特許 6120423 液状化粧品

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6120423

(24)【登録日】2017年4月7日

(45)【発行日】2017年4月26日

(54)【発明の名称】液状化粧品

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/34 20060101AFI20170417BHJP

   A61K 8/31 20060101ALI20170417BHJP

   A61Q 19/10 20060101ALI20170417BHJP

   C11D 3/18 20060101ALI20170417BHJP

   C11D 3/20 20060101ALI20170417BHJP

   C11D 17/08 20060101ALI20170417BHJP

【ＦＩ】

   A61K8/34

   A61K8/31

   A61Q19/10

   C11D3/18

   C11D3/20

   C11D17/08

【請求項の数】2

【全頁数】33

(21)【出願番号】特願2016-142877(P2016-142877)

(22)【出願日】2016年7月21日

(62)【分割の表示】特願2015-105028(P2015-105028)の分割

【原出願日】2014年11月25日

(65)【公開番号】特開2016-185986(P2016-185986A)

(43)【公開日】2016年10月27日

【審査請求日】2016年7月30日

【審判番号】不服2016-19300(P2016-19300/J1)

【審判請求日】2016年12月25日

(31)【優先権主張番号】特願2013-249695(P2013-249695)

(32)【優先日】2013年12月3日

(33)【優先権主張国】JP

(31)【優先権主張番号】特願2014-81799(P2014-81799)

(32)【優先日】2014年4月11日

(33)【優先権主張国】JP

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用 １．平成２５年９月１２日に第８６回日本生化学会大会の学会予稿集ウェブサイトによる公開（ｈｔｔｐ：／／ｍｅｍｂｅｒ．ｊｂｓｏｃ．ｏｒ．ｊｐ／ｊｂｓ２０１３／ｉｎｄｅｘ．ｐｈｐ？ｔ＿ｎｏ＝２Ｐ−３６４＆ｂｔｎ＿ｓｙｏｕｓａｉ＝ｏｎ）、２．平成２５年９月１２日にパシフィコ横浜で開催された第８６回日本生化学会大会において発表、３．平成２５年９月１３日に自己のウェブサイト（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｉｓｈｉｎｔｉｄ．ｃｏｍ／）において公開

【早期審理対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】593012963

【氏名又は名称】村上 博

(72)【発明者】

【氏名】村上 博

【合議体】

【審判長】 須藤 康洋

【審判官】 大熊 幸治

【審判官】 関 美祝

(56)【参考文献】

【文献】 特開昭６１−１２７９９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平２−３００１０８（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

A61K8/00-8/99

A61Q1/00-90/00

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

オクチルドデカノールと、
リモネン、スクアレン、及びスクアランからなる群から選ばれる１種類以上の炭化水素と、
全量に対して０〜１０体積％の界面活性剤と、
を含む角栓除去用液状クレンジング剤。

【請求項2】

前記炭化水素は、
全量に対して３体積％以上９９体積％以下であり、
前記オクチルドデカノールは、
前記炭化水素に対して１体積％以上２００体積％以下である請求項１に記載のクレンジング剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、液状化粧品に関する。詳しくは、皮膚に付着したタンパク質洗浄用の液状化粧品に関する。

【背景技術】

【0002】

皮膚の汚れにはタンパク質等が含まれている。この汚れを落とすには、タンパク質を皮膚表面から抽出する作用を有する化粧品等が使用される。このような化粧品として、例えば、溶液中から少なくともタンパク質を抽出する作用を有する液状化粧品が挙げられる。溶液中の対象物質（例えば、タンパク質等）を分離又は抽出等するための方法としてはエマルションを利用した方法が挙げられる（例えば、特許文献１及び２を参照）。

【0003】

対象物質の分離等のためのエマルションを利用した方法としては、例えば、油層中の逆ミセル内部の水層に対象物質を分離等する方法、乳化型液膜抽出による方法、多層乳化したエマルションを転層させて対象物質を分離等する方法等が挙げられる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特許第３２１８０３１号公報

【特許文献2】特開平１０−２３１２４０号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

しかし、溶液中の対象物質を分離等するために使用されて来た従来の方法は、いずれも、界面活性剤の使用を前提としていた。他方、界面活性剤は、皮膚に負担をかけ、荒れ等を生じさせ得るため、界面活性剤を使用していないか、又は、界面活性剤の使用量が極少量である方法が求められていた。

【0006】

本発明は、上記の課題を解決するためになされたものであり、タンパク質を抽出できる液状化粧品を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明者は、所定の高級アルコールと、脂肪酸又は炭化水素とを少なくとも含むタンパク質抽出剤によれば上記課題を解決できる点を見出し、本発明を完成するに至った。具体的に、本発明は下記のものを提供する。

【0008】

［１］
オクチルドデカノールと、
リモネン、スクアレン、及びスクアランからなる群から選ばれる１種類以上の炭化水素と、
全量に対して０〜１０体積％の界面活性剤と、
を含む角栓除去用液状クレンジング剤。
［２］
前記炭化水素は、
全量に対して３体積％以上９９体積％以下であり、
前記オクチルドデカノールは、
前記炭化水素に対して１体積％以上２００体積％以下である、前記［１］に記載のクレンジング剤。

【発明の効果】

【0009】

本発明によれば、タンパク質を抽出できる液状化粧品が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1(A)】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図1(B)】本発明の一実施例に係る抽出剤によって抽出されたタンパク質の観察結果である。

【図2(A)】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図2(B)】本発明の一実施例に係る抽出剤によって抽出されたタンパク質の観察結果である。

【図3】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図4】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図5】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図6】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図7】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図8】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図9】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図10】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図11(A)】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図11(B)】本発明の一実施例に係る抽出剤によって抽出されたタンパク質の観察結果である。

【図12】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図13】本発明の一実施例に係る抽出剤による抽出結果を示す写真である。

【図14(A)】本発明に係るタンパク質抽出剤に含まれる高級アルコールの作用結果を示す観察結果において、抽出対象液（対照）を示す写真像である。

【図14(B)】本発明に係るタンパク質抽出剤に含まれる高級アルコールの作用結果を示す観察結果において、第１のタンパク質抽出剤に含まれる第１の高級アルコールの作用結果を示す写真像である。

【図14(C)】本発明に係るタンパク質抽出剤に含まれる高級アルコールの作用結果を示す観察結果において、第２のタンパク質抽出剤に含まれる第２の高級アルコールの作用結果を示す写真像である。

【発明を実施するための形態】

【0011】

以下、本発明の実施形態について説明する。なお、本発明は以下の実施形態に限定されない。
また、本発明において「タンパク質を抽出できる液状化粧品」とは、タンパク質を抽出する作用を有する液状化粧品を指す。本発明に係る液状化粧品は、下記有効成分を所定量にて含有してなるタンパク質抽出剤の一態様を指すものである。本明細書においては、本発明に係る液状化粧品を、「タンパク質抽出剤」という場合がある。
本発明において「タンパク質抽出剤」とは、本発明に係る有効成分を含有してなる組成物を指すものである。
また、本発明において、「タンパク質を抽出する」とは、抽出対象物（つまり、タンパク質）を、皮膚等から分離することを指す。具体的に、「タンパク質の抽出」には、皮膚等からのタンパク質の洗浄（抽出対象物であるタンパク質を皮膚等から抽出して、タンパク質抽出剤と共に水等で洗い流すこと）、及び／又は、皮膚等からのタンパク質の除去という意味が含まれる。
また、本発明において「液状化粧品」とは、室温（１９℃〜２５℃）において液状である化粧品を指す。

【0012】

１．第１のタンパク質抽出剤
本発明の第１のタンパク質抽出剤は、少なくとも第１の高級アルコールと、脂肪酸と、を、タンパク質抽出作用の有効成分として含んでなるものである。

【0013】

本発明の第１のタンパク質抽出剤は、界面活性剤を含まなくともよい。また、本発明の第１のタンパク質抽出剤には、従来使用されてきた対象物質の分離等のためのエマルション等に含まれる界面活性剤よりも少ない量（例えば、タンパク質抽出剤の体積全体に対して０．１％〜１０％）の界面活性剤が含まれていてもよい。
具体的には、タンパク質抽出剤（液状化粧品）全量に対して１０体積％以下、好ましくは８体積％以下、より好ましくは５体積％以下、さらに好ましくは４体積％以下の界面活性剤が含まれていてもよい。下限としては、特に制限はないが、例えば、０．１体積％以上を挙げることができる。
なお、本発明において「界面活性剤」とは、溶媒中でミセル構造をとり得る両親媒性分子を指す。第１のタンパク質抽出剤としては、疎水性の性質が強い界面活性剤、親水性の性質が強い界面活性剤のいずれのものであっても、界面活性剤としての配合使用が許容される。

【0014】

第１のタンパク質抽出剤を、抽出対象物（つまり、タンパク質）と水性溶媒とを含む溶液（以下、「抽出対象液」ともいう）に添加して、適宜撹拌した後に静置すると、抽出対象液は少なくとも２層に分離する。本発明において、第１のタンパク質抽出剤によって少なくとも２層に分離したうちの、タンパク質を含む層を「第１のタンパク質含有層」という。通常、少なくとも２層に分離したうちの上層が第１のタンパク質含有層である。

【0015】

本発明において、抽出対象液が少なくとも２層に分離している状態とは、層間に明確な界面が形成されている状態、及び、層間に明確な界面は形成されていないが見かけ上は少なくとも２層に分離しているように見える状態、のうちいずれも含む。本発明において、分離した各層（見かけ上の層も含む）は、公知の界面検出センサー（超音波等）によって特定できる。

