特許 6275881 デュオカルマイシンのプロドラッグを製造するための改良された方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6275881

(24)【登録日】2018年1月19日

(45)【発行日】2018年2月7日

(54)【発明の名称】デュオカルマイシンのプロドラッグを製造するための改良された方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 209/60 20060101AFI20180129BHJP

   C07D 471/04 20060101ALI20180129BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20180129BHJP

   A61P 35/00 20060101ALN20180129BHJP

   A61K 31/437 20060101ALN20180129BHJP

【ＦＩ】

   C07D209/60

   C07D471/04 108E

   A61K47/68

   !A61P35/00

   !A61K31/437

【請求項の数】14

【全頁数】24

(21)【出願番号】特願2016-570985(P2016-570985)

(86)(22)【出願日】2014年6月5日

(65)【公表番号】特表2017-516822(P2017-516822A)

(43)【公表日】2017年6月22日

(86)【国際出願番号】EP2014061701

(87)【国際公開番号】WO2015185142

(87)【国際公開日】20151210

【審査請求日】2017年1月26日

(73)【特許権者】

【識別番号】516205959

【氏名又は名称】シントン・バイオファーマシューティカルズ・ビー．ブイ．

【氏名又は名称原語表記】ＳＹＮＴＨＯＮ ＢＩＯＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ Ｂ．Ｖ．

(74)【代理人】

【識別番号】100108855

【弁理士】

【氏名又は名称】蔵田 昌俊

(74)【代理人】

【識別番号】100103034

【弁理士】

【氏名又は名称】野河 信久

(74)【代理人】

【識別番号】100153051

【弁理士】

【氏名又は名称】河野 直樹

(74)【代理人】

【識別番号】100179062

【弁理士】

【氏名又は名称】井上 正

(74)【代理人】

【識別番号】100189913

【弁理士】

【氏名又は名称】鵜飼 健

(74)【代理人】

【識別番号】100199565

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 茂

(72)【発明者】

【氏名】フイーブレグッツ、ティール

(72)【発明者】

【氏名】エルゲルスマ、ロナルド・クリスチャーン

(72)【発明者】

【氏名】ベウスカー、パトリック・ヘンリー

(72)【発明者】

【氏名】ヨーステン、ヨハンネス・アルベルトゥス・フレデリクス

(72)【発明者】

【氏名】コーマンズ、ルディ・ゲラルドゥス・エリザベス

(72)【発明者】

【氏名】スピーカー、ヘンリ・ヨハンネス

(72)【発明者】

【氏名】メンゲ、ウィロ

(72)【発明者】

【氏名】デ・グルート、フランシスコ・マリヌス・ヘンドリクス

【審査官】 三上 晶子

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１３−５２５３４７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１２−５１３９５４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 LUTZ F TIETZE，SYNTHESIS OF FLUORESCENCE-LABELLED GLYCOSIDIC PRODRUGS BASED ON THE CYTOTOXIC ANTIBIOTIC DUOCARMYCIN，EUROPEAN JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY，WILEY-VCH，２０１０年１１月 ２日，VOL:2010, NR:36,，PAGE(S):6909 - 6921，ＵＲＬ，http://dx.doi.org/10.1002/ejoc.201000966

【文献】 LUTZ F TIETZE，ENANTIO- AND DIASTEREOSELECTIVE SYNTHESIS OF DUOCARMYCINE-BASED PRODRUGS FOR A SELECTIVE TREATMENT OF CANCER BY EPOXIDE OPENING，CHEMISTRY - A EUROPEAN JOURNAL，ドイツ，WILEY-VCH VERLAG GMBH & CO. KGAA，２００８年 １月１８日，VOL:14, NR:3,，PAGE(S):895 - 901，ＵＲＬ，http://dx.doi.org/10.1002/chem.200700988

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ２０１／００−５２１／００

Ａ６１Ｋ ３１／３３− ３３／４４

Ａ６１Ｐ １／００− ４３／００

Ａ６１Ｋ ４７／６８

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）

【化1】

の化合物を、適切な溶媒中でのモノメタル有機リチウム試薬との反応によって、式（ＩＩ）

【化2】

の化合物に変換することを含む方法であって、
式中、ＰおよびＰ’は、独立して、保護基であり、
Ｒ¹は、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃、ＯＣＨ₂ＣＨ₃、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、ＣｌもしくはＦであり、
Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴は、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、
Ｒ¹およびＲ²は、一緒になって、５または６員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成し、
Ｘは、ハロゲンである方法。

【請求項2】

Ｒ¹が、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃もしくはＯＣＨ₂ＣＨ₃であり、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、Ｒ¹およびＲ²が、一緒になって、５員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記モノメタル有機リチウム試薬が、ｎ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウムおよびメチルリチウムからなる群から選択される、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

前記ハロゲンが、臭素またはヨウ素である、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

強塩基を添加する、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

式（ＩＩ）の化合物を、塩素化試薬との一段階または二段階の反応のいずれかによって、式（ＩＩＩ）

【化3】

の化合物に変換することをさらに含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記塩素化試薬が、ＬｉＣｌ、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、ＮＨ₄Ｃｌ、ＨＣｌ、濃塩酸中のＡｌＣｌ₃、ＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄、ＰＰｈ₃／ＮＣＳ、ＳＯＣｌ₂およびＰＣｌ₃／ＰＣｌ₅からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記塩素化試薬が、ＬｉＣｌまたはＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄である、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

式（ＩＩＩ）の化合物を、
ａ）保護基Ｐの除去、および
ｂ）カップリング試薬の存在下での、式（Ｖ）

【化4】

の化合物との反応、続いて、
ｃ）保護基Ｐ’の脱離
によって、式（ＩＶ）

【化5】

の化合物に変換することをさらに含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法
［式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、ＰおよびＰ’は、請求項１に定義の意味を有し、
Ｐ”は、独立して、保護基であり、
Ｘ₁、Ｘ₂、Ｘ₃は、独立して、ＣまたはＮである］。

【請求項10】

前記カップリング試薬が、ＢＯＰ、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣ、ＨＡＴＵ、ＴＢＴＵおよびＴ３Ｐからなる群から選択される、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記カップリング試薬が、ＥＤＣである、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

式（ＩＩ）の前記化合物が、

【化6】

である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

式（ＩＶ）の前記化合物が、

【化7】

である、請求項９から１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

対応する抗体薬物複合体の合成において式（ＩＶ）の化合物を使用することをさらに含む、請求項９から１３のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【発明の背景】

【0001】

本発明は、抗腫瘍抗生物質のデュオカルマイシンのプロドラッグの製造方法における改良に関する。このようなプロドラッグは、抗体指向性酵素プロドラッグ治療（ＡＤＥＰＴ）中癌の選択的な治療に使用することができる。化合物は、細胞傷害性の抗生物質である、（＋）−ＣＣ−１０６５、（＋）−デュオカルマイシンＡおよび（＋）−デュオカルマイシンＳＡに基づく。

【0002】

ＣＣ−１０６５およびデュオカルマイシン類縁体、これらは、典型的にはＤＮＡアルキル化およびＤＮＡ結合部分からなり、それらの強力な抗腫瘍特性が公知であるが、それらの非常に高い毒性のために、それらだけでは通常使用されない。最近、それらは抗体薬物複合体（ＡＤＣｓ）における細胞傷害性の薬剤として研究されている。

