特許 6023699 抗体依存性細胞性細胞傷害を増強する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6023699

(24)【登録日】2016年10月14日

(45)【発行日】2016年11月9日

(54)【発明の名称】抗体依存性細胞性細胞傷害を増強する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20161027BHJP

   A61K 31/55 20060101ALI20161027BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20161027BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20161027BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20161027BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20161027BHJP

【ＦＩ】

   A61K39/395 N

   A61K31/55

   A61P35/00

   A61P1/00

   A61P35/02

   A61P29/00 101

【請求項の数】18

【全頁数】40

(21)【出願番号】特願2013-506314(P2013-506314)

(86)(22)【出願日】2011年4月21日

(65)【公表番号】特表2013-525373(P2013-525373A)

(43)【公表日】2013年6月20日

(86)【国際出願番号】US2011033500

(87)【国際公開番号】WO2011133819

(87)【国際公開日】20111027

【審査請求日】2014年3月24日

(31)【優先権主張番号】61/326,406

(32)【優先日】2010年4月21日

(33)【優先権主張国】US

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】511027770

【氏名又は名称】ベンティアールエックス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＶｅｎｔｉＲｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】ハーシュバーグ， ロバート

【審査官】 天野 貴子

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００６−５２８６２６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００９／１４９３０６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／０１４９１３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００９−５０４７６３（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３９／３９５

Ａ６１Ｋ ３１／５５

Ａ６１Ｐ １／００

Ａ６１Ｐ ２９／００

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ａ６１Ｐ ３５／０２

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

治療用モノクローナル抗体処置を受けている被験体において抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を増大させるための組合わせ物であって、該組合わせ物は、治療用モノクローナル抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を含み、ここで、該ＡＤＣＣエンハンサー分子が、｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、組合わせ物。

【請求項2】

前記治療用モノクローナル抗体が、治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、治療用抗Ｈｅｒ２モノクローナル抗体、または治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体である、請求項１に記載の組合わせ物。

【請求項3】

前記治療用モノクローナル抗体が、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブまたはパニツムマブである、請求項１に記載の組合わせ物。

【請求項4】

前記被験体がＦｃγＲ多型またはＫＲＡＳ変異を有するか、前記被験体が、治療用抗体処置に対して不応答性であると以前に同定された被験体であるか、または前記被験体がＡＤＣＣ機能障害を有する、請求項１に記載の組合わせ物。

【請求項5】

前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が、前記治療用抗体の投与の前に、該治療用抗体の投与と同時に、または該治療用抗体の投与の後に投与されることを特徴とする、請求項１に記載の組合わせ物。

【請求項6】

請求項１に記載の組合わせ物であって、
（ｉ）前記被験体が乳癌を有する場合、前記モノクローナル抗体は、抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体であるか；
（ｉｉ）前記被験体がＢ細胞障害を有する場合、前記モノクローナル抗体は、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体であるか；
（ｉｉｉ）前記被験体がＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫、ＥＧＦＲを発現する頭頸部癌、またはＫＲＡＳ変異体癌を有する場合、前記モノクローナル抗体は、抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体である、組合わせ物。

【請求項7】

前記抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体が、トラスツズマブである、請求項６に記載の組合わせ物。

【請求項8】

前記抗ＣＤ２０モノクローナル抗体が、リツキシマブである、請求項６に記載の組合わせ物。

【請求項9】

前記Ｂ細胞障害がリンパ腫、白血病または関節リウマチである、請求項６に記載の組合わせ物。

【請求項10】

前記抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体がセツキシマブまたはパニツムマブである、請求項６に記載の組合わせ物。

【請求項11】

前記ＫＲＡＳ変異体癌が結腸直腸癌である、請求項６に記載の組合わせ物。

【請求項12】

前記ＡＤＣＣを増大させるのに十分な量が、０．１ｍｇ／ｍ^２〜１０ｍｇ／ｍ^２の間、１ｍｇ／ｍ^２〜８ｍｇ／ｍ^２の間、２ｍｇ／ｍ^２〜８ｍｇ／ｍ^２の間、２ｍｇ／ｍ^２〜６ｍｇ／ｍ^２の間、２ｍｇ／ｍ^２〜４ｍｇ／ｍ^２の間、または、０．１ｍｇ／ｍ^２〜４ｍｇ／ｍ^２の間である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組合わせ物。

【請求項13】

治療有効量の１つ以上の化学療法剤をさらに含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組合わせ物。

【請求項14】

｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミド、ならびに、セツキシマブおよびパニツムマブからなる群より選択される治療用抗体を含有する組合わせ物であって、
ここで、該｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドは、治療用モノクローナル抗体処置を受けている被験体において抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を増大させる方法において使用するためのものであり、該被験体においてＡＤＣＣを増大するのに十分な量である、
組合わせ物。

【請求項15】

さらに１つ以上の化学療法剤を含む、請求項１４に記載の組合わせ物。

【請求項16】

｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミド、ならびに、セツキシマブおよびパニツムマブからなる群より選択される１つ以上の治療用モノクローナル抗体を含むキットであって、
ここで、該｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドは、治療用モノクローナル抗体処置を受けている被験体において抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を増大させる方法において使用するためのものであり、該被験体においてＡＤＣＣを増大するのに十分な量である、
キット。

【請求項17】

１つ以上の化学療法剤をさらに含む、請求項１６に記載のキット。

【請求項18】

癌の処置における使用のための指示をさらに含む、請求項１６または１７に記載のキット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
本願は、２０１０年４月２１日に出願された米国仮特許出願第６１／３２６，４０６号の利益を主張し、この米国仮特許出願の全体の内容は、本明細書中に参考として援用される。

【0002】

開示の分野
本開示の実施形態は、癌および他の細胞性疾患の処置のための治療用モノクローナル抗体の細胞傷害性を増強する方法を対象とする。

【背景技術】

【0003】

開示の背景
モノクローナル抗体（ＭＡｂ）は、様々な悪性疾患における臨床的有効性を明らかにしてきた。モノクローナル抗体は現在、癌、自己免疫疾患、血栓症、炎症および感染の処置および／または予防のための治療薬として一般的に使用されている。しかし、低い抗体活性が癌、自己免疫疾患、炎症および感染に対する不十分な治療効果に寄与するいくつかの場合がある。そのような不十分な薬剤作用は、投薬量の増加および処置のために必要なコストの増加を導き得る。これらの状況下で、モノクローナル抗体の治療活性の増強は重要な目標である。

【0004】

治療用モノクローナル抗体は、特に癌または他の細胞性疾患の処置において使用される場合、好ましくは抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）の能力を有する。すなわち、治療用ＭＡｂは、好ましくは、標的癌細胞またはリンパ球などの標的細胞に対して細胞傷害作用を及ぼす。そのような抗体は、標的細胞の表面の抗原に結合し、抗体のＦｃドメインを介して、ＮＫ細胞およびマクロファージなどのエフェクター細胞の表面のＦｃ受容体に結合して、それにより標的細胞に損傷を及ぼす。この機構が抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）である。あるいは、抗体は、Ｆｃドメインを介して補体を活性化することによって細胞を損傷する。これは補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）と呼ばれる。Ｆｃドメインを介して働くそのような抗体活性は、エフェクター活性と呼ばれる。

【0005】

抗体の治療活性を増強することを目的として、抗体のエフェクター機能を増強する様々な試みが為されてきた。単球、好中球およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞などのいくつかの種類のエフェクター細胞は、免疫グロブリンのＦｃ部分に結合する表面受容体を有する。標的細胞に対するＡＤＣＣを誘導するためのエフェクター細胞には、ヒト白血球、マクロファージ、単球、活性化好中球、ならびにおそらく活性化ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞および好酸球が含まれる。好ましいエフェクター細胞はＦｃγＲＩを発現し、例えば単球および活性化好中球を含む。ＦｃγＲＩの発現はインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）によって上方調節されることが認められている。この発現増強は、標的細胞に対する単球および好中球の細胞傷害活性を増大させる。

【0006】

Ｆｃ受容体は、免疫系の防御機能に寄与する、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、好中球および肥満細胞を含む特定の細胞の表面上で認められるタンパク質である。Ｆｃ受容体は、感染細胞、侵入病原体または癌細胞に付着している抗体に結合する。その活性は食細胞または細胞傷害性細胞を刺激して、抗体媒介性食作用またはＡＤＣＣによって微生物、感染細胞または癌細胞を破壊する。フラビウイルスなどの一部のウイルスは、抗体依存性感染増強作用として知られる機構により、それらが細胞に感染するのを助けるためにＦｃ受容体を利用する。Ｆｃ受容体はＡＤＣＣ過程に関与する。例えば、ＡＤＣＣの間にナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の表面のＦｃγＲＩＩＩ受容体はＮＫ細胞を刺激し、それらの顆粒から細胞傷害性分子を放出させて、抗体で覆われた標的細胞を死滅させる。

【0007】

認識する抗体の種類に基づいて分類される、いくつかの異なる種類のＦｃ受容体が存在する。ＩｇＧ Ｆｃ受容体の１つの群であるＦｃγＲは、免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、オプソニン化された（被覆された）微生物の食作用を誘導するための最も重要なＦｃ受容体である。それらは白血球上で発現され、３つの異なるクラス：ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ（ＦｃγＲＩＩａおよびＦｃγＲＩＩｂ）、ＦｃγＲＩＩＩ（ＦｃγＲＩＩＩａおよびＦｃγＲＩＩＩｂ）からなる。上記受容体はまた、ＩｇＧに対するそれらの親和性によっても区別される。ＦｃγＲＩはＩｇＧに対して高い親和性を示し、一方ＦｃγＲＩＩとＦｃγＲＩＩＩはより弱い親和性を示す。ＦｃγＲＩＩａおよびＦｃγＲＩＩＩａは、それぞれ単球／マクロファージおよび単球／マクロファージ／ＮＫ細胞上で発現されるＦｃγＲを活性化し、ヒト標的の細胞傷害を引き起こすことができる。

【0008】

２つの機能性ＦｃγＲ遺伝子多型、ＦｃγＲ３ａ−Ｖ１５８ＦおよびＦｃγＲ２ａ−Ｈ１３１Ｒは、ＩｇＧの結合に影響を及ぼし、ＡＤＣＣ機能を変化させて、臨床での腫瘍応答に影響を与えることが同定されている。ＦｃγＲ２ａ−Ｈ１３１Ｒ多型は細胞外リガンド結合ドメインに位置する。上記多型は、アミノ酸位置１３１にヒスチジン（Ｈ）またはアルギニン（Ｒ）対立遺伝子のいずれかを有する。ＦｃγＲ２ａ−１３１Ｈ／Ｈ遺伝子型は、インビトロアッセイにおいてヒトＩｇＧ２に対してより高い親和性を有する。ＦｃγＲ３ａ−Ｖ１５８Ｆ多型は、アミノ酸位置１５８にバリン（Ｖ）またはフェニルアラニン（Ｆ）のいずれかをコードする。インビトロ試験は、ＦｃγＲ３ａ Ｖ対立遺伝子がＦ対立遺伝子よりもヒトＩｇＧ１に対してより高い結合親和性を有することを示し、それは、ＦｃγＲ３ａ Ｖ対立遺伝子を担持する免疫エフェクター細胞がＡＤＣＣをより有効に媒介することを示している（非特許文献１）。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0009】

【非特許文献1】Ｚｈａｎｇら、Ｊ．ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２５：３７１２−３７１８，２００７

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

モノクローナル抗体の治療上の有効性を改善するさらなる必要性が存在する。抗体のエフェクター機能を増強する、例えば抗体のＡＤＣＣおよび／またはＣＤＣ機能を増強することが求められている。

【課題を解決するための手段】

【0011】

関連技術の上記説明を含む本記載全体を通して、ありとあらゆる米国特許を含む、本明細書で記述されるありとあらゆる公的に利用可能な資料は、それらの全体が参照により本明細書に具体的に組み込まれる。関連技術の上記説明は、いかなる意味においても、係属中の米国特許出願を含む、その中で記述される資料のいずれかが本開示の実施形態に対する先行技術であることの承認とはみなされない。さらに、記述される生成物、方法および／または装置に関連するいかなる不都合についての本明細書の記述も、開示される実施形態を限定することを意図されない。実際に、本開示の実施形態は、記述される不都合に煩わされることなく記述される生成物、方法および／または装置の特定の特徴を含み得る。

【0012】

開示の概要
本開示は、癌および免疫細胞媒介性疾患または障害などの細胞性疾患の処置において治療用抗体のＡＤＣＣ活性を増強する方法に関する。一般に、治療用抗体のＡＤＣＣ活性は、式Ｉ：

【0013】

【化1】

［式中、
Ｙは、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ８で置換されたアリール環であり、上記アリール環は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ_３、ＣＦ_３Ｏ−、ＨＣＦ_２Ｏ−、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキルおよびＡｒＯ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じてさらに置換されており；
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ６ＳＯ_２Ｒ７、ＳＲ６ ４ ＳＯ_２Ｒ６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されているか；
またはＲ３およびＲ４は、それらが結合している原子と共に飽和または部分不飽和Ｃ_３〜Ｃ_６炭素環式環を形成し、上記炭素環式環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ６ＳＯ_２Ｒ７、ＳＲ６およびＳＯ_２Ｒ６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されており；
Ｒ２およびＲ８は、Ｈ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ６ＳＯ_２Ｒ７、ＳＲ６およびＳＯ_２Ｒ６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されており；
Ｒ５ａ、Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＭｅ、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＨＦ_２およびＣＦ_３から独立して選択され；そして
Ｒ６およびＲ７は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、Ｏ−アルキル、ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）アルキル、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏアルキル、 ＯＣ（＝Ｏ）Ｈ、ＯＣ（＝Ｏ）アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）_２アミノＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−およびアルキル−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されているか；
またはＲ６およびＲ７は、それらが結合している原子と共に、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択される飽和または部分不飽和複素環式環を形成し、上記複素環式環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）アルキル、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏアルキル、ＯＣ（＝Ｏ）Ｈ、ＯＣ（＝Ｏ）アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）_２アミノＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−およびアルキル−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されている］
を有するＡＤＣＣエンハンサー分子と治療用抗体との同時投与によって増強され得る。

