特許 6204915 悪液質治療

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6204915

(24)【登録日】2017年9月8日

(45)【発行日】2017年9月27日

(54)【発明の名称】悪液質治療

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20170914BHJP

   A61P 3/00 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20170914BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20170914BHJP

【ＦＩ】

   A61K39/395 D

   A61K39/395 U

   A61P3/00

   A61P35/00

   A61P43/00 111

【請求項の数】14

【全頁数】14

(21)【出願番号】特願2014-531996(P2014-531996)

(86)(22)【出願日】2012年9月21日

(65)【公表番号】特表2014-526559(P2014-526559A)

(43)【公表日】2014年10月6日

(86)【国際出願番号】US2012056492

(87)【国際公開番号】WO2013043973

(87)【国際公開日】20130328

【審査請求日】2015年9月3日

(31)【優先権主張番号】61/538,309

(32)【優先日】2011年9月23日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】510312617

【氏名又は名称】エックスバイオテク，インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＸＢＩＯＴＥＣＨ，ＩＮＣ．

(74)【代理人】

【識別番号】110001302

【氏名又は名称】特許業務法人北青山インターナショナル

(72)【発明者】

【氏名】シマール，ジョン

【審査官】 菊池 美香

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１１−５２４７４０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 Clinical Cancer Research, 1995, Vol.1, p.1353-1358

【文献】 American Journal of Pathology, 2003, Vol.163, No.6, p.2531-2541

【文献】 American Journal of Physiology, 1989, Vol.256, No.3, p.R659-R665

【文献】 Anticancer Research, 2002, Vol.22, p.2547-2554

【文献】 Cancer Letters, 1995, Vol. 95, p33-38

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３９／３９５

Ａ６１Ｐ ３／００

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

癌を有する人対象における除脂肪体重の減少を軽減するための医薬組成物であって、薬学的に許容し得る担体と、抗−ＩＬ−１α抗体（Ａｂ）を前記対象における除脂肪体重の減少を軽減するために有効な量で含むことを特徴とする医薬組成物。

【請求項2】

請求項１に記載の医薬組成物において、前記抗−ＩＬ−１α Ａｂがモノクローナル抗体（ｍＡｂ）であることを特徴とする医薬組成物。

【請求項3】

請求項２に記載の医薬組成物において、前記ｍＡｂがＩｇＧ１であることを特徴とする医薬組成物。

【請求項4】

請求項２に記載の医薬組成物において、前記ｍＡｂが、ＭＡＢｐ１の相補性決定領域を含むことを特徴とする医薬組成物。

【請求項5】

請求項２に記載の医薬組成物において、前記ｍＡｂがＭＡＢｐ１であることを特徴とする医薬組成物。

【請求項6】

請求項１に記載の医薬組成物において、前記対象の体重を増加させる効能を有することを特徴とする医薬組成物。

【請求項7】

請求項１に記載の医薬組成物において、前記対象の食欲を改善する効能を有することを特徴とする医薬組成物。

【請求項8】

請求項１に記載の医薬組成物において、前記対象が末期癌を有する人を含むことを特徴とする医薬組成物。

【請求項9】

請求項１に記載の医薬組成物において、前記対象の筋肉量を増加させる効能を有することを特徴とする医薬組成物。

【請求項10】

癌と、悪液質に関連する除脂肪体重の減少を有する人対象における寿命を前記対象の前記予測された寿命に比較して少なくとも１０％まで延ばすための医薬組成物であって、薬学的に許容し得る担体と、抗−ＩＬ−１α抗体（Ａｂ）を含むことを特徴とする医薬組成物。

【請求項11】

請求項１０に記載の医薬組成物において、前記抗−ＩＬ−１α Ａｂがモノクローナル抗体（ｍＡｂ）であることを特徴とする医薬組成物。

【請求項12】

請求項１１に記載の医薬組成物において、前記ｍＡｂが、ＭＡＢｐ１であることを特徴とする医薬組成物。

【請求項13】

請求項１０に記載の医薬組成物において、前記対象が末期癌を有する人を含むことを特徴とする医薬組成物。

【請求項14】

請求項１０に記載の医薬組成物において、前記医薬組成物の用量が、約０．２乃至２０ｍｇ／ｋｇ体重であることを特徴とする医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０１１年９月２３日に出願された米国仮特許出願第６１／５３８，３０９号明細書からの優先権を主張するものである。

【0002】

本発明は、全般的には、医薬品、腫瘍学、代謝、及び免疫学の分野に関する。具体的には、本発明は、悪液質の１つ又は複数の症状を治療するためのインターロイキン−１α（ＩＬ−１α）に特異的に結合する抗体（Ａｂ）などの薬剤の使用に関する。

【背景技術】

【0003】

悪液質は、体重減少、筋委縮、食欲減退、疲労感、及び衰弱を特徴とする状態である。これは、ＡＩＤＳ、ホルモン欠乏症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、鬱血性心疾患（ＣＨＦ）、結核（ＴＢ）、及び癌などの慢性進行性疾患を有する患者で一般的に見られる。悪液質では、エネルギー消費に対する食物摂取量の低下が体重減少につながる。適切な栄養補給によっても、炭水化物、タンパク質、及び脂肪の代謝における異常が、宿主組織の継続する可動化及び無効な充足を引き起こす。カケクチン／ＴＮＦ又はその他の炎症性サイトカインが関与していることが分かったが、悪液質を引き起こす生理学的代謝は、あまり解明されていないままである。

