特許 6203820 １５−ＰＧＤＨ活性を調節する組成物および方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6203820

(24)【登録日】2017年9月8日

(45)【発行日】2017年9月27日

(54)【発明の名称】１５−ＰＧＤＨ活性を調節する組成物および方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/4365 20060101AFI20170914BHJP

   A61K 31/519 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 19/08 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 19/10 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 7/00 20060101ALI20170914BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/4365

   A61K31/519

   A61P43/00 111

   A61P43/00 107

   A61P37/06

   A61P19/08

   A61P19/10

   A61P1/00

   A61P1/16

   A61P7/00

【請求項の数】16

【全頁数】189

(21)【出願番号】特願2015-507115(P2015-507115)

(86)(22)【出願日】2013年4月16日

(65)【公表番号】特表2015-514770(P2015-514770A)

(43)【公表日】2015年5月21日

(86)【国際出願番号】US2013036790

(87)【国際公開番号】WO2013158649

(87)【国際公開日】20131024

【審査請求日】2016年4月12日

(31)【優先権主張番号】61/624,670

(32)【優先日】2012年4月16日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】597138069

【氏名又は名称】ケース ウエスタン リザーブ ユニバーシティ

(73)【特許権者】

【識別番号】505359366

【氏名又は名称】ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティー オブ テキサス システム

(73)【特許権者】

【識別番号】514263757

【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ ケンタッキー

(74)【代理人】

【識別番号】100114775

【弁理士】

【氏名又は名称】高岡 亮一

(74)【代理人】

【識別番号】100121511

【弁理士】

【氏名又は名称】小田 直

(74)【代理人】

【識別番号】100191086

【弁理士】

【氏名又は名称】高橋 香元

(72)【発明者】

【氏名】マルコウィッツ，サンフォード

(72)【発明者】

【氏名】ウィルソン，ジェームズ，ケー．ブイ．

(72)【発明者】

【氏名】ポスナー，ブルース，エー．

(72)【発明者】

【氏名】レディ，ジョセフ

(72)【発明者】

【氏名】ジャン，ヨンギョウ

(72)【発明者】

【氏名】タイ，シン−シウン

(72)【発明者】

【氏名】モス，メリッサ

(72)【発明者】

【氏名】アントザク，モニカ

(72)【発明者】

【氏名】ガーソン，スタントン

(72)【発明者】

【氏名】キ，ベオム バエ

(72)【発明者】

【氏名】ヤン，スン イエウン

(72)【発明者】

【氏名】デサイ，アマー

【審査官】 伊藤 基章

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２０１１／０２６９９５４（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 Steroids, 1994, vol.59, p.136-141

【文献】 Cancer Science, 2010, vol.101, No.2, p.550-558

【文献】 J. Med. Chem., 2011, vol.54, p.5260-5264

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／００

Ａ６１Ｋ ４５／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

１５−ＰＧＤＨ酵素活性の阻害において使用する化合物およびその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物であって、
前記化合物が、式：

【化1】

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を持ち、
式中
ｎは０−２であり；
Ｘ_２はＮまたはＣＨであり
Ｒ_１はＣ_１−８アルキルであり、これは直鎖、分枝、または環状であり、これは非置換であり、または置換され；
Ｒ_６およびＲ_７は任意的であり、存在する場合、同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択される：Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、低級アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ’、Ｎ（Ｒ’）_２、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＯＲ’、ＳＲ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；置換もしくは非置換アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、またはヘテロシクリル
であり、
前記置換はハロ、ヒドロキシル、シリル、スルフヒドリル、Ｃ_１−Ｃ_２４アルコキシ、Ｃ_２−Ｃ_２４アルケニルオキシ、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキニルオキシ、Ｃ_５−Ｃ_２０アリールオキシ、アシル、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキルカルボニル、Ｃ_６−Ｃ_２０アリールカルボニル、アシルオキシ、Ｃ_２−Ｃ_２４アルコキシカルボニル、Ｃ_６−Ｃ_２０アリールオキシカルボニル、Ｃ_２ーＣ_２４アルキルカルボナト、Ｃ_６ーＣ_２０アリールカルボナト、カルボキシ、カルボキシラト、カルバモイル、モノ−（Ｃ_１−Ｃ_２４アルキル）−置換カルバモイル、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_４アルキル）−置換カルバモイル、モノ−置換アリールカルバモイル、チオカルバモイル、カルバミド、シアノ、イソシアノ、シアナト、イソシアナト、イソチオシアナト、アジド、ホルミル、チオホルミル、アミノ、モノ−およびジ−（Ｃ_１−Ｃ_２４アルキル）−置換アミノ、モノ−およびジ−（Ｃ_５−Ｃ_２０アリール）−置換アミノ、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキルアミド、Ｃ_６−Ｃ_２０アリールアミド、イミノ、アルキルイミノ、アリールイミノ、ニトロ、ニトロソ、スルホ、スルホナト、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキルスルファニル、アリールスルファニル、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキルスルフィニル、Ｃ_５−Ｃ_２０アリールスルホニル、ホスホノ、ホスホナト、ホスフィナト、ホスホ、およびホスフィノ；ならびにヒドロカルビル部分Ｃ_１−Ｃ_２４アルキル、Ｃ_２−Ｃ_２４アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキニル、Ｃ_５−Ｃ_２０アリール、Ｃ_６−Ｃ_２４アルカリル、およびＣ_６−Ｃ_２４アラルキルを含む、
医薬組成物。

【請求項2】

ｎは１であり、およびＸ_２はＣＨである、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記化合物は下記式およびその薬学的に許容される塩を有する、請求項１に記載の医薬組成物：

【化2】

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【請求項4】

下記式を有する化合物およびその薬学的に許容される塩から本質的に構成される、請求項３に記載の医薬組成物：

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

【請求項5】

前記組成物は、９９重量％超の化合物のＲ（＋）異性体および１重量％未満の化合物のＳ（−）異性体を含む、請求項３に記載の医薬組成物。

【請求項6】

細胞移植、臓器移植、組織移植片生着、臓器再生、組織再生、組織修復、創傷治癒、細胞成長および／または増殖の増強において使用する、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項7】

被験体の組織中の組織幹細胞を増加させるのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項8】

ドナー骨髄移植片またはドナー造血幹細胞移植片の適応度を増加させるのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項9】

被験体中の幹細胞、および／またはドナー移植片としての骨髄の適応度、および／または骨髄の再生の少なくとも１つを増加させるのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項10】

ドナー移植片としての幹細胞調製物の適応度を増加させる、および／または移植に要求される幹細胞の単位数を減少させるのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項11】

細胞、幹細胞、骨髄、臓器、および／または組織移植片拒絶の緩和、および／または細胞、幹細胞、骨髄、および／または組織移植片生着の増強において使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項12】

骨密度を増加させ、骨粗鬆症を治療し、骨折の治癒を促進し、または骨の治癒を促進するのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項13】

腸管損傷の治癒または防止において使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項14】

放射線への曝露または化学療法の毒性または致命的効果、あるいは炎症性腸疾患からの損傷に抵抗性および／または治癒を与えるのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項15】

肝臓手術、または肝臓損傷、または肝臓移植後を含む設定における肝臓再生を促進するのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【請求項16】

好中球数、および／または血小板数、および／または赤血球数、および／またはヘマトクリット、および／またはヘモグロビンレベル、および／または骨髄幹細胞を増加させるのに使用するための、請求項１〜５のいずれかに記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
本出願は２０１２年４月１６日に出願された米国仮特許出願第６１／６２４，６７０号（その対象物はその全体が参照により本明細書に組み込まれる）の優先権を主張する。

【0002】

政府出資
この発明は、国立衛生研究所により与えられた認可番号第Ｒ０１ＣＡ１２７３０６号、Ｒ０１ＣＡ１２７３０６−０３Ｓ１号、および５Ｐ５０ＣＡ１５０９６４号の下、政府支援によりなされた。米国政府は本発明に対し一定の権利を有し得る。

【背景技術】

【0003】

１５−ヒドロイキシ（ｈｙｄｒｏｙｘｙ）−プロスタグランジンデヒドロゲナーゼ（１５−ＰＧＤＨ）は多くの活性プロスタグランジン、ロイコトリエンおよびヒドロキシエイコサテトラエン酸（ＨＥＴＥ）の不活性化（例えば、ＰＧＥ_２の１５−ケト−プロスタグランジンＥ２、１５ｋ−ＰＧＥへの酸化を触媒することによる）における重要な酵素を表す。ヒト酵素は、ＨＰＧＤ遺伝子によりコードされ、２９ｋＤａのサイズのサブユニットを有するホモ二量体から構成される。酵素は短鎖デヒドロゲナーゼ／レダクターゼ酵素（ＳＤＲ）の進化的に保存されたスーパーファミリーに属し、ヒト酵素に対し最近承認された命名法によれば、ＳＤＲ３６Ｃ１と命名される。これまで、２つの型の１５−ＰＧＤＨ、ＮＡＤ＋依存性Ｉ型１５−ＰＧＤＨおよびＩＩ型ＮＡＤＰ依存性１５−ＰＧＤＨ（カルボニルレダクターゼ１（ＣＢＲ１、ＳＤＲ２１Ｃ１）としても知られている）が同定されている。しかしながら、ＣＢＲ１のＮＡＤＰに対する優先性およびほとんどのプロスタグランジンに対するＣＢＲ１の高いＫｍ値により、インビボ活性のほとんどがＩ型１５−ＰＧＤＨに起因し得ることが示唆される。

【0004】

最近の研究により、１５−ＰＧＤＨの阻害剤および１５−ＰＧＤＨの活性化剤は、治療的に価値があるであろうことが示唆される。１５−ＰＧＤＨノックアウトマウスモデルにおいて結腸腫瘍の発生率が増加することが示されている。より最近の研究はトロンビン媒介細胞死の保護における１５−ＰＧＤＨ発現の増加を示す。１５−ＰＧＤＨはプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ_２）（ＣＯＸ−２代謝の下流生成物である）の不活性化に関与することがよく知られている。ＰＧＥ_２は、インビトロおよびインビボの両方で神経毒性であることが見出されており；よってＰＧＥ_２放出を減少させるＣＯＸ−２特異阻害剤は、神経保護効果を示す。ＰＧＥ_２はまた、様々な生物学的プロセス、例えば頭髪密度、皮膚創傷治癒、および骨形成において有益であることが示されている。

【発明の概要】

【0005】

本明細書で記載される実施形態は、１５−ＰＧＤＨ活性を調節する、組織プロスタグランジンレベルを調節する、および／または１５−ＰＧＤＨ活性および／またはプロスタグランジンレベルを調節することが所望される疾患、障害または病状を治療する化合物および方法に関する。

【0006】

いくつかの実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は組織中のプロスタグランジンレベルを増加させるのに有効な量で被験体の組織に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤は式（Ｉ）およびその薬学的に許容される塩を含むことができる：

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

式中、ｎは０−２であり；
Ｒ_１はＣ_１−８アルキルであり、これは直鎖、分枝、または環状であり、これは非置換であり、または置換され（例えば、Ｒ_１はＣ_２−６アルキル、Ｃ_２−４アルキル、またはＣ_４アルキルとすることができ、これは直鎖、分枝、または環状であり、これは非置換であり、または置換される）；
Ｒ_２およびＲ_３は同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択され：Ｈ、低級アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ’、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；
Ｒ_４およびＲ_５は同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択され：水素、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキル、Ｃ_２−Ｃ_２４アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキニル、Ｃ_３−Ｃ_２０アリール、Ｃ_６−Ｃ_２４アルカリル、Ｃ_６−Ｃ_２４アラルキル、ハロ、シリル、ヒドロキシル、スルフヒドリル、Ｃ_１−Ｃ_２４アルコキシ、Ｃ_２−Ｃ_２４アルケニルオキシ、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキニルオキシ、Ｃ_５−Ｃ_２０アリールオキシ、アシル（Ｃ_２−Ｃ_２４アルキルカルボニル（‐−ＣＯ−アルキル）およびＣ_６−Ｃ_２０アリールカルボニル（−ＣＯ−アリール）を含む）、アシルオキシ（−Ｏ−アシル）、Ｃ_２−Ｃ_２４アルコキシカルボニル（−（ＣＯ）−Ｏ−アルキル）、Ｃ_６−Ｃ_２０アリールオキシカルボニル（−（ＣＯ）−Ｏ−アリール）、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキルカルボナト（−Ｏ−（ＣＯ）−Ｏ−アルキル）、Ｃ_６−Ｃ_２０アリールカルボナト（−Ｏ−（ＣＯ）−Ｏ−アリール）、カルボキシ（−ＣＯＯＨ）、カルボキシラト（−ＣＯＯ⁻）、カルバモイル（−（ＣＯ）−ＮＨ_２）、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキル−カルバモイル（−（ＣＯ）−ＮＨ（Ｃ_１−Ｃ_２４アルキル））、アリールカルバモイル（−（ＣＯ）−ＮＨ−アリール）、チオカルバモイル（−（ＣＳ）−ＮＨ_２）、カルバミド（−ＮＨ−（ＣＯ）−ＮＨ_２）、シアノ（−ＣＮ）、イソシアノ（−Ｎ^＋Ｃ⁻）、シアナト（−Ｏ−ＣＮ）、イソシアナト（−Ｏ−Ｎ^＋＝Ｃ⁻）、イソチオシアナト（−Ｓ−ＣＮ）、アジド（−Ｎ＝Ｎ^＋＝Ｎ⁻）、ホルミル（−−（ＣＯ）−−Ｈ）、チオホルミル（−−（ＣＳ）−−Ｈ）、アミノ（−−ＮＨ_２）、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキルアミノ、Ｃ_５−Ｃ_２０アリールアミノ、Ｃ_２−Ｃ_２４アルキルアミド（−ＮＨ−（ＣＯ）−アルキル）、Ｃ_６−Ｃ_２０アリールアミド（−ＮＨ−（ＣＯ）−アリール）、イミノ（−ＣＲ＝ＮＨ、式中、Ｒは水素、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキル、Ｃ_５−Ｃ_２０アリール、Ｃ_６−Ｃ_２４アルカリル、Ｃ_６−Ｃ_２４アラルキル、などである）、アルキルイミノ（−ＣＲ＝Ｎ（アルキル）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、アラルキル、などである）、アリールイミノ（−ＣＲ＝Ｎ（アリール）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、などである）、ニトロ（−ＮＯ_２）、ニトロソ（−ＮＯ）、スルホ（−ＳＯ_２−ＯＨ）、スルホナト（−ＳＯ_２−Ｏ−）、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキルスルファニル（−Ｓ−アルキル；「アルキルチオ」とも呼ばれる）、アリールスルファニル（−Ｓ−アリール；「アリールチオ」とも呼ばれる）、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキルスルフィニル（−（ＳＯ）−アルキル）、Ｃ_５−Ｃ_２０アリールスルフィニル（−（ＳＯ）−アリール）、Ｃ_１−Ｃ_２４アルキルスルホニル（−ＳＯ_２−アルキル）、Ｃ_５−Ｃ_２０アリールスルホニル（−ＳＯ_２−アリール）、ホスホノ（−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２）、ホスホナト（−Ｐ（Ｏ）（Ｏ⁻）_２）、ホスフィナト（−Ｐ（Ｏ）（Ｏ⁻））、ホスホ（−ＰＯ_２）、ホスフィノ（‐−ＰＨ_２）、それらの組み合わせ、ここで、Ｒ_４およびＲ_５は連結され、環状または多環状環を形成してもよく、ここで、環は置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、および置換もしくは非置換ヘテロシクリルである。

【0007】

他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、ｉ）２．５μΜ濃度では、７０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで（１００の値がベースラインに対するレポーター出力の倍加を示すスケールを用いる）、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激する；ｉｉ）２．５μΜ濃度では、７５を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激する；ｉｉｉ）７．５μΜ濃度では、７０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｖ）７．５μΜ濃度では、２０を超えるレベルまで、ＴＫ−ウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびにｖ）１μΜ未満のＩＣ５０で組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質の酵素活性を阻害する。

【0008】

他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、ｉ）２．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激する；ｉｉ）２．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激する；ｉｉｉ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｖ）７．５μΜ濃度では、バックグラウンドより２０％を超えるルシフェラーゼレベルまで、ＴＫ−ウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびにｖ）１μΜ未満のＩＣ５０で組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質の酵素活性を阻害する。

【0009】

他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は１μΜ未満のＩＣ５０で、または好ましくは２５０ｎＭ未満のＩＣ５０で、またはより好ましくは５０ｎＭ未満のＩＣ５０で、またはより好ましくは５ｎＭ未満のＩＣ５０で、組換え１５−ＰＧＤＨの酵素活性を阻害することができる。

【0010】

さらに他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、皮膚の色素沈着および／または発毛および／または脱毛阻止を促進および／または刺激するために、被験体の皮膚に適用することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤はまた、創傷治癒を促進し、組織を再生し、および／または、口腔潰瘍、潰瘍性大腸炎、胃腸潰瘍、炎症性腸疾患、血行障害、大腸炎、レイノー病、バージャー病、糖尿病性ニューロパチー、肺動脈高血圧、心血管疾患、糖尿病性潰瘍、腎疾患、および勃起不全の少なくとも１つを治療するために、被験体に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤はさらに、プロスタグランジン応答性病状においてアゴニストの治療効果を増強する目的でプロスタノイドアゴニストと組み合わせて被験体に投与することができる。

【0011】

いくつかの実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、組織幹細胞を増加させるために被験体の組織に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤はまた、ドナー骨髄移植片またはドナー造血幹細胞移植片の適応度を増加させるために、骨髄移植片ドナーまたは造血幹細胞ドナーに投与することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、被験体内の幹細胞を増加させるために被験体の骨髄に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤はさらに、ドナー移植片としての骨髄の適応度を増加させるために、被験体の骨髄に投与することができる。

【0012】

他の実施形態では１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、ドナー移植片としての幹細胞調製物の適応度を増加させるために、被験体の造血幹細胞の調製物に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤はまた、ドナー移植片としての幹細胞調製物の適応度を増加させるために、被験体の末梢血造血幹細胞の調製物に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ阻害剤はさらに、ドナー移植片としての幹細胞調製物の適応度を増加させるために、臍帯幹細胞の調製物に投与することができる。

【0013】

さらに他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、骨髄移植片拒絶を緩和させるために、骨髄移植片生着を増強するために、および／または造血幹細胞移植片、もしくは臍帯幹細胞移植片の生着を増強するために、被験体に投与することができる。

【0014】

さらに他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、移植片拒絶を緩和させるため、または移植片生着を増強するために、被験体または被験体の組織移植片に投与することができる。

【0015】

他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、放射線への曝露の毒性または致命的効果に対する抵抗性を与えるために、被験体または被験体の組織に投与することができる。

【0016】

他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、骨粗鬆症、骨折の治療、あるいは骨損傷または関節置換後の治癒の促進のために、被験体に投与することができる。

【0017】

別の例では、１５−ＰＧＤＨ阻害剤は、肝臓切除後または肝臓への毒性損傷後の、肝臓再生を促進するために、被験体または被験体の肝臓に投与することができる。１つの事例では、肝臓への毒性損傷は、アセトアミノフェンまたは関連肝毒性化合物の過剰投与により引き起こされ得る。

【0018】

本出願のさらに他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ活性化剤は、組織中の１５−ＰＧＤＨレベルを増加させ、プロスタグランジンレベルを減少させるのに有効な量で、被験体の組織に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ活性化剤は、式（ＩＶ）およびその薬学的に許容される塩を含むことができる：

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｘ_３およびＹ_２は独立してＣまたはＳＯであり；
ＵはＯＲ”（式中、Ｒ”はＨ、置換もしくは非置換アルキル基、または置換もしくは非置換アリール基である）または

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

であり；
Ｒ_８、Ｒ_９、Ｒ_１０、Ｒ_１１、およびＲ_１２はそれぞれ下記からなる群より選択され：Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ、Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ’、Ｎ（Ｒ’）_２、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＯＲ’、ＳＲ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、置換もしくは非置換ヘテロシクリル、ならびにＲ_８およびＲ_９は連結され、環状または多環状環を形成してもよい。

【0019】

いくつかの実施形態では、活性化剤は、ｉ）７．５μΜ濃度では、５０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで（１００の値がベースラインに対するレポーター出力の倍加を示すスケールを用いる）、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激する；ｉｉ）７．５μΜ濃度では、５０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激する；ｉｉｉ）７．５μΜ濃度では、５０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｖ）７．５μΜ濃度では、２５を超えるレベルまで、ＴＫ−ウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびにｖ）組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質に対しては、化合物は２．５μΜ以上の１５−ＰＧＤＨ酵素活性を阻害するためのＩＣ_５０濃度を示す。

【0020】

いくつかの実施形態では、活性化剤は、ｉ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激する；ｉｉ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激する；ｉｉｉ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｖ）７．５μΜ濃度では、２５％を超えるルシフェラーゼレベルまで、ＴＫ−ウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびに、ｖ）組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質に対しては、化合物は２．５μΜ以上の１５−ＰＧＤＨ酵素活性を阻害するためのＩＣ_５０濃度を示す。

【0021】

他の実施形態では、１５−ＰＧＤＨ活性化剤は、新生物、例えば、結腸新生物を治療するために被験体に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ活性化剤はまた、新生物、例えば結腸新生物を防止するために、被験体に投与することができる。１５−ＰＧＤＨ活性化剤はまた、炎症および／または疼痛を低減するために被験体に投与することができる。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】（Ａ−Ｃ）様々な濃度の化合物ＳＷ０３３２９１、ＳＷ０５４３８４、およびＳＷ１４５７５３で処理した、１５−ＰＧＤＨの最後のコードエキソンへのウミシイタケルシフェラーゼの標的遺伝子ノックインにより作成された、１５−ＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現する細胞のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。活性は、全て１５−ＰＧＤＨ−ルシフェラーゼ融合物を含むように操作された、３つの異なる結腸癌細胞系において証明される。これらの細胞系はＶａｃｏ−９ｍ（Ｖ９ｍ）、ＬＳ１７４Ｔ、Ｖａｃｏ５０３（Ｖ５０３）である。

【図2】７．５μΜのＳＷ０３３２９１、ＳＷ０５４３８４、およびＳＷ１４５７５３で４８時間処理した細胞系Ｖ９Ｍ、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３における１５−ＰＧＤＨタンパク質のレベルを証明するウエスタンブロットを示す。未処理ＦＥＴ細胞は１５−ＰＧＤＨ発現に対する陽性対照を提供する。

【図3】（Ａ−Ｃ）ＳＷ１２４５３１で処理した結腸細胞系における１５−ＰＧＤＨタンパク質レベルを証明するウエスタンブロットを示す（ＴＧＦ−β（１０ｎｇ／ｍｌで４８時間）で処理したＦＥＴ細胞が、ある一定のパネルでは、１５−ＰＧＤＨ発現に対する陽性対照として使用される）。

【図4】５μΜのＳＷ１２４５３１で処理したＶ４００−Ｓ３−２−３２細胞においてｃＤＮＡ発現ベクターから発現される１５−ＰＧＤＨタンパク質（ｗｔ−ＰＧＤＨ）のレベル、およびＳＷ１２４５３１で処理したＶ４００−Ｍ３−２−７２細胞においてｃＤＮＡ発現ベクターから発現される、触媒的に死んでいる変異１５−ＰＧＤＨ（ｍｕ−ＰＧＤＨ）のタンパク質レベルを証明するウエスタンブロットを示す。

【図5】（Ａ−Ｂ）免疫蛍光法（上２列）およびウエスタンブロット（下パネル）によりアッセイされた、ＳＷｌ２４５３１で処理したＶ５０３細胞における１５−ＰＧＤＨタンパク質レベルを示す。

【図6】（Ａ−Ｆ）ＳＷ０３３２９１で処理した結腸癌細胞系における１５−ＰＧＤＨ ｍＲＮＡレベルを表すグラフを示す。

【図7】（Ａ−Ｃ）ＳＷ０３３２９１で処理した結腸癌細胞系における１５−ＰＧＤＨ ｍＲＮＡレベルを表すグラフを示す。

【図8】（Ａ−Ｃ）ＳＷ０５４３８４およびＳＷ１４５７５３で処理した結腸癌細胞系における１５−ＰＧＤＨ ｍＲＮＡレベルを表すグラフを示す。

【図9】（Ａ−Ｉ）５μΜのＳＷ１２４５３１で処理した結腸癌細胞系における１５−ＰＧＤＨ ｍＲＮＡレベルを表すグラフを示す。

【図10】（Ａ−Ｃ）ＳＷ０３３２９１、ＳＷ０５４３８４、およびＳＷ１４５７５３で処理した細胞系における１５−ＰＧＤＨ活性を表すグラフを示す。活性はｐｍｏｌ ＰＧＥ_２／ｍｉｎ／１００万個細胞として測定される。

【図11】（Ａ−Ｄ）様々な濃度の試験化合物と共にインキュベートした組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質（１５−ＰＧＤＨ−ＧＳＴ融合タンパク質）の活性を表す表およびプロットを示す。

【図12】（Ａ−Ｄ）ＳＷ０３３２９１およびＳＷ０５４３８４で処理した組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質の活性を表すプロットを示し、パネル１２ＡおよびＣは、放射標識されたＰＧＥ２基質からのトリチウムの移行を測定し、パネル１２ＢおよびＤは、蛍光によるＮＡＤＨの生成を測定する。

【図13】ＳＷ１２４５３１で処理した細胞における（上パネル）およびＳＷ１２４５３１で処理した組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質における（下パネル）、放射標識されたＰＧＥ２基質からのトリチウムの移行後に測定された１５−ＰＧＤＨ活性を表す表およびプロットを示す。

【図14】（Ａ−Ｂ）タンパク質の融解温度のシフトにより測定される異なる化合物の組換え１５−ＰＧＤＨタンパク質に直接結合する能力を表す融解曲線および表を示す。

【図15】（Ａ−Ｂ）試験化合物で処理した触媒的に不活性な変異１５−ＰＧＤＨタンパク質の融解曲線温度を示す。

【図16】（Ａ−Ｂ）ＩＬ１−βにより２３時間、試験化合物と共に刺激された、Ａ５４９細胞の培地中でアッセイされたＰＧＥ_２レベルを表すグラフを示す。

【図17】ＩＬ１−β処理Ａ５４９細胞からのＰＧＥ_２産生に対するＳＷ０３３２９１の用量応答効果を表すグラフを示す。

【図18】（Ａ−Ｂ）Ｖａｃｏ−５０３細胞の培地中へのＰＧＥ_２の添加後のＰＧＥ_２レベルに反映される、化合物（２．５μΜ）によるＰＧＤＨ活性のインビボ調節を表すグラフを示す。

【図19】４８時間の処理にわたって観察される、ＨａＣａＴ細胞の単層における引っ掻き傷から構成されるモデル創傷の治癒の加速における、ＳＷ０３３２９１の活性を表す画像を示す。

【図20】対照、ＳＷ０３３２９１（２．５μΜ）処理細胞、およびＴＧＦ−β（１ｎｇ／ｍｌ）処理細胞における、０および４８時間での引っ掻き傷幅の定量を表すグラフを示す。

【図21】（Ａ−Ｂ）下記を表すプロットを示す：（Ａ）異なる１５−ＰＧＤＨ濃度で実行した１５−ＰＧＤＨ阻害剤ＳＷ０３３２９１の滴定を用いるＰＧＤＨのパーセント阻害；および（Ｂ）１５−ＰＧＤＨ阻害剤ＳＷ０３３２９１のＩＣ５０対１５−ＰＧＤＨ濃度。

【図22】（Ａ−Ｂ）１５−ＰＧＤＨおよびＳＷ０３３２９１混合物の透析前後に測定される、（Ａ）１５−ＰＧＤＨ酵素阻害活性および（Ｂ）ＳＷ０３３２９１による活性のパーセント阻害を表すグラフを示す。

【図23】（Ａ−Ｂ）様々な濃度のＳＷ０３３２９１での１５−ＰＧＤＨの反応速度および相対反応速度を表すプロットを示す。

【図24】（Ａ−Ｂ）下記を表すプロットを示す：（Ａ）ＰＧＥ−２の存在下でのＳＷ０３３２９１による１５−ＰＧＤＨの阻害；および（Ｂ）１５−ＰＧＤＨに対するＳＷ０３３２９１のＩＣ５０対ＰＧＥ２濃度。

【図25】ＳＷ０３３２９１の類似体の構造活性関係対それらの１５−ＰＧＤＨに対するＩＣ５０を表す概略図を示す。

【図26】ＳＷ０３３２９１の追加の類似体を表す概略図を示す。

【図27】（Ａ−Ｃ）２．５μΜおよび７．５μΜの、図２６の化合物で処理した、結腸癌細胞系Ｖ５０３、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図28】図２６の化合物による、１５−ＰＧＤＨ活性のパーセント阻害を表すグラフを示す。

【図29】（Ａ−Ｂ）ＳＷ０３３２９１およびＳＷ０２０６９８０の１５−ＰＧＤＨに対するＩＣ５０を表すプロットを示す。

【図30】（Ａ−Ｂ）１５−ＰＧＤＨに結合するＳＷ０２０６８９０およびＳＷ０３３２９１の融解プロファイルを表すプロットを示す。

【図31】（Ａ−Ｃ）ＳＷ０３３２９１、ＳＷ２０６９８０、およびＳＷ２０６９９２による１５−ＰＧＤＨ活性のパーセント阻害を表すプロットを示す。

【図32】（Ａ−Ｃ）様々な濃度のＳＷ０３３２９１で処理した結腸癌細胞系Ｖ５０３、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図33】（Ａ−Ｃ）様々な濃度のＳＷ０２０６９８０で処理した結腸癌細胞系Ｖ５０３、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図34】（Ａ−Ｃ）様々な濃度のＳＷ０２０６９９２で処理した結腸癌細胞系Ｖ５０３、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図35】（Ａ−Ｂ）１５−ＰＧＤＨに結合するＳＷ２０６９９２、ＳＷ０２０６８９０およびＳＷ０３３２９１の融解プロファイルを表すプロットを示す。

【図36】（Ａ−Ｂ）１５−ＰＧＤＨに結合するＳＷ２０６９９２、ＳＷ０２０６８９０およびＳＷ０３３２９１の融解プロファイルを表すプロットを示す。

【図37】（Ａ−Ｃ）ＩＬ１−βで刺激したＡ５４９細胞におけるＰＧＥ−２の制御に対するＳＷ２０６９９２、ＳＷ０２０６８９０およびＳＷ０３３２９１の効果を表すグラフを示す。

【図38】（Ａ−Ｃ）ＩＬ１−βで刺激した後のＡ５４９細胞中の細胞数に対するＳＷ２０６９９２、ＳＷ０２０６８９０およびＳＷ０３３２９１の効果を表すグラフを示す。

【図39】ＳＷ０３３２９１の追加の類似体の概略図を示す。

【図40】（Ａ−Ｃ）２．５μΜおよび７．５μΜの図３９の化合物で処理した結腸癌細胞系Ｖ９Ｍ、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図41】図４０の化合物による、１５−ＰＧＤＨ活性のパーセント阻害を表すグラフを示す。

【図42】図４０の化合物による、１５−ＰＧＤＨ活性のパーセント阻害を表すグラフを示す。

【図43】ＳＷ０３３２９１、ＳＷ２０８０６４、ＳＷ２０８０６５、ＳＷ２０８０６６、およびＳＷ２０８０６７の、Ｖ９ｍ細胞系バックグラウンドにおける１５−ＰＧＤＨ−ルシフェラーゼ融合遺伝子レポーターの誘導に対する用量反応曲線を示す。

【図44】ＩＬ１−βで刺激したＡ５４９細胞の培地中での、ＰＧＥ２レベルに対する効果を測定するアッセイにおける１５−ＰＧＤＨ阻害剤化合物の滴定曲線を示す。

【図45】ＳＷ０３３２９１で処置したＦＶＢマウスの体重変化を表すプロットを示す。

【図46】（Ａ−Ｃ）下記を表すグラフを示す：（Ａ）総骨髄細胞充実性；（Ｂ）野生型対ＰＧＤＨ−／−マウスのＳＫＬ集団；および（Ｃ）野生型対ＰＧＤＨ−／−マウス（ＰＧＤＨ−／−またはＰＧＤＨのいずれかとして指定）における平均ＣＦＵカウント。

【図47】ＳＷ０３３２９１およびＰＧＥ−２で処置した野生型骨髄におけるＣＦＵカウントを表すグラフを示す。

【図48】（Ａ−Ｃ）下記を表すグラフを示す：（Ａ）ＳＷ０３３２９１で処置したマウスの骨髄細胞充実性；（Ｂ）ＳＷ０３３２９１で処置したマウスの全骨髄中のＳＫＬ％；および（Ｃ）ＳＷ０３３２９１で処置したマウスにおけるＣＦＵカウント。

【図49】（Ａ−Ｂ）下記を示す：（Ａ）ＳＷ０３３２９１またはビヒクルで処置したドナーマウスからの骨髄移植で救済された、致死的に照射されたＣ５７ＢＬ／６ＪマウスにおけるＣＤ４５．２抗原標識細胞を追跡した概略図；および（Ｂ）そのような処置後の、ドナーＢ細胞、骨髄細胞、およびＴ細胞のキメラ化を表すグラフ。

【図50】Ｃ５７ＢＬ／６１マウスに第０日に１１ＧＹを照射し、続いて、ＳＷ０３３２９１で処置する研究のスキーマを表す概略図を示す。

【図51】部分肝切除の概略図を示す。

【図52】（Ａ−Ｄ）マウス肝臓の手術前および手術後観察を表す写真を示す。

【図53】（Ａ−Ｄ）マウス肝臓の肝切除後観察（左側）および手術後第７日でのマウス肝臓の再生（右側）を表す写真を示す。

【図54】（Ａ−Ｂ）ＳＷ０３３２９１および対照ビヒクルを投与したマウスの肝切除後マウス肝臓の顕微鏡写真を示し、矢印は有糸分裂図を指定する。

【図55】ＳＷ０３３２９１処置マウス対対照マウスの肝臓における有糸分裂を表すグラフを示す。

【図56】対照対ＳＷ０３３２９１処置Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスにおける、部分肝切除後に得られる肝臓対体重比を表すグラフを示す。

