特許 6153711 毛髪化粧料

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6153711

(24)【登録日】2017年6月9日

(45)【発行日】2017年6月28日

(54)【発明の名称】毛髪化粧料

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/97 20170101AFI20170619BHJP

   A61Q 5/00 20060101ALI20170619BHJP

【ＦＩ】

   A61K8/97

   A61Q5/00

【請求項の数】4

【全頁数】14

(21)【出願番号】特願2012-225601(P2012-225601)

(22)【出願日】2012年10月11日

(65)【公開番号】特開2013-224288(P2013-224288A)

(43)【公開日】2013年10月31日

【審査請求日】2015年3月31日

(31)【優先権主張番号】特願2012-67047(P2012-67047)

(32)【優先日】2012年3月23日

(33)【優先権主張国】JP

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】000162021

【氏名又は名称】共栄化学工業株式会社

(72)【発明者】

【氏名】岩野英生

(72)【発明者】

【氏名】松川清治

(72)【発明者】

【氏名】澤木茂

(72)【発明者】

【氏名】澤木茂豊

【審査官】 岩下 直人

(56)【参考文献】

【文献】 特開平０７−１８７９６２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００３−１０４８４８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００４−０９９５０３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０５−２２１８４４（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ８／９７

Ａ６１Ｑ ５／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

黒米又は赤米の抽出物を蛋白分解酵素で加水分解して得られる加水分解物を有効成分とする毛髪の色調変化の予防・改善用の毛髪化粧料。

【請求項2】

加水分解物が２種以上の蛋白分解酵素による処理で得られたものである請求項１に記載の毛髪化粧料。

【請求項3】

黒米又は赤米の抽出物を加水分解して得られる加水分解物を幹細胞増殖因子（ＳＣＦ）合成促進剤として用いる請求項１又は２に記載の毛髪化粧料。

【請求項4】

黒米又は赤米の抽出物を加水分解して得られる加水分解物をメラノサイト遊走活性促進剤として用いる請求項１又は２に記載の毛髪化粧料。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は有効性及び安全性に優れた毛髪の健康を維持、改善する毛髪用の化粧料に関する。

【背景技術】

【0002】

近年、ストレス、食生活の変化、加齢、紫外線等の様々な理由により、男性、女性を問わず毛髪の老化を訴える人が増加している。毛髪の老化としては、薄毛、抜け毛、ハリ・ツヤ・コシの低下、切れ毛、細化、色調変化が挙げられる。上記毛髪の老化のうち、薄毛や抜け毛に関しては、様々な研究が行われ、アデノシンやミノキシジル等の有効成分を配合した育毛剤や、また、天然物である生薬（ショウキョウ、センブリ、ニンジン等）成分を配合した育毛剤が提案されている。一方、上記毛髪の老化の中でも、毛髪の色調変化は様々な要因が関与していると考えられており、そのメカニズムが十分に解明されていない。このため、従来、毛髪の色調変化を予防・改善する有効成分が提案されているものの、まだ十分に効果を発揮するものがないのが現状である。従来、毛髪の色調変化には毛髪の毛包内のメラノサイトが関与していることが報告されている。このメラノサイトは、毛包の毛球部内に存在し、メラニンの産生に関与しているものであって、ストレス、加齢等が原因で、このメラノサイトによるメラニン産生能力の低下、メラノサイトの数の減少又は消失すること等により、毛髪の色調変化（色素異常・脱失等）が起こると考えられている。また、このメラノサイトの機能や数は、毛周期と密接に関連しており、毛髪の退行期から休止期にかけて、その機能が低下したり、或いはその数が減少又は消失したりすることも報告されている。さらに、メラノサイトは、毛周期の休止期から成長期初期にかけて、毛母細胞近傍に遊走、再配置された後、増殖し、これにより毛髪の色調が安定化することが知られているが、このメラノサイトの遊走、再配置が十分に行われないことが原因でも毛髪の色調が変化することも報告されている。

【0003】

従来、上記問題を解決するべく、様々な毛髪の色調変化の予防・改善剤が提案されている。例えば、メラノサイトによるメラニン産生能力の低下に着目し、メラニン産生促進剤を有効成分として含む毛髪の色調変化の予防・改善剤が提案されている（特許文献１，２）。しかし、これらの特許文献１，２に記載の従来発明は、特に有効性の点で十分に満足のいくものではなかった。すなわち、特許文献１，２に記載のメラニン産生促進剤はメラノサイトのメラニン産生能を亢進することで、毛髪の色調変化を予防・改善することを目的とするが、毛包内の毛母細胞近傍へのメラノサイトの遊走、再配置が充分になされてない場合は、十分な効果が得られないという問題があった。

