特許 6209579 補助化療薬品とされる医薬組成物その用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6209579

(24)【登録日】2017年9月15日

(45)【発行日】2017年10月4日

(54)【発明の名称】補助化療薬品とされる医薬組成物その用途

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/07 20060101AFI20170925BHJP

   A61K 31/282 20060101ALI20170925BHJP

   A61K 31/7068 20060101ALI20170925BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20170925BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20170925BHJP

   A61K 31/575 20060101ALI20170925BHJP

   A61K 31/704 20060101ALI20170925BHJP

   A61K 31/36 20060101ALI20170925BHJP

【ＦＩ】

   A61K36/07

   A61K31/282

   A61K31/7068

   A61P35/00

   A61P43/00 121

   A61K31/575

   A61K31/704

   A61K31/36

【請求項の数】19

【全頁数】19

(21)【出願番号】特願2015-218691(P2015-218691)

(22)【出願日】2015年11月6日

(65)【公開番号】特開2016-102111(P2016-102111A)

(43)【公開日】2016年6月2日

【審査請求日】2015年11月9日

(31)【優先権主張番号】103141511

(32)【優先日】2014年11月28日

(33)【優先権主張国】TW

(73)【特許権者】

【識別番号】515309689

【氏名又は名称】恩揚生物科技股▲分▼有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】100082418

【弁理士】

【氏名又は名称】山口 朔生

(72)【発明者】

【氏名】翁豐嶽

(72)【発明者】

【氏名】劉文煌

(72)【発明者】

【氏名】郭建良

(72)【発明者】

【氏名】林佳祺

【審査官】 石井 裕美子

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２０１３／００８９６２７（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特開２００４−０９１７８０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 Journal of Ethnopharmacology，２００８年，Vol.118,No.3，pp.387-395

【文献】 Arch Toxicol，２００９年，Vol.83,No.2，pp.121-129

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３６／００−３６／９０６８

Ａ６１Ｋ ３１／２８２

Ａ６１Ｋ ３１／３６

Ａ６１Ｋ ３１／５７５

Ａ６１Ｋ ３１／７０４

Ａ６１Ｋ ３１／７０６８

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

化療薬品の副作用を改善するための医薬組成物の製造方法におけるベニクスノキタケ子実体抽出物の使用であって、
前記医薬組成物は前記化療薬品と併用され、
前記化療薬品の前記副作用は、抜け毛症状、筋肉の融解及び萎縮、消化器病変、腎炎、或いは腎損傷を含み、
前記化療薬品が、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）又はゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）であり、
前記筋肉の融解及び萎縮の改善は、筋肉重量を増加させ、ミオスタチン（ｍｙｏｓｔａｔｉｎ）の発現を抑制し、インスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）の発現を促進し、あるいは、前記筋肉におけるプロテアソーム酵素の活性を抑制することであり、前記プロテアソーム酵素は、キモトリプシン（ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ）、トリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ）又はカスパーゼ（ｃａｓｐａｓｅ）であり、
前記消化器病変の改善は、腸絨毛破壊及び胃部潰瘍を緩和し、あるいは、化療後の小腸における酵素発現を増加させ、前記小腸における前記酵素は、ロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）、リパーゼ（ＬＩＰ）又はアミラーゼ（ａｍｙｌａｓｅ）であり、
前記腎炎の改善は、腎炎指数の低減を含み、前記腎炎指数は、クレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）、尿素窒素（ＢＵＮ）又は血清アルブミン（ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ）であり、
前記腎損傷の改善は、血液炎症因子の増大を抑制し、前記血液炎症因子は、ＩＬ−６、ＩＬ−１β又はＴＮＦ−αである、ことを特徴とする、使用。

【請求項2】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物は、マウス動物モードにおいて、有効薬用量が、５６〜２２５ミリグラム／キログラム（ｍｇ／ｋｇ）である、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項3】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、アントシンＫ（ａｎｔｃｉｎ Ｋ）、アントシンＣ（ａｎｔｃｉｎ Ｃ）、又はアントシンＨ（ａｎｔｃｉｎ Ｈ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項4】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、デヒドロスルフレン酸（ｄｅｈｙｄｒｏｓｕｌｐｈｕｒｅｎｉｃ ａｃｉｄ）又はデヒドロエブリコ酸（Ｄｅｈｙｄｒｏｅｂｕｒｉｃｏｉｃ ａｃｉｄ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項5】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、アントシンＢ（ａｎｔｃｉｎ Ｂ）又はアントシンＡ（ａｎｔｃｉｎ Ａ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項6】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、４，７−ジメトキシ−５− メチル−１，３−ベンゾジオキソール（４，７−ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−５−ｍｅｔｈｙｌ− １，３−ｂｅｎｚｏｄｉｏｘｏｌｅ、ＤＭＢ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項7】

前記医薬組成物は、カプレ、カプセル、滴丸、乳剤、沖劑、水性分散液或いはディスパージョンの経口投与剤である、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項8】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物は、ベニクスノキタケ子実体を、８０〜１００℃の熱い水に、１〜３時間浸入し、保管液を分離した後、低い極性溶剤で抽出すること、の手順により、上記ベニクスノキタケ子実体抽出物が得られ、前記低い極性溶剤は、ベンジン、ｎ‐ヘキサン、酢酸エチル、アセトン、エタノール及びその組合せを含む群から選ばれる、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項9】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の有効薬量は、ヒトにおいて、５．０６〜１８．７５ミリグラム／キログラム（ｍｇ／ｋｇ）である、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。

