特許 6050829 二置換ベンゾチエニル−ピロロトリアジンおよびＦＧＦＲ阻害剤としてのその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6050829

(24)【登録日】2016年12月2日

(45)【発行日】2016年12月21日

(54)【発明の名称】二置換ベンゾチエニル−ピロロトリアジンおよびＦＧＦＲ阻害剤としてのその使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 487/04 20060101AFI20161212BHJP

   A61K 31/53 20060101ALI20161212BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20161212BHJP

   A61K 31/5355 20060101ALI20161212BHJP

   A61K 31/541 20060101ALI20161212BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20161212BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20161212BHJP

【ＦＩ】

   C07D487/04 140

   A61K31/53

   A61K31/5377

   A61K31/5355

   A61K31/541

   A61P43/00 111

   A61P35/00

【請求項の数】13

【全頁数】201

(21)【出願番号】特願2014-546445(P2014-546445)

(86)(22)【出願日】2012年12月10日

(65)【公表番号】特表2015-500307(P2015-500307A)

(43)【公表日】2015年1月5日

(86)【国際出願番号】EP2012074977

(87)【国際公開番号】WO2013087578

(87)【国際公開日】20130620

【審査請求日】2015年6月2日

(31)【優先権主張番号】11193841.1

(32)【優先日】2011年12月15日

(33)【優先権主張国】EP

(73)【特許権者】

【識別番号】300049958

【氏名又は名称】バイエル ファーマ アクチエンゲゼルシャフト

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100143823

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 英彦

(74)【代理人】

【識別番号】100151448

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 孝博

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100185959

【弁理士】

【氏名又は名称】今藤 敏和

(74)【代理人】

【識別番号】100203035

【弁理士】

【氏名又は名称】五味渕 琢也

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(73)【特許権者】

【識別番号】512137348

【氏名又は名称】バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング

【氏名又は名称原語表記】Ｂａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100143823

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 英彦

(74)【代理人】

【識別番号】100151448

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 孝博

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100185959

【弁理士】

【氏名又は名称】今藤 敏和

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】ディルク・ブローム

(72)【発明者】

【氏名】メラニー・エルー

(72)【発明者】

【氏名】マリー−ピエーレ・コリン

(72)【発明者】

【氏名】ヴァルター・ヒュップシュ

(72)【発明者】

【氏名】マリオ・ロベル

(72)【発明者】

【氏名】クレメンス・ルスティッヒ

(72)【発明者】

【氏名】ジルヴィア・グリューネヴァルト

(72)【発明者】

【氏名】ウルフ・ベーマー

(72)【発明者】

【氏名】フェレーナ・フェーリンガー

【審査官】 東 裕子

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００９−５１９２２２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５２２２８４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５１９９０５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００３−５００３５９（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式(Ｉ)：

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、
Ｒ^１は、水素、クロロ、メチルまたはメトキシであり、
Ｒ^２は、水素またはメトキシであり、
ただし、Ｒ^１およびＲ^２の少なくとも一方が水素以外であり、
Ｇ^１は、クロロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、５員アザ−ヘテロアリールまたは基−ＣＨ_２−ＯＲ^３、−ＣＨ_２−ＮＲ^４Ｒ^５または−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^４Ｒ^６
{式中、
Ｒ^３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたはフェニルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは３個までのフルオロ原子で置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該フェニルは、所望によりフルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルおよび(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
Ｒ^４は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^５は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
Ｒ^６は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されているか、
あるいは、
Ｒ^４およびＲ^５、または、Ｒ^４およびＲ^６は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜７員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^７)およびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^７は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ホルミルまたは(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニルである。}
を表し、
Ｇ^２は、クロロ、シアノ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルまたは基−ＣＲ^８ＡＲ^８Ｂ−ＯＨ、−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０、−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２または−ＣＨ_２−ＯＲ^１５
{式中、
Ｒ^８ＡおよびＲ^８Ｂは、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピルおよびシクロブチルからなる群から独立して選択され、
Ｒ^９は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^１０は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたはジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
Ｒ^１１は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^１２は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたはジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されているか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０、または、Ｒ^１１およびＲ^１２は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜７員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^１３)、Ｏ、ＳおよびＳ(Ｏ)_２から選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、フルオロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される３個までの置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^１３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキル、ホルミルまたは(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニルであり、
Ｒ^１５は、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルである。}
を表す。
ただし、Ｇ^２がクロロまたはシアノであるとき、Ｇ^１はクロロではない。]
の化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物および／または溶媒和物。

【請求項2】

Ｒ^１が、クロロ、メチルまたはメトキシであり、
Ｒ^２が、水素またはメトキシであり、
Ｇ^１が、クロロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニルを表すか、または、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリルおよびオキサジアゾリルからなる群から選択される５員アザ−ヘテロアリールを表すか、または、基−ＣＨ_２−ＯＲ^３または−ＣＨ_２−ＮＲ^４Ｒ^５
{式中、
Ｒ^３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは３個までのフルオロ原子で置換されており、
Ｒ^４は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^５は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは５員または６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、ヒドロキシカルボニルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルで置換されており、
(ii)当該５員または６員ヘテロシクロアルキルは、所望によりオキソで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^７)およびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、オキソまたはヒドロキシで置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^７は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルである。}を表し、
Ｇ^２が、クロロ、シアノ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルまたは基−ＣＲ^８ＡＲ^８Ｂ−ＯＨ、−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０、−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２または−ＣＨ_２−ＯＲ^１５
{式中、
Ｒ^８ＡおよびＲ^８Ｂは、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルおよびシクロプロピルからなる群から独立して選択され、
Ｒ^９は、水素またはメチルであり、
Ｒ^１０は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは５員または６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシまたはアミノカルボニルで置換されており、
(ii)当該５員または６員ヘテロシクロアルキルは、所望によりオキソで置換されており、
Ｒ^１１は、水素またはメチルであり、
Ｒ^１２は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは５員または６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシで置換されており、
(ii)当該５員または６員ヘテロシクロアルキルは、所望によりオキソで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０、または、Ｒ^１１およびＲ^１２は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^１３)、Ｏ、ＳおよびＳ(Ｏ)_２から選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、フルオロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される３個までの置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^１３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピル、シクロブチル、ホルミルまたは(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル−カルボニルであり、
Ｒ^１５は、メチルまたはエチルである。}を表し、
ただし、Ｇ^２がクロロまたはシアノであるとき、Ｇ^１はクロロではない、
請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物および／または溶媒和物。

【請求項3】

Ｒ^１が、メチルであり、
Ｒ^２が、メトキシであり、
Ｇ^１が、メチル、オキサゾール−５−イルまたは基−ＣＨ_２−ＯＲ^３または−ＣＨ_２−ＮＲ^４Ｒ^５
{式中、
Ｒ^３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピルまたはシクロブチルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、ヒドロキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、シクロプロピル、シクロブチルまたは３個までのフルオロ原子で置換されており、
Ｒ^４は、水素、メチルまたはエチルであり、
Ｒ^５は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、アセチル、シクロプロピル、シクロブチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、シクロプロピルまたはシクロブチルで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和５員または６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、ＮＨおよびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、オキソまたはヒドロキシで置換されていてもよい。}
を表し、
Ｇ^２が、メチルまたは基−ＣＲ^８ＡＲ^８Ｂ−ＯＨ、−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０または−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２
{式中、
Ｒ^８ＡおよびＲ^８Ｂは、独立して、水素またはメチルであり、
Ｒ^９は水素であり、
Ｒ^１０は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、アセチル、シクロプロピル、シクロブチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシまたはアミノカルボニルで置換されており、
Ｒ^１１は、水素またはメチルであり、
Ｒ^１２は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピル、シクロブチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは所望によりヒドロキシで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０、または、Ｒ^１１およびＲ^１２は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^１３)、ＯおよびＳ(Ｏ)_２から選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、フルオロ、メチル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される３個までの置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^１３は、水素、ホルミルまたはアセチルである。}
を表す、請求項１または２に記載の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物および／または溶媒和物。

【請求項4】

Ｒ^１が、メチルであり、
Ｒ^２が、メトキシであり、
Ｇ^１が、基−ＣＨ_２−ＯＲ^３
{式中、Ｒ^３は、所望によりヒドロキシ、アミノまたはアミノカルボニルで置換された(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルである。}を表し、
Ｇ^２が、基−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０または−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２
{式中、
Ｒ^９は、水素であり、
Ｒ^１０は、２−オキソピロリジン−３−イルであるか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、ピペラジン−１−イル、３−オキソピペラジン−１−イルまたは４−アセチルピペラジン−１−イル環を形成し、
Ｒ^１１は、水素であり、
Ｒ^１２は、２−オキソピロリジン−３−イルであるか、
あるいは、
Ｒ^１１およびＲ^１２は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル、４−ヒドロキシピペリジン−１−イルまたは３−オキソピペラジン−１−イル環を形成する。}を表す、請求項１、２または３に記載の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩、水和物および／または溶媒和物。

【請求項5】

請求項１〜４の何れか１項に記載の、化合物４−｛［４−アミノ−６−（メトキシメチル）−５−（７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル）ピロロ［２，１ ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］メチル｝ピペラジン−２−オン

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。

【請求項6】

請求項１〜４の何れか１項に記載の、化合物４−｛［４−アミノ−６−（メトキシメチル）−５−（７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル）ピロロ［２，１ ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］メチル｝ピペラジン−２−オン。

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

【請求項7】

請求項１〜６の何れか１項で定義した式(Ｉ)の化合物を製造する方法であって、
[Ａ] 式(II)：

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の６位置換４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジンを、最初に、ホルムアルデヒドおよび式(III)：

【化5】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のアミンと、酸の存在下で反応させ、式(IV)：

【化6】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の化合物を得て、次いで、それを臭素化して、式(Ｖ)：

【化7】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の化合物とし、続いて、それを式(VI)：

【化8】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、
Ｒ^１およびＲ^２は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有し、
Ｒ^１４は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルを表すか、または、両方のＲ^１４基が、一体となって結合して、−(ＣＨ_２)_２−、−Ｃ(ＣＨ_３)_２−Ｃ(ＣＨ_３)_２−、−(ＣＨ_２)_３−、−ＣＨ_２−Ｃ(ＣＨ_３)_２−ＣＨ_２−または−Ｃ(＝Ｏ)−ＣＨ_２−Ｎ(ＣＨ_３)−ＣＨ_２−Ｃ(＝Ｏ)−架橋を形成する。]
のベンゾチオフェン−２−イル ボロネートと、パラジウム触媒および塩基の存在下でカップリングさせ、式(I-A)：

【化9】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の標的化合物を得ること、あるいは、
[Ｂ] 式(II)：

【化10】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の６位置換４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジンを、最初に、塩化ホスホリルの存在下、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミドでホルミル化して、式(VII)：

【化11】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のアルデヒドを得て、次いで、それを臭素化して、式(VIII)：

【化12】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の化合物とし、続いて、式(VI)：

【化13】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^１４は、上で示された意味を有する。]
のベンゾチオフェン−２−イル ボロネートと、パラジウム触媒および塩基の存在下でカップリングさせ、式(IX)：

【化14】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の化合物を得て、次いで、それを、
[B-1] 式(III)：

【化15】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のアミンと、酸および還元剤の存在下で反応させ、式(I-A)：

【化16】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の標的化合物を得るか、または、
[B-2] 式(Ｘ)：

【化17】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のカルボン酸に酸化して、最後に、式(XI)：

【化18】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１１およびＲ^１２は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のアミンと、縮合剤の存在下でカップリングさせ、式(I-B)：

【化19】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^１１およびＲ^１２は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の標的化合物を得ること、あるいは、
[Ｃ] 式(XII)：

【化20】

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の６位置換４−アミノ−５−ブロモピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジンを、最初に、式(VI)：

【化21】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^１４は、上で示された意味を有する。]
のベンゾチオフェン−２−イル ボロネートと、パラジウム触媒および塩基の存在下でカップリングさせ、式(XIII)：

【化22】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１およびＲ^２は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の化合物を得て、それをホルムアルデヒドおよび式(III)：

【化23】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のアミンと、酸の存在下で反応させ、式(I-C)：

【化24】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の化合物を得て、続いて、それを、
[C-1] 式(XIV)：

【化25】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のアルデヒドに酸化して、それを式(XV)：

【化26】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^４およびＲ^５は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
のアミンで、酸および還元剤の存在下で処理し、式(I-D)：

【化27】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有する。]
の標的化合物を得るか、または、
[C-2] 式(XVI)：

【化28】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^９およびＲ^１０は、請求項１〜４の何れか１項で示された意味を有し、
Ｘは、クロロ、ブロモまたはヨードである。]の対応する６−(ハロメチル)誘導体に変換し、式(XVII)：

【化29】

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[式中、Ｒ^３Ａは、請求項１〜４の何れか１項で示されたＲ^３の水素以外の意味を有する。]
のアルコールで、塩基の存在下で処理し、式(I-E)：

【化30】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３Ａ、Ｒ^９およびＲ^１０は、上で示された意味を有する。]
の標的化合物を得ること、
所望により、適切な場合は、続いて、(i) このようにして得られた式(Ｉ)の化合物を、そのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分離すること、および／または、(ii) 対応する溶媒および／または酸または塩基で処理することによって、式(Ｉ)の化合物を、その水和物、溶媒和物、塩および／または塩の水和物または溶媒和物に変換すること
を特徴とする方法。

【請求項8】

疾患を処置および／または予防するための請求項１〜６の何れか１項に定義した化合物。

【請求項9】

癌および腫瘍疾患を処置および／または予防する方法に使用するための請求項１〜６の何れか１項に定義した化合物。

【請求項10】

癌および腫瘍疾患を処置および／または予防する医薬組成物を製造するための請求項１〜６の何れか１項に定義した化合物の使用。

【請求項11】

請求項１〜６の何れか１項に定義した化合物および１種以上の薬学的に許容される添加物を含む医薬組成物。

【請求項12】

１種以上のさらなる治療薬をさらに含む請求項１１に記載の医薬組成物。

【請求項13】

癌および腫瘍疾患を処置および／または予防するための請求項１１または１２に定義した医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、タンパク質チロシンキナーゼ阻害活性を有する新規置換５−(１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]−トリアジン−４−アミン誘導体、当該化合物の製造方法、当該化合物を含む医薬組成物、および、増殖性障害、特に癌および腫瘍疾患を処置するための当該化合物の使用に関する。

【背景技術】

【0002】

癌は、世界的に主要な死亡原因であり、２００８年では７６００万人の死亡原因(全死者数の約１３％)である。癌による死亡は世界中で増え続け、２０３０年には１１００万人を超えると予想されている(WHO source, Fact Sheet No. 297, February 2011)。

【0003】

癌が生じ得る多くの経路があり、これが、癌治療を困難にしている理由の１つである。細胞の形質転換が起こり得る一つの経路は、遺伝子変化後である。ヒトゲノムプロジェクトの完成は、ヒトの癌遺伝子のゲノム不安定性および不均一性を示した。これらの遺伝子変化を同定する近年のストラテジーは、癌遺伝子の発見のプロセスを加速させた。遺伝子異常は、例えば、タンパク質の過剰発現をもたらし、それ故に、これらのタンパク質の非生理学的活性化をもたらす。幾つかの腫瘍性タンパク質が由来するタンパク質のファミリーは、チロシンキナーゼ、特に受容体チロシンキナーゼ(ＲＴＫ)である。過去２０年で、多数の研究手段により、癌を引き起こす有害な細胞増殖におけるＲＴＫ介在シグナル伝達の重要性が証明された。最近には、新しいクラスの抗腫瘍化剤として、チロシンキナーゼの選択的小分子阻害剤を用いて、臨床で有望な結果が達成された[Swinney and Anthony, Nature Rev. Drug Disc. 10 (7), 507-519 (2011)]。

【0004】

線維芽細胞増殖因子(ＦＧＦ)およびその受容体(ＦＧＦＲ)は、胚発生および成体病態生理学の様々な面を包含する多様な生物学的プロセスに重要な役割を果たす、独自の異なるシグナル伝達系の一部を形成する[Itoh and Ornitz, J. Biochem. 149 (2), 121-130 (2011)]。時空間的方法において、ＦＧＦは、ＦＧＦＲ結合を介して、細胞の遊走、増殖、分化および生存を含む広範囲の細胞の機能を刺激する。

【0005】

ＦＧＦファミリーは、細胞表面に発現する４つの高度に保存された受容体チロシンキナーゼ(ＦＧＦＲ−１からＦＧＦＲ−４)に結合する１８種の分泌型ポリペプチド増殖因子を含む。さらに、ＦＧＦＲ−５は、ＦＧＦに結合できるが、キナーゼドメインを有さず、従って、細胞内シグナル伝達を欠いている。リガンド／受容体相互作用の特異性は、選択的転写開始、選択的スプライシングおよびＣ末端切断によって多くのアイソフォームを生じる幾つかの転写および翻訳プロセスによって増強される。様々なヘパラン硫酸プロテオグリカン(例えばシンデカン)は、ＦＧＦ／ＦＧＦＲ複合体の一部であり、シグナル伝達応答を誘発するＦＧＦの能力に強く影響し得る[Polanska et al., Developmental Dynamics 238 (2), 277-293 (2009)]。ＦＧＦＲは、３つの細胞外免疫グロブリン様ドメイン、一回膜貫通ドメイン、および、細胞内キナーゼを細胞内二量化チロシンキナーゼドメインからなる細胞表面受容体である。ＦＧＦの結合は、細胞内キナーゼを接近させ、互いにトランスリン酸化することを可能とする。７つのリン酸化部位が確認されている(例えば、ＦＧＦＲ−１において、Tyr463、Tyr583、Tyr585、Tyr653、Tyr654、Tyr730およびTyr766)。

【0006】

これらのホスホチロシン基の幾つかは、それ自身ＦＧＦＲによって直接リン酸化され得る下流のシグナル伝達分子のドッキング部位として作用し、多くのシグナル伝達経路の活性化をもたらす。従って、ＭＡＰＫシグナル伝達カスケードは、細胞増殖および分化に関係し、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔシグナル伝達カスケードは、細胞生存および細胞運命決定に関与する。一方、ＰＩ３ＫおよびＰＫＣシグナル伝達カスケードは、細胞極性制御に機能を有する。幾つかのＦＧＦシグナル伝達フィードバック阻害剤が現在同定されており、Ｓｐｒｙ(Sprouty)およびＳｅｆ(ＦＧＦと類似の発現)ファミリーのメンバーを含む。さらに、特定の条件において、ＦＧＦＲは、プレゴルジ膜からサイトゾルに放出される。受容体およびそのリガンドであるＦＧＦ−２は、インポーチンに関与するメカニズムによって核に共輸送され、遺伝子活性化ゲート開閉因子として作用する共通の必須転写共役因子であるＣＲＥＢ結合タンパク質(ＣＢＰ)複合体に携わっている。ＦＧＦ−２、ＦＧＦＲ−１およびＦＧＦＲ−２の免疫組織化学的発現と、その細胞質および核の腫瘍細胞局在化の間には、多くの相関関係が観察される。例えば、肺腺癌において、この関連性が核レベルで見出され、核での複合体の積極的な役割を強調する[Korc and Friesel, Curr. Cancer Drugs Targets 5, 639-651 (2009)]。

【0007】

ＦＧＦは、発育中および成体組織の双方で広く発現され、組織発育、組織再生、血管新生、腫瘍化、細胞遊走、細胞分化および細胞生存を含む、多様な正常過程および病理学的過程に重要な役割を果たす。さらに、血管新生促進因子としてのＦＧＦはまた、血管内皮増殖因子受容体−２(ＶＥＧＦＲ−２)阻害に対する抵抗性の発生現象に関与している[Bergers and Hanahan, Nat. Rev. Cancer 8, 592-603 (2008)]。

【0008】

最近のシグナル伝達ネットワークの癌ゲノムプロファイルにより、幾つかの一般的なヒトの癌の発生における異常ＦＧＦシグナル伝達の重要な役割が証明された[Wesche et al., Biochem. J. 437 (2), 199-213 (2011)]。リガンド非依存性ＦＧＦＲ構成型シグナル伝達が、多くのヒトの癌、例えば脳の癌、頭頸部癌、胃癌および卵巣癌で記載されている。ＦＧＦＲ変異型およびＦＧＦＲ遺伝子内転座が、悪性病変、例えば骨髄増殖性疾患で確認されている。興味深いことに、多くの発達障害の原因であることが見出された変異と同じ変異が腫瘍細胞でも見出されている(例えば、軟骨形成不全および致死性骨異形成でみられるＦＧＦＲ−３の二量化および構成的活性化を起こす変異は、しばしば、膀胱癌でも見出される)。二量化を促進する変異は、ＦＧＦＲからリガンド非依存性シグナル伝達を増大させるメカニズムの一つに過ぎない。ＦＧＦＲのキナーゼドメインの内部または外部に位置する他の変異は、ドメインのコンホメーションを変化させ、恒久的に活性なキナーゼを生じさせ得る。

【0009】

ＦＧＦＲ−１のゲノム位置である染色体領域8p11-12の増幅は、乳癌で一般的な限局性増幅であり、乳癌の約１０％で起こり、主にエストロゲン受容体陽性癌で起こる。ＦＧＦＲ−１増幅はまた、非小細胞肺扁平上皮癌で報告されており、卵巣癌、膀胱癌および横紋筋肉腫で発生率は低いながら見られる。同様に、約１０％の胃癌で、ＦＧＦＲ−２増幅が示され、これは予後の悪い散在型癌に関連する。さらに、ＦＧＦＲ−１からＦＧＦＲ−４に位置する多くの一塩基多型(ＳＮＰ)は、選択的な癌発症リスクの増大と相関することが分かっているか、または、予後の悪さと関連することが報告されている(例えば乳癌、大腸癌および肺腺癌におけるFGFR-4 G388R 対立遺伝子)。癌の促進についてのこれらのＳＮＰの直接的な役割は、未だ議論の的である。

【0010】

要約すると、多くのインビトロおよびインビボ試験が行われ、ＦＧＦＲ−１からＦＧＦＲ−４を重要な癌標的として確認しており、包括的なレビューはこれらの発見を要約している[例えば Heinzle et al., Expert Opin. Ther. Targets 15 (7), 829-846 (2011); Wesche et al., Biochem. J. 437 (2), 199-213 (2011); Greulich and Pollock, Trends in Molecular Medicine 17 (5), 283-292 (2011); Haugsten et al., Mol. Cancer Res. 8 (11), 1439-1452 (2010)を参照のこと]。幾つかのストラテジーは、ヒトの腫瘍における異常なＦＧＦＲ−１からＦＧＦＲ−４シグナル伝達減少に従うものであり、とりわけ、遮断抗体および小分子阻害剤を含む。幾つかの選択的小分子ＦＧＦＲ阻害剤が、現在、臨床開発中であり、例えば AZD-4547 (AstraZeneca) および BJG-398 (Novartis)がある。

【0011】

最近の癌治療で一般的に達成されている顕著な進歩にもかかわらず、高い効力、高い選択性、低い毒性および／または良好な耐容性などの改善された性質を有する新規抗癌化合物を同定する必要性が続いている。従って、本発明によって解決されるべき技術的課題は、ＦＧＦＲキナーゼに対する阻害活性を有する代替化合物を提供し、その結果、ＦＧＦＲ介在疾患、特に癌および他の増殖性障害を処置する新規治療選択肢を提供する点と考えられる。

【0012】

９員または１０員二環式ヘテロアリール置換基を有する縮合ヘテロ−５,６−二環式キナーゼ阻害剤は、それぞれ WO 2007/061737-A2 および WO 2005/097800-A1に開示されている。これらの化合物は、ｍＴＯＲ(ラパマイシンの哺乳動物標的)および／またはＩＧＦ−１Ｒ(１型インスリン様増殖因子受容体)キナーゼに対する阻害作用のために、癌および他の疾患の処置に有用であると記載された。さらに、キナーゼの阻害に関連するヘテロ−５,６−二環式鋳型構造は、とりわけ、WO 01/19828-A2、WO 2007/079164-A2およびWO 2010/051043-A1に記載されている。

【0013】

幾つかのタンパク質キナーゼに対して異なる阻害プロファイルを有する４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン誘導体は、とりわけ、WO 00/71129-A1、WO 2007/056170-A2、WO 2007/061882-A2、WO 2007/064932-A2、WO 2009/136966-A1、および、WO 2010/126960-A1に開示されている。

【0014】

WO 2005/121147-A1、WO 2007/064883-A2およびWO 2007/064931-A2において、５位に置換ジアリール尿素基を含む４−アミノピロロ−[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン誘導体が、ＦＧＦＲ−１阻害活性を有すると記載されている。しかし、他の受容体チロシンキナーゼ、特にＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲおよびＴｉｅ−２キナーゼもまた、この特定のクラスの化合物によって、著しく阻害される。このようなマルチキナーゼ活性が、処置中の副作用のの可能性を高めるはずであると仮説立てられていたため、ＦＧＦＲキナーゼについての改善された選択性を有する新規薬剤を特定し、その結果、より耐容性の癌治療のための新規選択肢を提供することが、本発明の目的であった。

【0015】

驚くべきことに、本発明により特に５位に置換ベンゾチオフェン−２−イル基を有する４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン誘導体が、ＦＧＦＲキナーゼの、とりわけＦＧＦＲ−１およびＦＧＦＲ−３キナーゼの強力かつ選択的な阻害を示すことが見出され、これにより、これらの化合物は、増殖性障害、例えば癌および腫瘍疾患の処置に特に有用となる。

【発明の概要】

【0016】

従って、一つの局面において、本発明は、一般式(Ｉ)：

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、
Ｒ^１は、水素、クロロ、メチルまたはメトキシであり、
Ｒ^２は、水素またはメトキシであり、
ただし、Ｒ^１およびＲ^２の少なくとも一方が水素以外であり、

【0017】

Ｇ^１は、クロロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、５員アザ−ヘテロアリールまたは基−ＣＨ_２−ＯＲ^３、−ＣＨ_２−ＮＲ^４Ｒ^５または−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^４Ｒ^６
{式中、
Ｒ^３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたはフェニルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは３個までのフルオロ原子で置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該フェニルは、所望によりフルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルおよび(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
Ｒ^４は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^５は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
Ｒ^６は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニル、ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されているか、
あるいは、
Ｒ^４およびＲ^５、または、Ｒ^４およびＲ^６は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜７員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^７)およびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^７は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ホルミルまたは(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニルである。}
を表し、

【0018】

Ｇ^２は、クロロ、シアノ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルまたは基−ＣＲ^８ＡＲ^８Ｂ−ＯＨ、−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０、−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２または−ＣＨ_２−ＯＲ^１５
{式中、
Ｒ^８ＡおよびＲ^８Ｂは、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピルおよびシクロブチルからなる群から独立して選択され、
Ｒ^９は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^１０は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたはジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
Ｒ^１１は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^１２は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは４〜６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、アミノ、アミノカルボニル、モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルまたはジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルで置換されており、
(ii)当該(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されており、
(iii)当該４〜６員ヘテロシクロアルキルは、所望により(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、ヒドロキシ、オキソおよびアミノからなる群から独立して選択される１個または２個の置換基で置換されているか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０、または、Ｒ^１１およびＲ^１２は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜７員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^１３)、Ｏ、ＳおよびＳ(Ｏ)_２から選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、フルオロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される３個までの置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^１３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキル、ホルミルまたは(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニルであり、
Ｒ^１５は、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルである。}
を表す。
ただし、Ｇ^２がクロロまたはシアノであるとき、Ｇ^１はクロロではない。]
の６,７−二置換５−(１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン誘導体に関する。

【発明を実施するための形態】

【0019】

本発明の化合物はまた、その塩、溶媒和物および／または塩の溶媒和物の形態で存在できる。

【0020】

本発明の化合物は、式(Ｉ)の化合物およびその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、式(Ｉ)に含まれる下記の式(I-A)、(I-B)、(I-C)、(I-D)および(I-E)の化合物およびその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、および、製造工程の生成物としておよび／または具体例として下に記載された式(Ｉ)に含まれる化合物、および、式(Ｉ)に含まれる下に記載された化合物が、塩、溶媒和物および塩の溶媒和物でないならば、その塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である。

【0021】

塩は、本発明の目的において、好ましくは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩である(例えば、S. M. Berge et al., “Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19を参照のこと)。それ自体は薬学的使用に適さないが、例えば本発明の化合物の単離または精製に使用できる塩もまた含まれる。

【0022】

薬学的に許容される塩は、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、蟻酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩を含む。

【0023】

薬学的に許容される塩はまた、慣用の塩基の塩を含み、例えばおよび好ましくは、アルカリ金属塩(例えばナトリウム塩およびカリウム塩)、アルカリ土類金属塩(例えばカルシウム塩およびマグネシウム塩)、および、アンモニアまたは有機アミン、例えばおよび好ましくはエチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジメチルアミノエタノール、ジエチルアミノエタノール、プロカイン、ジシクロヘキシルアミン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、アルギニン、リジンおよび１,２−エチレンジアミンから誘導されるアンモニウム塩である。

【0024】

溶媒和物は、本発明の内容において、溶媒分子の化学量論的な配位によって、固体または液体状態で複合体を形成している、本発明の化合物の形態と示される。水和物は、配位が水で起こる場合の、溶媒和物の特定の形態である。本発明の内容において、水和物は、好ましい溶媒和物である。

【0025】

本発明の化合物は、不斉中心の性質または制限された回転の何れかによって、異性体の形態(エナンチオマー、ジアステレオマー)で存在し得る。何れの異性体も、不斉中心が(Ｒ)配置、(Ｓ)配置または(Ｒ,Ｓ)配置である状態で存在し得る。

【0026】

２個以上の不斉中心が本発明の化合物中に存在するとき、しばしば、例示された構造の幾つかのジアステレオマーおよびエナンチオマーが存在可能であること、そして、純粋なジアステレオマーおよび純粋なエナンチオマーが好ましい態様を表すことが認められるであろう。純粋な立体異性体、純粋なジアステレオマー、純粋なエナンチオマーおよびその混合物は、本発明の範囲内であることが意図される。

【0027】

二重結合または環の置換基の性質による幾何異性体は、ｃｉｓ型(＝Ｚ体)またはｔｒａｎｓ型(＝Ｅ体)で存在でき、両方の異性体の形態が、本発明の範囲内に包含される。

【0028】

本発明の化合物の全ての異性体は、分離されているか、純粋であるか、部分的に純粋であるか、またはラセミ混合物であるかにかかわらず、本発明の範囲内に包含される。当該異性体の精製および当該異性体混合物の分離は、当技術分野に既知の標準的な方法によって達成され得る。例えば、ジアステレオマー混合物は、クロマトグラフ法または結晶化によって個々の異性体に分離でき、ラセミ体は、キラルな相でのクロマトグラフによって、または分割によって、各エナンチオマーに分離できる。

【0029】

さらに、上記の化合物の全ての可能な互変異性体の形態が、本発明に含まれる。

【0030】

本発明はまた、本発明の化合物の全ての適当な同位体変異種を包含する。本発明の化合物の同位体変異種は、本発明の化合物中の少なくとも１個の原子が、同じ原子番号を有するが通常または天然に主に存在する原子質量と異なる原子質量を有する原子と交換されている化合物を意味すると理解される。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例は、水素の同位体、炭素の同位体、窒素の同位体、酸素の同位体、フッ素の同位体、塩素の同位体、臭素の同位体およびヨウ素の同位体、例えば^２Ｈ(重水素)、^３Ｈ(トリチウム)、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^１８Ｆ、^３６Ｃｌ、^８２Ｂｒ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２９Ｉおよび^１３１Ｉである。特定の本発明の化合物の同位体変異種、特に１個以上の放射性同位体が組み込まれたものは、例えば、作用メカニズムまたは体内の活性化合物の分布を調べるのに有益であり得る。製造および検出が比較的容易なため、特に^３Ｈまたは^１４Ｃ同位体で標識された化合物がこの目的に適している。さらに、重水素などの同位体の組み込みは、化合物の代謝安定性がより大きい結果として、例えば体内での半減期の延長、または必要とされる有効成分の投与量の減少などの特定の治療上の利点をもたらし得る。本発明の化合物のこのような修飾は、従って、幾つかの場合において、本発明の好ましい態様を構成し得る。本発明の化合物の同位体変異種は、当技術分野で既知の方法によって、例えば下記の方法および実施例に記載された方法によって、特定の反応剤および／または出発化合物の対応する同位体修飾を用いることによって製造できる。

【0031】

本発明の内容において、置換基および残基は、特に断りのない限り、下記の意味を有する：
(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、本発明の内容において、１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル基を表す。例として、および好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。

【0032】

(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシは、本発明の内容において、１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルコキシ基を表す。例として、および好ましくは、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシが挙げられる。

【0033】

モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノは、本発明の内容において、１〜４個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキル置換基を１個有するアミノ基を表す。例として、および好ましくは、メチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｎ−ブチルアミノおよびｔｅｒｔ−ブチルアミノが挙げられる。

【0034】

ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノは、本発明の内容において、同一であるかまたは異なっている、それぞれが１〜４個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキル置換基を２個有するアミノ基を表す。例として、および好ましくは、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミノ、Ｎ−ｎ−ブチル−Ｎ−メチル−アミノおよびＮ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノが挙げられる。

【0035】

(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニルは、本発明の内容において、カルボニル基[−Ｃ(＝Ｏ)−]を介して分子の残りに結合している、１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル基を表す。例として、および好ましくは、アセチル、プロピオニル、ｎ−ブチリル、イソブチリル、ｎ−ペンタノイルおよびピバロイルが挙げられる。

