特許 6063038 高温で抽出された鹿角抽出物を含む医薬組成物及び鹿角抽出物を抽出する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6063038

(24)【登録日】2016年12月22日

(45)【発行日】2017年1月18日

(54)【発明の名称】高温で抽出された鹿角抽出物を含む医薬組成物及び鹿角抽出物を抽出する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/32 20150101AFI20170106BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20170106BHJP

   A61P 5/06 20060101ALI20170106BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20170106BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20170106BHJP

   A61K 38/17 20060101ALI20170106BHJP

   A61K 38/27 20060101ALI20170106BHJP

【ＦＩ】

   A61K35/32

   A61P37/04

   A61P5/06

   A61P19/02

   A61P29/00 101

   A61K37/12

   A61K37/36

【請求項の数】2

【全頁数】13

(21)【出願番号】特願2015-513883(P2015-513883)

(86)(22)【出願日】2013年5月2日

(65)【公表番号】特表2015-518860(P2015-518860A)

(43)【公表日】2015年7月6日

(86)【国際出願番号】KR2013003800

(87)【国際公開番号】WO2013187602

(87)【国際公開日】20131219

【審査請求日】2014年11月21日

(31)【優先権主張番号】10-2012-0062548

(32)【優先日】2012年6月12日

(33)【優先権主張国】KR

(73)【特許権者】

【識別番号】508375974

【氏名又は名称】イーエスバイオテック カンパニーリミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100137095

【弁理士】

【氏名又は名称】江部 武史

(74)【代理人】

【識別番号】100173532

【弁理士】

【氏名又は名称】井上 彰文

(74)【代理人】

【識別番号】100091627

【弁理士】

【氏名又は名称】朝比 一夫

(72)【発明者】

【氏名】ハン， ビョング ホーン

(72)【発明者】

【氏名】ジョ， スン ジュン

(72)【発明者】

【氏名】キム， ジョン ウォン

(72)【発明者】

【氏名】チョイ， ヘ オク

(72)【発明者】

【氏名】キム， ジョン ファン

(72)【発明者】

【氏名】キム， モー カン

(72)【発明者】

【氏名】リ， スン ファン

【審査官】 伊藤 基章

(56)【参考文献】

【文献】 韓国公開特許第１０−２００３−００３１２７２（ＫＲ，Ａ）

【文献】 特開２０１１−１０３８１０（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３５／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

１３０℃以上の高温で、鹿角の２〜８倍重量の溶媒存在下、前記鹿角の２〜５回繰り返し抽出物である鹿角抽出物を含み、免疫不全疾患、成長ホルモンの分泌不全による成長疾患、及び関節リウマチからなる群から選択される疾患の治療又は予防用の医薬組成物であって、
前記鹿角抽出物は、ＩＩ型コラーゲン、成長ホルモン（ＧＨ）及びインスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）を含む、医薬組成物。

【請求項2】

鹿角に、前記鹿角の２〜８倍重量の溶媒を加える工程と、
前記鹿角に１３０℃以上の高温を加え、前記鹿角から鹿角抽出物を抽出する工程と、を有し、
前記鹿角抽出物は、ＩＩ型コラーゲン、成長ホルモン（ＧＨ）及びインスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）を含み、
前記抽出工程は、前記鹿角の前記２〜８倍重量の前記溶媒存在下、２〜５回繰り返し実行されることを特徴とする鹿角抽出物を抽出する方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、薬理効果が十分改善され、１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物を含む医薬組成物及び健康機能食品に関する。

【背景技術】

【0002】

鹿茸は、動物資源を活用した人体の健康増進のための機能性食品として開発された食品であり、漢方医学では代表的な滋養強壮食材として韓国人及び中国人に最も愛用されている薬剤である。アジア地域が主な消費国であり、集計された統計によれば、韓国が世界最大の消費国（８０％、２００７年基準）とされている。鹿茸の効能に関する科学的研究は、非常に広範且つ精力的に行われており、それに基づきアジア以外の国においても、健康増進を目的に鹿茸を食する人が増えている。鹿角とは、鹿茸の採取時期が遅くなった故に著しく骨化（Ossification又はCalcification）が進行されたものをいう。

【0003】

韓国国内において、鹿茸及び鹿角は、切片の形態で包装されその形態で用いられるか、或いは一部の製薬会社では、通常１００℃の温度で抽出され、「鹿角膠」又はパウチに微量含有させて販売されている。また、多くの漢方病院では、健康滋養剤として他の薬剤とともに１００℃で加熱抽出した液状製品として販売されている。これら切片のうち、鹿茸は１００℃の水でよく抽出されるが、鹿角は殆ど抽出されないため（抽出率１０％以下）、漢方医学界及び一般人において、鹿角は、鹿茸と比較して効能・効果の機能面では大差ないものの、効能の強度は非常に弱いものとして認識されている。