【請求項10】

癌の症状を改善するための医薬組成物の製造方法におけるベニクスノキタケ子実体抽出物の使用であって、前記癌の症状は、筋肉の融解及び萎縮、消化器病変、腎炎、或いは腎損傷を含み、
前記筋肉の融解及び萎縮の改善は、筋肉重量を増加させ、ミオスタチン（ｍｙｏｓｔａｔｉｎ）の発現を抑制し、とインスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）の発現を促進し、あるいは、前記筋肉におけるプロテアソーム酵素の活性を抑制することであり、前記プロテアソーム酵素は、キモトリプシン（ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ）、トリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ）又はカスパーゼ（ｃａｓｐａｓｅ）であり、
前記消化器病変の改善は、腸絨毛破壊及び胃部潰瘍を緩和し、あるいは、化療後の小腸における酵素発現を増加させ、前記小腸における前記酵素は、ロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）、リパーゼ（ＬＩＰ）又はアミラーゼ（ａｍｙｌａｓｅ）であり、
前記腎炎の改善は、腎炎指数の低減を含み、前記腎炎指数は、クレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）、尿素窒素（ＢＵＮ）又は血清アルブミン（ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ）であり、
前記腎損傷の改善は、血液炎症因子の増大を抑制し、前記血液炎症因子は、ＩＬ−６、ＩＬ−１β又はＴＮＦ−αである、ことを特徴とする使用。

【請求項11】

前記癌症は、肺癌である、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項12】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の有効薬量は、マウス動物モードにおいて、５６〜２２５ミリグラム／キログラム（ｍｇ／ｋｇ）である、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項13】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、アントシンＫ（ａｎｔｃｉｎ Ｋ）、アントシンＣ（ａｎｔｃｉｎ Ｃ）又はアントシンＨ（ａｎｔｃｉｎ Ｈ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項14】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、デヒドロスルフレン酸（ｄｅｈｙｄｒｏｓｕｌｐｈｕｒｅｎｉｃ ａｃｉｄ）又はデヒドロエブリコ酸（Ｄｅｈｙｄｒｏｅｂｕｒｉｃｏｉｃ ａｃｉｄ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項15】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、アントシンＢ（ａｎｔｃｉｎ Ｂ）又はアントシンＡ（ａｎｔｃｉｎ Ａ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項16】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、４，７−ジメトキシ−５− メチル−１，３−ベンゾジオキソール（４，７−ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−５−ｍｅｔｈｙｌ− １，３−ｂｅｎｚｏｄｉｏｘｏｌｅ、ＤＭＢ）が含まれる、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項17】

前記医薬組成物は、カプレ、カプセル、滴丸、乳剤、沖劑、水性分散液或いはディスパージョンの経口投与剤である、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項18】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物は、ベニクスノキタケ子実体を、８０〜１００℃の熱い水に、１〜３時間浸入し、保管液を分離した後、低い極性溶剤で抽出すること、の手順により、上記ベニクスノキタケ子実体抽出物が得られ、前記低い極性溶剤は、ベンジン、ｎ‐ヘキサン、酢酸エチル、アセトン、エタノール及びその組合せを含む群から選ばれる、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【請求項19】

前記ベニクスノキタケ子実体抽出物の有効薬量は、ヒトにおいて、５．０６〜１８．７５ミリグラム／キログラム（ｍｇ／ｋｇ）である、ことを特徴とする請求項１０に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ベニクスノキタケ抽出物とその応用に関し、特に、補助化療薬品とされる医薬組成物とその用途に関する。

【背景技術】

【0002】

ベニクスノキタケ（牛樟茸とも称され、Ａｎｔｒｏｄｉａ ｃｉｎｎａｍｏｍｅａ）は、台湾に特有とするキノコ類であり、台湾の中高海抜（４００〜２０００メートル）の山岳部にある特有の牛樟木に成長し、原住民が、昔から、その肝臓保護や酔い止め等の用途に利用される珍貴キノコ類と認められる。１９９５年までの研究結果によれば、ベニクスノキタケ子実体には、抗炎症や免疫力や体力の向上、抗ウイルス、酸化防止、抗癌及び肝臓保護等の多種類効果が得られ、また、多数の文献によれば、直接に、動物モード（ｉｎ ｖｉｖｏ）で、抗癌研究を行い、肝癌や肺癌、大腸癌及卵巣癌等に対して、明白的に、ベニクスノキタケ子実体エタノール抽出物に、抗癌効果があることと、明らかになる。しかしながら、牛樟師部を、取得することが難しいため、子実体の原料コストが高くなり、また、安定的に、大量供給することができなくて、雑菌や重金属汚染等の恐れがあって、薬品開発とする誘因がないため、台湾の特有ベニクスノキタケを、植物新薬として、開発することが、なかなか、進まない。そのため、大量的に且つ安定的に、雑菌や重金属の汚染無しの高品質なベニクスノキタケ子実体原料を、量産できる技術の開発は、至急の課題になる。

【0003】

正常の体組織は、糖質やタンパク質及び脂肪が、エネルギーの源泉とされて、必要とするが、癌細胞／組織の生長は、快速的で、単一に、葡萄糖を、熱量の源泉とするため、癌細胞の生長に、大量な葡萄糖が消費され、上記のことにより、癌症病者体内において、大量的に、タンパク質や脂肪が、葡萄糖に変換されて、癌細胞の生長に必要とするエネルギーとして供給される。また、癌組織は、人体内のタンパク質の生合成に影響し、筋肉組織が、降解されて流失するため、病者の味覚や臭覚及び食欲が、大幅に低下される。その結果、大部分の癌病者に、厳重栄養不良が発生して、器官機能障害や免疫機能低下の病症が現れる。