【0036】

(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニルは、本発明の内容において、カルボニル基[−Ｃ(＝Ｏ)−]を介して分子の残りに結合している、１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルコキシ基を表す。例として、および好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニルおよびｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルが挙げられる。

【0037】

モノ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルは、本発明の内容において、カルボニル基[−Ｃ(＝Ｏ)−]を介して分子の残りに結合しており、かつ、１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル置換基を１個有するアミノ基を表す。例として、および好ましくは、メチルアミノカルボニル、エチルアミノカルボニル、ｎ−プロピルアミノカルボニル、イソプロピル−アミノカルボニル、ｎ−ブチルアミノカルボニルおよびｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニルが挙げられる。

【0038】

ジ−(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルアミノカルボニルは、本発明の内容において、カルボニル基[−Ｃ(＝Ｏ)−]を介して分子の残りに結合しており、かつ、同一であるかまたは異なっている、それぞれが１〜４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキル置換基を２個有するアミノ基を表す。例として、および好ましくは、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミノカルボニル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ−カルボニル、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−メチルアミノカルボニル、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルアミノカルボニル、Ｎ−ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノカルボニルおよびＮ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノカルボニルが挙げられる。

【0039】

(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルは、本発明の内容において、３〜６個の環炭素原子を有する単環式、飽和炭素環を表す。例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられる。好ましくは、シクロプロピルおよびシクロブチルである。

【0040】

４〜７員ヘテロシクロアルキルおよび４〜６員ヘテロシクロアルキルは、本発明の内容において、全部で４〜７個または４〜６個の環原子をそれぞれ有し、かつ、Ｎ、Ｏ、ＳおよびＳ(Ｏ)_２のシリーズから選択される同一であるかまたは異なっている１個または２個の環ヘテロ原子を含み、かつ、環炭素原子または環窒素原子(存在するならば)を介して結合できる単環式飽和ヘテロ環を表す。１個の環窒素原子を含み、所望によりさらにＮ、ＯまたはＳ(Ｏ)_２のシリーズから選択される１個の環ヘテロ原子を含む、４〜６員ヘテロシクロアルキルが好ましい。環窒素原子を１個、かつ、所望によりＮまたはＯのシリーズから選択される環ヘテロ原子をさらに１個含む５員または６員ヘテロシクロアルキルが好ましい。例として、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ピロリジニル、ピラゾリジル、イミダゾリジニル、テトラヒドロフラニル、チオラニル、１,１−ジオキシドチオラニル、１,２−オキサゾリジニル、１,３−オキサゾリジニル、１,３−チアゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロ−チオピラニル、１,３−ジオキサニル、１,４−ジオキサニル、１,２−オキサジナニル、モルホリニル、チオモルホリニル、１,１−ジオキシドチオモルホリニル、アゼパニル、１,４−ジアゼパニルおよび１,４−オキサゼパニルが挙げられる。好ましくは、アゼチジニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、１,２−オキサゾリジニル、１,３−オキサゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、１,２−オキサジナニル、モルホリニルおよびチオモルホリニルである。特に好ましくは、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニルおよびモルホリニルである。

【0041】

５員アザ−ヘテロアリールは、本発明の内容において、全部で５個の環原子を有し、環窒素原子を少なくとも１個、かつ、所望によりＮ、Ｏおよび／またはＳのシリーズから選択されるヘテロ原子をさらに１個または２個含み、かつ、環炭素原子を介して、または所望により環窒素原子(原子価が許容されるとき)を介して結合している、芳香族ヘテロ環基(ヘテロ芳香族)を表す。環窒素原子を１個、かつ、Ｎおよび／またはＯのシリーズから選択される環ヘテロ原子をさらに１個または２個含む５員アザ−ヘテロアリールが好ましい。例として、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、オキサジアゾリルおよびチアジアゾリルが挙げられる。好ましくは、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリルおよびオキサジアゾリルである。

【0042】

オキソ置換基は、本発明の内容において、二重結合を介して炭素原子に結合している酸素原子を表す。

【0043】

本発明の内容において、複数回現れる基全てについて、その意味は互いに独立である。本発明の化合物中の基が置換されているならば、特に断りのない限り、基は、一置換されていても多置換されていてもよい。同一であるかまたは異なっている１個、２個または３個の置換基による置換が好ましい。同一であるかまたは異なっている１個または２個の置換基による置換が特に好ましい。

【0044】

好ましい態様において、本発明は、
Ｒ^１が、クロロ、メチルまたはメトキシであり、
Ｒ^２が、水素またはメトキシであり、
Ｇ^１が、クロロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、または、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリルおよびオキサジアゾリルからなる群から選択される５員アザ−ヘテロアリールを表すか、または、基−ＣＨ_２−ＯＲ^３または−ＣＨ_２−ＮＲ^４Ｒ^５
{式中、
Ｒ^３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルコキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは３個までのフルオロ原子で置換されており、
Ｒ^４は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、
Ｒ^５は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは５員または６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、ヒドロキシカルボニルまたは(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルで置換されており、
(ii)当該５員または６員ヘテロシクロアルキルは、所望によりオキソで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^７)およびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、オキソまたはヒドロキシで置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^７は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルである。}
を表し、

【0045】

Ｇ^２が、クロロ、シアノ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルまたは基−ＣＲ^８ＡＲ^８Ｂ−ＯＨ、−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０、−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２または−ＣＨ_２−ＯＲ^１５
{式中、
Ｒ^８ＡおよびＲ^８Ｂは、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルおよびシクロプロピルからなる群から独立して選択され、
Ｒ^９は、水素またはメチルであり、
Ｒ^１０は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは５員または６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシまたはアミノカルボニルで置換されており、
(ii)当該５員または６員ヘテロシクロアルキルは、所望によりオキソで置換されており、
Ｒ^１１は、水素またはメチルであり、
Ｒ^１２は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、(Ｃ_３−Ｃ_６)−シクロアルキルまたは５員または６員ヘテロシクロアルキルであり、
ここで、
(i)当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシで置換されており、
(ii)当該５員または６員ヘテロシクロアルキルは、所望によりオキソで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０、または、Ｒ^１１およびＲ^１２は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^１３)、Ｏ、ＳおよびＳ(Ｏ)_２から選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、フルオロ、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される３個までの置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^１３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピル、シクロブチル、ホルミルまたは(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルカルボニルであり、
Ｒ^１５は、メチルまたはエチルである。}
を表し、
ただし、Ｇ^２がクロロまたはシアノであるとき、Ｇ^１はクロロではない、
一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0046】

特に好ましい態様において、本発明は、
Ｒ^１が、メチルであり、
Ｒ^２が、メトキシであり、
Ｇ^１が、メチル、オキサゾール−５−イルまたは基−ＣＨ_２−ＯＲ^３または−ＣＨ_２−ＮＲ^４Ｒ^５
{式中、
Ｒ^３は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピルまたはシクロブチルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、メトキシ、エトキシ、ヒドロキシカルボニル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、アミノ、アミノカルボニル、シクロプロピル、シクロブチルまたは３個までのフルオロ原子で置換されており、
Ｒ^４は、水素、メチルまたはエチルであり、
Ｒ^５は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、アセチル、シクロプロピル、シクロブチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、シクロプロピルまたはシクロブチルで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和５員または６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、ＮＨおよびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、オキソまたはヒドロキシで置換されていてもよい。}
を表し、

【0047】

Ｇ^２が、メチルまたは基−ＣＲ^８ＡＲ^８Ｂ−ＯＨ、−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０または−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２
{式中、
Ｒ^８ＡおよびＲ^８Ｂは、独立して、水素またはメチルであり、
Ｒ^９は、水素であり、
Ｒ^１０は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、アセチル、シクロプロピル、シクロブチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは、所望によりヒドロキシまたはアミノカルボニルで置換されており、
Ｒ^１１は、水素またはメチルであり、
Ｒ^１２は、水素、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピル、シクロブチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは所望によりヒドロキシで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０、または、Ｒ^１１およびＲ^１２は、それぞれ、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^１３)、ＯおよびＳ(Ｏ)_２から選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、フルオロ、メチル、オキソ、ヒドロキシ、アミノおよびアミノカルボニルからなる群から独立して選択される３個までの置換基で置換されていてもよく、
ここで、Ｒ^１３は、水素、ホルミルまたはアセチルである。}
を表す、一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0048】

異なる態様において、本発明は、
Ｒ^１が、メチルであり、
Ｒ^２が、メトキシである、
一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0049】

さらに異なる態様において、本発明は、
Ｇ^１が、基−ＣＨ_２−ＯＲ^３
{式中、Ｒ^３は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルであり、当該基は、所望によりヒドロキシ、メトキシ、アミノ、アミノカルボニルまたは３個までのフルオロ原子で置換されている。}
を表す、一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0050】

他の異なる態様において、本発明は、
Ｇ^１が、基−ＣＨ_２−ＮＲ^４Ｒ^５
{式中、
Ｒ^４は、水素またはメチルであり、
Ｒ^５は、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、アセチル、シクロプロピル、シクロブチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは所望によりヒドロキシで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^４およびＲ^５は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和５員または６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、ＮＨおよびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、オキソまたはヒドロキシで置換されていてもよい。}
を表す、一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0051】

他の異なる態様において、本発明は、
Ｇ^２が、基−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０
{式中、
Ｒ^９は、水素であり、
Ｒ^１０は、アセチルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであるか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和５員または６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、Ｎ(Ｒ^１３)およびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、そして、環炭素原子で、メチル、オキソ、ヒドロキシおよびアミノからなる群から独立して選択される２個までの置換基で置換されていてもよく、
ここで、
Ｒ^１３は、水素、ホルミルまたはアセチルである。}
を表す、一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0052】

また、他の異なる態様において、本発明は、
Ｇ^２が、基−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２
{式中、
Ｒ^１１は水素であり、
Ｒ^１２は、(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルまたは２−オキソピロリジン−３−イルであり、
ここで、当該(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルは所望によりヒドロキシで置換されているか、
あるいは、
Ｒ^１１およびＲ^１２は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、単環式飽和４〜６員ヘテロシクロアルキル環を形成し、当該環は、ＮＨおよびＯから選択される第２環ヘテロ原子を含んでもよく、環炭素原子で、オキソまたはヒドロキシで置換されていてもよい。}
を表す、一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0053】

特に好ましい態様において、本発明は、
Ｒ^１が、メチルであり、
Ｒ^２が、メトキシであり、
Ｇ^１が、基−ＣＨ_２−ＯＲ^３
{式中、Ｒ^３は、所望によりヒドロキシ、アミノまたはアミノカルボニルで置換されている(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルである。}
を表し、
Ｇ^２が、基−ＣＨ_２−ＮＲ^９Ｒ^１０または−Ｃ(＝Ｏ)−ＮＲ^１１Ｒ^１２
{式中、
Ｒ^９は、水素であり、
Ｒ^１０は、２−オキソピロリジン−３−イルであるか、
あるいは、
Ｒ^９およびＲ^１０は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、ピペラジン−１−イル、３−オキソピペラジン−１−イルまたは４−アセチルピペラジン−１−イル環を形成し、
Ｒ^１１は、水素であり、
Ｒ^１２は、２−オキソピロリジン−３−イルであるか、
あるいは、
Ｒ^１１およびＲ^１２は、それらが結合している窒素原子と一体となって結合して、３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル、４−ヒドロキシピペリジン−１−イルまたは３−オキソピペラジン−１−イル環を形成する。}
を表す、一般式(Ｉ)の化合物に関する。

【0054】

また、それぞれの組み合わせで特記された基、または、好ましい組み合わせの基の定義は、他の組み合わせの基の定義によって、基について示された特定の組み合わせに関係なく、望み通りに置き換えられる。２個以上の上記の好ましい範囲の組み合わせが、特に好ましい。

【0055】

一般式(Ｉ)の化合物は、特定の選択されたＧ^１基およびＧ^２基(上記定義を参照)の性質によって主に決定される様々な合成経路によって製造できる。

【0056】

従って、他の態様において、本発明は、一般式(Ｉ)の化合物を製造する方法であって、以下を特徴とする方法に関する：
[Ａ] 式(II)：

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、上記の意味を有する。]
の６位置換４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジンを、最初に、ホルムアルデヒドおよび式(III)：

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
のアミンと、酸の存在下で反応させ、式(IV)：

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
の化合物を得て、次いで、それを臭素化して、式(Ｖ)：

【化5】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
の化合物とし、続いて、それを式(VI)：

【化6】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、
Ｒ^１およびＲ^２は、上記の意味を有し、
Ｒ^１４は、水素または(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキルを表すか、または、両方のＲ^１４基が、一体となって結合して、−(ＣＨ_２)_２−、−Ｃ(ＣＨ_３)_２−Ｃ(ＣＨ_３)_２−、−(ＣＨ_２)_３−、−ＣＨ_２−Ｃ(ＣＨ_３)_２−ＣＨ_２−または−Ｃ(＝Ｏ)−ＣＨ_２−Ｎ(ＣＨ_３)−ＣＨ_２−Ｃ(＝Ｏ)−架橋を形成する。]
のベンゾチオフェン−２−イル ボロネートと、パラジウム触媒および塩基の存在下でカップリングさせ、式(I-A)：

【化7】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
の標的化合物を得ること、あるいは、

【0057】

[Ｂ] 式(II)：

【化8】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、上記の意味を有する。]
の６位置換４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジンを、最初に、塩化ホスホリルの存在下、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミドでホルミル化して、式(VII)：

【化9】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、上記の意味を有する。]
のアルデヒドを得て、次いで、それを臭素化して、式(VIII)：

【化10】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３は、上記の意味を有する。]
の化合物とし、続いて、式(VI)：

【化11】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^１４は、上記の意味を有する。]
のベンゾチオフェン−２−イル ボロネートと、パラジウム触媒および塩基の存在下でカップリングさせ、式(IX)：

【化12】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、上記の意味を有する。]
の化合物を得て、次いで、それを、

【0058】

[B-1] 式(III)：

【化13】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
のアミンと、酸および還元剤の存在下で反応させ、式(I-A)：

【化14】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
の標的化合物を得るか、または、

【0059】

[B-2] 式(Ｘ)：

【化15】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、上記の意味を有する。]
のカルボン酸に酸化して、最後に、式(XI)：

【化16】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１１およびＲ^１２は、上記の意味を有する。]
のアミンと、縮合剤の存在下でカップリングさせ、式(I-B)：

【化17】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^１１およびＲ^１２は、上記の意味を有する。]
の標的化合物を得ること、あるいは、

【0060】

[Ｃ] 式(XII)：

【化18】

[この文献は図面を表示できません]

の６位置換４−アミノ−５−ブロモピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジンを、最初に、式(VI)：

【化19】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^１４は、上記の意味を有する。]
のベンゾチオフェン−２−イル ボロネートと、パラジウム触媒および塩基の存在下でカップリングさせ、式(XIII)：

【化20】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１およびＲ^２は、上記の意味を有する。]
の化合物を得て、それをホルムアルデヒドおよび式(III)：

【化21】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
のアミンと、酸の存在下で反応させ、式(I-C)：

【化22】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
の化合物を得て、続いて、それを

【0061】

[C-1] 式(XIV)：

【化23】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
のアルデヒドに酸化して、それを式(XV)：

【化24】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^４およびＲ^５は、上記の意味を有する。]
のアミンで、酸および還元剤の存在下で処理し、式(I-D)：

【化25】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
の標的化合物を得るか、または、

【0062】

[C-2] 式(XVI)：

【化26】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有し、
Ｘは、クロロ、ブロモまたはヨードである。]
の対応する６−(ハロメチル)誘導体に変換し、それを式(XVII)：

【化27】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^３Ａは、上記のＲ^３の水素以外の意味を有する。]
のアルコールで、塩基の存在下で処理し、式(I-E)：

【化28】

[この文献は図面を表示できません]

[式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３Ａ、Ｒ^９およびＲ^１０は、上記の意味を有する。]
の標的化合物を得ること；
所望により、適切な場合は、続いて、(i) このようにして得られた式(Ｉ)の化合物を、好ましくはクロマトグラフ法を用いて、そのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分離すること、および／または、(ii) 対応する溶媒および／または酸または塩基で処理することによって、式(Ｉ)の化合物を、その水和物、溶媒和物、塩および／または塩の水和物または溶媒和物に変換すること。

【0063】

上記の方法によって製造できる式(I-A)、(I-B)、(I-C)、(I-D)および(I-E)の化合物は、それぞれ、一般式(Ｉ)の化合物の特定のサブセットを表す。

【0064】

マンニッヒタイプのアミノメチル化反応を表す製造工程[Ａ](II)→(IV)および[Ｃ](XIII)→(I-C)は、通常の方法で、それぞれの出発化合物を、ホルムアルデヒド水溶液およびアミン成分(III)の混合物で、酸触媒、例えば蟻酸または酢酸の存在下で処理することによって行われる。好ましくは、酢酸は、触媒および溶媒の両方として用いられる。反応は、通常、＋２０℃〜＋８０℃の範囲の温度で行われる。

【0065】

製造工程[Ａ](IV)→(V)および[Ｂ](VII)→(VIII)における臭素化反応剤として、好ましくは、Ｎ−ブロモスクシンイミド(ＮＢＳ)、１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダントイン(ＤＢＤＭＨ)または臭素が用いられる。反応は、一般的に、不活性溶媒中で、例えばジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、アセトニトリルまたはＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)中で、−７８℃〜＋２０℃の温度範囲内で行われる。

【0066】

カップリング反応[Ａ](V)＋(VI)→(I-A)、[Ｂ](VIII)＋(VI)→(IX)、および、[Ｃ](XII)＋(VI)→(XIII)[“鈴木−宮浦カップリング”]は、一般的に、不活性溶媒中で、パラジウム触媒および塩基水溶液を用いて行われる。この目的に適したパラジウム触媒は、例えば、酢酸パラジウム(II)、塩化パラジウム(II)、塩化 ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)、塩化 ビス(アセトニトリル)パラジウム(II)、塩化 [１,１'−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)、ビス(ジベンジリデンアセトン)パラジウム(0)、および、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)を含み、所望により他のホスフィンリガンド、例えば、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル(X-Phos)、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２',６'−ジメトキシビフェニル(S-Phos)、４,５−ビス(ジフェニルホスフィノ)−９,９−ジメチルキサンテン (Xantphos)、または、４−(ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ホスフィノ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリンと組み合わせる。また、反応条件下で触媒として活性な種を生成するパラジウム・プレ触媒、例えば(２'−アミノビフェニル−２−イル)−(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィンを用いることができる[例えば S. Kotha et al., Tetrahedron 58, 9633-9695 (2002); T. E. Barder et al., J. Am. Chem. Soc. 127 (13), 4685-4696 (2005); S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)およびこれらに引用された参考文献を参照のこと]。

【0067】

これらのカップリング反応に適した塩基は、特に、炭酸アルカリ金属塩、例えば炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは炭酸セシウム、リン酸アルカリ金属塩、例えばリン酸ナトリウムまたはリン酸カリウム、または、フッ化アルカリ金属塩、例えばフッ化カリウムまたはフッ化セシウムである。通常、これらの塩基は、水溶液として用いられる。反応は、反応条件下で不活性な有機溶媒中で行われる。好ましくは、水と混和できる有機溶媒、例えば１,２−ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン、１,４−ジオキサン、アセトニトリル、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)またはジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)が用いられるが、他の不活性溶媒、例えばジクロロメタンまたはトルエンを用いてもよい。

【0068】

製造工程[Ｂ](II)→(VII)[“ビルスマイヤー・ハック・ホルミル化”]は、通常の方法で、ピロロトリアジン(II)を、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)溶媒中、塩化ホスホリルで処理することによって行われる。反応は、通常、０℃〜＋８０℃の温度で行われる。

【0069】

還元的アミノ化反応[B-1](IX)＋(III)→(I-A)および[C-1](XIV)＋(XV)→(I-D)に適した還元剤は、慣用の水素化ホウ素アルカリ金属塩、例えば水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素カリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムである。変換は、一般的に、アミン成分(III)および(XV)および／または用いられた特定の水素化ホウ素塩の反応性に応じて、酸、好ましくは酢酸の存在下で、アルコールまたはエーテル溶媒中、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフランまたは１,４−ジオキサン中で、０℃〜＋８０℃の温度範囲内で行われる。

【0070】

製造工程[B-2](IX)→(X)の酸化反応において、次亜塩素酸塩スカベンジャー、例えば２−メチル−２−ブテンの存在下での亜塩素酸ナトリウムによる酸化は、選択肢の方法を表す [cf. H. W. Pinnick et al., Tetrahedron 37, 2091-2096 (1981); A. Raach and O. Reiser, J. Prakt. Chem. 342 (6), 605-608 (2000)およびこれらに引用された参考文献]。反応は、通常、テトラヒドロフラン／水の混合物中、０℃から環境温度の間の温度で行われる。

【0071】

製造工程[B-2](X)＋(XI)→(I-B)[アミド形成]に適した縮合剤は、例えば、カルボジイミド、例えばＮ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド(ＤＣＣ)またはＮ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ'−エチルカルボジイミド(ＥＤＣ)、ホスゲン誘導体、例えばＮ,Ｎ'−カルボニルジイミダゾール(ＣＤＩ)またはクロロ蟻酸イソブチル、α−クロロエナミン、例えば１−クロロ−２−メチル−１−ジメチルアミノ−１−プロペン、リン化合物、例えば無水プロパンホスホン酸、シアノホスホン酸ジエチル、塩化 ビス(２−オキソ−３−オキサゾリジニル)ホスホリル、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス(ジメチルアミノ)−ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート(ＢＯＰ)またはベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス(ピロリジノ)ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート(PyBOP)、および、ウロニウム化合物、例えばＯ−(ベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム テトラフルオロボレート(ＴＢＴＵ)、Ｏ−(ベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート(ＨＢＴＵ)、２−(２−オキソ−１−(２Ｈ)−ピリジル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム テトラフルオロボレート(ＴＰＴＵ)、Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート(ＨＡＴＵ)またはＯ−(１Ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル)−１,１,３,３−テトラメチルウロニウム テトラフルオロボレート(ＴＣＴＵ)を含み、適切な場合は、さらなる補助剤、例えば１−ヒドロキシベンゾトリアゾール(ＨＯＢｔ)またはＮ−ヒドロキシスクシンイミド(ＨＯＳｕ)、および／または、塩基、例えば炭酸アルカリ金属塩、例えば炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウム、または、有機アミン塩基、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン(ＮＭＭ)、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)、ピリジンまたは４−Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン(ＤＭＡＰ)と組み合わせる。好ましいのは、Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート(ＨＡＴＵ)またはＯ−(ベンゾトリアゾール−１−イル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウム テトラフルオロボレート(ＴＢＴＵ)を、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン (ＤＩＰＥＡ)および所望により１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール(ＨＯＢｔ)と組み合わせて用いることである。

【0072】

製造工程[B-2](X)＋(XI)→(I-B)のための不活性溶媒は、例えば、エーテル、例えばジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチル メチル エーテル、テトラヒドロフラン、１,４−ジオキサンまたは１,２−ジメトキシエタン、炭化水素、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、ヘキサンまたはシクロヘキサン、ハロゲン化炭化水素、例えばジクロロメタン、トリクロロメタン、四塩化炭素、１,２−ジクロロエタン、トリクロロエチレンまたはクロロベンゼン、または、他の溶媒、例えばアセトン、アセトニトリル、酢酸エチル、ピリジン、ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)、Ｎ,Ｎ'−ジメチルプロピレン尿素(ＤＭＰＵ)またはＮ−メチルピロリジノン(ＮＭＰ)である。また、これらの溶媒の混合物を使用できる。好ましいのは、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはその混合物を用いることである。反応は、一般的に、０℃〜＋６０℃の温度範囲で、好ましくは＋１０℃〜＋４０℃で行われる。

【0073】

穏やかな条件下で第１級アルコール(I-C)をアルデヒド(XIV)に変換できる酸化剤(工程[C-1])は、１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン(“デス・マーチン・ペルヨージナン”)、第２酸化剤、例えばヨードソベンゼン−Ｉ,Ｉ−ジアセテートまたは次亜塩素酸ナトリウムと組み合わせた２,２,６,６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル(ＴＥＭＰＯ)、および、ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)をベースとした酸化系、例えばＤＭＳＯ／無水トリフルオロ酢酸またはＤＭＳＯ／Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド(ＤＣＣ)を含む。好ましくは、１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オンである。反応は、一般的に、不活性溶媒中で行われ、好ましくはジクロロメタンを用いて行われる。

【0074】

製造工程[C-2](I-C)→(XVI)におけるヒドロキシからハロゲンへの変換において、当技術分野で周知の様々な標準的な方法および反応剤が用いられ得る。反応剤の選択は、塩化チオニル[Ｘ＝Ｃｌについて]、テトラブロモメタン／トリフェニルホスフィン[Ｘ＝Ｂｒについて]、および、ヨウ素／トリフェニルホスフィン[Ｘ＝Ｉについて]である。６−(クロロメチル)誘導体(XVI)[Ｘ＝Ｃｌ]の製造は、後処理が好都合で化合物が安定であるという理由で好ましい。

【0075】

製造工程[C-2](XVI)＋(XVII)→(I-E)[エーテル形成]に適した塩基は、特に、炭酸アルカリ金属塩、例えば炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは炭酸セシウム、酢酸アルカリ金属塩、例えば酢酸ナトリウムまたは酢酸カリウム、または、慣用の第３級アミン塩基、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンまたはピリジンである。好ましくは、Ｎ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)である。反応(XVI)＋(XVII)→(I-E)は、不活性溶媒中、例えばテトラヒドロフラン中、または、溶媒なしで過剰のアルコール(XVII)を用いて、＋２０℃〜＋２００℃、好ましくは＋５０℃〜＋１５０℃の範囲の温度で行われる。有利には、変換は、マイクロ波反応装置によって行われる。

【0076】

反応順序(I-C)→(XVI)→(I-E)は、２つの別個の工程、すなわち中間体化合物(XVI)の単離および精製を伴って行われても、ワンポット法、すなわち製造反応で得られたままの粗製の中間体(XVI)を用いて行われてもよい。

【0077】

第１級または第２級アミン部分が、式(Ｉ)の標的化合物中のＧ^１またはＧ^２基の一部を形成する場合、時には、上記の製造反応において、遊離アミンの代わりに反応要素としてこのアミンの保護誘導体を用いることが適切であり得る。この目的のために、慣用の一時的なアミノ保護基、例えばアシル基(例えばアセチルまたはトリフルオロアセチル)またはカルバメート型保護基(例えばＢｏｃ基、Ｃｂｚ基またはＦｍｏｃ基)を用いてもよい。好ましくは、Ｂｏｃ(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)基が用いられる。同様に、Ｇ^１またはＧ^２基の一部であるヒドロキシ官能基は、前駆体化合物および工程中間体において、例えばテトラヒドロピラニル(ＴＨＰ) エーテルとして、または、シリル エーテル誘導体、例えばトリメチルシリルまたはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル エーテルとして、一時的にブロックされ得る。

【0078】

次いで、これらの保護基は、水での後処理および精製の手順の間に同時に切断され得るか、または、当技術分野で周知の標準的な方法を用いて、連続した別個の反応工程で切断される。対応する遊離アミンまたはアルコールからの当該保護された中間体の製造は、同様に、文献[例えば、T. W. Greene and P. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999を参照のこと]に記載された一般的な手順に従って、容易に達成される。

【0079】

保護された(すなわちアシル化した)アミン誘導体の特定のタイプは、それ自身、顕著なＦＧＦＲ阻害活性を有する。従って、このような化合物はまた、上で定義した一般式(Ｉ)に包含される。

【0080】

本発明の化合物の製造は、下記の反応スキームによって説明され得る：
スキーム１

【化29】

[この文献は図面を表示できません]

【0081】

スキーム２

【化30】

[この文献は図面を表示できません]

【0082】

スキーム３

【化31】

[この文献は図面を表示できません]

【0083】

スキーム４

【化32】

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【0084】

式(II)の６位置換４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジンは、例えば、下記のスキーム５に記載された２つの異なる経路によって製造できる。最初の経路では、４−アミノ−６−シアノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン(XVIII)を、酸媒介アルコール分解によってエステル(XIX)に変換し、次いで、トリエチル水素化ホウ素リチウムを用いて６−(ヒドロキシメチル)化合物(IIa)[(II)におけるＲ^３＝Ｈ]に還元する。対応する６−(ハロメチル)ピロロトリアジン、例えばクロロ化合物(XX)への標準的な変換に続いて、塩基存在下で式(XVII)のアルコールで処理することによって、式(IIb)のエーテル誘導体[(II)におけるＲ^３≠Ｈ]を提供する。出発化合物(XVIII)の製造は、以前に記載されている[国際特許出願 WO 2007/ 064883 (中間体AX／工程３)を参照のこと]。

【0085】

第２経路は、保護された１−アミノ−４−ブロモ−２−シアノピロール(XXI)[国際特許出願 WO 2007/064883 (中間体AAE, 工程３)に示した製造]から出発する。ウレタン窒素を脱保護し、続いて４位をメタレーションし、ホルムアルデヒドと反応させて、４−(ヒドロキシメチル)誘導体(XXII)を得る。塩化水素で処置し、続いてアルコール(XVII)を添加し、ワンポット法を用いてホルムアミジンで縮合して、式(IIb)の標的化合物を提供する。この経路は、アルコール反応剤(XVII)がこれらの場合の反応溶媒としての役割も果たし得る点で、アルキルエーテル誘導体[(IIb)におけるＲ^３Ａ＝(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル]の製造に特に適している。

【0086】

スキーム５

【化33】

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【0087】

式(XII)の４−アミノ−５−ブロモピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン誘導体は、４−アミノ−６−(ヒドロキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン(IIa)(スキーム５参照)から、最初に１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダントインを用いて５,７−ジブロモ化し、続いてｎ−ブチルリチウムとのハロゲン−金属交換を介して選択的に７位脱ブロモ化し、続いてメタノールで反応停止することによって(下記のスキーム６を参照のこと)、容易に利用可能である。

【0088】

スキーム６

【化34】

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【0089】

式(VI)のベンゾチオフェン−２−イル ボロネートは、好都合には、式(XXIV)の置換チオフェノール誘導体から出発して製造できる(下記のスキーム７を参照のこと)。ブロモアセタール(XXV)でアルキル化し、続いてポリリン酸介在環化をして、式(XXVII)のベンゾチオフェン中間体を得る。これを次いで２位でメタレーションし、トリアルキル ボレートと反応させる。アルカリで後処理し、式(VIa)の遊離の(ベンゾチオフェン−２−イル)ボロン酸を得る。これは、望ましいならば、当技術分野で既知の標準的な手順によって、式(VIb)の環状ボロネート、例えばいわゆるＭＩＤＡ ボロネートに変換してもよい[例えばD. M. Knapp et al., J. Am. Chem. Soc. 131 (20), 6961-6963 (2009)を参照のこと]。

【0090】

スキーム７

【化35】

[この文献は図面を表示できません]

[P. A. Ple and L. J. Marnett, J. Heterocyclic Chem. 25 (4), 1271-1272 (1988); A. Ventu-relli et al., J. Med. Chem. 50 (23), 5644-5654 (2007)を参照のこと]。

【0091】

式(III)、(XI)、(XV)、(XVII)、(XXIV)および(XXV)の化合物は、市販されているか、文献既知であるか、または、利用可能な出発物質から文献に記載された標準的な方法を適合させることによって容易に製造できる。出発物質を製造するための詳細な手順および参考文献は、実施例の出発物質および中間体の製造についての章で見出され得る。

【0092】

一般式(Ｉ)の化合物のさらなるサブグループの製造は、下記の反応スキーム８〜１４で説明される。必要なピロロトリアジン前駆体は、当技術分野で周知の慣用の方法によって容易に合成でき、さらなる合成は、多くの場合、上記の製造工程の章で略記した製造経路に従い、類似のタイプの反応、例えば、臭素化、ボロネートカップリング、アミノメチル化、還元アミノ化、酸化、および／または、エーテルまたはアミド形成反応を用いて行う。さらなる詳細は、例示的態様の製造および各前駆体化合物についての実施例で提供される。

【0093】

スキーム８

【化36】

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[Ｒ^８Ａ、Ｒ^８Ｂ＝(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピルまたはシクロブチル]。

【0094】

スキーム９

【化37】

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[Ｒ^８Ａ＝(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル、シクロプロピルまたはシクロブチル；Ｘ＝Ｃｌ、ＢｒまたはＩ]。

【0095】

スキーム１０

【化38】

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[Ｒ＝(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル]。

【0096】

スキーム１１

【化39】

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[Ｒ＝クロロまたは(Ｃ_１−Ｃ_４)−アルキル；出発物質(XXVIII)の製造については、国際特許出願WO 2007/064883およびWO 2007/056170をそれぞれ参照のこと]。

【0097】

スキーム１２

【化40】

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[出発化合物(XXIX)の製造については、下記のスキーム１４を参照のこと]。

