特許 6272950 抗体製剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6272950

(24)【登録日】2018年1月12日

(45)【発行日】2018年1月31日

(54)【発明の名称】抗体製剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20180122BHJP

   A61K 47/22 20060101ALI20180122BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20180122BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20180122BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20180122BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20180122BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20180122BHJP

   A61L 31/16 20060101ALI20180122BHJP

   C07K 16/24 20060101ALN20180122BHJP

   C07K 16/46 20060101ALN20180122BHJP

【ＦＩ】

   A61K39/395 UZNA

   A61K47/22

   A61K47/26

   A61K47/10

   A61K9/08

   A61P11/00

   A61P11/06

   A61L31/16

   !C07K16/24

   !C07K16/46

【請求項の数】26

【外国語出願】

【全頁数】50

(21)【出願番号】特願2016-114267(P2016-114267)

(22)【出願日】2016年6月8日

(62)【分割の表示】特願2014-539136(P2014-539136)の分割

【原出願日】2012年10月30日

(65)【公開番号】特開2016-193922(P2016-193922A)

(43)【公開日】2016年11月17日

【審査請求日】2016年7月7日

(31)【優先権主張番号】61/553,916

(32)【優先日】2011年10月31日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】509012625

【氏名又は名称】ジェネンテック， インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林特許業務法人

(72)【発明者】

【氏名】デシュムク， アジャイ

(72)【発明者】

【氏名】ザイド， ジョウマナ

(72)【発明者】

【氏名】シェーラー， トーマス エム．

【審査官】 馬場 亮人

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１０−５１５７４２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５２１４８２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００８−５２０５５１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１０／０３９８５１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００６−５１９２１０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１１／１１９４８７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／０６３４９３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２０１４−５３２６６４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 N. Engl. J. Med., 2011.09, vol.365, No.12, p.1088-1098

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３９／３９５

Ａ６１Ｋ ９／０８

Ａ６１Ｋ ４７／１０

Ａ６１Ｋ ４７／２２

Ａ６１Ｋ ４７／２６

Ａ６１Ｌ ３１／１６

Ａ６１Ｐ １１／００

Ａ６１Ｐ １１／０６

Ｃ０７Ｋ １６／２４

Ｃ０７Ｋ １６／４６

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

抗ＩＬ１３抗体、ｐＨ５．４から６．０のヒスチジンアセテートバッファー、ポリオール、及び界面活性剤を含有する製剤において、製剤中の抗体の濃度が少なくとも１００ｍｇ／ｍＬであり、バッファー中のヒスチジンアセテートの濃度が５ｍＭから４０ｍＭであり、製剤の粘度が２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満であり、製剤中のポリオールの濃度が１００ｍＭから２００ｍＭの間であり、製剤中の界面活性剤の濃度が０．０１％から０．１％の間であり、抗ＩＬ１３抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む、製剤。

【請求項2】

抗体の濃度が１２５ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬである、請求項１に記載の製剤。

【請求項3】

ポリオールがスクロースであり、界面活性剤がポリソルベート２０である、請求項１又は２に記載の製剤。

【請求項4】

ヒスチジンアセテートバッファーがｐＨ５．７であり、バッファー中のヒスチジンアセテート濃度が２０ｍＭであり、製剤中のスクロースの濃度が１７５ｍＭであり、ポリソルベート２０の濃度が０．０３％である、請求項１〜３の何れか一項に記載の製剤。

【請求項5】

ｐＨ５．４から６．０のヒスチジンアセテートバッファー中に抗ＩＬ１３抗体、ポリオール、及び界面活性剤を含有し、バッファー中のヒスチジンアセテート濃度が５ｍＭから４０ｍＭの間であり、製剤中の抗体の濃度が少なくとも１００ｍｇ／ｍＬであり、製剤中のポリオールの濃度が１００ｍＭから２００ｍＭの間であり、製剤中の界面活性剤の濃度が０．０１％から０．１％の間であり、抗ＩＬ１３抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む、製剤。

【請求項6】

ポリオールがスクロースであり、界面活性剤がポリソルベート２０である、請求項５に記載の製剤。

【請求項7】

ヒスチジンアセテートバッファーがｐＨ５．７であり、バッファー中のヒスチジンアセテート濃度が２０ｍＭであり、製剤中のスクロースの濃度が１７５ｍＭであり、ポリソルベート２０の濃度が０．０３％である、請求項５又は６に記載の製剤。

【請求項8】

２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満の粘度を有する、請求項５〜７の何れか一項に記載の製剤。

【請求項9】

抗体の濃度が１２５ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬである、請求項５〜８の何れか一項に記載の製剤。

【請求項10】

抗ＩＬ−１３抗体が延長された安定性を有する、請求項１〜９の何れか一項に記載の製剤。

【請求項11】

抗ＩＬ−１３抗体が、５℃で少なくとも１年間、５℃で少なくとも２年間、又は５℃で３年間、安定である、請求項１０に記載の製剤。

【請求項12】

抗ＩＬ１３抗体が、２５℃で少なくとも４週間、又は２５℃で少なくとも８週間、又は２５℃で少なくとも１２週間、又は４℃で２６週間安定である、請求項１０に記載の製剤。

【請求項13】

２０ｍＭヒスチジンアセテートバッファー、ｐＨ５．７、１７５ｍＭスクロース、０．０３％ポリソルベート２０中に安定性が延長されている抗ＩＬ１３抗体を含有する製剤であって、製剤中の抗体の濃度が１２５ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬであり、製剤の粘度が２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満であり、抗ＩＬ１３抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む、製剤。

【請求項14】

請求項１〜１３の何れか一項に記載の製剤と皮下投与デバイスとを含む製造品。

【請求項15】

皮下投与デバイスが自己注入装置である、請求項１４に記載の製造品。

【請求項16】

皮下投与デバイスがプレフィルドシリンジを含む、請求項１４又は１５に記載の製造品。

【請求項17】

プレフィルドシリンジが、ガラスバレル、針及びニードルシールドを含む、請求項１６に記載の製造品。

【請求項18】

プランジャーロッドとプランジャーストッパーを更に含む、請求項１７に記載の製造品。

【請求項19】

針安全装置を更に含む、請求項１７又は１８に記載の製造品。

【請求項20】

ガラスバレルが、ホウケイ酸ガラスを含み、０．３ｍＬ、１．０ｍＬ又は２．０ｍＬの製剤を含む、請求項１７〜１９の何れか一項に記載の製造品。

【請求項21】

プランジャーストッパーが、４０２３／５０ゴム及びエチレン−テトラフルオロエチレンコーティングを含む、請求項１８〜２０の何れか一項に記載の製造品。

【請求項22】

針が、固定式、ステンレス鋼、２７Ｇ薄壁、１／２インチ長及び５べベルチップである、請求項１７〜２１の何れか一項に記載の製造品。

【請求項23】

ニードルシールドが剛性であり、エラストマー部品ＦＭ２７／０及び剛性ポリプロピレンシールドを含む、請求項１７〜２２の何れか一項に記載の製造品。

【請求項24】

有効量の請求項１〜１３の何れか一項に記載の製剤を含む、喘息又は特発性肺線維症を治療するための医薬。

【請求項25】

有効量が、０．３ｍＬ、１ｍＬ又は２ｍＬである、請求項２４に記載の医薬。

【請求項26】

請求項１４〜２３の何れか一項に記載の製造品に含まれる皮下投与デバイスで投与される、皮下投与のための、請求項１〜１３の何れか一項に記載の抗ＩＬ１３抗体を含有する製剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願とのクロスリファレンス
本願は、その全体が出典明示によりここに援用される２０１１年１０月３１日出願の米国仮出願第６１／５５３９１６号の優先権の利益を主張する。

【0002】

抗ＩＬ−１３抗体を含有する製剤が、薬学的製剤及びこのような製剤を使用する方法を含め、提供される。

【0003】

配列表
本願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで提出され、その全体が出典明示によりここに援用される配列表を含む。２０１２年１０月４日作成の上記ＡＳＣＩＩコピーは、Ｐ４７８６Ｒ１Ｗ．ｔｘｔとの名を付けており、サイズは２２７７６バイトである。

【背景技術】

【0004】

インターロイキン（ＩＬ）−１３は、多面Ｔヘルパー細胞サブクラス２（Ｔｈ２）サイトカインである。ＩＬ１３は、喘息の症状と関連するエフェクター機能において他のＴｈ２サイトカインよりも顕著な役割を果たし得るということが主張されてきた（Ｃｏｒｒｙ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１：６１０（１９９９））。ヒト化抗ＩＬ−１３抗体が記載されている。例えば、国際公開第２００５／０６２９６７号を参照のこと。ある特定の抗ＩＬ１３抗体のレブリキズマブは、管理不良の喘息の患者の治療について臨床的に研究されてきた。これらの結果のうちある一定のものは、Ｃｏｒｒｅｎら、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６５（１２）：１０８８−９８（２０１１）に記載されている。

【0005】

抗体を含むタンパク質は、従来からの有機及び無機薬物よりも大きく複雑なので（例えば、複雑な三次元構造に加えて複数の官能基を保持）、このようなタンパク質の製剤は、特別な問題をもたらす。タンパク質が生物学的に活性であり続けるために、製剤は、タンパク質の複数の官能基の分解を防ぐと同時に、タンパク質のアミノ酸の少なくともコア配列の立体構造的な完全性をそのままに保持しなければならない。タンパク質に対する分解経路には、化学的不安定性（例えば、結果として新しい化学物質を生じさせる結合形成又は切断によるタンパク質の修飾を含む何らかの過程）又は物理的不安定性（例えば、タンパク質のより高次の構造の変化）が含まれ得る。化学的不安定性は、脱アミド化、ラセミ化、加水分解、酸化、β−脱離又はジスルフィド交換によるものであり得る。物理的不安定性は、例えば変性、凝集、沈殿又は吸着によるものであり得る。３つの最もよくあるタンパク質分解経路は、タンパク質凝集、脱アミド化及び酸化である。Ｃｌｅｌａｎｄら、Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ １０（４）：３０７−３７７（１９９３）。

【0006】

例えば、治療的投与の経路のために、又は小体積の薬物製品が望ましい場合の治療適用のために、例えば皮下注射のために、高濃度（例えば＞１００ｍｇ／ｍＬ）の液体抗体製剤が所望される。しかし、高濃度抗体製剤には、多くの困難及び問題がある。一つの問題は、微粒子の形成ゆえの不安定性である。再構成液体製剤では、界面活性剤（例えばポリソルベート）を使用することでこの問題に対処してきたが、界面活性剤は、処理を更に困難にするので、液体製剤には不適切であると考えられる場合がある。更に、界面活性剤は、抗体の巨大分子の性質により多数の分子間相互作用の結果として引き起こされる粘度上昇を更には抑えない。

【0007】

界面活性剤はタンパク質の微粒子形成の度合いを顕著に低下させることが示されているものの、これらは、濃縮抗体製剤の操作及び投与を困難にする粘度上昇の問題に対処できない。抗体は、それらの巨大分子的な性質及び分子間相互作用の可能性ゆえに、高濃度で粘性溶液を形成する傾向がある。更に、薬学的に許容可能な糖が安定化剤として使用されることが多い。このような糖は、分子間相互作用を促進し得、それによって製剤の粘度を上昇させる。高粘度製剤は、製造し、シリンジに吸い取り、皮下に注射することが困難である。粘性製剤を操作する際の力の使用によって、過度な起泡が起こり、活性生物物質の変性及び不活性化を生じせしめ得る。

【0008】

高濃度抗体のためのある種の製剤が記載されている。例えば国際公開第２００６／０６５７４６号及び同第２００２／３０４６３号を参照のこと。これらの刊行物は、具体的に高濃度抗ＩＬ１３抗体を記載していない。

【0009】

安定性が延長されており、高抗体濃度で低粘度である抗ＩＬ−１３抗体を含有する製剤を有することは非常に有利である。このような特性を有する高抗体濃度製剤は、ある種の投与経路、例えば皮下投与に対して非常に有利である。本明細書中で提供される製剤は、これらのニーズに対処し、他の有用な利益を提供する。

【0010】

特許出願及び刊行物を含め、本明細書中で引用される参考文献は全て、あらゆる目的のために、それらの全体が出典明示により援用される。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0011】

【特許文献1】国際公開第２００５／０６２９６７号パンフレット

【特許文献2】国際公開第２００６／０６５７４６号パンフレット

【特許文献3】国際公開第２００２／３０４６３号パンフレット

【非特許文献】

【0012】

【非特許文献1】Ｃｏｒｒｙ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１：６１０（１９９９）

【非特許文献2】Ｃｏｒｒｅｎら、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ３６５（１２）：１０８８−９８（２０１１）

【非特許文献3】Ｃｌｅｌａｎｄら、Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｄｒｕｇ Ｃａｒｒｉｅｒ Ｓｙｓｔｅｍｓ １０（４）：３０７−３７７（１９９３）

【発明の概要】

【0013】

本発明の組成物は、少なくとも部分的には、本明細書中に記載の抗ＩＬ１３抗体、レブリキズマブが、ポリオール及び界面活性剤を含んでいるヒスチジンバッファー中で高濃度（＞１００ｍｇ／ｍＬ）で処方され得、このような高抗体濃度製剤が低粘度であり、物理的及び化学的安定性が延長され、効力を維持しているという発見に基づく。本発明の組成物又は製剤は、例えば喘息及び他の肺障害、例えば特発性肺線維症及びある種のアレルギー、自己免疫及び他の炎症性障害の治療に有用である。更に、このような製剤は、例えば製品安定性及び他の所望の特質を維持しながら、本明細書中に記載のような皮下投与デバイス中にパッケージされ得る。

【0014】

従って、ある態様では、抗ＩＬ１３抗体を含有する製剤が提供される。所定の実施態様では、製剤中の抗体の濃度は少なくとも１００ｍｇ／ｍＬであり、製剤の粘度は２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満である。別の実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ２、及び配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ３と、３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖を含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域とを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む。一実施態様では、抗体の濃度は１２５ｍｇ／ｍＬである。一実施態様では、抗体の濃度は１５０ｍｇ／ｍＬである。

【0015】

別の態様では、本製剤は、ｐＨ５．４から６．０のヒスチジンアセテートバッファーを含有し、バッファー中のヒスチジンアセテート濃度は５ｍＭから４０ｍＭの間である。所定の実施態様では、本製剤は、ポリオール及び界面活性剤を含有し、製剤中のポリオールの濃度は、１００ｍＭから２００ｍＭの間であり、製剤中の界面活性剤の濃度は、０．０１％から０．１％の間である。所定の実施態様では、ポリオールはスクロースであり、界面活性剤はポリソルベート２０である。所定の実施態様では、ヒスチジンアセテートバッファーはｐＨ５．７であり、該バッファー中のヒスチジンアセテート濃度は２０ｍＭであり、製剤中のスクロースの濃度は１７５ｍＭであり、ポリソルベート２０の濃度は０．０３％である。一実施態様では、抗体の濃度は、１２５ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬである。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ２、及び配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ３と、３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ２及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ３とを含む。

【0016】

また別の態様では、本製剤は、ｐＨ５．４から６．０のヒスチジンアセテートバッファー中に抗ＩＬ１３抗体を含有し、該バッファー中のヒスチジンアセテート濃度は５ｍＭから４０ｍＭの間であり、製剤中の抗体の濃度は少なくとも１００ｍｇ／ｍＬである。所定の実施態様では、本製剤は、ポリオール及び界面活性剤を更に含有し、製剤中のポリオールの濃度は、１００ｍＭから２００ｍＭの間であり、製剤中の界面活性剤の濃度は、０．０１％から０．１％の間である。一実施態様では、ポリオールはスクロースであり、界面活性剤はポリソルベート２０である。一実施態様では、ヒスチジンアセテートバッファーはｐＨ５．７であり、該バッファー中のヒスチジンアセテート濃度は２０ｍＭであり、製剤中のスクロースの濃度は１７５ｍＭであり、ポリソルベート２０の濃度は０．０３％である。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ２、及び配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ３と、３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域とを含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む。一実施態様では、製剤は、２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満の粘度を有する。一実施態様では、抗体の濃度は１２５ｍｇ／ｍＬである。一実施態様では、抗体の濃度は１５０ｍｇ／ｍＬである。

【0017】

更に別の態様では、安定性が延長されている抗ＩＬ−１３抗体を含有する製剤が提供される。所定の実施態様では、抗体濃度は少なくとも１００ｍｇ／ｍＬであり、粘度は２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満である。一実施態様では、抗ＩＬ−１３抗体は、５℃で少なくとも１年間安定である。一実施態様では、抗ＩＬ−１３抗体は、５℃で少なくとも２年間安定である。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、５℃で３年間安定である。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、２５℃で少なくとも４週間安定であるか、又は２５℃で少なくとも８週間又は２５℃で少なくとも１２週間、又は４℃で２６週間安定である。一実施態様では、本製剤は、ｐＨ５．４から６．０のヒスチジンアセテートバッファーを含有し、バッファー中のヒスチジンアセテート濃度は５ｍＭから４０ｍＭの間である。一実施態様では、本製剤は、ポリオールと界面活性剤を更に含有し、製剤中のポリオールの濃度は、１００ｍＭから２００ｍＭの間であり、製剤中の界面活性剤の濃度は、０．０１％から０．１％の間である。一実施態様では、ポリオールはスクロースであり、界面活性剤はポリソルベート２０である。一実施態様では、ヒスチジンアセテートバッファーはｐＨ５．７であり、該バッファー中のヒスチジンアセテート濃度は２０ｍＭであり、製剤中のスクロースの濃度は１７５ｍＭであり、ポリソルベート２０の濃度は０．０３％である。一実施態様では、抗体の濃度は、１２５ｍｇ／ｍＬ又は１５０ｍｇ／ｍＬである。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ２、及び配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ３と、３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ３とを含む。

【0018】

また別の態様では、２０ｍＭヒスチジンアセテートバッファー、ｐＨ５．７、１７５ｍＭスクロース、０．０３％ポリソルベート２０中に安定性が延長されている抗ＩＬ１３抗体を含有する製剤が提供される。一実施態様では、製剤中の抗体の濃度は１２５ｍｇ／ｍＬであり、製剤の粘度は２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満である。一実施態様では、製剤中の抗体の濃度は１５０ｍｇ／ｍＬであり、製剤の粘度は、２５℃で１５センチポアズ（ｃＰ）未満である。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号１のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ２、及び配列番号３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｈ３と、３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、配列番号４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ２、及び配列番号６のアミノ酸配列を有するＣＤＲ−Ｌ３とを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域とを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む。

