特許 6073480 ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6073480

(24)【登録日】2017年1月13日

(45)【発行日】2017年2月1日

(54)【発明の名称】ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 471/14 20060101AFI20170123BHJP

   C07D 519/00 20060101ALI20170123BHJP

   A61K 31/519 20060101ALI20170123BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20170123BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20170123BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20170123BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20170123BHJP

【ＦＩ】

   C07D471/14 102

   C07D471/14CSP

   C07D519/00 311

   A61K31/519

   A61K31/5377

   A61P43/00 111

   A61P35/00

   A61K45/00

【請求項の数】8

【全頁数】89

(21)【出願番号】特願2015-531423(P2015-531423)

(86)(22)【出願日】2013年9月12日

(65)【公表番号】特表2015-531779(P2015-531779A)

(43)【公表日】2015年11月5日

(86)【国際出願番号】CN2013001061

(87)【国際公開番号】WO2014040373

(87)【国際公開日】20140320

【審査請求日】2015年6月11日

(31)【優先権主張番号】201210334795.0

(32)【優先日】2012年9月12日

(33)【優先権主張国】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】512184858

【氏名又は名称】山東軒竹医薬科技有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】100080791

【弁理士】

【氏名又は名称】高島 一

(74)【代理人】

【識別番号】100125070

【弁理士】

【氏名又は名称】土井 京子

(74)【代理人】

【識別番号】100136629

【弁理士】

【氏名又は名称】鎌田 光宜

(74)【代理人】

【識別番号】100121212

【弁理士】

【氏名又は名称】田村 弥栄子

(74)【代理人】

【識別番号】100117743

【弁理士】

【氏名又は名称】村田 美由紀

(74)【代理人】

【識別番号】100163658

【弁理士】

【氏名又は名称】小池 順造

(74)【代理人】

【識別番号】100174296

【弁理士】

【氏名又は名称】當麻 博文

(72)【発明者】

【氏名】▲呉▼ 永▲謙▼

(72)【発明者】

【氏名】舒 楚天

【審査官】 早川 裕之

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１０／０４４８８５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 中国特許出願公開第１０２３９９２２０（ＣＮ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００８／１０９５９９（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ ４７１／１４

Ｃ０７Ｄ ５１９／００

Ａ６１Ｋ ３１／５１９〜５３７７

Ａ６１Ｋ ４５／００

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物：

【化1】

ＸおよびＹはそれぞれＯ；
ＡおよびＢはそれぞれＣＨ；
Ｒ^１は６〜１０員アリールまたは５〜６員単環式ヘテロアリールであり、両方は１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２は６〜１０員アリール、５〜６員単環式ヘテロアリール、もしくは９〜１０員縮合ヘテロアリールであり、すべては１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３は水素；
Ｒ^４は水素またはＣ_１−６アルキル（ここで、Ｃ_１−６アルキルはヒドロキシで置換されてもよい）；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９、もしくは−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシであり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）５〜６員単環式ヘテロアリールもしくは５〜６員単環式ヘテロ環式基であり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９、および−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル；
Ｒ^９は水素またはＣ_１−６アルキル（ここで、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、および−ＮＲ^８ａＲ^８ｂから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
ｍは０、１または２；および
ｎは０〜３。

【請求項2】

請求項１に記載の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物：
ＸおよびＹはそれぞれＯ；
ＡおよびＢはそれぞれＣＨ；
Ｒ^１がフェニル、ピリジルまたはピリミジルであり、すべては１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２がフェニル、ピリジル、ピリミジル、チエニル、ピラゾリル、インダゾリル、インドリル、ピリドピロリル、ピラゾロピリジル、またはキノリルであり、すべては１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３が水素；
Ｒ^４は水素、メチル、エチルもしくはヒドロキシメチル；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）シアノ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、−ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、−Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９、もしくは−Ｎ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピペリジル、ピペラジニルもしくはモルホリニルであり、すべてはハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−Ｎ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル；
Ｒ^９は水素またはＣ_１−６アルキル（ここで、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノおよびヒドロキシから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
ｍは０、１または２。

【請求項3】

式（Ｉ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物：

【化2】

ＸおよびＹはそれぞれＯ；
ＡおよびＢはそれぞれＣＨ；
Ｒ^１は５〜６員単環式ヘテロ環式基であり、１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２は６〜１０員アリール、５〜６員単環式ヘテロアリール、もしくは９〜１０員縮合ヘテロアリールであり、すべては１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３は水素；
Ｒ^４は水素、メチルまたはヒドロキシメチル；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）シアノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９、もしくは−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシであり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）５〜６員単環式ヘテロアリールもしくは５〜６員単環式ヘテロ環式基であり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル；
Ｒ^９は水素またはＣ_１−６アルキル（ここで、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノ、ヒドロキシおよび−ＮＲ^８ａＲ^８ｂから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
ｍは０、１または２；および
ｎは０〜３。

【請求項4】

【化3-1】

【化3-2】

【化3-3】

【化3-4】

からなる群より選ばれる化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物。

【請求項5】

【化4-1】

【化4-2】

【化4-3】

【化4-4】

【化4-5】

【化4-6】

【化4-7】

【化4-8】

からなる群より選ばれる化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物。

【請求項6】

請求項１〜５の何れか１項に記載の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物、および１以上の製薬上許容し得る担体、および任意でさらに１以上の抗腫瘍薬および免疫抑制剤を含有する医薬組成物であって、抗腫瘍薬および免疫抑制薬が、
（１）カペシタビン、ゲムシタビンおよびペメトレキセド二ナトリウムから選択される代謝拮抗剤；
（２）パゾパニブ、イマチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、ゲフィチニブおよびバンデタニブから選択される成長因子阻害剤；
（３）トラスツズマブおよびベバシズマブから選択される抗体；
（４）パクリタキセル、ビノレルビン、ドセタクセルおよびドキソルビシンから選択される有糸分裂阻害剤；
（５）レトロゾール、タモキシフェン、フルベストラント、フルタミドおよびトリプトレリンから選択される抗腫瘍ホルモン類；
（６）サイクロフォスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシルおよびカルムスチンから選択されるアルキル化剤；
（７）カルボプラチン、シスプラチンおよびオキサリプラチンから選択されるプラチナ金属；
（８）カンプトセシン、トポテカンおよびイリノテカンから選択されるトポイソメラーゼ阻害剤；
（９）エベロリムス、シロリムスおよびテムシロリムスから選択される免疫抑制剤；
（１０）６−メルカプトプリン、６−チオグアニンおよびアザチオプリンから選択されるプリン類似体；
（１１）ストレプトゾトシンＤ、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトキサントロン、ブレオマイシンおよびプリカマイシンから選択される抗生物質；または
（１２）副腎皮質阻害剤であるアミノグルテチイミド
である医薬組成物。

【請求項7】

請求項１〜５の何れか１項に記載の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物を含有する、増殖性疾患の治療用および／または予防用医薬組成物。

【請求項8】

請求項１〜５の何れか１項に記載の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物を含有する、がん及び非がん性疾患を含む増殖性疾患の治療用および／または予防用薬剤であって、
前記がんが脳腫瘍、肺がん、非小細胞肺がん、扁平上皮細胞がん、膀胱がん、胃がん、卵巣がん、腹膜がん、膵臓がん、乳がん、頭頚部がん、子宮頸がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、肝臓がん、腎臓がん、食道腺がん、食道扁平上皮細胞がん、固形がん、非ホジキン性リンパ腫、神経膠腫、多形性膠芽腫、神経膠肉腫、前立腺がん、甲状腺がん、生殖管がん、上皮内がん、リンパ腫、組織球性リンパ腫、神経線維腫症、骨肉腫、皮膚がん、結腸がん、精巣がん、肺小細胞がん、消化管間質腫瘍、前立腺腫瘍、肥満細胞腫瘍、多発性骨髄腫、メラノーマ、神経膠腫膠芽腫、星状細胞腫、神経芽細胞腫、肉腫から選択され；前記非がん性疾患が皮膚または前立腺の良性増殖から選択される、薬剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本願は、２０１２年９月１２日に出願した中国出願（番号Ｎｏ．２０１２１０３３４７９５．０）に対する優先権を主張するものであり、参照することによりすべて本願明細書に組み込まれる。本明細書において引用されるすべての文献の内容は本願の一部を構成する。

【0002】

本発明は、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）および／または哺乳類ラパマイシン標的蛋白質（ｍＴＯＲ）阻害剤またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物、これらの化合物の合成方法、これら化合物を含む医薬組成物、並びに増殖性疾患の治療および／または予防用薬剤の製造のためのこれらの化合物の使用に関する。

【背景技術】

【0003】

腫瘍は、多様な発がん性因子の作用および下記細胞の遺伝形質の変化の結果生じる異常な遺伝子の発現および細胞増殖による体内で形成される新生物である。腫瘍細胞は、それらの正常な成長を制御する機能を失い、自律的なまたは比較的自律的な増殖能を有する。腫瘍細胞は、発がん性の因子が消失しても増殖を続け、大量のヒトの栄養の消費を生じるだろう。もし初期に発見し治療しなければ、がん細胞は転移し体内中で増殖し、体重減少、貧血、臓器不全および死さえも生じる多様な毒素を放出するだろう。

【0004】

腫瘍の治療方法としては、主に３つの態様：薬物療法、手術および放射線療法が挙げられる。手術および放射線療法は腫瘍を根絶するのは困難であり、中程度の進行がんの患者においては明らかな効果を示さないので、薬物療法は、がん治療においてますます重要になっている。従来の抗がん薬は、腫瘍細胞と正常細胞を区別しないで、しばしば重篤な副作用を起こしている。標的薬剤は特にがん細胞を標的とし腫瘍に正確に作用しえ、そのことにより、進行結腸直腸がんの患者の生存期間中央値を６６．７％増加させ、進行乳がんの治療効率を７１．３％増加させるなど治療レベルを大きく改善し、有害な反応率を減らす。

【0005】

製薬会社は、標的抗悪性腫瘍剤の開発を加速させ、またこのクラスの抗悪性腫瘍剤を求める大きな市場があるので、分子的標的薬剤は世界規模の市場において世界の最も急速に成長する分野となっている。ＰＩ３Ｋ経路は、ヒトがん細胞が突然変異するもっとも多いところであり、細胞増殖を導き、活性化し信号を増幅しうる。ＰＩ３ＫおよびｍＴＯＲは、ＰＩ３Ｋシグナリング経路の重要なキナーゼである。

【0006】

ＰＩ３Ｋは、脂質キナーゼファミリーの一員であり、ホスファチジルイノシトールの３位のリン酸化を通じて細胞代謝および成長を制御し、ホスファチジルイノシトール−トリホスフェート（ＰＩＰ３）を生成する。脂質の第２メッセンジャーであるＰＩＰ３は、Ｐ１３Ｋを下流のエフェクター（特にＡｋｔ）と一緒にすることができ、その結果膜の補強およびリン酸化、細胞増殖および活性化が起こりうる。従って、ホスファチジルイノシトール３−キナーゼの阻害は、ＰＩ３Ｋ経路を障害し、その結果、がん細胞増殖および活性化を阻害しうる。

【0007】

ｍＴＯＲは、細胞質に存在するセリン／スレオニンプロテインキナーゼであり、ホスホイノシチド３−キナーゼ関連プロテインキナーゼファミリーに属し、２個の複合体すなわちｍＴＯＲＣｌ（ラパマイシン標的）およびｍＴＯＲＣ２（ラパマイシンにより阻害されない）として生体中に存在する。ｍＴＯＲは、細胞のシグナル伝達蛋白質であり、栄養物および増殖因子に対する腫瘍細胞の応答を制御し、血管内皮成長因子の役割を通じて腫瘍血液供給をコントロールする。ｍＴＯＲ阻害剤は、がん細胞を餓死させ、ｍＴＯＲを阻害することにより腫瘍体積を減少しうる。

