特許 6185157 多機能組成物並びにその作製方法及び使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6185157

(24)【登録日】2017年8月4日

(45)【発行日】2017年8月23日

(54)【発明の名称】多機能組成物並びにその作製方法及び使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/7016 20060101AFI20170814BHJP

   A61K 31/734 20060101ALI20170814BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20170814BHJP

   A61K 47/18 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 1/14 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 19/10 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 25/20 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 15/00 20060101ALI20170814BHJP

   A61P 3/02 20060101ALI20170814BHJP

   A23L 33/21 20160101ALI20170814BHJP

   A61K 36/02 20060101ALN20170814BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/7016

   A61K31/734

   A61K47/26

   A61K47/18

   A61P3/10

   A61P1/14

   A61P3/04

   A61P17/00

   A61P19/10

   A61P25/20

   A61P15/00

   A61P3/02

   A23L33/21

   !A61K36/02

【請求項の数】13

【全頁数】38

(21)【出願番号】特願2016-515642(P2016-515642)

(86)(22)【出願日】2014年5月30日

(65)【公表番号】特表2016-521686(P2016-521686A)

(43)【公表日】2016年7月25日

(86)【国際出願番号】CN2014078886

(87)【国際公開番号】WO2014190935

(87)【国際公開日】20141204

【審査請求日】2016年3月2日

(31)【優先権主張番号】201310207729.1

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310207747.X

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310207750.1

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310207755.4

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310208184.6

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310208165.3

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310208145.6

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310208130.X

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201310207752.0

(32)【優先日】2013年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】514005456

【氏名又は名称】蘇州科景生物医薬科技有限公司

(73)【特許権者】

【識別番号】515330683

【氏名又は名称】ピンフー サイスケープ バイオ―ファーマシューティカル テクノロジー カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＰＩＮＧＨＵ ＳＣＩＳＣＡＰＥ ＢＩＯ―ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＴＥＣＮＯＬＯＧＹ ＣＯ．， ＬＴＤ．

(73)【特許権者】

【識別番号】515330694

【氏名又は名称】ベイジン バイラニン バイオテクノロジー カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＢＥＩＪＩＮＧ ＢＡＩＬＥＮＩＮＧ ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＣＯ．， ＬＴＤ．

(74)【代理人】

【識別番号】100122471

【弁理士】

【氏名又は名称】籾井 孝文

(72)【発明者】

【氏名】ヂャン， チォンガン

(72)【発明者】

【氏名】リー， ヂーフイ

(72)【発明者】

【氏名】リー， ユー

【審査官】 常見 優

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１１／１０８７６２（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開平１１−１５８０７５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１１−０２１０１２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０５−２７９３７４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０２−１９６７８０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平１０−０１７４７８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０５−１８６３５３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０００−１９８７３６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００６−２０６４７４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０９−２０８４７５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０３−１７２１５５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第００／０５５３４９（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ３１／００−３３／４４

９／００− ９／７２

４７／００−４７／６９

Ａ６１Ｐ １／００−４３／００

Ａ２３Ｌ ５／４０− ５／４９

３１／００−３３／２９

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

海藻由来の物質と酵素阻害剤とを含む経口投与又は胃腸投与用の多機能組成物であって、該多機能組成物における酵素阻害剤の質量パーセントは０．００１％以上であり、該海藻由来の物質はトレハロース、アルギン酸及びアルギン酸塩からなる群から選択されるもの、又はそれらのいくつかの混合物であり、酵素は胃腸管における該海藻由来の物質を分解するものであり、該酵素阻害剤は該酵素が効果を発揮するのを防ぐ物質であって、バリダマイシン、ヘキサコナゾール及びトレハゾリンからなる群から選択されるもの、又はそれらのいくつかの混合物である、多機能組成物。

【請求項2】

前記トレハロースが、トレハロース異性体の混合物である、請求項１に記載の多機能組成物。

【請求項3】

前記酵素阻害剤が、バリダマイシンである、請求項１又は２に記載の多機能組成物。

【請求項4】

前記トレハロースは、含水化合物である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の多機能組成物。

【請求項5】

請求項１〜４のいずれか一項に記載の多機能組成物の作製方法であって、該多機能組成物が、粉末状の海藻由来の物質と酵素阻害剤とを直接均一に混合することにより調製される粉末組成物であり、
該海藻由来の物質が、トレハロース、アルギン酸及びアルギン酸塩からなる群から選択されるもの、又はそれらのいくつかの混合物であり、
該酵素阻害剤が、バリダマイシン、ヘキサコナゾール及びトレハゾリンからなる群から選択されるもの、又はそれらのいくつかの混合物である、作製方法。

【請求項6】

請求項１〜４のいずれか一項に記載の多機能組成物の作製方法であって、該多機能組成物が、海藻由来の物質の溶液と酵素阻害剤の溶液とを混合することにより、又は、粉末状の該海藻由来の物質と該酵素阻害剤とを直接均一に混合することにより調製される粉末組成物を溶解することにより調製される液体組成物であり、
該海藻由来の物質が、トレハロース、アルギン酸及びアルギン酸塩からなる群から選択されるもの、又はそれらのいくつかの混合物であり、
該酵素阻害剤が、バリダマイシン、ヘキサコナゾール及びトレハゾリンからなる群から選択されるもの、又はそれらのいくつかの混合物である、作製方法。

【請求項7】

多機能製品の作製における請求項１〜４のいずれか一項に記載の多機能組成物の使用。

【請求項8】

前記多機能製品が、糖尿病用の糖代用製品、血糖を下げる製品、便通を良くするとともに消化管をきれいにする製品、痩身製品、美容製品、骨粗鬆症を改善する製品、睡眠を改善する製品、月経障害を改善する製品、及び抗疲労製品、又はこれらの機能を２つ以上同時に発揮する混合製品である、請求項７に記載の使用。

【請求項9】

前記多機能製品が、前記多機能組成物を含有する健康管理製品又は薬物であり、該多機能組成物が有効健康管理成分又は有効医薬成分として働く、請求項７又は８に記載の使用。

【請求項10】

前記健康管理製品又は前記薬物が丸薬、カプセル剤、粉剤、顆粒剤又は経口液剤の形態である、請求項９に記載の使用。

【請求項11】

前記多機能製品が、前記組成物を含有する機能性食品である、請求項７又は８に記載の使用。

【請求項12】

前記機能性食品がトローチ剤、飲用固形物又は飲用液体の形態である、請求項１１に記載の使用。

【請求項13】

海藻由来の物質がグルコースに分解されず、そのままでヒトの体内にて機能を発揮する製品の作製における請求項１〜４のいずれか一項に記載の多機能組成物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、機能性製品、薬物及び健康管理の分野、特に多機能組成物並びにその作製方法及び使用に関するものである。

【背景技術】

【0002】

海に住む藻類の総称である海藻は通常、海底又は一部の固体構造物に固着している。海藻は基本細胞で構成される単純な個々の植物又は長く連なった植物であり、大量に出現すると茎部又は葉部を判別することが難しい水生植物である。海藻と呼ばれる生物は数多くの種を包含しており、形状が大きく異なり、多くの生物種に属する。これらの生物の共通点は、海水中に生息しており、体内の色素を用いた光合成によって有機物を合成することができることである。最も一般的な大型海藻は緑藻類、紅藻類及び褐藻類等の海草類である。海藻は浅海にて高密度に増殖し、水深５０メートル未満の沿岸部に明確な生息域を形成する。高潮線より上で生育する海藻は空気に曝されることが多くなる。他方、低潮線より下で生育する海藻、例えばヒバマタ属（Fucus）、マクロシスチス属（Macrocystis）、ネレオシスチス属（Nereocystis）及びラミナリア属（Laminaria）の集団は長時間空気に曝されることなく、そのため海岸付近で生育することができない。これらは１８℃未満でしか繁殖することができず、冷水域にのみ分布する。

【0003】

科学及び技術の発展により、産業及び生活における海藻の利用価値についての理解が深まっている。広範な供給源、低価格及び他の利点から、海藻由来の抽出物が様々な分野において注目されてきている。この抽出物は例えば、トレハロース、藻多糖類、アルギン酸及びそれらの無機塩である。

【0004】

トレハロースは１，１−グルコシド結合（glucosidic bond）を有する２つのグルコース分子からなる非還元糖類である。トレハロースには、３つの異性体、すなわちトレハロース（α，α）、イソトレハロース（β，β）及びネオトレハロース（α，β）がある。市販のトレハロースは通例、これら３つの異性体の混合物であり、その殆どがトレハロース（α，α）である。トレハロースは自然界において多くの動物、植物及び微生物に広く存在しており、食品として使用することができる。例えばトレハロース含量は日常生活にて一般的に見られるキノコ、海藻、マメ、小エビ、パン、ビール及び酵母発酵食品において比較的高い。トレハロースは天然の食用甘味料として最も一般的に使用されている。またトレハロースは、非常に高い温度、非常に低い温度、高い浸透圧、水分が喪失した乾燥条件といった厳しい環境条件下にて細胞表面上に特有の保護膜を形成することができることから、生体に対する素晴らしい保護効果を有する。特にトレハロースはタンパク質分子を変性及び失活から効果的に保護し、生体の生命過程及び生物学的特徴を維持する。多くの種における外部の過酷な環境に対する顕著な耐性は体内の大量のトレハロースに直接関係する。かかる特有の機能的特徴から、トレハロースは細胞活性（cell viability）を維持するとともに保湿する化粧品における重要な成分となり、またタンパク質、酵素、ワクチン及び他の生物学的製品に対する良好な活性保護剤になっている。その上、トレハロースは食品の劣化を防ぎ、食品の新鮮な風味を保ち、食品の質を向上することができる固有の食品成分としても働くことができる。この特徴がこの化合物の用途を大幅に拡大させている。トレハロースと同様に、藻多糖類は全て海藻由来の安全でかつ信頼性の高い天然糖類である。

【0005】

アルギン酸は淡黄色の臭いの殆どない粉末である。アルギン酸は単糖由来のウロン酸の線形重合により生成される多糖類である。アルギン酸は主に、昆布、ホンダワラ、アスコフィルム・ノドスム（yellow tang）及び真昆布等の褐藻類から生じる。現在のところ、アルギン酸は製薬業界において接着剤及び崩壊剤に使用されている。アルギン酸の無機塩であるアルギン酸ナトリウム、アルギン酸カルシウム及びアルギン酸カリウムは天然のアルギン酸に類似している。

【0006】

豊富な藻類抽出物を利用することができるより多くの分野を探求することが専門家の課題である。

【発明の概要】

【0007】

本発明の主の目的は、いくつかの新たな分野における海藻抽出物の特別な用途を導入すること、及び海藻抽出物に基づき多機能組成物を提供することである。本組成物には海藻由来の物質と酵素阻害剤とが含まれ、多機能組成物における酵素阻害剤の質量パーセントが０．００１％以上であり、海藻由来の物質が天然の藻糖類、アルギン酸及びアルギン酸塩からなる群の１つ又は複数であり、酵素阻害剤が海藻由来の物質を分解する酵素の阻害剤である。

【0008】

天然の藻糖類はトレハロース若しくは藻多糖類又はそれらの混合物である。天然の藻糖類の含水化合物及び異性体も含まれる。

【0009】

酵素阻害剤は、バリダマイシン、ヘキサコナゾール、トレハゾリン、２Ｒ，５Ｒ−ジメチロール−３Ｒ，４Ｒ−ジヒドロキシピロール、トレハロスタチン、サルボスタチン、スイダトレスチン（Suidatrestin）及びＭＤＬ２５６３７からなる群の１つ又は複数である。

【0010】

アルギン酸塩としては、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸カリウム及びアルギン酸カルシウムからなる群の１つ又は複数が挙げられる。