【0019】

また更なる態様では、皮下投与デバイスを含む製造品が提供される。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、患者に均一用量の抗ＩＬ１３抗体を送達する。一実施態様では、この均一用量は、３７．５ｍｇの抗ＩＬ１３抗体である。一実施態様では、この均一用量は、７５ｍｇの抗ＩＬ１３抗体である。一実施態様では、この均一用量は、１２５ｍｇの抗ＩＬ１３抗体である。一実施態様では、この均一用量は、１５０ｍｇの抗ＩＬ１３抗体である。所定の実施態様では、抗ＩＬ１３抗体はレブリキズマブである。皮下投与デバイス中の抗ＩＬ１３抗体は、安定な薬学的製剤として提供されるように、上記のようなバッファー及び他の賦形剤中に処方される。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、ガラスバレルと、プランジャーストッパーを有するプランジャーロッドと、針（ニードル）とを具備するプレフィルドシリンジである。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、ニードルシールドと場合によってはニードルシールドデバイスを更に含む。所定の実施態様では、プレフィルドシリンジ中に入れられる製剤の体積（量）は、０．３ｍＬ、１ｍＬ、１．５ｍＬ又は２．０ｍＬである。所定の実施態様では、針は、３べベルチップ又は５べベルチップを含む固定（staked-in）針である。所定の実施態様では、針は、２５ゲージ（Ｇ）から３０Ｇの間であり、１／２インチ長から５／８インチ長の間である。一実施態様では、皮下投与デバイスは、プレフィルド１．０ｍＬ低タングステンホウケイ酸ガラス（タイプＩ）シリンジ及びステンレス鋼５べベル２７Ｇ１／２インチ長薄壁固定針を含む。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、剛性のニードルシールドを含む。所定の実施態様では、剛性のニードルシールドは、低亜鉛含量のゴム配合物を含む。一実施態様では、ニードルシールドは剛性であり、エラストマー部品、ＦＭ２７／０、及び剛性のポリプロピレンシールドを含む。所定の実施態様では、プランジャーロッドは、ゴム製プランジャーストッパーを含む。所定の実施態様では、ゴム製プランジャーストッパーは、４０２３／５０ゴム及びＦｌｕｒｏＴｅｃ（登録商標）エチレン−テトラフルオロエチレン（ＥＴＦＥ）コーティングを含む。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、針安全装置を含む。代表的な針安全装置としては、Ｕｌｔｒａｓａｆｅ Ｐａｓｓｉｖｅ（登録商標）Ｎｅｅｄｌｅ Ｇｕａｒｄ Ｘ１００Ｌ（Ｓａｆｅｔｙ Ｓｙｒｉｎｇｅｓ，Ｉｎｃ．）及びＲｅｘａｍ Ｓａｆｅ ｎ Ｓｏｕｎｄ（商標）（Ｒｅｘａｍ）が挙げられるが、これらに限定されない。

【0020】

また別の態様では、患者において喘息を治療する方法が提供される。所定の実施態様では、本方法は、有効量の上記製剤の何れかを患者に投与することを含む。所定の実施態様では、有効量は、０．３ｍＬ、０．５ｍＬ、１ｍＬ又は２ｍＬ又は約０．３ｍＬ、約０．５ｍＬ、約１ｍＬ又は約２ｍＬである。別の態様では、患者において特発性肺線維症を治療する方法が提供される。所定の実施態様では、本方法は、有効量の上記製剤の何れかを患者に投与することを含む。所定の実施態様では、有効量は、０．５ｍＬ、１ｍＬ又は２ｍＬ又は約０．５ｍＬ、約１ｍＬ又は約２ｍＬである。

【0021】

更にまた別の態様では、抗ＩＬ１３抗体を含有する製剤を皮下に投与する方法が提供される。このような方法は、上述の抗ＩＬ１３抗体製剤の何れかを皮下に投与することを含む。所定の実施態様では、本方法は、上述のデバイスの何れかに従う皮下投与デバイスを含む。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】図１は、実施例１に記載のような、ｐＨの関数としての１週間あたりの抗ＩＬ１３抗体単量体分解の速度を示す。

【図2】図２は、実施例１に記載のような、３０℃での保存中のｐＨの関数としての抗ＩＬ１３抗体溶液の３５０ｎｍでの溶液濁度の上昇を示す。

【図3】図３は、実施例１に記載のような、ｐＨの関数としての３０℃での保存中の非還元ＣＥ−ＳＤＳにより測定される低分子量（ＬＭＷ）可溶性断片及び高分子量（ＨＭＷ）凝集物の変化を示す。

【図4】図４は、実施例１に記載のような、ｐＨの関数としての３０℃での酸性変異体（ＡＶ）及び塩基性変異体（ピーク１）（ＢＶ）形成の速度を示す。電荷変異体形成速度は、縦軸で示される％／週として表される。

【図5】図５は、実施例１に記載のような、ｐＨの関数としての３０℃での塩基性変異体（ピーク２）（ＢＶ２）形成及び主要ピーク（ＭＰ）喪失の速度を示す。電荷変異体形成速度は、縦軸で示される％／週として表される。

【図6】図６は、実施例１に記載のような抗体濃度及び溶液ｐＨの関数としての抗ＩＬ１３抗体のレオロジー特性評価を示す。溶液粘度は、縦軸で示される２５℃でのセンチポアズ（ｃＰ）で表される。

【図7】図７は、実施例１に記載のような多岐にわたる濃度の様々なモノクローナル抗体のレオロジー特性評価を示す。溶液粘度は、縦軸で示される２５℃でのセンチポアズ（ｃＰ）で表される。

【図8】図８は、実施例１に記載のような、９０度比濁法を用いた、濃度の関数としての抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０抗体溶液の外観の定量を示す。

【図9】図９は、実施例１に記載のような、ｍＡｂ濃度の関数としての抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０抗体溶液に対する濁度測定（Ａ３５０）を示す。

【図10】図１０は、実施例１に記載のような、濃度及びｐＨの関数としての抗ＩＬ１３抗体溶液濁度を示す。

【図11】図１１は、実施例１に記載のような、ｍＡｂ濃度の関数としての、抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０抗体溶液中の、肉眼では見えない微粒子数を示す。

【図12】図１２は、実施例１に記載のような、抗ＩＬ１３抗体の１２５ｍｇ／ｍＬ溶液の比濁、濁度及び静的光散乱の測定を示す。

【図13】図１３は、実施例１に記載のような、１２５ｍｇ／ｍＬ及び２０４ｍｇ／ｍＬでの抗ＩＬ１３抗体に対する様々なｐＨ条件での溶液の乳白光性の温度依存性をまとめる。

【図14】図１４は、実施例１に記載のような、抗ＩＬ１３製剤組成及び溶液ｐＨの関数としての、キャピラリーＤＳＣにおける２つの部分的に分解されたピークに対して観察される熱融解転移ピークをまとめる。

【図15】図１５は、実施例１に記載のような、０．１から１．０ｍｇ／ｍＬで示され、測定された場合の、単純なバッファー中の試料を用いた、溶液ｐＨの関数としての抗ＩＬ１３抗体に対する測定浸透圧第２ビリアル係数（Ｂ_２）をまとめる。

【図16】図１６は、実施例１に記載のような、１．０から１０ｍｇ／ｍＬの範囲にわたる製剤組成及びｐＨの関数としての抗ＩＬ１３抗体に対する測定浸透圧第２ビリアル係数を示す。

【図17】図１７は、実施例１に記載のような、剛体球（ＨＳ）モデルと比較した、抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０抗体のそれぞれの、濃度に対する測定静的光散乱強度を示す。

【図18】図１８は、実施例１に記載のような、２００ｍｇ／ｍＬ以下の濃度で観察される見かけの分子量として表される、製剤ｐＨの関数としての、抗ＩＬ１３抗体に対する静的光散乱データを示す。

【図19】図１９は、実施例１に記載のような、２００ｍｇ／ｍＬ以下の高濃度の溶液中の抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０抗体の見かけの分子量を示す。

【図20】図２０は、実施例１に記載のような、２５℃での個々の処方条件下での抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０に対して測定されるせん断粘度を示す。

【発明を実施するための形態】

【0023】

別段の定めがない限り、本明細書中で使用される技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野の熟練者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎら、Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２ｎｄ ｅｄ．，Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．１９９４）及びＭａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ４ｔｈ ｅｄ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．１９９２）は、本願で使用される多くの用語に対する一般的な指針を当業者に提供する。

【0024】

幾つかの定義
本明細書を解釈する目的のために、次の定義が適用され、単数形で使用される用語は、適切であるときは複数も含み、逆もまた成り立つ。下記で示される何らかの定義が参照により本明細書中に組み込まれる何らかの書類と対立する場合、以下で示される定義が優先する。

【0025】

本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、内容が別段に明確に規定しない限り、複数への言及を含む。従って、例えば、「タンパク質」又は「抗体」への言及は、複数のタンパク質又は抗体をそれぞれ含み、「細胞」への言及は細胞の混合物などを含む。

【0026】

「薬学的製剤」という用語は、活性成分の生物学的活性が有効となるような形態であり、製剤が投与される対象にとって受け入れがたく毒性である更なる成分を含有しない調製物を指す。このような製剤は滅菌性である。「薬学的に許容可能な」賦形剤（ビヒクル、添加物）は、用いられる有効用量の活性成分を提供するために対象哺乳動物に合理的に投与され得るものである。

【0027】

「滅菌」製剤は、無菌であるか、又は全ての生きている微生物及びそれらの胞子を含まないかもしくは基本的に含まない。

【0028】

「凍結」製剤は、０℃を下回る温度の製剤である。一般に、この凍結製剤は、凍結乾燥されておらず、前又は後にも凍結乾燥に供されない。所定の実施態様では、凍結製剤は、（ステンレス鋼タンク中での）保存のための凍結製剤原料又は（最終バイアル形態での）凍結製剤を含む。

【0029】

「安定な」製剤は、それらの中のタンパク質が、基本的に、保存時の、その物理的安定性及び／又は化学的安定性及び／又は生物学的活性を保持するものである。所定の実施態様では、本製剤は、基本的に、保存時の、その物理的及び化学的安定性並びにその生物学的活性を保持する。保存期間は一般に、本製剤の意図される使用期限に基づいて選択される。

【0030】

本明細書中で使用される場合、「安定性が延長された」製剤は、５℃での１年以上にわたる保存時に、その中のタンパク質が基本的にその物理的安定性、化学的安定性及び生物学的活性を保持するものを意味する。所定の実施態様では、保存は、５℃で２年以上である。所定の実施態様では、保存は、５℃で最長３年である。

【0031】

色及び／又は透明性を目視で調べた際に、又はＵＶ光散乱によるか、又はサイズ排除クロマトグラフィーによって測定した場合に、タンパク質が、凝集、沈殿及び／又は変性の兆候を示さないか又は非常に僅かな兆候しか示さない場合、タンパク質は、製剤処方中で「その物理的安定性を保持している」。

【0032】

ある時間での化学的安定性が、タンパク質が以下で定められるようなその生物学的活性を依然として保持すると考えられるようなものである場合、タンパク質は、製剤処方中で「その化学的安定性を保持する」。化学的安定性は、タンパク質の化学的に改変された形態を検出及び定量することによって評価され得る。化学的改変は、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び／又はマトリクス支援レーザー脱離イオン化／飛行時間型質量分析（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ ＭＳ）を用いて評価され得るサイズ改変（例えば切り出し）を含み得る。他のタイプの化学的改変としては、例えば、イオン交換クロマトグラフィー又は画像化キャピラリー等電点電気泳動（ｉｃＩＥＦ）により評価され得る荷電変化（例えば脱アミド化の結果として生じるもの）が挙げられる。

【0033】

ある時間での抗体の生物学的活性が、例えば抗原結合アッセイ又は効力アッセイにおいて調べた場合、製剤処方が調製された時間に示される生物学的活性の約１０％以内（アッセイのエラー以内）である場合、抗体は、製剤処方中で「その生物学的活性を保持する」。

【0034】

本明細書中で、モノクローナル抗体の「生物学的活性」は、抗体の、抗原への結合能を指す。これには、抗原への抗体結合及び、結果としてインビトロ又はインビボで測定され得る測定可能な生物学的反応が生じることが更に含まれ得る。このような活性はアンタゴニスト性又はアゴニスト性であり得る。

【0035】

「脱アミド化された」モノクローナル抗体は、その１以上のアスパラギン残基が例えばアスパラギン酸又はイソアスパラギン酸に対して誘導体化されているものである。

【0036】

「脱アミド化されやすい」抗体は、脱アミド化する傾向があることが分かっている１以上の残基を含むものである。

【0037】

「凝集しやすい」抗体は、特に凍結及び／又は撹拌時に他の抗体分子と凝集することが分かっているものである。

【0038】

「断片化しやすい」抗体は、例えばそのヒンジ領域で２以上の断片に切断されることが分かっているものである。

【0039】

「脱アミド化、凝集又は断片化を減少させる」とは、異なるｐＨで又は異なるバッファー中で処方されたモノクローナル抗体と比較して、脱アミド化、凝集又は断片化を妨げるか又はその量を減少させることであるものとする。

【0040】

処方される抗体は、基本的に純粋であり、望ましくは基本的に均一である（例えば混入タンパク質など不含）。「基本的に純粋」な抗体は、組成物の総重量に対して少なくとも約９０重量％の抗体、又は少なくとも約９５重量％を含む組成物を意味する。「基本的に均一」な抗体は、組成物の総重量に対して少なくとも約９９重量％の抗体を含む組成物を意味する。

【0041】

「等張性」とは、関心のある製剤が、ヒト血液と基本的に同じ浸透圧を有することを意味する。等張性製剤は、一般に、約２５０から３５０ｍＯｓｍの浸透圧を有する。等張性は、例えば蒸気圧又はアイスフリージング型の浸透圧計を用いて測定され得る。

【0042】

本明細書中で使用される場合、「バッファー」は、その酸−塩基共役成分の作用によってｐＨが変化しにくい緩衝化された溶液を指す。

【0043】

「ヒスチジンバッファー」は、ヒスチジンイオンを含むバッファーである。ヒスチジンバッファーの例としては、ヒスチジンクロリド、ヒスチジンアセテート、ヒスチジンリン酸、ヒスチジン硫酸、ヒスチジンコハク酸などが挙げられる。一実施態様では、ヒスチジンバッファーは、ヒスチジンアセテートである。一実施態様では、ヒスチジンアセテートバッファーは、Ｌ−ヒスチジン（遊離塩基、固形物）を酢酸（液体）で滴定することによって調製される。所定の実施態様では、ヒスチジンバッファー又はヒスチジン−酢酸バッファーはｐＨ４．５から６．５の間である。所定の実施態様では、ヒスチジンバッファー又はヒスチジン−酢酸バッファーは、ｐＨ５．４から６．０の間である。一実施態様では、バッファーのｐＨは５．６である。一実施態様では、バッファーのｐＨは５．７である。一実施態様では、バッファーのｐＨは５．８である。

【0044】

本明細書中で、「界面活性剤」は、表面活性剤、一般的には非イオン性界面活性剤を指す。本明細書中の界面活性剤の例としては、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０及びポリソルベート８０）；ポロキサマー（例えばポロキサマー１８８）；Ｔｒｉｔｏｎ；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；ラウレル硫酸ナトリウム；オクチルグリコシドナトリウム；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−又はステアリル−スルホベタイン；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−又はステアリル−サルコシン；リノレイル−、ミリスチル−又はセチル−ベタイン；ラウロアミドプロピル−、コカミドプロピル−、リノールアミドプロピル−、ミリストアミドプロピル−、パルミドプロピル−又はイソステアルアミドプロピル−ベタイン（例えばラウロアミドプロピル）；ミリストアミドプロピル−、パルミドプロピル−又はイソステアルアミドプロピル−ジメチルアミン；メチルココイルタウリン酸ナトリウム又はメチルオレイルタウリン酸二ナトリウム；及びＭＯＮＡＱＵＡＴ（商標）シリーズ（Ｍｏｎａ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｐａｔｅｒｓｏｎ，Ｎ．Ｊ．）；ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール及び、エチレン及びプロピレングリコールのコポリマー（例えばプルロニック、ＰＦ６８など）などが挙げられる。一実施態様では、界面活性剤はポリソルベート２０である。

【0045】

「保存料」は、場合によっては、基本的にその中の細菌作用を減少させるために製剤中に含まれ得る、したがって例えば多用途製剤の製造を促進する化合物である。可能性のある保存料の例としては、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム（アルキル基が長鎖化合物であるアルキルベンジルジメチルアンモニウムクロリドの混合物）及びベンゼトニウムクロリドが挙げられる。他のタイプの保存料としては、芳香族アルコール、例えばフェノール、ブチル及びベンジルアルコールなど、アルキルパラベン、例えばメチル又はプロピルパラベンなど、カテコール、レゾルシノール、シクロへキサノール、３−ペンタノール及びｍ−クレゾールが挙げられる。一実施態様では、本明細書中の保存料はベンジルアルコールである。

【0046】

「ポリオール」は、複数のヒドロキシル基を有する物質であり、糖（還元及び非還元糖）、糖アルコール及び糖酸を含む。ポリオールは、本製剤中に場合によっては含まれ得る。所定の実施態様では、本明細書中のポリオールは、約６００ｋＤ未満（例えば約１２０から約４００ｋＤの範囲）の分子量を有する。「還元糖」は、金属イオンを還元し得るか又はタンパク質中のリジン及び他のアミノ基と共有結合的に反応し得るヘミアセタール基を含有するものであり、「非還元糖」は、還元糖のこれらの特性を持たないものである。還元糖の例は、フルクトース、マンノース、マルトース、ラクトース、アラビノース、キシロース、リボース、ラムノース、ガラクトース及びグルコースである。非還元糖としては、スクロース、トレハロース、ソルボース、メレジトース及びラフィノースが挙げられる。マンニトール、キシリトール、エリスリトール、スレイトール、ソルビトール及びグリセロールは、糖アルコールの例である。糖酸に関しては、これらには、Ｌ−グルコネート及びその金属塩が含まれる。製剤が凍結−融解安定性であることが望ましい場合、ポリオールは、一般的には、凍結温度（例えば−２００℃）で結晶化して製剤中で抗体を不安定化しないものである。一実施態様では、ポリオールは非還元糖である。あるこのような実施態様において、非還元糖はスクロースである。