【図57】対照対ＳＷ０３３２９１の１日２回処置Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスにおける、部分肝切除後に得られる肝臓対体重比を表すグラフを示す。

【図58】対照対ＳＷ０３３２９１処置Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスにおける、部分肝切除後に得られる肝臓対体重比を再現するグラフを示す。

【図59】（Ａ−Ｂ）１匹のマウス対照対ＳＷ０３３２９１で処置した１匹のマウスにおける、部分肝切除後のＡＬＴレベルを表すグラフおよびプロットを示す。

【図60】対照マウスおよびＳＷ０３３２９１で処置したマウスにおける、部分肝切除後の血清ビリルビンレベルを表すグラフを示す。

【図61】対照対ＳＷ０３３２９１処置ＦＶＢマウスにおける、部分肝切除後に得られる肝臓対体重比を表すグラフを示す。

【図62】対照対ＳＷ０３３２９１処置ＦＶＢマウスにおける、手術前体重を表すグラフを示す。

【図63】ＳＷ０３３２９１またはビヒクル対照のいずれかで処置し、肝臓再生に対してアッセイしたマウス由来の切除した肝臓セグメントの重量を表すグラフを示す。

【図64】ＳＷ０３３２９１および対照マウスにおける、部分肝切除後に得られた肝臓重量を表すグラフを示す。

【図65】ＳＷ０３３２９１処置および対照マウスにおける、部分肝切除後に得られた肝臓対体重比を表すグラフを示す。

【図66】手術後第４日での、ＳＷ０３３２９１処置および対照ＦＶＢマウスの部分肝切除後の肝臓対体重比を比較する「箱ひげ」プロットを示す。

【図67】手術後第７日での、ＳＷ０３３２９１処置および対照ＦＶＢマウスの部分肝切除後の肝臓対体重比を比較する「箱ひげ」プロットを示す。

【図68】手術後第４日での、ＳＷ０３３２９１処置および対照ＦＶＢマウスの部分肝切除後の肝臓対体重比を比較する「箱ひげ」プロットを示す。

【図69】ＳＷ０３３２９１処置およびビヒクル処置対照マウスの肝臓における、手術後第２日での部分肝切除後のＳ期細胞の写真を示す。

【図70】図６９の研究から得られる代表的な視野の強拡大（４０Ｘ）観察を表す写真を示す。

【図71】部分肝切除後の手術後第２日での、ＳＷ０３３２９１処置対ビヒクル対照処置マウスの肝臓におけるＢｒｄＵ陽性細胞のパーセントを比較する「箱ひげ」プロットを示す。

【図72】対照対ＳＷ０３３２９１処置マウス（全て飲料水中に含まれる２％デキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）で処置した）のコホートのベースライン重量からの平均変化を表すグラフを示す。

【図73】対照対ＳＷ０３３２９１処置マウス（全て飲料水中に含まれる２％ＤＳＳで処置した）のコホートの毎日の疾患活性指数のグラフを示す。

【図74】対照ビヒクル対ＳＷ０３３２９１を摂取したＤＳＳ処置マウスのコホートのベースライン重量からの平均変化を表すグラフを示す。

【図75】（Ａ−Ｂ）下記を示す：（Ａ）対照ビヒクル対ＳＷ０３３２９１を摂取したＤＳＳ処置マウスの結腸中の潰瘍の数を表すグラフ；および（Ｂ）対照（左）またはＳＷ０３３２９１（右）を摂取したＤＳＳ処置マウスの潰瘍を表す写真。

【図76】ＤＳＳ処置マウスの第１５日での潰瘍負荷の定量を表すグラフを示す。

【図77】（Ａ−Ｂ）対照ビヒクルまたはＳＷ０３３２９１を摂取したＤＳＳ処置マウスに対する、大腸内視鏡所見を表す写真および大腸炎重症度（ＭＥＩＣ）のマウス内視鏡指数を示す。

【図78】対照ビヒクルまたはＳＷ０３３２９１を摂取したＤＳＳ処置マウスのＭＥＩＣＳスコアを表すグラフを示す。

【図79】対照マウス、ＳＷ０３３２９１処置マウス（処置）および１５−ＰＧＤＨノックアウトマウス（ＫＯ）由来の、ＤＳＳプロトコルの第８日での中央結腸からの強拡大視野の顕微鏡写真ならびにＤＳＳ処置プロトコルの第１日、第８日、および第１５日での、対照（Ｃｎ）、ＳＷ０３３２１９処置マウス（Ｔｘ）、および１５−ＰＧＤＨノックアウトマウス（ＫＯ）の遠位＋中央結腸における、ＢｒｄＵ陽性細胞の平均数の合計／陰窩を表すグラフを示す。

【図80】対照ビヒクルまたはＳＷ０３３２９１を摂取したＤＳＳ処置マウスの、第２２日での結腸長を表すグラフを示す。

【図81】ＳＷ０５４３８４の類似体の概略図を示す。

【図82】（Ａ−Ｃ）２．５μΜおよび７．５μΜの、図８１の化合物で処理した結腸癌細胞系Ｖ９Ｍ、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図83】図７４の化合物による１５−ＰＧＤＨ活性のパーセント阻害を表すグラフを示す。

【図84】（Ａ−Ｃ）下記を示す：（Ａ）図８１の化合物を用いた、ＩＬ１−βを使用する処置によりＰＥＧ２を産生するように刺激されたＡ５４９細胞の培地中のＰＧＥ２レベルを低下させる際の活性を表すグラフ；（Ｂ）図８１の化合物が投与されたＡ５４９細胞の毒性を表すグラフ；ならびに（Ｃ）図８１の化合物で処置したＡ５４９細胞の写真。

【図85】マウス肝臓Ｓ９ミクロソームとのインキュベーションによる、ＳＷ０５４３８４の代謝安定性を表すプロットを示す。

【図86】マウス肝臓Ｓ９ミクロソームとのインキュベーションによるＳＷ０１２５９９１の代謝安定性を表すプロットを示す。

【図87】ＳＷ０５４３８４の類似体の概略図を示す。

【図88】２．５μΜおよび７．５μΜの、図８７の化合物で処理した結腸癌細胞Ｖ９ｍのルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図89】２．５μΜおよび７．５μΜの、図８７の化合物で処理した結腸癌ＬＳ１７４Ｔ細胞のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図90】２．５μΜおよび７．５μΜの、図８７の化合物で処理した結腸癌細胞Ｖ５０３のルシフェラーゼ活性を表すグラフを示す。

【図91】図８７の化合物による１５−ＰＧＤＨのパーセント阻害を表すグラフを示す。

【図92】１５−ＰＧＤＨ活性化剤、ＳＷ０５４３８４、ＳＷ１２５９９１、ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、およびＳＷ２０７９９９の構造を表す略図を示す。

【図93】２．５μΜの各化合物で、２．５ｎｇ／ｍｌのＩＬ１−β添加と共に処理したＡ５４９細胞の培地中のＰＧＥ２レベルを低下させる際のＳＷ０５４３８４、ＳＷ１２５９９１、ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、ＳＷ２０７９９９の活性を表すグラフを示す。

【図94】ＩＬ１−βで刺激したＡ５４９細胞の培地中のＰＧＥ２レベルへの効果を測定するアッセイにおける１５−ＰＧＤＨ活性化剤化合物の滴定曲線を示す。

【図95】Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ１２５９９１の毒性の評価を表す写真を示す。

【図96】Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ２０７９９７の毒性の評価を表す写真を示す。

【図97】Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ２０７９９８の毒性の評価を表す写真を示す。

【図98】Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ２０７９９９の毒性の評価を表す写真を示す。

【発明を実施するための形態】

【0023】

便宜上、明細書、実施例、および添付の特許請求の範囲で使用されるある一定の用語をここでまとめておく。別に規定されない限り、本明細書で使用される全ての技術および科学用語は本出願が属する分野の当業者により普通に理解されるものと同じ意味を有する。

【0024】

冠詞「一（ａおよびａｎ）」は、１つの、または１つを超える（すなわち、少なくとも１つの）、その冠詞の文法的対象を示すために本明細書で使用される。例として、「一要素」は、１つの要素または１を超える要素を意味する。

【0025】

「含む」「含んでいる」「含有する」「含有している」「有する」および「有している」という用語は追加の要素が含まれ得ることを意味する包括的な開かれた感覚で使用される。本明細書で使用される「など」、「例えば」という用語は非限定的であり、例示目的にすぎない。「含む」および「含むが、それらに限定はされない」は同じ意味で使用される。

【0026】

「または」という用語は、本明細書では、文脈により明確に別記されない限り、「および／または」を意味すると理解されるべきである。

【0027】

出願の化合物のいくつかは不斉（キラル）炭素原子を含むことに気が付くであろう。したがって、別記されない限り、そのような不斉性から生じる異性体が本明細書に含まれることが理解されるべきである。そのような異性体は、古典的な分離技術により、および立体化学的に制御された合成により実質的に純粋な形態で得ることができる。本出願の化合物は立体異性体型で存在することができ、そのため、個々の立体異性体として、また混合物として生成させることができる。

【0028】

「異性」という用語は、同一の分子式を有するが、それらの原子の結合の性質もしくは順序またはそれらの原子の空間における配列が異なる化合物を意味する。それらの原子の空間における配列が異なる異性体は「立体異性体」と呼ばれる。お互いの鏡像ではない立体異性体は「ジアステレオ異性体」と呼ばれ、重ね合わせることができない鏡像である立体異性体は「鏡像異性体」、または時として光学異性体と呼ばれる。４つの同一でない置換基に結合された炭素原子は「キラル中心」と呼ばれる。

【0029】

「キラル異性体」という用語は、少なくとも１つのキラル中心を有する化合物を意味する。それは反対のキラリティーの２つの鏡像異性体型を有し、個々の鏡像異性体として、あるいは鏡像異性体の混合物として存在し得る。等しい量の反対のキラリティーの個々の鏡像異性体型を含む混合物は「ラセミ混合物」と呼ばれる。１を超えるキラル中心を有する化合物は２ｎ−１の鏡像異性体対を有し、ここで、ｎはキラル中心の数である。１を超えるキラル中心を有する化合物は、個々のジアステレオマーとして、または、「ジアステレオマー混合物」と呼ばれるジアステレオマーの混合物として存在することができる。１つのキラル中心が存在する場合、立体異性体はそのキラル中心の絶対配置（ＲまたはＳ）により特徴付けられ得る。あるいは、１つ以上のキラル中心が存在する場合、立体異性体は（＋）または（−）として特徴付けられ得る。絶対配置は、キラル中心に付着された置換基の空間配列を示す。検討中のキラル中心に付着された置換基は、Ｃａｈｎ、ＩｎｇｏｌｄおよびＰｒｅｌｏｇの順位規則に従いランクづけされる（Ｃａｈｎ ｅｔ ａｌ， Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔｅｒ． Ｅｄｉｔ． １９６６， ５， ３８５； ｅｒｒａｔａ ５１１ ； Ｃａｈｎ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． １９６６， ７８， ４１３； Ｃａｈｎ ａｎｄ Ｉｎｇｏｌｄ， Ｊ Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９５１ （Ｌｏｎｄｏｎ）， ６１２； Ｃａｈｎ ｅｔ ａｌ．， Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ １９５６， １２， ８１ ； Ｃａｈｎ， Ｊ．， Ｃｈｅｍ． Ｅｄｕｃ． １９６４， ４１， １１６）。

【0030】

「幾何異性体」という用語は、それらの存在が二重結合周りの回転障害に起因するジアステレオマーを意味する。これらの立体配置は、それらの名称において、接頭辞ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ、またはＺおよびＥにより識別され、これらは、基が、Ｃａｈｎ−Ｉｎｇｏｌｄ−Ｐｒｅｌｏｇ規則に従い、分子中の二重結合の同じまたは反対側に存在することを示す。さらに、本出願で記載される構造および他の化合物はその全てのアトロプ異性体を含む。

【0031】

「アトロプ異性体」という用語は、２つの異性体の原子が空間で異なって配列される立体異性体の型である。アトロプ異性体の存在は、中心結合周りの大きな基の回転障害により引き起こされる回転制限に起因する。そのようなアトロプ異性体は典型的には、混合物として存在するが、しかしながら、クロマトグラフィー技術の最近の進歩の結果として、限定された場合に、２つのアトロプ異性体の混合物を分離することが可能になっている。

【0032】

「結晶多形」または「多形」または「結晶形」という用語は、化合物（またはその塩もしくは溶媒和物）が異なる結晶充填配列（全て、同じ元素組成を有する）で結晶化できる結晶構造を意味する。異なる結晶形は通常、異なるＸ線回折パターン、赤外スペクトル、融点、密度硬度、結晶形状、光学および電気特性、安定性および溶解度を有する。再結晶溶媒、結晶化速度、貯蔵温度、および他の因子は、１つの結晶形を優先させ得る。化合物の結晶多形は、異なる条件下で結晶化することにより調製することができる。

【0033】

「誘導体」という用語は、共通のコア構造を有し、本明細書で記載される様々な基で置換された化合物を示す。

【0034】

「バイオアイソスター」という用語は、１つの原子または原子の一群の別の、広義に同様な、原子または原子の一群との交換により得られる化合物を示す。生物学的等価性置換の目的は、親化合物と同様の生物学的特性を有する新規化合物を作成することである。生物学的等価性置換は、物理化学またはトポロジーに基づいてもよい。カルボン酸バイオアイソスターの例としては、アシルスルホンイミド、テトラゾール、スルホネート、およびホスホネートが挙げられる。例えば、Ｐａｔａｎｉ ａｎｄ ＬａＶｏｉｅ， Ｃｈｅｍ． Ｒｅｖ． ９６， ３１４７−３１７６ （１９９６）を参照されたい。

【0035】

「非経口投与」および「非経口的に投与され」という句は当該技術分野において承認されている用語であり、経腸および局所投与以外の投与様式、例えば、注射を含み、限定はされないが、静脈内、筋肉内、胸膜内、血管内、心膜内、動脈内、くも膜下腔内、関節内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内および胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｍａｌ）注射ならびに注入が挙げられる。

【0036】

「治療する」という用語は当該技術分野において承認されており、被験体において疾患、障害または病状を阻害する、例えば、その進行を妨害する；および疾患、障害または病状を軽減する、例えば、疾患、障害および／または病状の退行を引き起こすことを含む。疾患または病状を治療することは、根底にある病態生理が影響を受けなくても、特定の疾患または病状の少なくとも１つの症状を寛解させることを含む。

【0037】

「防止する」という用語は当該技術分野において承認されており、疾患、障害および／または病状に罹る可能性があるが、まだ、それを有すると診断されていない疾患、障害または病状が被験体において起こるのを中止させることを含む。疾患に関連する病状を防止することは、疾患が診断されされた後、病状が診断される前に、その病状が起こらないように中止させることを含む。

【0038】

「医薬組成物」という用語は、被験体への投与に好適な形態の、開示された化合物を含む製剤を示す。好ましい実施形態では、医薬組成物はばらでまたは単位剤形で存在する。単位剤形は様々な形態のいずれかであり、例えば、カプセル、ＩＶバッグ、錠剤、エアロゾル吸入器上の単一ポンプ、またはバイアルが挙げられる。単位用量の組成物中の活性成分（例えば、開示された化合物またはその塩の製剤）の量は、有効量であり、関連する特定の治療に従い変動する。当業者は、患者の年齢および状態によって投与量にルーチン的な変化を与えることが時として必要であることを認識するであろう。投与量はまた、投与経路に依存する。様々な経路が企図され、経口、肺、直腸、非経口、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、鼻腔内、吸入、などが挙げられる。本明細書で記載される化合物の局所または経皮投与のための剤形としては、粉末、噴霧剤、軟膏剤、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチ、噴霧化化合物、および吸入薬が挙げられる。好ましい実施形態では、活性化合物は無菌条件下で薬学的に許容される担体と、および要求される任意の保存剤、緩衝剤、または噴射剤と混合される。

【0039】

「フラッシュドーズ（ｆｌａｓｈ ｄｏｓｅ）」という用語は、迅速に剤形を分散する化合物製剤を示す。

【0040】

「即時放出」という用語は、比較的短い期間の、一般に約６０分までの剤形からの化合物の放出として規定される。「改良放出」という用語は、遅延放出、持続放出、およびパルス放出を含むように規定される。「パルス放出」という用語は、剤形からの薬物の一連の放出として規定される。「徐放」または「持続放出」という用語は、長期にわたる、剤形からの化合物の連続放出として規定される。

【0041】

「薬学的に許容される」という句は当該技術分野において承認されている。ある一定の実施形態では、その用語は、健全な医学的判断の範囲内で、ヒトおよび動物の組織と接触させて、過剰の毒性、刺激作用、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症なしで使用するのに好適で、妥当な利益／リスク比に見合った、組成物、ポリマおよび他の材料および／または剤形を含む。

【0042】

「薬学的に許容される担体」という句は、当該技術分野において承認されており、例えば、任意の対象組成物を１つの器官、または身体の一部から別の器官、または身体の一部へ運搬または輸送するのに関与する、薬学的に許容される材料、組成物またはビヒクル、例として液体もしくは固体フィラー、希釈剤、賦形剤、溶媒または封入材料を含む。各担体は、対象組成物の他の材料成分と適合し、患者に有害ではないという意味で、「許容され」なければならない。ある一定の実施形態では、薬学的に許容される担体は非発熱性である。薬学的に許容される担体として機能し得る材料のいくつかの例としては、下記があげられる：（１）糖類、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース；（２）デンプン、例えばトウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプン；（３）セルロース、およびその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；（４）トラガント末；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤、例えばカカオバターおよび坐薬ろう；（９）油類、例えばピーナッツ油、綿実油、ひまわり油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油；（１０）グリコール、例えばプロピレングリコール；（１１）ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコール；（１２）エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質を含まない水；（１７）等張食塩水；（１８）リンガー液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝溶液；および（２１）医薬製剤で使用される他の無毒性適合物質。

【0043】

本出願の化合物はさらに塩を形成することができる。これらの形態もまた全て本明細書で企図される。

【0044】

化合物の「薬学的に許容される塩」は、薬学的に許容され、親化合物の所望の薬理活性を有する塩を意味する。例えば、塩は酸付加塩とすることができる。酸付加塩の１つの実施形態は塩酸塩である。薬学的に許容される塩は、塩基性または酸性部分を含む親化合物から、従来の化学的方法により合成することができる。一般に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸または塩基形態を化学量論量の適切な塩基または酸と、水中または有機溶媒中、あるいはその２つの混合物中で反応させることにより調製することができ；一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水媒体が好ましい。塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， １８ｔｈ ｅｄ．（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， １９９０）において見出される。

【0045】

本明細書で記載される化合物はまた、エステル、例えば薬学的に許容されるエステルとして調製することができる。例えば、化合物中のカルボン酸官能基は、その対応するエステル、例えば、メチル、エチル、または他のエステルに変換することができる。また、化合物中のアルコール基は、その対応するエステル、例えば、アセテート、プロピオネート、または他のエステルに変換することができる。

【0046】

本明細書で記載される化合物はまた、プロドラッグ、例えば薬学的に許容されるプロドラッグとして調製することができる。「プロ−ドラッグ」および「プロドラッグ」という用語は本明細書では同じ意味で使用され、活性親薬物をインビボで放出する任意の化合物を示す。プロドラッグは医薬品の多くの望ましい品質を増強することが知られているので（例えば、溶解度、バイオアベイラビリティ、製造、など）、化合物は、プロドラッグ形態で送達させることができる。よって、本明細書で記載される化合物は、ここで特許請求される化合物のプロドラッグ、これを送達する方法およびこれを含む組成物を含むことが意図される。「プロドラッグ」は、そのようなプロドラッグが被験体に投与された場合、活性親薬物をインビボで放出する、任意の共有結合された担体を含むことが意図される。プロドラッグは、修飾がルーチン操作またはインビボで開裂されて親化合物になるように、化合物中に存在する官能基を修飾することにより調製される。プロドラッグとしては、ヒドロキシ、アミノ、スルフヒドリル、カルボキシ、またはカルボニル基が、インビボで開裂されて、それぞれ、遊離ヒドロキシル、遊離アミノ、遊離スルフヒドリル、遊離カルボキシまたは遊離カルボニル基を形成することができる任意の基に結合された化合物が挙げられる。

【0047】

プロドラッグの例としては下記が挙げられるが、それらに限定されない：式Ｉの化合物中の、ヒドロキシ官能基のエステル（例えば、アセテート、ジアルキルアミノアセテート、ホルマート、ホスフェート、スルフェート、およびベンゾエート誘導体）およびカルバメート（例えば、Ν，Ν−ジメチルアミノカルボニル）、カルボキシル官能基のエステル基（例えば、エチルエステル、モルホリノエタノールエステル）、アミノ官能基のＮ−アシル誘導体（例えば、Ｎ−アセチル）Ｎ−マンニッヒ塩基、シッフ塩基およびエナミノン、ケトンおよびアルデヒド官能基のオキシム、アセタール、ケタールおよびエノールエステル、など、Ｂｕｎｄｅｇａａｒｄ， Ｈ． “Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ” ｐ１−９２， Ｅｌｅｓｅｖｉｅｒ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｏｘｆｏｒｄ （１９８５）を参照されたい。

【0048】

「保護基」という用語は、分子中の反応基に付着されると、反応性をマスクし、低減し、または防止する原子の一群を示す。保護基の例は、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｗｕｔｓ， Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， （Ｗｉｌｅｙ， ２．ｓｕｐ．ｎｄ ｅｄ． １９９１）； Ｈａｒｒｉｓｏｎ ａｎｄ Ｈａｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｍｅｔｈｏｄｓ， Ｖｏｌｓ． １−８ （Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， １９７１−１９９６）；およびＫｏｃｉｅｎｓｋｉ， Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ Ｇｒｏｕｐｓ， （Ｖｅｒｌａｇ， ３^ｒｄｅｄ． ２００３）において見出すことができる。

【0049】

「アミン保護基」という用語は、アミン、アミド、または他の窒素含有部分を特定の化学反応の条件に対し実質的に不活性な異なる化学基に変換する官能基を意味することが意図される。アミン保護基は好ましくは、容易にかつ選択的に良好な収率で分子の他の官能基に影響を与えない条件下で除去される。アミン保護基の例としては下記が挙げられるが、それらに限定されない：ホルミル、アセチル、ベンジル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ｐ−メトキシベンジル、メトキシメチル、トシル、トリフルオロアセチル、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、フルオレニル−メチルオキシカルボニル、２−トリメチルシリル−エチオキシ（ｅｔｈｙｏｘｙ）カルボニル、１−メチル−１−（４−ビフェニリル）エトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（ＳＥＳ）、トリチルおよび置換トリチル基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、ニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（ＮＶＯＣ）、など。当業者は、他の好適なアミン保護基を同定することができる。

【0050】

代表的なヒドロキシ保護基としては、ヒドロキシ基がアシル化またはアルキル化されたもの、例えばベンジル、およびトリチルエーテルならびにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテルおよびアリルエーテルが挙げられる。

【0051】

加えて、本明細書で記載される化合物の塩は、水和または未水和（無水）形態で、または他の溶媒分子との溶媒和物として存在することができる。水和物の非限定的な例としては一水和物、二水和物、などが挙げられる。溶媒和物の非限定的な例としては、エタノール溶媒和物、アセトン溶媒和物、などが挙げられる。

【0052】

「溶媒和物」という用語は、化学量論量または非化学量論量のいずれかの溶媒を含む溶媒付加形態を意味する。いくつかの化合物は結晶固体状態中に一定モル比の溶媒分子をトラップする傾向を有し、よって溶媒和物を形成する。溶媒が水である場合、形成された溶媒和物は水和物であり、溶媒がアルコールである場合、形成された溶媒和物はアルコラートである。水和物は、１つ以上の水分子を物質の１つと組み合わせることにより形成され、この場合、水は、Ｈ_２Ｏとしてのその分子状態を保持し、そのような組み合わせは、１つ以上の水和物を形成することができる。

【0053】

本明細書で記載される化合物、塩およびプロドラッグはいくつかの互変異性体型、例えばエノールおよびイミン型、ならびにケトおよびエナミン型、ならびに幾何異性体およびそれらの混合物で存在することができる。互変異性体は溶液中で互変異性体セットの混合物として存在する。固体形態では、通常１つの互変異性体が優位を占める。１つの互変異性体が記載されている場合であっても、本出願は本化合物の全ての互変異性体を含む。互変異性体は、平衡で存在し、１つの異性体型からもう一方の異性型に容易に変換される２つ以上の構造異性体の１つである。この反応によって、隣接する共役二重結合のスイッチに伴って起こる水素原子の形式的な移動がもたらされる。互変異性化が可能な溶液では、互変異性体の化学平衡に到達するであろう。互変異性体の正確な比は温度、溶媒およびｐＨを含むいくつかの因子に依存する。互変異性化によって相互交換可能である互変異性体の概念は互変異性と呼ばれる。

【0054】

可能である互変異性の種々の型のうち、２つが一般に観察される。ケト−エノール互変異性では、電子と水素原子の同時シフトが起こる。

【0055】

互変異性化は塩基については：１．脱プロトン化；２．非局在化アニオンの形成（例えば、エノラート）；３．アニオンの異なる位置でのプロトン化により；酸については：１．プロトン化；２．非局在化カチオンの形成；３．カチオンに隣接した異なる位置での脱プロトン化により触媒することができる。

【0056】

「類似体」という用語は、もう１つと構造的に類似するが、組成がわずかに異なる化学化合物を示す（１つの原子の異なる元素の原子による、または特定の官能基の存在下での置換、あるいは１つの官能基の別の官能基による置換などの場合）。よって、類似体は、参照化合物と、機能および外観が同様または同等であるが、構造または起源がそうでない化合物である

【0057】

対象方法により治療される「患者」、「被験体」、または「宿主」は、ヒトまたは非ヒト動物、例えば哺乳類、魚、鳥類、爬虫類、または両生類のいずれかを意味することができる。よって、本明細書で開示される方法の被験体はヒト、非ヒト霊長類、ウマ、ブタ、ウサギ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、雌ウシ、ネコ、モルモットまたは齧歯類とすることができる。この用語は、特定の年齢または性別を示さない。よって、成体および新生被験体、ならびに胎児が、雄雌関係なく、含まれることが意図される。１つの態様では、被験体は哺乳類である。患者は、疾患または障害に苦しむ被験体を示す。

【0058】

「予防的」または「治療的」処置は当該技術分野において承認されており、宿主への対象組成物の１つ以上の投与を含む。望まれない病状（例えば、宿主動物の疾患または他の望まれない状態）の臨床徴候前に投与される場合、処置は予防的であり、すなわち、これは、宿主を望まれない病状の発症に対し保護し、一方、望まれない病状の徴候後に投与される場合、処置は治療的である（すなわち、既存の望まれない病状またはその副作用を減弱、寛解、または安定化させることが意図される）。

【0059】

「治療薬」、「薬物」、「薬剤」および「生理活性物質」という用語は当該技術分野において承認されており、患者または被験体において疾患または病状を治療するように局所的または全身的に作用する、生物学的に、生理的に、または薬理学的に活性な物質である分子および他の作用物質を含む。これらの用語は、限定はされないが、その薬学的に許容される塩およびプロドラッグを含む。そのような作用物質は酸性、塩基性、または塩であってもよく；それらは水素結合することができる中性分子、極性分子、または分子複合体であってもよく；それらは、患者または被験体に投与されると生物学的に活性化される、エーテル、エステル、アミドなどの形態のプロドラッグであってもよい。

【0060】

「治療的有効量」または「薬学的有効量」は当該技術分野において承認されている用語である。ある一定の実施形態では、その用語は、任意の医学的処置に適用可能な妥当な利益／リスク比でいくらかの所望の効果を生成させる治療薬の量を示す。ある一定の実施形態では、その用語は、特定の治療レジメンの標的を排除、低減または維持するのに必要なまたは十分なその量を示す。有効量は、治療される疾患または病状、投与される特定の標的コンストラクト、被験体のサイズあるいは疾患または病状の重症度などの因子によって変動し得る。当業者は経験的に、過度の実験を必要とすることなく、特定の化合物の有効量を決定することができる。ある一定の実施形態では、インビボ使用のための治療薬の治療的有効量はおそらく、下記を含む多くの因子に依存するであろう：ポリママトリクスからの作用物質の放出速度（これは一部、ポリマの化学および物理的特性に依存するであろう）；作用物質のアイデンティティ；投与の様式および方法；および作用物質に加えてポリママトリクスに組み込まれる任意の他の材料。

【0061】

「ＥＤ５０」という用語は当該技術分野において承認されている。ある一定の実施形態では、ＥＤ５０は、その最大応答または効果の５０％を生成させる薬物の用量、あるいは、試験被験体または標本の５０％において予め決められた応答を生成させる用量を意味する。「ＬＤ５０」という用語は当該技術分野において承認されている。ある一定の実施形態では、ＬＤ５０は、試験被験体の５０％において致死的である薬物の用量を意味する。「治療指数」という用語は当該技術分野において承認されている用語であり、これは、ＬＤ５０／ＥＤ５０として規定される、薬物の治療指数を示す。

【0062】

「ＩＣ_５０」という用語または「５０％阻害濃度」は、生物学的プロセス、またはプロセスの構成成分、例えばタンパク質、サブユニット、小器官、リボヌクレオタンパク質、などの５０％阻害に要求される物質（例えば、化合物または薬物）の濃度を示すことが意図される。

【0063】

任意の化学化合物に関しては、本出願は、本化合物において起こる、原子の全ての同位体を含むことが意図される。同位体としては、同じ原子番号を有するが、異なる質量数を有するそれらの原子が挙げられる。一般的な例としては、限定はされないが、水素の同位体はトリチウムおよび重水素を含み、炭素の同位体はＣ−１３およびＣ−１４を含む。

【0064】

置換基への結合が、環中の２つの原子を連結する結合を横切るように表されている場合、そのような置換基は、環中の任意の原子に結合され得る。置換基が、そのような置換基が、与えられた式の化合物の残りに、それを介して結合される原子を示さずに列挙される場合、そのような置換基は、そのような置換基内の任意の原子を介して結合させることができる。置換基および／または変数の組み合わせは、そのような組み合わせにより安定な化合物が得られる場合にのみ許容される。

【0065】

原子または化学部が下付き文字の数値範囲を伴う場合（例えば、Ｃ_１−６）、範囲内の各数字ならびに全ての中間範囲を含むことが意味される。例えば、「Ｃ_１−６アルキル」は、１、２、３、４、５、６、１−６、１−５、１−４、１−３、１−２、２−６、２−５、２−４、２−３、３−６、３−５、３−４、４−６、４−５、および５−６個の炭素を有するアルキル基を含むことが意味される。

【0066】

「アルキル」という用語は、分枝（例えば、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル）、直鎖、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル）の両方、およびシクロアルキル（例えば、脂環式）基（例えば、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル）、アルキル置換シクロアルキル基、およびシクロアルキル置換アルキル基を含むことが意図される。そのような脂肪族炭化水素基は特定数の炭素原子を有する。例えば、Ｃ_１−６アルキルは、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、およびＣ_６アルキル基を含むことが意図される。本明細書では、「低級アルキル」は、炭素鎖の骨格中に１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を示す。「アルキル」はさらに、１つ以上の炭化水素骨格炭素原子にとって代わる酸素、窒素、硫黄またはリン原子を有するアルキル基を含む。ある一定の実施形態では、直鎖または分枝鎖アルキルは、その骨格内に６個以下の炭素原子（例えば、直鎖ではＣ_１−Ｃ_６、分枝鎖ではＣ_３−Ｃ_６）、例えば４個以下を有する。同様に、ある一定のシクロアルキルは、それらの環構造内に３〜８個の炭素原子、例えば環構造内に５または６個の炭素を有する。

【0067】

「置換アルキル」という用語は、炭化水素骨格の１つ以上の炭素上の水素にとって代わる置換基を有するアルキル部分を示す。そのような置換基としては、例えば、下記が挙げられる：アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分。シクロアルキルはさらに、例えば、上記置換基で置換することができる。「アルキルアリール」または「アラルキル」部分はアリールで置換されたアルキルである（例えば、フェニルメチル（ベンジル））。別に示されない限り、「アルキル」および「低級アルキル」という用語は、それぞれ、直鎖、分枝、環状、非置換、置換、および／またはヘテロ原子含有アルキルまたは低級アルキルを含む。

【0068】

「アルケニル」という用語は、少なくとも１つの二重結合を含む、２〜約２４個の炭素原子の直鎖、分枝または環状炭化水素基、例えばエテニル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブテニル、イソブテニル、オクテニル、デセニル、テトラデセニル、ヘキサデセニル、エイコセニル、テトラコセニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロオクテニル、などを示す。一般に、これまた必ずではないが、アルケニル基は２〜約１８個の炭素原子、より特定的には２〜１２個の炭素原子を含むことができる。「低級アルケニル」という用語は、２〜６個の炭素原子のアルケニル基を示し、「シクロアルケニル」という特定の用語は、好ましくは５〜８個の炭素原子を有する環状アルケニル基を意図する。「置換アルケニル」という用語は、１つ以上の置換基で置換されたアルケニルを示し、「ヘテロ原子含有アルケニル」および「ヘテロアルケニル」という用語は、少なくとも１つの炭素原子がヘテロ原子で置換された、アルケニルまたはヘテロシクロアルケニル（例えば、ヘテロシクロヘキセニル）を示す。別に示されない限り、「アルケニル」および「低級アルケニル」という用語は、それぞれ、直鎖、分枝、環状、非置換、置換、および／またはヘテロ原子含有アルケニルおよび低級アルケニルを示す。

【0069】

「アルキニル」という用語は、少なくとも１つの三重結合を含む、２〜２４個の炭素原子の直鎖または分枝炭化水素基、例えばエチニル、ｎ−プロピニル、などを示す。一般に、これまた必ずではないが、アルキニル基は２〜約１８個の炭素原子を含むことができ、より特定的には２〜１２個の炭素原子を含むことができる。「低級アルキニル」という用語は、２〜６個の炭素原子のアルキニル基を意図する。「置換アルキニル」という用語は、１つ以上の置換基で置換されたアルキニルを示し、「ヘテロ原子含有アルキニル」および「ヘテロアルキニル」という用語は、少なくとも１つの炭素原子がヘテロ原子で置換されたアルキニルを示す。別に示されない限り、「アルキニル」および「低級アルキニル」という用語は、それぞれ、直鎖、分枝、非置換、置換、および／またはヘテロ原子含有アルキニルおよび低級アルキニルを含む。

