において重要である。細胞を刺激して方向性を持って移動させる細胞外シグナルの伝達は、細胞外マトリックスタンパク質に結合する膜貫通インテグリン、増殖因子（例えば、ＥＧＦ、ＩＧＦ、ＶＥＧＦ）のその同族の受容体の細胞外ドメインへの作用を含めた多数の過程によって引き起こされ得る。

【0003】

ＦＡＫは、膜貫通インテグリン及び増殖因子受容体の両方からのシグナルを仲介する非受容体チロシンキナーゼである。ＦＡＫは、これらの多様な細胞外シグナルを調整し、外部環境を通って細胞が方向性を持って移動するようにこれらのシグナルを統合するにあたって中心的な役割を果たすと報告されている（Ｔｏｍａｒ ａｎｄ Ｓｃｈｌａｅｐｆｅｒ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００９，２１，６７６−６８３）。

【0004】

インテグリンのクラスタ形成又は増殖因子受容体（例えば、ＥＧＦＲ、ＩＧＦ−１Ｒ、Ｈｅｒ２、ＶＥＧＦＲ）の活性化は、Ｙ３９７でのＦＡＫ自己リン酸化を促進する。リン酸化されたＹ３９７ ＦＡＫは次にｃ−Ｓｒｃ（本明細書ではＳｒｃと称する）に結合し、Ｓｒｃが仲介するＹ５７６及びＹ５７７でのＦＡＫのリン酸化が起きて活性なＦＡＫ−Ｓｒｃ複合体が生じる。この活性なＦＡＫ−Ｓｒｃは次に、細胞接着、遊走、浸潤、細胞の生存、増殖、化学療法耐性の獲得、転移等の過程に影響する多数の生化学的経路を介したシグナル伝達を促進する（Ｂｒｕｎｔｏｎ ａｎｄ Ｆｒａｍｅ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ：２００８，８，４３７−４３２及びＣｈａｔｚｉｚａｃｈａｒｉａｓ ｅｔ ａｌ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｔａｒｇｅｔｓ：２００７，１１（１０），１３１５−１３２８）。

【0005】

細胞接着
細胞接着におけるＦＡＫの役割に取り組んだ機能性の研究は、ＦＡＫが接着斑の構築（Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ ａｎｄ Ｐａｒｓｏｎｓ．Ｎａｔｕｒｅ：１９９６，３８０，５３８−５４０）及び接着斑のターンオーバー（Ｆｉｎｃｈａｍ ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：１９９５，１０（１１），２２４７−２２５２）の両方に寄与することを示唆している。ヒト及びマウスの両方の細胞株における、ＦＡＫタンパク質レベルの低下をもたらすＲＮＡｉによるＦＡＫの阻害は、インビトロで、フィブロネクチン／ラミニンをコーティングしたプレートへの細胞接着の低下を示している（Ｔｓｕｔｓｕｍｉ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ：２００８，３３（１），２１５−２２４）。

【0006】

細胞遊走
ＦＡＫが細胞遊走の主要制御因子であるとの強力なエビデンスがある（Ａｎｇｅｌｕｃｃｉ ａｎｄ Ｂｏｌｏｇｎａ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ：２００７，１３，２１２９−２１４５及びＭｉｔｒａ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００５，６，５６−６８）。ＦＡＫ−／−マウスの胎仔から採取した細胞は、接着斑のターンオーバーが損なわれる結果としての遊走の減少を示す（Ｉｌｉｃ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ：１９９５，３７７，５３９−５４４）。更に、接着斑からＦＡＫを外すと細胞遊走は減少するが（Ｇｉｌｍｏｒｅ ａｎｄ Ｒｏｍｅｒ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ：１９９６，７（８），１２０９−１２２４）、ＣＨＯ細胞における過剰発現は遊走を刺激する（Ｃａｒｙ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ：１９９６，７，１７８７−１７９４）。加えて、ヒト及びマウスの両方の細胞株における、ＦＡＫタンパク質レベルの低下をもたらすＲＮＡｉによるＦＡＫの阻害は、インビトロでの走触性遊走アッセイにおいて細胞遊走を低下させると判明している（Ｔｓｕｔｓｕｍｉ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ：２００８，３３（１），２１５−２２４）。

【0007】

細胞浸潤
ＦＡＫ活性化は、マトリックス分解性の浸潤性挙動を強化すると判明している。細胞アポトーシス感受性タンパク質（ＣＡＳ）を介したＦＡＫ−Ｓｒｃシグナル伝達（Ｌｉａｏ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００８，２７：１５）は、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９を含めたマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の発現につながる。ＦＡＫ−Ｓｒｃ活性化はまた、エンドフィリンＡ２のリン酸化を介したＭＭＰ１４の細胞表面での発現を促進する。次に、ＭＭＰ１４は、ＭＭＰ２を、プロＭＭＰ２のその活性型への切断により活性化する（Ｓｉｅｓｓｅｒ ａｎｄ Ｈａｎｋｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００６，１２（１１），３２３３−３２３７）。浸潤性が高いがん細胞は、浸潤突起として知られる特殊化されたアクチンが豊富な細胞外マトリックス分解性膜突起を形成し、浸潤突起は、ＭＭＰ等のマトリックス分解性のプロテアーゼが豊富である。ＦＡＫ及びＳｒｃの両方が、浸潤突起の形成に関与すると判明している（Ｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００９，１８５（２），３５７−３７０）。

【0008】

細胞の生存
ＦＡＫが細胞の生存において重要な役割を果たすことが示されている。ＦＡＫの活性化は、アノイキス（不適切な細胞外マトリックス環境に応答してのアポトーシス）の抑制をもたらすと判明している（Ｆｒｉｓｃｈ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ．１９９６，１３４（３），７９３−７９９及びＸｕ ｅｔ ａｌ Ｃｅｌｌ Ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．１９９６，７（４），４１３−４１８）。複数の研究が、ＦＡＫは複数の下流経路を活性化させることによってアノイキスを線維芽細胞及び上皮細胞の両方において抑制すると実証している（Ｚｏｕｑ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ：２００８，１２２，３５７−３６７）。ヒトの腸管のクリプト細胞において、ＦＡＫとβ１インテグリンとの会合とそれに続くＳｒｃとの結合を通じたシグナル伝達は、ＰＩ３−Ｋ／Ａｋｔ−１シグナル伝達を介した抗アポトーシス性タンパク質Ｂｃｌ−Ｘ_L及びＭｃｌ−１の発現を上方制御する。また、ＰＩ３−Ｋ／Ａｋｔ−１シグナル伝達はアポトーシス促進性のアクチベータＢａｘ及びＢａｋの発現の下方制御を行い、アポトーシス促進性の感作物質Ｂａｄのリン酸化を引き起こし、ｐ３８βの活性化をアンタゴナイズする。ＦＡＫ／Ｓｒｃが解離すると、アポトーシス／アノイキスを引き起こすものであるｐ３８βの持続的な／強化された活性化が起きる（Ｂｏｕｃｈａｒｄ ｅｔ ａｌ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：２００８，１３，５３１−５４２）。

【0009】

細胞増殖
ＦＡＫ又はβ１インテグリンの発現における減少とそれに伴うβ１−ＦＡＫシグナル伝達軸の分裂は、肺に散らばった微小転移細胞の初期増殖の減少につながる。３Ｄ培養Ｄ２細胞を使用すると、ＦＡＫ Ｙ３９７、Ｙ８６１のリン酸化と増殖能力との間に強い相関関係が観察された（Ｓｈｉｂｕｅ ａｎｄ Ｗｅｉｎｂｅｒｇ．ＰＮＡＳ ２００９，１０６（２５），１０２９０−１０２９５）。ＦＡＫを過剰発現するように遺伝子導入を行ったＨＬ−６０細胞は、コントロールのＨＬ−６０細胞の１．５倍の速度で倍増すると判明している。研究によって、ＦＡＫを過剰発現している細胞におけるサイクリンＤ３発現及びＣＤＫ活性の著しい惹起が明らかとなった。多数の研究においてＦＡＫ活性化と関連付けられている過程であるＰＩ３−Ｋ／Ａｋｔ−１シグナル伝達の活性化は、サイクリンの発現／活性化の蓋然的な原因であると特定された（Ｙａｍａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：２００３，１５．５７５−５８３）。

【0010】

化学療法耐性の獲得
シスプラチン感受性卵巣がん細胞株ＯＡＷ４２をシスプラチン処理及び続く回復のサイクルに繰り返し曝露すると、化学療法耐性があるＯＡＷ４２−Ｒ細胞が形成された。この化学療法耐性の原因を突き止めようとする研究により、ＦＡＫが、感受性細胞及び化学療法耐性細胞の両方において構成上不可欠的に活性であることが明らかとなった。しかしながら、Ｙ３９７ ＦＡＫのリン酸化の阻害は、ＯＡＷ４２細胞においてシスプラチンでの処理によって誘発されたものの、ＯＡＷ４２−Ｒ細胞では誘発されなかった（Ｐｏｕｌａｉｎ ａｎｄ ｃｏ−ｗｏｒｋｅｒｓ．Ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｉｃ ｏｎｃｏｌｏｇｙ：２００６，１０１，５０７−５１９）。ＦＡＫ阻害の化学療法耐性への効果は、インビトロ及びインビボでＦＡＫ阻害剤ＴＡＥ２２６を単独又はドセタキセルと組み合わせて使用して、タキサン感受性（ＳＫＯＶ３ｉｐ１及びＨｅｙＡ８）及びタキサン耐性（ＨｅｙＡ８−ＭＤＲ）卵巣がん細胞株においても研究されている。ＴＡＥ２２６は構造：

【化1】

を有し、国際公開第２００４／０８０９８０号及び国際公開第２００５／０１６８９４号パンフレットに記載されている。インビトロで、ＴＡＥ２２６は、ＦＡＫのリン酸化をＹ３９７及びＹ８６１の両方の部位で阻害し、細胞増殖を時間、用量依存的に阻害し、タキサン感受性細胞株及びタキサン耐性細胞株においてそれぞれドセタキセル介在性の増殖阻害を１０倍及び２０倍強化した。インビボでは、ＴＡＥ２２６によるＦＡＫ阻害は、ビヒクルで処理したコントロールと比較して、腫瘍量をＨｅｙＡ８、ＳＫＯＶ３ｉｐ１及びＨｅｙＡ８−ＭＤＲモデルにおいて有意に減少させた（４６−６４％）。しかしながら、最大の効力は、３つの全てのモデルにおいて、ＴＡＥ２２６とドセタキセルとを同時投与した場合に観察された（８５−９７％の減少）。加えて、ドセタキセルと組み合わせたＴＡＥ２２６は、腫瘍を有するマウスの生存期間を有意に延ばした（Ｈａｌｄｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ：２００７，６７（２２），１０９７６−１０９８３）。

【0011】

転移能
ＦＡＫタンパク質レベルの役割と、動物モデルにおける腫瘍の進行とのその関係を調べた研究が幾つかある。ＦＡＫ＋／−マウスを用いたマウスの皮膚がん発症モデルにおいて、ＦＡＫタンパク質の発現低下は、ＦＡＫ＋／＋野生型コントロール群マウスと比較して、乳頭腫の形成の減少（４６％）と相関関係にあった（ＭｃＬｅａｎ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００１，６１，８３８５−８３８９）。ヒト乳がん細胞を使用して、研究者は、ＦＡＫ ｓｉＲＮＡ処理細胞は、ヌードマウスでの同所性移植後に肺への転移が阻害されたと示した（Ｂｅｎｌｉｍａｍｅ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００５，１７１，５０５−５１６）。４Ｔ１マウス乳がん細胞におけるＦＡＫに対する短いヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）を使用した同様の実験では、乳腺への同所性移植後、肺への転移が阻害された（Ｍｉｔｒａ ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：２００６，２５，４４２９−４４４０）。４Ｔ１マウス乳がん細胞におけるドミナントネガティブ発現によるＦＡＫ阻害によって、マウスにおける腫瘍の増殖及び血管新生は減少した（Ｍｉｔｒａ ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：２００６，２５，５９６９−５９８４）。乳がんの遺伝子導入モデルの乳腺上皮におけるＦＡＫ機能を混乱させるためのＣｒｅ／ｌｏｘＰ組み換え系の使用により、前がん性の過形成の細胞腫とそれに続く転移への移行にはＦＡＫの発現が必要であることが実証された。腫瘍の進行における観察された減速は更に乳腺上皮の増殖の障害と相関関係があり、これはＦＡＫが乳房腫瘍の進行において極めて重要な役割を果たすことを示唆している（Ｌａｈｌｏｕ ｅｔ ａｌ．ＰＮＡＳ ＵＳＡ：２００７，１０４（５１），２０３０２−２０３０７）。

【0012】

上記の観察結果と合致して、ＦＡＫ ｍＲＮＡ及び／又はタンパク質の過剰発現は、結腸直腸がん（ｄｅ Ｈｅｅｒ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｕｒｇｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ：２００８，３４（１１），１２５３−１２６１）、前立腺がん（Ｔｒｅｍｂｌａｙ，Ｌ．，Ｗ．Ｈａｕｃｋ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ：１９９６，６８（２），１６４−１７１）、乳がん（Ｗａｔｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ２００５，９３（６），６９４−６９８）及びメラノーマ（Ｈｅｓｓ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００５，６５（２１），９８５１−６０）を含めた多数のヒトのがんにおいて報告されている。更に、ＦＡＫの過剰発現は、これらのがんのより悪性度が高い表現型と相関関係にあることが多い。

【0013】

つまり、ＦＡＫ阻害剤を、細胞接着、細胞遊走、細胞浸潤、細胞増殖及び化学療法耐性の低下に応用できるかもしれないことを示唆する強力なエビデンスがある。更に、ＦＡＫ阻害剤を、不適切な細胞外マトリックス環境にある細胞のアポトーシスの惹起及び血管新生の減少に応用できる可能性がある。

【0014】

選択的ＦＡＫ阻害剤である化合物は、他のタンパク質キナーゼ等の、標的の阻害により引き起こされる潜在的な問題を伴うことなく、特定の生物学的経路を標的にすることを可能にする。

【0015】

したがって、ＦＡＫを選択的に阻害する化合物は、がん等の増殖性疾患の治療に有用となり得る。

【0016】

ＦＡＫを阻害すると報告されている２種の化合物はＰＦ−５６２，２７１及びＰＦ−５７３，２２８である。

【化2】

ＰＦ−５６２，２７１は国際公開第２００４／０５６７８６号、国際公開第２００４／０５６８０７号、国際公開第２００５／０２３７８０号、国際公開第２００７／０６３３８４号のパンフレット及びＲｏｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８，６８（６），１９３５−１９４４に記載されている。

【0017】

ＰＦ−５７３，２２８は、Ｓｌａｃｋ−Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００７，２８２（２０），１４８４５−１４８５２に記載されている。

【0018】

これらの具体的に記載された化合物に加えて、別種のＦＡＫ阻害剤が、国際公開第２００８／１２９３８０号パンフレット、国際公開第２００８／１１５３６９号パンフレット、国際公開第２００９／１０５４９８号パンフレット、米国特許出願公開２０１０／１１３４７５号明細書、国際公開第２００９／１４３３８９号パンフレット、国際公開第２００９／０７１５３５号パンフレット、国際公開第２０１０／０５５１１７号パンフレット、国際公開第２０１０／０５８０３０号パンフレット、国際公開第２０１０／０５８０３２号パンフレット、国際公開第２００７／１４０２２２号パンフレット及び国際公開第２００９／０２４３３２号パンフレットに開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0019】

【特許文献1】国際公開第２００４／０８０９８０号パンフレット

【特許文献2】国際公開第２００５／０１６８９４号パンフレット

【特許文献3】国際公開第２００４／０５６７８６号パンフレット

【特許文献4】国際公開第２００４／０５６８０７号パンフレット

【特許文献5】国際公開第２００５／０２３７８０号パンフレット

【特許文献6】国際公開第２００７／０６３３８４号パンフレット

【特許文献7】国際公開第２００８／１２９３８０号パンフレット

【特許文献8】国際公開第２００８／１１５３６９号パンフレット

【特許文献9】国際公開第２００９／１０５４９８号パンフレット

【特許文献10】米国特許出願公開２０１０／１１３４７５号明細書

【特許文献11】国際公開第２００９／１４３３８９号パンフレット

【特許文献12】国際公開第２００９／０７１５３５号パンフレット

【特許文献13】国際公開第２０１０／０５５１１７号パンフレット

【特許文献14】国際公開第２０１０／０５８０３０号パンフレット

【特許文献15】国際公開第２０１０／０５８０３２号パンフレット

【特許文献16】国際公開第２００７／１４０２２２号パンフレット

【特許文献17】国際公開第２００９／０２４３３２号パンフレット

【非特許文献】

【0020】

【非特許文献1】Ｔｏｍａｒ ａｎｄ Ｓｃｈｌａｅｐｆｅｒ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００９，２１，６７６−６８３

【非特許文献2】Ｂｒｕｎｔｏｎ ａｎｄ Ｆｒａｍｅ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ：２００８，８，４３７−４３２

【非特許文献3】Ｃｈａｔｚｉｚａｃｈａｒｉａｓ ｅｔ ａｌ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｔａｒｇｅｔｓ：２００７，１１（１０），１３１５−１３２８

【非特許文献4】Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ ａｎｄ Ｐａｒｓｏｎｓ．Ｎａｔｕｒｅ：１９９６，３８０，５３８−５４０

【非特許文献5】Ｆｉｎｃｈａｍ ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：１９９５，１０（１１），２２４７−２２５２

【非特許文献6】Ｔｓｕｔｓｕｍｉ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ：２００８，３３（１），２１５−２２４

【非特許文献7】Ａｎｇｅｌｕｃｃｉ ａｎｄ Ｂｏｌｏｇｎａ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ：２００７，１３，２１２９−２１４５

【非特許文献8】Ｍｉｔｒａ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００５，６，５６−６８

【非特許文献9】Ｉｌｉｃ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ：１９９５，３７７，５３９−５４４

【非特許文献10】Ｇｉｌｍｏｒｅ ａｎｄ Ｒｏｍｅｒ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ：１９９６，７（８），１２０９−１２２４

【非特許文献11】Ｃａｒｙ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ：１９９６，７，１７８７−１７９４

【非特許文献12】Ｌｉａｏ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００８，２７：１５

【非特許文献13】Ｓｉｅｓｓｅｒ ａｎｄ Ｈａｎｋｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００６，１２（１１），３２３３−３２３７

【非特許文献14】Ｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００９，１８５（２），３５７−３７０

【非特許文献15】Ｆｒｉｓｃｈ ｅｔ ａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ．１９９６，１３４（３），７９３−７９９

【非特許文献16】Ｘｕ ｅｔ ａｌ Ｃｅｌｌ Ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．１９９６，７（４），４１３−４１８

【非特許文献17】Ｚｏｕｑ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ：２００８，１２２，３５７−３６７

【非特許文献18】Ｂｏｕｃｈａｒｄ ｅｔ ａｌ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：２００８，１３，５３１−５４２

【非特許文献19】Ｓｈｉｂｕｅ ａｎｄ Ｗｅｉｎｂｅｒｇ．ＰＮＡＳ ２００９，１０６（２５），１０２９０−１０２９５

【非特許文献20】Ｙａｍａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：２００３，１５．５７５−５８３

【非特許文献21】Ｐｏｕｌａｉｎ ａｎｄ ｃｏ−ｗｏｒｋｅｒｓ．Ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｉｃ ｏｎｃｏｌｏｇｙ：２００６，１０１，５０７−５１９

【非特許文献22】Ｈａｌｄｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ：２００７，６７（２２），１０９７６−１０９８３

【非特許文献23】ＭｃＬｅａｎ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００１，６１，８３８５−８３８９

【非特許文献24】Ｂｅｎｌｉｍａｍｅ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：２００５，１７１，５０５−５１６

【非特許文献25】Ｍｉｔｒａ ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：２００６，２５，４４２９−４４４０

【非特許文献26】Ｍｉｔｒａ ｅｔ ａｌ．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ：２００６，２５，５９６９−５９８４

【非特許文献27】Ｌａｈｌｏｕ ｅｔ ａｌ．ＰＮＡＳ ＵＳＡ：２００７，１０４（５１），２０３０２−２０３０７

【非特許文献28】ｄｅ Ｈｅｅｒ．Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｓｕｒｇｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ：２００８，３４（１１），１２５３−１２６１

【非特許文献29】Ｔｒｅｍｂｌａｙ，Ｌ．，Ｗ．Ｈａｕｃｋ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ：１９９６，６８（２），１６４−１７１

【非特許文献30】Ｗａｔｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ ２００５，９３（６），６９４−６９８

【非特許文献31】Ｈｅｓｓ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ：２００５，６５（２１），９８５１−６０

【非特許文献32】Ｒｏｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８，６８（６），１９３５−１９４４

【非特許文献33】Ｓｌａｃｋ−Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００７，２８２（２０），１４８４５−１４８５２

【発明の概要】

【0021】

発明者は、選択的ＦＡＫ阻害剤として効果的な特定の種類の化合物を発見した。これらの化合物は、ＩＧＦ−１Ｒ（インスリン様増殖因子１受容体）、ＩＲ（インスリン受容体）、ＣＤＫ（サイクリン依存性キナーゼ）等のキナーゼ、またＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、ＶＥＧＦＲ３等の他のキナーゼに優先してＦＡＫに対して選択性を示し得る。加えて、本発明の化合物は、チトクロムｐ４５０酵素、具体的には２Ｃ９及び３Ａ４アイソフォームの阻害に高い選択性を有し得る。更に、本発明の化合物は、グルタチオンとの付加体を形成する傾向が低くなり得る。

【0022】

第１の態様において、本発明は、以下の式（Ｉ）：

【化3】

の化合物を提供し、式中、
Ｒ¹は、Ｈ及び

【化4】

から選択され、
Ｒ^N1は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N2は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N3は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N4は、Ｈ及びＣＨ₃から選択され、
Ｒ²は、Ｈ及び

【化5】

から選択され、
Ｒ^N5は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ^N6は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、
Ｒ¹及びＲ²の一方だけがＨであり、
Ｒ³は、Ｏ−Ｃ_1-2アルキル、Ｃ_1-2アルキル、ハロ（ハロゲン）、シアノから選択され、Ｃ_1-2アルキル基は１個以上のフルオロ基で置換され得て、
Ｒ⁴は、ＣＦ₃、ハロ（ハロゲン）、ＣＦ₂Ｈ及びＣＮから選択され、
Ｒ⁵は、以下の式：

【化6】

の基から選択され、
Ｒ⁶は、Ｈ、（ＣＨＲ^C1）_n1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^N6）Ｚ¹及び（ＣＨ₂）_n2Ｃ（Ｏ）ＯＺ²から選択され、
ｎ１は１であり、
Ｒ^C1はＨ又はＭｅであり、
Ｒ^N6はＨ又はＣＨ₃であり、
Ｚ¹はＨ、ＣＨ₃又はＯＣＨ₃であり、
ｎ２は１であり、
Ｚ²はＣＨ₃であり、
Ｒ^N6及びＺ¹の一方だけがＣＨ₃になり得て、
Ｒ⁷は、Ｈ及び（ＣＨ₂）_m1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^M1）Ｙ¹から選択され、
ｍ１は０又は１であり、
Ｒ^M1はＨであり、
Ｙ¹はＨ、Ｍｅ又はＯＣＨ₃であり、
Ｒ⁶及びＲ⁷の一方だけがＨであり、
Ｒ⁸はＨであり、あるいはＲ⁷がＣ（＝Ｏ）ＮＨ₂の場合、Ｒ⁸はＨ及びＣ_1-2アルキルから選択される。

【0023】

本発明の第２の態様では、第１の態様の化合物と薬学的に許容可能な担体又は希釈剤とを含む組成物を提供する。

【0024】

本発明の第３の態様では、治療法で使用するための第１の態様の化合物を提供する。

【0025】

本発明の第４の態様では、ＦＡＫの阻害により改善される疾患を治療するための薬物の調製における、第１の態様の化合物の使用を提供する。本発明の第４の態様では、ＦＡＫの阻害により改善される疾患の治療法において使用するための第１の態様の化合物も提供する。

【0026】

本発明の更なる態様では、ヒト又は動物の身体の治療法で使用するための、好ましくは医薬組成物の形態である本明細書に記載されるような活性化合物を提供する。

【0027】

本発明の別の態様では、インビトロ又はインビボでのＦＡＫの阻害方法を提供し、この方法は、細胞を、有効量の本明細書に記載されるような活性化合物と接触させることを含む。

【発明を実施するための形態】

【0028】

基Ｒ¹−Ｒ⁸のそれぞれについて以下でより詳しく論じる。

【0029】

Ｒ¹
Ｒ¹は、以下の構造：

【化7】

の１つを有し得る。

【0030】

Ｒ¹がＨの場合、Ｒ²（以下で論じる）はＨではない。

【0031】

Ｒ^N1、Ｒ^N2及びＲ^N3のそれぞれは独立してＨ、Ｃ_1-3アルキル（すなわち、メチル、エチル、プロプ−１−イル、プロプ−２−イル）及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択され、Ｒ^N4はＨ又はメチルから選択される。

【0032】

Ｒ²
Ｒ²は、以下の構造：

【化8】

の１つを有し得る。

【0033】

Ｒ²がＨの場合、Ｒ¹（上で論じた）はＨではない。

【0034】

Ｒ^N5及びＲ^N6は、独立してＨ、Ｃ_1-3アルキル（すなわち、メチル、エチル、プロプ−１−イル、プロプ−２−イル）及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択される。

【0035】

Ｒ³
Ｒ³は、Ｏ−Ｃ_1-2アルキル、Ｃ_1-2アルキル、ハロ（ハロゲン）、シアノから選択され、Ｃ_1-2アルキル基は、１個以上のフルオロ基で置換され得る。このため、Ｒ³は、
ａ）ハロ（ハロゲン）：Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、
ｂ）シアノ：ＣＮ、
ｃ）Ｃ_1-2アルキル、任意で１個以上のフルオロ基で置換され得る：ＣＨ₃、ＣＨ₂Ｆ、ＣＨＦ₂、ＣＦ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₂Ｆ、ＣＨ₂ＣＨＦ₂、ＣＨ₂ＣＦ₃、ＣＨＦＣＨ₃、ＣＨＦＣＨ₂Ｆ、ＣＨＦＣＨＦ₂、ＣＨＦＣＦ₃、ＣＦ₂ＣＨ₃、ＣＦ₂ＣＨ₂Ｆ、ＣＦ₂ＣＨＦ₂、ＣＦ₂ＣＦ₃、
ｄ）Ｏ−Ｃ_1-2アルキル、ここでＣ_1-2アルキル基は任意で１個以上のフルオロ基で置換される：Ｏ−ＣＨ₃、Ｏ−ＣＨ₂Ｆ、Ｏ−ＣＨＦ₂、Ｏ−ＣＦ₃、Ｏ−ＣＨ₂ＣＨ₃、Ｏ−ＣＨ₂ＣＨ₂Ｆ、Ｏ−ＣＨ₂ＣＨＦ₂、Ｏ−ＣＨ₂ＣＦ₃、Ｏ−ＣＨＦＣＨ₃、Ｏ−ＣＨＦＣＨ₂Ｆ、Ｏ−ＣＨＦＣＨＦ₂、Ｏ−ＣＨＦＣＦ₃、Ｏ−ＣＦ₂ＣＨ₃、Ｏ−ＣＦ₂ＣＨ₂Ｆ、Ｏ−ＣＦ₂ＣＨＦ₂、Ｏ−ＣＦ₂ＣＦ₃
になり得る。

