特許 6262569 レスベラトロール誘導体及びチロシナーゼ活性阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6262569

(24)【登録日】2017年12月22日

(45)【発行日】2018年1月17日

(54)【発明の名称】レスベラトロール誘導体及びチロシナーゼ活性阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07H 15/203 20060101AFI20180104BHJP

   A61K 31/7034 20060101ALI20180104BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20180104BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20180104BHJP

   A61K 8/60 20060101ALI20180104BHJP

   A61Q 19/02 20060101ALI20180104BHJP

【ＦＩ】

   C07H15/203CSP

   A61K31/7034

   A61P43/00 111

   A61P17/00

   A61K8/60

   A61Q19/02

【請求項の数】4

【全頁数】28

(21)【出願番号】特願2014-40124(P2014-40124)

(22)【出願日】2014年3月3日

(65)【公開番号】特開2015-164903(P2015-164903A)

(43)【公開日】2015年9月17日

【審査請求日】2017年3月2日

(73)【特許権者】

【識別番号】304036743

【氏名又は名称】国立大学法人宇都宮大学

(73)【特許権者】

【識別番号】301068114

【氏名又は名称】株式会社コスモステクニカルセンター

(74)【代理人】

【識別番号】100117226

【弁理士】

【氏名又は名称】吉村 俊一

(72)【発明者】

【氏名】二瓶 賢一

(72)【発明者】

【氏名】大出 知里

(72)【発明者】

【氏名】島田 亙

【審査官】 杉江 渉

(56)【参考文献】

【文献】 CHEN Y. et al，New bibenzyl glycosides from leaves of Camellia oleifera Abel. with cytotoxic activities，Fitoterapia，２０１１年，vol.82，p.481-484

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｈ １／００ − ９９／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

５−レゾルシノール骨格を少なくとも有した式１で示される化合物（式１中、Ｒ_１は水素又はキシロシルである。）であることを特徴とするレスベラトロール誘導体。

【化1】

【請求項2】

５−レゾルシノール骨格を少なくとも有した式２で示される化合物（式２中、Ｒ_２はキシロシルである。）であることを特徴とするレスベラトロール誘導体。

【化2】

【請求項3】

式１又は式２で示されるレスベラトロール誘導体からなる（式１中、Ｒ_１は水素又はキシロシルであり、式２中、Ｒ_２はキシロシル又はグルコシルである。）ことを特徴とするチロシナーゼ活性阻害剤。

【化3】

【化4】

【請求項4】

請求項１又は２に記載のレスベラトロール誘導体を配合することを特徴とする皮膚外用剤組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、レスベラトロール誘導体及びチロシナーゼ活性阻害剤に関する。

【背景技術】

【0002】

酸化還元酵素のポリフェノールオキシダーゼ（チロシナーゼを含む。）は、動植物の細胞構成組織に含まれるフェノール類の化学反応を促進させる作用がある。こうしたポリフェノールオキシダーゼは、人の皮膚では褐色化（日焼け）を引き起こしたり、青果類や魚介類等の食品では褐変により商品価値を低下させたり、食品に含まれて有益な抗酸化活性のあるポリフェノール類を分解したりする、酸化還元酵素として知られている。

【0003】

特に、動植物における色素形成反応の初期段階には、チロシナーゼ（ポリフェノールオキシダーゼ）が深く関与している。チロシナーゼは、銅原子を活性中心に含む酸化還元酵素であり、自然界で観察される様々な褐変現象の初期反応を触媒する。例えば、皮膚が紫外線を浴びた場合には、皮膚のメラノサイトではメラニン生合成の第一段階を司るチロシナーゼの働きが活性化し、その結果、メラニンが過剰に蓄積してシミやそばかす等の皮膚褐変を引き起こす。このメラニン生合成を効果的に抑制するために、チロシナーゼの働きを阻害又は抑制できる化合物（以下「チロシナーゼ活性阻害剤」ともいう。）の研究が行われている。

【0004】

チロシナーゼ活性阻害剤は、機能性化粧品への添加剤として、果実や野菜の褐変防止剤として、また、医薬品として、広い応用が期待されている。現在までに開発されてきたチロシナーゼ活性阻害剤は、構造及び酵素化学的な性質に基づき、基質類似体と銅キレーターの二種類に大別される。特にレゾルシノール骨格を持つ基質類似体は、チロシナーゼの働きを阻害する活性性能（「チロシナーゼ阻害活性」ともいう。）が強いことが知られている。レゾルシノール骨格を持つ基質類似体として、例えば、コウジ酸、アルブチン、４位置換アルキルレゾルシノール（例えば、４−ブチルレゾルシノール）等がある。

【0005】

このうち、コウジ酸は、日焼けや褐変を防ぐものとして古くから化粧品や食品に添加されてきたが、２００３年に医薬部外品（薬用化粧品）への使用が一旦禁止された。アルブチンは、コケモモやナシ等の植物に含まれる天然フェノール配糖体であるが、チロシナーゼ阻害活性はそれほど高くない。しかし、このアルブチンは、水溶性かつ低毒性のために、美白効果のある化粧品の成分に使用されている。また、脂溶性の４位置換アルキルレゾルシノールである４−ブチルレゾルシノールは、レゾルシノール骨格を持つために強い阻害活性を示すことが知られている。

【0006】

なお、本発明者は、ビベンジル誘導体を含有するチロシナーゼの活性阻害剤（特許文献１）、レゾルシノール誘導体及びチロシナーゼ活性阻害剤（特許文献２）、及び、ロデシンドール誘導体及び生理活性剤（特許文献３）を既に提案している。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【特許文献1】特開２００８−５６６５１号公報

【特許文献2】特開２０１２−１９７２６９号公報

【特許文献3】特開２０１３−２１３０２４号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明の目的は、新規なレスベラトロール誘導体を提供するとともに、そのレスベラトロール誘導体からなるチロシナーゼ活性阻害剤を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明者らは、チロシナーゼ阻害活性を示す新規な化合物の研究開発を行っている過程で、特定のレスベラトロール誘導体が良好なチロシナーゼ阻害活性を示すことを見出した。本発明は、こうした知見に基づいて完成させたものである。

【0010】

上記課題を解決するための本発明に係る第１のレスベラトロール誘導体は、５−レゾルシノール骨格を少なくとも有した式１で示されるレスベラトロール誘導体である（式１中、Ｒ_１は水素又はキシロシルである。）。

【0011】

【化1】

【0012】

上記課題を解決するための本発明に係る第２のレスベラトロール誘導体は、５−レゾルシノール骨格を少なくとも有した式２で示されるレスベラトロール誘導体である（式２中、Ｒ_２はキシロシル又はグルコシルである。）。

【0013】

【化2】

【0014】

第１及び第２の新規なレスベラトロール誘導体は、各種の使用に適したチロシナーゼ阻害活性剤として利用可能である。

【0015】

上記課題を解決するための本発明に係るチロシナーゼ活性阻害剤は、上記した本発明に係る式１又は式２で示されるレスベラトロール誘導体からなる（式１中、Ｒ_１は水素又はキシロシルであり、式２中、Ｒ_２はキシロシル又はグルコシルである。）。

【0016】

この発明によれば、第１及び第２の新規なレスベラトロール誘導体はそれぞれチロシナーゼ阻害活性を有するので、使用目的に応じたチロシナーゼ阻害活性剤として利用可能である。

【0017】

本発明に係るレスベラトロール誘導体を配合することによって、新しい皮膚外用剤組成物を提供することができる。

【発明の効果】

【0018】

本発明によれば、新規なレスベラトロール誘導体を提供することができる。

【0019】

また、本発明によれば、チロシナーゼ阻害活性を示す新規なレスベラトロール誘導体を用いたチロシナーゼ活性阻害剤を提供することができる。こうして得られたチロシナーゼ活性阻害剤は、皮膚褐色化防止機能をもつ化粧品（すなわち皮膚の美白化粧品等）や、野菜等の植物カット食材の鮮度保持を目的とする褐変防止機能をもつ添加剤として、使用目的に応じたチロシナーゼ阻害活性剤として利用可能である。

【図面の簡単な説明】

【0020】

【図1】本発明に係る第１のレスベラトロール誘導体の合成経路の模式図である。

【図2】本発明に係る第２のレスベラトロール誘導体の合成経路の模式図である。

【発明を実施するための形態】

【0021】

以下、本発明に係るレスベラトロール誘導体及びチロシナーゼ活性阻害剤について詳細に説明する。なお、本発明の技術的範囲は、以下に記載の事項及び実施例に記載の事項に限定されない。