【0004】

従って、一般人は、効能の強度面における差異のため、安価な鹿角より高価な鹿茸をより好む。それどころか、鹿茸については多くの科学的研究が多様に行われているのに対し、鹿角に関する研究論文はごく僅かである。

【0005】

鹿茸及び鹿角の有効成分中、非常に重要且つ含有量が多い成分の一つとしてコラーゲン成分がある。現在市販されている熱水抽出製品である「鹿角膠」中に含まれるコラーゲンの含有量を分析したところ、製品に表示された鹿角の使用量から算出されるコラーゲン含有量と比較して含有量が実際に満たされていない製品が流通している。

【0006】

韓国公開特許第２００９−００２２２００号公報には、鹿角膠濃縮粉末の調製方法に関する特許が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【特許文献1】韓国公開特許第２００９−００２２２００号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明は、鹿茸と同等或いはより優れた薬理効果を有する、１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物を含む医薬組成物及び健康機能食品を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

１．１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物を含み、免疫系疾患、成長疾患、貧血、骨粗鬆症、及び関節リウマチからなる群から選択される疾患の治療又は予防用医薬組成物。

【0010】

２．前記項目１において、前記鹿角抽出物が、ＩＩ型コラーゲン、成長ホルモン（ＧＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）からなる群から選択される有効成分を含む医薬組成物。

【0011】

３．前記項目１において、前記抽出が、鹿角の２〜８倍重量の溶媒存在下で２〜５回繰り返し遂行される医薬組成物。

【0012】

４．１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物を含み、免疫促進、成長ホルモン増加、造血機能改善、骨密度改善、及び関節リウマチ抑制からなる群から選択される効能を有する健康機能食品。

【0013】

５．前記項目４において、前記鹿角抽出物が、ＩＩ型コラーゲン、成長ホルモン（ＧＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）からなる群から選択される有効成分を含む健康機能食品。

【0014】

６．前記項目４において、前記抽出が、鹿角の２〜８倍重量の溶媒存在下で２〜５回繰り返し遂行される健康機能食品。

【0015】

７．前記項目４乃至６のいずれか一項目において、乳製品、製菓、調味料、飲料及びドリンク剤、スナック、キャンディ類、アイスクリーム及び冷凍用デザート、シリアル類、栄養バー、スナックチョコバー製品、加工食品、穀物製品及びパスタ、スープ、ソース及びドレッシング、菓子製品、オイル及び脂肪製品、乳製品飲料（dairy drink）及び牛乳飲料、豆乳及び豆乳製品（soy dairy-like product）、冷凍食品、調理食品及び代替食品、肉類製品、チーズ、ヨーグルト、パン及びロールパン、酵母製品、ケーキ、クッキー及びクラッカーからなる群から選択されるものである健康機能食品。

【発明の効果】

【0016】

本発明の１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物は、従来の抽出方法による鹿角抽出物より、成長ホルモン（ＧＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）を多く含んでおり、さらに、ＩＩ型コラーゲンも含んでいるため、免疫促進、成長ホルモン増加、造血機能改善、骨密度改善、及び関節リウマチ抑制効果に優れる。これは鹿茸と同等或いはより優れたものであるので、優れた品質を有する医薬組成物及び健康機能食品を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0017】

【図1】図１は、温度条件による鹿角抽出物の収率を示す図である。

【図2】図２は、鹿茸及び鹿角コラーゲンの電気泳動写真である。

【図3】図３は、鹿茸及び鹿角コラーゲンのＳＤＳ−ＰＡＧＥ結果である。

【図4】図４は、鹿茸及び鹿角抽出物が脾臓細胞の増殖に及ぼす影響を示す図である。

【図5】図５は、鹿角及び鹿茸抽出物を投与した動物の骨密度変化を示す図である。

【図6】図６は、鹿角及び鹿茸抽出物を投与した動物の成長ホルモン変化を示す図である。

【図7】図７は、鹿角及び鹿茸抽出物を投与した動物のＩＧＦ−１変化を示す図である。

【図8】図８は、鹿角及び鹿茸抽出物を投与した動物のＥＰＯ変化を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0018】