【0004】

栄養補給は、悪液質患者の体重を維持することに役立つことができるが、除脂肪筋肉量の低下を抑制しない。ステロイド（特に、プロゲステロン様薬剤）は、食欲を増大させ、体重減少を改善することができるが、これもまた、筋肉量の減少を改善するという証拠はない。ヒト化抗ＩＬ−６抗体は、肺癌患者を伴う臨床試験において、悪液質のための治療方法として評価されている。この抗体は安全であり、十分許容できると考えられ、肺症状スコアを改善し、疲労感を改善し、除脂肪体重減少の速度を低下させた。しかしながら、この抗体はこのプロセスを改善しない。

【発明の概要】

【0005】

本発明は、ＩＬ−１αを特異的に標的化する薬剤が、ヒト患者における悪液質の症状を改善し、除脂肪体重（又は除脂肪体組織；ＬＢＴ）の減少を改善することを含める）、悪液質に関連する除脂肪体重の減少を有する癌患者の生存率を増大させることができるという発見に基づく。これは、サイトカイン−標的化薬剤が、悪液質を有するヒト対象における除脂肪体重を増大させることができ、悪液質に関連する除脂肪体重の減少を有する癌患者の生存率を向上させることができることを示す最初のものであると思われる。

【0006】

したがって、本発明は、薬学的に許容し得る担体と、悪液質の症状を軽減するために有効なＩＬ−１α標的化薬剤の量とを含む医薬組成物を対象に投与することによる、ヒト対象における悪液質を治療する方法を特徴とする。更に本発明の範囲内にあるものは、薬学的に許容し得る担体と、対象の生存期間を延長させるために有効なＩＬ−１α標的化薬剤の量とを含む医薬組成物を対象に投与することによる、悪液質を有するヒト対象の生存期間を延長させる方法である。

【0007】

ＩＬ−１α標的化薬剤は、抗−ＩＬ−１αモノクローナルＡｂ（ｍＡｂ）などの抗−ＩＬ−１α Ａｂであり得る。抗−ＩＬ−１α Ａｂは、ＭＡＢｐ１と命名されたｍＡｂ（２０１１年９月２日に出願された米国特許出願第１３／２２５，０２９号明細書のこの抗体に関する説明を参照されたい）、又はＭＡＢｐ１の１つ又は複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有するｍＡｂであり得る。

【0008】

医薬組成物は、皮下、静脈内、又は筋肉内で、注射によって対象に投与され得る。この方法では、患者に投与される用量は、体重のｋｇ当たり、少なくとも０．０５（例えば、少なくとも０．０５、０．１０、０．２５、０．５、０．７５、１、２、３、４、又は５）ｍｇであり得る。

【0009】

別途指示しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同様な意味を有する。生物学的用語の一般的に理解される定義は、Ｒｉｅｇｅｒら著、Ｇｌｏｓｓａｒｙ ｏｆ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ：Ｃｌａｓｓｉｃａｌ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ、第５版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ：ニューヨーク、１９９１年；及びＬｅｗｉｎ著、Ｇｅｎｅｓ Ｖ、オックスフォード大学出版局：ニューヨーク、１９９４年で見ることができる。医学用語の一般的に理解される定義は、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ、第２７版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ、２０００年で見ることができる。

【0010】

本明細書で使用するとき、「Ａｂ」又は「Ａｂ」は、免疫グロブリン（Ｉｇ）、同一又は異種Ｉｇの溶液、又はＩｇの混合物である。「Ａｂ」はまた、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、及びＦ（ａｂ’）_２断片などのＩｇの断片及び操作された変型；及びｓｃＦＶ’ｓ、ヘテロ結合Ａｂ、並びに抗原特異性を付与するためにＩｇ誘導ＣＤＲを使用する類似の人工分子を指す。「ｍＡｂ」又は「ｍＡｂ」は、特定の抗原の特定のエピトープと免疫反応することが可能な抗原結合部位の１つの種のみを含有する１つのクローンＢ細胞系又はＡｂ分子の１つの集団によって発現されるＡｂである。「ポリクローナルＡｂ」又は「ポリクローナルＡｂ」は、異種Ａｂの混合物である。典型的には、ポリクローナルＡｂは、抗原の異なるエピトープと免疫反応する異なるＡｂの少なくともいくつかで、特定の抗原に結合する無数の異なるＡｂ分子を含むであろう。本明細書で使用するとき、ポリクローナルＡｂは、２つ以上のｍＡｂの混合物であり得る。