【0004】

肺癌は、罹病率と死亡率がもっとも高い癌の一つである。主として、「小細胞肺癌」（発生率が、約１６．８％である）と「非小細胞肺癌」（発生率が、約８０．４％である）の二種類がある。肺癌を治療するには、普通、手術治療や放射線治療及び薬品治療（化療やターゲット薬品が含まれる）等を行い、また、化療薬は、医師が肺癌を治療する時の主な選択の一つであり、現在、第一線の治療薬品は、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）とシスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）であり、第一線の化療組合せによる効果が、平均的に、半年以上を維持でき、その後、腫瘤が抑えなければ、第二線の化療薬品（単一薬品）を利用し、例えば、注射型のジェムザールやタキソール、或いは口服や静脈注射のビノレルビン等があって、ともに、肺癌病者が選択できる第二線用薬である。化療法は、一応、癌細胞を殺せるが、正常細胞も、選択無しに殺され、これにより、病者の免疫や造血系に、厳重な障害を与えるため、良い細胞と悪い細胞が、“ともに、殺され”、また、化療は、一般の増殖速い正常細胞に対して、例えば、口腔や胃腸道の表層上皮、骨髓の造血細胞及び髪の毛を生成する毛嚢細胞等に影響し、そのため、倦怠やむかつき、嘔吐、血細胞低減、毛抜け、口腔潰瘍及び疼痛等の厳重副作用がある。

【0005】

化療副作用の発生により、癌症病者の体が不快になり、癌症病者がその治療過程を続いて完成することにも、影響し、そのため、化療を行うと同時に、補助治療を合わせれば、化療過程において、癌症病者の化療による体不快が、低減や改善され、これにより、スムーズに、治療過程全体を行う。近年、西薬を主として開発することが、難航になり、その一部に、臨床使用上、厳重な副作用が発生するため、天然植物薬を主とする研究開発へ移転する。補助治療としてベニクスノキタケを移用して、化療による不快を改善するものは、マウスのシスプラチンによって発生した肝毒性の緩和やマウスの炎症性腸病と腸癌の悪病質の緩和及び、乳癌用薬補助等の研究報導によって、ベニクスノキタケの補助化療薬品としての減毒効果が証明された。

【0006】

本発明者は、上記欠点を解消するため、慎重に研究し、また、学理を活用して、有効に上記欠点を解消でき、設計が合理である本発明を提案する。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

本発明の主な目的は、ベニクスノキタケ子実体抽出物を、化療薬品シスプラチンやゲムシタビンの補助として、癌症を治療する効果が向上され、有効的に、化学治療癌症後の抜け毛や筋肉の融解と萎縮、腸胃道と腎臓炎症の障害等の副作用を低減できる、補助化療薬品とされる医薬組成物とその用途を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明は、上記目的を達成できる補助化療薬品の医薬組成物であり、有効薬用量のベニクスノキタケ子実体抽出物と、薬学的に許容しうる担体と、が含有され、ベニクスノキタケ子実体抽出物が、化療薬品を補助して、癌症を治療し、癌症副作用を改善し、上記化療薬品が、シスプラチンやゲムシタビンである。

【0009】

本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物の主な成分には、構造式（Ｉ）を有するアントシンＫ（ａｎｔｃｉｎ Ｋ）やアントシンＣ（ａｎｔｃｉｎ Ｃ）、アントシンＨ（ａｎｔｃｉｎ Ｈ）及びその化学誘導体が、含まれ、

【0010】

【化1】

その中、
Ｒ１が、−ＯＨや＝Ｏ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ２が、−Ｈや−ＯＨ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ３が、−ＯＨや＝Ｏ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ４が、−Ｈや−ＯＨ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ５が、Ｃ_１−３カルボキシ基やＣ_１−３エステル基である。

【0011】

また、ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、構造式（ＩＩ）を有するデヒドロスルフレン酸（ｄｅｈｙｄｒｏｓｕｌｐｈｕｒｅｎｉｃ ａｃｉｄ）やデヒドロエブリコ酸（Ｄｅｈｙｄｒｏｅｂｕｒｉｃｏｉｃ ａｃｉｄ）及びその化学誘導体が、含まれ、

【0012】

【化2】

その中、
Ｒ１が、−Ｈや−ＯＨ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ２が、−ＯＨや−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ３が、Ｃ_１−３カルボキシ基やＣ_１−３エステル基である。

【0013】

また、ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、構造式（ＩＩＩ）を有するアントシンＢ（ａｎｔｃｉｎ Ｂ）やアントシンＡ（ａｎｔｃｉｎ Ａ）及びその化学誘導体が、含まれ、

【0014】

【化3】

その中、Ｒ１が、−Ｈや＝Ｏであり、
Ｒ２が、Ｃ_１−３カルボキシ基やＣ_１−３エステル基である。

【0015】

また、ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分には、更に、構造式（IV）を有するモノフェノール類化合物（４，７−ジメトキシ−５− メチル−１，３−ベンゾジオキソール、４，７−ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−５−ｍｅｔｈｙｌ− １，３−ｂｅｎｚｏｄｉｏｘｏｌｅ、ＤＭＢ）及びその化学誘導体が、含まれ、

【0016】

【化4】

その中、
Ｒ１が、−ＯＨや＝Ｏ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ２が、−Ｈや−ＯＨ、＝Ｏ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ３が、−Ｈや−ＯＨ或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、
Ｒ４が、−Ｈやメチル基であり、
Ｒ５が、−Ｈや−ＯＨ、メチル基或いは−Ｏ−グリコシル基（単糖や二糖或いは多糖類である）やＣ_１−３エステル基であり、Ｒ６が、−Ｈやメチル基である。

