特許 6190445 ベンゼンポリカルボン酸化合物及びその薬剤としての使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6190445

(24)【登録日】2017年8月10日

(45)【発行日】2017年8月30日

(54)【発明の名称】ベンゼンポリカルボン酸化合物及びその薬剤としての使用

(51)【国際特許分類】

   C07C 53/126 20060101AFI20170821BHJP

   C08H 7/00 20110101ALI20170821BHJP

   C07C 59/105 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 57/26 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 57/03 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 57/00 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 59/82 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 409/04 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 59/42 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 69/94 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 69/96 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 69/157 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 69/78 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 51/42 20060101ALI20170821BHJP

   C07C 67/48 20060101ALI20170821BHJP

   C07F 15/00 20060101ALI20170821BHJP

   C07F 11/00 20060101ALI20170821BHJP

   C07D 303/12 20060101ALI20170821BHJP

   C07D 307/79 20060101ALI20170821BHJP

   C07D 311/30 20060101ALI20170821BHJP

   C07D 311/86 20060101ALI20170821BHJP

   C07D 307/91 20060101ALI20170821BHJP

   C07D 317/46 20060101ALI20170821BHJP

【ＦＩ】

   C07C53/126CSP

   C08H7/00

   C07C59/105

   C07C57/26

   C07C57/03

   C07C57/00

   C07C59/82

   C07C409/04

   C07C59/42

   C07C69/94

   C07C69/96 Z

   C07C69/157

   C07C69/78

   C07C51/42

   C07C67/48

   C07F15/00 F

   C07F11/00 B

   C07D303/12

   C07D307/79

   C07D311/30

   C07D311/86

   C07D307/91

   C07D317/46

【請求項の数】18

【全頁数】40

(21)【出願番号】特願2015-502098(P2015-502098)

(86)(22)【出願日】2013年4月2日

(65)【公表番号】特表2015-520121(P2015-520121A)

(43)【公表日】2015年7月16日

(86)【国際出願番号】DK2013050092

(87)【国際公開番号】WO2013143549

(87)【国際公開日】20131003

【審査請求日】2016年3月14日

(31)【優先権主張番号】PA201270159

(32)【優先日】2012年3月30日

(33)【優先権主張国】DK

(31)【優先権主張番号】61/618,037

(32)【優先日】2012年3月30日

(33)【優先権主張国】US

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】514249038

【氏名又は名称】エルデーイノバショーン アンパルトセルスカブ

【氏名又は名称原語表記】ＲＤＩｎｎｏｖａｔｉｏｎ ＡｐＳ

(74)【代理人】

【識別番号】110000774

【氏名又は名称】特許業務法人 もえぎ特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】シポフ， ヴァレリー パブロビッチ

(72)【発明者】

【氏名】ピガレフ， エフゲニー セルゲエビッチ

(72)【発明者】

【氏名】フェドロス， エレナ アイ．

【審査官】 鈴木 雅雄

(56)【参考文献】

【文献】 特開平０３−００８７８８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開昭６３−２３８０９６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開昭６１−０８７６１０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００９−０２７９５７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２０１１／０１７３８７５（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特開平１１−２０６３２４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０４−２１４０８５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０２−１６７２０８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開昭５９−０４８０８７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 幡克美、十河村男，樹皮のリグニン，工業化学雑誌，日本，１９５８年，第６１巻、第９号，１０８３−１０８６頁

【文献】 船岡正光、阿部勲，クラフトリグニンの化学構造，三重大学農学部演習林報告，日本，１９８３年，第１２巻，２７−３９頁

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｃ ５３／１２６

Ｃ０７Ｃ ５１／４２

Ｃ０７Ｃ ５７／００

Ｃ０７Ｃ ５７／０３

Ｃ０７Ｃ ５７／２６

Ｃ０７Ｃ ５９／１０５

Ｃ０７Ｃ ５９／４２

Ｃ０７Ｃ ５９／８２

Ｃ０７Ｃ ６７／４８

Ｃ０７Ｃ ６９／１５７

Ｃ０７Ｃ ６９／７８

Ｃ０７Ｃ ６９／９４

Ｃ０７Ｃ ６９／９６

Ｃ０７Ｃ ４０９／０４

Ｃ０７Ｄ ３０３／１２

Ｃ０７Ｄ ３０７／７９

Ｃ０７Ｄ ３０７／９１

Ｃ０７Ｄ ３１１／３０

Ｃ０７Ｄ ３１１／８６

Ｃ０７Ｄ ３１７／４６

Ｃ０７Ｆ １１／００

Ｃ０７Ｆ １５／００

Ｃ０８Ｈ ７／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

乾燥重量でＣが６２〜６７％、Ｈが３．８〜４．２％、Ｏが２９〜３４％、かつＮが０．２％未満の元素組成を有し、かつ他の元素の合計が乾燥重量で１％以下である、ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物の製造方法であって、
ａ）針葉樹から製造されたものであり、ｐＨが５．５〜７、含水量が５０〜７０％であり、３２％以下の多糖類と６６％以上のリグニンと２％以下の水溶性化合物とを含むリグニン含有出発原料を用意する工程と、
ｂ）前記工程ａ）のリグニン含有出発原料を、水酸化ナトリウムを添加することによりアルカリ処理してベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を調製する工程と、
ｃ）前記工程ｂ）のベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を、鉱酸処理と遠心力処理を備える酸密度勾配処理により、粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を調製する工程と、
ｄ）低分子不純物を取り除くことにより前記工程ｃ）の粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を精製して、精製ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物を調製する工程と、を含むベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物を調製する方法。

【請求項2】

前記工程ｂ）のアルカリ処理は、前記工程ａ）のリグニン含有出発原料のアルカリ性懸濁液をｐＨ１３±０．５、圧力２．２±０．３ＭＰａで酸素と反応させることにより行われる、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記工程ｃ）の酸密度勾配処理は、前記工程ｂ）のベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を鉱酸で処理してｐＨを１〜２とし、その後遠心力を作用させることにより行われる、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

前記工程ｄ）の精製は、前記工程ｃ）の粗ベンゼンポリカルボン酸重合体に対して、抽出、浮選、蒸留、濾過、沈殿、遠心分離、デカンテーション、及び透析から選択される１つ以上の精製工程を施すことにより行われる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項5】

乾燥重量でＣが６２〜６７％、Ｈが３．８〜４．２％、Ｏが２９〜３４％、かつＮが０．２％未満の元素組成を有し、かつ他の元素の合計が乾燥重量で１％以下であるベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物と平面四配位白金（ＩＩ）化合物とを含み、
前記ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物が前記白金（ＩＩ）化合物を封止しているか、前記白金（ＩＩ）化合物と錯体を形成している、複合物質。

【請求項6】

分子式（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３（Ｐｔ（ＮＨ_３）_２）_ｘ４（ただし、ｘ_１、ｘ_２、ｘ_３、及びｘ_４は任意の正の整数または小数を表す係数である）で表される請求項５に記載の複合物質。

【請求項7】

ａ１）針葉樹から製造されたものであり、ｐＨが５．５〜７、含水量が５０〜７０％であり、３２％以下の多糖類と６６％以上のリグニンと２％以下の水溶性化合物とを含むリグニン含有出発原料を用意する工程と、
ｂ１）前記工程ａ１）のリグニン含有出発原料を、水酸化ナトリウムを添加することによりアルカリ処理してベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を調製する工程と、
ｃ１）前記工程ｂ１）のベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を、鉱酸処理と遠心力処理を備える酸密度勾配処理により、粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を調製する工程と、
ｄ１）前記工程ｃ１）の粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を精製して、精製ベンゼンポリカルボン酸重合体を調製する工程と、
ｅ１）前記工程ｄ１）で調製された精製ベンゼンポリカルボン酸重合体を平面四配位白金（ＩＩ）化合物と反応させて反応混合物を調製する工程と、
ｆ１）前記工程ｅ１）の反応混合物を自動温度調節して粗複合物質を調製する工程と、
ｇ１）前記工程ｆ１）の粗複合物質を精製して複合物質を調製する工程とを含む、請求項５または６に記載された複合物質を調製する方法。

【請求項8】

前記工程ｂ１）のアルカリ処理は、前記工程ａ１）のリグニン含有材料のアルカリ性懸濁液をｐＨ１３±０．５、圧力２．２±０．３ＭＰａで酸素と反応させることにより行われる、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記工程ｃ１）の酸密度勾配処理は、前記工程ｂ１）のベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を鉱酸で処理してｐＨを１〜２とし、その後、遠心力を作用させることにより行われる、請求項７または８に記載の方法。

【請求項10】

前記工程ｄ１）の精製は、前記工程ｃ１）の粗ベンゼンポリカルボン酸重合体に対して、抽出、浮遊、蒸留、濾過、沈殿、遠心分離、デカンテーション、及び透析から選択される１つ以上の精製工程を施すことにより行われる、請求項７〜９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項11】

前記平面四配位白金化合物は二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）、四塩化白金酸カリウム、またはこれらの混合物である、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項12】

乾燥重量でＣが６２〜６７％、Ｈが３．８〜４．２％、Ｏが２９〜３４％、かつＮが０．２％未満の元素組成を有し、かつ他の元素の合計が乾燥重量で１％以下であるベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン酸塩としてのモリブデン化合物とを含み、前記ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物が前記モリブデン化合物を封止しているか、または前記モリブデン化合物と錯体を形成している、複合物質。

【請求項13】

分子式（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３（ＭｏＯ_３）_ｘ４（Ｈ_２Ｏ）_ｘ５（ＮＨ_４）_ｘ６（ただし、ｘ_１、ｘ_２、ｘ_３、ｘ_４、ｘ_５、及びｘ_６は任意の正の整数または小数を表す係数である）で表される請求項１２に記載の複合物質。

【請求項14】

ａ２）針葉樹から製造されたものであり、ｐＨが５．５〜７、含水量が５０〜７０％であり、３２％以下の多糖類と６６％以上のリグニンと２％以下の水溶性化合物とを含むリグニン含有出発原料を用意する工程と、
ｂ２）前記工程ａ２）のリグニン含有出発原料を、水酸化ナトリウムを添加することによりアルカリ処理してベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を調製する工程と、
ｃ２）前記工程ｂ２）のベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を、鉱酸処理と遠心力処理を備える酸密度勾配処理により、粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を調製する工程と、
ｄ２）前記工程ｃ２）の粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を精製して精製ベンゼンポリカルボン酸重合体を調製する工程と、
ｅ２）前記工程ｄ２）で調製された精製ベンゼンポリカルボン酸重合体をモリブデン化合物と反応させて反応混合物を調製する工程と、
ｆ２）前記工程ｅ２）の反応混合物を自動温度調節して粗複合物質を調製する工程と、
ｇ２）前記工程ｆ２）の粗複合物質を精製して複合物質を調製する工程とを含む請求項１２または１３に記載の複合物質を調製する方法。