【0003】

ＡＤＣｓは、非常に強力な細胞傷害性の薬物を癌細胞に特異的に指し向けることによって、依然として主要な死因である癌の効果的な新たな治療の満たされていない大きな必要性に対処する可能性を有していると思われる。したがって、デュオカルマイシンのプロドラッグの工業的規模での合成は、デュオカルマイシン類縁体を含むＡＤＣｓの将来的な商業的成功のための重要な側面の１つである。

【0004】

デュオカルマイシン類縁体およびそれらの中間体を製造するための、特に、このような類縁体のＤＮＡアルキル化部分を製造するための、様々な方法が従来技術において公知である。

【0005】

Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００８，１４，８９５−９０１においてＬ．Ｆ．Ｔｉｅｔｚｅらは、エポキシドの開環によるデュオカルマイシン系プロドラッグのエナンチオおよびジアステレオ選択的な合成を記載している。化合物（１）の金属が媒介する環化によって化合物（２）を得るためには、妥当な結果を得る幾つかの異なる反応条件を検討しなければならなかった。

【0006】

【化1】

【0007】

立体選択的な反応を達成するために、著者らは、リチウムがエポキシドの酸素に配位して立体的に固定された遷移状態の形成を可能にする傾向があること（これは前記文献のスキーム５に示されている）が公知であるので、リチウム含有クプラートの使用に集中した。環化反応の最良の結果は、銅オルガニルＬｉ₂Ｃｕ（ＣＮ）Ｍｅ₂（収率７８％）および亜鉛オルガニルＬｉ₂Ｚｎ（ＳＣＮ）Ｍｅ₃（収率７２％）を使用することによって達成されたが、一方で、ｎ−ＢｕＬｉを使用すると、脱ハロゲン化生成物だけがほとんど得られ（収率４７％）、所望の５員環の生成物（２）はわずか７％であった。前記文献の表２を参照のこと。

【0008】

Ｌ．Ｆ．Ｔｉｅｔｚｅらは、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１０，６９０９−６９２１のスキーム６および７に、ｎ−ブチルリチウムを使用する、所望のエナンチオピュアな５員環の生成物への、エポキシドのｔｅｒｔ−ブチル（８−シアノ−４−（ベンジルオキシ）−１−ブロモナフタレン−２−イル）（オキシラン−２−イル）カルバメートの金属が誘導する閉環を記載しているが、収率はわずか１２％である。ジンケートおよびクプラートを介した環化を引き起こすための他の全ての試みが失敗したことを、さらに言及している。

【0009】

したがって、デュオカルマイシン類縁体およびそれらの重要な中間体の製造方法は、従来技術において公知であるが、改良の必要性が依然として存在している。特に、デュオカルマイシン類縁体の中間体を、良好な純度、許容可能な収率、ならびに、ＤＮＡアルキル化部分およびＤＮＡ結合部分を有するデュオカルマイシン類縁体と、対応する抗体薬物複合体への次の変換工程に良く適した形態で与えるエナンチオ選択的な方法を有することが望ましく、この方法は、上述の、高価で、取り扱いが難しく、容易に入手できないリチウムクプラートおよびジンケートのような金属間試薬の使用を必要としない。

【発明の概要】

【0010】

本発明は、デュオカルマイシン類縁体の改良された製造方法に関し、これは、方法の条件に関して簡便で、所望の５員の閉環生成物を許容可能な収率で提供する。

【0011】

第１の側面において、本発明は、式（Ｉ）

【0012】

【化2】

【0013】

の化合物を、有機リチウム試薬との反応によって、式（ＩＩ）

【0014】

【化3】

【0015】

の化合物に変換することを含む方法
［式中、ＰおよびＰ’は、独立して、保護基であり、
Ｒ¹は、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃、ＯＣＨ₂ＣＨ₃、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、ＣｌもしくはＦであり、
Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴は、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、
Ｒ¹およびＲ²は、一緒になって、５または６員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成し、
Ｘは、ハロゲンである］を提供する。

【0016】

本発明の方法の好ましい態様において、有機リチウム試薬は、ｎ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウムおよびメチルリチウムからなる群から選択される。

【0017】

本発明の態様において、Ｒ¹は、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃もしくはＯＣＨ₂ＣＨ₃であり、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴は、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、Ｒ¹およびＲ²は、一緒になって、５員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成する。有利には、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴は、独立して、ＨまたはＣＨ₃である。

【0018】

Ｘは、有利には、臭素またはヨウ素である。

【0019】

第２の側面において、本発明は、式（ＩＩ）の化合物を、塩素化試薬との一段階または二段階の反応のいずれかによって、式（ＩＩＩ）

【0020】

【化4】

【0021】

の化合物に変換することをさらに含む方法
［式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、ＰおよびＰ’は、上記定義の意味を有する］
を提供する。

【0022】

本発明の方法の好ましい態様において、塩素化試薬は、ＬｉＣｌまたはＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄である。

【0023】

第３の側面において、本発明は、式（ＩＩＩ）の化合物を、
ａ）保護基Ｐの除去、および
ｂ）カップリング試薬の存在下での、式（Ｖ）

【0024】

【化5】

【0025】

の化合物との反応、続いて、
ｃ）保護基Ｐ’の脱離
によって、式（ＩＶ）

【0026】

【化6】

【0027】

の化合物に変換することをさらに含む方法
［式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、ＰおよびＰ’は、上記定義の意味を有し、Ｐ”は、独立して、保護基であり、Ｘ₁、Ｘ₂、Ｘ₃は、独立して、ＣまたはＮである］
を提供する。

【0028】

本発明の方法の好ましい態様において、カップリング試薬は、ＢＯＰ、ＥＤＣ、ＨＡＴＵまたはＴＢＴＵである。

【0029】

本発明の態様において、Ｘ₁はＮであり、Ｘ₂およびＸ₃はＣである。

【0030】

第４の側面において、本発明は、式（ＩＶ）の化合物から出発する、対応する抗体薬物複合体（ＡＤＣｓ）の調製法を提供する。

【発明の詳細な説明】

【0031】

デュオカルマイシンのプロドラッグにおける当業者によって、主題の発明がより完全に理解され得るように、以下の詳細な説明を提供する。

【0032】

定義
他に定義しない限り、ここで使用される全ての技術的および科学的用語は、当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有する。

【0033】

本明細書の全体にわたって使用される用語「有機リチウム試薬」は、炭素およびリチウムの間の結合を含有する任意の化学化合物である。この定義には、金属間試薬、たとえば、上記で引用した先行技術文献において使用される、リチウムクプラートおよびリチウムジンケートは包含しない。本発明によれば、有機リチウム試薬は、モノメタル有機リチウム試薬である。有利には、モノメタル有機リチウム試薬は、ｎ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウムおよびメチルリチウムからなる群から選択される。ｎ−ブチルリチウムは、特に好ましいモノメタル有機リチウム試薬である。

