特許 6139866 脱毛防止又は毛髪成長促進用組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6139866

(24)【登録日】2017年5月12日

(45)【発行日】2017年5月31日

(54)【発明の名称】脱毛防止又は毛髪成長促進用組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/97 20170101AFI20170522BHJP

   A61K 8/99 20170101ALI20170522BHJP

   A61Q 7/00 20060101ALI20170522BHJP

【ＦＩ】

   A61K8/97

   A61K8/99

   A61Q7/00

【請求項の数】4

【全頁数】12

(21)【出願番号】特願2012-258834(P2012-258834)

(22)【出願日】2012年11月27日

(65)【公開番号】特開2013-112684(P2013-112684A)

(43)【公開日】2013年6月10日

【審査請求日】2015年11月4日

(31)【優先権主張番号】10-2011-0125710

(32)【優先日】2011年11月29日

(33)【優先権主張国】KR

(73)【特許権者】

【識別番号】506213681

【氏名又は名称】株式会社アモーレパシフィック

【氏名又は名称原語表記】ＡＭＯＲＥＰＡＣＩＦＩＣ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ

(74)【代理人】

【識別番号】100132230

【弁理士】

【氏名又は名称】佐々木 一也

(74)【代理人】

【識別番号】100082739

【弁理士】

【氏名又は名称】成瀬 勝夫

(74)【代理人】

【識別番号】100087343

【弁理士】

【氏名又は名称】中村 智廣

(72)【発明者】

【氏名】金 ▲ス▼ ▲ナ▼

(72)【発明者】

【氏名】金 ▲ア▼ ▲ルム▼

(72)【発明者】

【氏名】丁 賢 晶

(72)【発明者】

【氏名】朴 恵 胤

(72)【発明者】

【氏名】朴 元 錫

【審査官】 松村 真里

(56)【参考文献】

【文献】 特開２００７−１４５７９０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平１１−１５８０４２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０３−１２３７２０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開昭６１−２６３９０５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０２−０４８５１５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００５−５０８９９７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００７−００８９６５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０６−０８７７２３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０８−００３０２１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０７−００２６２８（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ８／００−８／９９

Ａ６１Ｑ １／００−９０／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参からなる薬参混合物の麹発酵抽出物を有効成分として含む脱毛防止又は毛髪成長促進用組成物。

【請求項2】

前記薬参混合物の麹発酵抽出物は、組成物の総質量に対して０．０１〜１０重量％含まれることを特徴とする請求項１に記載の脱毛防止又は毛髪成長促進用組成物。

【請求項3】

前記組成物は、血行を促進することを特徴とする請求項１に記載の脱毛防止又は毛髪成長促進用組成物。

【請求項4】

前記組成物は、頭皮抗酸化用であることを特徴とする請求項１に記載の脱毛防止又は毛髪成長促進用組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参のうち１種以上の麹発酵物を含む毛髪及び頭皮状態改善用組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

脱毛は、成長周期によって休止期性脱毛と成長期性脱毛とに分けられ、休止期性脱毛としては、アンドロゲンによる男性型脱毛、女性の産後脱毛、内分泌疾患による脱毛があり、成長期性脱毛としては、円形脱毛、瘢痕性脱毛及び頭部白癬による脱毛などがある（Ｋｕａｇ， ２００１）。また、局所感染（Ｍｕｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， １９８０）、内分泌障害（Ｂｅｒｇｆｅｌｄ， １９７８）、遺伝因子（Ｓｅｌｍａｎ， ｗｉｌｚｅｔａｌ．， １９７４）及び自己免疫（Ｆｒｉｅｄｍａｎ， １９８１）などによって脱毛が発生すると知られている。

【0003】

現在、代表的な脱毛防止剤としては、アメリカＦＤＡで承認されたプロペシアとミノキシジルなどがある。このような薬物は、臨床的に明確な効果を奏するが、性機能障害及び皮膚刺激などの副作用を招くだけでなく、女性は使用が不可となったり、制限的であるという欠点がある。最近、このような薬物の欠点を補完することができる新しいメカニズムの発毛剤とともに、安全であり、かつ性別に制限なく使用することができる天然原料の開発が活性に行われている。

