特許 6000946 肺感染症の治療のための組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6000946

(24)【登録日】2016年9月9日

(45)【発行日】2016年10月5日

(54)【発明の名称】肺感染症の治療のための組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/7036 20060101AFI20160923BHJP

   A61K 9/12 20060101ALI20160923BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20160923BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20160923BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/7036

   A61K9/12

   A61P11/00

   A61P31/04

【請求項の数】27

【全頁数】38

(21)【出願番号】特願2013-518982(P2013-518982)

(86)(22)【出願日】2011年7月8日

(65)【公表番号】特表2013-530248(P2013-530248A)

(43)【公表日】2013年7月25日

(86)【国際出願番号】EP2011003405

(87)【国際公開番号】WO2012007130

(87)【国際公開日】20120119

【審査請求日】2014年4月9日

(31)【優先権主張番号】20101576

(32)【優先日】2010年11月8日

(33)【優先権主張国】NO

(31)【優先権主張番号】61/363,330

(32)【優先日】2010年7月12日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】505371232

【氏名又は名称】クセリア ファーマシューティカルズ エーピーエス

【氏名又は名称原語表記】Ｘｅｌｌｉａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＡｐＳ

(74)【代理人】

【識別番号】100068755

【弁理士】

【氏名又は名称】恩田 博宣

(74)【代理人】

【識別番号】100105957

【弁理士】

【氏名又は名称】恩田 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100142907

【弁理士】

【氏名又は名称】本田 淳

(72)【発明者】

【氏名】ノーリン、トマス

【審査官】 磯部 洋一郎

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００４−５３４７６３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００８−５４０６７６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００３−５２２００３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表平０９−５１１２５４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５１００７７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００５−５１４３９３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００２−５３２４３０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 International Journal of Pharmaceutics, 1999, Vol.189, p.215-225

【文献】 新・薬剤学総論（改訂第３版）, 1987, p.84

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／７０３６

Ａ６１Ｋ ９／１２

Ａ６１Ｐ １１／００

Ａ６１Ｐ ３１／０４

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

肺系統における細菌感染症の治療的または予防的治療を必要とする患者の該治療において使用するための、１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンを含んでなる組成物において、前記組成物は吸入によって投与されるようになっており、かつ４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する単分散微小液滴の形態のエアロゾルを提供する計量式吸入器により投与されるようになっており、
前記計量式吸入器は、１．８〜３．９μｍの範囲の直径を有するオリフィスを通して組成物を移送することによりエアロゾルの形成を提供するスプレーノズルユニットを有する、組成物。

【請求項2】

肺系統における細菌感染症の治療的または予防的治療を必要とする患者の該治療において使用するための、１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのアミノグリコシドを含んでなる組成物において、前記組成物は吸入によって投与されるようになっており、４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する単分散微小液滴の形態のエアロゾルを提供する計量式吸入器により投与されるようになっており、かつ、塩化ナトリウムをほとんど含まない組成物。

【請求項3】

前記組成物は１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンを含んでなる、請求項２に記載の組成物。

【請求項4】

前記組成物は、１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンに相当する硫酸トブラマイシンを含んでなる、請求項１または請求項２に記載の組成物。

【請求項5】

前記組成物は、１８０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンに相当する硫酸トブラマイシンを含んでなる、請求項４に記載の組成物。

【請求項6】

前記硫酸トブラマイシンは水中に溶解されており、ｐＨは任意選択でｐＨ６〜８の範囲内にあるように調節される、請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

前記吸入は１〜５分で行なわれるようになっている、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項8】

前記吸入は、４分未満で行なわれるようになっている、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項9】

前記吸入は３分未満で行なわれるようになっている、請求項８に記載の組成物。

【請求項10】

前記吸入は２分未満で行なわれるようになっている、請求項８に記載の組成物。

【請求項11】

前記吸入は１分未満で行なわれるようになっている、請求項８に記載の組成物。

【請求項12】

単分散微小液滴は１８０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンを含んでなり、前記吸入は４分未満で行なわれるようになっている、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項13】

前記吸入は３分未満で行なわれるようになっている、請求項１２に記載の組成物。

【請求項14】

前記吸入は２分未満で行なわれるようになっている、請求項１２に記載の組成物。

【請求項15】

前記吸入は１分未満で行なわれるようになっている、請求項１２に記載の組成物。

【請求項16】

組成物は最大で５００μｌまでの体積を有する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項17】

組成物は、投与を必要とする患者への５０〜８０ｍｇの範囲の総アミノグリコシド量の投与を提供する、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項18】

組成物は、６０〜７０ｍｇのトブラマイシンを含んでなる単位用量の投与であって、５分未満で行われるようになっている投与を提供する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項19】

組成物の前記吸入は、投与を必要とする患者の肺系統への６３ｍｇトブラマイシン（１８０ｍｇ／ｍＬ×０．３５ｍＬ）の投与を提供し、該組成物は患者が深くゆっくりとした吸入を７回行なうことによって吸入されるようになっている、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項20】

細菌感染症はシュードモナス属の細菌により引き起こされる、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項21】

患者は嚢胞性繊維症のような慢性肺疾患に罹患している、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項22】

３００〜５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの浸透圧重量モル濃度を有する、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項23】

３７５〜４７５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの浸透圧重量モル濃度を有する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項24】

組成物は、２〜８ＭＰａ（２０〜８０バール）の範囲の動作圧力を提供する計量式吸入器を使用して投与されるようになっている、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項25】

前記圧力は、３〜４ＭＰａ（３０〜４０バール）の範囲である、請求項２４に記載の組成物。

【請求項26】

前記圧力は、３．５ＭＰａ（３５バール）である、請求項２５に記載の組成物。

【請求項27】

組成物は１０〜５０Ｌ／分の流量で投与されるようになっている、請求項１〜２６のいずれか１項に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は肺感染症の治療に関し、特に患者が嚢胞性繊維症に罹患している症例における肺感染症の治療に関する。

【背景技術】

【0002】

細菌性の肺感染症は重要な問題であり、喘息、嚢胞性繊維症、および慢性閉塞性肺疾患のような慢性肺疾患に罹患している患者にとっては生命にかかわるものとなりうる。
具体的には、嚢胞性繊維症（ＣＦ）は、米国ではおよそ３０，０００人、および欧州ではおよそ４０，０００人に発症している常染色体劣性遺伝疾患である。ＣＦ突然変異は、ＣＦ膜コンダクタンス制御因子（ＣＦ ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ ｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ：ＣＦＴＲ）と呼ばれるクロライドチャネルタンパク質をコードする遺伝子に生じる。不完全なＣＦＴＲ遺伝子についてホモ接合である患者は、一般に、慢性の再発性気管支内感染症（究極的には致命的）および副鼻腔炎に加えて、膵機能不全に起因する吸収不良、汗で失われる塩類の増大、閉塞性肝胆道系疾患、および低受精率に患う。

【0003】

緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ：Ｐａ）は、ＣＦ肺疾患において最も重要な病原体である。８０％を超えるＣＦ患者において最終的にはＰａのコロニーが形成されるようになり、緑膿菌による肺の慢性感染の発症は、肺組織へのさらなる損傷および生命にかかわる呼吸不全を引き起こしうる、嚢胞性繊維症の典型的な特徴である。

【0004】

トブラマイシンは、ストレプトマイセス・テネブラリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｔｅｎｅｂｒａｒｉｕｓ）によって天然生産されるアミノグリコシド系抗生物質である。トブラマイシンは主として、タンパク質合成を中断させて細胞膜の透過性変化、細胞外膜の漸進的破壊および最終的には細胞死をもたらすことにより作用する。トブラマイシンは、その阻害濃度と同等またはわずかに高い濃度において殺菌力を有する。

【0005】

慢性肺疾患の患者の肺感染症を予防および治療するためには、アミノグリコシド系抗生物質のような抗生物質が広く使用される。非経口のアミノグリコシドは極性の高い作用薬であり、気管支内空間には不十分にしか浸透しない。更に、アミノグリコシドの痰への結合（非特許文献１〜３）または痰中の糖タンパク質もしくはＤＮＡへの結合（非特許文献４）は生物活性を低減し、細菌標的に対するアミノグリコシドの低い有効性を克服するためには最小阻止濃度（ＭＩＣ）の１０〜２５倍の局所濃度を必要とする。非経口投与を用いて感染部位における適切な薬物濃度を得るためには、血清レベルは腎毒性、前庭毒性および聴器毒性のような重篤な副作用を伴うレベルに接近する（非特許文献５、非特許文献６）。

【0006】

アミノグリコシドのエアロゾル投与は、気管支内空間の感染部位に高濃度の抗生物質を直接送達すると同時に全身バイオアベイラビリティを極小化する、非経口投与の魅力的な代案を提供する。

【0007】

トブラマイシンのようなアミノグリコシドは、ネブライザ、すなわちエネルギーを動力源とするデバイスであって液状アミノグリコシド製剤をミストに変換した後に形成された該ミストをフェースマスクまたはマウントピース（ｍｏｕｎｔ ｐｉｅｃｅ）を通して肺の中に吸い込むことにより該ミストが患者に投与されるデバイス、を使用してエアロゾル化されることが多い。エアロゾル製剤投与用の一般に用いられているネブライザは、「アトマイザ」とも呼ばれるジェット式ネブライザである。ジェット式ネブライザはチューブによってコンプレッサに接続され、コンプレッサは液状薬剤を通して圧縮空気または圧縮酸素を高速で噴射して、該薬剤を患者に吸入されるべきエアロゾルに変える。