【0034】

本明細書の全体にわたって使用される用語「保護基」は、後に続く化学反応における化学選択性を得るために、官能基の化学修飾によって分子に導入される任意の基であるが、これらに限定されない。本発明によれば、アルコール保護基（すなわち、Ｐ’およびＰ”）およびアミン保護基（すなわち、Ｐ）が使用される。好ましいアルコール保護基は、ベンジル基およびメトキシメチルエーテル基である。好ましいアミン保護基は、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基である。しかしながら、多くの他の適切なアルコールおよびアミン保護基が、Ｐｅｔｅｒ Ｇ．Ｍ．ＷｕｔｓおよびＴｈｅｏｄｏｒａ Ｗ．ＧｒｅｅｎｅのＧｒｅｅｎｅ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第４版、２００６（ＩＳＢＮ：９７８−０−４７１−６９７５４−１）によって例示されるように、当業者には公知であり、これらの多くは本発明による方法において使用することができる。当業者は、前記文献から、本発明の方法に従って使用される適切な保護基を選択することが可能であろう。

【0035】

本明細書の全体にわたって使用される用語「５または６員の（ヘテロ）シクロアルキル基」は、Ｒ¹およびＲ²から形成されるシクロペンタンまたはシクロヘキサン環であり、これらの置換基が結合する炭素原子であって、任意の１個以上の炭素原子は、ヘテロ原子、好ましくはＯである。

【0036】

本明細書の全体にわたって使用される用語「塩素化試薬」は、一段階または二段階のいずれかでヒドロキシ基を塩素原子に置換することができる任意の試薬であるが、これらに限定されない。適切な塩素化試薬の例は、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ、第２版、１９９９、６９０−６９３頁（ＩＳＢＮ ０−４７１−１９０３１−４）、Ｒｉｃｈａｒｄ Ｃ．Ｌａｒｏｃｋ著に見出すことができる。有利には、置換が、ヒドロキシ基の脱離基Ｌへの変換後に行われる場合（下記のスキーム１、ルートＡ参照）、前記塩素化試薬は、ＬｉＣｌ、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、ＮＨ₄Ｃｌ、ＨＣｌ、および濃ＨＣｌ中のＡｌＣｌ₃からなる群から選択される。好ましい塩素化試薬はＬｉＣｌである。あるいは、置換が、ヒドロキシ基に対して直接行われる場合（下記のスキーム１、ルートＢ参照）、前記塩素化試薬は、ＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄、ＰＰｈ₃／ＮＣＳ、ＳＯＣｌ₂、およびＰＣｌ₃／ＰＣｌ₅からなる群から有利には選択される。好ましい塩素化試薬はＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄である。

【0037】

本明細書の全体にわたって使用される用語「カップリング試薬」は、当業者に公知の任意のペプチドカップリング試薬であるが、これらに限定されない。適切な例は、Ａｙｍａｎ Ｅｌ−ＦａｈａｍおよびＦｅｒｎａｎｄｏ ＡｌｂｅｒｉｃｉｏによってＰｅｐｔｉｄｅ Ｃｏｕｐｌｉｎｇ Ｒｅａｇｅｎｔｓ， ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ａ Ｌｅｔｔｅｒ Ｓｏｕｐ（Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１，１１１，６５５７−６６０２）に記載されている。有利には、前記カップリング試薬は、ＢＯＰ、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣ、ＨＡＴＵ、ＴＢＴＵおよびＴ３Ｐからなる群から選択される。本発明の方法の好ましい態様において、カップリング試薬は、ＢＯＰ、ＥＤＣ、ＨＡＴＵまたはＴＢＴＵである。より好ましいペプチドカップリング試薬はＥＤＣである。

【0038】

以下の略号がここで使用され、示された定義を有する：Ｂｎ：ベンジル；ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド；ＮＭＰ：１−メチル−２−ピロリジノン；ＨＭＰＡ：ヘキサメチルホスホルアミド；ＮＣＳ：Ｎ−クロロスクシンイミド；ＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート；ＤＩＣ：Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＣＣ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド；ＥＤＣ：１−［（３−ジメチルアミノプロピル）］−３−エチルカルボジイミド塩酸塩；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；ＴＢＴＵ：Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート；Ｔ３Ｐ：１−プロパンホスホン酸無水物溶液、２，４，６−トリプロピル−１，３，５，２，４，６−トリオキサトリホスホリナン−２，４，６−トリオキシド溶液；Ｍｓ：メタンスルホニル；ＲＴ：室温；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；ｐ−ＴｓＯＨ：ｐ−トルエンスルホン酸；ＮＨ₄ＨＣＯ₂：ギ酸アンモニウム。

【0039】

本発明によれば、従来技術における教示にもかかわらず、式（ＩＩ）の化合物を、適切な溶媒中での有機リチウム試薬との反応によって、式（Ｉ）の化合物から、許容可能な収率で、有利に調製し得ることが、驚くべきことに見出された。本発明の好ましい態様において、ナトリウムメトキシドまたは水素化ホウ素ナトリウムのような強塩基が適切な溶媒に添加される。

【0040】

式（ＩＩ）の化合物への式（Ｉ）の化合物のエナンチオ選択的な閉環のための適切な溶媒は、有機溶媒、好ましくは非プロトン性溶媒であるが、これに限定されない。好ましい溶媒は、エーテル溶媒であり、特に好ましい溶媒はＴＨＦである。

【0041】

本発明の各種の側面による方法を下のスキーム１に示す［式中、ＰおよびＰ’は、独立して、保護基であり、Ｒ¹は、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃、ＯＣＨ₂ＣＨ₃、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、ＣｌもしくはＦであり、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴は、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、Ｒ¹およびＲ²は、一緒になって、５または６員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成し、Ｘは、ハロゲンである］。

【0042】

本発明の好ましい態様において、Ｒ¹は、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃もしくはＯＣＨ₂ＣＨ₃であり、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴は、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、Ｒ¹およびＲ²は、一緒になって、５員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成する。Ｘは、有利には、臭素またはヨウ素である。

【0043】

【化7】

【0044】

本発明の出発物質、すなわち、式（Ｉ）の化合物は、従来技術において公知の任意の適切な方法、たとえば、Ｌ．Ｆ．ＴｉｅｔｚｅらによってＥｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１０，６９０９−６９２１のスキーム３〜６に記載された方法によって、またはその類似の方法によって製造してもよい。

【0045】

好ましい出発物質の式（Ｉ）の化合物は以下の化合物：

【0046】

【化8】

【0047】

［式中、Ｐは、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルであり、Ｐ’は、ベンジルであり、Ｘは、臭素またはヨウ素である］である。

【0048】

上に示した式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物は単一のエナンチオマー（すなわち、１００％の光学純度を有する）に相当するが、本発明は、関連する場合はいつでも、１００％未満の光学純度を有する化合物も包含することが理解されるべきである。しかしながら、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物は、少なくとも９５％以上、好ましくは９８％以上、最も好ましくは９９％以上の光学純度であることが好ましい。

【0049】

所望のまたは有利な場合、式（ＩＩ）の化合物は、反応混合物から、たとえば、単一のエナンチオマーとして単離されてもよく、任意に精製されてもよい。

【0050】

本発明の具体的な態様において、有機リチウム試薬との式（Ｉ）の化合物の反応後、式（ＩＩ）の化合物は精製されず、ＯＨ基を有利には脱離基Ｌに変換した、式（ＶＩ）の化合物に、直接、さらに変換する（スキーム１参照）。Ｌは、当業者に公知の任意の適切な脱離基である。有利には、Ｌは、スルホネート基、たとえばメシレート、トシレート、またはベシレートである。好ましくは、Ｌはメシレートである。

