特許 6104257 ピロロベンゾジアゼピンおよびそのコンジュゲート

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6104257

(24)【登録日】2017年3月10日

(45)【発行日】2017年3月29日

(54)【発明の名称】ピロロベンゾジアゼピンおよびそのコンジュゲート

(51)【国際特許分類】

   C07K 16/00 20060101AFI20170316BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20170316BHJP

   C07K 16/32 20060101ALI20170316BHJP

   C07D 519/00 20060101ALI20170316BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20170316BHJP

   A61K 31/5517 20060101ALI20170316BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20170316BHJP

【ＦＩ】

   C07K16/00ZNA

   C07K16/28

   C07K16/32

   C07D519/00 311

   C07D519/00CSP

   A61K39/395 T

   A61K31/5517

   A61P35/00

【請求項の数】30

【全頁数】108

(21)【出願番号】特願2014-535895(P2014-535895)

(86)(22)【出願日】2012年10月12日

(65)【公表番号】特表2014-534199(P2014-534199A)

(43)【公表日】2014年12月18日

(86)【国際出願番号】US2012059864

(87)【国際公開番号】WO2013055987

(87)【国際公開日】20130418

【審査請求日】2015年10月8日

(31)【優先権主張番号】61/547,187

(32)【優先日】2011年10月14日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】508098350

【氏名又は名称】メドイミューン・リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ

(73)【特許権者】

【識別番号】509012625

【氏名又は名称】ジェネンテック， インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000523

【氏名又は名称】アクシス国際特許業務法人

(72)【発明者】

【氏名】ジョン・エイ・フライゲア

(72)【発明者】

【氏名】ジャネット・エル・ガンズナートースト

(72)【発明者】

【氏名】トーマス・ピロー

(72)【発明者】

【氏名】フィリップ・ウィルソン・ハワード

(72)【発明者】

【氏名】ルーク・マスターソン

【審査官】 戸来 幸男

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００９−５２４６３６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１１／１３０５９８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 Bioorg. Med. Chem. Lett.，２００８年，vol.18, no.13，pp.3769-3773

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｋ １６／００−１６／４６

Ｃ０７Ｄ ４８７／００−４８７／２２

Ｃ０７Ｄ ５１９／００−５１９／０６

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ／

ＷＰＩＤＳ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＰｕｂＭｅｄ

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ａ）のコンジュゲートであって、

【化1】

式Ａ中、前記破線が、Ｃ１とＣ２との間、または、Ｃ２とＣ３との間における二重結合の任意選択の存在を示し；
Ｒ²が、Ｈ、ＯＨ、＝Ｏ、＝ＣＨ₂、ＣＮ、Ｒ、ＯＲ、＝ＣＨ−Ｒ^D、＝Ｃ（Ｒ^D）₂、Ｏ−ＳＯ₂−Ｒ、ＣＯ₂ＲおよびＣＯＲから独立して選択され、および場合によりさらに、ハロまたはジハロから選択され；Ｒ^Dが、Ｒ、ＣＯ₂Ｒ、ＣＯＲ、ＣＨＯ、ＣＯ₂Ｈおよびハロから独立して選択され；Ｒ⁶およびＲ⁹が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎおよびハロから独立して選択され；Ｒ⁷が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎおよびハロから独立して選択され；Ｙが、単結合および、式Ａ１またはＡ２：

【化2】

の基から選択され、式Ａ１およびＡ２中、Ｎが、前記基がＰＢＤ部分のＮ１０に結合する位置を示し；Ｒ^L1およびＲ^L2が、Ｈおよびメチルから独立して選択されるか、または、それらが結合されている炭素原子と共に、シクロプロピレン基を形成し；ＣＢＡが、細胞結合剤を表わし；Ｑが、Ｏ、ＳおよびＮＨから独立して選択され；Ｒ¹¹が、ＨもしくはＲのいずれかであるか、または、ＱがＯである場合、ＳＯ₃Ｍであり、Ｍが、金属カチオンであり；ＲおよびＲ’が、それぞれ独立して、場合により置換されているＣ_1-12アルキル、Ｃ_3-20ヘテロシクリルおよびＣ_5-20アリールの基から選択され、場合により、前記基ＮＲＲ’との関連において、ＲおよびＲ’が、それらが付着されている窒素原子と共に、場合により置換されている４−、５−、６−または７−員の複素環を形成し；Ｒ¹²、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁹およびＲ¹⁷が、それぞれ、Ｒ²、Ｒ⁶、Ｒ⁹およびＲ⁷について規定の通りであり；Ｒ”が、Ｃ_3-12アルキレン基であり、前記アルキレン基は、鎖が、１つ以上のヘテロ原子、例えば、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅおよび／または芳香環、例えば、ベンゼンもしくはピリジンに割り込まれていてもよく、前記芳香環は、環が場合により置換されていてもよく；ＸおよびＸ’が、Ｏ、ＳおよびＮ（Ｈ）から独立して選択される、コンジュゲート。

【請求項2】

Ｒ^L1およびＲ^L2が両方とも、Ｈである、請求項１に記載のコンジュゲート。

【請求項3】

Ｒ^L1およびＲ^L2の一方がＨであり、他方がメチルである、請求項１に記載のコンジュゲート。

【請求項4】

Ｙが、単結合である、請求項１から３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項5】

Ｒ⁹およびＲ¹⁹が、Ｈである、
及び／又は
Ｒ⁶およびＲ¹⁶が、Ｈである、請求項１から４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項6】

Ｒ⁷およびＲ¹⁷が両方とも、ＯＲ^7Aであり、Ｒ^7Aが、場合により置換されているＣ_1-4アルキルである、請求項１から５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項7】

Ｒ^7Aが、Ｍｅである、請求項６に記載のコンジュゲート。

【請求項8】

Ｘが、Ｏである、請求項１から７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項9】

Ｒ¹¹が、Ｈである、請求項１から８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項10】

各モノマーユニットにおけるＣ２とＣ３との間に、二重結合が存在する、
及び
Ｒ²およびＲ¹²が、独立して、Ｒである、請求項１から９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項11】

Ｒ²およびＲ¹²が、独立して、場合により置換されているＣ_5-20アリールである、請求項１０に記載のコンジュゲート。

【請求項12】

Ｒ²およびＲ¹²が、＝Ｏ、＝ＣＨ₂、＝ＣＨ−Ｒ^D、＝Ｃ（Ｒ^D）₂から独立して選択される、請求項１から９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項13】

Ｒ²およびＲ¹²が、＝ＣＨ₂である、請求項１２に記載のコンジュゲート。

【請求項14】

Ｒ”が、Ｃ₃アルキレン基またはＣ₅アルキレン基である、請求項１から１３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項15】

前記細胞結合剤が、抗体またはその活性なフラグメントである、
及び
前記抗体または抗体フラグメントが、腫瘍関連抗原に対する抗体または抗体フラグメントである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項16】

前記抗体または抗体フラグメントが、（１）−（３６）：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（ＩＢ型骨形成タンパク質受容体）；
（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５）；
（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原）；
（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６）；
（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ）；
（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質キャリアファミリ３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム−依存性リン酸トランスポーター３ｂ）；
（７）Ｓｅｍａ ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、Ｓｅｍａｐｈｏｒｉｎ ５ｂ Ｈｌｏｇ、ｓｅｍａドメイン、７回トロンボスポンジン繰り返し（１型および１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）および短い細胞質ドメイン、（ｓｅｍａｐｈｏｒｉｎ）５Ｂ）；
（８）ＰＳＣＡ ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２遺伝子）；
（９）ＥＴＢＲ（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ Ｂ型受容体）；
（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、推定タンパク質ＦＬＪ２０３１５）；
（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺ガン関連遺伝子１、前立腺ガン関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２、６回膜貫通型前立腺タンパク質）；
（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体ポテンシャルカチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４）；
（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形ガン腫由来の増殖因子）；
（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン・バー・ウイルス受容体）またはＨｓ ７３７９２）；
（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン−関連ベータ）、Ｂ２９）；
（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ）；
（１７）ＨＥＲ２；
（１８）ＮＣＡ；
（１９）ＭＤＰ；
（２０）ＩＬ２０Ｒα；
（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ；
（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ；
（２３）ＡＳＬＧ６５９；
（２４）ＰＳＣＡ；
（２５）ＧＥＤＡ；
（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３）；
（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム）；
（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン関連アルファ）；
（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１）；
（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット）；
（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５）；
（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）；
（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチ繰り返し（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質）；
（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１）；
（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グルブリンスーパーファミリー受容体転座関連２）；および、
（３６）ＴＥＮＢ２（推定膜貫通プロテオグリカン）
から選択される１つ以上の腫瘍関連抗原または細胞表面受容体に結合する抗体である、請求項１５に記載のコンジュゲート。

【請求項17】

前記抗体または抗体フラグメントが、システイン改変抗体である、請求項１５に記載のコンジュゲート。

【請求項18】

前記抗体が、トラスツズマブである、請求項１５または請求項１７に記載のコンジュゲート。

【請求項19】

Ａｂが、抗−ＨＥＲ２抗体、抗−Ｓｔｅａｐ１抗体または抗−ＣＤ２２抗体である、請求項１５または請求項１７に記載のコンジュゲート。

【請求項20】

抗体（Ａｂ）に対する、前記ドラッグ（Ｄ）のドラッグ充填（ｐ）が、１から約８の整数である、請求項１５に記載のコンジュゲート。

【請求項21】

前記抗体−ドラッグコンジュゲート化合物の混合物を含み、前記抗体−ドラッグコンジュゲート化合物の混合物における抗体あたりの平均ドラッグ充填が、約２から約５である、請求項２０に記載のコンジュゲート。

【請求項22】

治療に使用するための、請求項１から２１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項23】

対象における増殖性疾患の処置に使用するための、請求項１から２１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項24】

前記疾患が、ガンである、請求項２３に記載のコンジュゲート。

【請求項25】

請求項１から２１のいずれか一項に記載のコンジュゲートと、薬学的に許容され得る希釈剤、キャリアまたは賦形剤を含む、薬学的組成物。

【請求項26】

さらに、治療的に有効量の化学療法剤を含む、請求項２５に記載の薬学的組成物。

【請求項27】

式（Ｅ）：

【化3】

の化合物であって、
式（Ｅ）中、前記破線が、Ｃ１とＣ２との間、または、Ｃ２とＣ３との間における二重結合の任意選択の存在を示し；Ｒ²、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁹、Ｒ¹²、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁹、Ｘ、Ｘ’、Ｒ”、Ｙ、Ｒ^L1およびＲ^L2が、請求項１から１４のいずれか一項に規定の通りである、
化合物ならびに、その塩および溶媒和物。

【請求項28】

【化4】

である、請求項２７に記載の化合物。

【請求項29】

【化5】

である、請求項２７に記載の化合物。

【請求項30】

細胞結合剤を、請求項２７から２９のいずれか一項に規定の化合物（Ｄ）と反応させる工程を含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載のコンジュゲートを調製する方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）、具体的には、細胞結合剤に対するリンカーの形態にある、不安定なＮ１０保護基を有するピロロベンゾジアゼピンに関する。

【背景技術】

【0002】

ピロロベンゾジアゼピン
一部のピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）は、特定のＤＮＡ配列を認識し、同ＤＮＡに結合する能力を有する。好ましい配列は、ＰｕＧＰｕである。最初のＰＢＤ抗腫瘍抗生物質であるアントラマイシンは、１９６５年に発見された（Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９３−５７９５（１９６５）；Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９１−５７９３（１９６５））（非特許文献１および２）。ついで、多くの天然由来のＰＢＤが報告され、１０より多くの合成経路が、各種の類似体に対して開発された（Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４３３−４６５（１９９４）；Ａｎｔｏｎｏｗ，Ｄ．ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１ １１１（４），２８１５−２８６４））（非特許文献３および４）。ファミリーメンバーとしては、アベイマイシン（Ｈｏｃｈｌｏｗｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４０，１４５−１４８（１９８７））（非特許文献５）、チカマイシン（Ｋｏｎｉｓｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３７，２００−２０６（１９８４））（非特許文献６）、ＤＣ−８１（特開昭５８−１８０４８７号公報（特許文献１）、Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔ．，２６，７６７−７７２（１９９０）；Ｂｏｓｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８，７５１−７５８（１９９２）（非特許文献７および８）、マゼトラマイシン（Ｋｕｍｉｎｏｔｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３３，６６５−６６７（１９８０））（非特許文献９）、ネオトラマイシンＡおよびＢ（Ｔａｋｅｕｃｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，９３−９６（１９７６））（非特許文献１０）、ポロトラマイシン（Ｔｓｕｎａｋａｗａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１３６６−１３７３（１９８８））（非特許文献１１）、プロトラカルシン（Ｓｈｉｍｉｚｕ，ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，２４９２−２５０３（１９８２）；Ｌａｎｇｌｅｙ ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，９１−９７（１９８７））（非特許文献１２および１３）、シバノマイシン（ＤＣ−１０２）（Ｈａｒａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，７０２−７０４（１９８８）；Ｉｔｏｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１２８１−１２８４（１９８８））（非特許文献１４および１５）、シビロマイシン（Ｌｅｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１０，２９９２−２９９３（１９８８））（非特許文献１６）および、トママイシン（Ａｒｉｍａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２５，４３７−４４４（１９７２））（非特許文献１７）があげられる。ＰＢＤは、一般構造：

【化1】

である。

【0003】

前記ＰＢＤは、その芳香環Ａおよびピロロ環Ｃの両方における置換基の数、種類および位置、ならびに、前記Ｃ環の飽和度合いにおいて異なる。Ｂ環には、ＤＮＡのアルキル化を担う求電子中心である、Ｎ１０−Ｃ１１位に、イミン（Ｎ＝Ｃ）、カルビノールアミン（ＮＨ−ＣＨ（ＯＨ））またはカルビノールアミンメチルエーテル（ＮＨ−ＣＨ（ＯＭｅ））のいずれかが存在する。公知の天然物は全て、キラルＣ１１ａ位において、（Ｓ）−型（コンフィグレーション）を有する。キラルＣ１１ａ位は、前記Ｃ環からＡ環に向かって見た場合、右回りの捻じれを与える。これは、Ｂ−型ＤＮＡの小溝に対して、イソらせん性（ｉｓｏｈｅｌｉｃｉｔｙ）に適した三次元形状を与え、結合部位におけるぴったり合うフィットをもたらす（Ｋｏｈｎ，Ｉｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ＩＩＩ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．３−１１（１９７５）；Ｈｕｒｌｅｙ ａｎｄ Ｎｅｅｄｈａｍ−ＶａｎＤｅｖａｎｔｅｒ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，１９，２３０−２３７（１９８６））（非特許文献１８および１９）。前記小溝に付加体を形成するその能力は、それらが、ＤＮＡプロセシングを妨げることを可能にするため、抗腫瘍剤としてのその使用を可能にする。

【0004】

本発明者らは、以前に国際公開第２００５／０８５２５１号パンフレット（特許文献２）において、Ｃ２アリール置換基を有する二量体ＰＢＤ化合物、例えば

【化2】

を開示した。
これらの化合物は、非常に有用な細胞毒薬物であることが示されてきた。

【0005】

特に有利なピロロベンゾジアゼピン化合物は、Ｇｒｅｇｓｏｎら（Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９９，７９７−７９８）により、化合物１として記載され、Ｇｒｅｇｓｏｎら（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００１，４４，１１６１−１１７４）により、化合物４ａとして記載されている。ＳＪＧ−１３６としても公知のこの化合物は、以下に示される。

【化3】

【0006】

本発明者らは、前記ＰＢＤ化合物が、それをＮ１０位において、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて除去可能な窒素保護基で保護することにより、プロドラッグとして使用され得ることを、以前に開示した（国際公開第００／１２５０７号パンフレット）。これらの保護基の多くは、カルバメートであり、例えば、化学構造：

【化4】

である。前記化学構造中、前記アスタリスク（^*）は、前記ＰＢＤのＮ１０原子への付着点を示す。

【0007】

本発明者らは、前記Ｎ１０位に窒素カルバメート保護基を有するＰＢＤ化合物の調製も説明してきた（国際公開第２００５／０２３８１４号パンフレット）。前記保護基は、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合を遊離するために、前記ＰＢＤ部分のＮ１０位から除去可能である。保護基の範囲としては、例えば、酵素の作用により開裂され得る基が記載されている。

【0008】

国際公開第２００７／０８５９３０号パンフレットには、細胞結合剤、例えば、抗体への結合のためのリンカー基を有する、二量体ＰＢＤ化合物の調製が記載されている。前記リンカーは、前記二量体におけるモノマーＰＢＤユニットを結合するブリッジに存在する。

【0009】

抗体−ドラッグコンジュゲート 抗体療法は、ガン、免疫および血管新生の障害を有する患者の標的化処置に関して確立されてきた（Ｃａｒｔｅｒ，Ｐ．（２００６）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６：３４３−３５７）。細胞毒薬物または細胞増殖抑制剤、すなわち、ガンの処置において腫瘍細胞を殺すか、または、阻害するドラッグの局所輸送のために、抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）、すなわち、免疫コンジュゲートを使用することは、腫瘍への前記ドラッグ部分の輸送、および、そこでの細胞内蓄積を目的とする。一方、これらの非コンジュゲート薬剤の全身投与は、正常な細胞および除去されるべき腫瘍細胞に対して、許容し得ないレベルの細胞毒性をもたらす場合がある（Ｘｉｅ ｅｔ ａｌ（２００６）Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．６（３）：２８１−２９１；Ｋｏｖｔｕｎ ｅｔ ａｌ（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６６（６）：３２１４−３１２１；Ｌａｗ ｅｔ ａｌ（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６６（４）：２３２８−２３３７；Ｗｕ ｅｔ ａｌ（２００５）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（９）：１１３７−１１４５；Ｌａｍｂｅｒｔ Ｊ．（２００５）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ．ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：５４３−５４９；Ｈａｍａｎｎ Ｐ．（２００５）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ １５（９）：１０８７−１１０３；Ｐａｙｎｅ，Ｇ．（２００３）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ３：２０７−２１２；Ｔｒａｉｌ ｅｔ ａｌ（２００３）Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２：３２８−３３７；Ｓｙｒｉｇｏｓ ａｎｄ Ｅｐｅｎｅｔｏｓ（１９９９）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １９：６０５−６１４）。

【0010】

したがって、最少の毒性で最大の効果が求められる。ＡＤＣを設計および改良するための努力が、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）の選択ならびに、薬物の作用機序、ドラッグ−結合、ドラッグ／抗体比（充填）およびドラッグ−遊離特性に集中されてきた（Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ ａｌ．，２００８ｂ Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２６（８）：９２５−９３２；Ｄｏｒｎａｎ ｅｔ ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ １１４（１３）：２７２１−２７２９；米国特許第７５２１５４１；７７２３４８５号明細書；国際公開第２００９／０５２２４９号パンフレット；ＭｃＤｏｎａｇｈ（２００６）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ． Ｄｅｓｉｇｎ＆Ｓｅｌ．１９（７）：２９９−３０７；Ｄｏｒｏｎｉｎａ ｅｔ ａｌ（２００６）Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１７：１１４−１２４；Ｅｒｉｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６６（８）：１−８；Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ（２００５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１１：８４３−８５２；Ｊｅｆｆｒｅｙ ｅｔ ａｌ（２００５）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４８：１３４４−１３５８；Ｈａｍｂｌｅｔｔ ｅｔ ａｌ（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１０：７０６３−７０７０）。ドラッグ部分は、チューブリン結合、ＤＮＡ結合またはトポイソメラーゼ阻害を含むメカニズムにより、その細胞毒性および細胞増殖抑制の効果を付与し得る。一部の細胞毒薬物は、大きな抗体またはタンパク質受容体リガンドにコンジュゲートされた場合、不活性になるか、または、ほとんど活性でない傾向がある。

【0011】

本発明者らは、細胞結合剤を含むＰＢＤコンジュゲート、および具体的には、ＰＢＤ抗体コンジュゲートを形成するための新たなアプローチを開発してきた。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0012】

【特許文献1】特開昭５８−１８０４８７号公報

【特許文献2】国際公開第２００５／０８５２５１号パンフレット

【非特許文献】

【0013】

【非特許文献1】Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９３−５７９５（１９６５）

【非特許文献2】Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９１−５７９３（１９６５）

【非特許文献3】Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４３３−４６５（１９９４）

【非特許文献4】Ａｎｔｏｎｏｗ，Ｄ．ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１ １１１（４），２８１５−２８６４）

【非特許文献5】Ｈｏｃｈｌｏｗｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４０，１４５−１４８（１９８７）

【非特許文献6】Ｋｏｎｉｓｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３７，２００−２０６（１９８４）

【非特許文献7】Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔ．，２６，７６７−７７２（１９９０）

【非特許文献8】Ｂｏｓｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８，７５１−７５８（１９９２）

【非特許文献9】Ｋｕｍｉｎｏｔｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３３，６６５−６６７（１９８０）

【非特許文献10】Ｔａｋｅｕｃｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，９３−９６（１９７６）

【非特許文献11】Ｔｓｕｎａｋａｗａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１３６６−１３７３（１９８８）

【非特許文献12】Ｓｈｉｍｉｚｕ，ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，２４９２−２５０３（１９８２）

【非特許文献13】Ｌａｎｇｌｅｙ ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，９１−９７（１９８７）

【非特許文献14】Ｈａｒａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，７０２−７０４（１９８８）

【非特許文献15】Ｉｔｏｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１２８１−１２８４（１９８８）

【非特許文献16】Ｌｅｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１０，２９９２−２９９３（１９８８）

【非特許文献17】Ａｒｉｍａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２５，４３７−４４４（１９７２）

【非特許文献18】Ｋｏｈｎ，Ｉｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ＩＩＩ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．３−１１（１９７５）

【非特許文献19】Ｈｕｒｌｅｙ ａｎｄ Ｎｅｅｄｈａｍ−ＶａｎＤｅｖａｎｔｅｒ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，１９，２３０−２３７（１９８６）

【発明の概要】

【0014】

全体的な態様において、本発明は、細胞結合剤への特定の硫黄リンカーを介して、前記Ｎ１０位で結合されている、ＰＢＤ二量体化合物を含むコンジュゲートを提供する。前記細胞結合剤は、好ましくは、抗体である。

【0015】

第１の態様では、本発明は、式（Ａ）：

【化5】

の新規なコンジュゲート化合物ならびに、その塩および溶媒和物を提供する。

【0016】

式（Ａ）中、前記破線が、Ｃ１とＣ２との間、または、Ｃ２とＣ３との間における二重結合の任意選択の存在を示し；
Ｒ²が、Ｈ、ＯＨ、＝Ｏ、＝ＣＨ₂、ＣＮ、Ｒ、ＯＲ、＝ＣＨ−Ｒ^D、＝Ｃ（Ｒ^D）₂、Ｏ−ＳＯ₂−Ｒ、ＣＯ₂ＲおよびＣＯＲから独立して選択され、および場合によりさらに、ハロまたはジハロから選択され；Ｒ^Dが、Ｒ、ＣＯ₂Ｒ、ＣＯＲ、ＣＨＯ、ＣＯ₂Ｈおよびハロから独立して選択され；Ｒ⁶およびＲ⁹が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎおよびハロから独立して選択され；Ｒ⁷が、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎおよびハロから独立して選択され；Ｙが、単結合および、式Ａ１またはＡ２：

【化6】

の基から選択され、式Ａ１およびＡ２中、Ｎが、前記基がＰＢＤ部分のＮ１０に結合する位置を示し；Ｒ^L1およびＲ^L2が、Ｈおよびメチルから独立して選択されるか、または、それらが結合されている炭素原子と共に、シクロプロピレン基を形成し；ＣＢＡが、細胞結合剤を表わし；Ｑが、Ｏ、ＳおよびＮＨから独立して選択され；Ｒ¹¹が、ＨもしくはＲのいずれかであるか、または、ＱがＯである場合、ＳＯ₃Ｍであり、Ｍが、金属カチオンであり；ＲおよびＲ’が、それぞれ独立して、場合により置換されているＣ_1-12アルキル、Ｃ_3-20ヘテロシクリルおよびＣ_5-20アリールの基から選択され、場合により、前記基ＮＲＲ’との関連において、ＲおよびＲ’が、それらが付着されている窒素原子と共に、場合により置換されている４−、５−、６−または７−員の複素環を形成し；Ｒ¹²、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁹およびＲ¹⁷が、それぞれ、Ｒ²、Ｒ⁶、Ｒ⁹およびＲ⁷について規定の通りであり；Ｒ”が、Ｃ_3-12アルキレン基であり、前記アルキレン基は、鎖が、１つ以上のヘテロ原子、例えば、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅおよび／または芳香環、例えば、ベンゼンもしくはピリジンに割り込まれていてもよく、前記芳香環は、環が場合により置換されていてもよく；ＸおよびＸ’が、Ｏ、ＳおよびＮ（Ｈ）から独立して選択される。

【0017】

このため、式Ａは、Ｙに応じて、下記式Ａ−Ｉ、Ａ−ＩＩおよびＡ−ＩＩＩ：

【化7】

から選択される。

【0018】

式Ａの化合物において、

【化8】

は、硫黄結合基である。

【0019】

本発明の第２の態様は、標的部位に、式（Ｂ）または（Ｃ）：

【化9】

【化10】

の化合物ならびに、その塩および溶媒和物を提供するための、前記第１の態様のコンジュゲートの使用に関する。式（Ｂ）および（Ｃ）中、Ｑが、Ｏ、ＳおよびＮＨから独立して選択され；および、Ｒ¹¹が、ＨもしくはＲのいずれかであるか、または、ＱがＯである場合、ＳＯ₃Ｍであり、Ｍが、金属カチオンであること以外は、前記基は、前記第１の態様についての通りである。

【0020】

本発明の第３の態様は、本発明のコンジュゲート化合物の調製に使用するための、式（Ｄ）：

【化11】

の化合物ならびに、その塩および溶媒和物も提供する。式（Ｄ）中、前記基は、本発明の第１の態様に規定の通りである。

【0021】

上記化合物では、前記５−員環は、

【化12】

により表され、
（ａ）

【化13】

（Ｅ）中、Ｒ²とＲ¹またはＲ³のいずれかとが、それらが付着されているＣ環の炭素原子と共に、場合により置換されているベンゼン環を形成し；Ｒ¹およびＲ²が、それらが付着されているＣ環の炭素原子と共に、場合により置換されているベンゼン環を形成する場合にＶがＣであること、ならびに、Ｒ³およびＲ²が、それらが付着されているＣ環の炭素原子と共に、場合により置換されているベンゼン環を形成する場合にＷがＣであることを例外として、ＶおよびＷは、（ＣＨ₂）_n、Ｏ、Ｓ、ＮＲ、ＣＨＲおよびＣＲＲ’からそれぞれ選択され、ｎは、１、２または３であり、；および、
（ｂ）

【化14】

（Ｆ）中、Ｔは、ＣＨ₂、ＮＲ、ＣＯ、ＢＨ、ＳＯおよびＳＯ₂から選択され；Ｕは、ＣＨ₂、ＮＲ、ＯおよびＳから選択され；Ｙは、（ＣＨ₂）_nであり、ｎは、１、２、３または４であり；ただし、Ｔ、ＵおよびＹが全てＣＨ₂であることはない、
から選択される環により置き替えられてもよい。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】図１は、（１）媒体 ２０ｍＭ ヒスチジンアセテート、ｐＨ５．５、２４０ｍＭ スクロース、（２）１０ｍｇ／ｋｇでのｘＣＤ２２−２２（１０３）、（３）１ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）、（４）３ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）および（５）１０ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）による、０日における単独ｉｖ投与後、ＣＲＬ ｎｕ／ｎｕマウス内に接種された、乳がんモデル ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２ Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍における、ｉｎ ｖｉｖｏでの経時的な平均腫瘍体積変化のプロットを示す。

【図2】図２は、（１）媒体 ２０ｍＭ ヒスチジンアセテート、ｐＨ５．５、２４０ｍＭ スクロース、（２）６ｍｇ／ｋｇでのｘＣＤ２２−１４（１１２）、（３）１ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−１４（１１０）、（４）３ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−１４（１１０）、（５）６ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−１４（１１０）および（６）１ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）による、０日における単独ｉｖ投与後、ＣＲＬ ｎｕ／ｎｕマウス内に接種された、乳がんモデル ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２ Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍における、ｉｎ ｖｉｖｏでの経時的な平均腫瘍体積変化のプロットを示す。

【発明を実施するための形態】

【0023】

本発明は、細胞結合剤への特定のリンカーを介して、前記ＰＢＤ部分の一方におけるＮ１０位で結合されている、ＰＢＤ二量体を含むコンジュゲートを提供する。

【0024】

本発明は、対象における好ましい部位にＰＢＤ化合物を提供するのに使用するのに適している。前記コンジュゲートは、前記リンカーのいずれの部分も保持しない活性なＰＢＤ化合物を遊離させる。前記ＰＢＤ化合物の反応性に影響を及ぼし得るスタブが存在しない。

【0025】

選択
下記選択が、上記本発明の全ての態様に適用されてもよいし、または、単独の態様に関連し得る。前記選択は、任意の組み合わせで互いに組み合わせられてもよい。

【0026】

二重結合
一実施形態では、Ｃ１とＣ２との間、および、Ｃ２とＣ３との間には、二重結合は存在しない。

【0027】

一実施形態では、前記破線は、以下に示すように、Ｃ２とＣ３との間における二重結合の任意選択の存在を示す。

【0028】

【化15】

【0029】

一実施形態では、Ｒ²がＣ_5-20アリールまたはＣ_1-12アルキルである場合、Ｃ２とＣ３との間に二重結合が存在する。

【0030】

一実施形態では、前記破線は、以下に示すように、Ｃ１とＣ２との間における二重結合の任意選択の存在を示す。

【0031】

【化16】

【0032】

一実施形態では、Ｒ²がＣ_5-20アリールまたはＣ_1-12アルキルである場合、Ｃ１とＣ２との間に二重結合が存在する。

【0033】

Ｒ²
一実施形態では、Ｒ²は、Ｈ、ＯＨ、＝Ｏ、＝ＣＨ₂、ＣＮ、Ｒ、ＯＲ、＝ＣＨ−Ｒ^D、＝Ｃ（Ｒ^D）₂、Ｏ−ＳＯ₂−Ｒ、ＣＯ₂ＲおよびＣＯＲから独立して選択され、および場合によりさらに、ハロまたはジハロから選択される。

【0034】

一実施形態では、Ｒ²は、Ｈ、ＯＨ、＝Ｏ、＝ＣＨ₂、ＣＮ、Ｒ、ＯＲ、＝ＣＨ−Ｒ^D、＝Ｃ（Ｒ^D）₂、Ｏ−ＳＯ₂−Ｒ、ＣＯ₂ＲおよびＣＯＲから独立して選択される。

【0035】

一実施形態では、Ｒ²は、Ｈ、＝Ｏ、＝ＣＨ₂、Ｒ、＝ＣＨ−Ｒ^Dおよび＝Ｃ（Ｒ^D）₂から独立して選択される。

【0036】

一実施形態では、Ｒ²は、独立して、Ｈである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、＝Ｏである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、＝ＣＨ₂である。

【0037】

一実施形態では、Ｒ²は、独立して、＝ＣＨ−Ｒ^Dである。前記ＰＢＤ化合物内において、前記基＝ＣＨ−Ｒ^Dは、以下に示されるいずれかの構成を有し得る。

【0038】

【化17】

【0039】

一実施形態では、前記構成は、構成（Ｉ）である。

【0040】

一実施形態では、Ｒ²は、独立して、＝Ｃ（Ｒ^D）₂である。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、＝ＣＦ₂である。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、Ｒである。

【0041】

一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているＣ_5-20アリールである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているＣ_1-12アルキルである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているＣ_5-20アリールである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているＣ_5-7アリールである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているＣ_8-10アリールである。

【0042】

一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているフェニルである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているチエニルである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているナフチルである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているピリジルである。
一実施形態では、Ｒ²は、独立して、場合により置換されているキノリニルまたはイソキノリニルである。

【0043】

一実施形態では、Ｒ²は、１から３つの置換基を有し、１および２つがより好ましい。一置換されている基が最も好ましい。前記置換基は、任意の位置でよい。

【0044】

Ｒ²が、Ｃ_5-7アリール基である場合、１つの置換基は、好ましくは、前記化合物の残部への結合と隣接しない環原子上である。すなわち、好ましくは、前記化合物の残部への結合に対してβまたはγである。したがって、前記Ｃ_5-7アリール基がフェニルである場合、前記置換基は、好ましくは、メタ−またはパラ−位にあり、より好ましくは、パラ−位にある。

【0045】

一実施形態では、Ｒ²は、

【化18】

から選択され、前記アスタリスクは、付着点を示す。

【0046】

Ｒ²が、Ｃ_8-10アリール基、例えば、キノリニルまたはイソキノリニルである場合、前記キノリンまたはイソキノリンの環の任意の位置に、任意の数の置換基を有してもよい。一部の実施形態では、前記Ｃ_8-10アリール基は、１、２または３つの置換基を有し、これらは、（２つ以上の置換基の場合、）近位環および遠位環のいずれかまたは両方上にあり得る。