【0016】

また、抽出対象液が少なくとも２層に分離している状態とは、水層の上表面全体に油層が形成されている状態だけではなく、液滴が水層の上部中及び上表面上の一部に分布している状態も含む。

【0017】

少なくとも２層に分離した抽出対象液のいずれかの層にタンパク質が含まれる。少なくとも２層に分離した抽出対象液のいずれの層にタンパク質が含まれるかは、タンパク質の性質（水との親和性（親水性、親油性又は両親媒性）、比重等）に応じて異なる。本発明において、タンパク質は、水との親和性等に関わらず、少なくとも２層に分離した抽出対象液のうちの上層に含まれることが多い。

【0018】

抽出対象液の構成としては、水性溶媒中にタンパク質が混合されたものが挙げられる。水性溶媒としては、タンパク質を変性させないものであれば特に限定されず、公知の水溶性の溶媒（水、リン酸バッファ、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファ等）等が挙げられる。第１のタンパク質抽出剤によって抽出対象液を少なくとも２層に明瞭に分離できる点で、水性溶媒は、水が好ましい。

【0019】

（第１の高級アルコール）
第１の高級アルコールは、後述する脂肪酸と組み合わせることにより、下記の作用によって抽出対象液からタンパク質を抽出できると考えられる。すなわち、第１の高級アルコール中の疎水基（オレイル基等）が抽出対象液中のタンパク質と結合する。次いで、水性溶媒中で形成された脂肪酸の液滴が、第１の高級アルコールと結合したタンパク質を引き寄せ、タンパク質含有層が形成され、タンパク質を水性溶媒から分離させる。その結果、タンパク質を抽出対象液から抽出できる。なお、本発明において「抽出」とは、タンパク質と水性溶媒とを分離させること（つまり、タンパク質含有層が形成されること）を指す。ただし、タンパク質含有層には水性溶媒や抽出対象液由来の物質が含まれ得る。タンパク質含有層中の水性溶媒に対するタンパク質の割合が、抽出対象液中の水性溶媒に対するタンパク質の割合よりも高ければ、抽出対象液からタンパク質が抽出されたといえる。

【0020】

第１の高級アルコールとしては、炭素数１５以上の１価アルコールであれば特に限定されないが、炭素数が多い高級アルコールの方が、タンパク質と結合しやすく、かつ、水性溶媒中で形成される脂肪酸の液滴に引き寄せられやすいという点で好ましい。そのため、第１の高級アルコールの炭素数は、好ましくは炭素数１６以上、さらに好ましくは炭素数１８以上である。

【0021】

他方、第１の高級アルコールの炭素数が多すぎると、後述する脂肪酸が水性溶媒中で液滴を形成し難いため好ましくない。第１の高級アルコールの炭素数は、好ましくは炭素数３０以下、さらに好ましくは炭素数２０以下、特に好ましくは炭素数１８以下である。

【0022】

炭素数１５以上の高級アルコールとしては、イソステアリルアルコール（炭素数１８）、オレイルアルコール（炭素数１８）等が挙げられる。炭素数１５以上の高級アルコールのうち、抽出対象液中のタンパク質と結合しやすいという点で直鎖構造部分の炭素数が１５以上の高級アルコールが好ましい。

【0023】

例えば、直鎖構造部分の炭素数が「１６」である高級アルコールとして、下記式１で表されるイソステアリルアルコールを例示できる。

【0024】

【化1】

【0025】

第１の高級アルコールとしては、イソステアリルアルコール又はオレイルアルコールが特に好ましい。第１の高級アルコールは１種であってもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。

【0026】

（脂肪酸）
脂肪酸としては、炭化水素の１価のカルボン酸であれば特に限定されず、直鎖脂肪酸及び分岐脂肪酸のいずれでもよい。水性溶媒中で液滴を形成してタンパク質を引き寄せやすいという点で、脂肪酸としては、脂肪酸の炭素骨格中の不飽和結合が少ないものが好ましい。具体的には、炭素骨格中に１以下の不飽和結合を有する脂肪酸が好ましい。つまり、脂肪酸としては、炭素骨格中に１以下の不飽和結合を有さない脂肪酸（つまり、飽和脂肪酸）であってもよい。
一方、リノール酸のように炭素骨格中に２以上の不飽和結合を有する脂肪酸を使用すると抽出対象液を少なくとも２層に分離しにくい可能性がある。なお、脂肪酸のみを抽出対象液と混合すると、脂肪酸を含む層と抽出対象液を含む層に分かれ、タンパク質を抽出できない。

【0027】

炭素骨格中に１以下の不飽和結合を有する脂肪酸としては、オレイン酸、イソステアリン酸等が挙げられる。上記の脂肪酸のうち、オレイン酸、イソステアリン酸が特に好ましい。脂肪酸は１種であってもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。

【0028】

第１のタンパク質抽出剤中の第１の高級アルコール及び脂肪酸の組み合わせとしては、抽出対象液を少なくとも２層に分離しやすいという点でイソステアリルアルコール及びオレイン酸、オレイルアルコール及びオレイン酸が特に好ましい。

【0029】

第１のタンパク質抽出剤中の第１の高級アルコールと脂肪酸との比率は、抽出対象物であるタンパク質の量や性質に応じて適宜調整でき、例えば、質量比で第１の高級アルコール／脂肪酸＝２／１〜１／１００、好ましくは２／１〜１／１０、より好ましくは２／１〜１／２、特に好ましくは１／１〜１／２であることが好適である。

【0030】

第１のタンパク質抽出剤には、本発明の目的を害さない限り、公知の添加剤（界面活性剤、炭素数１５未満の高級アルコール等）を添加してもよい。添加剤の添加量は得ようとする効果等に応じて適宜設定できる。また、有効成分以外の他成分として、リノール酸のように炭素骨格中に２以上の不飽和結合を有する脂肪酸を含むものを含むものであっても良い。

【0031】

（第１の抽出工程）
本発明において「第１の抽出工程」とは、第１のタンパク質抽出剤と抽出対象液とを接触させる工程から、抽出対象液を少なくとも２層に分離させる工程までを指す。第１の抽出工程における温度条件は、タンパク質やタンパク質抽出剤中の成分が変性等しない限り特に限定されないが、例えば、室温（例えば、２０〜２８℃）であってもよい。

【0032】

第１のタンパク質抽出剤と抽出対象液とを接触させる方法は、特に限定されないが、第１のタンパク質抽出剤及び抽出対象液を混合、撹拌等することで行える。第１の抽出工程における第１のタンパク質抽出剤と抽出対象液との混合比は特に限定されないが、質量比で、第１のタンパク質抽出剤／抽出対象液＝１／１〜１／５であってもよい。特に第１タンパク質抽出剤の混合比率が多い分には制限はない。第１のタンパク質抽出剤と抽出対象液との混合方法は特に限定されず、公知の撹拌機や試験管の上下倒立等で混合できる。

【0033】

第１のタンパク質抽出剤の使用方法としては、抽出対象液に添加する前に第１のタンパク質抽出剤を構成する成分を予め混合してから添加してもよいが、第１の高級アルコール又は脂肪酸のいずれか一方を先に抽出対象液に添加した後に、さらに残りを順次混合してもよい。第１の高級アルコール中の疎水基が抽出対象液中のタンパク質と結合し、次いで、水性溶媒中で形成される脂肪酸の液滴が、第１の高級アルコールと結合したタンパク質を引き寄せ、水性溶媒とタンパク質とを分離させるという本発明の効果が奏されやすい点で、第１の高級アルコールを脂肪酸よりも先に添加することが好ましい。

【0034】

少なくとも２層に分離した抽出対象液において、タンパク質がいずれの層に存在するかは、界面検出センサー等によって特定される。通常、タンパク質は、少なくとも２層に分離したうちの上層に抽出される。タンパク質含有層は遠心分離等の方法を使用して回収できる。また、タンパク質は、クロマトグラフィー等の方法を使用して、タンパク質含有層から抽出することができる。

【0035】

（液状化粧品としての第１のタンパク質抽出剤）
第１のタンパク質抽出剤を液状化粧品として使用する場合、「脂肪酸」の含量としては、タンパク質抽出剤（液状化粧品）の「全量」に対して３体積％以上含まれていることが好適である。好ましくは「全量」に対して５体積％以上、より好ましくは７．５体積％以上、さらに好ましくは１０体積％以上、一層好ましくは１２．５体積％以上、より一層好ましくは１５体積％以上、さらに一層好ましくは１７．５体積％以上、特に一層好ましくは２０体積％以上含まれていることが好適である。脂肪酸の濃度が低い場合には、タンパク質抽出剤（液状化粧品）をより多く使用することにより、タンパク質の抽出は可能である。しかし、脂肪酸の含有量が全量に対して３体積％を下回ると、化粧品として実用的な範囲を上回る量を使用しなければならなくなるため、好適ではない。なお、ここでの「脂肪酸」には、リノール酸等の不飽和結合を２以上有する脂肪酸は含まれない。
第１のタンパク質抽出剤を液状化粧品として使用する場合、「第１の高級アルコール」の含量としては、「脂肪酸」の体積に対して１体積％以上含まれていることが好適である。好ましくは「脂肪酸」の体積に対して１０体積％以上、より好ましくは５０体積％以上含まれていることが好適である。第１の高級アルコールの濃度が低い場合には、タンパク質抽出剤（液状化粧品）をより多く使用することにより、タンパク質の抽出は可能である。しかし、第１の高級アルコールの含有量が脂肪酸に対して１体積％を下回ると、化粧品として実用的な範囲を上回る量を使用しなければならなくなるため、好適ではない。第１の高級アルコール含量の上限としては、「脂肪酸」の体積に対して２００体積％以下、好ましくは１００体積％以下が好適である。