【0036】

Ｒ⁴
Ｒ⁴は、ＣＦ₃、ハロ（ハロゲン）（すなわち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ＣＦ₂Ｈ及びＣＮから選択される。

【0037】

一部の実施形態において、ハロ基（ハロゲンの基）はＣｌ又はＢｒである。

【0038】

Ｒ⁵
Ｒ⁵は、以下の式：

【化9】

の基から選択される。

【0039】

Ｒ⁶
Ｒ⁶は、Ｈ、（ＣＨＲ^C1）_n1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^N6）Ｚ¹及び（ＣＨ₂）_n2Ｃ（Ｏ）ＯＺ²から選択され、
ｎ１は１であり、
Ｒ^C1はＨ又はＭｅであり、
Ｒ^N6はＨ又はＣＨ₃であり、
Ｚ¹はＨ、ＣＨ₃又はＯＣＨ₃であり、
ｎ２は１であり、
Ｚ²はＣＨ₃であり、
Ｒ^N6及びＺ¹の一方だけがＣＨ₃になり得る。

【0040】

Ｒ⁶がＨの場合、Ｒ⁷（以下で論じる）はＨではない。

【0041】

Ｒ⁶が（ＣＨＲ^C1）_n1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^N6）Ｚ¹の場合、Ｒ⁶は、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＣＨ₃、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＣＨ₃ＯＣＨ₃、ＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、ＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃、ＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＣＨ₃及びＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＣＨ₃ＯＣＨ₃から選択され得る。

【0042】

Ｒ⁶が（ＣＨ₂）_n2Ｃ（Ｏ）ＯＺ²の場合、Ｒ⁶はＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ₃である。

【0043】

Ｒ⁷
Ｈ及び（ＣＨ₂）_m1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^M1）Ｙ¹であり、
ｍ１は０又は１であり、
Ｒ^M1はＨであり、
Ｙ¹は、Ｈ、Ｍｅ又はＯＣＨ₃である。

【0044】

Ｒ⁷がＨの場合、Ｒ⁶（上で論じた）はＨではない。

【0045】

Ｒ⁷が（ＣＨ₂）_m1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^M1）Ｙ¹の場合、Ｒ⁷は、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃、Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＣＨ₃、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃及びＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＯＣＨ₃から選択され得る。

【0046】

Ｒ⁸
Ｒ⁸は、Ｒ⁷がＣ（＝Ｏ）ＮＨ₂である場合を除いてＨであり、あるいはＣ_1-2アルキル、すなわちメチル又はエチルになり得る。

【0047】

他の形態を含む
上記には、これらの置換基の周知のイオン、塩、溶媒和及び保護形態が含まれる。例えば、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）に言及する場合、そのアニオン（カルボキシレート）形態（−ＣＯＯ^-）、塩又は溶媒和物、また慣用の保護形態も含まれる。同様に、アミノ基に言及する場合、そのアミノ基のプロトン化形態（−Ｎ⁺ＨＲ¹Ｒ²）、塩又は溶媒和物、例えばアミノ基のヒドロクロリド塩、慣用の保護形態も含まれる。同様に、ヒドロキシル基に言及する場合、そのアニオン形態（−Ｏ^-）、塩又は溶媒和物、またヒドロキシル基の慣用の保護形態も含まれる。

【0048】

異性体、塩、溶媒和物、保護形態及びプロドラッグ
特定の化合物は、１種以上の特定の幾何学的、光学的、エナンチオマー的、ジアステレオマー的、エピマー的、立体異性的、互変異性的、立体配座的又はアノマー的形態で存在し得て、以下に限定するものではないが、シス−及びトランス型、Ｅ−及びＺ型、ｃ−、ｔ−及びｒ型、エンド−及びエキソ型、Ｒ−、Ｓ−及びメソ型、Ｄ−及びＬ型、ｄ−及びＩ型、（＋）及び（−）型、ケト−、エノール−及びエノレート型、ｓｙｎ−及びａｎｔｉ型、シンクリナル−及びアンチクリナル型、α−及びβ型、アキシアル及びエカトリアル型、ボート−、チェア−、ツイスト−、エンベロープ及びハーフチェア型並びにこれらの組み合わせが含まれ、以下、集合的に「異性体」（又は「異性体形態」）と称する。

【0049】

以下で論じるように互変異性体を除いて、本明細書で使用の用語「異性体」から特に除外されるのは、構造（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ、ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ）異性体（すなわち、空間における原子の位置だけではなく原子間の連結が異なる異性体）であることに留意されたい。例えば、メトキシ基：−ＯＣＨ₃に言及する場合、その構造異性体ヒドロキシメチル基：−ＣＨ₂ＯＨのことであるとは解釈されない。同様に、オルトクロロフェニルに言及する場合、その構造異性体メタ−クロロフェニルのことだとは解釈されない。しかしながら、ある種類の構造に言及する場合、その種類の範囲内の構造的な異性体形態も含まれ得る（例えば、Ｃ_1-7アルキルはｎ−プロピル及びイソ−プロピルを含み、ブチルはｎ−、イソ−、ｓｅｃ−及びｔｅｒｔ−ブチルを含み、メトキシフェニルはオルト−、メタ−及びパラ−メトキシフェニルを含む）。

【0050】

上で述べた除外は、例えば以下の互変異性体対：ケト／エノール（以下に図示する）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エンチオール、Ｎ−ニトロソ／ヒドロキシアゾ及びニトロ／ａｃｉ−ニトロにおけるような互変異性体、例えばケト−、エノール−及びエノレート型には関係しない。

【化10】

【0051】

用語「異性体」に特に含まれるものは、１個以上の同位体の置換を伴う化合物であることに留意されたい。例えば、Ｈは、¹Ｈ、²Ｈ（Ｄ）及び³Ｈ（Ｔ）を含めたいずれの同位体形態にもなり得て、Ｃは、¹²Ｃ、¹³Ｃ及び¹⁴Ｃを含めたいずれの同位体形態にもなり得て、Ｏは、¹⁶Ｏ及び¹⁸Ｏを含めたいずれの同位体形態にもなり得る等である。

【0052】

特に指定しない限り、特定の化合物に言及する場合、その（全体的又は部分的）ラセミ混合物及び他の混合物を含めた全てのそのような異性体形態が含まれる。このような異性体形態の調製（例えば、不斉合成）及び分離（例えば、分別結晶化、クロマトグラフィ）方法は、当該分野で公知であるか、あるいは本明細書で教示された方法又は公知の方法を公知のやり方で適合させることで容易に得られる。

【0053】

特に指定しない限り、特定の化合物に言及する場合、以下で論じるように例えばそのイオン、塩、溶媒和物及び保護形態も含まれる。

【0054】

活性化合物の対応する塩、例えば薬学的に許容可能な塩を調製し、精製し及び／又は取り扱うことが便利又は望ましい場合もある。薬学的に許容可能な塩の例は、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１−１９（１９７７）で論じられている。

【0055】

例えば、化合物がアニオン性である又はアニオン性になり得る官能基（例えば、−ＣＯＯＨは−ＣＯＯ^-になり得る）を有するならば、塩は適切なカチオンと共に形成され得る。適切な無機カチオンの例には、以下に限定するものではないが、Ｎａ⁺、Ｋ⁺等のアルカリ金属イオン、Ｃａ²⁺、Ｍｇ²⁺等のアルカリ土類カチオン及びＡｌ³⁺等の他のカチオンが含まれる。適切な有機カチオンの例には、以下に限定するものではないが、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ⁴⁺）及び置換アンモニウムイオン（例えば、ＮＨ₃Ｒ⁺、ＮＨ₂Ｒ²⁺、ＮＨＲ³⁺、ＮＲ⁴⁺）が含まれる。幾つかの適切な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、塩素、メグルミン、トロメタミン、またアミノ酸、例えばリシン、アルギニン由来のものである。一般的な第４級アンモニウムイオンの例はＮ（ＣＨ₃）⁴⁺である。

【0056】

化合物がカチオン性である又はカチオン性になり得る官能基（例えば、−ＮＨ₂は−ＮＨ³⁺になり得る）を有するならば、塩は適切なアニオンと共に形成され得る。適切な無機アニオンの例には、以下に限定するものではないが、以下の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸及び亜リン酸に由来するものが含まれる。適切な有機アニオンの例には、以下に限定するものではないが、以下の有機酸：酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、パルミチン酸、乳酸、リンゴ酸、パモ酸、酒石酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、アスパラギン酸、安息香酸、ケイ皮酸、ピルビン酸、サリチル酸（ｓａｌｉｃｙｃｌｉｃ）、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、フェニルスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、パントテン酸、イセチオン酸、吉草酸、ラクトビオン酸及びグルコン酸由来のものが含まれる。適切な高分子アニオンの例には、以下に限定するものではないが、以下のポリマー酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロース由来のものが含まれる。

【0057】

活性化合物の対応する溶媒和物を調製し、精製し及び／又は取り扱うのが便利又は望ましい場合もある。用語「溶媒和物」は、本明細書において、溶質（例えば、活性化合物、活性化合物の塩）と溶媒との複合体に言及する通常の意味で使用される。溶媒が水の場合は、溶媒和物を便宜上水和物と称し得て、例えば一水和物、二水和物、三水和物等である。活性化合物を化学的に保護された形態で調製し、精製し及び／又は取り扱うのが便利又は望ましい場合もある。本明細書で使用の用語「化学的に保護された形態（ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ ｆｏｒｍ）」は、１個以上の反応性官能基が望ましくない化学反応から保護された、すなわち保護された又は保護基（マスクされた若しくはマスキング基又はブロックされた若しくはブロッキング基としても知られる）の形態にある化合物のことである。反応性官能基を保護することによって、他の保護されていない反応性官能基が関与する反応を、保護された基に影響を与えることなく行うことができ、保護基を、通常は次のステップにおいて、残りの分子に実質的に影響を与えることなく除去し得る。例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｔ．Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｐ．Ｗｕｔｓ，Ｗｉｌｅｙ，１９９９）を参照のこと。

【0058】

例えば、ヒドロキシ基はエーテル（−ＯＲ）又はエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ）、例えばｔ−ブチルエーテル、ベンジル、ベンズヒドリル（ジフェニルメチル）若しくはトリチル（トリフェニルメチル）エーテル、トリメチルシリル若しくはｔ−ブチルジメチルシリルエーテル又はアセチルエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ₃、−ＯＡｃ）として保護され得る。

【0059】

例えば、アルデヒド又はケトン基は、それぞれアセタール又はケタールとして保護され得て、カルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ）は、例えば第１級アルコールとの反応によってジエーテル（＞Ｃ（ＯＲ）₂）に変換される。このアルデヒド又はケトン基は、酸の存在下、大幅に過剰量の水を使用した加水分解により容易に再生される。

【0060】

例えば、アミン基は、例えばアミド又はウレタンとして、例えばメチルアミド（−ＮＨＣＯ−ＣＨ₃）、ベンジルオキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₅、−ＮＨ−Ｃｂｚ）として、ｔ−ブトキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ₃）₃、−ＮＨ−Ｂｏｃ）として、２−ビフェニル−２−プロポキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ₃）₂Ｃ₆Ｈ₄Ｃ₆Ｈ₅、−ＮＨ−Ｂｐｏｃ）、９−フルオレニルメトキシアミド（−ＮＨ−Ｆｍｏｃ）として、６−ニトロベラトリルオキシアミド（−ＮＨ−Ｎｖｏｃ）として、２−トリメチルシリルエチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｔｅｏｃ）として、２，２，２−トリクロロエチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｔｒｏｃ）として、アリルオキシアミド（−ＮＨ−Ａｌｌｏｃ）として、２（−フェニルスルホニル）エチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｐｓｅｃ）として又は適切なケースにおいてはＮ−オキシド（＞ＮＯ・）として保護され得る。

【0061】

例えば、カルボン酸基は、エステル、例えばＣ_1-7アルキルエステル（例えば、メチルエステル、ｔ−ブチルエステル）、Ｃ_1-7ハロアルキルエステル（例えば、Ｃ_1-7トリハロアルキルエステル）、トリＣ_1-7アルキルシリル−Ｃ_1-7アルキルエステル、Ｃ_5-20アリール−Ｃ_1-7アルキルエステル（例えば、ベンジルエステル、ニトロベンジルエステル）又はアミド、例えばメチルアミドとして保護され得る。

【0062】

例えば、チオール基は、チオエーテル（−ＳＲ）、例えばベンジルチオエーテル、アセトアミドメチルエーテル（−Ｓ−ＣＨ₂ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ₃）として保護され得る。

【0063】

活性化合物をプロドラッグの形態で調製し、精製し及び／又は取り扱うのが便利又は望ましい場合もある。本明細書で使用の用語「プロドラッグ」は、代謝された場合に（例えば、インビボ）、望ましい活性化合物をもたらす化合物のことである。典型的には、プロドラッグは不活性であるか、活性化合物より活性は低いが有利な取扱い性、投与性又は代謝特性をもたらし得る。例えば、一部のプロドラッグは活性化合物のエステルである（例えば、生理学的に許容可能な代謝的に不安定なエステル）。代謝中、エステル基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ）が開裂して活性な薬剤が得られる。このようなエステルは、適宜、親化合物中に存在する任意の他の反応性基を保護してから、例えば親化合物中の任意のカルボン酸基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ）のエステル化と、必要に応じた続く脱保護によって形成され得る。このような代謝的に不安定なエステルの例には、ＲがＣ_1-7アルキル（例えば、−Ｍｅ、−Ｅｔ）、Ｃ_1-7アミノアルキル（例えば、アミノエチル、２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）エチル、２−（４−モルホリノ）エチル）、アシルオキシ−Ｃ_1-7アルキル（例えば、アシルオキシメチル、アシルオキシエチル、例えばピバロイルオキシメチル、アセトキシメチル、１−アセトキシエチル、１−（１−メトキシ−１−メチル）エチル−カルボンキシルオキシエチル、１−（ベンゾイルオキシ）エチル、イソプロポキシ−カルボニルオキシメチル、１−イソプロポキシ−カルボニルオキシエチル、シクロヘキシル−カルボニルオキシメチル、１−シクロヘキシル−カルボニルオキシエチル、シクロヘキシルオキシ−カルボニルオキシメチル、１−シクロヘキシルオキシ−カルボニルオキシエチル、（４−テトラヒドロピラニルオキシ）カルボニルオキシメチル、１−（４−テトラヒドロピラニルオキシ）カルボニルオキシエチル、（４−テトラヒドロピラニル）カルボニルオキシメチル、１−（４−テトラヒドロピラニル）カルボニルオキシエチル）であるものが含まれる。

【0064】

また、一部のプロドラッグを酵素的に活性化すると、活性化合物又は更なる化学反応により活性化合物がもたらされる化合物が得られる。例えば、プロドラッグは糖誘導体又は他のグリコシド結合体になり得て、あるいはアミノ酸エステル誘導体になり得る。

【0065】

選択性
他のキナーゼ、例えばＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２及び／又はＶＥＧＦＲ３、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＲ並びにＣＤＫに優先してＦＡＫを阻害する化合物の選択性を、生化学的なアッセイの結果により実証することができる（例えば、後述のＦＡＫキナーゼアッセイ及びＶＥＧＦＲ３アッセイを参照のこと）。

【0066】

チトクロムｐ４５０酵素、具体的には２Ｃ９及び３Ａ４アイソフォームの阻害に優先してのＦＡＫに対する化合物の選択性は、標準的な阻害アッセイを用いて判断し得る。

【0067】

本発明の化合物がどの程度グルタチオンと付加体を形成しやすいかは、Ｗａｌｋｅｒ，ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｓ．２００８，１８，６０７１−６０７７に記載のプロトコルに従って判断し得る。

【0068】

他の酵素に優先してＦＡＫを阻害する化合物の選択性は、他の酵素の阻害（ＩＣ₅₀）対ＦＡＫ阻害（ＩＣ₅₀）の比として表し得る。例えば、ＶＥＧＦＲ３に優先してＦＡＫを阻害するための化合物の選択性を判定するにあたって、ＶＥＧＦＲ３についての化合物のＩＣ₅₀をＦＡＫについての化合物のＩＣ₅₀で割ると比が得られる。比が大きければ大きいほど、この化合物の選択性は高い。

【0069】

更なる実施形態
以下の実施形態及び好ましいものは適宜、互いに組み合わせ得る。

【0070】

幾つかの実施形態において、Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化11】

であり、Ｒ^N1は、Ｈ、Ｃ_1-3アルキル（すなわち、メチル、エチル、プロプ−１−イル、プロプ−２−イル）及びＣ（＝Ｏ）Ｍｅから選択される。これらの実施形態の幾つかにおいては、Ｒ^N1がＣ（＝Ｏ）Ｍｅであることが好ましくなり得る。これらの実施形態の他のものにおいては、Ｒ^N1がＨ、メチル又はエチルであることが好ましくなり得る。これらの実施形態の更なるものにおいては、Ｒ^N1がＨであることが好ましくなり得る。

【0071】

他の実施形態において、Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化12】

であり、Ｒ^N2は、Ｈ及びＣ_1-3アルキル（すなわち、メチル、エチル、プロプ−１−イル、プロプ−２−イル）から選択される。これらの実施形態においては、Ｒ^N2がＨ及びメチルから選択されるのが好ましくなり得る。これらの実施形態においては、Ｒ^N2がエチルであることが好ましくなり得る。

【0072】

他の実施形態において、Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化13】

であり、Ｒ^N3は、Ｈ及びＣ_1-3アルキル（すなわち、メチル、エチル、プロプ−１−イル、プロプ−２−イル）から選択される。これらの実施形態においては、Ｒ^N3がＨ及びメチルから選択されることが好ましくなり得る。

【0073】

他の実施形態において、Ｒ²はＨであり、Ｒ¹は

【化14】

であり、Ｒ^N4は、Ｈ及びメチルから選択される。これらの実施形態においては、Ｒ^N4がＨであることが好ましくなり得る。

【0074】

幾つかの実施形態において、Ｒ¹はＨであり、Ｒ²は

【化15】

であり、Ｒ^N5はＨ及びＣ_1-3アルキル（すなわち、メチル、エチル、プロプ−１−イル、プロプ−２−イル）から選択される。これらの実施形態においては、Ｒ^N5がＨ及びメチルから選択されることが好ましくなり得る。

【0075】

Ｒ¹が、

【化16】

及び

【化17】

から選択されることが好ましくなり得る。

【0076】

幾つかの実施形態において、Ｒ¹はＨであり、Ｒ²は

【化18】

であり、Ｒ^N6は、Ｈ及びＣ_1-3アルキル（すなわち、メチル、エチル、プロプ−１−イル、プロプ−２−イル）から選択される。これらの実施形態においては、Ｒ^N6がＨ及びメチルから選択されることが好ましくなり得る。

【0077】

Ｒ¹がＨであり、Ｒ²が

【化19】

であることが更に好ましくなり得る。

【0078】

幾つかの実施形態において、Ｒ³は、Ｆ、Ｍｅ、Ｅｔ、ＯＭｅ及びＯＣＦ₃から選択される。これらの実施形態の幾つかにおいて、Ｒ³はＯＭｅである。

【0079】

幾つかの実施形態において、Ｒ⁴は、ＣＦ₃、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＦ₂Ｈ及びＣＮから選択される。

【0080】

更なる実施形態において、Ｒ⁴は、ＣＦ₃、Ｃｌ及びＣＦ₂Ｈから選択される。更なる実施形態において、Ｒ⁴は、ＣＦ₃及びＣｌから選択される。Ｒ⁴がＣＦ₃であることが好ましくなり得る。

【0081】

幾つかの実施形態においては、Ｒ⁵が、以下の式：

【化20】

の基であることが好ましくなり得る。

【0082】

幾つかの実施形態において、Ｒ⁷はＨであり、Ｒ⁶は（ＣＨＲ^C1）_n1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^N6）Ｚ¹である。

【0083】

更なる実施形態において、Ｒ⁷はＨであり、Ｒ⁶は、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃、ＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃から選択される。

【0084】

Ｒ⁷がＨであり、Ｒ⁶が、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、ＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃から、より好ましくはＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨＣＨ₃Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂から選択されるのが好ましくなり得る。最も好ましくは、Ｒ⁶はＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂である。

【0085】

幾つかの実施形態において、Ｒ⁶はＨであり、Ｒ⁷は（ＣＨ₂）_m1Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^M1）Ｙ¹である。

【0086】

更なる実施形態において、Ｒ⁶はＨであり、Ｒ⁷は、Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃、ＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂及びＣＨ₂Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ₃から選択される。

【0087】

Ｒ⁶がＨであり、Ｒ⁷がＣ（Ｏ）ＮＨ₂であることが好ましくなり得る。

【0088】

Ｒ⁶がＨであり、Ｒ⁷がＣ（Ｏ）ＮＨ₂である幾つかの実施形態において、Ｒ⁸はメチルである。

【0089】

幾つかの実施形態においては、Ｒ⁵が以下の式：

【化21】

の基であることが好ましくなり得る。

【0090】

本発明の選択された実施形態において、化合物は式Ｉａ：

【化22】

のものになり得て、Ｒ^1aは、

【化23】

から選択され、
Ｒ^3aは、Ｍｅ、Ｅｔ、ＯＭｅ、ＯＣＦ₃及びＦから選択される。

【0091】

本発明の選択された実施形態において、化合物は、式Ｉｂ：

【化24】

のものになり得て、Ｒ^3bはＯＭｅ及びＯＣＦ₃から選択され、Ｒ^5bは、

【化25】

及び

【化26】

から選択される。

【0092】

本発明の実施形態は、化合物１−１３を含めた実施例の化合物である。特に興味深い実施形態には、化合物３、６及び１１が含まれる。

【0093】

一般合成法
本発明の化合物は、以下の一般合成法及び実験の項で詳述する手順を用いて調製することができる。記載の反応条件は説明の便宜上のものであって、非限定的である。

【0094】

上記のような式Ｉの化合物は以下で概要を述べる合成ストラテジーにより調製することができ、上記の定義があてはまる。
スキームＡ

【化27】

【0095】

式Ｆ１の化合物を、式Ｆ２の置換された合成のアニリン（スキームＣ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈで調製）と反応させると、式Ｆ３の中間体（Ｌ¹及びＬ²は同一又は異なり得て、またＣｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＳＭｅ、ＳＯ₂Ｍｅを含み得て、Ｒ⁴＝ＣＦ₃、ハロゲン、ＣＦ₂Ｈ又はＣＮである）が生成され得る。

【0096】

Ｌ¹及びＬ²が異なって位置選択的な置換が可能な式Ｆ１の化合物を調製し得て（スキームＢを参照のこと）、あるいはＬ¹＝Ｌ²の場合、適切な反応条件を採用することによって（溶媒、反応温度、ジエチルエーテル中のルイス酸、例えばＺｎＣｌ₂の追加の選択）、Ｌ¹をＬ²に優先して選択的に置換することができる。位置化学混合物及び２置換が得られたら、位置異性体を、クロマトグラフィで分離し得る。

【0097】

Ｌ¹＝Ｌ²である式Ｆ１の化合物は市販されていて、例えば２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン、２，４−ジクロロ−５−フルオロピリミジン、２，４，５−トリクロロピリミジン、２，４−ジクロロ−５−ブロモピリミジン、２，４−ジクロロ−５−ヨードピリミジン、２，４−ジクロロ−５−シアノピリミジンであり、あるいは市販の開始材料から容易に調製し得る。Ｒ⁴＝ＣＦ₃であり、Ｌ¹とＬ²とが異なっていることが望ましい場合は、スキームＢで概説する方法を採用し得る。

【0098】

スキームＢ

【化28】

【0099】

市販の２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｇ１）を、選択的にナトリウムチオメトキシドと塩化亜鉛（ＩＩ）の存在下で反応させると、２−チオメチル−４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｇ２）が得られる。２位及び４位での違いが更に必要である、あるいは追加の活性化が望ましい場合は、２−チオメチル−４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｇ２）を更に、例えばフィンケルシュタイン条件下での２−チオメチル−４−ヨード−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｇ３）への変換及び／又はｍＣＰＢＡでの酸化により反応させると対応するスルホンが得られる。

【0100】

スキームＣ

【化29】

【0101】

市販のｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボキシレート（Ｇ５）及び式Ｆ４の４−フルオロ−２−置換−１−ニトロベンゼンをＳ_NＡｒ反応において反応させると、式Ｆ５のｔｅｒｔ−ブチル４−（３−置換−４−ニトロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレートが得られる。触媒、例えばパラジウム／チャコール又は酸化白金の存在下での水素化を通じた続く還元により、Ｒ³がＣｌ、Ｂｒ又はＩの場合、式Ｆ６の対応するアニリンが得られる。

【0102】

スキームＤ

【化30】

【0103】

Ｆ６の対応する４−ピペリジン類似体を、市販のｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（Ｇ６）のビニルトリフレートＧ７への変換から始まる一連の反応により調製することができる。Ｇ７をスズキタイプの反応において式Ｆ７のアリールボロン酸又は類似するボロン酸エステルとカップリングさせると、式Ｆ８のテトラヒドロピリジンが得られる。触媒、例えばパラジウム／チャコールの存在下での水素化を通じた続く還元により、式Ｆ９のアニリノ−ピペリジンが得られる。あるいは、式Ｆ７の化合物の保護アニリン類似体、例えばＢｏｃ又はＣＢｚ保護アニリンを、スズキカップリングステップで用いることができる。これにより後の還元ステップの必要性がなくなり、またＲ³がハロ（ハロゲン）の場合に有益になり得る。

【0104】

スキームＥ

【化31】

【0105】

３−ピペリジン類似体を、Ｌ³＝Ｉ又はＢｒである市販の式Ｆ１０の化合物をピリジン−３−イルボロン酸（Ｇ８）とスズキタイプの反応で反応させて式Ｆ１１の中間体を生成することで調製することができる。触媒、例えば酸化白金の存在下での水素での式Ｆ１１の化合物の還元により式Ｆ１２の中間体が得られ、これをＢｏｃ無水物で保護し得て、式Ｆ１３の化合物が得られる。

【0106】

スキームＦ

【化32】

【0107】

２−ピペリジン類似体を、Ｌ³＝Ｉ又はＢｒである市販の式Ｆ１４の化合物をピリジン−２−イルボロン酸（Ｇ９）とスズキタイプの反応で反応させて式Ｆ１５の中間体を生成することで調製することができる。触媒、例えば酸化白金の存在下での水素での式Ｆ１５の化合物の還元により式Ｆ１６の中間体が得られ、これをＢｏｃ無水物で保護し得て、式Ｆ１７の化合物が得られる。

