特許 6243227 自己生物学的療法のためのシステム及び方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6243227

(24)【登録日】2017年11月17日

(45)【発行日】2017年12月6日

(54)【発明の名称】自己生物学的療法のためのシステム及び方法

(51)【国際特許分類】

   C12N 5/071 20100101AFI20171127BHJP

   C12N 5/077 20100101ALI20171127BHJP

   C12N 5/078 20100101ALI20171127BHJP

   G01N 33/48 20060101ALI20171127BHJP

   G01N 33/49 20060101ALI20171127BHJP

   A61K 35/19 20150101ALN20171127BHJP

   A61K 35/28 20150101ALN20171127BHJP

   A61K 35/15 20150101ALN20171127BHJP

   A61K 35/17 20150101ALN20171127BHJP

   A61K 35/18 20150101ALN20171127BHJP

   A61P 43/00 20060101ALN20171127BHJP

【ＦＩ】

   C12N5/071

   C12N5/077

   C12N5/078

   G01N33/48 C

   G01N33/49 X

   G01N33/49 K

   !A61K35/19

   !A61K35/28

   !A61K35/15 A

   !A61K35/17

   !A61K35/18

   !A61P43/00 107

【請求項の数】10

【全頁数】29

(21)【出願番号】特願2013-558201(P2013-558201)

(86)(22)【出願日】2012年3月16日

(65)【公表番号】特表2014-517684(P2014-517684A)

(43)【公表日】2014年7月24日

(86)【国際出願番号】US2012029379

(87)【国際公開番号】WO2012125899

(87)【国際公開日】20120920

【審査請求日】2015年3月12日

(31)【優先権主張番号】61/453,658

(32)【優先日】2011年3月17日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】513232587

【氏名又は名称】グレイリッジ テクノロジーズ リミティド ライアビリティ カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100099759

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100077517

【弁理士】

【氏名又は名称】石田 敬

(74)【代理人】

【識別番号】100087871

【弁理士】

【氏名又は名称】福本 積

(74)【代理人】

【識別番号】100087413

【弁理士】

【氏名又は名称】古賀 哲次

(74)【代理人】

【識別番号】100117019

【弁理士】

【氏名又は名称】渡辺 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100141977

【弁理士】

【氏名又は名称】中島 勝

(74)【代理人】

【識別番号】100150810

【弁理士】

【氏名又は名称】武居 良太郎

(72)【発明者】

【氏名】デイビッド カルリ

(72)【発明者】

【氏名】デイビッド ボンバード

【審査官】 藤澤 雅樹

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２００９／０２１５６０２（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 米国特許第０５９５８２５０（ＵＳ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２００３／００６６８０７（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 米国特許出願公開第２０１０／０１１２０８１（ＵＳ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ１２Ｎ ５／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

多血小板血漿濃縮物又は多骨髄細胞血漿濃縮物を作製する方法であって、
全血サンプル又は骨髄サンプルを、赤血球画分、乏血小板血漿又は乏骨髄細胞血漿、及び多血小板血漿又は多骨髄細胞血漿に分離し；
少なくとも最初の測定により、当該分離後に、当該分離された血漿において、乏血小板の濃度及び多血小板の濃度、又は、乏骨髄細胞の濃度及び多骨髄細胞の濃度を決定し；
対象における用量反応関係を研究し又は定義するために、多血小板血漿の第一の容量、又は多骨髄細胞血漿の第一の容量を決定し；
前記の乏血小板の濃度及び多血小板の濃度、又は乏骨髄細胞の濃度及び多骨髄細胞の濃度が、目的濃度範囲内の標的細胞の濃度を有し、ここで、前記目的濃度範囲が、０．８〜２．０×１０^６標的細胞／μｌであり；
前記濃度及び第一の容量を用いて、多血小板血漿又は多骨髄細胞血漿と混合する場合に目的の濃度範囲内にある血漿中の乏血小板の濃度又は乏骨髄細胞の濃度を提供する乏血小板血漿又は乏骨髄細胞血漿の第二の容量を決定し；そして
第二の容量の乏血小板血漿又は乏骨髄細胞血漿と、第一の容量の多血小板血漿又は多骨髄細胞血漿とを混合することにより、多血小板血漿濃縮物又は多骨髄細胞血漿濃縮物を作製すること、
を含む、方法。

【請求項2】

前記分離することが、
全血サンプルから赤血球を分離して血漿画分を形成すること、及び
血漿画分を乏血小板画分及び多血小板画分に分離すること
を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記分離することが、
遠心分離機の半径の内側に向かう血漿画分、及び遠心分離機の半径の外側に向かう赤血球画分を形成するための全血サンプルの第一の遠心分離；
赤血球画分の除去；
遠心分離機の半径の内側に向かう乏血小板血漿画分、及び遠心分離機の半径の外側に向かう多血小板血漿画分を形成するための血漿画分の第二の遠心分離；
を含む、請求項２に記載の方法。

【請求項4】

測定が、全血サンプル若しくは骨髄サンプルに関して行なわれるか、第一の遠心分離後、血漿画分に関して行われるか、及び、第二の遠心分離後、多血小板血漿画分又は多骨髄細胞血漿画分に関して行なわれる、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

血液サンプルインプットを有し、血液サンプルを赤血球画分と血漿画分とに分離するように構成された血液分離コンポーネントであって、ここで、前記血液分離コンポーネントが、さらに前記血漿画分を、多標的細胞画分及び乏標的細胞画分に分離することができ；細胞濃縮システム中の標的細胞の総数及び濃度を測定する測定システム；
対象における用量反応関係を研究し又は定義するために、目的濃度範囲内にある標的細胞の濃度を有する多標的細胞濃縮物を形成するための多標的細胞画分の第一の容量、及び多標的細胞画分と混合する乏標的細胞画分の第二の容量を決定する濃度論理及びフロー論理、及び多標的細胞濃縮物が、目的濃度範囲内にある標的細胞の濃度を有するかどうかを決定する決定論理；並びに
第一の容量の乏標的細胞画分と多標的細胞画分とを混合することにより、多標的細胞濃縮物を形成するように構成される混合コンポーネント、ここで目的濃度範囲が、０．８〜２．０×１０^６標的細胞／μｌである
を含む、細胞濃縮システム。

【請求項6】

前記測定システムが、
細胞濃縮システム中で標的細胞の濃度を測定する濃度測定コンポーネント；及び
濃度が測定される第一の容量及び第二の容量を測定するフローメーターコンポーネント
を含む、請求項５に記載の細胞濃縮システム。

【請求項7】

前記濃度測定コンポーネントが、乏標的細胞画分中の標的細胞の濃度を測定し、かつ第一の容量が乏標的細胞画分のものであり、多標的細胞画分中の標的細胞の濃度を測定し、かつ第二の容量が多標的細胞画分のものであるように構成される、請求項６に記載の細胞濃縮システム。

【請求項8】

前記濃度測定コンポーネントが、光学顕微鏡、光学光散乱、及び電気インピーダンスからなる群から選択される機能を実行するように構成される、請求項６に記載の細胞濃縮システム。

【請求項9】

血分離コンポーネントが、遠心分離、レーザーインピーダンス、フローサイトメトリー、誘電泳動、マイクロ流体チャネル分離、電気インピーダンス、及び蛍光マーカーの使用からなる群から選択される機能を実行するように構成される、請求項５に記載の細胞濃縮システム。

【請求項10】

前記標細胞が、多能性細胞、白血球、赤血球、血小板、好中球、単球、リンパ球、好酸球、及び好塩基球からなる群から選択される、請求項５に記載の細胞濃縮システム。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

発明の分野
本願は、「多血小板血漿を製造するためのシステム及び方法」の表題で、２０１１年３月１７日に出願した米国特許出願第６１／４５３，６５８号に対する優先権を主張し、これらの全ては、これらの全体において、そして全ての目的のために、参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

本発明は、多血小板血漿（ＰＲＰ）及び骨髄細胞濃縮物（ＢＭＣＣ）療法及び技術を限定することなく含む、自己生物学的療法のためのシステム、方法、及び装置に関する。

【背景技術】

【0003】

発明の背景
硬組織及び軟組織再生を促進する実証された方法の一つは、創傷部又は術創へのヒト成長因子の添加である。臨床状況において適合する成長因子を調達する安全で簡便な方法は、「自己血小板濃縮物」と称される患者の血液からの血小板の単離によるものである。

【0004】

血小板は、主に止血に関与する血液細胞である。しかしながら、これらはまた、治癒及び組織再生の促進に役立つ成長因子と呼ばれるタンパク質を含む。人工の血小板の極めて濃縮された混合物（血小板濃縮物又は多血小板血漿（ＰＲＰ））は、天然の血液よりも高い血小板の数を有し、身体の軟組織及び硬組織再生を刺激することが発見されている。

【0005】

骨髄細胞濃縮物（ＢＭＣＣ）は、幹様細胞（多能性細胞）（例えば単球）、白血球、血小板、好中球、リンパ球、好酸球、及び好塩基球を含む多数の目的の細胞を含み、これらの全ては治癒、再生、及び治療における様々な用途を有する。ＢＭＣＣからの任意の一又は複数のこれらの細胞画分を分離することは困難であるので、典型的には、これらは、患者に全て挿入又は注入される。一つの実施形態では、ＢＭＣＣは、幹細胞画分を含む血小板及び白血球を含み、ここで幹細胞画分は、血小板の再生効果を促進する。

【0006】

創傷治癒の生化学的媒介物としての成長因子の役割の理解の深まりは、創傷治癒を促進する生体活性治療薬の新たなファミリーについての道を築いた。成長因子（組み換え又は自己の血小板）の送達は、軟組織、骨組織及び結合組織修復の臨床結果を改善するための可能性のある商業上の機会を生ずる。しかしながら、当該技術分野において、用量反応関係の研究又は定義が要求される狭い目的範囲に、最終生成品濃度を制御又は操作すること、及び最終的にこれらの試薬の治療的有効性を確認することはできない。

【0007】

血液分析機は、典型的な血小板濃度を測定することができる一方で、これらは、ＰＲＰ輸液にみられる高い血小板濃度の測定に適していない。これらの機械はまた、大きく、高価（例えば＄１５，０００〜２０，０００／ユニット）である。

【0008】

血小板及びＢＭＣ濃縮物を形成する上での別の課題は、分離及び濃縮手順が、血小板を早期に活性化し、それ故、凝固カスケードが開始し得ることである。従って、血小板の早期活性化を避ける分離手順についての必要性が存在する。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0009】

概要
図面に示される本発明の典型的な実施形態を下記に要約する。これらの及び他の実施形態は、詳細な説明の欄にさらに十分に記載される。しかしながら、本発明をこの発明の概要、又は詳細な説明に記載される形態に限定するものではないことは、理解される。当業者は、特許請求の範囲に表される発明の趣旨及び範囲内に、多数の改変、同等物、及び代替の構成が存在することを認識することができる。