【特許文献1】特開平１０−３３０２１８号

【特許文献2】特許４２２３１７０号

【特許文献3】特開２００１−４８７５４号

【特許文献4】特開平０７−１８７９６２号

【特許文献5】特許２６５２０３９号

【非特許文献1】赤坂俊英、「メラノサイトは動く」、第３４回日本香粧品学会要旨集

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

上記課題を解決するために本発明者らが鋭意研究を行った結果、有色素米の加水分解物が、メラノサイトの遊走、再配置に関与する幹細胞増殖因子（ＳＣＦ）の合成促進効果を有することを新たに見出して、本発明を完成させるに至った。

【0005】

上述したように、毛髪の色調変化の発生は毛周期と密接に関連しており、毛周期の成長期初期に毛乳頭細胞から分泌されるＳＣＦがメラノサイトの遊走、再配置に関与していることが知られている（非特許文献１）。従来、このＳＣＦを有効成分とする毛髪の色調変化の予防・改善剤（特許文献３）も提案されているが、特許文献３に記載の従来発明でも十分な効果が得られなかった。その理由の一つとして、毛周期の退行期から休止期を経て成長期初期に至るまでの間に、毛母細胞の周辺細胞（毛乳頭を含む）からはＳＣＦ以外にも様々な因子が合成されるため、それらの中にはＳＣＦ合成を阻害することで、メラノサイトの遊走、再配置、及び増殖の阻害要因となり得る因子が含まれていることが考えられる。

【0006】

そこで、本発明者らは、このＳＣＦ合成の阻害要因について研究を行ったところ、毛周期の成長期から退行期にかけて、毛乳頭細胞が男性ホルモンの刺激を受けて分泌する毛周期の退行期移行因子（トランスフォーミング増殖因子−β1（ＴＧＦ−β１））がＳＣＦの合成を阻害することを確認した。すなわち、このＴＧＦ−β１が毛周期の退行期から成長期初期にかけて毛乳頭細胞によるＳＣＦの分泌を抑制して、これにより、メラノサイトの遊走、再配置が十分に行われなくなり、その結果、白毛症等の毛髪の色素異常・脱失の原因となる知見を新たに見出した。そして、この知見に基づき、本発明者らは、鋭意研究を行ったところ、有色素米の加水分解物がＴＧＦ−β１の曝露下でもＳＣＦ合成促進作用を有し、これにより、毛周期の休止期から成長期初期にかけて起こるメラノサイトの遊走、再配置を亢進して、すぐれた毛髪の色調変化（色素異常・脱失による白化等）の予防・改善効果を発揮することを新たに見出し、本発明を完成させるに至った。

【0007】

従来、白米の加水分解物を色調変化の改善等を目的として毛髪化粧料に用いることは既に特許文献４により知られており、また、黒米の抽出物が育毛剤に用いることは特許文献５等により知られているが、有色素米の加水分解物がＳＣＦ合成促進作用及びメラノサイトの遊走活性促進作用に基づく毛髪の色調変化の予防・改善効果を発揮することについては知られていなかった。さらに、有色素米の加水分解物がＳＣＦ合成の阻害因子と成り得るＴＧＦ−β１の曝露下でも、その合成促進効果を発揮することも新規な知見である。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明は、有色素米の抽出物を加水分解して得られる加水分解物を有効成分とする毛髪化粧料である。
本発明において、有色素米は黒米であることが好ましい。
また、本発明において、上記有色素米の抽出物はアルカリ性の溶媒を用いて得られるものであることが好ましい。
また、本発明において、上記加水分解物は、２以上の蛋白分解酵素により得られるものであることが好ましい。
また、本発明は、毛髪の色調変化の予防・改善用として用いることが好ましい。
また、本発明は、有色素米の抽出物を加水分解して得られる加水分解物を幹細胞増殖因子（ＳＣＦ）合成促進剤として用いる毛髪化粧料である。
また、有色素米の抽出物を加水分解して得られる加水分解物をメラノサイト遊走活性促進剤として用いる毛髪化粧料である。
なお、本発明において「化粧料」という文言は、化粧品だけでなく医薬部外品も含むものとする。

