特許 6239139 新規化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6239139

(24)【登録日】2017年11月10日

(45)【発行日】2017年11月29日

(54)【発明の名称】新規化合物

(51)【国際特許分類】

   C07D 471/04 20060101AFI20171120BHJP

   C07D 471/14 20060101ALI20171120BHJP

   A61K 31/437 20060101ALI20171120BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20171120BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20171120BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20171120BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20171120BHJP

   A61P 17/04 20060101ALI20171120BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20171120BHJP

   C07D 239/48 20060101ALN20171120BHJP

   C07D 487/04 20060101ALN20171120BHJP

   C07D 495/04 20060101ALN20171120BHJP

   A61K 31/519 20060101ALN20171120BHJP

   A61K 31/53 20060101ALN20171120BHJP

   A61K 31/505 20060101ALN20171120BHJP

   A61K 31/5025 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 37/02 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 37/06 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 19/02 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 3/10 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 35/00 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 35/02 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 11/06 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 37/08 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 5/00 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 1/04 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 25/28 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 11/02 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 11/00 20060101ALN20171120BHJP

   A61P 27/14 20060101ALN20171120BHJP

【ＦＩ】

   C07D471/04 104Z

   C07D471/04CSP

   C07D471/14 102

   A61K31/437

   A61P43/00 111

   A61P25/00 101

   A61P29/00

   A61P17/06

   A61P17/04

   A61P17/00

   A61P43/00 171

   !C07D239/48

   !C07D487/04 144

   !C07D487/04 143

   !C07D487/04 140

   !C07D495/04 105Z

   !C07D495/04 105A

   !A61K31/519

   !A61K31/53

   !A61K31/505

   !A61K31/5025

   !A61P37/02

   !A61P37/06

   !A61P19/02

   !A61P3/10

   !A61P35/00

   !A61P35/02

   !A61P11/06

   !A61P37/08

   !A61P5/00

   !A61P1/04

   !A61P25/28

   !A61P11/02

   !A61P11/00

   !A61P27/14

【請求項の数】10

【全頁数】33

(21)【出願番号】特願2016-554336(P2016-554336)

(86)(22)【出願日】2015年3月25日

(65)【公表番号】特表2017-506656(P2017-506656A)

(43)【公表日】2017年3月9日

(86)【国際出願番号】EP2015056430

(87)【国際公開番号】WO2015144773

(87)【国際公開日】20151001

【審査請求日】2016年8月26日

(31)【優先権主張番号】14162391.8

(32)【優先日】2014年3月28日

(33)【優先権主張国】EP

(73)【特許権者】

【識別番号】515115459

【氏名又は名称】ノバルティス ティーアゲズントハイト アーゲー

(74)【代理人】

【識別番号】100100158

【弁理士】

【氏名又は名称】鮫島 睦

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(72)【発明者】

【氏名】ノエル・ゴヴリー

(72)【発明者】

【氏名】シュエブ・タータウィ

(72)【発明者】

【氏名】パスカル・フュレ

(72)【発明者】

【氏名】ピエール・デュクレイ

【審査官】 三上 晶子

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１３−５１７２２０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１３／００７７６５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００８−５４５６６０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００８−５２５４６３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５０１１３０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１３／０２４８９５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２０１３−５１４３５６（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ２０１／００−５２１／００

Ａ６１Ｋ ３１／３３− ３３／４４

Ａ６１Ｐ １／００− ４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式１

【化1】

の化合物
（式中Ｒは、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＣ_３〜Ｃ_５−シクロアルキルであり、かつＡは、式２ａ

【化2】

からなる
（式中Ｙは、ＮＨ、Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_２−アルキル）またはＯからなる群から選択され、かつＲ^２は、シアノ（ＣＮ）、ニトロ（ＮＯ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）ＯＲ’またはＮＲ’Ｒ’’からなる群から選択され、かつＲ’およびＲ’’は、独立にＨまたはＣ_１〜Ｃ_４−アルキルからなる群から選択されるか、あるいは
ＹおよびＲ^２は、共に

【化3】

を形成する（式中Ｒ^０は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルコキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＮＨ_２からなる群から選択される）））。

【請求項2】

式１

【化4】

の化合物
（式中Ｒは、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＣ_３〜Ｃ_５−シクロアルキルであり、かつＡは、式２ａ

【化5】

からなる
（式中Ｙは、ＮＨ、Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_２−アルキル）またはＯからなる群から選択され、かつＲ^２は、シアノ（ＣＮ）、ニトロ（ＮＯ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）ＯＲ’またはＮＲ’Ｒ’’からなる群から選択され、かつＲ’およびＲ’’は、独立にＨまたはＣ_１〜Ｃ_４−アルキルからなる群から選択されるか、あるいは
ＹおよびＲ^２は、共に

【化6】

を形成する（式中Ｒ^０は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルコキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＮＨ_２からなる群から選択される）））、またはその獣医学的に許容可能な塩。

【請求項3】

式１

【化7】

の化合物
（式中Ｒは、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＣ_３〜Ｃ_５−シクロアルキルであり、かつＡは、式２ａ

【化8】

からなる
（式中Ｙは、ＮＨ、Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_２−アルキル）またはＯからなる群から選択され、かつＲ^２は、シアノ（ＣＮ）、ニトロ（ＮＯ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）ＯＲ’またはＮＲ’Ｒ’’からなる群から選択され、かつＲ’およびＲ’’は、独立にＨまたはＣ_１〜Ｃ_４−アルキルからなる群から選択される））。

【請求項4】

式１

【化9】

の化合物
（式中Ｒは、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＣ_３〜Ｃ_５−シクロアルキルであり、かつＡは、式２ａ

【化10】

からなる
（式中Ｙは、ＮＨ、Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_２−アルキル）またはＯからなる群から選択され、かつＲ^２は、シアノ（ＣＮ）、ニトロ（ＮＯ_２）、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）ＯＲ’またはＮＲ’Ｒ’’からなる群から選択され、かつＲ’およびＲ’’は、独立にＨまたはＣ_１〜Ｃ_４−アルキルからなる群から選択される））、またはその獣医学的に許容可能な塩。

【請求項5】

式１

【化11】

の化合物
（式中Ｒは、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＣ_３〜Ｃ_５−シクロアルキルであり、かつＡは、式２ａ’

【化12】

からなる
（式中Ｒ^０は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルコキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＮＨ_２からなる群から選択される））。

【請求項6】

式１

【化13】

の化合物
（式中Ｒは、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＣ_３〜Ｃ_５−シクロアルキルであり、かつＡは、式２ａ’

【化14】

からなる
（式中Ｒ^０は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルコキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＮＨ_２からなる群から選択される））、またはその獣医学的に許容可能な塩。

【請求項7】

１−［ｔｒａｎｓ−４−（（２−アミノ）イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドであり

【化15】

として構造的に表現され得る化合物。

【請求項8】

１−［ｔｒａｎｓ−４−（（２−アミノ）イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドであり

【化16】

として構造的に表現され得る化合物、またはその獣医学的に許容可能な塩。

【請求項9】

請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物またはその獣医学的に許容可能な塩、および獣医学的に許容可能な担体を含む、イヌにおけるアトピー性皮膚炎、湿疹、乾癬、強皮症、掻痒および他の掻痒状態またはアレルギー性皮膚炎の治療のための医薬組成物。

【請求項10】

イヌにおけるアトピー性皮膚炎、湿疹、乾癬、強皮症、掻痒および他の掻痒状態またはアレルギー性皮膚炎の治療のための薬物の製造における請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ＪＡＫ阻害剤の別名でも知られる、ヤヌスキナーゼ阻害剤である新規のヘテロシクリル置換されたシクロヘキシルメタンスルホンアミド、ならびにアレルギー性皮膚炎、湿疹、アトピー性皮膚炎、掻痒および他の掻痒状態ならびに炎症性疾患も含めたアレルギー反応の治療におけるそれらの使用に関する。

【背景技術】

【0002】

オクラシチニブ、ピロロピリミジンアミノシクロヘキシルメタンスルホンアミドは、イヌにおけるアレルギー性皮膚炎に関連した掻痒のコントロールおよびアトピー性皮膚炎のコントロール用に認可されたＪＡＫ阻害剤である。しかしながら、新規の、より効力のあるＪＡＫ阻害剤分子の研究が続いている。驚いたことに、皮膚疾患、具体的にはアトピー性皮膚炎および掻痒に関して改善された活性を提供する新規の特異的なＪＡＫ阻害剤が発見されている。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0003】

したがって本発明は、一態様において式

【化1】

の化合物に関する
（式中Ｒは、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＣ_３〜Ｃ_５−シクロアルキルであり、かつＡは、
（ｉ）式

【化2】

の基
（式中Ｙは、ＮＨ、Ｎ（Ｃ_１〜Ｃ_２−アルキル）またはＯのいずれかであり、Ｒ^２は、シアノ（ＣＮ）、ニトロ（ＮＯ_２）Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）ＯＲ’またはＮＲ’Ｒ’’であり、かつＲ’およびＲ’’は、独立にそれぞれ他のＨまたはＣ_１〜Ｃ_４−アルキルであるか、あるいは
ＹおよびＲ^２は、共に二価の基

