特許 6063571 ヘリコバクター・ピロリ感染の治療

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6063571

(24)【登録日】2016年12月22日

(45)【発行日】2017年1月18日

(54)【発明の名称】ヘリコバクター・ピロリ感染の治療

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/519 20060101AFI20170106BHJP

   C07D 487/04 20060101ALI20170106BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20170106BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/519

   C07D487/04 140

   C07D487/04CSP

   A61P1/04

【請求項の数】30

【全頁数】67

(21)【出願番号】特願2015-526657(P2015-526657)

(86)(22)【出願日】2013年8月7日

(65)【公表番号】特表2015-524475(P2015-524475A)

(43)【公表日】2015年8月24日

(86)【国際出願番号】US2013053885

(87)【国際公開番号】WO2014025842

(87)【国際公開日】20140213

【審査請求日】2015年4月1日

(31)【優先権主張番号】61/680,334

(32)【優先日】2012年8月7日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/806,476

(32)【優先日】2013年3月29日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】515314797

【氏名又は名称】アルバート アインシュタイン カレッジ オブ メディシン，インコーポレイティド

(73)【特許権者】

【識別番号】515144839

【氏名又は名称】ビクトリア リンク リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110001173

【氏名又は名称】特許業務法人川口國際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】シュラム，バーン・エル

(72)【発明者】

【氏名】ワン，シャンジー

(72)【発明者】

【氏名】ハッパライネン，アンティ・マルコ

(72)【発明者】

【氏名】エバンス，ゲイリー・ブライアン

(72)【発明者】

【氏名】フルノー，リチャード・ヒューバート

(72)【発明者】

【氏名】クリンチ，キース

(72)【発明者】

【氏名】タイラー，ピーター・チャールズ

(72)【発明者】

【氏名】グラブ，シバリ・アシュウィン

【審査官】 中尾 忍

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２０１１／０１９０２６５（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 J. Biol. Chem.，２０１１年 ６月 ３日，Vol.286，No.22，p.19392-19398

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／５１９

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

被験者におけるヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）感染の治療に使用するための、式（Ｉ）

【化1】

（式中、
ＶはＣＨ_２であり且つＷはＮＲであるか、またはＶはＮＨであり且つＷはＣＨＲであり；
ＸはＲまたはＳ立体配置のＣＨ_２及びＣＨＯＨから選択され；
ＺはＱまたはＳＱであり；ここで
ＱはＣ_１−Ｃ_８アルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキルメチル、アリール、ヘテロアリールまたはアルアルキルであり、これらの各々は場合により１個以上のハロゲンまたはメチル基で置換されており、または
ＱはＣＨ_２＝ＣＨ−（ＣＨ_２）_ｄ−またはＣＨ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_ｄ−であり、ここでｄは０、１、２、３、４、５または６であり、または
ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ａ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｂ−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ａは０、１、２、３、４、５または６であり、ｂは１、２、３、４、５、６または７であり、Ｚの鎖長が８個以下のＣ、Ｏ及びＳ原子であるように選択され、または
ＺはＱであり、ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ｅ−Ｓ−ＣＨ_２−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ｅは２、３、４、５または６であり、Ｑの鎖長が８個以下のＣ、Ｏ及びＳ原子であるように選択され；
Ｒは

【化2】

であり；
ＧはＣＨ_２であるか、またはＧは存在しない）
の化合物、またはその医薬的に許容され得る塩を含む、ピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項2】

前記化合物が、式（Ｉａ）

【化3】

（式中、
ＶはＣＨ_２であり且つＷはＮＲであるか、またはＶはＮＨであり且つＷはＣＨＲであり；
ＸはＲまたはＳ立体配置のＣＨ_２及びＣＨＯＨから選択され；
ＺはＳＱまたはＱであり；
ＱはＣ_１−Ｃ_５アルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキルメチル、アリールまたはアルアルキルであり、これらの各々は場合により１個以上のハロゲン、ヒドロキシ及び／またはメチル基で置換されており；
Ｒは

【化4】

であり；
ＧはＣＨ_２であるか、またはＧは存在しない）
の化合物、またはその医薬的に許容され得る塩である請求項１に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項3】

ＶはＣＨ_２であり、ＷはＮＲであり、ＧはＣＨ_２であり、ＸはＣＨ_２である請求項１または２に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項4】

ＶはＮＨであり、ＷはＣＨＲであり、Ｇは存在せず、ＸはＣＨＯＨである請求項１または２に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項5】

ＺはＱである請求項１〜４のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項6】

ＺはＳＱである請求項１〜４のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項7】

ＱはＣ_１−Ｃ_５アルキルである請求項１〜６のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項8】

ＱはＣ_４−Ｃ_７シクロアルキルである請求項１〜６のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項9】

Ｑはアリールである請求項１〜６のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項10】

Ｑはメチル基またはハロゲンで置換されているアリールである請求項１〜６のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項11】

前記メチル基またはハロゲンはオルト、メタまたはパラ位にある請求項１０に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項12】

前記ハロゲンはＣｌ、Ｆ、ＢｒまたはＩである請求項１〜１１のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項13】

前記化合物が、式

【化5】

を有する化合物、またはその医薬的に許容され得る塩である請求項１または２に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項14】

前記化合物が、式

【化6】

を有する化合物、またはその医薬的に許容され得る塩である請求項１または２に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項15】

Ｚは

【化7】

からなる群から選択される請求項１〜４または１３〜１４のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項16】

前記化合物が、

【化8】

からなる群から選択される請求項１〜２または１３〜１４のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項17】

前記化合物が、

【化9】

からなる群から選択される請求項１〜２または１３〜１４のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項18】

被験者におけるピロリ菌感染の治療に使用するための、

【化10】

からなる群から選択される化合物、またはその医薬的に許容され得る塩を含む、ピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項19】

被験者におけるピロリ菌感染の治療に使用するための、

【化11】

からなる群から選択される化合物、またはその医薬的に許容され得る塩を含む、ピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項20】

前記化合物が、

【化12】

である請求項１〜２または１３のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項21】

前記化合物が、ピロリ菌５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼ（ＭＴＡＮ）を阻害する、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項22】

ＶがＣＨ_２であり、ＷがＮＲであり、ＸがＣＨ_２であり、ＧがＣＨ_２であり、ＺがＳＱであるとき、Ｑはメチル、エチル、ベンジルまたはｐ−クロロフェニルでない請求項１〜２または２１のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項23】

前記化合物は、ピロリ菌の増殖を抑制するが、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、コレラ菌（Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、肺炎桿菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、赤痢菌（Ｓ．ｆｌｅｘｎｅｒｉ）、サルモネラ菌（Ｓ．ｅｎｔｅｒｉｃａ）及び緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）からなる群から選択される１つ以上の細菌の増殖を抑制しない、請求項１〜２２のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項24】

前記化合物が、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、コレラ菌（Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、肺炎桿菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、赤痢菌（Ｓ．ｆｌｅｘｎｅｒｉ）、サルモネラ菌（Ｓ．ｅｎｔｅｒｉｃａ）及び緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）のすべての増殖を抑制しない、請求項２３に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項25】

前記化合物が、ピロリ菌の増殖の抑制の点で、アモキシシリン、メトロニダゾールまたはテトラサイクリンよりも有効である請求項１〜２４のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項26】

前記被験者が、消化性潰瘍を患っている請求項１〜２５のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項27】

前記被験者が、胃潰瘍または十二指腸潰瘍を患っている請求項１〜２５のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項28】

経口投与のための、請求項１〜２７のいずれか一項に記載のピロリ菌の増殖抑制剤。

【請求項29】

【化13】

から選択される化合物、またはその医薬的に許容され得る塩。

【請求項30】

請求項２９に記載の化合物及び医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、特に消化性潰瘍を患っている被験者におけるヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）に起因する感染のピロリ菌ＭＴＡＮ（５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼ）の阻害剤を用いる治療に関する。

【背景技術】

【0002】

本明細書を通じて各種刊行物が上付き文字で言及されている。これらの刊行物は特許請求の範囲の前の明細書の最後に完全に列挙されている。これらの刊行物の開示内容は本出願が関わる技術をより完全に記載するために参照により本明細書に全文組み入れられる。

【0003】

ピロリ菌はグラム陰性菌であり、ヒト宿主の胃粘膜中に微好気的に生存している。ピロリ菌が胃潰瘍の８５％、十二指腸潰瘍の９５％に関連している^１。薬物耐性がピロリ菌の臨床分離株で見られている。特定の抗生物質を用いて３０年未満の治療後では、２つの抗生物質の組合せを２週間治療で使用してもピロリ菌を根絶することはますます難しくなる^２。ピロリ菌感染を治療するためには新しい標的及び作用メカニズムを有する抗生物質が必要である。

【0004】

グラム陰性菌は呼吸における電子伝達体としてメナキノンに依存しており、これらの必須代謝物質のために生合成経路を維持している^３。対照的に、ヒトはメナキノン合成の経路を欠いており、メナキノン経路を標的とすると抗細菌薬の設計アプローチが与えられ得る。最近、メナキノン合成経路が多くの細菌とは異なるカンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）及びヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）で提案された^４，５。この経路では、６−アミノ−６−デオキシフタロシンがＭｑｎＡにより合成され、Ｎ−リボシド結合でＭＴＡＮで開裂されると、５’−メチルチオアデノシン及びアデノシルホモシステイン、６−アミノ−６−デオキシフタロシンに延長する。ＨｐＭＴＡＮは６−アミノ−６−デオキシフタロシンをアデニン及びデヒポキサンチンフタロシンに変換し、後者はメナキノン合成のプロセッサーとして使用される（図１Ａ）。この経路の初期反応はヒトの正常細菌叢中には存在せず、酵素により薬物標的を引きつけるこれらの反応は触媒される。ＨｐＭＴＡＮは、他の細菌中に存在している５’−メチルチオアデノシン／Ｓ−アデノシルホモシステインヒドロラーゼ（ＭＴＡＮ）に密接に関連している。十分に特徴づけられているＭＴＡＮは多くの種でクオラムセンシング及びＳ−アデノシルメチオニンリサイクリングに関連しており、細菌増殖のために必須ではない^６。ピコモル〜フェムトモル親和性を有する遷移状態アナログ阻害剤がクオラムセンシングに関連する細菌機能を中断するために開発された^６，７。

【0005】

本発明は、ピロリ菌の増殖を選択的に阻止する新しい化合物に対するニーズに対処する。

【発明の概要】

【0006】

本発明は、被験者に対してヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）の増殖を抑制するのに有効な量の式（Ｉ）の化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルを投与することを含む前記被験者におけるピロリ菌感染の治療方法を提供し、式（Ｉ）は

【0007】

【化1】

（式中、
ＶはＣＨ_２であり且つＷはＮＲであるか、またはＶはＮＨであり且つＷはＣＨＲであり；
ＸはＲまたはＳ立体配置のＣＨ_２及びＣＨＯＨから選択され；
ＺはＱまたはＳＱであり；ここで
ＱはＣ_１−Ｃ_７アルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキルメチル、アリール、ヘテロアリールまたはアルアルキルであり、これらの各々は場合により１個以上のハロゲンまたはメチル基で置換されており、または
ＱはＣＨ_２＝ＣＨ−（ＣＨ_２）_ｄ−またはＣＨ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_ｄ−であり、ここでｄは０、１、２、３、４、５または６であり、または
ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ａ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｂ−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ａは０、１、２、３、４、５または６であり、ｂは１、２、３、４、５、６または７であり、Ｚの鎖長が８個以下のＣ、Ｏ及びＳ原子であるように選択され、または
ＺはＱであり、ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ｅ−Ｓ−ＣＨ_２−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ｅは２、３、４、５または６であり、Ｑの鎖長が８個以下のＣ、Ｏ及びＳ原子であるように選択され；
Ｒは