【0047】

本明細書中で使用される場合、「喘息」は、不定で再発性の症状、原因となる炎症を付随していてもよいし、又は付随しなくてもよい、（例えば気管支拡張剤による）可逆性の気流閉塞及び気管支過敏性を特徴とする複合障害を指す。喘息の例としては、アスピリン過敏性／悪化喘息、アトピー性喘息、重度喘息、軽度喘息、中度から重度の喘息、コルチコステロイド未感作喘息、慢性喘息、コルチコステロイド耐性喘息、コルチコステロイド難治性喘息、新たに診断された及び未治療の喘息、喫煙による喘息、コルチコステロイドにおいてコントロール不良である喘息及びＪ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２０１０）１２６（５）：９２６−９３８において述べられるような他の喘息が挙げられる。

【0048】

本明細書中で使用される場合、「治療」は、治療されている個体又は細胞の自然経過を変化させようとする臨床的介入を指し、一連の臨床病態前又はその間に行われ得る。治療の所望の効果としては、疾患又はその状態もしくは症状の発症又は再発を予防すること、疾患の状態又は症状を緩和すること、疾患の何らかの直接的又は間接的な病理的帰結を軽減すること、疾患進行速度を遅らせること、疾患状態を改善又は緩和すること及び寛解又は予後の向上を達成することが挙げられる。

【0049】

「有効量」とは、所望の治療又は予防的結果を達成するための投与量で、それに必要な時間にわたって効果的である量を指す。治療剤の「治療的有効量」は、個体の疾患状態、年齢、性別及び体重並びに、抗体が個体において所望の反応を誘発する能力などの要因に従い変動し得る。治療的有効量はまた、治療剤の何らかの毒性又は有害作用を治療的に有益な効果が上回るものでもある。

【0050】

「個体」、「対象」又は「患者」は脊椎動物である。所定の実施態様では、脊椎動物は哺乳動物である。哺乳動物としては、霊長類（ヒト及び非ヒト霊長類を含む。）及びげっ歯類（例えばマウス及びラット）が挙げられるが、これらに限定されない。所定の実施態様では、哺乳動物はヒトである。

【0051】

「医薬」は、疾患、障害及び／又は状態を治療するための活性のある薬物である。

【0052】

「抗体」（Ａｂ）及び「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、同様の構造的特徴を有する糖タンパク質を指す。抗体が特異的な抗原に対する結合特異性を示し、一方で、免疫グロブリンは、一般に抗原特異性を欠く抗体及び他の抗体様分子の両方を含む。後者の種類のポリペプチドは、例えばリンパ系により低レベルで、骨髄腫により高レベルで産生される。

【0053】

「抗体」及び「免疫グロブリン」という用語は、最も広い意味において交換可能に使用され、モノクローナル抗体（例えば全長又はインタクトなモノクローナル抗体）、ポリクローナル抗体、一価抗体、多価抗体、多特異性抗体（例えば、それらが望ましい生物学的活性示す限り、二特異性抗体）を含み、（本明細書中でより詳細に記載されるような）ある一定の抗体断片も含み得る。抗体は、キメラ、ヒト、ヒト化及び／又は親和性成熟されたものであり得る。

【0054】

「全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「全抗体」という用語は、以下で定められるような抗体断片ではなく、その実質的にインタクトな形態の抗体を指すために、本明細書中で交換可能に使用される。この用語は、特に、Ｆｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。

【0055】

「抗体断片」は、インタクトな抗体の一部分を含み、好ましくはその抗原結合領域を含む。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２及びＦｖ断片；ダイアボディ；直鎖状抗体；１本鎖抗体分子；及び抗体断片から形成される多特異性抗体が挙げられる。

【0056】

抗体のパパイン消化によって、それぞれが１個の抗原−結合部位及び残存「Ｆｃ」断片（この名称は、その易結晶化能を反映する。）を有する「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２個の同一の抗原−結合断片が生成される。ペプシン処理によって、２個の抗原−結合部位を有し、依然として抗原を架橋可能であるＦ（ａｂ’）_２断片を生じる。

【0057】

「Ｆｖ」は、完全な抗原−結合部位を含有する最小抗体断片である。一実施態様では、２本鎖Ｆｖ種は、密着した非共有結合における１本の重鎖及び１本の軽鎖可変ドメインの二量体からなる。まとめると、Ｆｖの６個のＣＤＲは、抗体に対する抗原−結合特異性を付与する。しかし、１個の可変ドメイン（又は抗原に特異的な３個のＣＤＲしか含まないＦｖの半分）さえも、結合部位全体よりも親和性は低いものの、抗原を認識し、これに結合する能力を有する。

【0058】

Ｆａｂ断片は、重鎖及び軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の第一の定常ドメイン（ＣＨ１）も含む。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域からの１以上のシステインを含め、重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に数個の残基が付加していることによってＦａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基が遊離チオール基を有するＦａｂ’に対する本明細書中の指示記号である。Ｆ（ａｂ’）_２抗体断片は元来、それらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片のペアとして作製された。抗体断片の他の化学的カップリングも公知である。

【0059】

「モノクローナル抗体」という用語は、本明細書中で使用される場合、実質的に均一である抗体の集団から得られた抗体、すなわち、少量存在し得る突然変異の可能性、例えば天然の突然変異を除いて同一である集団を含む個々の抗体を指す。従って、修飾語「モノクローナル」は、別個の抗体の混合物ではないという抗体の特徴を示す。所定の実施態様では、このようなモノクローナル抗体は、一般に、標的に結合するポリペプチド配列を含む抗体を含み、ここで、標的−結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列からの単一の標的結合ポリペプチド配列の選択を含む過程によって得られた。例えば、選択過程は、ハイブリドーマクローン、ファージクローン又は組換えＤＮＡクローンのプールなど、複数のクローンから特有のクローンを選択することであり得る。例えば、標的に対する親和性を向上させるために、標的結合配列をヒト化するために、細胞培養におけるその産生を向上させるために、インビボでのその免疫原性を低下させるために、多特異性抗体を作製するためになど、選択された標的結合配列を更に改変し得ること、及び改変された標的結合配列を含む抗体も本発明のモノクローナル抗体であることを理解されたい。一般に、異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を含むポリクローナル抗体製剤と対照的に、モノクローナル抗体製剤の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対するものである。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体製剤は、一般にはそれらに他の免疫グロブリンが混入していない点で有利である。

【0060】

「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体の集団から得られるような抗体の特徴を示し、何らかの特定の方法によって抗体の産生を必要とするものとして解釈されるものではない。例えば、本発明に従い使用しようとするモノクローナル抗体は、例えばハイブリドーマ法（例えばＫｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）；Ｈａｒｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２^ｎｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば米国特許第４，８１６，５６７号参照）、ファージディスプレイ技術（例えばＣｌａｃｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０（２００４）；Ｌｅｅら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７−１２４７２（２００４）；及びＬｅｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１−２）：１１９−１３２（２００４）参照及びヒト免疫グロブリン遺伝子座又はヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の一部又は全てを有する動物においてヒト又はヒト様抗体を作製するための技術（例えばＷＯ９８／２４８９３；ＷＯ９６／３４０９６；ＷＯ９６／３３７３５；ＷＯ９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５−２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら、Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；同第５，６６１，０１６号；Ｍａｒｋｓら、Ｂｉｏ．Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９−７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６−８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２−８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５−８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）及びＬｏｎｂｅｒｇ及びＨｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３（１９９５）参照）を含む様々な技術によって作製され得る。

【0061】

本明細書中のモノクローナル抗体は、具体的に、重及び／又は軽鎖の一部分が、特定の種由来であるか、又は特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一であるか又はそれと相同であり、一方で鎖の残りの部分が別の種由来であるか、又は別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一であるか又はそれと相同である、「キメラ」抗体並びに、望ましい生物学的活性を示す限りこのような抗体の断片を含む（米国特許第４，８１６，５６７号；及びＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５５−９８５５（１９８４））。

【0062】

「ネイティブ抗体」は、各種構造を有する天然の免疫グロブリン分子を指す。例えば、ネイティブＩｇＧ抗体は、ジスルフィド結合される２本の同一の軽鎖及び２本の同一の重鎖から構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。ＮからＣ末端へ、各重鎖は、可変重鎖ドメイン又は重鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＨ）とそれに続く３個の定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）を有する。同様に、ＮからＣ末端へ、各軽鎖は、可変軽鎖ドメイン又は軽鎖可変ドメインとも呼ばれる可変領域（ＶＬ）とそれに続く定常軽鎖（ＣＬ）ドメインを有する。抗体の軽鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つのタイプのうち１つに割り当てられ得る。

【0063】

「可変領域」又は「可変ドメイン」という用語は、抗体を抗原に結合させることに関与する抗体重鎖又は軽鎖のドメインを指す。ネイティブ抗体の重鎖及び軽鎖の可変ドメイン（それぞれＶＨ及びＶＬ）は、一般に、各ドメインが４個の保存的フレームワーク領域（ＦＲ）及び３個の超可変領域（ＨＶＲ）を含む、同様の構造を有する。（例えばＫｉｎｄｔら、Ｋｕｂｙ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６ｔｈ ｅｄ．，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ．，９１頁（２００７）参照）。抗原−結合特異性を付与するためには、１個のＶＨ又はＶＬドメインで十分であり得る。更に、特定の抗原に結合する抗体は、それぞれ相補的ＶＬ又はＶＨドメインのライブラリをスクリーニングするために、抗原に結合する抗体からのＶＨ又はＶＬドメインを用いて単離され得る。例えばＰｏｒｔｏｌａｎｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：８８０−８８７（１９９３）；Ｃｌａｒｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４−６２８（１９９１）を参照のこと。

【0064】

「ヒト化」抗体は、非ヒトＨＶＲからのアミノ酸残基及びヒトＦＲからのアミノ酸残基を含むキメラ抗体を指す。所定の実施態様では、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、及び一般的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、これにおいて、ＨＶＲ（例えばＣＤＲ）の全て又は実質的に全てが非ヒト抗体のものに相当し、ＦＲの全て又は実質的に全てがヒト抗体のものに相当する。ヒト化抗体は、場合によってはヒト抗体由来の抗体定常領域の少なくとも一部を含み得る。抗体、例えば非ヒト抗体の「ヒト化型」とは、ヒト化が行われた抗体を指す。

【0065】

「超可変領域」又は「ＨＶＲ」という用語は、本明細書中で使用される場合、配列において超可変性であり、及び／又は構造的に定められるループ（「超可変ループ」）を形成する、抗体可変ドメインの各領域を指す。一般に、ネイティブの４本鎖抗体は、６個のＨＶＲ；ＶＨにおいて３個（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）及びＶＬにおいて３個（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）を含む。ＨＶＲは、一般に、超可変ループからの及び／又は「相補性決定領域」（ＣＤＲ）からのアミノ酸残基を含み、後者は、最大の配列可変性であり、及び／又は抗原認識に関与する。代表的な超可変ループは、アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）及び９６−１０１（Ｈ３）で生じる。（Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。代表的なＣＤＲ（ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２、ＣＤＲ−Ｌ３、ＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３）は、Ｌ１のアミノ酸残基２４−３４、Ｌ２の５０−５６、Ｌ３の８９−９７、Ｈ１の３１−３５Ｂ、Ｈ２の５０−６５及びＨ３の９５−１０２で生じる（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））。ＶＨ中のＣＤＲ１を除き、ＣＤＲは一般に、超可変ループを形成するアミノ酸残基を含む。ＣＤＲはまた、抗原に接触する残基である「特異性決定残基」又は「ＳＤＲ」も含む。ＳＤＲは、短縮型−ＣＤＲ又はａ−ＣＤＲと呼ばれるＣＤＲの領域内に含有される。代表的なａ−ＣＤＲ（ａ−ＣＤＲ−Ｌ１、ａ−ＣＤＲ−Ｌ２、ａ−ＣＤＲ−Ｌ３、ａ−ＣＤＲ−Ｈ１、ａ−ＣＤＲ−Ｈ２及びａ−ＣＤＲ−Ｈ３）は、Ｌ１のアミノ酸残基３１−３４、Ｌ２の５０−５５、Ｌ３の８９−９６、Ｈ１の３１−３５Ｂ、Ｈ２の５０−５８及びＨ３の９５−１０２で生じる。（Ａｌｍａｇｒｏ及びＦｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．ＢｉｏＳｃｉ．１３：１６１９−１６３３（２００８）を参照のこと）。別段の指示がない限り、可変ドメイン中のＨＶＲ残基及び他の残基（例えばＦＲ残基）は、Ｋａｂａｔら、上出に従い本明細書中で付番される。

【0066】

「ヒト抗体」は、ヒトにより産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を含むものであり、及び／又は、本明細書中で開示されるようなヒト抗体を作製するための技術の何れかを用いて作製されてきた。このような技術としては、ヒト−由来コンビナトリアルライブラリ、例えばファージディスプレイライブラリをスクリーニングすること（例えばＭａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）及びＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１９：４１３３−４１３７（１９９１）参照）；ヒトモノクローナル抗体の作製のためにヒト骨髄腫及びマウス−ヒトへテロ骨髄腫細胞株を使用すること（例えばＫｏｚｂｏｒ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５５−９３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）；及びＢｏｅｒｎｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１４７：８６（１９９１）参照）；及び内因性免疫グロブリン産生を欠くヒト抗体の全レパートリーを産生可能なトランスジェニック動物（例えばマウス）においてモノクローナル抗体を作製すること（例えばＪａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ ＵＳＡ，９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｒｍａｎｎら、Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，７：３３（１９９３）参照）が挙げられる。このヒト抗体の定義では、具体的に、非ヒト動物からの抗原−結合残基を含むヒト化抗体が排除される。

【0067】

「親和性成熟」抗体は、その１以上のＣＤＲにおいて１以上の改変があり、その結果、そのような改変を持たない親抗体と比較して抗原に対する抗体の親和性が向上しているものである。一実施態様では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対するナノモル単位又は更にピコモル単位の親和性を有する。親和性成熟抗体は、当技術分野で公知の手順によって作製される。Ｍａｒｋｓら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９−７８３（１９９２）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリングによる親和性成熟を記載する。ＨＶＲ及び／又はフレームワーク残基の無作為突然変異誘発は、Ｂａｒｂａｓら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：３８０９−３８１３（１９９４）；Ｓｃｈｉｅｒら、Ｇｅｎｅ １６９：１４７−１５５（１９９５）；Ｙｅｌｔｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４−２００４（１９９５）；Ｊａｃｋｓｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０−９（１９９５）；及びＨａｗｋｉｎｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９−８９６（１９９２）により記載されている。

【0068】

「遮断抗体」又は「アンタゴニスト抗体」は、それが結合する抗原の生物学的活性を阻害するか又は低下させるものである。ある種の遮断抗体又はアンタゴニスト抗体は、抗原の生物学的活性を部分的に又は完全に阻害する。

【0069】

抗体の「クラス」は、その重鎖により保持されるあるタイプの定常ドメイン又は定常領域を指す。抗体の５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭがあり、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２に更に分類され得る。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ及びμと呼ばれる。

【0070】

本明細書中で使用される場合、「抗ＩＬ１３抗体」は、レブリキズマブも指し、ヒトＩＬ１３に結合するヒト化ＩｇＧ４抗体を意味する。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ、つまり、ＣＤＲ−Ｈ１（配列番号１）、ＣＤＲ−Ｈ２（配列番号２）及びＣＤＲ−Ｈ３（配列番号３）を含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、３つの軽鎖ＣＤＲＳ、ＣＤＲ−Ｌ１（配列番号４）、ＣＤＲ−Ｌ２（配列番号５）及びＣＤＲ−Ｌ３（配列番号６）を含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲと３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、ＣＤＲ−Ｈ１（配列番号１）、ＣＤＲ−Ｈ２（配列番号２）、ＣＤＲ−Ｈ３（配列番号３）、ＣＤＲ−Ｌ１（配列番号４）、ＣＤＲ−Ｌ２（配列番号５）及びＣＤＲ−Ｌ３（配列番号６）を含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７及び８から選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖領域、ＶＨを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域、ＶＬを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７及び８から選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖領域、ＶＨ、及び配列番号９のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域、ＶＬを含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０又は配列番号１１又は配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖を含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号１３から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖及び配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。抗ＩＬ１３抗体は、国際公開第２００５／０６２９６７号に更に記載されている。

【0071】

「単離された」生体分子、例えば核酸、ポリペプチド又は抗体などは、その天然環境の少なくとも一つの成分から、同定され、分離され、及び／又は回収されたものである。

【0072】

本明細書中の「約」値又はパラメーターに対する言及は、それ自体、その値又はパラメーターを対象とする実施態様を含む（及び記載する。）。例えば「約Ｘ」に言及する記述は、「Ｘ」の記述を含む。

【0073】

「皮下投与デバイス」は、皮下経路によって、薬物、例えば、治療用抗体又は製剤処方を投与するために適用されるか又は設計される装置を指す。代表的な皮下投与デバイスとしては、プレフィルドシリンジを含むシリンジ、注射装置、注入ポンプ、ペン型注射器、針なし装置及びパッチ送達系が挙げられるが、これらに限定されない。皮下投与デバイスは、製剤処方のある一定の体積、例えば約１．０ｍＬ、約１．２５ｍＬ、約１．５ｍＬ、約１．７５ｍＬ又は約２．０ｍＬを投与する。

【0074】

「添付文書」又は「ラベル」は、指示、用途、投与量、投与、禁忌、包装された製造品と組み合わせるべき他の治療用製造品に関する情報、及び／又はこのような治療用製造品又は医薬の使用に関する警告などを含有する治療用製造品又は医薬の市販パッケージ中に習慣的に含まれる説明書を指すために使用される。

【0075】

「キット」は、少なくとも一つの試薬、例えば喘息又は他の肺障害の治療のための医薬を含む何らかの製造品（例えばパッケージ又は容器）である。所定の実施態様では、本製造品は、本発明の方法を行うためのユニットとして販売促進、流通又は販売される。

