特許 6099573 新規なヘルペス抗原をコードする核酸分子、それを含むワクチン及びその使用方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6099573

(24)【登録日】2017年3月3日

(45)【発行日】2017年3月22日

(54)【発明の名称】新規なヘルペス抗原をコードする核酸分子、それを含むワクチン及びその使用方法

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/09 20060101AFI20170313BHJP

   C07K 14/035 20060101ALI20170313BHJP

   C07K 14/04 20060101ALI20170313BHJP

   A61K 39/245 20060101ALI20170313BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20170313BHJP

   A61P 31/22 20060101ALI20170313BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20170313BHJP

【ＦＩ】

   C12N15/00 AZNA

   C07K14/035

   C07K14/04

   A61K39/245

   A61K48/00

   A61P31/22

   A61P37/04

【請求項の数】11

【全頁数】105

(21)【出願番号】特願2013-551433(P2013-551433)

(86)(22)【出願日】2012年1月31日

(65)【公表番号】特表2014-513522(P2014-513522A)

(43)【公表日】2014年6月5日

(86)【国際出願番号】US2012023398

(87)【国際公開番号】WO2012106377

(87)【国際公開日】20120809

【審査請求日】2015年1月28日

(31)【優先権主張番号】61/438,089

(32)【優先日】2011年1月31日

(33)【優先権主張国】US

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】500429103

【氏名又は名称】ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(72)【発明者】

【氏名】ウェイナー， デイビッド ビー

(72)【発明者】

【氏名】シェドロック， デボン ジェイ

【審査官】 大久保 智之

(56)【参考文献】

【文献】 特表平１１−５０７２０９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１０／１４８５４１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 中国特許出願公開第１０１７８０２７７（ＣＮ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５１８３０６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 細胞，２００１年，33, 9，28-31

【文献】 日本歯科評論，２００１年，61, 2，173-175

【文献】 小児感染免疫，２００８年，20, 1，33-41，http://www.jspid.jp/journal/full/02001/020010033.pdf参照

【文献】 日本臨床，２００６年，64, 増刊号3，59-64

【文献】 J Virol.，２００３年，77, 11，6167-6177

【文献】 1-4-1 抗原抗体反応を用いた核酸の検出，標準技術集（核酸の増幅および検出）データベース:抗原抗体反応を用いた核酸の検出，２００１年，技術内容 （ｃ），http://www.jpo.go.jp/shiryou/s_sonota/hyoujun_gijutsu/kakusan/0006.html参照

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ１２Ｎ １５／００

Ｃ０７Ｋ １４／００

ＵｎｉＰｒｏｔ／ＧｅｎｅＳｅｑ

ＧｅｎＢａｎｋ／ＥＭＢＬ／ＤＤＢＪ／ＧｅｎｅＳｅｑ

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

配列番号：１を含む核酸配列を含む核酸分子。

【請求項2】

配列番号：３； 配列番号：５； 配列番号：７； 配列番号：９； 配列番号：１１； 配列番号：１３； 配列番号：１５； 配列番号：１７；および配列番号：１９から成る群から選択される１以上のヌクレオチド配列をさらに含む請求項１に記載の核酸分子。

【請求項3】

核酸分子がさらに、異なる核酸配列である異なる第２の核酸配列を含み、前記第２の核酸配列がＨＣＭＶ ｇＭ， ＨＣＭＶ ｇＮ， ＨＣＭＶ ｇＨ， ＨＣＭＶ ｇＬ， ＨＣＭＶ ｇＯ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１ａ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０， ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８， ＨＣＭＶ−ＵＬ８３， ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ， ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ， ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ， ＶＺＶ−ｇＥ， ＶＺＶ−ｇＩ， ＶＺＶ−ｇＣ， ＶＺＶ−ｇＫ， ＣｅＨＶ１−ｇＢ， ＣｅＨＶ１−ｇＨ， ＣｅＨＶ１−ｇＬ， ＣｅＨＶ１−ｇＣ， 及び ＣｅＨＶ１−ｇＤから成る群から選択されるタンパク質をコードする請求項１に記載の核酸分子。

【請求項4】

核酸分子がＨＣＭＶのコーディング配列を含み、第２の核酸配列がＨＣＭＶ ｇＭ， ＨＣＭＶ ｇＮ， ＨＣＭＶ ｇＨ， ＨＣＭＶ ｇＬ， ＨＣＭＶ ｇＯ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１ａ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０， ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８， 又は ＨＣＭＶ−ＵＬ８３から選択されるタンパク質をコードする請求項３に記載の核酸分子。

【請求項5】

核酸分子がプラスミドである請求項１に記載の核酸分子。

【請求項6】

核酸分子が発現ベクターであり、核酸配列が調節要素に操作可能に連結される請求項１に記載の核酸分子。

【請求項7】

請求項１に記載の核酸分子を含む組成物であって、核酸分子がウイルス粒子に組み入れられる、組成物。

【請求項8】

請求項１に記載の核酸分子を含む組成物。

【請求項9】

個体においてヘルペスウイルス抗原に対する免疫応答を誘導するための組成物であって、請求項１に記載の核酸分子を含む組成物。

【請求項10】

ヘルペスウイルス感染から個体を防御するための組成物であって、請求項１に記載の核酸分子を含む組成物。

【請求項11】

ヘルペスウイルス感染であると診断されている個体を防御するための組成物であって、請求項１に記載の核酸分子を含む組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ヒトのヘルペスファミリーウイルス（Ｈｅｒｐ）タンパク質をコードする核酸配列及びその断片；改善されたヘルペスワクチン；ヘルペスに対する免疫応答を誘導する改善された方法；ヘルペスウイルスに対して予防上及び／又は治療上個体を免疫する改善された方法に関する。

【背景技術】

【0002】

Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｉｄａｅ（ヘルペスウイルス又はヘルペスファミリーウイルス）は、相対的に大きく複雑なゲノムを持つエンベロープのある二本鎖ＤＮＡウイルスのファミリーの名称である。ヒトで単離された８種、ウマ、ウシ、マウス、ブタ、ニワトリ、カメ、トカゲ、魚のそれぞれにおける数種を含むそれらは、広範範囲の脊椎動物宿主、及びさらにカキのような一部の非脊椎動物の核の中で複製する。ヒトでのヘルペスウイルスの感染は流行性であり、単純ヘルペスウイルス１及び２（ＨＳＶ−１、ＨＳＶ−２）の双方、またヒトのサイトメガロウイルス（ＨＨＶ−５）及び多分カポジ肉腫ヘルペスウイルス（ＨＨＶ−８）を含む幾つかについては性的接触が伝染の重要な方法である。性器ヘルペスの増え続ける有病率及び新生児感染の相当する上昇及びヒトの癌における補因子としてのエプステインバーウイルス（ＨＨＶ−４）とカポジ肉腫ヘルペスウイルスの関与によって、この複雑で、高度に成功を収めたウイルスファミリーについて緊急にさらに良く理解することが求められている。

【0003】

ヘルペスウイルスすべてのビリオンのビリオン構造は４つの構造要素から構成される：１．コア：コアは環状体の形態でのｄｓＤＮＡの単一直鎖分子から成る。２．カプシド：コアを取り囲むのは１６２のカプソメアで構成される直径１００ｎｍの２０面体カプシドである。３．テグメント：カプシドとエンベロープの間は、非晶性の時には非対称性のテグメントと呼ばれる造作である。それはウイルス酵素から成り、その一部は細胞の化学反応過程を制御するのに必要であり、一部は宿主細胞の即時型応答に対して防御し、他の機能は未だ理解されていない。４．エンベロープ：エンベロープはビリオンの外層であり、変化した宿主の膜と１２の独特のウイルス糖タンパク質で構成される。それらは電子顕微鏡では、エンベロープに埋め込まれた短い穂に見える。

【0004】

ヘルペスウイルスのゲノムは長さ１２０〜２３０ｋｂｐに及び、３１％〜７５％のＧ＋Ｃ含量の基本組成を持ち、６０〜１２０の遺伝子を含有する。複製が核の中で起きるので、ヘルペスウイルスは宿主の転写機構及びＤＮＡ修復酵素の双方を使用して複雑な数々の遺伝子を持つ大きなゲノムを支えることができる。真核生物宿主の遺伝子のようにヘルペスウイルス遺伝子はオペロンに配置されず、ほとんどの場合、個々のプロモータを有する。しかしながら、真核生物の遺伝子とは異なって、ヘルペスウイルス遺伝子はほとんどスプライシングされることはない。

【0005】

遺伝子は、細胞培養にて増殖に必須であるか又は可欠であるかのいずれかとして性状分析される。必須な遺伝子は転写を調節し、ビリオンを構築するのに必要とされる。ほとんどの部分で可欠な遺伝子は、ウイルス産生の細胞環境を向上させ、宿主の免疫系からウイルスを防御し、細胞から細胞への広がりを促進するように機能する。多数の可欠な遺伝子が生体内の感染で生産性のために実は必要とされる。それらが可欠であるのは実験室の細胞培養の制約された環境においてのみである。ヘルペスウイルスのゲノムはすべて、正方向及び逆方向の双方で非常に長い末端反復を含有する。６つの末端反復配置があり、これらの反復がウイルスの成功でどのように機能するのかを理解することは現在の研究の興味ある部分である。

【0006】

ヘルペスウイルスファミリーのメンバーを特徴付ける４つの生物学的特性は、ヘルペスウイルスは、核酸の代謝（たとえば、チミジンキナーゼ）、ＤＮＡ合成（たとえば、ＤＮＡヘリカーゼ／プライマーゼ）及びタンパク質のプロセッシング（たとえば、タンパク質キナーゼ）に関与する多数の酵素を発現すること；ヘルペスウイルスはウイルスゲノムを合成し、核の中でカプシドを組み立てること；その増殖性ウイルス感染は不可避の細胞破壊を伴うこと；及びヘルペスウイルスは宿主にて潜伏状態を確立し、維持することができ、その後の細胞ストレスを再活性化することができることである。潜伏には、ウイルス遺伝子の小さなサブセットを限定して発現させた核内でのウイルスゲノムの安定した維持が含まれる。

【0007】

サイトメガロウイルス及び単純ヘルペスウイルスを含むヘルペスウイルスファミリーは尿、唾液、母乳、血液、涙、精液及び膣液を含む感染個体の体液で見い出される。

【0008】

米国では、成人の５０％〜８０％が４０歳までにＨＣＭＶについて陽性であり、治療法はない。感染のほとんどがサイレントである一方で、ＨＣＭＶは胎児及び免疫不全の人々に病気を引き起こし得る。陽性の母親におけるＨＣＭＶはダウン症候群、胎児性アルコール症候群及び神経管欠損をもたらし得る。さらに、妊娠中に初めてＨＣＭＶに感染した女性の３３％が胎児にウイルスを受け渡す。現在、１５０人に１人の新生児が先天性ＨＣＭＶ感染で生まれ、７５０人に１人の新生児がＨＣＭＶのせいで永続的な障害を持って生まれるか又はそれを発症する。さらに、ＨＣＭＶは開発途上国及び社会経済学的な状態が低い地域で蔓延する。従って、ＨＣＭＶに対する予防上及び／又は治療上のワクチンを開発することは、世界中のウイルス関連の病気に関連した罹患率及び医療コストを減らすことになる。

【0009】

弱毒化した／殺傷したウイルス又は組換えタンパク質を用いた現在のワクチン戦略は、せいぜい３５％に近い有効性のレベルが得られるにすぎないと報告されている。防御の場合、たとえば、ｇＢ、ｇＨ、ｇＭ及びｇＮのようなウイルス性糖タンパク質を認識する抗体（Ａｂｓ）が認められるので、これらウイルスの表面標的に対する中和Ａｂｓの導出は重要であると考えられる。さらに、ＵＬ８３（ｐｐ６５）を含む特定のウイルスタンパク質にＴ細胞エピトープが存在することが知られ、それは、ｐｐ６５エピトープを標的とするＴ細胞に偏ったワクチンのアプローチを具体的に規定する。

【0010】

動物及びヒトの疾患に対してワクチン接種するために核酸配列の直接投与が研究され、所望の抗原の必要な発現を得るために多数の尽力が核酸送達の有効で、効率的な手段に注がれ、免疫応答及び最終的にはこの技法の成功を生じた。

【0011】

ＤＮＡワクチンは、たとえば、弱毒化生ワクチン及び組換えタンパク質に基づくワクチンのようなさらに従来のワクチン接種法よりも多数の概念的利点を有する。ＤＮＡワクチンは、安全で、安定であり、容易に生産され、プラスミド統合の証拠をほとんど示さない前臨床試験によってヒトにてよく認容される［非特許文献１；非特許文献２］。加えて、ＤＮＡワクチンは、ワクチンの有効性がベクターに対する既存の抗体価によって影響を受けないという事実によって反復投与に上手く適合する［非特許文献３］。しかしながら、ＤＮＡワクチンの臨床導入に対する主な障害の１つは、大きな動物に移る場合、基本骨格の免疫原性の低下であった［非特許文献４］。たとえば、コドン最適化、ＲＮＡ最適化及び免疫グロブリンのリーダー配列の添加のような、ＤＮＡワクチンの免疫原性を操作することにおける最近の技術的進歩は、ＤＮＡワクチンの発現及び免疫原性を改善している［非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８］と共に電気穿孔のようなプラスミド送達システムにおける最近開発された技術を改善している［非特許文献９；非特許文献１０；非特許文献１１］。加えて、研究によって、コンセンサス免疫原の使用は、天然の抗原のみに比べて細胞性免疫応答の幅を広げることができることが示唆されている［Ｙａｎ， Ｊ．， ｅｔ ａｌ．， Ｅｎｈａｎｃｅｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｅｌｉｃｉｔｅｄ ｂｙ ａｎ ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ＨＩＶ−１ ｓｕｂｔｙｐｅ Ｂ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ−ｂａｓｅｄ ｅｎｖｅｌｏｐｅ ＤＮＡ ｖａｃｃｉｎｅ． Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ， ２００７． １５（２）： ｐ． ４１１−２１； Ｒｏｌｌａｎｄ， Ｍ．， ｅｔ ａｌ．， Ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｃｅｓｔｒａｌ ｃｅｎｔｅｒ−ｏｆ−ｔｒｅｅ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ ｐｒｏｔｅｉｎｓ． Ｊ Ｖｉｒｏｌ， ２００７． ８１（１６）： ｐ． ８５０７−１４］。

【0012】

プラスミドＤＮＡのような核酸配列を送達する方法の１つは、電気穿孔（ＥＰ）法である。その技法をヒト臨床試験で使用してたとえば、ブレオマイシンのような抗癌剤を送達し、多数の動物種において多数の前臨床試験で使用されている。

【0013】

ヘルペスウイルス抗原をコードする核酸構築物及びヘルペスウイルスに対する免疫応答を誘導するのに有用な組成物に対するニーズが存在したままである。経済的で効果的なヘルペスウイルスに対する有効なワクチンへのニーズが存在したままである。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0014】

【非特許文献1】Ｍａｒｔｉｎ， Ｔ．， ｅｔ ａｌ．， Ｐｌａｓｍｉｄ ＤＮＡ ｍａｌａｒｉａ ｖａｃｃｉｎｅ： ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ｇｅｎｏｍｉｃ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ． Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ， １９９９． １０（５）： ｐ． ７５９−６８

【非特許文献2】Ｎｉｃｈｏｌｓ， Ｗ．Ｗ．， ｅｔ ａｌ．， Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ＤＮＡ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｉｎｔｏ ｈｏｓｔ ｃｅｌｌ ｇｅｎｏｍｅ． Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ， １９９５． ７７２： ｐ． ３０−９

【非特許文献3】Ｃｈａｔｔｅｒｇｏｏｎ， Ｍ．， Ｊ． Ｂｏｙｅｒ， ａｎｄ Ｄ．Ｂ． Ｗｅｉｎｅｒ， Ｇｅｎｅｔｉｃ ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ： ａ ｎｅｗ ｅｒａ ｉｎ ｖａｃｃｉｎｅｓ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ． ＦＡＳＥＢ Ｊ， １９９７． １１（１０）： ｐ． ７５３−６３

【非特許文献4】Ｌｉｕ， Ｍ．Ａ． ａｎｄ Ｊ．Ｂ． Ｕｌｍｅｒ， Ｈｕｍａｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ ｏｆ ｐｌａｓｍｉｄ ＤＮＡ ｖａｃｃｉｎｅｓ． Ａｄｖ Ｇｅｎｅｔ， ２００５． ５５： ｐ． ２５−４０

【非特許文献5】Ａｎｄｒｅ， Ｓ．， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｅｌｉｃｉｔｅｄ ｂｙ ＤＮＡ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ａ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｇｐ１２０ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｃｏｄｏｎ ｕｓａｇｅ． Ｊ Ｖｉｒｏｌ， １９９８． ７２（２）： ｐ． １４９７−５０３

【非特許文献6】Ｄｅｍｌ， Ｌ．， ｅｔ ａｌ．， Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｏｄｏｎ ｕｓａｇｅ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ＤＮＡ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｖａｃｃｉｎｅｓ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １ Ｇａｇ ｐｒｏｔｅｉｎ． Ｊ Ｖｉｒｏｌ， ２００１． ７５（２２）： ｐ． １０９９１−１００１

【非特許文献7】Ｌａｄｄｙ， Ｄ．Ｊ．， ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ−ｂａｓｅｄ ＤＮＡ ｖａｃｃｉｎｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ａｖｉａｎ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ． Ｖａｃｃｉｎｅ， ２００７． ２５（１６）： ｐ． ２９８４−９

【非特許文献8】Ｆｒｅｌｉｎ， Ｌ．， ｅｔ ａｌ．， Ｃｏｄｏｎ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍＲＮＡ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ３／４Ａ ｇｅｎｅ． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ， ２００４． １１（６）： ｐ． ５２２−３３

【非特許文献9】Ｈｉｒａｏ， Ｌ．Ａ．， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ／ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｂｙ ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｐｌａｓｍｉｄ ｖａｃｃｉｎｅ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｃｙ ｉｎ ｐｉｇｓ ａｎｄ ｒｈｅｓｕｓ ｍａｃａｑｕｅｓ． Ｖａｃｃｉｎｅ， ２００８． ２６（３）： ｐ． ４４０−８

【非特許文献10】Ｌｕｃｋａｙ， Ａ．， ｅｔ ａｌ．， Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｌａｓｍｉｄ ＤＮＡ ｖａｃｃｉｎｅ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ｖａｃｃｉｎｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｒｈｅｓｕｓ ｍａｃａｑｕｅｓ． Ｊ Ｖｉｒｏｌ， ２００７． ８１（１０）： ｐ． ５２５７−６９

【非特許文献11】Ａｈｌｅｎ， Ｇ．， ｅｔ ａｌ．， Ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ ｎｏｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ３／４Ａ ＤＮＡ ｂｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｌｏｃａｌ ＤＮＡ ｕｐｔａｋｅ， ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ， ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ， ａｎｄ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ３＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ， ２００７． １７９（７）： ｐ． ４７４１−５３

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0015】

本発明の態様の１つでは、配列番号２を含むタンパク質；配列番号２に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号４を含むタンパク質；配列番号４に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号６を含むタンパク質；配列番号６に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号８を含むタンパク質；配列番号８に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１０を含むタンパク質；配列番号１０に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１２を含むタンパク質；配列番号１２に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１４を含むタンパク質；配列番号１４に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１６を含むタンパク質；配列番号１６に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１８を含むタンパク質；配列番号１８に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号２０を含むタンパク質を含むタンパク質；配列番号２０に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号８５を含むタンパク質；配列番号８５に対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号８７の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号８７の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号８９の５１１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号８９の５１９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号９１を含むタンパク質；配列番号９１に対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号９３の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号９３の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号９５の４８０位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号９５の４８８位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号９７を含むタンパク質；配列番号９７に対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号９９の８４１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号９９の８４９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号１０１の４３５位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＭに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号１０１の４４３位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＮに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１０３を含むタンパク質；配列番号１０３に対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号１０５の８５８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号１０５の８６６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号１０７の４６７位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号１０７の４７５位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号１０９の６２３位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＥに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号１０９の６３１位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＩに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１１１を含むタンパク質；配列番号１１１に対して９５％相同であるタンパク質；及び配列番号１１３を含むタンパク質；配列番号１１３に対して９５％相同であるタンパク質；及び少なくとも１０アミノ酸を含むそれらの免疫原性断片から成る群から選択される１以上のタンパク質をコードするヘルペスウイルス抗原についてのコーディング配列を含む核酸分子が存在する。

【0016】

一部の例では、上記で言及されたタンパク質は、たとえば、ＩｇＥのシグナルペプチド（配列番号６１）（たとえば、配列番号２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８及び４０）及び／又はＨＡタグのような抗原タグ（配列番号６２）（たとえば、配列番号４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８及び６０）のようなシグナルペプチドを含む。さらに上記で言及された１以上のタンパク質は互いに連結されて融合タンパク質を形成し得る。一部の例では、タンパク質はフーリン部位（配列番号６３）のようなタンパク分解性切断部位を手段として連結される（たとえば、配列番号６５、６７、６９、７１、７３、７５、８７、８９、９３、９５、９９、１０１、１０５及び１０７）。

【0017】

上記で言及された１以上のタンパク質分子をコードする配列を含む核酸分子が提供される。一部の実施形態では、核酸分子は、配列番号１を含む核酸配列；配列番号１に対して９５％相同である核酸配列；配列番号３を含む核酸配列；配列番号３に対して９５％相同である核酸配列；配列番号５を含む核酸配列；配列番号５に対して９５％相同である核酸配列；配列番号７を含む核酸配列；配列番号７に対して９５％相同である核酸配列；配列番号９を含む核酸配列；配列番号９に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１１を含む核酸配列；配列番号１１に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１３を含む核酸配列；配列番号１３に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１５を含む核酸配列；配列番号１５に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１７を含む核酸配列；配列番号１７に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１９を含む核酸配列；配列番号１９に対して９５％相同である核酸配列；配列番号８６を含む核酸配列；配列番号８６に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；配列番号９２を含む核酸配列；配列番号９２に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＣをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＣをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＤをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＤをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；配列番号９８を含む核酸配列；配列番号９８に対して９５％相同である核酸配列；ＶＺＶ−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＶＺＶ−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＶＺＶ−ｇＭをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＭをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＶＺＶ−ｇＮをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＮをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１０４を含む核酸配列；配列番号１０４に対して９５％相同である核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＶＺＶ−ｇＥをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＥをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；ＶＺＶ−ｇＩをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＩをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１１２を含む核酸配列；配列番号１１２に対して９５％相同である核酸配列；配列番号１１４を含む核酸配列；配列番号１１４に対して９５％相同である核酸配列；及び少なくとも１０アミノ酸を含む免疫原性断片をコードする核酸配列を含むそれらの断片から成る群から選択される配列を含む。

【0018】

一部の例では、核酸配列は、たとえば、ＩｇＥシグナルペプチド（配列番号６１をコードするＤＮＡ配列）（たとえば、配列番号２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７及び３９）及び／又はＨＡタグ（配列番号６２をコードするＤＮＡ配列）（たとえば、配列番号４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７及び５９）のような抗原タグのようなシグナルペプチドをさらに含むタンパク質をコードする。さらに１以上の核酸配列は互いに連結して融合タンパク質をコードするキメラ遺伝子を形成し得る。一部の例では、核酸配列は、フーリン部位（配列番号６３をコードするＤＮＡ配列）（たとえば、配列番号６４、６６、６８、７０、７２、７４、８８、９０、９４、９６、１００、１０２、１０６、１０８、及び１１０）のようなタンパク分解性切断部位を手段として連結するタンパク質をコードする。

【0019】

一部の実施形態では、上記で言及した１以上のタンパク質をコードする配列を含む核酸分子は、異なる第２の核酸配列と組み合わせても提供され、その際、第２の核酸配列は、ＨＣＭＶ−ｇＢ、ＨＣＭＶ−ｇＭ、ＨＣＭＶ−ｇＮ、ＨＣＭＶ−ｇＨ、ＨＣＭＶ−ｇＬ、ＨＣＭＶ−ｇＯ、ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１ａ、ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０、ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８、ＨＣＭＶ−ＵＬ８３、ＨＳＶ１−ｇＢ、ＨＳＶ１−ｇＨ、ＨＳＶ１−ｇＬ、ＨＳＶ１−ｇＣ、ＨＳＶ１−ｇＤ、ＨＳＶ２−ｇＢ、ＨＳＶ２−ｇＨ、ＨＳＶ２−ｇＬ、ＨＳＶ２−ｇＣ、ＨＳＶ２−ｇＤ、ＶＺＶ−ｇＢ、ＶＺＶ−ｇＨ、ＶＺＶ−ｇＬ、ＶＺＶ−ｇＭ、ＶＺＶ−ｇＮ、ＶＺＶ−ｇＥ、ＶＺＶ−ｇＩ、ＶＺＶ−ｇＣ、ＶＺＶ−ｇＫ、ＣｅＨＶ１−ｇＢ、ＣｅＨＶ１−ｇＨ、ＣｅＨＶ１−ｇＬ、ＣｅＨＶ１−ｇＣ、及びＣｅＨＶ１−ｇＤから成る群から選択されるタンパク質をコードする。好ましくは、ＨＣＭＶ配列は、異なる第２のＨＣＭＶ配列と組み合わせられ； ＨＳＶ１配列は、異なる第２のＨＳＶ１配列と組み合わせられ；ＨＳＶ２配列は、異なる第２のＨＳＶ２配列と組み合わせられ；ＣｅＨＶ１配列は、異なる第２のＣｅＨＶ１配列と組み合わせられ；ＶＺＶ配列は、異なる第２のＶＺＶ配列と組み合わせられる。

【0020】

本発明の別の態様は、本明細書で提供される１以上の核酸分子を含む組成物を含む。

【0021】

本発明の一部の態様は、本明細書で提供される核酸分子を投与することを含む、ヘルペスウイルス抗原に対する免疫応答を誘導する方法を提供する。好ましくは、ヘルペスウイルス抗原は、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１及びＶＺＶの抗原を含む。

【0022】

本発明の追加の態様は、本明細書で提供される核酸分子を投与することを含む、ヘルペスウイルス感染から個体を防御する方法を提供する。一部の実施形態では、個体はヘルペスウイルス感染であると診断された個体である。

【0023】

本発明の別の態様では、配列番号２を含むタンパク質；配列番号２に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号４を含むタンパク質；配列番号４に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号６を含むタンパク質；配列番号６に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号８を含むタンパク質；配列番号８に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１０を含むタンパク質；配列番号１０に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１２を含むタンパク質；配列番号１２に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１４を含むタンパク質；配列番号１４に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１６を含むタンパク質；配列番号１６に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１８を含むタンパク質；配列番号１８に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号２０を含むタンパク質を含むタンパク質；配列番号２に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号８５に対して９５％相同であるタンパク質；配列番号８５を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号８７の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号８７の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号８９の５１１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号８９の５１９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号９１を含むタンパク質；配列番号９１に対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号９３の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号９３の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号９５の４８０位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号９５の４８８位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号９７を含むタンパク質；配列番号９７に対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号９９の８４１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号９９の８４９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号１０１の４３５位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＭに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号１０１の４４３位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＮに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１０３を含むタンパク質；配列番号１０３に対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号１０５の８５８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号１０５の８６６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号１０７の４６７位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号１０７の４７５位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号１０９の６２３位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＥに対して９５％相同であるタンパク質；ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号１０９の６３１位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＩに対して９５％相同であるタンパク質；配列番号１１１を含むタンパク質；配列番号１１１に対して９５％相同であるタンパク質；及び配列番号１１３を含むタンパク質；配列番号１１３に対して９５％相同であるタンパク質；及び少なくとも１０アミノ酸を含むそれらの免疫原性断片から成る群から選択されるタンパク質が存在する。

【0024】

一部の実施形態では、本明細書で提供されるタンパク質を個体に送達することを含むヘルペスウイルス感染に対する免疫応答を誘導する方法が提供される。一部の実施形態では、個体はヘルペスウイルス感染であると診断された個体である。

【0025】

本発明の態様は、系統的な分子進化的な解析を行って臨床的に関連し、公的に利用可能なヘルペスウイルスの標的タンパク質間での多様性を推定することと、（ａ）特異的な臨床的に意義のある多様なタンパク質の亜群又は（ｂ）高度に保存されたタンパク質を含む群から少なくとも２つの標的タンパク質配列を選択することと、選択した標的タンパク質配列からコンセンサス配列を生成することと、多価のワクチンの形成のために生成工程からのコンセンサス標的タンパク質配列を１以上の発現構築物にクローニングすることを含むヘルペスファミリーウイルスに対する多価のワクチンを生成する方法に関する。一部の実施形態では、選択工程はヘルペスウイルスによって発現される生物複合体の一部として互いに関連する標的タンパク質を選択することを含む。一部の実施形態では、選択される標的タンパク質は表面抗原である。一部の実施形態では、表面抗原はｇＨ、ｇＬ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＣ及びｇＤから成る群から選択される。一部の実施形態では、表面抗原はｇＨ及びｇＬである。一部の実施形態では、多様なタンパク質の特異的な臨床的に意義のある亜群はさらに、培養で４回以下継代したヘルペスウイルスの臨床的に意義のある株を選択することを含む。一部の実施形態では、多様なタンパク質の特異的な臨床的に意義のある亜群を選択する工程はさらに、培養で６回以下継代したヘルペスウイルスの臨床的に意義のある株を選択することを含む。一部の実施形態では、ヘルペスファミリーのウイルスは、ＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＶＺＶ、ＣｅＨＶ１、ＥＢＶ、ロゼオロウイルス、カポジ肉腫関連のヘルペスウイルス及びＭｕＨＶから成る群から選択される。

【0026】

本発明の別の態様は、系統的な分子進化的な解析を行って臨床的に関連し、公的に利用可能なヘルペスウイルスの標的タンパク質間での多様性を推定することと、（ａ）特異的な臨床的に意義のある多様なタンパク質の亜群又は（ｂ）高度に保存されたタンパク質を含む群から少なくとも２つの標的タンパク質配列を選択することと、選択した標的タンパク質配列からコンセンサス配列を生成することと、多価のワクチンの形成のために生成工程からのコンセンサス標的タンパク質配列を１以上の発現構築物にクローニングすることを含むヘルペスファミリーウイルスに対する多価のワクチンを生成する方法を含む。発現構築物は、既知で利用可能な、薬学上許容可能な賦形剤と共に製剤化することができる。一部の実施形態では、多価のワクチンンには、既知のワクチンアジュバント、好ましくはＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２８、及びＲＡＮＴＥＳも含まれ得る。