【0008】

今のところＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤は、薬剤として開発されているが、市場にはでていない。従来技術文献、Journal of Medicinal Chemistry (2011), 54(5), 1473-1480, “Discovery of 9-(6-Aminopyridin- 3-yl)-1-(3-(trifluoromethyl) phenyl)benzo[h][1,6]naphthyridin-2(1H)-one (Torin2) as a potent, selective, and orally available mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitor for treatment of cancerは、Ｔｏｒｉｎ２と呼ばれる化合物を開示し、インビボ薬物動態についての研究結果を報告している。

【0009】

【化1】

【0010】

キナーゼ阻害剤（ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤など）の研究のために、多くの注意がキナーゼ標的に対する選択性に対して払われるべきである。キナーゼは高い相同性を有するので、小化合物は、ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲを阻害しながら、他のキナーゼ標的を阻害することができる。これらのキナーゼは、バイオシグナルコンディションにおいて重要な役割をする。いったん阻害されると、生体に有害な副作用または毒性を示すシグナルコンディション障害があらわれる。従って、良好な選択性を有するキナーゼ阻害剤を開発するために、ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲキナーゼが至急に必要とされる。

【0011】

キナーゼ選択性の他に、他の非キナーゼ標的に対する選択性も重要である。イオンチャンネルおよび種々の受容体のような非キナーゼ標的も、シグナルコンディションおよび神経伝達物質放出のような生理的過程に重要である。いったんこれらの非キナーゼ標的が阻害されると、生体は患者の安全性に重大な影響をもたらしうる代謝障害や生理的機能低下を有するだろう。

【0012】

要約すると、ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲに高い選択性、良好な阻害活性および良好な薬物動態を有する化合物を開発することは抗腫瘍薬の現在の研究におけるホットスポットになっている。

【発明の概要】

【0013】

本発明の目的は、ＰＩ３Ｋおよび／またはｍＴＯＲ阻害剤を提供することである。具体的には本発明は以下に関する：
（Ｉ）式（Ｉ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物：

【0014】

【化2】

【0015】

ＸおよびＹはそれぞれ独立してＯまたはＳ；
ＡおよびＢはそれぞれ独立してＣＲ^６であり、Ｒ^６は水素、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシル、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシ（式中、Ｃ_１−６アルキルおよびＣ_１−６アルコキシはハロゲン、ヒドロキシおよびカルボキシルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
Ｒ^１は水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_２−８アルキニル、Ｃ_３−８シクロアルキル、６〜１４員アリール、５〜１４員ヘテロアリール、３〜１４員ヘテロ環式基、７〜１２員スピロ環式基もしくは７〜１２員橋かけ基であり、水素以外はすべて１〜５個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２は水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_２−８アルキニル、Ｃ_３−８シクロアルキル、６〜１４員アリール、５〜１４員ヘテロアリール、３〜１４員ヘテロ環式基、７〜１２員スピロ環式基、もしくは７〜１２員橋かけ基であり、水素以外のすべては１〜５個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３は水素、カルボキシルまたはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、ヒドロキシおよびカルボキシルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；

【0016】

Ｒ^４は水素、Ｃ_３−８シクロアルキル、Ｃ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、ヒドロキシおよびカルボキシルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９もしくは−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_２−８アルキニルもしくはＣ_１−６アルコキシであり、すべてハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；または
（３）Ｃ_３−８シクロアルキル、６〜１４員アリール、５〜１４員ヘテロアリールもしくは３〜１４員ヘテロ環式基であり、すべてハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_２−８アルケニル、Ｃ_２−８アルキニル、Ｃ_１−６アルコキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；

【0017】

Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−８シクロアルキル、６〜１４員アリール、５〜１４員ヘテロアリールもしくは３〜１４員ヘテロ環式基であり、水素以外はすべてヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、カルボキシル、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、スルファモイル、カルバモイルおよびスルファミノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^９は水素、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_１−６アルコキシであり、水素以外はすべてハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシル、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、スルファモイルおよびカルバモイルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
ｍが０、１または２；および
ｎが０−４。

【0018】

（ＩＩ）上記（Ｉ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物、（式中、
ＡおよびＢはそれぞれ独立してＣＲ^６（式中、Ｒ^６が水素、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシ（式中、Ｃ_１−６アルキルおよびＣ_１−６アルコキシはハロゲン、ヒドロキシおよびカルボキシルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい））；
Ｒ^１はＣ_３−８シクロアルキル、６〜１０員アリール、５〜１０員ヘテロアリールもしくは５〜１０員ヘテロ環式基であり、すべて１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２はＣ_３−８シクロアルキル、６〜１０員アリール、５〜１０員ヘテロアリールもしくは５〜１０員ヘテロ環式基であり、すべて１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３およびＲ^４はそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、ヒドロキシおよびカルボキシルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；

【0019】

Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９、もしくは−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシであり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）Ｃ_３−８シクロアルキル、６〜１０員アリール、５〜１０員ヘテロアリールもしくは５〜１０員ヘテロ環式基であり、すべてハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；

【0020】

Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して、水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、カルボキシル、スルファモイル、カルバモイル、およびスルファミノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^９は、水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシル、−ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、スルファモイルおよびカルバモイルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
ｍは０、１または２；および
ｎが０−４）。

【0021】

（ＩＩＩ）上記（ＩＩ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物（式中、
ＸおよびＹはそれぞれＯ；
ＡおよびＢはそれぞれＣＨ；
Ｒ^１が６〜１０員アリール、５〜６員単環式ヘテロアリール、９〜１０員縮合ヘテロアリール、５〜６員単環式ヘテロ環式基または９〜１０員縮合ヘテロ環式基であり、すべて１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２は６〜１０員アリール、５〜６員単環式ヘテロアリール、９〜１０員縮合ヘテロアリール、５〜６員単環式ヘテロ環式基または９〜１０員縮合ヘテロ環式基であり、すべて１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３は水素；
Ｒ^４は水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、ヒドロキシおよびカルボキシルから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシであり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）５〜１０員ヘテロアリールもしくは５〜１０員ヘテロ環式基であり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル；
Ｒ^９は水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノ、ヒドロキシおよび−ＮＲ^８ａＲ^８ｂから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
ｍが０、１または２；および
ｎは０〜３）。

【0022】

本発明の式（Ｉ）の化合物のさらに好ましい実施形態において：
ＸおよびＹはそれぞれＯ；
ＡおよびＢはそれぞれＣＨ；
Ｒ^１は６〜１０員アリールまたは５〜６員単環式ヘテロアリールであり、両方は１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２は６〜１０員アリール、５〜６員単環式ヘテロアリールまたは９〜１０員縮合ヘテロアリールであり、すべて１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３は水素；
Ｒ^４は水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはヒドロキシで置換されてもよい）；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９もしくは−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシであり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）５〜６員単環式ヘテロアリールもしくは５〜６員単環式ヘテロ環式基であり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル；
Ｒ^９は水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノ、ヒドロキシおよび−ＮＲ^８ａＲ^８ｂから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
ｍが０、１または２；および
ｎは０〜３。

【0023】

さらに本発明の式（Ｉ）の化合物の好ましい実施形態において：
ＸおよびＹはそれぞれＯ；
ＡおよびＢはそれぞれＣＨ；
Ｒ^１がフェニル、ピリジルまたはピリミジルであり、すべては１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^１はフェニル、ピリジル、ピリミジル、チエニル、ピラゾリル、インダゾリル、インドリル、ピリドピロリル、ピラゾロピリジルもしくはキノリルであり、すべては１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３が水素；
Ｒ^４が水素、メチル、エチルまたはヒドロキシメチル；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）シアノ、ヒドロキシ、−ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、−Ｓ（Ｏ）_ｍＲ^９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９もしくは−Ｎ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルＣ_１−６アルコキシであり、両方がハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピペリジル、ピペラジニルもしくはモルホリニルであり、すべてがハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−Ｎ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル；
Ｒ^９が水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノおよびヒドロキシから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
ｍが０、１または２。

【0024】

（ＩＶ）上記（ＩＩＩ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物（式中、
ＸおよびＹはそれぞれＯ；
ＡおよびＢはそれぞれＣＨ；
Ｒ^１は５〜６員単環式ヘテロ環式基であり、１〜３個のＲ^７ａで置換されてもよい；
Ｒ^２は６〜１０員アリール、５〜６員単環式ヘテロアリールもしくは９〜１０員縮合ヘテロアリールであり、すべては１〜３個のＲ^７ｂで置換されてもよい；
Ｒ^３は水素；
Ｒ^４は水素、メチルまたはヒドロキシメチル；
Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂはそれぞれ独立して
（１）シアノ、ヒドロキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＳ（Ｏ）_ｍＲ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ_２）_ｎＯＲ^９もしくは−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９、
（２）Ｃ_１−６アルキルもしくはＣ_１−６アルコキシであり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、およびシアノから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい、または
（３）５〜６員単環式ヘテロアリールもしくは５〜６員単環式ヘテロ環式基であり、両方はハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、−（ＣＨ_２）_ｎＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）Ｒ^９、−（ＣＨ_２）_ｎＣ（Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、−（ＣＨ_２）_ｎＯＣ（Ｏ）Ｒ^９および−（ＣＨ_２）_ｎＮ（Ｒ^８ａ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^９から選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい；
Ｒ^８ａおよびＲ^８ｂはそれぞれ独立して水素またはＣ_１−６アルキル；
Ｒ^９は水素またはＣ_１−６アルキル（式中、Ｃ_１−６アルキルはハロゲン、シアノ、ヒドロキシおよび−ＮＲ^８ａＲ^８ｂから選択される１〜３個の置換基で置換されてもよい）；
ｍが０、１または２；および
ｎは０〜３）。

【0025】

（Ｖ）上記（Ｉ）−（ＩＶ）のいずれかの化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物、および１以上の製薬上許容し得る担体、および任意でさらに１以上の抗腫瘍薬および免疫抑制剤を含有する医薬組成物（ここで、抗腫瘍薬および免疫抑制薬は：
（１）カペシタビン、ゲムシタビンおよびペメトレキセド二ナトリウムから選択される代謝拮抗剤；
（２）パゾパニブ、イマチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、ゲフィチニブおよびバンデタニブから選択される成長因子阻害剤；
（３）ハーセプチンおよびアバスチンから選択される抗体；
（４）パクリタキセル、ビノレルビン、ドセタクセルおよびドキソルビシンから選択される有糸分裂阻害剤；
（５）レトロゾール、タモキシフェン、フルベストラント、フルタミドおよびトリプトレリンから選択される抗腫瘍ホルモン類；
（６）サイクロフォスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシルおよびカルムスチンから選択されるアルキル化剤；
（７）カルボプラチン、シスプラチンおよびオキサリプラチンから選択されるプラチナ金属；
（８）カンプトセシン、トポテカンおよびイリノテカンから選択されるトポイソメラーゼ阻害剤；
（９）エベロリムス、シロリムスおよびテムシロリムスから選択される免疫抑制剤；
（１０）６−メルカプトプリン、６−チオグアニンおよびアザチオプリンから選択されるプリン類似体；
（１１）ストレプトゾトシンＤ、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトキサントロン、ブレオマイシンおよびプリカマイシンから選択される抗生物質；または
（１２）副腎皮質阻害剤であるアミノグルテチイミド
である）。

【0026】

（ＶＩ）がんおよび非がん性疾患などの増殖性疾患を治療および／または予防するための薬剤の合成のための上記（Ｉ）−（ＩＶ）いずれかの化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物の使用（ここで、がん疾患は脳腫瘍、肺がん、非小細胞肺がん、扁平上皮細胞がん、膀胱がん、胃がん、卵巣がん、腹膜がん、膵臓がん、乳がん、頭頚部がん、子宮頸がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、肝臓がん、腎臓がん、食道腺がん、食道扁平上皮細胞がん、固形がん、非ホジキン性リンパ腫、神経膠腫、多形性膠芽腫、神経膠肉腫、前立腺がん、甲状腺がん、生殖管がん、上皮内がん、リンパ腫、組織球性リンパ腫、神経線維腫症、骨肉腫、皮膚がん、脳がん、結腸がん、精巣がん、肺小細胞がん、消化管間質腫瘍、前立腺腫瘍、肥満細胞腫瘍、多発性骨髄腫、メラノーマ、神経膠腫膠芽腫、星状細胞腫、神経芽細胞腫、肉腫から選択される；また非がん性疾患は皮膚または前立腺の良性増殖から選択される）。