【0011】

本発明の別の目的はこの多機能組成物を作製する方法を提供することである。多機能組成物は粉末状の海藻由来の物質と酵素阻害剤とを直接均一に混合することにより調製される粉末組成物である。

【0012】

多機能組成物は、海藻由来の物質の溶液と酵素阻害剤の溶液とを混合することにより、又は粉末組成物を溶解することにより調製される液体組成物である。

【0013】

本発明の別の目的は、多機能製品の作製における多機能組成物の使用を提供することである。

【0014】

多機能製品としては、糖尿病用の糖代用製品、血糖を下げる製品、便通を良くするとともに消化管をきれいにする製品、痩身製品、美容製品、骨粗鬆症を改善する製品、睡眠改善製品、月経障害を改善する製品、及び抗疲労製品、又は少なくとも２つの上述の機能を同時に発揮する混合製品が挙げられるが、これらに限定されない。

【0015】

多機能製品は、上記多機能組成物を含有する健康管理製品又は薬物であり、該多機能組成物が健康管理製品又は薬物の有効成分である。

【0016】

健康管理製品又は薬物は丸薬、カプセル剤、粉剤、顆粒剤又は経口液剤の形態である。

【0017】

上記製品は上記組成物を含有する機能性食品とすることもできる。

【0018】

機能性食品はトローチ剤、飲用固形物又は飲用液体の形態である。

【0019】

本発明において提供される多機能組成物は資源が多岐にわたり、また低価格である。多機能組成物は海藻から作製することができ、人体に対する毒性及び副作用がない。多機能組成物を様々な経口形態の製品にするための製造プロセスは単純である。さらに実験から、本発明の組成物から作製された多機能製品は、血糖を下げ、腸を弛緩させるとともに消化管をきれいにし、体重を減少させ、美を保つとともに若さを維持し、骨粗鬆症を改善し、睡眠を改善させ、月経障害を改善し、疲労に耐える効能があり、糖尿病、便秘、便秘により引き起こされる腹部膨満及び腹痛、肥満、カルシウム欠乏症、不眠症、並びに月経障害を治療及び軽減するのに使用することができることが分かった。多機能製品は迅速に効果を生み、緩やかに作用し、明確な用量−効果関係性を持ち、毒性及び副作用を生じない。多機能製品は患者における簡便な投与のために複数の経口形態に配合することができ、そのため患者にとって安全でかつ信頼性の高い多機能製品である。

【図面の簡単な説明】

【0020】

【図1】痩身実験に参加したボランティアにおける体重変化の平均を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0021】

海藻系物質は我々の日常食品に広く存在している。海藻由来の物質におけるトレハロース又は藻多糖類は食品を風味豊かにするための安全でかつ信頼性の高い天然の糖として使用することもできる。どのような形をとるかを問わず、食品中のその含量はごく僅かであり、また限られた量が人体に取り込まれる。その中で、本発明者らは人体におけるその変化を分析している。海藻由来の物質は人体に取り込まれた後、胃及び腸管内での酵素（海藻由来の物質を分解する酵素）の作用のもとでグルコースへと分解され、そのグルコースが腸管を通して人体へと吸収されることが見出された。海藻由来の物質は食品中にほんの僅かな量しか含まれていないことから、人体における海藻由来の物質の変化は見落とされることが多い。

【0022】

上記の研究に基づき、本発明者らは、海藻由来の物質が胃及び腸内にて分解されない場合に何が起きているのか、またどのような因子が海藻由来の物質を分解するのを防ぐことができるのかを調べた。結果として、海藻由来の物質を酵素（海藻由来の物質を分解する酵素）の阻害剤と混ぜ合わせた後、人体に投与すると、初めに酵素阻害剤が胃及び腸内にて上記酵素と結合し、海藻由来の物質が分解されるのが避けられ、そのため海藻由来の物質が（分解された後のグルコース形態ではなく）元々の形態で腸管に入ることができることが見出された。また、腸管にて分解されなかった海藻由来の物質は実際に人体において顕著な変化を生じることも見出された。例えば、本組成物は血糖を下げ、腸を弛緩させるとともに消化管をきれいにし、体重を減少させ、美を保つとともに若さを維持し、骨粗鬆症を改善し、睡眠を改善させ、月経障害を改善し、疲労に耐える効果等の予期せぬ効能を有することが見出された。本発明者らによって実験を通じてこれらの顕著な効能が更に確認された。

【0023】

そのため本発明はまず、海藻由来の物質と酵素阻害剤とを含有する多機能組成物を提供する。本組成物における酵素阻害剤の質量パーセントは０．００１％以上である。

【0024】

本発明に有用な海藻由来の物質としては、トレハロース、藻多糖類、アルギン酸、並びにアルギン酸ナトリウム、アルギン酸カルシウム及びアルギン酸カリウム等のその無機塩が挙げられる。結晶水を含む又は含まない上述の海藻由来の物質のどちらも本発明に使用することができる。本発明では、上記で挙げられた単一種の海藻由来の物質を使用しても又はそれらのいくつかを任意の比率で組み合わせて使用してもよい。

【0025】

多くの酵素阻害剤を本発明に使用することができ、酵素阻害剤としては、既知のバリダマイシン、ヘキサコナゾール、トレハゾリン、２Ｒ，５Ｒ−ジメチロール−３Ｒ，４Ｒ−ジヒドロキシピロール（ＤＭＤＰ）、トレハロスタチン、サルボスタチン、スイダトレスチン、トレハリン（Trehalin）若しくはＭＤＬ２５６３７、若しくはそれらのいくつかの組合せ、又はこれらの物質の類似物及びそれらの混合物、又は直接適用することができ、上記物質を生成することが可能な対象（微生物及び植物を含む）、例えばバリダマイシンを生成することが可能なストレプトマイセス・ハイグロスコピカス（Streptomyces hygroscopicus）又はヘキサコナゾールを生成することが可能な生物が挙げられる。

【0026】

特に、バリダマイシンは８つの異性体（異性体Ａ〜異性体Ｈ）を有し、アクチノマイセス（Actinomycetes）によって生成される化合物であり、或る特定の選択性を有する殺菌性抗生物質である。バリダマイシンは細菌によって容易に吸収され、細胞内に迅速に伝播して、いくつかの酵素が細菌における糖類の代謝に作用するのを阻害し、更には細菌の成長及び発達を干渉（interfere）阻害することができる。ストレプトマイセス・ハイグロスコピカスのジンガンゲンシス（jinggangensis）変種によって生成された水溶性グルコシドの混合物はペリクラリア・ササキイ（Pellicularia sasakii：稲紋枯病菌）に対する最大の活性を有する。バリダマイシン異性体の中でも、純粋なバリダマイシンＡは白色粉末であり、固定の融点を持たない。バリダマイシンＡは９５℃〜１００℃で軟化し、１３０℃〜１３５℃で分解する。さらにバリダマイシンＡは水溶性である。バリダマイシンＡは、ラットにおいて２０ｇ／ｋｇを超える急性経口毒性（ＬＤ_５０）を有するが、ハナバチ及び他の有益な昆虫に対する毒性はない。特にバリダマイシンＡは細菌によって容易に吸収され、細胞内に伝播され、細菌の正常な成長及び発達を乱し阻害することで、治療に関与することができる。本発明では、１つの異性体又はいくつかの異性体の混合物を使用してもよい。市販のバリダマイシン関連製品には主にバリダマイシンＡが含まれている。

【0027】

ヘキサコナゾールは全身性作用物質であり、子嚢菌類（Ascomycotina）、担子菌類（Basidiomycotina）及び不完全菌類（Deuteromycotina）によって誘導される病害を効果的に予防及び治療することができる。特にヘキサコナゾールは、うどんこ病、さび病、ウリ科植物の黒星病、褐斑病、炭疽病、紋枯病及び稲麹病等の担子菌類及び子嚢菌類によって誘導される病害を予防及び治療するのに良好な役割を果たす。他方、トレハゾリンは殺虫活性及び抗真菌活性を有し、トレハラーゼに対する高度に特異的な阻害剤である。またバリダマイシン、ヘキサコナゾール及びトレハゾリンは全て、酵素阻害剤であり、現在稲紋枯病、稲麹病、小麦紋枯病（wheat sharp eyespot）、綿花、朝鮮人参、マメ及びメロンの立ち枯れ病、並びにトウモロコシすす紋病及びトウモロコシごま葉枯病の予防及び治療に使用されている。加えてこれらは、バッタ等の害虫を予防するとともに制御するのにも役立つ。

【0028】

上述の海藻由来の物質及び酵素阻害剤は全て市販されている。

【0029】

本発明では、粉末状の海藻由来の物質と酵素阻害剤とを直接均一に混合して、粉末組成物を形成するか、又は海藻由来の物質の溶液と酵素阻害剤の溶液とを混合して、液体組成物を形成する。代替的には、粉末組成物を溶解して液体組成物を提供する。さらに粉末組成物又は液体組成物を、従来法により丸薬、粉剤、顆粒剤、カプセル剤又は経口液剤の形態の健康管理製品又は薬物にしても、トローチ剤、飲用固形物又は飲用液体の形態の機能性食品にしてもよい。

【0030】

本発明における多機能組成物は追加の機能性製品としてヒトに与えられる。人体には投与の際に海藻由来の物質が追加で与えられる。その一方で、海藻由来の物質は酵素阻害剤が存在するために酵素によって分解されず、腸管内で分解されない形態を維持することから、人体において特別な健康管理機能及び医学的機能を発揮する。

【0031】

これより本発明を特定の実施例を参照して更に詳細に記載及び説明するが、これらの実施例は本発明を限定するものでは決してない。本明細書の教示に基づき当業者によって本発明の実施例に対して為されたいずれの変更も本発明の特許請求の範囲に規定された範囲内にあると考える。

【0032】

実施例で使用される生物学的材料は広範な供給源から得られ、法律及び倫理を犯すことなく入手可能な生物学的材料は全て、実施例に示されるように交換して使用することができる。特に指示のない限り、本明細書で用いられる方法は全て従来的なものである。また特に指定のない限り、同じ名称の材料又は試薬は実施例を通じて実質的に同じものである。

【実施例】

【0033】

実施例１：本発明における多機能組成物
原料をそれぞれ、表１に示される海藻由来の物質と酵素阻害剤との重量比に従って秤量した。原料を直接混合して粉末組成物を形成した。代替的に原料を混合した後、水に溶解して組成物の溶液を形成した。実施例で使用されるバリダマイシンはバリダマイシンＡ〜バリダマイシンＨ又はそれらのいくつかの混合物の１つとすることができた（酵素に対する異なる異性体の阻害効果には実際に差は見られなかった）が、バリダマイシンＡを主に使用した。トレハロース（α，α）、イソトレハロース（β，β）及びネオトレハロース（α，β）の混合物をトレハロースとして使用した。

【0034】

【表1】

【0035】

さらに固体組成物又は組成物の溶液を、従来法により製剤にすることができるが、ここには挙げていない。

【0036】

実験例２：本発明の多機能組成物のｉｎ ｖｉｖｏ吸収
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0037】

本実験例で使用される組成物は組成物１の溶液とした。特に１５ｇのトレハロース及び３ｍｇのバリダマイシンを取った後、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解して組成物１の溶液を得て、これを後の使用のために保存した。

【0038】

２． 方法
３日間通常どおり飼育した後、水を十分に与えながらマウスを１２時間絶食させた。次いでマウスを血糖に応じて４群、すなわちブランク対照群、投与群、並びに陰性対照群１及び陰性対照群２にランダムに分けた。投与群のマウスには本実験例にて調製した組成物１の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、ブランク対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。加えて、陰性対照群１及び陰性対照群２のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）及びバリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの同用量で胃内投与した。投与前、並びに投与の１０分後、２５分後、４０分後及び６０分後の血糖値をそれぞれ測定し、結果を表２に示した。