【0014】

本発明はまた、式Ｉに従う化合物の代謝産物、溶媒和物、互変異性体または薬学的に許容され得る塩に関する。

【0015】

例えば、Ｒ２はＯＲ６である。

【0016】

例えば、Ｒ６は、エチルなどのＣ_１〜Ｃ_６アルキルである。

【0017】

例えば、本発明は、Ｒ２がＮＲ６Ｒ７である、式Ｉの化合物に関する。

【0018】

例えば、本発明は、Ｒ２がＮＲ６Ｒ７であり、かつＲ６およびＲ７が、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルおよびＣ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキルから独立して選択される、例えばＲ６およびＲ７がＨ、エチル、プロピルまたはＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３などである、式Ｉの化合物に関する。

【0019】

例えば、本発明は、Ｙがフェニルである、式Ｉの化合物に関する。

【0020】

例えば、本発明は、Ｒ８が、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、ならびに３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキルから選択される、式Ｉの化合物に関する。

【0021】

例えば、本発明は、Ｒ８が、５または６個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキルである、式Ｉの化合物に関する。例えば、Ｒ８はピロリジンである。

【0022】

例えば、本発明は、Ｒ６およびＲ７が、ＨおよびＣ_１〜Ｃ_６アルキルから独立して選択される、式Ｉの化合物に関する。

【0023】

例えば、本発明は、Ｙが、

【0024】

【化2】

である、式Ｉの化合物に関する。

【0025】

本発明の一部の化合物において、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５ａ、Ｒ５ｂおよびＲ５ｃの各々は水素である。

【0026】

例えば、本発明は、
（１Ｅ，４Ｅ）−エチル−２−アミノ−８−（４−（ピロリジン−１−カルボニル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキシレート；
（１Ｅ，４Ｅ）−エチル−２−アミノ−８−（４−（メトキシカルボニル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキシレート；
（１Ｅ，４Ｅ）−エチル−２−アミノ−８−（４−（メチルカルバモイル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキシレート；
（１Ｅ，４Ｅ）−２−アミノ−Ｎ，Ｎ−ジプロピル−８−（４−（ピロリジン−１−カルボニル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキサミド
および薬学的に許容され得るその塩から選択される化合物に関する。

【0027】

好ましい実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、以下のような化学構造：

【0028】

【化3】

を有する、｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである。

【0029】

ＡＤＣＣエンハンサー分子は、抗体のエフェクター活性を増強するまたは改善する。したがって、抗原結合活性にかかわらず、本発明の方法は、抗体によって発揮されるエフェクター活性を増強することにより、その抗体の治療効果を増大させることができる。ＡＤＣＣエンハンサー分子は、ＮＫ細胞またはＣＤ５６^＋細胞を直接または間接的に活性化することによりＡＤＣＣを改善し得る。加えて、より大きな比率の活性化ＮＫ細胞を有することは、低親和性Ｆｃ受容体を有する一部の患者群で認められる低いＡＤＣＣを克服するのに役立ち得る。

【0030】

ＡＤＣＣの能力を有する治療用ＭＡｂが好ましい。これらには、抗ＣＤ２０のリツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））、抗Ｈｅｒ２のトラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））、抗ＥＧＦＲのセツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））および抗ＥＧＦＲパニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））が含まれる。

【0031】

一部の実施形態によれば、治療用モノクローナル抗体による処置を受けている被験体においてＡＤＣＣを増大させるための方法が提供される。一部の実施形態では、上記方法は、治療有効量の治療用抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を被験体に投与する工程を含む。あるいは、本発明の方法は、治療有効量の治療用抗体、ＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤を被験体に投与する工程を含む。

【0032】

一部の実施形態によれば、ＮＫ感受性標的細胞の死滅を増強するための方法が提供される。一部の実施形態では、上記方法は、治療有効量の治療用抗体およびＮＫ感受性標的細胞の死滅を増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を被験体に投与する工程を含む。

【0033】

一部の実施形態によれば、ＮＫ細胞またはＣＤ５６^＋細胞のエフェクター活性を増強するための方法が提供される。一部の実施形態では、上記方法は、治療有効量の治療用抗体およびＮＫ細胞またはＣＤ５６^＋細胞のエフェクター活性を増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を被験体に投与する工程を含む。

【0034】

一部の実施形態によれば、患者の細胞においてＡＤＣＣを増強するための方法が提供される。一部の実施形態では、上記方法は、治療有効量の治療用抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を被験体に投与する工程を含む。被験体は、モノクローナル抗体が対象とする腫瘍抗原を低いレベルしか発現しないため、または該被験体のＦｃ受容体においてモノクローナル抗体に対する親和性を低下させる一塩基多型を有するため、別段ＭＡｂ療法の良好な治療候補であるとは限らない。

【0035】

一部の実施形態によれば、モノクローナル抗体の治療有効性を増強させるための方法が提供される。一部の実施形態によれば、治療用モノクローナル抗体の効率を増大させるための方法が提供される。一部の実施形態では、上記方法は、治療有効量の治療用抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を被験体に投与する工程を含む。あるいは、本発明の方法は、治療有効量の治療用抗体、ＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤を被験体に投与する工程を含む。

【0036】

一部の実施形態によれば、治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させるための方法であって、治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。あるいは、本発明の方法は、治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む。好ましい実施形態では、抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体はトラスツズマブである。

【0037】

一部の実施形態によれば、乳癌を処置するための方法であって、治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。あるいは、本発明の方法は、治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む。好ましい実施形態では、抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体はトラスツズマブである。

【0038】

一部の実施形態によれば、治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させるための方法であって、治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。好ましい実施形態では、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体はリツキシマブである。

【0039】

一部の実施形態によれば、Ｂ細胞障害を処置するための方法であって、治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。好ましい実施形態では、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体はリツキシマブである。一部の実施形態では、Ｂ細胞障害はリンパ腫、白血病または関節リウマチである。

【0040】

一部の実施形態によれば、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させるための方法であって、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。本発明の方法はまた、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む。好ましい実施形態では、抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体は、パニツムマブ、セツキシマブ、ネシツムマブまたはザルツムマブである。

【0041】

一部の実施形態によれば、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫を処置するための方法であって、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。一部の実施形態によれば、ＥＧＦＲを発現する頭頸部癌を処置するための方法であって、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。本発明はまた、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫を処置する方法であって、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を包含する。一部の実施形態によれば、ＥＧＦＲを発現する頭頸部癌を処置するための方法であって、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法も提供される。好ましい実施形態では、抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体は、パニツムマブ、セツキシマブ、ネシツムマブまたはザルツムマブである。

【0042】

一部の実施形態によれば、ＫＲＡＳ変異体結腸直腸癌を処置するための方法であって、治療用モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。好ましい実施形態では、治療用モノクローナル抗体はパニツムマブまたはセツキシマブである。

【0043】

一部の実施形態によれば、癌を処置するための方法であって、治療有効量の治療用抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。本発明はまた、癌を処置する方法であって、治療有効量の治療用抗体、ＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を包含する。

【0044】

一部の実施形態によれば、Ｂ細胞性悪性疾患またはＢ細胞障害を処置するための方法であって、治療有効量の治療用抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。

【0045】

一部の実施形態によれば、自己免疫障害を処置するための方法であって、治療有効量の治療用抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。一部の実施形態では、自己免疫障害は関節リウマチである。

【0046】

一部の実施形態によれば、被験体における腫瘍再発を回避するための方法であって、治療有効量の治療用抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。

【0047】

一部の実施形態では、治療用抗体は、マウス、ヒトまたは非ヒト霊長動物ＩｇＧ１またはＩｇＧ３ Ｆｃ部分を有する。一部の実施形態では、治療用抗体は、キメラ、ヒトもしくはヒト化抗体またはそのフラグメントである。

【0048】

本発明では、適切な治療レジメンを、それを必要とする被験体のために選択するための方法であって、アミノ酸位置１５８におけるＦｃｇＲ３ａのＳＮＰを決定する工程を含み、ここで、ＦｃｇＲ３ａのアミノ酸位置１５８のホモ接合バリンにより、その被験体が、ＦｃｇＲ３ａのアミノ酸位置１５８にホモ接合バリンを有さない被験体よりも上記治療レジメンに対してより応答性であると予測されることが示される、方法が提供される。

【0049】

本発明では、適切な治療レジメンを、それを必要とする被験体のために選択するための方法であって、アミノ酸位置１３１におけるＦｃｇＲ２ａのＳＮＰを決定する工程を含み、ここで、ＦｃｇＲ２ａのアミノ酸位置１３１のホモ接合ヒスチジンにより、その被験体が、ＦｃｇＲ２ａのアミノ酸位置１３１にホモ接合ヒスチジンを有さない被験体よりも上記治療レジメンに対してより応答性であると予測されることが示される、方法が提供される。

【0050】

本発明は、液体または凍結乾燥ＡＤＣＣエンハンサー分子、必要に応じて治療用抗体、および／または１つ以上の化学療法剤が入った１つ以上の容器を含む薬学的パックまたはキットを提供する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
治療用モノクローナル抗体処置を受けている被験体において抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を増大させる方法であって、治療用モノクローナル抗体およびＡＤＣＣを増大させるのに十分な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を該被験体に投与する工程を含み、ここで、該ＡＤＣＣエンハンサー分子が、構造：

【化8】

［式中、Ｙは、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^８で置換されたアリール環であり、該アリール環は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ_３、ＣＦ_３Ｏ−、ＨＣＦ_２Ｏ−、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキルおよびＡｒＯ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じてさらに置換されており；
Ｒ^１、Ｒ^３およびＲ^４は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ^６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^６Ｒ^７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ^６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ^６ＳＯ_２Ｒ^７、ＳＲ^６ ４ ＳＯ_２Ｒ^６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されているか；
またはＲ^３およびＲ^４は、それらが結合している原子と共に飽和または部分不飽和Ｃ_３〜Ｃ_６炭素環式環を形成し、ここで、該炭素環式環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ^６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^６Ｒ^７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ^６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ^６ＳＯ_２Ｒ^７、ＳＲ^６およびＳＯ_２Ｒ^６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されており；
Ｒ^２およびＲ^８は、Ｈ、ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＲ^６Ｒ^７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ^６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ^６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ^６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^６Ｒ^７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ^６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ^６ＳＯ_２Ｒ^７、ＳＲ^６およびＳＯ_２Ｒ^６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されており；
Ｒ^５ａ、Ｒ^５ｂおよびＲ^５ｃは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＭｅ、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＨＦ_２およびＣＦ_３から独立して選択され；そして
Ｒ^６およびＲ^７は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、ここで、該アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、Ｏ−アルキル、ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）アルキル、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏアルキル、 ＯＣ（＝Ｏ）Ｈ、ＯＣ（＝Ｏ）アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）_２アミノＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−およびアルキル−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されているか；
またはＲ^６およびＲ^７は、それらが結合している原子と共に、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択される飽和または部分不飽和複素環式環を形成し、ここで、該複素環式環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ^６、ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）アルキル、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏアルキル、ＯＣ（＝Ｏ）Ｈ、ＯＣ（＝Ｏ）アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）_２アミノＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−およびアルキル−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されている］
によって表される、方法。
（項目２）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記治療用モノクローナル抗体が、治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、治療用抗Ｈｅｒ２モノクローナル抗体、または治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記治療用モノクローナル抗体が、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブまたはパニツムマブである、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記被験体に治療有効量の１つ以上の化学療法剤を投与する工程をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記被験体がＦｃγＲ多型またはＫＲＡＳ変異を有する、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記被験体が、治療用抗体処置に対して不応答性であると以前に同定されたことがある、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記被験体がＡＤＣＣ機能障害を有する、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子を治療用抗体の投与の前に、治療用抗体の投与と同時に、治療用抗体の投与の後に投与する、項目１に記載の方法。
（項目１０）
治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させる方法であって、該治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体をＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目１１）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体がトラスツズマブである、項目１０に記載の方法。
（項目１３）
前記被験体に治療有効量の１つ以上の化学療法剤を投与する工程をさらに含む、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
乳癌を処置する方法であって、治療用抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体をＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目１５）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記モノクローナル抗体がトラスツズマブである、項目１４に記載の方法。
（項目１７）
前記被験体に治療有効量の１つ以上の化学療法剤を投与する工程をさらに含む、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させる方法であって、該治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体をＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目１９）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記抗ＣＤ２０モノクローナル抗体がリツキシマブである、項目１８に記載の方法。
（項目２１）
Ｂ細胞障害を処置する方法であって、治療用抗ＣＤ２０モノクローナル抗体をＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目２２）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記抗ＣＤ２０モノクローナル抗体がリツキシマブである、項目２１に記載の方法。
（項目２４）
前記Ｂ細胞障害がリンパ腫、白血病または関節リウマチである、項目２１に記載の方法。
（項目２５）
治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させる方法であって、該治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体をＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目２６）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体がセツキシマブである、項目２５に記載の方法。
（項目２８）
前記被験体に治療有効量の１つ以上の化学療法剤を投与する工程をさらに含む、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記抗ＥＧＦＲモノクローナルがパニツムマブである、項目２５に記載の方法。
（項目３０）
前記被験体がＫＲＡＳ変異を有する、項目２５に記載の方法。
（項目３１）
ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫を処置する方法であって、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体をＡＤＣＣ分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目３２）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記抗ＥＧＦＲモノクローナルがセツキシマブである、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記被験体に治療有効量の１つ以上の化学療法剤を投与する工程をさらに含む、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
前記抗ＥＧＦＲモノクローナルがパニツムマブである、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
ＥＧＦＲを発現する頭頸部癌を処置する方法であって、治療用抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体をＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目３７）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体がセツキシマブである、項目３６に記載の方法。
（項目３９）
前記被験体に治療有効量の１つ以上の化学療法剤を投与する工程をさらに含む、項目３６に記載の方法。
（項目４０）
ＫＲＡＳ変異体癌を処置する方法であって、治療用モノクローナル抗体をＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法。
（項目４１）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記治療用モノクローナルがセツキシマブである、項目４０に記載の方法。
（項目４３）
前記治療用モノクローナルがパニツムマブである、項目４０に記載の方法。
（項目４４）
前記ＫＲＡＳ変異体癌が結腸直腸癌である、項目４０に記載の方法。
（項目４５）
ＡＤＣＣエンハンサー分子および治療用抗体を含有する組成物。
（項目４６）
前記ＡＤＣＣエンハンサー分子が２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである、項目４５に記載の組成物。
（項目４７）
前記治療用抗体が、リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブおよびパニツムマブからなる群より選択される、項目４５に記載の組成物。
（項目４８）
｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドを含むキット。
（項目４９）
リツキシマブ、トラスツズマブ、セツキシマブおよびパニツムマブからなる群より選択される１つ以上の治療用モノクローナル抗体をさらに含む、項目３２に記載のキット。
（項目５０）
１つ以上の化学療法剤をさらに含む、項目３３に記載のキット。