【0022】

［レスベラトロール誘導体］
本発明に係るレスベラトロール誘導体は、いずれもレスベラトロールの誘導体であり、５−レゾルシノール骨格を少なくとも有している。本発明者は、５−レゾルシノール骨格を少なくとも有するレスベラトロール誘導体について研究し、図１及び図２に示すように、各種用途に使用するために必要な安定化処理と親水化処理とを行っている過程で、本発明で提供する第１のレスベラトロール誘導体と第２のレスベラトロール誘導体とが有効なチロシナーゼ活性阻害性能を示すことを見出して本発明を完成させた。

【0023】

第１のレスベラトロール誘導体は、５−レゾルシノール骨格（図１中の「５ＲＥ」）を有し、さらに４−レゾルシノール骨格（図１中の「４ＲＥ」）を有するレスベラトロールの誘導体である。このレスベラトロール誘導体は、図１に示すように、５−レゾルシノール骨格のみを配糖体化し、４−レゾルシノール骨格はそのまま残した親水性の新規レスベラトロール誘導体である。詳しくは、式１で示されるレスベラトロール誘導体である。式１中、Ｒ_１は水素又はキシロシルである。なお、図１及び式１中の「Ｘｙｌ」はキシロシルの略である。

【0024】

【化3】

【0025】

第２のレスベラトロール誘導体は、５−レゾルシノール骨格を有するレスベラトロールの誘導体である。このレスベラトロール誘導体は、５−レゾルシノール骨格をそのまま残した状態で配糖体化した親水性の新規レスベラトロール誘導体である。詳しくは、式２で示されるレスベラトロール誘導体である。式２中、Ｒ_２はキシロシル又はグルコシルである。なお、図２及び式２中の「Ｘｙｌ」はキシロシルの略であり、「Ｇｌｃ」はグルコシルの略である。

【0026】

【化4】

【0027】

これらのレスベラトロール誘導体は、チロシナーゼ活性阻害剤として利用でき、皮膚褐色化防止機能をもつ化粧品（すなわち皮膚の美白化粧品等）や、野菜等の植物カット食材の鮮度保持を目的とする褐変防止機能をもつ添加剤として、使用目的に応じたチロシナーゼ阻害活性剤として利用可能である。

【0028】

以下、詳しく説明する。

【0029】

（第１のレスベラトロール誘導体）
第１のレスベラトロール誘導体は、上記の式１で示されるレスベラトロール誘導体であり、具体的には、下記の化合物３と、下記の化合物４である。化合物３は、式１中のＲ_１が水素で構成されている。化合物４は、式１中のＲ_１がキシロシル（Ｘｙｌ）で構成されている。

【0030】

【化5】

【0031】

【化6】

【0032】

図１に示すように、オキシレスベラトロール（１）は、クワ科植物のＭｏｒｕｓ ａｌｂａ Ｌ．から単離されたスチルベノイドである。このオキシレスベラトロール（１）は、コウジ酸の３３倍の活性を示す強力なチロシナーゼ阻害剤であるが、脂溶性で用途が限られ、かつスチルベン骨格を持つため光に不安定であるという問題があった。本発明では、スチルベン骨格上の二重結合を還元してジヒドロオキシレスベラトロール（２）を得て、さらに位置選択的な配糖体化を行って親水化を図り、化学式３，４に示すレスベラトロール誘導体を合成した。合成したレスベラトロール誘導体は、チロシナーゼ阻害活性を示し、親水性かつ安定な新規化合物である。

【0033】

（第２のレスベラトロール誘導体）
第２のレスベラトロール誘導体は、上記の式２で示されるレスベラトロール誘導体であり、具体的には、下記の化合物７と、下記の化合物８である。化合物７は、式２中のＲ_２がグルコシル（Ｇｌｃ）で構成されている。化合物８は、式２中のＲ_２がキシロシル（Ｘｙｌ）で構成されている。

【0034】

【化7】

【0035】

【化8】

【0036】

図２に示すように、ユリ科やブドウ科等の植物に広く分布するレスベラトロール（５）は、近年、サーチュイン遺伝子を活性化させることが分かり、寿命延命作用との関連が注目されている。本発明では、このレスベラトロール（５）の二重結合を還元してジヒドロレスベラトロール（６）を得て、さらに位置選択的な配糖体化を行って親水化を図り、化学式７，８に示すレスベラトロール誘導体を合成した。合成したレスベラトロール誘導体は、弱いチロシナーゼ阻害活性を示し、親水性かつ安定な新規化合物である。

【0037】

従来、上記第１及び第２のレスベラトロール誘導体のように、チロシナーゼ阻害活性を有し且つ配糖体化された親水性のレスベラトロール誘導体は知られていない。なお、チロシナーゼ（ポリフェノールオキシダーゼ）は、日焼け、青果類や魚介類の褐変、昆虫の外皮形成等の自然界における着色・ポリマー化現象の初期反応を触媒する酸化還元酵素である。日焼けは、過剰紫外線によって皮膚基底層の色素細胞（メラノサイト）が活性化し、生成した過剰のメラニンが皮膚に沈着する現象で、シミやソバカス等の皮膚老化の主因となっている。食品の褐変は、着色や変質による商品価値の低下及び食品成分で抗酸化活性のあるポリフェノール類の分解に繋がる。また、害虫外皮は、フェノール成分がチロシナーゼの作用で重合することにより形成される。

【0038】

以上説明した本発明に係るレスベラトロール誘導体は、安定で親水性があり、いずれもチロシナーゼ活性阻害能を有する新しい化合物である。この化合物は、チロシナーゼ阻害活性を示すことからチロシナーゼ活性阻害剤として好ましく用いることができる。本発明に係るレスベラトロール誘導体をチロシナーゼの活性阻害剤として使用する場合、そのまま単独で使用してもよいが、通常は、各種用途に応じた使用形態とすることが望ましい。具体的には、得られたレスベラトロール誘導体と、医薬品、化粧品等に一般に用いられる各種成分（例えば、水性成分、油性成分、粉末成分、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、色剤、香料、ｐＨ調整剤、抗酸化剤、防腐剤又は紫外線防御剤等）の１種又は２種以上を、本発明の効果を損なわない範囲で配合することができる。

【0039】

例えば、本発明に係るレスベラトロール誘導体又はそのレスベラトロール誘導体を含むチロシナーゼ活性阻害剤を、水やペースト剤と混合して塗布用の皮膚褐色化防止機能性化粧品、すなわち皮膚の美白化粧品（美白効果の高い皮膚外用剤や美白用皮膚外用剤）として使用できる。また、水と混合して植物カット食材の褐変防止機能性添加剤としても使用できる。また、散布剤として使用すれば野菜野鮮度保持用の散布剤としても使用できる。また、昆虫のさなぎ化抑止剤や人畜無害な殺虫剤としても使用できる。

【0040】

特に本発明に係るレスベラトロール誘導体又はそのレスベラトロール誘導体を含むチロシナーゼ活性阻害剤は、メラニン生成を抑制することから、美白剤として有用であり、皮膚外用剤（皮膚外用剤組成物）に好適に配合される。皮膚外用剤として用いる場合、通常、化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる他の成分、例えば粉末成分、液体油脂、固体油脂、高級脂肪酸、高級アルコール、低級アルコール、多価アルコール、エステル類、シリコーン、各種界面活性剤、保湿剤、水溶性高分子化合物、増粘剤、紫外線吸収剤、金属イオン封鎖剤、糖類、アミノ酸類、有機アミン類、ｐＨ調整剤、皮膚栄養剤、ビタミン類、酸化防止剤、酸化防止助剤、香料、水等を必要に応じて適宜配合することができる。さらに、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸等の他の美白剤も適宜配合することができる。

【0041】

以上、本発明によれば、チロシナーゼ阻害活性を示す新規なレスベラトロール誘導体を提供することができる。また、本発明に係るチロシナーゼ活性阻害剤によれば、美白化粧品、アンチエイジング剤、医薬品、食品添加物（酸化防止剤）、農薬等の幅広い目的に使用可能であり、食品・化学工業等の産業界が切望する生理活性物質の一つである。

【実施例】

【0042】

以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。

【0043】

［実施例１］
＜ジヒドロオキシレスベラトロール誘導体３及び４の合成＞
第１のレスベラトロール誘導体である、ジヒドロオキシレスベラトロール誘導体３及び４を合成した。合成経路を下記に示す。