【0108】

スキームＧ

【化33】

【0109】

式Ｆ２０の化合物を、市販のｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボキシレート（Ｇ５）をＬ³＝Ｉ又はＢｒの式Ｆ１８の化合物とブッフバルトタイプの反応においてカップリングさせて式Ｆ１９の中間体を得ることで調製することができる。式Ｆ１９の化合物を、触媒、例えばパラジウム／チャコール又は酸化白金の存在下、水素で還元すると式Ｆ２０のアニリンが得られる。

【0110】

スキームＨ

【化34】

【0111】

式Ｆ２１の化合物を反応させることによって式Ｆ２２のエステルを生成し得て、ここでＸ＝Ｂｒ又はＩであり、Ｒ⁸＝Ｈ又はＭｅであり、Ｙは、単結合、−ＣＨ₂−及びＣＨＣＨ₃−から選択される。Ｒ^O1＝ｔ−Ｂｕの場合、Ｂｏｃ無水物を使用し得て、あるいはＲ^O1＝Ｍｅの場合、酸、例えば硫酸の存在下でメタノールを使用して所望のエステルを生成し得る。式Ｆ２２のエステルを式Ｆ２３の末端アセチレンとソナガシラタイプのカップリングで反応させると式Ｆ２４のアセチレンが得られ、ここでＲ⁹＝ＴＭＳ、ＴＥＳ又は（ＣＨ₃）₂Ｃ^*ＯＨである。次に、Ｒ⁹を除去することによって、式Ｆ２５の化合物を生成し得る。Ｒ⁹＝ＴＭＳ又はＴＥＳの場合、炭酸カリウム又はテトラ−ｎ−ブチルフッ化アンモニウムを使用してこの変換を引き起こし得る。Ｒ⁹＝（ＣＨ₃）₂Ｃ^*ＯＨの場合、還流トルエン中の水素化ナトリウムを使用し得る。

【0112】

スキームＩ

【化35】

【0113】

式Ｆ３のピリミジンを式Ｆ２５の末端アセチレンと反応させると、ソナガシラタイプのカップリングにおいて式Ｆ２６のアセチレンが得られる。式Ｆ２６の化合物中のアセチレンを、水素ガスを使用し、遷移金属触媒の存在下、式Ｆ２７のアルカンに還元し得る。用いる触媒及び条件の正確な選択は、Ｒ⁴の性質に左右される。例えば、Ｒ⁴＝ＣＦ₃の場合、１０％のＰｄ／Ｃを使用し得て、Ｒ⁴＝Ｃｌの場合は酸化白金を利用する。次に、式Ｆ２７のエステルを脱保護すると、式Ｆ２８のカルボン酸が得られる。Ｒ^O1＝Ｍｅ又はＥｔの場合、水酸化リチウム溶液を使用し得る。Ｒ^O1＝ｔ−Ｂｕの場合、酸性溶液、例えばジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸を使用し得る。当然のことながら、酸性条件下、Ｒ¹及びＲ²のＢｏｃ保護基も開裂する。

【0114】

スキームＪ

【化36】

【0115】

式Ｆ２８のカルボン酸を、式Ｆ２９のアミドに、適切なアミン又はアンモニア塩を使用し、ペプチドカップリング剤、例えばＨＡＴＵの存在下、変換することができる。

【0116】

スキームＫ

【化37】

【0117】

あるいは、Ｒ^O1＝Ｍｅの場合、式Ｆ２７のエステルを直接、式Ｆ２９のアミドに、アミンとの高温での反応により変換し得る。

【0118】

スキームＬ

【化38】

【0119】

右側の芳香環にラクタムが縮合した分子が必要な場合、式Ｆ３０の化合物を式Ｆ２３の末端アセチレンとソナガシラタイプのカップリングで反応させることができ、式Ｆ３１のアセチレンが得られ、ここでＲ⁹＝ＴＭＳ、ＴＥＳ又は（ＣＨ₃）₂Ｃ^*ＯＨである。次に、Ｒ⁹を除去することによって、式Ｆ３２の化合物を生成し得る。Ｒ⁹＝ＴＭＳ又はＴＥＳの場合、炭酸カリウム又はテトラ−ｎ−ブチルフッ化アンモニウムを使用してこの変換を引き起こし得る。Ｒ⁹＝（ＣＨ₃）₂Ｃ^*ＯＨの場合、還流トルエン中の水素化ナトリウムを使用し得る。

【0120】

次に、式Ｆ３２の化合物を式Ｆ３の化合物にカップリングさせることができ、上述、後述するように更に反応に供し得る。

【0121】

スキームＭ

【化39】

【0122】

ラクタムを含有し、Ｒ¹又はＲ²にＢｏｃ保護基が存在する（Ｒ^N1、Ｒ^N2、Ｒ^N3、Ｒ^N4、Ｒ^N5の位置）式Ｆ２９の化合物又はその類似体を次に、酸性条件下で例えばジクロロメタン溶液中のトリフルオロ酢酸を使用して脱保護すると、式Ｆ３３の対応する親ピペラジン又はピペリジン化合物がもたらされ得る。

【0123】

スキームＮ

【化40】

【0124】

次に、式Ｆ３３の化合物を、アミン官能基の誘導体化により更に修飾し得る。例えば、Ｒ^N1、Ｒ^N2、Ｒ^N3、Ｒ^N4、Ｒ^N5又はＲ^N6＝Ｍｅの式Ｆ３４の化合物を、ホルムアルデヒドとのナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの存在下での還元的アルキル化により調製し得る。Ｒ^N1、Ｒ^N2、Ｒ^N3、Ｒ^N5又はＲ^N6＝Ｅｔの誘導体は、アセトアルデヒドとのナトリウムトリアセトキシボロヒドリドの存在下での還元的アルキル化により調製し得る。Ｒ^N1、Ｒ^N2、Ｒ^N3、Ｒ^N5又はＲ^N6＝アセチルの式Ｆ３４の化合物を、式Ｆ３３の化合物の適切なアシル化剤、例えば無水酢酸との反応により調製し得る。

【0125】

Ｒ³＝ＣＦ₃及びＲ⁷＝Ｈである式Ｆ２７の化合物を生成するための別のストラテジーは、スキームＮで概説するように式Ｆ３７の化合物を調製することである。

【0126】

スキームＮ

【化41】

【0127】

Ｒ⁸＝Ｈである式Ｆ２５のエステルの４−ヨード−２−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｇ３）とのソナガシラ条件下でのカップリングにより、式Ｆ３５のアセチレンが得られる。ＭＣＰＢＡを使用した酸化により、式Ｆ３６のスルホンが得られる。水素を使用した、触媒、例えば１０％のパラジウム／チャコールの存在下でのアセチレンの還元により、式Ｆ３７の化合物が得られる。

【0128】

式Ｆ３７の化合物を式Ｆ２のアニリンと酸性条件下、例えばトリフルオロ酢酸の存在下で反応させると式Ｆ２７の化合物が得られ、次にこの化合物を上述したように更に反応に供することができる。

【0129】

本発明の化合物の使用
本発明では、活性化合物、具体的には活性な２，４，５−置換ピリミジンを提供する。

【0130】

本明細書で使用の用語「活性（である）」とはＦＡＫ活性を阻害可能な化合物のことであり、具体的には、固有活性を有する化合物（薬剤）とこのような化合物のプロドラッグの両方が含まれ、プロドラッグそれ自体は、固有活性を殆ど又は全く示さない。

【0131】

特定の化合物によってもたらされるＦＡＫ阻害を評価するために用い得るアッセイについては、以下の実施例で説明する。

【0132】

本発明では更に、細胞においてＦＡＫ阻害を阻害する方法を提供し、この方法は、この細胞を好ましくは薬学的に許容可能な組成物の形態にある有効量の活性化合物と接触させることを含む。このような方法は、インビトロ又はインビボで実践し得る。

【0133】

本発明では更に、ＦＡＫ活性を阻害する活性化合物並びにＦＡＫ活性を阻害する方法の方法を提供し、この方法は、インビトロであるかインビボであるかに関係なく、細胞を有効量の活性化合物と接触させることを含む。

【0134】

活性化合物を、例えば治療対象候補が問題の化合物での治療から利益を得られそうか否かを判断するためのインビトロのアッセイの一部としても使用し得る。

【0135】

本発明では更に、ヒト又は動物の身体の治療法において使用するための活性化合物を提供する。このような方法は、このような被験体に、治療有効量の活性化合物を、好ましくは医薬組成物の形態で投与することを含み得る。

【0136】

ある病態を治療する文脈において本明細書で使用される用語「治療」とは、概して、ヒトであるか動物（例えば、獣医学用途において）であるかに関わらず、ある望ましい治療効果、例えばその病態の進行の阻害が達成される治療及び療法のことであり、進行速度の低下、進行速度の停止、その病態の改善及びその病態の治癒が含まれる。予防対策としての治療（すなわち、予防法）も含まれる。

【0137】

本明細書で使用の用語「治療有効量」とは、ある望ましい治療効果を生じさせるのに効果的な、合理的な利益／リスク比の活性化合物又は活性化合物を含有する材料、組成物若しくは剤形の量のことである。

【0138】

がん
本発明では、抗がん剤である活性化合物を提供する。当業者ならば、候補化合物が、特定の細胞型の前駆病態を、単体又は組み合わせで治療できるか否かを容易に判断することができる。

【0139】

がんの例には、以下に限定するものではないが、骨がん、脳幹神経膠腫、乳がん、副腎がん、肛門部のがん、膀胱がん、内分泌系のがん、食道がん、頭部又は頸部のがん、腎臓又は尿管のがん、肝臓がん、副甲状腺がん、陰茎がん、小腸がん、甲状腺がん、尿道がん、子宮頸がん、子宮内膜の細胞腫、卵管の細胞腫、腎盂の細胞腫、膣の細胞腫、外陰部の細胞腫、慢性又は急性白血病、結腸がん、皮膚黒色腫又は眼球内黒色腫、血液学的悪性腫瘍、ホジキン病、肺がん、リンパ球性リンパ腫、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、卵巣がん、膵がん、下垂体腺腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺がん、直腸がん、腎細胞がん、軟部組織の肉腫、皮膚がん、脊髄軸腫瘍、胃がん、子宮がんが含まれる。

【0140】

以下に限定するものではないが、肺、胃腸管（例えば腸、結腸を含む）、乳房（乳腺）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳及び皮膚を含めたいずれの型の細胞も治療し得る。

【0141】

上で定義した抗がん治療は単独の療法として適用し得るが、あるいは本発明の化合物に加えて、慣用の外科手術、放射線療法又は化学療法も併用し得る。このような化学療法は、以下の種類の抗腫瘍薬の１種以上を含み得る：
（ｉ）腫瘍内科学で使用するような他の抗増殖／抗悪性腫瘍薬及びこれらの組み合わせ、例えばアルキル化剤（例えば、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、テモゾルアミド（ｔｅｍｏｚｏｌａｍｉｄｅ）、ニトロソウレア）、代謝拮抗剤（例えば、ゲムシタビン、葉酸代謝拮抗剤、例えば５フルオロウラシル、テガフール等のフルオロピリミジン、ラルチトレキセド、メトトレキセート、シトシンアラビノシド、ヒドロキシウレア）、抗腫瘍性抗生物質（例えば、アドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシン、ミトラマイシン等のアントラサイクリン）、有糸分裂阻害剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン等のビンカアルカロイド、タキソール、ドセタキセル（タキソテール）等のタキソイド、ポロキナーゼ阻害剤）、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド、テニポシド等のエピポドフィロトキシン、アムサクリン、トポテカン、カンプトテシン）
（ｉｉ）細胞分裂阻害剤、例えば抗エストロゲン剤（例えば、タモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン（ｉｏｄｏｘｙｆｅｎｅ））、抗アンドロゲン剤（例えば、ビカルタミド、フルタミド、ニルタミド、酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨアンタゴニスト又はＬＨＲＨアゴニスト（例えば、ゴセレリン、リュープロレリン、ブセレリン）、プロゲストーゲン（例えば、酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害剤（例えば、アナストロゾール、レトロゾール、ボラゾール（ｖｏｒａｚｏｌｅ）、エキセメスタン）並びにフィナステリド等の５^*−レダクターゼ
（ｉｉｉ）抗浸潤剤（例えば、４−（６−クロロ−２，３−メチレンジオキシアニリノ）−７−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ］−５−テトラヒドロピラン−４−イルオキシキナゾリン（ＡＺＤ０５３０、国際特許出願第０１／９４３４１号）、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝チアゾール−５−カルボキシアミド（ダサチニブ、ＢＭＳ−３５４８２５、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００４，４７，６６５８−６６６１）、４−（（２，４−ジクロロ−５−メトキシフェニル）アミノ）−６−メトキシ−７−（３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロポキシ）キノリン−３−カルボニトリル（ボスチニブ、ＳＫＩ−６０６、Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ （２００３），６３（２），３７５−８１）等のｃ−Ｓｒｃキナーゼファミリー阻害剤、マリマスタット等のメタロプロテイナーゼ阻害剤、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベータ受容体機能の阻害剤又はヘパラナーゼに対する抗体）
（ｉｖ）増殖因子機能の阻害剤：例えば、このような阻害剤には、増殖因子抗体及び増殖因子受容体抗体（例えば、抗ｅｒｂＢ２抗体トラスツズマブ［ハーセプチンＴ］、抗−ＥＧＦＲ抗体パニツムマブ、抗ｅｒｂＢ１抗体セツキシマブ［アービタックス、Ｃ２２５］、Ｓｔｅｒｎ ｅｔ ａｌ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ ｏｎｃｏｌｏｇｙ／ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ，２００５，Ｖｏｌ．５４，ｐｐ１１−２９に開示されている全ての増殖因子又は増殖因子受容体抗体）が含まれる。このような阻害剤にはチロシンキナーゼ阻害剤、例えば上皮増殖因子ファミリーの阻害剤（例えば、Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン−４−アミン（ゲフィチニブ、ＺＤ１８３９）、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（エルロチニブ、ＯＳＩ７７４）、６−アクリルアミド−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−（３−モルホリノプロポキシ）−キナゾリン−４−アミン（ＣＩ１０３３）等のＥＧＦＲファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、ラパチニブ等のｅｒｂＢ２チロシンキナーゼ阻害剤、肝細胞増殖因子ファミリーの阻害剤、イマチニブ等の血小板由来増殖因子ファミリーの阻害剤、セリン／スレオニンキナーゼの阻害剤（例えば、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤等のＲａｓ／Ｒａｆシグナル伝達阻害剤、例えばソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６））、ＭＥＫ及び／又はＡＫＴキナーゼを介した細胞のシグナル伝達の阻害剤、肝細胞増殖因子ファミリーの阻害剤、ｃ−ｋｉｔ阻害剤、ａｂＩキナーゼ阻害剤、ＩＧＦ受容体（インスリン様増殖因子）キナーゼ阻害剤、オーロラキナーゼ阻害剤（例えば、ＡＺＤ１１５２、ＰＨ７３９３５８、ＶＸ−６８０、ＭＬＮ８０５４、Ｒ７６３、ＭＰ２３５、ＭＰ５２９、ＶＸ−５２８、ＡＸ３９４５９）並びにＣＤＫ−２及び／又はＣＤＫ−４阻害剤等のサイクリン依存性キナーゼ阻害剤も含まれる
（ｖ）血管内皮増殖因子の影響を阻害するもの等の血管新生抑制剤［例えば、抗血管内皮細胞増殖因子抗体ベバシズマブ（アバスチンＴ）、４−（４−ブロモ−２−フルオロアニリノ）−６−メトキシ−７−（１−メチルピペリジン−４−イルメトキシ）キナゾリン（ＺＤ６４７４、国際公開第０１／３２６５１号パンフレットに記載の実施例２）、４−（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イルオキシ）−６−メトキシ−７−（３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）キナゾリン（ＡＺＤ２１７１、国際公開第００／４７２１２号パンフレットに記載の実施例２４０）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７、国際公開第９８／３５９８５号）、ＳＵ１１２４８（スニチニブ、国際公開第０１／６０８１４号）等のＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、国際特許出願第９７／２２５９６号、第９７／３００３５号、第９７／３２８５６号及び第９８／１３３５４号パンフレットに開示のもの等の化合物、他の作用機序による化合物（例えば、リノマイド、インテグリンａｖｂ３機能の阻害剤、アンジオスタチン）］
（ｖｉ）血管損傷剤、例えばコンブレタスタチンＡ４、国際特許出願第９９／０２１６６号、第００／４０５２９号、第００／４１６６９号、第０１／９２２２４号、第０２／０４４３４号及び第０２／０８２１３号パンフレットに開示の化合物
（ｖｉｉ）アンチセンス療法、例えばＩＳＩＳ ２５０３、抗−ｒａｓアンチセンス等の上で挙げた標的が対象のもの
（ｖｉｉｉ）例えば、異常なｐ５３又は異常なＢＲＣＡ１若しくはＢＲＣＡ２等の異常な遺伝子を置き換えるアプローチ、シトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼ又は細菌性ニトロレダクターゼ酵素を使用するもの等のＧＤＥＰＴ（遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法）アプローチ、多剤耐性遺伝子療法等の化学療法又は放射線療法に対する患者の耐性を向上させるアプローチを含めた遺伝子療法アプローチ
（ｉｘ）例えば、インターロイキン２、インターロイキン４又は顆粒球マクロファージコロニー刺激因子等のサイトカインによる遺伝子導入等の、患者の腫瘍細胞の免疫原性を上昇させるためのエクスビボ及びインビボのアプローチ、Ｔ細胞アネルギーを低下させるアプローチ、サイトカイン遺伝子導入樹状細胞等の遺伝子導入免疫細胞を使用するアプローチ、サイトカイン遺伝子導入腫瘍細胞系を使用したアプローチ、抗イディオタイプ抗体を使用したアプローチを含めた免疫療法アプローチ

【0142】

特に興味深い組み合わせは、ドセタキセルとの組み合わせである。興味深い他の考えられ得る組み合わせには、ゲムシタビン、シスプラチン及びカンプトテシンプロドラッグのイリノテカンとの組み合わせが含まれる。

【0143】

投与
活性化合物又は活性化合物を含む医薬組成物を、被験体に、任意の都合のよい投与経路で投与し得て、全身的／末梢的な投与であるか所望の作用部位での投与かは問わず、以下に限定するものではないが、経口投与（例えば、経口摂取）、局所投与（例えば、経皮投与、鼻腔内投与、眼球内投与、頬側投与、舌下投与を含む）、経肺投与（例えば、口又は鼻を経由しての例えばエアロゾルを使用した吸入療法又はガス注入療法による）、経直腸投与、経膣投与、例えば皮下、皮内、筋肉内、静脈内、動脈内、心臓内、くも膜下腔内、脊髄内、嚢内、嚢下、眼窩内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、クモ膜下、胸骨内へのものを含めた注射、例えば皮下、筋肉内へのデポ剤の注入による非経口投与が含まれる。被験体は、真核生物、動物、脊椎動物、哺乳動物、齧歯類（例えば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ科の動物（例えば、マウス）、イヌ科の動物（例えば、イヌ）、ネコ科の動物（例えば、ネコ）、ウマ科の動物（例えば、ウマ）、霊長目の動物、類人猿（例えば、有尾（長尾）のサル、無尾（短尾）のサル）、サル（例えば、マーモセット、ヒヒ）、無尾（短尾）のサル（例えば、ゴリラ、チンパンジー、オラウータン、ギボン）又はヒトになり得る。

【0144】

製剤
活性化合物を単体で投与することも可能だが、少なくとも１種の上で定義したような活性化合物を、１種以上の薬学的に許容可能な担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、フィラー、バッファ、安定剤、保存料、滑沢剤又は当業者に公知の他の材料、また任意で他の治療薬又は予防薬と共に含む医薬組成物（例えば、製剤）として提供することが好ましい。

【0145】

したがって、本発明は更に、上で定義したような医薬組成物と、少なくとも１種の上で定義したような活性化合物を、本明細書に記載されるような１種以上の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、バッファ、アジュバント、安定剤又は他の材料と共に混合することを含む医薬組成物の製造方法とを提供する。

【0146】

本明細書で使用の用語「薬学的に許容可能な」とは、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応又は他の問題若しくは合併症を伴うことなく被験体（例えば、ヒト）の組織と接触させて使用するのに適した、合理的な利益／リスク比の化合物、材料、組成物及び／又は剤形のことである。各担体、賦形剤等も、製剤の他の成分と適合するという意味で「許容可能」なものでなくてはならない。

【0147】

適切な担体、賦形剤等は、標準的な薬学の教科書、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９０に記載されている。

【0148】

製剤は適宜、単位剤形として提供し得て、また薬学の分野で周知の任意の方法で調製し得る。そのような方法には、活性化合物と、１種以上の補助成分を構成する担体とを会合させるステップが含まれる。概して、製剤は、活性化合物を液体担体又は微粉固体担体又はその両方と均一且つ密接に会合させ、次に必要に応じて生成物を成形することで調製する。

【0149】

製剤は、液剤、溶液剤、懸濁液剤、乳濁液剤、エリキシル剤、シロップ剤、錠剤、ロゼンジ剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、カシェ剤、丸薬、アンプル剤、坐剤、ペッサリー、軟膏剤、ゲル剤、ペースト剤、クリーム剤、スプレー剤、ミスト剤、フォーム剤、ローション剤、オイル剤、ボーラス剤、舐剤又はエアロゾル剤の形態になり得る。

【0150】

経口投与（例えば、経口摂取による）に適した製剤は、それぞれ既定量の活性化合物を含有するカプセル剤、カシェ剤若しくは錠剤等の個別の単位、散剤若しくは顆粒剤、水性若しくは非水性の液体中の溶液剤若しくは懸濁液剤、水中油型乳濁液剤若しくは油中水型乳濁液剤、ボーラス剤、舐剤又はペースト剤として提供し得る。

【0151】

錠剤は、任意で１種以上の補助成分を使用して、慣用の手段、例えば圧縮又は成型により形成し得る。圧縮錠は、任意で１種以上の結合剤（例えば、ポビドン、ゼラチン、アラビアゴム、ソルビトール、トラガカント、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、フィラー又は希釈剤（例えば、ラクトース、結晶セルロース、リン酸水素カルシウム）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ）、崩壊剤（例えば、ナトリウムデンプングリコレート、架橋型ポビドン、架橋型ナトリウムカルボキシメチルセルロース）、界面活性剤又は分散剤又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）及び保存料（例えば、メチルｐ−ヒドロキシベンゾエート、プロピルｐ−ヒドロキシベンゾエート、ソルビン酸）と混合した自由流動形態（粉末、顆粒等）の活性化合物を適切な機械で圧縮することで調製し得る。成型錠は、適切な機械において、不活性な液状希釈剤で湿潤させた粉末状化合物の混合物を成型することで形成し得る。錠剤には任意でコーティングを施したり、溝を入れたりし得て、また例えば様々な割合でヒドロキシプロピルメチルセルロースを使用して活性化合物がゆっくりと、すなわち徐放されて所望の放出プロファイルが得られるように製剤し得る。錠剤に任意で腸溶コーティングを施して胃以外の腸の一部で放出が起きるようにし得る。

【0152】

局所投与（例えば、経皮投与、鼻腔内投与、眼球内投与、頬側投与、舌下投与）に適した製剤は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁液剤、ローション剤、散剤、溶液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤又はオイル剤として製剤し得る。あるいは、製剤は、活性化合物を任意で１種以上の賦形剤又は希釈剤と共に含浸させた包帯又は絆創膏等のパッチ又はドレッシング材を含み得る。

【0153】

口内局所投与に適した製剤には、風味付け基剤（通常はスクロース、アラビアゴム又はトラガカント）中に活性化合物を含むロゼンジ剤、不活性基剤（例えば、ゼラチン、グリセリン、スクロース、アラビアゴム）中に活性化合物を含むトローチ剤及び適切な液体担体中に活性化合物を含むマウスウォッシュが含まれる。

【0154】

また、眼への局所投与に適した製剤には、活性化合物を適切な担体（特には、活性化合物用の水性溶媒）中に溶解又は懸濁させた点眼剤が含まれる。

【0155】

担体が固形物である経鼻投与に適した製剤には、例えば約２０−約５００ミクロンの範囲内の粒径を有する粗い散剤が含まれ、嗅ぐ、すなわち鼻の近くに保持した散剤の入った容器から鼻腔を通して迅速に吸引するやり方で投与する。担体が、例えば鼻腔スプレー、点鼻薬として投与するための又はネブライザによるエアロゾル投与のための液体である適切な製剤には、活性化合物の水性又は油性の溶液剤が含まれる。

【0156】

吸引による投与に適した製剤には、適した高圧ガス（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、他の適切なガス）を使用した加圧パックからのエアロゾルスプレーとして提供されるものが含まれる。

【0157】

皮膚を介した局所投与に適した製剤には、軟膏剤、クリーム剤及び乳濁液剤が含まれる。軟膏剤として製剤する場合、活性化合物を任意で、パラフィン系又は水混和性軟膏基剤と共に使用し得る。あるいは、活性化合物を、水中油型クリーム基剤を使用したクリーム剤に製剤し得る。要望に応じて、クリーム基剤の水相は、例えば少なくとも約３０重量％の多価アルコール、すなわち２個以上のヒドロキシル基を有するアルコール（例えば、プロピレングリコール、ブタン−１，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロール、ポリエチレングリコール、これらの混合物）を含み得る。局所製剤は、望ましくは、皮膚又は他の患部を介した活性化合物の吸収又は浸透を強化する化合物を含み得る。このような真皮浸透性強化剤の例には、ジメチルスルホキシド及びその関連する類似体が含まれる。

【0158】

局所乳濁液剤として製剤する場合、油相は任意で乳化剤（エマルジェントとしても知られる）だけを含み得る。あるいは、少なくとも１種の乳化剤と脂肪若しくは油又は脂肪及び油の両方との混合物を含み得る。好ましくは、親水性乳化剤は、安定剤として作用する親油性乳化剤と共に含められる。また、油及び脂肪の両方を含めることが好ましい。一緒になって、安定剤を伴う又は伴わない乳化剤はいわゆる乳化ワックスを構成し、このワックスは油及び／又は脂肪と一緒になって、クリーム製剤の油性分散相を形成するいわゆる乳化軟膏基剤を構成する。

【0159】

適切なエマルジェント及び乳濁液安定剤には、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル及びラウリル硫酸ナトリウムが含まれる。乳濁製剤に使用されることが多い殆どの油への活性化合物の溶解性は極めて低くなり得るため、乳濁液剤に適した油又は脂肪の選択は、所望の見た目上の特性を達成することに基づく。このため、クリーム剤は、好ましくは、チューブ又は他の容器からの漏れを回避するのに適した粘稠性を備えた、べたべたせず、染みにならず且つ洗い落とすことができる製品であるべきである。直鎖又は分岐鎖の一塩基性又は二塩基性のアルキルエステル、例えばジイソアジペート、イソセチルステアレート、ヤシ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、２−エチルヘキシルパルミテート、Ｃｒｏｄａｍｏｌ ＣＡＰ（登録商標）として知られる分岐鎖エステルのブレンド物を使用し得て、最後の３種が好ましいエステルである。これらを、必要とされる特性に応じて単体で又は組み合わせて使用し得る。

