特許 6273349 ニトロキソリンの塩基付加塩及びその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6273349

(24)【登録日】2018年1月12日

(45)【発行日】2018年1月31日

(54)【発明の名称】ニトロキソリンの塩基付加塩及びその使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 215/28 20060101AFI20180122BHJP

   C07D 215/30 20060101ALI20180122BHJP

   A61K 31/47 20060101ALI20180122BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20180122BHJP

   A61P 9/14 20060101ALI20180122BHJP

   A61P 13/02 20060101ALI20180122BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20180122BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20180122BHJP

【ＦＩ】

   C07D215/28CSP

   C07D215/30

   A61K31/47

   A61P9/00

   A61P9/14

   A61P13/02

   A61P31/04

   A61P35/00

【請求項の数】18

【全頁数】32

(21)【出願番号】特願2016-503414(P2016-503414)

(86)(22)【出願日】2014年3月17日

(65)【公表番号】特表2016-514705(P2016-514705A)

(43)【公表日】2016年5月23日

(86)【国際出願番号】US2014030532

(87)【国際公開番号】WO2014145723

(87)【国際公開日】20140918

【審査請求日】2015年11月13日

(31)【優先権主張番号】61/790,059

(32)【優先日】2013年3月15日

(33)【優先権主張国】US

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】515255249

【氏名又は名称】アジエリス ファーマシューティカル テクノロジーズ コンパニー リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000109

【氏名又は名称】特許業務法人特許事務所サイクス

(72)【発明者】

【氏名】パン ケ

【審査官】 三原 健治

(56)【参考文献】

【文献】 特開平０３−２８４７３４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開昭５７−１０１８３５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開昭５７−０６８８３１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許第０４３２９１８５（ＵＳ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１１／０９１９７３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開２０１２−１００６７８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１０−０７０５５７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１０−５００８７５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許第０３８７２１２８（ＵＳ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２００８／０２０７６７３（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 Man-Made Textitle in India，２００５年，Vol.48，p.216-219

【文献】 Antimicrob. Agents Chemother.，１９９５年，Vol.39，p.707-713

【文献】 Eur. Polym. J.，１９９３年，Vol.29，p.715-720

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ニトロキソリンのアミン塩であって、前記アミンが、ジエチルアミン、ジオールアミン、２−（ジエチルアミノ）エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、リジン、１-(２-ヒドロキシルエチル)ピロリジン、及びＮ-メチルグルカミンらなる群より選択される前記アミン塩。

【請求項2】

前記アミンがリジンである請求項１に記載のアミン塩。

【請求項3】

前記アミンが、ジエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、及びジオールアミンからなる群より選択される請求項１に記載のアミン塩。

【請求項4】

前記アミンがＮ−メチルグルカミンである請求項１に記載のアミン塩。

【請求項5】

ニトロキソリンの四級アンモニウム塩であって、前記四級アンモニウムがコリンである四級アンモニウム塩。

【請求項6】

前記塩が、４.５と８との間のｐＨの水又は水媒体において少なくとも０.１ｍｇ／ｍＬの溶解度を有する請求項１〜４のいずれか一項に記載のアミン塩又は請求項５に記載の四級アンモニウム塩。

【請求項7】

請求項１〜６のいずれか一項に記載のニトロキソリンのアミン塩又は四級アンモニウム塩の製造方法であって、
（i）有機溶媒中でニトロキソリンと塩基とを混合してニトロキソリンの前記アミン塩又は四級アンモニウム塩を取得すること、ここで、前記塩基は、アミン及び水酸化四級アンモニウムからなる群より選択され、及び
（ii）前記有機溶媒からニトロキソリンの前記アミン塩又は四級アンモニウム塩を回収することを含む方法。

【請求項8】

前記有機溶媒が、アセトン、メチルイソブチルケトン、ジクロロメタン、トルエン、ピリジン、イソブチロニトリル、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、及びイソプロパノールからなる群より選択される１つ以上の溶媒を含む請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記回収工程がニトロキソリンの前記アミン塩又は四級アンモニウム塩を前記有機溶媒から結晶化することを含む請求項７又は８に記載の方法。

【請求項10】

粉末Ｘ線回折パターンにおいて、精度±０．２θの回折角（２θ）：９.９６、１２.１２、１７.７２及び２０.０８にピークを有するニトロキソリンコリン塩の結晶。

【請求項11】

治療上有効な量の請求項１〜６のいずれか一項に記載のニトロキソリンのアミン塩又は四級アンモニウム塩又は請求項１０に記載のニトロキソリンコリン塩の結晶と一つ以上の薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。

【請求項12】

前記医薬組成物が徐放性組成物である請求項１１に記載の医薬組成物。

【請求項13】

前記組成物が液体組成物である請求項１１に記載の医薬組成物。

【請求項14】

前記医薬組成物が注射投与のために製剤化されている請求項１１に記載の医薬組成物。

【請求項15】

それを必要とする対象において疾病、障害又は身体異常を治療又は予防する用途のための、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記疾病、障害又は身体異常が尿路感染症、血管新生に伴う疾病、腫瘍、及び癌からなる群より選択される医薬組成物。

【請求項16】

血管新生に伴う疾病を治療又は予防する用途のための、請求項１５に記載の医薬組成物であって、前記疾病、障害又は身体異常が膀胱癌、腎癌、又は前立腺癌である医薬組成物。

【請求項17】

それを必要とする対象において泌尿器保護効果を与える用途のための、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項18】

治療上有効な量のニトロキソリンの前記アミン塩又は四級アンモニウム塩と一つ以上の薬学的に許容可能な担体とを組み合わせることを含む請求項１１〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物の製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ニトロキソリン又は他のニトロキソリン塩と比較して、水溶液の溶解度と安定性が向上した、新規なニトロキソリンの塩基付加塩に関する。本発明は、ニトロキソリンの塩基付加塩を含む医薬組成物ならびに、該医薬組成物の使用による疾病、障害及び身体異常の治療又は予防方法に関する。

【背景技術】

【0002】

ニトロキソリンは、尿路感染症の治療用として長年市販されている抗菌薬である。近年、血管新成の抑制［１］及び癌の増殖や侵襲の抑制[２、３]についてもニトロキソリンに活性があることが発見された。

【0003】

ニトロキソリンは、患者に経口投与される。ヒトでの薬物動態研究から、ニトロキソリンは迅速に血液中に吸収され循環することができることが示された［４］。ヒトでは、ニトロキソリンの半減期（t_1/2）は２.６３時間と非常に短い。このように、ニトロキソリンは急速に代謝され、主に尿から排泄される。従って、継続的な薬物曝露を維持するため、通常、ニトロキソリン薬は、一日に３回（ＴＩＤ）又は４回（ＱＩＤ）服用するよう処方されている。

【0004】

ニトロキソリンは、また、水に対する溶解度が低い。そのため、通常はこれを即効型製剤とすることで、胃内の胃液へ放出させ、その後腸で吸収させている。ニトロキソリンの塩酸塩（ＨＣｌ）付加塩の結晶構造がYatsenko et al.［５］により報告されているが、ニトロキソリンＨＣｌ塩を含む任意のニトロキソリン塩の溶解度に関するデータは開示されていない。ニトロキソリンの水への溶解度が低いため、ニトロキソリンの放出制御製剤や注射製剤などのヒトへの使用については現在に至るまで報告も開発もされていない。

【0005】

水への溶解度が向上した新規なニトロキソリン塩により、ニトロキソリンの最適な製剤の開発が可能となり、患者へのニトロキソリン薬製剤の投与回数を少なくすることができる。これにより、薬剤投与コンプライアンスが向上する。薬剤服用コンプライアンスは、患者への薬剤の適切な曝露と生物学的有用性、すなわち疾病治療時における有効性を保証するために重要である。最適化された製剤により、血流において薬剤レベルが安定することで、有害な副作用を低減できる。さらに、水に対する溶解度の向上により、液体組成物中にニトロキソリン塩を調製することが可能となる。

【0006】

安定性が向上した新規なニトロキソリン塩により、最適化された製剤が開発され、製造工程も向上する。ニトロキソリンは高温で昇華し［６］、製造過程のいくつかの問題の原因となる。例えば、昇華したニトロキソリンは、製造現場や機器の表面に蓄積され、乾燥工程時の汚染の原因となる。従って、例えばタブレットとして製造されると、ニトロキソリンはコーティング膜を貫通し、容器を汚染してしまう。

【0007】

上記により、ニトロキソリンと比較して、水への溶解度及び安定性が向上した新規なニトロキソリン塩に対する本技術分野のニーズがある。

【発明の概要】

【0008】

本発明は、新規なニトロキソリンの塩基付加塩を提供することで、上記のニーズを満たすものである。本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩は、ニトロキソリンと比較して、水やその他の水媒体での溶解度や安定性が向上するため、より良好な医薬組成物への製剤化が可能である。

【0009】

本発明は、一般的な態様においてニトロキソリンの塩基付加塩を提供する。塩基付加塩としてアルカリ金属塩、アミン塩又はアンモニウム塩が好適である。

【0010】

本発明は、他の一般的な態様において、溶媒中にニトロキソリンと塩基とを混合してニトロキソリンの塩基付加塩を得て、溶媒からニトロキソリンの塩基付加塩を回収することを含む、ニトロキソリンの塩基付加塩の製造方法を提供する。

【0011】

本発明は、更に他の一般的な態様において、ニトロキソリンコリン塩の結晶を提供し、前記結晶は、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角(２θ)（精度±０．２θ）が９.９６、１２.１２、１７.７２及び２０.０８の位置にピークを有する。

【0012】

本発明は、他の一般的な態様において、治療上有効な量のニトロキソリンの塩基付加塩と、薬学的に許容可能な担体とから構成される医薬組成物に関する。

【0013】

本発明の他の態様は、治療上有効な量の本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩を含む組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む、上記対象の疾病、障害又は身体異常を治療もしくは予防する方法を含む。治療又は予防される疾病、障害又は身体異常は、ニトロキソリンが有効であると知られているものであり、例えば尿路感染症や、腫瘍や癌などの血管新生に伴う疾病、認知症やアルツハイマー病などである。

【0014】

本発明のその他の態様、特徴及び利点は、本発明の詳細な説明と、好ましい実施態様及び特許請求の範囲を含む、以下の開示から明らかになる。

【0015】

添付の図面を参照することで、本発明の詳細な説明と共にその要旨についても良好な理解が得られる。図面には、本発明を表すため、好ましい実施態様が示されている。ただし本発明は、示されている構成や機器などに制限されることはないことは明らかである。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】ニトロキソリンコリン塩の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。