【0098】

スキーム１３

【化41】

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【0099】

スキーム１４

【化42】

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【0100】

本発明の化合物は、有益な薬理学的性質を有し、ヒトおよび他の哺乳動物の障害を予防および処置するのに用いられ得る。

【0101】

本発明の化合物は、受容体チロシンキナーゼ、特にＦＧＦＲキナーゼ、最も顕著にはＦＧＦＲ−１およびＦＧＦＲ−３キナーゼの活性または発現の強力な阻害剤である。従って、他の態様において、本発明は、処置を必要とする患者において、ＦＧＦＲキナーゼ活性が関連するまたは介在する障害を処置する方法であって、該患者に、有効量の上で定義した式(Ｉ)の化合物を投与することを含む方法を提供する。或る態様において、ＦＧＦＲキナーゼ活性が関連する障害は、増殖性障害、特に癌および腫瘍疾患である。

【0102】

本発明の内容において、用語“処置”または“処置する”は、疾患、障害、状態または容態を、その発症および／または進行および／または症候を阻害し、遅延し、軽減し、緩和し、阻止し、減少させまたはその退縮を起こすことを含む。用語“予防”または“予防する”は、疾患、障害、状態または容態を、その発症および／または進行および／または症候を、有する、罹患する、または経験するリスクを減少させることを含む。用語“予防”(prevention)は、予防(prophylaxis)を含む。障害、疾患、状態または容態の処置または予防は、部分的であっても完全であってもよい。

【0103】

用語“増殖性障害”は、望ましくないまたは制御されていない細胞増殖を含む障害を含む。本発明の化合物は、細胞増殖および／または細胞分割を予防し、阻害し、遮断し、軽減し、減少させ、制御することなど、および／または、アポトーシスを生じさせることに利用できる。本方法は、ヒトを含む哺乳動物を含む処置を必要とする対象に、該障害を処置または予防するのに有効な本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩、異性体、多形、代謝物、水和物または溶媒和物を或る量で投与することを含む。

【0104】

この明細書を通して、単純にするために、単数表現を複数表現より好んで用いているが、一般的に、特に断りのない限り、単数表現は複数表現を含むことを意味する。例えば、“患者において疾患を処置する方法であって、有効量の式(Ｉ)の化合物を患者に投与することを含む方法”は、１種より多い疾患の同時処置、および、１種より多い式(Ｉ)の化合物の投与を含むことを意味する。

【0105】

本発明の化合物で処置および／または予防できる増殖性障害は、特に、癌および腫瘍疾患のグループを含むが、これらに限定されない。これらは、特に、下記の疾患を意味すると理解されるが、それらに限定されない：乳癌および乳房の腫瘍(乳管および小葉型、また非浸潤性のもの)、呼吸管の腫瘍(小細胞肺癌および非小細胞肺癌、小細胞癌および非小細胞癌、気管支癌、気管支腺腫、胸膜肺芽腫)、脳の腫瘍(例えば脳幹の腫瘍、および視床下部の腫瘍、星状細胞腫、神経膠芽腫、髄芽腫、上衣腫、神経外胚葉腫瘍および松果体腫瘍)、消化器(食道、胃、胆嚢、小腸、大腸、直腸、肛門)の腫瘍、肝臓の腫瘍(とりわけ肝細胞癌、胆管細胞癌、および、肝細胞・胆管細胞混合型腫瘍)、頭および頸部(喉頭、下咽頭、上咽頭、中咽頭、口唇および口腔)の腫瘍、皮膚癌(扁平上皮癌、カポジ肉腫、悪性黒色腫、メルケル細胞皮膚癌および非黒色腫皮膚癌)、軟部組織の腫瘍(とりわけ軟部組織肉腫、骨肉腫、悪性線維性組織球腫、リンパ肉腫および横紋筋肉腫)、眼の腫瘍(とりわけ眼球内黒色腫、ぶどう膜黒色腫および網膜芽細胞腫)、内分泌腺および外分泌腺(例えば甲状腺および副甲状腺、膵臓および唾液腺)の腫瘍、尿路の腫瘍(膀胱、陰茎、腎臓、腎盂および尿管の腫瘍)、生殖器の腫瘍(女性における子宮内膜、子宮頸、卵巣、膣、外陰部および子宮の癌、および、男性における前立腺および精巣の癌)、ならびに、その遠隔転移。これらの障害はまた、固形癌および循環血液細胞としての増殖性血液疾患、例えばリンパ腫、白血病、および、骨髄増殖性疾患、例えば急性骨髄腫、急性リンパ芽球性、慢性リンパ性、慢性骨髄性および有毛細胞白血病、および、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫および中枢神経系のリンパ腫を含む。

【0106】

本発明の化合物の活性および選択性プロファイルのために、本発明の化合物は、胸部(乳房)、肺、胃、膀胱および卵巣の癌および腫瘍疾患の処置に特に適当であると考えられる。さらに、本発明の化合物は、全般的な腫瘍転移の予防または抑制に特に適している。

【0107】

本発明の化合物および方法で処置および／または予防できる他の増殖性障害は、乾癬、ケロイドおよび他の皮膚に影響を与える過形成、水疱性類天疱瘡、多形紅斑および疱疹状皮膚炎を含む表皮下水疱形成を伴う水疱性障害、線維性障害、例えば肺線維症、アテローム性動脈硬化症、再狭窄および肝硬変、メサンギウム細胞増殖性障害、糸球体症、糸球体腎炎、糖尿病性腎症、悪性腎硬化症および多発性嚢胞腎疾患を含む腎臓疾患、良性前立腺過形成(ＢＰＨ)、血管新生のまたは血管増殖性障害および血栓性微小血管障害症候群を含む。

【0108】

本発明の化合物はまた、眼疾患、例えば加齢黄斑変性(ＡＭＤ)、萎縮型黄斑変性、虚血性網膜静脈閉塞症、糖尿病性黄斑浮腫、糖尿病網膜症、未熟児網膜症および他の網膜症の処置および／または予防に有用である。

【0109】

本発明の化合物を投与することによって処置および／または予防し得る他の状態は、婦人科疾患、例えば子宮内膜症、筋腫および卵巣嚢腫、脂肪生成、胆汁代謝、リン酸代謝、カルシウム代謝および／または骨ミネラル化に関連する代謝障害、骨格障害、例えば低身長症、軟骨形成不全およびパイフェル症候群、軟骨疾患、例えば変形性関節症および多発性関節炎、関節リウマチ、禿頭症および移植拒絶反応を含む。

【0110】

上記の疾患は、ヒトにおいて、よく特徴づけられているが、他の哺乳動物においても、比較可能な病因で存在し、本発明の化合物および方法で処置できる。

【0111】

従って、本発明は、さらに、障害、特に上記の障害を処置および／または予防するための本発明の化合物の使用に関する。

【0112】

本発明は、さらに、障害、特に上記の障害を処置および／または予防する医薬組成物を製造するための、本発明の化合物の使用に関する。

【0113】

本発明は、さらに、障害、特に上記の障害を処置および／または予防する方法における、本発明の化合物の使用に関する。

【0114】

本発明は、さらに、有効量の少なくとも１種の本発明の化合物を用いることによって、障害、特に上記の障害を処置および／または予防する方法に関する。

【0115】

本発明の化合物を、唯一の薬剤として投与してもよく、または、組み合わせが望ましくないおよび／または許容されない副作用を起こさない限り、１種以上のさらなる治療薬と組み合わせて投与してもよい。このような併用治療は、上で定義した式(Ｉ)の化合物および１種以上のさらなる治療薬を含む一つの医薬投与製剤の投与、ならびに、それぞれ別個の医薬投与製剤における式(Ｉ)の化合物およびさらなる治療薬の投与を含む。例えば、式(Ｉ)の化合物および１つの治療薬を、１個の(固定化された)経口投与組成物、例えば錠剤またはカプセル剤で、一緒に患者に投与してもよく、または、それぞれの薬物を別個の投与製剤で投与してもよい。

【0116】

別個の投与製剤を用いるとき、式(Ｉ)の化合物と１種以上のさらなる治療薬を、基本的に同時に(すなわち共に)投与しても、別個に時間差で(すなわち連続で)投与してもよい。

【0117】

特に、本発明の化合物は、他の抗癌剤、例えばアルキル化剤、代謝拮抗薬、植物誘発抗癌剤、ホルモン治療薬、トポイソメラーゼ阻害剤、チューブリン阻害剤、キナーゼ阻害剤、標的化薬物、抗体、抗体−薬物コンジュゲート(ＡＤＣ)、免疫剤、生物学的応答修飾剤、抗血管新生化合物、および、他の抗増殖性細胞分裂阻害剤および／または細胞毒との固定化された組み合わせまたは別個の組み合わせで用いられ得る。この点で、下記は、本発明の化合物と組み合わせて用いられ得る第２薬物の例の非限定的な一覧である：
アバレリックス、アビラテロン、アクラルビシン、アファチニブ、アフリベルセプト、アルデスロイキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アルファラディン(alpharadin)、アルトレタミン、アミノグルテチミド、アモナファイド(amonafide)、アムルビシン、アムサクリン、アナストロゾール、アンドロムスチン(andromustine)、アルグラビン、アスパラギナーゼ、アキシチニブ、５−アザシチジン、バシリキシマブ、ベロテカン、ベンダムスチン、ベバシズマブ、ベキサロテン、ビカルタミド、ビサントレン、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ボスチニブ、ブリバニブアラニンエステル、ブセレリン、ブスルファン、カバジタキセル、CAL-101、ホリナートカルシウム、レボホリナートカルシウム、カンプトテシン、カペシタビン、カルボプラチン、カルモフール、カルムスチン、カツマキソマブ、セジラニブ、セルモロイキン、セツキシマブ、クロラムブシル、クロルマジノン、クロルメチン、シドホビル、シスプラチン、クラドリビン、クロドロン酸、クロファラビン、コンブレタスタチン、クリサンタスパーゼ、クリゾチニブ、シクロホスファミド、シプロテロン、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダルベポエチン アルファ、ダーリナパーシン(darinaparsin)、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デガレリクス、デニロイキンジフチトクス、デノスマブ、デスロレリン、塩化ジブロスピジウム(dibrospidium chloride)、ドセタキセル、ドビチニブ、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、デュタステリド、エクリズマブ、エドレコロマブ、エフロルニチン、エリプチニウム アセテート、エルトロンボパグ、エンドスタチン、エノシタビン、エピムビシン(epimbicin)、エピルビシン、エピチオスタノール、エポエチン アルファ、エポエチン ベータ、エポチロン、エプタプラチン(eptaplatin)、エリブリン、エルロチニブ、エストラジオール、エストラムスチン、エトポシド、エベロリムス、エキサテカン、エキセメスタン、エクシスリンド、ファドロゾール、フェンレチニド、フィルグラスチム、フィナステリド、フラボピリドール、フルダラビン、５−フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミド、ホレチニブ、ホルメスタン、ホテムスチン、フルベストラント、ガニレリクス、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、ギマテカン、ギメラシル、グルホスファミド、グルトキシム(glutoxim)、ゴセレリン、ヒストレリン、ヒドロキシ尿素、イバンドロン酸、イブリツモマブ チウキセタン、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、イミキモド、インプロスルファン、インテダニブ(intedanib)、インターフェロン アルファ、インターフェロン アルファ−２ａ、インターフェロン アルファ−２ｂ、インターフェロン ベータ、インターフェロン ガンマ、インターロイキン−２、イピリムマブ、イリノテカン、イキサベピロン、ランレオチド、ラパチニブ、ラソフォキシフェン、レナリドミド、レノグラスチム、レンチナン、レンバチニブ、レスタウルチニブ、レトロゾール、リュープロレリン、レバミゾール、リニファニブ、リンスチニブ(linsitinib)、リスリド、ロバプラチン(lobaplatin)、ロムスチン、ロニダミン、ルルトテカン、マホスファミド、マパツムマブ(mapatumumab)、マシチニブ、マソプロコール、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール、メラルソプロール、メルファラン、メピチオスタン、メルカプトプリン、メトトレキサート、アミノレブリン酸メチル、メチルテストステロン、ミファムルチド、ミフェプリストン、ミルテホシン、ミリプラチン、ミトブロニトール、ミトグアゾン、ミトラクトール、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、モルグラモスチム、モテサニブ、ナンドロロン、ネダプラチン、ネララビン、ネラチニブ、ニロチニブ、ニルタミド、ニモツズマブ(nimotuzumab)、ニムスチン、ニトラクリン、ノラトレキセド、オファツムマブ、オプレルベキン、オキサリプラチン、パクリタキセル、パリフェルミン、パミドロン酸、パニツムマブ、パゾパニブ、ペグアスパルガーゼ、ペグ−エポエチン ベータ、ペグフィルグラスチム(pegfilgastrim)、ペグ−インターフェロン アルファ−２ｂ、ペリトレキソール、ペメトレキセド、ペムツモマブ(pemtumomab)、ペントスタチン、ペプロマイシン、ペルホスファミド、ペリホシン、ペルツズマブ、ピシバニール、ピラムビシン(pirambicin)、ピラルビシン、プレリキサフォル、プリカマイシン、ポリグルサム(poliglusam)、リン酸ポリエストラジオール、ポナチニブ、ポルフィマー ナトリウム、プララトレキサート、プレドニムスチン、プロカルバジン、プロコダゾール、PX-866、キナゴリド、ラロキシフェン、ラルチトレキセド、ラニビズマブ、ラニムスチン、ラゾキサン、レゴラフェニブ、リセドロン酸、リツキシマブ、ロミデプシン、ロミプロスチム、ルビテカン、サラカチニブ、サルグラモスチム、サトラプラチン、セルメチニブ、シプロイセル−Ｔ、シロリムス、シゾフィラン、ソブゾキサン、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、スニチニブ、タラポルフィン、タミバロテン、タモキシフェン、タンズチニブ、タソネルミン、テセロイキン、テガフール、テラタニブ(telatinib)、テモポルフィン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、テストラクトン、テストステロン、テトロホスミン、サリドマイド、チオテパ、チマルファシン、チオグアニン、ティピファニブ、チボザニブ、トセラニブ(toceranib)、トシリズマブ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラベクテジン、トラスツズマブ、トレオスルファン、トレチノイン、トリアピン、トリロスタン、トリメトレキサート、トリプトレリン、トロホスファミド、ウベニメクス、バルルビシン、バンデタニブ、バプレオチド、バルリチニブ(varlitinib)、バタラニブ、ベムラフェニブ、ビダラビン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビンフルニン、ビノレルビン、ボロシキシマブ、ボリノスタット、ジノスタチン、ゾレドロン酸およびゾルビシン。

【0118】

一般的に、下記の目的は本発明の化合物と他の抗癌剤との組み合わせ剤で達成できる：
・活性な化合物単独での処置と比べて、腫瘍の増殖を遅らせる、腫瘍の大きさを減少させる、または、腫瘍を完全に除去する活性の改善；
・用いられる化学療法剤を、単剤治療よりも低い投与量で用いることが可能：
・個々の投与と比較して、少ない副作用で、より耐容性の治療が可能；
・より広範囲の癌および腫瘍疾患の処置が可能；
・治療に対して、より速い応答速度を達成；
・標準的な治療と比べて、より長い患者の生存時間。

【0119】

従って、さらなる態様において、本発明は、少なくとも１種の本発明の化合物、および、障害、特に上記障害を処置および／または予防する１種以上のさらなる治療薬を含む医薬組成物に関する。
癌の処置において、本発明の化合物はまた、放射線治療および／または外科的処置と組み合わせて用いられ得る。

【0120】

さらに、式(Ｉ)の化合物を、そのまま、または、研究や診断における組成物で、または、当技術分野で周知の分析参照標準として利用し得る。

【0121】

本発明の化合物が医薬としてヒトおよび他の哺乳動物に投与されるとき、それらは、それ自身で、または、１種以上の薬学的に許容される添加物と組み合わせた、例えば０.１％〜９９.５％(より好ましくは０.５％〜９０％)の有効成分を含む医薬組成物として与えられる。

【0122】

従って、他の局面において、本発明は、慣用的には１種以上の不活性な非毒性の薬学的に適当な添加物と共に、少なくとも１種の本発明の化合物を含む医薬組成物、および、障害、特に上記障害の処置および／または予防におけるその使用に関する。

【0123】

本発明の化合物は、全身におよび／または局所に作用し得る。この目的のために、本発明の化合物は、適当な方法で、例えば経口、非経腸、肺、鼻、舌、舌下、頬側、直腸、皮膚、経皮、結膜、耳または局所経路で、あるいは、インプラントまたはステントとして投与できる。
これらの適用経路において、本発明の化合物は、適当な適用形態で投与できる。

【0124】

経口投与に適当なものは、従来技術に従って機能し、本発明の化合物を素早くおよび／または修飾された方法で送達する適用形態であって、結晶形、非晶形および／または溶解された形態の本発明の化合物を含む適用形態であり、例えば、錠剤(コートされていないか、あるいは、例えば腸溶性コーティング、または、不溶性であるかまたは遅れて溶解し、本発明の化合物の放出を制御するコーティングを有するコートされた錠剤)、口内で素早く崩壊する錠剤、または、フィルム／ウェハ、フィルム／凍結乾燥物、カプセル剤(例えば硬または軟ゼラチンカプセル剤)、糖衣錠、顆粒剤、ペレット、散剤、エマルジョン、懸濁液、エアロゾルまたは溶液である。

【0125】

非経腸適用は、吸収段階を避けて(静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内)、または、吸収を含めて(筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内)、行うことができる。有用な非経腸適用形態は、溶液、懸濁液、エマルジョン、凍結乾燥物および滅菌処理した粉末の形態の、注射液および注入製剤を含む。

【0126】

他の適用経路に適当な形態は、例えば、吸入用医薬形態(例えば粉末吸入器、ネブライザー)、点鼻薬、溶液またはスプレー、舌、舌下または頬側投与用錠剤またはカプセル剤(例えばトローチ、ロゼンジ)、坐剤、耳用および眼用製剤(例えば滴剤、軟膏)、膣用カプセル剤、水性懸濁液(ローション、振盪混合物)、親油性懸濁液、軟膏、クリーム、ミルク、ペースト、フォーム、細粉、経皮治療系(例えばパッチ)、インプラントおよびステントを含む。

【0127】

好ましい態様において、上で定義した式(Ｉ)の化合物を含む医薬組成物を、経口投与に適当な形態で提供する。他の好ましい態様において、上で定義した式(Ｉ)の化合物を含む医薬組成物を、静脈内投与に適当な形態で提供する。

【0128】

本発明の化合物は、それ自身既知の方法で、不活性な非毒性の薬学的に適当な添加物と混合することによって、列挙された適用形態に変換できる。これらの添加物は、とりわけ、担体(例えば微晶性セルロース、乳糖、マンニトール)、溶媒(例えば液体ポリエチレングリコール)、乳化剤(例えばドデシル硫酸ナトリウム)、界面活性剤(例えばポリオキシソルビタン オレート)、分散剤(例えばポリビニルピロリドン)、合成および天然ポリマー(例えばアルブミン)、安定剤(例えば抗酸化剤、例えばアスコルビン酸)、着色料(例えば無機顔料、例えば酸化鉄)、および、味覚および臭気マスキング剤を含む。

【0129】

本発明の化合物の好ましい投与量は、患者に耐容性であって重篤な副作用を起こさない最大量である。例としては、本発明の化合物は、非経腸で、約０.００１mg/kg〜約１mg/kg体重、好ましくは約０.０１mg/kg〜約０.５mg/kg体重で投与され得る。経口投与では、例示的な投与量範囲は、約０.０１〜１００mg/kg体重、好ましくは約０.０１〜２０mg/kg体重、より好ましくは約０.１〜１０mg/kg体重である。上記の値の範囲の間に入る値もまた、本発明の一部であることが意図される。

【0130】

にもかかわらず、特定の患者、組成物および投与方法において、患者に毒性でなく、望ましい治療応答を達成するのに有効な量の有効成分を得るように、本発明の医薬組成物中の有効成分投与の実際の投与量と時間経過は変化し得る。従って、適切な場合は、特に患者の年齢、性別、体重、食習慣および全身の健康状態、特定の化合物のバイオアベイラビリティーおよび薬力学的性質、および、投与方法および投与経路、投与を行う時間または時間間隔、選択される投与レジメ、個々の患者の有効成分に対する応答、関与する特定の疾患、疾患の程度または合併症もしくは重症度、同時処置の種類(すなわち本発明の化合物と他の共投与される治療薬の相互作用)、および他の関連の状況の関数として、上記の量から逸脱することも必要であり得る。

【0131】

従って、幾つかの場合では上記の最少量より少ない量で十分に管理し得るが、他の場合では記載された上限を超えなければならない。処置は、化合物の最適な投与量より少ない投与量で開始することができる。その後、その状況下で最適な効果に至るまで、投与量を少しずつ増加させ得る。利便性のために、総１日投与量を分割して、各１回分ずつを１日の間で分けて投与してもよい。

【0132】

下記の例示的態様は、本発明を説明する。本発明は、実施例に限定されない。
下記の試験および実施例におけるパーセンテージは、特に断りの無い限り、重量パーセントであり；重量部である。液体／液体溶液について記載された溶媒比、希釈比、および濃度は、それぞれ容積に基づく。

【0133】

Ａ. 実施例
略号および頭字語：

【表1】

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【0134】

【表2】

[この文献は図面を表示できません]

【0135】

ＬＣ−ＭＳおよびＧＣ−ＭＳ法：
方法１(ＬＣ−ＭＳ)：
装置＝Micromass Quattro Premier と Waters UPLC Acquity；カラム＝Thermo Hypersil GOLD 1.9μ, 50mm×1mm；溶出液Ａ＝１Ｌの水＋０.５mlの５０％蟻酸水溶液, 溶出液Ｂ＝１Ｌのアセトニトリル＋０.５mlの５０％蟻酸水溶液；濃度勾配＝０.０分 ９０％ Ａ→０.１分 ９０％ Ａ→１.５分 １０％ Ａ→２.２分 １０％ Ａ；温度＝５０℃；流速＝０.３３mL/分；ＵＶ検出＝２１０nm.

【0136】

方法２(ＬＣ−ＭＳ)：
装置＝Waters Acquity SQD UPLC System；カラム＝Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ, 50mm×1mm；溶出液Ａ＝１Ｌの水＋０.２５mlの９９％蟻酸, 溶出液Ｂ＝１Ｌのアセトニトリル＋０.２５mlの９９％蟻酸；濃度勾配＝０.０分 ９０％ Ａ→１.２分 ５％ Ａ→２.０分 ５％ Ａ；オーブン＝５０℃；流速＝０.４０mL/分；ＵＶ検出＝２１０〜４００nm.

【0137】

方法３(ＬＣ−ＭＳ)：
装置＝Micromass Quattro Micro と HPLC Agilent 1100シリーズ；カラム＝YMC-Triart C18 3μ, 50mm×3mm；溶出液Ａ＝１Ｌの水＋０.０１mol炭酸アンモニウム, 溶出液Ｂ＝１Ｌのアセトニトリル；濃度勾配＝０.０分 １００％ Ａ→２.７５分 ５％ Ａ→４.５分 ５％ Ａ；オーブン＝４０℃；流速＝１.２５mL/分；ＵＶ検出＝２１０nm.

【0138】

方法４(ＬＣ−ＭＳ)：
装置＝Waters Acquity SQD UPLC System；カラム＝Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ, 30mm×2mm；溶出液Ａ＝１Ｌの水＋０.２５mlの９９％蟻酸, 溶出液Ｂ＝１Ｌのアセトニトリル＋０.２５mlの９９％蟻酸；濃度勾配＝０.０分 ９０％ Ａ→１.２分 ５％ Ａ→２.０分 ５％ Ａ；オーブン＝５０℃；流速＝０.６０mL/分；ＵＶ検出＝２０８〜４００nm.

【0139】

方法５(ＬＣ−ＭＳ)：
装置＝Micromass Quattro Premier と Waters UPLC Acquity；カラム＝Thermo Hypersil GOLD 1.9μ, 50mm×1mm；溶出液Ａ＝１Ｌの水＋０.５mlの５０％蟻酸水溶液, 溶出液Ｂ＝１Ｌのアセトニトリル＋０.５mlの５０％蟻酸水溶液；濃度勾配＝０.０分 ９７％ Ａ→０.５分 ９７％ Ａ→３.２分 ５％ Ａ→４.０分 ５％ Ａ；温度＝５０℃；流速＝０.３mL/分；ＵＶ検出＝２１０nm.

【0140】

方法６(ＧＣ−ＭＳ)：
装置＝Micromass GCT, GC6890；カラム＝Restek RTX-35, 15m×200μm×0.33μm；ヘリウムの一定流量＝０.８８mL/分；オーブン＝７０℃；入口＝２５０℃；濃度勾配＝７０℃, ３０℃／分→３１０℃(３分間維持).

【0141】

方法７(ＬＣ−ＭＳ)：
装置 ＭＳ＝Waters Micromass QM；装置 ＨＰＬＣ＝Agilent 1100シリーズ；カラム＝Agilent ZORBAX Extend-C18 3.0mm×50mm, 3.5μ；溶出液Ａ＝１Ｌの水＋０.０１mol炭酸アンモニウム, 溶出液Ｂ＝１Ｌのアセトニトリル；濃度勾配＝０.０分 ９８％ Ａ→０.２分 ９８％ Ａ→３.０分 ５％ Ａ→４.５分 ５％ Ａ；温度＝４０℃；流速＝１.７５mL/分；ＵＶ検出＝２１０nm.

【0142】

方法８(ＬＣ−ＭＳ)：
装置 ＭＳ＝Waters Micromass ZQ；装置 ＨＰＬＣ＝Agilent 1100シリーズ；カラム＝Agilent ZORBAX Extend-C18 3.0mm×50mm, 3.5μ；溶出液Ａ＝１Ｌの水＋０.０１mol炭酸アンモニウム, 溶出液Ｂ＝１Ｌのアセトニトリル；濃度勾配＝０.０分 ９８％ Ａ→０.２分 ９８％ Ａ→３.０分 ５％ Ａ→４.５分 ５％ Ａ；温度＝４０℃；流速＝１.７５mL/分；ＵＶ検出＝２１０nm.

【0143】

一般的な精製方法(下記の表ＩおよびIIを参照)：
方法Ｐ１：
分取ＲＰ−ＨＰＬＣ(Reprosil C18, 濃度勾配 アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)
方法Ｐ２：
分取ＲＰ−ＨＰＬＣ(XBridge C18, 濃度勾配 アセトニトリル／水＋０.１％アンモニア水溶液)
方法Ｐ３：
分取ＲＰ−ＨＰＬＣ(Sunfire C18, 濃度勾配 アセトニトリル／水)
方法Ｐ４：
分取ＲＰ−ＨＰＬＣ(XBridge C18, 濃度勾配 アセトニトリル／水＋０.０５％アンモニア水溶液)

【0144】

方法Ｐ５：
ＲＰ−ＨＰＬＣ精製を行って得られる生成物を、メタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過する。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させる。
方法Ｐ６：
酢酸エチル中の生成物の溶液を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で、続いて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。

【実施例】

【0145】

出発物質および中間体：
中間体１Ａ
２−メトキシ−４−メチルアニリン

【化43】

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ＴＨＦ(１.３２Ｌ)中の５−メチル−２−ニトロアニソール(２６５ｇ, １.５８mol)および１０％ Ｐｄ／Ｃ(３９.７５ｇ)の混合物を、室温で、１atmの水素下で、一夜撹拌した。珪藻土で濾過し、蒸発させ、２１６.１ｇの粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法３): R_t = 2.39分; MS (ESIpos): m/z = 138 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 6.45-6.63 (m, 3H), 4.46 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 2.16 (s, 3H) ppm.

【0146】

中間体２Ａ
２−メトキシ−４−メチルベンゼンチオール

【化44】

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【0147】

方法１：
水(２５ml)中の亜硝酸ナトリウム(７ｇ, １０１.４mmol)の溶液を、濃塩酸(３０ml)および水(８５ml)中の中間体１Ａ(１３.７ｇ, １００mmol)の冷却溶液(０℃〜５℃)に滴下した。０℃で１０分間撹拌した後、酢酸ナトリウム(１５ｇ, １８２.８mmol)を加えた。得られた混合物を水(１４０ml)中のＯ−エチルジチオ炭酸カリウム(３０ｇ, １８７.１mmol)の熱い溶液(７０℃〜８０℃)に滴下し、７０℃から８０℃の間で１時間撹拌し、室温まで冷却した。混合物を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。残渣を、エタノール(３００ml)中１.３Ｍの水酸化カリウム溶液に溶かした。ブドウ糖(８ｇ)を加え、得られた混合物を３時間還流した。次いで、エタノール溶媒を蒸発させ、残渣を水で希釈し、６Ｎ 硫酸水溶液で酸性にした。亜鉛粉末(１５ｇ)を注意深く加え、得られた混合物を５０℃で３０分間加熱した。混合物を室温まで冷却し、ジクロロメタンで希釈し、濾過した。濾液をジクロロメタンで２回抽出し、合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、１４.３ｇの粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。

【0148】

方法２：
２.９ＬのＴＨＦに、１.１Ｌの水中の３５５ml(６.６７mol)の濃硫酸の熱い溶液を加えた。５０℃で、２９３ｇ(１.３３mol)の塩化 ２−メトキシ−４−メチルベンゼンスルホニルを撹拌しながら加えた。次いで、５２１ｇ(７.９７mol)の亜鉛粉末を、少しずつ注意深く加え(発泡する)、５０℃〜５５℃の温度を維持するために、僅かな発熱反応物を水浴中で冷却した。続いて混合物を５５℃で３時間撹拌した。反応の進行を、ＴＬＣ(シリカゲル, 石油エーテル／酢酸エチル ９５：５)によってモニターした。反応混合物を１３.６Ｌの水に注ぎ、６.８Ｌのジクロロメタンを加え、混合物を５分間撹拌した。残った亜鉛を傾斜して、相を分離した後、水相を６.８Ｌのジクロロメタンで１回以上抽出した。合わせた有機相を１０％ 塩水で洗浄し、乾燥し、４０℃で、減圧下で蒸発させ、２３７ｇの粗生成物を得た。この物質をさらに精製することなく次の工程に用いた。分析用サンプルを石油エーテル／酢酸エチル(９７：３)を溶出液として、シリカゲルのクロマトグラフィーによって得た。
LC-MS (方法１): R_t = 1.21分; MS (ESIneg): m/z = 153 (M-H)^-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.17 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.66 (d, 1H), 4.63 (br. s, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.26 (s, 3H) ppm.

【0149】

中間体３Ａ
１−[(２,２−ジエトキシエチル)スルファニル]−２−メトキシ−４−メチルベンゼン

【化45】

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２３７ｇの中間体２Ａの粗製の物質、２８７ｇ(１.４６mol)のブロモアセトアルデヒド−ジエチルアセタール、および、８６２ｇ(２.６５mol)の炭酸セシウムを、２ＬのＤＭＦに懸濁した。反応温度を、最初に４０℃まで上昇させ、環境温度で一夜撹拌を続けた。反応混合物を１０Ｌの水と２.７Ｌの酢酸エチルの層間に分配した。水相をさらなる２.７Ｌの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を１０％ 塩水で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。得られた油性残渣を、石油エーテル／酢酸エチル(９５：５)を溶出液として、シリカゲルのクロマトグラフィーによって精製した。
収量：２３６ｇの油状物(理論値の６６％)
GC-MS (方法６): R_t = 6.03分; MS (EIpos): m/z = 270 (M)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.16 (d, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.73 (d, 1H), 4.55 (t, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.52-3.64 (m, 2H), 3.39-3.51 (m, 2H), 2.96 (d, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.09 (t, 6H) ppm.

【0150】

中間体４Ａ
７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン

【化46】

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１３ｇのポリリン酸および１５０mlのクロロベンゼンの混合物に、還流しながら、５.２ｇ(１９.２mmol)の中間体３Ａの溶液を滴下し、一夜還流を続けた。冷却後、有機層を傾斜し、残渣とフラスコをＤＣＭで２回濯いだ。合わせた有機相を減圧で蒸発させた。残渣(３.７６ｇ)について、イソヘキサン／０〜１０％ 酢酸エチルを溶出液として、シリカゲルのクロマトグラフィーを行った。
収量：１.６９ｇの油状物(理論値の４９％)
GC-MS (方法６): R_t = 5.20分; MS (EIpos): m/z = 178 (M)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.68 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.43 (s, 3H) ppm.

【0151】

中間体５Ａ
(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ボロン酸

【化47】

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アルゴン雰囲気下、２６.７ｇ(１５０mmol)の中間体４Ａを２７０mlのＴＨＦに溶解し、−７０℃まで冷却した。−７０℃から−６５℃の間で、６６ml(１６５mmol)のヘキサン中２.５Ｎのｎ−ブチルリチウム溶液を、２０分以内で滴下し、その結果、白色の沈殿物が形成した。−７０℃で１時間撹拌した後、４１.５ml(１８０mmol)のホウ酸トリイソプロピルを、この温度で、１０分以内で加えた(その結果、濃厚懸濁液を得た)。−７０℃で１時間撹拌を続けた後、反応混合物を室温で一夜温めた。次いで、４００mlの飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、層を分離し、水層をＴＨＦで１回以上抽出した。合わせた有機相を減圧下で蒸発させた。このようにして得られた残渣に、２００mlの水および８６mlの２Ｎ 水酸化ナトリウム水溶液を加えた。溶液をＤＣＭで２回洗浄し、３５mlの３Ｍ 硫酸で酸性にして、得られた懸濁液を１時間激しく撹拌した。沈殿物を吸引濾過し、４５℃で、真空で一夜乾燥した。
収量：２８.２５ｇの無色の固体(ＬＣ−ＭＳによる純度９４％, 理論値の８０％)
LC-MS (方法２): R_t = 0.87分; MS (ESIpos): m/z = 223 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.17 (d, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.66 (d, 1H), 4.63 (br. s, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.26 (s, 3H) ppm.