【0076】

「標的視聴者」は、個人の患者、患者集団、新聞、医学文献及び雑誌の読者、テレビ又はインターネット視聴者、ラジオ又はインターネットリスナー、医師、製薬会社など、特に、特定の使用、治療又は適用に対して、マーケティングするか又は宣伝することなどによって、特定の医薬を販売促進するか又は、販売促進しようとする対象の人又は研究所の群である。

【0077】

「血清試料」という用語は、個体から得られる何らかの血清試料を指す。哺乳動物から血清を得るための方法は当技術分野で周知である。

【0078】

「全血」という用語は、個体から得られる何らかの全血試料を指す。一般的には、全血は、血液成分、例えば細胞成分及び血漿の全てを含有する。哺乳動物から全血を得るための方法は当技術分野で周知である。

【0079】

ある種の疾患又は障害に罹患している患者に対する臨床的利益の向上と関連するか又は特定の治療剤もしくは治療レジメンに対する反応を予測するバイオマーカーの「量」又は「レベル」は、生体試料中で検出可能なレベルである。これらは、当業者にとって公知であり、また本明細書中でも開示される方法によって測定され得る。評価されるバイオマーカーの発現レベル又は量は、治療又は治療剤に対する反応又は予測される反応を判定するために使用され得る。

【0080】

「発現のレベル」又は「発現レベル」という用語は、一般に交換可能に使用され、一般的に生体試料中のアミノ酸生成物又はタンパク質の量を指す。「発現」は一般的に、遺伝子にコードされる情報が細胞に存在し、操作する構造に変換される過程を指す。従って、本明細書中で使用される場合、遺伝子の「発現」は、ポリヌクレオチドへの転写、タンパク質への翻訳又は更にそのタンパク質の翻訳後修飾を指し得る。

【0081】

喘息及び他の肺疾患及びある種のアレルギー、自己免疫及び他の炎症性疾患
喘息は、気道炎症、応答性亢進及び閉塞を含む慢性肺疾患として記載される。生理的に、気道応答性亢進は、メタコリン又はヒスタミンでの気管支誘発試験後の気管支の気流減少によって明らかにされる。気道閉塞を誘発する他の誘発因子としては、冷気、運動、上気道ウイルス感染、喫煙及び呼吸器アレルゲンが挙げられる。アレルゲンでの気管支誘発試験により、迅速な初期免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）が介在する気管支気流の減少と、多くの患者ではそれに続く４から８時間にわたる気管支気流減少を伴う晩期ＩｇＥ介在反応が誘発される。初期反応は、ヒスタミン、ＰＧＤ−２−、ロイコトリエン、トリプターゼ及び血小板活性化因子（ＰＡＦ）などの炎症性物質の急性放出によって引き起こされ、一方で晩期反応は、デノボ合成されたプロ炎症性サイトカイン（例えばＴＮＦα、ＩＬ４、ＩＬ１３）及びケモカイン（例えばＭＣＰ−１及びΜΙΡ−Ια）によって引き起こされる（Ｂｕｓｓｅら、Ａｌｌｅｒｇｙ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｅｄ．Ｍｉｄｄｌｅｓｔｏｎ，１１７３（１９９８）において）。慢性喘息患者において、持続性の肺症状にはＴｈ２細胞の反応の高まりが介在する。Ｔｈ２サイトカインは、げっ歯類の喘息モデルで示されるように（Ａｋｂａｒｉら、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．，９：５８２（２００３））、特に気道におけるＮＫ表現型（ＮＫＴ）があるＴｈ２細胞により産生されるＩＬ１３及びＩＬ４は、この疾患に極めて重要な関与があると考えられる（Ｌａｒｃｈｅら、Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１１：４５０（２００３））。喘息性気道の肉眼的所見は、肺の過膨脹、平滑筋肥厚、網状板肥大、粘膜浮腫、上皮細胞腐肉形成、繊毛細胞崩壊及び粘液腺分泌過多を示す。顕微鏡的に、喘息は、気管支組織における好酸球、好中球、リンパ球及び形質細胞数、気管支分泌物及び粘液の増加があることを特徴とする。最初に、活性化ＣＤ４＋Ｔ−リンパ球による血流から気道への白血球の動員がある。活性化Ｔ−リンパ球はまた、好酸球、肥満細胞及びリンパ球からの炎症性メディエーターの放出にも向かわせる。更に、Ｔｈ２細胞は、ＩＬ４、ＩＬ５、ＩＬ９及びＩＬ１３を産生する。ＩＬ４は、ＩＬ１３と合わせて、ＩｇＭからＩｇＥ抗体へのスイッチをシグナル伝達する。

【0082】

アレルゲンによる膜−結合ＩｇＥ分子の架橋によって、肥満細胞が脱顆粒し、ヒスタミン、ロイコトリエン及び、気道炎症を永続化させる他のメディエーターを放出する。ＩＬ５は、好酸球の動員及び活性化を活性化する。活性化された肥満細胞及び好酸球はまた、炎症の永続化を促進するそれらのサイトカインも産生する。肺組織に対する損傷とその後の修復を伴う、肺におけるこれらの炎症サイクルの反復は、気道の長期の構造的変化（「リモデリング」）を引き起こし得る。

【0083】

中度の喘息は、現在、破綻的症状又はアレルゲンもしくは運動誘発性喘息を軽減するために、抗炎症−コルチコステロイド又は肥満細胞阻害剤、例えばクロモグリク酸ナトリウム又はネドクロミルなどを毎日吸入することと、それに加えて必要に応じて（１日３から４回）β２−アゴニストを吸入することにより処置している。クロモグリク酸ナトリウム及びネドクロミルは、気管支痙攣及び炎症を阻止するが、通常は、アレルゲン又は運動に関連する喘息に対してのみ、及び一般的には若年性喘息に対してのみ有効である。コルチコステロイド吸入によって、炎症、気道反応性亢進及び閉塞を改善し、多くの急性増悪を抑える。しかし、効果が現れるまで少なくとも１ヶ月を要し、顕著な改善が生じるには最長１年かかる。最も頻度の高い副作用は、嗄声及び口腔真菌感染症、すなわちカンジダ症である。より重篤な副作用が報告されており、例えば部分的な副腎抑制、発育抑制及び骨形成の低下であるが、これはより高い用量を使用した場合のみである。ベクロメタゾン、トリアムシノロン及びフルニソリドはおそらく同様の効力を有し；一方でブデソニド及びフルチカゾンはより強力であり、全身的な副作用はあまりないと報告されている。

【0084】

軽度疾患がある患者さえも、活性化Ｔ細胞、肥満細胞及び好酸球による粘膜及び上皮の浸潤含め、気道炎症を示す。Ｔ細胞及び肥満細胞は、好酸球増殖及び成熟並びにＩｇＥ抗体の産生を促進するサイトカインを放出し、これらは、次に毛細血管透過性を向上させ、上皮を破壊し、神経反射及び粘液分泌腺を刺激する。その結果、喘鳴、咳及び呼吸困難により明らかとなる気道反応性亢進、気管支収縮及び分泌過多が起こる。

【0085】

従来、喘息は、経口及び吸入気管支拡張剤で治療されてきた。これらの薬剤は喘息の症状を助けるが、基礎となる炎症に対しては何もしない。この１０年間の、又は喘息の原因における炎症の重要性の認識から、コルチコステロイドの使用が増加しているが、多くの患者は、喘息のコントロールは不良のままである。

【0086】

喘息に加えて、本発明の製剤によって治療され得る他の疾患としては、アレルギー、自己免疫疾患又は他の炎症性疾患が挙げられる。他のアレルギー性疾患としては、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物に対する過敏性及び蕁麻疹が挙げられ；免疫介在性の皮膚疾患は、水疱性皮膚疾患、多形性紅斑及び接触性皮膚炎が挙げられ；自己免疫疾患としては、乾癬、関節リウマチ、若年性慢性関節炎；炎症性腸疾患（すなわち、潰瘍性大腸炎、クローン病）が挙げられ；ＩＬ１３が関連する他の疾患としては、特発性間質性肺炎、杯細胞化生、炎症性及び線維肺疾患、例えば嚢胞性線維症など、グルテン過敏性腸疾患及びウィップル病；肺の免疫性疾患、例えば好酸球性肺炎、特発性肺線維症及び過敏性肺炎；慢性閉塞性肺疾患、ＲＳＶ感染、ブドウ膜炎（ｕｖｅｌｉｔｉｓ）、強皮症、骨粗鬆症及びホジキンリンパ腫が挙げられる。

【0087】

特発性肺線維症（ＩＰＦ）は、本発明の製剤での治療に適している障害である。ＩＰＦは、肺実質の進行性の間質線維化を特徴とする拘束性肺疾患であり、米国でおよそ１００，０００人の罹患者がいる（Ｒａｇｈｕら、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １７４：８１０−８１６（２００６））。ＩＰＦが関与するこの間質線維化は、進行性の肺機能の喪失に至り、その結果、殆どの患者が呼吸不全により死亡する。診断時からの生存期間の中央値は２から３年間である（Ｒａｇｈｕら、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １８３：７８８−８２４（２０１１））。ＩＰＦの病因及びキーとなる分子的及び病態生理学的な作動因子は不明である。ＩＰＦ患者において生存を延長させることが示されている唯一の治療は肺移植である（Ｔｈａｂｕｔら、Ａｎｎａｌｓ ｏｆ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ １５１：７６７−７７４（２００９））。しかし、肺移植は死亡率が無視できないものであり、全てのＩＰＦ患者が移植の適切な候補というわけではなく、適切なドナー肺は比較的不足状態にある。多くの試みにもかかわらず、一部の介入が一部の患者において肺機能低下の速度を遅らせると考えられているものの、今まで、ＩＰＦ患者における無作為化プラセボ介入試験において実質的に生存を延長させることが示されている薬物療法はない（Ｒａｇｈｕら、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １８３：７８８−８２４（２０１１）；Ｒｉｃｈｅｌｄｉら、Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊ．ｏｆ Ｍｅｄ．３６５：１０７９−１０８７（２０１１））。

【0088】

全てのＩＰＦ患者について予後不良であるが、病状経過は非常に異なる（Ｒａｇｈｕら、Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １８３：７８８−８２４（２０１１））。一部の患者は、比較的緩徐進行性の経過を示し、１０年以上にわたり比較的一定の速度で肺機能が失われ、一方で、他の患者は、肺機能低下がより急速であり、診断の１又は２年以内に死を迎える。更に、一部の患者では疾患が急性に増悪し、一般的には肺機能の急激で劇的な低下を特徴とする。一般にこれらの患者は、急性事象後に完全に回復することはなく、増悪中又はその直後に死亡することが多い。病状経過がこのように様々であることから、それらの疾患の基礎となる病態生理学的要因がＩＰＦ患者によって異なり得、本発明の製剤などの分子的に標的化される治療剤の影響の受け易さも異なり得ることが示唆される。

【0089】

好酸球性炎症は、アレルギー性及び非アレルギー性両方の様々な疾病に関連する（Ｇｏｎｌｕｇｕｒ（２００６）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｎｖｅｓｔ．３５（１）：２９−４５）。炎症は、損傷に対する生体組織の修復反応である。炎症反応の特徴は、組織そのもので産生されるある種の化学物質による損傷組織における白血球の蓄積である。好酸球白血球は、アレルギー性障害、蠕虫感染及び新生物疾患などの多岐にわたる状態で蓄積する（Ｋｕｄｌａｃｚら、（２００２）Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ２６：１１１−１１９）。免疫系の成分である好酸球白血球は、粘膜表面の防御的エレメントである。これらは、抗原だけでなく、寄生生物、化学物質及び外傷に対しても反応する。

【0090】

組織好酸球増多は、湿疹、天疱瘡、急性蕁麻疹及び中毒性表皮剥離症などの皮膚疾患において、並びにアトピー性皮膚炎において生じる（［Ｒｚａｎｙら、１９９６］）。好酸球は、組織及びＩｇＥ介在性アレルギー性皮膚反応において空の顆粒タンパク質に蓄積する（［Ｎｉｅｌｓｅｎら、２００１］）。肥満細胞と組み合わさった好酸球は、関節の炎症を引き起こすと思われる（Ｍｉｏｓｓｅｃら、１９９７）。好酸球性炎症は、関節外傷を合併することがある。滑液好酸球増多は、関節リウマチ、寄生性疾患、過好酸球増加症候群、ライム病などの疾患及びアレルギーの過程並びに関節血症及び関節造影と関連し得る（［Ａｔａｎｅｓら、１９９６］）。好酸球性炎症は、骨にも影響を及ぼし得る（［Ｙｅｔｉｓｅｒら、２００２］）。好酸球性筋疾患の例としては、好酸球性筋周膜炎、好酸球性多発性筋炎及び局所性好酸球性筋炎が挙げられる（［Ｌａｋｈａｎｐａｌら、１９８８］）。骨格筋に影響を及ぼす好酸球性炎症は、寄生生物感染又は薬物又は過好酸球増加症の一部の全身性障害の特性（例えば特発性過好酸球増加症候群及び好酸球増多−筋痛症候群と関連し得る。好酸球は、自己免疫抗体により認識されるエピトープに対する炎症反応に関与する（［Ｅｎｇｉｎｅｅｒら、２００１］）。結合組織疾患は、好中球性、好酸球性又はリンパ球性の血管の炎症に至り得る（［Ｃｈｅｎら、１９９６］）。組織及び末梢血好酸球増多は、活動性リウマチ疾患において起こり得る。ある種の結合組織疾患である強直性脊椎炎における血清ＥＣＰレベルの上昇は、その根本的過程にも好酸球が関与することを示唆する（Ｆｅｌｔｅｌｉｕｓら、１９８７）。ヴェーゲナー肉芽腫は、肺結節、胸水及び末梢血好酸球増多を示すことは稀であり得る（［Ｋｒｕｐｓｋｙら、１９９３］）。

【0091】

少なくとも４００／ｍｍ^３の末梢血好酸球増多は、全身性硬化症の症例の７％、局限性強皮症の症例の３１％及び好酸球性筋膜炎の症例の６１％で起こり得る（［Ｆａｌａｎｇａ及びＭｅｄｓｇｅｒ，１９８７］）。強皮症は、マイスナー及びアウエルバッハ神経叢と酷似した炎症過程を生じ、これは、胃腸系において肥満細胞及び好酸球白血球からなる。好酸球由来の神経毒は、強皮症で起こるような胃腸運動機能不全に関与し得る（［ｄｅ Ｓｃｈｒｙｖｅｒ Ｋｅｃｓｋｅｍｅｔｉ及びＣｌｏｕｓｅ，１９８９］）。

【0092】

好酸球は、局所的（［Ｖａｒｇａ及びＫａｈａｒｉ，１９９７］）又は全身的（［Ｂｏｕｒｏｓら、２００２］）結合組織増殖を伴い得る。これらは、線維芽細胞においてプロテオグリカン分解を阻害することによって線維症を誘発し得（［Ｈｅｒｎｎａｓら、１９９２］）、線維芽細胞は、ＧＭ−ＣＳＦを分泌することによって好酸球生存に介在する（［Ｖａｎｃｈｅｒｉら、１９８９］）。好酸球は、鼻腔（［Ｂａｃｈｅｒｃｔら、２００１］）、気管支（［Ａｒｇｕｅｌｌｅｓ及びＢｌａｎｃｏ，１９８３］）及び胃腸ポリープ組織（［Ａｓｓａｒｉａｎ及びＳｕｎｄａｒｅｓｏｎ，１９８５］）で見出され得る。同様に、好酸球は、炎症性偽腫瘍（筋線維芽細胞性腫瘍）に局在し得る。好酸球は、眼窩部における炎症性偽腫瘍に付随することが多く、この場合、この状態は、血管性浮腫又はアレルギー性鼻結膜炎と類似した症状を呈し得る（［Ｌｉら、１９９２］）。

【0093】

好酸球性炎症は、組織外傷（例えば手術又は損傷の結果として）で見出され得る。好酸球性炎症はまた、心血管系疾病（例えば好酸球性心筋炎、好酸球性冠動脈炎、虚血性心疾患、急性心筋梗塞、心臓破裂）とも関連し得る。壊死性炎症過程もまた好酸球性炎症（多発性筋炎、冠動脈解離、ニューロ・ベーチェット病の壊死性病変、認知症、脳梗塞）を含み得る。

【0094】

幾つかの治療剤
喘息及び他の肺疾患の治療のための治療剤が本明細書中で提供される。一実施態様では、治療剤は抗ＩＬ１３抗体であり、またレブリキズマブとも呼ばれる。ＩｇＧ４抗体としてのレブリキズマブ。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ、つまり、ＣＤＲ−Ｈ１（配列番号１）、ＣＤＲ−Ｈ２（配列番号２）及びＣＤＲ−Ｈ３（配列番号３）を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、ＣＤＲ−Ｌ１（配列番号４）、ＣＤＲ−Ｌ２（配列番号５）及びＣＤＲ−Ｌ３（配列番号６）を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲ、つまり、ＣＤＲ−Ｈ１（配列番号１）、ＣＤＲ−Ｈ２（配列番号２）、ＣＤＲ−Ｈ３（配列番号３）、ＣＤＲ−Ｌ１（配列番号４）、ＣＤＲ−Ｌ２（配列番号５）及びＣＤＲ−Ｌ３（配列番号６）を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７及び８から選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖領域ＶＨを含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域ＶＬを含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号７及び８から選択されるアミノ酸配列を有する可変重鎖領域ＶＨと、配列番号９のアミノ酸配列を有する可変軽鎖領域ＶＬとを含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０又は配列番号１１又は配列番号１２又は配列番号１３のアミノ酸配列を有する重鎖を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号１３から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖と配列番号１４のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む。抗ＩＬ１３抗体は、国際公開第２００５／０６２９６７号で更に記載されている。

【0095】

別の態様では、抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含む。所定の実施態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＨ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１３抗体は、ヒトＩＬ−１３への結合能を保持する。所定の実施態様では、配列番号８において、全部で１から１０個のアミノ酸が置換され、変更され、挿入され及び／又は欠失させられている。所定の実施態様では、ＣＤＲの外側の領域（すなわちＦＲにおいて）で、置換、挿入又は欠失が起こる。場合によっては、本抗ＩＬ１３抗体は、その配列の翻訳後修飾を含め、配列番号８におけるＶＨ配列を含む。