【図2】ニトロキソリンコリン塩の質量スペクトルを示す。

【図3】ニトロキソリンコリン塩の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を示す。

【図4】ニトロキソリンコリン塩の粉末Ｘ線粉末(ｐＸＲＤ)を示す。

【図5】再結晶化ニトロキソリンコリン塩の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。

【図6】再結晶化ニトロキソリンコリン塩の質量スペクトルを示す。

【図7】再結晶化ニトロキソリンコリン塩のＤＳＣを示す。

【図8】再結晶化ニトロキソリンコリン塩のｐＸＲＤを示す。

【発明を実施するための形態】

【0017】

様々な出版物、記事及び特許が背景として引用又は説明され、本明細書全体を通して、その全内容が参照により本明細書に組み込まれているものとする。本発明の明細書に含まれている文書、作用、材料、装置、物品などについての説明は、本発明の内容を提供するためのものである。このような説明は、開示又は権利請求された任意の発明に関する従来技術の任意の又は全ての主題を容認するものではない。

【0018】

他に定義されている場合を除き、本明細書で使用されている全ての専門用語及び科学用語は、本発明に関連する当業者が一般的に理解しているものと同様の意味を有する。それ以外は、本明細書で使用されている特定の用語は、本明細書で設定された意味を有する。本明細書で引用された特許、公開された特許出願及び出版物は、その全内容が参照により本明細書に組み込まれているものとする。明細書及び特許請求の範囲で使用されている単数形「a」、「an」、及び「the」は、特に明示した場合を除き、複数の場合も含む。

【0019】

本明細書で使用される「脂肪族」や「脂肪族基」は、飽和もしくは不飽和線形（すなわち、直鎖）又は分枝炭化水素基及び非芳香族環（すなわち、脂環式）を意味する。脂肪族は、炭素原子が単一結合により結合される（アルカン又はシクロアルカン）ことを意味する飽和であってもよく、炭素原子が二重結合（アルケン又はシクロアルケン）又は三重結合（アルキン又はシクロアルキン）により結合されることを意味する不飽和であってもよい。脂肪族基は、アルキル、アルケニル、アルキニル及び脂環式基を含む。

【0020】

他に注記されている場合を除き、本明細書で使用されている「アルキル」は少なくとも一つの炭素原子を含む飽和の、非分枝又は分枝の炭化水素鎖を意味する。アルキルは例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、へプチル、オクチル、ノニル、イソプロピル、イソブチル、２-メチルペンチル、３-メチルペンチル、２,２-ジメチルブチル、２,３-ジメチルブチル、２-メチルヘキシル、２,３-ジメチルヘキシル、２,２-ジメチルヘキシル、３,３-ジメチルヘキシルなどが挙げられるが、これらに限定されない。アルキル基は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。

【0021】

他に注記されている場合を除き、本明細書で使用されている「アルケニル」は、一つ以上の炭素-炭素二重結合を有する不飽和の、非分枝又は分枝の炭化水素鎖を意味する。アルケニルは、例えばエテニル、プロぺニル、ブテニル、ペンテニル、へキセニル、２-メチル-２-ペンテニル、２-エチル-２-ヘキセニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。アルケニル基は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。

【0022】

他に注記されている場合を除き、本明細書で使用されている「アルキニル」は、一つ以上の炭素-炭素三重結合を有する不飽和の、非分枝又は分枝の炭化水素鎖を意味する。アルキニルは、例えばエチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、へキシニル、３-メチル-１-ブチニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0023】

他に注記されている場合を除き、「アルコキシ」は、一般式-ＯＲを有する有機単位を意味し、Ｒは脂肪族（すなわち、アルキル、アルケニル、アルキニル、脂環式）である。アルコキシ基は、例えばメトキシ及びエトキシとしてよい。アルコキシ基のその他の例として、プロポキシ、イソプロポキシ、イソブトキシ及びtert-ブトキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0024】

他に注記されている場合を除き、「脂環式」は、少なくとも３個の炭素原子を含む非芳香族環状炭化水素環を意味する。脂環式基は、３-１２個の炭素原子を有することが好適であり、環状構造に３-８個の炭素原子を有することがより好適であり、環状構造に５-６個の炭素原子を有することが最も好適である。脂環式基は、飽和（シクロアルカン）であっても、少なくとも２個の炭素原子が二重結合（シクロアルケン）又は三重結合（シクロアルキン）で結合されていることを意味する不飽和であってもよい。脂環式基は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。

【0025】

本明細書で使用されている「複素環式」及び「複素環」は、脂環式基、すなわち少なくとも３個の炭素原子を有する飽和又は不飽和環状炭化水素環を意味し、環状炭化水素環の一つ以上の炭素原子は、酸素、窒素又は硫黄などの複素原子と置換されている。複素環は、複素原子に置換されている炭素原子の少なくとも一つを持つ環位置に、３-１２個の炭素原子を有することが好適であり、環内の１-２個の炭素原子が複素原子で置換されている５-６個の炭素原子を有することがより好適である。複素環は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。

【0026】

本明細書で使用されている「アリール」は、少なくとも５個の炭素原子を環位置に有する、芳香単環炭化水素基又は芳香多環炭化水素基を意味する。アリール基として、フェニル、ナフタレニルが挙げられるが、これらに限定されない。アリール基は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基に置換されていてもよく、上記置換は、環上のいずれの位置であってもよい。

【0027】

本明細書で使用されている「ヘテロアリール」及び「ヘテロアリール環」は、少なくとも５個の炭素原子を環位置に持つ単環又は多環の芳香環系を意味し、一つ以上の炭素原子は、窒素、酸素及び硫黄などの複素原子に置換されている。ヘテロアリール環は、複素原子と置換されている炭素原子の少なくとも一つを持つ環位置に、５-１２個の炭素原子を有することが好適であり、複素原子と置換されている環に１-３個の、より好ましくは１-２個の上記の炭素原子を持つ５-６個の炭素原子を有することが、更に好適である。複素環は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。ヘテロアリール環として、イミダゾリル、ピリミジニル、テトラゾリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、ピラゾリル、オキサゾリル、トリアゾリル、ベンゾフリルなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0028】

本明細書で使用されている「アミン」の意味は当業者により周知であり、広義には、非共有電子対を持つ窒素原子を含む化合物を意味する。「アミン」は、脂肪族アミン（アルキルアミン、アレニルアミン、アルキニルアミン及び脂環式アミンを含む）、複素環アミン、アリールアミン、ヘテロアリールアミン、ポリアミン、塩基性アミノ酸、アミノ糖を含むものとする。好適な脂肪族アミンとして、アルキルアミンが挙げられる。アミンは、一つ以上の適切な置換基で置換されている。

【0029】

本明細書で使用されている「アルキルアミン」は、アミンを意味し、窒素原子は、メチル又はエチルなど、一つ以上のアルキル基と置換されている。アルキルアミンは、アミンが一つのアルキル基と置換されていることを意味する第一級アミンであってもよく、二つのアルキル基と置換されていることを意味する第二級アミンであってもよく、三つのアルキル基と置換されていることを意味する第三級アミンであってもよい。第二級又は第三級アミンの複数のアルキル基は、同じであっても異なっていてもよい。アルキルアミンの例として、ジメチルアミン（２個のメチル基で置換されている窒素原子を有する第二級アミン）、メチルエチルアミン（メチル基とエチル基で置換されている窒素原子を有する第二級アミン）、又はトリエチルアミン（３個のエチル基で置換されている窒素原子を有する第三級アミン）などが挙げられるが、これらに限定されることはない。

【0030】

アルキルアミンは、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。置換アルキルアミンは、アルキルアミンの一つ以上のアルキル基が、一つ以上の適切な置換基で置換されていることを意味する。

【0031】

本明細書で使用されている「アルケニルアミン」は、窒素原子がエテニルやプロぺニルなど、一つ以上のアルケニル基で置換されているアミンを意味する。アルケニルアミンは、第一級アミン、第二級アミン、又は第三級アミンであればよい。第二級又は第三級アルケニルアミンの複数のアルケニル基は、同じでも異なっていてもよい。アルケニルアミンは、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。例えば、アルケニルアミンはメチルジアリルアミンであってもよいが、これに限定されない。

【0032】

本明細書で使用されている「アルキニルアミン」は、窒素原子がエチニルやプロピニルなど、一つ以上のアルキニル基で置換されているアミンを意味する。アルキニルアミンは、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミンであればよい。第二級又は第三級アルキニルアミンの複数のアルキニル基は、同じでも異なっていてもよい。アルキニルアミンは、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。例えば、アルキニルアミンは、Ｎ-メチル-ジ（２-プロピニル）アミン又は２-プロピン-１-アミンであってもよいが、これに限定されない。

【0033】

本明細書で使用されている「複素環アミン」は、炭化水素環の少なくとも一つの炭素原子が窒素原子で置換されている複素環を意味する。複素環アミンは、炭化水素環の１-２個の炭素原子が窒素原子と置換されていることが好適である。一つ以上の窒素原子を含む複素環の任意の位置で、複素環アミンは、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。複素環アミンは、炭化水素環の少なくとも一つの炭素原子が窒素原子と置換されていることに加えて、一つ以上の炭素原子が酸素や硫黄など他の複素原子と置換されていてもよい。複素環アミンとしては例えばピペラジン、ピロリジン、モルホリンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0034】

本明細書で使用されている「アリールアミン」は、窒素原子が、一つ以上のフェニルなどのアリール基で置換されているアミンを意味する。アリールアミンの窒素原子は、１、２又は３個のアリール基での置換が可能である。アリールアミンは、窒素原子が、少なくとも一つのアリール基で置換され、アルキル基など一つ以上の脂肪族基で任意に置換されているアミン類を含むものとする。アリールアミンは、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。置換アリールアミンは、アリールアミンの一つ以上のアリール基が、また特定の実施態様では、アルキル基などの一つ以上の脂環式が、一つ以上の適正な置換基に置換されていることを意味する。例えば、アリールアミンとして、アニリン、Ｎ-メチルアニリン、４-メチルアニリン、及び４-ヒドロキシルアニリンなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0035】