【0039】

【表2】

【0040】

表２のデータから、ブランク対照群、陰性対照群２及び投与群の間には、投与の前後に関係なく血糖値に有意差はないのに対して、陰性対照群１の血糖値はブランク対照群と比較して有意に増大し、その後投与後の後期ではいくらか低下したことが示された。これはトレハロースが二糖類の一種であったためであった。単独で使用すると、トレハロースは胃及び腸内の酵素によってグルコースへと分解された後、血中に吸収され、その結果血糖値が増大する。このことから、陰性対照群１の血糖値は他の群よりも明らかに高くなった。投与後の後期では、ｉｎ ｖｉｖｏ糖代謝に起因して、血糖値が幾らか低下した。他方、トレハロースとバリダマイシン（酵素阻害剤）とを一緒に使用しても（投与群）、又は酵素阻害剤のみを使用しても（陰性対照群２）、血糖値は明らかに上昇しなかった。このことから一つとして、酵素阻害剤は血糖値には影響を及ぼさないことが示された。もう一つとしてトレハロースは、血中に吸収されることで血糖値を増大させるグルコースへとｉｎ ｖｉｖｏにて変換されないことが示された。つまり、酵素阻害剤が酵素によるトレハロースの分解を防ぐことで、トレハロース自体が胃腸管へと入った。

【0041】

実施例３：本発明の多機能組成物の適用
本実施例で使用される組成物の溶液は下記のように調製した。
組成物１の溶液：１５ｇのトレハロースと３ｍｇのバリダマイシンとを秤量した後、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解することで、組成物１の溶液を調製し、これを後の使用のために保存した。
組成物２の溶液：３００ｇのトレハロースと３ｍｇのバリダマイシンとを秤量し、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解することで、組成物２の溶液を調製し、これを後の使用のために保存した。
組成物３の溶液：６００ｇのトレハロースと３ｍｇのバリダマイシンとを秤量し、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解することで、組成物３の溶液を調製し、これを後の使用のために保存した。
組成物４の溶液：１５ｇのトレハロースと３ｍｇのヘキサコナゾールとを秤量し、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解することで、組成物４の溶液を調製し、これを後の使用のために保存した。
組成物５の溶液：１５ｇのトレハロースと３ｍｇのトレハゾリンとを秤量し、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解することで、組成物５の溶液を調製し、これを後の使用のために保存した。
組成物６の溶液：１５ｇの藻多糖類と３ｍｇのバリダマイシンとを秤量し、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解することで、組成物６の溶液を調製し、これを後の使用のために保存した。
組成物７の溶液：１５０ｇのアルギン酸と３ｍｇのバリダマイシンとを秤量し、１００ｍＬの医療用滅菌水に溶解することで、組成物７の溶液を調製し、これを後の使用のために保存した。

【0042】

Ｉ．血糖を下げる働きがある糖尿病用の糖代用製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．糖尿病マウスにおける血糖の低下に対する組成物の効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0043】

ここでも組成物１の溶液〜組成物７の溶液を本実施例で使用した。

【0044】

２． 方法
Ｉ．モデル化：実験を始める前に、０．１ｍｏｌ／Ｌのクエン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ４．５）を準備した。このバッファーをオートクレーブにて滅菌した後、４℃の冷蔵庫内に保存した。モデル化を始める前に、このクエン酸ナトリウムバッファーを用いて、氷浴にて新たに１０ｍｇ／ｍＬのストレプトゾトシン（ＳＴＺ）溶液を調製した。マウスを３日間通常どおり飼育した後、マウスに５日間連続して１日１回新たに調製したＳＴＺ溶液を４５ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内投与した。

【0045】

ＩＩ．治療：モデルの確立に成功した後、ストレプトゾトシン溶液を投与しなかったマウスを或る群、すなわち正常群に配し、通常どおり飼育した。糖尿病マウスは血糖値に応じて、モデル群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３の１１群にランダムに分けた。投与群１〜投与群７のマウスにはそれぞれ、本実施例にて調製した組成物１の溶液〜組成物７の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。モデル群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、バリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。この投与は毎日午前９時及び午後９時に行い、血糖値は１週間おきに５週間、Rocheの血糖測定器によって確認した。結果を表３．１に示す。

【0046】

【表3】

【0047】

表３．１のデータからモデル群と正常群との間に血糖値の有意差が示され、このことから糖尿病マウスモデルの確立に成功したことが示唆された。陰性対照群１〜陰性対照群３の血糖値はモデル群と同程度であり、このことから単一成分のみの使用では血糖低下には影響がないことが示された。これに対して、投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７の血糖値は、モデル群よりも有意に低かった。すなわち組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は全て、糖尿病マウスにおいて血糖値を下げることができる。投与群３はモデル群及び陰性対照群１〜陰性対照群３と血糖値に差はなく、このことから組成物３には血糖を下げる働きがなかったことが示唆された。これは酵素阻害剤の含量が少なすぎたためであった。

【0048】

投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７のマウスの血糖値は陰性対照群１〜陰性対照群３よりも低く、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７が実際に糖尿病マウスの血糖値を下げることが示された。すなわち、組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は血糖を下げる働きがあり、投与の１週間後には働いた。言い換えれば、これらの組成物は投与の１週間後には血糖低下に対する効果を生じた。

【0049】

投与群１と投与群６との結果の比較にて、トレハロースを含む投与群１が藻多糖類を含む投与群６よりも血糖値が低かったことを容易に見出すことができ、このことから２つの物質はどちらも海藻由来の物質ではあるが、トレハロースは藻多糖類よりも血糖低下に対する効果が良好であることが示された。一方、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、３つ全てが酵素阻害剤ではあるが、バリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも血糖値が低かったことが明らかとなった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が吸収されることで、血糖値を下げることができた。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、血糖値に対する効果はバリダマイシンの投与を伴う投与群１よりも低かった。

【0050】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を増大させることで、血糖を下げる効果がゼロになるまで徐々に低減することが示された。かかる事実から、酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより血糖を下げる効果がますます悪化することが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ比が２０００００：１に達すると、組成物は血糖を下げる効果がなくなり、このことから酵素阻害剤が占める質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはならないことが示唆された。

【0051】

（ＩＩ）．正常なヒトにおける血糖値に対する効果
６名の健常なボランティアを一晩絶食させた後、空腹時血糖について測定した。次いで、表３．２に述べられるように、ボランティアに２００ｍＬの組成物１の溶液、又は２００ｍＬのトレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、又は２００ｍＬのバリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）、又は２００ｍＬの蒸留水を経口投与した。ボランティアごとの血糖値を投与前、並びに投与の３０分後、６０分後及び１２０分後に調べた。結果を表３．２に示した。

【0052】

【表4】

【0053】

表３．２のデータから、蒸留水又はバリダマイシンの溶液の投与には血糖値に対する影響がなく、トレハロースの溶液の投与が血糖値を有意に上昇させたことが示された。他方、組成物１の溶液は血糖値の増大を抑えるばかりか、血糖値をいくらか低下させた。投与の１２０分後、組成物１の溶液を摂取したボランティアは血糖値が投与前の血糖値まで戻り、ボランティアによっては投与前よりも低い血糖値を示したものさえいた。これらは組成物１が実際に正常なヒトの血糖値の上昇を抑えることが可能であり、また血糖を下げる軽い効果を有することを示唆するものであった。

【0054】

（ＩＩＩ）．ヒト糖尿病における治療についての短期実験
６名のＩＩ型糖尿病患者を一晩絶食させた後、空腹時血糖値について測定した。次いで、表３．３に述べられるように、患者に２００ｍＬの組成物１の溶液、又は２００ｍＬのトレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、又は２００ｍＬのバリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）、又は２００ｍＬの蒸留水を経口投与した。患者ごとの血糖値を投与前、並びに投与の３０分後、６０分後及び１２０分後に調べた。結果を表３．３に示した。

【0055】

【表5】

【0056】

表３．３のデータから、蒸留水及びバリダマイシン溶液の投与にはＩＩ型糖尿病患者の血糖値に対する影響がなく、トレハロースの溶液の投与が血糖値を有意に上昇させることが示された。他方、組成物１の溶液は血糖値の増大を抑えるばかりか、血糖値をいくらか低下させた。投与の１２０分後、組成物１の溶液を服用したＩＩ型糖尿病患者は血糖値が投与前の血糖値まで戻り、患者によっては投与前よりも低い血糖値を示したものさえいた。これらは組成物１が実際にＩＩ型糖尿病患者の血糖値の上昇を抑えることが可能であり、また血糖を下げる軽い効果を有することを示唆するものであった。

【0057】

（ＩＶ）．ヒト糖尿病における治療についての長期実験
６名のＩＩ型糖尿病患者を一晩絶食させた後、空腹時血糖値について測定した。次いで、表３．４に述べられるように、患者に２００ｍＬの組成物１の溶液、又は２００ｍＬのトレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、又は２００ｍＬのバリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）、又は２００ｍＬの蒸留水を経口投与した。患者ごとの血糖値を投与前、並びに投与の１日後、１週間後、２週間後及び１ヶ月後に調べた。結果を表３．４に示した。

【0058】

【表6】

【0059】

表３．４のデータから、蒸留水及びバリダマイシン溶液の投与にはＩＩ型糖尿病患者の血糖値に対する影響がなく、組成物１の溶液の投与が血糖値の上昇を効果的に抑えることが示された。治療の１ヶ月後、組成物１の溶液を服用したＩＩ型糖尿病患者は血糖値が正常なヒトの血糖値近くまで戻り、このことから組成物１の長期的使用が実際にＩＩ型糖尿病における状態を改善することが示唆された。

【0060】

ＩＩ．便通を良くし、消化管をきれいにする製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．正常マウスにおける腸蠕動に対する本発明の多機能組成物の効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0061】

組成物１の溶液〜組成物７の溶液を本実施例で使用した。

【0062】

０．１ｇ／ｍＬの炭素粉末の懸濁液も使用した。詳細には、１ｇの炭素粉末を１０ｍＬの生理食塩水に添加した後、均一に懸濁させた。

【0063】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、１８時間〜２４時間マウスに食餌を与えず、水を与えた。体重によって、マウスを１１群、すなわちブランク対照群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３にランダムに分けた。投与群１〜投与群７のマウスにはそれぞれ、組成物１の溶液〜組成物７の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、ブランク対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、バリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍｌ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与の２０分後〜３０分後に、全てのマウスに炭素粉末の懸濁液を体重１０ｇ当たり０．２ｍＬの用量で胃内投与した。炭素粉末懸濁液の投与の１５分後〜２０分後、マウスを頚椎脱臼にて屠殺した後、迅速に切開して小腸を取り出した。炭素粉末の移動距離（炭素粉末の最前端から十二指腸の心臓に近い方の端部までの距離）及び小腸の全長を測定した。結果を表４．１に示した。

【0064】

【表7】

【0065】

表４．１のデータから、陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスの小腸での炭素粉末の移動距離（炭素粉末の移動距離）はブランク対照群と同程度であることが示された。また小腸の全長に対する炭素粉末の移動距離の比は陰性対照群１〜陰性対照群３とブランク対照群とでいずれも何ら有意な差を示さなかった。これらは本組成物に由来する単一成分の使用のみでは腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにするのには影響がないことを示唆するものであった。投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７における炭素粉末の移動距離はブランク対照群よりも長く、その差は有意なものであった。その上、これらの投与群における小腸の全長に対する炭素粉末の移動距離の比もブランク対照群よりも有意に高かった。すなわち、組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は全て炭素粉末がより長く移動するように小腸を平滑にすることができる。投与群３における炭素粉末の移動距離はブランク対照群及び陰性対照群１〜陰性対照群３と差はなかった。また、小腸の全長に対する炭素粉末の移動距離の比についてもこの群とブランク対照群及び陰性対照群１〜陰性対照群３との間に明確な差はなかった。これらは全て、組成物３は酵素阻害剤の含量が少なすぎるために小腸を平滑にする役割を果たすことができないことを示唆するものであった。