【0051】

その後、式（ＶＩ）の化合物を、適切な溶媒中での塩素化試薬との反応によって、式（ＩＩＩ）の化合物に変換する。

【0052】

有利には、前記塩素化試薬は、ＬｉＣｌ、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、ＮＨ₄Ｃｌ、ＨＣｌ、および濃ＨＣｌ中のＡｌＣｌ₃からなる群から選択される。式（ＩＩＩ）の化合物への式（ＩＩ）の化合物の好ましい二段階での変換のための好ましい塩素化試薬は、ＬｉＣｌである。

【0053】

塩素化反応のための適切な溶媒は、有機溶媒であり、好ましくは極性の非プロトン性溶媒である。好ましい溶媒はＤＭＦである。

【0054】

好ましい式（ＩＩＩ）の化合物は、以下の化合物：

【0055】

【化9】

【0056】

である。

【0057】

あるいは、式（ＩＩ）の化合物は、ＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄、ＰＰｈ₃／ＮＣＳ、ＳＯＣｌ₂、およびＰＣｌ₃／ＰＣｌ₅からなる群から選択される塩素化試薬との反応によって、式（ＩＩＩ）の化合物に直接変換してもよい。式（ＩＩＩ）の化合物への式（ＩＩ）の化合物の一段階での変換のための好ましい塩素化試薬は、ＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄である。

【0058】

本発明のさらに具体的な態様において、本発明による式（ＶＩＩ）の化合物を製造する有利な方式において、スキーム１に示すように、式（ＩＩＩ）の化合物をまず酸で処理して保護基Ｐを除去し、次いで、生成物を、カップリング試薬の存在下、適切な溶媒中で式（Ｖ）の化合物と反応させて、式（ＶＩＩ）の化合物を得る。１つの態様において、塩基を適切な溶媒に添加する。適切な塩基は、３級アミンである。特に適切な塩基はＤＩＰＥＡである。

【0059】

有利には、酸は、無機鉱酸、たとえばＨＣｌである。

【0060】

ペプチドカップリング反応での使用のための適切な溶媒は、有機溶媒であり、好ましくは極性の非プロトン性溶媒である。有利には、前記適切な溶媒は、ＤＭＡ、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ＮＭＰ、ＨＭＰＡ、メチルエチルケトン、アセトニトリル、ＴＨＦ、ＤＣＭ、アセトン、ＥｔＯＡｃ、および２−ブタノンからなる群から選択される。好ましい溶媒はＤＭＡである。

【0061】

有利には、カップリング試薬は、ペプチドカップリングにおいて慣用されているカップリング試薬である。好ましくは、前記カップリング試薬は、ＢＯＰ、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣ、ＨＡＴＵ、ＴＢＴＵおよびＴ３Ｐからなる群から選択され、より好ましくは、ＢＯＰ、ＥＤＣ、ＨＡＴＵまたはＴＢＴＵである。特に好ましいカップリング試薬はＥＤＣである。

【0062】

その後、式（ＶＩＩ）の化合物を、適切な溶媒中での保護基Ｐ’の脱離によって、Ｐ’がベンジル基である場合は好ましくは水素化分解によって、式（ＩＶ）の化合物に変換する。

【0063】

有利には、水素化分解は、水素化金属触媒、好ましくは炭素担持パラジウム、および水素源の存在下で、触媒的に行われる。有利には、水素源は、水素またはギ酸アンモニウムである。水素化分解のための好ましい水素源は、ギ酸アンモニウムである。

【0064】

式（ＩＶ）の化合物は、典型的には固体の生成物であり、単離された生成物は安定な物質で、これは通常の保管条件で保管してもよく、有利には、当業者に周知の手順および装置を使用して、たとえばＷＯ２０１０／０６２１７１ＡおよびＷＯ２０１１／１３３０３９Ａに記載されているように、対応する抗体薬物複合体（ＡＤＣｓ）の合成に使用される。

【0065】

以下の実施例は、本発明の範囲を例示することを意図しており、本発明の範囲をそれらに限定する意図はない。

【0066】

［実施例］
例１
式（ＩＩ）の化合物の調製のための一般的手順

【0067】

【化10】

【0068】

式（Ｉ）の化合物を乾燥ＴＨＦに溶解し、アルゴン雰囲気下、−２０℃に冷却する。次に、ｎ−ブチルリチウム（１．１当量）を−２０℃で滴加し、終了するまで撹拌する。次いで、反応を塩化アンモニウムの飽和水溶液を使用してクエンチする。得られた反応混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出し、有機層を合わせる。次いで、選択肢１として、乾燥剤を使用して有機層を乾燥し、濃縮し、任意に続いて、たとえばシリカゲルクロマトグラフィーを使用して、精製して、生成物の式（ＩＩ）の化合物を得る。または、選択肢２として、有機層に、ある量（たとえば０．１５当量）のｐ−ＴｓＯＨおよび水を添加し、混合物を６０分間撹拌する。副生成物は、分解して、所望の式（ＩＩ）の化合物からより容易に分離する。これに続いて、１ＭのＮａ₂ＣＯ₃水溶液、飽和ＮａＣｌ溶液で抽出し、有機層を乾燥し、続いて濃縮して、式（ＩＩ）の粗生成物を得る。粗生成物は、たとえばシリカゲルクロマトグラフィーによって、任意に精製することができる。

【0069】

例２ａ
以下の反応スキームによる、化合物（３）および（４）からの、式（ＩＩ）の化合物である化合物（１２）の調製：

【0070】

【化11】

【0071】

２−メチルベンズアルデヒド（３）（１．５ｋｇ）およびジメチルスクシネート（４、１．７５当量）を、メタノール（約４ｌ）中のメタノール性ナトリウムメトキシド（１．３当量）の存在下、６５〜８０℃で１時間、反応させた。次いで、混合物を２０℃に冷却し、過剰の塩基をＨＣｌで中和し、水で希釈し、ＤＣＭで抽出することによって、未反応のジメチルスクシネートを除去した。混合物を過剰のＨＣｌで酸性化し、生成物をＤＣＭに抽出した。この抽出物をＭｇＳＯ₄で脱水した。真空下、ロータリーエバポレーターで（８０ｍｂａｒ、４０〜６０℃浴）、溶媒をＤＣＭからＴＨＦに交換して、粗（Ｅ）−３−（メトキシカルボニル）−４−（ｏ−トリル）ブタ−３−エン酸（５）のＴＨＦ（１０ｌ）溶液を得た。

【0072】

次いで、この化合物（５）の溶液を、還流温度で、トリフルオロ酢酸無水物（２．４９ｋｇ）と反応させて、メチル４−ヒドロキシ−８−メチル−２−ナフトエート（６）への変換を終了した。反応混合物をＫ₂ＣＯ₃水溶液で中和した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濃縮し、−５℃に冷却することによって結晶化させた。結晶（白色／黄色）をろ過し、アセトニトリルで洗浄し、４８〜５３℃で１６時間乾燥して、化合物（６）を１１１９ｇの量で得た（収率４１．４％、純度９９．８％）。