【化3】

を形成する（式中Ｒ^０は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルコキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＮＨ_２でありかつ好ましくはＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはＮＨ_２である））、
または（ｉｉ）式

【化4】

の基
（式中Ｘは、Ｎ、Ｃ（ＣＮ）、Ｃ（ＮＯ_２）、Ｃ［Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’］、Ｃ［Ｃ（Ｏ）ＯＲ’］またはＣ（ＮＲ’Ｒ’’）であり、かつＹ、Ｒ’およびＲ’’は、上記で定義された通りである）、
または（ｉｉｉ）式

【化5】

の基
（式中Ｘ^１およびＸ^２のうちの１つは、Ｎでありかつもう一方は、Ｃ（Ｒ^３）であり、Ｒ^３は、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、フェニルまたはベンジルであり、かつＹは、上記で定義された通りである）、
または（ｉｖ）式

【化6】

の基
（式中Ｘ^３がＮでありかつＸ^４がＣＨまたはＮであるか、あるいはＸ^３がＣ（ＣＮ）、Ｃ（ＮＯ_２）、Ｃ［Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’］、Ｃ［Ｃ（Ｏ）ＯＲ’］またはＣ（ＮＲ’Ｒ’’）でありかつＸ^４がＮであり、かつＹ、Ｒ’およびＲ’’は、上記で定義された通りである）、
または（ｖ）式

【化7】

の基である
（式中Ｒ^４およびＲ^５は、独立にそれぞれ他のＨ、ハロゲン、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルまたはフェニルであり、かつＹは、上記で定義された通りである））。

【0004】

可変のＲは、好ましくはメチル、エチルまたはシクロブチル、特にメチルである。

【0005】

ヒドロキシル−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルとしてのＲ^０は、好ましくはヒドロキシメチルまたはヒドロキシエチル、特にヒドロキシメチルである。Ｃ_１〜Ｃ_４−アルコキシ−Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキルとしてのＲ^０は、好ましくはメトキシメチルまたはエトキシメチル、特にメトキシメチルである。可変のＲ^０は、好ましくはＨ、メチルヒドロキシメチル、メトキシメチルまたはＮＨ_２、より好ましくはＨ、メチルまたはＮＨ_２、特にＨである。Ｒ’およびＲ’’は、独立にそれぞれ他の好ましいＨ、メチルまたはエチルである。Ｒ^２は、好ましくはシアノまたはニトロである。

【発明を実施するための形態】

【0006】

本発明の一実施形態は、Ｒ^２およびＹが定義された通りの意味を有する、式（２ａ）の基Ａに関する。好ましい基Ａは、Ｒ^２が、シアノまたはニトロかつＹが、ＮＨ、Ｎ（ＣＨ_３）またはＯ、好ましくはＮＨまたはＮ（ＣＨ_３）、特にＮ（ＣＨ_３）である、式（２ａ）のものである。

【0007】

いっそうのさらなる好ましい基Ａは、式

【化8】

の基である。

【0008】

好ましい式（２ｂ）の基は、基

【化9】

である
（式中Ｙは、いずれの場合にもＯ、ＮＨまたはＮ（ＣＨ_３）、特にＮ（ＣＨ_３）、またはＯ、特にＮ（ＣＨ_３）である）。

【0009】

本発明のさらなる実施形態は、Ｘ^１がＣＨかつＸ^２がＮである、式（２ｃ）の基Ａに関する。いっそうのさらなる実施形態は、Ｘ^１がＮ、Ｘ^２がＣ（Ｒ^３）かつＲ^３がＨ、Ｃ_１〜Ｃ_４−アルキル、フェニルまたはベンジル、好ましくはＨ、メチル、フェニルまたはベンジルである式（２ｃ）の基Ａに関する。

【0010】

好ましい式（２ｄ）の基は、

【化10】

である
（式中Ｙは、いずれの場合にもＮＨまたはＮ（ＣＨ_３）である）。

【0011】

さらなる実施形態は、Ｒ^４およびＲ^５のうちの１つが、Ｈでありかつもう一方が、Ｈ、ハロゲン、またはフェニルであり、かつＹが、ＮＨまたはＮ（ＣＨ_３）である、式（２ｅ）の基Ａに関する。

【0012】

本発明の化合物は、１種または複数の立体異性体として存在しうる。種々の立体異性体には、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、アトロプ異性体および幾何異性体が含まれる。

【0013】

式（Ｉ）の化合物がキラル炭素原子を有する場合、それらは（Ｒ）または（Ｓ）配置のいずれかを有し得る。本発明は、特定のキラル炭素原子において（Ｓ）および（Ｒ）配置の両方を有する化合物式（Ｉ）を包含し、これは本発明が、当該の炭素原子がそれぞれ独立に（Ｒ）配置を有する、または（Ｓ）配置を有する一般式（Ｉ）の化合物を対象として含むことを意味する。

【0014】

複数のキラル中心が式（Ｉ）の化合物中に存在する場合はキラル中心の配置の任意の所望の組み合わせが可能であり、これは（１）１つのキラル中心が（Ｒ）配置を有していてよくかつもう一方のキラル中心が（Ｓ）配置、（２）１つのキラル中心が（Ｒ）配置を有していてよくかつもう一方のキラル中心が（Ｒ）配置、ならびに（３）１つのキラル中心が（Ｓ）配置を有していてよくかつもう一方のキラル中心が（Ｓ）配置であることを意味する。

【0015】

１つの立体異性体は、もう一方の立体異性体と比較して豊富な場合またはもう一方の立体異性体から切り離された場合により活性かつ／あるいは有益な効果を示し得ることは、当業者なら理解するであろう。加えて、当業者は、前記立体異性体を分離、濃縮、および／または選択的に調製する方法を知っている。本発明の化合物は、立体異性体の混合物、個々の立体異性体、または光学的に活性の形態として存在し得る。

【0016】

当業者なら、窒素はオキシドへの酸化のために利用可能な孤立電子対を必要とするので全ての窒素を含有する複素環がＮ−オキシドを形成し得るわけではないことを理解し、当業者はＮ−オキシドを形成し得るそれらの窒素を含有する複素環を認識するであろう。当業者は、第三級アミンがＮ−オキシドを形成し得ることも認識するであろう。過酢酸およびｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）などの過酸、過酸化水素、ｔ−ブチルヒドロペルオキシドなどのアルキルヒドロペルオキシド、過ホウ酸ナトリウム、ならびにジメチルジオキシランなどのジオキシランでの複素環および第三級アミンの酸化を含めた複素環および第三級アミンのＮ−オキシドの調製のための合成法は、当業者に非常に良く知られている。Ｎ−オキシドの調製のためのこれらの方法は、文献に広範に記述されかつ精査されている。適したＳ−オキシドの製造は、例えば、Ｎ−オキシドのための上述の通りの酸化剤と同じ種類を用いて、類似したやり方で実行され得る。

【0017】

当業者は、環境および生理学的条件下で化学化合物の塩はそれらの対応する非塩形態と平衡状態にあるので、塩が非塩形態の生物学的有用性を共有することを認識する。したがって式（Ｉ）の化合物の多様な種類の塩が有用である（すなわち獣医学的に適する）。式（Ｉ）の化合物の塩には、臭化水素酸、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、酢酸、酪酸、フマル酸、乳酸、マレイン酸、マロン酸、シュウ酸、プロピオン酸、サリチル酸、酒石酸、４−トルエンスルホン酸または吉草酸などの無機または有機酸との酸付加塩が含まれる。式（Ｉ）の化合物が、カルボン酸またはフェノールなどの酸性の部分を含有する場合、塩は、ピリジン、トリエチルアミンまたはアンモニアなどの有機または無機塩基、あるいはナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウムまたはバリウムのアミド、水素化物、水酸化物または炭酸塩と共に形成されたものも含まれる。したがって、本発明は、式（Ｉ）、Ｎ−オキシドおよび獣医学的に許容可能なその塩から選択される化合物を含む。本発明の化合物は、分子内塩も形成し得る。