本発明は、１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物を含む医薬組成物及び健康機能食品に関し、より詳しくは、１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物が、従来の抽出方法による鹿角抽出物より成長ホルモン（ＧＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）を多く含んでおり、さらに、ＩＩ型コラーゲンも含んでいるため、免疫促進、成長ホルモン増加、造血機能改善、骨密度改善、及び関節リウマチ抑制効果に優れる。これは鹿茸と同等或いはより優れたものであるので、優れた品質を有する医薬組成物及び健康機能食品に関する。

【0019】

以下、本発明をより詳しく説明する。

【0020】

本発明の鹿角抽出物は以下のとおり調製することができる。

【0021】

本発明の鹿角抽出物において、鹿角の産地は、韓国、日本、ロシア、中国、米国、カナダ等、どこであっても構わない。

【0022】

鹿角を幅０．１〜２ｃｍ程度に微粉砕する。粉砕方法は、限定されることなく、当業界において公知となったいずれの方法を用いることができる。

【0023】

粉砕された鹿角に溶媒を添加し、１３０℃以上の温度で１〜３時間掛けて抽出する。抽出溶媒の量は、抽出物が十分得られるまで適宜決定され得るが、鹿角重量対比２〜８倍の用量の溶媒で抽出することができる。調製工程における効率を考慮して、さらに好ましくは、３〜７倍の用量の溶媒で抽出することができる。

【0024】

濾過して抽出物を得、抽出段階をさらに１〜４回繰り返す。

【0025】

続いて、前記濾過された抽出物を分画し、減圧濃縮して乾燥することで、本発明の鹿角抽出物が得られる。

【0026】

従来、鹿茸が劣化すれば鹿角となるが、この際に鹿茸中の有効成分であるＩＩ型コラーゲンがＩ型コラーゲンに変化することが知られており、ＩＩ型コラーゲンの含有有無が鹿茸及び鹿角の最大の差異点として知られていた。しかしながら、前記の抽出方法で抽出した鹿角抽出物の場合、ＩＩ型コラーゲン、成長ホルモン（ＧＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）、及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）からなる群から選択される有効成分を含んでいるため、鹿茸と同等或いはより優れた薬理活性を有する。

【0027】

本発明の好ましい具体例によると、本発明の１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物は、脾臓細胞活性増進の効果を有するため、これを含む免疫系疾患の予防又は治療用の医薬組成物であってよい。

【0028】

前記免疫系疾患は、生体の免疫系の異常から誘発される様々な炎症性疾患、アレルギー性疾患及び癌等を含み、例えば、風邪、喘息、肺炎、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、アレルギー、アルツハイマー病、自己免疫性甲状腺疾患、炎症性腸疾患、再生不良性貧血、紅斑性ループス及び乾癬等が含まれ得るが、これらに限定されるものではない。

【0029】

本発明の免疫系疾患の予防又は治療用の医薬組成物は、ＺＡＤＡＸＩＮ（チモシンα−１）、ＥＰ−ＨＢＳ（HBV Therapeutic Vaccine）、ＨＢＶ Ｃｏｒｅ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｖａｃｃｉｎｅ、ＬＰＳ、Ｃｏｎ．Ａのような免疫刺激剤、或いはイントロンＡ（インターフェロンα−２ｂ）、ペガシス（ペグインターフェロンα−２ａ）のような免疫調節剤とともに投薬されてもよい。

【0030】

本発明の他の一具体例として、本発明の１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物は、成長ホルモン（ＧＨ）及びインスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）を含んでおり、これを含む成長疾患の予防又は治療用の医薬組成物であってよい。

【0031】

本発明の成長疾患の予防又は治療用の医薬組成物は、成長ホルモンを増加させるため、小人症、矮小症、小児の発育不振及び成長低下のような成長疾患の予防及び治療に有用に使用され得る。

【0032】

本発明の他の一具体例として、本発明の１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物は、エリスロポエチン（ＥＰＯ）を含んでおり、これを含む貧血の予防又は治療用の医薬組成物であってよい。

【0033】

エリスロポエチン（ＥＰＯ）は、赤血球系先祖細胞を赤血球として成熟させるために必要な糖タンパク質ホルモンである。これは腎臓から生成され、循環の際に赤血球レベルを調節するために必須的なものである。

【0034】

貧血は、ヘモグロビン数の減少、血液中のヘモグロビンの量的減少、ヘモグロビン分子の酸素結合能力の低下による組職細胞への酸素供給が減少した生理的反応である。本発明によって治療することができる症状は、腎臓機能の衰退又は損失（慢性腎不全）に関する貧血、化学療法又は抗−ウイルス薬剤（例えば、ＡＺＴ）のような骨髓抑制療法に関する貧血、非−骨髓癌の進行に関する貧血、ウイルス感染（例えば、ＨＩＶ）に関する貧血、及び慢性疾病の貧血が含まれるが、これらに限定されるものではない。