【0010】

一つの態様では、この開示は、多血小板血漿濃縮物（又は多骨髄細胞血漿濃縮物（bone marrow cell-rich plasma concentrate））を作製する方法を記載する。該方法は、全血サンプル（又は骨髄サンプル）を赤血球画分、乏血小板血漿（又は乏骨髄細胞血漿（bone marrow cell-poor plasma））、及び多血小板血漿（又は多骨髄細胞血漿）に分離することを含み得る。該方法は、さらに、少なくとも最初の測定により、分離前、中、又は後に、血小板濃度（又は骨髄細胞濃度）を決定することを含む。該方法は、さらに、最初の決定が行なわれる液体の第一の容量決定することを含む。該方法はまた、多血小板血漿（又は多骨髄細胞血漿）と混合される場合、目的濃度範囲内にある血小板又は骨髄細胞の濃度を提供する、乏血小板血漿（又は乏骨髄細胞血漿）の第二の容量を決定するために該濃度及び該第一の容量を用いることを含み得る。最後に、該方法は、第二の容量の乏血小板血漿（又は乏骨髄細胞血漿）と、多血小板血漿（又は多骨髄細胞血漿）を混合することにより、多血小板血漿濃縮物（又は多骨髄細胞血漿濃縮物）を作製することを含み得る。

【0011】

別の態様では、この開示は、血液分離コンポーネント、測定システム、濃度及びフロー論理、並びに混合コンポーネントを含んでなる細胞濃縮システムを記載する。血液分離コンポーネントは、血液サンプルインプットを有し、血液サンプルを赤血球画分及び血漿画分に分離するように構成され得る。該血漿画分は、多標的細胞画分及び乏標的細胞画分を含み得る。該測定システムは、細胞濃縮システムにおいて標的細胞の総数を測定することができる。濃度及びフロー論理は、多標的細胞濃縮物を形成するために、多標的細胞濃縮物と混合する乏標的細胞画分の第一の容量を決定することができる。該濃縮物は、目的濃度範囲内である標的細胞の濃度を有することができる。該混合コンポーネントは、乏標的細胞画分の第一の容量と多標的細胞画分を混合することにより、多標的細胞濃縮物を形成するように構成され得る。

【0012】

さらに別の態様では、この開示は、多標的細胞濃縮物を作製する方法を記載する。該方法は、標的血液サンプルを赤血球画分、乏標的細胞画分、及び多標的細胞画分に分離することができる。該方法はまた、標的血液サンプル中の標的細胞の総数を測定することができる。さらに、該方法は、この画分が多標的細胞画分と混合される場合、目的濃度範囲内で標的細胞の組み合わせを提供することができるように、乏標的細胞画分の第一の容量を計算することができる。最後に、該方法は、乏標的細胞画分の第一の容量と多標的細胞画分を混合することにより、多標的細胞濃縮物を作製することを含み得る。

【図面の簡単な説明】

【0013】

本発明の様々な目的及び利点、並びにより完全な理解は、添付の図面と合わせて以下の詳細な説明及び添付の特許請求の範囲を参照することにより明らかであり、容易に理解される。

【0014】

【図1】図１は、特定の濃度範囲を有する多血小板血漿濃縮物又は骨髄細胞濃縮物の自己注入のためのシステムの操作及びコンポーネントのフローダイヤグラムを図説する。

【図2】図２は、特定の血小板濃度のＰＲＰ濃縮物を作製するための方法を図説する。

【図3】図３は、特定の血小板濃度のＰＲＰ濃縮物を作製するための別の方法を図説する。

【図4】図４は、特定の血小板濃度のＰＲＰ濃縮物を作製するためのさらに別の方法を図説する。

【図5】図５は、特定のＢＭＣ濃度の多ＢＭＣ濃縮物を作製するための方法を図説する。

【0015】

【図6】図６は、特定のＢＭＣ濃度のＢＭＣ濃縮物を作製するための別の方法を図説する。

【図7】図７は、特定のＢＭＣ濃度のＢＭＣ濃縮物を作製するためのさらに別の方法を図説する。

【図8】図８は、目的濃度及び／又は容量の血小板又は骨髄細胞（ＢＭＣ）を作製するための別のシステムのブロックダイヤグラム表示を図説する。

【図9】図９は、ＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮装置を図説する。

【図10】図１０は、使い捨て可能な装置のこれらのコンポーネントを含んでなるパッケージの一つの実施形態を図説する。

【0016】

【図11】図１１は、図９の装置に全血又は骨髄サンプルを提供するためにシリンジがどのように用いられ得るかを図説する。

【図12】図１２は、例えば、ユーザーインターフェースのタッチスクリーン実施形態による、図９の装置とのユーザーインターラクションを図説する。

【図13】図１３は、図９〜１３に図説される第一のベッセルの内容物を除去するためにシリンジがどのように用いられ得るかを図説する。

【図14】図１４は、デバイスに本開示の任意の一又は複数の態様及び／又は方法を実施又は実行させるために、その中で一連の指示が実行され得るコンピューターシステムの典型的な形態における機械の一つの実施形態のブロックダイヤグラム表示を示す。

【発明を実施するための形態】

【0017】

詳細な説明
当該技術分野において、ＰＲＰ及びＢＭＣＣの狭い濃度範囲を生成することができるシステム、方法、及び装置についての長年の必要性が存在する。かかる既知の濃度と併せて、患者に関する様々な濃度の効果の臨床研究は、著しく改善される。

【0018】

この開示の目的において、骨髄細胞（ＢＭＣ）及び骨髄細胞濃縮物（ＢＭＣＣ）は、限定することなく、任意の一又は複数の幹様細胞（多能性細胞）（例えば単球）、白血球、血小板、好中球、リンパ球、好酸球、及び好塩基球を含む。事実、ＢＭＣは、骨髄サンプルにおいて発見される任意の細胞を含み、ＢＭＣＣは、骨髄サンプルおいて発見される任意の細胞を含むが、天然のものよりも高い濃度において含む。この開示を通じて、多ＢＭＣ画分とは、人体中の天然の濃度と比較して、増加した濃度の一又は複数の標的の又は所望の細胞を有する物質又は液体を意味する。乏ＢＭＣ画分とは、人体中の天然の濃度と比較して、減少した濃度の一又は複数の標的の又は所望の細胞を有する物質又は液体を意味する。

【0019】

この開示の濃縮物は、一又は複数の細胞、シグナル、及びスキャフォールド（scaffolds）を含むことができる。これらの成分は、多くの起源から回収され、生成されることができる。例えば、自己システムにおいて、該患者は、同一の患者から除去された成分を用いて治療される。

【0020】

この開示の目的において、「細胞」とは、骨髄、脂肪、血液、滑膜、又は他の組織に由来する間葉幹細胞（ＭＳＣ）を含む。細胞はまた、骨髄、血液、及び他の起源由来の多能性細胞を含む。細胞はさらに、シグナルを介して成長及び増殖するよう刺激され得る天然の組織細胞を含む。

【0021】

この開示の目的において、「シグナル」とは、ヒト成長因子タンパク質を意味し、血小板又は自己分泌（細胞−細胞）起源由来でもよい。加えて、この開示の目的において、「スキャフォールド」とは、インビボで組織成長のためのプラットフォームを送達及び提供するために用いられ得る血液に基づくフィブリンから作られる機械的マトリックスを意味する。本明細書で開示されるように、血液中の凝固カスケードを誘導することによるスキャフォールドを形成し、フィブリノーゲンをフィブリンに変換し、そして機械的フィブリンマトリックスを形成する、血液に基づくフィブリンがしばしば存在する。細胞及び／又は成長因子タンパク質は、スキャフォールドに埋め込まれ、あるいは播種され得、スキャフォールドは、種からの三次元組織形成を支持する。

【0022】

全血は、標準的な輸血由来のヒトの血液である。全血は、回収プロセスの間に抗凝血剤と合わされ得るが、一般的に他に加工されない。大文字の「全血（Whole Blood）」とは、輸血又は更なる加工のために特定の標準化された生成物を意味する。小文字の場合「全血（whole blood）」は、任意の未改変の回収された血液を含む。

【0023】

フローサイトメトリー（ＦＣＭ）は、微細粒子、例えば細胞及び染色体を流体の水路中にこれらを分散させ、電気的検出装置によってこれらを通過させることにより、計測及び試験するための技術である。これは、１秒あたり、最大数千の粒子の物理的及び／又は化学的特性の同時マルチパラメータ解析を可能にする。

【0024】

この開示の目的において、分離とは、成分を化学的に分離することを意味し、必ずしも物理的な分離を意味しない。例えば、遠心分離は、液体を粒子の質量に基づいて互いから主に単離される層に分離する。しかしながら、層間の幾らかの重なりが存在し得、これは、この開示の分離なる用語の使用に含まれる。これに加えて、これらの層が異なるベッセルに分けられる場合、これはまた、分離と考えられる。

【0025】

図１は、特定の濃度範囲を有する多血小板血漿濃縮物又は骨髄細胞濃縮物の自己注入のためのシステムの操作及びコンポーネントのフローダイヤグラムを表す。図１は、同一の方法を記載する図２〜４と併せて記載される。全血サンプル又は骨髄細胞（ＢＭＣ）サンプル１０２は、患者１０４から採取される（ブロック２０２、３０２、４０２、５０２、６０２、７０２）。該サンプル１０２は、赤血球（ＲＢＣ）分離コンポーネント１０６（第一の分離コンポーネント）に入り、これは、サンプル１０２の血漿画分からＲＢＣを分離する（ブロック２０４、３０４、４０４、５０４、６０４、７０４）。該ＲＢＣは、ＲＢＣ保管又は廃棄ベッセル１０８に保存され得る（ブロック２０６、３０６、４０６、５０６、６０６、７０６）。

【0026】

該血漿画分は、従って、ＰＲＰ又はＢＭＣ画分分離コンポーネント１１０（第二の分離コンポーネント）に分離され得る。第二の分離コンポーネント１１０は、血漿画分を乏血小板血漿（ＰＰＰ）画分及び多血小板血漿（ＰＲＰ）画分に、あるいは乏ＢＭＣ画分及び多ＢＭＣ画分に分離する（ブロック２１０、３１０、４１０、５１０、６１０、７１０）。ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分は、ＰＰＰ若しくは乏ＢＭＣ保管又は廃棄ベッセル１１２に保存され得る。

【0027】

ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分は、混合コンポーネント１１４において、一定分量のＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分と混合され得る（ブロック２１２、３１２、４１２、５１２、６１２、７１２）。あるいは、全てのＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分を取り除かずに、むしろ一定分量の除去された画分と再混合され、第一の一定分量のＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分は、ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ保管又は廃棄ベッセル１１２に取り除かれ得る一方で、第二の一定分量は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分とともに残される。

【0028】

混合コンポーネント１１４は、濃度及びフロー論理並びに制御１１６により制御され得る。濃度及びフロー論理並びに制御１１６は、全血サンプル又はＢＭＣサンプル１０２中に存在する血小板又はＢＭＣの総数の決定に基づいて、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分に添加される一定分量の容量を決定する（ブロック２０８、３０８、４０８、５０８、６０８、７０８）。かかる決定は、血小板又はＢＭＣ濃度測定コンポーネント１１８を介してプロセス中の様々な点における血小板又はＢＭＣ濃度１２０、１２２、１２４を測定することによりなされ得る。例えば、濃度１２０は、全血又はＢＭＣサンプルから測定され得る（ブロック４０８、７０８）。濃度１２２は、ＲＢＣ分離後に測定され得、従って、血漿中の血小板又はＢＭＣ濃度を測定する（ブロック２０８、５０８）。別の選択肢として、濃度１２４は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分が、第二の分離コンポーネント１１０において分離された後に、測定されうる（ブロック３０８、６０８）。この濃度１２４は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分から測定される。全ての３つの濃度１２０、１２２、１２４は、同一の測定結果であるべきであるが、分離は理想的ではなく、従って幾らかの血小板又はＢＭＣは、ＲＢＣ画分又はＰＰＰ若しくは乏ＢＭＣ画分に行き着くので、これらは変更され得る。血小板及び骨髄細胞は分離され得るので、撹拌ステップは、第一、第二、又は第三の濃度１２０、１２２、１２４のいずれかが測定される前に加えられてもよい。