【0017】

もう一方、本発明も、医薬組成物の用途を提供し、上記医薬組成物に、有効薬用量のベニクスノキタケ子実体抽出物と、薬学的に許容しうる担体とが含有され、その用途は、化療薬品を補助して、癌症を治療し、癌症副作用を改善する。その中、化療薬品は、シスプラチンやゲムシタビンである。より好ましいのは、ベニクスノキタケ子実体抽出物の有効薬用量が、５．０６〜１８．７５ミリグラム／キログラム（ｍｇ／ｋｇ）である。

【0018】

動物モードの結果によれば、本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物を合わせた化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）の治療セットにより、明確に、６９．４％ （ｐ＜０．００５）までに、肺癌組の肺重量が低減され、単なる化療薬品組の肺重量より、明確に、３０．６％（ｐ＜０．０１）が、低減され、肺腫瘤結節数について、ベニクスノキタケ子実体抽出物を合わせた化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）の治療セットの方は、肺癌組より、５５．４％までに、低減され、筋肉の融解や萎縮の改善について、ベニクスノキタケ子実体抽出物を合わせた化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）の治療セットの方は、単独的に化療薬品組の試験鼠の大腿筋肉の筋肉重量と比較すると、４２％（ｐ＜０．０１）が増加され、そして、明白的に、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）試験鼠の筋肉のプロテアソーム（ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ）の酵素活性が、抑制され、例えば、キモトリプシン（ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ）やトリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ）及びカスパーゼ（ｃａｓｐａｓｅ）等で、それぞれ、２８％（ｐ＜０．０１）や２６．１％（ｐ＜０．０１）及び１１．１％である。腸胃道の障害改善には、ベニクスノキタケ子実体抽出物で、大幅に、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による腸絨毛破壊や胃部潰瘍等の副作用が改善され、また、明確的に、小腸内のロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）やリパーゼ（ＬＩＰ）及びアミラーゼ（ａｍｙｌａｓｅ）等の酵素活性が改善され、腎臓炎症や障害の改善には、ベニクスノキタケ子実体抽出物により、有効的に、化療後の腎盂腎炎指数で、例えば、クレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）や尿素窒素（ＢＵＮ）及び血清アルブミン（ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ）等が、低減される。

【0019】

そのため、本発明によれば、このベニクスノキタケ子実体抽出物を化療薬品の補助として応用でき、また、異なる医薬組成物を調製でき、癌症の治療効果が向上されて、化療副作用が低減される。

【0020】

以下、図面を参照しながら、本発明の特徴や技術内容について、詳しく説明するが、それらの図面等は、参考や説明のためであり、本発明は、それによって制限されることが無い。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】本発明に係る補助化療薬品とするベニクスノキタケ子実体抽出物の作成方法の手順流れ図

【図2】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物のＨＰＬＣ解析スペクトル

【図3】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で化療薬品によるマウス体重低下の改善効果

【図4】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で化療薬品によるマウス常食量低下の改善効果であり、その中、（ａ）がＮｏｒｍａｌ組で、（ｂ）がＣａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）がＣＧＣＡ組で、（ｅ）がＣＡ組である

【図5】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で肺癌鼠の肺重量の低減効果であり、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図6】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で肺癌鼠の肺腫瘤結節数の低減効果であり、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図7】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で化療薬品による試験鼠の筋肉融解と萎縮の改善効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図8】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で、化療薬品による試験鼠の筋肉中のプロテアソーム酵素活性の抑制効果

【図9a】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物でミオスタチン表現の抑制とインスリン様成長因子表現の促進効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図9b】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物でミオスタチン表現の抑制とインスリン様成長因子表現の促進効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図10a】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による血液炎症因子上昇の抑制効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図10b】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による血液炎症因子上昇の抑制効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図10c】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による血液炎症因子上昇の抑制効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図11a】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による小腸中酵素表現の改善効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図11b】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による小腸中酵素表現の改善効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図11c】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による小腸中酵素表現の改善効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図12a】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による腎臓炎症障害の改善効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図12b】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による腎臓炎症障害の改善効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図12c】本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品による腎臓炎症障害の改善効果で、その中、（ａ）が、Ｎｏｒｍａｌ組で、（ｂ）が、Ｃａｎｃｅｒ組で、（ｃ）が、ＣＧＣ組で、（ｄ）が、ＣＧＣＡ組で、（ｅ）が、ＣＡ組である

【図13】異なる薬用量のベニクスノキタケ子実体抽出物を、癌症化療薬品に合わせて、試験鼠の体重に対する影響である

【発明を実施するための形態】

【0022】

以下、複数の実施例で、更に、本発明において、ベニクスノキタケ子実体抽出物を作成することやその動物試験方法及びその流れを説明し、また、本発明の効果や目的を実証する。

【0023】

実施例１：ベニクスノキタケ子実体抽出物の作成方式と高度液体クロマトグラフィー解析

【0024】

１、本発明に係るベニクスノキタケ子実体は、ＣＮＳ１５６５４草案の規格標準に満たし、キノコ体の直径が、約１３センチメートルになり、解剖顕微鏡で、表面を観察すると、明らかに、ベニクスノキタケ子実体の特有多孔化特徴を識別できるし、一枚のキノコ体の乾燥重量が、約６〜１５グラムである。

【0025】

２、ベニクスノキタケ子実体抽出物の作成

【0026】

図１を参照しながら、ベニクスノキタケ子実体抽出物の抽出分離工程を説明すると、ベニクスノキタケ子実体の乾燥粉末を取得する手順Ｓ１０や、一回目の抽出過程において、３０倍体積の、８０〜１００℃の熱い水に、１〜３時間浸入する手順Ｓ２０、１号濾紙（ＡＤＶＡＮＴＥＣ(登録商標)＃１）で、抽気ろ過した後、保管液を除去する手順Ｓ３０、二回目の抽出過程において、低い極性溶剤で、８時間で、５倍の９５％エタノール溶液を抽出すること、三回繰り返す手順Ｓ４０、及び抽出液を収集して得られた抽出液を、降圧濃縮乾燥する手順Ｓ５０を介して、ベニクスノキタケ子実体抽出物が取得される。