【0004】

特許文献１は、メハジキ、甘松香、甘菊、挑仁、山茱萸、ネナシカズラ、五味子、白朮、松葉とトウキの数種の漢方薬の混合抽出液を含む脱毛防止及び発毛促進組成物を開示しており、特許文献２は、トウキ根とゴボウ根のエタノール抽出物を含むことによって、トウキ根のベータシトステロール成分による５−アルファ還元酵素の抑制効果と、ゴボウ根のイヌリン成分による血流改善効果によって脱毛防止効果を有する脱毛防止シャンプー組成物を開示している。しかし、このような従来の技術の多くが臨床的に示される脱毛防止効果の作用メカニズムを明確に説明することができず、本発明による７種の薬参抽出物の麹発酵抽出物を使用した毛乳頭細胞増殖、血行促進効果及び頭皮抗酸化効果についてはいまだに知られていない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】韓国特許第０５８１３１６号公報

【特許文献2】韓国特許第０６０９２１０号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

本発明では、シャンプーのように、日常的な管理として、便利であり、副作用を引き起こさずに安全に脱毛防止効果を提供する天然原料を利用した組成物を開発するために努力した結果、玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参のうち１種以上を麹発酵して、毛乳頭細胞増殖、血行促進、抗酸化効果を奏することによって脱毛防止効果を与えることができることを見出し、本発明を完成するに至った。

【課題を解決するための手段】

【0007】

前記目的を達成するために、本発明は、玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参のうち１種以上の麹発酵物を含む毛髪及び頭皮状態改善用組成物を提供する。

【0008】

以下、本発明をさらに詳細に説明する。
本発明の一つの実施形態による組成物に使用される前記玄参（Ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａ ｂｕｅｒｇｅｒｉａｎａ）は、玄参科の多年草植物であって、重台、玄台、鬼蔵、逐馬とも呼ばれる。漢方では、根を玄参と言い、解熱剤として咽喉炎、腫れ物、リンパ節炎に使用する。

【0009】

本発明の一つの実施形態による組成物に使用される前記人参は、タラノキ属の人参（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）の根であって、細い根およびコルク層が除去されたものを言う。特に、韓国では、白参（生物）、紅参（蒸し物）、及び尾蔘（細い根）に区分して記録したが、民間では、野生参も長脳と山参とに分けられる。中国では、人参の根や根茎を言い、園参（栽培人参）、紅参、及び山参（野生参）に区別する。人参は、根が人間と同一の形状をしているため付けられた名称であり、優れた効能があるとして神草とも呼ばれ、高い階級に該当して、人が奉るという意味で、人銜とも呼ばれ、日を背にし、陰地に向かっているため、鬼蓋とも呼ばれる。この薬は、独特な匂いがして、味は甘く、やや苦味があり、性質はやや暖かい。人参は、元気を補し、身体▲オウ▼弱、倦怠、疲れ、食欲不振、嘔吐、下痢に使用され、肺機能を向上させ、津液を生成し、安神作用及び腎機能を向上させる。薬理作用は、大脳皮質興奮と抑制、平衡、抗疲労、抗老化、免疫増強、心臓収縮、性線促進、高血糖抑制、タンパク質合成促進、恒常性維持、抗癌、解毒作用などが報告された。外観は、細長い円周状または紡錘状であり、２〜５個の側根が生えており、外面は、淡い黄褐色を帯び、縦シワと細い根跡がある。根頭部には茎幹の残基が付いていた蘆頭がある。