【0027】

（ＶＩＩ）上記（Ｉ）−（ＩＶ）いずれかの化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物の治療有効量を患者に投与する工程を含む増殖性疾患を治療および／または予防方法。

【0028】

下記化合物、またはその製薬上許容され得る塩、立体異性体もしくは溶媒和物が好ましい：

【0029】

【表1-1】

【0030】

【表1-2】

【0031】

【表1-3】

【0032】

【表1-4】

【0033】

【表1-5】

【0034】

【表1-6】

【0035】

【表1-7】

【0036】

【表1-8】

【0037】

【表1-9】

【0038】

【表1-10】

【0039】

【表2-1】

【0040】

【表2-2】

【0041】

【表2-3】

【0042】

【表2-4】

【0043】

【表2-5】

【0044】

【表2-6】

【0045】

【表2-7】

【0046】

【表2-8】

【0047】

【表2-9】

【0048】

【表2-10】

【0049】

【表2-11】

【0050】

【表2-12】

【0051】

【表2-13】

【0052】

【表2-14】

【0053】

【表2-15】

【0054】

【表2-16】

【0055】

【表2-17】

【0056】

【表2-18】

【0057】

【表2-19】

【0058】

【表2-20】

【0059】

【表2-21】

【0060】

【表2-22】

【0061】

本明細書で使用される用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を含む。

【0062】

用語「Ｃ_１−６アルキル」は直鎖状または分枝状でありえ、例えば、「Ｃ_１−４アルキル」、「Ｃ_１−３アルキル」および「Ｃ_１−２アルキル」を含む。具体例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、２−メチルプロピル、１−メチルプロピル、１，１−ジメチルエチル、ｎ−ペンチル、３−メチルブチル、２−メチルブチル、１−メチルブチル、１−エチルプロピル、ｎ−ヘキシル、４−メチルペンチル、３−メチルペンチル、２−メチルペンチル、１−メチルペンチル、３，３−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、１，１−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、１，２−ジメチルプロピルを含むがそれらに限定されない。

【0063】

本明細書で使用される用語「Ｃ_３−８シクロアルキル」としては、例えば、「Ｃ_３−７シクロアルキル」、「Ｃ_３−６シクロアルキル」、「Ｃ_４−６シクロアルキル」および「Ｃ_５−６シクロアルキル」が挙げられる。具体例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等を含むがそれらに限定されない。

【0064】

本明細書で使用される用語「Ｃ_２−８アルケニル」は直鎖状または分枝状または環状でありえ、例えば、「Ｃ_２−５アルケニル」、「Ｃ_２−４アルケニル」、「Ｃ_２−３アルケニル」および「Ｃ_３−６シクロアルケニル」を含む。具体例としては、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、１−メチル−２−プロペニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、２−メチル−１−ブテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−３−ブテニル、１，１−ジメチル−２−プロペニル、１−エチル−２−プロペニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、２−メチル−１−ペンテニル、３−メチル−１−ペンテニル、１−メチル−２−ペンテニル、３−メチル−２−ペンテニル、２−メチル−３−ペンテニル、１−メチル−４−ペンテニル、３−メチル−４−ペンテニル、１，１−ジメチル−３−ブテニル、１，２−ジメチル−３−ブテニル、１，３−ジメチル−２−ブテニル、２，２−ジメチル−３−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−３−ブテニル、２−エチル−１−ブテニル、２−エチル−３−ブテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、４−ヘプテニル、１−オクテニル、３−オクテニル、４−オクテニル、１，３−ブタジエニル、２，４−ペンタジエニル、１，４−ヘキサジエニル、２，４−ヘキサジエニル、１，５−ヘプタジエニル、２，５−ヘプタジエニル、２，６−オクタジエニル、シクロペンテニル、１，３−シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、１，４−シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル、１，４−シクロヘプタジエニル、シクロオクテニル等を含むがそれらに限定されない。

【0065】

本明細書で使用される用語「Ｃ_２−８アルキニル」は、直鎖状または分枝状でありえ、例えば、「Ｃ_２−５アルキニル」、「Ｃ_２−４アルキニル」および「Ｃ_２−３アルキニル」を含む。具体例としては、エチニル、１−プロピニル、２−ブチニル、１−メチル−２−プロピニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、１−メチル−２−ブチニル、２−メチル−３−ブチニル、１，１−ジメチル−２−プロピニル、１−エチル−２−プロピニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、１−メチル−２−ペンチニル、１−メチル−３−ペンチニル、２−メチル−３−ペンチニル、１，１−ジメチル−３−ブチニル、２−エチル−３−ブチニル、２−ヘプチニル、３−ヘプチニル、４−メチル−２−ヘキシニル、５−メチル−２−ヘキシニル、２−メチル−３−ヘキシニル、５−メチル−３−ヘキシニル、２−メチル−４−ヘキシニル、４−メチル−５−ヘキシニル、２−オクチニル、３−オクチニル、４−オクチニル、４−メチル−２−ヘプチニル、５−メチル−３−ヘプチニル、６−メチル−３−ヘプチニル、２−メチル−４−ヘプチニル、２−メチル−５−ヘプチニル、３−メチル−６−ヘプチニル等を含むがそれらに限定されない。

【0066】

本明細書で使用される用語「Ｃ_１−６アルコキシ」は、「Ｃ_１−６アルキル−Ｏ−」（「Ｃ_１−６アルキル）」は上記に定義される）を示す。

【0067】

本明細書で使用される用語「Ｃ_１−６アルキルカルボニル」は、「Ｃ_１−６アルキル−Ｃ（Ｏ）−」（「Ｃ_１−６アルキル」は上記に定義される）を示す。

【0068】

本明細書で使用される用語「６〜１４員アリール」としては、６〜８員単環式アリールおよび８〜１４員縮合アリールが挙げられる。６〜８員単環式アリールとしては、例えば、フェニルシクロオクタテトラエニル等が挙げられる。８〜１４員縮合アリールとしては、例えば、ナフチル、フェナントリル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデニル、１Ｈ−インデニル、１，２，３，４−テトラヒドロナフチル、１，４−ジヒドロナフチル等が挙げられる。

【0069】

本明細書で使用される用語「５〜１４員ヘテロアリール」としては、５〜８員の単環式ヘテロアリールおよび６〜１４員縮合ヘテロアリール（ここでヘテロ原子は窒素、酸素、硫黄等である）が挙げられる。前記用語は炭素原子、窒素原子または硫黄原子はオキソで置換されている場合が挙げられる。

【0070】

５ないし８員の単環式ヘテロアリールの例としては、フリル、チエニル、ピロリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、オキサゾリル、イソキサゾリル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、ピリジル、２−ピリドン、４−ピリドン、ピリミジニル、１，４−ジオキシニル、２Ｈ−１，２−オキサジニル、４Ｈ−１，２−オキサジニル、６Ｈ−１，２−オキサジニル、４Ｈ−１，３−オキサジニル、６Ｈ−１，３−オキサジニル、４Ｈ−１，４−オキサジニル、ピリダジニル、ピラジニル、１，２，３−トリアジニル、１，３，５−トリアジニル、１，２，４，５−テトラジニル、アゼピニル、１，３−ジアゼピニル、アザシクロオクタテトラエニル等が挙げられるが、それらに限定されない。５〜６員単環式ヘテロアリールが好ましい。

【0071】

６〜１４員縮合ヘテロアリールの例としては、ベンゾフリル、イソベンゾフリル、ベンゾチエニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイミダゾール、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、キノリル、２−キノリノン、４−キノリノン、１−イソキノリノン、イソキノリル、アクリジニル、フェナントリジニル、ベンゾピリダジニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、フェナジニル、プテリジニル、プリニル、ナフチリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル等が挙げられるがそれらに限定されない。９〜１０員縮合ヘテロアリールが好ましい。

【0072】

本明細書で使用される用語「３〜１４員ヘテロ環式基」としては、３〜８員単環式ヘテロ環式基および６〜１４員縮合ヘテロ環式基（ヘテロ原子は窒素、酸素、硫黄等）が挙げられる。前記用語は炭素原子、窒素原子または硫黄原子はオキソで置換されている場合が挙げられる。

【0073】

３〜８員単環式ヘテロ環式基の例としては、アジリジニル、２Ｈ−アジリジニル、ジアジリジニル、３Ｈ−ジアジリジニル、アゼチジニル、１，４−ジオキサニル、１，３−ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、１，４−ジオキシニル、テトラヒドロフリル、ジヒドロピロリル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、４，５−ジヒドロイミダゾリル、ピラゾリジニル、４，５−ジヒドロピラゾリル、２，５−ジヒドロチエニル、テトラヒドロチエニル、４，５−ジヒドロチアゾリル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、４，５−ジヒドロオキサゾリル、４，５−ジヒドロイソキサゾリル、２，３−ジヒドロイソキサゾリル、２Ｈ−１，２−オキサジニル、６Ｈ−１，３−オキサジニル、４Ｈ−１，３−チアジニル、６Ｈ−１，３−チアジニル、２Ｈ−ピラニル、２Ｈ−ピラン−２−ケト、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラニル等が挙げられるがそれらに限定されない。５〜６員単環式ヘテロ環式基が好ましい。

【0074】

６〜１４員縮合ヘテロ環式基の例としては、テトラヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］ピリジル、３，４−ジヒドロキナゾリニル、１，２−ジヒドロキノキサリニル、ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソリル、１，３−ジヒドロイソベンゾフリル、２Ｈ−クロメニル、２Ｈ−クロメン−２−ケト、４Ｈ−クロメニル、４Ｈ−クロメン−４−ケト、クロマニル、４Ｈ−１，３−ベンゾオキサジニル、４，６−ジヒドロ−１Ｈ−フロ［３，４−ｄ］イミダゾリル、３ａ，４，６，６ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−フロ［３，４−ｄ］イミダゾリル、４，６−ジヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾリル、４，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］イミダゾリル、４，５，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾリル等が挙げられるがそれらに限定されない。９〜１０員縮合ヘテロ環式基が好ましい。

【0075】

本明細書で使用される用語「７〜１２員橋かけ基」は、いずれの２個の環も２個の隣接しない原子を共有し、すべての環原子は、炭素原子である７〜１２員橋かけ基、または窒素、酸素および硫黄などの少なくとも１個のヘテロ原子を含む７〜１２員橋かけヘテロ環式基を示す。７〜１２員橋かけ基および７〜１２員橋かけヘテロ環式基は、飽和または部分的に飽和でありえる。

【0076】

飽和橋かけ基は、すべての環が飽和である橋かけ基を示し、好ましくは７〜８員飽和橋かけ基である。具体例は、

【0077】

【化3】

【0078】

などを含むがそれらに限定されない。

【0079】

部分的飽和橋かけ基は、橋かけ基中の少なくとも１個の環が不飽和環式基であることを意味し、好ましくは７〜８員の部分的飽和橋かけ基である。具体例は、

【0080】

【化4】

【0081】

などを含むがそれらに限定されない。

【0082】

本明細書で使用される用語「７〜１２員スピロ環式基」は、少なくとも２個の環が１個の原子を共有し、すべての環原子が炭素原子である７〜１２員スピロ環式基、または窒素、酸素および硫黄などの少なくとも１個のヘテロ原子を含む７〜１２員スピロ環式基を示す。７〜１２員スピロ環式基および７〜１２員スピロ−ヘテロ環式基は、飽和または部分的に飽和でありえる。