【0018】

本発明は、ｉｎ ｖｉｖｏで本発明の化合物に転換する本発明の化合物のプロドラッグも提供する。プロドラッグは、対象へのプロドラッグの投与後に本発明の化合物に、加水分解、代謝および同類のものなどの、ｉｎ ｖｉｖｏでの生理学的作用を通して化学的に変性される活性または不活性の化合物である。例示的なプロドラッグは、例えば、アシルが本明細書において定義された通りの意味を有する、遊離カルボン酸のエステルならびにチオール、アルコールまたはフェノールのＳ−アシルおよびＯ−アシル誘導体である。好ましいものは、生理学的条件下の加溶媒分解によって親カルボン酸に転換可能な獣医学または薬学的に許容可能なエステル誘導体、例えば、低級アルキルエステル、シクロアルキルエステル、低級アルケニルエステル、ベンジルエステル、モノ−またはジ−置換された低級アルキルエステル、例えばω−（アミノ、モノ−またはジ−低級アルキルアミノ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル）−低級アルキルエステル、α−（低級アルカノイルオキシ、低級アルコキシカルボニルまたはジ−低級アルキルアミノカルボニル）−低級アルキルエステル、例えばピバロイルオキシメチルエステルおよび当技術分野において慣例的に使用される同類のものである。加えて、アミンは、ｉｎ ｖｉｖｏでエステラーゼによって開裂され遊離薬剤およびホルムアルデヒドを放出するアリールカルボニルオキシメチル置換誘導体としてマスクされている。さらに、イミダゾール、イミド、インドールおよび同類のものなどの、酸性のＮＨ基を含有する薬剤は、Ｎ−アシルオキシメチル基でマスクされている。ヒドロキシ基は、エステルおよびエーテルとしてマスクされている。欧州特許第００３９０５１号は、マンニッヒ塩基ヒドロキサム酸プロドラッグ、それらの調製および使用を開示している。化合物、それらの塩の形態の化合物およびプロドラッグの間の密接な関係を考慮して、本発明の化合物へのいかなる参照も、適切かつ好都合な場合、本発明の化合物の対応するプロドラッグも指すと理解される。

【0019】

式（Ｉ）の化合物は、例えば、式
Ａ’−Ｈａｌ （３）
の化合物を式

【化11】

の化合物と反応させることによって、調製され得る
（式中ＹおよびＲは、上記で定義された通りであり、Ｈａｌは、ハロゲン、例えば、塩素であり、かつＡ’は、式

【化12】

の基である
（式中Ｒ^２、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｘ^１、Ｘ^２、Ｘ^３およびＸ^４は、上記で定義された通りである））。求核置換反応は、例えば、有機化学の教科書に記載のように実行してよい。例えば、式（３）および（４）の化合物は、塩基の存在下で適した溶媒または溶媒の混合物中で反応させる。溶媒および塩基の選択は、式（３）および（４）の化合物の特有の性質に強く依存する。反応は、室温または、例えば、１００℃を超える高温で起こり得る。ＮＨ基を有する基Ａ’を含む式（３）の化合物の場合、式（４）の化合物との反応を実行する前に前記アミン基を保護することが得策で有り得る。アミン基の保護および後の脱保護は、それ自体が周知であるやり方で実行してよい。

【0020】

あるいは式（３）および（４）の化合物は、有機化学の教科書に記載のようにブッフバルト−ハートウィッグＰｄ触媒によるアミノ化によって結合してよい。

【0021】

式（３）の化合物は、それ自体が周知であるかまたはそれ自体が周知である方法に従って調製され得る。

【0022】

式（４）の化合物は、同様に周知であるか、またはそれ自体が周知である方法に従って調製され得る。例えば、式

【化13】

の化合物のＨＹ基は、
（式中Ｙは、上記で定義された通りである）
式

【化14】

の対応するアルコールを与えるためにカルボキシル基を還元する前にそれ自体が周知であるやり方で最初に保護される
（式中ＰＧは、保護基でありかつＹは、上記で定義された通りである）。式（６）のアルコールは、次いで式（７）

【化15】

の対応する化合物に転換され
（式中ＬＧは、脱離基、例えば、塩素、臭素、メシラートまたはトシラートである）、これが今度は亜硫酸ナトリウムまたはチオ酢酸ナトリウムその後に過酸化水素酸化を用いて式（８）

【化16】

の対応するスルホン酸に転換される。

【0023】

式（８）の化合物は、例えば塩化チオニルとの反応によって、対応するメタンスルホン酸ハロゲン化物に転換された後、式
Ｈ_２Ｎ−Ｒ （９）
のアミンと反応し
（式中Ｒは、上記で定義された通りである）、保護された形態の式（４）の化合物を与え、これは最終的に脱保護される。式（５）の化合物から式（４）の化合物への上記の略述したステップは、全て有機化学の教科書に開示されている通りに実行してよいよく知られている反応である。実施例は、反応をさらに例示する。

【0024】

別の方法では、式（１）の化合物は、国際公開第２０１０／０２０９０５号、１４ページのスキームＩＩに類似して合成してよい。

【0025】

加えて、Ａが式

【化17】

の基である、式（１）の化合物
（式中Ｒ^０は、上記で定義された通りである）は、
アミンの脱保護後、式

【化18】

の化合物（式中ＲおよびＲ^０は、上記で開示された通りである）を与えるために、上記で述べた通りのプロセスによって、それ自体が周知であるやり方で、例えばＨ_２／ラネーニッケルで触媒的に、式（１ａ）の化合物のニトロ基を還元すること、および得られるジアミンを酸ハロゲン化物Ｒ^０−Ｃ（Ｏ）Ｈａｌまたはトリアルキルオルト−エステル（ＡｌｋＯ）_３−Ｃ−Ｒ_０（式中Ｈａｌは、ＢｒまたはＣｌ、Ａｌｋは、例えば、エチルかつＲ^０は、上記で開示された通りである）と反応させることによって、まず第一に式

【化19】

（式中ＰＧは、保護基である）の化合物を調製することによって取得してよい。

【0026】

本発明の化合物は、例えば、ヤヌスキナーゼ−１（ＪＡＫ−Ｉ）、ヤヌスキナーゼ−２（ＪＡＫ−２）、ヤヌスキナーゼ−３（ＪＡＫ−３）およびチロシンキナーゼ−２キナーゼ（ＴＹＫ−２）、特にＪＡＫ−ＩまたはＪＡＫ−３に対する、有効性を有するヤヌスキナーゼ阻害剤（ＪＡＫ−ｉ）である。したがって、それらは、臓器移植、狼瘡、多発性硬化症、リウマチ性関節炎、乾癬、１型糖尿病および糖尿病からの合併症、がん、喘息、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺障害、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、クローン病、アルツハイマー病、白血病、変形性関節炎、掻痒のコントロール、慢性呼吸器疾患、角結膜炎ならびに免疫抑制／免疫調節が望ましいであろう他の徴候のための療法剤として有用である。

【0027】

具体的には本発明の化合物は、アトピー性皮膚炎、湿疹、乾癬、強皮症、掻痒および他の掻痒状態を含めた皮膚疾患、状態または障害、ウマにおける咬傷過敏症、夏癬および皮膚掻痒（ｓｗｅｅｔ ｉｔｃｈ）などのウマアレルギー性疾患を含めた哺乳動物におけるアレルギー性皮膚炎を含めたアレルギー反応をコントロールするための安全かつ有効な薬剤であることが判明している。

【0028】

本発明の化合物は、ＪＡＫ−ＩおよびＪＡＫ−３に対する有効性を有するＪＡＫ阻害剤であるので、それらは、蚤アレルギー性皮膚炎における蚤などの、アレルゲンまたは原因物質の除去後にアトピー性皮膚炎に根強く残るまたはゆっくり退縮するであろう慢性の掻痒および炎症の解決を提供する。

【0029】

本発明の化合物は、薬学的に許容可能な形態で単独であるいは哺乳類の免疫システムを調節する１種もしくは複数の追加の薬剤または抗炎症剤と組み合わせて投与してよい。例は、シクロスポリンＡ、アスピリン、アセトアミノフェン、イブプロフェン、ナプロキセン、ピロキシカム、および抗炎症ステロイド（例えばプレドニゾロンまたはデキサメタゾン）である。これらの薬剤は、同一または別個の剤形の一部として、同一または異なる投与の経路を介して、かつ当業者に周知の標準的な医薬品の慣習に従って同一または異なる投与計画で投与してよい。

【0030】

一実施形態において、本発明は、本明細書に述べる有効量の１種または複数の化合物を対象に投与することを含む、ヒトまたは非ヒト哺乳動物などの、対象におけるＪＡＫに関連した疾患、状態または障害を治療または予防する方法を提供する。ＪＡＫに関連した疾患、状態または障害は、ＪＡＫ−Ｉ、ＪＡＫ−２、ＪＡＫ−３、および／またはＴＹＫ−２に関係し得る。治療され得る適した対象には、家庭内または野生の動物、イヌ、ネコ、ウマおよび同類のものなどの、コンパニオン動物、ウシおよび他の反芻動物、ブタ、家禽、ウサギおよび同類のものを含めた、家畜、霊長類、例えばサル、ならびにラット、マウス、アレチネズミ、モルモットおよび同類のものなどの、齧歯類が含まれる。一実施形態において、化合物は、薬学的に許容可能な形態で、場合によっては薬学的に許容可能な担体において投与される。