【0029】

濃度１２０、１２２、１２４は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分中の血小板又はＢＭＣの総数を決定するために、サンプル１０２の容量、血漿容量は又はＰＲＰ若しくは多ＢＭＣ画分容量によりそれぞれかけ算され得る。濃度及びフロー論理並びに制御１１６は、混合が到達すべき合計目的容量を得るために、目的濃度（例えば０．８〜２．０ｘ１０^６血小板／μＬ又は１．０〜１．５ｘ１０^６血小板／μＬ）によりこの総数を割る。ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分と混合されるＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分の量は、合計目的容量とＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分の容量との間で異なる（更なる説明のために、方程式１〜６を参照のこと）。

【0030】

一定分量のＰＰＰ又は一定分量の乏ＢＭＣ画分及びＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分の混合物は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物保管ベッセル１２６中に保存され得る。この混合物は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物と称され、血小板又はＢＭＣの目的濃度及び／又は目的容量を有し得る。ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物は、従って、患者１０４に注入して戻すために利用可能である（ブロック２１６、３１６、４１６、５１６、６１６、７１６）。ＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物は、血液バンク交差適合血液と適合し得る。

【0031】

一つの選択肢では、血小板の活性化を防ぐために、第一の分離前に、任意の抗凝血剤１２８を全血サンプル又はＢＭＣサンプル１０２に添加し得る（ブロック２２２、３２２、４２２、５２２、６２２、７２２）。同様に、抗凝血剤１２８を逆行させるための溶液１３０は、濃縮物がＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物保管ベッセル１２６に達する前又は後にＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物に添加され得る。

【0032】

別の実施形態は、濃縮物がＰＲＰ又は多ＢＭＣ保管ベッセル１２６に達する前又は後に、撹拌コンポーネント１３２を介して濃縮物を任意で撹拌し得る。この撹拌は、濃縮物の混合を助け、そして／あるいは濃縮物中の血小板の活性化を開始する。撹拌コンポーネント１３２は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物保管ベッセル１２６から分離されても、あるいはこれと統合されてもよい。撹拌（agitation）は、一つの実施形態において撹拌（stirring）を含む。

【0033】

ユーザーインターフェース１３４は、濃度及びフロー論理並びに制御１１６を介したプロセスをインターフェースで接続し、制御し、そして観察するために用いることができる。ユーザーインターフェース１３４は、ユーザー（例えば、医師、看護師、又は技術者）が、手順のパラメータを観察するために、そしてＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物の目的濃度及び／又は目的容量等のインプットを提供することを可能にする。

【0034】

一つの実施形態では、患者１０４への注入の前に、濃縮物のＰＲＰ又はＢＭＣ濃度の別の測定及び分析が行なわれる（ブロック２１４、３１４、４１４、５１４、６１４、７１４）。濃縮物が目的の範囲の濃度内であった場合、その後濃縮物は、患者１０４に提供され得る（ブロック２１６、３１６、４１６、５１６、６１６、７１６）。しかしながら、濃縮物が目的の範囲の濃度内になかった場合、その後濃縮物は、ＲＢＣ画分と再混合され得（ブロック２１８、３１８、４１８、５１８、６１８、７１８）、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物が目的の範囲内になるまで、ＲＢＣ分離で開始するプロセスに戻される（ブロック２０４、３０４、４０４、５０４、６０４、７０４）。血小板又はＢＭＣ濃度１２０の決定がサンプル１０２から得られる場合（ブロック４０８、７０８）、第一の分離（ブロック４０４、７０４）の前に合計の血小板（ブロック４２４）、又はＢＭＣの総数（ブロック７２４）の任意の決定が存在し得る。

【0035】

一つの実施形態では、任意の抗凝血剤１２８、例えばＡＣＤＡは、任意の分離手順が開始される前に、全血又はＢＭＣサンプル１０２に添加され得る。分離手順、及びベッセル間の血小板の僅かな移動、遠心、又はシステムの任意の他のコンポーネントは、血小板の撹拌を必然的に伴い、撹拌は望ましくない血小板の活性化（凝固）を開始するので、抗凝血剤１２８は、これらが患者１０４に注入して戻す準備がされるまで、血小板の非活性化状態を保持するのを助ける。一つの実施形態では、３ｍＬの抗凝血剤は、５０ｍＬの全血に添加され得、あるいは５ｍＬの抗凝血剤は、５０ｍＬのＢＭＣに添加され得る。ＢＭＣサンプル１０２の場合、吸引シリンジは、ＢＭＣサンプル１０２が、分離コンポーネント１０６を通過する前に、フラッシュされ得る。例えば、吸引シリンジは、ヘパリン（例えば１，０００Ｕ／ｍＬ）でフラッシュされ得る。

【0036】

一つの実施形態では、全血又はＢＭＣサンプル１０２は、６０〜２５０ｍＬの間である一方で、別のサンプル１０２は、６０〜１２０ｍＬの間である。全血は静脈内カテーテルから供給されてもよい。ＢＭＣは、前又は後臀部、肩、又は膝の髄内腔から針穿刺吸引により回収され得るが、ＢＭＣを得るための他の方法及び供給源も、想定される。

【0037】

現在議論されるシステム及び方法は自己システム及び方法（供給源の患者１０４に注入して戻される）を記載する一方で、他の実施形態では、供給源の患者と注入される患者は、異なってもよい。

【0038】

ＢＭＣサンプル１０２は、高分子量成分、例えば骨粒子を除去するための最初の除去ステージを経てもよい。ＢＭＣサンプル１０２は、残った脂質及び／又は大きな粒子を除去するために濾過され得る（ブロック５２６、６２６、７２６）。一例として１７０〜２６０μｍフィルターを用いることができる。

【0039】

赤血球（ＲＢＣ）分離コンポーネント１０６は、サンプル１０２をＲＢＣ画分及び非ＲＢＣ画分又は血漿画分に分離する。全血サンプル１０２の場合、非ＲＢＣ画分は、有核細胞、又は白血球（ＷＢＣ）、血小板、及び血清を含み得る。ＢＭＣサンプル１０２の場合、非ＲＢＣ画分は、血漿、血小板、及びＷＢＣ（多能性細胞を含む）を含み得る。

【0040】

ＲＢＣ分離コンポーネント１０６は、一つの実施形態では、遠心分離による「ソフトスピン（soft spin）」が行なわれ得る。一つの実施形態では、ソフトスピンは、全血が含まれる場合、２５００〜３０００ＲＰＭにおいて８〜１５分、ＢＭＣが供給源である場合、２４００ＲＰＭにおいて１０分間の遠心分離を含み得、これらの典型的な詳述は限定されない。遠心分離では、血漿画分は、ＲＢＣ画分の上部、又は遠心分離機の最も中央近くに蓄積するサンプル１０２の画分である（ＲＢＣは、ＲＢＣサンプルの最も重い成分である）。ＲＢＣは、これらはより重い傾向にあるので、血漿画分の下に蓄積する。血漿画分内で、遠心分離は、主な血漿粒子と有核細胞、血小板、血漿、及びＷＢＣが含まれる「バフィーコート（buffy coat）」との更なる分離を引き起す。バフィーコートは、血漿及びＲＢＣ画分の間に見出される傾向がある。

【0041】

ＲＢＣ分離コンポーネント１０６は、限定しないが、マイクロ流体チャネル分離、ポリマー型分離、音響泳動（acoustophoresis）、様々なラボ・オン・チップ（lab-on-chip）又はラボ・オン・ＣＤ（コンパクトディスク）技術、フローサイトメトリー、誘電泳動、レーザーインピーダンス、フローサイトメトリー、及び蛍光又は他のマーカーの使用による分離を含む、様々な他の分離コンポーネント及び方法を代替的に使用し得る。マイクロ流体チャネル分離は、様々なサイズの粒子が特定のチャネルを通してのみ通り抜けることができ、従って粒子は通過することができるチャネルに応じて分離することができるように、様々な直径のチャネルを通過させることに関する。音響泳動（acoustophoresis）は、液体の成分を分離するための音響シグナルの使用に関する。ポリマー型方法は、血小板を血漿から分離させる、血漿画分へのポリマーの添加に関する。ＲＢＣ分離コンポーネント１０６は、血小板の活性化を最小限にし、血小板の収率を最大化するように選択されるべきである。

【0042】

ＲＢＣ画分は、後の注入又は廃棄のために、バルブ又はポンプを介してＲＢＣ保管ベッセル１０８に向けられ得る。血漿画分は、異なるベッセル、又は更なる分離が行なわれるシステムの一部に向けられ得る。実施形態によっては、ＲＢＣ画分は、血漿画分が除去された後に第一の分離コンポーネント１０６内に残り、第一の分離コンポーネント１０６は廃棄され得るので、ＲＢＣ画分は、廃棄のために第一の分離コンポーネント中に残され得る。かかる実施形態では、分離されたＲＢＣ保管又は廃棄ベッセル１０８は、実行されない。

【0043】

骨髄由来の血漿画分の場合、濾過プロセスは、血漿を更に濾過するために用いられ得る（例えば、約２００μｍメッシュフィルター）。例えば、任意の抗凝集フラッシュシリンジは、フィルターを通して血漿画分を分離するために用いられ得る。

【0044】

一度ＲＢＣ画分が血漿画分から分離されると、血漿は、多血小板血漿（ＰＲＰ）又は多ＢＭＣ画分分離コンポーネント１１０（第二の分離コンポーネント）を通過し得る。第二の分離コンポーネント１１０は、血漿を乏血小板血漿（ＰＰＰ）画分と多血小板血漿（ＰＲＰ）画分とに、あるいは乏ＢＭＣ画分と多ＢＭＣ画分とに分離する。多くの場合、ＰＰＰ画分又は乏ＢＭＣ画分は、より大きい画分である。ＰＰＰ画分は、低い又は僅かな濃度の血小板を有する傾向にある。

【0045】

実施形態によっては、第二の分離コンポーネント１１０は、ＲＢＣ分離コンポーネント１０６（第一の分離コンポーネントとしても知られる）であり、分離コンポーネント１０６／１１０として以下称される。例えば、一つの遠心分離機は、サンプル１０２をＲＢＣ画分、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分、及びＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分に分離するために用いられ得る。これは、最初に分離コンポーネント１０６／１１０からの血漿画分を除去し、その後分離コンポーネント１０６／１１０に血漿画分を戻し、あるいは分離コンポーネント１０６／１１０中に血漿画分を残すことを含む一方で、ＲＢＣ画分は、最初に分離及び除去され、その後、血漿画分が分離される。あるいは、三つの画分が同時に分離され得る。