【0027】

一部の実施形態では、ヘルペスファミリーウイルスは、ＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＶＺＶ、ＣｅＨＶ１、ＥＢＶ、ロゼオロウイルス、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス、又はＭｕＨＶから選択され、好ましくは、ＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１又はＶＺＶから選択される。

【0028】

一部の実施形態では、選択される標的タンパク質はヘルペスウイルスによって発現される生物複合体の一部として互いに関連するものである。好ましくは、標的タンパク質は表面抗原であり、さらに好ましくは抗原ｇＨ、ｇＬ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＣ及びｇＤであり、一層さらに好ましくは、表面抗原はｇＨ及びｇＬである。

【0029】

一部の実施形態では、多様なタンパク質の特異的な臨床的に意義のある亜群を選択する工程はさらに、培養にて４回以下、好ましくは６回以下継代したヘルペスウイルスの臨床的に意義のある株を選択することを含む。

【0030】

本発明の態様は、２以上の抗原のコーディング配列を含むヘルペスファミリーのウイルスに対するワクチンに関する。一部の実施形態では、２以上のそのような抗原はたとえば、プラスミドのような同一ベクターに提供されて、同一細胞における双方の抗原の同時発現を確保する。２つ以上のそのような抗原が同一ベクターで提供される実施形態を含んでそのような複数の抗原をコードする複数のプラスミドが提供される種々の配置がそうであるように、抗原の種々の入れ替えが提供される。たとえば、ＨＣＭＶ及びＨＳＶ１に由来するｇＨ及びｇＬの組み合わせの同時発現は双方とも細胞表面への抗原の輸送を提供することが認められ、それはタンパク質が互いの非存在下で発現される場合、生じない。データはｇＨ及びｇＬの同時発現が、タンパク質が互いの非存在下で発現される場合よりも効果的な免疫標的を提供することを示している。本発明の態様によれば、複数の抗原がコーディング配列として送達されて有効なワクチンを提供し得る。一部の実施形態では、複数の抗原のためのコーディング配列は、たとえば、単一プラスミドのような単一ベクターに提供される。
本願は特定の実施形態において例えば以下の項目を提供する：
（項目１）
ヘルペスウイルス抗原のコーディング配列を含む核酸分子であって、ヘルペスウイルス抗原が
配列番号２を含むタンパク質；配列番号２に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号４を含むタンパク質；配列番号４に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号６を含むタンパク質；配列番号６に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号８を含むタンパク質；配列番号８に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号１０を含むタンパク質；配列番号１０に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号１２を含むタンパク質；配列番号１２に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号１４を含むタンパク質；配列番号１４に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号１６を含むタンパク質；配列番号１６に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号１８を含むタンパク質；配列番号１８に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号２０を含むタンパク質を含むタンパク質；配列番号２０に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号８５を含むタンパク質；配列番号８５に対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号８７の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号８７の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号８９の５１１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号８９の５１９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号９１を含むタンパク質；配列番号９１に対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号９３の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号９３の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号９５の４８０位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号９５の４８８位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号９７を含むタンパク質；配列番号９７に対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号９９の８４１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号９９の８４９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号１０１の４３５位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＭに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号１０１の４４３位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＮに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号１０３を含むタンパク質；配列番号１０３に対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号１０５の８５８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号１０５の８６６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号１０７の４６７位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号１０７の４７５位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号１０９の６２３位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＥに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号１０９の６３１位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＩに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号１１１を含むタンパク質；配列番号１１１に対して９５％相同であるタンパク質；及び
配列番号１１３を含むタンパク質；配列番号１１３に対して９５％相同であるタンパク質；及び少なくとも１０アミノ酸を含むそれらの免疫原性断片から成る群から選択される１以上のタンパク質をコードする核酸分子。
（項目２）
配列番号：２； 配列番号：４； 配列番号：６； 配列番号：８； 配列番号：１０； 配列番号：１２； 配列番号：１４， 配列番号：１６； 配列番号：１８， 配列番号：２０； 配列番号：２２； 配列番号：２４； 配列番号：２６； 配列番号：２８； 配列番号：３０； 配列番号：３２； 配列番号：３４； 配列番号：３６； 配列番号：３８； 配列番号：４０； 配列番号：４２； 配列番号：４４； 配列番号：４６； 配列番号：４８； 配列番号：５０； 配列番号：５２； 配列番号：５４； 配列番号：５６； 配列番号：５８； 配列番号：６０； 配列番号：８５； ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号：８７の８３８位までＮ末端領域）；ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号：８７の８４６位からのＣ末端領域）；ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号：８９の５１１位までのＮ末端領域）；ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号：８９の５１９からのＣ末端領域）；配列番号：９１；ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号：９３の８３８位までのＮ末端領域）；ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号：９３の８４６位からのＣ末端領域）；ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号：９５の４８０位までのＮ末端領域）；ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号：９５の４８８からのＣ末端領域）；配列番号：９７；ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号：９９の８４１までのＮ末端領域）；ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号：９９の８４９からのＣ末端領域）；ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号：１０１の４３５位までのＮ末端領域）；ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号：１０１の４４３位からのＣ末端領域）；配列番号：１０３；ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号：１０５の８５８位までのＮ末端領域）；ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号：１０５の８６６位からのＣ末端領域）；ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号：１０７の４６７までのＮ末端領域）；ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号：１０７の４７５からのＣ末端領域）；ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号：１０９の６２３位までのＮ末端領域）；ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号：１０９の６３１からのＣ末端領域）；配列番号：１１１；及び配列番号：１１３から成る群から選択される１以上のタンパク質をコードする項目１に記載の核酸分子。
（項目３）
配列番号：１を含む核酸配列；配列番号：１に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：３を含む核酸配列；配列番号：３に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：５を含む核酸配列；配列番号：５に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：７を含む核酸配列；配列番号：７に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：９を含む核酸配列；配列番号：９に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：１１を含む核酸配列；配列番号：１１に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：１３を含む核酸配列；配列番号：１３に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：１５を含む核酸配列；配列番号：１５に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：１７を含む核酸配列；配列番号：１７に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：１９を含む核酸配列；配列番号：１９に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：８６を含む核酸配列；配列番号：８６に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：９２を含む核酸配列；配列番号：９２に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ２−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ２−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ２−ｇＣをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＣをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＨＳＶ２−ｇＤをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＨＳＶ２−ｇＤをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：９８を含む核酸配列；配列番号：９８に対して９５％相同である核酸配列；
ＶＺＶ−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＶＺＶ−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＶＺＶ−ｇＭをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＭをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＶＺＶ−ｇＮをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＮをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：１０４を含む核酸配列；配列番号：１０４に対して９５％相同である核酸配列；
ＣｅＨＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＣｅＨＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＣｅＨＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＣｅＨＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＣｅＨＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＶＺＶ−ｇＥをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＥをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
ＶＺＶ−ｇＩをコードするＤＮＡ配列を含む核酸配列；ＶＺＶ−ｇＩをコードするＤＮＡ配列に対して９５％相同である核酸配列；
配列番号：１１２を含む核酸配列；配列番号：１１２に対して９５％相同である核酸配列；及び
配列番号：１１４を含む核酸配列；配列番号：１１４に対して９５％相同である核酸配列；及び少なくとも１０アミノ酸を含む免疫原性断片をコードする核酸配列を含むそれらの断片から成る群から選択される１以上の配列を含む項目１に記載の核酸分子。
（項目４）
配列番号：１； 配列番号：３； 配列番号：５； 配列番号：７； 配列番号：９； 配列番号：１１； 配列番号：１３； 配列番号：１５； 配列番号：１７； 配列番号：１９；． 配列番号：２１； 配列番号：２３； 配列番号：２５； 配列番号：２７； 配列番号：２９； 配列番号：３１； 配列番号：３３； 配列番号：３５； 配列番号：３７； 配列番号：３９， 配列番号：４１； 配列番号：４３； 配列番号：４５； 配列番号：４７； 配列番号：４９； 配列番号：５１； 配列番号：５３； 配列番号：５５； 配列番号：５７； 配列番号：５９； 配列番号：８６；ＨＳＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列；配列番号：９２；ＨＳＶ２−ｇＨをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ２−ｇＬをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ２−ｇＬをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ２−ｇＣをコードするＤＮＡ配列；ＨＳＶ２−ｇＤをコードするＤＮＡ配列；配列番号：９８；ＶＺＶ−ｇＨをコードするＤＮＡ配列；ＶＺＶ−ｇＬをコードするＤＮＡ配列；ＶＺＶ−ｇＭをコードするＤＮＡ配列；ＶＺＶ−ｇＮをコードするＤＮＡ配列；配列番号：１０４；ＣｅＨＶ１−ｇＨをコードするＤＮＡ配列；ＣｅＨＶ１−ｇＬをコードするＤＮＡ配列；ＣｅＨＶ１−ｇＣをコードするＤＮＡ配列；ＣｅＨＶ１−ｇＤをコードするＤＮＡ配列；ＶＺＶ−ｇＥをコードするＤＮＡ配列；ＶＺＶ−ｇＩをコードするＤＮＡ配列；配列番号：１１２；及び配列番号：１１４から成る群から選択される１以上のヌクレオチド配列を含む項目１に記載の核酸分子。
（項目５）
核酸分子がＤＮＡプラスミドである項目４に記載の核酸分子。
（項目６）
核酸分子がさらに、異なる核酸配列である異なる第２の核酸配列を含み、前記第２の核酸配列がＨＣＭＶ ｇＢ， ＨＣＭＶ ｇＭ， ＨＣＭＶ ｇＮ， ＨＣＭＶ ｇＨ， ＨＣＭＶ ｇＬ， ＨＣＭＶ ｇＯ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１ａ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０， ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８， ＨＣＭＶ−ＵＬ８３， ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ， ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ， ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ， ＶＺＶ−ｇＥ， ＶＺＶ−ｇＩ， ＶＺＶ−ｇＣ， ＶＺＶ−ｇＫ， ＣｅＨＶ１−ｇＢ， ＣｅＨＶ１−ｇＨ， ＣｅＨＶ１−ｇＬ， ＣｅＨＶ１−ｇＣ， 及び ＣｅＨＶ１−ｇＤから成る群から選択されるタンパク質をコードする項目１に記載の核酸分子。
（項目７）
核酸分子がＨＣＭＶのコーディング配列を含み、第２の核酸配列がＨＣＭＶ ｇＢ， ＨＣＭＶ ｇＭ， ＨＣＭＶ ｇＮ， ＨＣＭＶ ｇＨ， ＨＣＭＶ ｇＬ， ＨＣＭＶ ｇＯ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１ａ， ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０， ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８， 又は ＨＣＭＶ−ＵＬ８３から選択されるタンパク質をコードする項目６に記載の核酸分子。
（項目８）
核酸分子がＨＳＶ１のコーディング配列を含み、第２の核酸配列がＨＳＶ１−ｇＢ、ＨＳＶ１−ｇＨ、ＨＳＶ１−ｇＬ、ＨＳＶ１−ｇＣ又はＨＳＶ１−ｇＤから選択されるタンパク質をコードする項目６に記載の核酸分子。
（項目９）
核酸分子がＨＳＶ２のコーディング配列を含み、第２の核酸配列がＨＳＶ２−ｇＢ、ＨＳＶ２−ｇＨ、ＨＳＶ２−ｇＬ、ＨＳＶ２−ｇＣ又はＨＳＶ２−ｇＤから選択されるタンパク質をコードする項目６に記載の核酸分子。
（項目１０）
核酸分子がＶＺＶのコーディング配列を含み、第２の核酸配列がＶＺＶ−ｇＢ、ＶＺＶ−ｇＨ、ＶＺＶ−ｇＬ、ＶＺＶ−ｇＭ、ＶＺＶ−ｇＮ、ＶＺＶ−ｇＥ、ＶＺＶ−ｇＩ、ＶＺＶ−ｇＣ又はＶＺＶ−ｇＫから選択されるタンパク質をコードする項目６に記載の核酸分子。
（項目１１）
核酸分子がＣｅＨＶ１のコーディング配列を含み、第２の核酸配列がＣｅＨＶ１−ｇＢ、ＣｅＨＶ１−ｇＨ、ＣｅＨＶ１−ｇＬ、ＣｅＨＶ１−ｇＣ又はＣｅＨＶ１−ｇＤから選択されるタンパク質をコードする項目６に記載の核酸分子。
（項目１２）
核酸分子がプラスミドである項目１に記載の核酸分子。
（項目１３）
核酸分子が発現ベクターであり、前記１以上のタンパク質をコードする核酸配列が調節要素に操作可能に連結される項目１に記載の核酸分子。
（項目１４）
核酸分子がウイルス粒子に組み入れられる項目１に記載の核酸分子。
（項目１５）
項目１に記載の１以上の核酸分子を含む組成物。
（項目１６）
ヘルペスウイルス抗原に対する免疫応答を誘導する方法であって、項目１に記載の核酸分子を個体に投与することを含む方法。
（項目１７）
ヘルペスウイルス感染から個体を防御する方法であって、項目１に記載の核酸分子を個体に投与することを含む方法。
（項目１８）
ヘルペスウイルス感染であると診断されている個体を防御する方法であって、項目１に記載の核酸分子を個体に投与することを含む方法。
（項目１９）
タンパク質であって、
配列番号：２を含むタンパク質；配列番号：２に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：４を含むタンパク質；配列番号：４に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：６を含むタンパク質；配列番号：６に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：８を含むタンパク質；配列番号：８に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：１０を含むタンパク質；配列番号：１０に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：１２を含むタンパク質；配列番号：１２に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：１４を含むタンパク質；配列番号：１４に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：１６を含むタンパク質；配列番号：１６に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：１８を含むタンパク質；配列番号：１８に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：２０を含むタンパク質を含むタンパク質；配列番号：２０に対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：８５を含むタンパク質；配列番号：８５に対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号：８７の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号：８７の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号：８９の５１１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号：８９の５１９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：９１を含むタンパク質；配列番号：９１に対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号：９３の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号：９３の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号：９５の４８０位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号：９５の４８８位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＨＳＶ２−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：９７を含むタンパク質；配列番号：９７に対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号：９９の８４１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号：９９の８４９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号：１０１の４３５位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＭに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号：１０１の４４３位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＮに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：１０３を含むタンパク質；配列番号：１０３に対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号：１０５の８５８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＨに対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号：１０５の８６６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＬに対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号：１０７の４６７位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＣに対して９５％相同であるタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号：１０７の４７５位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＤに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号：１０９の６２３位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＥに対して９５％相同であるタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号：１０９の６３１位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＩに対して９５％相同であるタンパク質；
配列番号：１１１を含むタンパク質；配列番号：１１１に対して９５％相同であるタンパク質；及び
配列番号：１１３を含むタンパク質；配列番号：１１３に対して９５％相同であるタンパク質；及び少なくとも１０アミノ酸を含むそれらの免疫原性断片から成る群から選択されるタンパク質。
（項目２０）
配列番号：２を含むタンパク質；
配列番号：４を含むタンパク質；
配列番号：６を含むタンパク質；
配列番号：８を含むタンパク質；
配列番号：１０を含むタンパク質；
配列番号：１２を含むタンパク質；
配列番号：１４を含むタンパク質；
配列番号：１６を含むタンパク質；
配列番号：１８を含むタンパク質；
配列番号：２０を含むタンパク質を含むタンパク質；
配列番号：８５を含むタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号：８７の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号：８７の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号：８９の５１１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；
ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号：８９の５１９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；
配列番号：９１を含むタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号：９３の８３８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号：９３の８４６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号：９５の４８０位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；
ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号：９５の４８８位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；
配列番号：９７を含むタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号：９９の８４１位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号：９９の８４９位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号：１０１の４３５位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号：１０１の４４３位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；
配列番号：１０３を含むタンパク質；
ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号：１０５の８５８位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号：１０５の８６６位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号：１０７の４６７位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号：１０７の４７５位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号：１０９の６２３位までのＮ末端領域）を含むタンパク質；
ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号：１０９の６３１位からのＣ末端領域）を含むタンパク質；
配列番号：１１１を含むタンパク質；及び
配列番号：１１３を含むタンパク質から成る群から選択されるタンパク質をコードする項目１９に記載のタンパク質。
（項目２１）
ヘルペスウイルス感染に対する免疫応答を誘導する方法であって、項目１９に記載のタンパク質を個体に送達することを含む方法。
（項目２２）
ヘルペスウイルス感染であると診断されている個体を治療する方法であって、項目１９に記載のタンパク質を前記個体に送達することを含む方法。

【図面の簡単な説明】

【0031】

【図1】ヘルペスウイルスのコーディング配列挿入物を伴ったプラスミドの骨格として使用したｐＶａｘ１変異体のマップを示す図である。ｐＶａｘ１変異体の配列は配列番号７６に示す。

【図2】実施例１で記載されるプラスミド１のプラスミドマップを示す図である。プラスミド１はまたｐＨＣＭＶｇＢ又はｐＨＣＭＶｇＢ＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶｇＢ＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号７７に示す。

【図3】実施例１で記載されるプラスミド２のプラスミドマップを示す図である。プラスミド２はまたｐＨＣＭＶｇＭｇＮ又はｐＨＣＭＶｇＭｇＮ＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶｇＭｇＮ＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号７８に示す。

【図4】実施例１で記載されるプラスミド３のプラスミドマップを示す図である。プラスミド３はまたｐＨＣＭＶｇＨｇＬ又はｐＨＣＭＶｇＨｇＬ＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶｇＨｇＬ＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号７９に示す。

【図5】実施例１で記載されるプラスミド４のプラスミドマップを示す図である。プラスミド４はまたｐＨＣＭＶｇＯ又はｐＨＣＭＶｇＯ＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶｇＯ＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号８０に示す。

【図6】実施例１で記載されるプラスミド５のプラスミドマップを示す図である。プラスミド５はまたｐＨＣＭＶｇＵＬ又はｐＨＣＭＶｇＵＬ＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶｇＵＬ＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号８１に示す。

【図7】実施例１で記載される改変プラスミド１のプラスミドマップを示す図である。改変プラスミド１は、改変プラスミド１がＨＣＭＶｇＢ抗原配列のコーディング配列に連結されたＨＡタグのコーディング配列を含有しないという点でプラスミド１と異なる。改変プラスミド１はまたｐＨＣＭＶｇＢ又はｐＨＣＭＶ＿ｇＢ＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶ＿ｇＢ＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号８２に示す。

【図8】実施例１で記載される改変プラスミド３のプラスミドマップを示す図である。改変プラスミド３は、改変プラスミド３がＨＣＭＶｇＨ及びｇＬ抗原配列のコーディング配列に連結されたＨＡタグのコーディング配列を含有しないという点でプラスミド３と異なる。改変プラスミド３はまたｐＨＣＭＶｇＨｇＬ又はｐＨＣＭＶ＿ｇＨｇＬ＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶ＿ｇＨｇＬ＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号８３に示す。

【図9】実施例１で記載される改変プラスミド６のプラスミドマップを示す図である。改変プラスミド６は、改変プラスミド６がＨＣＭＶｇＵ８３抗原配列のコーディング配列に連結されたＨＡタグのコーディング配列を含有しないという点でプラスミド６（示さず）と異なる。改変プラスミド６はまたｐＨＣＭＶｇＵ８３又はｐＨＣＭＶ＿ＵＬ８３＿ｐＶＡＸ１とも呼ばれる。ｐＨＣＭＶ＿ＵＬ８３＿ｐＶＡＸ１の配列は配列番号８４に示す。

【図10】プラスミド１を用いたＨＣＭＶ−ｇＢの免疫優勢エピトープを特定する実験から得たデータを示す図である。

【図11】プラスミド３を用いたＨＣＭＶ−ｇＨ及びＨＣＭＶ−ｇＬの免疫優勢エピトープを特定する実験から得たデータを示す図である。

【図12】プラスミド２を用いたＨＣＭＶ−ｇＭとＨＣＭＶ−ｇＮ及びプラスミド４を用いたＨＣＭＶ−ｇＯの免疫優勢エピトープを特定する実験から得たデータを示す図である。

【図13】改変プラスミド６を用いたＨＣＭＶ−ＵＬ８３とプラスミド５を用いたＨＣＭＶ−ＵＬ１３１Ａ、ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０及びＨＣＭＶ−ＵＬ１２８の免疫優勢エピトープを特定する実験から得たデータを示す図である。

【図14】ＨＣＭＶタンパク質で免疫したマウスからのマウス血清における中和抗体の力価を示す図である。データは９５％のＣＩと共に３つの値の幾何平均値として表す。長寿命化した（ヒト包皮線維芽細胞）細胞を用いた。

【図15】ＤＮＡワクチンのデータの要約を示す表である。

【図16-1】以下を示すグラフである。（ａ）遺伝的配列が異なり、ウイルスに由来する（天然）又はマウスでの発現を最適化した（最適化）、しかし、コードされるアミノ酸は同一である３５μｇのｐＨＣＭＶ−ＮＰで２群のマウスを免疫した。２回目の免疫の８日後に脾細胞を回収し、ＮＰ特異的なＴ細胞をＥＬＩＳＰＯＴによって評価した。（ｂ）ＥＰ（ｎ＝１０）又は２×１０^５ＰＦＵのＨＣＭＶｉ．ｐ．（ｎ＝５）と共にＥＰ、ｐＶＡＸの存在下又は非存在下でｐＨＣＭＶ−ＮＰでマウスを２回免疫した。２回目の免疫又はＨＣＭＶの急性感染の８週後、２０ＬＤ_５０ＨＣＭＶ、ｉ．ｃ．をマウスに負荷したが、その生き残りデータを示す。（ｃ）ＥＰ、ｐＶＡＸで又はＥＰ、ｐＶＡＸなしで１回、２回、３回若しくは４回、ＥＰで４回マウスを免疫した又はＨＣＭＶを急性感染させた。各免疫の７日後、又はＨＣＭＶ感染の６０日後、ＮＰ特異的なＩｇＧ応答を評価したが、そのデータを示す。

【図16-2】（ｄ）ＥＰと共に３５μｇのｐＨＣＭＶ−ＮＰ又はＥＰと共に４５μｇのｐＨＣＭＶ−ＧＰのいずれかでマウスを２回免疫し、８日後、ウイルスタンパク質特異的なＴ細胞免疫を評価した。（ｅ）ＥＰ（ｎ＝１０）又は２×１０^５ＰＦＵのＨＣＭＶｉ．ｐ．（ｎ＝５）と共にＥＰ、ｐＶＡＸの存在下でＥＰと共に３５μｇのｐＨＣＭＶ−ＮＰ又はＥＰと共に４５μｇのｐＨＣＭＶ−ＧＰの単回注射をマウスに施し、ワクチン接種又は感染の８週後に２０ＬＤ_５０ＨＣＭＶ、ｉ．ｃ．をマウスに負荷した。マウスの各群について生き残りデータを示す。

【図17-1】公的に利用可能な情報源に由来するＨＣＭＶの推定上のワクチンタンパク質免疫原の模式的な系統樹を示す図である。アミノ酸配列はＣｌｕｓｔａｌＷによって複数並べ、クラスター解析は最尤法によって実施した。無根系統樹の有意性はブートストラップ解析によって検証し、有意なサポート値（≧８０％、１，０００ブートストラップ複製）は主な結節点での星印によって示す。主な報告された遺伝子型を説明し、比率は完全長配列すべてのうちのアミノ酸同一性の位置であり、参照株： ＡＤ−ＡＤ１６９、ＤＶ−Ｄａｖｉｓ、ＪＨ−ＪＨＣ、ＪＰ−ＪＰ、ＭＬ−Ｍｅｒｌｉｎ、ＴＯ−Ｔｏｌｅｄｏ、ＴＮ−Ｔｏｗｎｅ、ＶＲ−ＶＲ１８１４を示す。ＤＮＡワクチンをコードするＨＣＭＶ免疫原も示す（Ｖａｃ）。スケールバーは部位当たりのアミノ酸の距離を表し、解析はＭＥＧＡバージョン５を用いて行った。

【図17-2】同上。

【図17-3】同上。

【図18a】強固な免疫を誘導する構造的に関連するＨＣＭＶ免疫原の新生同時発現を示すグラフ及び画像を示す図である。（ａ）免疫性を示すＨＣＭＶ：ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１Ａ、及びＵＬ８３ドメインのグラフ（同一データの異なったグラフ表示については図１０〜１３も参照のこと）。

【図18b】（ｂ）免疫応答の特徴を示す画像。

【図18c】（ｃ）ＨＣＭＶ：ＵＬ８３、ｇＯ、ｇＢ、ｇＭｇＮ、ＵＬ、及びｇＨｇＬの画像；並びに（ｄ）ＨＣＭＶ：ＵＬ８３、ｇＯ、ｇＢ、ｇＭｇＮ、ＵＬ、及びｇＨｇＬについてのＣＤ４４＋ＩＦＮｇ＋Ｔ細胞の比率。

【図18d】同上。

【図19】以下についての中和データのグラフを示す図である。（ａ）ＨＣＭＶ：ｇＢ、ｇＭｇＮ、ｇＨｇＬ、ｇＯ、ＵＬ、及びＵＬ８３についての５０％中和レベル。（ｂ）ＣＭＶのみ、血清陽性の血清及びＨＣＭＶ−ｇＨｇＬで免疫した血清についての５０％中和レベル。

【図20】以下についての中和レベルを示すグラフを示す図である。（ａ）ＨＳＶ１−ｇＢ及びＨＳＶ１−ｇＣｇＤで免疫した血清によるＨＳＶ−１（ＮＳ株）に対する中和。（ｂ）ＨＳＶ２−ｇＢ及びＨＳＶ２−ｇＣｇＤで免疫した血清によるＨＳＶ−２（ＭＳ株）に対する中和。

【発明を実施するための形態】

【0032】

１．定義
本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的とし、限定を意図するものではない。本明細書及び添付のクレームで使用されるとき、単数形態「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が明瞭に指示しない限り、複数の参照を含む。

【0033】

本明細書における数的範囲の記述については、同じ程度の正確さでその間に介在する各数が明白に熟考される。たとえば、６〜９の範囲については、６及び９に加えて数７及び８が熟考され、６．０〜７．０の範囲については、数６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６、９、及び７．０が明白に熟考される。

【0034】

ａ．アジュバント
「アジュバント」は本明細書で使用されるとき、本明細書に記載されるＤＮＡプラスミドワクチンに加えられてＤＮＡプラスミドによってコードされ、以後に記載される核酸配列をコードする抗原の免疫原性を高める分子を意味する。

【0035】

ｂ．抗体
「抗体」は本明細書で使用されるとき、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ又はＩｇＥクラスの抗体又は断片、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｄを含むその断片又は誘導体、及び単鎖抗体、二機能性抗体、二重特異性抗体、二官能性抗体及びその誘導体を意味する。抗体は、所望のエピトープ又はそれに由来する配列に対して十分な結合特異性を示す、哺乳類の血清試料から単離された抗体、ポリクローナル抗体、アフィニティ精製抗体、又はそれらの混合物であり得る。

【0036】

ｃ．コーディング配列
「コーディング配列」又は「核酸をコードすること」は本明細書で使用されるとき、タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸（ＲＮＡ又はＤＮＡ分子）を意味する。コーディング配列はさらに、核酸が投与される個体又は哺乳類の細胞における発現を指示することが可能であるプロモータ及びポリアデニル化シグナルを含む調節要素に操作可能に連結される開始シグナル及び終結シグナルを含むことができる。

【0037】

ｄ．相補体
「相補体」又は「相補性」は本明細書で使用されるとき、核酸が、核酸分子のヌクレオチド間又はヌクレオチド類似体間でワトソン／クリック型塩基対（たとえば、Ａ−Ｔ／Ｕ及びＣ−Ｇ）又はフーグスティーン型塩基対を意味できることを意味する。

【0038】

ｅ．コンセンサス又はコンセンサス配列
「コンセンサス」又は「コンセンサス配列」は本明細書で使用されるとき、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、エプステインバーウイルス（ＥＢＶ）、ロゼオロウイルス（又はリンパ球指向性ヘルペスウイルス）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス及びマウスのガンマヘルペスウイルス（ＭｕＨＶ−４）、好ましくは、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、さらに好ましくはＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、及びＶＺＶの抗原を含む特定のヘルペスファミリーウイルスの複数のサブタイプの配列の解析に基づいたポリペプチド配列を意味する。コンセンサスポリペプチド配列をコードする核酸配列が調製されてもよい。コンセンサス配列を含むタンパク質及び／又はそのようなタンパク質をコードする核酸分子を含むワクチンを使用して特定のＨＣＭＶ抗原の複数のサブタイプ又は血清型に対する広い免疫を誘導することができる。

【0039】

ｆ．定電流
「定電流」は本明細書で使用されるとき、同一組織に送達される電気パルスの持続時間にわたって組織又は前記組織を規定する細胞が受け取る又は経験する電流を意味する。電気パルスは、本明細書に記載される電気穿孔装置から送達される。電気穿孔装置はフィードバック要素を有し、好ましくは瞬時のフィードバック要素を有するので、この電流は電気パルスが続く間、前記組織で一定のアンペア数のままである。フィードバック要素は、パルスの持続時間全体を通して組織（又は細胞）の抵抗を測定することができ、電気穿孔装置がその電気的エネルギーの出力を変えることができる（たとえば、電圧を上げる）ので、同一組織における電流は電気パルス全体を通して（マイクロ秒の桁で）又はパルスからパルスの間で一定のままである。一部の実施形態では、フィードバック要素はコントローラを含む。

【0040】

ｇ．電流フィードバック又はフィードバック
「電流フィードバック」又は「フィードバック」は相互交換可能に使用することができ、提供される電気穿孔装置の能動的な応答を意味し、それは、電流を一定のレベルで維持するために電極間の組織における電流を測定すること及びＥＰ装置によって送達されるエネルギーの出力を変えることを含む。この一定レベルはパルス系列又は電気処理に先立ってユーザーによって事前に設定される。その中の電気回路が、電極間の組織における電流を絶え間なくモニターし、モニターした電流（又は組織内の電流）を事前設定した電流と比べ、エネルギー出力の調整を絶え間なく行ってモニターした電流を事前設定レベルで維持することができるので、電気穿孔装置の電気穿孔成分、たとえば、コントローラによってフィードバックを達成することができる。フィードバックのループは、類似体閉鎖ループのフィードバックなので瞬時であり得る。

【0041】

ｈ．分散電流
「分散電流」は本明細書で使用されるとき、本明細書に記載される電気穿孔装置の種々の針状電極の列から送達される電流のパターンを意味し、パターンは、電気穿孔される組織の領域で電気穿孔関連の熱ストレスの発生を最小化する又は好ましくは排除する。