【0160】

あるいは、白色ワセリン及び／又は流動パラフィン又は他の鉱物油等の高融点の脂質を使用することができる。

【0161】

直腸投与に適した製剤は、例えばカカオバター又はサリチレートを含む適切な基剤を使用した坐剤として提供し得る。

【0162】

経膣投与に適した製剤は、活性化合物に加えて当該分野で適当であると公知であるような担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレー製剤として提供し得る。

【0163】

非経口投与（例えば、皮膚注射、皮下注射、筋肉内注射、静脈内注射及び皮内注射を含めた注射による投与）に適した製剤には、水性及び非水性の等張性、発熱物質非含有及び無菌の注射液（酸化防止剤、バッファ、保存料、安定剤、静菌剤及び製剤が目的とする投与対象の血液と等張となるようにする溶質を含有し得る）並びに水性及び非水性の無菌の懸濁液（懸濁化剤、増粘剤及びリポソーム又は血液成分若しくは１種以上の器官に化合物を送り届けるように設計された他の微粒子系を含み得る）が含まれる。このような製剤での使用に適した等張性ビヒクルの例には、塩化ナトリウム注射液、リンゲル液、乳酸リンゲル注射液が含まれる。典型的には、溶液中の活性化合物の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ−約１０μｇ／ｍＬ、例えば約１０ｎｇ／ｍＬ−約１μｇ／ｍＬである。製剤は、単位用量の入った又は複数回分の用量が入った密閉容器（例えば、アンプル、バイアル）で提供し得て、また使用直前に無菌の液体担体（例えば、注射用水）の添加だけを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存し得る。即席の注射溶液及び懸濁液は、無菌の粉末、顆粒及び錠剤から調製し得る。製剤は、リポソーム又は血液成分若しくは１種以上の器官に活性化合物を送り届けるように設計された他の微粒子系の形態になり得る。

【0164】

用量
当然のことながら、活性化合物及び活性化合物を含む組成物の適当な用量は患者によって変化し得る。最適な用量を決定する際は一般的に、本発明の治療に伴うリスク又は有害な副作用に対して治療効果のレベルのバランスをとる必要がある。選択する用量レベルは様々な要因に左右され、以下に限定するものではないが、特定の化合物の活性、投与経路、投与時期、化合物の排出速度、治療期間、併用する他の薬剤、化合物及び／又は材料、患者の年齢、性別、体重、病態、全般的な健康状態並びに既往歴が含まれる。化合物の量及び投与経路は最終的には担当医の判断に委ねられるが、一般的に、用量は、実質的な害又は有害な副作用を引き起こすことなく所望の効果が得られる局所濃度を作用部位で達成するものである。

【0165】

生体への投与は、治療の全期間を通じて１回で又は連続的に又は断続的に（例えば、適当な間隔をあけて分割した用量で）行うことができる。最も効果的な投与手段及び投与量を決定する方法は当業者に周知であり、また療法に使用する製剤、療法の目的、治療対象の標的細胞及び治療対象の被験体に応じて変動する。単回の又は複数回にわたる投与は、治療を担当する医師が選択する用量レベル及びパターンで行うことができる。

【0166】

概して、活性化合物の適切な用量は、被験体の体重１キログラムあたり１日約１００μｇ−約２５０ｍｇである。活性化合物が塩、エステル、プロドラッグ等である場合、投与量は親化合物を基準として計算され、したがって使用する実際の重量は比例的に増加する。

【実施例】

【0167】

以下は実施例だが、これらは本発明を説明するためのものにすぎず、本明細書に記載の本発明の範囲を限定することを意図してはいない。

【0168】

頭字語
便宜上、多くの化学部分を周知の省略記号を使用して表していて、これらには、以下に限定するものではないが、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、ｎ−プロピル（ｎＰｒ）、イソプロピル（ｉＰｒ）、ｎ−ブチル（ｎＢｕ）、ｔｅｒｔ−ブチル（ｔＢｕ）、ｎ−ヘキシル（ｎＨｅｘ）、シクロヘキシル（ｃＨｅｘ）、フェニル（Ｐｈ）、ビフェニル（ｂｉＰｈ）、ベンジル（Ｂｎ）、ナフチル（ｎａｐｈ）、メトキシ（ＭｅＯ）、エトキシ（ＥｔＯ）、ベンゾイル（Ｂｚ）及びアセチル（Ａｃ）が含まれる。

【0169】

便宜上、多くの化合物を周知の省略記号を使用して表していて、これらには、以下に限定するものではないが、メタノール（ＭｅＯＨ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、イソプロパノール（ｉ−ＰｒＯＨ）、メチルエチルケトン（ＭＥＫ）、エーテル又はジエチルエーテル（Ｅｔ₂Ｏ）、酢酸（ＡｃＯＨ）、ジクロロメタン（メチレンクロリド、ＤＣＭ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、メタクロロペルオキシ安息香酸（ｍＣＰＢＡ）、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ）、２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）及び１，２−ジクロロエテン（ＤＣＥ）が含まれる。

【0170】

全般的な実験の詳細
特に断りがない限り、概括すると以下の通りである。

【0171】

¹ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＲＸ３００（３００ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｅｉｌｄ ｐｌｕｓ（４００ＭＨｚ）又はＶａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ Ｉｎｏｖａ ６００（６００ＭＨｚ）分光計で記録した。シグナルの多重度は、以下の省略記号：ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｂｒ（ブロード）、ｍ（マルチプレット）で示す。観察された全てのカップリング定数Ｊをヘルツで報告する。¹³Ｃ ＮＭＲは、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＤＲＸ３００（７５ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ Ｕｌｔｒａｓｈｅｉｌｄ ｐｌｕｓ（１００ＭＨｚ）又はＶａｒｉａｎ Ｕｎｉｔｙ Ｉｎｏｖａ ６００（１５０ＭＨｚ）分光計を使用してブロードバンドデカップルモードで記録した。

【0172】

ＬＣ／ＭＳデータは、Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ Ｍａｘ（ＬＣＭＳ−Ａ）、Ｗａｔｅｒｓ ＺＱ ３１００システム（ＬＣＭＳ−Ｂ）又はＡｇｉｌｅｎｔ ６１００シリーズＳｉｎｇｌｅ Ｑｕａｄ ＬＣ／ＭＳ（ＬＣＭＳ−Ｃ）を使用して作成した。

【0173】

ＬＣＭＳ法Ａ（ＬＣＭＳ−Ａ）
機器：Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＬＣＱ Ａｄｖａｎｔａｇｅ Ｍａｘ
ポンプ：Ｆｉｎｎｉｇａｎ Ｓｕｒｖｅｙｏｒ ＬＣ Ｐｕｍｐ
Ｆｉｎｎｉｇａｎ Ｓｕｒｖｅｙｏｒ Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ
Ｆｉｎｎｉｇａｎ Ｓｕｒｖｅｙｏｒ ＰＤＡ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ

【0174】

ＬＣ条件：
逆相ＨＰＬＣ分析
カラム：Ｇｅｍｉｎｉ ３μ Ｃ１８ ２０ｘ４．０ｍｍ １１０Ａ
注入体積：１０μＬ
溶媒Ａ：水０．１％ギ酸
溶媒Ｂ：アセトニトリル０．１％ギ酸
グラジエント：１０−１００％Ｂ、１０分
検出：１００−６００ｎｍ

【0175】

ＭＳ条件：
イオンソース：イオントラップ
イオンモード：ＥＳポジティブ
温度：３００℃
キャピラリＶ−２５
検出：イオン計数
走査範囲：８０−１０００Ａｍｕ
走査時間：０．２秒
アクイジション時間：１０分

【0176】

ＬＣＭＳ法Ｂ（ＬＣＭＳ−Ｂ）
機器：Ｗａｔｅｒｓ ＺＱ ３１００−Ｍａｓｓ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ
Ｗａｔｅｒｓ ２５４５−Ｐｕｍｐ
Ｗａｔｅｒｓ ＳＦＯ Ｓｙｓｔｅｍ Ｆｌｕｉｄｉｃｓ Ｏｒｇａｎｉｚｅｒ
Ｗａｔｅｒｓ ２９９６ Ｄｉｏｄｅ Ａｒｒａｙ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ
Ｗａｔｅｒｓ ２７６７ Ｓａｍｐｌｅ Ｍａｎａｇｅｒ

【0177】

ＬＣ条件：
逆相ＨＰＬＣ分析
カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ ＴＭ Ｃ１８ ５μｍ ４．６ｘ１００ｍｍ
注入体積：１０μＬ
溶媒Ａ：水０．１％ギ酸
溶媒Ｂ：アセトニトリル０．１％ギ酸
グラジエント：１０−１００％Ｂ、１０分
流量：１．５ｍＬ／分
検出：１００−６００ｎｍ

【0178】

ＭＳ条件：
イオンソース：シングル四重極
イオンモード：ＥＳポジティブ
ソース温度：１５０℃
脱溶媒温度：３５０℃
検出：イオン計数
キャピラリ（ＫＶ）−３．００
コーン（Ｖ）：３０
エクストラクタ（Ｖ）：３
ＲＦレンズ（Ｖ）：０．１
走査範囲：１００−１０００Ａｍｕ
走査時間：０．５秒
アクイジション時間：１０分
ガス流
脱溶媒Ｌ／時間−６５０

【0179】

ＬＣＭＳ法Ｃ（ＬＣＭＳ−Ｃ）
機器：Ａｇｉｌｅｎｔ ６１００シリーズＳｉｎｇｌｅ Ｑｕａｄ ＬＣ／ＭＳ
Ａｇｉｌｅｎｔ １２００シリーズＨＰＬＣ
ポンプ：１２００シリーズＧ１３１１Ａ Ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ｐｕｍｐ
オートサンプラ：１２００シリーズＧ１３２９Ａ Ｔｈｅｒｍｏｓｔａｔｔｅｄ Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ
検出器：１２００シリーズＧ１３１４Ｂ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ Ｄｅｔｅｃｔｏｒ

【0180】

ＬＣ条件：
逆相ＨＰＬＣ分析
カラム：Ｌｕｎａ Ｃ８（２） ５μ ５０ｘ４．６ｍｍ １００Ａ
カラム温度：３０℃
注入体積：５μＬ
溶媒Ａ：水０．１％ギ酸
溶媒Ｂ：アセトニトリル０．１％ギ酸
グラジエント：５−１００％Ｂ、１０分
検出：２５４ｎｍ又は２１４ｎｍ

【0181】

ＭＳ条件：
イオンソース：四重極
イオンモード：マルチモード−ＥＳ
乾燥ガス温度：３００℃
ベーパライザ温度：２００℃
キャピラリ電圧（Ｖ）：２０００（正）
キャピラリ電圧（Ｖ）：４０００（負）
走査範囲：１００−１０００
ステップサイズ：０．１秒
アクイジション時間：１０分

【0182】

分析薄層クロマトグラフィを、Ｍｅｒｃｋ社のシリカゲル６０Ｆ２５４アルミニウムバックプレートで行い、プレートを紫外線下での蛍光クエンチング又は酸性アニスアルデヒド若しくは塩基性過マンガン酸カリウムへの浸漬により可視化した。フラッシュクロマトグラフィを、標準的なＲｅｄｉＳｅｐ（登録商標）カートリッジを使用したＴｅｌｅｄｙｎｅ Ｉｓｃｏ社のＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ ＲＦ精製システム又はＧｒａｃｅ若しくはＢｉｏｔａｇｅシリカカートリッジを使用したＢｉｏｔａｇｅ Ｉｓｏｌｅｒａ精製システムで行った。

【0183】

必要に応じて、無水溶媒を、Ｂｒａｕｎ精製システムを使用して調製した又はＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社から購入した。

【0184】

実施例１：２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１）

【化42】

【0185】

（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−ニトロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ１）
ジメチルスルホキシド（２０ｍＬ）中の５−フルオロ−２−ニトロアニソール（３．００ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボキシレート（４．５７ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（３．６３ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）の混合物を、９０℃で１．５時間にわたって窒素雰囲気下で加熱した。この反応混合物を冷却し、水（１００ｍＬ）で希釈した。得られた沈殿物を濾過し、乾燥させると、鮮やかな黄色の固形物が得られた。この固形物を石油エーテル／ジエチルエーテルの５：１の溶液（５０ｍＬ）に懸濁させ、２分間にわたって超音波処理し、濾過し、乾燥させると、表題の化合物（Ｉ１）（３．９５ｇ、６６％）が鮮やかな黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１．４２（ｓ、９Ｈ）、３．４６（ｂｒｓ、８Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、６．５２（ｓ、１Ｈ）、６．５７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝９．５Ｈｚ）、７．８９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝９．３Ｈｚ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間７．４５分；ｍ／ｚ ３３８．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0186】

（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ２）
メタノール（２０ｍＬ）及びエチルアセテート（８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−ニトロフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ１）（１．９０ｇ、５．６３ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％のＰｄ／Ｃ（０．５００ｇ）を添加した。この混合物から空気を抜き、水素ガスを３回再充填し、次に水素雰囲気下で１８時間にわたって撹拌した。この未精製反応混合物をセライトプラグで濾過し、エチルアセテートで洗浄し、濾液を真空下で蒸発させ、次に高真空下で乾燥させると、暗赤色で粘性のオイルが得られた。このオイルをジエチルエーテル及び石油エーテルの２：１の溶液（１５ｍＬ）に懸濁させ、３分間にわたって超音波処理した。得られた混合物を真空下で蒸発させ、高真空下で乾燥させると、表題の化合物（Ｉ２）（１．５５ｇ、８９％）が暗赤色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１．４７（ｓ、９Ｈ）、２．９７（ｔ、４Ｈ、Ｊ＝４．７Ｈｚ）、３．５７（ｔ、４Ｈ、Ｊ＝４．７Ｈｚ）、３．８３（ｓ、３Ｈ）、６．４０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３、２．１Ｈｚ）、６．５０（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０Ｈｚ）、６．６４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３Ｈｚ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間５．０２分；ｍ／ｚ ３０８．３［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0187】

（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ３）
ドライＮ₂ガス流下にある、１：１のジクロロエタン／ｔｅｒｔ−ブタノール（５０ｍＬ）中の２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（０．８００ｇ、３．６８ｍｍｏｌ）の撹拌冷却溶液（０℃）に、塩化亜鉛（ジエチルエーテル中、１Ｍ；４．４２ｍＬ、４．４２ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。０℃での１時間にわたる撹拌後、１：１のジクロロエタン／ｔｅｒｔ−ブタノール（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ２）（１．１３ｇ、３．６８ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を３０分かけて滴加し、続いて１：１のジクロロエタン／ｔｅｒｔ−ブタノール（５ｍＬ）中のトリエチルアミン（０．５６５ｍＬ、０．４１０ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液を３０分かけて滴加した。次に、得られた混合物を力強く室温で１８時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、次に残留物を高真空下で乾燥させた。エチルアセテート及び水を添加し、水層をエチルアセテート（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、蒸発させると、未精製生成物が暗黄色の発泡体として得られた。この未精製生成物をシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィで精製すると（０−２０％のエチルアセテート／石油エーテル）、表題の化合物（Ｉ３）（１．２５ｇ、６９％）が黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ１．４８（ｓ、９Ｈ）、３．１１（ｔ、４Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、３．５９（ｔ、４Ｈ、Ｊ＝５．０Ｈｚ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、６．５４（ｓ、１Ｈ）、６．５７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝９．４Ｈｚ）、７．８３（ｓ、１Ｈ）、８．１７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．５Ｈｚ）、８．５３（ｓ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間９．２４分；ｍ／ｚ ４８８．３［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0188】

（ｄ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ５）
ジメチルホルムアミド（２．５ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．４５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ７２）（０．３５０ｇ、０．７１７ｍｍｏｌ）の溶液に、メチル２−（２−エチニルフェニル）アセテート（Ｉ４：Ｐｅｎｇ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．；Ａｄｖ．Ｓｙｎｔｈ．Ｃａｔａｌ．２００８，３５０，２３５９−２３６４の手順に従って又は後述する通りに調製）（０．１３７ｇ、０．７８９ｍｍｏｌ）、トランス−ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．０２５ｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（０．０１４ｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（０．０１９ｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をマイクロ波照射下、撹拌しながら１２０℃で１５分間にわたって加熱した。この反応混合物をエチルアセテート及び水で希釈し、次に得られた混合物をエチルアセテート（３ｘ１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、蒸発させると、褐色の固形物が得られた。この固形物をシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィで精製すると（１０−５０％のエチルアセテート／石油エーテル）、表題の化合物（Ｉ５）（０．３６０ｇ、８０％）がオレンジ色で結晶性の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ１．４９（ｓ、９Ｈ）、３．１１（ｓ、４Ｈ）、３．６０（ｓ、４Ｈ）、３．７１（ｄ、３Ｈ、Ｊ＝１．０Ｈｚ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、３．９６（ｓ、２Ｈ）、６．５５（ｓ、１Ｈ）、６．５９（ｓ、１Ｈ）、７．２６−７．４５（ｍ、３Ｈ）、７．６８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．６Ｈｚ）、７．８３（ｓ、１Ｈ）、８．２７（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、８．６０（ｓ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間９．５５分；ｍ／ｚ ６２６．４［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0189】

（ｅ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ６）
エチルアセテート（２５ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ５）（０．３５８ｇ、０．５７２ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％のＰｄ／Ｃ（０．２００ｇ）を添加した。この混合物から空気を抜き、水素ガスを３回再充填し、次に水素雰囲気下で１８時間にわたって撹拌した。この反応混合物をセライトプラグで濾過し、エチルアセテートで洗浄し、次に濾液を真空下で蒸発させ、高真空下で乾燥させると、表題の化合物（Ｉ６）（０．３６０ｇ、１００％）が粘性の黄色のオイルとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ１．４８（ｓ、９Ｈ）、３．００−３．２０（ｍ、８Ｈ）、３．５９（ｔ、４Ｈ、Ｊ＝４．８Ｈｚ）、３．６７（ｓ、３Ｈ）、３．７５（ｓ、２Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、６．５５−６．５７（ｍ、２Ｈ）、７．１９−７．２６（ｍ、４Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝９．４Ｈｚ）、８．５０（ｓ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間６．５５分；ｍ／ｚ ６３０．５［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0190】

（ｆ）リチウム２−（２−（２−（２−（（４−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）−２−メトキシフェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ７）
テトラヒドロフラン（１７ｍＬ）、メタノール（３ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ６）（０．３６０ｇ、０．５７２ｍｍｏｌ）の溶液に水酸化リチウム（０．０４２ｇ、１．７７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で２０時間にわたって撹拌した。反応揮発性物質を真空下で蒸発させ、得られた残留物をエチルアセテート及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈した。水相をエチルアセテート（３ｘ２０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、真空下で蒸発させ、乾燥させると、表題の化合物（Ｉ７）（０．３５６ｇ、１００％）が黄色の発泡体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ１．４８（ｓ、９Ｈ）、２．９６−３．０６（ｍ、８Ｈ）３．５６−３．６２（ｍ、６Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、６．４７−６．５１（ｍ、２Ｈ）、７．００−７．１１（ｍ、２Ｈ）、８．００（ｂｒｓ、２Ｈ）、８．４３（ｓ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間９．００分；ｍ／ｚ ６１６．４［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0191】

（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ８）
ドライテトラヒドロフラン（１６ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（７ｍＬ）中のリチウム２−（２−（２−（２−（（４−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）−２−メトキシフェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ７）（０．３５２ｇ、０．６７２ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０９３ｇ、０．６８６ｍｍｏｌ）及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド）ヒドロクロリド（０．１２１ｇ、０．６２９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．４９８ｍＬ、２．８６ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で添加した。この反応混合物を１０分間にわたって室温で撹拌し、次に炭酸アンモニウム（０．２６３ｇ、２．８５９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１８時間にわたって撹拌した。反応揮発性物質を真空下で蒸発させ、得られた残留物をエチルアセテート（１５ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水層をエチルアセテート（２ｘ１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、真空下で濃縮すると黄色の発泡体が得られ、これをシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィで精製すると（５５−８５％のエチルアセテート／石油エーテル）、表題の化合物（Ｉ８）（０．２７６ｇ、８７％）が黄色の発泡体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ１．４８（ｄ、９Ｈ、Ｊ＝１．１Ｈｚ）、３．０９（ｄ、８Ｈ、Ｊ＝３．９Ｈｚ）、３．５８（ｂｒｓ、４Ｈ）、３．６６（ｓ、２Ｈ）、３．８８（ｄ、３Ｈ、Ｊ＝１．０Ｈｚ）、５．４８（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．７８（ｂｒｓ、１Ｈ）、６．５４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．３Ｈｚ）、６．５７（ｓ、１Ｈ）、７．２３−７．２５（ｂｒｓ、４Ｈ）、７．７２（ｓ、１Ｈ）、８．１３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．６Ｈｚ）、８．４８（ｓ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間８．５２分；ｍ／ｚ ６１５．４［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0192】

（ｆ）２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペラジン−１−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１）
ジクロロメタン（８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペラジン−１−カルボキシレート（Ｉ８）（０．２７６ｇ、０．４４９ｍｍｏｌ）の溶液にトリフルオロ酢酸（０．６６９ｍＬ、８．９８ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を窒素雰囲気下、１８時間にわたって撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させると黄色の残留物が得られ、これを３：１のクロロホルム／２−プロパノール及び１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液に溶解させた。水層を３：１のクロロホルム／２−プロパノール（３ｘ１５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、蒸発させると、表題の化合物（１）（０．２２９ｇ、９９％）が黄色の発泡体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ２．８７−３．１０（ｍ、１２Ｈ）、３．４６（ｓ、２Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）、４．３２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．２Ｈｚ）、６．４８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．２、８．７Ｈｚ）、６．６１（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．１Ｈｚ）、６．８８（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．１５−７．３０（ｍ、４Ｈ）、７．３８（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．４６（ｂｒｓ、１Ｈ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、８．８１（ｓ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｂ：保持時間５．６５分；ｍ／ｚ ５１５．４［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0193】

中間体Ｉ４：メチル２−（２−エチニルフェニル）アセテート（Ｉ４）の合成

【化43】

【0194】

（ａ）メチル２−（２−ヨードフェニル）アセテート（Ｉ９）
２−（２−ヨードフェニル）酢酸（５．００ｇ、１９．１ｍｍｏｌ）を反応フラスコに入れ、ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）に溶解させた。硫酸（２５０μＬ）を添加し、この反応混合物を撹拌し、８０℃、窒素下で１６時間にわたって加熱した。得られた混合物を室温まで冷却し、揮発性物質を減圧下での蒸発により除去した。残留物をエチルアセテート（１００ｍＬ）に溶解させ、１０％のＮａＨＣＯ₃（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下で蒸発させると、表題の化合物（Ｉ９）（５．２０ｇ、９９％）が透明な液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．８５（ｄｄ、Ｊ＝７．９、１．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５−７．２７（ｍ、２Ｈ）、６．９７（ｄｄｄ、Ｊ＝７．９、７．０、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．８１（ｓ、２Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）。

【0195】

（ｂ）メチル２−（２−（（トリメチルシリル）エチニル）フェニル）アセテート（Ｉ１０）
メチル２−（２−ヨードフェニル）アセテート（Ｉ９）（４．６５ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（２９５ｍｇ、４２１μｍｏｌ）及びＣｕ（Ｉ）Ｉ（８０．０ｍｇ、４２１μμｍｏｌ）をオーブン乾燥させた反応フラスコに窒素下で入れた。（トリメチルシリル）アセチレン（２．８０ｍＬ、２０．２ｍｍｏｌ）、ドライ脱気ＴＨＦ（２０ｍＬ）及びトリエチルアミン（２０ｍＬ）を添加し、この反応混合物を室温で１６時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去すると黒色の残留物が得られ、これをシリカ上に吸着させ、次にシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−５％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１０）（４．６３ｇ、９９％）が淡褐色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．４８（ｄｄ、Ｊ＝７．５、０．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３２−７．１４（ｍ、３Ｈ）、３．８４（ｓ、２Ｈ）、３．７１（ｓ、３Ｈ）、０．２６（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．６４分。

【0196】

（ｃ）メチル２−（２−エチニルフェニル）アセテート（Ｉ４）
メチル２−（２−（（トリメチルシリル）エチニル）フェニル）アセテート（Ｉ１０）（４．６３ｇ、１９．０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２００ｍＬ）に溶解させ、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中、１．０Ｍ）（２８．５ｍＬ、２８．５ｍｍｏｌ、１．５当量）を０℃で添加した。得られた溶液を室温で１時間にわたって撹拌してから、１０％のＮａＨＣＯ₃（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、次に減圧下で蒸発させると、暗褐色／黒色の残留物が得られた。この残留物をシリカ上に吸着させ、次にシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−１０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４）（２．７６ｇ、８３％）が赤色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．５２（ｄｄ、Ｊ＝７．６、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３−７．１６（ｍ、３Ｈ）、３．８８（ｄ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．７７−３．５２（ｍ、３Ｈ）、３．２８（ｓ、１Ｈ）。

【0197】

中間体Ｉ１５：メチル２−（２−（２−（２−（メチルスルホニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ１５）の合成

【化44】

【0198】

（ａ）４−クロロ−２−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｉ１１）
氷浴、窒素下にあるＴＨＦ（５０ｍＬ）中の２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（２．５０ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）の溶液に、塩化亜鉛（ＩＩ）（エーテル中、１．０Ｍ、１３．８ｍＬ、１３．８ｍｍｏｌ）を滴加した。この混合物を氷浴中、２時間にわたって撹拌し、次にナトリウムメタンチオレート（０．８８８ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を一晩撹拌し、反応物をゆっくりと室温にした。１８時間後、反応物を２ＭのＨＣｌ（１５ｍＬ）でクエンチし、有機物を減圧下での蒸発により除去した。水性残留物をブライン（１５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（相分離器）、慎重に蒸発させると、淡黄色のオイルが得られた。クロマトグラフィ（２ｘ４０ｇシリカカートリッジ、０−２０％のＤＣＭ／ｎ−ヘキサン）とそれに続く溶媒の慎重な蒸発（４０℃、４００ｍｍＨｇ、次に室温、２００ｍｍＨｇ）により、表題の化合物（Ｉ１１）（２．１４９ｇ、収率８２％）が無色のオイルとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．６６（ｓ、１Ｈ）、２．６１（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間：７．９５分；ｍ／ｚ ２２９．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。注：Ｉ１１は揮発性である。

【0199】

（ｂ）４−ヨード−２−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｉ１２）
４−クロロ−２−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｉ１１）（５．００ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）を反応フラスコに入れ、次にヨウ化ナトリウム（９．８０ｇ、６５．６ｍｍｏｌ）及びヨウ化水素酸（５８％）（７０ｍＬ）を添加した。この反応混合物を４８時間にわたって暗所で撹拌し、次に水（２００ｍＬ）で希釈すると、無色の固形物が沈殿した。この沈殿物を濾過により回収し、中性になるまで１０％のＮａＨＣＯ₃溶液で洗浄した。得られた固形物を水（１００ｍＬ）で洗浄し、次に２時間にわたって減圧乾燥させると、表題の化合物（Ｉ１２）（３．９５６ｇ、５７％）が淡黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．４２（ｓ、１Ｈ）、２．５８（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．３０分；ｍ／ｚ ３２１．０［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0200】