【0096】

別の態様では、配列番号９のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗ＩＬ−１３抗体が提供される。所定の実施態様では、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するＶＬ配列は、参照配列に対して置換（例えば保存的置換）、挿入又は欠失を含むが、その配列を含む抗ＩＬ−１３抗体は、ＩＬ−１３への結合能を保持する。所定の実施態様では、全部で１から１０個のアミノ酸が、配列番号９において置換され、挿入され、及び／又は欠失させられている。所定の実施態様では、ＣＤＲの外側の領域（すなわちＦＲにおいて）でこの置換、挿入又は欠失が起こる。場合によっては、本抗ＩＬ−１３抗体はその配列の翻訳後修飾を含め、配列番号９におけるＶＬ配列を含む。

【0097】

また別の実施態様では、本抗ＩＬ−１３抗体は、配列番号９のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するＶＬ領域及び配列番号８のアミノ酸配列に対して、少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有するＶＨ領域を含む。

【0098】

幾つかの分子バイオマーカー
ある例では、ある治療剤での治療のために患者を選択する手段として、患者から得られる生体試料においてバイオマーカー、例えば血清バイオマーカーを定量する。米国特許出願第６１／４５９７６０号、同第６１／４６５４２５号、同第６１／４８４６５０号及び同第６１／５７４４８５号（「Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ Ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ＴＨ２ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）は、ペリオスチンアッセイ及び本明細書中に記載の抗ＩＬ１３抗体製剤での治療のために患者を選択する方法を記載する。

【0099】

製剤のための一般的技術
抗ＩＬ１３抗体を含有する製剤は、当技術分野で公知であり、本明細書中で更に記載されるようなある一定の賦形剤及び技術を用いて調製され、分析され得る。所定の実施態様では、処方しようとする抗体は、予め凍結乾燥に供されておらず、本明細書中の関心のある製剤は水性製剤である。所定の実施態様では、本抗体は、全長抗体である。一実施態様では、本製剤中の抗体は、抗体断片、例えばＦ（ａｂ’）２であり、この場合、全長抗体に対して起こり得ない問題（Ｆａｂへの抗体の切り出しなど）に対処する必要があり得る。本製剤中に存在する抗体の治療的有効量は、例えば所望の用量体積及び投与方式を考慮することにより決定される。本製剤において、代表的な抗体濃度は、約０．１ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬ又は約１０ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬ又は約５０ｍｇ／ｍＬから約１７５ｍｇ／ｍＬである。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、１２５ｍｇ／ｍＬの濃度で処方される。一実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体は、１５０ｍｇ／ｍＬの濃度で処方される。

【0100】

ｐＨ緩衝溶液中に本抗体を含有する水性製剤が調製される。所定の実施態様では、そのバッファーは、約４．５から約６．５の範囲のｐＨを有する。所定の実施態様では、ｐＨは、５．０から６．０のｐＨの範囲であるか、又はｐＨ５．２５から５．７５の範囲、又はｐＨ５．３から５．６の範囲である。本発明の所定の実施態様では、本製剤は、５．６又は約５．６のｐＨを有する。本発明の所定の実施態様では、本製剤は、５．７又は約５．７のｐＨを有する。本発明の所定の実施態様では、本製剤は、５．８又は約５．８のｐＨを有する。この範囲内でｐＨを調整するバッファーの例としては、酢酸（例えばヒスチジンアセテート、アルギニン酢酸、酢酸ナトリウム）、コハク酸（ヒスチジンコハク酸、アルギニンコハク酸、コハク酸ナトリウムなど）、グルコン酸、クエン酸及び他の有機酸バッファー及びそれらの組合せが挙げられる。バッファー濃度は、例えば本製剤のバッファー及び所望の等張性に依存して、約１ｍＭから約６００ｍＭであり得る。所定の実施態様では、ｔｈｅは、約５ｍＭから４０ｍＭの濃度のヒスチジンを含有する。一実施態様では、バッファーは、２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．７である。所定の実施態様では、バッファーは２０ｍＭヒスチジンコハク酸、ｐＨ５．７である。

【0101】

抗体製剤に界面活性剤が場合によっては添加され得る。代表的な界面活性剤としては、非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート（例えばポリソルベート２０、８０など）又はポロキサマー（例えばポロキサマー１８８）などが挙げられる。添加される界面活性剤の量は、処方される抗体の凝集を減少させ、及び／又は本製剤中の微粒子の形成を最小限に抑え、及び／又は吸着を減少させるような量である。例えば、界面活性剤は、約０．００１％から約０．５％又は約０．００５％から約０．２％又は約０．０１％から約０．１％の量で本製剤中に存在し得る。一実施態様では、界面活性剤は、０．０３％の量で本製剤中に存在するポリソルベート２０である。

【0102】

一実施態様では、本製剤は、上で特定された薬剤（例えば抗体、バッファー及び界面活性剤）を含有し、本質的に、１以上の保存料、例えばベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、クロロブタノール及びベンゼトニウムＣｌなどは不含である。一実施態様では、本製剤は保存料を含有しない。別の実施態様では、特に本製剤が複数回用量製剤である場合、本製剤中に保存料が含まれ得る。保存料の濃度は、約０．１％から約２％又は約０．５％から約１％の範囲であり得る。１以上の他の薬学的に許容可能な担体、賦形剤又は安定化剤、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に記載のものなどが本製剤中に含まれ得るが、ただし、これらは本製剤の所望の特徴に悪影響を与えないものとする。許容可能な担体、賦形剤又は安定化剤は、使用される投与量及び濃度で受容者に対して無毒性であり、更なる緩衝剤；共溶媒；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；キレート剤、例えばＥＤＴＡなど；金属錯体（例えばＺｎ−タンパク質錯体）；生体分解性ポリマー、例えばポリエステルなど；及び／又は塩形成対イオンを含む。

【0103】

本明細書中のキレート剤の様々な記述はＥＤＴＡに焦点を当てることが多い一方で、当然のことながら、他の金属イオンキレート剤も本発明内に包含される。金属イオンキレート剤は、当業者にとって周知であり、金属イオンキレート剤としては、アミノポリカルボキシラート、ＥＤＴＡ（エチレンジアミンテトラ酢酸）、ＥＧＴＡ（エチレングリコール−ビス（β−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラ酢酸）、ＮＴＡ（ニトリロトリ酢酸）、ＥＤＤＳ（エチレンジアミンジコハク酸）、ＰＤＴＡ（１，３−プロピレンジアミンテトラ酢酸）、ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミンペンタ酢酸）、ＡＤＡ（β−アラニンジ酢酸）、ＭＧＣＡ（メチルグリシンジ酢酸）などが挙げられるが必ずしもこれらに限定されない。更に、本明細書中の幾つかの実施態様は、リン酸／ホスホン酸キレート剤を含む。所定の実施態様では、本製剤はメチオニンを含む。

【0104】

「安定化剤」として知られることがある等張剤は、液体組成物の等張性を調整するか又は維持するために存在する。タンパク質及び抗体などの大きな荷電生体分子で使用される場合、これらは、アミノ酸側鎖の荷電基と相互作用し、それによって分子間及び分子内相互作用の可能性を減少させ得るので「安定化剤」と呼ばれることが多い。等張剤は、他の成分の相対量を考慮して、０．１％から２５重量％又は１から５％の間の何れかの量で存在し得る。等張剤としては、多価糖アルコール、スリヒドリック（ｔｈｒｉｈｙｄｒｉｃ）以上の糖アルコール、例えばグリセリン、エリスリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール及びマンニトールが挙げられる。

【0105】

更なる安定化剤としては、増量剤から溶解促進剤、変性又は容器壁への付着を防ぐ薬剤まで機能が様々である、幅広い賦形剤が挙げられる。安定化剤は、０．１から１０，０００部／活性タンパク質又は抗体重量の範囲で存在し得る。典型的な安定化剤としては、多価糖アルコール（上記で列挙）；アミノ酸、例えばアラニン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、オルニチン、ロイシン、２−フェニルアラニン、グルタミン酸、スレオニンなど；有機糖又は糖アルコール、例えば、スクロース、ラクトース、ラクチトール、トレハロース、スタキオース、マンノース、ソルボース、キシロース、リボース、リビトール、ミオイニシトース（ｍｙｏｉｎｉｓｉｔｏｓｅ）、ミオイニシトール（ｍｙｏｉｎｉｓｉｔｏｌ）、ガラクトース、ガラクチトール、グリセロール、シクリトール（例えばイノシトール）、ポリエチレングリコール；硫黄含有還元剤、例えば、尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、α−モノチオグリセロール及びチオ硫酸ナトリウム；低分子量タンパク質、例えばヒト血清アルブミン、ウシ血清アルブミン、ゼラチン又は他の免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドンなど；単糖類（例えばキシロース、マンノース、フルクトース、グルコース；二糖類（例えばラクトース、マルトース、スクロース）；三糖類、例えばラフィノース；及び多糖類、例えば、デキストリン又はデキストランが挙げられる。

【0106】

非イオン性界面活性剤又は洗剤（「湿潤剤」としても知られている。）は、治療剤の溶解を促進するために、並びに撹拌により誘導される凝集から治療用タンパク質を保護するために存在し、これによって、活性のある治療用タンパク質又は抗体の変性を引き起こさずにせん断表面応力に製剤を曝露させることも可能になる。非イオン性界面活性剤は、約０．０５ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは約０．０７ｍｇ／ｍＬから約０．２ｍｇ／ｍＬの範囲で存在する。

【0107】

適切な非イオン性界面活性剤としては、ポリソルベート（２０、４０、６０、６５、８０など）、ポロキサマー（ｐｏｌｙｏｘａｍｅｒ）（１８４、１８８など）、プルロニック（登録商標）ポリオール、Ｔｒｉｔｏｎ（登録商標）、ポリオキシエチレンソルビタンモノエーテル（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−８０など）、ラウロマクロゴール４００、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレン水素化ヒマシ油１０、５０及び６０、モノステアリン酸グリセロール、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロース及びカルボキシメチルセルロースが挙げられる。使用され得るアニオン性界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム及びスルホン酸ジオクチルナトリウムが挙げられる。カチオン性界面活性剤としては、塩化ベンザルコニウム又は塩化ベンゼトニウムが挙げられる。

【0108】

タンパク質安定性を測定するための様々な分析技術は、当技術分野で利用可能であり、例えば、Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，２４７−３０１，Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｌｅｅ Ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，Ｐｕｂｓ．（１９９１）及びＪｏｎｅｓ，Ａ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．１０：２９−９０（１９９３）で概説されている。安定性は、選択された時間にわたり選択された温度で測定され得る。所定の実施態様では、本製剤は、約４０℃で少なくとも約２から４週間にわたり安定であり、及び／又は約５℃で少なくとも３ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約５℃で少なくとも６ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約５℃で少なくとも１２ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約−２０℃で少なくとも３ヶ月間又は少なくとも１年間にわたり安定である。所定の実施態様では、本製剤は、約２５℃で少なくとも６ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約２５℃で１２ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約５℃で６ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約５℃で１２ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約−２０℃で少なくとも６ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は約−２０℃で少なくとも１２ヶ月間にわたり安定であり、及び／又は５℃又は−２０℃で少なくとも２年間にわたり安定である。所定の実施態様では、本製剤は、本製剤の凍結（例えば−７０℃に）及び融解後、例えば１、２又は３サイクルの凍結及び融解後、安定である。凝集物形成を評価すること（例えばサイズ排除クロマトグラフィーを使用して、濁度を測定することによって、及び／又は目視によって）；陽イオン交換クロマトグラフィー、イメージキャピラリー等電点電気泳動（ｉｃＩＥＦ）又はキャピラリーゾーン電気泳動を用いて電荷不均一性を評価することによるもの；アミノ末端又はカルボキシ末端配列分析；質量分析；還元された及びインタクトな抗体を比較するためのＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析；ペプチドマップ（例えばトリプシン又はＬＹＳ−Ｃ）分析；抗体の生物学的活性又は抗原結合機能を評価することなどを含め、様々な異なる方法で安定性を定性的に及び／又は定量的に評価し得る。不安定性は、凝集、脱アミド化（例えばＡｓｎ脱アミド化）、酸化（例えばＭｅｔ酸化）、異性化（例えばＡｓｐ異性化）、切り出し／加水分解／断片化（例えばヒンジ領域断片化）、スクシンイミド形成、不対システイン、Ｎ末端伸長、Ｃ末端プロセシング、グリコシル化の相違などのうち何れか１以上を含み得る。

【0109】

インビボ投与に対して使用しようとする製剤は滅菌状態でなければならない。これは、製剤調製前又は後の滅菌ろ過膜を通じたろ過によって容易に遂行される。

【0110】

公知の方法に従い、例えばボーラスとしての静脈内投与又は長時間にわたる持続注入によって、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内、経口、局所又は吸入経路などによって、治療剤を投与し得る。場合によっては、様々な市販の装置を用いてミニポンプ注入を通じて投与を行い得る。

【0111】

本明細書中の製剤はまた、治療されている特定の適応症に対する必要に応じて、複数の活性化合物、好ましくは互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有するもの、も含有し得る。あるいは、又は更に、本組成物は、細胞毒性剤、サイトカイン又は増殖阻害物質を含み得る。このような分子は、意図される目的に有効である量と組み合わせて適切に存在する。

【0112】

活性成分はまた、例えば、コアセルべーション技術によって又は界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルション、ナノ粒子及びナノカプセル）中の、又はマクロエマルション中の、それぞれヒドロキシメチルセルロース又はゼラチン−マイクロカプセル、及びポリ（メチルメタクリラート）マイクロカプセル中にも封入され得る。このような技術は、上出のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １８ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ中で開示される。

【0113】

持続放出製剤が調製され得る。持続放出製剤の適切な例としては、造形品の形態である、本抗体を含有する固形疎水性ポリマーの半透過性マトリクス、例えばフィルム又はマイクロカプセルが挙げられる。持続放出マトリクスの例としては、ポリエステル、ヒドロゲル（例えばポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリラート）又はポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸とγ−エチル−Ｌ−グルタミン酸とのコポリマー、非分解性エチレン酢酸ビニル、分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、例えばＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴＴＭ（乳酸−グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドから構成される注射用ミクロスフェア）など、及びポリＤ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。持続放出のための組換えタンパク質のマイクロカプセル化は、ヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、インターフェロン−（ｒｈＩＦＮ−）、インターロイキン−２及びＭＮｒｐｇ１２０を用いて良好に行われてきた。Ｊｏｈｎｓｏｎら、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２：７９５−７９９（１９９６）；Ｙａｓｕｄａら、Ｂｉｏｍｅｄ．Ｔｈｅｒ．２７：１２２１−１２２３（１９９３）；Ｈｏｒａら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ８：７５５−７５８（１９９０）；Ｃｌｅｌａｎｄ，”Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｉｎｇｌｅ Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ Ｖａｃｃｉｎｅｓ Ｕｓｉｎｇ Ｐｏｌｙｌａｃｔｉｄｅ Ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｄｅ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ”，Ｖａｃｃｉｎｅ Ｄｅｓｉｇｎ：Ｔｈｅ Ｓｕｂｕｎｉｔ ａｎｄ Ａｄｊｕｖａｎｔ Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｐｏｗｅｌｌ及びＮｅｗｍａｎ，ｅｄｓ．，（Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９５），ｐｐ．４３９−４６２；ＷＯ９７／０３６９２；ＷＯ９６／４００７２；ＷＯ９６／０７３９９；及び米国特許第５，６５４，０１０号。

【0114】

これらのタンパク質の持続放出製剤は、ポリ乳酸−コグリコール酸（ＰＬＧＡ）ポリマーが生体適合性であり、多岐にわたる生体分解特性を有するので、ポリ乳酸−コグリコール酸（ＰＬＧＡ）ポリマーを用いて開発され得る。ＰＬＧＡ、乳酸及びグリコール酸の分解産物はヒト体内で迅速に排除され得る。更に、このポリマーの分解性は、その分子量及び組成物に依存して、月から年単位で調整され得る。Ｌｅｗｉｓ，”Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ａｇｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｌａｃｔｉｄｅ／ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ ｐｏｌｙｍｅｒ”，Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ Ｐｏｌｙｍｅｒｓ ａｓ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９０），Ｍ．Ｃｈａｓｉｎ及びＲ．Ｌａｎｇｅｒ（Ｅｄｓ．）ｐｐ．１−４１。

【0115】

ポリマー、例えばエチレン−ビニルアセタート及び乳酸−グリコール酸などが１００日間を超えて分子放出可能である一方で、ある種のヒドロゲルがタンパク質を放出する時間はより短い。封入された抗体が長時間にわたり身体に留まる場合、３７℃で湿気に曝露される結果、これらは変性又は凝集し得、その結果、生物学的活性が失われ、免疫原性が変化する可能性がある。合理的なストラテジーは、関与するメカニズムに依存して安定化のために考案され得る。例えば、凝集メカニズムが、チオ−ジスルフィド交換を通じた分子間Ｓ−Ｓ結合形成であることが分かった場合、スルフヒドリル残基を修飾し、酸性溶液から凍結乾燥し、水分含量を調節し、適切な添加物を使用し、特異的なポリマーマトリクス組成物を開発することによって安定化が達成され得る。

【0116】

リポソーム又はプロテイノイド組成物も、本明細書中で開示されるタンパク質又は抗体を処方するために使用され得る。米国特許第４，９２５，６７３号及び同第５，０１３，５５６号を参照のこと。

【0117】

無毒性の「水溶性多価金属塩」の使用を通じて、本明細書中に記載のタンパク質及び抗体の安定性が促進され得る。例としては、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、Ｚｎ２＋、Ｆｅ２＋、Ｆｅ３＋、Ｃｕ２＋、Ｓｎ２＋、Ｓｎ４＋、Ａｌ２＋及びＡｌ３＋が挙げられる。上記の多価金属カチオンと水溶性塩を形成し得る、例となる陰イオンとしては、無機酸及び／又は有機酸から形成されるものが挙げられる。このような水溶性塩の水中での溶解度（２０℃）は、少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬ、あるいは少なくとも約１００ｍｇ／ｍＬ、あるいは少なくとも約２００ｍｇ／ｍＬである。