【0010】

本発明の一つの実施形態による組成物に使用される前記丹参は、Ｓａｌｖｉａ ｍｉｌｔｉｏｒｒｈｉｚａ Ｂｕｎｇｅの根で作られた薬剤（韓国、中国）であって、日本では使用しない。５種の参−人参、苦参、丹参、玄参、沙参−は、５色を帯び、五臓にそれぞれ配属されるが、丹参は心に入るため、赤参とも呼ばれた。また、丹参は、風病を治療して、下肢無力感をなくすため、走っている馬を追い掛けることができるとして、奔馬草とも呼ばれた。この薬は、やや独特な匂いがして、薬性は苦味や渋みがあり、性質はやや冷たい。血液循環をよくし、淤血を除去し、四肢疼痛を緩和させる。婦人の生理不順、生理痛、産後腹痛、淤血性心腹部痛、打撲傷などを治療する。高熱による意識混濁、うわごと、煩燥、不眠症、皮疹、心悸亢進などを治療する。薬理作用は、冠状動脈拡張、コレステロール降下、血圧降下、肝機能活性化、抗炎鎮静、抗癌、抗菌作用が報告された。

【0011】

本発明の一つの実施形態による組成物に使用される前記黄耆は、豆科に属する多年生草本植物であって、皇耆とも呼ばれる。高麗時代の吏頭郷名としては数板麻と言い、朝鮮初期には甘板麻と言ったが、１６００年代に入っては‘ノサムブルフィ’などに変わり、１７００年代は‘黄耆’になった。それは、苦参（ノサム）と類似しているものの、味が甘いため付けられた名称である。学名は、Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ ＢＵＮＧＥである。山地で育ち、根は薬剤として利用するが、薬効成分は、ポリ酸（ｆｏｌｉｃ ａｃｉｄ）、コリン（ｃｈｏｌｉｎｅ）などである。動物実験では、中枢神経系統の興奮作用と利尿作用に優れており、白鼠に大量の粉末を投与した場合、腎炎の発生を抑制させ、蛋白尿やコレステロール血症の発生も遅延させ、血圧降下作用も認められた。この薬は、薬性が温和であり、甘味がある。効能は、疲れやすく、力が弱く、音声が低く、脈が弱く、大汗をかく人に優れた効能を奏するため、昔から人参の代わりに多用されてきた。そして、子宮下垂、胃下垂、脱肛、子宮出血にも広く利用され、体力を増強させ、全身筋肉の緊張度を高めたりする。しかし、発熱がひどいときには使用することができない。民間では、鶏にこの薬を入れて煎じて食べれば、冷汗をかかずに体力が増強するとして多用されている。代表的な処方としては、元気がなく、食欲を失った人に多く活用される補中益気湯がある。

【0012】

本発明の一つの実施形態による組成物に使用される前記蔓参は、双子葉植物のキキョウ目のキキョウ科の蔓性多年生草（Ｃｏｄｏｎｏｐｓｉｓ ｐｉｌｏｓｕｌａ Ｎａｎｎｆｅｌｄｔ）であって、根を党参または参と言い、去痰剤または食用として使用する。蔓参は、人参に対する副作用のある人が人参の代わりに使用すれば、人参と同じ効能を得ることができるという名薬である。この薬は、独特な芳香があり、味はやや甘く、性質は偏らずに平易である。党参は、脾胃気が不足するため生じる身体疲労、消化吸収不良、咳、渇き、気虚、血虚に効能がある。薬理作用は、強壮作用、抗疲労及び免疫機能亢進作用、赤血球数増加作用、消化性潰瘍、血圧降下及び心臓、脳、下肢、内臓血流量増加作用が報告された。

【0013】

本発明の一つの実施形態による組成物に使用される前記苦参は、苦参（Ｓｏｐｈｏｒａ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ Ａｉｔｏｎ）の周皮をほとんど剥いた根を言う。苦参という名称は、味が苦いため、‘苦’という字を使用し、効能が参と類似しているとして‘参’という字を使用する。根の外観のために、泥棒の杖という植物名を有する。この薬は、独特な匂いがして、残留性であり、薬性は、非常に苦くて冷たい。下焦湿熱による赤痢、こしけ、陰部掻痒症、皮膚の掻痒病などに使用し、膀胱炎によって小便が出にくくなったり、痛症があるときに使用する。薬理効果としては、白血球減少症の治療及び抗放射能作用、冠状動脈血流量増加、心臓筋肉強化、血糖低下作用、抗腫瘍、抗菌、免疫機能抑制作用などが報告された。