（ｃ）メチル２−（２−（（２−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチニル）フェニル）アセテート（Ｉ１３）
４−ヨード−２−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（Ｉ１２）（２．００ｇ、６．２４ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（４３８ｍｇ、６２５μｍｏｌ）、ＣｕＩ（１１９ｍｇ、６２５μｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（１６４ｍｇ、６２５μｍｏｌ）をオーブン乾燥させたマイクロ波反応バイアルに窒素下で入れた。メチル２−（２−エチニルフェニル）アセテート（Ｉ４）（１．３１ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（２０ｍＬ）及びトリエチルアミン（１０ｍＬ）を添加し、得られた混合物を１００℃でマイクロ波照射下、１０分間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、次に残留物をシリカ上にＤＣＭから吸着させた。この事前に吸着させた材料をシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−２５％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１３）（１．５７１ｇ、６９％）がオレンジ色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．７１（ｄ、Ｊ＝０．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６８（ｄｄ、Ｊ＝７．７、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．５０−７．２９（ｍ、３Ｈ）、３．９３（ｓ、２Ｈ）、３．７１（ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、３Ｈ）、２．６２（ｄ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、３Ｈ）。

【0201】

（ｄ）メチル２−（２−（（２−（メチルスルホニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチニル）フェニル）アセテート（Ｉ１４）
メチル２−（２−（（２−（メチルチオ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチニル）フェニル）アセテート（Ｉ１３）（３．１４ｇ、８．５７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５０ｍＬ）に溶解させ、得られた溶液を０℃まで冷却した。ｍＣＰＢＡ（７０％；４．６５ｇ、１８．９ｍｍｏｌ）を添加し、次にこの反応混合物が室温まで温まるにまかせ、室温で撹拌を一晩継続した。この未精製混合物を１０％のＮａＨＣＯ₃（２００ｍＬ）で洗浄し、層を分離した。有機物を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、次に減圧下で蒸発させると、淡黄色の固形物が得られた。この固形物をシリカ上に吸着させ、次にシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−５０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１４）（２．８７６ｇ、８４％）が黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ９．１３（ｄ、Ｊ＝０．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３（ｄｄ、Ｊ＝７．６、０．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．５４−７．４６（ｍ、１Ｈ）、７．４４−７．３２（ｍ、２Ｈ）、３．９４（ｓ、２Ｈ）、３．７７−３．６７（ｍ、３Ｈ）、３．４３（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．９０分；ｍ／ｚ ４２１．０（Ｍ＋Ｎａ）、３９９．１（Ｍ＋１）、３６７．０（Ｍ−ＯＭｅ）、３３９．１（Ｍ−ＣＯＯＭｅ）。

【0202】

（ｅ）メチル２−（２−（２−（２−（メチルスルホニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ１５）
メチル２−（２−（（２−（メチルスルホニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチニル）フェニル）アセテート（Ｉ１４）（１．５０ｇ、３．７６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍＬ）に溶解させ、次に１０％のＰｄ／Ｃ（７５０ｍｇ）を添加した。得られた懸濁液をＨ₂（１ａｔｍ）下、１６時間にわたって室温で撹拌した。この未精製反応混合物をセライトで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液を減圧下で蒸発させると黄色の液体が得られ、これをシリカ上に吸着させた。このシリカ吸着材料をシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−１００％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１５）（１．３８ｇ、９１％）が黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ９．０７（ｄ、Ｊ＝０．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．３０−７．１２（ｍ、４Ｈ）、３．７２（ｓ、２Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）、３．４１−３．３５（ｍ、２Ｈ）、３．３５（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｄｄ、Ｊ＝９．６、６．３Ｈｚ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．９２分；ｍ／ｚ ４２５．１（Ｍ＋Ｎａ）、４０３．１（Ｍ＋１）、４０１．１（Ｍ−１）、３７１．１（Ｍ−ＯＭｅ）、３４３．１（Ｍ−ＣＯＯＭｅ）。

【0203】

実施例２：２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（２）

【化45】

【0204】

（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ１６）
リチウムジイソプロピルアミド（ヘプタン／ＴＨＦ／エチルベンゼン中、２Ｍ；１５．１ｍＬ、３０．１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−オキソピペリジン−１−カルボキシレート（３．００ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃で滴加し、この混合物を３０分間にわたって撹拌し続けた。次に、ＴＨＦ（６０ｍＬ）中のＮ−フェニル−ビス（トリフルオロメタンスルホンイミド）（６．４６ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけて反応物に滴加し、この混合物を３０分間にわたって−７８℃で撹拌し続けた。次に、得られた混合物が室温まで温まるにまかせ、２４時間にわたって撹拌した。溶媒を部分的に除去し（約８０ｍＬ）、この反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ₃溶液（５０ｍＬ）でクエンチした。ＤＣＭ（５０ｍＬ）をこの溶液に添加し、層を分離した。次に、水層をＤＣＭ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、０．２Ｍのクエン酸溶液（５０ｍＬ）、１ＭのＮａＯＨ（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去すると褐色のオイルが得られ、これをシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィで精製すると（石油ベンジン中、０−１０％のジエチルエーテル、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１６）（２．４８ｇ、５０％）がオレンジ色のオイルとして得られ、これは−１８℃まで冷却すると結晶化した；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ５．７６（ｓ、１Ｈ）、４．０５−４．０４（ｍ、２Ｈ）、３．６３（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．４６−２．４３（ｍ、２Ｈ）、１．４７（ｓ、９Ｈ）。

【0205】

（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル（２−メトキシ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）カルバメート（Ｉ１７）
２−メトキシ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アニリン（１．００ｇ、４．０１ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ無水物（１．７５ｇ、８．０２ｍｍｏｌ）及びトルエン（１０ｍＬ）を窒素下、１１０℃で２０時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、次に残留物をシリカゲル上に吸着させた。クロマトグラフィにより（ＳｉＯ₂、０−２０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１７）（１．４０ｇ、１００％）が無色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．１１（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｄｄ、Ｊ＝８．０、０．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６（ｄｄ、Ｊ＝７．８、６．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、１．５３（ｓ、９Ｈ）、１．３５（ｓ、１２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．８５分。

【0206】

（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−メトキシフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ１８）
ＤＭＥ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ１６）（４７４ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル（２−メトキシ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）カルバメート（Ｉ１７）（５００ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ₃）₄（１６５ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）の溶液に、３．５ＭのＮａＨＣＯ₃水溶液（２．００ｍＬ、５．０当量）を添加し、得られた懸濁液を８０℃で１６時間にわたって加熱した。室温まで冷却してから、エチルアセテート（７０ｍＬ）を添加し、得られた溶液を水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、蒸発乾固させた。残留物をクロマトグラフィに供すると（ＳｉＯ₂、０−２０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１８）（５２０ｍｇ、９０％）が淡黄色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．０３（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．０９（ｓ、１Ｈ）、６．９６（ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．８８（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．９８（ｓ、１Ｈ）、４．０８（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．８９（ｓ、３Ｈ）、３．６４（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．５２（ｓ、２Ｈ）、１．５４（ｓ、９Ｈ）、１．５１（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．８７分；ｍ／ｚ ３４９．１［Ｍ−ｔ−Ｂｕ＋２］⁺。

【0207】

（ｄ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ１９）
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−メトキシフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ１８）（５００ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）及び１０％のＰｄ／Ｃ（５０ｍｇ）の懸濁液を水素雰囲気下、１６時間にわたって撹拌した。得られた混合物をセライトで濾過し、エチルアセテート（７０ｍＬ）で洗浄し、次に濾液を蒸発乾固させた。残留物をクロマトグラフィに供すると（ＳｉＯ₂、０−２０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ１９）（４１１ｍｇ、８２％）が淡黄色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．９４（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．９９（ｓ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．６７（ｓ、１Ｈ）、４．２１（ｓ、２Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、２．７７（ｔ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．５７（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．１、９．０、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．７９（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．６８−１．５４（ｍ、２Ｈ）、１．５０（ｓ、９Ｈ）、１．４７（ｓ、９Ｈ）。

【0208】

（ｅ）メチル２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ２０）
メチル２−（２−（２−（２−（メチルスルホニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ１５）（２００ｍｇ、０．４９７ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ１９）（３０３ｍｇ、０．７４５ｍｍｏｌ）を、トリフルオロエタノール（４ｍＬ）に溶解させた。トリフルオロ酢酸（２００μＬ）を添加し、得られた混合物を１００℃でマイクロ波照射下、１時間にわたって加熱した。この未精製反応混合物をシリカゲル上に吸着させ、シリカゲルクロマトグラフィで分離すると（０−２０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）、表題の化合物（Ｉ２０）（２１５ｍｇ、８２％）が淡褐色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−アセトン）δ８．６４（ｓ、１Ｈ）、８．３７（ｄｄ、Ｊ＝８．３、３．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．２９（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．２、６．９、１．７Ｈｚ、３Ｈ）、７．２２（ｄｄｄ、Ｊ＝８．９、６．１、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．１０（ｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、１Ｈ）、６．９７（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、３．９８（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）、３．８２（ｓ、２Ｈ）、３．７４−３．６０（ｍ、５Ｈ）、３．２７（ｔ、Ｊ＝１１．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．２２−３．０６（ｍ、４Ｈ）、３．００（ｓ、１Ｈ）、２．３４−２．１７（ｍ、２Ｈ）、２．１２（ｄｄ、Ｊ＝４．０、３．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．０８（ｄｔ、Ｊ＝６．６、２．２Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．２３分；ｍ／ｚ ５２９．１［Ｍ＋１］⁺。

【0209】

（ｆ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２１）
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のメチル２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ２０）（３００ｍｇ、０．５６７ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ無水物（２４７ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）の溶液を室温で窒素下、２０時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させると褐色の液体が得られ、これをシリカゲル上に吸着させた。クロマトグラフィにより（ＳｉＯ₂、０−１５％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）、表題の化合物（Ｉ２１）（２１０ｍｇ、収率５９％）が褐色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５６（ｓ、１Ｈ）、８．４０（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｓ、１Ｈ）、７．３１−７．１８（ｍ、４Ｈ）、６．８７（ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．７９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．２８（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９５（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、３Ｈ）、３．７８（ｓ、２Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．２６−３．０２（ｍ、４Ｈ）、２．８４（ｔ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．６６（ｔ、Ｊ＝３．４Ｈｚ、１Ｈ）、１．８７（ｄ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．６６（ｄｄ、Ｊ＝１２．９、３．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．５２（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．２４分；ｍ／ｚ ６２９．２［Ｍ＋１］⁺、６２７．０［Ｍ−１］^-。

【0210】

（ｇ）リチウム２−（２−（２−（２−（（４−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）−２−メトキシフェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ２２）
ＴＨＦ（１０ｍＬ）、水（２ｍＬ）及びＭｅＯＨ（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２１）（２１０ｍｇ、０．３３４ｍｍｏｌ）及びＬｉＯＨ．Ｈ₂Ｏ（４２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で２０時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させると、表題の化合物（Ｉ２２）が淡黄色の固形物３００ｍｇとして得られた。過剰な質量は、無機塩の存在に起因する。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．３１分；ｍ／ｚ ６１５．１［Ｍ＋１］⁺、６１３．２［Ｍ−１］^-。

【0211】

（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２３）
ドライＤＭＦ（４ｍＬ）中のリチウム２−（２−（２−（２−（（４−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−４−イル）−２−メトキシフェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ２２）（２１０ｍｇ、０．３３８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２５７ｍｇ、０．６７６ｍｍｏｌ）、塩化アンモニウム（３６２ｍｇ、６．７６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１１５μＬ）の溶液を、室温で一晩撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物をエチルアセテートで希釈した。得られた溶液を１０％のＮａＨＣＯ₃で洗浄し、次に有機層を乾燥させた（ＭｇＳＯ₄）。揮発性物質を減圧下で除去し、残留物をクロマトグラフィに供すると（ＳｉＯ₂、０−１００％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ２３）（１８５ｍｇ、８９％）が無色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５４（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．８８（ｓ、１Ｈ）、７．２５（ｄｄ、Ｊ＝４．４、２．４Ｈｚ、２Ｈ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．４９（ｄ、Ｊ＝３９．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．２４（ｓ、２Ｈ）、３．９２（ｓ、３Ｈ）、３．７０（ｓ、２Ｈ）、３．２０−３．０２（ｍ、４Ｈ）、２．８０（ｍ、２Ｈ）、２．６４（ｓ、２Ｈ）、１．８４（ｄ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．６２（ｄｄ、Ｊ＝１２．３、３．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．６４分；ｍ／ｚ ６３６．２［Ｍ＋Ｎａ］⁺、６１４．１［Ｍ＋１］⁺、６１２．２［Ｍ−１］^-、５５８．２［Ｍ−ｔ−Ｂｕ＋２］⁺。

【0212】

（ｉ）２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（２）
トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２３）（１８５ｍｇ、０．３０１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加し、得られた溶液を、室温で２時間にわたって撹拌した。ＤＣＭ（２０ｍＬ）及び１０％のＮａＨＣＯ₃溶液（１０ｍＬ）を添加し、次に有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下で蒸発乾固させると、表題の化合物（２）（１２５ｍｇ、８１％）が無色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ₂Ｃｌ₂）δ８．４９（ｓ、１Ｈ）、８．３１（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９１（ｓ、１Ｈ）、７．２８−７．１２（ｍ、３Ｈ）、６．９４（ｂｓ、２Ｈ）、６．８５（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、６．７８（ｄｄ、Ｊ＝１１．８、３．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．３５（ｓ、１Ｈ）、５．９４（ｓ、１Ｈ）、３．８８（ｓ、３Ｈ）、３．６５（ｓ、２Ｈ）、３．４２（ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、２Ｈ）、３．２４−３．０２（ｍ、４Ｈ）、２．９１（ｔ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．７５−２．６１（ｍ、１Ｈ）、２．１０−１．８３（ｍ、４Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９２分；ｍ／ｚ ５１４．１［Ｍ＋１］⁺、５２１．１［Ｍ−１］^-。

【0213】

実施例３：２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（３）

【化46】

【0214】

ホルムアルデヒド溶液（３７％、水性；３２μＬ、０．３９ｍｍｏｌ）を、ドライＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（２）（４０ｍｇ、７８μｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（８３ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を窒素下で添加し、得られた混合物を室温で２時間にわたって撹拌した。この未精製混合物をエチルアセテートで希釈し、シリカゲル上に吸着させた。クロマトグラフィにより（ＳｉＯ₂、０−２０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）、表題の化合物（３）（２５ｍｇ、６１％）が固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ₂Ｃｌ₂）δ８．５３（ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９４（ｓ、１Ｈ）、７．２９−７．１５（ｍ、４Ｈ）、６．９２（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．１２（ｂｓ、１Ｈ）、５．８４（ｂｓ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．６８（ｓ、２Ｈ）、３．６０（ｄ、Ｊ＝１０．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．２４−３．０３（ｍ、４Ｈ）、２．８０（ｓ、３Ｈ）、２．７９（ｍ、２Ｈ）、２．７１（ｍ、１Ｈ）、２．４２−２．２０（ｍ、２Ｈ）、２．０１（ｍ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９２分；ｍ／ｚ ５２８．１［Ｍ＋１］⁺、５２６．１［Ｍ−１］^-。

【0215】

実施例３Ａ：２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（２）及び２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（３）の代替合成

【化47】

【0216】

（ａ）４−ブロモ−２−メトキシ−１−ニトロベンゼン（Ｉ２４）
ナトリウム金属（３．１４ｇ、１３６ｍｍｏｌ）をメタノール（３００ｍＬ）に窒素雰囲気下、少しずつ添加した。均質な溶液が一旦得られたら、４−ブロモ−２−フルオロ−１−ニトロベンゼン（２０．０ｇ、９１ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を６０℃で１時間にわたって撹拌した。揮発性物質を蒸発させ、固形残留物を水（４００ｍＬ）に懸濁させた。得られた懸濁液を濾過し、水（２ｘ５０ｍＬ）で洗浄した。フィルターケーキを空気乾燥させると、表題の化合物（Ｉ２４）（２０．１ｇ、収率９５％）が淡黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．７５（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．２４（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．１８（ｄｄ、Ｊ＝８．６、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．９７（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．８５分。

【0217】

（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−ニトロフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ２５）
４−ブロモ−２−メトキシ−１−ニトロベンゼン（Ｉ２４）（２．３６４ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（３．００ｇ、９．７０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．０２ｇ、２９．１ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（６０ｍＬ）の混合物を３回の真空／窒素サイクルで脱気し、次にＰｄＣｌ₂（ｄｐｐｆ）−ＤＣＭ溶媒和物（４５０ｍｇ、６ｍｏｌ％）を窒素下、シュレンク管において添加した。第２の管を同じやり方で準備し（すなわち、全部で６．００ｇの開始ボロネート）、２本の管を８５℃まで窒素下で加熱した。１７時間後、２本の管を窒素下で冷却し、５％ｗ／ｖの塩化リチウム水溶液（６００ｍＬ）に添加した。得られた混合物をエーテル（３００ｍＬ）及びエチルアセテート（３ｘ３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（６００ｍＬ）及びブライン（６００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、次に蒸発乾固させた。残留物をクロマトグラフィに供すると（１２０ｇシリカカートリッジ、０−６０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ２５）（５．８６３ｇ、収率９１％）が、黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．８６（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．０４−６．９７（ｍ、２Ｈ）、６．１７（ｓ、１Ｈ）、４．１２（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、３．６５（ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．５２（ｓ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．２７分；ｍ／ｚ ２７９．０［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺、２３５．１［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺。

【0218】

（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２６）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−ニトロフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ２５）（５．６０９ｇ、１６．７８ｍｍｏｌ）を１：１のエタノール：エチルアセテート（５００ｍＬ）に溶解させ、Ｐｄ／Ｃ（２．５０ｇ）を添加した。この混合物を力強く水素下で５時間にわたって撹拌し、次にセライトで濾過した。このセライトをエチルアセテート（５００ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を蒸発させると、表題の化合物（Ｉ２６）（４．９３ｇ、収率９６％）がオフホワイトの固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ６．６９−６．６０（ｍ、３Ｈ）、４．２２（ｓ、２Ｈ）、３．８４（ｓ、３Ｈ）、２．７８（ｔ、Ｊ＝１２．４Ｈｚ、２Ｈ）、２．５４（ｔｔ、Ｊ＝１２．１、３．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．８０（ｄ、Ｊ＝１３．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．６５−１．５３（ｍ、２Ｈ）、１．４８（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９１分；ｍ／ｚ ２５１．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺、２０７．２［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺。

【0219】

（ｄ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２７）
１：１のｔｅｒｔ−ブタノール：ジクロロエタン（４０ｍＬ）中の２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（９８１ｍｇ、４．５２ｍｍｏｌ）の溶液を０℃まで窒素下で冷却し、次にエーテル中の１．０Ｍの塩化亜鉛（ＩＩ）（４．５２ｍＬ、４．５２ｍｍｏｌ）を滴加した。１時間後、１：１のｔｅｒｔ−ブタノール：ジクロロエタン（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２６）（１．２６ｇ、４．１１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．８６０ｍＬ、６．１７ｍｍｏｌ）の溶液を−１０℃で滴加し、次に混合物を１６時間にわたって撹拌し、温度を室温まで上げた。この混合物を濃縮し、シリカ上に蒸発させ、クロマトグラフィに供すると（１２０ｇシリカカートリッジ、０−１０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ２７）（１．２７７ｇ、収率６４％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５７（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．０１（ｓ、１Ｈ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２５（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、２．８７−２．７３（ｍ、２Ｈ）、２．６４（ｔｔ、Ｊ＝１２．１、３．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．８３（ｄ、Ｊ＝１２．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．６９−１．５４（ｍ、水とオーバーラップ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．１２分；ｍ／ｚ ４３１．０［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺、３８７．１［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ４８５．１［Ｍ−Ｈ］^-。

【0220】

（ｅ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２８）
メチル２−（２−エチニルフェニル）アセテート（Ｉ４）（０．４７２ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２７）（１．１０ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（５９ｍｇ、１０ｍｏｌ％）、ヨウ化銅（Ｉ）（４３ｍｇ、１０ｍｏｌ％）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（７９ｍｇ、５ｍｏｌ％）、ＤＭＦ（１２ｍＬ）及びトリエチルアミン（１．２６ｍＬ、９．０４ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波管において窒素で脱気し、次にマイクロ波照射下、１２０℃で１５分間にわたって加熱した。更に３本の管を準備し、上述した通りに加熱した（すなわち、全部で４．４０ｇのＩ２７）。冷却した混合物を合わせ、水（６００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物をジクロロメタン（３ｘ２５０ｍＬ）で抽出し、次に合わせた有機相を水（２ｘ３００ｍＬ）、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残留物をクロマトグラフィに供すると（１２０ｇシリカカートリッジ、０−５０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ２８）（５．５２ｇ、収率９８％）が黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．６３（ｓ、１Ｈ）、８．３８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．００（ｓ、１Ｈ）、７．６９（ｄｄ、Ｊ＝７．７、０．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｔｄ、Ｊ＝７．６、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝７．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．３２（ｄｄ、Ｊ＝７．５、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２６（ｓ、２Ｈ）、３．９７（ｓ、２Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．７１（ｓ、３Ｈ）、２．８１（ｔ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．６４（ｔｔ、Ｊ＝１２．２、３．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．８４（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．６９−１．５５（ｍ、水とオーバーラップ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．０５分；ｍ／ｚ（６２５．１［Ｍ＋Ｈ］⁺、５６９．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ６２３．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0221】

（ｆ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２１）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２８）（５．５２ｇ、８．８４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２５０ｍＬ）に溶解させ、次にトリエチルアミン（１ｍＬ）及びＰｄ／Ｃ（２．５０ｇ）を添加し、この混合物を３０℃、水素下で撹拌した。１６時間後、混合物をセライトで濾過し、このセライトをＤＭＦ（２５０ｍＬ）で洗浄した。トリエチルアミン（１ｍＬ）及びＰｄ／Ｃ（２．５０ｇ）を合わせた濾液に添加し、混合物を３０℃、水素下で撹拌した。１８時間後、得られた混合物をセライトで濾過し、エチルアセテート（３００ｍＬ）で洗浄した。濾液を２つのロットに分割し、それぞれを水（８００ｍＬ）に注ぎ、得られた混合物をエチルアセテート（３ｘ３００ｍＬ）で抽出した。各ロットからのエチルアセテート抽出物を合わせ、水（２ｘ５００ｍＬ）及びブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。得られたもの２つを合わせ、クロマトグラフィに供すると（１２０ｇシリカカートリッジ、０−２０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ２１）（３．６２０ｇ、収率６５％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５５（ｓ、１Ｈ）、８．３７（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９１（ｓ、１Ｈ）、７．２９−７．１８（ｍ、ＣＨＣｌ₃とオーバーラップ）、６．８５（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．７７（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２６（ｓ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）、３．１９−３．０１（ｍ、４Ｈ）、２．８１（ｔ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．６４（ｔｔ、Ｊ＝１２．０、３．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．８５（ｄ、Ｊ＝１３．３Ｈｚ、２Ｈ）、１．７０−１．５７（ｍ、水とオーバーラップ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．１４分；ｍ／ｚ ６２９．２［Ｍ＋Ｈ］⁺、５７３．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ６２７．２［Ｍ−Ｈ］。

【0222】

（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２３）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−メトキシ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２１）（３．６２ｇ、５．７６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２００ｍＬ）に溶解させ、次に水（１００ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（１．２１ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。得られた混合物を１８時間にわたって室温で撹拌し、次に濃縮した。残留物を飽和炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）及び水（３００ｍＬ）に注いだ。得られた混合物をエチルアセテート（３ｘ３００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。残留物をトルエンから蒸発させ、次にＴＨＦ（７０ｍＬ）及びＤＭＦ（１２ｍＬ）に３０℃、窒素下で溶解させた。この混合物を力強く撹拌し、同時にＨＯＢＴ（１．０１２ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ．ＨＣｌ（１．３３０ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（５．０２ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、炭酸アンモニウム（２．７７ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を１６時間にわたって継続した。得られた混合物を飽和炭酸水素ナトリウム（３００ｍＬ）に注ぎ、エチルアセテート（３ｘ３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を１：１の飽和ブライン：水（２ｘ３００ｍＬ）、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。残留物をクロマトグラフィに供すると（１２０ｇシリカカートリッジ、０−８０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ２３）（２．６９８ｇ、２ステップで７６％）が、白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５４（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．８６（ｓ、１Ｈ）、７．２９−７．２２（ｍ、残留ＣＨＣｌ₃とオーバーラップ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝１．９Ｈｚ、１Ｈ）、５．３７（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、２Ｈ）、４．２５（ｓ、２Ｈ）、３．９３（ｓ、３Ｈ）、３．７１（ｓ、２Ｈ）、３．１８−３．０４（ｍ、４Ｈ）、２．８１（ｔ、Ｊ＝１２．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．６４（ｔｔ、Ｊ＝１２．０、３．４Ｈｚ、１Ｈ）、１．８４（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、２Ｈ）、１．６９−１．５５（ｍ、水とオーバーラップ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．５９分；ｍ／ｚ ６１４．２［Ｍ＋Ｈ］⁺、５５８．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ６１２．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0223】

（ｈ）２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（２）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２３）（２．６９４ｇ、４．３９ｍｍｏｌ）の溶液をジクロロメタン（１５０ｍＬ）に溶解させ、ＴＦＡ（１５ｍＬ）を添加した。得られた混合物を１６時間にわたって撹拌し、次に濃縮した。残留物を１０％の水酸化ナトリウム（２００ｍＬ）に懸濁させ、次にエチルアセテート（５ｘ２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をブライン（３００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させると、表題の化合物（２）（２．２５２ｇ、収率１００％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５３（ｓ、１Ｈ）、８．２６（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．８５（ｓ、１Ｈ）、７．２９−７．２１（ｍ、ＣＨＣｌ₃とオーバーラップ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．８０（ｓ、１Ｈ）、５．４３（ｄ、Ｊ＝１０．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．９２（ｄ、Ｊ＝１．３Ｈｚ、３Ｈ）、３．７０（ｓ、２Ｈ）、３．２０（ｄ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．１５−３．０５（ｍ、４Ｈ）、２．７５（ｔ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．６１（ｔｔ、Ｊ＝１２．０、３．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．８９−１．７６（ｍ、水とオーバーラップ）、１．６７（ｑｄ、Ｊ＝１２．７、３．９Ｈｚ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９２分；ｍ／ｚ ５１４．１［Ｍ＋Ｈ］⁺、５３６．１［Ｍ＋Ｎａ］⁺；ｍ／ｚ ５１２．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0224】