本明細書で使用されている「ヘテロアリールアミン」は、芳香環系の少なくとも一つの炭素原子が、窒素原子で置換されているヘテロアリール環を意味する。ヘテロアリールアミンは、芳香環の１-３個の炭素原子が窒素原子で置換されていることが好適であり、１-２個の炭素原子が窒素原子で置換されていることがより好適である。ヘテロアリールアミンは、無置換であってもよく、ヘテロアリール環の任意の位置で、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。ヘテロアリールアミンは、炭化水素環の少なくとも一つの炭素原子が窒素原子で置換されていることに加え、一つ以上の炭素原子が酸素や硫黄などの他の複素原子で置換されていてもよい。ヘテロアリールアミンとして、ピリジン、ピロール、ピリミジン、イミダゾール、キナゾリン、プリン、ピラゾール、及びトリアゾールなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0036】

本明細書で使用されている「脂環式アミン」は、窒素原子が、一つ以上のシクロヘキシルなどの脂環式基で置換されているアミンを意味する。脂環式アミンの窒素原子は、１、２又は３個の脂環式基で置換されていてもよい。脂環式アミンは、窒素原子が少なくとも一つの脂環式基とアルキル基などの少なくとも他の脂肪族基とで置換されているアミン類を包含するものとする。脂環式アミンは、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。置換脂環式アミンは、その一つ以上の脂環式基又はアルキル基が、一つ以上の適切な置換基で置換されていることを意味する。脂環式アミンとしては、シクロヘキシルアミン、シクロペンチルアミン、Ｎ-メチルシクロヘキシルアミン、及び４-メチルシクロヘキシルアミンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0037】

本明細書で使用されている「ポリアミン」は、非共有電子対を含む一つ以上の窒素原子を有する非環状アミンを意味する。「ポリアミン」は、「ジアミン」を包含するものとする。本明細書で使用されている「ジアミン」は、非共有電子対を含む２個の窒素原子を有するポリアミンである。ポリアミンは、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。ポリアミンとしては、ジアミンを含み、エチレンジアミン、１,３−ジアミノプロパン、へキサメチレンジアミン、スペルミジン及びスペルミンが挙げられるが、これらに限定されることはない。

【0038】

アミノ酸は、アミノ、グアニジノ、イミノなど一つ以上のアルカリラジカル、又は炭素１以外の任意の炭素原子に結合されたヒドラジンラジカルを有する有機酸である。アミノ酸は、天然であっても非天然であってもよい。天然アミノ酸の大半は、「Ｌ型」アミノ酸だが、少数の「Ｄ型」アミノ酸も存在する。本明細書で使用されている「塩基性アミノ酸」は、塩基として作用可能な、すなわちプロトンを受容できる付加的なアルカリラジカルを有するアミノ酸を意味する。塩基性アミノ酸として、それぞれＬ型とＤ型の双方を有するアルギニン及びリジンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0039】

本明細書で使用されている「アミノ糖」は、アミノ（-ＮＨ₂）基と置換された一つ以上の水酸基を有する単糖単位を意味する。アミノ糖のアミノ基は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。アミノ糖として、グルコサミン及びＮ-メチルグルカミンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0040】

本明細書で使用されている「水酸化四級アンモニウム」は、一般構造［ＮＲ₄⁺］［ＯＨ^-］を持つ正の帯電イオンを意味し、Ｒはアルキル基を示す。水酸化四級アンモニウムは塩であり、カチオンは四級アンモニウム（ＮＲ₄⁺）イオン、陰イオンは水酸化イオン（ＯＨ^-）である。本明細書で使用されている「四級アンモニウムイオン」、「四級アンモニウムカチオン」、「四級アンモニウム」は、一般構造[ＮＲ₄⁺]を持つ、正の帯電イオンであり、Ｒはアルキル基を示す。四級アンモニウムイオンの４個のアルキル基は同じでも異なっていてもよい。アルキル基は、無置換であってもよく、一つ以上の適切な置換基で置換されていてもよい。水酸化四級アンモニウムとして、水酸化コリン、水酸化テトラエチルアンモニウム、水酸化テトラメチルアンモニウム、水酸化ジエチルジメチルアンモニウムが挙げられるが、これらに限定されない。四級アンモニウムとしては、コリン、テトラエチルアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、ジエチルアンモニウムなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0041】

特定基がアミン、アルキル、脂肪族アミン（例：アルキルアミン、アルケニルアミン、アルキニルアミン、脂環式アミン）、複素環アミン、アリールアミン、ヘテロアリールアミン、ポリアミン、又はアミノ糖などで「置換」されるとき、この基は一つ以上の置換基を持つことができ、好適には１-５個の置換基、より好適には１-３個、最も好適には１-２個の置換基を持つことができる。基が一つ以上の置換基で置換されるとき、これらの置換基は同じでも、異なっていてもよい。特定基が置換可能な適正な置換基の代表的なものとしてヒドロキシル（−ＯＨ）、アルキル、アミノ(−ＮＨ₂)及びカルボキシル（−ＣＯＯＨ）などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0042】

本明細書で使用される「薬学的に許容可能な塩」という表現は、哺乳類に使用される薬剤として安全かつ効果的であり、所望の生物活性を有する、対象となる化合物の塩を意味する。薬学的に許容可能な塩は、規定化合物に存在する塩基性基の塩である塩基付加塩、及び規定化合物に存在する酸性基の塩である酸付加塩を含む。酸性基又は塩基性基は、有機であっても無機であってもよい。薬学的に許容可能な塩の検討については、参照により本明細書に組み込まれたBERGE et al, 66J. PHARM. SCI. 1-19 (1977)を見よ。

【0043】

本発明にかかる薬学的に許容可能な塩は、ニトロキソリンの塩基付加塩であることが好適である。塩基付加塩は、無機塩基及び有機塩基により形成された塩を含む。本明細書で使用される「無機塩基」の意味は、当業者によって通常理解されるもので、広義には、プロトン受容体として作用する無機化合物を意味する。本明細書で使用される「有機塩基」の意味もまた、当業者によって通常理解されるものであり、プロトン受容体として作用する有機化合物を意味する。

【0044】

特に注記されている場合を除き、「ニトロキソリン」は、以下の化学構造を有する化合物を意味する。

【化1】

【0045】

「ニトロキソリンの塩基付加塩」は、以下の化学構造を有する化合物を意味する。

【化2】

ここでＸ⁺は、金属カチオン、アミンカチオン、アンモニウムカチオン（ＮＨ₄⁺）、又は四級アンモニウムカチオンなどのカチオンを示す。

【0046】

本明細書で使用されている「医薬組成物」は、治療上有効な量の活性医薬成分と薬学的に許容可能な担体とを含む製品又は組成物を包含するものとする。

【0047】

本明細書で使用されている「治療上有効な量」について、有効な医薬成分量という観点から、研究者、獣医、医者、又は他の臨床医などが求める動物又は人間の組織系における生物学的又は医薬的反応を引き出す活性医薬成分の量を意味し、上記反応には、治療される疾病、障害又は身体異常の症状緩和が含まれる。特定の実施態様において「治療上有効な量」は、疾病、障害、身体異常の発症を防いだり、遅らせるなど、予防的効果が得られる量を意味する。本発明の実施態様に係る治療上有効な活性医薬成分量を決定する方法は知られている。更に、当業者も理解しているように、任意の特定対象の規定用量レベルは、年齢、体重、健康状態、性別、食習慣、投与タイミング、投与ルート、排出率、これらを組み合わせて投与される治療薬剤、ならびに治療対象となる疾病、障害、身体異常の重症度を含む様々な要因によって変化する。

【0048】

一般的な態様において、本発明は、ニトロキソリンの塩基付加塩に関する。ニトロキソリンの塩基付加塩は、ニトロキソリンと塩基との組み合わせにより調製される。本発明の実施態様によれば、塩基は無機塩基であっても有機塩基であってもよい。

【0049】

塩基付加塩の形成に使用可能な無機塩基として、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの金属水酸化物、リチウムアミド、ナトリウムアミドなどの金属アミド、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどの金属炭酸塩、水酸化アンモニウム及び炭酸アンモニウムなどのアンモニウム塩基が挙げられるが、これらに限定されない。

【0050】

本発明の好適な実施態様において、無機塩基は、金属水酸化物と水酸化アンモニウムから選択される。好適な金属水酸化物として、水酸化ナトリウムと水酸化カリウムが挙げられる。

【0051】

塩基付加塩の形成に使用可能な有機塩基として、リチウムメトキシド、ナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、リチウムエトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、及びカリウムtert-ブトキシドを含むカリウムアルコキシド、水酸化コリンなど水酸化四級アンモニウムを含む、リチウム、ナトリウム、及びカリウムアルコキシドなどの金属アルコキシド；ならびに脂肪族アミン（例；アルキルアミン、アルケニルアミン、アルキニルアミン及び脂環式アミン）、複素環アミン、アリールアミン、ヘテロアリールアミン、塩基性アミノ酸、アミノ糖、及びポリアミンなどを含み、これらに限定されないアミン類が挙げられる。好適な脂肪族アミン塩基としてはアルキルアミンが挙げられる。

【0052】

本発明の実施態様において、塩基は、四級アンモニウムイオンの一つ以上のアルキル基が任意に一つ以上の適正な置換基で置換されている水酸化四級アンモニウムであればよい。少なくとも一つのアルキル基が一つ以上のヒドロキシル基で置換されていることが好適である。本発明で使用可能な水酸化四級アンモニウムとして、例えば水酸化コリン、トリメチルエチルアンモニウム水酸化物、水酸化テトラメチルアンモニウムが挙げられるが、これらに限定されることはなく、水酸化コリンが好適である。

【0053】

本発明の実施態様によれば、アルキルアミン塩基は置換されていても、無置換であってもよい。本発明において使用可能な無置換アルキルアミン塩基として、メチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、及びトリエチルアミンが挙げられるが、これらに限定されない。置換アルキルアミン塩基は、一つ以上のヒドロキシル基で置換されていることが好適であり、また１-３個のヒドロキシル基で置換されていることが更に好適である。本発明において使用可能な置換アルキルアミン塩基として、２-(ジエチルアミノ)エタノール、Ｎ，Ｎ-ジメチルエタノールアミン（デアノール）、トロメタミン、エタノールアミン、及びジオールアミンなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0054】

本発明の好ましい実施態様において、アルキルアミン塩基は、ジエチルアミン、ジエチルアミン、２-ジエチルアミノエタノール、Ｎ，Ｎ-ジメチルエタノールアミン、トロメタミン、エタノールアミン、及びジオールアミンから選択される。