【請求項15】

前記工程ｂ２）のアルカリ処理は、前記工程ａ２）のリグニン含有材料のアルカリ性懸濁液をｐＨ１３±０．５、圧力２．２±０．３ＭＰａで酸素と反応させることにより行われる、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記工程ｃ２）の酸密度勾配処理は、前記工程ｂ２）のベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を鉱酸で処理し、その後遠心力を作用させることにより行われる、請求項１４または１５に記載の方法。

【請求項17】

前記工程ｄ２）の精製は、前記工程ｃ２）の粗ベンゼンポリカルボン酸重合体に対して抽出、浮遊、蒸留、濾過、沈殿、遠心分離、デカンテーション、及び透析から選択される１つ以上の精製工程を施すことにより行われる、請求項１４〜１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記モリブデン酸塩は、モリブデン酸アンモニウム、モリブデン酸アンモニウム四水和物、カリウムモリブデン酸、ナトリウムモリブデン酸、ナトリウムモリブデン酸二水和物、またはこれらの混合物である、請求項１４〜１７のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、加水分解リグニンのアルカリ酸化により調製される新規なベンゼンポリカルボン酸化合物に関する。本発明はまた、新規なベンゼンポリカルボン酸化合物で金属陽イオンを錯化または封止することにより調製される複合物質の一部としての新規なベンゼンポリカルボン酸化合物の使用に関する。本発明はまた、新規なベンゼンポリカルボン酸化合物の調製方法、およびその化粧品組成物、栄養補助食品組成物、及び医薬品組成物での使用に関する。

【背景技術】

【0002】

癌治療用薬剤として最も研究されているものの一つに、白金薬剤シスプラチンがある。シスプラチンは、広い活性スペクトルを持つ薬剤で、例えば非上皮性悪性腫瘍、上皮性悪性腫瘍、及びリンパ腫の治療に効果的である。それと同時に、この薬剤には多くの重大な問題がある。不活性タンパク質結合化合物の形成を伴う急速な代謝により、この薬剤は癌細胞及び正常細胞の両方を損傷して高い毒性、特に腎臓毒性を示す。

【0003】

これらの問題を克服するため、低分子有機配位子に基づく新規な金属有機錯体を開発することにより、シスプラチンの毒性を低減する方法の研究に相当な努力が払われている（米国特許第４，１６９，８４６号；米国特許第４，６５７，９２７号）。この点から、重合体化合物をキレート剤または封止剤として用いることが、この問題に対する効果的解決の一つの可能性として提起されている。

【0004】

米国特許出願第２０１０／０２７８９２５号には、新規な有機プラチン化合物製剤が記載されている。この製剤は、少なくとも１種の有機プラチン化合物と、少なくとも１種の会合性水溶性重合体とを含み、前記重合体は、（メタ）アクリル酸単量体、ウレタン単量体、及びヘミマレイン酸塩単量体を、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチンからなる群から選択される有機プラチン化合物と重合することにより調製される。特に、この発明によると、シロップ状または顆粒状の薬剤の経口投与製剤を得ることができる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】米国特許第４，１６９，８４６号

【特許文献2】米国特許第４，６５７，９２７号

【特許文献3】米国特許出願第２０１０／０２７８９２５号

【発明の概要】

【0006】

上記発明とは異なり、本発明は、水溶性重合体としてベンゼンポリカルボン酸の重合体化合物を用いて、好ましくは非経口投与、腸内投与、及び局所投与用の有機金属化合物を調製するものである。

【0007】

別の特許ＢＹ６４２０には、抗癌効果を示す二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）重合体薬剤の製剤が記載されている。この発明の目的は、６−カルボキシセルロースの表面に白金化合物を固定化（封止）することである。得られた薬剤製剤は神経外科の脳移植に用いられ、悪性腫瘍の再発を防止するものである。この生分解性シスプラチン重合体薬剤の製剤は、中程度の神経毒性を示し、細胞増殖抑制効果が向上している。

【0008】

ＢＹ６４２０に開示された発明とは異なり、本発明では、ベンゼンポリカルボン酸の水溶性重合体が独自の生物学的効果を示す。また、この重合体に基づく重合体薬剤の製剤は、非経口投与、腸内投与、及び局所投与に用いることができる。

【0009】

ＲＵ２１８２４８２には、四塩化白金酸カリウムに基づく抗癌剤を調製する方法が開示されている。この特許では、四塩化白金酸カリウムをフミン酸化合物と反応させる方法が開示されている。この方法では、フミン酸物質の水溶液を四塩化白金酸カリウム溶液で処理する。この処理では、４〜８分間、超音波を出力密度４０Ｗ／ｃｍ^２、周波数２２ｋＨｚで照射する。ＲＵ２１８２４８２に記載の上記生成物とは異なり、本発明の生成物では、白金剤として白金（ＩＩ）の平面四配位化合物を選択している。また、本発明の生成物は、照射条件が異なる別の方法により調製される。照射出力は照射される生成物の体積によって決められ、重合体と未反応の白金量が初期量の２５％以下になるまで照射を行う。また、加水分解性白金の量が１０％以下になるまで温度の自動調節を行う。これにより異なる生成物が得られる。本発明の得られた錯体は、結合の安定性が高く、実質的に毒性が低減されている。

【0010】

ＥＰ１８６４６７３及びＲＵ２３６８３７９には、他の抗癌剤が記載されている。この抗癌剤もまた、白金（ＩＩ）の配位化合物をフミン酸化合物と反応させて調製したものである。フミン酸は予め、出力密度が０．５〜５Ｗ／ｃｍ^３、超音波周波数が１８〜６６ｋＨｚで超音波に晒すことにより音響キャビテーションで処理されている。このように調製した抗癌剤は、フミン酸化合物の高分子部分の含有量が５％以下である。ＥＰ１８６４６７３及びＲＵ２３６８３７９に記載された生成物とは異なり、本発明の生成物では、重合体と未反応の白金量が初期量の２５％以下になるまで照射を行い、加水分解性白金の量が１０％以下になるまで温度の自動調節を行う。これにより異なる生成物が得られる。本発明の得られた錯体は、結合の安定性が高く、実質的に毒性が低減されている。

【0011】

ＲＵ２１８３１２４では、電離放射から組織を保護する手段、すなわち、放射線防護特性を有する物質を天然由来の材料から調製する方法が開示されている。この方法によれば、フミン酸物質は天然の原材料に由来し、このようなフミン酸物質の水溶液をモリブデン酸アンモニウムで処理する。このモリブデン酸アンモニウムによる処理は、４０±５℃の温度で出力密度が４０Ｗ／ｃｍ^２、周波数が２２ｋＨｚの超音波を４〜８分間、照射して行う。この方法は、酸化木材リグニンから得たフミン酸物質を用いる。ＲＵ２１８３１２４に記載の上記生成物とは異なり、本発明の生成物ではモリブデン塩は広範囲の化合物から選択される。また、本発明の生成物は、照射条件が異なる別の方法により調整される。照射出力は照射される生成物の体積によって決められ、重合体と未反応のモリブデン量が初期量の２５％以下になるまで照射を行う。また、加水分解性モリブデンの量が１０％以下になるまで温度の自動調節を行う。これにより異なる生成物が得られる。本発明の得られた錯体は、結合の安定性が高く、実質的に毒性が低減されている。

【0012】

ＥＰ１８６４６７４及びＲＵ２３５０３５３には、電離放射から組織を保護する薬剤を調製する他の方法が開示されている。この薬剤は、フミン酸物質とモリブデン酸アンモニウムを含む水溶液を波動放射で処理して調製される。モリブデン酸アンモニウムの含有量は、フミン酸物質１重量部につき０．４重量部までの範囲で選択される。処理は、高分子分率のフミン酸物質が５％以下の水準になるまで行われる。ＥＰ１８６４６７４及びＲＵ２３５０３５３に記載の上記生成物とは異なり、本発明の生成物ではモリブデン塩は広範囲の化合物から選択される。また、本発明の生成物は、照射条件が異なる別の方法により調整される。重合体と未反応のモリブデン量が初期量の２５％以下になるまで照射を行う。また、加水分解性モリブデンの量が１０％以下になるまで温度の自動調節を行う。これにより異なる生成物が得られる。本発明の得られた錯体は、結合の安定性が高く、実質的に毒性が低減されている。

【0013】

ＲＵ２１８２４８２、ＥＰ１８６４６７３、ＲＵ２３６８３７９、ＲＵ２１８３１２４、ＥＰ１８６４６７４、及びＲＵ２３５０３５３に記載された組成物には、利点の他に、組み込まれている有機配位子が可変の組成物、安全性、及び生物学的活性によって特徴づけられるという事実から生じる問題が多数あり、医薬品組成物、栄養補助食品組成物、あるいは化粧品組成物の調製に好適な、安定した錯体または複合物質の開発には用いることができない。

【0014】

驚くべきことに、本発明者らは、鉱物及び低分子不純物の含有量が少なく、それ自体の生物学的活性により特徴づけられる新規なベンゼンポリカルボン酸の水溶性重合体化合物が、安定的で、安全で、効果がある有機金属錯体の開発に用いることができることを見出した。

【0015】

このような錯体における重合体と金属陽イオンの結合安定性は、重合、精製、及び温度自動調節操作を導入し、体積あたりの出力を設定し、金属化合物の７５％超の錯体が形成されるまで処理を行う場合の新規な超音波処理条件を使用することにより向上する。これにより異なる生成物が得られる。

【0016】

本発明はまた、新規なベンゼンポリカルボン酸の水溶性重合体化合物に基づく複合物質を開示する。前記重合体化合物は、非常に安定した結合を有し、非常に効果の高い低毒性錯体を形成する錯化剤および／または封止剤として作用する。これら新規な複合物質は、低濃度でも高い効果を示す。このような複合物質は、例えば、白金錯体及びモリブデン錯体を含み、前途有望な特性を持つ。この白金錯体は効果のある抗癌剤として作用する。この錯体の試作品と、シスプラチンやカルボプラチンなど周知の抗癌剤を比較すると、実験結果からこの白金錯体の癌細胞を殺す能力が向上していることが示された。モリブデン錯体は、細胞周期破壊によって起こる病気の予防及び治療に効果的な薬剤として作用する。これらの病気は例えば、放射線暴露、細胞の老化、あるいは免疫異常に由来する。本発明の医薬品組成物はまた、従来の放射線治療や化学療法の結果生じる副作用の低減／最小化に用いることができる。