【0044】

【化9】

【0045】

上記の合成経路に示すように、リチウムヘキサメチルジシラシド（ＬｉＨＭＤＳ）を用いてエーテル１０とＷｉｔｔｉｇ試薬９とをカップリングし、スチルベン１１を合成した。パラジウムエチレンジアミン複合体［Ｐｄ（ｅｎ）／Ｃ］を触媒とした水素添加反応により、スチルベン１１をビベンジル１２に還元した。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（ＴｓＯＨ・Ｈ_２Ｏ）を用いてビベンジル１２のＭＯＭ基を除去し、フェノール１３を得た。

【0046】

トリメチルシリルトリフラート（ＴＭＳＯＴｆ）をルイス酸に用いて配糖体化を行い、フェノール１３とイミデート１５とからグリコシド１４を合成した。水酸化パラジウム［Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ］を触媒とした加水素分解により、グリコシド１４のベンジル基を除去してフェノール１６を得た。ナトリウムメトキシドによるエステル交換反応により、フェノール１６のすべてのアセチル基を脱保護し、キシロシドであるジヒドロオキシレスベラトロール誘導体３を合成した。配糖体化の際、イミデート１５を過剰に用いることでグリコシド１７を合成し、そのベンジル基を脱保護して、フェノール１８に導いた。さらに、フェノール１８の保護基を除去して、キシロシドであるジヒドロオキシレスベラトロール誘導体４を合成した。

【0047】

以下、合成経路中の化合物についてそれぞれ説明する。

【0048】

＜２，４−Ｏ−ジベンジル−３’，５’−Ｏ−ジ（メトキシメチル）オキシレスベラトロール（１１）＞
ホスホニウム塩９（２．０ｇ，３．３ｍｍｏｌ）を真空乾燥し、アルゴン雰囲気下で脱水テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に懸濁した。氷冷後、この懸濁液に１．３Ｍリチウムヘキサメチルジシラジド／テトラヒドロフラン溶液（２．１ｍＬ，２．７ｍｍｏｌ）を滴下し、橙色のイリド溶液を得た。この溶液を室温で３０分間撹拌した後、再び氷冷した。真空乾燥したアルデヒド１０（０．３８ｇ，１．７ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下、脱水テトラヒドロフラン（１．０ｍＬ）に溶かし、得られた溶液を氷冷下でイリド溶液に加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬで２回）、５％亜硫酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬで３回）及び飽和食塩水（３０ｍＬで１回）で洗浄した。この有機層に無水硫酸ナトリウムを加え、ろ過後、ろ液を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１０％〜３５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、油状のスチルベン１１である下記の２，４−Ｏ−ジベンジル−３’，５’−Ｏ−ジ（メトキシメチル）オキシレスベラトロールを０．３９ｇ得た（収率４５％）。

【0049】

【化10】

【0050】

ｃｉｓ−１１：^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３４（ｍ，１０Ｈ，Ｂｎ），７．１５（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ，Ｈ−６），６．６７（ｄ，Ｊ＝１２．２，１Ｈ，Ｈ−７’），６．６１（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．５７（ｄ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−３），６．５２（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４’），６．４４（ｄ，Ｊ＝１２．２，１Ｈ，Ｈ−７），６．３７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．５，１Ｈ，Ｈ−５），５．０３（ｓ，４Ｈ，ＭＯＭ），５．００（ｓ，４Ｈ，Ｂｎ），３．３８（ｓ，６Ｈ，ＭＯＭ）．

【0051】

ｔｒａｎｓ−１１：^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．５８（ｄ，Ｊ＝１６．０，１Ｈ，Ｈ−７’），７．３４（ｍ，１０Ｈ，Ｂｎ），７．１５（ｄ，Ｊ＝８．５，１Ｈ，Ｈ−６），６．９７（ｄ，Ｊ＝１６．０，１Ｈ，Ｈ−７），６．６１（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．５７（ｄ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−３），６．５２（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４’），６．３７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．５，１Ｈ，Ｈ−５），５．０３（ｓ，４Ｈ，ＭＯＭ），５．００（ｓ，４Ｈ，Ｂｎ），３．３８（ｓ，６Ｈ，ＭＯＭ）．

【0052】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１５９．４（Ｃ−４），１５７．９（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１５７．４（Ｃ−２），１３９．８（Ｃ−１’），１３７．０（Ｂｎ），１３６．９（Ｂｎ），１３０．７（Ｃ−６），１２８．６４（Ｃ−７’），１２８．５９（２Ｃ，Ｂｎ），１２８．４９（２Ｃ，Ｂｎ），１２８．０（Ｂｎ），１２７．８（Ｂｎ），１２７．５（２Ｃ，Ｂｎ），１２７．２（２Ｃ，Ｂｎ），１２６．０（Ｃ−７），１１９．４（Ｃ−１），１１０．３（Ｃ−２’，Ｃ−６’），１０５．８（Ｃ−５），１０３．８（Ｃ−４’），１００．６（Ｃ−３），９４．５（２Ｃ，ＭＯＭ），７０．２（Ｂｎ），７０．１（Ｂｎ），５５．９（２Ｃ，ＭＯＭ）

【0053】

＜２，４−Ｏ−ジベンジル−３’，５’−Ｏ−ジ（メトキシメチル）ジヒドロオキシレスベラトロール（１２）＞
スチルベン１１（０．１５ｇ，０．２９ｍｍｏｌ）のトルエン（６．０ｍＬ）溶液に、５％パラジウム／活性炭−エチレンジアミン複合体（３０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下、室温で２時間撹拌した。セライトを用いてパラジウム触媒をろ過し、ろ液を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１５％〜２０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、白色固体のビベンジル１２である下記の２，４−Ｏ−ジベンジル−３’，５’−Ｏ−ジ（メトキシメチル）ジヒドロオキシレスベラトロールを０．１３ｇ得た（収率８６％）。

【0054】

【化11】

【0055】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．４１（ｍ，１０Ｈ，Ｂｎ），７．００（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ，Ｈ−６），６．５９（ｄ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−３），６．５４（ｔ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−４’），６．４９（ｄ，Ｊ＝２．４，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．４８（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．２，１Ｈ，Ｈ−５），５．０８（ｓ，４Ｈ，ＭＯＭ），５．０３（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），５．００（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），３．４４（ｓ，６Ｈ，ＭＯＭ），２．８３（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’）．

【0056】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１５８．４（Ｃ−４），１５８．１（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１５７．４（Ｃ−２），１４５．１（Ｃ−１’），１３７．２（Ｂｎ），１３７．１（Ｂｎ），１３０．２（Ｃ−６），１２８．６（２Ｃ，Ｂｎ），１２８．５（２Ｃ，Ｂｎ），１２８．０（Ｂｎ），１２７．８（Ｂｎ），１２７．５（２Ｃ，Ｂｎ），１２７．１（２Ｃ，Ｂｎ），１２３．１（Ｃ−１），１０９．９（Ｃ−２’，Ｃ−６’），１０５．２（Ｃ−５），１０２．４（Ｃ−４’），１００．５（Ｃ−３），９４．４６（２Ｃ，ＭＯＭ），７０．２（Ｂｎ），６９．８（Ｂｎ），５６．０（２Ｃ，ＭＯＭ），３６．８（Ｃ−７’），３２．０（Ｃ−７）．

【0057】

＜２，４−Ｏ−ジベンジルジヒドロオキシレスベラトロール（１３）＞
ビベンジル１２（６５ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）とメタノール（２．０ｍＬ）との混合溶媒に溶かし、その溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２９ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を加え、４時間リフラックスした。反応液に酢酸エチル（３０ｍＬ）を加え、有機層を蒸留水（１５ｍＬで３回）及び飽和食塩水（１５ｍＬで３回）で洗浄した。得られた全ての水層を合わせて、さらに酢酸エチル（３０ｍＬで３回）で抽出した。全ての有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、ろ液を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（３０％〜４０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、白色固体のフェノール１３である下記の２，４−Ｏ−ジベンジルジヒドロオキシレスベラトロールを４６ｍｇ得た（収率８５％）。

【0058】

【化12】

【0059】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３９（ｍ，１０Ｈ，Ｂｎ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ，Ｈ−６），６．６１（ｄ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−３），６．４９（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．２，１Ｈ，Ｈ−５），６．１２（ｍ，３Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−４’，Ｈ−６’），５．０１（ｓ，４Ｈ，Ｂｎ），４．７２（ｓ，２Ｈ，ＯＨ），２．７６（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’）．