【0008】

ジェット式ネブライザは、パソジェネシス・コーポレイション（ＰａｔｈｏＧｅｎｅｓｉｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、現ノバルティス（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））によって開発された市販の吸入用トブラマイシン溶液製剤（ＴＯＢＩ（登録商標）；１／４生理食塩水５ｍＬ中に６０ｍｇ／ｍＬ）の投与にも使用される。ＴＯＢＩ（登録商標）は１９９７年に米国食品医薬品局によって６歳より年長のＣＦ患者における１日２回の使用が承認されている。

【0009】

吸入用トブラマイシン溶液の様々な製剤についても先行技術に記載されている。例えば、特許文献１は、４分の１の生理食塩水濃度に希釈された１ｍｌの生理食塩水中に４０〜１００ｍｇのアミノグリコシドを含んでなる製剤であって５．５〜６．５のｐＨを有しかつ該溶液がエアロゾル化により５ｍｌの濃縮形態で送達される製剤を開示している。

【0010】

特許文献２は、０．４５％（ｗ／ｖ）塩化ナトリウムを含有する水溶液に溶解された７５ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンで構成されるエアロゾル製剤であって、ｐＨが４．０〜５．５であり浸透圧モル濃度が２５０〜４５０ｍＯｓｍ／ｌの範囲にある製剤を開示している。

【0011】

特許文献３は、約１００ｍｇ／ｍｌ〜２００ｍｇ／ｍｌの抗グラム陰性菌抗生物質を含んでなるエアロゾル製剤を示唆している。トブラマイシン製剤が示唆されているが、トブラマイシンを用いた実験は開示されていない。特許文献４は、約８０〜１２０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシン、酸性アジュバント、およびごく低濃度の塩化ナトリウムを含んでなるトブラマイシン組成物を開示している。酸性アジュバントは硫酸ナトリウムまたはリン酸ナトリウムであってよい。特許文献４によれば、高濃度のトブラマイシンは組成物の粘性に起因する噴霧化への悪影響を有すると言われているので、活性作用物質の濃度は１２０ｍｇ／ｍｌを超過するべきでない。更に、特許文献４によるトブラマイシン組成物は、ネブライザの使用により患者に投与されることになっている、すなわち有効成分は周期性呼吸により吸入される。

【0012】

特許文献５はとくに、生理学的に許容可能な担体中に６０〜２００ｍｇ／ｍｌのアミノグリコシド系抗生物質を含んでなる４ｍｌ未満の溶液の組成物について記載している。特許文献５において報告された実験は、パリ・ＬＣプラス（登録商標）ジェット式ネブライザ（パリ・ボーイＮ（Ｐａｒｉ Ｂｏｙ Ｎ）コンプレッサ、ドイツ連邦共和国シュタルンベルク）を使用して１２０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンを含んでなる組成物を投与するために必要な時間が約１０分であることを示している。これは市販のＴＯＢＩ（登録商標）の投与に必要な時間より短いかもしれないが、該所要時間は、患者のコンプライアンスおよび患者ユーザの扱い易さの観点から見れば依然として長すぎる。呼吸作動式吸入デバイスを使用して、特許文献５は既述の市販システムを用いて達成されるよりも迅速な投与時間を報告している。しかしながら、特許文献５に報告された実験で使用された呼吸作動式吸入デバイス（ＡｃｒｏＤｏｓｅ（商標））を用いて達成された投与時間は、低いトブラマイシン濃度（６０ｍｇ／ｍｌ）を有する組成物のみを使用して得られている。更に、ＡｃｒｏＤｏｓｅ（商標）システムを使用する６０ｍｇ／ｍｌ組成物の投与では、第２のアリコートが同様に投与されなければならない場合もあることが報告されている。第２のアリコートの補充および投与の必要は、患者の扱い易さおよびコンプライアンスの観点から見て不都合を意味する。

【0013】

トブラマイシン溶液は、局所投与、例えば角膜炎の治療における局所投与についても知られている。非特許文献７〜９を参照されたい。
利用可能な投与手段および治療レジメンの周知の短所は、とくに患者のコンプライアンスおよび患者の生活の質に影響する、投与に要する時間である。

【0014】

非特許文献１０は、単施設（ｍｏｎｏｃｅｎｔｒｉｃ）オープンラベル交差試験であって、様々な量のトブラマイシン（ＴＯＢＩ（登録商標））が種々の吸入システム、すなわち良く知られたパリ・ＬＣプラス（登録商標）ネブライザ（パリ・ボーイＮコンプレッサ、ドイツ連邦共和国シュタルンベルク）およびパリ・ＬＣプラス（登録商標）ネブライザと組み合わされたＡＫＩＴＡ（登録商標）（アクティフアエロ（Ａｃｔｉｖａｅｒｏ）、ドイツ連邦共和国ゲミュンデン）を使用して投与された試験の結果を報告している。該試験は、ＡＫＩＴＡ（登録商標）システムの使用によって、エアロゾル吸入に必要な時間が約２０分から約７〜８分に短縮されることを示した。該試験はさらに、前述の臨床研究の二法により同様の血清中濃度が得られることを示した。

【0015】

ＡＫＩＴＡ（登録商標）投与デバイスの使用は一般の投与システムと比較して有効量のトブラマイシン投与のための所要時間を短縮するが、該所要時間はそれでも長すぎる。従って、嚢胞性繊維症患者およびトブラマイシンで治療可能な他の肺障害を有する患者のための、より良好なコンプライアンスおよび生活の質をもたらす、より短い投与時間を確実にする治療レジメンがなおも必要とされている。

【0016】

加えて、吸入により患者の肺へアミノグリコシドを投与するための先行技術のシステムおよび方法は、さらなる短所、例えば、製剤の残りがトブラマイシン製剤の投与後にネブライザデバイス内に残存する、または患者の周囲に出て消失するという事実が原因で、有効成分の量が作用部位に達しない、という短所を抱えている。よって経済的かつ環境上の観点から、より少量のトブラマイシン製剤しか無駄にならない投与レジメンも必要とされている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0017】

【特許文献1】米国特許第５５０８２６９号明細書

【特許文献2】米国特許第６９８７０９４号明細書

【特許文献3】米国特許出願第２００７／０１１６６４９号明細書

【特許文献4】米国特許出願第２００７／００７１６８６号明細書

【特許文献5】欧州特許出願第２１８６５０８号明細書

【非特許文献】

【0018】

【非特許文献1】国際嚢胞性繊維症［ムコビシドーシス］協会（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｙｓｔｉｃ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ ［Ｍｕｃｏｖｉｓｃｉｄｏｓｉｓ］ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）、１９９５年年次アンケート調査、フランス国パリ、１９９５年

【非特許文献2】コリンズ、ＦＳ（Ｃｏｌｌｉｎｓ ＦＳ）、「嚢胞性繊維症の分子生物学および治療的意義（Ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ）」、サイエンス誌（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、１９９２年、第２５６巻、ｐ．７７４−７７９

【非特許文献3】デイビス、ＰＢ（Ｄａｖｉｓ ＰＢ）ら、「嚢胞性繊維症（Ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）」、米国呼吸器救命医学会雑誌（Ａｍｅｒ Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ）、１９９６年、第１５４巻、第５号、ｐ．１２２９−５６

【非特許文献4】コッホ、Ｃ（Ｋｏｃｈ Ｃ）、ホイビー、Ｎ（Ｈｏｉｂｙ Ｎ）、「嚢胞性繊維症の病原論（Ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）」、ランセット誌（Ｌａｎｃｅｔ）、１９９３年、第３４１巻、第８８５２号、ｐ．１０６５−１０６９

【非特許文献5】コンスタン、ＭＷ（Ｋｏｎｓｔａｎ ＭＷ）、バーガー、Ｍ（Ｂｅｒｇｅｒ Ｍ）、「嚢胞性繊維症における肺の感染および炎症（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｌｕｎｇ ｉｎ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）」、米国ニューヨーク州ニューヨーク、デッカー社（Ｄｅｋｋｅｒ）、１９９３年

【非特許文献6】フィッツシモンズ、ＳＣ（ＦｉｔｚＳｉｍｍｏｎｓ ＳＣ）、「嚢胞性繊維症の疫学の変化（Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｉｎｇ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）」、小児科学会雑誌（Ｊ Ｐｅｄｉａｔｒ）、１９９３年、第１２２巻、ｐ．１−９

【非特許文献7】デイビス（Ｄａｖｉｓ）ら、カナダ眼科学会雑誌（Ｃａｎａｄ．Ｊ Ｏｐｈｔａｌ．）、１９７８年、第１３巻、ｐ．２７３

【非特許文献8】デイビス（Ｄａｖｉｓ）ら、眼科学文書（Ａｒｃｈ Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ）、１９７８年、第９６巻、ｐ．１２３−１２５

【非特許文献9】ウンターマン（Ｕｎｔｅｒｍａｎ）ら、白内障屈折矯正手術学会雑誌（Ｊ．Ｃａｔａｒａｃｔ Ｒｅｆｒａｃｔ．Ｓｕｒｇ．）、１９８８年、第１４巻、ｐ．５００−５０４ページ

【非特許文献10】ドップァー（Ｄｏｐｆｅｒ）ら、「嚢胞性繊維症患者におけるトブラマイシンの吸入：二法の比較（Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｏｂｒａｍｙｃｉｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｙｃｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ：Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ｍｅｔｈｏｄｓ）」、生理学薬理学会雑誌（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ）、２００７年、第５８巻、補遺５、ｐ．１４１−１５４