【0083】

飽和スピロ環式基は、スピロ環式基中のすべての環が飽和環式基であることを意味する。具体例は、

【0084】

【化5】

【0085】

などを含むがそれらに限定されない。

【0086】

部分的飽和スピロ環式基は、スピロ環式基中の少なくとも１個の環が不飽和環式基であることを意味する。具体例は、

【0087】

【化6】

【0088】

などを含むがそれらに限定されない。

【0089】

本発明の化合物は、下記方法および／または当業者に公知の他の合成技術に従い合成しうるが、合成方法はこれらの例示された方法に限定されないことは理解されるべきである。

【0090】

【化7】

【0091】

反応工程：
（１）中間体２の合成
中間体１（実験室で作成）をＲ^１−ＮＨ_２（１．５当量）および適切な量の塩基（例えば、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、重曹、酢酸カリウム等）のアルコール性溶媒（例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノール等）溶液に加える。混合液を加熱下で反応させる。反応をＴＬＣにより検出する。反応終了後、反応液を室温で冷却し、ロータリーエバポレイトさせ、アルコール性溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィまたは再結晶で分離し中間体２を生成する。

【0092】

（２）中間体３の合成
中間体２を水混和性溶媒（例えばメタノール、エタノール、テトラヒドロフランまたはその混合液）に溶解する。得られた混合液に、塩基（例えば水酸化リチウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等）（３当量）の水溶液を滴下し加える。滴下添加終了後、得られた混合液を室温で２−６時間反応させ、ロータリーエバポレイトさせて有機溶媒を除去する。適切な量の水を添加後、得られた混合液を生成物が完全に分離するまで適切なｐＨに塩酸で調整する。得られた生成物を吸引ろ過し、シリカゲルカラムクロマトグラフィまたは再結晶で分離し中間体３を生成する。

【0093】

（３）中間体の合成４
中間体３を適切な量の有機溶媒（例えば、スルフィニルクロライド、トルエン、クロロホルム、四塩化炭素等）に懸濁し、数時間反応させる。得られた混合液を濃縮し、揮発性物質を除去し、次に適切な量の極性溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ピリジン、アセトン、トリエチルアミン等）に分散させる。温度を約０℃に調整する。得られた混合液に適切な量の塩基溶媒（例えば、メチルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、エチレンジアミン、トリエタノールアミン等）およびアミン含有保護基（ＰＧ−ＮＨ_２）の混合液に添加する。反応液を室温で撹拌し、ＴＬＣにより検出する。反応終了後、反応液をロータリーエバポレイトさせて溶媒を除去し、再結晶またはシリカゲルカラムクロマトグラフィで分離し中間体４を生成する。

【0094】

（４）中間体５の合成
中間体４を適切な量のエステル溶媒（例えば、クロロギ酸エチル、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸プロピル等）に分散する。得られた混合液を還流しながら撹拌する。反応をＴＬＣにより検出する。反応終了後、反応液をロータリーエバポレイトさせて揮発性物質を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィまたは再結晶で分離し中間体５を生成する。

【0095】

（５）中間体の合成６
アミノ保護基を保護基（ＰＧ）に従い選択した反応条件下で除去し、中間体６を生成する。

【0096】

（６）中間体の合成７
中間体６、Ｒ^４−Ｈａｌ（１．５当量）および適切な量の塩基（例えば、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、重曹、酢酸カリウム等）を溶媒に溶解する。混合液を撹拌する。反応をＴＬＣにより検出する。反応終了後、反応液をロータリーエバポレイトさせ溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィまたは再結晶で分離し中間体７を生成する。

【0097】

（７）本願式（Ｉ）の化合物の合成

【0098】

【化8】

【0099】

適切な量の塩基（例えば、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、重曹、酢酸カリウム等）およびパラジウム剤および／または対応ホスフィンリガンド（例えば、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム等）を有機溶媒（例えば、トルエン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド、エチレングリコールジメチルエーテル等）および水の混合溶媒中にいれる。得られた混合液を窒素保護下加熱下で反応させる。反応はＴＬＣにより検出する。反応終了後、反応液をシリカゲルカラムクロマトグラフィにかけて本願化合物を生成する。

【0100】

反応方程式においては、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｙ、ＡおよびＢは上記に定義し、Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩから選択されるハロゲンを示す。

【0101】

上記反応のために、酸または塩基の条件は、特定の保護剤に従い選択された適当な酸または塩基で作ることができる。塩基としては有機塩基および無機塩基が挙げられ、酸としては有機酸および無機酸が挙げられる。

【0102】

無機塩基としては、例えば水酸化リチウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸ナトリウム、重曹等から選択されるが、それらに限定されない。

【0103】

有機塩基としては、例えば、アミン化合物（例えば、メチルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、エチレンジアミン、トリエタノールアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン等）；塩基性アミノ酸（例えば、リジン、ヒスチジン等）；第四級アンモニウム塩基（例えば、ベタニン、コリン等）；アルカロイド（例えば、プロカイン、カフェイン、エフェドリン等）；アルカリ金属アルコキシド（例えば、ナトリウムメトキシド、カリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等）；リチウム化合物（例えば、ブチルリチウム、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、リチウムビス（トリメチルシリル）アマイド（ＬｉＨＭＤＳ）等から選択されるが、それらに限定されない。

【0104】

無機酸は、例えば、臭化水素酸、塩酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、リン酸等から選択されるが、それらに限定されない。

【0105】

有機塩基は、例えば、メタンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、シュウ酸、２，２−ジクロロ酢酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、Ｌ−アスパラギン酸、マレイン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等から選択されるが、それらに限定されない。

【0106】

用語「製薬上許容し得る塩」は、式（Ｉ）の化合物が酸性基（例えば、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、ＳＯ_３Ｈ等）を含む場合には適切な無機または有機カチオン（塩基）で合成される塩を示し、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属で形成された塩、アンモニウム塩および窒素含有有機塩基で形成された塩などが挙げられる；ならびに式（Ｉ）の化合物が塩基性官能基（例えば、−ＮＨ_２等）を含む場合には、適切な無機または有機アニオン（酸）で合成される塩を示し、無機酸で形成された塩、有機カルボン酸で形成された塩等が挙げられる。

【0107】

本発明の式（Ｉ）の化合物の立体異性体は、１以上の不斉炭素原子が本発明の式（Ｉ）の化合物中に存在する場合には既存のエナンチオマーを示し；化合物が炭素−炭素二重結合またはサイクリック構造を有する場合には既存のシス／トランス異性体を示し；ケトンまたはオキシム等を含む場合には既存の互変異性体を示す。光学異性体、ジアステレオマー、ラセミ異性体、シス−トランス異性体、互変異性体、幾何異性体、エピメライドおよびそれらの混合物のすべてが、本発明の範囲に包含される。

【0108】

本発明の式（Ｉ）の化合物の、用語「溶媒和物」は、溶媒と結びつくことにより形成される物質を示す。溶媒は、有機溶媒（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、アセトニトリル等）、水等でありえる。例えば、本発明の式（Ｉ）の化合物は、エタノールと一緒にエタノレートを形成または水と一緒に水和物を形成しうる。

【0109】

本発明の式（Ｉ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、溶媒和物もしくは立体異性体は、がんおよび非がん性疾患などの増殖性疾患の治療および／または予防に有用である（がん疾患は、脳腫瘍、肺がん、非小細胞肺がん、扁平上皮細胞がん、膀胱がん、胃がん、卵巣がん、腹膜がん、膵臓がん、乳がん、頭頚部がん、子宮頸がん、子宮内膜がん、結腸直腸がん、肝臓がん、腎臓がん、食道腺がん、食道扁平上皮細胞がん、固形がん、非ホジキン性リンパ腫、神経膠腫、多形性膠芽腫、神経膠肉腫、前立腺がん、甲状腺がん、生殖管がん、上皮内がん、リンパ腫、組織球性リンパ腫、神経線維腫症、骨肉腫、皮膚がん、脳がん、結腸がん、精巣がん、肺小細胞がん、消化管間質腫瘍、前立腺腫瘍、肥満細胞腫瘍、多発性骨髄腫、メラノーマ、神経膠腫、グリア芽腫、星状細胞腫、神経芽細胞腫、肉腫から選択され；また非がん性疾患は、皮膚または前立腺の良性増殖から選択される。

【0110】

本発明の式（Ｉ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、溶媒和物もしくは立体異性体は、１以上の製薬上許容し得る担体と一緒になって医薬製剤になしうる。該医薬製剤は、臨床用途においては従来の製剤を示し、そのような治療を必要とする患者に経口的または非経口的に適用しうる。経口投与の場合、錠剤、カプセル、ピル、顆粒等の従来の固形製剤、ならびに経口溶液、経口懸濁剤、シロップ等経口液体製剤になしうる。非経口投与の場合は、注射剤溶液、注射用無菌性散剤、注射用の濃縮液および注射用懸濁剤などの注射液になしうる。直腸投与の場合には、座薬等になしうる。経肺動脈投与の場合には、吸入剤またはエアロゾル等になしうる。局所または経皮投与の場合には、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、散剤、溶液または経皮シール等になしうる。これらの製剤は常法によって調製しうる、賦形剤、結合剤、保湿剤、崩壊剤、増粘剤等などの製薬上許容し得る担体を添加して従来の方法によって調製しうる。

【0111】

本発明の化合物の投与量および投与頻度は、例えば、患者の年齢、体重、症状の重症度によって臨床医または薬剤師によって調節しうる。本発明の化合物の１日の投与量は、単一の用量もしくは分割された用量で投与する場合には、通常２０−５００ｍｇであり、好ましく５０−３００ｍｇでありえる。

【0112】

本発明の式（Ｉ）の化合物、またはその製薬上許容され得る塩、溶媒和物もしくは立体異性体を１以上の抗がん剤および免疫抑制剤と組み合わせて使用することができる。抗腫瘍剤および免疫抑制剤は、カペシタビン、ゲムシタビンおよびペメトレキセド二ナトリウムなどの代謝拮抗剤；パゾパニブ、イマチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、ゲフィチニブおよびバンデタニブなどの成長因子阻害剤；ハーセプチンおよびアバスチンなどの抗体；パクリタキセル、ビノレルビン、ドセタクセルおよびドキソルビシンなどの有糸分裂阻害剤；レトロゾール、タモキシフェン、フルベストラント、フルタミドおよびトリプトレリンなどの抗腫瘍ホルモン類；サイクロフォスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシルおよびカルムスチンなどのアルキル化剤；カルボプラチン、シスプラチンおよびオキサリプラチンなどのプラチナ金属；カンプトセシン、トポテカンおよびイリノテカンなどのトポイソメラーゼ阻害剤；エベロリムス、シロリムスおよびテムシロリムスなどの免疫抑制類；６−メルカプトプリン、６−チオグアニンおよびアザチオプリンなどのプリン類似体；ストレプトゾトシンＤ、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ミトキサントロン、ブレオマイシンおよびプリカマイシンなどの抗生物質；アミノグルテチイミドなどの副腎皮質阻害剤から選択されるがこれらに限定されない。

【0113】

本発明の化合物の有利な効果を、以下にさらに詳細に述べる。本発明の他の化合物は、実験において記載されている化合物と同じ有利な効果を有するが、本発明の化合物のみが下記の効果を有するとは理解すべきでない。

【0114】

下記実験における略語は下記の意味を有する：
ＨＥＰＥＳ：ヒドロキシエチルピペラジン−エタンスルホン酸；
Ｂｒｉｊ−３５：ポリエチレングリコールモノドデシルエーテル；
ＥＤＴＡ：エチレンジアミンテトラ酢酸；
ＥＧＴＡ：エチレングリコール−ビス−（２−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ酢酸；
ＣＨＡＰＳ：３−（（３−コラミドプロピル）ジメチルアンモニウム）−１−プロパンスルホネート
ＤＴＴ：ジチオスレイトール；
ＰＩＰ２：ホスファチジルイノシトール−４，５−ビスホスフェート；
ＡＴＰ：アデノシントリホスフェート；
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド；
Ｔｗｅｅｎ−２０：ツイーン２０；
ＰＥＧ：ポリエチレングリコール．