【0055】

本発明の実施態様において、ニトロキソリンの塩基付加塩の形成に使用可能なアミン塩基は複素環アミンであってもよい。本発明での使用に適した複素環アミン塩基として、ピペラジン、ピロリドン、及びモルホリンが挙げられるが、これらに限定されない。複素環アミンの一つ以上の窒素原子は、一つ以上の置換基で置換されていてもよい。好適な置換基として、メチルやエチルなどのアルキル、ヒドロキシル基で置換されたメチルやエチルなどの置換アルキルなどが挙げられる。本発明での使用に適した置換複素環アミン塩基として、１-(２-ヒドロキシルエチル)ピロリジン及び４-(２-ヒドロキシエチル)モルホリンが挙げられるが、これらに限定されない。

【0056】

本発明の好ましい実施態様において、複素環アミン塩基は、ピペラジン、１-(２-ヒドロキシルエチル)ピロリジン及び４-(２-ヒドロキシエチル)モルホリンから選択される。

【0057】

本発明の実施態様において、アミン塩基を、塩基性アミノ酸とすることも可能である。塩基性アミノ酸として、アルギニン及びリジンが挙げられるが、これらに限定されない。好適な実施態様において、塩基性アミノ酸はリジンである。

【0058】

本発明の他の実施態様において、アミン塩基はアミノ糖であってよく、Ｎ-メチルグルカミンやポリアミン、エチレンジアミンが好適である。

【0059】

本発明の他の実施態様において、ニトロキソリンの塩基付加塩の形成に使用可能なアミン塩基は、アニリンなどのアリールアミン、ピリジンなどのヘテロアリールアミン、シクロヘキシルなどの脂環式アミン、メチルジアリルアミンなどのアルケニルアミン、２-プロピン-１-アミンなどのアルキニルアミンであればよい。本開示において、任意のアリールアミン、ヘテロアリールアミン、脂環式アミン、アルケニルアミン、又はアルキニルアミンを使用することができる。

【0060】

本発明の実施態様において、ニトロキソリンの塩基付加塩は、アルカリ金属塩、アンモニウム塩、四級アンモニウム塩又はアミン塩であればよい。

【0061】

本明細書で使用される「アルカリ金属塩」は、化合物の塩を意味し、化合物の塩のカチオンはアルカリ金属である。本発明に係る好適なニトロキソリンアルカリ金属塩としては、ニトロキソリンナトリウム塩及びニトロキソリンカリウム塩が挙げられる。

【0062】

本明細書で使用される「アンモニウム塩」は、化合物の塩を意味し、化合物の塩のカチオンはアンモニウム（ＮＨ₄⁺）である。ニトロキソリン塩の場合、アンモニウム塩はニトロキソリンアンモニウム塩である。

【0063】

本明細書で使用される「四級アンモニウム塩」は、化合物の塩を意味し、化合物の塩のカチオンは四級アンモニウムである。本発明に係る好適なニトロキソリン四級アンモニウム塩としては、ニトロキソリンコリン塩が挙げられる。

【0064】

本明細書で使用される「アミン塩」は、化合物の塩を意味し、化合物の塩のカチオンはアミンである。本発明の実施態様において、ニトロキソリンアミン塩は、ニトロキソリンアルキルアミン塩、ニトロキソリン複素環アミン塩、ニトロキソリンアリールアミン塩、ニトロキソリンヘテロアリールアミン塩、ニトロキソリンアミノ酸塩、ニトロキソリンポリアミン塩又はニトロキソリンアミノ糖塩であればよい。本発明に係るニトロキソリンのアミン塩の他の例としては、ニトロキソリンアルケニルアミン塩、ニトロキソリンアルキニルアミン塩、ニトロキソリン脂環式アミン塩が挙げられる。

【0065】

本発明の特に好ましい実施態様において、ニトロキソリンアミン塩は、ニトロキソリンジエチルアミン塩、ニトロキソリンエチレンジアミン塩、ニトロキソリンピペラジン塩、ニトロキソリンＬ-アルギニン塩、ニトロキソリン１-(２-ヒドロキシエチル)ピロリジン塩、ニトロキソリン２-ジエチルアミノエタノール塩、ニトロキソリン４-(２-ヒドロキシエチル)モルホリン塩、ニトロキソリンＮ,Ｎ-ジメチルエタノールアミン塩、ニトロキソリンリジン塩、ニトロキソリントロメタミン塩、ニトロキソリンＮ-メチルグルカミン塩、ニトロキソリンエタノールアミン塩又はニトロキソリンジオールアミン塩である。

【0066】

本発明の他の好ましい実施態様において、ニトロキソリンの塩基付加塩は、以下から選択される化学構造を有する。

【化3】

【0067】

別の一般的な態様において、本発明は、ニトロキソリンの塩基付加塩を提供し、該塩は、ニトロキソリンと塩基との混合によって得られる。本開示において、有機塩基、無機塩基を含む、任意の塩基を使用することができる。好適には、塩基は、アミン塩基、金属水酸化物、水酸化アンモニウム又は水酸化四級アンモニウムである。

【0068】

本発明の実施態様によれば、ニトロキソリンの塩基付加塩は、ニトロキソリンと比較して、例えばpHが約４.５〜８の範囲での生理的条件において、溶解度と安定性を向上させた。「溶解度」と「可溶性」は、互換的に使用され、４.５と８との間のpHの水媒体での生理的条件における本発明の化合物の溶解度を意味する。本明細書で使用されている「水媒体」は、水、及び水と他の成分との混合物を意味し、上記混合物は、少なくとも水の５０重量％、好適には少なくとも７０重量%、最も好適には少なくとも９０重量%を含むことが前提である。ある実施態様において、ニトロキソリンの塩基付加塩を参照して使用する際、「安定性」との用語は、昇華する傾向が低下することを意味する。本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩は、対象の尿での薬物排泄も増加させた。

【0069】

本開示を考慮して、本技術で知られる任意の方法を、本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩の溶解度を決定するため使用することができる。例えば、定義されたpHでの既知量の水媒体への既知の質量の化合物の添加を伴う平衡溶解度方法によって溶解度を決めることができる。平衡状態が得られるまで溶液を（例えば、撹拌によって）かき混ぜる。既知の分析方法（例：分光測光）により、定性的又は定量的に溶解度を決定することができる。化合物の溶解度を決定する他の方法は、「Physiochemical Properties of Prostaglandin F2α(Tromethamine Salt):Solubility Behavior, Surface Properties, and Ionization Constants(プロスタグランジンF2α（トロメタミン塩）の物理化学的性状：溶解度挙動、表面プロパティ及びイオン化定数)」：Journal of Pharmaceutical Sciences, 1973,62:pp.1680-5；「General treatment of pH solubility profiles of weak acids and bases. II. Evaluation of thermodynamic parameters from the temperature dependence of solubility profiles applied to a zwitterionic compound（弱酸及び塩基のpH溶解度プロファイルの一般療法II. 双極性イオン化合物に適用された溶解度プロファイルの温度依存性からの熱力学パラメータの評価）」：International Journal of Pharmaceutics, 1985,25:pp.135-145；及び米国特許No.7723119に記載されている。これらは、本明細書に参照により組み込まれる。

【0070】

本発明の実施態様によれば、溶解度が向上したニトロキソリンの塩基付加塩は、４.５、５.０、５.５、６.０、６.５、７.０、７.５又は８.０のpHなど、４.５と８との間のpH値の水媒体において、少なくとも０.１ mg/mL、好適には０.１-１.０ mg/mL、より好適には１-１０ mg/mL、より好適には３０-１００ mg/mL、より好適には>１００ mg/mL、更に好適には、>１０００ mg/mL の溶解度を有する。好ましい実施態様では、溶解度が向上したニトロキソリンの塩基付加塩は、水中で、少なくとも０.１ mg/mL、より好適には０.１-１.０ mg/mL、より好適には１-１０ mg/mL、より好適には３０-１００ mg/mL, より好適には>１００ mg/mL、更により好適には>１０００ mg/mLの溶解度を有する。

【0071】

他の一般的な態様において、本発明は、ニトロキソリンの塩基付加塩の製造方法を提供する。本発明の実施態様によれば、ニトロキソリンの塩基付加塩の製造方法は、溶媒中でニトロキソリンと塩基とを混合して塩基付加塩を取得すること、及び溶媒からニトロキソリンの塩基付加塩を回収することを含む。

【0072】

本開示を考慮して、当業者に知られている任意の塩基を、本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩の製造方法で使用することができる。好適な塩基としては、アルカリ金属水酸化物、水酸化アンモニウム、水酸化四級アンモニウム、アミン塩基が挙げられる。特に好適な塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化コリン、ジエチルアミン、エチレンジアミン、ピペラジン、Ｌ-アルギニン、１-(２-ヒドロキシエチル)-ピロリジン、２-（ジエチルアミノ）エタノール、２-(ヒドロキシエチル)-モルホリン、Ｎ,Ｎ-ジメチルエタノールアミン、リジン、トロメタミン、Ｎ-メチルグルカミン、エタノールアミン、ジオールアミンが挙げられる。

【0073】

本発明の実施態様によれば、ニトロキソリンと塩基が溶媒中で混合される。この溶媒は、有機溶媒又は有機溶媒の混合液であることが好適である。本発明の方法での使用に適した有機溶媒としては、メタノール、エタノール、イソプロパノールなどのアルコール、アセトン、メチルイソブチルケトンなどのケトン、ジクロロメタンなどのハロゲン化溶媒、イソブチロニトリル、アセトニトリルなどのニトリル、トルエン、ピリジンなどの芳香族溶媒、テトラヒドロフラン及びその混合などが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の好ましい実施態様によれば、溶媒は、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、メタノール及びエタノールから成る群から選択される一つ以上の溶媒を含む。

【0074】

本発明の実施態様によれば、ニトロキソリンに対して約１.０-２.０モル当量の塩基が、ニトロキソリンの塩基付加塩の製造方法で使用される。例えば、ニトロキソリンに対して１.０、１.１、１.２、１.３、１.４、１.５、１.６、１.７、１８、１.９又は２.０モル当量の塩基を使用することができる。

【0075】

本開示を考慮して本技術で知られる任意の方法により、ニトロキソリンと塩基とを溶媒中で混合することができる。ニトロキソリンと塩基を、任意の順序で溶媒又は溶媒混合液に添加することができる。例えば、最初にニトロキソリンを溶媒に添加した後、塩基を溶媒に添加してもよく、最初に塩基を添加した後、ニトロキソリンを溶媒に添加してよく、又は塩基とニトロキソリンを同時に溶媒に添加してもよい。ニトロキソリン、塩基及び溶媒の混合物は、例えば撹拌棒を使用して反応過程で連続的に撹拌してもよく、この混合物を加熱還流してもよい。