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0019】

本発明の目的は、アミノグリコシドのための、先行技術の短所を負っていない改善された投与レジメンを提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0020】

本発明は、アミノグリコシド系抗生物質、特にトブラマイシンを用いた肺感染症の治療および予防のための新規な投与形態および新規なレジメンを提供する。本発明は、先行技術と比較して、アミノグリコシド系抗生物質の高速かつ効率的な投与を提供する。市場で利用可能な投与レジメン（パリ・ＬＣ（登録商標）ネブライザを使用して投与されるＴＯＢＩ（登録商標））と比較して、本発明による投与レジメンは、わずか数分（例えば１〜５分）でトブラマイシンを効率的に投薬する。

【0021】

本発明者らは、驚くべきことに、高濃度のトブラマイシン溶液を小体積の投与製剤と組み合わせると、効率的かつ改善された投薬レジメンを提供することを見出した。
さらに、本発明による投与形態および投与レジメンは、先行技術の投与レジメンと比較して、肺に投与されるべき２倍の有効成分、例えばトブラマイシン製剤を提供する。本投与レジメンのさらなる利点は、ボイド容量、従って本発明により使用される吸入デバイス内に残存する廃棄量が、先行技術の投与レジメンと比較して無視できるということである。廃棄量という語により、パリ・ネブライザを使用する場合に大気中へ吐出される微小粒子についても了解される。特に劇薬および抗生物質は作用部位にとどまるべきであり、一般環境中に存在すべきではない。例えば、低濃度の抗生物質は抵抗性の微生物を生じさせるおそれがある。

【0022】

本発明のさらに別の利点は、本発明によって得られる平均最大血漿中濃度が先行技術の投与レジメン（ＴＯＢＩ（登録商標）およびパリ・ＬＣ（登録商標）ネブライザを使用するトブラマイシン投与レジメン）を用いて得られる平均最大血漿中濃度と比較して低いことである。

【0023】

本発明の１つの態様によれば、肺系統における細菌感染症の治療的または予防的治療を必要とする患者の該治療のための組成物であって、１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンを含んでなり、吸入によって投与されるようになっている、組成物が提供される。

【0024】

本発明の別の態様によれば、肺系統における細菌感染症の治療的または予防的治療を必要とする患者の該治療のための組成物であって、肺系統における細菌感染症の治療的または予防的治療を必要とする患者の該治療のための１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのアミノグリコシドを含んでなり、吸入によって投与されるようになっており、かつ、塩化ナトリウムをほとんど含まない、組成物が提供される。

【0025】

本発明のさらに別の態様は、前記組成物のエアロゾル化によって形成された４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する単分散微小液滴の吸入によって投与されるようになっている、組成物に関する。

【0026】

本発明のさらなる態様は、肺系統における細菌感染症の治療的または予防的治療を必要とする患者の該治療のための、１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのアミノグリコシドを含んでなる組成物であって、４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する単分散微小液滴の形態のエアロゾルの吸入により投与されるようになっている組成物に関する。

【0027】

本発明の１つの実施形態によれば、アミノグリコシドはトブラマイシンである。
本発明のさらに別の実施形態によれば、前記組成物は、１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンに相当する、例えば１８０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンに相当する、硫酸トブラマイシンを含んでなる。一実施形態によるそのような組成物は吸入により投与可能であり、前記吸入は、４分未満、好ましくは３分未満、より好ましくは２分未満、より好ましくは１分未満で行なわれるようになっている。

【0028】

本発明の別の実施形態によれば、前記組成物は水中に溶解された硫酸トブラマイシンを含んでなり、ｐＨは任意選択でｐＨ６〜８の範囲内にあるように調節される。
本発明のさらに別の実施形態によれば、前記組成物は吸入によって投与されるようになっており、かつ前記吸入は１〜５分で行なわれるようになっている。

【0029】

さらなる実施形態によれば、前記吸入は、４分未満、好ましくは３分未満、好ましくは２分未満、より好ましくは１分未満で行なわれるようになっている。
本発明の別の実施形態によれば、組成物は最大で５００μｌまでの体積を有する。

【0030】

本発明のさらなる実施形態によれば、本組成物は、投与を必要とする患者への５０〜８０ｍｇの範囲の総アミノグリコシド量の投与を提供する。
本発明のさらに別の実施形態によれば、本組成物は、６０〜７０ｍｇのトブラマイシンを含んでなる単位用量の投与であって、５分未満で行なわれるようになっている投与を提供する。

【0031】

本発明のさらに別の実施形態によれば、組成物の吸入は、投与を必要とする患者の肺系統への６３ｍｇのトブラマイシン（１８０ｍｇ／ｍＬ×０．３５ｍＬ）の投与を提供し、該組成物は患者が深くゆっくりとした吸入を７回行なうことによって吸入されるようになっている。

【0032】

本発明のさらに別の実施形態によれば、組成物は３００〜５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、好ましくは３７５〜４７５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの浸透圧重量モル濃度を有する。
本発明のさらなる実施形態によれば、組成物は、１．８〜３．９μｍの範囲の直径を有するオリフィスを通して組成物を移送することにより前記エアロゾルの形成を提供するスプレーノズルユニットを有する計量式吸入器を使用した投与に有用である。

【0033】

本発明による組成物は、２〜８ＭＰａ（２０〜８０バール）、例えば３〜４ＭＰａ（３０〜４０バール）の範囲、好ましくは３．５ＭＰａ（３５バール）の動作圧力を提供する計量式吸入器を使用して投与されてもよい。

【0034】

本発明による組成物はさらに、１０〜５０Ｌ／分の流量で投与されてもよい。
本発明による組成物は、呼吸作動式吸入または連携式吸入に適した計量式吸入器を使用して投与されてもよい。

【0035】

本発明の組成物はさらに、シュードモナス（Ｐｓｅｄｏｍｏｎａｓ）属の細菌により引き起こされた肺系統における感染症の治療に特に有用である。
本発明の組成物はさらに、患者が嚢胞性繊維症のような慢性肺疾患に罹患している、肺系統における感染症の治療において特に有用である。

【図面の簡単な説明】

【0036】

【図1】Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイス（６回作動）を使用してｉｎ ｖｉｔｒｏで送達された、放射性標識された２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の物質収支を示す図。

【図2】Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用してｉｎ ｖｉｔｒｏで送達された、放射性標識されたトブラマイシン溶液の物質収支を示す図。

【図3】Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを介してｉｎ ｖｉｔｒｏで送達された、放射性標識された１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の物質収支を示す図。

【図4】パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ネブライザを使用してｉｎ ｖｉｔｒｏで送達された、放射性標識されたＴＯＢＩ（登録商標）トブラマイシン溶液の物質収支を示す図^４。

【図5】治療レジメンＡ（６０ｍｇのトブラマイシンをＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用して送達）および治療レジメンＢ（３００ｍｇのトブラマイシン（ＴＯＢＩ（登録商標））をパリ・ＬＣ（登録商標）プラス・デバイスシステムを使用して送達）を実施されている全対象者についての肺浸透プロファイルを示す図。

【図6】再生可能な電源パック（１）、使い捨ての薬物コンテナ（標準的なシリンジ）（２）およびスプレーノズルユニットを備えたマウスピース（３）を含んでなる適切な吸入器を示す図。

【図7】レイリー分裂（Ｒａｙｌｅｉｇｈ ｂｒｅａｋｕｐ）によって微小液滴（６）を提供するシリコンチップ（５）を有する、スプレーノズルユニット（４）を備えたマウスピースを示す図。

【図8】デバイスに挿入可能なシリンジであって、取り外し可能な保護キャップ（７）およびシリンジ（９）の内容物をデバイス内へ移送するためのピストン（８）を有するシリンジを示す図。

【発明を実施するための形態】

【0037】

定義：
本明細書中で使用される用語「アミノグリコシド」は、アミノ糖を含んでなる、ストレプトマイセスまたはミクロモノスポラによって天然生産されている抗生物質化合物を包含すると同時に、その合成誘導体および半合成誘導体も包含するように意図されている。よって「アミノグリコシド」は、抗菌化合物、例えばトブラマイシン、ストレプトマイシン、アプラマイシン、パロモマイシン、ソドストレプトマイシン（ｔｈｏｄｏｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）、ネオマイシン、カナマイシン、アミカシン、アルベカシン、カプレオマイシン、およびネチルミシンを含むように意図されている。

【0038】

トブラマイシン、すなわち（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−４−アミノ−２−｛［（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，６Ｒ）−４，６−ジアミノ−３−｛［２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−３−アミノ−６−（アミノメチル）−５−ヒドロキシオキサン−２−イル］オキシ｝−２−（ヒドロキシメチルシクロヘキシル］オキシ）−６−（ヒドロキシメチル）オキサン−３，５−ジオール）（化学情報検索サービス機関（ＣＡＳ）により指定された登録番号３２９８６−５６−４）は、下式：

【0039】

【化1】

によって表すことができる。

【0040】

「硫酸トブラマイシン」は、化学情報検索サービス機関（ＣＡＳ）により指定された登録番号４９８４２−０７−１の塩である。固体形態のこの塩は、トブラマイシンおよび硫酸を２：５比で含んでなる。

【0041】

「含水硫酸トブラマイシン」という用語は、トブラマイシンおよび硫酸イオンを任意の比率で含んでなる水溶液を包含するように意図されている。
「高濃度のアミノグリコシド溶液」は、１ｍｌ当たり１００ｍｇを超えるアミノグリコシドを含んでなる任意の溶液、例えば１ｍｌ当たり１８０ｍｇのゲンタマイシンを含んでなる溶液である。トブラマイシンに関して、高濃度溶液は、本明細書中では、任意選択で硫酸トブラマイシンの形態の、１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンを含んでなるトブラマイシン溶液を意味する。