【0031】

別の実施形態は、ＪＡＫ酵素を非治療量または治療的有効量いずれかの本化合物のうちの１種または複数と接触させることを含む、ＪＡＫ−Ｉ、ＪＡＫ−２、ＪＡＫ−３および／またはＴｙｋ−２を含めた、ＪＡＫ酵素を阻害する方法を提供する。こうした方法は、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで生じ得る。Ｉｎ ｖｉｔｒｏでの接触は、種々の量または濃度における選択された酵素に対する１種または複数の化合物の有効性を判定するためのスクリーニングアッセイを伴ってよい。Ｉｎ ｖｉｖｏでの治療的有効量の１種または複数の化合物との接触は、記述された疾患、障害または状態の治療あるいはその中で接触が生じる動物における臓器移植拒否反応の予防を伴ってよい。ＪＡＫ酵素および／または宿主動物への１種または複数の化合物の効果も、判定または測定してよい。ＪＡＫ活性を判定するための方法は、下記の実施例の部分に示される。

【0032】

哺乳動物（すなわちヒトおよび動物）における障害を治療するための治療用途において、本発明の化合物またはその医薬組成物は、経口的に、非経口的に、局所的に、直腸に、経粘膜的に、または腸内に投与してよい。非経口投与には、全身効果を発生する間接注入または罹患領域への直接注入が含まれる。局所投与には、局所適用によって容易に接触可能な皮膚または臓器、例えば、眼球または耳の治療が含まれる。局所投与には、全身効果を発生するための経皮的送達も含まれる。直腸投与には、坐剤の形態が含まれる。投与の好ましい経路は、経口および非経口である。

【0033】

本発明の医薬組成物は、当技術分野において良く知られているプロセスによって、例えば、従来型の混合、溶解、顆粒化、糖衣錠形成、研和、乳化、カプセル化、封入、凍結乾燥プロセスまたは噴霧乾燥の手段によって製造してよい。本発明に従う使用のための医薬組成物は、薬学的に使用してよい、活性化合物を調剤品への加工を容易にする、賦形剤および助剤を含む１種または複数の薬学的に許容可能な担体を用いて従来型のやり方で調剤してよい。適切な製剤は、選択された投与の経路に依存する。薬学的に許容可能な賦形剤および担体は、一般に当業者に既知でありかつしたがって本発明に含まれる。

【0034】

本発明の製剤は、短時間作用型、速放性、長時間作用型、および持続性放出であるように設計してよい。したがって、医薬品製剤は、制御放出または徐放性のためも調剤してよい。

【0035】

本発明における使用に適した医薬組成物には、活性要素が意図される目的、すなわち、障害または疾患のコントロールまたは治療を達成するのに十分な量で含有される組成物が含まれる。より具体的には、治療的有効量は、疾患の症状／症候を予防する、緩和するまたは改善するあるいは治療されている対象の生存を延ばすために効果的な化合物の量を意味する。

【0036】

医薬組成物およびその単位剤形における、本発明の化合物である、活性成分の分量は、投与のやり方、特定の化合物の効力および所望の濃度に広く依存して変更または調整してよい。治療的有効量の決定は、当業者なら十分に行うことができる。一般には、活性成分の分量は、組成物の０．０１重量％から９９重量％の間の範囲であろう。

【0037】

一般には、活性成分の投薬量の治療的有効量は、約０．０１から約１００ｍｇ／体重のｋｇ／日、好ましくは約０．１から約１０ｍｇ／体重のｋｇ／日、より好ましくは約０．３から３ｍｇ／体重のｋｇ／日、さらにより好ましくは約０．３から１．５ｍｇ／体重のｋｇ／日の範囲であろう。投薬量は、それぞれの対象の要求条件および治療されている障害または疾患の深刻度に依存して変化し得ることを理解すべきである。所望の用量は、単回用量でまたは適切な間隔で投与される分割用量として、例えば、１日当たり２回、３回、４回、もしくはそれ以上の副用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅｓ）として好都合に表わしてよい。副用量自体は、吸入器からの複数の吸入または眼球への複数の滴の適用によるなど、例えば、いくつかの不連続な疎に間隔をあけた投与に、さらに分割してよい。同様に、投与される初期投薬量は、所望の血漿濃度を急速に達成するために上記の上位レベルを超えて増加してよいことを理解すべきである。一方で、初期投薬量は、最適量より少なくてもよくかつ１日の投薬量は、特定の状況に依存して治療の過程の間に漸次増加してもよい。必要に応じて、１日の用量を、投与のための複数の用量、例えば、１日当たり２から４回に分割してもよい。

【0038】

実施例は、本発明をさらに例示する。

【実施例】

【0039】

実施例１
本実施例は、１−［ｔｒａｎｓ−４−（イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミド（表１の化合物２２）の調製を例示する。

【0040】

ステップＡ：ｔｒａｎｓ−４−アミノシクロヘキサンカルボン酸メチル（０．１９ｇ）、アセトニトリル（３ｍｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（０．４０７ｇ）を、磁気撹拌機および加熱浴を備えた丸底フラスコ内に置いた。臭化ベンジル（０．２９ｍｌ）を加えて反応混合物を２５から３０℃で３時間勢いよく撹拌した。ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ８：１）は、出発原料の完全転換およびモノベンジル化アミンの存在を示した。無機沈殿物をろ過した。ろ液を蒸発させた。残留物を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ヘキサン １：１からＤＣＭ／ＭｅＯＨ １０：１）によって精製しｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸メチルを白色針晶として与えた（０．３３ｇ）。

【0041】

ステップＢ：ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸メチル（０．２２ｇ）を、無水ＴＨＦ（２．２ｍｌ）に溶解して０℃に冷却した。水素化リチウムアルミニウム（０．１２５ｇ）を、約１５分かけて少量ずつ加えた。発泡が止まったときにバッチ温度をゆっくり上昇させて反応を加速した（発熱）。３０分後ＴＬＣ（ＤＣＭ）用に標本抽出し出発原料は検出されなかった。反応混合物を、水および１０％のＮａＯＨでクエンチした。相を分離した。水性を、メチルｔ−ブチルエーテルで抽出した。組み合わせた有機相を、塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ真空中で濃縮して［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］メタノールを、静置すると凝固する無色油として与えた（０．２０ｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0042】

ステップＣ：［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］メタノール（７．７４ｇ）およびトリフェニルホスフィン（９．８４ｇ）を、無水ＴＨＦ（６０ｍｌ）に溶解した。テトラブロモメタン（１２．４４ｇ）を、ＴＨＦ（１７．５ｍｌ）に溶解して滴下で反応混合物に加えた。フラスコを、発熱のために水（約１０℃）で冷却した。沈殿物が出現した。１時間後ＴＬＣ（ＤＣＭ１００％）用に標本抽出しこれは反応の完了を示した。溶媒を蒸発させて残留物をシリカゲルのクロマトグラフィー（ＤＣＭ１００％）によって精製した。生成物を含有する画分を、組み合わせて蒸発させた。固体残留物を、ヘキサン（３０ｍｌ）で取り２から４℃に冷却した。沈殿物を、ろ過し、冷ヘキサンですすぎ真空下で乾燥してＮ，Ｎ−ジベンジル−ｔｒａｎｓ−４−（ブロモメチル）シクロヘキサンアミンを白色固体として与えた（９．２ｇ）。

【0043】

ステップＤ：Ｎ，Ｎ−ジベンジル−ｔｒａｎｓ−４−（ブロモメチル）シクロヘキサンアミン（５．０ｇ）を、イソプロピルアルコール（１０ｍｌ）中に懸濁させた。Ｎａ_２ＳＯ_３（２．２ｇ）およびＫＩ（触媒）を、水（２０ｍｌ）に溶解して加圧反応器内のＮ，Ｎ−ジベンジル−４−（ブロモメチル）シクロヘキサンアミンの懸濁液に加えた。これを密封して十分な撹拌と共に１３０℃に加熱した。反応進行を、ＴＬＣ（ＤＣＭ１００％）によってコントロールした。反応が完了したことが分かったとき、溶媒を蒸発させてトルエンとの共沸蒸留によって乾燥させ［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホン酸を与えた。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0044】

ステップＥ：粗製の［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホン酸（４．５ｇ）を、クロロホルム（７５ｍｌ）中に懸濁させて氷浴中で冷却した。塩化チオニル（１９．４ｍｌ）を、滴下で加えた。反応混合物を、室温で２０分間撹拌し次いで６５℃に加熱して６５℃で一晩撹拌した。溶媒および過剰の塩化チオニルを蒸発させて塩化［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホニルを与えた。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0045】

ステップＦ：粗製の塩化［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホニル（約１１．５ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（４５ｍｌ）中に懸濁させて０℃に冷却した。トリエチルアミン（２．４ｍｌ）その後メチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、１１．５ｍｌ）を加えた。反応混合物を、０℃で１時間撹拌し、室温に温めて室温で１時間保持した。溶媒を蒸発させて残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）で取りＮａＨＣＯ_３（飽和）で洗った。水性相を、ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で逆洗した。組み合わせた有機相を、水および塩水（それぞれ５０ｍｌ）で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させて真空中で濃縮した。粗製材料を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ８：１）で精製した。生成物を含有する画分を組み合わせ、真空中で濃縮してＤＣＭ／ヘキサン（１：１）で摩砕した。沈殿物をろ過し、冷ＤＣＭ／ヘキサン（１：１）で洗い真空下で乾燥させて１−［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを白色固体として与えた（１．６７ｇ）。