【0060】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１５８．４（Ｃ−４），１５７．４（Ｃ−２），１５６．５（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１４５．６４（Ｃ−１’），１３７．３（Ｂｎ），１３７．０（Ｂｎ），１３０．１（Ｃ−６），１２８．６（４Ｃ，Ｂｎ），１２８．０（Ｂｎ），１２７．９（Ｂｎ），１２７．６０（２Ｃ，Ｂｎ），１２７．５７（２Ｃ，Ｂｎ），１２３．１（Ｃ−１），１０８．２（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１０５．２（Ｃ−５），１００．５（Ｃ−３），１００．１（Ｃ−４’），７０．２（Ｂｎ），６９．９（Ｂｎ），３６．４（Ｃ−７’），３２．０（Ｃ−７）．

【0061】

＜３’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）−２，４，−Ｏ−ジベンジルオキシジヒドロオキシレスベラトロール（１４）＞
フェノール１３（１６ｍｇ，３６μｍｏｌ）とイミデート１５（１９ｍｇ，４５μｍｏｌ）を真空乾燥し、アルゴン雰囲気下で脱水ジクロロメタン（２．０ｍＬ）に溶かした。その溶液を−７８℃に冷却した後、０．１１Ｍトリメチルシリルトリフラート／ジクロロメタン溶液（２．７μＬ，０．３０μｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。反応液にトリエチルアミンを加えて中和した後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（３０−４５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して白色固体のグリコシド１４である下記の３’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）−２，４，−Ｏ−ジベンジルオキシジヒドロオキシレスベラトロールを１９ｍｇ得た（収率７６％）。

【0062】

【化13】

【0063】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３６（ｍ，１０Ｈ，Ｂｎ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．３，１Ｈ，Ｈ−６），６．６０（ｄ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−４），６．４８（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．３，１Ｈ，Ｈ−５），６．３３（ｄ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−２’），６．３０（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４’），６．２２（ｄ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−６’），５．２０（ｔ，Ｊ＝８．０，１Ｈ，Ｈ−３”），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝６．２，８．０，１Ｈ，Ｈ−２”），５．０４（ｄ，Ｊ＝６．２，１Ｈ，Ｈ−１”），５．０２（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），５．０１（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），４．９９（ｄｔ，Ｊ＝４．８，８．０，１Ｈ，Ｈ−４”），４．７２（ｓ，１Ｈ，ＯＨ），４．１４（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１２．１，１Ｈ，Ｈ−５”），３．４２（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１２．１，１Ｈ，Ｈ−５”），２．７７（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０６（ｍ，９Ｈ，Ａｃ）．

【0064】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７０．０（Ａｃ），１６９．９（Ａｃ），１６９．４（Ａｃ），１５８．４（Ｃ−４），１５７．６（Ｃ−２），１５７．３９（Ｃ−３’），１５６．４（Ｃ−５’），１４５．５（Ｃ−１’），１３７．２（Ｂｎ），１３７．０（Ｂｎ），１３０．２（Ｃ−６），１２８．５９（２Ｃ，Ｂｎ），１２８．５８（２Ｃ，Ｂｎ），１２７．９７（Ｂｎ），１２７．９０（Ｂｎ），１２７．５（２Ｃ，Ｂｎ），１２７．４（２Ｃ，Ｂｎ），１２２．９３（Ｃ−１），１１０．２（Ｃ−２’），１０９．３（Ｃ−６’），１０５．２（Ｃ−５），１０１．７（Ｃ−４’），１００．５（Ｃ−３），９８．４（Ｃ−１”），７０．８（Ｃ−３”），７０．１９（Ｂｎ），７０．１６（Ｂｎ），６９．９（Ｃ−２”），６８．５（Ｃ−４”），６１．８（Ｃ−５”），３６．５（Ｃ−７’），３２．０（Ｃ−７），２０．７（３Ｃ，Ａｃ）．

【0065】

＜３’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロール（１６）＞
グリコシド１４（９０ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）を酢酸エチル（２．０ｍＬ）とメタノール（３．０ｍＬ）との混合溶媒に溶かした。その溶液に１０％水酸化パラジウム／活性炭（１８ｍｇ）を加えて水素雰囲気下、２０℃で３０分撹拌した。セライトを用いてパラジウムをろ過し、ろ液を減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（５０％〜７０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、フェノール１６である下記の３’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロールを５２ｍｇ得た（収率７７％）。

【0066】

【化14】

【0067】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ６．８０（ｄ，Ｊ＝８．８，１Ｈ，Ｈ−６），６．３５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２’），６．３０（ｍ，３Ｈ，Ｈ−３，Ｈ−５，Ｈ−４’），６．２９（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６’），５．１９（ｔ，Ｊ＝８．０，１Ｈ，Ｈ−３”），５．０８（ｄｄ，Ｊ＝６．３，８．０，１Ｈ，Ｈ−２”），４．９８（ｄ，Ｊ＝６．３，１Ｈ，Ｈ−１”），４．９４（ｄｔ，Ｊ＝４．８，８．０，１Ｈ，Ｈ−４”），４．１２（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１３．０，１Ｈ，Ｈ−５”），３．４３（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１３．０，１Ｈ，Ｈ−５”），２．７４（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０２（ｍ，９Ｈ，Ａｃ）．

【0068】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７１．３（３Ｃ，Ａｃ），１５７．５（Ｃ−３’），１５６．７（Ｃ−５’），１５５．１（Ｃ−４），１５４．７（Ｃ−２），１４４．９（Ｃ−１’），１３１．１（Ｃ−６），１１８．５（Ｃ−１），１１０．６（Ｃ−２’），１０９．３（Ｃ−６’），１０７．５（Ｃ−５），１０３．０（Ｃ−３），１０２．１（Ｃ−４’），９８．５（Ｃ−１”），７０．７（Ｃ−３”），７０．１（Ｃ−２”），６８．５（Ｃ−４”），６１．８（Ｃ−５”），３６．３（Ｃ−７’），３１．２（Ｃ−７），２１．０（３Ｃ，Ａｃ）．

【0069】

＜３’−Ｏ−（β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロール（３）＞
アルゴン雰囲気下、フェノール１６（３２ｍｇ，６３μｍｏｌ）をメタノール（４．０ｍＬ）に溶解した。氷冷下、その溶液に５．２Ｍナトリウムメトキシド／メタノール溶液（６０μＬ，０．３１ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で１時間撹拌した。反応液にアンバーライトＩＲ−１２０Ｈを少しずつ加え、ｐＨ試験紙で反応液が中性になったことを確認した後、アンバーライトをろ過し、ろ液を減圧濃縮して、本発明に係るジヒドロオキシレスベラトロール３である下記の３’−Ｏ−（β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロールを１７ｍｇ得た（収率７１％）。生理活性評価用のサンプル１７ｍｇは、分取ＨＰＬＣ（３０％ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ，流速１．０ｍＬ／分）を用いて精製した（溶出時間４．０分）。

【0070】

【化15】

【0071】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ６．７４（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ，Ｈ−６），６．３３（ｍ，３Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−４’，Ｈ−６’），６．２７（ｄ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−３），６．１６（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．２，１Ｈ，Ｈ−５），４．７３（ｄ，Ｊ＝７．１，Ｈ−１”），３．８９（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１１．４，１Ｈ，Ｈ−５”），３．５４（ｄｔ，Ｊ＝５．４，９．７１Ｈ，Ｈ−４”），３．３９（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３”，Ｈ−５”），３．２８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２”），２．７０（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’）．

【0072】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ１５９．９（Ｃ−３’），１５９．２（Ｃ−５’），１５７．４（Ｃ−４），１５７．１（Ｃ−２），１４６．４（Ｃ−１’），１３１．６（Ｃ−６），１２０．６（Ｃ−１），１１０．８（Ｃ−２’），１０９．３（Ｃ−６’），１０７．２（Ｃ−５），１０３．４（Ｃ−３），１０２．９（Ｃ−１”），１０２．６（Ｃ−４’），７７．７（Ｃ−３”），７４．８（Ｃ−２”），７１．１（Ｃ−４”），６６．９（Ｃ−５”），３７．７（Ｃ−７’），３３．０（Ｃ−７）．