【0118】

「水溶性多価金属塩」を形成させるために使用し得る適切な無機酸としては、塩酸、酢酸、硫酸、硝酸、チオシアン酸及びリン酸が挙げられる。使用し得る適切な有機酸としては、脂肪族カルボン酸及び芳香族酸が挙げられる。この定義内の脂肪族酸は、飽和又は不飽和Ｃ２−９カルボン酸（例えば脂肪族モノ、ジ及びトリカルボン酸）として定義され得る。例えば、この定義内の代表的なモノカルボン酸としては、飽和Ｃ２−９モノカルボン酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ペラルゴン酸及びカプリオン酸（ｃａｐｒｙｏｎｉｃ）並びに不飽和Ｃ２−９モノカルボン酸、アクリル酸、プロプリオル酸（ｐｒｏｐｒｉｏｌｉｃ）、メタクリル酸、クロトン酸及びイソクロトン酸が挙げられる。代表的なジカルボン酸としては、飽和Ｃ２−９ジカルボン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸及びピメリン酸が挙げられ、一方で不飽和Ｃ２−９ジカルボン酸としては、マレイン酸、フマル酸、シトラコン酸及びメサコン酸が挙げられる。代表的なトリカルボン酸としては、飽和Ｃ２−９トリカルボン酸、トリカルバリル酸及び１，２，３−ブタントリカルボン酸が挙げられる。更に、この定義のカルボン酸はまた、ヒドロキシカルボン酸を形成するための１又は２個のヒドロキシル基も含有し得る。代表的なヒドロキシカルボン酸としては、グリコール酸、乳酸、グリセリン酸、タルトロン酸、リンゴ酸、酒石酸及びクエン酸が挙げられる。この定義内の芳香族酸としては、安息香酸及びサリチル酸が挙げられる。

【0119】

封入された本発明のポリペプチドの安定化を促進するために使用され得る一般に用いられる水溶性多価金属塩としては、例えば：（１）ハロゲン化物の無機酸金属塩（例えば塩化亜鉛、塩化カルシウム）、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩及びチオシアン酸塩；（２）脂肪族カルボン酸金属塩（例えば酢酸カルシウム、酢酸亜鉛、プロプリオン酸カルシウム（ｃａｌｃｉｕｍ ｐｒｏｐｒｉｏｎａｔｅ）、グリコール酸亜鉛、乳酸カルシウム、乳酸亜鉛及び酒石酸亜鉛）；及び（３）安息香酸塩の芳香族カルボン酸金属塩（例えば安息香酸亜鉛）及びサリチル酸塩が挙げられる。

【0120】

所定の実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、例えば、自己注射装置、自己注入装置又は自己投与用に設計された他の装置を用いて投与される。所定の実施態様では、抗ＩＬ１３抗体は、皮下投与デバイスを用いて投与される。自己注入装置を含む様々な自己注射装置及び皮下投与デバイスは当技術分野で公知であり、市販されている。代表的な装置としては、プレフィルドシリンジ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎからの、ＢＤ ＨＹＰＡＫ ＳＣＦ（登録商標）、ＲＥＡＤＹＦＩＬＬ（商標）及びＳＴＥＲＩＦＩＬＬ ＳＣＦ（商標）；ＢａｘｔｅｒからのＣＬＥＡＲＳＨＯＴ（商標）コポリマープレフィルドシリンジ；及びＷｅｓｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓから入手可能なＤａｉｋｙｏ Ｓｅｉｋｏ ＣＲＹＳＴＡＬ ＺＥＮＩＴＨ（登録商標）プレフィルドシリンジなど）；使い捨てペン型注射装置、例えばＢｅｃｔｏｎ ＤｉｃｋｉｎｓｏｎからのＢＤ Ｐｅｎなど；ウルトラシャープ及び極微針装置（Ｂｅｃｔｏｎ ＤｉｃｋｉｎｓｏｎからのＩＮＪＥＣＴ−ＥＡＳＥ（商標）及び微小注入装置；及びＶａｌｅｒｉｔａｓから入手可能なＨ−ＰＡＴＣＨ（商標）など）並びに針なし注射装置（Ｂｉｏｊｅｃｔから入手可能なＢＩＯＪＥＣＴＯＲ（登録商標）及びＩＪＥＣＴ（登録商標）；及びＭｅｄｔｒｏｎｉｃから入手可能なＳＯＦ−ＳＥＲＴＥＲ（登録商標）及びパッチ装置など）が挙げられるが、これらに限定されない。皮下投与デバイスのある一定の実施態様は、本明細書中で更に記載されている。このような自己注射装置又は皮下投与デバイスでの、少なくとも第二の治療用化合物との抗ＩＬ１３抗体の同時処方又は同時投与が想定される。

【0121】

組換え法
抗体は、例えば米国特許第４８１６５６７号に記載のように、組換え法及び組成物を用いて作製され得る。一実施態様では、本明細書中に記載の抗ＩＬ１３抗体をコードする単離核酸が提供される。このような核酸は、抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び／又はＶＨを含むアミノ酸配列をコードし得る（例えば抗体の軽及び／又は重鎖）。更なる実施態様において、このような核酸を含む１以上のベクター（例えば発現ベクター）が提供される。更なる実施態様において、このような核酸を含む宿主細胞が提供される。あるこのような実施態様において、宿主細胞は、（１）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含むベクター又は（２）抗体のＶＬを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第一のベクター及び抗体のＶＨを含むアミノ酸配列をコードする核酸を含む第二のベクターを含む（例えばこれらで形質転換されている。）。一実施態様では、宿主細胞は、真核細胞、例えばチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞又はリンパ系細胞（例えばＹ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。一実施態様では、抗ＩＬ１３抗体を作製する方法が提供されるが、この方法は、抗体の発現に適切な条件下で上記で提供されるように抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を培養し、場合によっては宿主細胞（又は宿主細胞培養液）から抗体を回収することを含む。

【0122】

抗ＩＬ１３抗体の組換え産生のために、例えば上述のような抗体をコードする核酸を単離し、宿主細胞での更なるクローニング及び／又は発現のために１以上のベクターに挿入する。このような核酸は、従来の手順を用いて容易に単離され、配列決定され得る（例えば抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能なオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）。

【0123】

抗体をコードするベクターのクローニング又は発現のための適切な宿主細胞としては、本明細書中に記載の原核又は真核細胞が挙げられる。例えば、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要でない場合、抗体を細菌中で産生させ得る。細菌中の抗体断片及びポリペプチドの発現については、例えば米国特許第５６４８２３７号、同第５７８９１９９号及び同第５８４０５２３号を参照のこと。（Ｅ．コリにおける抗体断片の発現を記載する、Ｃｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５−２５４も参照のこと。）。発現後、この抗体を可溶性分画中の細菌の細胞ペーストから単離し得、更に精製し得る。

【0124】

原核生物に加えて、グリコシル化経路が「ヒト化」されている真菌及び酵母株を含め、真核微生物、例えば線維状真菌又は酵母などは、抗体をコードするベクターに対する適切なクローニング又は発現宿主であり、その結果、部分的又は完全にヒトグリコシル化パターンを有する抗体が産生される。Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９−１４１４（２００４）及びＬｉら、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０−２１５（２００６）を参照のこと。

【0125】

グリコシル化抗体の発現に適切な宿主細胞はまた、多細胞生物（無脊椎動物及び脊椎動物）由来でもある。無脊椎動物細胞の例としては、植物及び昆虫細胞が挙げられる。特にスポドプテラ・フルギペルダ（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）細胞の遺伝子移入のための、昆虫細胞と合わせて使用され得る多数のバキュロウイルス株が同定されている。

【0126】

植物細胞培養物も宿主として利用できる。例えば米国特許第５９５９１７７号、同第６０４０４９８号、同第６４２０５４８号、同第７１２５９７８号及び同第６４１７４２９号（トランスジェニック植物における抗体産生のためのＰＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳＴＭ技術を記載）を参照のこと。

【0127】

脊椎動物細胞も宿主として使用し得る。例えば、縣濁液中で増殖するよう適応させられている哺乳動物細胞株は有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ−７）により形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株；ヒト胚性腎臓株（例えばＧｒａｈａｍら、Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７）に記載のような２９３又は２９３細胞）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞（例えばＭａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３−２５１（１９８０）に記載のようなＴＭ４細胞）；サル腎臓細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ；バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝臓細胞（ＨｅｐＧ２）；マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ０６０５６２）；例えばＭａｔｈｅｒら、Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４−６８（１９８２）に記載のようなＴＲＩ細胞；ＭＲＣ５細胞；及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞株としては、ＤＨＦＲ−ＣＨＯ細胞を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（Ｕｒｌａｕｂら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７７：４２１６（１９８０））；及び骨髄腫細胞株、例えばＹ０、ＮＳ０及びＳｐ２／０などが挙げられる。抗体産生に適切なある種の哺乳動物宿主細胞株の概説については、例えばＹａｚａｋｉ及びＷｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ），ｐｐ．２５５−２６８（２００３）を参照のこと。

【0128】

アッセイ
当技術分野で公知の様々なアッセイによって、本明細書中で提供される抗ＩＬ１３抗体を同定し、それらの物理的／化学的特性及び／又は生物学的活性についてスクリーニングするか、又は特徴を評価し得る。

【0129】

結合アッセイ及び他のアッセイ
ある態様において、例えばＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロットなどの公知の方法によって、抗ＩＬ１３抗体をその抗原結合活性について試験する。

【0130】

別の態様では、ＩＬ１３への結合に対して抗ＩＬ１３抗体と競合する抗体を同定するために競合アッセイを使用し得る。所定の実施態様では、このような競合抗体は、レブリキズマブ又は本明細書中で特定される別の抗ＩＬ１３抗体が結合する同じエピトープ（例えば直鎖状又は立体構造エピトープ）に結合する。抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な代表的方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）「Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ」，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．６６（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）において提供される。

【0131】

代表的な競合アッセイにおいて、ＩＬ１３に結合する第一の標識化抗体（例えばレブリキズマブ）と、ＩＬ１３への結合に対する第一の抗体とのその競合能について試験される第二の非標識抗体と、を含む溶液中で固定化ＩＬ１３を温置する。第二の抗体はハイブリドーマ上清中に存在し得る。対照として、第一の標識化抗体を含むが第二の非標識抗体を含まない溶液中で固定化ＩＬ１３を温置する。第一の抗体のＩＬ１３への結合を許容する条件下での温置後、過剰な未結合の抗体を除去し、固定化ＩＬ１３と会合する標識量を測定する。固定化ＩＬ１３と会合する標識量は、対照試料と比較して試験試料中では実質的に減少し、このことから、第二の抗体がＩＬ１３への結合に対して第一の抗体と競合していることを示す。Ｈａｒｌｏｗ及びＬａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ｃｈ．１４（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ）を参照のこと。

【0132】

活性アッセイ
ある態様において、生物学的活性を有する抗ＩＬ−１３抗体を同定するために、アッセイが提供される。生物学的活性には、例えば喘息における活性が含まれ得る。インビボ及び／又はインビトロでこのような生物学的活性を有する抗体も提供される。所定の実施態様では、このような生物学的活性について本発明の抗体が試験される。

【0133】

製造品及びキット
本製剤を含有し、その使用に対する説明書を提供する製造品が提供される。本製造品は、容器を含む。適切な容器としては、例えば、瓶、バイアル（例えば二重チャンバーバイアル）、シリンジ（単一又は二重チャンバーシリンジなど）及び試験管が挙げられる。本容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。本容器は製剤を保持し、本容器上にあるか又は本容器と連結されるラベルは、再構成及び／又は使用に対する指示を示し得る。本ラベルは、製剤が皮下投与に対し有用であるか又は対象としたものであることを更に示し得る。製剤を保持する容器はマルチユースバイアルであり得、これにより再構成された製剤の反復投与（例えば２から６回投与）が可能となる。本製造品は、適切な希釈剤（例えばＢＷＦＩ）を含む第二の容器を更に含み得る。希釈剤及び凍結乾燥製剤の混合時、再構成された製剤中の最終タンパク質濃度は一般に少なくとも５０ｍｇ／ｍＬとなろう。本製造品は、使用のための説明書とともに、他のバッファー、希釈液、フィルター、針、シリンジ及び添付文書を含め、商業上及びユーザーの観点から望ましい他の材料を更に含み得る。

【0134】

所定の実施態様では、均一用量の抗ＩＬ１３抗体を患者に送達する皮下投与デバイスを含む製造品が提供され、この均一用量は、例えば３７．５ｍｇ、７５ｍｇ又は１２５ｍｇ又は１５０ｍｇであるが限定されない。所定の実施態様では、本抗ＩＬ１３抗体はレブリキズマブである。皮下投与デバイス中の抗ＩＬ１３抗体は、バッファー、例えば、ヒスチジンｐＨ５．７及び他の賦形剤、例えば、スクロース及びポリソルベート中で処方され、これが安定な製剤処方中で提供されるようになる。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、針及び場合によっては、ニードルシールド及びまた場合によってはニードルシールド装置付きのガラスバレルを含むプレフィルドシリンジである。所定の実施態様では、シリンジ中に含有される体積は、０．５ｍＬ、１ｍＬ、１．５ｍＬ又は２．０ｍＬ又は約０．５ｍＬ、約１ｍＬ、約１．５ｍＬ又は約２．０ｍＬである。所定の実施態様では、針は、３ベベルチップ又は５ベベルチップを含む固定針である。所定の実施態様では、針は２５ゲージ（Ｇ）から３０Ｇの間である。所定の実施態様では、針は、１／２インチ長から５／８インチ長の間である。一実施態様では、皮下投与デバイスは、プレフィルド１．０ｍＬ低タングステンホウケイ酸ガラス（タイプＩ）シリンジ及びステンレス鋼５ベベル２７Ｇ１／２インチ長の薄壁固定針を含む。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、剛性のニードルシールドを含む。所定の実施態様では、剛性のニードルシールドは、亜鉛含量が低いゴム配合物、例えば、ＦＭ２７／０（Ｄａｅｔｗｙｌｅｒ）を含み、剛性のポリプロピレンシールドを含む。所定の実施態様では、プランジャーロッドはゴム製プランジャーストッパーを含む。所定の実施態様では、ゴム製プランジャーストッパーは、４０２３／５０ゴム及びＦｌｕｒｏＴｅｃ（登録商標）エチレン−テトラフルオロエチレン（ＥＴＦＥ）コーティング（Ｗｅｓｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ．）を含む。所定の実施態様では、皮下投与デバイスは、針安全装置を含む。代表的な針安全装置としては、Ｕｌｔｒａｓａｆｅ Ｐａｓｓｉｖｅ（登録商標）Ｎｅｅｄｌｅ Ｇｕａｒｄ Ｘ１００Ｌ（Ｓａｆｅｔｙ Ｓｙｒｉｎｇｅｓ，Ｉｎｃ．）及びＲｅｘａｍ Ｓａｆｅ ｎ Ｓｏｕｎｄ（商標）（Ｒｅｘａｍ）が挙げられるが、これらに限定されない。

【0135】

皮下送達に適切な更なる装置としては、例えば、注射装置、例えばＩＮＪＥＣＴ−ＥＡＳＥ（商標）及びＧＥＮＪＥＣＴ（商標）装置など；注入ポンプ、例えばＡＣＣＵ−ＣＨＥＣＫ（商標）など；ペン型注射器、例えばＧＥＮＰＥＮ（商標）など；針なし装置、例えばＭＥＤＤＣＴＯＲ（商標）及びＢＩＯＪＥＣＴＯＲ（商標）など；自己注射器及び皮下パッチ送達系が挙げられるがこれらに限定されない。

【0136】

キットは、一般的には、上述の容器及び、バッファー、希釈液、フィルター、針、シリンジ及び使用のための説明がある添付文書を含め、商業上及びユーザーの観点から望ましい材料を含む１以上の他の容器を含む。本組成物が特定の治療に使用されることを示すために容器上にラベルが存在し得る。

【実施例】

【0137】

次のものは、本発明の製剤及び方法の例である。上記で提供される全般的な記述を考慮すると、様々な他の実施態様が実施され得ることが理解される。

【0138】

実施例１
材料及び方法
材料及び試料調製手順
ヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である抗ＩＬ１３を除き、下記で記載される実験において使用される他の抗体は全て、ヒト化ＩｇＧ１モノクローナル抗体であった。モノクローナル抗体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株において発現させ、タンパク質Ａ及びイオン交換クロマトグラフィー法を含め一連の標準的なクロマトグラフィー段階により精製した。溶液バッファー及び安定化剤が添加された接線流ろ過から濃縮溶液として精製抗体を得た。これらを、下記の研究のための出発材料として使用する保存用抗体溶液とした。

【0139】

これらの保存用ｍＡｂ出発材料を更なる使用まで２から８℃で保存した。ｍＡｂ溶液の更なる調製には、大きな微粒子を除去するための低イオン強度バッファーに対する透析及び０．２２μｍの改良ＰＶＤＦ（ポリビニリデンフルオリド）フィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｔｅｒｉｆｌｉｐ，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐ．，ＭＡ）を通じたろ過が含まれた。一般的には、透析後に１４０から１５０ｍｇ／ｍＬのｍＡｂ濃度を得た。より高いｍＡｂ濃度を得るために、２７００ｒｐｍで遠心してＡｍｉｃｏｎ ＹＭ３０ Ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐ，ＭＡ）の濃縮装置で１０ｍＬのｍＡｂを濃縮した。重力による希釈及び２８０ｎｍでの吸収率（Ａ２８０）及び１ｃｍ経路長のクオーツキュベット中での、Ａｇｉｌｅｎｔダイオードアレイ分光光度計モデル８４５３を用いた２８０ｎｍでのＵＶ吸収測定を使用することによって、透析し、遠心で濃縮した調製物の最終ｍＡｂ濃度を決定した。定量的アミノ酸分析によって減衰係数を調べた。

【0140】

層流フード中での、既知の保存溶液濃度の重量測定による希釈によって、２０ｍＬシンチレーションバイアル中で、０．５から２７５ｍｇ／ｍＬにわたる光散乱実験用のモノクローナル抗体溶液を調製した。シンチレーションバイアルは全て、脱イオン水で慎重に洗浄し、ろ過済みの圧縮窒素気流中で乾燥させた。タンパク質溶液に添加する前に、０．１０μｍ Ｗｈａｔｍａｎ Ａｎｏｔｏｐ２５フィルターに通して全バッファー及び試薬溶液を更にろ過した。試料の調製又は希釈後、ｍＡｂ溶液を均一になるように混合し、制御室温で２時間にわたり熱的及び化学的平衡に到達させた。タンパク質溶液を室温で３０００ｒｐｍで２０から３０分間遠心し、光散乱に対する使用前に偶発的な塵及び泡を溶液から除去した。光散乱シグナルが最低限のノイズを示すまで、高濃度の溶液（ｍＡｂ＞１７０ｍｇ／ｍＬ）ほど長い時間遠心した。バイアルの表面欠陥からの不要な散乱を減少させるためにシンチレーションバイアルの外面をシリコーン油で薄く被覆した。上記のように調製した試料を測定のために光散乱測定器に直接置いた。