【0017】

このベンゼンポリカルボン酸の新規な水溶性重合体化合物の化学特性により、広範囲の非常に安定した錯体だけでなく、ヒト及び動物への非経口投与、腸内投与、及び局所投与に適した医薬品組成物、栄養補助食品組成物、及び化粧品組成物を得ることができる。

【0018】

本発明の第１の態様は、乾燥重量でＣが６２〜６７％、Ｈが３．８〜４．２％、Ｏが２９〜３４％、かつＮが０．２％未満の元素組成を有し、かつ他の元素の合計が乾燥重量で１％以下である、新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物に関する。

【0019】

本発明の第２の態様は、リグニン含有出発原料をアルカリ処理し、続いて酸密度勾配処理を行ってベンゼンポリカルボン酸の粗水溶性重合体化合物を調製し、最後に粗化合物を精製する、上記の新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物を調製する方法に関する。

【0020】

本発明の第３の態様は、ヒト及び動物の病気の予防、治療、及び進行遅延に使用する上記の新規な水溶性重合体化合物と、ヒト及び動物の病気の予防、治療、及び進行遅延に使用する上記の新規な水溶性重合体化合物を含む医薬品組成物に関する。

【0021】

本発明の第４の態様は、上記の新規な水溶性重合体化合物を含む化粧品組成物または栄養補助食品組成物に関する。

【0022】

本発明の第５の態様は、上記の新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物と、金属陽イオンと、必要に応じて抗癌剤とを含む複合物質、及びヒトまたは動物の病気の予防、治療、または進行遅延のための医薬品組成物でのその使用に関する。

【0023】

本発明の第６の態様は、上記の新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物と平面四配位白金（ＩＩ）化合物とを含む上記複合物質を調製する方法に関する。

【0024】

本発明の第７の態様は、薬剤として使用する、または医薬品組成物の調製に使用するための、新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物と平面四配位白金（ＩＩ）化合物とを含む上記複合物質に関する。

【0025】

本発明の第８の態様は、新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物と平面四配位白金（ＩＩ）化合物とを含む上記複合物質を含む薬剤または医薬品組成物の、癌など哺乳類の病気の予防、治療、苦痛緩和治療、または進行の遅延での使用に関する。

【0026】

本発明の第９の態様は、新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物とを含む複合物質に関し、上記ベンゼンポリカルボン酸の重合体化合物は、前記モリブデン化合物を封止しているか、前記モリブデン化合物と錯体を形成している。

【0027】

本発明第１０の態様は、新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物とを含む複合物質を調製する方法に関する。

【0028】

本発明の第１１の態様は、上記新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物とを含む複合物質の、薬剤としての使用、または医薬品組成物の調製における使用に関する。

【0029】

本発明の第１２の態様は、上記の新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物とを含む複合物質を含む薬剤または医薬品組成物の、細胞周期破壊疾病などの病気の予防、治療または前記病気で苦しむほ乳類の苦痛緩和治療における使用、あるいは前記病気の進行遅延における使用に関する。

【0030】

本発明の第１３の態様は、従来の放射線治療または化学療法の結果生じる副作用の低減／最小化における医薬品組成物の使用に関する。

【図面の簡単な説明】

【0031】

【図1】試作品ＲＵ２１８２４８２によるフミン酸の^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。

【図2】本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物のＩＲスペクトルを示す図である。

【図3】本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物の^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す図である。

【図4】本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物の二次元ＮＭＲ同核種スペクトル及び異種核スペクトルを示す図である。

【図5】本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物のＦＴＩＣＲ−ＭＳスペクトルを示す図である。

【図6】本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物と二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）とを含む複合物質、前記無機二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）（図中、「シスプラチン」として示す）、及びシス−ジアンミン（シクロブタン−１，１−ジカルボキシラート−Ｏ，Ｏ’）白金（ＩＩ）（図中、「カルボプラチン」として示す）の広域Ｘ線吸収微細構造（ｍ）のスペクトルを示す図である。

【図7】ベンゼンポリカルボン酸の重合体化合物を添加せずに培地で培養して１５日目の末梢血単核球細胞（peripheral blood mononuclear cell、ＰＢＭＣ）の画像（「ａ−対照」として示す）と、本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物を培地に対して２１５μｇ／Ｌの濃度で含む培地で培養して１５日目のＰＢＭＣの画像（「ｂ−重合体化合物、２１５μｇ／Ｌ」として示す）を示す図である。

【図8】本発明の化合物で処理後のヒト乳癌細胞ＭＣＦ−７の生存率データを示す図である。

【図9】本発明の化合物で処理後のヒト乳癌細胞Ｔ４７−Ｄの生存率データを示す図である。

【図10】本発明の化合物で処理後のヒト脾臓癌細胞ＰＩ４５の生存率データを示す図である。

【図11】本発明の化合物で処理後のヒト膀胱癌細胞Ｔ２４Ｐ及びヒト卵巣癌細胞ＳＫＯＶ−３の生存率データを示す図である。

【図12】本発明の化合物で処理後のヒト乳癌細胞ＭＣＦ−７の乳酸脱水素酵素（lactate dehydrogenase、ＬＤＨ）活性を示す図である。

【図13】本発明の化合物で処理後のヒト乳癌細胞Ｔ４７−ＤのＬＤＨ活性を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0032】

本発明は、新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物に関し、その元素組成は、乾燥重量でＣが６２〜６７％、Ｈが３．８〜４．２％、Ｏが２９〜３４％、Ｎが０．２％未満、他の元素（無機不純物）の合計が１％未満であることを特徴とする。この新規な化合物は、独自の薬理活性、高い純度を有し、安定した錯体を形成する能力、すなわち様々な薬剤を封止する能力が高められている。

【0033】

本明細書を通じて、用語「ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物」は主に水溶性多塩基芳香族炭酸を含む重合体を指す。

【0034】

この新規な水溶性重合体はさらに^１３Ｃ−ＮＭＲ法、ＩＲ法、及びＦＴＩＣＲ−ＭＳ法によって特徴づけることができる。

【0035】

^１３Ｃ−ＮＭＲによると、０〜４８ｐｐｍの範囲で検出されたＣＨ_ｎ脂肪族基の炭素量は１５〜２２％であり、１０８〜１４５ｐｐｍの範囲で検出された芳香族Ｃ_ＡＲの炭素量は３０〜４２％であり、１６５〜１８７ｐｐｍの範囲で検出されたカルボン酸エステルＣＯＯ基の炭素量は５〜１３％であり、１８７〜２２０ｐｐｍの範囲で検出されたケトン基С＝Оの炭素量は２〜８％である。１６８．５ｐｐｍ（カルボン酸陰イオン）、１７１ｐｐｍ（ギ酸陰イオン）、１７３ｐｐｍ（シュウ酸陰イオン）、及び１８１〜１８２ｐｐｍ（酢酸陰イオン）で検出された低分子不純物の全量は１％未満である。

【0036】

本明細書を通して、用語「低分子不純物」は、重合されなかった分子量３００Ｄａ未満の化合物を指す。

【0037】

１４１０ｃｍ^−１にピークを持つイオン化不斉ＣＯＯ基に特有の顕著な伸縮振動がこの重合体のＩＲスペクトルに認められる。脂肪族及び芳香族炭酸の混合物に相当する錯体吸収帯が、１５００〜１７００ｃｍ^−１の範囲に広く見られる。カルボン酸の他に、この重合体は水素結合で互いに結合したかなりの量のフェノール性化合物をも含む。このことは、以下の吸収帯が存在することにより証明されている。３４００〜３６００ｃｍ^−１（ОН）、１０５０ｃｍ^−１（С−О）、１２５０〜１３００ｃｍ^−１（ОН）。２８００〜３０００ｃｍ^−１帯域には、２９２８ｃｍ^−１にピークを有する吸収帯と、２８５３ｃｍ^−１にピークを有する吸収帯が含まれ、それぞれＣＨ_３基及びＣＨ_２基のＣＨ基の原子価振動に相当する。１７５０ｃｍ^−１に特定される小さな吸収ピークは、Ｃ＝Ｏ基の振動に相当する。

【0038】

本発明の新規な重合体化合物の１５００Ｄａの断片は、次の分子式で表すことができる。
（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３
（ただしｘ_１≦１２、х_２≦９、х_３≦３３）

【0039】

ベンゼンポリカルボン酸（芳香族成分、主にベンゼンポリカルボン酸のメチルエステルとして定義される）は、この重合体の主要な単量体である。また、ベンゼンポリカルボン酸重合体は、飽和脂肪族カルボン酸、飽和脂肪族ヒドロキシカルボン酸、一不飽和脂肪族カルボン酸、一不飽和脂肪族ヒドロキシカルボン酸、多不飽和脂肪族カルボン酸などの単量体を含む。

【0040】

飽和脂肪族カルボン酸は一般式−Ｃ_ｎＨ_２ｎＯ_２（ｎは１２〜２６）に相当する。飽和脂肪族ヒドロキシカルボン酸は一般式−Ｃ_ｎＨ_２ｎＯ_３（ｎは１６〜２６）に相当する。一不飽和脂肪族カルボン酸及び一不飽和脂肪族ヒドロキシカルボン酸は、下記式に相当する。
−Ｃ_ｎＨ_２ｎ−２Ｏ_２、Ｃ_ｎＨ_２ｎ−２Ｏ_３、Ｃ_ｎＨ_２ｎ−２Ｏ_４、Ｃ_ｎＨ_２ｎ−２Ｏ_５（ｎは１４〜２８）
上記化合物は重合体の表面活性特性にとって重要である。多不飽和脂肪族カルボン酸は、１３−シス−レチノイン酸、６Ｚ，９Ｚ，１２Ｚ，１５Ｚ−オクタデカテトラエン酸、シス，シス，シス−６，９，１２−オクタデカトリエン酸、（９Ｒ，１３Ｒ）−２−オキソ−５−ペンチル−３−シクロペンテン−１−オクタン酸、９Ｓ−ヒドロペルオキシ−１０Ｅ，１２Ｚ，１５Ｚ−オクタデカトリエン酸、С１３（Ｓ）−ヒドロキシオクタデカ−９Ｚ，１１Ｅ−ジエン酸、１０Ｓ，１１Ｓ−エポキシ−９Ｓ−ヒドロキシ−１２Ｚ−オクタデセン酸、９Ｓ，１２Ｓ，１３Ｓ−トリヒドロキシ−１０Ｅ，１５Ｚ−オクタデカジエン酸、５，６−デヒドロアラキドン酸、及び１５（Ｓ）−ヒドロキシ−（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１３Ｅ，１７Ｚ）−エイコサペンタエン酸で表される。この最後の群（１３−シス−レチノイン酸（イソトレチノイン）、С１３（Ｓ）−ヒドロキシオクタデカ−９Ｚ，１１Ｅ−ジエン酸、５，６−デヒドロアラキドン酸など）に属する多くの化合物の抗癌効果及び酸化防止効果は、本発明の重合体にも保持される。