【0042】

トブラマイシンを含んでなる医薬製剤は滅菌水中にトブラマイシンまたは硫酸トブラマイシンを溶解することにより得られることも考えられる。そのような製剤のｐＨは肺送達に適したレベルに調節されうる。

【0043】

本発明による組成物の適切なｐＨは６〜８の範囲内となりうる。アミノグリコシド製剤のｐＨは、例えばアミノグリコシドがトブラマイシンである場合、硫酸の追加によって調節可能である。

【0044】

本発明の適切な組成物は、硫酸トブラマイシンおよび水で構成され、硫酸トブラマイシンの量は１８０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンに相当し、かつ前記組成物のｐＨは６〜８の範囲内にある。

【0045】

本発明の１つの態様によれば、本発明による本組成物は塩化ナトリウムをほとんど含まない。「塩化ナトリウムをほとんど含まない」という用語は、トブラマイシンの溶液（例えば、滅菌水に溶解されたトブラマイシン）に塩化ナトリウムが添加されないことを意味する。したがって、塩化ナトリウムをほとんど含まない組成物中に存在する唯一の塩化ナトリウムは、硫酸トブラマイシンのようなトブラマイシンを溶解するために使用された水に含まれていて存在する塩化ナトリウムに起因する。

【0046】

本明細書中で使用される「治療用量」という用語は、本発明に従って患者に投与された時に、肺内のシュードモナス属細菌のレベルの減少をもたらすか、または肺内のシュードモナス属細菌の増殖速度の低下をもたらす用量であるものと了解されることになっている。

【0047】

平均最大血漿中濃度は、少なくとも１００ｍｇ／ｍｌのアミノグリコシド、例えば１５０〜２００ｍｇ／ｍｌのアミノグリコシド、例えば１８０ｍｇ／ｍｌの本発明によるアミノグリコシドを含んでなる製剤の投与により得られる。この発明による平均最大血漿中濃度は、パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ネブライザを用いるＴＯＢＩ（登録商標）の治療レジメンによって得られるよりも低い。

【0048】

本発明によれば、高濃度のアミノグリコシド溶液、例えば１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシンを含んでなる組成物は、肺感染症の治療および予防において使用され、前記組成物は４〜７μｍの空気動力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を有する単分散微小液滴を提供するエアロゾル化に適している。したがって「ＭＭＡＤ」は、微小液滴／エアロゾルの空気動力学的質量中央径として理解されることになる。

【0049】

水性計量式吸入器（ａＭＤＩ）は、患者によって吸入される薬剤の液滴の短時間大量放出の形で、肺に特定量の医薬品を送達するデバイスである。
ネブライザは、周期性呼吸によって肺内へ連続的に吸入されるミストの形態で液体医薬品を投与するために使用されるデバイスである。典型的な投与時間はマスクを通した連続的かつ安定した呼吸で２０分間である。先行技術の投与レジメンによってトブラマイシンを投与するために使用される周知のデバイスは、パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・デバイスシステム（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｐａｒｉ．ｃｏｍ／ｐｒｏｄｕｃｔｓ／ｎｅｂｕｌｉｚｅｒｓ／ｐｒｏｄｕｃｔ／ｄｅｔａｉｌ／ｉｎｆｏ／ｌｃ＿ｐｌｕｓ＿ｒｅｕｓａｂｌｅ＿ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ．ｈｔｍｌ）である。ネブライザを使用して医薬を投与する場合、患者はデバイスによって形成されたエアロゾルを周期性呼吸によって吸入する。これは、吸入が吸入器の作動と連携する本発明に適した計量式吸入器とは対照的である。したがって、投与はデバイスの作動毎に１回の吸入を含んでなる。デバイスの作動は当分野で既知の様々な手段により引き起こされうる。例えば、手動であってもよいし「呼吸センサ」によるものでもよい。

【0050】

計量式吸入器が呼吸センサの使用およびしたがって吸入のみによって作動せしめられる場合、組成物は「呼吸作動式吸入」によって投与される。
患者が１回の吸入を行なうと同時に計量式吸入器が手動で作動せしめられる場合、組成物は「連携式吸入」によって投与される。

【0051】

ａＭＤＩを用いた１回の吸入についての典型的な投与時間は数秒である。この操作が所望の用量を得るために数回繰り返されてもよい。
本発明で使用される最も好ましいａＭＤＩは、およそ５〜５．７μｍ（ＧＳＤ＜１．６）の空気動力学的質量中央径（ＭＭＡＤ）を備えた単分散粒子を生産する。

【0052】

当業者には、肺への浸透が主として粒度および吸入流量に依存するという事実はよく知られている。肺への浸透は１〜５μｍの範囲にわたり粒度（ＭＭＡＤ）の減少とともに増大し、かつ大きい粒子ほど口腔咽頭および太い気道において一般に衝突するので、１μｍ未満の粒子が一般に吐出されている。本発明の１つの態様によれば、組成物は、前記組成物のエアロゾル化によって形成された４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する単分散微小液滴の、１０〜５０Ｌ／分の流量を提供する適切な計量式吸入器を使用した吸入によって投与されるようになっている。計量式吸入器は、流量を制御するための絞り排気管を含んでなることもできる。

【0053】

いくつかの計量式吸入器が当業者に良く知られている。計量式吸入器は通常、特定用量の医薬製剤の肺への投与および送達のために設計されており、患者が操作すると同時にエアロゾル化された製剤の短時間大量放出を提供し、こうして該製剤が患者によって吸入される。簡潔に述べると、計量式吸入器は通常、下記構成要素すなわち：
ｉ）組成物が放出されるのを可能にする基端側開口部を有する、エアロゾル化用の製剤を含んでなるコンテナ；
ｉｉ）計量デバイスであって、該デバイスの操作時に、例えば軸方向可動ピストンに力を加えることにより、送達されるべき所定量の製剤の送達を提供する計量デバイス；
ｉｉｉ）組成物の計量および送達を可能にする手段で構成されている電源パック；ならびに
ｉｖ）エアロゾルの形成を提供するスプレーノズルユニット（ＳＮＵ）を備えたマウスピースであって、該マウスピースを通してエアロゾル化された薬剤が該デバイスを操作している患者によって吸入され、その結果該患者の肺の中へ組成物の前記エアロゾルの送達がもたらされる、マウスピース；
を含んでなる。

【0054】

組成物の計量および送達を可能にするための手段は、例えば、患者に投与されるべき所定量の薬剤の移送および送達を提供する計量式吸入器デバイスの外側で利用可能な投薬ノブを備え、該投薬ノブからピストンへと伝えられた力の集積が薬剤コンテナの内部圧力を作出してもよい。そのような圧力は、当業者に周知の任意の動力源、例えば電気力（バッテリー）、機械力（筋肉）、物理力（噴射剤）によって達成されうる。

【0055】

４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する高濃度アミノグリコシド製剤のエアロゾルを提供する任意の計量式吸入器が、本発明によって使用されうる。したがって、本発明の組成物を投与するのに有用な適切な計量式吸入器は、該計量式吸入器が４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する高濃度アミノグリコシド製剤のエアロゾルを形成するＳＮＵを含んでなる限り、組成物の連携式吸入に適した計量式吸入器であっても、呼吸作動式吸入に適した計量式吸入器であってもよく、前記計量式吸入器は、吸入および吸入器の作動と同時にコンテナからＳＮＵを通した本発明の組成物の移送を確実にする所望の圧力を提供する手段を含んでなる。

【0056】

本発明によれば、「微小液滴」または「エアロゾル」は、高濃度アミノグリコシド溶液のような医薬製剤を含んでなる、エアロゾル化された液体粒子である。
「ＧＳＤ」は幾何標準偏差である。

【0057】

本明細書中で使用され、かつ実施例において以下に言及される「Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイス」は、高濃度のトブラマイシンを含んでなる組成物の４〜７μｍのＭＭＡＤを有する単分散微小液滴を生じる、水性計量式吸入器（ＭＤＩ）である。

【0058】

高濃度アミノグリコシド溶液、例えば１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのトブラマイシン溶液を、例えば硫酸トブラマイシンの形態で含んでなる製剤の投与に有用な適切な計量式吸入器は、国際公開公報第２０１１／０４３７１２号パンフレットに記載されており、同文献は参照により本願に援用される。

【0059】

スプレーノズルユニット（ＳＮＵ）は、本発明によって使用される計量式吸入器のマウスピースに設けられて、吸入時（呼吸作動式吸入または連携式吸入）および患者によるデバイス操作時に単分散に近い微小液滴の作出を可能にする。より具体的には、例えば投薬ノブに力を加えて電源パックの作動を引き起こしたとき、かつデバイスを操作する患者の口内にマウスピースを設置した状態での連携呼吸により、組成物はコンテナからマウスピースへと移送されて強制的にＳＮＵを通過せしめられ、その結果吸入されるべき４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有するエアロゾルの形成がもたらされる。ＳＮＵは、前記エアロゾルの形成を提供する複数の通過オリフィスを含んでなる。

【0060】

４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有し、かつ高濃度のアミノグリコシド溶液を含んでなるエアロゾルを提供するための計量式吸入器で使用される適切なスプレーノズルユニット（ＳＮＵ）は、国際公開公報第０２／１８０５８号パンフレットに記載されており、同文献は参照により本願に援用される。