【0046】

ステップＧ：１−［ｔｒａｎｓ−４−（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド（１．６ｇ）を、ＭｅＯＨ（１６ｍｌ）に（一部分）溶解した。ギ酸アンモニウム（１．０４ｇ）および湿性１０％Ｐｄ／Ｃ（０．３ｇ）を加えた。反応混合物を、十分な撹拌と共に加熱して還流した。非常にゆっくりとした転換が生じた（ＴＬＣ−ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ８：１）。溶媒を、ＴＨＦ（１０ｍｌ）でいっぱいに満たした。ギ酸アンモニウムの別の部（１．０４ｇ）その後１０％Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ（０．３ｇ）を加えた。反応混合物を、１時間後ＴＬＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ８：１）用に再標本抽出し、完全な転換が確認された。パラジウム触媒を、セライトプラグを通してろ過した。ろ過ケークを、ＭｅＯＨ（２×２０ｍｌ）で洗った。ろ液を、組み合わせて蒸発させた。固体残留物を、メタノールで取り蒸発させた（残留している芳香族の揮発性物およびギ酸アンモニウムを除去するため）。本ステップを、２回繰り返して１−（ｔｒａｎｓ−４−アミノシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを灰白色固体として与えた（０．８５ｇ）。

【0047】

ステップＨ：ＤＣＭ（７０ｍｌ）中の４−クロロ−７−アザインドール（１．３７ｇ）、トリエチルアミン（１．９ｍｌ）およびＤＭＡＰ（０．１１ｇ）の懸濁液に、室温で塩化ベンゼンスルホニル（１．３ｍｌ）を加えた。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。反応混合物を、ＤＣＭで希釈してＨＣｌの水溶液（１Ｍ、７０ｍｌ）でクエンチした。有機相を、分離してＮａＨＣＯ_３（７０ｍｌ）の飽和溶液、水およびＮａＣｌの飽和水溶液で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ真空中で濃縮して１−（ベンゼンスルホニル）−４−クロロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンを褐色固体として与えた（２．６５ｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0048】

ステップＩ：ＤＣＭ（５ｍｌ）に溶解した硝酸テトラブチルアンモニウム（３８１ｍｇ）を、−１０℃で窒素下でＤＣＭ（５ｍｌ）中の１−（ベンゼンスルホニル）−４−クロロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（２９２ｍｇ）の溶液に滴下で加えた。トリフルオロ酢酸無水物（１８０μｌ）を、滴下で加え、同温度で３０分次いで室温で４時間撹拌した。追加の硝酸テトラブチルアンモニウム（８０ｍｇ）およびトリフルオロ酢酸無水物（４０μｌ）を加えて反応混合物を室温で一晩撹拌した。追加の硝酸テトラブチルアンモニウム（３８０ｍｇ）およびトリフルオロ酢酸無水物（１８０μｌ）を加えて反応混合物を室温で３時間撹拌した。ＤＣＭで希釈後、反応混合物を、水でクエンチした。有機相を、分離して水で３回およびＮａＣｌの飽和水溶液で１回抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて真空中で濃縮した。粗製生成物を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン １：５）によって精製して１−（ベンゼンスルホニル）−４−クロロ−５−ニトロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジンをベージュ色固体として与えた（１１１ｍｇ）。

【0049】

ステップＪ：１−（ベンゼンスルホニル）−４−クロロ−５−ニトロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（３３７ｍｇ）、１−（ｔｒａｎｓ−４−アミノシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド（実施例１、ステップＧ、２０６ｍｇ）および炭酸カリウム（３０４ｍｇ）を、ジオキサン／水９：１（１０ｍｌ）中に懸濁させた。得られる懸濁液を、マイクロ波加熱炉内で１２０℃に加熱した。２時間後、反応混合物を、ＨＰＬＣ／ＭＳ用に標本抽出し、可視の出発原料は無く、生成物が形成された。反応混合物を、真空中で濃縮した。ＴＨＦ（１５ｍｌ）、ＥｔＯＡｃ（４５ｍｌ）および水（３０ｍｌ）を、残留物に加えた。反応混合物を、室温で３０分間撹拌した。水性相を、分離してＴＨＦ／ＥｔＯＡｃ １：３の混合物で２回抽出した。組み合わせた有機相を、ＮａＣｌの飽和水溶液で抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて真空中で濃縮した。粗製生成物を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン１：１からＥｔＯＡｃ１００％）によって精製して１−［ｔｒａｎｓ−４−［［１−（ベンゼンスルホニル）−５−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル］アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを黄色泡沫として与えた（２７６ｍｇ）。

【0050】

ステップＫ：１−［ｔｒａｎｓ−４−［［１−（ベンゼンスルホニル）−５−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル］アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド（２５４ｍｇ）を、ＴＨＦ（２０ｍｌ）に溶解した。この溶液を、Ｈ−ｃｕｂｅ（登録商標）フロー反応器（フルＨ_２モード、温度＝室温、流速＝１ｍｌ／分）を用いてラネーニッケル触媒上で６時間水素添加した。ＴＨＦを、真空中で除去した。残留物を、ＥｔＯＡｃに溶解し、硫酸マグネシウムで乾燥させ真空中で濃縮して１−［ｔｒａｎｓ−４−［［５−アミノ−１−（ベンゼンスルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル］アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを黄色樹脂として与えた（２２２ｍｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0051】

ステップＬ：トルエン（６ｍｌ）中の１−［ｔｒａｎｓ−４−［［５−アミノ−１−（ベンゼンスルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル］アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド（９５ｍｇ）、オルトギ酸トリエチル（８０μｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４ｍｇ）の混合物を、一晩還流した。ＥｔＯＡｃで希釈後、反応混合物を、ＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液でクエンチした。有機相を、分離してＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液およびＮａＣｌの飽和水溶液でもう一回抽出し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させて真空中で濃縮した。粗製生成物を、セミ分取ＨＰＬＣ上で精製して１−［ｔｒａｎｓ−４−（６−（フェニルスルホニル）−イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドを無色樹脂として与えた（５０ｍｇ）。

【0052】

ステップＭ：イソプロパノール／水１：１（１ｍｌ）中の１−［ｔｒａｎｓ−４−（６−（フェニルスルホニル）−イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミド（６８ｍｇ）および水酸化リチウム（１４ｍｇ）の混合物を、４０℃で一晩撹拌した。２０時間後、反応混合物を、５０℃に加熱して５０℃で１日撹拌した。追加の水酸化リチウム（１４ｍｇ）を加えた。反応混合物を、６０℃に加熱して６０℃で１日撹拌した。ＨＣｌの水溶液３７％（１２０μｌ）を、ｐＨ＝５に達するまで加え次いでＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液（１００μｌ）を、ｐＨ＝８に達するまで加えた。イソプロパノールを蒸発させた。ＥｔＯＡｃ／ＴＨＦ（２〜３ｍｌ）を、残留物に加えて得られる懸濁液を、室温で撹拌した。炭酸カリウムの水溶液（２Ｍ、２〜３ｍｌ）を、ｐＨ＝１２に達するまで加えた。懸濁液を、室温でさらに撹拌して沈殿物をろ過し、水ですすいで真空下で乾燥し１−［ｔｒａｎｓ−４−（イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドを与えた（１３ｍｇ、表１の化合物２２）。ＭＳ（ＨＰＬＣ／ＭＳ）：３４８（ＭＨ^＋）。保持時間：１．７０分

【0053】

実施例２
本実施例は、Ｎ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−［（５−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ］シクロヘキシル］メタンスルホンアミドの調製を例示する（表１の化合物２５）

【0054】

ステップＡ：ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキサンカルボン酸エチル（１０ｇ）、ジイソプロピルアミン（２１ｍｌ）、臭化ベンジル（１０ｍｌ）およびヨウ化ナトリウム（０．９ｇ）を、一緒に混合して封管内で１２０℃で一晩加熱した。ＥｔＯＡｃで希釈後、反応混合物を、水でクエンチした。水性相を、分離してＥｔＯＡｃで２回抽出した。組み合わせた有機相を、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥させて真空中で濃縮した。粗製生成物を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ ９：１）によって精製しｔｒａｎｓ−４−（ベンジルオキシ）シクロヘキサンカルボン酸エチルを黄色油として与えた（１６．０ｇ）。

【0055】

ステップＢ：ｔｒａｎｓ−４−（ベンジルオキシ）シクロヘキサンカルボン酸エチル（１６．０ｇ）を、氷浴中で冷却しながら乾燥ＴＨＦ中に懸濁させた。水素化リチウムアルミニウム（５．２ｇ）を、少量ずつ加えた。追加後に反応混合物を６０℃で４時間加熱した。その後反応混合物を、０℃に冷却してＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）その後水（３０ｍｌ）を加えた。得られる無機塩を、セライトのパッドを通してろ過した。相を分離した。水性を、ＥｔＯＡｃで抽出した。組み合わせた有機相を、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥させ真空中で濃縮してｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）メタノールを淡黄色固体として与えた（１４．２ｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0056】