【0036】

第１のタンパク質抽出剤を液状化粧品として使用する場合、水を含有する態様及び水を含有しない態様という、２つの態様がある。以下に、各態様について説明する。
なお、ここで、第１タンパク質抽出剤を液状化粧品に使用した場合の各成分の含量としては、液状化粧品の製品形態とした場合に好適な量を示すものであり、実際の使用態様において、これより薄い濃度にて使用することを許容するものである。
・水を含有する態様
水を含有する態様の第１のタンパク質抽出剤（液状化粧品）において、脂肪酸の配合量は、水への溶解度以上の量である。第１の高級アルコールの配合量は、脂肪酸の体積に対し、１体積％以上から脂肪酸の体積の２倍以下（２００体積％以下）の範囲内の量である。第１のタンパク質抽出剤に脂肪酸及び第１の高級アルコール以外の成分を配合する場合には、上記の脂肪酸及び第１の高級アルコールの配合量の条件を満たし、かつ、該成分の配合量に相当する分だけ、脂肪酸の体積を減らすように調整する。
・水を含有しない態様
水を含有しない態様の第１のタンパク質抽出剤（液状化粧品）において、脂肪酸の配合量は、第１のタンパク質抽出剤全体に対して３体積％以上９９体積％以下である。第１の高級アルコールの配合量は、脂肪酸の体積に対し、１体積％以上から脂肪酸の体積の２倍以下（２００体積％以下）の範囲内の量である。第１のタンパク質抽出剤に脂肪酸及び第１の高級アルコール以外の成分を配合する場合には、上記の脂肪酸及び第１の高級アルコールの配合量の条件を満たし、かつ、該成分の配合量に相当する分だけ、脂肪酸の体積を減らすように調整する。上記の処方により化粧品を調整すると、該化粧品の性状は常温で液体となる。

【0037】

２．第２のタンパク質抽出剤
本発明の第２のタンパク質抽出剤は、上記第１の高級アルコールとは異なる第２の高級アルコールと、炭化水素と、をタンパク質抽出作用の有効成分として含んでなるものである。

【0038】

本発明の第２のタンパク質抽出剤は、界面活性剤を含まなくともよい。また、本発明の第２のタンパク質抽出剤には、従来使用されてきた対象物質の分離等のためのエマルション等に含まれる界面活性剤よりも少ない量（例えば、タンパク質抽出剤の体積全体に対して０．１％〜１０％）の界面活性剤が含まれていてもよい。
具体的には、タンパク質抽出剤（液状化粧品）全量に対して１０体積％以下、好ましくは８体積％以下、より好ましくは５体積％以下、さらに好ましくは４体積％以下の界面活性剤が含まれていてもよい。下限としては、特に制限はないが、例えば、０．１体積％以上を挙げることができる。
第２のタンパク質抽出剤としては、疎水性の性質が強い界面活性剤、親水性の性質が強い界面活性剤のいずれのものであっても、界面活性剤としての配合使用が許容される。

【0039】

第２のタンパク質抽出剤は、抽出対象液に直接添加して単独で用いることが可能であるが、好ましくは、第１の抽出工程後に得られたタンパク質含有層（以下、「第１のタンパク質含有層」ともいい、この層には、タンパク質、水性溶媒、炭素数１５以上の高級アルコール、及び脂肪酸が含まれ得る）に添加して用いることが好適である。この場合、第１のタンパク質含有層に含まれ得る夾雑物（細胞膜等）を分離できるので、タンパク質をより効率的に抽出できる。
（※なお、第２のタンパク質抽出剤は、第１の抽出工程を行っていない抽出対象液に直接接触させて、抽出工程を行うことも可能である。以下、本明細書では、「第１のタンパク質含有層」を「抽出対象液」と読み替えて、第２のタンパク質抽出剤を使用することも可能である。）

【0040】

第２のタンパク質抽出剤を、第１のタンパク質含有層に添加して、適宜撹拌した後に静置すると、第１のタンパク質含有層は少なくとも２層に分離する。少なくとも２層に分離した第１のタンパク質含有層のうちのいずれかの層にタンパク質が含まれる。以下、少なくとも２層に分離した第１のタンパク質含有層のうち、タンパク質を含む層を「第２のタンパク質含有層」という。通常、少なくとも２層に分離したうちの下層が第２のタンパク質含有層である。

【0041】

本発明において、第１のタンパク質含有層が少なくとも２層に分離している状態とは、層間に明確な界面が形成されている状態、及び、層間に明確な界面は形成されていないが見かけ上は少なくとも２層に分離しているように見える状態、のうちいずれも含む。本発明において、分離した各層（見かけ上の層も含む）は、公知の界面検出センサー（超音波等）によって特定できる。

【0042】

少なくとも２層に分離した第１のタンパク質含有層のいずれの層にタンパク質が含まれるかは、タンパク質の性質（水との親和性（親水性、親油性又は両親媒性）、比重等）に応じて異なる。本発明において、タンパク質は、水との親和性等に関わらず、少なくとも２層に分離した第１のタンパク質含有層のうちの下層に含まれることが多い。

【0043】

第１のタンパク質含有層は、第２のタンパク質抽出剤によって抽出を行う前に、水性溶媒で適宜希釈してもよい。第１のタンパク質含有層を水性溶媒で希釈することによって、第２のタンパク質抽出剤による第１のタンパク質含有層の分離が容易になり得る。水性溶媒としては、抽出対象液におけるものと同様の水性溶媒であってもよく、水、リン酸バッファ、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファ等が挙げられる。

【0044】

（第２の高級アルコール）
第２の高級アルコールは、後述する炭化水素と組み合わせることで、下記の作用によって、第１のタンパク質含有層からタンパク質を抽出できると考えられる。すなわち、第１のタンパク質含有層には、タンパク質、水性媒体、第１の高級アルコール及び脂肪酸等が分散していると考えられるところ、炭化水素が加えられると、第１のタンパク質含有層中の分散状態が崩れ、水性媒体を含む層、並びに、第１の高級アルコール、脂肪酸、及び炭化水素を含む層に分離する。他方、第２の高級アルコール中の疎水基（オレイル基等）が第１のタンパク質含有層中のタンパク質と結合する。次いで、炭化水素の液滴が、第２の高級アルコールと結合したタンパク質と反発しあう。その結果、タンパク質以外の夾雑物の含有量がより少ない第２のタンパク質含有層が形成される。

【0045】

第２の高級アルコールとしては、第１の高級アルコールよりも第１のタンパク質含有層中のタンパク質と結合しやすいものを使用することが好適であり、第１の高級アルコールとは異なるものを使用する。具体的には、第２の高級アルコールは、炭素数１８以上の高級アルコールである。

【0046】

他方、第２の高級アルコールの炭素数が多すぎると、後述する炭化水素が水性溶媒中で液滴を形成し難いため好ましくない。第２の高級アルコールの炭素数は、好ましくは炭素数５０以下、さらに好ましくは炭素数４０以下、特に好ましくは炭素数２０以下である。

【0047】

第２の高級アルコールとしては、高級アルコールの炭素鎖にタンパク質が結合しやすいという点で分岐構造中に水酸基を有する炭素数１８以上の分岐状高級アルコールが好ましい。分岐構造中に水酸基を有する分岐状高級アルコールとしては、高級アルコールの炭素鎖とタンパク質との結合を阻害しないという点で分岐構造中の炭素数が少ないものが好ましい。
具体的には、水酸基から分岐部分までの炭素原子数が１以下である分岐状高級アルコールが好ましい。水酸基から分岐部分までの炭素原子数が１以下である分岐状高級アルコールとしては、オクチルドデカノール（炭素数２０）等が挙げられる。

【0048】

例えば、水酸基から分岐部分までの炭素原子数が「１」である高級アルコールとして、下記式２で表されるオクチルドデカノールを例示できる。

【0049】

【化2】

【0050】

第２の高級アルコールとしては、オクチルドデカノールが好ましい。第２の高級アルコールは１種であってもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。

【0051】

（炭化水素）
炭化水素としては、炭素原子及び水素原子のみからなる化合物であれば特に限定されないが、第１のタンパク質含有層の分散状態を崩し、水性媒体を含む層、並びに、第１の高級アルコール及び脂肪酸を含む層に分離しやすいという点で、炭素数が１０以上の炭化水素が好ましい。特に、高融点の炭化水素を液化させるための熱によってタンパク質が変性することを避けるという点で、２５℃で液体である炭化水素が好ましい。２５℃で液体である炭化水素としては、具体的には、リモネン（炭素数１０）、スクアレン（炭素数３０）、スクアラン（炭素数３０）、流動パラフィン（炭素数２０以上）等が挙げられる。炭化水素は１種であってもよく、２種以上を組み合わせて使用してもよい。

【0052】

第２のタンパク質抽出剤中の第２の高級アルコール及び炭化水素の組み合わせとしては、第１のタンパク質含有層を少なくとも２層に分離しやすいという点でオクチルドデカノール及びリモネンが特に好ましい。

【0053】

第２のタンパク質抽出剤中の第２の高級アルコールと炭化水素との比率は、タンパク質の量や性質に応じて適宜調整でき、例えば、質量比で第２の高級アルコール／炭化水素＝２／１〜１／１００、好ましくは２／１〜１／１０、より好ましくは２／１〜２／３、特に好ましくは１／１〜２／３であることが好適である。