【0061】

図６では、水性計量式吸入器は、本発明の投与レジメンに従って使用されうることが示されている。前記デバイスは、再生可能な電源パック（３）、シリンジホルダ、使い捨ての薬物コンテナ（標準的なシリンジ（２））、およびスプレーノズルユニット（ＳＮＵ）を備えたマウスピース（１）を含んでなる。

【0062】

本発明による組成物の投与に適したａＭＤＩは、高粘性液体の平均径４〜７ミクロンの個別かつ均一なエアロゾル微小液滴を形成することができる。国際公開公報第９５／１３８６０号パンフレットには、典型的には５ｎｍ〜５０μｍの細孔径を有する細孔を備えた薄膜フィルタが記載されている。４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有するエアロゾルを提供する大きさの細孔を有している、該文献中に開示される薄膜は、本発明による高濃度のトブラマイシン組成物を投与するために、例えば国際公開公報第２０１１／０４３７１２号パンフレットに開示された計量式吸入器のような計量式吸入器に設置されるスプレーノズルユニットにおいて使用されることが好ましい。

【0063】

本発明の好ましい実施形態によれば、計量式吸入器によって形成されたエアロゾルは、ウィシンク（Ｗｉｓｓｉｎｋ）およびバン・ライン（ｖａｎ Ｒｉｊｎ）、「呼吸器のドラッグデリバリー ８（Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ８）」、２００２年（参照により本願に組込まれる）に記載されているようなスプレーノズルユニットを使用して提供される。同文献に開示された高性能マイクロノズルの使用は、粘着性から運動性へと転ずる噴流特性を備えて、０．５ＭＰａ（５バール）未満の経ノズル圧において＜１０μｍオリフィスで完全なレイリー分裂を提供する。本発明については、組成物が１５０〜２５０ｍｇ／ｍｌのアミノグリコシドを含んでなるとき、計量式吸入器は、２〜８ＭＰａ（２０〜８０バール）、好ましくは３〜４ＭＰａ（３０〜４０バール）の動作圧力を提供することが好ましい。

【0064】

本発明によれば、ＳＮＵは、４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有する高濃度アミノグリコシド溶液製剤のエアロゾル形成のための手段を備えている（上述のウィシンク（Ｗｉｓｓｉｎｋ）および（ｖａｎ Ｒｉｊｎ）（２００８）を参照）。１つの実施形態によれば、ＳＮＵは、シリコンチップ（メッシュ）（４）および医療グレードのプラスチックの成型プラスチック部品に分けられる（図７参照）。

【0065】

吸入されるべきエアロゾル化用製剤を含んでなるコンテナは、１つの実施形態によれば１ｍｌシリンジのようなシリンジ（１０）であってよい。可動ピストン（８）、および計量式吸入器内へのシリンジの挿入前に取り外される取り外し可能な保護キャップ（７）、を有する適切な１ｍｌシリンジは図８に示されている。

【0066】

本発明の投与レジメンに適した計量式吸入器は投薬ノブを含んでなる場合がある。患者が計量式吸入器の投薬ノブに圧力をかけると、該デバイスは作動せしめられ、ピストン（８）は所定距離を移動してシリンジからＳＮＵを通して適切な投与量の移送を提供することになる。

【0067】

デバイスが作動せしめられると、次いでピストン（８）は一定距離（およそ５０μｌに相当）を移動し、液体はシリコンチップ（メッシュ）の穴部を通して押し出されることにより微小液滴を作出し、該液滴はその後吸入される。これは、合計吸入用量を送達するのに必要な回数だけ繰り返すことができる。

【0068】

例えば、ピストンは、移動せしめられると、高濃度アミノグリコシド溶液を含んでなる所定量の製剤を移送せしめかつＳＮＵのオリフィスを通して押し出させ、４〜７μｍの空気動力学的質量中央径を有するエアロゾルの形成を提供する。したがって前記エアロゾルは、高濃度アミノグリコシド溶液を含んでなる製剤を、シリコンチップ（メッシュ）（５）のようなＳＮＵの穴部（オリフィス）に通して押し出すことにより、その後吸入される微小液滴が作出されて、形成される（図７）。これは、処方された用量を送達するのに必要な回数だけ繰り返すことができる。

【0069】

当業者であれば、本発明に従って１組の少量のエアロゾルを形成するために、ＳＮＵの例えばシリコンプレートまたは薄膜に設けられた１組の均一な大きさの穴部を通して粘稠溶液を移送することができるように、適切な圧力が加えられなければならないことを了解するであろう。本発明に従って使用される計量式吸入器は、２〜８ＭＰａ（２０〜８０バール）の範囲の動作圧力を提供することができる。好ましくは、１８０ｍｇ／ｍｌの硫酸トブラマイシンを含んでなる組成物が吸入されることになっている場合、本発明に従って使用される計量式吸入器は、３〜４ＭＰａ（３０〜４０バール）の範囲、好ましくは３．５ＭＰａ（３５バール）の動作圧力を提供することができる。

【0070】

本発明による組成物は、ａＭＤＩのＳＮＵを通して押し出されると、穴部の直径のおよそ１．８倍の直径を備えた個別の微小液滴として穴部を出ることになる。したがって、本発明に従って組成物を通して移送せしめるべきＳＮＵに存在するオリフィスの適切な直径は、１．８〜３．９μｍの範囲にありうる。その後、マウスピースを通した呼吸が始動されると微小液滴は肺へと導かれ、微小液滴の大規模な合体は回避される。

【0071】

適切なノズルを含んでなる上記言及の適切な吸入器はさらに、高いせん断速度＜５０ １／Ｓで最大５ｍＰａＳの粘性を有する組成物のエアロゾルを形成することもできるであろう。

【0072】

適切な吸入器は１０〜５０Ｌ／分の流量を提供するであろう。
本発明は、先行技術を上回るいくつかの利点を有している。投与時間は、利用可能な普及型の投与システム（ＴＯＢＩ（登録商標）／パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ネブライザ）を使用した２０〜３０分に対して、５分未満である。更に、合計では低量のトブラマイシンを投与しながらも、本発明は肺へのより大量のトブラマイシンの送達を提供する（表１２および表１３を参照）。加えて、本発明の方法は、前記の普及型の投与システムと比較して、より低い血漿中トブラマイシン濃度をもたらす（表１９を参照）。非常に低量の有効成分の投与が、なおも肺内に大量の有効成分をもたらすということは、驚くべきことである。本発明の方法が、たとえ肺内に大量の有効成分を提供するとしてもなお、普及型の投与レジメンを適用して得られる血漿中濃度と比較して低い有効成分の血漿中濃度をもたらすことは、更に驚異的である（表１９を参照）。本発明の方法によって得られる低い血漿中濃度はさらに、トブラマイシンの血漿中濃度が望ましくない副作用と関連することから、先行技術よりも優れた改善点である。

【0073】

本発明の１つの態様によれば、水１ｍｌあたり１８０ｍｇのトブラマイシンを含んでなる薬剤溶液が使用される。これは、市販製品（ＴＯＢＩ（登録商標））中の溶液の濃度のおよそ３倍に相当する。６０ｍｇ／ｍＬのトブラマイシンは、より高い総用量レベルでも健常ボランティアにおいて忍容されることが知られているが；上記の濃度上昇は、局所刺激のリスクを潜在的に増大させるとは考えられても、総用量レベルは低いので本研究において全身曝露または全身性副作用の主要な動因になるとは考えられない。本発明に関して実施された臨床研究の結果は、本発明の治療レジメンに供された時にごく少数の局所刺激の事例があることを明らかにした。

【実施例】

【0074】

ここで本発明について、以降の実験データに照らして説明する。当然ながら、実施例は本発明の範囲について限定するものと解釈されるべきではない。
材料
以降の実施例において、ｉｎ ｖｉｔｒｏの実験およびｉｎ ｖｉｖｏの臨床研究が提示され、普及型のネブライザ（パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザ）を使用して送達された普及型のトブラマイシン吸入溶液（ＴＯＢＩ（登録商標））が、本発明により４〜７μｍの範囲の空気動力学的質量中央径を有するエアロゾルを提供するＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用して送達されたトブラマイシン吸入溶液と比較されている。

【0075】

前記被験トブラマイシン溶液は以下の特徴を有する：

【0076】

【表1】

パリ・ネブライザ中で５ｍＬを使用した３００ｍｇトブラマイシンによる標準的治療は、用量のおよそ１０％しか肺に到達しないという結果を生じることになる。Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスについては、これは標識された用量の２０〜６０％である。

【0077】

Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスのような適切なａＭＤＩによって生じた微小液滴は、４〜７μｍの範囲の空気動力学的質量中央径を有する。
以下の実施例で使用されるトブラマイシン溶液は、３００ｍｌの水に８１．５ｇの硫酸トブラマイシンを溶解することにより調製された。よってｉｎ ｖｉｖｏの試験で患者に投与される溶液は、約６３ｍｇのトブラマイシン（０．３５ｍｌの１８０ｍｇ／ｍｌトブラマイシン）の投与に相当する。

【0078】

実施例１：トブラマイシンのｉｎ ｖｉｔｒｏ送達
臨床研究に先立ち、本発明によるトブラマイシンの溶液を放射性標識することが可能であること、および送達される放射活性のレベルがボランティアにとって安全かつシンチグラフィ撮像に十分であることを実証するために、ｉｎ ｖｉｔｒｏの実験が行なわれた。更に、該実験は、使用されるネブライザシステムの様々な部品に残るトブラマイシン溶液の量に関する情報も提供した。

