【図1】図１は、ナノファイバープレートを用いたマウスES細胞分化を促進する低分子化合物スクリーニング方法の概要を示した図である。

【図2】図２は、化合物のスクリーニングにおける定量的画像解析において、化合物候補と判断するためのスキームの概要を示した図である。図２Ａは、画像解析において、DAPIによる核染色に加え、Pdx1をAlexa 488、InsulinをAlexa 568で染色し蛍光観察することを示している。図２Ｂは、MetaXpressソフトウエアを用いた画像解析によりDAPI、Pdx1、Insulinの三重陽性の細胞の占める面積を算出し、これをインスリン陽性細胞の数を反映する数値とすることを示している。

【図3】図３は、スクリーニングのプロセスを示した図である。

【図4】図４は、本発明の一つであるレセルピンの濃度依存的効果を調べた結果を示した図である。Pdx1をAlexa 488、InsulinをAlexa 568で染色し蛍光観察した結果を示している。

【図5】図５は、化合物スクリーニングにより選択された各化合物のインスリン発現細胞への分化促進効果を比較した図である。Pdx1をAlexa 488、InsulinをAlexa 568で染色し蛍光観察した結果を示している。

【図6】図６は、モノアミンオキシダーゼ阻害剤（MAOBi）のインスリン発現細胞への分化に対する影響、およびレセルピンの分化促進効果に対する影響を示した図である。Pdx1をAlexa 488、InsulinをAlexa 568で染色し蛍光観察した結果を示している。

【図7】図６の結果を、全細胞に対する比で示した図である。

【図8】図８は、ドーパミンのインスリン産生細胞への分化に対する影響を示した図である。

【図9】図９は、ドーパミンD2受容体ノックダウン細胞セルラインの分化に対するレセルピンの影響を見た図である。図９Ａは、Drd2の発現を示す図である。図９Ｂは、通常ES細胞（NS）およびドーパミンD2受容体ノックダウン細胞セルライン（KD）のインスリン産生細胞への分化の増加を、対照に対する比で示した図である。Resは、レセルピンを添加した場合を示している。

【図10】図１０は、通常ES細胞（NS）および小胞モノアミントランスポーターノックダウンセルライン（VMAT2KD）のインスリン産生細胞への分化に対するcAMPアナログの影響を調べた結果を示している。

【図11】図１１Ａは、図１０の結果を、対照（cAMPアナログ無添加の正常細胞を１とする）に対する比で示した図である。図１１Ｂは、レセルピン、ドーパミンおよびdBu-cAMPの相乗効果を示した図である。

【図12】図１２Ａは、本発明の化合物を用いて分化した細胞のインスリン量を調べた結果を示した図である。図１２Ｂは、本発明の化合物を用いて分化した細胞のグルコース濃度依存的インスリン分泌量を調べた結果を示した図である。

【図13】図１３は、本発明の化合物を用いて分化した細胞における、グルコース感知および分泌に対する応答分子の発現を、リアルタイムPCRを用いて調べた結果を示した図である。

【図14】図１４は、セロトニンおよびヒスタミン添加によるPdx1/GFP陽性細胞数とインスリン陽性細胞数の変化を示した図である。

【図15】図１５は、4つの化合物添加条件下で培養した場合のNgn3、Nkx6.1、MafAおよびInsulin1遺伝子の発現量変化を示した図である。

【図16】図１６は、TBZまたはdBu-cAMPの添加が、Ngn3陽性細胞誘導率に与える影響について示した図である。Ａは、TBZまたはdBu-cAMPの添加期間を示した模式図である。Ｂは、Ngn3/GFPマウスES細胞の可視光写真と蛍光写真を示している。Ｃは、GFP陽性細胞の割合の比率を示した図である。

【図17】図１７は、培養11日目から17日目におけるdBu-cAMPの添加が、糖応答性C-peptide分泌に与える影響について示した図である。上段は添加期間を示した模式図である。

【図18】図１８は、各化合物を添加した場合において、GFP陽性細胞をセルソーターにより分取し、C-peptide含量とグルコース濃度依存的なインスリン分泌量を測定した結果を示した図である。