【0070】

「アルキル」、「アルケニル」、および「アルキニル」という用語は、ジラジカルである、すなわち、２つの付着点を有する部分を含むことが意図される。ジラジカルであるそのようなアルキル部分の非限定的例は−−ＣＨ_２ＣＨ_２−−、すなわち、各末端炭素原子を介して分子の残り共有結合されるＣ_２アルキル基である。

【0071】

「アルコキシ」という用語は、単一の末端エーテル結合を介して結合されるアルキル基を示し；すなわち、「アルコキシ」基は、−−Ｏ−アルキルとして表すことができ、ここで、アルキルは上記で規定される通りである。「低級アルコキシ」基は１〜６個の炭素原子を含むアルコキシ基を意図し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔ−ブチルオキシ、などが挙げられる。本明細書で「Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ」または「低級アルコキシ」として規定される好ましい置換基は１〜３個の炭素原子を含み、特に好ましいそのような置換基は１または２個の炭素原子を含む（すなわち、メトキシおよびエトキシ）。

【0072】

「アリール」という用語は、単一の芳香環または、共に縮合され、直接結合され、または間接的に結合された（よって、異なる芳香環が共通の基、例えば、メチレンまたはエチレン部分に結合される）複数の芳香環を含む芳香族置換基を示す。アリール基は５〜２０個の炭素原子を含むことができ、特に好ましいアリール基は、５〜１４個の炭素原子を含むことができる。アリール基の例としては、下記が挙げられる：ベンゼン、フェニル、ピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、およびピリミジン、など。さらに、「アリール」という用語は多環状アリール基、例えば、三環、二環、例えば、ナフタレン、ベンゾキサゾール、ベンゾジオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチオフェン、メチレンジオキシフェニル、キノリン、イソキノリン、ナフトリジン（ｎａｐｔｈｒｉｄｉｎｅ）、インドール、ベンゾフラン、プリン、ベンゾフラン、デアザプリン、またはインドリジンを含む。環構造内にヘテロ原子を有するそれらのアリール基はまた、「アリール複素環」、「複素環」、「ヘテロアリール」または「ヘテロ芳香族」と呼ぶことができる。芳香環は、１つ以上の環位で、以上で記載される置換基、例えば、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アラルキルアミノカルボニル、アルケニルアミノカルボニル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分で置換することができる。アリール基はまた、脂環式環または複素環（芳香族ではない）と縮合または架橋させることができ、多環状系（例えば、テトラリン、メチレンジオキシフェニル）が形成される。別に示されない限り、「アリール」という用語は、非置換、置換、および／またはヘテロ原子含有芳香族置換基を含む。

【0073】

「アルカリル」という用語は、アルキル置換基を有するアリール基を示し、「アラルキル」という用語は、アリール置換基を有するアルキル基を示し、ここで、「アリール」および「アルキル」は上記で規定される通りである。例示的なアラルキル基は６〜２４個の炭素原子を含み、特に好ましいアラルキル基は６〜１６個の炭素原子を含む。アラルキル基の例としては、限定はされないが、下記が挙げられる：ベンジル、２−フェニル−エチル、３−フェニル−プロピル、４−フェニル−ブチル、５−フェニル−ペンチル、４−フェニルシクロヘキシル、４−ベンジルシクロヘキシル、４−フェニルシクロヘキシルメチル，
４−ベンジルシクロヘキシルメチル、など。アルカリル基としては、例えば、下記が挙げられる：ｐ−メチルフェニル、２，４−ジメチルフェニル、ｐ−シクロヘキシルフェニル、２，７−ジメチルナフチル、７−シクロオクチルナフチル、３−エチル−シクロペンタ−ｌ，４−ジエン、など。

【0074】

「ヘテロシクリル」または「複素環基」は閉環構造、例えば、３〜１０、または４〜７員環を含み、これらは１つ以上のヘテロ原子を含む。「ヘテロ原子」は、炭素または水素以外の任意の元素の原子を含む。ヘテロ原子の例としては、窒素、酸素、硫黄およびリンが挙げられる。

【0075】

ヘテロシクリル基は飽和もしくは不飽和とすることができ、ピロリジン、オキソラン、チオラン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、ラクトン、ラクタム、例えばアゼチジノンおよびピロリジノン、スルタム、およびスルトンが挙げられる。ピロールおよびフランなどの複素環基は芳香族特性を有することができる。それらは、縮合環構造、例えばキノリンおよびイソキノリンを含む。複素環基の他の例としては、ピリジンおよびプリンが挙げられる。複素環は１つ以上の位置で例えば下記のような、以上で記載される置換基で置換することができる：ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、シアノ、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分。複素環基はまた、１つ以上の構成原子で、例えば、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、低級アルキルアミノ、低級アルキルカルボキシル、ニトロ、ヒドロキシル、−−ＣＦ_３、または‐ーＣＮ、などで置換することができる。

【0076】

「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを示す。「対イオン」は、小さな、負電荷を持つ種、例えばフッ化物、塩化物、臭化物、ヨウ化物、水酸化物、アセテート、およびスルフェートを表すために使用される。

【0077】

「置換アルキル」「置換アリール」などにおいて見られるような「置換」という用語は、前記定義のいくつかにおいて示唆されるように、アルキル、アリール、または他の部分においては、炭素（または他の）原子に結合された少なくとも１つの水素原子が１つ以上の非水素置換基にとって代わられることを意味する。そのような置換基の例としては、下記が挙げられるが、それらに限定されない：官能基、例えばハロ、ヒドロキシル、シリル、スルフヒドリル、Ｃ_１ーＣ_２４アルコキシ、Ｃ_２ーＣ_２４アルケニルオキシ、Ｃ_２ーＣ_２４アルキニルオキシ、Ｃ_５ーＣ_２０アリールオキシ、アシル（Ｃ_２ーＣ_２４アルキルカルボニル（ーＣＯーアルキル）およびＣ_６ーＣ_２０アリールカルボニル（ーＣＯーアリール）を含む）、アシルオキシ（ーＯーアシル）、Ｃ_２ーＣ_２４アルコキシカルボニル（ー（ＣＯ）ーＯーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールオキシカルボニル（ー（ＣＯ）ーＯーアリール）、Ｃ_２ーＣ_２４アルキルカルボナト（ーＯー（ＣＯ）ーＯーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールカルボナト（ーＯー（ＣＯ）ーＯーアリール）、カルボキシ（ーＣＯＯＨ）、カルボキシラト（ーＣＯＯー）、カルバモイル（ー（ＣＯ）ーＮＨ_２）、モノー（Ｃ_１ーＣ_２４アルキル）ー置換カルバモイル（ー（ＣＯ）ーＮＨ（Ｃ_１ーＣ_２４アルキル））、ジー（Ｃ_１ーＣ_４アルキル）ー置換カルバモイル（ー（ＣＯ）ーーＮ（Ｃ_１ーＣ_２４アルキル）_２）、モノー置換アリールカルバモイル（ー（ＣＯ）ーＮＨーアリール）、チオカルバモイル（ー（ＣＳ）ーＮＨ_２）、カルバミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーＮＨ_２）、シアノ（ーＣＮ）、イソシアノ（ーＮ^＋Ｃ^ー）、シアナト（ーＯーーＣＮ）、イソシアナト（ーＯＮ^＋Ｃ^ー）、イソチオシアナト（ーＳーＣＮ）、アジド（ーＮ＝Ｎ^＋＝Ｎー）、ホルミル（ー（ＣＯ）ーーＨ）、チオホルミル（ー（ＣＳ）ーＨ）、アミノ（ーＮＨ_２）、モノーおよびジー（Ｃ_１ーＣ_２４アルキル）ー置換アミノ、モノーおよびジー（Ｃ_５ーＣ_２０アリール）ー置換アミノ、Ｃ_２ーＣ_２４アルキルアミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールアミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーアリール）、イミノ（ーＣＲ＝ＮＨ、式中、Ｒ＝水素、Ｃ_１ーＣ_２４アルキル、Ｃ_５ーＣ_２０アリール、Ｃ_６ーＣ_２４アルカリル、Ｃ_６ーＣ_２４アラルキル、など）、アルキルイミノ（ーＣＲ＝Ｎ（アルキル）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、など）、アリールイミノ（ーＣＲ＝Ｎ（アリール）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、など）、ニトロ（ーＮＯ_２）、ニトロソ（ーＮＯ）、スルホ（ーＳＯ_２ーＯＨ）、スルホナト（ーＳＯ_２ーＯ^ー）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルファニル（ーＳーアルキル；「アルキルチオ」とも呼ばれる）、アリールスルファニル（ーＳーアリール；「アリールチオ」とも呼ばれる）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルフィニル（ーー（ＳＯ）ーアルキル）、Ｃ_５ーＣ_２０アリールスルフィニル（ー（ＳＯ）ーアリール）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルホニル（ーＳＯ_２ーアルキル）、Ｃ_５ーＣ_２０アリールスルホニル（ーＳＯ_２ーアリール）、ホスホノ（ーＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２）、ホスホナト（ーＰ（Ｏ）（Ｏ^ー）_２）、ホスフィナト（ーＰ（Ｏ）（Ｏ^ー））、ホスホ（ーＰＯ_２）、およびホスフィノ（ーＰＨ_２）；ならびにヒドロカルビル部分Ｃ_１ーＣ_２４アルキル、Ｃ_２ーＣ_２４アルケニル、Ｃ_２ーＣ_２４アルキニル、Ｃ_５ーＣ_２０アリール、Ｃ_６ーＣ_２４アルカリル、およびＣ_６ーＣ_２４アラルキル。

【0078】

加えて、前記官能基は、特定の基が許容した場合、さらに１つ以上の追加の官能基または１つ以上のヒドロカルビル部分、例えば以上で特定的に列挙されたもので置換することができる。類似して、上記ヒドロカルビル部分はさらに、１つ以上の官能基または追加のドロカルビル部分、例えば特定的に列挙されたもので置換することができる。

【0079】

「置換」という用語が可能な置換基のリストの前に現れた場合、その用語はその群の全てのメンバーに適用されることが意図される。例えば、「置換アルキル、アルケニル、およびアリール」という句は、「置換アルキル、置換アルケニル、および置換アリール」として解釈されるべきである。類似して、「ヘテロ原子含有」という用語が可能なヘテロ原子含有基のリストの前に現れた場合、その用語はその群の全てのメンバーに適用されることが意図される。例えば、「ヘテロ原子含有アルキル、アルケニル、およびアリール」という句は、「ヘテロ原子含有アルキル、置換アルケニル、および置換アリール」として解釈されるべきである。

【0080】

「任意的な」または「任意で」は、その後に記載される状況が起きても起こらなくてもよく、よって、その記載はその状況が起きた場合および起きなかった場合を含む。例えば、「任意で置換された」という句は、非水素置換基が所定の原子上に存在してもしなくてもよいことを意味し、よってその記載は非水素置換基が存在する構造および非水素置換基が存在しない構造を含む。

【0081】

「安定な化合物」および「安定な構造」という用語は、単離、および必要に応じて、反応混合物からの精製、および有効な治療薬への製剤化を生き残るのに十分強固である化合物を示すことが意味する。

【0082】

「遊離化合物」という用語は、非結合状態にある化合物を記載するために本明細書で使用される。

【0083】

記載を通して、組成物が特定の構成成分を有する、含有する、または含むものとして記載される場合、組成物はまた、列挙された構成成分から本質的構成される、または、これらから構成されることが企図される。同様に、方法またはプロセスが、特定のプロセス工程を有する、含有する、または含むように記載される場合、プロセスはまた、列挙されたプロセス工程から本質的に構成される、またはこれらから構成される。さらに、工程の順序またはある一定の行為を実施する順序は、本明細書で記載される組成物および方法が動作可能である限り重要でないことが理解されるべきである。その上、２つ以上の工程または行為は同時に実施することができる。

【0084】

「小分子」という用語は当該技術分野において承認されている用語である。ある一定の実施形態では、この用語は、約２０００ａｍｕ未満、または約１０００ａｍｕ未満、さらには約５００ａｍｕ未満の分子量を有する分子を示す。

【0085】

本明細書で使用される全てのパーセンテージおよび比は、別記されない限り、重量である。

【0086】

「新生物」という用語は、新生物形成の結果としての細胞または組織の任意の異常な塊を示す。新生物は、良性、潜在的に悪性（前癌性）、または悪性（癌性）であり得る。腺腫は新生物の一例である。

【0087】

「腺腫」、「結腸腺腫」および「ポリープ」という用語は、結腸の任意の前癌性新生物を説明するために本明細書で使用される。

【0088】

「結腸」という用語は、本明細書では、右結腸（盲腸を含む）、横行結腸、左結腸および直腸を含むことが意図される。

【0089】

「結腸直腸癌」および「結腸癌」という用語は、結腸（以上で規定されるように直腸を含む）の任意の癌性新生物を示すために、本明細書では同じ意味で使用される。

【0090】

「遺伝子発現」または「タンパク質発現」という用語は、試料中に存在する遺伝子転写物またはタンパク質の量に関する任意の情報、ならびに遺伝子またはタンパク質が生成され、または蓄積し、または分解される速度についての情報（例えば、レポーター遺伝子データ、核ランオフ（ｎｕｃｌｅａｒ ｒｕｎｏｆｆ ）実験からのデータ、パルスチェイスデータなど）を含む。ある一定の種類のデータは、遺伝子およびタンパク質発現の両方と関連すると考えられ得る。例えば、細胞中のタンパク質レベルは、タンパク質のレベルならびに転写のレベルを反映し、そのようなデータは、「遺伝子またはタンパク質発現情報」という句に含まれることが意図される。そのような情報は、単位のない測定値で表された、量／細胞、対照遺伝子またはタンパク質に対する量などの形態で与えることができ；「情報」という用語は、表現の任意の特定の意味に限定されず、関連情報を提供する任意の表現を意味することが意図される。「発現レベル」という用語は、データが遺伝子転写物蓄積またはタンパク質蓄積またはタンパク質合成速度、などに向けられたものであるかどうかに関係なく、遺伝子またはタンパク質発現データで反映される、またはこれから誘導することができる量を示す。

【0091】

「健康な」および「正常な」という用語は、疾患状態を欠く（少なくとも検出限界まで）被験体または特定の細胞もしくは組織を示すために、本明細書では同じ意味で使用される。

【0092】

「核酸」という用語は、ポリヌクレオチド、例えばデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、適切な場合には、リボ核酸（ＲＮＡ）を示す。その用語はまた、ヌクレオチド類似体から作製されたＲＮＡまたはＤＮＡのいずれかの類似体、および、記載される実施形態に適用可能なように、一本鎖（例えばセンスまたはアンチセンス）および二本鎖ポリヌクレオチドを含むと理解されるべきである。いくつかの実施形態では、「核酸」は、阻害核酸を示す。阻害核酸化合物のいくつかのカテゴリは、アンチセンス核酸、ＲＮＡｉコンストラクト、および触媒核酸コンストラクトを含む。そのような核酸のカテゴリは当技術分野でよく知られている。

【0093】

本明細書で記載される実施形態は、１５ーＰＧＤＨ活性を調節する、組織プロスタグランジンレベルを調節する、および／または１５ーＰＧＤＨ活性および／またはプロスタグランジンレベルを調節することが所望される疾患、障害または病状を治療する化合物および方法に関する。１５ーＰＧＤＨ発現または１５ーＰＧＤＨ活性の「阻害剤」「活性化剤」および「モジュレーター」は、それぞれ、１５ーＰＧＤＨ発現または１５ーＰＧＤＨ活性についてインビトロおよびインビボアッセイを用いて同定された阻害、活性化、または調節分子、例えば、リガンド、アゴニスト、アンタゴニスト、ならびにそれらの相同体および模倣物を示すために使用される。「モジュレーター」という用語は阻害剤および活性化剤を含む。阻害剤は、例えば、１５ーＰＧＤＨの発現を阻害するまたは、１５ーＰＧＤＨに結合する、部分的にまたは全体として刺激をブロックする、活性化を減少させる、防止する、遅延させる、不活性化する、脱感作する、または活性を下方制御する作用物質、例えば、アンタゴニストである。活性化剤は例えば、１５ーＰＧＤＨの発現を誘導もしくは活性化する、または１５ーＰＧＤＨに結合する、刺激する、安定化させる、増加させる、開放する、活性化する、促進する、または活性化を増強する、感作させるもしくは活性を上方制御する作用物質、例えば、アゴニストである。モジュレーターは天然起源および合成リガンド、小化学分子、などを含む。

【0094】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、組織中のプロスタグランジンレベルを上昇させるための薬理学的方法を提供することができる。プロスタグランジンの公知の活性は、発毛を促進すること、皮膚色素沈着を促進すること、および皮膚暗色化または皮膚黒化の出現を促進することを含む。プロスタグランジンの公知の活性はまた、肺動脈高血圧を寛解させることを含む。本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤はまた、放射線による組織損傷に対する抵抗性を増加させる、放射線への環境曝露に対する抵抗性を増加させる、骨髄または他の型の移植の適応度を増加させるために幹細胞数を増加させる（移植組織の収集前に幹細胞数を増加させるための本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤へのインビボ曝露、またはレシピエント宿主への移植前の収集組織のエクスビボ曝露のいずれかを介する）ことを含むであろう目的のために組織幹細胞数を増加させるために使用されてもよい。本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤はまた、肝臓再生、例えば肝臓切除後の肝臓再生、および毒性傷害（例えば、アセトアミノフェン過剰投与の毒性傷害であり得る）後の肝臓再生を促進することを含むであろう目的のために使用されてもよい。プロスタグランジンシグナル伝達はまた、創傷治癒を促進し、胃を潰瘍形成から保護し、胃および腸の潰瘍の治癒を促進することが知られている。加えて、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、ケラチノサイト細胞の培養物を横切る引っ掻き傷の「治癒」においてヒトケラチノサイトの活性を促進することができる。よって、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、他の組織、例えば、限定はされないが皮膚の潰瘍、例えば、限定はされないが、糖尿病性潰瘍を治癒させるためにも使用され得る。さらに、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は勃起不全の治療のために使用され得る。

【0095】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ活性化剤は細胞中の１５ーＰＧＤＨタンパク質のレベルを増加させることができ、細胞中の１５ーＰＧＤＨ酵素活性のレベルを増加させることができる。１５ーＰＧＤＨの組織レベルの増加は、プロスタグランジンの組織レベルを減少させることができる。組織プロスタグランジンを減少させる化合物と関連する活性は、ヒト腫瘍の発症を減少させること、特にヒト結腸腫瘍の発症を減少させることを含む。したがって、組織１５ーＰＧＤＨ活性を増加させる化合物は、結腸腫瘍および他の腫瘍の発症のリスクを低下させることができる。１５ーＰＤＧＨ活性を増加させる化合物はまた、結腸腫瘍および他の腫瘍を治療するために使用することができる。１５ーＰＤＧＨを増加させる化合物は、単独で与えられた場合、あるいはシクロオキシゲナーゼー１および／またはシクロオキシゲナーゼー２酵素の阻害剤と組み合わせて与えられた場合、あるいは他の治療薬と組み合わせて与えられた場合、腫瘍を治療または防止するために使用することができる。

【0096】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤および活性化剤は、推定モジュレーター化合物が、１５ーＰＧＤＨを発現する細胞に適用され、その後、１５ーＰＧＤＨ活性に対する機能的効果が決定されるアッセイを用いて同定することができる。可能性のある活性化剤、阻害剤、またはモジュレーターで処理される１５ーＰＧＤＨを含む試料またはアッセイは、阻害剤、活性化剤、またはモジュレーターなしの対照試料と比較され、効果の程度が調査される。対照試料（モジュレーターによる処理なし）には、１００％の相対１５ーＰＧＤＨ活性値が割り当てられる。対照に対する１５ーＰＧＤＨ活性値が約８０％、任意で５０％または２５％、１０％、５％または１％になると、１５ーＰＧＤＨの阻害が達成される。対照に対する１５ーＰＧＤＨ活性または発現値が１０５％、任意で１１０％、任意で１２５％、任意で１５０％、任意で２００％、３００％、４００％、５００％、または１０００ー３０００％あるいはそれ以上になると、１５ーＰＧＤＨの活性化が達成される。

【0097】

１５ーＰＧＤＨのモジュレーターとして試験される作用物質は任意の小化学分子または化合物とすることができる。典型的には、試験化合物は小化学分子、天然産物、またはペプチドである。アッセイは、アッセイ工程を自動化し、任意の好都合な起源由来の化合物をアッセイに提供することにより大きな化合物ライブラリーをスクリーニングするように設計され、これらは、典型的には並行して実行される（例えば、ロボットアッセイにおけるマイクロタイタープレート上でのマイクロタイターフォーマットにおいて）。モジュレーターはまた、１５ーＰＧＤＨ ｍＲＮＡのレベルまたはｍＲＮＡからの翻訳のレベルを増加させるように設計された作用物質を含む。

【0098】

いくつかの実施形態では、１５ーＰＧＤＨのモジュレーターは下記式（Ｉ）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含む１５ーＰＧＤＨ阻害剤とすることができる：

【化4】

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式中、ｎは０ー２であり；
Ｒ_１はＣ_１ー８アルキルでありこれは直鎖、分枝、または環状であり、これは非置換であり、または置換され（例えば、Ｒ_１はＣ_２ー６アルキル、Ｃ_２ー４アルキル、またはＣ_４アルキルとすることができ、これは直鎖、分枝、または環状であり、これは非置換であり、または置換される）；
Ｒ_２およびＲ_３は同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択され：Ｈ、低級アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；
Ｒ_４およびＲ_５は同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択され：水素、Ｃ_１ーＣ_２４アルキル、Ｃ_２ーＣ_２４アルケニル、Ｃ_２ーＣ_２４アルキニル、Ｃ_３ーＣ_２０アリール、Ｃ_６ーＣ_２４アルカリル、Ｃ_６ーＣ_２４アラルキル、ハロ、シリル、ヒドロキシル、スルフヒドリル、Ｃ_１ーＣ_２４アルコキシ、Ｃ_２ーＣ_２４アルケニルオキシ、Ｃ_２ーＣ_２４アルキニルオキシ、Ｃ_５ーＣ_２０アリールオキシ、アシル（Ｃ_２ーＣ_２４アルキルカルボニル（‐ーＣＯーアルキル）およびＣ_６ーＣ_２０アリールカルボニル（ーＣＯーアリール）を含む）、アシルオキシ（ーＯーアシル）、Ｃ_２ーＣ_２４アルコキシカルボニル（ー（ＣＯ）ーＯーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールオキシカルボニル（ー（ＣＯ）ーＯーアリール）、Ｃ_２ーＣ_２４アルキルカルボナト（ーＯー（ＣＯ）ーＯーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールカルボナト（ーＯー（ＣＯ）ーＯーアリール）、カルボキシ（ーＣＯＯＨ）、カルボキシラト（ーＣＯＯ^ー）、カルバモイル（ー（ＣＯ）ーーＮＨ_２）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルーカルバモイル（ー（ＣＯ）ーＮＨ（Ｃ_１ーＣ_２４アルキル））、アリールカルバモイル（ー（ＣＯ）ーＮＨーアリール）、チオカルバモイル（ー（ＣＳ）ーＮＨ_２）、カルバミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーＮＨ_２）、シアノ（ーＣＮ）、イソシアノ（ーＮ^＋Ｃ^ー）、シアナト（ーＯーＣＮ）、イソシアナト（ーＯーＮ^＋＝Ｃ^ー）、イソチオシアナト（ーＳーＣＮ）、アジド（ーＮ＝Ｎ^＋＝Ｎ^ー）、ホルミル（ーー（ＣＯ）ーーＨ）、チオホルミル（ーー（ＣＳ）ーーＨ）、アミノ（ーーＮＨ_２）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルアミノ、Ｃ_５ーＣ_２０アリールアミノ、Ｃ_２ーＣ_２４アルキルアミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールアミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーアリール）、イミノ（ーＣＲ＝ＮＨ、式中、Ｒは水素、Ｃ_１ーＣ_２４アルキル、Ｃ_５ーＣ_２０アリール、Ｃ_６ーＣ_２４アルカリル、Ｃ_６ーＣ_２４アラルキル、などである）、アルキルイミノ（ーＣＲ＝Ｎ（アルキル）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、アラルキル、などである）、アリールイミノ（ーＣＲ＝Ｎ（アリール）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、などである）、ニトロ（ーＮＯ_２）、ニトロソ（ーＮＯ）、スルホ（ーＳＯ_２ーＯＨ）、スルホナト（ーＳＯ_２ーＯ^ー）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルファニル（ーＳーアルキル；「アルキルチオ」とも呼ばれる）、アリールスルファニル（ーＳーアリール；「アリールチオ」とも呼ばれる）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルフィニル（ー（ＳＯ）ーアルキル）、Ｃ_５ーＣ_２０アリールスルフィニル（ー（ＳＯ）ーアリール）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルホニル（ーＳＯ_２ーアルキル）、Ｃ_５ーＣ_２０アリールスルホニル（ーＳＯ_２ーアリール）、ホスホノ（ーＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２）、ホスホナト（ーＰ（Ｏ）（Ｏ^ー）_２）、ホスフィナト（ーＰ（Ｏ）（Ｏ^ー））、ホスホ（ーＰＯ_２）、ホスフィノ（‐ーＰＨ_２）、それらの組み合わせ、ここで、Ｒ_４およびＲ_５は連結され、環状または多環状環を形成してもよく、ここで、環は置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、および置換もしくは非置換ヘテロシクリルである。

【0099】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、下記式（ＩＩ）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含むことができる：

【化5】

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式中、ｎは０ー２であり；
Ｒ_１はＣ_１ー８アルキルであり、これは直鎖、分枝、または環状であり、これは非置換であり、または置換され；
Ｒ_２およびＲ_３は同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択され：Ｈ、低級アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；
Ｚ_１はＮＲ’、ＯまたはＳであり（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；
Ｘ_１およびＹ_１は同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択され：水素、Ｃ_１ーＣ_２４アルキル、Ｃ_２ーＣ_２４アルケニル、Ｃ_２ーＣ_２４アルキニル、Ｃ_３ーＣ_２０アリール、Ｃ_６ーＣ_２４アルカリル、Ｃ_６ーＣ_２４アラルキル、ハロ、シリル、ヒドロキシル、スルフヒドリル、Ｃ_１ーＣ_２４アルコキシ、Ｃ_２ーＣ_２４アルケニルオキシ、Ｃ_２ーＣ_２４アルキニルオキシ、Ｃ_５ーＣ_２０アリールオキシ、アシル（Ｃ_２ーＣ_２４アルキルカルボニル（‐ーＣＯーアルキル）およびＣ_６ーＣ_２０アリールカルボニル（ーＣＯーアリール）を含む）、アシルオキシ（ーＯーアシル）、Ｃ_２ーＣ_２４アルコキシカルボニル（ー（ＣＯ）ーＯーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールオキシカルボニル（ー（ＣＯ）ーＯーアリール）、Ｃ_２ーＣ_２４アルキルカルボナト（ーＯー（ＣＯ）ーＯーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールカルボナト（ーＯー（ＣＯ）ーＯーアリール）、カルボキシ（ーＣＯＯＨ）、カルボキシラト（ーＣＯＯ^ー）、カルバモイル（ー（ＣＯ）ーーＮＨ_２）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルーカルバモイル（ー（ＣＯ）ーＮＨ（Ｃ_１ーＣ_２４アルキル））、アリールカルバモイル（ー（ＣＯ）ーＮＨーアリール）、チオカルバモイル（ー（ＣＳ）ーＮＨ_２）、カルバミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーＮＨ_２）、シアノ（ーＣＮ）、イソシアノ（ーＮ^＋Ｃ^ー）、シアナト（ーＯーＣＮ）、イソシアナト（ーＯーＮ^＋＝Ｃ^ー）、イソチオシアナト（ーＳーＣＮ）、アジド（ーＮ＝Ｎ^＋＝Ｎ^ー）、ホルミル（ーー（ＣＯ）ーーＨ）、チオホルミル（ーー（ＣＳ）ーーＨ）、アミノ（ーーＮＨ_２）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルアミノ、Ｃ_５ーＣ_２０アリールアミノ、Ｃ_２ーＣ_２４アルキルアミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーアルキル）、Ｃ_６ーＣ_２０アリールアミド（ーＮＨー（ＣＯ）ーアリール）、イミノ（ーＣＲ＝ＮＨ、式中、Ｒは水素、Ｃ_１ーＣ_２４アルキル、Ｃ_５ーＣ_２０アリール、Ｃ_６ーＣ_２４アルカリル、Ｃ_６ーＣ_２４アラルキル、などである）、アルキルイミノ（ーＣＲ＝Ｎ（アルキル）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、アラルキル、など）、アリールイミノ（ーＣＲ＝Ｎ（アリール）、式中、Ｒ＝水素、アルキル、アリール、アルカリル、など）、ニトロ（ーＮＯ_２）、ニトロソ（ーＮＯ）、スルホ（ーＳＯ_２ーＯＨ）、スルホナト（ーＳＯ_２ーＯ^ー）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルファニル（ーＳーアルキル；「アルキルチオ」とも呼ばれる）、アリールスルファニル（ーＳーアリール；「アリールチオ」とも呼ばれる）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルフィニル（ー（ＳＯ）ーアルキル）、Ｃ_５ーＣ_２０アリールスルフィニル（ー（ＳＯ）ーアリール）、Ｃ_１ーＣ_２４アルキルスルホニル（ーＳＯ_２ーアルキル）、Ｃ_５ーＣ_２０アリールスルホニル（ーＳＯ_２ーアリール）、ホスホノ（ーＰ（Ｏ）（ＯＨ）_２）、ホスホナト（ーＰ（Ｏ）（Ｏ^ー）_２）、ホスフィナト（ーＰ（Ｏ）（Ｏ^ー））、ホスホ（ーＰＯ_２）、ホスフィノ（‐ーＰＨ_２）、それらの組み合わせ、ここで、Ｘ_１およびＹ_１は連結され、環状または多環状環を形成してもよく、ここで、環は置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換ヘテロアリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、および置換もしくは非置換ヘテロシクリルである。

【0100】

式（Ｉ）または（ＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の例としては、下記化合物、およびその薬学的に許容される塩が挙げられる：

【化6】

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【0101】

ある一定の実施形態では、ｉａ）２．５μΜ濃度では、７０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで（１００の値がベースラインに対するレポーター出力の倍加を示すスケールを用いる）、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激する；ｉｉａ）２．５μΜ濃度では、７５を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激する；ｉｉｉａ）７．５μΜ濃度では、７０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ならびにｉｖａ）７．５μΜ濃度では、２０を超えるレベルまで、ＴＫーウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびにｖａ）１μΜ未満のＩＣ５０で組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質の酵素活性を阻害する、式（Ｉ）または（ＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤を選択することができる。

【0102】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、ｉｂ）２．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激する；ｉｉｂ）２．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激する；ｉｉｉｂ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｖｂ）７．５μΜ濃度では、バックグラウンドより２０％を超えるルシフェラーゼレベルまで、ＴＫーウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびにｖｂ）１μΜ未満のＩＣ５０で組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質の酵素活性を阻害する。

【0103】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、ｉｃ）１μΜ未満のＩＣ５０で、好ましくはｉｉｃ）２５０ｎＭ未満のＩＣ５０で、より好ましくはｉｉｉｃ）５０ｎＭ未満のＩＣ５０で、より好ましくはｉｖ）５ｎＭ未満のＩＣ５０で組換え１５ーＰＧＤＨの酵素活性を阻害することができる。

【0104】

上記判断基準（ｉａーｖａ）を満たす式（Ｉ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の一例は式（ＩＩＩ）を有する化合物を含み：上記判断基準（ｉｂーｖｂ）を満たす式（Ｉ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の一例は式（ＩＩＩ）を有する化合物を含み：上記判断基準ｉｃおよび／またはｉｉｃ、およびまたはｉｉｉｃ、およびまたはｉｖｃを満たす式（Ｉ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の一例は式（ＩＩＩ）を有する化合物を含み：さらに他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は下記式（ＩＩＩ）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含むことができる：

【化7】

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式中、ｎは０ー２であり；
Ｒ_１はＣ_１ー８アルキルであり、これは直鎖、分枝、または環状であり、これは非置換であり、または置換され；
Ｒ_２およびＲ_３は同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択され：Ｈ、低級アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；
Ｚ_１はＮＲ’、ＯまたはＳであり（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；
Ｘ_２はＮまたはＣであり；
Ｒ_６およびＲ_７は任意的であり、存在する場合、同じかまたは異なり、各々、下記からなる群より選択される：Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、低級アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、Ｎ（Ｒ’）_２、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＯＲ’、ＳＲ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）；置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、および置換もしくは非置換ヘテロシクリル。

【0105】

式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、下記のように合成することができる：

【化8】

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【0106】

上記調製プロセスでは、反応に関与しない限り、任意の反応溶媒を使用することができる。例えば、反応溶媒としては、エーテル、例えばジエチルエーテル、テトラヒドロフランおよびジオキサン；ハロゲン化炭化水素、例えばジクロロメタンおよびクロロホルム；アミン、例えばピリジン、ピペリジンおよびトリエチルアミン；アルキルケトン、例えばアセトン、メチルエチルケトンおよびメチルイソブチル；アルコール、例えばメタノール、エタノールおよびプロパノール；非プロトン極性溶媒、例えばΝ，Νージメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎージメチルアセトアミド、アセトニトリル、ジメチルスルホキシドおよびヘキサメチルリン酸トリアミドが挙げられる。有機合成において通常使用される非反応性有機溶媒の中で、好ましい溶媒は反応中に生成した水がディーン・スターク・トラップにより除去できるものである。そのような溶媒の例としては、ベンゼン、トルエン、キシレンなどが挙げられるが、それらに限定されない。このように得られた反応生成物は、凝縮、抽出など（有機合成の分野で通常、実施される）により、所望であれば、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより単離および精製され得る。式ＩＩＩを有するＰＧＤＨ阻害剤の個々の鏡像異性体は、分取ＨＰＬＣにより、キラル固定相を含むクロマトグラフィーカラムを使用して分離することができる。