【0014】

本発明の一つの実施形態による組成物に使用される前記沙参は、ユリ科のつりがね草（Ａｄｅｎｏｐｈｏｒａｔｒｉｐｈｙｌｌａ ｖａｒ． ｊａｐｏｎｉｃａ Ｈａｒａ）または同属植物の根で作られた薬剤であって（韓国）、日本では、細葉沙参（Ａｄｅｎｏｐｈｏｒａ ｔｒｉｐｈｙｌｌａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ａ． ＤＣ．）、中国では、北沙参（Ａｄｅｎｏｐｈｏｒａ ｓｔｒｉｃｔａ Ｍｉｑ）と輪葉沙参（Ａｄｅｎｏｐｈｏｒａ ｔｅｔｒａｐｈｙｌｌａ（ＴＨＵＮＢ．）ＦＩＳＣＨ）を使用して作る。前記沙参は、人参、玄参、丹参、苦参とともに五参と呼ばれるが、それは、これらは形状は異なるが、治療方法は類似しているためである。沙参という名称は、白色であり、砂地でよく育つため付けられた名称である。根には白汁が多く、俚人たちは羊婆▲ダイ▼とも呼んだ。この薬は、独特な芳香があり、噛めば粘液性があり、味はやや甘く、性質はやや冷たい。沙参は、津液を補充して、肺を潤沢にし、熱を冷やして痰をなくすため、咽喉乾燥、空咳、痰、咳嗽、喘息などに使用される。胃陰の不足によって口内が乾き、咽喉が乾燥し、大便が固まる便秘症などに使用する。薬理作用として、去痰作用、抗菌作用、溶血作用、強心作用などが報告された。

【0015】

本発明において、前記７種の薬参は、東医宝監と韓国本草図鑑で血行（人参、丹参、黄耆）、栄養（玄参、蔓参）、保護（苦参、沙参）の効能を示す薬剤を選別したものである。

【0016】

本発明で使用された組成物は以下のような方法によって製造する。
まず、玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参のうち１種以上を麹発酵して、本発明の一つの実施形態による組成物を製造することができる。

【0017】

また、玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参のうち１種以上の抽出物を得た後、前記抽出物を麹発酵して、本発明の一つの実施形態による組成物を製造することができる。

【0018】

この際に使用される麹は、代表的な天然熟成発酵剤であり、最初に作られたのは中国春秋時代であり、韓国は三国時代以前である。麹は、お酒を作る酵素を含む麹菌及び酵母を穀類である小麦に繁殖させたものであって、麹菌は約５０種が知られている。その中でも、Ａｓｐｅｒｇｕｌｌｕｓ ｏｒｙｚａｅ（黄麹菌）とＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ（黒麹菌）が代表的なものであるが、これらは米の片栗粉を糖化する強力な酵素を含み、片栗粉を二糖類及び単糖類に分解し、最終的にエタノールに転換させる酵素転換反応が行われる。お酒の発酵以外にも、これら酵素は、イソフラボンとポリフェノールの配糖体を、生理活性が強くなった形態である非配糖体の活性化した形態に転換させる。味噌やお酒を製造する工場で勤める作業者の手が白く変わる事実を研究した結果、麹菌の成分であるコウジ酸が発見された。酵母は、お酒の製造に使用されるためでなく、生命現象に深く関連した多様な酵素とともに、ビタミンＢ複合体、タンパク質、無機質などを含む。

【0019】

前記製造方法についてさらに詳細に説明すれば、例えば、玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参、沙参のうち１種以上を麻布風呂敷で包んで、麹とご飯の混合物が入っているカメに入れる。３５℃で２〜３日間発酵させた後、熱水抽出して組成物を得ることができるが、本発明がこれに限定されるものではない。