【0011】

Ａｂの「抗原−結合部分」は、ＡｂのＦａｂ部分の可変領域内に含まれ、Ａｂに抗原特異性を付与する部分（すなわち、典型的には、Ａｂの重鎖又は軽鎖のＣＤＲによって形成される三次元ポケット）である。「Ｆａｂ部分」又は「Ｆａｂ領域」は、そのＩｇの抗原−結合部分を含有するパパインで消化したＩｇのタンパク質分解性断片である。「非Ｆａｂ部分」は、Ｆａｂ部分、例えば、「Ｆｃ部分」又は「Ｆｃ領域」内にはないＡｂの部分である。Ａｂの「定常領域」は、可変領域の外側のＡｂの部分である。定常領域内に一般的に包含されるものは、Ａｂの「エフェクター部分」であり、これは、免疫応答を容易にするその他の免疫系成分との結合に関与しているＡｂの部分である。したがって、例えば、補体成分又はＦｃ受容体に結合する（その抗原−結合部分を介さず）Ａｂ上の部位は、そのＡｂのエフェクター部分である。

【0012】

Ａｂなどのタンパク質分子に言及する場合、「精製された」とは、このような分子を自然に随伴する成分から分離されることを意味する。典型的には、Ａｂ又はタンパク質は、これが自然に結合している非Ａｂタンパク質又はその他の天然起源の有機分子を含まずに、重量で少なくとも約１０％（例えば、９％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％、９９．９％、及び１００％）存在する場合、精製されている。純度は、任意の適切な方法、例えば、カラムクロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、又はＨＰＬＣ分析によって測定され得る。化学的に合成されたタンパク質又はその中でタンパク質が自然発生する細胞型以外の細胞型で産生されたその他の組換えタンパク質は、「精製される」。

【0013】

「結合」、「結合する」、又は「反応する」とは、サンプル中で１つの分子が特定の第２の分子を認識しかつ接着するが、実質的にサンプル中のその他の分子を認識せず又はそれに接着しないことを意味する。一般的に、別の分子に「特異的に結合する」Ａｂは、その他の分子に対して、約１０^５、１０^６、１０^７、１０^８、１０^９、１０^１０、１０^１１、又は１０^１２リットル／モルを超えるＫ_ｄを有する。

【0014】

「治療的有効量」とは、処置された動物又はヒトで、医学的に望ましい効果（例えば、疾患又は疾患の症状の軽減若しくは予防、又は生存可能性若しくは寿命の延長）を得ることができる量である。

【0015】

本明細書に記載されるものと類似した又は等価な方法及び材料が、本発明の実践又はテストで使用され得るが、好適な方法及び材料が以下に記載される。本明細書に記載される全ての刊行物、特許出願、特許、及びその他の参考文献は、それらの全体が、参照により本明細書に組み込まれる。矛盾が生じる場合は、定義を含めた本明細書が優先する。これに加えて、以下に説明される特定の実施形態は、例示に過ぎず、限定することを意図していない。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】図１は、ＬＢＴ増加の証拠による、スクリーニング及びフォローアップ時のＤＥＸＡ（ｎ＝１８）を有する患者間の生存を示すカプラン・マイヤー曲線である。

【発明を実施するための形態】

【0017】

本発明は、対象の悪液質の１つ又は複数の症状を軽減するための及び／又は悪液質を有する対象の生存を延長させるための組成物及び方法を包含する。以下に記載される好ましい実施形態は、これら組成物及び方法の適用したものを説明するものである。一方、これら実施形態の説明から、本発明のその他の態様が、以下に提供された説明に基づいて実施及び／又は実践され得る。

【0018】

一般的な方法
従来の免疫学的及び分子生物学的技法を伴う方法が、本明細書で記載される。免疫学的方法（例えば、抗原−Ａｂ複合体の検出及び位置確認のためのアッセイ、免疫沈降反応、イムノブロッティング等）は、当該技術分野で一般的に既知であり、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｃｏｌｉｇａｎら編集、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ニューヨークなどの方法学論文に記載されている。分子生物学の技法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版、１−３巻、Ｓａｍｂｒｏｏｋら編集、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク州コールドスプリングハーバー、２００１年；及びＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ａｕｓｕｂｅｌら編集、Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、ニューヨークなどの論文で詳細に記載されている。Ａｂ法は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｂｓ、Ｄｕｂｅｌ，Ｓ．編集、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００７年に記載されている。医学的治療の一般的な方法は、ＭｃＰｈｅｅ及びＰａｐａｄａｋｉｓ著、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２０１０年、第４９版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｍｅｄｉｃａｌ、２０１０年；及びＦａｕｃｉら著、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第１７版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ、２００８年に記載されている。