【0115】

アッセイ１−１：本発明の化合物のキナーゼ選択性
目的：このアッセイでは、表３に記載のキナーゼにおける試験物質の阻害活性を測定し、それによって本発明の化合物の選択性を決定した。
試験物質：実験室で作った本発明の化合物５。その化学名および構造式を実施例１に示した。

【0116】

方法
表３におけるＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅキナーゼを除いて、移動度シフトアッセイ（Mobility Shift Assay）を他のキナーゼに使用した。
１．薬剤の合成：
１．１ ＭｎＣｌ_２無添加１倍キナーゼ緩衝液：５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、０．００１５％Ｂｒｉｊ−３５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２ｍＭ ＤＴＴ。
１．２ ＭｎＣｌ_２無添加１倍キナーゼ緩衝液：５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、０．００１５％Ｂｒｉｊ−３５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１０ｍＭ ＭｎＣｌ_２、２ｍＭ ＤＴＴ。
１．３ 停止液：１００ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、０．００１５％Ｂｒｉｊ−３５、０．２％コーティング試薬＃３、５０ｍＭ ＥＤＴＡ。
１．４ ２．５倍キナーゼ液：１倍キナーゼ緩衝液にキナーゼを加え２．５倍キナーゼ液を作る。
１．５ ２．５倍基質溶液：１倍キナーゼ緩衝液にＦＡＭ蛍光−標識ポリペプチドおよびＡＴＰを加え２．５倍基質溶液を作る。

【0117】

２．５倍化合物の合成
化合物の試験最終濃度は最大１０μＭであった。最初に、５０倍の濃度（すなわち５００μＭ）を１００％ＤＭＳＯで調製した。化合物を１００％ＤＭＳＯで５倍ずつ５つの濃度に希釈した（連続して５００μＭ、１００μＭ、２０μＭ、４μＭおよび０．８μＭ）。１倍キナーゼ緩衝液で１０倍ずつ希釈後、５μｌのサンプルを３８４−ウェル反応プレートに移した。２個の陰性コントロールウェルと２個の陽性コントロールウェルをそれぞれ各ラインにおいた。複製は、５倍の化合物の５つの濃度において９６−ウエルプレート中でなされた。１０％ＤＭＳＯを陽性コントロールウエルに加え、また５μｌのＥＤＴＡ（２５０ｍＭ）を陰性コントロールウエルに加えた。

【0118】

３．手順
３．１ ３８４ウェル反応プレートに１０％ＤＭＳＯに溶解した５倍化合物を加えた（５μｌ／ウェル）。
３．２ ３８４ウェル反応プレートに２．５倍キナーゼ液を加えた（１０μｌ／ウェル）。プレートを室温で１０分間インキュベーションした。
３．３ ３８４ウェル反応プレートに２．５倍基質液を加えた（１０μｌ／ウェル）。プレートを２８℃で一定時間インキュベーションした。
３．４ ２５μｌ停止液を加え反応を停止させた。変換をキャリパー（Caliper）で読んだ。

【0119】

４．阻害率計算
阻害率（％）＝（最大−検体値）／（最大−最小）×１００
式中：
最大は、ＤＭＳＯコントロールウエルにおける変換を示す。
最小は、キナーゼ無添加コントロールウエルにおける変換を示す。

【0120】

ＢＲＡＦ Ｖ６００Ｅキナーゼのためのランサスクリーン（Ｌａｎｔｈａｓｃｒｅｅｎ）分析方法
１．薬剤の合成：
１．１ ２倍キナーゼ液：１倍キナーゼ緩衝液を使用して、最終濃度０．３５ｎＭのＢＲＡＦＶ６００Ｅを含む２倍キナーゼ液を調製；
１．２ ４倍基質溶液：１倍キナーゼ緩衝液を使用して最終基質溶液濃度０．２μＭのＦｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ−ＭＡＰ２Ｋ１および１．５μＭのＡＴＰを含む４倍基質溶液を調製。

【0121】

２．４倍化合物の合成
化合物の最終試験濃度は、最大１０μＭであった。最初は、１００倍濃度（すなわち１０００μＭ）を１００％ＤＭＳＯで調製した。化合物を１００％ＤＭＳＯで５倍ずつ５つの濃度に希釈した。化合物シリーズは、移動度シフトアッセイにおける値と一致した。１倍キナーゼ緩衝液を用いて２５倍ずつに希釈後、得られたサンプルをプレートシェイカー上で１０分間振とうし均一に混合した。

【0122】

３．手順
３．１ ３８４ウェル反応プレートに１０％ＤＭＳＯに溶解した４倍化合物を加えた（２．５μｌ／ウェル）。
３．２ ３８４ウェル反応プレートに２倍キナーゼ液を加え（５μｌ／ウェル）、陰性コントロールウェルに１倍キナーゼ緩衝液を加えた。検体を振とうし均一に混合し室温で放置した。
３．３ ３８４ウェル反応プレートに４倍基質液を加えた（２．５μｌ／ウェル）。プレートを反応させ、振とうし、均一に混合し、室温で１時間インキュベーションした。
３．４ 反応結果検出：最終濃度２ｎＭの抗体および１０ｍＭ ＥＤＴＡを含む２倍検出液を調製した。１０μｌの検出溶液を３８４−ウエルプレートに移し反応を停止させた。プレートをプレート−シェイカー上で３０分間静かに振とうさせた。

【0123】

４．阻害率計算
検体の蛍光値は、Ｖｉｃｔｏｒから読んだ（３４０ｎｍの励起光（ｅｘｃｉｔｉｏｎ）および５２０ｎｍの吸光）。
阻害率（％）＝（最大−検体値）／（最大−最小）×１００
式中：
最大は、キナーゼ無添加コントロールウエルにおける測定値を示す。
最小は、ＤＭＳＯコントロールウエルにおける測定値を示す。
データをＭＳエクセルに入力し、Ｇｒａｐｈｐａｄ５．０を用いて曲線の当てはめを行った。

【0124】

結果

【0125】

【表3】

【0126】

要約
本発明の化合物５は、リストに掲載のキナーゼに対しては劣るＩＣ_５０を有し、それらの大部分が＞１００００ｎＭであったことは表３から認めうる。このことは、本発明の化合物５がそれらのキナーゼに対して阻害活性を有さなかったことを示している。下記のアッセイにおいて、本発明の化合物５が、ＰＩ３ｋキナーゼおよびｍＴＯＲキナーゼに対して良好な阻害活性を有したことを実証しうる。このことは、本発明の化合物５がＰＩ３ｋキナーゼおよびｍＴＯＲキナーゼに対して良好な選択性および高い阻害活性を有したことを示している。

【0127】

アッセイ１−２：本発明の化合物のインビトロ酵素阻害活性
試験物質：本発明の化合物は実験室で作成した。それらの化学名および構造式を実施例に示した。

【0128】

ｍＴＯＲ酵素アッセイ
１．薬剤の合成：
１．１ １倍キナーゼ緩衝液：５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１ｍＭ ＥＧＴＡ、３ｍＭ ＭｎＣｌ_２、０．０１％Ｔｗｅｅｎ−２０、２ｍＭ ＤＴＴ；
１．２ ４倍キナーゼ液：１倍キナーゼ緩衝液にｍＴＯＲキナーゼを加え最終濃度２．５ｎＭの４倍キナーゼ液を作る；
１．３ ２倍基質溶液およびＡＴＰ溶液：１倍キナーゼ緩衝液に基質４ＥＢＰ１およびＡＴＰを加え最終濃度５０ｎＭ ４ＥＢＰ１および１０．８μＭのＡＴＰの２倍基質溶液を作る；
１．４ ４倍試験物質溶液：１００％ＤＭＳＯを用いて異なるグラジエント濃度で１００倍試験物質溶液を作成し、１倍キナーゼ緩衝液で２５倍ずつに希釈し異なるグラジエント濃度で４倍試験物質溶液を作成した。
１．５ 検出溶液の調製：最終濃度ＥＤＴＡおよび４ＥＢＰ１リン酸化抗体の２倍を含む検出溶液を作成する（ＥＤＴＡの最終濃度は８ｍＭおよび４ＥＢＰリン酸化抗体最終濃度は２ｎＭであった）。

【0129】

２．手順
２．１ ３８４ウエルプレートの各ウェルに２．５μＬの４倍試験物質溶液をグラジエント濃度で加えた。複製を作成した。
２．２ 各ウェルに２．５μＬの４倍倍キナーゼ液を加え、次にプレートを１０分間インキュベーションした。
２．３ 次に各ウェルに５μＬの２倍基質液およびＡＴＰ溶液を加え、次にプレートを室温で１時間インキュベーションした。
２．４ 最終的に、１０μＬの検出溶液を加え反応を停止させた。６０分後、データランスシグナル（Ｌａｎｃｅ ｓｉｇｎａｌ）（６６５ｎＭ）をエンビジョン（Ｅｎｖｉｓｉｏｎ）から読んだ。

【0130】

３ データ処理
阻害率（％）＝（検体値−最小）／（最大−最小）×１００
（式中：
最大は、ＤＭＳＯコントロールウエルにおける測定値を示す。
最小は、キナーゼ無添加コントロールウエルにおける測定値を示す。
データをグラフパッドプリズム（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ）５．０に入力し、プロットして曲線およびＩＣ_５０値を得た。

【0131】

ＰＩ３Ｋα酵素アッセイ
１．薬剤の合成：
１．１ １倍キナーゼ緩衝液：５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、３ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１ｍＭ ＥＧＴＡ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、０．０３％ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ ＤＴＴ）；
１．２ ４倍キナーゼ液：１倍キナーゼ緩衝液にＰＩ３Ｋαキナーゼを加え、最終濃度１．６５ｎＭの４倍キナーゼ液を作った；
１．３ ２倍基質およびＡＴＰ溶液：１倍キナーゼ緩衝液に基質ＰＩＰ２およびＡＴＰを加え、最終濃度がＰＩＰ２ ５０μＭおよびＡＴＰ２５μＭの２倍基質溶液を作った；
１．４ ４倍試験物質溶液：異なるグラジエント濃度で１００倍試験物質溶液を１００％ＤＭＳＯで作成し、１倍キナーゼ緩衝液を用いて２５倍ごとに希釈して、異なるグラジエント濃度で４倍試験物質溶液を作った。
１．５ キナーゼＧｌｏ試薬キットは室温に温めておいた。

【0132】

２．手順
２．１ ３８４ウエルプレートの各ウェルに２．５μＬの４倍試験物質溶液をグラジエント濃度で加えた；
２．２ 各ウェルに２．５μＬの４倍キナーゼ液を加え、次にプレートを１０分間インキュベーションした；
２．３ 次に各ウェルに５μＬの２倍基質液およびＡＴＰ溶液を加え、次にプレートを室温で１時間インキュベーションした。
２．４ 最終的に、１０μＬの検出溶液を加え反応を停止させた。１５分後、データランスシグナル（Ｌａｎｃｅ ｓｉｇｎａｌ）（６６５ｎＭ）をエンビジョン（Ｅｎｖｉｓｉｏｎ）で読んだ。

【0133】

３．データ処理
阻害率（％）＝１００−（検体値−最小）／（最大−最小）×１００
（式中：
最大は、キナーゼ無添加コントロールウエルにおける測定値を示す。
最小は、ＤＭＳＯコントロールウエルにおける測定値を示す。
データをグラフパッドプリズム（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ）５．０に入力し、プロットして曲線およびＩＣ_５０値を得た。