【発明の効果】

【0009】

本願発明に係る細胞増殖因子（ＳＣＦ）合成促進剤は、その有効成分である有色素米の加水分解物がＴＧＦ−β１の曝露下でも毛乳頭細胞によるＳＣＦの合成を促進する効果を発揮することから、毛周期の休止期から成長期初期にかけての毛包内のメラノサイトの遊走、再配置を促進し、極めて有用な毛髪の色調変化（特に、色素異常・脱失による白化（白毛症）等）の予防・改善用の毛髪化粧料を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1】は、本発明の実施の形態に係る試験例２においてＰＢＳ（−）溶液添加による毛乳頭細胞培養上清のメラノサイトの遊走活性に対する影響を示す。

【図2】は、本発明の実施の形態に係る試験例２において製造例１の加水分解物添加による毛乳頭細胞培養上清のメラノサイトの遊走活性に対する影響を示す。

【図3】は、本発明の実施の形態に係る試験例２においてＳＣＦ含有培地によるメラノサイトの遊走活性に対する影響を示す。

【発明を実施するための形態】

【0011】

本発明は、有色素米の抽出物を加水分解して得られる加水分解物を有効成分とするＳＣＦ合成促進剤及びメラノサイト遊走活性促進剤、並びに当該剤を配合した毛髪化粧料である。
本発明で言う有色素米とは、稲「Oryza sativa linne（Gramineae）」の種子であり、中国原産の古代米の一種で、一般的に、黒米（紫黒米）、紫米、赤米、緑米とも呼ばれるものを指す。また、本発明の抽出物に用いる有色素米は玄米又は精白米のいずれでも良い。

【0012】

抽出処理で用いられる溶媒としては、例えば、精製水；エタノールなどの低級アルコール類；エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、１，３‐ブチレングリコールなどのポリオール類；オレイルアルコール、ステアリルアルコール、オクチルドデカノールなどの高級アルコール類；アセトンなどのケトン類；酢酸エチルなどのエステル類；ヘキサン、クロロホルム、ベンゼンなどの炭化水素系溶剤などがあげられ、これらは単独もしくは２種以上を混合して用いられる。これらのうち、化粧料への幅広い適用という点で、精製水、又は精製水とエタノール、グリセリン、１，３‐ブチレングリコールとの１種又は２種以上を混合した溶媒が好ましい。

【0013】

これらの混合溶媒を用いる場合の容量比は、精製水とエタノールは１乃至２５：１、精製水とグリセリンは１乃至１５：１、精製水と１，３-ブチレングリコールは１乃至１５：１が好ましい。

【0014】

また、ｐＨは酸性、中性、アルカリ性のいずれに調製しても良いが、得られる効果及び色調変化の予防・改善剤として利用の容易性の観点から、アルカリ性に調製することが好ましい。アルカリ調製剤としては、例えば、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウムなどのナトリウム塩、水酸化カリウムなどのカリウム塩などが挙げられ、これらのｐＨは７．５
〜１４．０に設定される。これらのうち低濃度で目的のｐＨに設定できるため、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウムが好ましい。

【0015】

抽出温度、抽出時間等の抽出条件は、用いる溶媒の種類やｐＨによっても異なるが、例えば、精製水を抽出溶媒とする場合で、ｐＨ７．５ 〜１４．０の条件で抽出するときの抽出温度は４〜４０℃が好ましく、より好ましくは１５〜２５℃である。また、このときの抽出時間は４時間〜７日間が好ましく、より好ましくは２０〜２４時間である。

【0016】

次に、上記のようにして得られた抽出物を加水分解処理する。処理の方法としては、酸処理、アルカリ処理、酵素処理等が挙げられるが、それらの中でも酵素処理が最も好ましい。使用する酵素としては、蛋白分解酵素、澱粉分解酵素、繊維素分解酵素及び脂肪分解酵素から選ばれた１種又は２種以上が挙げられる。

【0017】

蛋白分解酵素は、動物由来酵素、植物由来酵素、及び微生物由来の酵素のいずれでも良い。例えば、アクチナーゼ類、ペプシンなどのペプシン類、トリプシンなどのトリプシン類、パパイン、キモパパインなどのパパイン類、グリシルグリシンペプチターゼ、カルボキシペプチターゼ、アミノペプチターゼなどのペプチターゼ類およびブロメラインなどがあげられ、これらの１種以上が用いられる。また、澱粉分解酵素としては、グルコアミラーゼ、α-アミラーゼ等が挙げられる。また、繊維素分解酵素としては、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼ等が挙げられる。また、脂肪分解酵素としてはリパーゼ等が挙げられる。本発明で用いる酵素としては、蛋白分解酵素の１種または２種以上を組合せて用いることが好ましく、中でもアクチナーゼと、パパイン、キモパパイン又はブロメラインとの組合せが特に好ましい。