（ｉ）２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（３）
２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（２）（２．２４９ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）をメタノール（２２０ｍＬ）に溶解させ、３７％のホルムアルデヒド溶液（０．４８３ｍＬ、１７．５ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、ナトリウムトリス（アセトキシ）ボロヒドリド（４．６４１ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）を添加し、撹拌を室温で２時間にわたって継続した。揮発性物質を蒸発させ、残留物を５％の水酸化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）に懸濁させた。得られた混合物をエチルアセテート（５ｘ２００ｍＬ）で抽出し、次に合わせた有機相をブライン（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。残留物をエーテルから蒸発させ、溶媒残渣を高真空下で除去すると、表題の化合物（３）（２．１９６ｇ、収率９５％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５３（ｓ、１Ｈ）、８．２４（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．８５（ｓ、１Ｈ）、７．２８−７．２２（ｍ、ＣＨＣｌ₃とオーバーラップ）、６．８８（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．８１（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．４１（ｓ、２Ｈ）、３．９０（ｓ、３Ｈ）、３．７０（ｓ、２Ｈ）、３．１６−３．０６（ｍ、４Ｈ）、２．９９（ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、２．４８（ｔｔ、Ｊ＝１０．５、５．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．３４（ｓ、３Ｈ）、２．０７（ｔｄ、Ｊ＝１１．１、４．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．８９−１．７７（ｍ、水とオーバーラップ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９４分；ｍ／ｚ ５２８．１［Ｍ＋Ｈ］⁺、５５０．１［Ｍ＋Ｎａ］⁺；ｍ／ｚ ５２６．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0225】

実施例４：２−（２−（２−（２−（（４−（１−エチルピペリジン−４−イル）−２−メトキシフェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（４）

【化48】

【0226】

アセトアルデヒド（１８ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を、ドライＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の２−（２−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（２）（４０ｍｇ、７８μｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（８３ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を窒素下で添加し、得られた混合物を室温で２時間にわたって撹拌した。この未精製混合物をエチルアセテートで希釈し、シリカゲル上に吸着させた。クロマトグラフィにより（ＳｉＯ₂、０−２０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）、表題の化合物（４）（１０ｍｇ、２４％）が淡色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ₂Ｃｌ₂）δ８．５２（ｓ、１Ｈ）、８．３４（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．９２（ｓ、１Ｈ）、７．２８−７．１４（ｍ、４Ｈ）、６．９２（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．９１（ｂｓ、１Ｈ）、５．８７（ｂｓ、１Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、３．６６（ｓ、２Ｈ）、３．６３（ｍ、２Ｈ）、３．２０−３．０１（ｍ、６Ｈ）、２．７３（ｄ、Ｊ＝１１．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．４２−２．２１（ｍ、３Ｈ）、２．０２（ｄ、Ｊ＝１８．０Ｈｚ、４Ｈ）、１．３７（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９６分；ｍ／ｚ ５４２．２［Ｍ＋１］⁺、５４０．１［Ｍ−１］^-。

【0227】

実施例５：３−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）ベンズアミド（５）

【化49】

【0228】

（ａ）３−ヨードベンズアミド（Ｉ２９）
室温のＭｅＣＮ（１００ｍＬ）中の３−ヨード安息香酸（２．００ｇ、８．０６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（５．６２ｍＬ、３２．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＯＢＴ（１．６３ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）及びＥＤＣＩ．ＨＣｌ（２．３２ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）を添加した。１０分間にわたる撹拌後、炭酸アンモニウム（４．６５ｇ、４８．４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を一晩撹拌した。揮発性物質を真空下で除去すると未精製固形物が得られ、これを水（１００ｍＬ）に懸濁させた。得られた懸濁液を１０分間にわたって超音波処理し、次に固形物を濾過により回収した。フィルターケーキを水（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させると、表題の化合物（Ｉ２９）（１．６５ｇ、８３％）が褐色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．１３（ｔ、Ｊ＝１．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．８３（ｄｄｄ、Ｊ＝７．９、１．７、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３（ｄｄｄ、Ｊ＝７．８、１．７、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．１６（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．１８−５．４９（ｍ、Ｊ＝１３７．３Ｈｚ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間＝５．０４分；ｍ／ｚ＝２４８［Ｍ＋１］⁺。

【0229】

（ｂ）３−（（トリメチルシリル）エチニル）ベンズアミド（Ｉ３０）
ＴＨＦ（１００ｍＬ）及びトリエチルアミン（４．６４ｍＬ、３３．３ｍｍｏｌ）中の３−ヨードベンズアミド（Ｉ２９）（１．６５ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）、Ｃｕ（Ｉ）Ｉ（１２７ｍｇ、０．６６６ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（５２４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）の溶液を、１０分間にわたって窒素雰囲気下で超音波処理した。次に、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（６４２ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）及びＴＭＳアセチレン（１．８８ｍＬ、１３．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で３日間にわたって撹拌した。揮発性物質を真空下で蒸発させ、残留物をシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−５０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ３０）（１．５３ｇ）が得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．７８（ｔ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．６７（ｄｄｄ、Ｊ＝７．８、１．８、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．５３−７．４８（ｍ、１Ｈ）、７．２９（ｔｄ、Ｊ＝７．８、０．５Ｈｚ、１Ｈ）、０．１５（ｓ、９Ｈ）。

【0230】

（ｃ）３−エチニルベンズアミド（Ｉ３１）
炭酸カリウム（１．８４ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中の３−（（トリメチルシリル）エチニル）ベンズアミド（Ｉ３０）（１．４５ｇ、６．６６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。得られた懸濁液を３０分間にわたって撹拌し、次に水（１００ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）を添加した。得られた沈殿物を濾過により回収し、空気乾燥後、これをアセトン及びメタノールの１：１の混合物（１５ｍＬ）に懸濁させた。超音波処理後、得られた懸濁液を濾過すると、表題の化合物（Ｉ３１）（３３５ｍｇ、３５％）が得られ、これを更に精製することなく使用した。

【0231】

（ｄ）２−メトキシ−４−（１，２，３，６−テトラヒドロピリジン−４−イル）アニリン（Ｉ３２）
ＤＣＭ（６０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−メトキシフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ１８）（６．７ｇ、０．０１６ｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（６．０ｍＬ、０．０８１ｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を室温で１４時間にわたって撹拌した。更に５ｍＬのＴＦＡを添加し、反応物を更に６時間にわたって撹拌した。揮発性物質を真空下で除去し、残留物をＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏに溶解させ、凍結乾燥させると、表題の化合物（Ｉ３２）がＴＦＡ塩（６．３８ｇ、９１％）として褐色のオイルとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₄−ＭｅＯＨ）δ７．３１（ｄｄ、Ｊ＝７．３、２．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１（ｔ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．１３−７．０９（ｍ、１Ｈ）、６．２０（ｔｔ、Ｊ＝３．４、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．８３（ｄｄ、Ｊ＝５．７、２．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｔ、Ｊ＝６．１Ｈｚ、２Ｈ）、２．７７（ｄｄｄ、Ｊ＝８．０、３．９、１．９Ｈｚ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間１．３８分；ｍ／ｚ ２０１．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0232】

（ｅ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ３３）
室温のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の２−メトキシ−４−（１，２，３，６−テトラヒドロピリジン−４−イル）アニリン（Ｉ３２）（６．３８ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の（Ｂｏｃ）₂Ｏ（３．２７ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）の溶液を５分かけて滴加し、得られた溶液を１時間にわたって撹拌した。この混合物を真空下で濃縮し、残留物を２ＭのＮａＯＨ（５０ｍＬ）溶液に溶解させた。水層をＣＨ₂Ｃｌ₂（４ｘ５０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、次に乾燥させた（ＭｇＳＯ₄）。溶媒を真空下で除去すると、表題の化合物（Ｉ３３）（１．９７ｇ、４３％）が褐色のオイルとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ６．８５−６．８０（ｍ、１Ｈ）、６．６７（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．９０（ｓ、１Ｈ）、４．０５（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．８７（ｓ、３Ｈ）、３．６２（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．４９（ｓ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。

【0233】

（ｆ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２６）
窒素下にあるＤＭＦ（２ｍＬ）中の１０％のＰｄ／Ｃ（０．０６８ｇ）の懸濁液に、ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ３３）（２．０ｇ、６．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、得られた懸濁液を水素雰囲気下、室温で２４時間にわたって撹拌した。この反応混合物をセライトで濾過し、エチルアセテート（１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を蒸発乾固させると、表題の化合物（Ｉ２６）（１．４２ｇ、７２％）が淡褐色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ６．６６−６．５８（ｍ、３Ｈ）、４．２１（ｓ、２Ｈ）、３．７６−３．６６（ｍ、４Ｈ）、２．５３（ｔｔ、Ｊ＝１２．１、３．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．８４−１．７５（ｍ、２Ｈ）、１．５５（ｔｄｄ、Ｊ＝１１．５、６．４、３．１Ｈｚ、１Ｈ）、１．４７（ｓ、９Ｈ）。

【0234】

（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ３４）
塩化亜鉛（Ｅｔ₂Ｏ中、１．０Ｍ）（８．５６ｍＬ、８．５６ｍｍｏｌ）を、１：１のＤＣＥ／ｔ−ＢｕＯＨ（１０ｍＬ）中の２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（１．０６ｍＬ、７．８５ｍｍｏｌ）の溶液に０℃、窒素下で添加した。この混合物を１時間にわたって０℃で撹拌し、次に１：１のＤＣＥ／ｔＢｕＯＨ（３０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ２６）（１．９７ｇ、７．１３ｍｍｏｌ）を添加した。次に、１：１のＤＣＥ／ｔ−ＢｕＯＨ（１０ｍＬ）中のトリエチルアミン（６００μＬ、０．４３２ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液を０℃で滴加した。最後の添加後、この反応混合物を力強く更に３０分間にわたって０℃、次に室温で２４時間にわたって撹拌した。溶媒を真空下で除去すると褐色で油性の残留物が得られ、これをシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィで精製すると（石油ベンジン中、０−４５％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃）淡黄色のオイルが得られ、静置すると固化した。これを順次、水、１：１の水／ＭｅＯＨ及びＭｅＯＨでトリチュレートし、沈殿物を濾過すると、白色の固形物が得られた。この固形物を水から再結晶化させると、表題の化合物（Ｉ３４）（０．９２ｇ、３０％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５７（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．０１（ｓ、１Ｈ）、６．８６（ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２５（ｓ、２Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、２．８１（ｔ、Ｊ＝１１．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．６４（ｔｔ、Ｊ＝１２．１、３．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．８３（ｄ、Ｊ＝１３．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．６９−１．５７（ｍ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．００分；ｍ／ｚ＝４８７．０［Ｍ＋Ｈ］⁺、４３１．０［Ｍ−^tＢｕｔｙｌ＋Ｈ］⁺、４８５．０［Ｍ−Ｈ］^-。

【0235】

（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（（３−カルバモイルフェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ３５）
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ３４）（０．０９８ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、３−エチニルベンズアミド（Ｉ３１）（０．０３８ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（９ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（０．０１０ｇ、０．０４ｍｍｏｌ）及びヨウ化銅（Ｉ）（０．００９ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の混合物（窒素で１０分間にわたって脱気済み）に、トリエチルアミン（０．０９０ｍＬ、０．６５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を窒素で脱気し、次に１２０℃まで２５分間にわたってマイクロ波照射下で加熱した。室温まで冷却するにあたって得られた混合物を一晩静置し、次に３−エチニルベンズアミド（Ｉ２６）（０．０４７ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を更に添加した。窒素での脱気後、反応物を１２０℃で２５分間にわたってマイクロ波照射下で加熱した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製すると（２０−７０％のＥｔＯＡｃ／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ３５）（０．０７３ｇ、６１％）が黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．６６（ｓ、１Ｈ）、８．３５（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、８．０４（ｄｄ、Ｊ＝１．４、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、８．０２（ｓ、１Ｈ）、７．９３（ｄｄｄ、Ｊ＝７．９、１．８、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．８０（ｍ、１Ｈ）、７．５３（ｍ、１Ｈ）、６．８８（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．７６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２７（ｍ、２Ｈ）、３．９１（ｓ、３Ｈ）、 ２．８１（ｍ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．６４（ｔｔ、Ｊ＝１２．２、３．４Ｈｚ、１Ｈ）、１．８４（ｍ、２Ｈ）、１．６５（ｍ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．５９分；ｍ／ｚ ４９６．１［（Ｍ−Ｂｏｃ）＋Ｈ］⁺、５４０．０［（Ｍ−ｔ−Ｂｕ）＋Ｈ］⁺。

【0236】

（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（３−カルバモイルフェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ３６）
ＤＭＦ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（（３−カルバモイルフェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ３５）（０．０７３ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）及び１０％のパラジウム／活性炭素（０．０４２ｇ）の混合物を、水素雰囲気下、２０時間にわたって撹拌した。得られた混合物を濾過し、濾液を減圧下で蒸発乾固させた。残留物をシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（２０−１００％のアセトン／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ３６）（０．０７０ｇ、９５％）が得られた。

【0237】

（ｊ）３−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）ベンズアミド（５）
ＴＨＦ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（３−カルバモイルフェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−メトキシフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ３６）（０．０７０ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）及びＴＦＡ（０．２００ｍＬ、２．６１ｍｍｏｌ）の混合物を、１６時間にわたって室温で撹拌した。この混合物を減圧下で濃縮し、トルエンで共沸させた。次に、残留物を、ＳＣＸカートリッジを使用して精製した（ＭｅＯＨ、０．５％のＮＨ₃／ＭｅＯＨ）。メタノール性アンモニア溶出液を濃縮し、次に、温かいアセトニトリルに溶解させ、室温まで冷却した。この冷却したアセトニトリル溶液を濾過し、濾液を濃縮し、温かいアセトニトリル（２ｍＬ）及び水（１ｍＬ）に溶解させ、次にフリーズドライすると、表題の化合物（５）（４９．４ｍｇ、８５％）が白色の固形物として得られた。この材料の一部を更に質量指向性（ｍａｓｓ−ｄｉｒｅｃｔｅｄ）自動分取ＨＰＬＣで精製すると、表題の化合物（５）（４．５ｍｇ）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ８．９０（ｍ、１Ｈ）、８．５７（ｓ、１Ｈ）、８．４１（ｓ、１Ｈ）、７．９３（ｓ、１Ｈ）、７．７７（ｓ、１Ｈ）、７．７１（ｍ、１Ｈ）、７．６２（ｄｄ、Ｊ＝７．５、７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．３４（ｍ、２Ｈ）、６．９４（ｄｄ、Ｊ＝７．３、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８２（ｄｄｄ、Ｊ＝７．９、３．４、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）、３．１２（ｍ、２Ｈ）、３．０５（ｍ、４Ｈ）、２．８９（ｍ、１Ｈ）、２．６８（ｍ、２Ｈ）、２．２０（ｍ、１Ｈ）、１．７８（ｍ、２Ｈ）、１．６４（ｍ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．８９分；ｍ／ｚ ５００．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0238】

実施例６：３−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）ベンズアミド（６）

【化50】

【0239】

無水メタノール（２．００ｍＬ）中の３−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）ベンズアミド（５）（０．０２１ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％のホルムアルデヒド水溶液（０．０１２ｍＬ、０．１６ｍｍｏｌ）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．０４４ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をＮ₂雰囲気下で添加した。次に、この混合物を１．５時間にわたって撹拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（１０ｍＬ）で洗浄した。水性物を更にＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）で洗浄し、次に相分離カートリッジを使用して乾燥させた。有機物を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィで精製した（０−３０％のＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ＋１％の２Ｍのエタノール性ＮＨ₃）。次に、生成物を最小限の温かいアセトニトリル及び水に溶解させ、フリーズドライすると、表題の化合物（６）（０．０１６ｇ、７４％）が白色の固形物としてられた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−アセトン）δ８．６２（ｓ、１Ｈ）、８．２７（ｄｄ、Ｊ＝８．３、４．１Ｈｚ、１Ｈ）、８．１５（ｓ、１Ｈ）、７．９０（ｓ、１Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｍ、３Ｈ）、６．９９（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．５５（ｓ、１Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、３．２０（ｍ、４Ｈ）、２．９０（ｍ、２Ｈ）、２．５７（ｍ、１Ｈ）、２．２２（ｓ、３Ｈ）、１．９８（ｔｄ、Ｊ＝１１．２、３．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．７８（ｍ、４Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９７分；ｍ／ｚ ５１４．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0240】

実施例７：３−（２−（２−（（４−（１−エチルピペリジン−４−イル）−２−メトキシフェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）ベンズアミド（７）

【化51】

【0241】

メタノール（２．００ｍＬ）中の３−（２−（２−（（２−メトキシ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）ベンズアミド（５）（０．０２１ｇ、０．０４ｍｍｏｌ）の溶液に、アセトアルデヒド（０．０１０ｍＬ、０．１８ｍｍｏｌ）、続いてナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．０４４ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をＮ₂雰囲気下で添加した。次に、この混合物を室温で５時間にわたって撹拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィで精製した（０−３０％のＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ＋１％の２Ｍのエタノール性ＮＨ₃）。生成物を更に質量指向性自動分取ＨＰＬＣで精製すると、表題の化合物（７）（３．５ｍｇ、１６％）が得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−アセトン）δ８．６２（ｓ、１Ｈ）、８．２４（ｍ、２Ｈ）、７．９１（ｓ、１Ｈ）、７．７８（ｄｄｄ、Ｊ＝７．５、１．４、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｍ、３Ｈ）、７．０１（ｄ、Ｊ＝１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．６０（ｍ、１Ｈ）、３．９７（ｓ、３Ｈ）、３．２１（ｍ、４Ｈ）、３．１２（ｍ、２Ｈ）、２．５５（ｍ、３Ｈ）、２．１６（ｍ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、４Ｈ）、１．１１（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９８分；ｍ／ｚ ５２８．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0242】

実施例８：２−（２−（２−（２−（（２−エチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（８）

【化52】

【0243】

（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ３７）
ビス（ピナコラト）ジボロン（０．５１１ｇ、２．０１ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（０．５９２ｇ、６．０４ｍｍｏｌ）、ｄｐｐｆ（５６ｍｇ、５ｍｏｌ％）及びＰｄＣｌ₂（ｄｐｐｆ）ジクロロメタン溶媒和物（８３ｍｇ、５ｍｏｌ％）をシュレンク管に入れ、窒素でパージした。ジオキサン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ１６）（１．００ｇ、３．０２）の溶液を添加し、この混合物を３回の真空／窒素サイクルで脱気し、次に窒素下で８０℃にした。１６時間後、この混合物を冷却し、水（１００ｍＬ）に添加した。得られた混合物をジクロロメタン（３ｘ５０ｍＬ）で抽出し、合わせたＤＣＭ抽出物をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。クロマトグラフィにより（４０ｇシリカカートリッジ、０−１００％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ３７）（３８３ｍｇ、収率６２％）が結晶性で白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ６．４５（ｓ、１Ｈ）、３．９４（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｔ、Ｊ＝５．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．２２（ｓ、２Ｈ）、１．４５（ｓ、９Ｈ）、１．２６（ｓ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．４８分；ｍ／ｚ ２５４．２［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺、２１０．２［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺。

【0244】

（ｂ）ベンジル（４−ブロモ−２−エチルフェニル）カルバメート（Ｉ３８）
４−ブロモ−２−エチルアニリン（５００ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）をトルエン（２５ｍＬ）に溶解させ、炭酸ナトリウム（３９７ｍｇ、３．７５ｍｍｏｌ）及びベンジルクロロホルメート（０．４２８ｍＬ、３．００ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を窒素下、室温で撹拌した。２０時間後、水（２５ｍＬ）を添加し、水相を分離し、エチルアセテート（２ｘ２５ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。クロマトグラフィにより（４０ｇシリカカートリッジ、０−１００％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ３８）（７０８ｍｇ、８５％）がピンク色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．７２（ｓ、１Ｈ）、７．４４−７．２８（ｍ、７Ｈ）、６．４３（ｓ、１Ｈ）、５．２０（ｓ、２Ｈ）、２．５４（ｑ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．２１（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．４６分；ｍ／ｚ ２５８．０［Ｍ−ＰｈＣＨ₂Ｏ＋ＣＨ₃ＯＨ］⁺。

【0245】

（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−エチルフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ３９）
炭酸カリウム（２１５ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ３７）（１６０ｍｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）、ベンジル（４−ブロモ−２−エチルフェニル）カルバメート（Ｉ３４）（１８２ｍｇ、０．５４３ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ₂（ｄｐｐｆ）−ＤＣＭ溶媒和物（２２ｍｇ、５ｍｏｌ％）及びＤＭＦ（５ｍＬ）をシュレンク管に入れ、３回の真空／窒素サイクルで脱気した。この混合物を窒素下で８０℃にし、次に１８時間後、冷却し、水（１００ｍＬ）に注いだ。ＤＣＭ（７５ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）を添加し、水相を更なるＤＣＭ（２ｘ７５ｍＬ）で洗浄し、合わせたＤＣＭ抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ、蒸発させた。クロマトグラフィにより（４０ｇシリカカートリッジ、０−８０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ３９）（１２９ｍｇ、収率５７％）が無色のオイルとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．７７（ｓ、１Ｈ）、７．４５−７．３１（ｍ、５Ｈ）、７．２２（ｄｄ、Ｊ＝８．５、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．１８（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．４８（ｓ、１Ｈ）、５．９９（ｓ、１Ｈ）、５．２１（ｓ、２Ｈ）、４．０６（ｄ、Ｊ＝２．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６３（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．５８（ｑ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．５０（ｓ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）、１．２２（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．６７分；ｍ／ｚ ３３７．１［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺、３８１．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺。

【0246】

（ｄ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−エチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４０）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−エチルフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ３９）（０．５００ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、エタノール（２ｍＬ）中の１０％のＰｄ／Ｃ（０．２５ｇ）のスラリーを添加した。この混合物を水素下で１８時間にわたって撹拌し、次にセライトで濾過し、このセライトをエタノール（３０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を蒸発させ、クロマトグラフィにより（１２ｇシリカカートリッジ、０−８０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４０）（０．２１２ｇ、収率６１％）がピンク色のシロップとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ６．９０（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄｄ、Ｊ＝８．０、２．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．６３（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．２１（ｓ、２Ｈ）、３．５５（ｓ、２Ｈ）、２．７８（ｔ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．５９−２．４６（ｍ、３Ｈ）、１．７８（ｄ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ、２Ｈ）、１．６６−１．５３（ｍ、水とオーバーラップ）、１．４８（ｓ、９Ｈ）、１．２５（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．３３分；ｍ／ｚ ２４９．２［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺、２０５．２［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺。

【0247】

（ｅ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−エチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４１）
１：１のＤＣＥ：ｔ−ＢｕＯＨ（５ｍＬ）中の２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（１６６ｍｇ、０．７６６ｍｍｏｌ）の溶液を０℃、窒素下で撹拌した。エーテル中の１．０Ｍの塩化亜鉛（ＩＩ）（０．７７ｍＬ、０．７７ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１時間にわたって撹拌した。１：１のＤＣＥ：ｔ−ＢｕＯＨ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−エチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４０）（２１２ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を滴加し、３０分後、１：１のＤＣＥ：ｔ−ＢｕＯＨ（５ｍＬ）中のトリエチルアミン（１４６μＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物をゆっくりと室温にした。１８時間後、この混合物を濃縮し、クロマトグラフィにより（１２ｇシリカカートリッジ、０−５０％のエチルアセテート／シクロヘキサン）、表題の化合物（Ｉ４１）（２８３ｍｇ、収率８４％）が淡いピンク色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５１（ｄ、Ｊ＝０．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．１５−７．０７（ｍ、３Ｈ）、４．２５（ｓ、２Ｈ）、２．８０（ｔ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、２．６９−２．５９（ｍ、３Ｈ）、１．８３（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、２Ｈ）、１．６９−１．５９（ｍ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）、１．２３（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．９４分；ｍ／ｚ ４２９．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺、３８５．１［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ４８３．１［Ｍ−Ｈ］^-。

【0248】

（ｆ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−エチル−４−（（４−（（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４２）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−エチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４１）（２８３ｍｇ、０．５８４ｍｍｏｌ）、メチル２−（２−エチニルフェニル）アセテート（Ｉ４）（１２２ｍｇ、０．７００ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（１７ｍｇ、１５ｍｏｌ％）、トリフェニルホスフィン（２３ｍｇ、１５ｍｏｌ％）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（４１ｍｇ、１０ｍｏｌ％）、トリエチルアミン（０．３３ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（３ｍＬ）の混合物を窒素で脱気し、次にマイクロ波照射下で加熱した（１２０℃／１５分）。冷却した混合物を水（３０ｍＬ）に注ぎ、エチルアセテート（３ｘ２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（２ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。クロマトグラフィにより（１２ｇシリカカートリッジ、０−８０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４２）（３１１ｍｇ、収率８６％）が褐色のオイルとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５７（ｓ、１Ｈ）、７．７３−７．６５（ｍ、２Ｈ）、７．４６−７．２８（ｍ）、７．１５−７．０８（ｍ）、４．２５（ｓ、２Ｈ）、３．９５（ｓ、Ｊ＝９．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、２．８０（ｔ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、２．７０−２．５９（ｍ、３Ｈ）、１．８４（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、２Ｈ）、１．６５（ｔｄ、Ｊ＝１２．８、４．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）、１．２５（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ：保持時間７．０１分；ｍ／ｚ ６２３．１［Ｍ＋Ｈ］⁺、５６７．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺、５２３．１［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ６２１．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0249】

（ｇ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−エチル−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４３）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−エチル−４−（（４−（（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４２）（３１１ｍｇ、０．４９９ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、エタノール（２ｍＬ）中のＰｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）のスラリーを添加した。この混合物を水素下で１８時間にわたって撹拌し、セライトで濾過し、このセライトをエタノール（２０ｍＬ）で洗浄し、濾液を濃縮した。混合物をエタノール（２０ｍＬ）に溶解させ、エタノール（２ｍＬ）中のＰｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）のスラリー、続いてトリエチルアミン（２０μＬ）を添加した。この混合物を水素下、１８時間にわたって撹拌し、セライトで濾過し、このセライトをエタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、合わせた濾液を蒸発させた。残留物をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＰｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）のスラリーを添加し、この混合物を水素下で撹拌した。１６時間後、混合物をセライトで濾過し、このセライトをエチルアセテート（１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を蒸発させると、淡緑色のオイルが得られた。クロマトグラフィにより（１２ｇシリカカートリッジ、０−６０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４３）（１７７．１ｍｇ、収率５７％）が淡黄色のオイルとして得られた。¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．４９（ｄ、Ｊ＝０．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２５−７．１６（ｍ、４Ｈ）、７．１２−７．０７（ｍ、２Ｈ）、７．０６（ｓ、１Ｈ）、４．２５（ｂｒ ｓ、２Ｈ）、３．７２（ｓ、２Ｈ）、３．６７（ｓ、３Ｈ）、３．１４−３．０１（ｍ、４Ｈ）、２．８１（ｔ、Ｊ＝１２．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．７２−２．５９（ｍ、３Ｈ）、１．８４（ｄ、Ｊ＝１３．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．６９−１．５６（ｍ、溶媒中の水とオーバーラップ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）、１．２６（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ：保持時間７．１６分；ｍ／ｚ ６２７．２［Ｍ＋Ｈ］⁺；５７１．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ６２５．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0250】