【0020】

さらに他の製造方法として、例えば、前記玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参、沙参のうち１種以上を通常の天然産物の修得方法を利用して抽出物を得た後、それを麹とご飯の混合物が入っているカメに入れる。３５℃で２〜３日間発酵させて組成物を得ることができるが、本発明がこれに限定されるものではない。

【0021】

前記薬参抽出物を得る方法についてさらに詳細に説明すれば、例えば、前記玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参、沙参のうち１種以上を洗浄して乾燥した後、それを溶媒抽出し、前記抽出物を濾過する過程を経て得ることができる。前記溶媒は、水、有機溶媒、及び水と有機溶媒との混合物からなる群から選択された一つ以上を含む。前記水は、蒸溜水または精製水を含み、前記有機溶媒は、Ｃ１ないしＣ５の低級アルコール、例えば、アルコール、アセトン、エーテル、エチルアセテート、ジエチルエーテル、エチル・メチル・ケトン及びクロロホルムからなる群から選択された一つ以上を含むが、本発明がこれに限定されるものではない。

【0022】

本発明の玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参のうち１種以上の薬参の麹発酵物は、組成物の総質量に対して０．０１〜１０質量％を含むことが好ましく、前記範囲で頭皮刺激及びトラブルを引き起こさずに優れた毛髪及び頭皮状態を改善させることができる。

【発明の効果】

【0023】

本発明で、玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参の抽出物のうち１種以上の麹発酵抽出物を含む頭皮及び毛髪化粧料組成物は、毛乳頭細胞増殖、血行促進及び抗酸化効果を示すことによって、脱毛現象を防止し、毛髪成長を促進することができる。

【図面の簡単な説明】

【0024】

【図1】本発明による組成物が毛嚢毛乳頭細胞増殖を促進する効果を示すグラフである。

【図2】本発明による組成物の血行促進に関連するカリウムイオンチャンネルの活性増大効果を示すグラフである。

【図3】本発明による組成物の抗酸化効果を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0025】

以下、実施例及び実験例によって本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の権利範囲がこれらに限定されるものではない。

【実施例】

【0026】

［製造例１］薬参抽出物の製造
本発明の玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参及び沙参の７種の薬参抽出物は下記の方法によって製造した。前記それぞれの薬参を流水で洗浄した後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルターで濾過して５０℃で２４時間乾燥する。乾燥したそれぞれの薬参５０ｇに、７０％のエタノールを１Ｌ添加し、７種の乾燥した薬参混合物３５０ｇ（各５０ｇ）には、７０％のエタノールを１０Ｌ添加して、４℃の温度条件下で４８時間還流抽出した。その後、２５０メッシュのフィルターで濾過して沈澱させた後、再び０．５μｍのフィルターで濾過してそれぞれの薬参抽出物及び混合抽出物を得た。

【0027】

［製造例２］麹発酵抽出物の製造
本発明で使用した組成物は、前記薬参の麹発酵抽出物またはその混合抽出物を有効成分として含み、下記のような方法によって製造した。７種の薬参（玄参、人参、丹参、黄耆、蔓参、苦参、及び沙参）を流水で洗浄した後、２５０メッシュ（ｍｅｓｈ）のフィルターで濾過して５０℃で２４時間乾燥する。麻布風呂敷で前記乾燥したそれぞれの薬参５０ｇと７種の乾燥した薬参混合物３５０ｇ（各５０ｇ）を包んで、麹とご飯が１：１で混合された混合物が入っているカメに入れた。３５℃で３日間発酵させた後、麻布風呂敷を取り出した。発酵した薬参の重量の２０倍の精製水を入れ、８０℃で２４時間熱水抽出して麹発酵抽出物を得た。

【0028】

［参考例１］比較例１〜９、及び実施例１〜８（参照例１〜７、実施例８）の製造
前記製造例１の抽出物を使用して比較例１〜９を、前記製造例２の麹発酵抽出物を使用して実施例１〜８（参照例１〜７、実施例８）を下記表１の組成によって製造した。