【0079】

次の溶液すなわち：
１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液、クセリア社（Ｘｅｌｌｉａ）、ＢＮ：８００００９９１および８００００９９２
２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液、クセリア社、ＢＮ：８００００９８１
ＴＯＢＩ（登録商標）３００ｍｇ／５ｍＬトブラマイシン溶液、ノバルティス社（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＮ：Ｘ００３８１２
過テクネチウム酸ナトリウム溶液（^９９ｍＴｃ−ジェネレータから溶出）、ＩＢＡ、ＢＮ：Ａ−ＡＪＹ−０５およびＡ−ＡＬＬ−１３
^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡキット、コヴィデン（Ｃｏｖｉｄｅｎ）、ＢＮ：２９２７８６、２９０１８７および２９４８１４
がｉｎ ｖｉｔｒｏの実験において使用された。

【0080】

２０（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の放射性標識
臨床研究計画（実施例２）に基づき、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスは、ボランティアに６０ｍｇのトブラマイシンを、すなわち２０％（ｗ／ｖ）溶液×０．３ｍＬを吸入６回にわたって送達するように企図された。したがって、２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液はＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用する試験のために放射性標識された。^９９ｍＴｃ（過テクネチウム酸ナトリウム）溶液はテクネチウムジェネレータから溶出され、必要な体積がＤＴＰＡキットに添加されて完全に混合された。得られた^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液の放射活性が測定され、バイアルは密閉されて使用まで鉛製ポットに保管された。１５ｍＬの２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液は０．２０μｍフィルタを通してろ過され、清浄なシンチレーションバイアルに移された。その後、６４２ＭＢｑの放射活性を含有する^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液ほぼ０．１５ｍＬが該薬物溶液に添加され、磁気撹拌で完全に混合された。トブラマイシン溶液の色の変化または薬物沈澱が無いことが、放射性標識後に観察され、該放射性標識の該薬物製品との適合性が示された。得られたトブラマイシン溶液中の放射活性レベルは４２．８ＭＢｑ／ｍＬであり、０．３ｍＬ用量あたり１２．８ＭＢｑの放射活性が得られた。最終薬物溶液中の^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液の総体積はおよそ１．０％であったが、これは最終薬物溶液の特性（例えば粘性）にいかなる重要な影響も及ぼさず、従ってデバイス性能に影響を与えるものではない。

【0081】

Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用する２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシンのｉｎ ｖｉｔｒｏ送達
Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスによるｉｎ ｖｉｔｒｏトブラマイシン送達について、コプレイ（Ｃｏｐｌｅｙ）のフローポンプ（型番：ＨＣＰ２）を使用し、連続流量４５Ｌ／分（ｎ＝３）として特徴解析がなされた。

【0082】

試験に先立ち、ほぼ０．５ｍＬ（０．３ｍＬに加えて十分な過剰量）の放射性標識された２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液が、メドスプレイ（Ｍｅｄｓｐｒａｙ）提供の説明書（Ｔｏｂｒａｉｒ試験デバイスの使用説明書、ＳＨＬグループ、２０１０年１月１１日、２０１０年３月２日および２０１０年４月６日）に従って薬物カートリッジ（１ｍＬガラスシリンジ）に装荷され、放射活性が測定された。その後、薬物カートリッジ（シリンジ）はＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスへ組み立てられた。プライミング後、スプレーノズルユニット（ＳＮＵ）内の残存製剤はティッシュペーパーを使用して取り除かれた。デバイスの総重量（薬物カートリッジを加えたもの）は、該デバイスを吸入フィルタ（用量収集用）および次にコプレイフローポンプに接続する前に測定された。６回作動の後、重量減少（送達量）を計算するためにデバイスの重量が再測定された。その後、デバイスは分解され、各部分、すなわちノズルおよびマウスピース（ＳＮＵ）、シリンジ、シリンジホルダ、フィルタおよびフィルタホルダを加えた電源パックの放射活性が、放射性標識の物質収支（放射活性分布）を計算するためにガンマカメラを使用して測定された^３。

【0083】

表１に列挙された結果は、６回作動の後にデバイスから送達される薬物溶液の質量が正確でありかつ非標識製剤に非常に近いことを示している。この結果は、内標準法を用いる２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の放射性標識が薬物製剤／デバイスの性能を変化させなかったことを示している。シリンジから送達された放射活性は、１６．７〜２０．６ＭＢｑであった。しかしながら、これらの値は単に情報を得るために得られたものであり、この数字はプライミング中に失われた放射活性を含むのでボランティアに送達される実際の放射活性はこの値未満になるであろう。

【0084】

【表2】

Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスからの送達後の放射性標識された２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の放射活性分布は、表２に示された。３つの試験の間で比較的高い変動が観察されたが、これは、最初のシリンジへの製剤の装荷を正確にコントロールすることができなかったため、そのような装荷が変動的であることに起因すると思われた。送達される薬物（および放射性標識）用量はデバイスによってコントロールされるので、薬物装荷（従って総放射活性）の正確さは（装荷が６回の作動に十分である限り）重要ではない。しかしながら、最初の薬物装荷における変動は、投薬後にシリンジに残される製剤の様々な残存レベルをもたらす可能性があり、これは明らかに全物質収支の結果に影響するであろう。したがって、送達された用量の分布およびＳＮＵ、デバイスなどに残される製剤を反映するためには、シリンジを除外した物質収支がより正確であろう。そのような分布は表３および図１に示されており、表３および図１は比較的高い用量送達効率（５４〜７２％）がＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用して達成されうることを示している。６回の作動後にシリンジから送達された薬物および送達された放射活性の割合（％）に基づくと（キャピンテック（ＣａｐｉｎＴｅｃ）の型番：ＣＲＣ−１５Ｒを使用して測定）、該薬物溶液が対象時間に４２．８ＭＢｑ／ｍＬの放射活性レベルを有する場合、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスから送達された放射活性は２．４〜４．１ＭＢｑである（表３）。これらの放射活性レベルでは、ｉｎ ｖｉｔｒｏのガンマカメラ撮像に十分であると思われた。しかしながら、より良好なシンチグラフィ像のためにより高い放射活性レベルが必要な場合、最初の放射活性レベルが適宜調節されてもよい。

【0085】

【表3】

【0086】

【表4】

１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の放射性標識
修正された製剤／デバイスの組み合わせが臨床研究で使用するために選択された。これは、吸入７回にわたる１８％（ｗ／ｖ）溶液×０．３５ｍＬの送達を必要とした。したがって、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスによる^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ放射性標識トブラマイシン溶液のｉｎ ｖｉｔｒｏ送達が１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液を使用して反復された。放射性標識の方法は先述とほとんど同一であった。簡潔に述べると、^９９ｍＴｃ溶液が溶出され、ＤＴＰＡキットを使用して^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液が調製された。計算された体積の^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液（４８２ＭＢｑの放射活性を含有しているおよそ０．１５ｍＬ）が、１０ｍＬの予めろ過処理されたクセリア社提供の１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液が入ったバイアルに添加され、磁気撹拌を用いて完全に混合された。得られたトブラマイシン溶液中の放射活性レベルは、０．３５ｍＬ用量あたり１６．９ＭＢｑの放射活性を与える４８．２ＭＢｑ／ｍＬであった^３。放射性標識後、放射性標識された１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の色の変化または薬物沈澱は観察されず、該放射性標識の薬物産物との適合性が示された。

【0087】

Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用する１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシンのｉｎ ｖｉｔｒｏ送達
試験に先立ち、ほぼ０．７ｍＬの放射性標識された１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液が、既述のような薬物カートリッジに装荷された。プライミング後、ＳＮＵは残存製剤を除去するために水ですすがれ、残留水は１枚のペーパータオル上で穏やかにタッピングすることにより除去された。投薬送達のための試験条件は、２０％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液について上述されたものと同一であった。７回の作動後に送達された質量が決定され、放射性標識された溶液の物質収支（すなわち放射活性分布）も計算された。

【0088】

７回の作動後にデバイスから送達された薬物溶液の質量はほぼ０．４５ｍＬであり、予想された０．３５ｍＬより２８％多いことが分かった（表４）。この比較的高い送達質量は、ＳＮＵに残った残存生理食塩水（デバイスアセンブリにおいて使用）および水（すすぎに使用）の寄与によると考えられた。この実験では、臨床研究のために計画された同じ手順を再現するために；マウスピースは水ですすがれ、作動前にはティッシュペーパーで先述のように拭われるのではなくタッピングで乾燥せしめられた。この手順を用いると、少量の水がＳＮＵにまだ残っており、吸入の間に蒸発してみかけ上大きな重量減少を引き起こしているのであろう。

【0089】

【表5】

シリンジから送達された放射活性は２６．１７〜３６．０２ＭＢｑである。しかしながら、以前に議論されたように、これらの値はプライミングの間に送達された放射活性を含み、従ってボランティアに送達される実際の放射活性は表わしていない。Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスによる放射性標識された１８％（ｗ／）トブラマイシン溶液の送達の後、各部分における放射活性の分布がガンマカメラを使用して測定された。シリンジ内への最初の薬物装荷の変動が物質収支の結果に影響する可能性があるので、シリンジを除外した物質収支が計算されて表５および図２に示された。試験３ａおよび３ｂの結果は、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用して比較的高い用量送達効率（７７．８および８６．１％）が達成可能されうることを示している。しかしながら、試験３ｃからは比較的低い放射活性が送達され、対照的に、シリンジホルダおよび電源パックに予想外の比較的高い放射活性が観察された。この問題についての当初の見解は作動中の製剤の漏出に起因するものであった。しかしながら、そのような漏出であれば、漏出した製剤は吸入フィルタに送達されるよりもむしろまだデバイスに残ると思われるのでより低い質量送達（重量減少）をもたらすであろうが、実際には試験３ｃから送達された全質量は他の２つの試験との差がない（表４）。したがって、デバイス作動中の製剤の漏出は除外された。別の可能性は、デバイスの分解または放射活性測定の際の試料の交差汚染である。これは、実験３ｃの送達された用量質量が３ａおよび３ｂと同様であったにもかかわらず比較的低い放射活性を示した、表５の実験３ｃの送達された放射活性の結果により確認された。しかしながら、３つの試験すべての結果は、この放射活性レベルすなわち４８．２ＭＢｑ／ｍＬにおいて、送達される放射活性が所要範囲にあることを示している。