【図面の簡単な説明】

【0051】

図面の簡単な説明

【図1】図１は、Ｋ５６２標的細胞の溶解を示す線グラフである。カルセインＡＭ標識Ｋ５６２標的細胞を、ＡＤＣＣエンハンサーであらかじめ刺激しておいたＰＢＭＣエフェクター細胞と共にインキュベートした。標的細胞の特異的溶解パーセントを一連のエフェクター細胞：標的細胞比にわたって評価した。

【図2】図２は、ＡＤＣＣエンハンサーがＲｉｔｕｘａｎによるＡＤＣＣを増強することを示す。Ｒｉｔｕｘａｎで被覆したカルセインＡＭ標識ＨＳ−Ｓｕｌｔａｎ細胞を、ＡＤＣＣエンハンサーであらかじめ刺激しておいたＰＢＭＣエフェクター細胞と共にインキュベートした。標的細胞の特異的溶解パーセントを一連のエフェクター細胞：標的細胞比にわたって評価した。

【図3A】図３は、高レベルのＨｅｒ２ｎｅｕ腫瘍抗原を発現するＳＫＢＲ３細胞系およびより低レベルの上記腫瘍抗原を発現するＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系の両方において、ＡＤＣＣエンハンサーがＨｅｒｃｅｐｔｉｎによるＡＤＣＣを増強することを示す。Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎで被覆したカルセインＡＭ標識ＳＫＢＲ３細胞（パネルＡ）またはＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（パネルＣ）を、ＡＤＣＣエンハンサーであらかじめ刺激しておいたＰＢＭＣエフェクター細胞と共にインキュベートした。標的細胞の特異的溶解パーセントを一連のエフェクター細胞：標的細胞比にわたって評価した。Ｈｅｒ２ｎｅｕ発現を、ＳＫＢＲ３（パネルＢ）およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１（パネルＤ）乳癌細胞系においてＰＥ体化結合ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（緑色の線）または対照（Ｎｏ．１およびＮｏ．２）を用いたフローサイトメトリによって定量化した。

【図3B】図３は、高レベルのＨｅｒ２ｎｅｕ腫瘍抗原を発現するＳＫＢＲ３細胞系およびより低レベルの上記腫瘍抗原を発現するＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系の両方において、ＡＤＣＣエンハンサーがＨｅｒｃｅｐｔｉｎによるＡＤＣＣを増強することを示す。Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎで被覆したカルセインＡＭ標識ＳＫＢＲ３細胞（パネルＡ）またはＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（パネルＣ）を、ＡＤＣＣエンハンサーであらかじめ刺激しておいたＰＢＭＣエフェクター細胞と共にインキュベートした。標的細胞の特異的溶解パーセントを一連のエフェクター細胞：標的細胞比にわたって評価した。Ｈｅｒ２ｎｅｕ発現を、ＳＫＢＲ３（パネルＢ）およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１（パネルＤ）乳癌細胞系においてＰＥ体化結合ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（緑色の線）または対照（Ｎｏ．１およびＮｏ．２）を用いたフローサイトメトリによって定量化した。

【図3C】図３は、高レベルのＨｅｒ２ｎｅｕ腫瘍抗原を発現するＳＫＢＲ３細胞系およびより低レベルの上記腫瘍抗原を発現するＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系の両方において、ＡＤＣＣエンハンサーがＨｅｒｃｅｐｔｉｎによるＡＤＣＣを増強することを示す。Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎで被覆したカルセインＡＭ標識ＳＫＢＲ３細胞（パネルＡ）またはＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（パネルＣ）を、ＡＤＣＣエンハンサーであらかじめ刺激しておいたＰＢＭＣエフェクター細胞と共にインキュベートした。標的細胞の特異的溶解パーセントを一連のエフェクター細胞：標的細胞比にわたって評価した。Ｈｅｒ２ｎｅｕ発現を、ＳＫＢＲ３（パネルＢ）およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１（パネルＤ）乳癌細胞系においてＰＥ体化結合ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（緑色の線）または対照（Ｎｏ．１およびＮｏ．２）を用いたフローサイトメトリによって定量化した。

【図3D】図３は、高レベルのＨｅｒ２ｎｅｕ腫瘍抗原を発現するＳＫＢＲ３細胞系およびより低レベルの上記腫瘍抗原を発現するＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系の両方において、ＡＤＣＣエンハンサーがＨｅｒｃｅｐｔｉｎによるＡＤＣＣを増強することを示す。Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎで被覆したカルセインＡＭ標識ＳＫＢＲ３細胞（パネルＡ）またはＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞（パネルＣ）を、ＡＤＣＣエンハンサーであらかじめ刺激しておいたＰＢＭＣエフェクター細胞と共にインキュベートした。標的細胞の特異的溶解パーセントを一連のエフェクター細胞：標的細胞比にわたって評価した。Ｈｅｒ２ｎｅｕ発現を、ＳＫＢＲ３（パネルＢ）およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１（パネルＤ）乳癌細胞系においてＰＥ体化結合ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（緑色の線）または対照（Ｎｏ．１およびＮｏ．２）を用いたフローサイトメトリによって定量化した。

【図4】図４は、ＡＤＣＣエンハンサーが、高親和性Ｆｃ受容体を有する患者および低親和性Ｆｃ受容体を有する患者からの細胞においてＲｉｔｕｘａｎ媒介性ＡＤＣＣを増強することを示す。５０：１のエフェクター細胞：標的細胞比（Ｅ：Ｔ ｒａｔｉｏ）でＰＢＭＣエフェクター細胞と共にインキュベートしたＲｉｔｕｘａｎ被覆ＨＳ−Ｓｕｌｔａｎ細胞についての特異的溶解パーセントを示す。高親和性遺伝子型ＦｃｇＲ２ａ１３１ Ｈ／ＨおよびＦｃｇＲ３ａ Ｖ／Ｖを有する患者（中実四角）またはより低親和性の遺伝子型ＦｃｇＲ２ａ１３１ Ａ／ＡおよびＦｃｇＲ３ａ Ｖ／Ｆを有する患者（白四角）からのＰＢＭＣを、緩衝液対照（ベースライン）での刺激または５００ｎＭ ＡＤＣＣエンハンサーでの刺激後のＡＤＣＣに関して評価した。

【図5】図５は、ＦｃｇＲ３ａ ＦＦまたはＦｃｇＲ３ａ ＦＶを有する患者が、ＦｃｇＲ３ａ ＶＶ表現型を有する個体よりも有意に低いリツキシマブ媒介性ＡＤＣＣ活性を有することを示す。

【発明を実施するための形態】

【0052】

発明の詳細な説明
本発明は、ＡＤＣＣエンハンサー分子が抗体の抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性を増大させるという発見に基づく。したがって、本発明は、治療用モノクローナル抗体およびＡＤＣＣエンハンサー分子である、以下のような式Ｉ：

【0053】

【化4】

［式中、
Ｙは、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ８で置換されたアリール環であり、上記アリール環は、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ_３、ＣＦ_３Ｏ−、ＨＣＦ_２Ｏ−、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキルおよびＡｒＯ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じてさらに置換されており；
Ｒ１、Ｒ３およびＲ４は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ６ＳＯ_２Ｒ７、ＳＲ６およびＳＯ_２Ｒ６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されているか；
またはＲ３およびＲ４は、それらが結合している原子と共に飽和または部分不飽和Ｃ_３〜Ｃ_６炭素環式環を形成し、上記炭素環式環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ６ＳＯ_２Ｒ７、ＳＲ６およびＳＯ_２Ｒ６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されており；
Ｒ２およびＲ８は、Ｈ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ６、Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、ＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−、Ｒ６ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−、ＮＲ６ＳＯ_２Ｒ７、ＳＲ６およびＳＯ_２Ｒ６から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されており；
Ｒ５ａ、Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＭｅ、ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｆ、ＣＨＦ_２およびＣＦ_３から独立して選択され；そして
Ｒ６およびＲ７は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルケニル、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキル、アリールならびに５〜７員ヘテロアリールから独立して選択され、上記アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールは、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、Ｏ−アルキル、ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）アルキル、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏアルキル、 ＯＣ（＝Ｏ）Ｈ、ＯＣ（＝Ｏ）アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）_２アミノＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−およびアルキル−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されているか；
またはＲ６およびＲ７は、それらが結合している原子と共に、３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択される飽和または部分不飽和複素環式環を形成し、上記複素環式環は、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＯＲ６、ＮＨ_２、−Ｃ（＝Ｏ）アルキル、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）Ｏアルキル、ＯＣ（＝Ｏ）Ｈ、ＯＣ（＝Ｏ）アルキル、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）アミノ、（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）_２アミノＣＨ_３ＯＣＨ_２Ｏ−およびアルキル−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ＝ＣＨ−から独立して選択される１つ以上の置換基で必要に応じて置換されている］
を有する化合物を投与することにより、癌および免疫細胞媒介性疾患または障害などの細胞性疾患を処置する方法を提供する。

【0054】

本発明はまた、式Ｉに従う化合物の代謝産物、溶媒和物、互変異性体または薬学的に許容され得る塩に関する。

【0055】

例えば、Ｒ２はＯＲ６である。

【0056】

例えば、Ｒ６は、エチルなどのＣ_１〜Ｃ_６アルキルである。

【0057】

例えば、本発明は、Ｒ２がＮＲ６Ｒ７である、式Ｉの化合物に関する。

【0058】

例えば、本発明は、Ｒ２がＮＲ６Ｒ７であり、かつＲ６およびＲ７が、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルおよびＣ_１〜Ｃ_６ヘテロアルキルから独立して選択される、例えばＲ６およびＲ７がＨ、エチル、プロピルまたはＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３などである、式Ｉの化合物に関する。

【0059】

例えば、本発明は、Ｙがフェニルである、式Ｉの化合物に関する。

【0060】

例えば、本発明は、Ｒ８が、ＯＲ６、ＮＲ６Ｒ７、ならびに３〜８個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキルから選択される、式Ｉの化合物に関する。

【0061】

例えば、本発明は、Ｒ８が、５または６個の環原子を有し、そのうち１個の原子が窒素、酸素および硫黄から選択されるヘテロシクロアルキルである、式Ｉの化合物に関する。例えば、Ｒ８はピロリジンである。

【0062】

例えば、本発明は、Ｒ６およびＲ７が、ＨおよびＣ_１〜Ｃ_６アルキルから独立して選択される、式Ｉの化合物に関する。

【0063】

例えば、本発明は、Ｙが、

【0064】

【化5】

である、式Ｉの化合物に関する。

【0065】

本発明の一部の化合物において、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５ａ、Ｒ５ｂおよびＲ５ｃの各々は水素である。

【0066】

例えば、本発明は、
（１Ｅ，４Ｅ）−エチル−２−アミノ−８−（４−（ピロリジン−１−カルボニル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキシレート；
（１Ｅ，４Ｅ）−エチル−２−アミノ−８−（４−（メトキシカルボニル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキシレート；
（１Ｅ，４Ｅ）−エチル−２−アミノ−８−（４−（メチルカルバモイル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキシレート；
（１Ｅ，４Ｅ）−２−アミノ−Ｎ，Ｎ−ジプロピル−８−（４−（ピロリジン−１−カルボニル）フェニル）−３Ｈ−ベンゾ［ｂ］アゼピン−４−カルボキサミド
および薬学的に許容され得るその塩から選択される化合物に関する。他の適切なＡＤＣＣエンハンサーは、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、国際公開公報第ＷＯ２００７／０２４６１２号に記載されている。