【0041】

主要な単量体（芳香族成分）群は、以下の単量体を含む。３−ベンジルオキシ−４，５−ジヒドロキシ−安息香酸メチルエステル、５−（フラン−２−カルボニルオキシ）−２−メチル−ベンゾフラン−３−カルボン酸メチルエステル、２，６−ジメチル−ベンゾ（１，２−ｂ，４，５−ｂ’）ジフラン−３，７−ジカルボン酸ジメチルエステル、５−（フラン−２−カルボニルオキシ）−２−メチル−ベンゾフラン−３−カルボン酸エチルエステル、ラムネチン、（４−メチル−６−オキソ−６ｈ−ベンゾ（ｃ）クロメン−３−イル）オキシ）酢酸メチル水和物、炭酸ビス（２−（メトキシカルボニル）フェニル）、スロクリン、２，６−ジアセチル−７，９−ジヒドロキシ−８，９ｂ−ジメチルジベンゾフラン−１，３（２Ｈ，９ｂＨ）−ジオン、Ｏ−アセチルサリチル酸無水物、４−ｈｏ−３−（（６−ｈｏ−ベンゾ（１，３）ジオキソール−５−イル）−（３−メトキシ−フェニル）−メチル）−５ｈ−フラン−２−オン、２，３−ビス−ベンゾイルオキシ−コハク酸、５−ヒドロキシ−７，８−ジメトキシ−１，３−ジオキソ−１，３，１０，１１−テトラヒドロベンゾ［５，６］シクロオクタ［１，２−ｃ］フラン−４−カルボン酸メチル、（１−メトキシカルボニルメトキシ−６−オキソ−６ｈ−ベンゾ（ｃ）クロメン−３−イルオキシ）−酢酸メチルエステル、アトラノリン及びフェニルプロパノイド置換エピカテキン。この群に属する多くの化合物は、抗生物質効果及び抗癌効果を示す。

【0042】

本発明はまた、ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物を調製する方法に関する。本発明の新規な重合体化合物を以下の方法により調製することができる。

【0043】

この方法の第１の工程で、リグニン含有材料を出発原料として用意する。そのようなリグニン含有材料には、例えば酸化リグニン、木材、泥炭、植物の残部、パルプ工場の残りなどが挙げられる。最も好ましいリグニン含有出発原料は、針葉樹から製造されたものであり、ｐＨが５．５〜７、含水量が５０〜７０％、３２％以下の多糖類と６６％以上のリグニンと２％以下の水溶性化合物とを含む。

【0044】

この方法の第２の工程では、リグニン含有材料の懸濁水液を圧力２．２±０．３ＭＰａでｐＨ１３±０．５のアルカリで処理する。この処理に用いることができるアルカリは例えば、アルカリ金属および／またはアルカリ土類金属および／またはアンモニアの水酸化物が挙げられる。しかしながら、好ましいアルカリは水酸化ナトリウムである。このアルカリ処理により、加水分解及び酸化の結果、ベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液が得られる。

【0045】

この方法の第３の工程では、このベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を酸密度勾配処理する。この工程では、ベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液は、鉱酸で処理され、遠心力で処理される。その結果、密度勾配が形成され、ベンゼンポリカルボン酸が縮合重合する。この処理に用いることができる鉱酸は例えば、硫酸、オルトリン酸、硝酸、塩酸など安定した溶解性の酸が挙げられる。しかしながら、好ましい鉱酸は塩酸である。

【0046】

第４の工程は精製工程で、抽出、浮遊、蒸留、濾過、沈殿、遠心分離、デカンテーションおよび／または透析などの精製工程を１つ以上行って低分子不純物を取り除く。この精製は、^１３Ｃ−ＮＭＲまたは他の典型的な方法（ガスクロマトグラフィなど）で検出される低分子不純物量が重合体の乾燥重量の１％未満になるまで行う。

【0047】

この重合体を調製する方法の最良の形態が実施例１に開示されている。本発明の重合体と、ＲＵ２１８２４８２によって得られたフミン酸との比較結果も実施例１に記載されている。

【0048】

本発明はまた、この新規なベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物と金属陽イオンと必要に応じて抗癌剤とを含む複合物質に関する。好ましい複合物質では、このベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物が錯化剤および／または封止剤として作用する。

【0049】

本明細書を通じて用語「水溶性重合体」は、濃度５ｗｔ％でｐＨが中性またはアルカリ性の水に可溶な重合体を指す。

【0050】

本明細書を通じて用語「錯化剤」は、金属イオンと可溶性錯体を形成することができる電子供与性化合物を指す。これら錯体は配位錯体および／またはキレート錯体であってもよい。これら錯体では、本発明の重合体の断片が、中心の金属イオンの配位子である。金属イオンは、２ｓ−５ｓ金属または３ｄ−５ｄ金属であることができる。そのような２ｓ−５ｓ金属または３ｄ−５ｄ金属は例えば、白金、モリブデン、リチウム、カルシウム、カリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、亜鉛、銀、パラジウム、銅などが挙げられる。

【0051】

本明細書を通じて用語「封止剤」は、小分子を閉じこめて周囲の環境負荷から保護することができる大分子を指す。錯化剤に対して、封止剤は閉じこめている小分子と安定した化学結合を形成しない。よって、用語「封止」は、「より大きな分子内に小分子を閉じこめる過程」を指す。

【0052】

また、本発明の発明者らは、１種の新規な水溶性重合体と、さらに必要に応じて１種以上の賦形剤とを含む医薬品組成物、栄養補助食品組成物、及び化粧品組成物を調製する課題に取り組んだ。

【0053】

化粧品組成物は、上記の新規な水溶性重合体化合物とそのような化粧品組成物に典型的に存在する他の成分とからなる。この化粧品組成物はさらに、例えば殺菌特性、創傷治癒特性、酸化防止特性を有する他の化合物を含むことができる。このように殺菌剤組成物を得るには、殺菌活性を示す金属として銀陽イオンを用いる。創傷治癒組成物を得るには、創傷治癒活性を示す金属として銅を用いる。酸化防止組成物を得るには、酸化防止活性を示す金属有機鉱物錯体としてリチウムを用いる。この化粧品組成物は、皮膚の修復や治療に用いることができる。

【0054】

栄養補助食品組成物は、上記の新規な水溶性重合体化合物とそのような栄養補助食品組成物に典型的に存在する他の成分とからなる。この栄養補助食品組成物はさらに栄養素を含むことができる。栄養素（生体に必須の栄養素のミネラル）としては、例えば鉄、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどの多量元素および／または例えばリチウム、銀、亜鉛、銅、マンガン、パラジウムなどの微量元素を用いることができる。この栄養補助食品組成物は栄養バランスの回復に用いることができる。

【0055】

いくつかの実施形態では、医薬品組成物は上記の新規な水溶性重合体化合物を含むが、他の実施形態ではこの医薬品組成物は上記の新規な水溶性重合体化合物と金属陽イオンとを含む複合物質を含む。医薬品組成物はまた、抗癌剤を含むことができる。抗癌剤は、世界保健機関作用部位・薬効・化学構造別（Anatomical Therapeutic Chemical、ＡＴＣ）分類体系のＬ群から選択することができる。そのような抗癌剤の好適な例としては、シクロホスファミド、シスプラチン、メトトレキサート、フルオロウラシル、ドキソルビシン、ゴセレリン、タモキシフェン、フィルグラスチム、インターフェロンα、インターロイキンなどが挙げられる。この医薬品組成物は病気の治療、予防、または進行遅延に用いることができる。本発明による医薬品組成物に用いることができる賦形剤は例えば、付着防止剤、結着剤、被覆剤、崩壊剤、増量剤、溶媒／共溶媒、香味料、着色料、潤滑剤、流動促進剤、保存料、吸収吸着剤、甘味料、担体、医薬品有効成分（active pharmaceutical ingredient、ＡＰＩ）放出調節用重合体、ＡＰＩ保護用重合体、緩衝剤、酸化防止剤、湿潤剤、気泡防止剤、増粘剤、保湿剤、またはこれらの混合物からなる群から選択される化合物が挙げられる。

【0056】

本発明による医薬品組成物は好ましくは経口投与、粘膜投与、または舌下投与するように処方される。よって本発明の医薬品組成物は、好ましくは錠剤、トローチ剤、チューインガム、粘着性液状ペースト、飴、棒付き飴、噛み砕ける飴、またはゲル状ドロップとして処方される。

【0057】

本発明のいくつかの実施形態は、上記の新規な水溶性重合体化合物と金属陽イオンとを含む複合物質に関する。上記複合物質の中でも最も関心が高いのが、上記重合体と白金化合物とを含む複合物質、及び上記重合体とモリブデン化合物とを含む複合物質である。

【0058】

平面四配位構造を有するという点で区別される２価の白金錯体が、最も可能性の高い抗腫瘍化合物であることが知られている。この白金錯体は、白金イオンが中心位置を占め、配位子が同一面の正方形の四角に配置された構造を有する。このような組成物では、白金配位イオンの原子価角が、ＤＮＡの隣接するグアニン分子間の距離に一致する。これにより、白金配位イオンが、鎖内付加物の形成によりＤＮＡの合成を阻害することができる。本発明の一つの好ましい実施の形態において、複合物質の合成のための２価白金錯体として二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）、四塩化白金酸カリウム、またはこれらの混合物を用いる。

【0059】

本発明はまた、本発明による上記複合物質を調製する方法に関する。本発明によれば、本発明の重合体化合物と平面四配位白金（ＩＩ）化合物とを含む複合物質は、未結合の白金含有量（すなわち重合体と反応しなかった白金）が元の量の２５％未満になるまで上記物質を波動放射に晒す、特に出力密度０．５〜５Ｗ／ｃｍ^３、周波数１８〜６６ｋＨｚで１分間から３０分間、超音波処理を行うことにより調製することができる。

【0060】

続く工程で、未結合の白金部分が元の量の１０％未満になり、平面四配位白金（ＩＩ）化合物と上記重合体とで錯体が形成されるまでこの複合物質を１〜３０日間２℃から４０℃で温度自動調節（すなわち特定の温度条件で保存）する。