【0019】

悪液質の治療
本明細書に記載の組成物及び方法は、対象における悪液質の少なくとも１つの特性を改善するために有効な、及び／又は悪液質（特に、癌関連悪液質）を有する哺乳動物対象の生存期間を延長させるために有効な、ＩＬ−１α標的化剤の量を含有する医薬組成物を対象に投与することによって、哺乳動物対象における悪液質を治療するために有用である。哺乳動物対象は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ及びブタを含める悪液質に冒された任意の対象であり得る。ヒト対象は、男性、女性、成人、小児、又は高齢者（６５歳以上）であり得る。哺乳動物対象は、癌（特に、転移性癌、固形腫瘍癌、並びにステージＩＩ、ＩＩＩ、又はＩＶの癌）、ＨＩＶ感染症、ＴＢ、ＣＯＰＤ、ＣＨＦ、慢性腎不全、ホルモン失調症、重度外傷（例えば、火傷）、代謝亢進（例えば、所定の対象に関する正常値を少なくとも６ｂｐｍ超える持続しかつ上昇した心拍数）、過剰な交感神経活動、超炎症性状態（例えば、ＣＲＰレベルの上昇、ＩＬ−６レベルの増加、ＴＮＦαレベルの増加、及び／又はＩＦＮγレベルの増加）、二か月以内の＞５ｌｂの体重減少、及び／又は＜２０ｃａｌ／ｋｇの推定された１日のカロリー摂取量を有する対象であり得る。癌を有する対象は、２４、１８、１２、又は６ヶ月未満の期待寿命を有する対象であり得る。対象はまた、ステロイド、栄養補給、及び／又は食欲増進剤で処置中、又は処置された対象であってもよい。

【0020】

ＩＬ−１α標的化剤の投与による改善に感受性がある悪液質のいずれかの症状が標的とされ得る。このような症状の例としては、衰弱、疲労、胃腸窮迫、睡眠／覚醒障害、疼痛、気力低下、呼吸困難、嗜眠、うつ状態、倦怠感、食欲不振、体重減少、筋委縮、及び除脂肪体重の減少が挙げられる。パーセントで測定可能であるならば、改善は、少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、又は９０％であり得る。衰弱、疲労、疼痛、気力低下、うつ状態、及び倦怠感などの症状は、当該技術分野で既知の技法によって測定され得る（例えば、ＥＯＲＴＣ−全般的生活の質、ベックうつ病特性尺度、ツァンのうつ状態自己評価尺度、疫学研究用うつ病尺度（ｔｈｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃ Ｓｔｕｄｉｅｓ−Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｓｃａｌｅ）、ハミルトンうつ病評価尺度、及び患者の自己報告を用いる）。食欲不振の評価、筋質量、又は除脂肪体重評価については、二重エネルギーＸ線吸収スキャン（ＤＥＸＡ）、成体電気インピーダンス分析（ＢＩＡ）、間接熱量測定、栄養摂取日誌、及び類似の既知の方法が使用され得る。

【0021】

悪液質を有する哺乳動物対象の生存期間の延長は、対象の期待寿命を超えて少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、又は２００％であり得る。悪液質に関連する特定の疾患を有する対象の期待寿命は、既知の方法、例えば、過去のデータを平均化処理することによって計算され得る。癌患者における期待生存期間は、既知の方法、例えば、Ｌｌｏｂｅｒａら著、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ、３６：２０３６、２０００年及びＭｃＣｕｓｋｅｒら著、Ｊ．Ｃｈｒｏｎ．Ｄｉｓ．、３７：３７７、１９８４年に記載されているような方法によって決定され得る。

【0022】

ＩＬ−１αを標的とする抗体及び他の薬剤
ＩＬ−１αに特異的に結合し、対象における悪液質の特性を低減する及び／又は悪液質を有する哺乳動物対象の生存期間を延長させる任意の好適なタイプのＡｂ又はその他の生物学的薬剤（例えば、ＩＬ−１受容体などのＩＬ−１α結合成分を含める融合タンパク質）が、本発明で使用され得る。例えば、使用される抗−ＩＬ−１αは、ｍＡｂ、ポリクローナルＡｂ、ｍＡｂの混合物、又はＡｂ断片若しくはｓｃＦｖなどの操作されたＡｂ様分子であり得る。ＡｂのＫａは、好ましくは少なくとも１×１０^９Ｍ^−１以上（例えば、９×１０^１０Ｍ^−１、８×１０^１０Ｍ^−１、７×１０^１０Ｍ^−１、６×１０^１０Ｍ^−１、５×１０^１０Ｍ^−１、４×１０^１０Ｍ^−１、３×１０^１０Ｍ^−１、２×１０^１０Ｍ^−１、又は１×１０^１０Ｍ^−１を超える）である。好ましい実施形態では、本発明は、（ｉ）ヒトＩＬ−１αに対して非常に高い結合親和性（例えば、少なくともナノモル又はピコモルの）を呈する抗原に結合する可変領域と、（ｉｉ）定常領域とを含有する完全なヒトｍＡｂを利用する。ヒトＡｂは、ＩｇＧ１であることが好ましいが、これはＩｇＭ、ＩｇＡ、若しくはＩｇＥ、又はＩｇＧ２、ＩｇＧ３、若しくはＩｇＧ４などのサブクラスなどの異なるイソ型であってもよい。特に有用なｍＡｂの一例は、ＭＡＢｐ１であり、これは２００９年６月１日に出願された米国特許出願第１２／４５５，４５８号明細書に記載されるＩＬ−１αに特異的なＩｇＧ１ ｍＡｂである。その他の有用なｍＡｂは、ＭＡＢｐ１の少なくとも１つのＣＤＲ、しかし好ましくは全てのＣＤＲを含有するものである。ＣＤＲは、Ｏｆｒａｎら著、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１８１：６２３０、２００８年；及びＡｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ 第２巻、第２版、Ｋｏｎｔｅｒｍａｎ及びＤｕｂｅｌ（編集）、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、２０１０年に記載されるような既知の方法により決定されてもよい。