【0073】

＜３’，５’−Ｏ−ジ（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）−２，４，−Ｏ−ジベンジルジヒドロオキシレスベラトロール（１７）＞
フェノール１３（０．１３ｇ，０．３１ｍｍｏｌ）とイミデート１５（０．２５ｇ，０．５９ｍｍｏｌ）とを真空乾燥し、アルゴン雰囲気下で脱水ジクロロメタン（６．０ｍＬ）に溶かした。その溶液を−２０℃に冷却し、０．１１Ｍトリメチルシリルトリフラート／ジクロロメタン溶液（２２μＬ，２．４μｍｏｌ）を加え、２０分間撹拌した。反応液にトリエチルアミンを加えて中和した後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（３５％〜５５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製してグリコシド１７である下記の３’，５’−Ｏ−ジ（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）−２，４，−Ｏ−ジベンジルジヒドロオキシレスベラトロールを０．１２ｇ得た（収率４３％）。

【0074】

【化16】

【0075】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３８（ｍ，１０Ｈ，Ｂｎ），６．９６（ｄ，Ｊ＝８．２，１Ｈ，Ｈ−６），６．６０（ｄ，Ｊ＝２．３，１Ｈ，Ｈ−３），６．４８（ｄｄ，Ｊ＝２．３，８．２，１Ｈ，Ｈ−５），６．４５（ｍ，３Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−４’，Ｈ−６’），５．２０（ｔ，Ｊ＝７．９，２Ｈ，Ｈ−３”，Ｈ−３”’），５．１２（ｄｄ，Ｊ＝６．１，７．９，２Ｈ，Ｈ−２”，Ｈ−２”’），５．０５（ｄ，Ｊ＝６．１，２Ｈ，Ｈ−１”，Ｈ−１”’），５．０３（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），５．０１（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），４．９７（ｄｔ，Ｊ＝４．８，７．９，２Ｈ，Ｈ−４”，Ｈ−４”’），４．１３（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１２．１，２Ｈ，Ｈ−５”，Ｈ−５”’），３．４０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１２．１，２Ｈ，Ｈ−５”，Ｈ−５”’），２．８１（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０６（ｍ，１８Ｈ，Ａｃ）．

【0076】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１６９．９（２Ｃ，Ａｃ），１６９．８（２Ｃ，Ａｃ），１６９．３（２Ｃ，Ａｃ），１５８．４（Ｃ−４），１５７．４（Ｃ−２），１５７．３（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１４５．４（Ｃ−１’），１３７．１（Ｂｎ），１３７．０（Ｂｎ），１３０．３（Ｃ−６），１２８．６０（２Ｃ，Ｂｎ），１２８．５９（Ｂｎ），１２８．５（２Ｃ，Ｂｎ），１２７．９（Ｂｎ），１２７．５（２Ｃ，Ｂｎ），１２７．１（２Ｃ，Ｂｎ），１２２．６（Ｃ−１），１１１．３（Ｃ−２’，Ｃ−６’），１０５．２（Ｃ−５），１０３．４（Ｃ−４’），１００．５（Ｃ−３），９８．２（２Ｃ，Ｃ−１”，Ｃ−１”’），７０．８（２Ｃ，Ｃ−３”，Ｃ−３”’），７０．１（２Ｃ，Ｃ−２”，Ｃ−２”’），７０．１（２Ｃ，Ｂｎ），６８．４（２Ｃ，Ｃ−４”，Ｃ−４”’），６１．９（２Ｃ，Ｃ−５”，Ｃ−５”’），３６．６（Ｃ−７’），３１．９（Ｃ−７），２０．７（６Ｃ，Ａｃ）．

【0077】

＜３’，５’−Ｏ−ジ（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロール（１８）＞
グリコシド１７（４９ｍｇ，５２μｍｏｌ）を酢酸エチル（２．０ｍＬ）とメタノール（３．０ｍＬ）との混合溶媒に溶かした。その溶液に１０％水酸化パラジウム／活性炭（１０ｍｇ）を加えて水素雰囲気下、２０℃で１時間撹拌した。セライトを用いてパラジウムをろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（５０−７０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製してフェノール１８である下記の３’，５’−Ｏ−ジ（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロールを３８ｍｇ得た（収率９６％）。

【0078】

【化17】

【0079】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ６．７６（ｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ，Ｈ−６），６．４３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４’），６．４０（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．３１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３），６．３０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−５），５．９３（ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ），５．６１（ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ），５，２０（ｔ，Ｊ＝７．７，２Ｈ，Ｈ−３”，Ｈ−３”’），５．０９（ｔ，Ｊ＝７．７，２Ｈ，Ｈ−２”，Ｈ−２”’），５．０４（ｄ，Ｊ＝７．７，２Ｈ，Ｈ−１”，Ｈ−１”’），４．９６（ｄｔ，Ｊ＝４．６，７．７，２Ｈ，Ｈ−４”，Ｈ−４”’），４．１６（ｄｄ，Ｊ＝４．６，１２．１，２Ｈ，Ｈ−５”，Ｈ−５”’），３．４７（ｄｄ，Ｊ＝７．７，１２．１，２Ｈ，Ｈ−５”，Ｈ−５”’），２．７７（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０６（ｍ，１８Ｈ，Ａｃ）．

【0080】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７０．３（２Ｃ，Ａｃ），１７０．０（２Ｃ，Ａｃ），１６９．７（２Ｃ，Ａｃ），１５７．２（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１５５．２（Ｃ−４），１５４．７（Ｃ−２），１４４．９（Ｃ−１’），１３１．３（Ｃ−６），１１９．４（Ｃ−１），１１１．７（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１０７．５（Ｃ−５），１０３．７（Ｃ−４’），１０２．９（Ｃ−３），９８．２３（２Ｃ，Ｃ−１”，Ｃ−１”’），７０．５（２Ｃ，Ｃ−３”，Ｃ−３”’），７０．０（２Ｃ，Ｃ−２”，Ｃ−２”’），６８．４（２Ｃ，Ｃ−４”，Ｃ−４”’），６１．７（２Ｃ，Ｃ−５”，Ｃ−５”’），３６．３（Ｃ−７’），３１．２（Ｃ−７），２０．７（６Ｃ，Ａｃ）．

【0081】

＜３’，５’−Ｏ−ジ（β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロール（４）＞
アルゴン雰囲気下、フェノール１８（１２ｍｇ，１６μｍｏｌ）をメタノール（３．０ｍＬ）に溶かした。氷冷下、その溶液に５．２Ｍナトリウムメトキシド／メタノール溶液（３０μＬ，０．１６ｍｍｏｌ）を滴下し、室温に戻して１時間撹拌した。反応液にアンバーライトＩＲ−１２０Ｈを少しずつ加え、ｐＨ試験紙で反応液が中性になったことを確認した後、アンバーライトをろ過し、ろ液を減圧濃縮して、本発明に係るジヒドロオキシレスベラトロール４である下記の３’，５’−Ｏ−ジ（β−キシロピラノシル）ジヒドロオキシレスベラトロールを７．０ｍｇ得た（収率８８％）。生理活性評価用のサンプル１４ｍｇは、分取ＨＰＬＣ（２０％ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ，流速１．０ｍＬ／分）によって精製した（溶出時間７．５分）。

【0082】

【化18】

【0083】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ６．６９（ｄ，Ｊ＝８．１，１Ｈ，Ｈ−６），６．５７（ｔ，Ｊ＝２．１，１Ｈ，Ｈ−４’），６．５１（ｄ，Ｊ＝２．１，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．２８（ｄ，Ｊ＝２．４，１Ｈ，Ｈ−３），６．１５（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．１，１Ｈ，Ｈ−５），４．７３（ｄ，Ｊ＝６．８，２Ｈ，Ｈ−１”，Ｈ−１”’），３．８９（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１１．４，２Ｈ，Ｈ−５”，Ｈ−５”’），３．５３（ｄｔ，Ｊ＝５．３，１０．４，２Ｈ，Ｈ−４”，Ｈ−４”’），３．３９（ｍ，４Ｈ，Ｈ−３”，Ｈ−３”’，Ｈ−５”，Ｈ−５”’），３．２８（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２”，Ｈ−２”’），２．７３（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’）．

【0084】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ１５９．６（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１５７．５（Ｃ−４），１５７．１（Ｃ−２），１４６．３（Ｃ−１’），１３１．８（Ｃ−６），１２０．３（Ｃ−１），１１２．１（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１０７．２（Ｃ−５），１０４．５（Ｃ−４’），１０３．４（Ｃ−３），１０３．０（２Ｃ，Ｃ−１”，Ｃ−１”’），７７．７０（２Ｃ，Ｃ−３”，Ｃ−３”’），７４．７（２Ｃ，Ｃ−２”，Ｃ−２”’），７１．１（２Ｃ，Ｃ−４”，Ｃ−４”’），６６．９（２Ｃ，Ｃ−５”，Ｃ−５”’），３７．６（Ｃ−７’），３２．９（Ｃ−７）．