【0027】

その中、低い極性溶剤は、ベンジンやｎ‐ヘキサン、酢酸エチル、アセトン、エタノール及びその組合せからなるグルップから選ばれ、エタノールを例とすると、２５〜１００重量％のエタノール溶液である。

【0028】

３、高度液体クロマトグラフィー解析

【0029】

高度液体クロマトグラフィー解析器で、ベニクスノキタケ子実体抽出物の成分を解析する。高度液体クロマトグラフィーの条件は、高度液体クロマトグラフィー解析器のポンプが、Ｓｐｅｃｔｒａ ＳＹＳＴＥＭ Ｐ１０００で、自動サンプラーが、Ｓｐｅｃｔｒａ ＳＹＳＴＥＭ ＡＳ３０００で、検知器が、Ｓｕｒｖｅｙｏｒ ＰＤＡ Ｐｌｕｓで、高度液体クロマトグラフィー管柱が、Ｔｈｅｒｍｏ， ＢＤＳ ＨＹＰＥＲＳＩＬ Ｃ１８、４．６ ＊ ２５０ ｍｍで、流速が、１．０ ｍＬ／ｍｉｎで、管柱温度が、室温で、検知波長が、２５４ ｎｍである。溶媒システムの条件は、下記の表１の通りである。

【0030】

【表1】

【0031】

図２は、本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物のＨＰＬＣ解析スペクトルである。その結果によれば、本発明に係るベニクスノキタケ子実体は、原生ベニクスノキタケ子実体に符合した八つの化学指標成分で、アントシンＡ（（Ｒ，Ｓ）Ａｎｔｃｉｎ Ａ）とアントシンＢ（（Ｒ，Ｓ） Ａｎｔｃｉｎ Ｂ、Ｚｈａｎｋｕｉｃ ａｃｉｄ Ａ）、アントシンＣ（（Ｒ，Ｓ） Ａｎｔｃｉｎ Ｃ）、アントシンＫ（（Ｒ，Ｓ）Ａｎｔｃｉｎ Ｋ）、アントシンＨ（（Ｒ，Ｓ）Ａｎｔｃｉｎ Ｈ）、４，７−ジメトキシ−５− メチル−１，３−ベンゾジオキソール（４，７−ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−５−ｍｅｔｈｙｌ− １，３−ｂｅｎｚｏｄｉｏｘｏｌｅ、ＤＭＢ）、デヒドロスルフレン酸（Ｄｅｈｙｄｒｏｓｕｌｐｈｕｒｅｎｉｃ ａｃｉｄ）及びデヒドロエブリコ酸（Ｄｅｈｙｄｒｏｅｂｕｒｉｃｏｉｃ ａｃｉｄ）を有する。

【0032】

実施例２：本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物の化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）を補助する時の肺癌治療効果が向上される動物試験

【0033】

本試験は、ＬＬＣ（Ｌｅｗｉｓ Ｌｕｎｇ Ｃａｒｃｉｎｏｍａ）／Ｃ５７ＢＬ／６肺癌動物モードを利用し、試験に用いられた動物が、ｍａｌｅ Ｃ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅで、８週間、体重約２５グラムである。飼養環境は、１２時間の光照週期（ＡＭ７：００−ＰＭ７：００）で、適当な温度と湿度制御を行い、十分に、飼料と飲水を供給する。使用される癌細胞株は、マウス肺癌細胞ＬＬＣであり、培養は、１０％ｈｅａｔ−ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｉｕｍ（ＦＢＳ）と１００ｕｎｉｔ／ｍＬ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ（Ｐ／Ｓ）を含む Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｅａｇｌｅ ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ ｍｅｄｉｕｍ）の環境下で、行う。ＬＬＣ細胞を、０．０５％Ｔｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡに移植する。ＦＢＳで、細胞濃度を、２×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬに希釈し、目当ての濃度の癌細胞が、ソフト針により、０．１ｍＬを、８週間のＣ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅの気管内生体位注射して、気管に沿って、肺内に滑り込ませる（即ち、各マウスに、２×１０６ｃｅｌｌｓを移植する）。

【0034】

腫瘤を接種して１週間立つと、マウスを、５匹を１組として、５組に、ランダムに籠に分けて、
１、正常組（コード名：Ｎｏｒｍａｌ組）：正常マウスで、通常生理食塩溶液を供与し、
２、腫瘤組（コード名：Ｃａｎｃｅｒ組）：癌細胞が接種されたマウスで、通常生理食塩溶液を供与し、
３、腫瘤＋化療薬品組（コード名：ＣＧＣ組）：癌細胞が接種されたマウスで、シスプラチンやゲムシタビンの臨床化療薬品が注射され、
４、腫瘤＋ベニクスノキタケ子実体抽出物＋化療薬品組（コード名：ＣＧＣＡ組）：癌細胞が接種されたマウスで、シスプラチンやゲムシタビンの臨床化療薬品が注射され、それとともに、ベニクスノキタケ子実体抽出物を、３００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで、供与し、及び
５、腫瘤＋ベニクスノキタケ子実体抽出物（コード名：ＣＡ組）：ベニクスノキタケ子実体抽出物を、３００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで、供与する。

【0035】

腫瘤を接種誘導してから十日後、被測定薬品の供与を始める。実験の期間、毎日、マウスの生存と生理状況（体重や常食量）を観察する。３週間（或いは４週間、実験設計に基づく）、続いて、投薬して、実験を終了し、動物を犠牲して、各器官を取得して重さを量り、写真を撮って記録し、それから、病理解析を行い、残った各器官を、１．５ｍＬ遠心管に移入して、−８０℃の冷蔵庫に保管し、後続解析に利用される。試験結果は、図３〜６のようである。