【0073】

メチル４−ヒドロキシ−８−メチル−２−ナフトエート（６）（０．８３ｋｇ）を、Ｋ₂ＣＯ₃（１．４当量）の存在下、５０〜８０℃で、ＤＭＦ（３．３ｌ）中の塩化ベンジル（１．０５当量）で処理した。

【0074】

反応が終了したら、混合物を５０℃に冷却し、ＤＣＭで希釈し、２０℃に冷却し、水を添加した。有機層を分離し、液状抽出物を、大気圧下、次いで真空下、蒸留によって濃縮して、ＤＭＦを除去した。中間体のメチル４−（ベンジルオキシ）−８−メチル−２−ナフトエート（７）を含む残渣をトルエン（５ｌ）およびＭｅＯＨ（６．６ｌ）で希釈し、還流下で２時間、ＮａＯＨ（水７．６ｌ中に１．２４ｋｇ（約８当量））水溶液で処理した。水（２９ｌ）を数回に分けて徐々に添加し、メタノールおよびトルエンを蒸留によって除去した。溶媒を水に変換後、溶液の容積は約３２〜３３ｌであった。粗４−（ベンジルオキシ）−８−メチル−２−ナフトエ酸（８）を過剰の４ＭのＨＣｌ（３．３２ｌ）の添加によって沈殿させ、懸濁液を１０℃に冷却し、沈殿物をろ別し、水（３０ｌ、１０℃）で洗浄し、７０℃で１６時間乾燥した。純４−（ベンジルオキシ）−８−メチル−２−ナフトエ酸（８）を、トルエン（２９．４ｌ）からの結晶化によって、オフホワイト結晶として得た。沈殿した結晶をろ過し、トルエンで洗浄し、１０３〜１０８℃で１６時間乾燥した（９５６ｇ、収率９２．５％、純度９９．９％）。

【0075】

４−（ベンジルオキシ）−８−メチル−２−ナフトエ酸（８）（１ｋｇ）を、Ｅｔ₃Ｎ（１．１当量）の存在下、８２〜８８℃で約３時間、過剰のｔｅｒｔ−ブタノール（２．６当量）を含有するトルエン（５ｌ）中、ジフェニルホスホリルアジド（１．１６当量）と反応させた。３０℃に冷却後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよび水の間で分配した。有機層を分離し、Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。ＥｔＯＡｃを留去し、イソプロパノールを用いて粗生成物を粉砕した。粉砕した結晶をろ過し、イソプロパノールで洗浄し、６２〜６８℃で１６時間乾燥して、純ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−８−メチルナフタレン−２−イル）カルバメート（９）を１０９６ｇの量で得た（収率９２．８％、純度９９．６％）。

【0076】

ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−８−メチルナフタレン−２−イル）カルバメート（９）（１．０５ｋｇ）を、−１０℃で、ＴＨＦ（１７．６ｌ）中、１．０５当量のＮ−ブロモスクシンイミドで処理した。反応を、Ｎａ₂ＳＯ₃水溶液、続いて１Ｍの水酸化ナトリウム溶液の添加によってクエンチした。酢酸エチルを添加し、生成物（１０）を有機層に抽出した。抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、真空下、ロータリーエバポレーターで蒸発乾固させた。粗中間体のｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−１−ブロモ−８−メチルナフタレン−２−イル）カルバメート（１０）をＴＨＦ（３．３ｌ）に溶解し、約１０℃で、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．３当量）で脱プロトン化し、約２５℃で３時間、（Ｓ）−グリシジルノシレート（１．２当量）でアルキル化した。反応をＮＨ₄Ｃｌ水溶液の添加によってクエンチし、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ層を水およびブラインで洗浄した。溶媒の蒸発後、粗（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−１−ブロモ−８−メチルナフタレン−２−イル）（オキシラン−２−イルメチル）カルバメート（１１）を得た。ヘプタンから結晶化して１１８５ｇの純（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−１−ブロモ−８−メチルナフタレン−２−イル）（オキシラン−２−イルメチル）カルバメート（１１）を、収率８２．３％（純度９６．０９％）でベージュ結晶として得た。

【0077】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−１−ブロモ−８−メチルナフタレン−２−イル）（オキシラン−２−イルメチル）カルバメート（１１）（１０３４ｇ）をＴＨＦ（１０．４ｌ）に溶解した。乾燥窒素雰囲気下、溶液を−２５℃に冷却した。次いで、ｎ−ブチルリチウム（１ｌ、ヘキサン中２．５Ｍ）を、温度を−２５〜−２０℃に維持しながら、徐々に添加し、さらに１０分間撹拌した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水（１．１ｌ中３６６ｇ）でクエンチし、水層を酢酸エチル（２×４．８ｌ）で抽出した。合わせた有機層を、真空下、２０分間撹拌した。その後、ｐ−ＴｓＯＨの水溶液（５２０ｍｌの水中に、１２１ｇのＰＴＳＡ一水和物）を添加し、反応混合物を１時間撹拌した。反応を１Ｍの炭酸ナトリウム溶液の添加によってクエンチした。水層を排出した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、蒸発乾固させた。

【0078】

粗（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−１−（ヒドロキシメチル）−９−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３（２Ｈ）−カルボキシレート（１２）の半分を、２．１３ｌのＤＣＭに溶解し、２．４ｋｇのシリカゲル６０Å、粒子径０．０６３〜０．１ｍｍでろ過した。（副）生成物をＤＣＭ（１１ｌ）、続いてＤＣＭ／酢酸エチル（９：１；１３．４ｌ）およびＤＣＭ／酢酸エチル（８：２；１２ｌ）で溶出した。この手順を残りの半分の粗化合物に対して繰り返し、化合物（１２）を含有する画分を合わせ、濃縮し、真空中で乾燥し、ＤＣＭ／ペンタン（残渣１ｇあたり４ｍｌ／６０ｍｌ）中で結晶化させ、真空下、３５〜４０℃で１２〜１６時間乾燥して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−１−（ヒドロキシメチル）−９−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３（２Ｈ）−カルボキシレート（１２）をベージュから白色の固体として得た（３４７ｇ、収率３９．９％、純度９６．３％、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−１−（ヒドロキシメチル）−９−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３（２Ｈ）−カルボキシレート収率５．１４％）。

【0079】

例２ｂ
例２ａのスキームによる化合物（９）からの、式（ＩＩ）の化合物である化合物（１２）の調製：
ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−８−メチルナフタレン−２−イル）カルバメート（９）（１０．５ｇ）を、−１０℃で、ＴＨＦ（３１．５ｇ）中、１．０１当量のＮ−ブロモスクシンイミド（５．２０ｇ）で処理した。反応を水酸化ナトリウム水溶液（０．７５ｇのＮａＯＨおよび７．５ｇの水）の添加によってクエンチした。抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液（１５ｇ）で洗浄し、水層を酢酸エチル（１１．２５ｇ）で抽出した。有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（１５ｇ）で洗浄し、真空下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（４−（ベンジルオキシ）−１−ブロモ−８−メチルナフタレン−２−イル）カルバメート（１０）を得た（１４．３６ｇ、収率１１２．３６％）。