【0061】

最後の工程で、この複合物質を精製して、医薬品への応用に好適な生成物を調製する。精製は、殺菌濾過、高圧蒸気滅菌、照射など１つ以上の精製工程を含むことができる。

【0062】

上記複合物質では、白金が、以下の構造を有するベンゼンポリカルボン酸重合体の１つで封止されているか、錯体を形成している。

【化1】

（式中、構造（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）は、上記芳香族成分の部分を表し、構造（ｅ）は上記脂肪族成分の部分を表す。）

【0063】

これら構造の存在は、３４００〜３６００ｃｍ^−１、２８００〜３０００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、１２５０〜１３００ｃｍ^−１、及び１０５０ｃｍ^−１にあるＩＲ特性吸収帯により示される。重合体と白金の結合のため、３４００〜３６００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、及び１２５０〜１３００ｃｍ^−１のピーク強度はベンゼンポリカルボン酸重合体化合物のピーク強度よりも小さい。

【0064】

白金含有複合物質の実験式は、^１３Ｃ−ＮＭＲ法（分子式）及び２Ｄ−ＮＭＲ法により確立された。これによると、この白金含有複合物質は重合体の各繰り返し断片（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）、（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）、（ＣＨ_２）からなる。溶液中でこの重合体化合物はコロイド状ミセルのかたちでのみ存在するという事実から、その真の分子質量を確証するのが困難である。この重合体の正確な分子式は未だ確立しておらず、よってその分子式ではより特定の係数を例示することができない。本発明によれば、この白金含有複合物質の組成は、以下の一般式によって表すことができる。
（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３（Ｐｔ（ＮＨ_３）_２）_ｘ４

【0065】

この式において、ｘ_４＝１、ｘ_１≦１２，ｘ_２≦９、及びｘ_３≦３３という化学量論比が維持される。この分子式は、上記複合物質の１５００〜２０００Ｄａの断片を記述するものである。これより大きいまたは小さい分子量の複合物質が調製される場合、係数ｘ_１、ｘ_２、ｘ_３、及びｘ_４は比例して変化する。この式では、これら係数は正の整数または小数である。

【0066】

上記重合体化合物と白金化合物とを含む上記複合物質を調製する最良の形態が実施例２で記載されている。

【0067】

本発明はまた上記重合体化合物と白金（ＩＩ）化合物とを含む薬剤に関する。

【0068】

本発明はまた上記重合体化合物と白金（ＩＩ）化合物との薬剤を含む医薬品組成物に関する。この医薬品組成物は、必要に応じて１種以上の賦形剤を含んでいてもよい。好ましくは、この１種以上の賦形剤は、付着防止剤、結着剤、被覆剤、崩壊剤、増量剤、溶媒／共溶媒、香味料、着色料、潤滑剤、流動促進剤、保存料、吸収吸着剤、甘味料、担体、ＡＰＩ放出調節用重合体、ＡＰＩ保護用重合体、緩衝剤、酸化防止剤、湿潤剤、気泡防止剤、増粘剤、保湿剤、またはこれらの混合物からなる群から選択される。

【0069】

上記薬剤及び上記薬剤を含む医薬品組成物は、転移性乳癌を含む様々な種類の癌の治療など、病気の治療に用いることができる。本発明の医薬品組成物によって治療することができる癌は乳癌、脾臓癌、膀胱癌、前立腺癌、大腸癌、頭部及び頸部癌などが挙げられるが、これらに限定されない。上記薬剤及び医薬品組成物はまた、癌の予防、癌で苦しむ哺乳類の苦痛緩和治療、あるいは前記癌の進行遅延に用いることができる。本明細書を通じて用語「前記癌の進行遅延」は、薬剤が直接の抗癌効果を保証するものではないが、病気の発達に影響を与える、かつ／または癌患者の生活の質を変化させることを指す。この薬剤は、いずれの通常投与経路から投与することができるが、好ましくは投与経路は非経口投与、腸内投与、または局所投与である。非経口投与の場合は、筋肉注射が好ましい。治療対象の哺乳類は、一つの実施形態では非食物生産種である。好ましくは、前記非食物生産種はヒト、イヌ、ネコ、ウマから選択することができる。

【0070】

上記複合物質に基づく医薬品組成物を癌の治療に用いると、ヒトの前臨床試験及び臨床試験で腫瘍の成長を有意に阻害することができる（実施例３）。

【0071】

本発明の発明者らはまた、ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物に基づく複合物質群を調製した。好ましくは、上記モリブデン化合物は、モリブデン酸アンモニウム、モリブデン酸アンモニウム四水和物、カリウムモリブデン酸、ナトリウムモリブデン酸、ナトリウムモリブデン酸二水和物、及びこれらの混合物などモリブデン酸塩から選択される。

【0072】

上記複合物質では、モリブデンが、以下の構造を有するベンゼンポリカルボン酸重合体の１つで封止されているか、錯体を形成している。

【化2】

（式中、構造（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）は、上記芳香族成分の部分を表し、構造（ｅ）は上記脂肪族成分の部分を表す。）

【0073】

これら構造の存在は、３４００〜３６００ｃｍ^−１、２８００〜３０００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、１２５０〜１３００ｃｍ^−１、及び１０５０ｃｍ^−１にあるＩＲ特性吸収帯により示される。ここで、上記重合体とモリブデンの結合により、３４００〜３６００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、及び１２５０〜１３００ｃｍ^−１のピーク強度はベンゼンポリカルボン酸重合体化合物のピーク強度よりも小さい。

【0074】

本発明によれば、モリブデン含有複合物質の組成は、以下の一般式によって表すことができる。
（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３（ＭｏＯ_３）_ｘ４（Ｈ_２Ｏ）_ｘ５（ＮＨ_４）_ｘ６

【0075】

この式において、ｘ_４＝１．５、ｘ_１≦１２、ｘ_２≦９、ｘ_３≦３３、ｘ_５≦２、及びｘ_６≦２という化学量論比が維持される。この分子式は、上記複合物質の１５００〜２０００Ｄａの断片を記述するものである。これより大きいまたは小さい分子量の複合物質が調製される場合、係数ｘ_１、ｘ_２、ｘ_３、ｘ_４、ｘ_５、及びｘ_６は比例して変化する。この式では、これら係数は正の整数または小数である。

【0076】

本発明はまた、本発明による複合物質を調製する方法に関する。本発明によれば、本発明の重合体化合物とモリブデン化合物とを含む複合物質は、未結合のモリブデン（上記重合体と未反応のモリブデン）の含有量が元の量の２５％未満になるまで上記複合物質を波動放射に晒す、特に出力密度０．５〜５Ｗ／ｃｍ^３、周波数１８〜６６ｋＨｚで１分間から３０分間、超音波処理を行うことにより調製することができる。

【0077】

続く工程で、未結合のモリブデン部分が元の量の１０％未満になり、モリブデン化合物と上記重合体の錯体が形成されるまでこの複合物質を１〜３０日間２℃から４０℃で自動温度調節（すなわち特定の温度条件で保存）する。

【0078】

最後の工程で、この複合物質を精製して、医薬品への応用に好適な生成物を調製する。精製は、殺菌濾過、高圧蒸気滅菌、照射など１つ以上の精製工程を含むことができる。

【0079】

上記重合体とモリブデン化合物とを含む複合物質を調製する最良の形態は、実施例４に記載されている。

【0080】

本発明はまた、上記重合体化合物とモリブデン化合物とを含む薬剤に関する。

【0081】

本発明はまた、重合体化合物とモリブデン化合物からなる上記薬剤を含む医薬品組成物に関する。この医薬品組成物は、必要に応じて１種以上の賦形剤を含むことができる。好ましくは、この１種以上の賦形剤は、付着防止剤、結着剤、被覆剤、崩壊剤、増量剤、溶媒／共溶媒、香味料、着色料、潤滑剤、流動促進剤、保存料、吸収吸着剤、甘味料、担体、ＡＰＩ放出調節用重合体、ＡＰＩ保護用重合体、緩衝剤、酸化防止剤、湿潤剤、気泡防止剤、増粘剤、及び保湿剤からなる群から選択される。

【0082】

上記薬剤及び上記薬剤を含む医薬品組成物は放射線によって誘発された発癌や細胞の自然老化による発癌など、細胞周期破壊病気で苦しむ哺乳類の治療に用いることができる。

【0083】

上記薬剤及び医薬品組成物はまた、放射線によって誘発された発癌や細胞の自然老化による発癌など、細胞周期破壊病気で苦しむ哺乳類の苦痛緩和治療、あるいは前記病気の進行遅延に用いることができる。本明細書を通じて用語「前記病気の進行遅延」は、薬剤が直接病気を治療するものではないが、病気の発達に影響を与える、かつ／または癌患者の生活の質を変化させることを指す。上記薬剤は経口投与することができる。治療対象の哺乳類は、一つの実施形態では非食物生産種である。好ましくは、前記非食物生産種はヒト、イヌ、ネコ、ウマから選択することができる。

【0084】

実施例５では、上記重合体化合物とモリブデン化合物とを含む医薬品組成物の研究結果が開示されている。前記医薬品組成物は細胞応答を誘発するのに用いられる。

【実施例】

【0085】

以下の例により本発明を更に説明するが、これらの例はいかなる点においてでも本発明の範囲を限定するものではない。
比較例１Ａ：ＲＵ２１８２４８２に開示されたフミン酸を調製する方法及び前記化合物の特性評価

【0086】

比較のため、露国特許ＲＵ２１８２４８２の実施例１に記載された周知のフミン酸を調製し、以下のように特性評価を行った。
調製

【0087】

加水分解リグニン。非特異的腸内投与吸収吸着剤（商標名「Ｐｏｌｙｐｈｅｐａｎｕｍ」としてＳｃｉｅｎｔｅｋ社から入手可能）を開始材料として用いた。

【0088】

１ｋｇの開始材料、１００ｇの水酸化ナトリウム、及び８．１ｋｇの水からなる溶液を、酸素を５ｌ／分で供給しながら、機械的撹拌機構を備えた酸化反応器で１時間、１６０℃の温度、２．５ＭＰａの圧力で処理した。反応混合物を室温まで冷却し、固体残渣を濾過により取り除いた。この濾液は、フミン酸物質を含むアルカリ性溶液であるが、そのｐＨを硫酸で２〜３に調整した。フミン酸の残留物を濾過して分離し、ｐＨが６．０〜６．５になるまで蒸留水、次いで水とアルコールの混合物で洗浄した。質量が一定になるまで得られた生成物を１０５℃で乾燥した。
特性評価