（ｈ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−エチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４４）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−エチル−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４３）（１７７ｍｇ、０．２８２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させ、水（２ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（５９．０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この混合物を１８時間にわたって撹拌し、次に濃縮した。残留物を飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）に懸濁させ、エチルアセテート（３ｘ２０ｍＬ）で抽出した。合わせたエチルアセテート相をブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。残留物をＴＨＦ（１０ｍＬ）及びＤＭＦ（１ｍＬ）に３０℃で溶解させ、ＨＯＢｔ（５０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（６５ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．２４６ｍＬ、１．４１ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後、炭酸アンモニウム（１３５ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１８時間にわたって３０℃で撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を飽和炭酸水素ナトリウム（２５ｍＬ）で希釈し、エチルアセテート（３ｘ２５ｍＬ）で抽出した。合わせたエチルアセテート相をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、蒸発させた。クロマトグラフィにより（１２ｇシリカカートリッジ、０−１００％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４４）（１２２ｍｇ、２ステップで７１％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．４９（ｓ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２８−７．２２（ｍ、ＣＨＣｌ₃とオーバーラップ）、７．２２−７．１５（ｍ、１Ｈ）、７．１３−７．０５（ｍ、３Ｈ）、５．３８（ｓ、１Ｈ）、５．１５（ｓ、１Ｈ）、４．２５（ｓ、２Ｈ）、３．６４（ｓ、２Ｈ）、３．１１−２．９９（ｍ、４Ｈ）、２．８０（ｔ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、２．６９−２．６０（ｍ、３Ｈ）、１．８４（ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、２Ｈ）、１．６９−１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）、１．２３（ｔ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ：保持時間６．６５分；ｍ／ｚ ６１２．２［Ｍ＋Ｈ］⁺、５５６．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ６１０．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0251】

（ｉ）２−（２−（２−（２−（（２−エチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（８）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−エチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４４）（１２０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解させ、ＴＦＡ（２ｍＬ）を添加し、この混合物を１６時間にわたって室温で撹拌した。混合物を濃縮し、残留物を１０％の水酸化ナトリウム（１０ｍＬ）及びブライン（１０ｍＬ）に懸濁させた。この混合物をエチルアセテート（４ｘ２０ｍＬ）で抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム）、蒸発させ、残留物をエーテルについて蒸発させると、表題の化合物（８）（９３ｍｇ、収率９３％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ９．４７（ｓ、１Ｈ）、８．４９（ｓ、１Ｈ）、７．３７（ｓ、１Ｈ）、７．２６−７．１８（ｍ、２Ｈ）、７．１７−７．０９（ｍ、４Ｈ）、７．０５（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．８９（ｓ、１Ｈ）、３．４４（ｓ、２Ｈ）、３．０９−２．８８（ｍ、６Ｈ）、２．６２−２．５４（ｍ、ＤＭＳＯとオーバーラップ）、１．７０（ｄ、Ｊ＝１１．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．５２（ｑｄ、Ｊ＝１２．３、３．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．１０（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：４．９６分；ｍ／ｚ ５１２．２［Ｍ＋Ｈ］⁺、５３４．２［Ｍ＋Ｎａ］⁺；ｍ／ｚ ５１０．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0252】

実施例９：２−（２−（２−（２−（（２−エチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（９）

【化53】

【0253】

２−（２−（２−（２−（（２−エチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（８）（８４ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）をメタノール（８ｍＬ）に溶解させ、３７％のホルムアルデヒド溶液（５３μＬ、０．６６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１０分間にわたって室温で撹拌した。ナトリウムトリス（アセトキシ）ボロヒドリド（１７４ｍｇ、０．８２１ｍｍｏｌ）を添加し、２時間後、この混合物を濃縮した。残留物を１０％の水酸化ナトリウム（１５ｍＬ）及びブライン（１５ｍＬ）で希釈し、混合物をエチルアセテート（４ｘ２５ｍＬ）で抽出した。合わせたエチルアセテート相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させ、残留物をＤＣＭから蒸発させると、表題の化合物（９）（７２ｍｇ、収率８４％）が、白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ９．４６（ｓ、１Ｈ）、８．４９（ｓ、１Ｈ）、７．３６（ｓ、１Ｈ）、７．２１（ｔ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．１８−７．１０（ｍ、４Ｈ）、７．０６（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８８（ｓ、１Ｈ）、３．４４（ｓ、２Ｈ）、３．０７−２．９０（ｍ、４Ｈ）、２．８６（ｄ、Ｊ＝１１．３Ｈｚ、２Ｈ）、２．５７（ｑ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．４８−２．３７（ｍ、１Ｈ）、２．１９（ｓ、３Ｈ）、２．０２−１．８９（ｍ、２Ｈ）、１．７９−１．５９（ｍ、４Ｈ）、１．０９（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．０４分；ｍ／ｚ ５２６．２［Ｍ＋Ｈ］⁺；ｍ／ｚ ５２４．２［Ｍ−Ｈ］^-。

【0254】

実施例１０：２−（２−（２−（２−（（４−（ピペリジン−４−イル）−２−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１０）

【化54】

【0255】

（ａ）２−（２−エチニルフェニル）アセトアミド（Ｉ４５）
厚肉シュレンク管内の、０℃のメタノール（２ｍＬ）中のメチル２−（２−エチニルフェニル）アセテート（Ｉ４）（０．２００ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、窒化マグネシウム（０．２９０ｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を１回で添加した。この管を速やかに封止し、水浴中、１時間かけて室温まで温まるにまかせ、次に８０℃で２２時間にわたって加熱した。室温まで冷却した後、得られた混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（８０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で抽出し、２ＭのＨＣｌ水溶液で中和し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ８０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、真空下で濃縮すると、黄色の固形物が得られた。シリカゲルクロマトグラフィにより（４０ｇ Ｓｉカートリッジ、ジクロロメタン中、０−５０％のＥｔＯＡｃ）、表題の化合物（Ｉ４５）（０．０９３ｇ、収率５１％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ７．４４（ｄｄ、Ｊ＝７．６、１．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０−７．２８（ｍ、３Ｈ）、７．２４（ｔｄ、Ｊ＝７．４、１．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｓ、１Ｈ）、４．３２（ｓ、１Ｈ）、３．５９（ｓ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．６８分；ｍ／ｚ １６０．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0256】

（ｂ）ベンジル（４−ブロモ−２−（トリフルオロメトキシ）フェニル）カルバメート（Ｉ４６）
４−ブロモ−２−（トリフルオロメトキシ）アニリン（１．０ｇ、３．９ｍｍｏｌ）をドライトルエン（２５ｍＬ）に溶解させ、炭酸ナトリウム（０．６２１ｇ、５．８６ｍｍｏｌ）及びベンジルクロロホルメート（０．６６９ｍＬ、４．６９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を窒素下、室温で２２時間にわたって撹拌した。次に、この反応物を８０℃まで加熱し、この温度で１７時間にわたって撹拌し、次に更に還流するまで加熱し、２２時間にわたって撹拌した。水（１００ｍＬ）を冷却した混合物に添加し、水相を分離し、エチルアセテート（２ｘ１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機抽出物を０．５Ｍのクエン酸水溶液（７０ｍＬ）、水（７０ｍＬ）、ブライン（７０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、真空下で濃縮すると、ピンク色の固形物が得られた。この未精製材料をシリカゲルクロマトグラフィで精製すると（４０ｇ Ｓｉカートリッジ、石油ベンジン中、０−２０％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４６）（１．１５３ｇ、収率７６％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．１５（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．４４−７．３６（ｍ、７Ｈ）、６．９５（ｓ、１Ｈ）、５．２２（ｓ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．６７分；ｍ／ｚ ３８９．９［Ｍ−Ｈ］^-。

【0257】

（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４７）
２ＭのＮａ₂ＣＯ₃水溶液（１．８５ｍＬ、３．７０ｍｍｏｌ）を、ドライ１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ３７）（純度約５０％、０．９１５ｇ、１．４８０ｍｍｏｌ）、ベンジル（４−ブロモ−２−（トリフルオロメトキシ）フェニル）カルバメート（Ｉ４６）（０．６３５ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）、ＬｉＣｌ（０．１２５ｇ、２．９６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₂Ｃｌ₂（０．０５２ｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）及びＴＢＡＢ（０．０４８ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。この反応混合物を８０℃で１７時間にわたって撹拌し、次にセライトで濾過し、これをＥｔＯＡｃ及びＭｅＯＨで洗浄し、濾液を真空下で濃縮すると、淡黄色のゴムが得られた。この未精製材料をシリカゲルクロマトグラフィで精製すると（４０ｇ Ｓｉカートリッジ、石油ベンジン中、０−１５％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃）、淡黄色のゴムが得られた（０．５１５ｇ）。ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）中の中間体の溶液に、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）中の１０％のＰｄ／Ｃ（８０ｍｇ）を添加した。次に、この反応物を室温で１８時間にわたって水素雰囲気下で撹拌し、次にセライトのパッドで濾過し、このパッドをＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で洗浄した。溶媒を真空下で除去すると未精製生成物が得られ、これをシリカゲルクロマトグラフィで精製すると（４０ｇ Ｓｉカートリッジ、石油ベンジン中、０−３０％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４７）（純度８０％、０．２２０ｇ、２ステップで収率３３％）が淡黄色のゴムとして得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ６．９８−６．９５（ｍ、１Ｈ）、６．９２（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．３０−４．１３（ｍ、２Ｈ）、３．７７（ｓ、２Ｈ）、２．７７（ｔ、Ｊ＝１２．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．５４（ｔｔ、Ｊ＝１２．１、３．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．７８（ｄ、Ｊ＝１３．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．５７−１．５０（ｍ、２Ｈ、水シグナルにより不明瞭になった）、１．４８（ｓ、９Ｈ）。

【0258】

（ｄ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４８）
２，４−ジクロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン（０．１１０ｇ、０．５０６ｍｍｏｌ）を１：１のｔ−ＢｕＯＨ：１，２−ジクロロエタン混合物（１０ｍＬ）中、０℃で撹拌した。ジエチルエーテル中の１．０ＭのＺｎＣｌ₂溶液（０．５７８ｍＬ、０．５７８ｍｍｏｌ）を慎重に添加し、添加後、反応物を０℃で３０分間にわたって撹拌し続けた。１：１のｔ−ＢｕＯＨ：１，２−ジクロロエタン（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４７）（不純、純度約８０％、０．２１７ｇ、０．４８２ｍｍｏｌ）の溶液を０℃で、続いて１：１のｔ−ＢｕＯＨ：１，２−ジクロロエタン（５ｍＬ）中のＮＥｔ₃（０．０８１ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液を滴加し、この反応物が室温まで温まるにまかせ、１８時間にわたって撹拌し、次に６０℃で２４時間にわたって撹拌した。有機溶媒を真空下で蒸発させ、未精製ゴムをシリカゲルクロマトグラフィで精製すると（４０ｇ Ｓｉカートリッジ、石油ベンジン中、０−４０％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４８）（０．０８５ｇ、収率３３％）が淡黄色で油性の固形物が得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１０．３８（ｓ、１Ｈ）、８．７２（ｓ、１Ｈ）、７．５２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．３３−７．２９（ｍ、２Ｈ）、４．１３−４．０４（ｍ、２Ｈ）、２．８８−２．７２（ｍ、３Ｈ）、１．７９（ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．５６−１．４４（ｍ、２Ｈ）、１．４２（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．０２分；ｍ／ｚ ５３９．０、５４１．０［Ｍ−Ｈ］^-。

【0259】

（ｅ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４９）
ドライＤＭＦ（４ｍＬ）中の２−（２−エチニルフェニル）アセトアミド（Ｉ４１）（０．０２９ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４８）（０．０８２ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の窒素脱気溶液に、トリエチルアミン（０．０８５ｍＬ、０．６１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（６．０ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）、トランス−ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．０１１ｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）及びＣｕ（Ｉ）Ｉ（４．０ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物をマイクロ波照射下、１２０℃で２０分間にわたって加熱し、真空下で濃縮乾固させ、シリカゲルクロマトグラフィで精製すると（１２ｇ Ｓｉカートリッジ、石油ベンジン中、０−１００％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ４９）（０．０７３ｇ、収率７３％）が淡黄色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１０．１１（ｓ、１Ｈ）、８．７４（ｓ、１Ｈ）、７．５８（ｄｄ、Ｊ＝７．７、６．２Ｈｚ、２Ｈ）、７．５３−７．４７（ｍ、１Ｈ）、７．４２−７．２７（ｍ、５Ｈ）、６．９９（ｓ、１Ｈ）、４．１４−４．０３（ｍ、２Ｈ）、３．６７（ｓ、２Ｈ）、２．８７−２．７２（ｍ、３Ｈ）、１．７９（ｄ、Ｊ＝１２．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．５０（ｑｄ、Ｊ＝１２．５、４．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．４２（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．６３分；ｍ／ｚ ５６４．０［Ｍ−Ｂｏｃ＋２Ｈ］⁺。

【0260】

（ｆ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ５０）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェニル）エチニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ４９）（７２．０ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）をドライＤＭＦ（７ｍＬ）に窒素雰囲気下で溶解させ、ＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）中の１０％のＰｄ（ＯＨ）₂／Ｃ（０．０５０ｇ）のスラリーを添加した。次に、この混合物を力強く水素下で２４時間にわたって撹拌した。完了後、反応物をセライトのパッドで濾過し、このパッドをＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）で洗浄した。合わせた濾液を真空下で濃縮すると、淡黄色のオイルが得られた。この未精製生成物をシリカゲルクロマトグラフィで精製すると（１２ｇ Ｓｉカートリッジ、石油ベンジン中、０−１００％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ５０）（０．０６４ｇ、収率８８％）がオフホワイトの固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ９．８０（ｓ、１Ｈ）、８．６０（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．３２−７．２６（ｍ、２Ｈ）、７．２１（ｄｔ、Ｊ＝６．７、３．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．１８−７．０８（ｍ、３Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、４．０９（ｄ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、２Ｈ）、３．４５（ｓ、２Ｈ）、３．０９−２．９４（ｍ、４Ｈ）、２．８８−２．７２（ｍ、３Ｈ）１．７９（ｄ、Ｊ＝１２．３Ｈｚ、２Ｈ）、１．５９−１．３８（ｍ、１１Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．７５分、ｍ／ｚ ６６８．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0261】

（ｇ）２−（２−（２−（２−（（４−（ピペリジン−４−イル）−２−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１０）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ５０）（０．０６２ｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）を、ドライＤＣＭ（６ｍＬ）に窒素雰囲気下で溶解させた。トリフルオロ酢酸（０．１４２ｍＬ、１．８６ｍｍｏｌ）をこの溶液に添加し、反応物を室温で２０時間にわたって撹拌した。揮発性物質を真空下で除去し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）及び２ＭのＮａＯＨ水溶液（５０ｍＬ）を残留物に添加し、層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ７０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機物を水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、真空下で濃縮すると、オフホワイトの固形物が得られた。この未精製材料をシリカゲルクロマトグラフィで精製すると（１２ｇ Ｓｉカートリッジ、石油ベンジン中、０−１００％のＥｔＯＡｃ、４０−６０℃、次にＥｔＯＡｃ中の０−１００％のメタノール、次に、メタノール中の１％のアンモニア）、表題の化合物（１０）（０．０４２ｇ、収率８０％）が白色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ９．７８（ｓ、１Ｈ）、８．５９（ｓ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．２９−７．１７（ｍ、３Ｈ）、７．１８−７．０６（ｍ、３Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、３．４５（ｓ、２Ｈ）、３．０９−２．９２（ｍ、６Ｈ）、２．７１−２．５３（ｍ、３Ｈ）、１．７１（ｄ、Ｊ＝１１．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．４９（ｑｄ、Ｊ＝１２．１、３．７Ｈｚ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．０７分；ｍ／ｚ ５６８．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0262】

実施例１１：２−（２−（２−（２−（（４−（１−メチルピペリジン−４−イル）−２−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１１）

【化55】

【0263】

無水メタノール（４ｍＬ）中の２−（２−（２−（２−（（４−（ピペリジン−４−イル）−２−（トリフルオロメトキシ）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１０）（０．０３９ｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）の懸濁液に、３７％のホルムアルデヒド水溶液（０．０２０ｍＬ、０．２８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で添加し、続いてナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．０７３ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を室温で３時間にわたって撹拌した。次に、揮発性物質を真空下で除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（３０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２ｘ３０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、真空下で濃縮するとゴムが得られ、これをＤＣＭ（約１０ｍＬ）及びメタノール（約１ｍＬ）に溶解させ、真空下で濃縮した。この工程をＤＣＭだけで２回繰り返した。次に、得られたゴムをジエチルエーテル（５ｍＬ）に懸濁させ、溶媒を真空下で除去した。この手順を繰り返すと、表題の化合物（１１）（０．０３７ｇ、収率９３％）が白色のふわふわした固形物として得られた：¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ９．７９（ｓ、１Ｈ）、８．５９（ｓ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．２８（ｄｄ、Ｊ＝８．４、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．２６−７．２３（ｍ、１Ｈ）、７．２３−７．１９（ｍ、１Ｈ）、７．１８−７．０８（ｍ、３Ｈ）、６．８９（ｓ、１Ｈ）、３．４５（ｓ、２Ｈ）、３．０８−２．９３（ｍ、４Ｈ）、２．９０−２．８３（ｍ、２Ｈ）、２．５７−２．５２（ｍ、１Ｈ、残留溶媒シグナルにより不明瞭になった）、２．１９（ｓ、３Ｈ）、１．９６（ｔｄ、Ｊ＝１１．５、２．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．８０−１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．６５（ｄｄｄ、Ｊ＝２４．６、１２．４、３．７Ｈｚ、２Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．１１分；ｍ／ｚ ５８２．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0264】

実施例１２：２−（２−（２−（２−（（２−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１２）

【化56】

【0265】

（ａ）ベンジル（４−ブロモ−２−メチルフェニル）カルバメート（Ｉ５１）
２−ブロモ−４−メチルアニリン（５．００ｇ、２６．９ｍｍｏｌ）、ベンジルクロロホルメート（５．７５ｍＬ、４０．３ｍｍｏｌ）、Ｎａ₂ＣＯ₃（４．２７ｇ、４０．３ｍｍｏｌ）及びトルエン（１００ｍＬ）を窒素下、室温で２０時間にわたって撹拌した。得られた混合物をエチルアセテートで希釈し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、揮発性物質を減圧下での蒸発により除去した。石油ベンゼン、４０−６０℃を添加し、得られた沈殿物を濾過により回収すると、表題の化合物（Ｉ５１）が無色の針状結晶体として得られた（８．５０ｇ、９９％）；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．８０−７．６７（ｍ、１Ｈ）、７．４４−７．２８（ｍ、６Ｈ）、６．４０（ｓ、１Ｈ）、５．２０（ｓ、２Ｈ）、２．２１（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．３６分；ｍ／ｚ ３２０［Ｍ＋１］⁺。

【0266】

（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ５２）
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中のベンジル（４−ブロモ−２−メチルフェニル）カルバメート（Ｉ５１）（１．００ｇ、３．１２ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（３７）（１．１６ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ₂（ｄｐｐｆ）−ＤＣＭ複合体（３１０ｍｇ、０．３７４ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１．２９ｇ、９．３６ｍｍｏｌ）の懸濁液を窒素下、８０℃で１６時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物をシリカゲル上に吸着させた。シリカゲル上でのクロマトグラフィにより（０−３０％のエチルアセテート／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ５２）（９４９ｍｇ、７２％）が黄色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．８３−７．７０（ｍ、１Ｈ）、７．４１−７．３４（ｍ、５Ｈ）、７．２１（ｄｄ、Ｊ＝８．５、１．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．５６（ｓ、１Ｈ）、５．９７（ｓ、１Ｈ）、５．２０（ｓ、２Ｈ）、４．０５（ｄ、Ｊ＝２．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．６１（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．４８（ｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ）、１．５０（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、９Ｈ）。

【0267】

（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ５３）
ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ５２）（７９８ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）及び１０％のＰｄ／Ｃ（２５０ｍｇ）の懸濁液を水素下（１ａｔｍ）、１６時間にわたって室温で撹拌した。得られた混合物をセライトで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄し、次に揮発性物質を減圧下での蒸発により除去すると、表題の化合物（Ｉ５３）（５５０ｍｇ、７６％）が紫色／褐色の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ６．９５（ｄ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、３Ｈ）、４．２２（ｓ、２Ｈ）、２．７７（ｓ、２Ｈ）、２．５４（ｓ、１Ｈ）、２．２９（ｓ、３Ｈ）、１．７７（ｄ、Ｊ＝１２．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．５６（ｄｄ、Ｊ＝１２．６、３．７Ｈｚ、９Ｈ）、１．４７（ｓ、９Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ保持時間：５．０９分；ｍ／ｚ ２３５．１［Ｍ−ｔＢｕ＋２］⁺、１９１．２［Ｍ−Ｂｏｃ＋２］⁺。

【0268】

（ｄ）メチル２−（２−（２−（２−（（２−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ５４）
２，２，２−ＴＦＥ（３ｍＬ）中のメチル２−（２−（２−（２−（メチルスルホニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ１５）（４５０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−アミノ−３−メチルフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ５３）（３９０ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）及びＴＦＡ（０．２５ｍＬ）の溶液を、１２０℃、マイクロ波照射下で３０分間にわたって加熱した。得られた混合物をシリカゲル上に吸着させ、クロマトグラフィに供すると（０−５０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）、表題の化合物（Ｉ５４）（４７８ｍｇ、８３％）が粘性の液体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ９．１４（ｂｓ、１Ｈ）、８．７６（ｂｓ、１Ｈ）、８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．５８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１（ｄｄｔ、Ｊ＝１０．７、７．４、４．３Ｈｚ、４Ｈ）、７．１５−７．０６（ｍ、１Ｈ）、３．６５（ｓ、２Ｈ）、３．６０（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．４９（ｓ、３Ｈ）、３．１５−３．０２（ｍ、６Ｈ）、２．８７−２．７１（ｍ、１Ｈ）、２．３２（ｓ、３Ｈ）、２．０７（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、４Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．２４分；ｍ／ｚ ５１３．２［Ｍ＋１］⁺。

【0269】

（ｅ）メチル２−（２−（２−（２−（（２−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ５５）
メチル２−（２−（２−（２−（（２−メチル−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（５４）（１．１０ｇ、２．１５ｍｍｏｌ）をドライＭｅＯＨ（２０ｍＬ）に溶解させ、ホルムアルデヒド溶液（３７％の水性；３４８μＬ、４．２９ｍｍｏｌ）を添加した。ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（２．２７ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）を窒素下で添加し、得られた混合物を室温で１６時間にわたって撹拌した。エチルアセテート（５０ｍＬ）を添加し、この混合物を１０％のＮａＨＣＯ₃溶液（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、次に揮発性物質を減圧下での蒸発により除去した。クロマトグラフィにより（ＳｉＯ₂、０−５０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）、表題の化合物（Ｉ５５）（４８０ｍｇ、４２％）がクリーム色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５４（ｓ、１Ｈ）、７．８３−７．７３（ｍ、１Ｈ）、７．３５（ｓ、１Ｈ）、７．３２−７．１９（ｍ、３Ｈ）、７．１９−７．０９（ｍ、２Ｈ）、７．０７−６．９７（ｍ、１Ｈ）、３．７６（ｓ、２Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、３．２３（ｄ、Ｊ＝１１．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．１７−３．０４（ｍ、４Ｈ）、２．６１−２．５１（ｍ、１Ｈ）、２．５０（ｓ、３Ｈ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）、２．３３−２．２４（ｍ、２Ｈ）、２．０２−１．８４（ｍ、４Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間５．２５分；ｍ／ｚ ５２７．２［Ｍ＋１］⁺。

【0270】

（ｆ）２−（２−（２−（２−（（２−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１２）
ＴＨＦ（２０ｍＬ）、水（４ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２ｍＬ）の混合物中のメチル２−（２−（２−（２−（（２−メチル−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ５５）（４７６ｍｇ、０．９０６ｍｍｏｌ）及びＬｉＯＨ．Ｈ₂Ｏ（１１３ｍｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を、室温で２４時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させると淡黄色の固形物が得られ、これをドライＤＭＦ（１０ｍＬ）及びドライＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解させた。ＨＯＢＴ（１７１ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１９６ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）、炭酸アンモニウム（４５８ｍｇ、４．８７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（８２９μＬ、４．８７ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１６時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物をエチルアセテートに溶解させた。得られた溶液を１０％のＮａＨＣＯ₃で洗浄し、層を分離し、有機層を乾燥させた（ＭｇＳＯ₄）。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物をクロマトグラフィに供すると（ＳｉＯ₂、０−１００％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）、表題の化合物（１２）（３５８ｍｇ、５２％）がクリーム色の固形物として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５１（ｓ、１Ｈ）、７．５８（ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、１Ｈ）、７．３４（ｓ、１Ｈ）、７．２８−７．１９（ｍ、４Ｈ）、７．１４−７．０９（ｍ、２Ｈ）、５．６６（ｓ、１Ｈ）、５．４９（ｓ、１Ｈ）、３．６５（ｓ、２Ｈ）、３．１３−３．０４（ｍ、４Ｈ）、３．０４−２．９７（ｍ、２Ｈ）、２．５４−２．４１（ｍ、１Ｈ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）、２．３０（ｓ、３Ｈ）、２．０８（ｔｄ、Ｊ＝１１．３、３．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．８８−１．８０（ｍ、４Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９１分；ｍ／ｚ ５１２．２［Ｍ＋１］⁺、５１０．２［Ｍ−１］^-。

【0271】

実施例１３：２−（２−（２−（２−（（２−フルオロ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１３）

【化57】

【0272】

（ａ）ｔｅｒｔ−ブチル（２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）カルバメート（Ｉ５６）
トルエン（１５ｍＬ）中の２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アニリン（１．００ｇ、４．２２ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ₂Ｏ（１．１４ｇ、５．２１ｍｍｏｌ）の混合物を還流下、１６時間にわたって加熱した。Ｂｏｃ₂Ｏ（１．０４ｇ、４．８ｍｍｏｌ）を更に添加し、この混合物を更に２０時間にわたって加熱し、次にＢｏｃ₂Ｏ（１．４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を更に添加した。還流下での更に２４時間にわたる加熱後、触媒量のＤＭＡＰを添加し、この混合物を還流下、３０分間にわたって加熱してから減圧下で濃縮すると、表題の化合物（５６）（１．４２ｇ、９９％）が得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．５２（ｍ、２Ｈ）、７．１４（ｄｄ、Ｊ＝７．５、７．５Ｈｚ、１Ｈ）、１．４０（ｓ、１２Ｈ）、１．３５（ｓ、９Ｈ）。

【0273】

（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フルオロフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ５７）
Ｎ₂雰囲気下にあるｔｅｒｔ−ブチル４−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ１６）（０．５０４ｇ、１．５２ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル（２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）カルバメート（Ｉ６２）（０．４９６ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）及びＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（０．０５５ｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）の混合物にジオキサン（１５ｍＬ）を添加し、この混合物にＮ₂を５分間にわたってバブリングしてから３．０Ｍの炭酸ナトリウム水溶液（１．５ｍＬ、４．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応物を還流下、６時間にわたって加熱し、次に減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−２５％のＥｔＯＡｃ／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ５７）（０．４０９ｇ、７１％）が得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．１２（ｍ、３Ｈ）、６．０９（ｓ、１Ｈ）、４．０８（ｍ、Ｊ＝２．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．６３（ｄｄ、Ｊ＝５．６、５．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．４９（ｍ、２Ｈ）、１．４２（ｓ、１８Ｈ）。