【0047】

一実施形態では、Ｒ²は、場合により置換されており、前記置換基は、以下の置換基セクションにおいて与えられた置換基から選択される。
Ｒが場合により置換されている場合、前記置換基は、好ましくは、ハロ、ヒドロキシル、エーテル、ホルミル、アシル、カルボキシ、エステル、アシルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、ウレイド、ニトロ、シアノおよびチオエーテルから選択される。

【0048】

一実施形態では、ＲまたはＲ²は、場合により置換されている場合、前記置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、ハロ、ＣＯ₂Ｒ、ＣＯＲ、ＣＯＮＨ₂、ＣＯＮＨＲおよびＣＯＮＲＲ’からなる群から選択される。

【0049】

Ｒ²が、Ｃ_1-12アルキルである場合、任意選択の置換基は、さらに、Ｃ_3-20ヘテロシクリルおよびＣ_5-20アリールの基を含み得る。

【0050】

Ｒ²が、Ｃ_3-20ヘテロシクリルである場合、任意選択の置換基は、さらに、Ｃ_1-12アルキルおよびＣ_5-20アリールの基を含み得る。

【0051】

Ｒ²が、Ｃ_5-20アリール基である場合、任意選択の置換基は、さらに、Ｃ_3-20ヘテロシクリルおよびＣ_1-12アルキルの基を含み得る。

【0052】

「アルキル」の用語は、部分集合であるアルケニルおよびアルキニルならびにシクロアルキルを包含すると理解される。このため、Ｒ²が、場合により置換されているＣ_1-12アルキルである場合、前記アルキル基は、１つ以上の炭素−炭素の二重結合または三重結合を、場合により含むと理解される。前記結合は、コンジュゲート系の一部を形成し得る。一実施形態では、前記場合により置換されているＣ_1-12アルキル基は、少なくとも１つの炭素−炭素の二重結合または三重結合を含み、この結合は、Ｃ１とＣ２との間、または、Ｃ２とＣ３との間に存在する二重結合とコンジュゲートされる。一実施形態では、前記Ｃ_1-12アルキル基は、飽和Ｃ_1-12アルキル、Ｃ_2-12アルケニル、Ｃ_2-12アルキニルおよびＣ_3-12シクロアルキルから選択される基である。

【0053】

Ｒ²上の置換基がハロである場合、前記ハロは、好ましくは、ＦまたはＣｌ、より好ましくはＦである。

【0054】

Ｒ²上の置換基がエーテルである場合、一部の実施形態では、前記エーテルは、アルコキシ基、例えば、Ｃ_1-7アルコキシ基（例えば、メトキシ、エトキシ）でもよいし、または、一部の実施形態では、前記エーテルは、Ｃ_5-7アリールオキシ基（例えば、フェノキシ、ピリジロキシ、フラニロキシ）でもよい。

【0055】

Ｒ²上の置換基がＣ_1-7アルキルである場合、前記Ｃ_1-7アルキルは、好ましくは、Ｃ_1-4アルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル）でもよい。

【0056】

Ｒ²上の置換基がＣ_3-7ヘテロシクリルである場合、一部の実施形態では、前記Ｃ_3-7ヘテロシクリルは、Ｃ₆窒素含有ヘテロシクリル基、例えば、モルホリノ、チオモルホリノ、ピペリジニル、ピペラジニルでもよい。これらの基は、前記窒素原子を介して、前記ＰＢＤ部分の残部に結合され得る。これらの基は、例えば、Ｃ_1-4アルキル基により、さらに置換されてもよい。

【0057】

Ｒ²上の置換基がビス−オキシ−Ｃ_1-3アルキレンである場合、これは、好ましくは、ビス−オキシ−メチレンまたはビス−オキシ−エチレンである。

【0058】

Ｒ²に関する特に好ましい置換基としては、メトキシ、エトキシ、フルオロ、クロロ、シアノ、ビス−オキシ−メチレン、メチル−ピペラジニル、モルホリノおよびメチル−チエニルがあげられる。

【0059】

特に好ましい置換されているＲ²基としては、制限されず、４−メトキシ−フェニル、３−メトキシフェニル、４−エトキシ−フェニル、３−エトキシ−フェニル、４−メチル−フェニル、４−フルオロ−フェニル、４−クロロ−フェニル、３，４−ビスオキシメチレン−フェニル、４−メチルチエニル、４−シアノフェニル、４−フェノキシフェニル、キノリン−３−イルおよびキノリン−６−イル、イソキノリン−３−イルおよびイソキノリン−６−イル、２−チエニル、２−フラニル、メトキシナフチルおよびナフチルがあげられる。

【0060】

一実施形態では、Ｒ²は、ハロまたはジハロである。一実施形態では、Ｒ²は、−Ｆまたは−Ｆ₂であり、前記置換基は、それぞれ、（ＩＩＩ）および（ＩＶ）のように、以下に説明される。

【0061】

【化19】

【0062】

一部の実施形態では、Ｃ２とＣ３との間における二重結合が存在するか、または、前記Ｃ２置換基が二重結合により、前記ＰＢＤ環に結合される（すなわち、Ｃ２におけるＣ原子がｓｐ²中心である）かのいずれかが好ましい。

【0063】

Ｒ^D
一実施形態では、Ｒ^Dは、Ｒ、ＣＯ₂Ｒ、ＣＯＲ、ＣＨＯ、ＣＯ₂Ｈおよびハロから独立して選択される。

【0064】

一実施形態では、Ｒ^Dは、独立して、Ｒである。
一実施形態では、Ｒ^Dは、独立して、ハロである。

【0065】

Ｒ⁶
一実施形態では、Ｒ⁶は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎ−およびハロから独立して選択される。

【0066】

一実施形態では、Ｒ⁶は、Ｈ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＮＨ₂、ＮＯ₂およびハロから独立して選択される。

【0067】

一実施形態では、Ｒ⁶は、Ｈおよびハロから独立して選択される。
一実施形態では、Ｒ⁶は、独立して、Ｈである。

【0068】

一実施形態では、Ｒ⁶およびＲ⁷は共に、基−Ｏ−（ＣＨ₂）_p−Ｏ−を形成し、ｐは、１または２である。

【0069】

Ｒ⁷
Ｒ⁷は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎおよびハロから独立して選択される。

【0070】

一実施形態では、Ｒ⁷は、独立して、ＯＲである。

【0071】

一実施形態では、Ｒ⁷は、独立して、ＯＲ^7Aであり、Ｒ^7Aは、独立して、場合により置換されているＣ_1-6アルキルである。

【0072】

一実施形態では、Ｒ^7Aは、独立して、場合により置換されている飽和Ｃ_1-6アルキルである。

【0073】

一実施形態では、Ｒ^7Aは、独立して、場合により置換されているＣ_2-4アルケニルである。
一実施形態では、Ｒ^7Aは、独立して、Ｍｅである。
一実施形態では、Ｒ^7Aは、独立して、ＣＨ₂Ｐｈである。
一実施形態では、Ｒ^7Aは、独立して、アリルである。

【0074】

Ｒ⁹
一実施形態では、Ｒ⁹は、Ｈ、Ｒ、ＯＨ、ＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎ−およびハロから独立して選択される。

【0075】

一実施形態では、Ｒ⁹は、独立して、Ｈである。
一実施形態では、Ｒ⁹は、独立して、ＲまたはＯＲである。

【0076】

結合基
前記結合基は、以下に示されるように、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合、カルビノールアミン、置換されているカルビノールアミン、ＱＲ¹¹がＯＳＯ₃Ｍである亜硫酸水素塩付加物、チオカルビノールアミン、置換されているチオカルビノールアミンまたは置換されているカルビナールアミン（式ＢまたはＣの化合物）を遊離するために、前記式Ａのコンジュゲートにおける前記ＰＢＤ部分のＮ１０位から除去可能である。

【0077】

【化20】

【0078】

ＲおよびＭは、本発明のコンジュゲートについて規定の通りである。

【0079】

一実施形態では、前記結合基は、Ｎ１０−Ｃ１１イミン結合を遊離するために、前記ＰＢＤ部分のＮ１０位から除去可能である。

【0080】

本発明における、前記ＰＢＤ二量体と前記細胞結合剤、例えば、抗体との間における特異的な結合は、好ましくは、細胞外において安定である。細胞内への輸送または送達前に、前記抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）は、好ましくは、安定であり、元のままである。すなわち、前記抗体は、前記ドラッグ部分に結合されたままである。前記リンカーは、標的細胞の外側において安定であり、前記細胞の内側において、いくらか有効な速度で開裂され得る。有効なリンカーは、（ｉ）前記抗体の特異的な結合特性を維持し；（ｉｉ）前記コンジュゲートまたはドラッグ部分の細胞内送達を可能にし；（ｉｉｉ）前記コンジュゲートがその標的部位に送達または輸送されるまで、安定で完全なままであり、すなわち、開裂されず；および（ｉｖ）前記ＰＢＤドラッグ部分の細胞毒性、細胞殺傷効果または細胞増殖抑制効果を維持するであろう。前記ＡＤＣの安定性は、標準的な分析技術、例えば、質量分析法、ＨＰＬＣおよび分離／分析技術のＬＣ／ＭＳにより測定され得る。

【0081】

式ＢまたはＣの化合物の送達は、前記結合基における酵素の作用により、式Ａのコンジュゲートにおける脱部位された活性化部位において達成される。前記式ＡのコンジュゲートにおけるＳは、前記細胞結合剤上の、遊離のＳ（活性なチオール）に対するジスルフィド結合により結合される。

【0082】

前記結合基は、酵素の作用により開裂可能であり得る。一実施形態では、前記酵素は、チオールレダクターゼである。

【0083】

特定の抗体は、還元可能な鎖内ジスルフィド、すなわち、システイン架橋を有する。抗体は、還元剤、例えば、ＤＴＴ（ジチオスレイトール）で処理することにより、リンカー試薬とコンジュゲートするための反応性を形成され得る。このため、各システイン架橋は、理論的には、２つの反応性チオール求核種を形成するであろう。更なる求核基は、チオールへのアミンの変換をもたらす、２−イミノチオラン（Ｔｒａｕｔ’ｓ試薬）によるリジンの反応により、抗体内に導入され得る。反応性チオール基は、１、２、３、４つまたはそれ以上のシステイン残基を導入すること（例えば、１つ以上の非天然のシステインアミノ酸残基を含む変異抗体を調製すること）により、前記抗体（またはそのフラグメント）内に導入されてもよい。米国特許第７５２１５４１号明細書には、反応性システインアミノ酸の導入による、改変抗体が教示されている。

【0084】

Ｒ^L1およびＲ^L2は、Ｈおよびメチルから選択されるか、または、それらが結合されている炭素原子と共に、シクロプロピレン基を形成する。一部の実施形態では、両方とも、Ｈである。他の実施形態では、両方とも、メチルである。更なる実施形態では、一方がＨであり、他方がメチルである。これらの実施形態では、前記Ｒ^L1およびＲ^L2が結合されている炭素原子は、キラル中心である。

【0085】

一部の実施形態では、Ｙは、単結合である。

【0086】

他の実施形態では、Ｙは、

【化21】

である。

【0087】

更なる実施形態では、Ｙは、

【化22】

である。

【0088】

Ｑ
一実施形態では、Ｑは、Ｏ、ＳまたはＮ（Ｈ）から選択される。
好ましくは、Ｑは、Ｏである。

【0089】

Ｒ¹¹
一実施形態では、Ｒ¹¹は、ＨもしくはＲのいずれかであるか、または、ＱがＯである場合、ＳＯ₃Ｍであり、Ｍは、金属カチオンである。

【0090】

一実施形態では、Ｒ¹¹は、Ｈである。
一実施形態では、Ｒ¹¹は、Ｒである。

【0091】

一実施形態では、ＱがＯである場合、Ｒ¹¹は、ＳＯ₃Ｍであり、Ｍは、金属カチオンである。前記カチオンは、Ｎａ⁺でもよい。

【0092】

細胞結合剤
細胞結合剤は、任意の種類でもよく、ペプチドおよび非ペプチドを含む。これらは、少なくとも１つの結合部位を含む、抗体もしくは抗体のフラグメント、リンホカイン、ホルモン、増殖因子、栄養輸送分子または、任意の他の細胞結合分子もしくは物質を含み得る。

【0093】

本願明細書において、「抗体」の用語は、幅広い意味で使用され、具体的には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二量体、多量体、多重特異性抗体（例えば、二特異性抗体）および、所望の生物学的活性を示すのであれば、抗体フラグメント（Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ（２００３）Ｊｏｕｒ．ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １７０：４８５４−４８６１）をカバーする。抗体は、マウス、ヒト、ヒト化、キメラでもよく、または、他の種類に由来してもよい。抗体は、免疫系により生じる、特異的な抗原を認識可能で、同抗原に結合可能なタンパク質である（Ｊａｎｅｗａｙ，Ｃ．，Ｔｒａｖｅｒｓ，Ｐ．，Ｗａｌｐｏｒｔ，Ｍ．，Ｓｈｌｏｍｃｈｉｋ（２００１）Ｉｍｍｕｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。標的抗原は、一般的には、エピトープとも呼ばれる、複数の抗体上のＣＤＲにより認識される、数多くの結合部位を有する。異なるエピトープに特異的に結合する各抗体は、異なる構造を有する。このため、１つの抗原が、２つ以上の対応する抗体を有する場合がある。抗体としては、全長免疫グロブリン分子または、全長免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち、対象となる標的の抗原またはその一部と免疫特異的に結合する抗原結合部位を含む分子があげられる。このような標的としては、制限されず、ガン細胞または自己免疫疾患に関連する自己免疫抗体を産生する細胞があげられる。前記免疫グロブリンは、任意の種類（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤおよびＩｇＡ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）または免疫グロブリン分子のサブクラスであり得る。前記免疫グロブリンは、任意の種、例えば、ヒト、マウスまたはラビット起源に由来し得る。

【0094】

「抗体フラグメント」は、全長抗体の一部を含み、一般的には、抗原結合領域またはその可変領域を含む。抗体フラグメントとしては、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）₂およびＦｖフラグメント；二重特異性抗体；直線状抗体；Ｆａｂ発現ライブラリにより産生されるフラグメント、抗イディオタイプ（抗−Ｉｄ）抗体、ＣＤＲ（相補性決定領域）および、ガン細胞抗原、ウイルス抗原または細菌抗原に免疫特異的に結合する、上記のいずれかのエピトープ結合フラグメント、一本鎖抗体分子；および抗体フラグメントから形成された多重特異性抗体があげられる。

【0095】

本願明細書で使用する時、「モノクローナル抗体」の用語は、実質的に均質な抗体群から取得される抗体を意味する。すなわち、個々の抗体を含む前記群は、若干生じる可能性のある自然発生の変異を除いて、同一である。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、単一の抗原性部位に対する。さらに、種々の決定基（エピトープ）に対する種々の抗体を含むポリクローナル抗体の調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、前記抗原上の１つの決定基に対する。その特異性に加えて、前記モノクローナル抗体は、それらが、他の抗体により汚染されずに合成され得る点で有利である。「モノクローナル」の修飾語句は、実質的に均質な抗体群から取得される抗体の特徴を示し、任意の具体的な方法により抗体の産生を必要とするとは理解されない。例えば、本発明に基づいて使用される前記モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５に最初に記載されたハイブリドーマ法により製造されてもよいし、または、組換えＤＮＡ法（米国特許第４８１６５６７号明細書を参照のこと）により製造されてもよい。前記モノクローナル抗体は、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７に記載の技術を使用して、ファージ抗体ライブラリから単離されてもよい。

【0096】

本願明細書において、前記モノクローナル抗体は、具体的には、「キメラ」抗体を含む。前記キメラ抗体では、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来する抗体における対応配列と同一もしくは類似であるか、または、特定の抗体のクラスもしくはサブクラスに属し、一方、前記鎖の残部が、別の種に由来する抗体における対応配列と同一もしくは類似であるか、または、別の抗体のクラスもしくはサブクラスに属する。ならびに、前記モノクローナル抗体は、所望の生物学的活性を示すのであれば、このような抗体のフラグメントを含む（米国特許第４８１６５６７号明細書；および、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５）。キメラ抗体としては、非ヒトの霊長類（例えば、旧世界ザルまたは類人猿）に由来する可変ドメイン抗原結合配列と、ヒトの定常領域配列とを含む「霊長類化」抗体があげられる。

【0097】

本願明細書において、「インタクトな抗体」は、ＶＬおよびＶＨドメインならびに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）および重鎖定常ドメインであるＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３を含むものである。前記定常ドメインは、ネイティブ配列の定常ドメイン（例えば、ヒトのネイティブ配列の定常ドメイン）でもよいし、または、そのアミノ酸配列の変異体でもよい。前記インタクトな抗体は、１つ以上の「エフェクター機能」を有してもよい。前記エフェクター機能は、抗体のＦｃ領域（ネイティブ配列のＦｃ領域またはアミノ酸配列の変異体Ｆｃ領域）に起因し得るそれらの生物学的活性を意味する。抗体のエフェクター機能としては、例えば、Ｃ１ｑ結合；補体依存性細胞毒性；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）；食作用；および細胞表面受容体、例えば、Ｂ細胞受容体およびＢＣＲの下方制御があげられる。

【0098】

それらの重鎖の定常ドメインにおけるアミノ酸配列に応じて、インタクトな抗体は、種々の「クラス」に割り当てられ得る。インタクトな抗体の５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭが存在する。これらのいくつかは、さらに、「サブクラス」（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡおよびＩｇＡ２に分割され得る。種々のクラスの抗体に対応する前記重鎖の定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γおよびμと呼ばれる。種々のクラスの免疫グロブリンにおける前記サブユニットの構造および三次元構成は、周知である。

【0099】

細胞結合剤としては、例えば、本願明細書に取り込まれる、国際公開第２００７／０８５９３０号パンフレットにおいて使用するのに記載された剤があげられる。

【0100】

前記細胞結合剤は、ポリペプチドでもよいし、または、同ポリペプチドを含んでもよい。前記ポリペプチドは、環状ポリペプチドでもよい。前記細胞結合剤は、抗体でもよい。このため、一実施形態では、本発明は、抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。

【0101】

ドラッグ充填
前記ドラッグ充填は、抗体あたりのＰＢＤドラッグの平均数である。ドラッグ充填は、抗体（Ａｂ）あたりに、１から８個のドラッグ（Ｄ）の範囲でもよい。すなわち、１、２、３、４、５、６、７または８個のドラッグ部分が、前記抗体に共有的に付着される。ＡＤＣの組成は、１から８個の範囲のドラッグでコンジュゲートされた抗体の収集物を含む。コンジュゲート反応からのＡＤＣの調製における、前記抗体あたりのドラッグの平均数は、従来の手段、例えば、質量分析法、ＥＬＩＳＡアッセイ、電気泳動およびＨＰＬＣにより特徴付けられ得る。ｐに関して、ＡＤＣの定量的分布も決定され得る。ＥＬＩＳＡにより、ＡＤＣの具体的な調製におけるｐの平均値が決定され得る（Ｈａｍｂｌｅｔｔ ｅｔ ａｌ（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１０：７０６３−７０７０；Ｓａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ（２００５）Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１１：８４３−８５２）。ただし、前記ｐ（ドラッグ）値の分布は、前記抗体−抗原結合およびＥＬＩＳＡの検出限界により識別できない。また、抗体−ドラッグコンジュゲートを検出するためのＥＬＩＳＡアッセイは、前記ドラッグ部分が前記抗体のどこに、例えば、重鎖または軽鎖のフラグメントまたは特定のアミノ酸残基に付着されているかを決定しない。一部の例では、ｐが、他のドラッグ充填によるＡＤＣからのある値である場合、均質なＡＤＣの分離、精製および特徴決定は、逆相ＨＰＬＣまたは電気泳動等の手段により達成され得る。
一部の抗体−ドラッグコンジュゲートに関して、ｐは、前記抗体上の付着部位の数に制限され得る。例えば、抗体が１つのみ、もしくは複数個のシステインチオール基を有してもよいし、または、リンカーが付着し得る、１つのみ、もしくは複数個の十分に反応性のチオール基を有してもよい。より高いドラッグ充填、例えば、ｐ＞５は、特定の抗体−ドラッグコンジュゲートにおける、凝集、不溶性、毒性または細胞浸透性の喪失の原因となる場合がある。

【0102】

典型的には、理論上の最大値未満のドラッグ部分が、コンジュゲート反応中に抗体にコンジュゲートされる。抗体は、例えば、前記ドラッグ−リンカー中間体（Ｄ−Ｌ）またはリンカー試薬と反応しない、多くのリジン残基を含んでもよい。最も反応性のリジン基のみが、アミン反応性のリンカー試薬と反応してもよい。また、最も反応性のシステインチオール基のみが、チオール反応性のリンカー試薬と反応してもよい。一般的には、抗体は、ドラッグ部分に結合し得る遊離した反応性のシステインチオール基を、あったとしても多くは含まない。前記化合物の抗体におけるほとんどのシステインチオール残基は、ジスルフィド架橋として存在し、部分的または完全な還元条件下において、還元剤、例えば、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）またはＴＣＥＰにより還元されなければならない。前記ＡＤＣの充填（ドラッグ／抗体比）は、複数の異なる方法：例えば、（ｉ）抗体に対して、過剰のモル濃度のドラッグ−リンカー中間体（Ｄ−Ｌ）またはリンカー試薬を制限すること、（ｉｉ）コンジュゲート反応の時間または温度を制限すること、および（ｉｉｉ）システインチオール修飾用の還元条件を不完全にするまたは制限することにおいて調整され得る。
システインアミノ酸は、抗体における反応性部位において改変されてもよく、前記反応部位は、鎖内または分子内のジスルフィドリンケージを形成しない（Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ ａｌ．，２００８ｂ Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２６（８）：９２５−９３２；Ｄｏｒｎａｎ ｅｔ ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ １１４（１３）：２７２１−２７２９；米国特許第７５２１５４１；７７２３４８５号明細書；国際公開第２００９／０５２２４９号パンフレット、Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，３０（２）：１８４−１９１；Ｊｕｎｕｔｕｌａ ｅｔ ａｌ（２００８）Ｊｏｕｒ ｏｆ Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３３２：４１−５２）。前記改変されたシステインチオールは、システイン改変抗体（ＴｈｉｏＭａｂ）および前記ＰＢＤドラッグ部分によりＡＤＣを形成するための、チオールとの反応性を有する求電子基、例えば、マレイミドまたはアルファ−ハロアミドを有する、本発明のリンカー試薬またはドラッグ−リンカー試薬と反応してもよい。このため、前記ドラッグ部分の位置は、設計され得、調整され得、および公知である。前記ドラッグ充填は、前記改変システインチオール基が、典型的には、高収率でチオール反応性リンカー試薬またはドラッグ−リンカー試薬と反応することにより、調整され得る。前記重鎖または軽鎖上の１か所に置換によりシステインアミノ酸を導入するために、ＩｇＧ抗体を改変することにより、対称的な抗体上に、２つの新たなシステインが得られる。２付近のドラッグ充填が達成されることができ、共益結合生成物ＡＤＣをほぼ均質にすることができる。

【0103】

前記抗体における２つ以上の求核基または求電子基が、ドラッグ−リンカー中間体と反応するか、またはリンカー試薬と反応し、続けて、ドラッグ部分試薬と反応する場合には、得られた生成物は、抗体に付着された、例えば、１、２、３つ等のドラッグ部分の分布を有する、ＡＤＣ化合物の混合物である。液体クロマトグラフィー法、例えば、ポリマー逆相（ＰＬＲＰ）および疎水性相互作用（ＨＩＣ）により、前記混合物における化合物が、ドラッグ充填値により分離され得る。単一のドラッグ充填値（ｐ）を有するＡＤＣの調製物が単離され得るが、これらの単一の充填値のＡＤＣは、未だに不均質な混合物である場合がある。前記ドラッグ部分が、前記抗体上の異なる部位で、前記リンカーを介して付着される場合があるためである。

【0104】

このため、本発明の抗体−ドラッグコンジュゲート組成物は、前記抗体が、１つ以上のＰＢＤドラッグ部分を有し、前記ドラッグ部分が、種々のアミノ酸残基で前記抗体に付着され得る、抗体−ドラッグコンジュゲートの混合物を含む。

【0105】

一実施形態では、細胞結合剤あたりの二量体ピロロベンゾジアゼピン基の平均数は、１から２０の範囲である。一部の実施形態では、前記範囲は、１から８、２から８、２から６、２から４および４から８から選択される。

【0106】

一部の実施形態では、細胞結合剤あたりに、１つの二量体ピロロベンゾジアゼピン基が存在する。

【0107】

ペプチド
一実施形態では、前記細胞結合剤は、４−２０個、好ましくは６−２０個の連続的なアミノ酸残基を含む、直鎖状または環状のペプチドである。この実施形態では、１つの細胞結合剤が、１つの単量体または二量体のピロロベンゾジアゼピン化合物に結合されるのが好ましい。

【0108】

一実施形態では、前記細胞結合剤は、インテグリンα_νβ₆と結合するペプチドを含む。前記ペプチドは、ＸＹＳに対してα_νβ₆に選択的でもよい。

【0109】

一実施形態では、前記細胞結合剤は、Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓポリペプチドを含む。前記Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓは、配列：ＮＡＶＰＮＬＲＧＤＬＱＶＬＡＱＫＶＡＲＴＣを有する。または、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０個のアミノ酸残基が、別のアミノ酸残基により置換されている、前記Ａ２０ＦＭＤＶ−Ｃｙｓ配列の変異体が使用されてもよい。

【0110】

一実施形態では、前記抗体は、モノクローナル抗体；キメラ抗体；ヒト化抗体；完全にヒトの抗体；または一本鎖抗体である。前記抗体の一実施形態は、生物学的活性を有するこれらの抗体の１つのフラグメントである。このようなフラグメントとしては、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）₂およびＦｖフラグメントがあげられる。

【0111】

これらの実施形態では、各抗体は、１つまたは複数の二量体ピロロベンゾジアゼピン基に結合され得る。細胞結合剤に対するピロロベンゾジアゼピンの好ましい比は、上記の通りである。

【0112】

前記抗体は、ドメイン抗体（ＤＡＢ）でもよい。

【0113】

一実施形態では、前記抗体は、モノクローナル抗体である。

【0114】

本発明に使用する抗体としては、本願明細書に取り込まれる、国際公開第２００５／０８２０２３号パンフレットに記載の抗体があげられる。腫瘍関連抗原用の抗体が、特に好ましい。当該分野において公知のそれらの抗原としては、例えば、制限されず、国際公開第２００５／０８２０２３号パンフレットに提示される、腫瘍関連抗原があげられる。例えば、４１−５５頁を参照のこと。

【0115】

本発明のコンジュゲートは、その細胞表面抗原を介して腫瘍細胞を標的とするように設計される。前記抗原は、通常、異常なタイミングで過剰発現または発現のいずれかがされている、正常な細胞表面抗原である。理想的には、前記標的抗原は、増殖性細胞（好ましくは、腫瘍細胞）上でのみ発現される。ただし、これは、実際には稀にしか見られない。結果として、標的抗原は、通常、増殖性組織と健康な組織との間の異なる発現に基づいて選択される。

【0116】

抗体は、特異的な腫瘍関連抗原、例えば：Ｃｒｉｐｔｏ、ＣＤ３０、ＣＤ１９、ＣＤ３３、糖タンパク質ＮＭＢ、ＣａｎＡｇ、Ｈｅｒ２（ＥｒｂＢ２／Ｎｅｕ）、ＣＤ５６（ＮＣＡＭ）、ＣＤ２２（Ｓｉｇｌｅｃ２）、ＣＤ３３（ｓｉｇｌｅｃ３）、ＣＤ７９、ＣＤ１３８、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ（前立腺特異的膜抗原）、ＢＣＭＡ、ＣＤ２０、ＣＤ７０、Ｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＥｐｈＢ２、メラノトランスフェリン、Ｍｕｃ１６およびＴＭＥＦＦ２に対して生じている。

【0117】

腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）は、当該分野において公知であり、当該分野において周知の方法および情報を使用して、生じる抗体に使用するために調製され得る。ガンの診断および治療のための効果的な細胞標的を発見するための試みにおいて、研究者は、１つ以上の正常な非ガン性細胞と比較して、１つ以上の特定種のガン細胞の表面上で特異的に発現される、膜貫通型または他の腫瘍関連ポリペプチドを特定することを求めてきた。多くの場合、このような腫瘍関連ポリペプチドは、前記非ガン性細胞の表面上と比較して、前記ガン細胞の表面上に、より多量に発現されている。このような腫瘍関連細胞表面抗原ポリペプチドの特定は、標的ガン細胞を、抗体系治療により特異的に死滅させる能力を生じさせた。

【0118】

ＴＡＡとしては、例えば、制限されず、以下に列記されたＴＡＡ（１）−（３６）があげられる。便宜上、その全てが当該分野において公知である、これらの抗原に関連する情報は、以下に列記され、国立バイオテクノロジー情報センター（ＮＣＢＩ）の核酸およびタンパク質の配列特定規定に基づく、名称、代替名、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションナンバーおよび主要な参考文献を含む。ＴＡＡ（１）−（３６）に対応する核酸およびタンパク質の配列は、公衆のデータベース、例えば、Ｇｅｎｂａｎｋで利用可能である。抗体により標的とされる腫瘍関連抗原は、前記引用された参考文献において特定された配列に対して、少なくとも約７０％、８０％、８５％、９０％または９５％の配列同一性を有する全アミノ酸配列の変異体およびアイソフォームを含むか、または、前記引用された参考文献において見出された配列を有するＴＡＡと、実質的に同じ生物学的特性または特徴を示す。例えば、変異配列を有するＴＡＡは、一般的には、列記された対応する配列を有するＴＡＡに特異的に結合する抗体に、特異的に結合可能である。本願明細書において具体的に引用した参考文献における配列および開示は、参照により明確に取り込まれる。

【0119】

腫瘍関連抗原（１）−（３６）：
（１）ＢＭＰＲ１Ｂ（ＩＢ型骨形成タンパク質受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿００１２０３）ｔｅｎ Ｄｉｊｋｅ，Ｐ．，ｅｔ ａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６４（５１５５）：１０１−１０４（１９９４）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １４（１１）：１３７７−１３８２（１９９７）；国際公開第２００４／０６３３６２号パンフレット（請求項２）；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３／１３４７９０−Ａ１号明細書（３８−３９頁）；国際公開第２００２／１０２２３５号パンフレット（請求項１３；２９６頁）；国際公開第２００３／０５５４４３号パンフレット（９１−９２頁）；国際公開第２００２／９９１２２号パンフレット（実施例２；５２８−５３０頁）；国際公開第２００３／０２９４２１号パンフレット（請求項６）；国際公開第２００３／０２４３９２号パンフレット（請求項２、図１１２）；国際公開第２００２／９８３５８号パンフレット（請求項１；１８３頁）；国際公開第２００２／５４９４０号パンフレット（１００−１０１頁）；国際公開第２００２／５９３７７号パンフレット（３４９−３５０頁）；国際公開第２００２／３０２６８号パンフレット（請求項２７；３７６頁）；国際公開第２００１／４８２０４号パンフレット（実施例；図４）；ＮＰ＿００１１９４ 骨形成タンパク質受容体、ＩＢ型／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００１１９４．１。クロスリファレンス：ＭＩＭ：６０３２４８；ＮＰ＿００１１９４．１；ＡＹ０６５９９４

【0120】

（２）Ｅ１６（ＬＡＴ１、ＳＬＣ７Ａ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿００３４８６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５５（２），２８３−２８８（１９９９）、Ｎａｔｕｒｅ ３９５（６６９９）：２８８−２９１（１９９８）；Ｇａｕｇｉｔｓｃｈ，Ｈ．Ｗ．，ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７（１６）：１１２６７−１１２７３）；国際公開第２００４／０４８９３８号パンフレット（実施例２）；国際公開第２００４／０３２８４２号パンフレット（実施例ＩＶ）；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２００３／０１６４７５号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００２／７８５２４号パンフレット（実施例２）；国際公開第２００２／９９０７４号パンフレット（実施例１９；１２７−１２９頁）；Ｐａｇｅ １２７−１２９）；国際公開第２００２／８６４４３号パンフレット（請求項２７；２２２、３９３頁）；国際公開第２００３／００３９０６号パンフレット（請求項１０；２９３頁）；国際公開第２００２／６４７９８号パンフレット（請求項３３；９３−９５頁）；国際公開第２０００／１４２２８号パンフレット（請求項５；１３３−１３６頁）；米国特許出願公開第２００３／２２４４５４号明細書（図３）；国際公開第２００３／０２５１３８号パンフレット（請求項１２；１５０頁）；ＮＰ＿００３４７７ 溶質キャリアファミリ７（カチオン性アミノ酸トランスポーター、ｙ＋ｓｙｓｔｅｍ）、メンバー５／ｐｉｄ＝ＮＰ＿００３４７７．３−ホモサピエンス；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６００１８２；ＮＰ＿００３４７７．３；ＮＭ＿０１５９２３；ＮＭ＿００３４８６＿１