【0066】

要するに投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７のマウスの小腸における炭素粉末の移動距離は陰性対照群１〜陰性対照群３よりも長く、小腸の全長に対する炭素粉末の移動距離の比もまた同様であり、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は実際に炭素粉末がより長く移動するように小腸を平滑にすることができることが示唆された。言い換えれば、これらの組成物は腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにする役割を果たすことができる。さらにこれらの組成物は投与後２０分〜３０分で効果が現れ、腸を弛緩させるとともに消化管をきれいにする効能が達成される。個々の差から、投与群２のマウスの小腸における炭素粉末移動距離は陰性対照群１と同程度の長さであったが、投与群２における小腸の全長に対する炭素粉末の移動距離の比は陰性対照群１よりも有意に高かった。このことは組成物１又は組成物２は実際に腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにする効果があるという結論を支持すると考えられた。

【0067】

投与群１と投与群６との比較にて、トレハロースを含む投与群１は藻多糖類を含む投与群６よりも炭素粉末の移動距離が長かったことを容易に見出すことができ、このことから２つの物質はどちらも海藻由来の物質ではあるが、トレハロースは藻多糖類よりも腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにする効果が良好であることが示された。その一方で、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、３つ全てが酵素阻害剤ではあるが、バリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも炭素粉末の移動距離が長いことが明らかとなった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が小腸に入ることで、腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにした。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにする効果はバリダマイシンの投与を伴う投与群１よりも低かった。

【0068】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を増大させることで、腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにする効果がゼロになるまで徐々に低減することが示された。かかる事実から、酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにする効果がますます悪化することが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ比が２０００００：１に達すると、組成物は腸を弛緩させるとともに腸管をきれいにする効果がなくなり、このことから酵素阻害剤が占める質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはなり得ないことが示唆された。

【0069】

（ＩＩ）．正常マウスにおける排便量に対する効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0070】

組成物の溶液：本実施例にて調製した組成物１の溶液を使用した。

【0071】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、４時間マウスに食餌を与えず、水を与えた。体重によって、マウスを２群、すなわち対照群及び投与群にランダムに分けた。投与群のマウスには本実施例にて調製した組成物１の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与の２０分後〜３０分後に、マウスに自由に食餌を与えた。投与後１時間〜３時間での各群のマウスの排便量（各群のマウスの排便量の平均）を記録し、結果を表４．２に示した。

【0072】

【表8】

【0073】

表４．２のデータから、対照群のマウスと投与群のマウスとは投与前では同程度の糞便粒数であったが、投与の１時間〜２時間後には投与群のマウスにおける糞便粒数は対照群のマウスよりも明らかに増えたことが示された。特にこの差は投与の１時間後に最大に達した、すなわち投与群における排便量は対照群より４．３倍多かった（対照群の０．７に対して投与群の２．６）。さらに組成物１は投与の１時間後には正常マウスにおいて便通を促し、効果が現れることが証明された。投与の３時間後には投与群のマウスにおける排便量は対照群のマウスよりも少なかった。これは腸管内の糞便が投与後１時間〜２時間で殆ど排泄され、腸管内に残る糞便が大幅に減ったためであった。したがって、この時点での投与群に見られる排便量が対照群よりも少なくなった。糞便の状態の観察から、投与群のマウスの糞便は黄色がかっていたことが明らかとなった。この群のマウスは軽度の下痢を伴い、肛門近くに緩い糞便があったが、深刻な腐敗臭はしなかった。対照群のマウスの糞便は黒く、腐敗臭がした。これらは全て、組成物１が排便を容易にし、トレハロースが腐敗臭を発する糞便中の有機酸を捕捉することができることから腸管内の毒素を除去する明らかな効能を達成することができることを示していた。

【0074】

（ＩＩＩ）．便秘マウスにおける排便量に対する効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0075】

組成物の溶液：本実施例にて調製した組成物１の溶液を使用した。

【0076】

２． 実験方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、体重に応じて、マウスを３群、すなわち正常群、対照群及び投与群にランダムに分けた。対照群及び投与群のマウスには７２時間水を与えず、食餌を与え、正常群のマウスは通常どおり飼育した。その後、投与群のマウスに組成物１の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、対照群のマウスに医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。一方、正常群のマウスは通常どおり飼育した。投与の２０分後〜３０分後に、マウスを自由に飲食させた。投与後１時間〜２時間以内での各群のマウスの排便量（各群のマウスの排便量の平均）を記録し、結果を表４．３に示した。

【0077】

【表9】

【0078】

表４．３のデータから、対照群のマウスと投与群のマウスとは投与前では同程度の糞便粒数であったが、投与の１時間〜２時間後には投与群のマウスにおける糞便粒数は対照群及び正常群のマウスよりも明らかに増えたことが示された。特にこの差は投与の１時間後に最大に達した、すなわち投与群における排便量は対照群及び正常群よりそれぞれ１．８８倍及び４倍多かった（対照群の１．７に対して投与群の３．２及び正常群の０．８に対して投与群の３．２）。組成物１は投与の１時間後には便秘マウスにおいて便通を促し、効果が現れることが証明された。投与群のマウスにおける排便量は投与の２時間後には明らかに減少した。これは腸管内の糞便が投与後１時間で殆ど排泄され、腸管内に残る糞便の総量が大幅に減ったためであった。したがって、この時点での投与群における排便量が顕著に低下した。糞便の状態の観察から、投与群のマウスの糞便は黒緑色であり、軽い腐敗臭がしており、対照群のマウスの糞便は黒く、腐敗臭がしたことが明らかとなった。他方、投与群のマウスの糞便は黄色がかっていた。この群のマウスは軽度の下痢を伴い、肛門近くに緩い糞便があったが、深刻な腐敗臭はしなかった。これらは全て、組成物１が排便を容易にし、トレハロースが腐敗臭を発する糞便中の有機酸を捕捉することができることから腸管内の毒素を除去する明らかな効能を達成することができることを示していた。

【0079】

（ＩＶ）．ヒトの便秘の治療実験
１． 身長１６０ｃｍ及び体重６０ｋｇの３８歳のボランティアMr. Liuは、軽い便秘であったが、心血管疾患の病歴はなかった。彼に絶食後に本実施例にて調製した組成物１の溶液を２００ｍＬ投与し、投与の３０分後に食事を開始した。食事の３０分後に、１回の便意及び排便があった。糞便は多少緩かった。このボランティアは実験中には明らかな腹部膨満及び腹痛又は他の不快症状を全く感じなかった。本実施例から、本発明の組成物は、腹部膨満、腹痛及び下痢等の任意の不快症状を呈することなくヒトの腸を弛緩する役割を果たし、迅速に効果が現れることが示された。

【0080】

２． 機能性便秘についてのローマＩＩＩ基準を満たす２２名のボランティアを選択したが、その内訳は年齢１８歳〜８５歳（平均４８．５７±１７．４３歳）で体重４０ｋｇ〜８３ｋｇ（平均６１．１１±１２．１５ｋｇ）、身長１５５ｃｍ〜１８０ｃｍ（平均１６５．２６±７．２３ｃｍ）及び肥満度指数（ＢＭＩ）１５．６３〜２８．１３（平均２２．２４±３．３５）の５名の男性ボランティア及び１７名の女性ボランティアであった。下記のように投与計画を立てた。詳細には、毎朝胃を空にした状態でボランティアに２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を経口投与した後、３０分後に通常どおり朝食を与えた。投与は７日間続けた。

【0081】

実験結果：
１）．排便頻度はこれらのボランティアにおいて顕著に増大した。組成物１の投与前、ボランティアには平均して２〜３日に１回の排便があった。組成物１の投与を開始してから、ボランティアを７日間連続して観察した。この７日間、各ボランティアには平均して１日１回の排便があった。組成物１の投与を止めてから更に１週間観察を続けた。この結果から、各ボランティアには依然平均して１日１回の排便があったことが分かった。

【0082】

２）．ボランティアの排便困難は著しく軽減した。排便困難は排便困難指数を用いて分析した（排便困難指数は、３つの評価パラメータ、すなわち不完全な排便感、排便の労力（difficult defecation）及び肛門閉塞を含む患者における便秘の程度を評価する重要な指数であり、評価には１〜５の等級を採用した、すなわち１．症状なし、２．僅かな症状を呈したが、忍容性あり、３．比較的はっきりした症状を呈したが、日常生活には支障なし、４．はっきりした症状を呈し、日常生活に支障あり、５．深刻な症状を呈し、日常生活及び仕事に影響あり）。組成物１の投与前では、ボランティアにおける排便困難指数の平均は２．５〜３にランク付けられた。組成物１の投与後、排便困難指数は７日間で１以下まで低下した。組成物１の投与を止めてから更に７日間ボランティアの観察を続け、その結果から排便困難指数は１以下のままであったことが示された。

【0083】

３）．ボランティアにおける他の良性応答は下記のとおりであった。組成物１の投与中、ボランティアの７０％近くにおいて長い間見られなかった全身に亘る弛緩感（feeling of easiness：リラックス感）の報告があった。ボランティアの３０％近くにおいて血色の改善の報告があり、ボランティアの２５％近くにおいて睡眠が改善したとの報告があった。さらに数名のボランティアで健康状態の改善の報告があった。

【0084】

４）．ボランティアにおける他の応答は下記のとおりであった。ボランティアが組成物１の投与の初期に腸雑音の増大及び放屁の増加等の制御可能な不快症状を頻繁に感じていたことがボランティアにおいて広く報告された。数例にて、軽い腹部膨満、排便回数の増加及び緩い糞便の報告があった。しかしながら、これらの症状は忍容性があり、何も処置しなくても約２日後には改善又は寛解した。はっきりした症状を伴う数名のボランティアでは、これらの症状は組成物１の投与の中断直後に消失した。

【0085】

５）．一部のボランティアにおける特別な兆候は下記のとおりであった。７３歳の女性であるボランティア１は長年便秘を患っていた。めったに便意がなく平均して３日に１回の排便であり、排便に困難が伴うこともあった。糞便には悪臭がしていた。睡眠不足であり、寝付きが悪く、目が覚めやすく、早くに起きてしまうという問題を抱えることが多かった。平均して夜４時間睡眠であった。２０１３年４月２８日から組成物１の服用を開始した。詳細には、朝食前に２００ｍＬ、夜寝る前に２００ｍＬを服用した。投与１日目、難なく１回の排便があった。投与２日目以降、睡眠の改善が感じられた。例えば、簡単に寝付き、睡眠は夜７時間〜８時間続き、睡眠の質が改善していた。翌朝全身に長い間なかった弛緩感があった。１０日の連続した投与の後、規則的な毎日の排便及び睡眠の報告があった。また全身の弛緩及び良好な健康状態の報告もあった。

【0086】

８５歳の女性であるボランティア２は一度パーキンソン病の診断を受け、４０年超便秘を患っていた。平均して４日〜５日に１回の排便があり、糞便は乾燥していた。彼女は常に、手で掻き出すことによって多大な労力を伴って排便を行っていた。これまで様々な種類の下剤を服用していたが、効果は良好とはいえなかった。２０１３年８月から組成物１の服用を開始した。始めは、朝食前に２００ｍＬを服用していたが、効果は良好ではなかった。後に用量を４００ｍＬへと徐々に増やし、これは排便に有用であった。１日〜２日に１回の排便があり、糞便は全て軟らかかった。３日〜４日連続して組成物１を服用した後、１日〜２日使用を中断し、これを彼女の投与サイクルとした。約１ヶ月後、用量を１週間に１回〜２回、３００ｍＬ／日へと減らした。