【0035】

本発明の貧血の予防又は治療用の医薬組成物は、造血細胞を増殖し、分化及び動員（モビリゼーション）を刺激することができる。本発明は、造血細胞の増殖又は分化を刺激するか、或いは造血細胞を動員することが好ましい場合であれば、いつでも有用である。造血細胞の動員は、骨髓内の初期起源細胞の豊富さ、並びにこれら細胞が動員剤（例えば、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＭ−ＣＳＦ等）と反応して周辺へ漸増することを特徴とする。本発明による有用な製剤は、造血細胞欠乏を阻害するか、或いはこのような欠乏を有する個体の造血及び成熟血液細胞数の回復のために用いられ得る。このような製剤は、さらに、個体の免疫システムの補充又は生成のために用いられる場合、骨髓又は末梢血液移植片のような造血細胞移植片に関して用いることもできる。また、この製剤は、免疫助剤としても用いられ得る。なお、この製剤は、治療及び研究用途のための細胞の培養に関して試験管内で有用である。

【0036】

本発明の他の一具体例として、本発明の１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物は、骨密度改善効果を有しており、これを含む骨粗鬆症の予防又は治療用の医薬組成物であってよい。

【0037】

骨粗鬆症は、骨組職の石灰が減少することで骨の緻密質が薄くなり、それによって骨髄腔が広くなる状態のことであり、原発性骨粗鬆症（例えば、加齢による原発性骨粗鬆症、閉経による原発性骨粗鬆症、卵巣摘出術による原発性骨粗鬆症等）、二次性骨粗鬆症（例えば、グルココルチコイド誘発性骨粗鬆症、甲状腺機能亢進性骨粗鬆症、固定誘発性骨粗鬆症、ヘパリン誘発性骨粗鬆症、免疫抑制誘発性骨粗鬆症、腎不全による骨粗鬆症、炎症性骨粗鬆症、クッシング症候群による骨粗鬆症、リウマチ性骨粗鬆症等）に分けることができる。

【0038】

本発明の鹿角抽出物は、骨粗鬆症の予防及び治療のために単独で用いるか、或いは従来から用いられてきた骨粗鬆症に対する予防又は治療活性を有する物質を含んで用いてもよく、手術、放射線治療、ホルモン治療、化学治療、及び生物学的反応調節剤を用いる方法と併用することができる。

【0039】

本発明の他の一具体例として、本発明は、１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物を含むリウマチ関節炎の予防又は治療用の医薬組成物であってよい。

【0040】

リウマチ関節炎とは、滑膜組織を侵す原因不明の慢性且つ進行性の自己免疫疾患であり、不可逆的な関節損傷、慢性痛症、間接強直、及び機能的損傷を引き起こす慢性炎症性全身疾患である。

【0041】

関節リウマチの動物モデルにおいて、ＩＩ型コラーゲンを経口投与すれば、パイエル板（peyer's patch）内でＣＤ１１ｃ＋、ＣＤ１１ｂ＋樹状細胞の割合が増加し、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋調節Ｔ細胞の誘導が増加するため、経口寛容（oral tolerance）を誘導して免疫抑制効果を奏する。また、ＣＤ１１ｃ＋、ＣＤ１１ｂ＋樹状細胞は、養子移入（adoptive transfer）によってリウマチ関節炎の深刻性を軽減する（ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol. 54, No. 3, March 2006, pp.887〜898を参照）。

【0042】

本発明の免疫系疾患、成長疾患、貧血、骨粗鬆症又はリウマチ関節炎の予防又は治療用の医薬組成物は、医薬的に有効な量で投与される。本発明において用いられる用語「薬剤学的に有効な量」とは、医学的治療に適用可能な合理的な受恵／危険の割合で疾患を治療するのに十分な量を意味する。有効用量の水準は、患者の性別、年齢、疾患の重さ（程度）、薬物の活性、薬物に対する敏感度、投与時間、投与経路及び排出割合、治療期間、同時に用いられる薬物を含む要素、並びにその他の医学分野において公知となった要素によって決定され得る。本発明の組成物は、個別治療剤として投与するか、或いは他の治療剤と併せて投与されてもよく、従来の治療剤と順次又は同時に投与されてもよい。単回又は複数回投与されてもよい。前記要素を全て考慮した上で、副作用のない最小限の量で最大効果が得られる量を投与することが重要であり、当業者によって容易に決定され得る。本発明の調製方法によって調製された化合物を含む組成物の投与方法は、経口投与又は静脈投与が好ましい。特定患者に対する投与用量の水準は、性別、年齢、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、薬剤混合、及び疾患の重さによって変化され得る。