【0090】

【表6】

加えて、実験３ｂおよび３ｃにおいて短い作動時間が観察された。始動から停止クリックまでの時は３．５秒未満であり、これは推奨される作動時間であった。停止クリックは作動のほとんど直後に生じた。シリンジチップとＳＮＵキャビティとの間の緩い嵌合またはＳＮＵのシリコンチップの損傷は恐らくは作動時間に影響し、該作動時間は１．５秒以下であることが考えられる。この問題は、以下にさらに議論されることになる。

【0091】

Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用して送達された後の１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシンの質量減量
Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用した１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシンの送達についてのｉｎ ｖｉｔｒｏ試験の際、７回の作動後に該デバイスから送達される薬物溶液の質量が予想される０．３５ｍＬより２８％高いことが分かった。この比較的高い質量送達は、プライミングおよびＳＮＵのルアーキャビティ内に閉じ込められた空気の除去の後に薬物製剤をすすぐために使用された水および生理食塩水の同時蒸発に起因すると考えられた。この仮説を裏付けるために、先の実験で使用された減衰した放射性標識１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液を使用して、質量減少試験が行なわれた。デバイスは上述されたのと同じ方法を使用してプライミングされて乾燥せしめられた。その後、デバイスはコプレイのフローポンプに接続され、該ポンプは、デバイスの実際の作動を伴わずに４５Ｌ／分で１４０秒間（７回の作動に必要な合計時間と同じ）操作された。残留水の蒸発を計算するため、この処理の前後にデバイスの重量が測定された。その後、デバイスは正規の手順のように７回作動され、さらなる重量減少が測定された。

【0092】

【表7】

表６に列挙された結果は、ＳＮＵ内の残留水が総重量減少に影響すること、および、エアフローポンプを４５Ｌ／分で１４０秒間運転することにより残留水を蒸発させた後は、送達された製剤からの実際の重量減少は０．３７ｇであることを示した。１．１１５ｇ／ｍＬの製剤密度を考慮すると、平均送達体積は必要とされる用量をわずか４．６％しか下回らない０．３３４ｍＬのはずである。この実験は、７回の作動で、Ｔｏｂｒａｉｒ ４デバイスは臨床研究のための１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の正確な用量を実際に送達することができることを立証している。

【0093】

３回の送達実験１０４４１８−０４ａ、４ｂおよび４ｃの全体にわたって作動時間が観察された。実験４ｂおよび４ｃにおける７回の作動の各々はおよそ３．５秒であることが分かった。しかしながら実験４ａでは、およそ１秒の短い作動時間を有する２回の作動（作動６および７）が存在していた。

【0094】

Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用する放射性標識された１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシンのｉｎ ｖｉｔｒｏ送達
Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスによる放射性標識された１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液のｉｎ ｖｉｔｒｏ送達は、送達用量が適切であることを確認するために、また７回の作動の各々がおよそ３．５秒でエアロゾル化されることを実証するために、再び行われた。

【0095】

１０ｍＬの予めろ過処理された１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液は、０．１５ｍＬ（薬物溶液の全体積の１．５％）の^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡキットを用いて放射性標識された。１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液の放射活性は対象時間において０．３５ｍＬあたり１６．２４ＭＢｑを与える４６．４ＭＢｑ／ｍＬであった。この溶液は試験のために５つのシリンジ（公称の充填容積は０．７ｍＬである）に充填された。シリンジ５ｂおよび５ｄは組み立てられたがプライミング中に短い作動時間が観察されたため試験は行われなかった。送達用量および物質収支の試験は、ＳＮＵ中のあらゆる残留生理食塩水および水を除去するために、デバイス作動前に１４０秒の遅延時間が導入されて行われた。表７の結果は、送達された用量が７回の作動で名目上の用量すなわち０．３５ｍＬの１０％の範囲内の１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液であることを実証した。表８に列挙された結果は、送達された放射活性が１０〜２０ＭＢｑの範囲内にあることを立証した。放射性標識された溶液の物質収支（表８および図４）は、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用して高い用量送達効率（６８％〜８４％）が達成されうることを実証した。

【0096】

コプレイ（Ｃｏｐｌｅｙ）の流量調節計（型番：ＴＰＫ）のタイマーに基づけば、これら３つの実験からの７回の作動時間はすべて３秒以上であった。汚染または漏出はガンマカメラ像からは検知されなかった（図３）。

【0097】

【表8】

【0098】

【表9】

【0099】

【表10】

デバイスは、「Ｔｏｂｒａｉｒ試験デバイス使用説明書（Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｕｓｅ ｏｆ Ｔｏｂｒａｉｒ ｔｅｓｔ ｄｅｖｉｃｅ）」の最新版に従ってプライミングされた。デバイスのプライミング中、シリンジはＳＮＵキャビティに確実に嵌合されたが、不適当な作動時間（すなわち１秒以下）に関する問題は排除されないことが見出され、デバイスアセンブリに使用されたＳＮＵまたはシリンジのうち少なくともいずれかに依存することが分かった。メドスプレイ（Ｍｅｄｓｐｒａｙ）との討議の後、最初のプライミングが用量設定ノブを保持するためにスパナを使用して実施された後に、作動が行われるべきであると考えられた。これは、ＳＮＵ内部のシリコンチップを破損するおそれのある高圧下で最初の用量が放出されないことを確実にするためである。更に、制御された動力を備えたシリンジ押し込み用具が提供されており、該用具はＳＮＵキャビティ内にシリンジを取り付けるために使用されるはずである。

【0100】

パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザを使用するトブラマイシン（ＴＯＢＩ（登録商標））のｉｎ ｖｉｔｒｏ送達
ＴＯＢＩ（登録商標）溶液の放射性標識
使用された先行技術のトブラマイシン溶液および普及型の送達システムとの比較のために、パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザを使用して送達されるべきＴＯＢＩ（登録商標）溶液（３００ｍｇ／５ｍＬのトブラマイシン）、個々のＴＯＢＩ（登録商標）ユニットが放射性標識された。９９ｍＴｃ溶液が溶出され、ＤＴＰＡキットを使用して９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液が調製された。得られた９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液の放射活性が測定され、バイアルは密閉されて使用まで鉛製ポットに保管された。ＴＯＢＩ（登録商標）溶液のアンプルの全内容物（〜５ｍＬ）が清浄なシンチレーションバイアルへ移され、計算された体積の９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液（１８．１ＭＢｑ／５ｍＬを含有するおよそ０．０７ｍＬ）が該薬物溶液に添加され、磁気撹拌を用いて完全に混合された。放射性標識後、トブラマイシン溶液の色の変化または薬物沈澱は観察されず、ＴＯＢＩ（登録商標）溶液を用いた放射性標識の適合性が示された。得られた薬物溶液の平均放射活性レベルは単位用量あたり１８．１ＭＢｑであり、最終薬物溶液中の９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ溶液の全体積はおよそ１．４％４であったが、これは最終薬物溶液の特性にいかなる重要な影響も及ぼさないと思われ、従ってデバイス性能に影響しないと思われる。

【0101】

パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザを使用するＴＯＢＩ（登録商標）トブラマイシンの送達
パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザによるｉｎ ｖｉｔｒｏのトブラマイシン送達は、標準的な周期性呼吸モードを備えたコプレイ（Ｃｏｐｌｅｙ）ＢＲＳ１０００呼吸シミュレータを使用して特徴解析された（ｎ＝３）：
・一回呼吸量： ５００ｍＬ
・頻度： 毎分１５回呼吸（１５ｂｐｍ）
・吸入／呼息比： １：１
試験に先立ち、放射性標識されたＴＯＢＩ（登録商標）溶液はシンチレーションバイアルからパリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザ内の薬物チャンバの中へ移された。放射性標識されたＴＯＢＩ（登録商標）溶液の重量が測定され、次に放射活性が計算された（表１０）。その後、ネブライザは呼息フィルタ（パリ・フィルタ／バルブセット^９）とともに組み立てられてから、吸入フィルタ（用量収集用）を介してコプレイＢＲＳ１０００呼吸シミュレータに接続された。その後、該デバイスはパリ・ターボボーイＮ（ＴｕｒｂｏＢＯＹ Ｎ）コンプレッサを使用して乾固するまで運転された。投薬の後、送達された質量を計算するためにデバイスの重量が再度測定された。デバイスはさらに分解され、各部分すなわち吸入フィルタ、呼息フィルタ、Ｔ部品およびパリ・ネブライザの放射活性が、放射性標識の物質収支を計算するためにガンマカメラを使用して測定された（表１１）。「実験室の詳細記録：１０４４１８−０２ パリ・ＬＣプラス・ジェット式ネブライザによる放射性標識ＴＯＢＩ溶液の送達用量および物質収支試験（Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｗｒｉｔｅ ｕｐ：１０４４１８−０２ Ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ ｄｏｓｅ ａｎｄ Ｍａｓｓ ｂａｌａｎｃｅ ｔｅｓｔｓ ｏｆ ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ ＴＯＢＩ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｖｉａ ＰＡＲＩ ＬＣ ＰＬＵＳ Ｊｅｔ ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ）」、２０１０年２月２日付、を参照。