【0121】

（３）ＳＴＥＡＰ１（前立腺の６回膜貫通型上皮抗原、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿０１２４４９）；Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１（１５），５８５７−５８６０（２００１）、Ｈｕｂｅｒｔ，Ｒ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ（１９９９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９６（２５）：１４５２３−１４５２８）；国際公開第２００４／０６５５７７号パンフレット（請求項６）；国際公開第２００４／０２７０４９号パンフレット（図１Ｌ）；欧州特許出願公開第１３９４２７４号明細書（実施例１１）；国際公開第２００４／０１６２２５号パンフレット（請求項２）；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３／１５７０８９号明細書（実施例５）；米国特許出願公開第２００３／１８５８３０号明細書（実施例５）；米国特許出願公開第２００３／０６４３９７号明細書（図２）；国際公開第２００２／８９７４７号パンフレット（実施例５；６１８−６１９頁）；国際公開第２００３／０２２９９５号パンフレット（実施例９；図１３Ａ、実施例５３；１７３頁、実施例２；図２Ａ）；ＮＰ＿０３６５８１ 前立腺の６回膜貫通型上皮抗原；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６０４４１５；ＮＰ＿０３６５８１．１；ＮＭ＿０１２４４９＿１

【0122】

（４）０７７２Ｐ（ＣＡ１２５、ＭＵＣ１６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＦ３６１４８６）；Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６（２９）：２７３７１−２７３７５（２００１）；国際公開第２００４／０４５５５３号パンフレット（請求項１４）；国際公開第２００２／９２８３６号パンフレット（請求項６；図１２）；国際公開第２００２／８３８６６号パンフレット（請求項１５；１１６−１２１頁）；米国特許出願公開第２００３／１２４１４０号明細書（実施例１６）；クロスリファレンス：ＧＩ：３４５０１４６７；ＡＡＫ７４１２０．３；ＡＦ３６１４８６＿１

【0123】

（５）ＭＰＦ（ＭＰＦ、ＭＳＬＮ、ＳＭＲ、巨核球増強因子、ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｎ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿００５８２３）Ｙａｍａｇｕｃｈｉ，Ｎ．，ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９（２），８０５−８０８（１９９４）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９６（２０）：１１５３１−１１５３６（１９９９）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３（１）：１３６−１４０（１９９６）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０（３７）：２１９８４−２１９９０（１９９５）；国際公開第２００３／１０１２８３号パンフレット（請求項１４）；国際公開第２００２／１０２２３５号パンフレット（請求項１３；２８７−２８８頁）；国際公開第２００２／１０１０７５号パンフレット（請求項４；３０８−３０９頁）；国際公開第２００２／７１９２８号パンフレット（３２０−３２１頁）；国際公開第９４／１０３１２号パンフレット（５２−５７頁）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６０１０５１；ＮＰ＿００５８１４．２；ＮＭ＿００５８２３＿１

【0124】

（６）Ｎａｐｉ３ｂ（ＮＡＰＩ−３Ｂ、ＮＰＴＩＩｂ、ＳＬＣ３４Ａ２、溶質キャリアファミリ３４（リン酸ナトリウム）、メンバー２、ＩＩ型ナトリウム−依存性リン酸トランスポーター３ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿００６４２４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７（２２）：１９６６５−１９６７２（２００２）、Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ６２（２）：２８１−２８４（１９９９）、Ｆｅｉｌｄ，Ｊ．Ａ．，ｅｔ ａｌ（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５８（３）：５７８−５８２；国際公開第２００４／０２２７７８号パンフレット（請求項２）；欧州特許出願公開第１３９４２７４号明細書（実施例１１）；国際公開第２００２／１０２２３５号パンフレット（請求項１３；３２６頁）；欧州特許出願公開第０８７５５６９号明細書（請求項１；１７−１９頁）；国際公開第２００１／５７１８８号パンフレット（請求項２０；３２９頁）；国際公開第２００４／０３２８４２号パンフレット（実施例ＩＶ）；国際公開第２００１／７５１７７号パンフレット（請求項２４；１３９−１４０頁）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６０４２１７；ＮＰ＿００６４１５．１；ＮＭ＿００６４２４＿１

【0125】

（７）Ｓｅｍａ ５ｂ（ＦＬＪ１０３７２、ＫＩＡＡ１４４５、Ｍｍ．４２０１５、ＳＥＭＡ５Ｂ、ＳＥＭＡＧ、Ｓｅｍａｐｈｏｒｉｎ ５ｂ Ｈｌｏｇ、ｓｅｍａドメイン、７回トロンボスポンジン繰り返し（１型および１型様）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）および短い細胞質ドメイン、（ｓｅｍａｐｈｏｒｉｎ）５Ｂ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＢ０４０８７８）；Ｎａｇａｓｅ Ｔ．，ｅｔ ａｌ（２０００）ＤＮＡ Ｒｅｓ．７（２）：１４３−１５０；国際公開第２００４／０００９９７号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／００３９８４号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００２／０６３３９号パンフレット（請求項１；５０頁）；国際公開第２００１／８８１３３号パンフレット（請求項１；４１−４３、４８−５８頁）；国際公開第２００３／０５４１５２号パンフレット（請求項２０）；国際公開第２００３／１０１４００号パンフレット（請求項１１）；アクセッション：Ｑ９Ｐ２８３；ＥＭＢＬ；ＡＢ０４０８７８；ＢＡＡ９５９６９．１．Ｇｅｎｅｗ；ＨＧＮＣ：１０７３７

【0126】

（８）ＰＳＣＡ ｈｌｇ（２７０００５０Ｃ１２Ｒｉｋ、Ｃ５３０００８Ｏ１６Ｒｉｋ、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２、ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ ２７０００５０Ｃ１２遺伝子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＹ３５８６２８）；Ｒｏｓｓ ｅｔ ａｌ（２００２）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６２：２５４６−２５５３；米国特許出願公開第２００３／１２９１９２号明細書（請求項２）；米国特許出願公開第２００４／０４４１８０号明細書（請求項１２）；米国特許出願公開第２００４／０４４１７９号明細書（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３／０９６９６１号明細書（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３／２３２０５６号明細書（実施例５）；国際公開第２００３／１０５７５８号パンフレット（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３／２０６９１８号明細書（実施例５）；欧州特許出願公開第１３４７０４６号明細書（請求項１）；国際公開第２００３／０２５１４８号パンフレット（請求項２０）；クロスリファレンス：ＧＩ：３７１８２３７８；ＡＡＱ８８９９１．１；ＡＹ３５８６２８＿１

【0127】

（９）ＥＴＢＲ（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ Ｂ型受容体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＹ２７５４６３）；Ｎａｋａｍｕｔａ Ｍ．，ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７７，３４−３９，１９９１；Ｏｇａｗａ Ｙ．，ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７８，２４８−２５５，１９９１；Ａｒａｉ Ｈ．，ｅｔ ａｌ Ｊｐｎ．Ｃｉｒｃ．Ｊ．５６，１３０３−１３０７，１９９２；Ａｒａｉ Ｈ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８，３４６３−３４７０，１９９３；Ｓａｋａｍｏｔｏ Ａ．，Ｙａｎａｇｉｓａｗａ Ｍ．，ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１７８，６５６−６６３，１９９１；Ｅｌｓｈｏｕｒｂａｇｙ Ｎ．Ａ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８，３８７３−３８７９，１９９３；Ｈａｅｎｄｌｅｒ Ｂ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０，ｓ１−Ｓ４，１９９２；Ｔｓｕｔｓｕｍｉ Ｍ．，ｅｔ ａｌ Ｇｅｎｅ ２２８，４３−４９，１９９９；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ Ｒ．Ｌ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９，１６８９９−１６９０３，２００２；Ｂｏｕｒｇｅｏｉｓ Ｃ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．８２，３１１６−３１２３，１９９７；Ｏｋａｍｏｔｏ Ｙ．，ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２，２１５８９−２１５９６，１９９７；Ｖｅｒｈｅｉｊ Ｊ．Ｂ．，ｅｔ ａｌ Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．１０８，２２３−２２５，２００２；Ｈｏｆｓｔｒａ Ｒ．Ｍ．Ｗ．，ｅｔ ａｌ Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．５，１８０−１８５，１９９７；Ｐｕｆｆｅｎｂｅｒｇｅｒ Ｅ．Ｇ．，ｅｔ ａｌ Ｃｅｌｌ ７９，１２５７−１２６６，１９９４；Ａｔｔｉｅ Ｔ．，ｅｔ ａｌ，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．４，２４０７−２４０９，１９９５；Ａｕｒｉｃｃｈｉｏ Ａ．，ｅｔ ａｌ Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５：３５１−３５４，１９９６；Ａｍｉｅｌ Ｊ．，ｅｔ ａｌ Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．５，３５５−３５７，１９９６；Ｈｏｆｓｔｒａ Ｒ．Ｍ．Ｗ．，ｅｔ ａｌ Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．１２，４４５−４４７，１９９６；Ｓｖｅｎｓｓｏｎ Ｐ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１０３，１４５−１４８，１９９８；Ｆｕｃｈｓ Ｓ．，ｅｔ ａｌ Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．７，１１５−１２４，２００１；Ｐｉｎｇａｕｌｔ Ｖ．，ｅｔ ａｌ（２００２）Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１１１，１９８−２０６；国際公開第２００４／０４５５１６号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００４／０４８９３８号パンフレット（実施例２）；国際公開第２００４／０４００００号パンフレット（請求項１５１）；国際公開第２００３／０８７７６８号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／０１６４７５号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／０１６４７５号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００２／６１０８７号パンフレット（図１）；国際公開第２００３／０１６４９４号パンフレット（図６）；国際公開第２００３／０２５１３８号パンフレット（請求項１２；１４４頁）；国際公開第２００１／９８３５１号パンフレット（請求項１；１２４−１２５頁）；欧州特許出願公開第０５２２８６８号明細書（請求項８；図２）；国際公開第２００１／７７１７２号パンフレット（請求項１；２９７−２９９頁）；米国特許出願公開第２００３／１０９６７６号明細書；米国特許第６５１８４０４号明細書（図３）；米国特許第５７７３２２３号明細書（請求項１ａ；カラム３１−３４）；国際公開第２００４／００１００４号パンフレット

【0128】

（１０）ＭＳＧ７８３（ＲＮＦ１２４、推定タンパク質ＦＬＪ２０３１５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿０１７７６３）；国際公開第２００３／１０４２７５号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００４／０４６３４２号パンフレット（実施例２）；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２００３／０８３０７４号パンフレット（請求項１４；６１頁）；国際公開第２００３／０１８６２１号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／０２４３９２号パンフレット（請求項２；図９３）；国際公開第２００１／６６６８９号パンフレット（実施例６）；クロスリファレンス：ＬｏｃｕｓＩＤ：５４８９４；ＮＰ＿０６０２３３．２；ＮＭ＿０１７７６３＿１

【0129】

（１１）ＳＴＥＡＰ２（ＨＧＮＣ＿８６３９、ＩＰＣＡ−１、ＰＣＡＮＡＰ１、ＳＴＡＭＰ１、ＳＴＥＡＰ２、ＳＴＭＰ、前立腺ガン関連遺伝子１、前立腺ガン関連タンパク質１、前立腺の６回膜貫通型上皮抗原２、６回膜貫通型前立腺タンパク質、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＦ４５５１３８）；Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．８２（１１）：１５７３−１５８２（２００２）；国際公開第２００３／０８７３０６号パンフレット；米国特許出願公開第２００３／０６４３９７号明細書（請求項１；図１）；国際公開第２００２／７２５９６号パンフレット（請求項１３；５４−５５頁）；国際公開第２００１／７２９６２号パンフレット（請求項１；図４Ｂ）；国際公開第２００３／１０４２７０号パンフレット（請求項１１）；国際公開第２００３／１０４２７０号パンフレット（請求項１６）；米国特許出願公開第２００４／００５５９８号明細書（請求項２２）；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；米国特許出願公開第２００３／０６０６１２号明細書（請求項１２；図１０）；国際公開第２００２／２６８２２号パンフレット（請求項２３；図２）；国際公開第２００２／１６４２９号パンフレット（請求項１２；図１０）；クロスリファレンス：ＧＩ：２２６５５４８８；ＡＡＮ０４０８０．１；ＡＦ４５５１３８＿１

【0130】

（１２）ＴｒｐＭ４（ＢＲ２２４５０、ＦＬＪ２００４１、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ４Ｂ、一過性受容体ポテンシャルカチオンチャネル、サブファミリーＭ、メンバー４、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿０１７６３６）；Ｘｕ，Ｘ．Ｚ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９８（１９）：１０６９２−１０６９７（２００１）、Ｃｅｌｌ１０９（３）：３９７−４０７（２００２）、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８（３３）：３０８１３−３０８２０（２００３）；米国特許出願公開第２００３／１４３５５７号明細書（請求項４）；国際公開第２０００／４０６１４号パンフレット（請求項１４；１００−１０３頁；国際公開第２００２／１０３８２号パンフレット（請求項１；図９Ａ）；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２００２／３０２６８号パンフレット（請求項２７；３９１頁）；米国特許出願公開第２００３／２１９８０６号明細書（請求項４）；国際公開第２００１／６２７９４号パンフレット（請求項１４；図１Ａ−Ｄ）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６０６９３６；ＮＰ＿０６０１０６．２；ＮＭ＿０１７６３６＿１

【0131】

（１３）ＣＲＩＰＴＯ（ＣＲ、ＣＲ１、ＣＲＧＦ、ＣＲＩＰＴＯ、ＴＤＧＦ１、奇形ガン腫由来の増殖因子、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＰ＿００３２０３またはＮＭ＿００３２１２）；Ｃｉｃｃｏｄｉｃｏｌａ，Ａ．，ｅｔ ａｌ ＥＭＢＯ Ｊ．８（７）：１９８７−１９９１（１９８９）、Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．４９（３）：５５５−５６５（１９９１）；米国特許出願公開第２００３／２２４４１１号明細書（請求項１）；国際公開第２００３／０８３０４１号パンフレット（実施例１）；国際公開第２００３／０３４９８４号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２００２／８８１７０号パンフレット（請求項２；５２−５３頁）；国際公開第２００３／０２４３９２号パンフレット（請求項２；図５８）；国際公開第２００２／１６４１３号パンフレット（請求項１；９４−９５、１０５頁）；国際公開第２００２／２２８０８号パンフレット（請求項２；図１）；米国特許第５８５４３９９号明細書（実施例２；カラム１７−１８）；米国特許第５７９２６１６号明細書（図２）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：１８７３９５；ＮＰ＿００３２０３．１；ＮＭ＿００３２１２＿１

【0132】

（１４）ＣＤ２１（ＣＲ２（補体受容体２）またはＣ３ＤＲ（Ｃ３ｄ／エプスタイン・バー・ウイルス受容体）またはＨｓ．７３７９２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．Ｍ２６００４）；Ｆｕｊｉｓａｋｕ ｅｔ ａｌ（１９８９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４（４）：２１１８−２１２５；Ｗｅｉｓ Ｊ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６７，１０４７−１０６６，１９８８；Ｍｏｏｒｅ Ｍ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８４，９１９４−９１９８，１９８７；Ｂａｒｅｌ Ｍ．，ｅｔ ａｌ Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５，１０２５−１０３１，１９９８；Ｗｅｉｓ Ｊ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８３，５６３９−５６４３，１９８６；Ｓｉｎｈａ Ｓ．Ｋ．，ｅｔ ａｌ（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０，５３１１−５３２０；国際公開第２００４／０４５５２０号パンフレット（実施例４）；米国特許出願公開第２００４／００５５３８号明細書（実施例１）；国際公開第２００３／０６２４０１号パンフレット（請求項９）；国際公開第２００４／０４５５２０号パンフレット（実施例４）；国際公開第９１／０２５３６号パンフレット（図９．１−９．９）；国際公開第２００４／０２０５９５号パンフレット（請求項１）；アクセッション：Ｐ２００２３；Ｑ１３８６６；Ｑ１４２１２；ＥＭＢＬ；Ｍ２６００４；ＡＡＡ３５７８６．１

【0133】

（１５）ＣＤ７９ｂ（ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ７９β、ＩＧｂ（免疫グロブリン−関連ベータ）、Ｂ２９、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿０００６２６または１１０３８６７４）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．（２００３）１００（７）：４１２６−４１３１、Ｂｌｏｏｄ（２００２）１００（９）：３０６８−３０７６、Ｍｕｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２（６）：１６２１−１６２５；国際公開第２００４／０１６２２５号パンフレット（請求項２、図１４０）；国際公開第２００３／０８７７６８号パンフレット、米国特許出願公開第２００４／１０１８７４号明細書（請求項１、１０２頁）；国際公開第２００３／０６２４０１号パンフレット（請求項９）；国際公開第２００２／７８５２４号パンフレット（実施例２）；米国特許出願公開第２００２／１５０５７３号明細書（請求項５、１５頁）；米国特許第５６４４０３３号明細書；国際公開第２００３／０４８２０２号パンフレット（請求項１、３０６および３０９頁）；国際公開第９９／５８６５８号パンフレット、米国特許第６５３４４８２号明細書（請求項１３、図１７Ａ／Ｂ）；国際公開第２０００／５５３５１号パンフレット（請求項１１、１１４５−１１４６頁）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：１４７２４５；ＮＰ＿０００６１７．１；ＮＭ＿０００６２６＿１

【0134】

（１６）ＦｃＲＨ２（ＩＦＧＰ４、ＩＲＴＡ４、ＳＰＡＰ１Ａ（ＳＨ２ドメイン含有ホスファターゼアンカータンパク質１ａ）、ＳＰＡＰ１Ｂ、ＳＰＡＰ１Ｃ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿０３０７６４、ＡＹ３５８１３０）；Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．１３（１０）：２２６５−２２７０（２００３）、Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ５４（２）：８７−９５（２００２）、Ｂｌｏｏｄ ９９（８）：２６６２−２６６９（２００２）、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９８（１７）：９７７２−９７７７（２００１）、Ｘｕ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ（２００１）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２８０（３）：７６８−７７５；国際公開第２００４／０１６２２５号パンフレット（請求項２）；国際公開第２００３／０７７８３６号パンフレット；国際公開第２００１／３８４９０号パンフレット（請求項５；図１８Ｄ−１−１８Ｄ−２）；国際公開第２００３／０９７８０３号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２００３／０８９６２４号パンフレット（請求項２５）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６０６５０９；ＮＰ＿１１０３９１．２；ＮＭ＿０３０７６４＿１

【0135】

（１７）ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．Ｍ１１７３０）；Ｃｏｕｓｓｅｎｓ Ｌ．，ｅｔ ａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８５）２３０（４７３０）：１１３２−１１３９；Ｙａｍａｍｏｔｏ Ｔ．，ｅｔ ａｌ Ｎａｔｕｒｅ ３１９，２３０−２３４，１９８６；Ｓｅｍｂａ Ｋ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８２，６４９７−６５０１，１９８５；Ｓｗｉｅｒｃｚ Ｊ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１６５，８６９−８８０，２００４；Ｋｕｈｎｓ Ｊ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４，３６４２２−３６４２７，１９９９；Ｃｈｏ Ｈ．−Ｓ．，ｅｔ ａｌ Ｎａｔｕｒｅ ４２１，７５６−７６０，２００３；Ｅｈｓａｎｉ Ａ．，ｅｔ ａｌ（１９９３）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ １５，４２６−４２９；国際公開第２００４／０４８９３８号パンフレット（実施例２）；国際公開第２００４／０２７０４９号パンフレット（図１Ｉ）；国際公開第２００４／００９６２２号パンフレット；国際公開第２００３／０８１２１０号パンフレット；国際公開第２００３／０８９９０４号パンフレット（請求項９）；国際公開第２００３／０１６４７５号パンフレット（請求項１）；米国特許出願公開第２００３／１１８５９２号明細書；国際公開第２００３／００８５３７号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／０５５４３９号パンフレット（請求項２９；図１Ａ−Ｂ）；国際公開第２００３／０２５２２８号パンフレット（請求項３７、図５Ｃ）；国際公開第２００２／２２６３６号パンフレット（実施例１３；９５−１０７頁）；国際公開第２００２／１２３４１号パンフレット（請求項６８；図７）；国際公開第２００２／１３８４７号パンフレット（７１−７４頁）；国際公開第２００２／１４５０３号パンフレット（１１４−１１７頁）；国際公開第２００１／５３４６３号パンフレット（請求項２；４１−４６頁）；国際公開第２００１／４１７８７号パンフレット（１５頁）；国際公開第２０００／４４８９９号パンフレット（請求項５２；図７）；国際公開第２０００／２０５７９号パンフレット（請求項３；図２）；米国特許第５８６９４４５号明細書（請求項３；カラム３１−３８）；国際公開第９６３０５１４号パンフレット（請求項２；５６−６１頁）；欧州特許出願公開第１４３９３９３号明細書（請求項７）；国際公開第２００４／０４３３６１号パンフレット（請求項７）；国際公開第２００４／０２２７０９号パンフレット；国際公開第２００１／００２４４号パンフレット（実施例３；図４）；アクセッション：Ｐ０４６２６；ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６７；ＡＡＡ３５８０８．１．ＥＭＢＬ；Ｍ１１７６１；ＡＡＡ３５８０８．１

【0136】

（１８）ＮＣＡ（ＣＥＡＣＡＭ６、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．Ｍ１８７２８）；Ｂａｒｎｅｔｔ Ｔ．，ｅｔ ａｌ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ３，５９−６６，１９８８；Ｔａｗａｒａｇｉ Ｙ．，ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５０，８９−９６，１９８８；ＳｔｒａｕｓｂｅｒｇＲ．Ｌ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９：１６８９９−１６９０３，２００２；国際公開第２００４／０６３７０９号パンフレット；欧州特許出願公開第１４３９３９３号明細書（請求項７）；国際公開第２００４／０４４１７８号パンフレット（実施例４）；国際公開第２００４／０３１２３８号パンフレット；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２００２／７８５２４号パンフレット（実施例２）；国際公開第２００２／８６４４３号パンフレット（請求項２７；４２７頁）；国際公開第２００２／６０３１７号パンフレット（請求項２）；アクセッション：Ｐ４０１９９；Ｑ１４９２０；ＥＭＢＬ；Ｍ２９５４１；ＡＡＡ５９９１５．１．ＥＭＢＬ；Ｍ１８７２８

【0137】

（１９）ＭＤＰ（ＤＰＥＰ１、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＢＣ０１７０２３）；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９（２６）：１６８９９−１６９０３（２００２）；国際公開第２００３／０１６４７５号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００２／６４７９８号パンフレット（請求項３３；８５−８７頁）；特開平５−００３７９０号公報（図６−８）；国際公開第９９／４６２８４号パンフレット（図９）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：１７９７８０；ＡＡＨ１７０２３．１；ＢＣ０１７０２３＿１

【0138】

（２０）ＩＬ２０Ｒα（ＩＬ２０Ｒａ、ＺＣＹＴＯＲ７、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＦ１８４９７１）；Ｃｌａｒｋ Ｈ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．１３，２２６５−２２７０，２００３；Ｍｕｎｇａｌｌ Ａ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ Ｎａｔｕｒｅ ４２５，８０５−８１１，２００３；Ｂｌｕｍｂｅｒｇ Ｈ．，ｅｔ ａｌ Ｃｅｌｌ １０４，９−１９，２００１；Ｄｕｍｏｕｔｉｅｒ Ｌ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６７，３５４５−３５４９，２００１；Ｐａｒｒｉｓｈ−Ｎｏｖａｋ Ｊ．，ｅｔ ａｌ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７，４７５１７−４７５２３，２００２；Ｐｌｅｔｎｅｖ Ｓ．，ｅｔ ａｌ（２００３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ４２：１２６１７−１２６２４；Ｓｈｅｉｋｈ Ｆ．，ｅｔ ａｌ（２００４）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７２，２００６−２０１０；欧州特許出願公開第１３９４２７４号明細書（実施例１１）；米国特許出願公開第２００４／００５３２０号明細書（実施例５）；国際公開第２００３／０２９２６２号パンフレット（７４−７５頁）；国際公開第２００３／００２７１７号パンフレット（請求項２；６３頁）；国際公開第２００２／２２１５３号パンフレット（４５−４７頁）；米国特許出願公開第２００２／０４２３６６号明細書（２０−２１頁）；国際公開第２００１／４６２６１号パンフレット（５７−５９頁）；国際公開第２００１／４６２３２号パンフレット（６３−６５頁）；国際公開第９８／３７１９３号パンフレット（請求項１；５５−５９頁）；アクセッション：Ｑ９ＵＨＦ４；Ｑ６ＵＷＡ９；Ｑ９６ＳＨ８；ＥＭＢＬ；ＡＦ１８４９７１；ＡＡＦ０１３２０．１

【0139】

（２１）Ｂｒｅｖｉｃａｎ（ＢＣＡＮ、ＢＥＨＡＢ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＦ２２９０５３）；Ｇａｒｙ Ｓ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ Ｇｅｎｅ ２５６，１３９−１４７，２０００；Ｃｌａｒｋ Ｈ．Ｆ．，ｅｔ ａｌ Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．１３，２２６５−２２７０，２００３；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ Ｒ．Ｌ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９，１６８９９−１６９０３，２００２；米国特許出願公開第２００３／１８６３７２号明細書（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３／１８６３７３号明細書（請求項１１）；米国特許出願公開第２００３／１１９１３１号明細書（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３／１１９１２２号明細書（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３／１１９１２６号明細書（請求項１）；米国特許出願公開第２００３／１１９１２１号明細書（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３／１１９１２９号明細書（請求項１）；米国特許出願公開第２００３／１１９１３０号明細書（請求項１）；米国特許出願公開第２００３／１１９１２８号明細書（請求項１；図５２）；米国特許出願公開第２００３／１１９１２５号明細書（請求項１）；国際公開第２００３／０１６４７５号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００２／０２６３４号パンフレット（請求項１）

【0140】

（２２）ＥｐｈＢ２Ｒ（ＤＲＴ、ＥＲＫ、Ｈｅｋ５、ＥＰＨＴ３、Ｔｙｒｏ５、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＮＭ＿００４４４２）；Ｃｈａｎ，Ｊ．ａｎｄ Ｗａｔｔ，Ｖ．Ｍ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ６（６），１０５７−１０６１（１９９１）、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １０（５）：８９７−９０５（１９９５）、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２１：３０９−３４５（１９９８）、Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｃｙｔｏｌ．１９６：１７７−２４４（２０００）；国際公開第２００３０４２６６１号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２０００５３２１６号パンフレット（請求項１；４１頁）；国際公開第２００４０６５５７６号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００４０２０５８３号パンフレット（請求項９）；国際公開第２００３００４５２９号パンフレット（１２８−１３２頁）；国際公開第２０００５３２１６号パンフレット（請求項１；４２頁）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６００９９７；ＮＰ＿００４４３３．２；ＮＭ＿００４４４２＿１
（２３）ＡＳＬＧ６５９（Ｂ７ｈ、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＸ０９２３２８）；米国特許出願公開第２００４／０１０１８９９号明細書（請求項２）；国際公開第２００３１０４３９９号パンフレット（請求項１１）；国際公開第２００４０００２２１号パンフレット（図３）；米国特許出願公開第２００３／１６５５０４号パンフレット（請求項１）；米国特許出願公開第２００３／１２４１４０号パンフレット（実施例２）；米国特許出願公開第２００３／０６５１４３号パンフレット（図６０）；国際公開第２００２／１０２２３５号パンフレット（請求項１３；２９９頁）；米国特許出願公開第２００３／０９１５８０号パンフレット（実施例２）；国際公開第２００２／１０１８７号パンフレット（請求項６；図１０）；国際公開第２００１／９４６４１号パンフレット（請求項１２、図７ｂ）；国際公開第２００２／０２６２４号パンフレット（請求項１３；図１Ａ−１Ｂ）；米国特許出願公開第２００２／０３４７４９号明細書（請求項５４；４５−４６頁）；国際公開第２００２／０６３１７号パンフレット（実施例２；３２０−３２１頁、請求項３４；３２１−３２２頁）；国際公開第２００２／７１９２８号パンフレット（４６８−４６９頁）；国際公開第２００２／０２５８７号パンフレット（実施例１；図１）；国際公開第２００１／４０２６９号パンフレット（実施例３；１９０−１９２頁）；国際公開第２０００／３６１０７号パンフレット（実施例２；２０５−２０７頁）；国際公開第２００４／０５３０７９号パンフレット（請求項１２）；国際公開第２００３／００４９８９号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００２／７１９２８号パンフレット（２３３−２３４、４５２−４５３頁）；国際公開第０１／１６３１８号パンフレット

【0141】

（２４）ＰＳＣＡ（前立腺幹細胞抗原前駆体、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッションｎｏ．ＡＪ２９７４３６）；Ｒｅｉｔｅｒ Ｒ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５，１７３５−１７４０，１９９８；Ｇｕ Ｚ．，ｅｔ ａｌ Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １９，１２８８−１２９６，２０００；Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２０００）２７５（３）：７８３−７８８；国際公開第２００４／０２２７０９号パンフレット；欧州特許出願公開第１３９４２７４号明細書（実施例１１）；米国特許出願公開第２００４／０１８５５３号明細書（請求項１７）；国際公開第２００３／００８５３７号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００２／８１６４６号パンフレット（請求項１；１６４頁）；国際公開第２００３／００３９０６号パンフレット（請求項１０；２８８頁）；国際公開第２００１／４０３０９号パンフレット（実施例１；図１７）；米国特許出願公開第２００１／０５５７５１号明細書（実施例１；図１ｂ）；国際公開第２０００／３２７５２号パンフレット（請求項１８；図１）；国際公開第９８／５１８０５号パンフレット（請求項１７；９７頁）；国際公開第９８／５１８２４号パンフレット（請求項１０；９４頁）；国際公開第９８／４０４０３号パンフレット（請求項２；図１Ｂ）；アクセッション：Ｏ４３６５３；ＥＭＢＬ；ＡＦ０４３４９８；ＡＡＣ３９６０７．１

【0142】

（２５）ＧＥＤＡ（ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＡＹ２６０７６３）；ＡＡＰ１４９５４ 脂肪腫ＨＭＧＩＣ融合パートナー様タンパク質／ｐｉｄ＝ＡＡＰ１４９５４．１−ホモサピエンス（ヒト）；国際公開第２００３／０５４１５２号パンフレット（請求項２０）；国際公開第２００３／０００８４２号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／０２３０１３号パンフレット（実施例３、請求項２０）；米国特許出願公開第２００３／１９４７０４号明細書（請求項４５）；クロスリファレンス：ＧＩ：３０１０２４４９；ＡＡＰ１４９５４．１；ＡＹ２６０７６３＿１

【0143】

（２６）ＢＡＦＦ−Ｒ（Ｂ細胞活性化因子受容体、ＢＬｙＳ受容体３、ＢＲ３、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＡＦ１１６４５６）；ＢＡＦＦ受容体／ｐｉｄ＝ＮＰ＿４４３１７７．１−ホモサピエンス：Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｊ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２９３（５５３７），２１０８−２１１１（２００１）；国際公開第２００４／０５８３０９号パンフレット；国際公開第２００４／０１１６１１号パンフレット；国際公開第２００３／０４５４２２号パンフレット（実施例；３２−３３頁）；国際公開第２００３／０１４２９４号パンフレット（請求項３５；図６Ｂ）；国際公開第２００３／０３５８４６号パンフレット（請求項７０；６１５−６１６頁）；国際公開第２００２／９４８５２号パンフレット（カラム１３６−１３７）；国際公開第２００２／３８７６６号パンフレット（請求項３；１３３頁）；国際公開第２００２／２４９０９号パンフレット（実施例３；図３）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：６０６２６９；ＮＰ＿４４３１７７．１；ＮＭ＿０５２９４５＿１；ＡＦ１３２６００

【0144】

（２７）ＣＤ２２（Ｂ細胞受容体ＣＤ２２−Ｂアイソフォーム、ＢＬ−ＣＡＭ、Ｌｙｂ−８、Ｌｙｂ８、ＳＩＧＬＥＣ−２、ＦＬＪ２２８１４、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＡＫ０２６４６７）；Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ（１９９１）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７３：１３７−１４６；国際公開第２００３／０７２０３６号パンフレット（請求項１；図１）；クロスリファレンス：ＭＩＭ：１０７２６６；ＮＰ＿００１７６２．１；ＮＭ＿００１７７１＿１