【0085】

［実施例２］
＜ジヒドロレスベラトロール誘導体７及び８の合成＞
第２のレスベラトロール誘導体である、ジヒドロレスベラトロール誘導体７及び８を合成した。合成経路を下記に示す。

【0086】

【化19】

【0087】

上記の合成経路に示すように、リチウムヘキサメチルジシラシド（ＬｉＨＭＤＳ）を塩基として用い、アルデヒド２０とＷｉｔｔｉｇ試薬１９とをカップリングしてスチルベン２１を合成した。水酸化パラジウム［Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ］を触媒とした接触水素化反応により、スチルベン２１の二重結合の還元及びベンジル（Ｂｎ）基の脱保護を同時に行い、フェノール２２を得た。トリメチルシリルトリフラート（ＴＭＳＯＴｆ）をルイス酸に用いた配糖体化反応により、フェノール２２とグルコシルイミデート２３とからグリコシド２４を合成した。このグリコシド２４のＴＢＳ基を除去して、フェノール２５に導き、さらにそのアセチル基を脱保護してグリコシドである目的のジヒドロレスベラトロール誘導体７を得た。キシロシルイミデート１５を用いた配糖体化反応で、フェノール２２からグリコシド２６を導き、そのＴＢＳ基を除去して、フェノール２７を得た。そのアセチル基を脱保護することにより、キシロシドである目的のジヒドロレスベラトロール誘導体８を合成した。

【0088】

以下、合成経路中の化合物についてそれぞれ説明する。

【0089】

＜３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）−４’−Ｏ−ベンジルレスベラトロール（２１）＞
ホスホニウム塩１９（１．３ｇ，２．６ｍｍｏｌ）を真空乾燥し、アルゴン雰囲気下で脱水テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に懸濁した。氷冷後、この懸濁液に１．３Ｍリチウムヘキサメチルジシラジド／テトラヒドロフラン溶液（１．５ｍＬ，２．０ｍｍｏｌ）を滴下し、橙色のイリド溶液を得た。この溶液を室温で３０分間撹拌した後、再び氷冷した。真空乾燥したアルデヒド２０（０．４７ｇ，１．３ｍｍｏｌ）を脱水テトラヒドロフラン（２．０ｍＬ）に溶解し、氷冷下でイリド溶液に加え、室温で１時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。得られた有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬで２回）及び飽和食塩水（３０ｍＬで２回）で洗浄した。得られた全ての水層を合わせて、酢酸エチル（３０ｍＬで３回）で抽出した。全ての有機層に無水硫酸ナトリウムを加え、ろ過後、ろ液を減圧濃縮した。残渣に１０％酢酸エチル／ヘキサンを加えて懸濁し、ろ過して大半のトリフェニルホスフィンオキシドを除き、ろ液を減圧濃縮した。この粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜２％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、スチルベン２１である下記の３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）−４’−Ｏ−ベンジルレスベラトロールを０．７０ｇ得た（収率１００％）。

【0090】

【化20】

【0091】

ｃｉｓ−２１：^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３８（ｍ，５Ｈ，Ｂｎ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．８１（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．４７（ｄ，Ｊ＝１２．２，１Ｈ，Ｈ−７），６．３９（ｄ，Ｊ＝１２．２，１Ｈ，Ｈ−７’），６．３５（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．１８（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４），５．０１（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），０．９２（ｓ，１８Ｈ，ＴＢＳ），０．２０（ｓ，１２Ｈ，ＴＢＳ）．

【0092】

ｔｒａｎｓ−２１：^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．３８（ｍ，５Ｈ，Ｂｎ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．９４（ｄ，Ｊ＝１６．０，１Ｈ，Ｈ−７），６．８６（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．３３（ｄ，Ｊ＝１６．０，１Ｈ，Ｈ−７’），６．５９（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．２３（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４），５．０７（ｓ，２Ｈ，Ｂｎ），０．９９（ｓ，１８Ｈ，ＴＢＳ），０．０９（ｓ，１２Ｈ，ＴＢＳ）．

【0093】

＜３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ジヒドロレスベラトロール（２２）＞
スチルベン２１（０．７１ｇ，１．３ｍｍｏｌ）のエーテル溶液（６．０ｍＬ）に、１０％水酸化パラジウム／活性炭（７１ｍｇ）を加え、水素雰囲気下、２２℃で４時間撹拌した。セライトを用いてパラジウムをろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（５−１０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製してフェノール２２である下記の３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ジヒドロレスベラトロールを０．４８ｇ得た（収率８５％）。

【0094】

【化21】

【0095】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ６．９９（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．７１（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．２５（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．１６（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４），４．７９（ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ），２．７５（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），０．９５（ｓ，１８Ｈ，ＴＢＳ），０．１５（ｓ，１２Ｈ，ＴＢＳ）．

【0096】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１５６．３（２Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−５），１５３．６（Ｃ−４’），１４３．７（Ｃ−１），１３３．９（Ｃ−１’），１２９．５（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１１５．１（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１１３．８（２Ｃ，Ｃ−２，Ｃ−６），１０９．７（Ｃ−４），３８．０（Ｃ−７），３６．７（Ｃ−７’），２５．７（ＴＢＳ），１８．２（ＴＢＳ），−４．３（ＴＢＳ）．

【0097】

＜４’−Ｏ−（２”，３”，４”，６”−テトラアセチル−β−グルコピラノシル）−３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ジヒドロレスベラトロール（２４）＞
フェノール２２（０．２０ｇ，０．４４ｍｍｏｌ）とイミデート２３（０．４０ｇ，０．８１ｍｍｏｌ）を真空乾燥し、アルゴン雰囲気下で脱水ジクロロメタン（６．０ｍＬ）を加え、−２０℃に冷却した。その溶液に０．１１Ｍトリメチルシリルトリフラート／ジクロロメタン溶液（７３μＬ，８．０μｍｏｌ）を加え、８０分間撹拌した。反応液にトリエチルアミンを加えて中和した後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（２０−４０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製してグリコシド２４である下記の４’−Ｏ−（２”，３”，４”，６”−テトラアセチル−β−グルコピラノシル）−３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ジヒドロレスベラトロールを０．２８ｇ得た（収率８２％）。

【0098】

【化22】

【0099】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．０８（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．２７（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．１７（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４），５．３０（ｔ，Ｊ＝９．４，１Ｈ，Ｈ−３”），５．２６（ｄｄ，Ｊ＝７．６，９．４，１Ｈ，Ｈ−４”），５．１７（ｄｄ，Ｊ＝７．６，９．４，１Ｈ，Ｈ−２”），５．０３（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ，Ｈ−１”），４．２９（ｄｄ，Ｊ＝５．３，１２．２，１Ｈ，Ｈ−６”），４．１７（ｄｄ，Ｊ＝２．４，１２．２，１Ｈ，Ｈ−６”），３．８４（ｄｄｄ，Ｊ＝２．４，５．３，７．６，１Ｈ，Ｈ−５”），２．７９（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０９（ｓ，３Ｈ，Ａｃ），２．０６（ｓ，３Ｈ，Ａｃ），２．０５（ｓ，３Ｈ，Ａｃ），２．０４（ｓ，３Ｈ，Ａｃ），０．９５（ｓ，１８Ｈ，ＴＢＳ），０．１６（ｓ，１２Ｈ，ＴＢＳ）．

【0100】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７０．７（Ａｃ），１７０．３（Ａｃ），１６９．５（Ａｃ），１６９．４（Ａｃ），１５６．３（２Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−５），１５５．１（Ｃ−４’），１４３．４（Ｃ−１），１３６．８（Ｃ−１’），１２９．５（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１１６．９（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１１３．７（２Ｃ，Ｃ−２，Ｃ−６），１０９．８（Ｃ−４），９９．３（Ｃ−１”），７２．７（Ｃ−５”），７１．９（Ｃ−３”），７１．１（Ｃ−２”），６８．３（Ｃ−４”），６１．９（Ｃ−６”），３７．８（Ｃ−７），３６．７（Ｃ−７’），２５．７（ＴＢＳ），２０．７（Ａｃ），２０．６３（Ａｃ），２０．６１（Ａｃ），２０．５９（Ａｃ），１８．２（ＴＢＳ），−４．４（ＴＢＳ）．