【0067】

好ましい実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、以下のような化学構造：

【0068】

【化6】

を有する｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドである。

【0069】

ＡＤＣＣエンハンサー分子は、抗体のエフェクター活性を増強するまたは改善する。したがって、抗原結合活性にかかわらず、本発明の方法は、抗体によって発揮されるエフェクター活性を増強することにより、その抗体の治療効果を増大させることができる。したがって、本発明の方法は、一般に、抗体エフェクター活性の増強が望ましい任意の障害の症状を、それを必要とする被験体において処置するまたは緩和するために有用である。ＡＤＣＣエンハンサー分子は、ＮＫ細胞またはＣＤ５６^＋細胞を直接または間接的に活性化することによりＡＤＣＣを改善し得る。加えて、より大きな比率の活性化ＮＫ細胞を有することは、低親和性Ｆｃ受容体を有する一部の患者群で認められる低いＡＤＣＣを克服するのに役立ち得る。

【0070】

それを必要とする被験体とは、ＫＲＡＳ変異もしくはＦｃγＲ多型を有すると同定された、または以前に治療用抗体処置に対して不応答性であると同定された、またはＡＤＣＣ機能障害を有する癌被験体を含む。

【0071】

別の実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は１つ以上の治療用抗体と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、抗体は、癌および他の細胞性疾患に対するインビボでの治療および／または予防用途を有する。

【0072】

特定の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、１つ以上の治療用抗体の投与の前に、投与と同時に、または投与の後に投与される。１つの実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は１つ以上の治療用抗体と共に処方される。別の実施形態では、１つ以上の治療用抗体は別の薬学的組成物中で投与される。この実施形態に従って、１つ以上の治療用抗体は、ＡＤＣＣエンハンサー分子を投与するために使用されるのと同じかまたは異なる投与経路によって被験体に投与され得る。

【0073】

別の態様では、本発明は、癌細胞を死滅させるためにある量の本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子を治療用モノクローナル抗体と組み合わせて投与する工程を含む、癌細胞を死滅させるための方法を提供する。治療用モノクローナル抗体の種類は、リツキシマブ、セツキシマブ、パニツムマブおよびトラスツズマブを含むが、これらに限定されない。

【0074】

治療用抗体
本発明の文脈の範囲内で、「治療用抗体（単数または複数）」という用語は、より具体的には患者において標的細胞を枯渇させるように機能する任意の抗体を表す。そのような標的細胞の具体的な例には、腫瘍細胞、ウイルス感染細胞、同種異系細胞、癌、アレルギー、自己免疫疾患、同種異系反応に関与する病的免疫応答性細胞（例えばＢリンパ球、Ｔリンパ球、抗原提示細胞等）が含まれる。本発明の文脈の範囲内で最も好ましい標的細胞は、腫瘍細胞およびウイルス感染細胞である。治療用抗体は、例えば、特に抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）による、細胞傷害作用または細胞溶解を媒介し得る。

【0075】

ＡＤＣＣは、ＩｇＧのＦｃ部分についての白血球受容体（ＦｃγＲ）を必要とし、その機能は、ＩｇＧ感作抗原を、ＦｃγＲを担持する細胞傷害性細胞に結びつけ、細胞活性化機構を始動させることである。この作用機構はヒトにおいてインビボでは証明されていないが、そのような標的細胞を枯渇させる治療用抗体の効力を説明し得る。したがって、治療用抗体は免疫複合体を形成することができる。例えば、免疫複合体は、治療用抗体によって被覆された腫瘍標的であり得る。治療用抗体は、ポリクローナルまたは、好ましくはモノクローナルであり得る。それらはハイブリドーマによって、または所望の可変ドメインおよび定常ドメインを発現するように工学的に作製された組換え細胞によって産生され得る。治療用抗体は、一本鎖抗体または抗原特異性および低ヒンジ領域を保持する他の抗体誘導体またはその改変体であり得る。これらは多機能性抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、そのフラグメントまたは改変体であり得る。上記フラグメントまたはその誘導体は、好ましくはＦａｂフラグメント、Ｆａｂ’_２フラグメント、ＣＤＲおよびＳｃＦｖから選択される。治療用抗体は表面抗原、例えば膜抗原に特異的である。最も好ましい治療用抗体は、ＣＤ２０、ＣＤ５２、ＥｒｂＢ２（またはＨＥＲ２／Ｎｅｕ）、ＣＤ３３、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＭＵＣ−１、ＣＥＡ、ＫＤＲ、αＶβ３３などの腫瘍抗原（例えば腫瘍細胞によって特異的に発現される分子）、特にリンパ腫抗原（例えばＣＤ２０）に特異的である。治療用抗体は、好ましくはヒトまたは非ヒト霊長動物ＩｇＧ１またはＩｇＧ３ Ｆｃ部分、より好ましくはヒトＩｇＧ１を有する。

【0076】

本発明の治療用抗体の典型的な例は、リツキシマブ、セツキシマブ、パニツムマブおよびトラスツズマブである。そのような抗体は、ヒト被験体における使用に関して承認されている臨床プロトコールに従って使用し得る。治療用抗体のさらなる具体例としては、例えばアレムツズマブ、エプラツズマブ、バシリキシマブ、ダクリズマブ、ラベツズマブ、セビルマブ（ｓｅｖｉｕｍａｂ）、ツブリマブ、パリビズマブ、インフリキシマブ、オマリズマブ、エファリズマブ（ｅｆａｌｉｚｕａｂ）、ナタリズマブおよびクレノリキシマブが含まれる。当業者は、他の治療用抗体が本発明の方法において有用であることを認識する。

【0077】

一部の実施形態では、治療用抗体の用量は、好ましくは２００〜６００ｍｇ／ｍ^２である。これは、２００ｍｇ／ｍ^２、２５０ｍｇ／ｍ^２、３００ｍｇ／ｍ^２、３５０ｍｇ／ｍ^２、４００ｍｇ／ｍ^２、４５０ｍｇ／ｍ^２、５００ｍｇ／ｍ^２、６００ｍｇ／ｍ^２およびその間の点を含む。好ましくは、治療用抗体は静脈内注入によって（例えば３０分間、４５分間、６０分間、９０分間または１２０分間注入として）投与される。例えば、治療用抗体の用量は、１２０分間の静脈内注入（例えば最大注入速度１０ｍｇ／分）として投与される４００ｍｇ／ｍ^２であり得る。

【0078】

一部の実施形態では、治療用抗体の用量は、好ましくは１〜１０ｍｇ／ｋｇである。これは、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇおよびその間の点を含む。好ましくは、治療用抗体は静脈内注入によって（例えば３０分間、４５分間、６０分間、９０分間または１２０分間注入として）投与される。例えば、治療用抗体の用量は、３０分間、６０分間または９０分間の静脈内注入として投与される６ｍｇ／ｋｇであり得る。

【0079】

ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）（セツキシマブ）
一部の実施形態では、治療用抗体は抗ＥＧＦＲ（上皮増殖因子受容体）モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はヒトまたはヒト化抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はキメラ抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体である。好ましくは、モノクローナル抗体は、キメラ（マウス／ヒト）モノクローナル抗体および上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）（セツキシマブ）である。

【0080】

セツキシマブは、転移性結腸直腸癌および頭頸部癌の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサーと組み合わせて使用され得る。結腸直腸癌は、小腸より下の腸管（すなわち盲腸、上行結腸、横行結腸、下行結腸およびＳ状結腸を含む大腸（結腸）ならびに直腸）の細胞の癌を特徴とする医学的状態として結腸直腸癌を定義する、広く受け入れられている医学的定義を含む。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫の処置のためにセツキシマブと組み合わせて使用される。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、イリノテカンに基づく化学療法に不応性の患者において、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫の処置のためにセツキシマブと組み合わせて使用される。

【0081】

頭頸部は複数の器官の集合であり、頭頸部癌の原発巣は、副鼻腔、上咽頭、口腔咽頭部、口腔、下咽頭、喉頭および唾液腺を含む。頭頸部癌は、身体の頭部または頸部領域の癌を含む。大部分の頭頸部癌は扁平上皮癌腫であるが、一部は外向発育性（ｅｘｏｐｈｉｌｉｃ）または内向発育性（ｅｎｄｏｐｈｉｌｉｃ）であり得る。頭頸部癌の例には、唇、口腔（口）、舌、咽喉、気管、鼻腔、副鼻腔、咽頭、喉頭、甲状腺、唾液腺および頸部のリンパ節等が含まれるが、これらに限定されない。

【0082】

一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、頭頸部の局所的または限局性に進行した扁平上皮癌腫の処置のためにセツキシマブと組み合わせて使用される。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、白金に基づく療法後に進行する頭頸部の再発性または転移性扁平上皮癌腫の処置のためにセツキシマブと組み合わせて使用される。

【0083】

一部の実施形態によれば、本発明は、転移性結腸直腸癌または頭頸部癌の処置においてセツキシマブの有効性を増大させる方法を提供する。したがって、一部の実施形態は、セツキシマブの臨床的有効性を増大させるための方法であって、セツキシマブを本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0084】

セツキシマブの用量は、好ましくは２００〜６００ｍｇ／ｍ^２である。これは、２００ｍｇ／ｍ^２、２５０ｍｇ／ｍ^２、３００ｍｇ／ｍ^２、３５０ｍｇ／ｍ^２、４００ｍｇ／ｍ^２、４５０ｍｇ／ｍ^２、５００ｍｇ／ｍ^２、６００ｍｇ／ｍ^２およびその間の点を含む。好ましくは、セツキシマブは静脈内注入によって（例えば３０分間、４５分間、６０分間、９０分間または１２０分間注入として）投与される。例えば、セツキシマブの用量は、１２０分間の静脈内注入（例えば最大注入速度１０ｍｇ／分）として投与される４００ｍｇ／ｍ^２であり得る。

【0085】

セツキシマブは、より高い初期用量、続いてより低いその後の用量で投与され得る。投与の頻度は、好ましくは週１回である。例えば、１２０分間の静脈内注入（例えば最大注入速度１０ｍｇ／分）として投与される４００ｍｇ／ｍ^２のセツキシマブの初期用量に続いて、その後の週１回の用量は、疾患の進行または許容され得ない毒性に至るまで、６０分間にわたって注入される（例えば最大注入速度１０ｍｇ／分）２５０ｍｇ／ｍ^２であり得る。

【0086】

ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）
一部の実施形態では、治療用抗体は抗ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はヒトまたはヒト化抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はキメラ抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体である。

【0087】

一部の実施形態では、治療用抗体は、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ受容体）に干渉するヒト化モノクローナル抗体、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）である。ＨＥＲ２／ｎｅｕ受容体は、上皮増殖因子受容体ファミリーとしてより一般的に知られる、ＥｒｂＢタンパク質ファミリーのメンバーである。トラスツズマブは、過剰活性なＨＥＲ２受容体の作用を逆転させる。

【0088】

一部の実施形態では、トラスツズマブは、乳癌の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、その腫瘍がＨＥＲ２タンパク質を過剰発現する転移性乳癌を有する患者の処置のためにセツキシマブと組み合わせて使用される。

【0089】

一部の実施形態によれば、本発明は、乳癌の処置においてトラスツズマブの有効性を増大させる方法を提供する。したがって、一部の実施形態は、トラスツズマブの臨床的有効性を増大させるための方法であって、トラスツズマブを本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0090】

トラスツズマブの用量は、好ましくは１〜１０ｍｇ／ｋｇである。これは、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇおよびその間の点を含む。好ましくは、トラスツズマブは静脈内注入によって（例えば３０分間、４５分間、６０分間、９０分間または１２０分間注入として）投与される。例えば、トラスツズマブの用量は、３０分間、６０分間または９０分間の静脈内注入として投与される６ｍｇ／ｋｇであり得る。

【0091】

トラスツズマブは、より高い初期用量、続いてより低いその後の用量または維持用量で投与され得る。投与の頻度は、好ましくは週１回である。例えば、９０分間の静脈内注入として投与される４ｍｇ／ｋｇのトラスツズマブの初期用量に続いて、その後の週１回の用量は、疾患の進行または許容され得ない毒性に至るまで、３０分間にわたって注入される２ｍｇ／ｋｇであり得る。

【0092】

ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）（リツキシマブ）
一部の実施形態では、治療用抗体は抗ＣＤ２０モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はヒトまたはヒト化抗ＣＤ２０モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はキメラ抗ＣＤ２０モノクローナル抗体である。

【0093】

好ましくは、タンパク質ＣＤ２０に対するモノクローナル抗体はＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）（リツキシマブ）である。したがって、一部の実施形態は、トラスツズマブの臨床的有効性を増大させるための方法であって、トラスツズマブを本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0094】

リツキシマブは、リンパ腫、白血病および一部の自己免疫障害（例えば関節リウマチ）などのＢ細胞障害の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサーと組み合わせて使用され得る。

【0095】

リツキシマブは、その表面にＣＤ２０を有する正常Ｂ細胞および悪性Ｂ細胞の両方を破壊する。リツキシマブは、多過ぎるＢ細胞、過剰活性Ｂ細胞または機能不全Ｂ細胞を有することを特徴とする疾患を処置するために本発明のＡＤＣＣエンハンサーと組み合わせて使用され得る。一部の実施形態によれば、本発明は、リンパ腫、白血病および一部の自己免疫障害（例えば関節リウマチ）などのＢ細胞障害の処置においてリツキシマブの有効性を増大させる方法を提供する。したがって、一部の実施形態は、リツキシマブの臨床的有効性を増大させる方法であって、リツキシマブを本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0096】