【0042】

ｉ．電気穿孔
「電気穿孔」、「電気透過化」又は「電気動力学増強」（「ＥＰ」）は本明細書で相互交換可能に使用されるとき、生体膜に顕微鏡的経路（孔）を誘導するための膜貫通電場パルスの使用を意味し；その存在によって、たとえば、プラスミド、オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、薬剤、イオン及び水のような生体分子が細胞膜の一方側から他方側に通過するのが可能になる。

【0043】

ｊ．フィードバック機構
「フィードバック機構」は本明細書で使用されるとき、ソフトウエア又はハードウエア（ファームウエア）によって実施される工程を意味し、工程は、所望の組織（エネルギーのパルスの送達前、送達中及び／又は送達後）のインピーダンスを受け取り、現在の値、好ましくは電流と比較し、送達されたエネルギーのパルスを調整して事前設定した値を達成する。フィードバック機構は類似体閉鎖ループの回路によって実施することができる。

【0044】

ｋ．断片
「断片」は核酸配列に関して本明細書で使用されるとき、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、エプステインバーウイルス（ＥＢＶ）、ロゼオロウイルス（又はリンパ球指向性ヘルペスウイルス）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス及びマウスのガンマヘルペスウイルス（ＭｕＨＶ−４）、好ましくは、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、さらに好ましくはＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、及びＶＺＶの抗原を含むヘルペスファミリーウイルスの完全長の野生型株と交差反応する哺乳類における免疫応答を誘発することが可能であるポリペプチドをコードする核酸配列又はその一部を意味する。断片は以下で言及するタンパク質断片をコードする種々のヌクレオチド配列の少なくとも１つから選択されるＤＮＡ断片であり得る。

【0045】

ポリペプチド配列に関連する「断片」は、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、エプステインバーウイルス（ＥＢＶ）、ロゼオロウイルス（又はリンパ球指向性ヘルペスウイルス）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス及びマウスのガンマヘルペスウイルス（ＭｕＨＶ−４）、好ましくは、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、さらに好ましくはＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、及びＶＺＶの抗原を含むヘルペスファミリーウイルスの完全長の野生型株と交差反応する哺乳類における免疫応答を誘発することが可能であるポリペプチドを意味する。コンセンサスタンパク質の断片は、コンセンサスタンパク質の少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％又は少なくとも９５％を含む。

【0046】

ｌ．遺伝子構築物
本明細書で使用されるとき、「遺伝子構築物」はタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含むＤＮＡ又はＲＮＡの分子を指す。コーディング配列は、核酸分子が投与される個体の細胞における発現を指示することが可能であるプロモータ及びポリアデニル化シグナルを含む調節要素に操作可能に連結される開始シグナル及び終結シグナルを含む。本明細書で使用されるとき、「発現可能な形態」は個体の細胞に存在する場合、コーディング配列が発現されるようにタンパク質をコードするコーディング配列に操作可能に連結された必要な調節要素を含有する遺伝子構築物を指す。

【0047】

ｍ．同一の
２以上の核酸配列又はポリペプチド配列の文脈にて本明細書で使用されるとき、「同一の」又は「同一性」は、配列が特定の領域にわたって同一である特定の比率の残基を有することを意味する。特定の領域にわたって２つの配列を比較し、双方の配列で同一の残基が存在する位置の数を測定して一致した位置の数を得、特定の領域における位置の総数で一致した位置の数を割り、結果に１００を掛けて配列同一性の比率を得ることによって比率を算出することができる。２つの配列が異なった長さである又は配置によって互い違いの末端を生じ、比較の特定の領域が一方の配列のみに含まれる場合、一方の配列の残基は計算の分母に含まれるが、分子には含まれない。ＤＮＡとＲＮＡを比較する場合は、チミン（Ｔ）とウラシル（Ｕ）を同等であるとみなすことができる。同一性は、手動又はＢＬＡＳＴ若しくはＢＬＡＳＴ２．０のようなコンピュータ配列アルゴリズムを使用して実施することができる。

【0048】

ｎ．インピーダンス
「インピーダンス」はフィードバック機構を議論する際、使用することができ、オームの法則に従って電流値に変換できるので、事前設定した電流との比較を可能にすることができる。

【0049】

ｏ．免疫応答
「免疫応答」は本明細書で使用されるとき、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、エプステインバーウイルス（ＥＢＶ）、ロゼオロウイルス（又はリンパ球指向性ヘルペスウイルス）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス及びマウスのガンマヘルペスウイルス（ＭｕＨＶ−４）、好ましくは、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、さらに好ましくはＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、及びＶＺＶのコンセンサス抗原を含むヘルペスファミリーウイルスのような抗原の導入に応答した宿主の免疫系、たとえば、哺乳類のそれの活性化を意味する。免疫応答は細胞性応答又は液性応答又は双方の形態であり得る。

【0050】

ｐ．核酸
「核酸」又は「オリゴヌクレオチド」又は「ポリヌクレオチド」は本明細書で使用されるとき、一緒に共有結合した少なくとも２つのヌクレオチドを意味する。一本鎖の表現は相補鎖の配列も規定する。従って、核酸は記載された一本鎖の相補鎖も包含する。核酸の多数の変異体を所与の核酸として同一目的で使用することができる。従って、核酸はまた、実質的に同一の核酸及びその相補体も包含する。一本鎖は、ストリンジェントなハイブリッド形成条件下で標的配列とハイブリッド形成することができるプローブを提供する。従って、核酸はまた、ストリンジェントなハイブリッド形成条件下でハイブリッド形成するプローブも包含する。

【0051】

核酸は、一本鎖又若しくは二本鎖であることができ、又は二本鎖配列及び一本鎖配列双方の一部を含有することができる。核酸は、ＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ及びｃＤＮＡの双方、ＲＮＡ又はハイブリッドであることができ、その際、核酸はデオキシリボヌクレオチド及びリボヌクレオチドの組み合わせ、及びウラシル、アデニン、チミン、シトシン、グアニン、イノシン、キサンチン、ヒポキサンチン、イソシトシン及びイソグアニンを含む塩基の組み合わせを含有することができる。核酸は、化学合成法又は組換え法によって得ることができる。

【0052】

ｑ．操作可能に連結される
「操作可能に連結される」は本明細書で使用されるとき、それが空間的に接続されるプロモータの制御下に遺伝子の発現があることを意味する。プロモータはその制御下で遺伝子の５’（上流）又は３’（下流）に位置することができる。プロモータと遺伝子の間の距離は、プロモータが由来する遺伝子にてそれが制御する遺伝子とそのプロモータの間の距離とほぼ等しくあり得る。当該技術で既知のように、この距離における変動はプロモータ機能を喪失することなく調整することができる。

【0053】

ｒ．プロモータ
「プロモータ」は本明細書で使用されるとき、細胞における核酸の発現を付与する、活性化する又は増強することが可能である合成の又は天然に由来する分子を意味する。プロモータは１以上の特異的な転写調節配列を含んで、さらに、その発現を高め、及び／又はその空間的発現及び／又は時間的発現を変化させることができる。プロモータはまた、遠位のエンハンサ要素又はリプレッサ要素も含み、それらは転写開始部位から数千塩基対に位置することができる。プロモータは、ウイルス、細菌、真菌、植物、昆虫及び動物を含む供給源に由来することができる。プロモータは、発現が生じる細胞、組織又は臓器に関して、又は発現が生じる発生段階に関して、又はたとえば、生理的ストレス、病原体、金属イオン又は誘導剤のような外部刺激に反応して構成的に又は差次的に遺伝子成分の発現を調節することができる。プロモータの代表例には、バクテリオファージＴ７プロモータ、バクテリオファージＴ３プロモータ、ＳＰ６プロモータ、ｌａｃオペレータプロモータ、ｔａｃプロモータ、ＳＶ４０後期プロモータ、ＳＶ４０早期プロモータ、ＲＳＶ−ＬＴＲプロモータ、ＣＭＶ ＩＥプロモータ、ＳＶ４０早期プロモータ、ＳＶ４０後期プロモータ、及びＣＭＶ ＩＥプロモータが挙げられる。

【0054】

ｓ．シグナルペプチド
「シグナルペプチド及びリーダー配列」は本明細書では相互交換可能に使用され、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、エプステインバーウイルス（ＥＢＶ）、ロゼオロウイルス（又はリンパ球指向性ヘルペスウイルス）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス及びマウスのガンマヘルペスウイルス（ＭｕＨＶ−４）、好ましくは、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、ＶＺＶ、さらに好ましくはＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、及びＶＺＶのタンパク質を含むヘルペスファミリーウイルスのアミノ末端におけるアミノ酸配列を指す。シグナルペプチド／リーダー配列は通常、タンパク質の局在化を指図する。本明細書で使用されるシグナルペプチド／リーダー配列は好ましくはそれが産生される細胞からのタンパク質の分泌を促進する。シグナルペプチド／リーダー配列は、細胞からの分泌の際、成熟タンパク質と呼ばれることが多い、タンパク質の残りの部分から切断されることが多い。シグナルペプチド／リーダー配列はタンパク質のＮ末端に連結される。シグナルペプチド又はリーダー配列をタンパク質のＮ末端に連結することに関して本明細書で言及されるように、シグナルペプチド／リーダー配列はタンパク質のＮ末端メチオニンを置き換える。従って、たとえば、配列番号２２は、配列番号２のＮ末端に連結されたシグナルペプチド／リーダー配列を伴った配列番号２である。配列番号２のＮ末端残基は、何でもよいが、開始配列によってコードされるのであれば、それはメチオニンである。配列番号２のＮ末端でのシグナルペプチド／リーダー配列の連結はＮ末端メチオニンを排除する。本明細書で使用されるとき、配列番号２２は、配列番号２のＮ末端Ｘａａ残基の排除にもかかわらず、配列番号２のＮ末端で連結されたシグナルペプチド／リーダー配列を伴ったシグナルペプチド／リーダー配列を含むことが意図される。同様に、配列番号２２のコーディング配列は、配列番号２をコードするコーディング配列の５’末端に連結されたシグナルペプチド／リーダー配列のコーディング配列を伴った配列番号２のコーディング配列を含む。開始コドンは配列番号２のコーディング配列におけるｎｎｎであってもよいが、配列番号２をコードするコーディング配列の５’末端に連結されたシグナルペプチド／リーダー配列のコーディング配列がある場合、それは排除される。本明細書で使用されるとき、配列番号２２のコーディング配列は、ｎｎｎが存在する配列番号２のコーディング配列の５’末端に連結されたシグナルペプチド／リーダー配列のコーディング配列を伴った配列番号２のコーディング配列を含むことが意図される。従って、たとえば、配列番号２１は、ｎｎｎの代わりに配列番号１の５’末端に連結されたシグナルペプチド／リーダー配列のコーディング配列を伴った配列番号１を含むことが意図される。一部の実施形態では、ｎｎｎは配列番号１の５’末端における開始コドンである。配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８及び２０は末端Ｘａａを含まずに提供され、配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７及び１９はｎｎｎを含まずに提供されることが意図される。

【0055】

ｔ．ストリンジェントなハイブリッド形成条件
「ストリンジェントなハイブリッド形成条件」は本明細書で使用されるとき、たとえば、そのもとで核酸の複雑な混合物にて第１の核酸配列（プローブ）が第２の核酸配列（標的）とハイブリッド形成する条件を意味する。ストリンジェントな条件は配列に左右され、異なる状況で異なる。ストリンジェントな条件は、限定されたイオン強度ｐＨにて特定の配列について融点（Ｔ_ｍ）よりも約５〜１０℃低いように選択することができる。Ｔ_ｍは、平衡（標的配列が過剰に存在するので、Ｔ_ｍにてプローブの５０％は平衡で占有される）にて、標的に相補性のプローブの５０％が標的配列とハイブリッド形成する温度（限定されたイオン強度、ｐＨ及び核酸濃度のもとで）であり得る。ストリンジェントな条件は、塩濃度がｐＨ７．０〜８．３にてたとえば、約０．０１〜１．０Ｍのナトリウム濃度のような約１．０Ｍ未満のナトリウムイオン（又は他の塩）であり、温度が、短いプローブ（たとえば、約１０〜５０ヌクレオチド）について少なくとも約３０℃及び長いプローブ（たとえば、約５０ヌクレオチドを超える）について少なくとも６０℃であるものであり得る。ストリンジェントな条件は、ホルムアミドのような不安定化剤の添加によっても達成することができる。選択的な又は特異的なハイブリッド形成については、陽性シグナルはバックグランドのハイブリッド形成の少なくとも２〜１０倍であり得る。例となるストリンジェントな条件には、以下：５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ及び１％ＳＤＳ、４２℃でのインキュベート、又は５×ＳＳＣ、１％ＳＤＳ、６５℃でのインキュベート、０．２×ＳＳＣ及び０．１％ＳＤＳ、６５℃での洗浄が挙げられる。

【0056】

ｕ．実質的に相補性
「実質的に相補性」は本明細書で使用されるとき、第１の配列が、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１８０、２７０、３６０、４５０、５４０、６３０、７２０、８１０、９００、９９０、１０８０、１１７０、１２６０、１３５０、１４４０、１５３０、１６２０、１７１０、１８００、１８９０、１９８０、２０７０以上のヌクレオチド又はアミノ酸の領域にわたる第２の配列の相補体に少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％又は９９％同一であること、又はストリンジェントな条件下で２つの配列がハイブリッド形成することを意味する。

【0057】

ｖ．実質的に同一
「実質的に同一」は本明細書で使用されるとき、第１の配列が第２の配列の相補体に対して実質的に相補性であれば、第１の配列と第２の配列が８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１８０、２７０、３６０、４５０、５４０、６３０、７２０、８１０、９００、９９０、１０８０、１１７０、１２６０、１３５０、１４４０、１５３０、１６２０、１７１０、１８００、１８９０、１９８０、２０７０以上のヌクレオチド又はアミノ酸の領域にわたって、又は核酸に関して少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％又は９９％同一であることを意味する。

【0058】

ｗ．サブタイプ又は血清型
「サブタイプ」又は「血清型」は、相互交換可能に及びヘルペスウイルスを参照して本明細書で使用されるとき、サブタイプの１つが、異なるサブタイプとは違った免疫系によって認識されるようなヘルペスウイルスの遺伝的変異体を意味する。

【0059】

ｘ．変異体
核酸に関連して本明細書で使用される「変異体」は、（ｉ）参照したヌクレオチド配列の一部又は断片；（ｉｉ）参照したヌクレオチド配列又はその一部の相補体；（ｉｉｉ）参照した核酸に実質的に一致する核酸又はその相補体；又は（ｉｖ）参照した核酸とストリンジェントな条件下でハイブリッドを形成する核酸、その相補体又はそれに実質的に一致する配列を意味する。

【0060】

アミノ酸の挿入、欠失、又は保存的置換によってアミノ酸配列が異なるが、少なくとも１つの生物活性を保持するペプチド又はポリペプチドに関連する「変異体」。変異体はまた、少なくとも１つの生物活性を保持するアミノ酸配列を伴った参照したタンパク質と実質的に同一であるアミノ酸配列を持つタンパク質も意味する。アミノ酸の保存的置換、すなわち、類似する特性（たとえば、疎水性、電荷領域の程度及び分布）の異なるアミノ酸によるアミノ酸の置き換えは、通常軽微な変化を含むとして当該技術で認識される。これらの軽微な変化は当該技術で理解されるようなアミノ酸の疎水性指標を検討することによって部分的に特定することができる。Ｋｙｔｅら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３２（１９８２）。アミノ酸の疎水性指標はその疎水性及び電荷の検討に基づく。類似の疎水性指標のアミノ酸を置換することができ、依然としてタンパク質の機能を保持することが当該技術で知られている。態様の１つでは、±２の疎水性指標を有するアミノ酸を置換する。アミノ酸の親水性を用いて生物機能を保持するタンパク質を生じる置換を示すこともできる。ペプチドの文脈でアミノ酸の親水性を検討することは、そのペプチドの最大局所平均親水性の計算を可能にし、それは、抗原性及び免疫原性と良く相関することが報告されている有用な測定値である。参照によって本明細書に完全に組み入れられる米国特許第４，５５４，１０１号。類似の親水性を有するアミノ酸の置換は、当該技術で理解されるように、生物活性、たとえば、免疫原性を保持するペプチドを生じ得る。互いに±２の範囲内で親水性を有するアミノ酸で置換を行うことができる。アミノ酸の疎水性指標及び親水性値は双方とも、そのアミノ酸の特定の側鎖によって影響を受ける。その観察に一致して、生物機能に適合するアミノ酸の置換は、疎水性、親水性、電荷、サイズ及び他の特性によって示されるように、アミノ酸の相対的類似性及び特にそれらアミノ酸の側鎖に左右されると理解される。

【0061】

ｙ．ベクター
「ベクター」は本明細書で使用されるとき、複製開始点を含有する核酸配列を意味する。ベクターは、ベクター、バクテリオファージ、細菌人工染色体又は酵母人工染色体であり得る。ベクターはＤＮＡベクター又はＲＮＡベクターであり得る。ベクターは、自己複製する染色体外ベクターであることができ、好ましくはＤＮＡプラスミドである。

【0062】

２．ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣＥＨＶ１、及びＶＺＶの抗原を含むヘルペスウイルス
本発明の態様では、提供されるのは、種々のヘルペスファミリーウイルスにわたって有用な新規のヘルペスウイルス抗原を生成して各ウイルス抗原（Ａｇ）によって引き出される免疫の考えられる幅を広げる方法である。

【0063】

先ず、系統樹上の多様性を調べて多型現象を評価し、臨床的に意義のあるコンセンサスアミノ配列の作出を助けた。ＭＥＧＡバージョン５（Ｔａｍｕｒａ， Ｐｅｔｅｒｓｏｎ， Ｓｔｅｃｈｅｒ， Ｎｅｉ， ａｎｄ Ｋｕｍａｒ ２０１１）を用いて系統樹解析及び分子進化解析を行い、コンセンサスワクチンＡｇを生成するのに使用した臨床的に関連した及び公的に利用できるヘルペス標的タンパク質配列の間で多様性を推定することができる。１，０００のブートストラップ複製と共にブートストラップ法を用いた近隣結合系統樹再構築解析を用いて放射形状のブートストラップコンセンサス樹を生成することができる。

【0064】

各ヘルペス免疫原のためのコンセンサスアミノ酸配列を生成する戦略は実施例で以下に概説する。一般に、高度に保存されたヘルペスタンパク質からのコンセンサス配列をワクチン用の免疫原に使用することができる一方で、特異的な、臨床的に意義のある亜群からのコンセンサス配列は高度に多様なタンパク質に使用することができる。

【0065】

配列配置用のベクターＮＴ１ソフトウエア（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて公的に利用可能な株（ＧｅｎＢａｎｋ）及び臨床的に意義のある株（組織培養で６回以下の継代）のコンセンサスを利用することによってヘルペスワクチン用のタンパク質のアミノ酸配列を生成することができる。好ましくは、単一の抗原を有する複数のベクター又はその中に複数の抗原、２以上の抗原を有する単一のベクターとしてワクチン製剤にて抗原を組み合わせることができる。一部の実施形態では、２以上を超える特異的なヘルペスウイルス抗原がワクチン製剤１つに存在する。複数の抗原がベクター（たとえば、ＤＮＡプラスミド、たとえば、ｐＨＣＭＶ−ｇＨｇＬ又はＨＳＶ１−ｇＨｇＬ）に存在する場合、そのような遺伝子は構造上関連する高分子の同時発現についての切断部位、好ましくはフーリン部位、たとえば、配列番号６３によって分離される。ＤＮＡワクチンの遺伝的最適化は、ヒトにおけるタンパク質発現のためのコドン及びＲＮＡの最適化を含み、遺伝子はすべて合成し、改変されたｐＶＡＸ１哺乳類発現ベクターにサブクローニングした（ドイツ、レーゲンスブルグのＧｅｎｅＡｒｔ、ニュージャージー州、ピスカタウエイのＧｅｎＳｃｒｉｐｔ）。

【0066】

別の態様では、本明細書で提供されるのは、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、及びＶＺＶの血清型を含む１以上のヘルペスウイルスに対して哺乳類で免疫応答を誘発することが可能である抗原である。抗原は、それに対して抗ヘルペスウイルス免疫応答を誘導することができる免疫原としてそれを特に効果的にするエピトープを含むことができる。ヘルペスウイルス抗原は、完全長の翻訳産物、その変異体、その断片又はその組み合わせを含むことができる。ヘルペスウイルス抗原は、野生型配列であることができ、複数の異なる配列に由来するコンセンサス配列であることができる。

【0067】

ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、及びＶＺＶのタンパク質を含む様々なヘルペスウイルスをコードする種々の核酸配列が、免疫原性タンパク質に対して免疫応答を誘導し、予防用及び治療用のワクチンで使用することができるヘルペスウイルスに対するワクチンの一部として単独で使用するために、又は種々の組み合わせで使用するために特定されている。或いは、タンパク質自体が使用され得る。免疫原性タンパク質には、ＨＣＭＶ、ＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１、又はＶＺＶに由来しようとしまいとｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ｇＥ、ｇＩ、ｇＫ、ｇＣ、ｇＤ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ−１３１Ａ、ＵＬ−８３（ｐｐ６５）が挙げられ、ワクチンは、この群から選択される１以上の免疫原性タンパク質を含み得るし、及び／又はワクチンは、この群から選択される１以上の免疫原性タンパク質をコードする１以上の核酸配列を含み得る。

【0068】

広く行き渡って循環しているヒト株の間での臨床的な単離体からの進化的な多様性と広範な遺伝的差異を考慮して、各免疫原性タンパク質のためのコンセンサスアミノ酸配列を生成している。ｇＢ、ｇＭ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＥ、ｇＩ、ｇＫ、ｇＣ、ｇＤ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ−１３１Ａ及びＵＬ−８３（ｐｐ６５）のコンセンサスアミノ酸配列は、２０１０年初頭時点でのヒトの臨床単離体に由来する配列に基づいた。ｇＮタンパク質の大きな進化的多様性のために、コンセンサス配列は、７つの血清型のうち、血清的に最も行き渡ったもの（ｇＮ−４）を代表する１つだけ（ｇＮ−４ｃ）から生成した。同様に、ｇＯの場合、特定の血清型がｇＮ−４ｃ血清型との連鎖を報告したために８つの血清型のうち１つ（ｇＯ−５）からコンセンサスアミノ酸配列を生成した。

【0069】

一部の実施形態では、コンセンサスヘルペスウイルス抗原にはシグナルペプチドが設けられ得る。一部の実施形態では、ＩｇＥリーダー（配列番号６１）がＮ末端に連結される。本明細書に記載されるように、コンセンサス配列のＮ末端に連結されたシグナルペプチドを参照する場合、コンセンサス配列のＮ末端Ｘａａ残基がシグナルペプチドで置き換えられる実施形態を特に含むことが意図される。すなわち、本明細書で使用されるとき、Ｘａａは任意のアミノ酸を参照するか又はアミノ酸を参照しないことが意図される。本明細書で言及されるコンセンサス配列、配列番号：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、８５、９１、９７、１０３、１１１及び１１３を含むタンパク質並びにタンパク質ＨＳＶ１−ｇＨ、ＨＳＶ１−ｇＬ、ＨＳＶ１−ｇＣ、ＨＳＶ１−ｇＤ、ＨＳＶ２−ｇＨ、ＨＳＶ２−ｇＬ、ＨＳＶ２−ｇＣ、ＨＳＶ２−ｇＤ、ＶＺＶ−ｇＨ、ＶＺＶ−ｇＬ、ＶＺＶ−ｇＭ、ＶＺＶ−ｇＮ、ＣｅＨＶ１−ｇＨ、ＣｅＨＶ１−ｇＬ、ＣｅＨＶ１−ｇＣ、ＣｅＨＶ１−ｇＤ、ＶＺＶ−ｇＥ、及びＶＺＶ−ｇＩは、Ｎ末端Ｘａａを含まない配列を含み得る。

【0070】

一部の実施形態では、ヘルペスウイルス抗原は、シグナルペプチドがあろうとなかろうと、ＨＡタグ（配列番号４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８及び６０のそれぞれに含まれる配列番号６２）のような抗原性タグを含み得る。抗原性タグを用いて発現を検出することができる。ＨＡタグはこの目的で使用される一般的な抗原性タグである。さらに、上記で言及された１以上のタンパク質が互いに連結して融合タンパク質を形成し得る。一部の例では、たとえば、フーリン部位（配列番号６５、６７、６９、７１、７３、７５、８７、８９、９３、９５、９９、１０１、１０５、１０７、及び１０９のそれぞれに含まれる配列番号６３）のようなタンパク分解性切断部位を手段としてタンパク質が連結される。

【0071】

コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＢ（配列番号：２）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＭ（配列番号：４）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＮ（配列番号：６）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＨ（配列番号：８）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＬ（配列番号：１０）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＯ（配列番号：１２）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８（配列番号：１４）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０（配列番号：１６）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−１３１Ａ（配列番号：１８）、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−８３（ｐｐ６５）（配列番号：２０）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＢ配列番号：８５、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号：８７の８３８位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号：８７の８４６からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号：８９の５１１までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号：８９の５１９からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＢ（配列番号：９１）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号：９３の８３８位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号：９３の８４６位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号：９５の４８０位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号：９５の４８８位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＢ（配列番号：９７）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号：９９の８４１位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号：９９の８４９位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号：１０１の４３５位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号：１０１の４４３からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＢ（配列番号：１０３）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号：１０５の８５８までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号：１０５の８６６位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号：１０７の４６７までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号：１０７の４７５位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号：１０９の６２３位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号：１０９の６３１位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＣ（配列番号：１１１）、及びコンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＫ（配列番号：１１３）が提供される。特定の例それぞれにて、ヘルペスウイルス免疫原性タンパク質コンセンサス配列のＮ末端でＩｇＥリーダー配列を含むアミノ酸配列を生成した。従って、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＢ（配列番号：２２）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＭ（配列番号：２４）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＮ（配列番号：２６）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＨ（配列番号：２８）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＬ（配列番号：３０）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＯ（配列番号：３２）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８（配列番号：３４）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０（配列番号：３６）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−１３１Ａ（配列番号：３８）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−８３（ｐｐ６５）（配列番号：４０）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質も提供される。ＩｇＥリーダーは配列番号６２である。コンセンサス配列のＣ末端にＨＡタグが連結される実施形態も提供される。従って、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＢ（配列番号：４２）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＭ（配列番号：４４）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＮ（配列番号：４６）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＨ（配列番号：４８）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＬ（配列番号：５０）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＯ（配列番号：５２）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８（配列番号：５４）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０（配列番号：５６）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−１３１Ａ（配列番号：５８）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−８３（ｐｐ６５）（配列番号：６０）に連結されたＩｇＥリーダーを伴ったタンパク質も提供される。一部の実施形態では、２以上のヘルペスウイルス抗原が、タンパク分解性切断部位によって互いに連結された融合タンパク質として発現される核酸構築物が提供される。フーリンタンパク分解性切断部位（配列番号６３）は、構築物によって発現される融合タンパク質にてヘルペスウイルス抗原を連結し得るタンパク分解性切断部位の例である。

【0072】

特異的なコンセンサス抗原のそれぞれについて本明細書で提供されるタンパク質配列のいずれかとタンパク質は相同であり得る。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列に対して９５％の相同性を有する免疫原性タンパク質に関する。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列に対して９６％の相同性を有する免疫原性タンパク質に関する。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列に対して９７％の相同性を有する免疫原性タンパク質に関する。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列に対して９５％の相同性、場合によっては９８％の相同性を有する免疫原性タンパク質に関する。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列に対して９９％の相同性を有する免疫原性タンパク質に関する。

【0073】

コンセンサスタンパク質の断片は、コンセンサスタンパク質の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％又は少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％を含み得る。特異的なコンセンサス抗原のそれぞれについて本明細書で提供されるタンパク質配列のいずれかの免疫原性断片が提供され得る。免疫原性断片は、特異的なコンセンサス抗原のそれぞれについて本明細書で提供されるタンパク質配列のいずれかの少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％又は少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％を含み得る。

【0074】

特異的なコンセンサス抗原のそれぞれについて本明細書で提供されるタンパク質配列のいずれかの免疫原性断片に相同のアミノ酸配列を持つタンパク質の免疫原性断片が提供され得る。そのような免疫原性断片は、特異的なコンセンサス抗原のそれぞれについて本明細書で提供されるタンパク質配列のいずれかに対して９５％相同であるタンパク質の少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％又は少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％を含み得る。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列の免疫原性断片に対して９６％の相同性を有する免疫原性断片に関する。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列の免疫原性断片に対して９７％の相同性を有する免疫原性断片に関する。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列の免疫原性断片に対して９５％の相同性、場合によっては９８％の相同性を有する免疫原性断片に関する。一部の実施形態は、本明細書のコンセンサスタンパク質配列の免疫原性断片に対して９９％の相同性を有する免疫原性断片に関する。

【0075】

３．遺伝子配列、構築物及びプラスミド
配列番号：２， 配列番号：４， 配列番号：６， 配列番号：８， 配列番号：１０， 配列番号：１２， 配列番号：１４， 配列番号：１６， 配列番号：１８， 配列番号：２０， 配列番号：２２， 配列番号：２４， 配列番号：２６， 配列番号：２８， 配列番号：３０， 配列番号：３２， 配列番号：３４， 配列番号：３６， 配列番号：３８， 配列番号：４０， 配列番号：４２， 配列番号：４４， 配列番号：４６， 配列番号：４８， 配列番号：５０， 配列番号：５２， 配列番号：５４， 配列番号：５６， 配列番号：５８， 配列番号：６０、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＢ配列番号：８５、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号：８７の８３８位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号：８７の８４６位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号：８９の５１１位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号：８９の５１９からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＢ（配列番号：９１）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号：９３の８３８位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号：９３の８４６位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号：９５の４８０までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号：９５の４８８位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＢ（配列番号：９７）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号：９９の８４１位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号：９９の８４９位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号：１０１の４３５位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号：１０１の４４３位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＢ（配列番号：１０３）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号：１０５の８５８位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号：１０５の８６６からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号：１０７の４６７位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号：１０７の４７５位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号：１０９の６２３位までのＮ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号：１０９の６３１位からのＣ末端領域）、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＣ（配列番号：１１１）、及びコンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＫ（配列番号：１１３）、並びに相同タンパク質、免疫原性断片及び相同タンパク質の免疫原性断片をコードする核酸配列は日常的に生成することができる。従って、コンセンサス配列に対して９５％までの相同性、コンセンサス配列に対して９６％までの相同性、コンセンサス配列に対して９６％までの相同性、コンセンサス配列に対して９７％までの相同性、コンセンサス配列に対して９８％までの相同性、及び９９％までを有する免疫原性タンパク質をコードする核酸分子が提供され得る。同様に、本明細書で言及される免疫原性断片及び本明細書で言及されるタンパク質に相同なタンパク質の免疫原性断片をコードする核酸配列も提供される。