【0018】

前記蛋白分解酵素の使用量は、１回の処理につき抽出物１００部（重量部、以下同様）に対して０．０００５〜０．０５部、好ましくは０．００１〜０．００５部であり、２種以上の酵素を使用する場合は、合計して０．００３〜０．０１５部程度であることが作用効果の点で好ましい。

【0019】

酵素処理時間は用いる蛋白分解酵素の種類および分解温度などによって異なるが、通常１〜２４時間が好ましい。なお、分解温度は約３０〜５０℃である。こうして得られた分解物は減圧下で濃縮して濃度を調整してもよいし、またこの分解物を凍結乾燥法やスプレードライ法により粉末化して用いてもよい。

【0020】

なお、得られた分解物溶液のｐＨは、皮膚への安全性の点からｐＨ４〜８に調整されることが好ましい。

【0021】

本発明のＳＣＦ合成促進剤は毛髪用の化粧料（医薬部外品も含む）及び医薬品等（以下、一括して毛髪化粧料等という）に配合する使用が可能であり、その剤形としては、例えば、育毛剤、ヘアトニック、へアローション、シャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアークリーム等が挙げられる。毛髪化粧料等における上記ＳＣＦ合成促進剤の配合量は、全体に対して固形分として、０．００１〜１０重量％の範囲であり、より好ましくは０．０１〜１重量％の範囲である。

【0022】

本発明のＳＣＦ合成促進剤及びメラノサイト遊走活性促進剤を配合する毛髪化粧料等には、必須成分たる有色素米の加水分解物に加えて、他の活性成分（毛母細胞賦活剤、抗男性ホルモン剤、血行促進剤、皮脂分泌抑制剤、抗炎症剤、毛髪保護剤、毛周期の成長維持剤等）を組合せて配合してもよく、これによって、相乗的な色調変化（白毛症等）の予防・改善効果、さらには、育毛効果、脱毛防止効果又は髪質改善効果をも期待することができる。

【0023】

例えば、他の活性成分としては、ミノキシジル、シプロテロンアセテート、ペンタデカン酸グリセリド、６−ベンジルアミノプリン（サイトプリン）、アデノシン、トランス−３,４'−ジメチル３−ヒドロキシフラバノン（t−フラバノン）、センブリエキス、ヒノキチオール、感光素、パントテン酸及びその誘導体、マイマイ花エキス、ゲンチアナエキス、カミツレエキス、ビタミンＥ及びその誘導体、ニコチン酸誘導体（ニコチン酸アミド等）、塩化カルプロニウム、女性ホルモン類（エチニルエストラジオール、エストロン等）、イチョウエキス、チョウジエキス、アマモエキス、タケノコ皮エキス、黒大豆エキス、サリチル酸、グリチルリチン酸カリウム（カンゾウエキス）、ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、イソプロピルメチルフェノール、ｌ−メントール、塩酸ピリドキシン（ビタミンＥ６）、チオキソロン、オランダカラシエキス、カンファー、サリチル酸、レゾルシン、タマサキツヅラフジから得られるビス型アルカロイド、ミツイシコンブ、エルカ酸（ｃｉｓ−１３−ドコセン酸）、ゴンドイン酸（ｃｉｓ−１１−エイコセン酸）等の高級モノエン酸、さらにはアミノ酸類、ビタミン類などを配合してもよい。

【0024】

また、本発明のＳＣＦ合成促進剤及びメラノサイト遊走活性促進剤を配合した毛髪粧料等には、通常の化粧料等に用いられる配合成分、例えば油性成分、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、防腐・殺菌剤、紫外線吸収剤、抗酸化剤、色素、香料、乳化剤、生理活性物質等を必要に応じて適宜配合することができる。これにより、髪質改善、及び頭皮のフケ、痒みの抑制の相乗効果も期待できる。