【0008】

【化2】

であり；
ＧはＣＨ_２であるか、またはＧは存在しない）
である。

【0009】

本発明は更に、式（ＩＩ）

【0010】

【化3】

（式中、
ＺはＱまたはＳＱであり、ＱはＣ_４−Ｃ_７シクロアルキル、ヘテロアリール、Ｒ^１−（ＣＨ_２）_ａ−であり、ここでＲ^１はＨであり、ａは５、６、７であるか、またはＲ^１はＯＨ、ＯＭｅ、ＣＨ_２＝ＣＨ−またはＣＨ≡Ｃ−、ＯＭｅまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ａは２、３、４、５、６または７であり、Ｚの鎖長が８個以下のＣ、Ｏ及びＳ原子であるように選択され；または
ＺはＱであり、ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ａ−であり、ここでＲ^１はＨであり、ａは４であり；または
ＺはＱであり、ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ｅ−Ｓ−ＣＨ_２−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ｅは２、３または４である）
の構造を有する化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルを提供する。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】ＭＴＡＮにより触媒される反応、その提案されている遷移状態及び遷移状態アナログ阻害剤ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）。Ａ：ピロリ菌におけるメナキノン経路の提案されている初期ステップ。ＭｑｎＡ反応の提案されている基質にはクエッションマークが付けられている。Ｂ：ＨｐＭＴＡＮにより触媒される反応及び提案されている遷移状態。Ｒ’は遷移状態を超えた後水からのヒドロキシドの形成をもたらすプロトン吸引基である。候補はＧｌｕ１３及びＧｌｕ１７５である（図２）。Ｃ：ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）。

【図2】ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）との複合体中のＨｐＭＴＡＮの活性状態。Ａ：結合したＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡを有するＨｐＭＴＡＮの活性状態の結晶構造。この図は１．５σで輪郭を有する阻害剤及び触媒水分子の周りの２Ｆｏ−Ｆｃマップを示す。このグラフはＰｙｍｏｌを用いて作成した。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡとの複合体中のＨｐＭＴＡＮの結晶構造はタンパク質データバンクに寄託番号４ＦＦＳで受託されている。Ｂ：ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ、水分子及びＨｐＭＴＡＮの残基間の相互作用の概略図。残基Ｐｈｅ１０７及びＬｅｕ１０４はＨｐＭＴＡＮダイマーの隣接モノマーに属している。破線は水素結合を表す。示されている全ての水素結合は、３’−ＯＨに対する水（３．１Å）及びＧｌｕ１７５に対する水（３．３Å）を除いて３Å以下である。

【図3】ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）のピロリ菌増殖に対する効果。Ａ：ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡの濃度（ｎｇ／ｍｌ）増加の血液寒天での増殖に対する効果。Ｂ：阻害研究のゾーンでＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡの阻害効果をアモキシシリン、メトロニダゾール及びテトラサイクリと比較する。薬物濃度は０（上部ディスク）、１０ｎｇ（中央ディスク）、または２０ｎｇ（下部ディスク）であった。各々の特定抗生物質を同一方法でディスクに適用した。１０ｎｇ ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡでクリアランスの小ゾーン（右中央）、２０ｎｇで大きいゾーン（右下）が見られた。

【図4】ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）と結合したＨｐＭＴＡＮの結晶構造。この図はＰｙｍｏｌを用いて作成した。

【発明を実施するための形態】

【0012】

本発明は、被験者に対してヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）の増殖を抑制するのに有効な量の式（Ｉ）の化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルを投与することを含む前記被験者におけるピロリ菌感染の治療方法を提供し、式（Ｉ）は

【0013】

【化4】

（式中、
ＶはＣＨ_２であり且つＷはＮＲであるか、またはＶはＮＨであり且つＷはＣＨＲであり；
ＸはＲまたはＳ立体配置のＣＨ_２及びＣＨＯＨから選択され；
ＺはＱまたはＳＱであり；ここで
ＱはＣ_１−Ｃ_７アルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキルメチル、アリール、ヘテロアリールまたはアルアルキルであり、これらの各々は場合により１個以上のハロゲンまたはメチル基で置換されており、または
ＱはＣＨ_２＝ＣＨ−（ＣＨ_２）_ｄ−またはＣＨ≡Ｃ−（ＣＨ_２）_ｄ−であり、ここでｄは０、１、２、３、４、５または６であり、または
ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ａ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｂ−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ａは０、１、２、３、４、５または６であり、ｂは１、２、３、４、５、６または７であり、Ｚの鎖長が８個以下のＣ、Ｏ及びＳ原子であるように選択され、または
ＺはＱであり、ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ｅ−Ｓ−ＣＨ_２−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ｅは２、３、４、５または６であり、Ｑの鎖長が８個以下のＣ、Ｏ及びＳ原子であるように選択され；
Ｒは

【0014】

【化5】

であり；
ＧはＣＨ_２であるか、またはＧは存在しない）
である。

【0015】

１つの実施形態において、前記化合物は式（Ｉａ）の化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルであり、式（Ｉａ）は

【0016】

【化6】

（式中、
ＶはＣＨ_２であり且つＷはＮＲであるか、またはＶはＮＨであり且つＷはＣＨＲであり；
ＸはＲまたはＳ立体配置のＣＨ_２及びＣＨＯＨから選択され；
ＺはＳＱまたはＱであり；
ＱはＣ_１−Ｃ_５アルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキル、Ｃ_４−Ｃ_７シクロアルキルメチル、アリールまたはアルアルキルであり、これらの各々は場合により１個以上のハロゲン、ヒドロキシ及び／またはメチル基で置換されており；
Ｒは

【0017】

【化7】

であり；
ＧはＣＨ_２であるか、またはＧは存在しない）
である。

【0018】

好ましくは、ＶはＣＨ_２であり、ＷはＮＲであり、ＧはＣＨ_２であり、ＸはＣＨ_２であり；またはＶはＮＨであり、ＷはＣＨＲであり、Ｇは存在せず、ＸはＣＨＯＨである。

【0019】

ＺはＱ、ＣＨ_２ＱまたはＳＱであり得る。好ましい化合物には、ＺがＳＱであるものが含まれる。

【0020】

Ｑは、例えばＣ_１−Ｃ_７アルキル、例えばメチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（Ｐｒ）、ブチルまたはペンチル基のようなＣ_１−Ｃ_５アルキルであり得る。Ｑは、例えばＣ_４−Ｃ_７シクロアルキル、すなわちＣ_４シクロアルキル、Ｃ_５シクロアルキル、Ｃ_６シクロアルキルまたはＣ_７シクロアルキルであり得る。Ｑは、例えばアリールであり得る。用語「アリール」は６〜１２個の炭素原子を有する芳香族ラジカルを意味し、ヘテロ芳香族ラジカルが含まれる。好ましいアリールには、６個の炭素原子を有するものが含まれる。Ｑは、例えばＣ_４−Ｃ_７シクロアルキルメチルまたはアルアルキル、例えばシクロヘキシルメチルまたはベンジル基でもあり得る。Ｑは、例えばメチル基、ヒドロキシ及び／またはハロゲン（例えば、Ｃｌ、Ｆ、ＢｒまたはＩ）で置換され得る。塩素及びフッ素が好ましいハロゲンである。メチル基またはハロゲン置換はオルト、メタまたはパラ位にあり得る。Ｚ及びＱの追加の例は本明細書中に例示されている。

【0021】

好ましい化合物には、式

【0022】

【化8】

または、式

【0023】

【化9】

を有する化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルが含まれる。

【0024】

好ましい化合物には、Ｚが

【0025】

【化10】

（式中、矢印は化合物への結合ポイントを指す）
からなる群から選択される化合物が含まれる。

【0026】

好ましい化合物には、

【0027】

【化11】

からなる群から選択される化合物、及び

【0028】

【化12】

からなる群から選択される化合物が含まれる。

【0029】

従って、本発明は、被験者に対してヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）の増殖を抑制するのに有効な量の化合物を投与することを含む前記被験者におけるピロリ菌感染の治療方法を提供し、前記化合物は

【0030】

【化13】

からなる群から選択される化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルであり、及び

【0031】

【化14】

からなる群から選択される化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルである。

【0032】

好ましい化合物には、

【0033】

【化15】

或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルが含まれる。

【0034】

用語「医薬的に許容され得る塩」には、無機または有機酸から誘導される非毒性塩が含まれ、これらには例えば酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、半硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パルモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩及びウンデカン酸塩が含まれる。

【0035】

好ましくは、化合物をピロリ菌５’−メチルチオアデノシンヌクレオシダーゼ（ＭＴＡＮ）を阻害するのに有効な量で投与する。

【0036】

ＶがＣＨ_２であり、ＷがＮＲであり、ＸがＣＨ_２であり、ＧがＣＨ_２であり、ＺがＳＱである化合物を用いる方法の１つの実施形態において、Ｑはメチル、エチル、ベンジルまたはｐ−クロロフェニルでない。

【0037】

好ましくは、化合物はピロリ菌の増殖を抑制するが、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、コレラ菌（Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、肺炎桿菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、赤痢菌（Ｓ．ｆｌｅｘｎｅｒｉ）、サルモネラ菌（Ｓ．ｅｎｔｅｒｉｃａ）及び緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）からなる群から選択される１つ以上の細菌の増殖を抑制しない。より好ましくは、化合物は大腸菌、コレラ菌、黄色ブドウ球菌、肺炎桿菌、赤痢菌、サルモネラ菌及び緑膿菌のすべての増殖を抑制しない。好ましくは、化合物はピロリ菌の増殖においてアモキシシリン、メトロニダゾールまたはテトラサイクリンよりもより有効である。

【0038】

好ましくは、被験者は消化性潰瘍、例えば胃潰瘍または十二指腸潰瘍を患っている。

【0039】

好ましくは、化合物を経口投与する。経口投与の場合、化合物は固体または液体製剤、例えば錠剤、カプセル剤、散剤、溶液剤、懸濁液剤及び分散液剤に製剤化され得る。化合物は、例えばラクトース、スクロース、トウモロコシ澱粉、ゼラチン、ジャガイモ澱粉、アルギン酸及び／またはステアリン酸マグネシウムのような物質を用いて製剤化され得る。

【0040】

化合物は被験者に対して当業界で公知の他のルートにより、例えば非経口的に、吸入により、局所的に、直腸内に、鼻腔内に、口腔に、または移植したリザーバを介しても投与され得る。化合物は徐放手段により投与され得る。

【0041】

本発明は更に、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）感染の治療用薬剤を製造するためのピロリ菌ＭＴＡＮを阻害する化合物の使用を提供する。本発明は更に、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）感染を治療するために使用するためのピロリ菌ＭＴＡＮを阻害する化合物をも提供する。

【0042】

本発明は更に、消化性潰瘍の治療用薬剤を製造するためのヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）ＭＴＡＮを阻害する化合物の使用を提供する。本発明は更に、消化性潰瘍を治療するために使用するためのヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）（ピロリ菌）ＭＴＡＮを阻害する化合物をも提供する。

【0043】

本発明は、他のヘリコバクター（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ）種及びカンピロバクター（Ｃａｍｐｙｒｏｂａｃｔｅｒ）種（例えば、カンピロバクター・ジェジュニ（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ））に起因する感染の治療に対しても適用され得る。

【0044】

本発明は更に、式（ＩＩ）

【0045】

【化16】

（式中、
ＺはＱまたはＳＱであり、ＱはＣ_４−Ｃ_７シクロアルキル、ヘテロアリール、Ｒ^１−（ＣＨ_２）_ａ−であり、ここでＲ^１はＨであり、ａは５、６、７であるか、またはＲ^１はＯＨ、ＯＭｅ、ＣＨ_２＝ＣＨ−またはＣＨ≡Ｃ−、ＯＭｅまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ａは２、３、４、５、６または７であり；または
ＺはＱであり、ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ａ−であり、ここでＲ^１はＨであり、ａは４であり；または
ＺはＱであり、ＱはＲ^１−（ＣＨ_２）_ｅ−Ｓ−ＣＨ_２−であり、ここでＲ^１はＨ、ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＰｒまたはＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨであり、ｅは２、３または４である）
の構造を有する化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルを提供する。

【0046】

好ましい化合物には、構造

【0047】

【化17】

を有する化合物、或いはその医薬的に許容され得る塩またはそのエステルが含まれる。

【0048】

本発明は更に、本明細書中に開示されている化合物及び医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物を提供する。本明細書中で使用されている「医薬的に許容され得る担体」は、（ｉ）組成物をその所期の目的のために不適当とすることなく該組成物の他の成分と適合し得、（ｉｉ）過度の副作用（例えば、毒性、刺激及びアレルギー応答）なしに本明細書中に記載されている被験者で使用するのに適している。副作用は、そのリスクが組成物が与えるベネフィットを上回るときには「過度」である。医薬的に許容され得る担体の非限定例には、標準の医薬用担体、例えばリン酸緩衝食塩液、水及びエマルジョン（例えば、油／水エマルジョン及びミクロエマルジョン）が含まれる。