【0087】

この実験から組成物１の腸を弛緩させる効果が確認された。組成物１は１週間に２回〜３回から１週間に６回〜７回へと排便頻度を増やすことができ、その後維持された。服用時間を延ばした際に、排便が正常なままであれば、組成物１の用量を徐々に減らした。本実施例における観察結果によると、用量が適切であれば、腸を弛緩する効果は投与１日目には達成することができる。その後、２日〜３日投与を行った後、１日〜２日中断し、その後再び２日〜３日投与を行った。こうすることで、腸を弛緩する効果がより良好なものとなった。排便及び胃腸機能の改善に伴い、上述の４サイクルの後に組成物１の用量を徐々に減らし、２回の投与の間隔を徐々に延ばすことができ、それでも正常な排便を保つことができた。後に必要に応じて投与を止めても又は断続的に実施してもよい。

【0088】

ＩＩＩ．痩身製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．正常マウスにおける排便量に対する組成物の効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0089】

本実施例にて調製した組成物１の溶液〜組成物７の溶液を使用した。

【0090】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、４時間マウスに食餌を与えず、水を与えた。体重によって、マウスを１１群、すなわちブランク対照群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３にランダムに分けた。投与群１〜投与群７のマウスにはそれぞれ、組成物１の溶液〜組成物７の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。他方、ブランク対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。さらに、陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、バリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与の２０分後〜３０分後に、マウスに自由に食餌を与え、各群のマウスにおける投与前後の排便量（各群のマウスの糞便量の平均）、実験を通じての総排便量に対する投与前後の排便量の割合、及び体重を記録した。結果を表５．１に示した。

【0091】

【表10】

【0092】

表５．１のデータから、投与前では、陰性対照群１〜陰性対照群３における排便量がブランク対照群と同程度であり、体重について有意差は見られなかったことが示された。投与後では、陰性対照群１〜陰性対照群３における排便量はブランク対照群と比較して著しく減少したが、依然体重について有意差は見られず、このことから本組成物に由来する単一成分のみの使用では体重減少に対する効果がないことが示唆された。投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７では、投与前のマウスにおける排便糞便量及び体重はどちらもブランク対照群と同程度であった。投与後ではこれらの群における排便量はブランク対照群よりも明らかに多く、体重も有意に減少した。すなわち、組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７はマウスの体重を減少することが可能であった。投与前では、投与群３のマウスにおける排便量及び体重はブランク対照群及び陰性対照群１〜陰性対照群３と比較して差はなかった。投与後では、排便量はブランク対照群よりも明らかに少なかったが、体重は依然ブランク対照群及び陰性対照群１〜陰性対照群３と明らかな差はなく、このことから組成物３は酵素阻害剤の含量が少なすぎるために体重を減少する役割を果たすことができないことが示唆された。

【0093】

投与後では、投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７のマウスにおける排便量は陰性対照群１〜陰性対照群３における排便量よりも多く、体重は陰性対照群１〜陰性対照群３よりも軽く、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は実際に小腸を平滑にすることで、排泄物を腸管から排泄し、体重を減少することが示唆された。これらの組成物は投与後３時間以内に効果が現れ、痩身効能を達成した。

【0094】

投与群１と投与群６との比較に基づき、トレハロースを含む投与群１は藻多糖類を含む投与群６よりも投与後の排便量が多く、またトレハロースを含む投与群１は藻多糖類を含む投与群６よりも投与後の体重が軽くなることを容易に見出すことができ、これによりどちらも海藻由来の物質ではあるが、トレハロースは藻多糖類よりも痩身効果が良好であることが示された。一方、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、３つ全ての物質が酵素阻害剤ではあるが、バリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも投与後の排便量が多く、またバリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも投与後の体重が軽いことが明らかとなった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が小腸に吸収されることで、体重が減少した。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、痩身効果はバリダマイシンを含む投与群１よりも低かった。

【0095】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を徐々に増大させることで、体重を減少する効果がゼロになるまで徐々に低減することが示され、このことから酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより痩身効果の低減が示されることが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースの重量部の比が２０００００：１に達すると、組成物は痩身効果がなくなり、このことから酵素阻害剤の質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはならないことが示唆された。

【0096】

（ＩＩ）．肥満ラットにおける体重に対する効果
１． 動物及び材料
体重１５０ｇ〜１８０ｇの雄性ＳＤラットをShanghai Sippr-BK Lab Animal Co., Ltd.から購入した。

【0097】

組成物の溶液：本実施例にて調製した組成物１の溶液を使用した。

【0098】

２． 方法
ラットを３日間通常どおり飼育した後、ラットに高脂肪飼料（８０％の基礎飼料、１０％のラード及び１０％の卵黄粉）を３０日間与えた。体重によって、ラットを２群、すなわち対照群及び投与群にランダムに分けた。投与群のラットには組成物１の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、対照群のラットには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与は１日１回行い、３０日間続けた。投与期間中、対照群のラット及び投与群のラットに高脂肪飼料を与え続け、体重を１週間に１回記録した。結果を表５．２に示した。さらに基礎飼料を与えたラットを正常群に配した。

【0099】

【表11】

【0100】

表５．２のデータから、正常群においてラットの体重は、給餌が進むにつれて投与前の約１８９ｇから投与の４週後の約２８０ｇまで安定して増大する傾向があったことが示された。その一方で、対照群及び投与群では、高脂肪食餌を採用したことに起因して、体重が投与前に約２３５ｇに達し、これは正常群との有意差を示すものであり、このことから肥満ラットモデルの確立が成功したことが示唆された。投与前、対照群のラットの体重は投与群と同等であり、有意差はなかった。しかしながら、投与の１週間後〜５週間後の投与群のラットの体重は対照群よりも明らかに低かった。特にこの差は投与の３週間後に最大に達し、体重は１３％減少した（対照群の３４５．８ｇに対して投与群の３００．８ｇ）。さらに組成物１は肥満ラットにおいて体重を著しく減少させ、１週間以内に効果が現れることが証明された。したがって組成物１は体重を減少することが可能であり、明らかな痩身効果を有していた。

【0101】

（ＩＩＩ）．ヒトの食事における実験
減量の意思がある１０７名のボランティアを２０１３年４月から２０１３年９月まで集め、そこから３９名の男性のうち６名を実験から外し、６８名の女性のうち１１名を実験から外し、合計９０名のボランティアの経過観察を行った。本件の統計の時点まで、６８名のボランティアの経過観察を１週間超行った。これら６８名のデータを分析した。ボランティアの年齢は１４歳〜７８歳（平均４１．４６±１３．２７歳）、体重は４９．５ｋｇ〜１３０ｋｇ（平均７６．１５±１５．３０ｋｇ）、身長は１５３ｃｍ〜１９２ｃｍ（平均１６５．４８±７．３７ｃｍ）、肥満度指数は１９．８３〜４２．４５（平均２７．７３±４．５０）であった。下記のように投与計画を立てた。詳細には、毎朝空っぽの胃に２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を与えた後、３０分後に通常どおり朝食を与えた。投与は１０週間続けた。基礎疾患に関しては、ボランティアは脂肪肝、高血圧、高脂血症、糖尿病、便秘、睡眠不足等の合併症を患っていた。

【0102】

ボランティアにおける平均体重の変化を図１に示した。図１から、元の平均体重と比較すると、これら６８名のボランティアの体重は１０週間の痩身試験後に５ｋｇ減少したことが分かり、このことから組成物１は明らかな痩身効果を有していたことが示唆された。

【0103】

他の実験結果は下記に提示した。

【0104】

１）．排便頻度はこれらのボランティアにおいて著しく増加した。組成物１の投与前、ボランティアには平均して２日間〜３日間に１回の排便があった。組成物１の投与を開始してから、ボランティアの観察を７日間続けた。この７日間、各ボランティアには平均して１日１回排便があった。組成物１の投与を止めてから更に１週間ボランティアの観察を続けた。この結果から、便秘ボランティアには依然平均して１日１回の排便があったことが分かった。

【0105】

２）．便秘ボランティアの排便困難は著しく軽減した。排便困難は排便困難指数を用いて分析した（排便困難指数は、３つの評価パラメータ、すなわち不完全な排便感、排便の労力及び肛門閉塞を含む患者における便秘の程度を評価する重要な指数であり、評価に１〜５の等級を採用した、すなわち１．症状なし、２．僅かな症状を呈したが、忍容性あり、３．比較的はっきりした症状を呈したが、日常生活には支障なし、４．はっきりした症状を呈し、日常生活に支障あり、５．深刻な症状を呈し、日常生活及び仕事に影響あり）。組成物１の投与前では、便秘ボランティアにおける排便困難指数の平均は２．５〜３にランク付けられた。組成物１の投与後、排便困難指数は７日間で１以下まで低下した。組成物１の投与を止めてから更に７日間ボランティアの観察を続け、その結果から排便困難指数は１以下のままであったことが示された。

【0106】

３）．ボランティアにおける他の良性応答は下記のとおりであった。組成物１の投与中、ボランティアの７０％近くにおいて長い間見られなかった全身に亘る弛緩感の報告があった。ボランティアの３０％近くにおいて血色の改善の報告があり、ボランティアの２５％近くにおいて睡眠が改善したとの報告があった。さらに数名のボランティアでは健康状態の改善の報告もあった。

【0107】

４）．ボランティアにおける他の応答は下記のとおりであった。ボランティアが組成物１の投与の初期に腸雑音の増大及び放屁の増加等の制御可能な不快症状を頻繁に感じていたことがボランティアにおいて広く報告された。数例にて、軽い腹部膨満、排便回数の増加及び緩い糞便の報告があった。しかしながら、これらの症状は忍容性があり、何も処置しなくても約２日後には改善又は寛解した。はっきりした症状を伴う数名のボランティアでは、これらの症状は組成物１の投与の中断直後に消失した。

【0108】

５）．一部のボランティアにおける特別な兆候は下記のとおりであった。７３歳の女性であるボランティア１は睡眠不足を患っており、寝付きが悪く、目が覚めやすく、早くに起きてしまうという問題を抱えることが多かった。平均して夜４時間睡眠であった。２０１３年４月２８日から組成物１の服用を開始した。詳細には、朝食前に２００ｍＬ、夜寝る前に２００ｍＬを服用した。投与２日目以降、睡眠の改善が感じられた。例えば、簡単に寝付き、睡眠は夜７時間〜８時間続き、睡眠の質が改善していた。翌朝全身に長い間なかった弛緩感があった。１０日の連続した投与の後、規則的な毎日の排便及び睡眠の報告があった。また全身の弛緩及び良好な健康状態の報告もあった。

【0109】

この実験結果から、組成物１の体重を減少する効果が確認された。体重は１０週間で平均して５ｋｇ減少した。投与を止めた後、体重をこのレベルに維持することができ、リバウンドはないと考えられた。投与を続けた際に、体重が減り続けているようであれば、組成物１の量を徐々に減らした。実験の観察結果によると、用量が適切であれば、体重減少の効果は投与２日目には達成することができる。

【0110】

ＩＶ．美容製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．ヒトの皮膚における水分量の測定
１． 被験者及び材料
１１０名を本試験に参加したボランティアから選択した。被験者は皮膚の水分量が１２％未満の３０歳〜５５歳の女性とした。