【0054】

第２のタンパク質抽出剤には、本発明の目的を害さない限り、公知の添加剤（界面活性剤、炭素数１８未満の高級アルコール等）を添加してもよい。添加剤の添加量は得ようとする効果等に応じて適宜設定できる。また、有効成分以外の他成分として、リノール酸のように炭素骨格中に２以上の不飽和結合を有する脂肪酸を含むものであっても良い。

【0055】

（第２の抽出工程）
以下、第２のタンパク質抽出剤と第１のタンパク質含有層とを接触させる工程から、第１のタンパク質含有層を少なくとも２層に分離させる工程を「第２の抽出工程」という。（※なお、抽出対象液と第２のタンパク質抽出剤を接触させて抽出を行う工程も想定されるが、本明細書では便宜上この場合も第２の抽出工程というものとする。）

【0056】

第２の抽出工程における温度条件は、タンパク質やタンパク質抽出剤中の成分が変性等しない限り特に限定されないが、例えば、室温（例えば、２０〜２８℃）であってもよい。第２のタンパク質抽出剤に含まれる炭化水素として２５℃で液体である炭化水素が含まれる場合、炭化水素の液体状態を保持すると、第１のタンパク質含有層を好ましく分離できるため、第２の抽出工程における温度条件は、２４〜２６℃であることが好ましい。

【0057】

第２のタンパク質抽出剤と第１のタンパク質含有層とを接触させる方法は、特に限定されないが、第２のタンパク質抽出剤及び第１のタンパク質含有層を混合及び撹拌等することで行える。第２のタンパク質抽出剤と第１のタンパク質含有層との混合比は特に限定されないが、質量比で、第２のタンパク質抽出剤／第１のタンパク質含有層＝１／１〜１／５であってもよい。特に第２タンパク質抽出剤の混合比率が多い分には制限はない。第２のタンパク質抽出剤と第１のタンパク質含有層との混合方法は特に限定されず、公知の撹拌機や試験管の上下倒立等で混合できる。

【0058】

第２のタンパク質抽出剤の使用方法としては、第１のタンパク質含有層に添加する前に第２のタンパク質抽出剤を構成する成分を予め混合してから添加してもよいが、第２の高級アルコール又は炭化水素のいずれか一方を先に第１のタンパク質含有層に添加した後に、さらに残りを順次混合してもよい。炭化水素によって、第１のタンパク質含有層の分散状態を崩し、第２の高級アルコールと結合したタンパク質を引き寄せるという本発明の効果が奏されやすい点で、炭化水素を第２の高級アルコールよりも先に添加することが好ましい。

【0059】

少なくとも２層に分離した第１のタンパク質含有層において、タンパク質がいずれの層に存在するかは、界面検出センサー等によって特定される。通常、タンパク質は、少なくとも２層に分離したうちの下層に抽出される。また、タンパク質は、クロマトグラフィー、遠心分離等の方法を使用して、第２のタンパク質含有層から取り出し、抽出することができる。

【0060】

（液状化粧品としての第２のタンパク質抽出剤）
第２のタンパク質抽出剤を液状化粧品として使用する場合、「炭化水素」の含量としては、タンパク質抽出剤（液状化粧品）の「全量」に対して３体積％以上含まれていることが好適である。好ましくは「全量」に対して５体積％以上、より好ましくは７．５体積％以上、さらに好ましくは１０体積％以上、一層好ましくは１２．５体積％以上、より一層好ましくは１５体積％以上、さらに一層好ましくは１７．５体積％以上、特一層好ましくは２０体積％以上含まれていることが好適である。炭化水素の濃度が低い場合には、タンパク質抽出剤（液状化粧品）をより多く使用することにより、タンパク質の抽出は可能である。しかし、炭化水素の含有量が全量に対して３体積％を下回ると、化粧品として実用的な範囲を上回る量を使用しなければならなくなるため、好適ではない。
第２のタンパク質抽出剤を液状化粧品として使用する場合、「第２の高級アルコール」の含量としては、「炭化水素」の体積に対して１体積％以上含まれていることが好適である。好ましくは「炭化水素」の体積に対して１０体積％以上、より好ましくは５０体積％以上含まれていることが好適である。第２の高級アルコールの濃度が低い場合には、タンパク質抽出剤（液状化粧品）をより多く使用することによりタンパク質の抽出は可能である。しかし、第２の高級アルコールの含有量が炭化水素に対して１体積％を下回ると、化粧品として実用的な範囲を上回る量を使用しなければならなくなるため、好適ではない。第２の高級アルコール含量の上限としては、「炭化水素」の体積に対して２００体積％以下、好ましくは１００体積％以下が好適である。

【0061】

第２のタンパク質抽出剤を液状化粧品として使用する場合、水を含有する態様及び水を含有しない態様という、２つの態様がある。以下に、各態様について説明する。
なお、ここで、第２タンパク質抽出剤を液状化粧品に使用した場合の各成分の含量としては、液状化粧品の製品形態とした場合に好適な量を示すものであり、実際の使用態様において、これより薄い濃度にて使用することを許容するものである。
・水を含有する態様
水を含有する態様の第２のタンパク質抽出剤（液状化粧品）において、炭化水素の配合量は、水への溶解度以上の量である。第２の高級アルコールの配合量は、炭化水素の体積に対し、１体積％以上から炭化水素の体積の２倍以下（２００体積％以下）の範囲内の量である。第２のタンパク質抽出剤に炭化水素及び第２の高級アルコール以外の成分を配合する場合には、上記の炭化水素及び第２の高級アルコールの配合量の条件を満たし、かつ、該成分の配合量に相当する分だけ、炭化水素の体積を減らすように調整する。
・水を含有しない態様
水を含有しない態様の第２のタンパク質抽出剤（液状化粧品）において、炭化水素の配合量は、第２のタンパク質抽出剤全体に対して３体積％以上９９体積％以下である。第２の高級アルコールの配合量は、炭化水素の体積に対し、１体積％以上から炭化水素の体積の２倍以下（２００体積％以下）の範囲内の量である。第２のタンパク質抽出剤に炭化水素及び第２の高級アルコール以外の成分を配合する場合には、上記の炭化水素及び第２の高級アルコールの配合量の条件を満たし、かつ、該成分の配合量に相当する分だけ、炭化水素の体積を減らすように調整する。上記の処方により化粧品を調整すると、該化粧品の性状は常温で液体となる。

【0062】

（第１のタンパク質抽出剤及び第２のタンパク質抽出剤の混合物）
第１のタンパク質抽出剤及び第２のタンパク質抽出剤は、それぞれ単独で液状化粧品として使用することもできるが、混合して液状化粧品として使用することもできる。第１のタンパク質抽出剤と第２のタンパク質抽出剤との混合比は特に限定されないが、第１のタンパク質抽出剤及び第２のタンパク質抽出剤の混合物において、各成分の含有量が、上記（水を含有する態様）又は（水を含有しない態様）の項に示した条件を満たしていることが好ましい。上記の処方により化粧品を調整すると、該化粧品の性状は常温で液体となる。

【0063】

３．本発明のタンパク質抽出剤の効果
上記の通り、本発明のタンパク質抽出剤によれば、抽出対象液からタンパク質以外の成分（水性溶媒、細胞膜等の夾雑物）の割合を減らして、タンパク質を簡便に抽出できる。本発明によって得られたタンパク質から、クロマトグラフィー等によって目的のタンパク質を精製することもできる。したがって、本発明は、特定のタンパク質の単離や精製の前段階の処理として有用である。例えば、本発明は、細胞液（抽出対象液に相当する）等からの膜タンパク質の抽出等において有用である。

【0064】

本発明のタンパク質抽出剤は、タンパク質を簡便に抽出できるため、皮膚に付着したタンパク質を抽出洗浄することが可能な液状化粧品（「タンパク質洗浄用の液状化粧品」）として好適に使用できる。
本発明に係るタンパク質抽出剤は、具体的には、トイレタリー製品等の液状化粧品（クレンジング剤、シャンプー、ボディーソープ、ハンドソープ、マッサージオイル、先顔剤、等）として好適に使用できる。特に好ましくは、クレンジング用の液状化粧品として好適に使用できる。

【0065】

また、本発明のタンパク質抽出剤は、界面活性剤等を含まなくとも、優れたタンパク質抽出効果を奏する。したがって、本発明のタンパク質抽出剤によれば、皮膚への負担を低減しつつ、所望の洗浄効果が得られる。本発明のタンパク質抽出剤には、液状化粧品に配合される公知の添加剤（界面活性剤、防腐剤、保湿剤、香料、エンモリメント成分等）が含まれていてもよい。添加剤の種類や量は、本発明の目的を阻害しない範囲で適宜選択できる。

【0066】

本発明のタンパク質抽出剤（第１のタンパク質抽出剤及び／又は第２のタンパク質抽出剤）には、タンパク質の凝集抑制剤が含まれていてもよい。本発明のタンパク質抽出剤にタンパク質の凝集抑制剤が含まれていると、タンパク質が抽出剤中に分散しやすくなり、タンパク質凝集体の生成や、該凝集体の洗浄部位等への付着を抑制でき、本発明の効果がより奏されやすくなる。