【0049】

本発明は以下の実施例から更に理解されるであろう。しかしながら、当業者は、検討されている具体的方法及び結果は下記する特許請求の範囲に詳しく記載されている本発明の単なる例示であることを容易に認識している。

【実施例】

【0050】

序
幾つかの細菌ＭＴＡＮの遷移状態特徴は攻撃性水求核基及び中性アデニン離脱基の最小の関与でリボカチオン性を有していることは公知である^８−１０。現在の研究で、ＨｐＭＴＡＮの遷移状態は他のＭＴＡＮに対するその相同に基づいて類似であると仮定された（図１Ｂ）^４。遷移状態アナログが触媒作用に関与する動的タンパク質運動をより安定な熱力学的状態に変換することにより^１３その同族体酵素^{１１，１２}に強く結合することは公知である。

【0051】

材料及び方法
材料 ピロリ菌（Ｊ９９及び４３５０４）、肺炎桿菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、赤痢菌（Ｓ．ｆｌｅｘｎｅｒｉ）、サルモネラ菌（Ｓ．ｅｎｔｅｒｉｃａ）、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）及び緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）はアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクションから購入した。脱線維ウマ血液（ＤＨＢ）はＨｅｍｏｓｔａｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（カリフォルニア州ディクソン）から購入した。トリプシン大豆寒天（ＴＳＡ）はＢｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ（メリーランド州スパークス）から購入した。マッコンキー寒天はＯｘｏｉｄ ＬＴＤ．（Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ，英国ハンプシャー）から購入した。キサンチンオキシダーゼ及び５’−メチルチオアデノシンはＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から購入した。残りの材料は入手可能な最高濃度で購入した。

【0052】

ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）（（３Ｒ，４Ｓ）−４−（１−ブチルチオメチル）−１−［（９−デアザ−アデニン−９−イル）−メチル］−３−ヒドロキシピロリジン）の合成は既に記載されており、最終ステップは（３Ｒ，４Ｓ）−４−ブチルチオメチル−３−ヒドロキシピロリジン塩酸塩、９−デアザアデニン及びホルムアルデヒド間の３成分マンニッヒ反応により化合物を与えることからなる^２１。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡの構造及び純度（＞９５％）はＮＭＲ、ＨＰＬＣ及び微量分析により確認した。６−アミノ−６−デオキシフタロシンの合成は既に報告^２２されているように実施した。

【0053】

ＨｐＭＴＡＮ精製 ＨｐＭＴＡＮの精製手順は既に報告^１０されている。簡単に説明すると、Ｎ末端Ｈｉｓ６−タグを有するＨｐＭＴＡＮをコードするプラスミドを有しているＢＬ２１（ＤＥ３）細胞を５９５ｎｍで測定して０．７の光学密度まで増殖させ、ＩＰＴＧを０．５ｍＭの最終濃度まで導入した。２２℃で更に１５時間後、細胞を遠心により採取した。ペレットを懸濁させた後、圧力セル及び音波処理により破壊した。可溶性部分をＮｉ−ＮＴＡカラムにかけ、ＨｐＭＴＡＮを２００から５００ｍＭのイミダゾール濃度勾配で溶離させた。タンパク質をスーパーデックスＧ１５ゲル濾過カラムを用いて脱塩した後、平衡化し、１０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ，３０ｍＭ ＫＣｌ，ｐＨ７．６中で濃縮した。純度をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより確認した。

【0054】

Ｋ_ｉ測定 ＨｐＭＴＡＮのキネティックを５’−メチルチオアデノシンからの遊離アデニンの形成の結果として連続的に２７４ｎｍでの吸光度の低下を伴う直接アッセイを用いて測定した。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）のＫ_ｉ及びＫ_ｉ^＊値は、キサンチンオキシダーゼをカップリング酵素として使用し、生成物アデニンが２，８−ジヒドロキシアデニンに変換されるので吸光度の増加を２９２ｎｍで追跡する共役アッセイを用いて測定した^８。

【0055】

細菌増殖 ピロリ菌を５％ ウマ血液を含むトリプシン大豆寒天において微好気性条件（５％ Ｏ_２，１０％ ＣＯ_２及び８５％ Ｎ_２）下３７℃で７２時間増殖させた。ＭＩＣ値を測定するために、注ぐ直前に試験物質をゲル溶液に添加した。阻害ゾーンを比較するために、ピロリ菌を蔓延させた後特定抗生物質をディスクの中心に添加し、次いでピロリ菌を微好気性条件下３７℃で７２時間増殖させた。

【0056】

所望濃度の試験物質ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）で、肺炎桿菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、赤痢菌（Ｓ．ｆｌｅｘｎｅｒｉ）及びサルモネラ菌（Ｓ．ｅｎｔｅｒｉｃａ）をマッコンキー寒天において３７℃で２４時間増殖させ、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）及び緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）はＬＢ寒天において３７℃で２４時間増殖させた。

【0057】

タンパク質結晶化及びデータ収集 結晶化前に、ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）を１ｍＭの濃度に達するまで１５ｍｇ／ｍｌ ＨｐＭＴＡＮ溶液に添加した。ＨｐＭＴＡＮ結晶を０．１Ｍ トリス（ｐＨ８．５），１．２Ｍ クエン酸トリナトリウム溶液からシッティングドロップ蒸気拡散方法を用いて室温で３〜５日で成長させた。ＨｐＭＴＡＮ及びＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ複合体の結晶を１０〜１５％ グリセロールを含有している結晶化溶液の新鮮な液滴に移し、液体窒素を用いて急速冷凍した。Ｘ線回折データをＢｒｏｏｋｈａｖｅｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ ＬａｂｏｒａｔｏｒｙにおいてＢｅａｍｌｉｎｅ Ｘ２９Ａで収集した。データセットをＨＫＬ３０００プログラム集２３を用いて処理し、プロセッシング統計量を表１に示す。

【0058】

構造決定及び精密化 ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）を含むＨｐＭＴＡＮの結晶構造を、研究モデルとして髄膜炎菌（Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）ＭＴＡＮ（ＰＤＢコード３ＥＥＩ）の構造を用い、ＣＣＰ４プログラム集^{２５，２６}のＭＯＬＲＥＰ^２４を用いて分子置換により調べた。まずモデルをＣＯＯＴ^２７において再構築し、ＲＥＦＭＡＣ５^２８において精密化した。最後にＦ_ｏ−Ｆ_ｃマップを用いてＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡを３σで加えた。構造の質をＰＲＯＣＨＥＣＫ^２９及びＭＯＬＰＲＯＢＩＴＹ^{３０，３１}によりチェックした。精密化及び幾何統計量を表１に示す。座標及び構造因子ファイルをそれぞれエントリー４ＦＦＳ及びＲＣＳＢ０７２８４６としてタンパク質データーバンクに委託した。

【0059】

ＤＡＤＭｅ−イムシリンの合成 一般的に、一般構造６の所望のＤＡＤＭｅ−イムシリンを容易に入手し得るアルコール１及び２を用いて合成した［Ｃｌｉｎｃｈら，３７］（スキーム１）。標準条件下でメタンスルホニルクロリドを用いてスルホニル化すると、メシレート３または４が生じた。この後、２当量の適当なメルカプタンをＤＭＦ中でＮａＨで処理し、こうして形成された硫黄求核基を３または４と優先的に反応させると、所望のカルバメートが生じた。これを酸脱保護し、次いで溶離液にアンモニアを添加してシリカでクロトグラフィー精製した後、一般構造５の所望のアミンを良好な収率で得た。その後、遊離塩基５は９−デアザアデニン（９−ＤＡＡ）及びホルムアルデヒドと共に３成分マンニッヒ反応の１部分を形成し、クロマトグラフィー後所望のＤＡＤＭｅ−イムシリン６を適度〜良好な収率で得た。

【0060】

【化18】

一般構造９の１炭素ホモログ化ＤＡＤＭｅ−イムシリンをカルバメート２を用いて形成し、これを４ステップでメシレート７に変換した（スキーム２）。これらのステップはデス・マーチン・ペルヨージナン（ＤＭＰ）酸化、次いでウィッティヒ反応、こうして形成されたアルケンのヒドロホウ素化、最後に標準条件下でのメシル化を含み、メシレート７が生ずる。その後、メシレート基は硫黄または酸素求核基により置換され得た。よって、２当量の適当なメルカプタンまたはアルコールをＤＭＦ中でＮａＨで処理し、こうして形成されたアニオンをメシレート７と反応させると、所望のカルバメートが生ずる。これをＨＣｌを用いる処理、またはＴＦＡ及びＴＢＡＦを用いた後、溶離液にアンモニアを添加してシリカでのクロトグラフィー精製する２ステップフロセスにより脱保護した後、一般構造８の所望のアミンを良好な収率で得た。生じたアミン８は９−デアザアデニン（９−ＤＡＡ）及びホルムアルデヒドと共に３成分マンニッヒ反応の１部分を形成し、クロマトグラフィー後一般構造９の所望の鎖延長したＤＡＤＭｅ−イムシリンを適度〜良好な収率で得た。

【0061】

【化19】

全ての反応をアルゴン雰囲気下で実施した。有機溶液を無水ＭｇＳＯ_４で乾燥し、溶媒を減圧下で蒸発させた。無水及びクロマトグラフィー溶媒は商業的に入手し、更に精製することなく使用した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は６０ Ｆ２５４ シリカゲルをコーティングしたアルミニウムシートを用いて実施した。有機化合物はＵＶ光下及び／またはエールリッヒ溶液、または水性Ｈ_２ＳＯ_４（２Ｍ）中のモリブデン酸アンモニウム（５質量％）及び硫酸セリウム（ＩＶ）・４Ｈ_２Ｏ（０．２質量％）のディップを用いて可視化した。フラッシュクロマトグラフィーはシリカゲル（４０〜６３μｍ）を用いて実施した。^１Ｈ及び^１３Ｃ ＮＭＲスペクトルはＣＤＣｌ_３、ＣＤ_３ＯＤ、Ｄ_２ＯまたはＣＤ_６ＳＯ中で測定した。^１Ｈ及び^１３Ｃ共鳴の帰属は２Ｄ（^１Ｈ−^１Ｈ ＤＱＦ−ＣＯＳＹ，^１Ｈ−^１３Ｃ ＨＳＱＣ）及びＤＥＰＴ実験に基づいた。使用した略語：ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｑ，四重線；ｂｓ，幅広一重線；ｂｔ，幅広三重線；ｄｄ，二重線の二重線；ｄｄｄ，二重線の二重線の二重線；ｄｔ，三重線の二重線。高解像度エレクトロスプレー質量スペクトル（ＥＳＩ−ＨＲＭＳ）はＱ−ＴＯＦタンデム質量分光計を用いて記録した。

【0062】

（４Ｓ）−４−（（（２−ヒドロキシエチル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール（５，Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）
アルコール１（５００ｍｇ，１．５０８ｍｍｏｌ）及びヒューニッヒ塩基（０．７８８ｍＬ，４．５２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に含む溶液にメタンスルホニルクロリド（０．１７５ｍＬ，２．２６２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。完了後、反応物をクロロホルムで希釈し、水及び飽和ＮａＨＣＯ_３で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。粗なメシレート２（６２０ｍｇ，１００％）を更に精製も特性評価もすることなく次ステップにかけた。２−メルカプトエタノール（２１２μＬ，３．０２ｍｍｏｌ，２ｅｑ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（１２１ｍｇ，３．０２ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％，２ｅｑ）を添加し、生じた懸濁液を１０分間撹拌した。この後、粗なメシレート２（６２０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液を添加し、生じた混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物をトルエンで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル（溶離液：石油エーテル中３０％→５０％ 酢酸エチル）を用いて精製すると、所望のカルバメート（４２５ｍｇ，２ステップに対して７２％）が油状物として生じた。これを特性評価することなく次ステップにかけた。カルバメート（４２５ｍｇ，０．９２ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）中に含む溶液にｃＨＣｌ（２ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加のｃＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮し、残渣を水とクロロホルムに分配した。水性層を更にクロロホルムで洗浄した後、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣｌ_３中２０→２５％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製し、有機塩基に変換して、標記化合物５（Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）（１９９ｍｇ，７３％）をシロップとして得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝４．０９（ｄｔ，Ｊ＝５．５，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．２３（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），３．０１（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，５．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７６（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７３−２．６１（ｍ，４Ｈ），２．５０（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，８．６Ｈｚ，１Ｈ）及び２．１９−２．１２ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝７７．７，６２．５，５４．８，５１．５，４９．３，３５．６及び３５．４ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_７Ｈ_１６ＮＯ_２Ｓ） １７８．０９０２，実測値 １７８．０９００。