【0080】

粗中間体（１０）（１４．３６ｇ）をＴＨＦ（１５ｇ）およびトルエン（１０ｇ）に溶解し、約１０℃で、２分割して添加した（１×４．３０および１×０．２０ｇ、全部で１．３９当量）カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドで脱プロトン化し、約２５℃で２時間、（Ｓ）−グリシジルノシレート（８．８０ｇ、１．１９当量）でアルキル化した。反応物をトルエン（３７．５ｇ）で希釈し、Ｋｉｅｓｅｌｇｕｈｒ（商標）の活性炭（０．７５ｇ）でろ過した。固体残渣をトルエン（３０ｇ）で洗浄し、ろ液を飽和ＮａＣｌ水溶液（２×１５ｇ）で洗浄し、真空下で濃縮して、（１１）を油状物として得た（１３．７５ｇ、収率９５．４９％）。

【0081】

油状物（１１）（１３．７５ｇ）をＴＨＦ（１３５ｇ）に溶解した。乾燥窒素雰囲気下、溶液を−１０℃に冷却した。次いで、ナトリウムメトキシド（１．５０ｇ、１．０６Ｍ）およびｎ−ブチルリチウム（８．４０ｇ、１．１６Ｍ、ヘキサン中２．５Ｍ）を、撹拌しながら、−１０℃で徐々に添加した。さらに８０分撹拌後、反応混合物を飽和ＮａＣｌ水溶液（１５ｇ）および水（９．７５）でクエンチした。有機層を、まず、酢酸水（０．３０ｇの酢酸および２．７０ｇの水）および飽和ＮａＣｌ溶液（１５ｇの溶液）の混合物を使用して行う酸洗浄に付した。これに続いて、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（１１．２５ｇの溶液）および飽和ＮａＣｌ水溶液（１１．２５ｇの溶液）の混合物でアルカリ洗浄した。

【0082】

炭素ろ過後、フィルター上の活性炭（１．１２ｇ）をＥｔＡｃ（１５ｇ）で洗浄した。ろ液を蒸発乾固させ（１１．２０ｇ）、温めた（５５℃）メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３３．７５ｇ）に溶解した。溶液を約４５℃に冷却した。懸濁液をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２２．５ｇ）で希釈し、徐々に−１５℃まで冷却し、ろ過し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２×５ｇ）で洗浄し、真空下で乾燥して、（１２）を得た（５．４０ｇ、化合物（１１）からの収率４９．３５％、純度９９．５６％）。

【0083】

例３ａ
以下のスキームによる化合物（１２）からの化合物（１４）の調製

【0084】

【化12】

【0085】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−１−（ヒドロキシメチル）−９−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３（２Ｈ）−カルボキシレート（１２）（１７０ｇ、４０５ｍｍｏｌ）を、０〜５℃で９０分間、Ｅｔ₃Ｎ（２．６当量）の存在下、ＤＣＭ（１．４ｌ）中、塩化メタンスルホニル（１．３当量）で処理した。反応混合物を塩酸、水およびブラインで洗浄した。抽出物を硫酸マグネシウムで脱水し、蒸発乾固させた。溶媒の蒸発後、中間体の（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−９−メチル−１−（（（メチルスルホニル）オキシ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３（２Ｈ）−カルボキシレート（１３）を含む残渣をＤＭＦ（１．２ｌ）に溶解し、約８０℃で９０分間、塩化リチウム（５当量）で処理した。ＤＭＦの蒸発（８〜４ｍｂａｒ）後、残渣をＤＣＭおよび水の間で分配した。下層を分離し、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。次いで、ＤＣＭを蒸発させ、残渣を温ヘプタン（３．５ｌ）に溶解し、活性炭で処理し、４ｌのジャケット付反応器内にろ過した。フィルター上の活性炭を別量のヘプタンで洗浄した。粗生成物の溶液を約５０℃に冷却し、種晶を加え、この温度で１時間維持した。懸濁液を２時間で７℃まで冷却し、この温度でさらに１時間撹拌し、ろ過し、ヘプタンで洗浄し、真空下で乾燥した。乾燥結晶（１３５ｇ、７６％）を、上述の手順を使用してヘプタンから再結晶して、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−９−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３（２Ｈ）−カルボキシレート（１４）を得た（１１１ｇ、８２％、光学純度９９．９９％（合計収率６３．０％））。

【0086】

例３ｂ
例３ａのスキームによる化合物（１２）からの化合物（１４）の調製：
化合物（１２）（１０ｇ）を、Ｅｔ₃Ｎ（３．３ｇ、１．３７当量）の存在下、０〜５℃で９０分間、ＴＨＦ（５０ｇ）中、塩化メタンスルホニル（３．０ｇ、１．１当量）で処理した。反応混合物を塩酸水（１．７０ｇの３６％ＨＣｌおよび１０ｇの水）の添加によってクエンチした。有機層を、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（５ｇ）、および飽和ＮａＣｌ水溶液（５ｇ）で洗浄した。水層を酢酸エチル（１３．３ｇ）で抽出した。有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（１０ｇ）で洗浄し、次いで真空下で濃縮して、（１３）（１３．１０ｇ）を得た。

【0087】

中間体（１３）を含む残渣をＤＭＦ（２０ｇ）に溶解し、約８０℃で１８０分間、塩化リチウム（２．４０ｇ、２．３８当量）で処理した。４０℃に冷却後、反応混合物をトルエン（３０ｇ）および水（５０ｇ）で希釈した。有機層を分離し、水（５０ｇ）を有機層に添加し、この混合物をトルエン（２×１５ｇ）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｇ）、次いで水（２５ｇ）で洗浄した。

【0088】

炭素ろ過後、フィルター上の活性炭（０．８３ｇ）をトルエン（１１．７ｇ）で洗浄した。ろ液を蒸発乾固させ（８．３ｇ）、ヘプタン（３３．３ｇ）およびエタノール（３３．３ｇ）の温めた（６０℃）混合物に溶解した。溶液を徐々に−１５℃に冷却し、ろ過し、ヘプタン（２×８ｇ）で洗浄し、真空下６０℃（１時間）で乾燥して、（１４）を得た（７．６０ｇ、化合物（１２）に対して７２．８０％、純度９９．３６％、光学純度９９．９９％）。

【0089】

例４
例５に使用するための４−（メトキシメトキシ）安息香酸の調製
１ｇ（６．６ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ安息香酸メチルを、窒素雰囲気下、２５ｍｌのＤＣＭに溶解した。次に、溶液を０℃に冷却し、続いて、６００μｌ（７．９ｍｍｏｌ）のクロロメチルメチルエーテルおよび３．２５ｍｌ（１９．７ｍｍｏｌ）のＤＩＰＥＡを添加した。混合物を撹拌して、一晩室温まで昇温させた。翌日、水（１００ｍｌ）を添加し、混合物をＤＣＭ（１００ｍｌ）で２回抽出した。合わせたＤＣＭ層をブライン（１００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空中で濃縮して、４−（メトキシメトキシ）安息香酸メチルエステルを得た。