【0043】

それは、医学的に許容可能な任意の投与方式によって実施され得る。このような投与方式としては、経口、直腸、局所、鼻腔、皮内又は非経口経路がある。用語の「非経口」とは、皮下、静脈内、筋肉内又は注入を含む。静脈内又は筋肉内経路は、長期間の療法及び予防法には特に好ましくない。しかしながら、これらは応急状況では好ましい場合がある。個体の利便性及び投与日程を考慮すると経口投与が好ましい。

【0044】

本発明の免疫系疾患、成長疾患、貧血、骨粗鬆症又はリウマチ関節炎の予防又は治療用の医薬組成物は、薬剤学的に適合し、且つ生理学的に許容される助剤を用いて調製されてもよい。前記助剤としては、賦形剤、崩壊剤、甘味剤、結合剤、被覆剤、膨張剤、潤滑剤、滑沢剤又は香味剤等を用いることができる。さらに、投与のため、薬剤学的に許容可能な担体を１種以上含むことで、薬剤学的な組成物として好ましく製剤化することができる。薬剤の製剤形態は、顆粒剤、散剤、錠剤、被覆錠、カプセル剤、座剤、液剤、シロップ、汁、懸濁剤、及び油剤等であってよいが、これらに限定されるものではない。

【0045】

例えば、錠剤又はカプセル剤の形態への製剤化のために、有効成分は、エタノール、グリセロール、水等のような経口、無毒性の薬剤学的に許容可能な不活性担体と結合され得る。また、所望又は必要に応じて、適合する結合剤、潤滑剤、崩壊剤、及び発色剤もさらに混合物として含まれ得る。適合する結合剤は、澱粉、ゼラチン、グルコース又はβ−ラクトースのような天然糖、トウモロコシ甘味剤、アカシア、トラガカント又はオレイン酸ナトリウムのような天然及び合成ガム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が含まれるが、これらに限定されるものではない。崩壊剤は、澱粉、メチルセルロース、アガロース、ベントナイト、キサンタンガムが含まれるが、これらに限定されるものではない。

【0046】

液状溶液として製剤化される医薬組成物において、薬剤学的に許容可能な担体としては、滅菌及び生体に適合したものであって、食塩水、滅菌水、リンガー溶液、緩衝食塩水、アルブミン注射溶液、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、エタノール、及びこれらの成分のうち１成分以上を混合して使用することができ、必要に応じて、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤等の他の通常の添加剤を添加することができる。また、希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤、及び潤滑剤を付加的に添加して、水溶液、懸濁液、乳濁液等の丸剤、カプセル剤、顆粒剤または錠剤等に製剤化することができる。さらには、当該技術分野の適宜な方法として、Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PAに開示されている方法を用いて、各疾患または成分に応じて好適に製剤化することができる。

【0047】

非経口投与のための製剤としては、滅菌水性又は非水性溶液、懸濁液及び乳化液がある。非水性溶媒の例としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物性オイル（例えば、オリーブ油）及び注射可能な有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）である。水性担体では、食塩水及び緩衝媒質を含み、水、アルコール／水溶液、乳化液又は懸濁液がある。非経口賦形剤では、塩化ナトリウム溶液、リンゲル（Ringer）デキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、ラクテート化リンゲル又は固定オイルがある。静脈内賦形剤では、流体及び栄養補充液、電解質補充液（例えば、リンゲルデキストロースを基剤とするもの）等がある。防腐剤及び他の添加剤、例えば、抗菌剤、酸化防止剤、キレート剤及び不活性気体等が存在してもよい。さらに少ない投与量は、静脈内投与のような他の投与形態によって行われてもよい。適用された初期投与量による個体の反応が不十分である場合は、個体の耐性が許容する程度までさらに多い投与量（又は異なる、さらに限られた伝達経路による、効果のあるさらに多い投与量）が用いられ得る。１日複数回の投与が考慮され得る。