【0076】

コンセンサスアミノ酸配列をコードする核酸分子を生成した。ワクチンは、ヒトにおける安定性及び発現を最適化するように生成された配列のこの群から選択される免疫原性タンパク質のコンセンサス型の１以上をコードする１以上の核酸配列を含み得る。コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＢ（配列番号：１）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＭ（配列番号：３）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＮ（配列番号：５）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＨ（配列番号：７）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＬ（配列番号：９）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＯ（配列番号：１１）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８（配列番号：１３）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０（配列番号：１５）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−１３１Ａ（配列番号：１７）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−８３（ｐｐ６５）（配列番号：１９）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＢ（配列番号：８６）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号：８８のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号：８８のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号：９０のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号：９０のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＢ（配列番号：９２）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号：９４のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号：９４のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号：９６のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号：９６のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＢ（配列番号：９８）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号：１００のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号：１００のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号：１０２のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号：１０２のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＢ（配列番号：１０４）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号：１０６のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号：１０６のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号：１０８のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号：１０８のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号：１１０のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号：１１０のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＣ（配列番号：１１２）をコードする核酸配列、及びコンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＫ（配列番号：１１４）をコードする核酸配列が本明細書で提供される。加えて、コンセンサスアミノ酸配列のＮ末端でＩｇＥリーダー配列を有するタンパク質をコードする、最適化されたコンセンサスコーディング核酸配列の５’末端でＩｇＥリーダーのコーディング配列を組み入れる核酸配列を生成した。コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＢ（配列番号：２１）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＭ（配列番号：２３）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＮ（配列番号：２５）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＨ（配列番号：２７）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＬ（配列番号：２９）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＯ（配列番号：３１）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８（配列番号：３３）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０（配列番号：３５）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−１３１Ａ（配列番号：３７）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−８３（ｐｐ６５）（配列番号：３９）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列が提供される。ＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号６１をコードするＤＮＡ）。Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＢに連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：４２）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＭに連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：４３）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＮに連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：４５）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＨに連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：４７）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＬに連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：４９）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ｇＯに連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：５１）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：５３）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：５５）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−１３１Ａに連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：５７）、Ｃ末端にＨＡタグを持つコンセンサスタンパク質ＨＣＭＶ−ＵＬ−８３（ｐｐ６５）に連結されたＩｇＥリーダーをコードする核酸配列（配列番号：５９）が提供される。

【0077】

一部の実施形態は、本明細書の核酸コーディング配列に対して９５％の相同性を有する免疫原性タンパク質をコードする核酸分子に関する。一部の実施形態は、本明細書の核酸コーディング配列に対して９６％の相同性を有する免疫原性タンパク質をコードする核酸分子に関する。一部の実施形態は、本明細書の核酸コーディング配列に対して９７％の相同性を有する免疫原性タンパク質をコードする核酸分子に関する。一部の実施形態は、本明細書の核酸コーディング配列に対して９８％の相同性を有する免疫原性タンパク質をコードする核酸分子に関する。一部の実施形態は、本明細書の核酸コーディング配列に対して９９％の相同性を有する免疫原性タンパク質をコードする核酸分子に関する。一部の実施形態では、本明細書で開示されるコンセンサスタンパク質のコーディング配列に対して相同である本明細書で開示されるコーディング配列を持つ核酸分子には、本明細書で開示される相同なタンパク質配列をコードするコーディング配列の５’末端に連結されるＩｇＥリーダー配列をコードする配列が挙げられる。

【0078】

一部の実施形態は、配列番号：１， 配列番号：３， 配列番号：５， 配列番号：７， 配列番号：９， 配列番号：１１， 配列番号：１３， 配列番号：１５， 配列番号：１７， 配列番号：１９， 配列番号：２１， 配列番号：２３， 配列番号：２５， 配列番号：２７， 配列番号：２９， 配列番号：３１， 配列番号：３３， 配列番号：３５， 配列番号：３７， 配列番号：３９， 配列番号：４１， 配列番号：４３， 配列番号：４５， 配列番号：４７， 配列番号：４９， 配列番号：５１， 配列番号：５３， 配列番号：５５， 配列番号：５７， 配列番号：５９， 配列番号：８６、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＨ（配列番号：８８のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＬ（配列番号：８８のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＣ（配列番号：９０のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＤ（配列番号：９０のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、配列番号：９２、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＨ（配列番号：９４のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＬ（配列番号：９４のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＣ（配列番号：９６のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＤ（配列番号：９６のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、配列番号：９８、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＨ（配列番号：１００のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＬ（配列番号：１００のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＭ（配列番号：１０２のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＮ（配列番号：１０２のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、配列番号：１０４、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＨ（配列番号：１０６のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＬ（配列番号：１０６のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＣ（配列番号：１０８のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＤ（配列番号：１０８のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＥ（配列番号：１１０のＮ末端部分、フーリン部位の前）をコードする核酸配列、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＩ（配列番号：１１０のＣ末端部分、フーリン部位の後ろ）をコードする核酸配列、配列番号：１１２、及び配列番号：１１４の断片に関する。断片は、特異的なコンセンサス抗原のそれぞれについて本明細書で提供されるヌクレオチド配列のいずれかの少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％又は少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％であり得る。断片は、特異的なコンセンサス抗原のそれぞれについて本明細書で提供されるヌクレオチド配列のいずれかの断片に対して少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％相同であり得る。

【0079】

本明細書で提供されるのは、コンセンサスタンパク質配列、コンセンサスタンパク質配列に相同な配列、コンセンサスタンパク質配列の断片及びコンセンサスタンパク質配列の断片に相同な配列を含む本明細書で開示されるヘルペスウイルス抗原をコードする核酸配列を含むことができる遺伝子構築物である。遺伝子構築物は機能している染色体外分子として細胞に存在することができる。遺伝子構築物は、セントロメア、テロメア又はプラスミド又はコスミドを含む線形のミニ染色体であることができる。

【0080】

遺伝子構築物はまた、組換えアデノウイルス、組換えアデノウイルス関連ウイルス及び組換えワクシニアを含む組換えウイルスベクターのゲノムの一部であることもできる。遺伝子構築物は、細胞の中で生きている弱毒化生微生物又は組換え微生物ベクターにおける遺伝子材料の一部であることができる。

【0081】

遺伝子構築物は、核酸のコーディング配列の遺伝子発現のための調節要素を含むことができる。調節要素は、プロモータ、エンハンサ、開始コドン、停止コドン、又はポリアデニル化シグナルであり得る。

【0082】

核酸配列がベクターであり得る遺伝子構築物を構成し得る。ベクターは、哺乳類にて免疫応答を引き出すのに有効な量で哺乳類の細胞にて抗原を発現することが可能である。ベクターは組換えであり得る。ベクターは抗原をコードする非相同の核酸を含むことができる。ベクターはプラスミドであり得る。ベクターは、抗原をコードする核酸を細胞に形質移入するのに有用であることができ、形質転換された宿主細胞は抗原の発現が起こる条件下で培養され、維持される。

【0083】

一部の実施形態では、１つの抗原のコーディング配列が単一のベクターに提供され得る。

【0084】

一部の実施形態では、２以上の異なる抗原のコーディング配列が単一のベクターに提供され得る。一部の実施形態では、コーディング配列は発現を制御する別々のプロモータを有し得る。一部の実施形態では、コーディング配列は、コーディング配列を分離するＩＲＥＳ配列と共に、発現を制御する単一プロモータを有し得る。ＩＲＥＳ配列の存在は、転写産物の別々の翻訳を生じる。一部の実施形態では、コーディング配列は、抗原のコーディング配列を分離するタンパク分解性切断ペプチド配列をコードするコーディング配列と共に、発現を制御する単一プロモータを有し得る。単一の翻訳産物が作出され、次いでプロテアーゼが切断する部位を認識するプロテアーゼによって処理されて別々のタンパク質分子を生成する。発現が生じる場合、使用されるプロテアーゼ切断部位は、細胞に内因性に存在するプロテアーゼによって通常認識される。一部の実施形態では、プロテアーゼ用の別のコーディング配列を含めて、ポリタンパク質の翻訳産物を処理するのに必要とされるプロテアーゼの産生を提供する。一部の実施形態では、ベクターは、１、２、３、４以上のＨＣＭＶ抗原、ＨＳＶ１抗原、ＨＳＶ２抗原、ＶＺＶ抗原、又はＣｅＨＶ１抗原のためのコーディング配列を含む。

【0085】

一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原ｇＭ及びｇＮのコーディング配列は同一ベクターに含まれる。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原コンセンサスｇＭ及びｇＮ４−ｃのコーディング配列は同一ベクターに含まれる。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原ｇＭ及びｇＮのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にある。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原コンセンサスｇＭ及びｇＮ４−ｃのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にある。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原ｇＭ及びｇＮのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にあり、タンパク分解性切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原コンセンサスｇＭ及びｇＮ４−ｃのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にあり、タンパク分解性切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原ｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれる。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原コンセンサスｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれる。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原ｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にある。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原コンセンサスｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にある。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原ｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にあり、タンパク分解性切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原コンセンサスｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にあり、タンパク分解性切断部位のコーディング配列に連結される。

【0086】

一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原／シャペロンタンパク質ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ−１３１Ａのコーディング配列は同一ベクターに含まれる。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原／シャペロンタンパク質コンセンサスＵＬ１２８、コンセンサスＵＬ１３０及びコンセンサスＵＬ−１３１Ａのコーディング配列は同一ベクターに含まれる。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原／シャペロンタンパク質ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ−１３１Ａのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にある。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原／シャペロンタンパク質コンセンサスＵＬ１２８、コンセンサスＵＬ１３０及びコンセンサスＵＬ−１３１Ａのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にある。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原／シャペロンタンパク質ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ−１３１Ａのコーディング配列は、同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にあり、タンパク分解性切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＨＣＭＶ抗原／シャペロンタンパク質コンセンサスＵＬ１２８、コンセンサスＵＬ１３０及びコンセンサスＵＬ−１３１Ａのコーディング配列は、同一ベクターに含まれ、単一プロモータの制御下にあり、タンパク分解性切断部位のコーディング配列に連結される。

【0087】

一部の実施形態では、ＨＳＶ１抗原ｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＨＳＶ１抗原ｇＣ及びｇＤのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＨＳＶ２抗原ｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＨＳＶ２抗原ｇＣ及びｇＤのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＶＺＶ抗原ｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＶＺＶ抗原ｇＭ及びｇＮのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＣｅＨＶ１抗原ｇＨ及びｇＬのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＣｅＨＶ１抗原ｇＣ及びｇＤのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。一部の実施形態では、ＶＺＶ抗原ｇＥ及びｇＩのコーディング配列は同一ベクターに含まれ、場合によっては単一プロモータの制御下にあり、場合によってはタンパク分解性切断部位、好ましくはフーリン切断部位のコーディング配列に連結される。

【0088】

本明細書で開示される任意のタンパク質のコーディング配列は単一ベクターにて単一コーディング配列として提供され得る。同様に、本明細書で開示される異なるタンパク質の組み合わせのコーディング配列は、単一ベクターにて、ＩＲＥＳ配列に連結された自体のプロモータと共に、又は個々のタンパク質がタンパク分解性切断部位と連結するポリタンパク質の単一のコーディング配列として提供され得る。

【0089】

本明細書で言及されるそれぞれの例及びあらゆる例では、発現の安定性及び高いレベルのためにコーディング配列が最適化され得る。一部の例では、分子内結合により形成されるもののようなＲＮＡの二次構造形成を低減するようにコドンが選択される。

【0090】

ベクターは、抗原をコードする非相同の核酸を含むことができ、さらに、抗原コーディング配列の上流であり得る開始コドン及び抗原コーディング配列の下流であり得る停止コドンを含むことができる。開始コドンと終結コドンは抗原コーディング配列と共にインフレームであり得る。ベクターはまた、抗原コーディング配列に操作可能に連結されるプロモータを含むことができる。抗原コーディング配列に操作可能に連結されるプロモータは、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）に由来するプロモータ、マウス乳癌ウイルス（ＭＭＴＶ）プロモータ、ウシ免疫不全ウイルス（ＢＩＶ）の長い末端反復（ＬＴＲ）プロモータのようなヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）プロモータ、モロニーウイルスプロモータ、トリ白血病ウイルス（ＡＬＶ）プロモータ、ＣＭＶ前初期遺伝子プロモータのようなサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモータ、エプステインバーウイルス（ＥＢＶ）プロモータ、又はラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）プロモータであり得る。プロモータはまた、たとえば、ヒトのアクチン、ヒトのミオシン、ヒトのヘモグロビン、ヒトの筋肉クレアチン又はヒトのメタロチオネインのようなヒトの遺伝子に由来するプロモータであり得る。プロモータはまた、天然の又は合成の、たとえば、筋肉又は皮膚に特異的なプロモータのような組織特異的なプロモータであり得る。そのようなプロモータの例は、米国特許出願公開番号ＵＳ２００４０１７５７２７に記載されており、その内容はその全体が参照によって本明細書に組み入れられる。

【0091】

ベクターはまたポリアデニル化シグナルを含むことができ、それはヘルペス抗原コーディング配列の下流にあり得る。ポリアデニル化シグナルは、ＳＶ４０ポリアデニル化シグナル、ＬＴＲポリアデニル化シグナル、ウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化シグナル、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナル、又はヒトβ−グロビンポリアデニル化シグナルであり得る。ＳＶ４０ポリアデニル化シグナルはｐＣＥＰ４ベクターに由来するポリアデニル化シグナル（カリフォルニア州、サンディエゴ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）であり得る。

【0092】

ベクターはまた、コンセンサスヘルペス抗原コーディング配列の上流でエンハンサを含むこともできる。エンハンサはＤＮＡの発現に必要であり得る。エンハンサは、ヒトのアクチン、ヒトのミオシン、ヒトのヘモグロビン、ヒトの筋肉クレアチンのエンハンサ、又はＣＭＶ、ＨＡ、ＲＳＶ若しくはＥＢＶの１つのようなウイルスエンハンサであり得る。ポリヌクレオチド機能のエンハンサは、米国特許第５，５９３，９７２号、同第５，９６２，４２８号及びＷＯ９４／０１６７３７に記載されており、その内容はその全体が参照によって本明細書に組み入れられる。

【0093】

ベクターはまた、細胞にてベクターを染色体外で維持し、複数コピーのベクターを生じるために哺乳類の複製開始点を含むこともできる。ベクターは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（カリフォルニア州、サンディエゴ）からのｐＶＡＸ１、ｐＣＥＰ４又はｐＲＥＰ４であることができ、それは、エプステインバーウイルスの複製開始点及び核抗原ＥＢＮＡ−１コーディング領域を含むことができ、統合することなくコピー数の多いエピソームの複製を生じることができる。ベクターは、ｐＶＡＸ１又は配列番号７６に含まれるもののような変化を持つｐＶａｘ１変異体（図１）であることができる。変異体ｐＶａｘ１プラスミドは骨格ベクタープラスミドｐＶＡＸ１（カリフォルニア州、カールスバッドのＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の２９９８塩基対の変異体である。ＣＭＶプロモータは塩基１３７〜７２４に位置する。Ｔ７プロモータ／プライミング部位は塩基６６４〜６８３に位置する。複数のクローニング部位は塩基６９６〜８１１にある。ウシＧＨポリアデニル化シグナルは塩基８２９〜１０５３にある。カナマイシン耐性遺伝子は塩基１２２６〜２０２０にある。ｐＵＣの開始点は塩基２３２０〜２９９３にある。Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから入手可能なｐＶＡＸ１の配列に基づいて、本明細書で言及されるプラスミド１〜６の骨格として使用されるｐＶＡＸ１の配列で以下の変異が見い出された：
ＣＭＶプロモータにおけるＣ＞Ｇ２４１
ウシ成長ホルモンのポリアデニル化シグナル（ｂＧＨポリＡ）の下流、骨格、Ｃ＞Ｔ１９４２
カナマイシン遺伝子の下流、骨格、Ａ＞−２８７６
ｐＵＣ複製開始点（Ｏｒｉ）のコピー数の多い変異におけるＣ＞Ｔ３２７７（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １９８５を参照）
ＲＮＡＳｅＨ部位の上流のｐＵＣ Ｏｒｉの一番端、Ｇ＞Ｃ３７５３
ＣＭＶプロモータの上流の骨格にて２、３及び４の塩基対がＡＣＴからＣＴＧに変化する。
ベクターの骨格はｐＡＶ０２４２であり得る。ベクターは、複製に欠陥のあるアデノウイルス５型（Ａｄ５）ベクターであり得る。

【0094】

ベクターはまた調節配列を含むことができ、それは、ベクターが投与される哺乳類又はヒトの細胞における遺伝子の発現に良く適し得る。コンセンサスヘルペス抗原コーディング配列は、宿主細胞におけるコーディング配列のさらに効率的な転写を可能にし得るコドンを含むことができる。

【0095】

ベクターは、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）でのタンパク質産生に使用することができるｐＳＥ４２０（カリフォルニア州、サンディエゴのＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）であることができる。ベクターはまた、酵母のＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ株でのタンパク質産生に使用することができるｐＹＥＳ２（カリフォルニア州、サンディエゴのＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）であることができる。ベクターはまた、昆虫細胞でのタンパク質産生に使用することができるＭＡＸＢＡＣ（商標）完全バキュロウイルス発現系（カリフォルニア州、サンディエゴのＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）のものであることができる。ベクターはまた、チャイニーズハムスターの卵巣（ＣＨＯ）細胞のような哺乳類細胞でのタンパク質産生に使用することができるｐｃＤＮＡ Ｉ又はｐｃＤＮＡ３（カリフォルニア州、サンディエゴのＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）であることができる。ベクターは、参照によって完全に組み入れられるＳａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，第２版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ（１９８９）を含む日常的な技法及び入手しやすい出発物質によってタンパク質を産生する発現ベクター又は発現系であり得る。

【0096】

４．医薬組成物
本明細書で提供されるのは、約１ナノグラム〜約１０ミリグラムのＤＮＡを含む、本発明に係る医薬組成物である。一部の実施形態では、本発明に係る医薬組成物は、１）少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５又は１００ナノグラム、又は少なくとも１， ５， １０， １５， ２０， ２５， ３０， ３５， ４０， ４５， ５０， ５５， ６０， ６５， ７０， ７５， ８０， ８５， ９０， ９５，１００， １０５， １１０， １１５， １２０， １２５， １３０， １３５， １４０， １４５， １５０， １５５， １６０， １６５， １７０， １７５， １８０， １８５， １９０， １９５， ２００， ２０５， ２１０， ２１５， ２２０， ２２５， ２３０， ２３５， ２４０， ２４５， ２５０， ２５５， ２６０， ２６５， ２７０， ２７５， ２８０， ２８５， ２９０， ２９５， ３００， ３０５， ３１０， ３１５， ３２０， ３２５， ３３０， ３３５， ３４０， ３４５， ３５０， ３５５， ３６０， ３６５， ３７０， ３７５， ３８０， ３８５， ３９０， ３９５， ４００， ４０５， ４１０， ４１５， ４２０， ４２５， ４３０， ４３５， ４４０， ４４５， ４５０， ４５５， ４６０， ４６５， ４７０， ４７５， ４８０， ４８５， ４９０， ４９５， ５００， ６０５， ６１０， ６１５， ６２０， ６２５， ６３０， ６３５， ６４０， ６４５， ６５０， ６５５， ６６０， ６６５， ６７０， ６７５， ６８０， ６８５， ６９０， ６９５， ７００， ７０５， ７１０， ７１５， ７２０， ７２５， ７３０， ７３５， ７４０， ７４５， ７５０， ７５５， ７６０， ７６５， ７７０， ７７５， ７８０， ７８５， ７９０， ７９５， ８００， ８０５， ８１０， ８１５， ８２０， ８２５， ８３０， ８３５， ８４０， ８４５， ８５０， ８５５， ８６０， ８６５， ８７０， ８７５， ８８０， ８８５， ８９０， ８９５． ９００， ９０５， ９１０， ９１５， ９２０， ９２５， ９３０， ９３５， ９４０， ９４５， ９５０， ９５５， ９６０， ９６５， ９７０， ９７５， ９８０， ９８５， ９９０， ９９５ 若しくは１０００μｇ又は少なくとも１．５， ２， ２．５， ３， ３．５， ４， ４．５， ５， ５．５， ６， ６．５， ７， ７．５， ８， ８．５， ９， ９．５若しくは１０ｍｇ以上；及び２）１５， ２０， ２５， ３０， ３５， ４０， ４５， ５０， ５５， ６０， ６５， ７０， ７５， ８０， ８５， ９０， ９５若しくは１００ナノグラム又は１， ５， １０， １５， ２０， ２５， ３０， ３５， ４０， ４５， ５０， ５５， ６０， ６５， ７０， ７５， ８０， ８５， ９０， ９５，１００， １０５， １１０， １１５， １２０， １２５， １３０， １３５， １４０， １４５， １５０， １５５， １６０， １６５， １７０， １７５， １８０， １８５， １９０， １９５， ２００， ２０５， ２１０， ２１５， ２２０， ２２５， ２３０， ２３５， ２４０， ２４５， ２５０， ２５５， ２６０， ２６５， ２７０， ２７５， ２８０， ２８５， ２９０， ２９５， ３００， ３０５， ３１０， ３１５， ３２０， ３２５， ３３０， ３３５， ３４０， ３４５， ３５０， ３５５， ３６０， ３６５， ３７０， ３７５， ３８０， ３８５， ３９０， ３９５， ４００， ４０５， ４１０， ４１５， ４２０， ４２５， ４３０， ４３５， ４４０， ４４５， ４５０， ４５５， ４６０， ４６５， ４７０， ４７５， ４８０， ４８５， ４９０， ４９５， ５００， ６０５， ６１０， ６１５， ６２０， ６２５， ６３０， ６３５， ６４０， ６４５， ６５０， ６５５， ６６０， ６６５， ６７０， ６７５， ６８０， ６８５， ６９０， ６９５， ７００， ７０５， ７１０， ７１５， ７２０， ７２５， ７３０， ７３５， ７４０， ７４５， ７５０， ７５５， ７６０， ７６５， ７７０， ７７５， ７８０， ７８５， ７９０， ７９５， ８００， ８０５， ８１０， ８１５， ８２０， ８２５， ８３０， ８３５， ８４０， ８４５， ８５０， ８５５， ８６０， ８６５， ８７０， ８７５， ８８０， ８８５， ８９０， ８９５． ９００， ９０５， ９１０， ９１５， ９２０， ９２５， ９３０， ９３５， ９４０， ９４５， ９５０， ９５５， ９６０， ９６５， ９７０， ９７５， ９８０， ９８５， ９９０， ９９５，若しくは１０００μｇグラムまで及びそれを含む、又は１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５若しくは１０ｍｇまで及びそれを含む、の間を含む。一部の実施形態では、本発明に係る医薬組成物は、約５ナノグラム〜約１０ｍｇのＤＮＡを含む。一部の実施形態では、本発明に係る医薬組成物は、約２５ナノグラム〜約５ｍｇのＤＮＡを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、約５０ナノグラム〜約１ｍｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約０．１〜約５００μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約０．１〜約５００μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約１〜約３５０μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約５〜約２５０μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約１０〜約２００μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約１５〜約１５０μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約２０〜約１００μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約２５〜約７５μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約３０〜約５０μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約３５〜約４０μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約１００〜約２００μｇのＤＮＡを含有する。一部の実施形態では、医薬組成物は、約１０μｇ〜約１００μｇのＤＮＡを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、約２０μｇ〜約８０μｇのＤＮＡを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、約２５μｇ〜約６０μｇのＤＮＡを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、約３０ｎｇ〜約５０μｇのＤＮＡを含む。一部の実施形態では、医薬組成物は、約３５ｎｇ〜約４５μｇのＤＮＡを含む。一部の好まれる実施形態では、医薬組成物は、約０．１〜約５００μｇのＤＮＡを含有する。一部の好まれる実施形態では、医薬組成物は、約１〜約３５０μｇのＤＮＡを含有する。一部の好まれる実施形態では、医薬組成物は、約２５〜約２５０μｇのＤＮＡを含有する。一部の好まれる実施形態では、医薬組成物は、約１００〜約２００μｇのＤＮＡを含有する。

【0097】

本発明に係る医薬組成物は、使用される投与の方式に従って製剤化される。医薬組成物が注射用医薬組成物である場合、それらは無菌で、発熱物質を含まず、粒子状物質を含まない。等張の製剤が好ましくは使用される。一般に等張性のための添加剤には、塩化ナトリウム、デキストロース、マンニトール、ソルビトール及びラクトースが挙げられる。場合によっては、たとえば、リン酸緩衝化生理食塩水のような等張溶液が好まれる。安定化剤にはゼラチン及びアルブミンが挙げられる。一部の実施形態では、血管収縮剤が製剤に添加される。

【0098】

好ましくは、医薬組成物はワクチンであり、さらに好ましくはＤＮＡワクチンである。

【0099】

本明細書で提供されるのは、ヘルペスウイルス抗原に対して哺乳類にて免疫応答を生成することが可能であるワクチンである。ワクチンは上記で議論したような遺伝子構築物を含むことができる。ワクチンは、それぞれ１以上のヘルペスウイルス抗原に向けられた複数のベクターを含むことができる。ワクチンは、１以上のコンセンサスヘルペスウイルス抗原をコードする１以上の核酸配列を含むことができる。ワクチンが１を超えるコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を含む場合、そのような配列はすべて単一の核酸分子に存在してもよいし、又はそのような配列はそれぞれ異なる核酸分子に存在してもよい。或いは、１を超えるコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を含むワクチンは、単一のコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を伴った核酸分子及び１を超えるコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を伴った核酸分子を含み得る。加えて、１以上のコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を含むワクチンはさらに、１以上のヘルペスウイルス抗原のコーディング配列を含み得る。

【0100】

ワクチンは、本明細書で言及される免疫原性タンパク質のコンセンサス型の１以上を含み得る及び／又はワクチンは、この群から選択される免疫原性タンパク質のコンセンサス型の１以上をコードする１以上の核酸配列を含み得る。ワクチンは、野生型配列を含む本明細書で開示されるコンセンサス配列以外の配列を持つ他の免疫原性ヘルペスウイルスタンパク質との組み合わせにて本明細書で言及される免疫原性タンパク質のコンセンサス型の１以上を含み得る及び／又はワクチンは、野生型配列を含む本明細書で開示されるコンセンサス配列以外の配列を持つ他の免疫原性ヘルペスウイルスタンパク質をコードする核酸分子との組み合わせにて、この群から選択される免疫原性タンパク質のコンセンサス型の１以上をコードする１以上の核酸配列を含み得る。

【0101】

科学的な理論によって束縛されることはないが、ヘルペスウイルスに対して広く免疫応答（液性、細胞性、又は双方）を引き出すのに使用することができるワクチンは、ａ）ＨＣＭＶについて：コンセンサスｇＢ、コンセンサスｇＭ、コンセンサスｇＮ４−ｃ、コンセンサスｇＨ、コンセンサスｇＬ、コンセンサスｇＯ−５、コンセンサスＵＬ１２８、コンセンサスＵＬ１３０、コンセンサスＵＬ１３１ａ、コンセンサスＵＬ８３；ｂ）ＨＳＶ１について：コンセンサスｇＢ、コンセンサスｇＨ、コンセンサスｇＬ、コンセンサスｇＣ、及びコンセンサスｇＤ；ｃ）ＨＳＶ２について：コンセンサスｇＢ、コンセンサスｇＨ、コンセンサスｇＬ、コンセンサスｇＣ、及びコンセンサスｇＤ；ｄ）ＣｅＨＶ１について：コンセンサスｇＢ、コンセンサスｇＨ、コンセンサスｇＬ、コンセンサスｇＣ、及びコンセンサスｇＤ；並びにｅ）ＶＺＶについて：コンセンサスｇＢ、コンセンサスｇＨ、コンセンサスｇＬ、コンセンサスｇＣ、及びコンセンサスｇＫ、コンセンサスｇＭ、コンセンサスｇＮ、コンセンサスｇＥ、及びコンセンサスｇＩ、上記コンセンサスヘルペス抗原に対して相補性のタンパク質、上記コンセンサスヘルペス抗原のいずれかの断片、上記コンセンサスヘルペス抗原のいずれかに対して相補性のタンパク質の断片から成る群から選択される１以上のヘルペスウイルス抗原をコードする以下の核酸配列の１以上を含み得る。加えて、上記核酸配列のいずれかを含むワクチンは、ａ）ＨＣＭＶについて：ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、及びＵＬ８３；ｂ）ＨＳＶ１について：ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ、及びｇＤ；ｃ）ＨＳＶ２について：ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ、及びｇＤ、ｄ）ＣｅＨＶ１について：ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ、及びｇＤ；並びにｅ）ＶＺＶについて：ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ、ｇＫ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＥ、及びｇＩから成る群から選択される１以上のタンパク質をコードする１以上の核酸配列をさらに含み得る。或いは、ワクチンは、上記で言及された任意のコーディング配列の代わりに又はそれに加えて、１以上のタンパク質分子を含み得る。