【0023】

ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するＢリンパ球は、ヒトでは自然に発生し、ｍＡｂを産出するための現在において好ましい方法は、まず初めにこのようなＢリンパ球を対象から単離し、次いでこれが培養中で連続的に複製され得るように、これを不死化することである。ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現する自然発生のＢリンパ球を大量に欠乏する対象は、このようなＢリンパ球の数を増加させるために、１つ又は複数のヒトＩＬ−１α抗原で免疫化されてもよい。ヒトｍＡｂは、ヒトＡｂ分泌細胞（例えば、ヒトプラズマ細胞）を不死化することによって調製される。例えば、米国特許第４，６３４，６６４号明細書を参照されたい。

【0024】

例示的な方法では、１人又は複数人の（例えば、５、１０、２５、５０、１００、１０００人又はそれを上回る人数の）ヒト対象が、彼らの血液中のこのようなヒトＩＬ−１αに特異的なＡｂの存在についてスクリーニングされる。次いで、所望のＡｂを発現するこれら対象を、Ｂリンパ球ドナーとして使用され得る。１つの可能な方法では、末梢血をヒトＩＬ−１αに特異的なＡｂを発現するＢリンパ球を有するヒトドナーから得る。このようなＢリンパ球は、その後、ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するＢリンパ球を選択するために、細胞選別法（例えば、蛍光活性化細胞選別法、「ＦＡＣＳ」；又は磁気ビーズ細胞選別法）によって、血液細胞から単離される。次いで、これら細胞は、ウイルス形質転換（例えば、ＥＢＶを使用する）によって、又は既知の方法によるヒト骨髄腫細胞などの別の不死化細胞への融合によって、不死化され得る。次に、ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇを発現するこの集団内のＢリンパ球が、限界希釈法によって単離され得る（例えば、ヒトＩＬ−１αに特異的なＩｇについて陽性であるマイクロタイタープレートのウェル内の細胞を選択し、継代培養し、所望のクローン細胞系が単離され得るまでこのプロセスを繰り返す）。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ著、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ、５９〜１０３頁、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９８６年を参照されたい。ヒトＩＬ−１αに対して少なくともナノモル又はピコモルの結合親和性を有するＩｇを発現するクローン細胞系が好ましい。これらクローン細胞系から分泌されるｍＡｂは、塩カット、サイズ排除、イオン交換分離、及び親和性クロマトグラフィーなどの通常のＩｇ精製手順によって、培養基又は体液（例えば、腹水）から精製され得る。

【0025】

不死化Ｂリンパ球は、ｍＡｂを直接的に産生するためにインビトロ培養で使用されてもよいが、特定の場合には、ｍＡｂを産生するための異種発現系を使用することが望ましいことがある。例えば、米国特許出願第１１／７５４，８９９号明細書に記載される方法を参照されたい。例えば、ヒトＩＬ−１αに特異的なｍＡｂをコード化する遺伝子がクローンされ、異種宿主細胞（ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、骨髄腫細胞、及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）細胞）中における発現のために、発現ベクター（例えば、プラスミド系発現ベクター）に導入されてもよい。Ｉｇは、Ｈ_２Ｌ_２配置形態で、重鎖（Ｈ）及び軽鎖（Ｌ）を含有するために、それぞれをコード化する遺伝子が別個に単離され、異なるベクター内で発現される。

【0026】

対象が抗−Ａｂ反応を発症する可能性が大きくなることから通常あまり好ましくないが、異なる動物種に由来する異なる部分（例えば、ヒトＩｇの定常領域に融合されたマウスＩｇの可変領域）を有する抗原−結合分子であるキメラｍＡｂ（例えば、「ヒト化」ｍＡｂ）が、本発明で使用され得る。このようなキメラＡｂは、当該技術分野で既知の方法によって、調製され得る。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎら著、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８１：６８５１、１９８４年；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら著、Ｎａｔｕｒｅ、３１２：６０４、１９８４年；Ｔａｋｅｄａら著、Ｎａｔｕｒｅ、３１４：４５２、１９８４年を参照されたい。同様に、Ａｂは、当該技術分野で既知の方法によって、ヒト化され得る。例えば、所望の結合親和性を具備するｍＡｂは、様々な製造販売業者によって、又は米国特許第５，６９３，７６２号明細書、同第５，５３０，１０１号明細書、又は同第５，５８５，０８９号明細書で記載されるようにヒト化され得る。