【0152】

中間体６Ａ
２−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−メチル−１,３,６,２−ジオキサアザボロカン−４,８−ジオン

【化48】

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６.３ｇ(２８.４mmol)の中間体５Ａおよび４.２ｇ(２８.４mmol)の２,２'−(メチルイミノ)ジ酢酸を、４５mlのＤＭＳＯおよび４００mlのトルエンの混合物に溶解し、ディーン・スターク・トラップを用いて、１６時間還流した。蒸発後、残渣を酢酸エチルに溶かし、水で３回および塩水で１回洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、約２００mlの体積まで蒸発させた。白色固体が沈殿し、これを濾過し、酢酸エチルで洗浄し、真空で乾燥し、第１収穫物(５.５２ｇ)の表題化合物を得た。母液を蒸発させ、シリカゲルの層で、シクロヘキサン／０〜１００％ 酢酸エチルを溶出液として用いて、フラッシュクロマトグラフィーを行った後、第２収穫物(３.３２ｇ)を得た。
収量：８.８４ｇ(ＬＣ−ＭＳによる全純度９２.５％, 理論値の８７％)
LC-MS (方法２): R_t = 0.93分; MS (ESIpos): m/z = 334 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.42 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.40 (d, 2H), 4.17 (d, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.63 (s, 3H), 2.42 (s, 3H) ppm.

【0153】

中間体７Ａ
４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボン酸エチル

【化49】

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エタノール(１２４.８ml)中の４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボニトリル(３.９ｇ, ２４.５mmol；ＰＣＴ国際特許出願 WO 2007/064883に記載された製法)の溶液を、濃硫酸(６２.４ml)と共に、８０℃で一夜撹拌した。室温まで冷却した後、反応混合物を８００ｇの氷に注ぎ、濃水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ ６〜７とした。酢酸エチル(５００ml)およびジクロロメタン(５００ml)を懸濁液に加え、得られた混合物を珪藻土で濾過した。有機層を水層から分離した。固体を熱水(１Ｌ)に溶解し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。残渣をイソプロパノール／ジエチルエーテル混合物で磨砕し、固体を濾過し、２.５ｇ(理論値の４９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.59分; MS (ESIpos): m/z = 206 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.11-7.97 (m, 3H), 7.88 (s, 1H), 7.34 (br. s, 1H), 4.27 (q, 2H), 1.30 (t, 3H) ppm.

【0154】

中間体８Ａ
(４−アミノピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル)メタノール

【化50】

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ＴＨＦ(３０ml)中の中間体７Ａ(３.０ｇ, １４.５mmol)の氷冷した溶液を、ＴＨＦ(５８ml)中１Ｍのトリエチル水素化ホウ素リチウム溶液で処理し、室温で４５分間撹拌した。反応混合物を０℃まで冷却し、メタノールで反応停止させ、室温までゆっくりと温め、珪藻土に吸着させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ２０：１→４：１の濃度勾配)、２.２１ｇ(理論値の９２.５％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法３): R_t = 1.46分; MS (ESIpos): m/z = 164 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.75 (s, 1H), 7.64 (br. s, 2H), 7.50 (br. d, 1H), 6.79 (br. d, 1H), 5.01 (t, 1H), 4.50 (d, 2H) ppm.

【0155】

中間体９Ａ
[２−シアノ−４−(ヒドロキシメチル)−１Ｈ−ピロール−１−イル]カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化51】

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アルゴン下、ＴＨＦ中１Ｍの臭化メチルマグネシウム溶液(１３.３ml)を、１５分かけて、ＴＨＦ(３７ml)中の(４−ブロモ−２−シアノ−１Ｈ−ピロール−１−イル)カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(３.７ｇ, １２.０９mmol；ＰＣＴ国際特許出願 WO 2007/064883, 中間体ＡＡＥ, 工程３に記載された製法)の−６０℃に冷却した溶液に加えた。３０分後、ヘキサン中１.６Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液(１５.１ml, ２４.２mmol)を、１０分かけて反応物に加え、得られた混合物を−６０℃から−４０℃の間で１時間撹拌した。次いで、パラホルムアルデヒド(１.０９ｇ, ３６.３mmol)を反応物に加え、反応混合物を室温までゆっくりと温め、一夜撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で反応停止した後、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ２：１→１：１)、２.０４ｇ(理論値の６９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 238 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.79 (br. s, 1H), 7.09 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 4.97 (t, 1H), 4.28 (d, 2H), 1.45 (s, 9H) ppm.

【0156】

中間体１０Ａ
６−(メトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化52】

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【0157】

方法１：
ＴＨＦ(２５ml)中の中間体８Ａ(１.３ｇ, ７.９mmol)の溶液を、塩化チオニル(１.１５ml, １５.８mmol)で処理し、室温で２時間撹拌した。蒸発後、残渣をメタノール(２５ml)に溶解し、酢酸ナトリウム(１.３ｇ, １５.８mmol)で処理した。混合物を６５℃で３時間撹拌し、再度蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール １００：２)、７８７mg(理論値の５５％)の表題化合物を得た。

【0158】

方法２：
１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１５ml)中の、中間体９Ａ(６.１４ｇ, ２５.８８mmol)の溶液を、室温で５時間撹拌した。メタノール(７３ml)で希釈した後、室温で一夜撹拌を続けた。次いで、リン酸カリウム(５４.９ｇ, ２５８.６５mmol)およびホルムアミジニウム アセテート(１３.４６ｇ, １２９.３２mmol)を加え、得られた混合物を６５℃で１７時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、飽和塩化ナトリウム水溶液を加え、混合物を、ジクロロメタンで、続いて酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ４０：１→２０：１)、２.３６ｇ(理論値の４９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法３): R_t = 1.72分; MS (ESIpos): m/z = 179 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.77 (s, 1H), 7.69 (br. s, 2H), 7.57 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.25 (s, 3H) ppm.

【0159】

中間体１１Ａ
４−アミノ−６−(メトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化53】

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塩化ホスホリル(１３.７ml, １４７.１８mmol)を、ＤＭＦ(８０ml)中の中間体１０Ａ(５.２４ｇ, ２９.４３mmol)の溶液に、０℃で加えた。得られた混合物を６０℃で８時間撹拌し、次いで水で注意深く反応停止させ、４Ｍ 水酸化ナトリウム水溶液で中和した。水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。メタノール(５０ml)中の残渣の溶液を、酢酸ナトリウム(２.４１ｇ, ２９.４３mmol)で処理し、一夜還流した。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、２.６６ｇの粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法４): R_t = 0.50分; MS (ESIpos): m/z = 207 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.35 (s, 1H), 8.20 (br. s, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 4.72 (s, 2H), 3.39 (s, 3H) ppm.

【0160】

中間体１２Ａ
４−アミノ−５−ブロモ−６−(メトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化54】

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ＤＭＦ(３０ml)中の中間体１１Ａ(粗製, ２.６６ｇ)の−３０℃に冷却した溶液を、ＤＭＦ(１４ml)中のＮ−ブロモスクシンイミド(ＮＢＳ；２.５２ｇ, １４.１９mmol)の溶液で処理した。得られた混合物を０℃までゆっくりと温めた。１時間後、混合物を室温まで温め、さらに１５分間撹拌し、次いで、１Ｍ チオ硫酸ナトリウム水溶液で反応停止させた。沈殿物を濾過して取り、酢酸エチルで洗浄し、１.１ｇ(純度１００％, 理論値の３０％)を表題化合物の第１収穫物として得た。残った濾液を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル １：１→１：３)、さらに１.３９ｇ(純度７０％, 理論値の２６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.67分; MS (ESIpos): m/z = 283/285 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.36 (s, 1H), 8.63 (br. s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.23 (br. s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.26 (s, 3H) ppm.

【0161】

中間体１３Ａ
４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化55】

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アルゴン下、脱気した０.５Ｍのリン酸カリウム水溶液(９.９ml)を、脱気したＴＨＦ(２８.４ml)中の中間体１２Ａ(７１０mg, ２.４９mmol)、中間体５Ａ(９２１mg, ３.７３mmol)および(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, １９６mg, ２４９μmol, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照)の溶液に加えた。得られた混合物を６０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ５：１→１：１)、５５０mg(理論値の５１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.06分; MS (ESIpos): m/z = 383 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.50 (s, 1H), 8.43 (br. s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.09 (br. s, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0162】

中間体１４Ａ
６−(エトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化56】

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【0163】

方法１：
４０mlのＴＨＦ中の２ｇ(１２.２mmol)の中間体８Ａの懸濁液に、１.７８ml(２４.４mmol)の塩化チオニルを室温で２０秒以内で加えた。混合物を１.５時間撹拌し、蒸発乾固し、残渣を４０mlのエタノールに溶解した。２ｇ(２４.４mmol)の酢酸ナトリウムを加え、混合物を７０℃で１時間４５分間撹拌した。反応混合物を再度蒸発させ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。混合物を酢酸エチルで５回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発乾固し、２.０２ｇの粗生成物を得た。これを、ジクロロメタン／メタノール(０〜２％)を溶出液として、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製した。
収量：１.３７ｇ(理論値の５８％)。

【0164】

方法２：
工程１： １,４−ジオキサン(５ml)中の中間体９Ａ(２.３ｇ, ９.６９mmol)の溶液を、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２４ml, ９６.９mmol)で処理し、室温で１３０分間撹拌した。次いで、懸濁液を濾過し、沈殿物を１,４−ジオキサン(５ml)で洗浄し、真空で乾燥し、１.０１ｇ(理論値の５４％)の中間体化合物１−アミノ−４−(クロロメチル)−１Ｈ−ピロール−２−カルボニトリル塩酸塩を得た。

【0165】

工程２： 新しく調製した工程１の１−アミノ−４−(クロロメチル)−１Ｈ−ピロール−２−カルボニトリル塩酸塩(０.３ｇ, １.８２mmol)をエタノール(１０ml)に溶解し、室温で５分間撹拌した。透明な溶液をホルムアミジン酢酸塩(８１３mg, ７.８１mmol)およびリン酸カリウム(１.６６ｇ, ７.８１mmol)で処理し、最初に、室温で３日間撹拌し、次に８０℃で１０.５時間撹拌した。さらにホルムアミジン酢酸塩(４８８mg, ４.６９mmol)を加え、混合物を８０℃でさらに１８時間撹拌した。混合物を室温まで冷却し、水および酢酸エチルを加えた。有機相を分離し、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。残渣をメタノールおよびジクロロメタンの混合物に溶解し、珪藻土に吸着させ、真空で乾燥し、最後にシリカゲルのクロマトグラフィーによって精製し(濃度勾配 ０〜１０％ メタノール／ジクロロメタン)、２６０mg(理論値の７８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法３): R_t = 2.02分; MS (ESIpos): m/z = 193 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.77 (s, 1H), 7.59-7.74 (br. s, 2H), 7.56 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.46 (q, 2H), 1.13 (t, 3H) ppm.

【0166】

中間体１５Ａ
４−アミノ−６−(エトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化57】

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４０mlの乾燥ＤＭＦ中の２.１ｇ(１０.９mmol)の中間体１４Ａの溶液に、５.１ml(５４.６mmol)の塩化ホスホリルを、０℃で、アルゴン雰囲気下で滴下した。混合物を６０℃で１０時間撹拌した。次いで、水を注意深く加え、全ての反応性中間体が壊れるまで(ＨＰＬＣコントロール)、混合物を環境温度で撹拌した。酸性溶液を１Ｍ 水酸化ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧で蒸発させた。
収量：１.９４ｇ(純度９０％, 理論値の８１％)
LC-MS (方法５): R_t = 1.49分; MS (ESIpos): m/z = 221 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.35 (s, 1H), 8.14-8.26 (m, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.58 (q, 2H), 1.20 (t, 3H) ppm.

【0167】

中間体１６Ａ
４−アミノ−５−ブロモ−６−(エトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化58】

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１.９ＬのＤＭＦ中の７３ｇ(０.３３mol)の中間体１５Ａの溶液に、２００mlのＤＭＦ中の６５ｇ(０.３７mol)のＮＢＳの溶液を、−１５℃で滴下した。混合物を０℃に温め、この温度で３時間撹拌した。反応混合物を２％ チオ硫酸ナトリウム水溶液に撹拌しながら注ぎ、沈殿物を濾過して取り、水で洗浄し、五酸化リンで、真空で乾燥した。
収量：８５.６ｇ(理論値の８６％)
LC-MS (方法２): R_t = 0.76分; MS (ESIpos): m/z = 299/301 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.36 (s, 1H), 8.62 (br. s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.22 (br. s, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.49 (q, 2H), 1.10 (t, 3H) ppm.

【0168】

中間体１７Ａ
４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化59】

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アルゴン雰囲気下、７１４mg(純度８５％, ２.０３mmol)の中間体１６Ａ、９４６mg(２.８４mmol)の中間体６Ａおよび１６０mg(０.２mmol)の(２'−アミノビフェニル−２−イル)−(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照)を１５.５mlのＴＨＦに懸濁した。次いで、１５.５mlの脱気した０.５Ｍ リン酸カリウム水溶液を加え、混合物を５０℃で１６時間撹拌した。水の添加後、混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣を、シリカゲル(１００ｇ)のカラムクロマトグラフィーによって、１０〜５０％ 酢酸エチル／シクロヘキサンを溶出液として精製した。
収量：４５２mg(ＨＰＬＣによる純度７５％, 理論値の４２％)
LC-MS (方法５): R_t = 2.38分; MS (ESIpos): m/z = 397 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.50 (s, 1H), 8.42 (br. s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.07 (br. s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.40 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.02 (t, 3H) ppm.

【0169】

中間体１８Ａ
(４−アミノ−５,７−ジブロモピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル)メタノール

【化60】

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ＴＨＦ(１００ml)中の中間体８Ａ(５ｇ, ３０.４mmol)の溶液を、１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダントイン(９.５８ｇ, ３３.５mmol)で処理し、室温で２時間撹拌した。沈殿物を濾過して取り、真空で乾燥し、６.６０ｇ(理論値の６４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.56分; MS (ESIpos): m/z = 321/323/325 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.23 (br. s, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.94 (br. s, 1H), 5.09 (br. s, 1H), 4.43 (s, 2H) ppm.

【0170】

中間体１９Ａ
(４−アミノ−５−ブロモピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル)メタノール

【化61】

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ＴＨＦ(８００ml)中の中間体１８Ａ(３.７ｇ, １１.５mmol)の懸濁液を、完全に溶解するまで、撹拌しながら加熱した。混合物を−７８℃に冷却し、ヘキサン中１.６Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液(２０ml, ３２.１mmol)を滴下した。５分後、さらに１.６Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液(１.５ml, ２.２９mmol)を加えた。得られた混合物を−７８℃で５分間撹拌し、次いでメタノール(５ml)で反応停止させ、室温まで温めた。反応混合物を、飽和塩化アンモニウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液および酢酸エチルで希釈した。相の分離後、有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。合わせた水相を酢酸エチルで再度抽出した。合わせた有機相を再度飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、２.８７ｇの粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法３): R_t = 1.73分; MS (ESIpos): m/z = 243/245 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.41-7.89 (br. s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.13-6.48 (br. s, 1H), 5.11 (t, 1H), 4.45 (d, 2H) ppm.

【0171】

中間体２０Ａ
[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メタノール

【化62】

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ＴＨＦ／水混合物(１０：１, ８０ml)中の、中間体１９Ａ(純度７０％, ２.５２ｇ, ７.２６mmol)、中間体６Ａ(３.６３ｇ, １０.９mmol)およびフッ化セシウム(５.５１ｇ, ３６.３mmol)の懸濁液を、アルゴン下で脱気した。４−(ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリン−ジクロロパラジウム(２：１, １７６mg, ０.２４８mmol)を加え、得られた混合物を再度脱気し、５０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣をメタノールに懸濁し、得られた固体を濾過し、真空で乾燥し、１.９７ｇ(純度９０％, 理論値の７２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.85分; MS (ESIpos): m/z = 340 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.91 (s, 1H), 7.5-8.1 (br. s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.5-6.0 (br. s, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.49 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0172】

中間体２１Ａ
６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化63】

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ジクロロメタン(１２ml)中の中間体２０Ａ(４００mg, １.１７mmol)の溶液を、塩化チオニル(１２８μｌ, １.７６mmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をメタノール(１２ml)に溶かし、ＤＩＰＥＡ(４０９μｌ, ２.３５mmol)で処理した。混合物を一夜還流し、次いで再度蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ９８：２→９５：５)、３８８mg(理論値の９３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.00分; MS (ESIpos): m/z = 355 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.93 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 2.45 (s, 3H)ppm.

【0173】

中間体２２Ａ
６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化64】

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ジクロロメタン(５ml)中の中間体２０Ａ(２００mg, ５８７μmol)を、塩化チオニル(６４μｌ, ８８１μmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をエタノール(５ml)中で１時間還流し、ＤＩＰＥＡ(２０４μｌ, １.１７mmol)で処理し、再度一夜還流した。反応混合物を蒸発させ、粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ９８：２→９５：５)、２０２mg(理論値の９０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 2.32分; MS (ESIpos): m/z = 369 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.31-7.59 (br. s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.20-5.50 (br. s, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.41 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.08 (t, 3H) ppm.

【0174】

中間体２３Ａ
４−{[４−アミノ−６−(ヒドロキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化65】

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酢酸(１３６.８ml)中の中間体２０Ａ(９.５ｇ, ２７.９mmol)の溶液を、ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル(６.２４ｇ, ３３.４９mmol)および３７％のホルムアルデヒド水溶液(２.５ml, ３３.４９mmol)で処理した。混合物を６０℃で２.５時間撹拌した。蒸発後、残渣を酢酸エチルに溶かし、混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。残渣を沸騰エタノール(１００ml)中で磨砕した。固体を濾過して取り、エタノールで、そしてジエチルエーテルで洗浄し、９.７０ｇ(理論値の５８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.88分; MS (ESIpos): m/z = 539 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 7.94 (s, 1H), 7.13-7.35 (m, 2H, ＣＨＣｌ_３のピークと重複), 6.67 (s, 1H), 5.86 (br. s, 1H), 5.54 (br. s, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.08 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.45 (br. s, 4H), 2.59-2.48 (m, 7H), 1.45 (s, 9H) ppm.

【0175】

中間体２４Ａ
４−({４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−[(２−メトキシ−２−オキソエトキシ)メチル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル}メチル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化66】

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ジクロロメタン(１２ml)中の中間体２３Ａ(３００mg, ５５６μmol)の溶液を、塩化チオニル(８１μｌ, １.１１mmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣を新しく蒸留したグリコール酸メチル(２.５ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(４８５μｌ, ２.７８mmol)で処理した。混合物を７０℃で２時間撹拌し、再度蒸発させ、過剰なグリコール酸メチルを蒸留によって除去した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル １：５)、１３６mg(理論値の３３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.88分; MS (ESIpos): m/z = 611 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.30-3.24 (m, 4H), 2.45-2.38 (m, 7H), 1.39 (s, 9H) ppm.

【0176】

中間体２５Ａ
４−{[４−アミノ−６−ホルミル−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化67】

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ジクロロメタン(４.２ml)中の中間体２３Ａ(３００mg, ５５６μmol)の溶液を、デス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン；３０７mg, ７２４μmol)で処理し、室温で２時間撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液(１：１)で反応停止させ、室温で３０分間撹拌した。水層をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル １：１→１００％ 酢酸エチル)、２７３mg(理論値の８７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.87分; MS (ESIpos): m/z = 537 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.02 (s, 1H), 8.44-8.18 (br. s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.01-5.74 (br. s, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.30-3.22 (m, 4H), 2.48-2.40 (m, 7H), 1.38 (s, 9H) ppm.

【0177】

中間体２６Ａ
４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボアルデヒド 二蟻酸塩

【化68】

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ＴＨＦ(３.９ml)中の中間体２３Ａ(８０mg, １４８μmol)の溶液を、デス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン；９４mg, ２２２μmol)で処理し、室温で３０分間撹拌した。反応混合物を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液(１：１)で反応停止させた。水層を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(４ml)に溶解し、室温で１時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、３４mg(理論値の５２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.78分; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 10.02 (s, 1H), 8.29 (br. s, 2H), 8.09 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.17 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.90-2.81 (m, 4H), 2.63-2.56 (m, 4H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0178】

中間体２７Ａ
４−({４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−[(３−オキソピペラジン−１−イル)メチル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル}メチル)ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化69】

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ＴＨＦ(４.６ml)中の中間体２５Ａ(１８５mg, ３４４μmol)の溶液を、２−オキソ−ピペラジン(３４４mg, ３.４mmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(３６５mg, １.７mmol)および酢酸(３９μｌ, ６８９μmol)で処理した。得られた混合物を室温で２時間撹拌し、珪藻土に吸着させ、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン→ジクロロメタン／メタノール １００：８)、２２１mg(定量的)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.77分; MS (ESIpos): m/z = 621 (M+H)⁺.

【0179】

中間体２８Ａ
Ｎ−エチルエタンアミニウム ４−アミノ−７−{[４−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル)ピペラジン−１−イル]カルボニル}−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボキシレート

【化70】

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ＴＨＦ／水(１０：１, ４.８５ml)中の中間体２５Ａ(７０mg, １３０μmol)の溶液を、ＴＨＦ中２Ｍの２−メチル−２−ブテン溶液(５２１μｌ, １.０４mmol)およびリン酸二水素ナトリウム(１０７mg, ７８３μmol)で処理し、室温で５分間撹拌した。塩化ナトリウム(７０mg, ７８３μmol)を加え、得られた混合物を室温で一夜撹拌した。水で希釈した後、水相を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(XBridge C18, 濃度勾配 ５〜５０％ アセトニトリル／水＋０.０５％ジエチルアミン)、１８mg(理論値の２１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法１): R_t = 1.14分; MS (ESIpos): m/z = 567 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.26-7.89 (br. s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.64-5.33 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.80 (q, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.40 (s, 9H), 1.09 (t, 6H) ppm.

【0180】

中間体２９Ａ
４−{[４−アミノ−６−(アジドメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化71】

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ジクロロメタン(７.５ml)中の中間体２３Ａ(１５０mg, ０.２７８mmol)の溶液を、塩化チオニル(４０μｌ, ０.５６mmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をＤＭＦ(６ml)に溶解し、アジ化ナトリウム(３６２mg, ５.５７mmol)およびヨウ化ナトリウム(２０８mg, １.３９mmol)で処理した。混合物を８０℃で１時間加熱し、水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を、水で、そして飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ９８：２→１００％ 酢酸エチル)、９５.８mg(理論値の５７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.99分; MS (ESIpos): m/z = 564 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.20-7.80 (br. s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.05-5.55 (br. s, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.94 (s, 2H), 3.32-3.25 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.36 (m, 4H), 1.39 (s, 9H) ppm.

【0181】

中間体３０Ａ
４−{[６−(アセトアミドメチル)−４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化72】

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メタノール(３２ml)中の中間体２９Ａ(３２０mg, ５６７μmol)、１０％ Ｐｄ／Ｃ(３２０mg)および無水酢酸(１０６μｌ, １.１３mmol)の混合物を、１atmの水素下、室温で９０分間撹拌した。混合物を珪藻土で濾過し、濾液を蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル １：１→１００％ 酢酸エチル)、４４０mg(定量的)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.91分; MS (ESIpos): m/z = 580 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.02-7.97 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.27 (br. d, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.89 (s, 2H), 3.31-3.24 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.36 (m, 4H), 1.74 (s, 3H), 1.39 (s, 9H) ppm.

【0182】

中間体３１Ａ
７−[(４−アセチルピペラジン−１−イル)メチル]−４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボアルデヒド

【化73】

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モレキュラー・シーブ(４Å)を含むジクロロメタン(４ml)中の実施例５５(６７８mg, 純度８９％, １.２６mmol)の溶液を、デス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン, ６２３mg, １.４７mmol)で処理し、室温で５分間撹拌した。反応混合物を珪藻土に吸着させ、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(濃度勾配 ３０〜１００％ 酢酸エチル／シクロヘキサン、次に０〜１０％ メタノール／ジクロロメタン)、４４９mg(理論値の４９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 479 (M+H)⁺.

【0183】

中間体３２Ａ
４−{[４−アミノ−６−(アジドメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化74】

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ジクロロメタン(３.５ml)中の実施例１３(５９mg, １３０μmol)の溶液を、塩化チオニル(１９μｌ, ２６１μmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をＤＭＦ(２.８ml)に溶解し、ヨウ化ナトリウム(９７mg, ６５２μmol)およびアジ化ナトリウム(１６９mg, ２.６mmol)で処理した。混合物を８０℃で１時間撹拌した。飽和塩化ナトリウム水溶液で希釈した後、水相を酢酸エチルで４回抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ９８：２→９０：１０)、３５mg(理論値の５６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 2.04分; MS (ESIpos): m/z = 478 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.02 (s, 1H), 7.75 (br. s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.16-3.08 (m, 2H), 3.04-2.98 (m, 2H), 2.65-2.58 (m, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0184】

中間体３３Ａ
４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(モルホリン−４−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボアルデヒド

【化75】

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モレキュラー・シーブ(４Å)を含むジクロロメタン(５ml)中の実施例５０(７１０mg, 純度７０％, １.１３mmol)の溶液を、デス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン, ６２３mg, １.４７mmol)で処理し、室温で５分間撹拌した。次いで反応混合物を珪藻土に吸着させ、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(濃度勾配 ３０〜１００％ 酢酸エチル／シクロヘキサン)、３８６mg(理論値の７２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.76分; MS (ESIpos): m/z = 438 (M+H)⁺.

【0185】

中間体３４Ａ
(４−アミノ−７−ブロモピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル)メタノール

【化76】

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ＴＨＦ(１ml)中の１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダントイン(８７mg, ０.３０５mmol)の溶液を、ＴＨＦ(４ml)およびメタノール(２ml)中の中間体８Ａ(１００mg, ０.６０９mmol)の溶液に−７８℃で滴下した。混合物を−７８℃で１６時間撹拌し、水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ２０：１→１０：１)、５５mg(理論値の３２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法３): R_t = 1.71分; MS (ESIpos): m/z = 243/245 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.74-7.94 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 5.12 (t, 1H), 4.48 (d, 2H) ppm.

【0186】

中間体３５Ａ
７−ブロモ−６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化77】

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ＤＭＦ(１１ml)中の中間体３４Ａ(８８５mg, ３.６４mmol)の溶液を、塩化 ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル(８２３mg, ５.４６mmol)およびイミダゾール(７４３mg, １０.９２mmol)で処理し、室温で２時間撹拌した。反応混合物を、１００mgのテストランの反応混合物と合わせ、水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を、水で、そして飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ２：１→１００％ 酢酸エチル)、１.３６ｇ(理論値の９３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.13分; MS (ESIpos): m/z = 357/359 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.98-7.68 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.

【0187】

中間体３６Ａ
４−アミノ−６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化78】

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アルゴン下、脱気したＤＭＦ／水(１００：１, ９.２ml)中の、中間体３５Ａ(８８０mg, ２.４６mmol)、[１,１'−ビス(ジフェニル−ホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)−ジクロロメタン錯体[ＰｄＣｌ_２(ｄｐｐｆ)・ＤＣＭ](１２０mg, ０.１４８mmol)、ビス(ジベンジリデンアセトン)パラジウム[Ｐｄ(ｄｂａ)_２](１３５mg, ０.１４８mmol)、シアン化亜鉛(５７８mg, ４.９２mmol)、亜鉛粉末(６４mg, ０.９８５mmol)および酢酸亜鉛(１８０mg, ０.９８５mmol)の混合物を、１６０℃で一夜撹拌した。反応混合物を、１００mgのテストランの反応混合物と合わせ、合わせた混合物を珪藻土に吸着させ、他の珪藻土の層で濾過し、ｔｅｒｔ−ブチル メチル エーテルで溶出した。濾液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、再度、水層をｔｅｒｔ−ブチル メチル エーテルで３回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル １：１)、４５３mg(理論値の４４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.09分; MS (ESIpos): m/z = 304 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.22-8.35 (m, 2H), 8.06 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.11 (s, 6H) ppm.

【0188】

中間体３７Ａ
４−アミノ−５−ブロモ−６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化79】

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ＴＨＦ(２０ml)中の１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダントイン(６２１mg, ２.１７mmol)の溶液を、ＴＨＦ(８０ml)中の中間体３６Ａ(１.１ｇ, ３.６２mmol)の溶液に、−５０℃で滴下した。得られた混合物を室温までゆっくりと温め、２時間撹拌し、１０％ チオ硫酸ナトリウム水溶液および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で反応停止させた。水相を酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル溶液から沈殿した固体を濾過し、酢酸エチルで洗浄し、５０８mg(純度１００％, 理論値の３６％)の表題化合物を第１収穫物として得た。残った濾液を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。残渣をＤＭＳＯから沈殿させ、ＤＭＳＯで、そして酢酸エチルで洗浄し、さらに４９８mg(純度８５％, 理論値の２６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 2.70分; MS (ESIpos): m/z = 382/384 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.10 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 0.90 (s, 9H), 0.12 (s, 6H) ppm.

【0189】

中間体３８Ａ
４−アミノ−６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化80】

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アルゴン下、脱気したＴＨＦ(１４.８ml)中の中間体３７Ａ(４５９mg, １.２９mmol)の溶液を、(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, １５２mg, ０.１９mmol, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照のこと)および中間体６Ａ(６４７mg, １.９４mmol)に加えた。脱気した０.５Ｍのリン酸カリウム水溶液(５.１ml)を滴下し、得られた混合物を６０℃で２時間撹拌した。反応混合物を、先の７０mg, ９０mgおよび５００mgのテストランの反応混合物と合わせ、蒸発させた。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ３：１→１００％ 酢酸エチル)、１.０ｇ(理論値の５８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.49分; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.57-8.35 (br. s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.28-6.03 (br. s, 1H), 4.74 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 0.83 (s, 9H), 0.00 (s, 6H) ppm.

【0190】

中間体３９Ａ
４−アミノ−６−ホルミル−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化81】

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ジクロロメタン(５ml)中の実施例６８(２５０mg, ０.６８４mmol)の溶液を、デス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン, ３７７mg, ０.８８９mmol)で処理し、室温で１時間撹拌した。反応混合物を、５０mgのテストランの反応混合物と合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液(１：１)で反応停止させ、室温で３０分間撹拌した。水相を酢酸エチルで３回抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／２５％ 酢酸エチル→１００％ 酢酸エチル)、１０２mg(理論値の２４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.02分; MS (ESIpos): m/z = 364 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.86 (s, 1H), 8.78 (br. s, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 6.51 (br. s, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0191】

中間体４０Ａ
４−アミノ−６−(アジドメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化82】

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ジクロロメタン(５ml)中の実施例６８(１００mg, ２７３μmol)の溶液を、塩化チオニル(３９μｌ, ５４７μmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をＤＭＦ(６ml)に溶解し、ヨウ化ナトリウム(２０５mg, １.３６mmol)およびアジ化ナトリウム(３５５mg, ５.４７mmol)で処理した。混合物を８０℃で一夜撹拌し、水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を、水で、次に飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、９１mgの粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法２): R_t = 1.13分; MS (ESIpos): m/z = 391 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): d = 8.65-8.45 (br. s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.41-6.10 (br. s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0192】

中間体４１Ａ
５,７−ジブロモ−６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化83】

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ＤＭＦ(２０ml)中の中間体１８Ａ(２ｇ, ６.２１mmol)の溶液を、イミダゾール(８４６mg, １２.４mmol)および塩化 ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル(１.１２ｇ, ７.４５mmol)で処理し、室温で２０時間撹拌した。反応混合物を水(２００ml)で希釈し、室温でさらに２時間撹拌した。固体を濾過し、２.４６ｇ(理論値の８８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.37分; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.49-8.05 (br. s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.15-6.76 (br. s, 1H), 4.64 (s, 2H), 0.87 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.

【0193】

中間体４２Ａ
２−[４−アミノ−５−ブロモ−６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]プロパン−２−オール

【化84】

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アルゴン下、ＴＨＦ(４０ml)中の中間体４１Ａ(１ｇ, ２.２９mmol)の溶液を−７８℃まで冷却し、ジエチルエーテル中１.６Ｍのメチルリチウム溶液(１.５ml, ２.４０mmol)で処理した。−７８℃で１０分間撹拌した後、ヘキサン中１.６Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液(１.５８ml, ２.５２mmol)を加え、１０分間撹拌を続けた。アセトン(１.６８ml, ２２.９２mmol)を加え、得られた混合物を室温までゆっくりと温め、室温で１８時間撹拌した。反応を水で停止させ、水相を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ２：１)、３０６mg(理論値の３０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 1.39分; MS (ESIpos): m/z = 415/417 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.23-7.85 (br. s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.05-6.82 (br. s, 1H), 5.49 (s, 1H), 4.88 (s, 2H), 1.66 (s, 6H), 0.87 (s, 9H), 0.08 (s, 6H) ppm.

【0194】

中間体４３Ａ
２−[４−アミノ−５−ブロモ−６−(ヒドロキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]プロパン−２−オール

【化85】

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ＴＨＦ(１５ml)中の中間体４２Ａ(３０４mg, ０.７３２mmol)の溶液を、ＴＨＦ中１Ｍのフッ化 テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム溶液(７６８μｌ, ７６８μmol)で処理し、室温で２分間撹拌した。反応混合物をアセトニトリル(２０ml)で希釈し、蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣ(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜３０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)によって精製した。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、１８０mg(理論値の６７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.55分; MS (ESIpos): m/z = 301/303 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.21-7.90 (m, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.09-6.60 (br. s, 1H), 5.90 (br. s, 1H), 5.03 (br. s, 1H), 4.63 (s, 2H), 1.66 (s, 6H) ppm.