【0036】

体重観察について、図３を参照しながら、試験結果によって、３週間、続いて、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与した後、Ｎｏｒｍａｌ組の試験鼠の体重平均が、２５．４３グラムであり、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の体重は、１９．０３グラムだけで、Ｎｏｒｍａｌ組の体重より、約２５．２％低減し、ＣＧＣ組の試験鼠の体重は、最も軽い１７．８２グラムで、Ｃａｎｃｅｒ組の体重よりも、約６．４％低減し、ＣＧＣＡ組の試験鼠の体重は、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与するため、平均的体重が、２０．０１グラムになり、Ｃａｎｃｅｒ組の体重よりも、約５．１％増加し、ＣＡ組は、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与するため、平均的体重が、２２．２１グラムになり、Ｃａｎｃｅｒ組の体重よりも、約１６．７％増加する。

【0037】

常食量観察について、図４を参照しながら、試験結果によって、Ｎｏｒｍａｌ組の試験鼠は、毎日常食量が、約３．５５±０．２４グラムであり、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠は、毎日常食量が、約２．５９±０．６０グラムであり、Ｎｏｒｍａｌ組の試験鼠の常食量よりも、約２７％低減し、ＣＧＣ組の試験鼠が、毎日常食量が、僅か２．５１±０．７６グラムであり、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の常食量よりも、約３．０％低減し、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＧＣＡ組とＣＡ組の常食量は、それぞれ、２．６５±０．６４グラムと３．０２±０．３８グラムであり、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の常食量より、それぞれ、２．３％と１６．６％増加し、これにより、化療薬品による試験の常食量低減効果を改善することが、明らかになる。

【0038】

試験鼠の生体位肺癌生長について、外観観察結果によって、ＣＧＣＡ組は、ＣＧＣ組よりも、肺癌生長を低減する効果が明らかであり、肺重量解析結果によって、図５を参照しながら、Ｎｏｒｍａｌ組の試験鼠の肺重量が、約０．１６±０．０１グラムであり、Ｃａｎｃｅｒ組の肺重量は、１．１１±０．１４グラムになって、Ｎｏｒｍａｌ組の試験鼠の肺重量よりも、約５９３．８％増加し、ＣＧＣ組の肺重量は、０．４９±０．０７グラムで、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の肺重量よりも、約５５．９％低減し、化療薬品＋ベニクスノキタケ子実体抽出物のＣＧＣＡ組の肺重量が、僅か、約０．３４±０．０５グラムで、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の肺重量よりも、約６９．４％低減し、ＣＧＣ組とは、差異が大きくなり（ｐ＜０．０１）、また、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＡ組は、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の肺重量が、約４２．３％低減し、これにより、肺癌鼠の肺重量の低減効果が明白的である（ｐ＜０．００５）。

【0039】

図６は、肺癌鼠の肺腫瘤結節数の結果によって、Ｃａｎｃｅｒ組の肺癌結節数が、５３．４±３．３９個になり、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＡの肺癌結節数は、３８．２±３．４８個で、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の肺結節数よりも、約２８．５％低減し、Ｃａｎｃｅｒ組とは、明白的に、差異がある（ｐ＜０．００５）。また、ＣＧＣＡ組の肺癌結節数は、僅か、２３．８±３．６８個で、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の肺結節数よりも、約５５．４％低減し、それも、単純のＣＧＣ組の３１．４±４．１３個よりも低い。

【0040】

実施例３：ベニクスノキタケ子実体抽出物で化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による抜け毛の改善効果

【0041】

試験方法は、実施例２と同じであり、試験鼠に対して、３週間、続いて、投薬した後、実験を終了し、各組の試験鼠の抜け毛を、観察して写真を撮り、試験結果によって、ＣＧＣ組は、明白的に、Ｎｏｒｍａｌ組よりも、抜け毛が発生し、また、ＣＧＣ組の抜け毛が、厳重的であるが、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＧＣＡ組は、ＣＧＣ組の抜け毛が、明白に改善される。

【0042】

実施例４：ベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による筋肉融解と萎縮の改善効果

【0043】

試験方法は、実施例２と同じである。試験鼠に対して、３週間、続いて、投薬した後、実験を終了し、動物を犠牲して、各組のひ腹筋（Ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ ｍｕｓｃｌｅ）とヒラメ筋（Ｓｏｌｅｕｓ ｍｕｓｃｌｅ）の重量変化を、統計解析し、また、病理組織を切片染色して、筋肉組織ａｔｒｏｐｈｙの改善状況を観察し、そして、筋肉にある主なプロテアソーム（ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ）で、キモトリプシン（ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ）やトリプシン（ｔｒｙｐｓｉｎ）及びカスパーゼ（ｃａｓｐａｓｅ）等の活性変化を解析する。各組の後大腿筋肉の比較結果によって、Ｃａｎｃｅｒ組とＣＧＣ組は、明白に、Ｎｏｒｍａｌ組よりも細く小さくなり、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＧＣＡ組とＣＡ組は、明白に、大腿筋肉の融解と萎縮が改善される。