【0067】

タンパク質の凝集抑制剤としては、等電点が５以下のアミノ酸を使用できる。等電点が５以下のアミノ酸としては、例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸、クエン酸、及びアルギニンからなる群から選択される１種以上が挙げられる。これらのうち、本発明によるタンパク質の抽出効果を高めやすい点で、グルタミン酸、アスパラギン酸、が特に好ましい。さらに特には、グルタミン酸が最も好適である。

【0068】

タンパク質の凝集抑制剤が水溶性である場合は、水性溶媒（水、リン酸バッファ、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファ等）中に溶かしてから、本発明のタンパク質抽出剤に添加してもよい。タンパク質の凝集抑制剤の配合量は特に限定されないが、タンパク質抽出剤全体に対して０．００１〜１．０００質量％であってもよい。

【0069】

本発明のタンパク質抽出剤は、第１のタンパク質抽出剤又は第２のタンパク質抽出剤を単独で使用してもよく、これらの混合物として使用してもよいが、本発明の効果が顕著に得られやすいという点で、第１のタンパク質抽出剤単独、第２のタンパク質抽出剤単独の順で、これらを併用することが好ましい。

【0070】

第１のタンパク質抽出剤及び／又は第２のタンパク質抽出剤は、化粧品セットの構成物品とすることができる。好ましくは、第１のタンパク質抽出剤と第２のタンパク質抽出剤の両方を構成物品として含む化粧品セットとする形態が、製品として好適である。
化粧品セットには、他の構成物品としては、乳液、クリーム、パフ、綿、タオルなど、化粧用途を逸脱しない範囲であれば如何なる構成物品を含むものである。

【0071】

本発明のタンパク質抽出剤をクレンジング剤として使用する場合、例えば、下記の方法を実施することが好ましい。まず、皮膚等において、タンパク質を抽出したい部位（汚れを洗浄したい部位）に本発明のタンパク質抽出剤を塗布し、軽く揉む等してマッサージする。塗布前に、該部位は水で濡らしてもよいが、濡らさなくともよい。マッサージ後、該部位を水で濡らし、さらにマッサージした後、水で本発明のタンパク質抽出剤を洗い流す。洗い流す際に、本発明のタンパク質抽出剤によって皮膚等の表面のタンパク質が抽出され、かつ、皮膚等から除去される。水による洗浄後、石けんや洗顔剤等によって皮膚等をさらに洗浄してもよい。

【0072】

第１のタンパク質抽出剤及び第２のタンパク質抽出剤を併用する場合、第１のタンパク質抽出剤を塗布後に洗い流す前に、第２のタンパク質抽出剤を第１のタンパク質抽出剤が塗布された部位に塗布してマッサージした後、洗い流すことが望ましい。

【実施例】

【0073】

以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、下記の試験はいずれも室温（１９℃以上２５℃以下）で行った。また、下記表中において、「ｗｔ％」は質量％を、「ｖоｌ％」は体積％をそれぞれ示す。

【0074】

［実施例１］ 第１のタンパク質抽出剤による抽出−１
本発明の第１のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、抽出対象液から抽出対象物（タンパク質）を抽出した。

【0075】

１．抽出対象液の構成
豆乳（株式会社紀文食品製、豆乳中にはタンパク質（不溶性）が含まれる） １ｍｌ
リン酸バッファ（ＳＩＧＭＡ社製、商品名「Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ」） ９ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌した後、得られた溶液にクマシーブリリアントブルーＧ２５０を加え、タンパク質を青色に着色し、抽出対象液を得た。

【0076】

２．第１のタンパク質抽出剤の調製
イソステアリルアルコール（高級アルコール工業株式会社、商品名「イソステアリルアルコール ＥＸ」、第１の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
オレイン酸（東京化成工業株式会社、商品名「Ｏｌｅｉｃ Ａｃｉｄ」、脂肪酸に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第１のタンパク質抽出剤を調製した。

【0077】

３．第１の抽出工程
抽出対象液（６ｍｌ）に第１のタンパク質抽出剤（４ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、２０分間静置した。なお、以下、溶液の撹拌は試験管を約２０秒間、上下倒立させることで行った。

【0078】

４．結果
第１の抽出工程の前後の結果を図１（Ａ）に示す。図１（Ａ）の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図１（Ａ）の右側は、第１の抽出工程後の試験管内の様子である。図１（Ａ）の右側に示される通り、溶液が２層にはっきりと分離しており、タンパク質が上層に抽出されていることがわかる。なお、下層の液体はほぼ透明だった。

【0079】

図１（Ｂ）は、図１（Ａ）の右側の試験管中の上層における液体（以下、「実施例１の上層の液体」ともいう）を光学顕微鏡（４００倍）で観察した結果である。図１（Ｂ）に示される通り、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在する。

【0080】

［実施例２］ 第２のタンパク質抽出剤抽出−１
本発明の第２のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、実施例１の上層の液体からタンパク質をさらに抽出した。

【0081】

１．第２のタンパク質抽出剤の調製
オクチルドデカノール（高級アルコール工業株式会社、商品名「リソノール ２０ＳＰ」、第２の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
リモネン（東京化成工業、商品名「（＋）−リモネン」、炭化水素に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第２のタンパク質抽出剤を調製した。

【0082】

２．第２の抽出工程
実施例１の上層の液体に第２のタンパク質抽出剤を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0083】

３．結果
第２の抽出工程の前後の結果を図２（Ａ）に示す。図２（Ａ）の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図２（Ａ）の右側は、第２の抽出工程後の試験管内の様子である。図２（Ａ）の右側に示される通り、溶液が２層にはっきりと分離しており、タンパク質が下層に抽出されていることがわかる。

【0084】

図２（Ｂ）は、図２（Ａ）の右側の試験管中の下層における液体を光学顕微鏡（４００倍）で観察した結果である。図２（Ｂ）に示される通り、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在する。

【0085】

［実施例３］ 第１のタンパク質抽出剤による抽出−２
本発明の第１のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、抽出対象液から抽出対象物（タンパク質）を抽出した。

【0086】

１．抽出対象液の構成
実施例１の抽出対象液と同様である。

【0087】

２．第１のタンパク質抽出剤の調製
イソステアリルアルコール（高級アルコール工業株式会社、商品名「イソステアリルアルコール ＥＸ」、第１の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
イソステアリン酸（高級アルコール工業株式会社、商品名「イソステアリン酸 ＥＸ」、脂肪酸に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第１のタンパク質抽出剤を調製した。

【0088】

３．第１の抽出工程
実施例１と同様である。

【0089】

４．結果
第１の抽出工程の前後の結果を図３に示す。図３の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図３の右側は、第１の抽出工程後の試験管内の様子である。図３の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が上層に抽出されていることがわかる。なお、下層の液体はほぼ透明だった。

【0090】

図３の右側の試験管中の上層における液体（以下、「実施例３の上層の液体」ともいう）を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0091】

［実施例４］ 第２のタンパク質抽出剤による抽出−２
本発明の第２のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、実施例３の上層の液体からタンパク質をさらに抽出した。

【0092】

１．第２のタンパク質抽出剤の調製
実施例２と同様である。

【0093】

２．第２の抽出工程
実施例３の上層の液体に第２のタンパク質抽出剤を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0094】

３．結果
第２の抽出工程の前後の結果を図４に示す。図４の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図４の右側は、第２の抽出工程後の試験管内の様子である。図４の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が下層に抽出されていることがわかる。

【0095】

図４の右側の試験管中の下層における液体を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0096】

［実施例５］ 第１のタンパク質抽出剤による抽出−３
本発明の第１のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、抽出対象液から抽出対象物（タンパク質）を抽出した。

【0097】

１．抽出対象液の構成
実施例１の抽出対象液と同様である。

【0098】

２．第１のタンパク質抽出剤の調製
オレイルアルコール（東京化成工業株式会社、商品名「Ｏｌｅｙｌ Ａｌｃｏｈｏｌ」、第１の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
イソステアリン酸（高級アルコール工業株式会社、商品名「イソステアリン酸 ＥＸ」、脂肪酸に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第１のタンパク質抽出剤を調製した。

【0099】

３．第１の抽出工程
実施例１と同様である。

【0100】

４．結果
第１の抽出工程の前後の結果を図５に示す。図５の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図５の右側は、第１の抽出工程後の試験管内の様子である。図５の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が上層に抽出されていることがわかる。なお、下層の液体はほぼ透明だった。

【0101】

図５の右側の試験管中の上層における液体（以下、「実施例５の上層の液体」ともいう）を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0102】

［実施例６］ 第２のタンパク質抽出剤による抽出−３
本発明の第２のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、実施例５の上層の液体からタンパク質をさらに抽出した。

【0103】

１．第２のタンパク質抽出剤の調製
オクチルドデカノール（高級アルコール工業株式会社、商品名「リソノール ２０ＳＰ」、第２の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
スクアレン（和光純薬工業、商品名「Ｓｑｕａｌｅｎｅ」、炭化水素に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第２のタンパク質抽出剤を調製した。

【0104】

２．第２の抽出工程
実施例５の上層の液体に第２のタンパク質抽出剤を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0105】

３．結果
第２の抽出工程の前後の結果を図６に示す。図６の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図６の右側は、第２の抽出工程後の試験管内の様子である。図６の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が下層に抽出されていることがわかる。

【0106】

図６の右側の試験管中の下層における液体を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0107】

［実施例７］ 第２のタンパク質抽出剤による抽出−４
本発明の第２のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、実施例１の上層の液体からタンパク質をさらに抽出した。