【0145】

（２８）ＣＤ７９ａ（ＣＤ７９Ａ、ＣＤ７９α、免疫グロブリン−関連アルファ、Ｉｇベータ（ＣＤ７９Ｂ）と共有的に相互作用し、ＩｇＭ分子と表面において複合体を形成し、Ｂ細胞分化に関与するシグナルを変換するＢ細胞特異的タンパク質）、ｐＩ：４．８４、ＭＷ：２５０２８ ＴＭ：２［Ｐ］遺伝子染色体：１９ｑ１３．２、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＮＰ＿００１７７４．１０）；国際公開第２００３／０８８８０８号パンフレット、米国特許出願公開第２００３／０２２８３１９号明細書；国際公開第２００３／０６２４０１号パンフレット（請求項９）；米国特許出願公開第２００２／１５０５７３号明細書（請求項４、１３−１４頁）；国際公開第９９／５８６５８号パンフレット（請求項１３、図１６）；国際公開第９２／０７５７４号パンフレット（図１）；米国特許第５６４４０３３号明細書；Ｈａ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５２６−１５３１；Ｍｕｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．．２２：１６２１−１６２５；Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ（１９９４）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ４０（４）：２８７−２９５；Ｐｒｅｕｄ’ｈｏｍｍｅ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９０（１）：１４１−１４６；Ｙｕ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（２）６３３−６３７；Ｓａｋａｇｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ（１９８８）ＥＭＢＯ Ｊ．７（１１）：３４５７−３４６４

【0146】

（２９）ＣＸＣＲ５（バーキットリンパ腫受容体１、ＣＸＣＬ１３ケモカインにより活性化され、リンパ球遊走および体液性防御において機能し、ＨＩＶ−２感染および、おそらくＡＩＤＳ、リンパ腫、骨髄腫および白血病の進行において、役割を果たすＧタンパク質−カップリング受容体）；３７２ａａ、ｐＩ：８．５４ ＭＷ：４１９５９ ＴＭ：７［Ｐ］遺伝子染色体：１１ｑ２３．３、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＮＰ＿００１７０７．１）；国際公開第２００４／０４００００号パンフレット；国際公開第２００４／０１５４２６号パンフレット；米国特許出願公開第２００３／１０５２９２号明細書（実施例２）；米国特許第６５５５３３９号明細書（実施例２）；国際公開第２００２／６１０８７号パンフレット（図１）；国際公開第２００１／５７１８８号パンフレット（請求項２０、２６９頁）；国際公開第２００１／７２８３０号パンフレット（１２−１３頁）；国際公開第２０００／２２１２９号パンフレット（実施例１；１５２−１５３頁、実施例２、２５４−２５６頁）；国際公開第９９／２８４６８号パンフレット（請求項１、３８頁）；米国特許第５４４００２１号明細書（実施例２、カラム４９−５２）；国際公開第９４／２８９３１号パンフレット（５６−５８頁）；国際公開第９２／１７４９７号パンフレット（請求項７、図５）；Ｄｏｂｎｅｒ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：２７９５−２７９９；Ｂａｒｅｌｌａ ｅｔ ａｌ（１９９５）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３０９：７７３−７７９

【0147】

（３０）ＨＬＡ−ＤＯＢ（ペプチドと結合し、それをＣＤ４＋Ｔリンパ球に提示するＭＨＣクラスＩＩ分子（Ｉａ抗原）のベータサブユニット）；２７３ａａ、ｐＩ：６．５６、ＭＷ：３０８２０．ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：６ｐ２１．３、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＮＰ＿００２１１１．１）；Ｔｏｎｎｅｌｌｅ ｅｔ ａｌ（１９８５）ＥＭＢＯ Ｊ．４（１１）：２８３９−２８４７；Ｊｏｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ（１９８９）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ２９（６）：４１１−４１３；Ｂｅｃｋ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２８：４３３−４４１；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ ９９：１６８９９−１６９０３；Ｓｅｒｖｅｎｉｕｓ ｅｔ ａｌ（１９８７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：８７５９−８７６６；Ｂｅｃｋ ｅｔ ａｌ（１９９６）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５５：１−１３；Ｎａｒｕｓｅ ｅｔ ａｌ（２００２）Ｔｉｓｓｕｅ Ａｎｔｉｇｅｎｓ ５９：５１２−５１９；国際公開第９９／５８６５８号パンフレット（請求項１３、図１５）；米国特許第６１５３４０８号明細書（カラム３５−３８）；米国特許第５９７６５５１号明細書（カラム１６８−１７０）；米国特許第６０１１１４６号明細書（カラム１４５−１４６）；Ｋａｓａｈａｒａ ｅｔ ａｌ（１９８９）Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ３０（１）：６６−６８；Ｌａｒｈａｍｍａｒ ｅｔ ａｌ（１９８５）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０（２６）：１４１１１−１４１１９

【0148】

（３１）Ｐ２Ｘ５（プリン受容体Ｐ２Ｘリガンド開口型イオンチャネル５、細胞外ＡＴＰにより開閉され、シナプス伝達およびニューロン新生、欠乏に関与し、特発性排尿筋不安定の病態生理に関与し得るイオンチャネル）；４２２ａａ、ｐＩ：７．６３、ＭＷ：４７２０６ ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１７ｐ１３．３、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＮＰ＿００２５５２．２）；Ｌｅ ｅｔ ａｌ（１９９７）ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．４１８（１−２）：１９５−１９９；国際公開第２００４／０４７７４９号パンフレット；国際公開第２００３／０７２０３５号パンフレット（請求項１０）；Ｔｏｕｃｈｍａｎ ｅｔ ａｌ（２０００）Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．１０：１６５−１７３；国際公開第２００２／２２６６０号パンフレット（請求項２０）；国際公開第２００３／０９３４４４号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／０８７７６８号パンフレット（請求項１）；国際公開第２００３／０２９２７７号パンフレット（８２頁）

【0149】

（３２）ＣＤ７２（Ｂ細胞分化抗原ＣＤ７２、Ｌｙｂ−２）；３５９ａａ、ｐＩ：８．６６、ＭＷ：４０２２５、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：９ｐ１３．３、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＮＰ＿００１７７３．１）；国際公開第２００４０４２３４６号パンフレット（請求項６５）；国際公開第２００３／０２６４９３号パンフレット（５１−５２、５７−５８頁）；国際公開第２０００／７５６５５号パンフレット（１０５−１０６頁）；Ｖｏｎ Ｈｏｅｇｅｎ ｅｔ ａｌ（１９９０）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４４（１２）：４８７０−４８７７；Ｓｔｒａｕｓｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ ９９：１６８９９−１６９０３

【0150】

（３３）ＬＹ６４（リンパ球抗原６４（ＲＰ１０５）、ロイシンリッチ繰り返し（ＬＲＲ）ファミリーのＩ型膜タンパク質、Ｂ細胞の活性化およびアポトーシスを制御し、機能損失は、全身性エリテマトーデスを有する患者において疾患活性の向上に関連する。）；６６１ａａ、ｐＩ：６．２０、ＭＷ：７４１４７ ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：５ｑ１２、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＮＰ＿００５５７３．１）；米国特許出願公開第２００２／１９３５６７号明細書、国際公開第９７／０７１９８号パンフレット（請求項１１、３９−４２頁）；Ｍｉｕｒａ ｅｔ ａｌ（１９９６）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ３８（３）：２９９−３０４；Ｍｉｕｒａ ｅｔ ａｌ（１９９８）Ｂｌｏｏｄ ９２：２８１５−２８２２；国際公開第２００３／０８３０４７号パンフレット；国際公開第９７／４４４５２号パンフレット（請求項８、５７−６１頁）；国際公開第２０００／１２１３０号パンフレット（２４−２６頁）

【0151】

（３４）ＦｃＲＨ１（Ｆｃ受容体様タンパク質１、Ｃ２型Ｉｇ様およびＩＴＡＭドメインを含む免疫グロブリンＦｃドメインに関する推定受容体、Ｂリンパ球分化に役割を有し得る。）；４２９ａａ、ｐＩ：５．２８、ＭＷ：４６９２５ ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１ｑ２１−１ｑ２２、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＮＰ＿４４３１７０．１）；国際公開第２００３／０７７８３６号パンフレット；国際公開第２００１／３８４９０号パンフレット（請求項６、図１８Ｅ−１−１８−Ｅ−２）；Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ（２００１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ ９８（１７）：９７７２−９７７７；国際公開第２００３／０８９６２４号パンフレット（請求項８）；欧州特許出願公開第１３４７０４６号明細書（請求項１）；国際公開第２００３／０８９６２４号パンフレット（請求項７）。

【0152】

（３５）ＩＲＴＡ２（免疫グルブリンスーパーファミリー受容体転座関連２、Ｂ細胞発達およびリンパ腫発生において役割を有し得る推定免疫受容体；一部のＢ細胞悪性腫瘍において、転座により遺伝子の調節解除が生じる。）；９７７ａａ、ｐＩ：６．８８、ＭＷ：１０６４６８、ＴＭ：１［Ｐ］遺伝子染色体：１ｑ２１、ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ヒト：ＡＦ３４３６６２、ＡＦ３４３６６３、ＡＦ３４３６６４、ＡＦ３４３６６５、ＡＦ３６９７９４、ＡＦ３９７４５３、ＡＫ０９０４２３、ＡＫ０９０４７５、ＡＬ８３４１８７、ＡＹ３５８０８５；マウス：ＡＫ０８９７５６、ＡＹ１５８０９０、ＡＹ５０６５５８；ＮＰ＿１１２５７１．１；国際公開第２００３／０２４３９２号パンフレット（請求項２、図９７）；Ｎａｋａｙａｍａ ｅｔ ａｌ（２０００）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２７７（１）：１２４−１２７；国際公開第２００３／０７７８３６号パンフレット；国際公開第２００１／３８４９０号パンフレット（請求項３、図１８Ｂ−１−１８Ｂ−２）。

【0153】

（３６）ＴＥＮＢ２（ＴＭＥＦＦ２、ｔｏｍｏｒｅｇｕｌｉｎ、ＴＰＥＦ、ＨＰＰ１、ＴＲ、推定膜貫通プロテオグリカン、増殖因子およびホリスタチンのＥＧＦ／ｈｅｒｅｇｕｌｉｎファミリーに関連）；３７４ａａ、ＮＣＢＩアクセッション：ＡＡＤ５５７７６、ＡＡＦ９１３９７、ＡＡＧ４９４５１、ＮＣＢＩ ＲｅｆＳｅｑ：ＮＰ＿０５７２７６；ＮＣＢＩ遺伝子：２３６７１；ＯＭＩＭ：６０５７３４；ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ Ｑ９ＵＩＫ５；ＧｅｎｂａｎｋアクセッションＮｏ．ＡＦ１７９２７４；ＡＹ３５８９０７、ＣＡＦ８５７２３、ＣＱ７８２４３６；国際公開第２００４／０７４３２０号パンフレット；特開２００４１１３１５１号公報；国際公開第２００３／０４２６６１号パンフレット；国際公開第２００３／００９８１４号パンフレット；欧州特許出願公開第１２９５９４４号明細書（６９−７０頁）；国際公開第２００２／３０２６８号パンフレット（３２９頁）；国際公開第２００１／９０３０４号パンフレット；米国特許出願公開第２００４／２４９１３０号明細書；米国特許出願公開第２００４／０２２７２７号明細書；国際公開第２００４／０６３３５５号パンフレット；米国特許出願公開第２００４／１９７３２５号明細書；米国特許出願公開第２００３／２３２３５０号明細書；米国特許出願公開第２００４／００５５６３号明細書；米国特許出願公開第２００３／１２４５７９号明細書；Ｈｏｒｉｅ ｅｔ ａｌ（２０００）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ６７：１４６−１５２；Ｕｃｈｉｄａ ｅｔ ａｌ（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２６６：５９３−６０２；Ｌｉａｎｇ ｅｔ ａｌ（２０００）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６０：４９０７−１２；Ｇｌｙｎｎｅ−Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ（２００１）Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．Ｏｃｔ １５；９４（２）：１７８−８４。

【0154】

前記元の抗体は、アルブミン結合ペプチド（ＡＢＰ）配列を含む融合タンパク質でもよい（Ｄｅｎｎｉｓ ｅｔ ａｌ．（２００２）「Ａｌｂｕｍｉｎ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ａｓ Ａ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｔｒａｔｅｇｙ Ｆｏｒ Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ Ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ」Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７７：３５０３５−３５０４３；国際公開第０１／４５７４６号パンフレット）。本発明の抗体は、（ｉ）Ｄｅｎｎｉｓ ｅｔ ａｌ（２００２）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７７：３５０３５−３５０４３の表ＩＩＩおよびＩＶ、３５０３８頁；（ｉｉ）米国特許出願公開第２００４／０００１８２７号明細書の［００７６］；および、（ｉｉｉ）国際公開第０１／４５７４６号パンフレットの１２−１３頁に教示されたＡＢＰ配列を有する融合タンパク質を含む。前記文献は全て、参照により本願明細書に取り込まれる。

【0155】

一実施形態では、前記抗体は、前記腫瘍関連抗原α_νβ₆に特異的な標的に対して生じる。

【0156】

前記細胞結合剤は、例えば、コンジュゲートとしてか、または、コンジュゲートの一部としてかのいずれかで包含される前に、前記剤の検出または精製を補助するために、標識されてもよい。前記標識は、ビオチン標識でもよい。別の実施形態では、前記細胞結合剤は、放射性同位体で標識されてもよい。

【0157】

ＲおよびＲ’
一実施形態では、Ｒは、場合により置換されているＣ_1-12アルキル、Ｃ_3-20ヘテロシクリルおよびＣ_5-20アリールの基から独立して選択される。これらの基は、それぞれ、以下の置換基セクションにおいて規定される。

【0158】

一実施形態では、Ｒは、独立して、場合により置換されているＣ_1-12アルキルである。

【0159】

一実施形態では、Ｒは、独立して、場合により置換されているＣ_3-20ヘテロシクリルである。

【0160】

一実施形態では、Ｒは、独立して、場合により置換されているＣ_5-20アリールである。
一実施形態では、Ｒは、独立して、場合により置換されているＣ_1-12アルキルである。

【0161】

好ましいアルキルおよびアリールの基ならびに任意選択の置換基の同一性および数に関する種々の実施形態は、Ｒ²に関して上記に記載されている。Ｒ²に関して提示された選択は、Ｒに適用する場合、適用可能であり、必要に応じて、例えば、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸またはＲ⁹が、Ｒである場合、全ての他の基Ｒに適用可能である。

【0162】

Ｒに関する選択は、Ｒ’にも適用する。

【0163】

本発明の一部の実施形態では、置換基−ＮＲＲ’を有する化合物が提供される。一実施形態では、ＲおよびＲ’は、それらが付着されている窒素原子と共に、場合により置換されている４−、５−、６−または７−員の複素環を形成する。前記環は、更なるヘテロ原子、例えば、Ｎ、ＯまたはＳを含んでもよい。

【0164】

一実施形態では、前記複素環は、それ自体が基Ｒで置換されている。更なるＮヘテロ原子が存在する場合、前記置換基は、前記Ｎヘテロ原子上にあってもよい。

【0165】

Ｒ”
Ｒ”は、Ｃ_3-12アルキレン基であり、前記アルキレン基は、鎖が、１つ以上のヘテロ原子、例えば、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅおよび／または芳香環、例えば、ベンゼンもしくはピリジンに割り込まれていてもよく、前記芳香環は、環が場合により置換されている。

【0166】

一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ_3-12アルキレン基であり、前記アルキレン基は、鎖が、１つ以上のヘテロ原子および／または芳香環、例えば、ベンゼンもしくはピリジンに割り込まれていてもよい。

【0167】

一実施形態では、前記アルキレン基は、場合により、Ｏ、ＳおよびＮＭｅから選択される１つ以上のヘテロ原子、ならびに／または芳香環に割り込まれていてもよく、前記芳香環は、環が場合により置換されていている。

【0168】

一実施形態では、前記芳香環は、Ｃ_5-20アリーレン基である。前記アリーレンは、芳香族化合物の２つの芳香環原子から、２つの水素原子を除去することにより取得される二価の部分に関する。前記部分は、５から２０個の環原子を有する。

【0169】

一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ_3-12アルキレン基であり、前記アルキレン基は、鎖が、１つ以上のヘテロ原子、例えば、Ｏ、Ｓ、Ｎ（Ｈ）、ＮＭｅおよび／または芳香環、例えば、ベンゼンもしくはピリジンに割り込まれていてもよく、前記芳香環は、環が場合により、ＮＨ₂で置換されている。

【0170】

一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ_3-12アルキレン基である。

【0171】

一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ₃、Ｃ₅、Ｃ₇、Ｃ₉およびＣ₁₁アルキレン基から選択される。

【0172】

一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ₃、Ｃ₅およびＣ₇アルキレン基から選択される。
一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ₃およびＣ₅アルキレン基から選択される。

【0173】

一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ₃アルキレン基である。
一実施形態では、Ｒ”は、Ｃ₅アルキレン基である。

【0174】

上記列記されたアルキレン基は、場合により、１つ以上のヘテロ原子および／または芳香環、例えば、ベンゼンもしくはピリジンに割り込まれていてもよく、前記芳香環は、環が場合により置換されている。上記列記されたアルキレン基は、場合により、１つ以上のヘテロ原子および／または芳香環、例えば、ベンゼンもしくはピリジンに割り込まれていてもよい。

【0175】

上記列記されたアルキレン基は、非置換の直鎖状の脂肪族アルキレン基でもよい。

【0176】

Ｘ
一実施形態では、Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮ（Ｈ）から選択される。
好ましくは、Ｘは、Ｏである。

【0177】

Ｅ
一方または両方のＣ環が式Ｅの環で置き替えられている化合物は、Ｒ¹またはＲ³のいずれかが、それらが付着されている前記Ｃ環の炭素原子と共に、場合により置換されているベンゼン環を形成する、基Ｒ²を有する。前記場合により置換されているベンゼン環は、前記ピロロベンゾジアゼピンのＣ環に縮合されていると認識され得る。前記縮合ベンゼン環は、前記Ｄ環と呼ばれてもよい。前記縮合環の化学構造は、以下に説明される。

【0178】

【化23】

【0179】

前記化学構造中、各Ｄ¹、Ｄ²、Ｄ³およびＤ⁴は、Ｈまたは置換基を表わす。
一実施形態では、前記ベンゼン環は、非置換である。

【0180】

一実施形態では、前記ベンゼン環は、ＯＨ、ＣＮ、Ｒ、ＯＲ、Ｏ−ＳＯ₂−Ｒ、ＣＯ₂Ｒ、ＣＯＲ、ＳＨ、ＳＲ、ＮＨ₂、ＮＨＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、Ｍｅ₃Ｓｎおよびハロから選択される、１、２、３または４つの基で、場合により置換されている。

【0181】

一実施形態では、前記ベンゼン環は、一置換である。前記一置換基は、Ｄ¹、Ｄ²、Ｄ³またはＤ⁴のいずれか１つでもよい（残りは、Ｈである。）。一実施形態では、前記ベンゼン環は、Ｄ²において置換されており、Ｄ¹、Ｄ³およびＤ⁴はそれぞれ、Ｈである。一実施形態では、前記ベンゼン環は、Ｄ³において置換されており、Ｄ¹、Ｄ²およびＤ⁴はそれぞれ、Ｈである。

【0182】

一実施形態では、Ｒ²は、Ｒ¹と、それらが付着されている前記Ｃ環の炭素原子と共に、場合により置換されているベンゼン環を形成する。

【0183】

ＶおよびＷに関する選択は、以下に提示される。

【0184】

Ｆ
一方または両方のＣ環が式Ｆの環で置き替えられている化合物において、一実施形態では、ＴがＮＲ、ＢＨ、ＳＯまたはＳＯ₂である場合、Ｕは、ＣＨ₂である。

【0185】

一実施形態では、ＵがＮＲ、ＯまたはＳである場合、Ｔは、ＣＨ₂またはＣＯである。
一実施形態では、Ｔは、ＣＨ₂およびＣＯから選択される。
一実施形態では、Ｕは、ＮＲ、ＯおよびＳから選択される。
一実施形態では、Ｙは、（ＣＨ₂）_nであり、ｎは、１または２である。

【0186】

一実施形態では、前記化合物Ａ−ＢのＣ環は、以下に示されるものから選択される化学構造を有する。

【0187】

【化24】

【0188】

ＶおよびＷ
ＶおよびＷは、Ｒ¹およびＲ²が、それらが付着されている前記Ｃ環の炭素原子と共に、場合により置換されているベンゼン環を形成する場合、ＶがＣであることを除き、ならびに、Ｒ³およびＲ²が、それらが付着されている前記Ｃ環の炭素原子と共に、場合により置換されているベンゼン環を形成する場合、ＷがＣであることを除いて、（ＣＨ₂）_n、Ｏ、Ｓ、ＮＲ、ＣＨＲおよびＣＲＲ’からそれぞれ選択され、ｎは、２、３または４である。

【0189】

一実施形態では、ＶおよびＷの一方がＣである場合、ＶおよびＷの他方は、ＣＨ₂およびＮＲから選択される。

【0190】

一実施形態では、ＶおよびＷの一方がＣである場合、ＶおよびＷの他方は、ＣＨ₂である。

【0191】

好ましい化合物
一実施形態では、前記コンジュゲートは、二量体であり、各ＰＢＤ部分は、Ｃ２メチレン基を有する。すなわち、各Ｒ²は、＝ＣＨ₂である。前記細胞結合剤は、抗体であるのが好ましい。

【0192】

別の実施形態では、前記コンジュゲートは、二量体であり、前記各モノマーは、Ｃ２アリール基を有する。すなわち、各Ｒ²は、場合により置換されているＣ_5-20アリールであり、各ＰＢＤ部分におけるＣ２とＣ３との間には、二重結合が存在する。前記細胞結合剤は、抗体であるのが好ましい。

【0193】

Ｃ２アルキレン
一実施形態では、前記コンジュゲートは、化合物：

【化25】

であり、より好ましくは：

【化26】

である。前記化合物中、ＣＢＡは、細胞結合剤、例えば、抗体または環状もしくは直鎖状のペプチドであり、および、ｎは、０または１である。Ｙ、Ｒ^L1およびＲ^L2は、先に規定の通りであり、Ｒ^EおよびＲ^E”は、それぞれ独立して、ＨまたはＲ^Dから選択される。

【0194】

上記各化合物に関して、必要に応じて、下記の選択が適用されてもよい。ｎは０である；ｎは、１である；Ｒ^Eは、Ｈである；Ｒ^Eは、Ｒ^Dであり、Ｒ^Dは、場合により置換されているアルキルである；Ｒ^Eは、Ｒ^Dであり、Ｒ^Dは、メチルである；ＣＢＡは、抗体である；ＣＢＡは、環状ペプチドである；Ｒ^L1およびＲ^L2は、Ｈである；Ｒ^L1およびＲ^L2は、Ｍｅである。

【0195】

Ｃ２アリール
一実施形態では、前記コンジュゲートは、化合物：

【化27】

であり、より好ましくは：

【化28】

である。前記化合物中、ＣＢＡは、細胞結合剤、例えば、抗体または環状もしくは直鎖状のペプチドであり、Ｙ、Ｒ^L1およびＲ^L2は、先に規定の通りである。Ａｒ¹およびＡｒ²は、それぞれ独立して、場合により置換されているＣ_5-20アリールであり、および、ｎは、０または１である。Ａｒ¹およびＡｒ²は、同一でもよいし、または、異なってもよい。

【0196】

一実施形態では、上記各実施形態におけるＡｒ¹およびＡｒ²は、それぞれ独立して、場合により置換されているフェニル、フラニル、チオフェニルおよびピリジルから選択される。

【0197】

一実施形態では、上記各実施形態におけるＡｒ¹およびＡｒ²は、場合により置換されているフェニルである。

【0198】

一実施形態では、上記各実施形態におけるＡｒ¹およびＡｒ²は、場合により置換されているチエン−２−イルまたはチエン−３−イルである。

【0199】

一実施形態では、上記各実施形態におけるＡｒ¹およびＡｒ²は、場合により置換されているキノリニルまたはイソキノリニルである。

【0200】

前記キノリニルまたはイソキノリニルの基は、任意の利用可能な環位置で、前記ＰＢＤコアに結合されてもよい。例えば、前記キノリニルは、キノリン−２−イル、キノリン−３−イル、キノリン−４−イル、キノリン−５−イル、キノリン−６−イル、キノリン−７−イルおよびキノリン−８−イルでもよい。これらの中でも、キノリン−３−イルおよびキノリン−６−イルが好ましくあり得る。前記イソキノリニルは、イソキノリン−１−イル、イソキノリン−３−イル、イソキノリン−４−イル、イソキノリン−５−イル、イソキノリン−６−イル、イソキノリン−７−イルおよびイソキノリン−８−イルでもよい。これらの中でも、イソキノリン−３−イルおよびイソキノリン−６−イルが好ましくあり得る。

【0201】

Ｃ２ビニル
一実施形態では、前記コンジュゲートは、化合物：

【化29】

であり、より好ましくは：

【化30】

である。前記化合物中、ＣＢＡは、細胞結合剤、例えば、抗体または環状もしくは直鎖状のペプチドであり、Ｙ、Ｒ^L1およびＲ^L2は、先に規定の通りである。Ｒ^V1およびＲ^V2は、Ｈ、メチル、エチルおよびフェニル（前記フェニルは、特に４位において、フルオロで場合により置換されていてもよい。）ならびにＣ_5-6ヘテロシクリルから独立して選択され、および、ｎは、０または１である。Ｒ^V1およびＲ^V2は、同一でもよいし、または、異なってもよい。

【0202】

上記実施形態の一部では、Ｒ^V1およびＲ^V2は、Ｈ、フェニルおよび４−フルオロフェニルから独立して選択されてもよい。

【0203】

好ましい中間体
本発明は、本願明細書に記載のコンジュゲート化合物を調製するのに使用するための中間体も提供する。

【0204】

好ましい中間体は、以下に記載され、上記好ましいコンジュゲートと密接に対応する。

【0205】

一実施形態では、前記中間体は、化合物：

【化31】

であり、より好ましくは：

【化32】

である。前記化合物中、ｎは、０または１であり、Ｙ、Ｒ^L1およびＲ^L2は、先に規定の通りであり、Ｒ^EおよびＲ^E”は、それぞれ独立して、ＨまたはＲ^Dから選択される。

【0206】

一実施形態では、前記中間体は、化合物：

【化33】

であり、より好ましくは：

【化34】

である。前記化合物中、Ｙ、Ｒ^L1およびＲ^L2は、先に規定の通りであり、Ａｒ¹およびＡｒ²は、それぞれ独立して、場合により置換されているＣ_5-20アリールであり、ｎは、０または１である。Ａｒ¹およびＡｒ²は、同一でもよいし、または、異なってもよい。

【0207】

一実施形態では、前記中間体は、化合物：

【化35】

であり、より好ましくは：

【化36】

である。前記化合物中、Ｙ、Ｒ^L1およびＲ^L2は、先に規定の通りである。Ｒ^V1およびＲ^V2は、Ｈ、メチル、エチルおよびフェニル（前記フェニルは、特に４位においてフルオロで場合により置換されていてもよい。）ならびにＣ_5-6ヘテロシクリルから独立して選択され、および、ｎは、０または１である。Ｒ^V1およびＲ^V2は、同一でもよいし、または、異なってもよい。

【0208】

置換基
本願明細書で使用する時、「場合により置換されている」の用語は、置換されていなくてもよいし、または、置換されていてもよい元の基に関する。

【0209】

特に断らない限り、本願明細書で使用する時、「置換されている」の用語は、１つ以上の置換基を有する元の基に関する。「置換基」の用語は、本願明細書において、従来の意味で使用され、元の基に共有的に付着される化学部分、または必要に応じて、元の基に縮合される化学部分を意味する。幅広い各種の置換基が周知であり、それを形成および各種の元の基内に導入するための方法も周知である。

【0210】

好ましい実施形態では、（任意選択の置換基を含む）本願明細書に記載の置換基は、細胞結合剤に反応性でない基に限定される。本件における前記細胞結合剤への結合は、前記ＰＢＤ化合物のＮ１０位から、リンカー基（例えば、Ｌ¹、Ｌ²およびＡを含む）を介して、前記細胞結合剤に形成される。前記ＰＢＤ構造の他の部分に位置する反応性官能基は、前記細胞結合剤への更なる結合を形成可能でもよい（これは、架橋とも言う）。これらの更なる結合は、前記コンジュゲートの輸送および生物学的活性を変化させ得る。したがって、一部の実施形態では、前記更なる置換基は、反応性の官能基を欠くものに制限される。

【0211】

一実施形態では、前記置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、ハロ、ＣＯ₂Ｒ、ＣＯＲ、ＣＯＮＨ₂、ＣＯＮＨＲおよびＣＯＮＲＲ’からなる群から選択される。

【0212】

一実施形態では、前記置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂、ＣＯ₂Ｒ、ＣＯＲ、ＣＯＮＨ₂、ＣＯＮＨＲおよびＣＯＮＲＲ’からなる群から選択される。

【0213】

一実施形態では、前記置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’、ＮＯ₂およびハロからなる群から選択される。

【0214】

一実施形態では、前記置換基は、Ｒ、ＯＲ、ＳＲ、ＮＲＲ’およびＮＯ₂からなる群から選択される。

【0215】

上記実施形態のいずれか１つは、本願明細書に記載の置換基のいずれか１つに適用されてもよい。または、前記置換基は、以下に列記される１つ以上の基から選択され得る。

【0216】

置換基は、例えば、以下に、より詳細に記載される。

【0217】

Ｃ_1-12アルキル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_1-12アルキル」の用語は、１から１２個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記炭化水素化合物は、脂肪族でもよいし、または、脂環式でもよく、飽和でもよいし、または不飽和（例えば、部分的に不飽和、完全に不飽和）でもよい。

【0218】

このため、「アルキル」の用語は、以下に記載される、部分集合であるアルケニル、アルキニル、シクロアルキル等を含む。

【0219】

飽和のアルキル基としては、例えば、制限されず、メチル（Ｃ₁）、エチル（Ｃ₂）、プロピル（Ｃ₃）、ブチル（Ｃ₄）、ペンチル（Ｃ₅）、ヘキシル（Ｃ₆）およびヘプチル（Ｃ₇）があげられる。

【0220】

飽和の直鎖状アルキル基としては、例えば、制限されず、メチル（Ｃ₁）、エチル（Ｃ₂）、ｎ−プロピル（Ｃ₃）、ｎ−ブチル（Ｃ₄）、ｎ−ペンチル（アミル）（Ｃ₅）、ｎ−ヘキシル（Ｃ₆）およびｎ−ヘプチル（Ｃ₇）があげられる。

【0221】

飽和の分岐鎖状アルキル基としては、例えば、ｉｓｏ−プロピル（Ｃ₃）、ｉｓｏ−ブチル（Ｃ₄）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ₄）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ₄）、ｉｓｏ−ペンチル（Ｃ₅）およびｎｅｏ−ペンチル（Ｃ₅）があげられる。

【0222】

アルキル基は、場合により、Ｏ、Ｎ（Ｈ）およびＳから選択される、１つ以上のヘテロ原子に割り込まれていてもよい。このような基は、「ヘテロアルキル」とも言う。

【0223】

Ｃ_2-20ヘテロアルキル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_2-12ヘテロアルキル」の用語は、２から１２個の炭素原子、および、Ｏ、Ｎ（Ｈ）およびＳ、好ましくはＯおよびＳから選択される１つ以上のヘテロ原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することにより取得される一価の部分に関する。

【0224】

ヘテロアルキル基としては、例えば、制限されず、１つ以上の、−（ＯＣＨ₂ＣＨ₂）−型のエチレングリコールユニットを含むものがあげられる。前記ヘテロアルキル基の末端は、ヘテロ原子、例えば、−ＯＨ、−ＳＨまたは−ＮＨ₂の一級型でもよい。好ましい実施形態では、前記末端は、−ＣＨ₃である。

【0225】

Ｃ_2-12アルケニル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_2-12アルケニル」の用語は、１つ以上の炭素−炭素二重結合を有するアルキル基に関する。

【0226】

不飽和のアルケニル基としては、例えば、制限されず、エテニル（ビニル、−ＣＨ＝ＣＨ₂）、１−プロペニル（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₃）、２−プロペニル（アリル、−ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ₂）、イソプロペニル（１−メチルビニル、−Ｃ（ＣＨ₃）＝ＣＨ₂）、ブテニル（Ｃ₄）、ペンテニル（Ｃ₅）およびヘキセニル（Ｃ₆）があげられる。

【0227】

Ｃ_2-12アルキニル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_2-12アルキニル」の用語は、１つ以上の炭素−炭素三重結合を有するアルキル基に関する。

【0228】

不飽和のアルキニル基としては、例えば、制限されず、エチニル（−Ｃ≡ＣＨ）および２−プロピニル（プロパルギル、−ＣＨ₂−Ｃ≡ＣＨ）があげられる。

【0229】

Ｃ_3-12シクロアルキル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_3-12シクロアルキル」の用語は、シクリル基でもあるアルキル基；すなわち、環状炭化水素（炭素環式）化合物の脂環式環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記部分は、３から７個の炭素原子、例えば、３から７個の環原子を有する。

【0230】

シクロアルキル基としては、例えば、制限されず、
飽和の単環式炭化水素化合物：シクロプロパン（Ｃ₃）、シクロブタン（Ｃ₄）、シクロペンタン（Ｃ₅）、シクロヘキサン（Ｃ₆）、シクロヘプタン（Ｃ₇）、メチルシクロプロパン（Ｃ₄）、ジメチルシクロプロパン（Ｃ₅）、メチルシクロブタン（Ｃ₅）、ジメチルシクロブタン（Ｃ₆）、メチルシクロペンタン（Ｃ₆）、ジメチルシクロペンタン（Ｃ₇）およびメチルシクロヘキサン（Ｃ₇）；