【0027】

本明細書に記載のｍＡｂは、ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリング（Ｍａｒｋｓら著、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０：７７９−７８３、１９９２年）、高度可変領域のランダム突然変異誘発（ＨＶＲ）及び／又はフレームワーク残基（Ｂａｒｂａｓら著、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９１：３８０９−３８１３、１９９４年；Ｓｃｈｉｅｒら著、Ｇｅｎｅ、１６９：１４７−１５５、１９９５年；Ｙｅｌｔｏｎら著、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５５：１９９４−２００４、１９９５年；Ｊａｃｋｓｏｎら著、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１５４（７）：３３１０−９、１９９５年；及びＨａｗｋｉｎｓら著、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２６：８８９−８９６、１９９２年）などの既知の方法によって、それらの結合特異性を増強させる又は別の方法で変更させるために親和性成熟されていてもよい。Ａｂのアミノ酸配列変異体は、適切な変更を、Ａｂをコード化するヌクレオチド配列に導入することによって調製され得る。これに加えて、ｍＡｂをコード化する核酸配列への修飾が、特定の発現系におけるｍＡｂの産生を向上させるために（例えば、所定の発現系に対するイントロン除去及び／又はコドン最適化）、変更されてもよい（例えば、ｍＡｂのアミノ酸配列を変更することなく）。本明細書に記載のｍＡｂはまた、別のタンパク質（例えば、別のｍＡｂ）又は非タンパク質分子への抱合によって、修飾され得る。例えば、ｍＡｂは、ポリエチレングリコール又はカーボンナノチューブなどの水溶性ポリマーに抱合されてもよい（例えば、Ｋａｍら著、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１０２：１１６００−１１６０５、２００５年を参照）。米国特許出願第１１／７５４，８９９号明細書を参照されたい。

【0028】

好ましくは、ヒトＩＬ−１αに特異的なｍＡｂの高力価が、最小の副作用で対象に投与され得ることを保証するために、本発明のｍＡｂ組成物は、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．９重量％又はそれを上回る％で純粋である（いずれの賦形剤も除外して）。本発明のｍＡｂ組成物は、単一のタイプのｍＡｂのみを含有してもよく（すなわち、単一のクローンＢリンパ球系から産生されたもの）、又は２つ以上の（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個の又はそれを上回る数の）異なるタイプのｍＡｂの混合物を含有してもよい。

【0029】

本明細書に記載のＩＬ−１αに特異的なＡｂが、本発明の使用に好ましいが、場合によっては、ＩＬ−１αを特異的に標的化する他の薬剤が、それらの投与が悪液質の特性の改善につながる限りにおいて使用されてもよい。これら他の薬剤としては、ＩＬ−１αに特異的に結合する小型有機分子、アプタマー、ペプチド、及びタンパク質（例えば、アナキンラ又はリロナセプト）を挙げることができる。

【0030】

医薬組成物及び方法
抗−ＩＬ−１α Ａｂ組成物は、投与のモード及び経路並びに標準的医薬調製法に基づいて選択される薬学的に許容し得る担体（例えば、無菌生理食塩水）中で動物又はヒトに投与され得る。薬学的に許容し得る担体、並びに医薬品製剤の列挙は、レミントンの薬剤科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、本分野における標準的テキスト、及びＵＳＰ／ＮＦで見ることができる。その他の物質が組成物に添加されてもよく、組成物を安定化及び／若しくは保存するために、並びに／又は対象へのこれらの投与を容易にするためのその他の工程が使用されてもよい。

【0031】

例えば、Ａｂ組成物は、凍結乾燥され（Ｄｒａｂｅｒら著、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、１８１：３７、１９９５年；及びＰＣＴ／ＵＳ第９０／０１３８３号明細書を参照）、ナトリウム及び塩化物イオンを含有する溶液中で溶解され、アルブミン、グルコース、マルトース、ショ糖、ソルビトール、ポリエチレングリコール、及びグリシンなどの１つ又は複数の安定化剤を含有する溶液中で溶解され、濾過され（例えば、０．４５及び／又は０．２ミクロンのフィルターを使用して）、β−プロピオラクトンと接触され、及び／又は殺菌剤（例えば、洗剤、有機溶媒、並びに洗剤及び有機溶媒の混合物）を含有する溶液中で溶解されてもよい。

【0032】

Ａｂ組成物は、任意の好適な技法で動物又は人に投与されてもよい。典型的には、このような投与は、非経口（例えば、静脈内、皮下、筋肉内、又は腹腔内導入）であるだろう。組成物はまた、例えば、注射によって標的部位に直接的に投与されてもよい。送達のその他の方法、例えば、リポソーム送達又は組成物を含浸させた装置からの拡散が、当該技術分野で既知である。組成物は、単回ボーラス、複数回注射で、又は持続性輸注により（例えば、静脈内で、又は腹膜透析によって）投与されてもよい。

【0033】

治療的有効量は、処置された動物又はヒトにおいて医学的に望ましい結果を生み出すことが可能な量である。抗−ＩＬ−１α Ａｂ組成物の有効量は、上記記載の１つ又は複数の悪液質特性における改善によって測定されるような、患者で臨床的有効性を示す量である。医学分野で周知であるように、任意の１匹の動物又は１人のヒトについての投与量は、対象のサイズ、体表面積、年齢、投与される特定の組成物、性別、投与の時間及び経路、全般的健康状態、及び同時に投与されるその他の薬剤を含める多くの因子に依存する。好ましい用量は、約０．２〜２０（例えば、０．０５、０．１０、０．１５、０．２、０．３、０．４、０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、又は４０）ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。この用量は、繰り返し、例えば、毎時、毎日、半週毎、毎週、二週間毎、三週間毎、又は毎月投与され得る。好ましくは、２つ以上（例えば、３、４、５、６、７、８、１０個又はそれを上回る数の）用量が投与される。