【0063】

（４Ｓ）−４−（（（３−ヒドロキシプロピル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール（５，Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）
３−メルカプト−１−プロパノール（４６０μＬ，３．０２ｍｍｏｌ，３ｅｑ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（１３７ｍｇ，３．４２ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％，２ｅｑ）を添加し、生じた懸濁液を１０分間撹拌した。この後、粗なメシレート２（７００ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液を添加し、生じた混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物をトルエンで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル（溶離液：石油エーテル中４０％ 酢酸エチル）を用いて精製すると、所望のカルバメート（３６１ｍｇ，２ステップに対して５２％）が無色シロップとして生じた。これを特性評価することなく次ステップにかけた。カルバメート（３６１ｍｇ，０．８９ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）中に含む溶液にｃＨＣｌ（２ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加のｃＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮し、残渣を水とクロロホルムに分配した。水性層を更にクロロホルムで洗浄した後、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣｌ_３中２０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製し、遊離塩基に変換して、標記化合物５（Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）（１３５ｍｇ，７９％）を無色シロップとして得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝４．０５（ｄｔ，Ｊ＝５．５，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６４（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．２２（ｄｄ，Ｊ＝１１．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ），３．００（ｄｄ，Ｊ＝１２．１，５．６Ｈｚ，１Ｈ），２．７５（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．６７（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，６．６Ｈｚ，１Ｈ），２．６４−２．６０（ｍ，３Ｈ），２．４６（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，８．７Ｈｚ，１Ｈ），２．１９−２．１２及び１．８２−１．７６ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝７７．８，６１．５，５４．９，５１．５，４９．２，３５．２，３３．６及び２９．６ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_８Ｈ_１８ＮＯ_２Ｓ） １９２．１０５８，実測値 １９２．１０６１。

【0064】

（４Ｓ）−４−（（（４−ヒドロキシブチル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール［５，Ｒ＝−（ＣＨ_２）_４ＯＨ］
４−メルカプト−１−ブタノール（５５６μＬ，３．０２ｍｍｏｌ，３ｅｑ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（１３７ｍｇ，３．４２ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％，２ｅｑ）を添加し、生じた懸濁液を１０分間撹拌した。この後、粗なメシレート２（７００ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液を添加し、生じた混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物をトルエンで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル（溶離液：石油エーテル中４０％ 酢酸エチル）を用いて精製すると、所望のカルバメート（４５８ｍｇ，２つのステップに対して６４％）が無色シロップとして生じた。これを特性評価することなく次ステップにかけた。カルバメート（４５８ｍｇ，０．８９ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）中に含む溶液にｃＨＣｌ（２ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加のｃＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮し、残渣を水とクロロホルムに分配した。水性層を更にクロロホルムで洗浄した後、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣｌ_３中２０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製し、遊離塩基に変換して、標記化合物５［Ｒ＝−（ＣＨ_２）_４ＯＨ］（１８５ｍｇ，８２％）を無色シロップとして得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝４．０４（ｄｔ，Ｊ＝５．５，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．５６（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），３．２２（ｄｄ，Ｊ＝１１．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ），３．００（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，５．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７５（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，３．４Ｈｚ，１Ｈ），２．６７（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，６．６Ｈｚ，１Ｈ），２．６３（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，６．０Ｈｚ，１Ｈ），２．５７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．４５（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，８．７Ｈｚ，１Ｈ），２．１８−２．１２（ｍ，１Ｈ），１．６９−１．５９（ｍ，４Ｈ）及びｐｐｍ。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝７７．８，６２．５，５４．９，５１．５，４９．２，３５．１，３３．０，３２．８及び２７．２ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_９Ｈ_２０ＮＯ_２Ｓ） ２０６．１２１５，実測値 ２０６．１２１４。

【0065】

（４Ｓ）−４−（（（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール（５，Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）
２−（２−メルカプトエトキシ）エタノール（３６９ｍｇ，３．０２ｍｍｏｌ，２ｅｑ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（１２１ｍｇ，３．０２ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％）を添加し、生じた懸濁液を１０分間撹拌した。この後、粗なメシレート２（６２０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中に含む溶液を添加し、生じた混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物をトルエンで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲル（溶離液：石油エーテル中３０％→５０％ 酢酸エチル）を用いて精製すると、所望のカルバメート（３６０ｍｇ，２ステップに対して６１％）が油状物として生じた。これを特性評価することなく次ステップにかけた。カルバメート（３６０ｍｇ，０．９２ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）中に含む溶液にｃＨＣｌ（２ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加のｃＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮し、残渣を水とクロロホルムに分配した。水性層を更にクロロホルムで洗浄した後、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣｌ_３中２０→２５％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製し、遊離塩基に変換して、標記化合物５（Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）（１５１ｍｇ，７４％）をシロップとして得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝４．０４（ｄｔ，Ｊ＝５．５，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６８−３．６４（ｍ，３Ｈ），３．５６−３．５３（ｍ，２Ｈ），３．２２（ｄｄ，Ｊ＝１１．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ），３．０１（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，５．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７８−２．７１（ｍ，３Ｈ），２．６４（ｄｄ，Ｊ＝１１．５，５．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５２（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，８．７Ｈｚ，１Ｈ）及び２．２１−２．１３ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝７７．７，７３．４，７２．１，６２．３，５４．８，５１．５，４９．２，３５．６及び３２．６ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_９Ｈ_２０ＮＯ_３Ｓ） ２２２．１１６４，実測値 ２２２．１１６０。

【0066】

（４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（（（２−ヒドロキシエチル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール（１０）
アミン５（Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）（９０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）を水／ＥｔＯＨ（４：１，２．５ｍＬ）中に溶解し、９−デアザアデニン（６２ｍｇ，０．４６ｍｍｏｌ）及び水性ホルムアルデヒド（３３μＬ，０．４６ｍｍｏｌ）で処理し、混合物を室温で７２時間撹拌した。粗な反応物をシリカに吸着させ、シリカゲル（溶離液：ＣＨＣｌ_３中２０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］→５：４．５：０．５ ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）を用いて精製すると、白色固体が生じた。これを２−プロパノール中に溶解して、標記化合物１０（６３ｍｇ，３９％）を結晶性白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝８．１６（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），３．９６（ｄｔ，Ｊ＝６．４，４．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），３．０４（ｄｄ，Ｊ＝９．７，７．９Ｈｚ，１Ｈ），２．８５（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７６（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．６６−２．６２（ｍ，３Ｈ），２．５４（ｄｄ，Ｊ＝１２．７，８．９Ｈｚ，１Ｈ），２．３８（ｄｄ，Ｊ＝９．９，７．１Ｈｚ，１Ｈ）及び２．２１−２．１４ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝１５２．１，１５１．０，１４７．０，１３０．１，１１５．２，１１２．５，７６．８，６２．４，６２．３，４９．３，４９．０，４８．７，３６．０及び３５．６ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１４Ｈ_２２Ｎ_５Ｏ_２Ｓ） ３２４．１４９４，実測値 ３２４．１４９６。

【0067】

（４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（（（３−ヒドロキシプロピル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール（１１）
アミン５（Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）（１５０ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）を水／ＥｔＯＨ（４：１，２．５ｍＬ）中に溶解し、９−デアザアデニン（１０８ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）及び水性ホルムアルデヒド（６２μＬ，０．８２ｍｍｏｌ）で処理し、混合物を室温で７２時間撹拌した。粗な反応物をシリカに吸着させ、シリカゲル（溶離液：ＣＨＣｌ_３中２０％→３０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）を用いて精製すると、シロップが生じた。これを放置すると結晶化して、標記化合物１１（１９０ｍｇ，７２％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝８．１８（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｄｔ，Ｊ＝６．４，４．１Ｈｚ，１Ｈ），３．８６（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），３．０７（ｄｄ，Ｊ＝９．８，７．９Ｈｚ，１Ｈ），２．８５（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．７４−２．６７（ｍ，２Ｈ），２．５７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．４９（ｄｄ，Ｊ＝１２．７，９．０Ｈｚ，１Ｈ），２．３８（ｄｄ，Ｊ＝９．９，７．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２３−２．１６（ｍ，１Ｈ）及び１．７６ｐｐｍ（五重線，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝１５２．１，１５１．０，１４７．０，１３０．１，１１５．２，１１２．４，７６．８，６２．３，６１．５，５８．９，４９．０，４８．６，３５．８，３３．５及び２９．５ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１５Ｈ_２４Ｎ_５Ｏ_２Ｓ） ３３８．１６５１，実測値 ３３８．１６４８。

【0068】

（４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（（（４−ヒドロキシブチル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール（１２）
アミン５［Ｒ＝−（ＣＨ_２）_４ＯＨ］（１８０ｍｇ，０．８８ｍｍｏｌ）を水／ＥｔＯＨ（４：１，２．５ｍＬ）中に溶解し、９−デアザアデニン（１２１ｍｇ，０．８８ｍｍｏｌ）及び水性ホルムアルデヒド（６９μＬ，０．９２ｍｍｏｌ）で処理し、混合物を室温で７２時間撹拌した。粗な反応物をシリカに吸着させ、シリカゲル（溶離液：ＣＨＣｌ_３中２０％→３０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）を用いて精製すると、シロップが生じた。これを放置すると結晶化して、標記化合物１２（２３１ｍｇ，７５％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝８．１７（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），３．９６（ｄｔ，Ｊ＝６．４，４．２Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），３．３２（五重線，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），３．０５（ｄｄ，Ｊ＝９．８，８．０Ｈｚ，１Ｈ），２．８４（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．７２（ｄｄ，Ｊ＝１２．７，６．１Ｈｚ，１Ｈ），２．６７（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，４．２Ｈｚ，１Ｈ），２．５３−２．４６（ｍ，４Ｈ），２．３７（ｄｄ，Ｊ＝９．９，７．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２２−２．１５（ｍ，１Ｈ）及び１．６６−１．５６ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝１５２．１，１５１．０，１４７．０，１３０．１，１１５．２，１１２．４，７６．８，６２．５，６２．３，５８．９，４９．０，４８．６，３５．８，３３．０，３２．８及び２７．１ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１６Ｈ_２６Ｎ_５Ｏ_２Ｓ） ３５２．１８０７，実測値 ３５３．１８０１。

【0069】

（４Ｓ）−１−（（４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）メチル）−４−（（（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）チオ）メチル）ピロリジン−３−オール（１３）
アミン５（Ｒ＝ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ）（１５１ｍｇ，０．６８ｍｍｏｌ）を水／ＥｔＯＨ（４：１，２．５ｍＬ）中に溶解し、９−デアザアデニン（８３ｍｇ，０．６２ｍｍｏｌ）及び水性ホルムアルデヒド（４５μＬ，０．６２ｍｍｏｌ）で処理し、混合物を室温で７２時間撹拌した。粗な反応物をシリカに吸着させ、シリカゲル（溶離液：５：４．８：０．２ ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）を用いて精製すると、白色固体が生じた。これを２−プロパノールと摩砕して、標記化合物１０（１９１ｍｇ，６６％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ）：δ＝７．９９（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），３．９１（ｍ，１Ｈ），３．６１（ｂｒｓ，４Ｈ），３．５２（ｂｒｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４９−３．４６（ｍ，２Ｈ），２．８９（ｔ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ），２．７９−２．７３（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．５４（ｍ，４Ｈ），２．３８（ｔ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ），２．２０（ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）及び２．１０−２．０２ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ）：δ＝１５０．１，１４９．５，１４５．１，１２９．６，１１３．２，１０９．４，７５．１，７１．５，６９．４，６０．４，５９．８，５６．４，４６．８，４６．３，３４．０及び３０．９ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１６Ｈ_２６Ｎ_５Ｏ_３Ｓ） ３６８．１７５６，実測値 ３６８．１７５５。

【0070】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ヘキサ−５−イン−１−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（１４）の合成（スキーム３）