【0195】

中間体４４Ａ
４−アミノ−７−(２−ヒドロキシプロパン−２−イル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボアルデヒド

【化86】

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ジクロロメタン(７ml)中の実施例７３(１３５mg, 純度８９％, ３０２μmol)の溶液を、デス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン, １６６mg, ３９２μmol)で処理し、室温で７０分間撹拌した。反応混合物を、１８mg(４５μmol)のテストランの反応混合物と合わせ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液(１：１)で反応停止させた。水相をジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、１４３mg(純度７７％, 理論値の９２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.08分; MS (ESIpos): m/z = 397 (M+H)⁺.

【0196】

中間体４５Ａ
６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化87】

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１５mlの乾燥ＤＭＦ中の１.５ｇ(９.１４mmol)の中間体８Ａの溶液を、１.６５ｇ(１０.９６mmol)の塩化 ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルおよび１.２４ｇ(１８.２７mmol)のイミダゾールで処理し、室温で一夜撹拌した。反応混合物を２５０mlの水に注ぎ、５分間撹拌した。得られた沈殿物を濾過し、４５℃で、真空で乾燥した。
収量：２.２８ｇ(理論値の９０％)。
LC-MS (方法５): R_t = 2.12分; MS (ESIpos): m/z = 279 (M+H)⁺.

【0197】

中間体４６Ａ
６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)−７−クロロピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化88】

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２０mlのＴＨＦ中の２ｇ(７.１８mmol)の中間体４５Ａの溶液を、８９３mg(６.４７mmol)のＮ−クロロスクシンイミドの６部で、６０分かけて−１０℃で処理した。−１０℃で１５分間撹拌を続け、混合物を室温まで温めた。さらに１９２mg(１.４４mmol)のＮ−クロロスクシンイミドを室温で加え、一夜撹拌を続けた。約１／１０の反応混合物を乾固するまで蒸発させ、残渣を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、９４mg(理論値の４％)の表題化合物を得た。反応混合物の主要な部分をシリカゲルに吸着させ、イソヘキサン／酢酸エチル ５〜６６％を溶出液としてシリカゲルのクロマトグラフィーを行い、８９９mg(理論値の４０％)の表題化合物を得た。
総収量：９９３mg(理論値の４４％).
LC-MS (方法５): R_t = 2.45分; MS (ESIpos): m/z = 313 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.69-8.04 (m, 3H), 7.0 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 0.88 (s, 9H), 0.08 (s, 6H) ppm.

【0198】

中間体４７Ａ
５−ブロモ−６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)−７−クロロピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化89】

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２０mlのＤＭＦ中の８９０mg(２.８５mmol)の中間体４６Ａの溶液を、５０６mg(２.８５mmol)のＮ−ブロモスクシンイミドで、少しずつ、−１０℃で１時間かけて処理した。−１０℃で３時間、次いで室温で一夜、撹拌を続けた。水(２００ml)を加え、混合物を２時間撹拌した。沈殿した固体を濾過して取り、水で洗浄し、４５℃で真空で乾燥した。
収量：９９７mg(理論値の８９％).
LC-MS (方法５): R_t = 2.82分; MS (ESIpos): m/z = 391/393/395 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.32 (br. s, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.97 (br. s, 1H), 4.66 (s, 2H), 0.87 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.

【0199】

中間体４８Ａ
６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)−７−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化90】

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アルゴン雰囲気下、フラスコに、８００mg(２.０４mmol)の中間体４７Ａ、６８０mg(２.０４mmol)の中間体６Ａ、８０mg(０.１mmol)の(２'−アミノビフェニル−２−イル)−(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照のこと)および１.３ｇ(６.１３mmol)のリン酸カリウムを入れた。次いで、３０mlの脱気した１,４−ジオキサン／水混合物(５：１)を加え、溶液を７０℃で１時間撹拌した。さらに６８０mg(２.０４mmol)の中間体６Ａおよび３２mg(０.０４mmol)の(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１)を加え、７０℃でさらに１時間撹拌を続けた。出発物質が消費されるまで(ＬＣ−ＭＳによりコントロール)、この手順を３回繰り返した。反応物の最後の部分で、ｐＨ値が８〜９に至るまで１.６mlの５Ｍ 水酸化ナトリウム水溶液を加えた。反応の最後に、油状物が分離するまで、３０mlの水および５Ｍの蟻酸水溶液を加えた(ｐＨ ３〜４)。この油状物の一部を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。表題化合物の２つのフラクションを得た：１０３mgの固体(ＬＣ−ＭＳによる純度８９％, 理論値の９％)および２３mgの固体(ＬＣ−ＭＳによる純度１００％, 理論値の２％)。油状物の残りおよび上清を水で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ ８〜９に調節し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機相を水で洗浄し、乾燥し、減圧下で蒸発させ、２.１ｇの油状物を得た。この物質を、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン／０〜５％ メタノールを溶出液として精製し、さらに７０９mg(ＬＣ−ＭＳによる純度４３％, 理論値の３１％)の表題化合物を得た。
総収率：理論値の４２％
LC-MS (方法２): R_t = 1.57分; MS (ESIpos): m/z = 489 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.08 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 0.84 (s, 9H), -0.03 (s, 6H) ppm.

【0200】

中間体４９Ａ
４−アミノ−７−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボアルデヒド

【化91】

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３mlのジクロロメタン中の１６６mg(０.４４mmol)の実施例７９およびモレキュラー・シーブ(３Å)の懸濁液に、２０７mg(０.４９mmol)のデス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン)を、０〜５℃で加えた。混合物をこの温度で１０分間撹拌し、さらに５６mg(０.１３mmol)のデス・マーチン・ペルヨージナンを加え、５℃で１５分間、環境温度で１０分間撹拌を続けた。この後、混合物を珪藻土に吸着させ、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって、ジクロロメタン／０〜１０％ メタノールを溶出液として精製した。
収量：１００mgの固体(ＬＣ−ＭＳによる純度９２.７％, 理論値の５６％).
LC-MS (方法２): R_t = 1.08分; MS (ESIpos): m/z = 373 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.90 (s, 1H), 8.46 (br. s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.07 (br. s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0201】

中間体５０Ａ
７−クロロ−６−(クロロメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化92】

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表題化合物を、実施例７９の製造(下記参照)における副生成物として単離した。
収量：９.２mg(理論値の１０％).
LC-MS (方法３): R_t = 2.98分; MS (ESIpos): m/z = 393/395 (M+H)⁺.

【0202】

中間体５１Ａ
６−({[ｔｅｒｔ−ブチル(ジメチル)シリル]オキシ}メチル)−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化93】

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６０mlの１,４−ジオキサン中の３ｇ(８.４mmol)の中間体３５Ａの溶液に、アルゴン雰囲気下、１７１mg(０.２１mmol)のＰｄＣｌ_２(ｄｐｐｆ)・ＤＣＭを加え、１０分かけて１６.８mlのトルエン中２Ｍのジメチル亜鉛溶液を滴下した(２２℃から３１℃への温度上昇が起こる)。最初に環境温度で１０分間、次いで９０℃で１３時間撹拌を続けた。この後、水(１０ml)を反応混合物に室温で加え、懸濁液を１時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残渣を水および酢酸エチルに溶かし、さらに１時間撹拌した。沈殿物を濾過して廃棄し、相を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を乾燥し、蒸発させ、２.４５ｇ(ＬＣ−ＭＳによる純度９２％, 理論値の９２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 2.18分; MS (ESIpos): m/z = 293 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.98-7.78 (m, 3H), 7.04 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 0.89 (s, 9H), 0.09 (s, 6H) ppm.

【0203】

中間体５２Ａ
(４−アミノ−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル)メタノール

【化94】

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【0204】

方法１：
２mlの１,４−ジオキサン中の１００mg(０.２８mmol)の中間体３５Ａの溶液に、アルゴン雰囲気下、６mg(０.０１mmol)のＰｄＣｌ_２(ｄｐｐｆ)・ＤＣＭを加え、１０分かけて、０.５６mlのトルエン中２Ｍのジメチル亜鉛溶液を滴下した。混合物を９０℃で一夜撹拌し、次いで蒸発させ、残渣をアセトニトリルおよび５Ｍの蟻酸水溶液で処理した。沈殿物を濾過し、濾液を蒸発させ、残渣をＤＭＳＯ／アセトニトリルに溶かし、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。
収量：３３mg(理論値の６６％).
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.79 (s, 1H), 7.47 (br. s, 2H), 6.80 (s, 1H), 4.84 (t, 1H), 4.49 (d, 2H), 2.36 (s, 3H) ppm.

【0205】

方法２：
アルゴン雰囲気下、マイクロ波反応容器に、７５０mg(３.１mmol)の中間体３４Ａ、５１５μｌ(３.７mmol)のトリメチルボロキシン、７８６mg(３.７mmol)のリン酸カリウムおよび７３mg(０.０９mmol)の(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照のこと)を入れた。次いで、１３mlの脱気した１,４−ジオキサン／水混合物(５：１)を加え、容器を密封し、混合物を、マイクロ波中(４bar, ５０watt)、１４０℃で２０分間加熱した。さらに、５０mgの(２'−アミノビフェニル−２−イル)−(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１)を加え、混合物を再度マイクロ波中で１４０℃で２０分間加熱した。さらに５１５μｌのトリメチルボロキシンを加え、容器を再度１４０℃で２０分間加熱した。ＬＣ−ＭＳにより少量の出発物質しか残っていないことが示されるまで、後者の手順を各３０分間の加熱時間で２回以上繰り返した。混合物を珪藻土で濾過し、１,４−ジオキサンで洗浄し、合わせた濾液を蒸発乾固した。この残渣を先の１００mgのテストランと合わせて、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(XBridge C18, 濃度勾配 ５〜４２％ アセトニトリル／０.０５％水酸化アンモニウム水溶液)。
収量：２３８mg(理論値の３８％).
LC-MS (方法５): R_t = 0.51分; MS (ESIneg): m/z = 177 (M-H)^-
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.79 (s, 1H), 7.48 (br. s, 2H), 6.80 (s, 1H), 4.84 (t, 1H), 4.49 (d, 2H), 2.36 (s, 3H) ppm.

【0206】

中間体５３Ａ
(４−アミノ−５−ブロモ−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル)メタノール

【化95】

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８.８mlのＤＭＦ中の２４５mg(１.３８mmol)の中間体５２Ａの溶液を、２８８mg(１.６２mmol)のＮ−ブロモスクシンイミドを少しずつ加えて、−１０℃で２時間処理した。−１０℃で３０分間、次いで環境温度で２時間撹拌を続けた。混合物を５０mlの水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を乾燥し、蒸発させた。残渣について、ジクロロメタン／０〜１５％ メタノールを溶出液として、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーを行った。
収量：１４８mg(理論値の４２％).
LC-MS (方法４): R_t = 0.42分; MS (ESIpos): m/z = 257/259 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.85 (s, 1H), 6.14-8.22 (broad, 2H), 4.88 (t, 1H), 4.45 (d, 2H), 2.43 (s, 3H) ppm.

【0207】

中間体５４Ａ
４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボアルデヒド

【化96】

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３.５mlのジクロロメタン中の１７５mg(０.４９mmol)の実施例７５およびモレキュラー・シーブ(３Å)の懸濁液に、２３０mg(０.５４mmol)のデス・マーチン・ペルヨージナン(１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンゾヨードキソール−３(１Ｈ)−オン)を０〜５℃で加えた。混合物を、この温度で５分間、続いて室温で３０分間撹拌した。この後、混合物を珪藻土に吸着させ、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって、イソヘキサン／１０〜１００％ 酢酸エチルを溶出液として精製した。
収量：１３９mgの固体(理論値の７９％).
LC-MS (方法５): R_t = 2.34分; MS (ESIpos): m/z = 353 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.93 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.71 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0208】

中間体５５Ａ
４−[(４−アミノ−６−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル)メチル]ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化97】

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酢酸(８ml)中の６−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン(５００mg, ３.３mmol；ＰＣＴ国際特許出願WO 2007/056170に記載された製法)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(３２８μｌ, ４.０４mmol)およびピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル(７５４mg, ４.０４mmol)で処理した。混合物を６０℃で一夜撹拌した。蒸発後、残渣を酢酸エチルに溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、１.２ｇの粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法２): R_t = 0.56分; MS (ESIpos): m/z = 347 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.79 (s, 1H), 7.51 (br. s, 2H), 6.67 (s, 1H), 3.76 (br. s, 2H), 3.29-3.17 (m, 4H), 2.36-2.29 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.37 (s, 9H) ppm.

【0209】

中間体５６Ａ
４−[(４−アミノ−５−ブロモ−６−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル)メチル]ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化98】

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ＴＨＦ(２０ml)中の中間体５５Ａ(１.１７ｇ, ３.３７mmol)の溶液を−６０℃に冷却し、１,３−ジブロモ−５,５−ジメチルヒダントイン(５.７８mg, ２.０２mmol)で処理した。混合物を−６０℃〜−２０℃で４時間撹拌した。この後、反応混合物を１０％ チオ硫酸ナトリウム水溶液で反応停止させた。大部分のＴＨＦ溶媒を蒸発させると、固体が沈殿した。濾過し、アセトンから再結晶して、８６２mg(理論値の５９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.66分; MS (ESIpos): m/z = 425/427 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.29-7.62 (br. s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.17-6.44 (br. s, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.29-3.22 (m, 4H), 2.37-2.27 (m, 4H), 2.16 (s, 3H), 1.37 (s, 9H) ppm.

【0210】

中間体５７Ａ
４−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化99】

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脱気した１,４−ジオキサン(３ml)中の中間体５６Ａ(１００mg, ２３５μmol)の溶液を、中間体６Ａ(９３mg, ２８２μmol)、ジシクロヘキシル(２',６'−ジメトキシビフェニル−２−イル)ホスフィン(Ｓ−Ｐｈｏｓ；９.６mg, ２３μmol)および酢酸パラジウム(２.６mg, １１μmol)で処理した。脱気した３Ｍのリン酸カリウム水溶液(５８８μｌ)を加え、得られた混合物を６０℃で１時間撹拌した。さらなる中間体６Ａ(７８mg, ２３５μmol)を加え、６０℃で一夜撹拌を続けた。反応混合物を２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液で反応停止させ、水相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ３：２)、８２mg(理論値の６２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.97分; MS (ESIpos): m/z = 523 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.94 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.30-3.23 (m, 4H, 水のピークと重複), 2.45 (s, 3H), 2.42-2.33 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 1.39 (s, 9H) ppm.

【0211】

中間体５８Ａ
４−[(４−アミノ−６−クロロピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル)メチル]ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化100】

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中間体５５Ａの手順に従って、４ｇ(２３.７mmol)の６−クロロピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]−トリアジン−４−アミン(ＰＣＴ国際特許出願WO 2007/064883に記載された製造)を反応させ、１１.２ｇの表題化合物を粗製の物質として得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法５): R_t = 0.74分; MS (ESIpos): m/z = 367 (M+H)⁺

【0212】

１００mgの上で得られた粗製の物質の分取ＲＰ−ＨＰＬＣ後(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、６７mgの対応する蟻酸塩のサンプルである４−[(４−アミノ−６−クロロピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル)メチル]ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル蟻酸塩を単離した。
¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.14 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.83 (br. s, 2H), 6.95 (s, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.17 (s, 2H), 2.38 (br. s, 4H), 1.37 (s, 9H) ppm.

【0213】

中間体５９Ａ
４−[(４−アミノ−５−ブロモ−６−クロロピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル)メチル]ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化101】

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中間体５６Ａの手順に従って、１１ｇ(３０mmol)の中間体５８Ａを反応させ、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン／メタノール １０：１)、続いて分取ＲＰ−ＨＰＬＣ(Daiso C18, 濃度勾配 ４０〜６５％ アセトニトリル／水)の後、１.１７ｇ(理論値の９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.74分; MS (ESIpos): m/z = 445/447/449 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 7.96 (s, 1H), 3.84 (s, 2H), 2.37 (br. s, 4H), 1.37 (s, 9H) ppm.

【0214】

中間体６０Ａ
４−{[４−アミノ−６−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化102】

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アルゴン雰囲気下、フラスコに、１４０mg(０.３１mmol)の中間体５９Ａ、１０２mg(０.４６mmol)の中間体５Ａ、１６mg(０.０２mmol)のＰｄＣｌ_２(ｄｐｐｆ)・ＤＣＭおよび１２２mg(１.１５mmol)の炭酸ナトリウムを入れた。３mlの脱気した１,２−ジメトキシエタン／水(３：１)を添加後、懸濁液を６０℃で２.５時間撹拌した。さらなる中間体５Ａ(５０mg, ０.２３mmol)およびＰｄＣｌ_２(ｄｐｐｆ)・ＤＣＭ(８mg, ０.０１mmol)を加え、４０℃で２.５時間撹拌を続けた。出発物質が消費されるまで、後者の手順を１回以上繰り返した。次いで、反応混合物を減圧下で部分的に蒸発させ、水を加え、混合物をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を、水で、そして飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥し、減圧下で蒸発させた。残渣(３２２mg)を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、４９mgの表題化合物およびＢｏｃ脱保護誘導体である６−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)−ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミンの混合物を得た。この混合物を次の反応工程(実施例８５を参照)にそのまま用いた。
LC-MS (方法２): R_t = 1.00分; MS (ESIpos): m/z = 543 (M+H)⁺, および R_t = 0.81分; MS (ESIpos): m/z = 443 (M+H)⁺.

【0215】

中間体６１Ａ
４−{[４−アミノ−６−(メトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化103】

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酢酸(８５ml)中の中間体１０Ａ(５ｇ, ２８.１mmol)およびピペラジン−２−オン(３.０９ｇ, ３０.９mmol)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(３.１５ml, ４２.１mmol)で処理し、６０℃で１６時間撹拌した。揮発成分を減圧下で蒸発させ、残渣をメタノールに溶解し、珪藻土に吸着させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(５〜１０％ メタノール／ジクロロメタン)、３.９１ｇ(理論値の４６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法３): R_t = 1.68分; MS (ESIpos): m/z = 291 (M+H)⁺.

【0216】

中間体６２Ａ
４−{[４−アミノ−５−ブロモ−６−(メトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化104】

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ＤＭＦ(５０ml)中の中間体６１Ａ(３.９ｇ, １３.４mmol)の溶液を０℃に冷却し、ＤＭＦ(６ml)中のＮ−ブロモスクシンイミド(２.６３ｇ, １４.８mmol)の溶液で処理した。混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで、溶媒を蒸発させ、残渣をメタノールに溶解し、珪藻土に吸着させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(５〜１０％ メタノール／ジクロロメタン)、１.９９ｇ(理論値の３９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法３): R_t = 1.86分; MS (ESIpos): m/z = 369/371 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.96-8.23 (br. s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.72-6.98 (br. s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.07 (br. s, 2H), 2.96 (s, 2H), 2.56 (br. s, 2H) ppm.

【0217】

中間体６３Ａ
７−(クロロメチル)−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン塩酸塩

【化105】

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トルエン(６０ml)中の実施例８６(１ｇ, ２.５１mmol)の懸濁液を、塩化チオニル(１.８３ml, ２５.１mmol)で滴下して処理し、混合物を室温で一夜撹拌した。揮発成分を減圧下で蒸発させた。残渣を減圧下でトルエンと共に３回共沸させ、０.８５ｇ(理論値の７４％)の表題化合物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に直接用いた。

【0218】

中間体６４Ａ
４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボン酸

【化106】

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ＴＨＦ／水(１０：１, ２２０ml)中の中間体１７Ａ(５ｇ, １２.６mmol)の懸濁液を、ＴＨＦ中２Ｍの２−メチル−２−ブテン溶液(３１.５ml, ６３.１mmol)で、そしてリン酸二水素ナトリウム(６.９６ｇ, ５０.４mmol)で処理した。混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、塩化ナトリウム(４.５６ｇ, ５０.４４mmol)を加え、得られた混合物を室温で２０時間撹拌した。懸濁液を濾過し、得られた固体を水で洗浄し、４.２４ｇ(理論値の７４％)の表題化合物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法４): R_t = 1.06分; MS (ESIpos): m/z = 413 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 13.22 (br. s, 1H), 8.53-8.00 (br. s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.28-5.65 (br. s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.36 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.01 (t, 3H) ppm.

【0219】

中間体６５Ａ
５,７−ジメトキシ−１−ベンゾチオフェン

【化107】

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アセトン(２０ml)中の１−ベンゾチオフェン−５,７−ジオール(１.１６ｇ, ６.９８mmol)の溶液に、アルゴン下、炭酸カリウム(２.８９ｇ, ２０.９mmol)およびヨードメタン(９１２μｌ, １４.６mmol)を加えた。得られた混合物を還流しながら１８時間撹拌した。室温まで冷却した後、混合物をメタノール中７Ｍのアンモニア溶液(１０ml)で３０分間処理し、シリカゲルに吸着させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ４０：１)、０.５２ｇ(理論値の３２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 1.02分; MS (ESIpos): m/z = 195 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.69 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.02 (d, 1H), 6.57 (d, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.81 (s, 3H) ppm.

【0220】

中間体６６Ａ
(５,７−ジメトキシ−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ボロン酸

【化108】

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アルゴン雰囲気下、ヘキサン中１.６Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液(１.８４ml, ２.９５mmol)を、乾燥ＴＨＦ(５ml)中の中間体６５Ａ(５２０mg, ２.６８mmol)の溶液に、−７０℃で滴下した。−７０℃で１時間後、ホウ酸トリイソプロピル(７４２μｌ, ３.２１mmol)を加え、混合物を１６時間撹拌し、その間ゆっくりと室温まで温めた。ジクロロメタンおよび飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、１Ｍ 塩酸の添加によって、ｐＨ値を６に調節した。有機相を分離し、水相をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(最初にジクロロメタン／メタノール ４０：１、次いでメタノール、最後にメタノール／１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素 １０：１で溶出)、６３１mg(純度７１％, 理論値の７１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.83分; MS (ESIpos): m/z = 239 (M+H)⁺.

【0221】

中間体６７Ａ
４−アミノ−６−(クロロメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化109】

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中間体１１Ａの合成の副生成物として、シリカゲルのカラムクロマトグラフィー後(ジクロロメタン／アセトン ８：２→７：３)、中間体６７Ａを単離した。
LC-MS (方法２): R_t = 0.6分; MS (ESIpos): m/z = 211/213 (M+H)⁺.

【0222】

中間体６８Ａ
４−アミノ−６−[(３−オキソピペラジン−１−イル)メチル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボアルデヒド

【化110】

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３３１mlのＤＭＦ中の中間体６７Ａ(１１.０３ｇ, ５２.４mmol)および２−オキソピペラジン(６.８２ｇ, ６８.１mmol)の溶液を、室温で、ＤＩＰＥＡ(１３.７ml, ７８.６mmol)で処理し、一夜撹拌した。沈殿物を濾過し、ＤＭＦで、そしてジエチルエーテルで洗浄し、真空で乾燥し、１１.６４ｇの表題化合物を得た(純度８９％, 理論値の７２％)。
LC-MS (方法７): R_t = 1.30分; MS (ESIpos): m/z = 275 (M+H)⁺.

【0223】

中間体６９Ａ
４−{[４−アミノ−７−(ヒドロキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化111】

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１Ｍの塩酸(３７０ml)およびメタノール(３７０ml)中の中間体６８Ａ(１０.１７ｇ, 純度８９％, ３３.０１mmol)の溶液に、室温で、亜鉛粉末(１２.１ｇ, １８５mmol)を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。シリカゲル(１００ｇ)を加え、揮発成分を減圧下で蒸発させた。残渣をメタノールに懸濁し、揮発成分を再度減圧下で蒸発させ、残渣を真空で乾燥した。固体についてシリカゲルのカラムクロマトグラフィーを行い(濃度勾配 ジクロロメタン／メタノール中７Ｍのアンモニア １０：１→３：１)、６.３９ｇの表題化合物を得た(理論値の６０％)。
LC-MS (方法８): R_t = 1.12分; MS (ESIpos): m/z = 277 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.83 (s, 1H), 7.76 (br. s, 1H), 7.64 (br. s, 2H), 6.83 (s, 1H), 5.01 (br. s, 1H), 4.74 (s, 2H), 3.64 (br. s, 2H), 3.14 (br. s, 2H), 2.95 (br. s, 2H), 2.58 (br. s, 2H) ppm.

【0224】

中間体７０Ａ
４−{[４−アミノ−５−ブロモ−７−(ヒドロキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン トリフルオロ酢酸塩

【化112】

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メタノール／水(１０：１, ３３ml)中の中間体６９Ａ(１ｇ)の懸濁液を、トリフルオロ酢酸(０.５６ml, ７.２４mmol)で処理すると、透明な溶液が得られた。メタノール(３０ml)中のＮ−ブロモスクシンイミド(７０８mg, ３.９８mmol)の溶液を０℃で滴下し、混合物を０℃で１時間撹拌した。形成した沈殿物を濾過し、真空で乾燥し、７００mgの表題化合物を得た(理論値の４１％)。
LC-MS (方法７): R_t = 1.38分; MS (ESIpos): m/z = 355/357 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 7.90 (s, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.58 (br. t, 2H), 3.50 (br. t, 2H) ppm.

【0225】

製造例：
実施例１
４−{[４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化113】

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【0226】

方法１：
メタノール(８７ml)中の中間体１３Ａ(３ｇ, ７.８４mmol)の溶液を、酢酸(０.８９８ml, １５.６８mmol)、２−オキソピペラジン(１.１７ｇ, １１.７６mmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(４.９８ｇ, ２３.５３mmol)で処理した。混合物を室温で４.５時間撹拌した。さらに２−オキソピペラジン(３９２mg, ３.９mmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(３.３ｇ, １５.６８mmol)を加え、得られた混合物を６０℃で一夜撹拌した。蒸発後、残渣を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に溶かし、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製した(ジクロロメタン／メタノール ４０：１→１０：１)。このようにして得られた生成物をメタノールで磨砕し、濾過して、５４０mg(理論値の１４％)の表題化合物を得た。メタノール性母液を蒸発させ、残渣を２倍ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。純粋な生成物を含むフラクションを合わせて、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和した。アセトニトリル溶媒を蒸発させ、水相を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、３９５mg(理論値の１３％)の表題化合物を第２バッチとして得た。

【0227】

方法２：
酢酸(２.９ml)中の中間体２１Ａ(２９１mg, ０.８２mmol)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(１０４μｌ, １.３９mmol)および２−オキソピペラジン(１３９mg, １.３９mmol)で処理した。混合物を６０℃で３時間撹拌し、蒸発させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、１８４mg(理論値の４４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.77分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.00 (s, 1H), 7.73 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.15-3.08 (br. s, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.64 (br. t, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0228】

実施例２
４−{[４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン 二塩酸塩

【化114】

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１,４−ジオキサン(２ml)中の実施例１(１００mg, ２１４μmol)の溶液を、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml, ８mmol)で処理した。溶媒を蒸発させ、１３０mg(定量的)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.79分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.39 (br. s, 1H), 8.31-8.53 (br. s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.21-6.42 (br. s, 1H), 4.81 (br. s, 2H), 4.52 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.57 (s, 2H), 3.32-3.72 (m, 4H), 3.26 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0229】

実施例３
(３Ｒ)−３−({[４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}アミノ)ピロリジン−２−オン 二塩酸塩

【化115】

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メタノール(１５ml)および酢酸(１５６μｌ, ２.７mmol)中の中間体１３Ａ(５２０mg, １.３６mmol)の溶液を、(Ｒ)−３−アミノピロリジン−２−オン(５０３mg, ５.０mmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素塩(１.０６ｇ, ５.０mmol)で処理した。混合物を室温で一夜撹拌し、蒸発させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、このようにして得られた生成物を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥して、２７２mg(理論値の３６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.62 (br. s, 1H), 9.46 (br. s, 1H), 8.56-8.22 (br. s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.54-6.12 (br. s, 1H), 4.89-4.65 (m, 2H), 4.58-4.46 (m, 2H), 4.17-4.07 (br. s, 1H, 水のピークと重複), 3.96 (s, 3H), 3.36-3.16 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 2.48-2.39 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.23-2.06 (m, 1H) ppm.

【0230】

実施例４
(３Ｒ)−３−({[４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}アミノ)ピロリジン−２−オン

【化116】

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メタノール(５８ml)および酢酸(０.６ml)中の中間体１３Ａ(２.０ｇ, ５.２mmol)の溶液を、(Ｒ)−３−アミノピロリジン−２−オン(７８５mg, ７.８mmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素塩(３.３２ｇ, １５.６mmol)で処理した。混合物を室温で一夜撹拌した。この後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。２倍シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ４０：１〜１０：１)、９５７mg(理論値の３７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.72分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.01 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.46-4.34 (m, 2H), 4.24-4.02 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.24-3.04 (m, 3H), 3.21 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.40-2.27 (m, 1H), 1.80-1.65 (m, 1H) ppm.

【0231】

実施例５
４−{[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化117】

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【0232】

方法１：
ＴＨＦ(１００ml)中の中間体１７Ａ(２ｇ, ５.０５mmol)の溶液を、０℃で、２−オキソピペラジン(１.０１ｇ, １０.１mmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(１.０７ｇ, ５.０４mmol)および酢酸(０.２９ml, ５.０４mmol)で処理した。得られた混合物を０℃で３０分間撹拌した。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(１.０７ｇ, ５.０４mmol)および酢酸(０.２９ml, ５.０４mmol)を３０分毎に４回加え、得られた混合物を０℃でさらに３０分間、次いで、３５℃で２５分間、最後に室温で一夜撹拌した。１０％の塩化ナトリウム水溶液で反応を停止させ、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を蒸発させた。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ９５：５→９０：１０)、３６０mg(理論値の１７％)の実施例８６に記載された化合物(下記参照)および１.８２ｇの表題化合物を別個のフラクションで得た。このようにして得られた表題生成物をエタノール(２０ml)に懸濁し、２時間還流し、１５℃に冷却した。固体を濾過し、エタノールで洗浄し、１.６３ｇ(理論値の６７％)の純粋な表題化合物を得た。

【0233】

方法２：
ジクロロメタン(１８ml)中の実施例１３(９３０mg, １.９mmol)の溶液を、塩化チオニル(２１０μｌ, ２.８mmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をエタノール(１８ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(６７０μｌ, ３.８mmol)で処理した。混合物を７０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製した(ジクロロメタン／メタノール ９８：２→９０：１０)。このようにして得られた生成物を、アセトニトリル／ジエチルエーテル混合物中で磨砕し、濾過した。濾液を蒸発させ、残渣を再度シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製した(ジクロロメタン／メタノール ９８：２→９０：１０)。再度、このようにして得られた生成物を、アセトニトリル／ジエチルエーテル中で磨砕し、濾過した。この手順を１回以上繰り返した。このようにして得られた固体の３つのバッチを合わせて、再度アセトニトリル／ジエチルエーテル中で１回磨砕し、最後に濾過し、６００mg(理論値の６２％)の表題化合物を得た。

【0234】

方法３：
酢酸(１０ml)中の中間体２２Ａ(７２０mg, 純度８９％, １.７４mmol)の溶液を、ピペラジン−２−オン(２６１mg, ２.６１mmol)で、６０℃で撹拌した。これに、３７％のホルムアルデヒド水溶液(２６０μｌ, ３.４８mmol)を３回、それぞれ０時間目、３時間目および１２時間目に加え、混合物を６０℃で合計２４時間撹拌した。次いで、揮発成分を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の層間に分配した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。残渣をメタノールおよびジクロロメタンの混合物に溶解し、珪藻土に吸着させ、真空で乾燥し、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーによって精製した(濃度勾配 ０〜６％ メタノール／ジクロロメタン)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発させ、再度、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ３０〜５０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを再度合わせて、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、２８１mg(理論値の３１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.86分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.01 (s, 1H), 7.8-8.05 (br. s, 1H), 7.74 (br. s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.6-5.9 (br. s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.41 (q, 2H), 3.09-3.13 (m, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.63-2.69 (br. s, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.07 (t, 3H) ppm.

【0235】

実施例６
４−{[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ−[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン 二塩酸塩

【化118】

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メタノール(６ml)中の中間体１７Ａ(６０mg, 純度６９％, １０４μmol)の溶液を、２−オキソピペラジン(２２mg, ２０９μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(３３mg, ５２２mmol)および酢酸(１２μｌ, ２０９μmol)で処理した。混合物を６０℃で１６時間撹拌し、濾過した。濾液および残渣を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって別個に精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ４０〜６０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、１Ｍ 塩酸(３ml)で希釈し、蒸発乾固し、４６mg(理論値の７９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.87分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.37 (br. s, 1H), 8.31 (br. s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.13 (br. s, 1H), 4.80 (br. s, 2H), 4.52 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.86 (br. s, 2H), 3.36-3.51 (m, 5H), 2.46 (s, 3H), 1.11 (t, 3H) ppm.