【0029】

【表1】

【0030】

［実験例１］毛嚢毛乳頭細胞増殖効果の試験
毛髪を構成するケラチンタンパク質は、毛根部のケラチン形成細胞（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ）で生成され、このケラチン形成細胞は、毛乳頭細胞から分化する。本発明による組成物の毛乳頭細胞の活性を評価するために、本発明では、ＤＰ６（ｒａｔ ｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄ ｄｅｒｍａｌ ｐａｐｉｌｌａ ｃｅｌｌ）細胞株を使用した〔Ｗｅｎｄｙ Ｆｉｌｓｅｌｌ， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ １０７， １７６１−１７７２（１９９４）〕。本毛乳頭細胞株は、雄ＰＶＧ ｒａｔのひげの毛根でｍｉｃｒｏｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ方法で分離して培養した細胞株であり、１０％のウシ胎仔血清（Ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ、ＦＢＳ）が含まれたＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ；Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ， Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ， ＭＤ， ＵＳＡ）培地で５％のＣＯ₂、３７℃が維持される培養器（ｉｎｃｕｂａｔｏｒ）で２４時間培養した。

【0031】

前記培養されたＤＰ６に、表１の組成の比較例１〜９、又は実施例１〜８（参照例１〜７、実施例８）を処理して、９６穴プレート（９６−ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ）に入れ、３７℃の培養器（ｉｎｃｕｂａｔｏｒ）で２４時間培養した。比較例１は、抽出物を処理していない未処理群である。薬物処理が２４時間経過した後、ＷＳＴ−１ ｋｉｔ（Ｒｏｃｈｅ）を使用して細胞増殖能を測定した。その結果を図１に示す。

【0032】

図１に示される結果から、薬参抽出物そのものを使用する比較例２〜９の場合に比べて、麹発酵抽出物を処理した実施例１〜８（参照例１〜７、実施例８）の場合、毛乳頭細胞増殖効果が優れており、１種の抽出物と同じ濃度で処理した混合抽出物である実施例８の場合、１種のみの抽出物を使用する実施例１〜７（参照例１〜７）に比べて効果が優れており、混合使用による上昇効果があることが確認できる。

【0033】

［実験例２］カリウムイオンチャンネル活性増大効果の評価
脱毛治療剤であるミノキシジルは、潜在的なミトコンドリアＫＡＴＰ ｃｈａｎｎｅｌ ｏｐｅｎｅｒ（カリウムイオンチャンネルオープナー）として知られており、アンドロゲン性脱毛の治療に使用される代表的な薬物である。このようなミノキシジルのメカニズムを評価するために、頭皮の真皮を構成する線維芽細胞で、ＫＡＴＰ ｃｈａｎｎｅｌを塞ぐトルブタミド（Ｔｏｌｂｕｔａｍｉｄｅ， ＳＩＧＭＡ ＡｌＤＲＩＣＨ， Ｔ０８９１）を処理して細胞増殖を抑制し、再びカリウムイオンチャンネルを開いて細胞増殖が回復する試験法を使用した。

【0034】

本組成物のＫＡＴＰ ｃｈａｎｎｅｌ ｏｐｅｎｅｒとしての機能を評価するために、本発明では、線維芽細胞株であるＮＩＨ３Ｔ３（Ｍｏｕｓｅ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ）細胞株を使用した。本細胞株は、ＮＩＨ Ｓｗｉｓｓ ｍｏｕｓｅ ｅｍｂｒｙｏから分離した線維芽細胞株を、３Ｔ３ ｐｒｏｔｏｃｏｌで自然不滅化させた細胞株である。前記細胞株は、１０％ウシ胎仔血清（Ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ、ＦＢＳ）が含まれたＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍ；Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ， Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ， ＭＤ， ＵＳＡ）培地で、５％のＣＯ₂、３７℃が維持される培養器（ｉｎｃｕｂａｔｏｒ）で２４時間培養した。ＮＩＨ３Ｔ３を９６穴プレート（９６−ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ）に入れ、３７℃の培養器（ｉｎｃｕｂａｔｏｒ）で２４時間培養した後、２．５ｍＭのトルブタミドで処理し、１０分後に陽性対照群であるミノキシジル１０μＭと、製造例１での薬参抽出物又は製造例２の麹発酵抽出物とを、下記表２及び表３の組成でそれぞれ処理し、薬物処理が４８時間経過した後、ＷＳＴ−１ ｋｉｔ（Ｒｏｃｈｅ）を使用して細胞増殖能を測定した。その結果を図２に示す。