【0102】

表１０に列挙された結果は、デバイスに装荷された放射性標識ＴＯＢＩ（登録商標）溶液の質量が５ｇよりわずかに多く、かつ投薬前のデバイス中の放射活性が１５．５〜１９．５ＭＢｑであったことを示している。しかしながら、噴霧化して乾固した後、すなわちエアロゾルがもはや生成されない時、最初に装荷された質量のおよそ４０％がデバイス内に依然として残されていた（表１０）。

【0103】

【表11】

【0104】

【表12】

パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザによる送達後の放射性標識されたＴＯＢＩ（登録商標）トブラマイシン溶液の物質収支（放射活性として表示）は、表１１および図４に示されている。該結果に基づくと、肺に沈着した製剤の割合（％）（吸入フィルタ内の分画として定義）はおよそ約３０％であろうことが予想される。合計送達用量（吸入フィルタおよび呼息フィルタの合計）は、装荷用量の４０．６〜５３．５％であろう（１ＴＯＢＩ（登録商標）ユニット＝３００ｍｇトブラマイシン）。

【0105】

デバイスに残された放射活性の割合（およそ５０％）が質量の割合（３５．８〜４１．７％）より高いことが注目される。同様の知見は、ガトナッシュ（Ｇａｔｎａｓｈ）らによりネブライザからの用量送達について報告されており（ガトナッシュ、Ａ．Ａ．（Ｇａｔｎａｓｈ，Ａ．Ａ．）ら、「放射性トレーサを使用してエアロゾルネブライザ出力を測定する新しい方法（Ａ ｎｅｗ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｍｅａｓｕｒｉｎｇ ａｅｒｏｓｏｌ ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ ｏｕｔｐｕｔ ｕｓｉｎｇ ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ ｔｒａｃｅｒｓ）」、欧州呼吸学会雑誌（Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｊ．）、１９９８年、第１２巻、ｐ．４６７−４７１）、これは移行時の放射性標識（および薬物）溶液からの水蒸発に起因すると考えられた）。薬物濃度は噴霧化中に一定ではないので、噴霧化後に重量減少を測定することにより送達された薬物用量を決定することは適切ではない。しかしながら、薬物および放射性標識の両方が製剤中に溶解され、また噴霧化の際の放射活性の変化が薬物濃度の変化に相当するであろうことから；送達される放射活性は依然として送達される薬物用量の十分な代用物になるであろう。

【0106】

ｉｎ ｖｉｔｒｏの特徴解析の結果から、^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ内標準法は、パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ネブライザによって送達される用量（放射活性）の割合（％）がＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスについて観察される割合より低い可能性があるものの、臨床研究のためのＴＯＢＩ（登録商標）トブラマイシン溶液の放射性標識に適していることが示されている。その結果、製剤中の放射活性は可能な限り高く、最大許容限界内を目標とされるべきである。さらに、臨床研究の際の画像収集時間が増大する好機は、研究目的を達成するのに適した良質な画像が得られることを保証するであろう。

【0107】

結論
両トブラマイシン溶液、すなわち高濃度の１８％（ｗ／ｖ）溶液およびＴＯＢＩ（登録商標）６％（ｗ／ｖ）溶液は、内標準法を使用して^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡで良好に放射性標識された。すべての放射性標識された薬物溶液は、沈澱が存在せず透明かつ無色であり、従って薬物・放射性標識相互作用は観察されなかった。良好な用量（放射活性）送達および物質収支の結果は、製剤送達の点でパリ・ＬＣ（登録商標）ネブライザよりも相対的に高い効率を示したＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスから見出された。結論付けられることは、^９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡがガンマシンチグラフィ検査に使用するのに好適な代理マーカーであること、ならびに１８％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液およびＴＯＢＩ（登録商標）６％（ｗ／ｖ）トブラマイシン溶液に使用される放射活性のレベルはそれぞれ最高でも０．３５ｍＬにつき（ＮＭＴ）２０ＭＢｑ以下およびＴＯＢＩ（登録商標）１ユニット（〜５ｍＬ）につきＮＭＴ ２０ＭＢｑであって、ボランティアへの投薬に適切であろうことである。

【0108】

実施例２：ｉｎ ｖｉｖｏデータ；先行技術の投与レジメンと本発明による治療レジメンとの比較
本発明の治療方法によるトブラマイシンの肺沈着を評価するために、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスおよびパリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザによるトブラマイシンの単回用量投与後の、健常者における肺分布および薬物動態を研究する二者間の非無作為化交差試験が行なわれた。該試験は、使用されるエアロゾル送達システムが何であるかを隠すことが不可能であるため、オープンラベル試験として設計された。

【0109】

１８名の健康なボランティアの男性および健康なボランティアの妊娠していない授乳中でない女性が以下の治療レジメンの対象となった：
・およそ６３ｍｇのトブラマイシン（１８０ｍｇ／ｍＬ×０．３５ｍＬ）を新規なＴｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスによって深くゆっくりとした吸入７回にわたり肺に送達。

【0110】

・３００ｍｇのトブラマイシン（ＴＯＢＩ（登録商標）、６０ｍｇ／ｍＬ×５ｍＬ）をパリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザによって緩やかな周期性呼吸を用いて乾固するまでまたは最大３０分間、肺に送達。

【0111】

トブラマイシンの肺沈着を測定するために使用される方法は、確立したガンマシンチグラフィの放射線核種撮像技法であり（処方情報、吸入用ＴＯＰＩ（登録商標）トブラマイシン溶液（添付文書）、米国ワシントン州シアトル：カイロン・コーポレイション（Ｃｈｉｒｏｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）；２００４年、クラステルスク（Ｋｌａｓｔｅｒｓｋｕ）ら、「グラム陰性菌による気管支肺感染の治療におけるアミノグリコシドの間欠的および持続的投与の比較試験（Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｔ ａｎｄ ｃｏｎｔｉｎｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｂｒｏｎｃｈｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ ｄｕｅ ｔｏ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ）」、感染疾患総説誌（Ｒｅｖ．Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ．）、１９８１年、第３巻、第１号、ｐ．７４−８３）、該方法は肺送達システムからのｉｎ ｖｉｖｏ沈積の定量的評価が定量化されるのを可能にする。ガンマシンチグラフィはさらに、主として太い気道に相当する中央領域と、主として細い気道および肺胞に相当する末梢領域とを備えた肺の中の沈積した薬物または製剤の領域分布の評価を提供することもできる。

【0112】

本臨床研究は、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスを使用して健常者へ吸入により投与されたトブラマイシンのエアロゾル送達特性（ｉｎ ｖｉｖｏの肺沈着および投与時間により測定）を、パリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザを使用した送達特性と比較するために設計された。加えて、血清トブラマイシン濃度および薬物動態パラメータが、トブラマイシン肺沈着との関連を評価するために決定された。

【0113】

ガンマシンチグラフィを使用してトブラマイシンの気管支肺での分布を評価するために、薬物溶液は代用マーカーとしてガンマ線を放射する放射性同位元素で標識された。より具体的には、テクネチウム９９ｍジエチレントリアミンペンタ酢酸（９９ｍＴｃ−ＤＴＰＡ）が本研究で使用されて、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスおよびパリ・ＬＣ（登録商標）プラス・ジェット式ネブライザを使用して１用量当たり１０〜２０ＭＢｑが達成された。

【0114】

安全性は、有害事象データならびにパルスオキシメトリおよび肺活量測定のデータを含む生命徴候データの調査により同じく評価された。
ボランティア被験者について実施されたガンマシンチグラフィの測定値は、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイスのような吸入器を使用するおよそ６３ｍｇのトブラマイシン（すなわち０．３５ｍｌの１８０ｍｇ／ｍｌトブラマイシン溶液）の投与が、商業的に利用可能かつ普及型の投与レジメンと類似の肺浸透プロファイルを提供することを示している（図１参照）。この結果は、Ｔｏｂｒａｉｒ（登録商標）デバイス内の投与に利用可能な合計量が普及型の投与レジメンと比較すると本発明の方法によれば相当に低いことを考慮に入れると、驚くべきことである。

【0115】

加えて、該結果は、レジメンＡを使用する場合はレジメンＢと比較してより少ないトブラマイシンが吐出されることを示している（表１２および下記参照）。

【0116】

【表13】

【0117】

【表14】

該結果はさらに、本発明による治療レジメン（レジメンＡ）が、６つの肺領域（区域１〜６）において普及型の投与レジメン（レジメンＢ）と同様の沈着パターンおよび肺浸透プロファイルを提供することを示している（以下の表１４参照）。

【0118】

【表15】

【0119】

【表16】

【0120】

【表17】

【0121】

【表18】

更に、本発明による治療レジメンは普及型の投与レジメン（レジメンＢ）と比較してより短い投与時間を提供する。治療レジメンＡに従って、すなわち深くゆっくりとした７回の吸入により、トブラマイシン用量を吸入するためにかかる時間は、実施に６０秒未満しか要しない。これは、７回の吸入それぞれにかかった時間が記録されている表１８に示された結果によって例証される。

【0122】

【表19】

【0123】

【表20】

【図6】

【図7】

【図8】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】