【0046】

他の実施形態では、第一の分離コンポーネント１０６及び第二の分離コンポーネント１１０は別々の異なるコンポーネントである。例えば、二つの遠心分離機が用いられてもよい。しかしながら、第一及び第二の分離コンポーネント１０６、１１０は、異なる種類のコンポーネントであってもよい。一つの場合において、遠心分離機は、第一の分離コンポーネント１０６として用いられ得、一組の異なる直径のマイクロ液体孔が第二の分離コンポーネント１１０として用いられ得る。多くの他の変形も可能である。

【0047】

第二の分離コンポーネント１１０が遠心分離機である場合、又は双方の分離コンポーネント１０６、１１０が同じ遠心分離機である場合、第二の、又は「ハードスピン（hard spin）」は、血漿画分に関して行なわれうる。ハードスピンは、全血が供給源の場合、２８００〜３２００ＲＰＭにおいて５〜８分、ＢＭＣが供給源である場合、３４００ＲＰＭにおいて６分間の遠心分離を含み得、もっともこれらの典型的な詳述は限定されない。ハードスピンは、血漿をＰＰＰ画分とＰＲＰ画分とに、あるいは乏ＢＭＣ画分と多ＢＭＣ画分とに分離し、ＰＰＰ画分又は乏ＢＭＣ画分は、軽い粒子及び小さい濃度の血小板又はＢＭＣを含む大きい上部の層にある傾向がある。この層の下部は、より小さい「バフィーコート（buffy coat）」又はより重い血小板又はＢＭＣを含む「ペレット（pellet）」であり、これは、遠心分離機の半径の外側に向かって蓄積する。

【0048】

ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分分離コンポーネント１０６は、限定することなく、マイクロ流体チャネル分離、ポリマー型分離、音響泳動（acoustophoresis）、様々なラボ・オン・チップ（lab-on-chip）又はラボ・オン・ＣＤ（コンパクトディスク）技術、フローサイトメトリー、誘電泳動、レーザーインピーダンス、フローサイトメトリー、及び蛍光又は他のマーカーの使用による分離を含む、様々な他の分離コンポーネント及び方法を代替的に、使用し得る。

【0049】

一度血漿画分が分離されると、ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分は、ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ保管又は廃棄ベッセル１１２に向けられる。例えば、一又は複数のバルブ及びポンプが流体フローに向けるために用いられ得る。

【0050】

一つの実施形態では、ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分を取り除くよりも、この画分一定分量が、保管又は廃棄ベッセル１１２に取り除かれる。この一定の容量の選択は、濃度及びフロー論理並びに制御１１６及び混合コンポーネント１１４に関連して、後で議論される。

【0051】

混合コンポーネント１１４は、液体内で細胞を懸濁するために、ＰＲＰ及びＰＰＰ又は多ＢＭＣ及び乏ＢＭＣの混合物を撹拌し得る。あるいは、二つの物質を同一のベッセルに入れるというちょっとした操作により十分な混合が達成され得る。

【0052】

目的濃度を達成するための、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ血漿画分と混合するための一定分量のＰＰＰ又は乏ＢＭＣ血漿画分の容量は、以下のように決定される。読みやすさのために、この記載は、血小板についてのみ言及するが、ＢＭＸについても同様に適用可能である。まず、サンプル１０２中の血小板の総数Ｐ_{ｔｏｔａｌ}が決定される。これは、（ａ）血小板濃度ＰＣ_０（例えば血小板濃度１２０、１２２、１２４）を測定又は推定し、そして（ｂ）血小板濃度が測定される液体中の血小板濃度ＰＣ_０に容量Ｖ_０を乗じることにより行なわれる。これは、以下のように方程式（１）において示される。

【0053】

【数1】

【0054】

濃度ＰＣ_０及び容量Ｖ_０が決定され得るプロセスの間に、少なくとも三つの位置又は時間が存在する。第一に、第一の濃度１２０は、全血サンプル１０２から測定され得る。第二に、第二の濃度１２２は、第一の分離コンポーネント１０６がサンプル１０２をＲＢＣ画分及び血漿画分に分離した後に測定され得る。第二の濃度１２２は、ＲＢＣ画分がＲＢＣ保管又は廃棄ベッセル１０８に移動する前又は後の何れかに測定され得る。いずれにしても、第二の濃度１２２は、血漿画分から測定され、ＲＢＣ画分から測定されない。第三に、第三の濃度１２４は、血漿画分がＲＢＣ画分及びＰＰＰ画分に分離された後に測定され得る。

【0055】

濃度ＰＣ_０は、測定された液体の容量Ｖ_０中の血小板の総数を決定するために用いられる濃度及びフロー論理並びに制御１１６を通過する。血小板又はＢＭＣ濃度測定コンポーネント１１８は、濃度ＰＣ_０が測定された容量Ｖ_０（例えばフローメーターを介して）を測定し得る。あるいは、濃度ＰＣ_０は、既知の容量Ｖ_０を有する空間内で測定され得る。例えば、サンプル１０２、又は血漿画分、又はＰＲＰは、既知の容量を有する。別の実施形態では、ユーザー（例えば医師、看護師、又は技術者）は、ユーザーインターフェース１３４に容量Ｖ_０を入力することができ、これは、濃度及びフロー論理並びに制御１１６に容量Ｖ_０を提供する。従って、濃度及びフロー論理並びに制御１１６は、方程式１の血小板の総数Ｐ_{ＴＯＴＡＬ}を溶解するための測定された液体の濃度ＰＣ_０及び容量Ｖ_０の双方を用いることができる。

【0056】

目的の（例えばユーザーが規定した）ＰＲＰ濃度ＰＣ_ｔを達成するために、幾らかの一定分量のＰＰＰ画分は、ＰＲＰ画分と混合される。目的のＰＲＰ濃度ＰＣ_ｔの典型的な範囲は、０．８〜２．０ｘ１０^６血小板／μＬ又は１．０〜１．５ｘ１０^６血小板／μＬである。典型的な目的のＰＲＰ濃度ＰＣ_ｔは、１．５ｘ１０^６血小板／μＬである。一つの実施形態では、これは、いくらかのＰＰＰ画分の除去、その後残ったＰＰＰ画分及びＰＲＰ画分を混合することを含む。別の実施形態では、ＰＰＰ画分は除去され、その後、ＰＰＰ画分の一部は、ＰＲＰ画分と混合して戻される。双方の場合、ＰＲＰ画分と混合するためのＰＰＰ画分の量は、混合のための目的容量Ｖ_Ｔを計算することにより決定され得る。この値は、以下により与えられる。

【0057】

【数2】

【0058】

目的容量Ｖ_ｔは、目的のＰＲＰ濃度ＰＣ_ｔにより割られる血小板の数Ｐ_{ｔｏｔａｌ}に等しい。方程式（２）は、以下のように方程式（２）においてＰ_{ｔｏｔａｌ}についての方程式（１）を置換することにより単純化することができる。

【0059】

【数3】

【0060】

目的のＰＲＰ濃度ＰＣ_ｔを達成するために、ＰＰＰ画分の一定分量Ｖ_ＰＰＰは、容量Ｖ_ＰＲＰ（例えばフローメーターにより測定される）を有するＰＲＰ画分と混合され、その結果合わせたものは、目的容量Ｖ_ｔと等しくなる。これは、方程式（４）として書かれ、以下のように方程式（５）及び（６）において一定分量Ｖ_ＰＰＰについて解くことができる。

【0061】

【数4】

【0062】

従って、ＰＰＰ画分の一部が除去された場合、幾らかのＰＰＰ画分は、残るＰＰＰ画分及びＰＲＰ画分の容量がＶ_ｔと等しくなるまで除去される。前記別の方法では、ＰＰＰ画分の一部は、残るＰＰＰ画分が、方程式６におけるＶ_ＰＰＰと等しい容量を有するまで、除去される。ＰＰＰ画分全体が除去された場合、容量Ｖ_ＰＰＰを有する一定分量はＰＲＰ画分Ｖ_ＰＲＰに戻して添加され、一定分量のＰＰＰ画分は、一定分量のＰＰＰ画分Ｖ_ＰＰＰとＰＲＰ画分Ｖ_ＰＲＰの容量の合わされた容量が、目的容量Ｖ_ｔと等しくなるように選択される。

【0063】

方程式（６）は、幾らかの血小板が、第一の分離コンポーネント１０６によるＲＢＣ、及び第二の分離コンポーネント１１０によるＰＰＰ画分とともに除去されるという事実に悩まされるが、しかしながら、分離が注意深く行なわれる場合、かかる数は無視することができる。

【0064】

いずれかに記載されるように、方程式６の導出は、ＰＲＰに関して記載されるが、多ＢＭＣ血漿に対して同様に適用可能である。特に、方程式７は、骨髄が供給源であり、多ＢＭＣ血漿濃縮物が最終目標である場合に適用される方程式６を示す。

【0065】

【数5】

【0066】

ＢＭＣの濃度ＢＭＣＣ_０は、第一の分離コンポーネント１０６がＢＭＣサンプル１０２をＲＢＣ画分と血漿画分に分離後、あるいは第二の分離コンポーネント１１０が血漿画分を乏ＢＭＣ画分と多ＢＭＣ画分に分離後、ＢＭＣサンプル１０２から測定され得る。ＢＭＣの目的濃度は、ＢＭＣＣ_ｔである。多ＢＭＣ画分の容量が、Ｖ_ＢＭＣ＋であり、多ＢＭＣ画分と混合される一定分量の乏ＢＭＣ画分の容量は、Ｖ_ＢＭＣである。再度、一定分量の乏ＢＭＣ画分Ｖ_ＢＭＣ−は、多ＢＭＣ画分に添加され、あるいは残りの乏ＢＭＣ画分が除去されるので、多ＢＭＣ画分と残される。方程式６及び７は、任意の目的の血液細胞、例えば白血球（例えば単球）、血小板、骨髄細胞、及び「幹様（stem-like）」細胞又は「多能性（pluripotent）」細胞を用いた使用にも適用され得る。

【0067】

このプロセスの間、濃度及びフロー論理並びに制御１１６は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分と混合するＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分の量がどれくらいであるかを示すユーザーインターフェース１３４を介して人間のユーザーに指示することができる。あるいは、濃度及びフロー論理並びに制御１１６は、ユーザーインターフェース１３４を介してユーザーに目的容量Ｖ_ｔについての値を提供することができる。別の実施形態では、濃度及びフロー論理並びに制御１１６は、混合コンポーネント１１４を自動的に制御し、そしてＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分と混合されるＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分の容量を制御することができる。例えば、濃度及びフロー論理並びに制御１１６は、特定の量のＰＰＰ画分を除去するか、特定量のＰＰＰ画分をＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分に戻して加えるバルブ又はポンプを制御することができる。

【0068】

ユーザーインターフェース１３４は、血小板又はＢＭＣ濃度測定コンポーネント１１８が実施する測定を記載する情報を表示することができる。ユーザーインターフェース１３４は、濃度及びフロー論理並びに制御１１６の一部であってもよく、濃度及びフロー論理並びに制御１１６から分離されてもよい。この情報はまた、メモリに保存され、又はテレメトリ（telemetry）を介して中央記録管理システムに移され得る。

【0069】

ユーザーインターフェース１３４は、目的のＰＲＰ又はＢＭＣ濃度ＰＣ_ｔ又はＢＭＣＣ_ｔ及び目的容量Ｖ_ｔを設定するために、ユーザー（例えば医師、看護師、又は技術者）により用いられ得る。ユーザーインターフェース１３４は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物の濃度分析からの結果を要求及び表示するために用いられ得る。かかる分析は、濃縮物を形成後、濃縮物が患者に投与される前に、所望の濃度が作製されたことを確実にするために、行われ得る。