一部の実施形態では、リツキシマブは、白血病およびリンパ腫などの血液系腫瘍を処置するために本発明のＡＤＣＣエンハンサーと組み合わせて使用され得る。

【0097】

リツキシマブは、特発性自己免疫性溶血性貧血、赤芽球ろう、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、エヴァンズ症候群、脈管炎（例えばヴェーゲナー肉芽腫症）、水疱性皮膚障害（例えば天疱瘡、類天疱瘡）、１型糖尿病、シェーグレン症候群およびドヴィック病を含むがこれらに限定されない、自己免疫疾患を処置するために本発明のＡＤＣＣエンハンサーと組み合わせて使用され得る。

【0098】

一部の実施形態によれば、リツキシマブは、血液系悪性疾患を処置するために本発明のＡＤＣＣエンハンサーと組み合わせて使用され得る。そのような血液系悪性疾患には、例えば、Ｂ細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病および慢性リンパ性白血病が含まれる。そのような処置は、例えば、動物モデルまたはヒトにおいて腫瘍退縮を生じさせる。腫瘍退縮は、例えば、癌細胞を死滅させることを含み得る。

【0099】

したがって、１つの態様では、本発明は、ある量のリツキシマブおよび造血癌の癌細胞を死滅させるために有効な量の本発明のＡＤＣＣエンハンサーを投与する工程を含む、癌細胞を死滅させるための方法を提供する。造血癌の種類としては、Ｂ細胞リンパ腫、慢性リンパ性白血病および急性骨髄性白血病が含まれるが、これらに限定されない。

【0100】

一部の実施形態では、リツキシマブは、再発性または難治性、低悪性度または濾胞性、ＣＤ２０陽性、Ｂ細胞性非ホジキンリンパ腫を有する患者の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて投与される。

【0101】

一部の実施形態では、リツキシマブは、ＣＶＰ化学療法を併用した、濾胞性、ＣＤ２０陽性、Ｂ細胞性非ホジキンリンパ腫の再優良の（ｆｉｒｓｔ−ｌｉｎｅ）処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて投与される。

【0102】

一部の実施形態では、リツキシマブは、関節リウマチの処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて投与される。上記の組合せにメトトレキサートをさらに加えてもよい。したがって、一部の実施形態では、リツキシマブは、中等度から重度の活動性関節リウマチを有する成人患者において徴候および症状を軽減するために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、そしてメトトレキサートと組み合わせて投与される。一部の実施形態では、リツキシマブは、１つ以上のＴＮＦ拮抗物質療法に対する応答が不十分であった、中等度から重度の活動性関節リウマチを有する成人患者において徴候および症状を軽減するために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、そしてメトトレキサートと組み合わせて投与される。

【0103】

リツキシマブの用量は、好ましくは２００〜１２００ｍｇ／ｍ^２である。これは、２００ｍｇ／ｍ^２、２５０ｍｇ／ｍ^２、３００ｍｇ／ｍ^２、３５０ｍｇ／ｍ^２、３７５ｍｇ／ｍ^２、４００ｍｇ／ｍ^２、４５０ｍｇ／ｍ^２、５００ｍｇ／ｍ^２、６００ｍｇ／ｍ^２、７００ｍｇ／ｍ^２、８００ｍｇ／ｍ^２、９００ｍｇ／ｍ^２、１０００ｍｇ／ｍ^２、１１００ｍｇ／ｍ^２、１２００ｍｇ／ｍ^２およびその間の点を含む。好ましくは、リツキシマブは静脈内注入によって（例えば３０分間、４５分間、６０分間、９０分間または１２０分間注入として）投与される。例えば、リツキシマブの用量は、１２０分間の静脈内注入として、好ましくは４時間以内に投与される３７５ｍｇ／ｍ^２であり得る。

【0104】

リツキシマブの投与の頻度は、好ましくは週１回または月１回であり、疾患の進行または許容され得ない毒性に至るまで継続し得る。一部の実施形態では、リツキシマブの２〜１６用量が投与される（例えば２、４、６、８、１０、１２、１４、１６用量）。一部の実施形態では、リツキシマブは、３７５ｍｇ／ｍ^２の静脈内注入で週１回、４または８用量にわたって与えられる。一部の実施形態では、リツキシマブの投与は、６か月ごとに４用量、１６用量までである。一部の実施形態では、リツキシマブは、２週間の間隔を置いて２回の１０００ｍｇ静脈内注入として与えられる。

【0105】

ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）（パニツムマブ）
一部の実施形態では、治療用抗体はＶｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標）（パニツムマブ）である。Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標）（パニツムマブ）は、ヒト上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）に特異的に結合する組換えヒトＩｇＧ２κモノクローナル抗体である。Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標）は、フルオロピリミジン、オキサリプラチンおよびイリノテカンを含む化学療法レジメンの下でまたは上記化学療法レジメン後に疾患の進行を有する、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫の処置のために単剤として適応される。

【0106】

一部の実施形態によれば、本発明は、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫の処置においてパニツムマブの有効性を増大させる方法を提供する。したがって、一部の実施形態は、パニツムマブの臨床的有効性を増大させるための方法であって、パニツムマブを本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。他の実施形態は、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫の処置においてパニツムマブの臨床的有効性を増大させるための方法であって、パニツムマブを本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0107】

一部の実施形態では、パニツムマブは、転移性結腸直腸癌腫の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、パニツムマブは、フルオロピリミジン、オキサリプラチンおよびイリノテカン化学療法レジメンの下でまたは上記化学療法レジメン後に疾患の進行を有する転移性結腸直腸癌腫の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて投与される。

【0108】

パニツムマブの用量は、好ましくは１〜１０ｍｇ／ｋｇである。これは、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇおよびその間の点を含む。好ましくは、パニツムマブは静脈内注入によって（例えば３０分間、４５分間、６０分間、９０分間または１２０分間注入として）投与される。例えば、パニツムマブの用量は、３０分間、６０分間または９０分間の静脈内注入として投与される４ｍｇ／ｋｇであり得る。１０００ｍｇより高い用量は、９０分間かけて投与すべきである。投与の頻度は７〜２１日ごとに１回（例えば１０、１４、１８日ごとに１回等）であり得る。投与の頻度は、好ましくは１４日ごとに１回である。

【0109】

パニツムマブは、より高い初期用量、続いてより低いその後の用量または維持用量で投与され得る。例えば、９０分間の静脈内注入として投与される６ｍｇ／ｋｇのパニツムマブの初期用量に続いて、その後の週１回の用量は、疾患の進行または許容され得ない毒性に至るまで、３０分間にわたって注入される２〜４ｍｇ／ｋｇであり得る。

【0110】

治療用抗体および化学療法剤との併用
特定の実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、１つ以上の治療用抗体および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される。「化学療法剤」とは、作用機構に関わらず、癌の処置において有用な化合物である。化学療法剤には、以下の群の化合物：細胞傷害性抗生物質、代謝拮抗物質、抗有糸分裂薬、アルキル化剤、白金含有化合物、ヒ素化合物、ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤、タキサン類、ヌクレオシド類似体、植物アルカロイド類および毒素ならびにその合成誘導体が含まれるが、これらに限定されない。以下は、これらの群の中の特定の化合物の非限定的な例である。アルキル化剤には、シクロホスファミド、イフォスファミド、トロフォスファミドおよびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード；カルムスチン（ＢＣＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）などのニトロソ尿素；ブスルファンおよびトレオスルファンなどのアルキルスルホネート；ならびにダカルバジンなどのトリアゼンが含まれる。白金含有化合物には、シスプラチン、カルボプラチン、アロプラチンおよびオキサリプラチンが含まれる。植物アルカロイド類には、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビンなどのビンカアルカロイド；ならびにパクリタキセルおよびドセタキセルなどのタキソイドが含まれる。ＤＮＡトポイソメラーゼ阻害剤には、エトポシド、テニポシド、トポテカン、９−アミノカンプトテシン、カンプトテシンおよびクリスナトールなどのエピポドフィリン；ならびにマイトマイシンＣなどのマイトマイシンが含まれる。抗葉酸薬には、メトトレキサートおよびトリメトレキサートなどのＤＨＦＲ阻害剤；ミコフェノール酸、チアゾフリン、リバビリン、ヒドロキシ尿素およびＥＩＣＡＲなどのＩＭＰデヒドロゲナーゼ阻害剤；ならびにデフェロキサミンなどのリボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤が含まれる。ピリミジン類似体には、５−フルオロウラシル、フロクスウリジン、ドキシフルリジンおよびラルチトレキセド（ｒａｔｉｔｒｅｘｅｄ）などのウラシル類似体；ならびにシタラビン（ａｒａＣ）、シトシンアラビノシドおよびフルダラビンなどのシトシン類似体が含まれる。プリン類似体には、メルカプトプリンおよびチオグアニンが含まれる。ＤＮＡ代謝拮抗物質には、３−ＨＰ、２’−デオキシ−５−フルオロウリジン、５−ＨＰ、α−ＴＧＤＲ、アフィジコリングリシネート、ａｒａ−Ｃ、５−アザ−２’−デオキシシチジン、β−ＴＧＤＲ、シクロシチジン、グアナゾール、イノシングリコジアルデヒド、マセベシンＩＩおよびピラゾロイミダゾールが含まれる。抗有糸分裂薬には、アロコルヒチン、ハリコンドリンＢ、コルヒチン、コルヒチン誘導体、ドルスタチン１０、メイタンシン、リゾキシン、チオコルヒチンおよびトリチルシステインが含まれる。

【0111】

本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と共に使用するための化学療法剤の他の例には、イソプレニル化阻害剤；１−メチル−４−フェニルピリジニウムイオンなどのドーパミン作動性神経毒；スタウロスポリンなどの細胞周期阻害剤；アクチノマイシンＤおよびダクチノマイシンなどのアクチノマイシン類；ブレオマイシンＡ２、ブレオマイシンＢ２およびペプロマイシンなどのブレオマイシン類；ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、イダルビシン、エピルビシン、ピラルビシン、ゾルビシンおよびミトザントロンなどのアントラサイクリン類；ベラパミルなどのＭＤＲ阻害剤；ならびにタプシガルギンなどのＣａ^２＋ＡＴＰアーゼ阻害剤が含まれる。

【0112】

１つの実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、以下のもの：ＩＦＮα、ＩＬ−２、ダカルバジン（Ｂａｙｅｒ）、テモゾロミド（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）、タモキシフェン（ＡＺ）、カルムスチン（ＢＭＳ）、メルファラン（ＧＳＫ）、プロカルバジン（Ｓｉｇｍａ−Ｔａｕ）、ビンブラスチン、カルボプラチン、シスプラチン、タキソール、シクロホスファミド、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｎ）、Ｒｉｔｕｘａｎ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、Ｇｌｅｅｖｅｃ、Ｉｒｅｓｓａ（ＡＺ）、Ａｖａｓｔｉｎ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、Ｅｒｂｉｔｕｘ（ＩｍＣｌｏｎｅ／Ｍｅｒｃｋ ＫＧａＡ）またはＴａｒｃｅｖａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）の１つ以上と組み合わせて投与される。

【0113】

別の実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、以下のもの：カリケアマイシンおよびエスペラマイシンなどのエンジイン；デュオカルマイシン、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、Ａｒａ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチナム、エトポシド、ブレオマイシンならびに５−フルオロウラシルの１つ以上と組み合わせて投与される。

【0114】

本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて使用できる適切な毒素および化学療法剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９ｔｈ Ｅｄ．（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．１９９５）、およびＧｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，７ｔｈ Ｅｄ．（ＭａｃＭｉｌｌａｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．１９８５）に記載されている。他の適切な毒素および／または化学療法剤は当業者に公知である。

【0115】

特定の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、１つ以上の化学療法剤の投与の前に、投与と同時に、または投与の後に投与される。１つの実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は１つ以上の化学療法剤と共に処方される。別の実施形態では、１つ以上の化学療法剤は別の薬学的組成物中で投与される。この実施形態に従って、１つ以上の化学療法剤は、ＡＤＣＣエンハンサー分子を投与するために使用されるのと同じかまたは異なる投与経路によって被験体に投与され得る。

【0116】

ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）（セツキシマブ）
頭頸部癌
一部の実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、１つ以上の化学療法剤および治療用抗体の投与の前に、投与と同時に、または投与の後に使用される。治療用抗体は抗ＥＧＦＲ（上皮増殖因子受容体）モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はヒトまたはヒト化抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はキメラ抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体である。好ましくは、モノクローナル抗体は、キメラ（マウス／ヒト）モノクローナル抗体および上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤、ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）（セツキシマブ）である。

【0117】

セツキシマブは、頭頸部癌の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサーおよび１つ以上の化学療法剤と組み合わせて使用され得る。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、頭頸部の局所的または限局性に進行した扁平上皮癌腫の処置のために１つ以上の化学療法剤およびセツキシマブの投与の前に、投与と同時に、または投与の後に使用される。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、白金に基づく療法後に進行する頭頸部の再発性または転移性扁平上皮癌腫の処置のために１つ以上の化学療法剤およびセツキシマブの投与の前に、投与と同時に、または投与の後に使用される。