【0274】

（ｃ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フルオロフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ５４）
ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フルオロフェニル）−５，６−ジヒドロピリジン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（Ｉ５３）（０．４０９ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）及び１０％のＰｄ／Ｃ（０．０４３ｇ）の混合物を、１６時間にわたって室温、Ｈ₂雰囲気下で撹拌した。この混合物をセライトで濾過し、濾液を減圧下で濃縮すると、表題の化合物（Ｉ５４）（０．３７６ｇ、９２％）が白色の発泡体として得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ７．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．１、８．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．９５（ｍ、２Ｈ）、４．２５（ｍ、２Ｈ）、２．７９（ｄｄ、Ｊ＝１２．０、１２．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．６５（ｍ、１Ｈ）、１．８２（ｍ、２Ｈ）、１．４３（ｓ、１８Ｈ）。

【0275】

（ｄ）メチル２−（２−（２−（２−（（２−フルオロ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ５８）
２，２，２−トリフルオロエタノール（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フルオロフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ５７）（０．３７６ｇ、０．９５４ｍｍｏｌ）及びメチル２−（２−（２−（２−（メチルスルホニル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ１５）（０．２６８ｇ、０．６６７ｍｍｏｌ）の混合物に、ＴＦＡ（０．８ｍＬ）を添加した。得られた混合物をマイクロ波照射下、１００℃で２０分間、次に１５分間にわたって加熱し、次に減圧下で濃縮すると、表題の化合物の未精製のサンプル（Ｉ５８）（０．３４４ｇ）が得られ、これを精製することなく使用した。

【0276】

（ｅ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（３−フルオロ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ６０）
ＤＣＭ（１５ｍＬ）中の未精製メチル２−（２−（２−（２−（（２−フルオロ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセテート（Ｉ５９）（０．３４４ｇ）、Ｂｏｃ₂Ｏ（０．２１４ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）及び触媒量のＤＭＡＰの混合物を、２０時間にわたって撹拌した。次に、トリエチルアミン（０．１０ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を２０時間にわたって４０℃で撹拌した。トリエチルアミン（１．５０ｍＬ、１０．８ｍｍｏｌ）及びＢｏｃ₂Ｏ（０．２６０ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を更に添加し、撹拌を４０℃で４時間にわたって継続した。混合物を減圧下で濃縮し、シリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−７５％のＥｔＯＡｃ／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ６０）（０．２０６ｇ、５０％）がＬＣＭＳにより純度７９％で得られ、この材料を続いて更に精製することなく使用した；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．５７（ｓ、１Ｈ）、８．２８（ｄｄ、Ｊ＝８．６、８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．４８（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２２（ｍ、４Ｈ）、７．００（ｍ、２Ｈ）、４．２５（ｍ、２Ｈ）、３．７５（ｓ、２Ｈ）、３．６８（ｓ、３Ｈ）、３．１１（ｍ、４Ｈ）、２．８１（ｍ、２Ｈ）、２．６４（ｍ、１Ｈ）、１．８４（ｍ、２Ｈ）、１．６２（ｄｄ、Ｊ＝１２．６、４．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、９Ｈ）；ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間７．０５分；ｍ／ｚ ６１７．２［Ｍ＋Ｈ］⁺、５６１．１［（Ｍ−ｔ−Ｂｕ）＋Ｈ］⁺。

【0277】

（ｆ）ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−フルオロフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ６１）
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（３−フルオロ−４−（（４−（２−（２−メトキシ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）フェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ６０）（０．２０６ｇ）の溶液に、２ＭのＬｉＯＨ水溶液（０．５００ｍＬ、１．００ｍｍｏｌ）及び水（０．５ｍＬ）を添加し、得られた溶液を１６時間にわたって室温で撹拌した。ＬｉＯＨ水溶液（１．５Ｍ；０．５ｍＬ）を添加し、この反応物を更に２０時間にわたって室温で撹拌した。次に、この混合物を５０℃まで加熱し、メタノール（１ｍＬ）を添加してから、２０時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物をトルエンで２回共沸させてから、ＴＨＦ（４ｍＬ）、固形水酸化リチウム（０．０２１ｇ、０．８７ｍｍｏｌ）、水（１ｍＬ）及びメタノール（１ｍＬ）を添加した。得られた混合物を室温で５時間にわたって撹拌し、次に５０℃まで１６時間にわたって加熱した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物を水で希釈した。この水溶液をＥｔＯＡｃ（２ｘ２０ｍＬ）で抽出してから、ｐＨ３までＨＣｌ水溶液で酸性化した。得られた沈殿物を遠心分離によりペレットとして回収し、次にメタノールに溶解させ、減圧下で濃縮した。残留物をトルエンで共沸させ、次にＤＭＦ（６ｍＬ）に溶解させ、ここにＥＤＣＩ（０．０８０ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（０．０６１ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．２９ｍＬ、１．６７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で３０分間にわたって窒素下で撹拌してから、炭酸アンモニウム（０．１２９ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を３０℃で２０時間にわたって撹拌してから、揮発性物質を減圧下で蒸発させた。水（２０ｍＬ）を添加し、得られた懸濁液をＥｔＯＡｃ（３ｘ２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を減圧下で濃縮し、残留物をシリカゲル上でのクロマトグラフィに供すると（０−１００％のＥｔＯＡｃ／石油ベンジン、４０−６０℃、次に７０−１００％のＥｔＯＡｃ／石油ベンジン、４０−６０℃）、表題の化合物（Ｉ６１）（０．０４９ｇ、２４％）が得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−アセトン）δ８．７１（ｓ、１Ｈ）、８．６０（ｓ、１Ｈ）、７．９８（ｄｄ、Ｊ＝８．４、８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２９（ｍ、１Ｈ）、７．１７（ｍ、５Ｈ）、６．６６（ｓ、１Ｈ）、６．２２（ｓ、１Ｈ）、４．２１（ｍ、１Ｈ）、３．６３（ｓ、２Ｈ）、３．１６（ｍ、４Ｈ）、２．０９（ｍ、２Ｈ）、１．８７（ｍ、３Ｈ）、１．５９（ｑｄ、Ｊ＝１２．７、４．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．４６（ｓ、９Ｈ）；ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間６．４６分；ｍ／ｚ ６０２．１［Ｍ＋Ｈ］⁺、６２４．１［Ｍ＋Ｎａ］⁺、５４６．１［（Ｍ−ｔ−Ｂｕ）＋Ｈ］⁺、５０２．１［（Ｍ−Ｂｏｃ）＋Ｈ］⁺。

【0278】

（ｇ）２−（２−（２−（２−（（２−フルオロ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（Ｉ６２）
ＴＨＦ（３ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（（４−（２−（２−アミノ−２−オキソエチル）フェネチル）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）アミノ）−３−フルオロフェニル）ピペリジン−１−カルボキシレート（Ｉ６１）（０．０４９ｇ、０．０８１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（０．２０ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。次に、得られた混合物を室温で２０時間、次に４０℃で２４時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下での蒸発により除去し、ＤＣＭ（２ｍＬ）及びＴＦＡ（１．００ｍＬ、１３．１ｍｍｏｌ）を添加した。３０℃での１８時間にわたる撹拌後、混合物を減圧下で濃縮し、残留物をトルエン（１０ｍＬ）で２回共沸させると、表題の化合物（Ｉ６２）（０．０３７ｇ、９１％）が得られた。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．８４分；ｍ／ｚ ５０２．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0279】

（ｈ）２−（２−（２−（２−（（２−フルオロ−４−（１−メチルピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（１３）
無水メタノール（３ｍＬ）中の２−（２−（２−（２−（（２−フルオロ−４−（ピペリジン−４−イル）フェニル）アミノ）−５−（トリフルオロメチル）ピリミジン−４−イル）エチル）フェニル）アセトアミド（Ｉ６２）（０．０３７ｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）の溶液に、３７％のホルムアルデヒド水溶液（０．０２２ｍＬ、０．３０ｍｍｏｌ）及びナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（０．０８１ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で添加した。得られた混合物を、室温で１時間にわたって撹拌した。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残留物を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（２５ｍＬ）に溶解させた。得られた混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ２５ｍＬ）で抽出し、次に合わせた有機層をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（相分離カートリッジ）、減圧下で蒸発乾固させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製すると（０−５０％のＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、１％の２Ｍのエタノール性アンモニアを伴う）、表題の化合物（１３）（０．０２０ｇ、５２％）が得られた；¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ｄ₆−アセトン＋ｄ₄−ＭｅＯＨ）δ８．５４（ｓ、１Ｈ）、７．８８（ｄｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．１６（ｍ、６Ｈ）、３．８０（ｓ、２Ｈ）、３．６３（ｓ、２Ｈ）、３．１０（ｍ、４Ｈ）、２．９５（ｍ、２Ｈ）、２．５４（ｍ、１Ｈ）、２．２７（ｓ、３Ｈ）、１．７９（ｍ、４Ｈ）。ＬＣＭＳ法Ｃ：保持時間４．９３分；ｍ／ｚ ５１６．１［Ｍ＋Ｈ］⁺。

【0280】

バイオアッセイ
本発明の化合物の活性を、生化学的及び細胞学的アッセイを用いて分析することができる。

【0281】

ＦＡＫでの一次効力を、Ａｌｐｈａ Ｓｃｒｅｅｎ（登録商標）テクノロジーバイオケミカルアッセイを用いて評価することができる。

【0282】

この結合の動力学を、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｓ５１センサを使用した表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）テクノロジーアッセイにより更に研究することによって、Ｋ_a、ｋ_d、ひいてはＫ_Dを確立し得る。極めて強力な化合物の場合に起こり得るように、タンパク質からのオフレートが大きくオンレートを上回る場合、Ｋ_Dは、タンパク質／リガンド結合親和性の正確な尺度となる。

【0283】

細胞内でＦＡＫを阻害する本発明の化合物の能力を、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ社の機器ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ６０００を使用して行うＥＬＩＳＡタイプのアッセイで評価することができる。このアッセイにおいては、Ｙ３９７−ＦＡＫのリン酸化を阻害する本発明の化合物の能力を判定する。

【0284】

非ＦＡＫ活性に起因する細胞増殖の阻害に対する本発明の化合物の効果を、適切な細胞株を使用した２Ｄ増殖アッセイを用いて評価し得る。これによって本発明の化合物の標的以外での活性及び潜在的な毒性がわかる。したがって、Ｙ３９７−ＦＡＫのリン酸化及び２Ｄ増殖の阻害の比較は、ＦＡＫ特異的な介在作用及び標的以外での活性に起因する潜在的な毒性の尺度となる。

【0285】

ＶＥＧＦＲ３での一次効力は、Ａｌｐｈａ Ｓｃｒｅｅｎ（登録商標）テクノロジーバイオケミカルアッセイを用いて評価することができる。

【0286】

ＦＡＫバイオケミカルＡｌｐｈａ Ｓｃｒｅｅｎ（登録商標）アッセイ
ビオチン標識したペプチドを基質（アミノ酸配列：ビオチン−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ₂）として使用する。ＦＡＫ酵素を昆虫細胞において、６個のヒスチジンアミノ酸及びタバコエッチウイルス（ＴｅＶ）切断配列でＮ末端をタグ付けした触媒ドメイン（アミノ酸４１１−６８６）として発現させた。細胞の超音波処理による溶解後、キナーゼを、Ｎｉ固定化金属アフィニティクロマトグラフィ、Ｎ末端グリシンが残るＴｅＶ切断及びゲル濾過により精製した。１５μｌのアッセイ反応物を、Ｇｒｅｉｎｅｒブランドの白色３８４ウェル低容量プレートに入れた。全ての反応物は、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、２５ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、０．０１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０、５０μＭのＮａ₃ＶＯ₄、０．０１％（ｗ／ｖ）のニワトリ卵白からのアルブミン、１１１ｎＭのペプチド基質、８０μＭのＡＴＰ及び４ｎｇ／反応物のＦＡＫ酵素を含有し、ネガティブコントロール反応物では酵素を除外した。化合物を、ＤＭＳＯ中で作成した希釈系列から体積１００ｎｌで添加し、ポジティブ及びネガティブコントロール反応物には同じ体積のＤＭＳＯを化合物を入れずに添加した。プレートを接着シールで封止し、９０分間にわたって３０℃でインキュベートした。反応を停止させ、検出試薬を同時に添加した。生成物の量を、ストレプトアビジンをコーティングしたドナー及び抗ホスホチロシン（Ｐ−Ｔｙｒ−１００）アクセプタビーズを使用して、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社のＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ビーズ間の増幅蛍光として定量化した。５μｌの１０ｍＭのＨＥＰＥＳを含有する各反応物に（ｐＨ７．４）、２５ｍＭのＮａＣｌ、１００ｍＭのＥＤＴＡ、０．０１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０及び各ビーズタイプ６．２５μｇ／ｍｌを添加した。プレートを６時間にわたってインキュベートしてから、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社のＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）プレートリーダによりＨＴＳ Ａｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ（登録商標）モードで読み取りを行った。ＩＣ₅₀値は、同じプレート上のコントロールと比較しての各反応物についての阻害率（％Ｉ）を計算し（％Ｉ＝（Ｉ−ＣＮ）／（ＣＰ−ＣＮ）。ＣＮ／ＣＰはそれぞれネガティブ／ポジティブ反応物の平均である）、次にこの％Ｉデータ対化合物濃度［Ｉ］を％Ｉ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／［Ｉ］）＾Ｄ））））にフィットさせることによって得られ、ここでＡは下方漸近線であり、Ｂは上方漸近線であり、ＣはＩＣ₅₀値であり、Ｄはスロープファクターである。

【0287】

【表1】

【0288】

ＦＡＫ Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）ＳＰＲアッセイ
化合物の結合パラメータを、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｓ５１センサを使用して測定した。抗ＧＳＴ抗体を、製造業者の推奨に従い、一級アミンのカップリングによりＣＭ５チップに固定した。

【0289】

ランニングバッファ（０．０１ＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、０．１５ＭのＮａＣｌ、０．００５％の界面活性剤Ｐ２０、１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、１％のＤＭＳＯ）において、Ｎ末端ＧＳＴ融合精製ＦＡＫ酵素は、スポット１、２の両方に捕捉された。続いて、各サイクルの開始時に３０ｎＭのＰＦ５６２２７１をロードすることによってスポット１をブロックした。試験化合物の濃度系列を、スポットに２５℃で注入した。特異的結合を、スポット２及び１のシグナル間の差として計算し、続いて溶媒補正を行った。１サイト結合モデルにフィットさせると運動速度定数ｋ_d及びｋ_a並びに平衡結合定数Ｋ_D＝ｋ_d／ｋ_aが得られた。

【0290】

予想Ｋ_D＜５ｎＭの化合物に関し、Ｎ末端ＧＳＴ融合精製ＦＡＫ酵素は、抗ＧＳＴ抗体をコーティングしたチップのスポット２だけに捕捉された。化合物の注入サイクル後、チップ表面を、１０ｍＭのグリシン−ＨＣｌ（ｐＨ２．２）で再生してから酵素を再度捕捉させた。結合センサーグラムを、上述したようにして分析した。

【0291】

【表2】

＊この結果は、より長い３０分の洗浄ステップを用いて測定された

【0292】

Ｐ３９７Ｙ−ＦＡＫ阻害ＭＳＤプラットフォーム細胞バイオマーカーアッセイ
本発明の化合物を、以下のアッセイにおいてインビトロ活性について試験し得る。

【0293】

９６ウェルプレート（カタログ番号：ＭＡ６０００、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）に、濃度１ｍｇ／ｍＬに事前にＰＢＳ中で希釈した３０μＬ／ウェルのマウスモノクローナルＦＡＫ抗体［６３Ｄ５］（カタログ番号：ａｂ７２１４０、Ａｂｃａｍ）をコーティングする。これらのプレートを接着フィルムで封止し、１６時間にわたって４℃でインキュベートする。次に、抗体をプレートからはじいて落とし、１５０μＬの３％［ｗ／ｖ］のＢｌｏｃｋｅｒ Ａ（カタログ番号：Ｒ９３ＡＡ−１、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）を添加した。プレートを接着フィルムで再度封止し、室温で、中程度の速度に設定した振盪機上で２時間にわたってインキュベートした。次に、プレートを３回、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、０．１５ＭのＮａＣｌ及び０．０２％のＴｗｅｅｎ−２０を含有する溶液で洗浄してから、後述する細胞溶解産物を添加した。

【0294】

化合物での処理の２日前に、細胞をＴ１５０細胞培養フラスコに１：２で分割する。当日、化合物で処理する前に、２００００個の細胞を含有する２００μＬの培地を、白色、透明底の、ＴＣで処理したμｃｌｅａｒ（登録商標）９６ウェルマイクロタイタープレート（カタログ番号：６５５０９８、Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ−Ｏｎｅ）の全てのウェルに播種し、プレートを３７℃、５％のＣＯ₂で３６時間にわたってインキュベートする。次に、１μＬ／ウェルの化合物を、ＤＭＳＯで調製した希釈系列から添加する。ネガティブコントロールのウェルには化合物の入っていない同体積のＤＭＳＯを入れ、ポジティブコントロールのウェルには、同体積のＤＭＳＯ中の２μＭのコントロール化合物を入れる。細胞を１時間にわたって３７℃、５％のＣＯ₂で処理する。次に、培地／化合物をはじき、５５μＬ／ウェルの氷冷完全溶解バッファを添加する。完全溶解バッファは、１０ｍＬの不完全溶解バッファ（１５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、１ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＥＧＴＡ、１％のＴｒｉｔｏｎ−Ｘ １００）あたり１錠のＰｈｏｓＳＴＯＰ完全ホスファターゼ阻害剤（カタログ番号：０４９０６８３７００１、Ｒｏｃｈｅ）及び１錠のＣｏｍｐｌｅｔｅ，Ｍｉｎｉ（登録商標）ＥＤＴＡフリープロテアーゼ阻害剤（カタログ番号：０４６９３１５９００１、Ｒｏｃｈｅ）の添加により調製する。プレートを氷上で３０分間にわたってインキュベートし、５分毎に３０秒間にわたって高速でプレートを振盪させる。４０μＬ／ウェルの細胞溶解産物を、上述した、コーティングを施し、ブロックし、洗浄した９６ウェルマイクロタイタープレートに移す。この９６ウェルプレートを接着フィルムで封止し、１６時間にわたって４℃でインキュベートする。次に、プレートを、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、０．１５ＭのＮａＣｌ及び０．０２％のＴｗｅｅｎ−２０を含有する溶液で３回洗浄し、空にする。２５μＬ／ウェルの検出溶液（５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、０．１５ＭのＮａＣｌ及び０．０２％のＴｗｅｅｎ−２０中の１％［ｗ／ｖ］のＢｌｏｃｋｅｒ Ａ（カタログ番号：Ｒ９３ＡＡ−１、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）、１：６００のウサギポリクローナルＦＡＫ ｐｈｏｓｐｈｏ Ｙ３９７抗体（カタログ番号：ａｂ３９９６７、Ａｂｃａｍ）、１：１０００の抗ウサギスルホ標識抗体（カタログ番号：Ｒ３２ＡＢ−１、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）及び１：４０の再構成したＢｌｏｃｋｅｒ Ｄ−Ｍ（カタログ番号：Ｄ６０９−０１００、Ｒｏｃｋｌａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ ｆｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ））を添加し、プレートを接着フィルムで再封止し、１時間にわたって室温で中程度の速度に設定したプレート振盪機上でインキュベートする。次に、プレートを、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、０．１５ＭのＮａＣｌ及び０．０２％のＴｗｅｅｎ−２０を含有する溶液で３回洗浄し、空にする。次に、１５０μＬ／ウェルのＲｅａｄ Ｂｕｆｆｅｒ Ｔ＋界面活性剤（カタログ番号：Ｒ９２ＴＣ−１、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）を添加し、ｐＦＡＫ−３９７レベルを、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ社の機器ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ６０００を使用して定量化する。

【0295】

ＩＣ₅₀値を、まず各溶解産物について同じプレート上のコントロールに対する阻害率（％Ｉ）を計算することで求め（％Ｉ＝（Ｓ−ＣＰ）／（ＣＮ−ＣＰ））、ここでＳはサンプルの結果、ＣＮはＤＭＳＯだけで処理したネガティブコントロールの平均結果であり、ＣＰは、２μＭの処理したポジティブコントロールの平均結果である。％Ｉを化合物濃度［Ｉ］に対してプロットし、データを以下の式：％Ｉ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／［Ｉ］）＾Ｄ））））を用いてフィットさせ、ここでＡは下方漸近線であり、Ｂは上方漸近線であり、ＣはＩＣ₅₀値であり、Ｄはスロープファクターである。

【0296】

【表3】

【0297】

２Ｄ細胞増殖アッセイ
細胞を播種する２日前に、細胞を１：４でＴ７５細胞培養フラスコに分割する。このアッセイでは、様々ながん細胞株を利用することができる。

【0298】

細胞を播種する当日、１０００−５０００個の細胞を含有する１００μＬ／ウェルの培地を、９６ウェルマイクロタイタープレート（カタログ番号：６５５１８０、Ｇｒｅｉｎｅｒ ｂｉｏ−ｏｎｅ）に加える。ただしウェルＧ１２及びＨ１２には１００μｌの培地を加える。２枚目のプレートには、１列の細胞を同じ濃度で播種する。この第２のプレートはｔ＝０プレートとして知られ、試験薬を添加する前の相対細胞数の計算に使用する。細胞の入ったプレートを２４時間にわたって３７℃／５％のＣＯ₂でインキュベートする。次に、０．５μＬ／ウェルの化合物を、ＤＭＳＯで調製した希釈系列から添加する。既知の効力を有する化合物を各プレートセットに含めることによって、アッセイの性能を評価する。ネガティブコントロールのウェルには、化合物の入っていない同体積のＤＭＳＯを入れる。バックグラウンドシグナルを、培地だけを入れたウェルから求める。ｔ＝０のプレートの読み取りを、他のプレートに化合物を加えた日に、レサズリン系試薬（以下を参照のこと）を添加して行う。次に、化合物を添加した、細胞が入ったプレートを、３日間にわたって３７℃、５％のＣＯ₂でインキュベートする。

【0299】

３日間にわたるインキュベーション後、細胞増殖を、以下の典型的な組成：ＰＢＳバッファ中のレサズリン、Ｓｉｇｍａ、番号：Ｒ７０１７−１Ｇ、０．０１５％ｗ／ｖ、メチレンブルー、Ｓｉｇｍａ、番号：ＭＢ−１（２５ｇ）、０．００２５％ｗ／ｖ、ヘキサシアノ鉄（ＩＩＩ）酸カリウム、Ｓｉｇｍａ、番号：Ｐ８１３１−１００Ｇ、０．０３３ｗ／ｖ、ヘキサシアノ鉄（ＩＩ）酸カリウム三水和物、Ｓｉｇｍａ、番号：Ｐ９３８７−１００Ｇ、０．０４２％ｗ／ｖの２０μｌ／ウェルのレサズリン系試薬の添加により定量化する。（５７９_Ex／５８４_Em）での又はその近くでの蛍光の測定に先立って、プレートをレサズリン系試薬と共に１−４時間にわたってインキュベートする（３７℃、５％のＣＯ₂）。

【0300】

同じプレート上のコントロールに対しての処理を施した各ウェルについての増殖阻害率（％Ｉ）を、式：％Ｉ＝（Ｓ−Ｂ）−（Ｔ₀−Ｂ）／（ＣＮ−Ｂ）−（Ｔ₀−Ｂ）を用いて計算し、ここでＳはサンプルの結果であり、Ｂはバックグラウンド蛍光であり、Ｔ₀はｔ＝０値であり、ＣＮはＤＭＳＯだけで処理したネガティブコントロールの平均結果である。ＩＣ５０を求めるためには、％Ｉを化合物濃度［Ｉ］に対してプロットし、データを以下の式：％Ｉ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／［Ｉ］）＾Ｄ））））を用いてフィットさせ、ここでＡは下方漸近線であり、Ｂは上方漸近線であり、ＣはＩＣ₅₀値であり、Ｄはスロープファクターである。

【0301】

【表4】

【0302】

ＶＥＧＦＲ３バイオケミカルアッセイ
本発明の化合物を、以下のアッセイにおいて、インビトロ活性について試験し得る。ビオチン標識したペプチドを基質として使用する（アミノ酸配列：ビオチン−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−ＮＨ₂）。ＶＥＧＦＲ３細胞質ドメイン（アミノ酸７９８−１２９８）を、Ｎ末端ＧＳＴ融合タンパク質として購入した（「酵素」）。１５μｌのアッセイ反応物を、Ｇｒｅｉｎｅｒブランドの白色３８４ウェル低容量プレートに入れる。全ての反応物が、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、０．０１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０、５０μＭのＮａ₃ＶＯ₄、０．０１％（ｗ／ｖ）のニワトリ卵白からのアルブミン、１ｍＭのジチオスレイトール、１１１ｎＭのペプチド基質、５００μＭのＡＴＰ及び３．８ｎｇ／反応酵素を含有し、ネガティブコントロール反応物からは酵素を除外した。化合物を、ＤＭＳＯで調製した希釈系列から体積１００ｎｌで添加し、ポジティブ及びネガティブコントロール反応物には同じ体積のＤＭＳＯを化合物を入れずに添加した。プレートを接着シールで封止し、９０分間にわたって３０℃でインキュベートした。反応を停止させ、検出試薬を以下のようにして同時に添加した。生成物の量を、ストレプトアビジンをコーティングしたドナー及び抗ホスホチロシン（Ｐ−Ｔｙｒ−１００）アクセプタビーズを使用して、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社のＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ビーズ間の増幅蛍光として定量化した。５μｌの１０ｍＭのＨＥＰＥＳを含有する各反応物に（ｐＨ７．４）、２５ｍＭのＮａＣｌ、１００ｍＭのＥＤＴＡ、０．０１％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ−２０及び各ビーズタイプ６．２５μｇ／ｍｌを添加した。プレートを６時間にわたってインキュベートしてから、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社のＥｎＶｉｓｉｏｎ（登録商標）プレートリーダによりＨＴＳ Ａｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ（登録商標）モードで読み取りを行った。ＩＣ₅₀値は、同じプレート上のコントロールに対する各反応物についての阻害率（％Ｉ）を計算し（％Ｉ＝（Ｉ−ＣＮ）／（ＣＰ−ＣＮ）。ＣＮ／ＣＰはそれぞれネガティブ／ポジティブ反応物の平均である）、次にこの％Ｉデータ対化合物濃度［Ｉ］を％Ｉ＝（Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（Ｃ／［Ｉ］）＾Ｄ））））にフィットさせることによって得られ、ここでＡは下方漸近線であり、Ｂは上方漸近線であり、ＣはＩＣ₅₀値であり、Ｄはスロープファクターである。

【0303】

上記のアッセイを、一部のケースでは若干修正した形でも行った（以下で^*をつけて示す）。これらのケースでは、ＶＥＧＦＲ３細胞質ドメイン（アミノ酸８１８−１１７７、ＵｎｉＰｒｏｔアクセッション番号Ｐ３５９１６の９４９−１００２を欠く）を発現させ、Ｎ末端ＧＳＴ融合タンパク質を使用するのではなく、Ｎ末端ヘキサ−Ｈｉｓ融合タンパク質（「酵素」）として精製した。

【0304】

【表5】