【0134】

結果

【0135】

【表4】

【0136】

要約
本発明の化合物がＰＩ３ＫαおよびｍＴＯＲキナーゼの両方に良好な阻害活性を有したことは表４から認めうる。

【0137】

アッセイ１−３：本発明の化合物の薬剤標的放射性リガンド競合結合アッセイ
目的：試験物質が濃度１０μＭの場合、表５に列挙された非キナーゼ薬剤標的放射性リガンドにおける試験物質の競合結合能力を測定するために調査された（Ｂｒｏａｄ ｌｉｇａｎｄ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｃｏｍｐｌｅｔｅｄＬｅａｄ Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ Ｓｃｒｅｅｎ）。これらの標的に対する試験物質の阻害率が５０％を超える場合は、試験物質が該標的に阻害活性を有すると考えられ；これらの標的に対する試験物質の阻害率が５０％未満の場合には、試験物質が該標的に阻害活性を有さず、試験物質がこれらの標的に選択性を有さず潜在的な副作用が存在しないことを示していると考えられた。

【0138】

試験物質：本発明の化合物５は実験室で作成した。それらの化学名および構造式を実施例１に示した。

【0139】

方法
放射性リガンド結合アッセイ（Ｒａｄｉｏｌｉｇａｎｄ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ａｓｓａｙ）
具体的な方法および条件は、薬品テスト溶液を提供する国際的仲介業者であるＥｕｒｏｆｉｎｓ Ｐａｎｌａｂｓオフィシャルウェブサイトを参照。

【0140】

試験物質濃度は１０μＭであり、複製を作った。放射標識リガンドと一緒に、表５に記載した標的リガンドに対する試験物質の阻害率を検出した。

【0141】

結果

【0142】

【表5-1】

【0143】

【表5-2】

【0144】

【表5-3】

【0145】

要約
記載した非キナーゼ薬剤標的リガンドに対する本発明の化合物５の阻害率は５０％未満であり阻害作用を示さなかったことは、表５から認められうる。

【0146】

アッセイ２：本発明の化合物のインビトロ細胞学的阻害活性
試験物質：本発明の化合物は実験室で作成した。それらの化学名および構造式を実施例に示した。
下記細胞株をアッセイで使用した：
Ａ５４９：ヒト肺がん細胞株；
Ｕ８７ＭＧ：ヒト脳アストロサイトブラスト細胞株；
ＰＣ−３：ヒト前立腺上皮性悪性腫瘍細胞株；
ＳＫＯＶ−３：ヒト卵巣がん細胞株；
Ｌｏｖｏ：ヒト結腸上皮性悪性腫瘍細胞株；
ＨＣＴ１１６：ヒト結腸上皮性悪性腫瘍細胞株；
ＢＴ４７４：ヒト乳腺腫瘍細胞株；
７８６−Ｏ：ヒト副腎上皮腫細胞株；
ＭＣＦ−７：ヒト乳房上皮性悪性腫瘍細胞株；
Ａ４９８：ヒト腎上皮性悪性腫瘍細胞株。

【0147】

方法
１．薬剤および化合物の調製：
１．１ リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）の調製：８ｇＮａＣｌ、０．２ｇＫＣｌ、１．４４ｇＮａ_２ＨＰＯ_４および０．２４ｇＫＨ_２ＰＯ_４を秤量し、８００ｍＬの超高純度水に添加した。混合液をｐＨ＝７．４に調整し、超高純度水を加え体積１Ｌにした。次に２０分間オートクレーブを行った。
１．２ ＸＴＴ検出希釈標準溶液の調製：１００ｍｇ（２，３−ビス−（２−メトキシ−４−ニトロ−５−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム−５−カルボキシアニリド）；２，３−ビス（２−メトキシ−４−ニトロ−５−スルホフェニル）−５−［（フェニルアミノ）カルボニル］−２Ｈ−テトラゾリウム水酸化物（ＸＴＴ）散剤を秤量し、遮光下で、５０℃に温めたフェノールレッドおよび血清無添加ＲＰＭＩ１６４０培地（３００ｍＬ）に溶解した。得られた混合液をろ過し、パックし、直ちにもしくは１週間以内に使用した。全工程は遮光下で行った。
１．３ 試験化合物の調製
試験化合物の原液の合成：試験化合物の粉末をＤＭＳＯに溶解し濃度１０ｍＭとした。
試験化合物をグラジエントに希釈した溶液の調製：１０ｍＭの試験化合物の原液をＤＭＳＯで連続的およびグラジエントに、４倍ごとに１０の濃度に希釈した。次にＤＭＳＯ希釈化合物（２μＬ）をそれぞれ１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含有する培地（９９８μＬ）に添加した。試験物質の最大濃度は、２０ＭおよびＤＭＳＯ濃度は０．２％であった。合計で１０のグラジェント濃度が存在した。

【0148】

２．細胞培養：
２．１ 細胞蘇生：
細胞凍結チューブを液体窒素から取出し、３７℃から３９℃のウォーターバスに入れて細胞を素早く溶かす。凍結原液を無菌性１５ｍＬ遠心分離管に移し、凍結原液より１０倍より多い体積の培養液を添加した。その混合液を１０００ｒｐｍ、４℃で５分間遠心分離した。遠心分離チューブ中の培養液を捨て、１０％ＦＢＳ含有培養液を加え細胞を再懸濁し、得られた混合液を培養フラスコに移し、培養液を翌日に入れ換えた。
２．２ 細胞継代
対数増殖期の細胞を取り出して、培養液を除去した。適切な用量のＰＢＳを加え細胞を１度洗浄した。次に０．２５％パンクレオザイミンおよび０．０２％ＥＤＴＡを含有する適切な用量の消化溶液を添加した。培養液を３７℃で２−５分間おいた。消化溶液を捨て、細胞をＰＢＳで一度洗浄した。適切な用量の１０％ＦＢＳを含有する培養液を加え消化を停止させた。消化された細胞を静かにピペットで吹き継代およびアッセイのための細胞懸濁液を調製した。
２．３ 細胞凍結保存
対数増殖期の細胞を取り出し、０．２５％パンクレオザイムおよび０．０２％ＥＤＴＡを含有する消化溶液で消化させた。消化された細胞を細胞懸濁液に調製した。細胞懸濁液を１０００ｒｐｍ、４℃で５分間遠心分離した。培養液を捨て、１０％ＤＭＳＯおよび９０％ＦＢＳを含有する凍結原液を加え、細胞を再懸濁した。細胞を１チューブあたり２×１０^６細胞ずつ凍結チューブに小分けした。凍結チューブをプログラムされた細胞凍結ボックスに入れた。−８０℃２４時間置いたのち、凍結チューブを凍結保存のため液体窒素に移した。

【0149】

３． 細胞プレイティング
３．１ 細胞懸濁液の調製：培養液を培養フラスコから除去し、細胞をＰＢＳで二度洗浄した。パンクレオザイムを加え細胞を消化させた。細胞を遠心分離で回収、１０％ＦＢＳ（牛胎児）を含有する培養液で再懸濁した。細胞をカウントし、適切な濃度に調整した（細胞の生存は９０％より多くあるべき）；および細胞濃度は、５×１０^４／ｍＬであった；
３．２ ９６ウエルプレートに細胞懸濁液を加えた（ウェルあたり１００μｌ）。プレートを３７℃細胞培養器（５％ＣＯ_２）中に一晩おいた。

【0150】

４．処理
希釈試験化合物（ウエルあたり１００μｌ）を細胞培養プレートに加えた（３複製）。最終体積は２００μｌだった。初めの濃度は、４倍希釈を伴う１０μＭであった。合計で１０のグラジェント濃度が存在する。プレートをＣＯ_２細胞培養器中に７２時間おいた。

【0151】

５．ＸＴＴでの細胞生存検出
培養液を除去し、ＸＴＴ検出希釈標準溶液を加えた（ウェルあたり１５０μＬ）。プレートを３７℃ＣＯ_２細胞培養器中２時間おいた。プレートを４５０ｎｍで吸光用マイクロプレートリーダーにいれた。

【0152】

６．データ処理
１）阻害率（％）＝（溶媒コントロールのウェルの測定値−試験物質のウェルの測定値）／（溶媒コントロールのウェルの測定値−ブランクコントロールのウェルの測定値）×１００
２）データをグラフパッドプリズム（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ）５．０に入力し、プロットして曲線およびＩＣ_５０値を得た。

【0153】

結果

【0154】

【表6】

【0155】

【表7】

【0156】

【表8】

【0157】

【表9】

【0158】

要約
本発明の化合物は細胞Ｕ８７ＭＧ、Ａ５４９等の増殖を効果的に阻害できることは表６−９から認められる。

【0159】

アッセイ３：本発明の化合物のインビボ薬物動態アッセイ（ラット）
試験動物：ＳＤ系雄性ラット、体重１９０−２６０ｇ。静脈内ボーラス注射（Ｉ．Ｖ．）および強制経口（Ｐ．Ｏ．）投与を３匹のラットにそれぞれ適用した。

【0160】

試験物質：本発明の化合物は実験室で作成した。それらの化学名および構造式を実施例に示した

【0161】

Ｉ．ＶおよびＰ．Ｏ投与用の化合物５を３０％ＤＭＦ＋５０％ＰＥＧ４００＋２０％（０．９％塩化ナトリウム注射剤）の溶液で可溶化した（ｐＨは適切な量の塩酸水溶液（２ｍｏｌ／Ｌ）で調整）。
Ｉ．ＶおよびＰ．Ｏ投与用の化合物６を、３０％ＤＭＦ＋３０％ＰＥＧ４００＋５％０．１ｍｏｌ／ｌ塩酸＋４５％生理食塩水の溶液で可溶化した。
Ｉ．Ｖ投与用の化合物３０を３０％ＤＭＦ＋５０％ＰＥＧ４００＋２０％生理食塩水の溶液で可溶化した；Ｐ．Ｏ投与用の化合物３０を５％ＤＭＳＯ＋３０％ポリオキシエチレンヒマシ油＋６５％生理食塩水の溶液で可溶化した。
Ｉ．Ｖ投与用の化合物３０の塩酸塩を３０％ＤＭＦ＋５０％ＰＥＧ４００＋２０％注射用無菌水の溶液で可溶化した。

【0162】

方法
１．投与：試験物質の投与方法および投与量を表１０−１および１０−２に示した。

【0163】

【表10-1】

【0164】

【表10-2】

【0165】

２．血液採取：
Ｉ．Ｖ血液採取時点：投与後、０．０８３ｈ、０．２５ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈおよび２４ｈ、
Ｐ．Ｏ血液採取時点：投与後０．１７ｈ、０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈおよび２４ｈ。
約１００μｌの全血液を各時点でとり、ヘパリンナトリウムで抗凝固処理し、高速遠心分離機において８，０００ｒｐｍで６分間遠心分離し血漿を分離し、得られた血漿を−８０℃の冷蔵庫で凍結させた。

【0166】

３．血漿検体分析：
血漿検体を液−液抽出で処理した。２０μＬの血漿をとり、ＢＥＺ−２３５（ノバルティス、フェーズＩＩ）のｔｅｒｔブチルメチルエーテル溶液（６００μＬ、１０ｎｇ／ｍＬ）を内部基準として加えた。混合液を１５００ｒｐｍで１０分間垂直に回転させ、次に１２０００ｒｐｍで５分間遠心分離にかけた。４００μＬの上清をとり窒素下で乾燥させた。乾燥した物質をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のため２００μＬのメタノール：水（７：３、Ｖ／Ｖ）で再溶解した。

【0167】

結果
以下の表１１、１２−１、１２−２を参照。
計算
絶対的バイオアベイラビリティＦ％＝［ＡＵＣ］_{ｌａｓｔ（Ｐ．Ｏ）}＊Ｄｏｓｅ（Ｉ．Ｖ）／［ＡＵＣ］_{ｌａｓｔ（Ｉ．Ｖ）}＊Ｄｏｓｅ_{（Ｐ．Ｏ）}