【0141】

マルチアングル光散乱によるＢ_２の測定
光散乱用の試料調製では、ＭｉｌｌｉＱ水で洗浄し、ろ過済み窒素気流下で乾燥させた２０ｍＬのＴｅｆｌｏｎ（登録商標）で裏打ちされた隔壁キャップバイアルを使用した。およそ８０ｍｇ／ｍＬの適切な体積の保存用ｍＡｂ溶液を採取し、最初に適切なバッファーでおよそ８ｍｇ／ｍＬに希釈し、次いで２０ｍＬの０．２μｍろ過済みバッファーで最終希釈を行うことによって、様々な濃度の試料を調製した。測定開始前に、各バッファー状態に対する全部で８種類のタンパク質濃度（０．０５から１．１ｍｇ／ｍＬ ｍＡｂ）を室温で１４から１８時間平衡化した。測定は全て、タンパク質濃度が漸増する一連の溶液として行い、各実験は３つ組で行った。２５ｍｍ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）溶媒フィルター（ＰＶＤＦ、０．１μｍ）付きのＡｇｉｌｅｎｔ溶媒脱気装置及びアイソクラチックポンプ（Ａｇｉｌｅｎｔ，Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，ＣＡ）を０．５ｍＬ／分の連続流速で使用した。試料注入は、２ｍＬ注入ループ及び０．１μｍ、１０ｍＭ ＰＶＤＦ膜付きのＷｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｄｅｕｔｓｃｈｌａｎｄインラインマイクロフィルターを用いて構成されるＧｉｌｓｏｎ ＧＸ２８１（Ｇｉｌｓｏｎ，Ｉｎｃ．，Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ ＷＩ）液体処理ユニットで自動化した。２８０ｎｍで測定するＡｇｉｌｅｎｔ ＭＷＤ ＵＶ検出器、続いて増幅率を２１ｘに低下させた１８−アングルＥＯＳ ＭＡＬＳ検出器（Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓａｎｔａ Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）を用いて、濃度及び光散乱測定を順次行った。データを得て、Ａｓｔｒａ（商標）４．９０．０７（ＷＴＣ）ソフトウェアで処理し、スライス結果を転送することによって更なる分析を行った。データの直線回帰フィッティングを行い、濃度に対するＫ^＊ｃ／Ｒ（θ＝０）／Ｋ^＊ｃ／又は１／Ｍ_Ｗａｐｐのプロットから、勾配＝２Ｂ_２及び１／Ｍｗｏの切片、無限希釈での重量平均分子量が得られる。

【0142】

高濃度マルチアングル静的光散乱（ＳＬＳ）
２３℃の水冷式ペルチェ温度制御セットを用いた全静的光散乱測定のために、Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｓａｎｔａ Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）からの３０ｍＷ固体レーザー（λ＝６９０ｎｍ）付きの１８−アングルＤａｗｎ ＥＯＳ光散乱検出器を使用した。９９．９％トルエン（クロマトグラフィーグレード）を用いてこの機器を較正した。典型的なシンチレーションバイアル実験の場合、３８°から１４８°の固定角度で、全ての光ダイオードに対して１ｘの検出器増幅率設定を使用した。抗ＣＤ１１ａの回転半径（Ｒｇ）は１０ｎｍ未満なので、各実験の終了時に２１ｘの光ダイオード検出器の増幅率設定を使用して９０°検出器に対する光ダイオードの角度依存性を正規化するために、抗ＣＤ１１ａの希釈溶液（１から２ｍｇ／ｍＬ）を各塩濃度で使用した。０．５ｍｇ／ｍＬから２７５ｍｇ／ｍＬのｍＡｂ濃度の関数として、及びＮａＣｌ濃度（０から６００ｍＭ）の関数として、静的光散乱強度の測定を行った。１２点／分の頻度のデータ回収で、５から１０分の間隔で各試料／バイアルに対する散乱データを回収した。Ａｓｔｒａ４．９０．０７ソフトウェア（Ｗｙａｔｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓａｎｔａ Ｂａｒｂａｒａ，ＣＡ）を使用して静的光散乱データを得て、処理し、計算に対して０．１８５のｄｎ／ｄｃ値を適用し、スライス結果として転送し得た。Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ，Ｏｒｉｇｉｎ ｖ７．５及びＭＡＴＬＡＢ Ｒ１４において、転送された結果を用いた更なる分析及び計算を行った。高濃度光散乱データについては、分子量の増加が濃度依存性の可逆的な自己会合の存在に相当した場合、Ｍ_Ｗａｐｐ対ｍＡｂ濃度の形式の結果を解釈することがより容易であることが多かった。（例えばＳｃｈｅｒｅｒ，Ｔ．Ｍ．，ら、Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｂ１１４（４０）：１２９４８−１２９５７（２０１０）；Ｍｉｎｔｏｎ，Ａ．Ｐ．，ＪＰｈａｒｍ Ｓｃｉ ９６（１２）：３４６６−９（２００７）；Ｍｉｎｔｏｎ，Ａ．Ｐ．Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ９３（４）：１３２１−１３２８（２００７）を参照のこと。

【0143】

ＵＶ分光法による濁度
Ａｇｉｌｅｎｔ８４５３分光光度計を使用することによって、高濃度光散乱実験からの試験タンパク質溶液に対する、及びｐＨスクリーニング実験からのタンパク質溶液に対する濁度を（それぞれ以下で更に記載のように）周囲温度で測定した。波長３５０ｎｍでの吸収の平均として濁度を計算したが、３４０ｎｍから３６０ｎｍの波長範囲にわたる５ｎｍ増分での吸収値の合計を５で除した。１ｃｍ経路長の小体積クオーツキュベット中でタンパク質溶液の測定を行った。６９０ｎｍでの吸収も記録した。

【0144】

溶融温度（Ｔｍ）のキャピラリー示差走査熱量測定（ＤＳＣ）の特徴評価
ＭｉｃｒｏＣａｌキャピラリー示差走査熱量計を使用することによって、タンパク質の熱立体構造安定性を評価した。バッファー中でＭＡｂを１ｍｇ／ｍＬに希釈した。５００μＬのタンパク質及びその適合バッファーを９６ウェルプレートに入れた。６０℃／時の走査速度で１５から９５℃に温度を上昇させながら、熱容量を監視した。ＶＰＶｉｅｗｅｒ ２０００ Ｃａｐ ＤＳＣを使用してデータを得て、ＭｉｃｒｏＣａｌ，ＬＬＣ ＤＳＣ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓを使用してデータを分析した。Ｙａｄａｖ，Ｓ．ら、Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ．９９（３）：１１５２−６８（２０１０）を参照のこと。

【0145】

比濁法
散乱強度の９０°検出を行うＨＡＣＨ（モデル２１００ＡＮ ＩＳ）Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｅｒ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔを使用して比濁測定を行った。０から０．５の相対濁度標準濃度でＦｏｒｍａｚｉｎ ｓｔａｎｄａｒｄ ４０００ネフェロメ濁度単位（ＮＴＵ）保存溶液を用いて検出器を較正した。試料をキュベットに入れ、２つ組で測定し、試料の平均ＮＴＵを報告した。

【0146】

レオロジー
円錐及び平板測定系を使用して、ＭＣＲ３００レオメータ（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ，Ａｓｈｌａｎｄ，ＶＡ）により試料の粘度を測定した。試料を下の測定プレート上に載せ、２５℃で熱平衡に来るようにした。溶媒蒸発を防ぐために、溶媒トラップを使用した。試料には、２サイクルのせん断速度掃引（各サイクルは、１０秒^−１から１０００秒^−１に一定の比率で上昇、１０００秒^−１で１分間維持、１０００秒^−１から１０秒^−１に一定の比率で下降させることを含む。）を行った。サイクル間に１分間の休止が１回ある。報告値は、一つの試料の２回の１０００秒^−１でのせん断速度掃引の平均である。エラーバーは、ミリパスカル−秒（ｍＰａｓ）の単位の２回の走査の標準偏差を表す。１０００秒^−１で全部で２分間、試料をせん断応力下に置いた。発明者らは１０００秒^−１を選んだが、これは、この範囲（２００秒^−１＜せん断速度＜２０００秒^−１）で、粘度がせん断速度に比較的依存しないからである。ある一つの試料の２つのアリコート間の粘度の相違は１０００秒^−１で±０．５ｍＰａ以内であった。ＵＳ２００ソフトウェア（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ，Ａｓｈｌａｎｄ，ＶＡ）を使用して各せん断速度での測定時間を最適化した。

【0147】

曇り点温度測定
液体−液体相分離（ＬＬＰＳ）が起こる系の場合、温度が低下する結果、一つの液相の液滴が他方の相において形成される。これらの液滴が形成される温度は、曇り点温度と呼ばれ、顕微鏡によるか又は溶液の透過性を監視することによるかの何れかで、実験的に測定され得る。ここに記載の実験の場合、曇り点温度は、Ａｖｉｖ １４ＤＳ分光光度計（Ａｖｉｖ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ，Ｌａｋｅｗｏｏｄ，ＮＪ）における温度の関数として６００ｎｍでの透過性の喪失を監視することによって決定した。５ｍｍ平方のキュベットにおよそ０．６ｍＬの抗体溶液を満たした。熱電冷却器を用いて０．５℃の刻み幅で２５℃から０℃まで温度を低下させた。透過性を記録する前に各温度で試料を１０分間平衡化した。曇り点温度は、％透過率が出発値の５０％まで低下した温度とした（Ａｓｈｅｒｉｅ，２００４）。Ａｖｉｖ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌモデル１４Ｓ ＵＶ−Ｖｉｓ分光光度計を使用することによって、様々なタンパク質濃度及び様々な実験溶液での抗ＩＬ１３相分離に対するＴｃを測定した。２５℃から０℃の温度スキャンで、−０．５℃の刻み幅で、６００秒の平衡時間及び６００ｎｍの波長で、温度データに対する％透過率を回収した。１ｃｍ経路長のクオーツキュベット中でタンパク質溶液の測定を行った。

【0148】

サイズ排除クロマトグラフィー
凝集物及び断片を定量するために、サイズ排除クロマトグラフィーを使用した。このアッセイは、ＴＳＫ Ｇ３０００ ＳＷＸＬＴＭ、７．８Ｘ３００ｍｍカラムを利用し、２５℃にてＨＰ１１００ＴＭ ＨＰＬＣ系で行った。移動相で試料を２ｍｇ／ｍＬに希釈し、注射体積を２５μＬとした。移動相は、０．２Ｍ Ｋ_２ＨＰＯ_４、０．２５Ｍ ＫＣｌ、ｐＨ６．２であり、３０分間にわたり０．５ｍＬ／分の一定流速でタンパク質を溶出した。２８０ｎｍで溶出液吸収を監視した。ＨＰ ＣＨＥＭＳＴＡＴＩＯＮＭ（商標）ソフトウェアを用いて積分を行った。

【0149】

画像化キャピラリー等電点電気泳動（ｉｃＩＥＦ）
抗ＩＬ１３抗体安定性試料の電荷（酸性及び塩基性）変異を定量するために、ｉｃＩＥＦを使用して試料をアッセイした。この方法では、ＰｒｉｎＣＥマイクロインジェクター付きのｉＣＥ２８０Ａｎａｌｙｚｅｒ（Ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）においてフルオロカーボン被覆キャピラリー（Ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を使用した。ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから陽極液及び陰極液の溶液を購入し；Ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ ＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅからｐＩマーカーの溶液を購入した。）。

【0150】

キャピラリー電気泳動−ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ−ＳＤＳ）
４８８ｎｍ励起のＬＩＦ検出器を備える、２０から４０±２℃でキャピラリー温度調節が可能なＢｅｃｋｍａｎ Ｐ／ＡＣＥ ＭＤＱ又はＰＡ８００キャピラリー電気泳動系を使用してＣＥ−ＳＤＳを行った。

【0151】

抗ＩＬ１３抗体効力アッセイ
ヒト気管支上皮細胞株、Ｌ−Ｂｅａｓ−２Ｂ細胞（ＡＴＣＣより入手可能、ＡＴＣＣカタログ番号ＣＲＬ−９６０９（商標））において抗ＩＬ１３抗体溶液のＩＬ−１３誘導性ルシフェラーゼ発現阻害能を測定する細胞培養アッセイを使用して、抗ＩＬ１３抗体溶液の生物学的活性又は効力を評価した。様々な濃度の抗ＩＬ１３抗体標準物質、対照及び試料を固定濃度のＩＬ−１３（例えばｒｈｕ−ＩＬ１３、Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ、カタログ番号２００−１３）と混合し、２ｘ１０^５細胞／ｍＬの濃度でＬ−Ｂｅａｓ−２Ｂ細胞が播種されている９６−ウェルプレートに添加した。温置後、製造者の説明書（Ｂｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイ系、Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｅ２６２０、Ｅ２６５０又はＢｒｉｔｅ−Ｌｉｔｅ Ｐｌｕｓ，Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ カタログ番号６０１６７６１）に従い、発光ルシフェラーゼ基質を使用して、ルシフェラーゼ発現を定量した。各抗体溶液に対する希釈曲線を作成し、参照物質と比較した。その結果を相対的発光単位（ＲＬＵ）として表した。最小二乗及び平行線分析プログラムの方法を使用して、相対効力推定値を計算した。相対効力推定値に参照物質の比活性を乗じることによって、％比活性を計算した。

【0152】

抗ＩＬ１３抗体（レブリキズマブ）アミノ酸配列
以下の表は、ＶＨ、ＶＬ、重鎖配列及び軽鎖配列とともに、レブリキズマブのＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２、ＣＤＲ−Ｈ３、ＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３領域のアミノ酸配列を示す。以下の表１で示されるように、ＶＨ及び重鎖は、Ｎ末端グルタミンを含み得、重鎖はまた、Ｃ末端リジンも含み得る。当技術分野で周知であるように、Ｎ末端グルタミン残基はピログルタミン酸を形成し得、Ｃ末端リジン残基は、製造過程中に切り出され得る。

【0153】

表１．抗ＩＬ１３抗体（レブリキズマブ）アミノ酸配列

【0154】

結果
様々なｐＨでの抗ＩＬ１３抗体製剤の物理的及び化学的安定性
５．４から７．８のｐＨ範囲をカバーするために、２０ｍＭヒスチジンアセテート又は２０ｍＭリン酸ナトリウムの何れかを使用して様々なｐＨのバッファーを調製した。ヒスチジンアセテートバッファーは５．４から６．０のｐＨ範囲をカバーし、リン酸ナトリウムバッファーは６．６から７．８のｐＨ範囲をカバーした。各バッファーｐＨに対して、次のものを一定に保持した：１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＬ１３抗体濃度、１７５ｍＭスクロース及び０．３ｍｇ／ｍＬ（０．０３％）ポリソルベート２０。

【0155】

以下の表２で示される時間及び温度でバイアル中で抗体溶液を保存した。様々な時間において、表２で「Ｘ」により示されるが、ＳＥＣ、Ａ３５０濁度及び非還元ＣＥ−ＳＤＳを含む物理的安定性を評価するための、及びｉｃＩＥＦを含む化学的安定性を評価するための様々な方法によって試料をアッセイした。

【0156】

表２．物理的及び化学的安定性抗ＩＬ１３抗体溶液を判定するために使用した、安定性時間点及び条件

【0157】

図１は、ＳＥＣにより測定した場合の、指定ｐＨでのバッファー中での１週間あたりのパーセント単量体喪失を示す。図１で示されるように、より高いｐＨ範囲よりも、より低いｐＨ範囲で％単量体喪失が少なくなり、％単量体喪失が最小だったのはｐＨ５．７であり、０．０５６の％単量体喪失／週を示した。

【0158】

別の物理的安定性アッセイでは、ｐＨの関数として、３０℃での経時的な（Ａ３５０により測定した場合の）濁度の変化を測定した。図２で示されるように、最初の濁度及び変化は、ｐＨ５．４から６．０の間のバッファーに対して、より高いｐＨ範囲の場合よりも大きくなる。図２において、ニート（ｎｅａｔ）濁度は、Ａ３５０＝１／Ｔ（式中、Ｔは、１ｃｍという規定の経路長の３５０ｎｍでの透過光強度である。）である。

【0159】

第三の物理的安定性アッセイでは、ｐＨの関数として、抗ＩＬ１３抗体溶液において、３０℃での６週間の保存中の、低分子量（ＬＭＷ）可溶性断片及び高分子量（ＨＭＷ）凝集体の増加を測定した。図３で示されるように、より低いｐＨ範囲、ｐＨ５．４から６．６で、断片化速度及び凝集速度が最低になった。

【0160】

発明者らはまた、ｐＨの関数として、３０℃での経時的な酸性及び塩基性変異体形成速度の変化（図４）及び、ｐＨの関数として、３０℃での経時的な塩基性変異体及び主要ピーク喪失の速度の変化（図５）を調べるためにｉｃＩＥＦを使用して、化学的安定性も評価した。図４で示されるように、酸性変異体の速度は低ｐＨ範囲で最小となり、高ｐＨ範囲で最大となり、一方で塩基性変異体（ＢＶ１ピーク）の速度は高ｐＨ範囲で最小となり、低ｐＨ範囲で最大となった。図５で示される結果から、ｐＨ５．４から６．０の間で主要ピーク喪失が最小限となったことが示される。

【0161】

ｐＨが溶液粘度に影響を与えるか否かを調べるために、発明者らは、様々なｐＨ（ｐＨ５．５から７．２の範囲）で様々な抗ＩＬ１３抗体濃度（０から２００ｍｇ／ｍＬ抗体の範囲）のレオロジー特性評価を行った。各溶液には、１７５ｍＭスクロース及び０．３ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０が含まれた。結果を図６で示す。これらの結果により、ある抗体濃度に対する溶液ｐＨにかかわらず、一貫した粘度プロファイルが維持されたことが示される。特に、この結果から、より高い抗体濃度ではｐＨにより粘度に影響が及ぼされなかったことが示された。