【0076】

ニトロキソリンと塩基とを、数時間又は終夜、反応完了まで反応させる。上記反応の進行状況は、薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）などの、本開示を考慮して本技術で知られる任意の方法によりモニタすることができる。典型的には、窒素雰囲気下において、例えば１８-２５℃の室温又は周囲温度で反応を行う。ただし、使用される特定の塩基や、ニトロキソリン及び塩基の量によって温度を変えることができ、当業者の判断範囲内において、適正な反応時間が決定され、反応が完了したときがモニタされる。

【0077】

本発明の実施態様によれば、ニトロキソリンの塩基付加塩を、本開示を考慮して本技術で知られる任意の方法により、溶媒から回収することができる。例えば、ろ過や結晶化など溶媒を真空状態で除去することで塩基付加塩を回収することができる。好ましい実施態様によれば、ニトロキソリンの塩基付加塩は、適正な温度で結晶化することで、溶媒から回収する。

【0078】

塩基付加塩の分析は、本開示を考慮して本技術で知られる任意の分析方法、例えば、融点、¹Ｈ−ＮＭＲ、質量スペクトロメトリ（ＭＳ）や液体クロマトグラフィ質量スペクトロメトリ(ＬＣＭＳ)及び示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって可能であるが、これらに限定されない。

【0079】

本発明は、新規な結晶形を有するニトロキソリンコリン塩を提供する。本発明の実施態様において、前記結晶は、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、精度±０．２θの回折角(２θ)：９.９６、１２.１２、１７.７２及び２０.０８にピークを有する。図４及び図８とを参照すること。本発明のニトロキソリンコリン塩のその他のピーク特性は、精度±０．２θの回折角（２θ）：７.６４、１３.０６、１６.６、１８.５、２２.２４、２３.０６、２３.６２、２５.５２及び２７.０６である。

【0080】

更に別の一般的な態様において、本発明は、治療上有効な量の本発明のニトロキソリンの塩基付加塩と一つ以上の薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物、及び該医薬組成物の製造方法に関する。医薬組成物は、本発明に係り、本明細書で説明されている任意のニトロキソリンの塩基付加塩を含んでいてもよい。

【0081】

本発明に係る医薬組成物は、注射（静脈）、粘膜、経口（固体薬、液体薬）、吸入、眼、直腸、局所、又は非経口（注入、注射、移植、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内）投与を含む、任意の投与形式で処方可能である。経口投与のための固体製剤として、粉末、カプセル、カプレット、ジェルキャップ、タブレットなどが挙げられるが、これらに限定されない。経口又は粘膜投与のための液状製剤として、懸濁液、乳状液、エリキシル剤、溶媒が挙げられるが、これらに限定されない。局所製剤として、乳状液、ゲル、軟膏、クリーム、パッチ、ペースト、泡、ローション、液滴又はしょう液などが挙げられるが、これらに限定されない。非経口投与のための製剤例として、注射剤、薬学的に許容可能な注入用担体に溶解又は懸濁可能なドライ製品、注入可能な懸濁液、及び注入可能な乳状液が挙げられるが、これらに限定されない。他の適正な組成物として、点眼薬やその他の眼に関する薬品、鼻噴霧や吸入器などのエアゾール噴霧器、非経口投与に適した薬液形態、座薬及びトローチ剤などが挙げられる。

【0082】

好ましい実施態様において、医薬組成物は、注射により投与されるように処方される。

【0083】

本発明に係る医薬組成物は、薬剤製造業界で幅広く利用されている担体などの、薬学的に許容可能な担体を含む。薬学的に許容可能な担体は、非毒性であり、一種以上の結着剤、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース；可溶化剤、例えばポビドン、塩化セチルピリジニウム；酸性化剤、例えばアルギン酸；孔形成剤、例えばスクロース；滑沢剤、例えばフマル酸ステアリル；流動促進剤、例えばコロイド状二酸化ケイ素；バインダー、懸濁化剤、乳化剤、希釈剤、充填剤、造粒剤、接着剤、崩壊剤、接着防止剤、流動促進剤、湿潤剤、ゲル化剤、緩衝剤、キレート剤、防腐剤、着色剤、風味剤、甘味料などを含んでいてもよい。薬学的に許容可能な担体は、投与形式に求められる製剤型に応じて、幅広い形態をとることができ、その量や型は、要求に応じて変化する。当業者は、本発明の医薬組成物に添加される適切な担体を、本開示を考慮して容易に決めることができる。

【0084】

ある実施態様において、本発明に係る医薬組成物は、徐放性組成物である。本明細書で使用される「徐放性」とは、活性医薬成分が医薬組成物から制御された速度で放出されることを意味し、活性成分の治療上有効な血中濃度が、長期間、例えば１-２４時間、８-２４時間、又は１２-２４時間にわたり維持される。

【0085】

本発明の実施態様によれば、本発明に係る医薬組成物の製造方法は、治療上有効な量のニトロキソリン塩基付加塩と、一つ以上の薬学的に許容可能な担体とを混合することを含む。ニトロキソリンの塩基付加塩と一つ以上の薬学的に許容可能な担体とを組み合わせるために、本開示を考慮して本技術で知られる任意の方法を使用できる。例えば、本発明に係る医薬組成物は、治療上有効な量のニトロキソリンの塩基付加塩を、従来の薬剤調合技術による一つ以上の薬学的に許容可能な担体と混合することで調製できる。上記薬剤調合技術としては、従来の混合、溶解、粒状化、乳化、カプセル化、封入又は凍結乾燥方法などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0086】

本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩の溶解度向上により、ニトロキソリンの処方が改良され、かつニトロキソリンの医薬組成物の製剤が改良された。特に、塩基付加塩の溶解度の向上により、上記ニトロキソリン塩を液体組成物として製剤可能となった。従って好ましい実施態様において、本発明に係る医薬組成物は、液体組成物である。特に好ましい実施態様において、医薬組成物は、注射投与を可能とするよう製剤化された液体組成物である。注射可能なニトロキソリン塩の製剤により、ニトロキソリンは、患者に対してその効果をより速く発揮することができる。

【0087】

本発明の他の一般的な態様は、それを必要とする対象における、疾病、障害又は身体異常の予防及び/又は治療のための、本発明の実施態様に係る医薬組成物の使用に関する。本発明の実施態様によれば、ニトロキソリンの塩基付加塩を含む医薬組成物を、ニトロキソリンが効果的と知られている対象の疾病、障害、又は身体異常を治療又は予防する方法に使用できる。

【0088】

本明細書で記載されている「対象」は、本発明の実施態様に係る医薬組成物又はニトロキソリンの塩基付加塩の処方がなされる又は既に処方されたことのある、任意の動物であり、哺乳類が好適であり、ヒトが最も好適である。本明細書で使用される「哺乳類」には、任意の哺乳動物が含まれる。哺乳類の例としては、雌牛、馬、羊、豚、猫、犬、マウス、ラット、兎、モルモット、猿、ヒトなどが挙げられ、ヒトが最も好適であるが、これらに限定されない。

【0089】

ある実施態様において、「治療」又は「治療行為」は、疾病、障害、又は、それらに起因すると識別できる少なくとも一つの症状の改善、予防、又は回復を意味する。他の実施態様において、「治療」又は「治療行為」は、哺乳類において、又は哺乳類により必ずしも識別できない、治療中の疾病や障害に関連する、少なくとも一つの測定可能な物理パラメータの改善、予防、又は回復を意味する。更に他の実施態様において、「治療」又は「治療行為」は、例えば識別可能な系の安定化など物理的に、又は物理パラメータの安定化など生理学的に、もしくは物理的かつ生理学的に、疾病や障害の進行を抑制又は遅延させることを意味する。他の実施態様において、「治療」又は「治療行為」は、疾病又は障害の発症を遅らせることを意味する。

【0090】

ある実施態様において、本発明の組成物は、予防手段として投与可能である。本明細書で使用される「予防」又は「予防行為」は、所定の疾病、障害又は身体異常をもたらすリスクの軽減を意味する。

【0091】

本発明の実施態様によれば、それを必要としている対象における疾病、障害又は身体異常を治療又は予防する方法は、本発明にかかる医薬組成物を上記対象に投与することを含む。本明細書で記載されているニトロキソリンの塩基付加塩を有する任意の医薬組成物は、本発明の方法で使用可能であり、上記対象に対する医薬組成物の任意の適切な投与方法を、本開示を考慮して使用することができる。

【0092】

本発明で使用される、治療上有効な量の化合物は、年齢、食習慣、健康など、特定の対象、症状の重症度、合併症やタイプ、治療又は予防する疾病、障害、もしくは身体異常、使用される製剤など、要因に応じて異なっていてよいことについて当業者は理解するであろう。当業者は、本開示を考慮して対象から所望の生物学的又は医薬的反応を引き出すため、対象に投与する化合物の治療的に有効な量を容易に決定することができる。

【0093】

ニトロキソリンが有効であることが知られている任意の疾病、障害、身体異常を、本発明の方法で治療又は予防することができる。このような疾病、障害、身体異常の例としては、尿路感染症、及び、腫瘍、癌などの血管新生に伴う疾病が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施態様において、本発明の方法は、血管新生又は癌の増殖及び侵襲の抑制に利用できる。

【0094】

本明細書で使用されている「尿路感染症」は、腎臓、尿管、尿道、膀胱など、尿路系の任意の部分の感染を意味する。典型的には、尿路感染症は、膀胱や尿道など、尿路系の下部に関する。尿路感染症には、膀胱炎（膀胱感染）、腎盂炎（片側又は両側の腎臓感染）及び尿道炎（尿道感染）が含まれる。尿路感染症は、大腸菌属、ブドウ球菌属、クレブシエラ属、プロテウス属、シュードモナス属、エンテロバクター属、ウィルス又は菌類からの細菌種により引き起こされる。尿路感染症は、一般的には、大腸菌により引き起こされる。

【0095】

癌は、通常の制御がきかなくなることに起因する制御不能の細胞の増殖であり、異常成長、分化の欠乏、局部組織の侵襲、そしてしばしば転移（癌腫）に至る。腫瘍は、細胞又は組織が異常成長したもので、良性又は悪性となる。本発明の医薬組成物により治療可能な腫瘍又は癌として、日光性角化症、副腎癌、基底細胞癌、膀胱癌、脳腫瘍、乳癌、子宮頸癌、結腸癌、食道癌、頭頸部癌、ホジキン病、カポジ肉腫、咽頭癌、白血病、肺癌、肝臓癌、黒色腫、多発性骨髄腫、中皮腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、腎癌、直腸癌、胃癌、扁平上皮癌、甲状腺癌、精巣(睾丸)癌、甲状腺癌、子宮癌などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0096】