【0168】

【表11】

【0169】

【表12-1】

【0170】

【表12-2】

【0171】

ＡＵＣ_ｌａｓｔは血漿濃度−時間曲線０→ｔ下の面積を表す。
ＡＵＣ_ｉｎｆは血漿濃度−時間曲線０→∞下の面積を表す。
ＣＬはクリアランスを表す。
Ｖｓｓは分布の見かけの体積を表す。
Ｔ_１／２は半減期を表す。
Ｔ_ｍａｘは血漿中の薬物の最大濃度に到達するまでの時間を表す。
Ｃ_ｍａｘは血漿中の最大薬物濃度を表す。
Ｆ％は絶対的バイオアベイラビリティを表す。

【0172】

要約
本発明の化合物がＰ．ＯおよびＩ．Ｖ投与の両方において良好な薬物動態を有したことが表１１、１２−１および１２−２から認められる。

【0173】

実施例
本発明の上記内容を下記実施例によりさらに詳細に記載するが、このことから本発明が下記実施例に限定されると解釈するべきではない。

【0174】

下記実施例の略語は以下のように定義される：
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；
ＥＡ：酢酸エチル；
ＰＥ：石油エーテル；
ＨＡＴＵ：２−（７−アザベンゾトリアゾール）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；
ＤＣＭ：ジクロロメタン；
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド．

【0175】

５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−アミンを実験室で作成した。合成方法は以下の通りである：
２−アミノ−５−ブロモピリジン（５．１ｇ、３０ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（１０．７ｇ、４５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（８．３ｇ、６０ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６９３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬジオキサンおよび２ｍＬの水に加えた。得られた混合液を還流させながら窒素保護中４時間反応させ、室温まで冷却し、ろ過し濃縮した。粗生成物を３００ｍＬジクロロメタンに溶かし、水で洗浄、無水硫酸ナトリウム下で乾燥させ濃縮した。ほんの少し溶媒が残っている場合は、石油エーテルをそれに加えた。黄色の固体を分離ろ過し生成物を得た（１．８ｇ）。
５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジン−２−アミン、ＰｈａｒｍａＢｌｏｃｋ（Ｎａｎｊｉｎｇ）Ｒ＆Ｄ Ｃｏ． Ｌｔｄ．から購入；
（２−メトキシピリミジン−５−イル）ホウ酸、Ｊ＆Ｋ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌｔｄ．から購入；
（６−メトキシピリジン−３−イル）ホウ酸、Ｊ＆Ｋ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｌｔｄ．から購入；
５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン、ＰｈａｒｍａＢｌｏｃｋ（Ｎａｎｊｉｎｇ）Ｒ＆Ｄ Ｃｏ． Ｌｔｄ．から購入。

【0176】

実施例１：９−（６−アミノピリジン−３−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（化合物５）の合成
１）エチル６−クロロ−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレートの合成

【0177】

【化9】

【0178】

４，６−ジクロロ−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレートエチル（５．４ｇ、２０ｍｍｏｌ）（ＷＯ２０１３／２０７１６９８、３８頁に従って合成）、メタ−トリフルオロメチルアニリン（４．５ｇ、２８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（５．５ｇ、４０ｍｍｏｌ）を１５０ｍＬのｔｅｒｔ−ブタノールに加えた。得られた混合液を９０℃に加熱し、１８時間反応させた。反応液を室温まで冷却し、ロータリーエバポレイトして乾燥させた。得られた固体に３００ｍＬの水を加え、ろ過し、酢酸エチルおよび石油エーテル（１／２０、５０ｍＬ）で洗浄し、６−クロロ−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレートエチル（６．０ｇ）の黄色の固体を得た。

【0179】

２）６−クロロ−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボン酸

【0180】

【化10】

【0181】

エチル６−クロロ−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレート（３．９５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を５０ｍＬメタノールおよび５０ｍＬテトラヒドロフランに溶かした。得られた混合液に水（５０ｍＬ）に溶かした水酸化リチウム（１．２６ｇ、３０ｍｍｏｌ）溶液を滴下して添加した。滴下終了後、得られた混合液を室温で４時間反応させる。反応物を濃縮し２００ｍＬの水を加えた。得られた混合液を塩酸でｐＨ＝３に調整した。固体を分離し、真空乾燥し、黄色の固形（３．６ｇ）を得た。

【0182】

３）Ｎ−（４−メトキシベンジル）−６−クロロ−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミド

【0183】

【化11】

【0184】

６−クロロ−４−（３−（トリフルオロメチル）フェニルアミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボン酸（３．６ｇ、９．８ｍｍｏｌ）を５０ｍＬスルフィニルクロライド中に懸濁した。得られた混合液を７５℃まで撹拌しながら加熱し、同じ温度を保ちながら４時間反応させた。反応物を室温まで自然に冷却し、濃縮して黄色の個体を得た。得られた固体を１００ｍＬテトラヒドロフラン中に分散させた。得られた混合液に、トリエチルアミン（３．０３ｇ、３０ｍｍｏｌ）およびパラ−メトキシベンジルアミン（１．６ｇ、１３ｍｍｏｌ）の混合液を０℃にて滴下して添加した。反応液を室温で４時間撹拌し、ロータリーエバポレイトして溶媒を除去した。残渣に３００ｍＬの水を加えた。得られた混合液を吸引ろ過した。ろ過ケークを酢酸エチルおよび石油エーテル（体積比１／１０、１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて淡黄色の固体、Ｎ−（４−メトキシベンジル）−６−クロロ−４−（３−（トリフルオロメチル）フェニルアミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミド（４．５ｇ）を得た。

【0185】

４）９−クロロ−３−（４−メトキシベンジル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンの合成

【0186】

【化12】

【0187】

Ｎ−（４−メトキシベンジル）−６−クロロ−４−（３−（トリフルオロメチル）フェニルアミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミド（４．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ）をクロロギ酸エチル（５０ｍＬ）に懸濁した。得られた混合液を９０℃まで加熱し、１２０時間撹拌し、ロータリーエバポレイトし揮発性物質を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０−１／４）で分離し、黄色のオイル、９−クロロ−３−（４−メトキシベンジル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（７００ｍｇ）を得た。

【0188】

５）９−クロロ−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオンの合成

【0189】

【化13】

【0190】

９−クロロ−３−（４−メトキシベンジル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（７００ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（４０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）に溶かした。アンモニウムセリウムニトレート（２．９ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）を室温でバッチに加えた。反応液を室温で１８時間撹拌し、次にロータリーエバポレイトして溶媒を除去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０−１／４）で分離し黄色の個体（４００ｍｇ）を得た。

【0191】

６）９−（６−アミノピリジン−３−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン

【0192】

【化14】

【0193】

９−クロロ−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（４００ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−アミン（４４０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４１４ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をジオキサン（４０ｍＬ）および水（２ｍＬ）に加えた。得られた混合液を１８時間窒素保護下で還流させながら反応させ、室温に冷却し、セライトでろ過し、濃縮しシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０−１０／１）で分離し粗生成物を得、粗生成物をメタノールで洗浄し、黄色の固体、９−（６−アミノピリジン−３−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（５６ｍｇ）を得た。
式：Ｃ_２２Ｈ_１３Ｆ_３Ｎ_６Ｏ_２ ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４５１．１（Ｍ＋Ｈ）
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：１２．２８（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）、９．２６（ｓ，１Ｈ）、８．３３（ｍ，１Ｈ）、８．２１ − ８．２６（ｍ，１Ｈ）、８．１６（ｍ，１Ｈ）、７．９３（ｓ，１Ｈ）、７．８１（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）、７．７０（ｍ，２Ｈ）、６．７６（ｍ，１Ｈ）、６．４６（ｓ，２Ｈ）、６．２４（ｍ，１Ｈ）。

【0194】

実施例２ ９−（６−メトキシピリジン−３−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（化合物２）の合成

【0195】

【化15】

【0196】

９−クロロ−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（３００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、（６−メトキシピリジン−３−イル）ホウ酸（１１８ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３１７ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）をジオキサン（４０ｍＬ）および水（２ｍＬ）に加えた。得られた混合液を１８時間窒素保護下で還流させながら反応させ、室温に冷却し、セライトでろ過した。得られたろ液に食塩を加え、固体を分離し、吸引ろ過し粗生成物を得、粗生成物を水、酢酸エチルおよびメタノールで順次洗浄し、９−（６−メトキシピリジン−３−イル）−１−（３−（トリフルオロメトキシ）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（１５０ｍｇ）を生成した。
式：Ｃ_２３Ｈ_１４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_３ ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４６６．１（Ｍ＋Ｈ）
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００Ｍｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：１２．３２（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）、９．３３（ｓ，１Ｈ）、８．４５（ｄ、Ｊ ＝ ９．２，１Ｈ）、８．３５（ｍ，２Ｈ）、７．８９（ｍ，２Ｈ）、７．７４（ｍ，２Ｈ）、７．０５（ｍ，１Ｈ）、６．６５（ｍ，１Ｈ）、３．８９（ｓ，３Ｈ）。

【0197】

実施例３ ９−（２−メトキシピリミジン−５−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（化合物１７）の合成

【0198】

【化16】

【0199】

９−クロロ−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（３００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、（２−メトキシピリミジン−５−イル）ホウ酸（１１９ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３１７ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をジオキサン（４０ｍＬ）および水（２ｍＬ）に加えた。得られた混合液を１８時間窒素保護下で還流させながら反応させ、室温に冷却し、セライトでろ過し濃縮した。４０ｍＬの水を加えた。得られた混合液をろ過し粗生成物を得、粗生成物を酢酸エチル（３０ｍＬ）およびメタノール（１０ｍＬ）で連続的に洗浄し、９−（２−メトキシピリミジン−５−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（１５０ｍｇ）を生成した。
式：Ｃ_２２Ｈ_１３Ｆ_３Ｎ_６Ｏ_３ ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４６７．１（Ｍ＋Ｈ）
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：１２．３５（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）、９．３５（ｓ，１Ｈ）、８．５１（ｄ、Ｊ ＝ ８．８ １Ｈ）、８．３７（ｄ、Ｊ ＝ ８．８，１Ｈ）、８．３１（ｓ，２Ｈ）、７．９０（ｓ，１Ｈ）、７．７０−７．８３（ｍ，３Ｈ）、３．９６（ｓ，３Ｈ）。

【0200】

実施例４ ９−（２−アミノピリミジン−５−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（化合物２０）の合成

【0201】

【化17】

【0202】

９−クロロ−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（３００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリミジン−２−アミン（１７０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３１７ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をジオキサン（４０ｍＬ）および水（２ｍＬ）に加えた。得られた混合液を１８時間窒素保護下で還流させながら反応させ、室温に冷却し、濃縮した。４００ｍＬの水を加えた。得られた混合液をろ過し粗生成物を得、粗生成物を６Ｍ濃塩酸（２０ｍＬ）に溶解し、ジクロロメタン（４×５０ｍＬ）で洗浄した。水相に炭酸ナトリウム水溶液を滴下して加え、ろ過し、水で洗浄した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄し９−（２−アミノピリミジン−５−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（１６０ｍｇ）を生成した。
式：Ｃ_２１Ｈ_１２Ｆ_３Ｎ_７Ｏ_２ ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４５２．１（Ｍ＋Ｈ）
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１２．２５（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）、９．２９（ｓ，１Ｈ）、８．３８（ｄ，１Ｈ）、８．２４（ｄ、Ｊ ＝ ９．２，１Ｈ）、８．００（ｓ，２Ｈ）、７．７０−７．８４（ｍ，４Ｈ）、７．１４（ｓ，２Ｈ）。