【0044】

筋肉の外観と重量解析について、図７を参照しながら、結果によれば、Ｎｏｒｍａｌ組は、ひ腹筋（Ｇａｓｔｒｏｃｎｅｍｉｕｓ ｍｕｓｃｌｅ）とヒラメ筋（Ｓｏｌｅｕｓ ｍｕｓｃｌｅ）の重量が、約１．２８±０．０７グラムであり、ＣａｎｃｅｒとＣＧＣ組の重量は、それぞれ、０．６±０．０３グラム（Ｎｏｒｍａｌ組よりも５３．１％低減する）と０．５７±０．０５グラムに低減し（Ｎｏｒｍａｌ組よりも５５．５％低減する）、他の各組より、明らかに萎縮するが、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＧＣＡ組とＣＡ組は、その筋肉重量が、それぞれ、０．８１±０．１１（Ｃａｎｃｅｒ組よりも３５％増加する）と０．９０±０．０４グラムになり（Ｃａｎｃｅｒ組よりも５０％増加する）、明白に、ＣＧＣ組の筋肉融解と萎縮現象が改善される（ｐ＜０．０１）。筋肉病理組織切片Ｈ＆Ｅ染色結果によれば、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＧＣＡ組とＣＡ組は、明白に、化療薬品による筋肉融解が改善される効果が得られる。図８の試験結果によれば、化療薬品組（ＣＧＣ組）は、筋肉にあるキモトリプシンやトリプシン等のプロテアソーム酵素活性が、全ての試験組の中において、最も高く、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＧＣ組は、明白に、その活性（ｐ＜０．０１）を低下でき、また、アポトーシマメカニズムを実行するカスパーゼ酵素活性は、ＣＧＣ組が最も高く、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与することは、筋肉において、化療薬品によるプロテアソーム酵素活性を低下することに、有利である。その作用メカニズムは、ミオスタチン（ｍｙｏｓｔａｔｉｎ）の抑制とインスリン様成長因子（ＩＧＦ−１）の促進によって実現されると推測する（図９ａ〜９ｂ）。

【0045】

実施例５：ベニクスノキタケ子実体抽出物で、癌症化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による血液炎症因子上昇の抑制効果

【0046】

試験方法は、実施例２と同じである。試験鼠に対して、３週間（或いは４週間、実験設計に基づく）、続いて、投薬して、実験を終了し、動物を犠牲して、血液を取得して、各組の血液のインターロイキン６（ＩＬ−６）やインターロイキン１β（ＩＬ−１β）及び腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）の変化を解析する。図１０ａ〜１０ｃ図の試験結果によれば、各組の血液のＩＬ−６やＩＬ−１β及びＴＮＦ−α等の炎症因子の濃度は、ＣＧＣ組が、最も高く、ベニクスノキタケ子実体抽出物を供与したＣＧＣＡ組は、明白に、血液中のＩＬ−６やＩＬ−１β及びＴＮＦ−α等の炎症因子濃度が低下される（ｐ＜０．０１）。

【0047】

実施例６：ベニクスノキタケ子実体抽出物で、癌症化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による腸胃道の障害の改善効果

【0048】

試験方法は、実施例２と同じである。試験鼠に対して、３週間（或いは４週間、実験設計に基づく）、続いて、投薬した後、実験を終了し、動物を犠牲して、小腸絨毛病理切片を作成してＨ＆Ｅ染色で、絨毛破壊を観察し、結果として、ベニクスノキタケ子実体抽出物で、大幅に、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による腸絨毛破壊や胃部潰瘍等の副作用が改善され、また、明白に、小腸中のロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）やリパーゼ（ＬＩＰ）與アミラーゼ（ａｍｙｌａｓｅ）等の酵素活性が改善される（図１１ａ〜１１ｃ）。

【0049】

実施例７：ベニクスノキタケ子実体抽出物で癌症化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による腎臓炎症の障害の改善効果

【0050】

試験方法は、実施例２と同じである。試験鼠に対して、３週間（或いは４週間、実験設計に基づく）、続いて、投薬した後、実験を終了し、動物を犠牲して、血液を取得して、各組の血液のクレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）や尿素窒素（ＢＵＮ）及び血清アルブミン（ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ）等の濃度を解析し、結果により、ベニクスノキタケ子実体抽出物で、明白に、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による試験鼠の血中の腎盂腎炎指数であるクレアチニン（ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ）や尿素窒素（ＢＵＮ）及び血清アルブミン（ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ）が、低減されることが分かる（図１２ａ〜１２ｃ）。

【0051】

実施例８：ベニクスノキタケ子実体抽出物で、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）を補助して肺癌を治療する薬用量試験

【0052】

本試験は、皮下癌細胞注射モードで、腫瘤生長の悪化を評価する。実験に使用された動物が、８週間のｍａｌｅ Ｃ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅであり、体重が、約２５グラムである。飼養環境は、１２時間の光照週期（ＡＭ７：００−ＰＭ７：００）で、適当な温度と湿度制御を行い、十分に、飼料と飲水を供給する。使用される癌細胞株は、マウス肺癌細胞ＬＬＣである。

【0053】

鼠肺癌細胞株（ＬＬＣ）は、１０％ ｈｅａｔ−ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｉｕｍ（ＦＢＳ）、１００ ｕｎｉｔ／ｍｌ Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ−Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ（Ｐ／Ｓ）を含有する Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｅａｇｌｅ ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ ｍｅｄｉｕｍ）環境に培養され、また、細胞が、５％ＣＯ２、３７℃と９０％湿度の恒温の二酸化炭素の培養箱に培養され、細胞密度が、２×１０５〜１×１０６（八から九分）に維持される。固定的に、二日から三日おきに、新鮮な培養基を交換する。

【0054】

ＬＬＣ細胞を、０．０５％ Ｔｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡに移植する。ＦＢＳで、細胞濃度を、１×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬに希釈し、目当ての濃度の細胞が、インシュリン針で、０．１ｍＬの癌細胞を、８週間のＣ５７ＢＬ／６ｍｉｃｅの右背側の皮下に皮下注射する（即ち、各マウスに１×１０６ｃｅｌｌｓを移植する）。