【0071】

【化20】

（３Ｒ，４Ｓ）−４−［（ヘキサ−５−イン−１−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（５，Ｒ＝ヘキサ−５−イン−１−イル）
（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−（メチルスルホニルオキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（３）（５００ｍｇ，１．７０ｍｍｏｌ）及びヘキサ−５−イン−１−チオール（０．４６ｍｍｏｌ，３．４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（１２０ｍｇ，２．９ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％）を添加した後、混合物を１時間撹拌した。粗な反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。粗な残渣、多分（３Ｓ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ヘキサ−５−イン−１−イルチオメチル）−４−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボキシレートを精製または特性評価することなく次ステップにかけた。（３Ｓ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ヘキサ−５−イン−１−イルチオメチル）−４−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボキシレート（５３０ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）中に含む溶液に濃ＨＣｌ（２ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加の濃ＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮した。残渣をメタノール中に溶解し、シリカゲルに吸着させ、真空中で濃縮し、固体残渣をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中１％→２０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製して、５（Ｒ＝ヘキサ−５−イン−１−イル）（２７９ｍｇ，７７％）を黄色シロップとして得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝４．０８（ｄｔ，Ｊ＝５．３，３．３Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，７．７Ｈｚ，１Ｈ），３．００（ｄｄ，Ｊ＝１１．９，５．３Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ＝１１．９，３．１Ｈｚ，１Ｈ），２．６１−２．５０（ｍ，５Ｈ），２．２２（ｔｄ，Ｊ＝６．９，２．６Ｈｚ，１Ｈ），１．９７（ｔ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），１．７５−１．６９（ｍ，２Ｈ）及び１．６６−１．６０ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝８４．０，７７．２，６８．７，５４．８，５１．６，４８．４，３４．８，３１．９，２８．５，２７．４及び１８．０ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１１Ｈ_２０ＮＯＳ） ２１４．１２６５，実測値 ２１４．１２６５。

【0072】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ヘキサ−５−イン−１−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（１４）
９−デアザアデニン（１６２ｍｇ，１．１７ｍｍｏｌ）及び化合物５（Ｒ＝ヘキサ−５−イン−１−イル）（２５０ｍｇ，１．１７ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物中に含む懸濁液に水性ホルムアルデヒド（１７６μＬ，２３４ｍｍｏｌ，３７％）を添加し、生じた懸濁液を５０℃に加温した。９０分後、反応はＴＬＣ分析が示すように完了した。粗な反応物をシリカゲルに吸着させ、真空中で濃縮した。固体残渣をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中２０％ ＭｅＯＨ→［ＣＨＣｌ_３中２０％ ＭｅＯＨ］中１％ 水性ＮＨ_４ＯＨ］→５：４：１ ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）により精製して、標記化合物１４（２６２ｍｇ，６２％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝８．１８（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｄｔ，Ｊ＝６．４，４．２Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．０５（ｄｄ，Ｊ＝９．７，８．０Ｈｚ，１Ｈ），２．８３（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．７２（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，６．１Ｈｚ，１Ｈ），２．６７（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，４．１Ｈｚ，１Ｈ），２．４９（ｍ，３Ｈ），２．３６（ｄｄ，Ｊ＝９．８，７．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２０（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），２．１８（ｍ，１Ｈ），２．１６（ｔｄ，Ｊ＝６．９，２．４Ｈｚ，２Ｈ），１．１６（ｍ，２Ｈ）及び１．５６ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝１５２．１，１５１．０，１４７．０，１３０．０，１１５．２，１１２．７，８４．８，７６．９，６９．８，６２．４，５９．０，４９．０，４８．７，３５．８，３２．６，２９．６，２８．７及び１８．７ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１８Ｈ_２６Ｎ_５ＯＳ） ３６０．１８５８，実測値 ３６０．１８５２。

【0073】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−｛２−［（２−ヒドロキシエチル）チオ］エチル｝ピロリジン−３−オール（１６）の合成（スキーム４）

【0074】

【化21】

（３Ｒ，４Ｓ）−４−｛２−［（２−ヒドロキシエチル）チオ］エチル｝ピロリジン−３−オール（８，Ｒ＝２−ヒドロキシエチルチオ）
（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ−４−（２−メチルスルホニルオキシエチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（７）（１２３ｍｇ，０．２９ｍｍｏｌ）及び２−メルカプトエタノール（６１μＬ，０．８７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（２９ｍｇ，０．７３ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％）を添加し、混合物を１時間撹拌した。粗な反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。粗な残渣をクロマトグラフィー（石油エーテル中２５→４０％ 酢酸エチル）により精製して、多分（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］−４−｛２−［（２−ヒドロキシエチル）チオ］エチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（７３ｍｇ）を得た。これを特性評価することなく次ステップにかけた。（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］−４−｛２−［（２−ヒドロキシエチル）チオ］エチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（７３ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍＬ）中に含む溶液に濃ＨＣｌ（３ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加の濃ＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮した。残渣を水とＣＨＣｌ_３に分配し、水層をシリカに吸着させ、真空中で濃縮し、生じた固体をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中２０→３０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製して、８（Ｒ＝２−ヒドロキシエチルチオ）（２９ｍｇ，８４％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝４．２１（ｄｔ，Ｊ＝５．０，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），３．５８（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４０（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝１２．２，３．１Ｈｚ，１Ｈ），３．０５（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，５．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６９−２．６４（ｍ，４Ｈ），２．４１−２．３４（ｍ，１Ｈ），１．８４−１．７７（ｍ，１Ｈ）及び１．６５−１．５８ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝７５．０，６２．６，５２．５，４９．８，４６．５，３５．２，３２．２及び３０．９ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_８Ｈ_１８ＮＯ_２Ｓ） １９２．１０５８，実測値 １９２．１０５５。

【0075】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−｛２−［（２−ヒドロキシエチル）チオ］エチル｝ピロリジン−３−オール（１６）
９−デアザアデニン（５２ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）及び化合物８（Ｒ＝２−ヒドロキシエチルチオ）（７２ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物中に含む懸濁液に水性ホルムアルデヒド（５６μＬ，０．７５ｍｍｏｌ，３７％）を添加し、生じた懸濁液を６０℃に加温した。２時間後、反応はＴＬＣ分析が示すように完了した。粗な反応物をシリカゲルに吸着させ、真空中で濃縮した。固体残渣をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中３０％ ＭｅＯＨ）により精製して、標記化合物１６（５８ｍｇ，４７％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ）：δ＝８．０９（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｑ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｓ，２Ｈ），３．６５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），３．１８（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，８．１Ｈｚ，１Ｈ），２．９９（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，６．３Ｈｚ，１Ｈ），２．８１（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，３．９Ｈｚ，２Ｈ），２．６１（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ），２．４６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），２．４６（ｍ，１Ｈ），２．０６（ｍ，１Ｈ），１．７０−１．６３（ｍ，１Ｈ）及び１．４７−１．４１ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｄ_２Ｏ）：δ＝１５０．５，１５０．０，１４５．２，１３０．４，１１３．５，１０７．８，７５．０，６０．３，５９．１，５６．３，４７．１，４５．３，３３．３，３１．７及び２９．３ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１５Ｈ_２４Ｎ_５Ｏ_２Ｓ） ３３８．１６５１，実測値 ３３８．１６４５。

【0076】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−（２−｛［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル］チオ｝エチル）ピロリジン−３−オール（１７）の合成（スキーム５）

【0077】

【化22】

（３Ｒ，４Ｓ）−４−（２−｛［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル］チオ｝エチル）ピロリジン−３−オール［８，Ｒ＝２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルチオ］
（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ−４−（２−メチルスルホニルオキシエチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（７）（４００ｍｇ，０．９４ｍｍｏｌ）及び２−メルカプトエトキシエタノール（３１９μＬ，２．８３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（９４ｍｇ，２．３６ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％）を添加し、混合物を１４時間撹拌した。粗な反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。粗な残渣をクロマトグラフィー（石油エーテル中４０％ 酢酸エチル）により精製して、多分（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］−４−（２−｛［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）］チオ｝エチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（４０２ｍｇ，９４％）を得た。これを特性評価することなく次ステップにかけた。（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］−４−（２−｛［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル］チオ｝エチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（２００ｍｇ，０．４４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４ｍＬ）中に含む溶液にＴＨＦ中フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）（１ｍＬ，１ｍｏｌ／Ｌ）を添加し、生じた溶液を１４時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（酢酸エチル→ＣＨＣｌ_３中５％ ＭｅＯＨ）により精製して、（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−｛２−［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルチオ］エチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（９４ｍｇ，６３％）を無色シロップとして得た。これを特性評価することなく次ステップにかけた。（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−｛２−［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルチオ］エチル｝ピロリジン−１−カルボキシレート（９４ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ_３（１０ｍＬ）中に含む溶液にトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１ｍＬ，１３．０ｍｍｏｌ，９９．９質量％，１ｍＬ，１．４８９ｇ）を添加し、混合物を２時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、残渣をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中３０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製して、８［Ｒ＝２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルチオ］（７０ｍｇ，１０６％）をシロップとして得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝４．２１（ｄｔ，Ｊ＝５．１，３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．６８−３．６５（ｍ，４Ｈ），３．５８（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．５６−３．５４（ｍ，２Ｈ），３．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．６，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．０４（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，６．０Ｈｚ，１Ｈ），２．７３（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６９−２．６５（ｍ，２Ｈ），２．４０−２．３４（ｍ，１Ｈ），１．８３−１．７６（ｍ，１Ｈ）及び１．６４−１．５７ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝７５．１，７３．４，７２．２，６２．３，５２．４，４９．７，４６．５，３２．３，３２．１及び３１．１ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１０Ｈ_２２ＮＯ_３Ｓ） ２３６．１３２０，実測値 ２３６．１３１９。

【0078】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−（２−｛［２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル］チオ｝エチル）ピロリジン−３−オール（１７）
９−デアザアデニン（４１ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）及び化合物８［Ｒ＝２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチルチオ］（７０ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物中に含む溶液に水性ホルムアルデヒド（４５μＬ，０．５９ｍｍｏｌ，３７％）を添加し、生じた懸濁液を６０℃に加温した。２時間後、反応はＴＬＣ分析が示すように完了した。粗な反応物をシリカゲルに吸着させ、真空中で濃縮した。固体残渣をクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣｌ_３中３０％ ＭｅＯＨ）により精製して、標記化合物１７（６５ｍｇ，５７％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝８．３０（ｓ，１Ｈ），７．８１（ｓ，１Ｈ），４．５３（ｓ，２Ｈ），４．１９−４．１６（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，７．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６７−３．６２（ｍ，４Ｈ），３．５４−３．５０（ｍ，３Ｈ），３．３３−３．３１（ｍ，１Ｈ），３．１２（ｄｄ，Ｊ＝１１．９，７．８Ｈｚ，１Ｈ），２．６８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．４０−２．３６（ｍ，１Ｈ），１．８５−１．７８（ｍ，１Ｈ）及び１．６１−１．５４ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝１５２．６，１５０．８，１４５．１，１３３．１，１１５．３，１０５．１，７４．８，７３．４，７２．２，６２．３，６０．２，５７．６，４９．４，４６．６，３２．５，３２．３及び３１．１ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１７Ｈ_２８Ｎ_５Ｏ_３Ｓ） ３８２．１９１３，実測値 ３８２．１９０６。

【0079】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ヘキシルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（１８）の合成（スキーム６）

【0080】

【化23】

（３Ｒ，４Ｓ）−４−［（ヘキシルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（５，Ｒ＝ｎ−ヘキシル）
（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−４−（メチルスルホニルオキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（４２５ｍｇ，１．４４ｍｍｏｌ）及び１−ヘキサンチオール（０．６２４μＬ，４．３２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（１１５ｍｇ，２．８８ｍｍｏｌ，６０質量％）を添加し、混合物を１４時間撹拌した。粗な反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。粗な残渣、多分（３Ｓ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ｎ−ヘキシルチオメチル）−４−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボキシレートを精製も特性評価もすることなく次ステップにかけた。（３Ｓ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−（ｎ−ヘキシルチオメチル）−４−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボキシレート（４５７ｍｇ，１．４４ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍＬ）中に含む溶液に濃ＨＣｌ（３ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加の濃ＨＣｌ（３ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮した。残渣をメタノール中に溶解し、シリカに吸着させ、真空中で濃縮し、生じた固体をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中１０→２０％ ７Ｎ ＮＨ_３）により精製して、５（Ｒ＝ｎ−ヘキシル）（２２１ｍｇ，７２％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝４．０３（ｄｔ，Ｊ＝５．５，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１１．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ），２．９８（ｄｄ，Ｊ＝１２．１，５．６Ｈｚ，１Ｈ），２．７４（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，３．５Ｈｚ，１Ｈ），２．６６（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，６．６Ｈｚ，１Ｈ），２．６１（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，５．９Ｈｚ，１Ｈ），２．５４（ｂｒｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．４４（ｄｄ，Ｊ＝１２．７，８．７Ｈｚ，１Ｈ），２．１７−２．１０（ｍ，１Ｈ），１．６０−１．５５（ｍ，２Ｈ），１．４３−１．３８（ｍ，２Ｈ），１．３４−１．２８（ｍ，４Ｈ）及び０．９１ｐｐｍ（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝７７．９，５４．９，５１．６，４９．３，３５．３，３３．２，３２．６，３０．８，２９．６，２３．７及び１４．４ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１１Ｈ_２４ＮＯＳ） ２１８．１５７９，実測値 ２１８．１５７８。