【0107】

さらに、本出願の実施形態は、以上で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤の調製方法に対する任意の改変を含む。これに関連して、調製方法の任意の工程から得られる任意の中間生成物は、他の工程における開始材料として使用することができる。そのような開始材料は、インサイチューで、ある一定の反応条件下にて形成させることができる。反応試薬はまた、それらの塩または光学異性体の形態で使用することができる。

【0108】

１５ーＰＧＤＨ阻害剤の調製において使用される置換基の種類、ならびに選択される中間生成物および調製方法によって、新規１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、任意の可能な異性体、例えば実質的に純粋な幾何（ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ）異性体、光学異性体（鏡像異性体）およびラセミ体の形態で存在することができる。

【0109】

いくつかの実施形態では、式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、下記式を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含むことができる：

【化9】

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。

【0110】

便宜的に、式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＤＧＨ阻害剤は、ｉ）１ｎＭ濃度で、組換え１５ーＰＧＤＨを阻害する；ｉｉ）１００ｎＭ濃度で、細胞系において１５ーＰＧＤＨを阻害する、ｉｉｉ）細胞系によるＰＧＥ_２産生を増加させる；ｉｖ）水溶液中、広いｐＨ範囲にわたって化学的に安定である；ｖ）肝細胞抽出物とインキュベートした場合、化学的に安定である、ｖｉ）肝細胞系とインキュベートした場合、化学的に安定である；ｖｉｉ）マウスにＩＰ注射されると２５３分血漿半減期を示す；ならびにｖｉｉｉ）マウスに０．６μｍｏｌｅ／一匹マウスおよび１．２μｍｏｌｅ／一匹マウスでＩＰ注射されると２４時間にわたり即時毒性を示さず、およびまた、マウスに０．３μｍｏｌｅ／一匹マウスで、１日２回２１日間ＩＰ注射されると毒性を示さないことが見出された。

【0111】

他の実施形態では、式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤は下記式を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含むことができる：

【化10】

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。

【0112】

さらに他の実施形態では、式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤は下記式を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含むことができる：

【化11】

[この文献は図面を表示できません]

。

【0113】

他の実施形態では、１５ーＰＤＨＧ阻害剤は式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）もしくは（ー）光学異性体を含むことができる。さらに他の実施形態では、１５ーＰＤＨＧ阻害剤は式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）もしくは（ー）光学異性体の少なくとも１つの混合物を含むことができる。例えば、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、下記の混合物を含むことができる：５０重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および５０重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体、２５重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および７５重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体、１０重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および９０重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体、１重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および９９重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体、５０重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および５０重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体、７５重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および２５重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体、９０重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および１０重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体、または９９重量％超の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体および約１重量％未満の式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体。

【0114】

さらに別の実施形態では、１５ーＰＤＧＨ阻害剤は、式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（＋）光学異性体から本質的に構成することができ、またはから構成することができる。さらに別の実施形態では、ＰＤＧＨ阻害剤は式（ＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の（ー）光学異性体から本質的に構成することができ、またはから構成することができる。

【0115】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、１５ーＰＧＤＨおよび／または減少したプロスタグランジンレベルと関連する疾患の防止または治療のために、および／または被験体においてプロスタグランジンレベルを増加させることが望ましい場合に、使用することができる。例えば、上記のように、プロスタグランジンは発毛において重要な役割を果たすことが知られている。特定的には、毛包またはそれらの隣接する皮膚環境の様々なコンパートメントにおける様々な型（Ａ_２、Ｆ_２ａ、Ｅ_２）のプロスタグランジンの内部貯蔵が、毛髪密度を維持し、増加させるのに必須であることが示されている（Ｃｏｌｏｍｂｅ Ｌ ｅｔ． ａｌ， ２００７， Ｅｘｐ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ， １６（９）， ７６２ー９）。プロスタグランジンの分解に関与する１５ーＰＧＤＨは毛包皮膚乳頭中に存在し、プロスタグランジン、とりわけ、ＰＧＦ_２ａおよびＰＧＥ_２を不活性化し、頭皮ダメージおよび脱毛症を引き起こすことが報告されている（Ｍｉｃｈｅｌｅｔ Ｊ Ｆ ｅｔ．ａｌ．，２００８， Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ， １７（１０）， ８２１ー８）。よってプロスタグランジンを分解する１５ーＰＧＤＨに対して抑制または阻害活性を有する本明細書で記載される化合物は、頭皮ダメージを改善し、脱毛症を防止し、発毛を促進することができ、脱毛症の防止および発毛の促進のための医薬組成物において使用することができる。

【0116】

他の実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、皮膚および／または皮膚付属器の色素沈着促進するおよび／または誘導するおよび／または刺激するのための医薬組成物において、ならびに／あるいは皮膚および／または皮膚付属器の色素脱失および／または白化を防止するおよび／または制限する作用物質として、特にしらがを防止するおよび／または制限するための作用物質として使用することができる。

【0117】

さらに他の実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、心血管疾患および／または血行障害の疾患、例えばレイノー病、バージャー病、糖尿病性ニューロパチー、および肺動脈高血圧の防止または治療のための医薬組成物において使用することができる。体内で産生されるプロスタグランジン同族体を含むプロスタグランジンは、血管壁の適正な作用を維持する、とりわけ血流のための血管拡張に寄与する、血小板凝集を防止する、および血管壁を取り囲む平滑筋の増殖を調節することが知られている（Ｙａｎ． Ｃｈｅｎｇ ｅｔ． ａｌ．， ２００６， Ｊ． Ｃｌｉｎ．， Ｉｎｖｅｓｔ）。加えて、プロスタグランジン産生の阻害またはそれらの活性の損失は血管壁内の内皮の変性、血小板凝集および平滑筋における細胞メカニズムの機能障害を引き起こす。とりわけ、血管におけるプロスタグランジンの産生は、肺動脈高血圧を含む高血圧患者において減少することが示された。

【0118】

他の実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、口腔および／または胃腸疾患、例えば口腔潰瘍、歯周病、胃炎、大腸炎、潰瘍性大腸炎、および胃潰瘍の防止または治療のための医薬組成物において使用することができる。胃腸疾患の代表である胃炎および胃潰瘍は、胃腸粘液膜が胃酸により消化され、潰瘍が形成される状態として規定される。一般に粘膜、粘膜下層、筋肉層および漿膜からなる胃壁では、胃潰瘍はさらに粘膜下層および筋肉層にダメージを与え、一方、胃炎は粘膜のみにダメージを与える。胃炎および胃潰瘍の罹患率は比較的高いが、その理由はまだ明らかになっていない。これまで、それらは攻撃因子と防御因子の間の不均衡により引き起こされることが知られており、すなわち、攻撃因子の増加、例えば胃酸またはペプシン分泌の増加、または防御因子の減少、例えば胃粘液膜の構造または形態的欠損、粘液および重炭酸イオン分泌の減少、プロスタグランジン産生の減少、などである。

【0119】

胃炎および胃潰瘍のための現在入手可能な治療薬は、防御因子を強化するための様々な薬物、例えば制酸薬（これは、胃酸分泌に影響を与えないが、すでに産生された胃酸を中和する）、胃酸分泌の阻害剤、プロスタグランジン分泌の促進剤、および胃壁のためのコーティング剤を含む。とりわけ、プロスタグランジンは、胃粘液膜を保護および防御するためのメカニズムを維持するのに必須であることが知られている（Ｗａｌｌａｃｅ Ｊ Ｌ．， ２００８， Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｒｅｖ．， ８８（４）， １５４７ー６５， Ｓ． Ｊ． Ｋｏｎｔｕｒｅｋ ｅｔ ａｌ．， ２００５， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ， ５６（５））。上記を考慮すると、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、１５ーＰＧＤＨ（胃粘液膜を保護するプロスタグランジンを分解する）に対し抑制または阻害活性を示すので、それらは胃腸疾患、とりわけ、胃炎および胃潰瘍の防止または治療に有効となり得る。

【0120】

腎臓では、プロスタグランジンは腎血流を調節し、腎血管および細尿管効果の両方による尿形成を制御するように作用し得る。臨床研究では、ＰＧＥ_１は慢性腎疾患を有する患者におけるクレアチニンクリアランスを改善する、腎臓移植患者における移植片拒絶およびシクロスポリン毒性を防止する、糖尿病性腎症を有する患者において尿中アルブミン排出速度およびＮーアセチルーβーＤーグルコサミニダーゼレベルを低減させるために使用されてきた（Ｐｏｒｔｅｒ， Ａｍ．， １９８９， Ｊ． Ｃａｒｄｉｏｌ．， ６４： ２２Ｅー２６Ｅを参照されたい）。加えて、米国特許第５，８０７，８９５号は、プロスタグランジン、例えばＰＧＥ_１、ＰＧＥ_２およびＰＧＩ_２の静脈内投与により腎臓機能障害を防止する方法を開示する。さらに、プロスタグランジンは腎臓において血管拡張薬として機能し、よって、腎臓におけるプロスタグランジン産生の阻害により腎機能障害となることが報告されている（Ｈａｏ． Ｃ Ｍ， ２００８， Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ７０， ３５７．ａｂｏｕｔ．７７）。

【0121】

よって、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、プロスタグランジンを分解する１５ーＰＧＤＨに対する抑制または阻害活性を有し、腎機能障害と関連する腎疾患の防止または治療において有効であり得る。

【0122】

「腎機能障害」という用語は、本明細書では下記のような徴候を含む：正常クレアチニンクリアランスより低い、正常遊離水クリアランスより低い、正常血中尿素、窒素、カリウムおよび／またはクレアチニンレベルより高い、腎臓酵素、例えばγグルタミルシンテターゼ、アラニンホスファチダーゼ、ＮーアセチルーβーＤーグルコサミニダーゼ、またはβーｗーミクログロブリンの変化した活性；およびマクロアルブミン尿の正常レベルを超える増加。

【0123】

ＰＧＥ_１、ＰＧＥ_２およびＰＧＦ_２ａを含むプロスタグランジンはまた、骨吸収および骨形成を刺激し、骨の容積および強度を増加させることが示されている（Ｈ． Ｋａｗａｇｕｃｈｉ ｅｔ． ａｌ．， Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｒｔｈｏｐ． Ｒｅｌ． Ｒｅｓ．， ３１３， １９９５； Ｊ． Ｋｅｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｅｕｒ． Ｊｒ． Ｅｘｐ． Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ Ｒｅｓ．， １， １９９２， ８６９２）。以上で言及されるように、１５ーＰＧＤＨがプロスタグランジンの活性を阻害することを考慮すると、１５ーＰＧＤＨ活性の阻害により、１５ーＰＧＤＨにより阻害される骨吸収および骨形成の促進が得られ得る。よって、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、１５ーＰＧＤＨ活性を阻害することにより、骨吸収および骨形成の促進に有効である可能性がある。１５ーＰＧＤＨ阻害剤はまた、骨密度を増加させ、骨粗鬆症を治療し、骨折の治癒を促進し、あるいは骨手術または関節置換後の治癒を促進するために使用することができる。

【0124】

さらに他の実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、１５ーＰＧＤＨを発現する癌を治療するするのに有効であり得る。１５ーＰＧＤＨの阻害は、１５ーＰＧＤＨを発現する癌の成長、増殖、および転移を阻害することができる。

【0125】

さらに他の実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は創傷治癒に有効であり得る。様々なプロスタグランジンな中で、ＰＧＥ_２は創傷治癒のためのメディエーターとして機能することが知られている。よって、皮膚が創傷または熱傷により損傷された場合、１５ーＰＧＤＨ活性の阻害により、創傷または熱傷のＰＧＥ_２による治療効果が生成され得る。

【0126】

加えて、上記のように、プロスタグランジンレベルの増加は、増加したβカテニンに媒介される転写活性によりＷｎｔシグナル伝達経路を介するシグナル伝達を刺激することが示されている。Ｗｎｔシグナル伝達は、組織幹細胞により使用される重要な経路であることが知られており、ＰＧＥ_２シグナル伝達の増加は、モデル生物にて、造血幹細胞の数を増加させることが示されている。ここで、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、放射線による組織損傷に対する抵抗性を増加させる、放射線への環境曝露に対する抵抗性を増加させる、骨髄または他の型の移植の適応度を増加させるために幹細胞数を増加させる（移植組織の収集前に幹細胞数を増加させるための本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤へのインビボ曝露、またはレシピエント宿主への移植前の収集組織のエクスビボ曝露、または移植片の受け取り前、中または後のいずれかでのレシピエント宿主の処置のいずれかを介する）ことを含むであろう目的のために、組織幹細胞数を増加させるために使用されてもよい。

【0127】

いくつかの実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、ドナー骨髄移植片またはドナー造血幹細胞移植片の適応度を増加させるために、骨髄移植片ドナーまたは造血幹細胞ドナーに投与することができる。

【0128】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤はまた、被験体内の幹細胞を増加させるために、またはドナー移植片としての骨髄の適応度を増加させるために、被験体の骨髄に投与することができる。

【0129】

さらに他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、ドナー移植片としての幹細胞調製物の適応度を増加させるために、または移植に要求される臍帯血液の単位数を減少させるために、被験体の造血幹細胞、末梢血造血幹細胞、または臍帯幹細胞の調製物に投与することができる。

【0130】

さらに他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、骨髄移植片拒絶を緩和させるために、骨髄移植片生着を増強するために、造血幹細胞移植片、もしくは臍帯幹細胞移植片の生着を増強するために、造血幹細胞移植片、もしくは臍帯幹細胞移植片の生着を増強するために、および／または被験体への移植に要求される臍帯血液の単位数を減少させるために、被験体に投与することができる。投与は、例えば、放射線療法、化学療法、または免疫抑制療法による被験体または被験体の骨髄の治療後とすることができる。

【0131】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、他の治療または成長因子の投与を減少させるために、骨髄移植、造血幹細胞移植、または臍帯幹細胞移植のレシピエントに投与することができる。

【0132】

さらなる実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、移植片拒絶を緩和させるため、移植片生着を増強するため、放射線療法、化学療法、または免疫抑制療法による被験体または被験体の骨髄の治療後の、移植片生着を増強するため、放射線への曝露の毒性または致命的効果への抵抗性を与える、シトキサンの毒性効果、フルダラビンの毒性効果、化学療法の毒性効果、または免疫抑制療法の毒性効果に抵抗性を与えるため、感染を減少させるため、および／または放射線由来の肺毒性を減少させるために、被験体または被験体の組織移植片に投与することができる。

【0133】

加えて、モデル生物では、ＰＧＥ_２シグナル伝達は、肝毒性（ｈｅｐａｔｏｘｉｃ）作用物質、例えばアセトアミノフェンへの曝露後に、肝臓再生を刺激し、生存を増加させる。よって、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、肝臓切除後の肝臓再生を増加させるため、または肝毒性作用物質、例えば、限定はされないが、アセトアミノフェンおよび同様の化合物への曝露後、肝臓再生を増加させ、生存を増加させるために使用され得る。

【0134】

ＰＧＥ１類似体はまた、勃起不全の治療において使用されてきた。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、勃起不全の治療のために、単独で、または、プロスタグランジンと組み合わせて使用することができる。

【0135】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、治療される病理学的または美容的状態または障害によって、医薬組成物または化粧品組成物で提供することができる。活性成分として本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤を含む医薬組成物は、従来の方法にしたがい、誘導体を薬学的に許容される担体（複数可）もしくは賦形剤（複数可）と混合すること、または１５ーＰＧＤＨ阻害剤を希釈剤（複数可）で希釈することにより製造され得る。医薬組成物はさらに、フィラー、粘着防止剤、潤滑剤、湿潤剤、香味剤、乳化剤、保存剤などを含み得る。医薬組成物は、当業者に知られている方法にしたがい、好適な製剤に製剤化することができ、よって、哺乳類に投与された後、１５ーＰＧＤＨ阻害剤の即時、制御または持続放出を提供することができる。

【0136】

いくつかの実施形態では、医薬組成物は、非経口または経口剤形に製剤化することができる。経口投与のための固体剤形は、賦形剤を、必要に応じて、バインダー、崩壊剤、潤滑剤、着色剤、および／または香味剤と共に、１５ーＰＧＤＨ阻害剤に添加し、得られた混合物を錠剤、糖衣丸薬、顆粒、粉末またはカプセルの形態に成形することにより製造することができる。組成物中に添加することができる添加物は、当技術分野において普通のものであってもよい。例えば、賦形剤の例としては、下記が挙げられる：ラクトース、スクロース、塩化ナトリウム、グルコース、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、シリケートなど。例示的なバインダーとしては下記が挙げられる：水、エタノール、プロパノール、甘味シロップ、スクロース溶液、デンプン溶液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルデンプン、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、ホスホン酸カルシウムおよびポリピロリドン。崩壊剤の例としては、下記が挙げられる：乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ａｒｇｉｎａｔｅ）、寒天粉末、重炭酸ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリドおよびラクトース。さらに、精製タルク、ステアレート、ホウ酸ナトリウム、およびポリエチレングリコールが、潤滑剤として使用され得；ならびにスクロース、橙皮、クエン酸、酒石酸が、香味剤として使用され得る。いくつかの実施形態では、医薬組成物は吸入により投与するためのエアロゾル製剤（例えば、それらは、噴霧化することができる）にすることができる。

【0137】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、従来の方法にしたがい、香味剤、緩衝剤、安定化剤、などと組み合わせることができ、経口液体剤形、例えば溶液、シロップまたはエリキシル剤に組み入れることができる。緩衝剤の１つの例はクエン酸ナトリウムであり得る。安定化剤の例としては、トラガント、アラビアゴムおよびゼラチンが挙げられる。

【0138】

いくつかの実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、これに、ｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、弛緩薬、局所麻酔薬を添加することにより、例えば、皮下、筋肉内または静脈内経路のための注射剤形に組み入れることができる。ｐＨ調整剤および緩衝剤の例としては、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウムおよびリン酸ナトリウムが挙げられる。安定化剤の例としては、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸およびチオ乳酸が挙げられる。局所麻酔薬は、プロカインＨＣｌ、リドカインＨＣｌなどとしてもよい。弛緩薬は塩化ナトリウム、グルコースなどとしてもよい。

【0139】

他の実施形態では、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、従来の方法にしたがい、これに、当技術分野で知られている薬学的に許容される担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオバターまたは脂肪酸トリグリセリドを、必要に応じて、界面活性剤、例えばＴｗｅｅｎと共に添加することにより、坐薬に組み入れることができる。

【0140】

医薬組成物は、上記のように様々な剤形に製剤化することができ、その後、経口、吸入、経皮、皮下、静脈内または筋肉内経路を含む様々な経路を介して投与され得る。投与量は薬学的有効量とすることができる。薬学的有効量は、脱毛症、心血管疾患、胃腸疾患、創傷、および腎疾患を治療または改善する１５ーＰＧＤＨ阻害剤の量とすることができる。化合物の薬学的有効量は、治療される疾患の種類および重症度、治療される患者の年齢、性別、体重および身体状態、投与経路、療法の持続期間などによって適切に決定される。一般に、化合物の有効量は、経口投与では約１〜１，０００ｍｇ、静脈内投与では約０．１〜５００ｍｇ、直腸投与では約５〜１，０００ｍｇの範囲であり得る。一般に、成人に対する１日投与量は、約０．１〜５，０００ｍｇ、好ましくは約〜１，０００ｍｇの範囲にあるが、均一に決定することができない。というのも、これは、治療される患者の年齢、性別、体重および身体状態によるからである。製剤は、１日１回または１日数回分割量で投与され得る。

【0141】

１５ーＰＧＤＨ阻害剤を含む化粧品組成物は、排他的にまたは主に、それらを清浄にする、それらに芳香を与える、またはそれらの外観を改変するおよび／または体臭を修正するおよび／またはそれらを保護するまたはそれらを良好な状態に維持する目的で、ヒト身体の様々な表在部分（表皮、体毛および毛髪系、爪、唇および外性器）と、または歯もしくは頬粘膜と接触させられることが意図される任意の物質または調製物を含むことができる。

【0142】

化粧品組成物は、水または水と親水性有機溶媒、親油性有機溶媒、両親媒性有機溶媒、およびそれらの混合物の中から選択される少なくとも１つの溶媒の混合物とすることができる、美容的に許容される媒体を含むことができる。

【0143】

局所適用のために、化粧品組成物は、水性、アルコール性、水性ーアルコール性または油性溶液もしくは懸濁液の、または、脂肪相の水相中での分散（Ｏ／Ｗ）またはその逆（Ｗ／Ｏ）により得られる、ローションもしくはセラム形態の分散物、液体または半液体稠度を有する、もしくはペースト状であるエマルジョン、もしくは多重エマルジョンの、生理的に許容される媒体に組み込まれた、もしくは組み込まれるように使用される遊離または圧縮粉末の、あるいはマイクロカプセルもしくは微小粒子の、またはイオン性および／または非イオン性型の小胞分散物の形態で投与することができる。よって、これは、軟膏、チンキ、ミルク、クリーム、軟膏剤、粉末、パッチ、含浸パッド、溶液、エマルジョンまたは小胞分散物、ローション、水性もしくは無水ゲル、スプレー、懸濁液、シャンプー、エアロゾルまたはフォームの形態であってもよい。これは無水または水性であってもよい。これはまた、セッケンまたはクレンジングケーキを構成する固体調製物を含んでもよい。

【0144】

化粧品組成物は、特に、ヘアケア組成物、特にシャンプー、セットローション、トリートメントローション、スタイリングクリームもしくはゲル、髪のためのリストラクチャリングローション、マスク、などを含み得る。化粧品組成物はクリーム、ヘアーローション、シャンプーまたはコンディショナーとすることができる。これらは、特に、その後のリンスがあるか、もしくはない塗布を使用するトリートメント、あるいはシャンプーの形態で使用することができる。フォームの形態、あるいはスプレーもしくはエアロゾルの形態の組成物（よって、加圧下の噴射剤を含む）もまた、意図される。よって、ローション、セラム、ミルク、クリーム、ゲル、軟膏、軟膏剤、粉末、バルム、パッチ、含浸パッド、ケーキまたはフォームの形態とすることができる。

【0145】

特に、頭皮または毛髪への適用のための組成物は、ヘアケアローション（例えば毎日、もしくは１週間に２回の適用のため）の、シャンプーの、またはヘアーコンディショナー（特に１週間に２回または毎週の適用のため）の、毎日の適用のための頭皮を清浄にするための液体もしくは固体セッケンの、ヘアスタイル成形製品（ラッカー、ヘアセット製品またはスタイリングゲル）の、トリートメントマスクの、または毛髪を清浄にするためのフォーミングゲルもしくはクリームの形態とすることができる。これらはまた、ブラシまたは櫛で適用される染毛剤またはマスカラの形態であってもよい。

【0146】

その上、まつげまたは体毛への局所適用のために、組成物は、ブラシでまつげあるいは顎髭もしくは口ひげに適用される着色または非着色マスカラの形態であってもよい。注射による組成物投与では、組成物は水性ローションまたは油性懸濁液の形態であってもよい。経口用途では、組成物は、カプセル、顆粒、経口シロップまたは錠剤の形態であってもよい。特定の実施形態によれば、組成物はヘアークリームもしくはヘアーローション、シャンプー、ヘアーコンディショナーまたは毛髪またはまつげのためのマスカラの形態である。

【0147】

既知の様式では、化粧品組成物はまた、化粧品分野では普通であるアジュバント、例えば親水性もしくは親油性ゲル化剤、親水性もしくは親油性添加物、保存剤、抗酸化剤、溶媒、芳香、フィラー、ＵＶ遮断薬、匂い吸収剤および色素を含み得る。これらの様々なアジュバントの量は、化粧品分野で従来使用されるものであり、例えば、組成物の総重量の０．１％〜２０％、特に１０％以下である。それらの性質によって、これらのアジュバントは脂肪相、水相および／または脂質小球中に導入することができる。

【0148】

いくつかの実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、１５ーＰＧＤＨ阻害剤と１つ以上の追加の活性剤の投与を含む、コンビナトリアル療法または併用療法において投与することができる。「コンビナトリアル療法」または「併用療法」という句は、１５ーＰＧＤＨ阻害剤、および１つ以上の治療薬の投与を、これらの治療薬の共作用からの有益な効果を提供することが意図される特定の治療レジメンの一部として包含する。組み合わせたこれらの治療薬の投与は典型的には、規定された期間（通常、選択した組み合わせによって分、時間、日、週）にわたって実施される。「コンビナトリアル療法」または「併用療法」はこれらの治療薬の連続様式での投与を含むことが意図され、すなわち、各治療薬は異なる時間に投与され、ならびにこれらの治療薬、または治療薬の少なくとも２つの投与は、実質的に同時様式である。実質的同時投与は、例えば、被験体に、一定比の各治療薬を有する個々の用量を、または複数に分けて、治療薬の各々に対する個々の用量を投与することにより達成することができる。各治療薬の連続または実質的同時投与は、任意の適切な経路、例えば、限定はされないが、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路、および粘膜組織を介する直接吸収により実施することができる。治療薬は同じ経路または異なる経路により投与することができる。治療薬が投与される順序は、辛うじて重要ではない。

【0149】

いくつかの実施形態では、追加の活性剤は特に、下記から選択することができる：ＥＰ６４８４８８号で記載されるリポキシゲナーゼ阻害剤、特にＥＰ８４５７００号で記載されるブラジキニン阻害剤、プロスタグランジンおよびそれらの誘導体、特にＷＯ９８／３３４９７号、ＷＯ９５／１１００３号、ＪＰ９７ー１０００９１号、ＪＰ９６ー１３４２４２号で記載されるもの、プロスタグランジンのための受容体のアゴニストまたはアンタゴニスト、ならびにＥＰ１１７５８９１号およびＥＰ１１７５８９０号、ＷＯ０１／７４３０７号、ＷＯ０１／７４３１３号、ＷＯ０１／７４３１４号、ＷＯ０１／７４３１５号またはＷＯ０１／７２２６８号で記載されるプロスタグランジンの非プロスタン酸系類似体。

【0150】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、活性剤、例えば血管拡張薬、プロスタノイドアゴニスト、抗アンドロゲン薬、シクロスポリンおよびそれらの類似体、抗菌薬、トリテルペン（単独、または混合物として）と組み合わせて投与することができる。血管拡張薬はカリウムチャネルアゴニストを含むことができ、ミノキシジルおよびその誘導体、アミネキシルおよび米国特許第３，３８２，２４７号、５，７５６，０９２号、５，７７２，９９０号、５，７６０，０４３号、５，４６６，６９４号、５，４３８，０５８号、４，９７３，４７４号に記載される化合物、クロマカリン（ｃｈｒｏｍａｋａｌｉｎ）およびジアゾキシドが挙げられる。抗アンドロゲン薬としては５．α．ーレダクターゼ阻害剤、例えばフィナステリドおよび米国特許第５，５１６，７７９号に記載される化合物、酢酸シプロステロン（ｃｙｐｒｏｓｔｅｒｏｎｅ）、アゼライン酸、その塩およびその誘導体、および米国特許第５，４８０，９１３号で記載される化合物、フルタミドおよび米国特許第５，４１１，９８１号、５，５６５，４６７号および４，９１０，２２６号で記載される化合物が挙げられる。抗菌化合物としては、セレン誘導体、ケトコナゾール、トリクロカルバン、トリクロサン、ジンクピリチオン、イトラコナゾール、アジアティック酸、ヒノキチオール、ミピロシン、およびＥＰ６８０７４５号で記載される化合物、クリニシン（ｃｌｉｎｙｃｉｎｅ）塩酸塩、過酸化ベンゾイルまたはベンジルおよびミノサイクリンが挙げられる。抗炎症薬としては、Ｃｏｘー２に特異的な阻害剤、例えば、例としてＮＳー３９８およびＤｕＰー６９７（Ｂ． Ｂａｔｉｓｔｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， ＤＮ＆Ｐ １９９４； ７（８）：５０１ー５１１）および／またはリポキシゲナーゼ、特に５ーリポキシゲナーゼの阻害剤、例えば、例としてジロートン（Ｆ． Ｊ． Ａｌｖａｒｅｚ ＆ Ｒ． Ｔ． Ｓｌａｄｅ， Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓ． １９９２； ９（１１）： １４６５ー１４７３）が挙げられる。

【0151】

医薬および／または化粧品組成物中に存在することができる他の活性化合物としては、下記が挙げられる：アミネキシルおよびその誘導体、６０ー［（９Ｚ，１２Ｚ）オクタデクー９、１２ージエノイル］ヘキサピラノース、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、エストラジオール、マレイン酸クロルフェニラミン、クロロフィリン誘導体、コレステロール、システイン、メチオニン、ニコチン酸ベンジル、メンソール、ペパーミント油、パントテン酸カルシウム、パンテノール、レゾルシノール、タンパク質キナーゼＣ阻害剤、プロスタグランジンＨシンターゼ１またはＣＯＸー１活性化剤、またはＣＯＸー２活性化剤、グリコシダーゼ阻害剤、グリコサミノグリカナーゼ阻害剤、ピログルタミン酸エステル、六糖酸（ｈｅｘｏｓａｃｃｈａｒｉｄｉｃ ａｃｉｄ）もしくはアシル六糖酸（ａｃｙｌｈｅｘｏｓａｃｃｈａｒｉｃ ａｃｉｄ）、置換エチレンアリール、Ｎーアシル化アミノ酸、フラボノイド、アスコマイシンの誘導体および類似体、ヒスタミンアンタゴニスト、トリテルペン、例えばウルソール酸および米国特許第５，５２９，７６９号、米国特許第５，４６８，８８８号、米国特許第５，６３１，２８２号で記載される化合物、サポニン、プロテオグリカナーゼ阻害剤、エストロゲンのアゴニストおよびアンタゴニスト、シュードプテリン（ｐｓｅｕｄｏｐｔｅｒｉｎ）、サイトカインおよび成長因子促進剤、ＩＬー１またはＩＬー６阻害剤、ＩＬー１０促進剤、ＴＮＦ阻害剤、ビタミン、例えばビタミンＤ、ビタミンＢ１２の類似体およびパントテノール（ｐａｎｔｈｏｔｅｎｏｌ）、ヒドロキシ酸、ベンゾフェノン、エステル化脂肪酸、およびヒダントイン。

【0152】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ阻害剤を含む医薬および／または化粧品組成物は、加えて、例えば、下記から選択される少なくとも１つの化合物を含むことができる：プロスタグランジン、特にプロスタグランジンＰＧＥ_１、ＰＧＥ_２、それらの塩、それらのエステル、それらの類似体およびそれらの誘導体、特にＷＯ９８／３３４９７号、ＷＯ９５／１１００３号、ＪＰ９７ー１０００９１号、ＪＰ９６ー１３４２４２号で記載されるもの、特にプロスタグランジン受容体のアゴニスト。これは特に、少なくとも１つの化合物、例えば、プロスタグランジンＦ_２α受容体のアゴニスト（酸形態または前駆体の形態、特にエステル形態）、例えば、例としてラタノプロスト、フルプロステノール、クロプロステノール、ビマトプロスト、ウノプロストン、プロスタグランジンＥ_２受容体のアゴニスト（およびそれらの前駆体、特にエステル、例えばトラボプロスト）、例えば１７ーフェニルＰＧＥ_２、ビプロストール、ブタプロスト、ミソプロストール、スルプロストン、１６，１６ージメチルＰＧＥ_２、１１ーデオキシＰＧＥ_１、１ーデオキシＰＧＥ_１、プロスタサイクリン（ＩＰ）受容体のアゴニストおよびそれらの前駆体、特にエステル、例えばシカプロスト、イロプロスト、イソカルバサイクリン、ベラプロスト、エポプロステノール、トレプロスチニル、プロスタグランジンＤ_２受容体のアゴニストおよびそれらの前駆体、特にエステル、例えばＢＷ２４５Ｃ（（４Ｓ）ー（３ー［（３Ｒ，Ｓ）ー３ーシクロヘキシルー３ーイソプロピル］ー２，５ージオキソ）ー４ーイミダゾリジンヘプタン酸）、ＢＷ２４６Ｃ（（４Ｒ）ー（３ー［（３Ｒ，Ｓ）ー３ーシクロヘキシルー３ーイソプロピル］ー２，５ージオキソ）ー４ーイミダゾリジンヘプタン酸）、トロンボキサンＡ２（ＴＰ）のための受容体のアゴニストおよびそれらの前駆体、特にエステル、例えばＩーＢＯＰ（［１Ｓー［１ａ，２ａ（Ｚ）、３ｂ（１Ｅ，３Ｓ），４ａ］］ー７ー［３ー［３ーヒドロキシー４ー［４ー（ヨードフェノキシ）ー１ーブテニル］ー７ーオキサビシクロー［２．２．１］ヘプトー２ーイル］ー５ーヘプテン酸）を含み得る。

【0153】

便宜的に、組成物は、少なくとも１つの、以上で規定される１５ーＰＧＤＨ阻害剤および少なくとも１つのプロスタグランジンまたはプロスタグランジン誘導体、例えば、例として、シリーズ２のプロスタグランジン、例えば特に生理食塩水形態、または前駆体の形態、特にエステル（例えばイソプロピルエステル）のＰＧＦ_２αおよびＰＧＥ_２、それらの誘導体、例えば１６，１６ージメチルＰＧＥ_２、１７ーフェニルＰＧＥ_２および１６，１６ージメチルＰＧＦ_２α１７ーフェニルＰＧＦ_２α、シリーズ１のプロスタグランジン、例えば生理食塩水またはエステル形態の１１ーデオキシプロスタグランジンＥ１、１ーデオキシプロスタグランジンＥ１、それらの類似体、特にラタノプロスト、トラボプロスト、フルプロステノール、ウノプロストン、ビマトプロスト、クロプロステノール、ビプロストール、ブタプロスト、ミソプロストール、それらの塩またはそれらのエステルを含むことができる。

