特許 6242532 新規化合物、脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B1)

(11)【特許番号】6242532

(24)【登録日】2017年11月17日

(45)【発行日】2017年12月6日

(54)【発明の名称】新規化合物、脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品組成物

(51)【国際特許分類】

   C07F 9/24 20060101AFI20171127BHJP

   A61K 31/664 20060101ALI20171127BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20171127BHJP

   A23L 33/10 20160101ALI20171127BHJP

   A23J 7/00 20060101ALI20171127BHJP

   A61K 8/68 20060101ALN20171127BHJP

   C11B 1/10 20060101ALN20171127BHJP

【ＦＩ】

   C07F9/24 Z

   A61K31/664

   A61P3/06

   A23L33/10

   A23J7/00

   !A61K8/68

   !C11B1/10

【請求項の数】5

【全頁数】12

(21)【出願番号】特願2017-136784(P2017-136784)

(22)【出願日】2017年7月13日

【審査請求日】2017年7月13日

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】504146349

【氏名又は名称】佐々木食品工業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110000796

【氏名又は名称】特許業務法人三枝国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】千々松 武司

(72)【発明者】

【氏名】望月 聡

(72)【発明者】

【氏名】山田 耕史

【審査官】 村守 宏文

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１２／１１９７８１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開２００４−２５６４５６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００９−０２４０５０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０７−２６５０８９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００５−００２３２４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１６／０９２８７８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 望月聡 ほか，脂質代謝を中心とした二枚貝の生理作用に関する研究，科学研究費助成事業 研究成果報告書 [オンライン]，２０１４年 ６月１１日，[検索日 2017.08.15], インターネット: <URL:https://kaken.nii.ac.jp/ja/file/KAKENHI-PROJECT-23500931/23500931seika.pdf>

【文献】 千々松武司ほか，二枚貝，特にシジミの機能性因子に関する研究，New Food Industry，２０１３年，vol.55 no.8，pp.23-31

【文献】 Chijimatsu, Takeshi et al.，Lipid components prepared from a freshwater Clam(Corbicula fluminea) extract ameliorate hypercholesterolaemia in rats fed high-cholesterol diet，Food Chemistry，２０１３年，vol.136 no.，pp.328-334

【文献】 Bjorkbom, Anders et al.，Importance of the phosphocholine linkage on sphingomyelin molecular properties and interactions with cholesterol; a study with phosphate oxygen modified sphingomyelin-analogues，Biochimica et Biophysica Acta，２００８年，vol.1778 vol.6，pp.1501-1507

【文献】 Kratzer, Bernd et al.，Efficient synthesis of sphingosine-1-phosphate, ceramide-1-phosphate, lysosphingomyelin, and sphingomyelin，European Journal of Organic Chemistry，１９９５年，vol.1995 no.6，pp.957-963

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｆ

Ａ２３Ｌ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

Ｃ１１Ｄ

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記式

【化1】

（式中、
（ｉ）Ｒ¹は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示し、
Ｒ²は下記式

【化2】

で表わされるいずれかの基を示すか、或いは、
（ｉｉ）Ｒ¹は下記式

【化3】

で表わされるいずれかの基を示し、Ｒ²は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示すか、或いは、
（ｉｉｉ）Ｒ¹は下記式

【化4】

で表わされるいずれかの基を示し、Ｒ²は下記式

【化5】

で表わされるいずれかの基を示す。）
で表わされる化合物。

【請求項2】

下記式

【化6】

で表わされる、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

請求項１又は２に記載の化合物を含む、脂肪肝の予防又は治療剤。

【請求項4】

請求項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下剤。

【請求項5】

請求項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下用食品組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、新規化合物、脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品組成物に関するものである。

【背景技術】

【0002】

シジミは古くから味噌汁や佃煮として食されてきた一般的な和食材であると同時に、「肝臓に良い」、「黄疸によい」などの理由から民間療法として利用されてきた。更に、近年の健康志向の高まりからシジミ抽出物食品が栄養補助食品、健康補助食品やサプリメントとして流通している。

【0003】

特許文献１は、シジミ抽出物を含む血中コレステロール低下剤を開示している。

【0004】

非特許文献1は、シジミ抽出物中のコレステロール低下作用を有する分画を記載し、スフィンゴ脂質を含む分画にコレステロール低下作用があることが記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特開2007-210990号公報

【非特許文献】

【0006】

【非特許文献1】Food Chemistry, 136 (2013) 328-334

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

シジミ抽出物が血中コレステロール低下作用を有することは公知であるが、シジミ抽出物中には数多くの成分が存在し、血中コレステロール低下作用を有する物質は特定されていなかった。