ステップＣ：（ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）メタノール（１４．２ｇ）を、氷浴中で冷却しながら乾燥ＴＨＦ中に懸濁させた。トリフェニルホスフィン（２２．３２ｇ）を加えた。得られる溶液を、０℃で１０分間撹拌し、次いでテトラブロモメタン（２８．２２ｇ）を少量ずつ加えてスラリーを室温に達しさせた。撹拌の２４時間後に白色沈殿物をろ過してＴＨＦその後ＥｔＯＡｃで洗った。ろ液を、減圧下で蒸発させシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ ９：１）によって精製してベンジルｔｒａｎｓ−４−（ブロモメチル）シクロヘキシルエーテルを黄色固体として与えた（１７．０ｇ）。

【0057】

ステップＤ：ベンジルｔｒａｎｓ−４−（ブロモメチル）シクロヘキシルエーテル（８．０ｇ）を、イソプロパノール（１００ｍｌ）に溶解して水（１００ｍｌ）中の亜硫酸ナトリウム（７．１２ｇ）を加えた。反応混合物を、次いで１００℃で一晩加熱しながら勢いよく撹拌した。室温まで冷却後、反応混合物を濃縮して白色固体を与えた。メタノールを加えて混合物を室温で３時間撹拌し、次いで沈殿物をろ過し、メタノールですすぎ、ろ液を蒸発させて（ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）メタンスルホン酸を白色固体として与えた（９．５ｇ）。

【0058】

ステップＥ：（ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）メタンスルホン酸（１．０ｇ）を、新たに蒸留したクロロホルム（５０ｍｌ）中に氷浴中で冷却しながら懸濁させた。乾燥ＤＭＦ（３〜５滴）を加えた。得られる溶液を、０℃で１０分間撹拌し、次いで塩化チオニル（０．５２ｍｌ）を、滴下で加えた。混合物を、この温度で１５分間、室温で３０分間および４５℃で一晩撹拌した。冷却後、溶媒を蒸発させ、乾燥ＤＣＭを加え蒸発させて残りの塩化チオニルを除去した。この手順を２回繰り返して塩化（ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）メタンスルホニルを黄色油として与えた（１．０ｇ）。

【0059】

ステップＦ：塩化（ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）メタンスルホニル（１．０ｇ）を、乾燥ＤＣＭ（５０ｍｌ）中に氷浴中で冷却しながら懸濁させ、メチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、５．０ｍｌ）を滴下で加えた。続いて、反応混合物を、室温に達しさせてこの温度で一晩撹拌した。その後、溶媒を蒸発させシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ ９：１）によって精製して１−（ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを淡黄色固体として与えた（０．５６ｇ）。

【0060】

ステップＧ：１−（ｔｒａｎｓ−４−ベンジルオキシシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド（３．７ｇ）を、メタノール中に懸濁させて、Ｐｄ（ＯＨ）_２（１．７５ｇ）を加えた。続いて、反応をパール装置（Ｐａｒｒ ａｐｐａｒａｔｕｓ）内で１２時間継続した。次いで、触媒を、セライトのパッドを通してろ過した。ろ液を蒸発させ、Ｅｔ_２Ｏで洗い真空下で乾燥させて１−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを白色固体として与えた（２．４４ｇ）。

【0061】

ステップＨ：水素化ナトリウム（鉱油中６０％、０．０９ｇ）を、窒素下でＤＭＦ（１９ｍｌ）中の１−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド（０．４０ｇ）の溶液に加えた。室温で３０分後、塩化２−（トリメチルシリル）エトキシメチルを、１５分間かけて反応混合物に加えた。室温で１８時間後、反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈しリン酸ナトリウムの水溶液（１Ｍ）でクエンチした。水性相を、分離してＥｔＯＡｃで２回抽出した。組み合わせた有機相を、水で洗って塩水で２回洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ真空中で濃縮して１−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−Ｎ−（２−トリメチルシリルエトキシメチル）メタンスルホンアミドを黄色油として与えた（０．６６ｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0062】

ステップＩ：水素化ナトリウム（鉱油中６０％、０．０７ｇ）を、窒素下でＤＭＦ（１０ｍｌ）中の１−（ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｎ−メチル−Ｎ−（２−トリメチルシリルエトキシメチル）メタンスルホンアミド（０．４９ｇ）の溶液に加えた。室温で３０分後、ＤＭＦ（５ｍｌ）中の１−（ベンゼンスルホニル）−４−クロロ−５−ニトロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（実施例１、ステップＩ、０．４９ｇ）を、１５分間かけて反応混合物に加えた。室温で３日後、ＥｔＯＡｃを加えて反応混合物を水に注いだ。水性相を、分離してＥｔＯＡｃで抽出した。組み合わせた有機相を、水で２回、水酸化ナトリウム水溶液（２Ｎ）で２回および塩水で２回洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥させて真空中で濃縮した。粗製生成物を、セミ分取ＨＰＬＣ上で精製してＮ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−［（５−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ］シクロヘキシル］−Ｎ−（２−トリメチルシリルエトキシメチル）メタンスルホンアミドを黄色固体として与えた（０．１２ｇ）。

【0063】

ステップＪ：ＡｃＯＨ（１０ｍｌ）および水（５ｍｌ）中のＮ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−［（５−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ］シクロヘキシル］−Ｎ−（２−トリメチルシリルエトキシメチル）メタンスルホンアミド（１２０ｍｇ）の溶液を、窒素下で７０℃で１時間撹拌した。反応混合物を、室温に冷却して水に注いだ。ＮａＯＨの水溶液（４Ｎ）を、ｐＨ＝７〜８に達するまで加えた。水性相を、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。組み合わせた有機相を、水、水酸化ナトリウム水溶液（２Ｎ）で２回および塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥させて真空中で濃縮した。残留物をＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（９：１）から再結晶させてＮ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−［（５−ニトロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）オキシ］シクロヘキシル］メタンスルホンアミドを与えた（５０ｍｇ、表１の化合物２５）。ＭＳ（ＨＰＬＣ／ＭＳ）：３６９（ＭＨ^＋）。保持時間：（１．１２分）

【0064】

実施例３
本実施例は、１−［ｔｒａｎｓ−４−［（５−シアノ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−メチル−アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドの調製を例示する（表１の化合物２６）。

【0065】

ステップＡ：ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム水素化物溶液（Ｒｅｄ−Ａｌ（登録商標）、トルエン中６５％、１８３ｍｌ）を、０℃でトルエン（２５０ｍｌ）中のｔｒａｎｓ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）シクロヘキサンカルボン酸（２４．３ｇ）の溶液に６０分かけて加えた。反応混合物を、次いで１３０℃に加熱してこの温度で１時間撹拌した。０℃まで冷却後、硫酸ナトリウムの飽和水溶液（１９５ｍｌ）を滴下で加えた。反応混合物を、次いでＨｙｆｌｏろ過器を通してろ過した。ろ過ケークを、ＤＣＭ（１５０ｍｌ）および水（２４ｍｌ）ですすいだ。水性相を、分離してＤＣＭ（２×１５０ｍｌ）で２回抽出した。組み合わせた有機相を、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ真空中で濃縮して［ｔｒａｎｓ−４−（メチルアミノ）シクロヘキシル］メタノールをと白色結晶として与えた（１２．５ｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0066】

ステップＢ：塩化ベンゾイル（８．８ｍｌ）を、水（５０ｍｌ）中の炭酸水素ナトリウム（１２．６ｇ）のエマルションおよびＤＣＭ（５０ｍｌ）中の［ｔｒａｎｓ−４−（メチルアミノ）シクロヘキシル］メタノール（１０．９ｇ）に０℃で滴下で加えた。続いて、反応混合物を、室温に達しさせてこの温度で３時間撹拌した。反応混合物を、水（１５０ｍｌ）およびＤＣＭ（２００ｍｌ）で希釈した。有機相を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ真空中で濃縮してＮ−［ｔｒａｎｓ−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルベンズアミドをベージュ色結晶として与えた（１７．２ｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0067】

ステップＣ：トリエチルアミン（１１ｍｌ）、ＤＭＡＰ（０．４３ｇ）および塩化ｐ−トルエンスルホニル（１３．２ｇ）を、ＤＣＭ（２５０ｍｌ）中のＮ−［ｔｒａｎｓ−４−（ヒドロキシメチル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルベンズアミド（１７．０ｇ）の溶液に加えた。室温で３時間後、反応混合物を水（１５０ｍｌ）でクエンチした。有機相を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させて真空中で濃縮した。粗製生成物を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘプタン１：１）によって精製し４−メチルベンゼンスルホン酸［ｔｒａｎｓ−４−［ベンゾイル（メチル）アミノ］シクロヘキシル］メチルを白色結晶として与えた（１９．５ｇ）。