【0089】

上記のように調製したフミン酸を以下のように特性評価した。
灰分（鉱物不純物）：１３．５％
元素組成：Ｃ（６７．０％）、Ｈ（４．０％）、Ｎ（１．０％）Ｏ（０．２８％）
低分子不純物：次の^１３Ｃ−ＮＭＲピークによって同定した。１６８．５ｐｐｍ（カルボン酸陰イオン）、１７１ｐｐｍ（ギ酸陰イオン）、１７３ｐｐｍ（シュウ酸陰イオン）、１８１〜１８２ｐｐｍ（酢酸陰イオン）。特定された不純物の全量は乾燥重量の４．１％であった。

【0090】

このフミン酸の構造を^１３Ｃ−ＮＭＲにより分析した。結果を以下の表１及び図１に示す。

【0091】

表１ ^１３Ｃ−ＮＭＲの分析結果

【表1】

【0092】

実施例１Ｂ：本発明のベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物を調製する方法、及び前記化合物の特性評価

【0093】

調製
加水分解リグニン。非特異的腸内投与吸収吸着剤 （商標名「Ｐｏｌｙｐｈｅｐａｎｕｍ」としてＳｃｉｅｎｔｅｋ社から入手可能）を開始材料として用いた。

【0094】

この開始材料は以下の物理・化学特性を有する。ｐＨ６．５、含水量６６．６３％、乾燥重量で多糖類の含有量２５％、リグニンの含有量７２．５％、水溶性化合物１．５％。

【0095】

工程ａ。０．９９８ｋｇのＰｏｌｙｐｈｅｐａｎｕｍを１５リットルの容器に入れ、６ｋｇの蒸留水を加えた。この混合物を十分に撹拌した。

【0096】

工程ｂ。約２リットルの５０％水酸化ナトリウム溶液を、工程ａの混合物に断続的に加えてｐＨ１３にした。この懸濁液を１０リットルの酸化加水分解反応器でアルカリ処理した。温度が１６０℃、圧力が２．２ＭＰａに達したら、空気の供給量を５ｄｍ^３／分に下げて、さらに２時間処理を継続して不溶性リグニンを完全に加水分解及び酸化した。得られた生成物、すなわちベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液を加圧濾過器にて固体残渣から分離した。

【0097】

工程ｃ。工程ｂで調製したベンゼンポリカルボン酸のナトリウム塩溶液をｐＨが１〜２になるまで塩酸で処理した。その後、１５分間２５００ｒｐｍで前記溶液を遠心力にかけて、密度勾配によりベンゼンポリカルボン酸の重合を誘導した。このように、緻密化した粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を調製した。

【0098】

工程ｄ。粗ベンゼンポリカルボン酸重合体を３．５ｋＤａ透析管に入れて、^１３Ｃ−ＮＭＲまたは他の典型的な方法（例えばガスクロマトグラフィ）で検出される低分子不純物量が重合体の乾燥重量の１％になるまで蒸留水に対して透析した。ベンゼンポリカルボン酸の最終精製重合体化合物が調製された。

【0099】

ベンゼンポリカルボン酸の最終精製重合体化合物を乾燥して、さらに特性評価を行った。

【0100】

特性評価
工程ｄで調製した重合体を以下のように特性評価した。
性状：黒色結晶
同定：ＩＲスペクトル吸収帯：３４００〜３６００ｃｍ^−１（ОН）、１０５０ｃｍ^−１（С−О）、１２５０〜１３００ｃｍ^−１（ОН）。２８００〜３０００ｃｍ^−１の領域には、２９２８ｃｍ^−１及び２８５３ｃｍ^−１にピークを有する吸収帯が含まれ、それぞれＣＨ_３基及びＣＨ_２基のＣＨ基の原子価振動に相当する。小さな吸収ピークが１７５０ｃｍ^−１に特定された。これはＣ＝Ｏ基の振動に相当する。重合体のＩＲスペクトルを図２に示す。
固体残渣：９３．２５％
灰分（鉱物不純物）：０．６７％
塩化物：０．０３％未満
重金属：０．００１％未満
元素組成：Ｃ（６２．５％）、Ｈ（３．８％）、Ｎ（０．１８％）、Ｏ（３３．７％）
低分子不純物：次の^１３Ｃ−ＮＭＲピークによって同定した。１６８．５ｐｐｍ（カルボン酸陰イオン）、１７１ｐｐｍ（ギ酸陰イオン）、１７３ｐｐｍ（シュウ酸陰イオン）、１８１〜１８２ｐｐｍ酢酸陰イオン）。同定された不純物の全量は乾燥重量で０．８％であった。

【0101】

この重合体化合物の構造を^１３Ｃ−ＮＭＲにより分析した。その結果を以下の表２及び図３に示す。

【0102】

表２ ^１３Ｃ−ＮＭＲの分析結果

【表2】

【0103】

本発明の重合体について、二次元ＮＭＲ同核種スペクトル及び異種核スペクトルも得た（図４）。ピーク同定の結果を以下の表３に示す。

【0104】

表３ 本発明の重合体の二次元ＮＭＲ同核種スペクトル及び異種核スペクトル

【表3】

【0105】

このＮＭＲ分析から得たデータによると、本発明の重合体は、事実上すべての位置でアルキル基、メトキシ基、アルコール、ヒドロキシ基、カルボキシ基で置換された芳香族核として特徴づけることができる。表３から明らかなように、脂肪族炭素の４．５〜６個の原子が芳香族炭素の炭素数６に相当する。ここで、断片構造（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）、Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）、（ＣＨ_２）が繰り返されている。

【0106】

本発明の重合体の分子量をゲル濾過法により分析した。これにより求められた本発明の重合体の断片の分子量は１．５ｋＤａであった。この分子量、元素組成及びＮＭＲ分析のデータに基づいて以下の構造式を算出した。
（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３
（ただし、ｘ１≦１２、х２≦９、х３≦３３）

【0107】

本発明の重合体の単量体をフーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴質量分析により調べた（ＦＴＩＣＲ−ＭＳ）（図５）（表４）。

【0108】

表４ 本発明の重合体中に同定された高存在量の単量体

【表4-1】

【0109】

【表4-2】

【0110】

【表4-3】

【0111】

【表4-4】

【0112】

【表4-5】

【0113】

【表4-6】

【0114】

【表4-7】

【0115】

実験データ
本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物をさらに蒸留水で希釈して異なる濃度の溶液を調製し、健康な提供者の血液からリンポプレップ（Lymphoprep）を用いる遠心分離によって分離したリンパ球（７０〜８０％）及び単球（２０〜３０％）からなる末梢血単核細胞（peripheral blood mononuclear cell、ＰＢＭＣ）に対して試験を行った。

【0116】

本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物を２１５μｇ／Ｌ含む細胞培地を１５日間培養した後、ＰＢＭＣに対して効果を発揮したことが認められた。これは、図７に示すように、リンパ球の運動性及び単球の持続性の増加として現れた。

【0117】

実施例２Ａ：ＲＵ２１８２４８２による抗癌剤の調製方法及び前記抗癌剤の特性評価
調製
ＲＵ２１８２４８２で開示された方法に従って実施例１Ａで調製したフミン酸を、フミン酸１ｇにつき８０ｍｌの量の５％アンモニア溶液で処理し、水槽で加熱して過剰のアンモニアを取り除いた。その後、得られた溶液を濾過して、３０体積％の蒸留水と混合した。さらに、フミン酸の塩として得られたこの溶液をフミン酸１ｇにつき０．２７質量％の量の四塩化白金酸カリウムで処理し、４０Ｗ／ｃｍ^２、２２ｋＨｚで４分間、音響キャビテーションに晒した。水で溶液の体積を１００ｍｌに調整した。

【0118】

実験２Ａ−１
このように調製した抗癌剤を、エールリッヒ腫瘍を接種したマウスに、体重あたり６２．５ｍｇ／ｋｇの量を皮下投与した。腫瘍は、１０^７個の細胞を皮下に接種した。腫瘍の接種後４８時間後に治療を開始した。０．３ｍｌ／マウスの量を週に３回、３週間（合計９回の注射）注射した。対照群には、同じ投与計画に従って等張塩化ナトリウム溶液を与えた。治療されなかった対照群と比べて６０％（１０匹中６匹）が生存し、腫瘍の成長が５０％阻害されたことが実験で認められた。
動物の死亡は、フミン酸に未結合の白金化合物の毒性が原因となっていた。

【0119】

実施例２Ｂ：本発明の白金（ＩＩ）を含む複合物質を調製する方法及び前記複合物質の特性評価
調製
工程ａ。実施例１Ｂに記載した方法で調製した乾燥重合体４．５２９グラムを１リットルの蒸留水で希釈した。１０％アンモニア溶液でｐＨを９．２に調整した。この溶液に０．８３７３ｇの二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）を加えた。得られた溶液を、未結合の白金量が元の量の２５％未満になるまで３．５Ｗ／ｃｍ^３、２２ｋＨｚで超音波処理を行った。

【0120】

未結合の白金の検出方法
上記白金錯体の形成の完成を標準的な孔径５００〜１０００Ｄａのセルロースの透析膜で制御した。この範囲の孔径とすると、白金化合物は透析膜を透過することができるが、１５００Ｄａの本発明の重合体は透過されず、従って白金との錯体もまた透過されない。

【0121】

この試験を行うため、超音波処理中に集めた複合物質の試料８ｍｌを透析管に入れた。この透析管を、蒸留水で満たした容器に４時間浸して透析液を得た。

【0122】

０．８３７３ｇの二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）を１リットルの蒸留水で希釈してモデル溶液（対照溶液）を得た。モデル溶液から透析液に移動した白金の量を１００％とした。

【0123】

モデル溶液の透析液を測定したところ、未結合の白金濃度は７６ｍｇ／ｌ（１００％）であった。一方、本発明の複合物質の透析液を測定したところ、未結合の白金濃度は１８ｍｇ／ｌ（２４％）であった。

【0124】

工程ｂ。さらに、上記のベンゼンポリカルボン酸と二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）とを含む重合体化合物を含む反応混合物を４０℃で２４時間、自動温度調節して、所望の錯体の形成を完了させた。未結合の白金濃度（上記方法で求めた）が工程ａで添加した量の１０％未満になるまでこの自動温度調節を継続した。

【0125】

工程ｃ。さらに１０．０μｍのポリプロピレン濾過器で工程ｂの粗複合物質を機械的含有物から分離して、実施例３に記載する医薬品組成物の調製に用いた。

【0126】

実験２Ｂ−１
このように調製した複合物質を、エールリッヒ腫瘍を接種した動物に、体重あたり６２．５ｍｇ／ｋｇの量を皮下投与した。腫瘍は、１０^７個の細胞を皮下接種した。腫瘍の接種４８時間後に治療を開始した。０．３ｍｌ／マウスの量を週に３回、３週間（合計９回の注射）注射した。対照群には、同じ投与計画に従って等張塩化ナトリウム溶液を与えた。治療されなかった対照群と比べて１００％（１０匹中１０匹）が生存し、腫瘍の成長が６５％阻害されたことが実験で認められた。