【0008】

本発明は、血中コレステロール低下作用を有する新規化合物、該化合物を含む脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明者は、血中コレステロール低下作用に基づいてシジミ抽出物を分画し、血中コレステロール低下作用を有する新規化合物を見出した。該化合物は、血中コレステロール低下作用及び肝臓中性脂肪の低下作用を有し、脂肪肝の予防又は治療剤として有用である。

【0010】

本発明は、以下の新規化合物、脂肪肝の予防又は治療剤、血中コレステロール低下剤及び血中コレステロール低下用食品組成物を提供するものである。
項１． 下記式

【0011】

【化1】

【0012】

（式中、Ｒ^１は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。Ｒ^２は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。）で表わされる化合物。
項２． 下記式

【0013】

【化2】

【0014】

で表わされる、項１に記載の化合物。
項３． 項１又は２に記載の化合物を含む、脂肪肝の予防又は治療剤。
項４． 項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下剤。
項５． 項１又は２に記載の化合物を含む、血中コレステロール低下用食品組成物。

【発明の効果】

【0015】

本発明の化合物は、血液、血清、血漿中の総コレステロール、遊離コレステロール、コレステロールエステル、LDL-コレステロール、さらに肝臓中性脂肪を低下させることができる。

【0016】

本発明によれば、血中コレステロール低下作用及び肝臓中性脂肪低下作用を有する化合物が提供される。この化合物は血中コレステロール低下用食品組成物あるいは脂肪肝の予防又は治療剤として摂取することで、血中コレステロールを低下させ、脂肪肝を予防又は治療することができる。

【図面の簡単な説明】

【0017】

【図1】シジミ熱水抽出エキスの分画スキームを示す。

【発明を実施するための形態】

【0018】

本発明は、血中コレステロール低下作用を有する以下の式（I）の化合物を提供するものである。好ましい立体配置を式(IA)に示す。

【0019】

【化3】

【0020】

（式中、Ｒ^１は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。Ｒ^２は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。）
炭素数１〜２４のアルキル基としては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、２−エチルヘキシル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、ヘプタデシル、ステアリル、イソステアリル、ノナデシル、イコシル、ヘンイコシル、ドコサニル、トリコサニル、テトラコサニルなどの直鎖又は分岐を有する炭素数１〜２４、好ましくは炭素数４〜２２、より好ましくは炭素数８〜２０のアルキル基が挙げられる。

【0021】

炭素数１〜２４のアルケニル基としては、例えば、ビニル、アリル、ブテニル、イソブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル、ヘキサデセニル、ヘプタデセニル、オクタデセニル、イソオクタデセニル、ノナデセニル、イコセニル、ヘンイコセニル、ドコセニル、トリコセニル、テトラコセニルなどの直鎖又は分岐を有する炭素数２〜２４、好ましくは炭素数４〜２２、より好ましくは炭素数８〜２０のアルケニル基が挙げられる。

【0022】

好ましいＲ^１としては、以下のものが挙げられる：

【0023】

【化4】

【0024】

好ましいＲ^２としては、以下のものが挙げられる：

【0025】

【化5】

【0026】

本発明のさらに好ましい化合物を以下に示す。

【0027】

【化6】

【0028】

本発明の化合物が１以上の不斉炭素を有する場合、各不斉炭素の立体配置はＲ体、Ｓ体、Ｒ体とＳ体の任意の割合の混合物(ラセミ体を含む)を包含する。したがって、本発明の化合物は、各種エナンチオマー及びジアステレオマーを含む。

【0029】

本発明の化合物は、例えば以下のスキーム１〜３のようにして合成することができる。スキーム４は、原料である化合物（４）の製造法を示す。

【0030】

【化7】

【0031】

(式中、Ｒ^１、Ｒ^２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（１）１モルに対し、酸クロライド（２）を１モルから過剰量使用し、必要に応じて塩基の存在下に溶媒中で反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は０〜１００℃程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。塩基としては、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウムなどのアルカリ金属炭酸塩又は炭酸水素塩、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵなどが挙げられる。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレンなどが挙げられる。

【0032】

【化8】

【0033】

(式中、Ｒ^１、Ｒ^２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（３）１モルに対し、アンモニアを１モルから過剰量使用し、必要に応じて塩基の存在下に溶媒中で反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は室温から１００℃程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。塩基としては、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素ナトリウムなどのアルカリ金属炭酸塩又は炭酸水素塩、アンモニア、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵなどが挙げられる。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。

【0034】

【化9】

【0035】

(式中、Ｒ^１、Ｒ^２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（４）１モルに対し、アンモニアを１モルから過剰量使用し、DICのようなカルボジイミド縮合剤を等モルから過剰量使用し、溶媒中で反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は０℃から１００℃程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、ピリジンなどが挙げられる。