【0070】

血小板又はＢＭＣ濃度測定コンポーネント１１８は、様々な血液分析機及び方法を含み得る。例えば、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）は、抗体細胞表面マーカーに基づいて、液体内で特定の多能性、幹様細胞の濃度を決定することができる。濃度測定コンポーネント１１８の他の典型的な実施形態は、光学顕微鏡、光学光散乱、及び電気インピーダンスについてのものを含む。光学顕微鏡は、形状及びサイズにより粒子を計測及び識別するコンピューター制御されたパターン及び形状認識コンポーネント及び論理を必要とする。例によっては、この方法は、連続的に行うことができず、液体の別々の部分のサンプリングを要求し得る。一つの実施形態では、薄い液体層のサンプリングが実行され得る。光学光散乱は、流体力学の液体の流れを用いることができ、該方法は、特に、蛍光マーカー又は抗体が用いられる様々な種類の細胞及び分子を計測することができる。電気インピーダンスは、流体力学の流体の流れを用いることができる。

【0071】

実施形態によっては、これらの濃度測定コンポーネント１１８のいずれかを、粒子分離コンポーネントと組み合わせることができる。例えば、マイクロ流体チャネル装置は、ＰＲＰ画分内で粒子を分離するために用いられ得る一方で、光散乱装置は、各流体の流れにおける粒子の数を測定する。粒子計測装置は、同一の流れの中で異なる種類の細胞又は粒子を識別することができない場合、粒子分離装置及び粒子計測装置の組み合わせは、有益であり得る。

【0072】

一つの実施形態では、血液分析は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物に関して行われ得る（ブロック２１４、３１４、４１４、５１４、６１４、７１４）。この血液分析は、一又は複数の先の血液分析工程に加えられ、あるいは代わりとなり得る。例えば、一つの実施形態では、血液分析は、全血サンプル又はＢＭＣサンプルに関して、及び濃縮物に関して行われ得る。別の実施形態では、血液分析は、第一の分離後、濃縮物に関して行われ得る。

【0073】

一つの実施形態では、自己トロンビン又はフィブリンマトリックスは、ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ保管又は廃棄ベッセル１１２中のＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分の幾らかまたは全体から分離され得る（ブロック２２０、３２０、４２０、５２０、６２０、７２０）。抗凝血剤１２８の効果は、例えば、ＣａＣｌの添加により（例えば、ＣａＣｌの１０％溶液をＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分に添加することができる）、逆行させることができる。ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分及び抗凝血剤１２８を逆行させるために用いられる物質は、撹拌され得（例えば約１分間）、フィブリン凝血塊の形成をもたらす。凝血塊形成の間又は後、さらなるＰＰＰ又はいくらかの乏ＢＭＣ画分は、混合物に添加され得る。さらに撹拌は行われ、混合物は、形成を続けるために凝血のための時間が与えられ得る。凝血が完了すると、凝血塊は除去され、手動で圧縮され得る（又は圧縮のために再度遠心分離される）。

【0074】

自己トロンビン形成の場合、プロトロンビンタンパク質は、抗凝血剤を逆行させるプロセスにおいて切断され、トロンビンが生成される。凝血塊の除去は、血清及び低濃度のトロンビンを残す。トロンビンは、再生的応答を刺激するために血小板成長因子の放出を開始及び調節するために、埋め込まれるＰＲＰと組み合わされ得る。

【0075】

フィブリノーゲンのフィブリンへの切断を導くために、ＰＰＰ中のフィブリノーゲンが抗凝血剤のカルシウム逆行（reversal）又は自己トロンビンの添加により活性化される場合、フィブリンマトリックス又はスキャフォールドは形成される。マトリックス又はスキャフォールドは、新しい組織を形成するための天然の又は埋め込まれる細胞が結合し、増殖する足場として機能するために埋め込まれ得る。

【0076】

凝血塊は、患者１０４の埋め込み先に移され得る。埋め込み先は、患者１０４の関節、若しくは再生が望まれる場所、又は任意の他の選択される部位でもよい。凝血塊が除去された後、残ったＰＰＰ又は乏ＢＭＣは、インビトロ（ＰＲＰ膜を作製する）又はインビボ（活性化されたＰＲＰを作製する）のいずれかにおいて、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ濃縮物と組み合わせることにより、血小板活性化を改良するために用いられ得る。トロンビン又はフィブリンマトリックスが自己に適用され得るが、これらは、また患者１０４以外の別の患者に埋め込まれ得る。

【0077】

自己トロンビン又はフィブリンマトリックスは、シリンジを介して採取され、患者１０４に埋め込まれ得る。一つの選択肢では、フィブリンマトリックス又は自己血小板ゲル（ＡＰＧ）は、活性化されたＰＰＰ及びＰＲＰ濃縮物の一部から自動で作製され得る。他の生成物は、自己トロンビンを含む活性化されたＰＰＰを含む。手動の又は自動の手順は、手術室又は所望の処置場所で行われ得る。

【0078】

ＰＰＰは、９１％の水分含量及び残りはタンパク質である、約５５％の血液容量を含む無細胞血液画分を含み得る。好ましくは、ＰＰＰから血小板が排除されるが、実際には少量の残った血小板画分が観察され得る。

【0079】

実施形態によっては、血小板又はＢＭＣ濃度測定コンポーネント１１８は、他の血液成分濃度、例えば白血球濃度も測定することができる。測定することができる他の濃度は、赤血球、好中球、リンパ球、単球、好酸球、及び好塩基球についての濃度を含む。これらの代替の測定は、非血小板及び非ＢＭＣ血液細胞の濃度が目的濃度又は目的濃度範囲まで濃縮される実施形態において用いられ得る。

【0080】

しばしば、混合コンポーネント１１４の混合は、ＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物中の血小板を懸濁するのに十分でない。これらの場合、あるいは血小板活性化を増大させる場合、任意の撹拌コンポーネント１３２はＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物を撹拌することができる。ＢＭＣが用いられる場合、ペレットは、患者に容易に注入するために、三つの媒体：無細胞の骨髄吸引物；血漿；又はＰＲＰのうちの一つにおいて再構成され得る（液体含量を増加させ得る）。

【0081】

一又は複数の第一及び第二の分離コンポーネント１０８、１１０、血小板又はＢＭＣ濃度測定コンポーネント１１８、濃度及びフロー論理並びに制御１１６、並びに混合コンポーネント１１４は、システム３００内の滅菌性を強化するために、使用後廃棄され得る。全ての保管ベッセル１０８、１１２、１２６は、使い捨てにされ得る。

【0082】

システム１００は、ハンドヘルド式若しくはベンチトップ式、又は他の携帯可能な実装等の小型化形態を含む様々な形態をとり得る。携帯性は、ハンドヘルド、軽量であるもの、及び／又はカートにより支持されるものを含み得る。システム１００はまた、連続的又は断続的なＰＲＰの注入が長時間にわたり、患者に投与され得るように、設計され得る。一つの実施形態では、システム１００は、マイクロマシンシステム（ＭＥＭＳ）装置及び／又はラボオンチップとして完全に、又は部分的に実装され得る。

【0083】

本明細書に開示されるシステム及び方法は、様々な代替の実施形態により、更なるいくつかの目的を達成することができる。一つの実施形態では、例えば一又は複数の使い捨てコンポーネントの包含により、血液製品の滅菌性が維持される。一つの実施形態では、血液は、手術の前に患者から回収され、手術のための最終ＰＲＰ生成物を調製するために用いられる。一つの実施形態では、ＰＲＰ膜が作製される。あるいは、活性化されたＰＲＰは、自己フィブリンマトリックス内でＰＲＰを作製するために用いられる。別の実施形態では、システム１００は、３０分以内にＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物を作製することができる。

【0084】

システム及び方法は、自動注入機及び血液分析機に用いられる従来技術及びコンポーネントを組み込んでもよく、又はこれらに組み込まれてもよい。赤血球、白血球、血小板、又は他の血液成分の計測、測定及び分析に加えて、自動血液分析装置はまた、血液中及び各赤血球内において、ヘモグロビン又は化学的調節因子の量を測定することができる。

【0085】

本明細書に記載されるシステム及び方法は、修復又は再生を刺激及び／又は増進させるために傷害組織又は病理組織に適用され得る。埋め込みの方法は、経皮（注入）的適用又は手術中（外科的）適用を含むことができる。他の実施形態は、長時間にわたり所定の用量を提供するための埋め込まれる、あるいは部分的に埋め込まれる連続的又は断続的送達システムを含むことができる。

【0086】

他のサンプル供給源はまた、全血、及び脂質、滑膜を含む骨髄、並びに他の組織の代わりに用いられ得る。

【0087】

図２は、特定の血小板濃度のＰＲＰ濃縮物を生成するための方法を図解する。方法２００は、全血サンプルの取得操作２０２において全血サンプルを得ること、及び抗凝血剤の添加操作２２２において任意で抗凝血剤を添加することを含む。その後、第一の分離操作２０４は、サンプルを赤血球（ＲＢＣ）画分と血漿画分に分離する。ＲＢＣ画分は、廃棄又は再灌流操作２０６において、廃棄又は患者に再灌流し得る。

【0088】

血漿画分中の血小板の総数Ｐ_{ｔｏｔａｌ}は、決定操作２０８において決定され得る。この操作２０８は、少なくとも一つの測定値、例えば血液分析装置により測定される濃度を用いる。血小板濃度ＰＣ_０は、例えば濃度測定が行われるフローメーターにより測定されるような液体の容量Ｖ_０を乗じられ得る。容量Ｖ_０倍の濃度ＰＣ_０は、血小板の総数Ｐ_{ｔｏｔａｌ}を与える。血漿画分は、その後、第二の分離操作２１０（例えばマイクロ流体チャネル分離又は遠心分離）によりさらに分離され、多血小板血漿（ＰＲＰ）画分（高濃度の血小板）及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）画分（わずかな血小板濃度）が生成される。

【0089】

ＰＲＰ画分及び一定分量のＰＰＰ画分Ｖ_ＰＰＰは、混合操作２１２において混合される。一定分量の容量Ｖ_ＰＰＰは、目的の血小板濃度ＰＣ_ｔ及び血小板の総数Ｐ_{ｔｏｔａｌ}に基づき得る（例えば方程式６）。混合操作２１２は、その後、ＰＲＰ濃縮物の患者への提供操作２１６において患者に提供され得るＰＲＰ濃縮物を形成する。残ったＰＰＰ画分はまた、自己トロンビン調製操作２２０において、患者への埋め込みのための自己トロンビン調製物を形成するために用いられ得る。

【0090】

任意で、ＰＲＰ濃縮物が混合操作２１２において形成された後、血小板濃度は任意の決定２１４において、血小板濃度が目的の範囲内（又は目的の血小板濃度の許容誤差内）に確実にあることを確認され得る。決定２１４は、ＰＲＰ濃縮物が目的の範囲内又は目的濃度の許容誤差内であることを見出した場合、その後、ＰＲＰ濃縮物は、患者に提供され得る。そうでない場合、濃縮物はＲＢＣ画分と再混合され、第一の分離操作２０４で開始するプロセスが繰り返され得る。