【0025】

ここで、油性成分としては、例えばオリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、大豆油、米油、米胚芽油、ヤシ油、パーム油、カカオ油、メドウフォーム油、シアーバター、ティーツリー油、アボガド油、マカデミアナッツ油、植物由来スクワランなどの植物由来の油脂類；ミンク油、タートル油などの動物由来の油脂類；ミツロウ、カルナウバロウ、ライスワックス、ラノリンなどのロウ類；流動パラフィン、ワセリン、パラフィンワックス、スクワランなどの炭化水素類；ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、エルカ酸、ゴンドイン酸などの脂肪酸類；ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコールなどの高級アルコール類；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、２−エチルヘキシルグリセライド、高級脂肪酸オクチルドデシル（ステアリン酸オクチルドデシル等）などの合成エステル類及び合成トリグリセライド類等が挙げられる。

【0026】

界面活性剤としては，例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルなどの非イオン界面活性剤；脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレン脂肪アミン硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル燐酸塩、α−スルホン化脂肪酸アルキルエステル塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル燐酸塩などのアニオン界面活性剤；第四級アンモニウム塩、第一級〜第三級脂肪アミン塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、２−アルキル−１−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、Ｎ，Ｎ−ジアルキルモルフォルニウム塩、ポリエチレンポリアミン脂肪酸アミド塩などのカチオン界面活性剤；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニオベタイン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリアルキル−Ｎ−アルキレンアンモニオカルボキシベタイン、Ｎ−アシルアミドプロピル−Ｎ′，Ｎ′−ジメチル−Ｎ′−β−ヒドロキシプロピルアンモニオスルホベタインなどの両性界面活性剤等を使用することができる。

【0027】

乳化剤としては、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀など）等を使用することもできる。

【0028】

保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等があり、さらにトレハロース等の糖類、乳酸菌醗酵米、ムコ多糖類（例えば、ヒアルロン酸及びその誘導体、コンドロイチン及びその誘導体、ヘパリン及びその誘導体など）、エラスチン及びその誘導体、コラーゲン及びその誘導体、ＮＭＦ関連物質、乳酸、尿素、高級脂肪酸オクチルドデシル、海藻抽出物、ビャッキュウ抽出物、魚介類由来コラーゲン及びその誘導体、各種アミノ酸及びそれらの誘導体が挙げられる。

【0029】

増粘剤としては、例えばアルギン酸、寒天、カラギーナン、フコイダン等の褐藻、緑藻或いは紅藻由来成分、ビャッキュウ抽出物、ペクチン、ローカストビーンガム、アロエ多糖体等の多糖類、キサンタンガム、トラガントガム、グアーガム等のガム類、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸共重合体等の合成高分子類；ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリグルタミン酸及びその誘導体、グルコシルトレハロースと加水分解水添デンプンを主体とする糖化合物等が挙げられる。

【0030】

防腐・殺菌剤としては、例えば尿素；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類；フェノキシエタノール、ジクロロフェン、ヘキサクロロフェン、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、サリチル酸、エタノール、ウンデシレン酸、フェノール類、ジャマール（イミダゾデイニールウレア）、１，２−ペンタンジオール、各種精油類、樹皮乾留物等がある。

【0031】

紫外線吸収剤としては、例えばパラアミノ安息香酸エチル、パラジメチルアミノ安息香酸エチルヘキシル、サリチル酸アミル及びその誘導体、パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル、桂皮酸オクチル、オキシベンゾン、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸塩、４−ターシャリーブチル−４−メトキシベンゾイルメタン、２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、アロエ抽出物等がある。

【0032】

抗酸化剤としては、例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ビタミンＥ及びその誘導体、イネ抽出物、白芥子加水分解抽出物等がある。

【0033】

また、生理活性成分として、加水分解党参エキス（加水分解ヒカゲノツルニンジンエキス）、加水分解黒豆エキス、豆乳発酵液、ハイビスカス花発酵液、アッケシソウエキス、デイリリー花発酵液（ヘメロカリス属の花の発酵液）、紫蘭根エキス、ムラサキシキブ抽出物、ハス種子発酵物、ローヤルゼリー発酵物、カミツレ抽出物（商品名：カモミラＥＴ)、コンブ等の海藻の抽出物、アマモ等の海草の抽出物、リノール酸及びその誘導体もしくは加工物（例えばリポソーム化リノール酸など）、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体、動物又は魚由来のコラーゲン及びその誘導体、エラスチン及びその誘導体、ニコチン酸及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体（ジカリウム塩等）、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＣ及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、アラントイン、α−ヒドロキシ酸類、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、タマサキツヅラフジから得られるビス型アルカロイド、ゲンチアナエキス、甘草エキス、ハトムギエキス、ニンジンエキス、アロエエキスなどの生薬抽出エキス、米抽出物加水分解物、米糠抽出物、米糠抽出物加水分解物、米醗酵エキス、アナアオサ抽出物、ソウハクヒエキス、ジョアゼイロ（Zizyphus joazeiro）抽出物等がある。