【0231】

不飽和の単環式炭化水素化合物：シクロプロペン（Ｃ₃）、シクロブテン（Ｃ₄）、シクロペンテン（Ｃ₅）、シクロヘキセン（Ｃ₆）、メチルシクロプロペン（Ｃ₄）、ジメチルシクロプロペン（Ｃ₅）、メチルシクロブテン（Ｃ₅）、ジメチルシクロブテン（Ｃ₆）、メチルシクロペンテン（Ｃ₆）、ジメチルシクロペンテン（Ｃ₇）およびメチルシクロヘキセン（Ｃ₇）；ならびに、
飽和の多環式炭化水素化合物：ノルカラン（Ｃ₇）、ノルピナン（Ｃ₇）、ノルボルナン（Ｃ₇）に由来するものがあげられる。

【0232】

Ｃ_3-20ヘテロシクリル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_3-20ヘテロシクリル」の用語は、複素環化合物の環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記部分は、３から２０個の環原子を有し、その内の１から１０個が、環のヘテロ原子である。好ましくは、各環は、３から７個の環原子を有し、その内の１から４個が、環のヘテロ原子である。

【0233】

この文脈において、接頭辞（例えば、Ｃ_3-20、Ｃ_3-7、Ｃ_5-6等）は、炭素原子またはヘテロ原子であるかに関わらず、環原子の数、または、環原子の数の範囲を意味する。例えば、本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-6ヘテロシクリル」の用語は、５または６個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。

【0234】

単環式のヘテロシクリル基としては、例えば、制限されず、
Ｎ₁：アジリジン（Ｃ₃）、アゼチジン（Ｃ₄）、ピロリジン（テトラヒドロピロール）（Ｃ₅）、ピロリン（例えば、３−ピロリン、２，５−ジヒドロピロール）（Ｃ₅）、２Ｈ−ピロールもしくは３Ｈ−ピロール（イソピロール、イソアゾール）（Ｃ₅）、ピペリジン（Ｃ₆）、ジヒドロピリジン（Ｃ₆）、テトラヒドロピリジン（Ｃ₆）、アゼピン（Ｃ₇）；
Ｏ₁：オキシラン（Ｃ₃）、オキセタン（Ｃ₄）、オキソラン（テトラヒドロフラン）（Ｃ₅）、オキソール（ジヒドロフラン）（Ｃ₅）、オキサン（テトラヒドロピラン）（Ｃ₆）、ジヒドロピラン（Ｃ₆）、ピラン（Ｃ₆）、オキセピン（Ｃ₇）；
Ｓ₁：チイラン（Ｃ₃）、チエタン（Ｃ₄）、チオラン（テトラヒドロチオフェン）（Ｃ₅）、チアン（テトラヒドロチオピラン）（Ｃ₆）、チエパン（Ｃ₇）；
Ｏ₂：ジオキソラン（Ｃ₅）、ジオキサン（Ｃ₆）およびジオキセパン（Ｃ₇）；
Ｏ₃：トリオキサン（Ｃ₆）；
Ｎ₂：イミダゾリジン（Ｃ₅）、ピラゾリジン（ジアゾリジン）（Ｃ₅）、イミダゾリン（Ｃ₅）、ピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（Ｃ₅）、ピペラジン（Ｃ₆）；
Ｎ₁Ｏ₁：テトラヒドロオキサゾール（Ｃ₅）、ジヒドロオキサゾール（Ｃ₅）、テトラヒドロイソキサゾール（Ｃ₅）、ジヒドロイソキサゾール（Ｃ₅）、モルホリン（Ｃ₆）、テトラヒドロオキサジン（Ｃ₆）、ジヒドロオキサジン（Ｃ₆）、オキサジン（Ｃ₆）；
Ｎ₁Ｓ₁：チアゾリン（Ｃ₅）、チアゾリジン（Ｃ₅）、チオモルホリン（Ｃ₆）；
Ｎ₂Ｏ₁：オキサジアジン（Ｃ₆）；
Ｏ₁Ｓ₁：オキサチオール（Ｃ₅）およびオキサチアン（チオキサン）（Ｃ₆）；ならびに、
Ｎ₁Ｏ₁Ｓ₁：オキサチアジン（Ｃ₆）に由来するものがあげられる。

【0235】

置換されている単環式ヘテロシクリル基としては、例えば、環型の単糖類、例えば、フラノース（Ｃ₅）、例えば、アラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノースおよびキシロフラノース、ならびに、ピラノース（Ｃ₆）、例えば、アロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノースおよびタロピラノースに由来するものがあげられる。

【0236】

Ｃ_5-20アリール：本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-20アリール」の用語は、芳香族化合物の芳香族環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関し、前記部分は、３から２０個の環原子を有する。好ましくは、各環は、５から７個の環原子を有する。

【0237】

この文脈において、接頭辞（例えば、Ｃ_3-20、Ｃ_5-7、Ｃ_5-6等）は、炭素原子またはヘテロ原子であるかに関わらず、環原子の数、または、環原子の数の範囲を意味する。例えば、本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-6アリール」の用語は、５または６個の環原子を有するアリール基に関する。

【0238】

「カルボアリール基」のように、前記環原子が、全て炭素原子でもよい。

【0239】

カルボアリール基としては、例えば、制限されず、ベンゼン、（すなわち、フェニル）（Ｃ₆）、ナフタレン（Ｃ₁₀）、アズレン（Ｃ₁₀）、アントラセン（Ｃ₁₄）、フェナントレン（Ｃ₁₄）、ナフタセン（Ｃ₁₈）およびピレン（Ｃ₁₆）に由来のものがあげられる。

【0240】

縮合環を含み、その内の少なくとも１つが芳香族環であるアリール基としては、例えば、制限されず、インダン（例えば、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン）（Ｃ₉）、インデン（Ｃ₉）、イソインデン（Ｃ₉）、テトラリン（１，２，３，４−テトラヒドロナフタレン（Ｃ₁₀）、アセナフテン（Ｃ₁₂）、フルオレン（Ｃ₁₃）、フェナレン（Ｃ₁₃）、アセフェナントレン（Ｃ₁₅）およびアセアントレン（Ｃ₁₆）に由来する基があげられる。

【0241】

または、前記環原子は、「ヘテロアリール基」のように、１つ以上のヘテロ原子を含んでもよい。単環式のヘテロアリール基としては、例えば、制限されず、
Ｎ₁：ピロール（アゾール）（Ｃ₅）、ピリジン（アジン）（Ｃ₆）；
Ｏ₁：フラン（オキソール）（Ｃ₅）；
Ｓ₁：チオフェン（チオール）（Ｃ₅）；
Ｎ₁Ｏ₁：オキサゾール（Ｃ₅）、イソキサゾール（Ｃ₅）、イソキサジン（Ｃ₆）；
Ｎ₂Ｏ₁：オキサジアゾール（フラザン）（Ｃ₅）；
Ｎ₃Ｏ₁：オキサトリアゾール（Ｃ₅）；
Ｎ₁Ｓ₁：チアゾール（Ｃ₅）、イソチアゾール（Ｃ₅）；
Ｎ₂：イミダゾール（１，３−ジアゾール）（Ｃ₅）、ピラゾール（１，２−ジアゾール）（Ｃ₅）、ピリダジン（１，２−ジアジン）（Ｃ₆）、ピリミジン（１，３−ジアジン）（Ｃ₆）（例えば、シトシン、チミン、ウラシル）、ピラジン（１，４−ジアジン）（Ｃ₆）；
Ｎ₃：トリアゾール（Ｃ₅）、トリアジン（Ｃ₆）；ならびに、
Ｎ₄：テトラゾール（Ｃ₅）に由来するものがあげられる。

【0242】

縮合環を含むヘテロアリールとしては、例えば、制限されず：
ベンゾフラン（Ｏ₁）、イソベンゾフラン（Ｏ₁）、インドール（Ｎ₁）、イソインドール（Ｎ₁）、インドリジン（Ｎ₁）、インドリン（Ｎ₁）、イソインドリン（Ｎ₁）、プリン（Ｎ₄）（例えば、アデニン、グアニン）、ベンズイミダゾール（Ｎ₂）、インダゾール（Ｎ₂）、ベンズオキサゾール（Ｎ₁Ｏ₁）、ベンズイソキサゾール（Ｎ₁Ｏ₁）、ベンゾジオキソール（Ｏ₂）、ベンゾフラザン（Ｎ₂Ｏ₁）、ベンゾトリアゾール（Ｎ₃）、ベンゾチオフラン（Ｓ₁）、ベンゾチアゾール（Ｎ₁Ｓ₁）、ベンゾチアジアゾール（Ｎ₂Ｓ）に由来するＣ₉（２縮合環を含む）；
クロメン（Ｏ₁）、イソクロメン（Ｏ₁）、クロマン（Ｏ₁）、イソクロマン（Ｏ₁）、ベンゾジオキサン（Ｏ₂）、キノリン（Ｎ₁）、イソキノリン（Ｎ₁）、キノリジン（Ｎ₁）、ベンゾキサジン（Ｎ₁Ｏ₁）、ベンゾジアジン（Ｎ₂）、ピリドピリジン（Ｎ₂）、キノキサリン（Ｎ₂）、キナゾリン（Ｎ₂）、シンノリン（Ｎ₂）、フタラジン（Ｎ₂）、ナフチリジン（Ｎ₂）、プテリジン（Ｎ₄）に由来するＣ₁₀（２縮合環を含む）；
ベンゾジアゼピン（Ｎ₂）に由来するＣ₁₁（２縮合環を含む）；
カルバゾール（Ｎ₁）、ジベンゾフラン（Ｏ₁）、ジベンゾチオフェン（Ｓ₁）、カルボリン（Ｎ₂）、ペリミジン（Ｎ₂）、ピリドインドール（Ｎ₂）に由来するＣ₁₃（３縮合環を含む）；ならびに、
アクリジン（Ｎ₁）、キサンテン（Ｏ₁）、チオキサンテン（Ｓ₁）、オキサントレン（Ｏ₂）、フェノキサチイン（Ｏ₁Ｓ₁）、フェナジン（Ｎ₂）、フェノキサジン（Ｎ₁Ｏ₁）、フェノチアジン（Ｎ₁Ｓ₁）、チアントレン（Ｓ₂）、フェナントリジン（Ｎ₁）、フェナントロリン（Ｎ₂）、フェナジン（Ｎ₂）に由来するＣ₁₄（３縮合環を含む）があげられる。

【0243】

単独であるか、または、別の置換基の一部であるかに関わらず、上記基は、それ自体が場合により、それらおよび、以下に列記される更なる置換基から選択される１つ以上の基で置換されていてもよい。

【0244】

ハロ：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒおよび−Ｉ。
ヒドロキシ：−ＯＨ。

【0245】

エーテル：−ＯＲ、前記ＯＲ中、Ｒは、エーテル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基（以下に記載される、Ｃ_1-7アルコキシ基とも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基（Ｃ_3-20ヘテロシクリルオキシ基とも言う）または、Ｃ_5-20アリール基（Ｃ_5-20アリールオキシ基とも言う）、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。

【0246】

アルコキシ：−ＯＲ、前記ＯＲ中、Ｒは、アルキル基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基である。Ｃ_1-7アルコキシ基としては、例えば、制限されず、−ＯＭｅ（メトキシ）、−ＯＥｔ（エトキシ）、−Ｏ（ｎＰｒ）（ｎ−プロポキシ）、−Ｏ（ｉＰｒ）（イソプロポキシ）、−Ｏ（ｎＢｕ）（ｎ−ブトキシ）、−Ｏ（ｓＢｕ）（ｓｅｃ−ブトキシ）、−Ｏ（ｉＢｕ）（イソブトキシ）および−Ｏ（ｔＢｕ）（ｔｅｒｔ−ブトキシ）があげられる。

【0247】

アセタール：−ＣＨ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）、前記−ＣＨ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アセタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基であるか、または、「環状」アセタール基の場合、Ｒ¹およびＲ²は、それらが付着されている前記２つの酸素原子と、それらが付着されている炭素原子と互いにまとまって、４から８個の環原子を有する複素環を形成している。アセタール基としては、例えば、制限されず、−ＣＨ（ＯＭｅ）₂、−ＣＨ（ＯＥｔ）₂および−ＣＨ（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0248】

ヘミアセタール：−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＲ¹）、前記−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＲ¹）中、Ｒ¹は、ヘミアセタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。ヘミアセタール基としては、例えば、制限されず、−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＭｅ）および−ＣＨ（ＯＨ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0249】

ケタール：−ＣＲ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）、前記−ＣＲ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）中、Ｒ¹およびＲ²は、アセタールについて規定の通りである。Ｒは、水素以外のケタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。ケタール基としては、例えば、制限されず、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）₂、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＥｔ）₂、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）₂、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＥｔ）₂および−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0250】

ヘミケタール：−ＣＲ（ＯＨ）（ＯＲ¹）、前記−ＣＲ（ＯＨ）（ＯＲ¹）中、Ｒ¹は、ヘミアセタールについて規定の通りである。Ｒは、水素以外のヘミケタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。ヘミケタール基としては、例えば、制限されず、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、−Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）および−Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0251】

オキソ（ケト、−オン）：＝Ｏ。
チオン（チオケトン）：＝Ｓ。

【0252】

イミノ（イミン）：＝ＮＲ、前記＝ＮＲ中、Ｒは、イミノ置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。エステル基としては、例えば、制限されず、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ、＝ＮＥｔおよび＝ＮＰｈがあげられる。

【0253】

ホルミル（カルバルデヒド、カルボキシアルデヒド）：−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ。

【0254】

アシル（ケト）：−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、前記−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、アシル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基（Ｃ_1-7アルキルアシルまたはＣ_1-7アルカノイルとも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基（Ｃ_3-20ヘテロシクリルアシルとも言う）またはＣ_5-20アリール基（Ｃ_5-20アリールアシルとも言う）、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。アシル基としては、例えば、制限されず、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₃（アセチル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃（プロピオニル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ₃）₃（ｔ−ブチリル）および−Ｃ（＝Ｏ）Ｐｈ（ベンゾイル、フェノン）があげられる。

【0255】

カルボキシ（カルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ。
チオカルボキシ（チオカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＳＨ。

【0256】

チオロカルボキシ（チオロカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｏ）ＳＨ。
チオノカルボキシ（チオノカルボン酸）：−Ｃ（＝Ｓ）ＯＨ。

【0257】

イミド酸：−Ｃ（＝ＮＨ）ＯＨ。
ヒドロキサム酸：−Ｃ（＝ＮＯＨ）ＯＨ。

【0258】

エステル（カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル）：−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、前記−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ中、Ｒは、エステル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。エステル基としては、例えば、制限されず、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ₃、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ₂ＣＨ₃、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ₃）₃および−Ｃ（＝Ｏ）ＯＰｈがあげられる。

【0259】

アシルオキシ（逆エステル）：−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ、前記−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、アシルオキシ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。アシルオキシ基としては、例えば、制限されず、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ₃（アセトキシ）、−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ₃）₃、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｐｈおよび−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ₂Ｐｈがあげられる。

【0260】

オキシカルボイルオキシ：−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ、前記−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ中、Ｒは、エステル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。エステル基としては、例えば、制限されず、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ₃、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ₂ＣＨ₃、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ₃）₃および−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＰｈがあげられる。

【0261】

アミノ：−ＮＲ¹Ｒ²、前記−ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基（Ｃ_1-7アルキルアミノまたはジ−Ｃ_1-7アルキルアミノとも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、ＨまたはＣ_1-7アルキル基であるか、または、「環状」アミノ基の場合、Ｒ¹およびＲ²は、それらが付着されている前記窒素原子と互いにまとまって、４から８個の環原子を有する複素環を形成している。アミノ基は、一級（−ＮＨ₂）、二級（−ＮＨＲ¹）または三級（−ＮＨＲ¹Ｒ²）でもよいし、カチオンの状態において、四級（−⁺ＮＲ¹Ｒ²Ｒ³）でもよい。アミノ基としては、例えば、制限されず、−ＮＨ₂、−ＮＨＣＨ₃、−ＮＨＣ（ＣＨ₃）₂、−Ｎ（ＣＨ₃）₂、−Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂および−ＮＨＰｈがあげられる。環状アミノ基としては、例えば、制限されず、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノおよびチオモルホリノがあげられる。

【0262】

アミド（カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキシアミド）：−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²、前記−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。アミド基としては、例えば、制限されず、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ₃、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₃）₂、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ₂ＣＨ₃および−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂、ならびに、Ｒ¹およびＲ²が、それらが付着されている前記窒素原子と互いにまとまって、複素環構造、例えば、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニルおよびピペラジノカルボニルを形成しているアミド基があげられる。

【0263】

チオアミド（チオカルバミル）：−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ¹Ｒ²、前記−Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。アミド基としては、例えば、制限されず、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ₃、−Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（ＣＨ₃）₂および−Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0264】

アシルアミド（アシルアミノ）：−ＮＲ¹Ｃ（＝Ｏ）Ｒ²、前記−ＮＲ¹Ｃ（＝Ｏ）Ｒ²中、Ｒ¹は、アミド置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。Ｒ²は、アシル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。アシルアミド基としては、例えば、制限されず、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ₃、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃および−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｐｈがあげられる。Ｒ¹およびＲ²は共に、例えば、スクシンイミジル、マレイミジルおよびフタルイミジルのような、環状構造を形成し得る。

【0265】

【化37】

【0266】

アミノカルボニルオキシ：−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²、前記−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。アミノカルボニルオキシ基としては、例えば、制限されず、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨＭｅ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＭｅ₂および−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＥｔ₂があげられる。

【0267】

ウレイド：−Ｎ（Ｒ¹）ＣＯＮＲ²Ｒ³、前記−Ｎ（Ｒ¹）ＣＯＮＲ²Ｒ³中、Ｒ²およびＲ³は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。Ｒ¹は、ウレイド置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。ウレイド基としては、例えば、制限されず、−ＮＨＣＯＮＨ₂、−ＮＨＣＯＮＨＭｅ、−ＮＨＣＯＮＨＥｔ、−ＮＨＣＯＮＭｅ₂、−ＮＨＣＯＮＥｔ₂、−ＮＭｅＣＯＮＨ₂、−ＮＭｅＣＯＮＨＭｅ、−ＮＭｅＣＯＮＨＥｔ、−ＮＭｅＣＯＮＭｅ₂および−ＮＭｅＣＯＮＥｔ₂があげられる。

【0268】

グアノジノ：−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ₂。
テトラゾリル：４つの窒素原子と１つの炭素原子とを有する５員の芳香環。

【0269】

【化38】

【0270】

イミノ：＝ＮＲ、前記＝ＮＲ中、Ｒは、イミノ置換基、例えば、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、ＨまたはＣ_1-7アルキル基である。イミノ基としては、例えば、制限されず、＝ＮＨ、＝ＮＭｅおよび＝ＮＥｔがあげられる。

【0271】

アミジン（アミジノ）：−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ₂、前記−Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ₂中、各Ｒは、アミジン置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、ＨまたはＣ_1-7アルキル基である。アミジン基としては、例えば、制限されず、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＭｅ₂および−Ｃ（＝ＮＭｅ）ＮＭｅ₂があげられる。

【0272】

ニトロ：−ＮＯ₂。
ニトロソ：−ＮＯ。

【0273】

アジド：−Ｎ₃。
シアノ（ニトリル、カーボニトリル）：−ＣＮ。
イソシアノ：−ＮＣ。
シアナト：−ＯＣＮ。
イソシアナト：−ＮＣＯ。

【0274】

チオシアノ（チオシアナト）：−ＳＣＮ。
イソチオシアノ（イソチオシアナト）：−ＮＣＳ。
スルフヒドリル（チオール、メルカプト）：−ＳＨ。

【0275】

チオエーテル（スルフィド）：−ＳＲ、前記−ＳＲ中、Ｒは、チオエーテル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基（Ｃ_1-7アルキルチオ基とも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。Ｃ_1-7アルキルチオ基としては、例えば、制限されず、−ＳＣＨ₃および−ＳＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0276】

ジスルフィド：−ＳＳ−Ｒ、前記−ＳＳ−Ｒ中、Ｒは、ジスルフィド置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基（本願明細書では、Ｃ_1-7アルキルジスルフィドとも言う）である。Ｃ_1-7アルキルジスルフィド基としては、例えば、制限されず、−ＳＳＣＨ₃および−ＳＳＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0277】

スルフィン（スルフィニル、スルホキシド）：−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、前記−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、スルフィン置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィン基としては、例えば、制限されず、−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ₃および−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0278】

スルホン（スルホニル）：−Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ、前記−Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ中、Ｒは、スルホン置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基、例えば、フッ素化もしくは全フッ素置換されたＣ_1-7アルキル基である。スルホン基としては、例えば、制限されず、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₃（メタンスルホニル、メシル）、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＦ₃（トリフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＨ₃（エシル）、−Ｓ（＝Ｏ）₂Ｃ₄Ｆ₉（ノナフリル）、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＦ₃（トレシル）、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ₂（タウリル），−Ｓ（＝Ｏ）₂Ｐｈ（フェニルスルホニル、ベシル）、４−メチルフェニルスルホニル（トシル）、４−クロロフェニルスルホニル（クロシル）、４−ブロモフェニルスルホニル（ブロシル）、４−ニトロフェニル（ノシル）、２−ナフタレンスルホナート（ナプシル）および５−ジメチルアミノ−ナフタレン−１−イルスルホナート（ダンシル）があげられる。

【0279】

スルフィン酸（スルフィノ）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＨ、−ＳＯ₂Ｈ。
スルホン酸（スルホ）：−Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨ、−ＳＯ₃Ｈ。

【0280】

スルフィナート（スルフィン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ；前記−Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ中、Ｒは、スルフィナート置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィナート基としては、例えば、制限されず、−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ₃（メトキシスルフィニル；メチルスルフィナート）および−Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ₂ＣＨ₃（エトキシスルフィニル；エチルスルフィナート）があげられる。

【0281】

スルホナート（スルホン酸エステル）：−Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＲ、前記−Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＲ中、Ｒは、スルホナート置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルホナート基としては、例えば、制限されず、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₃（メトキシスルホニル；メチルスルホナート）および−Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₂ＣＨ₃（エトキシスルホニル；エチルスルホナート）があげられる。

【0282】

スルフィニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒ、前記−ＯＳ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、スルフィニルオキシ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィニルオキシ基としては、例えば、制限されず、−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ₃および−ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0283】

スルホニルオキシ：−ＯＳ（＝Ｏ）₂Ｒ、前記−ＯＳ（＝Ｏ）₂Ｒ中、Ｒは、スルホニルオキシ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルホニルオキシ基としては、例えば、制限されず、−ＯＳ（＝Ｏ）₂ＣＨ₃（メシレート）および−ＯＳ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＨ₃（エシレート）があげられる。

【0284】

サルフェート：−ＯＳ（＝Ｏ）₂ＯＲ：前記−ＯＳ（＝Ｏ）₂ＯＲ中、Ｒは、サルフェート置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。サルフェート基としては、例えば、制限されず、−ＯＳ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₃および−ＳＯ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0285】

スルファミル（スルファモイル；スルフィン酸アミド；スルフィナミド）：−Ｓ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²、前記−Ｓ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。スルファミル基としては、例えば、制限されず、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ₃）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₃）₂、−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）、−Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂および−Ｓ（＝Ｏ）ＮＨＰｈがあげられる。

【0286】

スルホンアミド（スルフィンアモイル；スルホン酸アミド；スルホンアミド）：−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ¹Ｒ²、前記−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。スルホンアミド基としては、例えば、制限されず、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨ₂、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨ（ＣＨ₃）、−Ｓ（＝Ｏ）₂Ｎ（ＣＨ₃）₂、−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）、−Ｓ（＝Ｏ）₂Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂および−Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨＰｈがあげられる。

【0287】

スルファミノ：−ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨ、前記−ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨ中、Ｒ¹は、アミノ基について規定のアミノ置換基である。スルファミノ基としては、例えば、制限されず、−ＮＨＳ（＝Ｏ）₂ＯＨおよび−Ｎ（ＣＨ₃）Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨがあげられる。

【0288】

スルホンアミノ：−ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ、前記−ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ中、Ｒ¹は、アミノ基について規定のアミノ置換基である。Ｒは、スルホンアミノ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルホンアミノ基としては、例えば、制限されず、−ＮＨＳ（＝Ｏ）₂ＣＨ₃および−Ｎ（ＣＨ₃）Ｓ（＝Ｏ）₂Ｃ₆Ｈ₅があげられる。

【0289】

スルフィンアミノ：−ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、前記−ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒ¹は、アミノ基について規定のアミノ置換基である。Ｒは、スルフィンアミノ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィンアミノ基としては、例えば、制限されず、−ＮＨＳ（＝Ｏ）ＣＨ₃および−Ｎ（ＣＨ₃）Ｓ（＝Ｏ）Ｃ₆Ｈ₅があげられる。

【0290】

ホスフィノ（ホスフィン）：−ＰＲ₂、前記−ＰＲ₂中、Ｒは、ホスフィノ置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスフィノ基としては、例えば、制限されず、−ＰＨ₂、−Ｐ（ＣＨ₃）₂、−Ｐ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂、−Ｐ（ｔ−Ｂｕ）₂および−Ｐ（Ｐｈ）₂があげられる。

【0291】

ホスホ：−Ｐ（＝Ｏ）₂。
ホスフィニル（ホスフィンオキシド）：−Ｐ（＝Ｏ）Ｒ₂、前記−Ｐ（＝Ｏ）Ｒ₂中、Ｒは、ホスフィニル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスフィニル基としては、例えば、制限されず、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ₃）₂、−Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂、−Ｐ（＝Ｏ）（ｔ−Ｂｕ）₂および−Ｐ（＝Ｏ）（Ｐｈ）₂があげられる。

【0292】

ホスホン酸（ホスホノ）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）₂。
ホスホナート（ホスホノエステル）：−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂、前記−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂中、Ｒは、ホスホナート置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスホナート基としては、例えば、制限されず、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₃）₂、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）₂、−Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）₂および−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）₂があげられる。

【0293】

リン酸（ホスホノオキシ）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）₂。
ホスフェート（ホスホノオキシエステル）：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂、前記−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂中、Ｒは、ホスフェート置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスフェート基としては、例えば、制限されず、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₃）₂、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）₂、−ＯＰ（＝Ｏ）（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）₂および−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）₂があげられる。

【0294】

亜リン酸：−ＯＰ（ＯＨ）₂。
ホスファイト：−ＯＰ（ＯＲ）₂、前記−ＯＰ（ＯＲ）₂中、Ｒは、ホスファイト置換基、例えば、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスファイト基としては、例えば、制限されず、−ＯＰ（ＯＣＨ₃）₂、−ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）₂、−ＯＰ（Ｏ−ｔ−Ｂｕ）₂および−ＯＰ（ＯＰｈ）₂があげられる。

【0295】

ホスホラミダイト：−ＯＰ（ＯＲ¹）−ＮＲ²₂、前記−ＯＰ（ＯＲ¹）−ＮＲ²₂中、Ｒ¹およびＲ²は、ホスホラミダイト置換基、例えば、−Ｈ、（場合により置換されている）Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスホラミダイト基としては、例えば、制限されず、−ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）−Ｎ（ＣＨ₃）₂、−ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）₂および−ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₂ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）₂があげられる。

【0296】

ホスホラミデート：−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ¹）−ＮＲ²₂、前記−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ¹）−ＮＲ²₂中、Ｒ¹およびＲ²は、ホスホラミデート置換基、例えば、−Ｈ、（場合により置換されている）Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、−Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスホラミデート基としては、例えば、制限されず、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）−Ｎ（ＣＨ₃）₂、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）₂および−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₂ＣＮ）−Ｎ（ｉ−Ｐｒ）₂があげられる。

【0297】

アルキレン
Ｃ_3-12アルキレン：本願明細書で使用する時、「Ｃ_3-12アルキレン」の用語は、（特に断らない限り）３から１２個の炭素原子を有する炭化水素化合物における、同じ炭素原子から両方、または、２つの異なる炭素原子のそれぞれから１つのいずれかの、２つの水素原子を除去することにより得られる二座部分に関する。前記炭化水素化合物は、脂肪族でもよいし、または、脂環式でもよく、飽和でもよいし、または、部分的に不飽和もしくは完全に不飽和でもよい。このため、「アルキレン」の用語は、以下に記載される、部分集合であるアルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレン等を含む。

【0298】

直鎖状の飽和Ｃ_3-12アルキレン基としては、例えば、制限されず、−（ＣＨ₂）_n−、ｎは、３から１２の整数であり、例えば、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−（プロピレン）、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−（ブチレン）、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−（ペンチレン）、および−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ−₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−（ヘプチレン）があげられる。

【0299】

分岐鎖状の飽和Ｃ_3-12アルキレン基としては、例えば、制限されず、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂−、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂−、−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂ＣＨ₂−、−ＣＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）−、−ＣＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）ＣＨ₂−および−ＣＨ₂ＣＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）ＣＨ₂−があげられる。

【0300】

直鎖状の部分的に不飽和Ｃ_3-12アルキレン基（Ｃ_3-12アルケニレンおよびアルキニレンの基）としては、例えば、制限されず、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−、−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−ＣＨ＝ＣＨ−および−ＣＨ₂−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ₂−があげられる。

【0301】

分岐鎖状の部分的に不飽和Ｃ_3-12アルキレン基（Ｃ_3-12アルケニレンおよびアルキニレンの基）としては、例えば、制限されず、−Ｃ（ＣＨ₃）＝ＣＨ−、−Ｃ（ＣＨ₃）＝ＣＨ−ＣＨ₂−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ（ＣＨ₃）−および−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ（ＣＨ₃）−があげられる。

【0302】

脂環式の飽和Ｃ_3-12アルキレン基（Ｃ_3-12シクロアルキレン）としては、例えば、制限されず、シクロペンチレン（例えば、シクロペント−１，３−イルエン）およびシクロヘキシレン（例えば、シクロヘキシ−１，４−イルエン）があげられる。

【0303】

脂環式の部分的に不飽和Ｃ_3-12アルキレン基（Ｃ_3-12シクロアルキレン）としては、例えば、制限されず、シクロペンテニレン（例えば、４−シクロペンテン−１，３−イルエン）、シクロヘキセニレン（例えば、２−シクロヘキセン−１，４−イルエン；３−シクロヘキセン−１，２−イルエン；２，５−シクロヘキサジエン−１，４−イルエン）があげられる。

【0304】

他の形態を含む
特に断らない限り、周知のイオン、塩、溶媒和物およびこれらの置換基の保護型は、上記に含まれる。例えば、カルボン酸（−ＣＯＯＨ）への言及は、アニオン（カルボキシレート）型（−ＣＯＯ^-）、その塩または溶媒和物および従来の保護型も含む。同様に、アミノ基への言及は、プロトン化された形態（−Ｎ⁺ＨＲ¹Ｒ²）、前記アミノ基の塩または溶媒和物、例えば、塩化水素塩、ならびにアミノ基の従来の保護型も含む。同様に、ヒドロキシル基への言及は、アニオン型（−Ｏ^-）、その塩または溶媒和物および従来の保護型も含む。

【0305】

塩
前記活性化合物の対応する塩、例えば、薬学的に許容され得る塩を調製、精製および／または取り扱うのが、都合がよく、または、望ましい場合がある。薬学的に許容され得る塩は、例えば、Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１−１９（１９７７）に記載されている。

【0306】

例えば、前記化合物がアニオン性であるか、または、アニオン性であり得る官能基（例えば、−ＣＯＯＨが、−ＣＯＯ^-であり得る。）を有する場合には、塩は、適切なカチオンとで形成されてもよい。適切な無機カチオンとしては、例えば、制限されず、アルカリ金属イオン、例えば、Ｎａ⁺およびＫ⁺、アルカリ土類カチオン、例えば、Ｃａ²⁺およびＭｇ²⁺、ならびに、他のカチオン、例えば、Ａｌ³⁺があげられる。適切な有機カチオンとしては、例えば、制限されず、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ₄⁺）および置換されているアンモニウムイオン（例えば、ＮＨ₃Ｒ⁺、ＮＨ₂Ｒ⁺₂、ＮＨＲ⁺₃、ＮＲ⁺₄）があげられる。一部の適切な置換されているアンモニウムイオンは、例えば、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミンおよびトロメタミンならびに、アミノ酸、例えば、リジンおよびアルギニン由来のものである。一般的な四級アンモニウムイオンは、例えば、Ｎ（ＣＨ₃）₄⁺である。

【0307】

前記化合物がカチオン性であるか、または、カチオン性であり得る官能基（例えば、−ＮＨ₂が、−ＮＨ₃⁺であり得る。）を有する場合には、塩は、適切なアニオンとで形成されてもよい。適切な無機アニオンとしては、例えば、制限されず、下記の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸および亜リン酸に由来するものがあげられる。