【0118】

一部の実施形態によれば、本発明は、頭頸部癌の処置においてセツキシマブの有効性を増大させる方法を提供する。したがって、一部の実施形態は、セツキシマブの臨床的有効性を増大させる方法であって、セツキシマブを１つ以上の化学療法剤および本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0119】

結腸直腸癌
セツキシマブは、転移性結腸直腸癌の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサーおよび１つ以上の化学療法剤と組み合わせて使用され得る。結腸直腸癌は、小腸より下の腸管（すなわち盲腸、上行結腸、横行結腸、下行結腸およびＳ状結腸を含む大腸（結腸）ならびに直腸）の細胞の癌を特徴とする医学的状態として結腸直腸癌を定義する、広く受け入れられている医学的定義を含む。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫の処置のためにセツキシマブおよび１つ以上の化学療法剤の投与の前に、投与と同時に、または投与の後に使用される。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、イリノテカンに基づく化学療法に不応性の患者において、ＥＧＦＲを発現する転移性結腸直腸癌腫の処置のためにセツキシマブおよび１つ以上の化学療法剤の投与の前に、投与と同時に、または投与の後に使用される。

【0120】

本発明はまた、転移性結腸直腸癌の処置においてセツキシマブの有効性を増大させる方法を提供する。したがって、一部の実施形態は、セツキシマブの臨床的有効性を増大させる方法であって、セツキシマブを１つ以上の化学療法剤および本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0121】

ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）
トラスツズマブは、本発明のＡＤＣＣエンハンサーおよび１つ以上の化学療法剤と共に使用され得る。一部の実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、１つ以上の化学療法剤および治療用抗体の投与の前に、投与と同時に、または投与の後に使用される。治療用抗体は抗ＥｒｂＢ２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ）モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はヒトまたはヒト化抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、治療用抗体はキメラ抗ＥｒｂＢ２モノクローナル抗体である。

【0122】

一部の実施形態では、治療用抗体は、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２／ｎｅｕ受容体）に干渉するヒト化モノクローナル抗体、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）である。ＨＥＲ２／ｎｅｕ受容体は、上皮増殖因子受容体ファミリーとしてより一般的に知られる、ＥｒｂＢタンパク質ファミリーのメンバーである。トラスツズマブは、過剰活性なＨＥＲ２受容体の作用を逆転させる。

【0123】

一部の実施形態では、トラスツズマブは、乳癌の処置のために本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、その腫瘍がＨＥＲ２タンパク質を過剰発現する転移性乳癌を有する患者の処置のためにセツキシマブおよび１つ以上の化学療法剤の投与の前に、投与と同時に、または投与の後に使用される。

【0124】

一部の実施形態によれば、本発明は、乳癌の処置においてトラスツズマブの有効性を増大させる方法を提供する。したがって、一部の実施形態は、トラスツズマブの臨床的有効性を増大させる方法であって、トラスツズマブを本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子および１つ以上の化学療法剤と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0125】

固形腫瘍
一部の実施形態によれば、固形腫瘍の成長（例えば乳房腫瘍、前立腺腫瘍、黒色腫、腎腫瘍、結腸腫瘍、子宮頸部腫瘍の成長）および／または転移を制御するための方法であって、有効量の本発明の化合物を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法が提供される。一部の実施形態では、被験体は哺乳動物である。一部の実施形態では、哺乳動物はヒトである。

【0126】

「腫瘍」という用語は、良性（例えば、転移を形成せず、隣接する正常組織を破壊しない腫瘍）または悪性／癌（例えば、周囲の組織に浸潤し、通常は転移を生じることができ、除去が試みられた後に再発することがあり、適切に処置されなければ宿主の死亡を引き起こす可能性がある腫瘍）であり得る、新生物成長を表すために使用される。本明細書で使用される場合、「腫瘍」、「腫瘍成長」または「腫瘍組織」という用語は交換可能に使用することができ、細胞の制御されない進行性増殖から生じる、生理的機能を果たさない組織の異常成長を指す。

【0127】

血液系癌
血液系癌は、血液、骨髄またはリンパ節を冒す種類の癌である。上記の３つは免疫系を介して密接に結びついているので、３つのうちの１つを冒す疾患はしばしばその他にも同様に影響を及ぼす。血液系癌は、２つの主要血球系統：骨髄性細胞系およびリンパ性細胞系のいずれかに由来し得る。骨髄性細胞系は、通常は顆粒球、赤血球、血小板、マクロファージおよび肥満細胞を産生し、リンパ性細胞系は、Ｂ細胞、Ｔ細胞、ＮＫ細胞および形質細胞を産生する。リンパ腫、リンパ性白血病および骨髄腫はリンパ系に由来し、一方、急性および慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群ならびに骨髄増殖性疾患は骨髄系起源である。

【0128】

本発明の組成物を使用して処置または改善し得る血液系癌には、非ホジキンリンパ腫（例えば小リンパ球性リンパ腫、濾胞性中心細胞リンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、辺縁層リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫および腸管Ｔ細胞リンパ腫）、白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病ならびに多発性骨髄腫を含む形質細胞新生物が含まれるが、これらに限定されない。

【0129】

本発明は、血液系癌を処置するまたは改善する方法であって、有効量の本発明の化合物を、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。

【0130】

ＫＲＡＳ変異体癌
ＫＲＡＳ癌原遺伝子はＫ−ｒａｓ Ｇタンパク質をコードする。この癌原遺伝子は、哺乳動物ｒａｓ遺伝子ファミリー由来のＫｉｒｓｔｅｎ ｒａｓ癌遺伝子ホモログである。単一アミノ酸置換、特に単一ヌクレオチド置換が活性化変異（ａｃｔｒｉｖａｔｉｎｇ ｍｕｔａｔｉｏｎ）の原因である。変異体ＫＲＡＳタンパク質は、肺腺癌、粘液性腺腫、膵臓の腺管癌腫および結腸直腸癌腫を含む様々な悪性疾患に関係する。いくつかの生殖細胞系列ＫＲＡＳ変異は、ヌーナン症候群および心臓・顔・皮膚症候群に関連することが認められている。体細胞ＫＲＡＳ変異は、白血病、結腸癌、膵癌および肺癌において高い率で認められる。ＫＲＡＳ変異を有する患者は、結腸直腸癌および肺癌などの癌の処置において一部の治療用抗体に対する非常に低い応答が予測される。

【0131】

本発明はまた、ＫＲＡＳ変異体癌の処置において治療用モノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させるための方法であって、治療用モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与する工程を含む方法を提供する。治療用抗体は、例えば、パニツムマブまたはセツキシマブである。それを必要とする被験体とは、ＫＲＡＳ変異を有すると同定されたまたは以前に治療用抗体処置に対して不応答性であると同定された癌被験体を含む。ＫＲＡＳ変異を有する被験体は、ピロ配列決定、すなわちヌクレオチド伸長配列決定、遺伝子型決定、リボヌクレアーゼ、変性勾配ゲル電気泳動、カルボジイミド、化学的開裂、一本鎖高次構造多型、ヘテロ二本鎖および配列決定（Ｏｇｉｎｏら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，７：４１３−４２１，２００５）などの当分野で公知の方法によって同定される。

【0132】

ＫＲＡＳ変異体結腸直腸癌
ＫＲＡＳ癌原遺伝子は、ＥＧＦＲを含む多くの増殖因子受容体の下流に位置するＲａｓ／マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）シグナル伝達経路において決定的に重要な役割を果たし、結腸直腸癌（ＣＲＣ）の発癌に関与する、Ｋ−ｒａｓ Ｇタンパク質をコードする。活性化ＥＧＦＲによるＫ−ｒａｓの動員は、細胞表面から核までのセリン−トレオニンキナーゼのカスケードの活性化の原因となる。ＫＲＡＳ変異（エクソン２、コドン１２および１３における）はＣＲＣ患者の３分の１超に存在し、サイクリンＤ１合成を誘導することにより、細胞増殖のための最も重要な経路の１つであるＲａｓ／ＭＡＰＫ経路の活性化を導く。その結果として、ＫＲＡＳ変異の存在下では、Ｋ−ｒａｓタンパク質の上流で作用する抗ＥＧＦＲモノクローナル抗体（セツキシマブまたはパニツムマブ）によってこの経路の活性化を顕著に阻害することができない。ＫＲＡＳ変異はまた、肺腺癌、粘液性腺腫および膵臓の腺管癌腫を含む他の悪性疾患にも関係する。

【0133】

ＫＲＡＳ変異体肺癌
肺癌は、現在もなお米国における癌による死亡の主要原因であり、２００６年には米国で１６２，０００例の死亡を引き起こすと予想される。受容体チロシンキナーゼである上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の大部分で発現される。ＮＳＣＬＣの２０％〜３０％、主として腺癌（３０％）および喫煙者で起こるＫＲＡＳ変異は、ＥＧＦＲ特異的チロシンキナーゼ阻害剤に対する応答不良に関連することが報告されている。ＫＲＡＳ変異体ＮＳＣＬＣを有する患者は、ＥＧＦＲのチロシンキナーゼドメインを標的とする低分子阻害剤、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ，ＯＳＩ−７７４；ＯＳＩ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）および化学療法で処置した場合、より不良の臨床転帰を示した。

【0134】

ＦｃγＲ遺伝子多型
本発明はまた、ＦｃγＲ多型を有する被験体などの、ＡＤＣＣ機能障害を有する被験体において、治療用モノクローナル抗体を本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子と組み合わせて、それを必要とする被験体に投与することにより、治療用モノクローナル抗体の臨床的有効性を増大させるための方法を提供する。それを必要とする被験体とは、ＦｃγＲ３ａ−Ｖ１５８ＦおよびＦｃγＲ２ａ−Ｈ１３１ＲなどのＦｃγＲ多型を有すると同定された、または以前に治療用抗体処置に対して不応答性であると同定された被験体を含む。ＦｃγＲ多型を有する被験体は、当分野で公知の方法、例えば動的対立遺伝子特異的ハイブリダイゼーション法（ＤＡＳＨ）、マイクロプレートアレイ対角線ゲル電気泳動法（ＭＡＤＧＥ）、ピロ配列決定、オリゴヌクレオチド特異的ライゲーション、ＴａｑＭａｎシステムならびにＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ ＳＮＰチップなどの様々なＤＮＡ「チップ」技術によって同定される。これらの方法は、典型的にはＰＣＲによる、標的遺伝子領域の増幅を必要とする。侵襲的切断とそれに続く質量分析または固定化パドロックプローブおよびローリンサークル増幅法による小さなシグナル分子の生成に基づく、さらなる他の新たに開発される方法は、最終的にＰＣＲの必要性を排除すると考えられる。

【0135】

ＦｃγＲ３ａ−Ｖ１５８Ｆ
ｒｓ３９６９９１は、ＩｇＧのＦｃフラグメント低親和性ＩＩＩａ受容体（ＣＤ１６ａ）ＦｃγＲ３ａ遺伝子におけるＳＮＰである。ｒｓ３９６９９１（Ｔ）はフェニルアラニン（Ｆ）対立遺伝子をコードし、改変体バリン（Ｖ）をコードする（Ｇ）対立遺伝子を有する。本発明では、適切な治療レジメンを、それを必要とする被験体のために選択するための方法であって、アミノ酸位置１５８におけるＦｃγＲ３ａのＳＮＰを決定する工程を含み、ここで、ＦｃγＲ３ａのアミノ酸位置１５８のホモ接合バリンにより、その被験体がＦｃγＲ３ａのアミノ酸位置１５８にホモ接合バリンを有さない被験体よりも上記治療レジメンに対してより応答性であると予測されることが示される、方法が提供される。

【0136】

ＦｃγＲ２ａ−Ｈ１３１Ｒ
ｒｓ１８０１２７４は、ＩｇＧのＦｃフラグメントＩＩａ受容体（ＣＤ３２）ＦｃγＲ２ａ遺伝子におけるＳＮＰである。ＦｃγＲＩＩａ遺伝子のエクソン４の１３１位のＳＮＰ（ｒｓ１８０１２７４）１３１Ｇ＞Ａ（またはＨ１３１Ｒ）は、ヒスチジンによるアルギニンの置換を導く。本発明では、適切な治療レジメンを、それを必要とする被験体のために選択するための方法であって、アミノ酸位置１３１におけるＦｃγＲ２ａのＳＮＰを決定する工程を含み、ここで、ＦｃγＲ２ａのアミノ酸位置１３１のホモ接合ヒスチジンにより、その被験体がＦｃγＲ２ａのアミノ酸位置１３１にホモ接合ヒスチジンを有さない被験体よりも上記治療レジメンに対してより応答性であると予測されることが示される、方法が提供される。

【0137】

ＡＤＣＣエンハンサー分子の投与
本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、好ましくは注射用に、最も好ましくは皮下注射による注射用に処方される。特定の実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子は、皮内、経皮、皮下または筋肉内経路による投与用に処方される。１つの実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は静脈内投与用に処方される。しかし、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、例として、鼻（例えばエアロゾルによる）、口腔（例えば舌下）、局所（すなわち皮膚および／または気道表面を含む粘膜表面のいずれかによる投与）、髄腔内、関節内、胸膜内（ｉｎｔｒａｐｌｕｒａｌ）、大脳内、動脈内、腹腔内、経口、リンパ内、鼻腔内、経直腸または経膣投与、局所カテーテルを介した灌流による、または直接的病巣内注射による投与を含む、任意の適切な投与経路用に処方され得る。

【0138】

本発明の処方物は、意図される用途のために有効な量のＡＤＣＣエンハンサー分子を含有する。特定の投薬量はまた、患者の年齢、性別、種および／または状態を含む多くの他の因子に基づいて選択される。有効量はまた、インビトロ試験系または動物モデルから誘導される用量反応曲線から推定することができる。