【0111】

医療用滅菌水を温水に置き換えたこと以外は、本実施例で調製した組成物１の溶液〜組成物７の溶液を使用した。

【0112】

２． 方法
皮膚の水分量によって、被験者を１１群、すなわちブランク対照群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３にランダムに分けた。投与群１〜投与群７の被験者はそれぞれ、午前９時及び午後９時の１日２回、２００ｍＬの組成物１の溶液〜組成物７の溶液を服用し、ブランク対照群の被験者は同じ時点で２００ｍＬの温水を服用した。加えて、陰性対照群１〜陰性対照群３の被験体はそれぞれ、２００ｍＬのトレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、２００ｍＬのバリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び２００ｍＬの藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）を服用した。投与は３０日間続けた。皮膚の水分量は投与前及び投与後に測定した。測定は広く十分に換気された実験室にて行った。被験者を落ち着かせてから、測定位置を蒸留水で湿らせた滅菌綿球にてきれいにした。測定位置を拭き取り乾燥させて１５分後、皮膚の水分量を「ＫＡＫＵＳＡＮ」という商標の皮膚水分試験器によって測定した。結果を表６．１に示した。

【0113】

【表12】

【0114】

表６．１のデータから、陰性対照群１〜陰性対照群３の被験者における皮膚水分量はブランク対照群と同等であることが示され、このことから本組成物に由来する単一成分のみの使用では皮膚水分量の増加効果がないことが示唆された。投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７の皮膚水分量はブランク対照群よりも高く、その差は有意なものであった。すなわち、組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は全て皮膚水分量を上昇させることができ、また美を保つとともに若さを維持する効果もあった。投与群３の皮膚水分量はブランク対照群及び陰性対照群１〜陰性対照群３と差はなく、このことから組成物３には酵素阻害剤の含量が少なすぎるために皮膚水分量を上昇する効果がないことが示された。

【0115】

投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７の被験者は全て陰性対照群１〜陰性対照群３よりも皮膚水分量が高く、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７が実際に皮膚水分量を増加させ、美を保つとともに若さを維持することが可能であることが示された。この効果は投与の僅か１ヶ月後には明らかとなった。

【0116】

投与群１と投与群６との比較にて、トレハロースを含む投与群１は藻多糖類を含む投与群６よりも皮膚水分量が高かったことを容易に見出すことができ、このことから両物質とも海藻由来の物質であるが、トレハロースは藻多糖類よりも皮膚水分量を増加させる効果が良好であることが示された。その一方で、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、３つ全てが酵素阻害剤ではあるが、バリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも皮膚水分量が高いことが明らかとなった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が小腸で吸収されることで、皮膚水分量が増加した。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、その効果はバリダマイシンの投与を伴う投与群１よりも低かった。

【0117】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を増大させることで、皮膚水分量を増加させ、美を保つ効果がゼロになるまで徐々に低減することが示された。かかる事実から酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより美を保つ効果がますます悪化することが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ比が２０００００：１に達すると、組成物は皮膚水分量を増加させる効果がなくなり、このことから酵素阻害剤が占める質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはならないことが示唆された。

【0118】

（ＩＩ）．美の保持及び若さの維持に対するヒトの実験
１． 身長１５８ｃｍ及び体重５０ｋｇの２５歳の女性であるボランティアＡは、顔の広い範囲にニキビが広がっていたが、病歴はなかった。彼女は妊娠していなかった。３０日間毎朝、胃を空にした状態で２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を服用した。実験中は他の経口又は外用の抗ニキビ製品の使用を止めたが、食習慣は変えずに通常の食事を与えた。実験が完了した後に測定した油分量は正常範囲内であり、ニキビの数は約５０％減少した。さらに皮膚の損傷度は明らかに軽減し、レベル１となった（皮膚の状態及びニキビの重症度に基づき、ニキビを臨床的に４つのレベルに分類した。レベル１：ニキビのみ；レベル２：ニキビに加えて、いくつかの炎症性丘疹あり；レベル３：ニキビに加えて、更には多くの炎症性丘疹又は膿疱あり；レベル４：ニキビに加えて、炎症性丘疹又は膿疱、更には結節及び嚢腫あり）。投与の間、被験者には何ら他の不快症状はなかった。

【0119】

２． 身長１６０ｃｍ及び体重５５ｋｇの３５歳の女性であるボランティアＢは、顔に多くの褐色斑があったが、病歴はなかった。彼女は妊娠していなかった。３０日間毎朝、胃を空にした状態で２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を服用した。実験中は他の経口又は外用の抗褐色斑製品の使用を止めたが、食習慣は変えずに通常の食事を与えた。実験が完了した後に顔における褐色斑の面積は低減し、色が明るくなった。投与の間、被験者には何ら他の不快症状はなかった。

【0120】

３． 身長１６３ｃｍ及び体重６２ｋｇの２０歳の女性であるボランティアＣは、ザラザラした肌触りの粗い皮膚をしていた。朝食前及び夜寝る前の１日２回、２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を服用した。投与の１ヶ月後、健康状態は明らかに改善され、皮膚は滑らかに極め細かく、また何ら不快症状はなかった。

【0121】

この実験結果から、組成物１の美を保つとともに若さを維持する効果が証明された。これは、トレハロースが生体細胞に対する優れた非特異的な保護を有し、高温、乾燥及び寒さ等の過酷な条件に対する生体細胞の耐性を改善することができることに起因するものであった。組成物１の投与を続けた際に、皮膚が正常なままであれば、組成物１の用量を徐々に減らすことができる。後に必要に応じて投与を止めても又は断続的に実施してもよい。

【0122】

Ｖ．睡眠を改善する製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．正常マウスにおける睡眠に対する組成物の効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0123】

本実施例にて調製した組成物１の溶液〜組成物７の溶液を使用した。

【0124】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、１８時間〜２４時間マウスに食餌を与えず、水を与えた。体重によって、マウスを１１群、すなわちブランク対照群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３にランダムに分けた。投与群１〜投与群７のマウスにはそれぞれ、組成物１の溶液〜組成物７の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、ブランク対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、バリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与の２０分後〜３０分後に、全てのマウスにペントバルビタールナトリウムを閾値未満の（subdissociative）用量（１５ｍｇ／ｋｇ）にて腹腔内注射した。マウスの立ち直り反射が消失した時間及び睡眠期間を記録した。結果を表７．１に示した。

【0125】

【表13】

【0126】

表７．１のデータから、陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにおいて立ち直り反射が消失した時間はブランク対照群と同等であり、睡眠期間について差は見られなかったことが示され、このことから本組成物に由来する単一成分のみの使用では睡眠を改善させる効果がないことが示唆された。投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７では、立ち直り反射はブランク対照群よりも早く消失し、その差は有意なものだった。また、これらの投与群における睡眠期間はブランク対照群よりも長く、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７はマウスにおいて睡眠の質を改善することが可能であることが示唆された。投与群３のマウスにおいて立ち直り反射が消失した時間はブランク対照群又は陰性対照群１〜陰性対照群３と差はなく、睡眠期間も差はなかった。このことから組成物３は酵素阻害剤の含量が少なすぎるために睡眠を改善する役割を果たすことができないことが示唆された。

【0127】

投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７における立ち直り反射は全て、陰性対照群１〜陰性対照群３より早く消失し、これらの投与群における睡眠期間は陰性対照群１〜陰性対照群３よりも長く、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は実際に、マウスの寝付きをより迅速にし、また睡眠期間を延ばすことで、マウスにおける睡眠の質を改善することが可能であることが示された。その上、これらの組成物は投与の２０分後〜３０分後に効果が現れ、睡眠を改善させる効能を達成した。

【0128】

投与群１と投与群６との比較にて、トレハロースを含む投与群１は藻多糖類を含む投与群６よりも早く立ち直り反射が消失したことを容易に見出すことができ、このことから両物質とも海藻由来の物質であるが、トレハロースは藻多糖類よりも睡眠を改善する効果が良好であることが示された。その一方で、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、３つ全てが酵素阻害剤ではあるが、バリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも早く立ち直り反射が消失することが明らかとなった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が小腸で吸収されることで、睡眠を改善した。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、睡眠を改善する効果はバリダマイシンの投与を伴う投与群１よりも低かった。

【0129】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を増大させることで、睡眠を改善する効果がゼロになるまで徐々に低減することが示された。かかる事実から酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより睡眠を改善する効果がますます悪化することが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ比が２０００００：１に達すると、組成物は睡眠を改善する効果がなくなり、このことから酵素阻害剤が占める質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはならないことが示唆された。

【0130】

（ＩＩ）．睡眠の質の改善に対するヒトの実験
１． 長期不眠症の診断基準を満たし、睡眠を改善する意思がある１０名のボランティアを選択したが、その内訳は３１歳〜６１歳の５名の男性及び５名の女性であった。下記のように具体的な投与計画を立てた。詳細には、２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を７日間毎晩寝る前に経口投与し、他の睡眠導入剤の投与は全て止めた。

【0131】

実験結果は下記に提示した。

【0132】

（１）．１０名のボランティアのうち８名において、本発明の組成物の定期投与後、ほぼ１週間で徐々に、１）容易に寝付き、２）自然の睡眠中にめったに覚醒することなく、３）再び容易に寝付き、４）朝起きた後も頭は冴えていた（cool mind）ことを特徴とする睡眠の改善があった。

【0133】

（２）．ボランティアにおける他の良性応答は下記のとおりであった。組成物１の投与中、ボランティアの７０％近くにおいて長い間見られなかった全身に亘る弛緩感の報告があった。ボランティアの３０％近くにおいて血色の改善の報告があり、ボランティアの２５％近くにおいて偏頭痛及び神経衰弱の症状が著しく軽減し、数名のボランティアでは健康状態の改善の報告があった。

【0134】

２． ５８歳のボランティアMr. Liuは軽度の耐糖能異常があったが、心血管疾患の病歴はなかった。彼は長年不眠多夢（insomnia and bad sleeping）を抱えており、早くに目が覚め、起きた後も疲れを感じていた。２週間毎晩寝る３０分前に、２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を服用した。寝付くまでの時間が明らかに短くなり、睡眠時間が長くなった。さらに、睡眠中めったに夢を見ることなく、早朝に目覚めた後は精力的に感じた。投与の間、被験者には何ら他の不快症状はなかった。

【0135】

４０歳のボランティアMs. Zhaoは、中程度の長期不眠症を患っていた。毎夜寝る３０分前に、２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を服用した。１週間後までは効果が見られなかった。彼女は投与期間中、仕事に忙しく、毎日ほぼ午前２時〜３時に眠りについていたが、前よりも寝付きが早く、睡眠の質が良好であった。その上、朝起きた後に目眩及び疲労感なく精力的に感じられた。

【0136】

この実験結果から組成物１の睡眠を改善する効果が証明された。特に、寝付きに費やされる時間を短くし、また睡眠の質を改善することができる。組成物１の投与を続けた際に、正常な睡眠が確保することができるようであれば、組成物１の用量を徐々に減らすことができる。実験の観察結果によると、用量が適切であれば、睡眠を改善する効果は投与１日目には見ることができる。睡眠が規則的になったら、投与を２日〜３日行った後、１日〜２日中断して、その後更に２日〜３日投与を行った。こうすることで、この効果はより良好なものとなった。睡眠の質が徐々に改善していることに伴い、上述のプロセスの４サイクルの後に、正常な睡眠を確保しながら、組成物１の用量を徐々に減らし、２回の投与の間隔を徐々に延ばすこともできた。後に必要に応じて投与を止めても又は断続的に実施してもよい。

【0137】

ＶＩ．骨粗鬆症を改善する製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．卵巣切除ラットにおける骨粗鬆症の改善に対する組成物の効果
１． 動物及び材料
体重２５０ｇ〜２８０ｇの雌性ＳＤラットをShanghai Sippr-BK Lab Animal Co., Ltd.から購入した。