【0102】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＢ（配列番号２及び／又は配列番号２２及び／又は配列番号４２）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＢ（配列番号２及び／又は配列番号２２及び／又は配列番号４２）のコーディング配列に加えてｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＢ（配列番号２及び／又は配列番号２２及び／又は配列番号４２）のコーディング配列に加えて（配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， （配列番号：５８）， （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0103】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＢをコードする特異的なコーディング配列、配列番号１及び／又は配列番号２１及び／又は配列番号４１を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＢコーディング配列、配列番号１及び／又は配列番号２１及び／又は配列番号４１に加えてｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ｇＢコーディング配列（配列番号１及び／又は配列番号２１及び／又は配列番号４１）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列 （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９） （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0104】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＭ（配列番号４及び／又は配列番号２４及び／又は配列番号４４）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＭ（配列番号４及び／又は配列番号２４及び／又は配列番号４４）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＭ（配列番号４及び／又は配列番号２４及び／又は配列番号４４）のコーディング配列に加えて （配列番号：２）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０）， （配列番号：４２）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， （配列番号：５８）， 及び （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0105】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＭをコードする特異的なコーディング配列、配列番号３及び／又は配列番号２３及び／又は配列番号４３を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＭコーディング配列、配列番号３及び／又は配列番号２３及び／又は配列番号４３に加えてｇＢ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ｇＭコーディング配列（配列番号３及び／又は配列番号２３及び／又は配列番号４３）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９）． 配列番号：４１）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0106】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＮ（配列番号６及び／又は配列番号２６及び／又は配列番号４６）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＮ（配列番号６及び／又は配列番号２６及び／又は配列番号４６）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＮ（配列番号６及び／又は配列番号２６及び／又は配列番号４６）のコーディング配列に加えて（配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０）． 配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， （配列番号：５８）， 及び （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0107】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＮをコードする特異的なコーディング配列、配列番号５及び／又は配列番号２５及び／又は配列番号４５を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＮコーディング配列、配列番号５及び／又は配列番号２５及び／又は配列番号４５に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ｇＮコーディング配列（配列番号５及び／又は配列番号２５及び／又は配列番号４５）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９）． 配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0108】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＨ（配列番号８及び／又は配列番号２８及び／又は配列番号４８）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＨ（配列番号８及び／又は配列番号２８及び／又は配列番号４８）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＨ（配列番号８及び／又は配列番号２８及び／又は配列番号４８）のコーディング配列に加えて（配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０）， （配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， （配列番号：５８）， （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0109】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＨをコードする特異的なコーディング配列、配列番号７及び／又は配列番号２７及び／又は配列番号４７を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＨコーディング配列、配列番号７及び／又は配列番号２７及び／又は配列番号４７に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ｇＨコーディング配列（配列番号７及び／又は配列番号２７及び／又は配列番号４７）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９），（配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0110】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＬ（配列番号１０及び／又は配列番号３０及び／又は配列番号５０）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＬ（配列番号１０及び／又は配列番号３０及び／又は配列番号５０）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＬ（配列番号１０及び／又は配列番号３０及び／又は配列番号５０）のコーディング配列に加えて （配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０）， （配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， （配列番号：５８）， （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0111】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＬをコードする特異的なコーディング配列、配列番号９及び／又は配列番号２９及び／又は配列番号４９を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＬコーディング配列、配列番号９及び／又は配列番号２９及び／又は配列番号４９に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ｇＬコーディング配列（配列番号９及び／又は配列番号２９及び／又は配列番号４９）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９）， （配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0112】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＯ（配列番号１２及び／又は配列番号３２及び／又は配列番号５２）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＯ（配列番号１２及び／又は配列番号３２及び／又は配列番号５２）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＯ（配列番号１２及び／又は配列番号３２及び／又は配列番号５２）のコーディング配列に加えて（配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０） （配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， （配列番号：５８）， （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0113】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＯをコードする特異的なコーディング配列、配列番号１１及び／又は配列番号３１及び／又は配列番号５１を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ｇＯコーディング配列、配列番号１１及び／又は配列番号３１及び／又は配列番号５１に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ｇＯコーディング配列（配列番号１１及び／又は配列番号３１及び／又は配列番号５１）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９）， （配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0114】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１２８（配列番号１４及び／又は配列番号３４及び／又は配列番号５４）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１２８（配列番号１４及び／又は配列番号３４及び／又は配列番号５４）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１２８（配列番号１４及び／又は配列番号３４及び／又は配列番号５４）のコーディング配列に加えて（配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０）， （配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５６）， （配列番号：５８）， （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0115】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１２８をコードする特異的なコーディング配列、配列番号１３及び／又は配列番号３３及び／又は配列番号５３を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１２８コーディング配列、配列番号１３及び／又は配列番号３３及び／又は配列番号５３に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＵＬ１２８コーディング配列（配列番号１３及び／又は配列番号３３及び／又は配列番号５３）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９）， （配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５５）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0116】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３０（配列番号１６及び／又は配列番号３６及び／又は配列番号５６）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３０（配列番号１６及び／又は配列番号３６及び／又は配列番号５６）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３０（配列番号１６及び／又は配列番号３６及び／又は配列番号５６）のコーディング配列に加えて（配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１８）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３８）， （配列番号：４０）， （配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５８）， （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0117】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３０をコードする特異的なコーディング配列、配列番号１５及び／又は配列番号３５及び／又は配列番号５５を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３０コーディング配列、配列番号１５及び／又は配列番号３５及び／又は配列番号５５に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３１ａ及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＵＬ１３０コーディング配列（配列番号１５及び／又は配列番号３５及び／又は配列番号５５）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１７）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３７）， （配列番号：３９）， （配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５７）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0118】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３１ａ（配列番号１８及び／又は配列番号３８及び／又は配列番号５８）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３１ａ（配列番号１８及び／又は配列番号３８及び／又は配列番号５８）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３１ａ（配列番号１８及び／又は配列番号３８及び／又は配列番号５８）のコーディング配列に加えて（配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：２０）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， 及び （配列番号：４０）， （配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， 及び （配列番号：６０）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0119】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３１ａをコードする特異的なコーディング配列、配列番号１７及び／又は配列番号３７及び／又は配列番号５７を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ１３１ａコーディング配列、配列番号１７及び／又は配列番号３７及び／又は配列番号５７に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ８３の１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＵＬ１３１ａコーディング配列（配列番号１７及び／又は配列番号３７及び／又は配列番号５７）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１９）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３９）， （配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， 及び （配列番号：５９）を含み得る。

【0120】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ８３（配列番号２０及び／又は配列番号４０及び／又は配列番号６）のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ８３（配列番号２０及び／又は配列番号４０及び／又は配列番号６０）のコーディング配列に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ１３１ａの１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ８３（配列番号２０及び／又は配列番号４０及び／又は配列番号６０）のコーディング配列に加えて（配列番号：２）， （配列番号：４）， （配列番号：６）， （配列番号：８）， （配列番号：１０）， （配列番号：１２）， （配列番号：１４）， （配列番号：１６）， （配列番号：１８）， （配列番号：２２）， （配列番号：２４）， （配列番号：２６）， （配列番号：２８）， （配列番号：３０）， （配列番号：３２）， （配列番号：３４）， （配列番号：３６）， （配列番号：３８）， （配列番号：４２）， （配列番号：４４）， （配列番号：４６）， （配列番号：４８）， （配列番号：５０）， （配列番号：５２）， （配列番号：５４）， （配列番号：５６）， 及び （配列番号：５８）の１以上のコーディング配列を含み得る。

【0121】

ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ８３をコードする特異的なコーディング配列、配列番号１９及び／又は配列番号３９及び／又は配列番号５９を含み得る。ワクチンは、コンセンサスタンパク質ＵＬ８３コーディング配列、配列番号１９及び／又は配列番号３９及び／又は配列番号５９に加えてｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ１３１ａの１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＵＬ８３コーディング配列（配列番号１９及び／又は配列番号３９及び／又は配列番号５９）に加えてコンセンサスタンパク質コーディング配列（配列番号：１）， （配列番号：３）， （配列番号：５）， （配列番号：７）， （配列番号：９）， （配列番号：１１）， （配列番号：１３）， （配列番号：１５）， （配列番号：１７）， （配列番号：２１）， （配列番号：２３）， （配列番号：２５）， （配列番号：２７）， （配列番号：２９）， （配列番号：３１）， （配列番号：３３）， （配列番号：３５）， （配列番号：３７）， （配列番号：４１）， （配列番号：４３）， （配列番号：４５）， （配列番号：４７）， （配列番号：４９）， （配列番号：５１）， （配列番号：５３）， （配列番号：５５）， 及び （配列番号：５７）を含み得る。

【0122】

ワクチンは、任意でＩｇＥリーダー配列及び／又はＨＡタグと共に、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ１−ｇＢ、ＨＳＶ１−ｇＨ、ＨＳＶ１−ｇＬ、ＨＳＶ−ｇＣ又はＨＳＶ１−ｇＤをコードする特定のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスＨＳＶ１タンパク質をコードする特定のコーディング配列のいずれか１つに加えて他のＨＳＶ１コンセンサスタンパク質のいずれか１以上のための１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＨＳＶ１コーディング配列（ＤＮＡ配列）に加えて他のＨＳＶ１コーディング配列の１以上のためのコンセンサスＨＳＶ１コーディング配列を含み得る。

【0123】

ワクチンは、任意でＩｇＥリーダー配列及び／又はＨＡタグと共に、コンセンサスタンパク質ＨＳＶ２−ｇＢ、ＨＳＶ２−ｇＨ、ＨＳＶ２−ｇＬ、ＨＳＶ２−ｇＣ又はＨＳＶ２−ｇＤをコードする特定のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスＨＳＶ２タンパク質をコードする特定のコーディング配列のいずれか１つに加えて他のＨＳＶ２コンセンサスタンパク質のいずれか１以上のための１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＨＳＶ２コーディング配列（ＤＮＡ配列）に加えて他のＨＳＶ２コーディング配列の１以上のためのコンセンサスＨＳＶ２コーディング配列を含み得る。

【0124】

ワクチンは、任意でＩｇＥリーダー配列及び／又はＨＡタグと共に、コンセンサスタンパク質ＣｅＨＶ１−ｇＢ、ＣｅＨＶ１−ｇＨ、ＣｅＨＶ１−ｇＬ、ＣｅＨＶ１−ｇＣ又はＣｅＨＶ１−ｇＤをコードする特定のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスＣｅＨＶ１タンパク質をコードする特定のコーディング配列のいずれか１つに加えて他のＣｅＨＶ１コンセンサスタンパク質のいずれか１以上のための１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＣｅＨＶ１コーディング配列（ＤＮＡ配列）に加えて他のＣｅＨＶ１コーディング配列の１以上のためのコンセンサスＣｅＨＶ１コーディング配列を含み得る。

【0125】

ワクチンは、任意でＩｇＥリーダー配列及び／又はＨＡタグと共に、コンセンサスタンパク質ＶＺＶ−ｇＢ、ＶＺＶ−ｇＨ、ＶＺＶ−ｇＬ、ＶＺＶ−ｇＣ、ＶＺＶ−ｇＫ、ＶＺＶ−ｇＭ、ＶＺＶ−ｇＮ、ＶＺＶ−ｇＥ、又はＶＺＶ−ｇＩをコードする特定のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、コンセンサスＶＺＶタンパク質をコードする特定のコーディング配列のいずれか１つに加えて他のＶＺＶコンセンサスタンパク質のいずれか１以上のための１以上のコーディング配列を含み得る。ワクチンは、ＶＺＶコーディング配列（ＤＮＡ配列）に加えて他のＶＺＶコーディング配列の１以上のためのコンセンサスＶＺＶコーディング配列を含み得る。

【0126】

一部の代わりの実施形態には、１以上のヘルペスウイルス抗原の免疫原性断片、ヘルペスウイルス抗原に対して相同性の１以上のタンパク質、及びヘルペスウイルス抗原に対して相同性の１以上のタンパク質の免疫原性断片をコードする核酸配列を含むものが含まれる。一部の代わりの実施形態には、１以上のヘルペスウイルス抗原タンパク質、１以上のヘルペスウイルス抗原タンパク質の免疫原性断片、ヘルペスウイルス抗原に対して相同性の１以上のタンパク質及びヘルペスウイルス抗原に対して相同性の１以上のタンパク質の免疫原性断片を含むものが含まれる。

【0127】

一部の実施形態は、本明細書で記載される１以上のコーディング配列又は組み合わせをまとめて含む１以上の組成物を個体に投与することを含む、ヘルペスウイルスタンパク質に対する免疫応答を生成する方法を提供する。一部の実施形態は、本明細書で記載される１以上のコーディング配列又は組み合わせをまとめて含む１以上の組成物を投与することを含む、ヘルペスウイルス感染に対して個体に予防的にワクチン接種する方法を提供する。一部の実施形態は、本明細書で記載される１以上のコーディング配列又は組み合わせをまとめて含む１以上の組成物を投与することを含む、ヘルペスウイルスに感染している個体に治療上、ワクチン接種する方法を提供する。

【0128】

ワクチンはＤＮＡワクチンであり得る。ＤＮＡワクチンは、コンセンサスヘルペスウイルス核酸配列の１以上を含む複数の同一の又は異なるプラスミドを含み得る。ＤＮＡワクチンは、１以上のコンセンサスヘルペスウイルス抗原をコードする１以上の核酸配列を含み得る。ＤＮＡワクチンが１を超えるコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を含む場合、そのような配列すべてが単一プラスミドに存在してもよく、又はそのような配列のそれぞれが異なるプラスミドに存在してもよく、又は一部のプラスミドが単一のコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を含んでもよい一方で、他のプラスミドは１を超えるコンセンサスヘルペスウイルス核酸配列を有する。加えて、ＤＮＡワクチンはさらに、１以上のヘルペスウイルス抗原についての１以上のコンセンサスコーディング配列を含み得る。そのような追加のコーディング配列は、同一のプラスミドにあってもよく、又は互いに及びコンセンサスの１以上を含むプラスミドとは異なるプラスミドにあってもよい。

【0129】

ＤＮＡワクチンは、参照によって完全に本明細書に組み入れられる米国特許第５，５９３，９７２号、同第５，７３９，１１８号、同第５，８１７，６３７号、同第５，８３０，８７６号、同第５，９６２，４２８号、同第５，９８１，５０５号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，０５５号、及び同第５，６７６，５９４号にて開示されている。ＤＮＡワクチンはさらに、それを染色体に統合するのを阻害する要素又は試薬を含むことができる。ワクチンはヘルペスウイルス抗原のＲＮＡであることができる。ＲＮＡワクチンを細胞に導入することができる。

【0130】

ワクチンは、上述の遺伝子構築物又は抗原を含む組換えワクチンであり得る。ワクチンはまた、１以上のタンパク質サブユニットの形態での１以上のコンセンサスヘルペスウイルス抗原、１以上のコンセンサスヘルペスウイルス抗原を含む１以上の殺傷したウイルス粒子、又は１以上のコンセンサスヘルペスウイルス抗原を含む１以上の弱毒化したウイルス粒子を含むこともできる。弱毒化ワクチンは、弱毒化生ワクチン、死菌ワクチン、及び１以上のコンセンサスヘルペスウイルス抗原をコードする外来遺伝子を送達するための組換えベクターを使用するワクチン、並びにサブユニットワクチン及び糖タンパク質ワクチンであり得る。弱毒化生ワクチン、外来抗原を送達するための組換えベクターを使用するもの、サブユニットワクチン及び糖タンパク質ワクチンの例は、米国特許第４，５１０，２４５； ４，７９７，３６８； ４，７２２，８４８； ４，７９０，９８７； ４，９２０，２０９； ５，０１７，４８７； ５，０７７，０４４； ５，１１０，５８７； ５，１１２，７４９； ５，１７４，９９３； ５，２２３，４２４； ５，２２５，３３６； ５，２４０，７０３； ５，２４２，８２９； ５，２９４，４４１； ５，２９４，５４８； ５，３１０，６６８； ５，３８７，７４４； ５，３８９，３６８； ５，４２４，０６５； ５，４５１，４９９； ５，４５３，３ ６４； ５，４６２，７３４； ５，４７０，７３４； ５，４７４，９３５； ５，４８２，７１３； ５，５９１，４３９； ５，６４３，５７９； ５，６５０，３０９； ５，６９８，２０２； ５，９５５，０８８； ６，０３４，２９８； ６，０４２，８３６； ６，１５６，３１９ 及び ６，５８９，５２９号に記載されており、それらはそれぞれ参照によって本明細書に組み入れられる。

【0131】

ワクチンは、世界の特定の地域に由来するヘルペスウイルスの血清型に向けられたベクター及び／又はタンパク質を含むことができる。ワクチンはまた、世界の複数の地域由来するヘルペスウイルスの血清型に向けることができる。

【0132】

提供されるワクチンを用いて、治療上又は予防上の免疫応答を含む免疫応答を誘導することができる。コンセンサスヘルペスウイルス抗原に向けられ、ヘルペスウイルスの複数の血清型にわたって広く向けられる抗体及び／又はキラーＴ細胞が生成され得る。そのような抗体及び細胞が単離され得る。

【0133】

ワクチンはさらに、薬学上許容可能な賦形剤を含むことができる。薬学上許容可能な賦形剤は、ビヒクル、アジュバント、キャリア又は希釈剤として機能的な分子であり得る。薬学上許容可能な賦形剤は、たとえば、免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭＳ）、フロイント不完全アジュバント、モノホスホリル脂質Ａを含むＬＰＳ類似体、ムラミルペプチド、キノン類似体、スクアレンやスクアレンのような小胞、ヒアルロン酸、脂質、リポソーム、カルシウムイオン、ウイルス性タンパク質、ポリアニオン、ポリカチオン、又はナノ粒子のような表面活性剤を含む形質移入促進剤、又は他の既知の形質移入促進剤であることができる。

【0134】

形質移入促進剤は、ポリアニオン、ポリ−Ｌ−グルタミン酸塩（ＬＧＳ）を含むポリカチオン、又は脂質である。形質移入促進剤は、ポリ−Ｌ−グルタミン酸塩であり、さらに好ましくはポリ−Ｌ−グルタミン酸塩は６ｍｇ／ｍｌ未満の濃度でワクチンに存在する。形質移入促進剤はまた、免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭＳ）、フロイント不完全アジュバント、モノホスホリル脂質Ａを含むＬＰＳ類似体、ムラミルペプチド、キノン類似体、及びスクアレンやスクアレンのような小胞のような表面活性剤を含むこともでき、ヒアルロン酸は遺伝子構築物と併せて投与するのに使用することができる。一部の実施形態では、ＤＮＡベクターワクチンはまた、脂質、レシチンリポソーム又はＤＮＡ／リポソーム混合物として当該技術で既知の他のリポソーム（たとえば、Ｗ０９３２４６４０を参照）を含むリポソーム、カルシウムイオン、ウイルス性タンパク質、ポリアニオン、ポリカチオン、又はナノ粒子のような形質移入促進剤又は他の既知の形質移入促進剤を含むこともできる。好ましくは、形質移入促進剤は、ポリアニオン、ポリ−Ｌ−グルタミン酸塩（ＬＧＳ）を含むポリカチオン、又は脂質である。ワクチンにおける形質移入剤の濃度は４ｍｇ／ｍｌ未満、２ｍｇ／ｍｌ未満、１ｍｇ／ｍｌ未満、０．７５０ｍｇ／ｍｌ未満、０．５００ｍｇ／ｍｌ未満、０．２５０ｍｇ／ｍｌ未満、０．１００ｍｇ／ｍｌ未満、０．０５０ｍｇ／ｍｌ未満、又は０．０１０ｍｇ／ｍｌ未満である。

【0135】

薬学上許容可能な賦形剤はアジュバントであり得る。アジュバントは、代替プラスミドで発現される他の遺伝子であってもよいし、又はワクチンにて上記プラスミドと組み合わせたタンパク質として送達される。アジュバントは、シグナル配列を欠失し、任意でＩｇＥからのシグナルペプチドを含むＩＬ−１５を含むα−インターフェロン（ＩＦＮ−α）、β−インターフェロン（ＩＦＮ−β）、γ−インターフェロン、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、ＴＮＦα、ＴＮＦβ、ＧＭ−ＣＳＦ、表皮増殖因子（ＥＧＦ）、皮膚Ｔ細胞誘引ケモカイン（ＣＴＡＣＫ）、表皮胸腺発現ケモカイン（ＴＥＣＫ）、粘膜関連上皮ケモカイン（ＭＥＣ）、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＭＨＣ、ＣＤ８０、ＣＤ８６から成る群から選択され得る。アジュバントは、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２８、ＣＴＡＣＫ、ＴＥＣＫ、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、ＴＮＦα、ＴＮＦβ、ＧＭ−ＣＳＦ、表皮増殖因子（ＥＧＦ）、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、又はそれらの組み合わせであり得る。

【0136】

有用なアジュバントであり得る他の遺伝子には、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−ｌａ、ＭＩＰ−１ｐ、ＩＬ−８、ＲＡＮＴＥＳ、Ｌ−セレクチン、Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチン ＣＤ３４、ＧｌｙＣＡＭ−１、ＭａｄＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１、ＶＬＡ−１、Ｍａｃ−１、ｐｌ５０．９５、ＰＥＣＡＭ、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、ＩＣＡＭ−３、ＣＤ２、ＬＦＡ−３、Ｍ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−４、ＩＬ−１８の変異形態、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、血管増殖因子、線維芽細胞増殖因子、ＩＬ−７、神経増殖因子、血管内皮増殖因子、Ｆａｓ、ＴＮＦ受容体、Ｆｌｔ、Ａｐｏ−１、ｐ５５、ＷＳＬ−１、ＤＲ３、ＴＲＡＭＰ、Ａｐｏ−３、ＡＩＲ、ＬＡＲＤ、ＮＧＲＦ、ＤＲ４、ＤＲ５、ＫＩＬＬＥＲ、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、ＴＲＩＣＫ２、ＤＲ６、カスパーゼＩＣＥ、Ｆｏｓ、ｃ−ｊｕｎ、Ｓｐ−１、Ａｐ−１、Ａｐ−２、ｐ３８、ｐ６５Ｒｅｌ、ＭｙＤ８８、ＩＲＡＫ、ＴＲＡＦ６、ＩｋＢ、不活性ＮＩＫ、ＳＡＰ Ｋ、ＳＡＰ−１、ＪＮＫ、インターフェロン応答遺伝子、ＮＦｋＢ、Ｂａｘ、ＴＲＡＩＬ、ＴＲＡＩＬｒｅｃ、ＴＲＡＩＬｒｅｃＤＲＣ５、ＴＲＡＩＬ−Ｒ３、ＴＲＡＩＬ−Ｒ４、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫリガンド、Ｏｘ４０、Ｏｘ４０リガンド、ＮＫＧ２Ｄ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＮＫＧ２Ａ、ＮＫＧ２Ｂ、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、ＮＫＧ２Ｆ、ＴＡＰ１、ＴＡＰ２及びその機能的断片をコードするものが挙げられる。

【0137】

ワクチンはさらに、１９９４年４月１日に出願され、参照によって完全に組み入れられる米国特許第５，７３９，１１８号に記載されたような遺伝子ワクチン促進剤を含むことができる。

【0138】

５．送達方法
本明細書で提供されるのは、ヘルペスウイルスのウイルス感染に対する免疫応答を誘導することができる特定の有効な免疫原にするエピトープを含むヘルペスウイルス抗原の遺伝子構築物及びタンパク質を提供するために、医薬製剤、好ましくはワクチンを送達する方法である。ワクチンを送達する又はワクチン接種する方法を提供して治療上及び／又は予防上の免疫応答を誘導することができる。ワクチン接種の過程は、哺乳類にて複数のヘルペスウイルス血清型に対して免疫応答を生成することができる。ワクチンを個体に送達して哺乳類の免疫系の活性を調節し、免疫応答を高めることができる。ワクチンの送達は、細胞にて発現され、免疫系が認識され、細胞性、液性又は細胞性液性の応答を誘導する細胞の表面に送達される核酸分子としてのＨＡ抗原の形質移入であり得る。本明細書で議論するような関連するヘルペスウイルスファミリーのワクチンを哺乳類に投与することによって、ワクチンの送達を用いて哺乳類において複数のヘルペスウイルスに対する、ヘルペスファミリー特異的な免疫応答を誘導する又は誘発することができる。

【0139】

哺乳類へのワクチンの送達の際、及び哺乳類の細胞へのベクターの送達の際、形質移入された細胞は相当する１以上のヘルペスウイルス抗原を発現する又は分泌する。これらの分泌されたタンパク質又は合成抗原は、免疫系によって異物として認識され、抗原に対して作られる抗体及び抗原に対して特異的なＴ細胞応答を含むことができる免疫応答を開始する。一部の例では、本明細書で議論されたワクチンでワクチン接種された哺乳類は、感作された免疫系を有し、関連するヘルペスウイルス株に暴露すると、感作された免疫系によって、液性、細胞性、又は双方を介してその後のヘルペスウイルスの迅速な一掃が可能になる。ワクチンを個体に送達し、個体の免疫系の活性を調節し、それによって免疫応答を高めることができる。

【0140】

ワクチンをＤＮＡワクチンの形態で送達することができ、ＤＮＡワクチンを送達する方法は米国特許第４，９４５，０５０号及び同第５，０３６，００６号に記載されており、双方とも参照によって完全に組み入れられる。

【0141】

ワクチンを哺乳類に投与して哺乳類にて免疫応答を引き出すことができる。哺乳類は、ヒト、非ヒト霊長類、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、レイヨウ、バイソン、スイギュウ、ウシ、シカ、ハリネズミ、ゾウ、ラマ、アルパカ、マウス、ラット、又はニワトリであることができ、好ましくは、ヒト、ウシ、ブタ又はニワトリであることができる。

【0142】

ａ．併用治療
医薬組成物、好ましくは、ワクチンは、１以上のヘルペスウイルス抗原との併用で投与することができる。ワクチンは、α−インターフェロン（ＩＦＮ−α）、β−インターフェロン（ＩＦＮ−β）、γ−インターフェロン、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２８、ＣＴＡＣＫ、ＴＥＣＫ、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、ＴＮＦα、ＴＮＦβ、ＧＭ−ＣＳＦ、表皮増殖因子（ＥＧＦ）、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−ｌａ、ＭＩＰ−１ｐ、ＩＬ−８、ＲＡＮＴＥＳ、Ｌ−セレクチン、Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチン、ＣＤ３４、ＧｌｙＣＡＭ−１、ＭａｄＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１、ＶＬＡ−１、Ｍａｃ−１、ｐｌ５０．９５、ＰＥＣＡＭ、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、ＩＣＡＭ−３、ＣＤ２、ＬＦＡ−３、Ｍ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−４、ＩＬ−１８の変異形態、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、血管増殖因子、線維芽細胞増殖因子、ＩＬ−７、神経増殖因子、血管内皮増殖因子、Ｆａｓ、ＴＮＦ受容体、Ｆｌｔ、Ａｐｏ−１、ｐ５５、ＷＳＬ−１、ＤＲ３、ＴＲＡＭＰ、Ａｐｏ−３、ＡＩＲ、ＬＡＲＤ、ＮＧＲＦ、ＤＲ４、ＤＲ５、ＫＩＬＬＥＲ、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、ＴＲＩＣＫ２、ＤＲ６、カスパーゼＩＣＥ、Ｆｏｓ、ｃ−ｊｕｎ、Ｓｐ−１、Ａｐ−１、Ａｐ−２、ｐ３８、ｐ６５Ｒｅｌ、ＭｙＤ８８、ＩＲＡＫ、ＴＲＡＦ６、ＩｋＢ、不活性ＮＩＫ、ＳＡＰＫ、ＳＡＰ−１、ＪＮＫ、インターフェロン応答遺伝子、ＮＦｋＢ、Ｂａｘ、ＴＲＡＩＬ、ＴＲＡＩＬｒｅｃ、ＴＲＡＩＬｒｅｃＤＲＣ５、ＴＲＡＩＬ−Ｒ３、ＴＲＡＩＬ−Ｒ４、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫリガンド、Ｏｘ４０、Ｏｘ４０リガンド、ＮＫＧ２Ｄ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＮＫＧ２Ａ、ＮＫＧ２Ｂ、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｅ、ＮＫＧ２Ｆ、ＴＡＰ１、又はＴＡＰ２、又はそれらの機能的断片を含むことができるタンパク質、又はアジュバントをコードする遺伝子との併用で投与することができる。

【0143】

ｂ．投与経路
ワクチンは、経口、非経口、舌下、経皮、直腸内、経粘膜、局所、吸入、頬内投与、胸膜内、静脈内、動脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、鼻内、クモ膜下、及び関節内、又はそれらの組み合わせを含む様々な経路によって投与することができる。獣医用途では、組成物は通常の獣医学診療に従って好適に許容できる製剤として投与することができる。獣医師は特定の動物に最も適する投与計画及び投与経路を容易に決定することができる。従来のシリンジ、針なし注射装置、「微粒子銃遺伝子銃」又は電気穿孔（「ＥＰ」）、「流体力学法」、若しくは超音波のような他の物理的方法によってワクチンを投与することができる。

【0144】

生体内電気穿孔の有無でのＤＮＡ注射（ＤＮＡワクチン接種とも呼ぶ）、リポソーム介在性、ナノ粒子促進性、たとえば、組換えアデノウイルス、組換えアデノウイルス関連ウイルス及び組換えワクシニアのような組換えウイルスを含む幾つかの周知の技術によってアクチンのベクターを哺乳類に送達することができる。ＤＮＡ注射を介して及び生体内電気穿孔と共にヘルペスウイルス抗原を送達することができる。

【0145】

ｃ．電気穿孔
ワクチンのプラスミドの電気穿孔を介したワクチンの投与は、細胞膜に可逆性の孔を形成させるのに有効なエネルギーのパルスを哺乳類の所望の組織に送達するように構成することができる電気穿孔装置を用いて達成されてもよく、好ましくは、エネルギーのパルスはユーザーが事前に設定した電流出力に類似する定電流である。電気穿孔装置は、電気穿孔成分及び電極部品又は取っ手部品を含み得る。電気穿孔成分は、コントローラ、電流波形発生器、インピーダンス試験器、波形ロガー、出力要素、状況報告要素、伝達ポート、記憶成分、電源、及び電源スイッチを含む電気穿孔装置の種々の要素の１以上を含み、取り込み得る。生体内電気穿孔装置、たとえば、ＣＥＬＬＥＣＴＲＡ（登録商標）ＥＰシステム（ペンシルベニア州、ブルーベルのＩｎｏｖｉｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）又はＥｌｇｅｎ電気穿孔器（ペンシルベニア州、ブルーベルのＩｎｏｖｉｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ社）を用いて電気穿孔が達成され得る。

【0146】

電気穿孔成分は、電気穿孔装置の要素の１つとして機能してもよく、他の要素は電気穿孔成分との連絡における別の要素（又は成分）である。電気穿孔成分は、電気穿孔装置の１を超える要素として機能してもよく、それは電気穿孔成分とは別の電気穿孔装置の他の要素と連通し得る。電気機械装置又は機械装置の一部として存在する電気穿孔装置の要素は、要素が装置の１つとして又は互いに連通する別々の要素として機能することができるので、限定され得ない。電気穿孔成分は、所望の組織で定電流を生じるエネルギーのパルスを送達することが可能であってもよく、フィードバック機構を含む。電極部品は、空間配置で複数の電極を有する電極の列を含み得るが、その際、電極部品は電気穿孔成分からエネルギーのパルスを受け取り、電極を介してそれを所望の組織に送達する。複数の電極のうち少なくとも１つはエネルギーのパルスの送達の間中性であり、所望の組織でインピーダンスを測定し、電気穿孔成分にインピーダンスを伝達する。フィードバック機構は測定されたインピーダンスを受け取り、電気穿孔成分によって送達されたエネルギーのパルスを調整して定電流を維持する。