【0081】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ヘキシルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（１８）
９−デアザアデニン（１１０ｍｇ，０．８３ｍｍｏｌ）及び化合物５（Ｒ＝ｎ−ヘキシル）（１８０ｍｇ，０．８３ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物中に含む溶液に水性ホルムアルデヒド（１２０μＬ，１．７０ｍｍｏｌ，３７％）を添加し、生じた懸濁液を６０℃に加温した。２時間後、反応はＴＬＣ分析が示すように完了した。粗な反応物をシリカゲルに吸着させ、真空中で濃縮した。固体残渣をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中５→１０→２０％ ＭｅＯＨ）により精製して、標記化合物１８（２０１ｍｇ，６７％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝８．１６（ｓ，１Ｈ），７．４９（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｄｔ，Ｊ＝４．４，４．２Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．０４（ｄｄ，Ｊ＝９．７，８．１Ｈｚ，１Ｈ），２．８４（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ），２．７２（ｄｄ，Ｊ＝１２．７，６．０Ｈｚ，１Ｈ），２．６５（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，４．２Ｈｚ，１Ｈ），２．５０−２．４７（ｍ，３Ｈ），２．３７（ｄｄ，Ｊ＝９．８，７．２Ｈｚ，１Ｈ），２．２０−２．１５（ｍ，１Ｈ），１．５４（ｂｒ五重線，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），２．１６（ｔｄ，Ｊ＝６．９，２．４Ｈｚ，２Ｈ），１．１６（ｍ，２Ｈ）及び１．５６ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝１５２．１，１５１．０，１４７．０，１３０．０，１１５．２，１１２．６，７６．９，６２．３，５８．９，４９．０，４９．０，３５．９，３３．１，３２．６，３０．７，２９．６，２３．６及び１４．４ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１８Ｈ_３０Ｎ_５ＯＳ） ３６４．２１７１，実測値 ３６４．２１６５。

【0082】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［２−（ヘキシルチオ）エチル］ピロリジン−３−オール（１９）の合成（スキーム７）

【0083】

【化24】

（３Ｒ，４Ｓ）−４−（２−（ヘキシルチオ）エチル）ピロリジン−３−オール（８，Ｒ＝ｎ−ヘキシルチオ）
（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ−４−（２−メチルスルホニルオキシエチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（４００ｍｇ，０．９４ｍｍｏｌ）（７）及び１−ヘキサンチオール（５３０μＬ，０．８７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（９４ｍｇ，２．３６ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％）を添加し、混合物を１４時間撹拌した。粗な反応混合物をトルエンで希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。粗な残渣をクロマトグラフィー（石油エーテル中１０％ 酢酸エチル）により精製した。推定で（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ−４−（２−ヘキシルチオエチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（４２１ｍｇ，７３％）を得た。これを特性評価することなく次ステップにかけた。（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ−４−（２−ヘキシルチオエチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（４２１ｍｇ，０．７０ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍＬ）中に含む溶液に濃ＨＣｌ（３ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加の濃ＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮し、残渣を水とＣＨＣｌ_３に分配し、水層をシリカに吸着させ、真空中で濃縮し、生じた固体をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中２０→３０％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製して、８（Ｒ＝ｎ−ヘキシルチオ）（１６０ｍｇ，７３％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ＋ＣＤＣｌ_３）：δ＝３．９７（ｄｔ，Ｊ＝５．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ），３．３０（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，７．７Ｈｚ，１Ｈ），３．１４（ｂｒｓ，２Ｈ），２．９６（ｄｄ，Ｊ＝１１．９，５．１Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１１．８，７．４Ｈｚ，１Ｈ），２．６０−２．５４（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．４６（ｄｄ，Ｊ＝１１．１，６．９Ｈｚ，１Ｈ），２．０３（二重線の五重線，Ｊ＝７．４，３．２Ｈｚ，１Ｈ），１．７６−１．６９（ｍ，１Ｈ），１．６０−１．５４（ｍ，２Ｈ），１．４２−１．３５（ｍ，２Ｈ），１．３４−１．２８（ｍ，２Ｈ）及び０．８９ｐｐｍ（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ＋ＣＤＣｌ_３）：δ＝７７．６，５４．９，５１．８，４８．２，３２．６，３２．２，３１．４，３０．７，２９．６，２８．６，２２．５及び１４．０ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１２Ｈ_２６ＮＯＳ） ２３２．１７３５，実測値 ２３２．１７３６。

【0084】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［２−（ヘキシルチオ）エチル］ピロリジン−３−オール（１９）
９−デアザアデニン（９６ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ）及び化合物８（Ｒ＝ｎ−ヘキシルチオ）（１６０ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物中に含む溶液に水性ホルムアルデヒド（１０４μＬ，１．３８ｍｍｏｌ，３７％）を添加し、生じた懸濁液を６０℃に加温した。２時間後、反応はＴＬＣ分析が示すように完了した。粗な反応物をシリカゲルに吸着させ、真空中で濃縮した。固体残渣をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中２０％ ＭｅＯＨ）により精製して、標記化合物１９（１３２ｍｇ，５１％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ＋ＣＤＣｌ_３）：δ＝８．２０（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｓ，１Ｈ），３．８９（ｑ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．１１（ｄｄ，Ｊ＝９．４，７．７Ｈｚ，１Ｈ），２．７５（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，２Ｈ），２．５２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．５０（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．１８（ｄｄ，Ｊ＝９．３，８．１Ｈｚ，１Ｈ），２．１４−２．０７（ｍ，１Ｈ），１．８５−１．７８（ｍ，１Ｈ），１．６４−１．５３（ｍ，３Ｈ），１．４１−１．３４（ｍ，２Ｈ），１．３３−１．２４（ｍ，４Ｈ），０．８９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）及び１．５６ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ＋ＣＤＣｌ_３）：δ＝１５１．９，１５１．０，１４７．１，１２９．８，１１５．３，１１２．７，７７．６，６２．５，５９．６，４９．４，４８．２，３４．５，３３．２，３２．７，３１．６，３０．８，２９．７，２３．７及び１４．８ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１９Ｈ_３２Ｎ_５ＯＳ） ３７８．２３２８，実測値 ３７８．２３３２。

【0085】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ピリジン−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（２４）の合成（スキーム８）

【0086】

【化25】

ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−［（ピリジン−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート（２３）
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（１）［Ｃｌｉｎｃｈら，３７］（１０．００ｇ、４６．０３ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ’−ジイソプロピルエチルアミン（１６．２ｍＬ，９２．０６ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（３００ｍＬ）中に溶解し、−６０℃に冷却した。メタンスルホニルクロリド（３．４５ｍＬ，４４．６１ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加した。３０分後、更にメタンスルホニルクロリド（０．６０ｍＬ）を添加し、混合物を更に５分間撹拌した後、０℃に加温し、飽和水性ＮａＨＣＯ_３（３×３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中５０→１００％ ＥｔＯＡｃの後、ＥｔＯＡｃ中０→１％ ＭｅＯＨの勾配）にかけて、メシレート２を黄色油状物（８．１８ｇ，６０％）として得た。

【0087】

ステップ２：ピリジン−２−チオール（０．１３５ｇ，１．２１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）中に含む撹拌溶液に０℃で水素化ナトリウム（油中６０ｗｔ％，０．０６０ｇ，１．５０ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。２０分後、上のステップ１からのメシレート２（０．３００ｇ，１．０２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１ｍＬ）中に含む溶液を添加し、混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。次いで、水（５ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔ_２Ｏ（６０ｍＬ）で抽出し、抽出物をＨ_２Ｏ（３×５ｍＬ）、ブライン（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、蒸発させると、黄色ガム／固体が生じた。シリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中４０→８０％ ＥｔＯＡｃの勾配）にかけて、２３を無色ガムとして得た。これを数日放置すると、固化した（０．１７５ｇ，５６％）。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ８．４０（ｄ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄｔ，Ｊ＝８．１，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２５（ｄｔ，Ｊ＝８．１，０．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄｔ，Ｊ＝５．５，１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．２３（ｂｓ，交換Ｄ_２Ｏ，０．５Ｈ），４．１４−４．０５（ｍ，１．５Ｈ，Ｄ_２Ｏ交換後，ｍ，１Ｈ），３．７６−３．４９（ｍ，３Ｈ），３．２４−３．１１（ｍ，３Ｈ），２．５１−２．３９（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，中心線 δ ７７．０）：δ １５９．１，１５８．９（Ｃ），１５４．６，１５４．４（Ｃ），１４９．３（ＣＨ），１３６．３（ＣＨ），１２２．９，１２２．８（ＣＨ），１１９．９（ＣＨ），７９．４（Ｃ），７２．１，７１．７（ＣＨ），５１．１，５０．８（ＣＨ），４８．４，４７．８（ＣＨ_２），４６．１，４５．５（ＣＨ_２），２９．２，２９．１（ＣＨ_２），２８．５（ＣＨ_３）。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）^＋ 計算値（Ｃ_１５Ｈ_２３Ｎ_２Ｏ_３Ｓ^＋） ３１１．１４２４，実測値 ３１１．１４２４。

【0088】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ピリジン−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（２４）
化合物２３（０．１７１ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍＬ）中に溶解し、水性塩酸（３６％，１．５ｍＬ）を添加した。１５分後、溶媒を蒸発させると、無色ガムが生じた。これをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解し、アンバーリストＡ２１樹脂で中和した後、同一樹脂の短カラムに通し、ＭｅＯＨで溶離させた。溶媒を蒸発させ、残渣をＥｔＯＨ（４ｍＬ）とＨ_２Ｏ（２ｍＬ）の混合物中に溶解し、これに水性ホルムアルデヒド溶液（３７％，０．０８ｍＬ，１ｍｍｏｌ）及び９−デアザアデニン（０．０９６ｇ，０．７２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で１６時間加熱し、全ての溶媒を吸着させるためにシリカゲルを添加した後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（２−ＰｒＯＨ中０→７％ 水性ＮＨ_４ＯＨ（２８％）の勾配）により精製した。生成物を含有している画分を蒸発させ、残渣を更にシリカゲルでのクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３−７Ｍ ＮＨ_３／ＭｅＯＨ，８５：１５）にかけて、２４を無色固体（０．０８７ｇ，４４％）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，１：１ ＣＤ_３ＯＤ−ＣＤＣｌ_３）：δ ８．３４（ｄｄｄ，Ｊ＝５．０．１．８，０．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），７．５４（ｄｄｄ，Ｊ＝９．７，７．７，１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｄｔ，Ｊ＝８．２，０．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄｄｄ，Ｊ＝７．３，５．０，０．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０７（ｄｄｄ，Ｊ＝６．４，３．９，３．９Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｄ，Ｊ＝１３．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．３７−３．３４（ｍ，１Ｈ＋残留重水素化溶媒），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝１３．１，８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．１０−３．０６（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，６．４Ｈｚ，１Ｈ），２．７４（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，３．９Ｈｚ，１Ｈ），２．４１−２．３３（ｍ，２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，１：１ ＣＤ_３ＯＤ−ＣＤＣｌ_３，中心線 δ ４９．０及びδ ７８．３）：δ １５９．８（Ｃ），１５１．２（Ｃ），１５０．４（ＣＨ），１４９．７（ＣＨ），１４６．５（Ｃ），１３７．２（ＣＨ），１２９．１（ＣＨ），１２３．０（ＣＨ），１２０．４（ＣＨ），１１４．７（Ｃ），１１２．２（Ｃ），７６．３（ＣＨ），６１．９（ＣＨ_２），５８．４（ＣＨ_２），４８．７（ＣＨ_２），４７．９（ＣＨ），３３．５（ＣＨ２）。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）^＋ 計算値（Ｃ_１７Ｈ_２１Ｎ_６ＯＳ^＋） ３５７．１４９３，実測値 ３５７．１４８５。