【0068】

ステップＤ：チオ酢酸カリウム（６．３ｇ）を、室温でＤＭＳＯ（６６ｍｌ）中の４−メチルベンゼンスルホン酸［ｔｒａｎｓ−４−［ベンゾイル（メチル）アミノ］シクロヘキシル］メチルの懸濁液（１９．５ｇ）に加えた。反応混合物を、５５℃に加熱して５５℃で３時間撹拌した。室温で冷却後、反応混合物を、ＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）で希釈してＮａＨＣＯ_３（０．１Ｍ、３００ｍｌ）の水溶液でクエンチした。水性相を、分離してＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で２回抽出した。組み合わせた有機相を、水および塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥させて真空中で濃縮した。残留物（１７ｇ、淡黄色結晶）を、ギ酸（７３ｍｌ）に溶解して反応混合物を、２５〜３５℃に加熱した。過酸化水素溶液（水中３０％、２５ｍｌ）を、この温度で６０分かけて加えた。続いて、反応混合物を、室温で冷却して室温で１５分間撹拌した。０℃で冷却後、反応混合物を、メタ重亜硫酸ナトリウムの水溶液（３３％、２７ｍｌ）でクエンチした。ＮａＯＨの水溶液（３３％、１２１ｍｌ）を、次いで０℃でｐＨ＝５に達するまで加えて反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、真空中で濃縮した。得られた残留物を、水（１６０ｍｌ）および２−プロパノール（４０ｍｌ）へ取り込んで４５℃で撹拌した。続いて、２−プロパノールを蒸発させてＨＣｌの水溶液（２Ｍ、１０ｍｌ）を加えた。懸濁液を、０℃で撹拌してろ過した。沈殿物を、真空下でＳｉｃａｐｅｎｔ（登録商標）で乾燥させて［ｔｒａｎｓ−４−［ベンゾイル（メチル）アミノ］シクロヘキシル］メタンスルホン酸をさらなる精製をせずに次のステップにおいて用いられる白色固体として与えた（３１．０ｇ）。

【0069】

ステップＥ：［ｔｒａｎｓ−４−［ベンゾイル（メチル）アミノ］シクロヘキシル］メタンスルホン酸（１０．１ｇ）を、数滴のＤＭＦの追加と共にＤＣＭ（４０ｍｌ）中に懸濁させた。反応混合物を、０℃で冷却して塩化チオニル（４．７ｍｌ）を滴下で１０分かけて加えた。反応混合物を、次いで６時間還流させた。０℃で冷却後、追加の塩化チオニル（４．７ｍｌ）を、滴下で１０分かけて加えた。反応混合物を、次いで一晩還流させた。その後、混合物を、室温に冷却して真空中でほとんど乾燥するまで濃縮した。いかなる未反応の塩化チオニルも確実に除去するために乾燥トルエンを残留物に加えて減圧下で除去した。残留物を、ＴＨＦ（４０ｍｌ）に取り込んでメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、４７ｍｌ）を加えた。反応混合物を、室温で一晩撹拌した。得られる懸濁液を、ろ過してＴＨＦですすいだ。ろ液を蒸発させて淡褐色樹脂を与えた（２．６ｇ）。沈殿物を、数滴のＤＭＦの追加と共にＤＣＭ（２０ｍｌ）中に懸濁させた。塩化チオニル（２．４ｍｌ）を、１０分かけて滴下で加えた。反応混合物を、次いで一晩還流させた。還流下で１６時間後、追加の塩化チオニル（２．４ｍｌ）を、滴下で１０分かけて加えた。反応混合物を、次いで一晩還流させた。その後、混合物を、室温に冷却して真空中でほとんど乾燥するまで濃縮した。いかなる未反応の塩化チオニルも確実に除去するために乾燥トルエンを残留物に加えて減圧下で除去した。残留物を、ＴＨＦ（２０ｍｌ）に取り込んでメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ、２４ｍｌ）を加えた。反応混合物を、室温で４時間撹拌し、次いでろ過してＴＨＦですすいだ。ろ液を蒸発させて淡褐色樹脂を与えた（２．０ｇ）。組み合わせた淡褐色樹脂（４．６ｇ）を、シリカゲルのクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ １：４９から１：１９）によって精製しＮ−メチル−Ｎ−［ｔｒａｎｓ−４−（メチルスルファモイルメチル）シクロヘキシル］ベンズアミドをベージュ色結晶として与えた（２．１８ｇ）。

【0070】

ステップＦ：Ｎ−メチル−Ｎ−［ｔｒａｎｓ−４−（メチルスルファモイルメチル）シクロヘキシル］ベンズアミド（８７５ｍｇ）を、ＨＣｌの水溶液（６Ｍ、１０ｍｌ）に取り込んで反応混合物を、２日間還流させた。室温で冷却後、得られる懸濁液をろ過した。ろ液を、真空中で濃縮してＮ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−（メチルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホンアミド塩酸塩をベージュ色結晶として与えた（７１０ｍｇ）。得られた粗製生成物を、さらなる精製をせずに用いた。

【0071】

ステップＧ：Ｎ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−（メチルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホンアミド塩酸塩（１２９ｍｇ）、４−クロロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−カルボニトリル（８９ｍｇ）および炭酸カリウム（２２５ｍｇ）を、水／ジオキサン１：９（４．５ｍｌ）中に懸濁させた。得られる懸濁液を、マイクロ波加熱炉内で１６０℃に８時間加熱した。反応混合物を、真空中で濃縮した。残留物を、ＴＨＦ（１０ｍｌ）に取り込んで、水／ＮａＣｌの飽和水溶液１：１の混合物（２０ｍｌ）を加えた。混合物を、室温で撹拌した。水性相を、分離してＴＨＦ（２×１０ｍｌ）で２回抽出した。組み合わせた有機相を、塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥させて真空中で濃縮した。残留物を、アセトニトリル中に懸濁させ、室温で撹拌し、ろ過してアセトニトリルですすいだ。ろ液を、真空中で濃縮しセミ分取ＨＰＬＣで精製して１−［ｔｒａｎｓ−４−［（５−シアノ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル）−メチル−アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを与えた（２２ｍｇ、表１の化合物２６）。ＭＳ（ＨＰＬＣ／ＭＳ）：３６２（ＭＨ^＋）。保持時間：（２．１９分）

【0072】

実施例４
本実施例は、Ｎ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−［メチル（９Ｈ−プリン−６−イル）アミノ］シクロヘキシル］メタンスルホンアミドの調製を例示する（表１の化合物２）。

【0073】

ステップＡ：Ｎ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−（メチルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホンアミド塩酸塩（実施例３、ステップＦ、１４０ｍｇ）、６−クロロプリン（５９ｍｇ）およびトリエチルアミン（０．２６ｍｌ）を、ｎ−ブタノール（４ｍｌ）に溶解した。反応混合物を、１４０℃に加熱し、１４０℃で一晩撹拌してマイクロ波加熱炉内で１５０℃に１時間加熱した。反応混合物を、真空中で濃縮した。残留物を、ＴＨＦ（３ｍｌ）に取り込んで水／ＮａＣｌの飽和水溶液１：１の混合物（４ｍｌ）を加えた。混合物を、室温で撹拌した。水性相を、分離してＴＨＦ（２×３ｍｌ）で２回抽出した。組み合わせた有機相を、塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥させて真空中で濃縮した。残留物を、最初にＩｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＮＨ_２（ＤＣＭ１００％、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ １：４９から１：１９）のクロマトグラフィー、次いでセミ分取ＨＰＬＣおよび最後にＩｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＮＨ_２（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ １：２４）のクロマトグラフィーによって精製してＮ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−［メチル（９Ｈ−プリン−６−イル）アミノ］シクロヘキシル］メタンスルホンアミドを与えた（２２ｍｇ、表１の化合物２）。ＭＳ（ＨＰＬＣ／ＭＳ）：３３９（ＭＨ^＋）。保持時間：（１．８７分）

【0074】

実施例５
本実施例は、１−［４−［（２−アミノ−５−メチル−ピリミジン−４−イル）−メチル−アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドの調製を例示する（表１の化合物２９）。

【0075】

ステップＡ：Ｎ−メチル−１−［ｔｒａｎｓ−４−（メチルアミノ）シクロヘキシル］メタンスルホンアミド塩酸塩（実施例３、ステップＦ、１２９ｍｇ）、４−クロロ−５−メチル−ピリミジン−２−アミン（７２ｍｇ）、Ｃｓ_２ＣＯ_３（３９０ｍｇ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（１１ｍｇ）およびＲｕＰｈｏｓ（４７ｍｇ）を、シュレンク管中のｔｅｒｔ−ブタノール（１ｍｌ）に溶解した。反応混合物を、８５℃に加熱し、８５℃で一晩撹拌した。反応混合物を、ＴＨＦ（１０ｍｌ）に取り込んでセライト上でろ過した。ろ液を、真空中で濃縮した。残留物を、セミ分取ＨＰＬＣ上で精製し１−［４−［（２−アミノ−５−メチル−ピリミジン−４−イル）−メチル−アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミドを与えた（表１の化合物２９）。ＭＳ（ＨＰＬＣ／ＭＳ）：３２８（ＭＨ^＋）。保持時間：（１．８２分）