【0108】

１．第２のタンパク質抽出剤の調製
オクチルドデカノール（高級アルコール工業株式会社、商品名「リソノール ２０ＳＰ」、第２の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
スクアレン（和光純薬工業、商品名「Ｓｑｕａｌｅｎｅ」、炭化水素に相当する） ２ｍｌ

【0109】

２．第２の抽出工程
実施例１の上層の液体に第２のタンパク質抽出剤を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0110】

３．結果
第２の抽出工程の前後の結果を図７に示す。図７の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図７の右側は、第２の抽出工程後の試験管内の様子である。図７の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が下層に抽出されていることがわかる。

【0111】

図７の右側の試験管中の下層における液体を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0112】

［実施例８］ 第２のタンパク質抽出剤による抽出−５
本発明の第２のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、実施例１の上層の液体からタンパク質をさらに抽出した。

【0113】

１．第２のタンパク質抽出剤の調製
オクチルドデカノール（高級アルコール工業株式会社、商品名「リソノール ２０ＳＰ」、第２の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
流動パラフィン（和光純薬工業、商品名「流動パラフィン」、炭化水素に相当する） ２ｍｌ

【0114】

２．第２の抽出工程
実施例１の上層の液体に第２のタンパク質抽出剤を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0115】

３．結果
第２の抽出工程の前後の結果を図８に示す。図８の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図８の右側は、第２の抽出工程後の試験管内の様子である。図８の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が下層に抽出されていることがわかる。

【0116】

図８の右側の試験管中の下層における液体を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0117】

［実施例９］ 第１のタンパク質抽出剤による抽出−４
本発明の第１のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、抽出対象液から抽出対象物（タンパク質）を抽出した。

【0118】

１．抽出対象液の構成
実施例１の抽出対象液と同様である。

【0119】

２．第１のタンパク質抽出剤の調製
オレイルアルコール（東京化成工業株式会社、商品名「Ｏｌｅｙｌ Ａｌｃｏｈｏｌ」、第１の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
オレイン酸（東京化成工業株式会社、商品名「Ｏｌｅｉｃ Ａｃｉｄ」、脂肪酸に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第１のタンパク質抽出剤を調製した。

【0120】

３．第１の抽出工程
実施例１と同様である。

【0121】

４．結果
第１の抽出工程の前後の結果を図９に示す。図９の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図９の右側は、第１の抽出工程後の試験管内の様子である。図９の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が上層に抽出されていることがわかる。なお、下層の液体はほぼ透明だった。

【0122】

図９の右側の試験管中の上層における液体（以下、「実施例９の上層の液体」ともいう）を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0123】

［実施例１０］ 第２のタンパク質抽出剤による抽出−６
本発明の第２のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、実施例９の上層の液体からタンパク質をさらに抽出した。

【0124】

１．第２のタンパク質抽出剤の調製
オクチルドデカノール（高級アルコール工業株式会社、商品名「リソノール ２０ＳＰ」、第２の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
スクアラン（和光純薬工業、商品名「スクアラン」、炭化水素に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第２のタンパク質抽出剤を調製した。

【0125】

２．第２の抽出工程
実施例９の上層の液体に第２のタンパク質抽出剤を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0126】

３．結果
第２の抽出工程の前後の結果を図１０に示す。図１０の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図１０の右側は、第２の抽出工程後の試験管内の様子である。図１０の右側に示される通り、溶液が２層に分離しており、タンパク質が下層に抽出されていることがわかる。

【0127】

図１０の右側の試験管中の下層における液体を光学顕微鏡（４００倍）で観察したところ、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在していた。

【0128】

［実施例１１］ 第１のタンパク質抽出剤による抽出−５
本発明の第１のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、抽出対象液から抽出対象物（タンパク質）を抽出した。

【0129】

１．抽出対象液の構成
卵白（タンパク質（水溶性）に相当する） １ｍｌ
リン酸バッファ（ＳＩＧＭＡ社製、商品名「Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ」） １０ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌した後、得られた溶液にクマシーブリリアントブルーＧ２５０を加え、タンパク質を青色に着色し、抽出対象液を得た。

【0130】

２．第１のタンパク質抽出剤の調製
下記の２種類の抽出剤を調製した。
（第１のタンパク質抽出剤−１）
イソステアリルアルコール（高級アルコール工業株式会社、商品名「イソステアリルアルコール ＥＸ」、第１の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
オレイン酸（東京化成工業株式会社、商品名「Ｏｌｅｉｃ Ａｃｉｄ」、脂肪酸に相当する） ２ｍｌ
（第１のタンパク質抽出剤−２）
オレイルアルコール（東京化成工業株式会社、商品名「Ｏｌｅｙｌ Ａｌｃｏｈｏｌ」、第１の高級アルコールに相当する） ２ｍｌ
オレイン酸（東京化成工業株式会社、商品名「Ｏｌｅｉｃ Ａｃｉｄ」、脂肪酸に相当する） ２ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第１のタンパク質抽出剤を調製した。

【0131】

３．第１の抽出工程
抽出対象液（６ｍｌ）に２種類のうちいずれかの第１のタンパク質抽出剤（４ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、２０分間静置した。

【0132】

４．結果
第１の抽出工程の前後の結果を図１１（Ａ）に示す。図１１（Ａ）の左側は、第１のタンパク質抽出剤を添加していない（つまり第１の抽出工程前の）抽出対象液を含む試験管内の様子である。図１１（Ａ）の中央（［第１のタンパク質抽出剤−１］を使用した結果）及び右側（［第１のタンパク質抽出剤−２］を使用した結果）は、第１の抽出工程後の試験管内の様子である。図１１（Ａ）の中央及び右側に示される通り、溶液が２層にはっきりと分離しており、タンパク質が上層に抽出されていることがわかる。なお、下層の液体は、いずれもほぼ透明だった。

【0133】

図１１（Ｂ）は、図１１（Ａ）の右側の試験管中の上層における液体を光学顕微鏡（４００倍）で観察した結果である。図１１（Ｂ）に示される通り、タンパク質は液滴の内部に取り込まれず、連続層に存在する。

【0134】

［実施例のまとめ］
上記の実施例の結果をまとめ、表１及び２に示した。なお、表中の「結果」における記号の意味は下記の通りである。
◎：タンパク質が非常に良好に分離された
○：タンパク質が良好に分離された
△：タンパク質が分離された

【0135】

【表1】

【0136】

【表2】

【0137】

上記の通り、本発明のタンパク質抽出剤によれば、タンパク質が良好に分離されることがわかる。特に、第１のタンパク質抽出剤中の第１の高級アルコール及び脂肪酸として、イソステアリルアルコール又はオレイルアルコールと、オレイン酸とを組み合わせるとタンパク質が良好に分離された。さらに、第２のタンパク質抽出剤中の第２の高級アルコール及び炭化水素として、オクチルドデカノールとリモネンとを組み合わせるとタンパク質がさらに良好に分離された。

【0138】

［実施例１２］ 第１のタンパク質抽出剤又は第２のタンパク質抽出剤による抽出−１
本発明の第１のタンパク質抽出剤又は第２のタンパク質抽出剤を使用して、以下の通り、抽出対象液から抽出対象物（タンパク質）を抽出した。

【0139】

１．抽出対象液の構成
卵白０．５ｍｌをリン酸バッファ５ｍｌ中に溶かし、抽出対象液を得た。

【0140】

２．第１のタンパク質抽出剤の調製
（第１のタンパク質抽出剤Ａ）
第１のタンパク質抽出剤（オレイン酸：オレイルアルコール＝２：１（体積比）） ９ｍｌ
リン酸バッファ ０．５ｍｌ
グルタミン酸 ０．１ｇ
（第１のタンパク質抽出剤Ｂ）
第１のタンパク質抽出剤（イソステアリン酸：イソステアリルアルコール＝２：１（体積比）） ９ｍｌ
リン酸バッファ ０．５ｍｌ
アスパラギン酸 ０．１ｇ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第１のタンパク質抽出剤Ａ又はＢを調製した。

【0141】

３．第２のタンパク質抽出剤の調製
（第２のタンパク質抽出剤Ａ）
第２のタンパク質抽出剤（スクワラン：オクチルドデカノール＝２：１（体積比）） ９ｍｌ
リン酸バッファ ０．５ｍｌ
グルタミン酸 ０．１ｇ
（第２のタンパク質抽出剤Ｂ）
第２のタンパク質抽出剤（流動パラフィン：オクチルドデカノール＝２：１（体積比）） ９ｍｌ
リン酸バッファ ０．５ｍｌ
アスパラギン酸 ０．１ｇ
上記を試験管内で混合及び撹拌して第２のタンパク質抽出剤Ａ又はＢを調製した。

【0142】

４．抽出工程
抽出対象液（５．５ｍｌ）に、第１のタンパク質抽出剤のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加して第１の抽出工程を行った。また、第１のタンパク質抽出剤Ａを用いて行った第１の抽出工程によって得られた上層の液体（３ｍｌ）に第２のタンパク質抽出剤のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加して第２の抽出工程を行った。

【0143】

５．結果
第１のタンパク質抽出剤による抽出工程後の結果を図１２に示す。図１２の左側は、グルタミン酸を含まない第１のタンパク質抽出剤（第１のタンパク質抽出剤（オレイン酸：オレイルアルコール＝２：１（体積比）） ９ｍｌ、リン酸バッファ ０．５ｍｌからなる抽出剤である。）を使用した結果であり、右側が第１のタンパク質抽出剤Ａを使用した結果である。グルタミン酸を含まない第１のタンパク質抽出剤よりも、第１のタンパク質抽出剤Ａによるタンパク質抽出効果が高かった。