【0089】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ピラジン−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（２７）の合成（スキーム９）

【0090】

【化26】

ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｓ，４Ｒ）−３−［（アセチルチオ）メチル］−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキシレート（２５）
チオ酢酸カリウム（０．９５０ｇ，８．１５ｍｍｏｌ）及びメシレート３（２．００ｇ，６．７７ｍｍｏｌ）を一緒に室温でＤＭＦ（２０ｍＬ）中で２４時間撹拌した。水（１５ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔ_２Ｏ（１２０ｍＬ）で抽出した。抽出物をＨ_２Ｏ（３×１５ｍＬ）、次いでブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させると、無色残渣が生じた。これをシリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中４０→７０％ ＥｔＯＡｃの勾配）にかけて、２５を無色油状物（１．５４ｇ，８３％）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，）：δ ４．０２（ｂｓ，１Ｈ），３．７１−３．５４（ｍ，２Ｈ），３．２８−３．１７（ｍ，１Ｈ），３．１５−３．０４（ｍ，１Ｈ），３．０２−２．９０（ｍ，２Ｈ），２．７４（ｓ，交換Ｄ_２Ｏ，１Ｈ），２．３７（ｓ，３Ｈ），２．３５−２．２５（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，中心線 δ ７７．０）：δ １９６．５，１９１．１（Ｃ），１５４．５（Ｃ），７９．６（Ｃ），７３．３，７２．８（ＣＨ），５２．０，５１．７（ＣＨ_２），４８．６，４８．０（ＣＨ_２），４６．０，４５．４（ＣＨ），３０．６（ＣＨ_３），２９．２，２９．１（ＣＨ_２），２５．５（ＣＨ３）。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：（Ｍ＋Ｎａ）^＋ 計算値（Ｃ_１２Ｈ_２１ＮＯ_４Ｓ^＋） ２９８．１０８４，実測値 ２９８．１０８７。

【0091】

ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−［（ピラジン−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート（２６）
２５（０．２５０ｇ，０．９１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）中に含む撹拌溶液にナトリウムメトキシドのメタノール溶液（２５％，０．２１ｍＬ，０．９２ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後、溶媒を蒸発させ、残渣をＤＭＦ（４ｍＬ）中に溶解した後、２−クロロピラジン（０．２４ｍＬ，２．７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌した。水（５ｍＬ）を添加し、混合物をＥｔ_２Ｏ（６０ｍＬ）で抽出した。抽出物をＨ_２Ｏ（３×１５ｍＬ）、ブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中４０→８０％ ＥｔＯＡｃの勾配）にかけて、２６を無色ガム（０．１７５ｇ，６２％）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ８．５０（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），４．１７−４．１２（ｍ，１Ｈ），３．７５−３．５９（ｍ，２Ｈ），３．４１−３．１３（ｍ，５Ｈ，Ｄ_２Ｏ交換後，４Ｈ），２．５２−２．４１（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，中心線 δ ７７．０）：δ １５６．６，１５６．５（Ｃ），１５４．５（Ｃ），１４４．２（ＣＨ），１４３．７（ＣＨ），１３９．８（ＣＨ），７９．６（Ｃ），７３．２，７２．７（ＣＨ），５１．８，５１．６（ＣＨ_２），４８．７，４８．１（ＣＨ_２），４６．０，４５．４（ＣＨ），２９．７，２９．５（ＣＨ_２），２８．５（ＣＨ_３）。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：（Ｍ＋Ｎａ）^＋ 計算値（Ｃ_１４Ｈ_２１Ｎ_３ＮａＯ_３Ｓ^＋） ３３４．１１９６，実測値３３４．１１９３。

【0092】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（ピラジン−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（２７）
化合物２６（０．１５５ｇ，０．５０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍＬ，９７．８ｍｍｏｌ）中に溶解し、水性塩酸（３６％，１．５ｍＬ）を添加した。１５分後、溶媒を蒸発させ、残渣をＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解し、アンバーリストＡ２１樹脂で中和した後、同一樹脂の短カラムに通し、ＭｅＯＨで溶離させた。残渣をエタノール（４ｍＬ）とＨ_２Ｏ（２ｍＬ）の混合物中に溶解した後、水性ホルムアルデヒド溶液（３７％，０．０７５ｍＬ，１．０ｍｍｏｌ）及び９−デアザアデニン（０．０８０ｇ，０．６０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で１６時間加熱した。全ての溶媒を吸着させるためにシリカゲルを添加した後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（２−ＰｒＯＨ中０〜１０％ 水性ＮＨ_４ＯＨ（２８％））により精製して、２７を無色固体（７０ｍｇ，３０％）を余り純粋でない画分（３４ｍｇ，１９％）と一緒に得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ ８．４３（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｄｄ，Ｊ＝２．６，１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），４．０４（ｄｄｄ，Ｊ＝６．４，４．２，４．２Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４１（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，６．４Ｈｚ，１Ｈ），３．２２（ｄｄ，Ｊ＝１３．３，８．３Ｈｚ，１Ｈ），３．０２（ｄｄ，Ｊ＝９．６，７．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ），２．６６（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，４．２Ｈｚ，１Ｈ），２．４２（ｄｄ，Ｊ＝９．７，７．０Ｈｚ，１Ｈ），２．３４（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ，中心線 δ ４９．０）：δ １５８．５（Ｃ），１５２．１（Ｃ），１５１．０（ＣＨ），１４７．０（Ｃ），１４５．４（ＣＨ），１４４．６（ＣＨ），１４０．４（ＣＨ），１３０．１（ＣＨ），１１５．１（Ｃ），１１２．４（Ｃ），７６．７（ＣＨ），６２．３（ＣＨ_２），５８．５（ＣＨ_２），４８．８（ＣＨ_２），４８．３（ＣＨ），３２．９（ＣＨ_２）。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）^＋ 計算値（Ｃ_１６Ｈ_２０Ｎ_７ＯＳ^＋） ３５８．１４４５，実測値 ３５８．１４４２。

【0093】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（１，３−チアゾル−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−３−オール（２９）の合成（スキーム１０）

【0094】

【化27】

ｔｅｒｔ−ブチル（３Ｒ，４Ｓ）−３−ヒドロキシ−４−［（１，３−チアゾル−２−イルチオ）メチル］ピロリジン−１−カルボキシレート（２８）
２５（０．２５０ｇ，０．９１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５ｍＬ）中に含む溶液にナトリウムメトキシドのメタノール溶液（２５％，０．２１ｍＬ，０．９２ｍｍｏｌ）を添加した。１０分後、溶媒を蒸発させ、残渣をＤＭＦ（４ｍＬ）中に溶解した後、２−ブロモチアゾール（０．２５ｍＬ，２．８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で６０時間撹拌した。水（５ｍＬ）を添加した後、混合物をＥｔ_２Ｏ（６０ｍＬ）で抽出した。抽出物をＨ_２Ｏ（３×５ｍＬ）、ブライン（５ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、蒸発させた。残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（ヘキサン中の４０→８０％ ＥｔＯＡｃの勾配）にかけて、２８を無色油状物（０．２３０ｇ，８０％）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ ７．６４２，７．６３６（２ｓ，１Ｈ），７．２４１，７．２３５（２ｓ，１Ｈ），４．３４（ｂｓ，交換Ｄ_２Ｏ，０．５Ｈ），４．２１−４．１２（ｍ，１．５Ｈ，Ｄ_２Ｏ交換後，ｍ，１Ｈ），３．７６−３．５６（ｍ，２Ｈ），３．５５−３．４２（ｍ，１Ｈ），３．２９−３．１２（ｍ，３Ｈ），２．４９（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，中心線 δ ７７．０）：δ １６５．８，１６５．４（Ｃ），１５４．６，１５４．４（Ｃ），１４２．３，１４２．２（ＣＨ），１１９．４（ＣＨ），７９．５（Ｃ），７２．３，７１．９（ＣＨ），５１．３，５１．０（ＣＨ_２），４８．４，４７．８（ＣＨ_２），４６．０，４５．４（ＣＨ），３４．０，３３．８（ＣＨ_２），２８．４（ＣＨ_３）。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：（Ｍ＋Ｎａ）＋ 計算値（Ｃ_１３Ｈ_２０Ｎ_２ＮａＯ_３Ｓ_２^＋） ３３９．０８０８，実測値 ３３９．０８０２。

【0095】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−［（１，３−チアゾル−２−イル］チオ）メチル］ピロリジン−３−オール（２９）
化合物２８（０．２１０ｇ，０．６６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４ｍＬ）中に溶解し、水性塩酸（３６％，１．５ｍＬ）を添加した。１５分後、溶媒を蒸発させると、固体が生じた。これをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解し、アンバーリストＡ２１樹脂で中和した後、同一樹脂の短カラムに通し、ＭｅＯＨで溶離させた。溶媒を蒸発させ、残渣をエタノール（４ｍＬ）とＨ_２Ｏ（２ｍＬ）の混合物中に溶解した後、水性ホルムアルデヒド溶液（３７％，０．０９９ｍＬ，１．３ｍｍｏｌ）及び９−デアザアデニン（０．１０７ｇ，０．８０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で１６時間加熱した。全ての溶媒を吸着させるためにシリカゲルを添加した後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３−ＭｅＯＨ−２８％ 水性ＮＨ_４ＯＨ，８５：１５：０．５、次いで８５：１５：０．７５）にかけて、粗な２９を無色ガムとして得た。更にクロマトグラフィー（２−ＰｒＯＨ中０→１０％ 水性ＮＨ_４ＯＨ（２８％）の勾配）にかけて、２９（８６ｍｇ，３６％）を余り純粋でない画分（８１ｍｇ，３４％）と一緒に得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ ８．１５（Ｓ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），４．０３（ｄｄｄ，Ｊ＝６．４，４．３，４．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４１（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，６．３Ｈｚ，１Ｈ），３．２０（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，８．６Ｈｚ，１Ｈ），３．０２（ｄｄ，Ｊ＝９．７，７．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，６．５Ｈｚ，１Ｈ），２．６５（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，４．２Ｈｚ，１Ｈ），２．４２（ｄｄ，Ｊ＝９．８，６．９Ｈｚ，１Ｈ），２．３４（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１２５．７ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ，中心線 δ ４９．０）：δ １６６．５（Ｃ），１５２．１（Ｃ），１５１．０（ＣＨ），１４７．０（Ｃ），１４３．６（ＣＨ），１３０．０（ＣＨ），１２１．１（ＣＨ），１１５．２（Ｃ），１１２．５（Ｃ），７６．６（ＣＨ），６２．３（ＣＨ_２），５８．４（ＣＨ２），４８．８（ＣＨ_２），４８．５（ＣＨ），３８．３（ＣＨ_２）。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：（Ｍ＋ＮＡ）^＋ 計算値（Ｃ_１５Ｈ_１８Ｎ_６ＮａＯＳ_２^＋） ３８５．０８７６，実測値３８５．０８６８。

【0096】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−｛［（５−｛ピリジン−４−イル｝−１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イル）チオ］メチル｝ピロリジン−３−オール（５６）の合成（スキーム１１）

【0097】

【化28】

（３Ｒ，４Ｓ）−４−（｛［５−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イル］チオ｝メチル）ピロリジン−３−オール（５５）
（３Ｒ，４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−４−（メチルスルホニルオキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレート（３）（３００ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）及び５−（４−ピリジル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−チオール（３７０ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）中に含む溶液に水素化ナトリウム（６９ｍｇ，１．７ｍｍｏｌ，油中６０ｗｔ％）を添加し、混合物を１時間撹拌した。粗な反応混合物をＣＨＣｌ_３で希釈し、水及びブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ_４）、真空中で濃縮した。粗な残渣をクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣｌ_３→ＣＨＣｌ_３中５％→１０％ ＭｅＯＨ）により精製して、多分（３Ｒ，４Ｓ）−４−｛［（５−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イル）チオ］メチル｝ピロリジン−３−オール（１００ｍｇ，２６％）を得た。これを特性評価することなく次ステップにかけた。（３Ｒ，４Ｓ）−４−｛［（５−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イル）チオ］メチル｝ピロリジン−３−オール（１００ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）中に含む溶液に濃ＨＣｌ（３ｍＬ）を添加し、混合物を真空中で濃縮した。生じた残渣を追加の濃ＨＣｌ（２ｍＬ）中に溶解し、真空中で濃縮し、残渣をメタノール中に溶解し、シリカゲルに吸着させ、固体残渣をクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３中１％→２５％［ＭｅＯＨ中７Ｎ ＮＨ_３］）により精製して、標記化合物５５（７２ｍｇ，２６％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３＋ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝８．５６（ｄｄ，Ｊ＝４．７，１．６Ｈｚ，２Ｈ），７．９６（ｄｄ，Ｊ＝４．７，１．６Ｈｚ，２Ｈ），４．３２（ｄｔ，Ｊ＝５．２，２．９Ｈｚ，１Ｈ），３．３７（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．３４（五重線，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），３．２６（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，６．７Ｈｚ，１Ｈ），３．１２−３．０８（ｍ，２Ｈ），３．０４（ｄｄ，Ｊ＝１３．９，８．５Ｈｚ，１Ｈ）及び２．５６−２．５０（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝１６１．０，１５７．９，１５０．６（Ｘ２），１４１．１，１２１．８（Ｘ２），７５．４，５３．４，４９．８，４８．９及び３５．１ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１２Ｈ_１６Ｎ_５ＯＳ） ２７８．１０７６，実測値 ２７８．１０７８。