【0147】

複数の電極はエネルギーのパルスを分散パターンで送達し得る。複数の電極は、プログラムされた順序のもとで電極の制御を介してエネルギーのパルスを分散パターンで送達し得るが、プログラムされた順序はユーザーが電気穿孔成分に入力する。プログラムされた順序は送達される複数のパルスを順に含み得るが、複数のパルスの各パルスは、一方がインピーダンスを測定する中性の電極である少なくとも２つの活性電極によって送達され、複数のパルスのそれに続くパルスは一方がインピーダンスを測定する中性の電極である少なくとも２つの活性電極の異なる方によって送達される。

【0148】

フィードバック機構はハードウエア又はソフトウエアのいずれかによって実施され得る。フィードバック機構は、アナログ閉鎖ループ回路によって実施され得る。フィードバックは、５０μｓ、２０μｓ、１０μｓ又は１μｓごとに起きるが、好ましくはリアルタイムフィードバック又は瞬時（すなわち、応答時間を判定するのに利用可能な技法によって判定されるような実質的な瞬時）である。中性の電極は所望の組織でインピーダンスを測定し、フィードバック機構にインピーダンスを伝達し、フィードバック機構はインピーダンスに応答し、エネルギーのパルスを調整して事前に設定した電流に類似する値で定電流を維持する。フィードバック機構は、エネルギーのパルスを送達する間、連続的に及び瞬時に定電流を維持し得る。

【0149】

本発明のＤＮＡワクチンの送達を促進し得る電気穿孔装置及び電気穿孔法の例には、Ｄｒａｇｈｉａ−Ａｋｌｉらによる米国特許第７，２４５，９６３号、Ｓｍｉｔｈらによって出願された米国特許公開番号２００５／００５２６３０に記載されたものが挙げられるが、その内容は、その全体が参照によって本明細書に組み入れられる。ＤＮＡワクチンの送達を促進するのに使用され得る他の電気穿孔装置及び電気穿孔法には、２００７年１０月１７日に出願された同時係属で共同所有の米国特許出願、出願番号１１／８７４０７２で提供されたものが挙げられ、それは、３５ＵＳＣ１１９（ｅ）のもとで、２００６年１０月１７日に出願された米国仮特許出願、出願番号６０／８５２，１４９及び２００７年１０月１０日に出願された同６０／９７８，９８２に対して利益を主張しているが、それらすべてはその全体が参照によって本明細書に組み入れられる。

【0150】

Ｄｒａｇｈｉａ−Ａｋｌｉらによる米国特許第７，２４５，９６３号は、生体又は植物における選択された組織の細胞に生体分子を導入するのを促進するモジュール式の電極方式及びその使用を記載している。モジュール式の電極方式は、複数の針状電極；皮下注射針；プログラム可能な定電流パルスコントローラから複数針状電極への導電性連結を提供する電気コネクタ；及び電源を含み得る。操作者は、支持構造に搭載され、生体又は植物における選択された組織にそれをしっかり挿入する複数の針状電極を掴むことができる。次いで皮下注射針を介して選択された組織に生体分子が送達される。プログラム可能な定電流パルスコントローラが活性化され、定電流の電気パルスが複数の針状電極に適用される。適用された定電流の電気パルスは複数の針状電極間で細胞への生体分子の導入を促進する。米国特許第７，２４５，９６３号の内容全体が参照によって本明細書に組み入れられる。

【0151】

Ｓｍｉｔｈらによって出願された米国特許公開番号２００５／００５２６３０は、生体又は植物における選択された組織の細胞に生体分子を導入するのを効果的に促進するのに使用され得る電気穿孔装置を記載している。電気穿孔装置は、その操作がソフトウエア又はファームウエアによって特定される動電装置（「ＥＫＤ装置」）を含む。ＥＫＤ装置は、ユーザーの制御及びパルスパラメータの入力に基づく配列における電極間でのプログラム可能な定電流パルスパターンを生じ、電流波形データの保存及び取得を可能にする。電気穿孔装置はまた、針状電極の配列を有する置き換え可能な電極ディスク、注射針用の中央注射流路、及び取り外し可能な案内ディスクも含む。米国特許公開番号２００５／００５２６３０の内容全体は参照によって本明細書に組み入れられる。

【0152】

米国特許第７，２４５，９６３号及び米国特許公開番号２００５／００５２６３０に記載された電極配列及び方法は、筋肉のような組織だけでなく、他の組織又は臓器への深い浸透に適合し得る。電極配列の構成のために、注射針（選択した生体分子を送達するための）も標的臓器に完全に挿入され、注射は、電極によって事前に描かれる領域にて標的組織に垂直に投与される。米国特許第７，２４５，９６３号及び米国特許公開番号２００５／００５２６３に記載された電極は好ましくは長さ２０ｍｍで２１ゲージである。

【0153】

さらに、電気穿孔装置及びその使用を組み入れる一部の実施形態で熟考されて、以下の特許：１９９３年１２月２８日に出願された米国特許第５，２７３，５２５号、２０００年８月２９に出願された同第６，１１０，１６１号、２００１年７月１７日に出願された同第６，２６１，２８１号及び２００５年１０月２５日に出願された同第６，９５８，０６０号及び２００５年９月６日に出願された同第６，９３９，８６２号に記載されたものであるような電気穿孔装置がある。さらに、種々の装置のいずれかを用いたＤＮＡの送達に関する２００４年２月２４日に出願された米国特許第６，６９７，６６９号に提供された主題を網羅する特許、及びＤＮＡを注射する方法に引かれる２００８年２月５日に出願された米国特許第７，３２８，０６４号が本明細書で熟考される。上記の特許はその全体が参照によって組み入れられる。

【0154】

ｄ．ワクチンの調製方法
本明細書で提供されるのは、本明細書で議論されるＤＮＡワクチンを含むＤＮＡプラスミドを調製する方法である。哺乳類の発現プラスミドへの最終サブクローニング工程の後、当該技術で既知の方法を用いて大規模な発酵タンクにて細胞培養物に接種するのにＤＮＡプラスミドを使用することができる。

【0155】

既知の装置と技法の組み合わせを用いて、本発明のＥＰ装置と共に使用するためのＤＮＡプラスミドを製剤化する又は製造することができるが、好ましくは、それらは、２００７年５月２３日に出願され、認可を受けた同時係属米国仮特許出願、出願番号６０／９３９，７９２に記載されている最適化されたプラスミド製造法を用いて製造される。一部の例では、これらの試験で使用されるＤＮＡプラスミドは１０ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で製剤化することができる。製造法はまた、２００７年７月３日に出願された認可された特許、米国特許第７，２３８，５２２号で記載されたものを含む米国特許出願、出願番号６０／９３９７９２に記載されたものに加えて当業者に一般に知られる種々の装置及びプロトコールを含む又は組み入れる。上記で参照した出願及び特許、米国特許出願、出願番号６０／９３９７９２及び米国特許第７，２３８，５２２号はそれぞれ、その全体が参照によって本明細書に組み入れられる。

【実施例】

【0156】

以下の実施例にて本発明をさらに説明する。これらの実施例は本発明の好まれる実施形態を示す一方で、説明のみを目的として付与されることが理解されるべきである。上記の議論及びこれらの実施例から、当業者は本発明の本質的な特徴を突き止めることができ、その精神及び範囲から逸脱することなく、本発明の種々の変更及び改変を行って種々の用途及び条件にそれを適合させることができる。従って、本明細書で示され、記載されるものに加えて本発明の種々の改変は前述の記載から当業者に明らかであろう。そのような改変はまた添付のクレームの範囲内に入ることも意図される。

【0157】

実施例１：ヘルペス抗原及び発現構築物を生成すること
ヘルペスウイルスファミリーの糖タンパク質、シャペロンタンパク質及びマトリクスタンパク質に着目したＤＮＡワクチン戦略を採用した。各ウイルス抗原（Ａｇ）によって引き出される免疫の可能性のある幅を増やすために、先ず、系統樹上の多様性を調べて多型性を評価し、臨床的に意義のあるコンセンサスアミノ酸配列の作製に役立てた。

【0158】

遺伝的及び統計的な解析
ＭＥＧＡバージョン５（Ｔａｍｕｒａ， Ｐｅｔｅｒｓｏｎ， Ｓｔｅｃｈｅｒ， Ｎｅｉ， ａｎｄ Ｋｕｍａｒ ２０１１）を用いて系統樹進化及び分子進化の解析を行い、コンセンサスワクチンＡｇを生成するのに使用される臨床的に意義のある及び公的に利用可能であるヘルペス標的タンパク質配列の間で多様性を推定した。１，０００のブートストラップ複製と共にブートストラップ法を用いた近隣結合系統樹再構成解析を用いて放射線状でブートストラップコンセンサス樹を生成した。たとえば、Ｐ距離はＨＣＭＶのために示す（図１７）。

【0159】

あらゆる値は平均値±ＳＥＭとして報告する。群間の解析は１つの対照（ＨＣＭＶ感染した）との複数の比較を補正する事後Ｄｕｎｎｅｔｔ検定と共にＡＮＯＶＡによって完了した。統計的解析はすべて、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（カリフォルニア州、ラ・ホヤのＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社）又は社会科学用の統計パッケージ（イリノイ州、シカゴのＳＰＳＳ）を用いて行った。

【0160】

各ヘルペス免疫原のためのコンセンサスアミノ酸配列を生成する戦略を以下で概説する。一般に、ワクチンの免疫原には高度に保存されたヘルペスタンパク質を使用した一方で、特異的で臨床的に意義のある亜群は高度に多様なタンパク質に使用した。

【0161】

配列配置のためのベクターＮＴＩソフトウエア（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて公的に利用可能な株（ＧｅｎＢａｎｋ）及び臨床的に意義のある株（組織培養で６回以下の継代）を利用してヘルペスワクチンタンパク質のアミノ酸配列を生成した。一部のプラスミド（ＶＺＶ−ｇＨｇＬ、ＶＺＶ−ｇＥｇＩ、ＶＺＶ−ｇＭｇＮ、ＨＳＶ１−ｇＨｇＬ、ＨＳＶ１−ｇＣｇＤ、ＨＳＶ２−ｇＨｇＬ、ＨＳＶ２−ｇＣｇＤ、ＣｅＨＶ１−ｇＨｇＬ、ＣｅＨＶ１−ｇＣｇＤ、ｐＣＭＶ−ｇＨｇＬ、ｐＣＭＶ−ｇＭｇＮ、及びｐＣＭＶ−ＵＬ）は、構造的に関連する高分子の同時発現のために切断部位（フーリン部位、配列番号６３）によって分離される複数のヘルペスタンパク質を発現した。ＤＮＡワクチンの遺伝的最適化にはヒトにおけるタンパク質発現のためのコドン及びＲＮＡの最適化が含まれ、遺伝子はすべて合成し、改変されたｐＶＡＸ１哺乳類発現ベクター（ドイツ、レーゲンスブルグのＧｅｎｅＡｒｔ、ニュージャージー州、ピスカタウエイのＧｅｎＳｃｒｉｐｔ）にサブクローニングした。
ＨＣＭＶ特異的解析

【0162】

ＨＣＭＶ−ｇＢの系統樹解析によって４つの主な変異体（ｇＢ１〜ｇＢ４）と１つの非原型変異体（ｇＢ５）の存在が確認された（図１７ａ）ｇＢタンパク質は臨床的で継代の少ない株の間では相対的に保存されている（約８６％同一）ので、我々はこれらの配列のコンセンサスを選択し、我々のＤＮＡワクチンがコードしたＡｇを示した。ワクチンの配列は、臨床では高度に症候性の個体の大半を占めることが場合によっては見い出されているｇＢ１遺伝子型に系統樹上、最も近かった。

【0163】

次に、ＤＮＡワクチンとしての評価のための候補免疫原として、ＨＣＭＶ−ｇＣＩＩＩ融合複合体の成分、ｇＨ，ｇＬ及びｇＯを発現させた。ｇＨの系統樹解析によって、骨髄移植患者から単離された新しく報告されたＪＨＣを含む、考えられる第３の群に加えて２つの主な遺伝子型の存在が確認された［Ｊｕｎｇ， ｅｔ． Ａｌ．， Ｖｉｒｕｓ Ｒｅｓ． ２０１１ Ｊｕｎ；１５８（１−２）：２９８］（図１７ｂ）。解析によって、抗ｇＨ ＭＡｂが何故広く反応性に見えるのかを説明し得るｇＨの間（約７％）での低レベルのアミノ酸変異が確認された。この高レベルの保存のせいで、ｇＨ１とｇＨ２の間にあるＤＮＡワクチンのコンセンサス免疫原は、ＪＨＣ臨床単離物と共に推定上の第３のｇＨ群に最も近かった。ｇＬタンパク質の系統樹解析は、同様に高度に保存されている（約９１％）一方で、あまり明確には群分けされなかった（図１７ｃ）。何回も継代した株からのｇＬのアミノ酸配列の除去の際、得られたＤＮＡコンセンサス免疫原は、系統樹上でＪＨＣ及びＭｅｒｌｉｎ臨床単離物に最も近く、ＡＤ１６９及びＴｏｗｎｅ研究室適合の株からは最も遠かった。従来定義されたｇＣＩＩＩ複合体の第３の成分はｇＯであり、それは高度にグリコシル化され、５’末端で高度に変異している。ｇＯの多型性が高度（約５５％）だったので、我々は我々の標的免疫原にｇＯ５遺伝子型群のコンセンサス配列を選択したが、それは、この群がｇＮ−４ｃ遺伝子型、最大のｇＮ−４変異体群及びほとんどの血清有病率と遺伝的に連鎖していると以前記載されているからである（図１７ｆ）。ｇＯ５亜群の中での同一性は約９９％なので、コンセンサスＡｇは、Ｍｅｒｌｉｎ及びＪＰ臨床単離物も含むこの亜群と共に系統樹上で群分けした。

【0164】

新規の候補ワクチン免疫原ＨＣＭＶ−ｇＭ及びｇＮは双方ともジスルフィド共有結合及び非共有相互作用によってＥＲにてヘテロ二量体化し、ウイルス感染性複合体を形成する。ｇＭはＣＭＶの間で高度に保存されている（約９５％）一方で、ｇＮは変異に富む（約４５）。ｇＭ間の相対的に高い同一性のために、臨床的に意義のある配列すべてのコンセンサスによって我々の候補ワクチン免疫原が決定された（図１７ｄ）。逆に、ほとんど独占的なＯ結合糖を特徴とするｇＮの高度に改変された性質のために、ｇＮ−４サブタイプのコンセンサスをワクチン免疫原として使用したが、それは、この亜群が北米、欧州、中国及びオーストラリアにおける臨床単離物すべての最大の普及型であると報告されたからである（図１７ｅ）。従って、この配列は、系統樹上ではｇＮ４ｂサブタイプに最も近く、それはｇＮ４ａ群とｇＮ４ｃ群の間に直接存在し、そのすべてがｇＮ４群を構成する。

【0165】

最近、ｇＣＩＩＩ融合複合体のためのｇＨ／ｇＬ／ｇＯの従来定義された会合の代わりに、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ１３１ＡがｇＨ及びｇＬと共に五量体複合体を形成することができることが示されている。さらに、この複合体は強力なｍＡｂを導出することが記載されている。何回も継代し、研究室に適合した株の除去の際の相対的に高レベルのアミノ酸保存（ＵＬ１２８では約８７％、ＵＬ１３０では約８６％及びＵＬ１３１Ａでは約７３％）のために、候補ワクチン免疫原のための各遺伝子にコンセンサス配列を使用した（図１７ｇ〜ｉ）。ＵＬ１２８ワクチン配列は、Ａｄ１６９株と同様にＭｅｒｌｉｎ及びＤａｖｉｓの単離物を含む群に系統樹上では群分けされた。しかしながら、ＵＬ１３０及びＵＬ１３１Ａの配列は双方とも、系統樹上ではそれぞれ、Ｔｏｗｎｅ及びＡＤ１６９の研究室株からは離れていたが、それらは、これらの遺伝子の欠失又は変異のために内皮細胞、上皮細胞及び白血球に感染する能力を失っている。そして最後にＵＬ８３タンパク質（ｐｐ６５）はＴ細胞標的としての最近のワクチン戦略における現在の使用のために選択された。このタンパク質は、ウイルス特異的なＣＤ８Ｔ細胞の大半によって認識されるので、当初、ＨＣＭＶに対する細胞性免疫応答におけるその明らかな優位性に基づいて注目された。このタンパク質は、ＣＭＶの間では高度に保存されており、多数の公表された配列と関連した３’切り詰めを含めない場合、約９７％同一だった（図１７ｊ）。従って、ＵＬ８３タンパク質のコンセンサスを標的ワクチンＡｇに使用し、それは系統樹上では、ＪＰ、ＶＲ１８１４、Ｍｅｒｌｉｎ及びＡｄ１６９に類似したが、Ｔｏｗｎｅ、Ｔｏｌｅｄｏ及びＪＨＣの株からは離れていた。

【0166】

次に完全長の候補ＣＭＶ免疫原を用いてプラスミドＤＮＡワクチンを構築した。各Ａｇはヒトでの発現のために遺伝的に最適化し、商業的に合成し、次いで改変したｐＶＡＸ１哺乳類発現ベクターにサブクローニングした。加えて、機能的ビリオンの表面複合体の構築に非相同の相互作用を必要とするタンパク質を同一ＤＮＡワクチンプラスミドの中で組み合わせてコードした。複数のタンパク質を発現するプラスミド、ｇＨｇＬ、ｇＭｇＮ及びｐＵＬは免疫原の間で普遍的な内在性タンパク分解性フーリン切断部位をコードして翻訳後の切断及び修飾を円滑にした。このように、構造的に且つ機能的に関連するタンパク質の同時発現は、臨床的に且つウイルス学的に関連するＢ細胞エピトープ決定基をさらに上手く発現し得る高分子複合体の形成を仮定上促進する。このことは、生産的発現に同時発現が必要とされる場合、細胞内輸送及び末端糖質の修飾にｇＨがｇＬの同時発現を必要とする場合［Ｓｐａｅｔｅ， １９９３ ＃１１９５］、及び同様にｇＨの非存在下で発現するときｇＬがＥＲに局在したままである場合に特に重要であり得る。

【0167】

プラスミドの１つは、ホモ二量体を形成し、Ｉ型の膜タンパク質であるＨＣＭＶ−ｇＢの９０７〜９アミノ酸タンパク質のコーディング配列を含んだ。別のプラスミドは、ＨＣＭＶ−ｇＮ、１３９アミノ酸タンパク質のコーディング配列に連結されたＨＣＭＶ−ｇＭ、３７３アミノ酸タンパク質を含んだ。ＨＣＭＶ−ｇＭ及びｇＮタンパク質はヘテロ二量体を形成し、感染性に関与する。別のプラスミドは、ｇＬ、２７８アミノ酸タンパク質のコーディング配列に連結されたＨＣＭＶ−ｇＨ、７４０アミノ酸タンパク質を含んだ。ＨＣＭＶ−ｇＨタンパク質及びＨＣＭＶ−ｇＬタンパク質はウイルス融合に関与するＨＣＭＶ−ｇＯ−ｇＣＩＩＩ複合体と共にヘテロ二量体を形成する。ＨＣＭＶ−ｇＨタンパク質及びＨＣＭＶ−ｇＬタンパク質はまたＥＲにてジスルフィド結合ヘテロ二量体を形成する。別のプラスミドは、ＨＣＭＶ−ｇＨ及び−ｇＬと共に前述のヘテロ二量体を形成するＨＣＭＶ−ｇＯ、４７２アミノ酸タンパク質のコーディング配列を含んだ。別のプラスミドは、ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１Ａ、７７アミノ酸タンパク質に連結されたＨＣＭＶ−ＵＬ１３０、２１５アミノ酸タンパク質に連結されたＨＣＭＶ−ｐＵＬ（ＵＬ１２８）、１４０アミノ酸タンパク質のコーディング配列をコードする。これら３つのタンパク質は、ＨＣＭＶ−ｇＯのシャペロンとして作用する。別のプラスミドは、Ｔ細胞標的タンパク質であるＨＣＭＶ−ｇＵＬ８３（ｐｐ６５）をコードする。

【0168】

一実施形態では、ＨＣＭＶのコンセンサスアミノ酸配列（配列番号：２、配列番号：４、配列番号：６、配列番号：８、配列番号：１０、配列番号：１２、配列番号：１４、配列番号：１６、配列番号：１８及び配列番号：２０）の１０のコーディング配列（配列番号：１、配列番号：３、配列番号：５、配列番号：７、配列番号：９、配列番号：１１、配列番号：１３、配列番号：１５、配列番号：１７及び配列番号：１９）が、６つの別個の発現ベクタープラスミドに含まれた。単一の遺伝子構築物がｇＢ（プラスミド１）、（プラスミド４）ｇＯ及びｇＵＬ８３（改変プラスミド６）に提供された。融合タンパク質をコードするキメラ遺伝子が、単一ポリタンパク質として発現されるｇＭとｇＮ（プラスミド２）、ｇＨとｇＬ（プラスミド３）及びＵＬ１２８とＵＬ１３０とＵＬ１３１ａ（プラスミド５）をコードする構築物に提供された。融合タンパク質の各場合、ポリタンパク質における異なる抗原のコーディング配列はフーリンタンパク分解性切断部位（配列番号６３）をコードする配列に連結した。融合タンパク質のコーディング配列は、ポリタンパク質のＮ末端におけるＩｇＥシグナルペプチド（配列番号６１）のコーディング配列と同様にポリタンパク質における各ＨＣＭＶ抗原のＣ末端に連結されるＨＡタグ（配列番号６２）のコーディング配列も含んだ。ポリタンパク質のタンパク分解性切断部位でのプロセッシングに続いて、各タンパク質はＨＡタグを含む。単一抗原構築物のコーディング配列にはそれぞれ、各翻訳産物のＮ末端に含められるＩｇＥシグナルペプチド（配列番号６１）のコーディング配列が設けられた。ｇＢ及びｇＯのコーディング配列にはそれぞれ、各ＨＣＭＶ抗原タンパク質のＣ末端がＨＡタグを含むようにＨＡタグ（配列番号６２）のコーディング配列も設けられた。改変プラスミド６におけるｇＵＬ８３のコーディング配列はＨＡタグのコーディング配列を含有しない。しかしながら、改変プラスミド６の別の型は、ＨＣＭＶ抗原タンパク質のＣ末端がＨＡタグを含むようにＨＡタグ（配列番号６２）のコーディング配列を含有するように構築することができる。

【0169】

プラスミド１〜６及び改変プラスミド１〜６のそれぞれは、本明細書で開示される変異体ｐＶａｘ１（図１、配列番号７６）を用いて作製され得る。

【0170】

プラスミド１（図２）は、配列番号４１、すなわち、ＨＡタグに連結したコンセンサスｇＢに連結したＩｇＥリーダーをコードするので、タンパク質、配列番号４２をコードする核酸配列に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ変異体ｐＶａｘ１である。

【0171】

プラスミド２（図３）は、ＨＡタグに連結したコンセンサスｇＮ４−ｃである核酸配列に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したＨＡタグに連結したコンセンサスｇＭに連結したＩｇＥリーダーをコードするので融合タンパク質、配列番号６５をコードする核酸配列、配列番号６４に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ変異体ｐＶａｘ１である。

【0172】

プラスミド３（図４）は、ＨＡタグに連結したコンセンサスｇＬである核酸配列に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したＨＡタグに連結したコンセンサスｇＨに連結したＩｇＥリーダーをコードするので融合タンパク質、配列番号６７をコードする核酸配列、配列番号６６に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ変異体ｐＶａｘ１である。

【0173】

プラスミド４（図５）は、ＨＡタグに連結したコンセンサスｇＯ−５に連結したＩｇＥリーダーをコードするので融合タンパク質、配列番号５２をコードする核酸配列、配列番号５１に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ変異体ｐＶａｘ１である。

【0174】

プラスミド５（図６）は、ＨＡタグに連結したコンセンサスＵＬ−１２８に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したＨＡタグに連結したコンセンサスＵＬ１３０に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したＨＡタグに連結したコンセンサスＵＬ１３１ａに連結したＩｇＥリーダーをコードするので融合タンパク質、配列番号６９をコードする核酸配列、配列番号６８に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ変異体ｐＶａｘ１である。

【0175】

改変プラスミド６（図９）は、配列番号３９、すなわち、コンセンサスＵＬ８３（ｐｐ６５）に連結したＩｇＥリーダーをコードするので、タンパク質、配列番号４０をコードする核酸配列に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ変異体ｐＶａｘ１である。

【0176】

プラスミド６（図７）は、Ｕ８３翻訳産物に連結されるＨＡタグが望ましいのであれば、改変プラスミド６の代わりに使用され得る。プラスミド６は、配列番号５９、すなわち、コンセンサスＵＬ８３（ｐｐ６５）に連結したＩｇＥリーダーをコードするので、タンパク質、配列番号６０をコードする核酸配列に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ変異体ｐＶａｘ１である。

【0177】

一部の実施形態では、プラスミド１〜５はＨＡタグのコーディング配列が非存在であるように改変され得る。

【0178】

改変プラスミド１（図７）は、配列番号２１、すなわち、コンセンサスｇＢに連結したＩｇＥリーダーをコードする核酸配列に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つので、タンパク質配列番号２２をコードする本明細書で記載される変異体ｐＶａｘ１であり得る。

【0179】

改変プラスミド２は、コンセンサスｇＮ４−ｃである核酸配列に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したコンセンサスｇＭに連結したＩｇＥリーダーをコードするので、タンパク質配列番号７１をコードする核酸配列、配列番号７０に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ本明細書で記載される変異体ｐＶａｘ１であり得る。

【0180】

改変プラスミド３（図８）は、コンセンサスｇＬである核酸配列に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したコンセンサスｇＨに連結したＩｇＥリーダーをコードするので、タンパク質、配列番号７３をコードする核酸配列、配列番号７２に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ本明細書で記載される変異体ｐＶａｘ１であり得る。

【0181】

改変プラスミド４は、コンセンサスｇＯ−５が連結され、ｇＯ−５に連結したＩｇＥリーダーをコードするので、タンパク質配列番号３２をコードする核酸配列、配列番号３１に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ本明細書で記載される変異体ｐＶａｘ１であり得る。

【0182】

改変プラスミド５は、コンセンサスＵＬ１２８に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したコンセンサスＵＬ１３０に連結したフーリンタンパク分解性切断部位に連結したコンセンサスＵＬ１３１ａに連結したＩｇＥリーダーをコードするので、タンパク質配列番号７５をコードする核酸配列、配列番号７４に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を持つ本明細書で記載される変異体ｐＶａｘ１であり得る。

【0183】

一部の実施形態では、これら６つのプラスミドを含む組成物が抗ＨＣＭＶワクチンの一例である。抗ＨＣＭＶワクチンの一部の実施形態では、これら６つのプラスミドをまとめて含む２以上の組成物。一部の実施形態は、これら６つのプラスミドのそれぞれをまとめて含む１以上の組成物を個体に投与することを含む、ＨＣＭＶタンパク質に対して免疫応答を生成する方法を提供する。一部の実施形態は、これら６つのプラスミドのそれぞれをまとめて含む１以上の組成物を個体に投与することを含む、ＨＣＭＶ感染に対して予防的に個体にワクチン接種する方法を提供する。一部の実施形態は、これら６つのプラスミドのそれぞれをまとめて含む１以上の組成物を個体に投与することを含む、ＨＣＭＶに感染している個体に治療上ワクチン接種する方法を提供する。
他のヘルペスウイルスの解析

【0184】

上記ＨＣＭＶと同様に、類似の戦略を用いてＨＳＶ１、ＨＳＶ２、ＣｅＨＶ１及びＶＺＶについて抗原を特定した。

【0185】

ファミリーＶＺＶ、ＣｅＨＶ１、ＨＳＶ１及びＨＳＶ２に由来するヘルペスウイルスについて、上記ＣＭＶで使用した類似の基準に基づいて以下の抗原を検討し、コンセンサス抗原を作製し、ＣＭＶと同様にクローニングした：表面抗原エンベロープｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＭ，ｇＮ、ｇＯ、ｇＥ、ｇＩ及びｇＫを検討した。

【0186】

関連タンパク質の新生同時発現を最適化するためにプラスミドを構築した。関連タンパク質の新生同時発現を最適化するため構築した高度に最適化したＤＮＡワクチンプラスミドにてＨＣＭＶ ｇＢ， ｇＭ／ｇＮ， ｇＨ／ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８−１３１， 及び Ｕｌ８３； ＶＺＶ ｇＨｇＬ， ｇＥｇＩ， ｇＭｇＮ， ｇＢ， ｇＣ， 及び ｇＫ； ＨＳＶ１ ｇＢ， ｇＨｇＬ， ｇＣｇＤ； ＨＳＶ２ ｇＢ， ｇＨｇＬ， ｇＣｇＤ； 及び ＣｅＨＶ１ ｇＢ， ｇＨｇＬ， 及び ｇＣｇＤを発現する合計２１のプラスミドを構築した。高度に最適化したＤＮＡワクチンにてＨＣＭＶ ｇＢ， ｇＭ／ｇＮ， ｇＨ／ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８−１３１， 及び Ｕｌ８３； ＶＺＶ ｇＨｇＬ， ｇＥｇＩ， ｇＭｇＮ， ｇＢ， ｇＣ， 及び ｇＫ； ＨＳＶ１ ｇＢ， ｇＨｇＬ， ｇＣｇＤ； ＨＳＶ２ ｇＢ， ｇＨｇＬ， ｇＣｇＤ； 及び ＣｅＨＶ１ ｇＢ， ｇＨｇＬ， 及び ｇＣｇＤを発現する合計２１のプラスミドを構築した。

【0187】

プラスミド７〜２１は、本明細書で開示される変異体ｐＶａｘ１（図１、配列番号７６）にクローニングした配列をコードする以下のＶＺＶ ｇＨｇＬ、ｇＥｇＩ、ｇＭｇＮ、ｇＢ、ｇＣ、及びｇＫ；ＨＳＶ１ ｇＢ、ｇＨｇＬ、ｇＣｇＤ；ＨＳＶ２ ｇＢ、ｇＨｇＬ、ｇＣｇＤ；及びＣｅＨＶ１ ｇＢ、ｇＨｇＬ、及びｇＣｇＤのそれぞれ１つに相当する。一部の実施形態では、ｐＶａｘ１は、抗原に連結したＩｇＥリーダーのコーディング配列（アミノ酸配列、配列番号６１をコードする）を含むヘルペス抗原をコードする核酸配列に操作可能に連結した調節要素を有する挿入物を有する。一部の実施形態では、プラスミド７〜２１は、ＨＡタグのコーディング配列（アミノ酸配列、配列番号６２をコードする）が抗原のＮ末端に連結されるように改変され得る。