【0048】

本発明の免疫系疾患、成長疾患、貧血、骨粗鬆症又はリウマチ関節炎の予防又は治療用の医薬組成物は、日常的に、塩、緩衝剤、防腐剤、相溶性担体、及び任意で他の治療剤を含んでもよい。塩は、薬に用いられる際に医薬的に許容可能でなければならないが、医薬的に許容不可能な塩も、その医薬的に許容可能な塩を調製する際に好適に用いられ得、本発明の範疇から除外されない。このような薬理学的及び医薬的に許容可能な塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、窒酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、クエン酸、ギ酸、マロン酸、コハク酸等から調製されたものがあるが、これらに限定されるものではない。また、医薬的に許容可能な塩は、ナトリウム、カリウム又はカルシウム塩のようなアルカリ金属又はアルカリ土類金属塩として調製され得る。

【0049】

本発明の他の一具体例として、本発明は、１３０℃以上の高温で抽出された鹿角抽出物を含む健康機能食品であってよい。

【0050】

本発明の健康機能食品は、免疫促進、成長ホルモン増加、造血機能改善、骨密度改善、及び関節リウマチ抑制からなる群から選択される効能を有する。

【0051】

本発明の健康機能食品は、乳製品、製菓、調味料、飲料及びドリンク剤、スナック、キャンディ類、アイスクリーム及び冷凍用デザート、シリアル類、栄養バー、スナックチョコバー製品、加工食品、穀物製品及びパスタ、スープ、ソース及びドレッシング、菓子製品、オイル及び脂肪製品、乳製品飲料（dairy drink）及び牛乳飲料、豆乳及び豆乳製品（soy dairy-like product）、冷凍食品、調理食品及び代替食品、肉類製品、チーズ、ヨーグルト、パン及びロールパン、酵母製品、ケーキ、クッキー及びクラッカーからなる群から選択されるいずれか一種であってよいが、これらに限定されるものではない。

【0052】

以下、本発明を具体的に説明するため、実施例を挙げて詳しく説明する。

【0053】

実施例１．鹿角抽出物の調製
鹿角を幅１ｃｍ程度に細く粉砕した後、そのうち１００ｇを高圧釜に投入し、水５００ｍｌを添加した後に、１３６℃で２時間加熱した。これをガーゼで濾過して水層を採取した後に、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離を行い透明な水層を得、遠心沈殿物及びガーゼの濾過残渣を合わせて蒸溜水２００ｍｌを添加した。その後、同様の条件で加熱及び濾過する工程をさらに２回繰り返した。抽出して遠心分離した上澄液を全て合わせた後に分液漏斗に投入し、同量のブタノールを添加してから振盪して分画する工程を２回繰り返した。その後、水層を採取して減圧濃縮し、その量が約２０％になるように濃縮した。続いて、セロハンの半透膜袋に投入し、蒸溜水を用いて４℃で４〜６時間透析することでゲル化された内容物を得、凍結乾燥して２６．２ｇの抽出物を得た。

【0054】

実施例２．鹿茸及び鹿角抽出物のＩＩ型コラーゲンの含有有無分析
鹿茸及び鹿角に同一のＩＩ型コラーゲンが含まれていることを確認するため、タンパク質が変性されない冷浸抽出法を用いた。鹿角及び鹿茸１０ｇを取って５０％酢酸１００ｍｌに投入し、４℃で２４時間冷浸させ非変性タンパク質を得た。その後、透析を通じて低分子物質を除去し、凍結乾燥によって粉末状態の鹿茸及び鹿角抽出物を得た。このような方法で調製し、非変性鹿茸及び鹿角抽出物を用いて、ＩＩ型コラーゲンの分析を行った。

【0055】

鹿茸及び鹿角から非変性タンパク質を抽出（Ａ−２）して１２％アクリルアミドゲルを製作した後、電気泳動（８０Ｖ、３０ｍＡ、２ｈｒ）を行った。サイズマーカー（１ｋｂ）、標準ＩＩ型コラーゲン、及びＩ型コラーゲンを共にローディングし、鹿茸及び鹿角タンパク質抽出物からコラーゲンを分析した。標準Ｉ型コラーゲン及びＩＩ型コラーゲンはｃｈｏｎｄｒｅｘ（ＵＳＡ）社より購入した。

【0056】

分析の結果、鹿角及び鹿茸抽出物において、ＩＩ型コラーゲン（５５ＫＤａ）及びＩ型コラーゲン（１３０ＫＤａ）のバンドが共に観察された。鹿角抽出物では、Ｉ型コラーゲンのバンドが濃く観察され、鹿茸抽出物では、ＩＩ型コラーゲンのバンドが濃く観察された（図２を参照）。ＳＤＳ−ＰＡＧＥをＵＮ−ＳＣＡＮ−ＩＴを用いてバンドの面積を求めた（図３を参照）。

【0057】

図２において、１は鹿角抽出物（Ossified antler extract）、２は鹿茸抽出物（Antler extract）、３はＩＩ型コラーゲン、４はＩ型コラーゲン、及びＭはサイズマーカーである。