【0127】

本発明の複合物質はＲＵ２１８２４８２の抗癌剤に比べてより高い安全性及び効力を有するが、複合物質内に上記白金化合物がよりよく錯化されていた結果によるものである。

【0128】

特性評価
ベンゼンポリカルボン酸重合体化合物と二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）との新規な錯体の形成をさらに広域Ｘ線吸収微細構造分析（ＥＸＡＦＳ）（図６を参照）により調査した。本発明のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物と二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）を含む本発明の複合物質、無機二塩化シス−ジアンミン白金（ＩＩ）（スペクトルでは「シスプラチン」として示される）、及びシス−ジアンミン（シクロブタン−１，１−ジカルボキシラート−Ｏ，Ｏ’）白金（ＩＩ）（図では「カルボプラチン」として示される）間の有意な違いがＥＸＡＦＳスペクトルに見られる。

【0129】

本発明の複合物質は、以下のＩＲスペクトルの特性吸収帯によって特徴づけられる。３４００〜３６００ｃｍ^−１、２８００〜３０００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、１２５０〜１３００ｃｍ^−１、及び１０５０ｃｍ^−１（ここで３４００〜３６００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、及び１２５０〜１３００ｃｍ^−１帯域の複合物質の強度は、ベンゼンポリカルボン酸重合体化合物の強度よりも小さい）。

【0130】

^１３Ｃ−ＮＭＲ及びＥＸＡＦＳ法で得たデータに基づき、この複合物質の分子式を以下のように算出した。
（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３（Ｐｔ（ＮＨ_３）_２）_ｘ４
（ただし、ｘ_１、ｘ_２、ｘ_３、及びｘ_４は任意の正の整数または小数である）。

【0131】

実施例３：上記ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とＰｔ化合物を含む複合物質に基づく医薬品組成物の使用を裏付ける非臨床データ及び臨床データの記載、及びその特性評価
調製
実施例２Ｂに従って調製された０．５％の複合物質を、さらに等張塩化ナトリウム溶液などの溶媒として賦形剤を含む医薬品組成物を調製するための主成分として用いて０．０５％の医薬品組成物を調製し、塩酸などの緩衝剤でｐＨ７〜８にした。ｐＨを常に監視しながら上記複合物質と賦形剤を機械的に撹拌して医薬品組成物を調製した。この医薬品組成物をさらに殺菌濾過して精製した。
このように調製した医薬品組成物を非経口（皮下または筋肉内）投与に用いた。

【0132】

特性評価
この医薬品組成物をヨーロッパ薬局方第６版に記載された方法で以下のように特性評価を行った。
性状：透明な暗褐色の液体
ｐＨ：７．２７
同定：３４００〜３６００ｃｍ^−１、２８００〜３０００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、１２５０〜１３００ｃｍ^−１、及び１０５０ｃｍ^−１に特性ＩＲ吸収帯が見られ、３４００〜３６００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、及び１２５０〜１３００ｃｍ^−１のピーク強度はベンゼンポリカルボン酸重合体化合物のピーク強度よりも小さい。
白金の含有量：０．００４９％
殺菌状態：殺菌
毒性：０．１ｍｇ／マウスで非毒性
発熱：体重当たり１．３ｍｇ／ｋｇの量を筋肉内投与して発熱がない（ウサギ試験）

【0133】

非臨床データ
本発明の医薬品組成物の抗癌効力を、ＨＥＲ−２／ｎｅｕ癌遺伝子、上皮成長因子の発現水準の上昇と複数の乳腺腫瘍の自発的発達の蓋然性が高いＨＥＲ−２／ｎｅｕ雌のマウスの自然発生乳癌で評価した。

【0134】

選択された計画によれば、乳癌の直径が少なくとも５ｍｍに成長したら、動物を対照群及び実験群に無作為に分けた。本発明の医薬品組成物を、動物が死亡するまで週に３回、２種類の投与量（体重当たり６２．５ｍｇ／ｋｇ及び３．０ｍｇ／ｋｇ）を皮下注射した。

【0135】

体重当たり６２．５ｍｇ／ｋｇまたは３ｍｇ／ｋｇの本発明の医薬品組成物で７〜１４日間治療された動物の寛解率は、それぞれ１３％と１２％であった（結果は統計的に有意であった）。一方、対照群は０％であった。

【0136】

これは本発明の医薬品組成物の乳癌治療における効力をよく示すものであり、ヒト及び非食用動物種への投与量を推定することができる。

【0137】

臨床データ
本発明の薬剤のフェーズＩｂ臨床試験を８人の転移性乳癌患者に対して行った。３２日間、この薬剤を毎日１回患者に注射した。評価した累積投与量範囲は体重当たり０．９６ｍｇ／ｋｇから１．１２ｍｇ／ｋｇであった。

【0138】

本発明の医薬品組成物を用いて以下のような結果が得られた。完全寛解（すべての転移の消滅）が１例、部分寛解（転移の大きさが２５％超減少）が１例、安定した病気（転移の大きさの変化が−２５％から２５％の間）が３例、及び進行した病気（転移の大きさが２５％超増加）が３例。
これらの結果は、転移性乳癌治療における本発明の医薬品組成物の臨床効力をよく示すものである。

【0139】

この臨床試験では７８例の有害事象も登録された。登録された有害事象のいずれも深刻なものではなかった。有害事象は主に軽度または中度のものであり、７８例の有害事象のうち２％のみが本発明の医薬品組成物に関するものであった。

【0140】

更に、本発明の医薬品組成物の治療量の増加に伴って副作用数の減少が観察された。このデータは、本発明の医薬品組成物の際だった安全性と、例えば末期患者の緩和療法の可能性をよく示すものである。

【0141】

また、本発明の医薬品組成物は血液パラメータの正常化に役立つことが裏付けられた。このように観察期間の終わりまでに以下の血液パラメータが正常になった。ヘモグロビンについて４患者中２患者、赤血球について３患者中２患者、血小板について３患者中１患者、白血球について５患者中３患者、好中球について３患者３患者、リンパ球について１患者が、検査で登録された水準と比較して正常になった。

【0142】

このデータは、本発明の医薬品組成物が例えば癌などの主たる病気の進行遅延に効果的に用いることができることをよく示すものである。

【0143】

実施例４：ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物を含む複合物質を調製する方法、及び前記複合物質の特性評価
工程ａ。実施例１Ｂに記載された方法で調製された乾燥重合体１５グラムを、１リットルの蒸留水で希釈した。約１５ｍｌの１０％アンモニア溶液でｐＨを９．２に調整した。さらに、この溶液を６０℃まで加熱して１．５時間撹拌し、過剰のアンモニアを取り除いた。５ｇのモリブデン酸アンモニウム四水和物を加えて、得られた溶液を、未結合のモリブデンの含有量が元の量の２５％未満になるまで３．５Ｗ／ｃｍ^３、２２ｋＨｚで超音波処理した。

【0144】

未結合のモリブデンの検出方法
上記モリブデン錯体の形成の完成を標準的な孔径５００〜１０００Ｄａのセルロースの透析膜で制御した。この範囲の孔径とすると、モリブデン化合物は透析膜を透過することができるが１５００Ｄａの本発明の重合体は透過することができず、従ってモリブデンとの錯体もまた透過されない。

【0145】

この試験を行うため、超音波処理中に集めた複合物質の試料８ｍｌを透析管に入れた。この透析管を、蒸留水で満たした容器に４時間浸して透析液を得た。

【0146】

５ｇのモリブデン酸アンモニウム四水和物を１リットルの蒸留水で希釈してモデル溶液（対照溶液）を調製した。モデル溶液から透析液に移動したモリブデンの量を１００％とした。

【0147】

モデル溶液の透析液中の未結合モリブデン濃度は５２ｍｇ／ｌ（１００％）であったが、本発明の複合物質の透析液中の未結合モリブデン濃度は１１ｍｇ／ｌ（２１％）であった。

【0148】

工程ｂ。さらに工程ａの上記のベンゼンポリカルボン酸重合体化合物とモリブデン酸アンモニウム四水和物を含む複合物質を４０℃で２４時間、自動温度調節して所望の錯体形成を完了させた。未結合のモリブデン濃度（上記方法で求めた）が工程ａで添加した量の１０％未満になるまでこの自動温度調節を継続した。

【0149】

工程ｃ。工程ｂの粗複合物質を１０．０μｍのポリプロピレン濾過器で機械的含有物から分離して、実施例５に記載する医薬品組成物の調製に用いた。

【0150】

特性評価
複合物質は、以下のＩＲスペクトルの特性吸収帯によって特徴づけられる。３４００〜３６００ｃｍ^−１、２８００〜３０００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、１２５０〜１３００ｃｍ^−１、及び１０５０ｃｍ^−１（ここで３４００〜３６００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、１２５０〜１３００ｃｍ^−１帯域の複合物質の強度はベンゼンポリカルボン酸重合体化合物の強度よりも小さい）。

【0151】

^１３Ｃ−ＮＭＲ方法で得たデータに基づき、この複合物質の分子式を以下のように算出した。
（Ｃ_３Ｈ_２Ｏ）_ｘ１（Ｃ_２Ｈ_２Ｏ）_ｘ２（ＣＨ_２）_ｘ３（ＭｏＯ_３）_ｘ４（Ｈ_２Ｏ）_ｘ５（ＮＨ_４）_ｘ６
（ただし、ｘ_１、ｘ_２、ｘ_３、ｘ_４、ｘ_５、及びｘ_６は任意の正の整数または小数である）。

【0152】

実施例５：ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物とを含む複合物質に基づく医薬品組成物の臨床での使用を裏付ける実験データの記載、及びその特性評価
調製
実施例４に従って調製された複合物質を、さらに溶媒として蒸留水を含む医薬品組成物を調製するための主成分として用いた。このとき、０．５５％の複合物質を１：４０の比で蒸留水と混合し、機械的に撹拌した。このように調製した医薬品組成物は経口投与に用いることができる。