【0090】

粗４−（メトキシメトキシ）安息香酸メチルエステルを１０ｍｌのＭｅＯＨに溶解し、続いて、４ｍｌの４Ｍ ＮａＯＨ溶液を添加した。混合物を７０℃で４時間加熱した。ＴＬＣが変換の終了を示した。混合物を０℃に冷却し、１００ｍｌの０．５Ｍ ＫＨＳＯ₄溶液を添加し（ｐＨ＝３）、ＥｔＯＡｃ（２×７５ｍｌ）で抽出した。合わせたＥｔＯＡｃ層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、真空中で濃縮して、１ｇ（８４％）の４−（メトキシメトキシ）安息香酸を白色固体として得た。

【0091】

例５
以下の反応スキームによる化合物（１８）および（１９）からの化合物（１５）の調製：

【0092】

【化13】

【0093】

５−ニトロピリジン−２−アミン（１９、５０ｇ、３５９ｍｍｏｌ）をエタノール（７００ｍｌ、９９＋％）に懸濁させ、アルゴンを吹き込んだ。次に、１．１当量のブロモピルビン酸エチル（１８、７９ｍｌ、５０３ｍｍｏｌ）を添加し、４５分間撹拌した。次いで、反応混合物を８５℃で６時間温め、別の０．３当量のブロモピルビン酸エチル（７９ｍｌ、５０３ｍｍｏｌ）を添加し、８５℃に１６時間温めた。

【0094】

その後、反応混合物を濃縮し、水（３００ｍｌ）を添加し、得られた懸濁液をろ過した。固体残渣をＥｔ₂Ｏ（６００ｍｌ）で洗浄し、乾燥して、エチル６−ニトロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−カルボキシレート（２０）（７５ｇ、３１９ｍｍｏｌ、収率８９％）を、砂色の固体として得た。ＵＰＬＣ−ＭＳで、所望の生成物が得られたことを確認した。

【0095】

ＭｅＯＨ（２００ｍｌ）中のエチル６−ニトロイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−カルボキシレート（２０）（２０ｇ、８５ｍｍｏｌ）の懸濁液を０℃に冷却し、１２Ｍ塩酸（７０ｍｌ、８５０ｍｍｏｌ）を滴加し、続いて亜鉛（２２．３ｇ、３４０ｍｍｏｌ）を分割して添加した。反応混合物を３０分間撹拌した。

【0096】

次に、ＭｅＯＨ（１４０ｍｌ）を添加し、反応を濃ＮＨ₃（１５当量）でクエンチし、ろ過した。固体残渣をＭｅＯＨ（２×２５ｍｌ）で洗浄した。ろ液を濃縮し、ＣＨＣｌ₃（７００ｍｌ）、Ｈ₂Ｏ（３００ｍｌ）および濃ＮＨ₃（３００ｍｌ、３５％溶液）に再懸濁させた。この混合物を全てが溶解するまで撹拌した。層を分離し、水層をＣＨＣｌ₃で１回抽出した。有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、ろ過し、真空中で濃縮して、エチル６−アミノイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−カルボキシレート（２１）（１１．８ｇ、６８％）を、灰色／緑色の固体として得た。ＵＰＬＣ−ＭＳで、所望の生成物が得られたことを確認した。

【0097】

エチル６−アミノイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−カルボキシレート（２１）（１３．２９ｇ、６４．８ｍｍｏｌ）のＤＭＡ（２００ｍｌ）溶液に、４−（メトキシメトキシ）安息香酸（１１．８ｇ、６４．８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（１４．９０ｇ、７８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で１８時間撹拌した。その後、反応混合物を濃縮し、続いて水（２５０ｍｌ）およびＤＣＭ（２５０ｍｌ）を添加した。層を分離し、有機層を水（１００ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、真空中で濃縮した。得られた固体物質をフィルターに移し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）でリンスした。生成物のエチル６−（４−（メトキシメトキシ）ベンズアミド）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−カルボキシレート（２２）を真空中で乾燥した。化合物（２２）（２２．１６ｇ、６０ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（５０ｍｌ）および水（５０ｍｌ）に溶解し、続いて２Ｍ ＮａＯＨ水溶液（１００ｍｌ、２００ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７０℃で３０分間撹拌した。

【0098】

次に、混合物を室温に冷却し、水（５０ｍｌ）の添加後、（４Ｍ ＨＣｌ溶液を使用して）酸性化した。得られた懸濁液をろ過し、固体物質を乾燥して、６−（４−（メトキシメトキシ）ベンズアミド）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−カルボン酸（１５）（１２．１ｇ、３５．５ｍｍｏｌ、収率５９．１％）を、黄褐色固体として得た。ＵＰＬＣ−ＭＳで、正しい生成物が生成したことを確認した。

【0099】

例６ａ
以下のスキームによる（１４）および（１５）からの化合物（１７）の調製：

【0100】

【化14】

【0101】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−９−メチル−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３（２Ｈ）−カルボキシレート（１４）（４．５ｇ、１０．２７ｍｍｏｌ）をＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、３０ｍｌ）に溶解し、２０℃で４時間撹拌した。得られた懸濁液を濃縮し、真空中で乾燥して、白色／灰色固体を得た。

【0102】

次いで、得られたＨＣｌ塩をＤＭＡ（８０ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却し、６−（４−（メトキシメトキシ）ベンズアミド）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−２−カルボン酸（１５）（３．８６ｇ、１１．３０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（５．９１ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）を添加し、１８時間撹拌して、混合物を２０℃まで昇温させた。

【0103】

次いで、反応混合物を真空中で濃縮し、粗生成物をＤＣＭ／水（１２００ｍｌ、１：１（ｖ／ｖ））に溶解し、層を分離した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（０〜２．５％のＭｅＯＨ勾配のＤＣＭ溶離液）によって精製した。生成物を有する画分を合わせ、濃縮して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−９−メチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イル）−４−（メトキシメトキシ）ベンズアミド（１６）、（６．３ｇ、９．５３ｍｍｏｌ、収率９３％）を、白色／灰色固体として得た。ＵＰＬＣ−ＭＳは、所望の生成物が得られたことを示した。

【0104】

ＭｅＯＨ（２０ｍｌ）中のＰｄ／Ｃ（０．５０７ｇ、０．４７６ｍｍｏｌ）と、１０当量のギ酸アンモニウムの懸濁液を、９５℃に５分間加熱した。次いで、混合物をＲＴ（２０℃）まで放冷した。次に、１０当量のギ酸アンモニウム、続いてＴＨＦ（１００ｍｌ）中の（Ｓ）−Ｎ−（２−（５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−９−メチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イル）−４−（メトキシメトキシ）ベンズアミド（１６）（６．３ｇ、９．５３ｍｍｏｌ）の懸濁液を添加した。得られた混合物を２０℃で３時間撹拌した。１００分後、追加の２００ｍｇのＰｄ／Ｃを添加した。

【0105】

反応が終了したら、ハイフロフィルターで補助してろ過し、ＴＨＦ（５０ｍｌ）でリンスし、続いて濃縮した。粗生成物を、ＭｅＯＨ勾配（２．５〜１０％）のＤＣＭで溶出する、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（あらかじめシリカが充填）によって精製した。合わせた生成物の画分を濃縮し、真空中で乾燥して、（Ｓ）−Ｎ−（２−（１−（クロロメチル）−５−ヒドロキシ−９−メチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−６−イル）−４−（メトキシメトキシ）ベンズアミド（１７）（４．９ｇ、８．５８ｍｍｏｌ、収率９０％）を、暗黄色固体として得た。ＵＰＬＣ−ＭＳは、所望の生成物が得られたことを示した。