【0236】

実施例７
(３Ｒ)−３−({[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}アミノ)ピロリジン−２−オン 二塩酸塩

【化119】

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メタノール(３ml)中の中間体１７Ａ(６０mg, 純度６９％, １０４μmol)の溶液を、(Ｒ)−３−アミノピロリジン−２−オン(２２mg, ２０９μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(３３mg, ５２２μmol)および酢酸(１２μｌ, ２０９μmol)で処理した。混合物を６０℃で４時間撹拌し、濾過した。濾液を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ４０〜６０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、１Ｍ 塩酸で希釈し、蒸発乾固し、４６mg(理論値の７９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.74分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.58-9.75 (m, 1H), 9.33-9.54 (m, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.27-8.71 (br. s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.18-6.48 (br. s, 1H), 4.68-4.87 (m, 2H), 4.49-4.62 (q, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H), 3.18-3.35 (m, 2H), 2.46 (s, 4H), 2.08-2.22 (m, 1H), 1.10 (t, 3H)ppm.

【0237】

実施例８
(３Ｒ)−３−({[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}アミノ)ピロリジン−２−オン

【化120】

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メタノール(４ml)中の中間体１７Ａ(２２６mg, 純度７５％, ４２８μmol)の溶液を、(Ｒ)−３−アミノピロリジン−２−オン(８５mg, ８５５μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(１３４mg, ２.１４mmol)および酢酸(４９μｌ, ８５５μmol)で処理した。混合物を室温で１.５時間撹拌した。この後、混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって直接分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ４０〜６０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発乾固し、１８０mg(理論値の８８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.74分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.00 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.8-8.1 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.6-5.9 (br. s, 1H), 4.39-4.49 (m, 2H), 4.04-4.23 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.41 (q, 2H), 3.05-3.23 (m, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.31-2.40 (m, 1H), 1.68-1.79 (m, 1H), 1.08 (t, 3H) ppm.

【0238】

実施例９
Ｎ^２−{[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}グリシンアミド 二塩酸塩

【化121】

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メタノール(３ml)中の中間体１７Ａ(６０mg, 純度６９％, １０４μmol)の溶液を、グリシンアミド塩酸塩(２３mg, ２０９μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(３２mg, ５２２mmol)および酢酸(１２μｌ, ２０９μmol)で処理した。混合物を６０℃で１６時間撹拌した。濾過後、濾液を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、１Ｍ 塩酸で希釈し、蒸発乾固し、濾過工程から得た残渣と合わせた。この物質を、再度、２倍分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。再度生成物のフラクションを合わせて、１Ｍ 塩酸で希釈し、蒸発乾固し、７.４mg(理論値の１３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.80分; MS (ESIpos): m/z = 455 (M+H)^+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.33 (br. s, 2H), 9.05 (br. s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.93 (br. s, 1H), 7.58 (br. s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.05 (br. s, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.65 (br. m, 2H), 4.56 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.74 (br. m, 2H), 3.46 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) ppm.

【0239】

実施例１０
６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(モルホリン−４−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化122】

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メタノール(３ml)中の中間体１７Ａ(５５mg, 純度７３％, １０１μmol)の溶液を、モルホリン(１８mg, ２０２μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(１９mg, ３０３mmol)および酢酸(１８μｌ, ３０４μmol)で処理した。混合物を６０℃で１８時間撹拌した。さらなる量のモルホリン(１８mg, ２０２μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(１９mg, ３０３mmol)および酢酸(１８μｌ, ３０４μmol)を加え、６０℃でさらに３時間撹拌を続けた。沈殿物を溶解させるために、得られた混合物をＴＨＦで希釈し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、３２mg(理論値の６８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.78分; MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.98 (s, 1H), 7.9 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.75 (br. s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.88 (s, 2H), 3.51-3.56 (m, 4H), 3.40 (q, 2H), 2.4-2.5 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.06 (t, 3H) ppm.

【0240】

実施例１１
１−(４−{[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−イル)エタノン 二塩酸塩

【化123】

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メタノール(８ml)中の中間体１７Ａ(１３０mg, ０.３２８mmol)の溶液を、Ｎ−アセチルピペラジン(６３mg, ０.４９２mmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(１０３mg, １.６３mmol)および酢酸(３７μｌ, ０.６５５mmol)で処理した。混合物を６０℃で３時間撹拌した。次いでそれを３０mgのテストランの反応混合物と合わせて、蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。このようにして得られた生成物を、１,４−ジオキサンから凍結乾燥し、酢酸エチルに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、再度１,４−ジオキサンから凍結乾燥した。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再度精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、続いて、２倍シリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い(ジクロロメタン／メタノール ９８：２→４：１)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥して、４９mg(理論値の１８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.82分; MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.65-8.26 (br. s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.53-6.05 (br. s, 1H), 4.75 (br. s, 2H), 4.56 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H, 水のピークと重複), 2.46 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.09 (t, 3H) ppm.

【0241】

実施例１２
[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メタノール 二蟻酸塩

【化124】

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１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(３.７ml)中の中間体２３Ａ(９５mg, １５２μmol)の溶液を、室温で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、４４mg(理論値の６２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.63分; MS (ESIpos): m/z = 439 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.28 (br. s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.50 (s, 2H, 水のピークと重複), 3.98 (s, 2H, 水のピークと重複), 3.95 (s, 3H, 水のピークと重複), 2.95-2.84 (m, 4H), 2.61-2.55 (m, 4H, ＤＭＳＯのピークと重複), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0242】

実施例１３
４−{[４−アミノ−６−(ヒドロキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化125】

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酢酸(１３.９ml)中の中間体２０Ａ(１.３４ｇ, ３.９６mmol)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(５０１μｌ, ６.６mmol)および２−オキソピペラジン(６７０mg, ６.６mmol)で処理した。混合物を５０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ９８：２→９０：１０)、９４２mg(理論値の４９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.67分; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.76 (br. s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.03 (br. s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.18-3.13 (m, 2H), 3.07-2.98 (m, 2H), 2.72-2.60 (m, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0243】

実施例１４
７−{[(３Ｓ)−３−アミノ−３−メチルピロリジン−１−イル]メチル}−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化126】

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酢酸(１ml)中の中間体２１Ａ(１００mg, ０.２８mmol)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(２５μｌ, ０.３３mmol)および[(３Ｓ)−３−メチルピロリジン−３−イル]カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(Yoshida et al., Chem. Pharm. Bull. 1996, 44 (7), 1376-1386, ６７mg, ０.３３mmol)で処理した。混合物を室温で３時間撹拌し、蒸発させた。残渣を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、もはやガスが発生しなくなるまで固体の炭酸カリウムを加えた。水相を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶解し、室温で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を２倍分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(最初にReprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液；次いでShield RP18, 濃度勾配 ５〜５０％ メタノール＋０.１％ＴＦＡ水溶液／０.１％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物を、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１４mg(理論値の８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.67分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.50-8.22 (br. s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.36-6.01 (br. s, 1H), 4.88 (br. s, 2H), 4.56 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H, 水のピークと重複), 3.26 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 1.52 (s, 3H) ppm.

【0244】

実施例１５
７−{[(３Ｓ)−３−アミノ−３−メチルピロリジン−１−イル]メチル}−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化127】

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酢酸(１ml)中の中間体１７Ａ(１００mg, ２７１μmol)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(２４μｌ, ３２６μmol)および[(３Ｓ)−３−メチルピロリジン−３−イル]カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(Yoshida et al., Chem. Pharm. Bull. 1996, 44 (7), 1376-1386, ６５mg, ３２６μmol)で処理した。混合物を６０℃で４時間撹拌した。さらに３７％のホルムアルデヒド水溶液(１０μｌ, １３６μmol)および[(３Ｓ)−３−メチルピロリジン−３−イル]カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(２７mg, １３６μmol)を加え、６０℃で一夜撹拌を続けた。蒸発後、残渣を酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液の層間に分配した。もはやガスが発生しなくなるまで、固体の炭酸カリウムを加えた。水相を酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。このようにして得られた生成物を、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶解し、室温で１時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、２４mg(理論値の１８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.19 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.90 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.46 (q, 3H), 2.46 (s, 3H), 1.54 (s, 3H), 1.14-1.05 (m, 3H) ppm.

【0245】

実施例１６
１−(４−{[４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−イル)エタノン 二塩酸塩

【化128】

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酢酸(１ml)中の中間体２１Ａ(５０mg, １４１μmol)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(４.６μｌ, １６９μmol)およびＮ−アセチルピペラジン(２１.６mg, １６９μmol)で処理した。混合物を７５℃で３時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、３４mg(理論値の３９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.78分; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.70-8.35 (br. s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.61-6.19 (br. s, 1H), 4.74 (br. s, 2H), 4.54 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.25 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.03 (s, 3H) ppm.

【0246】

実施例１７
６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン蟻酸塩

【化129】

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ジクロロメタン(２.２ml)中の中間体２３Ａ(１１０mg, ２０４μmol)の溶液を、塩化チオニル(２９μｌ, ４０８μmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をメタノールに溶解し(２.２ml)、ＤＩＰＥＡ(３９μｌ, ２２４μmol)で処理した。混合物を７０℃で１時間撹拌し、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２.２ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、４４.９mg(理論値の４６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.73分; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.28 (br. s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.00-3.90 (m, 5H), 3.00-2.90 (m, 4H), 2.65-2.56 (m, 4H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0247】

実施例１８
６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化130】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(８０mg, ３１７μmol)の溶液を、塩化チオニル(２２μｌ, ２９７μmol)で処理し、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、残渣をエタノール(２ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(２８μｌ, １６３μmol)で処理した。混合物を７０℃で１時間撹拌し、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶かし、室温で１時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、３５mg(理論値の５０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.82分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.09 (br. s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.50 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.42 (q, 2H, 水のピークと重複), 2.45 (s, 3H), 1.05 (t, 3H) ppm.

【0248】

実施例１９
６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 二塩酸塩

【化131】

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１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１ml)中の実施例１８(５０mg, １０７μmol)の溶液を、室温で１５分間撹拌した。蒸発後、５５mg(理論値の９３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.74分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.18 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.76 (br. s, 2H), 4.60 (br. s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.09 (t, 3H) ppm.

【0249】

実施例２０
１−(４−{[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−イル)エタノン

【化132】

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ジクロロメタン(２ml)およびＴＨＦ(０.８ml)中の実施例１８(７０mg, １５０μmol)の溶液を、塩化アセチル(２１μｌ, ３００μmol)および炭酸ナトリウム(１２７mg, １.２mmol)で処理した。混合物を室温で一夜撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、２７mg(理論値の３１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.77分; MS (ESIpos): m/z = 509 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.98 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.45-3.36 (m, 6H), 2.48-2.38 (m, 7H, ＤＭＳＯのピークと重複), 1.97 (s, 3H), 1.06 (t, 3H) ppm.

【0250】

実施例２１
４−({４−アミノ−６−[(２−ヒドロキシエトキシ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル}メチル)ピペラジン−２−オン蟻酸塩

【化133】

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ジクロロメタン(２ml)中の実施例１３(６０mg, １３２μmol)の溶液を、塩化チオニル(１４μｌ, １９８μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣をエチレングリコール(５００μｌ)に溶解し、１００℃で９０分間撹拌した。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、３４mg(理論値の４７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.69分; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.14 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.74 (br. s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.50-3.43 (m, 2H), 3.42-3.36 (m, 2H, 水のピークと重複), 3.15-3.07 (m, 2H), 3.03 (s, 2H), 2.69-2.61 (m, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0251】

実施例２２
２−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メトキシ}エタノール 二塩酸塩

【化134】

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ジクロロメタン(４ml)中の中間体２３Ａ(１００mg, １８５μmol)の溶液を、塩化チオニル(２７μｌ, ３７１μmol)で処理した。混合物を室温で２０分間撹拌し、蒸発させた。残渣をエチレングリコール／ＴＨＦ(２：１, １.５ml)に溶解し、１００℃で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、次にシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製した(ジクロロメタン／メタノール＋０.１％アンモニア水溶液 ９８：２→９０：１０)。１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、６７mg(理論値の６４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.66分; MS (ESIpos): m/z = 483 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.16 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.69 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.81-3.49 (m, 12H), 2.50 (s, 3H) ppm.

【0252】

実施例２３
６−(ブトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン蟻酸塩

【化135】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(１００mg, １８５μmol)の溶液を、塩化チオニル(２７μｌ, ３７１μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣を１−ブタノール(２ml)に溶解し、７０℃で１時間加熱した。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、２２mg(理論値の２４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.82分; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.29 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.35 (t, 2H), 2.90-2.79 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.47-1.37 (m, 2H), 1.31-1.18 (m, 2H), 0.80 (t, 3H) ppm.

【0253】

実施例２４
５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)−６−(プロポキシ−メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 二蟻酸塩

【化136】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(１００mg, １８５μmol)の溶液を、塩化チオニル(２７μｌ, ３７１μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣を１−プロパノール(２ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(４８μｌ, ２７８μmol)で処理し、室温で１時間撹拌した。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、１５mg(理論値の１６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.78分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.26 (br. s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.32 (t, 2H), 2.87-2.79 (m, 4H), 1.52-1.39 (m, 2H), 0.81 (t, 3H) ppm.

【0254】

実施例２５
６−[(シクロプロピルメトキシ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 二蟻酸塩

【化137】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(１００mg, １８５μmol)の溶液を、塩化チオニル(２７μｌ, ３７１μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣をシクロプロピルメタノール(２ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(４８μｌ, ２７８μmol)で処理し、７０℃で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、２９mg(理論値の３０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.78分; MS (ESIpos): m/z = 493 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.28 (br. s, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 3.21 (d, 2H), 2.95-2.83 (m, 4H), 2.61-2.56 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.01-0.91 (m, 1H), 0.46-0.37 (m, 2H), 0.15-0.08 (m, 2H) ppm.

【0255】

実施例２６
６−[(シクロブチルオキシ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化138】

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ジクロロメタン(１.７ml)中の中間体２３Ａ(８５mg, １５７μmol)の溶液を、塩化チオニル(２３μｌ, ３１５μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣をシクロブタノール(１.７ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(４１μｌ, ２３６μmol)で処理し、７０℃で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１.７ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、２３mg(理論値の２８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.82分; MS (ESIpos): m/z = 493 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.01 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.06-3.86 (m, 6H), 3.14-2.97 (m, 4H), 2.80-2.62 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.10-1.96 (m, 2H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.65-1.52 (m, 1H), 1.49-1.33 (m, 1H) ppm.

【0256】

実施例２７
６−(イソプロポキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イル−メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン蟻酸塩

【化139】

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ジクロロメタン(１.３ml)中の中間体２３Ａ(６５mg, １２０μmol)の溶液を、塩化チオニル(１７μｌ, ２４１μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣を２−プロパノール(１.３ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(２３μｌ, １３２μmol)で処理し、７０℃で１時間撹拌した。さらにＤＩＰＥＡ(２３μｌ, １３２μmol)を加え、再度混合物を７０℃で１時間撹拌した。次いで、さらにＤＩＰＥＡ(６３μｌ, ３６２μmol)を加え、９０℃で３時間撹拌を続けた。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１.３ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、２３mg(理論値の３４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.74分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.30 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.57 (m, 1H, 水のピークと重複), 2.88-2.78 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.04 (d, 6H) ppm.

【0257】

実施例２８
６−[(２−メトキシエトキシ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン蟻酸塩

【化140】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(１００mg, １８５μmol)の溶液を、塩化チオニル(２７μｌ, ３７１μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣を２−メトキシエタノール(２ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(３５μｌ, ２０４μmol)で処理し、７０℃で１時間撹拌した。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、５０mg(理論値の５０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.75分; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.26 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.94 (s, 2H), 3.52-3.46 (m, 2H, 水のピークと重複), 3.44-3.37 (m, 2H, 水のピークと重複), 3.20 (s, 3H), 2.94-2.84 (m, 4H), 2.61-2.54 (m, 4H, ＤＭＳＯのピークと重複), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0258】

実施例２９
５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)−６−[(２,２,２−トリフルオロエトキシ)メチル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン蟻酸塩

【化141】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(１００mg, １８５μmol)の溶液を、塩化チオニル(２７μｌ, ３７１μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣を２,２,２−トリフルオロエタノール(２ml)に溶かし、ＤＩＰＥＡ(３５μｌ, ２０４μmol)で処理し、７０℃で１時間撹拌した。さらにＤＩＰＥＡ(３５μｌ, ２０４μmol)を加え、室温で１時間撹拌を続けた。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、２３mg(理論値の２３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.79分; MS (ESIpos): m/z = 521 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.28 (br. s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.08 (q, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 2.85-2.75 (m, 4H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0259】

実施例３０
６−[(２−アミノエトキシ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化142】

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ジクロロメタン(５ml)中の中間体２３Ａ(１５０mg, ２７８μmol)の溶液を、塩化チオニル(４０μｌ, ５５６μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣をＴＨＦ(０.５ml)に溶解し、(２−ヒドロキシエチル)カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル(１ml)およびＤＩＰＥＡ(２４２μｌ, １.３９mmol)で処理した。混合物を１００℃で一夜撹拌した。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン(１０ml)に溶かし、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１０ml)で処理し、室温で１時間撹拌した。揮発成分を減圧下で除去し、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによってさらに精製し(Shield RP18, ２５％ アセトニトリル／７５％ ０.０１％ＴＦＡ水溶液)、次に１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１０mg(理論値の６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.58分; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.12 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.88-3.80 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 3H), 3.52-3.46 (m, 4H), 3.40-3.34 (m, 4H), 3.07 (t, 2H), 2.51 (s, 3H) ppm.

【0260】

実施例３１
{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イル−メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メトキシ}酢酸メチル

【化143】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(５０mg, ９２μmol)の溶液を、塩化チオニル(１３μｌ, １８６μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣をグリコール酸メチル(１ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(８０μｌ, ４６４μmol)で処理し、７０℃で２時間撹拌した。蒸発後、残渣をジクロロメタン(１.６ml)に溶かし、トリフルオロ酢酸(４００μｌ, ５.１９mmol)で処理し、室温で１時間撹拌した。次いで、混合物を蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。表題化合物を含むフラクションを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、蒸発させた。残渣を水に溶かし、混合物をジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、２１mg(理論値の４３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.72分; MS (ESIpos): m/z = 511 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), 2.81-2.69 (m, 4H), 2.48-2.39 (m, 7H) ppm.

【0261】

実施例３２
{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メトキシ}酢酸

【化144】

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ＴＨＦ(１４ml)中の中間体２４Ａ(２００mg, ３２７μmol)の溶液を、２.５Ｍの水酸化リチウム水溶液(１６ml)で処理し、８０℃で２時間撹拌した。混合物を２７mgのテストランの反応混合物と合わせた。水相をＴＨＦで２回抽出し、合わせた有機相を蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶解し、室温で３時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再度精製し(XBridge C18, 濃度勾配 ５〜９５％ アセトニトリル／０.１％水酸化アンモニウム水溶液)、１３mg(理論値の７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.69分; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.00 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.79 (s, 2H), 2.99-2.89 (m, 4H), 2.73-2.63 (m, 4H), 2.44 (s, 3H) ppm.

【0262】

実施例３３
２−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メトキシ}アセトアミド

【化145】

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中間体２４Ａ(２００mg, ３２７μmol)を、メタノール中７Ｍのアンモニア溶液(１０ml)で処理し、室温で一夜撹拌した。混合物を２０mgのテストランの反応混合物と合わせ、溶媒を蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)で処理し、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって連続精製を行い(最初に Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液；次いで XBridge C18, 濃度勾配 ５〜９５％ アセトニトリル／０.１％水酸化アンモニウム水溶液)、５.５mg(理論値の３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.69分; MS (ESIpos): m/z = 496 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.14-7.59 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.35-7.22 (m, 3H), 6.85 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.79 (s, 2H), 2.73-2.66 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.35 (m, 4H) ppm.

【0263】

実施例３４
２−({７−[(４−アセチルピペラジン−１−イル)メチル]−４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル}メトキシ)アセトアミド

【化146】

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ＴＨＦ／ジクロロメタン(１：２.５, ３.９ml)中の実施例３３(１０５mg, 純度６８％, １４４μmol)の溶液を、炭酸ナトリウム(１７９mg, １.６mmol)で処理し、室温で３０分間撹拌した。塩化アセチル(３０μｌ, ４２４μmol)を加え、得られた混合物を室温で３０分間撹拌し、メタノール(２ml)で反応停止させ、蒸発させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、３０mg(純度８５％, 理論値の３４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.67分; MS (ESIpos): m/z = 538 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.33-7.19 (m, 3H), 6.85 (s, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.96 (s, 5H), 3.80 (s, 2H), 3.43-3.36 (m, 4H), 2.47-2.38 (m, 7H), 1.97 (s, 3H) ppm.

【0264】

実施例３５
５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−(フェノキシメチル)−７−(ピペラジン−１−イル−メチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 二蟻酸塩

【化147】

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ジクロロメタン(２ml)中の中間体２３Ａ(１００mg, １８５μmol)の溶液を、塩化チオニル(２７μｌ, ３７１μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣をＴＨＦ(２ml)に溶解し、フェノール(１７４mg, １.８５mmol)およびＤＩＰＥＡ(４８μｌ, ２７８μmol)で処理し、７０℃で２時間撹拌した。さらにフェノール(１７４mg, １.８５mmol)およびＤＩＰＥＡ(６４μｌ, ３７１μmol)を加え、７０℃で一夜撹拌を続けた。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶かし、室温で２時間撹拌した。蒸発させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、８mg(理論値の８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.84分; MS (ESIpos): m/z = 515 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.26 (s, 2H), 8.02 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.30-7.22 (m, 3H), 6.99-6.89 (m, 3H), 6.81 (m, 1H), 5.04 (s, 2H), 3.93 (s, 5H), 2.78-2.71 (m, 4H), 2.42 (s, 3H) ppm.

【0265】

実施例３６
５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−[(メチルアミノ)メチル]−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化148】

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ＴＨＦ(３ml)中の中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)を、酢酸(３２μｌ, ５５９μmol)、ＴＨＦ中２Ｍのメチルアミン溶液(６９８μｌ, １.３９mmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(２９６mg, １.３９mmol)で処理した。混合物を６０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１.８７ml)に溶解し、室温で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、７９mg(理論値の４９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.56分; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.17 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.48-3.39 (m, 4H), 3.25-3.15 (m, 4H), 2.59 (s, 3H), 2.51 (s, 3H) ppm.

【0266】

実施例３７
６−[(ジメチルアミノ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化149】

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ＴＨＦ(３ml)中の中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)の溶液を、酢酸(３２μｌ, ５５９μmol)、ＴＨＦ中２Ｍのジメチルアミン溶液(６９８μｌ, １.３９mmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(２９６mg, １.３９mmol)で処理した。混合物を６０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１.８８ml)に溶解し、室温で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、８３mg(理論値の５０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.50分; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.17 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.47-3.36 (m, 4H), 3.21-3.12 (m, 4H), 2.80 (s, 6H), 2.51 (s, 3H) ppm.

【0267】

実施例３８
６−[(エチルアミノ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化150】

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ＴＨＦ(１ml)中の中間体２５Ａ(６０mg, １１１.８μmol)の溶液を、ＴＨＦ中２Ｍのエチルアミン溶液(８３μｌ, １６７μmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(１１８mg, ５５９μmol)および酢酸(８３μｌ, １６７μmol)で処理した。混合物を６０℃で９０分間撹拌した。さらに２Ｍのエチルアミン溶液(８３μｌ, １６７μmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(７１mg, ３３５μmol)を加え、６０℃でさらに２時間撹拌を続けた。蒸発後、残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(３ml)に溶解し、室温で一夜撹拌した。混合物を蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥した。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって再度精製し(Sunfire C18, ２０％ アセトニトリル／８０％ ０.０２％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から再度凍結乾燥し、１９mg(理論値の２９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.56分; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.14 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.45 (s, 4H), 4.04 (s, 3H), 3.45-3.32 (m, 4H), 3.18-3.05 (m, 4H), 2.99 (q, 2H), 2.51 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) ppm.

【0268】

実施例３９
２−({[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)エタノール 三塩酸塩

【化151】

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ＴＨＦ(３ml)中の中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)の溶液を、２−アミノ−エタノール(８４μｌ, １.３９mmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(２９６mg, １.３９mmol)および酢酸(３２μｌ, ５５９μmol)で処理した。混合物を６０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１.８７ml)に溶解し、室温で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１４０mg(理論値の８０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.54分; MS (ESIpos): m/z = 482 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.15 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.79-3.71 (m, 2H), 3.42-3.34 (m, 4H), 3.19-3.12 (m, 2H), 3.06-2.97 (m, 4H), 2.51 (s, 3H) ppm.

【0269】

中間体２５Ａによる還元的アミノ化反応についての一般的な手順(ＧＰ１)：
ＴＨＦ中０.１Ｍの中間体２５Ａ溶液を、５当量の反応性アミン成分、５当量のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムおよび２当量の酢酸で処理した。得られた混合物を６０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液中、０.１５Ｍのこのようにして得られた残渣の溶液を室温で１〜２時間撹拌した。蒸発後、残渣を下記の通り精製した。

【0270】

実施例４０
ｒａｃ−１−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペリジン−３−オール 三塩酸塩

【化152】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)を、３−ヒドロキシピペリジン(１４１mg, １.３９mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１７８mg(定量的)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.54分; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.66-4.16 (m, 5H), 4.04 (s, 3H), 3.55-2.71 (m, 11H), 2.51 (s, 3H), 1.96-1.42 (m, 4H), 1.64-1.50 (m, 1H) ppm.

【0271】

実施例４１
１−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペリジン−４−オール 三塩酸塩

【化153】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)を、４−ヒドロキシピペリジン(１４１mg, １.３９mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１６２mg(理論値の９１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.48分; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.58 (br. s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.67-4.48 (m, 4H), 4.04 (s, 4H), 3.59-2.78 (m, 12H), 2.51 (s, 3H), 2.14-1.38 (m, 4H) ppm.

【0272】

実施例４２
ｒａｃ−１−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピロリジン−３−オール 三塩酸塩

【化154】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)を、３−ヒドロキシピロリジン(１１３μｌ, １.３９mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１４８mg(理論値の８５％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.46分; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.18 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.71-4.30 (m, 5H), 4.04 (s, 3H), 3.70-2.95 (m, 12H), 2.51 (s, 3H), 2.32-2.14 (m, 1H), 2.03-1.87 (m, 1H) ppm.

【0273】

実施例４３
６−[(ジエチルアミノ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化155】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)を、ジエチルアミン(１４４μｌ, １.３９mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１２７mg(理論値の６９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.55分; MS (ESIpos): m/z = 494 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.19 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.47-3.35 (m, 4H), 3.29-3.00 (m, 8H), 2.51 (s, 3H), 1.07 (t, 6H) ppm.

【0274】

実施例４４
６−[(シクロブチルアミノ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化156】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)を、シクロブチルアミン(１１９μｌ, １.３９mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１２７mg(理論値の７２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.58分; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.69-3.58 (m, 1H), 3.44-3.33 (m, 4H), 3.21-3.12 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 2.02-1.87 (m, 4H), 1.81-1.62 (m, 2H) ppm.

【0275】

実施例４５
５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)−６−(ピロリジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化157】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(１５０mg, ２７９μmol)を、ピロリジン(１１６μｌ, １.３９mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１１２mg(理論値の６４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.54分; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.19 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.70-4.61 (m, 4H), 4.04 (s, 3H), 3.55-3.40 (m, 6H), 3.35-3.26 (m, 4H), 3.02-2.87 (m, 2H), 2.51 (s, 3H), 1.97-1.83 (m, 4H) ppm.

【0276】

実施例４６
６−[(シクロプロピルアミノ)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化158】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(２００mg, ３７２μmol)をシクロプロピルアミン(１２９μｌ, １.８６mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１４０mg(理論値の６２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.42分; MS (ESIpos): m/z = 478 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.16 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.47 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.46-3.34 (m, 4H), 3.19-3.07 (m, 4H), 2.61-2.54 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 0.75-0.64 (m, 4H) ppm.

【0277】

実施例４７
６−{[(シクロプロピルメチル)アミノ]メチル}−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化159】

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ＧＰ１に従って、中間体２５Ａ(２００mg, ３７２μmol)を、シクロプロピルメチルアミン(１６１μｌ, １.８６mmol)と反応させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１６３mg(理論値の６９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.60分; MS (ESIpos): m/z = 492 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.14 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.42-3.34 (m, 4H), 3.16-3.07 (m, 4H), 2.86 (d, 2H), 2.50 (s, 3H), 0.89-0.76 (m, 1H), 0.55-0.45 (m, 2H), 0.23-0.14 (m, 2H) ppm.

【0278】

実施例４８
Ｎ−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}グリシン 三塩酸塩

【化160】

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ＴＨＦ(３.２ml)中の中間体２５Ａ(１６１mg, ３００μmol)の溶液を、２−アミノ酢酸(１１２mg, １.５mmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(３１７mg, １.５mmol)および酢酸(３４μｌ, ６００μmol)で処理した。得られた混合物を６０℃で２時間撹拌し、蒸発させた。残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物を、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)に溶解し、室温で１時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。続いて、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、１８mg(理論値の９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.63分; MS (ESIpos): m/z = 496 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, D₂O): δ = 8.14 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.36 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.42-3.33 (m, 4H), 3.07-2.96 (m, 4H), 2.50 (s, 3H) ppm.

【0279】

実施例４９
４−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン 三塩酸塩

【化161】

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１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)中の、中間体２７Ａ(２２０mg, ３５４μmol)の溶液を、室温で２時間撹拌した。次いで、混合物を蒸発させ、２３５mgの粗生成物を得た。これをさらに精製することなく次の工程に用いた。
LC-MS (方法４): R_t = 0.60分; MS (ESIpos): m/z = 521 (M+H)⁺.

【0280】

実施例５０
[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(モルホリン−４−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メタノール

【化162】

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ＤＭＦ(２８ml)中の中間体２０Ａ(５００mg, 純度８７％, １.２８mmol)および４−メチレンモルホリン−４−イウム クロリド(３４７mg, ２.５６mmol)の溶液を、７０℃で１.５時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で、そして飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で蒸発させ、７１０mg(純度７８％, 理論値の９９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.65分; MS (ESIpos): m/z = 440 (M+H)⁺.

【0281】

実施例５１
(３Ｓ)−３−({[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(モルホリン−４−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)ピロリジン−２−オン

【化163】

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メタノール(２ml)中の中間体３３Ａ(６５mg, １４９μmol)の溶液を、(３Ｓ)−３−アミノピロリジン−２−オン(４５mg, ４４６μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(４７mg, ７４３μmol)および酢酸(２６μｌ, ４４６μmol)で処理した。６０℃で１６時間撹拌した後、得られた混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、４９mg(理論値の６３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.71分; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.96 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.5-8.1 (br. s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.4-6.0 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (s, 2H), 3.75 (d, 2H), 3.50-3.66 (m, 4H), 3.06-3.19 (m, 3H), 2.94-3.05 (m, 1H), 2.61 (t, 1H), 2.45 (t, 3H), 2.38-2.44 (m, 4H), 1.89-1.99 (m, 1H), 1.49-1.60 (m, 1H) ppm.

【0282】

実施例５２
４−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(モルホリン−４−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化164】

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メタノール(２ml)中の中間体３３Ａ(６５mg, １４９μmol)の溶液を、２−オキソピペラジン(４５mg, ４４６μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(４７mg, ７４３μmol)および酢酸(２６μｌ, ４４６μmol)で処理した。６０℃で１６時間撹拌した後、得られた混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、４１mg(理論値の５３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.97 (s, 1H), 7.67 (br. s, 1H), 7.55-8.05 (br. s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.29-5.88 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.92 (s, 2H), 3.58 (s, 2H), 3.51-3.56 (m, 4H), 3.00-3.06 (m, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.43-2.48 (m, 5H) ppm.

【0283】

実施例５３
ｒａｃ−１−({[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(モルホリン−４−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)プロパン−２−オール

【化165】

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メタノール(２ml)中の中間体３３Ａ(６４mg, １４６μmol)の溶液を、ｒａｃ−１−アミノプロパン−２−オール(３３mg, ４３９μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(４６mg, ７３１μmol)および酢酸(２５μｌ, ４３９μmol)で処理した。６０℃で１６時間撹拌した後、得られた混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、４２mg(理論値の５７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.63分; MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.96 (s, 1H), 7.47-7.92 (br. s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.36-5.92 (br. s, 1H), 4.36 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.64-3.75 (m, 2H), 3.49-3.61 (m, 5H), 2.45 (s, 3H), 2.39-2.47 (m, 4H), 2.31-2.38 (m, 2H), 0.97 (d, 3H) ppm.

【0284】

実施例５４
１−({[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(モルホリン−４−イルメチル)−ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)−２−メチルプロパン−２−オール

【化166】

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メタノール(２ml)中の中間体３３Ａ(８０mg, １８３μmol)の溶液を、１−アミノ−２−メチルプロパン−２−オール(３４mg, ２７４μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(５７mg, ９１４μmol)および酢酸(２１μｌ, ３６６μmol)で処理した。６０℃で１６時間撹拌した後、得られた混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、２９mg(理論値の３１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.65分; MS (ESIpos): m/z = 511 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.96 (s, 1H), 7.50-8.02 (br. s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.4-6.0 (br. s, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 3.70 (d, 2H), 3.51-3.58 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.39-2.46 (m, 4H), 2.33 (d, 2H), 1.83-1.92 (m, 1H), 1.03 (s, 6H) ppm.

【0285】

実施例５５
１−(４−{[４−アミノ−６−(ヒドロキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−イル)エタノン

【化167】

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酢酸(５ml)中の中間体２０Ａ(３４５mg, １.０１mmol)の溶液を、３７％のホルムアルデヒド水溶液(９１μｌ, １.２２mmol)および１−アセチルピペラジン(１６０mg, １.２２mmol)で処理した。混合物を６０℃で６時間撹拌し、蒸発させた。残渣をＴＨＦ／１Ｍ水酸化リチウム水溶液(１：１, １０ml)の混合物に溶解し、室温で２時間撹拌した。混合物を１００mgのテストランの反応混合物と合わせて、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で蒸発させ、６７８mg(純度８７％, 理論値の９４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.71分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)⁺.