【0138】

本実施例にて調製した組成物１の溶液〜組成物７の溶液を使用した。

【0139】

２． 方法
卵巣切除を行った後、ラットを１週間通常どおり飼育した。体重によって、ラットを１１群、すなわちブランク対照群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３にランダムに分けた。投与群１〜投与群７のラットにはそれぞれ、組成物１の溶液〜組成物７の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、ブランク対照群のラットには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、バリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与は１日１回行い、３０日間続けた。正常ラットを正常群に配し、全ての時間通常どおり飼育した。最後の投与の２０分後〜３０分後に、全てのラットを頚椎脱臼によって屠殺し、大腿骨を摘出した。次いで、大腿骨の骨密度及び骨塩量を測定した。結果を表８．１に示した。

【0140】

【表14】

【0141】

表８．１のデータから、ブランク対照群のラットにおける大腿骨の骨密度（以下、「骨密度」と称される）及び大腿骨の骨塩量（以下、「骨塩量」と称される）が正常群よりも明らかに低いことが示され、このことから骨粗鬆症のラットモデルの確立に成功したことが示唆された。これに基づき、比較を行った。陰性対照群１〜陰性対照群３における骨密度及び骨塩量はブランク対照群と同等であり、このことから本組成物に由来する単一成分のみの使用では骨密度及び骨塩量を増大させる効果（すなわち骨粗鬆症を改善する効果）がないことが示唆された。投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７のラットにおける骨密度及び骨塩量はブランク対照群よりも高く、その差は有意なものであった。すなわち、組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は全て、骨密度及び骨塩量を増大させることで、骨粗鬆症を改善することができる。投与群３における骨密度及び骨塩量はブランク対照群及び陰性対照群１〜陰性対照群３と差はなく、このことから組成物３は酵素阻害剤の含量が少なすぎるために骨粗鬆症を改善する役割を果たすことができないことが示唆された。

【0142】

陰性対照群１〜陰性対照群３と比較して、投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７は骨密度及び骨塩量が高く、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は実際に、骨密度及び骨塩量を増大させることで、骨粗鬆症を改善することが可能であることが示唆された。

【0143】

投与群１と投与群６との比較にて、トレハロースを含む投与群１は藻多糖類を含む投与群６よりも骨密度及び骨塩量が高かったことを容易に見出すことができ、このことから両物質とも海藻由来の物質であるが、トレハロースは藻多糖類よりも骨粗鬆症を改善する効果が良好であることが示された。その一方で、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、３つ全てが酵素阻害剤ではあるが、バリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも骨密度及び骨塩量が高いことが明らかとなった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が小腸に吸収されることで、骨粗鬆症を改善した。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、骨粗鬆症を改善する効果はバリダマイシンの投与を伴う投与群１よりも低かった。

【0144】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を増大させることで、骨粗鬆症を改善する効果がゼロになるまで徐々に低減することが示された。かかる事実から酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより骨粗鬆症を改善する効果がますます悪化することが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ比が２０００００：１に達すると、組成物は骨粗鬆症を改善する効果がなくなり、このことから酵素阻害剤が占める質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはならないことが示唆された。

【0145】

（ＩＩ）．正常な幼若ラットにおける骨の発達に対する効果
１． 動物及び材料
体重２０±２ｇの８週齢の離乳したＳＤラットをShanghai Sippr-BK Lab Animal Co., Ltd.から購入した。

【0146】

組成物の溶液：本実施例にて調製した組成物１の溶液を使用した。

【0147】

２． 方法
ラットを３日間通常どおり飼育した後、体重に応じて、ラットを３群、すなわち正常群、対照群及び投与群に分けた。投与群及び対照群のラットにはそれぞれ、午前９時及び午後９時の１日２回、本実施例にて調製した組成物１の溶液及び医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与は５週間続けた。正常群のラットは通常どおり飼育した。最後の投与の２０分後〜３０分後に、ラットに麻酔をかけ屠殺した。両側の大腿骨を摘出した。その後、大腿骨の長さ、重量、骨密度及び骨塩量を測定した。結果を表８．２に示した。

【0148】

【表15】

【0149】

表８．２のデータから、対照群における大腿骨の長さ、重量、骨密度及び骨塩量は正常群と有意な差はなかったことが示された。正常群及び対照群と比較して、投与群における大腿骨の長さ、重量、骨密度及び骨塩量は全て有意に増大した。これらは全て、組成物１が幼若ラットにおいて骨の発達を促し、幼若ラットにおいて大腿骨の骨密度及び骨塩量を増大させることが可能であることを示していた。この結論に基づき、組成物１が骨粗鬆症を改善することができることが示された。

【0150】

（ＩＩＩ）．ヒトにおける骨粗鬆症の改善に対する実験
１． ７０歳の女性であるボランティアＡは長年、骨粗鬆症を患っていた。主な症状は腰痛及び背部痛であり、長時間座るか又は立っていると悪化するようであった。２０１３年６月２１日から、本実施例にて調製した組成物１の溶液を朝食前に２００ｍＬ、その後夜寝る前に更に２００ｍＬ服用を始めた。３０日の連続投与の後、全身に弛緩を感じ、また良好な健康状態の報告があった。腰痛及び背部痛は明らかに軽減し、外での活動が増えた。

【0151】

２． ６５歳の女性であるボランティアＢは何年も前に骨粗鬆症の診断を受けていた。２０１３年６月２５日から、２００ｍＬの本実施例にて調製した組成物１の溶液を朝食前、その後更に夜寝る前に服用を始めた。およそ１ヶ月の投与の後、腰痛が明らかに軽減したため、ウォーキングが増えた。病院にて再検査し、その結果から骨粗鬆症が大きく改善したことが示された。続く投与では、組成物１の溶液の用量を１週間に１回〜２回、各朝１５０ｍＬ及び更に夜に１５０ｍＬへと減らした。その後も、骨粗鬆症の症状は十分に制御されていた。

【0152】

３． ６１歳の女性であるボランティアＣは老年性骨粗鬆症を患っていた。主な症状は腰痛及び背部痛であり、胸部圧迫等を伴い呼吸機能が弱っていた。２０１３年８月２１日から、本実施例にて調製した組成物１の溶液を朝食前に２００ｍＬ、夜寝る前に更に２００ｍＬ服用を始めた。半月後、腰痛及び背部痛は明らかに軽減した。その後、投与を更に１ヶ月続けたところ、呼吸機能が回復し、胸部圧迫が消失し、骨粗鬆症の状態が大きく改善した。

【0153】

この実験結果から、骨密度及び骨塩量を増大させることができ、また骨粗鬆症によって起こる他の不快症状を軽減し、取り除くことができるといった組成物１の骨粗鬆症を改善する効果が証明された。組成物１の投与を続けた際に、骨粗鬆症が改善されているようであれば、組成物１の用量を徐々に減らすことができる。

【0154】

ＶＩＩ．月経障害を改善する製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．正常マウスにおける疼痛に対する組成物の効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雄性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0155】

本実施例にて調製した組成物１の溶液〜組成物７の溶液を使用した。

【0156】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、体重に応じて、マウスを１１群、すなわちブランク対照群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３にランダムに分けた。投与群１〜投与群７のマウスにはそれぞれ、組成物１の溶液〜組成物７の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、ブランク対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、バリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与の２０分後に、マウスに０．２ｍｌの酢酸溶液（０．６％）を腹腔内投与した。その後、ライジング（writhing）の回数及びマウスが最初にライジングを起こした時間を酢酸溶液注射後３０分以内に観察して、疼痛抑制率（疼痛抑制率＝（ブランク対照群におけるライジングの回数−投与群におけるライジングの回数）／ブランク対照群におけるライジングの回数）を算出した。結果を表９．１に示した。

【0157】

【表16】

【0158】

表９．１のデータから、陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにおけるライジングの回数はブランク対照群と同等であり、最初のライジングの時間に差はなかったことが示され、このことから本組成物に由来する単一成分のみの使用では疼痛改善に対する効果がないことが示唆された。最初のライジングは投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７のマウスにおいてブランク対照群よりも後に起こり、その差は有意なものであった。その上、これらの投与群におけるライジングの回数はブランク対照群よりも有意に少なかった。すなわち、組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は全てマウスにおいて疼痛を軽減することができた。投与群３における最初のライジングの時間はブランク対照群及び陰性対照群１〜陰性対照群３と差はなく、これはライジングの回数も差はなかった。このことから組成物３は酵素阻害剤の含量が少なすぎるために疼痛を改善する役割を果たすことができないことが示唆された。

【0159】

最初のライジングは投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７のマウスにおいて陰性対照群１〜陰性対照群３よりも後に起こり、これらの投与群におけるライジングの回数は陰性対照群１〜陰性対照群３よりも少なく、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は実際に酢酸により生じる疼痛を軽減することで、痛み止めの役割を果たし得ることが示唆された。これらの組成物は投与の２０分後〜３０分後に効果が現れ、疼痛を軽減する効能を達成した。

【0160】

投与群１と投与群６との比較にて、最初のライジングはトレハロースを含む投与群１において藻多糖類を含む投与群６よりも後に起こったことを容易に見出すことができる。また投与群１におけるライジングの回数は投与群６より少なく、疼痛抑制率は投与群６より大きかった。これらは全て、両物質とも海藻由来の物質であるが、トレハロースは藻多糖類よりも疼痛を改善する効果が良好であることを示唆するものであった。その一方で、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、最初のライジングはバリダマイシンを含む投与群１においてヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも後に起こったことが明らかとなった。また、３つ全てが酵素阻害剤ではあるが、投与群１におけるライジングの回数は投与群４及び投与群５より少なく、疼痛抑制率は投与群４及び投与群５より大きかった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が小腸に吸収されることで、疼痛を改善した。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、疼痛を改善する効果はバリダマイシンの投与を伴う投与群１よりも低かった。

【0161】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を増大させることで、疼痛を改善する効果がゼロになるまで徐々に低減することが示された。かかる事実から酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより疼痛を改善する効果がますます悪化することが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ比が２０００００：１に達すると、組成物は疼痛を改善する効果がなくなり、このことから酵素阻害剤が占める質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはならないことが示唆された。

【0162】

（ＩＩ）．貧血のマウスにおける赤血球数及びヘモグロビン濃度に対する効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雌性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0163】

組成物の溶液：本実施例にて調製した組成物１の溶液を使用した。

【0164】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、マウスを体重によって４群、すなわち正常群、モデル群、対照群及び投与群に分けた。投与群のマウスには毎朝、組成物１の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で、更には毎日午後にマイトマイシンを体重１ｋｇ当たり１ｍＬの用量で胃内投与した。対照群のマウスには毎朝、医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で、更には毎日午後にマイトマイシンを体重１ｋｇ当たり１ｍＬの用量で胃内投与した。さらに、モデル群のマウスには毎日午後にマイトマイシンを体重１ｋｇ当たり１ｍＬの用量で胃内投与し、正常群のマウスは通常どおり飼育した。投与は５日間続けた。最後の投与の後、血液サンプルを採取して、各群のマウスにおける赤血球数及びヘモグロビン濃度を測定した。結果を表９．２に示した。

【0165】

【表17】

【0166】

表９．２のデータから、モデル群のマウスにおける赤血球数及びヘモグロビン濃度はブランク対照群と明らかな差があることが示され、このことから貧血のマウスモデルの確立に成功したことが示唆された。投与群における赤血球数及びヘモグロビン濃度はどちらも対照群及びモデル群よりも大きく、その差は有意なものであった。すなわち、組成物１はマウスにおいて赤血球の生成を促し、また血中のヘモグロビン濃度を増大させることで、鉄欠乏性貧血を或る程度治療することができる。