【0036】

【化10】

【0037】

(式中、Ｒ^１、Ｒ^２は前記に定義されるとおりである。)
化合物（５）１モルに対し、化合物（６）を１モルから過剰量使用し、塩基の存在下に溶媒中で反応させ、さらにｔ−ＢｕＯＯＨと反応させることにより、式（Ｉ）の化合物を得ることができる。反応温度は−７８℃から室温程度であり、反応時間は３０分から１２時間程度である。塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ＤＢＵ、ＤＩＰＥＡなどが挙げられる。溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、クロロホルム、塩化メチレン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどが挙げられる。

【0038】

本発明の脂肪肝の予防又は治療剤及び血中コレステロール低下用食品組成物は、製剤の形態が好ましい。製剤としては、具体的には錠剤、カプセル剤(ハードカプセル、ソフトカプセル)、丸剤、チュアブル錠、口腔内崩壊錠、顆粒剤、散剤、液剤、ドリンク剤、懸濁剤、乳濁剤などが挙げられる。

【0039】

本発明の脂肪肝の予防又は治療剤及びコレステロール低下用食品組成物は、本発明の化合物とともに製剤用の担体を含むことができる。このような担体としては、固形製剤の場合、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤などが挙げられ、液状製剤の場合、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤などが挙げられる。また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、安定化剤等の製剤添加物を用いることもできる。カプセル剤の担体としては、ハードカプセルの場合には、カプセル皮膜としてゼラチンを挙げることができ、ソフトカプセルの場合には、カプセル用皮膜として、ゼラチン、多価アルコール（グリセリン、ソルビトール、マンニトール、マルチトール等）等を挙げることができる。ソフトカプセルはさらに水を含んでいてもよい。賦形剤としては、乳糖、白糖、D-マンニトール、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、無水ケイ酸等が挙げられる。

【0040】

結合剤としては、水、エタノール、1-プロパノール、2-プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、α-デンプン液、ゼラチン液、D-マンニトール、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。

【0041】

崩壊剤としては、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等が挙げられる。

【0042】

滑沢剤としては、精製タルク、ステアリン酸塩ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、ホウ砂、ポリエチレングリコール等が挙げられる。

【0043】

着色剤としては、酸化チタン、酸化鉄等が挙げられる。

【0044】

矯味・矯臭剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等が挙げられる。

【0045】

緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。

【0046】

安定剤としては、トラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。

【0047】

本発明の食品組成物は、サプリメントの形態であってもよい。

【0048】

本発明において、食品としては、グミ、飲料、ドリンクゼリー、キャンデー、クッキー、ビスケットなどが挙げられる。

【0049】

本発明の化合物は、健常な成人１日当たり５ｎｇ〜１ｍｇ程度、好ましくは２０ｎｇ〜０．５ｍｇ程度、より好ましくは１００ｎｇ〜０．１ｍｇ程度摂取されることが望ましい。

【実施例】

【0050】

以下に参考例、実施例及び試験例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、これらは本発明を限定するものではない。

【0051】

実施例1
特許文献１の実施例１の記載に従い2.5kgのシジミエキス粉末を得た。得られたシジミエキス粉末2.5kgを、図1のプロトコールに従い分画した。

【0052】

得られた分画のうち、フラクション1-2-7において、以下の構造式の化合物を単離した。

【0053】

【化11】

【0054】

上記化合物のマススペクトルの物性値を以下に示す。
C₃₆H₇₃N₂O₅P
Exact Mass: 644.5
Mol. Wt.: 644.9
(+)HR-FABMS C₃₆H₇₄N₂O₅P [M+H]⁺ 645.5339 Δ+0.4mmu
C₃₆H₇₃N₂O₅PNa [M+Na]⁺ 667.5165 Δ+1.1mmu

【0055】

上記化合物を含むフラクション1-2-7及びコントロールについて、非特許文献１の記載に従い、高コレステロール食を与えたラットについて、血清総コレステロールを測定した。コントロールはコレステロール0.5％、コール酸ナトリウム0.25％を含む高コレステロール食を自由摂食させたラットである。フラクション1-2-7は同様の高コレステロール食に0.23％添加した試験食を自由摂食させたラットである。結果を表１に示す。血清総コレステロール、LDL-コレステロール、遊離コレステロール、コレステロールエステル及び肝臓中性脂肪の測定は、常法に従い行った。

【0056】

【表1】

【0057】

本発明の化合物が、強力な血中コレステロール低下作用及び肝臓中性脂肪の低下作用を有することが明らかになった。

【要約】

【課題】血中コレステロール及び肝臓中性脂肪を低下させる新規化合物を提供する。
【解決手段】下記式
【化１】

（式中、Ｒ^１は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。Ｒ^２は炭素数１〜２４のアルキル基又はアルケニル基を示す。）で表わされる化合物。
【選択図】なし

【図1】