本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩は、ニトロキソリンと比較して、尿排泄による予想外の増加が見られる。従って、本発明の好ましい実施態様において、治療又は予防すべき疾病、障害又は身体異常を尿路感染症である。

【0097】

本発明は、泌尿器保護効果を与える方法を提供する。本発明の実施態様によれば、上記方法は、本発明に係るニトロキソリンの塩基付加塩を含有する医薬組成物を、それを必要としている対象へ投与することを含む。好ましい実施態様において、泌尿器保護効果を付与する方法により、尿路感染症に対する保護効果が得られる。

【0098】

本発明の実施態様による以下の実施例は、本発明の特徴を更に示すものである。以下の実施例が本発明を制限することはなく、本発明の範囲は、特許請求の範囲により決まることが理解されるべきである。

【実施例】

【0099】

特に記載がない限り、温度はセ氏（℃）で表現する。実験は室温又は環境温度で実施され、「rt」又は「RT」と省略される（一般に、約１８-２５℃の範囲）。溶媒の蒸発は、６０℃未満の浴温で減圧下（典型的には４.５-３０ mmHg）において、回転蒸発装置を使用して行われた。反応過程は、典型的には、薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）によってモニタされた。融点は補正されない。製品から、十分な１Ｈ−ＮＭＲ及び/又は微量分析データが得られた。以下の従来の略語もまた、実施例全体を通して使用される。L(リットル)、mL（ミリリットル）、mmol（ミリモル）、M（モル濃度、mol/L）、g（グラム）、mg（ミリグラム）、min（分）、h (時間)、eq.（当量）、dd(両ダブレット)、d（片側ダブレット）、s(シングレット)、t(トリプレット)、m(多重)。

【0100】

特に規定されない限り、全ての溶媒及び試薬は、サプライヤーから調達され、精製されずに使用された。特に記載がない限り、窒素で覆われた状態で反応が実行された。化合物は、ＵＶランプ（２５４ｎｍ）で可視化された。１ＨＮＭＲスペクトルは、３００ ＭＨｚにて３００ＭＨｚ ＮＭＲに記録された。

【0101】

実施例１から２２には、様々な溶媒系での塩基又は酸試薬を使用してニトロキソリンを処理することで、様々なニトロキソリン塩を製造する方法が記載されている。例として、本発明の実施態様に係るニトロキソリンの新規な塩基付加塩を含む、ニトロキソリン塩の作製に使用可能な塩基と溶媒の実施例を表１に示すが、これらに限定されない。

【0102】

【表1】

【0103】

実施例１：ニトロキソリンＨＣｌ塩（ＡＰＬ−１０７１）の作製方法
４mL MeOHのニトロキソリン（０.２ g、１.０５ mmol）の懸濁液に対して、１.３ eq. ３６% ＨＣｌ水溶液をゆっくりと添加した。オレンジ色の固体がろ過によって得られた（収量：０.１５g、６３%）。もしくは、ニトロキソリン（０.５g、２.６３mmol）を、２５mL ３６% ＨＣｌ水溶液中で還流した。透明な溶液が形成され、冷却した。ろ過により、黄色の固体（収量：０.３３ g、５５%）を得た。mp: 236-240℃;及び¹H-NMR (300 MHz、DMSO-d6)δ:9.20 (d、1H)、9.03-9.05 (dd、1H)、8.55-8.58 (d、1H)、7.91-7.95 (m、1H)、7.25-7.28 (d、1H)。

【0104】

実施例２：ニトロキソリンＨＢｒ塩（ＡＰＬ−１０７４）の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）の溶液に対して、１.５eq. ４０% ＨＢｒ水溶液をゆっくりと添加した。ろ過により、黄色の固体を得た(収量：０.１７g、６０%)。もしくは、ニトロキソリン（０.５g、２.６３mmol）を、２５mL４０% ＨＢｒ水溶液中で還流した。透明な溶液が形成され、冷却した。ろ過により、黄色の固体（収量：０.４３g、６０%）を得た。mp: 274-276℃;及び¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.24-9.28 (dd、1H)、9.05-9.07 (dd、1H)、8.56-8.59 (d、1H)、7.95-7.99 (m、1H)、7.24-7.27 (d、1H)。

【0105】

実施例３：ニトロキソリンＨＮＯ₃塩 (ＡＰＬ−１０７５)の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）の溶液に対して、２.０eq. ６０% ＨＮＯ₃水溶液をゆっくりと添加した。ろ過により、暗黄色の固体を得た(収量：０.２１g、７９%)。mp: >290℃;及び¹H-NMR(300 MHz、DMSO-d6)δ:9.20-9.23 (dd、1H)、9.03-9.05 (dd、1H)、8.55-8.58 (d、1H)、7.91-7.96 (m、1H)、7.21-7.24 (d、1H)。

【0106】

実施例４：ニトロキソリンＰｈＳＯ₃Ｈ塩（ＡＰＬ−１０７６）の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）の溶液に対して、１.５eq.のベンゼンスルホン酸をゆっくりと添加した。ろ過により、薄黄色の固体を得た(収量：０.２４g、６５%)。mp:238-241℃;及び¹H-NMR(300MHz、DMSO-d6)δ:9.24-9.27 (dd、1H)、9.05-9.06 (dd、1H)、8.56-8.59 (d、1H)、7.95-7.99 (m、1H)、7.58-7.63 (m、2H)、7.32-7.36 (m、3H)、7.23-7.26 (d、1H)。

【0107】

実施例５：ニトロキソリンナトリウム塩（ＡＰＬ−１０７２）の作製方法
４mL ＥｔＯＨのニトロキソリン（０.２ g、１.０５ mmol）の懸濁液に対して、１.５eq. の水酸化ナトリウムをゆっくりと添加した。ろ過により、オレンジ色の固体を得た(収量：０.１５g、６７%)。mp: >290℃;及び¹H-NMR(300MHz、DMSO-d6)δ:9.43-9.46 (dd、1H)、8.53-8.55 (dd、1H)、8.39-8.42 (d、1H)、7.55-7.59 (m、1H)、6.22-6.26 (d、1H)。

【0108】

実施例６：ニトロキソリンカリウム塩（ＡＰＬ−１０７７）の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）の溶液に対して、１.５eq.の水酸化カリウムを含む水１ｍLをゆっくりと添加した。ろ過により、オレンジ色の固体を得た(収量：０.２０ g、８３%)。mp: >290℃;及び¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.43-9.46 (dd、1H)、8.51-8.53 (dd、1H)、8.33-8.36 (d、1H)、7.48-7.52 (m、1H)、6.11-6.14 (d、1H)。

【0109】

実施例７：ニトロキソリンアンモニウム塩（ＡＰＬ−１０７３）の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）の溶液に対して、１.４eq. の水酸化アンモニウムをゆっくりと添加した。ろ過により、オレンジ色の固体を得た(収量：０.１７g、７８%)。mp: 188-192℃;及び¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.40-9.43 (dd、1H)、8.56-8.57 (dd、1H)、8.37-8.40 (d、1H)、7.52-7.57 (m、1H)、6.21-6.25 (d、1H)。

【0110】

実施例８：ニトロキソリンコリン塩（ＡＰＬ−１０７８）の作製方法
ニトロキソリン（２５g、１３１.６mmol）とコリン（５０%の水溶液、３６.５g、１５０.７ mmol）を含むイソプロピルアルコール(ＩＰＡ)(３５０ mL)の懸濁液を１時間還流し、透明な溶液を得た。真空状態で溶媒を除去した後、ＩＰＡ(１１０ mL)を付加した。懸濁液を６０℃まで加熱し、透明な溶液を得た。室温まで冷却後、ろ過により、黄色の固体（２９g）を得た（収率：７５.６%)。mp:110-113℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.45-9.42 (dd、J=8.7 Hz、1.62 Hz、1H)、8.51-8.50 (dd、J=4.00 Hz、1.55 Hz、1H)、8.35-8.32 (d、J=9.93 Hz、1H)、7.50-7.46 (m、1H)、6.12-6.09 (d、J=9.90 Hz、1H)、5.34-5.31 (t、J=4.55 Hz、1H)、3.84 (m、2H)、3.41-3.38 (t、J=5.25 Hz、2H)、3.10 (s、9H)(図１);LC/MS(M-1):189(図２);DSC:112.50℃(図３)；ならびに粉末Ｘ線回折(ｐＸＲＤ)２θ及びピーク強度値を図４に示す。

【0111】

実施例９：ニトロキソリンジエチルアミン塩（ＡＰＬ−１０７９）の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）溶液に対して、１.８eq.のジエチルアミンをゆっくりと添加した。ろ過により、黄色の固体を得た(収量：０.２０g、７２%)。mp: 160-168℃;及び¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.41-9.44 (dd、1H)、8.57-8.59 (dd、1H)、8.37-8.40 (d、1H)、7.53-7.57 (m、1H)、6.22-6.25 (d、1H)、2.92-2.99 (dd、4H)、1.13-1.18 (t、6H)。

【0112】

実施例１０：ニトロキソリンエチレンジアミン塩（ＡＰＬ−１０８０）の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）溶液に対して、１.９eq.のエチレンジアミンをゆっくりと添加した。ろ過により、黄色の固体を得た(収量：０.２０g、７７%)。mp: 204-206℃;及び¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.40-9.43 (dd、1H)、8.55-8.57 (dd、1H)、8.37-8.40 (d、1H)、7.52-7.56 (m、1H)、6.22-6.26 (d、1H)、2.84 (s、4H)。

【0113】

実施例１１：ニトロキソリンピペラジン塩（ＡＰＬ−１０８１）の作製方法
４mL ＴＨＦのニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）溶液に対して、１.５eq.のピペラジンをゆっくりと添加した。ろ過により、黄色の固体を得た(収量：０.２５g、８６%)。mp: 206-210℃;及び¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.41-9.44 (dd、1H)、8.58-8.59 (d、1H)、8.36-8.40 (d、1H)、7.53-7.57 (m、1H)、6.23-6.26 (d、1H)、2.91(s、8H)。