【0055】

腫瘤を移植して、１週間立つと、マウスを、５匹を１組として、５組に、ランダムに籠に分けて、
１、腫瘤組（コード名：Ｃａｎｃｅｒ組）：癌細胞が接種され、
２、腫瘤＋化療薬品組（コード名：ＣＧＣ組）：癌細胞が接種されて、シスプラチンやゲムシタビンの臨床化療薬品を注射し、
３、腫瘤＋ベニクスノキタケ子実体抽出物＋化療薬品組（コード名：ＣＧＣＡ３００組）：癌細胞が接種されて、シスプラチンやゲムシタビンの臨床化療薬品を注射し、それに合わせて、３００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのベニクスノキタケ子実体抽出物を供与し、
４、腫瘤＋ベニクスノキタケ子実体抽出物＋化療薬品組（コード名：ＣＧＣＡ１５０組）：癌細胞が接種されて、シスプラチンやゲムシタビンの臨床化療薬品を注射し、それに合わせて、１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのベニクスノキタケ子実体抽出物を供与し、
５、腫瘤＋ベニクスノキタケ子実体抽出物＋化療薬品組（コード名：ＣＧＣＡ７５組）：癌細胞が接種されて、シスプラチンやゲムシタビンの臨床化療薬品を注射し、それに合わせて、７５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙのベニクスノキタケ子実体抽出物を供与する。

【0056】

腫瘤を種植誘導してから十日後、被測定薬品の供与を始める。三日毎に、腫瘤の生長を観察して、腫瘤の大きさ（体積）を測定し、腫瘤大きさの計算式は、０．５３ｘ長さｘ幅２である。２週間、投薬した後、薬品の供与を停止し、翌日、鼠を犠牲して、実験過程において、腫瘤の大きさや抜け毛、体重改善及び摂食量等を観察して評価する。情報の表示方法は、ｍｅａｎ±ＳＥＭであり、ＳｉｇｍａＰｌｏｔで、データーの処理や解析及び図の描きを行う。

【0057】

体重と抜け毛の観察によれば、図１３を参照しながら、結果として、試験終了後、Ｃａｎｃｅｒ組の試験鼠の体重が、２６．２グラムになり、化療薬品組（ＣＧＣ組）の試験鼠の体重が、僅か、１８．３グラム（Ｃａｎｃｅｒ組より、体重が３０％低減する）であり、また、異なる薬用量のベニクスノキタケ子実体抽出物が供与されたＣＧＣＡ７５組とＣＧＣＡ１５０組及びＣＧＣＡ３００組の試験鼠の体重が、それぞれ、２１．７と２１．９及び２２．１グラムであり、ＣＧＣ組の体重より、それぞれ、１８．６％と１９．６％及び２０．８％増加する。結果として、７５ｍｇ／ｋｇのベニクスノキタケ子実体抽出物を使用すれば、明白に、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による体重低減現象を改善できる。各組の試験鼠の抜け毛を観察すると、結果として、ベニクスノキタケ子実体抽出物の使用薬用量が７５ｍｇ／ｋｇ以上であれば、明白に、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）による試験鼠の毛色がやや灰色や抜け毛現象を改善できる。

【0058】

試験鼠の肺癌生長の低減については、外観観察結果として、Ｃａｎｃｅｒ組の腫瘤が、最も厳重になり、ＣＧＣ組とは、その差異が、極めて明白になり（ｐ＜０．００１）、また、ＣＧＣＡ１５０組とＣＧＣＡ３００組は、ＣＧＣ組とも、明白な差異が現れ（ｐ＜０．００１）、結果として、ベニクスノキタケ子実体抽出物により、化療薬品（シスプラチンやゲムシタビン）の肺癌に対する治療効果が向上される。

【0059】

上記実施例によれば、本発明に係るベニクスノキタケ子実体抽出物は、有効に化療薬品（例えば、シスプラチンやゲムシタビン）に補助して、肺癌抑制効果が向上され、また、化学治療による抜け毛や筋肉融解と萎縮、及び腸胃道と腎臓炎症の障害等を改善でき、更に、各種類の薬剤形態の医薬組成物に作成することができて、化療薬品の治療補助として利用できる。

【0060】

上記の医薬組成物は、少なくとも、有効薬用量のベニクスノキタケ子実体抽出物と薬学的に許容しうる担体と、が含有され、カプレやカプセル、滴丸、乳剤、沖劑、水性分散液、ディスパージョン或いは他の溶液の経口投与剤作成されることができ、また、化療薬品を補助して癌症を治療することや癌症副作用の改善に応用できる。また、本発明の実施例によれば、ベニクスノキタケ子実体抽出物の使用薬用量が、７５〜３００ミリグラム／キログラム（ｍｇ／ｋｇ）の範囲内にあり、含水率が約２５％であることを顧慮すれば、マウス動物モードでは、有効薬用量が、５６〜２２５ｍｇ／ｋｇであることが好ましい。

【0061】

以上のように、本発明に係る補助化療薬品とされる医薬組成物とその用途は、確実に、化療薬品に合わせて癌症病者に投薬あると、治療効果が向上されて、化療副作用が低下され、未來の臨床癌症治療に、実質上、有利である。

【0062】

そのため、本発明は、より進歩的かつより実用的で、法に従って特許出願する。

【0063】

以上は、ただ、本発明のより良い実施例であり、本発明は、それによって制限されることが無く、本発明に係わる発明請求の範囲や明細書の内容に基づいて行った等価の変更や修正は、全てが、本発明の発明請求の範囲内に含まれる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9a】

【図9b】

【図10a】

【図10b】

【図10c】

【図11a】

【図11b】

【図11c】

【図12a】

【図12b】

【図12c】

【図13】