【0101】

＜４’−Ｏ−（２”，３”，４”，６”−テトラアセチル−β−グルコピラノシル）ジヒドロレスベラトロール（２５）＞
グリコシド２４（０．１０ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２．０ｍＬ）を氷冷し、テトラブチルアンモニウムフルオリド三水和物（０．１２ｇ，０．３８ｍｍｏｌ）を加えて８０分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。得られた有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬで２回）及び飽和食塩水（３０ｍＬで２回）で洗浄した。得られた全ての水層を合わせて、酢酸エチル（３０ｍＬで３回）で抽出した。全ての有機層に無水硫酸ナトリウムを加え、ろ過後、ろ液を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（５０−７０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、フェノール２５である下記の４’−Ｏ−（２”，３”，４”，６”−テトラアセチル−β−グルコピラノシル）ジヒドロレスベラトロールを３７ｍｇ得た（収率５１％）。

【0102】

【化23】

【0103】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．０４（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．９０（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．１９（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４），６．１４（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），５．３０（ｔ，Ｊ＝９．１，１Ｈ，Ｈ−３”），５．２５（ｄｄ，Ｊ＝７．６，９．１，１Ｈ，Ｈ−４”），５．１７（ｄｄ，Ｊ＝７．５，９．１，１Ｈ，Ｈ−２”），５．０８（ｄ，Ｊ＝７．５，１Ｈ，Ｈ−１”），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１２．２，１Ｈ，Ｈ−６”），４．１９（ｄｄ，Ｊ＝２．５，１２．２，１Ｈ，Ｈ−６”），３．８４（ｄｄｄ，Ｊ＝２．５，５．１，７．６，１Ｈ，Ｈ−５”），２．８１（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０８（ｓ，３Ｈ，Ａｃ），２．０６（ｓ，３Ｈ，Ａｃ），２．０５（ｓ，３Ｈ，Ａｃ），２．０４（ｓ，３Ｈ，Ａｃ）．

【0104】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７０．８（Ａｃ），１７０．３（Ａｃ），１６９．６（Ａｃ），１６９．５（Ａｃ），１５６．７（２Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−５），１５４．７（Ｃ−４’），１４４．４（Ｃ−１），１３６．６（Ｃ−１’），１２９．６（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１１７．２（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１０８．１（２Ｃ，Ｃ−２，Ｃ−６），１００．５（Ｃ−４），９９．１（Ｃ−１”），７２．８（Ｃ−５”），７２．０（Ｃ−３”），７１．０（Ｃ−２”），６８．２（Ｃ−４”），６１．９（Ｃ−６”），３７．８（Ｃ−７），３６．６（Ｃ−７’），２０．７２（Ａｃ），２０．６５（Ａｃ），２０．６２（Ａｃ），２０．６０（Ａｃ）．

【0105】

＜４’−Ｏ−（β−グルコピラノシル）ジヒドロレスベラトロール（７）＞
アルゴン雰囲気下、フェノール２５（３４ｍｇ，６１μｍｏｌ）をメタノール（４．０ｍＬ）に溶解した。氷冷下、この溶液に５．２Ｍナトリウムメトキシド／メタノール溶液（７９μＬ，０．４１ｍｍｏｌ）を滴下し、室温に戻して１時間撹拌した。反応液にアンバーライトＩＲ−１２０Ｈを少しずつ加え、ｐＨ試験紙で反応液が中性になったことを確認した後、アンバーライトをろ過し、ろ液を減圧濃縮して、本発明に係るジヒドロレスベラトロール７である下記の４’−Ｏ−（β−グルコピラノシル）ジヒドロレスベラトロールを１７ｍｇ得た（収率７１％）。生理活性評価用のサンプルは、分取ＨＰＬＣ（２８％ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ，流速１．０ｍＬ／分）によって精製した（溶出時間５．０分）。

【0106】

【化24】

【0107】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ７．０８（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．１１（ｂｓ，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．０７（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−４），４．８５（ｄ，Ｊ＝７．３，１Ｈ，Ｈ−１”），３．８９（ｄｄ，Ｊ＝１．６，１１．８，１Ｈ，Ｈ−６”），３．６９（ｄｄ，Ｊ＝５．１，１１．８，１Ｈ，Ｈ−６”），３．４３（ｍ，４Ｈ，Ｈ−２”，Ｈ−３”，Ｈ−４”，Ｈ−５”），２．８０（ｄｄ，Ｊ＝６．４，９．２，２Ｈ，Ｈ−７’），２．７０（ｄｄ，Ｊ＝６．４，９．２，２Ｈ，Ｈ−７）．

【0108】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ１５９．３（２Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−５），１５７．４（Ｃ−４’），１４５．４（Ｃ−１），１３７．１（Ｃ−１’），１３０．４（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１１７．６（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１０８．１（２Ｃ，Ｃ−２，Ｃ−６），１０２．５（Ｃ−１”），１０１．２（Ｃ−４），７８．１（Ｃ−３”），７８．０（Ｃ−５”），７４．９（Ｃ−２”），７１．４（Ｃ−４”），６２．５（Ｃ−５”），３９．３（Ｃ−７），３８．０（Ｃ−７’）．

【0109】

＜４’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−グルコピラノシル）−３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ジヒドロレスベラトロール（２６）＞
フェノール２２（０．１１ｇ，０．２４ｍｍｏｌ）とイミデート１５（０．２０ｇ，０．４８ｍｍｏｌ）とを真空乾燥し、アルゴン雰囲気下で脱水ジクロロメタン（４．０ｍＬ）を加えた。その溶液を−２０℃に冷却し、０．１１Ｍトリメチルシリルトリフラート／ジクロロメタン溶液（４３μＬ，４．７μｍｏｌ）を加え、４０分間撹拌した。反応液にトリエチルアミンを加えて中和した後、減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（２０％〜２５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製してグリコシド２６である下記の４’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−グルコピラノシル）−３，５−Ｏ−ジ（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）ジヒドロレスベラトロールを８６ｍｇ得た（収率５０％）。

【0110】

【化25】

【0111】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．０８（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．６，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．２６（ｄ，Ｊ＝２．２，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．１７（ｔ，Ｊ＝２．２，１Ｈ，Ｈ−４），５，２３（ｔ，Ｊ＝７．９，１Ｈ，Ｈ−３”），５．１７（ｄｄ，Ｊ＝６．１，７．９，１Ｈ，Ｈ−２”），５．１１（ｄ，Ｊ＝６．１，１Ｈ，Ｈ−１”），５．０１（ｄｔ，Ｊ＝４．８，７．９，１Ｈ，Ｈ−４”），４．２１（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１２．０，１Ｈ，Ｈ−５”），３．５０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１２．０，１Ｈ，Ｈ−５”），２．７８（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０８（ｍ，９Ｈ，Ａｃ），０．９７（ｍ，１８Ｈ，ＴＢＳ），０．１６（ｍ，１２Ｈ，ＴＢＳ）．

【0112】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７０．０（Ａｃ），１６９．９（Ａｃ），１６９．４（Ａｃ），１５６．３（２Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−５），１５４．８（Ｃ−４’），１４３．５（Ｃ−１），１３６．５（Ｃ−１’），１２９．５（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１１６．８（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１１３．７（２Ｃ，Ｃ−２，Ｃ−６），１０９．８（Ｃ−４），９８．８（Ｃ−１”），７０．８（Ｃ−３”），７０．２（Ｃ−２”），６８．５（Ｃ−４”），６１．８（Ｃ−５”），３７．８（Ｃ−７），３６．８（Ｃ−７’），２５．７（ＴＢＳ），１８．２（ＴＢＳ），２０．８（Ａｃ），２０．７３（Ａｃ），２０．６９（Ａｃ），−４．４（ＴＢＳ）．

【0113】

＜４’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）ジヒドロレスベラトロール（２７）＞
グリコシド２６（０．１３ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（３．０ｍＬ）を氷冷し、テトラブチルアンモニウムフルオリド三水和物（０．２４ｇ，０．７６ｍｍｏｌ）を加えて３０分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。得られた有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液（３０ｍＬで２回）及び飽和食塩水（３０ｍＬで２回）で洗浄した。全ての水層を合わせて、酢酸エチル（３０ｍＬで３回）で抽出した。全ての有機層に無水硫酸ナトリウムを加え、ろ過後、ろ液を減圧濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（５０−５５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、フェノール２７である下記の４’−Ｏ−（２”，３”，４”−トリアセチル−β−キシロピラノシル）ジヒドロレスベラトロールを９０ｍｇ得た（収率１００％）。