【0153】

特性評価
この医薬品組成物をヨーロッパ薬局方第６版に記載された方法で以下のように特性評価を行った。
性状：不透明な暗褐色の液体
ｐＨ：８．２７
同定：３４００〜３６００ｃｍ^−１、２８００〜３０００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、１２５０〜１３００ｃｍ^−１、及び１０５０ｃｍ^−１に特性ＩＲ吸収帯が見られ、３４００〜３６００ｃｍ^−１、１５００〜１７００ｃｍ^−１、１４１０ｃｍ^−１、及び１２５０〜１３００ｃｍ^−１領域の医薬品組成物の強度はベンゼンポリカルボン酸重合体化合物の強度よりも小さい。
生物汚染度：１００ｃｆｕ／ｇ未満
毒性：０．１ｍｇ／マウスで非毒性
発熱：体重当たり１．３ｍｇ／ｋｇの量を筋肉内投与して発熱がない（ウサギ試験）

【0154】

実験データ
上記ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物を含む複合物質に基づく医薬品組成物を、さらに蒸留水で希釈して異なる濃度の溶液を調製し、リンポプレップを用いる遠心分離によって健康な提供者の血液から分離したリンパ球（７０〜８０％）及び単球（２０〜３０％）からなる末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）に対して試験を行った。

【0155】

３５及び２１５μｇ／Ｌの医薬品組成物を含む細胞培地を１１日間培養した後、後者がＰＢＭＣに対する効果を発揮したことが認められた。これは、リンパ球の運動性及び単球の持続性の増加として現れた。

【0156】

上記医薬品組成物の、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）によって作られたサイトカインのパネルに対する効果が同様の一連の実験で評価された。細胞培地で１１日間培養した後、インターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）の産出が対照群では０〜７５ｐｇ／ｍｌであったが上記医薬品組成物で治療した群では２０００〜３０００ｐｇ／ｍｌに増加したことが認められた。また、腫瘍壊死因子ＴＮＦ−αの産出が対照群では０であったのが、上記医薬品組成物で治療した群では４００〜６５０ｐｇ／ｍｌに増加したことが認められた。

【0157】

このデータは、上記医薬品組成物が細胞周期破壊（例えば放射線に誘発された発癌や細胞の自然老化による発癌）に関連する病気の予防及び治療に有効に用いることができることをよく示すものである。

【0158】

実施例６：従来の放射線治療または化学療法に関連した副作用の低減／最小化での、上記ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物を含む複合物質に基づく医薬品組成物の臨床での使用を裏付ける実験データの記載

【0159】

患者の特徴
この試験の患者は、長期の胃腸病歴がある６４歳の女性であった。２０１２年５月にリンパ節への局所転移がある大腸癌と診断されて、手術を勧められ、同年６月に手術を受けた。様々な状況から、患者は二度再手術を受けなければならなかった。患者は、化学療法開始について８月の終わりまでに１回目の評価がなされた。

【0160】

結果及び手順
この１回目の評価に関する実験結果では、実質的に少量の血清アルブミンが、少量のヘモグロビン、白血球、好中性顆粒球ン、及びリンパ球とともに検出された。また、実験室での分析により、好酸球、アラニンアミノトランスフェラーゼ（alanine aminotransferase、ＡＬＡＴ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（aspartate aminotransferase、ＡＳＡＴ）及びアルカリ性ホスファターゼの減少が検出された（表５）。担当の癌専門医は化学療法の開始を避けて、２週間以内に新たに評価を行わなければならなかった。この期間に、患者は新規なモリブデンとのベンゼンポリカルボン酸錯体を含む医薬品組成物２０ｍｌを毎日投与された。この組成物は経口投与された。２回目の評価で得た実験結果はアルブミンの正常化を示すものであった。実質的にヘモグロビン、白血球、好中性顆粒球、リンパ球、及び好酸球の水準が上昇していた。また、ＡＬＡＴ及びＡＳＡＴいずれの水準も上昇していた。すぐに化学療法を開始した。

【0161】

化学療法による治療
患者は２日間で１２回の注射を受け、次の化学療法治療までの２週間の休息期間を設けた。治療ごとに実験室での分析のために血液試料を採取した。また、この休息期間の途中で患者は生活の質（Quality of Life、ＱｏＬ）に関する質問票Ｃ−３０を記入した。

【0162】

患者は、１回目の２日間の注射前２週間と１回目の２日間の注射後の第１週目には本発明の組成物（すなわちベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物を含む複合物質）を２０ｍｌ経口投与された。

【0163】

２回目の注射期間の前１週間と２回目の注射期間後の１週間は、本発明の組成物を利用しなかった。本発明の組成物による治療を２回目の注射期間の１週間後に再開し、続く３回の注射期間の前後は毎日投与された。６回目の注射期間の前１週間は、患者は再度、本発明の組成物を投与されなかった。この追加治療は、７回目の治療期間直前に再開され、１２回の化学療法による治療期間の残りの間は行われなかった

【0164】

１回目の治療期間及び２回目の治療期間の後に患者はＱｏＬ質問票Ｃ−３０を記入した。また５回目、６回目、７回目の治療期間の後にも質問票を記入した。

【0165】

結果
実験変数。血清アルブミンは化学療法による治療の開始にあたって低いことがわかった。最初は、血清アルブミンは２８（表５）と低かったが、本発明の組成物で１０日間治療した後に３９まで増加した。この値は、本発明の組成物による追加治療により１回目の化学療法による治療期間中も保持された。患者がまた本発明の組成物で治療された前後の回と比べると、アルブミンは、本発明の組成物による追加治療を行わなかった２回目、６回目の化学療法による治療の間わずかに減少した。

【0166】

ヘモグロビン、白血球、顆粒球、リンパ球、及び好酸球についても同様のパターンが検出された。これら変数のすべては、化学療法前は低かったが、１０日間本発明の組成物を経口投与する追加治療を行ったところ実質的に増加した。これらの得られた水準は、本発明の組成物による追加治療により１回目の化学療法による治療期間中ほとんど変化がなかった。

【0167】

表５ １回目の化学療法（７回）による治療期間中のいくつかの実験変数の変化
太字で表示された列は、本発明の組成物による追加治療が行われなかったことを示す。

【0168】

【表5】

＊追加治療は、化学療法とともに本発明の組成物の投与が行われたか否かを示し、「あり」はその期間に本発明の組成物を投与したことを、「なし」はその期間に本発明の組成物を投与しなかったことを示す。

【0169】

２回目の化学療法治療期間は、本発明の組成物を投与しない治療が行われた。上記の変数は、再び減少したことが分かった。続く３回の化学療法期間は、本発明の組成物を追加投与して治療が行われた。ヘモグロビン、白血球、顆粒球、及びリンパ球は再びその前のレベルにまで上昇した。好酸球については３回目の治療期間を除き、ほとんど同様のパターンが検出された。６回目の化学療法治療期間は、２回目と同様に本発明の組成物を追加投与しない治療が行われた。再び、ほぼ同じような数値の減少が起こった。

【0170】

ＡＬＡＴ及びＡＳＡＴは、１回目の化学療法治療の開始前と１回目の２日間の治療期間中にのみ測定された。しかしながら、上記血液変数で記載したのと同じパターンが示された。

【0171】

ＱＯＬ質問票Ｃ−３０。本発明の組成物を追加投与しなかった２回目の化学療法治療後の休息期間のＣ−３０の合計は、本発明の組成物を追加投与した１回目の化学療法治療後の休息期間の合計から５３％減少した。同様のパターンが５回目、６回目、７回目の化学療法治療後の休息期間にも検出された。本発明の組成物を追加投与した５回目の治療後のＣ−３０の合計は、投与しなかった６回目の治療後のＣ−３０の合計から４８％減少した。本発明の組成物を追加投与した７回目の治療後のＣ−３０の合計は６回目の治療後のＣ−３０の合計から５８％増加した。

【0172】

結論。本試験は体系化されていない症例報告ではあるが、化学療法治療に対する有力な補充療法として本発明の組成物の有益な効果を明確に示している。

【0173】

実施例７：本発明の化合物で処理した癌細胞生存率についての試験
この試験で用いた細胞は、以下のものである。
・ＭＣＦ−７、ヒト乳癌細胞（高分化）
・Ｔ４７−Ｄ、ヒト乳癌細胞（低分化）
・ＰＬ４５、ヒト脾臓細胞（低分化）
・Ｔ２４Ｐ、ヒト膀胱癌細胞（低分化）
・ＳＫＯＶ、ヒト卵巣癌細胞（低分化）
・ＨＣＴ１１６、ヒト結腸直腸癌細胞
・Ｆａｄｕ、ヒト頭部及び頸部癌細胞

【0174】

これらの細胞を以下の化合物の量（１０〜２００μｇ／ｗｅｌｌ）を変えて７２時間処理した。
・ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物（図８〜１３では「化合物２」として示す）
・ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物と白金化合物を含む複合物質（図８〜１３では「化合物１」として示す）、及び
・ベンゼンポリカルボン酸水溶性重合体化合物とモリブデン化合物を含む複合物質（図８〜１３では「化合物３」として示す）

【0175】

細胞生存率
細胞を９６ウェルプレート（５×１０^４細胞ｓ／ｍｌ）に蒔き、２日目にこの培地を、上記化合物／複合物質の濃度が異なる培地に変えた。７２時間後及び９６時間後、細胞生存率をＸＴＴ試験でキットに添付された手順に従って求めた。

【0176】

結果を図８〜１１に示す。

【0177】

これらの結果から、３種類の化合物／複合物質すべてがすべての細胞株の生存率に影響することが分かった。生存率は、調べた細胞株によって４０％から９０％低減した。試験物質の最も有効な殺細胞効果は、ヒト結腸癌細胞株及びヒト頭部及び頸部癌細胞株で見られた。また、最も低い殺細胞効果は卵巣癌細胞株及び肝臓癌細胞株で見られた。以下の表６を参照のこと。

【0178】

表６ 白金を含む複合物質の推定ＩＣ５０値

【表6】

【0179】

乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）の測定による細胞毒性
細胞膜の完全性は、培養培地に放出されたＬＤＨ活性を測定することにより求めた。ＬＤＨ活性は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドＮＡＤＨの酸化後、３３４ｎｍでの吸光度の減少として監視された。放出されたＬＤＨの百分率は、上澄み液中のＬＤＨ活性の、放出されたＬＤＨ量と細胞溶解物で測定されたＬＤＨ活性の和に対する比として定義される。

【0180】

結果を図１２〜１３に示す。

【0181】

この結果から、細胞損傷の兆候が見られないことが示された。ＬＤＨは、対照細胞からも試験物質で処理された細胞からも放出された。すなわち試験物質は非毒性である。壊死などの細胞損傷は培地のＬＤＨ濃度を上昇させる。処理後の細胞膜の完全性は、培養培地に放出されたＬＤＨ活性を測定することにより求めた。酵素活性は、分光光度法（Moran and Schnellmann 1996）で測定した。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】