【0203】

実施例５ ９−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（化合物３０）の合成

【0204】

【化18】

【0205】

９−クロロ−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（３００ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（１８８ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３１７ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４５ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をジオキサン（４０ｍＬ）および水（２ｍＬ）に加えた。得られた混合液を１８時間窒素保護下で還流させながら反応させ、室温に冷却し、濃縮した。４０ｍＬの水を加えた。得られた混合液をろ過し粗生成物を得、粗生成物を６Ｎ塩酸（１０ｍＬ）に溶解し、ＤＣＭ（４×５０ｍＬ）で洗浄した。水相に炭酸ナトリウム水溶液を滴下して加え、ろ過し、水で洗浄した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄し９−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（１７０ｍｇ）を生成した。
式：Ｃ_２４Ｈ_１３Ｆ_３Ｎ_６Ｏ_３ ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４７５．１（Ｍ＋Ｈ）
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：１１．８４（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）、９．３１（ｓ，１Ｈ）、８．４２（ｓ，２Ｈ）、８．２４（ｍ，１Ｈ）、７．８９（ｓ，２Ｈ）、７．７５（ｓ，２Ｈ）、７．５２（ｓ，３Ｈ）、６．５０（ｓ，１Ｈ）。

【0206】

化合物３０の塩酸塩の合成

【0207】

【化19】

【0208】

化合物３０（４３ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）をメタノール（１０ｍＬ）に分散した。０．１ｍＬの濃塩酸を加えた。得られた混合液を１時間撹拌し、真空下で濃縮し化合物３０の塩酸塩を生成した。

【0209】

実施例６ ２−（４−（９−（アミノピリジン−３−イル）−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−２−メチルプロパンニトリル（化合物４１）の合成
１）２−メチル−２−（４−ニトロフェニル）プロピオニトリル

【0210】

【化20】

【0211】

２−（４−ニトロフェニル）アセトニトリル（４．８６ｇ、３０ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのジクロロメタンに溶解した。得られた混合液に３０ｍＬの水酸化ナトリウム水溶液（３．６ｇ、９０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。次に得られた混合液にイオドメタン（１０．６５ｇ、７５ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。滴下終了後、得られた混合液を室温窒素保護下遮光下で１６時間反応させた。５０ｍＬの水および１００ｍＬのジクロロメタンを加えた。分相した。水相を１００ｍＬジクロロメタンで抽出した。有機相を合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０−１／２０）で分離し、淡黄色の固体、２−メチル−２−（４−ニトロフェニル）プロパンニトリル（４．５ｇ）を得た。

【0212】

２）２−（４−アミノフェニル）−２−メチルプロパンニトリル

【0213】

【化21】

【0214】

２−メチル−２−（４−ニトロフェニル）プロパンニトリル（４．５ｇ、２３．６ｍｍｏｌ）を反応槽に加え、Ｐｄ／Ｃ（４５０ｍｇ）および５０ｍＬ酢酸エチルを連続して加えた。システムを吸引し水素を導入した。得られた混合液を室温で１５時間反応させた。得られた反応物をセライトでろ過し酢酸エチルで洗浄した。得られたろ液を濃縮し、無色オイル、２−（４−アミノフェニル）−２−メチルプロパンニトリル（３．５ｇ）を得た。

【0215】

３）エチル６−クロロ−４−（（４−（２−シアノプロパン−２−イル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレート

【0216】

【化22】

【0217】

４，６−ジクロロ−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレートエチル（５．９ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）および２−（４−アミノフェニル）−２−メチルプロパンニトリル（３．５ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブタノール（１００ｍＬ）に溶解した。得られた混合液に炭酸カリウム（６．０ｇ、４３．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を加熱し還流し１５時間反応させた。反応物を室温に冷却し、次に減圧濃縮した。残査に１００ｍＬの水および１００ｍＬのＤＣＭを加えた。分相した。水相を１００ｍＬのＤＣＭで抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０−１／２）により分離し、淡黄色の固体、６−クロロ−４−（（４−（２−シアノプロパン−２−イル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレートエチル（６．９ｇ）を生成した。

【0218】

４）６−クロロ−４−（（４−（２−シアノプロパン−２−イル）フェニル）アミノ）−Ｎ−（４−メトキシベンジル）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミドの合成

【0219】

【化23】

【0220】

エチル６−クロロ−４−（（４−（２−シアノプロパン−２−イル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレート（６．９ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）を５０ｍＬメタノールおよび５０ｍＬテトラヒドロフランに溶かした。得られた混合液に５０ｍＬの水酸化リチウム水溶液（２．２ｇ、５２．４ｍｍｏｌ）を室温で滴下して加えた。滴下終了後、得られた混合液を室温で４時間反応させた。反応物を濃縮した。２００ｍＬの水を加えた。得られた混合液を塩酸でｐＨ＝２−３に調整した。固体を分離し真空下で乾燥し黄色の固体を得、次に１００ｍＬのジクロロメタンに分散した。０．０５ｍＬのＤＭＦを加えた。得られた混合液に氷浴でオキサリルクロライド（４．２ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）を滴下し加えた。滴下終了後、反応液を室温で加温し４時間反応させた。反応物を減圧留去し溶媒を除去し、続いて１００ｍＬのジクロロメタンに溶解した。得られた混合液にトリエチルアミン（５．０ｇ、４９．８ｍｍｏｌ）およびｐａｒａ−メトキシベンジルアミン（２．７ｇ、１９．９ｍｍｏｌ）の混合液を氷浴下で滴下して加えた。滴下終了後、反応液を室温で１５時間反応させた。５０ｍＬの水および１００ｍＬのＤＣＭを加えた。分相した。水相を１００ｍＬのＤＣＭで抽出した。有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝１／１０−３／２）により分離し淡黄色の固体（４．０ｇ）を得た。

【0221】

５）２−（４−（９−クロロ−３−（４−メトキシベンジル）−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−２−メチルプロパンニトリル

【0222】

【化24】

【0223】

水素化ナトリウム（１．０ｇ、２５ｍｍｏｌ）を２５ｍＬのＤＭＦで懸濁した。得られた混合液に室温でゆっくりと６−クロロ−４−（（４−（２−シアノプロパン−２−イル）フェニル）アミノ）−Ｎ−（４−メトキシベンジル）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミド（２．４３ｇ、５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２５ｍＬ）に溶かした溶液を滴下して加えた。滴下終了後、得られた混合液を６０℃に加温し１時間反応させた。得られた混合液に氷浴でクロロギ酸エチル（１．３６ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴下し加えた。滴下終了後、反応液を６０℃に加温し１６時間反応させた。反応物を室温に冷却し、次に水にゆっくり注ぎ、酢酸エチル（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ＰＥ＝０−１／５）により分離し淡黄色の固体（１．２ｇ）を生成した。

【0224】

６）２−（４−（９−クロロ−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−２−メチルプロパンニトリル

【0225】

【化25】

【0226】

２−（４−（９−クロロ−３−（４−メトキシベンジル）−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−２−メチルプロパンニトリル（１．２ｇ、２．３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（８０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）に溶かした。アンモニウムセリウムニトレート（５．１ｇ、９．４ｍｍｏｌ）を室温でバッチに加えた。反応液を室温で１６時間反応後濃縮した。１００ｍＬの水を加えた。混合液をろ過した。得られた固体をＥＡおよびＰＥ（１：１）で洗浄し真空乾燥して黄色固体（６００ｍｇ）を得た。

【0227】

７）２−（４−（９−（６−アミノピリジン−３−イル）−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−２−メチルプロパンニトリル

【0228】

【化26】

【0229】

２−（４−（９−クロロ−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−２−メチルプロパンニトリル（３９２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−アミン（４４０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ、含有量５０％）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４６ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのジオキサンに溶解した。得られた混合液に１ｍＬの炭酸カリウム水溶液（２７６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を窒素保護下１５−１８時間１００℃で反応させ、室温に冷却し濃縮し、ろ過し、水で洗浄した。得られた粗生成物を酢酸エチルおよびメタノールで連続的に洗浄し、淡黄色の固体、２−（４−（９−（６−アミノピリジン−３−イル）−２，４−ジオキソ−３，４−ジヒドロピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−１（２Ｈ）−イル）フェニル）−２−メチルプロパンニトリル（１５０ｍｇ）を生成した。
式：Ｃ_２５Ｈ_１９Ｎ_７Ｏ_２ ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｅ）：４５０．１（Ｍ＋Ｈ）
^１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｍｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：１２．１９（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）、９．２４（ｓ，１Ｈ）、８．３０（ｄ、Ｊ ＝ ８．８，１Ｈ）、８．１７（ｄ、Ｊ ＝ ８．８，１Ｈ）、７．９７（ｍ，１Ｈ）、７．５９（ｍ，２Ｈ）、７．４２（ｍ，２Ｈ）、７．２０（ｍ，１Ｈ）、６．３２−６．４０（ｍ，３Ｈ）、１．７３（ｓ，６Ｈ）。

【0230】

実施例７
９−（６−アミノピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（化合物６）の合成
１）６−クロロ−Ｎ−メチル−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミド

【0231】

【化27】

【0232】

６−クロロ−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）−１，５−ナフチリジン−３−カルボキシレートエチル（３．９５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのメタノールおよび５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶かした。得られた混合液に５０ｍＬの水酸化リチウム水溶液（１．２６ｇ、３０ｍｍｏｌ）を滴下し加えた。滴下終了後、混合液を室温４時間撹拌した。反応物を濃縮した。２００ｍＬの水を加えた。得られた混合液を塩酸でｐＨ＝２−３に調整し、吸引ろ過し乾燥した。

【0233】

得られた固体およびメチルアミン塩酸塩（９２４ｍｇ、１３．７ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのＤＭＦに入れた。混合液にトリエチルアミン（５．９９ｇ、５８．８ｍｍｏｌ）を加え、続いてＨＡＴＵ（５．６ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温４時間撹拌した。３００ｍＬの水を加えた。得られた混合液を吸引ろ過した。ろ過ケークを水で洗浄し、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル／石油エーテル ＝ ０−１／１）により分離し、淡黄色の固体、６−クロロ−Ｎ−メチル−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミド（２．５ｇ）を生成した。

【0234】

２）９−クロロ−３−メチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン）−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン

【0235】

【化28】

【0236】

水素化ナトリウム（１．３ｇ、３３ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのＤＭＦに懸濁した。０℃で、得られた混合液に、６−クロロ−Ｎ−メチル−４−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ−１，５−ナフチリジン−３−カルボキサミド（２．５ｇ、６．６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（６０ｍＬ）に溶かした溶液をゆっくりと滴下し加えた。滴下終了後、その混合液を室温に加温し１時間攪拌した。氷浴下で、クロロギ酸エチル（１．８ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）をゆっくりと反応物に滴下し加えた。滴下終了後、反応液を６０℃に加温し、１６時間撹拌した。次に反応物を室温に冷却し水を加えた。反応を酢酸エチルで抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩液で洗浄し無水硫酸ナトリウムで乾燥し、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル／石油エーテル ＝ ０−１／５）により分離し黄色のオイル（１．２ｇ）を得た。

【0237】

３）９−（６−アミノピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン

【0238】

【化29】

【0239】

９−クロロ−３−メチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−ピリミジノ［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（６０９ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−アミン（６６０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ、含有量５０％）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（７０ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのジオキサンに加えた。得られた混合液に２０ｍＬの炭酸カリウム水溶液（６２１ｍｇ、４．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を１０５℃１８時間窒素保護下で反応後冷却し、セライトでろ過、濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル／石油エーテル ＝ ０−１０／１）により分離し粗生成物を生成し、これを６Ｍ塩酸（５０ｍＬ）に溶かした。得られた混合液をジクロロメタンで洗浄した。水相を炭酸ナトリウム水溶液に滴下し加え、吸引ろ過し、水およびメタノールで連続的に洗浄し乾燥し、９−（６−アミノピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピリド［５，４−ｃ］［１，５］ナフチリジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン（５００ｍｇ）を生成した。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００Ｍｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ：９．３３（ｓ，１Ｈ）、８．３４（ｍ，１Ｈ）、８．２５（ｍ，１Ｈ）、８．１６（ｍ，１Ｈ）、７．９１（ｓ，１Ｈ）、７．８２（ｍ，１Ｈ）、７．７１（ｍ，２Ｈ）、６．７８（ｍ，１Ｈ）、６．４７（ｓ，２Ｈ）、６．２５（ｍ，１Ｈ）、３．３７（ｓ，３Ｈ）。