【0308】

適切な有機アニオンとしては、例えば、制限されず、下記の有機酸：２−アセトキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリル酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、粘液酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸および吉草酸に由来するものがあげられる。適切なポリマー性有機アニオンとしては、例えば、制限されず、下記のポリマー酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロースに由来するものがあげられる。

【0309】

溶媒和物
前記活性化合物の対応する溶媒和物を調製、精製および／または取り扱うのが、都合がよく、または、望ましい場合がある。本願明細書において、「溶媒和物」の用語は、媒質（例えば、活性化合物、活性化合物の塩）と溶媒との錯体を意味する、従来の意味で使用される。前記溶媒が水の場合、前記溶媒和物は、便宜上、水和物、例えば、一水和物、二水和物、三水和物等を意味し得る。

【0310】

本発明は、前記ＰＢＤ部分のイミン結合に溶媒が付加する化合物を含み、これは以下に説明され、ここで、前記溶媒は水またはアルコール（Ｒ^AＯＨ、Ｒ^Aが、Ｃ_1-4アルキルである。）である。

【0311】

【化39】

【0312】

これらの型は、前記ＰＢＤにおけるカルビノールアミンおよびカルビノールアミンエーテル型と言うことができる（上記Ｒ¹⁰に関連するセクションにおいて記載のように）。これらの平衡のバランスは、化合物が見出される条件および前記部分自体の性質により決まる。

【0313】

これらの具体的な化合物は、例えば、凍結乾燥により、固体状で単離され得る。

【0314】

異性体
本発明の特定の化合物は、１つ以上の具体的な幾何学型、光学型、鏡像型、ジアステレオ異性型、エピマー型、アトロプ型、立体異性型、互変異性型、立体構造型またはアノマー型、例えば、制限されず、ｃｉｓ−およびｔｒａｎｓ−型；Ｅ−およびＺ−型；ｃ−、ｔ−およびｒ−型；ｅｎｄｏ−およびｅｘｏ−型；Ｒ−、Ｓ−およびｍｅｓｏ−型；Ｄ−およびＬ−型；ｄ−およびｌ−型；（＋）および（−）型；ケト−、エノール−およびエノレート型；ｓｙｎ−およびａｎｔｉ−型；シンクリナル−およびアンチクリナル−型；α−およびβ−型；アキシャルおよびエカトリアル型；ｂｏａｔ−、ｃｈａｉｒ−、ｔｗｉｓｔ−、ｅｎｖｅｌｏｐｅ−およびｈａｌｆｃｈａｉｒ−型；ならびに、それらの組み合わせの型で存在してもよい。以下、まとめて「異性体」（または「異性型」）と言う。

【0315】

「キラル」の用語は、鏡像体を重ね合わせることができない特性を有する分子を意味する。一方、「アキラル」の用語は、その鏡像体と重ね合わせることができる分子を意味する。

【0316】

「立体異性体」の用語は、同一の化学組成を有するが、空間における原子または基の配置に関して異なる化合物を意味する。

【0317】

「ジアステレオマー」は、２つ以上の不斉中心を有する立体異性体を意味する。前記分子は、互いの鏡像ではない。ジアステレオマーは、異なる物理的特性、例えば、融点、沸点、スペクトル特性および反応性を有する。ジアステレオマーの混合物は、高解像の分析的手法、例えば、電気泳動およびクロマトグラフィー下において分離してもよい。

【0318】

「エナンチオマー」は、互いの鏡像を重ね合わせることができない化合物の、２つの立体異性体を意味する。

【0319】

本願明細書で使用される、立体化学的な定義および規定は、一般的には、Ｓ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ，Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｒｍｓ（１９８４）ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｂｏｏｋ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；および、Ｅｌｉｅｌ，Ｅ．ａｎｄ Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．，「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９４に従う。本発明の化合物は、非対称またはキラル中心を含んでもよく、このため、種々の立体異性体が存在する。本発明の化合物の全ての立体異性体、例えば、制限されず、ジアステレオマー、エナンチオマーおよびアトロプアイソマーならびにそれらの混合物、例えば、ラセミ混合物は、本発明の一部を構成する。多くの有機化合物には、光学活性体が存在する。すなわち、前記有機化合物は、平面偏光の面を回転させる能力を有する。光学的に活性な化合物の記載において、接頭辞であるＤおよびＬまたはＲおよびＳは、そのキラル中心についての、前記分子の絶対配置を意味するのに使用される。接頭辞であるｄおよびｌまたは（＋）および（−）は、前記化合物による平面偏光の回転のサインを表わすのに使用される。（−）またはｌは、前記化合物が、左旋回であることを意味する。（＋）またはｄの接頭辞を有する化合物は、右旋回である。所定の化学構造に関して、これらの立体異性体は、それらが互いの鏡像であること以外は同一である。個別の立体異性体は、エナンチオマーとも言う。このような異性体の混合物は、多くの場合、エナンチオ混合物と呼ばれる。エナンチオマーの５０：５０の混合物は、ラセミ混合物またはラセミ体と呼ばれる。前記ラセミ混合物またはラセミ体は、化学反応またはプロセスにおいて、立体選択性または立体特異性がない場合に生じ得る。「ラセミ混合物」および「ラセミ体」の用語は、２つのエナンチオ種の、光学活性を欠いている、等モル混合物を意味する。

【0320】

互変異性型に関して以下に説明する場合以外は、本願明細書で使用する時、構造（または構造）異性体（すなわち、空間における単に原子の位置よりもむしろ、原子間の結合が異なる異性体）は、「異性体」の用語から特に除外されることに留意するべきである。例えば、メトキシ基、−ＯＣＨ₃への言及は、その構造異性体である、ヒドロキシメチル基、−ＣＨ₂ＯＨへの言及として理解されるべきではない。同様に、オルト−クロロフェニルへの言及は、その構造異性体である、メタ−クロロフェノールへの言及として理解されるべきではない。ただし、構造の分類への言及は、その分類内にある構造的異性型を十分に含み得る（例えば、Ｃ_1-7アルキルは、ｎ−プロピルおよびｉｓｏ−プロピルを含み；ブチルは、ｎ−、ｉｓｏ−、ｓｅｃ−およびｔｅｒｔ−ブチルを含み；メトキシフェニルは、オルト−、メタ−およびパラ−メトキシフェニルを含む。）。

【0321】

上記除外は、互変異性型、例えば、ケト−、エノール−およびエノレート型、例えば、下記互変異対における場合、ケト／エノール（以下に説明）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エネチオール、Ｎ−ニトロソ／ヒドロキシアゾおよびニトロ／ａｃｉ−ニトロには関連しない。

【0322】

【化40】

【0323】

「互変異性体」または「互変異性型」の用語は、低エネルギー障壁を介して相互変換できる、種々のエネルギーの構造異性体を意味する。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー性互変異性体としても知られる）は、プロトンの移動による相互変換、例えば、ケト−エノールおよびイミン−エナミンの異性化を含む。原子価互変異性体は、一部の結合電子の再編成による相互変換を含む。

【0324】

１つ以上の同位体置換を有する化合物が、「異性体」の用語に特に含まれることに留意すべきである。例えば、Ｈは、任意の同位体型、例えば、¹Ｈ、²Ｈ（Ｄ）および³Ｈ（Ｔ）でもよく；Ｃは、任意の同位体型、例えば、¹²Ｃ、¹³Ｃおよび¹⁴Ｃでもよく；Ｏは、任意の同位体型、例えば、¹⁶Ｏおよび¹⁸Ｏ；等でもよい。

【0325】

本発明の化合物に包含され得る同位体としては、例えば、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体、例えば、制限されず、²Ｈ（重水素、Ｄ）、³Ｈ（三重水素）、¹¹Ｃ、¹³Ｃ、¹⁴Ｃ、¹⁵Ｎ、¹⁸Ｆ、³¹Ｐ、³²Ｐ、³⁵Ｓ、³⁶Ｃｌおよび¹²⁵Ｉがあげられる。本発明の種々の同位体標識化合物、例えば、放射性同位体、例えば、３Ｈ、１３Ｃおよび１４Ｃが包含される。このような同位体標識化合物は、代謝研究、反応速度論研究、検出または画像化技術、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射形コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、例えば、ドラッグまたは基質の組織分布アッセイまたは、患者の放射線処置に有用であり得る。重水素標識または置換された本発明の治療化合物は、分布、代謝および排泄（ＡＤＭＥ）に関して、改善されたＤＭＰＫ（薬物代謝および薬物動態）特性を有し得る。より重い同位体、例えば、重水素による置換により、より高い代謝安定性、例えば、向上したｉｎ ｖｉｖｏにおける半減期または低減された用量要求を生じる、特定の治療的利益を得ることができる。１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴの研究に有用であり得る。この発明の同位体標識化合物およびそのプロドラッグは、一般的には、非同位体標識試薬について、容易に利用可能な同位体標識試薬に置換することにより、前記スキームまたは、実施例および以下に記載の調製に開示の手法を行うことにより調製され得る。さらに、より重い同位体、具体的には、重水素（すなわち、２ＨまたはＤ）で置換することにより、より高い代謝安定性、例えば、向上したｉｎ ｖｉｖｏにおける半減期または低減された用量要求または治療指数の改善を生じる、特定の治療的利益を得ることができる。この文脈における重水素は、置換基と認識されると理解される。このようなより重い同位体、具体的には、重水素の濃度は、同位体濃縮因子により規定され得る。この発明の化合物では、具体的な同位体として具体的に指定されていない任意の原子は、その原子の任意の安定同位体を表わすことを意味する。

【0326】

特に断らない限り、特定の化合物への言及は、全てのこのような異性型、例えば、（全体的にまたは部分的に）ラセミおよびそれらの他の混合物を含む。このような異性型を調製（例えば、非対称合成）および分離（例えば、分別結晶およびクロマトグラフの手段）をするための方法は、当該分野において公知であるか、または、本願明細書で教示される方法もしくは公知の手法における公知の方法を採用することにより直ちに取得されるかのいずれかである。

【0327】

生物学的活性
ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞増殖アッセイ
一般的には、前記抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）の細胞毒性または細胞増殖抑制の活性は、受容体タンパク質、例えば、ＨＥＲ２を有する哺乳類の細胞を、細胞培養培地において、前記ＡＤＣの抗体に曝し；前記細胞を、約６時間から約５日の期間培養し；細胞生存性を測定することにより測定される。細胞系ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイは、本発明のＡＤＣにおける、生存性（増殖）、細胞毒性およびアポトーシスの誘導（カスパーゼ活性）を測定するのに使用される。

【0328】

前記抗体−ドラッグコンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏでの有効性は、細胞増殖アッセイにより測定され得る。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光細胞生存性アッセイは、商業的に利用可能な（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）、Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａルシフェラーゼの組換え発現に基づく均質なアッセイ法である（米国特許第５５８３０２４；５６７４７１３および５７００６７０号明細書）。この細胞増殖アッセイは、代謝的に活性な細胞の指標である、存在する定量のＡＴＰに基づく培養において生細胞数を測定する（Ｃｒｏｕｃｈ ｅｔ ａｌ（１９９３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１６０：８１−８８；米国特許第６６０２６７７号明細書）。前記ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイは、自動化された高処理のスクリーニング（ＨＴＳ）に受け入れられる、９６ウェルのフォーマットにおいて行われる（Ｃｒｅｅ ｅｔ ａｌ（１９９５）ＡｎｔｉＣａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇｓ ６：３９８−４０４）。前記均質なアッセイの手法は、１つの試薬（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）試薬）を、血清添加培地において培養された細胞に、直接添加することによる。細胞の洗浄、培地の除去および複数回のピペット工程は不要である。前記システムは、試薬の添加および混合後１０分で、３８４ウェルフォーマットにおいて、わずか１５個／ウェルの細胞を検出する。前記細胞は、ＡＤＣにより連続的に処理されてもよいし、または、前記細胞は、ＡＤＣで処理され、ＡＤＣから分離されてもよい。一般的に、簡潔に、すなわち、３時間処理された細胞は、連続的に処理された細胞と同じ有効性の効果を示した。

【0329】

前記均質な「添加−混合−測定」フォーマットは、存在するＡＴＰの量に比例した、細胞溶解および発光シグナルの発生をもたらす。前記ＡＴＰの量は、培養に存在する細胞の数に直接比例する。前記ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）アッセイは、ルシフェラーゼの反応により生成される、「増殖型」の発光シグナルを発生させる。前記発光シグナルは、使用した細胞種および培地に応じて、通常、５時間より長い半減期を有する。生細胞は、相対発光ユニット（ＲＬＵ）に反映される。基質である昆虫のルシフェリンは、組換えのホタルルシフェラーゼにより、ＡＴＰのＡＭＰへの同時変換および光子の発生を伴って、酸化的に脱カルボキシル化される。

【0330】

ｉｎ ｖｉｖｏにおける有効性
本発明の抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）のｉｎ ｖｉｖｏにおける有効性は、マウスにおける腫瘍異種移植研究により測定され得る。例えば、本発明の抗−ＨＥＲ２ ＡＤＣのｉｎ ｖｉｖｏにおける有効性は、高発現ＨＥＲ２トランスジェニック外植片マウスモデルにより測定され得る。同種移植片は、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）治療に応答しないか、または、ほとんど応答しない、Ｆｏ５ ｍｍｔｖトランスジェニックマウスから繁殖される。対象は、特定の用量レベル（ｍｇ／ｋｇ）およびＰＢＤドラッグ暴露（μｇ／ｍ²）で、ＡＤＣ；および、プラセボバッファーコントロール（媒体）で１回処理され、腫瘍倍加、ログ細胞殺傷および腫瘍収縮を測定するために、２週間以上にわたってモニターされた。

【0331】

使用
本発明のコンジュゲートは、標的部位に、ＰＢＤ化合物を提供するのに使用され得る。
前記標的部位は、好ましくは、増殖性細胞群である。前記抗体は、増殖性細胞群において提示される抗原に対する抗体である。

【0332】

一実施形態では、前記抗原は、前記増殖性細胞群、例えば、腫瘍細胞群に存在する抗原の量と比較して、非増殖性細胞群において、存在しないか、または、低下したレベルで存在する。

【0333】

前記標的部位において、前記リンカーは、式ＢまたはＣの化合物を遊離するように、開裂され得る。このため、前記コンジュゲートは、前記標的部位に、式ＢまたはＣの化合物を、選択的に提供するのに使用され得る。

【0334】

前記リンカーは、前記標的部位に存在する酵素により開裂されてもよい。
前記標的部位は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏであり得る。

【0335】

本発明の抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）化合物は、抗ガン活性に有用性を有するものを含む。具体的には、前記化合物は、ＰＢＤドラッグ部分、例えば、毒素にコンジュゲートされた、すなわち、リンカーにより共有的に付着された抗体を含む。前記ドラッグが、抗体とコンジュゲートされていない場合、前記ＰＢＤドラッグは、細胞毒性効果を有する。このため、前記ＰＢＤドラッグ部分の生物学的活性は、抗体へのコンジュゲートにより調節される。本発明の抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）は、効果的な用量の細胞毒薬物を、腫瘍組織に選択的に送達する。これにより、より高い選択性、すなわち、より低い有効用量が達成され得る。

【0336】

このため、一態様では、本発明は、治療に使用するための、本願明細書に記載のコンジュゲート化合物を提供する。

【0337】

更なる態様では、増殖性疾患の処置に使用するための、本願明細書に記載のコンジュゲート化合物も提供する。本発明の第２の態様は、増殖性疾患を処置するための医薬の製造におけるコンジュゲート化合物の使用を提供する。

【0338】

当業者であれば、候補コンジュゲートが、具体的な細胞種のいずれかに関する増殖性症状を処置するかどうかを、直ちに決定することができる。例えば、具体的な化合物により提供された活性を評価するのに都合よく使用され得るアッセイは、以下の実施例に記載されている。

【0339】

「増殖性疾患」の用語は、望ましくない過剰もしくは異常な細胞の、望ましくなく、または、制御できない細胞増殖、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏに関わらず、腫瘍性増殖または過形成増殖に関する。

【0340】

増殖性の症状としては、例えば、制限されず、良性、前悪性および悪性の細胞増殖、例えば、制限されず、新生物および腫瘍（例えば、組織細胞種、グリオーマ、星状細胞種、骨腫）、ガン（例えば、肺ガン、肺小細胞ガン、胃腸ガン、腸ガン、結腸ガン、乳がん腫、卵巣ガン腫、前立腺ガン、精巣ガン、肝臓ガン、腎臓ガン、膀胱ガン、膵臓ガン、脳ガン、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫またはメラノーマ）、白血病、乾癬、骨疾患、（例えば、結合組織の）繊維増殖性障害ならびにアテローム硬化症があげられる。具体的な対象となるガンとしては、制限されず、白血病および卵巣ガンがあげられる。

【0341】

任意の種類の細胞、例えば、制限されず、肺、胃腸（例えば、腸、結腸）、乳房（乳腺）、卵巣、前立腺、肝臓（肝臓）、腎臓（腎臓）、膀胱、膵臓、脳および皮膚が処理され得る。

【0342】

一実施形態では、前記処置は、膵臓ガンの処置である。
一実施形態では、前記処置は、前記細胞表面上に、α_νβ₆インテグリンを有する腫瘍の処置である。

【0343】

本発明の抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）は、例えば、腫瘍抗原の過剰発現により特徴付けられる、種々の疾患または障害を処置するのに使用され得ることが考慮される。典型的な症状または過剰増殖の障害としては、良性または悪性の腫瘍；白血病、血液学的およびリンパ性腫瘍があげられる。他のものとしては、神経細胞、グリア、星状細胞、視床下部、腺、マクロファージ、上皮、間質、割腔、炎症、血管新生および免疫、例えば、自己免疫の障害があげられる。

【0344】

一般的に、前記処置される疾患または障害は、過剰増殖性疾患、例えば、ガンである。本願明細書において、処置されるガンとしては、例えば、制限されず、ガン腫、リンパ腫、芽腫、肉腫および白血病またはリンパ性腫瘍があげられる。このようなガンのより具体的な例としては、扁平上皮ガン（例えば、扁平上皮細胞ガン）、肺ガン、例えば、小細胞肺ガン、非小細胞肺ガン、肺の腺腫および肺の扁平上皮ガン、腹膜のガン、肝細胞ガン、胃もしくは腹部のガン、例えば、胃腸ガン、膵臓ガン、神経膠芽細胞腫、子宮頸部ガン、卵巣ガン、肝ガン、膀胱ガン、ヘパトーム、乳がん、結腸ガン、直腸ガン、結直腸ガン、子宮内膜もしくは子宮のガン腫、唾腺ガン腫、腎臓もしくは腎臓部のガン、前立腺ガン、外陰ガン、甲状腺ガン、肝ガン腫、肛門ガン腫、陰茎ガン腫ならびに頸部ガンがあげられる。

【0345】

前記ＡＤＣ化合物が処置に使用され得る自己免疫疾患としては、リウマチ性障害（例えば、関節リウマチ、シェーグレン症候群、強皮症、ループス、例えば、ＳＬＥおよびループス腎炎、多発性筋炎／皮膚筋炎、クリオグロブリン血症、抗リン脂質抗体症候群および乾癬性関節炎等）、骨関節炎、自己免疫性胃腸および肝臓障害（例えば、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎、クローン病）、自己免疫性胃炎および悪性貧血、自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、セリアック病等）、脈管炎（例えば、ＡＮＣＡ関連脈管炎、例えば、チャーグ−ストラウス症候群、ウェゲナー肉芽腫症、多発性動脈炎等）、自己免疫性神経障害（例えば、多発性硬化症、オプソクローヌス−ミオクローヌス症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎、パーキンソン病、アルツハイマー病および自己免疫性多発ニューロパシー等）、腎臓障害（例えば、糸球体腎炎、グッドパスチャ症候群、ベルガー病等）、自己免疫性皮膚障害（例えば、乾癬、じんましん、じんましん、尋常性天疱瘡、水疱性類天疱瘡、皮膚エリテマトーデス等）、血液障害（例えば、血小板減少性紫斑病、血栓性血小板減少性紫斑病、輸血後紫斑病および自己免疫性溶血性貧血等）、アテローム硬化症、ブドウ膜炎、自己免疫性聴覚疾患（例えば、内耳疾患および聴力喪失等）、ベーチェット病、レイノー症候群、臓器移植および自己免疫性内分泌障害（例えば、糖尿病関連自己免疫疾患、例えば、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）、アジソン病および自己免疫甲状腺疾患（例えば、グレーブス病、甲状腺炎）等）があげられる。より好ましいこのような疾患としては、例えば、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎、ＡＮＣＡ関連脈管炎、ループス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、グレーブス病、ＩＤＤＭ、悪性貧血、甲状腺炎および糸球体腎炎があげられる。

【0346】

処置方法
本発明のコンジュゲートは、治療方法に使用され得る。処置を必要とする対象に、治療的に有効量の、本発明のコンジュゲート化合物を投与することを含む、処置方法も提供される。「治療的に有効量」の用語は、患者に対して、利点を示すのに十分な量である。このような利点は、少なくとも１つの兆候の少なくとも改善であり得る。投与される実際の量ならびに投与の速度およびタイムコースは、処置される性質および重症度により決まるであろう。処置の処方、例えば、用量の決定は、一般医および他の医師の責任内である。

【0347】

本発明の化合物は、単独または、処置される症状に応じて、同時または連続のいずれかで、他の処置との組み合わせで投与され得る。処置および治療としては、例えば、制限されず、化学療法（活性剤、例えば、薬剤、例えば、化学療法剤の投与）；手術；および放射線療法があげられる。

【0348】

「化学療法剤」は、作用機序に関わらず、ガンの処置に有用な化合物である。化学療法剤の分類としては、制限されず、アルキル化剤、代謝拮抗剤、紡錘体毒植物アルカロイド、細胞毒性／抗腫瘍抗生物質、トポイソメラーゼ阻害剤、抗体、光増感剤、キナーゼ阻害剤があげられる。化学療法剤としては、「標的療法」および従来の化学療法に使用される化合物があげられる。

【0349】

化学療法剤としては、例えば、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ Ｐｈａｒｍ．）、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）、５−ＦＵ（フルオロウラシル、５−フルオロウラシル、ＣＡＳ Ｎｏ．５１−２１−８）、ゲムシタビン（ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）、Ｌｉｌｌｙ）、ＰＤ−０３２５９０１（ＣＡＳ Ｎｏ．３９１２１０−１０−９、Ｐｆｉｚｅｒ）、シスプラチン（ｃｉｓ−ジアミン、ジクロロプラチナ（ＩＩ）、ＣＡＳ Ｎｏ．１５６６３−２７−１）、カルボプラチン（ＣＡＳ Ｎｏ．４１５７５−９４−４）、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、テモゾロミド（４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミド、ＣＡＳ Ｎｏ．８５６２２−９３−１、ＴＥＭＯＤＡＲ（登録商標）、ＴＥＭＯＤＡＬ（登録商標）、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）、タモキシフェン（（Ｚ）−２−［４−（１，２−ジフェニルブト−１−エニル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタンアミン、ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）、ＩＳＴＵＢＡＬ（登録商標）、ＶＡＬＯＤＥＸ（登録商標））およびドキソルビシン（ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標））、Ａｋｔｉ−１／２、ＨＰＰＤおよびラパマイシンがあげられる。

【0350】

化学療法剤の更なる例としては、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍ．）、ｓｕｔｅｎｔ（ＳＵＮＩＴＩＮＩＢ（登録商標）、ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ−５１８（Ｍｅｋ阻害剤、Ｅｘｅｌｉｘｉｓ、国際公開第２００７／０４４５１５号パンフレット）、ＡＲＲＹ−８８６（Ｍｅｋ阻害剤、ＡＺＤ６２４４、Ａｒｒａｙ ＢｉｏＰｈａｒｍａ、Ａｓｔｒａ Ｚｅｎｅｃａ）、ＳＦ−１１２６（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｓｅｍａｆｏｒｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＢＥＺ−２３５（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＸＬ−１４７（ＰＩ３Ｋ阻害剤、Ｅｘｅｌｉｘｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ロイコボリン（ホリニン酸）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ Ｓｍｉｔｈ Ｋｌｉｎｅ）、ロナファルニブ（ＳＡＲＡＳＡＲ（商標）、ＳＣＨ ６６３３６、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、ＢＡＹ４３−９００６、Ｂａｙｅｒ Ｌａｂｓ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、イリノテカン（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）、ＣＰＴ−１１、Ｐｆｉｚｅｒ）、ティピファニブ（ＺＡＲＮＥＳＴＲＡ（商標）、Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、アブラキサン（商標）（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ−フリー）、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ、Ｉｌ）、バンデタニブ（ｒＩＮＮ、ＺＤ６４７４、ＺＡＣＴＩＭＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、クロラムブシル、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ ５２７１；Ｓｕｇｅｎ）、
テムシロリムス（ＴＯＲＩＳＥＬ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、パゾパニブ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、カンホスファミド（ＴＥＬＣＹＴＡ（登録商標）、Ｔｅｌｉｋ）、チオテパおよびシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）、ＮＥＯＳＡＲ（登録商標））；アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドパ、カルボクオン、メツレドパおよびウレドパ；エチレンイミンおよびメチルアメラミン、例えば、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミドおよびトリメチロメラミン；アセトゲニン（特に、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（例えば、合成類似体であるトポテカン）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（例えば、そのアドゼレジン、カルゼレジンおよびビゼレジン合成類似体）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（例えば、合成類似体であるＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；ナイトロゲンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクトレタミンオキシド・塩酸、メルファラン、ノベムビシン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェナステリン、プレドニムスチン、トロホファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、カリケアマイシン・ガンマ１Ｉ、カリケアマイシン・オメガＩ１（Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）３３：１８３−１８６）；ジネマイシン、ジネマイシンＡ；ビスホスホネート、例えば、クロドロネート；エスペラマイシン；ならびに、ネオカルチノスタチン発色団および関連する色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン、カルジノフィリン（ｃａｒｚｉｎｏｐｈｉｌｉｎ）、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、ネモルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗剤、例えば、メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート；プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン、例えば、カルステロン、ドロモスタノロン・プロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン：副腎ステロイド抑制剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補液、例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）；アセグラトン；アルドホスファミド・グリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート；デホファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルホルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；エリプチニウム・アセテート；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン（ｌｏｎｉｄａｉｎｉｎｅ）；メイタンシノイド、例えば、メイタンシンおよびアンサマイトシン；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）；ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２トキシン、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡおよびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金類似体、例えば、シスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ビノレルビン（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標））；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標）、Ｒｏｃｈｅ）；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えば、レチノイン酸；ならびに、上記のいずれかの薬学的に許容され得る塩、酸および誘導体があげられる。

【0351】

前記「化学療法剤」の定義には、（ｉ）腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭ）、例えば、タモキシフェン（例えば、ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；クエン酸タモキシフェン）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストンおよびＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（クエン酸トレミフィン（ｔｏｒｅｍｉｆｉｎｅ））等；（ｉｉ）副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メゲストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Ｐｆｉｚｅｒ）、ホルメスタニエ（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）およびＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）等；（ｉｉｉ）抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリドおよびゴセレリンならびにトロキサシタビン（１，３−ジオキソラン・ヌクレオシド・シトシン類似体）；（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤、例えば、ＭＥＫ阻害剤（国際公開第２００７／０４４５１５号パンフレット）；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子、例えばＰＫＣ−α、ＲａｆおよびＨ−Ｒａｓの発現を阻害するもの、例えば、オブリメルセン（ＧＥＮＡＳＥＮＳＥ（登録商標）、Ｇｅｎｔａ Ｉｎｃ．）；（ｖｉｉ）リボザイム、例えば、ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））およびＨＥＲ２発現阻害剤；（ｖｉｉｉ）ワクチン、例えば、遺伝子治療ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）およびＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ−２；トポイソメラーゼ１阻害剤、例えば、ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；（ｉｘ）抗血管新生剤、例えば、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；ならびに、上記のいずれかの薬学的に許容され得る塩、酸および誘導体も含まれる。

【0352】

前記「化学療法剤」の定義には、治療抗体、例えば、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）；パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ）、パーツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）ならびに、前記抗体ドラッグコンジュゲート、ゲムツズマブ・オゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）も含まれる。

【0353】

本発明のコンジュゲートとの組み合わせで、化学療法剤としての治療的有効性を有するヒト化モノクローナル抗体としては、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、アトリズマブ、バピニューズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブ・メルタンシン、カンツズマブ・メルタンシン、セデリズマブ（ｃｅｄｅｌｉｚｕｍａｂ）、セルトリズマブ・ペゴル、シドフシツズマブ（ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、シドツズマブ（ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ（ｆｅｌｖｉｚｕｍａｂ）、フォントリズマブ、ゲムツズマブ・オゾガマイシン、イノツズマブ・オゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ（ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ（ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ）、ヌマビズマブ（ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ（ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペクフシツズマブ（ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ペクツズマブ（ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ、ペキセリズマブ、ラリビズマブ（ｒａｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ、レスリビズマブ（ｒｅｓｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、レスリズマブ、レシビズマブ（ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ）、ルプリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、シプリズマブ、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブ・テトラキセタン、タドシズマブ（ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブ・セルモロイキン、ツクシツズマブ（ｔｕｃｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ウマビズマブ（ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、ウルトキサズマブ（ｕｒｔｏｘａｚｕｍａｂ）およびビシリズマブ（ｖｉｓｉｌｉｚｕｍａｂ）があげられる。

【0354】

本発明に基づいて使用するための、本発明の薬学的組成物は、前記活性成分、すなわち、コンジュゲート化合物に加えて、薬学的に許容され得る賦形剤、キャリア、バッファー、安定剤または、当業者に周知の他の材料を含んでもよい。このような材料は、非毒性であるべきであり、前記活性成分の効能を妨げないべきである。前記キャリアまたは他の材料の正確な性質は、投与経路により決まるであろう。前記投与経路は、経口または注射、例えば、皮膚、皮下または静脈内でもよい。

【0355】

経口投与用の薬学的組成物は、錠剤、カプセル剤、粉末または液体の形態であり得る。錠剤は、固体状のキャリアまたは補助剤を含んでもよい。液体状の薬学的組成物は、一般的には、液体状のキャリア、例えば、水、石油、動物もしくは植物のオイル、鉱油または合成油を含む。生理食塩水、デキストロースまたは他の糖類の溶液またはグリコール、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコールが含まれてもよい。カプセル剤は、固体状のキャリア、例えば、ゼラチンを含んでもよい。

【0356】

静脈内、皮膚もしくは皮下の注射または苦痛の部位での注射に関して、前記活性成分は、発熱物質を含まず、適切なｐＨ、等張性および安定性を有する、非経口的に許容され得る水溶液の形態であろう。当業者は、等張性の媒体、例えば、塩化ナトリウム注射剤、リンゲル液、乳酸リンゲル液を使用して、適切な溶液を調製することが十分に可能である。保存剤、安定剤、バッファー、抗酸化剤および／または他の添加剤が、必要に応じて含まれてもよい。

【0357】

製剤
前記コンジュゲート化合物は、単独で使用される（例えば、投与される）ことが可能であるが、組成物または製剤として存在するのが、多くの場合好ましい。

【0358】

一実施形態では、前記組成物は、本願明細書に記載のコンジュゲート化合物、および、薬学的に許容され得るキャリア、希釈剤または賦形剤を含む、薬学的組成物（例えば、製剤、調製物、医薬）である。

【0359】

一実施形態では、前記組成物は、少なくとも１つの本願明細書に記載のコンジュゲート化合物を、１つ以上の当業者に周知の他の薬学的に許容され得る成分、例えば、制限されず、薬学的に許容され得るキャリア、希釈剤、賦形剤、補助剤、充填材、バッファー、保存剤、抗酸化剤、潤滑剤、安定剤、溶解剤、界面活性剤（例えば、湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、香味料および甘味料と共に含む薬学的組成物である。

【0360】

一実施形態では、前記組成物は、さらに、他の活性成分、例えば、他の治療剤または予防剤を含む。

【0361】

適切なキャリア、希釈剤、賦形剤等は、標準的な薬学のテキストに見出され得る。例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（ｅｄｓ．Ｍ．Ａｓｈ ａｎｄ Ｉ．Ａｓｈ），２００１（Ｓｙｎａｐｓｅ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｎｄｉｃｏｔｔ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＵＳＡ）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐｕｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００；およびＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，２ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９４を参照のこと。

【0362】

本発明の別の態様は、本願明細書に規定の、少なくとも１つの［¹¹Ｃ］放射性標識コンジュゲートまたはコンジュゲート様化合物を、１つ以上の当業者に周知の他の薬学的に許容され得る成分、例えば、キャリア、希釈剤、賦形剤等と混合することを含む、薬学的組成物を製造する方法に関する。個々の単位（例えば、錠剤等）として配合される場合は、各単位は、所定量（用量）の前記活性化合物を含む。

【0363】

本願明細書で使用する時、「薬学的に許容され得る」の用語は、安全な医療的判断の範囲内にあり、合理的な利益／リスク比と比例して、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応または他の問題もしくは合併症なしに、当該対象（例えば、ヒト）の組織との接触に使用するのに適している、化合物、成分、材料、組成物、剤形等に関する。各キャリア、希釈剤、賦形剤等は、前記製剤の他の成分と適合する意味においても、「許容され得」なければならない。