【0091】

沈殿は、濃縮物のＰＰＰ層とＰＲＰ層への少なくとも部分的な分離を引き起こすので、撹拌操作は、任意で注入の前に血小板を懸濁するために用いられ得る。

【0092】

図３は、特定の血小板濃度のＰＲＰ濃縮物を生成するための別の方法を図説する。方法３００は、ＰＲＰ画分に関する決定操作３０８が、第一及び第二の分離操作３０４、３１０の間ではなく、第二の分離操作３１０後に行われることを除いて、方法２００とほぼ同一である。実施形態によっては、第一及び第二の分離操作３０４、３１０は、単一の分離コンポーネント（例えば、ＲＢＣ画分、ＰＲＰ画分及びＰＰＰ画分を作製する遠心分離機）により単一の操作において行われ得る。

【0093】

図４は、特定の血小板濃度のＰＲＰ濃縮物を生成するためのさらに別の方法を図説する。方法４００は、全血サンプルに関する決定操作４０８が、分離操作４０４、４１０のいずれかの前において行われることを主に除いて、方法２００とほぼ同一である。

【0094】

方法２００及び３００との別の差異は、少なくとも一回の測定に基づく全血中の血小板の総数の決定操作４０８における血小板の総数の決定が、任意の全血サンプルへの抗凝血剤の添加操作４２２と並行して行われ得ることである。あるいは、双方の操作４０８、４２２は、全血サンプルの取得操作４０２と第一の分離操作４０４との間に、重複して、あるいは重複せずに行われ得る。

【0095】

決定的な差異は、任意の赤血球画分とＰＲＰ濃縮物との再混合操作４１８の後、方法４００は、血小板の総数の決定操作４２４を含んでもよいことである。この操作４２４は、決定４１４による、ＰＲＰ濃縮物が目的濃度範囲にない場合における再混合の後、ＲＢＣ及びＰＲＰ濃縮物の混合物中の血小板の総数を決定し得る。実施形態によっては、第一及び第二の分離操作４０４、４１０は、一つの分離コンポーネント（例えばＲＢＣ画分、ＰＲＰ画分及びＰＰＰ画分を作製する遠心分離機）による一つの操作において行われ得る。

【0096】

図５は、特定のＢＭＣ濃度の多ＢＭＣ濃縮物を生成するための方法を図説する。方法５００は、サンプルの取得操作５０２においてＢＭＣサンプルを得ること、及び抗凝血剤の添加操作５２２において任意で抗凝血剤を添加することを含む。その後、第一の分離操作５０４は、サンプルを赤血球（ＲＢＣ）画分と血漿画分に分離する。ＲＢＣ画分は、廃棄又は再灌流操作５０６において、廃棄又は患者に再灌流し得る。

【0097】

血漿画分中のＢＭＣの総数ＢＭＣ_{ｔｏｔａｌ}は、決定操作５０８において決定される。この操作５０８は、少なくとも一つの測定値、例えば血液分析装置により測定される濃度を用いる。ＢＭＣ濃度ＢＭＣ_０は、例えばそれから濃度測定が行われるフローメーターにより測定されるような液体の容量Ｖ_０を乗じられ得る。容量Ｖ_０倍の濃度ＢＭＣ_０は、ＢＭＣの総数ＢＭＣ_{ｔｏｔａｌ}を与える。血漿画分は、その後、第二の分離操作５１０（例えばマイクロ流体チャネル分離又は遠心分離）によりさらに分離され、多ＢＭＣ血漿画分（高濃度のＢＭＣ）及び乏ＢＭＣ血漿画分（わずかなＢＭＣ濃度）が生成される。

【0098】

多ＢＭＣ画分及び一定分量の乏ＢＭＣ画分Ｖ_ＢＭＣ−は、混合操作２１２において混合される。一定分量の容量Ｖ_ＢＭＣ−は、目的のＢＭＣ濃度ＢＭＣＣ_ｔ及びＢＭＣの総数ＢＭＣ_{ｔｏｔａｌ}に基づき得る（例えば方程式７）。混合操作５１２は、ＢＭＣ濃縮物を形成し、その後、ＢＭＣ濃縮物の患者への提供操作５１６において、患者に提供され得る。残った乏ＢＭＣ画分はまた、自己トロンビン調製操作５２０において患者に埋め込まれるための残った乏ＢＭＣ画分からの自己トロンビン調製操作５２０において、患者への埋め込みのための自己トロンビン調製物を形成するために用いられ得る。

【0099】

任意で、ＢＭＣ濃縮物が混合操作５１２において形成された後、ＢＭＣ濃度は任意の決定５１４において、ＢＭＣ濃度が目的の範囲内（又は目的のＢＭＣ濃度の許容誤差内）に確実にあることを確認され得る。決定５１４は、ＢＭＣ濃縮物が目的の範囲内又は目的濃度の許容誤差内であることを見出した場合、その後、ＢＭＣ濃縮物は、患者に提供され得る。そうでない場合、濃縮物はＢＭＣ画分と再混合され、第一の分離操作５０４で開始するプロセスが繰り返される。

【0100】

沈殿は、濃縮物の乏ＢＭＣ層と多ＢＭＣ層への少なくとも部分的な分離を引き起こすので、撹拌操作は、任意で注入の前にＢＭＣを懸濁するために用いられ得る。この方法は、第一の分離操作５０４後、任意のフィルター血漿画分操作５２４を含んでもよい。任意のフィルター操作５２６は、何らかの残った脂質及び／又は大きな粒子を除去することができる。一例としては、１７０〜２６０μｍフィルターが用いられ得る。

【0101】

図６は、特定のＢＭＣ濃度のＢＭＣ濃縮物を生成するための別の方法を図説する。方法６００は、ＢＭＣ画分に関する決定操作６０８が、第一及び第二の分離操作６０４、６１０の間ではなく、第二の分離操作６１０後に行われることを除いて、方法５００とほぼ同一である。

【0102】

図７は、特定のＢＭＣ濃度のＢＭＣ濃縮物を生成するためのさらに別の方法を図説する。方法７００は、全骨髄サンプルに関する決定操作７０８が、分離操作７０４、７１０のいずれかの前において行われることを主に除いて、方法５００及び６００とほぼ同一である。

【0103】

方法５００及び６００との別の差異は、少なくとも一回の測定に基づく骨髄サンプル中のＢＭＣの総数の決定操作７０８におけるＢＭＣの総数の決定が、任意の骨髄サンプルへの抗凝血剤の添加操作７２２と並行して行われ得ることである。あるいは、双方の操作７０８、７２２は、骨髄サンプルの取得操作７０２と第一の分離操作７０４との間に、重複して、あるいは重複せずに行われ得る。

【0104】

決定的な差異は、任意の赤血球画分とＢＭＣ濃縮物との再混合操作７１８の後、方法７００は、任意でＢＭＣの総数の決定操作７２４を含んでもよいことである。この操作７２４は、ＢＭＣ濃縮物が決定７１４に従って目的濃度範囲にない場合における再混合の後、ＲＢＣ及びＢＭＣ濃縮物の混合物中のＢＭＣの総数を決定し得る。

【0105】

図８は、血小板又は骨髄細胞（ＢＭＣ）の目的の濃度及び／又は容量を生成するための別のシステム８００のブロックダイヤグラム表示を図説する。システム８００は、患者８０４から全血サンプル又はＢＭＣサンプル８０２を得る、あるいは提供する。サンプルは、分離装置８０８（例えば、二つの例として、マイクロ流体チャネル又は遠心分離機）に入る前に、任意で抗凝血剤８０６と混合され得る。

【0106】

分離装置８０８は、サンプル８０２を二つの画分：赤血球（ＲＢＣ）画分及び血漿画分に分離することができる。分離装置８０８は、サンプル８０２を三つの画分：ＲＢＣ画分、乏標的細胞画分、及び多標的細胞画分に分離することもできる。標的細胞は、最終濃縮物中に特定の濃度において存在することが所望されるものである。例えば、血小板、白血球、骨髄細胞、多能性細胞、及び幹様細胞は、いくつかの典型的な標的細胞である。骨髄サンプル中にみられる任意の細胞は、標的細胞となり得る。乏標的細胞画分は、わずかな濃度の標的細胞を有するものである一方で、多標的細胞画分は、天然の濃度よりも高い濃度の標的細胞を有する。

【0107】

各画分は分離装置８０８に残るので、フローメーター８１０は分離装置８０８に残る液体の容量を計算し得る。このデータは、濃度及びフロー論理並びに制御コンポーネント８１２に受け継がれ得る。濃度及びフロー論理並びに制御８１２は、液体のフローを制御するために、第一の制御可能な混合コンポーネント８１８を制御する。フロー論理及び制御８１２はまた、分離装置８０８に残る標的細胞の濃度に分離装置８０８に残る液体の容量を乗じることにより標的細胞の総数を決定する。フローの論理及び制御８１２はさらに、目的濃度の標的細胞を得るための、混合されるべき液体の量を決定する。

【0108】

流速、容量及び他のパラメータを表すデータは、ユーザーインターフェース８１４を介してユーザーに表示され得る。

【0109】

各画分内の様々な粒子及び細胞の濃度は、血液分析装置８１８により測定される。血液分析装置８１８は、様々な装置及び方法、例えばいくつか例をあげると、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、光学顕微鏡，光学光散乱、及び電気インピーダンスに組み込まれ得る。血液分析装置８１６により測定される濃度は、濃度及びフロー論理並びに制御８１２に受け継がれ、液体中の標的細胞の総数を決定するためにこれらの測定値を使用する。標的細胞のこの総数から、濃度及びフロー論理並びに制御８１２は、第一の制御可能な混合コンポーネント８１８（例えばポンプ若しくはバルブ又は二つの組み合わせ）に対する指示を決定し得る。

【0110】

第一の制御可能な混合コンポーネント８１８は、ＲＢＣ画分をＲＢＣ保管又は廃棄ベッセル８２０に向かわせる。これはまた、乏標的画分を乏標的保管又は廃棄ベッセル８２２に向かわせる。最終的には、これはまた、多標的画分を多標的保管ベッセル８２４に向かわせる。これらの三つの画分がこれらのそれぞれのベッセル８２０、８２２、８２４に向けられる順序は、限定されず、従って、任意の組み合わせ、又は順序が想定される。

【0111】

濃度及びフロー論理制御８１２はまた、第二の制御可能な混合コンポーネント（例えばポンプ若しくはバルブ又は二つの組み合わせ）に、一定分量の乏標的画分が多標的保管ベッセル８２４内の多標的画分全体に添加されるように指示する。一定分量の容量は、多標的保管ベッセル８２４内の組み合わせが目的濃度又は目的濃度範囲を満たす標的細胞の濃度又は濃度範囲を有するように、選択される。

【0112】

この目的濃度又は濃度範囲が達成される場合、標的細胞濃縮物は、多標的保管ベッセル８２４中に存在し、患者８０４（又は別の患者）に提供され得る。乏標的保管又は廃棄ベッセル８２２中の残った乏標的画分はまた、自己トロンビン又はフィブリンマトリックスとして、患者８０４（又は別の患者）に提供され得る。