【0154】

本出願の別の態様によれば、１５ーＰＧＤＨのモジュレーターは１５ーＰＧＤＨの活性を促進または刺激することができる１５ーＰＧＤＨ活性化剤とすることができる。ある一定の実施形態では、１５ーＰＤＧＨ活性化剤は式（ＩＶ）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含むことができ：

【化12】

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式中、Ｘ_３およびＹ_２は独立してＣまたはＳＯであり；
ＵはＯＲ”（式中、Ｒ”はＨ、置換もしくは非置換アルキル基、または置換もしくは非置換アリール基である）または

【化13】

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であり；
Ｒ_８、Ｒ_９、Ｒ_１０、Ｒ_１１、およびＲ_１２は各々、下記からなる群より選択され：Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、Ｎ（Ｒ’）_２、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＯＲ’、ＳＲ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、置換もしくは非置換ヘテロシクリル、ならびにＲ_８およびＲ_９は連結され、環状または多環状環を形成してもよい。

【0155】

他の実施形態では、１５ーＰＤＧＨ活性化剤は式（Ｖ）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含むことができ：

【化14】

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式中、ＵはＯＲ”（式中、Ｒ”はＨ、置換もしくは非置換アルキル基、または置換もしくは非置換アリール基である）または

【化15】

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であり；
Ｒ_８、Ｒ_９、Ｒ_１０、Ｒ_１１、およびＲ_１２は各々、下記からなる群より選択され：Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、Ｎ（Ｒ’）_２、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＯＲ’、ＳＲ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、置換もしくは非置換ヘテロシクリル、ならびにＲ_８およびＲ_９は連結され、環状または多環状環を形成してもよい。

【0156】

ある一定の実施形態では、下記である、式（ＩＶ）または（Ｖ）を有する１５ーＰＧＤＨ活性化剤を選択することができる：ｉａ）７．５μΜ濃度では、５０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで（１００の値がベースラインに対するレポーター出力の倍加を示すスケールを用いる）、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激することができ；ｉｉａ）７．５μΜ濃度では、５０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｉｉａ）７．５μΜ濃度では、５０を超えるルシフェラーゼ出力レベルまで、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｖａ）７．５μΜ濃度では、２５を超えるレベルまで、ＴＫーウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびにｖａ）組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質に対しては、化合物は２．５μΜを超える、１５ーＰＧＤＨ酵素活性を阻害するためのＩＣ５０濃度を示す。

【0157】

ある一定の実施形態では、下記である、式（ＩＶ）または（Ｖ）を有する１５ーＰＧＤＨ活性化剤を選択することができる：ｉｂ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶａｃｏ５０３レポーター細胞系を刺激することができ；ｉｉｂ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＶ９ｍレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｉｉｂ）７．５μΜ濃度では、ルシフェラーゼ出力を増加させるように、１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現するＬＳ１７４Ｔレポーター細胞系を刺激することができ；ｉｖｂ）７．５μΜ濃度では、２５％を超えるルシフェラーゼレベルまで、ＴＫーウミシイタケルシフェラーゼレポーターを発現する陰性対照Ｖ９ｍ細胞系を活性化せず；ならびにｖｂ）組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質に対しては、化合物は２．５μΜ以上の１５ーＰＧＤＨ酵素活性を阻害するためのＩＣ_５０濃度を示す。

【0158】

他の実施形態では、上記判断基準（ｉａーｖａ）を満たすおよび／または上記判断基準（ｉｂーｖｂ）を満たす、式（ＩＶ）または（Ｖ）を有する１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、式（ＶＩ）を有する化合物、およびその薬学的に許容される塩を含む：

【化16】

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。

【0159】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ活性化剤は式（ＶＩ）を有する化合物の類似体とすることができる。そのような類似体は下記式（ＶＩＩ）、およびその薬学的に許容される塩を有することができ：

【化17】

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式中、ＵはＯＲ”（式中、Ｒ”はＨ、置換もしくは非置換アルキル基、または置換もしくは非置換アリール基である）または

【化18】

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であり；
Ｒ_８およびＲ_９は各々、下記からなる群より選択され：Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、Ｎ（Ｒ’）_２、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＯＲ’、ＳＲ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、置換もしくは非置換ヘテロシクリル、ならびにＲ_８およびＲ_９は連結され、環状または多環状環を形成してもよい。

【0160】

式（ＶＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ活性化剤の例としては、下記、およびその薬学的に許容される塩が挙げられる：

【化19】

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【0161】

式（ＶＩＩ）を有する化合物の他の例としては、下記、およびその薬学的に許容される塩が挙げられる：

【化20】

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【0162】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ活性化剤は下記式（ＶＩＩＩ）、およびその薬学的に許容される塩を有する化合物（ＶＩ）の類似体とすることができ：

【化21】

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式中、Ｒ_１０は、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、および置換もしくは非置換ヘテロシクリルからなる群より選択される。

【0163】

式（ＶＩＩＩ）を有する１５ーＰＧＤＨ活性化剤の例としては、下記、およびその薬学的に許容される塩が挙げられる：

【化22】

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【0164】

式（ＶＩＩＩ）を有する化合物のさらに他の例としては、下記、およびその薬学的に許容される塩が挙げられる：

【化23】

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【0165】

さらに他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、式（ＩＸ）を有する化合物（ＶＩ）、およびその薬学的に許容される塩の類似体とすることができ：

【化24】

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式中、Ｒ_１１はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、低級アルキル基、（ＣＨ_２）_ｎ１ＯＲ’（式中、ｎ１＝１、２、または３である）、ＣＦ_３、ＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＣＨ_２ーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ、ＯーＣＨ_２ーＣＨ_２Ｘ（式中、Ｘ＝Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩである）、ＣＮ、（Ｃ＝Ｏ）ーＲ’、Ｎ（Ｒ’）_２、ＮＯ_２、（Ｃ＝Ｏ）Ｎ（Ｒ’）_２、Ｏ（ＣＯ）Ｒ’、ＯＲ’、ＳＲ’、ＣＯＯＲ’（式中、Ｒ’はＨまたは低級アルキル基である）、置換もしくは非置換アリール、置換もしくは非置換シクロアルキル、および置換もしくは非置換ヘテロシクリルである。

【0166】

式（ＩＸ）を有する１５ーＰＧＤＨ活性化剤の例としては、下記、およびその薬学的に許容される塩が挙げられる：

【化25】

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【0167】

式（ＩＸ）を有する化合物のさらに他の例としては、下記、およびその薬学的に許容される塩が挙げられる：

【化26】

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【0168】

他の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、下記式を有する式（ＩＶ）の化合物、およびその薬学的に許容される塩の類似体とすることができる

【化27】

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【0169】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、１５ーＰＧＤＨレベルの減少および／またはプロスタグランジンレベルの増加と関連する疾患の防止または治療のために使用することができる。１５ーＰＧＤＨの組織レベルが増加すると、プロスタグランジンの組織レベルを減少するはずである。組織プロスタグランジンを減少させる化合物と関連する活性は、ヒト腫瘍の発症を減少させることを含む。例えば、１５ーＰＧＤＨ活性化剤の投与を使用して、結腸新生物、例えば、結腸癌または結腸腺腫を有する患者を治療する、または結腸新生物歴を有する患者における新規疾患を治療および防止する、または新生物療法もしくは新生物防止療法のためのＮＳＡＩＤ療法に対する抵抗を逆転させることができる。さらに、本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ活性化剤の投与を使用して、ＮＳＡＩＤ応答状態を有する被験体を治療することができる。ある一定の実施形態では、１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、ＮＳＡＩＤ治療に対して比較的無応答性である被験体におけるＮＳＡＩＤー応答性を増強させる。

【0170】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ活性化剤はまた、任意のＮＳＡＩＤ応答状態を治療する方法において使用することができる。ＮＳＡＩＤ応答状態は、ＮＳＡＩＤ抵抗性である被験体またはＮＳＡＩＤ療法に抵抗性であることが決定された被験体に適用される。方法では、治療的有効量の１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、単独で、または有効な有効量の１５ーＰＧＤＨタンパク質、ｃＤＮＡ、またはその活性断片と組み合わせて投与することができる。患者は、結腸新生物を発症するリスクのある（例えば、家族歴に基づく）被験体、または結腸腺腫再発のリスクのある被験体であってもよいが、ＮＳＡＩＤ療法に抵抗性である疑いがある。さらに、患者は、任意のＮＳＡＩＤ応答状態のためのＮＳＡＩＤ療法を受けている、またはこれを受けようとしているが、ＮＳＡＩＤ抵抗性を経験している任意の被験体であってもよい。

【0171】

本明細書で記載される１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、薬学的に許容される担体を含む医薬組成物で提供することができる。いくつかの実施形態では、１５ーＰＧＤＨ活性化剤は、単独で、または他の構成成分（例えば、ＮＳＡＩＤ）と組み合わせて提供することができ、吸入により投与するために、エアロゾル製剤にすることができる（すなわち、「噴霧化する」ことができる）。１５ーＰＧＤＨ活性化剤はまた、単独で、または他の構成成分と組み合わせて、水性および非水性溶液、等張滅菌溶液（抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬、および製剤を等張にする溶質を含むことができる）、ならびに水性および非水性滅菌懸濁液（懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、および保存剤を含むことができる）中で提供することができる。１５ーＰＧＤＨ活性化剤を含む組成物は、例えば、経口的に、経鼻的に、局所的に、静脈内、腹腔内に、またはくも膜下腔内に投与することができる。製剤は、単位用量または複数回用量密閉容器、例えばアンプルおよびバイアルで提供することができる。溶液および懸濁液は、前に記載した種類の滅菌粉末、顆粒、および錠剤から調製することができる。モジュレーターはまた、調理済み食品または薬物の一部として投与することができる。

【0172】

患者へ投与される用量は、被験体において時間と共に有益な応答を誘導するのに十分でなければならない。任意の患者に対する最適用量レベルは、使用する特定のモジュレーターの効力、患者の年齢、体重、身体活動、および食事を含む様々な因子、他の薬物との可能な組み合わせ、および糖尿病の症例の重症度に依存するであろう。１５ーＰＧＤＨ活性化剤の１日投与量は各個々の患者に対し当業者により決定することができることが推奨される。用量のサイズはまた、特定の被験体における、特定の化合物の投与に付随する任意の有害な副作用の存在、性質および程度により決定されるであろう。

【0173】

いくつかの実施形態では、１５ーＰＧＤＨ活性化剤は併用療法で投与することができ、１５ーＰＧＤＨ活性化剤および１つ以上の追加の活性剤を含む単一の医薬投与製剤の投与、ならびにその独自の別々の医薬投与製剤中での１５ーＰＧＤＨ活性化剤および各活性剤の投与が含まれる。例えば、１５ーＰＧＤＨ活性化剤およびセレコキシブは、ヒト被験体に、単一の経口投与組成物、例えば錠剤またはカプセル中で一緒に投与することができ、または各作用物質は、別々の経口投与製剤中で投与することができる。他の実施形態では、ＮＳＡＩＤ、例えば、セレコキシブまたはアスピリンは、有効量の１５ーＰＧＤＨ活性化剤と共に投与することができる。別々の投与製剤が使用される場合、１５ーＰＧＤＨ活性化剤および１つ以上の追加の活性剤は、本質的に同じ時間に（すなわち、同時に）、または別々にずらした時間で（すなわち、連続して）投与することができる。併用療法は全てのこれらのレジメンを含むことが理解される。

【0174】

発明はさらに下記実施例により説明され、実施例は、特許請求の範囲を制限することを意図しない。

【0175】

実施例１
この実施例は、酵素１５ープロスタグランジンデヒドロゲナーゼ（１５ーＰＧＤＨ）（遺伝子ＨＰＧＤによりコードされる）に関する４つの化合物の活性を説明する。化合物はＳＷ０３３２９１、ＳＷ０５４３８４、ＳＷ１２４５３１、ＳＷ１４５７５３であり、下記式を有する：

【化28】

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【0176】

図１は、ＳＷ０３３２９１、ＳＷ０５４３８４、およびＳＷ１４５７５３は全て、１５ーＰＧＤＨの最後のコードエキソンへのウミシイタケルシフェラーゼの標的遺伝子ノックインにより作成された１５ーＰＧＤＨルシフェラーゼ融合コンストラクトを発現する、細胞のルシフェラーゼ活性を増加させることを示す。活性は、全て、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合物を含むように操作された、３つの異なる結腸癌細胞系において証明される。これらの細胞系はＶａｃｏー９ｍ（Ｖ９ｍ）、ＬＳ１７４Ｔ、Ｖａｃｏ５０３（Ｖ５０３）である。ＳＷ０５４３８４は一般に最も良好なインデューサーであり、６．２５μΜで最大活性を示す。Ｙ軸上の１．０の値は薬物を含まないＤＭＳＯビヒクルで処理された細胞中でのレポーター活性の基礎レベルである。

【0177】

図２はＳＷ０３３２９１、ＳＷ０５４３８４、およびＳＷ１４５７５３は全て、７．５μΜの化合物で４８時間処理した細胞系Ｖ５０３、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３において、１５ーＰＧＤＨタンパク質のレベルを増加させることを証明するウエスタンブロットを示す。未処理ＦＥＴ細胞は１５ーＰＧＤＨ発現に対する陽性対照を提供する。

【0178】

図３は、ＳＷ１２４５３１はまた、結腸細胞系において１５ーＰＧＤＨタンパク質レベルを増加させることを証明するウエスタンブロットを示す（ＴＧＦーβ（１０ｎｇ／ｍｌ）で４８時間処理したＦＥＴ細胞が、ある一定のパネルでは、１５ーＰＧＤＨ発現に対する陽性対照として使用される）。

【0179】

図４は、５μΜのＳＷ１２４５３１は、Ｖ４００ーＳ３ー２ー３２細胞において、ｃＤＮＡ発現ベクターから発現された１５ーＰＧＤＨタンパク質（ｗｔーＰＧＤＨ）のレベルを増加させ、ならびにまた、Ｖ４００ーＭ３ー２ー７２細胞において、ｃＤＮＡ発現ベクターから発現された触媒的に死んでいる変異１５ーＰＧＤＨ（ｍｕーＰＧＤＨ）のタンパク質レベルも増加させることを証明するウエスタンブロットを示す。これらのタンパク質は、異種ＣＭＶプロモーターから発現されるので、所見は、化合物が１５ーＰＧＤＨタンパク質の安定化に直接作用することを示唆する。化合物は関連酵素、１７ーβーエストラジオールーデヒドロゲナーゼのレベルには効果を示さない。

【0180】

図５は、免疫蛍光法（上２列）およびウエスタンブロット（下パネル）によりアッセイした、ＳＷｌ２４５３１で処理したＶ５０３細胞における１５ーＰＧＤＨタンパク質レベルの増加を示す。

【0181】

図６ー９はＳＷ０３３２９１、ＳＷ０５４３８４、ＳＷ１４５７５３、およびＳＷ１２４５３１は、リアルタイムＰＣＲにより評価されるように、処理された結腸癌細胞系において、一般に１５ーＰＧＤＨ ｍＲＮＡレベルを変化させないことを示す。唯一の例外は、ＳＷ０３３２９１で処理したＶ５０３細胞における１５ーＰＧＤＨ ｍＲＮＡのわずかな増加であり、これは、ＳＷ０３３２９１で処理されたＶ５０３細胞において見られる１５ーＰＧＤＨタンパク質ならびに１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーターレベルの誘導より低い。これらの研究では、親細胞系（１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーターを含まない）が使用される。

【0182】

図１０は、化合物で処理した細胞系における総１５ーＰＧＤＨ活性に対する３つの化合物の効果を示す。細胞系を化合物で、７．５μΜにて４８時間処理し、その後、ペレット化した。ペレットを溶解させ、総１５ーＰＧＤＨ活性を測定し、１，０００，０００インプット細胞／ペレットに対し正規化した。（ＣｈｉＸ，Ｆｒｅｅｍａｎ ＢＭ， Ｔｏｎｇ Ｍ， Ｚｈａｏ Ｙ， Ｔａｉ ＨＨ．１５ーヒドロキシプロスタグランジンデヒドロゲナーゼ（１５ーＰＧＤＨ）は、ヒト結腸癌ＨＴ２９細胞において、フルルビプロフェンおよび他の非ステロイド性抗炎症薬により上方制御される（１５ーＨｙｄｒｏｘｙｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ （１５ーＰＧＤＨ） ｉｓ ｕｐーｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｆｌｕｒｂｉｐｒｏｆｅｎ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｎｏｎーｓｔｅｒｏｉｄａｌ ａｎｔｉーｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒμｇｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ＨＴ２９ ｃｅｌｌｓ．）Ａｒｃｈ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ． ２００９；４８７（２）： １３９ー４５）に記載されるように、１５ーＰＧＤＨをグルタミン酸デヒドロゲナーゼとカップリングさせることにより、トリチウムの１５（Ｓ）ー［１５ー３Ｈ］ＰＧＥ_２からグルタミン酸への移行を測定することにより、１５ーＰＧＤＨ活性をアッセイした。活性をｐｍｏｌＰＧＥ_２／ｍｉｎ／１００万個細胞として測定する。図示されるように、ＳＷ０３３２９１は、試験した細胞系の３つ全てにおいて顕著に１５ーＰＧＤＨ活性を阻害する。我々は、ＳＷ０３３２９１は、細胞において総１５ーＰＧＤＨタンパク質レベルを増加させるが、これはまた、１５ーＰＧＤＨ酵素活性を不活性化すると結論付ける。

【0183】

対照的に、１５ーＰＧＤＨ酵素活性はＳＷ０５４３８４で処理した細胞およびＳＷ１４５７５３で処理した細胞で増加する。

【0184】

図１１は様々な濃度の試験化合物と共にインキュベートした組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質（１５ーＰＧＤＨーＧＳＴ融合タンパク質）の活性に対する効果を示し、ある範囲の化合物濃度にわたる１５ーＰＧＤＨ活性を表に記録し、対応するグラフに表示する。図示されるように、ＳＷ０３３２９１は１５ーＰＧＤＨ活性の強力な阻害剤であり、ＩＣ５０は＜１．２５ｎＭである。これは、Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌから入手可能な市販の１５ーＰＧＤＨ阻害剤（Ｃａｙｍａｎカタログ項目１０６３８、Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ番号１３６９５）に対して測定される２５ｎＭー６２．５ｎＭの間のＩＣ５０と対照的である。

【0185】

図１１はまた、非常に高い濃度ではＳＷ０５４３８４は組換え１５ーＰＧＤＨ活性を阻害することができることを示し、ＩＣ５０は５μΜー５０μΜの間である。我々は、ＳＷ０５４３８４は７．５μΜの化合物で処理した細胞において総１５ーＰＧＤＨレベルおよび活性を増加させるが、５μΜー５０μΜの化合物を用いたインビトロアッセイでは、インビトロで組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質を阻害することができると結論付ける。

【0186】

図１１はまた、ＳＷ１４５７５３は、１２ー６．２５ｎＭの間のＩＣ５０で、インビトロアッセイにおいて組換え１５ーＰＧＤＨ酵素の活性を阻害することができることを示す。これにより、１５ーＰＧＤＨ活性を増加させるか阻害するＳＷ１４５７５３の活性は、細胞対インビトロアッセイでは一致しない可能性があり（おそらく、細胞の洗浄時の薬物の洗い流しによる）、または濃度依存性となる可能性があることが示唆される。

【0187】

図１２はインビトロで試験した組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質の活性に対するＳＷ０３３２９１およびＳＷ０５４３８４の効果の繰り返し試験を示す。アッセイは、左側で示される、トリチウムの１５（Ｓ）ー［１５ー３Ｈ］ＰＧＥ_２からグルタミン酸への移行を測定することにより（１μΜのＰＧＥ_２基質）（パネルＡ、Ｃ）、または右側で示される、１５ーＰＧＤＨによるＮＡＤＨ生成の直接蛍光モニタリングにより（２０μΜＰＧＥ_２基質で実施）（パネルＢ、Ｄ）実施した。ＳＷ０３３２９１は再び、非常に強力な１５ーＰＧＤＨ阻害剤であると確認され、ＩＣ５０は、トリチウムアッセイで測定すると０．７ｎＭ、ＩＣ５０は蛍光アッセイで測定すると１．６ｎＭである。基質濃度に対するＩＣ５０の相対的な非感受性は、ＳＷ０３３２９１が１５ーＰＧＤＨの非競合的阻害剤であることを示唆する。

【0188】

ＳＷ０５４３８４は非常に弱い阻害活性を示し、ＩＣ５０がＳＷ０３３２９１のもの（それぞれ、トリチウムおよび蛍光に基づくアッセイで８．４μΜおよび１１μΜ）より１０，０００倍高い。これは、結局、細胞において１５ーＰＧＤＨタンパク質レベルおよび酵素活性を増加させるＳＷ０５４３８４の活性と一致する。

【0189】

図１３はＳＷ１２４５３１で処理した細胞（上パネル）およびＳＷ１２４５３１で処理した組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質（下パネル）における、トリチウム方法を用いた１５ーＰＧＤＨ活性のアッセイの結果を示す。ＳＷ１２４５３１はほとんどの細胞系で１５ーＰＧＤＨ活性の増加において活性を示すが、この活性は基礎１５ーＰＧＤＨ活性が＞１０単位である細胞系において最も良好である。ＳＷ１２４５３１はまた、１５ーＰＧＤＨ組換えタンパク質の活性を、５０ｎＭのＩＣ５０で阻害する。

【0190】

図１４は、タンパク質の融解温度をシフトさせることにより測定される、異なる化合物の、組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質に直接結合する能力に対するアッセイを示す。タンパク質の融解後に、染料が、タンパク質が融解するにつれ曝露される疎水性残基に結合するのに伴い増加する、ＳＹＰＲＯオレンジ染料（Ｓｉｇｍａ＃Ｓ５６９２）の蛍光を測定する。左上のグラフは、１５ーＰＧＤＨの融解曲線を示し、異なる化合物の存在下で実施されるアッセイを全て、互いに重ね合わせた。右上のグラフは、左側で示される曲線の各々に対する蛍光対温度の負の導関数をプロットし、融点は、負のピークの温度（すなわち、蛍光対温度プロットにおいて最も急激に変化する点）として測定される。結果を下記表において表形態で示す。ラパチニブを陰性対照として使用する。酵素補因子（ＮＡＤまたはＮＡＤＨのいずれか）がない場合、いずれの薬物の結合もない。ＮＡＤまたはＮＡＤＨのいずれかの存在下、ＳＷ０３３２９１は融解曲線において２つのピークを生成し、これらのピークの１つは１５℃だけずれ、ＳＷ０３３２９１の１５ーＰＧＤＨへの直接結合と一致する。ＳＷ１２４５３１およびＳＷ１４５７５３もまた、１５ーＰＧＤＨへの直接結合の証拠を示す。このアッセイでは、ＳＷ０５４３８４は、１５ーＰＧＤＨに結合することを証明することができない。ＳＷ０５４３８４は１５ーＰＧＤＨに結合するが、その結合は弱く、１５ーＰＧＤＨタンパク質の融解温度より低い温度で、融解して離れてしまう可能性がある。アッセイは、１０μΜおよび１００μΜ補因子の両方で実施し（ＮＡＤおよびＮＡＤＨの両方を試験）、これは、１５．８μΜのＮＡＤの公開されたＫｍとよく匹敵する。

【0191】

図１５は、試験した４つの化合物のいずれも、触媒的に不活性な変異１５ーＰＧＤＨタンパク質の融解温度のシフトを誘導しないことを示す。我々はＳＷ１２４５３１による１５ーＰＧＤＨ変異タンパク質の誘導を、ＳＷ１２４５３１はおそらく、変異１５ーＰＧＤＨに弱く結合し、これは３７℃ではタンパク質を安定化させることができるが、薬物はタンパク質の融解温度である５０℃より低い温度で融解して離れてしまうことを示唆するものとして解釈する。

【0192】

図１６は、ＩＬ１ーβにより２３時間刺激し、化合物を最後の５時間添加したＡ５４９細胞の培地中でアッセイしたＰＧＥ_２レベルで反映される１５ーＰＧＤＨ活性の化合物によるインビボ調節を示す（青色バー）。ＰＧＥ_２レベルの増加は、ＳＷ０３３２９１（ならびにＳＷ１４５７５３、ＳＷ１２４５３１、およびＣａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌからの市販の１５ーＰＧＤＨ阻害剤）の添加による、細胞における１５ーＰＧＤＨ活性の明らかな阻害を示す。追加の反復では（赤色バー）（２）、ＳＷ０５４３８４をＩＬ１ーβの添加前開始２４時間に添加し、その後、次の２６時間の間、ＩＬ１ーβの存在下で維持した。生成したより低いレベルのＰＧＥ_２は、これらの細胞では、ＳＷ０５４３８４が１５ーＰＧＤＨ活性を増加させたことを支持する。左側のパネルは生データを示し；一方、右側のパネルは、実験の終わりに存在する細胞数に対し正規化されたデータを示す。ＰＧＥ_２レベルをＥＬＩＳＡによりアッセイする。

【0193】

図１７は、ＩＬ１ーβにより２４時間刺激され、ＳＷ０３３２９１が最後の８時間の間添加されたＡ５４９細胞の培地中でアッセイされたＰＧＥ_２レベルで反映される、ＩＬ１ーβ処理Ａ５４９細胞からのＰＧＥ_２産生に対するＳＷ０３３２９１の効果の用量応答を示す。

【0194】

図１８は、ＰＧＥ_２のＶａｃｏー５０３細胞の培地への添加後の、ＰＧＥ_２レベルで反映される、１５ーＰＧＤＨ活性の２．５μΜの化合物によるインビボ調節を示す。この研究では、細胞を化合物で２４時間処理し、その後、ＰＧＥ_２を培地に添加する。添加２４時間後、培地中に残っているＰＧＥ_２レベルをＥＬＩＳＡによりアッセイする。「培地」と表示されたデータは、対照レーンであり、ＰＧＥ_２が細胞がない培地のみに添加される。ＤＭＳＯと表示されたデータは対照であり、この場合、細胞はＤＭＳＯ（化合物のための希釈剤）のみで処理される。「培地」レーンと「ＤＭＳＯ」レーンの間の違いは、ＰＧＥ_２の１５ーＰＧＤＨによる細胞依存分解を表す。ＰＧＥ_２分解の遮断により反映される、２．５μΜのＳＷ０３３２９１の添加による１５ーＰＧＤＨ活性のほぼ完全な遮断が重ねて証明される。加えて、ＰＧＥ_２の分解の増加により反映される、ＳＷ０５４３８４による１５ーＰＧＤＨ活性の刺激が証明される。

【0195】

図１９は、４８時間の処理にわたって観察される、ＨａＣａＴ細胞の単層における引っ掻き傷から構成されるモデル創傷の治癒の促進における２．５μΜのＳＷ０３３２９１の活性を示す。ＴＧＦーβはアッセイにおいて陽性対照として機能する。

【0196】

図２０は、対照、２．５μΜのＳＷ０３３２９１処理細胞、およびＴＧＦーβ（１ｎｇ／ｍｌ）処理細胞における、０および４８時間での引っ掻き傷の幅の定量を示す。

【0197】

実施例２
リード化合物ＳＷ０３３２９１、１５ーＰＧＤＨ阻害剤の類似体の分析
この実施例はＳＷ０３３２９１の一群の構造類似体に関するデータを提供する。提供したデータは、レポーターを含むように操作され、２．５μΜまたは７．５μΜのいずれかの化合物で処理された、３つの結腸癌細胞系、Ｖ９ｍ、Ｖ５０３、およびＬＳ１７４Ｔにおける、基礎レベルに対するルシフェラーゼ活性の増加％として報告される、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合遺伝子レポーターの誘導のレベルを含む（すなわち、値は１００がベースラインレベルに対するルシフェラーゼ活性の倍加を示すスケールで記録される）。インビトロアッセイにおいて、組換え１５ーＰＧＤＨの酵素活性を阻害するための各化合物のＩＣ５０もまた、記録される。

【表1】

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【0198】

我々は最初に、ＳＷ０３３２９１の１５ーＰＧＤＨ阻害活性は、異性体ＡおよびＢと指定される、この化合物の２つの光学異性体の１つの活性のために、少なくとも９８％であることを指摘する。異性体Ａ対異性体Ｂの構造割り当てはまだ、確立されていない。

【0199】

組換え１５ーＰＧＤＨをインビトロで阻害するためのＩＣ５０については、ＳＷ０３３２９１の炭素側鎖の長さに関する重要な効果が存在する。ＳＷ０３３２９１（４個の炭素）と比較して：ＳＷ２０８０８０（５個の炭素）は１．５倍高いＩＣ５０を有し、ＳＷ２０８０８１（６個の炭素）は１０倍高いＩＣ５０を有し、およびＳＷ２０８０７９（１個の炭素）は、６０倍高いＩＣ５０を有し、細胞系レポーターを誘導するのに著しい活性損失がある。

【0200】

スルホキシド基は、重要な置換基であると考えられ、というのも、スルホキシドの不活性置換は対応する：ケトン（ＳＷ２０６９７６）、アミド（ＳＷ２０６９７７）、エステル（ＳＷ２０６９７８）、およびカルボン酸（ＳＷ２０６９７９）を含むからである。しかしながら、阻害活性は、スルホン類似体で観察される。

【0201】

ＳＷ０３３２９１（ＳＷ２０６９８０）上のフェニル基の欠失はＩＣ５０を半分だけ低下させる。ＳＷ２０６９８０は、２．５μΜ濃度でレポーター細胞系に適用された場合、レポーター誘導の高い活性化合物であり続ける。
実施例３

【0202】

下記実施例は、ＳＷ０３３２９１およびその類似体の合成を説明し、ならびに構造の質量分析ＮＭＲ確認を提供する。

【化29】

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【化30】

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【0203】

ＳＷ０３３２９１ ２ー（ブチルスルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンをＫａｌｕｇｉｎにより説明された手順を用いて調製した。４ー（（（ブチルチオ）メチル）スルフィニル）ー２，６ージフェニルピリミジンー５ーカルボニトリル（０．５３ｍｍｏｌ、２２０ｍｇ）を含むＤＭＦ（０．２５Ｍ）／ＥｔＯＨ（０．５Ｍ）の溶液にＫＯＨ（０．３２ｍｍｏｌ、１８ｍｇ、０．６ｅｑｕｉｖ．、０．１Ｍ水溶液）を添加した。反応混合物を３５℃で４０ｍｉｎ撹拌した。完了した時点で、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、酸性酸の１０％水溶液で洗浄し、有機相を分離し、水層を２回ＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、２１１ｍｇのＳＷ０３３２９１ ２ー（ブチルスルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを得た（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６７ー７．６０（ｍ、１Ｈ）、７．５７ー７．３５（ｍ、７Ｈ）、７．１０（ｄｄ、Ｊ＝５．０、３．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．５４（ｓ、２Ｈ）、３．２６（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．１、６．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．０９（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．１、６．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．８３ー１．６１（ｍ、２Ｈ）、１．５３ー１．３８（ｍ、２Ｈ）、０．９３（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４１３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化31】

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【0204】

２ー（（（ブチルチオ）メチル）スルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ニコチノニトリル．酢酸（９００μＬ）および過酸化水素（０．５７ｍｍｏｌ、１．５ｅｑｕｉｖ．、３０％水溶液）を、２ー（（（ブチルチオ）メチル）スルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ニコチノニトリル（０．３８ｍｍｏｌ、１５０ｍｇ）を含むクロロホルム（９００μＬ）の溶液に添加した。反応混合物を３２℃で４５ｍｉｎ撹拌した。反応物をその後、ＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、１５３ｍｇの設計された生成物を得た（９８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．７５（ｄｄ、７＝３．８、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６ー７．５７（ｍ、２Ｈ）、７．５８ー７．５１（ｍ、４Ｈ）、７．４７（ｓ、１Ｈ）、７．１６（ｄｄ、７＝５．０、３．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．７４（ｄ、７＝１３．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．４１（ｄ、７＝１３．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．９７（ｄｔ、７＝１３．０、８．２Ｈｚ、１Ｈ）、２．８１（ｄｔ、７＝１２．９、７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．９４ー１．７６（ｍ、２Ｈ）、１．５３ー１．３８（ｍ、２Ｈ）、０．９４（ｔ、７＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４１３［Ｍ＋Ｈ］^＋

【化32】

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【0205】

２ー（（（ブチルチオ）メチル）チオ）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ニコチノニトリル．４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリル（０．３４ｍｍｏｌ、１０１ｍｇ）、ブチル（クロロメチル）スルファン（０．３４ｍｍｏｌ、４８ｍｇ、１．０ｅｑｕｉｖ．）およびＥｔ_３Ｎ（０．５１ｍｍｏｌ、７２μＬ、１．５ｅｑｕｉｖ．）の混合物を、乾燥ＣＨ_３ＣＮ（３５０μＬ）中で２０ｍｉｎ還流させた。反応混合物をその後、ＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。有機相を分離し、水層を２回、ＥｔＯＡｃで抽出した。抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、１２４ｍｇの設計された生成物を得た（９２％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．７０（ｄｄ、７＝３．８、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．６４ー７．５６（ｍ、１Ｈ）、７．５５ー７．４７（ｍ、５Ｈ）、７．４０（ｄ、７＝１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．１４（ｄｄ、７＝５．０、３．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．５３（ｓ、２Ｈ）、２．７４（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．７２ー１．５７（ｍ、２Ｈ）、１．４９ー１．３４（ｍ、２Ｈ）、０．９０（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３９７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化33】

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【0206】

４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリル．３ーフェニルー１ー（チオフェンー２ーイル）プロプー２ーエンー１ーオン（２．３４ｍｍｏｌ、５００ｍｇ）およびシアノチオアセトアミド（７．０ｍｍｏｌ、７１７ｍｇ、３．０ｅｑｕｉｖ．）を含むエタノール（７ｍＬ）の溶液に、数滴のピペリジンを添加した。反応物を３ｈ還流させた。形成した固体を回収し、酢酸から再結晶化させ、設計された生成物を４６％の単離収率で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯーｄ_６）δ８．１７（ｄ、Ｊ＝３．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．９６（ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．７４ー７．６２（ｍ、２Ｈ）、７．５４（ｄｄ、Ｊ＝５．１、２．０Ｈｚ、３Ｈ）、７．３１ー７．１９（ｍ、１Ｈ）、７．０１（ｓ、１Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：２９５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化34】