【0034】

次に、製造例、実施例（処方例）及び試験例によって本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。なお、以下に於いて、部はすべて重量部を、また％はすべて重量％を意味する。

【0035】

以下に、ＳＣＦ合成促進剤及びメラノサイト遊走活性促進剤の有効成分である有色素米の加水分解物の製造方法の一例を説明する。

【0036】

製造例１．黒米加水分解物溶液の調製（１）
精白した黒米２５０gに１０００gの０．１％水酸化ナトリウム水溶液を加え、１日間撹拌抽出した後、ろ布で粗ろ過して残った黒米の残渣を除去した。その抽出液を希塩酸で中和した後, 液量に対して, 蛋白分解酵素（アクチナーゼＡＳ０．０２％、パパイン０．０２％）を加え, ４０℃で２時間酵素分解処理を行い、その後８０℃で１時間加熱して酵素を失活させ、室温まで冷却した。こうして得られた酵素処理液を精製ろ過し、淡褐色透明の黒米加水分解物溶液８００gを得た（固形分濃度：１．７０％）。

【0037】

製造例２．黒米加水分解物溶液の調製（２）
製造例１で用いたパパインの代わりにブロメラインを用いる他は製造例１と同様にして淡褐色透明の黒米加水分解物溶液７９５gを得た（固形分濃度：１．６８％）。

【0038】

製造例３．赤米加水分解物溶液の調製
製造例１で用いた黒米の代わりに赤米を用いる他は、製造例１と同様にして淡赤色透明の赤米加水分解物溶液７９０gを得た（固形分濃度：１．６０％）。

【0039】

処方例１．育毛料
［成分］ 部
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
モノニトログアヤコールナトリウム ０．０２
塩酸ピリドキシン ０．０３
ｌ−メントール ０．８
タマサキツヅラフジ根エキス ０．３
褐藻エキス ０．３
豆乳発酵液 ０．３
オタネニンジンエキス ０．３
ゲンチアナエキス ２．０
製造例１の加水分解物溶液 ３．５
トリメチルグリシン ０．５
乳酸 ０．２
１，３−ブチレングリコール １０．０
フェノキシエタノール ０．２
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ０．４
Ｌ−アルギニン 適量
エタノール ２０
精製水 全量が１００部となる量
上記の成分を十分攪拌混合して育毛料を得た。

【0040】

処方例２．育毛料
処方例１の成分中、製造例１の黒米加水分解物溶液に代えて製造例２の黒米加水分解物溶液を用いるほかは処方例１と同様にして育毛料を得た。

【0041】

処方例３．育毛料
処方例１の成分中、製造例１の黒米加水分解物溶液に代えて製造例３の赤米加水分解物溶液を用いるほかは処方例１と同様にして育毛料を得た。

【0042】

処方例４．ヘアートニック
［成分］ 部
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
モノニトログアヤコールナトリウム ０．０２
塩酸ピリドキシン ０．０３
ｌ−メントール ０．８
加水分解コラーゲン ０．３
ハイビスカス花発酵液 ０．３
アマモエキス ０．３
タケノコの皮エキス ０．３
ゲンチアナエキス ２．０
製造例１の黒米加水分解物溶液 ３．５
トリメチルグリシン ０．５
乳酸 ０．２
１，３−ブチレングリコール ２．０
フェノキシエタノール ０．２
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ０．４
Ｌ−アルギニン 適量
エタノール ６０
精製水 全量が１００部となる量
上記の成分を十分攪拌混合してヘアートニックを得た。

【0043】

処方例５．ヘアーフォーム
［原液成分］ 部
カチオン化セルロース ３．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 適量
シリコーン油 ５．０
ジプロピレングリコール ７．０
エタノール １５．０
防腐剤 ０．１
製造例１の黒米加水分解物溶液 １０．０
精製水 全量が１００部となる量
［充填成分］ 部
原液 ９０．０
液化石油ガス １０．０
シリコーン油をジプロピレングリコールとポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の溶解物に添加し、ホモミキサーで均一に乳化した後、これを他の成分の混合溶液に添加して原液を得た。この原液を缶に充填し、バルブを装着後、ガスを充填した。