【0162】

まとめると、図１から６で与えられるデータから、ｐＨ５．４から６．０での殆どの物理的及び化学的変化に対して勾配が浅かったことが示される。従って、ｐＨ５．７の２０ｍＭヒスチジンアセテートバッファーをその後の研究及び製剤評価のために選択した。

【0163】

高濃度モノクローナル抗体溶液のレオロジー特性評価
２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．７、１７５ｍＭスクロース、０．３ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０中で１５０ｍｇ／ｍＬで処方された抗ＩＬ１３抗体に対して観察された粘度（２５℃で＜１５ｃＰ）が様々な異なる抗体に対して一般に観察されるか否かを探索するために、発明者らは、１５０ｍｇ／ｍＬの同様の製剤中の３種類の更なる抗体の粘度を試験した。抗ＩＬ１３抗体に対して観察されるようなこのような粘度プロファイルは、高抗体濃度での、薬物投与のある種の経路、例えば皮下注射のための製造に望ましい。図７で示されるように、抗ＩＬ１３抗体は、抗ＣＤ１１ａ抗体と同様の粘度プロファイルを維持し、２５℃で粘度は＜１５ｃＰであった。一方で、抗ＣＤ２０抗体及びｍＡｂ−１抗体は極めて異なる粘度プロファイルを示した。１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＤ２０抗体の粘度は、２５℃で＞１５ｃＰであり、一方でｍＡｂ−１は、図７で見られ得るとおり粘度に関する重大な問題ゆえに、このバッファー製剤中では１５０ｍｇ／ｍＬで処方できなかった。図７から、１２５ｍｇ／ｍＬでのｍＡｂ−１の粘度が２５℃で＞４５ｃＰであったことが示される。従って、このデータから、２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．７、１７５ｍＭスクロース、０．３ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０中で１５０ｍｇ／ｍＬで処方される場合、抗体によってレオロジー特性が異なるということが明らかである。

【0164】

外観及び乳白光の特徴評価
発明者らは、９０度比濁法及びＡ３５０濁度の測定を使用して、抗ＣＤ２０抗体製剤と比較した、抗ＩＬ１３抗体製剤の外観及び乳白光の特徴を評価した。図８は、ネフェロメ濁度単位（ＮＴＵ）における２種類の異なる抗体製剤の外観の定量を示す。図８において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は参照標準物質を指し、Ｒ４は最大の視覚的な乳白光の度合いを有し、Ｒ１は最小である。抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０抗体に対するＡ３５０濁度の測定は図９で示す。図９で示されるように、各抗体製剤に対して、タンパク質濃度の上昇につれて濁度が上昇した。これらの図で示される結果から、本質的に測定されるものが異なるために、特により高いタンパク質濃度で、２種類の抗体に対する外観の２種類の異なる測定が異なる傾向を有することが明らかとなる。このデータはまた、測定の傾向が、溶液乳白光が上昇しているように見えるこれらの２種類の抗体間で一致することも示す。

【0165】

発明者らは、濃度及びｐＨの関数として、抗ＩＬ１３抗体濃度も調べた。結果は図１０で示す。最大濁度を示す溶液はｍＡｂ等電点（ｐＩ）の近傍であった。

【0166】

理論により縛られるものではないが、発明者らは、これらの結果を、タンパク質吸収バンドによる光の吸収ゆえにタンパク質濃度の上昇につれて３５０ｎｍ波長（濁度）での吸収が上昇したことを示すと解釈するが、このピークの端部が広いがために２８０ｎｍ周辺で最大となった。ｍＡｂ溶液の濃度に対するＡ３５０上昇に対する第二の要因は、総透過光を減少させる、光散乱の非線形的上昇であった。

【0167】

更に、発明者らは、ｍＡｂ濃度の関数として、肉眼では見えない粒子数を評価し、これらの結果を図１１で示す。ＨＩＡＣ光遮断分析によって、＞２μｍサイズの肉眼では見えない微粒子の有意な増加は観察されず、これにより、＞２μｍの微粒子物質が抗ＩＬ１３抗体溶液の乳白光又は濁度に関与しないことが示される。図１２は、次第に孔径を小さくして（０．１μｍ又は１００ｎｍまで縮小）抗体溶液をろ過した場合の、抗ＩＬ１３抗体の１２５ｍｇ／ｍＬ溶液の比濁、濁度及び静的光散乱の測定を示す。図１１及び１２で示されるこれらの結果をまとめると、抗ＩＬ１３抗体溶液及び薬学的製剤の外観は、光散乱の濃度依存性を誘導する、肉眼では見えないか又はサブミクロンの微粒子物質により決定されるものではないことが示される。

【0168】

次に、発明者らは、１２５ｍｇ／ｍＬ及び２０４ｍｇ／ｍＬで、溶液ｐＨの関数として、溶液の外観の依存性を調べた。６００ｎｍでの透過光強度の温度走査を使用して、溶液の外観を評価した。結果は図１３で示し、これにより、抗ＩＬ１３抗体溶液乳白光は、温度低下の関数として一定のままであり、溶液成分が多岐にわたる溶解性を有し、個別の組成物の２つの分離相を形成する、液体−液体相分離などの臨界現象ゆえではなかったことが示される。このことから、典型的な保存及び／又は曝露温度の範囲にわたる溶液均一性（相分離）は、（室温での）最初の溶液乳白光／外観にかかわらず、温度によって影響を受けないことが示唆される。

【0169】

熱安定性（Ｔ_ｍｅｌｔ）実験
発明者らは、製剤組成及び溶液ｐＨの関数として、キャピラリー示差走査熱量計において、２つの部分的に分解されたピークに対する熱融解転移ピークを測定した。結果を図１４で示す。図１４で示されるように、ｐＨの関数として抗ＩＬ１３に対する最大の融解転移挙動がｐＨ６．０から７．５の間で観察された。一般的な科学的見解は、融解転移が起こるのが低いほど、何らかの期間での保存時のその系の予想される物理的安定性が低くなるというものである。例えばＣｈｉら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ １２（５）：９０３−９１３（２００３）；Ｃｈｉら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０（９）：１３２５−１３３６（２００３）；Ｇｏｌｄｂｅｒｇら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １００（４）：１３０６−１３１５（２０１１）を参照のこと。従って、抗ＩＬ１３抗体製剤（ｐＨ５．７）に対する本明細書中で示される物理的安定性データは驚くべきものであり、予想外であった。

【0170】

コロイド安定性
抗体の希釈溶液（０．１０から１ｍｇ／ｍＬの間）を使用した静的光散乱並びに２００ｍｇ／ｍＬ超での抗体濃度の光散乱によってコロイド安定性を測定した。コロイド安定性とは、溶液中で懸濁された巨大分子の溶液挙動を指し、これによりモノクローナル抗体などの巨大分子間の平衡、時間平均相互作用を調べることができる。理論により縛られるものではないが、相互作用が反発的である場合、溶液組成物は安定なままであると予想され得る。しかし、溶質分子間で正味の誘因性相互作用が起こり、これは一般に相転移及びタンパク質溶解性の問題と関連する。

【0171】

発明者らは、単純なバッファー中の試料を用いて、溶液ｐＨの関数として（０．１から１．０ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で）抗ＩＬ１３抗体に対する浸透圧第２ビリアル係数（Ｂ_２）を測定した。なお、図１５及び１６において、０を上回る値は正の浸透圧第２ビリアル係数であり、これは正味の反発性相互作用を示し、０を下回る値は、負の浸透圧第２ビリアル係数であり、これは正味の誘引性分子間相互作用を示す。図１５のデータは、抗ＩＬ１３抗体がｐＨ範囲にわたり誘引性相互作用を有し、最大の誘引性相互作用がｐＨ５．５から６．５の間で起こったことを示す。図１６で示される結果に対して、処方添加物を様々なｐＨで溶液に添加した。図１６で見られ得るように、ｐＨ５．５から６．５で、測定浸透圧第２ビリアル係数は負のままであり、したがって誘引性であった。０の散乱角度に対する強度を外挿する１から２００ｍｇ／ｍＬの濃度範囲にわたる多角度光散乱検出器での光散乱の測定を図１７で示す。これらのデータから、散乱される強度プロファイルが、ＨＡＣＨ比濁計に対して観察されるものと非常に類似していたことが明らかとなった（図１７と図８を比較）。両機器とも散乱光強度及び、したがってレイリー散乱を測定する。この散乱は、微粒子不含の溶液中で目立ち、散乱分子間の相互作用にも依存する、溶液の小さな密度及び濃度変動により生じる。分子が互いに徐々に密に接触するようになる場合、散乱光強度の低下が起こり、時間／空間のそれらの位置が相関するようになり、その結果、散乱光の相殺的干渉が起こる（例えばＢｅｔｔｅｌｈｅｉｍら、Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ４１（１）：２９−３３（１９８３）；Ｘｉａら、Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ６６（３＿Ｐｔ＿１）：８６１−８７２（１９９４）；及びＸｉａら、Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ４１（１）：２９−３３（１９９６）を参照のこと。図１８は、製剤ｐＨの関数として、抗ＩＬ１３抗体に対する静的光散乱データを示す。図１８のデータは、２００ｍｇ／ｍＬ以下の抗体濃度で観察される見かけの分子量として表す。図１８で示されるデータは、ｍＡｂ排除体積の単純な剛体球種モデルに対する理論的散乱（図１８の破線）と比較した、弱い程度（ｐＨ７．２）から中程度（ｐＨ６．５）に誘引性であるコロイド相互作用及び濃度範囲全体にわたる抗ＩＬ１３抗体自己会合を示す。

【0172】

抗ＩＬ１３及び抗ＣＤ２０の両者とも、図１９で示されるように、誘引性コロイド相互作用及びｍＡｂ自己会合により引き起こされる同等レベルの濁度を示した。驚くべきことに、このような誘引性コロイド相互作用は、図２０で示されるように、抗ＩＬ１３抗体に対する製剤では、高粘度（例えば１５０ｍｇ／ｍＬで＞１５ｃＰ）又はレオロジーの問題として現れなかった。しかし、抗ＣＤ２０抗体に対するコロイド相互作用は、溶液レオロジーにおいて影響があり、その結果、溶液乳白光だけでなく（図８）、２５℃及び１５０ｍｇ／ｍＬで＞１５ｃＰという高い粘度も生じた（図２０）。

【0173】

長期物理的、化学的及び効力安定性
長期の安定性及び効力を試験するために、２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．７、１７５ｍＭスクロース及び０．３ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０中で１２５ｍｇ／ｍＬで抗ＩＬ１３抗体を処方し、次いで様々な保存条件に供した。５℃又は２５℃の何れかで表３で示される週数にわたりバイアルを保存した（５℃で最長１５６週間及び２５℃で最長２６週間）。表３で示されるとおりの各時点で、発色及び透明性（ＣＡＣ）、ｐＨ及び指定の化学的又は物理的安定性の測定について試料を分析した。更に、各時点で生物学的活性（効力）も評価した。表３で示されるデータにより示されるように、２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．７、１７５ｍＭスクロース及び０．３ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０中で１２５ｍｇ／ｍＬで処方された抗ＩＬ１３抗体は、効力を維持し、５℃で全１５６週間（３年間）にわたり、及び２５℃で全２６週間にわたり、良好な化学的及び物理的安定性を示した。これらのデータから、この製剤が、長期にわたり抗ＩＬ１３抗体の望ましい化学的、物理的及び効力特質を維持することが確認される。

【0174】

表３．安定性及び、抗ＩＬ１３抗体の長期の物理的、化学的及び効力安定性を決定するための条件

ＣＡＣ：発色及び透明性
ＳＹ＝僅かに黄色
ＬＩＱ＝液体
ＳＯＰＬ＝僅かな乳白光

【0175】

結論
発明者らは、ｐＨ及び、長期の化学的及び物理的安定性の両方を促進し、効力を維持する賦形剤を伴う溶液条件で、抗ＩＬ１３抗体が良好に処方されていることを示した。具体的に、その製剤は、２０ｍＭヒスチジンアセテート、ｐＨ５．７、１７５ｍＭスクロース及び０．３ｍｇ／ｍＬポリソルベート２０中で１２５ｍｇ／ｍＬ及び１５０ｍｇ／ｍＬを含め、１００ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で抗体を含んだ。驚くべきことに、発明者らは、本製剤が２５℃で＜１５ｃＰの望ましい粘度プロファイルを有することを見出した。このような粘度プロファイルは、製造可能性及びまた投与の容易さのために（例えば、患者の快適さ及びコンプライアンスを含め、幾つかの理由のために、小体積中の高濃度の製剤が最適である皮下注射のために）望ましい。発明者らは、同じ又は同様の製剤中の他の抗体が２５℃で＞１５ｃＰの望ましくない粘度プロファイルを有することを観察したが、これは、抗ＩＬ１３抗体製剤に対する粘度プロファイルの予測不可能性を強調する。

【0176】

更に、しばしば使用される、タンパク質製剤選択に対する２つの基準としては、熱安定性及びコロイド安定性が挙げられる（Ｃｈｉら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ １２（５）：９０３−９１３（２００３）；Ｃｈｉら、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０（９）：１３２５−１３３６（２００３）を参照のこと。）。抗ＩＬ１３抗体溶液の変性温度の熱分析から、ｐＨ５．４から６．０の条件での物理的安定性が、本抗体製剤の物理的安定性に最適ではないであろうことが示唆された。抗ＩＬ１３抗体溶液のコロイド安定性分析からまた、５．５から６．５のｐＨ範囲での処方条件は、低凝集速度を維持するのに最も望ましくないであろうことも示唆された。また、驚くべきことに、ここで与えられるデータにより示されるように、ｐＨ５．７で処方された抗ＩＬ１３抗体は、５℃で、及びまた加速条件下で、長期にわたり良好な物理的安定性を示した。これらの条件下での製造品安定性が、熱融解転移及びコロイド安定性が低かったとしても、物理的及び化学的両面で、より高いｐＨで見られるものを上回っていたことも驚くべきことであった。処方された抗ＩＬ１３抗体溶液の外観（及び濁度）は、ある種の選択されなかった条件よりも選択された処方条件で乳白光が強かった一方で、分子特性及び処方組成が、リアルタイム及び加速保存条件の両方で最適の安定性を維持し、効力を維持し、小体積中の高濃度製剤の送達に対して望ましい溶液レオロジー特性をもたらした。

【0177】

皮下投与デバイス
様々な市販の部品を評価することによって、上述の抗ＩＬ１３製剤の投与のための、針付きのプレフィルドシリンジ、プランジャーストッパー付きプランジャー、ニードルシールド及び針安全装置を含む皮下投与デバイスを選択した。例えば、評価した部品には、ガラスケーン、固定針付きの成形シリンジ、プランジャー及びプランジャーストッパー、剛性のニードルシールド及び針安全装置が含まれた。

【0178】

注射時の針ゲージ及び針の内径の影響及び製剤が本明細書中で記載のようなある一定の粘度を有する場合の滑り力（ｇｌｉｄｅ ｆｏｒｃｅ）などの要因を含む、安定性及び患者の快適性及び便宜などの他の考慮すべき点を含むが限定されない、製剤特性への影響について、当業者にとって公知の方法に従い様々な組合せで様々な部品を評価した。これらの研究によって、発明者らは、本明細書中に記載のような高濃度処方レブリキズマブの投与のための最適な皮下投与デバイスとして、プレフィルド１．０ｍＬ低タングステンホウケイ酸ガラス（タイプＩ）シリンジ及び、ＦＭ２７／０（Ｄａｅｔｗｙｌｅｒ）及び剛性のポリプロピレンシールドを含む剛性のニードルシールド付きのステンレス鋼５ベベル２７Ｇ１／２インチ薄壁固定針を選択した。更に、プランジャーロッドには、４０２３／５０ゴム及びＦｌｕｒｏＴｅｃ（登録商標）エチレン−テトラフルオロエチレン（ＥＴＦＥ）コーティング（Ｗｅｓｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｉｎｃ．）を含むゴム製プランジャーストッパーが含まれた。この皮下投与デバイスにはまた、針安全装置、Ｕｌｔｒａｓａｆｅ Ｐａｓｓｉｖｅ（登録商標）Ｎｅｅｄｌｅ Ｇｕａｒｄ Ｘ１００Ｌ（Ｓａｆｅｔｙ Ｓｙｒｉｎｇｅｓ，Ｉｎｃ．）も含まれた。上記で詳述した皮下投与デバイスは、以下で固定針プレフィルドシリンジ又は「ＳＩＮ ＰＦＳ」と呼ぶ。

【0179】

選択したＳＩＮ ＰＦＳと同等のバイアル中でのレブリキズマブ製剤の安定性を明らかにするために、発明者らは、４０℃／周囲相対湿度で２ｃｃバイアル又は１ｍＬ ＳＩＮ ＰＦＳに手動で充填したＧＭＰ製剤原料を評価した。発明者らは、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）による単量体の変化並びに画像化キャピラリー等電点電気泳動（ＩＣＩＥＦ）及びキャピラリー電気泳動ドデシル硫酸ナトリウム（ＣＥ−ＳＤＳ）によるパーセント主要ピークの変化によって特徴を評価した場合の分解速度を評価した。

【0180】

これらの研究から、４０℃での４週間にわたる保存後、バイアルとＳＩＮ ＰＦＳとの間でＳＥＣにより測定した場合、単量体減少（それぞれ０．６％から０．９％の減少を示す。）又はパーセント主要ピークの低下（それぞれ、ＩＣＩＥＦにより測定した場合は１８から２１％の低下及びＣＥ−ＳＤＳにより測定した場合は０．９％から１．５％の低下を示す。）に顕著な差がなかったことが明らかになった。更に、クロマトグラフィーのプロファイルは、互いに同等であり、バイアル試料と比較して、ＳＩＮ ＰＦＳ試料において新しいピークは観察されなかった。

【0181】

分解速度に僅かな差があった（４０℃で４週間後、バイアルでは高分子量種が０．５％から０．６％増加したことに対し、ＳＩＮ ＰＦＳでは高分子量種が０．８％増加）。この僅かな差がリアルタイムの保存中の品質に影響を与える可能性は低いと考えられた。

【0182】

従って、発明者らは、上述のデータから、バイアル中の上述のように処方される高濃度レブリキズマブ製剤の安定性が、上述の選択ＳＩＮ ＰＦＳ中での安定性と同等であることが示されると結論付ける。

【0183】

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【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]