【0364】

前記製剤は、薬学の分野において周知の任意の方法により調製され得る。このような方法は、前記活性化合物と、１つ以上の副成分を構成するキャリアとの関連付けをもたらす工程を含む。一般的には、前記製剤は、前記活性化合物とキャリア（例えば、液体状のキャリア、細分化された固体状のキャリア等）との関連付けを均一および密接にもたらし、ついで、必要に応じて、製品を成形することにより調製される。

【0365】

前記製剤は、速放性もしくは緩効性；即効性、遅効性；徐放性もしくは持効性の放出またはそれらの組み合わせを提供するように調製されてもよい。

【0366】

（例えば、注射による）非経口投与に適した製剤としては、水性または非水性、等張性、発熱物質フリーの滅菌された液体（例えば、溶液、懸濁液）があげられる。前記製剤では、前記活性成分は、（例えば、リポソームまたは他の微粒子に、）溶解され、懸濁され、または、他の方法で提供される。このような液体は、さらに、他の薬学的に許容され得る成分、例えば、抗酸化剤、バッファー、保存剤、安定剤、静菌剤、懸濁化剤、増粘剤および、目的のレシピエントの血液（または他の関連する体液）と等張性の製剤を提供する溶質を含んでもよい。賦形剤としては、例えば、水、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油等があげられる。このような製剤に使用するのに適した等張性のキャリアとしては、例えば、塩化ナトリウム注射剤、リンゲル液、乳酸リンゲル液があげられる。典型的には、前記液体における活性成分の濃度は、約１ｎｇ／ｍｌから約１０μｇ／ｍｌ、例えば、約１０ｎｇ／ｍｌから約１μｇ／ｍｌである。前記製剤は、ユニット−ドーズまたはマルチ−ドーズの密封容器、例えば、アンプルおよびバイアル中に存在してもよいし、使用直前に、滅菌された液体状のキャリア、例えば、注射用水を添加することのみを必要とする、凍結乾燥された（凍結乾燥された）状態で保存されてもよい。即席の注射溶液および懸濁液が、滅菌された粉末、顆粒および錠剤から調製されてもよい。

【0367】

用量
前記コンジュゲート化合物および前記コンジュゲート化合物を含む組成物の適切な用量が、患者間で変更され得ることは、当業者により理解されるであろう。適切な用量を決定することは、一般的には、任意のリスクまたは有害な副作用に対する、治療的利益のレベルのバランスによるであろう。選択される用量レベルは、各種の要因、例えば、制限されず、具体的な化合物の活性、投与経路、投与のタイミング、前記化合物の排出速度、処置の持続性、組み合わせで使用される他の薬剤、化合物および／または材料、症状の重症度ならびに、種、性別、年齢、体重、症状、全体的な健康ならびに、患者の既往歴により決まるであろう。前記化合物の量および投与経路は、最終的には、医師、獣医または臨床医の裁量であるが、一般的には、前記用量は、実質的に有害または有害な副作用を引き起こすことなく、所望の効果を達成する、作用部位における局所濃度を達成するように選択されるであろう。

【0368】

投与は、１回の投与、処置のコースにわたって、（例えば、適切な間隔で分割された用量で）連続的または断続的にもたらされ得る。最も効果的な手段および投与量を決定する方法は、当業者に周知であり、治療に使用される製剤、治療の目的、処置される標的細胞および処置される対象により変更されるであろう。１回または複数回の投与は、処置している医師、獣医または臨床医により選択される用量レベルおよびパターンで行われ得る。

【0369】

一般的には、前記活性化合物の適切な用量は、１日あたりの、対象の体重１キログラムあたりに、約１００ｎｇから約２５ｍｇ（より典型的には、約１μｇから約１０ｍｇ）の範囲である。前記活性化合物が、塩、エステル、アミド、プロドラッグ等である場合、投与される量は、元の化合物に基づいて算出され、使用される実際の重量が比例的に増加される。

【0370】

一実施形態では、前記活性化合物は、下記の投与計画に基づいて、ヒトの患者に投与される：約１００ｍｇ、１日３回。

【0371】

一実施形態では、前記活性化合物は、下記の投与計画に基づいて、ヒトの患者に投与される：約１５０ｍｇ、１日２回。

【0372】

一実施形態では、前記活性化合物は、下記の投与計画に基づいて、ヒトの患者に投与される：約２００ｍｇ、１日２回。

【0373】

ただし、一実施形態では、前記コンジュゲート化合物は、下記の投与計画に基づいて、ヒトの患者に投与される：約５０または約７５ｍｇ、１日３または４回。

【0374】

一実施形態では、前記コンジュゲート化合物は、下記の投与計画に基づいて、ヒトの患者に投与される：約１００または約１２５ｍｇ、１日２回。

【0375】

上記用量は、（抗体に対するＰＢＤ部分およびリンカーを含む）前記コンジュゲートまたは、提供される有効量の前記ＰＢＤ化合物、例えば、前記リンカーの開裂後に遊離可能な量の化合物に適用し得る。

【0376】

疾患の予防または処置に関して、本発明のＡＤＣの適切な用量は、処置される上記の疾患の種類、前記疾患の重症度および経過、前記分子が予防または治療の目的で投与されるかどうか、それまでの治療、患者の既往歴および、前記抗体に対する反応ならびに主治医の裁量により決まるであろう。前記分子は、１回または一連の処置にわたって、患者に適切に投与される。前記疾患の種類および重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇから１５ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１−２０ｍｇ／ｋｇ）の分子が、例えば、１回以上の分割した投与であるか、または、連続的な点滴であるに関わらず、前記患者に投与するための、最初の候補用量である。典型的な１日の用量は、上記要因に応じて、約１μｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇ以上の範囲であり得る。患者に投与されるＡＤＣの典型的な用量は、約０．１から約１０ｍｇ／ｋｇ 患者体重の範囲である。数日以上にわたる繰り返し投与に関して、症状に応じて、前記処置は、疾患の兆候における所望の抑制が起こるまで、持続される。典型的な投与計画は、約４ｍｇ／ｋｇの初期量を投与し、続けて、ＡＤＣの更なる用量を、１週間、２週間または３週間ごとに投与するコースを含む。他の投与計画が、有用な場合がある。この治療の進行は、従来の技術およびアッセイにより、容易にモニターされる。

【0377】

処置
症状を処置することの文脈において、本願明細書で使用する時、「処置」の用語は、一般的には、ヒトまたは（例えば、獣医用途における）動物に関わらず、いくらかの所望の治療効果、例えば、前記症状の進行の防止が達成される、処置および治療に関し、進行速度の低下、進行速度の停止、前記症状の抑制、前記症状の改善、前記症状の回復を含む。予防的測定（すなわち、予防、防止）としての処理も含まれる。

【0378】

本願明細書で使用する時、「治療的に有効量」の用語は、所望の投与計画に基づいて投与された場合、合理的な利益／リスク比と比例して、いくらかの所望の治療効果を生じさせるのに有効な、活性化合物または、活性化合物を含む材料、組成物もしくは剤形の量に関する。

【0379】

同様に、本願明細書で使用する時、「予防的に有効量」の用語は、所望の投与計画に基づいて投与された場合、合理的な利益／リスク比と比例して、いくらかの所望の予防効果を生じさせるのに有効な、活性化合物または、活性化合物を含む材料、組成物もしくは剤形の量に関する。

【0380】

抗体ドラッグコンジュゲートの調製
抗体ドラッグコンジュゲートは、複数の経路により、当業者に公知の有機化学反応、条件および試薬を使用して、例えば、（１）抗体の求核基を二価のリンカー試薬と反応させて、共有結合を介して、抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成し、続けて、活性化したドラッグ部分の試薬と反応させること；ならびに、（２）ドラッグ部分の試薬をリンカー試薬と反応させて、共有結合を介して、ドラッグ−リンカー試薬Ｄ−Ｌを形成し、続けて、抗体の求核基と反応させることを使用して調製され得る。コンジュゲート方法（１）および（２）は、本発明の抗体−ドラッグコンジュゲートを調製するために、各種の抗体およびリンカーに関して使用されてもよい。

【0381】

抗体上の求核基としては、制限されず、側鎖のチオール基、例えば、システインがあげられる。チオール基は、求核性であり、リンカー部分、例えば、本発明のものの上の球電子基と共有結合を形成する反応が可能である。特定の抗体は、還元性の鎖内ジスルフィド、すなわち、システイン架橋を有する。抗体は、還元剤、例えば、ＤＴＴ（Ｃｌｅｌａｎｄ’ｓ試薬、ジチオスレイトール）またはＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン・塩酸；Ｇｅｔｚ ｅｔ ａｌ（１９９９）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｖｏｌ ２７３：７３−８０；Ｓｏｌｔｅｃ Ｖｅｎｔｕｒｅｓ、Ｂｅｖｅｒｌｙ、ＭＡ）による処理により、リンカー試薬とのコンジュゲートのための反応性を形成されてもよい。このため、各システインジスルフィド架橋は、理論的には、２つの反応性チオール求核基を形成するであろう。更なる求核基は、チオールへのアミンの変換をもたらす、リジンと２−イミノチオラン（Ｔｒａｕｔ’ｓ試薬）との反応により、抗体内に導入され得る。

【0382】

対象／患者
前記対象／患者は、動物、哺乳類、有胎盤類、有袋類（例えば、カンガルー、ウォンバット）、単孔類（例えば、カモノハシ）、げっ歯類（例えば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ミューリン（例えば、マウス）、ウサギ（例えば、ウサギ）、鳥類（例えば、トリ）、イヌ（例えば、イヌ）、ネコ（例えば、ネコ）ウマ（例えば、ウマ）、ブタ（例えば、ブタ）、ヒツジ（例えば、ヒツジ）ウシ（例えば、ウシ）、霊長類、類人猿（例えば、サルまたは類人猿）、サル（例えば、マーモセット、ヒヒ）、類人猿（例えば、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル）またはヒトであり得る。

【0383】

さらに、前記対象／患者は、その発達形態のいずれか、例えば、胎児でもよい。好ましい一実施形態では、前記対象／患者は、ヒトである。

【0384】

一実施形態では、前記患者は、各患者が、細胞の表面上に、α_νβ₆インテグリンを有する腫瘍を有する群である。

【0385】

合成
式ＶＩＩＩの二量体中間体への１つの可能な合成経路は、以下に示される。

【0386】

【化41】

【0387】

上記スキームにおいて、Ｒ^Lは、

【化42】

を表わす。

【0388】

一般的には、そのＮ１０−Ｃ１１結合に関して、非対称の二量体は、前記分子の対称性を崩すために、式ＩＶのビス−アミノ化合物を、１当量の商業的に利用可能な（または、容易に調製される）クロロホルメート試薬で処理することにより調製され得る。ついで、前記結合基前駆体（Ｒ^L）を導入するために、残った遊離のアミンは、独立して、官能化される。前記ＰＢＤ−Ｂ環近くに対する、更なる官能基の操作により、保護基を除去して、目的の分子を取得する。

【0389】

式ＩＶの化合物は、典型的には、適切に官能化されたＣ環フラグメント（Ｉ）を、式ＩＩの二量体コアを含むＡ環にカップリングさせることにより調製される。Ｃ環フラグメントは、公知のカルバメート保護されているメチル ４−オキソプロリネート結合ブロックから調製され得る。ＷｉｔｔｉｇまたはＨｏｒｎｅｒ−Ｅｍｍｏｎｓ条件下におけるオレフィン化が、ｅｎｄｏ−またはｅｘｏ−不飽和アルケンを供給するのに使用され得る。Ｃ環およびＡ環フラグメントは、前記Ａ環フラグメントの酸塩化物誘導体を使用して、トリエチルアミンの存在下において、標準的な条件下でカップリングされて、式ＩＩＩの分子を取得し得る。対称性は、異なるＣ環を導入することにより、この段階で崩されてもよい。ＩＩＩ型の化合物は、ｅｎｄｏまたはｅｘｏ Ｃ環不飽和に影響を及ぼすことなく、酢酸またはギ酸における亜鉛により還元されて、式ＩＶの分子を取得し得る。

【0390】

または、適切な４−ヒドロキシピロリジン基本単位が、式ＩＩの二量体コアにカップリングされてもよい。前記ヒドロキシル基は、ケトンに酸化され、ついで、エノールトリフラートに変換され得る。Ｓｕｚｕｋｉカップリングが、ｐｒｏ Ｃ２置換基（例えば、アリール、アルケニル等）を導入するのに使用され得る。ついで、前記ニトロ基は、アミンに還元され得る。１つのアミンは、前記リンカー基を有するために、他の遊離を遊離して保護される。

【0391】

ＶＩ型の非対称カルバメートは、ＩＶ型のビス−アミンを、ピリジンまたはトリエチルアミンの存在下において、１当量の商業的に利用可能な（または、容易に調製される）クロロホルメートで処理することにより調製され得る。クロロホルメートが、前記ｐｒｏ−リンカー基（Ｒ^L）に使用されたものに対して直交する、適切なカルバメート系窒素保護基（Ｐｒｏｔ^N）を取得するために選択されてもよい。前記Ｒ^Lカルバメートは、残りのアミノ基をイソシアネートに変換し、Ｒ^Lアルコールでそれを停止させることにより導入され得る。または、前記Ｒ^Lアルコールは、クロロホルメートまたは機能的に同等なもの（フルオロホルメート、ｐ−ニトロカルボネート、ペンタフルオロカルボネートまたはヒドロキシベンゾトリアゾールカルボネート）に変換され得る。最終的に、前記残りのアミノ基は、前記Ｒ^Lアルコールにより移動されて、式ＶＩの分子を取得し得る、反応性のｐ−ニトロカルバメート、ペンタフルオロカルバメートまたはヒドロキシベンゾトリアゾールカルバメートに変換され得る。
式ＶＩＩの分子は、例えば、酢酸水溶液で、シリル保護基を除去することにより、式ＶＩの分子から調製され得る。デス−マーチンペルヨージナン（または、代替的に、ＴＰＡＰ／ＮＭＯ、ＰＤＣまたはＳｗｅｒｎ条件下において）による酸化により、閉環生成物が取得される。

【0392】

式Ｖのコンジュゲートは、カルバメート系窒素保護基の除去により、式ＶＩＩの分子から調製され得る。

【0393】

別の実施形態では、式ＸＶＩＩＩのコンジュゲートは、スキーム２に示されるように、化合物ＩＸから調製され得る。

【0394】

化合物ＩＩ
式（ＩＩ）の化合物の合成は、出願人の先の出願である、国際公開第２００６／１１１７５９号パンフレットに記載されており、Ｇｒｅｇｓｏｎらよっても記載されている（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００１，４４，１１６１−１１７４）。前記パンフレットに記載の化合物（ＩＩ）の調製は、参照により本願明細書に、具体的に取り込まれる。

【0395】

参照は、ＰＢＤ二量体を合成する公知の方法、例えば、Ａｎｔｏｎｏｗ，Ｄ．ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１ １１１（４），２８１５−２８６４においてレビューされたものにもなされる。

【0396】

更なる関連する開示は、国際公開第２０１０／０９１１５０号パンフレットに見出され得る。国際公開第２０１０／０９１１５０号パンフレットに記載の中間体化合物は、上記方法に使用されてもよい。

【0397】

例えば、［１６４］段落に示される二量体化合物（１５）は、上記スキームＩにおける化合物（ＩＩＩ）として使用されてもよい。これおよび更なる採用は当業者に明らかであろう。

【実施例】

【0398】

一般的な実験方法
旋光度を、ＡＤＰ２２０旋光計（Ｂｅｌｌｉｎｇｈａｍ Ｓｔａｎｌｅｙ Ｌｔｄ．）において測定した。濃度（ｃ）を、ｇ／１００ｍＬとして得た。融点を、デジタル融点装置（Ｅｌｅｃｔｒｏｔｈｅｒｍａｌ）を使用して測定した。ＩＲスペクトルを、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒスペクトル１０００ＦＴ ＩＲ分光計において記録した。¹Ｈおよび¹³Ｃ ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＮＭＲ分光計を使用して、それぞれ、４００および１００ＭＨｚにおいて、３００Ｋで取得した。化学シフトを、ＴＭＳ（δ＝０．０ｐｐｍ）と比較して報告する。シグナルを、ヘルツ（Ｈｚ）として与えられるカップリング定数により、ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｄｔ（ダブルトリプレット）、ｄｄ（ダブルダブレット）、ｄｄｄ（ダブルダブルダブレット）またはｍ（マルチプレット）として指定する。質量分析（ＭＳ）データを、Ｗａｔｅｒｓ ２９９６ ＰＤＡを含むＷａｔｅｒｓ ２６９５ ＨＰＬＣと組み合わせられた、Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱ機器を使用して収集する。使用したＷａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱのパラメータを、キャピラリー（ｋＶ）、３．３８；コーン（Ｖ）、３５；抽出器（Ｖ）、３．０；ソース温度（℃）、１００；脱溶媒和温度（℃）、２００；コーン流速（Ｌ／時間）、５０；脱溶媒和速度（Ｌ／時間）、２５０とした。高解像能質量分析（ＨＲＭＳ）データを、ポジティブＷ−モードにおいて、前記機器内に試料を導入するための金属コートされたホウケイ酸ガラスチップを使用して、Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＱＴＯＦグローバルにおいて記録した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、シリカゲルアルミニウム板（Ｍｅｒｃｋ ６０、Ｆ₂₅₄）上で行った。フラッシュクロマトグラフィーは、シリカゲル（Ｍｅｒｃｋ ６０、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）を使用した。ＨＯＢｔ（ＮｏｖａＢｉｏｃｈｅｍ）および固体支持試薬（Ａｒｇｏｎａｕｔ）に関する以外は、全ての他の薬品および溶媒を、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、更なる精製をすることなく提供されたまま使用した。無水溶媒を、乾燥した窒素雰囲気下で、適切な乾燥剤の存在下において、蒸留することにより調製し、４Åの分子ふるいまたはナトリウムワイヤにおいて保存した。石油エーテルは、４０−６０℃で沸騰する留分を意味する。

【0399】

一般的なＬＣ／ＭＳの条件：前記ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ２６９５）を、水（Ａ）（ギ酸０．１％）およびアセトニトリル（Ｂ）（ギ酸０．１％）の移動相を使用して行った。勾配：１．０分の間、開始組成 ５％ Ｂ、ついで、３分以内に、５％ Ｂから９５％ Ｂ。前記組成を、９５％ Ｂで０．５分間保持し、ついで、０．３分で５％ Ｂに戻した。総勾配実行時間を、５分とした。流速３．０ｍＬ／分、前記質量分析計内を通過する０デッドボリュームのＴ継手により、４００μＬを分割した。波長検出は、２２０から４００ｎｍの範囲とする。機能種：ダイオードアレイ（５３５スキャン）。カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｏｎｙｘ Ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ Ｃ１８ ５０×４．６０ｍｍ。

【0400】

実施例１
（ａ）（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−４−メチレンピロリジウムクロリド（３）

【化43】

【0401】

（ｉ）（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メチル ４−メチレンピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（２）
炭酸カリウム（１９．９２ｇ、１４ｍｍｏｌ、３当量）を、ＤＭＦ（２７０ｍＬ）における前記カルボン酸（１）（１０．９２ｇ、４８ｍｍｏｌ、１当量）の攪拌溶液に添加した。得られた白色の懸濁液を、室温で３０分間攪拌した。その時点で、ヨードメタン（２１．４８ｇ、９．５ｍＬ、１５１ｍｍｏｌ、３．１５当量）を添加した。前記反応混合物を、室温で３日間攪拌した。減圧下において、ロータリーエバポレーションにより、前記ＤＭＦを除去して、黄色の残渣を取得した。前記残渣を、酢酸エチルと水との間で分割した。有機層を分離し、水相を、酢酸エチルで抽出した。組み合わせた有機層を、水、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。減圧下において、ロータリーエバポレーションにより、前記酢酸エチルを除去して、黄色のオイルとして、粗製生物を取得した。前記粗製生物を、フラッシュクロマトグラフィー［８５％ ｎ−ヘキサン／１５％ 酢酸エチル］で精製して、無色のオイルとして生成物を取得した（公知の化合物、Ｆ Ｍａｎｆｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９２，５７，２０６０−２０６５）。

【0402】

（ｉｉ）（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−４−メチレンピロリジニウムクロリド（３）
ジオキサンにおける４Ｍ 塩酸の溶液（６３ｍＬ、２５４．４ｍｍｏｌ、４．５当量）を、前記Ｂｏｃ保護されたＣ環フラグメント（２）（１３．６７ｇ、５６．６ｍｍｏｌ、１当量）に、室温で添加した。ＣＯ₂の遊離および前記Ｂｏｃ基の除去を示す解熱が観察された。生成物が、白色の固形物として沈殿し、更なるジオキサンを、攪拌を容易にするために添加した。前記反応混合物を、１時間攪拌し、ついで、エーテルで希釈した。前記沈殿した生成物を、真空ろ過により収集し、更なるエーテルで洗浄した。風乾により、白色の粉末として、所望の生成物を取得した（９．２４ｇ、９４％）（Ｐ Ｈｅｒｄｗｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎａｄｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．１９８２，６０，２９０３−７）。

【0403】

（ｂ）ｔｅｒｔ−ブチル（５−（（５−（５−アミノ−４−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）ペンチル）オキシ）−２−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシフェニル）カルバメート（９）

【化44】

【0404】

（ｉ）（Ｓ）−（４，４’−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（５−メトキシ−２−ニトロ−４，１−フェニレン））ビス（（（Ｓ）−２−（メトキシカルボニル）−４−メチレンピロリジン−１−イル）メタノン（５）
触媒量の無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）を、無水ＤＣＭ（１８０ｍＬ）における、オキサリルクロリド（９．１ｇ、６．２５ｍＬ、７１．７ｍｍｏｌ、３当量）および二量体コア（４）（１１．８２ｇ、２３．９ｍｍｏｌ、１当量）の攪拌懸濁液に、室温で添加した。前記ＤＭＦの添加後に、激しい解熱が観察され、前記反応混合物を、塩化カルシウム乾燥管を備える丸底フラスコにおいて、１８時間攪拌した。得られた透明な溶液を、減圧下で蒸発させ、固形物を、エーテルで粉砕した。前記固体状の生成物を、真空ろ過により収集し、更なるエーテルで洗浄し、４０℃の真空で、１．５時間乾燥させた。ついで、この固形物を、乾燥した冷／アセトニトリル浴の補助により、−４０と−５０℃との間の温度を維持して、ＴＥＡ（１２．０８ｇ、１１９．６ｍｍｏｌ、５当量）および乾燥したＤＣＭ（１１０ｍＬ）における、前記Ｃ環（３）（９．３５ｇ、５２．６ｍｍｏｌ、２．２当量）の懸濁液に、一部ずつ添加した。前記反応混合物を、−４０℃で１時間攪拌し、ついで、室温に温めた。その時点で、ＬＣＭＳは、開始材料の完全な消費を示した。前記反応混合物を、更なるＤＣＭで希釈し、塩酸水溶液（１Ｍ、２×２００ｍＬ）、重炭酸ナトリウムの飽和水溶液（２×２５０ｍＬ）、水（２５０ｍＬ）、塩水（２５０ｍＬ）で順次洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ₄）。減圧下において、ロータリーエバポレーションにより、ＤＣＭを除去して、黄色の泡状物質として、生成物を取得した（１３．９４ｇ、７９％）。分析データ：ＲＴ ３．９５分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）７４１（［Ｍ＋１］⁺、１００）。

【0405】

（ｉｉ）（Ｓ）−（４，４’−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（５−メトキシ−２−ニトロ−４，１−フェニレン））ビス（（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−イル）メタノン（６）
ナトリウムリチウムボロヒドリド（０．０９３ｇ、４．３ｍｍｏｌ、３当量）を、乾燥したＴＨＦ（１０ｍＬ）における前記エステル（５）（１．０５ｇ、１４２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、窒素雰囲気下において、０℃（氷浴）で、一部ずつ添加した。前記反応混合物を、０℃で３０分間攪拌し、ついで、室温に温めた。その時点で、オレンジ色のゴムの沈殿物が観察された。前記反応混合物を、室温でさらに２時間攪拌し、ついで、氷浴において冷却し、水（２０ｍＬ）で処理して、黄色の懸濁液を取得した。塩酸（１Ｍ）を、解熱が終了するまで、注意深く添加した（激しい解熱）。前記反応混合物を、酢酸エチル（４×５０ｍＬ）で抽出し、前記組み合わせた有機層を、水（１００ｍＬ）、塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ₄）。減圧下において、ロータリーエバポレーションにより、酢酸エチルを除去して、黄色の泡状物質として、生成物を取得した（０．９６ｇ、９９％）。前記反応を、１２．４ｇのスケールで繰り返して、１１．０６ｇの生成物を収集した（９６％）。分析データ：ＲＴ ３．３７分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）６８５（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）。

【0406】

（ｉｉｉ）（Ｓ）−（（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（５−メトキシ−２−ニトロ−４，１−フェニレン））ビス（（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−イル）メタノン）（７）
無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）における、ビス−ニトロアルコール（６）（７．９４ｇ、１１．６ｍｍｏｌ、１当量）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（４．５４ｇ、３０．１５ｍｍｏｌ、２．６当量）およびイミダゾール（４．１ｇ、６０．３ｍｍｏｌ、５．２当量）の溶液を、アルゴン雰囲気下において、室温で３時間攪拌した。前記反応混合物を、水（２５０ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（４×１００ｍＬ）で抽出した。前記組み合わせた抽出物を、水（２００ｍＬ）、飽和塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させた。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー［５０％ 酢酸エチル／５０％ ｎ−ヘキサンから、１０％増分における１００％ 酢酸エチル］で精製して、黄色の泡状物質として、生成物を取得した（１０．０ｇ、９４％）。分析データ：ＲＴ ４．５７分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）９１３（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）。

【0407】

（ｉｖ）（Ｓ）−（（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２−アミノ−５−メトキシ−４，１−フェニレン））ビス（（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−イル）メタノン（８）
ギ酸溶液（５％ ｖ／ｖ、１５ｍＬ）を、酢酸エチル／エタノール（８０ｍＬ／１５０ｍＬ）における、亜鉛粉末（２９．５６ｇ、０．４５ｍｏｌ、４０当量）および化合物（７）（１０．３４ｇ、１１．３２ｍｍｏｌ、１当量）の混合物に、一部ずつ添加した。１２℃の発熱が観察された。１５分後、前記反応混合物を、酢酸エチル（過剰量）で洗浄して、セライトを通してろ過した。前記ろ液を、飽和重炭酸ナトリウム（３×１５０ｍＬ）、水（２００ｍＬ）、飽和塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー［酢酸エチル］による精製により、白色の泡状物質として、生成物を取得した（８．０９ｇ、８４％）。分析データ：ＲＴ ４．４３分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）８５３（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）。

【0408】

（ｖ）ｔｅｒｔ−ブチル（５−（（５−（５−アミノ−４−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−２−メトキシフェノキシ）ペンチル）オキシ）−２−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシフェニル）カルバメート（９）
無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）における、ビス−アニリン（８）（６．０２ｇ、７．１ｍｍｏｌ、１当量）およびジ−ｔ−ブチル−ジカルボネート（１．５４ｇ、７．１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を、還流で１６時間加熱した。前記溶媒を、減圧下において蒸発させ、残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー［４０％ 酢酸エチル／６０％ ｎ−ヘキサンから、６０％ 酢酸エチル／４０％ ｎ−ヘキサンから、１００％ 酢酸エチル］で精製して、白色の泡状物質として、生成物を取得した（３．２２ｇ、４８％）。分析データ：ＲＴ ４．２７分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）９５３（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）、ＭＳ（ＥＳ^-）ｍ／ｚ（相対強度）９５１（［Ｍ−Ｈ］^-、１００）。

【0409】

（ｃ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル １１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（５−（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）ペンチル）オキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（１４）

【化45】

化合物１０を、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００６，１２８，６５２６−６５２７に基づいて調製した。

【0410】

（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル（２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル）（（Ｓ）−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシ−５，１−フェニレン））ジカルバメート（１１）
トリエチルアミン（０．２５ｇ、０．３４ｍＬ、２．４２ｍｍｏｌ、２．２当量）を、乾燥したＴＨＦ（１０ｍＬ）における、モノ−Ｂｏｃ保護されたビス−アニリン（９）（１．０５ｇ、１．１ｍｍｏｌ、１．０当量）およびトリホスゲン（０．１１７ｇ、０．４ｍｍｏｌ、０．３６当量）の攪拌溶液に、アルゴン雰囲気下において、室温で添加した。前記反応混合物を、４０℃に加熱し、５分後に、試料を、メタノールで処理し、メチルカルバメートとしてＬＣＭＳにより分析した。分析データ：ＲＴ ４．３７分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）１０１１（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）。

【0411】

乾燥したＴＨＦ（１０ｍＬ）における、２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エタノール（１０）（０．３１ｇ、１．６５ｍｍｏｌ、１．５当量）およびトリエチルアミン（０．１７ｇ、０．２３ｍＬ、１．６５ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を、前記新鮮に調製したイソシアネートに、滴下して添加した。前記反応混合物を、４０℃で１．５時間加熱した。その後、更なる部分のトリホスゲン（０．０５８ｇ、０．２ｍｍｏｌ、０．１８当量）を添加した。さらに３０分後、前記反応混合物を冷却し、ろ過して、トリエチルアミン・塩酸を除去した。前記ろ液を、蒸発乾固させて、黄色のオイルとして、粗製生物を取得した。前記粗製生物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー［６０％ ｎ−ヘキサン／４０％ 酢酸エチルを、５５％ ｎ−ヘキサン／４５％ 酢酸エチルに変化］で精製して、無色のオイルとして、所望の生成物を取得した（０．６３ｇ、４９％）。分析データ：ＲＴ ４．５０分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）１１６６（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）、ＭＳ（ＥＳ^-）ｍ／ｚ（相対強度）１１６４（［Ｍ−Ｈ］^-、７０）。

【0412】

（ｉｉ）ｔｅｒｔ−ブチル（２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル）（（Ｓ）−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシ−５，１−フェニレン））ジカルバメート（１２）
ＡｃＯＨ／Ｈ₂Ｏ（３／１／）（８ｍＬ）を、ＴＨＦ（２ｍＬ）における化合物（１１）（０．３７ｇ、０．３２ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に添加し、得られた溶液を、室温で１８時間攪拌した。前記反応混合物のｐＨを、ＮａＨＣＯ₃の飽和溶液でｐＨ８に調節した。前記混合物を、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出し、組み合わせた抽出物を、ＮａＨＣＯ₃の飽和溶液（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、飽和塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー［勾配溶出液 クロロホルム／メタノール １％増分における０％から５％］による残渣の精製により、白色の泡状物質として、生成物を取得した（０．２４ｇ、８１％）。分析データ：ＲＴ ３．０８分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）９３８（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）、ＭＳ（ＥＳ^-）ｍ／ｚ（相対強度）９３６（［Ｍ−Ｈ］^-、１００）。

【0413】

（ｉｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−ｔｅｒｔ−ブチル １１−ヒドロキシ−８−（（５−（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１０−（（２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エトキシ）カルボニル）−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）ペンチル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（１３）
ＤＣＭ（５ｍＬ）におけるＤＭＳＯ（７９ｍｇ、７２μＬ、１．０ｍｍｏｌ、４．４当量）の溶液を、ＤＣＭ（５ｍＬ）におけるオキサリルクロリド（６２ｍｇ、４２μＬ、０．４９ｍｍｏｌ、２．１５当量）の溶液に、アルゴン雰囲気下において、−７８℃（ドライアイス／アセトン）で、滴下して添加した。前記溶液を、−７８℃で１５分間攪拌した。ＤＣＭ（６ｍＬ）における化合物（１２）（０．２１４ｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を滴下して添加した。前記混合物を、−７８℃で４５分間攪拌し、トリエチルアミン（０．２３ｇ、０．３２ｍＬ、２．２８ｍｍｏｌ、１０当量）を添加した。５分後に、前記反応混合物を、室温に達しさせた。前記反応混合物を、ＮＨ₄Ｃｌの飽和溶液（１５ｍＬ）で処理した。有機部分を分離し、１Ｍ クエン酸溶液（３×５０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ₃の飽和溶液（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、飽和塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させて、淡い黄色のオイルを取得した。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、白色の泡状物質として、生成物を取得した（６８ｍｇ、３２％）。分析データ：ＲＴ ２．９０分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）９３３（［Ｍ＋Ｈ］⁺、５０）、ＭＳ（ＥＳ^-）ｍ／ｚ（相対強度）９３５（［Ｍ−Ｈ］^-、５５）。