【0114】

実施例１２：ニトロキソリンL-アルギニン塩（ＡＰＬ−１０８２）の作製方法
ニトロキソリン（０.２g、１.０５mmol）及び１.０eq. Ｌ-アルギニンを含む４mL ＩＰＡの溶液を終夜還流した。室温まで冷却した後、ろ過により、黄色の固体を得た(収量：０.３３g、７８%)。mp: 198-200℃;及び¹H-NMR (300MHz、MeOD-d4)δ:9.46-9.49 (dd、1H)、8.71-8.72 (dd、1H)、8.58-8.61 (d、1H)、7.61-7.70 (m、1H)、6.67-6.70 (d、1H)、3.52-3.56(t、1H)、3.22-3.25 (t、2H), 1.81-1.89 (m、2H), 1.67-1.77 (m、2H)。

【0115】

実施例１３：ＣＨ₃ＣＮ内でのニトロキソリンコリン塩の結晶化
ＣＨ₃ＣＮ (１００mL)のニトロキソリン水酸化コリン塩(３.５g)の懸濁液を５０-６０℃まで加熱し、透明な溶液を得た。これを室温まで冷却した後、ろ過により、薄黄色の固体である結晶（２.５g）を得た(収率：７１.４%)。mp:110-113℃;及び¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.46-9.42 (dd、J=8.70 Hz、1.53 Hz、1H)、8.51-8.50 (dd、J=3.99 Hz、1.41 Hz、1H)、8.35-8.32 (d、J=8.33 Hz、1H)、7.50-7.46 (m、1H)、6.12-6.09 (d、J=9.90 Hz、1H)、5.33-5.30 (t、J=4.68 Hz、1H)、3.84 (m、2H)、3.41-3.38 (t、J=5.22 Hz、2H), 3.10 (s、9H) (図５);LC/MS (M-1):189(図６);DSC:113.31℃(図７)；ならびに粉末Ｘ線回折（ｐＸＲＤ）2θ及びピーク強度値を図８に示す。

【0116】

実施例１４：ニトロキソリン1-(2-ヒドロキシエチル)-ピロリジン塩（APL-1088）の作製方法
ＴＨＦ (２０ mL)のニトロキソリン（１.０g、５.２６mmol）溶液に対して、１-(２-ヒドロキシエチル)-ピロリジン（１.０９g、９.４６mmol）を室温で添加した。この混合液を室温で終夜撹拌し、得られた懸濁液を濾過し、黄色の固体を得た(収量：０.８g、５０%)。mp: 102-104℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.34 (d、1H)、8.69 (d、1H)、8.40-8.43 (d、1H)、7.61-7.65 (m、1H)、6.47-6.50 (d、1H)、3.59-3.63 (m、2H), 2.97-3.03 (m、6H), 1.77-1.84 (m、4H);及びLC/MS (M-1):189.46。

【0117】

実施例１４：ニトロキソリン1-(2-ヒドロキシエチル)-ピロリジン塩（APL-1088）の作製方法
ＴＨＦ (２０ mL)のニトロキソリン（１.０g、５.２６mmol）溶液に対して、１-(２-ヒドロキシエチル)-ピロリジン（１.０９g、９.４６mmol）を室温で添加した。この混合液を室温で終夜撹拌し、得られた懸濁液を濾過し、黄色の固体を得た(収量：０.８g、５０%)。mp: 102-104℃; ¹H-NMR (300 MHz、DMSO-d6)δ:9.34 (d、1H)、8.69 (d、1H)、8.40-8.43 (d、1H)、7.61-7.65 (m、1H)、6.47-6.50 (d、1H)、3.59-3.63 (m、2H), 2.97-3.03 (m、6H), 1.77-1.84 (m、4H);及びLC/MS (M-1):189.46。

【0118】

実施例１５：ニトロキソリン２-(ジエチルアミノ)エタノール塩（ＡＰＬ−１０８９）の作製方法
ＴＨＦ (２０mL)のニトロキソリン（１.０g、５.２６mmol）溶液に対して、２-（ジエチルアミノ）エタノール（１.１g、９.４６mmol）を室温で添加した。この混合液を室温で終夜撹拌し、得られた懸濁液を濾過し、黄色の固体を得た(収量：０.７g、４３%)。mp:76-78℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.32 (d、1H)、8.70-8.72 (d、1H)、8.41-8.44 (d、1H)、7.62-7.66 (m、1H)、6.50-6.53(d、1H)、3.59-3.62 (m、2H), 2.87-2.95 (m、6H), 1.07-1.18 (m、6H);及びLC/MS (M-1):189.38。

【0119】

実施例１６：ニトロキソリン４-(２-ヒドロキシエチル)-モルホリン塩（ＡＰＬ−１０９０）の作製方法
ＴＨＦ(２０mL)のニトロキソリン（１.０g、５.２６mmol）溶液に対して、４-(２-ヒドロキシエチル)-モルホリン（０.９９g、７.５４mmol）を室温で添加した。この混合液を室温で終夜撹拌し、０℃に冷却後、得られた懸濁液を濾過し、黄色の固体を得た(収量：０.８g、４７%)。mp:124-128℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.18 (d、1H)、8.95-8.96 (d、1H)、8.51-8.54 (d、1H)、7.81-7.86 (m、1H)、7.04-7.07(d、1H)、3.50-3.60 (m、6H)、2.45-2.50 (m、2H);及びLC/MS (M-1):189.44。

【0120】

実施例１７：ニトロキソリン（N,N-ジメチルエタノールアミン）塩（ＡＰＬ−１０９１）の作製方法

【0121】

ＴＨＦ (２０mL)のニトロキソリン（１.０g、５.２６mmol）溶液に対して、Ｎ,Ｎ-ジメチルエタノールアミン（０.８４g、９.４６mmol）を室温で添加した。この混合液を室温で終夜撹拌し、得られた懸濁液を濾過し、黄色の固体を得た(収量：０.８g、５５%)。mp:120-124℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.31(d、1H)、8.73(d、1H)、8.42-8.45(d、1H)、7.64-7.68(m、1H)、6.55-6.58 (d、1H)、3.58-3.62(t、2H), 2.79-2.83(t、2H);及びLC/MS (M-1):189.38。

【0122】

実施例１８：ニトロキソリンリジン塩（ＡＰＬ−１０９２）の作製方法
イソプロパノール(２０mL)のニトロキソリン（１.０g、５.２６mmol）溶液に対して、リジン（１.１５g、７.８７mmol）を室温で添加した。この混合液を加熱還流し、終夜撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、得られた懸濁液を濾過して黄色の固体を得た(収量：１.２g、６８%)。mp:188-190℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.42 (d、1H)、8.56(d、1H)、8.35-8.38(d、1H)、7.51-7.53(m、1H)、6.17-6.20(d、1H)、3.17-3.20(m、2H), 2.76-2.80(t、2H);1.40-1.66(m、6H);及びLC/MS (M-1):189.41。

【0123】

実施例１９：ニトロキソリントロメタミン塩（ＡＰＬ−１０９３）の作製方法
イソプロパノール(２０mL)のニトロキソリン（１.０g、５.２６mmol）溶液に対して、トロメタミン（０.９５g、７.８７mmol）を室温で添加した。この混合液を加熱還流し、１時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、得られた懸濁液を濾過して黄色の固体を得た(収量：１.０g、６１%)。mp:154-158℃;¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.40-9.43(m、1H)、8.57-8.58(m、1H)、8.35-8.38(m、1H)、7.52-7.56(m、1H)、6.22-6.26(d、1H)、5.10(m、3H)、3.63 (m、6H;及びLC/MS (M-1):189.40。

【0124】

実施例２０：ニトロキソリンN-メチルグルカミン塩（ＡＰＬ−１１１６）の作製方法
ＴＨＦ(２０mL)のニトロキソリン（３.０g、１５.８mmol）溶液に対して、Ｎ-メチルグルカミン（５.５４g、２８.４mmol）を室温で添加した。この混合液を７０℃まで加熱し、数時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、得られた懸濁液を濾過して黄色の固体を得た(収量：４.５g、７４%)。mp:173-176℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.40 (m、1H)、8.58(dd、J=1.5 Hz、J=3.9 Hz、1H)、8.37 (d、J=9.9 Hz、1H)、7.54 (dd、J=3.9 Hz、J=9.0 Hz、1H)、6.24 (d、J=9.6 Hz、1H)、3.70-3.35 (m、4H)、3.10-2.85 (m、2H)、2.54 (s、3H);及びLC/MS (M-1):189.47。

【0125】

実施例２１：ニトロキソリンエタノールアミン塩（ＡＰＬ−１１１７）の作製方法
ＴＨＦ(２０mL)のニトロキソリン（３.０g、１５.８mmol）溶液に対して、エタノールアミン（１.４５g、２３.７mmol）を室温で添加した。この混合液を７０℃まで加熱し、数時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、得られた懸濁液を濾過して黄色の固体を得た(収量：３.４g、７６%)。mp:178-180℃; ¹H-NMR (300MHz、DMSO-d6)δ:9.43 (dd、J=2.5 Hz、J=8.9 Hz、1H)、8.57(dd、J=2.5 Hz、J=4.2 Hz、1H)、8.39 (d、J=9.9 Hz、1H)、7.55 (dd、J=4.2 Hz、J=8.9 Hz、1H)、6.23 (d、J=9.9 Hz、1H)、3.60 (t、J=5.6 Hz、2H)、2.19(t、J=5.6 Hz、2H);及びLC/MS (M-1):189.43。

【0126】

実施例２２：ニトロキソリンジオールアミン塩（ＡＰＬ−１１１８）の作製方法
ＴＨＦ(２０mL)のニトロキソリン（３.0g、１５.８mmol）溶液に対して、ジオールアミン（２.４９g、２３.７ mmol）を室温で添加した。この混合液を７０℃まで加熱し、数時間撹拌した。この溶液を室温まで冷却し、得られた懸濁液を濾過して黄色の固体を得た(収量：３.３９g、６２%)。mp: 142-144℃; ¹H-NMR(300MHz、DMSO-d6)δ:9.41 (dd、J=1.5 Hz、J=8.7 Hz、1H)、8.61(dd、J=1.5 Hz、J=3.9 Hz、1H)、8.40 (d、 J=9.6 Hz、1H)、7.58 (dd、J=3.9 Hz、J=8.7 Hz、1H)、6.31 (d、J=9.6 Hz、1H)、3.64 (t、J=5.7 Hz、2H)、3.00 (t、J=5.7 Hz、2H);及びLC/MS (M-1):189.51。