【0114】

【化26】

【0115】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．０５（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．５，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．２０（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−４），６．１８（ｂｓ，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），５，２４（ｔ，Ｊ＝７．７，１Ｈ，Ｈ−３”），５．１７（ｄｄ，Ｊ＝６．１，７．７，１Ｈ，Ｈ−２”），５．１３（ｄ，Ｊ＝６．１，１Ｈ，Ｈ−１”），５．０１（ｄｄｄ，Ｊ＝４．８，７．７，７．９，１Ｈ，Ｈ−４”），４．２１（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１２．１，１Ｈ，Ｈ−５”），３．５０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１２．１，１Ｈ，Ｈ−５”），２．７７（ｍ，４Ｈ，Ｈ−７，Ｈ−７’），２．０９（ｍ，９Ｈ，Ａｃ）．

【0116】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７０．４（Ａｃ），１７０．１（Ａｃ），１６９．９（Ａｃ），１５６．８（２Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−５），１５４．６（Ｃ−４’），１４４．５（Ｃ−１），１３６．５（Ｃ−１’），１２９．６（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１１６．９（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１０８．０（２Ｃ，Ｃ−２，Ｃ−６），１００．５（Ｃ−４），９８．７（Ｃ−１”），７０．８（Ｃ−３”），７０．１（Ｃ−２”），６８．５（Ｃ−４”），６１．８（Ｃ−５”），３７．６（Ｃ−７），３６．５（Ｃ−７’），２０．８（Ａｃ），２０．７４（Ａｃ），２０．７１（Ａｃ）．

【0117】

＜４’−Ｏ−（β−キシロピラノシル）ジヒドロレスベラトロール（８）＞
アルゴン雰囲気下、フェノール２７（７８ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）をメタノール（６．０ｍＬ）に溶解した。氷冷下、この溶液に５．２Ｍナトリウムメトキシド／メタノール溶液（０．１５ｍＬ，０．７８ｍｍｏｌ）を滴下し、室温に戻して１時間撹拌した。反応液にアンバーライトＩＲ−１２０Ｈを少しずつ加え、ｐＨ試験紙で反応液が中性になったことを確認した後、アンバーライトをろ過し、ろ液を減圧濃縮して、本発明に係るジヒドロレスベラトロール８である下記の４’−Ｏ−（β−キシロピラノシル）ジヒドロレスベラトロールを５８ｍｇ得た（収率１００％）。生理活性評価用のサンプルは、分取ＨＰＬＣ（３０％ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ，流速１．０ｍＬ／分）によって精製した（溶出時間６．０分）。

【0118】

【化27】

【0119】

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ７．０７（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ，Ｈ−２’，Ｈ−６’），６．９４（ｄ，Ｊ＝８．２，２Ｈ，Ｈ−３’，Ｈ−５’），６．１１（ｂｓ，２Ｈ，Ｈ−２，Ｈ−６），６．０７（ｂｓ，１Ｈ，Ｈ−４），４．８０（ｄ，Ｊ＝７．２，１Ｈ，Ｈ−１”），３．８９（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１１．４，１Ｈ，Ｈ−５”），３．５５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４”），３．４０（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３”，Ｈ−５”），３．３０（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２”），２．７９（ｄｄ，Ｊ＝６．９，９．５，２Ｈ，Ｈ−７’），２．６９（ｄｄ，Ｊ＝６．９，９．５，２Ｈ，Ｈ−７）．

【0120】

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ１５９．３（２Ｃ，Ｃ−３，Ｃ−５），１５７．２（Ｃ−４’），１４５．４（Ｃ−１），１３７．３（Ｃ−１’），１３０．４（２Ｃ，Ｃ−２’，Ｃ−６’），１１７．７（２Ｃ，Ｃ−３’，Ｃ−５’），１０８．１（２Ｃ，Ｃ−２，Ｃ−６），１０３．１（Ｃ−１”），１０１．２（Ｃ−４），７７．８（Ｃ−３”），７４．８（Ｃ−２”），７１．１（Ｃ−４”），６６．９（Ｃ−５”），３９．４（Ｃ−７），３８．０（Ｃ−７’）．

【0121】

［チロシナーゼ阻害活性の評価］
ＤＯＰＡ４９ｍｇを精製水に溶解し、５ｍＭのＤＯＰＡ水溶液を調製した。合成した各化合物３，４，７，８をＤＭＳＯに溶解し、３０ｍＭのサンプル溶液を調製した。チロシナーゼは、マッシュルーム由来のチロシナーゼ（「Ｅ．Ｃ．１．１４．１８．１」、購入先：Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を用い、５０ｍＭのリン酸ナトリウム緩衝液に溶解し、０．６７ｍｇ／ｍＬのチロシナーゼ溶液を調製した。

【0122】

キュベット（３ｍＬ容）に、ＤＭＳＯで１０段階〜１００段階に希釈したサンプル溶液０．１ｍＬ、２５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液０．６ｍＬ、５ｍＭのＤＯＰＡ水溶液０．３ｍＬ、精製水１．９ｍＬ及びチロシナーゼ溶液０．１ｍＬを加え、よく混合し、分光光度計で４７５ｎｍの吸光値の変化を計測した。各測定は３０℃で３０秒間行い、１秒ごとに吸光値をコンピュータに保存した。得られた吸光度を直線回帰し、ブランク測定時の傾きを１００％として５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）を算出した。表１中のＩＣ_５０に示されるデータは、５０％阻害する各誘導体の濃度を示し、値が低いほどチロシナーゼに対する阻害活性が強いことを示している。

【0123】

【表1】

【0124】

表１に示すように、本発明に係るジヒドロレスベラトロール誘導体の化合物３，４は、高いチロシナーゼ阻害活性を示した。特に新規配糖体である化合物４は、極めて高いチロシナーゼ活性阻害特性を示した。また、化合物４よりも親水性のある化合物４も高い阻害活性を示した。また、化合物７及び化合物８は、化合物１，２よりもチロシナーゼ阻害活性は弱いものの、天然物由来の構造に近い化合物であるため、弱い阻害活性を活かした用途、例えば水溶性のローション等の使用に応用できる。

【0125】

なお、表１中のα−アルブチンとβ−アルブチンのＩＣ_５０は、Biosci. Biotech. Biochem., 59(1)、143〜144(1995)に記載の結果であり、本発明に係る化合物３，４は、アルブチンよりも高いチロシナーゼ活性阻害性能を有し、化合物７，８は、α−アルブチンと同程度、又はβ−アルブチンよりも高いチロシナーゼ活性阻害性能を有している。

【0126】

[応用]
化粧水への応用として、以下のように配合して調製した。調製法は、Ａ相、Ｂ相ともに５０℃で加温溶解し、Ｂ相をＡ相に撹拌しながら徐々に加えて可溶化した。撹拌しながら冷却し、３０℃で撹拌を止めた。

【0127】

Ａ相：化合物３…０．１質量％
クエン酸…０．１質量％
クエン酸ナトリウム…０．３質量％
精製水で全量…１００質量％
Ｂ相：テトラオレイン酸ＰＯＥ（６０）ソルビトール…０．９質量％
モノオレイン酸ソルビタン…０．１質量％
オリーブ油…０．１質量％
ジプロピレングリコール…５．０質量％
エタノール…１０．０質量％

【0128】

美白クリームへの応用として、以下のように配合して調製した。調製法は、Ａ相、Ｂ相ともに８０℃で加温溶解し、Ｃ相は撹拌溶解した。Ｂ相をＡに撹拌しながら冷却し、５０℃でＣ相を徐々に加え、３５〜３０℃で撹拌を止めた。

【0129】

Ａ相：ＰＯＥ（４０）ステアリン酸…２．０質量％
自己乳化型モノステアリン酸グリセリル…３．０質量％
スクワラン…８．０質量％
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル…８．０質量％
セタノール…４．５質量％
メチルポリシロキサン（３００ｃＳｔ）…０．２質量％
防腐剤…適量
Ｂ相：ヒアルロン酸ナトリウム（１％水溶液）…５．０質量％
１，３−ブチレングリコール…７．０質量％
精製水で全量…適量
Ｃ相：化合物７…０．５質量％
クエン酸ナトリウム…０．５質量％
エデト酸四ナトリウム…０．２質量％
精製水で全量…１００質量％

【図1】

【図2】