【0286】

実施例５６
(３Ｒ)−３−[({７−[(４−アセチルピペラジン−１−イル)メチル]−４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル}メチル)アミノ]ピロリジン−２−オン

【化168】

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メタノール(１.４ml)中の中間体３１Ａ(８０mg, １６７μmol)の溶液を、(３Ｒ)−３−アミノピロリジン−２−オン(２１mg, ２５１μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(５２mg, ８３６μmol)および酢酸(１９μｌ, ３３４μmol)で処理した。６０℃で１６時間撹拌した後、得られた混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、４６mg(理論値の４９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 563 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.42 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.93-8.24 (br. s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.75-6.07 (br. s, 1H), 4.21-4.37 (m, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.10 (t, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.56-3.66 (m, 2H), 3.44-3.54 (m, 4H), 3.11-3.27 (m, 4H), 2.47 (s, 4H), 2.16-2.25 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.86-1.95 (m, 1H) ppm.

【0287】

実施例５７
１−(４−{[４−アミノ−６−{[(２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル)アミノ]メチル}−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−１−イル)エタノン

【化169】

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メタノール(２ml)中の中間体３１Ａ(８０mg, １８３μmol)の溶液を、１−アミノ−２−メチルプロパン−２−オール(３１mg, ２５１μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(５３mg, ８３６μmol)および酢酸(１９μｌ, ３３４μmol)で処理した。６０℃で１６時間撹拌した後、得られた混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、２９mg(理論値の３１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.71分; MS (ESIpos): m/z = 552 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.96 (s, 1H), 7.59-8.02 (br. s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.45-5.93 (br. s, 1H), 4.13 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.93 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.37-3.44 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.32-2.43 (m, 6H), 1.97 (s, 3H), 1.03 (s, 6H) ppm.

【0288】

実施例５８
４−({４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−[(３−オキソピペラジン−１−イル)−メチル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル}メチル)ピペラジン−１−カルボアルデヒド蟻酸塩

【化170】

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無水酢酸(４９８μｌ, ５.１７mmol)および蟻酸(２３７μｌ, ６.２８mmol)を、最初に５０℃で２時間、次いで室温で一夜撹拌した。続いて、混合物をジクロロメタン(５.１ml)で希釈し、１.１６mlのこの溶液を、ピリジン(８９μｌ)中の実施例４９(２３３mg, ３７０μmol)の溶液に加えた。室温で２時間撹拌した後、混合物をメタノールで希釈し、蒸発させた。残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、７７mg(理論値の３５％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.62分; MS (ESIpos): m/z = 549 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.14 (s, 1H), 7.97 (s, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.58 (s, 2H), 3.04 (br. t, 2H), 2.86 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.42 (br. t, 2H) ppm.

【0289】

実施例５９
４−({７−[(４−アセチルピペラジン−１−イル)メチル]−４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル}メチル)ピペラジン−２−オン

【化171】

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ジクロロメタン／ＴＨＦ(２.５：１, ９.６４ml)中の実施例４９(３１０mg, ５２２μmol)の懸濁液を、炭酸ナトリウム(４４２mg, ４.１７mmol)で処理し、室温で３０分間撹拌した。塩化アセチル(７４μｌ, １.０４mmol)を加え、得られた混合物を室温で２時間撹拌した。メタノールで反応停止させた後、混合物を蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、１３３mg(理論値の４５％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.69分; MS (ESIpos): m/z = 563 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, メタノール-d₄): δ = 7.89 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.13 (s, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.74 (s, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.54 (t, 2H), 3.18 (t, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.68-2.55 (m, 6H), 2.48 (s, 3H), 2.08 (s, 3H) ppm.

【0290】

実施例６０
４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルカルボニル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−カルボン酸メチル 二蟻酸塩

【化172】

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ＴＨＦ／メタノール混合物(５：１, １８０μｌ)中の中間体２８Ａ(１５mg, ２６μmol)の０℃に冷却した溶液に、(トリメチルシリル)ジアゾメタン(ヘキサン中２Ｍの溶液, １５μｌ, ３２μmol)を加えた。得られた混合物を３０分かけてゆっくりと室温まで温め、次いで蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(０.５ml)に溶解し、室温で１時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、４.８mg(理論値の３５％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.66分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.17 (s, 2H), 8.38-8.23 (br. s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.71-5.58 (br. s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.60 (s, 3H, 水のピークと重複), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0291】

実施例６１
５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−(１,３−オキサゾール−５−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化173】

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メタノール(３.３３ml)中の中間体２５Ａ(１００mg, ０.１９mmol)の溶液を、(４−トルエンスルホニル)メチルイソシアニド(３６mg, ０.１９mmol)および炭酸カリウム(２５mg, １８６μmol)で処理した。混合物を６時間還流した。次いで、それを３つの３０mgのテストランの反応混合物と合わせて、蒸発させた。残渣を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(１０ml)に溶解し、室温で２時間撹拌した。蒸発後、残渣を２倍分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。さらに、シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ５：１, ０.５％アンモニア水溶液含有)、１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、７５mg(理論値の３４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.69分; MS (ESIpos): m/z = 476 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.40 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0292】

実施例６２
６−(アミノメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化174】

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メタノール中０.５Ｍの塩化水素溶液(２０ml)中の中間体２９Ａ(７６mg, １３４μmol)および１０％ Ｐｄ／Ｃ(６０mg)の懸濁液を、１atmの水素下、室温で３時間撹拌した。次いで、混合物を珪藻土で濾過し、濾液を蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物を１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液から凍結乾燥し、３４mg(理論値の４６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.55分; MS (ESIpos): m/z = 438 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.24 (br. s, 3H), 8.12 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.76-3.63 (m, 1H), 3.52-3.42 (m, 1H), 2.47 (s, 3H) ppm.

【0293】

実施例６３
Ｎ−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アセトアミド ビス(トリフルオロアセテート)

【化175】

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ジクロロメタン(２６ml)中の中間体３０Ａ(２１０mg, ３６２μmol)の溶液を、トリフルオロ酢酸(５.２ml)で処理し、室温で１時間撹拌した。室温で蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)、１６３mg(理論値の６３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法３): R_t = 2.42分; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 9.00-8.75 (br. s, 1H), 8.30-8.16 (br. s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.32 (br. d, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.40-2.98 (m, 8H), 2.46 (s, 3H), 1.77 (s, 3H) ppm.

【0294】

実施例６４
Ｎ−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アセトアミド 二塩酸塩

【化176】

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ジクロロメタン(１０ml)およびトリフルオロ酢酸(２ml)中の中間体３０Ａ(８０mg, ０.１４mmol)の溶液を、室温で１時間撹拌し、蒸発させた。分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、メタノールおよび１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液の混合物から凍結乾燥し、３９mg(理論値の５０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.56分; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 8.12 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 4.37 (br. d, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.85-3.20 (m, 8H, 水のピークと重複), 2.46 (s, 3H), 1.76 (s, 3H) ppm.

【0295】

実施例６５
Ｎ−({４−アミノ−７−[(４−ホルミルピペラジン−１−イル)メチル]−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル}メチル)アセトアミド蟻酸塩

【化177】

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無水酢酸(３０４μｌ, ３.１６mmol)および蟻酸(１４５μｌ, ３.１６mmol)を、最初に５０℃で２時間、次いで室温で一夜撹拌した。続いて、混合物をジクロロメタン(３.１ml)で希釈し、６６３μｌのこの溶液をピリジン(５４μｌ)中の実施例６３(１６０mg, ２２６μmol)の溶液に加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、メタノール(１ml)で希釈し、４０℃でさらに２時間撹拌を続けた。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、７４mg(理論値の６１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.65分; MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.13 (s, 1H), 8.06-7.89 (m, 3H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.28 (d, 2H), 4.01-3.88 (m, 5H), 2.47-2.34 (m, 7H), 1.75 (s, 3H) ppm.

【0296】

実施例６６
Ｎ−({７−[(４−アセチルピペラジン−１−イル)メチル]−４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル}メチル)アセトアミド

【化178】

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ＴＨＦ／ジクロロメタン(１：２, ３ml)中の実施例６３(１１０mg, ２２９μmol)および塩化アセチル(３２μｌ, ４５８μmol)の溶液を、炭酸ナトリウム(１９４mg, １.８３mmol)で処理し、室温で一夜撹拌した。次いで、混合物をメタノール(２ml)および水(１ml)で希釈し、室温で１時間撹拌した。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。１,４−ジオキサンから凍結乾燥し、再度シリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ５０：１→１００％ メタノール)、３５mg(理論値の２８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.04-7.98 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.27 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (s, 2H), 3.44-3.36 (m, 4H), 2.48-2.35 (m, 7H), 1.98 (s, 3H), 1.75 (s, 3H) ppm.

【0297】

実施例６７
Ｎ−({４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−[(３−オキソピペラジン−１−イル)メチル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル}メチル)アセトアミド

【化179】

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メタノール(４.１ml)中の中間体３２Ａ(３５mg, ７３μmol)の懸濁液を、無水酢酸(１３μｌ, １４６μmol)および１０％ Ｐｄ／Ｃ(４１mg)で処理し、１atmの水素下、室温で１時間撹拌した。珪藻土で濾過し、濾液を蒸発させ、３０mg(理論値の７９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.65分; MS (ESIpos): m/z = 494 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 2H), 7.75 (br. s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.27 (s, 1H), 4.26 (s, 1H), 3.95 (s, 5H), 3.19-3.08 (m, 2H), 3.05-2.96 (m, 2H), 2.66-2.57 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.72 (s, 3H) ppm.

【0298】

実施例６８
４−アミノ−６−(ヒドロキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化180】

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ＴＨＦ(１０ml)中の中間体３８Ａ(１ｇ, ２.０８mmol)の溶液を、ＴＨＦ中１Ｍのフッ化 テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム溶液(１２ml, １２mmol)で処理した。混合物を室温で一夜撹拌し、蒸発させた。残渣を水に溶かし、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させた。残渣をｔｅｒｔ−ブチル メチル エーテル中で磨砕し、固体を濾過し、６８０mg(理論値の７８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.95分; MS (ESIpos): m/z = 366 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.61-8.29 (br. s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.32-6.03 (br. s, 1H), 5.46 (t, 1H), 4.55 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0299】

実施例６９
４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化181】

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ジクロロメタン(５ml)中の実施例６８(６０mg, １６４μmol)の溶液を、塩化チオニル(１８μｌ, ２４６μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、蒸発させた。残渣をメタノールに溶解し(２ml)、ＤＩＰＥＡ(５７μｌ, ３２８μmol)で処理した。混合物を最初６０℃で２時間撹拌し、次いで一夜還流し、最後にマイクロ波装置中、１５０℃で３０分間加熱した。この後、混合物を蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、１８mg(理論値の２８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 1.12分; MS (ESIpos): m/z = 379 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.61-8.40 (br. s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.34-6.09 (br. s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0300】

実施例７０
４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化182】

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ジクロロメタン(５ml)中の実施例６８(６０mg, １６４μmol)の溶液を、塩化チオニル(１８μｌ, ２４６μmol)で処理した。混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで蒸発させた。残渣をエタノール(２ml)に溶解し、ＤＩＰＥＡ(５７μｌ, ３２８μmol)で処理した。混合物を６０℃で一夜撹拌し、次いで、マイクロ波装置中、１５０℃で３０分間加熱した。この後、混合物を蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をエタノール(２ml)に溶解し、再度、マイクロ波オーブン中、１５０℃で３０分間加熱した。ＤＩＰＥＡ(５７μｌ, ３２８μmol)を加え、マイクロ波オーブン中、１５０℃でさらに３０分間加熱し続けた。蒸発後、残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーによって精製し(ジクロロメタン／メタノール ９５：５)、１６mg(理論値の２３％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.18分; MS (ESIpos): m/z = 393 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.61-8.38 (br. s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.33-6.08 (br. s, 1H), 4.51 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.45 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) ppm.

【0301】

実施例７１
４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−[(３−オキソピペラジン−１−イル)メチル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボニトリル

【化183】

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ＴＨＦ(０.７３ml)中の中間体３９Ａ(２０mg, ５５μmol)の溶液を、酢酸(６μｌ, １１０μmol)、２−オキソピペラジン(２７mg, ２７５μmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(５８mg, ２７５μmol)で処理した。室温で３時間撹拌した後、さらにＴＨＦ(１ml)、酢酸(６μｌ, １１０μmol)、２−オキソピペラジン(２７mg, ２７５μmol)およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(５８mg, ２７５μmol)を加え、室温で一夜撹拌を続けた。蒸発後、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、１３mg(理論値の５２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.86分; MS (ESIpos): m/z = 447 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.60-8.31 (br. s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.25-5.98 (br. s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.91 (s, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0302】

実施例７２
Ｎ,Ｎ'−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６,７−ジイル]ビス(メチレン)}ジアセトアミド

【化184】

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メタノール(１２ml)中の中間体４０Ａ(粗製, ８５mg)、１０％ Ｐｄ／Ｃ(１１５mg)および無水酢酸(４０μｌ, ４３５μmol)の懸濁液を、１atmの水素下、室温で撹拌した。４時間後、さらに１０％ Ｐｄ／Ｃ(１１５mg)および無水酢酸(４０μｌ, ４３５μmol)を加え、１atmの水素下、室温で２時間撹拌を続けた。得られた混合物を珪藻土で濾過し、濾液を蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、１８mg(理論値の１８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.73分; MS (ESIpos): m/z = 452 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.29 (br. t, 1H), 8.04 (br. t, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.58 (d, 2H), 4.26 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.74 (s, 3H) ppm.

【0303】

実施例７３
２−[４−アミノ−６−(ヒドロキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]プロパン−２−オール

【化185】

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ＴＨＦ／水(１０：１, １１ml)中の中間体４３Ａ(１８０mg, ５９８μmol)、中間体６Ａ(２９９mg, ８９７μmol)およびフッ化セシウム(４５４mg, ２.９９mmol)の懸濁液を含むフラスコを、減圧下で脱気し、アルゴンを再充填した。４−(ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ)−Ｎ,Ｎ−ジメチルアニリン−ジクロロパラジウム(２：１, １３mg, １８μmol)を加えた。得られた混合物を再度脱気し、アルゴン下、５０℃で１６時間撹拌した。この後、反応混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ３０〜５０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションをメタノール中７Ｍのアンモニア溶液で希釈し、減圧下で濃縮した。沈殿物を濾過して取り、水で洗浄し、真空で乾燥し、９９mg(理論値の４２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.89分; MS (ESIpos): m/z = 399 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.96 (s, 1H), 7.51-8.02 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 5.23-5.82 (br. s, 1H), 5.04 (t, 1H), 4.53 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.73 (s, 6H) ppm.

【0304】

実施例７４
４−{[４−アミノ−７−(２−ヒドロキシプロパン−２−イル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化186】

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メタノール(４ml)中の中間体４４Ａ(５０mg, 純度７３％, ９２μmol)の溶液を、２−オキソピペラジン(２８mg, ２７６μmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム(２３mg, ３６８μmol)および酢酸(２１μｌ, ３６８μmol)で処理した。混合物を、最初に６０℃で１８時間、室温で３日間撹拌した。この後、混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションをメタノール中７Ｍのアンモニア溶液で希釈し、減圧下で蒸発させた。残渣を酢酸エチルに溶解し、水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を１,４−ジオキサンに溶解し、凍結乾燥し、２４mg(理論値の５２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.85分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.73-8.01 (br. s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.2-5.7 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.57 (s, 2H), 3.14 (br. s, 2H), 2.60 (br. s, 4H), 2.46 (s, 3H), 1.70 (br. s, 6H) ppm.

【0305】

実施例７５
[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メタノール

【化187】

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アルゴン雰囲気下、フラスコに、１６５mg(０.６４mmol)の中間体５３Ａ、１４３mg(０.６４mmol)の中間体５Ａ、２５mg(０.０３mmol)の(２'−アミノビフェニル−２−イル)−(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照のこと)および４０９mg(１.９３mmol)のリン酸カリウムを入れた。次いで、７mlの１,４−ジオキサンおよび水(５：１)の脱気した混合物を加え、溶液を７０℃で１時間撹拌した。さらに中間体５Ａ(１４２mg, ０.６４mmol)および(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１０mg, ０.０１２mmol)を加え、１時間撹拌を続けた。この後、反応混合物を減圧下で一部蒸発させ、水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機相を減圧下で蒸発させ、残渣をアセトニトリルで磨砕した。沈殿物を濾過し、真空で乾燥し、１８０mg(ＬＣ−ＭＳによる純度９２％, 理論値の７３％)の表題化合物を得た。濾液から、第２バッチ(４１mg, 理論値の１８％)を、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって得た(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。
総収率：理論値の９１％
LC-MS (方法５): R_t = 1.92分; MS (ESIpos): m/z = 355 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.95 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.82 (t, 1H), 4.44 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0306】

実施例７６
４−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化188】

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ＴＨＦ(１.５ml)中の５５mg(０.１６mmol)の中間体５４Ａの懸濁液を、７８mg(０.７８mmol)のピペラジン−２−オン、１８μｌ(０.３１mmol)の酢酸および１６６mg(０.７８mmol)のトリアセトキシ水素化ホウ素塩で処理した。混合物を環境温度で一夜撹拌した。次いで、１.５mlの水を加え、大部分のＴＨＦ溶媒を減圧下で蒸発させた。残った混合物をさらに水で希釈し、沈殿した固体を濾過して取り、乾燥させた(３５mg)。この物質をさらに分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)。生成物のフラクションを固体炭酸カリウムでｐＨ ９に調節し、減圧下で一部濃縮した。沈殿した固体を濾過し、４５℃で真空で乾燥し、１６mg(理論値の２４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.74分; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.95 (s, 1H), 7.66 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.50 (s, 2H), 3.05 (m, 2H), 2.84 (s, 2H), 2.45 (m, 5H) ppm.

【0307】

実施例７７
１−({[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)−２−メチルプロパン−２−オール蟻酸塩

【化189】

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ＴＨＦ(１.５ml)中の５５mg(０.１６mmol)の中間体５４Ａの懸濁液を、９８mg(０.７８mmol)の１−アミノ−２−メチルプロパン−２−オール塩酸塩、３９mg(０.４７mmol)の酢酸ナトリウムおよび１６６mg(０.７８mmol)のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムで処理した。混合物を環境温度で一夜撹拌した。次いで、１.５mlの水を加え、混合物を減圧下で蒸発させた。残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、３８mg(理論値の５２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法５): R_t = 1.68分; MS (ESIpos): m/z = 426 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.19 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.34 (s, 2H), 1.02 (s, 6H)ppm.

【0308】

実施例７８
１−({[４−アミノ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−メチルピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)−２−メチルプロパン−２−オール

【化190】

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３mlのメタノール中の２９mg(０.０６mmol)の実施例７７の溶液を、予め２mlのメタノールで調整したStratospheres SPE PL-HCO₃ MP-樹脂カートリッジに通した。カートリッジを４mlのメタノールで洗浄し、溶出液を蒸発させ、２１.５mg(理論値の８２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.68分; MS (ESIpos): m/z = 426 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.94 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.63-3.75 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.32 (m, 3H), 1.42-1.56 (m, 1H), 1.02 (s, 6H) ppm.

【0309】

実施例７９
[４−アミノ−７−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メタノール

【化191】

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５mlのＴＨＦ中の中間体４８Ａ(１１７mg, ０.２４mmol)の溶液を５mlの濃塩酸で処理し、環境温度で一夜撹拌した。次いで、１２mlの５Ｍ 水酸化ナトリウム水溶液および酢酸エチルを加え、層を分離し、水層を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、３０mg(理論値の３４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.90分; MS (ESIpos): m/z = 375 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.04 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.02 (t, 1H), 4.43 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0310】

９.２mg(理論値の１０％)の７−クロロ−６−(クロロメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミンを副生成物として単離した(中間体５０Ａ参照)。

【0311】

実施例８０
４−{[４−アミノ−７−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化192】

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表題化合物を、４０mg(０.１１mmol)の中間体４９Ａから出発して、実施例７６の手順に従って製造した。
収量：２７mg(理論値の５５％).
LC-MS (方法２): R_t = 0.86分; MS (ESIpos): m/z = 457 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.05 (s, 1H), 7.68 (br. s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.52 (s, 2H), 3.05 (br. s, 2H), 2.86 (s, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0312】

実施例８１
１−({[４−アミノ−７−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)−２−メチルプロパン−２−オール蟻酸塩

【化193】

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表題化合物を、４０mg(０.１１mmol)の中間体４９Ａから出発して、実施例７７の手順に従って製造した。
収量：２４mg(理論値の４５％).
LC-MS (方法２): R_t = 0.73分; MS (ESIpos): m/z = 446 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.15 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.73 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.32 (s, 2H), 1.00 (s, 6H) ppm.

【0313】

実施例８２
１−({[４−アミノ−７−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}アミノ)−２−メチルプロパン−２−オール

【化194】

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表題化合物を、実施例８１から、実施例７８の手順に従って製造した。
LC-MS (方法２): R_t = 0.72分; MS (ESIpos): m/z = 446 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.04 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.09 (br. s, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.71 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.31 (s, 2H), 1.44-1.64 (m, 1H), 1.00 (s, 6H) ppm.

【0314】

実施例８３
７−クロロ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン

【化195】

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８.２mg(０.０２mmol)の中間体５０Ａを１mlのエタノールに懸濁し、４１μｌ(０.１１mmol)のエタノール中２.６８Ｍのナトリウム エタノレート溶液で処理し、１分間還流した。透明な溶液を蒸発させ、粗生成物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、５mg(理論値の５６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 1.25分; MS (ESIpos): m/z = 402 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.06 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.40 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.06 (t, 3H)ppm.

【0315】

実施例８４
５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−メチル−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン蟻酸塩

【化196】

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１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液(２ml)中の中間体５７Ａ(１００mg, １９１μmol)の溶液を、室温で３時間撹拌し、蒸発させた。２倍分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％蟻酸水溶液)、７１mg(理論値の６７％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.81分; MS (ESIpos): m/z = 423 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 8.46 (br. s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.27 (s, 1H, ＣＨＣｌ_３のピークと重複), 7.18 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.97 (s, 2H), 3.18-3.09 (m, 4H), 2.82-2.73 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.24 (s, 3H) ppm.

【0316】

実施例８５
６−クロロ−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−７−(ピペラジン−１−イルメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−４−アミン 三塩酸塩

【化197】

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中間体６０Ａ(６５mg, ０.１２mmol)を、１mlの１,４−ジオキサン中４Ｍの塩化水素溶液中で２時間室温で撹拌した。懸濁液を蒸発乾固し、粗生成物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製し(Reprosil C18, 濃度勾配 １０〜９５％ アセトニトリル／０.１％塩酸水溶液)、４９mg(理論値の７４％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.81分; MS (ESIpos): m/z = 443 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 9.56 (br. s, 1H), 8.45 (br. s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.30 (br. s, 1H), 4.63 (br. s, 1H), 3.40 (br. s, 8H), 2.46 (s, 3H) ppm.

【0317】

実施例８６
[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ]−[１,２,４]トリアジン−７−イル]メタノール

【化198】

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表題化合物(３６０mg)を、実施例５の製造における副生成物として、製造方法１によって得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.99分; MS (ESIpos): m/z = 399 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.09-7.72 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.05-5.48 (br. s, 1H), 5.04 (br. s, 1H), 4.81 (d, 2H), 4.47 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.39 (q, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.05 (t, 3H) ppm.

【0318】

実施例８７
１−{[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}イミダゾリジン−２−オン

【化199】

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ＴＨＦ(５ml)中の中間体６３Ａ(１００mg, ０.２２１mmol)の懸濁液を、イミダゾリジン−２−オン(５７mg, ０.６６２mmol)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(１５３μｌ, ０.９２６mmol)で処理し、混合物を、マイクロ波オーブン中、１５０℃で９０分間加熱した。この後、反応混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ４０〜６０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。このようにして得られた生成物をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させた。生成物をもう一度シリカゲルの分取薄層クロマトグラフィーによって精製し(シクロヘキサン／酢酸エチル ３：１)、２４mg(理論値の２２％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.99分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.21-7.65 (br. s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.04-5.56 (br. s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.38 (q, 2H), 3.31-3.10 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.06 (t, 3H) ppm.

【0319】

実施例８８
４−{[４−アミノ−５−(７−メトキシ−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−(メトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化200】

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脱気したＴＨＦ／水(１０：１, ２.２ml)中の、中間体６２Ａ(７２.６mg, １９７μmol)、(７−メトキシ−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−ボロン酸(４５mg, ２１６μmol)およびフッ化セシウム(１４９mg, ９８３μmol)の溶液に、アルゴン下、(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, ７.７mg, ９.８μmol, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照のこと)を加えた。得られた混合物を再度脱気し、アルゴン下、６０℃で３時間撹拌した。この後、混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、３１mg(理論値の３５％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.71分; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.00 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.61-8.23 (br. s, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.40 (t, 1H), 6.99 (d, 1H), 5.57-6.11 (br. s, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.98 (s, 5H), 3.20 (s, 3H), 3.11 (br. m, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.62-2.67 (m, 2H) ppm.

【0320】

実施例８９
４−{[４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化201】

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脱気したＴＨＦ／水(１０：１, ４.４ml)中の、中間体６２Ａ(５０mg, １３５μmol)、(５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−ボロン酸(２８.６mg, １４９μmol)およびフッ化セシウム(１０３mg, ６７７μmol)の溶液に、アルゴン下、(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, ５.３mg, ６.８μmol, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照のこと)を加えた。得られた混合物を再度脱気し、アルゴン下、６０℃で１６時間撹拌した。この後、混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ３０〜５０％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、２７mg(理論値の４５％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.79分; MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.00 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.58-8.18 (br. s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.24 (dd, 1H), 5.58-6.03 (m, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.11 (br. t, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.64 (t, 2H), 2.44 (s, 3H) ppm.

【0321】

実施例９０
１−[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]エタノール

【化202】

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アルゴン下、ＴＨＦ中１Ｍの臭化 メチルマグネシウム溶液(６３０μｌ, ６３０μmol)を、室温で、ＴＨＦ(１０ml)中の中間体１７Ａ(１００mg, ２５２μmol)の溶液に滴下した。混合物を室温で３時間撹拌し、さらにＴＨＦ中の臭化 メチルマグネシウム(１７７μｌ, １７７μmol)で処理した。反応混合物をさらに１６時間撹拌し、次いで、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応停止させ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ４０〜６０％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させ、３９mg(理論値の３６％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 1.07分; MS (ESIpos): m/z = 413 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.95 (s, 1H), 7.56-8.07 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.46-5.54 (m, 1H), 5.37-5.95 (br. s, 1H), 5.26 (d, 1H), 4.67 (d, 1H), 4.38 (d, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.38 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.52 (d, 3H), 1.05 (t, 3H) ppm.

【0322】

実施例９１
[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル](シクロプロピル)メタノール

【化203】

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アルゴン下、ＴＨＦ中０.５Ｍの臭化 シクロプロピルマグネシウム溶液(１.２６ml, ６３０μmol)を、室温で、ＴＨＦ(５ml)中の中間体１７Ａ(１００mg, ２５２μmol)の溶液に滴下した。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで飽和塩化アンモニウム水溶液で反応停止させ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ５０〜７０％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させ、１０mg(理論値の１０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 1.13分; MS (ESIpos): m/z = 439 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.94 (s, 1H), 7.68-8.04 (br. s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.47-5.89 (br. s, 1H), 5.30 (d, 1H), 4.64 (d, 1H), 4.59-4.67 (m, 1H), 4.39 (d, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.38 (q, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.54-1.64 (m, 1H), 1.04 (t, 3H), 0.51-0.59 (m, 1H), 0.40-0.47 (m, 1H), 0.28-0.38 (m, 2H) ppm.

【0323】

実施例９２
(３Ｓ)−３−({[４−アミノ−６−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}アミノ)ピロリジン−２−オン

【化204】

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ＴＨＦ(２ml)中の中間体１３Ａ(１００mg, ０.２３３mmol)の懸濁液を、(Ｓ)−３−アミノピロリジン−２−オン(３５mg, ０.３４９mmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(１４８mg, ０.６９８mmol)および酢酸(２６.６μｌ, ０.４６５mmol)で処理した。得られた混合物を室温で３時間撹拌し、直接分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ４０〜６０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、５６mg(理論値の５１％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.72分; MS (ESIpos): m/z = 467 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.01 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 4.48 (d, 2H), 4.43 (d, 2H), 4.24-4.02 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.26-2.99 (m, 6H), 2.45 (s, 3H), 2.40-2.27 (m, 1H), 1.82-1.64 (m, 1H) ppm.

【0324】

実施例９３
(３Ｓ)−３−({[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}アミノ)ピロリジン−２−オン

【化205】

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ＴＨＦ(２ml)中の中間体１７Ａ(１００mg, ０.２５２mmol)の懸濁液を、(Ｓ)−３−アミノピロリジン−２−オン(３８mg, ３７８μmol)、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム(１６０mg, ７５７μmol)および酢酸(３０μｌ, ５０４μmol)で処理した。得られた混合物を室温で３時間撹拌し、直接分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した(Reprosil C18, 濃度勾配 ３０〜５０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、８４mg(理論値の６９％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法４): R_t = 0.75分; MS (ESIpos): m/z = 481 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.00 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.67-8.11 (br. s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.5-6.0 (br. s, 1H), 4.44 (q, 2H), 4.14-4.21 (m, 1H), 4.02-4.11 (m, 1H), 3.38-3.45 (q, 2H), 3.16-3.24 (m, 1H), 3.05-3.16 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.31-2.40 (m, 1H), 1.67-1.79 (m, 1H), 1.08 (t, 3H) ppm.

【0325】

表Ｉ中の実施例９４〜１０５を製造するための一般的な手順：
ＴＨＦ中０.１３Ｍの中間体１７Ａの懸濁液を、１.５当量の各アミン成分、３当量のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムおよび１.５当量の酢酸で処理した。得られた混合物を６０℃で３〜２０時間撹拌した。この後、示された方法に従って精製を行った。

【0326】

【表3】

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【0327】

【表4】

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【0328】

【表5】

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【0329】

【表6】

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【0330】

実施例１０６
４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−Ｎ−[(３Ｒ)−２−オキソピロリジン−３−イル]ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−カルボキサミド

【化206】

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ＤＭＦ(２ml)中の中間体６４Ａ(５０mg, １２１μmol)の溶液を、撹拌しながら、室温で、Ｎ−[(１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ)(ジメチルアミノ)メチレン]−Ｎ−メチルメタンアミニウム テトラフルオロボレート(ＴＢＴＵ)(４３mg, １３３μmol)およびＤＩＰＥＡ(５３μｌ, ３０３μmol)で処理した。１５分後、(３Ｒ)−３−アミノピロリジン−２−オン(２４mg, ２４２μmol)を加え、得られた混合物を室温でさらに２時間撹拌した。この後、混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ３０〜５０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、３６mg(理論値の６０％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.91分; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 9.50 (d, 1H), 8.21-8.45 (br. s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.84-6.09 (br. s, 1H), 4.74 (dd, 2H), 4.47-4.56 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.37 (q, 2H), 3.22-3.29 (m, 2H), 2.54-2.61 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.90-2.03 (m, 1H), 1.00 (t, 3H) ppm.

【0331】

実施例１０７
４−{[４−アミノ−６−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]カルボニル}ピペラジン−２−オン

【化207】

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ＤＭＦ(２ml)中の中間体６４Ａ(５０mg, １２１μmol)の溶液を、撹拌しながら、室温で、ＴＢＴＵ(４３mg, １３３μmol)およびＤＩＰＥＡ(５３μｌ, ３０３μmol)で処理した。１５分後、ピペラジン−２−オン(２４mg, ２４２μmol)を加え、得られた混合物を室温でさらに１６時間撹拌した。この後、混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ４０〜６０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、４５mg(理論値の６８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.92分; MS (ESIpos): m/z = 495 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 8.14 (br. s, 1H), 7.99-8.01 (m, 1H), 7.9-8.3 (br. s, 1H), 7.41 (d, 1H), 7.32 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.78-6.05 (br. s, 1H), 4.30-4.49 (m, 2H), 4.13-4.23 (m, 1H), 4.03-4.10 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.76-3.87 (m, 1H), 3.57-3.74 (m, 1H), 3.35-3.43 (m, 2H), 3.14-3.25 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 0.96-1.05 (m, 3H) ppm.