【0127】

実施例２３：ニトロキソリン及びニトロキソリン塩の溶解度試験
ニトロキソリン及びニトロキソリン塩の溶解度を以下のように測定した。その結果が表２にまとめられている。
１）以下に示すように、pHを変えた水性緩衝液を調製した：
ｉ． 水：蒸留水；
ｉｉ． pH = １.２ 緩衝液： ７.６５mL ３６.５%のＨＣｌ溶液を水で希釈して１０００mLとした；
ｉｉｉ． pH = ４.５ 緩衝液：１８gの酢酸ナトリウムと９.８mLの酢酸を水で希釈し、１０００mLとした；
ｉｖ． pH = ５.０ 緩衝液：pHが５.０に調節されるまで、０.２mol/Lリン酸一ナトリウム(ＮａＨ₂ＰＯ₄)液に水酸化ナトリウムを添加した；
ｖ． pH = ６.０ 緩衝液：１８gの酢酸ナトリウムを２０mLの酢酸（１M）に添加し、混合液を水で希釈し、５００mLとした；
ｖｉ. pH = ６.８ 緩衝液：２５０mLの０.２M リン酸一カリウム（ＫＨ₂ＰＯ₄）液を１１８mLの０．２M水酸化ナトリウム溶液に添加し、混合液を水で希釈して１０００mLとした；
ｖｉｉ. pH = ７.４ 緩衝液：１.３６gのリン酸一カリウム（ＫＨ₂ＰＯ₄）を７９mLの０.１M水酸化ナトリウム溶液に添加し、混合液を水で希釈して２００mLとした；及び
ｖｉｉｉ. pH = ８.０ 緩衝液：５.５９gの重リン酸カリウム（Ｋ₂ＨＰＯ₄）と０.４１gのリン酸一カリウム（ＫＨ₂ＰＯ₄）を１０００mLの水に添加し、混合した。

【0128】

２）溶解度試験が以下のように実施された。
温度２５±２℃で、各塩の試料を１０mg秤量し、１００mL容量のボトルに添加した。０．２５mLの緩衝液をボトルに入れ、５分おきに３０秒間激しく振動させた。３０分間で試料の溶解を観察した。試料が完全に溶解したら、その溶解度について、「>３０mg/mL」と記録した。
試料が完全に溶解しなかった場合、同じ緩衝液を０.７mL添加し、同様の振動工程により溶解を観察した。試料が完全に溶解したら、その溶解度について「１０<<３０mg/mL」と記録した。
試料が完全に溶解しなかった場合、同じ緩衝液を８.５mL添加し、同様の振動工程で溶解を観察した。試料が完全に溶解したら、溶解度について「１<<１０ mg/mL」と記録した。
試料が、それでも完全に溶解しなかった場合、同じ緩衝液を８５mL添加し、同様の振動工程で溶解を観察した。試料が完全に溶解したら、溶解度について「０.１<<１mg/mL」と記録した。
試料が完全に溶解しなかった場合、溶解度について「<０.１mg/mL」と記録した。

【0129】

ＡＰＬ−１０７８(ニトロキソリンコリン塩)の溶解度試験
１０ mgのＡＰＬ−１０７８は、０.２５mLの水とpH=８.０の緩衝液に完全に溶解したので、溶解度について>３０mg/mLと記録した。第二の試験では、５０mgのＡＰＬ−１０７８を１００mLの定量ボトルに入れて、０.４５mLの水又はpH=８.０の緩衝液を個別に添加した。ＡＰＬ−１０７８は完全に溶解し、これは、両溶媒において溶解度が>１００ mg/mLとなったことを示す。第三の試験では、５０mgのＡＰＬ−１０７８を１００mL容量のボトルに入れ、０.０４５mLの水又はpH=８.０の緩衝液を個別に添加した。ＡＰＬ−１０７８は完全に溶解し、これは、三種類全ての溶媒において溶解度が>１０００mg/mLであったことを示す。

【0130】

【表2】

【0131】

表２に示す実験結果は、ニトロキソリン（化合物ＡＰＬ−１２０２）が、試験された全pH値、すなわちpH１.２-８で、溶解度が低いことを示している（<０.１mg/mL）。化合物ＡＰＬ−１０７１(塩酸塩）、ＡＰＬ−１０７４(臭化水素塩)、ＡＰＬ−１０７５（硝酸塩）及びＡＰＬ−１０７６（ＰｈＳＯ₃Ｈ塩)などのニトロキソリンの酸付加塩もまた、試験された全pH値での溶解度は低かった（<０.１mg/ml、ただし、pH １.２で１-１０ mg/mLの溶解度を示したＡＰＬ−１０７４及びＡＰＬ−１０７６は除く）。対照的に、塩基付加塩、特にニトロキソリンを金属水酸化物により処理したもの、例えば化合物ＡＰＬ−１０７２(ナトリウム塩)及びＡＰＬ−１０７７(カリウム塩)など、あるいはニトロキソリンをアミンにより処理したもの、例えばＡＰＬ−１０７８(コリン塩)、ＡＰＬ−１０７９(ジエチルアミン塩)、ＡＰＬ−１０８１(ピペラジン塩)及びＡＰＬ−１０８２（Ｌ-アルギニン)などは、生理学的に適切なpHすなわち４.５-８で、顕著に改善された溶解度を有する。

【0132】

従って、ある特定のニトロキソリン塩の溶解度は必ずしも予想可能ではないことを勘案すると、ニトロキソリンの塩基付加塩が生理学的pHの水媒体中で改善された溶解度を有することは本発明の驚くべき発見である。

【0133】

実施例２４ ビーグル犬におけるニトロキソリン及びニトロキソリン塩の生体内尿排泄の測定
体重が１０-１３kgの３匹の雄のビーグル犬に対し、一晩絶食させた後に７５mgのニトロキソリンを含むタブレットを経口投与した。０-２、２-４、４-６、６-８、８-２４の時間帯で尿試料を収集した。尿試料はＣＴＣ自動回収装置、ABAPI4000質量分析計及びACQUITY UPLC BEH C18(２.１*５０mm)を伴うアジレント社製1100 HPLCシステムを利用したＬＣ／ＭＳ／ＭＳ方法で分析した。デキサメタゾンを内部標準として使用した。ニトロキソリンのピークを、目標とするm/z=１９０.９及び１４４.７のフラグメントによりモニタした。線形性の範囲は、２５-５０００ng/mLとした。様々な時間帯における尿試料中に観察されたニトロキソリンの量について表３にまとめる。

【0134】

【表3】

【0135】

同じ実験をＡＰＬ−１０９２、ニトロキソリンリジン塩についても繰り返した。犬には、それぞれモル換算で７５mgのニトロキソリンと等量の１３３mgのＡＰＬ−１０９２のタブレットが投与された。様々な時間帯での尿試料内のニトロキソリン量を表４にまとめる。

【0136】

【表4】

【0137】

実施例２５：マウスのニトロキソリン及びニトロキソリン塩の生体内尿排泄の測定
体重が１５-２０gの範囲の６匹の雄のＣＤ−１ＩＣＲマウスそれぞれに対して、終夜絶食後、４１.８mg/Kgのニトロキソリンを経口投与した。０-２、２-６、６-２４時の各時間帯に尿試料を収集した。マウスの尿は少量なので、ケージ内収集システムは収集時間ごとに水で洗浄された。尿試料及び洗浄試料が、ビーグル犬の実験（実施例２４）と同じ方法で分析された。様々な時間帯でのマウスの尿試料から観察されたニトロキソリン量について表５にまとめる。

【0138】

【表5】

【0139】

同じ実験をＡＰＬ−１０９２、ニトロキソリンリジン塩についても繰り返した。それぞれのマウスには、モル換算で４１.８ mg/Kgのニトロキソリンと等量の７７.７mg/kgのＡＰＬ−１０９２が投与された。様々な時間帯での尿試料及び洗浄試料に含まれていたニトロキソリン量について表６にまとめられている。

【0140】

【表6】

【0141】

さらに驚くべきことに、例２４と２５の実験結果により、本発明に係るニトロキソリン塩基付加塩、特にニトロキソリンリジン塩が、ニトロキソリン自体の場合と比較して、尿による生体排泄量が増えていることが示されている。表５及び６に示される結果がまとめられている表７が示すように、モル換算でニトロキソリンと等量でニトロキソリンリジン塩を投与した後、ニトロキソリンリジン塩は、ビーグル犬での尿中排出量がニトロキソリンの場合と比較して５倍を超える増加を示した。マウスの場合も、ニトロキソリンリジン塩は尿中排出量の増加を示したが、その増加はニトロキソリンの約２倍を超える程度であった。

【0142】

【表7】

【0143】

参考文献
1. Shim JS, Matsui Y, Bhat S, Nacev BA, Xu J, Bhang HE, Dhara S, Han KC, Chong CR, Pomper MG, So A, Liu JO. Effect of nitroxoline on angiogenesis and growth of human bladder cancer. J Natl Cancer Inst. 2010; 102(24):1855-73. Erratum in: J Natl Cancer Inst. 2011; 103(13):1070.
2. Mirkovic B, Renko M, Turk S, Sosic I, Jevnikar Z, Obermajer N, Turk D, Gobec S, Kos J. Novel mechanism of cathepsin B inhibition by antibiotic nitroxoline and related compounds. ChemMedChem. 2011; 6(8):1351-6
3. Jiang H, Taggart JE, Zhang X, Benbrook DM, Lind SE, Ding WQ. Nitroxoline (8-hydroxy-5-nitroquinoline) is more a potent anti-cancer agent than clioquinol (5-chloro-7-iodo-8-quinoline). Cancer Lett. 2011; 312(1):11-7.
4. Bergogne-Berezin E, Berthelot G, Muller-Serieys C. Present status of nitroxoline Pathol Biol (Paris). 1987; 35 (5 Pt 2):873-8.
5. Yatsenko AV, Paseshnichenko KA, Chernysheva VV and Schenkb H Powder diffraction study of the hydrogen bonds in nitroxoline and its hydrochloride Acta Cryst. 2002; C58: 19-21.
6. Gao GY, Lin SY Thermodynamic Investigations of Nitroxoline Sublimation by Simultaneous DSC-FTIR Method and Isothermal TG Analysis J. Pharm. Sciences 2009: 1-7.

【0144】

当業者は、上述した態様の広い発明概念から逸脱せずに上記の態様に変化を加えることができることを理解するであろう。従って、本発明は、開示された特定の実施形態に限定されず、添付の特許請求の範囲で定義された本発明の精神又は範囲内での改変を包含する意図であることが理解される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】