【0106】

例６ｂ
例６ａのスキームによる（１４）および（１５）からの化合物（１７）の調製：
ジャケット付反応器中、化合物（１４）（１８３ｇ、０．４１８ｍｏｌ）をＨＣｌ／ジオキサン（４Ｍ、２．０８Ｌ）溶液に懸濁させ、２８〜３２℃で３時間撹拌した。生成した懸濁液を１８〜２２℃に冷却し、次いで、懸濁液にメチル−ｔ−ブチルエーテル（０．７６Ｌ）を添加した。生成した固体をろ別し、メチル−ｔ−ブチルエーテル（０．６４Ｌ）で洗浄し、ロータリーエバポレーター中４０℃で乾燥して、ＨＣｌ塩［（Ｓ）−５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−９−メチル−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール塩酸塩］を１５２．３ｇ（収率９７．４％）（ＨＰＬＣ純度９８．０８％）を得た。

【0107】

得られたＨＣｌ塩（７６．１ｇ、０．２０３ｍｏｌ）を、ジャケット付反応器中、ＤＭＡ（１．２５Ｌ）に懸濁させ、化合物（１５）（７４．３ｇ、０．２１８ｍｏｌ）を添加した。反応混合物の温度を１８〜２２℃に調整し、ＥＤＣ（５８．５ｇ、０．３０５ｍｏｌ）、続いてＤＭＡ（０．２Ｌ）を添加した。反応混合物を１８〜２２℃で１時間撹拌した。ジャケット内の温度を１０℃に変更し、水酸化アンモニウム（６．８ｍｌ）を反応混合物に添加した。水（２００ｍＬ）を反応混合物に徐々に添加し、生成物の結晶化を開始した。固体生成物をろ過し、メタノール（２×０．６Ｌ）で洗浄した。生成物をメタノール（１．２Ｌ）中で再度スラリー化し、懸濁液を２時間撹拌した。生成物をろ過し、メタノール（０．２Ｌ）で洗浄し、それを４５〜５０℃で乾燥して、化合物（１６）を得た（１２２ｇ、収率８９％）。

【0108】

水素化反応器中で化合物１６（２４０ｇ、０．３６３ｍｏｌ）をＴＨＦ（３．９Ｌ）に懸濁させた。一方、５％Ｐｄ／Ｃ（８６．５ｇ、湿ペースト状、約５０％）触媒をメタノールおよびギ酸アンモニウム（２５７．５ｇ）中に懸濁させることによって、Ｐｄ／Ｃ触媒を活性化した。混合物を３５℃に加熱し、この温度で１５分間撹拌した。混合物を２０℃に冷却した。触媒懸濁液を水素化反応器に添加した。反応器に窒素を流し、撹拌のスイッチを入れた。反応混合物を２０℃で２．５時間撹拌した。窒素下で触媒をろ別し、ＴＨＦ（２×１Ｌ）で洗浄した。ろ液を、ロータリーエバポレーター上減圧で蒸発させ、固体残渣を得た。ジクロロメタン（１．１５Ｌ）を固体残渣に添加し、混合物を撹拌して、結晶懸濁液を生成した。生成物をろ過し、ジクロロメタン（０．５Ｌ）およびメタノール（０．２Ｌ）で洗浄した。生成物をメタノール（１Ｌ）中で再度スラリー化し、ＤＭＡ（５０ｍＬ）を添加し、懸濁液を２０℃で２時間撹拌した。生成物をろ過し、メタノール（２５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した。化合物（１７）、１６７ｇ（収率８０．６％）を得た。
以下に出願当初の請求項を実施の態様として付記する。
［１］
式（Ｉ）

【化15】

の化合物を、有機リチウム試薬との反応によって、式（ＩＩ）

【化16】

の化合物に変換することを含む方法であって、
式中、ＰおよびＰ’は、独立して、保護基であり、
Ｒ¹は、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃、ＯＣＨ₂ＣＨ₃、ＣＦ₃、ＯＣＦ₃、ＣｌもしくはＦであり、
Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴は、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、
Ｒ¹およびＲ²は、一緒になって、５または６員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成し、
Ｘは、ハロゲンである方法。
［２］
Ｒ¹が、ＣＨ₃、ＣＨ₂ＣＨ₃、ＯＣＨ₃もしくはＯＣＨ₂ＣＨ₃であり、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴が、独立して、ＨもしくはＣ_1-6アルキルであるか、または、Ｒ¹およびＲ²が、一緒になって、５員の（ヘテロ）シクロアルキル基を形成する、［１］に記載の方法。
［３］
前記有機リチウム試薬が、モノメタル有機リチウム試薬である、［１］または［２］に記載の方法。
［４］
前記モノメタル有機リチウム試薬が、ｎ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウムおよびメチルリチウムからなる群から選択される、［３］に記載の方法。
［５］
前記ハロゲンが、臭素またはヨウ素である、［１］から［５］のいずれか一に記載の方法。
［６］
強塩基を添加する、［１］から［５］のいずれか一に記載の方法。
［７］
式（ＩＩ）の化合物を、塩素化試薬との一段階または二段階の反応のいずれかによって、式（ＩＩＩ）

【化17】

［式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、ＰおよびＰ’は、［１］に定義の意味を有する］
の化合物に変換することをさらに含む、［１］から［６］のいずれか一に記載の方法。
［８］
前記塩素化試薬が、ＬｉＣｌ、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、ＮＨ₄Ｃｌ、ＨＣｌ、濃塩酸中のＡｌＣｌ₃、ＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄、ＰＰｈ₃／ＮＣＳ、ＳＯＣｌ₂およびＰＣｌ₃／ＰＣｌ₅からなる群から選択される、［７］に記載の方法。
［９］
前記塩素化試薬が、ＬｉＣｌまたはＰＰｈ₃／ＣＣｌ₄である、［８］に記載の方法。
［１０］
式（ＩＩＩ）の化合物を、
ａ）保護基Ｐの除去、および
ｂ）カップリング試薬の存在下での、式（Ｖ）

【化18】

の化合物との反応、続いて、
ｃ）保護基Ｐ’の脱離
によって、式（ＩＶ）

【化19】

の化合物に変換することをさらに含む、［１］から［９］のいずれか一に記載の方法
［式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、ＰおよびＰ’は、［１］に定義の意味を有し、
Ｐ”は、独立して、保護基であり、
Ｘ₁、Ｘ₂、Ｘ₃は、独立して、ＣまたはＮである］。
［１１］
前記カップリング試薬が、ＢＯＰ、ＤＣＣ、ＤＩＣ、ＥＤＣ、ＨＡＴＵ、ＴＢＴＵおよびＴ３Ｐからなる群から選択される、［１０］に記載の方法。
［１２］
前記カップリング試薬が、ＥＤＣである、［１１］に記載の方法。
［１３］
式（ＩＩ）の前記化合物が、

【化20】

である、［１］から［１２］のいずれか一に記載の方法。
［１４］
式（ＩＶ）の前記化合物が、

【化21】

である、［１］から［１３］のいずれか一に記載の方法。
［１５］
対応する抗体薬物複合体の調製のための、式（ＩＶ）

【化22】

の化合物の使用。