【0139】

特定の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子の用量はｍｇ／ｋｇ体重の単位で測定される。他の実施形態では、用量はｍｇ／ｋｇ除脂肪体重（すなわち体重−体脂肪含有量）の単位で測定される。他の実施形態では、用量はｍｇ／ｍ^２体表面積の単位で測定される。他の実施形態では、用量は、患者に投与される用量あたりのｍｇ単位で測定される。用量の任意の測定を本発明の組成物および方法と共に使用することができ、投薬量単位を当分野で標準的な手段によって変換することができる。

【0140】

一部の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子の用量は０．１〜１０ｍｇ／ｍ^２（例えば０．１〜３．９ｍｇ／ｍ^２、０．１〜１ｍｇ／ｍ^２、０．１〜２ｍｇ／ｍ^２、０．１〜４ｍｇ／ｍ^２、２〜４ｍｇ／ｍ^２、２〜６ｍｇ／ｍ^２、２〜８ｍｇ／ｍ^２）である。これは、０．００３ｍｇ／ｍ^２、０．１ｍｇ／ｍ^２、１ｍｇ／ｍ^２、２ｍｇ／ｍ^２、３ｍｇ／ｍ^２、４ｍｇ／ｍ^２、５ｍｇ／ｍ^２、６ｍｇ／ｍ^２、７ｍｇ／ｍ^２、８ｍｇ／ｍ^２およびその間の点を含む。投与の頻度は、好ましくは７〜２１日ごとに１回（例えば７、１０、１４、１８、２１日ごとに１回）である。一部の実施形態では、投与の頻度は、好ましくは７〜２１日ごとに１回、２回または３回（例えば７、１０、１４、１８、２１日ごとに１回）である。ＡＤＣＣエンハンサー分子は、疾患の進行または許容され得ない毒性に至るまで与えられ得る。一部の実施形態では、２〜２０用量（例えば２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０用量）が与えられる。好ましい投与経路は皮下である。

【0141】

本発明の方法において使用できる投薬レジメンの例には、毎日、週３回（間欠的）、週１回または１４日ごとが含まれるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、投薬レジメンには、月１回の投薬または６〜８週間ごとの投薬が含まれるが、これらに限定されない。好ましい実施形態では、本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子処方物は、被験体、好ましくはヒト被験体において癌または感染性疾患の処置のために適切な処置様式と組み合わせて週１回または２週間に１回、皮下注射によって投与される。

【0142】

ＡＤＣＣエンハンサー分子の例示的な用量は、被験体のキログラム当たりのミリグラム量を含む。１つの実施形態では、用量は、約０．０２〜１０ｍｇ／ｋｇ体重または約０．０４〜５ｍｇ／ｋｇ体重である。具体的な実施形態では、投薬量は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇまたは約１０ｍｇ／ｋｇ被験体体重である。

【0143】

癌または感染性疾患を処置するための方法の特定の実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、約０．０２〜１０ｍｇ／ｋｇ被験体体重または約０．０４〜５ｍｇ／ｋｇ被験体体重の用量で被験体に投与される。詳細な実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇまたは約１０ｍｇ／ｋｇ被験体体重の用量で投与される。あるさらなる実施形態では、ＡＤＣＣエンハンサー分子処方物は、週１回または２週間に１回の頻度で被験体に投与される。具体的な実施形態では、１日量は、少なくとも０．０５ｍｇ、０．５０ｍｇ、１．０ｍｇ、５．０ｍｇ、１０ｍｇ、１５ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇまたは少なくとも５０ｍｇである。

【0144】

皮内、筋肉内、腹腔内、皮下、硬膜外または静脈内投与についての推奨される投薬量は、約０．０２〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。局所投与についての適切な用量は、投与面積に応じて約０．００１ｍｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。当業者は、維持レジメンと比較して初期処置に関しては一般に投薬量がより高いおよび／または投与頻度がより高いことを認識する。

【0145】

キット
本発明は、液体または凍結乾燥されたＡＤＣＣエンハンサー分子を充填した１つ以上の容器を含む薬学的パックまたはキットを提供する。好ましい実施形態では、液体または凍結乾燥処方物は無菌である。１つの実施形態では、キットは、１つ以上の容器中に、ＡＤＣＣエンハンサー分子の液体または凍結乾燥処方物および癌またはＢ細胞障害の処置のために有用な１つ以上の他の予防薬または治療薬を含む。１つ以上の他の予防薬または治療薬は、ＡＤＣＣエンハンサー分子と同じ容器中に存在し得るかまたは１つ以上の他の容器中に存在し得る。好ましくは、ＡＤＣＣエンハンサー分子は、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約２ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌの濃度で処方され、処方物は皮内、経皮、皮下または筋肉内経路による投与に適する。あるいは、ＡＤＣＣエンハンサー分子は静脈内投与用に処方される。ＡＤＣＣエンハンサー分子はまた、例として、鼻（例えばエアロゾルによる）、口腔（例えば舌下）、局所（すなわち皮膚および／または気道表面を含む粘膜表面のいずれかによる投与）、髄腔内、関節内、胸膜内、大脳内、動脈内、腹腔内、経口、リンパ内、鼻腔内、経直腸または経膣投与、局所カテーテルを介した灌流による、または直接的病巣内注射による投与を含む、任意の適切な投与経路用に処方され得る。好ましくは、キットは、単位剤形のＡＤＣＣエンハンサー分子を含む。最も好ましくは、単位剤形は、処置される被験体の体重ｋｇ当たり約０．０２〜１０ｍｇまたは約０．０４〜５ｍｇの単位用量を提供するのに適した形態である。

【0146】

特定の実施形態では、キットは、１つ以上の治療用モノクローナル抗体、例えばリツキシマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、エプラツズマブ、バシリキシマブ、ダクリズマブ、ラベツズマブ、セビルマブ、ツブリマブ、パリビズマブ、インフリキシマブ、オマリズマブ、エファリズマブ、ナタリズマブおよびクレノリキシマブをさらに含むが、これらに限定されない。キットはまた、１つ以上の化学療法剤も含み得る。本発明のキットは、癌の処置における使用（例えば本発明の液体処方物を単独でまたは別の予防薬もしくは治療薬と組み合わせて使用する）のための指示、ならびに副作用および１つ以上の投与経路についての投薬量情報をさらに含む。必要に応じて、医薬品または生物学的製剤の製造、使用または販売を規制する政府機関によって定められた形態の通知がそのような容器（複数可）に付随し、上記通知は、ヒトへの投与のための製造、使用または販売の政府機関による承認を反映する。

【0147】

組成物
また、ＡＤＣＣエンハンサー分子および治療用抗体を含有する組成物も本発明に含まれる。治療用抗体は、例えばリツキシマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、エプラツズマブ、バシリキシマブ、ダクリズマブ、ラベツズマブ、セビルマブ、ツブリマブ、パリビズマブ、インフリキシマブ、オマリズマブ、エファリズマブ、ナタリズマブまたはクレノリキシマブであるが、これらに限定されない。

【0148】

定義
別途定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術および学術用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載するものと類似または等価の方法および材料を本発明の実施または試験において使用することができるが、適切な方法および材料を以下に記載する。本明細書で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許および他の参考文献は、それらの全体が参照により組み込まれる。紛争の場合は、定義を含め本明細書が優先する。加えて、材料、方法および例は単なる説明であり、限定を意図するものではない。本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な記載および特許請求の範囲から明らかである。

【0149】

「投与」、「投与する」、「同時投与」または「同時投与する」という用語は、活性物質の同時投与と逐次投与の両方を指す。

【0150】

本発明の文脈の範囲内で「被験体」または「患者」は、好ましくは哺乳動物である。哺乳動物は、ヒト、非ヒト霊長動物、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマまたはウシであり得るが、これらの例に限定されない。被験体は雄性または雌性であり得る。

【0151】

本明細書で使用される場合、「ＡＤＣＣ活性」は、キラー細胞、ナチュラルキラー細胞、活性化マクロファージ等のようなエフェクター細胞の表面に存在するＦｃ受容体に抗体のＦｃ領域が結合することを介してエフェクター細胞を活性化することにより、標的細胞（例えば腫瘍細胞）に損傷を与える活性を指す。本発明の抗体の活性にはＡＤＣＣ活性が含まれる。ＡＤＣＣ活性の測定および抗腫瘍実験は、当分野で公知の任意のアッセイを用いることによって実施することができる。

【0152】

「抗体依存性細胞性細胞傷害を増強する」、「ＡＤＣＣを増強する」（例えば細胞に言及して）、または「ＡＤＣＣを増大させる」という用語は、治療用抗体およびＡＤＣＣエンハンサー分子と接触した場合、治療用抗体単独との接触における同じ細胞の細胞死滅と比較して、細胞溶解の何らかの測定可能な増大を含むことが意図されている。例えば、細胞溶解の増大は、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％、２５０％、３００％、３２５％、４００％または５００％であり得る。

【0153】

本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」という用語は、単一分子組成物の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一結合特異性および親和性を示す。

【0154】

本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」という用語は、フレームワーク領域とＣＤＲ領域の両方がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する抗体を指すことが意図されている。さらに、抗体が定常領域を含む場合は、定常領域もヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する。本発明のヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えばインビトロでのランダム変異誘発もしくは部位特異的変異誘発によってまたはインビボでの体細胞変異によって導入される変異）を含み得る。

【0155】

「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、フレームワーク領域とＣＤＲ領域の両方がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する、単一結合特異性を示す抗体を指す。１つの実施形態では、ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合された、ヒト重鎖導入遺伝子および軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有するトランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから得られるＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。本明細書で使用される場合、「ヒトモノクローナル抗体」という用語はまた、組換え手段によって調製される、発現される、作製されるまたは単離されるすべてのヒト抗体、例えば（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニックもしくはトランスクロモソーマルである動物（例えばマウス）またはそれから調製されたハイブリドーマから単離された抗体（以下でさらに説明する）、（ｂ）ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマから単離された抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、および（ｄ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを含む任意の他の手段によって調製された、発現された、作製されたまたは単離された抗体を含む。そのような組換えヒト抗体は、フレームワーク領域とＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。特定の実施形態では、しかし、そのような組換えヒト抗体をインビトロ変異誘発（または、ヒトＩｇ配列に関してトランスジェニックである動物が使用される場合は、インビボ体細胞変異誘発）に供することができ、したがって、組換え抗体のＶ_ＨおよびＶ_Ｌ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系列Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌ配列に由来し、かつ関連するが、インビボでのヒト抗体生殖細胞系列レパートリ内に天然には存在しない場合がある配列である。

【0156】

「ヒト化抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体を指すことが意図されている。さらなるフレームワーク領域の改変をヒトフレームワーク配列内で行い得る。

【0157】

「キメラ抗体」という用語は、可変領域配列がある１つの種に由来し、定常領域配列が別の種に由来する抗体、例えば可変領域配列がマウス抗体に由来し、定常領域配列がヒト抗体に由来する抗体を指すことが意図されている。

【0158】

「変異した遺伝子」または「変異」または「機能的変異」または「変異体」は、変異した遺伝子を有さない被験体と比べて変異した遺伝子を有する被験体の表現型を変化させることができる、遺伝子の対立遺伝子形態を指す。変異によって引き起こされる変化した表現型は、特定の作用物質によって修正または補償することができる。被験体が変化した表現型を有するためにこの変異に関してホモ接合でなければならない場合、その変異は劣性であると言われる。変異した遺伝子の１つのコピーが被験体の表現型を変化させるのに十分である場合、その変異は優性であると言われる。被験体が１コピーの変異した遺伝子を有し、ホモ接合被験体のものとヘテロ接合被験体のものとの中間（その遺伝子に関して）である表現型を有する場合、その変異は相互優性であると言われる。

【0159】

「多型」という用語は、２つ以上の形態の遺伝子またはその部分（例えば対立遺伝子改変体）の共存を指す。少なくとも２つの異なる形態、すなわち２つの異なるヌクレオチド配列が存在する遺伝子の部分は、「遺伝子の多型領域」と称される。遺伝子の多型領域の特定の遺伝子配列が対立遺伝子である。多型領域は、異なる対立遺伝子ではその同一性が異なる、単一ヌクレオチドであり得る。多型領域はまた、数ヌクレオチド長であり得る。

【0160】

「野生型対立遺伝子」という用語は、被験体において２コピーで存在する場合、野生型表現型を生じさせる遺伝子の対立遺伝子を指す。ある遺伝子におけるある種のヌクレオチド変化は、ヌクレオチド変化を有する２コピーの遺伝子を有する被験体の表現型に影響を及ぼさないことがあるので、特定の遺伝子のいくつかの異なる野生型対立遺伝子が存在し得る。

【0161】

本開示全体を通して使用される場合、単数形態の「１つ（ａ）」または「１つ（ａｎ）」および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに別のことを示していない限り、複数の言及を包含する。したがって、例えば、「１つの組成物」への言及は、複数のそのような組成物ならびに単一組成物を含み、また「１つの治療薬」への言及は、１つ以上の治療薬および／または薬剤ならびに当業者に公知のその等価物への言及である、等々である。したがって、例えば、「１つの宿主細胞」への言及は、複数のそのような宿主細胞を含み、また「１つの抗体」への言及は、１つ以上の抗体および当業者に公知のその等価物への言及である、等々である。さらに、特許請求の範囲および／または明細書において「含む」という用語と共に使用される場合の「１つ（ａ）」または「１つ（ａｎ）」という語の使用は、「１つ（ｏｎｅ）」を意味するが、また「１つ以上」、「少なくとも１つ」および「１つまたは１つより多い」の意味とも一致する。