【0044】

処方例６．ヘアーフォーム
処方例５の成分中、製造例１の黒米加水分解物溶液に代えて製造例２の黒米加水分解物溶液を用いるほかは処方例１と同様にしてヘアーフォームを得た。

【0045】

処方例７．ヘアークリーム
［Ａ成分］ 部
流動パラフィン １５．０
ワセリン １５．０
サラシミツロウ ２．０
防腐剤 ０．１
香料 ０．１
［Ｂ成分］
製造例１の黒米加水分解物溶液 １０．０
カルボキシビニルポリマー ０．１
キサンタンガム ０．１
グリセリン ５．０
１、３−ブチレングリコール ２．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 ３．０
キレート剤 ０．１
色素 ０．０１
精製水 全量が１００部となる量 ［Ｃ成分］
苛性ソーダ ０．０５ 上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱溶解した後、攪拌しながらＡ成分をＢ成分に加え、ホモジナイザーを用いて乳化した。これを３０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。

【0046】

実施例８．ヘアートリートメント
［成分］ 部
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム
６．０
ポリビニルピロリドン ４．０
グリセリン １．０
エチルパラベン ０．１
製造例２の黒米加水分解物溶液５．０
精製水 全量が１００部となる量
上記の成分を８０℃に加温した後混合攪拌してヘアートリートメントを得た。
本品はヘアーパックとしても好適なものであった。

【0047】

実施例９．ヘアーシャンプー
［Ａ成分］ 部
Ｎ−ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム
１０．０
ポリオキシエチレン（３）アルキルエーテル硫酸ナトリウム
２０．０
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン
１０．０
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド ４．０
メチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
クエン酸 ０．１
製造例１の黒米加水分解物溶液 ５．０
１，３−ブチレングリコール ２．０
精製水 全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してヘアーシャンプーを得た。

【0048】

実施例１０．ヘアーリンス
［Ａ成分］ 部
ポリオキシエチレン（１０）硬化ヒマシ油
１．０
塩化ジステアリルジメチルアンモニウム
１．５
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム
２．０
２−エチルヘキサン酸グリセリル １．０
セタノール ３．２
ステアリルアルコール １．０
メチルパラベン ０．１
［Ｂ成分］
製造例２の黒米加水分解物溶液 ５．０
１，３−ブチレングリコール ５．０
精製水 全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してヘアーリンスを得た。

【0049】

試験例１．毛乳頭細胞ＳＣＦ合成促進効果
ヒト毛乳頭細胞ＡＣＩ３０４７を、無血清ＣＳＣ培地を入れた９６穴マイクロプレートに１×１０^４ 個／穴播種し、３７℃,５．０％ＣＯ_２の条件下に１日間プレ培養した後、ＴＧＦ−β１と共に製造例１の黒米加水分解物溶液（試料溶液）を溶液として最終濃度が２．５％、５．０％となるように培地に添加し、同条件でさらに３日間培養した。次に、各培養上清をとり、Human SCF ELISA KIT（R&D Systems,USA)を用いて、培養上清中のＳＣＦの測定を行った。試料溶液に代えてＰＢＳ(-)を添加した試料無添加の場合（対照）についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたＳＣＦ量に対する各試料添加時のＳＣＦ量の相対値を求め、ＳＣＦ合成促進率（％）とした。また、試験系が正常に機能しているかを確認するために、試料溶液の代わりに陽性対照として１００pg/mLの線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ‐７）を添加した場合についても、同様の試験を行った。

【0050】

試験例１の結果を以下の表１に示す。
[表１］

【0051】

表１に示すように、まず、ＴＧＦ−β１は毛乳頭細胞のＳＣＦの合成を抑制することが確認された。そして本願発明の有効成分である製造例１の黒米加水分解物溶液は、ＴＧＦ−β１の曝露下でも濃度依存的に毛乳頭細胞によるＳＣＦの合成を促進することが明らかになった。なお、陽性対照であるＦＧＦ‐７も同様にＳＣＦ合成促進効果を示したことから、本試験系が正常であることも確認された。