【0058】

実験例１．鹿茸及び鹿角抽出物の免疫活性増進可否確認
脾臓細胞活性測定は、体内において肝と共に細胞分裂が最も活発な器官であって、免疫増加効果又は細胞再生能力を評価する際に主に用いられる臓器である。本実験では、ＳＤラット（rat）の脾臓を、１次細胞培養を通じて各群別に脾臓細胞を培養し、抗原コンカナバリンＡで処理し、それによる細胞増殖能を評価した。実験動物は、６週齢ＳＤラットを用い、鹿茸及び鹿角抽出物を３週間経口投与した後に開腹して動物の脾臓を分離した。分離した脾臓は、以下の段階を経てＭＴＴ試験（assay）を行った。

【0059】

各群別のＳＤラットは１０匹であり、温度２５±１℃、湿度５０±５％で飼育した。脾臓細胞は、温度２５±０．１℃、ＣＯ_２濃度５±０．２％で培養した。

【0060】

その結果、３週間鹿茸及び鹿角抽出物を経口投与したＳＤラットの脾臓を採取して１次細胞培養を通じて脾臓細胞の増殖を確認した結果、鹿茸抽出物及び鹿角抽出物を経口投与した動物の試料において兔疫細胞が増殖されることが確認された（図４を参照）。動物の重量１ｋｇ当たり１５０ｍｇの鹿茸抽出物を経口投与した動物の場合、対照群（control group）より脾臓細胞がさらに１２０％活性化され、鹿角抽出物を動物の重量１ｋｇ当たり１００〜２００ｍｇ経口投与した動物は、対照群と比較して脾臓細胞が約１１５〜１６０％程度増加した。各試料では、用量依存性（dose-dependency）が見られた。特に、鹿角抽出物１５０ｍｇ以上を経口投与した動物は、鹿茸抽出物１５０ｍｇを経口投与した動物の脾臓細胞活性より高い結果が示された。

【0061】

図４において、ＡＴは鹿茸抽出物（Antler extract）、ＯＡは鹿角抽出物（Ossified antler extract）投与群であり、１００、１５０、及び２００は投与量である（ｍｇ／ｋｇ）。

【0062】

実験例２．鹿茸及び鹿角抽出物が骨密度に与える影響の確認
６週齢ＳＤラットの雌を用い、韓国忠清南道動物資源センターに依頼して卵巣を摘出し、１週間の安定期を経てから、１６週間鹿茸及び鹿角抽出物を投与した。用いたＳＤラットは合計７０匹であり、各群当たり７匹ずつ合計１０つの群に分類した。温度は２５±１℃、湿度は５０±５％で飼育した。

【0063】

卵巣摘出を行っていないノーマル群、卵巣摘出は行っていないが腹部を開腹してから閉じたシャム（sham）群、卵巣摘出後にタンパク質源としてカゼインを経口投与した対照群、動物の重量１ｋｇ当たり１５０ｍｇの鹿茸抽出物を投与した群等を、正の対照（positive control）及び負の対照（negative control）に分類し、動物の重量１ｋｇ当たり５０、１００、１５０、２００、及び３００ｍｇの鹿角抽出物を濃度別で投与した５つの群に分類することで合計１０つの群に分類して実験を行った。各群の動物は、基本的に食餌を自由に摂取させ、それぞれの試料に対して経口投与した。骨密度の測定は、忠清北道梧倉邑の韓国基礎科学支援研究院のマイクロＣＴ装置（Inveon（商標）、Siemens Preclinical Solution, USA）を用いて測定し、測定条件は、レントゲン電圧８０ｋＶ、電流５００ｕＡ、露出時間２５０ｍｓ及び視野（ＦＯＶ；field of view）５６．９７＊７１．２１の条件で撮影した。得られた画像は、シェップ・ローガン（Shepp-Logan）フィルタ方式で映像を再構成した。映像分析は、Inveon Research Workplace（Siemens Preclinical Solution, USA）プログラムを用い、大腿骨体部分に関心領域を設定し、平均値を求めることでＢＭＤを算出した。測定部位は、大腿部頚部部分から大腿骨膝蓋面までを測定し、平均値を求めた。