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【化35】

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【0207】

３ーフェニルー１ー（チオフェンー２ーイル）プロプー２ーエンー１ーオンを、ベンズアルデヒドおよび１ー（チオフェンー２ーイル）エタノンから、アルドール縮合により、スキーム２で示されるＡｚａｍにより説明された手順を用いて調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．８８ー７．８０（ｍ、２Ｈ）、７．６７（ｄｄ、Ｊ＝４．９、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６ー７．５９（ｍ、２Ｈ）、７．４７ー７．３４（ｍ、４Ｈ）、７．１８（ｄｄ、７＝５．０、３．８Ｈｚ、１Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：２１５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化36】

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【0208】

３ーフェニルー１ー（チアゾールー２ーイル）プロプー２ーエンー１ーオンを、Ｗｉｔｔｉｇ反応により、スキーム２で示されるＭｅｒｉｎｏにより説明された手順を用いて調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルムーｄ）δ８．０６（ｄ、Ｊ＝３．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．９９（ｓ、１Ｈ）、７．９６（ｓ、１Ｈ）、７．７５ー７．６７（ｍ、３Ｈ）、７．４４ー７．３８（ｍ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：２１６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化37】

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【0209】

ＳＷ２０８０７９ー１ーＡ ２ー（メチルスルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ０３３２９１の調製のために説明され、スキーム１および２に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６７ー７．５０（ｍ、５Ｈ）、７．５０ー７．３６（ｍ、３Ｈ）、７．１６ー７．０９（ｍ、１Ｈ）、４．５８（ｓ、２Ｈ）、２．９９（ｓ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３７１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化38】

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【0210】

ＳＷ２０８０８０ー１ーＡ ２ー（ペンチルスルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ０３３２９１の調製のために説明され、スキーム１および２に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ_２Ｃｌ_２）δ７．９８ー７．３６（ｍ、８Ｈ）、７．３３ー６．８５（ｍ、１Ｈ）、４．４７（ｓ、２Ｈ）、３．２８ー３．１５（ｍ、１Ｈ）、３．０９ー２．９９（ｍ、１Ｈ）、１．８１ー１．５９（ｍ、２Ｈ）、１．５０ー１．２５（ｍ、４Ｈ）、０．８８（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４２７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化39】

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【0211】

ＳＷ２０８０８１ー１ーＡ ２ー（ヘキシルスルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ０３３２９１の調製のために説明され、スキーム１および２に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ_２Ｃｌ_２）δ７．７８ー７．６６（ｍ、１Ｈ）、７．６３ー７．４６（ｍ、７Ｈ）、７．２７ー７．０２（ｍ、１Ｈ）、４．１１（ｓ、２Ｈ）、３．４３ー３．２０（ｍ、１Ｈ）、３．１１（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．８、９．４、６．４Ｈｚ、１Ｈ）、１．８９ー１．６３（ｍ、２Ｈ）、１．５８ー１．３９（ｍ、４Ｈ）、１．４０ー１．２１（ｍ、２Ｈ）、０．９１（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４４１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化40】

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【0212】

ＳＷ２０８０６６、２ー（ブチルスルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チアゾールー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ０３３２９１の調製のために説明され、スキーム１および２に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．０６（ｓ、１Ｈ）、７．９２（ｄ、Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６５ー７．３９（ｍ、６Ｈ）、４．６３（ｓ、２Ｈ）、３．２８（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．０、６．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．１１（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．０、６．８Ｈｚ、１Ｈ）、１．８５ー１．６３（ｍ、２Ｈ）、１．５６ー１．４２（ｍ、２Ｈ）、０．９４（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化41】

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【0213】

ＳＷ２０６９８０、２ー（ブチルスルフィニル）ー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ０３３２９１の調製のために説明され、スキーム１および２に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．７９（ｄ、Ｊ＝８．５、１Ｈ）、７．６５ー７．４９（ｍ、２Ｈ）、７．３９（ｄｔ、Ｊ＝５．１、０．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０６（ｄｄ、Ｊ＝５．０、３．７、Ｈｚ、１Ｈ）、５．２０（ｓ、２Ｈ）、３．２６（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．０、６．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．１０（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．１、６．６Ｈｚ、１Ｈ）、１．７８ー１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．５５ー１．３９（ｍ、２Ｈ）、０．９２（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３３７［Ｍ＋Ｈ］^＋

【化42】

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【0214】

ＳＷ２０６９９２、２ー（ブチルスルフィニル）ー６ー（チアゾールー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ０３３２９１の調製のために説明され、スキーム１および２に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．１５（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．９０（ｄ、Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．４４（ｄ、Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．２９（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．７、９．０、６．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．１３（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．０、６．７Ｈｚ、１Ｈ）、１．８３ー１．６１（ｍ、２Ｈ）、１．５９ー１．３８（ｍ、２Ｈ）、０．９２（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３３８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化43】

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【0215】

ＳＷ２０８０６４、２ー（ブチルスルフィニル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ０３３２９１の調製のために説明され、スキーム１に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．６１（ｄｄ、Ｊ＝４．７、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．８９（ｄｄ、Ｊ＝８．１、１．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３３（ｄｄ、Ｊ＝８．１、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．３９ー３．１８（ｍ、１Ｈ）、３．２０ー３．０３（ｍ、１Ｈ）、１．７４（ｐ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．６３ー１．３８（ｍ、２Ｈ）、０．９４（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：２５５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化44】

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【0216】

ＳＷ２０８０７８ー１ーＡ ２ー（ブチルスルホニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミン．酢酸（５０μＬ）および過酸化水素（０．０３６ｍｍｏｌ、１．５ｅｑｕｉｖ．、３０％水溶液）を、ＳＷ０３３２９１ ２ー（ブチルスルフィニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミン（０．０２４ｍｍｏｌ、１０ｍｇ）を含むクロロホルム（５０μＬ）の溶液に添加した。反応混合物を３２℃で４ｈ撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、粗２ー（ブチルスルホニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを得、これを、８％の単離収率で、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．７１（ｄ、Ｊ＝３．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６４ー７．５４（ｍ、３Ｈ）、７．５３ー７．４２（ｍ、４Ｈ）、７．１５（ｄｄ、Ｊ＝５．０、３．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．０９（ｓ、２Ｈ）、３．３８ー３．０２（ｍ、２Ｈ）、１．９２ー１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．５２ー１．２８（ｍ、２Ｈ）、０．９２（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４２９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化45】

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【0217】

ＳＷ０３３２９０ー２ーＡ ２ー（メチルスルホニル）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ２０８０７８ー１ーＡの調製のために説明され、スキーム１および２に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．７８ー７．６８（ｍ、１Ｈ）、７．６４ー７．５４（ｍ、３Ｈ）、７．５３ー７．４５（ｍ、４Ｈ）、７．１８ー７．１０（ｍ、１Ｈ）、５．０８（ｓ、２Ｈ）、３．１４（ｓ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３８７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化46】

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【0218】

ＳＷ２０８０６５、６ー（ブチルスルフィニル）ー２，４ージフェニルチエノ［２，３ーｄ］ピリミジンー５ーアミン．４ー（（（ブチルチオ）メチル）スルフィニル）ー２，６ージフェニルピリミジンー５ーカルボニトリル（０．０７ｍｍｏｌ、３０ｍｇ）を含むＤＭＦ（０．２５Ｍ）の溶液にＫＯＨ（０．０３５ｍｍｏｌ、２ｍｇ、０．５ｅｑｕｉｖ．、０．１Ｍ水溶液）を添加した。反応混合物を室温で２０ｍｉｎ撹拌した。完了した時点で、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、酸性酸の５％水溶液で洗浄した。有機相を分離し、水層を２回、ＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物を得、これを、７０％の単離収率で、フラッシュクロマトグラフィーにより精製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．７３ー８．３７（ｍ、２Ｈ）、７．７８ー７．６８（ｍ、２Ｈ）、７．６６ー７．５５（ｍ、３Ｈ）、７．５３ー７．４０（ｍ、３Ｈ）、４．８３（ｓ、２Ｈ）、３．３０（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．７、８．９、６．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．２１ー３．０１（ｍ、１Ｈ）、１．８７ー１．６６（ｍ、２Ｈ）、１．５７ー１．４１（ｍ、２Ｈ）、０．９５（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４０８［Ｍ＋Ｈ］^＋

【化47】

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【0219】

４ー（（（ブチルチオ）メチル）スルフィニル）ー２，６ージフェニルピリミジンー５ーカルボニトリル．酢酸（６００μＬ）および過酸化水素（０．３７ｍｍｏｌ、１．５ｅｑｕｉｖ．、３０％水溶液）を、４ー（（（ブチルチオ）メチル）チオ）ー２，６ージフェニルピリミジンー５ーカルボニトリル（０．２５ｍｍｏｌ、９８ｍｇ）を含むクロロホルム（９００μＬ）の溶液に添加した。反応混合物を、３２℃で４５ｍｉｎ撹拌した。完了した時点で、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、８８ｍｇの設計された生成物を得た（９８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．５７（ｄｔ、Ｊ＝７．７、１．２Ｈｚ、２Ｈ）、８．２８ー８．０５（ｍ、２Ｈ）、７．８０ー７．４０（ｍ、６Ｈ）、４．８２（ｄ、Ｊ＝１３．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．４９（ｄ、Ｊ＝１３．３、１Ｈ）、２．９５（ｄｔ、Ｊ＝１３．０、８．１Ｈｚ、１Ｈ）、２．８４（ｄｔ、Ｊ＝１３．０、７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．９１ー１．７４（ｍ、２Ｈ）、１．５６ー１．４０（ｍ、２Ｈ）、０．９５（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４０８［Ｍ＋Ｈ］^＋

【化48】

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【0220】

４ー（（（ブチルチオ）メチル）チオ）ー２，６ージフェニルピリミジンー５ーカルボニトリル．４，６ージフェニルー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリル（０．３５ｍｍｏｌ、１０１ｍｇ）、ブチル（クロロメチル）スルファン（０．３５ｍｍｏｌ、４８ｍｇ、１．０ｅｑｕｉｖ．）およびＥｔ_３Ｎ（０．８７ｍｍｏｌ、２．５ｅｑｕｉｖ．）の混合物を、乾燥ＣＨ_３ＣＮ（２００μＬ）中で２０ｍｉｎ還流させた。反応物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。有機相を分離し、水層を２回、ＥｔＯＡｃで抽出した。抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をその後、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、５９ｍｇの設計された生成物を得た（７５％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．７５ー８．３６（ｍ、２Ｈ）、８．３５ー７．９１（ｍ、２Ｈ）、７．７１ー７．４１（ｍ、６Ｈ）、４．５９（ｓ、２Ｈ）、２．７４（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）、１．７５ー１．５８（ｍ、２Ｈ）、１．４９ー１．３４（ｍ、２Ｈ）、０．９１（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３９２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化49】

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【0221】

４，６ージフェニルー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリルをＳｏｔｏにより説明された手順に従い、調製した。ＮａＯｉＰｒ（１．５ｍｍｏｌ、１．０ｅｑｕｉｖ．、ナトリウムおよび乾燥ｉＰｒＯＨからインサイチューで調製）、ベンゾチオアミド（１．５ｍｍｏｌ、２０５ｍｇ、１．０ｅｑｕｉｖ．）および２ー（エトキシ（フェニル）メチレン）マロノニトリル（１．５ｍｍｏｌ、２９７ｍｇ、１．５ｅｑｕｉｖ．）を含むｉＰｒＯＨ（７５ｍＬ）の混合物を５ｈ、室温で撹拌した。反応物をその後、濃ＨＣｌで酸性化し、一晩撹拌し、蒸発させ、得られた固体を酢酸から再結晶化させ、２６５ｍｇの４，６ージフェニルー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリルを得た（６１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯーｄ_６）δ８．２３ー８．１２（ｍ、２Ｈ）、８．０７ー７．９１（ｍ、２Ｈ）、７．７４ー７．４９（ｍ、６Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：２９０［Ｍ＋Ｈ］^＋

【化50】

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【0222】

ＳＷ２０８０６７、６ー（ブチルスルフィニル）ー４ーフェニルー２ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｄ］ピリミジンー５ーアミンを、類似体ＳＷ２０８０６５の調製のために説明され、スキーム３に示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．１０（ｄｄ、Ｊ＝３．７、１．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．７４ー７．６５（ｍ、２Ｈ）、７．６２ー７．５３（ｍ、３Ｈ）、７．５０（ｄｄ、Ｊ＝５．０、１．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．１４（ｄｄ、Ｊ＝５．０、３．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．７９（ｓ、２Ｈ）、３．２８（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．０、６．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．１１（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．８、９．０、６．７Ｈｚ、１Ｈ）、１．８４ー１．６３（ｍ、２Ｈ）、１．５４ー１．４１（ｍ、２Ｈ）、０．９４（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：４１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化51】

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【化52】

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【0223】

ＳＷ２０６９７６ー１、１ー（３ーアミノー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー２ーイル）ペンタンー１ーオン．２ー（（２ーオキソヘキシル）チオ）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ニコチノニトリル（０．１３ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）を含むエタノール（５００μＬ）の溶液にＫＯＨ（０．１３ｍｍｏｌ、２ｍｇ、１．０ｅｑｕｉｖ．）を添加した。反応混合物を５０℃で３０ｍｉｎ撹拌した。完了した時点で、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％ＨＣｌ水溶液で洗浄した。有機相を分離し、水層を２回、ＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、設計された生成物を９８％収率で得た。

【0224】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６５（ｄｄ、Ｊ＝３．８、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．６２ー７．５６（ｍ、２Ｈ）、７．５５ー７．４８（ｍ、４Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．１３（ｄｄ、Ｊ＝５．０、３．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．１３（ｓ、２Ｈ）、２．７２（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．７２ー１．５６（ｍ、２Ｈ）、１．４２ー１．２５（ｍ、２Ｈ）、０．８８（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３９３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化53】

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【0225】

２ー（（２ーオキソヘキシル）チオ）ー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ニコチノニトリル．４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリル（０．０６８ｍｍｏｌ、２０ｍｇ）、Ｅｔ_３Ｎ（０．１１ｍｍｏｌ、１５μＬ、１．６ｅｑｕｉｖ．）および２ーブチルオキシラン（０．１１ｍｍｏｌ、１１ｍｇ、１．６ｅｑｕｉｖ．）を含むＭｅＯＨ（５００μＬ）の混合物を、室温で撹拌した。ＴＬＣにより判断して、反応が完了した時に、反応混合物を蒸発させ；ＤＣＭおよびＤＭＰに溶解したベタベタする生成物（０．１０ｍｍｏｌ、１．５ｅｑｕｉｖ．）を０℃で添加した。反応混合物を室温で２ｈ撹拌し、その後、２０％Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３／ＮａＨＣＯ_３溶液の１：１混合物の添加により反応停止させた。有機層を分離し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、設計された生成物を７２％収率で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．０２（ｓ、１Ｈ）、７．９７（ｄ、Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．７１ー７．５９（ｍ、２Ｈ）、７．５５（ｄ、Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．５５ー７．４６（ｍ、４Ｈ）、４．５２（ｓ、２Ｈ）、２．７５（ｔ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．７３ー１．５４（ｍ、２Ｈ）、１．５１ー１．２６（ｍ、２Ｈ）、０．９１（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３９３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化54】

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【0226】

ＳＷ２０６９７７、３ーアミノー４ーフェニルーＮープロピルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー２ーカルボキサミド．４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリル（０．１２ｍｍｏｌ、３５ｍｇ）、２ークロローＮープロピルアセトアミド（０．１２ｍｍｏｌ、１６ｍｇ、１．０ｅｑｕｉｖ．）およびＥｔＯＮａ（０．１９ｍｍｏｌ、１．６ｅｑｕｉｖ．）を含むエタノール（１ｍＬ）の混合物を、５０℃で撹拌した。ＴＬＣにより判断して、反応が完了した時に、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％ＨＣｌ水溶液で洗浄した。有機相を分離し、水層を２回、ＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、設計された生成物を６１％収率で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６５（ｄ、Ｊ＝３．７、１Ｈ）、７．５８ー７．４９（ｍ、３Ｈ）、７．４９ー７．３８（ｍ、４Ｈ）、７．１０（ｄｄ Ｊ＝４．９、３．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．７５（ｓ、２Ｈ）、５．５９ー５．３８（ｍ、１Ｈ）、３．３５（ｔｄ Ｊ＝７．０、５．９Ｈｚ、１Ｈ）、１．６４ー１．５８（ｍ、２Ｈ）、０．９６（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３９４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化55】

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【0227】

ＳＷ２０６９７８、エチル３ーアミノー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー２ーカルボキシレート．４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリル（０．３４ｍｍｏｌ、１００ｍｇ）、２ークロロ酢酸エチル（０．５４ｍｍｏｌ、１．６ｅｑｕｉｖ．）およびＥｔＯＮａ（０．５４ｍｍｏｌ、１．６ｅｑｕｉｖ．）を含むエタノール（１ｍＬ）の混合物を、還流しながら撹拌した。ＴＬＣにより判断して、反応が完了した時に、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％ＨＣｌ水溶液で洗浄した。有機相を分離し、水層を２回、ＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、設計された生成物を７９％収率で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯーｄ_６）δ８．０１（ｄ、Ｊ＝３．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．８７ー７．６７（ｍ、２Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、５Ｈ）、７．３６ー６．９０（ｍ、１Ｈ）、５．７３（ｓ、２Ｈ）、４．２３（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．２５（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３８１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化56】

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【0228】

ＳＷ２０６９７９、３ーアミノー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー２ーカルボン酸．ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ー２ーチオキソー１，２ージヒドロピリジンー３ーカルボニトリル（０．３４ｍｍｏｌ、１００ｍｇ）および２ークロロ酢酸エチル（０．５４ｍｍｏｌ、１．６ｅｑｕｉｖ．）を含むエタノール（１ｍＬ）の溶液に、Ｅｔ_３Ｎ（０．５４ｍｍｏｌ、１．６ｅｑｕｉｖ．）を添加した。反応物を２０ｍｉｎ還流させた。反応物をその後、ＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。有機相を分離し、水層を２回、ＥｔＯＡｃで抽出した。抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、設計された生成物を得た。エチル２ー（（３ーシアノー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）ピリジンー２ーイル）チオ）アセテートをその後、ＤＭＦに溶解し、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液で５０℃にて処理し、ＳＷ２０６９７９、３ーアミノー４ーフェニルー６ー（チオフェンー２ーイル）チエノ［２，３ーｂ］ピリジンー２ーカルボン酸を６３％収率で得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯーｄ_６）δ８．００（ｄｄ、Ｊ＝３．７、１．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．７９ー７．６４（ｍ、２Ｈ）、７．５５（ｄｔ、Ｊ＝７．６、３．２Ｈｚ、５Ｈ）、７．１６（ｄｄ、Ｊ＝５．０、３．７Ｈｚ、１Ｈ）、５．７２（ｓ、２Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：３５３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化57】

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【化58】

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【0229】

ＳＷ２０８０６８、２ー（ブチルチオ）ピリジンー３ーアミン．ブタンー１ーチオール（７．０ｍｍｏｌ、６２８ｍｇ、１．１ｅｑｕｉｖ．）を含むＴＨＦ（３０ｍＬ）の溶液にＮａＨ（６．６ｍｍｏｌ、１５８ｍｇ、１．０５ｅｑｕｉｖ．）を０℃で添加した。反応混合物を室温で３０ｍｉｎ撹拌した後、２ークロロー３ーニトロピリジン（６．３３ｍｍｏｌ、１．０ｇ）を少しずつ添加し、撹拌しながら、室温で２ｈ放置した。水をその後、反応混合物に添加し、得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を、塩化ナトリウムの飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。精製が難しいため、不純な２ー（ブチルチオ）ー３ーニトロピリジンを直接、次の工程のために使用した。ニトロピリジン（０．４７ｍｍｏｌ、１００ｍｇ）を酢酸（３．３ｍｌ）および濃塩酸（１３０μＬ）の混合溶媒中に溶解し、亜鉛（５．７ｍｍｏｌ、３７０ｍｇ）を少しずつ、氷で冷却しながら添加した。混合物を３０分撹拌した後、反応混合物を濾過し、濾液をＮａＨＣＯ_３の水溶液で中和し、ＤＣＭで抽出した。有機層を水、その後、塩化ナトリウムの飽和水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。その後、溶媒を蒸発させ、２ー（ブチルチオ）ピリジンー３ーアミンを淡黄色油として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．９４（ｄｄ、Ｊ＝４．１、２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．０５ー６．５１（ｍ、２Ｈ）、３．８４（ｓ、２Ｈ）、３．５１ー２．９５（ｍ、２Ｈ）、１．７２ー１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．５６ー１．３６（ｍ、２Ｈ）、０．９１（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：１８３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化59】

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【0230】

ＳＷ２０８０６９、２ー（ブチルスルフィニル）ー３ーニトロピリジン．ブタンー１ーチオール（７．０ｍｍｏｌ、６２８ｍｇ、１．１ｅｑｕｉｖ．）を含むＴＨＦ（３０ｍＬ）の溶液にＮａＨ（６．６ｍｍｏｌ、１５８ｍｇ、１．０５ｅｑｕｉｖ．）を０℃にて添加した。反応混合物を室温で３０ｍｉｎ撹拌した後、２ークロロー３ーニトロピリジン（６．３３ｍｍｏｌ、１．０ｇ）を少しずつ添加し、撹拌しながら室温で２ｈ放置した。水をその後、反応混合物に添加し、得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を塩化ナトリウムの飽和水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。精製が難しいため、不純な２ー（ブチルチオ）ー３ーニトロピリジンを直接、次の工程のために使用した。ニトロピリジン（０．４７ｍｍｏｌ、１００ｍｇ）を酢酸（１．２ｍｌ）およびクロロホルム（１．２ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、過酸化水素（０．７ｍｍｏｌ、１．５ｅｑｕｉｖ．、３０％水溶液）を添加した。混合物を４５分、３２℃で撹拌した後、反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮し、２ー（ブチルスルフィニル）ー３ーニトロピリジンを得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ９．１４（ｄｄ、Ｊ＝４．６、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、８．５４（ｄｄ、Ｊ＝８．２、１．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．６７（ｄｄ、Ｊ＝８．２、４．６Ｈｚ、１Ｈ）、３．１８（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．７、９．３、７．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．００（ｄｄｄ、Ｊ＝１２．７、９．１、４．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．１７ー１．９２（ｍ、１Ｈ）、１．９１ー１．７０（ｍ、１Ｈ）、１．６８ー１．３５（ｍ、２Ｈ）、０．９６（ｔ、７＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：２２９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【化60】

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【0231】

ＳＷ２０８０７０、２ー（ブチルスルフィニル）ピリジンー３ーアミンを、類似体ＳＷ２０８０６９の調製のために説明され、スキーム４で示された合成手順を使用することにより調製した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．９０（ｄｄ、Ｊ＝４．４、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．３、４．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｄｄ、Ｊ＝８．３、１．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．３０（ｓ、２Ｈ）、３．２４（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．０、９．５、５．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．０３（ｄｄｄ、Ｊ＝１３．０、９．８、６．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．９５ー１．６１（ｍ、２Ｈ）、１．５５ー１．３５（ｍ、２Ｈ）、０．９３（ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、３Ｈ）。ＥＳＩーＭＳ（ｍ／ｚ）：１９９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0232】

実施例４
ＳＷ０３３２９１および関連化合物による１５ーＰＧＤＨ阻害のメカニズムの分析
下記実施例は、ＳＷ０３３２９１が１５ーＰＧＤＨを阻害する作用メカニズムに関するデータを提供する。

【0233】

１５ーＰＧＤＨ阻害剤（ＳＷ０３３２９１）の２つ組の滴定を、４つの異なる濃度の１５ーＰＧＤＨ（２４ｎＭ、１２ｎＭ、６ｎＭ、３ｎＭ）で実行した。反応物は、示された濃度の酵素、２５０μΜのＮＡＤ（＋）、２５μΜのＰＧＥー２を含み、これらを構築し、室温で３分インキュベートした。

【0234】

図２１（ＡーＢ）は、酵素濃度変化に伴うＩＣ_５０値のシフトを示す。結果により、阻害剤の絶対濃度ではなく、むしろ酵素：阻害剤化学量論に依存する阻害のタイトバインディング様式が示される。全ての場合において、ＩＣ_５０値は酵素濃度より低く、ｎＭ薬物は、酵素によりほとんど完全に結合されることが示される。

【0235】

図２２（ＡーＢ）は、ＳＷ０３３２９１は１５ーＰＧＤＨの不可逆的阻害剤に非常によく似た挙動をし、１５ーＰＧＤＨタンパク質から効率的に透析することができないことを示す。

【0236】

ＳＷ０３３２９１が可逆阻害剤であるかどうかの試験は下記により進行させる：
（ｉ）１５ーＰＧＤＨストック（８ｍｇ／ｍＬ １５ーＰＧＤＨを含む５００μＬの１５ーＰＧＤＨアッセイ緩衝液）からとった８μｌのアリコート（４ｎｍｏｌ １５ーＰＧＤＨ、４μΜ １５ーＰＧＤＨ）を、氷上で下記と共にインキュベートした：（ａ）５μＬの１００ｍＭ ＮＡＤ（＋）の添加＋３．２μＬの２．５ｍＭ ＳＷ０３３２９１ストックの添加、その後、１Ｌの緩衝液に対し１２時間透析し、続いて新たに、１Ｌの緩衝液に対しさらに１２時間透析した；または（ｂ）５μＬ、１００ｍＭ ＮＡＤ（＋）の添加＋３．２μＬＤＭＳＯの添加、その後、１Ｌの緩衝液に対し１２時間透析し、１Ｌの緩衝液をさらに１２時間透析した。
（ｉｉ）透析前、１μＬを除去し、２００μＬのアッセイ緩衝液（２０ｎＭ）で希釈し、その後、１５ーＰＧＤＨ活性を測定する。
（ｉｉｉ）透析後、２４ｈｒで、１μＬを除去し、２００μＬのアッセイ緩衝液（２０ｎＭ）で希釈し、その後、１５ーＰＧＤＨ活性を測定する。

【0237】

透析緩衝液は５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．４、４０ｍＭ ＮａＣｌ、０．１ｍＭ ＤＴＴ、０．０１％ Ｔｗｅｅｎー２０である。

【0238】

アッセイの条件下では、ＳＷ０３３２９１は透析前９１％の１５ーＰＧＤＨ、透析後８５％の１５ーＰＧＤＨ活性を阻害しーすなわち、透析は１５ーＰＧＤＨの阻害を逆転させなかった。ＳＷ０３３２９１なしで透析された対照１５ーＰＧＤＨタンパク質は完全に活性なままであった。

【0239】

図２３（ＡーＢ）は、（Ａ）右上は、濃度増加の段階的な組のＳＷ０３３２９１の存在下での、１５ーＰＧＤＨに対する反応速度を示す。右上のグラフでは、Ｐは１５ーケトーＰＧＥ２に対する代用物としてのＮＡＤＨ濃度である。（Ｐ＋Ｓ）は、２０μΜの開始ＰＧＥ２濃度である。アッセイは、１０ｎΜの組換え１５ーＰＧＤＨの存在下で実施した。左下のグラフでは（Ｂ）、ＶｏはＳＷ０３３２９１なしでの、反応の初速度であり、Ｖｉは、対応する濃度のＳＷ０３３２９１の存在下での反応の初速度である。線は、データをＭｏｒｒｉｓｏｎ式にフィッティングさせることにより作成された曲線を示す。曲線フィッティングにより、０．１０１５ｎＭの計算されたＫｉ^Ａｐｐの値が得られる。点線はＸ軸と８．５ｎＭで交差する。これは酵素調製物が８５％活性酵素を含むことを示す［阻害剤］＝［活性酵素］の点を表す。Ｍｏｒｒｉｓｏｎ式では、Ｋｉは阻害剤の結合親和性であり；［Ｓ］は基質濃度であり；Ｋｍは酵素活性が最大半量となる基質の濃度である。ＩＣ５０は阻害剤の機能的強度であることに留意されたい。化合物に対するＩＣ_５０値は実験条件によって実験間で変動する可能性があるが、Ｋｉは絶対値である。Ｋｉは薬物に対する阻害定数；リガンドが存在しない場合の受容体の５０％を占める競合アッセイにおける競合リガンドの濃度である。

【0240】

図２４（ＡーＢ）は６つの異なる濃度のＰＧＥ２（１．２５μΜー４０μΜ）で実行した、１５ーＰＧＤＨ阻害剤（ＳＷ０３３２９１）の２つ組の滴定を示す。上のグラフでは、Ｙ軸はＳＷ０３３２９１による反応の％阻害である。Ｘ軸はｎＭで表したＳＷ０３３２９１の濃度である。反応物は５．０ｎＭの添加された１５ーＰＧＤＨ、２５０μΜのＮＡＤ（＋）、および示された濃度のＰＧＥー２を含み、構築して、室温で６０分インキュベートした。ＰＧＥ２に対するＫｍはおよそ５μΜであり、５μΜ未満のＰＧＥ２濃度を用いて実行した反応は非常にゆっくり進み、ＳＷ０３３２９１による阻害を定量するのは困難である。しかしながら、５μΜー４０μΜの濃度のＰＧＥ２との反応では、ＳＷ０３３２９１に対するＩＣ_５０はＰＧＥ２濃度の増加に影響されず、阻害は非競合的であることが示される。

【0241】

図２５はＳＷ０３３２９１の類似体対組換え１５ーＰＧＤＨに対するそれらのＩＣ５０の構造活性関係を示す。ＳＷ０３３２９１の２つの異性体、ＡおよびＢへの構造の割り当ては、活性異性体（異性体Ｂ）の構造が決定されていないので、任意である。ＳＷ０３３２９１の光学異性体を分取ＨＰＬＣにより１０ｍｍｘ２５０ｍｍのＣｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤＨカラム、５％イソプロパノールを含むヘキサン、１ｍＬ／ｍｉｎを使用して分離した。「Ａ」異性体はより速く溶離する異性体である。「Ｂ」異性体はより遅く溶離する異性体である。

【0242】

類似体ファミリーは、４個炭素側鎖を有するＳＷ０３３２９１は、ＳＷ２０８０８０（５個炭素側鎖）より２倍より強力、ＳＷ２０８０８１（６個炭素側鎖）より１５倍強力、ＳＷ２０８０７９（１個炭素側鎖）より１００倍強力であることを示す。ＳＷ０３３２９１はまた、ＳＷ２０８０７８、スルホキシド基をスルホンに変換した類似体よりも２０倍強力である。

【0243】

図２６はスルホキシド基をケトン、アミド、エステル、またはカルボン酸に変換する追加のＳＷ０３３２９１類似体の構造を示す。ＳＷ０３３２９１からフェニル環が欠失した構造ＳＷ２０６９８０もまた、示す。

【0244】

図２７（ＡーＣ）は、３つの異なる試験細胞系バックラウンド、Ｖ９ｍ、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３における、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合レポーターを誘導する化合物の活性のレベルを表すグラフを示す。各化合物を２つの濃度、２．５μΜ、および７．５μΜで試験した。Ｙ軸はルシフェラーゼ活性である。

【0245】

２．５μΜー７．５μΜでは、ＳＷ０３３２９１のフェニル基が欠失したＳＷ２０６９８０は、３つのレポーター系全てにおいて、ＳＷ０３３２９１と同等の活性を示す。

【0246】

スルホキシド基をケトン、アミド、エステル、またはカルボン酸に変換させた構造は、レポーターの誘導において大きな活性損失を示す。

【0247】

図２８は、５つの試験化合物の各々により、２．５μΜおよび７．５μΜで阻害された１５ーＰＧＤＨ酵素活性のパーセントを表すグラフを示す。ＳＷ０３３２９１のフェニル基が欠失したＳＷ２０６９８０は、これらの濃度で、１５ーＰＧＤＨ活性の阻害においてＳＷ０３２９１に類似する効力を示す。

【0248】

スルホキシド基をケトン、アミド、エステル、またはカルボン酸に変換させた構造は１５ーＰＧＤＨ阻害剤としての大きな活性損失を示す。

【0249】

図２９（ＡーＢ）は、ＳＷ０３３２９１およびＳＷ０２０６９８０の異なる濃度での、１５ーＰＧＤＨ酵素活性のパーセント阻害をプロットする滴定曲線を示す。同一のアッセイ条件下では、ＳＷ２０６９８０はわずかに低いＩＣ５０を示す。

【0250】

図３０（ＡーＢ）は、ＳＷ２０６９８０は１５ーＰＧＤＨに直接結合し、その融解曲線を著しくシフトさせることを示す。疎水性染料ＳＹＰＲＯオレンジの蛍光により反映される、１５ーＰＧＤＨの融解曲線が左側に示される。融解曲線の負の一次導関数が右側に示される。

【0251】

３つの条件、１０μΜ １５ーＰＧＤＨ、１０μΜ １５ーＰＧＤＨ＋１０μΜ ＳＷ２０６９８０、および１０μΜ １５ーＰＧＤＨ＋１２５μΜ ＮＡＤＨ＋１０μΜ ＳＷ２０６９８０をプロットする。右側の曲線の屈曲点により反映される融解温度は、ＳＷ２０６９８０およびＮＡＤＨの存在下、４８度から６８度まで２０℃だけシフトし、ＳＷ２０６９８０は、ＮＡＤＨ補因子の存在を要求する様式で、１５ーＰＧＤＨの三次構造に直接結合し、著しく安定化させることを反映する。

【0252】

図３１（ＡーＣ）は、ＳＷ０３３２９１フェニル環の除去（ＳＷ２０６９８０）は活性を保持したという前の所見に基づき構築されたＳＷ０３３２９１のさらなる類似体を示す。新規類似体（ＳＷ２０６９９２）は窒素を左側の環に追加する。