【0113】

図９は、ＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮装置９００を図説する。装置９００は、全血又はＢＭＣサンプルを分離するためのディスク型遠心分離機９０２を含む。ディスク型遠心分離機９０２は、サンプルを赤血球（ＲＢＣ）画分（外層）、多血小板血漿（ＰＲＰ）又は多ＢＭＣ画分（中間層）、及び乏血小板血漿（ＰＰＰ）画分又は乏ＢＭＣ画分（内層）に分離することができる。全血又は骨髄サンプルは、例えば、シリンジのニードルを許容し得る開口９１８を介して遠心分離機に提供されうる。開口９１８は、シリンジのニードルが開口に入れられない限り閉状態にあり、従って液体をディスク型遠心分離機９０２に移すことができるが、開口から漏れることはないように、構成され得る。

【0114】

ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分は最初に取り除かれ、フローメーター９０４及び血液分析装置モジュール９０６を通って第一のベッセル９１０に移され得る。フローは、最初にフローメーター９０４を通るように図説されているが、液体は、任意の順番で、フローメーター９０４又は血液分析装置モジュール９０６を通る。フローメーター９０６はＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分の容量を提供する。ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分の除去及びフローは、コンピューター制御されるバルブ／ポンプ９０８により制御され得る。

【0115】

一度ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分がディスク型遠心分離機９０２から除去されると、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分は、より下の又は最も内側の層となり、次に除去され得る。ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分は、装置９００（例えばプロセッサ）の論理にＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分の容量を提供するフローメーター９０６を通過する。ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分は、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分中の血小板又はＢＭＣの総数を測定する血液分析装置モジュール９０６を通過し得る。この容量及び血小板又はＢＭＣの総数が与えられると、装置内の論理は、血小板又はＢＭＣの総数倍のＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分として、ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分内の血小板又はＢＭＣの濃度を決定し得る。ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分は、第二のベッセル９１２に向かい得る。ＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分の除去及びフローは、コンピューター制御されるバルブ／ポンプ９０８により制御され得る。

【0116】

ＲＢＣ画分をディスク型遠心分離機中に残すことができ、遠心分離機は使い捨て可能であるので、更なる操作は、ＲＢＣ画分に関して必要とされない。装置９００内の論理は、目的の血小板又はＢＭＣ濃度を達成するためにＰＲＰ又は多ＢＭＣ画分と混合するための一定分量のＰＰＰ画分又は乏ＢＭＣ画分を決定することができる。一つの実施形態では、ユーザーは、ユーザーインターフェース９１６を介して目的濃度を設定することができる（図１２を参照のこと）。第二のコンピューター制御されるバルブ／ポンプ９１４は、ＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物を形成するために、一定分量を、第一のベッセル９１０から第二のベッセル９１２に移すことを可能にする。任意の撹拌機構（図説されない）は、第二のベッセル９１２内のＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物の混合を改良するために活性化され得る。

【0117】

一つの実施形態では、残ったＰＰＰ画分又は乏ＢＭＣ画分及びＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物を、シリンジの針を介してアクセス可能であるそれぞれの開口９２０及び９２２を介してベッセル９１０、９１２から除去することができる（図１３を参照のこと）。加えて、ベッセル９１０、９１２は、これらがそれぞれ患者に移され、あるいは後の使用のための位置に保存することができるように、分離可能、且つ除去可能であってもよい。

【0118】

図９は、液体がディスク型遠心分離機９０２の中間から除去されることを記載しているが、他の実施形態では、液体は、他の点からディスク型遠心分離機に残され得る。例えば、液体は、実施形態によっては、遠心分離機の半径の外側から残され得る。また、様々な画分を除去する順序は、変更することができる。実施形態によっては、プリンタ９２４は、装置９００からのデータのハードコピーを提供することができる。

【0119】

滅菌性を確実にするために、血液又は骨髄と接触する装置９００のこれらの部分は、モジュール式及び使い捨てでもよい。図１０は、使い捨てできる装置９００のこれらのコンポーネントを含んでなるパッケージ１０００の一つの実施形態を図説する。これらは、任意の一又は複数の以下の説明されるコンポーネント：遠心分離機９０２、遠心分離機開口９１８、血液分析装置モジュール９０６、第一のコンピューター制御されるバルブ／ポンプ９０８、並びに第一及び第二のベッセル９１０、９１２を含むことができる。加えて、装置９００の使い捨て部分は、遠心分離機９０２とコンピューター制御されるバルブ／ポンプ９０８を接続する流路９２４、及び第一及び第二のベッセル９１０、９１２を接続する流路９２６を含むことができる。任意の二つ又はそれ以上のこれらのコンポーネントは、据え付け、除去、及び移動を単純化及び容易にするために相互接続され得、相互接続されたパッケージ１０００は、同様の又は同一のパッケージ１０００により置き換えられ得る。

【0120】

図１１は、開口９１８を介した挿入により、図９の装置９００に全血又は骨髄サンプルを提供するためにシリンジ９２８をどのように用いることができるかを図説する。

【0121】

図１２は、例えば、ユーザーインターフェース９１６のタッチスクリーン実施形態による図９の装置９００とのユーザーインターラクションを図説する。

【0122】

図１３は、図９〜１３に図解される第一のベッセル９１０の内容物を除去するためにシリンジ９３０をどのように用いることができるかを図説する。記載されるように、第一のベッセル９１０は、ＰＰＰ画分又は乏ＢＭＣ画分を保持することができ、そして該シリンジは、第一のベッセル９１０の一部又は全ての内容物を抽出するために用いられ得る。

【0123】

図９〜１３は、典型的に、ＰＰＰ又は乏ＢＭＣ画分を保存するものとして第一のベッセル９１０、及び典型的にＰＲＰ若しくは多ＢＭＣ画分又はＰＲＰ若しくはＢＭＣ濃縮物を保存するものとして第二のベッセル９１２を記載する一方で、当業者は、二つのベッセル９１０、９１２が、相互に交換可能であり、従って、装置９００の右又は左に限定されないことを理解する。

【0124】

本明細書に記載されるシステム及び方法は、本明細書に記載される特定の物理的デバイスに加えて、コンピューターシステム等の機械においても実装され得る。図１４は、デバイスに本開示の任意の一又は複数の態様及び／又は方法を実施又は実行させるための、その中で一連の指示が実行され得るコンピューターシステム１４００の典型的な形態における機械の一つの実施形態のブロックダイヤグラム表示を示す。図１４中のコンポーネントは、単なる例であり、ハードウェア、ソフトウェア、埋め込まれた論理コンポーネント、又は特定の実施形態を実装する二又はそれ以上のかかるコンポーネントの組み合わせの使用又は機能性の範囲を限定しない。

【0125】

コンピューターシステム１４００は、バス１４４０を介して、互いに、且つ他のコンポーネントと通信するプロセッサ１４０１、メモリ１４０３、及びストレージ１４０８を含み得る。バス１４４０はまた、ディスプレイ１４３２、一又は複数のインプットデバイス１４３３（これは、例えば、キーパッド、キーボード、マウス、スタイラス等を含み得る。）、一又は複数のアウトプットデバイス１４３４、一又は複数のストレージデバイス１４３５、及び様々なタンジブルストレージ媒体１４３６と接続される。これらのエレメントの全ては、一又は複数のインターフェース、又はアダプタを介してバス１４４０と直接的にインターフェースで接続され得る。例えば、様々なタンジブルストレージ媒体１４３６は、ストレージ媒体インターフェース１４２６を介してバス１４４０とインターフェースで接続され得る。コンピューターシステム１４００は、限定することなく、一又は複数の集積回路（ＩＣ）、プリント回路基板（ＰＣＢ）、携帯用ハンドヘルドデバイス（例えば携帯電話又はＰＤＡ）、ラップトップ又はノートブック型コンピューター、分散型コンピューターシステム、コンピューティング・グリッド、又はサーバーを含む任意の好適な物理的形態を有してもよい。

【0126】

プロセッサ１４０１（又は中央処理装置（ＣＰＵ））は、任意で、指示の一時的なローカルストレージのためのキャッシュメモリユニット１４０２、データ、又はコンピューターアドレスを含む。プロセッサ１４０１は、コンピューター読み取り可能な指示の実行を支援するように構成される。コンピューターシステム１４００は、一又は複数のタンジブルコンピューター読み取り可能なストレージ媒体、例えばメモリ１４０３、ストレージ１４０８、ストレージデバイス１４３５、及び／又はストレージ媒体１４３６において具体化されるソフトウェアを実行するプロセッサ１４０１の結果として機能性を提供し得る。コンピューター読み取り可能媒体は、特定の実施形態を実行するソフトウェアを記録し、プロセッサ１４０１は、ソフトウェアを実行し得る。メモリ１４０３は、一又は複数の他のコンピューター読み取り可能媒体（例えば、大容量ストレージデバイス１４３５、１４３６）又は好適なインターフェース、例えばネットワークインターフェース１４２０を介した一又は複数の他のソースからソフトウェアを読み取り得る。該ソフトウェアは、プロセッサ１４０１に本明細書に記載又は図説される一又は複数のプロセス、又は一若しくは複数のプロセスの一若しくは複数の工程を実行させる。斯かるプロセス又は工程の実行は、ソフトウェアにより指示されるように、メモリ１４０３に保存されるデータ構造を定義すること、及びデータ構造を修正することを含んでもよい。

【0127】

メモリ１４０３は、限定することなく、ランダムアクセスメモリコンポーネント（例えばＲＡＭ１４０４）（例えばスタティックＲＡＭ「ＳＲＡＭ」、ダイナミックＲＡＭ「ＤＲＡＭ」等）、読み出し専用コンポーネント（例えばＲＯＭ１４０５）、及び任意のこれらの組み合わせを含む様々なコンポーネント（例えば、機械読み取り可能な媒体）を含んでもよい。ＲＯＭ１４０５は、プロセッサ１４０１と一方向にデータ及び指示を通信しようと働き、ＲＡＭ１４０４は、プロセッサ１４０１と双方向にデータ及び指示を通信しようと働く。ＲＯＭ１４０５及びＲＡＭ１４０４は、下記に記載される任意の好適なタンジブルなコンピューター読み取り可能媒体を含んでもよい。一つの例では、コンピューターシステム１４００内のエレメント間、例えばスタートアップの間の情報転送を助けるベーシックルーチンを含むベーシックインプット／アウトプットシステム１４０６（ＢＩＯＳ）は、メモリ１４０３に保存されてもよい。

【0128】

固定ストレージ１４０８は、任意でストレージコントロールユニット１４０７を介して、プロセッサ１４０１と双方向的に接続される。固定ストレージ１４０８は、更なるデータストレージキャパシティを提供し、任意の好適なタンジブルなコンピューター読み取り可能媒体を含み得る。ストレージ１４０８は、オペレーティングシステム１４０９、ＥＸＥＣｓ１４１０（実行可能）、データ１４１１、ＡＰＩアプリケーション１４１２（アプリケーションプログラム）等を保存するために用いられてもよい。常にではないが、しばしばストレージ１４０８は、一次ストレージ媒体（例えばメモリ１４０３）よりも遅い、二次ストレージ媒体（例えばハードディスク）である。ストレージ１４０８はまた、光学ディスクドライブ、ソリッドステートメモリデバイス（例えばフラッシュ型システム）、又は上記の組み合わせを含み得る。ストレージ１４０８中の情報は、適切な場合、メモリ１４０３中のビジュアルメモリとして組み込まれてもよい。