【0098】

（３Ｒ，４Ｓ）−１−（｛４−アミノ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル｝メチル）−４−（｛［５−（ピリジン−４−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イル］チオ｝メチル）ピロリジン−３−オール（５６）
９−デアザアデニン（２２ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）及び化合物５５（４５ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）をエタノール（４ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物中に含む懸濁液に水性ホルムアルデヒド（２４μＬ，０．３２ｍｍｏｌ，３７％）を添加し、生じた懸濁液を５０℃に加温した。２時間後、反応はＴＬＣ分析が示すように完了した。粗な反応混合物をシリカゲルに吸着させ、真空中で濃縮した。固体残渣をクロマトグラフィー（７０：２９：１→６０：４０：２→５：４：１ ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）により精製して、標記化合物５６（４１ｍｇ，６０％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）：δ＝８．５８（ｄｄ，Ｊ＝４．７，１．６Ｈｚ，２Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｄｄ，Ｊ＝４．６，１．６Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｓ，１Ｈ），４．１４（ｄｔ，Ｊ＝６．１，３．９Ｈｚ，１Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ），３．３６（ｄｄ，Ｊ＝１３．４，６．４Ｈｚ，１Ｈ），３．３１（五重線，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），３．２５（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，７．７Ｈｚ，１Ｈ），３．１４−３．１０（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ＝１０．９，３．８Ｈｚ，１Ｈ），２．６９（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，６．９Ｈｚ，１Ｈ）及び２．４２（ｍ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ＝１６０．６，１５７．１，１５２．２，１５１．２，１５０．７（Ｘ２），１４６．８，１４０．６，１３０．７，１２１．８（Ｘ２），１１５．３，１１０４，７５．９，６１．７，５７．９，４９．１，４８．８及び３６．１ｐｐｍ。ＥＳＩ−ＨＲＭＳ：［ＭＨ］^＋ 計算値（Ｃ_１９Ｈ_２２Ｎ_９ＯＳ） ４２４．１６６８，実測値 ４２４．１６６２。

【0099】

結果及び考察
ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）は既にＥｃＭＴＡＮの遷移状態アナログ阻害剤として特性評価されている（図１Ｃ）^８。ここで、阻害アッセイを基質として５’−メチルチオアデノシンを用い、組換えＨｐＭＴＡＮに対するＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡを用いて実施した。精製したＨｐＭＴＡＮは簡単な基質として５’−メチルチオアデノシン及び６−アミノ−６−デオキシフタロシンの両方を使用する。酵素は両基質に対してそれぞれ０．６±０．３及び０．８±０．３μＭの高い親和性（低いＫ_ｍ値）、及び１２．１±２．３及び４．３±０．９ｓ^−１のｋ_ｃａｔ値を示す。これにより、５’−メチルチオアデノシンに対して２．０×１０^７Ｍ^−１ｓ^−１、６−アミノ−６−デオキシ−フタロシンに対して５．４×１０^６Ｍ^−１ｓ^−１の高い触媒効率値（ｋ_ｃａｔ／Ｋ_ｍ）を与える。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡは０．８ｎＭの初期阻害定数（Ｋ_ｉ）の遅発性強力結合阻害剤であり、続いて３６ｐＭの平衡解離定数（Ｋ_ｉ^＊＝Ｋ_ｄ）の遅発性阻害である。基質としての６−アミノ−６−デオキシフタロシンに対するＫ_ｍ値を０．８μＭとすると、この基質に対するＫ_ｍ／Ｋ_ｄ比は２２，２００である。低いＫ_ｄ値は、ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡがＨｐＭＴＡＮに対する遷移状態アナログ阻害剤であるという提案を裏付ける。ＨｐＭＴＡＮに対する５’−メチルチオアデノシンまたはＳ−アデノシルホモシステイン基質の構造をその遷移状態と比較すると（図１Ｂ）、遷移状態にまねたＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡの３つの特徴；ヒドロキシｌ−ピロリジン部分、塩基と糖の間のメチレン架橋、及び９−デアザアデニンを示す（図１Ｂ及び１Ｃ）。ヒドロキシピロリジン部分の窒素は９のｐＫ_ａ値を有しており、よって遷移状態でリボカチオンの正電荷に似ている。この距離は遷移状態で３Åに近いので、メチレン架橋は糖とプリンの距離を延長する。９−デアザアデニンはプリンリングの配置を変化させ、高いｐＫ_ａ及びＮ７のプロトン化が生じ、遷移状態でＮ７−プロトン化デニン離脱基に似ている。

【0100】

ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）の強力結合に関与する触媒部位特徴はＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡとの複合体中のＨｐＭＴＡＮの結晶構造から確立された（図２）。他のＭＴＡＮと同様に、ＨｐＭＴＡＮはダイマー界面に位置する活性部位を有するプリン及びウリジンホスホリラーゼのスーパーファミリーに属するホモダイマーである（図４）。アデニン結合はＡｓｐ１９８のＮ７とＯＧ２の間の水素結合及びＶａｌ１５４のＮ１と主鎖ＮＨの間の水素結合により安定化されている。５’−リボシル位置結合部位での疎水基は強く拘束されないが、疎水性環境で包囲されており、この位置で変動し得る（図２Ａ及び４）。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡとＨｐＭＴＡＮの間の直接相互作用は５個の水素結合及び多数の疎水性相互作用を含む（図２）。ＭＴＡＮの遷移状態アナログ複合体は結晶構造及び気相での質量分光法で検出される複合体中に求核性水分子を含む^{１４，１５}。ＨｐＭＴＡＮでは、求核性水分子は、リボカチオン遷移状態での水攻撃部位であるカチオン性ヒドロキシピロリジン窒素から２．６Å離れて存在している（図２）。水分子は、タンパク質からの３つの水素結合と結合ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡからの２つの水素結合によりＨｐＭＴＡＮ中で安定化しており、明らかに接触しており、阻害剤複合体の高い親和性に寄与している。

【0101】

ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）の効果を５％ ウマ血液寒天で増殖させたピロリ菌で試験した。６ｎｇ／ｍｌでは僅かな増殖が検出され、８ｎｇ／ｍｌでは増殖は検出されず、従ってピロリ菌増殖の抑制についてのＭＩＣ_９０値は＜８ｎｇ／ｍｌである（図３Ａ）。８ｎｇ／ｍｌのＭＩＣ_９０値は、３６ｐＭのＫ_ｄ値でＨｐＭＴＡＮを飽和させるのに十分な２３ｎＭの化学濃度に相当する。

【0102】

ピロリ菌感染において慣用されている抗生物質には、アモキシシリン、メトロニダゾール及びテトラサイクリンが含まれる。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）の抗ピロリ菌効果を慣用されているこれらの抗生物質と比較した。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡの阻害ゾーンは他の抗生物質の阻害ゾーンよりも大きい（図３Ｂ）。等量のアモキシシリンはＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡよりも小さい増殖阻害ゾーンを与え、等量のメトロニダゾールまたはテトラサイクリンは増殖を抑制しなかった。よって、ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡはピロリ菌増殖の点で慣用されている抗生物質よりも有効である。

【0103】

殆どの細菌では、ＭＴＡＮは発現し、５’−メチルチオアデノシン及びＳ−アデノシルホモシステインのＮ−リボシド結合の加水分解を触媒する。２つの反応が細菌クオラムセンシング、Ｓ−アデノシルメチオニンを介する硫黄リサイクリング及びポリアミン合成に関与している^１６。しかしながら、多くの細菌性ＭＴＡＮはプランクトン増殖条件により判断して細菌増殖のために必須ではない。よって、ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）は大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）及びコレラ菌（Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ）の増殖に影響を与えないが、ＭＴＡＮ活性は完全に無効にされた^６。同様に、大腸菌中のｍｔｎ遺伝子欠失は富栄養培地での増殖に影響を与えないが、ビオチン栄養要求株を生ずる^６，１７。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡの効果を別の臨床的に一般的な病原体の黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、肺炎桿菌（Ｋ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、赤痢菌（Ｓ．ｆｌｅｘｎｅｒｉ）、サルモネラ菌（Ｓ．ｅｎｔｅｒｉｃａ）及び緑膿菌（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の増殖でも試験した。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡで５μｇ／ｍｌまでの培養濃度で、これらの細菌について増殖抑制は観察されなかった。これはＭＴＡＮにとって非必須でない役割に一致している。このレアなメナキノン経路に対する阻害剤特異性のために、ピロリ菌感染のＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡでの治療はオフターゲット細菌種において抗生物質耐性を生じさせないであろう。

【0104】

細菌ゲノム分析はメナキノン生合成に対するＨｐＭＴＡＮ媒介経路が稀であるが、カンピロバクター（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ）種中に存在することを予測している^４。カンピロバクター・ジェジュニ（Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ）は細菌性胃腸炎の世界の主な原因である^１８。

【0105】

ＨｐＭＴＡＮの作用が６−アミノ−６−デオキシフタロシンの加水分解において提案されており、酵素をこの機能について具体的に試験した。酵素は５．４×１０^６Ｍ^−１ｓ^−１の触媒効率でこれに対してロバストな触媒活性を示す。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）の酵素及びピロリ菌の増殖に対する効果はピロリ菌におけるＨｐＭＴＡＮの重要な役割を立証し、その電子転移鎖または他の機能に対する必須のメナキノン生合成経路の提案されている経路を裏付けている^４，１９。

【0106】

ピロリ菌では薬物耐性が急速に発現し、現在ピロリ菌感染の約３０％が単剤第一選択薬に対して耐性である^２０。その結果、一般的アプローチは通常ピロリ菌感染のために３剤治療を使用しており、作用メカニズムが異なる２つの抗生物質が含まれている。３剤治療でも、ピロリ菌感染の２０％以上が容易に根絶されない^２。ピロリ菌集団における耐性はおそらく部分的に他の細菌感染の治療中ピロリ菌が広域抗生物質に暴露されているためである。加えて、ピロリ菌の現在の根絶は抗生物質を２週間以上必要とし、治療を中断したならば耐性の発現が増加する。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ（３０）を用いる結果は、狭域抗生物質を単剤として、または薬物配合剤において使用するための機会を示している。ＭＴＡＮが必須であると見られる他の病原体（カンピロベクター（Ｃａｍｐｙｒｏｂａｃｔｅｒ）種）は現在シプロフロキサシン、エリスロマイシンまたはアジスロマイシンを用いて臨床的に治療されている。ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡは他の抗生物質よりもピロリ菌中の標的に対してより強力な抗生物質であり、カンピロベクター（Ｃａｍｐｙｒｏｂａｃｔｅｒ）感染に対する候補であり得るであろう。よって、ＢｕＴ−ＤＡＤＭｅ−ＩｍｍＡ及び他のＨｐＭＴＡＮ阻害剤は必須生合成ステップにおいてＭＴＡＮを用いる生物において特異的抗生物質として役立ち得る。追加のピロリ菌ＭＴＡ阻害剤の例及びその解離定数は表２に記載されている。表３には、本発明の具体的化合物についてのピロリ菌ＭＴＡＮに対する解離定数及びピロリ菌に対するＭＩＣ_９０値が要約されている。これらの化合物を含む配合剤も抗生物質耐性の現在の問題を対処し得る。

【0107】

【表1】

【0108】

【表2】

【0109】

【表3】

【0110】

【表4】

【0111】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】