【0076】

実施例６
本実施例は、１−［ｔｒａｎｓ−４−（（２−メトキシメチル）イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドの調製を例示する（表１の化合物３５）。

【0077】

ステップＡ：
塩化メチレン（５ｍｌ）中の１−［ｔｒａｎｓ−４−［［５−アミノ−１−（ベンゼンスルホニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−４−イル］アミノ］シクロヘキシル］−Ｎ−メチル−メタンスルホンアミド（実施例１、ステップＫ）（２１２ｍｇ）、塩化メトキシアセチル（４０μｌ）およびトリエチルアミン（７０μｌ）の混合物を、室温で１時間撹拌した。反応混合物を、真空中で濃縮する。粗製物を、酢酸（２ｍｌ）に取り込んでマイクロ波加熱炉内で１００℃で３時間加熱する。ＥｔＯＡｃで希釈後、反応混合物を、ＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液でクエンチした。有機相を、分離してＮａＨＣＯ_３の飽和水溶液およびＮａＣｌの飽和水溶液でもう一回抽出し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させて真空中で濃縮した。粗製生成物を、セミ分取ＨＰＬＣ上で精製して１−［ｔｒａｎｓ−４−（（２−メトキシメチル）−６−（フェニルスルホニル）−イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドを無色樹脂として与えた。

【0078】

ステップＢ：
１−［ｔｒａｎｓ−４−（（２−メトキシメチル）−６−（フェニルスルホニル）−イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドを、実施例１、ステップＩに記載のように同様の手順を用いて脱保護し、１−［ｔｒａｎｓ−４−（（２−メトキシメチル）イミダゾ［４，５−ｄ］ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１（６Ｈ）−イル）シクロヘキシル］−Ｎ−メチルメタンスルホンアミドを与える（２６ｍｇ、表１の化合物３５）。ＭＳ（ＨＰＬＣ／ＭＳ）：３９２（ＭＨ^＋）。保持時間：（１．８９分）

【0079】

精製した試料の分析は、いずれの場合にも独国、レオンバーグ、Ｂｉｓｃｈｏｆｆの逆相カラム（Ｄａｉｓｏｇｅｌ ＳＰ−１２０−ＯＤＳ−ＡＰ ５μｍ、１５０×３ｍｍ）を備えたＷａｔｅｒｓ Ａｕｔｏｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ（ＨＰＬＣ／ＭＳ）システムを用いて行う。試料は、ｍ／ｚおよび保持時間によって特性を決定する。上記で示した保持時間は、いずれの場合にも２種の異なる溶媒、溶媒Ａ：Ｈ_２Ｏ＋０．０１％ ＨＣＯＯＨ、および溶媒Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ＋０．０１％ ＨＣＯＯＨ）を含む溶媒系の使用に関連する。前記２種の溶媒ＡおよびＢは、表に示した通りの時間依存性勾配で２．００ｍｌ／分の流速で用いる。

【0080】

方法Ａ：独国、レオンバーグ、ＢｉｓｃｈｏｆｆのＤａｉｓｏｇｅｌ ＳＰ−１２０−ＯＤＳ−ＡＰ ５μｍ、１５０×３ｍｍ）カラム、表１に示した通りの時間依存性勾配で２．００ｍｌ／分の流速：

【表1】

【0081】

方法Ｂ：Ｗａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８ ５μｍ、５０×４．６ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ）カラム、表２に示した通りの時間依存性勾配で３．００ｍｌ／分の流速：

【表2】

【0082】

下記の表３において指定した物質を、上記の方法に類似して調製する。下記の物理データは、上記のＨＰＬＣ／ＭＳ特性評価プロセスに従って得られる。

【表3-1】

【表3-2】

【表3-3】

【表3-4】

【表3-5】

【0083】

ＪＡＫ酵素への効果の測定
ＪＡＫ／ＴＹＫ−キナーゼファミリーの４種のキナーゼ全てを、活性キナーゼドメインを含有する、精製した組み換えＧＳＴ−融合タンパク質として用いた。ＧＳＴ−ＪＡＫ１（８６６−１１５４）、ＧＳＴ−ＪＡＫ３（８１１−１１２４）、およびＧＳＴ−ＴＹＫ２（８８８−１１８７）を、発現させてＥＰＫ生物学単位でアフィニティークロマトグラフィーによって精製した。

【0084】

キナーゼアッセイは、ＬａｂＣｈｉｐ ３０００システムを用いるＣａｌｉｐｅｒ移動度シフトアッセイに基づいた。この技術は、キャピラリー電気泳動法に類似しており微小流体チップ内の基質および生成物の電荷駆動分離を使用する。

【0085】

全てのキナーゼ反応を、１８μＩの総反応体積で３８４ウェルマイクロタイタープレート内で実行した。アッセイプレートを、「化合物希釈物の調製」の節で述べた通りに、適切な試験濃度で１ウェル当り０．１μＩの試験化合物で調製した。反応を、９μＩの基質混合物（ペプチドおよびＡＴＰからなる）を９μＩのキナーゼ希釈物と組み合わせることによって開始した。反応を、３０℃で６０分間インキュベートして７０μＩの停止緩衝液（１００ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、５％ ＤＭＳＯ、０．１％コーティング試薬、１０ｍＭ ＥＤＴＡ、０．０１５％ Ｂｒｉｊ ３５）を加えることによって停止した。

【0086】

蛍光標識した合成ペプチドを、全ての反応において基質として用いた。ＩＲＳ−１（ＩＲＳ−１ペプチド、ＦＩＴＣ−Ａｈｘ−ＫＫＳＲＧＤＹＭＴＭＱＩＧ−ＮＨ２）の配列由来のペプチドは、ＪＡＫ１およびＴＹＫ２用にかつＪＡＫ３ｔｉｄｅと名前の付いたペプチド（ＦＩＴＣ−ＧＧＥＥＥＥＹＦＥＬＶＫＫＫＫ−ＮＨ２）を、ＪＡＫ３用に使用した。特有のアッセイ条件を表４に記載する。

【表4】

【0087】

終了した反応を、Ｃａｌｉｐｅｒ ＬａｂＣｈｉｐ ３０００読取り装置に移してそれぞれの反応のターンオーバーを、基質／生成物比率を決定することによって測定した。

【0088】

化合物希釈物の調製
試験化合物を、ＤＭＳＯ（１０ｍＭ）に溶解し個別の化合物ハブによって独自の２Ｄマトリクスチップを保持する１．４ｍＬの平底またはＶ字型のマトリクス管内に移した。これらのチップの数は、他と区別して個々の化合物識別番号に関連した。原液は、直ちに使用しない場合は−２０℃で保管した。試験手順のためにバイアルを解凍してスキャナーによって特定しそれによって後続の作業ステップを案内する作業シートを生成した。化合物希釈物を、９６ウェルプレートにおいて作成した。この形式は、４種の参照化合物を含めた８濃度（単一点）での最大４０種の個別試験化合物のアッセイを可能にした。希釈プロトコルには、前希釈プレート、マスタープレートおよびアッセイプレートの生成が含まれた。

【0089】

前希釈プレート：９６ポリプロピレンウェルプレートを、前希釈プレートとして用いた。プレート位置Ａ１〜Ａ１０上にそれぞれ１０種の試験化合物、Ａ１１に１種の標準化合物およびＡ１２に１種のＤＭＳＯ対照を含めた合計４つの前希釈プレートを調製した。全ての希釈ステップを、ＨａｍｉｌｔｏｎＳＴＡＲロボット上で行った。

【0090】

マスタープレート：４つの「前希釈プレート」の標準化合物および対照を含めた１００μＩの個別化合物希釈物を、それぞれＤＭＳＯの９０％中の次の濃度、１’８２０、５６４、１８２、５４．６、１８．２、５．４６、１．８２および０．５４６μＭを含む３８４「マスタープレート」に移した。

【0091】

アッセイプレート：全く同じアッセイプレートを、次いでマスタープレートの１００ｎＬの化合物希釈物を３８４−ウェル「アッセイプレート」にピペット操作することにより調製した。以下では化合物を、９μＩのアッセイ成分に加えてそれぞれ１０、３．０、１．０、０．３、０．１、０．０３、０．０１および０．００３μＭの最終濃度を可能にする１：１８１希釈ステップに対応する９μＩの酵素と混合した。マスタープレートの調製は、ＰｌａｔｅＭａｔｅ Ｐｌｕｓロボットによっておよびアッセイプレートの複製は、ＨｕｍｍｉｎｇＢｉｒｄロボットによって処理した。

【0092】

本調査に基づいて、本発明の化合物は、特にタンパク質キナーゼに依存する障害、特にＪＡＫ／ＴＹＫキナーゼ活性が介在する増殖性疾患に対する治療有効性を示す。

【表5】