【0144】

第１のタンパク質抽出剤Ａと第１のタンパク質抽出剤Ｂとを比較すると、第１のタンパク質抽出剤Ａによるタンパク質抽出効果の方が高かった。

【0145】

グルタミン酸を含まない第２のタンパク質抽出剤（第２のタンパク質抽出剤（スクワラン：オクチルドデカノール＝２：１（体積比）） ９ｍｌ、リン酸バッファ ０．５ｍｌからなる抽出剤である。）よりも、第２のタンパク質抽出剤Ａによるタンパク質抽出効果が高かった。

【0146】

第２のタンパク質抽出剤Ａと第２のタンパク質抽出剤Ｂとを比較すると、第２のタンパク質抽出剤Ａによるタンパク質抽出効果の方が高かった。

【0147】

図１３は、第１のタンパク質抽出剤Ａによる抽出工程後の上層における液体（図１２の右側の試験管中の上層における液体）を光学顕微鏡（４００倍）で観察した結果である。図１３に示される通り、グルタミン酸の存在下では、タンパク質の凝集が抑制されている。

【0148】

以上の結果から、グルタミン酸が抽出剤に含まれると、タンパク質の凝集を抑制しつつ、より高いタンパク質抽出効果が得られるものと推察された。

【0149】

［実施例１３］ 第１のタンパク質抽出剤又は第２のタンパク質抽出剤による抽出−２
実施例１２において調製した第１のタンパク質抽出剤Ａ及びＢ、第２のタンパク質抽出剤Ａ及びＢ、並びに市販の石けんを使用し、角栓のある皮膚に対する洗浄効果を比較した。
その結果、石けんと比較して、本発明のタンパク質抽出剤はいずれも高い洗浄効果を示した。そのなかでも、第１のタンパク質抽出剤Ａによる洗浄効果が最も高く、次いで、第１のタンパク質抽出剤Ｂによる洗浄効果が高かった。
第１のタンパク質抽出剤と第２のタンパク質抽出剤とを併せて使用する場合、第１のタンパク質抽出剤Ａを用いてマッサージし、その後第２のタンパク質抽出剤Ａを用いてマッサージする組み合わせが、他の組み合わせより洗浄力が高かった。
したがって、本発明のタンパク質抽出剤は、クレンジング剤として好ましく使用できる。上記のタンパク質抽出剤の洗浄効果は、グルタミン酸やアスパラギン酸等の、タンパク質の凝集抑制剤の作用によって、タンパク質が抽出剤中に分散しやすくなり、タンパク質凝集体の生成や、該凝集体の洗浄部位への付着を抑制できたことによるものと推察された。

【0150】

［実施例１４］ 第１の高級アルコール及び第２の高級アルコールの作用
本発明に係るタンパク質抽出剤の抽出工程のメカニズムを探るため、第１のタンパク質抽出剤における第１の高級アルコールの作用を確認した。また、第２のタンパク質抽出剤における第２の高級アルコールの作用を確認した。

【0151】

１．抽出対象液の構成
豆乳（株式会社紀文食品製、豆乳中にはタンパク質（不溶性）が含まれる） ０．５ｍｌ
リン酸バッファ（ＳＩＧＭＡ社製、商品名「Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ」） ４．５ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌した後、得られた溶液にクマシーブリリアントブルーＧ２５０を加え、タンパク質を青色に着色し、抽出対象液を得た。

【0152】

２．高級アルコール
下記の高級アルコールとしては、上記実施例に記載のものを用いた。
（第１の高級アルコール）
第１の高級アルコールとしては、オレイルアルコールを用いた。
（第２の高級アルコール）
第２の高級アルコールとしては、オクチルドデカノールを用いた。

【0153】

３．高級アルコールの添加混合
抽出対象液（１ｍｌ）に、第１の高級アルコール（１ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、２０分間静置した（試料１４−１）。その後、さらに第２の高級アルコール（１ｍｌ）を添加し、溶液を撹拌し、２０分間静置した（試料１４−２）。
得られた、各溶液（試料１４−１、試料１４−２）を光学顕微鏡（４００倍）で観察した。また、抽出対象液（対照）も、同様にして観察した。

【0154】

４．結果１
高級アルコールを添加混合した後の結果を図１４に示す。図１４（Ｂ）は、抽出対象液に第１の高級アルコール（オレイルアルコール）を作用させた後の溶液を撮影した結果である（試料１４−１）。試料１４−１のタンパク質は、連続層に存在していることが示された。一方、図１４（Ａ）は、抽出対象液のみを撮影した結果である（対照）。当該対照におけるタンパク質は、固形分のままであった。
以上の結果から、本発明に係る第１のタンパク質抽出剤を用いた抽出工程においては、次のメカニズムが推察された。即ち、第１の高級アルコールの作用によって溶媒中に遊離したタンパク質は、第１のタンパク質抽出剤に含まれていた脂肪酸に引き寄せられて、上層（脂肪酸を含む層）に抽出されるものと推察された。

【0155】

５．結果２
また、図１４（Ｃ）は、第１の高級アルコール（オレイルアルコール）を作用させた後の溶液に、さらに第２の高級アルコール（オクチルドデカノール）を作用させた後の溶液を撮影した結果である（試料１４−２）。試料１４−２のタンパク質は、試料１４−１よりもさらに細かな状態で、連続層に存在していることが示された。
以上の結果から、本発明に係る第２のタンパク質抽出剤を用いた抽出工程においては、次のメカニズムが推察された。即ち、第１の高級アルコール添加後に、さらに第２の高級アルコールの作用によってさらに細かくなったタンパク質（極性分子）は、第２のタンパク質抽出剤に含まれていた炭化水素（無極性分子）と反発し合い、下層（炭化水素等を含まない層）に抽出されるものと推察された。

【0156】

［実施例１５］ 液状化粧品
第１のタンパク質抽出剤を「界面活性剤を含む液状化粧品」（実際の化粧品に準じた態様）にした場合において、タンパク質抽出作用が発揮されるかを確認した。

【0157】

１．抽出対象液の構成
実施例１４の抽出対象液と同様である。

【0158】

２．液状化粧品の調製
表３〜６に記載の組成となるように、各化合物を試験管内で混合及び撹拌して液状化粧品を調製した。なお、液状化粧品の調製に用いた高級アルコール、脂肪酸、及び炭化水素としては、上記実施例に記載のものを用いた。
ここで、表３（試料１５−１〜試料１５−４）は、第１の高級アルコールとしてオレイルアルコール、脂肪酸としてオレイン酸を使用した例である。また、表４（試料１５−５〜試料１５−８）は、第１の高級アルコールとしてイソステアリルアルコール、脂肪酸としてオレイン酸を使用した例である。また、表５（試料１５−９〜試料１５−１２）は、第１の高級アルコールとしてオレイルアルコール、脂肪酸としてイソステアリン酸を使用した例である。また、表６（試料１５−１３〜試料１５−１６）は、第１の高級アルコールとしてイソステアリルアルコール、脂肪酸としてイソステアリン酸を使用した例である。
また、親水性の性質が強い界面活性剤としては、Ｔｗｅｅｎ８０（東京化成工業株式会社製、Polyoxethylene Sorbitan Monooleate）を用いた。また、疎水性の性質が強い界面活性剤としては、Ｓｐａｎ８０（東京化成工業株式会社製、Sobitan Monooleate）を用いた。また、エタノールとしては、和光純薬製のものを用いた。

【0159】

３．抽出工程
抽出対象液（５ｍｌ）に、表３〜６に記載の液状化粧品（試料１５−１〜試料１５−１６）のいずれか１種（各５ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、２０分間静置した。結果を表３〜６に示した。

【0160】

【表3】

【0161】

【表4】

【0162】

【表5】

【0163】

【表6】

【0164】

４．結果
上記の通り、第１のタンパク質抽出剤を、実際の液状化粧品の組成に準じた（界面活性剤を含む溶液）とした場合においても、抽出対象液からのタンパク質の抽出が可能であることが示された。
具体的には、親水性の性質が強い界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ８０）又は疎水性の性質が強い界面活性剤（Ｓｐａｎ８０）のいずれの界面活性剤を液状化粧品の組成成分として含有させた場合であっても、タンパク質抽出作用は、問題なく発揮されることが示された。特に、疎水性の性質が強い界面活性剤（Ｓｐａｎ８０）は、タンパク質の抽出作用に影響を与えにくい界面活性剤であることが示された。
また、エタノール及び流動パラフィン存在下であっても、第１のタンパク質抽出作用は問題なく発揮されることが示された。
また、第１のタンパク質抽出作用は、第１の高級アルコールとしてオレイルアルコール又はイソステアリルアルコールを用い、脂肪酸としてオレイン酸又はイソステアリン酸を用いて液状化粧品を調製した場合、いずれの組み合わせ（表３〜６）であってもタンパク質抽出効果が発揮されることが示された。

【0165】

［実施例１６］ 液状化粧品
第２のタンパク質抽出剤を「界面活性剤を含む液状化粧品」（実際の化粧品に準じた態様）にした場合において、タンパク質抽出作用が発揮されるかを確認した。
１．抽出対象液の構成
実施例１４の抽出対象液と同様である。

【0166】

２．第１のタンパク質抽出剤の調製
下記の４種類の抽出剤を調製した。なお、抽出剤の調製に用いた各化合物としては、上記実施例に記載のものを用いた。
（第１のタンパク質抽出剤−i ）
オレイン酸 ２ｍｌ
オレイルアルコール １ｍｌ
（第１のタンパク質抽出剤−ii）
オレイン酸 ２ｍｌ
イソステアリルアルコール １ｍｌ
（第１のタンパク質抽出剤−iii）
イソステアリン酸 ２ｍｌ
オレイルアルコール １ｍｌ
（第１のタンパク質抽出剤−iv）
イソステアリン酸 ２ｍｌ
イソステアリルアルコール １ｍｌ