【0052】

次に、毛乳頭細胞の存在下で製造例１の黒米加水分解物溶液が、メラノサイトの遊走活性促進効果を有すること確認するために、以下の試験例２を行った。

【0053】

試験例２．メラノサイト遊走活性試験
（１）毛乳頭細胞培養上清の調製
毛乳頭細胞（DSファーマバイオメディカル社製）を96−Well Plate（IWAKI社製）に1×10⁴cells/wellになるように無血清CS-C培地（DSファーマバイオメディカル社製）を用いて播種した。１日培養後、その培養液に製造例１の黒米加水分解物溶液を当該培養液中での終濃度５％となるように添加した。また、陰性対照として製造例１の黒米加水分解物溶液に代えてＰＢＳ(-)を用いたものを調製した。これらを３日間培養後、上清を無菌的に回収し、ＰＢＳ（−）(陰性対照）を添加した培養液の上清を試料１とし、製造例１の黒米加水分解物を添加した培養液の上清を試料２とした。
（２）メラノサイト遊走活性評価
メラノサイト遊走活性評価を市販のキット（CytoSelect^TM 24−Well Wound Healing
Assay(CELL BIOLABS,INC.)）を用いて行った。まず、24-Well Plate （Corning社製）のwellに、正常ヒトメラノサイト（NHEM:クラボウ社製）を含む培地（Dremalife社製）を添加し、正常ヒトメラノサイト細胞の播種を行った（1.0×10⁵cell/well）。その際、Wellの一部を所定のカバー（Wound
Healing Insert）で覆い、正常ヒトメラノサイト細胞が播種されない領域（Wound Field：WF）を作成した。この状態で正常ヒトメラノサイト細胞を２４時間培養した後、上記カバーをより除き、Wellを培地で一度洗浄した。その後、培地を１Well当たり５００μＬ添加し、さらに、当該Wellに上記毛乳頭細胞の培養上清である試料１及び２をそれぞれWellに５００μＬ添加した。さらに、陽性対照として、ＳＣＦを１５０pg/mLになるように毛乳頭細胞用の培地で調製し（試料３）、これを試料としてWellに５００μＬ添加した。このときのWellの状態を初期状態として写真撮影した。その後、１日培養後のWellの状態と、２日培養後のWell状態を写真撮影し、Wound
Field（WF）への正常メラノサイトの遊走を観察した。

【0054】

試験例２の結果を図１〜３に示す。すなわち、試料１（陰性対照）を添加したWellの観察結果を図１に、試料２（製造例１の黒米加水分解物溶液）を添加したWellの観察結果を図２に、試料３（陽性対照）を添加したWellの観察結果を図３に示す。図１，２に示すように、試料２（製造例１の黒米加水分解物を添加した毛乳頭細胞培養上清）を添加したWellの方が、試料１を添加したWellと比較して、より多くのメラノサイト細胞がWound Field（ＷＦ）に遊走されていることが確認された。すなわち、製造例１の黒米加水分解物を添加した毛乳頭細胞培養上清がメラノサイトの遊走活性を亢進することが確認された。なお、図３に示すように、ＳＣＦがメラノサイトの遊走活性を亢進することも確認されたことから、製造例１の黒米加水分解物溶液が毛乳頭細胞のＳＣＦ分泌を促進して、メラノサイトの遊走活性を促進することが示唆される。

【0055】

図１〜３に示す１日及び２日培養後のWellの状態を撮影した写真を画像解析ソフト（ImageJ）に取り込み、Wound
Field全面積に対する遊走されたメラノサイトの細胞面積が占める割合を算出した。算出式は以下の通りである。
デジタル画像からの細胞面積占有率（％）＝（Wound Field中のメラノサイト細胞画像のピクセル数）／（Wound Fieldのピクセル数）×１００

【0056】

Wound Fieldにおけるメラノサイト細胞の面積占有率の算出結果を表２に示す。
［表２］

表２に示すように、試料２（製造例１の黒米加水分解物溶液を添加した毛乳頭細胞培養上清）は試料１（陰性対照）と比較して、すぐれたメラサイト遊走活性効果を示すことも画像解析から明らかとなった。

【0057】

以上のように、本願発明の有色素米の加水分解物は、ＴＧＦ−β１の曝露下でも、毛乳頭細胞によるＳＣＦの合成を促進する効果を発揮し、かつ、メラノサイトの遊走活性を促進することから、この有色素米の加水分解物を配合した化粧料は、従来のものと比較して、格段にすぐれた毛髪の色調変化（色素異常・脱失による白化等）の予防・改善効果を発揮する。従って、ＳＣＦ合成促進剤及びメラノサイト遊走活性促進剤は、育毛・養毛用、髪質改善用、染毛用又は白髪予防・改善用等の様々な用途の毛髪化粧料の配合剤として極めて有用である。

【図1】

【図2】

【図3】