【0253】

表３はＳＷ０３３２９１、ＳＷ２０６９８０、およびＳＷ２０６９９２の特性の比較を提供する。

【表2】

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【0254】

阻害までの時間は、薬物が反応混合物に添加された瞬間からの、１５ーＰＧＤＨによるＮＡＤＨの生成を阻害するのに必要とされる時間を示す。ΔＴｍは、薬物の存在下（補因子ＮＡＤＨもまた存在する）での、組換え１５ーＰＧＤＨの融解温度のシフトを示す。完全な細胞系レポーター誘導の濃度は、ルシフェラーゼアッセイにより測定される、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ遺伝子融合レポーターカセットの最大誘導を達成するために、レポーター細胞系に添加される必要がある薬物の濃度を示す。肝細胞安定性は、培養中の肝細胞の存在下での化合物の半減期を示す。毒性は、細胞培養アッセイにおける、細胞数を減少させるのに必要とされる化合物の濃度を示す。

【0255】

図３２（ＡーＣ）は、３つの異なる細胞系バックラウンドにおける、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ遺伝子融合レポーターの、ＳＷ０３３２９１による誘導の滴定を示す。一般に２４時間の、８０ー１６０ｎＭの間のＳＷ０３３２９１曝露が、最大レポーター誘導を誘導するために必要とされる。

【0256】

図３３（ＡーＣ）は３つの異なる細胞系バックラウンドにおける、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ遺伝子融合レポーターの、ＳＷ２０６９８０による誘導の滴定を示す。一般に２４時間の、≧３００ｎＭのＳＷ２０６９８０曝露が、最大レポーター誘導を誘導するために必要とされる。

【0257】

図３４（ＡーＣ）は３つの異なる細胞系バックラウンドにおける、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ遺伝子融合レポーターの、ＳＷ２０６９９２による誘導の滴定を示す。一般に２４時間の、≧１０００ｎＭのＳＷ２０６９９２曝露が、最大レポーター誘導を誘導するために必要とされる。

【0258】

図３５（ＡーＣ）は、補因子ＮＡＤ（＋）（１００μΜ）の存在下での、２０μΜのＳＷ０３３２９１、ＳＷ２０６９８０、およびＳＷ２０６９９２による、組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質（１０μΜ）の融解曲線のシフトを示す。対照融解温度は４９セ氏温度である。ＳＷ０３３２９１は融解温度を６３度にシフトさせる。ＳＷ２０６９８０は融解温度を６１度にシフトさせる。ＳＷ２０６９９２は融解温度を５９度にシフトさせる。よって、３つの化合物は全て直接、１５ーＰＧＤＨに結合し、タンパク質の融解温度を著しく増加させ、温度シフトの順序はＳＷ０３３２９１＞ＳＷ２０６９８０＞ＳＷ２０６９９２である。

【0259】

図３６（ＡーＢ）は、補因子ＮＡＤＨ（１００μΜ）の存在下での、２０μΜのＳＷ０３３２９１、ＳＷ２０６９８０、およびＳＷ２０６９９２による、組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質（１０μΜ）の融解曲線におけるシフトを示す。対照融解温度は５５セ氏温度である。ＳＷ０３３２９１は融解温度を７４度にシフトさせる。ＳＷ２０６９８０は融解温度を７０．５度にシフトさせる。ＳＷ２０６９９２は融解温度を６８．５度にシフトさせる。よって、３つの化合物は全て直接、１５ーＰＧＤＨに結合し、タンパク質の融解温度を著しく増加させ、温度シフトの順序はＳＷ０３３２９１＞ＳＷ２０６９８０＞ＳＷ２０６９９２である。

【0260】

図３７（ＡーＣ）は、ＩＬ１ーβで刺激したＡ５４９細胞の培地におけるＰＧＥ２レベルに対する効果を測定するアッセイにおける、１５ーＰＧＤＨ阻害剤化合物の滴定曲線を示す。最高ＰＧＥ２レベル、３０００ｐｇ／ｍｌがＳＷ０３３２９１で達成され、２．５μΜの化合物で、最大効果が得られる。次の最高ＰＧＥ２レベル、２５００ｐｇ／ｍｌは、ＳＷ２０６９８０で達成され、７．５μΜの化合物で、最大効果が得られる。２１００ｐｇ／ｍｌ ＰＧＥ２への最低誘導がＳＷ２０６９９２で達成され、２．５μΜで、最大効果が得られる。これらの反応では、Ａ５４９細胞を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）および５０μｇ／ｍＬゲンタマイシンが補充されたＦ１２Ｋ培地において、５％ＣＯ_２を含む加湿雰囲気中、３７℃で維持した。細胞を２４ウェルプレート（０．５ｍＬ／ウェル）に、約１００，０００細胞／ウェルにて２つ組で蒔き、２４ｈ増殖させ、その後、ＩＬー１β（１ｎｇ／ｍＬ）で一晩（１６ｈ）刺激し、ＰＧＥ２を生成させた。ＳＷ０３３２９１およびその類似体を示された濃度で添加し、インキュベーションを８ｈ続けた。培地を回収し、ＰＧＥ２のレベルを酵素イムノアッセイにより分析した。データを３つの独立した実験の結果から分析した。

【0261】

図３８（ＡーＣ）は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒーＧｌｏ測定によりアッセイされた１５ーＰＧＤＨ阻害剤の２４時間でのＡ５４９細胞に対する細胞毒性のアッセイを示す。１０μΜまでのＳＷ０３３２９１、ＳＷ２０６９８０、およびＳＷ２２０６９９２の濃度による、ＣｅｌｌＴｉｔｒｅーＧｌｏレベルへの影響は見られない。

【0262】

図３９は７つのＳＷ０３３２９１類似体、ＳＷ２０８０６４、ＳＷ２０８０６５、ＳＷ２０８０６６、ＳＷ２０８０６７、ＳＷ２０８０６８、ＳＷ２０８０６９、ＳＷ２０８０７０の構造を示す。

【0263】

表４は、４つの類似体、ＳＷ２０８０６４、ＳＷ２０８０６５、ＳＷ２０８０６６、ＳＷ２０８０６７の特性の表にまとめた概要を提供し、特にこれら４つの化合物の各々の２．５ｎＭの組換え１５ーＰＧＤＨに対するＩＣ５０を列挙する。

【表3】

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【0264】

阻害までの時間は、薬物が反応混合物に添加された瞬間からの、１５ーＰＧＤＨによるＮＡＤＨの生成を阻害するのに必要とされる時間を示す。ΔＴｍは、薬物の存在下（補因子ＮＡＤＨもまた存在する）での、組換え１５ーＰＧＤＨの融解温度のシフトを示す。完全な細胞系レポーター誘導の濃度は、ルシフェラーゼアッセイにより測定される、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ遺伝子融合レポーターカセットの最大誘導を達成するために、レポーター細胞系に添加される必要がある薬物の濃度を示す。肝細胞安定性は、培養中の肝細胞の存在下での化合物の半減期を示す。毒性は、細胞培養アッセイにおける、細胞数を減少させるのに必要とされる化合物の濃度を示す。

【0265】

図４０は、３つの異なる結腸癌細胞系、Ｖ９ｍ、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３に導入された１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合遺伝子レポーターを誘導する際の、化合物の各々の活性を表すグラフで示した概要を提供する。結果は、細胞を２．５μΜまたは７．５μΜのいずれかの化合物濃度の化合物に曝露した後の、ルシフェラーゼ活性のアッセイにより測定する。

【0266】

図４１は、化合物を２．５μΜおよび７．５μΜで添加した場合の、組換え１５ーＰＧＤＨ酵素の酵素活性の阻害における化合物の各々の活性を表すグラフで示した概要を提供する。１００％阻害は酵素の完全阻害に対応する。

【0267】

図４２は、ある範囲の濃度のＳＷ２０８０６４、ＳＷ２０８０６５、ＳＷ２０８０６６、およびＳＷ２０８０６７にわたってインキュベートした場合の、２．５ｎＭの組換え１５ーＰＧＤＨを阻害するためのＩＣの測定を示す。各グラフのＹ軸は１５ーＰＧＤＨ酵素活性のパーセント阻害を記録する。１００％阻害は酵素の完全阻害に対応する。各グラフのＸ軸はｎＭで表した阻害剤濃度のｌｏｇを記録する。

【0268】

実施例５
ＳＷ０３３２９１の毒性の分析
表５は、ＳＷ０３３２９１の毒性に対して評価した対照またはＳＷ０３３２９１処置群における一群の８ー１２週齢雄ＦＶＢマウスの概要を示し、研究の各群に６匹のマウスである。

【表4】

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【0269】

図４３はＳＷ０３３２９１、ＳＷ２０８０６４、ＳＷ２０８０６５、ＳＷ２０８０６６、およびＳＷ２０８０６７のＶ９ｍ細胞系バックグラウンドにおける、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合遺伝子レポーターの誘導に対する用量反応曲線を示す。

【0270】

図４４は、図３７に対して説明した同じ実験設計において、ＩＬ１ーβで刺激したＡ５４９細胞の培地におけるＰＧＥ２レベルに対する効果を測定するアッセイにおける、１５ーＰＧＤＨ阻害剤化合物の滴定曲線を示す。１００ｎΜ濃度の薬物では、培地中の最高レベルのＰＧＥ２が、ＳＷ２０８０６６で、またはＳＷ２０８０６７で細胞を処理することにより達成され、その後、培地中の次の最高レベルのＰＧＥ２が、細胞をＳＷ０３３２９１で処理することにより達成される。

【0271】

図４５はビヒクルまたはＳＷ０３３２９１でＩＰにて、５ｍｇ／ｋｇで１日２回、２１日間処置した一群の８ー１２週齢ＦＶＢマウスの毎日の体重を示す。ＳＷ０３３２９１を１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中、１２５μｇ／２００μｌの濃度で投与した。図示されるように、ビヒクルおよび薬物処置マウスのどちらも２１日の期間中等しい体重増加を示し、ＳＷ０３３２９１がマウス体重を低減させる証拠はない。ＳＷ０３３２９１処置群およびビヒクル処置群の両方においてＮ＝６マウス。

【0272】

実施例６
骨髄機能に対するＳＷ０３３２９１の効果の分析
この実施例はＳＷ０３３２９１の骨髄機能に対する効果を示す。

【0273】

図４６（ＡーＣ）は野生型マウス対１５ーＰＧＤＨに対しホモ接合遺伝子ノックアウトであるマウス（ＰＧＤＨー／ーマウス）の骨髄の分析を示す。総骨髄細胞充実性および系統陰性（ＳＫＬ）細胞におけるＳｃａ１＋／ｃーＫｉｔ＋細胞のパーセントは両方の組のマウスにおいて同じである。しかしながら、１５ーＰＧＤＨー／ーマウス由来の骨髄は、骨髄をメチルセルロース（ｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｏｓｅ）中に蒔くと生成される造血コロニーの数においておよそ５０％の増加を示す。実験条件を図に示す。１５ーＰＧＤＨノックアウトマウスは、ラベルＰＧＤＨー／ーおよびラベル１５ーＰＧＤＨにより示される。

【0274】

図４７は、骨髄を、野生型マウスから収集し、エクスビボで氷上にて、２時間、ＳＷ０３３２９１（０．５μΜ）、または１μΜのＰＧＥ２または１μΜの１６，１６ージメチルＰＧＥ２（ｄｍＰＧＥ２）のいずれかと共にインキュベートしたアッセイを示す。処理した骨髄を再び、その後、造血コロニーの計数のためにメチルセルロースに蒔く。ＳＷ０３３２９１処理した骨髄は再び、生成されたコロニーから誘導された骨髄の数においておよそ５０％の増加を示す。これらの条件下では、ＰＧＥ２で処理した骨髄では、より少ない増加が見られ、ｄｍＰＧＥ２で処理した骨髄では、わずかに大きな増加が見られる。

【0275】

図４８（ＡーＣ）は、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中で、５ｍｇ／ｋｇまたは２０ｍｇ／ｋｇの用量にて投与されたＩＰ ＳＷ０３３２９１で処置したＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスの研究を示す。パネルＡはマウス骨髄細胞充実性、白血球数（ｗｂｃ）、赤血球数（ｒｂｃ）および血小板数を示す。パネルＢは、系統陰性（ＳＫＬ）細胞中のＳｃａ１＋／ｃーＫｉｔ＋細胞のパーセントは、ＳＷ０３３２９１処置マウスでは変化しないことを示す。パネルＣは、ＳＷ０３３２９１処置マウス由来の骨髄は、骨髄をメチルセルロース（ｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｏｓｅ）中に蒔くと生成される造血コロニーの数においておよそ３０％の増加を生じさせることを示す。実験条件を図に示す。

【0276】

図４９（ＡーＢ）は、ＳＷ０３３２９１で５ｍｇ／ｋｇ ＩＰにて毎日、３回用量に対し、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中にて処置したまたはビヒクル単独で処置した、ＣＤ４５．２抗原標識Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス由来の骨髄の分析を示す。第３日に、マウスを屠殺し、骨髄をフラッシングし、１：１比でビヒクル処理ＣＤ４５．１骨髄と混合した。２００万個の全ＢＭ細胞を致死的に照射されたＣＤ４５．１マウスの尾部静脈に注入し、パーセントキメラ化をフローサイトメトリーにより８、１２、１６週に測定した。図示されるように、１２および１６週に、ＣＤ４５．２標識細胞のパーセント血液キメラ化は、ビヒクル対照処置ドナーマウスとは対照的に、ＣＤ４５．２標識骨髄をＳＷ０３３２９１処置ドナーマウスから収集したレシピエントマウスにおいて著しく増加した。言い換えれば、ＳＷ０３３２９１処置マウス由来の骨髄は、対照骨髄との競合において、長期適応度増加を証明した。特に、１６週では、ＳＷ０３３２９１処置マウスから収集したＣＤ４５．２は、ＢおよびＴ細胞集団への寄与の著しい増加を示し、ＳＷ０３３２９１処置マウス由来の骨髄がリンパ球集団のより早い再構成および免疫能力へのより早い回復を促進することが示唆される。

【0277】

追加の研究では、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスに１１Ｇｙを第０日に照射し、続いて、ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇでＩＰにて１日２回（ｂｉｄ）、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中で、またはビヒクルのみで、２１日間処置する。ビヒクルまたはＳＷ０３３２９１で処置したマウスは全て、ドナーＣ５７ＢＬ／６Ｊマウス由来の骨髄の同種移植片を１００，０００細胞、２００，０００細胞、５００，０００細胞のいずれかの用量で受ける。３匹の対照および３匹のＳＷ０３３２９１マウスを、各条件で評価する。実験設計を、図５０に示す。

【0278】

表６は、研究の最初の１９日にわたる各コホートにおける生存マウスの数を示す。この研究中のマウスコロニーの条件下で、１００，０００ー５００，０００細胞を受ける対照マウスは全て、研究の第４ー１３日の間に死亡している。対照的に、５００，０００細胞を受けた２匹のＳＷ０３３２９１処置マウスは、研究の第１９日に生き続け、完全造血再構成を有すると推定される。よって、１５ーＰＧＤＨ阻害剤ＳＷ０３３２９１による処置は、骨髄移植を受けたマウスの生存を促進し、この知見は、ＳＷ０３３２９１は、移植されたマウスにおいてより迅速で完全な造血再構成を可能にすることと一致する。ＳＷ０３３２９１と同様の活性を有する他の１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、造血再構成のサポートにおいて、同様の活性を有すると予測されるであろう。ＳＷ０３３２９１による処置はまた、マウスに、標準的に必要とされる１，０００，０００細胞よりも、少ないドナー骨髄の接種材料をうまく移植させることができた。これらの知見は、ＳＷ０３３２９１、ならびに他の同様の１５ーＰＧＤＨ阻害剤は、より少ない数のドナー幹細胞の移植の成功をサポートすることができることを示唆する。そのような活性は、ドナー細胞数が制限される、臍帯幹細胞の移植などの設定において特に有用であろう。ＳＷ０３３２９１で処置した、移植を受けたマウスの生存の改善は、骨髄、造血幹細胞、および臍帯血幹細胞移植片を受ける患者のサポートにおいて普通に使用される他の処置または成長因子にとって代わるものとしての、またはその使用を減少させる際での、ＳＷ０３３２９１、および同様の１５ーＰＧＤＨ阻害剤の効力を示唆する。ＳＷ０３３２９１で処置した、移植を受けたマウスの生存の改善は、ＳＷ０３３２９１、およびさらに広げて、他の同様の１５ーＰＧＤＨ阻害剤が、移植されたマウスにおける感染症を低減させる、および／またはマウス腸の放射線によるダメージからの回復を促進する、および／または放射線からの肺毒性を低減させるのに活性を有することと一致する。

【表5】

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【0279】

実施例７
放射線生存に対するＳＷ０３３２９１の効果の分析
この実施例は、全身照射を受けたマウスにおけるＳＷ０３３２９１の効果の研究を示す。

【0280】

表７は、７Ｇｙ、９Ｇｙ、まらは１１Ｇｙが照射され、毎日、ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇをＩＰにて、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中、７回用量に対して受け、またはビヒクルのみを受けた１５週齢Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌マウスの研究の結果を示す。表は、連続する研究日でのマウス生存数を示す。この実験中のマウスコロニーの条件下では、致死的線量の１１Ｇｙを受けたマウスは、ＳＷ０３３２９１で処置された場合、ビヒクル対照を受けた場合に比べ、４８時間長く生存し、対照マウスは全て第８日に死亡し；一方、ＳＷ０３３２１９処置マウスは全て第１０日に死亡した。

【表6】

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【0281】

表８は、ビヒクル対照または、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中のＳＷ０３３２９１ ＩＰのいずれかで処置した、１１Ｇｙで処置したマウスの連続する研究日でのマウス生存数を示し、ＳＷ０３３２９１は、５ｍｇ／ｋｇを毎日７日間、５ｍｇ／ｋｇを毎日研究を通して、または５ｍｇ／ｋｇを１日２回７日間のいずれかで投与した。また、これらの投与スケジュールのいずれでも、ＳＷ０３３２９１で処置したマウスは、ビヒクル対照を受けたマウスよりも平均１ー２日長く生存する。放射線の毒性効果に対する抵抗性を促進する際のＳＷ０３３２９１の活性は、他の同様の毒性傷害、例えば、限定はされないが、シトキサン、フルダラビン、化学療法および免疫抑制療法に対する抵抗性を促進する際のＳＷ０３３２９１および他の同様の１５ーＰＧＤＨ阻害剤まで拡大し得る。

【表7】

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【0282】

実施例８
部分肝切除後の肝臓再生に対するＳＷ０３３２９１の効果の分析
この実施例は部分肝切除後のマウスにおける肝臓再生に対するＳＷ０３３２９１の効果を評価する研究を示す。

【0283】

図５１はマウス肝臓の解剖およびＭｉｔｃｈｅｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ， ３， １１６７ー１１７０ （２００８）において記載される部分肝切除手順の図を示し、この場合、中葉および左側葉が切除され、その後、肝臓再生が残りの右葉および尾状葉の肥大により観察される。総切除はマウス肝臓質量のおよそ７０％である。これらの研究ではマウスは、二酸化炭素吸入を用いて安楽死させた。マウスの身体を、その全体として秤量した。肝臓をマウスから除去し；外科的切除に由来する壊死性残遺物を整え；再生した肝臓を秤量した。

【0284】

図５２（ＡーＤ）は、マウス肝臓の解剖観察を示す。左側の写真は、手術前観察であり、右側の写真は切除後観察である。上２つの写真は、肝臓の前側観察を示し、左側は、中葉および側葉の一部を表示する。下の２つの写真は、肝臓の下側の観察を示し、左側は側葉を表示する。部分肝切除手順では、中葉および側葉は右側に図示されるように切除される。

【0285】

左側の図５３（ＡーＤ）はマウス肝臓の肝切除直後観察の写真を繰り返し、上には前側観察が、下には下側観察が示される。右上の図は手術後第（ＰＯＤ）１０日での、再生した肝臓のインサイチュー観察を示し、残遺右葉および尾状葉の肥大が示される。右下の写真は、マウス身体から除去した後の再生肝臓の前側観察を示す。右上肝臓縁の白っぽい領域は、切除由来の壊死性断端であり、秤量前に整える。

【0286】

第１の研究を毎日、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中のＳＷ０３３２９１を５ｍｇ／ｋｇでＩＰにて、対ビヒクルのみを受けた１０週齢雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスで実施し、毎日、各時間点で屠殺した５匹の対照および５匹のＳＷ０３３２９１レシピエントマウスを用いて、肝臓再生について評価した。この研究では、ケタミン麻酔を使用した。

【0287】

図５４（ＡーＢ）は、手術後第３日（ＰＯＤ３）での、ＳＷ０３３２９１処置マウス対対照マウスにおける、ヘマトキシリンおよびエオシン染色肝臓の顕微鏡写真を示し、有糸分裂像が左側のＳＷ０３３２９１処置マウス肝臓では黄色の矢印により、右側の対照マウス肝臓では緑色の矢印により示される。

【0288】

図５５は、手術後２〜５日（２Ｄー５Ｄ）でのＳＷ０３３２９１処置対対照マウスの肝臓における強拡大視野あたりの有糸分裂の数のグラフを示す。有糸分裂像を５個の肝臓／ＳＷ０３３２９１または対照マウス／日の各々由来の１０個の強拡大視野（４０Ｘ）でカウントした。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、第３および４日に、対照に比べ、著しく増加した肝臓有糸分裂を証明した。

【0289】

表９は、手術後２〜５日（２Ｄー５Ｄ）での、対照対ＳＷ０３３２９１処置マウスの肝臓においてカウントしたランダムな強拡大視野あたりの有糸分裂の数を示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、手術後、第３および４日に、有糸分裂肝細胞の著しく増加した数を示す。

【表8】

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【0290】

図５６は対照対、５ｍｇ／ｋｇのＳＷ０３３２９１がＩＰにて毎日（ｑｄ）手術後第０日から開始して、期間中ずっと継続して注射された、ＳＷ０３３２９１処置Ｃ５７Ｂｌ／６ｊマウスにおける部分肝切除後に得られる肝臓対体重比を示す。グラフは手術後第２ー７日（ＰＯＤ２ー７）の値を表示する。マウスのＳＷ０３３２９１ ｑｄ注射群は、手術後第４ー７日から、より高い肝臓対体重比を達成し、増加は手術後第４日および第７日に統計的に有意である。

【0291】

追加のマウス群はＳＷ０３３２９１５ｍｇ／ｋｇを１日２回（ｂｉｄ）受け、手術後第３日に分析し、データをＰＯＤ３ｂとしてグラフ化した。このマウス群もまた、対照マウスに比べ、肝臓対体重比の統計的に有意な増加を示した。

【0292】

５ｍｇ／ｋｇをＩＰにて１日２回（ｂｉｄ）与えられるＳＷ０３３２９１の、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスにおける肝臓再生に対する効果を試験する別の研究を実施した。研究の各時間点の分析のために、１０匹のマウスを対照で、１０匹のマウスを薬物処置群で使用した。研究はまた、毎日、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中のＳＷ０３３２９１を５ｍｇ／ｋｇでＩＰにて、対ビヒクルのみを受けた１０週齢雄マウスを使用し、１０匹の薬物処置および１０匹の対照マウスを毎日、比較のために屠殺した。この研究ではケタミン麻酔を使用した。

【0293】

図５７は、対照対、５ｍｇ／ｋｇのＳＷ０３３２９１がＩＰで１日２回（ｂｉｄ）、手術後１時間に開始して、期間中ずっと継続して注射された、ＳＷ０３３２９１処置Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスにおいて、部分肝切除後に得られた肝臓対体重比のグラフを示す。グラフは、手術後第２ー７日（ＰＯＤ２ー７）の値を表示する。マウスのＳＷ０３３２９１ ｂｉｄ注射群は、手術後第３、４、および７日に、対照マウスに対し、統計的に有意なより高い肝臓対体重比を示す。

【0294】

図５８は、対照マウス対ｓｗ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇでＩＰにて１日２回処置したマウスにおける、部分肝切除後に得られた肝臓対体重比のグラフを繰り返す。ブルーボックス内に含まれるデータでは、薬物は手術後１時間に開始し、肝臓対体重比の著しい増加が手術後第（ＰＯＤ）３日からずっと、薬物処置マウスにおいて見られる。レッドボックス内に含まれるデータでは、ｓｗ０３３２９１の最初の用量が手術前１時間に開始して送達され、肝臓対体重比の著しい増加が、早くも手術後第１日、手術の次の日に見られる。

【0295】

図５９（ＡーＢ）は、１匹の対照マウス対、ｓｗ０３３２９１で５ｍｇ／ｋｇ ＩＰにて１日２回（ｂｉｄ）処置した１匹のマウスにおける、部分肝切除後の血清ＡＬＴレベルのグラフを示す。手術後第１日の値を左側で比較し、手術後第２ー７日の値を右側で比較する。ＡＬＴ値は薬物処置マウスでより低い。

【0296】

図６０は、１匹の対照マウス対、ＳＷ０３３２９１で５ｍｇ／ｋｇ ＩＰにて１日２回（ｂｉｄ）、手術後第（ＰＯＤ）１ー７日に処置した１匹のマウスにおける、部分肝切除後の血清ビリルビンレベルのグラフを示す。

【0297】

別の研究では、ＳＷ０３３２９１を、ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇがＩＰにて１日２回（ｂｉｄ）投与され、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中で投与されたＦＶＢマウス系統を使用する部分肝切除モデルにおいて、手術後第（ＰＯＤ）１ー７日の各時間点での分析のために、５匹の処置マウス対、ビヒクルのみで処置した５匹の対照マウスを用いて試験した。この研究ではケタミン麻酔を使用した。

【0298】

図６１は、５ｍｇ／ｋｇ ＩＰ ＳＷ０３３２９１で処置したＦＶＢマウス対ビヒクルのみで処置した対照マウスにおいて、部分肝切除後に得られた肝臓対体重比のグラフを示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、手術後第２ー７日に肝臓対体重比の増加を示し、増加はＰＯＤ、２，３、４および７で統計的に有意である。

【0299】

別の研究では、ＳＷ０３３２９１を、ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇ ＩＰを１日２回（ｂｉｄ）、手術前１時間に開始して投与したＦＶＢマウス系統を使用する部分肝切除モデルにおいて試験した。１０週齢雄マウスを使用し、１０匹の処置マウスおよび１０匹の対照マウスを手術後第（ＰＯＤ）１ー７日の各時間点での分析のために使用した。この研究ではイソフルラン麻酔を使用した。ビヒクル処置１５ーＰＧＤＨノックアウト（ＫＯ）マウスもまた、追加の比較体として使用した。

【0300】

図６２は手術後第２、３、４および７日に肝臓再生の分析のために使用されるＦＶＢマウスの手術前体重を表すグラフを示す。各々の日に使用されるＳＷ０３３２９１および対照処置マウスは、よく一致している。

【0301】

図６３は、ＳＷ０３３２９１またはビヒクル対照のいずれかで処置し、手術後第（ＰＯＤ）２、３、４、および７日に肝臓再生に対してアッセイされたマウスから切除した肝臓セグメントの重量（切除したＬＷｔ）を表すグラフを示す。切除した肝臓の重量は、第７日を除く各々の日に、対照および薬物処置マウス間で、よく一致し、第７日には、切除した肝臓の重量が、対照マウスよりもＳＷ０３３２９１処置マウスにおいて大きかった。

【0302】

図６４は、手術後第２、３、４および７日（ＰＯＤ２、３、４、７）に、ＳＷ０３３２９１および対照マウスにおいて、部分肝切除後に得られた肝臓重量（再生した＿ＬＷｔ）を表すグラフを示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは全ての時間点で、対照マウスよりも著しく大きな肝臓重量を示し、ＳＷ０３３２９１処置マウスは、手術後第７日に、対照マウスよりもおよそ２５％大きな肝臓重量を有する。

【0303】

図６５は、ＳＷ０３３２９１および対照マウスにおいて、手術後第２、３、４および７日（ＰＯＤ２、３、４、７）に、部分肝切除後に得られた肝臓対体重比（ＬＢＷＲ）を表すグラフを示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、全ての時間点で、対照マウスよりも著しく大きな肝臓対体重比を示し、ＳＷ０３３２９１処置マウスは、手術後第７日に、対照マウスよりもおよそ２０％大きな肝臓対体重比を有する。

【0304】

図６６は、１日２回、ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇまたはビヒクル対照で処置したＦＶＢマウスの部分肝切除後の、手術後第４日での肝臓対体重比を比較する「箱ひげ」プロットを示し、各群１０匹のマウスである。太線は母集団中央値を示す。上ボックスマージンは上四分位値の下境界を示す。下ボックスマージンは、下四分位値の上境界を示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、Ｐ＝０．００４にて著しく増加した肝臓対体重比を示す。

【0305】

図６７は、１日２回、ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇまたはビヒクル対照で処置したＦＶＢマウスの部分肝切除後の、手術後第７日での肝臓対体重比を比較する「箱ひげ」プロットを示し、各群１０匹のマウスである。太線は母集団中央値を示す。上ボックスマージンは上四分位値の下境界を示す。下ボックスマージンは、下四分位値の上境界を示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、Ｐ＝０．００１にて著しく増加した肝臓対体重比を示す。

【0306】

図６８は、１日２回、ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇまたはビヒクル対照で処置したＦＶＢマウスの部分肝切除後の、手術後第４日での肝臓対体重比を比較する「箱ひげ」プロットを示し、各群１０匹のマウスである。ビヒクルのみで処置した１５ーＰＧＤＨノックアウトマウス（ＰＧＤＨーＫＯ）の、手術後第４日での肝臓対体重比もまた、示す。太線は母集団中央値を示す。上ボックスマージンは上四分位値の下境界を示す。下ボックスマージンは、下四分位値の上境界を示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、Ｐ＝０．００１にて著しく増加した肝臓対体重比を示す。１５ーＰＧＤＨノックアウトマウスもまた、ビヒクル処置１５ーＰＧＤＨ野生型マウスよりも大きな肝臓対体重比を示し、ＳＷ０３３２９１の肝臓再生活性が、１５ーＰＧＤＨの阻害により媒介されることを支持する。１５ーＰＧＤＨ遺伝子ノックアウトのより大きな効果は、ＳＷ０３３２９１の効果のさらなる増加は、投与スケジュールおよび送達の追加の改変により達成することができることを示唆する。

【0307】

図６９はＳＷ０３３２９１処置およびビヒクル処置対照マウスの肝臓における、手術後第２日での、部分肝切除後のＳ期細胞の可視化を示す。マウスにＢｒｄＵを５０ｍｇ／ｋｇでＩＰにて、屠殺２時間前に注射し、その後、肝臓をＤＮＡに組み込まれたＢｒｄＵを検出する抗体で染色することにより、Ｓ期細胞を可視化した。１０Ｘ倍率での代表的な視野はＳＷ０３３２９１処置肝臓におけるＢｒｄＵ陽性細胞の数の明確な増加を示す。

【0308】

図７０は図６９の研究からの代表的な視野の強拡大（４０Ｘ）観察を示す。

【0309】

図７１は、部分肝切除後の、手術後第２日での、ＳＷ０３３２９１処置対ビヒクル対照処置マウスの肝臓におけるＢｒｄＵ陽性細胞のパーセントを比較する「箱ひげ」プロットを示す。１０匹の薬物処置マウスの各々および１０匹の対照ビヒクル処置マウスの各々由来の１０個の視野としてカウントした、１００のランダム強拡大視野（４０Ｘ倍率）からのパーセントＢｒｄＵ陽性細胞を、各群においてプロットする。黒い太線は各分布の中央値を示す。上ボックスマージンは上四分位値の下境界を示す。下ボックスマージンは、下四分位値の上境界を示す。ＳＷ０３３２９１は、手術後第２日にＳ期細胞中央値の、２倍を超える増加を示す（Ｐ＜０．０５）。

【0310】

実施例９
アセトアミノフェン（タイレノール）過剰投与後の生存に対するＳＷ０３３２９１の効果の分析
この実施例は、致死量の肝臓毒素アセトアミノフェン（タイレノール）に対する抵抗性の媒介におけるＳＷ０３３２９１の効果を示すデータを提供する。

【0311】

研究では、１１週齢雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、６００ｍｇ／ｋｇのＬＤ５０用量で投与される、アセトアミノフェンを含むリン酸緩衝生理食塩水の懸濁液をＩＰ注射する。

【0312】

表１０は、すべて、６００ｍｇ／ｋｇのＬＤ５０用量でＩＰ投与される、アセトアミノフェン（タイレノール）を含むリン酸緩衝生理食塩水で処置した、６匹のマウスの最初のコホートからのマウス生存数の表にまとめた概要を提供する。

【表9】

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【0313】

試験マウスはさらに、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中のＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇでＩＰにて、アセトアミノフェン直後に開始し、１日１回、または１日２回で継続して処置する。対照マウスはさらに、ビヒクルのみで１日１回または１日２回処置する。生存を、アセトアミノフェンの投与の０時間点から、その後の１２０時間を通して記録する。ＳＷ０３３２９１処置および対照マウスの生存間では違いは顕著でない。

【0314】

表１１は、すべて、６００ｍｇ／ｋｇのＬＤ５０用量でＩＰ投与される、アセトアミノフェン（タイレノール）を含むリン酸緩衝生理食塩水で処置した１２匹の１１週齢Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌マウスの最初のコホートからのマウス生存数の概要を示す。マウスはさらに、ＳＷ０３３２９１またはビヒクル対照のいずれかで処置する。

【表10】

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【0315】

ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇを、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中で１日２回（ｂｉｄ）、アセトアミノフェン注射前４８時間に開始し、アセトアミノフェン注射後４８時間継続して、合計９用量に対してＩＰ投与した。アセトアミノフェン注射後１２０時間で、１２匹のマウスのうち１０匹が、ＳＷ０３３２９１処置コホートで生存し、対して、ビヒクル対照処置コホートでは、１２匹のマウスのうち５匹が生存し、片側フィッシャー直接確率法ではＰ＝０．０４５である。よって、ＳＷ０３３２９１の前投与はアセトアミノフェンの致死的肝毒性から保護する。

【0316】

表１２は６００ｍｇ／ｋｇのＬＤ５０用量でＩＰ投与される、アセトアミノフェン（タイレノール）を含むリン酸緩衝生理食塩水で処置した６匹の１１週齢Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雌マウスの最初のコホートからのマウス生存数の概要を示す。