【0188】

実施例２
一部の実施形態では、ＨＣＭＶ：ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のそれぞれのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のそれぞれのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のそれぞれのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれのコーディング配列をまとめて含む組成物の組み合わせ。一部の実施形態では、ワクチンは、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンはコーディング配列、配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７及び１９のそれぞれを含む。一部の実施形態では、ワクチンはコーディング配列、配列番号２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７及び３９のそれぞれを含む。一部の実施形態では、ワクチンはコーディング配列、配列番号４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７及び５９のそれぞれを含む。

【0189】

実施例３
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち９のコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち９のコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。組成物は、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち９のコーディング配列を含み得る、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち９のコーディング配列をまとめて含む複数の組成物を含み得る。以下の９−１〜９−１０の組み合わせ：９−１ ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ９−２ ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ９−３ ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ９−４ ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ９−５ ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ９−６ ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ９−７ ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ９−８ ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ９−９ ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； 及び ９−１０ ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３がそのようなワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、それらのワクチンは、配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８ 及び ６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７ 及び ５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７ 及び ５９から成る群から選択される。

【0190】

実施例４
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの８つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの８つのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。組成物は、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち８のコーディング配列を含み得る、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち８のコーディング配列をまとめて含む複数の組成物を含み得る。以下の８−１〜８−４５の組み合わせ：８−１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ８−２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ８−３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ８−４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ８−５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ８−６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ８−８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ８−９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−１０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−１１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ８−１２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ８−１３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−１４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−１５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−１６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ８−１７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ８−１８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−１９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ８−２３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ８−２４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−２９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ８−３０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ８−３１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−３２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−３３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−３４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−３５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−３６： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−３７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−ｘ： ８−３８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ８−３９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−４０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−４１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−４２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−４３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ８−４４： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； 及び ８−４５： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３が８抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８ 及び ６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７ 及び ５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７ 及び ５９から成る群から選択される。

【0191】

実施例５
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの７つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの７つのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。組成物は、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち７のコーディング配列を含み得る、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち７のコーディング配列をまとめて含む複数の組成物を含み得る。以下の７−１〜７−１２０の組み合わせ： ７−１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ７−２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ７−３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ７−４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ７−５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ７−６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ７−７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ７−８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−１０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ７−１２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ７−１３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ７−１４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−１５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−１６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−１８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−１９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−２０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−２１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−２２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−２３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ７−２４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ７−２５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ７−２６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−２７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−２８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−２９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−３０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−３１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−３２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−３３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−３４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−３５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−３６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−３７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−３８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−３９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−４０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ７−４１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ７−４２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ７−４３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−４４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−４５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−４６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−４７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−４８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−４９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−５０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−５１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−５２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−５３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−５４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−５５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−５６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−５７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ７−５８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ７−５９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ７−６０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−６１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−６２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−６３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−６４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−６５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−６６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−６７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−６８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−６９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−７０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−７１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−７２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−７３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−７４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−７５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−７６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−７７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−７８： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−７９： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−８０： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−８１： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−８２ ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−８３： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−８４： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−８５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ７−８６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ７−８７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ７−８８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−８９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−９０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−９１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−９２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−９３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−９４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−９５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−９６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−９７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−９８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−９９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１００： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−１０１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−１０２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１０３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１０４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１０５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１０６： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ７−１０７： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−１０８： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１０９： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１０： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１１： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１２： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１３： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１
ａ； ７−１１４： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ７−１１５： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１６： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１７： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１８： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１１９： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ７−１２０： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３が７抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８ 及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。

【0192】

実施例６
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの６つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの６つのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。組成物は、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち６のコーディング配列を含み得る、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうち６のコーディング配列をまとめて含む複数の組成物を含み得る。以下の６−１〜６−２１０の組み合わせ：６−１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ６−２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ６−３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ６−４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ； ６−５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ８３； ６−６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ６−７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ６−８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ６−９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ８３； ６−１０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−１１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−１２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−１３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ６−１７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ６−１８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ６−１９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ６−２０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−２１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−２２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−２３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−２４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−２５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−２７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−２８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−２９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−３０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−３１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−３２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−３３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−３４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−３５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−３６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ６−３７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ６−３８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ６−３９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ６−４０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−４１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−４２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−４３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−４４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−４５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−４６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−４７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−４８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−４９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−５０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−５１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−５２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−５３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−５４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−５５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−５６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−５７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−５８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−５９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−６０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−６１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−６２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−６３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−６４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−６５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−６６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−６７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−６８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−６９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−７０： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−７１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ６−７２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ６−７３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ６−７４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ６−７５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−７６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−７７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−７８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−７９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−８０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−８１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−８２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−８３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−８４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−８５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−８６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−８７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−８８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−８９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−９０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−９１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−９２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−９３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−９４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−９５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−９６ ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−９７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−９８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−９９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１００： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１０１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１０２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１０３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１０４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１０５： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１０６： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−１０７： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−１０８： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−１０９： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１１０： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１１１： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１１２： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１１３： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１１４： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１１５： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１１６： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１１７： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１１８： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１１９： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１２０： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１２１： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１２２： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１２３： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１２４： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１２５： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１２６： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１２７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ６−１２８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ６−１２９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ６−１３０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ６−１３１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０
； ６−１３２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−１３３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−１３４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１３５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１３６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１３７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−１３８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−１３９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−１４０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１４１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１４２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１４３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１４４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１４５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１４６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１４７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−１４８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−１４９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−１５０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１５１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１５２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１５３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１５４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１５５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１５６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１５７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１５８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１５９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１６０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１６１： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１６２： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−１６３： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−１６４： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−１６５： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１６６： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１６７： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１６８： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１６９： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１７０： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１７１： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１７２： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１７３： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１７４： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１７５： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１７６： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１７７： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１７８： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１７９： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１８０： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１８１： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１８２： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１８３： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ６−１８４： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ６−１８５： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ６−１８６： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１８７： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１８８： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１８９： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１９０： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１９１： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１９２： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１９３： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１９４： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−１９５： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１９６： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１９７： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−１９８： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−１９９： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−２００： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２０１： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２０２ ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２０３： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２０４： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ６−２０５： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ６−２０６： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２０７： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２０８： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； ６−２０９： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３； 及び ６−２１０： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３が６抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。

【0193】

実施例７
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの５つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの５つのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの５つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの５つのコーディング配列をまとめて含む組成物の組み合わせは「５抗原ワクチン」と呼ばれる。以下の組み合わせ５−１〜５−２５２：５−１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ； ５−２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ； ５−３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８； ５−４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０； ５−５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３１ａ； ５−６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ８３； ５−７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ； ５−８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ５−９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ５−１０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ； ５−１１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ８３； ５−１２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−１３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−１４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−１５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−１６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ５−２３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ５−２４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ５−２５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ； ５−２６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ８３； ５−２７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−２８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−２９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−３０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−３１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−３２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−３３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−３４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−３５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−３６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−３７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−３８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−３９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−４０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−４１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−４２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−４３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−４４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−４５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−４６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−４７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−４８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−４９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−５０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−５１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−５２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−５３： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−５４： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−５５： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−５６： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−５７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ５−５８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ５−５９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ５−６０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ； ５−６１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ８３； ５−６２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−６３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−６４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−６５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−６６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−６７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−６８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−６９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−７０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−７１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−７２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−７３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−７４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−７５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−７６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−７７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−７８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−７９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−８０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−８１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−８２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−８３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−８４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−８５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−８６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−８７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−８８： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−８９： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−９０： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−９１： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−９２： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−９３： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−９４： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−９５： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−９６： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−９７： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−９８： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−９９： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１００： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１０１： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１０２： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１０３： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１０４： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１０５： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１０６： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１０７： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１０８： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１０９： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１１０： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１１１： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１１２： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１１３： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１１４： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１１５： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１１６： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１１７： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１１８： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１１９： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１２０： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１２１： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１２２： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１２３： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１２４： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１２５： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１２６： ｇＢ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１２７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ５−１２８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ５−１２９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ５−１３０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１ａ； ５−１３１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ８３； ５−１３２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−１３３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−１３４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−１３５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−１３６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１３７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１３８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１３９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１４０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１４１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１４２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−１４３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−１４４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−１４５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−１４６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１４７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１４８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１４９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１５０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１５１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１５２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０
； ５−１５３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１５４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１５５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１５６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１５７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１５８： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１５９： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１６０： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１６１： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１６２： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−１６３： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−１６４： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−１６５： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−１６６： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１６７： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１６８： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１６９： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１７０： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１７１： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１７２： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１７３： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１７４： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１７５： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１７６： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１７７： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１７８： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１７９： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１８０： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１８１： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１８２： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−１８３： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−１８４： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−１８５： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１８６： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１８７： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１８８： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１８９： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１９０： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１９１： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１９２： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−１９３： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−１９４： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１９５： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１９６： ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−１９７： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ５−１９８： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ５−１９９： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１ａ； ５−２００： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ５−２０１： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−２０２： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−２０３： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−２０４： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２０５： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２０６： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２０７： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−２０８： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−２０９： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−２１０： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２１１： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２１２： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２１３： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２１４： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２１５： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２１６： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２１７： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−２１８： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−２１９： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−２２０： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２２１： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２２２： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２２３： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２２４： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２２５： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２２６： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２２７： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２２８： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２２９： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２３０： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２３１： ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； ５−２３２： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ５−２３３： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ； ５−２３４： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ５−２３５： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２３６： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２３７： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２３８： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２３９： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２４０： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２４１： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２４２： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２４３： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２４４： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２４５： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２４６： ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２４７： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ； ５−２４８： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ５−２４９： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２５０： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； ５−２５１： ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３； 及び ５−２５２： ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ ， ＵＬ８３が５抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。

【0194】

実施例８
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの４つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの４つのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。組成物は、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの４つのコーディング配列、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの４つのコーディング配列をまとめて含む組成物の組み合わせを含み得る。以下の組み合わせ４−１〜４−２１０：４−１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ； ４−２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ； ４−３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ； ４−４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１２８； ４−５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１３０； ４−６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１３１ａ； ４−７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ， Ｕ８３； ４−８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ； ４−９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ； ４−１０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１２８； ４−１１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１３０； ４−１２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１３１Ａ； ４−１３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ， Ｕ８３； ４−１４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ； ４−１５： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１２８； ４−１６： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１３０； ４−１７： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； ４−１８： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ， Ｕ８３； ４−１９： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−２０： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−２１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−２２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−２３： ｇＢ， ｇＭ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−２４： ｇＢ， ｇＭ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−２５： ｇＢ， ｇＭ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−２６： ｇＢ， ｇＭ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−２７： ｇＢ， ｇＭ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−２８： ｇＢ， ｇＭ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−２９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ； ４−３１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ； ４−３２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１２８； ４−３３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１３０； ４−３４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１３１Ａ； ４−３５： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ８３； ４−３６： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ； ４−３７： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１２８； ４−３８： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１３０； ４−３９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； ４−４０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ８３； ４−４１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−４２： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−４３： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−４４： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−４５： ｇＢ， ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−４６： ｇＢ， ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−４７： ｇＢ， ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−４８： ｇＢ， ｇＮ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−４９： ｇＢ， ｇＮ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−５０： ｇＢ， ｇＮ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−５１： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ４−５２： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１２８； ４−５３： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３０； ４−５４： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； ４−５５： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ８３； ４−５６： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−５７： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−５８： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−５９： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−６０： ｇＢ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−６１： ｇＢ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−６２： ｇＢ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−６３： ｇＢ， ｇＨ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−６４： ｇＢ， ｇＨ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−６５： ｇＢ， ｇＨ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−６６： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−６７： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−６８： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−６９： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−７０： ｇＢ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−７１： ｇＢ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−７２： ｇＢ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−７３： ｇＢ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−７４： ｇＢ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−７５： ｇＢ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−７６： ｇＢ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−７７： ｇＢ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−７８： ｇＢ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−７９： ｇＢ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−８０： ｇＢ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−８１： ｇＢ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−８２： ｇＢ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−８３： ｇＢ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−８４： ｇＢ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−８５： ｇＢ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−８６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ； ４−８７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ； ４−８８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１２８； ４−８９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１３０； ４−９０： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１３１Ａ； ４−９１： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ， Ｕ８３； ４−９２： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ； ４−９３： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１２８； ４−９４： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１３０； ４−９５： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； ４−９６： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ， Ｕ８３； ４−９７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−９８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−９９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−１００： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−１０１： ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１０２： ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１０３： ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１０４： ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１０５： ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１０６： ｇＭ， ｇＮ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１０７： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ４−１０８： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１２８； ４−１０９： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３０； ４−１１０： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； ４−１１１： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ８３； ４−１１２： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−１１３： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−１１４： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−１１５： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−１１６： ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１１７： ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１１８： ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１１９： ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１２０： ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１２１： ｇＭ， ｇＨ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１２２： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−１２３： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−１２４： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−１２５： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−１２６： ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１２７： ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１２８： ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１２９： ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１３０： ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１３１： ｇＭ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１３２： ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１３３： ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１３４： ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１３５： ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１３６： ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１３７： ｇＭ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１３８： ｇＭ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１３９： ｇＭ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１４０： ｇＭ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１４１： ｇＭ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１４２： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ４−１４３： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１２８； ４−１４４： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３０； ４−１４５： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； ４−１４６： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ， Ｕ８３； ４−１４７： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−１４８： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−１４９： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−１５０： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−１５１： ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１５２： ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１５３： ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１５４： ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１５５： ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１５６： ｇＮ， ｇＨ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１５７： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−１５８： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−１５９： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−１６０： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−１６１： ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１６２： ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１６３： ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１６４： ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１６５： ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１６６： ｇＮ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１６７： ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１６８： ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１６９： ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１７０： ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１７１： ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１７２： ｇＮ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１７３： ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１７４： ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１７５： ｇＮ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１７６： ｇＮ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１７７： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１２８； ４−１７８： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３０； ４−１７９： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； ４−１８０： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ， Ｕ８３； ４−１８１： ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１８２： ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１８３： ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１８４： ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１８５： ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１８６： ｇＨ， ｇＬ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１８７： ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１８８： ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１８９： ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−１９０： ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１９１： ｇＨ， ｇ
Ｏ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１９２： ｇＨ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１９３： ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−１９４： ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−１９５： ｇＨ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１９６： ｇＨ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−１９７： ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； ４−１９８： ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； ４−１９９： ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ８３； ４−２００： ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−２０１： ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−２０２： ｇＬ， ｇＯ， Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−２０２： ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−２０３： ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−２０４： ｇＬ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−２０５： ｇＬ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−２０６： ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； ４−２０７： ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ８３； ４−２０８： ｇＯ， Ｕ１２８； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； ４−２０９： ｇＯ， Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３； 及び ４−２１０： Ｕ１２８； Ｕ１３０； Ｕ１３１Ａ； Ｕ８３が４抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。

【0195】

実施例９
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの３つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの３つのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの３つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの３つのコーディング配列をまとめて含む組成物の組み合わせは「３抗原ワクチン」と呼ばれる。以下の組み合わせ３−１〜３−１２０：３−１： ｇＢ， ｇＭ， ｇＮ； ３−２： ｇＢ， ｇＭ， ｇＨ； ３−３： ｇＢ， ｇＭ， ｇＬ； ３−４： ｇＢ， ｇＭ， ｇＯ； ３−５： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１２８； ３−６： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１３０； ３−７： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ１３１Ａ； ３−８： ｇＢ， ｇＭ， ＵＬ８３； ３−９： ｇＢ， ｇＮ， ｇＨ； ３−１０： ｇＢ， ｇＮ， ｇＬ； ３−１１： ｇＢ， ｇＮ， ｇＯ； ３−１２： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１２８； ３−１３： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１３０； ３−１４： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ１３１Ａ； ３−１５： ｇＢ， ｇＮ， ＵＬ８３； ３−１６： ｇＢ， ｇＨ， ｇＬ； ３−１７： ｇＢ， ｇＨ， ｇＯ； ３−１８： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１２８； ３−１９： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１３０； ３−２０： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ１３１Ａ； ３−２１： ｇＢ， ｇＨ， ＵＬ８３； ３−２２： ｇＢ， ｇＬ， ｇＯ； ３−２３： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ３−２４： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ３−２５： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ； ３−２６： ｇＢ， ｇＬ， ＵＬ８３； ３−２７： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ３−２８： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ３−２９： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ； ３−３０： ｇＢ， ｇＯ， ＵＬ８３； ３−３１： ｇＢ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ３−３２： ｇＢ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ； ３−３３： ｇＢ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ３−３４： ｇＢ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ； ３−３５： ｇＢ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ３−３６： ｇＢ， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； ３−３７： ｇＭ， ｇＮ， ｇＨ； ３−３８： ｇＭ， ｇＮ， ｇＬ； ３−３９： ｇＭ， ｇＮ， ｇＯ； ３−４０： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１２８； ３−４１： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１３０； ３−４２： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ１３１Ａ； ３−４３： ｇＭ， ｇＮ， ＵＬ８３； ３−４４： ｇＭ， ｇＨ， ｇＬ； ３−４５： ｇＭ， ｇＨ， ｇＯ； ３−４６： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１２８； ３−４７： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１３０； ３−４８： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ１３１Ａ； ３−４９： ｇＭ， ｇＨ， ＵＬ８３； ３−５０： ｇＭ， ｇＬ， ｇＯ； ３−５１： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ３−５２： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ３−５３： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ； ３−５４： ｇＭ， ｇＬ， ＵＬ８３； ３−５５： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ３−５６： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ３−５７： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ； ３−５８： ｇＭ， ｇＯ， ＵＬ８３； ３−５９： ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ３−６０： ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ； ３−６１： ｇＭ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ３−６２： ｇＭ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ； ３−６３： ｇＭ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ３−６４： ｇＭ， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； ３−６５： ｇＮ， ｇＨ， ｇＬ； ３−６６： ｇＮ， ｇＨ， ｇＯ； ３−６７： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１２８； ３−６８： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３０； ３−６９： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ１３１Ａ； ３−７０： ｇＮ， ｇＨ， ＵＬ８３； ３−７１： ｇＮ， ｇＬ， ｇＯ； ３−７２： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ３−７３： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ３−７４： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ； ３−７５： ｇＮ， ｇＬ， ＵＬ８３； ３−７６： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ３−７７： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ３−７８： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ； ３−７９： ｇＮ， ｇＯ， ＵＬ８３； ３−８０： ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ３−８１： ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ； ３−８２： ｇＮ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ３−８３： ｇＮ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ； ３−８４： ｇＮ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ３−８５： ｇＮ， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； ３−８６： ｇＨ， ｇＬ， ｇＯ； ３−８７： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１２８； ３−８８： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３０； ３−８９： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ； ３−９０： ｇＨ， ｇＬ， ＵＬ８３； ３−９１： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ３−９２： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ３−９３： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ； ３−９４： ｇＨ， ｇＯ， ＵＬ８３； ３−９５： ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ３−９６： ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ； ３−９７： ｇＨ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ３−９８： ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ； ３−９９： ｇＨ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ３−１００： ｇＨ， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； ３−１０１： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１２８； ３−１０２： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３０； ３−１０３： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ； ３−１０４： ｇＬ， ｇＯ， ＵＬ８３； ３−１０５： ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ３−１０６： ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ； ３−１０７： ｇＬ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ３−１０８： ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ； ３−１０９： ｇＬ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ３−１１０： ｇＬ， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； ３−１１１： ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３０； ３−１１２： ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ； ３−１１３： ｇＯ， ＵＬ１２８， ＵＬ８３； ３−１１４： ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ； ３−１１５： ｇＯ， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ３−１１６： ｇＯ， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； ３−１１７： ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ； ３−１１８： ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ＵＬ８３； ３−１１９： ＵＬ１２８， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３； 及び ３−１２０： ＵＬ１３０， ＵＬ１３１Ａ， ＵＬ８３が３抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。

【0196】

実施例１０
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの２つのコーディング配列を含む組成物、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの２つのコーディング配列をまとめて含む複数の組成物が投与される。組成物は、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの２つのコーディング配列、又はｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、Ｕ８３のうちの２つのコーディング配列をまとめて含む組成物の組み合わせを含み得る。ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、及びＵ８３から成るＨＣＭＶのセットに由来する２つの抗原を有する４５のサブセット（２−１〜２−４５）がある。以下の組み合わせ２−１〜２−４５：２−１ ｇＢ， ｇＭ， ２−２ ｇＢ， ｇＮ， ２−３ ｇＢ， ｇＨ， ２−４ ｇＢ， ｇＬ， ２−５ ｇＢ， ｇＯ， ２−６ ｇＢ， ＵＬ１２８， ２−７ ｇＢ， ＵＬ１３０， ２−８ ｇＢ， ＵＬ１３１ａ， ２−９ ｇＢ， ＵＬ８３， ２−１０ ｇＭ， ｇＮ， ２−１１ ｇＭ， ｇＨ， ２−１２ ｇＭ， ｇＬ， ２−１３ ｇＭ， ｇＯ， ２−１４ ｇＭ， ＵＬ１２８， ２−１５ ｇＭ， ＵＬ１３０， ２−１６ ｇＭ， ＵＬ１３１ａ， ２−１７ ｇＭ， ＵＬ８３， ２−１８ ｇＮ， ｇＨ， ２−１９ ｇＮ， ｇＬ， ２−２０ ｇＮ， ｇＯ， ２−２１ ｇＮ， ＵＬ１２８， ２−２２ ｇＮ， ＵＬ１３０， ２−２３ ｇＮ， ＵＬ１３１ａ， ２−２４ ｇＮ， ＵＬ８３ ２−２５ ｇＨ， ｇＬ， ２−２６ ｇＨ， ｇＯ， ２−２７ ｇＨ， ＵＬ１２８， ２−２８ ｇＨ， ＵＬ１３０， ２−２９ ｇＨ， ＵＬ１３１ａ， ２−３０ ｇＨ， ＵＬ８３ ２−３１ ｇＬ， ｇＯ， ２−３２ ｇＬ， ＵＬ１２８， ２−３３ ｇＬ， ＵＬ１３０， ２−３４ ｇＬ， ＵＬ１３１ａ， ２−３５ ｇＬ， ＵＬ８３ ２−３６ ｇＯ， ＵＬ１２８， ２−３７ ｇＯ， ＵＬ１３０， ２−３８ ｇＯ， ＵＬ１３１ａ， ２−３９ ｇＯ， ＵＬ８３ ２−４０ ＵＬ１２８， ＵＬ１３０， ２−４１ ＵＬ１２８， ＵＬ１３１ａ， ２−４２ ＵＬ１２８， ＵＬ８３ ２−４３ ＵＬ１３０， ＵＬ１３１ａ， ２−４４ ＵＬ１３０， ＵＬ８３， 及び ２−４５ ＵＬ１３１ａ， ＵＬ８３が２抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれをコードする１以上のコーディング配列を含む。一部の実施形態では、１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおける１以上のコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。

【0197】

実施例１１
一部の実施形態では、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａ、及びＵＬ８３のうちの１つのコーディング配列を含む組成物が投与される。以下の組み合わせ：１−１ ｇＢ， １−２ ｇＭ， １−３ ｇＮ， １−４ ｇＨ， １−５ ｇＬ， １−６ ｇＯ， １−７ ＵＬ１２８， １−８ ＵＬ１３０， １−９ ＵＬ１３１ａ 及び １−１０ Ｕ８３が１抗原ワクチンに存在し得る。一部の実施形態では、これらのワクチンは、配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される配列を有するｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａをコードするコーディング配列を１つ含む。一部の実施形態では、コーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンにおけるコーディング配列は、配列番号１， ３， ５， ７， ９， １１， １３， １５， １７， １９， ２１， ２３， ２５， ２７， ２９， ３１， ３３， ３５， ３７， ３９， ４１， ４３， ４５， ４７， ４９， ５１， ５３， ５５， ５７及び５９から成る群から選択される。

【0198】

実施例１２
一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含む。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の１以上は配列番号２，４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の２以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の３以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の４以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の５以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の６以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の７以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の８以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の９以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。一部の実施形態では、ワクチンは、ｇＢ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＯ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０、ＵＬ１３１ａのそれぞれから成る群から選択される１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０の抗原のコーディング配列をコードするコーディング配列を含み、前記配列の１０以上は配列番号２， ４， ６， ８， １０， １２， １４， １６， １８， ２０， ２２， ２４， ２６， ２８， ３０， ３２， ３４， ３６， ３８， ４０， ４２， ４４， ４６， ４８， ５０， ５２， ５４， ５６， ５８及び６０から成る群から選択される。
実施例１３
ＨＣＭＶ抗原の発現

【0199】

構築に続いて、免疫ブロットによってタンパク質の発現を確認した。２９３Ｔ細胞に各プラスミド又は空のｐＶＡＸベクター（陰性対照）によって形質移入し、４８時間後、試料を回収し、ウエスタン免疫ブロットによって解析した（写真は示さず）。抗ＨＡタグ抗体（データは示さず）及びＮＰ特異的ポリクローナル血清（データは示さず）を用いて、ｐＨＣＭＶ−ＮＰ−形質移入２９３Ｔ細胞の細胞溶解物にて約６６ｋＤａのタンパク質の存在が検出されたが、対照ｐＶＡＸで形質移入した溶解物は抗原の発現について陰性だった。Ｂｒａｄｆｏｒｄタンパク質アッセイによって総タンパク質に対して試料を標準化し、試料は等量の球状チューブリンタンパク質を含有した。さらに、ｐＨＣＭＶ−ＮＰ−形質移入２９３Ｔ細胞は、ＨＣＭＶに免疫があり、ｐＨＣＭＶ−ＮＰで免疫したマウス（ｎ＝５）の血清と反応したが、ｐＶＡＸで免疫した動物（ｎ＝５）の血清とは反応せず；ｐＨＣＭＶ−ＮＰで５回免疫したマウスからプールした高度免疫の血清は、ＨＣＭＶに免疫のある動物の８．１％及びｐＶＡＸで形質移入した動物の０．７％に比べてｐＨＣＭＶ−ＮＰで形質移入した細胞の１６．６％と反応した（データは示さず）。陽性の血清がｐＶＡＸで形質移入した２９３Ｔ細胞と反応しなかったので非特異的な結合は検出されなかった。さらに、ウエスタン免疫ブロットによって、独立した抗原、ｇＭ、ｇＮ、ｇＨ、ｇＩ、ＵＬ１２８、ＵＬ１３０及びＵＬ１３１Ａにフーリン切断部位により分離した３つの融合タンパク質の宿主細胞におけるタンパク分解性切断が確認された。

【0200】

ウエスタンブロット解析
プラスミドＤＮＡがコードしたワクチンタンパク質の発現はウエスタン免疫ブロットによって検証した。Ｆｕｇｅｎｅ形質移入法（インディアナ州、インディアナポリスのＲｏｃｈｅ）を用いて２９３Ｔ細胞（１×１０^６個）に形質移入した。形質移入の４８時間後、細胞溶解物からタンパク質を回収し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（１２％）上で分画し、ｉＢｌｏｔドライブロッティングシステム（米国、カリフォルニア州のＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてニトロセルロースに移した。特異的なマウス抗血清（それぞれプラスミドＤＮＡ構築物で４〜６回免疫したマウスの個々の群からプールした）と共にＳＮＡＰｉ．ｄ．タンパク質検出システム（米国、マサチューセッツ州のＭｉｌｌｉｐｏｒｅ）を用いて免疫検出を行い、ＥＣＬ検出システム（ニュージャージー州、ピスカタウエイのＡｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を用いて西洋ワサビペルオキシダーゼを結合したヤギ抗マウスＩｇＧによって、発現したタンパク質を視覚化した。

【0201】

要するに、プラスミドＤＮＡ構築物のそれぞれを用いた２９３Ｔ細胞の形質移入は、繰り返し免疫したマウスから生成された抗体と特異的に反応する試験管内でのコンセンサス免疫原の産生に十分であった。

【0202】

エピトープのマッピング
プラスミド１でワクチン接種した動物の脾細胞とＨＣＭＶ−ｇＢの一連の重複したペプチドを用いてデータを生成し、ＨＣＭＶ−ｇＢの免疫優勢なエピトープを特定した。ＥＬＩＳｐｏｔのデータは図１０に示す。

【0203】

プラスミド３でワクチン接種した動物の脾細胞とＨＣＭＶ−ｇＨ及びＨＣＭＶ−ｇＬの一連の重複したペプチドを用いてデータを生成し、ＨＣＭＶ−ｇＨ及びＨＣＭＶ−ｇＬの免疫優勢なエピトープを特定した。ＥＬＩＳｐｏｔのデータは図１１に示す。

【0204】

プラスミド２でワクチン接種した動物の脾細胞とＨＣＭＶ−ｇＭ及びＨＣＭＶ−ｇＮの一連の重複したペプチドを用いてデータを生成し、ＨＣＭＶ−ｇＭ及びＨＣＭＶ−ｇＮの免疫優勢なエピトープを特定した。プラスミド４でワクチン接種した動物の脾細胞とＨＣＭＶ−ｇＯの一連の重複したペプチドを用いてデータを生成し、ＨＣＭＶ−ｇＯの免疫優勢なエピトープを特定した。ＥＬＩＳｐｏｔのデータは図１２に示す。

【0205】

プラスミド５でワクチン接種した動物の脾細胞とＨＣＭＶ−ＵＬ１３１Ａ、ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０及びＨＣＭＶ−ＵＬ１２８の一連の重複したペプチドを用いてデータを生成し、ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１Ａ、ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０及びＨＣＭＶ−ＵＬ１２８の免疫優勢なエピトープを特定した。プラスミド６でワクチン接種した動物の脾細胞とＨＣＭＶ−ＵＬ８３の一連の重複したペプチドを用いてデータを生成し、ＨＣＭＶ−ＵＬ８３の免疫優勢なエピトープを特定した。ＥＬＩＳｐｏｔのデータは図１３に示す。

【0206】

エピトープの解析については図１８ａも参照のこと。

【0207】

実施例１４
ＨＣＭＶプラスミドの免疫及びマウス
６〜８週齢の成熟メスＣ５７ＢＬ／６（Ｈ−２^ｂ）マウスをＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（メイン州、バーハーバー）から購入し、ペンシルベニア大学医学部動物施設の施設内動物実験委員会が認可したプロトコールに従って飼育した。前脛骨筋への筋肉内注射によって示した用量のプラスミドＤＮＡでマウスを免疫し、その後、以前記載された［Ｋｈａｎ， ２００５ ＃７２７；Ｓｈｅｄｌｏｃｋ， ２０１１ ＃１０９７］ようにＣＥＬＬＥＣＴＲＡ（登録商標）適応定電流ＥＰ最少侵襲装置（ＭＩＤ）（ペンシルベニア州、ブルーベルのＩｎｏｖｉｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を用いて生体内電気穿孔（ＥＰ）を行った。２６ゲージの中空ではないステンレススチールの電極から成る三角形の３列電極を介して２回のパルスの２セットとして合計４回の０．１アンペア定電流方形波パルスを送達した。各パルスは、パルスのセット間では３秒遅らせ、個々のパルス間では１秒遅らせて５２ミリ秒の長さだった。