【実施例】

【0034】

実施例１−Ｘｉｌｏｎｉｘ（商標）
Ｘｉｌｏｎｉｘ（商標）は、安定化等張緩衝液（ｐＨ ６．４）中、１５ｍｇ／ｍＬのＭＡＢｐ１の無菌注射可能液体製剤である。各々の１０ｍＬのＩ型ホウ珪酸ガラス血清バイアルは、４、５又は１０ｍＬの製剤を含有し、２０ｍｍのＤａｉｋｙｏ Ｆｌｕｒｏｔｅｃブチルゴム製ストッパー及びフリップオフアルミニウムシールで密封する。製剤を、室温までの可動域が許容されて、５±３℃で保管する。製剤の正確な組成を以下に示す。

【0035】

投与の方法
計算された容量を、好適な注射器を用いて、薬剤（ｍＡｂ）含有バイアルから抜き取る。次いで、薬剤を、１００ｍＬの通常生理食塩水（０．９％のＮａＣｌ）を含有する小型ＩＶバッグに注入し、反転させることで混合する。希釈した製剤は、投与前３時間にわたって室温で保管することができ、これを、投与後症状の徴候について対象を監視しながら、１時間にわたって注入する。輸注セット内に保持され得るいずれの製剤も送達させるために、輸注に最小限３０ｍＬの通常の生理食塩水を追加する。

【0036】

実施例２−ＭＡＢｐ１（ＩＬ−１αに対する完全なヒトモノクローナル抗体）の第１相試験に関する進行癌患者における身体構成、栄養摂取及び生活の質の改善
背景：炎症誘発性サイトカインＩＬ−１αは、食欲不振−悪液質症候群、筋肉質量の減少に関連する複合代謝障害及び病的炎症応答で重要な役割を果たす。ＭＡＢｐ１は、ＩＬ−１αに対して高い親和性を有する最初の完全なヒトモノクローナル抗体である。第Ｉ相の患者のコホートにおける身体構成、栄養摂取及び生活の質に及ぼすＭＡＢｐ１の効果を判定した。

【0037】

方法：ＭＡＢｐ１の非盲検、ヒト初回投与、第Ｉ相試験を、過去の療法の平均で５つのレジメンで失敗した難治性転移性疾患を有する患者で実行した。患者は、彼らが全ての標準的な治癒療法を失敗し、利益をもたらすことが期待される残りの治療の選択肢を有さなかったことから、難治性として定義された。患者に、ＭＡＢｐ１を４つの用量レベルのうちの１つ（０．２５、０．７５、１．２５、３．７５ｍｇ／ｋｇ）で、３週間毎に１回静脈内投与した。食欲不振−悪液質評価については、二重エネルギーＸ線吸収スキャン（ＤＥＸＡ）、成体電気インピーダンス分析（ＢＩＡ）、間接熱量測定、栄養摂取日誌に関するシリアルデータ、並びに欧州癌研究治療機構の３０項目の質問票（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ（ＥＯＲＴＣ ＱＬＱ−Ｃ３０））を利用した。身体構成、栄養摂取及び生活の質を、ベースラインとサイクル３との間で比較した。

【0038】

初期結果：３６人の登録した患者のベースライン患者背景は、平均年齢６０歳、女性２０人（５６％）、結腸直腸癌１４人（４０％）、体重中央値６１ｋｇ（四分位範囲５７〜８０ｋｇ）、肥満度指数中央値２４（２１〜２９ｋｇ／ｍ^２）で、３２人／３３人（９７％）が異化亢進であった。再判定された２４人の患者から、ＲＥＣＩＳＴ基準（≧３ヶ月間の症状の安定又は改善として定義される）により、３７％（９人／２４人）の全奏効率を達成した。これら２４人の患者から、１８人の患者が、予定通りのスクリーニング時及び８週のフォローアップ評価時の両時点でのＤＥＸＡスキャンに応じた。ベースライン及びフォローアップＤＥＸＡスキャンの分析は、大部分の患者が彼らの悪液質の改善を有するとの注目すべき結果を示した。フォローアップ時には、患者の６７％（１２人／１８人）が除脂肪体組織（ＬＢＴ）で客観的な増加を有した。以下の表１を参照されたい。応答患者は、彼らのベースライン値と比較して、１．５７±１．９５ｋｇ（ｐ＝０．０１７）のＬＢＴ改善の平均値を示した。一方、６人の非応答患者間のＬＢＴ変化の平均値は、−０．８２±０．４７ｋｇであった。非応答患者と対比しての応答患者についてのＬＢＴにおける増加は、２．３９±１．７ｋｇ（ｐ＝０．００１）であった。