【0035】

【表2】

【0036】

【表3】

【0037】

図２に示される結果から、実施例９〜１６（参照例９〜１５、実施例１６）で処理した場合、ミノキシジルで処理した比較例１２と同様な程度に線維芽細胞の増殖が回復し、薬参抽出物そのものを使用した場合である比較例１３〜２０に比べて、麹発酵抽出物で処理した実施例９〜１６（参照例９〜１５、実施例１６）の場合、カリウムイオンチャンネル活性増大効果が優れており、１種の抽出物と同じ濃度で処理した混合抽出物で処理した実施例１６の場合、１種のみの抽出物を使用した実施例９〜１５（参照例９〜１５）に比べて効果が優れており、混合使用による上昇効果があることが確認できる。

【0038】

［参考例２］比較例２１〜３１、及び実施例１７〜２４（参照例１７〜２３、実施例２４）の製造
前記製造例１の薬参抽出物を使用して比較例２１〜３１を、前記製造例２の麹発酵抽出物を使用して実施例１７〜２４（参照例１７〜２３、実施例２４）を、下記表４及び表５の組成によって製造した。

【0039】

【表4】

【0040】

【表5】

【0041】

［実験例３］抗酸化効果の評価
本組成物の抗酸化効果を評価するために、ＤＰＰＨ抗酸化評価法を使用した。体内で起こる酸化反応は、主に自由ラジカルによって起こり、このような作用は、細胞の老化及び癌の発生を招くと知られている。したがって、体内の自由ラジカルの生成抑制は、結局、体内抗酸化、抗老化に関連し、このような抗酸化効果は、体内の自由ラジカルを対象として実験し難いため、ＤＰＰＨ（２，２−ｄｉｐｈｅｎｙｌ−１−ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ）ラジカルを普遍的に使用している。ＤＰＰＨラジカルは、濃い紫色を帯びているが、抗酸化効能の物質と出合って反応すると、薄い黄色に変わり、５１７ｎｍの波長で吸光度を測定して抗酸化能を評価する。物質の抗酸化能が高ければ高いほど、薄い黄色を帯び、吸光度が低下する。

【0042】

本実験では、９６穴プレート（９６ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅ）に０．１ｍＭのＤＰＰＨ溶液を入れた後、これに前記参考例２の比較例２１〜３１、又は実施例１７〜２４（参照例１７〜２３、実施例２４）をそれぞれ入れて、３７℃の培養器で３０分間反応させ、５１７ｎｍで吸光度を測定した。その結果を図３に示す。比較例２１は未処理群であり、比較例２２〜２３は陽性対照群であり、ビタミンＣ〔ＳＩＧＭＡ, （＋）−Ｓｏｄｉｕｍ Ｌ−ａｓｃｏｒｂａｔｅ〕５０μｇ／ｍｌ又は１００μｇ／ｍｌでそれぞれ処理した。

【0043】

図３に示されるように、本発明の麹発酵抽出物で処理した実施例１７〜２４（参照例１７〜２３、実施例２４）は、対照群に比べて抗酸化効果に優れていることが分かり、薬参抽出物そのものを使用した比較例２４〜３１の場合に比べて、麹発酵抽出物で処理した実施例１７〜２４（参照例１７〜２３、実施例２４）が抗酸化効果に優れていることが分かる。また、１種の抽出物と同じ濃度で処理した混合抽出物である実施例２４の場合、１種のみの抽出物を使用した実施例１７〜２３（参照例１７〜２３）に比べて効果に優れており、抗酸化効果において混合使用による上昇効果があることが確認できる。

【図1】

【図2】

【図3】