【0064】

その結果、一般ＳＤラット及び開腹後に閉じたシャム群は、飼育８週まで骨密度が増加したが、それ以上増加しないまま１６週まで維持されることが観察された。卵巣摘出後にカゼインを投与した動物群では、８週以後から骨密度が低下することが観察された。動物の重量１ｋｇ当たり１５０ｍｇの鹿角抽出物及び鹿茸抽出物を投与した群は、８週以後でも骨密度が維持されることが観察された。特に、鹿角抽出物１５０ｍｇを投与した群は、１６週で一般ＳＤと僅差の数値まで増加し、骨密度改善効果が確認された（図５を参照）。

【0065】

図５において、ＣＡは、カゼイン１５０ｍｇ／ｋｇの投与群、ＡＴは、鹿茸抽出物１５０ｍｇ／ｋｇの投与群、及びＯＡは、鹿角抽出物１５０ｍｇ／ｋｇの投与群である。

【0066】

実験例３．鹿茸及び鹿角抽出物を投与した動物の血中ＧＨ（growth hormone）及びＩＧＦ（insulin like growth factor）変化の測定
６週齢ＳＤラットの雌を用い、卵巣を摘出した後に１週間の安定期を経てから、１６週間１日１回試料を投与して骨密度の経時変化を測定し、最終の１６週後に開腹して心臓から血液を採取し、常温で１時間放置した後、遠心分離（６０００ｒｐｍ、１５分）を行うことで血清を分離した。分離した血清は、ＧＨ、ＩＧＦ−１（Ｒ＆Ｄ）試験キットを用いて、酵素免疫測定法により測定した。

【0067】

各群別のＳＤラットは７匹であり、温度は２５±１℃、湿度は５０±５％で飼育した。

【0068】

その結果、骨密度改善に影響を与えた結果と類似のパターンを示した。ノーマル及びシャム群の血清中のＧＨは、３０ｎｇ／ｍｌレベルであり、卵巣を摘出してカゼインを投与した群は、２０ｎｇ／ｍｌであって、ノーマル及びシャム群と比較して血清中のＧＨ数値が低く測定された。鹿角抽出物１５０ｍｇを投与した群の血清ＧＨは、大方ノーマルより高く測定された（図６を参照）。同様の血清を用いてＩＧＦ−１を測定した結果でも、ＧＨの結果と同様に測定された（図７を参照）。これは、同一量の鹿茸抽出物を投与した群における結果よりさらに約１０％優れた結果である。

【0069】

図６及び７において、ＯＰは卵巣摘出（Oophorectomy）、Ｃａはカゼイン、ＡＴは鹿茸抽出物、ＯＡは鹿角抽出物、５０、１００、１５０、２００、及び３００は投与量（ｍｇ／ｋｇ）である。

【0070】

実験例４．鹿茸及び鹿角抽出物を投与した動物の血中ＥＰＯ（erythropoietin）変化の測定
６週齢ＳＤラットの雌を用い、卵巣を摘出した後に１週間の安定期を経てから、３週間鹿茸及び鹿角抽出物を投与した。使用動物は合計３５匹であり、各群当たり７匹ずつ計５つの群に分類した。温度は２４±１℃、湿度は５０％±５で飼育した。

【0071】

食水を投与した対照群、動物の重量１ｋｇ当たり１５０ｍｇの鹿茸抽出物を投与した群等を正の対照及び負の対照に分類し、動物の重量１ｋｇ当たり１００、１５０、及び２００ｍｇの鹿角抽出物を濃度別に投与した３つの群に分類して、合計５つの群に分類して実験を行った。各群の動物に試料を３週間経口投与した後、心臓から血液を採取し、常温で１時間放置した後、６０００ｒｐｍで１５分間遠心分離を行うことで血清を分離した。分離した血清は、ＥＰＯ試験キット（ＭＳＤ社）を用いて、酵素免疫測定法により測定した。

【0072】

その結果、対照群の血中ＥＰＯが２５ｎｇ／ｍｌレベルであるのに対して、鹿茸１５０ｍｇ／ｋｇを投与した動物群では、血中ＥＰＯ濃度が対照群対比６０％増加した４０ｎｇ／ｍｌレベルであり、鹿角１００〜２００ｍｇ／ｋｇを投与した動物の血中ＥＰＯ濃度は、対照群対比５０％増加した３７±３ｎｇ／ｍｌレベルであった。鹿角抽出物を投与した動物の血中ＥＰＯ濃度は、鹿茸抽出物を投与した動物の血中ＥＰＯ濃度より高くはなかったが、対照群動物より向上された数値を示した（図８を参照）。

【0073】

図８において、ＡＴ１５０は、鹿茸抽出物１５０ｍｇ／ｋｇの投与群、ＯＡは、それぞれ鹿角抽出物１００、１５０、及び２００ｍｇ／ｋｇの投与群である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】