【0039】

結論：ＬＢＴ減少の改善は、難治性転移性疾患を有する患者で生じることは知られていない。難治性進行性疾患におけるＬＢＴの増加を促進することができる薬剤の文献中でも報告がない。本試験では、試験に参加した大部分の患者が、登録前には劇的な体重減少を有した。それにもかかわらず、数人の応答患者は、８週間の治療にわたって十分なＬＢＴを増加させ、試験の開始前２６週で観察された体重よりも高い体重を結果として生じた。

【0040】

興味深いことに、治療期間中にＬＢＴを増加させたこれら患者はまた、平均で０．４ｋｇの脂肪質量を減少させた。脂肪質量の同時減少を伴う除脂肪体組織の増加は、脂肪の利用及び筋肉組織の合成に向かう、代謝エネルギーの使用の制御における根本的変化（エネルギー源としての筋肉の可動化から生じる）を強く示唆している。

【0041】

その他の結果：ＢＩＡデータを有する７人／１４人（５０％）の患者もまた、筋肉質量における増加を有した（中央値１．４ｋｇ、Ｑ１−Ｑ３ １．１−１．８ｋｇ）。毎日の平均カロリー摂取は、８人／１３人（６２％）の患者で、３６２ｋｃａｌの中央値（Ｑ１−Ｑ３ ２３４−９２２ｋｃａｌ）まで増加した。ベースラインとサイクル３との間で、ＥＯＲＴＣ−食欲は、５人／２０人（２５％）の患者で改善し（改善中央値３３／１００、Ｑ１−Ｑ３ ３３−３３）、残りの１５人／２０人（７５％）の患者では同じままであった。ＥＯＲＴＣ−全般的生活の質は、７人／２０人（３６％）の患者で改善し（改善中央値２０／１００、Ｑ１−Ｑ３ ８−２５）、８人／２０人（４０％）の患者では同じままであった。

【0042】

実施例３−結腸直腸コホートの分析
実施例２に記載された臨床試験で登録され、処置された患者の大部分は、難治性転移性結腸直腸癌を有した（４２人中１４人）。ＤＥＸＡで評価された１８人の対象のうち、７人が転移性結腸直腸癌を有し、これら７人のうち５人がＬＢＴの増加で応答した。これら患者の７人全てについてのＬＢＴの平均増加は３％であって、応答した対象については、増加平均値は４．６％であった。この臨床試験で登録された対象を、ＲＥＣＩＳＴ １．１を用いて腫瘍反応についても評価した。それに伴い、疾患進行のＸ線検査の証拠のために、一部の対象は投与を中止した。結腸直腸癌を有する１４人の患者の中では、生存期間中央値は１２９日（４．３ヶ月）であった（これらデータポイントの４つが中途で打ち切られた）。試験薬の少なくとも３用量を受容した１０人／１４人（７１％）の患者については、生存期間中央値は２２４日（７．５ヶ月）であった。生存期間中央値はまた、ＬＢＴの増加と密接に関連した。ベースラインから８週までのＬＢＴの増加の客観的証拠を有した５人（３６％）の患者については、生存期間中央値は、４７４日（１５．８ヶ月）であった。一方、ＬＢＴ増加の証拠を示さなかった９人の患者は、７２日（２．４ヶ月）の生存期間中央値を示したに過ぎない。同様な集団で実施された試験に基づくと、難治性結腸直腸癌患者についての予期される全生存期間は、約４．６ヶ月である（Ｊｏｎｋｅｒ，Ｄ．ら著、Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００６；３５７：２０４０−８）。

【0043】

実施例４−その後の時点における生存結果の概要
平均で５つの過去の全身的化学療法レジメンに対して難治性の進行性癌を有する合計で４２人の患者（女性５７％が、年齢中央値６１歳）が、実施例２に記載される臨床試験に登録した。結腸直腸癌は、試験集団全体の三分の一（１４人／４２人）を占める最もよくみられる悪性腫であることを見出した。２３人（５５％）の患者は、３つ以上のサイクルを完了し、一方ベースライン及びサイクル３終了時のＤＥＸＡ測定は、１８人の患者に有効であった。分析時までに、合計で１８人／４２人（４３％）の死亡が報告された。平均生存期間は、１６１日の生存期間中央値で、２７８±３８日であった。

【0044】

実施例５−応答患者対非応答患者の生存期間
実施例２に記載される試験において、合計で１８人の患者が、スクリーニング時及びサイクル３の１５日目に有効なＤＥＸＡ測定値を有し、そのうち１２人／１８人（６７％）が応答患者（≧０ｋｇのＬＢＴ変化）であった。図１に示すように、応答患者の中での全生存期間は、３７７±２８６日（中央値３３９日）であり、非応答患者については、３１３±２２６日（中央値２７７日）であった。応答患者群では、８人の患者が中途打ち切りされ、４人が死亡した。非応答患者の中では５人／６人の患者が死亡した（対数順位検定ｐ＝０．１４３）。

【0045】

その他の実施形態
本発明は、その詳細な説明と共に記載されてきたが、前述の説明は例示の目的のためであり、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を限定するよう意図するものではないことを理解されたい。その他の態様、利点、及び修正形態は、以下の特許請求の範囲内にある。

【図1】