【0167】

（ＩＩＩ）．女性における月経障害の改善に対する実験
１． 身長１６０ｃｍ及び体重５０ｋｇの３５歳の女性であるボランティア１は結婚して子供もいた。乳房腫脹痛は月経の直前に深刻なものとなり、月経サイクルは乱れ、月経困難症を伴い、月経の間は情緒が不安定であった。この状況に対処するために、これまで漢方薬を服用していたが、効果は良好とはいえなかった。彼女には心血管疾患の病歴はなかった。３ヶ月間、朝晩の１日２回それぞれ２００ｍＬの組成物１の溶液を服用した。組成物１の投与の３週目に月経が来て、経血量は中程度であった。さらに、下腹部の一時的な張り以外にはっきりした月経困難症の報告はなく、月経前の乳房腫脹痛は完全になくなった。特に健康状態は良好であり、全身が弛緩していた。また月経の間、情緒は安定しており、何ら他の不快症状はなかった。３ヶ月後、月経サイクルは２８日と正常な状態を保っていた。

【0168】

２． 身長１７０ｃｍ及び体重６０ｋｇの２７歳の女性であるボランティア２は未婚で子供もいなかった。彼女には慢性下痢の病歴があり、月経サイクルは不規則であり、大体推定日の前後３日に起こっていた。毎回月経困難症が起こり、月経は大体１週間続いた。月経前１週間から月経が終わるまで、朝晩の１日２回、２００ｍＬの組成物１の溶液を服用した。このようにして組成物を３ヶ月間服用した。投与期間中、放屁が頻繁になったが、悪臭はなく、他の不快症状も感じていなかった。投与の最初の１ヶ月目、推定日の３日後に月経が来た。その後、月経サイクルは２８日と正常であった。組成物１の投与以降、月経の不快症状及び月経困難症は明らかに軽減した。

【0169】

３． ３５歳の女性であるボランティア３は結婚していたが、子供はいなかった。ここ２年、はっきりと体重が増加していた。月経停止が１年続いていた。彼女は多くの所から医学的助言を求め、内分泌障害との関連性を指摘されていた。薬物療法の効果は殆どなかった。３ヶ月間、毎日３回の食事の前に２００ｍＬの組成物１の溶液を服用した。２ヶ月後、月経が起こり、不快症状は感じられなかった。

【0170】

この実験結果から、組成物１の月経障害を改善する効果が証明された。組成物１の投与を続けた際に、正常な月経サイクルが保たれていれば、組成物１の用量を徐々に減らすことができる。月経サイクルの改善に従って組成物１の用量を徐々に減らすことができる。また、投与を適切に中断し、中断時間を徐々に延ばすことができる。こうすることで正常な月経サイクルを確保することができる。後に必要に応じて投与を止めても又は断続的に実施してもよい。

【0171】

ＶＩＩＩ．抗疲労製品の作製における本発明の多機能組成物の使用
（Ｉ）．正常マウスにおける負荷遊泳に対する組成物の効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雌性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0172】

本実施例にて調製した組成物１の溶液〜組成物７の溶液を使用した。

【0173】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、マウスを体重によって１１群、すなわちブランク対照群、投与群１〜投与群７及び陰性対照群１〜陰性対照群３にランダムに分けた。投与群１〜投与群７のマウスにはそれぞれ、組成物１の溶液〜組成物７の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、ブランク対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスにはそれぞれ、トレハロースの溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）、バリダマイシンの溶液（０．３ｍｇ／ｍＬ）及び藻多糖類の溶液（０．１５ｇ／ｍＬ）を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。投与の２０分後、２ｇの重りを各マウスの尾に固定し、マウスをプールに入れ、負荷をかけながら泳がせた。浴温は２５±２℃であり、深さは３０ｃｍを超えるものとした。負荷遊泳における生存時間を記録した（マウスの全部位が１０秒間水面下にあった場合に、マウスを水面に浮上することができないとみなした）。結果を表１０．１に示した。

【0174】

【表18】

【0175】

表１０．１のデータから、陰性対照群１〜陰性対照群３のマウスの負荷遊泳における生存時間はブランク対照群と同等であったことが示され、このことから本組成物に由来する単一成分のみの使用では負荷遊泳の時間は延びず、マウスの体力を向上させる効果がないことが示唆された。投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与７はブランク対照群よりも負荷遊泳の時間が長く、その差は有意なものであった。すなわち、組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は全て、マウスの体力を向上させることで、マウスは負荷を受けながらより長時間泳ぐことができる。投与群３における負荷遊泳の時間はブランク対照群又は陰性対照群１〜陰性対照群３と差はなく、このことから組成物３は酵素阻害剤の含量が少なすぎるためにマウスの体力を向上させる又は疲労に耐える役割を果たすことができないことが示唆された。

【0176】

投与群１又は投与群２及び投与群４〜投与群７は陰性対照群１〜陰性対照群３よりも負荷遊泳の時間が長く、このことから組成物１又は組成物２及び組成物４〜組成物７は実際に、負荷遊泳の時間を延ばし、体力を向上させるとともに疲労に耐える役割を果たすことができることが示唆された。これらの組成物は投与の２０分後〜３０分後に効果が現れ、疲労に耐える効能を達成した。

【0177】

投与群１と投与群６との比較にて、トレハロースを含む投与群１は藻多糖類を含む投与群６よりも負荷遊泳の時間が長かったことを容易に見出すことができ、このことから両物質とも海藻由来の物質であるが、トレハロースは藻多糖類よりも体力の改善及び抗疲労の効果が良好であることが示された。一方、投与群１と投与群４又は投与群５との比較から、３つ全てが酵素阻害剤ではあるが、バリダマイシンを含む投与群１はヘキサコナゾールを含む投与群４及びトレハゾリンを含む投与群５よりも負荷遊泳の時間が長いことが明らかとなった。この差はこの酵素に対するバリダマイシンの阻害効果がより良好であることに起因し得て、より多くの海藻由来の物質が小腸に吸収されることで、体力を向上させるとともに疲労に耐えた。これに対して、ヘキサコナゾールを含む組成物４及びトレハゾリンを含む組成物５については、トレハロースの一部が胃腸管にて分解され得るために、抗疲労効果はバリダマイシンの投与を伴う投与群１よりも低かった。

【0178】

投与群１〜投与群３の間でのデータ比較から、バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ（重量部）比を増大させることで、体力の改善及び抗疲労の効果がゼロになるまで徐々に低減することが示された。かかる事実から酵素阻害剤の濃度を下げることで、海藻由来の物質の分解を防ぐ組成物の能力が徐々に低下し、それにより体力の改善及び抗疲労の効果がますます悪化することが示唆された。バリダマイシンに対するトレハロースのｐｂｗ比が２０００００：１に達すると、組成物は体力の改善及び抗疲労の効果がなくなり、このことから酵素阻害剤が占める質量パーセントは本発明の組成物の０．００１％未満とはならないことが示唆された。

【0179】

（ＩＩ）．正常マウスにおける抗疲労効果
１． 動物及び材料
８週齢、体重２０±２ｇの雌性ＩＣＲマウスをBeijing HFK Bioscience Co., Ltd.から購入した。

【0180】

組成物の溶液：本実施例における組成物１の溶液を使用した。

【0181】

２． 方法
マウスを３日間通常どおり飼育した後、マウスを体重によって３群、すなわち正常群、対照群及び投与群にランダムに分けた。投与群のマウスには組成物１の溶液を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与した。対照群のマウスには医療用滅菌水を体重１ｋｇ当たり１３．３ｍＬの用量で胃内投与し、正常群のマウスは通常どおり飼育した。投与の２０分後、マウスを水浴に入れ、１０分間自由に泳がせた。浴温は２５±２℃であり、深さは３０ｃｍを超えるものとした。マウスの眼球を摘出し、血液を採取して、血中の尿素及び乳酸の濃度を生化学分析器によって測定した。結果を表１０．２に示した。

【0182】

【表19】

【0183】

表１０．２のデータから、投与群における尿素及び乳酸の濃度はどちらも対照群又はモデル群よりも低く、その差は有意なものであったことが示された。すなわち、組成物１は運動したマウスの血中の尿素及び乳酸のレベルを著しく低減させ、マウスにおける体力を向上させることで、抗疲労効果をもたらすことができる。

【0184】

（ＩＩＩ）．抗疲労に対するヒトの実験
１． 身長１６０ｃｍ及び体重５０ｋｇの３５歳の女性であるボランティアＡは結婚して子供もいた。通常、毎晩午後１０時に床につき、睡眠は良好であった。本実験では、大体午後１０時に２００ｍＬの組成物１の溶液を服用した後、大体０：００まで気晴らしにネットサーフィンを行った。はっきりとした眠気はなく、頭は冴えていた。午前１時に眠りにつき、通常どおり寝付くことができた。翌朝午前７時に起き、疲労感なく通常どおり仕事した。この製品の投与の間、被験者には何ら他の不快症状はなかった。

【0185】

２． 身長１７０ｃｍ及び体重７５ｋｇの４１歳の男性であるボランティアＢ。彼はよく遅くまで仕事をしていたが、コーヒーを飲むことで動悸を起こすようであった。午後１２時に２００ｍＬの組成物１の溶液を服用し、その後翌朝の午前４時まで仕事した。この期間、はっきりとした眠気はなく、頭は冴えていた。翌朝午前６時に起き、同用量の溶液を服用した。このように溶液を３日間服用した。投与期間中、１日１時間〜３時間しか眠らなかったが、依然何ら眠気、目眩及び虚弱の問題なく、翌日通常どおり仕事をし、会議に出ることができた。実験中、被験者には何ら他の不快症状はなかった。

【0186】

３． 身長１８０ｃｍ及び体重８５ｋｇの５５歳の男性であるボランティアＣ。彼はよく中国と米国との間の飛行機に乗っており、時差ボケの問題に直面しなくてはならなかった。正午に飛行機（中国発米国行きの飛行機）を降りた後、２００ｍＬの組成物１の溶液を服用した。フライトによる疲労は明らかに軽減され、通常どおり仕事し、その夜影響なく眠ることができた。このボランティアは翌日には通常のスケジュールに戻した。

【0187】

この実験結果から組成物１の対疲労効果が証明された。かかる組成物はヒトに体力を迅速に回復させ、頭が冴えたままにし、通常のスケジュールを維持するのを助けることができる。本発明の組成物は中毒性がなかった。その投与は悪性応答なくどの時点でも止めることができる。必要に応じて服用することができる。

【0188】

本実施例における実験から、本発明の組成物には血糖を下げ、腸を弛緩させるとともに消化管をきれいにし、体重を減少させ、美を保つとともに若さを維持し、骨粗鬆症を改善し、睡眠を改善させ、月経障害を改善し、疲労に耐えるという顕著な効果があることが示された。本発明の組成物は迅速に効果が現れ、毒性及び副作用なく安全であった。本発明の組成物は経口投与用に様々な配合物へと加工し、口当たりをよくすることができる。本発明の組成物が丸薬、カプセル剤、又は他の固形経口配合物の形態である場合、患者は水又は飲料とともに直接服用することができ、本発明の組成物が顆粒剤、飲用固形物又は粉末の形態である場合、投与前に水若しくは飲料に溶解させるか、又は水若しくは飲料とともに直接服用することができ、本発明の組成物が経口液剤である場合、直接服用するか、又は投与前に水若しくは飲料で希釈することができる。本発明の組成物は患者にとって便利なものであった。

【産業上の利用可能性】

【0189】

本発明の多機能組成物は供給源が広範であり、低価格である。本発明の多機能組成物は人体に対して毒性又は副作用を生じない。さらに本発明の多機能組成物は様々な経口形態の製品にすることができ、製造過程が単純である。本発明の多機能組成物を工業規模にて、健康管理、並びに糖尿病、便秘、肥満、カルシウム欠乏症、不眠症及び月経障害の治療に適用することができる。

【図1】