【表11】

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【0317】

マウスをさらに、ＳＷ０３３２９１またはビヒクル対照のいずれかで処置する。ＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇを、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中で１日２回（ｂｉｄ）、アセトアミノフェン注射前３時間に開始して、アセトアミノフェン注射後０〜４８時間継続して、合計６用量に対してＩＰ投与した。アセトアミノフェン注射後１２０時間で、ＳＷ０３３２９１処置コホートでは６匹のマウスのうち３匹が生存し、対して、ビヒクル対照処置コホートでは、６匹のマウスのうち２匹が生存した。

【0318】

表１３は、６００ｍｇ／ｋｇのＬＤ５０用量でＩＰ投与される、アセトアミノフェン（タイレノール）を含むリン酸緩衝生理食塩水で処置した、７匹のＣ５７ＢＬ／６Ｊ ２５週齢雌１５ーＰＧＤＨ野生型（ＷＴ）または７匹のＣ５７ＢＬ／６Ｊ ２５週齢雌１５ーＰＧＤＨノックアウト（ＫＯ）マウスの最初のコホートからのマウス生存数の概要を示す。

【表12】

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【0319】

アセトアミノフェン注射後１２０時間で、７匹のノックアウトマウスのうち６匹が生存し、対して、７匹の野生型マウスのうち３匹が生存した。１５ーＰＧＤＨノックアウトマウスの生存の増加は、ＳＷ０３３２９１の生存利益が、１５ーＰＧＤＨの阻害に媒介されることと一致する。

【0320】

実施例１０
デクスタン（ｄｅｘｔａｎ）硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘導大腸炎に対するＳＷ０３３２９１の効果の分析
この実施例は、デキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）処置マウスにおける大腸炎の誘導の防止に対するＳＷ０３３２９１の効果の研究からのデータを提供する。研究では、８ー１２週齢ＦＶＢ雄マウスに、２％ＤＳＳを含む飲料水を第１ー７日間与え、その後、第８日に開始して正常飲料水に切り換え、第２２日まで継続した。マウスを１日２回、１２５μｇ／２００μｌの、１０％エタノール、５％クレモフォールＥＬ、８５％Ｄ５Ｗのビヒクル中のＳＷ０３３２９１ ５ｍｇ／ｋｇでＩＰにて、対してビヒクルのみで処置する。臨床スコアリング（体重、直腸出血、便の硬さ）を毎日記録し、内視鏡スコアリング（潰瘍数、粘膜肥厚、および血管パターン）を、第８、１１、１５日に評価する。マウスを、第１、８、１５および２２日に、結腸長、結腸重量、潰瘍数、潰瘍面積、および陰窩ダメージの評価のために屠殺する。

【0321】

表１４は、研究で使用される、２４匹のＳＷ０３３２９１処置マウスおよび２４匹の対照群マウスの齢および体重のベースライン特性の概要を示す。比較群として使用される４匹のＦＶＢ雄１５ーＰＧＤＨノックアウト（ＫＯ）マウスのベースライン特性もまた、提供される。

【表13】

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【0322】

図７２は、研究の２２日にわたる、対照対ＳＷ０３３２９１処置マウスのコホートのベースライン重量からの平均変化のグラフを示す。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、全ての時間点でより大きな体重を示し、特に、ＤＳＳの洗い流し後に、対照マウスよりもより速い体重増加を示す、Ｐ＝０．００１。

【0323】

図７３は、研究の２２日にわたる、対照対ＳＷ０３３２９１処置マウスのコホートの毎日の疾患活性指数（ＤＡＩ）のグラフを示す。疾患活性指数は、ベースライン重量からの変化、便の硬さ、および直腸出血の存在の均等加重平均として計算され、各成分は同一の数値範囲に及ぶように正規化される。ＳＷ０３３２９１処置マウスは、研究の各々の日に、対照よりも低い疾患活性指数を示す、Ｐ＜０．００１。

【0324】

図７４は、脾弯曲部までの左結腸の大腸内視鏡検査を、生存マウスで、第８、１１および１５日に、イソフルラン麻酔下で実施した、研究設計を示す。加えて、全結腸の死後大腸内視鏡検査を、２匹のＳＷ０３３２９１処置および２匹の対照処置マウスに対し、第１５日に実施し、所見により、ＤＳＳに誘導された潰瘍形成は、脾弯曲部より遠位の下行結腸に主に限定されることが確認された。

【0325】

図７５（ＡーＢ）は左下に粘膜血管パターンの損失および肉眼的潰瘍形成を示すＤＳＳ処置対照マウスの大腸内視鏡検査中に可視化された結腸を示す。右下には、ＳＷ０３３２９１を摂取したＤＳＳ処置マウスの大腸内視鏡所見が示され、小さな潰瘍のみが存在し、それ以外では正常粘膜血管パターンが維持される。上のグラフは、第８、１１、および１５日に、対照対ＳＷ０３３２９１処置マウスにおいて存在する潰瘍数を示す。ＳＷ０３３２９１処置は３分の２の潰瘍形成を防止する。１５ーＰＧＤＨノックアウトマウスの追加の研究は、１５ーＰＧＤＨ遺伝子ノックアウトは９５％の結腸潰瘍形成を防止することを示す。これらの所見は、ＳＷ０３３２９１の大腸炎防止活性は、その１５ーＰＧＤＨ阻害剤としての活性を介して媒介されることを支持し、薬物投与および送達のさらなる改変は、追加の大腸炎防止を提供し得ることを示唆する。

【0326】

図７６は、マウスのホルマリン固定結腸の全長をパラフィンブロックに包埋し、その後、潰瘍粘膜の可視化および測定のための全結腸長に沿ったランダム５μｍ切片の顕微鏡検査により決定される、ＤＳＳ処置マウスの第１５日での潰瘍負荷の定量を示す。グラフは、潰瘍粘膜の平均長は対照マウス（Ｎ＝９マウス）では４．４８ｍｍ／結腸切片であり、ＳＷ０３３２９１（薬物）処置マウス（Ｎ＝６マウス）では１．７４ｍｍの長さ／結腸切片に６１％だけ低減することを示す、Ｐ＝０．０４５。また、１５ーＰＧＤＨ遺伝子ノックアウト（ＫＯ）は、結腸潰瘍形成を防止するのに非常に有効であり、ＳＷ０３３２９１の治療効果が、１５ーＰＧＤＨの阻害により媒介されることが支持される。

【0327】

図７７（ＡーＢ）は、大腸炎重症度のマウス内視鏡指数（ＭＥＩＣＳ）（Ｂｅｃｋｅｒ Ｃ． ｅｔ ａｌ． Ｇｕｔ ２００５； ５４： ９５０ー９５４）による、マウス結腸粘膜のスコアリングの例を示す。上の（Ａ）では、ＳＷ０３３２９１を摂取したＤＳＳ処置マウスに対する大腸内視鏡所見およびＭＥＩＣＳスコアリングが示される。下の（Ｂ）では、ビヒクルのみを摂取したＤＳＳ処置マウスの大腸内視鏡所見およびＭＥＩＣＳスコアリングが示される。

【0328】

図７８は、ＳＷ０３３２９１（処置）対ビヒクル（対照）を摂取したＤＳＳ処置マウスに対するＭＥＩＣＳスコアのグラフを示す。ＭＥＩＣＳスコアは、研究の第８、１１および１５日に、ＳＷ０３３２９１処置マウスにおいて著しく低い大腸炎活性を示す。

【0329】

肉眼的目視検査およびＭＥＩＣＳ指数による大腸炎活性のスコアリングに加えて、マウスの全長結腸をホルマリン固定して、パラフィン包埋し、陰窩ダメージの顕微鏡スコアリングをＣｏｏｐｅｒ ＨＳ． Ｅｔ ａｌ．， Ｌａｂ Ｉｎｖｅｓｔ． １９９３；６９：２３８ー２４９の０ー４重症度スケールを用いて実施した。この分析のために、結腸を近位、中央、および遠位結腸、各々およそ１．６ｃｍの長さの３つのセグメントに分割し、各セグメントをさらに各々およそ４ｍｍの長さの４つの切片に分割した。各切片に対し、陰窩ダメージ重症度スコアに、ダメージ領域のｍｍで表した長さをかけ、０ー１６陰窩炎重症度指数を生成させた。平均陰窩炎重症度指数を、各セグメント（近位、中央、および遠位結腸）に対し計算し、合計した全結腸陰窩炎重症度指数を、０ー４８のスケールに基づき、各マウス結腸に対して決定した。視覚的ＭＥＩＣＳスコアと並行して、ＤＳＳプロトコルの第８日での顕微鏡的陰窩炎重症度指数は、ＳＷ０３３２９１処置マウス（３．１６の値）に比べ、対照マウス（９．４９の値）において著しく大きかった、Ｐ＜０．０５（データは記載するが、図には示さない）。

【0330】

図７９はＤＳＳ処置マウスの結腸粘膜における、ＤＮＡ合成の維持に対するＳＷ０３３２９１の効果の評価を示す。マウスに、ＢｒｄＵを１００ｍｇ／ｋｇでＩＰにて、屠殺３時間前に注射し、その後、全長結腸をホルマリン固定し、パラフィンに包埋させた。ＢｒｄＵをＤＮＡに組み入れたＳ期細胞を、５μｍの厚さの切片のＢｒｄＵを検出する抗体を用いた免疫蛍光染色により可視化させた。結腸陰窩を、上皮マーカーＥーカドヘリンに対する抗体を用いた免疫蛍光染色により可視化させた。写真挿入図は、ＤＳＳプロトコルの第８日での、対照マウス、ＳＷ０３３２９１処置マウス（処置）および１５ーＰＧＤＨノックアウトマウス（ＫＯ）由来の中央結腸から取った強拡大視野の顕微鏡写真を示す。赤色免疫蛍光は、ＢｒｄＵ陽性核を同定し、緑色免疫蛍光はＥーカドヘリン陽性結腸細胞を同定する。ＢｒｄＵ陽性細胞の数／陰窩は、二重標識赤色および緑色細胞の数／平均陰窩をカウントすることにより決定する。Ｓ期にない緑色のみの細胞はカウントせず、おそらく陰窩の外のストロマ細胞である赤色のみの細胞もまたカウントしない。示される顕微鏡写真では、陰窩は、対照およびＳＷ０３３２９１処置マウスでは垂直に配向するものとして表示され、陰窩は、１５ーＰＧＤＨノックアウトマウスでは水平に配向するものとして表示される。写真では、Ｓ期細胞の数は対照マウスで最も少なく、ＳＷ０３３２９１処置マウスで増加し、ノックアウトマウスでさらに増加する。図示される特定の写真では、対照マウス由来の陰窩はどちらもＳ期細胞を欠如しており、また、視覚的に高さが減少しており；一方、陰窩高さは、ＳＷ０３３２９１処置マウスから示された陰窩では増加し、陰窩高さは、１５ーＰＧＤＨノックアウトマウスから示される陰窩では、さらに増加する。グラフは、ＤＳＳ処置プロトコルの第１日、第８日、および第１５日での、対照（Ｃｎ）、ＳＷ０３３２１９処置（Ｔｘ）、および１５ーＰＧＤＨノックアウトマウス（ＫＯ）の、遠位結腸におけるＢｒｄＵ陽性細胞の平均数／陰窩＋中央結腸におけるＢｒｄＵ陽性細胞の平均数／陰窩の合計を示す。第８日では、ＳＷ０３３２９１処置マウスは、対照マウスよりも５．７倍大きなＢｒｄＵ陽性細胞数を証明し、対照マウスはＢｒｄＵ陽性細胞／陰窩の第１日の値の８５％を損失した。１５ーＰＧＤＨノックアウトマウスは、第８日で、陰窩中のＢｒｄＵ陽性細胞の損失を示さず、ＳＷ０３３２９１の保護効果が１５ーＰＧＤＨの阻害により媒介されることと一致する。

【0331】

表１５は、ＳＷ０３３２９１処置マウス、対ビヒクル処置対照マウス、対１５ーＰＧＤＨノックアウト（ＫＯ）マウスにおける、第８、１５および２２日に屠殺されたＤＳＳ処置マウスにおける結腸長（ｃｍで表す）の概要を示し、ここで、結腸の短縮は疾患活性の測定値である。

【表14】

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【0332】

ビヒクル処置対照マウスは、第２２日にＳＷ０３３２９１処置マウスに対して著しく大きな結腸短縮を示す、Ｐ＝０．０１２。この比較をまた、図８０でグラフにより示す。

【0333】

表１６は、ＳＷ０３３２９１またはビヒクル対照を摂取したＤＳＳ処置マウスに対する、屠殺日でのマウス体重（ｇｍ）および結腸長（ｃｍ）の概要を示す。

【表15】

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【0334】

第２２日に、ＳＷ０３３２９１処置マウスは、より大きな体重およびより大きな結腸長を示し、ＤＳＳ誘導大腸炎に対する保護におけるＳＷ０３３２９１の治療効果を示す。

【0335】

実施例１１：リード化合物ＳＷ０５４３８４、１５ーＰＧＤＨ活性化剤の類似体の分析
この実施例は、ＳＷ０５４３８４の一群の構造類似体に関するデータを提供する。表１７上のデータは、Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ大学と共有される化学ライブラリからＣａｓｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｒｅｓｅｒｖｅ大学により得られた類似体を特徴付ける。表１８のデータは商業的供給源から注文した類似体である。表１９のデータは、化合物ライブラリーに保持された、または発明者らのグループのメンバーにより、Ｔｅｘａｓ ＳｏｕｔｈＷｅｓｔｅｒｎ大学で合成された類似体である。

【表16】

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【表17】

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【表18】

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【0336】

提供したデータは、レポーターを含むように操作され、２．５μΜまたは７．５μΜのいずれかの化合物で処理された、３つの結腸癌細胞系、Ｖ９ｍ、Ｖ５０３、およびＬＳ１７４Ｔにおける、基礎レベルに対するルシフェラーゼ活性の％誘導として記録される、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合遺伝子レポーターの誘導のレベルを含む。いくつかの化合物に対し、２．５μΜまたは７．５μΜの化合物で処理された組換え１５ーＰＧＤＨタンパク質の酵素活性の阻害もまた、記録される。いくつかの化合物に対し、インビトロアッセイにおいて組換え１５ーＰＧＤＨの酵素活性を阻害するための各化合物のＩＣ_５０もまた、記録される。加えて、選択された化合物では、ＩＬー１βで刺激された、化合物処理Ａ５４９細胞の培地では、ＰＧＥ２レベルの減少が記録される。加えて、選択された化合物では、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒーＧｌｏアッセイにより測定されたＡ５４９細胞生存率に対する効果、およびＡ５４９細胞コロニー形成に対する化合物の効果が記録される。

【0337】

我々は最初に、ＳＷ０５４３８４におけるペプチド結合に関与するアミノ基は、化合物ＭＣＤー０３ー０２５において図示されるように修飾することができること、誘導化合物はレポーター細胞系において１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーターの発現を活性化する能力を保持し、実際、親化合物ＳＷ０５４３８４よりも、試験管において、２μΜでは組換え１５ーＰＧＤＨのより低い阻害を示すことに注目した。

【0338】

我々はまた、ＳＷ０５４３８４のフェニル環へのフッ素（ＳＷ２０３７３６）または臭素（ＳＷ２０３７３７）の付加は、良好な耐容性を示し、細胞系において１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーター活性を誘導するのに活性である化合物が得られ、２．５μΜでは組換え１５ーＰＧＤＨを最小に阻害するという点で、親ＳＷ０５４３８３に比べ、同様であり、もしくは改善され、ならびに、ＩＬー１βで刺激された、化合物処理Ａ５４９細胞の培地では、ＰＧＥ２レベルを減少させるという点で、親ＳＷ０５４３８４に対し同様であり、もしくは改善されることに注目した。ＳＷ０５４３８４のフェニル環はまた、メトキシ基（ＳＷ２０２９４０）の付加に耐用性を示し、これにより、細胞系において１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーター活性を誘導するのに活性であり、２．５μΜでは組換え１５ーＰＧＤＨを阻害しないという点で親ＳＷ０５４３８４と同様である化合物が得られる。

【0339】

我々はまた、ＳＷ０５４３８４ペプチド結合中の窒素を（アリール）ーＮＨー基から環状アミンに変換した、ＳＷ１２５９９１とも呼ばれる化合物ＳＷ１２５５９１の有利な特性に注目した。この化合物は１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーターアッセイの誘導において活性を保持する。これは、高い化合物濃度で、リード酵素活性化剤ＳＷ０５４３８４よりも低い１５ーＰＧＤＨの阻害を示す。ＳＷ１２５９９１はＩＬ１ーβ刺激Ａ５４９細胞において、ＰＧＥ２レベルを低減させるのにＳＷ０５４３８４と同様の活性を示す。ＳＷ１２５９９１は、２４時間で実施したＣｅｌｌＴｉｔｅｒーＧｌｏアッセイに対する効果により評価すると毒性を示さない。その上、ＳＷ１２５９９１は代謝安定性において、著しい改善を示す。

【0340】

我々はまた化合物ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、およびＳＷ２０７９９８の有利な特性に注目した。これらの３つの化合物は、ＳＷ１２５９９１のように、全て、ＳＷ０５４３８４ペプチド結合中の窒素を（アリール）ーＮＨー基から環状アミンに変換している。加えて、ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、およびＳＷ２０７９９８は全て、ＳＷ０５４３８４中のフェニル環にメトキシ基を付加している。ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、およびＳＷ２０７９９８は全て、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ遺伝子融合レポーターコンストラクトを誘導するのに、ＳＷ０５４３８４と同じ、またはいくつかのアッセイでは、これより大きな活性を示し、全て、２．５μΜおよび７．５μΜで、ＳＷ０５４３８４よりもずっと小さな１５ーＰＧＤＨの酵素活性阻害を示す。

【0341】

実施例１２
下記実施例は、ＳＷ０５４３８４およびその類似体の合成を説明し、ならびに構造の質量分析ＮＭＲ確認を提供する。
一般手順１：

【化61】

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手順

【0342】

（ヘテロ）アリールアミンを、ＤＭＦ／ジオキサンの１：１混合物に溶解し（アミンに基づき１．２１５Ｍ）、０℃まで冷却した。ブロモアセチルブロミド（１．２６ｅｑｕｉｖ）を一滴ずつ添加し、室温まで一晩温めさせた。ジオキサンおよび過剰の酸臭化物を減圧下で除去し、２，５ージメトキシアニリン（３．５ｅｑｕｉｖ）を添加した。粗材料を、１２０℃まで３時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、セライトに通して濾過した。濾液を水（３×）、重炭酸ナトリウム、およびブラインで洗浄した。有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗アミド（１）を得た。生成物を、フラッシュクロマトグラフィーによりさらに精製して、純粋Ｎーアリールグリシンアミド１を得た。

【0343】

Ｎーアリールグリシンアミド（１）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１Ｍ）に溶解した。ピリジン（４．９ｅｑｕｉｖ）およびスルホニルクロリド（２）を添加し（１．３ｅｑｕｉｖ）、反応物を一晩撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、水（３×）およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粗スルホンアミド３を得た。生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。
一般手順２：

【化62】

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手順

【0344】

アニリン４（１ｅｑｕｉｖ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解した（４に基づいて１Ｍ）。ＤＭＡＰ（０．３ｅｑｕｉｖ）およびピリジン（４．９ｅｑｕｉｖ）を添加し、続いてスルホニルクロリド２（１ｅｑｕｉｖ）を添加した。反応物を３６時間撹拌し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、水、ＨＣｌ（１Ｍ）、重炭酸ナトリウム、およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去して、５を得た。

【0345】

精製なしで、二級スルホンアミド５（１ｅｑｕｉｖ）を、ＤＭＦ（０．１Ｍ）およびブロモ酢酸エチル（４ｅｑｕｉｖ）の溶液に溶解した。この溶液を、水素化ナトリウムに０℃で一滴ずつ添加した。バブリングを中止した後、反応物を室温まで温め、一晩撹拌させた。１２ー１８時間後、水を添加し、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２で３回抽出した。有機抽出物を合わせ、再び水で、続いてブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、油を得た。ヘキサンの添加により、粗生成物の沈殿が得られ、これを濾過により単離し、精製なしで使用した。

【0346】

エステル６を、３：３：１比のＭｅＯＨ：ＴＨＦ：水に溶解した。水酸化リチウムを添加し、反応物を完了するまで撹拌した（１ー３ｈｒ）。反応を減圧下で濃縮し、その後、ＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈した。酸（７）を飽和重炭酸ナトリウム中に抽出した。水層を１Ｍ ＨＣｌ（ｐＨ約５）で中和し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出して７を得、これを精製なしで使用した。

【0347】

一般手順２Ａ
酸７（１ｅｑｕｉｖ）を、ＥｔＯＡｃ（２ｖｏｌ）に溶解した。ピリジン（１ｖｏｌ）および二級アミン（１．１ｅｑｕｉｖ）を添加し、続いてＴ３Ｐ（２ｅｑｕｉｖ、５０％ＥｔＯＡｃ溶液）を添加し、反応物を一晩撹拌した。反応を、ＨＣｌ（０．５Ｍ、３ｖｏｌ）で停止させ、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水、重炭酸塩、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。化合物８Ａをフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。

【0348】

一般手順２Ｂ
一級アミン（１ｅｑｕｉｖ）、ＤＭＡＰ（０．３ｅｑｕｉｖ）およびＥＤＣＩ（１．３ｅｑｕｉｖ）を、酸７（１ｅｑｕｉｖ）を含むＣＨ_２Ｃｌ_２（０．５Ｍ）の溶液に添加した。反応バイアルを窒素でパージし、１２ー２４ｈ撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、ブライン、水、ＨＣｌ（１Ｍ）、重炭酸ナトリウムおよび再びブラインで洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、８Ｂを得た。必要なら、化合物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。

【0349】

一般手順２Ｃ：
アルコール（４ｅｑｕｉｖ）、ＤＭＡＰ（０．３ｅｑｕｉｖ）およびＥＤＣＩ（１．１ｅｑｕｉｖ）を、酸７（１ｅｑｕｉｖ）を含むＣＨ_２Ｃｌ_２（０．５Ｍ）の溶液に０℃にて添加した。５分後、反応物を室温まで温め、完了するまで撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、ブライン、ＨＣｌ（１Ｍ）、および水で洗浄した。有機相を、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、純粋エステル８Ｃを得た。
一般手順３

【化63】

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【0350】

手順：ピリジン（１．１ｅｑｕｉｖ）を二級アミン９を含むＴＨＦ（０．５Ｍ）の溶液に添加し、反応混合物を０℃まで冷却した。ブロモアセチルブロミド（１ｅｑｕｉｖ）をその後、一滴ずつ添加し、反応物を室温まで温めた。反応物を２時間、この温度で撹拌し、その後、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、ブロモアセトアミド１０を得、これをシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。

【0351】

一般手順３Ａ：アミド１０を含むＤＭＦ（０．０７５Ｍ）の溶液を、スルホンアミド１２（１．５ｅｑｕｉｖ；手順２におけるスルホンアミド５と同一の合成）、炭酸カリウム（２ｅｑｕｉｖ）、およびＤＭＦ（０．０７５Ｍ）の溶液に添加した。反応物を一晩撹拌し、その後、ＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄した。ＥｔＯＡｃを減圧下で除去して、粗１２を得、これをシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。

【0352】

一般手順３Ｂ：アミド１０を含むＤＭＦ（０．０７５Ｍ）の溶液をアニリン、炭酸カリウム（２ｅｑｕｉｖ）、およびＤＭＦ（０．０７５Ｍ）の溶液に添加した。反応物を一晩撹拌し、その後ＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄し、アミド粗１１を得、これを精製なしで使用した。

【0353】

ＤＭＡＰ（０．３ｅｑｕｉｖ）、ピリジン（４．９ｅｑｕｉｖ）およびその後、スルホニルクロリド（１ｅｑｕｉｖ）を、アミド１１を含むＣＨ_２Ｃｌ_２（１Ｍ）の溶液に添加した。反応物を１２ー２４時間撹拌し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、水、ＨＣｌ（１Ｍ）、重炭酸ナトリウム、およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、化合物を減圧下で濃縮して、スルホンアミド１２を得、これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。

【0354】

実施例１３：リード化合物ＳＷ０５４３８４、１５ーＰＧＤＨ活性化剤の選択した類似体の特性
この実施例はＳＷ０５４３８４の選択した類似体の特性に関するデータを提供する。

【0355】

図８１はＳＷ０５４３８４の選択した類似体の構造を示す。

【0356】

図８２（ＡーＣ）は、３つの異なる試験細胞系バックラウンド、Ｖ９ｍ、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３において、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合レポーターを誘導する際の活性レベルを表すグラフを示す。各化合物を２つの濃度、２．５μΜ、および７．５μΜで試験した。Ｙ軸はルシフェラーゼ活性である。１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーターを誘導するのに活性な化合物としては、ＳＷ２０３７０、ＳＷ２０３７０４、ＳＷ１２５９９１、ＳＷ２０３７３６、ＳＷ２０３７３７が挙げられる。

【0357】

図８３は、２．５μΜおよび７．５μΜの高い濃度で試験した時の、組換えｌ５ーＰＧＤＨの酵素活性を阻害する際の試験化合物の活性を示す。ＳＷ１２５９９１およびＳＷ２０３７３６は、高い濃度で、リード１５ーＰＧＤＨ活性化剤、ＳＷ０５４３８４よりも低い阻害活性を示す。これらの濃度のＳＷ２０３７３７は、ＳＷ０５４３８４と同様の、組換え１５ーＰＧＤＨに対する阻害活性を示す。

【0358】

図８４（ＡーＣ）は、左側（８４Ａ）で、ＩＬ１ーβによる処置によりＰＧＥ２を産生するように刺激された、Ａ５４９細胞の培地においてＰＧＥ２レベルを低下させる際の活性を示す。ＳＷ０５４３８４、ＳＷ２０３７０３、ＳＷ１２５９９１、ＳＷ２０３７３６、およびＳＷ２０３７３７を含む、試験した化合物は全て、ＰＧＥ２を低下させるのに活性を示し、１５ーＰＧＤＨ活性のインデューサーとしてのそれらのインビボでの作用と一致する。図８４Ｂは、右側で、試験した化合物のいずれも、処置の２４時間でのＣｅｌｌＴｉｔｒｅーＧｌｏアッセイレベルにより評価される、Ａ５４９細胞に対する毒性を証明しないことを示す。図８４Ｃは、下に、右上のＣｅｌｌＴｉｔｒｅーＧｌｏデータのグラフ表示と同じ順で左から右へ整理された、ＣｅｌｌＴｉｔｒｅーＧｌｏアッセイで試験したＡ５４９細胞の写真を示す。

【0359】

図８５は、マウス肝臓Ｓ９ミクロソームとのインキュベーションによる、ＳＷ０５４３８４の代謝安定性の測定を示す。測定された半減期は２１．７２分である。ＳＷ０５４３８４（２ｍＭ ＤＭＳＯ溶液）をマウスＳ９（Ｌｏｔ ＫＷＢ）画分および第Ｉ相（ＮＡＤＰＨ再生系）補因子と０ー２４０分インキュベートした。反応を１ｍＬ（１：１）のＭｅＯＨ／（＋）ＩＳ／０．２％ギ酸で停止させ、１５秒間ボルテックスし、ＲＴで１０分インキュベートし、５分間２４００ｒｐｍで回転させた。上清（１ｍＬ）をその後、エッペンドルフチューブに移し、卓上で回転させ、５分間、１３．２Ｋｒｐｍで冷却遠心分離した。上清（８００μＬ）をＨＰＬＣバイアル（インサートなし）に移し、ＨＰＬＣ／ＭＳにより分析した。Ａ：ｄＨ_２Ｏ＋０．１％ＦＡ Ｂ：ＭｅＯＨ＋０．１％ＦＡ

【0360】

図８６は、マウス肝臓Ｓ９ミクロソームとのインキュベーションによる、ＳＷ１２５９９１の代謝安定性の測定を示す。測定された半減期は、２０４分である。ＳＷ１２５９９１（２ｍＭ ＤＭＳＯ溶液）をマウスＳ９（Ｌｏｔ ＫＷＢ）画分および第Ｉ相（ＮＡＤＰＨ再生系）補因子と０ー２４０分インキュベートした。反応を、１ｍＬ（１：１）の、０．２％ギ酸を含むメタノールおよび１００ｎｇ／ｍｌ ＩＳ（ＩＳ最終濃度＝５０ｎｇ／ｍｌ）で停止させた。試料を１５秒間ボルテックスし、ＲＴで１０分インキュベートし、５分間２４００ｒｐｍで回転させた。上清（１ｍＬ）をその後、エッペンドルフチューブに移し、卓上で回転させ、５分間、１３．２Ｋｒｐｍで冷却遠心分離した。上清（８００μＬ）をＨＰＬＣバイアル（インサートなし）に移した。Ｑｔｒａｐ３２００質量分析計により分析した。

【0361】

図８７は、ＳＷ０５４３８４の追加の類似体の構造を示す。

【0362】

図８８ー９０は、３つの異なる試験細胞系バックラウンド、Ｖ９ｍ、ＬＳ１７４Ｔ、およびＶ５０３において、１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼ融合レポーターを誘導する際の活性のレベル表すグラフを示す。各化合物を２つの濃度、２．５μΜ、および７．５μΜで試験した。Ｙ軸はルシフェラーゼ活性である。１５ーＰＧＤＨールシフェラーゼレポーターを誘導するのに活性な化合物としては、（限定はされないが）下記が挙げられる：ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、およびＳＷ２０７９９９。

【0363】

図９１は、２．５μΜおよび７．５μΜの高い濃度で試験した時の、１５ーＰＧＤＨの酵素活性を阻害する際の試験化合物の活性を示す。ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、およびＳＷ２０７９９９は、高い濃度で、リード１５ーＰＧＤＨ活性化剤、ＳＷ０５４３８４よりも低い阻害活性を示す。

【0364】

図９２は、１５ーＰＧＤＨ活性化剤ＳＷ０５４３８３、ＳＷ１２５９９１、ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、ＳＷ２０７９９９の構造を繰り返す。

【0365】

図９３は、２．５μΜの各化合物で２４時間処理し、インキュベーションの最後の１６時間２．５ｎｇ／ｍｌのＩＬ１ーβを添加し、その後、収集し、２４時間の時間点の培地中のＰＧＥ２濃度のアッセイを実施した、Ａ５４９細胞の培地中でＰＧＥ２レベルを低下させる際のＳＷ０５４３８３、ＳＷ１２５９９１、ＳＷ２０７９９７、ＳＷ２０７９９８、ＳＷ２０７９９９の活性のグラフ表示を示す。ＩＬ１ーβ刺激Ａ５４９細胞における１５ーＰＧＤＨを低下させる際の化合物の活性は、これらの化合物が細胞内１５ーＰＧＤＨを活性化することと一致する。

【0366】

図９４は、図９３に対して説明した同じ実験設計で、ＩＬ１ーβで刺激したＡ５４９細胞の培地中のＰＧＥ２レベルに対する効果を測定するアッセイにおける、１５ーＰＧＤＨ活性化剤化合物の滴定曲線を示す。１００ｎＭ濃度の薬物で、培地中のＰＧＥ２のレベルの最大低減は、細胞をＳＷ２０７９９７またはＳＷ２０７９９８で処理することにより達成され、続いて、ＳＷ１２５９９１である。ＳＷ０５４３８４およびＳＷ２０７９９９は０．５μΜー１．０μΜの間の用量で、培地中、同等レベルのＰＧＥ２の低減を達成する。

【0367】

図９５は、Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ１２５９９１の毒性の評価を示す。コロニー形成活性の低減は７．５μΜまでの化合物の用量では見られない。

【0368】

図９６は、Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ２０７９９７の毒性の評価を示す。コロニー形成活性の低減は７．５μΜまでの化合物の用量では見られない。

【0369】

図９７は、Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ２０７９９８の毒性の評価を示す。コロニー形成活性の低減は７．５μΜまでの化合物の用量では見られない。

【0370】

図９８は、Ａ５４９細胞、Ｖａｃｏ９Ｍ（Ｖ９ｍ）細胞、ＬＳ１７４Ｔ細胞、およびＶａｃｏ５０３（Ｖ５０３）細胞のコロニー形成に対する用量増加の効果を試験することによる、ＳＷ２０７９９９の毒性の評価を示す。コロニー形成活性の低減は７．５μΜまでの化合物の用量では見られない。

【0371】

この発明について、その好ましい実施形態を参照して特定的に図示し、記載してきたが、その中で、形態および細部において様々な変更が添付の特許請求の範囲に包含される発明の範囲から逸脱せずに可能であることが当業者には理解されるであろう。前記明細書において引用される全ての特許、刊行物および参考文献は、本明細書で、その全体が参照により組み込まれる。

【図1】

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【図2】

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【図3】

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【図4】

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【図5】

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【図6】

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【図7】

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【図8】

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【図9】

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【図10】

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【図11】

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【図12】

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【図13】

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【図14】

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【図15】

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【図16】

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【図17】

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【図18】

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【図19】

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【図20】

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【図21】

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【図22】

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【図23】

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【図24】

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【図25】

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【図26】

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【図27】

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【図28】

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【図29】

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【図30】

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【図31】

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【図32】

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【図33】

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【図34】

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【図35】

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【図36】

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【図37】

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【図38】

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【図39】

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【図40】

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【図41】

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【図42】

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【図43】

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【図44】

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【図45】

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【図46】

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【図47】

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【図48】

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【図49】

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【図50】

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【図51】

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【図52】

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【図53】

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【図54】

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【図55】

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【図56】

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【図57】

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【図58】

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【図59】

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【図60】

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【図61】

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【図62】

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【図63】

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【図64】

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【図65】

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【図66】

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【図67】

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【図68】

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【図69】

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【図70】

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【図71】

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【図72】

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【図73】

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【図74】

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【図75】

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【図76】

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【図77】

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【図78】

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【図79】

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【図80】

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【図81】

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【図82】

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【図83】

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【図84】

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【図85】

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【図86】

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【図87】

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【図88】

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【図89】

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【図90】

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【図91】

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【図92】

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【図93】

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【図94】

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【図95】

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【図96】

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【図97】

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【図98】

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