【0332】

表II中の実施例１０８〜１２３を製造するための一般的な手順：
ＤＭＦ中０.１３Ｍの中間体６４Ａの溶液を１.１当量のＴＢＴＵおよび２.５当量のＤＩＰＥＡで処理し、室温で１５分間撹拌した。２当量の各アミンを加え、得られた混合物を室温でさらに１８時間撹拌した。この後、示された方法に従って精製を行った。

【0333】

【表7】

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【0334】

【表8】

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【0335】

【表9】

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【0336】

【表10】

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【0337】

【表11】

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【0338】

【表12】

[この文献は図面を表示できません]

【0339】

実施例１２４
４−{[４−アミノ−５−(５,７−ジメトキシ−１−ベンゾチオフェン−２−イル)−６−(メトキシメチル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−７−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化208】

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脱気したＴＨＦ／水(１０：１, ５ml)中の、中間体６２Ａ(１００mg, ２７１μmol)、中間体６６Ａ(７７mg, ３２５μmol)およびフッ化セシウム(２０６mg, １.３５mmol)の溶液に、アルゴン下、(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピル−ビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, ４２.６mg, ５４μmol, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010))を加えた。得られた混合物を再度脱気し、アルゴン下、６０℃で６時間撹拌した。次いで、さらに中間体６６Ａ(３９mg, １６２μmol)を加え、６０℃で１０時間撹拌を続けた。この後、反応混合物を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ３０〜５０％ アセトニトリル／０.１％ＴＦＡ水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、蒸発乾固した。残渣をメタノールに溶解し、アニオン交換カートリッジ(Stratospheres SPE, PL-HCO₃ MP-樹脂)で濾過した。カートリッジをメタノールで溶出し、濾液を蒸発させ、４０mg(理論値の２８％)の表題化合物を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.78分; MS (ESIpos): m/z = 483 (M+H)^+
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.68 (br. s, 1H), 7.49-8.17 (br. s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.63 (d, 1H), 5.5-6.0 (br. s, 1H), 4.42 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.09-3.14 (m, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.62-2.67 (m, 2H) ppm.

【0340】

実施例１２５
４−{[４−アミノ−７−(ヒドロキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化209】

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脱気したＴＨＦ／水(２：１, ９０ml)中の、中間体７０Ａ(７００mg, １.４９mmol)、中間体５Ａ(４９７mg, ２.２４mmol)およびフッ化セシウム(１.３６ｇ, ８.９５mmol)の懸濁液に、アルゴン下、(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピル−ビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, １１７mg, ０.１４９mmol, S. L. Buchwald et al., J. Am. Chem. Soc. 132 (40), 14073-14075 (2010)を参照のこと)を加えた。得られた混合物を再度脱気し、アルゴン下、６０℃で一夜撹拌した。さらに、中間体５Ａ(２３１mg, １.０４mmol)および(２'−アミノビフェニル−２−イル)(クロロ)パラジウム−ジシクロヘキシル(２',４',６'−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１：１, １１７mg, ０.１４９mmol)を加え、６０℃で３時間撹拌を続けた。沈殿物を濾過して取り、ＴＨＦで洗浄し、真空で乾燥した。固体を、ＤＭＦおよび１Ｍのトリフルオロ酢酸水溶液の混合物に懸濁し、濾過した。濾液を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、次いで、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を添加することによってアルカリ化した。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、８８mgの表題化合物(理論値の１３％)を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.70分; MS (ESIpos): m/z = 453 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): とりわけ δ = 7.6-8.0 (br. s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.4-5.8 (br. s, 1H), 5.19 (t, 1H), 4.85 (d, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.58 (s, 2H), 3.04 (br. m, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.45 (s, 3H) ppm.

【0341】

実施例１２６
４−{[４−アミノ−７−(メトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化210】

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ジクロロメタン(５ml)中の実施例１２５(８８mg, １９４μmol)の懸濁液を、塩化チオニル(２９μｌ, ３８９μmol)で処理し、混合物を室温で６５分間撹拌した。さらに塩化チオニル(２９μｌ, ３８９μmol)を加え、１.５時間撹拌を続けた。過剰のメタノールを加え、続いて、ｐＨ ８に至るまで、メタノール中５.４Ｍのナトリウム メチレート溶液(８４mg, １.５６mmol)を滴下した。３日間撹拌した後、揮発成分を減圧下で蒸発させ、残渣を分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。生成物のフラクションを蒸発させ、１９mgの表題化合物(理論値の２１％)を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.77分; MS (ESIpos): m/z = 466 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.75-8.11 (br. s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.51-5.82 (m, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.55 (s, 2H), 3.31 (s, 3H), 3.04 (br. s, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.42-2.48 (m, 5H) ppm.

【0342】

実施例１２７
４−{[４−アミノ−７−(エトキシメチル)−５−(７−メトキシ−５−メチル−１−ベンゾチオフェン−２−イル)ピロロ[２,１−ｆ][１,２,４]トリアジン−６−イル]メチル}ピペラジン−２−オン

【化211】

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ジクロロメタン(１０ml)中の実施例１２５(１００mg, ２２１μmol)の懸濁液を、塩化チオニル(１６１μｌ, ２.２１mmol)で処理し、混合物を室温で３０分間撹拌した。エタノールを加え、揮発成分を減圧下で蒸発させた。残渣をエタノール(１０ml)に溶解し、ナトリウム エチレート(３０mg, ４４２μmol)を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を直接分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって分離した(Reprosil C18, 濃度勾配 ２０〜４０％ アセトニトリル／０.２％トリフルオロ酢酸水溶液)。生成物のフラクションを合わせて、飽和重炭酸ナトリウム水溶液を添加することによってアルカリ化した。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機層を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させ、５７mgの表題化合物(理論値の５４％)を得た。
LC-MS (方法２): R_t = 0.85分; MS (ESIpos): m/z = 480 (M+H)^+
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ = 7.99 (s, 1H), 7.75-8.09 (br. s, 1H), 7.64-7.71 (m, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.38-5.91 (br. s, 1H), 4.81 (s, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.49-3.59 (m, 4H), 2.99-3.08 (m, 2H), 2.86 (s, 2H), 1.12 (t, 3H) ppm.

【0343】

Ｂ. 生物学的活性の評価
略号および頭字語：

【表13】

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【0344】

本発明の化合物の活性の証明は、当技術分野で周知のインビトロ、エクスビボおよびインビボアッセイで達成され得る。例えば、本発明の化合物の活性を証明するために、下記のアッセイを用い得る。

【0345】

Ｂ−１. ＦＧＦＲ−１高ＡＴＰキナーゼアッセイ
本発明の化合物の、ＦＧＦＲ−１と共に予めインキュベート後の高濃度ＡＴＰでのＦＧＦＲ−１阻害活性を、次の段落に記載する通りにＴＲ−ＦＲＥＴをベースとするＦＧＦＲ−１高ＡＴＰアッセイを用いて定量化した：
ＳＦ９昆虫細胞中でバキュロウイルス発現系を用いて発現させ、グルタチオン・アガロースアフィニティークロマトグラフィーによって精製した、タグ付組み換えＦＧＦＲ−１融合タンパク質[グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ(ＧＳＴ)(Ｎ末端)、Ｈｉｓ６タグ、トロンビン切断部位、およびアミノ酸G400〜R800(GenBankエントリー番号NM_015850)のヒトＦＧＦＲ−１の細胞内部分の融合]を、Proqinase (製品番号0101-0000-1)から購入し、酵素として用いた。キナーゼ反応の基質として、ビオチン化ペプチド ビオチン−Ahx−AAEEEYFFLFAKKK(アミド型のＣ末端)を用いた。これは、例えばBiosyntan (Berlin-Buch, Germany)から購入できる。

【0346】

通常、試験化合物は、同じマイクロタイタープレートで、２０μＭ〜０.１ｎＭの範囲の１１種の異なる濃度で(例えば２０μＭ、５.９μＭ、１.７μＭ、０.５１μＭ、０.１５μＭ、４４ｎＭ、１３ｎＭ、３.８ｎＭ、１.１ｎＭ、０.３３ｎＭおよび０.１ｎＭ)、各濃度について二組試験した。希釈シリーズを、アッセイ前に、ＤＭＳＯ中の１００倍濃度ストック溶液として別個に調製した；正確な濃度は、用いられたピペッターに依存して変化する。アッセイのために、５０ｎｌのＤＭＳＯ中の試験化合物のストック溶液を、それぞれ、黒色の低容量３８４ウェルマイクロタイタープレート(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)にピペットで入れた。２μｌの水性アッセイ緩衝液[８ｍＭのＭＯＰＳ(ｐＨ ７.０)、１０ｍＭの酢酸マグネシウム、１.０ｍＭのジチオスレイトール、０.０５％(w/v)のウシ血清アルブミン(ＢＳＡ)、０.０７％(v/v)のTween-20、０.２ｍＭのＥＤＴＡ]中の上記ＦＧＦＲ−１融合タンパク質の溶液を加え、混合物を２２℃で１５分間インキュベートして、予め試験化合物を酵素に結合させた。次いで、３μｌのアッセイ緩衝液中のアデノシン三リン酸(ＡＴＰ, ３.３ｍＭ；５μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝２ｍＭ)および基質(０.１６μＭ；５μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝０.１μＭ)の溶液を添加することによって、キナーゼ反応を開始させ、得られた混合物を、反応時間１５分間、２２℃でインキュベートした。ＦＧＦＲ−１融合タンパク質の濃度を、酵素ロットの活性に応じて調節し、アッセイが直線範囲内(典型的な濃度は０.０５μg/mlの範囲であった)となるように適切に選択した。５μｌのＨＴＲＦ検出反応剤溶液[ＥＤＴＡ水溶液(５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ／ＮａＯＨ(ｐＨ ７.５)中の５０ｍＭのＥＤＴＡ、０.１％(w/v)のＢＳＡ)中の２５ｎＭのストレプトアビジン-XL665(Cis Biointernational)および１ｎＭのPT66-Eu-キレート、すなわちユーロピウムキレート標識抗ホスホチロシン抗体(Perkin-Elmer; PT66-Tb-クリプテート(Cis Biointernational)を代わりに用いてもよい)]を添加することによって、反応を停止させた。

【0347】

得られた混合物を２２℃で１時間インキュベートして、ホスホリル化ビオチン化ペプチドと検出反応剤で錯体を形成させた。続いて、Ｅｕキレートからストレプトアビジン-XL665への共鳴エネルギー移動を測定することによって、ホスホリル化基質の量を測定した。これについては、３５０nmで励起後、６２０nmおよび６６５nmでの蛍光放出を、ＴＲ−ＦＲＥＴリーダー[例えば Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany) または Viewlux (Perkin-Elmer)]で測定した。６６５nmおよび６２０nmでの放出の比を、ホスホリル化した基質の量についての測定値とした。データを正規化し(阻害剤なしでの酵素反応＝０％阻害、酵素がない以外他のアッセイ成分全て＝１００％阻害)、社内ソフトウェアを用いて、４変数フィットによって、ＩＣ_５０値を計算した。

【0348】

このアッセイから得られた個々の本発明の化合物についてのＩＣ_５０値を、下記の表１Ａに挙げる。

【表14】

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【0349】

【表15】

[この文献は図面を表示できません]

【0350】

【表16】

[この文献は図面を表示できません]

【0351】

最も近い先行技術(国際特許出願WO 2007/061737-A2およびそれに記載された実施例化合物)の代表例と考えられる選択された８−アミノ−１−(ベンゾチオフェン−２−イル)イミダゾ[１,５−ａ]ピラジン誘導体および関連化合物を、公表された手順に従って合成し、比較の目的のために、ＦＧＦＲ−１高ＡＴＰアッセイで試験した。これらの化合物について得られたＩＣ_５０値を、下記の表１Ｂに挙げる。

【0352】

【表17】

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【0353】

【表18】

[この文献は図面を表示できません]

【0354】

表１Ａおよび１Ｂに特記されたＩＣ_５０値は、本発明の化合物が選択された先行技術化合物より約５〜１０００倍強力にＦＧＦＲ−１キナーゼ活性を阻害することを証明している。

【0355】

Ｂ−２. ＦＧＦＲ−３キナーゼアッセイ
ＦＧＦＲ−３と共に予めインキュベートした後の本発明の化合物のＦＧＦＲ−３阻害活性を、次の段落に記載する通りにＴＲ−ＦＲＥＴをベースとするＦＧＦＲ−３アッセイを用いて定量化した：
ＳＦ９昆虫細胞中でバキュロウイルス発現系を用いて発現させ、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼアフィニティークロマトグラフィーによって精製した、タグ付組み換えＦＧＦＲ−３融合タンパク質[グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ(ＧＳＴ)(Ｎ末端)、Ｈｉｓ６タグ、トロンビン切断部位、およびアミノ酸R397〜T806 (NCBI/タンパク質エントリー番号NP_000133.1)のヒトＦＧＦＲ−３の細胞内部分の融合]を、Proqinas (製品番号1068-0000-1)から購入し、酵素として用いた。キナーゼ反応の基質として、ビオチン化ペプチド ビオチン-Ahx-AAEEEYFFLFAKKK (アミド型のＣ末端)を用いた。これは、例えばBiosyntan (Berlin-Buch, Germany)から購入できる。

【0356】

通常、試験化合物は、同じマイクロタイタープレートで、２０μＭ〜０.１ｎＭの範囲の１１種の異なる濃度で(例えば２０μＭ、５.９μＭ、１.７μＭ、０.５１μＭ、０.１５μＭ、４４ｎＭ、１３ｎＭ、３.８ｎＭ、１.１ｎＭ、０.３３ｎＭおよび０.１ｎＭ)、各濃度について二組試験した。希釈シリーズを、アッセイ前に、ＤＭＳＯ中の１００倍濃度ストック溶液として別個に調製した；正確な濃度は、用いられたピペッターに依存して変化する。アッセイのために、５０ｎｌのＤＭＳＯ中の試験化合物のストック溶液を、それぞれ、黒色の低容量３８４ウェルマイクロタイタープレート(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)にピペットで入れた。２μｌの水性アッセイ緩衝液[８ｍＭのＭＯＰＳ(ｐＨ ７.０)、１０ｍＭの酢酸マグネシウム、１.０ｍＭのジチオスレイトール、０.０５％(w/v)のウシ血清アルブミン(ＢＳＡ)、０.０７％(v/v)のTween-20、０.２ｍＭのＥＤＴＡ]中の上記ＦＧＦＲ−３融合タンパク質の溶液を加え、混合物を２２℃で１５分間インキュベートして、予め試験化合物を酵素に結合させた。次いで、３μｌのアッセイ緩衝液中のアデノシン三リン酸(ＡＴＰ, １６.７μＭ；５μｌアッセイ容量中の最終濃度＝１０μＭ)および基質(０.８μＭ；５μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝０.５μＭ)の溶液を添加することによって、キナーゼ反応を開始させ、得られた混合物を、反応時間６０分間、２２℃でインキュベートした。ＦＧＦＲ−３融合タンパク質の濃度を、酵素ロットの活性に応じて調節し、アッセイが直線範囲内(典型的な濃度は０.０３μg/mlの範囲であった)となるように適切に選択した。５μｌのＨＴＲＦ検出反応剤溶液[ＥＤＴＡ水溶液(５０ｍＭのＨＥＰＥＳ／ＮａＯＨ(ｐＨ ７.５)中の５０ｍＭのＥＤＴＡ、０.１％(w/v)のＢＳＡ)中の１００ｎＭのストレプトアビジン-XL665 (Cis Biointernational)および１ｎＭのPT66-Tb-クリプテート、すなわちテルビウム−クリプテート標識抗ホスホチロシン抗体(Cis Biointernational; PT66-Eu-キレート(Perkin-Elmer)を代わりに用いてもよい)]を添加することによって、反応を停止させた。

【0357】

得られた混合物を２２℃で１時間インキュベートして、ホスホリル化ビオチン化ペプチドと検出反応剤で錯体を形成させた。続いて、Ｔｂキレートからストレプトアビジン-XL665への共鳴エネルギー移動を測定することによって、ホスホリル化基質の量を測定した。これについては、３５０nmで励起後、６２０nmおよび６６５nmでの蛍光放出を、ＴＲ−ＦＲＥＴリーダー[例えば Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany) または Viewlux (Perkin-Elmer)]で測定した。６６５nmおよび６２０nmでの放出の比を、ホスホリル化した基質の量についての測定値とした。データを正規化し(阻害剤なしでの酵素反応＝０％阻害、酵素がない以外他のアッセイ成分全て＝１００％阻害)、社内ソフトウェアを用いて、４変数フィットによって、ＩＣ_５０値を計算した。

【0358】

このアッセイから得られた個々の本発明の化合物についてのＩＣ_５０値を、下記の表２Ａに挙げる。

【表19】

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【0359】

【表20】

[この文献は図面を表示できません]

【0360】

最も近い先行技術(国際特許出願WO 2007/061737-A2およびそれに記載された実施例化合物)の代表例と考えられる選択された８−アミノ−１−(ベンゾチオフェン−２−イル)イミダゾ[１,５−ａ]ピラジン誘導体および関連化合物を、公表された手順に従って合成し、比較の目的のために、ＦＧＦＲ−３アッセイで試験した。これらの化合物について得られたＩＣ_５０値を、下記の表２Ｂに挙げる。

【0361】

【表21】

[この文献は図面を表示できません]

【0362】

【表22】

[この文献は図面を表示できません]

【0363】

表２Ａおよび２Ｂに特記されたＩＣ_５０値は、本発明の化合物が選択された先行技術化合物より約３〜１０００倍強力にＦＧＦＲ−３キナーゼ活性を阻害することを証明している。

【0364】

Ｂ−３. ＦＧＦＲ−４高ＡＴＰキナーゼアッセイ
ＦＧＦＲ−４と共に予めインキュベートした後の本発明の化合物の高濃度ＡＴＰでのＦＧＦＲ−４阻害活性を、次の段落に記載する通りにＴＲ−ＦＲＥＴをベースとするＦＧＦＲ−４高ＡＴＰアッセイを用いて定量化した：
ＳＦ９昆虫細胞中でバキュロウイルス発現系を用いて発現させ、グルタチオン・アガロースアフィニティークロマトグラフィーによって精製した、タグ付組み換えＦＧＦＲ−４融合タンパク質[グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ(ＧＳＴ)(Ｎ末端)、Ｈｉｓ６タグ、トロンビン切断部位、およびアミノ酸R391〜T802 (GenBankエントリー番号NM_002011)のヒトＦＧＦＲ−４の細胞内部分の融合]を、Proqinase (製品番号0127-0000-3)から購入し、酵素として用いた。キナーゼ反応の基質として、ビオチン化ペプチド ビオチン−Ahx−AAEEEYFFLFAKKK(アミド型のＣ末端)を用いた。これは、例えばBiosyntan (Berlin-Buch, Germany)から購入できる。

【0365】

通常、試験化合物は、同じマイクロタイタープレートで、２０μＭ〜０.１ｎＭの範囲の１１種の異なる濃度で(例えば２０μＭ、５.９μＭ、１.７μＭ、０.５１μＭ、０.１５μＭ、４４ｎＭ、１３ｎＭ、３.８ｎＭ、１.１ｎＭ、０.３３ｎＭおよび０.１ｎＭ)、各濃度について二組試験した。希釈シリーズを、アッセイ前に、ＤＭＳＯ中の１００倍濃度ストック溶液として別個に調製した；正確な濃度は、用いられたピペッターに依存して変化する。アッセイのために、５０ｎｌのＤＭＳＯ中の試験化合物のストック溶液を、それぞれ、黒色の低容量３８４ウェルマイクロタイタープレート(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)にピペットで入れた。２μｌの水性アッセイ緩衝液[８ｍＭのＭＯＰＳ(ｐＨ ７.０)、１０ｍＭの酢酸マグネシウム、１.０ｍＭのジチオスレイトール、０.０５％(w/v)のウシ血清アルブミン(ＢＳＡ)、０.０７％(v/v)のTween-20、０.２ｍＭのＥＤＴＡ]中の上記ＦＧＦＲ−４融合タンパク質の溶液を加え、混合物を２２℃で１５分間インキュベートして、予め試験化合物を酵素に結合させた。次いで、３μｌのアッセイ緩衝液中のアデノシン三リン酸(ＡＴＰ, ３.３ｍＭ；５μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝２ｍＭ)および基質(０.８μＭ；５μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝０.５μＭ)の溶液を添加することによって、キナーゼ反応を開始させ、得られた混合物を、反応時間６０分間、２２℃でインキュベートした。ＦＧＦＲ−４融合タンパク質の濃度を、酵素ロットの活性に応じて調節し、アッセイが直線範囲内(典型的な濃度は０.０３μg/mlの範囲であった)となるように適切に選択した。５μｌのＨＴＲＦ検出反応剤溶液[ＥＤＴＡ水溶液(５０ｍＭのＨＥＰＥＳ／ＮａＯＨ(ｐＨ ７.５)中の５０ｍＭのＥＤＴＡ、０.１％(w/v)のＢＳＡ)中の１００ｎＭのストレプトアビジン-XL665 (Cis Biointernational)および１ｎＭのPT66-Tb-クリプテート、すなわちテルビウム−クリプテート標識抗ホスホチロシン抗体(Cis Biointernational; PT66-Eu-キレート(Perkin-Elmer)を代わりに用いてもよい)]を添加することによって、反応を停止させた。

【0366】

得られた混合物を２２℃で１時間インキュベートして、ホスホリル化ビオチン化ペプチドと検出反応剤で錯体を形成させた。続いて、Ｔｂキレートからストレプトアビジン-XL665への共鳴エネルギー移動を測定することによって、ホスホリル化基質の量を測定した。これについては、３５０nmで励起後、６２０nmおよび６６５nmでの蛍光放出を、ＴＲ−ＦＲＥＴリーダー[例えば Rubystar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Germany) または Viewlux (Perkin-Elmer)]で測定した。６６５nmおよび６２０nmでの放出の比を、ホスホリル化した基質の量についての測定値とした。データを正規化し(阻害剤なしでの酵素反応＝０％阻害、酵素がない以外他のアッセイ成分全て＝１００％阻害)、社内ソフトウェアを用いて、４変数フィットによって、ＩＣ_５０値を計算した。

【0367】

Ｂ−４. ｍＴＯＲキナーゼアッセイ(比較の目的のため)
本発明の化合物のｍＴＯＲ阻害活性は、次の段落に記載する通りにＴＲ−ＦＲＥＴをベースとするｍＴＯＲアッセイを用いて定量化した：
昆虫細胞中で発現させ、グルタチオン・セファロースアフィニティークロマトグラフィーによって精製した、タグ付組み換えｍＴＯＲ融合タンパク質[アミノ酸1360〜2549のヒトｍＴＯＲと融合したグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ(ＧＳＴ)]を、Invitrogen (カタログ番号4753)から購入し、酵素として用いた。キナーゼ反応の基質として、ＧＦＰおよび４Ｅ−ＢＰ１の組み換え融合タンパク質(Invitrogenから購入, カタログ番号PV4759)を用いた。

【0368】

試験化合物をＤＭＳＯに溶解して、１０ｍＭのストック溶液を作る。これらの溶液を最初に１００％のＤＭＳＯによって１０倍希釈し、１００％ＤＭＳＯ中１ｍＭの溶液を得て、次に、５０％のＤＭＳＯによって１００倍希釈し、５０％ＤＭＳＯ中１０μＭの溶液を得る。

【0369】

アッセイのために、０.５μｌの５０％ＤＭＳＯ中１０μＭの試験化合物の溶液を、黒色の低容量３８４ウェルマイクロタイタープレート(Greiner Bio-One, Frickenhausen, Germany)にピペットで入れた。２μｌの水性アッセイ緩衝液[５０ｍＭのＨＥＰＥＳ／ＮａＯＨ(ｐＨ ７.５)、５ｍＭの塩化マグネシウム、１.０ｍＭのジチオスレイトール、１ｍＭのＥＧＴＡ、０.０１％(v/v)のTriton-X100、０.０１％(w/v)のウシ血清アルブミン(ＢＳＡ)]中の上記ｍＴＯＲ融合タンパク質の溶液を加え、混合物を２２℃で１５分間インキュベートして、予め試験化合物を酵素に結合させた。次いで、２.５μｌのアッセイ緩衝液中のアデノシン三リン酸(ＡＴＰ, ８０μＭ；５μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝４０μＭ)および基質(０.６μＭ；５μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝０.３μＭ)の溶液の添加によって、キナーゼ反応を開始させ、得られた混合物を反応時間６０分間、２２℃でインキュベートした。ｍＴＯＲ融合タンパク質の濃度を、アッセイが直線範囲内(５μｌのアッセイ容量中の典型的な最終濃度は１.２５ng/μlであった)となるように適切に選択した。５μｌの３０ｍＭのＥＤＴＡ(１０μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝１５ｍＭ)およびＦＲＥＴ緩衝液中の２ｎＭのＴｂキレート標識抗４Ｅ−ＢＰ１[ｐＴ４６]ホスホ特異的抗体[Invitrogen カタログ番号PV4755](１０μｌのアッセイ容量中の最終濃度＝１ｎＭ)の添加によって、反応を停止させた。

【0370】

得られた混合物を２２℃で１時間インキュベートして、ホスホリル化基質とＴｂキレート標識抗体で錯体を形成させた。続いて、ＴｂキレートからＧＦＰへの共鳴エネルギー移動を測定することによって、ホスホリル化基質の量を測定した。これについては、３４０nmで励起後、４９５nmおよび５２０nmでの蛍光放出を、Envision 2104 multilabel reader (Perkin-Elmer)で測定した。 ５２０nmおよび４９５nmでの放出の比を、ホスホリル化した基質の量についての測定値とした。データを正規化し(阻害剤なしでの酵素反応＝０％阻害、酵素がない以外他のアッセイ成分全て＝１００％阻害)、平均値(１つの濃度で反復して試験したならば)、または、ＩＣ_５０値(社内ソフトウェアを用いた４変数フィットによる)を計算した。

【0371】

個々の本発明の化合物についての１μＭでの平均阻害値を、下記の表３に挙げる。

【表23】

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【0372】

【表24】

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【0373】

【表25】

[この文献は図面を表示できません]

(阻害効果検出できず＝１μＭで阻害効果が検出できなかった)。

【0374】

表３中のデータは、本発明の化合物が、ｍＴＯＲキナーゼに対して、あったとしても弱い阻害効果しか有さないことを示し、これらの化合物で観察される薬理学的活性に寄与するとは考えられない。

【0375】

Ｂ−５. 増殖因子介在細胞増殖の阻害
ヒト臍帯静脈内皮細胞(ＨＵＶＥＣ)を Cellsystems (FC-0003)から購入し、２％のウシ胎児血清(ＦＢＳ)を含むVasculife VEGF完全培地(Cellsystems, LL-1020)中で３７℃で５％ ＣＯ_２で増殖させた。細胞を最大７継代で増殖アッセイに用いた。

【0376】

ＨＵＶＥＣ細胞をaccutase (PAA, L11-007)を用いて回収し、９６ウェルプレート(Falcon MICROTEST 組織培養プレート９６ウェル平底, BD 353075、または、μCLEAR-PLATE, 黒色, ９６ウェル, Greiner Bio-One, No. 655090)のカラム２〜１２に、１００μｌのVasculife VEGF完全培地中２５００細胞／ウェルの細胞密度で播種し、残りの空のカラム１をブランクとした。細胞を、３７℃、５％ ＣＯ_２で少なくとも６時間インキュベートした。次いで、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、ヘパリン、アスコルビン酸塩およびＬ−グルタミン(Vasculife Life Factors Kitの構成成分, Cellsystems, LL-1020)、および、０.２％のＦＢＳを含むVasculife基本培地(Cellsystems, LM-0002)中で一夜飢餓状態とした。

【0377】

約１８時間後、飢餓培地を廃棄し、細胞を、１００μｌの飢餓培地中、１０ｐＭ〜３０μＭの範囲の９種の連続対数または半対数濃度の試験化合物、および、５、１０または２０ng/mlのｈＦＧＦ−２(組み換えヒトＦＧＦベーシック, R&D Systems, 233-FB)に、７２時間曝露した。ＤＭＳＯ中１０ｍＭの試験化合物ストック溶液を、ＤＭＳＯで２００×最終濃度に希釈し、全てのウェルで最終ＤＭＳＯ濃度を０.５％とした。コントロールは、飢餓培地のみの中で増殖させた細胞と、０.５％のＤＭＳＯを含むｈＦＧＦ−２含有飢餓培地中で増殖させた細胞からなる。細胞増殖を測定するために、５μｌのAlamar Blue溶液(Biosource, DAL1100)をそれぞれのウェルに加え(１：２０希釈)、細胞を、３７℃、５％ ＣＯ_２でさらに４時間インキュベートした後、Spectrafluor Plus Tecan plate reader (XFLUOR4 version 4.20)で蛍光を測定した(励起５３５nm, 放出５９５nm)。幾つかの実験において、ＡＴＰ測定キット(BIAFFIN GmbH, LBR-T100)を製造者の指示に従って用いた。各実験において、サンプルを三組アッセイして、標準偏差を決定した。データを分析するためにGraphPad Prism 5 softwareを用いて、ＩＣ_５０値を得た。全ての試験化合物を独立した実験で２〜１０回アッセイし、類似の結果を得た。

【0378】

下記の表４に挙げるデータは、対応する平均ｐＩＣ_５０値から得られる代表的な本発明の化合物についてのＩＣ_５０値を表す。

【0379】

【表26】

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【0380】

【表27】

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【0381】

本発明の化合物の大部分は、血管内皮増殖因子(ＶＥＧＦ−Ａ_１６５アイソフォーム)を媒介増殖因子として(ＦＧＦ−２の代わりに)用いたとき、この増殖アッセイで約１０〜１００倍低下した阻害活性を示し、ＶＥＧＦＲキナーゼに対するＦＧＦＲへのこれらの化合物の著しい選択性を示した。

【0382】

Ｂ−６. ヒト異種移植および同系腫瘍モデル
本発明の化合物をインビボでプロファイルするために、異なる腫瘍モデルを行った。ヒト、ラットまたはマウスの腫瘍細胞をインビトロで培養し、免疫不全または免疫適格性マウス、または、免疫不全ラットの何れかに移植した。腫瘍確立後に処置を開始し、腫瘍担持動物を、種々の経路(経口、静脈内、腹腔内、または皮下)を介して物質で処置した。物質を、単剤治療または他の薬理学的物質との併用治療として試験した。腫瘍が平均サイズ１２０mm²に達するまで腫瘍担持動物の処置を行った。ノギスを用いて２方向で腫瘍を測定し、腫瘍体積を式：(長さ×幅^２)／２によって計算した。物質の有効性を実験終了時にＴ／Ｃ比[Ｔ＝処置群の最終腫瘍重量；Ｃ＝コントロール群の最終腫瘍重量]を用いて評価した。コントロール群と処置群の有効性の統計学的有意性を、ＡＮＯＶＡ分散検定を用いて決定した。全ての動物試験をドイツの規制ガイドラインに従って行った。

【0383】

本発明は特定の具体的態様に言及して開示したが、他の態様および本発明の変法も、本発明の精神および範囲を逸脱せずに、他の当業者によって考案され得る。請求の範囲は、このような態様および等価の変法を全て含むと解釈されることを意図される。

【0384】

Ｃ. 医薬組成物に関する例
本発明の医薬組成物は、下記の通り説明できる。
滅菌処理された静脈内投与用溶液：
望ましい本発明の化合物の５mg/ml溶液は、滅菌処理された注射用水を用いて調製でき、必要であればｐＨを調節する。溶液は、投与のために、滅菌処理された５％のブドウ糖で１〜２mg/mlに希釈され、約６０分に亘って静脈内点滴として投与される。

【0385】

静脈内投与用凍結乾燥粉末：
滅菌処理された製剤は、(i)１００〜１０００mgの凍結乾燥粉末としての望ましい本発明の化合物、(ii)３２〜３２７mg/mlのクエン酸ナトリウム、および、(iii)３００〜３０００mgのデキストラン ４０で製造できる。製剤は、滅菌処理された注射用食塩水または５％のブドウ糖で、１０〜２０mg/mlの濃度に再構成され、これは、さらに食塩水または５％のブドウ糖で０.２〜０.４mg/mlに希釈され、静脈内にボラスとして投与されるか、または、１５〜６０分に亘って静脈内点滴によって投与される。

【0386】

筋肉内投与用懸濁液：
下記の溶液または懸濁液を筋肉内注射用に製造できる：
５０mg/mlの望ましい水不溶性の本発明の化合物；５mg/mlのカルボキシメチルセルロース ナトリウム；４mg/mlのTween 80；９mg/mlの塩化ナトリウム；９mg/mlのベンジルアルコール。

【0387】

ハードシェルカプセル：
１００mgの望ましい粉末状の本発明の化合物、１５０mgの乳糖、５０mgのセルロースおよび６mgのステアリン酸マグネシウムを、標準的な２ピース硬ゼラチンカプセルにそれぞれ充填することによって、多数の単位カプセルを製造する。

【0388】

軟ゼラチンカプセル：
可消化油、例えば大豆油、綿実油またはオリーブ油中の、望ましい本発明の化合物の混合物を調製し、容積型移送式ポンプによって融解ゼラチンに注入して、１００mgの有効成分を含む軟ゼラチンカプセルを形成する。カプセルを洗浄し、乾燥する。望ましい本発明の化合物を、ポリエチレングリコール、グリセリンおよびソルビトールの混合物に溶解し、水混和性医薬ミックスを調製できる。

【0389】

錠剤：
投与単位が、１００mgの望ましい本発明の化合物、０.２mgのコロイド状二酸化ケイ素、５mgのステアリン酸マグネシウム、２７５mgの微晶性セルロース、１１mgの澱粉および９８.８mgの乳糖であるように、多数の錠剤を慣用の手順によって調製する。嗜好性を向上し、上品さおよび安定性を改善し、または、吸収を遅らせるために、適切な水性および非水性コーティングを適用してもよい。

【0390】

眼への局所適用のための溶液または懸濁液(点眼薬):
滅菌製剤を、５mlの滅菌食塩水中で再構成された、１００mgの凍結乾燥粉末としての望ましい本発明の化合物で調製できる。保存料として、塩化ベンザルコニウム、チメロサール、硝酸フェニル水銀などを、約０.００１重量％〜１重量％の範囲で用いてもよい。