【0129】

一つの例では、ストレージデバイス１４３５は、ストレージデバイスインターフェース１４２５を介して、コンピューターシステム１４００（例えば外部ポートコネクターを介して（示されない））と取り外し可能にインターフェースで接続されてもよい。特に、ストレージデバイス１４３５及び支援される機械読み取り可能媒体は、非揮発性及び／又は揮発性ストレージの機械読み取り可能指示、データ構造、プログラムモジュール、及び／又はコンピューターシステム１４００についての他のデータを提供し得る。一つの例では、ソフトウェアは、ストレージデバイス１４３５上の機械読み取り可能媒体内に完全に又は部分的に存在する。別の例では、ソフトウェアは、プロセッサ１４０１内に完全に又は部分的に存在する。

【0130】

バス１４４０は、幅広い様々なサブシステムと接続する。本明細書では、バスへの言及は、適切な場合、一般的な機能を果たす一又は複数のデジタルシグナルラインを包含し得る。バス１４４０は、限定しないが、任意の様々なバスアーキテクチャを用いる、メモリバス、メモリコントローラ、周辺機器バス、ローカルバス、及びこれらの任意の組み合わせを含む、任意のいくつかの種類のバスでもよい。非限定的な例としては、かかるアーキテクチャは、業界標準アーキテクチャ（ＩＳＡ）バス、エンハンスドＩＳＡ（ＥＩＳＡ）バス、マイクロチャネルアーキテクチャ（ＭＣＡ）バス、ビデオ電子標準化団体ローカルバス（ＶＬＢ）、周辺機器コンポーネントインターコネクト（ＰＣＩ）バス、ＰＣＩ−エクスプレス（ＰＣＩ−Ｘ）バス、アクセラレーテッドグラフィックスポート（ＡＧＰ）バス、ハイパートランスポート（ＨＴＸ）バス、シリアルアドバンスドテクノロジーアタッチメント（ＳＡＴＡ）バス、及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。

【0131】

コンピューターシステム１４００はまた、インプットデバイス１４３３を含んでもよい。一つの例としては、コンピューターシステム１４００のユーザーは、インプットデバイス１４３３を介して、コンピューターシステム１４００にコマンド及び／又は他の情報を入力してもよい。インプットデバイス１４３３の例としては、限定しないが、アルファニューメリックインプットデバイス（例えばキーボード）、ポインティングデバイス（例えばマウス又はタッチパッド）、タッチパッド、ジョイスティック、ゲームパッド、オーディオ入力デバイス（例えばマイクロホン、音声応答システム等）、光学スキャナ、ビデオ、又は更なるイメージキャプチャデバイス（例えばカメラ）及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。インプットデバイス１４３３は、限定することなく、シリアル、パラレル、ゲームポート、ＵＳＢ、ＦＩＲＥＷＩＲＥ、ＴＨＵＮＤＥＲＢＯＬＴ、又は上記の任意の組み合わせを含む、任意の様々なインプットインターフェース１４２３（例えばインプットインターフェース１４２３）を介してバスとインターフェースで接続されてもよい。

【0132】

特定の実施形態では、コンピューターシステム１４００が、ネットワーク１４３０と接続される場合、コンピューターシステム１４００は、ネットワーク１４３０と接続する他のデバイス、具体的には携帯用デバイス、及び／又はエンタープライズシステムと通信し得る。コンピューターシステム１４００への及び／又はコンピューターシステム１４００からの通信は、ネットワークインターフェース１４２０を介して送信されてもよい。例えば、ネットワークインターフェース１４２０は、一又は複数のパケット（例えばインターネットプロトコール（ＩＰ）パケット）形態において、ネットワーク１４３０から着信（例えば他のデバイスからの要求又は応答）を受けることができ、コンピューターシステム１４００は、処理のためにメモリ１４０３における着信を保存してもよい。コンピューターシステム１４００は、メモリ１４０３における一又は複数のパケットの形態における送信（例えば他のデバイスへの要求又は応答）を同様に保存し得、ネットワークインターフェース１４２０からのネットワーク１４３０と通信される。プロセッサ１４０１は、処理のためのメモリ１４０３に記録されたこれらの通信パケットにアクセスすることができる。

【0133】

該ネットワークインターフェース１４２０の例としては、限定することなく、ネットワークインターフェースカード、モデム及び任意のこれらの組み合わせが挙げられる。ネットワーク１４３０又はネットワークセグメント１４３０の例としては、限定することなく、ワイドエリアネットワーク（ＷＡＮ）（例えばインターネット、エンタープライズネットワーク）、ローカルエリアネットワーク（ＬＡＮ）（例えば、オフィス、ビル、キャンパス、又は他の関連する小さい地理的空間に付随するネットワーク）、テレホンネットワーク、二つのコンピューティングデバイス間の直接接続、及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。ネットワーク１４３０などのネットワークは、有線及び／又は無線のモードの通信を用いてもよい。一般的に、任意のネットワークトポロジーが用いられ得る。

【0134】

情報及びデータは、ディスプレイ１４３２を介して表示され得る。ディスプレイ１４３２の例としては、限定することなく、液晶ディスプレイ（ＬＣＤ）、有機液晶ディスプレイ（ＯＬＥＤ）、ブラウン管（ＣＲＴ）、プラズマディスプレイ及びこれらの任意の組み合わせが挙げられる。ディスプレイ１４３２は、バス１４４０を介して、プロセッサ１４０１、メモリ１４０３、及び固定ストレージ１４０８並びに他のデバイス、例えばインプットデバイス１４３３とインターフェースで通信することができる。ディスプレイ１４３２は、ビデオインターフェース１４２２を介してバス１４４０と連結され、ディスプレイ１４３２とバス１４４０間のデータの転送は、グラフィックコントロール１４２１を介して制御され得る。

【0135】

ディスプレイ１４３２に加えて、コンピューターシステム１４００は、限定しないが、オーディオスピーカー、プリンタ及び／又はこれらの任意の組み合わせを含む、一又は複数の他の周辺機器アウトプットデバイス１４３４を含んでもよい。かかる周辺機器アウトプットデバイスは、アウトプットインターフェース１４２４を介してバス１４４０と接続されてもよい。アウトプットインターフェース１４２４の例としては、限定することなく、シリアルポート、並列接続、ＵＳＢポート、ＦＩＲＥＷＩＲＥポート、ＴＨＵＮＤＥＲＢＯＬＴポート、及び任意のこれらの組み合わせが挙げられる。

【0136】

加えて、あるいは代わりに、コンピューターシステム１４００は、ハードウェアにより実現される、あるいは回路において実現される論理の結果として、機能性が提供されてもよく、これはソフトウェアの代わりに、又はソフトウェアと一緒に本明細書に記載又は図説される一又は複数のプロセス、又は一若しくは複数のプロセスの一若しくは複数の工程を実行させるために行われ得る。この開示におけるソフトウェアへの言及は、論理を包含し得、そして論理への言及は、ソフトウェアを包含し得る。さらに、コンピューター読み取り可能媒体への言及は、必要に応じて、実行のためのソフトウェアを記録した回路（例えばＩＣ）、実行のための論理を具現化する回路、又は両者を包含しうる。本開示は、ハードウェア、ソフトウェア、又は両者の任意の好適な組み合わせを包含する。

【0137】

当業者は、情報及び／又はシグナルが任意の様々な異なる技術及び／又は技法を用いて表されてもよいことを理解する。例えば、上記の記載を通じて参照され得るデータ、指示、コマンド、情報、シグナル、ビット、記号、及びチップは、電圧、電流、電磁波、磁場、粒子、光学場、若しくは粒子、又はこれらの任意の組み合わせにより表されてもよい。

【0138】

本明細書に開示される実施形態との関係において記載される様々な説明のための論理ブロック、モジュール、回路、及びアルゴリズム工程は、電子ハードウェア、コンピューターソフトウェア、又は両者の組み合わせとして実装されてもよいことを当業者はさらに理解する。ハードウェア及びソフトウェアのこの互換性を明確に説明するために、様々な実例的なコンポーネント、ブロック、モジュール、回路、及び工程は、一般的にこれらの機能性の観点から上記に記載されている。かかる機能性がハードウェア又はソフトウェアとして実装されるか否かは、システム全体に課される特定の適用及び設計制約による。当業者は、それぞれの特定の適用のために様々な方法において記載される機能性を実施し得るが、斯かる実施の決定は、本発明の範囲から逸脱して解釈されるべきではない。

【0139】

本明細書に開示される実施形態との関係において記載される様々な説明のための論理ブロック、モジュール、及び回路は、汎用プロセッサ、デジタルシグナルプロセッサ（ＤＳＰ）、特定用途向け集積回路（ＡＳＩＣ）、現場でプログラム可能なゲートアレイ（ＦＰＧＡ）、又は他のプログラム可能な論理デバイス、別個のゲート又はトランジスタ論理、別個のハードウェアコンポーネント、又は任意の本明細書に記載される機能を実行するために設計されるこれらの組み合わせを用いて実施又は実行されてもよい。汎用プロセッサは、マイクロプロセッサでもよいが、代替として、該プロセッサは、任意の従来のプロセッサ、コントローラ、マイクロコントローラ又は状態機械でもよい。プロセッサはまた、コンピューティングデバイスの組み合わせ、例えばＤＳＰ及びマイクロプロセッサ、多数のマイクロプロセッサ、ＤＳＰコアとの関係における一又は複数のマイクロプロセッサ、又は他のかかる構成の組み合わせとして実装されてもよい。

【0140】

本明細書に開示される実施形態との関係において記載される方法又はアルゴリズムの工程は、ハードウェア、プロセッサにより実行されるソフトウェアモジュール、又はこれらの二つの組み合わせにより直接的に具現化され得る。ソフトウェアモジュールは、ＲＡＭメモリ、フラッシュメモリ、ＲＯＭメモリ、ＥＰＲＯＭメモリ、ＥＥＰＲＯＭメモリ、レジスタ、ハードディスク、リムーバブルディスク、ＣＤ−ＲＯＭ又は当該技術分野において知られるストレージ媒体の他の形態に属する。典型的なストレージ媒体は、かかるプロセッサがストレージ媒体から情報を読み取ることができ、これに情報を書き込むことができるプロセッサと接続され得る。あるいは、ストレージ媒体は、プロセッサに統合され得る。プロセッサ及びストレージ媒体は、ＡＳＩＣに属し得る。ＡＳＩＣは、ユーザー端末に属しうる。あるいは、プロセッサ及びストレージ媒体は、ユーザー端末における別個のコンポーネントとして存在し得る。

【0141】

結論として、本発明は、他のものの中でも、目的濃度の血小板又はＢＭＣを有するＰＲＰ又はＢＭＣ濃縮物を自動的に又は半自動的に製造するシステム及び方法を提供する。当業者は、本明細書に記載される実施形態により達成されるような実質的に同一の結果を達成するために、多数の変形及び置換が本発明、その使用及びその構成においてなされ得ることを容易に認識することができる。例えば、血液生成物を、手動又は自動のいずれかで、システム１００及び８００を介して、又は他のシステムに移動することができる。別の例としては、遠心分離の以外の血液成分を分離するための方法を用いることができる（例えばマイクロ流体チャネル分離又は電気インピーダンス分離）。したがって、本発明を、開示される典型的な形態に限定する意図はない。多くの変形、修正、代替の構成は、開示される本発明の範囲及び趣旨の内である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】