【0167】

３．第１の抽出工程
抽出対象液（３ｍｌ）に、第１のタンパク質抽出剤のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、２０分間静置した。

【0168】

４．液状化粧品の調製
表７〜１０に記載の組成となるように、各化合物を試験管内で混合及び撹拌して液状化粧品を調製した。なお、液状化粧品の調製に用いた高級アルコール、脂肪酸、炭化水素、エタノール、及び界面活性剤としては、上記実施例に記載のものを用いた。

【0169】

５．抽出工程
（表７）
「第１のタンパク質抽出剤−i」（オレイン酸２ｍｌ、オレイルアルコール１ｍｌ）を使用した第１の抽出工程で得られた溶液の上層の液体（３ｍｌ）に、表７に記載の液状化粧品（試料１６−１〜試料１６−４）のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0170】

【表7】

【0171】

（表８）
また、「第１のタンパク質抽出剤−ii」（オレイン酸２ｍｌ、イソステアリルアルコール１ｍｌ）を使用した第１の抽出工程で得られた溶液の上層の液体（３ｍｌ）に、表８に記載の液状化粧品（試料１６−５〜試料１６−８）のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0172】

【表8】

【0173】

（表９）
また、「第１のタンパク質抽出剤−iii」（イソステアリン酸２ｍｌ、オレイルアルコール１ｍｌ）を使用した第１の抽出工程で得られた溶液の上層の液体（３ｍｌ）に、表９に記載の液状化粧品（試料１６−９〜試料１６−１２）のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0174】

【表9】

【0175】

（表１０）
また、「第１のタンパク質抽出剤−iv」（イソステアリン酸２ｍｌ、イソステアリルアルコール１ｍｌ）を使用した第１の抽出工程で得られた溶液の上層の液体（３ｍｌ）に、表１０に記載の液状化粧品（試料１６−１３〜試料１６−１６）のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0176】

【表10】

【0177】

４．結果
上記の通り、第２のタンパク質抽出剤を、実際の液状化粧品の組成に準じた溶液（界面活性剤を含む溶液）とした場合においても、抽出対象液からのタンパク質の抽出が可能であることが示された。
具体的には、親水性の性質が強い界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ８０）又は疎水性の性質が強い界面活性剤（Ｓｐａｎ８０）のいずれの界面活性剤を液状化粧品に配合した場合であっても、タンパク質抽出作用は問題なく発揮されることが示された。特に、疎水性の性質が強い界面活性剤（Ｓｐａｎ８０）は、タンパク質の抽出作用に影響を与えにくい界面活性剤であることが示された。
また、エタノール存在下であっても、第２のタンパク質抽出作用は問題なく発揮されることが示された。

【0178】

［実施例１７］ 液状化粧品
第１のタンパク質抽出剤を「２以上の不飽和結合を有する脂肪酸を含む液状化粧品」（実際の化粧品に準じた一態様）にした場合において、タンパク質抽出作用が発揮されるかを確認した。

【0179】

１．抽出対象液の構成
実施例１４の抽出対象液と同様である。

【0180】

２．液状化粧品の調製
表１１に記載の組成となるように、各化合物を試験管内で混合及び撹拌して液状化粧品を調製した。なお、液状化粧品の調製に用いた高級アルコール、脂肪酸、炭化水素、エタノール、及び界面活性剤としては、上記実施例に記載のものを用いた。
なお、不飽和結合を２つ有する脂肪酸としては、リノール酸（和光純薬工業株式会社製）を用いた。

【0181】

３．抽出工程
抽出対象液（３ｍｌ）に、表１１に記載の液状化粧品（試料１７−１〜試料１７−８）のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、２０分間静置した。結果を表１１に示した。

【0182】

【表11】

【0183】

４．結果
上記の通り、第１のタンパク質抽出剤を、２以上の不飽和結合を有する脂肪酸を含む液状化粧品（リノール酸を含む溶液）とした場合においても、抽出対象液からのタンパク質の抽出が可能であることが示された。
また、界面活性剤の配合量としては、疎水性の性質が強い界面活性剤（Ｓｐａｎ８０）と親水性の性質が強い界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ８０）を合わせて合計８体積％とした場合であっても、タンパク質抽出が可能であることが示された（試料１７−５〜試料１７−８）。

【0184】

［実施例１８］ 液状化粧品
第２のタンパク質抽出剤を「２以上の不飽和結合を有する脂肪酸を含む液状化粧品」（実際の化粧品に準じた一態様）にした場合において、タンパク質抽出作用が発揮されるかを確認した。

【0185】

１．液状化粧品の調製
表１２に記載の組成となるように、各化合物を試験管内で混合及び撹拌して液状化粧品を調製した。なお、液状化粧品の調製に用いた高級アルコール、脂肪酸、炭化水素、エタノール、及び界面活性剤としては、上記実施例に記載のものを用いた。

【0186】

２．抽出工程
実施例１７における試料１７−４（第１のタンパク質抽出工程後の溶液）を使用した第１の抽出工程で得られた溶液の上層の液体（３ｍｌ）に、表１２に記載の液状化粧品（試料１８−１〜試料１８−８）のいずれか１種（各３ｍｌ）を添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0187】

【表12】

【0188】

３．結果
上記の通り、第２のタンパク質抽出剤を、２以上の不飽和結合を有する脂肪酸を含む液状化粧品（リノール酸を含む溶液）とした場合においても、抽出対象液からのタンパク質の抽出が可能であることが示された。
また、界面活性剤の配合量としては、疎水性の性質が強い界面活性剤（Ｓｐａｎ８０）と親水性の性質が強い界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ８０）を合わせて合計８体積％とした場合であっても、タンパク質抽出が可能であることが示された（試料１８−５〜試料１８−８）。

【0189】

［実施例１９］ 液状化粧品
第１のタンパク質抽出剤を「脂肪酸及び高級アルコールを様々な濃度で含む液状化粧品」（実際の化粧品に準じた一態様）にした場合において、タンパク質抽出作用が発揮されるかを確認した。

【0190】

１．抽出対象液の構成
豆乳（株式会社紀文食品製、豆乳中にはタンパク質（不溶性）が含まれる） １ｍｌ
リン酸バッファ（ＳＩＧＭＡ社製、商品名「Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｂｕｆｆｅｒｅｄ Ｓａｌｉｎｅ」） ９ｍｌ
上記を試験管内で混合及び撹拌した後、得られた溶液にクマシーブリリアントブルーＧ２５０を加え、タンパク質を青色に着色し、抽出対象液を得た。

【0191】

２．液状化粧品の調製
表１３に記載の組成となるように、各化合物を試験管内で混合及び撹拌して液状化粧品を調製した。なお、液状化粧品の調製に用いた高級アルコール、脂肪酸、炭化水素、及び界面活性剤としては、上記実施例に記載のものを用いた。

【0192】

３．抽出工程
抽出対象液（１０ｍｌ）を、表１３に記載の液状化粧品（試料１９−１〜試料１９−８）のいずれか１種（各５ｍｌ）に添加した後、溶液を撹拌し、２０分間静置した。結果を表１３に示した。

【0193】

【表13】

【0194】

４．結果
上記の通り、液状化粧品は、全量に対して３体積％以上９９体積％以下の炭素骨格中に１つの不飽和結合を有する脂肪酸又は飽和脂肪酸である炭素数１８の脂肪酸と、脂肪酸に対して１体積％以上２００体積％以下の第１の高級アルコールと、全量に対して０〜１０体積％の界面活性剤と、を含む構成とした場合であっても、タンパク質抽出が可能であることが示された。

【0195】

［実施例２０］ 液状化粧品
第２のタンパク質抽出剤を「脂肪酸及び高級アルコールを様々な濃度で含む液状化粧品」（実際の化粧品に準じた一態様）にした場合において、タンパク質抽出作用が発揮されるかを確認した。

【0196】

１．液状化粧品の調製
表１４に記載の組成となるように、各化合物を試験管内で混合及び撹拌して液状化粧品を調製した。なお、液状化粧品の調製に用いた高級アルコール、脂肪酸、炭化水素、リン酸バッファ、及び界面活性剤としては、上記実施例に記載のものを用いた。

【0197】

２．抽出工程
実施例１９における試料１９−４（第１のタンパク質抽出工程後の溶液）を使用した第１の抽出工程で得られた溶液の上層の液体（５ｍｌ）を、表１４に記載の液状化粧品（試料２０−１〜試料２０−８）のいずれか１種（各５ｍｌ）に添加した後、溶液を撹拌し、１時間静置した。

【0198】

【表14】

【0199】

３．結果
上記の通り、液状化粧品は、全量に対して３体積％以上９９体積％以下の２５℃にて液体である炭化水素と、炭化水素に対して１体積％以上２００体積％以下の炭素数２０の第２の高級アルコールと、全量に対して０〜１０体積％の界面活性剤と、を含む構成とした場合であっても、タンパク質抽出が可能であることが示された。

【符号の説明】

【0200】

１： タンパク質

【図1(A)】

【図1(B)】

【図2(A)】

【図2(B)】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11(A)】

【図11(B)】

【図12】

【図13】

【図14(A)】

【図14(B)】

【図14(C)】