【0414】

（ｉｖ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）エチル １１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（５−（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）ペンチル）オキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（１４）
９５％ トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）の冷（氷浴）溶液を、氷浴において冷却されている化合物１３に添加した。前記溶液を、０℃で１５分間攪拌した。その時点で、ＬＣＭＳにより完了していることが示された。前記反応混合物を、ＮａＨＣＯ₃の冷飽和溶液の混合物に滴下して添加して、前記トリフルオロ酢酸溶液を中和した。前記混合物を、ＤＣＭ（４×５０ｍＬ）で抽出した。前記組み合わせた抽出物を、飽和塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させて、白色の泡状物質として、生成物を取得した（２６ｍｇ、９６％）。分析データ：ＲＴ ２．７２分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）８１６（［Ｍ＋Ｈ］⁺、７０）、ＭＳ（ＥＳ^-）ｍ／ｚ（相対強度）８１４（［Ｍ−Ｈ］^-、４０）。

【0415】

実施例２
（ａ）（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパン−１−オール（１８）

【化46】

【0416】

（ｉ）（Ｒ）−メチル ２−（アセチルチオ）プロパノエート（１６）
チオ酢酸（１．９９ｇ、１．８６ｍＬ、２６．１ｍｍｏｌ、１．１当量）を、乾燥したＤＭＦ（４０ｍＬ）における炭酸セシウム（７．７３ｇ、２３．７２ｍｍｏｌ、１．０当量）の懸濁液に添加した。３０分後、（Ｓ）−メチル ２−クロロプロパノエート（１５）を添加し、前記混合物を、室温で１時間攪拌した。前記反応混合物を、ジエチルエーテル（１５０ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）との間で分割した。水を分離し、更なる部分のジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で洗浄した。組み合わせた有機部分を、水（６×１００ｍＬ）、塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー［１０％ 酢酸エチル／９０％ ｎ−ヘキサン］による精製により、無色のオイルとして、生成物を取得した（３．０１ｇ、８２％）。分析データ：ＲＴ ２．２５分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）１６３（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１０）、１８５（［Ｍ＋Ｎａ］⁺、６５）；［α］^t_d＝［＋１４１］^17.8°C_d（ｃ、２．２６ ＣＨＣｌ₃）。

【0417】

（ｉｉ）（Ｒ）−２−メルカプトプロパン−１−オール（１７）
乾燥したＴＨＦ（１０ｍＬ）におけるチオアセテート（１６）（０．５７ｇ、３．５４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を、乾燥したＴＨＦ（２０ｍＬ）におけるリチウムアルミニウムヒドリド（０．５４ｇ、１４．１５ｍｍｏｌ、４．０当量）の懸濁液に、アルゴン雰囲気下において、還流で滴下して添加した。１時間後、前記反応混合物を、０℃に冷却し、２Ｍ ＨＣｌを、解熱が終了するまで、３０℃未満の温度を維持して、滴下して添加した。得られた混合物を、室温で１時間攪拌し、ついで、ＴＨＦ（４０ｍＬ）で洗浄して、セライトを通してろ過した。前記溶媒を蒸発させた。残渣を、ＤＣＭに再度溶解し、乾燥させた（ＭｇＳＯ₄）。減圧下でのＤＣＭの蒸発、続けて、残渣のカラムクロマトグラフィー［６０％ ｎ−ヘキサン／４０％ 酢酸エチル］により、淡い黄色のオイルとして、生成物を取得した（０．１９３ｇ、５８％）。分析データ：［α］^t_d＝［−２２］^17.2°C_d（ｃ、０．９７２ ＣＨＣｌ₃）。

【0418】

（ｉｉｉ）（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパン−１−オール（１８）
スルフリルクロリド（ＤＣＭにおける１Ｍ、２．０ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ、１．１当量）を、乾燥したＤＣＭ（５ｍＬ）における２−メルカプトピリジン（０．２ｇ、１．８１ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、アルゴン雰囲気下において、０℃で滴下して添加した。得られた溶液を、室温で２時間攪拌した。前記ＤＣＭを、減圧下で蒸発させて、黄色の固形物を取得した。前記固形物を、乾燥したＤＣＭ（１０ｍＬ）に懸濁させ、乾燥したＤＣＭ（５ｍＬ）における（Ｒ）−２−メルカプトプロパン−１−オール（１７）（０．１８ｇ、１．９５ｍｍｏｌ、１．０８当量）の溶液を、滴下して添加した。前記混合物を、アルゴン雰囲気下において、室温で１８時間攪拌した。前記反応混合物をろ過した。前記ろ液を、減圧下で蒸発させて、黄色のゴムを取得した。前記ゴムを、水に再度溶解させた。前記溶液を、水酸化アンモニウム溶液で塩基性化し、ＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出した。前記組み合わせた抽出物を、水（１００ｍＬ）、塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、蒸発させて、黄色のオイルを取得した。フラッシュカラムクロマトグラフィー［８０％ ｎ−ヘキサン／２０％ 酢酸エチルから、５％増分における６０％ ｎ−ヘキサン／４０％ 酢酸エチル］による精製により、無色のオイルとして、生成物を取得した（０．２１３ｇ、５９％）。分析データ：ＲＴ ２．４３分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）２０２（［Ｍ＋Ｈ］⁺、５０）；［α］^t_d＝［＋２７３］^26.2°C_d（ｃ、０．２８ ＣＨＣｌ₃）。

【0419】

（ｂ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル １１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（５−（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）ペンチル）オキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（２２）

【化47】

【0420】

（ｉ）ｔｅｒｔ−ブチル（（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル）（（Ｓ）−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２−（（Ｓ）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシ−５，１−フェニレン））ジカルバメート（１９）
トリエチルアミン（０．２８ｇ、０．３９ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ、２．２当量）を、乾燥したＴＨＦ（１５ｍＬ）における、モノ−ｂｏｃ保護されたビス−アニリン（９）（１．２１ｇ、１．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）およびトリホスゲン（０．１３６ｇ、０．４６ｍｍｏｌ、０．３６当量）の攪拌溶液に、アルゴン雰囲気下において、室温で添加した。前記反応混合物を、４０℃に加熱し、５分後に、試料を、メタノールで処理し、メチルカルバメートとしてＬＣＭＳにより分析した。分析データ：ＲＴ ４．３０分 ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）１０１１（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）。

【0421】

乾燥したＴＨＦ（１０ｍＬ）における、（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロパン−１−オール（１８）（０．３８ｇ、１．９１ｍｍｏｌ、１．５当量）およびトリエチルアミン（０．１９ｇ、０．２７ｍＬ、１．９１ｍｍｏｌ、１．５当量）の溶液を、前記新鮮に調製したイソシアネートに、滴下して添加した。前記反応混合物を、４０℃で４時間加熱し、ついで、室温で１８時間攪拌した。前記反応混合物をろ過して、トリエチルアミン・塩酸を除去した。前記ろ液を、蒸発乾固させて、黄色のオイルとして、粗製生物を取得した。前記粗製生物を、フラッシュカラムクロマトグラフィー［６０％ ｎ−ヘキサン／４０％ 酢酸エチルから、５％増分における４０％ ｎ−ヘキサン／６０％ 酢酸エチル］で精製して、白色の泡状物質として、所望の生成物を取得した（０．７５ｇ、５０％）。分析データ：ＲＴ ４．５０分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）１１８０（［Ｍ＋Ｈ］⁺、６０）；［α］^t_d＝［−１８］^21°C_d（ｃ、０．２８ ＣＨＣｌ₃）。

【0422】

（ｉｉ）ｔｅｒｔ−ブチル（（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル）（（Ｓ）−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２−（（Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンピロリジン−１−カルボニル）−４−メトキシ−５，１−フェニレン））ジカルバメート（２０）
酢酸／Ｈ₂Ｏ（３／１、１６ｍＬ）を、ＴＨＦ（４ｍＬ）における前記ビス−シリルエーテル（１９）（０．７２ｇ、０．６１ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に添加した。得られた溶液を、室温で１６時間攪拌した。前記反応混合物のｐＨを、重炭酸ナトリウムの飽和溶液でｐＨ８に調節した。前記混合物を、酢酸エチル（４×１５０ｍＬ）で抽出し、前記組み合わせた抽出物を、重炭酸ナトリウムの飽和溶液（２×１５０ｍＬ）、水（１５０ｍＬ）、塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、白色の泡状物質として、生成物を取得した（０．５６ｇ、９６％）。分析データ：ＲＴ ３．１５分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）９５３（［Ｍ＋１］⁺、１００）；［α］^t_d＝［−１３．５］^26°C_d（ｃ、０．２２ ＣＨＣｌ₃）。

【0423】

（ｉｉｉ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−ｔｅｒｔ−ブチル １１−ヒドロキシ−８−（（５−（（（１１Ｓ，１１ａＳ）−１１−ヒドロキシ−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−１０−（（（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロポキシ）カルボニル）−２，３，５，１０，１１，１１ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）ペンチル）オキシ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（２１）
無水ＤＣＭ（５ｍＬ）におけるＤＭＳＯ（９１ｍｇ、８３μＬ、１．１６ｍｍｏｌ、４．４当量）の溶液を、無水ＤＣＭ（５ｍＬ）におけるオキサリルクロリド（ＤＣＭにおける２Ｍ、３１８μＬ、０．６３５ｍｍｏｌ、２．４当量）の溶液に、アルゴン雰囲気下において、−４０℃で滴下して添加した。前記溶液を、−４０℃で１５分間攪拌した。無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）における前記ビス−アルコール（２０）（０．２５２ｇ、０．２６ｍｍｏｌ、１当量）の溶液を、滴下して添加した。得られた混合物を、−４０℃で４５分間攪拌した。この最中に、温度を、−２５℃に達させた。前記温度を、−３５℃に低下させ、トリエチルアミン（０．２７ｇ、０．３６ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ、１０当量）を滴下して添加した。５分後に、前記温度を、室温に達しさせた。前記反応混合物を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、１Ｍ クエン酸溶液（３×５０ｍＬ）、重炭酸ナトリウムの飽和溶液（１５０ｍＬ）、水（２００ｍＬ）、塩水（２００ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させて、黄色の泡状物質を取得した。フラッシュカラムクロマトグラフィー［０．５％増分におけるクロロホルム／メタノール ０％から２％］による精製により、白色の泡状物質として、生成物を取得した（０．１３７ｇ、５３％）。分析データ：ＲＴ ３．１７分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）９４８（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）；［α］^t_d＝［＋１７０］^26°C_d（ｃ、０．２５ ＣＨＣｌ₃）。

【0424】

（ｉｖ）（１１Ｓ，１１ａＳ）−（Ｒ）−２−（ピリジン−２−イルジスルファニル）プロピル １１−ヒドロキシ−７−メトキシ−８−（（５−（（（Ｓ）−７−メトキシ−２−メチレン−５−オキソ−２，３，５，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−８−イル）オキシ）ペンチル）オキシ）−２−メチレン−５−オキソ−２，３，１１，１１ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン−１０（５Ｈ）−カルボキシレート（２２）
９５％ トリフルオロ酢酸（８．５ｍＬ）の冷（氷浴）溶液を、氷浴において冷却されている化合物（２１）（０．２２１ｇ、０．２３ｍｍｏｌ、１当量）に添加した。前記溶液を、０℃で２５分間攪拌した。その時点で、ＬＣＭＳにより完了していることが示された。前記反応混合物を、氷および重炭酸ナトリウムの飽和溶液（２００ｍＬ）の混合物に、滴下して添加して、前記トリフルオロ酢酸溶液を中和した。前記混合物を、ＤＣＭ（４×７５ｍＬ）で抽出した。前記組み合わせた抽出物を、水（１００ｍＬ）、飽和塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下において蒸発させて、粗製生物を取得した。フラッシュカラムクロマトグラフィー［１％増分におけるクロロホルム／メタノール ０％から３％］による精製により、白色の泡状物質として、生成物を取得した（０．１９２ｇ、９９％）。分析データ：ＲＴ ３．００分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）８３０（［Ｍ＋Ｈ］⁺、７５）；［α］^t_d＝［＋４４４］^22°C_d（ｃ、０．２６ ＣＨＣｌ₃）。

【0425】

実施例３：Ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒性の測定
Ｋ５６２ヒト慢性骨髄性白血病細胞を、１０％ ウシ胎児血清および２ｍＭ グルタミンを添加したＲＰＭ１ １６４０培地において、５％ ＣＯ₂を含む加湿雰囲気の３７℃で維持し、指定した用量の薬剤と、３７℃で暗所において、９６時間培養した。前記培養を、遠心（５分、３００ｇ）により終了し、前記細胞を、薬剤を含まない培地で、１回洗浄した。適切な薬剤での処理後、前記細胞を、９６ウェルマイクロタイタープレートに移した（ウェルあたりに１０⁴個の細胞、試料あたり８個のウェル）。ついで、プレートを、５％ ＣＯ₂を含む加湿雰囲気の３７℃で、暗所において維持した。前記アッセイは、黄色の可用性テトラゾリウム塩である、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ、Ａｌｄｒｉｃｈ−Ｓｉｇｍａ）を、不溶性の紫色のホルマザン沈殿物に還元する生細胞の能力に基づいている。（コントロール細胞の数を、おおよそ１０倍に増加するために）４日間の前記プレートの培養後、２０μＬのＭＴＴ溶液（リン酸緩衝生理食塩水における５ｍｇ／ｍＬ）を、各ウェルに添加し、さらに、前記プレートを、５時間インキュベートした。ついで、前記プレートを、３００ｇで５分間遠心し、大部分の培地を、ウェルあたりに１０−２０μＬを残して、細胞ペレットから取り出した。ＤＭＳＯ（２００μＬ）を、各ウェルに添加し、前記試料を、完全な混合を確保するために振とうした。ついで、光学密度を、Ｔｉｔｅｒｋｅｋ Ｍｕｌｔｉｓｃａｎ ＥＬＩＳＡプレートリーダーにおいて、５５０ｎｍの波長で読み取った。用量−反応曲線を構築した。各曲線に関して、ＩＣ₅₀値を、コントロール値の５０％に、最終光学密度を低下させるのに必要な用量として読み取った。

【0426】

コンジュゲート用ＴｈｉｏＭａｂの還元／酸化
ＣＨＯ細胞において発現される、全長のシステイン改変モノクローナル抗体（ＴｈｉｏＭａｂ−Ｊｕｎｕｔｕｌａ，ｅｔ ａｌ．，２００８ｂ Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２６（８）：９２５−９３２；Ｄｏｒｎａｎ ｅｔ ａｌ（２００９）Ｂｌｏｏｄ １１４（１３）：２７２１−２７２９；米国特許第７５２１５４１号明細書；米国特許第７７２３４８５号明細書；国際公開第２００９／０５２２４９号パンフレット、Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ（２０１２）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，３０（２）：１８４−１９１；Ｊｕｎｕｔｕｌａ ｅｔ ａｌ（２００８）Ｊｏｕｒ ｏｆ Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３３２：４１−５２）を、２ｍＭ ＥＤＴＡを含む５０ｍＭ トリス ｐＨ７．５における、約２０−４０倍過剰のＴＣＥＰ（トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン・塩酸）またはＤＴＴ（ジチオスレイトール）で、３７℃で２時間、または、室温でオーバーナイト還元させた（Ｇｅｔｚ ｅｔ ａｌ（１９９９）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｖｏｌ ２７３：７３−８０；Ｓｏｌｔｅｃ Ｖｅｎｔｕｒｅｓ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ）。前記還元されたＴｈｉｏＭａｂを希釈し、１０ｍＭ 酢酸ナトリウム、ｐＨ５において、ＨｉＴｒａｐ Ｓカラム上に載せ、０．３Ｍ 塩化ナトリウムを含むＰＢＳで溶出した。または、前記抗体を、１／２０量の１０％ 酢酸の添加により酸性化し、１０ｍＭ コハク酸塩 ｐＨ５で希釈し、前記カラム上に載せ、ついで、１０カラム容量のコハク酸塩バッファーで洗浄した。前記カラムを、５０ｍＭ トリス ｐＨ７．５、２ｍＭ ＥＤＴＡで溶出した。
前記溶出された、還元されたＴｈｉｏＭａｂを、１５倍モル濃度過剰のＤＨＡＡ（デヒドロアスコルビン酸）または２００ｎＭ 硫酸銅（ＣｕＳＯ₄）水溶液で処理した。鎖内ジスルフィド結合の酸化を、約３時間以上で完了させた。大気酸化も有効であった。前記再酸化された抗体を、２０ｍＭ コハク酸ナトリウム ｐＨ５、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡにおいて透析し、−２０℃で凍結保存した。

【0427】

抗体−ドラッグコンジュゲートを調製するためのＴｈｉｏ−ｍａｂと化合物とのコンジュゲート
非ブロック化され、再酸化されたｔｈｉｏ−抗体（ＴｈｉｏＭａｂ）を、前記反応混合物のＬＣ−ＭＳ分析により測定される場合、反応が完了するまで（１６−２４時間）、５０ｍＭ トリス、ｐＨ８における、６−８倍モル濃度過剰の上記化合物（１４、２２）（２０ｍＭ濃度におけるＤＭＳＯストックから）で反応させた。

【0428】

ついで、前記粗製の抗体−ドラッグコンジュゲート（ＡＤＣ）を、２０ｍＭ コハク酸ナトリウム、ｐＨ５で希釈した後、カチオン交換カラムにアプライした。前記カラムを、少なくとも１０カラム容量の２０ｍＭ コハク酸ナトリウム、ｐＨ５で洗浄した。前記抗体を、ＰＢＳで溶出した。前記抗体ドラッグコンジュゲートを、２４０ｍＭ スクロースを含む２０ｍＭ Ｈｉｓ／アセテート、ｐＨ５に、ゲルろ過カラムを使用して配合した。前記抗体−ドラッグコンジュゲートを、タンパク質濃度を測定するためのＵＶ分光法、凝集分析用の分析的ＳＥＣ（サイズ排除クロマトグラフィー）ならびに、リジンＣエンドペプチダーゼで処置した前後のＬＣ−ＭＳで特徴付けた。

【0429】

サイズ排除クロマトグラフィーを、Ｓｈｏｄｅｘ ＫＷ８０２．５カラムを使用して、０．２５ｍＭ 塩化カリウムおよび１５％ ＩＰＡを含む０．２Ｍ リン酸カリウムｐＨ６．２において、流速０．７５ｍｌ／分で行った。前記コンジュゲートの凝集状態を、２８０ｎｍでの溶出ピーク面積吸光の積算により決定した。

【0430】

ＬＣ−ＭＳ分析を、Ａｇｉｌｅｎｔ ＱＴＯＦ ６５２０ ＥＳＩ装置を使用して行った。一例として、この化学を使用して生成された抗体−ドラッグコンジュゲートを、トリスｐＨ７．５において、１：５００ ｗ／ｗ エンドプロテナーゼＬｙｓ Ｃ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で、３７℃において３０分間処理した。得られた開裂フラグメントを、８０℃に加熱した１０００Ａ、８ｕｍ ＰＬＲＰ−Ｓカラム上に載せ、５分での３０％ Ｂから４０％ Ｂの勾配で溶出した。移動相Ａを、０．０５％ ＴＦＡを含むＨ₂Ｏとし、移動相Ｂを、０．０４％ ＴＦＡを含むアセトニトリルとした。流速を、０．５ｍＬ／分とした。タンパク質溶出を、エレクトロスプレーイオン化およびＭＳ分析前に、２８０ｎｍでのＵＶ吸光検出によりモニターした。未コンジュゲートのＦｃフラグメント、残った未コンジュゲートのＦａｂおよびドラッグ化されたＦａｂのクロマトグラフ分離は、通常達成された。前記抗体フラグメントの質量を算出するために、得られたｍ／ｚスペクトルを、Ｍａｓｓ Ｈｕｎｔｅｒ（商標）ソフトウェア（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、畳み込みを解いた。

【0431】

一例として、２２（質量追加＝７２０ダルトン）とコンジュゲートしたｔｈｉｏ−Ｔｍａｂに関する分子量（ＭＷ）。観察された畳み込みを解いた質量：
未コンジュゲートのＦｃフラグメントのＭＷに対応する、５３，２９６ダルトン
未コンジュゲートのＦａｂフラグメントのＭＷに対応する、４７，４３１ダルトン
ドラッグ化されたＦａｂフラグメントのＭＷに対応する、４８，１５０ダルトン
したがって、４８，１５０ダルトンで観察されたピークが、１つのドラッグ２２（＋７２０ダルトン）を有する、期待したＦａｂフラグメント（４７，４３１ダルトン）に対応する。

【0432】

２２を含むＡＤＣ Ｔｈｉｏ−コンジュゲート
質量追加７１９．８４

【0433】

【表1】

【0434】

１４を含むＡＤＣ Ｔｈｉｏ−コンジュゲート
質量追加７０５．８１

【0435】

【表2】

【0436】

下記のｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏアッセイは、Ｐｈｉｌｌｉｐｓ ｅｔ ａｌ（２００８）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６８（２２）：９２８０−９２９０にも記載されている。

【0437】

Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ細胞増殖アッセイ
ＡＤＣの有効性を、下記プロトコルを使用する細胞増殖アッセイにより測定した（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ Ｇｌｏ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ａｓｓａｙ，Ｐｒｏｍｅｇａ Ｃｏｒｐ．Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ＴＢ２８８；Ｍｅｎｄｏｚａ ｅｔ ａｌ（２００２）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６２：５４８５−５４８８）。全ての細胞株を、アメリカ培養細胞系統保存機関から取得した。

【0438】

１．培地における約１０⁴個の細胞（例えば、ＫＰＬ−４、ヒト乳がん細胞株、Ｋｕｒｅｂａｙａｓｈｉ ｅｔ ａｌ（１９９９）Ｂｒｉｔ．Ｊｏｕｒ．Ｃａｎｃｅｒ ７９（５−６）：７０７−７１７）、ＳＫＢＲ−３またはＭＣＦ７）を含む細胞培養物の１００μＬアリコートを、９６ウェルの不透明壁プレートの各ウェルに入れた。
２．培地を含み、細胞を含まないコントロールウェルを準備した。
３．ＡＤＣを、実験ウェルに添加し、３−５日間培養した。
４．前記プレートを、室温におおよそ３０分間平衡させた。
５．各ウェルに存在する細胞培養培地の量と等しい量のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬を添加した。
６．細胞溶解をさせるために、内容物を、オービタル振とう器において、２分間混合した。
７．前記プレートを、発光シグナルを安定化させるために、室温で１０分間インキュベートした。
８．発光を記録し、ＲＬＵ＝相対発光単位として、グラフに報告した。

【0439】

特定の細胞を、９６ウェルプレート、５０μＬ／ウェルにおいて、１０００−２０００個／ウェルまたは２０００−３０００個／ウェルで播種する。１または２日後、培地のみを受け取る「ＡＤＣを含まない」コントロールウェルと共に、ＡＤＣを、最終濃度を９０００、３０００、１０００、３３３、１１１、３７、１２．４、４．１または１．４ｎｇ／ｍＬで、５０μＬ容量に添加する。条件は、２回または３回反復とする。３−５日後、１００μＬ／ウェルのＣｅｌｌ ＴｉｔｅｒＧｌｏ ＩＩを添加し（ルシフェラーゼ系アッセイ；ＡＴＰレベルにより増殖を測定）、細胞数集計を、ルミノメーターを使用して測定する。データを、各反復セットに関して、標準偏差エラーバーと共に、平均発光としてプロットする。前記プロトコルは、Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ発光細胞生存性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）の改良である。

【0440】

１．１０００個／ウェルの細胞を、５０μＬ／ウェルのＦＢＳ／グルタミン培地に播種する。細胞をオーバーナイト付着させる。
２．ＡＤＣを、１８μｇ／ｍｌの作業濃度で開始する培地において、連続的に１：３希釈する（これにより、９μｇ／ｍｌの最終濃度となる。）。５０μＬの希釈したＡＤＣを、前記ウェルに予め入っている５０μＬの細胞および培地に添加する。
３．７２−９６時間培養する（標準は７２時間であるが、前記細胞が８５−９５％コンフルエントになった時点でアッセイを終了するために、０μｇ／ｍＬの濃度を監視する。）。
４．１００μＬ／ウェルのＰｒｏｍｅｇａ Ｃｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏ試薬を添加し、３分間振とうし、ルミノメーターにおいて読み取る。

【0441】

結果
抗体ドラッグ−コンジュゲートである、トラスツズマブ−１４（１１０）およびトラスツズマブ−２２（１０１）を、５日の研究におけるｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞生存性を測定するために、ＳＫ−ＢＲ−３、ＫＰＬ−４およびＭＣＦ−７（Ｌｅｖｅｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ（１９９７）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７（１５）：３０７１−３０７８）の細胞に対して試験した。ＳＫ−ＢＲ−３に対する１０１に関するＩＣ₅₀（μｇ／ｍＬ）値は、２２．１２であった。ＳＫ−ＢＲ−３に対する１１０に関するＩＣ₅₀（μｇ／ｍＬ）値は、１０２．７８であった。ＳＫ−ＢＲ−３細胞は、ＨＥＲ２＋を発現する、トラスツズマブ感受性である。１０１および１１０は両方とも、ＭＣＦ−７に対して、効果的に不活性であった。前記ＭＣＦ−７は、ＨＥＲ２を発現していないヒトの乳腺ガンの細胞株である。したがって、コンジュゲート１０１および１１０は、標的細胞の殺傷能力を示す。

【0442】

腫瘍増殖阻害、ＨＥＲ２を高発現するトランスジェニック外移植マウスにおけるｉｎ ｖｉｖｏ活性
トランスジェニック実験に適した動物を、標準的な商業的供給元、例えば、Ｔａｃｏｎｉｃ（Ｇｅｒｍａｎｔｏｗｎ、Ｎ．Ｙ．）から取得し得る。多くの種が適切であるが、ＦＶＢの雌マウスが好ましい。腫瘍形成に対する感受性がより高いためである。ＦＶＢの雄を、交配用に使用し、パイプカットされたＣＤ．１雄マウスを使用して、偽妊娠を刺激した。パイプカットされたマウスを、任意の商業的供給元から入手し得る。創始者を、ＦＶＢマウスまたは１２９／ＢＬ６ ｘ ＦＶＢ ｐ５３ヘテロ接合性マウスのいずれかで繁殖させる。Ｐ５３対立遺伝子においてヘテロ接合性を有するマウスを、腫瘍形成を強力に向上させるのに使用した。ただし、これは、不要であることが証明された。したがって、一部のＦ１腫瘍は、交雑種である。創始者腫瘍は、ＦＶＢのみである。６つの創始者を、同腹子を有しない、いくらか進行している腫瘍により取得した。

【0443】

腫瘍（Ｆｏ５ ｍｍｔｖ トランスジェニックマウスから増殖した同種移植片）を有する動物を、ＡＤＣのＩＶ注射により、１回または複数回の投与で処置した。腫瘍体積を、注射後、種々の時点で評価した。

【0444】

腫瘍は、変異的に活性型の、ＨＥＲ２のラットホモログであるｎｅｕを発現するトランスジェニックマウスにおいて、容易に生じる。ただし、ヒトの乳がんで過剰発現されるＨＥＲ２は、変異されない。腫瘍形成は、非変異のＨＥＲ２を過剰発現するトランスジェニックマウスでは、はるかに微弱である（Ｗｅｂｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ（１９９４）Ｓｅｍｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ．５：６９−７６）。

【0445】

非変異のＨＥＲ２による腫瘍形成を改善するために、トランスジェニックマウスを、このような上流のＡＴＧコドンにおいて、翻訳開始を妨げるために、上流のＡＴＧが除去されているＨＥＲ２ ｃＤＮＡプラスミドを使用して生じさせた。前記上流のＡＴＧコドンは、下流におけるＨＥＲ２の真正な開始コドンからの翻訳開始の頻度を、他の方法で低下させるであろう（例えば、Ｃｈｉｌｄ ｅｔ ａｌ（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２４３３５−２４３４１を参照のこと。）。さらに、キメライントロンを、５’末端に付加した。前記５’末端は、先に報告のように、発現レベルも向上させるはずである（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ ａｎｄ Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９８８）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１６：６７１３；Ｂｕｃｈｍａｎ ａｎｄ Ｂｅｒｇ（１９８８）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８：４３９５；Ｂｒｉｎｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：８３６）。前記キメライントロンは、Ｐｒｏｍｅｇａベクター、Ｐｃｉ−ｎｅｏ哺乳類発現ベクター（ｂｐ ８９０−１０２２）に由来した。前記ｃＤＮＡの３’−末端は、ヒト成長ホルモンエクソン４および５に隣接し、ポリアデニル化配列である。さらに、ＦＶＢマウスを使用した。この種は、腫瘍増殖により感受性であるためである。ＭＭＴＶ−ＬＴＲ由来のプロモーターを、乳腺における組織特異性ＨＥＲ２発現を確実にするために使用した。腫瘍形成への感受性を向上させるために、動物を、ＡＩＮ ７６Ａ給餌で飼育した（Ｒａｏ ｅｔ ａｌ（１９９７）Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ４５：１４９−１５８）。

【0446】

Ｆｏ５ マウス乳腺腫瘍モデル
前記Ｆｏ５モデルは、マウス乳腺腫瘍ウイルスプロモーター（ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２）の転写制御下において、ヒトのＨＥＲ２遺伝子が乳腺上皮において過剰発現されている、トランスジェニックマウスモデルである。前記過剰発現は、前記ヒトのＨＥＲ２受容体を過剰発現する乳腺腫瘍の同時増殖による。前記創始者動物の１つ（創始者＃５［Ｆｏ５］）の乳腺腫瘍を、腫瘍フラグメントの連続的な移植により、ＦＶＢマウスの次の世代に繁殖させた。ｉｎ ｖｉｖｏ有効性研究に使用する前に、前記ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２ Ｆｏ５トランスジェニック乳腺腫瘍を、（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓからの）ｎｕ／ｎｕマウスの、Ｎｏ．２／３ 乳房の脂肪パッドに、おおよそ２×２ｍｍと測定されたフラグメントにおいて、外科的に移植した。腫瘍が所望の体積に達した際、前記腫瘍を有するマウスをランダム化し、前記ＡＤＣのＩＶ注射による１回投与を行った。

【0447】

結果
図１は、（１）媒体 ２０ｍＭ ヒスチジンアセテート、ｐＨ５．５、２４０ｍＭ スクロース、（２）１０ｍｇ／ｋｇでのｘＣＤ２２−２２（１０３）、（３）１ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）、（４）３ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）および（５）１０ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）による、０日における単独ｉｖ投与後、ＣＲＬ ｎｕ／ｎｕマウス内に接種された、乳がんモデル ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２ Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍における、ｉｎ ｖｉｖｏでの経時的な平均腫瘍体積変化のプロットを示す。前記図における線は、下記記号で表される。

【0448】

図２は、（１）媒体 ２０ｍＭ ヒスチジンアセテート、ｐＨ５．５、２４０ｍＭ スクロース、（２）６ｍｇ／ｋｇでのｘＣＤ２２−１４（１１２）、（３）１ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−１４（１１０）、（４）３ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−１４（１１０）、（５）６ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−１４（１１０）および（６）１ｍｇ／ｋｇでのトラスツズマブ−２２（１０１）による、０日における単独ｉｖ投与後、ＣＲＬ ｎｕ／ｎｕマウス内に接種された、乳がんモデル ＭＭＴＶ−ＨＥＲ２ Ｆｏ５乳腺同種移植腫瘍における、ｉｎ ｖｉｖｏでの経時的な平均腫瘍体積変化のプロットを示す。前記図における線は、下記記号で表される。

【0449】

略称
Ａｃ：アセチル
Ａｃｍ：アセトアミドメチル
Ａｌｌｏｃ：アリルオキシカルボニル
Ｂｏｃ：ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート
ｔ−Ｂｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
Ｂｚｌ：ベンジル、Ｂｚｌ−ＯＭｅは、メトキシベンジルであり、Ｂｚｌ−Ｍｅは、メチルベンゼンである。
ＣｂｚまたはＺ：ベンジルオキシ−カルボニル、Ｚ−ＣｌおよびＺ−Ｂｒは、それぞれ、クロロ−およびブロモベンジルオキシカルボニルである。
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
Ｄｎｐ：ジニトロフェニル
ＤＴＴ：ジチオスレイトール
Ｆｍｏｃ：９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル
ｉｍｐ：Ｎ−１０イミン保護基：３−（２−メトキシエトキシ）プロパノエート−Ｖａｌ−Ａｌａ−ＰＡＢ
ＭＣ−ＯＳｕ：マレイミドカプロイル−Ｏ−Ｎ−スクシンイミド
Ｍｏｃ：メトキシカルボニル
ＭＰ：マレイミドプロパンアミド
Ｍｔｒ：４−メトキシ−２，３，６−トリメチルベンゼンスルホニル
ＰＡＢ：パラ−アミノベンジルオキシカルボニル
ＰＥＧ：エチレンオキシ
ＰＮＺ：ｐ−ニトロベンゼンカルバメート
Ｐｓｅｃ：２−（フェニルスルホニル）エトキシカルボニル
ＴＢＤＭＳ：ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＢＤＰＳ：ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル
Ｔｅｏｃ：２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル
Ｔｏｓ：トシル
Ｔｒｏｃ：２，２，２−トリクロルエトキシカルボニルクロリド
Ｔｒｔ：トリチル
Ｘａｎ：キサンチル

【0450】

参考文献
下記参考文献は、その全体が参照により取り込まれる。

【0451】

【図1】

【図2】