【0208】

ＨＣＭＶ−ＮＰタンパク質の天然のウイルス由来のＤＮＡ配列（「天然」又は非最適化）をマウスのＤＮＡワクチン接種における免疫原性について宿主種に対して最適化した遺伝子と比較した（図１６ａ）。改変したＤＮＡ発現ベクターにサブクローニングした３５μｇの「天然の」又は「最適化した」遺伝子でマウス（ｎ＝１０）を２回免疫し、ＥＰによって送達し、８日後、Ｔ細胞免疫を評価した。「最適化した」構築物で免疫したマウスではＮＰ特異的なＴ細胞が２倍多かった（Ｐ＝０．０００１）ので、種特異的な遺伝子の最適化はＤＮＡワクチンが誘導したＴ細胞免疫を高めることを示した。

【0209】

Ｔ細胞及びＢ細胞の免疫の導出に対する生体内ＥＰ送達の寄与も評価した。ＨＣＭＶ−ＮＰのＤＮＡワクチンの最適化したものを上記と同様にマウス（ｎ＝５〜１０／群）に投与し、ＥＰによって又はＥＰなしで送達し、致死性負荷によって防御有効性を評価した（図１６ｂ）。対照のベクターと比べると双方のワクチンは防御有効性を引き出したが、ＤＮＡワクチン接種中のＥＰ送達はそれがない場合のたった６０％に対して完全に防御性だった。これらのデータは、致死性負荷に対する防御有効性に介在するＴ細胞の生成へのＥＰ送達による有意な寄与を示している。Ｂ細胞の生成へのＥＰの寄与の評価については、動物を数回免疫し（ｎ＝５／群）、各注射の７日後、抗体産生を野生型のＨＣＭＶ感染のそれと比較した（図１６ｃ）。ＤＮＡのみで免疫された動物は合計４回の免疫後にのみＮＰ特異的抗体を生じたが、ＥＰによって送達されたワクチンを受け取ったものは２回目の投与後抗体を示した。さらに、ＥＰで免疫したマウスにおける抗体の応答は、野生型のＨＣＭＶ感染後のマウスにおけるものを上回り、それはＥＰ送達がＤＮＡワクチン誘導の免疫を高めるのに強力な技術であることを明らかにした。

【0210】

ＤＮＡワクチン接種は強固なＴ及びＢの免疫を誘導する
ＤＮＡワクチンのデータの要約を図１５に示す。これらのデータは本明細書で例示されるワクチンによって非常に効果的な免疫応答が誘導されたことを示している。ＨＣＭＶ−ｇＨｇＬのデータは、優れた有効性を持つ卓越したワクチン標的としての構築物を示し、高い中和力価及びＣＴＬエピトープを提供する。そのような構築物は、ＤＮＡワクチンとして送達することができ、又は他のワクチンの基本骨格の成分として使用することができる。同様に、ＨＣＭＶ：ＵＬ１３１Ａ、ＵＬ１３０及びＵＬ１３８複合体免疫原はＣＴＬ活性と同様に新規のワクチン標的としての重要性を支持する中和活性を持つ。データはまた、設計さえたＨＣＶ−ｇＭｇＮがワクチン製造のために確立され、ＨＣＭＶ−ｇＯが防御のために確立され、複数のアプローチの重要性が実行可能な例として確立されることを示す。

【0211】

プラスミドＤＮＡの免疫原性を評価するために、４５μｇの各プラスミドベクターでマウス（ｎ＝４〜６／群）を、注射間で２週間空けて２回免疫し、その後直ちにＥＰを行った。２回目の免疫の７〜８日後マウスを屠殺し、ＥＬＩＳＰＯＴ及びＦＡＣＳを行ってＴ細胞免疫を評価した。新規のｇＨｇＬワクチンによる免疫は最高レベルのＴ細胞免疫（１００万個の脾細胞当たりほぼ＞１０，０００個のＩＦＮγ産生細胞）とその後のｐＵＬ（約８，０００個の細胞）を生じた。さらに、各ワクチンのエピトープ反応の幅を評価し、それは、最適化戦略の組み合わせを伴ったＤＮＡワクチン接種が多様なＴ細胞エピトープを生成することを示した。要するに、これらのデータは、６つのＨＣＭＶのＤＮＡワクチン構築物すべてが生体内ＥＰと組み合わせた免疫付与に続いて免疫原性であり、測定可能な免疫原性特異的なＴ細胞応答を生じることを示しており；Ｔ細胞免疫原性は、以下：ｇＨｇＬ＞ｐＵＬ＞ＵＬ８３＞ｇＢ＞ｇＭｇＮ＞ｇＯのようにランク付けられた（図１８ｂ〜ｄを参照）。

【0212】

５〜６回の免疫（２週間空けて）の７〜１０日後、それぞれのマウスのグループ（ｎ＝５）から血清試料を採取し、プールし、その後最終免疫の１か月後までプールした。さらに、最終免疫のそれぞれの６ヵ月後（長期の抗体応答について臨床的に関連するとみなされる時点）血清を採取し、長寿命化したヒト包皮線維芽細胞へのＡＤ１６９−ＥＧＦＰによる感染を中和する能力についてプールしたエフェクタ血清と共に調べた。データはｇＢ免疫した動物についての中和能を確認し、それは、ｎＡｂｓを引き出し、幾つかの負荷モデルで防御する能力を示す以前のデータを支持している。図１９ａ〜ｂを参照のこと。しかしながら、新規のｇＨｇＬ−ＤＮＡワクチンはｇＢ免疫よりも約２〜４倍高いｎＡｂ応答を生成した。興味深いことに、ｇＭｇＮ、ｇＯ、ＵＬ１２８〜１３１Ａ、又はＵＬ８３を含むほかのどの免疫原もこれらの中和レベルを達成しなかった。しかしながら、ＡＤ１６９ベクターは１３１Ａタンパク質にて相当に大きな変異／欠失を含有することが知られているので、このことはＵＬ１２８〜１３１Ａについては全く予想されなかったわけではない。最後に、中和レベルは、エフェクタ血清と最終免疫の６ヵ月後に採取した記憶血清を比較して各免疫原について相対的に安定していた。従って、これらのデータはＥＰとの組み合わせでのＤＮＡワクチン接種が強固なＢ細胞応答を生成したことを明らかにしている。要するに、本明細書のデータは、ＤＮＡプラスミドがマウスにおいて免疫原性であり、強固なＴ細胞及びＢ細胞の応答を生成したことを示している。

【0213】

ＨＣＭＶ−ｇＢのみに対する免疫性はモルモットでは完全に防御性であることが明らかにされているが、外来では限定された有効性を有する。従って我々は次に、ｇＢ−ＤＮＡワクチンとの組み合わせがＨＣＭＶ特異的免疫性を高めるかどうかを判定することを計画した。幾つかの用量のｇＢプラスミドのみ、ｇＢ＋ｇＨｇＬ、又はｇＢ＋ｇＨｇＬ＋ｐＵＬをマウス（ｎ＝５／群）に与え、Ｔ細胞及びＢ細胞の免疫を評価した。実際、これらプラスミドの三価の製剤が最高レベルのＴ細胞及びＢ細胞の免疫を誘導した。従って、これらのデータは、ワクチンが誘導したＣＭＶ特異的な免疫性は、多価のプラスミドＤＮＡ製剤による免疫付与によって高めることができることを明らかにしている。

【0214】

ｇＨ／ｇＬに対する血清反応性はウイルスの中和に相関する
図１９は、ａ）ＨＣＭＶ：ｇＢ、ｇＭｇＮ、ｇＨｇＬ、ｇＯ、ＵＬ及びＵＬ８３についての５０％中和レベル及びｂ）ＣＭＶのみ、血清陽性の血清及びＨＣＭＶ−ｇＨｇＬで免疫した血清についての５０％中和レベルを示す中和データのグラフを示す。

【0215】

脾細胞の単離及びＥＬＩＳｐｏｔアッセイ
プラスミドＤＮＡによる最終免疫の８日後にマウスを屠殺し、脾臓を回収し、１０％ＦＢＳ、１Ｘ抗−抗（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及び１Ｘβ−ＭＥ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で補完したＲＰＭＩ１６４０（バージニア州、マナッサスのＭｅｄｉａｔｅｃｈ社）に入れた。Ｓｔｏｍａｃｈｅｒ機（ニューヨーク州、ボヘミアのＳｅｗａｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ社）を用いた脾臓の機械的な破壊によって脾細胞を単離し、４０μｍの細胞濾過器（ＢＤ Ｆａｌｃｏｎ）を用いて、得られた生成物を濾過した。ＲＢＣを溶解するためにＡＣＫ溶解緩衝液（スイスのＬｏｎｚａ）で細胞を５分間処理し、次いで脾細胞をＰＢＳで洗浄し、完全ＲＰＭＩ培地に再浮遊させた。

【0216】

ＩＦＮγのＥＬＩＳＰＯＴアッセイを行った。手短には、抗マウスＩＦＮγ捕捉抗体でＥＬＩＳＰＯＴ９６穴プレート（マサチューセッツ州、ビルリカのＭｉｌｌｉｐｏｒｅ）を被覆し、４℃で２４時間インキュベートした（ミネソタ州、ミネアポリスのＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）。翌日、プレートをＰＢＳで洗浄し、ブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中１％ＢＳＡ及び５％スクロース）で２時間ブロックした。ＲＰＭＩ１６４０（陰性対照）、コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ：陽性対照）の存在下で、又は示したような（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ）個々の（個々のペプチドが重複する完全なワクチンタンパク質を示したように単一ペプチド解析（ＳＰＡ）に用いた）又はプールした１５量体ペプチドによって、ウェル当たり１００，０００〜２００，０００個の脾細胞を各動物からの３つ組で３７℃、５％ＣＯ_２にて一晩刺激した。刺激のおよそ１８〜２０時間後、細胞をＰＢＳで洗浄し、ビオチン化抗マウスＩＦＮγｍＡｂ（ミネソタ州、ミネアポリスのＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）と共に４℃にて２４時間インキュベートした。プレートをＰＢＳで洗浄し、各ウェルにストレプトアビジン／アルカリホスファターゼ（スウェーデンのＭａｂＴｅｃｈ）を加え、室温にて２時間インキュベートした。プレートを再びＰＢＳで洗浄し、各ウェルにＢＣＩＰ／ＮＢＴと基質（ＭａｂＴｅｃｈ）を１５〜３０分間加え、次いでプレートを蒸留水で洗浄し、室温で乾燥させた。自動ＥＬＩＳＰＯＴリーダー（オハイオ州、シェーカーハイツのＣｅｌｌｕｌａｒ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社」）によってスポットを計数した。

【0217】

さらに、免疫したマウスの脾細胞を、個々のペプチド（１１のアミノ酸が重複し、各ＤＮＡワクチンがコードする抗原の全長にわたる１５量体）で刺激してエピトープ応答の幅を評価したが、データは図１０〜１３及び図１８ａに示す。エピトープを含有するペプチドを特定するのに陽性のＴ細胞応答をより良く視覚化するために、各動物からのＥＬＩＳｐｏｔデータを棒グラフ形態に積み重ね、群当たりのＩＦＮγ＋応答の総計として表した。エピトープを含むペプチドは、８０％以上の応答率で平均少なくとも１０のスポットを刺激したのであれば、陽性とみなした。

【0218】

６つのＨＣＭＶ−ＤＮＡプラスミドワクチンのいずれかによる免疫付与は、測定可能なＴ細胞エピトープ；ＨＣＭＶ−ｇＢ誘導のＸエピトープ、ＨＣＭＶ−ｇＭｇＮ−Ｘ、ＨＣＭＶ−ｇＨｇＬ−Ｘ、ＨＣＭＶ−ｇＯ−Ｃ、ＨＣＭＶ−ｐＵＬ−Ｘ、及びＨＣＭＶ−ＵＬ８３−Ｘの多様性を刺激することが認められた。さらに、免疫優勢のエピトープは、あらゆるマウス（Ｈ−２^ｂマウスにおける＃５：ＧＰ_{２５−３９}及びＨ−２^ｄマウスにおける＃２７：ＧＰ_{１５１−１７１}）及びｐＥＢＯＳ（Ｈ−２^ｂマウスにおける＃４：ＧＰ_{１９−３３}及び Ｈ−２^ｄマウスにおける＃４１：ＧＰ_{２４１−２５５}）で認められたが、ｐＥＢＯＺはＨ−２^ｄマウス（＃２４：_{１３９−１５３}、＃３０：_{１７５−１８９}及び＃６６：_{３９１−４０５}）においてのみそれらを刺激した。図１０〜１３及び図１８ａを参照のこと。さらに、エピトープを含有するペプチドは、予測されたエピトープ配列を示し、Ｔ細胞応答を確認し、フローサイトメトリーによってノイズを除去した表１にてさらに性状分析される。ＤＮＡワクチンが誘導したＩＦＮγ＋応答すべてを報告し、それは、陽性に特定されたエピトープ当たりの平均応答の総計である−表１（以下）を参照のこと。

【0219】

【表1-1】

【0220】

【表1-2】

【0221】

ＨＣＭＶ抗原の断片に関して、好ましくは、断片は以下のＨＣＭＶ抗原のそれぞれについて以下のドメインを有するであろう：
ＨＣＭＶ−ｇＢ：アミノ酸領域２５−３９（ペプチド＃５）；アミノ酸領域１５１−１６５（ペプチド＃２６）；アミノ酸領域１５１−１６５（ペプチド＃２６）；アミノ酸領域３６１−３７５（ペプチド＃５＝６１）；アミノ酸領域４３９−４５３（ペプチド＃７４）；及び／又はアミノ酸領域４７５−４８９（ペプチド＃８０）；
ＨＣＭＶ−ｇＨ：アミノ酸領域６１−７５（ペプチド＃１１）；アミノ酸領域８５−９９（ペプチド＃１５）；アミノ酸領域９１−１０５（ペプチド＃１５）；アミノ酸領域１７５−１８９（ペプチド＃３０）；アミノ酸領域６６１−６７５（ペプチド＃１１１）；
ＨＣＭＶ−ｇＬ：アミノ酸領域８５−９９（ペプチド＃１５）；
ＨＣＭＶ−ＵＬ８３：アミノ酸領域１０９−１２３（ペプチド＃１９）；アミノ酸領域２５３−２６７（ペプチド＃４３）；
ＨＣＭＶ−ＵＬ１２８：アミノ酸領域９１−１０５（ペプチド＃１６）；アミノ酸領域９７−１１１（ペプチド＃１７）；アミノ酸領域１０３−１１７（ペプチド＃１８）；アミノ酸領域１２１−１３５（ペプチド＃２１）；アミノ酸領域１２７−１４１（ペプチド＃２２）；アミノ酸領域１６３−１７１（ペプチド＃２８）；
ＨＣＭＶ−ＵＬ１３０：アミノ酸領域１３−２７（ペプチド＃３）；アミノ酸領域４３−５７（ペプチド＃８）；
ＨＣＭＶ−ＵＬ１３１Ａ：アミノ酸領域６１−７５（ペプチド＃１１）；
ＨＣＭＶ−ｇＭ：アミノ酸領域１７５−１８９（ペプチド＃３０）；アミノ酸領域２９５−３０９（ペプチド＃５０）；
ＨＣＭＶ−ｇＮ：アミノ酸領域１−１５（ペプチド＃１）；及び
ＨＣＭＶ−ｇＯ：アミノ酸領域３３１−３４５（ペプチド＃５６）；アミノ酸領域３３７−３５１（ペプチド＃５７）。

【0222】

ＥＬＩＳＡ
ＨＣＭＶ−ｇＢ、ｇＨ又はｇＬに対する血清の抗体価を測定するために、示した量の組換えタンパク質又はＰＢＳで希釈したＢＳＡ（対照）によってＮｕｎｃ−Ｉｍｍｕｎｏ ＭａｘｉＳｏｒｐプレート（ニューヨーク州、ロチェスターのＮｕｎｃ）を４℃にて一晩被覆した。翌日、プレートをＰＢＳ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０（ＰＢＳ−Ｔ）で洗浄し、１０％ＢＳＡ／ＰＢＳ−Ｔで１時間ブロックし、ヒト患者又は免疫した動物からの連続希釈した血清と共に４℃にて一晩インキュベートした。次いでプレートを６回洗浄し、双方とも１：５，０００に希釈したヤギ抗ヒトＩｇＧ（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ）又はヤギ抗マウスＩｇＧ（カリフォルニア州、サンタクルーズのＳａｎｔａ Ｃｒｕｚ）を用いて結合したＩｇＧを検出した。結合した酵素はＳｉｇｍａＦＡＳＴ（商標）ジヒドロ塩化Ｏ−フェニレンジアミン）（ＯＰＤ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）によって検出し、光学密度はＢｉｏｔｅｋ（Ｗｉｎｏｏｓｋｉ，ＶＴ）ＥＬ３１２ｅリーダーにて４５０ｎｍで測定した。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（カリフォルニア州、ラ・ホヤのＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社）における変数傾きと共にＳ字用量反応モデルを用いた曲線適合によって算出した最大ＯＤの１０％として終点力価の逆数を報告した。

【0223】

中和アッセイ
５〜６回の免疫付与（２週間空けて）のそれぞれの７〜１０日後、マウスの各群（ｎ＝５）から血清試料を採取し、プールし、最終免疫の１ヵ月後までその後、プールした。さらに、最終免疫のそれぞれの６ヵ月後（長期の抗体応答について臨床的に関連するとみなされる時点）血清を採取し、関連するものによる感染を中和する能力についてプールしたエフェクタ血清と共に調べた。データはｇＢ免疫した動物についての中和能を確認し、それは、ｎＡｂｓを引き出し、幾つかの負荷モデルで防御する能力を示す以前のデータを支持している。しかしながら、新規のｇＨｇＬ−ＤＮＡワクチンはｇＢ免疫よりも約２〜４倍高いｎＡｂ応答を生成した。中和する抗体価は、ＨＣＭＶタンパク質で免疫したマウスのマウス血清及び長寿命化したＨＦＦ（ヒト包皮線維芽細胞）細胞を用いて測定した。データは９５％ＣＩと共に３つの値の幾何平均値として表す。データは図１４に示す。

【0224】

興味深いことに、ｇＭｇＮ、ｇＯ、ＵＬ１２８〜１３１Ａ、又はＵＬ８３を含むほかのどの免疫原も中和能のこれらのレベルを達成しなかった。最後に、中和レベルは、エフェクタ血清と最終免疫の６ヵ月後に採取した記憶血清を比較して各免疫原について相対的に安定していた。従って、これらのデータはＥＰとの組み合わせでのＤＮＡワクチン接種が強固なＢ細胞応答を生成したことを明らかにしている。要するに、本明細書のデータは、ＤＮＡプラスミドがマウスにおいて免疫原性であり、強固なＴ細胞及びＢ細胞の応答を生成したことを示している。

【0225】

ＨＣＭＶ−ｇＢのみに対する免疫性はモルモットでは完全に防御性であることが明らかにされているが、外来では限定された有効性を有する。従って我々は次に、ｇＢ−ＤＮＡワクチンとの組み合わせがＨＣＭＶ特異的免疫性を高めるかどうかを判定することを計画した。幾つかの用量のｇＢプラスミドのみ、ｇＢ＋ｇＨｇＬ、又はｇＢ＋ｇＨｇＬ＋ｐＵＬをマウス（ｎ＝５／群）に与え、Ｔ細胞及びＢ細胞の免疫を評価した。実際、これらプラスミドの三価の製剤が最高レベルのＴ細胞及びＢ細胞双方の免疫を誘導した。従って、これらのデータは、ワクチンが誘導したＣＭＶ特異的な免疫性は、多価のプラスミドＤＮＡ製剤による免疫付与によって高めることができることを明らかにしている。

【0226】

実施例１５：
ａ）ＨＳＶ１抗原及び２９３Ｔ細胞における発現
上記実施例１及びＨＣＭＶに関する上記実施例で提供されたのと同じ戦略を用いて、ＨＳＶ１抗原を選択し、核酸構築物を作製した。前述に基づいて選択したＨＳＶ１抗原は、ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ及びｇＤである。さらに本明細書で議論されたようなＨＳＶ１−ｇＨｇＬ及びＨＳＶ１−ｇＣｇＤを含む組み合わせを作製した。

【0227】

ＨＳＶ１−ｇＢ、ｇＣ及びｇＤが形質移入した細胞の表面で発現されるのが見い出されたということは、細胞による有効な翻訳、転移、表現を示しており；さらに、組み合わせた抗原ｇＣｇＤは同時発現することが分った（データは示さず）。このことは、対照（ベクターのみ）からの血清との抗原の結合がないことに対比して、抗原で免疫した動物の血清（１：２００希釈）における前述の抗原とのＭＨＣクラスＩの結合によって証拠付けられた。

【0228】

上記の同じペプチドによる免疫付与は、生体内で強固な抗体を誘導することが分った（データは示さず）。

【0229】

ｂ）ＨＳＶ２抗原及び２９３Ｔ細胞における発現
上記実施例１及びＨＣＭＶに関する上記実施例で提供されたのと同じ戦略を
用いて、ＨＳＶ２抗原を選択し、核酸構築物を作製した。前述に基づいて選択したＨＳＶ２抗原は、ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ及びｇＤである。さらに本明細書で議論されたようなＨＳＶ２−ｇＨｇＬ及びＨＳＶ２−ｇＣｇＤを含む組み合わせを作製した。

【0230】

ＨＳＶ２−ｇＢ、ｇＣ、ｇＤ、ｇＨ及びｇＬが形質移入した細胞の表面で発現されるのが見い出されたということは、細胞による有効な翻訳、転移、表現を示しており；さらに、組み合わせた抗原ｇＣｇＤ及びｇＨｇＬは同時発現することが分った（データは示さず）。このことは、対照（ベクターのみ）からの血清との抗原の結合がないことに対比して、抗原で免疫した動物の血清（１：２００希釈）における前述の抗原とのＭＨＣクラスＩの結合によって証拠付けられた。

【0231】

ｃ）ＣｅＨＶ１抗原及び２９３Ｔ細胞における発現
上記実施例１及びＨＣＭＶに関する上記実施例で提供されたのと同じ戦略を用いて、ＣｅＨＶ１抗原を選択し、核酸構築物を作製した。前述に基づいて選択したＣｅＨＶ１抗原は、ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ及びｇＤである。さらに本明細書で議論されたようなＣｅＨＶ１−ｇＨｇＬ及びＣｅＨＶ１−ｇＣｇＤを含む組み合わせを作製した。

【0232】

ＣｅＨＶ１−ｇＢ、ｇＣ及びｇＤが形質移入した細胞の表面で発現されるのが見い出されたということは、細胞による有効な翻訳、転移、表現を示しており；さらに、組み合わせた抗原ｇＣｇＤは同時発現することが分った（データは示さず）。このことは、対照（ベクターのみ）からの血清との抗原の結合がないことに対比して、抗原で免疫した動物の血清（１：２００希釈）における前述の抗原とのＭＨＣクラスＩの結合によって証拠付けられた。

【0233】

上記の同じペプチドによる免疫付与は、生体内で強固な抗体を誘導することが分った（データは示さず）。

【0234】

ｄ）ＶＺＶ抗原及び２９３Ｔ細胞における発現
上記実施例１及びＨＣＭＶに関する上記実施例で提供されたのと同じ戦略を用いて、ＶＺＶ抗原を選択し、核酸構築物を作製した。前述に基づいて選択したＶＺＶ抗原は、ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ、ｇＫ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＥ及びｇＩである。さらに本明細書で議論されたようなＶＺＶ−ｇＨｇＬ、ＶＺＶ−ｇＭｇＮ及びＶＺＶ−ｇＥｇＩを含む組み合わせを作製した。

【0235】

形質移入した細胞の表面上での発現について、組み合わせ抗原ｇＨｇＬ、ｇＭｇＮ及びｇＥｇＩを含めてＶＺＶ−ｇＢ、ｇＨ、ｇＬ、ｇＣ、ｇＫ、ｇＭ、ｇＮ、ｇＥ及びｇＩを解析するであろう。このことは、対照（ベクターのみ）からの血清で検出される抗原の結合がないことに対比して、抗原で免疫した動物の血清（１：２００希釈）における前述の抗原とのＭＨＣクラスＩの結合によって証拠付けられるであろう。

【0236】

上記の同じペプチドによる免疫付与は、生体内で強固な抗体を誘導することが分った（データは示さず）。

【0237】

実施例１６：中和抗体のデータ
ＨＳＶ１についてはＨＳＶ１−ｇＢ若しくはＨＳＶ１−ｇＣｇＤのいずれか
又はＨＳＶ２についてはＨＳＶ２−ｇＢ若しくはＨＳＶ２−ｇＣｇＤのいずれかのプラスミドのみによる免疫付与はＶｅｒｏ細胞を用いて中和活性を示した。ＨＳＶ１のプラスミドはＨＳＶ１臨床ウイルスＨＳＶ１株ＮＳを中和し、ＨＳＶ２のプラスミドはＨＳＶ２臨床ウイルスＨＳＶ２株ＭＳを中和した。図２０ａ及び図２０ｂを参照のこと。複数のヘルペスウイルスファミリー特異的なプラスミドの組み合わせはさらに多価で、そのようなヘルペスウイルスの中和のレベルをさらに高めると思われる。

【0238】

実施例１７：ＨＳＶ１
２、３、４及び５の組み合わせにおける５つの列挙したＨＳＶ１抗原の入れ替えには以下が含まれ得る。２抗原：ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ． Ｔｈｒｅｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ： ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ． Ｆｏｕｒ ａｎｔｉｇｅｎｓ： ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ． Ｆｉｖｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ： ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ

【0239】

入れ替えは複数のプラスミドに存在し得る。プラスミド１つにおける２つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤが挙げられる。プラスミド２つにおける２つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤが挙げられる。プラスミド１つにおける３つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤが挙げられる。プラスミド２つにおける３つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ； ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ； ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬが挙げられる。プラスミド３つにおける３つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤが挙げられる。プラスミド１つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤが挙げられる。プラスミド２つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＤが挙げられる。プラスミド３つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ， ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ， ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ； ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ， ＨＳＶ１−ｇＢ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＤ， ＨＳＶ１−ｇＢ ＨＳＶ１−ｇＣ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ， ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ； ＨＳＶ１−ｇＢ ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＨ ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＬ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣ； ＨＳＶ１−ｇＢ ＨＳＶ１−ｇＤ， 及び ＨＳＶ１−ｇＨ， 及び ＨＳＶ１−ｇＣが挙げられる。プラスミド４つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ、ＨＳＶ１−ｇＨ、ＨＳＶ１−ｇＬ、ＨＳＶ１−ｇＣが挙げられる。プラスミド５つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ１−ｇＢ、ＨＳＶ１−ｇＨ、ＨＳＶ１−ｇＬ、ＨＳＶ１−ｇＣ、ＨＳＶ１−ｇＤが挙げられる。局在化及び細胞内の抗原輸送を検出する実験によって、ＨＣＭＶの場合のように、細胞におけるｇＨ及びｇＬの同時発現は、他方の非存在下で一方のタンパク質が発現される場合生じない細胞表面への輸送を生じることが示された。

【0240】

実施例１８：ＨＳＶ２
２、３、４及び５の組み合わせにおける５つの列挙したＨＳＶ２抗原の入れ替えには以下が含まれ得る。２抗原：ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ． Ｔｈｒｅｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ： ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ． Ｆｏｕｒ ａｎｔｉｇｅｎｓ： ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ． Ｆｉｖｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ： ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ

【0241】

入れ替えは複数のプラスミドに存在し得る。プラスミド１つにおける２つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤが挙げられる。プラスミド２つにおける２つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤが挙げられる。プラスミド１つにおける３つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤが挙げられる。プラスミド２つにおける３つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ； ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ； ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬが挙げられる。プラスミド３つにおける３つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤが挙げられる。プラスミド１つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤが挙げられる。プラスミド２つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＤが挙げられる。プラスミド３つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ， ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ， ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ； ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ， ＨＳＶ２−ｇＢ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＤ， ＨＳＶ２−ｇＢ ＨＳＶ２−ｇＣ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ， ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ； ＨＳＶ２−ｇＢ ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＨ ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＬ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣ； ＨＳＶ２−ｇＢ ＨＳＶ２−ｇＤ， 及び ＨＳＶ２−ｇＨ， 及び ＨＳＶ２−ｇＣが挙げられる。プラスミド４つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ、ＨＳＶ２−ｇＨ、ＨＳＶ２−ｇＬ、ＨＳＶ２−ｇＣが挙げられる。プラスミド５つにおける４つの抗原の例には、ＨＳＶ２−ｇＢ、ＨＳＶ２−ｇＨ、ＨＳＶ２−ｇＬ、ＨＳＶ２−ｇＣ、ＨＳＶ２−ｇＤが挙げられる。

【0242】

実施例１９：ＶＺＶ
２、３、４及び５の組み合わせにおける５つの列挙したＶＺＶ抗原の入れ替えには以下が含まれ得る。２抗原：ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ． ３抗原： ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ． ４抗原： ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ． ５抗原： ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ

【0243】

入れ替えは複数のプラスミドに存在し得る。プラスミド１つにおける２つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮが挙げられる。プラスミド２つにおける２つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮが挙げられる。プラスミド１つにおける３つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮが挙げられる。プラスミド２つにおける３つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ； ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ； ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＬが挙げられる。プラスミド３つにおける３つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮが挙げられる。プラスミド１つにおける４つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮが挙げられる。プラスミド２つにおける４つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＮが挙げられる。プラスミド３つにおける４つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ， ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ， ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ； ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ， ＶＺＶ−ｇＢ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＮ， ＶＺＶ−ｇＢ ＶＺＶ−ｇＭ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ， ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ； ＶＺＶ−ｇＢ ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＨ ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＬ， 及び ＶＺＶ−ｇＭ； ＶＺＶ−ｇＢ ＶＺＶ−ｇＮ， 及び ＶＺＶ−ｇＨ， 及び ＶＺＶ−ｇＭが挙げられる。プラスミド４つにおける４つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ、ＶＺＶ−ｇＨ、ＶＺＶ−ｇＬ、ＶＺＶ−ｇＭが挙げられる。プラスミド５つにおける４つの抗原の例には、ＶＺＶ−ｇＢ、ＶＺＶ−ｇＨ、ＶＺＶ−ｇＬ、ＶＺＶ−ｇＭ、ＶＺＶ−ｇＮが挙げられる。

【図18a】

【図18c】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16-1】

【図16-2】

【図17-1】

【図17-2】

【図17-3】

【図18b】

【図18d】

【図19】

【図20】

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]