【0162】

本出願全体を通して、「約（ａｂｏｕｔ）」という用語は、ある値が、その値を決定するために使用されているデバイスまたは方法についての誤差の標準偏差を含むことを示すために使用される。

【0163】

特許請求の範囲における「または（ｏｒ）」という用語の使用は、どれか一方だけを指すことが明白に示されていない限りまたはどれか一方が相互に排他的でない限り、「および／または」を意味するために使用されるが、本開示は、どれか一方だけならびに「および／または」を指すという定義を支持する。

【0164】

本明細書および特許請求の範囲で使用される場合、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」（ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」などの任意の形態の「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」）、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」（ならびに「有する（ｈａｖｅ）」および「有する（ｈａｓ）」などの任意の形態の「有する（ｈａｖｉｎｇ）」）、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」（ならびに「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」および「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅ）」などの任意の形態の「包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」）または「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」（ならびに「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｓ）」および「含有する（ｃｏｎｔａｉｎ）」などの任意の形態の「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」）という語は、包括的または非制限的であり、付加的な、列挙されない要素または方法段階を除外しない。

【0165】

「有効量」という用語は、癌または細胞性疾患に罹患している動物、好ましくはヒトにおいて所望の抗癌作用、抗腫瘍作用または抗疾患作用を提供するのに十分な量を指す。所望の抗腫瘍作用には、限定されることなく、腫瘍成長の調節（例えば腫瘍成長の遅延）、腫瘍の大きさまたは転移の調節、特定の抗癌剤に関連する毒性および副作用の軽減、癌の臨床的障害または症状の改善または最小化、そのような処置の不在下で本来ならば予想される生存期間を超えて被験体の生存期間を延長させること、ならびに投与前にいかなる腫瘍形成も有さない動物における腫瘍成長の防止、すなわち予防的投与が含まれる。

【実施例】

【0166】

本発明の様々な実施形態の活性に実質的に影響を及ぼさない修正も、本明細書で提供される本発明の定義内で提供されることが理解される。したがって、以下の実施例は本発明を説明することを意図されるが、本発明を限定することは意図されない。特許請求される本発明を、その具体的な実施形態を参照して詳細に記載したが、様々な変更および修正を、特許請求される本発明の精神および範囲から逸脱することなくその本発明に行い得ることは当業者に明らかである。したがって、例えば、当業者は、通常の実験だけを用いて、本明細書に記載する特定の物質および手順に対する数多くの等価物を認識するまたは確認することができる。そのような等価物は本発明の範囲内であるとみなされ、以下の特許請求の範囲に包含される。

【実施例1】

【0167】

ＮＫ活性および遺伝的に抵抗性の集団におけるＡＤＣＣを含むＡＤＣＣを増強することによる、モノクローナル抗体療法の治療的有効性の増強
ＡＤＣＣエンハンサー｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドを含有する皮下処方物を実験のために使用した。｛２−アミノ−８−［４−（ピロリジニルカルボニル）フェニル］−（３Ｈ−ベンゾ［ｆ］アゼピン−４−イル）｝−Ｎ，Ｎ−ジプロピルカルボキサミドの構造は以下のとおりである：

【0168】

【化7】

ＰＢＭＣの刺激：ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）をＦｉｃｏｌｌ（商標）密度勾配遠心分離によって単離し、２％熱不活化ＦＢＳを含むＲＰＭＩに再懸濁した。１００万〜３００万細胞／ｍＬの濃度のＰＢＭＣを、加湿したＣＯ_２インキュベータ内で１０〜５００ｎＭ ＡＤＣＣエンハンサーと共に１８〜７２時間インキュベートした。活性化したＰＢＭＣを、次に、ＮＫおよびＡＤＣＣアッセイにおけるエフェクター細胞として使用した。

【0169】

ＮＫおよびＡＤＣＣアッセイ：ＡＤＣＣエンハンサーで活性化したＰＢＭＣを、モノクローナル抗体で被覆したＮＫ感受性標的細胞系Ｋ５６２または様々な腫瘍細胞の死滅を増強する能力に関して試験した。標的細胞を、暗い加湿ＣＯ_２インキュベータにおいて３７℃で１時間、蛍光染料Ｃａｌｃｅｉｎ ＡＭで標識した。標識した標的（２×１０^５細胞／ｍＬ）を、次に、５μｇ／ｍＬの濃度のＨｅｒｃｅｐｔｉｎ、ＲｉｔｕｘａｎおよびＥｒｂｉｔｕｘなどのモノクローナル抗体と共に４℃で３０分間インキュベートし、その後非結合抗体を洗い流した。活性化したエフェクター細胞および標識した標的細胞を、暗い加湿ＣＯ_２インキュベータにおいてＨＢＳＳ＋Ｃａ／Ｍｇ＋５％ＦＢＳを含むアッセイ緩衝液中３７℃で４時間、９６ウエル組織培養プレートでインキュベートした。エフェクター細胞対標的細胞の比率（Ｅ：Ｔ比）は、例えば１：３〜１：１００まで様々であった。インキュベーション終了のときに、細胞を遠心分離によってペレット化し、１００μＬの上清を９６ウエル平底黒色プレート（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｏｒ １ Ｂｌａｃｋ Ｆｌａｔ Ｂｏｔｔｏｍ Ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ Ｐｌａｔｅｓ−Ｔｈｅｒｍｏ／Ｆｉｓｈｅｒ Ｎｏ．７６０５）に移した。蛍光マクロタイタープレートリーダーで蛍光を定量化した。特異的溶解％を、（試料蛍光−自発蛍光）×１００／（１００％蛍光−自発蛍光）として計算した。１００％蛍光は、標識した標的細胞および０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０またはＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００などの界面活性剤を含むウエルから決定した。自発蛍光は、アッセイ緩衝液および標的細胞を含むがエフェクター細胞を含まないウエルから決定した。

【0170】

結果
ＮＫ細胞の溶解機能がＡＤＣＣエンハンサーによって増大されるかどうかを決定するため、一連の細胞傷害性試験を実施した。ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）をＡＤＣＣエンハンサーで刺激し、その後ＮＫ感受性標的細胞Ｋ５６２を溶解する能力に関して試験した。図１に示すように、ＡＤＣＣエンハンサーはＫ５６２標的細胞の溶解を用量依存的様式で増強した。緩衝液対照と共にインキュベートしたＰＢＭＣエフェクター細胞は標的細胞の２０％未満しか溶解しなかったが、１６７ｎＭ ＡＤＣＣエンハンサーで刺激しておいたＰＢＭＣは標的細胞の４５％までを死滅させ、５００ｎＭ ＡＤＣＣエンハンサーで刺激しておいたＰＢＭＣは標的細胞の９０％超を溶解した。

【0171】

ＮＫ感受性標的の直接溶解に加えて、ＡＤＣＣエンハンサーで刺激したＰＢＭＣは抗体依存性細胞性細胞傷害を増強した。図２に示すように、ＡＤＣＣエンハンサーは、Ｂ細胞リンパ腫細胞系ＨＳ−ＳｕｌｔａｎのＲｉｔｕｘａｎ媒介性ＡＤＣＣを増強した。Ｒｉｔｕｘａｎで被覆したＨＳ−Ｓｕｌｔａｎ細胞を刺激していないＰＢＭＣと共にインキュベートした場合、細胞死滅は、エフェクター細胞：標的細胞比（Ｅ：Ｔ比）の範囲にわたって９％〜約４０％に及んだ。これに対し、Ｒｉｔｕｘａｎで被覆した標的細胞をＡＤＣＣエンハンサーによって活性化しておいたＰＢＭＣと共にインキュベートした場合は、細胞死滅は８０および９０％と高かった。ＡＤＣＣの増強は用量依存的であり、Ｅ：Ｔ比が上昇すると共に増大した。

【0172】

低レベルの腫瘍抗原しか発現しない一部の患者については、ＡＤＣＣは効果がより低い。図３に示すように、ＡＤＣＣエンハンサーは、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎで被覆した、高レベルのＨｅｒ２ｎｅｕ腫瘍抗原を発現する乳癌細胞系ＳＫＢＲ３およびより低レベルの腫瘍抗原を発現する乳癌細胞系ＭＤＡ−ＭＢ−２３１の両方からの標的細胞の溶解を増強した。Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎで被覆した細胞を刺激していないＰＢＭＣと共にインキュベートした場合、細胞死滅は、ＳＫＢＲ３細胞系では４０％と高かったが、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系では１５％未満（ｌｅｓｓ ｔｈａｔ １５％）に過ぎなかった。ＡＤＣＣエンハンサーによるＰＢＭＣの活性化は、両細胞系においてＨｅｒｃｅｐｔｉｎ媒介性ＡＤＣＣを増強し、ＳＫＢＲ３標的の８０％超（ｇｒｅａｔｅｒ ｔｈａｔ ８０％）およびＭＤＡ−ＭＢ−２３１標的の約４０〜６０％を死滅させた。応答は、エフェクター細胞を刺激するために使用したＡＤＣＣエンハンサーの濃度およびエフェクター細胞：標的細胞の比率に依存した。

【実施例2】

【0173】

ＦｃγＲの多型および癌の処置
ＡＤＣＣは、特異的受容体を介してモノクローナル抗体のＦｃ部分に会合する、ＮＫ細胞を含む免疫エフェクター細胞を通して媒介される。ＦｃＲγ３ａの１５８位およびＦｃＲγ２ａの１３１位などのこれらの受容体における一塩基多型を有する患者は、おそらく上記モノクローナル抗体に対する上記受容体のより低い親和性に起因するＡＤＣＣ不良から、臨床的予後がより不良である。これまでの試験は、ＩｇＧ１に対するＦｃγＲ３Ａ分子の親和性を変化させるＦｃγＲ３Ａ分子の多型（１５８Ｆ／Ｖ）が、癌の処置において使用される一部のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）で認められる臨床効力を決定する重要な因子であることを見出した。この共通の多型がベースラインの抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）応答および／または本発明のＡＤＣＣエンハンサー分子（化合物ＶＴＸ−２３３７）に対する応答に影響を及ぼすかどうかを決定するため、ドナーからのＰＢＭＣを、それぞれＦおよびＶアイソフォームをコードする２つの対立遺伝子に関して遺伝子型決定し、インビトロで試験した。本発明者らは、ＦＦまたはＦＶ表現型を有する１０名のドナーおよびＶＶ表現型を有する５名のドナーを含む、１５名のドナーからの刺激していないＰＢＭＣまたはＶＴＸ−２３３７で刺激したＰＢＭＣを使用してリツキシマブ媒介性ＡＤＣＣを分析した。

【0174】

健常ドナーから血液を採取し、Ｆｉｃｏｌｌ勾配を用いてＰＢＭＣを単離した。ＰＢＭＣを加湿５％ＣＯ_２インキュベータにおいて３７℃で４８時間、５００ｎＭ ＶＴＸ−２３３７の存在下で培養することにより、ＰＢＭＣを活性化した。活性化ＰＢＭＣを、次に、１００：１の比率で負荷したリツキシマブ被覆ＨＳ−Ｓｕｌｔａｎ細胞と共に４時間インキュベートした。ＨＳ−Ｓｕｌｔａｎ細胞からの蛍光染料Ｃａｌｃｅｉｎ ＡＭの放出を測定することによって溶解を測定した。

【0175】

図４に示すように、高親和性の遺伝子型を有する患者からの細胞におけるベースラインのＡＤＣＣは約３０％であり、その一方、親和性のより低い遺伝子型を有する患者からの細胞におけるベースラインのＡＤＣＣは１０％であった。ＡＤＣＣエンハンサーでのＰＢＭＣの刺激は両方の患者においてＡＤＣＣを増強した。低親和性の遺伝子型を有する患者では、ＡＤＣＣは１０％から３０％に増大した。したがって、そのＡＤＣＣエンハンサーは不良遺伝子型を「救済」し、ＡＤＣＣを野生型遺伝子型のベースラインレベルまで増大させた。

【0176】

図５は、ＦＦまたはＦＶドナーがＶＶ表現型を有する個体よりも有意に低いリツキシマブ媒介性ＡＤＣＣ活性を有することを示す（ＦＦ／ＦＶについては２０．５±２．５％の特異的溶解、これに対しＶＶについては３１．７±２．９％の特異的溶解、ｐ＝０．０１７）。ＰＢＭＣを、標的腫瘍細胞と混合する前にＶＴＸ−２３３７で刺激した場合、生じるＡＤＣＣのレベルは、ＦＦ／ＦＶ群およびＶＶ群の両方で有意に増強された。ＡＤＣＣは、低親和性ＦＦ／ＦＶ群では２０．５±２．５％から４０．０±４．１％に（ｐ＝０．０００７）、および高親和性ＶＶ群では３１．７±２．９％から５５．５±２．６％に（ｐ＝０．０００３）増強された。ＦＦ／ＦＶドナーからの刺激したＰＢＭＣとＶＶドナーからの刺激していないＰＢＭＣの間に有意差はなく、このことは、ＶＴＸ−２３３７の存在が、低親和性ＳＮＰを有するドナーからのＡＤＣＣを、通常は高親和性ドナーからのＰＢＭＣによってのみ達成されるレベルまで増強し得ることを示している。

【図1】

【図2】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図4】

【図5】